KR20230106452A - 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물 등에 관한 것이다. 본 발명에 따른 참꽃마리 추출물은 DPPH 라디칼, ABTS 라디칼, 및 TBARs를 저해하고 PF를 증가시킴으로써 항산화 효과를 가지며, 히알루로니다제를 저해함으로써 항염증 효과를 나타낸다. 또한, 참꽃마리 추출물은 엘라스타제 또는 콜라게나제를 저해함으로써 주름예방 및 개선 효과를 가지고, 티로시나제를 저해함으로써 피부미백 효과를 나타내는 바, 상기와 같은 생리활성을 가지는 약학적 조성물, 식품 조성물, 또는 화장료 조성물 등으로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

Description

참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition for anti-oxidation, anti-inflammation, whitening, or anti-wrinkle comprising extract of Trigonotis radicans var. sericea as an active ingredient}

참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물 등에 관한 것이다.

현재 화장품(cosmetics) 산업은 약품(pharmaceuticals)의 기능이 첨가된 기능성 화장품 혹은 약용화장품(cosmeceuticals)의 방향으로 개발을 진행 중이며, 세계적으로 많은 사람들이 이용하고 있다. 새로운 기능성 화장품의 개발을 위해서는 원하는 활성을 가진 원료물질의 개발이 선행되어야 한다. 기능성 화장품이 가질 수 있는 효과로 미백 효과, 주름개선 효과, 항산화 효과, 피부탄력개선 효과 등이 있다. 젊음을 중요시 여기고 있는 사회적 관심에 초점을 맞추어 노화를 늦추거나 피부의 탄력 및 주름개선을 갖는 천연의 항노화 기능성 화장품이 이목을 끌고 있다.

노화는 모든 생물체에서 필연적으로 일어나는 자연현상이며, 피부노화는 내외적 요인에 따라 진행속도가 달라진다. 내적 요인은 중력, 체내분비의 기능의 변화에 따라, 외적 요인은 미세먼지, 자외선, 기후 등 환경적 영향에 따라 노화의 진행속도가 달라진다. 이러한 요인 중 자외선과 호흡을 통해 형성되는 ROS(Reactive oxygen species)는 피부노화의 주요인이자 조직 및 피부세포의 손상을 가속화시킨다. ROS의 종류에는 활성이 큰 라디칼류인 superoxide anion radical(O₂ ^-), hydrogen hydroxy radical(HO)뿐 아니라, 비라디칼 peroxide(H₂O₂), singlet oxygen(1 O₂)과 같은 비라디칼 종, 그리고 이들이 생체 성분과 반응하여 생성된 peroxyl radical(ROO), alkoxyl radical(RO) 등이 포함된다. ROS는 큰 반응성으로 인하여 생체내의 불포화 지방산, 지질 단백질, 및 막 지질을 산화시켜 세포 손상 및 DNA 산화와 같은 생체 구성 성분의 손상을 야기한다. 또한 MMPs(matrix metalloproteinases)의 발현을 촉진시켜 진피 내에서 비이상적인 엘라스틴 섬유를 증가시키고 진피에 장력과 안정도를 제공하는 콜라겐 섬유를 감소시킨다고 알려져 있다.

항산화제는 유리기를 소거하는 능력이 탁월하여 산화를 억제하는 역할을 하는데, 이러한 산화제는 크게 합성 항산화제와 천연 항산화제로 구분할 수 있다. 최근에 몇몇 합성 항산화제와 관련한 위험성이 보고됨에 따라, 효과적이면서도 독성이 없는 천연 항산화제에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다.

참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea)는 지치과 초본식물이다. 지치과 식물에 대한 연구로 자색풀 열수 추출물이 각질형성세포의 세포 연접 관련 유전자의 발현에 미치는 영향; 자근 추출물의 항산화 및 항노화 활성 등의 연구가 진행되었지만, 지치과 초본식물에 대한 연구는 미흡한 실정이기에 체계적인 분류와 관리 및 데이터 베이스 구축이 필요한 상황이다. 지치과 식물 중 참꽃마리는 높이가 약 10~15cm까지 자라는 여러해살이풀로서, 산기슭이나 약간 습기 있는 숲속 그늘에 분포한다. 꽃은 5~7월에 연한 남색으로 핀다. 봄나물로 식용하고 있으며, 한방에서는 잎과 줄기를 소변을 자주 보는 증상과 어린이의 적백이질(赤白痢疾) 약으로 사용한다. 현재까지 참꽃마리에 대한 연구는 식물학적 특성 연구 외에 참꽃마리 전초 추출물을 이용한 생리활성 및 기능성 검증에 관한 연구는 거의 전무한 실정이다.

따라서, 본 발명자들은 참꽃마리 전초 추출물의 항산화, 항염증, 피부미백, 주름 예방 및 개선 효과 등 피부 미용에 관여하는 기능성을 검증하여, 천연기능성 소재로 적합한지 여부를 확인하고자 하였다.

한국등록특허 제10-1943976호

본 발명자들은 참꽃마리 추출물의 항산화, 항염증, 피부미백, 주름 예방 및 개선 효과를 확인하였는 바, 이에 기초하여 본 발명을 완성하였다.

이에 본 발명의 목적은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.

그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 구현예에서 상기 참꽃마리 추출물은 뿌리를 제외한 참꽃마리 전초 추출물인 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 다른 구현예에서 상기 참꽃마리 추출물은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 저해, ABTS(2,2’-Azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) 라디칼 저해, TBARs(Thiobarbituric acid reactive substances) 저해, 또는 PF(Antioxidant protection factor) 증가 활성을 가지는 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 또 다른 구현예에서 상기 참꽃마리 추출물은 하기 특징 중 하나 이상을 만족하는 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다:

(a) 히알루로니다제(hyaluronidase)를 저해;

(b) 티로시나제(tyrosinase)를 저해; 및

(c) 엘라스타제(elastase) 또는 콜라게나제(collagenase)를 저해.

본 발명의 또 다른 구현예에서 상기 참꽃마리 추출물은 물, C₁ 내지 C₄의 저급알코올, n-헥산, 에틸아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸렌클로라이드, 및 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 용매로 추출된 것을 특징으로 할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선을 위한 미용 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선 용도를 제공한다.

또한, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선에 이용되는 화장품을 생산하기 위한 용도를 제공한다.

또한, 본 발명은 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선에 이용되는 약제를 생산하기 위한 참꽃마리 추출물의 용도를 제공한다.

본 발명에 따른 참꽃마리 추출물은 DPPH 라디칼, ABTS 라디칼, 및 TBARs를 저해하고 PF를 증가시킴으로써 항산화 효과를 가지며, 히알루로니다제를 저해함으로써 항염증 효과를 나타낸다. 또한, 참꽃마리 추출물은 엘라스타제 또는 콜라게나제를 저해함으로써 주름예방 및 개선 효과를 가지고, 티로시나제를 저해함으로써 피부미백 효과를 나타내는 바, 상기와 같은 생리활성을 가지는 약학적 조성물, 식품 조성물, 또는 화장료 조성물 등으로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리 추출물에서 에탄올 용매 농도별 페놀 함량을 나타낸 것이다.
도 2a는 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 2b는 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 ABTS 라디칼 억제 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 2c는 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 PF를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 2d는 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 TBARs 저해 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 히알루로니다제 저해 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 엘라스타제 저해 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 콜라게나제 저해 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명의 일 구현예에 따른 참꽃마리의 열수, 및 60% 에탄올 추출물의 티로시나제 억제 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명의 일 실험예에서는 참꽃마리 추출물에서 증류수, 및 에탄올 용매 농도별 페놀 함량을 확인한 결과, 증류수로 추출한 추출물이 페놀 함량이 가장 높고, 60 % 에탄올로 추출한 추출물이 두 번째로 페놀 함량이 높은 것을 확인하였다(실험예 1 참조).

본 발명의 또 다른 실험예에서는 참꽃마리 추출물이 DPPH 라디칼 소거 활성, ABTS 라디칼 억제 활성, PF 항산화 활성, 및 TBARs 저해 활성을 나타내어 항산화 효과를 가지는 것을 확인하였다(실험예 2 참조).

본 발명의 또 다른 실험예에서는 참꽃마리 추출물이 히알루로니다제 저해 활성을 나타내어 항염증 효과를 가지는 것을 확인하였다(실험예 3 참조).

본 발명의 또 다른 실험예에서는 참꽃마리 추출물이 엘라스타제 저해 활성, 및 콜라게나제 저해 활성을 나타내어 주름예방 및 개선 효과를 가지는 것을 확인하였다(실험예 4 및 5 참조).

본 발명의 또 다른 실험예에서는 참꽃마리 추출물이 티로시나제 저해 활성을 나타내는바, 피부미백 효과를 가지는 것을 확인하였다(실험예 6 참조).

따라서, 본 발명의 참꽃마리 추출물이 DPPH 라디칼 소거 활성, ABTS 라디칼 억제 활성, PF 항산화 활성, 및 TBARs 저해 활성, 히알루로니다제 저해 활성, 티로시나제 억제 활성, 엘라스타제 저해 활성 및 콜라게나제 저해 활성을 나타내는 바, 항산화, 항염증, 주름예방 및 개선, 및 피부미백 용도로 사용 가능할 것으로 기대된다.

이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다.

본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서, "참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea)"는 지치과 초본식물로 높이가 약 10~15cm까지 자라고, 산기슭이나 약간 습기 있는 숲속 그늘에 분포한다. 꽃은 5~7월에 연한 남색으로 피며, 봄나물로 식용하고 있다. 상기 참꽃마리 추출물은 참꽃마리의 꽃, 꽃잎, 잎, 줄기, 열매, 뿌리, 또는 이를 모두 포함한 식물 전체 추출물일 수 있으며, 본 발명의 일 실시예에 따르면 뿌리를 제외한 참꽃마리 전초 추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 참꽃마리는 직접 재배한 것 또는 시판되는 것 등을 제한 없이 사용할 수 있다.

본 발명에 있어서, “추출물”은 상기 참꽃마리의 추출처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 참꽃마리 추출물은 건조물 형태일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서, 상기 참꽃마리 추출물의 추출 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법, 초임계 추출법, 아임계 추출법, 고온 추출, 고압 추출, 용매 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 참꽃마리 추출물을 추출하는 데에 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 천연물로부터 추출물을 추출하는 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도, 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 예를 들어, 상기 참꽃마리 추출물은 물, C₁ 내지 C₄의 저급알코올, n-헥산, 에틸아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸렌클로라이드, 및 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 용매로 추출될 수 있으며, 본 발명의 일 실시예에 따르면 물 또는 에탄올을 용매로 사용하여 추출할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서, 상기 에탄올을 용매로 사용하여 참꽃마리를 추출할 경우, 에탄올의 농도는 10 % 내지 100 %, 10 % 내지 90 %, 10 % 내지 80 %, 10 % 내지 70 %, 20 % 내지 100 %, 20 % 내지 90 %, 20 % 내지 80 %, 20 % 내지 70 %, 30 % 내지 100 %, 30 % 내지 90 %, 30 % 내지 80 %, 30 % 내지 70 %, 40 % 내지 100 %, 40 % 내지 90 %, 40 % 내지 80 %, 40 % 내지 70%, 50 % 내지 100 %, 50 % 내지 90 %, 50 % 내지 80 %, 50 % 내지 70%, 또는 60 %일수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서, 상기 제조된 추출물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 예컨대, 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용할 수 있고, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조, 동결건조법 등을 수행할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 있어서, 추출 횟수는 1회 이상 실시할 수 있으나, 추출이 계속될수록 활성 성분은 수득량이 현저히 감소되므로 5회 이상 반복 실시하는 것은 경제적이지 않을 수 있다. 이에, 추출 횟수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 2 내지 5회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서, 상기 참꽃마리 추출물은 하기 특징 중 하나 이상을 만족할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다:

(a) 히알루로니다제(hyaluronidase)를 저해;

(b) 티로시나제(tyrosinase)를 저해; 및

(c) 엘라스타제(elastase) 또는 콜라게나제(collagenase)를 저해.

본 발명에 있어서, "항산화"는 생체분자에 산화 손상을 일으키며, 단백질을 가교시키고, DNA를 변이시키며, 지질을 과산화시킬 수 있는 자유 라디칼 및 활성 산소를 억제하는 것을 의미한다.

본 발명에 있어서, "주름예방 및 개선"은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 의미한다.

본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 미스트, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 핸드로션, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 클렌징오일, 클렌징밤, 바디로션 또는 바디클렌저의 형태일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 및 스핑고 지질로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 더 포함할 수 있다.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E(d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산 dl-알파 토코페롤, 니코틴산 dl-알파 토코페롤 비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장품에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n=2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n=2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n=2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE(폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP(폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인산염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 0.01-5% 중량 백분율 또는 0.01-3% 중량 백분율로 배합될 수 있다.

본 발명의 제형이 로션, 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 다른 양태로서, 본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서, "식품"이란 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 건강기능성 식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제 등을 모두 포함하는 의미이다.

본 발명에 있어서, 상기 식품 조성물은 건강기능성 식품 조성물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서, 상기 "건강기능성 식품(functional food)"이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미하며, 정제, 캡슐제, 환제, 과립제, 분말, 액제, 편상(flake), 페이스트, 시럽제, 겔, 젤리, 바(bar), 또는 필름 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다.

본 발명의 참꽃마리 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 이를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 참꽃마리 추출물은 원료에 대하여 15 중량% 이하, 또는 10 중량% 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.

본 발명에 따른 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당 및 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스 및 수크로오스와 같은 디사카라이드, 덱스트린 및 시클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 및 자일리톨, 소르비톨 및 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL당 일반적으로 약 0.01-0.20g, 또는 약 0.04-0.10g 이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01-0.20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

상기 건강기능성 식품은 이너뷰티 푸드(inner beauty) 형태로 섭취함으로써 더욱 우수한 효과를 갖는 장점을 가질 수 있다. 상기 이너뷰티(inner beauty)는 '먹는 화장품 또는 뷰티 푸드'로 일컬어지는 푸드로, 피부에 좋은 여러 가지 성분을 몸속으로 흡수시켜 피부 체질을 건강하게 바꾸는 식품을 지칭하며, 피부 타입에 맞는 화장품을 고르듯 피부 컨디션과 라이프스타일을 고려해 개개인에게 맞는 이너뷰티 푸드를 선택하여 섭취할 수 있다. 예를 들면, 상기 화장료 조성물을 포함하는 화장품과 상기 참꽃마리 추출물을 포함하는 이너뷰티 푸드를 혼용할 경우, 화장품 또는 약제만 사용하는 것에 비해 효과가 월등히 높아져 더욱 효과적인 항산화, 항염증, 피부미백, 주름예방 또는 개선 효과를 볼 수 있는 장점을 가질 수 있다.

또한, 본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서 “항염증”은 염증을 억제하거나 감소시키는 작용을 의미하며, 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료 활성을 포함하는 의미로 사용될 수 있다. 상기 염증성 질환은 천식, 알레르기성 및 비-알레르기성 비염, 위염, 장염, 궤양성 위염, 신장염, 간염, 만성 폐쇄성 폐질환, 폐섬유종, 과민성 대장증후군, 염증성 통증, 편두통, 두통, 허리 통증, 섬유 근육통, 근막 질환, 바이러스 감염(예컨대, C형 감염), 박테리아 감염, 곰팡이 감염, 화상, 외과적 또는 치과적 수술에 의한 상처, 관절염, 류머티스성 관절염, 강직성 척추염, 호지킨병, 췌장염, 결막염, 홍채염, 공막염, 포도막염, 피부염(아토피성 피부염 포함), 습진, 및 다발성 경화증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 있어서, "피부미백용 약학적 조성물"은 피부 과색소성 질환의 예방, 개선, 또는 치료 활성을 나타낼 수 있다. 상기 피부 과색소성 질환은 유전적 피부 질환, 예를 들어 기미와 같은 후천적 피부 질환, 약물치료에 기인한 피부 질환 예를 들어, 미노사이클린, 블레오마이신, 부술판, 지도부딘, 및 감염을 통해 전이된 피부 질환 예를 들어, 어루러기 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 상기 부형제는 예를 들어, 희석제, 결합제, 붕해제, 활택제, 흡착제, 보습제, 필름-코팅 물질, 및 제어방출 첨가제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 서방형 과립제, 장용과립제, 액제, 점안제, 엘실릭제, 유제, 현탁액제, 주정제, 트로키제, 방향수제, 리모나아데제, 정제, 서방형정제, 장용정제, 설하정, 경질캅셀제, 연질캅셀제, 서방캅셀제, 장용캅셀제, 환제, 틴크제, 연조엑스제, 건조엑스제, 유동엑스제, 주사제, 캡슐제, 관류액, 경고제, 로션제, 파스타제, 분무제, 흡입제, 패취제, 멸균주사용액, 또는 에어로졸 등의 외용제 등의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 상기 외용제는 크림, 젤, 패치, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제 등의 제형을 가질 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.

본 발명에 따른 정제, 산제, 과립제, 캡슐제, 환제, 트로키제의 첨가제로 옥수수전분, 감자전분, 밀전분, 유당, 백당, 포도당, 과당, 디-만니톨, 침강탄산칼슘, 합성규산알루미늄, 인산일수소칼슘, 황산칼슘, 염화나트륨, 탄산수소나트륨, 정제 라놀린, 미결정셀룰로오스, 덱스트린, 알긴산나트륨, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 카올린, 요소, 콜로이드성실리카겔, 히드록시프로필스타치, 히드록시프로필메칠셀룰로오스(HPMC), HPMC 1928, HPMC 2208, HPMC 2906, HPMC 2910, 프로필렌글리콜, 카제인, 젖산칼슘, 프리모젤 등 부형제; 젤라틴, 아라비아고무, 에탄올, 한천가루, 초산프탈산셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스칼슘, 포도당, 정제수, 카제인나트륨, 글리세린, 스테아린산, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 메칠셀룰로오스나트륨, 메칠셀룰로오스, 미결정셀룰로오스, 덱스트린, 히드록시셀룰로오스, 히드록시프로필스타치, 히드록시메칠셀룰로오스, 정제쉘락, 전분호, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 폴리비닐알코올, 폴리비닐피롤리돈 등의 결합제가 사용될 수 있으며, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 옥수수전분, 한천가루, 메칠셀룰로오스, 벤토나이트, 히드록시프로필스타치, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 알긴산나트륨, 카르복시메칠셀룰로오스칼슘, 구연산칼슘, 라우릴황산나트륨, 무수규산, 1-히드록시프로필셀룰로오스, 덱스트란, 이온교환수지, 초산폴리비닐, 포름알데히드처리 카제인 및 젤라틴, 알긴산, 아밀로오스, 구아르고무(Guar gum), 중조, 폴리비닐피롤리돈, 인산칼슘, 겔화전분, 아라비아고무, 아밀로펙틴, 펙틴, 폴리인산나트륨, 에칠셀룰로오스, 백당, 규산마그네슘알루미늄, 디-소르비톨액, 경질무수규산 등 붕해제; 스테아린산칼슘, 스테아린산마그네슘, 스테아린산, 수소화식물유(Hydrogenated vegetable oil), 탈크, 석송자, 카올린, 바셀린, 스테아린산나트륨, 카카오지, 살리실산나트륨, 살리실산마그네슘, 폴리에칠렌글리콜(PEG) 4000, PEG 6000, 유동파라핀, 수소첨가대두유(Lubri wax), 스테아린산알루미늄, 스테아린산아연, 라우릴황산나트륨, 산화마그네슘, 마크로골(Macrogol), 합성규산알루미늄, 무수규산, 고급지방산, 고급알코올, 실리콘유, 파라핀유, 폴리에칠렌글리콜지방산에테르, 전분, 염화나트륨, 초산나트륨, 올레인산나트륨, dl-로이신, 경질무수규산 등의 활택제가 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 액제의 첨가제로는 물, 묽은 염산, 묽은 황산, 구연산나트륨, 모노스테아린산슈크로스류, 폴리옥시에칠렌소르비톨지방산에스텔류(트윈에스텔), 폴리옥시에칠렌모노알킬에텔류, 라놀린에텔류, 라놀린에스텔류, 초산, 염산, 암모니아수, 탄산암모늄, 수산화칼륨, 수산화나트륨, 프롤아민, 폴리비닐피롤리돈, 에칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 시럽제에는 백당의 용액, 다른 당류 혹은 감미제 등이 사용될 수 있으며, 필요에 따라 방향제, 착색제, 보존제, 안정제, 현탁화제, 유화제, 점조제 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 유제에는 정제수가 사용될 수 있으며, 필요에 따라 유화제, 보존제, 안정제, 방향제 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 현탁제에는 아카시아, 트라가칸타, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 미결정셀룰로오스, 알긴산나트륨, 히드록시프로필메칠셀룰로오스(HPMC), HPMC 1828, HPMC 2906, HPMC 2910 등 현탁화제가 사용될 수 있으며, 필요에 따라 계면활성제, 보존제, 안정제, 착색제, 방향제가 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 주사제에는 주사용 증류수, 0.9%염화나트륨주사액, 링겔주사액, 덱스트로스주사액, 덱스트로스+염화나트륨주사액, 피이지(PEG), 락테이티드 링겔주사액, 에탄올, 프로필렌글리콜, 비휘발성유-참기름, 면실유, 낙화생유, 콩기름, 옥수수기름, 올레인산에칠, 미리스트산 이소프로필, 안식향산벤젠과 같은 용제; 안식향산나트륨, 살리실산나트륨, 초산나트륨, 요소, 우레탄, 모노에칠아세트아마이드, 부타졸리딘, 프로필렌글리콜, 트윈류, 니정틴산아미드, 헥사민, 디메칠아세트아마이드와 같은 용해보조제; 약산 및 그 염(초산과 초산나트륨), 약염기 및 그 염(암모니아 및 초산암모니움), 유기화합물, 단백질, 알부민, 펩톤, 검류와 같은 완충제; 염화나트륨과 같은 등장화제; 중아황산나트륨(NaHSO₃) 이산화탄소가스, 메타중아황산나트륨(Na₂S₂O₅), 아황산나트륨(Na₂SO₃), 질소가스(N₂), 에칠렌디아민테트라초산과 같은 안정제; 소디움비설파이드 0.1%, 소디움포름알데히드 설폭실레이트, 치오우레아, 에칠렌디아민테트라초산디나트륨, 아세톤소디움비설파이트와 같은 황산화제; 벤질알코올, 클로로부탄올, 염산프로카인, 포도당, 글루콘산칼슘과 같은 무통화제; 시엠시나트륨, 알긴산나트륨, 트윈 80, 모노스테아린산알루미늄과 같은 현탁화제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 좌제에는 카카오지, 라놀린, 위텝솔, 폴리에틸렌글리콜, 글리세로젤라틴, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 스테아린산과 올레인산의 혼합물, 수바날(Subanal), 면실유, 낙화생유, 야자유, 카카오버터+콜레스테롤, 레시틴, 라네트왁스, 모노스테아린산글리세롤, 트윈 또는 스판, 임하우젠(Imhausen), 모놀렌(모노스테아린산프로필렌글리콜), 글리세린, 아뎁스솔리두스(Adeps solidus), 부티룸 태고-G(Buytyrum Tego-G), 세베스파마 16(Cebes Pharma 16), 헥사라이드베이스 95, 코토마(Cotomar), 히드록코테 SP, S-70-XXA, S-70-XX75(S-70-XX95), 히드록코테(Hydrokote) 25, 히드록코테 711, 이드로포스탈(Idropostal), 마사에스트라리움(Massa estrarium, A, AS, B, C, D, E, I, T), 마사-MF, 마수폴, 마수폴-15, 네오수포스탈-엔, 파라마운드-B, 수포시로(OSI, OSIX, A, B, C, D, H, L), 좌제기제 IV 타입(AB, B, A, BC, BBG, E, BGF, C, D, 299), 수포스탈(N, Es), 웨코비(W, R, S, M ,Fs), 테제스터 트리글리세라이드 기제(TG-95, MA, 57)와 같은 기제가 사용될 수 있다.

경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.

경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 본 발명이 속하는 기술분야에 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 개체에게 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구 복용, 피하 주사, 복강 투여, 정맥 주사, 근육 주사, 척수 주위 공간(경막내) 주사, 설하 투여, 볼점막 투여, 직장 내 삽입, 질 내 삽입, 안구 투여, 귀 투여, 비강 투여, 흡입, 입 또는 코를 통한 분무, 피부 투여, 경피 투여 등에 따라 투여될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 치료할 질환, 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중 및 질환의 중등도 등의 여러 관련 인자와 함께 활성성분인 약물의 종류에 따라 결정된다.

또한, 본 발명은 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 대한민국 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.

또한, 상기 의약외품은 피부외용제 및 개인위생용품을 포함할 수 있다. 예를 들어, 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 바디 클렌져, 비누, 마스크, 크림, 로션, 에센스, 스프레이, 또는 연고제일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명에 따른 상기 의약외품 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.

본 발명의 의약외품 조성물은 일 예로, 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조된 것일 수 있다. 예를 들어, 로션 등과 같은 유액, 크림, 연고, 스프레이, 오일젤, 젤, 오일, 에어로졸, 연막제와 같은 제형을 가질 수 있으나, 본 발명의 해충 방제 유도 효과를 나타내는 것이라면 제한되지 않고 사용할 수 있다. 또한 상기 의약외품 조성물은 각각의 제형에 일반적으로 의약외품 조성물에 배합되는 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제 또는 향료 등을 필요에 따라 적절히 배합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 또 다른 양태로서, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선 방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 양태로서, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선을 위한 미용 방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 양태로서, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 양태로서, 본 발명은 참꽃마리 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선에 이용되는 화장품을 생산하기 위한 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 양태로서, 본 발명은 항산화, 항염증, 피부미백, 또는 주름예방 또는 개선에 이용되는 약제를 생산하기 위한 참꽃마리 추출물의 용도를 제공한다.

본 발명에 있어서, “예방”이란 목적하는 질환의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미하고, “치료”란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 목적하는 질환과 그에 따른 대사 이상 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미하며, “개선”이란 본 발명에 따른 조성물의 투여에 의해 목적하는 질환과 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 감소시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에 있어서, “개체”란 질병의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하고, 보다 구체적으로는 인간 또는 비-인간인 영장류, 생쥐 (mouse), 쥐 (rat), 개, 고양이, 말, 및 소 등의 포유류를 의미한다.

본 발명에 있어서, “투여”란 임의의 적절한 방법으로 개체에게 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1. 참꽃마리 시료 준비

참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea)는 한국토종야생산야초연구소(Busan, South Korea)에서 구매하여 뿌리를 제거하고 전초를 세척하여, 50℃ dry oven(FO600M, Jeiotech, Daejeon, South Korea)에서 건조시킨 후, 40 mesh로 분쇄하여 시료로 사용하였다.

실시예 2. 참꽃마리 추출물 제조

실험을 위해 증류수(D.W; distillation water)와 에탄올을 추출 용매로 사용하였다. 열수 추출물의 경우, 건조 참꽃마리 분쇄물 1g에 증류수 200 mL를 첨가하여 추출물이 100 mL이 될 때까지 가열한 후 상온으로 냉각하여 진탕 배양기(shaking incubator, 24 hr/200 rpm)에 넣고 교반 추출하였다. 에탄올 추출물의 경우, 건조 참꽃마리 분말 1g에 농도별(10 % 내지 100 %)로 제조한 에탄올 100 mL를 첨가하여 진탕배양기(24 hr/200 rpm)에서 교반 추출하였다. 각 추출물은 Whatman No. 1 여과지(Whatman inc., piscataway, New jersey, USA)로 여과하였다.

실시예 3. 총 페놀 함량(TPC ; Total phenolic compounds) 정량

TPC 함량 측정은 Folin-Denis 방법(Journal of Biological Chemistry,　12(2), 239-243.)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 참꽃마리 시료 추출물 1 mL에 100% 에탄올 1 mL, 증류수 5 mL, 1N Folin-ciocalteu 시약 0.5 mL를 순서대로 첨가한 후, 볼텍싱(vortexing)을 하고, 5분간 대기하였다. 그런 다음, 5% Na₂CO₃ 1 mL를 첨가하여 1시간 동안 암실에서 반응시킨 후, 725 nm의 파장에서 UV-vis spectrophotometer(Optizen 3220UV. Merasys Co. Ltd., Seoul, South Korea)를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 총 페놀 함량은 농도별로 조제한 갈산(gallic acid)을 이용한 표준 곡선과 대조하여 그 양을 환산하여 정량하였다.

실시예 4. DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 라디칼 소거 활성 측정

DPPH 라디칼 소거 활성은 Blios의 방법(Bios MS (1958), Nature 181: 11 99-1200)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 반응구는 각 시료 추출물 1 mL에 100 μM DPPH 3 mL를 넣고, 대조구에는 시료 대신 증류수 1 mL를 첨가하여 볼텍싱하였다. 그 후, 실온에서 15분 동안 반응시킨 다음 517 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조구는 BHT(butylated hydroxytoluene, Sigma Aldrich Co., St Louis, MO, USA)를 사용하였다. 한편, DPPH 라디칼 소거 활성(%)은 하기 식 1에 의해 계산하였다.

[식 1]

DPPH 라디칼 소거 활성(%) = (1-반응구의 흡광도/대조구의 흡광도)×100.

실시예 5. ABTS[2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline 6-sulphonic acid)] 라디칼 저해 활성 측정

ABTS 라디칼 저해 활성은 Pellegrin 등의 방법(Pellegrini N, Re R, Yang M, Rice-Evans C (1998), Methods Enzymology 299: 379-389)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 7 mM ABTS 50 mL와 140 mM K₂S₂O₈ 0.88 mL을 섞어 암실에서 약 15시간 이상 반응시켜 radical을 형성시킨 후, 이를 100% 에탄올과 약 1:88 비율로 섞어 734 nm에서 대조구의 흡광도 값이 약 0.7±0.02이 되도록 조절한 ABTS 용액을 사용하였다. 반응구는 참꽃마리 추출물 시료 0.2 mL와 ABTS 용액 4 mL를 혼합하였으며, 대조구에는 시료 대신 증류수 0.2 mL를 첨가하여 볼텍싱한 후 2분간 반응시키고 734 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조구는 BHT를 사용하였으며, ABTS 라디칼 저해 활성(%)은 하기 식 2에 의해 계산하였다.

[식 2]

ABTS 라디칼 저해 활성(%) = (1- 반응구의 흡광도/대조구의 흡광도) × 100.

실시예 6. PF(Antioxidant protection factor) 측정

항산화 보호 인자(PF; antioxidant protection factor) 활성은 Andarwulan과 Shetty의 방법(Andarwulan N, Shetty K (1999). J Agric Food Chem, 47: 1776-1780)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 베타카로틴(β-carotene) 용액을 제조하기 위해 0.05 g의 베타카로틴과 50 mL의 클로로포름(chloroform)을 혼합하여, 둥근 농축 플라스크에 1 mL를 분주하고 농축시켰다. 그런 다음, 리놀레산(linoleic acid) 0.02 mL, Tween 40 0.184 mL, H₂O₂ 50 mL를 첨가하여 베타카로틴 에멀젼을 제조하였다. 이후 참꽃마리 추출물 시료 0.1 mL에 에멀젼 5 mL를 넣고 볼텍싱하고, 50℃로 맞춰 둔 수조에서 30분간 빛을 차단하고 반응시킨 다음, 얼음 물에서 5분간 냉각시키고 470nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조군으로는 BHT를 사용하였으며, PF 값은 하기 식 3에 의해 계산하였다.

[식 3]

PF = 반응구의 흡광도/대조구의 흡광도.

실시예 7. TBARs(Thiobarbituric acid reactive substances) 저해 활성 측정

TBARs 활성 저해능 측정은 Buege와 Aust의 방법(Buege JA, Aust SD (1978). Academic press 52: 302-310)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 5% 리놀레산과 1% tween 40을 각각 100 mL씩 넣고 균질기로 에멀젼 용액을 사용 직전에 제조하였다. 그런 다음, 참꽃마리 추출물 시료 0.2 mL에 에멀젼 0.8 mL를 넣고 50℃의 수조에서 17시간 반응시켰다. TBA 시약은 15% TCA(trichloroacetic acid), 0.375% TBA(thiobarbitruric acid), 및 0.25 M HCl 4 mL를 순서대로 넣어 제조한 스톡 용액에 2% BHT를 첨가하여 제조하였다. 그 후, 반응액에 상기의 TBA 시약 4 mL를 첨가한 후 tube mixer로 잘 혼합하고, 100℃ 끓는 물에서 중탕으로 15분간 가열하였다. 가열 후 대조구 색이 분홍빛으로 변화하였는지 확인하고, 아이스챔버에서 10분간 냉각시켰다. 그런 다음, 원심분리기(FO600M, Jeio tech, Daejeon, Korea)에서 2,000 rpm로 20분간 원심분리한 후, 상온에서 10분간 방치하고 상등액을 532 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조구로 BHT를 사용하였으며, TBARs 활성 저해 활성(%)은 하기 식 4에 의해 계산하였다.

[식 4]

TBARs 저해 활성(%) = (1-반응구의 흡광도/대조구의 흡광도)×100.

실시예 8. 히알루로니다제 저해 효과 측정

히알루로니다제(HAase; Hyaluronidase) 저해 효과는 Dorfman와 Ott(Dorfman A, Ott ML (1948), J Biol Chem 172: 367-375)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 참꽃마리 추출물 시료 0.25 mL와 20 mM 인산 나트륨 완충액(sodium phosphate phosphate buffer, pH 6.9)에 용해시킨 HAase(1,000 U/mL, Wako Pure Chemical Industries Ltd., Osaka, Japan) 0.25 mL를 섞은 후 38℃ 수조에서 5분 동안 전처리 하였다. 그런 다음, 기질 0.4% 히알루론산(hyaluronic acid, 4 mg/mL)/0.3 M 인산 완충액(phosphate buffer, pH 5.3)을 0.25 mL 첨가하고, 38℃에서 45분 동안 효소반응을 시켰다. 이후, 반응액에 0.04 M 아세테이트 완충액(acetate buffer, pH 3.7)에 용해시킨 0.1% 알부민 용액 2.5 mL를 첨가하여 잘 혼합하였다. 그 후, 5분 동안 상온에서 방치하고 600 nm에서 투과율(%)을 측정하였다. 대조구로는 시료를 대신하여 증류수 0.25 mL를 넣고 반응시켰다. 양성 대조구는 PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate)를 사용하였으며, 히알루로니다제 저해 활성(%)은 하기 식 5에 의해 계산하였다.

[식 5]

히알루로니다제 저해 활성(%) = (1-반응구의 투과율/대조구의 투과율)×100.

실시예 9. 엘라스타제 저해 효과 측정

엘라스타제(Elastase) 저해 효과는 Kraunsoe 등의 방법(Kraunsoe JA, Claridge TD, Lowe G (1996). Biochemistry 35: 9090-9096)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 참꽃마리 추출물 시료 0.1 mL에 0.8 mM N-succinyl-(Ala)₃-p-nitroanilide(Sigma Aldrich Co., St Louis, MO, USA)/0.2 M Tris-HCl 완충액(pH 8.0)으로 제조한 기질 용액 0.1 mL를 넣었다. 그런 다음, 0.2 M Tris-HCl 완충액(pH 8.0) 1 mL와 동일 완충액에 녹인 0.3125 U/mL 돼지 췌장 엘라스타제(porcine pancreatic elastase, Sigma Aldrich Co.) 0.1 mL를 넣고 볼텍싱한 후, 37℃의 수조에서 20분간 반응시켰다. 이후, 아이스챔버에서 5분간 식힌 다음, 410 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조구로 EGCG(Epigallocatechin gallate)를 사용하였으며, 엘라스타제 저해 활성 (%)은 하기 식 6에 의해 계산하였다.

[식 6]

엘라스타제 저해 활성 (%) = (1-반응구의 흡광도/대조구의 흡광도)×100.

실시예 10. 콜라게나제 저해 효과 측정

콜라게나제(Collagenase) 저해 효과는 Wunsch-Heindrich의 방법(Wunsch E, Heidrich HG (1963). Hoppe-Seyler's Z Physiol Chem 333: 149-151)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 참꽃마리 추출물 시료 0.1 mL에 0.1 M tris-HCl에 4 mM CaCl₂를 첨가하여 제조한 완충액(pH 7.5)에 녹인 기질 0.4 mM 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg 0.25 mL를 넣었다. 그런 다음, 동일 완충액 0.15 mL와 동일 완충액에 녹인 100 U/mL 콜라게나제(from Clostridium histolyticum, Sigma Aldrich Co.) 0.15 mL를 첨가하여, 25℃ 수조에서 20분간 반응시켰다. 그 후, 반응종료 시약으로 6% 시트르산(citric acid) 0.5mL를 첨가하고, 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 2 mL를 추가하여 1분간 볼텍싱한 후, 320 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조구로 EGCG 를 사용하였으며, 콜라게나제 저해 활성(%)은 하기 식 7에 의해 계산하였다.

[식 7]

콜라게나제 저해 활성(%) = (1-반응구의 흡광도/대조구의 흡광도)×100.

실시예 11. 티로시나제 저해 활성 측정

티로시나제 저해 활성(Tyrosinase inhibition activity)은 Hearing과 Vincent의 방법(Wunsch E, Heindrich HG (1963), Hoppe-Seyler's Physiolchem 333: 149-151.)에 따라 측정하였다. 구체적으로, 참꽃마리 추출물 시료 0.2 mL에 0.1 M 인산 나트륨 완충액(sodium phosphate buffer, pH 6.8)로 녹인 기질 1.5 mM L-티로시나제 0.4 mL와 동일 완충액(pH 6.8) 2.3 mL를 혼합하고, 혼합용액에 티로시나제 (250 KU/mL from mushroom, Sigma Aldrich Co.) 0.1 mL를 추가하여 37℃ 수조에서 20분간 효소 반응시켰다. 효소 반응액은 아이스 챔버에서 5분간 식힌 후, 475 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조구는 코직산(kojic acid)을 사용하였으며, 티로시나제 저해 활성(%)은 하기 식 8에 의해 계산하였다.

[식 8]

티로시나제 저해 활성(%) = (1-반응구의 흡광도/대조구의 흡광도)×100.

실시예 12. 통계 분석

본 연구의 실험 결과는 평균과 표준오차로 나타내었다. 또한, SPSS software 25 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 이용하여 실험군 간의 유의차를 검증하고자, 평균 분석 중 일원 배치 분산분석(One-way ANOVA)을 실시하였으며, Duncan의 방법으로 사후검정을 실시하여 p<0.05 수준에서 상호 비교하였다.

[실험예]

실험예 1. 참꽃마리 전초 추출물의 페놀(TPC) 함량 확인

본 연구에서는 증류수와 농도별(10 내지 100% 에탄올) 에탄올을 추출용매로 사용한 참꽃마리 전초 추출물의 TPC(total phenolic compounds) 함량을 비교하였다. 그 결과는 도 1에 나타내었다.

도 1에 나타난 바와 같이, 열수 추출물에서 1 g당 페놀 함량이 27.05 mg로 가장 높게 나타났으며, 60% 에탄올 추출물에서 1 g 당 페놀 함량이 26.73 mg으로 두 번째로 높게 나타났다. 상기 결과에 따라, 증류수와 60% 에탄올을 용매로 사용하여 실험을 진행하였다.

실험예 2. 참꽃마리 추출물의 항산화 효과 확인

참꽃마리 추출물을 사용한 항산화 실험을 위해 추출물을 25, 50, 75 및 100 μg/mL의 4가지 페놀 농도로 테스트하였다.

2-1. DPPH 라디칼 소거 활성 확인

DPPH 라디칼은 항산화 물질의 전자공여능으로 인해 방향족 아민류에 의해 환원되어 짙은 자색에서 탈색되는 정도에 따라 항산화 효과를 나타내는 척도로 활용된다. 이에 참꽃마리 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 확인하였다. 그 결과는 도 2a에 나타내었다.

도 2a에 나타난 바와 같이, 열수 추출물의 경우, 25, 50, 75, 100 μg/mL의 TPC 농도에서 각각 78.78, 73.08, 74.17 72.54%의 소거 활성을 나타내었고, 60% 에탄올 추출물은 각각 83.69, 82.16, 81.36, 81.03%의 소거 활성을 나타내었다. 또한 양성 대조군으로 사용된 BHT는 같은 농도에서 20.46, 82.32, 82.91, 84.44%로 나타났는바, 참꽃마리 추출물이 DPPH 라디칼에 대한 항산화 활성이 매우 우수한 것을 의미한다.

2-2. ABTS 라디칼 억제 활성 확인

ABTS 라디칼 억제 활성 측정은 과황산칼륨(potassiun persulfate)과의 반응에 의해 생성되는 ABTS 라디칼이 추출물에 함유된 페놀 화합물의 항산화성에 의해 제거되고, 라디칼 특유의 청록색이 페놀 화합물의 라디칼 억제 활성으로 인해서 연한 녹색으로 탈색되는 것을 이용한 항산화 활성 측정 방법이다. 이에, 참꽃마리 추출물의 ABTS 라디칼 억제 활성을 확인하였다. 그 결과는 도 2b에 나타내었다.

도 2b에 나타난 바와 같이, 25, 50, 75, 100 μg/mL의 TPC 농도에서 열수 추출물 각각 35.36, 70.15, 91.02, 99.29%의 항산화 활성을 나타내었고, 60% 에탄올 추출물은 각각 39.86, 73.12, 93.51, 99.69%의 항산화 활성을 나타내었다. 한편, 양성 대조군으로 사용한 BHT도 동일한 농도로 실험을 진행했을 때, 3.52, 26.14, 36.66, 44.87%의 항산화 활성을 나타내었다. 이는 참꽃마리 추출물의 ABTS 라디칼에 대한 항산화 활성이 우수하다는 것을 의미한다.

2-3. PF 항산화 활성 확인

PF는 베타 카로틴 리놀레산(linoleate) 시스템을 이용한 항산화 효과 측정방법이다. 불포화 지방산의 산패 과정에서 생성된 자유 라디칼이 베타 카로틴을 산화시켜 베타 카로틴 특유의 색을 탈색시키게 되는데, 이 과정에서 산화된 베타 카로틴은 자유 라디칼의 연쇄 산화반응을 중단시켜 자유 라디칼의 반응성을 잃게 만든다. 이러한 원리를 이용하여 PF를 측정함으로써 참꽃마리 추출물의 항산화 효과를 확인하였다. 그 결과는 도 2c에 나타내었다.

도 2c에 나타난 바와 같이, PF 활성은 열수 추출물 25, 50, 75, 100 μg/mL TPC 농도에서 각각 1.15, 1.15, 1.28, 1.38의 PF 활성을 나타내었고, 60% 에탄올 추출물은 동일 농도에서 각각 1.17, 1.26, 1.38, 1.42의 PF 활성을 나타내었다. 양성 대조구인 BHT는 동일한 농도에서 1.10, 1.63, 1.67, 1.67의 PF 활성을 나타내었다. 열수 추출물, 60% 에탄올 추출물 모두 농도의존적으로 PF 활성이 유의적으로 증가하는 결과를 확인하였다.

2-4. TBARs 저해 활성 확인

참꽃마리 추출물의 TBARs 저해 활성을 확인하였다. 그 결과는 도 2d에 나타내었다.

도 2d에 나타난 바와 같이, 열수 추출물 25, 50, 75, 100 μg/mL TPC 농도에서 각각 40.71, 57.79, 72.61, 75.19%의 항산화 활성을 나타내었고, 60% 에탄올 추출물의 경우 각각 66.49, 77.66, 76.15, 77.77%의 항산화 활성을 나타내었다. 양성 대조구인 BHT는 동일 농도에서 각각 89.04, 92.70, 92.16, 93.98% 항산화 활성을 나타내었다. 열수 추출물은 농도 의존적으로 항산화 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있었고, 60% 에탄올 추출물은 열수 추출물보다 항산화 활성이 좋은 것을 확인할 수 있었다.

상기 결과로부터 참꽃마리 추출물이 수용성 및 지용성 항산화에 대한 높은 활성을 나타내며, 수용성 및 지용성 항산화 성분을 다량 함유하고 있다는 것을 알 수 있다.

실험예 3. 참꽃마리 추출물의 히알루로니다제 저해 활성 확인

히알루론산(hyaluronic acid)은 글루쿠론산(glucuronic acid)과 글루코사민(glucosamine)이 연속적으로 결합된 고분자 다당류이다. 고분자 형태의 히알루론산은 대식세포의 식세포 활성을 억제하여 염증을 억제하며, 소분자는 상처 치유 과정에서 염증을 형성한다. 이에, 참꽃마리 추출물의 항염증 효과를 확인하기 위해 염증 유발에 관련이 있는 효소인 히알루로니다제(hyaluronidase)의 저해 활성을 50, 100, 200 및 400 μg/mL의 4가지 페놀 농도의 참꽃마리 열수 추출물, 및 60% 에탄올 추출물 처리 후 확인하였다. 그 결과는 도 3에 나타내었다.

도 3에 나타난 바와 같이, 열수 추출물은 50, 100, 200, 400 μg/mL의 TPC 농도에서 각각 14.90, 42.08, 63.44, 100.00%의 저해 활성을 나타내었고, 60% 에탄올 추출물은 각각 12.24, 22.58, 45.11, 95.27%의 저해 활성을 나타내었다. 양성 대조구인 PDTC는 50, 100, 200, 400 μg/mL의 TPC 농도에서 0.00, 14.49, 23.95, 46.61%의 저해 활성을 나타내었다. 열수 추출물 및 60% 에탄올 추출물 모두 양성 대조구보다 히알루로니다제 저해 활성이 매우 뛰어난 바, 염증반응에 관여하는 주요 효소인 히알루로니다제의 활성을 저해시키는 우수한 효과가 있다는 것을 의미한다.

또한, 고분자의 히알루론산은 피부의 수분함량을 높여주고 유지하는 보습 효과가 있는 것으로 알려져 있는 바, 상기 참꽃마리 추출물의 히알루로니다제 저해 활성을 통해 항염증 효과 및 보습 효과를 갖는 미용 소재로의 응용 가능성을 확인하였다.

실험예 4. 참꽃마리 추출물의 엘라스타제 저해 활성 확인

인체의 피부탄력을 유지해주는 엘라스틴(elastin)을 분해하여 피부의 탄력을 감소시키고 주름을 생성시키는 효소인 엘라스타제(elastase)의 저해 활성을 50, 100, 200 및 400 μg/mL의 4가지 페놀 농도의 참꽃마리 열수 추출물, 및 60% 에탄올 추출물 처리 후 확인하였다. 그 결과는 도 4에 나타내었다.

도 4에 나타난 바와 같이, 열수 추출물에서는 50, 100, 200, 400 μg/mL의 TPC 농도에서 각각 0.00, 3.58, 11.85, 15.06%의 저해 활성을 나타내었으며, 60% 에탄올 추출물은 50, 100, 200, 400 μg/mL의 TPC 농도에서 각각 0.00, 16.25, 18.25, 27.82%의 저해 활성을 나타내었으며, 양성 대조군인 EGCG는 50, 100, 200, 400 μg/mL의 TPC 농도에서 46.79, 88.78, 91.79, 100.00%의 저해 활성을 나타내었다. 따라서, 열수 추출물 및 60% 에탄올 추출물 모두 최고 농도에서 15 내지 20% 수준의 엘라스타제 저해 효과를 확인할 수 있었다.

실험예 5. 참꽃마리 추출물의 콜라게나제 저해 활성 확인

콜라겐은 엘라스틴과 함께 피부의 진피층을 구성하는 결합조직이다. 광노화의 원인인 자외선 또는 자연노화로 인해 콜라게나제의 활성이 증가하고 그에 따라 콜라겐도 분해가 되는데, 이로 인하여 주름이 유발될 수 있다. 참꽃마리 추출물이 이러한 메커니즘을 억제하는지 확인하기 위해, 콜라게나제 저해 활성을 확인하였다. 그 결과는 도 5에 나타내었다.

도 5에 나타난 바와 같이, 열수 추출물은 100, 200, 400 μg/mL의 TPC 농도에서 각각 8.22, 11.05, 55.15%의 저해활성을 나타내어 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인하였고, 60% 에탄올 추출물은 200, 400 μg/mL의 TPC 농도에서 각각 4.82, 51.70% 의 저해 활성을 나타내어 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 한편, 양성 대조구인 EGCG는 25, 50, 75, 100 μg/mL의 TPC 농도에서 36.79, 43.37, 53.11, 74.77%의 저해 활성을 나타냈다. 따라서, 열수 추출물과 60% 에탄올 추출물 모두 최고 농도에서 콜라게나제 저해 활성이 50 내지 60% 수준인 것을 확인할 수 있었다.

상기 결과로부터 본 발명의 참꽃마리 추출물이 엘라스타제 및 콜라게나제 저해 활성을 나타냄으로써, 피부 주름개선 효과를 나타내는 것을 알 수 있었다.

실험예 6. 참꽃마리 추출물의 티로시나제 활성 저해 효과 확인

참꽃마리 추출물의 피부미백 효과를 확인하기 위해 티로시나제(tyrosinase) 저해 활성을 측정하였다. 그 결과는 도 6에 나타내었다.

도 6에 나타난 바와 같이, 열수 추출물의 경우 효과가 나타나지 않았으나, 60% 에탄올 추출물의 경우, 50, 100, 200, 400 μg/mL TPC 농도에서 각각 5.82, 6.86, 14.84, 27.52%의 저해 활성을 나타내었고, 역시 같은 농도 조건에서 양성 대조구인 코직산(kojic acid)의 경우, 50, 100, 200, 400 μg/mL TPC 농도에서 각각 27.71, 49.81, 79.45, 90.41%의 저해 활성을 나타냄을 확인하였다. 따라서, 60% 에탄올 추출물에서 티로시나제 저해 활성이 5 내지 27% 수준인 것을 확인할 수 있었다.

상기 결과로부터 참꽃마리 추출물이 티로시나제 저해 활성이 우수하여, 피부미백 효과를 나타낸다는 것을 알 수 있다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야 한다.

Claims (14)

1. 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 화장료 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 참꽃마리 추출물은 뿌리를 제외한 참꽃마리 전초 추출물인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
   
3. 제1항에 있어서,
   상기 참꽃마리 추출물은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 저해, ABTS(2,2’-Azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) 라디칼 저해, TBARs(Thiobarbituric acid reactive substances) 저해, 또는 PF(Antioxidant protection factor) 증가 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
   
4. 제1항에 있어서,
   상기 참꽃마리 추출물은 하기 특징 중 하나 이상을 만족하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물:
   (a) 히알루로니다제(hyaluronidase)를 저해;
   (b) 티로시나제(tyrosinase)를 저해; 및
   (c) 엘라스타제(elastase) 또는 콜라게나제(collagenase)를 저해.
   
5. 제1항에 있어서,
   상기 참꽃마리 추출물은 물, C₁ 내지 C₄의 저급알코올, n-헥산, 에틸아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸렌클로라이드, 및 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 용매로 추출된 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
   
6. 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 식품 조성물.
   
7. 제6항에 있어서,
   상기 참꽃마리 추출물은 뿌리를 제외한 참꽃마리 전초 추출물인 것을 특징으로 하는, 식품 조성물.
   
8. 제6항에 있어서,
   상기 참꽃마리 추출물은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 저해, ABTS(2,2’-Azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) 라디칼 저해, TBARs(Thiobarbituric acid reactive substances) 저해, 또는 PF(Antioxidant protection factor) 증가 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 식품 조성물.
   
9. 제6항에 있어서,
   상기 참꽃마리 추출물은 하기 특징 중 하나 이상을 만족하는 것을 특징으로 하는, 식품 조성물:
   (a) 히알루로니다제(hyaluronidase)를 저해;
   (b) 티로시나제(tyrosinase)를 저해; 및
   (c) 엘라스타제(elastase) 또는 콜라게나제(collagenase)를 저해.
   
10. 제6항에 있어서,
    상기 참꽃마리 추출물은 물, C₁ 내지 C₄의 저급알코올, n-헥산, 에틸아세테이트, 아세톤, 아세토니트릴, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 메틸렌클로라이드, 및 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 용매로 추출된 것을 특징으로 하는, 식품 조성물.
    
11. 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 약학적 조성물.
    
12. 제11항에 있어서,
    상기 참꽃마리 추출물은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 저해, ABTS(2,2’-Azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) 라디칼 저해, TBARs(Thiobarbituric acid reactive substances) 저해, 또는 PF(Antioxidant protection factor) 증가 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
    
13. 제11항에 있어서,
    상기 참꽃마리 추출물은 히알루로니다제(hyaluronidase)를 저해하는 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
    
14. 참꽃마리(Trigonotis radicans var. sericea) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항산화용; 항염증용; 피부미백용; 또는 주름예방 및 개선용 의약외품 조성물.

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