KR20230136766A - 질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물,제조 방법 및 용도 - Google Patents

질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물,제조 방법 및 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20230136766A
KR20230136766A KR1020237028014A KR20237028014A KR20230136766A KR 20230136766 A KR20230136766 A KR 20230136766A KR 1020237028014 A KR1020237028014 A KR 1020237028014A KR 20237028014 A KR20237028014 A KR 20237028014A KR 20230136766 A KR20230136766 A KR 20230136766A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
alkyl
pyrazole
mmol
pyridin
cycloalkyl
Prior art date
Application number
KR1020237028014A
Other languages
English (en)
Inventor
준 종
용큐안 저우
용보 리유
샤오후 첸
리빈 리유
민춘 첸
하오 왕
친 가오
Original Assignee
베이징 즈지엔진루이 셩우이야오 커지 요우시엔공스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 베이징 즈지엔진루이 셩우이야오 커지 요우시엔공스 filed Critical 베이징 즈지엔진루이 셩우이야오 커지 요우시엔공스
Publication of KR20230136766A publication Critical patent/KR20230136766A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

본 발명은 약물 화학 분야에 관한 것으로, 구체적으로는 식 I로 표시되는 질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물, 제조 방법 및 용도에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 고도로 선택적이고 매우 효과적인 RET 억제제로 사용될 수 있고, 이러한 유형의 화합물은 RET 게이트키퍼 잔기 돌연변이체 RET V804M 돌연변이, RET 용매 프론트 잔기 돌연변이체 G810R 및 다른 임상 관련 RET 돌연변이체 및 RET-wt에 대해 모두 강한 억제 작용을 가지며, 상기 화합물은 갑상선암 유래의 TT 세포계 및 다양한 RET 돌연변이체에 의해 형질전환된 Ba/F3 세포의 성장을 현저히 억제할 수도 있고, 억제 작용은 선택적 RET 억제제 LOXO-292보다 강하다. 이 밖에, 상기 화합물은 세포 RET 자가인산화 및 그 다운스트림 경로를 크게 차단하고, TT 세포 사멸을 현저히 유도할 수 있다.

Description

질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물, 제조 방법 및 용도
관련 출원의 상호 참조
본원 발명은 2021년 2월 8일 중국 국가지식산권국에 제출한 출원번호가 202110172167.6이고, 발명의 명칭이 “질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물, 제조 방법 및 용도”인 선출원의 우선권을 주장하는 바, 해당 출원의 모든 내용은 참조로서 본원 발명에 인용된다.
본 발명은 약물 화학 분야에 관한 것으로, 구체적으로는 질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물, 제조 방법 및 용도에 관한 것이다.
연구를 통해, 갑상선 유두암(papillary thyroid carcinoma, PTC)(Cell, 1990, 60(4): 557-563), 수질성 갑상선 암종(medullary thyroid carcinoma, MTC)(hyroid, 2009, 19(6): 565-612), 다발 내분비샘 종양 2형(multiple endocrineneoplasia typeⅡ, MEN2)(Endocr Rev, 2006, 27(5): 535-560), 선천성 거대결장증(Proc Natl Acad Sci USA, 2000, 97(1): 268-273), 폐의 선암(Nat Med, 2012, 18(3): 375-377) 등 다양한 질환의 발생이 RET 유전자 돌연변이와 밀접한 관계가 있음을 발견하였다. 현재 KIF5B-RET, CCDC6-RET, TRIM33-RET, NCOA4-RET 이 4가지 RET 융합 유전자만 비소세포폐암에서 보고되었고, KIF5B-RET는 비소세포폐암에서 흔히 보는 RET 융합 유전자이다(Cancer, 2013, 119(8): 1486-1494). KIF5B-RET는 KIF5B(kinesin family member 5B) 유전자 및 RET 유전자의 염색체 도치(inversion) (p11; q11)에 의해 형성된 융합 유전자이고, 전체 게놈 및 전사체를 통해 시퀀싱되며, 비흡연 한국인의 선암에서 최초로 검증되었고; KIF5B-RET는 폐암에서 차지하는 비율이 아주 낮은 바, 비흡연자 및 선암 환자에서 더 흔히 볼 수 있으며, 예컨대 EGFR,KRAS, BRAF, ErbB2, EML4-ALK 등 다른 돌연변이와 서로 배척한다(Genome Res, 2012,22(3): 436-445). KIF5B-RET융합 단백질은 모터 도메인 및 KIF5B의 이중나선 도메인을 포함하고, 상기 융합 단백질의 RET타이로신 키나아제 활성은 이중나선 도메인의 이합체화 작용을 통해 비정상적으로 활성화될 수 있으므로, 폐 종양 발생을 촉진시킨다(Cancer, 2011, 117(12): 2709-2718). Qian 등 연구에서(Mol Cancer,2014, 13: 176), KIF5B-RET 융합 키나아제는 체외 및 체내에서 모두 현저한 발암 활성화를 갖고, STAT3의 신호 전도 경로는 종양 발생의 주요 다운스트림 매체일 수 있음을 검증하였다. 증거에 따르면, KIF5B-RET는 STAT3의 지속적인 활성화를 조절할 수 있다. KIF5B-RET 융합 키나아제는 STAT3에 결합되어 STAT3-Tyr705를 직접 인산화 및 활성화할 수 있고; 또한 JAK/STAT3 의존적 경로를 통해 STAT3-Tyr705의 활성화를 매개하며, RAS/RAF/MEK/ERK1 경로를 통해 Ser727의 인산화를 촉발할 수 있다.
RET 융합물이 일부 암에서 구동자인 것인 증명되었는 바, 이는 RET 억제 활성을 이미 가지는 멀티 키나아제 억제제(multi-kinase inhibitor)의 응용을 촉진시키고, RET 융합물 단백질이 로딩된 종양 환자의 치료에 사용된다. 현재 이러한 발암 유전자를 목적적으로 표적화할 수 있는 약제가 허가된 바가 아직 없으며, 현재 RET 특이성 암의 치료 방식은 멀티 키나아제 억제제 및 화학 치료에만 제한되지만, 이들의 비특이성 치료 임상 표현 ORR(객관적 반응률)이 좋지 않고 아주 큰 탈표적 독성이 있다. 또한, 암 치료에서 가장 큰 도전은 치료가 일정하게 진행된 후 종양 세포에 약제내성이 나타나는 것인데, 약제내성이 나타나면, 환자의 치료 방식은 일반적으로 제한을 받게 되며, 대부분 경우 암은 계속 진행되어 억제되지 않는다. 갑상선암 등 다양한 인간 암에서, RET 키나아제 신호 전달은 아주 중요한 역할을 하는 것으로 밝혀졌다. 여기서, RET의 게이트키퍼 잔기체 RET 804V 돌연변이는 종양이 현재 허가된 비선택적 RET 억제제(예를 들어, 카보잔티닙(cabozantinib) 및 반데타닙(vandetanib))에 대해 약제 내성을 가지는 것을 일으키는 중요한 원인이다. 분리형 가족성 수질성 갑상선 암종의 RET 세포외 또는 세포내 도메인에서의 중요한 돌연변이 중 하나, 즉 키나아제 ATP 결합 부위에서의 게이트키퍼 잔기 V804M 돌연변이는 ATP 결합 부위에 대한 기존의 약물의 친화력을 감소시킨다. 문헌(RET Solvent Front Mutations Mediate Acquired Resistance to Selective RET Inhibition in RET-Driven Malignancies, Journal of Thoracic Oncology, 2020, Vol.15, No 4, 541-549)에서 보고된 바와 같이, 선택적 RET 억제제 LOXO-292(셀퍼카티닙(Selpercatinib))는 위에서 언급된 RET 804V 돌연변이를 방지할 수 있지만, 해당 선택적 RET 억제제를 사용할 경우 다른 돌연변이가 발생되어 약제 내성을 초래하게 되는데, 예를 들어, 비소세포폐암에서 키나아제 ATP 결합 부위 중 용매 프론트의 잔기 G810 돌연변이, 예를 들어, G810R,G810S, G801C 돌연변이를 초래하게 되고, ATP 결합 부위에 대한 LOXO-292를 감소시킴으로써, 약제 내성을 일으켜 암을 진행시키므로, 개선된 RET 돌연변이 억제제를 개발할 필요가 있다.
상기 문제점을 개선하기 위해, 본 발명은 하기 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하며:
I
여기서, Q는 또는 로부터 선택되고;
여기서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7은 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 CR1 또는 N으로부터 선택되고;
X8은 CR1R1’ 또는 NR1로부터 선택되며;
각각의 R1 및 R1’은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, 비치환되거나 선택적으로 Ra로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되며;
A는 H, 할로겐, CN, OH, NH2, 비치환되거나 선택적으로 Rb로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
D, E는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, B(OH)2, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7, -O-R21, C(O)OR22, -P(O)R23R24, 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, NH2로부터 선택되되, 조건은 D 및 E 중 적어도 하나는 H가 아니며, 예를 들어 D 및 E 중 적어도 하나는 -O-R21로부터 선택되거나 D 및 E 중 적어도 하나는 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, NH2로부터 선택되고;
R21, R22, R23, R24는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rd로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴로부터 선택되고;
G는 할로겐, 비치환되거나 선택적으로 Re로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 적어도 하나의 헤테로원자가 N으로부터 선택된 5-20원 헤테로아릴, 적어도 하나의 헤테로원자가 N으로부터 선택된 3-20원 헤테로시클릴, C3-40 시클로알킬-NH-로부터 선택되며;
K는 부재, H, 할로겐, CN, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
각각의 R2는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, -C(O)R4, -S(O)2R6으로부터 선택되고;
각각의 R3은 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, -C(O)R4, -S(O)2R6으로부터 선택되고;
또는, R2 및 R3은 연결된 N 원자와 함께 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 5-20원 헤테로아릴 또는 3-20원 헤테로시클릴을 형성하며;
각각의 R4는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3으로부터 선택되며;
각각의 R5는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬카르보닐, C2-40 알케닐카르보닐, C2-40 알키닐카르보닐, C3-40 시클로알킬카르보닐, C3-40 시클로알케닐카르보닐, C3-40 시클로알키닐카르보닐, C6-20 아릴카르보닐, 5-20원 헤테로아릴카르보닐, 3-20원 헤테로시클릴카르보닐로부터 선택되며;
각각의 R6은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3으로부터 선택되며;
각각의 R7은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴로부터 선택되며;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8이고;
각각의 R01, R02, R03, R04는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Rg로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
각각의 Ra, Rb, Rc, Rd, Re, Rf는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Rg로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
각각의 Rg는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Rh로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되거나; 또는, 시클릭기(C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, 3-20원 헤테로시클릴 등을 포함하나 이에 한정되지 않음)의 상이한 위치가 2개 이상의 치환기에 의해 치환되는 경우, 상기 치환기 중 2개는 상기 시클릭기와 가교 고리를 형성할 수도 있되, 상기 가교 고리 중 가교 헤드 원자를 제외한 가교 원자는 CH2, O, NH로부터 선택되는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 2가 기를 포함할 수 있고;
각각의 Rh는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Ri로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
각각의 Ri는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Rj로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
또는, 시클릭기(C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, 3-20원 헤테로시클릴 등을 포함하나 이에 한정되지 않음)의 상이한 위치가 2개 이상의 치환기에 의해 치환되는 경우, 상기 치환기 중 2개는 상기 시클릭기와 가교 고리를 형성할 수도 있되, 상기 가교 고리 중 가교 헤드 원자를 제외한 가교 원자는 CH2, O, NH로부터 선택되는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 2가 기를 포함할 수 있으며;
또는, 1개의 원자(예: 탄소 원자 또는 질소 원자)가 2개 이상의 치환기에 의해 치환되는 경우, 상기 치환기 중 2개는 이들이 공동으로 연결된 원자와 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 시클릭기(비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴 등을 포함하나 이에 한정되지 않음)를 형성할 수 있다.
예를 들어, NH2가 2개의 치환기 Rc에 의해 치환되는 경우, 상기 2개의 치환기 Rc는 이들이 공동으로 연결된 질소 원자와 함께 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 5-20원 헤테로아릴 또는 3-20원 헤테로시클릴, 예를 들어 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 5, 6 또는 7원 헤테로아릴 또는 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 3, 4, 5, 6 또는 7원 헤테로시클릴을 형성할 수 있으며;
본 발명의 실시형태에 따르면, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 CR1 또는 N으로부터 선택되며; 예를 들어, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7 중 적어도 하나는 N이고, 예를 들어 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개가 N이며;
본 발명의 실시형태에 따르면, X8은 CR1R1' 또는 NR1로부터 선택되고;
본 발명의 실시형태에 따르면, 각각의 R1 및 R1'은 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, C1-6 알킬, C3-10 시클로알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되고;
본 발명의 실시형태에 따르면, A는 H, 할로겐, CN, OH, C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되며;
본 발명의 실시형태에 따르면, D, E는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 NH2 또는 -O-R21로부터 선택되되, 조건은 D 및 E 중 적어도 하나는 H가 아니며, 예를 들어 D 및 E 중 적어도 하나는 -O-R21 또는 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 NH2로부터 선택되는 것이고;
본 발명의 실시형태에 따르면, R21은 비치환되거나 선택적으로 Rd로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-6 알킬로부터 선택되며;
본 발명의 실시형태에 따르면, R2 및 R3은 연결된 N 원자와 함께 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 5-20원 헤테로아릴 또는 3-20원 헤테로시클릴, 예를 들어 5, 6 또는 7원 헤테로아릴 또는 3, 4, 5, 6 또는 7원 헤테로시클릴을 형성할 수 있고;
본 발명의 실시형태에 따르면, 각각의 R01, R02, R03, R04는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되고;
본 발명의 실시형태에 따르면, 각각의 Ra, Rb, Rc, Rd, Re, Rf는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, NH2, CN, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rg로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시, C3-10 시클로알킬, C3-10 시클로알킬옥시, C2-6 알키닐옥시, 3-8원 헤테로시클릴, 3-8원 헤테로아릴로부터 선택되고;
본 발명의 실시형태에 따르면, 각각의 Rg는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 OH, 할로겐 또는 C3-10 시클로알킬로부터 선택되고;
본 발명의 실시형태에 따르면, G는 할로겐, C3-10 시클로알킬, C3-10 시클로알킬-NH-, C6-14 아릴, 5-14원 헤테로아릴, 3-12원 헤테로시클릴, 예를 들어 모노시클릭, 바이시클릭, 트리시클릭 또는 가교 고리 구조를 갖는 6-12원 헤테로시클릴로부터 선택되고, N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 포함할 수 있되, 조건은 그 중 적어도 하나의 헤테로원자는 N으로부터 선택되며, 예를 들어 1, 2 또는 3개의 헤테로원자는 N으로부터 선택되는 것이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, K는 -C1-6 알킬-C3-10 시클로알킬, -C1-6 알킬-C6-14 아릴, -C1-6 알킬-5-14원 헤테로아릴, -C1-6 알킬-3-10원 헤테로시클릴, -C(O)NH2, -C(O)-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C6-14 아릴, -C(O)-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-3-10원 헤테로시클릴, -C(O)-C1-6 알킬-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C1-6 알킬-C6-14 아릴, -C(O)-C1-6 알킬-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-C1-6 알킬-3-10원 헤테로시클릴로부터 선택되되, 상기 C3-10 시클로알킬, C6-14 아릴, 5-14원 헤테로아릴, 3-10원 헤테로시클릴, -C(O)-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C6-14 아릴, -C(O)-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-3-10원 헤테로시클릴, -C(O)-C1-6 알킬-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C1-6 알킬-C6-14 아릴, -C(O)-C1-6 알킬-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-C1-6 알킬-3-10원 헤테로시클릴의 시클릭기 또는 비시클릭기, 또는 -C(O)NH2는 또한 선택적으로 OH, 할로겐, CN, C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되는 1개, 2개 또는 그 이상의 기에 의해 치환되고; 상기 헤테로시클릴은 피리딜(예를 들어, 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리딘-5-일, 피리딘-6-일)일 수 있으며, 아릴은 페닐일 수 있고;
또는, K는 부재, H, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 페닐-C(O)-, 페닐-C(O)-NH-, 페닐-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 페닐옥시-C(O)-NH-, 페닐알킬-NH-C(O)-, 페닐알킬-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-, 피리딜-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 피리딜옥시-C(O)-NH-, 피리딜알킬-NH-C(O)-, 피리딜알킬-C(O)-NH-, 피롤리디닐-C(O)-NH-, 피롤리디닐옥시-C(O)-NH-, C1-6 알킬-C(O)-, C1-6 알킬-C(O)-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬옥시-C(O)-NH-, 피리딜-NH-C(O)-, C1-6 알킬-NH-C(O)-, C3-8 시클로알킬-NH-C(O)-, 피리딜옥시-, 피리딜알킬옥시-, 피리딜옥시알킬-, 페닐옥시-, 페닐알킬옥시-, 페닐옥시알킬-, C1-6 알킬-S(O)2-, C1-6 알킬-S(O)2-NH-, C1-6 알킬-NH-S(O)2-, 피리딜 C1-6 알킬-, 피리딜-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-S(O)2-, 피리딜-S(O)2-NH-, 피리딜-NH-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-NH-, 페닐 C1-6 알킬-, 페닐-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-S(O)2-, 페닐-S(O)2-NH-, 페닐-NH-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-, , 로부터 선택된다.
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, 여기서 X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 CH 또는 N으로부터 선택되며; 예를 들어, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7 중 적어도 하나는 N이고, 예를 들어 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개는 N이며;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, X8은 NR1로부터 선택되고;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, R01은 메톡시이며;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, R02는 H이고;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, R03은 메틸이며, R04는 H이고;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, R1은 H이며;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, A는 H, NH2, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필로부터 선택되고;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, E는 H, NH2로부터 선택되며;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, D는 할로겐, BnO-, H, CN, NH2, OCH3, COOH, B(OH)2,
,
, ,
, , , , , , ,
, , 로부터 선택되고;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, G는 F, 비치환되거나 선택적으로 Re로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 로부터 선택되며;
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, 기 G가 Re에 의해 치환되는 경우, Re는 기 G를 구성하는 -CH2-, -CH= 상의 H를 치환하여 예를 들어 , , , , 로부터 선택된 기를 형성할 수 있다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 달리 설명되지 않는 한, 물결선을 사용하여 표시한 화학 결합은 다른 기와의 연결 부위를 나타낸다. 예를 들어, 기 G에 2개의 물결선이 존재하면, 그 중 어느 하나는 X1, X2, X3 및 X4에 있는 고리에 모두 연결될 수 있고, 다른 하나는 기 K가 존재할 때 기 K에 연결될 수 있다.
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, 기 G의 고리 형성 원자가 탄소 원자 및 질소 원자를 포함하는 경우, 기 G는 탄소 원자 및 질소 원자 중 하나(예를 들어, 상기 예시적인 기에서 물결선으로 표시된 고리 형성 원자 중 하나)를 통해 X1, X2, X3 및 X4가 위치환 고리에 연결되고, 탄소 원자 및 질소 원자 중 다른 하나를 통해 기 K에 연결될 수 있다.
본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, K는 부재, H, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 페닐-C(O)-, 페닐-C(O)-NH-, 페닐-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 페닐옥시-C(O)-NH-, 페닐알킬-NH-C(O)-, 페닐알킬-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-, 피리딜-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 피리딜옥시-C(O)-NH-, 피리딜알킬-NH-C(O)-, 피리딜알킬-C(O)-NH-, 피롤리디닐-C(O)-NH-, 피롤리디닐옥시-C(O)-NH-, C1-6 알킬-C(O)-, C2-6 알케닐-C(O)-, C1-6 알킬-C(O)-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬옥시-C(O)-NH-, 피리딜-NH-C(O)-, C1-6 알킬-NH-C(O)-, C3-8 시클로알킬-NH-C(O)-, 피리딜옥시-, 피리딜알킬옥시-, 피리딜옥시알킬-, 페닐옥시-, 페닐알킬옥시-, 페닐옥시알킬-, C1-6 알킬-S(O)2-, C1-6 알킬-S(O)2-NH-, C1-6 알킬-NH-S(O)2-, 피리딜 C1-6 알킬-, 피리딜-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-S(O)2-, 피리딜-S(O)2-NH-, 피리딜-NH-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-NH-, 페닐 C1-6 알킬-, 페닐-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-S(O)2-, 페닐-S(O)2-NH-, 페닐-NH-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-, , , , , , , , 로부터 선택된다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 식 I로 표시되는 화합물은 하기 식 II 또는 III로 표시되는 구조를 가지며:
;
II III
여기서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, R01, R02, R03, R04, A, D, E, G, K, m은 상술한 바와 같은 정의를 갖는다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 식 I로 표시되는 화합물은 하기 식 IV 또는 V로 표시되는 구조를 가지며:
;
IV V
여기서, X1, X2, X3, X4, X5, R01, R03, R04, A, D, E, G, K는 상술한 바와 같은 정의를 갖는다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 화합물은 하기 화합물로부터 선택된다.
본 발명은 또한 식 I로 표시되는 화합물의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은 하기 단계를 포함하되:
여기서, A, D, E, Q, G, K, X5, X6, X7, X8은 상술한 바와 같은 정의를 가지며; L1은 이탈기로부터 선택된다.
또는, 상기 제조 방법은 하기 단계를 포함하되:
여기서, A, D, E, Q, G, K, X5, X6, X7, X8은 상술한 바와 같은 정의를 가지며; L2는 이탈기로부터 선택된다.
또는, 상기 제조 방법은 하기 단계를 포함하되:
여기서, A, D, E, Q, G, K, X5, X6, X7, X8은 상술한 바와 같은 정의를 가지며; L3은 이탈기로부터 선택된다.
또는, 상기 제조 방법은 보호기에 의해 치환된 식 I 화합물을 상기 보호기를 제거하는 조건에서 반응시켜 식 I 화합물을 얻는 단계를 포함한다. 여기서, 식 I 화합물에서 상이한 치환기에 따라 상기 보호기는 하이드록실 보호기, 아미노 보호기 등 중 적어도 하나로부터 선택될 수 있다.
본 발명은 또한 식 II로 표시되는 화합물의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은,
식 II-1 화합물을 화합물 R21-L과 반응시켜 식 II 화합물을 얻는 단계를 포함하되:
여기서, A, E, G, K, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, R21은 상술한 바와 같은 정의를 가지며;
D는 -O-R21로부터 선택되고; L은 이탈기로부터 선택된다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 이탈기는 OH, 할로겐 또는 OTf로부터 선택된다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 반응은 염기, 예를 들어 탄산칼륨의 존재 하에서 수행된다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 반응 온도는 50~100℃, 반응시간은 1~24시간이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 반응은 유기 용매(예: DMF)의 존재 하에서 수행될 수 있다.
본 발명은 또한 식 II-1 화합물의 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은 식 II-2 화합물의 반응을 통해 식 II-1 화합물을 제조하는 단계를 포함하되:
여기서, A, D, E, G, K, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8은 상술한 바와 같은 정의를 갖는다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 반응은 히드라진 수화물의 존재 하에서 수행되고, X7은 N이며, X8은 NH이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 반응은 유기 용매(예: DMF)의 존재 하에서 수행된다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 반응은 가열 조건에서 수행된다.
본 발명은 또한 상기 식 I-1, 식 I-2, 식 I-3, 식 II-1 또는 식 II-2로 표시되는 화합물을 제공한다.
본 발명은 또한 식 I로 표시되는 화합물을 제조하기 위한 식 I-1, 식 I-2, 식 I-3 또는 식 II-1로 표시되는 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명은 또한 약학 조성물을 제공하며, 상기 약학 조성물은 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나, 예를 들어 치료 유효량의 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나를 포함한다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 약학 조성물은 담체 및/또는 부형제와 같은 1종, 2종 또는 그 이상의 약학적으로 허용 가능한 보조제를 더 포함한다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 약학 조성물은 하나 이상의 추가적인 치료제를 더 포함한다.
본 발명은 또한 체외 또는 체내에서 세포 증식을 억제하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 세포와 유효량의 본 발명에 따른 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학 조성물을 접촉시키는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 RET 유전자 및/또는 RET 키나아제에 의해 매개되는 질환의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 환자에게 치료 유효량의 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나를 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명의 실시형태에 따르면, RET, RET 유전자 또는 RET 키나아제가 기재된 경우, 이는 RET-wt, V804M, V804L, V804E, G810R,G810S, G810C, G810V 및 S904F를 포함하나 이에 한정되지 않는 것으로부터 선택된 RET 유전자 또는 RET 키나아제를 의미한다.
본 발명은 또한 치료가 필요한 환자에서 RET 관련 질환 또는 병증을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 환자에게 치료 유효량의 본 발명에 따른 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 치료가 필요한 환자에서 암을 치료하거나 및/또는 특정 암 관련 전이를 억제하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 환자에게 치료 유효량의 본 발명에 따른 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 치료가 필요한 환자에서 과민성 대장증후군(IBS) 및/또는 IBS 관련 통증을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 환자에게 치료 유효량의 본 발명에 따른 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 암 환자에게 지지적 케어를 제공하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 치료(화학 요법 치료 포함)와 관련된 위장 질환(예를 들어, 설사)을 예방 또는 최소화하는 단계를 포함하고, 상기 방법은 환자에게 치료 유효량의 본 발명에 따른 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 약물의 제조에 있어서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도를 제공하며, 상기 약물은 RET 키나아제에 의해 매개되는 질환을 치료하고, RET 키나아제 활성을 억제하며, 암을 치료하거나 및/또는 특정 암 관련 전이를 억제하고, 과민성 대장증후군(IBS) 또는 IBS 관련 통증을 치료하며, 암 환자에게 지지적 케어를 제공하고, RET 관련 질환 또는 병증을 치료하며, 항암 약물에 대한 획득 저항성을 역전 또는 예방하고, 개체에서 항암 약제 내성 진행을 지연 및/또는 예방하며, 항암 약물 진행 저항성에 대한 가능성을 증가시키기 위한 것이다.
본 발명의 실시형태에 따르면, 상기 RET 관련 질환 또는 병증은 RET 유전자 및/또는 RET 키나아제에 의해 매개되는 질환으로부터 선택되고, 여기서 RET, RET 유전자 또는 RET 키나아제는 RET-wt, V804M, V804L, V804E, G810R,G810S, G810C, G810V 및 S904F를 포함하나 이에 한정되지 않는 RET 유전자 또는 RET 키나아제로부터 선택된다.
본 발명은 또한 RET 키나아제에 의해 매개되는 질환을 치료하기 위한 약물의 제조에 있어서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도를 제공한다.
본 발명은 또한 암을 치료하거나 및/또는 특정 암 관련 전이를 억제하기 위한 약물의 제조에 있어서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도를 제공한다.
본 발명은 또한 과민성 대장증후군(IBS) 또는 IBS 관련 통증을 치료하기 위한 약물의 제조에 있어서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도를 제공한다.
본 발명은 또한 암 환자에게 지지적 케어를 제공하기 위한 약물의 제조에 있어서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도를 제공하며, 상기 지지적 케어에는 설사와 같은 치료(화학 요법 치료 포함)와 관련된 위장 병증의 예방 또는 최소화가 포함된다.
본 발명은 또한 RET 키나아제 활성을 억제하기 위한 약물의 제조에 있어서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도를 제공한다.
본 발명은 또한 RET 관련 질환 또는 병증을 치료하기 위한 약물의 제조에 있어서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도를 제공한다.
본 발명은 또한 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, (a) 상기 암이 RET 유전자, RET 키나아제, 또는 그 중 어느 하나의 발현 또는 활성 또는 수준(예를 들어, RET 관련 암)의 실조와 관련되는지 여부를 결정하는 단계; (b) 상기 암이 RET 유전자, RET 키나아제, 또는 그 중 어느 하나의 발현 또는 활성 또는 수준(예를 들어, RET 관련 암)의 실조와 관련되는 것으로 결정되면, 환자에게 치료 유효량의 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 항암 약물에 대한 획득 저항성을 역전 또는 예방하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은, 치료 유효량의 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나를 항암 약물 진행 또는 획득 저항성을 가지는 위험에 처한 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 개체에서 항암 약제 내성 진행을 지연 및/또는 예방하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은 개체에 유효량의 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나를 투여하고, 이전, 기간 또는 이후에 유효량의 항암 약물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 암을 앓고 있고 항암 약물 진행 저항성에 대해 증가 가능성이 있는 개체를 치료하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은 개체에 (a) 유효량의 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나; 및 (b) 유효량의 항암 약물을 수반하여 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 RET 관련 암을 앓고 있는 개체를 치료하는 방법을 제공하며, 상기 암은 하나 또는 다수의 RET 억제제 저항성 돌연변이를 갖고, 상기 RET 억제제 저항성 돌연변이는 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나가 아닌 RET 억제제에 대한 상기 암의 저항성(예를 들어,RET-wt, 아미노산 부위 804, 810, 904 위치에서의 치환, 예를 들어, V804M, V804L, V804E, G810R,G810S, G810C, G810V, S904F)을 증가시키며, 상기 방법은, 다른 기타 항암 약물을 투여하기 이전, 기간 또는 이후, 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나를 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 RET 관련 암을 앓고 있는 개체를 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, 다른 기타 항암 약물을 투여하기 이전, 기간 또는 이후, 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나를 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 필요로 하는 환자에서 암(예를 들어, RET 관련 암)을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, 상기 환자에게 치료 유효량의 일반식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명에 따른 임의의 방법 또는 용도의 일부 실시형태에서, 암(예를 들어, RET 관련 암)은 혈액암이다. 본 발명에 따른 임의의 방법 또는 용도의 일부 실시형태에서, 암(예를 들어, RET 관련 암)은 고형 종양이다. 본 발명에 따른 임의의 방법 또는 용도의 일부 실시형태에서, 암(예를 들어, RET 관련 암)은 폐암(예를 들어, 소세포 폐암 또는 비소세포 폐암), 유두상 갑상선암, 갑상선 수질암, 분화 갑상선암, 재발성 갑상선암, 난치성 분화 갑상선암, 폐 선암종, 세기관지 폐암, 2A 또는 2B형 다발성 내분비 종양(각각 MEN2A 또는 MEN2B), 갈색세포종, 부갑상선 증식증, 유방암, 결장직장암(예를 들어, 전이성 결장직장암), 유두상 신세포암, 위장 점막의 신경절세포종증, 염증성 근섬유모세포종 또는 자궁경부암이다. 본 발명에 따른 임의의 방법 또는 용도의 일부 실시형태에서, 암(예를 들어, RET 관련 암)은 급성 림프구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 청소년암, 부신피질암, 항문암, 충수암, 성상세포종, 비정형 기형종/횡문근종양, 기질 세포암, 담관암, 방광암, 골암, 뇌간 신경아교종, 뇌종양, 유방암, 기관지 종양, 버킷 림프종, 유암종, 알려지지 않은 원발성 암, 심장 종양, 자궁경부암, 소아암, 척색종, 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수증식성 종양, 결장암, 결장직장암, 두개인두종, 피부 T 세포 림프종, 담관암, 유관상피내암, 배아 종양, 자궁내막암, 뇌실막종, 식도암, 후신경아세포종, 유잉 육종, 두개외 생식세포종양, 생식선외 생식세포종, 간외 담관암, 안구암, 나팔관암, 뼈의 섬유성 조직구종, 담낭암, 위암, 위장유암종, 위장관기질종양(GIST), 생식세포종, 임신성 융모성 질환, 신경아교종, 유모세포종, 유모세포 백혈병, 두경부암, 심장암, 간세포암, 조직구증, 호지킨 림프종, 인두암, 안내흑색종, 섬세포종, 췌장신경내분비종, 카포시육종, 신장암, 랑게르한스세포 조직구증, 후두암, 백혈병, 구순암, 간암, 폐암, 림프종, 마크로글로불린혈증, 뼈의 악성 섬유성 조직구종, 골암, 흑색종, 메르켈 세포암, 중피종, 전이성 편평 경부암, 정중선암, 구강암, 다발성 내분비 종양 증후군, 다발성 골수종, 균상식육종, 골수이형성 증후군, 골수이형성/골수증식성 종양, 급성 골수성 백혈병, 골수성 백혈병, 다발성 골수종, 골수증식성 종양, 비강 및 부비동암, 비인두암, 신경아세포종, 비호지킨 림프종, 비소세포 폐암, 구내암, 구강암, 입술암, 구강인두암, 골육종, 난소암, 췌장암, 유두종증, 부신경절종, 부비동 및 비강암, 부갑상선암, 음경암, 인두암, 갈색세포종, 뇌하수체암, 형질세포종, 흉막모세포종, 임신 및 유방암, 원발성 중추신경계 림프종, 원발성 복막암, 전립선암, 직장암, 신세포암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암종, 육종, 세자리 증후군, 피부암, 소세포 폐암, 소장암, 연조직육종, 편평 세포암, 편평 경부암, 위암, T 세포 림프종, 고환암, 인후암, 흉선종 및 흉선암, 갑상선암, 신장 골반 및 요관의 이행 세포암, 알려지지 않은 원발성 암, 요도암, 자궁암, 자궁 육종, 질암, 외음부암 및 윌름 종양으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, 혈액암(예를 들어, RET 관련 암인 혈액암)은 백혈병, 림프종(비호지킨 림프종), 호지킨병(호지킨 림프종으로도 지칭됨) 및 골수종, 예를 들어, 급성 림프구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 급성 전골수성 백혈병(APL), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수단핵구성 백혈병(CMML), 만성 호중구 백혈병(CNL), 급성 미분화 백혈병(AUL), 역형성 대세포 림프종(ALCL), 전림프구성 백혈병(PML), 청소년 단핵구 백혈병(JMML), 성인 T 세포 ALL, 삼중 골수이형성 AML(AML/TMDS), 혼합 계통 백혈병(MLL), 골수이형성 증후군(MDS), 골수증식성 질환(MPD) 및 다발성 골수종(MM)으로부터 선택된다. 혈액암의 다른 예는 진성적혈구증가증(PV), 본태성 혈소판감소증(ET) 및 특발성 원발성 골수 섬유증(IMF/IPF/PMF)과 같은 골수증식성 질환(MPD)을 포함한다. 일 실시형태에서, 혈액암(예를 들어, RET 관련 암인 혈액암)은 AML 또는 CMML이다.
일부 실시형태에서, 암(예를 들어, RET 관련 암)은 고형 종양이다. 고형 종양(예를 들어, RET 관련 암인 고형 종양)의 예는 예를 들어 갑상선암(예를 들어, 유두상 갑상선암, 갑상선 수질암), 폐암(예를 들어, 폐 선암종, 소세포 폐암), 췌장암, 췌장관암, 유방암, 결장암, 결장직장암, 전립선암, 신세포암, 두경부 종양, 신경모세포종 및 흑색종을 포함한다. 이는 예를 들어, NatureReviewsCancer,2014,14,173-186을 참조할 수 있다.
일부 실시형태에서, 암은 폐암, 유두상 갑상선암, 갑상선 수질암, 분화 갑상선암, 재발성 갑상선암, 난치성 분화 갑상선암, 2A 또는 2B형 다발성 내분비 종양(각각 MEN2A 또는 MEN2B), 갈색세포종, 부갑상선 증식증, 유방암, 결장직장암, 유두상 신세포암, 유장관 점막 신경절세포종 및 자궁경부암으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, 상기 환자는 인간이다.
식 I 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 RET 관련 암의 치료에 사용될 수도 있다.
본 발명은 또한 필요로 하는 환자에서 과민성 대장증후군(IBS)을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, (a) IBS가 RET 유전자, RET 키나아제, 또는 그 중 어느 하나의 발현 또는 활성 또는 수준의 실조와 관련되는지 여부를 결정하는 단계; 및 (b) IBS가 RET 유전자, RET 키나아제, 또는 그 중 어느 하나의 발현 또는 활성 또는 수준의 실조와 관련되는 것으로 결정되면, 환자에게 치료 유효량의 일반식 I 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나, 또는 이의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 필요로 하는 환자의 과민성 대장증후군(IBS)을 치료하기 위한 약물 조합을 제공하며, 상기 약물 조합은 (a) 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나, (b) 다른 치료제, 및 (c) 선택적인 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 운반체를 동시, 개별 또는 순차적으로 투여하여 IBS를 치료하는 단계를 포함하며, 여기서 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 양과 다른 치료제의 양은 IBS 치료에 공동으로 효과적이다. 본 발명은 또한 이러한 조합을 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 본 발명은 또한 IBS 치료용 약물의 제조에 있어서 이러한 조합의 용도를 제공한다. 본 발명은 또한 상업용 팩 또는 제품을 제공하며, 이는 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 조합 제제로서 이러한 조합을 포함하고; 또한 필요로 하는 환자에서 IBS를 치료하는 방법에 관한 것이다.
약물로 사용되는 경우, 본 발명의 화합물은 약학 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 이들 조성물은 약제학 분야에 널리 공지된 방식으로 제조될 수 있고, 국소 또는 전신 치료가 필요한지 여부 및 치료될 부위에 따라 다양한 경로로 투여될 수 있다. 국소(예를 들어, 비강, 질 및 직장 전달을 포함하는 경피, 피부, 안구 및 점막), 폐(예를 들어, 분무기에 의한 분말 또는 에어로졸의 기관내, 비강내 흡입 또는 블로잉), 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 비경구 투여는 정맥내, 동맥내, 피하, 복강내 또는 근육내 주사 또는 주입을 포함하거나; 또는 두개내, 예를 들어 척수강내 또는 뇌실내 투여를 포함한다. 단일 대용량 형태로 비경구 투여되거나, 예를 들어 연속 주입 펌프에 의해 투여될 수 있다. 국소 투여를 위한 약용 조성물 및 제제는 경피 패치, 연고, 로션, 크림, 젤, 드롭, 좌약, 분무제, 액체제 및 분산제를 포함할 수 있다. 통상적인 약물 담체, 물, 분말 또는 유성 베이스, 증점제 등은 필요하거나 바람직할 수 있다. 코팅 콘돔(Coated condoms), 장갑 등도 유용할 수 있다.
본 발명의 조성물을 제조할 때, 일반적으로 활성 성분을 부형제와 혼합하고, 부형제로 희석하거나, 또는 예를 들어 캡슐, 사셋(sachet), 종이 또는 기타 용기 형태의 이러한 담체 내에 담는다. 부형제는 희석제로 사용되는 경우에 고체, 반고체 또는 액체 물질일 수 있으며, 비히클, 담체 또는 활성 성분의 매질로 사용된다. 따라서, 조성물은 정제, 환제, 분산제, 로렌지, 사셋, 카셰, 엘릭시르, 현탁제, 에멀젼, 용액제, 시럽, 에어로졸(고체 또는 액체에 용해되는 비히클); 예를 들어 10 중량%에 달하는 활성 화합물을 함유하는 연고제, 연질 밀 경질 젤라틴 캡슐, 좌제, 멸균 주사용액 및 멸균 포장 분말의 형태일 수 있다.
적합한 부형제의 몇몇 구현예는 유당, 포도당, 자당, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아라비아 고무, 인산칼슘, 알지네이트, 트라가칸트 고무, 젤라틴, 규산칼슘, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽 및 메틸셀룰로오스를 포함한다. 제제는 활석분, 마그네슘 스테아레이트 및 광유와 같은 윤활제; 습윤제; 유화제 및 현탁제; 메틸 벤조에이트 및 하이드록시프로필 벤조에이트와 같은 방부제; 감미제 및 방취제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물은 환자에게 투여한 후 즉시, 지속 또는 지연 방출을 제공하도록 당업계에 공지된 방법을 사용하여 조제될 수 있다.
조성물은 단위 용량당 5~1000mg, 보다 일반적으로 약 100~500mg의 활성 성분을 함유하는 단위 투여 형태로 조제될 수 있다. 용어 "단위 제형"은 인간 환자 및 기타 포유동물에 대한 단일 용량 단위로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 의미하며, 각 단위는 적합한 약물 부형제와 혼합하여 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 예정량의 활성 물질을 함유한다.
활성 화합물의 유효 용량의 범위는 매우 클 수 있으며, 일반적으로 약학적 유효량으로 투여된다. 그러나, 실제로 투여되는 화합물의 양은 일반적으로 치료되는 병증, 선택된 투여 경로, 투여되는 실제 화합물; 환자 개체의 연령, 중량 및 반응; 환자 증상의 중증도를 포함하는 관련 상황에 따라 의사에 의해 결정됨을 이해할 수 있다.
정제와 같은 고체 조성물의 제조를 위해, 주요 활성 성분을 약물 부형제와 혼합하여 본 발명의 화합물의 균일한 혼합물을 포함하는 고체 예비 제제 조성물을 형성한다. 이들 예비 제제 조성물이 균일한 것으로 지칭되는 경우, 이는 활성 성분이 일반적으로 전체 조성물에 균일하게 분포되어 상기 조성물이 정제, 환제 및 캡슐제와 같은 동일하게 효과적인 단위 제형으로 쉽게 구분될 수 있음을 의미한다. 그 후 상기 고체 예비 제제를 상기 유형의 예를 들어 약 0.1~1000mg의 본 발명의 활성 성분을 포함하는 단위 제형으로 구분한다.
본 발명의 정제 또는 환제를 코팅 또는 복합시켜 장기간 작용의 이점을 제공하는 제형을 얻을 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 환제는 내부 용량 및 외부 용량 성분을 포함하며, 후자는 전자의 코팅된 형태이다. 장용층을 통해 두 성분을 분리할 수 있는데, 장용층은 위에서 내부 성분이 그대로 십이지장을 통과하거나 지연 방출되도록 위에서 붕해를 방지하기 위해 사용된다. 이러한 유형의 장용층 또는 코팅제에는 다양한 물질이 사용될 수 있으며, 이러한 유형의 물질은 고분자산 및 고분자산과 셸락, 세틸 알코올 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 상기 유형의 물질의 혼합물을 포함한다.
여기에 본 발명의 화합물 및 조성물이 도핑될 수 있으며, 경구 또는 주사 투여를 위한 액체 형태에는 수용액, 적절하게 향을 첨가한 시럽, 수성 또는 유성 현탁액; 및 면실유, 참기름, 코코넛유 또는 땅콩유와 같은 식용유로 향을 첨가한 에멀젼; 엘릭시르 및 유사한 약용 비히클이 포함된다.
흡입 또는 블로잉을 위한 조성물은 약학적으로 허용 가능한 물 또는 유기 용매 또는 이들의 혼합물에 용해된 용액제 및 현탁액, 분산제를 포함한다. 액체 또는 고체 조성물은 상기와 같은 적합한 약학적으로 허용 가능한 부형제를 함유할 수 있다. 몇몇 실시형태에서, 경구 또는 비강 호흡 경로로 조성물을 투여하여 국소 또는 전신 작용을 구현한다. 불활성 가스를 사용하여 조성물을 분무할 수 있다. 직접 분무 장치로 분무 용액을 흡입하거나 또는 분무 장치를 마스크 커튼 또는 간헐적 양압 호흡기에 연결할 수 있다. 용액, 현탁액 또는 분말 조성물은 경구 또는 적절한 방식으로 제제를 전달하는 장치를 통해 비강으로 투여될 수 있다.
환자에게 투여되는 화합물 또는 조성물의 양은 고정되지 않는 바, 투여되는 약물, 예방 또는 치료와 같은 투여 목적, 환자의 상태, 투여 방식 등에 따라 달라진다. 치료 적용 시, 이미 질환을 앓고 있는 환자에게 질환 및 그 합병증을 치유하거나 적어도 부분적으로 억제하기에 충분한 양의 조성물을 투여할 수 있다. 유효 용량은 치료할 질환의 상태 및 주치의사의 판단에 따라 달라지며, 상기 판단은 예를 들어 질환의 중증도, 환자의 연령, 체중 및 일반상황 등 요인에 따라 달라진다.
환자에게 투여되는 조성물은 상기 약용 조성물 형태일 수 있다. 이들 조성물은 통상적인 멸균 기술 또는 필터 멸균에 의해 멸균될 수 있다. 수용액을 포장된 그대로 사용하거나 동결건조할 수 있으며, 투여 전, 동결건조 제제는 멸균 수성 담체와 혼합된다. 화합물 제제의 Ph는 일반적으로 3~11, 보다 바람직하게는 5~9, 가장 바람직하게는 7~8이다. 몇몇 전술한 부형제, 담체 또는 안정화제를 사용하면 약물 염이 형성됨을 이해할 수 있다.
본 발명의 화합물의 치료 용량은 치료를 위한 구체적 용도, 화합물의 투여 방식, 환자의 건강 및 상태, 및 처방 의사의 판단에 따라 달라질 수 있다. 약용 조성물에서 본 발명의 화합물의 비율 또는 농도는 고정되지 않을 수 있는 바, 이는 용량, 화학적 특성(예를 들어, 소수성) 및 투여 경로를 포함하는 다양한 요인에 따라 달라진다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 약 0.1~10%w/v의 상기 화합물을 함유하는 생리 완충 수용액으로 비경구 투여를 위해 제공될 수 있다. 몇몇 전형적인 용량 범위는 약 1μg/kg~약 1g/kg체중/일이다. 몇몇 실시형태에서, 용량 범위는 약 0.01mg/kg~약 100mg/kg체중/일이다. 용량은 질환 또는 병증의 종류 및 진행 정도, 구체적 환자의 일반적 건강 상태, 선택된 화합물의 상대적인 생물학적 효능, 부형제 제제 및 그 투여 경로와 같은 변수에 따라 달라질 수 있다. 유효 용량은 체외 또는 동물 모델 시험 시스템에 의해 도출된 용량-반응 곡선에서 외삽하여 얻을 수 있다.
달리 설명되지 않은 한, 본 발명의 명세서 및 청구범위에 기재된 그룹 및 용어의 정의는 이의 구현예로서의 정의, 예시적인 정의, 바람직한 정의, 표에 기재된 정의, 실시예 중 구체적인 화합물의 정의 등을 포함하되, 이들은 서로 임의로 조합 및 결합될 수 있다. 이러한 조합 및 결합된 그룹 정의 및 화합물 구조는 본 발명의 명세서에 기재된 범위 내에 속해야 한다.
달리 설명되지 않은 한, 본 명세서 및 청구범위에 기재된 수치 범위는 적어도 그 중 각각의 구체적인 정수 수치를 기재한 것에 해당된다. 예를 들어, 수치 범위 “1~40”은 수치 범위 “1~10” 중 각각의 정수 수치, 즉 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 및 수치 범위 “11~40” 중 각각의 정수 수치, 즉 11, 12, 13, 14, 15, ..., 35, 36, 37, 38, 39, 40을 기재한 것에 해당된다. 본 명세서에서 치환기를 설명할 때 사용한 1개, 2개 또는 복수에서, “복수”는 ≥3인 정수, 예를 들어 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10을 의미한다. 이 밖에, 몇몇 수치 범위가 “숫자”로 정의된 경우, 해당 범위의 두 끝점, 해당 범위 내의 각 정수 및 해당 범위 내의 각 소수가 기재된 것으로 이해해야 한다. 예를 들어, “0~10의 숫자”는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10의 각 정수를 기재할 뿐만 아니라 적어도 각 정수와 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 각자와의 합에 대해서도 기재한 것으로 이해해야 한다.
용어 “할로겐”은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 의미한다.
용어 “C1-40 알킬”은 바람직하게 1~40개의 탄소 원자를 구비하는 직쇄 또는 분지쇄의 포화 1가 탄화수소기를 의미함을 이해해야 한다.
예를 들어, “C1-6 알킬”은 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 탄소 원자를 구비하는 직쇄 또는 분지쇄 알킬기를 의미한다. 상기 알킬기는 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 이소펜틸, 2-메틸부틸, 1-메틸부틸, 1-에틸프로필, 1,2-디메틸프로필, 네오펜틸, 1,1-디메틸프로필, 4-메틸펜틸, 3-메틸펜틸, 2-메틸펜틸, 1-메틸펜틸, 2-에틸부틸, 1-에틸부틸, 3,3-디메틸부틸, 2,2-디메틸부틸, 1,1-디메틸부틸, 2,3-디메틸부틸, 1,3-디메틸부틸 또는 1,2-디메틸부틸 등 또는 이들의 이성질체이다.
용어 “C2-40 알케닐”은 바람직하게는 하나 이상의 이중결합을 포함하고 2~40개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄의 1가 탄화수소기, 바람직하게는 “C2-6 알케닐”을 의미하는 것으로 이해해야 한다. “C2-6 알케닐”은 바람직하게는 하나 이상의 이중결합을 포함하고 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 탄소 원자, 특히 2개 또는 3개의 탄소 원자(“C2-3 알케닐”)을 갖는 직쇄 또는 분지쇄의 1가 탄화수소기를 의미하며, 상기 알케닐기가 하나 이상의 이중결합을 포함할 경우, 상기 이중결합은 서로 분리 또는 공액될 수 있음을 이해해야 한다. 상기 알케닐기는 예를 들어, 비닐, 알릴, (E)-2-메틸비닐, (Z)-2-메틸비닐, (E)-부트-2-에닐, (Z)-부트-2-에닐, (E)-부트-1-에닐, (Z)-부트-1-에닐, 펜트-4-에닐, (E)-펜트-3-에닐, (Z)-펜트-3-에닐, (E)-펜트-2-에닐, (Z)-펜트-2-에닐, (E)-펜트-1-에닐, (Z)-펜트-1-에닐, 헥스-5-에닐, (E)-헥스-4-에닐, (Z)-헥스-4-에닐, (E)-헥스-3-에닐, (Z)-헥스-3-에닐, (E)-헥스-2-에닐, (Z)-헥스-2-에닐, (E)-헥스-1-에닐, (Z)-헥스-1-에닐, 이소프로페닐, 2-메틸프로프-2-에닐, 1-메틸프로프-2-에닐, 2-메틸프로프-1-에닐, (E)-1-메틸프로프-1-에닐, (Z)-1-메틸프로프-1-에닐, 3-메틸부트-3-에닐, 2-메틸부트-3-에닐, 1-메틸부트-3-에닐, 3-메틸부트-2-에닐, (E)-2-메틸부트-2-에닐, (Z)-2-메틸부트-2-에닐, (E)-1-메틸부트-2-에닐, (Z)-1-메틸부트-2-에닐, (E)-3-메틸부트-1-에닐, (Z)-3-메틸부트-1-에닐, (E)-2-메틸부트-1-에닐, (Z)-2-메틸부트-1-에닐, (E)-1-메틸부트-1-에닐, (Z)-1-메틸부트-1-에닐, 1,1-디메틸프로프-2-에닐, 1-에틸프로프-1-에닐, 1-프로필비닐, 1-이소프로필비닐이다.
용어 “C2-40 알키닐”은 하나 이상의 삼중결합을 포함하고 2~40개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄의 1가 탄화수소기, 바람직하게는 “C2-C6알키닐”을 의미하는 것으로 이해해야 한다. 용어 “C2-C6-알키닐”은 바람직하게는 하나 이상의 삼중결합을 포함하고 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 탄소 원자, 특히 2개 또는 3개의 탄소 원자(“C2-C3-알키닐”)를 갖는 직쇄 또는 분지쇄의 1가 탄화수소기를 의미하는 것으로 이해해야 한다. 상기 C2-C6-알키닐은 예를 들어, 에티닐, 프로프-1-이닐, 프로프-2-이닐, 부트-1-이닐, 부트-2-이닐, 부트-3-이닐, 펜트-1-이닐, 펜트-2-이닐, 펜트-3-이닐, 펜트-4-이닐, 헥스-1-이닐, 헥스-2-이닐, 헥스-3-이닐, 헥스-4-이닐, 헥스-5-이닐, 1-메틸프로프-2-이닐, 2-메틸부트-3-이닐, 1-메틸부트-3-이닐, 1-메틸부트-2-이닐, 3-메틸부트-1-이닐, 1-에틸프로프-2-이닐, 3-메틸펜트-4-이닐, 2-메틸펜트-4-이닐, 1-메틸펜트-4-이닐, 2-메틸펜트-3-이닐, 1-메틸펜트-3-이닐, 4-메틸펜트-2-이닐, 1-메틸펜트-2-이닐, 4-메틸펜트-1-이닐, 3-메틸펜트-1-이닐, 2-에틸부트-3-이닐, 1-에틸부트-3-이닐, 1-에틸부트-2-이닐, 1-프로필프로프-2-이닐, 1-이소프로필프로프-2-이닐, 2,2-디메틸부트-3-이닐, 1,1-디메틸부트-3-이닐, 1,1-디메틸부트-2-이닐 또는 3,3-디메틸부트-1-이닐이다. 특히, 상기 알키닐은 에티닐, 프로프-1-이닐 또는 프로프-2-이닐이다.
용어 “C3-40 시클로알킬”은 포화 1가 단일고리, 이중고리 탄화수소 고리 또는 가교 고리 알케인을 의미하는 것으로 이해해야 하되, 이는 3~40개의 탄소 원자를 구비하고, 바람직하게 “C3-10 시클로알킬”이다. 용어 “C3-10 시클로알킬”은 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 탄소 원자를 갖는 포화 1가 단일고리, 이중고리 탄화수소 고리 또는 가교 고리 알케인을 의미하는 것으로 이해해야 한다. 상기 C3-10 시클로알킬은 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 시클로노닐 또는 시클로데실 등 단일고리 탄화수소기, 또는 데카히드로나프탈렌 고리 등 이중고리 탄화수소기일 수 있다.
용어 “3-20원 헤테로시클릴”은 포화 1가 단일고리, 이중고리 탄화수소 고리 또는 가교 고리 알케인을 의미하되, 이는 독립적으로 N, O 및 S로부터 선택된 1~5개의 헤테로 원자를 포함한 전체 고리 형성 원자 수가 3~20(예를 들어, 원자 수는 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 등)인 비방향족 환상 기이고, 바람직하게 “3-10원 헤테로시클릴”이다. 용어 “3-10원 헤테로시클릴”은 포화 1가 단일고리, 이중고리 탄화수소 고리 또는 가교 고리 알케인을 의미하되, 이는 독립적으로 N, O 및 S로부터 선택된 1~5개, 바람직하게 1~3개의 헤테로 원자를 포함하는데, 예를 들어, 독립적으로 N, O 및 S로부터 선택된 1개, 2개, 3개의 헤테로 원자를 포함한다. 상기 헤테로시클릴은 상기 탄소 원자 중 어느 하나 또는 질소 원자(존재하면)를 통해 분자의 나머지 부분과 연결될 수 있다. 특히, 상기 헤테로시클릴은 아제티디닐, 옥세타닐 등 4원 고리; 5원 고리, 테트라히드로푸라닐, 디옥솔릴, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 피롤리닐 등 5원 고리; 또는 테트라히드로피라닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 디티아알킬, 티오모르폴리닐, 피페라지닐 또는 트리티아일 등 6원 고리; 또는 디아제파닐 등 7원 고리를 포함할 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 선택적으로, 상기 헤테로시클릴은 벤조 축합된 것일 수 있다. 상기 헤테로시클릴은 이중고리일 수 있는데, 예를 들어, 헥사히드로시클로펜타[c]피롤-2(1H)-일 고리와 같은 5,5원 고리, 또는 헥사히드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일 고리와 같은 5,6원 이중고리일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 질소 원자를 함유한 고리는 부분 불포화일 수 있는 바, 즉 이는 하나 이상의 이중결합을 포함할 수 있는데, 예를 들어, 2,5-디히드로-1H-피롤릴, 4H-[1,3,4]티아디아지닐, 4,5-디히드로혹사졸릴 또는 4H-[1,4]티아지닐일 수 있으나 이에 한정되지 않을 수 있거나, 또는 이는 벤조 축합된 것일 수 있는데, 예를 들어, 디히드로이소퀴놀리닐일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따르면, 상기 헤테로시클릴은 비향향족이다. 상기 3-20원 헤테로시클릴이 다른 기와 연결되어 본 발명의 화합물을 구성할 경우, 3-20원 헤테로시클릴에서의 탄소 원자와 다른 기가 연결된 것일 수 있고, 3-20원 헤테로시클릴 고리에서의 헤테로고리 원자와 다른 기가 연결된 것일 수도 있다. 예를 들어, 3-20원 헤테로시클릴이 피페라지닐기로부터 선택될 경우, 피페라지닐에서의 질소 원자와 다른 기가 연결된 것일 수 있다. 또는 3-20원 헤테로시클릴이 피페리디닐기로부터 선택될 경우, 피페리디닐 고리에서의 질소 원자 및 다른 위치에서의 탄소 원자와 다른 기가 연결된 것일 수 있다.
용어 “C6-20 아릴”은 바람직하게 6~20개의 탄소 원자를 구비하는 1가 방향족 또는 부분 방향족 단일고리, 이중고리 또는 삼중고리 탄화수소 고리, 바람직하게 “C6-14 아릴”을 의미하는 것으로 이해해야 한다. 용어 “C6-14 아릴”은 바람직하게는 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개 또는 14개의 탄소 원자를 구비하는 1가 방향족 또는 부분 방향족 단일고리, 이중고리 또는 삼중고리 탄화수소 고리(“C6-14 아릴”), 특히 페닐기 또는 비페닐기 등 6개의 탄소 원자를 구비하는 고리(“C6 아릴”), 또는 인다닐기 또는 인데닐기 등 9개의 탄소 원자를 구비하는 고리(“C9 아릴”), 또는 테트라히드로나프틸, 디히드로나프틸기 또는 나프틸 등 10개의 탄소 원자를 구비하는 고리(“C10 아릴”), 또는 플루오레닐 등 13개의 탄소 원자를 구비하는 고리(“C13 아릴”), 안트릴 등 14개의 탄소 원자를 구비하는 고리(“C14 아릴”)를 의미하는 것으로 이해해야 한다. 상기 C6-20 아릴이 치환될 경우, 단일 치환 또는 다중 치환일 수 있다. 또한, 그 치환 위치는 한정되지 않는데, 예를 들어, 오르토 위치, 파라 위치 또는 메타 위치일 수 있다.
용어 “5-20원 헤테로아릴”은 5~20개의 고리 원자를 구비하고 독립적으로 N, O 및 S로부터 선택된 1~5개의 헤테로 원자, 예를 들어 “5-14원 헤테로아릴”을 포함하는 1가 단일고리, 이중고리 또는 삼중고리 방향족 고리계를 포함하는 것으로 이해해야 한다. 용어 “5-14원 헤테로아릴”은 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13 또는 14개의 고리 원자, 특히 5개 또는 6개 또는 9개 또는 10개의 탄소 원자를 구비하며, 독립적으로 N, O 및 S로부터 선택된 1~5개, 바람직하게 1~3개의 헤테로 원자를 포함하고, 이 밖에, 각 상황에서 벤조 축합된 것일 수 있는 1가 단일고리, 이중고리 또는 삼중고리 방향족 고리계를 포함하는 것으로 이해해야 한다. 특히, 헤테로아릴은 티에닐, 푸릴, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 옥사디아졸릴, 트리아졸릴, 티아디아졸릴, 티오-4H-피라졸릴 등 및 이들의 벤조 유도체, 예를 들어 벤조옥사졸릴, 벤즈이미다에닐, 벤조옥사졸릴, 벤즈이소옥사졸릴, 벤즈이미다에닐, 벤조옥사졸릴, 인다졸릴, 인돌릴, 이소인돌릴 등; 또는 피리디닐, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아지닐 등 및 이들의 벤조 유도체, 예를 들어 퀴놀리닐, 퀴나졸리닐, 이소퀴놀리닐 등; 또는 아제피닐, 인다지닐, 퓨리닐기 등 및 이들의 벤조유도체; 또는 시놀리닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 나프티리디닐, 페노리디닐, 카르바졸릴, 아크리디닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사지닐 등으로부터 선택된다. 상기 5-20원 헤테로아릴이 다른 기와 연결되어 본 발명의 화합물을 구성할 경우, 5-20원 헤테로아릴 고리에서의 탄소 원자와 다른 기가 연결된 것일 수 있고, 5-20원 헤테로아릴 고리에서의 헤테로 원자와 다른 기가 연결된 것일 수도 있다. 예를 들어, 5-20원 헤테로아릴이 치환될 경우, 이는 단일 치환 또는 다중 치환일 수 있다. 또한, 그 치환 위치는 한정되지 않는데, 예를 들어, 헤테로아릴 고리에서 탄소 원자와 연결된 수소가 치환되거나, 헤테로아릴 고리에서 헤테로 원자와 연결된 수소가 치환된 것일 수 있다.
달리 설명되지 않은 한, 헤테로시클릴, 헤테로아릴 또는 헤테로아릴렌은 이의 모든 가능한 이성질 형태, 예를 들어 이의 위치 이성질체를 포함한다. 따라서, 일부 설명적인 비제한적인 구현예에 있어서, 이의 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8-,9-, 10-, 11-, 12- 위치 등(존재하면) 중 1개, 2개 또는 그 이상의 위치에서 치환되거나 또는 다른 기와 결합된 형태를 포함할 수 있는데, 피리딘-2-일, 피리디닐리덴-2-일, 피리딘-3-일, 피리디닐리덴-3-일, 피리딘-4-일 및 피리디닐리덴-4-일; 티에닐, 또는 티오펜-2-일, 티에닐렌-2-일, 티오펜-3-일 및 티에닐렌-3-일을 포함한 티에닐렌; 피라졸-1-일, 피라졸-3-일, 피라졸-4-일, 피라졸-5-일을 포함한다.
용어 “옥소”는 치환기 중 탄소 원자, 질소 원자 또는 황 원자가 산화된 후 형성된 옥시기에 의해 치환된 (=O)를 의미한다.
달리 설명되지 않은 한, 본 명세서에서 용어의 정의는 상기 용어를 포함하는 기에 마찬가지로 적용되는데, 예를 들어, C1-6 알킬의 정의는 C1-6 알콕시, -N(C1-6알킬)2, -NHC1-6 알킬 또는 -S(O)2-C1-6 알킬 등에도 적용된다.
본 기술분야의 통상의 기술자는 식 I로 표시된 화합물은 다양한 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 존재할 수 있음을 이해할 수 있다. 이러한 화합물이 염기성 중심을 가지면, 이는 산 부가염을 형성할 수 있고; 이러한 화합물이 산성 중심을 가지면, 염기 부가염을 형성할 수 있으며; 이러한 화합물이 산성 중심(예를 들어, 카르복실기)을 가질 뿐만 아니라 염기성 중심(예를 들어, 아미노기)도 가지면, 이는 분자 내염을 형성할 수도 있다.
본 발명의 화합물은 용매화물(예를 들어, 수화물)의 형태로 존재할 수 있고, 여기서 본 발명의 화합물은 상기 화합물 결정격자의 구조 요소인 극성 용매를 포함하며, 특히 예를 들어, 물, 메탄올 또는 에탄올이다. 극성 용매 특히 물의 양은 화학 계량 비율 또는 비화학 계량 비율로 존재할 수 있다.
분자 구조에 따르면, 본 발명의 화합물은 키랄성일 수 있으므로, 다양한 거울상 이성질체 형태가 존재할 수 있다. 따라서, 이러한 화합물은 라세미체 형태 또는 광학 활성 형태로 존재할 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 이의 중간체는 본 기술분야의 통상의 기술자가 공지하고 있는 화학 또는 물리 방법을 통해 거울상 이성질체 화합물로 분리될 수 있거나, 또는 이러한 형태로 합성될 수 있다. 라세미 아민일 경우, 광학 활성의 분해 시약과의 반응을 통해, 화합물로부터 부분입체 이성질체를 제조한다. 적절한 분해 시약의 예시는 광학 활성의 산, 예를 들어, R 및 S 배열의 타르타르산, 디아세틸타르타르산, 만델산, 말산, 젖산, 적절한 N- 보호된 아미노산(예를 들어, N-벤조일프롤린 또는 N-벤젠술포닐프롤린) 또는 다양한 광학 활성의 캄포술폰산염이다. 광학 활성에 의한 분해 시약(예를 들어, 실리카겔에 고정된 디니트로벤조일페닐글리신, 셀룰로오스트리아세테이트 또는 다른 탄수화합물의 유도체 또는 키랄 유도체화된 메타크릴레이트 폴리머)은 크로마토그래피 거울상체 분해에 유리할 수도 있다. 이러한 목적에 사용되는 적절한 용리제는 물 함유 또는 알콜 함유의 용매 혼합물, 예를 들어, 헥산/이소프로판올/아세토니트릴이다.
용어 “호변 이성질체”는 분자 중 어느 하나의 원자가 2개의 위치에서 신속하에 이동되어 생성된 작용기 이성질체를 의미한다. 본 발명의 화합물은 호변 이성질 현상을 나타낼 수 있다. 호변 이성질의 화합물은 2가지 또는 여러 가지 서로 전환될 수 있는 종류가 존재할 수 있다. 양자 이동 호변 이성질체는 2개의 원자 사이에서 공유결합되는 수소 원자의 이동으로부터 유래된다. 호변 이성질체는 일반적으로 평형 형태로 존재하며, 단일 호변 이성질체의 분리를 시도할 경우 일반적으로 혼합물을 생성하며, 이의 물리화학 성질은 화합물의 혼합물과 일치하다. 평행되는 위치는 분자 내의 화학 특성에 의해 결정된다. 예를 들어, 수많은 지방족 알데히드 및 케톤, 예를 들어 아세트알데히드에서, 케톤형이 우세를 차지하며; 페놀에서, 에놀형이 우세를 차지한다. 본 발명은 화합물의 모든 호변 이성질 형태를 포함한다.
공지된 방법에 따라, 예를 들어, 추출, 여과 또는 컬럼 크로마토그래피를 통해 대응되는 안정한 이성질체를 분리할 수 있다.
용어 "환자”는 포유 동물을 비롯한 임의의 동물을 의미하고, 바람직하게 마우스, 랫트, 다른 설치류 동물, 토끼, 개, 고양이, 돼지, 소, 양, 말 또는 영장류 동물을 의미하며, 가장 바람직하게 인간을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 단어 “치료 유효량”은 연구원, 수의, 의사 또는 다른 임상 의사가 조직, 시스템, 동물, 개체 또는 인간에서 찾고 있는 생물학 또는 의학 반응을 일으키는 활성 화합물 또는 약물의 양을 의미하되, 이는 (1) 질환 예방: 예를 들어, 쉽게 감염되는 질환, 문란 또는 병증이지만 아직 질환 병리 또는 증상을 경험하지 않았거나 나타나지 않은 개체에서 질환, 문란 또는 병증에 대한 예방; (2) 질환 억제: 예를 들어, 질환, 문란 또는 병증의 병리 또는 증상을 경험하고 있거나 나타난 개체에서 질환, 문란 또는 병증(즉, 병리 및/또는 증상이 더 진행되는 것을 저지함)에 대한 억제; (3) 질환 완화: 예를 들어, 질환, 문란 또는 병증의 병리 또는 증상을 경험하고 있거나 나타난 개체에서 질환, 문란 또는 병증(즉, 병리 및/또는 증상의 역전)에 대한 완화 중 하나 또는 복수를 포함한다.
본 발명의 화합물은 높은 선택성 또는 억제 작용을 갖는 RET 억제제로서 예를 들어 RET 게이트키퍼 잔기 돌연변이체 RET V804M, RET 용매 프론트 잔기 돌연변이체 G810R 및 다른 임상 관련 RET 돌연변이체 및 RET-wt 모두에 대해 우수한 억제 작용을 갖는다. 또한, 본 발명의 바람직한 화합물은 갑상선암 유래의 TT 세포계 및 다양한 RET 돌연변이체에 의해 형질전환된 Ba/F3 세포의 성장을 고효율적으로 억제하고, 세포 RET 자가인산화 및 그 다운스트림 경로를 차단하며, TT 세포 사멸을 현저히 유도할 수 있다. 이 밖에, 본 발명의 바람직한 화합물은 또한 양호한 약물동태학 성질을 가져 활성 성분으로 사용될 경우 적은 용량으로 환자에게 투여될 수 있으므로 환자의 치료 비용을 절감한다.
아래 구체적인 실시예와 결부하여 본 발명의 기술적 해결수단을 더 상세하게 설명한다. 아래 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명 및 해석하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 보호범위를 한정하는 것으로 해석되어서는 아니됨을 이해해야 한다. 본 발명의 내용에 기반하여 구현된 기술은 모두 본 발명의 보호범위 내에 속한다.
달리 설명되지 않은 한, 이하 실시예에서 사용된 원료 및 시약은 모두 시중에 판매중인 상품이거나, 공지된 방법을 통해 제조될 수 있는 것이다.
실시예 1: 화합물 1의 제조
단계 A: N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)-5-플루오로-2-메틸벤즈아미드
반응 플라스크에 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 5-플루오로-2-메틸벤조산(37 mg, 0.24 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol), HATU(76 mg, 0.2 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 8.5 mg을 얻었다. m/z = 528.2[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.58 (d, J = 2.0Hz, 1H), 8.51 (d, J = 2.0Hz, 1H), 8.01-8.06 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.26-7.29 (m, 2H), 7.10-7.17 (m, 3H), 4.15 (q, J = 6.8Hz, 2H), 4.05-4.08 (m, 2H), 3.34-3.68 (m, 2H), 2.32-2.37 (m, 5H), 1.60-1.65 (m, 2H), 1.46 (s, 3H), 1.38-1.45 (m, 3H).
실시예 2: 화합물 3의 제조
단계 A: 2,4,6-트리메틸벤젠술포네이트 1-아미노-3-브로모-5-메톡시피리딘-1-윰
0도에서, 2-[(아미노옥시)술포닐]-1,3,5-트리메틸벤젠(6.8 g, 31.7 mmol)의 디클로로메탄(50 mL) 용액에 3-브로모-5-메톡시피리딘(6.0 g, 32.0 mmol)을 첨가하고, 0도에서 3시간 동안 계속 교반하면 다량의 백색 고체가 석출되고; 반응 완료 후, 0도에서 반응계에 디에틸에테르(50 mL)를 첨가하고 10분 동안 교반하였으며, 감압 여과하고, 디에틸에테르로 헹구었으며, 진공 건조시켜 제품(15 g)을 얻어 추가 정제 없이 그대로 다음 단계 반응에 사용하였다. m/z=204[M+1]+.
단계 B: 4-브로모-2-플루오로-6-메톡시피라졸[1,5-a]피리딘
실온에서, 2,4,6-트리메틸벤젠술포네이트 1-아미노-3-브로모-5-메톡시피리딘-1-윰(1.0 g, 2.3 mmol)을 함유하는 DMF(30 mL) 용액에 탄산칼륨(1.4 g, 10.0 mmol)을 첨가하고; 반응계를 0℃로 냉각시킨 후, 2,2-디플루오로비닐 p-톨루엔술포네이트(0.5 g, 2.3 mmol)를 여러 번 나누어 첨가하고, 실온으로 승온시켜 1시간 동안 교반한 후, 90℃에서 1시간 동안 교반하였으며; 반응 완료 후 실온으로 냉각시키고, 물을 첨가하여 켄칭하였으며, 에틸아세테이트로 추출하고, 유기상을 합치였으며, 물로 세척하고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 80 mg을 얻었다. m/z=245[M+1]+, 1HNMR (400MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.18 (d, 1H), 3.85 (s, 3H).
단계 C: 4-브로모-2-플루오로-6-메톡시피라졸[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드
0도에서, 4-브로모-2-플루오로-6-메톡시피라졸[1,5-a]피리딘(294 mg, 1.2 mmol)을 포함하는 DMF(10 mL) 용액에 옥시염화인(1.0 g, 6.5 mmol)을 적가하고, 적가 완료 후 자연적으로 실온으로 승온시켜 밤새 반응시켰다. 반응액을 100 mL의 얼음물에 붓고, 2N의 NaOH 용액으로 pH=7로 조절하였으며, 에틸아세테이트로 추출하고, 유기상을 합치였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 240 mg을 얻었다. m/z=273[M+1]+. 1HNMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.51 (s, 1H), 8.72 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 3.87 (s, 3H).
단계 D: 4-브로모-6-메톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-2-플루오로-6-메톡시피라졸[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드(273 mg, 1 mmol)의 DMF(10.0 mL) 용액에 히드라진 수화물(2.0 mL)을 첨가하여 100℃로 가열하고 12시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=267 [M+1]+, 1HNMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.82 (s, 1H), 8.67 (d, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 3.89 (s, 3H).
단계 E: 4-브로모-6-하이드록시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-메톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(267mg, 1 mmol), DCE(20 mL), 염화알루미늄(446 mg, 3.36 mmol)을 100 mL의 1구 플라스크에 넣고, 질소 가스 보호 하에 80℃에서 가열 및 교반하면 색이 점차 짙은 갈색으로 변하고, 3시간 동안 반응시킨 후, TLC로 반응 완료를 검출하고, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하였으며, 에틸아세테이트로 추출하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시켰으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=253 [M+1]+, 1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.69 (brs, 1H), 10.23 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.42 (d, 1H).
단계 F: 4-브로모-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-하이드록시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(76mg, 0.3 mmol)의 DMF(10.0 mL) 용액에 2-요오도에탄(47 mg, 0.3 mmol), 탄산칼륨(83 mg, 0.6 mmol)을 첨가하고, 60℃로 가열하여 12시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=281 [M+1]+, 1HNMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.79 (s, 1H), 8.64 (d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.59 (d, 1H), 4.17 (t, 2H), 1.38 (t, 3H).
단계 G: 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(1.0g, 3.6mmol)에 6-플루오로피리딘-3-브론산(0.6g, 4.3mmol), 탄산나트륨(1.5g, 14mmol), 1,4-디옥산 20ml 및 3ml의 물, 테트라키스트리페닐포스핀 팔라듐(0.12g, 0.1mmol)을 첨가하고, 질소 가스로 치환한 후, 90℃에서 12h 동안 반응시켰으며, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=298 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.73 (s, 1H), 8.61-8.76(m, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 4.16(q, 2H), 1.39(t, J=6.4Hz, 3H).
단계 H: tert-부틸(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에tert-부틸 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(500mg, 1.7mmol), (4-메틸피페리딘-4-일)카보네이트(721mg, 3.4mmol), DIEA(650mg, 5.1mmol) 및 10ml의 DMSO를 첨가하고, 90℃에서 4h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=492 [M+1]+.
단계 I: 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)아미노카보네이트(390mg, 0.8mmol), 5N 메탄올성 염산 용액(8ml, 40mmol)을 첨가하여 25℃에서 2h 동안 반응시킨 후, 감압 농축하여 제품을 얻었다. m/z=392 [M+1]+.
단계 J: 3-클로로-N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)2-피리딘카르복스아미드
반응 플라스크에 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드(100mg, 0.2mmol), 3-클로로피리딘-2-카르복실레이트(37mg, 0.24mmol), DIEA(85mg, 0.66mmol), HATU(84mg, 0.22mmol) 및 2ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 2h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=531[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53-8.57 (m, 3H), 8.32(s, 1H), 8.00-8.10 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.50 (dd, J1 = 8.0Hz, J2 = 2.4Hz, 1H), 7.28 (s,1H), 7.16 (d, J=8.4Hz, 1H), 4.15-4.23 (m, 2H), 4.07-4.10 (m, 2H), 3.35-3.42 (m, 2H), 2.33-2.37 (m, 2H), 1.60-1.65 (m, 2H), 1.45-1.48 (m, 6H).
실시예 3: 화합물 4의 제조
제조 방법은 실시예 1의 단계 J와 동일하다. m/z= 549[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.76 (s, 1H), 8.57-8.62 (m, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.19 (dd,1H), 8.19 (dd, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.15-4.22 (m, 2H), 4.06-4.10 (m, 2H), 3.33-3.36 (m, 2H), 2.30-2.33 (m, 2H), 1.58-1.65 (m, 2H), 1.43-1.47 (m, 6H).
실시예 4: 화합물 8의 제조
반응 플라스크에 순차적으로 2ml의 DMSO 및 0.5ml의 DIEA, 3-메톡시-6-(피페리딘-4-옥시)피리다진(400mg, 1.3mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(70mg, 0.2mmol)을 첨가하고, 100℃에서 48시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=487[M+1]+.
실시예 5: 화합물 11의 제조
단계 A: 에틸 4-((tert-부틸카르보닐)아미노)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(2.5 g, 8.4mmol), 에틸 4-(tert-부틸카르보닐)아미노피페리딘-4-카르복실레이트(2.8 g, 9.2mmol), DIEA(3.2g, 25.2mmol), DMSO(50ml)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=550[M+1]+.
단계 B: 에틸 4-(아미노)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
에틸 4-((tert-부틸카르보닐)아미노)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(1g, 1.8mmol)를 10ml의 MeOH/HCl(4M)에 첨가하여 25℃에서 4h 동안 반응시킨 후, 용매를 스핀 건조시켜 제품을 얻었다. m/z=450[M+1]+.
단계 C: 에틸 4-(2,6-디플루오로벤즈아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
에틸 4-(아미노)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(120 mg, 0.26mmol), 2,6-디플루오로벤조산(38mg, 0.24mmol), DIEA(100mg, 0.78mmol), HATU(108mg, 0.28mmol), DMF(2ml)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=590[M+1]+.
단계 D: N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
에틸 4-(2,6-디플루오로벤즈아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(30mg, 0.05mmol), 2ml의 THF를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 LiAlH4(1.9mg, 0.05mmol)를 첨가하여 1h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=548[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.59 (d, 1H), 8.52 (d, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.04 (dd, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.50 (tt, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.22-7.08 (m, 3H), 4.87 (t, 1H), 4.28 (d, 2H), 4.18 (q, 2H), 3.63 (d, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.24 (d, 2H), 1.68 (td, 4.3 Hz, 2H), 1.41 (t, 3H).
실시예 6: 화합물 12의 제조
단계 A: 에틸 4-(3-클로로메틸피리딘아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
에틸 4-((tert-부틸카르보닐)아미노)1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트 하이드로클로라이드(120 mg, 0.26mmol), 3-클로로피콜린산(37mg, 0.24mmol), DIEA(100mg, 0.78mmol), HATU(108mg, 0.28mmol), DMF(2ml)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12h 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 80mg을 얻었다. m/z=589.2[M+1] +.
단계 B: 3-클로로-N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)피페리딘-4-일)-피리딘카르복스아미드
에틸 4-(3-클로로메틸피리딘아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(30mg, 0.05mmol), 2ml의 THF를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 LiAlH4(1.9mg, 0.05mmol)를 첨가하여 1h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 18 mg을 얻었다. m/z=547.2[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.62?8.49 (m, 3H), 8.23 (s, 1H), 8.03 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.90 (t, 1H), 4.27?4.07 (m, 5H), 3.66 (d, 2H), 3.18 (d, 1H), 2.29 (d, 2H), 1.72 (m, 2H), 1.40 (t, 3H). m/z=547.2[M+1]+.
실시예 7: 화합물 15의 제조
단계 A: tert-부틸카르보닐(1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)피페리딘-4-일)카르바메이트
에틸 4-((tert-부틸카르보닐)아미노)1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(2.7 g, 5mmol), THF(100ml)를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 LiBH4(0.55g, 25mmol)를 첨가하여 실온에서 12h 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 200 ml의 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 용매를 스핀 건조시켜 제품 2.1g을 얻었다. m/z=508[M+1]+.
단계 B: tert-부틸카르보닐(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-포르밀피페리딘-4-일)카르바메이트
에틸 4-((tert-부틸카르보닐)아미노)1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(1g, 2.0mmol)를 40ml의 DCM에 첨가하고, 0℃에서 Dess-Martin(0.93g, 2.2mmol)을 첨가하여 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 0.8g을 얻었다. m/z=506[M+1]+.
단계 C: tert-부틸카르보닐(4-((2-메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카르바메이트
tert-부틸카르보닐(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-포르밀피페리딘-4-일)카르바메이트(505 mg, 1mmol), 디메틸아민 테트라하이드로푸란 용액(2M/L, 3ml, 3mmol), NaBH(OAc)3(424 mg, 2 mmol), DCE(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12h 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 400mg을 얻었다. m/z=534.2[M+1]+.
단계 D: 4-((2-메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드
tert-부틸카르보닐(4-((2-메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카르바메이트(100 mg, 0.19 mmol), 2mL의 메탄올성 염산 가스를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 5h 동안 반응시켰다. 용매를 직접 스핀 건조시켜 제품 80mg을 얻었다. m/z=435.2[M+1]+.
단계 E: 3-클로로-N-(4-((2-메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)피리딘아미드
4-((2-메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-아민(80mg, 0.19mmol), 3-클로로피콜린산(29.8mg, 0.19 mmol), HATU(72.2 mg, 0.19 mmol), DIEA(73.5 mg, 0.57mmol), DMF(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 15h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 60mg을 얻었다. m/z=574.2[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.69 (s, 1H), 8.62-8.49 (m, 3H), 8.28 (s, 1H), 8.08-7.98 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.52 (dd, J = 8.2, 4.7 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.26-4.13 (m, 4H), 3.25 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 2.70 (s, 2H), 2.38 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 2.31 (S,6H), 2.30 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 1.63 (td, J = 13.0, 12.4, 4.1 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.24 (s, 1H), 0.85 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 0.5 (s, 1H).
실시예 8: 화합물 17의 제조
단계 A: tert-부틸카르보닐 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피페리딘-4-일)카르바메이트
tert-부틸카르보닐(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-포르밀피페리딘-4-일)카르바메이트(505 mg;1mmol), 에틸피페라진(342mg, 3mmol), NaBH(OAc)3(424 mg, 2 mmol), DCE(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12h 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 800mg을 얻었다. m/z = 604.4[M+1]+.
단계 B: 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드
tert-부틸카르보닐(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피페리딘-4-일)카르바메이트(120 mg, 0.2 mmol), 2mL의 메탄올성 염산 가스를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 5h 동안 반응시켰다. 용매를 직접 스핀 건조시켜 제품 100 mg을 얻었다. m/z=504.2[M+1]+.
단계 C: N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피페리딘-4-일)-2,5-디플루오로벤즈아미드
4-((2-메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-아민(100 mg, 0.2 mmol, 2,5-디플루오로벤조산(31.6 mg, 0.2 mmol), HATU(76.0 mg, 0.2 mmol), DIEA(77.4 mg, 0.6 mmol), DMF(10mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 15h 동안 반응시켰다. 반응액을 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 용매를 스핀 건조시켰으며, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 67 mg을 얻었다. m/z=644.2[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.65 (s, 1H), 8.59 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.41-7.29 (m, 3H), 7.26 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.19 (m, 4H), 3.32 (s, 1H), 3.27-3.15 (m, 2H), 2.73 (s, 2H), 2.61-2.55 (m, 7H), 2.34 (d, J = 13.3 Hz, 4H), 1.62 (m, 2H), 1.41 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 0.99 (m, 3H). m/z=644.2[M+1]+.
실시예 9: 화합물 29의 제조
단계 A: tert-부틸카르보닐 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(메틸모르폴린)피페리딘-4-일)카르바메이트
tert-부틸카르보닐(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-포르밀피페리딘-4-일)카르바메이트(505 mg,1mmol), 모르폴린(261 mg, 3mmol), NaBH(OAc)3(424 mg, 2mmol), DCE(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12h 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 20ml의 물에 붓고, DCM으로 추출하였으며, 유기 용매를 건조시키고, 용매를 스핀 건조시켰으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 300 mg을 얻었다. m/z=576.2[M+1]+.
단계 B: 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드
tert-부틸카르보닐(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(메틸모르폴린)피페리딘-4-일)카르바메이트(120 mg, 0.2 mmol), 2mL의 메탄올성 염산 가스를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 5h 동안 반응시켰다. 용매를 직접 스핀 건조시켜 제품 90mg을 얻었다. m/z=477.2[M+1]+.
단계 C: N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-((4-에틸피페라진-1-일)메틸)피페리딘-4-일)-3-메틸부탄아미드
1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(메틸모르폴린)피페리딘-4-아민(90 mg, 0.19 mmol), 이소발레르산(20.4 mg, 0.2 mmol), HATU(76.0 mg, 0.2 mmol), DIEA(77.4mg, 0.6 mmol), DMF(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 15h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 71 mg을 얻었다. m/z=561.2[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) : δ 12.65 (s, 1H),δ 8.58 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.03 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.26 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.18 (m, 3H), 3.55 (m, 4H), 3.10 (m, 2H), 2.60 (s, 2H), 2.46 (m, 5H), 2.26 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 2.02 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 1.54 (dt, J = 12.8, 6.7 Hz, 2H), 1.40 (m, 3H), 1.24 (s, 1H), 0.90 (d, J = 6.2 Hz, 6H).
실시예 10: 화합물 31의 제조
단계 A: tert-부틸 ((3S,4R)-1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-하이드록시피롤리딘-3-일)아미노카보네이트
순차적으로 5-브로모-2-플루오로피리딘(240 mg, 1.36 mmol), DMSO(2.5 mL), 탄산칼륨(340 mg, 2.47 mmol), tert-부틸 ((3S,4R)-4-하이드록시피롤리딘-3-일)아미노카보네이트(250 mg, 1.24 mmol)을 첨가하고, 참가 후 90℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 스핀 건조하여 제품 390 mg을 얻었다. m/z=358/360 [M+1]+
단계 B: tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(피리딘-2-일옥시)피롤리딘-3-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 THF(20 mL), TMAD (260 mg, 1.51 mmol), BuP3(305 mg, 1.51 mmol)을 첨가하여 실온에서 30분 동안 교반하고, tert-부틸 ((3R,4S)-1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-하이드록시피롤리딘-3-일)아미노카보네이트(270 mg, 0.75 mmol)의 THF(10 mL) 용액을 적가하였으며, 적가 완료 후 1분 동안 교반하고, 그 후 2-하이드록실 피리딘(143 mg, 1.51 mmol)을 첨가하고 50℃로 승온시켜 3시간 동안 반응시켰다. 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 제품 140 mg을 얻었다. m/z=435/437[M+1]+.
단계 C: tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(피리딘-2-일옥시)피롤리딘-3-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 1,4-디옥산(1 mL), tert-부틸((3S,4S)-1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(피리딘-2-일옥시)피롤리딘-3-일)아미노카보네이트(60 mg, 0.14 mmol), 6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(47.5 mg, 0.12 mmol), 탄산칼륨(32.8 mg, 0.23 mmol), 테트라키스트리페닐포스핀 팔라듐(13.3 mg, 0.006 mmol), 물(0.5 mL)을 첨가하고, 90℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시켰다. 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 제품 40 mg을 얻었다. m/z=641[M+1]+.
단계 D: (3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(피리딘-2-일옥시)피롤리딘-3-아민
50 mL의 반응 플라스크에tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(피리딘-2-일옥시)피롤리딘-3-일)아미노카보네이트(40 mg, 0.06 mmol), 메탄올(2 mL), 염화수소의 디옥산 용액(4M, 2 mL)을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 6.9 mg을 얻었다. m/z=457[M+1]+. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.63 (s, 1H), 8.55-8.54 (m, 2H), 8.23-8.21 (m, 1H), 7.80-8.02 (m, 1H), 7.71-7.75 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.21-7.22 (m, 1H), 7.00-7.04 (m, 1H), 6.81-6.85 (m, 1H), 6.69-6.71 (m, 1H), 5.28-5.29 (m, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H),4.01-4.05 (m, 1H), 3.74-3.78 (m, 1H), 3.61-3.67 (m, 3H), 1.38-1.41 (m, 3H).
실시예 11: 화합물 33의 제조
단계 A: 6-벤질-1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄
반응 플라스크에 N-벤질-4-피페리돈(5.7 g, 30 mmol), 디메틸설폭사이드(75 mL)를 첨가하여 교반하고, NaH(1.44 g, 33 mmol)를 첨가하여 1시간 동안 반응시켰으며, 트리메틸설폭사이드 요오다이드(7.3 g, 33 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 반응시키고, 물을 첨가하여 켄칭하였으며, 에틸아세테이트로 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰으며, 여과하고, 감압 농축 및 건조시켜 제품 5.6 g을 얻었다. m/z=204[M+1]+.
단계 B: 6-벤질-1-타아-6-아자스피로[2.5]옥탄
반응 플라스크에 순차적으로 6-벤질-1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄(5.6 g, 27.6 mmol) 및 메탄올(80 mL)을 첨가하여 교반하고, 티오우레아(2.3 g, 30.4 mmol)를 첨가하여 40℃에서 20시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료되면 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축 및 건조시키고, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 제품 4.63 g을 얻었다. m/z=220[M+1]+.
단계 C: 1-벤질-4-메틸피페리딘-4-티올
반응 플라스크에 순차적으로 6-벤질-1-타아-6-아자스피로[2.5]옥탄(4.3 g, 19.6 mmol) 및 테트라히드로푸란(50 mL)을 첨가하고, 5℃로 감온시킨 후, 리튬 테트라히드로알루미늄(1.1 g, 29.4 mmol)을 첨가하고, 온도 유지 하에 1시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물 5 ml를 천천히 첨가하고, 포화 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH값을 14로 조절하였으며, 디클로로메탄으로 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰으며, 감압 농축 및 건조시키고, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 3.8 g을 얻었다. m/z=222[M+1]+.
단계 D: 1-벤질-4-(이소부틸티오)-4-메틸피페리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1-벤질-4-메틸피페리딘-4-티올(1.3 g, 6 mmol) 및 N,N-디메틸포름아미드 30 mL를 첨가하고, 5℃로 감온시킨 후, 1-브로모-2-메틸프로판(0.9 g, 6.6 mmol)을 첨가하고, 탄산칼륨(2.5 g, 18 mmol)을 첨가하여 40℃에서 16시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.0 g을 얻었다. m/z=278[M+1]+.
단계 E: 1-벤질-4-(이소부틸술포닐)-4-메틸피페리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1-벤질-4-(이소부틸티오)-4-메틸피페리딘(500 mg, 1.8 mmol) 및 디클로로메탄(6 mL)을 첨가하고, 5℃로 감온시킨 후, 클로로퍼옥시벤조산(930 mg, 5.4 mmol)을 첨가하여 실온에서 16시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 250 mg을 얻었다. m/z=310[M+1]+.
단계 F: 4-(이소부틸술포닐)-4-메틸피페리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1-벤질-4-(이소부틸술포닐)-4-메틸피페리딘(250 mg, 0.8 mmol) 및 에탄올(10 mL)을 첨가하고, 10% Pd/C(200 mg)를 첨가하였으며, 수소 가스로 치환하고, 실온에서 16시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 여과하고, 감압 농축 및 건조시켜 제품 180 mg을 얻었다. m/z=220[M+1]+.
단계 G: 6-에톡시-4-(6-(4-(이소부틸술포닐)-4-메틸피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 2 ml의 DMSO 및 0.5 ml의 DIEA, 4-(이소부틸술포닐)-4-메틸피페리딘(180 mg, 0.82 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.34 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 60시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 66 mg을 얻었다. m/z=497[M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.60 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.28 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 13.7 Hz, 2H), 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.16 (m, 2H), 2.96 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.25 (m, 1H), 2.01 (m, 2H), 1.72 (d, J = 13.0 Hz, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.08 (d, J = 6.7 Hz, 6H).
실시예 12: 화합물 34의 제조
반응 플라스크에 순차적으로 2ml의 DMSO 및 0.5ml의 DIEA, 4-벤질술포네이트 피페리딘(140mg, 0.51mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(50mg, 0.17mmol)을 첨가하고, 100℃에서 20시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=517.
실시예 13: 화합물 35의 제조
4-((디메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드(화합물 APS03035)
단계 A: 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-포르밀-N-이소부틸피페리딘-4-아미드
50 mL의 반응 플라스크에 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드(170 mg, 0.46 mmol), 디클로로메탄(10 mL)을 첨가한 후, 실온에서 Dess-Marting(292 mg, 0.69 mmol)을 여러 번 나누어 첨가하고, 실온에서 0.5시간 동안 교반한 후, 아황산나트륨 수용액으로 켄칭하고, 그 후 유기상을 스핀 건조하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 210 mg을 얻었다. m/z = 368/370[M+1]+.
단계 B: 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드
50 mL의 반응 플라스크에 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-포르밀-N-이소부틸피페리딘-4-아미드(70 mg, 0.19 mmol), 1,2-디클로로메탄(2 mL), 디메틸아민(25.7 mg, 0.57 mmol), 소듐 트리아세톡시 보로하이드라이드(80.8 mg, 0.38 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 물로 켄칭하고, 그 후 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 50 mg을 얻었다. m/z = 397/399[M+1]+.
단계 C: 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드
반응 플라스크에 순차적으로 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드(50 mg, 0.13 mmol), 6-에톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(56.2 mg, 0.15 mmol), 테트라키스트리페닐포스포팔라듐(23 mg, 0.02 mmol), 탄산칼륨(34.9 mg, 0.25 mmol), 물(0.3 mL), 1,4-디옥산(0.6 mL)을 첨가하고, 90℃로 가열하여 16시간 동안 반응시킨 후, 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 제품 5 mg을 얻었다. m/z=519[M+1]+. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (s, 1H), 8.50-8.56 (m, 2H), 8.00-8.03 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.25-7.25 (m, 1H), 7.03-7.05 (m, 1H), 4.15-4.20 (m, 2H), 4.04-4.07 (m, 2H), 3.16-3.21 (m, 2H), 2.96 (m, 2H), 2.42 (s, 1H), 2.09-2.17 (m, 8H), 1.75-1.79 (m, 1H), 1.46-1.52 (m, 2H), 1.30-1.40 (m, 3H), 1.21 (s, 1H), 0.80-0.90 (m, 6H).
실시예 14: 화합물 36의 제조
4-(아제티딘-1-일메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드(화합물 APS03036)
단계 A: 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(아제티딘-1-일메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드
50 mL의 반응 플라스크에 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-포르밀-N-이소부틸피페리딘-4-아미드(70 mg, 0.19 mmol), 1,2-디클로로메탄(2 mL), 아제티딘아민(32.6 mg, 0.57 mmol), 소듐 트리아세톡시 보로하이드라이드(80.8 mg, 0.38 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 물로 켄칭하고, 그 후 유기상을 스핀 건조하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 60 mg을 얻었다. m/z=409/411[M+1]+.
단계 B: 4-(아제티딘-1-일메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드
반응 플라스크에 순차적으로 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(아제티딘-1-일메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드(60 mg, 0.15 mmol), 6-에톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(65.3 mg, 0.18 mmol), 테트라키스트리페닐포스포팔라듐(23 mg, 0.02 mmol), 탄산칼륨(40.6 mg, 0.29 mmol), 물(0.35 mL), 1,4-디옥산(0.7 mL)을 첨가하고, 질소 가스로 3회 치환하였으며, 90℃로 가열하여 16시간 동안 반응시킨 후, 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 6 mg을 얻었다. m/z=531[M+1]+. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (s, 1H), 8.50-8.56 (m, 2H), 7.94-8.03 (m, 2H), 7.71-7.81 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.24-7.25 (m, 1H), 7.02-7.04 (m, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 4.04-4.07 (m, 2H), 3.15-3.20 (m, 6H), 2.93-2.96 (m, 2H), 2.04-2.17 (m, 2H), 1.88-1.96 (m, 2H), 1.74-1.80 (m, 1H), 1.34-1.44 (m, 5H), 0.85-0.88 (m, 7H).
실시예 15: 화합물 37의 제조
4-(피롤리딘-1-일메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드(화합물 APS03037)
단계 A: 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(피롤리딘-1-일메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드
50 mL의 반응 플라스크에 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-포르밀-N-이소부틸피페리딘-4-아미드(70 mg, 0.19 mmol), 1,2-디클로로메탄(2 mL), 피롤리딘(40.6 mg, 0.57 mmol), 소듐 트리아세톡시 보로하이드라이드(80.8 mg, 0.38 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 물로 켄칭하고, 그 후 유기상을 스핀 건조하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 65 mg을 얻었다. m/z = 423/425[M+1]+.
단계 B: 4-(피롤리딘-1-일메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드
반응 플라스크에 순차적으로 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(피롤리딘-1-일메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드(65 mg, 0.15 mmol), 6-에톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(68.3 mg, 0.18 mmol), 테트라키스트리페닐포스포팔라듐(23 mg, 0.02 mmol), 탄산칼륨(42.5 mg, 0.31 mmol), 물(0.3 mL), 1,4-디옥산(0.7 mL)을 첨가하고, 질소 가스로 3회 치환하였으며, 90℃로 가열하여 16시간 동안 반응시킨 후, 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 역상 컬럼 크로마토그래피로 제품 5 mg을 얻었다. m/z=545[M+1]+. 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.67 (s, 1H), 8.50-8.56 (m, 2H), 7.71-8.03 (m, 4H), 7.56-7.65 (m, 2H), 7.40-7.41 (m, 1H), 7.24-7.25 (m, 1H), 7.02-7.05 (m, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 4.04-4.07 (m, 2H), 3.15-3.24 (m, 2H), 2.93-2.96 (m, 2H), 2.51-2.62 (m, 2H), 2.11-2.17 (m, 2H), 1.73-1.79 (m, 1H), 1.63 (s, 4H), 1.38-1.51 (m, 5H), 0.84-0.87 (m, 6H).
실시예 16: 화합물 39의 제조
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올(256.5 mg, 0.51 mmol), 3-메틸부탄산(78 mg, 0.77 mmol), DIEA(263 mg, 2.04 mmol) 및 DCM(10 mL), HATU(292 mg, 0.77 mmol)를 50mL의 반응 플라스크에 넣고, 실온에서 0.5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 6.4 mg을 얻었다. m/z = 478[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.7 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.06 (d, 1H), 5.00 (bR,1H), 4.42-4.44 (m, 1H), 4.14-4.25 (m, 3H), 3.60-3.72 (m, 1H), 3.01-3.07 (m, 1H), 2.81-2.87 (m, 1H), 1.89-1.98 (m, 4H), 1.20-1.45 (m, 5H), 0.80-0.89 (m, 6H).
실시예 17: 화합물 40의 제조
단계 A: tert-부틸 ((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에tert-부틸 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(1.0 g, 3.3 mmol), ((3R,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카보네이트(720 mg, 3.3 mmol), DIEA(2.2g, 10mmol) 및 20ml의 DMSO를 첨가하고, 90℃에서 4h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.4 g을 얻었다. m/z=494[M+1]+.
단계 B: ((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노 하이드로클로라이드
tert-부틸 ((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트(1.4 g, 2.8 mmol), 4N 디옥산 하이드로클로라이드 용액(30 mL, 120 mmol)을 첨가하여 25℃에서 0.5h 동안 반응시킨 후, 직접 감압 농축 및 건조시켜 제품 1.6 g을 얻었다. m/z=394[M+1]+.
단계 C: N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-3-메틸부탄아미드
반응 플라스크에 ((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노 하이드로클로라이드(200mg, 0.4mmol), 3-메틸부탄산(48 mg, 0.47 mmol), DIEA(166 mg, 1.29 mmol), HATU(179 mg, 0.47 mmol) 및 2.5 ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 42 mg을 얻었다. m/z=478[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.64 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.56-7.59 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.10-4.27 (m, 4H), 3.92-3.99 (m, 1H), 3.88-3.91 (m, 1H), 3.18-3.21 (m, 1H), 3.10-3.16 (m, 1H), 1.97-2.03 (m, 3H), 1.86-1.94 (m, 1H), 1.56-1.60 (m, 1H), 1.38-1.43 (m, 3H), 0.88-0.94 (m, 6H).
실시예 18: 화합물 41의 제조
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올(256.5 mg, 0.51 mmol), 1-트리플루오로메틸사이클로부탄산(128 mg, 0.77 mmol), DIEA(263 mg, 2.04 mmol) 및 DCM(10 mL), HATU(292 mg, 0.77 mmol)을 50 mL의 반응 플라스크에 넣고, 실온에서 0.5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 9.6 mg을 얻었다. m/z = 544[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.08 (d, 1H), 5.02 (bR,1H), 4.51-4.54 (m, 1H), 4.31-4.34 (m, 1H), 4.18 (q, 2H), 3.80-3.82 (m, 1H), 3.50-3.53 (m, 1H), 2.95-3.01 (m, 1H), 2.73-2.79 (m, 1H), 2.54-2.56 (m, 1H), 2.30-2.33 (m, 2H), 1.78-1.90 (m, 3H), 1.48-1.38 (m, 4H).
실시예 19: 화합물 42의 제조
반응 플라스크에 ((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노 하이드로클로라이드(200 mg, 0.4 mmol), 3-클로로-2-피콜린산(74 mg, 0.47 mmol), DIEA(166 mg, 1.29 mmol), HATU(179 mg, 0.47 mmol) 및 2.5ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 26 mg을 얻었다. m/z=533[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.64 (s, 1H), 8.54-8.57 (m, 3H), 8.51 (s, 1H), 8.00-8.04 (m, 2H), 7.54-7.59 (m, 2H), 8.19 (dd, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.08 (d, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.27-4.38 (m, 2H), 4.13-4.17 (m, 3H), 3.91-3.94 (m, 1H), 3.15-3.20 (m, 1H), 1.90-1.98 (m, 1H), 1.73-1.78 (m, 1H), 1.42-1.45 (m, 3H).
실시예 20: 화합물 43의 제조
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올(256.5 mg, 0.51 mmol), DIEA(263 mg, 2.04 mmol) 및 DCM(10 mL)에 첨가하여 2-클로로-5-플루오로벤조일클로라이드(98 mg, 0.51 mmol)를 50mL의 반응 플라스크에 넣고, 0℃에서 0.5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 24 mg을 얻었다. m/z=550[M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (brs, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.53-7.59 (m, 2H), 7.39-7.41 (m, 1H), 7.30-7.35 (m, 2H), 7.11-7.21 (m, 1H), 7.45-7.47 (m, 1H), 4.20-4.29 (m, 1H), 4.14-4.18 (m, 2H), 3.90-3.93 (m, 1H), 3.52-3.55 (m, 2H), 3.14-3.20 (m, 1H), 2.93-2.96 (m, 1H), 1.99-2.02 (m, 1H), 1.49-1.51 (m, 1H), 1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 21: 화합물 44의 제조
단계 A: ((3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카르바메이트
실온 조건에서, 50 mL의 반응 플라스크에tert-부틸 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(2 g, 6.73 mmol), ((3S,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카바메이트(1.46 g, 6.73 mmol), 10 ml의 DMSO 및 DIEA(2.61 g, 20.2 mmol)를 첨가하고, 90℃에서 12시간 동안 교반한 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 2.7 g을 얻었다. m/z=494[M+1]+.
단계 B: (3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올
반응 플라스크에 순차적으로 tert-부틸((3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카르바메이트(2.7 g, 5.45 mmol) 및 4M 염산 농도의 1,4-디옥산 용액을 첨가하고, 3시간 동안 교반한 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 2.7 g을 얻었다. m/z=394[M+1]+.
단계 C: 2-클로로-N-((3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-6-플루오로벤즈아미드
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올(256.5 mg, 0.51 mmol), DIEA(263 mg, 2.04 mmol) 및 DCM(10 mL)2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(98 mg, 0.51 mmol)를 50mL의 반응 플라스크에 넣고, 0℃에서 0.5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 26 mg을 얻었다. m/z=550[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.69 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.02-8.05 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.07-7.49 (m, 5H), 5.07 (bR,1H), 4.40-4.44 (m, 1H), 4.14-4.22 (m, 3H), 3.92-3.95 (m, 1H), 3.50-3.51 (m, 1H), 3.16-3.22 (m, 1H), 2.96-3.01 (m, 1H), 2.01-2.11 (m, 1H), 1.37-1.48 (m, 4H).
실시예 22: 화합물 45의 제조
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올(256.5 mg, 0.51 mmol), DIEA(263 mg, 2.04 mmol) 및 DCM(10 mL), 3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카르보닐클로라이드(107 mg, 0.51 mmol)를 50mL의 반응 플라스크에 넣고, 0℃에서 0.5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 45 mg을 얻었다. m/z=567[M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.85-8.86 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.62-8.64 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.29-8.31 (m, 1H), 8.04-8.07 (m, 1H), 7.72-7.75 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.09-7.11 (m, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.46-4.50 (m, 1H), 4.26-4.29 (m, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.92-3.96 (m, 1H), 3.54-3.59 (m, 1H), 3.10-3.16 (m, 1H), 2.90-2.95 (m, 1H), 2.01-2.05 (m, 1H), 1.49-1.52 (m, 1H), 1.39 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 23: 화합물 46의 제조
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올(256.5 mg, 0.51 mmol), DIEA(263 mg, 2.04 mmol) 및 DCM(10 mL), 2-메틸-5-플루오로벤조일클로라이드(78 mg, 0.51 mmol)를 50 mL의 반응 플라스크에 넣고, 0℃에서 0.5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 33 mg을 얻었다. m/z=530[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.04-8.06 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.09-7.28 (m, 5H), 5.15 (bR,1H), 4.50-4.54 (m, 1H), 4.31-4.35 (m, 3H), 4.17 (q, 2H), 3.91-3.93 (m, 1H), 3.50-3.54 (m, 1H), 3.04-3.10 (m, 1H), 2.82-2.88 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 1.96-1.98 (m, 1H), 1.23-1.52 (m, 4H).
실시예 24: 화합물 48의 제조
단계 A: tert-부틸 ((3S,4R)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-하이드록시피페리딘-3-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(1.25 g, 4.22 mmol), DMSO(12 mL), DIEA(1.63 g, 12.66 mmol), tert-부틸 ((3S,4R)-4-하이드록시피페리딘-3-일)아미노카보네이트(1.0 g, 4.64 mmol)를 첨가하고, 가열하여 90~95℃로 승온시키고 24시간 동안 교반한 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.2 g을 얻었다. m/z=494 [M+1]+.
단계 B: tert-부틸 ((3S,4S)-4-(1,3-프탈로일-2-일)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3일)아미노카보네이트
반응 플라스크에tert-부틸 ((3S,4R)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-하이드록시피페리딘-3-일)아미노카보네이트(1.1 g, 2.22 mmol), THF(10 mL), 프탈이미드(0.65 g, 4.45 mmol), 트리페닐포스핀(1.2 g, 4.45 mmol)을 첨가하고, 0~10℃에서 30 min 동안 교반한 후, DEAD(0.77 g, 4.45 mmol)의 THF(1 mL) 용액을 적가하고, 실온으로 승온시켜 20시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 300 mg을 얻었다. m/z=623[M+1]+.
단계 C: tert-부틸 ((S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3일)아미노카보네이트
반응 플라스크에tert-부틸 ((3S,4S)-4-(1,3-프탈로일-2-일)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3일)아미노카보네이트(300 mg, 0.48 mmol), 에탄올(2 mL), 히드라진 수화물(1 mL)을 첨가하고, 가열하여 1시간 동안 환류하였으며, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 100 mg을 얻었다. m/z=493[M+1]+.
단계 D: N-((3S,4S)-3-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-2-클로로-6-메틸벤즈아미드
반응 플라스크 A에 2-메틸-6-클로로벤조산(51.7 mg, 0.3 mmol), 디클로로메탄(2 mL)을 첨가하고, 0~10℃로 감온한 후, 티오닐클로라이드(36.2 mg, 0.3 mmol), DMF 1방울을 첨가하고, 자연적으로 실온으로 승온시켜 2시간 동안 교반하여 준비해 두었다.
반응 플라스크 B에tert-부틸 ((3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3일)아미노카보네이트(100 mg, 0.2 mmol), 2 mL의 디클로로메탄, 트리에틸아민(41 mg, 0.4 mmol)을 첨가하고, 0~10℃로 감온한 후, 플라스크 A 내의 반응액을 반응 플라스크 B에 천천히 적가하고, 적가 완료되면 실온에서 2시간 동안 교반하여 반응을 완료하였다. 2 ml의 수분액을 첨가하고, 유기상을 수집하였으며, 농축 및 건조시킨 후, 2 mL의 메탄올을 첨가하여 용해 및 정화하고, 0~10℃로 감온한 후 20% 염화수소메탄올 용액을 첨가하고, 자연적으로 실온으로 승온시켰으며, 20시간 동안 교반하여 반응을 완료하였다. 농축 및 건조시킨 후 5 ml의 물을 첨가하여 용해 및 정화하고, 에틸아세테이트로 2회 추출하였으며, 수상을 수집하고, pH를 10으로 조절하였으며, 디클로로메탄으로 2회 추출하고, 유기상을 수집하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 18 mg을 얻었다. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.46-8.59 (m, 3H), 8.05-8.08 (m, 1H), 7.55-7.64 (m, 2H), 7.22-7.33 (m, 4H), 7.10-7.12 (d, 1H), 4.50-4.53 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.94 (m, 1H), 3.30 (m, 1H), 3.12 (m, 1H), 2.80-2.91 (m, 1H), 2.31-2.33 (m, 3H), 2.06-2.08 (m, 1H), 1.50-1.58 (m, 1H), 1.34-1.42 (m, 3H), 1.24 (s, 1H) m/z=545.2 [M+1]+.
실시예 25: 화합물 50의 제조
단계 A: tert-부틸 (3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1-(테트라히드로-2-히드로-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 4-(5-클로로피라진-2-일)-6-에톡시-1-(테트라히드로-2-히드로-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(500 mg, 1.25 mmol), tert-부틸 ((3S,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트(542 mg, 2.5 mmol), DIEA(484 mg, 3.75 mmol) 및 5 ml의 DMSO를 첨가하고, 80℃에서 밤새 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 670 mg을 얻었다. m/z=579.3[M+1]+.
단계 B: (3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 (3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1-(테트라히드로-2-히드로-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트(670 mg, 1.1 mmol), 5N 메탄올성 염산 용액(10 mL, 50 mmol)을 첨가하고, 25℃에서 2 h 동안 반응시켜 반응이 완료되면 직접 감압 농축 및 건조시켜 제품 710 mg을 얻었다. m/z = 395.2[M+1]+.
단계 C: 3-클로로-N-((3S,4S)-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2-피리딘카르복스아미드
반응 플라스크에 (3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(80 mg, 0.16 mmol), 3-클로로피리딘-2-카르복실레이트(38 mg, 0.24 mmol), DIEA(103 mg, 0.8 mmol), HATU(61 mg, 0.16 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하고, 25℃에서 2 h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 37.6 mg을 얻었다. m/z = 534.1[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.45 (brs, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.74 (d, J=7.6Hz, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.47 (dd, J 1 =8.0Hz, J 2 =6.0Hz, 1H), 7.36 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.28 (t, J=8.8Hz, 1H), 5.01-5.42 (m, 1H), 4.36-4.41 (m, 1H), 4.17-4.24 (m, 2H), 3.95-4.02 (m, 1H), 3.62-3.71 (m, 2H), 3.12-3.21 (m, 2H), 2.10-2.18 (m, 1H), 1.48-1.60 (m, 1H), 1.39-1.43 (m, 3H).
실시예 26: 화합물 51의 제조
단계 A: 2-클로로-N-((3S,4S)-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 (3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(80 mg, 0.16 mmol), 2-클로로-6플루오로벤조일클로라이드(46 mg, 0.24 mmol), DIEA(103 mg, 0.8 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하고, 25℃에서 1h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 4.6 mg을 얻었다. m/z = 551.1[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.54 (brs, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.59 (d, J=8.4Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.52 (dd, J 1 =8.4Hz, J 2 =4.8Hz, 1H), 5.01-5.28 (m, 1H), 4.44-4.52 (m, 1H), 4.25-4.33 (m, 1H), 4.17 (q, J=6.8Hz, 1H), 3.96-4.02 (m, 1H), 3.58-3.67 (m, 1H), 3.30-3.35 (m, 1H), 3.03-3.11 (m, 1H), 2.10-2.18 (m, 2H), 1.56-1.68 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 27: 화합물 55의 제조
단계 A: 4-브로모-6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-하이드록시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(2.0g, 7.1 mmol)의 테트라히드로푸란 용액 20ml에 디히드로피란 5ml, p-톨루엔술폰산(245mg, 1.4mmol)을 첨가하고, 50℃로 가열하여 12h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품을 얻었다. m/z=365[M+1]+.
단계 B: 6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 4-브로모-6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(5.4g, 14.8mmol), 피나콜 디보로네이트(11.3g, 44.5mmol), 아세트산칼륨(5.8g, 59.3mmol) 및 100ml의 1,4-디옥산, Pd(dppf)Cl2(1.0g, 1.5mmol)를 첨가하고, 질소 가스로 치환한 후, 80℃에서 12h 동안 반응시키고, 여과하였으며, 여액을 농축하여 제품 5.0 g을 얻었다. m/z=413[M+1]+.
단계 C: 4-(5-클로로피라진-2-일)-6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(4.5 g, 10.9 mmol), 2,5-디클로로피라진(4.8 g, 32.6 mmol), 탄산칼륨(4.5 g, 32.7 mmol), 1,4-디옥산(50 mL) 및 물(5mL), Pd(dppf)Cl2(1.0 g, 1.5 mmol)를 첨가하고, 질소 가스로 치환한 후, 80℃에서 4 h 동안 반응시키고, 물을 첨가하였으며, 에틸아세테이트로 추출하고, 유기상을 합치였으며, 물로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰으며, 여과하고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 2.5g을 얻었다. m/z=399[M+1]+.
단계 D: tert-부틸 (1-(5-(6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 4-(5-클로로피라진-2-일)-6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(1.0 g, 2.5 mmol), tert-부틸 (4-메틸피페리딘-4-일)카보네이트(1.0 g, 5.0 mmol), DIEA(972 mg, 7.5 mmol) 및 12 ml의 DMSO를 첨가하고, 80℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.3 g을 얻었다. m/z=577[M+1]+.
단계 E: (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 (1-(5-(6-에톡시-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)아미노카보네이트(1.25 g, 2.2 mmol), 5N 메탄올성 염산 용액(10 mL, 50 mmol)을 첨가하여 25℃에서 2 h 동안 반응시키고, 감압 농축 및 건조시켜 제품 1.1 g을 얻었다. m/z = 393[M+1]+.
단계 F: 3-클로로-N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)-5-플루오로-2-피리딘카르복스아미드
반응 플라스크에 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드(150 mg, 0.3 mmol), 3-클로로-5-플루오로피리딘-2-카르복실레이트(63 mg, 0.36 mmol), DIEA(193 mg, 1.5 mmol), HATU(114 mg, 0.3 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 2 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 11 mg을 얻었다. m/z=550[M+1]+.
실시예 28: 화합물 56의 제조
반응 플라스크에 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드(150 mg, 0.3 mmol), 3-클로로-5-플루오로피리딘-2-카르복실레이트(63 mg, 0.36 mmol), DIEA(193 mg, 1.5 mmol), HATU(114 mg, 0.3 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 2 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 13 mg을 얻었다. m/z=546[M+1]+.
실시예 29: 화합물 57의 제조
단계 A: N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)-2,3,6-트리플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 2,3,6-트리플루오로벤조산(39 mg, 0.22 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol), HATU(76 mg, 0.2 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하고, 25℃에서 2 h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 24.6 mg을 얻었다. m/z = 551.1[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.47 (brs, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.55 (d, J=2.0Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.55-7.63 (m, 1H), 7.21-7.26 (m, 1H), 4.16-4.24 (m, 4H), 3.30-3.35 (m, 2H), 1.62-1.66 (m, 2H), 1.39-1.44 (m, 6H).
실시예 30: 화합물 58의 제조
단계 A: 2-클로로-N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)-5-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드(150 mg, 0.3 mmol), 2-클로로-5-플루오로벤조일클로라이드(63 mg, 0.36 mmol), DIEA(193 mg, 1.5 mmol), HATU(76 mg, 0.2 mmol) 및 2ml의 DMF를 첨가하고, 25℃에서 1h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 43.6 mg을 얻었다. m/z=549.2[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD-d 4) δ 8.75 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.46-7.49 (m, 1H), 7.17-7.26 (m, 2H), 4.15-4.25 (m, 4H), 3.48-3.55 (m, 2H), 2.44-2.48 (m, 2H), 1.70-1.77 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.49 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 31: 화합물 59의 제조
단계 A: 3-클로로-N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-일)-2-피리딘카르복스아미드
반응 플라스크에 (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-4-메틸피페리딘-4-아미노 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 3-클로로-2-피리딘벤조산(39 mg, 0.22 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol), HATU(76 mg, 0.2 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하고, 25℃에서 2 h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 43.5mg을 얻었다. m/z=532.1[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.47 (brs, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.52-8.55 (m, 2H), 8.35 (s, 1H), 8.01-8.03 (m, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.50 (dd, J 1 =8.0Hz, J 2 =0.8Hz, 1H), 4.16-4.22 (m, 4H), 3.34-3.39 (m, 2H), 2.35-2.39 (m, 2H), 1.60-1.66 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 32: 화합물 87의 제조
1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드(화합물 APS03087)
단계 A: 메틸 1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
1-(tert-부톡시카르보닐)-4-(메톡시카르보닐)피페리딘-4-카르복실산(1.9 g, 6.6 mmol)에 염화수소의 1,4-디옥산(4 M, 4 mL)을 첨가하여 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 스핀 건조시키고, DMSO(10 mL), 탄산칼륨(3.3 g, 23.3 mmol), 5-브로모-2-플루오로피리딘(1.4 g, 7.9 mmol)을 첨가하고, 90℃로 가열하여 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1 g을 얻었다. m/z=298/300[M+1]+.
단계 B: 메틸 4-((벤질옥시)메틸)-1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
100 mL의 반응 플라스크에 메틸 1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(1.0 g, 3.34 mmol), 테트라히드로푸란(15 mL)을 첨가하여 -70℃로 감온시키고, -70±5℃로 온도를 제어하면서 n-부틸리튬(2 M, 1.67 mL, 3.34 mmol)을 적가하여 적가 완료되면 온도를 유지시켜 10분 동안 교반한 후, -70±5℃로 온도를 제어하면서 클로르메톡시벤질에테르(1.0 g, 6.68 mmol)를 적가하고, 적가 완료 후, 자연적으로 실온으로 승온시켜 2시간 동안 교반하였으며, 염화암모늄 수용액으로 켄칭한 후, 디클로로메탄을 첨가하여 추출하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.2 g을 얻었다. m/z=418/420[M+1]+.
단계 C: 메틸 4-히드록시메틸-1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
50 mL의 반응 플라스크에 메틸 4-((벤질옥시)메틸)-1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(1.2 g, 2.86 mmol), 디클로로메탄(24 mL) 및 염화알루미늄(1.5 g, 11.45 mmol)을 첨가하여 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 수산화나트륨으로 pH값을 약 7로 조절하고, 디클로로메탄을 첨가하여 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 0.71 g을 얻었다. m/z = 328/330[M+1]+.
단계 D: 4-히드록시메틸-1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실산
50 mL의 반응 플라스크에 메틸 4-히드록시메틸-1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(0.71 g, 2.1 mmol), 테트라히드로푸란(10 mL), 메탄올(10 mL) 및 수산화리튬(181 mg, 4.31 mmol)의 수용액(10 mL)을 첨가하고, 60℃에서 2시간 동안 교반하였으며, 농축한 후, 염산으로 pH를5~6으로 조절하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 농축하여 제품 315 mg을 얻었다. m/z = 314/316[M+1]+.
단계 E: 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드
50 mL의 반응 플라스크에 4-히드록시메틸-1-(5-브로모피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(315 mg, 1 mmol), 아세토니트릴(3 mL), 트리에틸아민(303 mg, 3 mmol), 이소부틸아민(146 mg, 2.0 mmol)을 첨가한 후, HATU(570 mg, 1.5 mmol)를 첨가하여 실온에서 0.5시간 동안 교반한 후, 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 제품 270 mg을 얻었다. m/z = 370/372[M+1]+.
단계 F: 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-아미드
반응 플라스크에 순차적으로 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)-N-이소부틸피페리딘-4-카르복스아미드(36.7 mg, 0.13 mmol), 6-에톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(50 mg, 0.13 mmol), 테트라키스트리페닐포스포팔라듐(23 mg, 0.02 mmol), 탄산칼륨(37.3 mg, 0.27 mmol), 물(0.25 mL), 1,4-디옥산(0.5 mL)을 첨가하고, 질소 가스로 3회 치환하였으며, 90℃로 가열하여 16시간 동안 반응시킨 후, 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 6 mg을 얻었다. m/z=492[M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.57 (s, 1H), 8.43-8.49 (m, 2H), 7.93-7.96 (m, 1H), 7.51-7.60 (m, 2H), 7.18-7.18 (d, 1H), 6.96-7.02 (m, 1H), 4.83-4.85 (m, 1H), 3.99-4.19 (m, 4H), 3.36-3.37 (m, 2H), 3.11 (m, 2H), 2.86-2.89 (m, 2H), 1.98-2.01 (m, 2H), 1.17-1.71 (m, 1H), 1.43 (m, 2H), 1.36-1.34 (m, 4H), 0.70-0.80 (m, 6H).
실시예 33: 화합물 88의 제조
tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카바메이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(50 mg, 0.17 mmol), tert-부틸 ((3S,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카바메이트(40 mg, 0.17 mmol), DIEA(65 mg, 0.5 mmol), DMSO(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 4h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 12 mg을 얻었다. m/z=494[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (brs, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.01 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.8Hz, 1H), 6.72 (brs, 1H), 4.98 (d, J=4.8Hz, 1H), 4.43-4.46 (m, 1H), 4.20-4.27 (m, 1H), 4.15 (q, J=6.8Hz, 2H), 3.35-3.41 (m, 2H), 2.96-3.02 (m, 1H), 2.75-2.80 (m, 1H), 1.86-1.88 (m, 1H), 1.35-1.42 (m, 13H).
실시예 34: 화합물 89의 제조
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올(256.5 mg, 0.51 mmol), 2,3-디메틸부탄산(60 mg, 0.51 mmol), DIEA(329 mg, 2.55 mmol), HATU(232 mg, 0.61 mmol) 및 DCM(10 mL)을 50 mL의 반응 플라스크에 넣고, 실온에서 0.5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 40 mg을 얻었다. m/z=492[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.64 (s, 1H), 8.50-8.60 (m, 2H), 8.05 (m, 1H), 7.65 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.10-7.15 (m, 1H), 4.30-4.50 (m, 1H), 4.10-4.30 (m, 3H), 3.70-3.80 (m, 1H), 3.50-3.60 (m, 2H), 3.06-3.39 (m, 1H), 2.75-2.95 (m, 1H), 1.88-1.96 (m, 2H), 1.66-1.70 (m, 1H), 1.33-1.41 (m, 4H), 0.83-0.98 (m, 9H).
실시예 35: 화합물 91의 제조
단계 A: 2-클로로-N-((3S,4S)-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)- 5-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 (3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피라진-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 2-클로로-5-플루오로벤조일클로라이드(46 mg, 0.24 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol) 및 2 ml의 DMF를 첨가하고, 25℃에서 1h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 8.5 mg을 얻었다. m/z=551.1[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.47 (brs, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.47 (d, J=8.0Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.54 (dd, J 1 =8.8Hz, J 2 =4.0Hz, 1H), 7.40-7.43 (m, 1H), 7.31-7.36 (m, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.42-4.46 (m, 1H), 4.28-4.32 (m, 1H), 4.17 (t, J=6.8Hz, 2H), 3.89-3.99 (m, 1H), 3.51-3.57 (m, 1H), 3.25-3.27 (m, 1H), 3.02-3.10 (m, 1H), 2.01-2.08 (m, 1H), 1.48-1.54 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 36: 화합물 101의 제조
단계 A: tert-부틸 4-(N-이소프로필술포닐)피페리딘-1-카보네이트
반응 플라스크에 이소프로필아민(97 mg, 1.7 mmol), 디클로로메탄(10 mL)을 첨가하여 교반하고, 트리에틸아민(300 mg, 3 mmol)을 첨가하여 10℃로 감온시킨 후, tert-부틸 4?(클로로술포닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (426 mg, 1.5 mmol)를 첨가하고 1시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축하여 제품 400 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=307[M+1]+.
단계 B: N-이소프로필피페리딘-4-술폰아미드
반응 플라스크에 순차적으로tert-부틸 4-(N-이소프로필술포닐)피페리딘-1-카보네이트(400 mg, 1.3 mmol) 및 HCl의 1.4-디옥산 용액(4 M, 10 mL)을 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 감압 농축하여 제품 340 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z = 207[M+1]+.
단계 C: 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-이소프로필피페리딘-4-술폰아미드
반응 플라스크에 순차적으로 DMSO(2 mL) 및 DIEA(0.5 mL), N-이소프로필피페리딘-4-술폰아미드(340 mg, 1.3 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.3 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 48시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 46 mg을 얻었다. m/z=484[M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.60 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 19.8, 8.4 Hz, 2H), 4.56 (d, J = 13.3 Hz, 2H), 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.46 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 3.32 (s, 1H), 3.02 (t, J = 12.2 Hz, 2H), 2.06 (d, J = 11.3 Hz, 2H), 1.60 (qd, J = 12.5, 4.2 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 6.5 Hz, 6H).
실시예 37: 화합물 102의 제조
단계 A: tert-부틸 4-하이드록시-4-(벤젠술폰아미드메틸렌)피페리딘-1-카보네이트
반응 플라스크에tert-부틸 4-(아미드메틸렌)-4-하이드록시피페리딘-1-카보네이트(230 mg, 1 mmol), 디클로로메탄(10 mL), 트리에틸아민(200 mg, 2 mmol)을 첨가하고, 10℃로 감온시킨 후, 벤조일클로라이드(194 mg, 1.1 mmol)를 첨가하여 1시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 300 mg을 얻었다. m/z=371[M+1]+.
단계 B: N-((4-하이드록시피페리딘-4-일)메틸렌)벤젠술폰아미드
반응 플라스크에 순차적으로tert-부틸 4-하이드록시-4-(벤젠술폰아미드메틸렌)피페리딘-1-카보네이트(300 mg, 0.8 mmol) 및 HCl의 1,4-디옥산 용액(4M, 10 mL)을 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 감압 농축하여 제품 320 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=271[M+1]+.
단계 C: N-((1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-하이드록시피페리딘-4-일)메틸렌)벤젠술폰아미드
반응 플라스크에 순차적으로 DMSO(2 mL) 및 DIEA(0.5 mL), N-((4-하이드록시피페리딘-4-일)메틸렌)벤젠술폰아미드(300 mg, 0.8 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.3 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 93 mg을 얻었다. m/z=548[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.58 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.03 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.86 - 7.78 (m, 2H), 7.69 - 7.53 (m, 5H), 7.26 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.23 - 4.07 (m, 4H), 3.35 - 3.24 (m, 2H), 2.72 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.60 (td, J = 12.8, 12.1,4.4 Hz, 2H), 1.48 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 38: 화합물 103의 제조
단계 A: tert-부틸 4-(피리딘-2-옥시)피페리딘-1-카르복실레이트
반응 플라스크에tert-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트(804 mg, 4 mmol), 테트라히드로푸란(10 mL)를 첨가하여 교반하고, 10℃로 감온시킨 후, NaH(함량 60%, 192 mg, 4.8 mmol)를 첨가하여 1시간 동안 반응시켰으며, 2-플루오로피리딘(388 mg, 4 mmol)을 첨가하여 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 950 mg을 얻었다. m/z=279[M+1]+.
단계 B: 2-(피페리딘-4-옥시)피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 4-(피리딘-2-옥시)피페리딘-1-카르복실레이트 (950 mg, 3.4 mmol) 및 HCl의 1.4-디옥산 용액(4M, 10 mL)을 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 감압 농축 및 건조시켜 제품 750 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=179[M+1]+.
단계 C: 6-에톡시-4-(6-(4-(피리딘-2-옥시)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피페리딘
반응 플라스크에 순차적으로 DMSO(2 mL) 및 DIEA(0.5 mL), N-((4-하이드록시피페리딘-4-일)메틸)벤젠술폰아미드(150 mg, 0.7 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(60 mg, 0.2 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 22 mg을 얻었다. m/z=456[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.60 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 2.1 Hz,1H), 8.19 (dd, J = 5.1, 2.0 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.72 (ddd, J = 8.8, 7.1, 2.1 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.27 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.94-7.03 (m, 1H), 6.82 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.31 (tt, J = 8.3, 3.9 Hz, 1H), 4.17 (dd, J = 13.4, 6.2 Hz, 4H), 3.45 (ddd, J = 13.1, 9.5, 3.2 Hz, 2H), 2.10 (dq, J = 8.1, 3.8 Hz, 2H), 1.71 (dtd, J = 12.7, 9.0, 3.7 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 39: 화합물 104의 제조
단계 A: tert-부틸 4-((6-메틸피리다진-3-일)옥시)피페리딘-1-카보네이트
반응 플라스크에tert-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (402 mg, 2 mmol), 테트라히드로푸란(10 mL)을 첨가하여 교반하고, 10℃로 감온시킨 후, NaH(함량 60%, 96 mg, 2.4 mmol)를 첨가하여 1시간 동안 반응시켰으며, 3-클로로-6-메틸피리다진(258 mg, 2 mmol)을 첨가하여 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 감압 농축 및 건조시키고 실리카겔 컬럼으로 정제하여 제품 250 mg을 얻었다. m/z=294[M+1]+.
단계 B: 3-메틸-6-(피리딘-4-옥시)피리다진
반응 플라스크에 순차적으로 tert-부틸 4-((6-메틸피리다진-3-일)옥시)피페리딘-1-카보네이트(250 mg, 0.8 mmol) 및 HCl의 1.4-디옥산 용액(4M, 10 mL)을 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 감압 농축하여 제품 210 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=194[M+1]+.
단계 C: 6-에톡시-4-(6-(4-((6-메틸피리다진-3-일)옥시)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 DMSO(2 mL) 및 DIEA(0.5 mL), 3-메틸-6-(피리딘-4-옥시)피리다진(210 mg, 0.8 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(80 mg, 0.2 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 27 mg을 얻었다. m/z=471[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.60 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.51 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 9.0, 7.2 Hz, 2H), 5.46 (tt, J = 8.3, 3.8 Hz, 1H), 4.17 (p, J = 8.6, 7.7 Hz, 4H), 3.49 (ddd, J = 13.0, 9.2, 3.2 Hz, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.21 - 2.11 (m, 2H), 1.76 (dtd, J = 12.7, 8.9, 3.8 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 40: 화합물 107의 제조
(3S,4S)-4-((2-클로로-6-플루오로벤젠)아미노)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올
(3S,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올 염산염(100 mg, 0.2 mmol), 1-클로로-2-(클로로메틸)-3-플루오로벤젠(50 mg, 0.2 mmol), Cs2CO3(130 mg, 0.4 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 50℃에서 12h 동안 반응시켰다. 반응액을 30 ml의 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 용매를 스핀 건조시켰으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 4.6 mg을 얻었다. m/z=535[M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.31-7.42 (m, 2H), 7.22-7.30 (m, 2H), 7.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.42-4.48 (m, 1H), 4.29-4.35 (m, 1H), 4.14 (m, 2H), 3.81-3.98 (m, 2H), 3.20-3.28 (m, 2H), 2.88-2.98 (m, 1H), 2.66-2.74 (m, 1H), 2.41-2.47 (m, 2H), 2.10-2.20 (m, 1H), 1.37 (m, 3H).
실시예 41: 화합물 118의 제조
N-((3aR, 6aS)-5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
6-에톡시-4-(6-((3aR, 6aS)-헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(200 mg, 0.4 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(77 mg, 0.4 mmol), DIEA(258 mg, 2 mmol), DCM(10 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 4.6 mg을 얻었다. m/z=546[M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.48-7.61 (m, 2H), 7.33-7.47 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.70-6.80 (m, 1H), 4.15 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.70-3.86 (m, 3H), 3.46-3.53 (m, 4H), 3.06-3.24 (m, 3H), 1.38 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 42: 화합물 150의 제조
단계 A: 에틸 4-(2,5-디플루오로벤즈아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트
에틸 4-((tert-부틸카르보닐)아미노)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트 하이드로클로라이드(120 mg, 0.26 mmol), 2,5-디플루오로벤조산(37.9 mg, 0.24 mmol), DIEA(100 mg, 0.78 mmol), HATU(108 mg, 0.28 mmol), DMF(2 ml)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 78 mg을 얻었다. m/z=590[M+1]+.
단계 B: N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)피페리딘-4-일)-2,5-디플루오로벤즈아미드
에틸 4-(2,5-디플루오로벤즈아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(29.4 mg, 0.05 mmol), 2 ml의 THF를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 LiAlH4(1.9 mg, 0.05 mmol)를 첨가하여 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 15 mg을 얻었다. m/z=548[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.62 - 8.56 (m, 1H), 8.52 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.08 - 7.99 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.47 - 7.29 (m, 3H), 7.27 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.88 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.21 (m, 2H), 3.64 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.33 (s, 2H), 3.23 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.29 (d, J = 13.6 Hz, 2H), 1.64 (m, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 43: 화합물 151의 제조
단계 A: tert-부틸 3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-6-카보네이트
3구 플라스크에 순차적으로 4-브로모-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(0.28 g, 1 mmol), 1,4-디옥산(2.8 mL), tert-부틸 6-(5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-일)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-카보네이트(0.52 g, 1.3 mmol), 탄산리튬(148 mg, 2 mmol), 테트라키스트리페닐포스포팔라듐(23 mg, 0.02 mmol), 물(1.4 mL)을 첨가하여 90℃로 승온시키고, 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 230 mg을 얻었다. m/z=476.2 [M+1]+
단계 B: 4-(6-(3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-6-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
3구 플라스크에 순차적으로tert-부틸 3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-6-카보네이트(200 mg, 0.42 mmol), 메탄올(4 mL), m-크실릴렌디메틸에테르(2.9mg, 0.02 mmol)를 첨가하고, 황산(98%, 168 mg, 1.68 mmol)을 첨가하여 55℃로 승온시켜 4시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 300 mg을 얻었다. m/z=376.2 [M+1]+.
단계 C: 6-에톡시-4-(6-(3-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-6-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
3구 플라스크에 순차적으로 4-(6-(3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-6-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(180 mg, 0.27 mmol), n-프로판올(3.6 mL), 트리에틸아민(136.2 mg, 1.35 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(111 mg, 0.81 mmol), Pic-BH3(86.7 mg, 0.81 mmol)을 첨가하고, 온도를 50℃로 유지시켜 24시간 동안 교반한 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 70 mg을 얻었다. m/z=497 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.67 (s, 1H), 8.53-8.56 (m, 2H), 7.99-8.02 (m, 1H), 7.76-7.76 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.31-7.32 (m, 1H),7.19-7.22 (m, 1H), 6.69-6.71 (m, 1H), 6.49-6.52 (m, 1H), 4.38-4.40 (m, 2H), 4.16-4.21 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.56 (s, 2H), 3.21-3.24 (m, 2H), 2.69-2.72 (m, 2H), 2.56-2.60 (m, 1H), 1.75-1.77 (d, 1H), 1.39-1.42 (m, 3H).
실시예 44: 화합물 152의 제조
단계 A: tert-부틸 (3aR, 6aS)-5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(700 mg, 2.4 mmol), tert-부틸 (3aR, 6aS)-헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(700 mg, 2.4 mmol), DIEA(1.5 g, 11.6 mmol), DMSO(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1 g을 얻었다. m/z=490[M+1]+.
단계 B: 6-에톡시-4-(6-((3aR, 6aS)-헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸 (3aR, 6aS)-5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-카르복실레이트(1 g, 2.0 mmol)에 HCl의 메탄올 용액(4 M, 20 mL)을 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시키고, 용매를 스핀 건조시켜 제품 1.1 g을 얻었다. m/z=390[M+1]+.
6-에톡시-4-(6-((3aR, 6aS)-5-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
단계 C: 6-에톡시-4-(6-((3aR, 6aS)-헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(200 mg, 0.4 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(165 mg, 1.2 mmol), Et3N(202 mg, 2.0 mmol), Pic-BH3(128 mg, 1.2 mmol), n-프로판올(10 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 40℃에서 48 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 67.2 mg을 얻었다. m/z=511[M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.58-7.64 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 6.72-6.78 (m, 2H), 4.15 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.62-3.71 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.35-3.41 (m, 2H), 2.88-2.97 (m, 2H), 2.61-2.71 (m, 2H), 2.42-2.44 (m, 2H), 1.38 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 45: 화합물 155의 제조
단계 A: tert-부틸 (1R, 5S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카보네이트
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(292 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카보네이트(250 mg, 1.2 mmol), DIEA(506 mg, 3.9 mmol) 및 3ml의 DMSO를 첨가하여 95℃에서 4 h 동안 반응시키고, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 208 mg을 얻었다. m/z=490[M+1]+.
단계 B: 4-(6-((1R, 5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 (1R, 5S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카보네이트(200 mg, 0.4 mmol), 5N 메탄올성 염산 용액(3 ml, 15 mmol)을 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시키고, 직접 감압 농축하여 제품 250 mg을 얻었다. m/z = 390 [M+1]+.
단계 C: (2-클로로-6-플루오로)((1R, 5S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)벤즈아미드
반응 플라스크에 4-(6-((1R, 5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(120 mg, 0.24 mmol), 3-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(10 mg, 0.26 mmol), DIEA(155 mg, 1.2 mmol), 2ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 136 mg을 얻었다. m/z=546[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD-d 3 ) δ 8.58 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.01 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.49-7.55 (m, 1H), 7.39-7.42 (m, 1H), 7.24-7.30 (m, 2H), 7.00 (d, J=8.8Hz, 1H), 5.03-5.04 (m, 1H), 4.31-4.35 (m, 1H), 4.13-4.20 (m, 3H), 3.92-3.94 (m, 1H), 3.18-3.25 (m, 1H), 3.04-3.07 (m, 1H), 1.92-2.13 (m, 4H), 1.45 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 46: 화합물 156의 제조
단계 A: 6-에톡시-4-(6-((1R, 5S)-8-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피라졸
반응 플라스크에 4-(6-((1R, 5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(82 mg, 0.6 mmol), TEA(121 mg, 1.2 mmol), 2-피콜린 보란(64 mg, 0.6 mmol), 및 n-프로판올 3 mL를 첨가하여 45℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 37.6 mg을 얻었다. m/z=511[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD-d 3 ) δ 8.53 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.95 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.89 (d, J=8.8Hz, 1H), 6.80 (d, J=8.4Hz, 1H), 4.11 (q, J=6.8Hz, 2H), 3.93-3.97 (m, 2H), 3.91(s, 3H), 3.59 (s, 2H), 3.35-3.38 (m, 2H), 3.15-3.18 (m, 2H), 2.15-2.18 (m, 2H), 1.45 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 47: 화합물 157의 제조
단계 A: tert-부틸 (1R, 5S)-8-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-카보네이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(292 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-카보네이트(250 mg, 1.2 mmol), DIEA(506 mg, 3.9 mmol) 및 2ml의 DMSO를 첨가하고, 120℃에서 16 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 220 mg을 얻었다. m/z=490[M+1]+.
단계 B: 4-(6-((1R, 5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 tert-부틸 (1R, 5S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카보네이트(200 mg, 0.4 mmol), 메탄올 3 mL, 5N 메탄올성 염산 용액(3 mL, 15 mmol)을 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 반응이 완료되면 감압 농축하여 제품 280 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z = 390 [M+1]+.
단계 C: (2-클로로-6-플루오로)((1R, 5S)-8-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)벤즈아미드
반응 플라스크에 4-(6-((1R, 5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 3-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(43 mg, 0.22 mmol), DIEA(155 mg, 1.2 mmol), 2ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 23.2 mg을 얻었다. m/z=546[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD-d 3 ) δ 8.59 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.02 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.46-7.52 (m, 1H), 7.42-7.44 (m, 1H), 7.17-7.27 (m, 2H), 7.03 (d, J=8.8Hz, 1H), 4.82-4.87 (m, 1H), 4.63-4.68 (m, 1H), 4.42 (t, J=11.2Hz, 1H), 4.12 (q, J=7.2Hz, 2H), 3.57 (t, J=13.6Hz, 1H), 3.18-2.24 (m, 1H), 1.92-2.18 (m, 4H), 1.45 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 48: 화합물 158의 제조
단계 A: 6-에톡시-4-(6-((1R, 5S)-3-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)피리딘-8-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피라졸
반응 플라스크에 4-(6-((1R, 5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(82 mg, 0.6 mmol), TEA(121 mg, 1.2 mmol), 2-피콜린 보란(64 mg, 0.6 mmol), 및 n-프로판올 3 mL를 첨가하여 45℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 45.5 mg을 얻었다. m/z=511 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD-d 3 ) δ 8.55 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.00-8.10 (m, 2H), 7.68-7.72 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.95 (d, J=9.2Hz, 1H), 6.78 (d, J=8.8Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.17 (q, J =6.8Hz, 2H), 3.88(s, 3H), 3.42-3.45 (m, 2H), 2.68-2.72 (m, 2H), 2.42-2.48 (m, 2H), 2.02-2.11 (m, 2H), 1.95-2.00 (m, 2H), 1.46 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 49: 화합물 159의 제조
단계 A: tert-부틸 5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(318 mg, 1.1 mmol), tert-부틸2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-카르복실레이트 (250 mg, 1.2 mmol), DIEA(414 mg, 3.2 mmol), DMSO(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 500 mg을 얻었다. m/z=490[M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-카르복실레이트(500 mg, 1.02 mmol)를 5 ml의 MeOH/HCl(4M)에 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시켰으며, 용매를 스핀 건조시켜 제품 500 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=390 [M+1]+.
단계 C: (2-클로로-6-플루오로페닐)-5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-일)메타논
4-(6-(2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(500 mg, 1.18 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(250 mg, 1.29 mmol), Et3N(357.5 mg, 3.54 mmol), DMF(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 412 mg을 얻었다. m/z=546 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.59 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 8.9, 2.5 Hz, 1H), 7.63-7.58 (m, 1H), 7.58-7.51 (m, 1H), 7.51-7.46 (m, 1H), 7.45-7.36 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 6.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.18 (m, 2H), 3.85-3.70 (m, 4H), 3.67-3.53 (m, 2H), 2.04-1.95 (m, 2H), 1.90 (d, J = 9.3 Hz, 2H), 1.40 (m, 3H).
실시예 50: 화합물 160의 제조
6-에톡시-4-(6-(5-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,5-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(500 mg, 1.18 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(176 mg, 1.29 mmol), Et3N(357.5 mg, 3.54 mmol), Pic-BH3(378.8 mg, 3.54 mmol), n-프로판올(5mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 351 mg을 얻었다. m/z=511 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.54 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.03 (m, 1H), 7.70 (m,1H), 7.60 (s, 1H), 7.23 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.17 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.71 (m, 2H), 3.41 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.33 (d, J = 9.5 Hz, 3H), 2.99 (s, 1H), 2.94-2.80 (m, 2H), 2.08 (s, 1H), 1.85 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 51: 화합물 161의 제조
(2-클로로-6-플루오로페닐)(6-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)메틸렌
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-6-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(120 mg, 0.18 mmol), DMF(2 mL), 트리에틸아민(90.5 mg, 0.9 mmol)을 첨가하고, 5℃로 감온시킨 후, 2-플루오로-5-클로로벤조일클로라이드(41.5 mg, 1.25 mmol)를 적가하여 5℃에서 2시간 동안 교반하였으며, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 50 mg을 얻었다. m/z=532 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.66 (s, 1H), 8.55-8.60 (m, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.23-7.51 (m, 5H), 6.86-6.88 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.16-4.26 (m, 3H), 3.51-3.82 (m, 2H), 2.77-2.80 (m, 1H), 1.68-1.71 (d, 1H), 1.40-1.42 (m, 3H).
실시예 52: 화합물 164의 제조
단계 A: tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(700 mg, 2.4 mmol), tert-부틸 4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트(500 mg, 2.4 mmol), DIEA(1.5 g, 11.6 mmol), DMSO(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 670 mg을 얻었다. m/z=491[M+1]+.
단계 B: 4-(6-(4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트(670 mg, 1.4 mmol)를 HCl의 메탄올 용액(4 M, 20 mL)를 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시키고, 용매를 스핀 건조시켜 제품 680 mg을 얻었다. m/z=391[M+1]+.
단계 C: N-(7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(200 mg, 0.4 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(77 mg, 0.4 mmol), DIEA(258 mg, 2 mmol), DCM (10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 100 mg을 얻었다. m/z=546 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (brs, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.06 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.50-7.59 (m, 2H), 7.33-7.48 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.05 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 4.05-4.28 (m, 3H), 3.48-3.88 (m, 4H), 3.38-3.46 (m, 1H),1.38 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.02-1.28 (m, 2H), 0.76-0.82 (m, 1H), 0.68-0.75 (m, 1H).
실시예 53: 화합물 165의 제조
6-에톡시-4-(6-(4-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-7-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(200 mg, 0.4 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(165 mg, 1.2 mmol), Et3N(202 mg, 2.0 mmol), Pic-BH3(128 mg, 1.2 mmol), n-프로판올(10 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 40℃에서 48 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 30.8 mg을 얻었다. m/z=511 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (brs, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.15 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.62-68 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 2.78-2.86 (m, 2H),1.38 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.60-0.71 (m, 4H).
실시예 54: 화합물 169의 제조
단계 A: tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(120 mg, 0.4 mmol)tert-부틸3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트(100 mg, 0.44 mmol), DIEA(155 mg, 1.2 mmol), DMSO(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 150 mg을 얻었다. m/z=506 [M+1]+.
단계 B: 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난 하이드로클로라이드
tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-카르복실레이트 (150 mg, 0.3 mmol)을 HCl의 메탄올 용액(4 M, 5 mL)에 첨가하여 25 ℃에서 4 h 동안 반응시키고, 용매를 스핀 건조시켜 제품 160 mg을 얻었다. m/z=406 [M+1]+.
단계 C: N-(7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난-9-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난(60 mg ; 0.1 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(23 mg, 0.1 mmol), Et3N(50 mg, 0.5 mmol), DMF(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 15 mg을 얻었다. m/z=562 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.60 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.53-7.64 (m, 1H), 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.69 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.53 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 4.18 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.11 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.94 (dd, J = 11.1,5.5 Hz, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.62 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.32 (d, J = 11.8 Hz, 2H), 3.15 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 55: 화합물 114의 제조
단계 A: 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-9-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난
7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-옥사-7,9-아자비시클로[3.3.1]노난(100 mg, 0.2 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(83 mg, 0.6 mmol), Pic-BH3(64 mg, 0.6 mmol), Et3N(120 mg, 1.2 mmol), n-프로판올(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 45℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 6.5 mg을 얻었다. m/z = 527 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.61 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.26 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.19 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.05 (d, J = 13.1 Hz, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.83 (d, J = 14.8 Hz, 7H), 3.47-3.57 (m, 2H), 2.83 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 56: 화합물 149의 제조
6-에톡시-4-(6-(6-(4-(메틸술포닐)벤질리덴)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(300 mg, 0.8 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(165 mg, 1.2 mmol), Et3N(202 mg, 2.0 mmol), Pic-BH3(128 mg, 1.2 mmol), DMSO(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 45℃에서 48 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 71.4 mg을 얻었다. m/z=544 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58-7.70 (m, 3H), 7.27 (s, 1H), 6.91 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.16-4.21 (m, 2H), 3.51-3.83 (m, 8H), 3.20 (s, 3H), 2.58-2.65 (m, 1H), 1.57-1.65 (m, 1H), 1.39-1.42 (m, 3H).
실시예 57: 화합물 170의 제조
2-클로로-N-(((1R, 5S, 6S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥실-6-일)-6-플루오로벤즈아미드
단계 A: (1R, 5S, 6S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(311 mg, 1.05 mmol), DMSO(6 mL), DIEA(407 mg, 3.15 mmol), ((1R, 5S, 6S)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노카보네이트(250 mg, 1.26 mmol)를 첨가하고, 90℃로 가열하여 24시간 동안 반응시킨 후, 반응을 정지시켰으며, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축한 후, 메탄올(2 mL) 및 1,4-디옥산/염화수소(4M, 1 mL)를 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였으며, 직접 농축하여 제품 0.4 g을 얻었다. m/z=376[M+1]+.
단계 B: 2-클로로-N-((1R, 5S, 6S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥실-6-일)-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 (1R, 5S, 6S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노 하이드로클로라이드(200 mg, 0.41 mmol), 2 ml의 DMF, 트리에틸아민(208 mg, 2.06 mmol)을 첨가하고, 5℃로 감온시킨 후, 2-플루오로-5-클로로벤조일클로라이드를 반응액에 천천히 적가하고, 적가 완료되면 실온에서 1시간 동안 교반하였으며, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 12 mg을 얻었다. m/z=532 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (s, 1H), 8.94-8.95 (m, 1H), 8.46-8.56 (m, 2H), 8.01-8.04 (m, 1H), 7.52-7.58 (m, 1H), 7.47-7.51 (m, 1H), 7.38-7.40 (m, 1H), 7.29-7.34 (m, 1H), 7.23-7.24 (m, 1H), 6.73-6.75 (m, 1H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.86-3.96 (m, 2H), 3.55-3.58 (d, 2H), 2.66-2.67 (m, 1H), 1.95 (s, 1H), 1.37-1.41 (m, 3H).
실시예 58: 화합물 171의 제조
(1R, 5S, 6S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노
반응 플라스크에 (1R, 5S, 6S)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노 하이드로클로라이드(200 mg, 0.41 mmol), DMSO(4 mL), 트리에틸아민(208 mg, 2.06 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(170 mg, 1.24 mmol)를 첨가한 후, 2-피콜린 보란(132.4 mg, 1.24 mmol)를 적가하여 실온에서 1시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 3 mg을 얻었다. m/z=497 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.63 (s, 1H), 8.50-8.56 (m, 2H), 7.98-8.08 (m, 2H), 7.57-7.65 (m, 2H), 7.20-7.23 (m, 1H), 6.81-6.87 (m, 1H), 6.61-6.64 (m, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H), 3.85-3.90 (m, 5H), 3.60-3.63 (m, 5H), 1.52-1.55 (m, 2H), 1.39-1.46 (m, 3H), 1.20 (s, 1H).
실시예 59: 화합물 172의 제조
2-클로로-N-(((1R, 5S, 6R)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥실-6-일)-6-플루오로벤즈아미드
단계 A: (1R, 5S, 6R)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(311 mg, 1.05 mmol), DMSO(2 mL), DIEA(407 mg, 3.15 mmol), ((1R, 5S, 6R)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노카보네이트(250 mg, 1.26 mmol)를 첨가하고, 90℃로 승온시켜 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축한 후, 잔류물에 메탄올(2 mL) 및 1,4-디옥산/염화수소(4M, 2 mL)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였으며, 감압 농축하여 제품 0.4 g을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=376 [M+1]+.
단계 B: 2-클로로-N-((1R, 5S, 6R)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥실-6-일)-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 (1R, 5S, 6R)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노 하이드로클로라이드(200 mg, 0.41 mmol), 2 ml의 DMF, 트리에틸아민(208 mg, 2.06 mmol)을 첨가하고, 5℃로 감온시킨 후, 2-플루오로-5-클로로벤조일클로라이드를 반응액에 천천히 적가하고, 적가 완료되면 실온에서 1시간 동안 교반하였으며, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 65 mg을 얻었다. m/z=532 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.64 (s, 1H), 8.63-8.64 (m, 1H), 8.49-8.49 (m, 2H), 7.95-7.97 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.35-7.41 (m, 1H), 7.16-7.23 (m, 3H), 6.58-6.60 (m, 1H), 7.23-7.24 (m, 1H), 6.73-6.75 (m, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H), 3.70 (s, 4H), 2.92-2.96 (m, 1H), 2.08-2.13 (m, 2H), 1.35-1.45 (m, 3H).
실시예 60: 화합물 173의 제조
(1R, 5S, 6R)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-N-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노
반응 플라스크에 (1R, 5S, 6R)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]-6-헥실아미노 하이드로클로라이드(200 mg, 0.41 mmol), n-프로판올(4 mL), 트리에틸아민(208 mg, 2.06 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(170 mg, 1.24 mmol), 2-피콜린 보란(132.4 mg, 1.24mol)을 첨가하여 40℃에서 20시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 4.8 mg을 얻었다. m/z=497 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.63 (s, 1H), 8.48-8.53 (s, 2H), 7.97-8.01 (m, 2H), 7.51-7.58 (m, 2H), 7.21-7.21 (m, 1H), 6.55-6.63 (m, 2H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.65-3.72 (m, 4H), 3.33-3.35 (m, 3H), 2.22-2.25 (m, 1H), 1.83-1.84 (m, 2H), 1.38-1.41 (t, 3H)
실시예 61: 화합물 174의 제조
2-클로로-N-(((3aR, 5S, 6aS)-2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-옥타하이드로사이클로펜틸[c]피롤릴 5-일)-6-플루오로벤즈아미드
단계 A: 2-클로로-6-플루오로-N-(((3aR, 5S, 6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)벤즈아미드 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 (3aR, 5S, 6aS)-5-아미노헥사하이드로사이클로펜틸[c]피롤-2(1H)-tert-부틸 카보네이트 하이드로클로라이드(120 mg, 0.53 mmol), 디클로로메탄(2 mL), 트리에틸아민(107 mg, 1.06 mmol), 6-플루오로-2-클로로벤조일클로라이드(113 mg, 0.58 mmol)를 첨가하여 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 물에 붓고, DCM으로 2회 추출하였으며, 추출되지 않을 때까지 농축한 후, 잔류물에 메탄올(1 mL) 및 1,4-디옥산/염화수소(4M, 2 mL)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였으며, 감압 농축하여 제품 140 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=283 [M+1]+.
단계 B: 2-클로로-N-(((3aR, 5S, 6aS)-2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-옥타하이드로사이클로펜틸[c]피롤릴 5-일)-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 2-클로로-6-플루오로-N-(((3aR, 5S, 6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)벤즈아미드 하이드로클로라이드(65 mg, 0.2 mmol), 2 ml의 DMSO, DIEA(65.7 mg, 0.51 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(65 mg, 0.2 mmol)을 첨가하고, 90℃로 가열하여 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 30 mg을 얻었다. m/z=560 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.64 (s, 1H), 8.80-8.82 (m, 1H), 8.50-8.55 (m, 2H), 7.80-8.02 (m, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.43-7.48 (m, 1H), 7.35-7.37 (m, 1H), 7.26-7.31 (m, 1H), 7.21-7.22 (m, 1H), 6.72-6.74 (m, 1H), 4.29-4.35 (m, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H), 3.59-3.63 (m, 2H), 3.49-3.52 (m, 2H), 2.78-2.80 (m, 2H), 2.32-2.38 (m, 2H), 1.37-1.50 (m, 5H).
실시예 62: 화합물 176의 제조
2-클로로-N-(((3aR, 5R, 6aS)-2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-옥타하이드로사이클로펜틸[c]피롤릴 5-일)-6-플루오로벤즈아미드
단계 A: 2-클로로-6-플루오로-N-(((3aR, 5R, 6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)벤즈아미드 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 (3aR, 5R, 6aS)-5-아미노헥사하이드로사이클로펜틸[c]피롤-2(1H)-tert-부틸 카보네이트 하이드로클로라이드(120 mg, 0.53 mmol), 디클로로메탄(2 mL), 트리에틸아민(107 mg, 1.06 mmol), 6-플루오로-2-클로로벤조일클로라이드(113 mg, 0.58 mmol)를 첨가하여 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 물에 붓고, DCM으로 2회 추출하였으며, 추출되지 않을 때까지 농축한 후, 잔류물에 메탄올(1 mL) 및 1,4-디옥산/염화수소(4M, 2 mL)를 첨가하여 실온에서 2시간 동안 교반하였으며, 감압 농축하여 제품 170 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=283 [M+1]+.
단계 B: 2-클로로-N-(((3aR, 5R, 6aS)-2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-옥타하이드로사이클로펜틸[c]피롤릴 5-일)-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 2-클로로-6-플루오로-N-(((3aR, 5R, 6aS)-옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-5-일)벤즈아미드 하이드로클로라이드(74 mg, 0.23 mmol), 2 ml의 DMSO, DIEA(74.8 mg, 0.58 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(57.4 mg, 0.19 mmol)을 첨가하고, 90℃로 가열하여 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 17 mg을 얻었다. m/z= 560 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.64 (s, 1H), 8.78-8.80 (m, 1H), 8.50-8.59 (m, 2H), 8.00-8.03 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.45-7.50 (m, 1H), 7.37-7.38 (m, 1H), 7.28-7.32 (m, 1H), 7.22-7.23 (m, 1H), 6.72-6.75 (m, 1H), 4.37-4.45 (m, 1H), 4.14-4.25 (m, 2H), 3.63-3.67 (m, 2H),3.40-3.43 (m, 2H), 2.91-2.95 (m, 2H), 1.86-2.01 (m, 4H), 1.38-1.41 (m, 3H).
실시예 63: 화합물 180의 제조
(2-클로로-6-플루오로페닐)((3aR, 7aS)-2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)옥타하이드로-1H-4,7-에피미노이소인돌-8-일)메타논
단계 A: (2-클로로-6-플루오로페닐)((3aR, 7aS)-옥타하이드로-1H-4,7-에피미노이소인돌-8-일)메타논 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 (3aR, 7aS)-옥타하이드로-2H-4,7-에피미노이소인돌-2-카보네이트(100mg, 0.35mmol), 디클로로메탄(2 mL), 트리에틸아민(70 mg, 0.69 mmol), 6-플루오로-2-클로로벤조일클로라이드(80.3mg, 0.42 mmol)를 첨가하여 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 물에 붓고, DCM으로 2회 추출하였으며, 추출되지 않을 때까지 농축한 후, 메탄올(1 mL) 및 1,4-디옥산/염화수소(4M, 2 mL)를 첨가하여 실온에서 2시간 동안 교반하였으며, 감압 농축하여 제품 50 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=295 [M+1]+.
단계 B: (2-클로로-6-플루오로페닐)((3aR, 7aS)-2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘- 4-일)피리딘-2-일)옥타하이드로-1H-4,7-에피미노이소인돌-8-일)메타논
반응 플라스크에 (2-클로로-6-플루오로페닐)((3aR, 7aS)-옥타하이드로-1H-4,7-에피미노이소인돌-8-일)메타논 하이드로클로라이드(50 mg, 0.15 mmol), 2 ml의 DMSO, K2CO3(69.5 mg, 0.5 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(37.4 mg, 0.13 mmol)을 첨가하고, 90℃로 가열하여 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 5 mg을 얻었다. m/z=572[M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.64 (s, 1H), 8.51-8.57 (d, 2H), 8.04-8.07 (m, 1H), 7.37-7.58 (m, 5H), 7.25 (s, 1H), 6.83-6.85 (m, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.85-3.88 (m, 1H), 3.75-3.78 (m, 2H), 3.03-3.18 (m, 5H), 3.90 (s, 1H), 1.59-1.62 (m, 4H), 1.34-1.41 (t, 3H), 2.78-2.80 (m, 2H), 2.32-2.38 (m, 2H), 1.37-1.50 (m, 5H).
실시예 64: 화합물 128의 제조
6-에톡시-4-(6-(((3aR, 7aS)-8-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)옥타하이드로-2H-4,7-에피아미노이소인돌-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
단계 A: (3aR, 7aS)-8-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)옥타하이드로-1H-4,7-에피아미노이소인돌 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 (3aR, 7aS)-옥타하이드로-2H-4,7-에피아미노이소인돌-2-카보네이트(100 mg, 0.35 mmol), 디클로로메탄(2 mL), 트리에틸아민(70 mg, 0.69 mmol), 5-(클로로메틸)-2-메톡시피리딘(80.3 mg, 0.42 mmol)을 첨가하고, 50℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 물에 붓고, DCM으로 2회 추출하였으며, 추출되지 않을 때까지 농축한 후, 메탄올(1 mL) 및 1,4-디옥산/염화수소(4M, 2 mL)를 첨가하여 실온에서 2시간 동안 교반하였으며, 감압 농축하여 제품 30 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=260 [M+1]+.
단계 B: 6-에톡시-4-(6-(((3aR, 7aS)-8-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)옥타하이드로-2H-4,7-에피아미노이소인돌-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 (3aR, 7aS)-8-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)옥타하이드로-1H-4,7-에피아미노이소인돌 하이드로클로라이드(30 mg, 0.10 mmol), 2 ml의 DMSO, K2CO3(69.5 mg, 0.5 mmol), 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(30 mg, 0.1 mmol)을 첨가하고, 가열하여 90℃로 승온시켜 24시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 4 mg을 얻었다. m/z=537 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.51-8.58 (m, 2H), 8.04-8.14 (m, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.26 (d, 1H), 6.83-6.85 (d, 2H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.80-3.85 (m, 5H), 3.09-3.18 (m, 2H), 2.89-2.93 (m, 2H), 1.40-1.46 (m, 4H), 1.21-1.29 (m, 5H), 1.18-1.98 (m, 1H), 1.09-1.10 (m, 1H).
실시예 65: 화합물 183의 제조
단계 A: 3-페닐-6-에틸-(1R, 5S, 6r)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3,6-카르복실레이트
반응 플라스크에 2,5-디하이드로-1H-피롤-1-페닐카보네이트(5.0 g, 24.6 mmol), Ph2(OAc)4(500 mg, 1.1 mmol) 및 50 mL의 DCE를 첨가하고, 질소 가스 보호 하에 80℃로 가열하였으며, 에틸2-디아조아세테이트(14 g, 123 mmol)를 50mL의 DCE에 용해시키고, 반응액에 4h 동안 적가하였으며, 적가 완료 후 80℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 3.59 g을 얻었다. m/z=290 [M+1]+.
단계 B: 에틸 (1R, 5S, 6r)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-카보네이트
반응 플라스크에 3-페닐-6-에틸(1R, 5S, 6r)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3,6-카르복실레이트(3.5 g, 12 mmol), 무수 메탄올(30 mL), 팔라듐탄소(600 mg)를 첨가하고, 수소 가스를 2회 치환한 후, 25℃에서 18 h 동안 반응시켜 반응이 완료되면 규조토를 첨가하여 여과하였으며, 감압 농축하여 (1R, 5S, 6R)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-에틸 카보네이트 조품 2.0 g을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z = 156 [M+1]+.
단계 C: 에틸 (1R, 5S, 6r)-3-(5-브로모피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-카보네이트
반응 플라스크에 5-브로모-2-플루오로피리딘(1.1 g, 6.4 mmol), 에틸 (1R, 5S, 6r)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-카보네이트(2.0 g), 탄산칼륨(2.6 g, 19 mmol) 및 10 ml의 DMSO을 첨가하고, 110℃에서 3 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 890 mg을 얻었다. m/z = 311 [M+1]+.
단계 D: ((1R, 5S, 6r)-3-(5-브로모피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메탄올
반응 플라스크에 에틸 (1R, 5S, 6r)-3-(5-브로모피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-카보네이트(750 mg, 2.4 mmol), THF(20 mL)를 첨가하고, 질소 가스 보호 하에 LiBH4(209 mg, 9.6 mmol)를 첨가하여 50℃에서 5 h 동안 반응시킨 후, LiBH4(156 mg, 7.2 mmol)를 추가하고, 50℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 340 mg을 얻었다. m/z = 269 [M+1]+.
단계 E: tert-부틸(((1R, 5S, 6r)-3-(5-브로모피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸)(tert-부톡시카르보닐)카르바메이트
반응 플라스크에 ((1R, 5S, 6r)-3-(5-브로모피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메탄올(340 mg, 1.2 mmol), HN(BOC)2(412 mg, 1.9 mmol), 트리페닐포스핀(660 mg, 2.5 mmol), THF(15 mL)를 첨가하고, 질소 가스 보호 후 디에틸 아조디카르복실레이트(438 mg, 2.5 mmol)를 반응액에 적가하여 50℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 505 mg을 얻었다. m/z = 468 [M+1]+.
단계 F: tert-부틸(((1R, 5S, 6r)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸) (tert-부톡시카르보닐)카르바메이트
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(360 mg, 1.1 mmol), (((1R, 5S, 6s)-3-(5-브로모피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸) (tert-부톡시카르보닐)카르바메이트(500 mg, 1.1 mmol), 탄산세슘(1.0 g, 3.3 mmol), 1,4-디옥산(10 mL), 물(2 mL)을 첨가하고, 질소 가스로 치환하였으며, Pd(dppf)Cl2(73.1 mg, 0.1 mmol)를 첨가하여 50℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 330 mg을 얻었다. m/z = 589 [M+1]+.
단계 G: ((1R, 5S, 6s)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸아민 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 tert-부틸(((1R, 5S, 6r)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸) (tert-부톡시카르보닐)카르바메이트(330 mg, 0.56 mmol), 4N 염산-디옥산 용액(5 mL, 20 mmol), 메탄올(1 mL)을 첨가하여 25℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 반응이 완료되면 감압 농축하여 제품 300 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z = 389 [M+1]+.
단계 H: 2-클로로-N-(((1R, 5S, 6s)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸)-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 ((1R, 5S, 6s)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸아민 하이드로클로라이드(120 mg, 0.3 mmol), 3-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(59 mg, 0.3 mmol), DIEA(232 mg, 1.8 mmol), 3ml의 DMF를 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 11.5 mg을 얻었다. m/z=546 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.63 (brs, 1H), 8.85-8.88 (m, 1H), 8.50-8.53 (m, 2H), 8.00 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.44-7.59 (m, 2H), 7.29-7.42 (m, 2H), 7.21 (s, 1H), 6.68 (d, J=8.8Hz, 1H), 4.14 (q, J=6.8Hz, 1H), 3.74-3.76 (m, 2H), 3.47-3.50 (m, 2H), 3.25-3.28 (m, 2H), 1.75-1.79 (m, 2H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H), 0.88-0.94 (m, 1H).
실시예 66: 화합물 184의 제조
단계 A: N-(((1R, 5S, 6s)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸)-1-(6-메톡시피리딘-3-일)-N-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)메틸아민
반응 플라스크에 ((1R, 5S, 6s)-3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-6-일)메틸아민 하이드로클로라이드(170 mg, 0.44 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(178 mg, 1.3 mmol), TEA(212 mg, 2.1 mmol), 2-피콜린 보란(139 mg, 1.3 mmol), 및 n-프로판올 10 mL를 첨가하여 45℃에서 18 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 6.4 mg을 얻었다. m/z=511[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (brs, 1H), 8.50-8.55 (m, 2H), 8.10 (s, 1H), 8.00 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.67-7.71 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.61 (d, J=8.8Hz, 1H), 4.14-4.18 (m, 2H), 3.74-3.76 (m, 2H), 3.52-3.61 (m, 3H), 3.37-3.42 (m, 2H), 2.32-2.45 (m, 2H), 1.41-1.48 (m, 2H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H), 0.80-0.88 (m, 1H).
실시예 67: 화합물 187의 제조
단계 A: tert-부틸 5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,5-디아자스피로[3.4]옥탄-5-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(318 mg, 1.1 mmol), tert-부틸2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-카르복실레이트 (254 mg, 1.2 mmol), DIEA(414 mg, 3.2 mmol), DMSO(5mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 511 mg을 얻었다. m/z=490 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,5-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
tert-부틸5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-카르복실레이트(511 mg, 1.04 mmol)를 5 ml의 MeOH/HCl(4M)에 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 감압 농축하여 제품 500 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=390 [M+1]+.
단계 C: (2-클로로-6-플루오로페닐)-5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,5-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)메타논
4-(6-(2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(500 mg, 1.18 mmol), 2-클로로- 6-플루오로벤조일클로라이드(250 mg, 1.29 mmol), Et3N(358 mg, 3.54 mmol), DMF(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 398 mg을 얻었다. m/z=546 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.65 (s, 1H), 8.57 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.06 (m,1H), 7.59 (s, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.49-7.34 (m, 2H), 7.27 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.86 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.05 (dd, J = 9.6, 7.8 Hz, 2H), 3.23 (td, J = 6.6, 1.9 Hz, 2H), 2.42 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.91-1.78 (m, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 68: 화합물 188의 제조
6-에톡시-4-(6-(5-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-2,5-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,5-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(500 mg;1.18 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(176 mg, 1.29 mmol), Et3N(357.5 mg, 3.54 mmol), Pic-BH3(378.8 mg, 3.54 mmol), n-프로판올(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 346 mg을 얻었다. m/z=511 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 12.65 (s, 1H), 8.54 (dd, J = 16.4, 2.2 Hz, 2H), 8.13-8.00 (m, 2H), 7.69 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.24 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.29 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 4.18 (m, 2H), 3.95 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.79 (s, 2H), 2.56 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.14 (dd, J = 9.1, 6.4 Hz, 2H), 1.71 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 69: 화합물 189의 제조
단계 A: tert-부틸 5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(318 mg, 1.1 mmol), tert-부틸2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-카르복실레이트(254.4 mg, 1.2 mmol), DIEA(414 mg, 3.2 mmol), DMSO(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 511 mg을 얻었다. m/z=490 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-카르복실레이트(511 mg, 1.04 mmol)를 5 ml의 MeOH/HCl(4M)에 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 감압 농축하여 제품 500 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=390 [M+1]+.
단계 C: (2-클로로-6-플루오로페닐)-5-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-일)메타논
4-(6-(2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(500 mg, 1.18 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(250 mg, 1.29 mmol), Et3N(357.5 mg, 3.54 mmol), DMF(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 398 mg을 얻었다. m/z=546 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.55 (dd, J = 12.5, 2.5 Hz, 1H), 8.52 (m, 1H), 8.03 (m, 1H), 7.61-7.33 (m, 4H), 7.28-7.20 (m, 1H), 6.64 (dd, J = 21.1, 8.7 Hz, 1H), 4.18 (m, 2H), 4.13-3.91 (m, 4H), 3.89-3.73 (m, 1H), 3.71-3.54 (m, 1H), 3.43 (s, 1H), 3.25 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 2.25 (m, 2H), 1.40 (m, 3H).
실시예 70: 화합물 190의 제조
6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(500 mg, 1.18mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(176 mg, 1.29 mmol), Et3N(357.5 mg, 3.54 mmol), Pic-BH3(378.8 mg, 3.54 mmol), n-프로판올(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 346 mg을 얻었다. m/z=511 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.52 (dd, J = 8.4, 2.3 Hz, 2H), 8.11 (s, 1H), 8.01 (dd, J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.22 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.17 (m, 2H), 3.97 (t, J = 6.1 Hz, 4H), 3.84 (s, 3H), 3.06 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 2.77 (s, 2H), 2.58 (s, 2H), 2.12 (s, 2H), 1.39 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.19 (t, J = 7.3 Hz, 1H).
실시예 71: 화합물 191의 제조
단계 A: tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(250 mg, 0.8 mmol), tert-부틸2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(230 mg, 0.9 mmol), DIEA(520 mg, 4 mmol), DMSO(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 390 mg을 얻었다. m/z=504 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-카르복실레이트(390 mg, 0.7 mmol)를 HCl의 메탄올 용액(4 M, 5 mL)를 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 감압 농축하여 제품 370 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=404 [M+1]+.
단계 C: N-(2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.2 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(46 mg, 0.2 mmol), Et3N(100 mg, 1.0 mmol), DMF(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 47 mg을 얻었다. m/z=560 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.53 (dd, J = 10.4, 2.3 Hz, 2H), 8.03 (dd, J = 8.6, 2.5 Hz, 1H), 7.48-7.59 (m, 2H), 7.33-7.49 (m, 2H), 7.23 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.18 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.80-3.91 (m, 4H), 3.73 (tq, J = 13.6, 7.4, 6.9 Hz, 2H), 3.15-3.26 (m, 2H), 1.71-1.91 (m, 4H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 72: 화합물 192의 제조
6-에톡시-4-(6-(7-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.2 mmol), 6-메톡시니코틴알데히드(83 mg, 0.6 mmol), Pic-BH3(64 mg, 0.6 mmol), Et3N(120 mg, 1.2 mmol), n-프로판올(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 45 ℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 37 mg을 얻었다. m/z=525 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.52 (dd, J = 7.4, 2.3 Hz, 2H), 7.97-8.09 (m, 2H), 7.65 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.23 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.76 (s, 4H), 3.42 (s, 2H), 2.35 (s, 4H), 1.78 (s, 3H), 1.78 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 73: 화합물 193의 제조
단계 A: tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(250 mg, 0.8 mmol), tert-부틸2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-카르복실레이트(230 mg, 0.9 mmol), DIEA(520 mg, 4 mmol), DMSO(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 370 mg을 얻었다. m/z=504 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,6-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-카르복실레이트(370 mg, 0.7 mmol)를 HCl의 메탄올 용액(4M, 5 mL)를 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 감압 농축하여 제품 370 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=404 [M+1]+.
단계 C: N-(2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.5]노난-6-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(2,6-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg; 0.2 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(46 mg, 0.2 mmol), Et3N(100 mg, 1.0 mmol), DMF(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 36 mg을 얻었다. m/z=560 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.59-8.48 (m, 2H), 8.03 (dd, J = 21.8, 8.6, 2.5 Hz, 1H), 7.41-7.62 (m, 3H), 7.34-7.43 (m, 1H), 7.23 (dd, J = 17.9, 2.1 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.12-4.23 (m, 2H), 4.08 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.90 (dd, J = 11.8, 8.2 Hz, 1H), 3.79 (dq, J = 8.0, 4.1, 2.8 Hz, 3H), 3.70 (s, 1H), 3.44 (s, 1H), 3.13-3.22 (m, 1H), 1.84-1.98 (m, 2H), 1.59 (d, J = 28.4 Hz, 4H), 1.40 (td, J = 7.0, 3.5 Hz, 3H).
실시예 74: 화합물 194의 제조
6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,6-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,6-디아자스피로[3.5]노난-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg; 0.2 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(83 mg, 0.6 mmol), Pic-BH3(64 mg, 0.6 mmol), Et3N(120 mg, 1.2 mmol), n-프로판올(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 45 ℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 32 mg을 얻었다. m/z=525 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.51 (t, J = 1.9 Hz, 2H), 8.08 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.22 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.70 (s, 4H), 3.47 (s, 2H), 2.28-2.34 (m, 4H), 1.52-1.69 (m, 4H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 75: 화합물 195의 제조
단계 A: tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(250 mg, 0.8 mmol), tert-부틸 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트(240 mg, 1.0 mmol), DIEA(520 mg, 4 mmol), DMSO(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 360 mg을 얻었다. m/z=518 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트(360 mg, 0.7 mmol)를 HCl의 메탄올 용액(4M, 5 mL)에 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 370 mg을 얻었다. m/z=418 [M+1]+.
단계 C: N-(2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.2 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(46 mg, 0.2 mmol), Et3N(100 mg, 1.0 mmol), DMF(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 55 mg을 얻었다. m/z=574 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.53 (dd, J = 19.9, 2.3 Hz, 2H), 8.01 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.52 (td, J = 8.2, 6.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.37 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.18 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.78-3.92 (m, 1H), 3.69 (dtd, J = 13.4, 8.7, 8.1, 3.8 Hz, 1H), 3.57 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.40-3.55 (m, 2H), 3.27 (q, J = 4.9 Hz, 2H), 1.97 (dddd, J = 15.5, 12.3, 9.2R, 5.0 Hz, 2H), 1.46-1.74 (m, 4H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 76: 화합물 196의 제조
6-에톡시-4-(6-(8-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.2 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(83 mg, 0.6 mmol), Pic-BH3(64 mg, 0.6 mmol), Et3N(120 mg, 1.2 mmol), n-프로판올(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 45 ℃에서 16 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 15 mg을 얻었다. m/z=539 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (s, 1H), 8.52 (dd, J = 16.8, 2.3 Hz, 2H), 8.07 (s, 1H), 8.00 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 8.3, 2.4 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.22 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.17 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.33 (s, 2H), 3.27 (s, 1H), 2.51 (m, 2H), 2.21-2.42 (m, 3H), 1.87 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.60 (s, 4H), 1.40 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 77: 화합물 197의 제조
단계 A: tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-7-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(310 mg, 1.04 mmol), tert-부틸 2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-7-카르복실레이트(250 mg, 1.04 mmol), DIEA(430 mg, 3.12 mmol), DMSO(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 350 mg을 얻었다. m/z=518 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-7-카르복실레이트 tert-부틸 에스테르(350 mg, 0.676 mmol)를 HCl의 메탄올 용액(4M, 10 mL)에 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 감압 농축하여 제품 320 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=418 [M+1]+.
단계 C: N-(2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-7-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(160 mg, 0.3 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(58 mg, 0.3 mmol), DIEA(194 mg, 1.5 mmol), DCM(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 48.3 mg을 얻었다. m/z=573[M+1]+, 1H-NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 12.63 (brs, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.32-7.59 (m, 4H), 7.23 (s, 1H), 6.68 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.45-3.73 (m, 4H), 3.01-3.39 (m, 4H), 1.45-2.13 (m, 6H), 1.37-1.41 (m, 3H).
실시예 78: 화합물 198의 제조
6-에톡시-4-(6-(7-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,7-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(160 mg, 0.3 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(124 mg, 0.9 mmol), Et3N(152 mg, 1.5 mmol), n-프로판올(10 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 45℃에서 48 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 16.0 mg을 얻었다. m/z=539 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.52 (dd, J = 17.8, 2.3 Hz, 2H), 7.95-8.07 (m, 2H), 7.62 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.22 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.68 (dd, J = 27.0, 8.6 Hz, 2H), 4.18 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.55 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 3.29-3.50 (m, 3H), 3.25 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 2.46 (s, 1H), 2.29 (s, 2H), 2.15 (s, 1H), 1.97 (s, 1H), 1.78 (dt, J = 12.2, 8.0 Hz, 1H), 1.56 (d, J = 14.6 Hz, 3H), 1.40 (m, 4H).
실시예 79: 화합물 199의 제조
단계 A: tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-6-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(125 mg, 0.4 mmol), tert-부틸 2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-6-카르복실레이트(100 mg, 0.4 mmol), DIEA(1.5 g, 2.0 mmol), DMSO(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 200 mg을 얻었다. m/z=518[M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-6-카르복실레이트 tert-부틸 에스테르(200 mg, 0.39 mmol)를 HCl의 1,4-디옥산 용액(4M, 9 mL)를 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시켰다. 감압 농축하여 제품 170 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=418 [M+1]+.
단계 C: N-(2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-6-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(85 mg, 0.16 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(32 mg, 0.16 mmol), DIEA(125 mg, 1 mmol), DCM(3 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 60 mg을 얻었다. m/z=574 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.58 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.05 (dt, J = 8.9, 1.7 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.31-7.55 (m, 3H), 7.24 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.75 (dd, J = 8.7, 4.7 Hz, 1H), 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.07 (dd, J = 18.3, 7.7 Hz, 2H), 3.71 (s, 1H), 3.54 (s, 1H), 2.83-2.70 (m, 1H), 2.51-2.65 (m, 1H), 1.46-1.93 (m, 8H), 1.41 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 80: 화합물 200의 제조
6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,6-디아자스피로[4.5]옥탄-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(85 mg, 0.16 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(66 mg, 0.48 mmol), Et3N(81 mg, 0.8 mmol), Pic-BH3(52 mg, 0.48 mmol), DMSO(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 45℃에서 72 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 21.3 mg을 얻었다. m/z=539 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (s, 1H), 8.56 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.99-8.10 (m, 2H), 7.67 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.23 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 12.8, 8.6 Hz, 2H), 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.73 (m, 2H), 3.53 (dd, J = 14.8, 9.0 Hz, 4H), 3.31 (s, 2H), 2.44 (s, 2H), 1.70 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 1.56-1.62 (m, 2H), 1.45 (d, J = 11.8 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 81: 화합물 201의 제조
단계 A: tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-2-일)피리딘-2-일)-1,7-디아자스피로[3.5]노난-1-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(300 mg, 1 mmol), tert-부틸 1,7-디아자스피로[3.5]노난-1-카르복실레이트(226 mg, 1 mmol), DIEA(645 mg, 5 mmol), DMSO(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 497 mg을 얻었다. m/z=504 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(1,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-2-일)피리딘-2-일)-1,7-디아자스피로[3.5]노난-1-카르복실레이트(497 mg, 1 mmol)를 HCl의 1,4-디옥산 용액(4M, 10 mL)에 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 470 mg을 얻었다. m/z=404 [M+1]+.
단계 C: N-(7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-1,7-디아자스피로[3.5]노난-1-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(1,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(50 mg, 0.1 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(19 mg, 0.1 mmol), DIEA(65 mg, 0.5 mmol), DCM (3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 5.1 mg을 얻었다. m/z=560 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.72 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.60 (dd, J = 6.1, 2.6 Hz, 1H), 8.52 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 8.11-8.02 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.57-7.41 (m, 1H), 7.46-7.24 (m, 2H), 7.02 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.83 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.41 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 3.00 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 2.36-2.18 (m, 4H), 1.98 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 1.40 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 82: 화합물 202의 제조
단계 A: tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(600 mg, 2 mmol), tert-부틸 2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(100 mg, 2 mmol), DIEA(1.3 g, 10 mmol), DMSO(10 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 840 mg을 얻었다. m/z=504 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-카르복실레이트(840 mg, 1.67 mmol)를 HCl의 1,4-디옥산 용액(4M, 20 mL)를 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 730 mg을 얻었다. m/z=404[M+1]+.
단계 C: N-(7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(50 mg, 0.1 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(19 mg, 0.1 mmol), DIEA(65 mg, 0.5 mmol), DCM(3 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 19.2 mg을 얻었다. m/z=560 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.51-7.55 (m, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35-7.39 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.50-3.71 (m, 6H), 1.70-1.89 (m, 4H), 1.38-1.43 (m, 3H).
실시예 83: 화합물 203의 제조
6-에톡시-4-(6-(2-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,7-디아자스피로[3.5]옥탄-7-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.19 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(80 mg, 0.58 mmol), Et3N(98 mg, 0.97 mmol), Pic-BH3(63 mg, 0.58 mmol), DMSO(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 45℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 6.1 mg을 얻었다. m/z=525 [M+1]+, 1H-NMR(400MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs,1H), 8.56 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.14-4.19 (m,2H), 3.83 (s, 3H), 3.48-3.67 (m, 6H), 2.92-3.09 (m, 4H), 1.65-1.81 (m, 4H), 1.38-1.43 (m, 3H).
실시예 84: 화합물 206의 제조
단계 A: tert-부틸 8-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(150 mg, 0.5 mmol), tert-부틸 1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (120 mg, 0.5 mmol), DIEA(323 mg, 2.5 mmol), DMSO(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 181 mg을 얻었다. m/z=518 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(1,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
tert-부틸8-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트(181 mg, 0.35 mmol)를 HCl의 1,4-디옥산 용액(4M, 5 mL)를 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 감압 농축하여 제품 150 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z=418 [M+1]+.
단계 C: N-(8-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-1,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-일)2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
4-(6-(1,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(18 mg, 0.1 mmol), DIEA(65 mg, 0.5 mmol), DCM(3 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 2.6 mg을 얻었다. m/z=574[M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.55-7.63 (m, 2H), 7.27-7.38 (m, 2H), 7.12 (s, J = 11.2 Hz, 1H), 4.48-4.56 (m, 2H), 4.17 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.16-3.24 (m, 2H), 2.89-3.08 (m, 4H), 2.12-2.20 (m, 2H), 1.80-1.87 (m, 2H), 1.52-1.58 (m, 2H), 1.38 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 85: 화합물 207의 제조
6-에톡시-4-(6-(1-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-1,8-디아자스피로[4.5]옥탄-8-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(1,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.19 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(80 mg, 0.57 mmol), Et3N(98 mg, 0.8 mmol), Pic-BH3(63 mg, 0.57 mmol), DMSO(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 45℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 23.8 mg을 얻었다. m/z=539 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.65 (brs, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.99-8.05 (m, 2H), 7.54-7.63 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.46-4.55 (m, 2H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.50 (s, 2H), 2.93-3.00 (m, 2H), 2.55-3.59 (m, 2H), 1.85-1.92 (m, 2H), 1.65-1.84 (m, 4H), 1.40-1.51 (m, 2H), 1.39-1.41 (m, 3H).
실시예 86: 화합물 208의 제조
단계 A: tert-부틸 8-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(297 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트(240 mg, 1.0 mmol), 디이소프로필에틸아민(390 mg, 3.0 mmol) 및 DMSO(4 mL)를 첨가하였다. 100℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 510 mg을 얻었다. m/z = 518 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 순차적으로 메탄올(5 mL), tert-부틸 9-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카보네이트(510 mg, 1.0 mmol) 및 6 N HCl의 1,4-디옥산 용액(4.0 mL, 24.0 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30 min 동안 반응시킨 후, 직접 감압 농축하여 제품 320 mg을 얻었다. m/z = 418 [M+1]+.
단계 C: N-(8-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(63 mg, 0.15 mmol), DMF(1 mL) 및 디이소프로필에틸아민(58 mg, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(29 mg, 0.15 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 23 mg을 얻었다. m/z = 574 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.00-8.04 (m, 1H), 7.35-7.56 (m, 4H), 7.23-7.26 (m, 1H), 7.04-7.08 (m, 1H), 4.16-4.18 (m, 2H), 3.52-3.79 (m, 6H), 3.20-3.26 (m, 1H), 3.06-3.10 ( m, 1H), 1.50-1.71 (m, 4H), 1.38-1.43 (m, 3H).
실시예 87: 화합물 209의 제조
단계 A: 6-에톡시-4-(6-(2-( (6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1,2-디클로로에탄(2 mL), 메탄올(1 mL), 4-(6-(2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(63 mg, 0.15 mmol), 6-메톡시니코틴알데히드(21 mg, 0.15 mmol), 트리아세톡시수소화붕소나트륨(96 mg, 0.45 mmol)을 첨가하고, 45℃로 승온시켜 1시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 24 mg을 얻었다. m/z = 539 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.02-8.15 (m, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.65-7.78 (m, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.76-6.89 (m, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.50-3.75 (m, 6H), 3.30-3.50 (m, 3H), 1.91 (s, 3H),1.50-1.79 (m, 6H), 1.38-1.41 (m, 3H).
실시예 88: 화합물 210의 제조
단계 A: tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(150 mg, 0.5 mmol), tert-부틸 2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-카르복실레이트 헤미옥살레이트(250 mg, 1.0 mmol), 디이소프로필에틸아민(390 mg, 3.0 mmol) 및 DMSO(4 mL)을 첨가하고, 100℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 525 mg을 얻었다. m/z = 518 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 메탄올(5 mL), tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-카보네이트(525 mg, 1.0 mmol) 및 6N HCl의 1,4-디옥산 용액(4.0 mL, 24.0 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30 min 동안 교반하여 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 1N NaOH로 pH = 10으로 조절한 후, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 농축하여 제품 301 mg을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z = 418 [M+1]+.
단계 C: N-(7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,7-디아자스피로[4.5]데칸-2-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(63 mg, 0.15 mmol), DMF(1 mL) 및 디이소프로필에틸아민(58 mg, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(29 mg, 0.15 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 16시간 동안 교반하여 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 23 mg을 얻었다. m/z = 574 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.50-8.55 (m, 2H), 7.97-8.04 (m, 1H), 7.30-7.61 (m, 4H), 7.25 (s, 1H), 7.01-7.12 (m, 1H), 4.16-4.18 (m, 2H), 3.33-3.70 (m, 6H), 3.22-3.28 (m, 1H), 3.12-3.19 ( m, 1H), 1.52-2.01 (m, 6H), 1.38-1.43 (m, 3H).
실시예 89: 화합물 211의 제조
단계 A: 6-에톡시-4-(6-(2-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1,2-디클로로에탄(2 mL), 메탄올(1 mL), 4-(6-(2,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(63 mg, 0.15 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(21 mg, 0.15 mmol) 및 아세트산(2방울)을 첨가하고, 45℃로 승온시켜 1시간 동안 반응시킨 후, 트리아세톡시수소화붕소나트륨(96 mg, 0.45 mmol)을 첨가하고 45℃에서 16시간 동안 계속 교반하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 16 mg을 얻었다. m/z = 539 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.02-8.15 (m, 1H), 7.98 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62-7.75 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.69-6.79 (m, 1H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.34-3.75 (m, 8H), 3.16-3.18 (m, 1H), 1.91 (s, 1H), 1.49-1.68 (m, 6H), 1.38-1.42 (m, 3H).
실시예 90: 화합물 212의 제조
단계 A: tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-1,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(297 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 1,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-카르복실레이트 (240 mg, 1.0 mmol), 디이소프로필에틸아민(390 mg, 3.0 mmol) 및 DMSO(4 mL)를 첨가하였다. 반응액을 100℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 500 mg을 얻었다. m/z = 518 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(1,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 메탄올(5 mL), tert-부틸 7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-1,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-카보네이트(500 mg, 1.0 mmol) 및 6N HCl의 1,4-디옥산 용액(4.0 mL, 24.0 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30 min 동안 교반하여 반응시켰다. 농축한 후 10 ml의 물을 첨가하여 희석하고, 1N NaOH로 pH = 10으로 조절한 후, 디클로로메탄(30 mL)으로 2회 추출하고, 추출액을 포화 식염수(10 mL)로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 농축하여 제품 310 mg을 얻었다. m/z = 418 [M+1]+.
단계 C: N-(7-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-1,7-디아자스피로[4.5]데칸-1-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(1,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(63 mg, 0.15 mmol), DMF(1 mL) 및 디이소프로필에틸아민(58 mg, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(29 mg, 0.15 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 16시간 동안 교반하여 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 27 mg을 얻었다. m/z = 574 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.8Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.36-7.52 (m, 3H), 7.26 (s, 1H), 7.12-7.16 (m, 1H), 4.43-4.46 (m, 2H), 4.15-4.18 (m, 2H), 3.86-3.91 (m, 1H), 3.20-3.26 (m, 2H), 3.00-3.10 (m, 1H), 2.85-2.96 (m, 1H), 2.05-2.13 (m, 1H), 1.71-1.92 (m, 4H), 1.61-1.70 (m, 2H),1.38-1.42 (m, 3H).
실시예 91: 화합물 213의 제조
6-에톡시-4-(6-(1-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-1,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(1,7-디아자스피로[4.5]데칸-7-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(42 mg, 0.1 mmol), DMF(1 mL), 탄산칼륨(40 mg, 0.3 mmol) 및 5-(클로로메틸)-2-메톡시피리딘(16 mg, 0.1 mmol)을 첨가하고, 60℃로 승온시켜 25시간 동안 교반하여 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 4.1 mg을 얻었다. m/z = 539 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.39-4.43 (m, 1H), 4.27 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.15-4.20 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.67-3.79 (m, 2H), 2.93 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.58-2.83 (m, 3H), 1.50-1.91 (m, 8H), 1.38-1.41 (m, 3H).
실시예 92: 화합물 214의 제조
단계 A: tert-부틸 9-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(297 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-카르복실레이트 (254 mg, 1.0 mmol), 디이소프로필에틸아민(390 mg, 3.0 mmol) 및 DMSO(4 mL)를 첨가하였다. 반응액을 100℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 540 mg을 얻었다. m/z = 532 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 메탄올(5 mL), tert-부틸 9-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-카보네이트(540 mg, 1.0 mmol) 및 6N HCl의 1,4-디옥산 용액(2.0 mL, 12.0 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30 min 동안 교반하여 반응시켰다. 농축한 후 물(3 mL)에 첨가하고, 1N NaOH로 pH = 10으로 조절한 후, 디클로로메탄으로 2회 추출하고(30 mLX2), 추출액을 포화 식염수(10 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 농축하여 제품 345 mg을 얻었다. m/z = 432 [M+1]+.
단계 C: N-(9-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(130 mg, 0.3 mmol), DMF(2 mL) 및 디이소프로필에틸아민(117 mg, 0.9 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(58 mg, 0.3 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 16시간 동안 교반하여 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 45 mg을 얻었다. m/z = 588 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.36-7.56 (m, 3H), 7.27 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.80-3.95 (m, 2H), 3.48-3.72 (m, 4H), 3.15-3.28 (m, 2H), 1.47-1.77 (m, 8H), 1.38-1.42 (m, 3H).
실시예 93: 화합물 215의 제조
6-에톡시-4-(6-(2-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1,2-디클로로에탄(2mL), 메탄올(1mL), 4-(6-(2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(65 mg, 0.15 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(62 mg, 0.45 mmol) 및 아세트산(2방울)을 첨가하고, 45℃로 승온시켜 2시간 동안 반응시킨 후, 트리아세톡시수소화붕소나트륨(160 mg, 0.75 mmol)을 첨가하고 45℃에서 16시간 동안 계속 교반하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 17 mg을 얻었다. m/z = 553 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.55-3.67 (m, 2H), 3.42-3.50 (m, 2H), 3.40 (s, 1H), 3.16-3.18 (m, 1H), 2.10-2.42 (m, 4H),1.30-1.60 (m, 11H).
실시예 94: 화합물 216의 제조
단계 A: tert-부틸 9-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(297 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트(254 mg, 1.0 mmol), 디이소프로필에틸아민(390 mg, 3.0 mmol) 및 DMSO(3 mL)를 첨가하였다. 반응액을 100℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 540 mg을 얻었다. m/z = 532 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 메탄올(5 mL), tert-부틸 9-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카보네이트(540 mg, 1.0 mmol) 및 6N HCl의 1,4-디옥산 용액(4.0 mL, 24.0 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30 min 동안 교반하여 반응시켰다. 물(3 mL)을 첨가하고, 1N NaOH로 pH = 10으로 조절한 후, 디클로로메탄(15mL)으로 2회 추출하고, 추출액을 포화 식염수(10 mL)로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 농축하여 제품 355 mg을 얻었다. m/z = 432 [M+1]+.
단계 C: N-(9-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(130 mg, 0.3 mmol), DMF(2 mL) 및 디이소프로필에틸아민(117 mg, 0.9 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(58 mg, 0.3 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 16시간 동안 교반하여 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 62.9 mg을 얻었다. m/z = 588 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.98 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.33-7.36 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.13 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.59-3.76 (m, 6H), 3.15-3.29 (m, 2H), 1.46-1.64 (m, 8H), 1.37-1.41 (m, 3H).
실시예 95: 화합물 217의 제조
6-에톡시-4-(6-(9-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(43 mg, 0.1 mmol), DMF(1 mL), 탄산칼륨(35 mg, 0.3 mmol) 및 5-(클로로메틸)-2-메톡시피리딘(16 mg, 0.1 mmol)을 첨가하여 실온에서 16시간 동안 교반하여 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 12.0 mg을 얻었다. m/z = 553 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.58-3.65 (m, 4H), 3.42 (s, 2H), 3.28-3.41 (m, 4H), 1.41-1.59 (m, 8H), 1.37-1.41 (m, 3H).
실시예 96: 화합물 218의 제조
단계 A: tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(297 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트(254 mg, 1.0 mmol), 디이소프로필에틸아민(390 mg, 3.0 mmol) 및 DMSO(3 mL)를 첨가하였다. 반응액을 100℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시켰다. 냉각 후 물(20 mL)에 붓고30분 동안 교반하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 550 mg을 얻었다. m/z = 532 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 메탄올(5 mL), tert-부틸 2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카보네이트(550 mg, 1.0 mmol) 및 6N HCl의 1,4-디옥산 용액(4.0 mL, 24.0 mmol)을 첨가하여 실온에서 30 min 동안 교반하여 반응시켰다. 물(3 mL)을 첨가하고, 1N NaOH로 pH = 10으로 조절한 후, 디클로로메탄(30 mL)으로 2회 추출하고, 추출액을 포화 식염수(10 mL)로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 농축하여 제품 355 mg을 얻었다. m/z = 432 [M+1]+.
단계 C: N-(2-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(130 mg, 0.3 mmol), DMF(2 mL) 및 디이소프로필에틸아민(119 mg, 0.9 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(58 mg, 0.3 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 62.9 mg을 얻었다. m/z = 588 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.98-8.01 (m, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.33-7.50 (m, 3H), 7.25 (s, 1H), 7.11-7.15 (m, 3H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.75-3.90 (m, 1H), 3.59-3.73 (m, 5H), 3.25-3.32 (m, 1H), 3.10-3.20 (m, 1H), 1.30-1.68 (m, 11H).
실시예 97: 화합물 219의 제조
6-에톡시-4-(6-(9-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1,2-디클로로에탄(2 mL), 메탄올(1 mL), 4-(6-(2,9-디아자스피로[5.5]운데칸-2-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(65 mg, 0.15 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(24 mg, 0.17 mmol) 및 아세트산(2방울)을 첨가하고, 45℃로 승온시켜 2시간 동안 반응시킨 후, 트리아세톡시수소화붕소나트륨(96 mg, 0.45 mmol)을 첨가하고 45℃에서 16시간 동안 계속 교반하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 15.8 mg을 얻었다. m/z = 553 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.04-8.18 (m, 1H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.65-7.73 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.03-7.15 (m, 1H), 6.75-6.90 (m, 1H), 4.14-4.20 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.30-3.65 (m, 8H), 3.17 (s, 1H), 1.91 (s, 1H), 1.38-1.68 (m, 11H).
실시예 98: 화합물 220의 제조
단계 A: tert-부틸 6-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-카보네이트
반응 플라스크에 순차적으로 6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(297 mg, 1.0 mmol), tert-부틸 2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-카르복실레이트(212 mg, 1.0 mmol), 디이소프로필에틸아민(390 mg, 3.0 mmol) 및 DMSO(4 mL)를 첨가하였다. 반응액을 100℃로 승온시켜 16시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 520 mg을 얻었다. m/z = 490 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 메탄올(4 mL), tert-부틸 6-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2, 6-디아자스피로[3.4] 옥탄-2-카보네이트(520 mg, 1.0 mmol) 및 6N HCl의 1,4-디옥산 용액(2.0 mL, 12.0 mmol)을 첨가하여 실온에서 30 min 동안 교반하여 반응시켰다. 물(10 mL)을 첨가하고, 1N NaOH로 pH = 10으로 조절한 후, 디클로로메탄(40 mL)으로 2회 추출하였으며, 추출액을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 농축하여 제품 310 mg을 얻었다. m/z = 390[M+1]+.
단계 C: N-(6-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-2-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(78 mg, 0.2 mmol), DMF(2 mL) 및 디이소프로필에틸아민(78 mg, 0.6 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 적가 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(40 mg, 0.2 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 16시간 동안 교반하여 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 29 mg을 얻었다. m/z = 546 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.50-7.56 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.35-7.39 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.68 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.11-4.19 (m, 4H), 3.85-3.94 (m, 2H), 3.65-3.78 (m, 2H), 3.45-3.60 (m, 2H), 2.16-2.33 (m, 2H), 1.33-1.45 (m, 3H).
실시예 99: 화합물 221의 제조
6-에톡시-4-(6-(2-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-2,6-디아자스피로[3.4]옥탄-6-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 1,2-디클로로에탄(2 mL), 메탄올(1 mL), 4-(6-(2,6-디아자스피로[3.4] 옥탄-6-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(60 mg, 0.15 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(62 mg, 0.45 mmol) 및 아세트산(2방울)을 첨가하고, 45℃로 승온시켜 2시간 동안 반응시킨 후, 트리아세톡시수소화붕소나트륨(160 mg, 0.75 mmol)을 첨가하고 45℃에서 16시간 동안 계속 교반하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 29 mg을 얻었다. m/z = 511 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.78 (d, J = 8.8Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.8Hz, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.40-3.68 (m, 6H), 3.15-3.30 (m, 3H), 2.15-2.19 (m, 2H), 1.91 (s, 1H), 1.37-1.44 (m, 3H).
실시예 100: 화합물 227의 제조
4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-6-(프로필-2-인-1-페녹시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-올(46.8 mg, 0.1 mmol), 프로파길 클로라이드(8.2 mg, 0.11 mmol), Cs2CO3(48 mg, 0.15 mmol) 및 DMF(2 mL)를 10mL의 반응 플라스크에 넣고, 50℃로 승온시켜 5시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 9.4 mg을 얻었다. m/z = 507 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.69 (s, 1H), 8.60-8.66 (m, 2H), 8.1-8.13 (m, 2H), 7.60-7.78 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 6.77-6.94 (m, 2H), 5.00 (s, 2H), 3.70-3.86 (m, 7H), 3.30-3.32 (m, 7H).
실시예 101: 화합물 228의 제조
메틸 2-((4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-일)에테르)아세테이트
4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-올(70 mg, 0.15 mmol), 메틸 클로로아세테이트(19 mg, 0.18 mmol), Cs2CO3(73 mg, 0.225 mmol) 및 DMF(5 mL)를 10 mL의 반응 플라스크에 넣고, 50℃로 승온시켜 3시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 29.6 mg을 얻었다. m/z = 541 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.68 (s, 1H), 8.60-8.66 (m, 2H), 8.10-8.16 (m, 2H), 7.64-7.72 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 6.91-6.93 (m, 1H), 6.76-6.79 (m, 1H), 5.0 (s, 2H), 3.80-3.97 (m, 4H), 3.62-3.80 (m, 6H), 3.42-3.62 (m, 4H), 3.31-3.33 (m, 1H), 2.51-2.67 (m, 1H)
실시예 102: 화합물 229의 제조
단계 A: 에틸 1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)아미노)피페리딘-4-카르복실산 에틸에스테르
에틸4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-카르복실레이트(449 mg, 1.0 mmol), 6-메톡시니코틴알데히드(164 mg, 1.2 mmol), Et3N(303 mg, 3.0 mmol), n-프로판올(5 ml)을 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 268 mg을 얻었다. m/z=571 [M+1]+.
단계 B: (1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)아미노)피페리딘-4-일)메탄올
에틸1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)아미노)피페리딘-4-카르복실산 에틸에스테르(268 mg, 0.47 mmol), 5 ml의 THF를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 LiAlH4(19. 6mg, 0.51 mmol)를 첨가하여 1 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 101 mg을 얻었다. m/z= 529 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.66 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.52 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.03 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (m, 2H), 7.26 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.18 (m, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 2.89 (m, 3H), 1.65 (s, 2H), 1.53 (s, 2H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 0.90 (d, J = 6.7 Hz, 1H).
실시예 103: 화합물 232의 제조
단계 A: 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-트리플루오로메틸술포네이트
반응 플라스크에 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-올(0.936 g, 2 mmol), DIEA(0.516 g, 4 mmol) 및 10 ml의 DMSO를 첨가하였다. 빙욕에서 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드(0.714 g, 2 mmol)를 첨가한 후, 실온에서 2 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.0 g을 얻었다. m/z = 601 [M+1]+.
단계 B: 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-트리플루오로메틸술포네이트(300 mg, 0.5 mmol), (비스(피나콜레이트)디보론(381 mg, 1.5 mmol), Pd(dppf)Cl2(73 mg, 0.1 mmol), 아세트산칼륨(245 mg, 2.5 mmol) 및 10 ml의 1,4디옥산을 첨가하여 90℃에서 4 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 178 mg을 얻었다. m/z = 579 [M+H]+.
단계 C: 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-일)브론산
반응 플라스크에 (4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(180 mg, 0.31 mmol), NaIO4(200 mg, 0.93 mmol) 및 THF(8 mL)/물(2mL)을 첨가하여 25℃에서 0.5 h 동안 반응시키고; 1N HCl(3 mL)를 상기 반응액에 첨가하여 밤새 교반하였다. 반응액을 100 ml의 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하여 제품 55 mg을 얻었다. m/z = 496 [M+1]+.
단계 D: 6-(아제티디닐-1-일)-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-일)브론산(50 mg, 0.1 mmol), 아제티딘(114 mg, 2 mmol), 아세트산 구리(37 mg, 0.2 mmol), 피리딘(45 mg, 0.5 mmol), 4A 분자체(2 g) 및 5 ml의 DMF를 첨가하고, 50℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, 여과하였으며, 여액을 20 ml의 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하여 제품 20 mg을 얻었다. m/z = 508 [M+1]+.
실시예 104: 화합물 233의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올의 합성
(3S, 4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올 염산염(100 mg, 0.2 mmol), 2,6-디플루오로벤조산(32 mg, 0.2 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol), HATU(76 mg, 0.2 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응액을 30 ml의 물에 봇고, EA로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 용매를 스핀 건조시켰으며, 컬럼 크로마토그래피(DCM:MeOH = 10:1)로 정제하여 제품 5.0 mg을 얻었다. m/z=534[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.65 (s, 1H), 8.61 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.02-8.05 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.07-7.49 (m, 5H), 5.07 (bR,1H), 4.40-4.44 (m, 1H), 4.14-4.22 (m, 3H), 3.92-3.95 (m, 1H), 3.50-3.51 (m, 1H), 3.16-3.22 (m, 1H), 2.96-3.01 (m, 1H), 2.01-2.11 (m, 1H), 1.37-1.48 (m, 4H).
실시예 105: 화합물 234의 제조
단계 A: tert-부틸 (1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)피페리딘-4-일)카바메이트
50 mL의 반응 플라스크에tert-부틸 (1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-포르밀피페리딘-4-일)카바메이트(200 mg, 0.52 mmol), 1,2-디클로로메탄(2 mL), 디메틸아민(0.78 mL, 1.56 mmol), 소듐 트리아세톡시 보로하이드라이드(220 mg, 1.04 mmol)를 첨가하여 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물을 첨가하여 켄칭한 후, 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 177 mg을 얻었다. m/z = 413/415[M+1]+.
단계 B: 1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드
(1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)피페리딘-4-)tert-부틸 카바메이트(177 mg, 0.43 mmol), 메탄올성 염산 가스(4 M, 2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 5h 동안 반응시켰다. 직접 스핀 건조하여 제품 250 mg을 얻었다. m/z=313/315[M+1]+.
단계 C: N-(1-(1-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
1-(5-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드(250 mg, 0.8 mmol), 2,6-디플루오로벤조산(152 mg, 0.96 mmol), HATU(334 mg, 0.88 mmol), DIEA(309mg, 2.4 mmol), DMF(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 15 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 117 mg을 얻었다. m/z=453/455[M+1]+.
단계 D: N-(4-((디메틸아미노)메틸)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 N-(1-(1-브로모피리딘-2-일)-4-((디메틸아미노)메틸)피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드(117 mg, 0.35 mmol), 6-에톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(161 mg, 0.35 mmol), 탄산세슘(326 mg, 1.0 mmol), 물(1 mL), 1,4-디옥산(5 mL), Pd(dppf)Cl2(25 mg, 0.035mmol)를 첨가하고, 90℃로 가열하여 16시간 동안 반응시킨 후, 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 50 mg을 얻었다. m/z=575 [M+1]+, 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.64 (s, 1H), 8.61-8.56 (m, 1H), 8.51 (m, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.21-7.06 (m, 3H), 4.22 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 3.17 (m, 2H), 2.67 (s, 2H), 2.34 (m, 2H), 2.29 (S,6H), 1.57 (m, 2H), 1.40 (m, 3H).
실시예 106: 화합물 237의 제조
(4-(6-(6-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-6-일)디메틸포스핀옥사이드
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(6-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-6-일 트리플루오로메탄술포네이트(30 mg, 0.05 mmol), 디메틸포스포러스옥사이드(9.7 mg, 0.125 mmol), 팔라듐 아세테이트(0.56 mg, 0.0025 mmol), 인산칼륨(11 mg, 0.055 mmol), DMF(1 mL), XantPhos(29 mg, 0.05mmol)를 첨가하고, 질소 가스 보호 조건에서, 150℃로 가열하여 2시간 동안 반응시킨 후, 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 19 mg을 얻었다. m/z=529 [M+1]+. 1HNMR (400MHz, DMSO-d 6 ): 12.90 (s, 1H), 9.02 (m, 1H), 8.70 (m, 1H), 8.20-8.08 (m, 2H), 7.83-7.65 (m, 3H), 6.95 (m, 1H), 6.79 (m, 1H), 3.83 (m, 5H), 3.70 (m, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.34 (s, 1H), 1.85 (s, 3H), 1.82 (s, 3H), 1.60 (m, 1H).
실시예 107: 화합물 238의 제조
단계 A: 4-(6-(6((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-하이드록시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘
6-((4-메톡시)벤질)-4-(6-(6((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-하이드록시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘(1 g, 1.7 mmol), DCM(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃ 조건에서 TFA(5 mL)을 적가하여 실온에서 4 h 동안 반응시켰다. 용매를 직접 스핀 건조시켜 제품 1.55 g을 얻었다. m/z=469[M+1]+.
단계 B: 4-(6-(6 ((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-트리플루오로메탄술포닐-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 4-(6-(6 ((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-하이드록시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘(1.5 g, 3.2 mmol), N-페닐비스(트리플루오로메탄술포닐)이미드(1.26 g, 3.5 mmol), DIEA(2 g, 16 mmol), DMF(10 mL)를 첨가하였다. 25℃에서 4h 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 30 ml의 물에 봇고, EA로 추출하였으며, 유기 용매를 건조시키고, 농축하였으며, 실리카겔 컬럼으로 정제 및 분리(DCM : MeOH = 10 : 1)하여 제품 810 mg을 얻었다. m/z=601[M+1]+.
단계 C: 4-(6-(6 ((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘
순차적으로 4-(6-(6 ((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-트리플루오로메탄술포닐-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘(810 mg, 0.19 mmol), 피나콜 디보로네이트(377 mg, 1.49 mmol), KOAc (400 mg, 4.05 mmol), Pd(dppf)Cl2(100 mg, 0.14 mmol), 1,4-디옥산(10 mL)을 반응 플라스크에 첨가하고, N2를 3회 치환하였으며, 95℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 직접 실리카겔 컬럼으로 정제(DCM : MeOH = 10 : 1) 및 분리하여 제품 510 mg을 얻었다. m/z=579[M+1]+.
단계 D: (4-(6-(6 ((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-6-일)브론산
4-(6-(6((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)-3,6-디아자시클로[3.1.1]헵탄-3-일)-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘(110 mg, 0.19 mmol), THF(5 mL)을 반응 플라스크에 첨가하고, 교반하였으며, 반응 플라스크에 과요오드산나트륨(41 mg, 0.19 mmol)을 첨가하여 0.5 h 동안 교반한 후, HCl의 수용액(1N, 3 mL)을 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시켰다. 반응액에 티오황산나트륨 수용액을 첨가하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 농축하였으며, 실리카겔 컬럼으로 정제 및 분리하여 제품 38.7 mg을 얻었다. m/z=497 [M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.69 (s, 1H), 9.00-9.20 (m, 1H), 8.63-8.69 (m, 1H), 8.46-8.50 (m, 1H), 8.05-8.11 (m, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.13 (m, 1H), 6.53-6.90 (m, 1H), 3.82-3.88 (m, 5H), 3.66-3.72 (m, 4H), 3.50-3.58 (m, 3H), 1.60 (m, 1H).
실시예 108: 화합물 239의 제조
4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-카르복실산
반응 플라스크에 순차적으로 MeOH(3 mL) 및 NaOH수용액(5 M, 3 mL), 4-(6-(6-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-니트릴(15 mg, 0.03 mmol)을 첨가하고, 50 ℃에서 16시간 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. HCl수용액(1 M)을 첨가하여 pH=7로 조절하고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 8 mg을 얻었다. m/z=497[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) : δ 12.79 (brs, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.73-7.69 (m, 2H), 6.92 (d, J = 8.4Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.4Hz, 1H), 3.86-3.75 (m, 5H), 3.72-3.68 (m, 2H), 3.66-3.51 (m, 4H), 1.60 (d, J = 8.4Hz, 1H).
실시예 109: 화합물 240의 제조
단계 A: 에틸 2-((4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-6-일)옥시)아세테이트
반응 플라스크에 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-6-하이드록실(100 mg, 0.21 mmol), 탄산세슘(138.8 mg, 0.42 mmol), N,N-디메틸포름아미드(3 mL)를 첨가하여 균일하게 교반한 후, 에틸클로로 아세테이트(39.1 mg, 0.32 mmol)를 첨가하고, 실온에서 10시간 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하여 켄칭하였으며, 에틸아세테이트로 추출하고, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 60 mg을 얻었다. m/z=555.2[M+1]+.
단계 B: 2-((4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-6-일)옥시)아세트산
반응 플라스크에 순차적으로 에틸 2-((4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-6-일)옥시)아세테이트(60 mg, 0.11 mmol), 메탄올(1 mL), 테트라히드로푸란(1 mL), 물(1 mL), 수산화리튬(9 mg, 0.22 mmol)을 첨가하여 교반하고, 60℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료되면 농축한 후, 2 ml의 물을 첨가하고, 염산으로 pH=6으로 조절하였으며, 제품을 석출하고, 여과하고 건조시켜 제품 20 mg을 얻었다. m/z=527.1[M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.66 (s, 1H), 8.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.15 (m, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.89 (s, 2H), 3.85 (m, 7H), 3.56 (s, 2H), 3.50 (s, 2H), 2.51 (s, 1H), 1.79 (s, 1H).
실시예 110: 화합물 242의 제조
4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-아크릴레이트
반응 플라스크에 4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-올(156 mg, 0.33 mmol) 및 3 mL의 NMP를 첨가하였다. 빙욕 조건에서, NaH(60%, 20 mg, 0. 49 mmol)를 첨가하여 30분 동안 교반하였다. 그 후 빙욕 조건에서, 아크릴로일 클로라이드(45 mg, 0.49 mmol)를 천천히 첨가하여 0.5 h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 반응액을 30 mL의 얼음물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 실리카겔 컬럼으로 정제하여하여 제품 10 mg을 얻었다. m/z = 523 [M+1]+,1H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ 12.80 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.10- 8.13 (m, 2H), 7.68- 7.72 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 6.92-6.94 (m, 1H), 6.76-6.78 (m, 1H), 6.60-6.65 (m, 1H), 6.47-6.53 (m, 1H), 6.22-6.25 (m, 1H), 3.76-3.82 (m, 6H), 3.53-3.69 (m, 7H).
실시예 111: 화합물 244의 제조
4-(5-(6-에톡시-1-메틸-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)1-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-2일)메탄올
4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)1-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-2일)메탄올(50 mg, 0.1 mmol), K2CO3(41 m g, 0.3 mmol), CH3I(16 mg, 0.1 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응액을 30 ml의 물에 봇고, EA로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 용매를 스핀 건조시켰으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 9.8 mg을 얻었다. m/z=529 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 8.57 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.74-4.77 (m, 1H), 4.10-4.20 (m, 3H), 3.99-4.00 (m, 1H), 3.84-3.90 (m, 3H), 3.79-3.84 (m, 6H), 3.53-3.54 (m, 1H), 3.16-3.38 (m, 2H), 2.67-2.68 (m, 1H), 2.26-2.33 (m, 1H), 1.40 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 112: 화합물 245의 제조
단계 A: 4-(6-(3-(클로로메틸)-4-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-1 일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘
4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)1-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-2일)메탄올(100 mg, 0.2 mmol), DMF(2 mg, 0.02 mmol), SOCl2(1 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 80℃에서 4 h 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 20 mL의 얼음물에 붓고, 4M NaOH의 수용액으로 pH=7로 조절하였으며, 디클로로메탄으로 추출하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 50 mg을 얻었다. m/z=533[M+1]+.
단계 B: 1-4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)1-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-2일)-N,N-디메틸메틸메틸아민
4-(6-(3-(클로로메틸)-4-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-1-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘(50 mg, 0.1 mmol), 디메틸아민의 테트라히드로푸란 용액(1M, 0.1 mL, 0.1 mmol), DMF(2 mL)을 반응 플라스크에 첨가하고, 80℃에서 1 h 동안 반응시켰다. 반응액을 20 ml의 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 22.8 mg을 얻었다. m/z=542 [M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.64 (brs, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.74-4.77 (m, 1H), 4.10-4.20 (m, 3H), 3.99-4.00 (m, 1H), 3.79-3.84 (m, 6H), 3.53-3.54 (m, 1H), 3.16-3.38 (m, 2H), 2.67-2.68 (m, 1H), 2.49-2.51 (m, 6H), 2.26-2.33 (m, 1H),1.36 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 113: 화합물 246의 제조
단계 A: 4-(6-(6-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-일 트리플루오로메탄술포네이트
반응 플라스크에 순차적으로 DMSO(5 mL), DIEA(1 mL), 4-(6-(6-(((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-올(510 mg, 1.09 mmol)을 첨가한 후, 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드(389 mg, 1.09 mmol)를 여러 번 나누어 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 500 mg을 얻었다. m/z=601 [M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 13.00 (brs, 1H), 9.51 (d, J = 2.0Hz, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.14 (d, J = 8.0Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.79-7.70 (m, 3H), 6.95 (d, J = 8.8Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.4Hz, 1H), 3.76-3.91 (m, 5H), 3.47-3.75 (m, 6H), 3.31 (s, 2H), 1.61-1.59 (m, 1H).
실시예 114: 화합물 247의 제조
단계 A: 7-브로모-6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(5 g, 10.06 mmol), N,N-디메틸포름아미드(50 mL)를 첨가하고, 교반하여 용해시킨 후, NBS(2.15 g, 12.08 mmol)를 첨가하여 실온에서 1시간 동안 반응시키고, 물을 첨가하여 켄칭하였으며, 에틸아세테이트로 추출하고, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.5 g을 얻었다. m/z = 575/577[M+1]+.
단계 B: 7-아미노-6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 7-브로모-6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(200 mg, 0.35 mmol), 디메틸설폭사이드(3 mL), 요오드화 제1구리(200 mg), 암모니아수(1 mL)를 첨가하고, 질소 가스로 치환하였으며, 90℃에서 13시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 5.2 mg을 얻었다. m/z=512.1[M+1]+, 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.66 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.87 (m, 1H), 6.78 (m, 1H), 6.51 (s, 2H), 4.22-4.16 (q, J = 8 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.78-3.70 (m, 5H), 3.54 (m, 4H), 1.70 (m, 1H), 1.41-1.38 (m, 3H) .
실시예 115: 화합물 248의 제조
단계 A: 3-브로모-6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(5 g, 10.06 mmol), N,N-디메틸포름아미드(50 mL)를 첨가하고, 교반하여 용해시킨 후, 실온에서 NBS(2.15 g, 12.08 mmol)를 천천히 첨가하여, 1시간 동안 반응시키고, 물을 첨가하여 켄칭하였으며, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1 g을 얻었다. m/z = 575/577[M+1]+.
단계 B: 3-시아노-6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 순차적으로 3-브로모-6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵트-3-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘(100 mg, 0.17 mmol), N,N-디메틸아세트아미드(1 mL), 물(0.5 ml), 페로시안화 칼륨(32 mg, 0.09 mmol), XantPhos(20 mg, 0.03 mmol), 알릴팔라듐(II) 클로라이드 다이머(6.3 mg, 0.017 mmol)를 첨가하고, 질소 가스로 치환하였으며, 90 ℃에서 13시간 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 에틸아세테이트로 추출하였으며, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 2 mg을 얻었다. m/z = 522 [M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.85 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.15-8.10 (m, 2H), 7.71-7.57 (m, 3H), 6.98-6.92 (m, 1H), 6.79-6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.38-4.33 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.83-3.77 (m, 5H), 3.70-3.53 (m, 7H), 1.61-1.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 1.41-1.40 (t, J = 3.2 Hz, 3H).
실시예 116: 화합물 249의 제조
단계 A: tert-부틸 4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트
6-에톡시-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(1.4 g, 4.7 mmol), tert-부틸 2-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트(1 g, 4.7 mmol), DIEA(1.8 g, 14.1 mmol), DMSO(15 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 90℃에서 12 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.6 g을 얻었다. m/z=494[M+1]+.
단계 B: 4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2-(히드록시메틸)피페라진 하이드로클로라이드
tert-부틸 4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2-(히드록시메틸)피페라진-1-카르복실레이트 (1.6 g, 3.2 mmol)를 HCl의 1,4-디옥산 용액(4M, 20 mL)를 첨가하여 25℃에서 4 h 동안 반응시키고, 용매를 직접 스핀 건조시켜 제품 1.7 g을 얻었다. m/z=394[M+1]+.
단계 C: 4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일) 1-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-2일)메탄올
4-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-2-(히드록시메틸)피페라진 하이드로클로라이드(100 mg, 0.19 mmol), 6-메톡시-3-피리딘카브알데하이드(80 mg, 0.57 mmol), Et3N(98 mg, 0.8 mmol), Pic-BH3(63 mg, 0.57 mmol), DMSO(3 mL)을 반응 플라스크에 첨가하여 45℃에서 12 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 10.1 mg을 얻었다. m/z=515 [M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.64 (brs, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.74-4.77 (m, 1H), 4.10-4.20 (m, 3H), 3.99-4.00 (m, 1H), 3.79-3.84 (m, 6H), 3.53-3.54 (m, 1H), 3.16-3.38 (m, 2H),2.67-2.68 (m, 1H), 2.26-2.33 (m, 1H),1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 117: 화합물 250의 제조
1-(3-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3,6-아자비시클로[3.1.1]헵탄-6-일)프로프-2-엔-1-온
반응 플라스크에 4-(6-(3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵틸-3-일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리디늄술페이트(150 mg, 0.2 mmol), DIEA(193 mg, 1.5 mmol) 및 DMF(2 mL)를 첨가하고, 빙욕에서 아크릴로일 클로라이드(22 mg, 0.25 mmol)를 첨가한 후, 25℃에서 2 h 동안 반응시켰으며, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 15.2 mg을 얻었다. m/z=430 [M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.60 (d, J = 2.4Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.05 (dd, J 1 = 2.4Hz, J 2 = 8.8Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.83 (d, J = 8.8Hz, 1H), 6.44-6.51 (m, 1H), 6.10 (d, J = 16.8Hz, 1H), 5.67 (d, J = 10.4Hz, 1H), 4.87-4.88 (m, 1H), 4.53-4.54 (m, 1H), 4.15 (q, J = 6.8Hz, 2H), 3.98-4.04 (m, 1H), 3.75-3.78 (m, 2H), 3.59-3.68 (m, 1H), 2.71-2.77 (m, 1H), 1.65-1.68 (m, 1H), 1.39 (t, J = 6.8Hz, 3H).
실시예 118: 화합물 251의 제조
6-에톡시-4-(6-(3-(메톡시메틸)-4-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-1 일)피페리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘
4-(6-(3-(클로로메틸)-4-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸렌)피페라진-1 일)피리딘-3-일)-6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘(150 mg, 0.28 mmol), 나트륨 메톡사이드(17 mg, 0.31 mmol), MeOH(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 6.5 mg을 얻었다. m/z = 529 [M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.64 (brs, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.99-8.10 (m, 2H), 7.57-7.71 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.20-4.24 (m, 2H), 4.02-4.18 (m, 2H), 3.91-3.98 (m, 4H), 3.82-3.84 (m, 2H), 3.30-3.33 (m, 6H), 3.21-3.22 (m, 1H), 2.49-2.51 (m, 2H), 1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 119: 화합물 258 및 화합물 259의 제조
화합물 258: (1S, 4R)-4-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)-N-((S)-1-(6-(4 -플루오로-1H-피라졸-1-일)피리딘-3-일)에틸)-1-메톡시시클로헥산-1-카르복스아미드
화합물 259: (1R,4S)-4-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸로[1,5-a]피리딘-4-일)-N-((S)-1-(6-(4-플루오로-1H-피라졸-1-일)피리딘-3-일)에틸)-1-메톡시시클로헥산-1-카르복스아미드
단계 A: tert-부틸-(S)-(1-(6-브로모피리딘-3-일)에틸)카르바메이트
반응 플라스크에 (S)-1-(6-브로모피리딘-3-일)에탄-1-아민(210 mg, 1.05 mmol), BOC 무수물(273 mg, 1.25 mmol), TEA(318 mg, 3.15 mmol), 아세토니트릴(10 mL)을 첨가하고, 실온에서 4 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 300 mg을 얻었다. m/z = 301[M+1]+.
단계 B: tert-부틸 (S)-(1-(6-(4-(4-플루오로-1H-피라졸-1-일)피리딘-3-일)에틸)카바메이트
반응 플라스크에 tert-부틸-(S)-(1-(6-브로모피리딘-3-일)에틸)카르바메이트(290 mg, 0.96 mmol), 4-플루오로-1H-피라졸(249 mg, 29.3 mmol), N 1 ,N 2 -디메틸시클로헥산-1,2-디아민(341 mg, 2.4 mmol), 요오드화 제1구리(183 mg, 0.96 mmol), 아세토니트릴(5 mL)을 첨가하여 108℃에서 4 h 동안 반응시킨 후, 실온으로 감온시키고, 50 ml의 물 및 50 mL의 에틸아세테이트를 첨가하였으며, 추출 및 분액하고, 유기상을 50 mL의 포화 식염수로 세척하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였으며, 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(EA/PE = 20%)로 분리하여 제품 245 mg을 얻었다. m/z = 307[M+1]+.
단계 C: (S)-(1-(6-(4-(4-플루오로-1H-피라졸-1-일)피리딘-3-일)에탄-1-아민 하이드로클로라이드
반응 플라스크에 (S)-(1-(6-(4-(4-플루오로-1H-피라졸-1-일)피리딘-3-일)에틸)tert-부틸 카바메이트(240 mg, 0.78 mmol), 4M염산/디옥산 용액(10 mL)을 첨가하고, 실온에서 2 h 동안 반응시켜 반응이 완료되면 감압 농축하여 제품 180 mg을 얻었다. m/z = 207[M+1]+.
단계 D: 메틸 1-메톡시-4-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)시클로헥스-3-엔-1-카르복실레이트
반응 플라스크에 메틸 1-메톡시-4-옥소시클로헥산-1-포메이트(680 mg, 3.6 mmol), THF(15 mL)를 첨가한 후, -70℃ 내지 -80℃의 내부 온도에서, LDA(2N, 2.7 mL)를 반응액에 적가하고, 상기 온도 구간을 1 h 동안 유지하였다. 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드(1.5 g, 4.3 mmol)를 10 mL의 테트라히드로푸란에 용해시킨 후, 상기 반응액에 적가하고, 적가 완료 후, 반응액을 자연적으로 실온으로 승온시켜 2 h 동안 반응시킨 후, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 820 mg을 얻었다.
단계 E: 메틸4-(6-에톡시-1H-피라졸[3'.4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-1-메톡시시클로헥스-3-엔-1-카르복실레이트
반응 플라스크에 6-에톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤린-2-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5- a]피리딘(938 mg, 2.9 mmol), 메틸 1-메톡시-4-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)시클로헥스-3-엔-1-카르복실레이트(1.0 g, 3.1 mmol), 탄산세슘(1.8 g, 5.7 mmol), Pd(dppf)Cl2(21 mg, 0.28 mmol), 1,4-디옥산(25 mL), 물(5 mL)을 첨가하고, 질소 가스를 2 min 동안 치환하였으며, 100℃로 가열하여 6 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 700 mg을 얻었다. m/z = 371[M+1]+.
단계 F: 메틸 4-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-1-메톡시시클로헥산-1-포메이트
반응 플라스크에 메틸4-(6-에톡시-1H-피라졸[3'.4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-1-메톡시시클로헥스-3-엔-1-카르복실레이트(420 mg, 1.1 mmol), 무수 에탄올(30 mL)을 첨가하고, 질소 가스로 치환하였으며, Pd(OH)2(100 mg)를 첨가한 후 수소 가스로 치환하고, 수소 가스 환경을 80℃로 유지하여 48 h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 감온하고, 여과하였으며, 20 mL의 에탄올로 헹구고, 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 330 mg을 얻었다. m/z = 373[M+1]+.
단계 G: 4-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-1-메톡시시클로헥산-1-포름산
반응 플라스크에 메틸 4-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-1-메톡시시클로헥산-1-포메이트(320 mg, 0.8 mmol), THF(10 mL), 메탄올(2 mL)을 첨가하고, 수산화리튬(81 mg, 3.4 mmol)을 1 ml의 물에 용해시켜 상기 반응계에 첨가하여 60℃에서 18 h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 감압 농축하여 제품 280 mg을 얻었다. m/z = 359[M+1]+.
단계 H: (S)-4-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-N-(1-(6-(4-플루오로-1H-피라졸-1-일)피리딘-3-일)에틸)-1-메톡시시클로헥산-1-카르복스아미드
반응 플라스크에 4-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-1-메톡시시클로헥산-1-포름산(250 mg, 0.7 mmol), (S)-(1-(6-(4-(4-플루오로-1H-피라졸-1-일)피리딘-3-일)에탄-1-아민 하이드로클로라이드(180 mg, 0.7 mmol), PyBop(400 mg, 0.77 mmol), DIEA(271 mg, 2.1 mmol), DMF(10 mL)를 첨가하고, 실온에서 12 h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 10 mL의 포화 중탄산나트륨으로 켄칭하고, 50 ml의 물로 희석하였으며, 에틸아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하고, 유기상을 합치였으며, 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰으며, 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 340 mg을 얻었으며, SFC에 의한 키랄 분리 후 화합물 258(104.2 mg)을 얻었다. m/z = 547 [M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.55 (brs, 1H), 8.68 (d, J = 4.4Hz, 1H), 8.55 (d, J = 8.4Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.94-7.88 (m, 3H), 6.99 (s, 1H), 5.06 (t, J = 7.2Hz, 1H), 4.08 (q, J = 7.2Hz, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.07-2.96 (m, 1H), 2.09-1.86 (m, 5H), 1.84-1.72 (m, 3H), 1.48 (d, J = 7.2Hz, 3H), 1.34 (t, J = 7.2Hz, 3H). 및 화합물 259(75.8 mg), m/z = 547 [M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ 12.50 (brs, 1H), 8.65 (d, J = 4.4Hz, 1H), 8.59 (d, J = 8.4Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.92-7.86 (m, 3H), 6.83 (s, 1H), 5.15 (t, J = 7.6Hz, 1H), 4.04 (q, J = 7.2Hz, 2H), 3.11 (s, 3H), 3.05-2.93 (m, 1H), 2.37-2.32 (m, 1H), 1.94-1.72 (m, 5H), 1.70-1.62 (m, 2H), 1.48 (d, J = 7.2Hz, 3H), 1.32 (t, J = 7.2Hz, 3H).
실시예 120: 화합물 267의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
단계 A: 4-브로모-6-(2-플루오로에톡시)-2-플루오로피라졸[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드
4-브로모-6-하이드록시-2-플루오로피리딘[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드(5 g, 19.3 mmol), K2CO3(5.3 g, 38.6 mmol), 1-플루오로-2-브로모에틸알칸(2.7 g, 21.2 mmol), DMF(50 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 65℃ 조건에서 2시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 얼음물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 2.65 g을 얻었다. m/z=305, 307[M+1]+.
단계 B: 4-브로모-6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-(2-플루오로에톡시)-2-플루오로피라졸[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드(2.55 g, 13.6 mmol), 히드라진 수화물(85%, 4.0 g, 68.1 mmol), DMSO(50 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 130℃에서 12시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 물에 붓고, EA로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 여과하였으며, 감압 하에 용매를 스핀 건조시켰으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 1.6 g을 얻었다. m/z=299, 301[M+1]+.
단계 C: 6-(2-플루오로에톡시)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(1.6 g, 5.3 mmol), 6-플루오로피리딘-3-브론산(0.75 g, 5.9 mmol), Cs2CO3(3.49 g, 10.7 mmol), Pd(dppf)Cl2(390 mg, 0.5 mmol), 디옥산(20 mL), 물(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 질소 가스로 3회 치환하였으며, 90℃에서 16시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 물에 붓고, EA로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 837 mg을 얻었다. m/z=316[M+1]+.
단계 D: tert-부틸 ((3R,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 6-(2-플루오로에톡시)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(410 mg, 1.3 mmol), tert-부틸 ((3R,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카보네이트(309 mg, 1.4 mmol), DIEA(840 mg, 6.5 mmol) 및 DMSO(5 mL)를 첨가하고, 90℃에서 40 h 동안 반응시켰다. 실온으로 냉각하여 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 420 mg을 얻었다. m/z = 512[M+1]+.
단계 E: (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 ((3R,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트(420 mg, 0.8 mmol), 4N 염산-디옥산 용액(8 mL)을 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 반응이 완료되면 감압 농축 및 건조시켜 제품 400 mg을 얻었다. m/z = 412[M+1]+.
단계 F: N-((3R,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(400 mg, 0.9 mmol), 2,6-디플루오로벤조산(151 mg, 1.0 mmol), DIEA(512 mg, 4.3 mmol), HATU(363 mg, 1.0 mmol) 및 DMF(5 mL)를 첨가하고, 25℃에서 2 h 동안 반응시켜 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 161.5 mg을 얻었다. m/z=552[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.68 (s, 1H), 8.57-8.63 (m, 3H), 8.02-8.05 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.48-7.61 (m, 1H), 7.32-7.33 (m, 1H), 7.11-7.15 (m, 3H), 5.01-5.01 (m, 1H), 4.87-4.89 (m, 1H), 4.75-4.77 (m, 1H), 4.38-4.46 (m, 2H), 4.17-4.21 (m, 3H), 3.94-3.94 (m, 1H), 3.36-3.41 (m, 1H), 3.11-3.14 (m, 1H), 1.93-1.96 (m, 1H), 1.69-1.72 (m, 1H).
실시예 121: 화합물 268의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
단계 A: 4-브로모-6-(2,2-디플루오로에톡시)-2-플루오로피라졸[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드
4-브로모-6-하이드록시-2-플루오로피리딘[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드(15 g, 54 mmol), K2CO3(14.9 g, 108 mmol), 1,1-디플루오로-2-요오도에탄(11.4 g, 60 mmol), DMF(140 mL)를 반응 플라스크에 첨가하고, 65℃에서 24시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 물에 붓고, EA로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 4.4 g을 얻었다. m/z=323, 325[M+1]+.
단계 B: 4-브로모-6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-(2,2-디플루오로에톡시)-2-플루오로피라졸[1,5-a]피리딘-3-카브알데하이드(4.4 g, 13.6 mmol), 히드라진 수화물(85%, 4.0 g, 68.1 mmol), DMSO(50 mL)을 반응 플라스크에 첨가하고, 130℃에서 12시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 물에 붓고, EA로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 3.4g을 얻었다. m/z=317, 319[M+1]+.
단계 C: 6-(2,2-디플루오로에톡시)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
4-브로모-6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(2.9 g, 9.1 mmol), 6-플루오로피리딘-3-브론산(1.4 g, 10.0 mmol), Cs2CO3(6.0 g, 18.3 mmol), Pd(dppf)Cl2(670 mg, 0.9 mmol), 디옥산(34 mL), 물(7 mL)을 반응 플라스크에 첨가하고, 질소 가스로 3회 치환하였으며, 90℃에서 2시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 반응액을 물에 붓고, EA로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 1.6 g을 얻었다. m/z=334[M+1]+.
단계 D: tert-부틸 ((3R,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 6-(2,2-디플루오로에톡시)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(1 g, 3.0 mmol), tert-부틸 ((3R,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카보네이트(700 mg, 3.3 mmol), DIEA(1900 mg, 15.0 mmol) 및 DMSO(10 mL)를 첨가하고, 90℃에서 40h 동안 반응시켰다. 실온으로 냉각하여 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 1 g을 얻었다. m/z = 530[M+1]+.
단계 E: (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 ((3R,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트(1 g, 1.9 mmol), 4N 염산-디옥산 용액(20 mL)을 첨가하여 25℃에서 1h 동안 반응시킨 후, 반응이 완료되면 감압 농축 및 건조시켜 제품 1.1 g을 얻었다. m/z = 430[M+1]+.
단계 F: N-((3R,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(400 mg, 0.9 mmol), 2,6-디플루오로벤조산(163 mg, 1.0 mmol), DIEA(553 mg, 4.3 mmol), HATU(392 mg, 1.0 mmol) 및 DMF(5 mL)를 첨가하고, 25℃에서 2 h 동안 반응시켜 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 115.4 mg을 얻었다. m/z=570[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.71 (s, 1H), 8.57-8.69 (m, 3H), 8.01-8.04 (m, 1H), 7.50-7.62 (m, 1H), 7.34-7.35 (m, 1H), 7.12-7.17 (m, 1H), 7.06-7.08 (m, 3H), 6.35-6.62 (m, 1H), 5.00-5.00 (m, 1H), 4.47-4.56 (m, 2H), 4.20-4.20 (m, 3H), 3.94-3.94 (m, 1H), 3.36-3.44 (m, 1H), 3.24-3.29 (m, 1H), 1.93-1.96 (m, 1H), 1.71-1.72 (m, 1H).
실시예 122: 화합물 269의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤젠술폰아미드
반응 플라스크에 (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 2,6-디플루오로벤조일클로라이드(43 mg, 0.2 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol) 및 DCM(10 mL)을 첨가하고, 25℃에서 1h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 15.5 mg을 얻었다. m/z=570.2[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.64 (brs, 1H), 8.54-8.50 (m, 2H), 8.02-7.96 (m, 2H), 7.70 (t, J=6.4Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.36-7.22 (m, 3H), 7.00 (d, J=9.2Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.28-4.08 (m, 4H), 3.72-3.70 (m, 1H), 3.68-3.59 (m, 1H), 3.45-3.41 (m, 1H), 3.20-3.14 (m, 1H), 1.90-1.85 (m, 1H), 1.52-1.48 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 123: 화합물 273의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,5-디플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 2,5-디플루오로벤조산(158 mg, 1.0 mmol) 및 디클로로메탄(3 mL)을 첨가하여 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 순차적으로 옥살릴 클로라이드(139 mg, 1.1 mmol) 및 촉매량의 DMF(4 mg, 0.05 mmol)를 적가하였다. 적가 완료 후, 반응액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하고 DMF(5 mL)로 희석한 후, 1 mL의 용액을 빙욕에서 취하여 (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(129 mg, 1.0 mmol)의 DMF(4 mL) 용액에 적가하였다. 반응액을 실온에서 2시간 동안 교반하여 반응시켰다. LCMS로 기본 반응이 완료된 것으로 모니터링되면 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 45 mg을 얻었다. m/z = 534 [M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.99-8.07 (m, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.49-7.53 (m, 1H), 7.36-7.42 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.07 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.15-4.38 (m, 5H), 3.90-3.99 (m, 1H), 3.28-3.35 (m, 1H), 3.11-3.21 ( m, 1H), 1.89-2.01 (m, 1H), 1.67-1.79 (m, 1H), 1.36-1.48 (m, 3H).
실시예 124: 화합물 274의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,3,6-트리플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 2,3,6-트리플루오로벤조산(176 mg, 1.0 mmol) 및 디클로로메탄(3 mL)을 첨가하여 빙욕에서 5℃로 냉각시킨 후, 순차적으로 옥살릴 클로라이드(139 mg, 1.1 mmol) 및 촉매량의 DMF(4 mg, 0.05 mmol)를 적가하였다. 적가 완료 후, 반응액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하고 DMF(5 mL)로 희석한 후, 1 mL의 용액을 빙욕에서 취하여 (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(129 mg, 1.0 mmol)의 DMF(4 mL) 용액에 적가하였다. 반응액을 실온에서 2시간 동안 교반하여 반응시켰다. LCMS로 기본 반응이 완료된 것으로 모니터링되면 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 35 mg을 얻었다. m/z = 552 [M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.50-7.61 (m, 2H), 7.15-7.26 (m, 2H), 7.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.15-4.38 (m, 5H), 3.90-3.99 (m, 1H), 3.21-3.41(m, 2H), 1.89-2.01 (m, 1H), 1.67-1.79 (m, 1H), 1.38-1.42 (m, 3H).
실시예 125: 화합물 275의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
반응 플라스크에 순차적으로 (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), DMF(2 mL) 및 디이소프로필에틸아민(129 mg, 1.0 mmol)을 첨가하였다. 빙욕에서 5℃로 냉각시키고, 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(39 mg, 0.2 mmol)의 DMF(0.2 mL) 용액을 적가하였으며, 실온에서 2시간 동안 교반하여 반응시켰다. LCMS로 기본 반응이 완료된 것으로 모니터링되면 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 47 mg을 얻었다. m/z = 550 [M+1]+. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.60 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.60 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.45-7.48 (m, 1H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.21-7.28 (m, 2H), 7.07 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.15-4.38 (m, 5H), 3.90-3.99 (m, 1H), 3.21-3.35(m, 1H), 3.31-3.47 ( m, 1H), 1.89-2.01 (m, 1H), 1.67-1.79 (m, 1H), 1.36-1.48 (m, 3H).
실시예 126: 화합물 276의 제조
2-클로로-N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-5-플루오로벤즈아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸로[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.25 mmol), 5-클로로-2-플루오로벤조일클로라이드(52 mg, 0.25 mmol), DIEA(194 mg, 1.80 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 18 mg을 얻었다. m/z=550[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.65 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.33 (d, J=7.6Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.58-7.53 (m, 2H), 7.42-7.30 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.06 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.33-4.13 (m, 5H), 3.97-3.93 (m, 1H), 3.42-3.40 (m, 1H), 3.24-3.18 (m, 1H), 1.99-1.89 (m, 1H), 1.75-1.66 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 127: 화합물 277의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)-피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-5-플루오로-2-메틸벤즈아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.25 mmol), 5-플루오로-2-메틸벤조일클로라이드(44 mg, 0.25 mmol), DIEA(194 mg, 1.80 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 30 mg을 얻었다. m/z=530[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.09 (d, J=7.6Hz, 1H), 7.99 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.30-7.15 (m, 4H), 7.06 (d, J=9.2Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.34-4.14 (m, 5H), 3.97-3.93 (m, 1H), 3.42-3.40 (m, 1H), 3.24-3.18 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.99-1.90 (m, 1H), 1.75-1.66 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 128: 화합물 278의 제조
2-클로로-N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일))피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-6-메틸벤즈아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.25 mmol), 2-클로로-6-메틸벤조산(42 mg, 0.25 mmol), DIEA(194 mg, 1.80 mmol), HATU(95 mg, 0.25 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1 h 동안 반응시켰다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 28 mg을 얻었다. m/z=546[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.32 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.99 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.30-7.20 (m, 4H), 7.05 (d, J=9.2Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.24-4.13 (m, 5H), 3.97-3.93 (m, 1H), 3.42-3.40 (m, 1H), 3.24-3.18 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.99-1.90 (m, 1H), 1.75-1.68 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 129: 화합물 279의 제조
N-((3R,4S)-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2-트리플루오로메틸벤즈아미드
반응 플라스크에 (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 2-트리플루오로메틸벤조일클로라이드(41 mg, 0.2 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol) 및 10 ml의 DCM을 첨가하고, 25℃에서 1h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 28.2 mg을 담황색 고체로 얻었다. m/z=566.2[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.27 (d, J=8.0Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.79-7.41 (m, 2H), 7.66-7.56 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 7.06 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.42-4.12 (m, 5H), 4.97-4.93 (m, 1H), 3.42-3.40 (m, 1H), 3.28-3.19 (m, 1H), 1.98-1.89 (m, 1H), 1.75-1.68 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 130: 화합물 280의 제조
2-시아노-N-((3R,4S)-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-벤즈아미드
반응 플라스크에 (3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 2-시아노벤조일클로라이드(33 mg, 0.2 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol) 및 10 ml의 DCM을 첨가하고, 25℃에서 1h 동안 반응시켜 반응을 완료하였다. 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 12.4 mg을 담황색 고체로 얻었다. m/z=523.2[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 10.27 (s, 1H), 8.58-8.51 (m, 2H), 8.20 (d, J=6.8Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.85-7.72 (m, 3H), 7.59 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.09 (d, J=8.4Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.85-4.51 (m, 2H), 4.27-4.15 (m, 4H), 3.22-3.20 (m, 1H), 3.08-2.98 (m, 2H), 1.75-1.68 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8Hz, 3H).
실시예 131: 화합물 281의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-1-(트리플루오로메틸)시클로부탄-1-카르복스아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(120.6 mg, 0.24 mmol), DMF(2 mL), DIEA(154.8 mg, 1.2 mmol), 1-트리플루오로시클로부탄-1-카르복실산(33.6 mg, 0.2 mmol)를 순차적으로 반응 플라스크에 첨가하고, 실온에서 HATU(114 mg, 0.3 mmol)를 첨가하여 실온에서 1 h 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 55 mg을 얻었다. m/z=544.1[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (s, 1H), 8.55-8.50 (m, 2H), 8.01-7.98 (m, 1H), 7.58 (s, 1H),7.50-7.48 (d, 1H), 7.24-7.23 (m, 1H), 7.07-7.05 (m,1H), 5.01 (s, 1H), 4.42-4.32 (m, 2H), 4.20-4.15 (m, 3H), 4.01-3.98 (m, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.35-3.05 (m, 2H), 2.37-2.34 (m, 2H), 1.96-1.83 (m, 4H), 1.61-1.58 (m, 1H), 1.43-1.38 (t, 3H).
실시예 132: 화합물 282의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-1-플루오로시클로프로판-1-카르복스아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(120.6 mg, 0.24 mmol), DMF(2 mL), DIEA(154.8 mg, 1.2 mmol), 1-플루오로시클로프로판-1-카르복실산(20.8 mg, 0.2 mmol)를 순차적으로 반응 플라스크에 첨가하고, 실온에서 HATU(114 mg, 0.3 mmol)를 첨가하여 실온에서 1 h 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 6 mg을 얻었다. m/z=480.1[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (s, 1H), 8.55-8.50 (m, 2H), 8.01-7.98 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.50-7.48 (d, 1H), 7.24-7.23 (m, 1H), 7.07-7.05 (m,1H), 5.01 (s, 1H), 4.20-4.15 (m, 3H), 3.60-3.58 (m, 1H), 3.37-3.04 (m, 4H), 1.70-1.85 (m, 2H), 1.43-1.38 (t, 3H), 1.00-1.25(m, 4H).
실시예 133: 화합물 283의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,3-디메틸부탄아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(238 mg, 0.51 mmol), 2,3-디메틸부탄산(60 mg, 0.51 mmol), DIEA(329 mg, 2.55 mmol), HATU(232 mg, 0.61 mmol), DMF(5 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 25 mg을 얻었다. m/z=492.3[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (brs, 1H), 8.50-8.54 (m, 2H), 7.98-8.01 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.48-7.49 (m, 1H), 7.24 (m, 1H), 7.00-7.02 (m, 1H), 4.87-4.93 (m, 1H), 4.16-4.18 (m, 4H), 3.80-3.94 (m, 2H), 3.10-3.20 (m, 1H), 2.00-2.10 (m, 1H), 1.50-1.90 (m, 3H), 1.40 (t, J=6.8Hz, 3H), 0.84-0.98 (m, 10H).
실시예 134: 화합물 284의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-3-(트리플루오로메틸)피리딘카르복스아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(150 mg, 0.30 mmol), DMF(2 mL), DIEA(154.8 mg, 1.2 mmol), 3-트리플루오로메틸-2-카르복실레이트피리딘(38 mg, 0.2 mmol)을 순차적으로 반응 플라스크에 첨가하고, 실온에서 HATU(114 mg, 0.3 mmol)를 첨가하여 실온에서 1 h 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 6 mg을 얻었다. m/z=567[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (s, 1H), 8.55-8.50 (m, 3H), 8.01-7.98 (m, 2H), 7.58 (s, 1H),7.50-7.48 (d, 2H), 7.24-7.23 (m, 1H), 7.07-7.05 (m,1H), 5.01 (s, 1H), 4.20-4.15 (m, 3H), 4.01-3.98 (m, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.35-3.05 (m, 2H), 2.37-2.34 (m, 2H), 1.61-1.58 (m, 1H), 1.43-1.38 (t, 3H).
실시예 135: 화합물 285의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-하이드록시피페리딘-4-일)-3-클로로-5-플루오로피리딘카르복스아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 3-클로로-5-플루오로피콜린산(32 mg, 0.2 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol), HATU(76 mg, 0.2 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 41.6 mg을 얻었다. m/z=551[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.51-8.49 (m, 2H), 8.32 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.92-7.87 (m, 1H), 7.73-7.69 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.07 (d, J=9.2 Hz, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.45-4.36 (m, 2H), 4.20-4.14 (m, 3H), 3.95-3.93 (m, 1H), 3.33-3.30 (m, 1H), 3.15-3.10 (m, 1H), 1.95-1.92 (m, 1H), 1.78-1.74 (m, 1H), 1.38 (t, J=6.8 Hz, 3H).
실시예 136: 화합물 286의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-하이드록시피페리딘-4-일)-3-플루오로피리딘카르복스아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(100 mg, 0.2 mmol), 3-플루오로피콜린산(32 mg, 0.2 mmol), DIEA(129 mg, 1.0 mmol), HATU(76 mg, 0.2 mmol), DMF(3 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 1시간 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 39.9 mg을 얻었다. m/z=517[M+1]+. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.65 (brs, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.35 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.20 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.07 (d, J=9.2 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.34-4.27 (m, 2H), 4.20-4.15 (m, 2H), 3.95-3.93 (m, 1H), 3.42-3.40 (m, 1H), 3.20-3.15 (m, 1H), 1.99-1.90 (m, 1H), 1.78-1.70 (m, 1H), 1.39 (t, J=6.8 Hz, 3H).
실시예 137: 화합물 291의 제조
N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)피페리딘-4-일)-2,5-디플루오로벤즈아미드
단계 A: 에틸 4-(2,5-디플루오로벤즈아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4- 포메이트
에틸4-아미노-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-포메이트(120 mg, 0.26 mmol), 2,5-디플루오로벤조산(38 mg, 0.24 mmol), DIEA(100 mg, 0.78 mmol), HATU(108 mg, 0.28 mmol), DMF(2 mL)를 반응 플라스크에 첨가하여 25℃에서 12 h 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 100 mg을 얻었다. m/z=590[M+1]+.
단계 B: N-(1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-4-(히드록시메틸)피페리딘-4-일)-2,5-디플루오로벤즈아미드
4-(2,5-디플루오로벤즈아미드)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-에틸 포메이트(30 mg, 0.05 mmol), 2 ml의 THF를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 LiAlH4(1.9 mg, 0.05 mmol)를 첨가하여 1h 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 물을 첨가하고 교반하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 20 mg을 얻었다. m/z=548[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.61 (s, 1H), 8.55 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.04 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.27 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.25-7.18 (m, 3H), 4.85 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.20 (d, J = 13.4 Hz, 2H), 4.15 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.58 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.15 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.20 (d, J = 13.4 Hz, 2H), 1.68 (td, J = 13.4, 4.4 Hz, 2H), 1.38 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 138: 화합물 292의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2-클로로-6-플루오로벤즈아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올 염산염(100 mg, 0.2 mmol), DCM(3 mL), DIEA(138 mg, 1.0 mmol), 2-클로로-6-플루오로벤조일클로라이드(41 mg, 0.2 mmol)를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 15 min 동안 반응시킨 후, LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 43.5 mg을 얻었다. m/z=586[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.70 (s, 1H), 8.57-8.69 (m, 3H), 8.01-8.02 (m, 1H), 7.61-7.61 (m, 1H), 7.45-7.47 (m, 1H), 7.28-7.37 (m, 3H), 7.06-7.06 (m, 1H), 6.34-6.62 (m, 1H), 4.94-4.95 (m, 1H), 4.48-4.52 (m, 2H), 4.19-4.20 (m, 3H), 3.93-3.93 (m, 1H), 3.42-3.45 (m, 1H), 3.27-3.34 (m, 1H), 1.94-1.97 (m, 1H), 1.70-7.73 (m, 1H).
실시예 139: 화합물 293의 제조
N-((3R,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2-클로로-5-플루오로벤즈아미드
(3R,4S)-4-아미노-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-올 염산염(100 mg, 0.2 mmol), DCM(3 mL), DIEA(138 mg, 1.0 mmol), 2-클로로-5-플루오로벤조일클로라이드(41 mg, 0.2 mmol)를 반응 플라스크에 첨가하고, 0℃에서 15 min 동안 반응시켰다, LCMS로 반응 완료가 모니터링되면, 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 11.0 mg을 얻었다. m/z=586[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.70 (s, 1H), 8.68-8.69 (m, 1H), 8.57-8.58 (m, 1H), 8.34-8.36 (m, 1H), 8.01-8.04 (m, 1H), 7.53-7.61 (m, 1H), 7.39-7.41 (m, 1H), 7.33-7.35 (m, 3H), 7.07-7.09 (m, 1H), 6.35-6.62 (m, 1H), 4.97-4.98 (m, 1H), 4.47-4.56 (m, 2H), 4.14-4.25 (m, 3H), 3.96-3.96 (m, 1H), 3.40-3.40 (m, 1H), 3.22-3.37 (m, 1H), 1.94-1.94 (m, 1H), 1.67-1.71 (m, 1H).
실시예 140: 화합물 294의 제조
N-((3S,4S)-1-(5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
(3S,4S)-4-아미노-1-5-(6-에톡시-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘 하이드로클로라이드(200 mg, 0.51 mmol), DMF(2 mL), DIEA(197 mg, 1.5 mmol), 2,6-디플루오로벤조산(88.4 mg, 0.56 mmol)을 순차적으로 반응 플라스크에 첨가하고, 실온에서 HATU(290 mg, 0.76 mmol)를 첨가하여 실온에서 1 h 동안 반응시켰다. LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 물에 붓고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 7 mg을 얻었다. m/z=534[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.64 (s, 1H), 8.61-8.50 (m, 3H), 8.02-7.99 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.52-7.47 (m, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.17-7.12 (m, 2H), 7.07-7.05 (d, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.24-4.15 (m, 5H), 3.93 (s, 1H), 3.44-3.43 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.28-3.26 (d, 1H), 1.95-1.93 (m, 1H), 1.71-1.68 (m, 1H), 1.43 (t, 3H).
실시예 141: 화합물 295의 제조
N-((3S,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
단계 A: tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 6-(2-플루오로에톡시)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(410 mg, 1.3 mmol), ((3S,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)tert-부틸 카보네이트(309 mg, 1.4 mmol), DIEA(840 mg, 6.5 mmol) 및 DMSO(5 mL)를 첨가하여 90℃에서 40h 동안 반응시켰다. 반응액을 실온으로 냉각하여 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 430 mg을 얻었다. m/z = 512[M+1]+.
단계 B: ((3S,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트(430 mg, 0.8 mmol), 4N 염산-디옥산 용액(8 mL)을 첨가하여 25℃에서 0.5 h 동안 반응시키고, 반응이 완료되면 감압 농축 및 건조시켜 제품 320 mg을 얻었다. m/z = 412[M+1]+.
단계 C: N-((3S,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
((3S,4S)-1-(5-(6-(2-플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노 하이드로클로라이드(320 mg, 0.8 mmol), 2,6-디플루오로벤조산(110 mg, 0.8 mmol), DIEA(502 mg, 4.0 mmol), HATU(325 mg, 0.9 mmol) 및 DMF(5 mL)를 첨가하여 25℃에서 2 h 동안 반응시켜 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 144.2 mg을 얻었다. m/z=552[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.68 (s, 1H), 8.60-9.00 (m, 3H), 8.05-8.07 (m, 1H), 7.61 (m, 1H), 7.50-7.50 (m, 1H), 7.32-7.33 (m, 1H), 7.09-7.16 (m, 3H), 5.11-5.11 (m, 1H), 4.76-4.88 (m, 1H), 4.76-4.46 (m, 1H), 4.38-4.39 (m, 3H), 4.24-4.27 (m, 1H), 3.94-3.95 (m, 1H), 3.49-3.50 (m, 1H), 3.16-3.36 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 2.04-2.07 (m, 1H), 1.45-1.48 (m, 1H).
실시예 142: 화합물 296의 제조
N-((3S,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
단계 A: tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트
반응 플라스크에 6-(2,2-디플루오로에톡시)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(600 mg, 1.8 mmol), tert-부틸 ((3S,4S)-3-하이드록시피페리딘-4-일)카보네이트(430 mg, 2.0 mmol), DIEA(1160 mg, 9.0 mmol) 및 DMSO(6 mL)를 첨가하여 90℃에서 40h 동안 반응시켰다. 실온으로 냉각하여 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 600 mg을 얻었다. m/z = 530[M+1]+.
단계 B: ((3S,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노 하이드로클로라이드
반응 플라스크에tert-부틸 ((3S,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노카보네이트(600 mg, 1.1 mmol), 4N 염산-디옥산 용액(10 mL)를 첨가하여 25℃에서 0.5 h 동안 반응시키고, 반응이 완료되면 감압 농축 및 건조시켜 제품 600 mg을 얻었다. m/z = 430[M+1]+.
단계 C: N-((3S,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)-2,6-디플루오로벤즈아미드
((3S,4S)-1-(5-(6-(2,2-디플루오로에톡시)-1H-피라졸[3',4':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-4-일)피리딘-2-일)-3-하이드록시피페리딘-4-일)아미노 하이드로클로라이드(400 mg, 0.9 mmol), 2,6-디플루오로벤조산(163 mg, 1.0 mmol), DIEA(553 mg, 4.3 mmol), HATU(392 mg, 1.0 mmol) 및 DMF(5 mL)를 첨가하여 25℃에서 2h 동안 반응시킨 후, 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 제품 111.2 mg을 얻었다. m/z=570[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.71 (s, 1H), 8.60-8.70 (m, 3H), 8.05-8.08 (m, 1H), 7.61-7.61 (m, 1H), 7.50-7.50 (m, 1H), 7.36-7.37 (m, 1H), 7.11-7.18 (m, 3H), 6.34-6.62 (m, 1H), 5.11-5.12 (m, 1H), 4.48-4.52 (m, 3H), 4.24-4.27 (m, 1H), 3.94-3.95 (m, 1H), 3.48-3.51 (m, 1H), 3.13-3.18 (m, 1H), 2.94-2.97 (m, 1H), 2.04-2.08 (m, 1H), 1.45-1.47 (m, 1H).
실시예 143: 화합물 297의 제조
6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-1H-피롤[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
단계 A: 에틸 2-(5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)-2-시아노아세테이트
반응 플라스크에 5-브로모-2,3-디클로로피리딘(45.4 g, 0.2 mol), 에틸시아노아세테이트(45.2 g, 0.4 mol), 탄산세슘(195 g, 0.6 mol), DMSO(500 mL)을 첨가하여 90℃에서 15 h 동안 반응시키고, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하여 제품 50 g을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z = 303[M+1]+.
단계 B: 2-(5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)아세토니트릴
반응 플라스크에 에틸 2-(5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)-2-시아노아세테이트(60 g, 0.2 mol), 염화나트륨(3.5 g, 0.06 mol), DMSO(500 mL)를 첨가하여 160℃에서 2 h 동안 반응시키고, LCMS로 반응 완료를 모니터링하였다. 반응액을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였으며, 유기상을 건조시키고, 감압 농축하여 제품 40 g을 얻고 이를 다음 단계 반응에 그대로 사용하였다. m/z = 231[M+1]+.
단계 C: 2,4,6-트리메틸벤젠술포네이트 1-아미노-5-브로모-3-클로로-2-(시아노메틸)피리딘-1-윰염
0도에서, 2-[(아미노옥시)술포닐]-1,3,5-트리메틸벤젠(6.8 g, 31.7 mmol)의 디클로로메탄(50 mL) 용액에 2-(5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)아세토니트릴(7.4 g, 32.0 mmol)을 첨가하고, 0도에서 3시간 동안 계속 교반하면 다량의 백색 고체가 석출된다. 반응 완료 후, 0도에서 반응계에 디에틸에테르(50 mL)를 첨가하여 10분 동안 교반하였으며, 감압 여과하고, 디에틸에테르로 헹구었으며, 진공 건조시켜 제품 15 g을 얻고 이를 추가 정제 없이 그대로 다음 단계 반응에 사용하였다. m/z=246[M+1]+.
단계 D: 6-브로모-4-클로로피라졸[1,5-a]피리딘-2-아민
0도에서, 2,4,6-트리메틸벤젠술포네이트 1-아미노-5-브로모-3-클로로-2-(시아노메틸)피리딘-1-윰염(1.0 g, 2.2 mmol)이 포함된 DMF(30 mL) 용액에 트리에틸아민(1.1 g, 11.0 mmol)을 첨가하고, 실온으로 승온시켜 12시간 동안 반응시켜 반응이 완료되면, 식염수를 첨가하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 식염수로 세척하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 350 mg을 얻었다. m/z=246[M+1]+.
단계 E: 1-(2-아미노-6-브로모-4-클로로피라졸[1,5-a]피리딘-3-일)-2-클로로에틸-1-온
반응 플라스크에 6-브로모-4-클로로피라졸[1,5-a]피리딘-2-아민(2.5 g, 10.0 mmol), 클로로아세토니트릴(1.5 g, 20.0 mmol), 삼염화붕소(12 mL, 12.0 mmol), 삼염화알루미늄(2.7 g, 20.0 mmol), 클로로벤젠(20 mL)을 첨가하여 120℃에서 12시간 동안 반응시킨 후, 묽은 염산(1N, 30 mL)을 첨가하여 100℃에서 1시간 동안 반응시켜 반응이 완료되면, 에틸아세테이트로 추출하고, 유기상을 합치였으며, 물로 세척하고, 감압 농축하였으며, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.5 g을 얻었다. m/z=322[M+1]+.
단계 F: 1-(2-아미노-6-브로모-4-클로로피라졸[1,5-a]피리딘-3-일)-2-클로로에틸-1-올
반응 플라스크에 1-(2-아미노-6-브로모-4-클로로피라졸[1,5-a]피리딘-3-일)-2-클로로에틸-1-온(2.0 g, 6.2 mmol), 디옥산(20 mL), 물(2 mL)을 첨가하고, 반응계를 0℃로 냉각시킨 후, 수소화붕소나트륨(0.3 g, 7.9 mmol)을 여러 번 나누어 첨가하고, 실온으로 승온시켜 5시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료되면, 물을 첨가하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 1.0 g을 얻었다. m/z=324[M+1]+.
단계 G: 6-브로모-4-클로로-1H-피롤[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 1-(2-아미노-6-브로모-4-클로로피라졸[1,5-a]피리딘-3-일)-2-클로로에틸-1-올(323 mg, 1.0 mmol), 테트라히드로푸란(10 mL)을 첨가하고, 반응계를 0℃로 냉각시킨 후, 이소프로필마그네슘클로라이드(1.5 mL, 3.0 mmol)를 천천히 적가하여 80℃에서 1시간 동안 반응시켜 반응이 완료되면, 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 178 mg을 얻었다. m/z=270[M+1]+.
단계 H: 4-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피롤[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
6-브로모-4-클로로-1H-피롤로[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(650 mg, 2.4 mmol)에 피나콜 디보로네이트(736 mg, 2.9 mmol), 아세트산칼륨(705 mg, 7.2 mmol) 및 1,4-디옥산(10 mL), Pd(dppf)Cl2(175 mg, 0.24 mmol)를 첨가하고, 질소 가스로 치환한 후, 80℃에서 12h 동안 반응시키고, 여과하였으며, 여액을 농축한 후 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 523 mg을 얻었다. m/z=318[M+1]+.
단계 I: 4-클로로-1H-피라졸[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-하이드록실
반응 플라스크에 4-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피롤[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(634 mg, 2.0 mmol), 테트라히드로푸란(10 mL), 그 후 반응계를 0℃로 냉각시킨 후, 과산화수소(340 mg, 10.0 mmol)를 천천히 적가하여 0℃에서 1시간 동안 반응시킨 후, 반응이 완료되면, 포화 메타중아황산나트륨 수용액을 참가하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 500 mg을 얻었다. m/z=208[M+1]+.
단계 J: 4-클로로-6-에톡시-1H-피롤[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 4-클로로-1H-피라졸[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘-6-하이드록실(416 mg, 2.0 mmol), 요오도에탄(374 mg, 2.4 mmol), 탄산칼륨(552 mg, 4.0 mmol), DMF(5 mL)을 첨가하고, 반응계를 50℃로 승온시켜 5시간 동안 반응시킨 후, 반응이 완료되면, 물을 첨가하여 켄칭하고, 에틸아세테이트로 추출하였으며, 유기상을 합치고, 물로 세척하였으며, 감압 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 400 mg을 얻었다. m/z=236[M+1]+.
단계 J: 6-에톡시-4-(6-(6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄-3-일)피리딘-3-일)-1H- 피롤[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘
반응 플라스크에 4-클로로-6-에톡시-1H-피롤[2',3':3,4]피라졸[1,5-a]피리딘(235 mg, 1.0 mmol), 6-((6-메톡시피리딘-3-일)메틸)-3-(5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥솔란-2-일)피리딘-2-일)- 3,6-디아자비시클로[3.1.1]헵탄(422 mg, 1.0 mmol), Xphos(95.2 mg, 0.2 mmol), 아세트산 팔라듐(22.4 mg, 0.1 mmol), 인산칼륨(424 mg, 2.0 mmol), 1,4-디옥산(10 mL) 및 물(2 mL)을 첨가하고, 질소 가스로 치환한 후, 100℃에서 12h 동안 반응시키고, 여과하였으며, 여액을 농축한 후 컬럼 크로마토그래피로 분리하여 제품 250 mg을 얻었다. m/z=496[M+1]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.81 (s, 1H), 8.61 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.11-7.99 (m, 2H), 7.69 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.01-6.92 (m, 2H), 6.86 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.10 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.81 (m, 5H), 3.68 (s, 2H), 3.52 (s, 2H), 3.31 (s, 2H), 1.58 (s, 1H), 1.37 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
상기 방법 또는 상기 방법을 참조하여 화합물 1~화합물 265를 제조하고, 이들의 화학 구조식 및 질량 분석 데이터를 표 1에 정리하였다.
표 1: 실시예 화합물 1~실시예 화합물 265의 화학 구조 및 질량 분석 데이터
번호 화학 구조 m/z [M+1]
1 528
2 599
3 531
4 549
5 579
6 616
7 616
8 487
9 568
10 499
11 548
12 547
13 613
14 615
15 574
16 519
17 644
18 586
19 588
20 660
21 533
22 558
23 608
24 661
25 657
26 670
27 518
28 545
29 561
30 457
31 457
32 487
33 497
34 517
35 519
36 531
37 545
38 588
39 478
40 448
41 544
42 533
43 550
44 550
45 567
46 530
47 532
48 545
49 529
50 534
51 551
52 526
53 554
54 556
55 550
56 546
57 551
58 549
59 532
60 548
61 496
62 476
63 497
64 542
65 488
66 478
67 505
68 510
69 571
70 517
71 559
72 561
73 575
74 602
75 643
76 576
77 590
78 629
79 613
80 544
81 531
82 505
83 574
84 575
85 574
86 572
87 492
88 494
89 492
90 545
91 551
92 540
93 510
94 487
95 557
96 540
97 579
98 569
99 567
100 581
101 484
102 548
103 456
104 471
105 586
106 586
107 536
108 454
109 466
110 480
111 404
112 490
113 511
114 527
115 530
116 418
117 499
118 546
119 582
120 528
121 568
122 557
123 529
124 569
125 472
126 431
127 543
128 537
129 525
130 531
131 513
132 486
133 468
134 512
135 526
136 471
137 416
138 471
139 528
140 499
141 499
142 486
143 504
144 503
145 507
146 533
147 544
148 496
149 544
150 548
151 497
152 511
153 532
154 497
155 546
156 511
157 546
158 511
159 546
160 511
161 532
162 562
163 527
164 546
165 511
166 548
167 513
168 548
169 562
170 532
171 497
172 532
173 497
174 560
175 525
176 560
177 525
178 574
179 539
180 572
181 600
182 565
183 546
184 632
185 546
186 511
187 546
188 511
189 546
190 511
191 560
192 525
193 560
194 525
195 574
196 539
197 574
198 539
199 574
200 539
201 560
202 560
203 525
204 560
205 525
206 574
207 539
208 574
209 539
210 574
211 539
212 574
213 539
214 588
215 553
216 588
217 553
218 588
219 553
220 546
221 511
222 546
223 511
224 508
225 565
226 515
227 507
228 541
229 529
230 611
231 575
232 508
233 534
234 575
235 483
236 545
237 529
238 497
239 497
240 527
241 495
242 523
243 478
244 529
245 542
246 601
247 512
248 522
249 515
250 430
251 529
252 447
253 463
254 468
255 470
256 454
257 510
258 547
259 547
260 511
261 525
262 535
263 551
264 533
265 563
번호 화학 구조 m/z [M+1]
266 551
267 552
268 570
269 570
270 584
271 533
272 572
273 534
274 552
275 550
276 550
277 530
278 546
279 566
280 523
281 544
282 480
283 492
284 567
285 551
286 517
287 557
288 557
289 543
290 586
291 548
292 586
293 586
294 534
295 552
296 570
297 496
생물학적 활성 시험예
시험예 1
형질감염 재조합 유전자(RET)는 이미 확인된 원암유전자이다. 이에 의해 코딩된 단일 막관통 수용체 타이로신 키나아제는 수많은 조직 및 세포 유형의 발육, 성숙 및 유지에 필수적이다. 정상적인 조건에서, 신경교 세포계로부터 유도된 신경영양인자(GDNF) 패밀리 리간드와 세포 표면에서의 RET의 결합은 세포내 타이로신 잔기의 이합체화 및 자가인산화를 일으킬 수 있음으로써, 다운스트림 RAS-MAPK, PI3K-AKT 및 포스폴리파아제 Cγ(PLCγ) 채널의 활성화를 일으키고, 세포 생존율 및 증식을 증가시킨다. RET 돌연변이를 활성화하는 구현예는 C634W, M918T 및 게이트키퍼 돌연변이 V804L 및 V804M 및 용매 프론트 돌연변이 G810R 등을 포함한다.
상기 시험에서 펩티드 기질 및 단일 독점 단클론 항체와 HTRF 기술을 결합하되, HTRF 기술은 고민감도 및 안정성을 가지는 기술로, 단백질의 분자 상호 작용을 검출하기 위한 것이다. 효소는 기질을 인산화한 다음, Eu로 라벨링된 항체와 인산화 기질을 결합하고, 스트렙트아비딘-XL665와 모든 기질을 결합한다. TR-FRET 신호는 HTRF 원리에 의해 생성된다. 억제제(피험 화합물)를 첨가하면, 비교적 약한 TR-FRET 신호를 획득한다. 이에 따라, 억제 효과를 평가한다.
표 1. 키나아제 활성 시험 시약 및 재료
1.2. 용액의 조제
모든 화합물을 모두 DMSO에 용해시켜 10 mM의 저장액으로 조제한다.
DMSO를 사용하여 카보잔티닙(Cabozantinib)을 2 mM 및 0.2 mM로부터 각각 3배로 구배 희석하되, 모두 10개의 농도로 희석한다.
DMSO를 사용하여 다른 화합물을 10 mM의 원액으로부터 3배로 구배 희석하되, 모두 10개의 농도로 희석한다.
1000×양성 대조(0.1 mM의 카보잔티닙) 및 1000×음성 대조(100％의 DMSO)를 제조한다.
평판식 진탕기에서 5 분 동안 진탕한다.
1.3. 1×키나아제 완충액의 제조
4 부피의 증류수를 1 부피의 효소 완충액5×에 넣고, 5 mM의 MgCl2; 1 mM의 DTT.
1.4. 선별 방법
a) 1 μl의 화합물 희석액을 시험 플레이트의 각 웰에 옮긴다.
b) 1000 g에서 화합물 플레이트를 1 분 동안 원심분리한다.
c) 시험 플레이트를 밀봉한다.
d) 1×키나아제 완충액 중의 5X Ret-wt(0.2ng /μl) 및 5X Ret V804M(0.5ng /μl) 및 2.5X RET G810R(2.5 ng/μl)을 제조한다.
e) 2μl의 5X Ret-wt 또는 2μl의 Ret V804L 또는 2μl의 RET G810R을 384웰 시험 플레이트에 넣는다.
f) 4μl의 1x 키나아제 완충액을 시험 플레이트의 각 웰에 넣고, 1000 g에서 샘플 플레이트를 30 초 동안 원심분리하여 실온에서 10 분 동안 방치한다.
g) 키나아제 완충액 중의 5x TK-기질-바이오틴(5μM) 및 키나아제 완충액 중의 5x ATP(50μM)의 용액을 제조한다.
h) 2μl STK-기질-바이오틴 및 2μlATP(단계 g에서 제조됨)를 넣고 반응을 시작한다.
i) 1000 g에서 샘플 플레이트를 30 초 동안 원심분리한다. 시험 플레이트를 밀봉하고, 실온에서 30 분 동안 방치한다.
j) HTRF 검출 완충액 중의 4X Sa-XL 665(250nM)를 제조한다.
k) 5μl의 Sa-XL 665 및 5μl의 TK-antibody-Cryptate(단계 i에서 제조됨)를 시험 플레이트의 각 웰에 넣는다.
l) 1000 g에서 30 초 동안 원심분리하고, 실온에서 1 시간 동안 방치한다.
m) Envision 2104 플레이트 리더 또는 BioTek마이크로 플레이트 리더에서 615nm/620nm(G810R)(Cryptate) 및 665nm(XL665) 의 형광 신호 값을 읽는다.
1.5. 데이터 분석
각 웰의 비율(665nm/615nm)을 계산한다.
억제율%는 하기와 같은 방식으로 계산한다.
억제율%=[1-(피험 화합물 비율-양성 대조 평균 비율)/(음성 대조 평균 비율-양성 대조 평균 비율)]Х100 %
비율: 측정된 형광 신호 값에 의해 생성된다.
양성 대조 평균 비율은 샘플 플레이트 중 양성 대조(20μM Cabozantinib)의 평균 비율이고;
음성 대조 평균 비율은 샘플 플레이트 중 음성 대조(0.1 %의 DMSO)의 평균 비율이다.
일부 비선형 피팅 공식을 이용하여 화합물의 IC50(반수 억제 농도)를 얻고, GraphPad 6.0 소프트웨어를 이용하여 데이터를 분석한다.
Y=Bottom +(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*Hill Slope))
X: 화합물 농도 Log 값 Y: 억제율(% inhibition)
Z’ 인자 기술 방정식:
Z’=1-3(SDmin+SDmax)/(AVEmax-AVEmin)
Min은 양성 대조 약물인 20 μM의 Cabozantinib Ratio(665/620 nMХ10000)이고, Max는 음성 대조 약물인 DMSO Ration(665/620 nMХ10000)이다.
SD는 표준 오차이고, AVE는 Ration(665/620 nM×10000) 평균값이다.
실시예 화합물의 키나아제 결과는 표 2, 표 3 및 표 4와 같다.
화합물 번호 RET-wt
IC 50 (nM)
화합물 3 0.1
화합물 4 0.1
화합물 11 0.1
화합물 39 0.1
화합물 40 0.1
화합물 41 0.1
화합물 42 0.1
화합물 44 0.1
화합물 46 0.1
화합물 88 0.1
Cabozantinib 20.2
화합물 번호 RET V804M
IC 50 (nM)
화합물 3 0.1
화합물 4 0.03
화합물 11 0.1
화합물 39 0.1
화합물 40 0.1
화합물 41 0.1
화합물 42 0.05
화합물 44 0.1
화합물 46 0.06
화합물 88 0.2
Cabozantinib 89.3
화합물 번호 RET G810R
IC 50 (nM)
화합물 1 6.5
화합물 3 2.9
화합물 4 2.3
화합물 8 8.7
화합물 11 0.36
화합물 12 2.1
화합물 15 1.5
화합물 17 2.1
화합물 29 8.8
화합물 31 2.6
화합물 33 2.5
화합물 34 4.9
화합물 35 5.1
화합물 36 5.7
화합물 37 6.3
화합물 39 4.2
화합물 40 2.2
화합물 41 2.8
화합물 42 1.4
화합물 43 1.9
화합물 44 0.8
화합물 45 5.2
화합물 46 1.6
화합물 48 2.9
화합물 50 17.9
화합물 51 4.3
화합물 55 4.5
화합물 56 23.6
화합물 57 6.9
화합물 58 5.6
화합물 59 4.6
화합물 87 9.4
화합물 88 7.8
화합물 89 2.0
화합물 91 2.2
화합물 101 6.6
화합물 102 3.6
화합물 103 11.1
화합물 104 6.4
화합물 107 14.5
화합물 114 3.6
화합물 118 7.7
화합물 149 4.7
화합물 150 4.4
화합물 152 4.1
화합물 155 14.2
화합물 156 11.4
화합물 157 8.6
화합물 158 18.7
화합물 159 16.1
화합물 160 8.2
화합물 165 38.3
화합물 169 4.8
화합물 170 27.3
화합물 172 8.2
화합물 173 12.5
화합물 174 3.5
화합물 176 12.1
화합물 180 9.7
화합물 183 8.0
화합물 188 16.9
화합물 189 15.3
화합물 193 33.7
화합물 201 4.1
화합물 207 49.0
화합물 208 24.1
화합물 214 47.3
화합물 219 66.4
화합물 220 26.2
화합물 227 4.01
화합물 228 5.7
화합물 229 38.1
화합물 233 0.96
화합물 234 1.6
화합물 235 2.2
화합물 237 112.1
화합물 239 33.7
화합물 240 4.0
화합물 242 4.7
화합물 243 89.0
화합물 245 20.8
화합물 248 15.5
화합물 249 13.5
화합물 250 40.8
화합물 258 9.9
화합물 267 3.0
화합물 268 2.8
화합물 269 6.2
화합물 273 1.8
화합물 274 1.3
화합물 275 0.8
화합물 276 0.7
화합물 277 1.2
화합물 278 0.9
화합물 279 2.2
화합물 280 2.1
화합물 281 1.5
화합물 282 3.5
화합물 283 9.9
화합물 284 4.2
화합물 285 5.0
화합물 286 10.3
화합물 291 1.6
화합물 292 1.8
화합물 293 1.6
화합물 294 4.1
화합물 295 2.1
화합물 296 2.1
화합물 297 9.6
Selpercatinib(LOXO-292) 43.2
Cabozantinib 325.5
상기 키나아제 및 세포 시험 결과로부터 알 수 있는 바, 본 발명의 화합물, 특히 상기 실시예 화합물은 RET-wt, RET V804M 및 RET G810R 모두에 대해 우수한 억제 활성을 갖는다. 여기서, RET-wt 및 RET V804M에 대한 화합물 3, 화합물 4, 화합물 11, 화합물 39, 화합물 40, 화합물 41, 화합물 42, 화합물 44, 화합물 46 및 화합물 88의 억제 활성은 모두 Cabozantinib(카보잔티닙)보다 현저히 우수하다. RET G810R에 대한 화합물 3, 화합물 4, 화합물 11, 화합물 12, 화합물 15, 화합물 17, 화합물 31, 화합물 33, 화합물 34, 화합물 39, 화합물 40, 화합물 41, 화합물 42, 화합물 43, 화합물 44, 화합물 46, 화합물 48, 화합물 51, 화합물 55, 화합물 59, 화합물 88, 화합물 89, 화합물 91, 화합물 101, 화합물 102, 화합물 103, 화합물 104, 화합물 107, 화합물 114, 화합물 118, 화합물 149, 화합물 150, 화합물 152, 화합물 155, 화합물 156, 화합물 157, 화합물 158, 화합물 159, 화합물 160, 화합물 165, 화합물 169, 화합물 170, 화합물 172, 화합물 173, 화합물 174, 화합물 176, 화합물 180, 화합물 183, 화합물 188, 화합물 189, 화합물 193, 화합물 201, 화합물 208, 화합물 220, 화합물 227, 화합물 228, 화합물 229, 화합물 233, 화합물 234, 화합물 235, 화합물 239, 화합물 240, 화합물 242, 화합물 245, 화합물 248, 화합물 249, 화합물 258, 화합물 267, 화합물 268, 화합물 269, 화합물 273, 화합물 274, 화합물 275, 화합물 276, 화합물 277, 화합물 278, 화합물 279, 화합물 280, 화합물 281, 화합물 282, 화합물 283, 화합물 284, 화합물 285, 화합물 286, 화합물 291, 화합물 292, 화합물 293, 화합물 294, 화합물 295, 화합물 296, 화합물 297의 억제 활성은 또한 Cabozantinib(카보잔티닙) 및 Selpercatinib(셀퍼카티닙, LOXO-292)보다 현저히 우수하다.
특히 RET G810R에 대한 화합물 3, 화합물 4, 화합물 11, 화합물 12, 화합물 15, 화합물 17, 화합물 31, 화합물 33, 화합물 40, 화합물 41, 화합물 42, 화합물 43, 화합물 44, 화합물 46, 화합물 48, 화합물 89, 화합물 91, 화합물 102, 화합물 114, 화합물 174, 화합물 233, 화합물 234, 화합물 235, 화합물 267, 화합물 268, 화합물 269, 화합물 273, 화합물 274, 화합물 275, 화합물 276, 화합물 277, 화합물 278, 화합물 279, 화합물 280, 화합물 281, 화합물 282, 화합물 291, 화합물 292, 화합물 293, 화합물 295, 화합물 296, 화합물 297의 억제 활성은 Selpercatinib(셀퍼카티닙, LOXO-292) 활성보다 10배 이상 높다. 따라서 본 발명의 화합물은 Selpercatinib(셀퍼카티닙, LOXO-292)과 같은 선택적 RET 억제제 치료 후 생성되는 용매 프론트 G810 약제 내성 돌연변이에 현저한 영향을 미치므로, 선택적 RET 억제제에 대한 약제 내성이 발생한 환자의 치료에 사용될 것으로 예상된다.
상기에서는 본 발명의 예시적인 실시형태를 설명하였으나, 본 발명의 보호범위는 상기 실시형태에 한정되지 않음을 이해해야 한다. 본 발명의 사상 및 원칙 내에서 진행한 임의의 수정, 등가적 대체, 개선 등은 모두 본 발명의 보호범위 내에 속해야 한다.

Claims (10)

  1. 하기 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염으로서,

    I
    상기 식에서, Q는 또는 로부터 선택되며,
    X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 CR1 또는 N으로부터 선택되며;
    X8은 CR1R1' 또는 NR1로부터 선택되고;
    각각의 R1 및 R1'은 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, 비치환되거나 선택적으로 Ra로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되며;
    A는 H, 할로겐, CN, OH, NH2, 비치환되거나 선택적으로 Rb로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
    D, E는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, B(OH)2, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7, -O-R21, C(O)OR22, -P(O)R23R24, 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, NH2로부터 선택되되, 조건은 D 및 E 중 적어도 하나는 H가 아니고, 예를 들어 D 및 E 중 적어도 하나는 -O-R21로부터 선택되거나 D 및 E 중 적어도 하나는 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, NH2로부터 선택되는 것이며;
    R21, R22, R23, R24는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rd로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴로부터 선택되며;
    G는 할로겐, 비치환되거나 선택적으로 Re로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 적어도 하나의 헤테로원자가 N으로부터 선택된 5-20원 헤테로아릴, 적어도 하나의 헤테로원자가 N으로부터 선택된 3-20원 헤테로시클릴, C3-40 시클로알킬-NH-;로부터 선택되고;
    K는 부재, H, 할로겐, CN, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되며;
    각각의 R2는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, -C(O)R4, -S(O)2R6으로부터 선택되며;
    각각의 R3은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, -C(O)R4, -S(O)2R6으로부터 선택되고;
    또는, R2 및 R3은 연결된 N 원자와 함께 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 5-20원 헤테로아릴 또는 3-20원 헤테로시클릴을 형성하며;
    각각의 R4는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3으로부터 선택되며;
    각각의 R5는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬카르보닐, C2-40 알케닐카르보닐, C2-40 알키닐카르보닐, C3-40 시클로알킬카르보닐, C3-40 시클로알케닐카르보닐, C3-40 시클로알키닐카르보닐, C6-20 아릴카르보닐, 5-20원 헤테로아릴카르보닐, 3-20원 헤테로시클릴카르보닐로부터 선택되며;
    각각의 R6은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3으로부터 선택되며;
    각각의 R7은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴로부터 선택되며;
    m은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8이고;
    각각의 R01, R02, R03, R04는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Rg로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
    각각의 Ra, Rb, Rc, Rd, Re, Rf는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Rg로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
    각각의 Rg는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Rh로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되거나; 또는, 시클릭기(C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, 3-20원 헤테로시클릴 등을 포함하나 이에 한정되지 않음)의 상이한 위치가 2개 이상의 치환기에 의해 치환되는 경우, 상기 치환기 중 2개는 상기 시클릭기와 가교 고리를 형성할 수도 있되, 상기 가교 고리 중 가교 헤드 원자를 제외한 가교 원자는 CH2, O, NH로부터 선택되는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 2가 기를 포함할 수 있고;
    각각의 Rh는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로 Ri로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
    각각의 Ri는 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 할로겐, CN, OH, SH, 옥소(=O), NO2, 비치환되거나 선택적으로Rj로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-40 알킬, C2-40 알케닐, C2-40 알키닐, C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, C6-20 아릴, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴, C1-40 알킬옥시, C2-40 알케닐옥시, C2-40 알키닐옥시, C3-40 시클로알킬옥시, C3-40 시클로알케닐옥시, C3-40 시클로알키닐옥시, C6-20 아릴옥시, 5-20원 헤테로아릴옥시, 3-20원 헤테로시클릴옥시, C6-20 아릴C1-40 알킬, 5-20원 헤테로아릴 C1-40 알킬, 3-20원 헤테로시클릴 C1-40 알킬, -NR2R3, -C(O)R4, -OCR5, -S(O)2R6, OS(O)2R7로부터 선택되고;
    또는, 시클릭기(C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, 3-20원 헤테로시클릴 등을 포함하나 이에 한정되지 않음)의 상이한 위치가 2개 이상의 치환기에 의해 치환되는 경우, 상기 치환기 중 2개는 상기 시클릭기와 가교 고리를 형성할 수도 있되, 상기 가교 고리 중 가교 헤드 원자를 제외한 가교 원자는 CH2, O, NH로부터 선택되는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 2가 기를 포함할 수 있고;
    또는, 1개의 원자(예: 탄소 원자 또는 질소 원자)가 2개 이상의 치환기에 의해 치환되는 경우, 상기 치환기 중 2개는 이들이 공동으로 연결된 원자와 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 시클릭기(비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C3-40 시클로알킬, C3-40 시클로알케닐, C3-40 시클로알키닐, 5-20원 헤테로아릴, 3-20원 헤테로시클릴 등을 포함하나 이에 한정되지 않음)를 형성할 수도 있는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  2. 제1항에 있어서,
    X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 CR1 또는 N으로부터 선택되며; 예를 들어, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7 중 적어도 하나는 N이고;
    X8은 CR1R1' 또는 NR1로부터 선택되고;
    각각의 R1 및 R1'은 동일하거나 상이하며, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, OH, C1-6 알킬, C3-10 시클로알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되고;
    A는 H, 할로겐, CN, OH, C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되며;
    D, E는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, 할로겐, CN, 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 NH2 또는 -O-R21로부터 선택되되, 조건은 D 및 E 중 적어도 하나는 H가 아니고, 예를 들어 D 및 E 중 적어도 하나는 -O-R21 또는 비치환되거나 선택적으로 Rc로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 NH2로부터 선택되는 것이며;
    R21은 비치환되거나 선택적으로 Rd로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-6 알킬로부터 선택되고;
    R2 및 R3은 연결된 N 원자와 함께 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 5-20원 헤테로아릴 또는 3-20원 헤테로시클릴, 예를 들어 5, 6 또는 7원 헤테로아릴 또는 3, 4, 5, 6 또는 7원 헤테로시클릴을 형성하며;
    각각의 R01, R02, R03, R04는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 H, C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되며;
    각각의 Ra, Rb, Rc, Rd, Re, Rf는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 할로겐, NH2, CN, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rg로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시, C3-10 시클로알킬, C3-10 시클로알킬옥시, C2-6 알키닐옥시, 3-8원 헤테로시클릴, 3-8원 헤테로아릴로부터 선택되며;
    각각의 Rg는 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 OH, 할로겐 또는 C3-10 시클로알킬로부터 선택되며;
    G는 할로겐, C3-10 시클로알킬, C3-10 시클로알킬-NH-, C6-14 아릴, 5-14원 헤테로아릴, 3-12원 헤테로시클릴, 예를 들어 모노시클릭, 바이시클릭, 트리시클릭 또는 가교 고리 구조를 갖는 6-12원 헤테로시클릴로부터 선택되고, N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 포함할 수 있되, 조건은 그 중 적어도 하나의 헤테로원자는 N으로부터 선택되며, 예를 들어 1, 2 또는 3개의 헤테로원자는 N으로부터 선택되는 것이며;
    K는 -C1-6 알킬-C3-10 시클로알킬, -C1-6 알킬-C6-14 아릴, -C1-6 알킬-5-14원 헤테로아릴, -C1-6 알킬-3-10원 헤테로시클릴, -C(O)NH2, -C(O)-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C6-14 아릴, -C(O)-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-3-10원 헤테로시클릴, -C(O)-C1-6 알킬-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C1-6 알킬-C6-14 아릴, -C(O)-C1-6 알킬-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-C1-6 알킬-3-10원 헤테로시클릴로부터 선택되되, 상기 C3-10 시클로알킬, C6-14 아릴, 5-14원 헤테로아릴, 3-10원 헤테로시클릴, -C(O)-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C6-14 아릴, -C(O)-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-3-10원 헤테로시클릴, -C(O)-C1-6 알킬-C3-10 시클로알킬, -C(O)-C1-6 알킬-C6-14 아릴, -C(O)-C1-6 알킬-5-14원 헤테로아릴, -C(O)-C1-6 알킬-3-10원 헤테로시클릴의 시클릭기 또는 비시클릭기, 또는 -C(O)NH2는 또한 선택적으로 OH, 할로겐, CN, C1-6 알킬, C1-6 알킬옥시로부터 선택되는 1개, 2개 또는 그 이상의 기에 의해 치환되고; 상기 헤테로시클릴은 피리딜(예를 들어, 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리딘-5-일, 피리딘-6-일)일 수 있으며, 아릴은 페닐일 수 있고;
    또는, K는 부재, H, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 페닐-C(O)-, 페닐-C(O)-NH-, 페닐-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 페닐옥시-C(O)-NH-, 페닐알킬-NH-C(O)-, 페닐알킬-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-, 피리딜-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 피리딜옥시-C(O)-NH-, 피리딜알킬-NH-C(O)-, 피리딜알킬-C(O)-NH-, 피롤리디닐-C(O)-NH-, 피롤리디닐옥시-C(O)-NH-, C1-6 알킬-C(O)-, C1-6 알킬-C(O)-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬옥시-C(O)-NH-, 피리딜-NH-C(O)-, C1-6 알킬-NH-C(O)-, C3-8 시클로알킬-NH-C(O)-, 피리딜옥시-, 피리딜알킬옥시-, 피리딜옥시알킬-, 페닐옥시-, 페닐알킬옥시-, 페닐옥시알킬-, C1-6 알킬-S(O)2-, C1-6 알킬-S(O)2-NH-, C1-6 알킬-NH-S(O)2-, 피리딜 C1-6 알킬-, 피리딜-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-S(O)2-, 피리딜-S(O)2-NH-, 피리딜-NH-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-NH-, 페닐 C1-6 알킬-, 페닐-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-S(O)2-, 페닐-S(O)2-NH-, 페닐-NH-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-, , 로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7은 동일하거나 상이하고, 서로 독립적으로 CH 또는 N으로부터 선택되며; 예를 들어, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7 중 적어도 하나는 N이고;
    X8은 NR1로부터 선택되며;
    R01은 메톡시이고;
    R02는 H이며;
    R03은 메틸이고;
    R04는 H이며;
    R1은 H이고;
    A는 H, NH2, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필로부터 선택되며;
    E는 H, NH2로부터 선택되고;
    D는 할로겐, BnO-, H, CN, NH2, OCH3, COOH, B(OH)2,


    ,
    , , ,
    , , , , , , ,
    , , 으로부터 선택되며;
    G는 F, 비치환되거나 선택적으로 Re로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 로부터 선택되며;
    바람직하게는, 기 G가 Re에 의해 치환되는 경우, Re는 기 G를 구성하는 -CH2-, -CH= 상의 H를 치환하여 예를 들어 , , , , 로부터 선택된 기를 형성할 수 있으며;
    K는 부재, H, OH, 비치환되거나 선택적으로 Rf로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 그 이상의 치환기에 의해 치환된 페닐-C(O)-, 페닐-C(O)-NH-, 페닐-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 페닐옥시-C(O)-NH-, 페닐알킬-NH-C(O)-, 페닐알킬-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-, 피리딜-C(O)-NH-, 피리딜-C(O)-NH-C1-6 알킬-, 피리딜옥시-C(O)-NH-, 피리딜알킬-NH-C(O)-, 피리딜알킬-C(O)-NH-, 피롤리디닐-C(O)-NH-, 피롤리디닐옥시-C(O)-NH-, C1-6 알킬-C(O)-, C2-6 알케닐-C(O)-, C, C1-6 알킬-C(O)-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬-C(O)-NH-, C3-8 시클로알킬옥시-C(O)-NH-, 피리딜-NH-C(O)-, C1-6 알킬-NH-C(O)-, C3-8 시클로알킬-NH-C(O)-, 피리딜옥시-, 피리딜알킬옥시-, 피리딜옥시알킬-, 페닐옥시-, 페닐알킬옥시-, 페닐옥시알킬-, C1-6 알킬-S(O)2-, C1-6 알킬-S(O)2-NH-, C1-6 알킬-NH-S(O)2-, 피리딜 C1-6 알킬-, 피리딜-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-S(O)2-, 피리딜-S(O)2-NH-, 피리딜-NH-S(O)2-, 피리딜-C1-6 알킬-NH-, 페닐 C1-6 알킬-, 페닐-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-S(O)2-, 페닐-S(O)2-NH-, 페닐-NH-S(O)2-, 페닐-C1-6 알킬-NH-, C1-6 알킬옥시-C(O)-, , , , , , , , 로부터 선택되고;
    바람직하게는, 상기 식 I로 표시되는 화합물은 하기 식 II, III, IV 또는 V로 표시되는 구조를 가지며:

    II III

    IV V
    상기 식에서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, R01, R02, R03, R04, A, D, E, G, K, m은 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 정의를 갖는 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 I 화합물은 하기 화합물로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염:

























  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 식 I 화합물의 제조 방법으로서,
    하기 단계를 포함하되:

    A, D, E, Q, G, K, X5, X6, X7, X8은 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 정의를 갖고; L1은 이탈기로부터 선택되며;
    또는, 상기 제조 방법은 하기 단계를 포함하되:

    A, D, E, Q, G, K, X5, X6, X7, X8은 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 정의를 갖고; L2는 이탈기로부터 선택되며;
    또는, 상기 제조 방법은 하기 단계를 포함하되:

    A, D, E, Q, G, K, X5, X6, X7, X8은 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 정의를 갖고; L3은 이탈기로부터 선택되며;
    또는, 상기 제조 방법은 보호기에 의해 치환된 식 I 화합물을 상기 보호기를 제거하는 조건에서 반응시켜 식 I 화합물을 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 식 I 화합물의 제조 방법.
  6. 식 II 화합물의 제조 방법으로서,
    상기 제조 방법은, 식 II-1 화합물을 화합물 R21-L과 반응시켜 식 II 화합물을 얻는 단계를 포함하되:

    A, E, G, K, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, R21은 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 정의를 갖고; D는 -O-R21로부터 선택되며; L은 이탈기로부터 선택되고;
    바람직하게는, 식 II-1 화합물의 제조 방법은 식 II-2 화합물의 반응을 통해 식 II-1 화합물을 제조하는 단계를 포함하되:

    A, D, E, G, K, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8은 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 정의를 갖는 식 II 화합물의 제조 방법.
  7. 화합물로서,
    제5항에서 식 I-1, 식 I-2, 식 I-3으로 표시되는 화합물, 또는 제6항에서 식 II-1 또는 식 II-2로 표시되는 화합물로부터 선택되는 화합물.
  8. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 식 I로 표시되는 화합물을 제조하기 위한 제7항에 따른 화합물의 용도.
  9. 약학 조성물로서,
    식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나, 예를 들어 치료 유효량의 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 식 I로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물 또는 약학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택된 적어도 하나를 포함하고;
    바람직하게는, 상기 약학 조성물은 담체 및/또는 부형제와 같은 1종, 2종 또는 그 이상의 약학적으로 허용 가능한 보조제를 더 포함하는 약학 조성물.
  10. 약물의 제조에 있어서 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 이의 입체 이성질체, 라세미체, 호변 이성질체, 동위원소 라벨, 질소산화물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염 중 적어도 하나의 용도로서,
    상기 약물은 RET 키나아제에 의해 매개되는 질환을 치료하고, RET 키나아제 활성을 억제하며, 암을 치료하거나 및/또는 특정 암 관련 전이를 억제하고, 과민성 대장증후군(IBS) 또는 IBS 관련 통증을 치료하며, 암 환자에게 지지적 케어를 제공하고, RET 관련 질환 또는 병증을 치료하며, 항암 약물에 대한 획득 저항성을 역전 또는 예방하고, 개체에서 항암 약제 내성 진행을 지연 및/또는 예방하며, 항암 약물 진행 저항성에 대한 가능성을 증가시키기 위한 것이고;
    바람직하게는, 상기 지지적 케어에는 설사와 같은 치료(화학 요법 치료 포함)와 관련된 위장 병증의 예방 또는 최소화가 포함되며;
    바람직하게는, 상기 RET 관련 질환 또는 병증은 RET 유전자 및/또는 RET 키나아제에 의해 매개되는 질환으로부터 선택되되, RET, RET 유전자 또는 RET 키나아제는 RET-wt, V804M, V804L, V804E, G810R,G810S, G810C, G810V 및 S904F를 포함하나 이에 한정되지 않는 RET 유전자 또는 RET 키나아제로부터 선택되고;
    바람직하게는, 상기 암은 혈액암 또는 고형 종양으로부터 선택되는 용도.
KR1020237028014A 2021-02-08 2022-01-24 질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물,제조 방법 및 용도 KR20230136766A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110172167 2021-02-08
CN202110172167.6 2021-02-08
PCT/CN2022/073467 WO2022166642A1 (zh) 2021-02-08 2022-01-24 含氮多环稠环类化合物，其药物组合物、制备方法和用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230136766A true KR20230136766A (ko) 2023-09-26

Family

ID=82740872

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237028014A KR20230136766A (ko) 2021-02-08 2022-01-24 질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물,제조 방법 및 용도

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20240174674A1 (ko)
EP (1) EP4289428A1 (ko)
JP (1) JP2024505711A (ko)
KR (1) KR20230136766A (ko)
CN (1) CN114907338B (ko)
TW (1) TWI818424B (ko)
WO (1) WO2022166642A1 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220042293A (ko) * 2019-08-05 2022-04-05 베이징 즈지엔진루이 셩우이야오 커지 요우시엔공스 질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물, 제조 방법 및 용도
TWI818424B (zh) * 2021-02-08 2023-10-11 大陸商北京志健金瑞生物醫藥科技有限公司 含氮多環稠環類化合物，其藥物組合物、製備方法和用途

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2887881B1 (fr) * 2005-07-01 2009-10-09 Pierre Fabre Medicament Sa Inhibiteurs de proteines kinases
PT3322706T (pt) * 2015-07-16 2021-03-08 Array Biopharma Inc Compostos de pirazolo[1,5-a]piridina substituídos como inibidores da quinase do ret
TWI704148B (zh) * 2016-10-10 2020-09-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ｒｅｔ激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
CN110267960B (zh) * 2017-01-18 2022-04-26 阿雷生物药品公司 作为RET激酶抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡嗪化合物
CN114380825B (zh) * 2018-09-30 2024-02-13 北京志健金瑞生物医药科技有限公司 取代吡唑稠环类衍生物及其制备方法和应用
KR20210100155A (ko) * 2018-12-07 2021-08-13 선샤인 레이크 파르마 컴퍼니 리미티드 Ret 억제제, 이의 약학 조성물 및 용도
CA3137887A1 (en) * 2019-05-14 2020-11-19 Yidong Su Inhibitor containing bicyclic derivative, preparation method therefor and use thereof
CN111961034A (zh) * 2019-05-20 2020-11-20 浙江同源康医药股份有限公司 用作ret激酶抑制剂的化合物及其应用
KR20220042293A (ko) * 2019-08-05 2022-04-05 베이징 즈지엔진루이 셩우이야오 커지 요우시엔공스 질소 함유 다환 축합 고리계 화합물, 이의 약학 조성물, 제조 방법 및 용도
TWI818424B (zh) * 2021-02-08 2023-10-11 大陸商北京志健金瑞生物醫藥科技有限公司 含氮多環稠環類化合物，其藥物組合物、製備方法和用途
CN115594678A (zh) * 2021-07-09 2023-01-13 北京志健金瑞生物医药科技有限公司（Cn） 含氮多环稠环类化合物的制备方法及其中间体和用途

Also Published As

Publication number Publication date
EP4289428A1 (en) 2023-12-13
US20240174674A1 (en) 2024-05-30
CN114907338B (zh) 2024-02-06
TWI818424B (zh) 2023-10-11
WO2022166642A1 (zh) 2022-08-11
JP2024505711A (ja) 2024-02-07
CN114907338A (zh) 2022-08-16
TW202237607A (zh) 2022-10-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102558066B1 (ko) Tam 억제제로서 피롤로트리아진 화합물
WO2020216371A1 (zh) Egfr抑制剂及其应用
RU2638116C2 (ru) Пиразоло[3,4-с]пиридины и способы их применения
CN110964008B (zh) 取代吡唑稠环类衍生物及其制备方法和应用
CN107857755B (zh) 作为trka激酶抑制剂的n-吡咯烷基、n′-吡唑基-脲、硫脲、胍和氰基胍化合物
WO2020239077A1 (zh) 含氮杂环类衍生物调节剂、其制备方法和应用
CN110382499B (zh) Fgfr抑制剂及其应用
BR112020019385A2 (pt) Inibidores de shp2 fosfatase e métodos de uso dos mesmos
KR20220100879A (ko) Fgfr 저해제로서의 이환식 헤테로사이클
KR20160094381A (ko) 신규 카르복스아미드, 그의 제조 방법, 그를 포함하는 제약 제제, 및 의약을 제조하기 위한 그의 용도
JP2023510929A (ja) ヘテロアリール誘導体、その製造方法およびその使用
BR112016016289B1 (pt) Heteroaris e usos dos mesmos
TW201838981A (zh) 嘧啶基-吡啶氧基-萘基化合物以及治療ire1相關之疾病及病症的方法
TWI818424B (zh) 含氮多環稠環類化合物，其藥物組合物、製備方法和用途
WO2020078362A1 (zh) 一类咪唑并芳环类化合物的制备和应用
CN113490670B (zh) 含氮多环稠环类化合物,其药物组合物、制备方法和用途
AU2021361060A1 (en) Piperidinyl small molecule degraders of helios and methods of use
JP7493251B2 (ja) ピラゾール置換縮合環誘導体並びにその製造方法及び応用
CN116669769A (zh) Helios的哌啶基小分子降解剂和使用方法