KR20230084476A - 암의 치료를 위한 면역요법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 키트 부품 및 조성물로서, 이중가닥 RNA (dsRNA), 및 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티 및 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하는 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 다중복합체로서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 PSMA에 결합할 수 있는 다중복합체; 및 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자로서, 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자를 포함하는 키트 부품 및 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 암의 치료에 사용되는 이러한 조성물 또는 키트 부품에 관한 것이다.

Description

암의 치료를 위한 면역요법
본 발명은 면역요법적 암 치료 분야에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 키트 부품 및 조성물로서, 이중가닥 RNA (dsRNA), 및 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티 및 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하는 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 다중복합체로서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 PSMA에 결합할 수 있는, 다중복합체; 및 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자로서, 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자를 포함하는, 키트 부품 및 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 암, 특히 전립샘 암의 치료에 사용되는 이러한 조성물 또는 키트 부품에 관한 것이다.
종양 관련 항원을 표적하는 항체는 악성암의 중요한 치료 양식이 되었다. 여러 단일클론 항체 (mAb)가 이미 비교적 잘 내성화되고, 매우 다양한 악성 질환의 치료에 효과적인 것으로 증명되었다. 이러한 항체는 병원에서 보편적으로 사용되지만, 이들의 효능은 종종 미미하다. mAb는 표적 세포 위에 제시된 항원에 도달하여 치료 효과를 나타내도록 실질적인 장애물을 극복하여야 한다 (Christiansen et al., Mol. Cancer Ther. 2004, 3(11): 1493- 1501). 더욱이, 종양 관련 항원을 표적으로 하는 항체의 효율은 면역계 항-종양 반응의 불충분한 활성화 및 종양 자체에 의해 유도되는 면역 반응 억제에 의해 저하된다.
세포독성 T 림프구 항원 4 (CTLA-4) 및 프로그램화된 세포 사멸 단백질 1 (PD-1)을 표적으로 하는 체크포인트 차단 항체는 진행된 흑색종, 비-소세포 폐암 (NSCLC) 및 기타 종양 유형에 걸린 일부 환자에서 허용가능한 독성, 유망한 임상 반응, 지속가능한 질환 관리 및 생존 개선을 입증하였다. 리간드 PD-L1 또는 PD-L2에 의한 PD-1의 개입은 T 세포 증식, 사이토카인 생성 및 세포독 활성의 결과를 가져오는 음성 대조군 신호를 유도한다 (Ma et al., Current status and perspectives in translational biomarker research for PD-1/PD-L1 immune checkpoint blockade therapy, Journal of Hematology & Oncology (2016), 9: 47).
종양괴사인자 (TNF)와 관련된 사이토카인은 병원체 및 악성 세포에 대응한 효과적인 숙주 방어 시스템 내에 다수의 세포 유형을 배치하는데 필수적인 소통망을 제공한다. 종양괴사인자의 리간드 (TNFSF) 및 수용체 (TNFRSF) 슈퍼패밀리는 발생 과정 동안 다양한 세포 유형 사이의 핵심 소통 신호를 제공한다. TNF 수용체 (TNFR)는 시스테인이 풍부한 서명에 의해 정의되는 보존된 외부도메인을 공유한다. 보조자극성이 알려져 있는 TNFR는 염색체 영역 1p36의 면역 반응 좌위 내에 상재하는 유전자에 의해 인코딩되고, GITR (글루코코티코이드 유도된 종양괴사인자), OX40, 4-1BB 및 CD30을 포함한다 (Ward-Kavanagh, et al., The TNF Receptor Superfamily in Co-stimulating and Co-inhibitory Responses, Immunity 44, 2016년 5월 17일).
악성암의 치료를 위한 상이한 접근법은 백신 기반의 요법이다. 종양 관련 항원의 분자적 정의는 종양 세포의 표적화를 목표로 하는 특이적인 백신의 가능성을 도입하였다. 정의된 종양 관련 항원 (TAA)으로부터 나온 펩티드 또는 단백질 기반의 재조합 백신은 보통 아쥬반트 또는 면역 조절인자와 함께 투여된다. 이러한 백신은 항원 특이적 T 세포 반응을 유도할 수 있지만, 임상 성과는 실망스러웠다 (Guo et al., Adv. Cancer Res. 2013, 119: 421-475).
암 면역요법에서 추가의 접근법은 면역 체크포인트를 차단하거나 억제함으로써 항-종양 면역을 활성화하는 항체와 백신의 조합을 언급하고 있다. 면역 체크포인트는 자가-내성을 유지하고 생리학적 면역 반응의 지속기간 및 진폭을 조정하는데 중요한 면역계 내에 설정된 다양한 억제성 경로를 말한다. 종양은 면역 저항성의 주요 메커니즘으로서 특정 면역 체크포인트를 선발한다. 많은 면역 체크포인트가 리간드-수용체 상호작용으로 개시되기 때문에, 이들은 항체에 의해 쉽게 차단 또는 억제되거나, 재조합 형태의 리간드 또는 수용체에 의해 조정될 수 있다. 세포독성 T 림프구 관련 항원 4 (CTLA-4) 항체는 미국 식품의약품기구 (FDA)의 승인을 받은 이러한 부류의 첫 번째 면역치료제이다. 그러나, 항체와 백신의 조합 접근법의 개발은 여전히 고전하고 있다. 조합 전략은 지적으로 설계되고, 기계적 숙고 및 전임상 모델에 의해 안내되어야 한다 (Pardoll, Nat. Rev. Cancer 2012, 12(4): 252-264).
다수의 종양학의 면역요법을 위한 신규한 조합은 제안되어 왔으며 (Morrisey et al. Clin. Transl. Sci 2016, 9: 89-104), B16 흑색종, 루이스 폐 암종 및 MC38 결장 암종의 암 마우스 모델에서 종양을 억제할 수 있는, 프로그램화된 세포 사멸 1 (PD-1) 경로를 표적하는 차단 항체 및 노출 폴리IC를 사용한 비-항원 특이적인 면역요법을 포함한다 (Nagato et al., OncoImmunology 2014, 3: e28440).
첫 고무적인 결과에도 불구하고, 암 면역요법의 개발은 종양 면역학자에게 계속 주요한 도전이 되고 있다. 따라서, 암, 특히 전립샘 암의 치료에 효과적이며 잘 내성화되는 면역요법이 매우 필요하다.
본 발명의 암의 치료를 위한 신규한 조합 면역요법 접근법을 제공한다.
제 1 양태에서, 본 발명은 키트의 부품 또는 조성물로서,
(a) 이중가닥 RNA (dsRNA) 및 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 다중복합체로서, 상기 중합체 컨쥬게이트는 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티 및 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하고, 상기 PEI는 하나 이상의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티 각각은 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 연결되고, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는, 다중복합체; 및
(b) 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자로서, 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자
를 포함하는, 키트 부품 및 조성물에 관한 것이다.
추가의 양태에서, 본 발명은 암의 치료에 사용되는 조성물 또는 키트의 부품에 관한 것이다. 본 발명자들은 놀랍게도, (i) 이중가닥 RNA (dsRNA), 및 PSMA에 결합할 수 있는 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하는 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 다중복합체; 및 (ii) 면역 체크포인트 단백질에 결합할 수 있는 하나 이상의 면역 체크포인트 조절인자를 사용한 본 발명에 따른 조합 치료가 면역계의 활성을 강화시키고, 강력한 항-종양 활성을 유도하는 점을 발견하였다. 면역계의 항-종양 활성은 다중복합체 단독과 비교하여 (i) dsRNA 및 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 PSMA 결합 다중복합체를 더한 (ii) 하나 이상의 면역 체크포인트 조절인자의 조합에 의해 더욱 증진되었다. 일부 개인에서 다중복합체 및 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자의 조합은 암 세포에 대응한 지속된 종양 방어를 유도하였다.
면역 세포, 바람직하게 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 본 발명의 다중복합체로 처리되었던 PSMA 발현 또는 과다발현하는 세포로부터의 배지에 노출시키거나, 본 발명의 다중복합체로 처리된 세포의 존재 하에 상기 면역 세포를 배양하는 것은 PBMC가 인터페론을 분비하도록 유도시킨다. 여기에 면역 체크포인트 조절인자를 첨가하는 것은 인터페론 분비의 유의한 증가를 추가로 유도한다.
따라서, 본 발명에 따른 PSMA 표적화 다중복합체 및 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자의 조합은 암 환자, 특히 현재 반응을 나타내지 않는 전립샘 암 환자에게 면역조절성 항체의 효능을 확장할 수 있다. 항-체크포인트 항체와 조합하여 dsRNA, 바람직하게 폴리IC의 PSMA 표적화 전달을 활용하는 것은 전립샘 암에 대응하여 면역계를 회생시키는 본 발명의 조성물 및 키트 부품의 성능으로 인한 유의한 효능을 나타낸다.
도 1은 PEI-PEG-DUPA/polyIC로의 처리 이후에 암 세포로부터의 IP-10 (CXCL10) 분비를 나타낸다. LNCaP 및 MCF7IP-10 세포 (CXCL10) (웰 당 40,000개 세포)는 다양한 농도의 PEI-PEG-DUPA/polyIC (0.125 μg/mL, 0.25 μg/mL, 0.5 μg/mL, 1.0 μg/mL)로 5시간 동안 처리하고, 배지 내로 분비된 인간 IP-10은 ELISA에 의해 측정하였다. 인간 IP-10 분비는 PSMA를 발현하지 않는 MCF7 세포와 비교하여 PSMA 과다발현하는 세포, LNCaP에서 증가하였다. IP-10 분비는 PEI-PEG-DUPA/polyIC로의 처리 이후에 PSMA를 과다발현하는 LNCaP 세포에서 유도되지만, PSMA를 발현하지 않는 MCF7 세포에서는 유도되지 않았다. LNCaP는 종양학 분야에 공통적으로 사용되는 인간 전립샘 샘암종이다.
도 2는 PEI-PEG-DUPA/polyIC로의 처리 이후에 LNCaP 세포 상의 PD-L1 발현의 유세포 측정 분석을 나타낸다. LNCaP 세포는 0.031 μg/mL, 0.063 μg/mL 또는 0.125 μg/mL 농도의 PEI-PEG-DUPA/polyIC로 5시간 동안 처리한 다음 PE 컨쥬게이션된 항-PD-L1 항체 또는 IgG1 이소형 대조군을 사용하여 유세포 분석법을 수행하였다. 평균 형광 강도 (MFI)에 의해 표시되는 PD-L1 발현은 처리되지 않은 대조군 세포와 비교하여 (MFI = 579), 0.031μg/mL, 0.063μg/mL 또는 0.125 μg/mL의 PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리 이후에 용량 의존적 방식으로 증가하였다 (각각 MFI = 695, 725 및 788). 이소형 대조군은 음성 대조군으로서 사용하였다 (MFI = 153).
도 3은 항-4-1BB 항체 및 PEI-PEG-DUPA/polyIC로의 조합 치료 이후에 LNCaP 암 세포와 공동-배양된 PBMC로부터의 IFN-γ 분비를 나타낸다. PBMC (항-CD3 항체 (5 ng/mL)로 자극되거나 자극되지 않음)는 PEI-PEG-DUPA/polyIC (0.125 μg/mL) 및/또는 4-1BB에 대한 항체 (10 μg/mL)의 존재 또는 부재 하에 LNCaP 세포와 공동-배양하였다. 밤샘 배양 이후에 배지를 수집하고, IFN-γ를 ELISA에 의해 측정하였다. PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체를 항-4-1BB 항체와 조합하는 것은 둘 중 하나의 단일 처리와 비교하여, 항-CD3 항체 자극된 PBMC에 의한 IFN-γ 분비를 2배 증가시켰으며, IFN-γ ELISA에 의해 입증된 바 조합 치료가 PBMC 활성화를 더 강하게 유도함을 시사한다. PBMC는 항-CD3 항체 (5 ng/mL)로 자극되거나 자극되지 않고, 4-1BB (10 μg/mL)에 대한 항체 단독으로 또는 PEI-PEG-DUPA/polyIC (0.125μg/mL) ((+)4-1BB)와 조합하여 처리된 LNCaP 세포와 공동-배양하였다. 대조군으로서 PBMC는 항-CD3 항체 (5 ng/mL)로 자극되거나 자극되지 않았으며, PEI-PEG-DUPA/polyIC (0.125μg/mL) ((-)4-1BB)로 처리되거나 처리되지 않은 LNCaP 세포와 공동-배양하였다. 밤샘 배양 이후에, PBMC 활성화를 정량화하도록 IFN-γ ELISA를 수행하였다. IFN-γ의 변화 배수가 제공되고, 각 세트 ((+)4-1BB 또는 (-)4-1BB)로부터의 미처리된 PBMS와 비교하였다. 통계학 (일방 ANOVA 테스트에 이어진 터키 다중 비교 테스트)은 PEI-PEG-DUPA/polyIC (+)4-1BB의 유의한 차이를 가져온다. 대조군으로서, PBMC가 항-CD3 항체 (5 ng/mL)로 자극되거나 자극되지 않았다. p 값: ≤ 0.0001
도 4는 니볼루맙, 항-PD-1 항체와 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체의 조합이 IFN-γ ELISA에 의해 입증된 바, PBMC 활성화를 증가시키는 것을 나타낸다. LNCaP 세포 또는 배지 단독 (세포가 없음)은 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 (0.125 μg/mL)로 5시간 동안 처리하거나 처리하지 않았다. PBMC는 항-CD3 항체 (500 ng/mL)로 자극하거나 자극하지 않고, 니볼루맙 (20 μg/mL)이 있거나 없이 처리하였다. 다음으로, PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체로 처리되거나 처리되지 않은 (UT) LNCaP 암 세포로부터의 상청액 ("LNCaP 상청액"), 또는 PEI-PEG-DUPA/polyIC-다중복합체 배지 또는 미처리 배지 ("배지 단독")를 PBMC에 첨가하였다. 밤샘 배양 이후에, PBMC 활성화를 정량화하도록 IFN-γ ELISA를 수행하였다. 니볼루맙 및 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 LNCap 세포로부터의 상청액 둘 다로 처리된 항-CD3 자극된 PBMC는 둘 중 하나로 단일 처리된 세포보다 유의하게 더 많은 IFN-γ를 분비하였다. 따라서, 조합 처리는 더 강한 PBMC 활성화를 유도하였다. 통계학: 다중 t- 테스트, 홈-시닥을 사용하여 결정된 통계적 유의성. p 값: ** ≤ 0.01; **** ≤ 0.0001
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에 의해 공통적으로 이해되는 바와 같은 동일한 의미를 갖는다.
본 명세서 전체 및 하기 청구범위를 통해, 달리 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 단어 "포함하다 (comprise)" 또는 단어 "포함하다 (include)"는 "포함하다/포함하다" 및 "포함하는/포함하는"과 같은 활용은 요소, 진술된 정수, 단계 또는 이의 군의 포함을 의미하지만 요소, 진술된 정수, 단계 또는 이의 군의 배제는 아닌는 것으로 이해되어야 한다.
본 명세서 및 첨부된 청구범위에 사용된 바, 단수형 "a", "an" 및 "the"는 달리 문맥상 명백하게 진술되지 않는 한 복수형 대상물을 포함한다.
용어 "약" 또는 "대략"은 수치 값과 연결하여 사용될 때 표기된 수치 값보다 0% 내지 10% 더 적은 하한 및 표기된 수치 값보다 0% 내지 10% 더 큰 상한을 갖는 범위 이내의 수치 값을 포괄하도록 의미한다. 용어 "약" 또는 "대략"은 바람직하게 ±10%, 더욱 바람직하게 ±5%, 더 더욱 바람직하게 ±3% 또는 가장 바람직하게 ±0% (주어진 수치 값을 각각 말함)를 의미한다. 본 발명의 구현예 각각에서, "약"은 생략될 수 있다. 본원에 개시된 값의 모든 범위는 범위를 정의하는 값을 포함한 상기 범위 내에 속하는 임의의 및 모든 값을 말하고, 이들을 포함하여야 한다.
일 양태에서, 본 발명은
(a) 이중가닥 RNA (dsRNA) 및 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 다중복합체로서, 상기 중합체 컨쥬게이트는 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티 및 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하고, 상기 PEI는 하나 이상의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티 각각은 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 연결되고, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는, 다중복합체; 및
(b) 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자로서, 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자
를 포함하는 조성물을 말한다.
추가의 양태에서, 본 발명은
(a) 이중가닥 RNA (dsRNA) 및 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 다중복합체를 포함하는 조성물로서, 상기 중합체 컨쥬게이트는 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티 및 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하고, 상기 PEI는 하나 이상의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티 각각은 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 연결되고, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는, 조성물; 및
(b) 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자로서, 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자
를 포함하는 키트 부품을 말한다.
바람직한 구현예에서, 본 발명의 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 포함한다. 상세한 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 다중복합체 및 하나 이상의 면역조절성 항체를 단일 용량 형태로 포함하는 고정된 용량 조성물이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 하나 이상의 아쥬반트를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "키트 부품"은 바람직하게 적어도 2가지 별도의 부분, 즉 상기 다중복합체 및 하나 이상의 면역조절성 항체의 조합을 말한다. 이러한 키트 부품의 배열 및 제작은 통상적으로 당업자에게 공지되어 있다. 상세한 바람직한 구현예에서, 본 발명의 상기 키트 부품 또는 본 발명의 키트 부품의 상기 일부, 즉 다중복합체 및/또는 하나 이상의 면역조절성 항체는 서로 독립적으로 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 포함한다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 본 발명의 상기 키트 부품 또는 본 발명의 키트 부품의 상기 일부, 즉 다중복합체 및/또는 하나 이상의 면역조절성 항체는 서로 독립적으로 적어도 하나의 아쥬반트를 포함한다.
특정 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물 및 키트 부품은 임의의 공지된 방법에 의해 투여를 위해 제형화된다. 본 발명에 따른 조성물 및 키트 부품, 즉 다더욱 바람직하게 본 발명에 따른 조성물 및 키트 부품, 즉 다중복합체 및/또는 하나 이상의 면역조절성 항체는중복합체 및/또는 하나 이상의 면역조절성 항체, 및 약제학적 조성물은 정맥내, 뇌내 (대뇌내), 경구, 근육내, 피하, 경피, 피부내, 점막내, 비강내, 설하, 복강내 또는 안구내 투여를 포함하나 이에 한정되지 않는 임의의 적합한 투여 경로를 위해 제형화될 수 있다.
또 다른 더욱 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 상기 조성물 또는 키트 부품은 전신 투여를 위해 제형화된다. 또한, 더욱 바람직하게 본 발명에 따른 조성물 및 키트 부품, 즉 다중복합체 및/또는 하나 이상의 면역조절성 항체는 정맥내, 복강내 또는 피하 투여를 위해 제형화된다. 더욱 바람직하게, 본 발명에 따른 조성물 및 키트 부품, 즉 다중복합체 및/또는 하나 이상의 면역조절성 항체는 주사에 적합한 하나 이상의 용량 형태, 바람직하게 주사에 적합한 용액, 유화액 또는 현탁액으로서 제형화된다.
일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물 또는 키트 부품은 다중복합체 및 하나 이상의 면역조절성 항체를 포함하고, 여기서 상기 다중복합체 및 하나 이상의 면역조절성 항체는 조성물 또는 키트 부품에서 치료적 유효량으로 존재한다.
본 발명의 상기 키트 부품은 다중복합체, 하나 이상의 면역조절성 항체 및/또는 키트 부품 즉 다중복합체 및/또는 하나 이상의 면역조절성 항체를 투여하기 위한 장치를 포함하는 용기를 포함할 수 있다. 바람직한 구현예에서, 본 발명의 상기 키트 부품은 유효 용량의 상기 다중복합체를 포함하는 적어도 하나의 용기 및 유효 용량의 상기 하나 이상의 면역조절성 항체를 포함하는 적어도 하나의 용기, 및 선택적으로 사용설명서를 포함한다.
바람직한 구현예에서, 상기 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는 하나 이상의 표적화 모이어티는 PSMA 항체, PSMA 앱타머 또는 소분자 PSMA 표적화 모이어티이다.
일부 구현예에서, PSMA 표적화 모이어티는 항-PSMA 항체, 즉 PSMA에 결합하는 항체이다. 이러한 PSMA 항체는 scFv 항체 A5, G0, G1, G2 및 G4, 및 mAb 3/E7, 3/F11, 3/A12, K7, K12 및 D20 (Elsasser-Beile et al., 2006, Prostate, 6611359); mAb E99, J591, J533 및 J415 (Liu et al., 1997, Cancer Res., 5713629; Liu et al., 1998, Cancer Res., 5814055; Fracasso et al., 2002, Prostate, 5319; McDevitt et al., 2000, Cancer Res., 6016095; McDevitt et al., 2001, Science, 29411537; Smith-Jones et al., 2000, Cancer Res., 6015237; Vallabhajosula et al., 2004, Prostate, 581145; Bander et al., 2003, J. Urol., 17011717; Patri et al., 2004, Bioconj. Chem., 1511174; 및 미국 특허 제 US 7,163,680호); mAb 7E11-C5.3 (Horoszewicz et al., 1987, Anticancer Res., 7: 927); 항체 7E11 (Horoszewicz et al., 1987, Anticancer Res., 7: 1927; 미국 특허 제 US 5,162,504호); 및 장 등에 기술된 항체 (Chang et al., 1999, Cancer Res., 5913192; Murphy et al., 1998, J. Urol., 16012396; Grauer et al., 1998, Cancer Res., 5814787; 및 Wang et al., 2001, Int. J. Cancer, 92: 871)를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 전술한 문헌 모두 (과학 및 기타 간행물, 특허 및 특허출원)는 본원에 이들의 전문이 참고문헌으로 통합된다.
더욱 바람직하게, 상기 PSMA에 결합할 수 있는 하나 이상의 표적화 모이어티는 소분자 PSMA 표적화 모이어티, 더 더욱 바람직하게 소분자 PSMA 표적화 펩티다제 저해제이다. 바람직한 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 표적화 펩티다제 저해제는 2-PMPA, GPI5232, VA-033, 페닐알킬포스포아미데이트 (Jackson et al., 2001, Curr. Med. Chem., 8: 949; Bennett et al., 1998, J. Am. Chem. Soc., 120112139; Jackson et al., 2001, J. Med. Chem., 4414170; Tsukamoto et al., 2002, Bioorg. Med. Chem. Lett., 1212189; Tang et al., 2003, Biochem. Biophys. Res. Commun., 307: 8; Oliver et al., 2003, Bioorg. Med. Chem., 1114455; 및 Maung et al., 2004, Bioorg. Med. Chem., 1214969), 및/또는 이들의 유사체 및 유도체를 포함한다. 전술한 문헌 모두 (과학 및 기타 간행물, 특허 및 특허출원)는 본원에 이들의 전문이 참고문헌으로 통합된다.
일부 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 표적화 모이어티는 단백질, 펩티드, 아미노산 또는 이들의 유도체이다. 바람직한 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 표적화 모이어티는 티올 및 인돌 티올 유도체, 예컨대 2-MPPA 및 3-(2-머캅토에틸)-1H-인돌-2-카르복실산 유도체 (Majer et al., 2003, J. Med. Chem., 4611989; 및 미국 특허출원 제 US 2005/0080128호)를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 표적화 모이어티는 히드록사메이트 유도체 (Stoerrner et al., 2003, Bioorg. Med. Chem. Lett., 1312097)를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 펩티다제 저해제는 안드로겐 수용체 표적화 제제 (ARTA), 예컨대 미국 특허 제 US 7,026,500호; 제 US 7,022,870호; 제 US 6,998,500호; 제 US 6,995,284호; 제 US 6,838,484호; 제 US 6,569,896호; 제 US 6,492,554호; 및 미국 특허출원 제 US 2006/0287547호; 제 US 2006/0276540호; 제 US 2006/0258628호; 제 US 2006/0241180호; 제 US 2006/0183931호; 제 US 2006/0035966호; 제 US 2006/0009529호; 제 US 2006/0004042호; 제 US 2005/0033074호; 제 US 2004/0260108호; 제 US 2004/0260092호; 제 US 2004/0167103호; 제 US 2004/0147550호; 제 US 2004/0147489호; 제 US 2004/0087810호; 제 US 2004/0067979호; 제 US 2004/0052727호; 제 US 2004/0029913호; 제 US 2004/0014975호; 제 US 2003/0232792호; 제 US 2003/0232013호; 제 US 2003/0225040호; 제 US 2003/0162761호; 제 US 2004/0087810호; 제 US 2003/0022868호; 제 US 2002/0173495호; 제 US 2002/0099096호; 및 제 US 2002/0099036에 기재된 제제를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 표적화 모이어티는 폴리아민, 예컨대 퓨트레신, 스퍼민 및 스퍼미딘 (미국 특허출원 제 US 2005/0233948호 및 제 US 2003/0035804호)을 포함한다. 전술한 문헌 모두 (과학 및 기타 간행물, 특허 및 특허출원)는 본원에 이들의 전문이 참고문헌으로 통합된다.
바람직한 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 펩티다제 저해제는 ZJ 43, ZJ ll, ZJ 17, ZJ 38 (Nan et al., 2000, J. Med. Chem., 431772; 및 Kozikowski et al., 2004, J. Med. Chem., 4711729)와 같은 PBMA- 및 우레아 기반의 저해제, 및/또는 이들의 유사체 및 유도체를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는 하나 이상의 표적화 모이어티는 소분자 PSMA 표적화 모이어티, 더욱 바람직하게 작은 우레아 기반의 저해제이다.
바람직한 구현예에서, 상기 소분자 PSMA 표적화 모이어티는 우레아 기반의 저해제 (본원에서 우레아 기반의 펩티다제 저해제로도 불림)이고, 더욱 바람직하게는 Kularatne et al., Mol Pharmaceutics 2009, 6: 780; Kularatne et al., Mol. Pharmaceutics 2009, 6: 790; Kopka et al., J. Nucl. Med. 2017, 58: 17S-26S, Kozikowski et al., J. Med. Chem. 2001, 44: 298-301; Kozikowski et al., J. Med. Chem. 2004, 47: 1729-1738; 국제특허출원 제 WO 2017/044936호; 제 WO 2011/084518호; 제 WO 2011/084521호; 제 WO 2011/084513호; 제 WO 2012/166923호; 제 WO 2008/105773호; 제 WO 2008/121949호; 제 WO 2012/135592호; 제 WO 2010/005740호; 제 WO 2015/168379호; 제 WO 03/045436호; 제 WO 03/045436호; 제 WO 2016/183447; 미국 특허 제 US 2015/258102호; 국제특허출원 제 WO 2011/084513호; 제 WO 2017/089942호; 미국 특허출원 제 US 2010/278927호; 국제특허출원 제 WO 2012/016188호; 제 WO 2008/124634호; 제 WO 2009/131435호; 미국 특허출원 제 US 2007/225213호; 국제특허출원 제 WO 2017/086467호; 제 WO 2009/026177호; 제 WO 2012005572호; 제 WO 2014/072357호; 및 제 WO 2011/108930호에 개시된 바와 같은 작은 우레아 기반의 저해제이다. 전술한 문헌 모두 (과학 및 기타 간행물, 특허 및 특허출원)는 본원에 이들의 전문이 참고문헌으로 통합된다.
본원에 사용된 용어 "소분자"는 약 2,000 g/mol 미만의 분자량을 갖는 유기 분자를 말한다. 일부 구현예에서, 소분자는 약 1,500 g/mol 미만, 바람직하게 약 1,000 g/mol 미만의 분자량을 갖는다. 추가의 구현예에서, 소분자는 약 800 g/mol 미만, 더욱 바람직하게 약 500 g/mol 미만의 분자량을 갖는다.
바람직한 구현예에서, 상기 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는 하나 이상의 표적화 모이어티는 디펩티드 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제, 바람직하게 소분자 디펩티드 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제이다. 용어 "우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제"는 우레아 기를 포함하는 PSMA 펩티다제 저해제에 관한 것이다. 용어 "디펩티드 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제"는 우레아 기, 및 우레아 기의 -NH2 기에 각각 독립적으로 부착된 2개의 펩티드 또는 아미노산을 포함하는 PSMA 펩티다제 저해제에 관한 것이다. PSMA 펩티다제 저해제는 말단 글루타메이트의 절단을 촉매하는 PSMA 막통과 아연 (Ⅱ) 금속효소의 활성을 감소시킨다. 더욱 바람직하게, 상기 소분자 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제는 약 500 g/mol 미만의 분자량을 갖는다. 더 더욱 바람직하게, 상기 소분자 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제는 바람직하게 Kopka et al., J. Nuc. Med. 2017, 58(9): suppl. 2; Wirtz et al., EJNMMI Research 2018, 8: 84 및 본원에 인용된 참고문헌에 언급된 바와 같은 글루타메이트-우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제이다.
바람직한 구현예에서, 상기 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제는 화학식 I, 바람직하게 화학식 I*의 글루타메이트-우레아 모이어티이다:
Figure pct00001
여기서 R은 OH, SH, NH2 또는 COOH로 한 번 이상, 바람직하게 한 번 치환되는 C1-6-알킬, 바람직하게 C2-C4-알킬이고, 상기 OH, SH, NH2 또는 COOH 기 중 하나는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용하고, 알킬기는 N(H), S 또는 O에 의해 선택적으로 방해받는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, R은 OH, SH, NH2 또는 COOH로 한 번 치환되는 C1-6-알킬, 바람직하게 C2-C4-알킬이고, 상기 NH2, OH, SH 또는 COOH 기는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용한다. 매우 바람직한 구현예에서, R은 COOH로 한 번 치환되는 C2-알킬이고, 상기 COOH 기는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용한다. 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 하나 이상의 링커를 통해 연결된다.
바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 화학식 I의 글루타메이트-우레아 모이어티이다:
Figure pct00002
여기서 R은 OH, SH, NH2 또는 COOH로 한 번 이상, 바람직하게 한 번 치환되는 C1-6-알킬, 바람직하게 C2-C4-알킬이고, 상기 OH, SH, NH2 또는 COOH 기 중 하나는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용하고, 알킬기는 N(H), S 또는 O에 의해 선택적으로 방해받는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, R은 OH, SH, NH2 또는 COOH로 한 번 치환되는 C1-6-알킬, 바람직하게 C2-C4-알킬이고, 상기 NH2, OH, SH 또는 COOH 기는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용한다. 매우 바람직한 구현예에서, R은 COOH로 한 번 치환되는 C2-알킬이고, 상기 COOH 기는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용한다. 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 하나 이상의 링커를 통해 연결된다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 화학식 I*의 글루타메이트-우레아 모이어티이다:
Figure pct00003
여기서 R은 OH, SH, NH2 또는 COOH로 한 번 이상, 바람직하게 한 번 치환되는 C1-6-알킬, 바람직하게 C2-C4-알킬이고, 상기 OH, SH, NH2 또는 COOH 기 중 하나는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용하고, 알킬기는 N(H), S 또는 O에 의해 선택적으로 방해받는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, R은 OH, SH, NH2 또는 COOH로 한 번 치환되는 C1-6-알킬, 바람직하게 C2-C4-알킬이고, 상기 NH2, OH, SH 또는 COOH 기는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용한다. 매우 바람직한 구현예에서, R은 COOH로 한 번 치환되는 C2-알킬이고, 상기 COOH 기는 PEG 모이어티와 연결하기 위한 공유 부착점으로서 작용한다. 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 하나 이상의 링커를 통해 연결된다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은 탄소 및 수소 원자만으로 구성되고, 불포화를 전혀 포함하지 않으며, 전형적으로 및 바람직하게 1개 내지 6개의 탄소 원자 (예로, C1-6 알킬)를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 사슬 라디칼, 바람직하게 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 사슬 라디칼을 말한다. 본원에 나올 때마다, "1 내지 6"과 같은 수치 범위는 주어진 범위의 각 정수를 말한다. 예를 들면, "1개 내지 6개의 탄소 원자"는, 정의가 수치 범위가 구체적으로 명시되지 않은 용어 "알킬"도 포괄하도록 의도되지만 알킬 기가 1개의 탄소 원자, 2개의 탄소 원자, 3개의 탄소 원자 등 최대 6개의 탄소 원자를 포함하여 구성될 수 있음을 의미한다. 전형적인 알킬 기는 메틸, 에틸, n-프로필, 프로프-2-일, n-부틸, 부트-2-일, 2-메틸-프로프-1-일 또는 2-메틸-프로프-2-일을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 유도체 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-CH2-) 또는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)를 포함하거나, 바람직하게 이로 구성된다.
추가의 매우 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)를 포함하거나, 바람직하게 이로 구성된다. 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 하나 이상의 링커를 통해 연결된다.
추가의 매우 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)로 구성된다. 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 하나 이상의 링커를 통해 연결된다.
추가의 매우 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)로 구성되고, 여기서 키랄 C 원자 둘 다는 화학식 I*에 나타낸 바와 같이 (S)- 입체구조를 갖는다. 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 직접 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 하나 이상의 링커를 통해 연결된다.
바람직하게, 상기 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는 하나 이상의 표적화 모이어티 또는 상기 소분자 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제는 본원에 HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-CH2-로서 정의된 DUPA 유도체, 또는 본원에 HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-로서 정의된 DUPA 모이어티를 포함한다. 가장 바람직하게, 상기 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는 하나 이상의 표적화 모이어티 또는 상기 소분자 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-) 또는 DUPA 유도체 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-CH2-)로 구성된다.
바람직한 구현예에서, 상기 DUPA 모이어티 또는 상기 DUPA 유도체는 상기 하나 이상의 PEG 모이어티와 직접적으로 또는 바람직하게 링커를 통해 연결된다. 바람직하게, 상기 링커는 예로 미국 특허공개 제 US 2020/0188523 A1호, 제 US 20 11/0288152 A1호 및 제 US 2010/324008 A1호에 개시된 바와 같으며, 모든 특허출원은 이들의 전문이 본원에 참고문헌으로 통합된다. 바람직하게, 상기 링커는 펩티드 링커 또는 C1 내지 C10 알킬렌 링커, 또는 둘 다의 조합이다. 더욱 바람직하게, 상기 링커는 펩티드 링커이다.
더욱 바람직하게, 상기 링커는 서열번호 1 (-(NH-(CH2)7-CO)-Phe-Phe-(NH-CH2-CH(NH2)-CO)-Asp-Cys-) 또는 서열번호 2 (-(NH-(CH2)7-CO)-Phe-Gly-Trp-Trp-Gly-Cys-)을 갖는다. 더 더욱 바람직하게, 상기 링커는 서열번호 2 (-(NH-(CH2)7-CO)-Phe-Gly-Trp-Trp-Gly-Cys-)이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 링커는 서열번호 1 또는 2를 갖고, 표적화 모이어티는 HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO- (DUPA 모이어티)이다. 더욱 바람직하게, 상기 링커는 서열번호 2를 갖고, 표적화 모이어티는 HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO- (DUPA 모이어티)이다.
용어 "면역 체크포인트 단백질" 또는 "면역 체크포인트"는 당해 기술분야에 공지되고, 기재되어 있으며 (예를 들면, Pardoll, Nature Rev. Cancer 2012, 12: 252-264; Darvin et al., Experimental & Molecular Medicine 2018, 50: 165 참조), 면역계, 특히 T 세포를 억제 또는 활성화 (보조-자극함)하는 면역계의 단백질 조절인자를 포함한다.
바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 면역계의 활성을 자극하거나 억제할 수 있는 T 세포, 수지상 세포, B 세포, 자연 킬러 (NK) 세포, 호중구 및 대식구의 수용체, 뿐만 아니라 이들의 가용성 또는 결합된 리간드 및 반대-수용체를 말한다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 면역계의 활성을 보조-자극하거나 보조-억제할 수 있는 T 세포 및 NK 세포의 수용체, 뿐만 아니라 이들의 가용성 또는 결합된 리간드 및 반대-수용체를 말한다. 바람직하게, 상기 면역계의 활성은 본원에 나타낸 바와 같이 T 세포 반응을 측정함으로써 검출된다. 바람직하게, 면역 체크포인트 단백질은 인간 면역 체크포인트 단백질이다.
면역 체크포인트는 동반된 조직 손상을 최소화하기 위하여 자가-내성을 유지하고 생리학적 면역 반응의 지속기간 및 진폭을 조정하는데 중요한 면역계의 억제성 및 활성화 단백질을 말한다. 종양은 특정 면역 체크포인트 경로를 구체적으로 종양 항원에 특이적인 T 세포에 대한 면역 저항성의 주요 메커니즘으로서 선발한다. T 세포는 모든 세포성 구획에서 단백질로부터 유래한 펩티드의 선택적인 인식을 위한 이들의 성능; 항원 발현하는 세포를 직접 인식하거나 살상하는 (CD8+ 효과기 T 세포, CTL에 의함) 이들의 성능; 및 적응성 및 선천성 효과기 메커니즘을 도입하여 다양한 면역 반응을 조율하는 (CD4+ 헬퍼 세포에 의함) 이들의 능력으로 인해 내인성 항-종양 면역을 치료적으로 조작하려는 노력의 주요 중점이 되어왔다. 따라서, 보조자극성 수용체의 작동제 또는 억제성 신호의 길항제 둘 다는 항원 특이적 T 세포 반응을 증폭시키는, 현재 임상 시험 중인 제제이다. 많은 면역 체크포인트가 리간드-수용체 상호작용에 의해 개시되기 때문에, 이들은 면역 체크포인트 조절인자에 의해 쉽게 조정될 수 있다.
본 발명의 키트 부품 또는 조성물은 (a) 다중복합체, 및 (b) 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "면역 체크포인트 조절인자"는 면역 체크포인트 단백질의 기능을 조정하고, 면역계, 특히 T 세포의 활성을 촉진할 수 있는 화합물에 관한 것이다. 용어 "면역 체크포인트 조절인자"는 (i) 보조자극성 체크포인트 단백질 및 이들의 리간드의 길항적 면역 체크포인트 조절인자, 및 (ii) 억제성 체크포인트 단백질 및 이들의 리간드의 길항적 면역 체크포인트 조절인자를 포함하고, 이들 모두는 면역계를 촉진시킨다. 면역계 활성의 촉진은 항원에 대한 증진된 면역 반응의 생성 및/또는 항원에 대한 면역억압성 면역 반응의 감소를 포함한다. 바람직하게, 면역계 활성의 촉진은 항원 특이적 T 세포 반응 및 종양 세포의 면역 매개된 제거를 유도한다. 용어 "면역 체크포인트 조절인자"는 RNA, DNA 또는 펩티드 앱타머, 항체, 수용체 리간드, 항체 모사체 예로 안키린 반복서열 (다르핀), 애드넥틴, 애피체, 항-칼린 또는 조작된 쿠니츠 유형 저해제 등으로부터 선택된 화합물을 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 조절인자는 항체, 다르핀 또는 단일가닥 올리고뉴클레오티드 앱타머이다.
용어 "조정하는" (또는 "조절인자")는 보조자극성 면역 체크포인트 단백질의 기능적 자극 또는 증진과 관련된 활성화, 뿐만 아니라 보조억제성 면역 체크포인트 단백질의 활성 및 완전한 차단의 감소와 관련된 보조억제성 면역 체크포인트 단백질의 억제를 포함한다.
용어 표현 "면역 체크포인트 단백질의 활성을 조정하는" 또는 "면역 체크포인트 단백질을 조정하는"은 T 헬퍼 세포, CTL, 자연 킬러 T 세포, 자연 킬러 세포 (NK), B 세포, 단핵구, 대식구 및 수지상 세포를 포함하는 T 세포의 자극을 포함한다. 면역 체크포인트 단백질의 조정에 의해 유도되는 자극 (또는 활성화)은 바람직하게, 본원에서 PBMC의 IFN-γ 분비에 관하여 ELISA 검정법에 의해 입증된 바와 같이 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체의 투여가 없는 대조군과 비교하여 구체적으로 T 및 NK 세포에 의해 생산되거나 방출되는 인터페론, 특히 IFN-γ와 같은 사이토카인의 수준 증가를 측정하는 것을 통해 검출된다.
면역 체크포인트 단백질의 예는 PD-1 (프로그램화된 사멸 1, 본원에서 PD-1와 상호교환적으로 사용되고, 이와 동등함), PD-L1, PD-L2, CTLA-4/B7-1/CD152 (세포독성 T 림프구 관련 단백질 4), CD137/4-1BB, 4-1BB 리간드 (4-1BBL), TIM-3 (T 세포 면역글로불린 도메인 및 뮤신 도메인 3)/HAVCR2, LAG-3, By-He, H4, IDO1, CD40/TNFRSF5, CD40 리간드, OX40/CD134, OX-40 리간드/OX-40L, GITR (글루코코티코이드 유도된 TNFR 패밀리 관련 유전자)/TNFRSF18, GITR 리간드/TNFSF18, ICOS/AILIM/CD278, CD122, CD155/PVR, CD226/DNAM-1, CD27, TNFSF14/LIGHT/CD258, CD70/CD27L/TNFSF7, CD28/TP44, CD80/B7-1, CD86/B7-2, A2AR, KIR (킬러 세포 면역글로불린 유사 수용체), NOX2/니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트 NADPH 옥시다제 이소형 2, SIGLEC7 (시알산 결합 면역글로불린 유형 렉틴 7)/CD328, SIGLEC9 (시알산 결합 면역글로불린 유형 렉틴 9)/CD329, CD80/B7-1, CD86/B7-2, B7-H3/CD276, VTCN1/B7-H4/B7S1/7x, VISTA (V 도메인 Ig T 세포 활성화의 억압인자)/B7-H5/GI24, LAG-3/CD223/림프구 활성화 유전자 3, 인돌 아민 2,3-디옥시게나제 - 디옥시게나제/IDO, TDO/트립토판 2,3-디옥시게나제, 갈렉틴-/LGALS9, TIGIT/VSTM3, HVEM (헤르페스 진입 매개인자)/TNFRSF14, BTLA (B 및 T 림프구 약화인자)/CD272, CD160, CEACAM1/CD66a, 인돌 아민, SIRP, 알파/CD172a, CD47, CD48/SLAMF2, CD30, CD30 리간드/CD30L, TMIGD2, HHLA2, TL1A, DR3, LTβR, TNF, TNFR2 및 2B4/CD244를 포함하나 이에 한정되지 않으며, 바람직하게 이들로 이루어진 군으로부터 선택된다.
바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 T 세포 관련 체크포인트 억제인자 또는 비-T 세포 관련 체크포인트 억제인자, 바람직하게는 T 세포 관련 체크포인트 억제인자이다.
바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 CD137/4-1BB, CD40/TNFRSF5, OX40/CD134, GITR/TNFRSF18, ICOS (유도가능한 T 세포 보조자극인자)/AILIM/CD278, CD122, A2AR (아데노신 A2A 수용체), KIR, NOX2, SIGLEC7/CD328, SIGLEC9/CD329, PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, CD80/B7-1, CD86/B7-2, B7-H3/CD276, B7-H4/B7S1/7x, VISTA/B7-H5/GI24, LAG-3/CD223/림프구 활성화 유전자 3, 2,3-디옥시게나제/IDO, 갈렉틴-/LGALS9, TIM-3/HAVCR2 및 TIGIT/VSTM3로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, B7-1, B7-2, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, GITR, CD40, OX40 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, B7-1, B7-2, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, GITR, CD40, OX40 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, GITR, CD40, OX40 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, 4-1BB, GITR, CD40 및 OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB, GITR, CD40 및 OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, 4-1BB, GITR, CD40 및 OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, 4-1BB, GITR 및 OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, 4-1BB 및 OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, 4-1BB, GITR, LAG-3 및 TIM-3로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB, LAG-3 및 TIM-3로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, GITR 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB, LAG-3, TIGIT, TIM-3 및 GITR로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, CTLA-4, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, GITR 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 4-1BB, PD-1, PD-L1, PD-L2 및 CTLA-4로 이루어진 군으로부터 선택된다.
추가의 매우 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-L1 또는 PD-L2이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-L1이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-L2이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 4-1BB이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 CTLA-4이다.
매우 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질은 본원에서 면역조절성 항체로서도 언급되는 면역 체크포인트 단백질의 활성을 조정할 수 있는 항체이다.
바람직하게, 상기 면역 체크포인트 조절인자는 면역조절성 작동적 또는 길항적 항체이다. 상기 면역조절성 항체는 보조자극성 체크포인트 단백질 및 이들의 리간드의 작동적 항체, 및 억제성 체크포인트 단백질 및 이들의 리간드의 길항적 항체를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "항체" 또는 "항-..." (용어 "항-" 이후에 언급되는 표적에 결합함)은 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 일부를 말하고, 바람직하게 상기 일부는 선택적으로 항원에 결합하는 항원 결합 부위를 포함하며, 여기서 항원은 햅텐, 에피토프, 수용체 또는 리간드, 또는 이들의 일부를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 항체"는 바람직하게 체크포인트 수용체, 반대-수용체 또는 이들의 결합된 및 가용성 리간드를 조정하는 항체를 말한다. 이와 같이, 용어 "항체"는 완전한 항체 분자, 뿐만 아니라 항체 단편, 및 변이체 (유도체를 포함함), 항체 단편, 융합 단백질, 항체 모사체 예컨대 안키린 반복서열 (다르핀), 애드넥틴, 애피체 또는 조작된 쿠니츠 유형 저해제를 포괄한다. 용어 "항체"는 2개의 면역글로불린 중쇄 및 2개의 면역글로불린 경쇄를 포함하는 항체, 뿐만 아니라 예를 들면 면역글로불린 분자, 단일클론 항체, 키메라 항체, CDR 접합된 항체, 인간화 항체, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, 디설파이드 연결된 Fv, scFv, 단일 도메인 항체 (dAb), 다이아체, DNA, RNA 또는 펩티드 앱타머, 애피체, 노출 항체, 항체-약물 컨쥬게이트, 이중- 또는 삼중 특이적 항체, 항-특발형 항체, 안티칼린 및 이들의 기능적으로 활성이 있는 에피토프 결합 단편을 포함하는 전장의 항체 및 이들의 일부를 포함하는 다양한 형태를 포함한다. 구체적인 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 항체는 단일클론 항체, 인간화 항체 또는 완전한 인간 항체이다.
본원에 사용된 용어 "애피체"는 표적 단백질 또는 펩티드에 높은 친화도로 결합하도록 조작되어 단일클론 항체를 모방하는 단백질을 말하며, 따라서 항체 모사체 패밀리의 구성원이다. 바람직하게, 애피체는 프로테인 A로부터 유래한 높은 친화도 결합 도메인을 갖는다.
바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 면역 체크포인트 조절인자는 단일클론 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 융합 단백질 또는 이들의 조합이다.
바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-4-1BB, 항-CD40/TNFRSF5, 항-OX40/CD134, 항-GITR/TNFRSF18, 항-ICOS (유도가능한 T 세포 보조자극인자)/AILIM/CD278, 항-B7-H2, 항-CD122, 항-A2AR (아데노신 A2A 수용체), 항-KIR, 항-NOX2, 항-SIGLEC7/CD328, 항-SIGLEC9/CD329, 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4, 항-CD80/B7-1, 항-CD86/B7-2, 항-B7-H3/CD276, 항-B7-H4/B7S1/7x, 항-VISTA/B7-H5/GI24, 항-LAG-3/CD223/림프구 활성화 유전자 3, 항-2,3-디옥시게나제/IDO, 항-갈렉틴/LGALS9, 항-TIM-3/HAVCR2 및 항-TIGIT/VSTM3으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4, 항-4-1BB, 항-LAG-3, 항-TIGIT, 항-TIM-3, 항-GITR 및 항-ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-4-1BB, 항-GITR, 항-CD40, 항-ICOS 및 항-OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-4-1BB, 항-GITR, 항-CD40 및 항-OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-4-1BB, 항-GITR 및 항-OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-4-1BB 및 항-OX40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4 및 항-4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 매우 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2 및 항-4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1 또는 항-4-1BB이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1 또는 항-PD-L2이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1 또는 항-PD-L1이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-1이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-L1이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-PD-L2이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-4-1BB이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 항-CTLA-4이다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 항체는 (i) 항-4-1BB (본원에서 항-CD137 또는 항-4-1BB로도 불림), 항-CD40/TNFRSF5, 항-OX40/CD134, 항-GITR/TNFRSF18, 항-ICOS/AILIM/CD278 및 항-B7-H2; (ii) 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4, 항-CD80/B7-1, 항-CD86/B7-2, 항-B7-H3/CD276, 항-B7-H4/B7S1/7×, 항-VISTA/B7-H5/GI24, 항-LAG-3/CD223/림프구 활성화 유전자 3, ㅎ-항-갈렉틴-/LGALS9, 항-TIM-3/HAVCR2 및 항-TIGIT/VSTM3; 또는 (iii) (i)의 적어도 하나의 항체 및 (ii)의 적어도 하나의 항체의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 항체는 (i) 항-4-1BB, 항-GITR, 항-OX40, 항-ICOS 및 항-CD40; (ii) 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4, 항-TIGIT, 항-LAG-3, 항-TIM-3, 항-B7-H3, 항-B7-H4, 항-VISTA 및 항-CCR4; 또는 (iii) (i)의 적어도 하나의 항체 및 (ii)의 적어도 하나의 항체의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 항체는 (i) 항-CD137/4-1BB; (ii) 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4; 또는 (iii) (i)의 적어도 하나의 항체 및 (ii)의 적어도 하나의 항체의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 항체는 (i) 항-CD137/4-1BB; (ii) 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2; 또는 (iii) (i)의 적어도 하나의 항체 및 (ii)의 적어도 하나의 항체의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 항체는 (i) 항-CD137/4-1BB; 및 (ii) 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 항체의 혼합물이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 항체는 (i) 항-4-1BB; 및 (ii) 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 항체의 혼합물이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 항체는 (i) 항-4-1BB; 및 (ii) 항-PD-1의 혼합물이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 항체는 이중특이적 항체이다. 바람직하게, 상기 이중특이적 항체는 (i) 4-1BB; 및/또는 (ii) PD-1, PD-L1 또는 PD-L2에 결합할 수 있다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 이중특이적 항체는 (i) 4-1BB; 및/또는 (ii) PD-1, PD-L1 또는 PD-L2에 결합할 수 있다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 이중특이적 항체는 (i) 4-1BB; 및/또는 (ii) PD-L1에 결합할 수 있다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 조절인자는 PSMA 및 면역 체크포인트 단백질에 대한 특이성을 갖는 이중특이적 항체이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 조절인자는 암 항원 PSMA, 및 PD-1, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택되는 면역 체크포인트 단백질에 결합할 수 있는 이중특이적 항체이다. 더욱 바람직하게, 상기 면역 체크포인트 조절인자는 이중특이적 PSMA 표적화된 올리고뉴클레오티드, PSMA 표적화된 다량체 항체 또는 이중특이적 다르핀이고, 이들 각각은 PSMA 및 면역 체크포인트 조절인자에 결합하고, 바람직하게 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택되고, 더욱 바람직하게 PD-1 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다.
상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 인간 또는 인간화 단일클론 항-CTLA-4, 항-PD-1, 항-PD-L1 또는 항-PD-L2 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 인간 또는 인간화 단일클론 항-CTLA-4 항체, 또는 인간 또는 인간화 단일클론 항-PD-1 항체이다. 바람직하게, 상기 인간 또는 인간화 단일클론 항체는 IgG4κ 항체이다.
상기 면역 체크포인트 PD-1을 조정할 수 있는 항체 (항-PD-1)의 바람직한 예는 인간 또는 인간화 단일클론 항-PD-1 항체이다. 바람직하게, 상기 인간 또는 인간화 단일클론 항-PD-1 항체는 IgG4κ 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 PD-1을 조정할 수 있는 항체 (항-PD-1)의 바람직한 예는 펨브롤리주맙, 니볼루맙 (MDX-1106 또는 BMS-936558로도 알려져 있으며, 미국 특허출원 제 US 8008449 B2호에 개시됨; Topalian et al., N. Eng. J. Med. 2012, 366: 2443-2454). 세미플리맙, IBI308, BCD-100, PDR001, 티슬렐리주맙, 캄렐리주맙, 피딜리주맙 (Rosenblatt et al., J. Immunother. 2011, 34: 409-18에 개시됨), 람브롤리주맙 (예로, 국제특허출원 제 WO 2008/156712호에서 hPD-109A 및 이의 인간화 유도체 h409All, h409A16 및 h409A17로서 기재됨; Hamid et al., N. Engl. J. Med. 2013, 369: 134-144), 및 PD-L2 Fc 융합 단백질 (B7-DC-Ig 또는 AMP-244로도 알려짐; Mkrtichyan M, et al., 2012, J. Immunol. 189: 2338-47에 개시됨)을 포함하나 이에 한정되지 않는 가용성 PD-1 리간드로 이루어진 군으로부터 선택되는 인간 또는 인간화 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 PD-1을 조정할 수 있는 항체 (항-PD-1)의 더욱 바람직한 예는 펨브롤리주맙 또는 니볼루맙이다. 더욱 바람직하게, 상기 면역 체크포인트 조절인자는 니볼루맙이다.
상기 면역 체크포인트 단백질 PD-L1 또는 PD-L2를 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 인간 또는 인간화 항-PD-L1 또는 항-PD-L2 단일클론 항체이다. 바람직하게, 상기 인간 또는 인간화 단일클론 항-PD-L1 또는 항-PD-L2 항체는 IgG4κ 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 PD-L1을 조정할 수 있는 항체 (항-PD-L1)의 더욱 바람직한 예는 듀르발루맙, 아벨루맙, 아테졸리주맙, MEDI-4736 (예로, 국제특허출원 제 WO 2011/066389 Al호에 개시됨), MPDL328 OA (예로, 미국 특허 제US 8217149 B2호에 개시됨) 및 MIH1 (애피메트릭스사)로 이루어진 군으로부터 선택된 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 PD-L1을 조정할 수 있는 항체 (항-PD-L1)의 더욱 바람직한 예는 듀르발루맙, 아벨루맙 및 아테졸리주맙으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체이다.
상기 면역 체크포인트 단백질 CTLA-4를 조정할 수 있는 항체 (항-CTLA-4)의 바람직한 예는 인간 또는 인간화 항-CTLA-4 단일클론 항체이다. 바람직하게, 상기 인간 또는 인간화 단일클론 항-CTLA-4 항체는 IgG4κ 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 CTLA-4를 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 이필리무맙 또는 트레멜리무맙, 더욱 바람직하게 이필리무맙이다. 이필리무맙은 상표명 예르보이 (브리스톨 마이어 스퀴브사) 하에 현재 시판되는 완전한 인간 CTLA-4 차단 항체이다. 추가의 CTLA-4 저해제는 트레멜리무맙 (Ribas et al., 2013, J. Clin. Oncol., 31: 616-22에서 언급됨)이다.
상기 면역 체크포인트 단백질 CD27을 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는CDX-1127, 길항적 항-CD27 단일클론 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 OXO40을 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 MEDI0562, 인간화 OX40 작동제; MEDI6469, 마우스 OX40 작동제; 및 MEDI6383, OX40 작동제이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 KIR을 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 리릴루맙, KIR에 대한 단일클론 항체이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 4-1BB를 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 우렐루맙이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 LAG-3를 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 렐라틀리맙이다. 상기 면역 체크포인트 단백질 LAG-3를 조정할 수 있는 항체의 바람직한 예는 단일클론 항체 BMS-986016이다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 세미플리맙, IBI308, BCD-100, PDR001, 티슬렐리주맙, 캄렐리주맙, 피딜리주맙, 람브롤리주맙, h409All, h409A16, h409A17, 가용성 PD-1 리간드 예컨대 PD-L2 Fc 융합 단백질, 듀르발루맙, 아벨루맙, 아테졸리주맙, MEDI-4736, MPD-L328 OA, CDX-1127, MIH1, MEDI0562, MEDI6469, MEDI6383, 이필루맙, 트레멜리무맙, 렐라틀리맙, 우렐루맙, 항-TIGIT 항체, 항-TIM-3 항체, 항-GITR 항체 및 항-ICOS 항체로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 세미플리맙, IBI308, BMS-986016, BCD-100, PDR001, 티슬렐리주맙, 캄렐리주맙, 피딜리주맙, 람브롤리주맙, h409All, h409A16, h409A17, 가용성 PD-1 리간드 예컨대 PD-L2 Fc 융합 단백질, 듀르발루맙, 아벨루맙, 아테졸리주맙, 리릴루맙, MEDI-4736, MPD-L328 OA, MIH1, 이필루맙, 트레멜리무맙, 렐라틀리맙 및 우렐루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 세미플리맙, IBI308, BCD-100, PDR001, 티슬렐리주맙, 캄렐리주맙, 피딜리주맙, 람브롤리주맙, h409All, h409A16, h409A17, 가용성 PD-1 리간드 예컨대 PD-L2 Fc 융합 단백질, 듀르발루맙, 아벨루맙, 아테졸리주맙, MEDI-4736, MPD-L328 OA, MIH1, 이필루맙, 트레멜리무맙 및 우렐루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 세미플리맙, IBI308, BCD-100, PDR001, 티슬렐리주맙, 캄렐리주맙, 피딜리주맙, 람브롤리주맙, h409All, h409A16, h409A17, 가용성 PD-1 리간드 예컨대 PD-L2 Fc 융합 단백질, 듀르발루맙, 아벨루맙, 아테졸리주맙, MEDI-4736, MPD-L328 OA, MIH1, 트레멜리무맙 및 우렐루맙으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 세미플리맙, IBI308, BCD-100, PDR001, 티슬렐리주맙, 캄렐리주맙, 피딜리주맙, 람브롤리주맙, h409All, h409A16, h409A17, 가용성 PD-1 리간드 예컨대 PD-L2 Fc 융합 단백질, 듀르발루맙, 아벨루맙, 아테졸리주맙, MEDI-4736, MPD-L328 OA 및 MIH1로 이루어진 군으로부터 선택된다.
바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 (i) 보조자극성 면역 체크포인트 단백질 (본원에서 체크포인트 활성인자로도 불림)을 작동할 수 있는 적어도 하나의 조절인자, 바람직하게 항체; (ii) 억제성 면역 체크포인트 단백질 (본원에서 체크포인트 억제인자로도 불림)을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자, 바람직하게 항체; 또는 (i) 및 (ii) 둘 다의 혼합물이다. 본원에 사용된 용어 "길항하는"은 감소 또는 차단 활성을 말한다. 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 체크포인트 억제인자이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 체크포인트 활성인자이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자, 바람직하게 적어도 하나의 항체는 면역 체크포인트 활성인자 또는 억제인자이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자, 바람직하게 항체는 면역 체크포인트 활성인자 또는 억제인자이다.
상기 체크포인트 활성인자는 보조자극성 면역 체크포인트 단백질을 활성화한다. 체크포인트 활성인자는 바람직하게 T 세포, B 세포 또는 자연 킬러 세포에게로 상기 세포 유형의 수용체를 작동함으로써 또는 항원 제시 세포 (APC) 상의 반대-수용체를 작동함으로써 활성화 신호를 (직접적으로 또는 간접적으로) 전달한다. 상기 체크포인트 억제인자는 억제성 면역 체크포인트 단백질의 억제 기능을 탈억제시키고, 즉 감소시키거나 차단한다. 체크포인트 억제인자는 T 세포, B 세포 또는 자연 킬러 세포에게로 상기 세포 유형의 수용체를 길항하거나, 억제성 리간드를 작동하거나, 항원 제시 세포 (APC) 상의 반대-수용체를 길항함으로써 길항 신호를 직접적으로 전달한다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 (i) 보조자극성 면역 체크포인트 단백질을 작동할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, CD155/PVR, CD226/DNAM-1, CD137/4-1BB, CD40/TNFRSF5, OX40/CD134, CD27, CD122, HVEM/TNFRSF14, TNFSF14/LIGHT/CD258, CD70/CD27L/TNFSF7, CD28/TP44, CD30, TMIGD2, HHLA2, CD80/B7-1, CD86/B7-2, GITR/TNFRSF18, DR3, TL1A, TMIGD2, HHLA2, TL1A, DR3, LTβR, TNF, TNFR2, ICOS/AILIM/CD278 및 B7-H2로 이루어진 군으로부터 선택되는, 보조자극성 면역 체크포인트 단백질; 또는 (ii) 보조억제성 면역 체크포인트 단백질을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, CD80/B7-1, CD86/B7-2, B7-H3/CD276, B7-H4/B7S1/7x, VISTA/B7-H5/GI24, HVEM/TNFRSF14, BTLA, CD160, LAG-3/CD223/림프구 활성화 유전자 3, CEACAM1/CD66a, 인돌 아민, 2,3-디옥시게나제/IDO, 갈렉틴-/LGALS9, TIM-3/HAVCR2, 2B4/CD244, SIRP, 알파/CD172a, CD47, CD48/SLAMF2, TIGIT/VSTM3, A2AR, KIR, NOX2, SIGLEC7/CD328, SIGLEC9/CD329로 이루어진 군으로부터 선택되는, 보조억제성 면역 체크포인트 단백질; 또는 (iii) 둘 다의 혼합물이다.
본 발명의 조성물 또는 키트 부품의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 (i) 보조자극성 면역 체크포인트 단백질을 작동할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, 4-1BB, CD40, OX40, GITR, ICOS로 이루어진 군으로부터 선택되는, 보조자극성 면역 체크포인트 단백질; 또는 (ii) 보조억제성 면역 체크포인트 단백질을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, B7-1, B7-2, B7-H3, B7-H4, VISTA, LAG-3, 갈렉틴-9, TIM-3 및 TIGIT로 이루어진 군으로부터 선택되는, 보조억제성 면역 체크포인트 단백질; 또는 (iii) (i) 및 (ii)의 혼합물이다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 (i) 4-1BB를 작동할 수 있는 적어도 하나의 조절인자; 또는 (ii) 보조억제성 면역 체크포인트 단백질을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4로 이루어진 군으로부터 선택되는, 보조억제성 면역 체크포인트 단백질; 또는 (iii) 둘 다의 혼합물이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 (i) 4-1BB를 작동할 수 있는 적어도 하나의 조절인자; 또는 (ii) 보조억제성 면역 체크포인트 단백질을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, PD-1, PD-L1, PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택되는, 보조억제성 면역 체크포인트 단백질; 또는 (iii) 둘 다의 혼합물이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 (i) CD137/4-1BB를 작동할 수 있는 적어도 하나의 조절인자; 또는 (ii) 보조억제성 면역 체크포인트 단백질을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, PD-1, PD-L1, PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직하게 PD-1인, 보조억제성 면역 체크포인트 단백질; 또는 (iii) 둘 다의 혼합물이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 (i) CD137/4-1BB를 작동할 수 있는 적어도 하나의 조절인자; 및 (ii) 보조억제성 면역 체크포인트 단백질을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, PD-1, PD-L1, PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택되고 바람직하게 PD-1인, 보조억제성 면역 체크포인트 단백질의 혼합물이다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 조절인자는 (ii) 보조억제성 면역 체크포인트 단백질을 길항할 수 있는 적어도 하나의 조절인자로서, PD-1, PD-L1 및 PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택되는, 보조억제성 면역 체크포인트 단백질이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 하나 이상의 항체를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 1개, 2개 또는 3개의 항체를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 2개 또는 3개의 항체를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 2개의 항체를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 3개의 항체를 포함한다.
바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 화학치료제를 추가로 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 방사선요법과 조합된다.
바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 다중복합체는 이중가닥 RNA (dsRNA) 및 중합체 컨쥬게이트를 포함하고, 여기서 상기 중합체 컨쥬게이트는 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티, 하나 이상의 링커 및 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하고, 상기 PEI는 하나 이상의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티 각각은 상기 하나 이상의 링커 중 하나를 통해 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 연결되고, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 암 항원에 결합할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 다중복합체는 이중가닥 RNA (dsRNA) 및 중합체 컨쥬게이트를 포함하고, 여기서 상기 중합체 컨쥬게이트는 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티, 하나 이상의 링커 및 하나 이상의 표적화 모이어티로 구성되고, 상기 PEI는 하나 이상의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티 각각은 상기 하나 이상의 링커 중 하나를 통해 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 연결되고, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 암 항원에 결합할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 다중복합체는 이중가닥 RNA (dsRNA) 및 중합체 컨쥬게이트로 구성되고, 여기서 상기 중합체 컨쥬게이트는 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티, 하나 이상의 링커 및 하나 이상의 표적화 모이어티로 구성되고, 상기 PEI는 하나 이상의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티 각각은 상기 하나 이상의 링커 중 하나를 통해 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 연결되고, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 암 항원에 결합할 수 있다.
본 발명의 다중복합체는 이중가닥 RNA (dsRNA)를 포함한다. 용어 "dsRNA"는 전형적으로 및 바람직하게 하나 이상의 리보뉴클레오티드가 상응하는 자연 발생 리보뉴클레오티드의 화학적 유사체 또는 변형된 유도체일 수 있는, 임의의 길이의 이중가닥 리보뉴클레오티드 중합체를 말한다. 용어 "dsRNA"는 또한 전형적으로 및 바람직하게 미스매칭된 dsRNA를 포함한다.
바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리이노신-폴리사이티딘 산 이중가닥 RNA (폴리IC 또는 pIC)이다. 폴리IC는 하나의 가닥이 이노신산의 중합체이고, 나머지가 사이티딘산의 중합체인 이중가닥 RNA이다.
본 발명에 따라 사용되는 다중복합체의 폴리IC는 각 가닥이 적어도 22개, 바람직하게 적어도 45개의 리보뉴클레오티드로 구성되는 dsRNA로 구성될 수 있다. 특정 구현예에서, 각 가닥은 20개 내지 80,000개의 리보뉴클레오티드로 구성된다.
용어 "분자량"은 본원에 사용된 바, 구체적으로 폴리IC, PEI 및 PEG와 같은 중합체를 언급할 때, 평균 분자량, 바람직하게 가중 평균 분자량을 말한다.
폴리IC는 비-공유 또는 공유 결합을 통해 중합체 컨쥬게이트에 결합되고, 여기서 비-공유 결합이 바람직하다. 바람직한 구현예에서, 폴리IC는 바람직하게 이온 결합에 의해 PEI에 비-공유 결합된다.
본 발명에 따른 다중복합체는 중합체 컨쥬게이트를 포함하고, 여기서 상기 중합체 컨쥬게이트는 핵산 분자의 다중음이온성 특성으로 인해 이들과 함께 농축되거나 비-공유적으로 회합하는 성능이 있는 다중양이온인 폴리에틸렌이민 (PEI)을 포함한다.
바람직한 구현예에서, 상기 폴리에틸렌이민 (PEI)은 선형의 폴리에틸렌이민 (LPEI)이다. 바람직한 구현예에서, LPEI는 LPEI의 둘 중 하나의 말단에 위치하는 히드록실 기를 포함한다. 바람직하게, 상기 히드록실 기는 LPEI의 말단 -NH2 기 또는 말단 -NHCH3 기를 대신한다.
본 발명의 바람직한 구현예에서, PEI, 바람직하게 LPEI는 약 10 kDa 내지 30 kDa의 분자량을 갖는다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, PEI, 바람직하게 LPEI는 약 15 kDa 내지 25 kDa (PEI15-25k // LPEI15-25k)의 분자량을 갖는다.
바람직한 구현예에서, PEI, 바람직하게 LPEI는 낮은 산포도를 갖는다. 바람직하게, PEI 또는 LPEI의 다중산포도 인덱스 PDI는 약 1 (SPECS NMT 1.1)이다.
바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 각각 독립적으로 PEI, 바람직하게 LPEI와 -NH-CO- 결합을 형성한다.
본 발명에 따라 사용되는 다중복합체는 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티를 포함한다. 또한, 본 발명에 따른 PEG 모이어티는 분자량에 따라 폴리에틸렌 옥사이드 (PEO) 또는 폴리옥시에틸렌 (POE) 모이어티로서 알려져 있다. 본원에 사용된 용어 "폴리에틸렌 글리콜 모이어티" (PEG 모이어티)는 전형적으로 및 바람직하게 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)의 둘 중 하나의 말단 위에 위치하는 2개의 기능기를 포함하는 PEG 모이어티를 말한다. 상기 기능기는 상기 PEI, 바람직하게 LPEI 또는 상기 표적화 모이어티와 반응할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 상기 PEG 모이어티는 선형 또는 분지형이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 PEG 모이어티는 분지형이다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 PEG 모이어티는 선형이다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 적어도 하나의 PEG 모이어티 각각은 1 kDa 이상의 분자량을 갖는다. 또 다른 구현예에서, 상기 적어도 하나의 PEG 모이어티 각각은 약 0.3 kDa 내지 8 kDa, 바람직하게 약 0.5 kDa 내지 5 kDa, 더욱 바람직하게 약 1 kDa 내지 3 kDa (PEG1-3k)의 분자량을 갖는다. 상기 분자량은 평균 분자량에 해당한다.
바람직한 구현예에서, 상기 PEI는 약 10 kDa 내지 30 kDa의 분자량을 갖고, 상기 적어도 하나의 PEG 모이어티는 약 0.3 kDa 내지 8 kDa의 분자량을 갖는다.
바람직한 구현예에서, PEI는 1개 내지 5개의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 바람직하게 PEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 바람직한 구현예에서, LPEI는 1개 내지 5개의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 바람직하게 LPEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 바람직한 구현예에서, PEI15-25k는 1개 내지 5개의 PEG1-3k 모이어티에 공유 결합되고, 바람직하게 PEI15-25k는 1개 내지 3개의 PEG1-3k, 바람직하게 PEG2k 모이어티에 공유 결합된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 다중복합체의 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 바람직하게, 상기 다중복합체의 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 또 다른 더욱 바람직한 구현예에서, 상기 다중복합체의 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다. 더욱 바람직하게, 상기 다중복합체의 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다.
본원에 사용된 용어 "1개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 PEI [...]" (본원에서 "PEI - PEG 1 : 1"과 상호교환적으로 사용됨) 또는 "1개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI [...]" (본원에서 "LPEI - PEG 1 : 1"과 상호교환적으로 사용됨)은 PEI 대 PEG 또는 PEI 대 PEG의 몰 비를 말하고, 여기서 PEI - PEG 1 : 1 또는 LPEI - PEG 1 : 1은 전형적으로 및 바람직하게 대략 1몰 PEI 또는 PEG 당 1몰 PEG가 중합체 컨쥬게이트에 포함됨을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 PEI [...]" (본원에서 "PEI - PEG 1 : 3"과 상호교환적으로 사용됨) 또는 용어 "3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI [...]" (본원에서 "LPEI - PEG 1 : 3"과 상호교환적으로 사용됨)은 전형적으로 및 바람직하게, 대략 1몰 PEI 또는 PEG 당 3몰 PEG가 중합체 컨쥬게이트에 포함됨을 의미한다. 값은 바람직하게 1H-NMR 분석에 의해 결정된다. PEG (-CH2-CH2-O-)에서 수소 원자의 상대 적분 값, 및 PEI 또는 LPEI (-CH2-CH2-NH-)에서 수소 원자의 상대 적분 값은 바람직하게 1H-NMR에 의해 값을 결정하는데 사용된다. 본원에서 용어 "대략"은 바람직하게 약 0% 내지 10%, 더욱 바람직하게 약 0% 내지 5%, 더 더욱 바람직하게 약 0% 내지 2%의 편차를 말한다.
바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 더욱 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다. 더욱 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다.
바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 더욱 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다. 더욱 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다.
바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다 (PEI - PEG 1 : 1). 더욱 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다 (LPEI - PEG 1 : 1).
바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된다. 더욱 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이다.
바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 LPEI는 1개 내지 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합된다.
본원에 사용된 용어 "암 항원" (본원에서 종양 항원 또는 종양 마커와 동의어로 사용됨)은 숙주에서 면역 반응을 촉발하는 종양 세포에서 생산되거나 제시되는 항원성 물질을 말한다. 상기 암 항원은 PSMA이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 암 항원은 PSMA이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이다.
본원에서는, DUPA 모이어티에 고정된 PEI-PEG를 포함하는 벡터 polyIC/PEI-PEG-DUPA (pIC/PPD)가 아폽토시스, 사이토카인 분비 및 인간 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)의 채용을 유도하는 PSMA 발현하는 암 세포 내로 폴리IC를 선택적으로 전달하는 점이 특히 주목된다. 구체적으로, pIC/PPD는 IFN-β, IP-10 및 RANTES의 생산, 화학주성, 및 강한 IL-2의 발현으로부터 입증되는 PBMC 활성화를 유도하고, 높은 수준의 TNF-α 및 IFN-γ을 생성하였다 (Langut et al., PNAS, 2017년 12월 26일, 114: 52; 및 IP-10 방출에 대한 도 1, 실시예 1). 니볼루맙 및 항-4-1BB 항체와 PEI-PEG-DUPA/polyIC의 조합은 PEI-PEG-DUPA/polyIC, 니볼루맙 또는 항-4-1BB 항체 단독으로의 처리와 비교하여, PBMC에서 사이토카인 IFN-γ 방출의 추가의 유의한 증가를 유도하였다 (본원에서 도 3 및 도 4, 실시예 2 및 3 참조).
따라서, 본 발명은 다중복합체, 및 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체를 포함하는 본 발명의 조성물 및 키트 부품이 면역계의 활성화 증가 및 더욱 강력한 항-종양 활성을 유도할 수 있는 점을 검증하고, 뒷받침하고 있다. 이것은 구체적으로 본 발명의 다중복합체를 포함하는 바람직한 조성물의 사례이고, 여기서 상기 암 항원은 PSMA이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이며, 상기 항체는 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있고, 바람직하게 항-4-1BB (본원에서 항-CD137로도 언급됨), 항-PD-1, 항-PD-L1 또는 항-PD-L2 항체이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI15-25k이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI15-25k이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k, 바람직하게 PEG1-3k, 더욱 바람직하게 PEG2k 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 내지 3개의 PEG0.3-8k, 바람직하게 PEG1-3k, 더욱 바람직하게 PEG2k 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG0.3-8k, 바람직하게 PEG1-3k, 더욱 바람직하게 PEG2k 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG0.3-8k, 바람직하게 PEG1-3k, 더욱 바람직하게 PEG2k 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG0.3-8k, 바람직하게 PEG1-3k, 더욱 바람직하게 PEG2k 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG0.3-8k, 바람직하게 PEG1-3k, 더욱 바람직하게 PEG2k 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1 또는 4-1BB이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, B7-1, B7-2, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, B7-H3, B7-H4, VISTA, CCR4, GITR, OX40, ICOS 및 CD40으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, B7-H3, B7-H4, VISTA, CCR4, GITR, OX40, ICOS 및 CD40으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 내지 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1 또는 4-1BB이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, 4-1BB, CTLA-4, GITR, CD40, OX40 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1 및/또는 4-1BB, 바람직하게 PD-1 또는 4-1BB이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 4-1BB이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4 및 항-4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2, 항-CTLA-4 및 항-4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-PD-L2 및 항-4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체는 항-PD-1 또는 항-4-1BB이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체는 항-PD-1, 항-PD-L1 또는 항-PD-L2이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체는 항-PD-1이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합된 LPEI이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질 조정하는 항체는 항-4-1BB이다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, B7-1, B7-2, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, B7-H3, B7-H4, VISTA, CCR4, GITR, OX40, ICOS 및 CD40으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 4-1BB, GITR, CD40, OX40 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1 또는 4-1BB이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 PEI는 1개, 2개 또는 3개의 PEG0.3-8k 모이어티에 공유 결합되고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 4-1BB이다.
바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 암 백신 또는 종양 관련 항원을 포함하지 않고, 즉 배제한다. 바람직한 구현예에서, 상기 본 발명의 조성물 또는 키트 부품은 암 백신 또는 종양 관련 항원을 포함한다.
본 발명의 다중복합체에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티에 연결된다. 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나에 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나에 하나 이상의 링커 중 하나를 통해 연결된다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 유도체 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-CH2-) 또는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)를 포함하거나, 바람직하게 이로 구성되고, 여기서 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나에 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나에 하나 이상의 링커 중 하나를 통해 연결된다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)로 구성되고, 여기서 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나에 직접적으로 연결되거나, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나에 하나 이상의 링커 중 하나를 통해 연결된다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)로 구성되고, 여기서 상기 하나 이상의 PEG 모이어티는 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나에 하나 이상의 링커 중 하나를 통해 연결된다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 링커는 -CO-R2-RX-R3 또는 3개 내지 7개의 아미노산 잔기로 구성된 펩티드 모이어티로부터 선택되고, 여기서 R2는 (C1-C8)알킬렌, (C2-C8)알케닐렌, (C2-C8)알키닐렌, (C6-C10)아릴렌-디일 또는 헤테로아릴렌디일로부터 선택되고; RX는 부재하거나 -S-이고; R3은 부재하거나 하기 화학식
Figure pct00004
을 갖고; R4는 (C1-C8)알킬렌, (C2-C8)알케닐렌, (C2-C8)알키닐렌, (C1-C8)알킬렌-(C3-C8)시클로알킬렌, (C2-C8)알케닐렌-(C3-C8)시클로알킬렌, (C2-C8)알키닐렌-(C3-C8)시클로알킬렌, (C6-C10)아릴렌-디일, 헤테로아릴렌디일, (C1-C8)알킬렌-(C6-C10)아릴렌-디일 또는 (C1-C8)알킬렌-헤테로아릴렌디일로부터 선택되고; 상기 (C1-C8)알킬렌, (C2-C8)알케닐렌 또는 (C2-C8)알킬렌 중 각각의 하나는 할로겐, -COR5, -COOR5, -OCOOR5, -OCON(R5)2, -CN, -NO2, -SR5, -OR5, -N(R5)2, -CON(R5)2, -SO2R5, -SO3H, -S(=O)R5, (C6-C10)아릴, (C1-C4)알킬렌-(C6-C10)아릴, 헤테로아릴 또는 (C1-C4)알킬렌-헤테로아릴로부터 각각 독립적으로 선택된 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고, S, O 또는 N, 및/또는 -NH-CO-, -CO-NH-, -N(R5)-, -N(C6-C10)아릴-, (C6-C10)아리렌-디일 또는 헤테로아릴렌디일로부터 각각 독립적으로 선택된 적어도 하나의 기로부터 선택된 하나 이상의 동일한 또는 상이한 헤테로원자에 의해 추가로 방해받으며; R5는 H 또는 (C1-C8)알킬이다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i) 내지 (iv)을 갖는다:
(i)
Figure pct00005
여기서 R6는
Figure pct00006
이고;
(ii)
Figure pct00007
여기서 R7은
Figure pct00008
이고;
(iii)
Figure pct00009
여기서 R6은
Figure pct00010
이고;
또는 (iv)
Figure pct00011
여기서 R7은
Figure pct00012
이고;
여기서 상기 T는 상기 표적화 모이어티이고; n은 0.3 kDa 내지 8 kDa, 바람직하게 0.5 kDa 내지 5 kDa, 더욱 바람직하게 1 kDa 내지 3 kDa, 가장 바람직하게 2 kDa의 분자량에 해당하고; m은 10 kDa 내지 30 kDa, 바람직하게 15 kDa 내지 25 kDa, 더욱 바람직하게 22 kDa의 분자량에 해당한다.
추가의 바람직한 구현예에서, 상기 표적화 모이어티는 HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO- (DUPA 모이어티)이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i) 또는 (iii)을 갖고, 여기서 R6는 서열번호 1 (-(NH-(CH2)7-CO)-Phe-Phe-(NH-CH2-CH(NH2)-CO)-Asp-Cys-)이고, T는 표적화 모이어티 HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO- (DUPA 모이어티)를 나타낸다. 추가의 바람직한 구현예에서, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (ii) 또는 (iv)을 갖고, 여기서 R7은 서열번호 2 (-(NH-(CH2)7-CO)-Phe-Gly-Trp-Trp-Gly-Cys-)이고, T는 표적화 모이어티 HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO- (DUPA 모이어티)를 나타낸다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, B7-1, B7-2, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, B7-H3, B7-H4, VISTA, CCR4, GITR, OX40, ICOS 및 CD40로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, B7-1, B7-2, 4-1BB, TIGIT, LAG-3, TIM-3, GITR, CD40, OX40 및 ICOS로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티 또는 DUPA 유도체이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1 또는 4-1BB이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 PD-1이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질은 4-1BB이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (i), (ii), (iii) 또는 (iv)을 갖는다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (ii) 또는 (iv)을 갖고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 4-1BB, PD-1, PD-L1, PD-L2 및 CTLA-4로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (ii) 또는 (iv)을 갖고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 4-1BB, PD-1, PD-L1 및 PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (ii) 또는 (iv)을 갖고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 4-1BB 또는 PD-1이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (ii) 또는 (iv)을 갖고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 4-1BB이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 dsRNA는 폴리IC이고, 상기 중합체 컨쥬게이트는 화학식 (ii) 또는 (iv)을 갖고, 상기 표적화 모이어티는 PSMA 결합 표적화 모이어티, 바람직하게 DUPA 모이어티이고, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 PD-1이다.
본 발명의 다중복합체는 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함한다. 상기 표적화 모이어티는 고유의, 천연 또는 변형된 리간드 또는 이의 파라로그, 또는 비-고유의 리간드 예컨대 항체, 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 또는 임의의 암 항원에 대한 애피체 또는 앱타머와 같은 항체 모사체일 수 있다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 본 발명의 다중복합체의 상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)이다.
추가의 양태에서, 본 발명은 암의 치료에 사용되는, 본 발명에 따른 조성물 또는 키트 부품에 관한 것이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명은 포유동물에서 암의 치료에 사용되는, 본 발명에 따른 조성물 또는 키트 부품에 관한 것이다. 바람직하게, 상기 포유동물은 인간이다.
바람직한 구현예에서, 본 발명은 암의 치료 방법으로서, 본 발명에 따른 상기 조성물 또는 상기 키트 부품은 이를 필요로 하는 환자에게 투여되는, 방법에 관한 것이다.
바람직한 구현예에서, 상기 암은 고형 종양이다. 바람직하게, 상기 암은 고형암으로서, 상기 고형암에 포함된 적어도 하나의 세포 유형이 PSMA를 발현하는, 고형암이다. 바람직하게, 상기 PSMA 발현하는 세포는 전립샘, 신생혈관 및 내피 세포이다 (Mhawech-Fauceglia et al., Histopathology 2007, 50: 472-483; Israeli R. S. et al., Cancer Res. 1994, 54: 1807-1811; Chang S. S. et al., Cancer Res. 1999, 59: 3192-198; Morgenroth et al., Breast Cancer Research 2019, 21: 116). 더욱 바람직하게, 상기 PSMA 발현하는 세포는 전립샘 세포이다.
바람직한 구현예에서, 상기 암은 고형 PSMA 발현하는 암 유형이다. PSMA 발현은 전립샘 암 세포에 한정되지 않고, 다른 종양 유형에서도 발현된다 (Mhawech-Fauceglia et al., Histopathology 2007, 50: 472-483; Israeli R. S. et al., Cancer Res 1994, 54: 1807-1811; Chang S. S. et al, Cancer Res. 1999, 59: 3192-198). 바람직하게, PSMA 발현은 예로 므하웨치 등 (Mhawech-Fauceglia et al., 2007)에 기재된 바와 같이, 단일클론 항체 표적화 PSMA를 사용한 면역조직화학적 방법에 의해 검출된다. 본원에 사용된 바, PSMA 발현하는 암 유형은 바람직하게 검사한 조직의 양성 세포 중 5% 이상의 컷오프를 갖으며, 여기서 PSMA 발현은 바람직하게 므하웨치-포세그리아 등 (Mhawech-Fauceglia et al.)에 기재된 바와 같이 단일클론 항체 표적화 PSMA를 사용한 면역조직화학적 방법에 의해 검출된다.
또 다른 구현예에서, 상기 암은 샘암종, 더욱 바람직하게는 PSMA 발현하는 샘암종이다.
바람직한 구현예에서, 상기 암은 전립샘 암, 자궁내막암, 신장 세포 암종, 요로상피 세포 암종, 방광암, 결장 암종, 교모세포종 (GBM), 흑색종, 비-소세포 폐암, 위암, 구강 편평세포 암종, 유방암 및 전이성 암으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
바람직한 구현예에서, 상기 암은 고형 PSMA 발현하는 암이고, 바람직하게 상기 고형 PSMA 발현하는 암은 전립샘 암, 요로상피 세포 암종, 방광암, 특히 요로상피 방광 암종, 교모세포종 (GBM), 비-소세포 폐암, 유방암, 침샘 종양, 특히 침샘상 낭성 암종, 간세포 암종, 식도, 위, 특히 장 유형의 위 및 소장의 샘암종, 및 두경부 편평세포 암종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
바람직한 구현예에서, 상기 암은 고형암이고, 바람직하게 상기 고형암은 전립샘 암, 요로상피 세포 암종, 방광암, 특히 요로상피 방광 암종, 교모세포종 (GBM), 비-소세포 폐암, 유방암, 침샘 종양, 특히 침샘상 낭성 암종, 간세포 암종, 식도, 위, 특히 장 유형의 위 및 소장의 샘암종, 및 두경부 편평세포 암종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 암은 전립샘 암, 요로상피 세포 암종, 방광암, 침샘 종양, 특히 침샘상 낭성 암종, 간세포 암종, 비-소세포 폐암 및 유방암으로 이루어진 군으로부터 선택된 고형암이다. 더욱 바람직하게, 상기 암 유형은 PSMA를 발현한다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 상기 암은 두경부의 편평세포 암종, 식도, 위 및 소장 특히 장 유형의 위의 샘암종, 교모세포종, 전립샘 암, 특히 방광의 요로상피 암종, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 고형암이다. 더욱 바람직하게, 상기 암 유형은 PSMA를 발현한다.
더욱 바람직한 구현예에서, 상기 암은 위 특히 장 유형의 위의 샘암종, 전립샘 암, 특히 방광의 요로상피 암종, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 고형암이다. 더욱 바람직하게, 상기 암 유형은 PSMA를 발현한다.
훨씬 더 바람직한 구현예에서, 상기 암은 전립샘 암, 방광의 요로상피 암종 또는 이들의 조합인 고형 PSMA를 발현하는 암이다. 훨씬 더 바람직한 구현예에서, 상기 암은 전립샘 암, 방광의 요로상피 암종 또는 이들의 조합이다.
가장 바람직한 구현예에서, 상기 암은 전립샘 암이다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 키트 부품에 포함되는 상기 다중복합체는 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 하나 이상의 항체와 별도로 투여된다.
일 구현예에서, 본 발명은 암의 치료를 위한 본 발명의 약제학적 조성물 또는 키트 부품의 용도를 제공하고, 상기 다중복합체는 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체의 치료적 유효량과 조합하여 상기 환자에게 치료적 유효량으로 투여된다.
바람직한 구현예에서, 암의 치료에서 본 발명의 키트 부품의 용도는 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체의 독립적인 투약을 포함한다. 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 동시적으로 또는 순차적으로 (연속적으로), 즉 시간적으로 교대로 투여될 수 있다. 본 발명의 키트 부품에 포함되는 바, 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 투여 이전에 조합될 수 있으며, 조성물로서 다함께 투여될 수 있거나 별도로 투여될 수 있다. 더욱 바람직한 구현예에서, 본 발명의 키트 부품에 포함되는 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 별도로 투여된다.
특정 구현예에서, 본 발명에 따라 사용되는 키트 부품 또는 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해 투여된다. 본 발명에 따라 사용되는 키트 부품 또는 조성물은 정맥내, 뇌내 (대뇌내), 경구, 근육내, 피하, 경피, 피부내, 점막내, 비강내, 설하, 복강내 또는 안구내 경로에 의해 투여될 수 있다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따라 사용되는 키트 부품 또는 조성물은 전신적으로, 즉 장내로 또는 비경구로 투여된다. 더욱 바람직하게, 본 발명에 따라 사용되는 키트 부품 또는 조성물은 정맥내로, 피하로 또는 복강내로 투여된다.
더욱 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 키트 부품 또는 조성물은 전신 투여를 위한 것이다. 더욱 바람직하게, 본 발명에 따른 키트 부품 또는 조성물은 정맥내로 또는 복강내로 투여되고, 더욱 더 바람직하게 정맥내로 투여된다.
본 발명에 따른 키트 부품에서 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 동일한 경로를 통해, 또는 바람직하게 상이한 경로를 통해 투여될 수 있다. 더욱 바람직하게, 본 발명에 따른 키트 부품에서 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 동일한 경로를 통해 투여된다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 키트 부품에서 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 순차적으로 또는 동시적으로, 바람직하게 순차적으로 투여된다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 키트 부품에서 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 상이한 경로를 통해 순차적으로 투여된다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 키트 부품에서 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 동일한 경로를 통해 동시적으로 투여된다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 키트 부품에서 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 순차적으로 또는 동시적으로, 바람직하게 순차적으로 투여되고, 여기서 본 발명의 키트 부품의 하나의 화합물 (또는 일부)은 복강내 주사를 통해 투여되고, 적어도 하나의 나머지 화합물 (또는 일부)은 정맥내 주사를 통해 투여된다. 바람직한 구현예에서, 본 발명에 따른 키트 부품에서 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 순차적으로 또는 동시적으로, 바람직하게 순차적으로 투여되고, 여기서 다중복합체는 정맥내 주사를 통해 투여되고, 면역조절성 항체는 복강내 또는 정맥내 주사를 통해 투여된다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 다중복합체는 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 이전에 투여된다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 순차적으로 투여되고, 여기서 다중복합체는 정맥내 주사를 통해 투여되고, 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체는 복강내 또는 정맥내 주사를 통해 투여되고, 다중복합체는 항체 이전에 투여된다.
본 발명의 키트 부품 또는 조성물로 투여되는 다중복합체의 양 또는 농도 대비 하나 이상의 항체의 양 또는 농도의 비율은, 예로 치료될 단일 환자 또는 환자 하위집단의 필요를 대처하기 위하여 달라질 수 있으며, 필요가 환자의 연령, 성별, 체중, 병태 등으로 인해 상이할 수 있다.
본 발명의 키트 부품는 애드-온 요법으로서 추가로 사용될 수 있다. 본원에 사용된 바, "애드-온 요법"은 상기 다중복합체, 및 상기 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는 적어도 하나의 항체의 조립물로서, 요법을 받는 대상체는 제 1 치료 섭생을 키트 부품의 하나 이상의 상이한 부분으로 시작하고, 다음으로 제 1 치료 섭생에 추가한 키트 부품의 하나 이상의 상이한 부분으로 제 2 치료 섭생을 시작하여, 요법에 사용된 시약이 모두 동시에 시작되지 않는, 조립물을 의미한다. 예를 들면, 하나 이상의 면역조절성 항체는 본 발명의 다중복합체를 미리 투여받은 환자에게 투여되거나 이의 역도 성립한다.
본 발명은 이제 하기 비-제한적인 실시예에 의해 설명될 것이다.
실시예
하기에서, 본 발명은 실시예에 의해 추가로 설명된다. 여기서 본 발명의 바람직한 다중복합체를 사용하였다. 상기 바람직한 다중복합체의 합성은 국제특허출원 제 WO 2015/173824호, 구체적으로 실시예 11 내지 13에, 더욱 구체적으로 국제특허출원 제 WO 2015/173824호의 실시예 12에 기재되어 있으며, 이는 본원에서 전문이 참고문헌으로 통합된다. 본원에서는 PEI 및 PEG 모이어티, 및 DUPA 모이어티를 포함하는 바람직한 중합체 컨쥬게이트를 "PEI-PEG-DUPA"로서 약어화하고, 폴리IC를 갖는 상응하는 바람직한 다중복합체는 상호교환적으로 "PEI-PEG-DUPA/polyIC" 또는 "PPD/PIC"로서 약어화한다.
실시예 1 - PEI-PEG-DUPA/polyIC 단독의 효과
강력한 케모카인, IFN-γ 유도된 단백질 10 (IP-10/CXCL10)의 분비는 하기와 같이 평가하였다: LNCaP 및 MCF7 세포 (96-웰 플레이트에서 웰 당 40,000개 세포 접종)는 다양한 농도의 PEI-PEG-DUPA/polyIC (0.125 μg/mL, 0.25 μg/mL, 0.5 μg/mL, 1.0 μg/mL)로 5시간 동안 처리하였다. 인간 IP-10 (CXCL10) 분비는 ELISA 검정법 (ABTS ELISA 현상 키트, 펩프로테크사, 카탈로그 번호 900-K39)에 의해 정량화하였다. 높은 PSMA 수준을 발현하는 LNCaP 세포에 의한 IP-10 분비는PEI-PEG-DUPA/polyIC와의 5시간의 배양 이후에 강하게 증가하였다 (도 1).
PD-L1의 세포 표면 발현은 하기와 같이 평가하였다: LNCaP 세포 (ATCC)는 편평한 바닥 12-웰 플레이트에 접종하고, 0.031 μg/mL, 0.063 μg/mL 또는 0.125 μg/mL 농도의 PEI-PEG-DUPA/polyIC로 37℃에서 5시간 동안 처리하였다. 다음으로 LNCaP 세포는 트립신을 사용하여 탈착시키고, 세척하여 2% FCS가 있는 PBS에 있는 항-PD-L1-PE 표지된 항체 (바이오레전드사, 카탈로그 번호 393607) 또는 IgG1 이소형 대조군 (바이오레전드사, 카탈로그 번호 400114)으로 얼음 위에서 35분 동안 염색하였으며, FACS 기기 (FACS 아리아Ⅱ, BD)에 의해 분석하였다. 0.031 μg/mL, 0.063 μg/mL 또는 0.125 μg/mL PEI-PEG-DUPA/polyIC로의 처리는 미처리된 대조군과 비교하여 (MFI = 579), PD-L1 발현에서 용량 의존적 증가를 생성하였다 (각각 MFI = 695, 725, 788). 이소형 대조군은 음성 대조군으로서 사용하였다 (MFI = 153) (도 2).
결론: 강력한 케모카인 IP-10의 분비는 PEI-PEG-DUPA/polyIC로의 처리 이후에 PSMA 과다발현하는 세포주, LNCaP에서 강하게 유도되었다. PSMA를 발현하지 않는 MCF7 세포에서는 IP-10 수준이 검출불가능하였다. PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리 이후에 IP-10의 증가는 본 발명의 조합의 면역자극성 성질을 겨냥하는 합리적 근거를 제공하였다. 또한, PD-L1 세포 표면 발현이 PEI-PEG-DUPA/polyIC로의 처리 이후에 유도되었으며, 미처리된 PSMA 과다발현하는 LNCaP 세포에서보다 더 강력하여 니볼루맙과 조합을 개발하기 위한 근거를 제공하였다.
실시예 2 - 보조자극성 4-1BB 항체와 조합한 PEI-PEG-DUPA/polyIC의 시험관내 효과
하기 실험은 단일 제제 처리와 비교하여 항-4-1BB 항체와 본 발명의 다중복합체의 조합의 유익을 입증하고 있다. PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리된 LNCaP 세포와 공동-배양된 PBMC로부터의 IFN-γ 방출을 정량화하였다.
PSMA 과다발현하는 LNCaP 세포 (96-웰 플레이트에서 웰 당 40,000개 세포 접종)는 0.125 μg/mL의 PEI-PEG-DUPA/polyIC로 5시간 동안 처리하였다. 건강한 공여자로부터 얻은 항-CD3 항체 자극되거나 (클론 OKT3, 5 ng/mL) 자극되지 않은 PBMC (200,000개 세포)를 4-1BB에 대한 항체의 존재 또는 부재 하에 첨가하였다. 다음으로 PBMC는 단독으로 또는 PEI-PEG-DUPA/polyIC와 조합하여 4-1BB에 대한 항체 (바이오레전드사 클론, 4B4-1; 10 μg/mL)로 처리된 LNCaP 세포와 16시간 동안 공동-배양하였다 ((+)4-1BB; 도 3b). 대조군으로서, PBMC를 4-1BB가 없이 PEI-PEG-DUPA/polyIC로 처리되지 않거나 처리된 LNCaP 세포와 16시간 동안 공동-배양하였다 ((-)4-1BB; 도 3a 및 도 3b). 16시간의 공동-배양 이후에, 배지를 수집하고, 인간 IFN-γ를 ELISA 검정법 (BD 바이오사이언스사, 카탈로그 번호 555142)에 의해 측정하였다.
항-4-1BB 항체와 PEI-PEG-DUPA/polyIC의 조합 ((+)4-1BB)은 둘 중 하나의 단독 처리와 비교하여 IFN-γ 분비의 유의한 2배 증가를 유도하였다 (도 3a 및 도 3b). 항-CD-3 자극된 PBMC 및 PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리된 LNCaP 세포의 공동-배양은 미처리된 LNCaP와 공동-배양된 항-CD-3 자극된 PBMC (항-CD3 단독)와 비교하여 IFN-γ 분비에서 경미한 증가만을 유도하였다 (도 3a).
결론: PEI-PEG-DUPA/polyIC로 처리된 LNCaP와 PBMC를 공동-배양하는 것은 PBMC로부터 IFN-γ의 분비를 유도하였다. PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리와 항-4-1BB 항체를 조합하는 것은 둘 중 하나의 단독 제제 처리와 비교하여 항-CD3 자극된 PBMC로부터 IFN-γ 분비에서 2배 및 유의한 증가를 유도하였다.
실시예 3 - 체크포인트 억제인자 항-PD-1 항체와 조합한 PEI-PEG-DUPA/polyIC의 시험관내 효과
하기 실험은 단일 제제 처리와 비교하여 니볼루맙과 본 발명의 다중복합체의 조합의 유익을 입증하고 있다. 항-PD-1 항체 (니볼루맙)의 존재 또는 부재 하에 PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리된 LNCaP 세포의 상청액에 노출되었던 항-CD3 항체 자극되거나 자극되지 않은 PBMC로부터의 IFN-γ (인간) 방출은 ELISA에 의해 정량화하였다.
본 발명에서, PEI-PEG-DUPA 삼중컨쥬게이트 및 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체는 국제특허출원 제 WO 2015/173824호, 실시예 12; Langut et al., PNAS, 2017년 12월 26일, 114: 52; 및 국제특허출원 제 WO 2019063705A1호에 따라 제조하였다.
항-PD-1 항체 (니볼루맙)는 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 및 체크포인트 차단의 조합을 테스트하는데 사용하였다. 항-PD-1 항체 (니볼루맙)는 단독으로 또는 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체와 조합하여 사용하였다. 항-CD3 항체 (클론 OKT3, 500 ng/mL)는 처리된 LNCaP 세포로부터의 배지를 전달한 이후에 PBMC를 자극시키는데 사용하였다. 항-PD-1 항체 (니볼루맙)는 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 및 체크포인트 차단의 조합을 테스트하는데 사용하였다. 인간 IFN-γ 분비는 제조사의 지침에 따라 ELISA 키트 (BD 바이오사이언스사)로 결정하였다.
LNCaP 세포는 편평한 바닥 96-웰 플레이트에 접종하였다 (RPMI-1640 배지의 웰 당 40,000개 세포). 동시에, 배지 단독의 플레이트 (세포가 없는 90 μL 배지)를 음성 대조군으로서 준비하였다. 다음 날, LNCaP 세포 또는 배지 단독은 125 μg/mL의 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 (10 μL/웰)로 37℃에 5시간 동안 처리하거나 처리하지 않았다. 냉동된 PBMC는 해동시키고, U-바닥 96-웰 플레이트에서 RPMI-1640 배지로 37℃에 적어도 5시간 동안 회복하도록 허용하였다 (200,000개 세포/100 μL). 5시간 이후에, PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 LNCaP 세포로부터의 상청액 ("LNCaP 상청액"), PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 "처리된" 배지 ("배지 단독") 또는 UT 미처리 배지가 건강한 공여자로부터의 항-CD3 항체 자극된 (OKT3, 500 ng/mL) 자극되거나 자극되지 않은 PBMC에 전달되었다. 이후에, PBMC는 항-CD3 항체 (OKT3, 500 ng/mL)를 사용하여 자극되고/거나, 니볼루맙 (20 μg/mL)으로 처리하고, 37℃에서 o/n 배양하였다. 자극된 PBMC의 SN을 수집하고, IFN-γ ELISA (BD 바이오사이언스사, 카탈로그 번호 555142)에 의해 분석할 때까지 -20℃에 보관하였다.
니볼루맙과 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체를 조합하는 것이 시험관내 면역 세포 활성화에 미치는 효과를 모델링하기 위하여, 하기와 같이 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체로 처리하였던 LNCaP 세포의 SN가 건강한 공여자로부터 얻은 인간 PBMC에 전달되고, 니볼루맙과 조합하여 처리하였다. LNCaP 세포는 표시된 농도의 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체로 5시간 동안 처리하였다, 대조군으로서 세포가 없는 배지를 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체로 처리하고, 마찬가지로 5시간 동안 배양하였다. 5시간 이후에, 항-CD3 항체로 자극되거나 자극되지 않은 PBMC는 하기와 같이 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 LNCaP 세포 단독으로부터의 SN, PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 배지 단독, 니볼루맙을 더한 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 LNCaP 세포로부터의 SN, 또는 니볼루맙을 더한 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 배지로 처리하였다. PBMC 활성화를 평가하기 위하여, PBMC로부터 분비된 IFN-γ를 ELISA에 의해 정량화하였다.
도 4 및 표 1에서 관찰할 수 있는 바와 같이, 항-CD3 항체 자극된 PBMC는 낮은 수준의 IFN-γ를 분비하였다. 니볼루맙이 있거나 없이 PEI-PEG-DUPA/polyIC 배지로 처리되거나 처리되지 않은 배지의 첨가는 IFN-γ 분비의 유의한 증가를 유도하지 않았다. 그러나, LNCaP 세포로부터의 SN의 첨가는 IFN-γ 분비의 증가를 유도하고 (1788.6 pg/mL), 이는 PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리된 LNCaP 세포로부터의 SN ("LNCaP 상청액")으로 추가로 상승하였다 (2893.4 pg/mL). 니볼루맙이 존재 또는 부재 하에 UT 세포로부터의 상청액이 있는 항-CD3 자극된 PBMC로부터 IFN-γ의 분비는 유의하게 상이하지 않았다 (2042.3 pg/mL). 그러나, 니볼루맙 및 PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리된 LNCaP 세포로부터의 상청액과의 조합에서 IFN-γ의 분비가 강하게 증진되었다 (4448.2 pg/mL).
도 4 및 표 1에서 관찰할 수 있는 바와 같이, PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 LNCaP 세포로부터의 SN ("LNCaP 상청액")이 투여된 CD3 자극된 PBMC는 미처리된 (UT) 세포로부터의 SN이 첨가된 PBMC (1788.6 pg/mL)보다 더 높은 농도의 IFN-γ의 분비를 유도하였다 (2893.4 pg/mL). IFN-γ 분비는 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 LNCaP 세포로부터의 배지가 투여된 PBMC에 니볼루맙을 투여하여 추가로 유의하게 증진되었다 (4448.2 pg/ml). 니볼루맙을 더한 미처리된 세포로부터의 SN이 투여된 PBMC는 더 낮은 수준의 IFN-γ를 분비하였다 (2042.3 pg/mL). PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 처리된 배지 (세포가 없음)의 단독 ("배지 단독") 또는 니볼루맙과의 조합은 UT 배지와 비교하여 IFN-γ 분비의 증가를 유도하지 않았다.
결론: 니볼루맙과 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체의 조합은 니볼루맙 또는 PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리된 LNCaP 세포 단독으로부터의 상청액 둘 중 하나로 처리된 PBMC와 비교하여, 조합으로 처리된 항-CD3 자극된 PBMC로부터의 증가된 IFN-γ 분비로 관찰되는 바, PBMC의 활성화를 유의하게 증가시켰다. PBMC는 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체의 단독 처리가 아닌, PEI-PEG-DUPA/polyIC 처리된 LNCaP 암 세포로부터 분비된 사이토카인에 의해 활성화된다. 하기 표 1은 PEI-PEG-DUPA/polyIC 다중복합체 및 니볼루맙의 조합이 IFN-γ ELISA에 의해 입증된 바 PBMC 활성화를 증가시킴을 나타낸다.
Figure pct00013
Figure pct00014
SEQUENCE LISTING <110> TargImmune Therapeutics AG <120> IMMUNOTHERAPY FOR THE TREATMENT OF CANCER <130> P6080PC00 <150> EP20200835.5 <151> 2020-10-08 <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> X is 8-aminooctanoic acid. <400> 1 Xaa Phe Gly Trp Trp Gly Cys 1 5 <210> 2 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> X is 8-aminooctanoic acid <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> X is diaminopropionic acid <400> 2 Xaa Phe Phe Xaa Asp Cys 1 5

Claims (15)

  1. 키트의 부품 또는 조성물로서,
    (a) 이중가닥 RNA (dsRNA) 및 중합체 컨쥬게이트를 포함하는 다중복합체로서, 상기 중합체 컨쥬게이트는 폴리에틸렌이민 (PEI), 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티 및 하나 이상의 표적화 모이어티를 포함하고, 상기 PEI는 하나 이상의 PEG 모이어티에 공유 결합되고, 상기 하나 이상의 PEG 모이어티 각각은 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 중 하나와 연결되고, 상기 하나 이상의 표적화 모이어티 각각은 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA)에 결합할 수 있는, 다중복합체; 및
    (b) 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자로서, 면역 체크포인트 단백질을 조정할 수 있는, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자
    를 포함하는, 키트 부품 및 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 면역 체크포인트 조절인자는 작동적 또는 길항적 항체인, 조성물 및 키트 부품.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
    상기 면역 체크포인트 단백질은 4-1BB, PD-1, PD-L1 및 PD-L2로 이루어진 군으로부터 선택되는, 조성물 및 키트 부품.
  4. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 면역 체크포인트 단백질은 4-1BB 또는 PD-1인, 조성물 및 키트 부품.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 항-4-1BB 항체, 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체 및 항-PD-L2 항체로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체, 바람직하게 항-4-1BB 항체 또는 항-PD-1 항체인, 조성물 및 키트 부품.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절인자는 (i) 상기 면역 체크포인트 단백질 4-1BB를 조정할 수 있는 조절인자; 및 (ii) PD-1, PD-L1 및 PD-L2으로 이루어진 군으로부터 선택되는 면역 체크포인트 단백질, 바람직하게 PD-1을 조정할 수 있는 조절인자를 포함하는 혼합물인, 조성물 및 키트 부품.
  7. 제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제인, 조성물 및 키트 부품.
  8. 제 7항에 있어서,
    상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 글루타메이트-우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제인, 조성물 및 키트 부품.
  9. 제 8항에 있어서,
    상기 글루타메이트-우레아 기반의 PSMA 펩티다제 저해제는 약 2,000 g/mol 미만, 바람직하게 약 1,000 g/mol 미만, 더욱 바람직하게 약 500 g/mol 미만의 분자량을 갖는, 조성물 및 키트 부품.
  10. 제 1항 내지 제 9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 하나 이상의 표적화 모이어티는 DUPA 유도체 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-CH2-) 또는 DUPA 모이어티 (HOOC(CH2)2-CH(COOH)-NH-CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-)를 포함하거나, 바람직하게 이로 구성되는, 조성물 및 키트 부품.
  11. 제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 폴리에틸렌이민 (PEI)은 1개, 2개 또는 3개의 PEG 모이어티, 바람직하게 1개 또는 3개의 PEG 모이어티에 공유 결합되는, 조성물 및 키트 부품.
  12. 제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 폴리에틸렌이민 (PEI)은 선형의 폴리에틸렌이민 (LPEI)인, 조성물 및 키트 부품.
  13. 제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 dsRNA는 폴리이노신-폴리사이티딘 산 이중가닥 RNA (폴리IC)인, 조성물 및 키트 부품.
  14. 암의 치료에 사용되는 조성물 및 키트 부품.
  15. 제 14항에 있어서,
    상기 암은 고형암이고, 바람직하게 상기 고형암은 전립샘 암, 요로상피 세포 암종, 방광암, 교모세포종 (GBM), 비-소세포 폐암, 유방암, 침샘 종양, 간세포 암종, 식도, 위 및 소장의 샘암종, 및 두경부 편평세포 암종으로부터 선택되는, 조성물 및 키트 부품.
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024100044A1 (en) * 2022-11-07 2024-05-16 Targimmune Therapeutics Ag Polyplexes of nucleic acids and targeted conjugates comprising polyethyleneimine and polyethylene glycol
WO2024100046A1 (en) * 2022-11-07 2024-05-16 Targimmune Therapeutics Ag Targeted linear conjugates comprising polyethyleneimine and polyethylene glycol and polyplexes comprising the same
WO2024100040A1 (en) * 2022-11-07 2024-05-16 Targimmune Therapeutics Ag Psma-targeting linear conjugates comprising polyethyleneimine and polyethylene glycol and polyplexes comprising the same

Family Cites Families (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5162504A (en) 1988-06-03 1992-11-10 Cytogen Corporation Monoclonal antibodies to a new antigenic marker in epithelial prostatic cells and serum of prostatic cancer patients
US6136311A (en) 1996-05-06 2000-10-24 Cornell Research Foundation, Inc. Treatment and diagnosis of cancer
US6368598B1 (en) 1996-09-16 2002-04-09 Jcrt Radiation Oncology Support Services, Inc. Drug complex for treatment of metastatic prostate cancer
US6995284B2 (en) 2000-08-24 2006-02-07 The University Of Tennessee Research Foundation Synthesis of selective androgen receptor modulators
US7205437B2 (en) 1996-11-27 2007-04-17 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators
US6492554B2 (en) 2000-08-24 2002-12-10 The University Of Tennessee Research Corporation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US7518013B2 (en) 2000-08-24 2009-04-14 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators
US7759520B2 (en) 1996-11-27 2010-07-20 University Of Tennessee Research Foundation Synthesis of selective androgen receptor modulators
US20030232792A1 (en) 2000-08-24 2003-12-18 Dalton James T. Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US20020173495A1 (en) 2000-08-24 2002-11-21 Dalton James T. Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US7026500B2 (en) 2000-08-24 2006-04-11 University Of Tennessee Research Foundation Halogenated selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
EP1705174A1 (en) 2000-08-24 2006-09-27 The University Of Tennessee Research Corporation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US6998500B2 (en) 2000-08-24 2006-02-14 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US20040260108A1 (en) 2001-06-25 2004-12-23 Dalton James T. Metabolites of selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US6838484B2 (en) 2000-08-24 2005-01-04 University Of Tennessee Research Foundation Formulations comprising selective androgen receptor modulators
US20030022868A1 (en) 2001-06-25 2003-01-30 Dalton James T. Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US20060004042A1 (en) 2001-08-23 2006-01-05 Dalton James T Formulations comprising selective androgen receptor modulators
AU2002365360A1 (en) 2001-11-28 2003-06-10 Biopolymed Inc. Biologically active non-antigenic copolymer and conjugates thereof and methods for producing the same
WO2003057670A2 (en) 2001-12-28 2003-07-17 Guilford Pharmaceuticals Inc. Indoles as naaladase inhibitors
US20030232013A1 (en) 2002-02-22 2003-12-18 Gary Sieckman Therapeutic and diagnostic targeting of cancers cells with tumor homing peptides
AU2003217304A1 (en) 2002-02-28 2003-09-16 The University Of Tennessee Research Corporation Radiolabeled selective androgen receptor modulators and their use in prostate cancer imaging and therapy
US7803970B2 (en) 2002-02-28 2010-09-28 University Of Tennessee Research Foundation Multi-substitued selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
EP1487780A4 (en) 2002-02-28 2005-11-16 Univ Tennessee Res Foundation HALOGENACETAMIDE AND AZIDSUBSTITUTED COMPOUNDS AND METHOD FOR THEIR USE
KR20040101251A (ko) 2002-02-28 2004-12-02 유니버시티 오브 테네시 리서치 파운데이션 다치환된 선택적 안드로겐 수용체 모듈레이터 및 이를사용하는 방법
WO2003106401A1 (en) 2002-06-17 2003-12-24 University Of Tennessee Research Foundation N-bridged selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US7741371B2 (en) 2002-06-17 2010-06-22 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
EP1562594A4 (en) 2002-10-15 2008-12-17 Univ Tennessee Res Foundation SELECTIVE ANDROGEN RECEPTOR MODULATORS WITH METHYLENE BRIDGES AND METHOD OF USE THEREOF
US20040087810A1 (en) 2002-10-23 2004-05-06 Dalton James T. Irreversible selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US7968721B2 (en) 2003-01-13 2011-06-28 University Of Tennessee Research Foundation Large-scale synthesis of selective androgen receptor modulators
US20040167103A1 (en) 2003-02-24 2004-08-26 Dalton James T. Haloacetamide and azide substituted compounds and methods of use thereof
US20060258628A1 (en) 2004-07-20 2006-11-16 Steiner Mitchell S Compositions comprising 5-alpha reductase inhibitors, and SARMs and methods of use thereof
JP4361545B2 (ja) 2005-05-09 2009-11-11 小野薬品工業株式会社 ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＤｅａｔｈ１（ＰＤ−１）に対するヒトモノクローナル抗体および抗ＰＤ−１抗体単独または他の免疫療法と併用した癌治療方法
US20070225213A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Kosak Matthew K Nucleic acid carriers for delivery of therapeutic agents
JP2009534309A (ja) 2006-03-31 2009-09-24 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 治療剤の標的化送達のためのシステム
WO2008124634A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Polymer-encapsulated reverse micelles
PL2170959T3 (pl) 2007-06-18 2014-03-31 Merck Sharp & Dohme Przeciwciała przeciwko ludzkiemu receptorowi programowanej śmierci PD-1
EP3831380A3 (en) 2007-08-17 2021-12-01 Purdue Research Foundation Psma binding ligand-linker conjugates and methods for using
ES2647538T3 (es) 2007-09-28 2017-12-22 Pfizer Inc. Direccionamiento a células de cáncer usando nanopartículas
WO2009131435A1 (en) 2008-04-23 2009-10-29 Erasmus University Medical Center Rotterdam Linker containing bungarotoxin and a binding peptide
SI2285350T1 (en) 2008-06-16 2018-03-30 Pfizer Inc. Methods for the preparation of diblock copolymers functionalized with targeting agent for use in the manufacture of therapeutic nanoparticles
US20110288152A1 (en) 2008-10-17 2011-11-24 Purdue Research Foundation Psma binding ligand-linker conjugates and methods for using
EP2376535B9 (en) 2008-12-09 2017-09-13 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
US8287910B2 (en) 2009-04-30 2012-10-16 Intezyne Technologies, Inc. Polymeric micelles for polynucleotide encapsulation
HUE049647T2 (hu) 2009-11-24 2020-09-28 Medimmune Ltd Targetált kötõdõ ágensek B7-H1 ellen
JP6175237B2 (ja) 2009-12-15 2017-08-02 ファイザー・インク コルチコステロイドを含む治療用ポリマーナノ粒およびそれを製造かつ使用する方法
WO2011084521A2 (en) 2009-12-15 2011-07-14 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles comprising epothilone and methods of making and using same
EA201290499A1 (ru) 2009-12-15 2013-01-30 Байнд Байосайенсиз, Инк. Композиции терапевтических полимерных наночастиц с высокой температурой стеклования и высокомолекулярными сополимерами
WO2011108930A1 (en) 2010-03-04 2011-09-09 Interna Technologies Bv A MiRNA MOLECULE DEFINED BY ITS SOURCE AND ITS DIAGNOSTIC AND THERAPEUTIC USES IN DISEASES OR CONDITIONS ASSOCIATED WITH EMT
EP2591106A1 (en) 2010-07-06 2013-05-15 InteRNA Technologies B.V. Mirna and its diagnostic and therapeutic uses in diseases or conditions associated with melanoma, or in diseases or conditions associated with activated braf pathway
US20130202652A1 (en) 2010-07-30 2013-08-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for delivery of active agents
EP2691120A4 (en) 2011-03-31 2014-09-24 Univ Johns Hopkins THERANOSTIC IMAGING AGENTS AND METHODS OF USE
WO2012166923A2 (en) 2011-05-31 2012-12-06 Bind Biosciences Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
EP3800256A1 (en) 2012-11-06 2021-04-07 InteRNA Technologies B.V. Combination to be used in therapeutic use against diseases or conditions associated with melanoma, or in diseases or conditions associated with activated b-raf pathway
AP2016009494A0 (en) 2014-03-14 2016-10-31 Pfizer Therapeutic nanoparticles comprising a therapeutic agent and methods of making and using same
CN107073090A (zh) 2014-04-30 2017-08-18 哈佛学院董事会 结合的疫苗装置和杀死癌细胞的方法
CN106687121A (zh) 2014-05-14 2017-05-17 亚历克斯利维斯兹奇管理和控股有限公司 改善的聚乙烯亚胺聚乙二醇载体
WO2016183447A1 (en) 2015-05-14 2016-11-17 The Johns Hopkins University Compositions of nucleic acid-containing nanoparticles for in vivo delivery
US20170209374A1 (en) 2015-09-11 2017-07-27 Pfizer Inc. Methods of controlling the morphology of polymeric nanoparticles
CN108289906B (zh) 2015-11-19 2022-03-11 公立大学法人名古屋市立大学 抗肿瘤性药物递送制剂
EP3380113A1 (en) 2015-11-25 2018-10-03 Pfizer Inc. Therapeutic nanoparticles comprising an antibiotic and methods of making and using same
WO2019063705A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Targimmune Therapeutics Ag CANCER OF THE PROSTATE RESISTANT TO CASTRATION
US20210346420A1 (en) * 2018-10-10 2021-11-11 The Regents Of The University Of California Combination immunotherapies
US20220175814A1 (en) * 2019-04-03 2022-06-09 Targimmune Therapeutics Ag Immunotherapy for the treatment of cancer

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