KR20230120939A - Nr 및 nad를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물 - Google Patents

Nr 및 nad를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20230120939A
KR20230120939A KR1020220017815A KR20220017815A KR20230120939A KR 20230120939 A KR20230120939 A KR 20230120939A KR 1020220017815 A KR1020220017815 A KR 1020220017815A KR 20220017815 A KR20220017815 A KR 20220017815A KR 20230120939 A KR20230120939 A KR 20230120939A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
nad
nicotinamide
composition
fermented yeast
supernatant
Prior art date
Application number
KR1020220017815A
Other languages
English (en)
Inventor
서정훈
정석근
안연진
박철오
장지영
정종훈
조상민
Original Assignee
제너럴바이오(주)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 제너럴바이오(주) filed Critical 제너럴바이오(주)
Priority to KR1020220017815A priority Critical patent/KR20230120939A/ko
Publication of KR20230120939A publication Critical patent/KR20230120939A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
    • C12N1/185—Saccharomyces isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/14—Yeasts or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/15—Vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/455—Nicotinic acids, e.g. niacin; Derivatives thereof, e.g. esters, amides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A61K8/673—Vitamin B group
    • A61K8/675—Vitamin B3 or vitamin B3 active, e.g. nicotinamide, nicotinic acid, nicotinyl aldehyde
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/70—Vitamins
    • A23V2250/704—Vitamin B
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C12N2500/38—Vitamins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/70—Undefined extracts
    • C12N2500/74—Undefined extracts from fungi, e.g. yeasts

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명에 따른 발효효모조성물 제조방법은, NAD 전구체인 니코틴아미드 리보사이드(nicotinamide riboside, NR)는 물론 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)를 다량 함유하고 있는 발효효모조성물을 제조할 수 있는 효능을 보유하고 있다.
본 발명에 따른 방법에 따라 제조된 발효효모조성물은 NR 및 NAD 함유 제제로 이용되어, 식품, 화장품 및 의약품 등에 포함될 수 있다.

Description

NR 및 NAD를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물{A method of manufacturing fermented compostion containg nicotinamide riboside and nicotinamide adenine dinucleotide, and the femented composition}
본 발명은 NR 및 NAD를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물에 관한 것이다.
사람의 피부는 나이를 먹으면서 노화 현상이 일어나고, 햇빛, 스트레스, 식생활 등의 여러가지 복합적인 요인에 의해 노화되는 속도가 영향을 받을 수 있다. 피부를 포함한 신체의 노화에 대한 메커니즘 중 하나로, 노화는 세포의 핵과 미토콘드리아 사이의 신호전달이 원활하지 못할 때 발생할 수 있다.
니코틴아미드 아데닌 다이뉴클레오티드(Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)는 이러한 핵과 미토콘드리아 사이의 활동을 조절하는 핵심분자로 신호를 전달할 수 있도록 하는 화학물질이다. NAD는 세포 호흡에 필수적인 화합물이며 에너지를 발생시키는 핵심적인 분자이고, 몸 전체에서 건강한 대사를 촉진하는 것으로 알려진 SIRT1단백질을 활성화시킨다.
최근 노화에 의해 세포내 NAD의 양이 감소할 수 있으며, NAD의 양적 증가가 노화를 방지할 수 있음이 보고된 바 있다. 특히 니코틴아미드 리보사이드(nicotinamide riboside, NR), 니코틴아미드 모노뉴클레오티드(nicotinamide mononucleotide, NMN)과 같은 NAD 전구체를 사용하여 부작용이 없으며, 세포 내에 적절한 양의 NAD의 생성을 유도함으로써 노화의 증상 및 징후 또는 피부 주름을 개선하고자 하는 방안들이 제시되고 있다.
그러나 지금까지의 NR 및 NAD는 천연에 거의 존재하지 않으며, 효소 합성 및 유기 합성 등을 통해서 만들어진다고 보고되고 있다.
선행기술문헌을 살펴보면, 대한민국 등록특허공보 10-2325437에 '니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드의 전구체를 포함하는 노화 방지용 조성물'이 기재되어 있다. 청구항 1에는, 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)의 전구체를 유효성분으로 포함하며, 상기 NAD의 전구체는 니코틴아미드 모노뉴클레오티드(Nicotinamide mononucleotide, NMN), 니코틴아미드 리보사이드(Nicotinamide riboside, NR), 니코틴산 모노뉴클레오티드(Nicotinic acid mononucleotide, NaMN), 니코틴산 아데닌 디뉴클레오티드(Nicotinic acid adenine dinucleotide, NaAD), 및 니코틴산(Nicotinic acid)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 포함하며, ATP의 생성을 증가시키거나 또는 ROS(Reactive oxygen species)의 생성을 감소시키는 노화 방지용 화장료 조성물'이 기재되어 있다.
또한, 대한민국 등록특허공보 10-2224032에 '피부노화 방지제 및 이를 포함하는 화장료 조성물'이 기재되어 있다. 청구항 1을 보면, 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(nicotinamide adenine dinucleotide) 전구체; 눈조류(snow algae); 가수분해 단백질로 코팅된 스피큘(spicule); 및 타우린을 포함하고, 상기 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 전구체:상기 눈조류:상기 스피큘:상기 타우린의 혼합 비율이 1:1 내지 50:1 내지 10:1의 중량비인 것인 피부노화 방지제'가 기재되어 있다.
대한민국 등록특허공보 10-2325437 (2021.11.05 등록) 대한민국 등록특허공보 10-2224032 (2021.03.02 등록)
해결과제는, 효소 합성 및 유기 합성 방법을 사용하지 않고, 효모 발효를 이용하여 NR 및 NAD가 다량 함유된 발효효모조성물을 제조하는 방법을 제공하는 것이다. 또한, 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물을 포함하는 NR 및 NAD 함유 제제를 제공하는 것이다.
해결수단은,
NA(nicotinic acid) 및 NAM(nicotinamide) 중 1종 이상을 배지에 첨가하는 단계; 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 포함하는 효모군에서 1종 이상의 효모를 배지에 접종하는 단계; 발효시킨 후 상등액과 균체를 분리하는 단계; 상등액 및 균체를 각각 건조 분말화하는 단계; 및 상등액 분말과 균체 분말을 혼합하여 NR(nicotinamide riboside) 및 NAD(nicotinamide adenine dinucleotide)를 함유한 발효효모조성물을 제조하는 단계;를 포함하는, 발효효모조성물의 제조방법이다.
상기에서, NA(nicotinic acid) 및 NAM(nicotinamide) 중 1종 이상은 5~10 mM로 배지에 첨가되고, 상기 1종 이상의 효모는 1~10% 인것을 특징으로 한다.
해결수단은,
상기 방법으로 제조된 발효효모조성물을 함유하는 NR 및 NAD 함유 제제이다.
해결수단은,
상기 NR 및 NAD 함유 제제를 포함하는 의약품 제제이다.
해결수단은,
상기 NR 및 NAD 함유 제제를 포함하는 식품 제제이다.
해결수단은,
상기 NR 및 NAD 함유 제제를 포함하는 화장품 제제이다.
본 발명에 따른 발효효모조성물 제조방법은, NAD 전구체인 니코틴아미드 리보사이드(nicotinamide riboside, NR)는 물론 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)를 다량 함유하고 있는 발효효모조성물을 제조할 수 있는 효능을 보유하고 있다.
본 발명에 따른 방법에 따라 제조된 발효효모조성물은 NR 및 NAD 함유 제제로 이용되어, 식품, 화장품 및 의약품 등에 포함될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 발효효모조성물 제조 방법을 공정 흐름도로 표시한 것이다.
본 명세서 및 청구 범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 안 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서 본 명세서에 기재된 실시예, 제조예, 참조예 및 도면에 기술된 사항은 본 발명의 가장 바람직한 일 예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
실험예 1. 발효효모조성물의 제조 및 NR 및 NAD 함량 분석
1) 발효효모조성물의 제조
도 1은 실험예 1에 따른 발효효모조성물 제조 방법을 공정 흐름도로 표시한 것이고, 아래의 표 1은 발효효모조성물 제조 방법을 정리한 것이다.
1 배지멸균 YPD 배지(Difco사, 10 g/L yeast extract, 20 g/L peptone, 20 g/L dextrose)배지 또는 단독 성 분 조합으로 제조된 배지에 일정량의 nicotinic acid, nicotinamide, nicotinic acid riboside를 첨가한 후, 121도에서 15분간 멸균한다.
2 접종 활성화시킨 Saccharomyces cerevisiae 1%~10%를 멸균 배지에 접종한다.
3 발효 25도, 150 rpm에서 24~72시간 발효한다.
4 실활 85도에서 30분간 실활한다.
5 원심분리 8,000 rpm, 15분간 원심분리하여 상등액과 pellet을 분리한다.
6 상등액 농축 상등액은 감압 농축하여 35 brix 용액으로 만든다.
7 분무 건조 Pellet에 증류수를 첨가하여 제조된 현탁액과 상등액 농축액을 각각 분무건조한다.
8 혼합 두 가지 분무건조물은 혼합기를 이용하여 균일하게 혼합한다.
1단계는, 배지에 NA(nicotinic acid), NAM(nicotinamide), NAR(nicotinic acid riboside)을 각각 첨가한후 멸균하는 단계이다.
2단계는, 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) 1%~10%를 멸균 배지에 접종하는 단계이다.
3 내지 5단계는, 발효, 실활시키고, 상등액과 균체를 분리하는 단계이다.
6 단계는, 상등액을 감압 농축하는 단계이다.
7 단계는, 상등액을 건조하여 분말화하고, 균체를 건조하여 분말화하는 단계이다.
8 단계는, 상등액 분말과 균체 분말을 혼합하여 발효효모조성물을 제조하는 단계이다.
2) 시료 전처리
발효효모조성물 시료 0.1 g을 취하여 80% 메탄올 1 mL를 첨가하고, 1분간 vortexing한다. 이어 약 10분간 sonication 한 후, 0.2 um 여과하여 분석 시료로 사용한다.
3) 기기분석 조건
시료에 존재하는 지표성분 분석을 위해 HPLC-MS/MS를 사용하였다. 분석은 Agilent HPLC 1200 series(Agilent, Santa Clara, CA, USA)가 연결된 6410 Triple quad를 사용하였으며 Column은 ACQUITY UPLC BEH Amide C18 Column(reversed-phased column, I.D. 2.1x50mm, particle size 1.7 um, Allentown, PA, USA)을 사용하였다. 이동상은 DW : 50 mM Ammonium formate in DW(pH 8.0) = 9 : 1 (A)과 ACN : 50 mM Ammonium formate in DW(pH 8.0) = 9 : 1 (B) 을 사용하였고, 표준품은 80% 메탄올에 녹인 후 희석하여 사용하였다.
유속은 0.5 mL/min이었으며, MS system의 이온화는 electrospray ionization (ESI) mode를 사용하였으며, MS 분석을 통해 그 분자량을 분석하였다.
scan range는 m/z 50-1500, scan time은 0.2 s, capillary voltage는 3.0 kV, sampling cone voltage는 30 V, desolvation gas flow는 650 L/h, cone gas flow는 150 L/h, desolvation temperature는 350℃, 그리고 ion source temperature는 150℃였다. MS/MS 분석은 collision energy ramp(10 eV)와 m/z 50-1500으로 실시하였다.
Gradient 조건은 아래의 표 2와 같다.
Time(min) Flow rate(mL/min) A(%) B(%)
0 0.5 0 100
0.5 0.5 0 100
4.0 0.5 60 40
4.5 0.5 60 40
6.0 0.5 0 100
10.0 0.5 0 100
4) 실험결과
아래의 표 3은 발효 조건별 NR 및 NAD 함량 분석을 나타낸다.
NA 첨가량
(mM)		 NAM 첨가량
(mM)		 NAR 첨가량
(mM)		 건조물 수득 수율(%) 건조물 내 NR 함량(ppm) 건조물 내 NAD 함량(ppm)
상등액 균체 상등액 균체 상등액 균체
1 - - 4.11 0.30 187 7.73 - 549
- 1 - 4.10 0.28 165 7.01 - 478
- - 1 3.98 0.27 - - - -
5 - - 2.85 1.15 255 12.75 - 1,194
- 5 - 2.60 1.04 214 11.43 - 994
- - 5 4.23 0.18 - - - -
10 - - 2.51 1.30 246 15.11 - 897
- 10 - 2.50 1.28 231 13.21 - 911
- - 10 4.55 0.09 - - - -
활성화시킨 효모를 멸균배지(YPD)에 1, 5, 10% 접종하여 생장을 확인한 결과, 5% 접종 및 48시간 배양시 배양액 상태, 균 생장 상태, 생산성, 단가 등을 고려할 때 가장 적합하였다(데이터 생략).
그래서 효모균 접종량을 5%로 고정시키고, NR 및 NAD의 전구체로 알려진 NA(nicotinic acid), NAM(nicotinamide), NAR(nicotinic acid riboside)를 일정량 YPD 배지에 혼합하여 발효를 진행하였다.
상기 결과와 같이, NA와 NAM를 5~10 mM로 하였을 때, 배양액과 균체 건조물에서 가장 높은 NR 및 NAD 함유량을 나타내었다. 또한, NAR 첨가에 의해서는 효모 생장을 억제하였기 때문에 첨가물로써 적당하지 않음을 확인하였다.
실험예 2. 발효효모조성물의 안정성 평가
수득된 배양액 분말과 균체 건조분말을 적정비율로 혼합하여, 원료에 NR 100 ppm, NAD 500 ppm (오차 10% 이내)가 함유되도록 제조하였다. 제조된 원료를 온도 조건별 저장기간 동안 함유한 후 NR 및 NAD 함량 변화를 확인한 결과는 표 4 내지 표 6과 같다. 표 4는 40℃, 표 5는 25℃, 표 6은 4℃ 조건이다.
보관기간(개월) 1 2 3 6 12
NR 함량(ppm) 98 92 85 71 59
NAD 함량(ppm) 497 451 421 374 286
보관기간(개월) 1 2 3 6 12
NR 함량(ppm) 98 97 92 89 85
NAD 함량(ppm) 497 491 484 475 461
보관기간(개월) 1 2 3 6 12
NR 함량(ppm) 98 96 93 92 87
NAD 함량(ppm) 497 488 485 479 460
안정성 평가 결과, 저온과 상온 4℃ ~ 25℃ 에서는 장기간 보관시 NR 및 NAD 함량이 소폭 감소되는 경향을 보였으나 1년 후에도 86~93% 정도 잔류하고 있는 것을 확인할 수 있었다. 단, 40도의 고온으로 보관된 시료에서는 6개월 이후부터 큰폭으로 감소되어 1년 후에는 57~60% 정도 잔류하고 있는 것을 확인할 수 있었다.
따라서 본 발명에 따른 발효효모조성물의 효능의 안정성은 저온과 상온에서 보관하여 장기 사용시에는 문제가 없다고 하겠다.
실시예 1. 발효효모조성물의 제조방법
실험예 1에서는 배지에 NA(nicotinic acid) 또는 NAM(nicotinamide)를 첨가하고 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 접종 발효시킨 후 상등액과 균체를 수득해서, 각각을 분말화하고 각 분말을 혼합한 발효효모조성물에는 NR 및 NAD 함유량이 높게 포함되어 있음을 확인하였다.
이에 따라 본 발명에 다른 제조방법에서는, 배지에 NA(nicotinic acid) 및 NAM(nicotinamide) 중 1종 이상을 첨가하는 것도 가능한 것을 알 수 있다.
또한, 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 단독 접종하는 것은 물론, S. cerevisiae 를 포함한 동일한 기능의 효모들 중에서 1종 이상을 접종하는 것도 가능한 것을 알 수 있다. 여기에서, 동일한 기능의 효모들은, 빵, 포도주를 제조하는 효모 또는 사카로마이세스 속에 포함된 유익한 효모들과 같이 본 발명의 목적에 어긋나지 않는 기능을 수행할 수 있는 효모들을 의미한다.
따라서 본 발명의 실시예 1에 따른 발효효모조성물의 제조방법은 다음의 단계를 포함한다.
1단계) 배지에 NA(nicotinic acid) 및 NAM(nicotinamide) 중 1종 이상을 첨가하여 멸균하는 단계
2단계) 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) 및 이와 동일한 기능의 효모들 중에서 1종 이상을 접종하는 단계
3단계) 발효시킨 후 상등액과 균체를 분리하는 단계
4단계) 상등액 및 균체를 각각 건조 분말화하는 단계
5단계) 상등액 분말과 균체 분말을 혼합하는 단계
각 단계별 세부 조건은 실험예 1에 근거하나 실험예 1의 목적에 어긋나지 않는 한도내에서 변경 가능하다.
실시예 2. 발효효모조성물을 유효성분으로 포함하는 NR 및 NAD 함유 제제
실험예 1에서 보듯이, 본 발명에 따른 발효효모조성물에는 NR 및 NAD가 함유되어 있어서, NR 및 NAD가 사용될 수 있는 각종 기능성 식품, 의약품, 화장품 등에 하나의 제제로서 이용될 수 있다. 특히, NR은 NAD의 전구체이므로 NAD의 함량을 보다 증진시킬 수 있는 장점을 보유하고 있다.
본 실시예에 따른 제제를 유효성분으로 포함하고 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제 등을 추가하여 약제학적 단위 투여형으로 제형화 된 노화 예방 또는 개선 제제를 제공할 수 있다. 여기에서, 담체, 부형제, 희석제로는 토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
또한 상기 약제학적 투여 형태는 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. 또한 상기 유효성분을 제제화 할 경우에는 통상적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면 활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 또한 상기 약제학적 투여 형태는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제, 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 경구 투여를 위한 고형 제제에는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분은 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
상기 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다. 상기 비 수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸 올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 제제의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 연령, 성별, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 제제는 0.001 내지 300 mg/kg으로 투여하는 것이 좋고, 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 추출물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하주사에 의해 투여될 수 있다.
실시예 3. 발효효모조성물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물
본 발명의 실시예 2에 따른 제제에 기타 화장품 첨가제를 추가하여 노화 예방 화장료 조성물을 제공할 수 있다. 예를 들어 크림제, 로션제, 젤제, 영양크림 등에 이용될 수 있는 다양한 제형의 조서물로 제공될 수 있다.
실시예 4. 발효효모조성물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물
본 발명의 실시예 2에 따른 제제에 식품 보조 첨가제를 추가하여 노화 예방 건강기능식품 조성물을 제공할 수 있다.
상기 유효성분을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.
식품 또는 음료 중의 상기 유효성분의 양은 전체 식품 또는 음료 중량의 0.01 내지 20 중량% 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ml를 기준으로 0.02 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.
건강 기능성 음료 조성물은 상기 제제를 함유하는 외의 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외에 향미제로써 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
본 발명의 제제 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그 밖에 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.

Claims (6)

  1. NA(nicotinic acid) 및 NAM(nicotinamide) 중 1종 이상을 배지에 첨가하는 단계;
    사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 포함하는 효모군에서 1종 이상의 효모를 배지에 접종하는 단계;
    발효시킨 후 상등액과 균체를 분리하는 단계;
    상등액 및 균체를 각각 건조 분말화하는 단계; 및
    상등액 분말과 균체 분말을 혼합하여 NR(nicotinamide riboside) 및 NAD(nicotinamide adenine dinucleotide)를 함유한 발효효모조성물을 제조하는 단계;를 포함하는, 발효효모조성물의 제조방법.
  2. 청구항 1에서,
    상기 NA(nicotinic acid) 및 NAM(nicotinamide) 중 1종 이상은 5~10 mM로 배지에 첨가되고, 상기 1종 이상의 효모는 1~10% 인것을 특징으로 하는, 발효효모조성물의 제조방법.
  3. 청구항 1 또는 2의 방법으로 제조된 발효효모조성물을 함유하는 NR 및 NAD 함유 제제.
  4. 청구항 3에 기재된 NR 및 NAD 함유 제제를 포함하는 의약품 제제.
  5. 청구항 3에 기재된 NR 및 NAD 함유 제제를 포함하는 식품 제제.
  6. 청구항 3에 기재된 NR 및 NAD 함유 제제를 포함하는 화장품 제제.
KR1020220017815A 2022-02-10 2022-02-10 Nr 및 nad를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물 KR20230120939A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220017815A KR20230120939A (ko) 2022-02-10 2022-02-10 Nr 및 nad를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220017815A KR20230120939A (ko) 2022-02-10 2022-02-10 Nr 및 nad를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230120939A true KR20230120939A (ko) 2023-08-17

Family

ID=87800613

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220017815A KR20230120939A (ko) 2022-02-10 2022-02-10 Nr 및 nad를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20230120939A (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102224032B1 (ko) 2020-08-27 2021-03-08 주식회사 에이치앤비나인 피부노화 방지제 및 이를 포함하는 화장료 조성물
KR102325437B1 (ko) 2014-10-23 2021-11-10 주식회사 엘지생활건강 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드의 전구체를 포함하는 노화 방지용 화장료 조성물

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102325437B1 (ko) 2014-10-23 2021-11-10 주식회사 엘지생활건강 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드의 전구체를 포함하는 노화 방지용 화장료 조성물
KR102224032B1 (ko) 2020-08-27 2021-03-08 주식회사 에이치앤비나인 피부노화 방지제 및 이를 포함하는 화장료 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101374026B1 (ko) 곰팡이와 유산균으로 동시 발효하여 생물전환 사포닌이증가된 삼 발효물
EP2623107B1 (en) Arctigenin-containing bardanae fructus extract and method for producing same
KR101974442B1 (ko) 사이클로덱스트린을 포함하는 카테킨 생체 이용률 증진제
EP3135682B1 (en) Glycosyl hesperetin composition and process for producing the same
KR101440685B1 (ko) 신바이오틱스를 이용한 인삼 사포닌 흡수 촉진용 조성물
KR20230134112A (ko) 흑삼 추출물 및 흑삼에서 분리한 화합물을 유효성분으로 포함하는 반려견의 면역력 증진용 조성물
KR20230120939A (ko) Nr 및 nad를 함유한 발효효모조성물 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효효모조성물
KR102507651B1 (ko) 전통주 효모 함유 천연발효효소복합액을 이용한 숙취해소, 알콜성간질환 또는 간기능 개선용 멀꿀발효물과 그 제조방법
KR102554508B1 (ko) 경구 미용제
JP2007131599A (ja) グリケーション抑制能を有する植物抽出物及びその製造方法
JP2007131599A6 (ja) グリケーション抑制能を有する植物抽出物及びその製造方法
KR20140088969A (ko) 갈근엑스 발효물을 함유한 간손상 보호용 조성물
KR20160122423A (ko) 항염증 또는 항산화 활성이 증가된 구기자 증숙 및 발효추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조방법.
KR20160114841A (ko) 두충피 추출물 또는 이로부터 분리한 아디포넥틴을 유효성분으로 포함하는 비만 개선 또는 치료용 조성물
KR101855837B1 (ko) 미세조류를 포함하는 식품조성물 및 그 제조방법
KR20230080791A (ko) 고함량 니코틴아미드 모노뉴클레오티드를 함유한 아보카도 추출물 제조방법
KR101908727B1 (ko) 항산화 성분이 증가된 상백피의 제조방법
KR102688684B1 (ko) 흑삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 반려동물의 면역력 증진용 조성물
KR102557702B1 (ko) 아로니아 식초를 포함하는 항염증용 조성물
JP7262760B2 (ja) シワ予防・改善用の医薬品、医薬部外品、化粧料又は飲食品組成物
KR102416208B1 (ko) 발효된 선복화 추출물을 포함하는 항인플루엔자 바이러스용 조성물
KR20170074027A (ko) 양파 유래 퀘세틴 비배당체의 제조방법
KR101991746B1 (ko) 카테킨 생체 이용률 증진제
KR101882791B1 (ko) 안토시아닌이 포함된 자색옥수수 추출물을 함유하는 숙취해소용 식품 조성물
KR20150119530A (ko) 백리향 지상부의 메탄올 추출물을 함유하는 항세균 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal