KR20230124789A - 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 조성물 및 이의 다양한 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 제주조릿대 발효 추출물 및/또는 녹차 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로 항산화, 주름 개선, 미백 효과가 우수한 화장료 조성물 및 이의 제조방법을 제공할 수 있다.

Description

제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 조성물 및 이의 다양한 용도{Composition comprising Sasa quelpaertensis fermented extract and green tea fermented extract and various uses thereof}
본 발명은 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다. 구체적으로는 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 항산화, 주름 개선, 미백 효과가 우수한 화장료 조성물 및/또는 식품 조성물에 관한 것이다.
피부노화는 크게 두 가지 과정을 통해 발생하는데, 특별한 환경적 요인 없이 누구에게나 세월과 함께 일어나는 변화를 내인성 노화라 하고, 자외선 조사와 같은 환경요인에 장기간 노출되어 얼굴, 목, 손 등에 나타나는 변화를 광 노화(Photo aging) 혹은 외인성 노화라고 한다.
내인성 노화의 주원인은 우리 몸의 신진대사과정에서 만들어진 반응성 활성 산소 라디칼에 의하여 우리 몸의 구성 성분에 생기는 손상이 누적되기 때문이다. 반면에, 외인성 노화는 유해한 활성산소가 자외선에 의하여 만들어진다는 점에서 차이가 있다. 일단 활성산소가 만들어진 후 몸속에 있는 여러 가지 보호 장치에 의하여 효과적으로 제거되지 못하게 되면 일련의 염증반응이 일어나 피부 손상이 초래되며, 상기 피부 손상 중 대표적인 손상으로는 피부 주름형성이 있다.
피부 주름형성과 관련된 주요 기작은 피부가 대기오염, 자외선 노출, 스트레스 또는 질병 등의 유해환경으로부터 산화적 스트레스(oxidative stress)에 계속적으로 노출되어 체내의 라디칼이 증가되고, 진피의 결합조직인 콜라겐(collagen), 엘라스틴(elastin), 히아루론산(hyaluronic aicd) 등을 파괴하여 피부의 일정 부위 침하현상(주름)을 일으킬 수 있는 것으로 설명된다. 또한 이러한 기작들은 세포막의 지질 부분을 산화시켜 세포의 파괴 현상을 일으켜 피부염, 여드름 또는 피부암 등의 질병을 유발할 수 있다. 이외에도 라디칼은 멜라닌 형성과정에 관여하여 기미, 주근깨 및 주름생성의 원인이 되며, 피부의 톤도 어둡게 만드는 요인이 된다.
피부 주름개선, 미백, 항산화 효과 관련하여 다양한 종래기술들이 개시되어 있으나, 특히 본 발명과 관련된 종래 선행기술 중 녹차추출물을 이용한 화장료 조성물, 제주조릿대 추출물을 이용한 화장료 조성물 등이 개시되어 있다. 그러나 본 발명과 같이 발효시킨 녹차추출물, 제주조릿대 추출물에 대해서는 개시되어 있지 않다.
따라서 천연 유래의 추출물을 포함하고 미백, 항산화, 주름 개선 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하기 위해 본 발명을 완성하였다.
공개특허공보 제10-2013-0082194호 공개특허공보 제10-2007-0005049호
상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 본 발명은 항산화, 피부 주름 개선 및 미백 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하고자 한다.
또한, 상기 화장료 조성물의 제조방법을 제공하고자 한다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위해 본 발명은 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 상기 조성물의 다양한 용도를 제공한다.
또한, 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 식품 조성물 및 상기 조성물의 다양한 용도를 제공한다.
또한, 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 조성물의 제조방법을 제공한다.
상기 제주조릿대(Sasa quelpaertensis) 추출물은 제주조릿대 잎, 줄기 또는 열매 등을 포함하는 제주 조릿대 전체 또는 제주조릿대의 잎, 줄기 또는 열매 중 어느 하나에서 추출한 추출물 일 수 있고, 바람직하게는 잎 또는 가지 추출물일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 0.1~9.5 :0.1~9.5, 바람직하게는 0.5~7 : 3~9.5의 부피비, 더욱 바람직하게는 1~7 : 3~9의 부피비로 포함할 수 있다. 상기 범위를 벗어나는 경우, 항산화, 피부 주름 개선 또는 주름 예방, 미백의 효과가 감소될 수 있다.
본 발명에서의 주름 개선은 피부에 나타나는 주름을 개선 또는 주름 생성 억제 또는 예방을 모두 포함할 수 있고, 수분 부족, 상처에 의한 주름 등을 모두 포함한다. 또한, 상기 주름은 제한되는 것은 아니나, 일 예로 이마, 눈가, 입가 등에 나타나는 주름을 의미할 수 있다.
본 발명에서의 항산화는 산화를 방지하는 모든 작용을 의미할 수 있다. 구체적으로, 활성산소종(ROS) 제거, ABTS 및 DPPH 자유 라디칼 소거 작용 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서의 미백은 상기한 바와 같이, 티로시나아제를 저해하여 멜라닌 생성 억제를 통한 미백 효과를 포함한다. 구체적인 예로는 기미, 주근깨와 같이 색소 침착된 부위를 원래의 피부색으로 회복시켜주는 것뿐만 아니라 기존의 피부 톤 보다 더 밝아지는 것을 포함한다.
상기 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물은 효모균으로 발효시킨 것일 수 있다. 상기 효모균은 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 보우라디(Saccharomyces boulardii), 사카로마이세스 엘립소이드(Saccharomyces ellipsoids) 또는 스키조사카로마이세스 엘립소이드(Schzosaccharomyces ellipsoids) 중 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 사카로마이세스 세레비시애일 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 제한되는 것은 아니지만, 바람직하게는 항산화, 피부 주름개선 또는 주름 예방, 미백 중 어느 하나 이상의 용도일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물 이외에 당 업계에서 화장료 조성물을 제조할 때 통상적으로 사용하는 보존제, 안정화제, 계면활성제, 용해제, 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제 등을 추가적으로 더 포함할 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 크림, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디크림 및 팩으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 상기 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 주름 개선용, 항산화용 또는 미백용 식품 또는 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 식품 또는 건강기능식품 조성물은 당 업계에서 식품을 제조하기 위해 통상적으로 사용하는 향미제, 풍미제, 안정화제, 증점제, 방부제 등을 추가적으로 더 포함할 수 있고, 예를 들면 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말디톨, 전분, 알지네이트, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 말토덱스트린, 이산화규소, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 등일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 식품 또는 건강기능식품 조성물은 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 분말, 과립, 정제, 캡슐,과자, 등의 형태로 제조될 수 있다. 특히 이너뷰티용 식품으로도 활용할 수 있다.
본 발명에 따른 식품 또는 건강기능식품 조성물은 섭취 대상의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 투여시간, 유효성분의 함량, 질환의 중증도 등에 따라 적절하게 선택될 수 있고, 섭취 횟수는 1일 1회 또는 2회, 격일마다, 격주마다, 격월 등의 방식으로 섭취할 수 있다.
본 발명에 제주조릿대 발효 추출물 및/또는 녹차 발효 추출물의 제조 방법은 하기의 단계를 포함한다;
(a) 제주조릿대 및/또는 녹차를 열수추출하고 여과하여 추출액을 얻는 단계;
(b) 상기 추출액에 탄소원과 효모균을 접종하여 발효시키는 단계;
(c) 발효물에서 균을 제거하고 제주조릿대 추출물 및/또는 녹차 추출물을 얻는 단계.
상기 (a) 단계는 제주조릿대 및/또는 녹차를 물을 용매로 하여 열수 추출하는 단계이다. 이때, 제주조릿대와 녹차를 혼합하여 투여하는 경우 제주조릿대 : 녹차는 0.1~9.5 :0.1~9.5, 바람직하게는 0.5~7 : 3~9.5의 중량비, 더욱 바람직하게는 1~7 : 3~9의 중량비로 투여할 수 있다. 또한, 상기 제주조릿대 및/또는 녹차는 제한되는 것은 아니지만 바람직하게는 건조시킨 것일 수 있다.
상기 열수 추출은 50 내지 70℃, 바람직하게는 60℃에서 60 내지 120분, 바람직하게는 90분간 추출한다. 상기 온도가 50℃ 미만 또는 시간이 60분 미만이면 유효성분이 충분히 추출되지 않을 수 있고, 상기 온도가 70℃ 초과시 또는 시간이 120분 초과 시, 불순물이 함께 추출되거나 유효성분이 파괴될 수 있다.
상기 (b) 단계에서 탄소원은 제한되는 것은 아니나 당류일 수 있으며, 구체적으로 포도당, 과당, 갈락토스를 포함하는 단당류, 말토오스, 슈크로오스, 락토오스를 포함하는 이당류, 전분, 글리코겐, 식이섬유를 포함하는 다당류 또는 올리고당류일 수 있다.
상기 탄소원은 추출물 중량 대비 3~7중량%, 바람직하게는 5중량% 투여할 수 있다. 상기 범위 미만 투여하는 경우, 이후 접종되는 균주 활성이 저해될 수 있고, 상기 범위 초과 투여하는 경우 균주가 과활성될 수 있다.
효모균은 추출물 중량 대비 0.01 내지 5중량%, 바람직하게는 0.05 내지 1.5중량% 접종할 수 있다. 여기서, 0.01중량% 미만 시 발효가 잘 진행되지 않을 수 있으며, 5중량% 초과 시 발효가 과도하게 진행되어 효과를 나타내지 못할 수 있다.
발효는 상온(15~30℃)에서, 바람직하게는 25~28℃에서 2~5일 동안 발효시킨다. 상기 온도(15~30℃)를 벗어나면 발효가 잘되지 않을 우려가 있고, 상기 발효 기간(2~5일)을 벗어나는 경우 항산화, 피부 주름 개선, 미백의 효과가 감소될 수 있다.
본 발명은 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 포함하는 조성물 및 상기 조성물의 용도, 제조방법에 관한 것으로 항산화, 주름 개선, 미백 효과가 우수한 조성물의 다양한 용도 및 이의 제조방법을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 추출물의 DPPH 라디칼소거활성 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 추출물의 주름개선 효능 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 따른 추출물의 미백 효능 평가 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1 내지 4, 비교예 1 내지 3> 제주조릿대 및 녹차 발효 추출물 제조
1. 제주 조릿대 및 녹차 추출물의 제조
건조된 제주조릿대(잎, 가지 등을 포함한 제주조릿대 전체) 및 녹차 잎을 아래 표의 질량 비율로 혼합하고 정제수를 제주조릿대 및 녹차의 중량 대비 20배 부피로 가한 후, 60℃에서 90분 동안 열수 추출하여 제주조릿대와 녹차잎을 제거한 추출액을 얻었다.
비교예 1은 건조된 녹차 잎 및 제주조릿대를 7:3 비율로 혼합하여 상기의 방법으로 제조된 추출액이다.
2. 제주 조릿대 및 녹차 발효 추출물의 제조
상기 1에 따라 제조된 추출액에 탄소원(슈크로오스, 추출물 중량 대비 5중량%)과 효모균(사카로마이세스 세레비시에(Saccharomyces cerevisiae))을 추출물 중량 대비 0.1중량%를 접종하여 25~28℃에서 2~5일 발효시킨 후, 균을 제거하여 비교예 2 및 3, 실시예 1 내지 4의 제주조릿대 및 녹차 발효 추출물을 수득하였다.
구분 녹차잎 제주조릿대
비교예1 7 3
비교예2 10 -
비교예3 1 9
실시예1 3 7
실시예2 5 5
실시예3 7 3
실시예4 9 1
[실험예 1] 항산화 효과 (DPPH 라디칼소거활성)
자유라디칼 소거시험은 안정한 DPPH의 흡광도가 517 nm에서 최대 흡광도를 나타내는 것을 이용하며, 자유라디칼인 DPPH가 시료에 의해 소거되어 보라색에서 옅은 노란색이 될수록 즉, 자유라디칼 소거율이 증가될수록 상기 517 nm파장에서 흡광도가 줄어들게 됨을 응용하여 하기와 같은 검정시험방법에 의해 진행하였다.
먼저 300 uM 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl radical(DPPH, Sigma)용액 1 mL에 상기의 발효물 시료를 메탄올에 적당한 농도로 희석하여 1 mL를 혼합하고, 실온에서 15분간 방치한 후 microplate reader를 이용하여 517 nm파장에서 흡광도를 측정하였다.
상기 자유라디칼소거시험에서 대조군은 DPPH 1 ml과 메탄올 1 ml을 넣어 같은 방법으로 측정하였으며, 메탄올 1 ml과 시료 1 ml을 넣어 시료와 대조군에 대한 각각의 색 보정 값을 얻는 것으로 설정하였다.
실험결과는 하기 표 2와 도 1에 나타내었다.
농도 (%) 측정값
Control - 0.00 ± 0.91
비교예1 1.0 (%) 23.87 ± 0.23
비교예2 1.0 (%) 27.94 ± 0.35
비교예3 1.0 (%) 22.21 ± 3.01
실시예1 1.0 (%) 57.51 ± 4.66
실시예2 1.0 (%) 73.59 ± 3.53
실시예3 1.0 (%) 84.68 ± 0.77
실시예4 1.0 (%) 85.93 ± 1.05
실험결과, 비교예 1 내지 3 간에는 항산화 효과 차이가 크지 않았으나, 실시예 1은 비교예 1 내지 3 대비 2배이상, 실시예 4는 비교예 1 내지 3 대비 3배 이상 높게 나타났다.
[실험예 2] 주름개선 효능 평가 (Elastase inhibition assay)
탄력섬유인 엘라스틴을 분해하는 효소로 알려진 엘라스타아제(elastase)는 건강한 피부에서 낮은 농도로 존재하며, 피부 염증반응 시에는 엘라스타아제 농도가 급격히 증가하기도 한다. 이러한 엘라스타아제는 탄성 섬유단백질인 엘라스틴을 분해시켜 피부의 진피조직의 그물망을 끊어 줌으로서 주름생성의 주원인 효소로 알려져 있으며, 엘라스타아제 활성을 저하시킴으로써 피부노화를 억제할 수 있다. 따라서 엘라스타아제 활성 저해능력을 실험하여 추출물의 피부 주름개선 물질의 효력을 뒷받침할 수 있다. 엘라스타아제 저해 활성 측정은 기질로서 N-succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (sigma)를 사용하여 생성된 p-nitoanilide의 생성량을 측정하였다.
Elastase inhibition assay는 0.2M Tris-HCl buffer (pH8.0) 60 uL에 시료 20 uL를 가한 후, 기질을 20 uL 가하여 25℃에서 10분간 반응 후, 1 unit 엘라스타아제를 20 uL 가하였다. 반응 혼합물은 다시 25℃에서 15분간 반응 후, 냉침으로 반응을 중지시킨 후 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 실험결과는 하기 표 3과 도 2에 나타내었다. 대조군은 0.2M Tris-HCl buffer (pH8.0) 60 uL에 정제수 20uL를 넣어 같은 방법으로 측정하였다.
Elastase inhibition activity (%) = (1 - Asample/Acontrol)× 100
Asample = 시료 첨가구의 흡광도
Acontrol = 무첨가구의 흡광도
농도 (%) 측정값
Control - 0.00 ± 0.01
비교예1 2.5 (%) 5.58 ± 0.1
비교예2 2.5 (%) 0.65 ± 4.44
비교예3 2.5 (%) ND
실시예1 2.5 (%) 20.09 ± 0.1
실시예2 2.5 (%) 21.48 ± 0.01
실시예3 2.5 (%) 36.73 ± 0
실시예4 2.5 (%) ND
실험결과, 비교예 1 내지 3에서는 엘라스타아제 억제 효과가 낮게 나타났으나, 실시예 1 내지 3에서는 비교예 1 대비 4배 이상 높은 억제 효과를 나타내었다.
[실험예 3] 미백 효능 평가 (Tyrosinase inhibition assay)
멜라닌 합성과정에서의 핵심 효소인 티로시나아제(tyrosinase)의 저해활성을 평가하여 미백효과의 가능성을 유추할 수 있다. 티로신(Tyrosine)은 효소인 티로시나아제에 의하여 멜라닌 생성의 전구체가 되는 DOPA 와 dopaquinone으로 대사된다. 따라서 티로시나아제의 억제는 피부의 멜라닌 색소의 조절을 통하여 피부 미백 효과를 기대할 수 있다. dopachrome법을 이용하여 티로시나아제 억제 효과를 측정하였다. mushroom Tyrosinase -300 unit 50 uL와 1.5 mM L-tyrosine 25 uL, 또는 시료 75 uL를 혼합한 후 배양 전, 15분간 배양 후의 각각의 흡광도를 490 nm의 파장에서 측정하였고, 결과는 하기 표 4와 도 3에 나타내었다. 대조군은 mushroom Tyrosinase -300 unit 50 uL와 1.5 mM L-tyrosine 25 uL, 정제수 75 uL를 혼합하여 처리하였다.
Tyrosinase 억제활성 (%) = (1 - Asample/Acontrol)× 100
Asample = 시료 첨가구의 흡광도
Acontrol = 무첨가구의 흡광도
농도 (%) 측정값
Control - 0.00 ± 0.01
비교예1 5.0 (%) 8.12 ± 0.01
비교예2 5.0 (%) 19.08 ± 2.05
비교예3 5.0 (%) 8.33 ± 0.03
실시예1 5.0 (%) 26.1 ± 0.01
실시예2 5.0 (%) 34.19 ± 0.01
실시예3 5.0 (%) 41.03 ± 0.02
실시예4 5.0 (%) 40.03 ± 0.02
티로시나아제 억제율을 비교한 결과, 실시예 1 내지 4는 비교예 1 내지 3 대비 적게는 30%, 많게는 약 5배 이상 티로시나아제 억제율이 높게 나타났다. 특히, 발효시키지 않은 비교예 1과 발효시킨 실시예 3는 동일한 배합비임에도 불구하고 티로시나아제 억제율이 현저하게 높아 미백 효능이 뛰어난 것을 알 수 있다.

Claims (13)

  1. 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물을 함유하는 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 제주조릿대 발효 추출물 : 녹차 발효 추출물은 0.5~7 : 3~9.5의 부피비로 포함되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물은 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 보우라디(Saccharomyces boulardii), 사카로마이세스 엘립소이드(Saccharomyces ellipsoids) 또는 스키조사카로마이세스 엘립소이드(Schzosaccharomyces ellipsoids) 중 선택되는 어느 하나 이상의 효모균으로 발효시킨 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물 또는 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 미백용도인 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 주름 개선 또는 주름 예방 용도인 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 항산화 용도인 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. (a) 제주조릿대 및 녹차를 물을 용매로 하여 추출하고 여과하여 추출액을 얻는 단계;
    (b) 상기 추출액에 탄소원과 효모균을 접종하여 발효시키는 단계;
    (c) 발효물에서 균을 제거하고 제주조릿대 추출물 및 녹차 추출물을 얻는 단계;
    를 포함하는 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물의 제조방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 (a) 단계의 열수추출은 제주조릿대 및 녹차를 50 내지 70℃에서 60 내지 120분간 물을 용매로 하여 추출하는 것을 특징으로 하는 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물의 제조방법.
  10. 제8항에 있어서, 상기 (a) 단계에서 제주조릿대 : 녹차는 0.5~7 : 3~9.5의 중량비로 투여되는 것을 특징으로 하는 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물의 제조방법.
  11. 제8항에 있어서, 상기 (b) 단계의 탄소원은 포도당, 과당, 갈락토스, 말토오스, 슈크로스, 락토오스, 전분, 글리코겐, 식이섬유, 올리고당류 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출액 중량 대비 3 내지 7중량% 투여하는 것을 특징으로 하는 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물의 제조방법.
  12. 제8항에 있어서, 상기 (b) 단계의 효모균은 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 보우라디(Saccharomyces boulardii), 사카로마이세스 엘립소이드(Saccharomyces ellipsoids) 또는 스키조사카로마이세스 엘립소이드(Schzosaccharomyces ellipsoids) 중 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물의 제조방법.
  13. 제8항에 있어서, 상기 (b) 단계의 효모균은 제주조릿대 추출액 및 녹차 추출액의 중량 대비 0.01~5중량% 접종하여 25~28℃에서 2~5일 동안 발효시키는 것을 특징으로 하는 제주조릿대 발효 추출물 및 녹차 발효 추출물의 제조방법.
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