KR102619171B1 - 동백나무 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 피부미백 개선용 조성물에 관한 것으로, 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 경우, 천연물을 이용함에 따라 장기간 복용에 따른 부작용의 우려가 없으며, 티로시나제 저해 활성을 통해 피부미백 개선 활성을 나타낼 수 있다.
Description
본 발명은 피부 미백용 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함함으로써, 피부미백 활성을 나타내는 조성물에 관한 것이다.
산업화로 인한 환경오염은 일반 생활의 장애를 초래하는데, 특히 인체 보호막으로서 피부질환이 증가할 뿐 아니라 삶의 질 향상이라는 인식 변화로 인해 피부 관련 미용과 질환 완화 치료 소재에 대한 관심이 증가하고 있다.
일반적으로 환경공해의 심화와 함께 자외선에 의한 피부손상 등으로 하얀 피부에 대한 선호도가 높아지고 있고, 투명 화장으로 보다 맑고 깨끗한 피부를 추구함에 따라 피부미백 효과를 얻을 수 있는 방법에 대한 관심이 고조되고 있다.
또한 현대 가치관의 다양화와 개성화가 두드러지면서 상기와 같은 관심의 증가는 미백, 보습, 세포 재생, 주름개선 등의 성분을 함유한 기능성 화장품의 개발로 이어지고 있으며, 제품의 안전성을 지향하는 화장품 업계는 천연물 소재에 대한 연구개발을 활발하게 진행하고 있다.
피부는 인체의 일차 방어막으로 체내의 제기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질, 외부자극으로부터 보호해주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에도 중요한 역할을 하고 있다. 그러나 외부로부터 과도한 자극을 받거나, 스트레스, 영양결핍, 체내 호르몬 이상, 유전질환 등은 피부의 정상적인 기능을 저하시키고 피부 색소 침착을 일으키거나 탄력손실, 각질화, 주름생성 등의 피부노화현상을 촉진시킨다. 이에 피부의 과색소 침착을 줄일 수 있는 미백활성 물질과 피부 고유의 기능을 유지시키고 피부세포를 활성시켜 피부노화를 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어왔다.
그 중, 피부의 과색소 침착의 주된 요인은 멜라닌 색소 합성이상 및 분포 이상에 의한 것이다.
멜라닌의 주요한 기능은 UV 빛 에너지를 흡수하여 UV에 의한 손상으로부터 세포들을 보호하는 역할을 한다. 멜라닌의 생성은 멜라닌세포 내에서 티로신(tyrosine)이 티로시나제(tyrosinase)의 작용에 의해 도파퀴논 (dopaquinone)으로 전환되며, 이후 효소의 작용 및 자발적인 산화 반응에 의하여 이루어진다. 그러나 멜라닌이 비정상적으로 적게 생산되면 백반증과 같은 피부 병변이 유발되고, 반대로 자외선 등에 의해 과도하게 멜라닌이 합성되면 피부에 손상을 줄 뿐만 아니라 기미, 주근깨를 형성하고 더 나아가 피부암의 원인이 되기도 한다.
멜라닌의 생성과정을 억제하기 위하여, 종래에는 아스콜빈산(ascorbic acid), 코직산(kojic acid), 알부틴(arbutin), 하이드로퀴논(hydroquinone), 및 천연식물의 추출물 등이 미백원료로 사용되어 왔다. 그러나, 대표적 미백원료인 코직산(kojic acid)이나 알부틴(arbutin)의 경우 좋은 미백효과에도 불구하고, 제품 안전성이 낮다는 문제가 있다.
최근에는 민간요법으로 오랫동안 사용되어오던 천연식물 추출물을 이용한 미백원료에 대한 연구에 관심이 쏟아지고 있다.
이에, 본원발명에서는 부작용을 최소화 하면서도 피부 미백 기능을 향상시키기 위해 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함한 피부 미백용 조성물을 제공하고자 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 다른 목적은 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함하여 부작용의 문제가 없어 장기간 복용에도 문제가 없으며, 피부미백 효과가 우수한 화장료 조성물 및 식품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 피부 미백용 조성물은 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 것이다.
상기 동백나무 추출물은 동백나무의 뿌리, 동백나무의 줄기, 동백나무의 잎, 동백나무의 꽃, 동백나무의 종자, 동백나무의 열매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나로부터 추출되는 것이다.
상기 동백나무 추출물은 물, C1 내지 C6의 저급 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출 용매를 이용하여 추출되는 것이다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상기 피부미백용 조성물을 포함하는 것이다.
상기 화장료 조성물은 스킨, 세럼, 로션, 에멀전, 크림, 에센스, 화장수, 파운데이션, 팩, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 스프레이 및 파우더로 구성된 군으로부터 선택된 제형인 것이다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 식품 조성물은 상기 피부미백용 조성물을 포함하는 것이다.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따른 건강기능식품은 상기 식품 조성물을 포함하는 것이다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 '추출물'은 상술한 바와 같이 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다.
즉, 천연 추출물은 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 천연 추출물에 포함되는 것이다.
본 발명에서 이용되는 천연 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 명세서에서 용어 '유효성분으로 포함하는'이란 하기의 천연 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 피부 미백용 조성물은 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 것이다.
상기 동백나무(Camellia japonica)는 쌍떡잎식물 물레나무목 차나무과의 상록교목으로 동백나무는 밑에서 가지가 갈라져서 관목으로 되는 것이 많다. 나무껍질은 회백색이며 겹눈은 선상 긴 타원형이다. 잎은 어긋나고 타원형 또는 긴 타원형이다. 잎가장자리에 물결 모양의 잔 톱니가 있고 윤기가 있으며 털이 없다. 꽃은 이른봄 가지 끝에 1개씩 달리고 적색이다. 꽃잎은 5∼7개가 밑에서 합쳐져서 비스듬히 퍼지고, 수술은 많으며 꽃잎에 붙어서 떨어질 때 함께 떨어진다. 암술대는 3개로 갈라진다. 열매는 삭과(果)로 둥글고 지름 3∼4cm로서 3실이며, 검은 갈색의 종자가 들어 있다. 식물체와 꽃은 관상용으로 하며, 종자에서는 기름을 짠다. 잿물을 내어 매염제로 쓰이기도 한다. 경상남도, 전라남북도, 충청남도, 중국, 일본 등지에 분포한다. 꽃잎이 수평으로 활짝 퍼지는 것을 뜰동백이라 하며 많은 품종이 있다. 백색 꽃이 피는 것을 흰동백, 어린가지와 잎 뒷면의 맥 위 및 씨방에 털이 많이 나 있는 것을 애기동백이라고 한다.
본원발명은 상기 동백나무 추출물을 포함함으로써 우수한 피부미백 효과를 나타낼 수 있다.
상기 동백나무 추출물은 동백나무의 뿌리, 동백나무의 줄기, 동백나무의 잎, 동백나무의 꽃, 동백나무의 종자, 동백나무의 열매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나로부터 추출되는 것이다.
바람직하게, 상기 동백나무 추출물은 동백나무의 뿌리, 동백나무의 줄기, 동백나무의 잎 및 동백나무의 꽃을 포함하는 혼합물을 추출한 것일 수 있다. 동백나무의 뿌리, 동백나무의 줄기, 동백나무의 잎, 동백나무의 꽃, 동백나무의 종자 또는 동백나무의 열매 중 미백 활성 자체는 동백나무의 종자 또는 열매가 우수하지만, 종자 및 열매를 제외한 뿌리, 줄기, 잎 및 꽃을 혼합하여 추출하는 경우 상호작용에 의한 상승효과로서 피부 미백 효과가 크게 증진되는 효과를 나타낼 수 있다.
더 바람직하게, 상기 동백나무 추출물은 동백나무의 뿌리를 포함하고, 상기 동백나무의 뿌리 100 중량부에 대하여 동백나무의 줄기 50 내지 150 중량부, 동백나무의 잎 80 내지 200 중량부, 동백나무의 꽃 40 내지 100 중량부를 포함하는 혼합물로 추출된 것으로, 상기 동백나무의 뿌리, 동백나무의 줄기, 동백나무의 잎 및 동백나무의 꽃은 건조된 것을 추출한 것일 수 있다.
상기 중량부 범위에 의하는 경우 피부 미백 활성이 증진되는 효과가 높아질 수 있으며, 적은 양으로 보다 우수한 피부 미백 활성을 나타낼 수 있어 세포 독성의 문제가 없이 장기간 사용될 수 있다.
보다 더 바람직하게, 상기 동백나무 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물은 잔잎바디 추출물 및 카칼리아 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다. 이를 통해 상기 동백나무 추출물의 피부 미백 활성을 보다 향상시킬 수 있으면서도 맛 및 향을 포함하는 기호성이 향상되어 기호도 높은 조성물로의 제공이 가능할 수 있다.
상기 잔잎바디(Angelica czernaevia (Fisch. et Meyer) Kitagawa.)는 쌍떡잎식물 산형화목 산형과의 여러해살이풀로 주로 높은 지대의 습지 근처에서 자란다. 높이가 1m에 달하며 곧게 자라며, 잎은 기수2~3회 우상복엽으로서 엽병이 길며 엽병 밑부분이 편평한 엽초로 되어 원줄기를 둘러싼다. 소엽은 긴 달걀모양 또는 피침형이고 가장자리에 딱딱한 톱니가 있으며 위로 갈수록 잎이 작아져서 3개로 갈라지고 엽병 전체가 엽초로 된다. 꽃은 백색으로 7~8월에 피며 겹우산모양꽃 차례에 달리고 산경에 능선이 있으며 윗부분에 밀모가 있고 소산경은 10~30개로서 길이 2~4cm이며 능선과 더불어 안쪽에 잔돌기가 밀생하고 꽃자루는 길이 1cm 정도이다. 총포(總苞)는 수개이고 소총포는 가늘고 작으며 다수이다. 꽃부리는 소형이고 꽃잎은 5개이며 안으로 굽는다. 열매는 구형(球珩)으로 9~10월에 성숙하며 늑(肋)사이에 3개, 합생면에 8개의 유관이 있다. 뿌리는 진정 또는 두통에 쓰이며 어린잎은 식용한다. 본원발명에서는 잔잎바디의 잎을 추출한 잔잎바디 추출물을 유효성분으로 포함하는 것이 바람직하다.
상기 카칼리아(Emilia coccinea)는 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 한해살이풀로 인도가 원산지이고 관상 식물로 재배한다. 잎은 어긋나고 긴 달걀 모양이며 가장자리에 둔한 톱니가 있고 잎자루가 없으며 분을 칠한 것처럼 보인다. 꽃은 6∼10월에 주황색이 도는 붉은 색으로 피고 가는 꽃줄기 끝에 두상화(頭狀花, 꽃대 끝에 꽃자루가 없는 작은 꽃이 많이 모여 피어 머리 모양을 이룬 꽃)가 달린다. 두상화는 관상화로 구성되며, 관상화의 화관은 5개로 갈라진다. 열매는 수과이다. 봄에 파종하며 성질이 강하다. 카칼리아란 과거의 속명(屬名)인 Cacalia에서 유래했으며, 불꽃씀바귀와 비슷하다.
상기 동백나무 뿌리 추출물 100 중량부에 대하여 잔잎바디 추출물 1 내지 10 중량부 및 카칼리아 추출물 1 내지 10 중량부로 더 포함되는 것일 수 있다.
상기 잔잎바디 추출물 및 카칼리아 추출물이 더 포함되는 경우 동백나무 추출물의 피부 미백 활성이 소폭 더 향상될 수 있을 뿐 아니라, 맛 또는 향을 향상시킬 수 있어 기호도 높은 화장료 조성물 또는 식품 조성물로의 제공이 가능할 수 있다.
상기 동백나무 추출물은 물, C1 내지 C6의 저급 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출 용매를 이용하여 추출되는 것이다.
상기 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 침출법 및 환류 추출법 등 당업계의 통상적인 추출 방법일 수 있다. 구체적으로 세척 및 건조로 이물질이 제거된 천연물을 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물일 수 있으며, 상기 용매들을 순차적으로 시료에 적용하여 추출한 추출물일 수 있다.
상기 초음파 추출법은 30 내지 50℃, 0.5 내지 2.5시간 동안 반응을 진행하며, 추출용매는 물 또는 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다. 구체적으로는 40 내지 50℃, 1 내지 2.5시간 동안 추출하며, 추출용매로 물 또는 70 내지 80%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다.
상기 침출법은 15 내지 30℃, 24 내지 72시간 동안 진행하며, 추출 용매로 물 또는 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올을 이용한다. 보다 구체적으로는 20 내지 25℃, 30 내지 54시간 동안 진행하며, 추출 용매는 물 또는 70 내지 80%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다.
상기 환류 추출법은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 100mL기준으로, 천연물의 분쇄물 10 내지 30g, 환류 시간 1 내지 3시간 및 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 물에 의한다. 보다 구체적으로, 탄소수 1 내지 6의 알코올 100mL 또는 물 100mL 기준으로, 천연물의 분쇄물 10 내지 20g, 환류 시간 1 내지 2 시간 및 70 내지 90%의 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 물에 의한 것이다.
상기 추출 용매는 시료의 중량 기준으로 2 내지 50배를 사용할 수 있으며, 보다 구체적으로는 2 내지 20배이다. 추출을 위해 시료는 추출 용매에서 침출을 위해 1 내지 72 시간 동안 방치될 수 있으며, 보다 구체적으로 24 내지 48시간 동안 방치될 수 있다.
추출 후, 추출물은 새로운 분획 용매를 순차적으로 적용하여 분획할 수 있다. 분획시 사용하는 분획 용매는 상기 용매는 물, 헥산, 부탄올, 에틸아세트산, 에틸 아세테이트, 메틸렌클로라이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상이며, 바람직하게는 에틸아세테이트 또는 메틸렌클로라이드이다.
추출물 또는 분획물을 얻은 후에는 농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 사용할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상기 피부미백용 조성물을 포함하는 것이다.
상기 화장료 조성물은 스킨, 세럼, 로션, 에멀전, 크림, 에센스, 화장수, 파운데이션, 팩, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 스프레이 및 파우더로 구성된 군으로부터 선택된 제형일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 해당 분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌증, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형, 수중유(O/W)형 또는 유중수(W/O)형의 제형 또는 연고로 제조될 수 있다.
상기 화장품은 본 발명의 동백나무 추출물 이외에도 피부학적으로 허용된 매질 또는 기제를 함유함으로써 당업계에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.
적합한 화장품의 제형으로는 예를 들면, 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱(conceal stick)의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 수렴화장수, 유연화장수, 영양화장수, 각종 크림, 에센스, 팩, 파운데이션 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트 또는 미용액 등이 있다. 구체적 제형으로서는 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클 렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 또는 아이섀도 등의 제형을 포함한다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 식품 조성물은 상기 피부미백용 조성물을 포함하는 것이다.
구체적으로, 상기 피부 미백용 조성물을 포함하는 식품 조성물을 이용하여 항산화, 피부 미백 개선 효과를 증강시킬 수 있는 가공식품을 제조할 수 있다. 이런 가공식품에는 예를 들어, 과자, 차, 음료, 주류, 발효식품, 통조림, 우유가공식품, 육류가공식품, 국수 등을 포함한다. 과자는 비스킷, 파이, 케익, 빵, 캔디, 젤리, 껌, 시리얼 등을 포함한다. 음료는 음용수, 탄산음료, 기능성 이온음료, 주스(예를 들어, 사과, 배, 포도, 알로에, 감귤, 복숭아, 당근, 토마토 쥬스 등), 식혜 등을 포함한다. 주류는 청주, 위스키, 소주, 맥주, 양주, 과실주 등을 포함한다. 발효식품은 간장, 된장, 고추장 등을 포함한다. 통조림은 수산물 통조림(예들 들어, 참치, 고등어, 꽁치, 소라 통조림 등), 축산물 통조림(쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 칠면조 통조림 등), 농산물 통조림(옥수수, 복숭아, 파일애플 통조림 등)을 포함한다. 우유가공식품은 치즈, 버터, 요구르트 등을 포함한다. 육류가공식품은 돈까스, 비프까스, 치킨까스, 소세지. 탕수육, 너겟류, 너비아니 등을 포함한다. 밀봉포장 생면 등의 국수를 포함한다. 이 외에도 상기 조성물은 레토르트식품, 스프류 등에 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따른 건강기능식품은 상기 식품 조성물을 포함하는 것이다.
상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 본 발명의 식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함시킬 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등) 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다.
본 발명의 피부 미백용 조성물은 동백나무 추출물을 유효성분으로 포함함으로써 티로시나아제 억제 활성을 통해 피부미백 개선효과를 나타낼 수 있는 천연추출물 기반의 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물을 다양한 식품 조성물, 화장료 조성물 등으로 제공하여 장기간 사용에 따른 부작용의 문제없는 기능성 제품의 효과를 제공할 수 있다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나, 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
[제조예 1: 동백나무 추출물의 제조]
동백나무 뿌리 추출물(CR)의 제조
동백나무의 뿌리를 세척 및 건조하고 분쇄한 뒤 상기 분쇄된 분말 100g을 추출 용매인 에탄올 2L에 넣고 25℃에서 24시간동안 120rpm으로 진탕 혼합하였다.
이를 통해 얻은 동백나무 뿌리 추출액은 Whatman No. 2 여과지로 여과하였고, 진공회전농축기(N-1000S)를 사용하여 용매가 제거된 동백나무 뿌리 추출물의 분말을 획득하였다. 동백나무 뿌리 추출물(CR)의 분말을 디메틸설폭사이드 (dimethyl sulfoxide, DMSO)에 녹여 100 mg/ml의 원액 (stock solution)을 제조한 후 4℃에서 보관하였다. 원액은 생리식염수를 사용하여 원하는 농도로 희석시켜 실험을 진행하였다.
기타 추출물(CS, CL, CF, CY 및 CO)의 제조
상기 동백나무 뿌리 추출물(CR)과 동일한 방법으로 동백나무의 줄기, 잎, 꽃 및 열매 각각의 추출물인 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL), 동백나무 꽃 추출물(CF) 및 동백나무 열매 추출물(CY)을 제조하였다.
또한, 동백나무 종자 오일 추출물(CO)의 경우 통상의 오일 추출 방법에 따라 동백나무 종자로부터 수득된 오일로 준비하였다.
[실험예 1 :
동백나무 추출물(CR, CS, CL, CF)의
세포 독성 억제 효과 측정]
과산화 수소 유도 세포독성 억제 효과
과산화수소는 세포 내에서 히드록실라디칼(Hydroxyl radical)을 생성하여 지질과산화를 유발함으로써 세포막의 손상과 세포독성을 일으킨다. 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL), 동백나무 꽃 추출물(CF)이 과산화수소에 의한 세포독성 작용을 억제시킬 수 있는지 확인하였다.
실험은 HaCaT 세포를 이용하여 MTT 분석법으로 측정하였다. 대수증식기에 있는 HaCaT 세포를 웰(well) 당 8 X 103개로 96 well plate에 접종하여 DMEM 배지 200 ㎕에서 24 시간 동안 배양하였다. 상기 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)은 각각 최종농도 50 ㎍/㎖로 배지에 첨가한 다음 4 시간 동안 반응시키고, 세포들은 PBS로 세척하였다. 과산화수소를 최종농도 1 mM로 포함하는 배지에 상기 세척된 세포들을 2 시간 동안 배양하여 산화적 스트레스를 유도하였고, 상기 세포들을 PBS로 세척하였다. 세척한 세포들은 0.5 ㎎/㎖의 MTT를 포함한 배지에서 다시 4시간 동안 배양하여 반응시켰다. 이때, 황색의 MTT는 살아있는 세포 내 미토콘드리아의 작용 하에 환원되어, 물에 용해되지 않는 자색의 포마잔(Formazan)으로 변화한다. MTT는 세포에 붙어있기 때문에, 디메틸설폭사이드(DMSO) 용액 200 ㎕로 상기 배양액을 용해하여, 세포를 파괴하고 MTT를 유리시켰다. 포마잔의 양은 살아있는 세포수에 정비례하므로, ELISA 판독기로 측정하였을 경우 나타나는 포마잔의 흡광도를 측정하여 세포 독성을 계산하였다.
또한, 과산화수소 처리를 하였으나 상기 추출물을 첨가하지 않은 HaCaT 세포를 대조군으로 하여 상기 방법과 동일하게 실시하였다. 상기에서 용해시킨 시료들 각각을 ELISA 판독기의 540 ㎚로 흡광도를 측정한 뒤, 각 용액의 세포 독성을 하기 식 1로 환산하여 표 1에 나타내었다.
[식 1]
세포독성(%) = {1-(실험군의 흡광도/과산화수소 무처리군의 흡광도)} X 100
| 구분 | 세포독성(%) |
| 대조군 | 79.2 |
| CR | 37.4 |
| CS | 33.6 |
| CL | 30.1 |
| CF | 36.0 |
| CO | 31.8 |
| CY | 32.5 |
(단위 : %)
상기 표 1을 참조하면, 대조군에 비해 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL), 동백나무 꽃 추출물(CF), 동백나무 종자 오일 추출물(CO) 및 동백나무 열매 추출물(CY)의 경우 과산화수소에 대한 저항 활성으로 인해 낮은 정도의 세포독성을 나타냄을 알 수 있다. 이는 동백나무 추출물의 과산화수소에 대한 저항 활성을 통해 세포 보호 활성이 우수함을 확인할 수 있다.
[실험예 2 :
동백나무 추출물(CR, CS, CL, CF, CO, CY)의
티로시나제 저해 활성(Tyrosinase inhibition activity)을 통한 미백 활성 측정]
티로시나제 저해 활성
티로시나아제(Tyrosinase) 저해활성은 Mason와 Peterson의 방법을 이용하여 측정하였다. 0.1 M의 포타슘 인산염 버퍼(potassium phophate buffer, pH 6.8) 120 μL에 제조예 1에서 얻은 일정 농도의 시료 용액 20 μL(1mg/ml 농도)와 mushroom tyrosinase(500 units/mL, Sigma Co., St. Louis, MO, USA) 용액 20 μL을 가하고 1.5mM의 티로신(tyrosin) 40 μL 를 첨가하고 37℃에서 10분간 반응시켰다. 반응 후 450 nm에서 흡광도를 측정하였으며 티로시나제(Tyrosinase) 저해 활성(%)은 하기 [식 2]에 따라 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 실험값의 비교를 위해 동백나무 종자 오일 추출물(CO) 및 동백나무 열매 추출물(CY)을 각각 비교예 1 및 비교예 2로 하였다.
[식 2]
티로시나제 저해 활성 (%) = (((A-B)-(C-D))/(A-B))×100
A: 티로시나아제 첨가, 시료 무첨가인 경우의 450 nm에서 흡광도의 값
B: 시료와 티로시나아제 무첨가인 경우의 450 nm에서 흡광도의 값
C: 시료와 티로시나아제 첨가인 경우의 450 nm에서 흡광도의 값
D: 티로시나아제 무첨가, 시료 첨가인 경우의 450 nm에서 흡광도의 값
| 비교예1(CO) | 비교예2(CY) | CR | CS | CL | CF | |
| 티로시나제 저해 활성(%) |
38.1±1.3 | 32.2±1.5 | 22.7±1.1 | 18.4±1.3 | 24.6±1.4 | 15.7±2.1 |
(단위 : %)
상기 표 2를 참조하면, 비교예 1 및 비교예 2인 동백나무 종자 오일 추출물(CO) 또는 동백나무 열매 추출물(CY)에 비해 본 발명의 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 각각 사용하는 경우, 티로시나제 저해 활성이 보다 미미한 것을 확인할 수 있다.
[실험예 3 :
동백나무 혼합 추출물(C1 ~ C10)의
미백 활성 측정]
상기 실험예 2의 결과에 의하면, 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)에 비해 동백나무 종자 오일 추출물(CO) 또는 동백나무 열매 추출물(CY)의 미백 활성이 우수함을 확인하였다.
그러나, 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)의 혼합 사용에 따른 미백 활성의 효과를 추가로 확인하기 위하여 하기 표 3과 같은 조성을 가지는 혼합 추출물을 제조하여, 상기 실험예 2와 동일한 미백 실험을 진행하였으며 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
| C1 | C2 | C3 | C4 | C5 | C6 | C7 | C8 | C9 | C10 | |
| CO | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | - | - | - | - | - |
| CY | 100 | - | - | - | - | 100 | 100 | 100 | 100 | - |
| CR | - | 100 | - | - | - | 100 | - | - | - | 100 |
| CS | - | - | 100 | - | - | - | 100 | - | - | 100 |
| CL | - | - | - | 100 | - | - | - | 100 | - | 100 |
| CF | - | - | - | - | 100 | - | - | - | 100 | 100 |
(단위 : 중량부)
| C1 | C2 | C3 | C4 | C5 | C6 | C7 | C8 | C9 | C10 | |
| 티로시나제 저해 활성(%) |
41.3 ±1.5 | 31.6±1.1 | 30.8±1.0 | 34.2±1.4 | 30.2±1.6 | 42.6±1.4 | 39.0±1.7 | 43.4±1.0 | 38.8±1.2 | 67.4±1.7 |
(단위 : %)
상기 표 4를 참조하면, 단일 추출물을 사용한 경우 티로시나제 저해 활성이 높았던 동백나무 종자 오일 추출물(CO)과 동백나무 열매 추출물(CY)을 혼합한 C1의 경우 그 활성이 소폭 향상된 것을 확인할 수 있다.
또한, 상기 티로시나제 저해 활성이 높아 미백활성이 우수한 동백나무 종자 오일 추출물(CO)에 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 각각 추가로 포함하는 C2 내지 C5, 그리고 동백나무 열매 추출물(CY)에 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 각각 추가로 포함하는 C6 내지 C9의 경우 미백 활성이 아주 소폭 향상될 뿐 동백나무 종자 오일 추출물(CO)과 동백나무 열매 추출물(CY)을 혼합한 C1에 비해 낮은 정도의 미백 활성을 나타냄을 확인할 수 있었다.
그러나, 동백나무 종자 오일 추출물(CO)과 동백나무 열매 추출물(CY)을 제외한 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 모두 포함하는 C10의 경우 그 활성이 우수한 정도로 나타나는 것을 확인하였으며, 동백나무의 뿌리, 줄기, 잎 및 꽃을 각각 포함하는 단일 추출물에 비해 혼합 추출물(C10)로 사용하는 경우 티로시나제 저해 활성이 매우 향상되어 미백 효과가 우수함을 확인할 수 있다.
이는 동백나무 종자 오일 추출물(CO) 및 동백나무 열매 추출물(CY)의 혼합 구성인 C1에 비해 더 우수한 미백 활성을 나타냄을 알 수 있다.
[실험예 4 :
동백나무 혼합 추출물(CX1 내지 CX5)의
미백 활성 측정]
상기 실험예 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 모두 포함하는 동백나무 혼합 추출물(C10)의 경우 가장 우수한 정도의 티로시나제 저해 활성을 나타내는 것을 확인함에 따라, 상기 구성의 혼합 중량비에 따른 상승 효과를 확인하기 위하여 하기 표 5와 같은 조성을 가지는 동백나무 혼합 추출물을 추가로 제조하였다.
그리고, 상기 실험예 2 및 실험예 3의 실험방법과 동일하게 진행하여 CX1 내지 CX5의 효과를 하기 표 6에 나타내었으며, 상기 CX1 내지 CX5의 실험 결과의 객관적인 비교를 위해 실험예 3의 동백나무 혼합 추출물(C10)의 효과를 지수 5로 하여 이를 기준으로 지수 1 내지 10의 범위내로 비교하여 나타내도록 하였으며, 그 숫자는 높을수록 피부 미백 활성이 우수한 것이다.
| CX1 | CX2 | CX3 | CX4 | CX5 | |
| CR | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| CS | 1 | 50 | 100 | 150 | 200 |
| CL | 20 | 80 | 140 | 200 | 260 |
| CF | 10 | 40 | 70 | 100 | 130 |
(단위 : 중량부)
| C10 | CX1 | CX2 | CX3 | CX4 | CX5 | |
| 티로시나제 저해 활성(%) |
5 | 3 | 8 | 8 | 9 | 4 |
(단위 : 지수)
상기 표 6과 같이, 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 모두 포함하는 동백나무 혼합 추출물 CX1 내지 CX5 중, CX2 내지 CX4의 경우 C10에 비해 보다 더 우수한 정도의 티로시나제 저해 활성(%)을 나타내는 것을 확인할 수 있으며, 이는 바람직한 중량범위 내의 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 포함함에 따른 것이다.
즉, 동백나무 뿌리 추출물(CR) 100 중량부에 대하여, 동백나무 줄기 추출물(CS) 50 내지 150 중량부, 동백나무 잎 추출물(CL) 80 내지 200 중량부 및 동백나무 꽃 추출물(CF) 40 내지 100 중량부로 포함함으로써 나타나는 혼합 사용에 따른 상승 효과로, 상기 추출물의 단순 혼합에 의한 것이 아닌 바람직한 중량부 범위 내의 혼합에 따른 미백 활성의 상승 효과인 것임을 상기 실험 결과를 통해 알 수 있다.
[실험예 5 :
천연 추출물(AE 및 EE)을 포함하는 동백나무 혼합 추출물의
미백 활성 측정]
상기 실험예 4에서 가장 우수한 미백 활성을 나타낸 CX4에 천연 추출물인 잔잎바디 및 카칼리아를 추가 혼합함에 따른 미백 활성 증진 효과를 확인하기 위해 추가 실험을 진행하였다.
상기 잔잎바디 및 카칼리아는 제조예 1의 동백나무 뿌리 추출물(CR)과 동일한 추출방식에 의해 잔잎바디 추출물(AE) 및 카칼리아 추출물(EE)로 제조하였으며, 하기 표 7과 같은 혼합 중량비로 하여 복합 추출물을 제조하여 실험예 2의 피부 미백활성 실험을 진행하여 하기 표 8에 나타내었다.
하기 표 8의 실험 결과는 CX4를 지수 5로 하여 상대적인 평가를 진행하였으며, 1 내지 10의 지수로 나타내도록 하였다. 그 숫자는 높을수록 피부 미백 활성이 우수한 것이다.
| M1 | M2 | M3 | M4 | M5 | M6 | M7 | |
| CR | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| CS | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 |
| CL | 200 | 200 | 200 | 200 | 200 | 200 | 200 |
| CF | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| AE | 5 | - | 0.1 | 1 | 5 | 10 | 20 |
| EE | - | 5 | 0.1 | 1 | 5 | 10 | 20 |
(단위 : 중량부)
| CX4 | M1 | M2 | M3 | M4 | M5 | M6 | M7 | |
| 티로시나제 저해 활성(%) |
5 | 5.2 | 5.3 | 5.6 | 7.5 | 7.8 | 8.0 | 6.0 |
(단위 : 지수)
상기 표 8을 참조하면, 천연 추출물인 잔잎바디 추출물(AE) 및 카칼리아 추출물(EE)를 각각 더 포함하는 M1 및 M2에 의하는 경우 CX4에 비해 소폭 향상된 미백 활성을 나타낼 수 있음을 확인할 수 있으며,
상기 잔잎바디 추출물(AE) 및 카칼리아 추출물(EE)을 모두 포함하는 M3 내지 M7의 경우 천연 추출물이 혼합 사용에 따른 상승 효과로 상기 M1 및 M2과 비교하였을 때 보다 더 우수한 티로시나제 저해 활성을 나타냄을 알 수 있다.
특히, 동백나무 뿌리 추출물(CR) 100 중량부에 대하여, 동백나무 줄기 추출물(CS) 150 중량부, 동백나무 잎 추출물(CL) 200 중량부, 동백나무 꽃 추출물(CF) 100 중량부에 추가로 잔잎바디 추출물(AE) 1 내지 10 중량부 및 카칼리아 추출물(EE) 1 내지 10 중량부를 포함하는 M4 내지 M6의 경우 상기 중량범위를 벗어나는 경우에 비해 보다 더 향상된 정도의 피부 미백 활성을 나타냄을 알 수 있다.
결과적으로, 동백나무 추출물의 경우, 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)을 혼합 사용하는 경우, 동백나무 종자 오일 추출물(CO) 또는 동백나무 열매 추출물(CY)만을 사용하는 경우에 비해 보다 우수한 정도의 피부 미백 활성을 나타냄을 알 수 있으며, 천연 추출물인 잔잎바디 추출물(AE) 및 카칼리아 추출물(EE)을 추가로 더 포함하는 경우 그 활성이 보다 더 향상됨을 알 수 있다.
[실험예 6: 차음료에 대한 기호도 평가]
상기 CX4, M1 내지 M7을 포함하는 차음료에 대하여 20 내지 40대 성인남녀 30인의 시험자에게 시음하게 한 뒤 향과 맛을 평가하게 하여 1 내지 10의 지수로 기호도를 평가하도록 하였다. 그 결과를 종합하여 평균한 뒤 하기의 표 9에 나타내었다. 하기의 지수는 높을수록 기호도가 우수한 것이며, 각 지수는 평균값에 반올림을 적용하여 나타내었다.
| CX4 | M1 | M2 | M3 | M4 | M5 | M6 | M7 | |
| 맛 | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 | 9 | 9 | 7 |
| 향 | 3 | 4 | 4 | 6 | 8 | 8 | 9 | 6 |
| 종합기호도 | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 | 9 | 9 | 7 |
(단위 : 지수)
상기 표 9를 참조하면, 본원발명 동백나무 뿌리 추출물(CR), 동백나무 줄기 추출물(CS), 동백나무 잎 추출물(CL) 및 동백나무 꽃 추출물(CF)만을 포함하는 동백나무 혼합 추출물(CX4)에 비해 천연 추출물 잔잎바디 추출물(AE) 및 카칼리아 추출물(EE)를 더 포함하는 M1 내지 M7의 경우 맛 및 향에 대한 기호도가 보다 향상됨을 확인할 수 있으며, 특히 바람직한 중량부로 포함하는 M4 내지 M6의 경우 전체적인 기호도가 8 내지 9를 나타내어 기호성 높은 조성물로의 제공이 가능함을 알 수 있다.
따라서, 상기 혼합 구성에 의하는 경우, 천연 추출물을 기반으로 하여 동백나무 혼합 추출물(CX4)에 대한 기호도를 향상시킬 수 있음을 알 수 있으며, 이를 통해 장기간 복용에 따른 부작용 등의 문제가 없으면서도 피부 미백 활성이 우수하며, 높은 정도의 맛과 향미를 갖는 기호성 있는 식품 조성물 또는 화장료 조성물로의 제공이 가능하다는 것을 확인할 수 있다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.
Claims (7)
- 동백나무 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물로,
상기 동백나무 추출물은 동백나무 뿌리 추출물, 동백나무 줄기 추출물, 동백나무 잎 추출물 및 동백나무 꽃 추출물을 포함하는 것인
피부 미백용 조성물. - 삭제
- 제 1항에 있어서,
상기 동백나무 추출물은 물, C1 내지 C6의 저급 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출 용매를 이용하여 추출되는 것인
피부 미백용 조성물. - 제 1항 또는 제 3항에 따른 조성물을 포함하는
화장료 조성물. - 제 4항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 스킨, 세럼, 로션, 에멀전, 크림, 에센스, 화장수, 파운데이션, 팩, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 스프레이 및 파우더로 구성된 군으로부터 선택된 제형인
화장료 조성물. - 제 1항 또는 제 3항에 따른 조성물을 포함하는
식품 조성물. - 제 6항에 따른 식품 조성물을 포함하는
건강기능식품.
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