KR20230026490A

KR20230026490A - 아밀로이드 베타 1-42에 결합하는 항체를 이용한 축삭 손상의 예방

Info

Publication number: KR20230026490A
Application number: KR1020237002535A
Authority: KR
Inventors: 키이스 탄; 크레이그 셰링; 존 알 심즈; 제프리 엘 데이지
Original assignee: 메디뮨 리미티드; 일라이 릴리 앤드 캄파니
Priority date: 2020-06-25
Filing date: 2021-06-25
Publication date: 2023-02-24
Also published as: BR112022026359A2; IL299215A; TW202216188A; WO2021260193A1; US20230287092A1; AU2021295605A1; JP2023531069A; EP4171742A1; CN116547299A; CA3187785A1

Abstract

본 발명은 신경 축삭 손상의 예방에 관한 것이다. 더욱 특히, 본 발명은 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원을 이용한 신경 축삭 손상의 예방으로서, 상기 결합 구성원을 이용한 환자 치료가 환자에서 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준을 감소시키는 것인 신경 축삭 손상의 예방에 관한 것이다.

Description

아밀로이드 베타 1-42에 결합하는 항체를 이용한 축삭 손상의 예방

본 발명은 신경 축삭 손상의 예방에 관한 것이다. 더욱 특히, 본 발명은 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원을 이용한 신경 축삭 손상의 예방으로서, 상기 결합 구성원을 이용한 환자 치료가 환자에서 신경필라멘트 경쇄(NfL: neurofilament light chain) 수준을 감소시키는 것인 신경 축삭 손상의 예방에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 에 관한 것이다. 본 발명은 알츠하이머병 치료에 관한 것이다.

알츠하이머병(AD: Alzheimer's Disease)은 인지 장애가 악화되어 환자의 사회적 및 직업적 기능을 약화시키는 기억력에 영향을 주는 것을 특징으로 한다. 퇴행성 질환은 뇌 속 신경 세포의 소실을 일으켜 언어 및 예컨대, 판단력, 계획력, 조직력, 추리력 등의 고차원 기능에 인지적 어려움을 가져오며, 이는 결국 성격 변화로 이어질 수 있다. 질환의 말기 단계는 독립적인 기능의 완전한 상실을 특징으로 한다.

알츠하이머병(AD), 특히, AD와 연관된 신경 축삭 손상과 연관된 우세한 병리는 세포외 공간에 침착된 플라크 및 미세소관 연관 단백질 tau의 신경세포내 신경섬유 엉킴이다.

플라크는 뇌의 뉴런과 성상세포에서 발견되는 막횡단 단백질인 아밀로이드 전구체 단백질(APP: amyloid precursor protein)의 비정상적인 절단으로부터 유도된 아밀로이드 β 펩티드(Aβ)의 응집체이다.

Aβ는 길이가 상이한 종을 생성하기 위해 세크레타제에 의해 순차적으로 절단되는 APP로부터 생성된다. 주요 플라크 성분은 AD 병인에서 신경독성 올리고머 및 플라크 형성에 관여하는 Aβ 1-42의 42개 아미노산 이소폼이다. Aβ 1-42, pGluAβ3-42, Aβ3-42 및 Aβ4-42를 포함하는 Aβ의 다수의 이소폼은 AD 뇌에서 우세하며, 그 중 Aβ1-42 및 Aβ4-42는 가족성 및 산발성 AD의 해마 및 피질에서 주요 형태이다. 잔기 42에서 끝나는 Aβ는 APP의 프로세싱에 의해 생성된 Aβ 종의 부성분이다. 다른 형태는 Aβ1-40 및 N-말단 말단절단체 Aβn-40을 포함한다. 그러나, 잔기 42에서 끝나는 Aβ는 응집되기 가장 쉽고, 아밀로이드 플라크로 침착을 유도한다. Aβ1-42 펩티드는 응집되기 더 쉬운 것 이외에도, 배양물에서 뉴런에 독성이 있는 것으로 나타난 가용성 저-n 중합체(또는 올리고머)를 형성한다. 더 큰 눈에 띄는 피브릴 침전물과 달리, 올리고머는 전형적인 병리 검정에서 검출되지 않는다. 유사한 특성을 가진 올리고머가 AD 뇌에서 단리되었으며, 이들은 플라크보다 질환 진행과 더 밀접하게 연관성을 갖는다.

아밀로이드 캐스케이드 가설 및 이후 Aβ 올리고머 가설로의 그의 진화는 AD 개시에 대한 지배적인 모델로 남아 있다. 결과적으로, Aβ가 치료 개입의 주요 표적이 되었고, 지난 20년 동안 임상 시험에서 대부분의 실험 약물은 Aβ의 생산을 감소시키거나(소분자 γ-세크레타제 및 BACE 억제제 사용), 또는 제거를 촉진시키는(면역요법 사용) 것에 관한 것이었다. 현재까지 상기 전략법 중 어느 것에 의해서도 AD에 대한 승인받은 질환 조절 치료를 얻지 못했다.

이러한 이전 접근법은 펩티드의 Aβ40 및 Aβ42 형태, 둘 모두를 표적화한다. Aβ1-42 및 Aβ1-43은 매우 소수성이고, 자기 응집성인 반면, Aβ1-40은 소수성이 적고, 실제로 항아밀로이드생성일 수 있으며, 뇌에서 신경 보호효과가 있다. 추가로, 프레세닐린(PSEN1, 감마-세크레타제 복합체의 촉매 서브유닛) 내의 대부분의 돌연변이는 전체 Aβ 생성을 증가시키지 않지만, 대신 Aβ의 더욱 긴(덜 트리밍된) 아밀로이드생성 종(≥Aβ42)의 방출과 비를 증가시킨다. 전장 Aβ1-42 외에도, 예컨대, 피로글루타메이트 변형 Aβ3-42(pGlu-Aβ3-42)와 같은 N-말단 말단절단된 버전을 포함하여 다른 고도의 아밀로이드생성 및 신경독성 형태의 Aβ도 AD 뇌에 풍부하며, 여기서, N-말단 지정 항체는 반응성이 없을 수 있다. 몇몇 N-말단 항체는 또한 예컨대, 미세 출혈 및 혈관성 부종과 같은 부작용을 유발하였고, 이는 아마도 뇌 실질 및 혈관 Aβ 침전물 사이의 차별 없이 이루어진 불용성 플라크의 표적화, 및 이펙터 기능이 활성화된 결과일 수 있다.

AD는 복잡한 다인성 질환이며, Aβ 축적과 함께 많은 유전적, 환경적, 혈관적, 대사적, 염증적 요인을 수반한다. Aβ 플라크는 AD 진단 수십 년 전에 뇌에서 출현이 시작될 수 있으며, 임상적으로 제시된 질환의 초기 단계에서도 Aβ 침착이 거의 포화상태에 이르고, 다른 병리(즉, tau 및 신경염증)가 인계되었을 가능성이 있는 것으로 알려져 있다. 그럼에도 불구하고, AD 개시에서 Aβ 항상성 이상증의 주요 역할에 대한 압도적인 증거가 여전히 있으며, 기계론적 연구는 후기 발병 AD에 대한 여러 위험 유전자를 Aβ 항상성의 측면과 관련시킨다.

따라서, 예컨대, AD와 연관된 것인, 신경 축삭 손상을 예방하기 위한 개선된 약제가 여전히 요구되고 있다. 본 발명은 상기 언급된 문제 중 하나 이상을 것을 해결한다.

본 발명은 예컨대, Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 항체와 같은 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 대한 결합 구성원을 이용한 신경 축삭 손상의 예방에 관한 것이다.

본 발명의 핵심 측면은 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 신경 축삭 손상의 예방이 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여 환자의 NfL 수준을 감소시킨다는 것이다. 이전에는 아밀로이드 표적화와 NfL 수준 감소 사이에 어떠한 연관성도 없었기 때문에 이는 특히 놀라운 일이었다. 따라서, NfL 수준을 감소시키는 Aβ1-42의 선택적 결합은 AD와 연관된 것을 포함하여 신경 축삭 손상에 대한 새로운 치료 분야를 제공한다.

본 발명자들은 이전에 Aβ40 대비 전장 및 N-말단 말단절단된 형태의 Aβ42/43에 대해 높은 친화도 및 선택성을 갖는 완전 인간, 이펙터-널(null) 단일클론 항체(MEDI1814)의 발견, 임상전 및 초기 임상 개발을 기술하였다(WO 2014/060444, 이는 그 전문이 본원에서 참조로 포함된다). 본 발명자들은 이 항체를 이용하여 경증 내지 중등도 AD를 앓는 인간 환자를 대상으로 무작위, 이중 맹검, 위약 대조 연구를 수행하였고, Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원을 이용하여 아밀로이드 표적화, 특히, Aβ1-42 표적화가 환자에서의 뇌척수액(CSF: cerebrospinal fluid) 및 혈장 중 NfL 수준을 감소시킨다는 것을 입증하였다. 즉, 본 발명자들은 Aβ1-42의 선택적 결합 및 격리가 NfL의 감소에 의한 증거로서 신경 축삭 손상을 예방하고, 따라서, 예컨대, AD와 같은 신경퇴행 병태를 앓는 환자에서의 신경 축삭 손상 치료에서 잠재적인 유용성을 갖는다는 것을 최초로 입증하였다.

본 발명은 잠재적인 안전성, 효능 및 중요하게는 Aβ(Aβ1-42)의 주요 독성 빌딩 블록만을 표적화하는 동시에 Aβ1-40을 아끼는 측면에서 이전 Aβ 요법에 비해 상당한 이점을 제공한다.

따라서, 본 발명은 환자에서 알츠하이머병(AD)을 치료하는 방법으로서, 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원의 결합의 치료 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법으로서, 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하고, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인 방법을 제공한다.

상기 방법에서, 결합 구성원은 환자의 혈장 중 NfL 수준을 감소시킬 수 있다. 결합 구성원은 환자의 뇌척수액(CSF) 중 NfL 수준을 감소시킬 수 있다. 결합 구성원은 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여 NfL 수준을 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20%, 더욱 바람직하게는 적어도 30%, 더욱더 바람직하게는 적어도 50% 감소시킬 수 있다. NfL 수준은 ELISA, 임의로 SIMOA-HD1에 의해 측정될 수 있다.

상기 방법에서, 환자는 아밀로이드에 대해 양성일 수 있고, 임의로 환자는 (a) tau에 대해 음성; (b) 신경퇴행에 대해 음성; (c) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 음성; (d) tau에 대해 양성; (e) 신경퇴행에 대해 양성; (f) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 양성; (g) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 음성; 또는 (h) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 양성이다. 따라서, 본 방법은 환자를 아밀로이드 양성으로 확인하고, 임의로 환자를 (a) tau에 대해 음성; (b) 신경퇴행에 대해 음성; (c) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 음성; (d) tau에 대해 양성; (e) 신경퇴행에 대해 양성; (f) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 양성; (g) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 음성; 또는 (h) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 양성으로 확인하는 것을 포함할 수 있다. (i) 아밀로이드 양성 또는 음성; (ii) tau 양성 또는 음성; 및/또는 (iii) 신경퇴행 양성 또는 음성인 환자 상태는 (a) CSF 마커; (b) 혈장 마커; 및/또는 (c) 이미징 마커에 기초하여 독립적으로 결정될 수 있다. 상기 방법에서 (a) (i) 아밀로이드에 대한 CSF 마커는 CSF Aβ1-42일 수 있고/있거나; (ii) tau에 대한 CSF 마커는 CSF 포스포-tau일 수 있고/있거나; (iii) 신경퇴행에 대한 CSF 마커는 CSF 전체 tau일 수 있고/있거나; (b) (i) 아밀로이드에 대한 이미징 마커는 아밀로이드 이미징일 수 있고/있거나; (ii) tau에 대한 이미징 마커는 tau 이미징일 수 있고/있거나; (iii) 신경퇴행에 대한 이미징 마커는 자기 공명 이미징 또는 플루오로데옥시글루코스 양전자 방출 단층촬영일 수 있다.

인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원은 항체일 수 있다. 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 상기 항체는 500 pM 이하의 해리 상수(K_D)로 Aβ1-42에 결합할 수 있고, Aβ1-40에 결합하지 않거나 1 mM 초과의 K_D로 Aβ1-40에 결합한다.

상기 항체는 (a) Abet0380 HCDRS의 아미노산 서열이 (i) HCDR1 서열 번호 1; (ii) HCDR2 서열 번호 2; 및 (iii) HCDR3 서열 번호 3인 MEDI1814 HCDR 세트를 포함하거나; 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 MEDI1814 HCDR 세트를 포함하는 VH 도메인; 및 (b) MEDI1814 LCDRS의 아미노산 서열이 (i) LCDR1 서열 번호 4; (ii) LCDR2 서열 번호 5; 및 (iii) LCDR3 서열 번호 6인 MEDI1814 LCDR 세트를 포함하거나; 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 MEDI1814 LCDR 세트를 포함하는 VL 도메인을 포함할 수 있다.

상기 항체는 (a) (i) 서열 번호 9의 아미노산 서열이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 MEDI1814 VH 도메인; 및 서열 번호 10의 아미노산 서열이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 MEDI1814 VL 도메인; 또는 (b) (i) 서열 번호 7의 아미노산 서열 또는 그의 생식세포계열화 버전이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 Abet0380 VH 도메인; 및 (ii) 서열 번호 8의 아미노산 서열 또는 그의 생식세포계열화 버전이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 Abet0380 VL 도메인을 포함할 수 있다.

상기 항체는 수탁 번호 41890 하에 기탁된 Abet0380-GL 핵산 서열에 의해 코딩된 VH 및 VL 도메인을 포함할 수 있다.

상기 항체는 인간 IgG, 임의로 인간 IgG1 또는 인간 IgG2일 수 있다. 특히, 상기 항체는 인간 IgG1-TM, IgG1-YTEor IgG1-TM-YTE일 수 있다.

상기 항체는 ≥200 mg의 용량으로 투여될 수 있거나/투여를 위한 것일 수 있고, 임의로 항체는 약 200 mg의 용량으로, 더욱 바람직하게는 약 300 mg의 용량으로, 더욱더 바람직하게는 약 900 mg의 용량으로, 또는 더욱더 바람직하게는 약 1800 mg의 용량으로 투여된다.

상기 항체는 3.5주 내지 4.5주 간격으로 투여될 수 있거나/투여를 위한 것일 수 있고, 임의로 항체는 4주 간격으로(Q4W) 투여된다.

결합 구성원은 환자에게 정맥내로 또는 피하로 투여될 수 있거나/투여를 위한 것일 수 있다.

신경 축삭 손상은 알츠하이머병(AD), 임의로 경증 내지 중등도 AD, 증상 발현 전 AD, 및/또는 AD에 기인한 경도 인지 장애와 연관된 것일 수 있다.

상기 방법에서, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 pTau217 수준과 비교하여, 환자에서의 pTau217 수준을 감소시킬 수 있다.

상기 방법에서, 결합 구성원은 (i) 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여, 환자에서의 유리 Aβ1-42 수준을 감소시킬 수 있고/있거나; (ii) 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여, 환자에서의 전체 Aβ1-42 수준을 증가시킬 수 있다.

결합 구성원은 약학적 조성물 내에 포함될 수 있다.

본 발명은 환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 사용하기 위한, 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원으로서, 방법은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게 결합 구성원의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하고, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인 결합 구성원을 추가로 제공한다.

본 발명은 또한 본원에서 정의된 바와 같은 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 본원에서 정의된 바와 같은 신경 축삭 손상을 예방하는 방법의 효능을 평가하는 방법으로서, 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전 및 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 NfL 수준을 측정하는 것을 포함하고, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 NfL 수준이 감소되었다면, 신경 축삭 손상을 예방하는 방법은 유효한 것인 방법을 제공한다.

알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자의 혈장 중 NfL 수준이 감소되고, 임의로 NfL 혈장 수준의 감소가 적어도 30% 감소라면, 유효한 것으로 평가될 수 있다.

알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자의 CSF 중 NfL 수준이 감소되고, 임의로 NfL 혈장 수준의 감소가 적어도 30% 감소라면, 유효한 것으로 평가될 수 있다.

본 발명은 본원에 정의된 바와 같은 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 적합한 환자인지 확인하는 방법으로서, 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 CSF 마커, 혈장 마커 및/또는 이미징 마커를 이용하여 환자의 아밀로이드 상태를 평가하는 것을 포함하고, 환자의 아밀로이드 상태가 아밀로이드 양성인 경우에는 환자가 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 적합한 것으로 확인되는 것인 방법을 추가로 제공한다.

상기 스크리닝 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 (i) tau 상태; (ii) 신경퇴행 상태; 또는 (iii) tau 상태 및 신경퇴행 상태를 평가하는 것을 추가로 포함할 수 있고, 여기서, CSF 마커 및/또는 이미징 마커가 tau 및/또는 신경퇴행에 대해 독립적으로 선택되고, 여기서, 환자가 (a) tau에 대해 음성; (b) 신경퇴행에 대해 음성; (c) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 음성; (d) tau에 대해 양성; (e) 신경퇴행에 대해 양성; (f) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 양성; (g) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 음성; 또는 (h) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 양성인 경우에는 환자가 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 적합한 것으로 확인된다.

상기 스크리닝 방법에서: (a) (i) 아밀로이드에 대한 CSF 마커는 CSF Aβ1-42일 수 있고/있거나; (ii) tau에 대한 CSF 마커는 CSF 포스포-tau일 수 있고/있거나; (iii) 신경퇴행에 대한 CSF 마커는 CSF 전체 tau일 수 있고/있거나; (b) (i) 아밀로이드에 대한 이미징 마커는 아밀로이드 이미징일 수 있고/있거나; (ii) tau에 대한 이미징 마커는 tau 이미징일 수 있고/있거나; (iii) 신경퇴행에 대한 이미징 마커는 자기 공명 이미징 또는 플루오로데옥시글루코스 양전자 방출 단층촬영일 수 있다.

본 발명은 또한 (i) 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원; 및 (ii) NfL에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 키트로서, 임의로 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원은 본원에 정의된 바와 같은 항체인 키트를 제공한다.

도 1: SAD 및 MAD 코호트, 둘 모두에 대한 용량 의존적인 CSF 유리 Aβ1-42의 감소(상단 그래프), CSF 전체 Aβ1-42의 증가(중간 그래프), CSF 전체 Aβ1-40는 그렇지 않은 것(하단 그래프)을 보여주는 그래프. CSF에서의 변화율(%)은 투여 후 29일째(SAD) 또는 85일(MAD)인 85일째의 것으로 제시되어 있다. 기준선 및 투여 후 샘플이 이용가능한 경우, 모든 개별 데이터는 중간값과 함께 제시되어 있다. SAD의 경우: 용량 범위 간의 풀링된 위약군. MAD의 경우: IV 및 SC 투여 간의 풀링된 위약군. Aβ는 MSD 기반 면역검정법을 이용하여 정량화하였다(문헌 [Bogstedt et al., J. Alz. Disease, 46, (2015), 1091]). 회색 기호 - 정량 하한(LLOQ: lower limit of quantification)의 유리 Aβ1-42 데이터(SAD=32 pg/ml; MAD=12 pg/ml).
도 2: 2개의 상이한 ELISA에 의한 용량 의존적인 CSF NfL 감소(상단 및 중간 그래프), 및 MAD 코호트에 대한 용량 의존적인 혈장 NfL 감소(하단 그래프)를 보여주는 그래프. 변화율(%)은 투여 후 85일(MAD)인 85일째의 것으로 제시되어 있다. 기준선 및 투여 후 샘플이 이용가능한 경우, 모든 개별 데이터는 평균 ± SE 값과 함께 제시되어 있다. IV 및 SC 투여 간의 풀링된 위약군. 바이오마커 결과의 자연 로그 변환 후 처리, 기준선, 연령, 성별을 공변량으로 사용하여 (변화율(%)이라기보다는) 기준선으로부터의 변화에 기초한 ANCOVA 모델로부터 도출된 공칭 p 값.
도 3: 스피어만(Spearman) 방법을 이용한 비변환 데이터 뿐만 아니라, 피어슨(Pearson) 방법을 이용하여 자연 로그 변환된 데이터에 대해 수행된 혈장과 CSF NfL 사이의 상관관계 분석을 보여주는 그래프. 기준선에서의 NfL 혈장 대 CSF: N=19, 스피어만=0.4737(p 값 < 0.05) 및 피어슨=0.5336(p 값 < 0.05). 투여 후 85일째의 NfL 혈장 대 CSF: N=20, 스피어만=0.7414(p 값 < 0.05) 및 피어슨=0.6931(p 값 < 0.05). 종점 상관관계는 처리에 대해 조정되지 않음.
도 4: 변화율(%)은 투여 후 85일째에 측정된 것인, CSF 중 pTau₁₈₁(상단 그래프), 혈장 중 pTau₁₈₁(중간 그래프) 및 혈장 중 pTau₂₁₇(하단 그래프)의 변화율(%)을 보여주는 그래프. 기준선 및 투여 후 샘플이 이용가능한 경우, 모든 개별 데이터는 평균 ± SE 값과 함께 제시되어 있다. IV 및 SC 투여 간의 풀링된 위약군.
도 5: 변화율(%)은 투여 후 85일째에 측정된 것인, CSF 중 tTau(상단 그래프), 및 CSF 중 뉴로그라닌(하단 그래프)의 변화율(%)을 보여주는 그래프. 기준선 및 투여 후 샘플이 이용가능한 경우, 모든 개별 데이터는 평균 ± SE 값과 함께 제시되어 있다. IV 및 SC 투여 간의 풀링된 위약군. 회색 기호 - 85일째 LLOQ[tau(75 pg/ml); 뉴로그라닌 125 pg/ml)] 이하.

정의

달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 개시내용이 속하는 분야의 숙련가에 의해 보편적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 문헌 [Singleton, et al., DICTIONARY OF MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY, 20 ED., John Wiley and Sons, New York (1994)], 및 [Hale & Marham, THE HARPER COLLINS DICTIONARY OF BIOLOGY, Harper Perennial, NY (1991)]은 본 개시내용에서 사용되는 많은 용어의 일반 사전을 당업자에게 제공한다.

본 개시내용은 본원에 개시된 예시적인 방법 및 물질에 의해 제한되지 않으며, 본원에 기술된 것과 유사하거나, 또는 등가인 임의의 방법 및 물질이 본 개시내용의 실시양태의 실시 또는 시험에서 사용될 수 있다. 수치 범위는 그 범위를 정의하는 수치를 포함한다. 달리 명시되지 않는 한, 각각 임의의 핵산 서열은 좌측으로부터 우측으로 5'에서 3' 배향으로 기재되고; 아미노산 서열은 좌측으로부터 우측으로 아미노에서 카복시 배향으로 기재된다.

본원에 제공된 표제는 본 개시내용의 다양한 측면 또는 실시양태를 제한하는 것은 아니다.

아미노산은 아미노산의 명칭, 3문자 약어 또는 1문자 약어를 사용하여 본원에서 언급된다. 본원에서 사용되는 바, 용어 "단백질"은 단백질, 폴리펩티드 및 펩티드를 포함한다. 본원에서 사용되는 바, 용어 "아미노산 서열"은 용어 "폴리펩티드" 및/또는 용어 "단백질"과 동의어이다. 일부 경우에서, 용어 "아미노산 서열"은 용어 "펩티드"와 동의어이다. 용어 "단백질" 및 "폴리펩티드"는 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 본 개시내용 및 청구범위에서, 아미노산 잔기에 대한 통상적인 1문자 및 3문자 코드가 사용될 수 있다. 아미노산에 대한 3문자 코드는 IUPACIUB 생화학적 명명법에 관한 공동 위원회(JCBN: Joint Commission on Biochemical Nomenclature)에 따라 정의된 바와 같다. 폴리펩티드는 유전자 코드의 축퇴성으로 인해 1 초과의 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩될 수 있다는 것 또한 이해된다.

용어의 다른 정의는 명세서 전역에 걸쳐 나타날 수 있다. 예시적인 실시양태가 더 상세하게 기술되기 전에, 본 개시내용은 기술된 특정 실시양태로 제한되지 않고, 그 자체로 변경될 수 있다는 것을 이해하여야 한다. 또한, 본원에서 사용된 용어는 단지 특정한 실시양태를 기술하기 위한 것이며, 제한하고자 하는 것이 아님을 이해하여 하며, 그 이유는 본 개시내용의 범주가 첨부된 청구범위에 의해서만 정의될 것이기 때문이다.

값의 범위가 제공되는 경우, 문맥상 명확하게 달리 명시하지 않는 한, 상기 범위의 상한과 하한 사이의 각각의 개재 값이 또한 하한치 단위의 10분의 1까지 구체적으로 개시되는 것으로 이해된다. 언급된 범위의 임의의 언급된 값 또는 개재 값과 상기 언급된 범위의 임의의 다른 언급된 값 또는 개재 값 사이의 각각의 더 작은 범위는 본 개시내용 내에 포함된다. 이들 더 작은 범위의 상한 및 하한은 독립적으로 그 범위에 포함되거나 제외될 수 있으며, 더 작은 범위에 어느 하나가 포함되거나, 둘 모두 포함되지 않거나, 또는 둘 모두가 포함되는 각각의 범위도 본 개시내용에 포함되되, 단, 언급된 범위 내의 임의의 구체적으로 제외된 한계치를 조건으로 한다. 언급된 범위가 한계치들 중 하나 또는 그 둘 모두를 포함하는 경우, 포함된 한계치들 중 하나 또는 그 둘 모두를 제외한 범위도 본 개시내용에 포함된다.

본원에서 사용되는 바, 관사 "하나"("a" 및 "an")는 관사의 문법적 대상 중 하나 또는 1 초과(즉, 적어도 하나)를 지칭할 수 있다.

"약"은 일반적으로 측정의 성질 또는 정밀도를 고려할 때, 측정된 양에 대해 허용가능한 오류 정도를 의미할 수 있다. 예시적인 오류 정도는 주어진 값 또는 값 범위의 20퍼센트(%) 이내, 전형적으로 10% 이내, 및 더욱 전형적으로 5% 이내이다. 바람직하게는, 용어 "약"은 함께 사용되는 수치의 수치 값의 플러스 또는 마이너스 (±) 5%, 바람직하게는 ± 4%, ± 3%, ± 2%, ± 1%, ± 0.5%, ± 0.1%로 이해되어야 한다.

하나 이상의 특징을 "포함하는" 것으로 본원에 기술된 실시양태는 또한 상기 특징으로 "구성된" 및/또는 "본질적으로 구성된" 상응하는 실시양태의 개시로서 간주될 수 있다.

본원에서 사용되는 바, "약학적으로 허용되는"이라는 용어는 연방 또는 주 정부의 규제 기관에 의해 승인되거나, 또는 동물, 더욱 특히, 인간에 사용하기 위해 미국 약전, 유럽 약전 또는 다른 일반적으로 인정되는 약전에 열거되어 있는 것을 의미한다.

농도, 양, 부피, 백분율 및 다른 수치 값은 본원에서 범위 포맷으로 제시될 수 있다. 또한 상기 범위 포맷은 단지 편의 및 간결성을 위해 사용되며, 범위의 한계로 명시적으로 언급된 수치 값 뿐만 아니라, 마치 각 수치 값 및 하위 범위가 명시적으 언급된 것과 같이, 모든 개별 수치 값 또는 상기 범위 내에 포함된 하위 범위를 포함하도록 유연하게 해석되어야 함을 이해하여야 한다.

본 발명의 항체의 아미노산 서열의 경미한 변이는 아미노산 서열(들)의 변이가 본원 어디에서든 정의된 바와 같은 본 발명의 항체 또는 그의 항원 결합 단편과 적어도 75%, 더욱 바람직하게는 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 및 가장 바람직하게는 적어도 99%의 서열 동일성을 유지한다면, 본 발명에 포함되는 것으로 고려된다.

본 발명의 항체는 한 종의 아미노산 잔기가 보존 또는 비보존 위치에서 또 다른 종의 상응하는 잔기 대신으로 치환된 변이체를 포함할 수 있다. 본원에 개시된 항체 분자의 변이체는 본 발명에서 제조되고, 사용될 수 있다. 다변량 데이터 분석 기술을 구조/특성-활성 관계에 적용하는 전산 화학의 선례를 따라 [예를 들어, 문헌 [Wold, et al. Multivariate data analysis in chemistry. Chemometrics-Mathematics and Statistics in Chemistry (Ed.: B. Kowalski)]; [D. Reidel Publishing Company, Dordrecht, Holland, 1984 (ISBN 90-277-1846-6] 참조], 항체의 정량적 활성-특성 관계는 널리 공지된 수학적 기법, 예컨대, 통계적 회귀, 패턴 인식 및 분류를 사용하여 도출될 수 있다 [예를 들어, 문헌 [Norman et al. Applied Regression Analysis. Wiley-lnterscience; 3rd edition (April 1998) ISBN: 0471170828]; [Kandel, Abraham et al. Computer-Assisted Reasoning in Cluster Analysis. Prentice Hall PTR, (May 11, 1995), ISBN: 0133418847]; [Krzanowski, Wojtek. Principles of Multivariate Analysis: A User's Perspective (Oxford Statistical Science Series, No 22 (Paper)). Oxford University Press; (December 2000), ISBN: 0198507089]; [Witten, Ian H. et al Data Mining: Practical Machine Learning Tools and Techniques with Java Implementations. Morgan Kaufmann; (October 11, 1999), ISBN:1558605525]; [Denison David G. T. (Editor) et al Bayesian Methods for Nonlinear Classification and Regression (Wiley Series in Probability and Statistics). John Wiley & Sons; (July 2002), ISBN: 0471490369]; [Ghose, Arup K. et al. Combinatorial Library Design and Evaluation Principles, Software, Tools, and Applications in Drug Discovery. ISBN: 0-8247-0487-8] 참조]. 항체의 특성은 항체 서열, 기능적 및 3차원 구조의 실험적 및 이론적 모델로부터 도출될 수 있고(예를 들어, 가능한 접촉 잔기의 분석 또는 계산된 물리화학적 특성), 이러한 특성은 개별적으로 또는 조합하여 고려될 수 있다.

비보존 위치의 아미노산 잔기는 보존적 또는 비보존적 잔기로 치환될 수 있다. 특히, 보존적 아미노산 대체가 고려된다.

"보존적 아미노산 치환"은 아미노산 잔기가 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체되는 것이다. 염기성 측쇄(예컨대, 리신, 아르기닌 또는 히스티딘), 산성 측쇄(예컨대, 아스파르트산 또는 글루탐산), 비하전된 극성 측쇄(예컨대, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신 또는 시스테인), 비극성 측쇄(예컨대, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌 또는 트립토판), 베타-분지형 측쇄(예컨대, 트레오닌, 발린, 이소류신) 및 방향족 측쇄(예컨대, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판 또는 히스티딘)를 비롯한, 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기 패밀리는 당업계에 정의되어 있다. 따라서, 폴리펩티드 중의 아미노산이 동일한 측쇄 패밀리로부터의 또 다른 아미노산으로 대체된다면, 아미노산 치환은 보존적인 것으로 간주된다. 본 발명의 항체에 보존적으로 변형된 변이체를 포함하는 것은 다른 형태의 변이체, 예를 들어, 다형성 변이체, 종간 상동체 및 대립유전자를 배제하지 않는다.

"비보존적 아미노산 치환"은 (i) 전기 양성 측쇄를 갖는 잔기(예컨대, Arg, His 또는 Lys)가 전기 음성 잔기(예컨대, Glu 또는 Asp) 대신으로, 또는 그에 의해 치환되거나, (ii) 친수성 잔기(예컨대, Ser 또는 Thr)가 소수성 잔기(예컨대, Ala, Leu, Ile, Phe 또는 Val) 대신으로, 또는 그에 의해 치환되거나, (iii) 시스테인 또는 프롤린이 임의의 다른 잔기 대신으로, 또는 그에 의해 치환되거나, 또는 (iv) 벌키한 소수성 또는 방향족 측쇄를 갖는 잔기(예컨대, Val, His, Ile 또는 Trp)가 더 작은 측쇄를 갖는 것(예컨대, Ala 또는 Ser) 또는 측쇄가 없는 것(예컨대, Gly) 대신으로, 또는 그에 의해 치환되는 것을 포함한다.

전형적인 항체는 적어도 2개의 "경쇄"(LC: light chain) 및 2개의 "중쇄"(HC: heavy chain)를 포함한다. 상기 항체의 경쇄 및 중쇄는 여러 도메인으로 구성된 폴리펩티드이다. 각 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서 "VH"로 약칭) 및 중쇄 불변 영역(본원에서 "CH"로 약칭)을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 중쇄 불변 도메인 CH1, CH2 및 CH3(항체 부류 IgA, IgD 및 IgG) 및 임의로 중쇄 불변 도메인 CH4(항체 부류 IgE 및 IgM)를 포함한다. 각 경쇄는 경쇄 가변 도메인(본원에서 "VL"로 약칭) 및 경쇄 불변 도메인(본원에서 "CL"로 약칭)을 포함한다. 가변 영역 VH 및 VL은 상보성 결정 영역(CDR: complementarity determining region)이라고 하는 초가변 영역으로 추가로 세분될 수 있으며, 프레임워크 영역(FR: framework region)이라고 하는 더욱 보존된 영역이 산재되어 있다. 각각의 VH 및 VL은 아미노 말단에서 카복시 말단으로 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4와 같은 순서로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다. 중쇄 및 경쇄의 "불변 도메인"은 표적에의 항체의 결합에 직접 관여하지 않지만, 다양한 이펙터 기능을 나타낸다.

항체와 그의 표적 항원 또는 에피토프 사이의 결합은 상보성 결정 영역(CDR)에 의해 매개된다. CDR은 항원 결합 부위를 형성하는 항체 중쇄 및 경쇄의 가변 영역 내에 위치하는 서열 가변성이 높은 영역이다. CDR은 항원 특이성의 주요 결정 기이다. 전형적으로, 항체 중쇄 및 경쇄는 각각 비연속적으로 배열된 3개의 CDR을 포함한다. 항체 중쇄 및 경쇄 CDR3 영역은 본 발명에 따른 항체의 결합 특이성/친화성에서 특히 중요한 역할을 하고, 따라서 본 발명의 추가 측면을 제공한다.

따라서, 본원에서 사용되는 바, 용어 "항원 결합 단편"은 폴리펩티드는 항원에 결합할 수 있는 것인, 1개, 2개 또는 3개의 경쇄 CDR 및/또는 1개, 2개 또는 3개의 중쇄 CDR을 포함하는 항원 결합 폴리펩티드의 임의의 자연적으로 발생된 또는 인공적으로 구성된 입체형태를 포함한다.

CDR의 서열은 당업계에 공지된 임의의 넘버 체계, 예를 들어, 카바트(Kabat) 체계(문헌 [Kabat, E. A., et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)]); 코티아(Chothia) 체계(문헌 [Chothia &, Lesk, "Canonical Structures for the Hypervariable Regions of Immunoglobulins," J. Mol. Biol. 196, 901-917 (1987)]); 또는 IMGT 체계(문헌 [Lefranc et al., "IMGT Unique Numbering for Immunoglobulin and Cell Receptor Variable Domains and Ig superfamily V-like domains," Dev. Comp. Immunol. 27, 55-77 (2003)])를 참조함으로써 확인될 수 있다.

본 발명에서 논의된 중쇄 불변 영역 아미노산에 대해, 넘버링은 문헌 [Edelman, G.M., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 63 (1969) 78-85)]에 최초로 기술된 EU 인덱스에 따라 이루어진다. (Edelman)의 EU 넘버링은 또한 문헌 [Kabat et al. (1991) (상기 문헌 동일)]에도 기재되어 있다. 따라서, 중쇄와 관련하여 "카바트에 기재된 바와 같은 EU 인덱스," "EU 인덱스," "카바트의 EU 인덱스" 또는 "EU 넘버링"이라는 용어는 문헌 [Kabat et al. (1991)]에 기재된 바와 같이 (Edelman et al.)의 인간 IgG1 EU 항체에 기초한 잔기 넘버링 체계를 지칭한다. 경쇄 불변 영역 아미노산 서열에 대해 사용된 넘버링 체계는 유사하게 문헌 [Kabat et al. (상기 문헌 동일)]에 기재되어 있다. 따라서, 본원에서 사용되는 바, "카바트에 따라 넘버링된"이라는 것은 문헌 [Kabat et al. (상기 문헌 동일)]에 기재된 카바트 넘버링 체계를 지칭한다.

본 발명의 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 바람직하게는 단일클론 항체이다. 더욱 바람직하게는 본 발명의 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 단리된 단일클론 항체이다.

본 발명의 항Aβ1-42 항체 및 그의 항원 결합 단편은 재조합 수단에 의해 임의의 종으로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 항체 또는 항원 결합 단편은 마우스, 래트, 염소, 말, 돼지, 소, 닭, 토끼, 낙타, 당나귀, 인간 또는 그의 키메라 버전일 수 있다. 인간으로의 투여에 사용하기 위해, 비인간 유래 항체 또는 항원 결합 단편은 인간 환자에게 투여시 더 적은 항원성을 갖도록 유전적으로 또는 구조적으로 변경될 수 있다.

인간 또는 인간화 항체, 특히, 재조합 인간 또는 인간화 항체가 특히 바람직하다. 용어 "인간화 항체"는 프레임워크 또는 "상보성 결정 영역"(CDR)이 모체 면역글로불린의 CDR과 비교하여 상이한 특이성의 면역글로불린의 CDR을 포함하도록 변형된 항체를 지칭한다. 예를 들어, 뮤린 CDR은 "인간화 항체"를 제조하기 위해 인간 항체의 프레임워크 영역으로 이식될 수 있다. 예컨대, 문헌 [Riechmann, L., et al., Nature 332 (1988) 323-327]; 및 [Neuberger, M.S., et al., Nature 314 (1985) 268-270]을 참조한다. 일부 실시양태에서, "인간화 항체"는 특히 C1q 결합 및/또는 Fc 수용체(FcR: Fc receptor) 결합과 관련하여 본 발명에 따른 항체의 특성을 생성하기 위해 불변 영역이 원래 항체의 것으로부터 추가로 변형되거나, 또는 변경된 것이다.

본 발명의 항체는 프레임워크 영역이 인간 생식계열 유전자 절편 서열인 "생식계열화 항체"일 수 있다. 따라서, 프레임워크는 생식계열화될 수 있고, 이에 의해 프레임워크 내의 하나 이상의 잔기는 가장 유사한 인간 생식계열 프레임워크의 등가 위치에 있는 잔기와 매칭되도록 변경된다. 당업자는 생식세포화 전에 서열이 항체의 프레임워크 서열에 가장 가까운 생식계열 절편을 선택하고, 항체의 친화성 또는 활성을 시험하여 생식세포화가 항원 결합 또는 효능을 유의적으로 감소시키지 않는다는 것을 확인할 수 있다(표준 검정법은 당업계에 공지되어 있다). 인간 생식계열 유전자 절편 서열은 당업자에게 공지되어 있고, 예를 들어, VBASE 컴필레이션(VBASE, MRC Centre of Protein Engineering, UK, 1997, http//mrc-35 cpe.cam.ac.uk)으로부터 이용가능하다.

용어 "키메라 항체"는 일반적으로 재조합 DNA 기술에 의해 제조된, 하나의 공급원 또는 종으로부터의 가변 영역, 즉, 결합 영역 및 상이한 공급원 또는 종으로부터 유래된 불변 영역의 적어도 일부를 포함하는 항체를 지칭한다. 뮤린 가변 영역 및 인간 불변 영역을 포함하는 키메라 항체가 바람직하다. 본 발명에 포함되는 "키메라 항체"의 다른 바람직한 형태는 특히 C1q 결합 및/또는 Fc 수용체(FcR) 결합과 관련하여 본 발명에 따른 항체의 특성을 생성하기 위해 원래 항체의 것으로부터 변형되거나, 또는 변경된 것이다. 상기 키메라 항체는 또한 "부류 전환 항체"로도 지칭된다. 키메라 항체는 면역글로불린 가변 영역을 코딩하는 DNA 절편 및 면역글로불린 불변 영역을 코딩하는 DNA 절편을 포함하는 발현된 면역글로불린 유전자의 생성물이다. 종래의 재조합 DNA 및 유전자 형질감염 기술을 포함하는 키메라 항체를 생산하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다. 예컨대, 문헌 [Morrison, S.L., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81 (1984) 6851-6855]; 미국 특허 제5,202,238호 및 제5,204,244호를 참조한다.

용어 "Fc 영역," "Fc 부분" 및 "Fc"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 2개의 Fc 쇄에 의해 형성되는 천연 면역글로불린의 일부를 지칭한다. 각각의 "Fc 쇄"는 불변 도메인 CH2 및 불변 도메인 CH3을 포함한다. 각각의 Fc 쇄는 또한 힌지 영역을 포함할 수 있다. 천연 Fc 영역은 동종이량체이다. 일부 실시양태에서, Fc 영역은 Fc 이종이량체화를 실시하기 위한 변형을 함유할 수 있기 때문에 이종이량체일 수 있다.

IgA, IgG, IgD, IgE 및 IgM으로 분류되는 중쇄 불변 영역의 5가지 주요 부류가 있으며, 각각은 이소타입으로 지정된 특징적인 이펙터 기능을 갖는다. 예를 들어, IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로 알려진 4개의 하위부류로 나뉜다. Ig 분자는 여러 부류의 세포 수용체와 상호작용한다. 예를 들어, IgG 분자는 항체의 IgG 부류에 특이적인 세 부류의 Fcγ 수용체(FcγR), 즉, FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII과 상호작용한다. FcγR 수용체에의 IgG의 결합을 위해 중요한 서열은 CH2 및 CH3 도메인에 위치하는 것으로 보고되었다.

본 발명의 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 임의의 이소타입, 즉, IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM, 및 4쇄 면역글로불린(Ig) 구조의 합성 다량체일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 IgG 이소타입이다. 항Aβ1-42 항체 또는 항원 결합 단편은 임의의 IgG 하위부류, 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 이소타입일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 IgG1 또는 IgG2 이소타입의 것이다.

일부 실시양태에서, 항Aβ1-42 항체는 IgG 이소타입인 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항Aβ1-42 항체는 IgG 이소타입인 중쇄 불변 영역의 일부를 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG 불변 영역 또는 그의 일부는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 영역이다. 바람직하게는 IgG 불변 영역 또는 그의 일부는 IgG1 또는 IgG2 불변 영역이다. 항체 분자는 또한 예컨대, Fc 영역에 YTE 돌연변이(문헌 [Dall'Acqua et al. (2002) J. Immunology, 169: 5171- 5180]; [Dall'Acqua et al. (2006) J Biol. Chem. 281 (33):23514-24]) 및/또는 TM 돌연변이 및/또는 TM 돌연변이(문헌 [Oganesyan et al. (2008) Acta Cryst D64:700-4])를 갖는 IgG1과 같이, 다른 포맷을 가질 수 있다.

본 발명의 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 람다 경쇄 또는 카파 경쇄를 포함할 수 있다.

바람직한 실시양태에서, 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 람다 경쇄인 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 람다 불변 영역인 경쇄 불변 영역(CL)을 포함하는 경쇄를 포함한다.

일부 실시양태에서, 항체는 람다 가변 영역인 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 경쇄를 포함한다. 바람직하게는 람다 경쇄는 람다 VL인 VL 및 람다 CL인 CL을 포함한다.

조작된 항Aβ1-42 항체 및 그의 항원 결합 단편은 VH 및/또는 VL 내의 프레임워크 잔기에 변형이 이루어진 것을 포함한다. 상기 변형은 예를 들어, 항체의 면역원성을 감소시키고/시키거나, 항체 생산 및 정제를 개선시키기 위해 항체의 특성을 개선시킬 수 있다.

본원에 개시된 항Aβ1-42 항체 및 그의 항원 결합 단편은 당업계에 공지된 통상적인 기술을 사용하여, 예를 들어, 아미노산 결실(들), 삽입(들), 치환(들), 부가(들), 및/또는 재조합(들) 및/또는 당업계에 공지된 임의의 다른 변형(들)을 단독으로 또는 조합하여 사용함으로써 추가로 변형될 수 있다. 면역글로불린 쇄의 아미노산 서열의 기초가 되는 DNA 서열에 상기 변형을 도입하는 방법은 당업자에게 널리 공지되어 있다.

본 발명의 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 임의의 항체 포맷을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 항체는 상기 기술된 "종래" 포맷을 갖는다. 대안적으로, 항체는 일부 실시양태에서 Fab 단편일 수 있다. 본 발명에 따른 항체는 또한 Fab', Fv, scFv, Fd, V NAR 도메인, IgNAR, 인트라바디, IgG CH2, 미니바디, 단일 도메인 항체, Fcab, scFv-Fc, F(ab')2, 디-scFv, 이중특이성 T 세포 인게이저(BiTE(bi-specific T-cell engager)®), F(ab')3, 테트라바디, 트리아바디, 디아바디, DVD-Ig, (scFv)2, 또는 mAb2일 수 있다.

용어 "Fab 단편" 및 "Fab"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 단일 경쇄(예컨대, 불변 도메인 CL 및 VL) 및 단일 중쇄(예컨대, 불변 도메인 CH1 및 VH)를 포함한다. Fab 단편의 중쇄는 또 다른 중쇄와 이황화 결합을 형성할 수 없다.

"Fab' 단편"은 단일 경쇄 및 단일 중쇄를 포함하지만, CH1 및 VH에 추가로, "Fab' 단편"은 쇄 간 이황화 결합의 형성에 필요한 중쇄 영역을 CH1 및 CH2 도메인 사이에 포함한다. 따라서, 2개의 "Fab' 단편"은 이황화 결합의 형성을 통해 회합하여 F(ab')2 분자를 형성한다.

"F(ab')2 단편"은 2개의 경쇄와 2개의 중쇄를 포함한다. 각 쇄는 2개의 중쇄 사이에 쇄 간 이황화 결합을 형성하는 데 필요한 불변 영역의 일부를 포함한다.

"Fv 단편"은 중쇄 및 경쇄의 가변 영역만을 포함한다. 불변 영역은 포함하지 않는다.

"단일 도메인 항체"는 단일 항체 도메인 단위(예컨대, VH 또는 VL)를 포함하는 항체 단편이다.

"단일 쇄 Fv"("scFv: single-chain Fv")는 함께 연결되어 단일 쇄를 형성하는, 항체의 VH 및 VL 도메인을 함유하는 항체 단편이다. 폴리펩티드 링커는 일반적으로 scFv의 VH 및 VL 도메인을 연결하는 데 사용된다.

TandAb®로도 공지된 "탠덤 scFv"는 가요성 펩티드 링커와 함께 탠덤 배향으로 2개의 scFv의 공유 결합에 의해 형성된 단일 쇄 Fv 분자이다.

"이중특이성 T 세포 인게이저"(BiTE®)는 단일 펩티드 쇄에 2개의 단일 쇄 가변 단편(scFv)으로 구성된 융합 단백질이다. scFv 중 하나는 CD3 수용체를 통해 T 세포에 결합하고, 다른 하나는 종양 세포 항원에 결합한다.

"디아바디"는 너무 짧아서 동일한 폴리펩티드 쇄 상의 두 도메인 사이의 쌍형성을 허용하지 못하는 펩티드 링커에 의해 연결된 동일한 폴리펩티드 쇄 상에서 경쇄 가변 도메인(VL)에 연결된 중쇄(VH) 가변 도메인(VH-VL)을 포함하는 소형 2가 및 이중특이적 항체 단편이다(문헌 [Kipriyanov, Int. J. Cancer 77 (1998), 763-772]). 이는 또 다른 쇄의 상보적인 도메인과 강제로 쌍을 형성하고, 2개의 기능적 항원 결합 부위를 가진 이량체 분자의 조립을 촉진한다.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항Aβ1-42 항체, 및 그의 항원 결합 단편은 네이키드 항체이다. 본원에서 사용되는 바, 용어 "네이키드 항체"는 치료제와, 예컨대, 세포독성제 또는 방사성표지와 접합되지 않은 항체를 지칭한다. 바람직한 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 네이키드 단일특이적 항체이다.

본 발명의 항Aβ1-42 항체, 또는 그의 항원 결합 단편은 본원에 개시된 항체의 무손상 형태 및 변형된 형태, 둘 모두를 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 하나 이상의 다른 분자 엔티티, 예컨대, 약제, 검출제, 및/또는 본 명세서에 개시된 결합 분자와 또 다른 분자(예컨대, 스트렙타비딘 코어 영역 또는 폴리히스티딘 태그)의 회합을 매개할 수 있는 단백질 또는 펩티드에 (예컨대, 화학적 커플링, 유전적 융합, 비공유 회합 등에 의해) 기능적으로 연결될 수 있다. 검출제의 비제한적인 예로는 효소, 예컨대, 알칼리성 포스파타제, 글루코스-6-포스페이트 데하이드로게나제 ("G6PDH"), 알파-D-갈락토시다제, 글루코스 옥시다제, 글루코스 아밀라제, 카보닉 안하이드라제, 아세틸콜린에스터라제, 리소자임, 말레이트 데하이드로게나제 및 퍼옥시다제, 예컨대, 호스래디쉬 퍼옥시다제; 염료; 형광 표지 또는 형광물질, 예컨대, 플루오레세인 및 그의 유도체, 플루오로크롬, 로다민 화합물 및 유도체, GFP(GFP: "녹색 형광성 단백질(Green Fluorescent Protein)"), 단실, 움벨리페론, 피코에리르린, 피코시아닌, 알로피코시아닌, o-프트알데히드 및 플루오레스카민; 형광단, 예컨대, 란타니드 크립테이트 및 킬레이트, 예컨대, 유로퓸 등(Perkin Elmer 및 Cis Biointernational); 화학발광 표지 또는 화학발광물질, 예컨대, 이소루미놀, 루미놀 및 디옥세탄; 생체발광 표지, 예컨대, 루시페라제 및 루시페린; 증감제; 조효소; 효소 기질; 브로민⁷⁷, 탄소¹⁴, 코발트⁵⁷, 플루오린⁸, 갈륨⁶⁷, 갈륨⁶⁸, 수소³(삼중수소), 인듐¹¹¹, 인듐^113m, 아이오딘^123m, 아이오딘125, 아이오딘¹²⁶, 아이오딘¹³¹, 아이오딘¹³³, 수은¹⁰⁷, 수은²⁰³, 인³², 레늄^99m, 레늄¹⁰¹, 레늄¹⁰⁵, 루테늄⁹⁵, 루테늄⁹⁷, 루테늄¹⁰³, 루테늄¹⁰⁵, 스칸듐⁴⁷, 셀레늄⁷⁵, 황³⁵, 테크네튬⁹⁹, 테크네튬^99m, 텔루륨^121m, 텔루륨^122m, 텔루륨^125m, 툴륨¹⁶⁵, 툴륨¹⁶⁷, 툴륨¹⁶⁸ 및 이트륨¹⁹⁹를 포함하나, 이에 제한되지 않는, 방사성표지; 염료, 촉매 또는 다른 검출가능한 기로 추가로 표지될 수 있는 입자, 예컨대, 라텍스 또는 탄소 입자, 금속 졸, 미세결정, 리포솜, 세포 등; 분자, 예컨대, 비오틴, 디곡시게닌 또는 5-브로모데옥시우리딘; 독소 모이어티, 예컨대, 예를 들어, 슈도모나스(Pseudomonas) 외독소(PE(Pseudomonas exotoxin), 또는 그의 세포독성 단편 또는 돌연변이체), 디프테리아(Diptheria) 독소, 또는 그의 세포독성 단편 또는 돌연변이체, 보툴리늄(Botulinum) 독소 A, B, C, D, E 또는 F, 리신 또는 그의 세포독성 단편, 예컨대, 리신 A, 아브린 또는 그의 세포독성 단편, 사포린 또는 그의 세포독성 단편, 미국자리공 항바이러스 독소 또는 그의 세포독성 단편 및 브리오딘 1 또는 그의 세포독성 단편을 포함한다.

본 발명의 항Aβ1-42 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 또한 공유 부착이 항체가 그의 에피토프에 결합하는 것을 막지 않도록, 또는 다르게는 항체의 생물학적 활성을 손상시키지 못하도록 (예컨대, 임의 유형의 분자의 항체에의 공유 부착에 의해) 변형된 유도체를 포함한다. 적합한 유도체의 예는 푸코실화 항체, 글리코실화 항체, 아세틸화 항체, PEG화 항체, 인산화 항체 및 아미드화 항체를 포함하나 이에 제한되지 않는다.추가 실시양태는 다중특이성 항체(이중특이성, 삼중특이성 등) 및 다른 접합체, 예를 들어 세포 독성 작은 분자로. 또 다른 바람직한 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 네이키드 이중특이성 항체이다. 적합한 유도체의 예로는 푸코실화된 항체, 글리코실화된 항체, 아세틸화된 항체, PEG화된 항체, 인산화된 항체 및 아미드화된 항체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

추가 실시양태는 다중특이적 항체(이중특이적, 삼중특이적 등) 및 다른 접합체, 예컨대, 세포독성 소분자이다. 또 다른 바람직한 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 네이키드 이중특이적 항체이다.

본원에서 특정 분자(구체적으로 본원에 언급된 바이오마커 중 임의의 것, 예컨대, NfL 또는 Aβ1-42)의 수준에 대한 언급은 분자의 실제 양, 예컨대, 분자의 질량, 몰량, 농도 또는 몰농도를 포함한다. 바람직하게는 본 발명의 맥락에서 특정 분자(예컨대, NfL 또는 Aβ1-42)의 수준에 대한 언급은 분자의 농도를 지칭한다.

분자 수준은 임의의 적절한 생리학적 구획에서 측정될 수 있다. 바람직한 생리학적 구획은 혈장, 혈액 및/또는 뇌척수액(CSF)을 포함한다. 분자 수준은 환자로부터의 임의의 적절한 샘플, 예컨대, 혈장 샘플, 혈액 샘플, 혈청 샘플 및/또는 CSF 샘플로부터 측정될 수 있다. 시험될 수 있는 샘플의 다른 비제한적인 예로는 조직 또는 체액 샘플 소변 및 생검 샘플이 있다. 따라서, 비제한적인 예로서, 본 발명은 환자의 혈장 및/또는 CSF 중 분자(예컨대, NfL 및/또는 Aβ1-42)의 수준(예컨대, 농도)을 참조할 수 있다. 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 분자/바이오마커의 수준은 "기준선"으로 상호교환적으로 지칭될 수 있다.

본 발명의 Aβ1-42 억제제를 이용한 치료 이후의 분자(예컨대, NfL 및/또는 Aβ1-42)의 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 분자 수준과 비교될 수 있다. 따라서, 본 발명은 전형적으로 치료 이전 및 치료 이후의 분자(예컨대, NfL 및/또는 Aβ1-42)의 상대적인 수준에 관한 것이다. 치료 이전의 분자(예컨대, NfL 및/또는 Aβ1-42)의 수준은 본 발명에 따른 치료에 적합한 환자인지 확인하 데 사용될 수 있다.

분자 수준은 직접 또는 간접적으로 측정될 수 있고, 임의의 적절한 기술을 사용하여 측정될 수 있다. 예를 들어, 웨스턴 블롯팅 및 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA: Enzyme linked immunosorbent assay)과 같은 합한 표준 기술이 당업계에 공지되어 있다.

용어 "베타 아밀로이드 펩티드" 또는 "Aβ 펩티드" 또는 "Aβ"는 상호교환적으로 사용되고, 길이가 수 개의 아미노산 내지 43개의 아미노산 길이인 APP의 펩티드 단편을 지칭한다. 예를 들어, 펩티드 단편의 길이는 10 내지 43개의 아미노산 길이일 수 있다. 펩티드는 2개의 프로테아제, B-세크레타제 및 γ-세크레타제에 의해 APP의 절단 생성물로서 생체내에서 생성된다. 예로는 Aβ1-40 및 Aβ1-42를 포함한다.

용어 "Aβ 1-42"는 AD 발병기전에서 신경독성 올리고머 및 플라크 형성에 관여하는 주요 플라크 성분을 지칭한다. 용어 "Aβ 1-42"는 또한 달리 언급되지 않는 한, pGluAβ3-42, Aβ3-42 및 Aβ4-42를 비롯한, 잔기 42(Aβn-42)에서 끝나는 다수의 이소폼을 포함할 수 있다. Aβ1-42에 대한 언급은 가용성 저-n 중합체(또는 올리고머) 뿐만 아니라, 단량체 형태를 포함한다. 예시적이되, 비제한적인 Aβ1-42의 아미노산 서열은 DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA(서열 번호 11)이다.

신경필라멘트는 특히 축삭에 풍부한 뉴런의 세포골격 성분이다. 그의 기능으로는 구조적 지지 제공 및 축삭의 크기, 형상 및 구경 유지를 포함한다(1). 신경필라멘트는 중간 필라멘트 패밀리에 속하고, 트리플릿은 3개의 서브유닛; 신경필라멘트 경쇄(NF-L), 신경필라멘트 중간 쇄(NF-M: neurofilament medium) 및 신경필라멘트 중쇄(NF-H: neurofilament heavy)로 구성된다.

용어 "신경필라멘트 경쇄" 또는 "NfL"은 본원에서 상호교환적으로 사용되고, 3개의 신경필라멘트 중 가장 작은(~68 kDa) 것을 지칭한다. NfL은 특히 대구경 수초화된 축삭에서 높게 발현된다. 인간 NfL은 NEFL 유전자에 의해 코딩된다. 예시적이되, 비제한적인 NfL의 아미노산 서열은

이다.

본원에 논의된 간행물은 단지 본 출원의 출원일 이전의 그의 개시내용에 대해서만 제공된다. 본원의 어느 것도 상기 간행물이 여기에 첨부된 청구범위에 대한 선행 기술을 구성한다는 것을 인정하는 것으로 해석되어서는 안된다.

Aβ1 - 42에 대한 결합 구성원

Aβ1-42에 대한 결합 구성원(본원에서 상호교환적으로 "Aβ1-42 결합 구성원"으로 지칭)은 Aβ1-42에 선택적으로 결합하고, 그렇게 함으로써 뇌 및 대뇌혈관 구조 내의 Aβn-42 이소폼(특히, Aβ1-42)의 축적을 방지하거나, 또는 그의 침착을 역전시킬 수 있는 분자를 지칭한다. 따라서, Aβ1-42에 대한 결합 구성원은 Aβ1-42를 격리시킨다.

본 발명에 따른 결합 구성원은 뇌 및 대뇌혈관 구조 내의 Aβ1-42의 축적을 방지하거나, 또는 그의 침착을 역전시킬 수 있다. 본 발명에 따른 결합 구성원은 혈장 및/또는 뇌척수액(CSF) 중 가용성 Aβ1-42에 결합하고, 그를 침전시켜 각각 혈청 및/또는 CSF에서 Aβ1-42의 농도를 감소시킬 수 있다. 이는 알츠하이머병 및 아밀로이드증과 연관된 다른 병태에 대한 치료적 접근법을 나타낸다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 Aβ1-42에 대해 선택적이다(또한 본원에서는 상호교환적으로 그에 대해 특이적이라고 지칭). 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 가용성 단량체 인간 Aβ1-42 및/또는 올리고머 Aβ1-42에 결합할 수 있다. 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 가용성 단량체 인간 3피로-42(피로글루타메이트 3), 11피로-42(피로글루타메이트 11) 및/또는 인간 Aβ1-43에 결합할 수 있다. 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 뮤린 Aβ1-42와 교차 반응성을 가질 수 있다.

선택적으로, 결합 구성원은 임의의 다른 분자, 특히, Aβ1-40에 대한 유의적인 교차 반응성 없이, Aβ1-42에 결합하는 것으로 이해될 것이다. 교차 반응성은 임의의 적합한 방법에 의해 평가될 수 있다. 비제한적인 예로서, 결합 구성원이 Aβ1-42에 결합하는 것만큼 강력하게 다른 분자에 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 100%로 결합한다면, Aβ1-42 이외의 다른 분자와 Aβ1-42 결합 구성원의 교차 반응성은 유의적인 것으로 간주될 수 있다. Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 Aβ1-42 결합 구성원은 그가 Aβ1-42에 결합하는 강도의 90%, 85%, 80%, 75%, 70%, 65%, 60%, 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25% 또는 20% 미만으로 또 다른 분자, 예컨대, Aβ1-40에 결합할 수 있다. 바람직하게는 Aβ1-42 결합 구성원은 그가 Aβ1-42에 결합하는 강도의 20% 미만, 15% 미만, 10% 미만 또는 5% 미만, 2% 미만, 또는 1% 미만으로 다른 분자에 결합한다.

예를 들어, 항체, 소분자, 펩티드 및 펩티드모방체 및 압타머와 같은 임의의 적합한 Aβ1-42 결합 구성원이 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 바람직한 결합 구성원으로는 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 바람직하게 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 담체와 함께 약학적 조성물의 일부일 수 있다(약학적 조성물 내에 포함될 수 있다). 적합한 약학적 조성물(예컨대, 제제)의 예는 WO2017031288(이는 본원에서 참조로 포함)에 기술되어 있다. 용어 "약학적으로 허용되는 담체"는 "부형제" 또는 "희석제"라는 용어와 상호교환적으로 사용될 수 있다.

항체

바람직하게는 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원, 즉, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 본원에 기술된 바와 같은 항체 또는 그의 항원 결합 단편이다.

전형적으로, 본 발명의 항체는 600 pM 이하, 500 pM 이하, 400 pM 이하 또는 300 pM 이하의 해리 상수(K_D)로 Aβ1-42에 결합한다. 바람직하게는 본 발명의 항체는 500 pM 이하의 K_D로 Aβ1-42에 결합한다. 전형적으로, 본 발명의 항체는 Aβ1-40에 결합하지 않거나, 또는 500 μM 초과, 750 μM 초과, 1 mM 초과 또는 1.5 mM 초과의 K_D로 Aβ1-40에 결합한다. 바람직하게는 본 발명의 항체는 Aβ1-40에 결합하지 않거나 1 mM 초과의 K_D로 Aβ1-40에 결합한다. 특히, 본 발명의 항체가 500 p1 mM 이상의 K_D로 Aβ1-42에 결합하는 실시양태가 바람직하다.

K_D 측정(결합 친화도)은 당업계에 공지된 임의의 적합한 검정법에 의해 수행될 수 있다. 적합한 검정법은 KinExA 시스템(예를 들어, KinExA 3100, KinExA 3200 또는 KinExA 4000)(Sapidyne Instruments: 미국 아이다호주 소재) 또는 포르테바이오 옥테트 시스템(ForteBio Octet system)을 통해 수행할 수 있는 친화성 검정법을 포함한다.

"Abet0380"은 높은 친화도 및 특이성으로 인간 Aβ1-42에 결합하는 단일클론 항체이다(즉, 이는 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합한다). Abet0380은 이전에 발명자들에 의해 WO2014/060444(이는 본원에서 참조로 포함된다)에 기술되었다. Abet0380의 VH 및 VL 서열(뿐만 아니라, CDR 서열, 이는 VH/VL 서열에서 밑줄체 및 굵은체로 표시)은 각각 하기 표 1에서 서열 번호 7 및 8로 제시되어 있다.

따라서, 본 발명의 바람직한 Aβ1-42 결합 구성원은 표 1에 제시된 바와 같은 Abet0380의 중쇄 CDR들(HCDR들)(서열 번호 1 내지 3), 또는 그의 기능적 변이체; 및 또한 표 1에 제시된 바와 같은 Abet0380의 경쇄 CDR들(LCDR들)(서열 번호 4 내지 6), 또는 그의 기능적 변이체를 포함하는 항체이다.

"MEDI1814"는 높은 친화도 및 특이성으로 인간 Aβ1-42에 결합하는 단일클론 항체이다(즉, 이는 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합한다). MEDI1814는 이전에 발명자들에 의해 WO2014/060444(이는 본원에서 참조로 포함된다)에 기술되었고, 여기서, 이는 생식계열화된 Abet0380, Abet0380-GL로 지칭된다. MEDI1814의 VH 및 VL 서열(뿐만 아니라, CDR 서열, 이는 VH/VL 서열에서 밑줄체 및 굵은체로 표시)은 각각 하기 표 1에서 서열 번호 9 및 10으로 제시되어 있다.

따라서, 본 발명의 바람직한 Aβ1-42 결합 구성원은 표 1에 제시된 바와 같은 Abet0380-GL/MEDI1814의 중쇄 CDR들(HCDR들)(서열 번호 1 내지 3), 또는 그의 기능적 변이체; 및 또한 표 1에 제시된 바와 같은 Abet0380/MEDI1814의 경쇄 CDR들(LCDR들)(서열 번호 4 내지 6), 또는 그의 기능적 변이체를 포함하는 항체이다.

본 발명의 바람직한 Aβ1-42 결합 구성원은 서열 번호 7의 Abet0380 VH 도메인 아미노산 서열 또는 그의 생식세포계열화 버전, 또는 그의 기능적 변이체; 및 (b) 서열 번호 8의 Abet0380 VL 도메인 아미노산 서열 또는 그의 생식세포계열화 버전, 또는 그의 기능적 변이체를 포함하는 항체이다.

본 발명의 특히 바람직한 Aβ1-42 결합 구성원은 서열 번호 9의 Abet0380-GL/MEDI1814 VH 도메인 아미노산 서열, 또는 그의 기능적 변이체; 및 (b) 서열 번호 10의 Abet0380-GL/MEDI1814 VL 도메인 아미노산 서열, 또는 그의 기능적 변이체를 포함하는 항체이다.

본 발명의 바람직한 Aβ1-42 결합 구성원은 항체로서, 상기 항체는 (2011년 11월 2일 영국 스코틀랜드 AB21 9YA 애버딘 벅스번 크레이브스톤 이스테이트 퍼거슨 빌딩 소재하는 NCIMB에 기탁된) NCIMB 수탁 번호 41890 하에 기탁된 Abet0380-GL/MEDI1814 핵산 서열에 의해 코딩된 VH 및 VL 도메인을 포함한다.

전형적으로, 본 발명의 항체는 인간 IgG, 임의로 인간 IgG1 또는 인간 IgG2이다. 항체는 인간 IgG1-TM, IgG1-YTE 또는 IgG1-TM-YTE일 수 있다.

어느 이론에도 얽매이지 않으면서, MEDI1814는 Aβ1-42에 선택적으로 결합하기 때문에, MEDI1814는 신경 축삭 손상(예컨대, AD와 연관된 것)을 예방하면서, (i) Aβ1-40에 영향을 미치지 않으면서, CSF 유리 Aβ1-42를 감소시키고, (ii) 혈장 및 CSF, 둘 모두에서 NfL 수준을 감소시키는 것으로 간주된다. 축삭 손상은 AD에서 신경병리학적 인자로 알려져 있으며, NfL 수준 증가와 연관이 있는 것으로 알려져 있다. 따라서, NfL 수준을 감소시키는 것은 예컨대, AD와 연관된 것과 같은 신경 축삭 손상의 치료 및/또는 예방에서 치료적 잠재성을 갖는다.

본 발명은 언급된 CDR 서열 또는 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열을 갖는 본원에서 정의된 항체(참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체) 뿐만 아니라, 그의 기능적 변이체를 포함한다. "기능적 변이체"는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 동일한 표적 항원에 결합한다. 기능적 변이체는 참조 항체와 비교하였을 때, 표적 항원에 대해 상이한 친화도를 가질 수 있지만, 실질적으로는 동일한 친화도가 바람직하다.

참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체의 기능적 변이체는 상응하는 참조 CDR 서열과 비교하여 하나 이상의 CDR에서 서열 변이를 나타낸다. 따라서, 기능성 항체 변이체는 CDR의 기능적 변이체를 포함할 수 있다. CDR 서열과 관련하여 용어 "기능적 변이체"가 사용되는 경우, 이는 CDR이 상응하는 참조 CDR 서열과 비교할 때, 최대 2개, 바람직하게는 최대 1개의 아미노산 차이를 갖고, 나머지 5개 CDR(또는 그의 변이체)과 조합되었을 때, 변이체 항체는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 동일한 표적 항원에 결합할 수 있고, 바람직하게는 표적 항원에 대해 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 동일한 친화도를 나타낼 수 있다는 것을 의미한다.

예를 들어, 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체의 변이체는

서열 번호 1과 비교하였을 때, 최대 2개의 아미노산 차이를 갖는 중쇄 CDR1;

서열 번호 2와 비교하였을 때, 최대 2개의 아미노산 차이를 갖는 중쇄 CDR2;

서열 번호 3과 비교하였을 때, 최대 2개의 아미노산 차이를 갖는 중쇄 CDR3;

서열 번호 4와 비교하였을 때, 최대 2개의 아미노산 차이를 갖는 경쇄 CDR1;

서열 번호 5와 비교하였을 때, 최대 2개의 아미노산 차이를 갖는 경쇄 CDR2; 및

서열 번호 6과 비교하였을 때, 최대 2개의 아미노산 차이를 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있고;

여기서, 변이체 항체는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380의 표적(예컨대, Aβ1-42)에 및 바람직하게는 동일한 친화도로 결합한다.

바람직하게는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체의 변이체는

서열 번호 1과 비교하였을 때, 최대 1개의 아미노산 차이를 갖는 중쇄 CDR1;

서열 번호 2와 비교하였을 때, 최대 1개의 아미노산 차이를 갖는 중쇄 CDR2;

서열 번호 3과 비교하였을 때, 최대 1개의 아미노산 차이를 갖는 중쇄 CDR3;

서열 번호 4와 비교하였을 때, 최대 1개의 아미노산 차이를 갖는 경쇄 CDR1;

서열 번호 5와 비교하였을 때, 최대 1개의 아미노산 차이를 갖는 경쇄 CDR2; 및

서열 번호 6과 비교하였을 때, 최대 1개의 아미노산 차이를 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있고;

변이체 항체는 상응하는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 비교할 때, 그의 CDR에서 총 최대 5, 4 또는 3개의 아미노산 차이를 가질 수 있되, 단, CDR당 최대 2개(바람직하게는 최대 1개)의 아미노산 차이가 존재한다. 바람직하게는 변이체 항체는 상응하는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 비교할 때, 그의 CDR에서 총 최대 2개(더욱 바람직하게는 최대 1개)의 아미노산 차이를 갖되, 단, CDR당 최대 2개의 아미노산 차이가 존재한다. 더욱 바람직하게는 변이체 항체는 상응하는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 비교할 때, 그의 CDR에서 총 최대 2개(더욱 바람직하게는 최대 1개)의 아미노산 차이를 갖되, 단, CDR당 최대 1개의 아미노산 차이가 존재한다.

아미노산 차이는 아미노산 치환, 삽입 또는 결실일 수 있다. 한 실시양태에서, 아미노산 차이는 본원에 기술된 바와 같은 보존적 아미노산 치환이다.

변이체 항체는 상응하는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 비교할 때, 그의 프레임워크 영역에서 총 최대 5, 4 또는 3개의 아미노산 차이를 가질 수 있되, 단, 프레임워크 영역당 최대 2개(바람직하게는 최대 1개)의 아미노산 차이가 존재한다. 바람직하게는 변이체 항체는 상응하는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 비교할 때, 그의 프레임워크 영역에서 총 최대 2개(더욱 바람직하게는 최대 1개)의 아미노산 차이를 갖되, 단, 프레임워크 영역당 최대 2개의 아미노산 차이가 존재한다. 더욱 바람직하게는 변이체 항체는 상응하는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 비교할 때, 그의 프레임워크 영역에서 총 최대 2개(더욱 바람직하게는 최대 1개)의 아미노산 차이를 갖되, 단, 프레임워크 영역당 최대 1개의 아미노산 차이가 존재한다.

따라서, 변이체 항체는 본원에 기술된 바와 같은 가변 중쇄 및 가변 경쇄를 포함할 수 있고, 여기서:

중쇄는 본원의 중쇄 서열과 비교하였을 때, 최대 14개의 아미노산 차이(각 CDR에 최대 2개의 아미노산 차이 및 각 프레임워크 영역에 최대 2개의 아미노산 차이)를 갖고;

경쇄는 본원의 경쇄 서열과 비교하였을 때, 최대 14개의 아미노산 차이(각 CDR에 최대 2개의 아미노산 차이 및 각 프레임워크 영역에 최대 2개의 아미노산 차이)를 갖고;

여기서, 변이체 항체는 참조(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 동일한 표적 항원(Aβ1-42)에 및 바람직하게는 동일한 친화도로 결합한다.

변이체 중쇄 또는 경쇄는 참조 중쇄 또는 경쇄의 "기능적 등가물"로 지칭될 수 있다.

한 실시양태에서, 변이체 항체는 본원에 기술된 바와 같은 가변 중쇄 및 가변 경쇄를 포함할 수 있고, 여기서:

중쇄는 본원의 중쇄 서열과 비교하였을 때, 최대 7개의 아미노산 차이(각 CDR에 최대 1개의 아미노산 차이 및 각 프레임워크 영역에 최대 1개의 아미노산 차이)를 갖고;

경쇄는 본원의 경쇄 서열과 비교하였을 때, 최대 7개의 아미노산 차이(각 CDR에 최대 1개의 아미노산 차이 및 각 프레임워크 영역에 최대 1개의 아미노산 차이)를 갖고;

여기서, 변이체 항체는 예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380) 항체와 동일한 표적 항원(Aβ1-42)에 및 바람직하게는 동일한 친화도로 결합한다.

본 발명자들은 특히 Aβ1-42 결합 구성원이 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814 항체 또는 그의 기능적 변이체인, 신경 축삭 손상의 예방을 위한 Aβ1-42 결합 구성원의 특히 유리한 용량/용량 요법을 추가로 입증하였다. 바람직한 용량 범위는 종래의 항아밀로이드증 치료 억제와 연관된 부작용, 또는 다른 바이오마커, 예컨대, Aβ1-40, pTau₁₈₁ 및 tTau 수준에 미치는 효과의 위험을 완화시키면서, NfL(및 유리 Aβ1-42 및 임의로 뉴로그라닌(Ng)) 수준을 감소시키는 것으로 입증되었다.

예를 들어, ≥ 200 mg의 용량(전형적으로 매월 또는 4주 간격으로 투여)이 NfL 및 유리 Aβ1-42를 감소시키는 데 효과적인 것으로 나타났다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 ≥ 200 mg의 용량, 예컨대, 200-2000 mg, 바람직하게는 300-2000 mg, 더욱 바람직하게는 300-1800 mg의 용량으로 투여될 수 있다.

본 명세서에서 값의 범위가 제공되는 경우, 문맥상 명백하게 달리 명시되지 않는 한, 상기 범위의 상한 및 하한 사이의 단위의 10분의 1까지 각각의 개재 값이 또한 구체적으로 개시된다는 것이 이해되어야 한다. 임의의 언급된 값 또는 언급된 범위 내의 개재 값과 그 언급된 범위 내의 임의의 다른 언급된 또는 개재 값 사이의 각각의 더 작은 범위는 본 개시내용 내에 포함된다. 본원에서 "a 내지 b"라는 표현으로 표시되는 임의의 수치 범위는 a에서 b까지 확장되는 수치 범위(즉, 엄밀한 종점 a 및 b 포함)를 의미하는 것으로 추가로 이해되어야 한다.

"용량"은 바람직하게는 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체가 밀리그램으로 (즉, 용량으로 환자에게 투여되는 결합 구성원/항체가 밀리그램으로) 정량화된다. 따라서, 비제한적인 예로서, "300 mg 용량의 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체"라고 지칭하는 것은 상기 용량을 받을 때, 환자가 300 mg의 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 투여받는다는 것을 의미한다. (임의로 부형제와 함께) 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 포함하는 약학적 조성물이 사용되는 경우, 용량은 투여되는 본 발명의 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체 성분의 양(예컨대, 밀리그램 단위의 투여되는 결합 구성원/항체)을 지칭한다.

적합한 용량은 약 200 mg일 수 있다. 따라서, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 약 200 mg의 용량으로 투여될 수 있다.

적합한 용량은 약 300 mg일 수 있다. 따라서, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 약 300 mg의 용량으로 투여될 수 있다.

적합한 용량은 약 900 mg일 수 있다. 따라서, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 약 900 mg의 용량으로 투여될 수 있다.

적합한 용량은 약 1800 mg일 수 있다. 따라서, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 약 1800 mg의 용량으로 투여될 수 있다.

추가로, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 특정 시간 간격으로 투여될 수 있다.

전형적으로, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 매 3.5주 내지 4.5주마다 1회 빈도로 투여된다. 예를 들어, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 매 3.5, 4 또는 4.5주마다 투여될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 매 4주마다 1회(Q4W) 빈도로 투여된다..

상기 약술된 특정(정의된) 용량 및 시간 간격을 고려하면, 본 발명의 특히 바람직한 치료 요법은 하기와 같을 수 있다

예를 들어, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 약 200 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

여기서, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하고, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 이용한 치료 이전(예컨대, 기준선에서)의 환자에서의 NfL(특히, 혈장 NfL) 수준과 비교하여, 환자에서 NfL(특히, 혈장 NfL)을 감소시키는 것인, 환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법을 제공한다.

다시 말해, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 기능적 변이체를 약 200 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

여기서, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하고, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 이용한 치료 이전(예컨대, 기준선에서)의 환자에서의 NfL(특히, 혈장 NfL) 수준과 비교하여, 환자에서 NfL(특히, 혈장 NfL)을 감소시키는 것인, 환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 사용하기 위한, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 기능적 변이체를 제공한다.

예를 들어, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 약 300 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

다시 말해, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 기능적 변이체를 약 300 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

예를 들어, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 약 900 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

다시 말해, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 기능적 변이체를 약 900 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

예를 들어, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 약 1800 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

다시 말해, 본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 기능적 변이체를 약 1800 mg의 용량으로 및 4주 간격으로(Q4W) 투여하는 것을 포함하고;

특정(예컨대, 최소) 기간 동안 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 투여하는 것은 추가의 또 다른 이점을 제공할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 적어도 8주, 바람직하게는 적어도 12주 또는 적어도 16주 동안 투여함으로써 투여량 요법은 결합 구성원의 최대 생체이용률, 및/또는 질환의 최대 치료(예컨대, 억제)를 제공할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 그를 필요로 하는 환자에게 만성 치료로서, 예컨대, 환자가 살아있는 동안, 본원에 기술된 임의의 투여 간격으로 투여되며, 여기서, Q4W 또는 매월인 투여 간격이 특히 바람직하다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 적어도 약 8주 동안 투여될 수 있다. 예를 들어, Aβ1-42 결합 구성원은 적어도 약 12, 16, 20, 24, 28, 또는 32주 또는 그 초과로 만성 치료로서, 바람직하게는 환자가 살아있는 동안 투여될 수 있다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체는 8-52주; 예를 들어, 12-48주, 16-44주, 20-40주, 또는 24-36주 또는 그 초과로 만성 치료로서, 바람직하게는 환자가 살아있는 동안 투여될 수 있다.

어느 이론에도 얽매이지 않으면서, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원, 특히, 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체를 환자에게 투여하면 환자에서 NfL 및 유리 Aβ1-42가 감소되고, 관련하여 신경 축삭 손상이 감소되고, 잠재적으로 관련하여 플라크 형성이 감소되는 것으로 간주된다.

의심의 여지를 없애기 위해, 본 발명의 항체(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체)와 관련된 본원의 개시내용 중 임의의 것은 본원에 기술된 바와 같은 본 발명의 다른 Aβ1-42 결합 구성원에도 동등하게 적용가능하다. 비제한적인 예로서, 본 발명의 항체(예컨대, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체)와 관련하여 투여량, 투여 간격, 및/또는 투여 지속 기간에 관한 본원의 개시내용은 본 발명의 다른 Aβ1-42 결합 구성원에도 또한 동등하게 적용가능하다.

소분자

소분자는 본원에 기술된 바와 같이 Aβ1-42 결합 구성원으로서 사용될 수 있다. 본원에서 정의되는 바, 소분자는 저분자량 화합물, 전형적으로, 유기 화합물이다. 전형적으로, 소분자는 최대 분자량이 900 Da이므로 세포막을 통해 신속하게 확산될 수 있다. 일부 실시양태에서, 소분자의 최대 분자량은 500 Da이다. 전형적으로, 소분자의 크기는 대략 1 nm이다.

소분자의 생산을 위한 표준 기술은 당업계에 공지되어 있으며, 이어서, 이는 본원에 기술된 바와 같이 Aβ1-42 결합 활성에 대해 용이하게 시험될 수 있다.

압타머

압타머는 일반적으로 특정 표적 분자에 결합하는 핵산 분자이다. 압타머는 시험관내에서 완전히 조작될 수 있고, 화학적 합성에 의해 쉽게 생산되며, 바람직한 보관 특성을 갖고, 치료 적용에서 면역원성을 거의 유도하지 않거나, 또는 전혀 유도하지 않는다. 이러한 특성으로 인해 약학적 및 치료 유틸리티에서 특히 유용하다.

본원에서 사용되는 바, "압타머"는 일반적으로 단일 또는 이중 가닥 올리고뉴클레오티드 또는 상기 올리고뉴클레오티드의 혼합물을 지칭하며, 여기서, 올리고뉴클레오티드 또는 혼합물은 표적에 특이적으로 결합할 수 있다. 올리고뉴클레오티드 압타머가 본원에서 논의되겠지만, 숙련된 독자는 예컨대, 펩티드 압타머와 같이 등가 결합 특성을 갖는 다른 압타머도 사용될 수 있다는 것을 이해할 것이다.

일반적으로, 압타머는 길이가 적어도 5, 적어도 10 또는 적어도 15개의 뉴클레오티드 길이인 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 압타머는 길이가 최대 40, 최대 60 또는 최대 100개 또는 초과의 뉴클레오티드 길이인 서열을 포함할 수 있다. 예를 들어, 압타머 길이는 5 내지 100개의 뉴클레오티드, 10 내지 40개의 뉴클레오티드, 또는 15 내지 40개의 뉴클레오티드 길이일 수 있다. 가능한 경우, 더 짧은 길이의 압타머가 자주 다른 분자 또는 물질의 간섭을 덜 받기 때문에 바람직하다.

압타머는 예컨대, 지수 농축(SELEX) 절차에 의한 리간드의 체계적 진화와 같은 통상적인 방법을 사용하여 생성될 수 있다. SELEX는 표적 분자에 매우 특이적으로 결합하는 핵산 분자의 시험관내 진화 방법이다. 예를 들어, US 5,654,151, US 5,503,978, US 5,567,588 및 WO 96/38579에 기술되어 있다.

SELEX 방법은 핵산 압타머를 선택, 및 특히, 올리고뉴클레오티드 컬렉션으로부터 원하는 표적에 결합할 수 있는 단일 가닥 핵산을 선택하는 것을 포함한다. 단일 가닥 핵산(예컨대, DNA, RNA 또는 그의 변이체) 컬렉션을 결합에 유리한 조건하에서 표적과 접촉시키고, 혼합물 중 표적에 결합된 핵산을 결합하지 않는 핵산과 분리하고, 핵산-표적 복합체를 해리시키고, 표적에 결합된 핵산을 증폭시켜 원하는 결합 활성을 가진 핵산이 농축된 컬렉션 또는 라이브러리를 수득한 후, 이어서, 상기 일련의 단계를 필요에 따라 반복하여 관련 표적에 대해 특이적인 결합 친화성을 갖는 핵산(압타머) 라이브러리를 수득한다.

펩티드모방체

펩티드모방체는 생물학적 표적과 상호작용할 수 있고, 동일한 생물학적 효과를 생성하는 능력을 가진 천연 펩티드 또는 단백질을 모방하는 화합물이다. 펩티드모방체는 천연 펩티드와 연관된 안정성 및 생체이용률 측면에서 펩티드보다 이점이 있을 수 있다. 펩티드모방체는 생물학적 기능을 위해 디자인된 모체 펩티드의 주쇄 또는 측쇄 변형을 가질 수 있다. 펩티드모방체 부류의 예는 펩토이드 및 β-펩티드뿐만 아니라, D-아미노산을 포함하는 펩티드를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

신경필라멘트 경쇄 ( NfL ) 감소

본 발명의 핵심은, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료가 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시킨다는 것이다. 본원에 기술된 바와 같이, NfL은 뉴런 내의 축삭골격의 성분이며, 그의 뇌척수액(CSF) 및/또는 혈장내으로의 방출이 신경 축삭 손상의 바이오마커이다. 따라서, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료는 신경 축삭 손상, 예컨대, AD와 연관된 것 뿐만 아니라, 다른 신경퇴행 질환 또는 장애와 연관된 신경 축삭 손상, 및/또는 신경 축삭 손상을 유발하는 아밀로이드증과 연관된 다른 병태에서, 및 그의 예방에 의해 잠재적인 치료적 유용성을 갖는다. 따라서, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원의 사용은 신경 축삭 손상에 대한 새로운 치료적 접근법을 나타낸다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 상응하는 NfL 수준과 비교하여, 환자에서 (i) 혈장; (ii) CSF; 또는 (iii) 혈장 및 CSF 중의 NfL 수준을 감소시킬 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 혈장 및 CSF, 둘 모두에서 NfL 수준을 감소시킨다.

환자의 혈장 중 NfL 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다. 혈장 NfL의 전형적인 수준/농도는 같은 연령의 건강한 개체와 비교하여 신경퇴행 질환, 예컨대, AD를 앓는 환자에서 증가된다(문헌 [Mattsson et al. (2017) JAMA Neurol. 74:557-566], 본원에서 참조로 포함). NfL의 증가는 진행 중인 신경 축삭 손상 정도에 비례하는 바, 전형적으로는 질환이 진행됨에 따라 시간 경과에 따라 증가한다. AD 피험체에서 전형적인 수준은 평균 51.0 pg/ml이고, 큰 표준 편차는 26.9 pg/ml이며, 동반 질환의 존재, 피험체의 연령, 및 샘플 수집 및 검정 방법론에 따라 달라질 수 있다. 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 혈장 중의 NfL 상승이 클수록, 감소 기회는 커진다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 혈장 NfL 수준의 감소는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 혈장 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (예컨대, 혈장) NfL 수준과 비교하여 NfL, 예컨대, 혈장 NfL 수준을 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20%, 더욱 바람직하게는 적어도 30%, 더욱더 바람직하게는 적어도 50% 감소시킨다.

환자의 CSF 중의 NfL 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다. CSF NfL의 전형적인 수준/농도는 같은 연령의 건강한 개체와 비교하여 신경퇴행 질환, 예컨대, AD를 앓는 환자에서 증가된다. NfL의 증가는 진행 중인 신경 축삭 손상 정도에 비례하는 바, 전형적으로는 질환이 진행됨에 따라 시간 경과에 따라 증가한다. 전형적으로, 치료 이전 환자의 CSF NfL 농도는 ≥ 1 ng/ml, ≥ 800 pg/ml, ≥ 600 pg/ml 또는 ≥ 500 pg/ml이다. 바람직하게는 치료 이전 환자의 CSF NfL 농도는 ≥ 600 pg/ml이다. AD 피험체에서 전형적인 CSF NfL 수준은 동반 질환의 존재, 피험체의 연령, 및 샘플 수집 및 검정 방법론에 따라 달라질 수 있다. 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 CSF 중의 NfL 상승이 클수록, 감소 기회는 커진다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 CSF NfL 수준의 감소는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL CSF 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (예컨대, CSF) NfL 수준과 비교하여 NfL, 예컨대, CSF NfL 수준을 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20%, 더욱 바람직하게는 적어도 30%, 더욱더 바람직하게는 적어도 50% 감소시킨다.

NfL 수준은 임의의 적절한 방법을 사용하여 측정될 수 있으며, 통상적인 기술은 당업계에 공지되어 있다. 비제한적인 예로서, NfL 수준은 예컨대, ELISA, 웨스턴 블롯팅, 면역세포화학법, 면역침전, 친화성 크로마토그래피 및 생화학적 또는 세포 기반 검정법과 같은 시험관내 검정법을 사용하여 측정될 수 있다. NfL 수준은 또한 바이오센서 시스템에서 결합 구성원(예컨대, NfL에 특이적인 항체)을 사용함으로써, 예컨대, 혈장 또는 CSF에서 직접 측정될 수 있으며, 여기서, 결합 구성원은 본원에 기술된 검출 시약으로 표지된다. 바람직하게는 NfL 수준(특히, 혈장 및/또는 CSF NfL 수준)은 ELISA, 더욱 바람직하게는 SIMOA-HD1을 사용하여 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 NfL 수준(예컨대, 혈장 및/또는 CSF 수준)을 감소시킨다.

비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF NfL 수준과 비교하여 CSF NfL 수준을 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 50% 감소시킬 수 있다.

추가의 비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 NfL 수준과 비교하여 혈장 NfL 수준을 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20% 감소시킬 수 있다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 이상, 예컨대, 적어도 15주, 적어도 20주 또는 적어도 25주 동안 NfL 수준(예컨대, 혈장 및/또는 CSF 수준)을 감소시킨다. 전형적으로, 본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 적어도 10주 동안 NfL 수준(예컨대, 혈장 및/또는 CSF 수준)을 감소시킨다.

비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 동안 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF NfL 수준과 비교하여 CSF NfL 수준을 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 50% 감소시킬 수 있다.

추가의 비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 동안 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 NfL 수준과 비교하여 혈장 NfL 수준을 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20% 감소시킬 수 있다.

pTau ₂₁₇ 감소

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료는 또한 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 pTau₂₁₇ 수준과 비교하여, 환자에서의 pTau217 수준을 감소시킬 수 있다.

Tau는 주로 뉴런에서 발현되는 미세소관 관련 단백질이다. Tau 단백질은 몇 가수개의 이소폼을 구성하며, 튜불린 단량체를 미세소관으로 조립하고, 세포골격과 축삭 수송을 유지하는 데 중요한 역할을 한다. 사상체성 봉입물에서 특정 tau 단백질 세트의 응집은 AD를 비롯한 수많은 신경퇴행 장애에서 신경세포내 신경섬유 엉킴의 일반적인 특징이다. 뇌척수액(CSF) 및/또는 혈장으로의 pTau₂₁₇(트레오닌 217에서 인산화된 Tau)의 방출은 신경 축삭 손상의 바이오마커이다. 따라서, 본원에 기술된 바와 같이, 따라서, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료는 신경 축삭 손상, 예컨대, AD와 연관된 것 뿐만 아니라, 다른 신경퇴행 질환 또는 장애와 연관된 신경 축삭 손상, 및/또는 신경 축삭 손상을 유발하는 아밀로이드증과 연관된 다른 병태에서, 및 그의 예방에 의해 잠재적인 치료적 유용성을 갖는다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 상응하는 pTau₂₁₇ 수준과 비교하여, 환자에서 (i) 혈장; (ii) CSF; 또는 (iii) 혈장 및 CSF 중의 pTau₂₁₇ 수준을 감소시킬 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 혈장 중의 pTau₂₁₇ 수준을 감소시킨다.

환자의 혈장 중의 pTau₂₁₇ 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다. 혈장 pTau₂₁₇의 전형적인 수준/농도는 같은 연령의 건강한 개체와 비교하여 신경퇴행 질환, 예컨대, AD를 앓는 환자에서 증가된다(문헌 [Janelictze et al. (2020) Nat Commun. 11:1683], 본원에서 참조로 포함). pTau₂₁₇의 증가는 진행 중인 신경 축삭 손상 정도에 비례하는 바, 전형적으로는 질환이 진행됨에 따라 시간 경과에 따라 증가한다. AD 피험체에서 전형적인 혈장 pTau₂₁₇ 수준은 동반 질환의 존재, 피험체의 연령, 및 샘플 수집 및 검정 방법론에 따라 달라질 수 있다. 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 혈장 중의 pTau₂₁₇ 상승이 클수록, 감소 기회는 커진다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 혈장 pTau₂₁₇ 수준의 감소는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 pTau₂₁₇ 혈장 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (예컨대, 혈장) pTau₂₁₇ 수준과 비교하여 pTau₂₁₇, 예컨대, 혈장 pTau₂₁₇ 수준을 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20%, 더욱 바람직하게는 적어도 30%, 더욱더 바람직하게는 적어도 35%, 추가로 더욱더 바람직하게는 적어도 50% 감소시킨다.

비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 pTau₂₁₇, 예컨대, 혈장 pTau₂₁₇ 수준을 적어도 30% 감소시킨다.

추가의 비제한적인 예로서, 전형적으로 혈장 pTau₂₁₇ 수준은 건강한 개체에서의 수준과 비교하여 AD 환자에서 4-8배 상승되고, 본 발명의 결합 구성원은 혈장 pTau₂₁₇ 수준을 약 2-8배 감소시킬 수 있고, 즉, pTau₂₁₇을 정상 수준으로 감소킬 수 있다.

pTau₂₁₇ 수준은 임의의 적절한 방법을 사용하여 측정될 수 있으며, 통상적인 기술은 당업계에 공지되어 있다. 비제한적인 예로서, pTau₂₁₇ 수준은 예컨대, ELISA, 웨스턴 블롯팅, 면역세포화학법, 면역침전, 친화성 크로마토그래피 및 생화학적 또는 세포 기반 검정법과 같은 시험관내 검정법을 사용하여 측정될 수 있다. pTau₂₁₇ 수준은 또한 바이오센서 시스템에서 결합 구성원(예컨대, pTau₂₁₇에 특이적인 항체)을 사용함으로써, 예컨대, 혈장 또는 CSF에서 직접 측정될 수 있으며, 여기서, 결합 구성원은 본원에 기술된 검출 시약으로 표지된다. 바람직하게는 pTau₂₁₇ 수준(특히, 혈장 pTau₂₁₇ 수준)은 ELISA를 사용하여 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 pTau₂₁₇ 수준(예컨대, 혈장 수준)을 감소시킨다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 이상, 예컨대, 적어도 15주, 적어도 20주, 또는 적어도 25주 동안 pTau₂₁₇ 수준(예컨대, 혈장 수준)을 감소시킨다. 전형적으로, 본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 적어도 10주 동안 pTau₂₁₇ 수준(예컨대, 혈장 수준)을 감소시킨다.

뉴로그라닌 (Ng) 감소

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료는 또한 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 Ng 수준과 비교하여, 환자에서 Ng 수준을 감소시킬 수 있는 잠재능을 가질 수 있다.

뉴로그라닌(Ng)은 장기 강화(일과성 입력에 대한 반응으로 신경 출력의 장기간 지속되는 변화)에 관여하는 수지상 단백질이다. 뇌척수액(CSF) 및/또는 혈장으로의 Ng 방출은 신경 축삭 손상의 바이오마커이다. 따라서, 본원에 기술된 바와 같이, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료는 신경 축삭 손상, 예컨대, AD와 연관된 것 뿐만 아니라, 다른 신경퇴행 질환 또는 장애와 연관된 신경 축삭 손상, 및/또는 신경 축삭 손상을 유발하는 아밀로이드증과 연관된 다른 병태에서, 및 그의 예방에 의해 잠재적인 치료적 유용성을 갖는다.

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 상응하는 Ng 수준과 비교하여, 환자에서 (i) 혈장; (ii) CSF; 또는 (iii) 혈장 및 CSF 중의 Ng 수준을 감소시킬 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 CSF 중의 Ng 수준을 감소시킨다.

환자의 CSF 중의 Ng 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다. CSF Ng의 전형적인 수준/농도는 같은 연령의 건강한 개체와 비교하여 신경퇴행 질환, 예컨대, AD를 앓는 환자에서 증가된다. Ng 증가는 진행 중인 신경 축삭 손상 정도에 비례하는 바, 전형적으로는 질환이 진행됨에 따라 시간 경과에 따라 증가한다. AD 피험체에서 전형적인 CSF Ng 수준은 동반 질환의 존재, 피험체의 연령, 및 샘플 수집 및 검정 방법론에 따라 달라질 수 있다. 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 CSF 중의 Ng 상승이 클수록, 감소 기회는 커진다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 Ng CSF 수준의 감소는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 Ng CSF 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 유사한 연령대의 건강한 개체에서 관찰된 수준으로 Ng 수준을 감소시킬 수 있다. 이는 신경 손상 감소를 나타낼 것이다.

Ng 수준은 임의의 적절한 방법을 사용하여 측정될 수 있으며, 통상적인 기술은 당업계에 공지되어 있다. 비제한적인 예로서, Ng 수준은 예컨대, ELISA, 웨스턴 블롯팅, 면역세포화학법, 면역침전, 친화성 크로마토그래피 및 생화학적 또는 세포 기반 검정법과 같은 시험관내 검정법을 사용하여 측정될 수 있다. Ng 수준은 또한 바이오센서 시스템에서 결합 구성원(예컨대, Ng에 특이적인 항체)을 사용함으로써, 예컨대, 혈장 또는 CSF에서 직접 측정될 수 있으며, 여기서, 결합 구성원은 본원에 기술된 검출 시약으로 표지된다. 바람직하게는 Ng 수준(특히, CSF Ng 수준)은 ELISA를 사용하여 측정된다.

아밀로이드 베타

본 발명에 따른 Aβ1-42 결합 구성원은 혈장 및/또는 뇌척수액(CSF) 중 가용성 Aβ1-42에 결합하고, 그를 침전시켜 각각 혈장 및/또는 CSF 중 유리 Aβ1-42 수준을 감소시킬 수 있다. (본원에 기술된 바와 같이) NfL 수준 감소와 함께, 이는 알츠하이머병 및 신경 축삭 손상 및 아밀로이드증과 연관된 다른 병태에 대한 새로운 치료 접근법을 나타낸다.

본원에서 사용되는 바, Aβ1-42와 관련하여 용어 "유리"는 전형적으로 본 발명의 결합 구성원, 특히, 본원에서 정의된 바와 같은 항체가 결합하지 않는 Aβ1-42를 지칭한다

본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 상응하는 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여, 환자에서 (i) 혈장; (ii) CSF; 또는 (iii) 혈장 및 CSF 중의 유리 Aβ1-42 수준을 감소시킬 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 혈장 및 CSF, 둘 모두에서 유리 Aβ1-42 수준을 감소시킨다.

환자의 혈장 중의 유리 Aβ1-42 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다.

혈장 Aβ1-42의 전형적인 수준/농도는 같은 연령의 건강한 개체와 비교하여 신경퇴행 질환, 예컨대, AD를 앓는 환자에서 증가된다. 유리 Aβ1-42 증가는 진행 중인 신경 축삭 손상 정도에 비례하는 바, 전형적으로는 질환이 진행됨에 따라 시간 경과에 따라 증가한다. AD 피험체에서 전형적인 혈장 Aβ1-42 수준은 동반 질환의 존재, 피험체의 연령, 및 샘플 수집 및 검정 방법론에 따라 달라질 수 있다. 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 혈장 중의 Aβ1-42 상승이 클수록, 감소 기회는 커진다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 혈장 Aβ1-42 수준의 감소는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 Aβ1-42 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (예컨대, 혈장) 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여 유리 Aβ1-42, 예컨대, 혈장 유리 Aβ1-42 수준을 적어도 60%, 바람직하게는 적어도 70%, 더욱 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 더욱더 바람직하게는 적어도 95% 이상 감소시킨다.

환자의 CSF 중의 유리 Aβ1-42은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다. CSF Aβ1-42의 전형적인 수준/농도는 같은 연령의 건강한 개체와 비교하여 신경퇴행 질환, 예컨대, AD를 앓는 환자에서 증가된다. 유리 Aβ1-42의 증가는 진행 중인 신경 축삭 손상 정도에 비례하는 바, 전형적으로는 질환이 진행됨에 따라 시간 경과에 따라 증가한다. AD 피험체에서 전형적인 CSF NfL 수준은 동반 질환의 존재, 피험체의 연령, 및 샘플 수집 및 검정 방법론에 따라 달라질 수 있다. 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 CSF 중의 Aβ1-42 상승이 클수록, 감소 기회는 커진다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 CSF Aβ1-42 수준의 감소는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF Aβ1-42 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (예컨대, CSF) 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여 유리 Aβ1-42, 예컨대, CSF 유리 Aβ1-42 수준을 적어도 30%, 적어도 40%, 바람직하게는 적어도 50%, 더욱 바람직하게는 적어도 60%, 더욱 바람직하게는 적어도 70% 더욱 바람직하게는 적어도 75%, 더욱 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 85%, 더욱 바람직하게는 적어도 90%, 또는 더욱더 바람직하게는 적어도 95% 감소시킨다.

Aβ1-42의 본 발명의 결합 구성원에의 결합 결과로서, 결합된 Aβ1-42의 반감기는 유리 Aβ1-42의 반감기보다 길다. 결과적으로, 유리 Aβ1-42의 수준은 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후 감소할 수 있지만, 전체 Aβ1-42의 양은 증가할 수 있다.

따라서, 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 상응하는 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여, 환자에서 (i) 혈장; (ii) CSF; 또는 (iii) 혈장 및 CSF 중의 전체 Aβ1-42 수준을 증가시킬 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 Aβ1-42 결합 구성원은 혈장 및 CSF, 둘 모두에서 전체 Aβ1-42 수준을 증가시킨다.

환자의 혈장 중의 전체 Aβ1-42 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 혈장 전체 Aβ1-42 수준의 증가는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 전체 혈장 Aβ1-42 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (예컨대, 혈장) 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여 전체 Aβ1-42, 예컨대, 혈장 전체 Aβ1-42 수준을 적어도 100%, 적어도 200%, 적어도 250%, 적어도 300% 이상 증가시킨다.

환자의 CSF 중의 전체 Aβ1-42 수준은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 측정될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 환자의 CSF 전체 Aβ1-42 수준의 증가는 상대적인 측면에서, 예컨대, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF 전체 Aβ1-42 수준 대비로 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (예컨대, CSF) 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여 전체 Aβ1-42, 예컨대, 혈장 전체 Aβ1-42 수준을 적어도 100%, 적어도 200%, 적어도 250%, 적어도 300% 이상 증가시킨다.

전형적으로, 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료는 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 상응하는 Aβ1-40 수준과 비교하여 환자의 혈장 및/또는 CSF 중 (유리 및/또는 전체) Aβ1-40 수준에 대해 어떤 영향도 미치지 않거나, 또는 최소의 영향을 미친다.

본 발명은 예를 들어, 바이오센서 시스템에서 본 발명에 따른 결합 구성원을 사용함으로써 예컨대, 혈장 또는 CSF에서 Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40 수준을 직접 측정하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 인간 Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40에의 결합을 검출 및/또는 측정하는 방법은 (i) 상기 결합 구성원을 Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40에 노출시키는 단계 및 (ii) 상기 결합 구성원의 Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40에의 결합을 검출하는 단계로서, 여기서, 결합은 본원에 기술된 임의의 방법 또는 검출제를 사용하여 검출되는 것인 단계를 포함할 수 있다. Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40은 단량체 또는 올리고머 Aβ1-42, 바람직하게는 단량체 Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40일 수 있다. (유리 및/또는 전체) Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40 수준은 임의의 적절한 방법을 사용하여 측정될 수 있으며, 통상적인 기술은 당업계에 공지되어 있다. 비제한적인 예로서, 유리 및/또는 전체) Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40 수준은 예컨대, 전기화학발광 면역검정법(ECLIA: electrochemiluminescence immunoassay), ELISA, 웨스턴 블롯팅, 면역세포화학법, 면역침전, 친화성 크로마토그래피 및 생화학적 또는 세포 기반 검정법과 같은 시험관내 검정법을 사용하여 측정될 수 있다. (유리 및/또는 전체) Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40 수준은 또한 바이오센서 시스템에서 결합 구성원(예컨대, Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40에 특이적인 항체)을 사용함으로써, 예컨대, 혈장 또는 CSF에서 직접 측정될 수 있으며, 여기서, 결합 구성원은 본원에 기술된 검출 시약으로 표지된다. 바람직하게는 (유리 및/또는 전체) Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40 수준(특히, 혈장 및/또는 CSF (유리 및/또는 전체) Aβ1-42 및/또는 Aβ1-40 수준)은 ECLIA를 사용하여 측정된다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 결합 구성원을 이용한 치료 후 3-20주, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 유리 Aβ1-42 수준(예컨대, 혈장 및/또는 CSF 수준)을 감소시킨다. 본 발명의 결합 구성원은 같은 기간 내에 전체 Aβ1-42(예컨대, 혈장 및/또는 CSF) 수준을 증가시킬 수 있다.

비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여 CSF 유리 Aβ1-42 수준을 적어도 50%, 바람직하게는 적어도 70%, 더욱 바람직하게는 적어도 80, 더욱더 바람직하게는 적어도 90% 감소시킬 수 있다. 본 발명의 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여 CSF 전체 Aβ1-42 수준을 적어도 200% 증가시킬 수 있다.

추가의 비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여 혈장 유리 Aβ1-42 수준을 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90% 감소시킬 수 있다. 본 발명의 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이후 3-20주 이내, 5-20주 이내, 바람직하게는 8-16주 이내, 더욱 바람직하게는 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 3주 이내 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여 혈장 전체 Aβ1-42 수준을 적어도 200% 증가시킬 수 있다.

본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 적어도 5주, 바람직하게는 적어도 10주, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 이상, 예컨대, 적어도 15주, 적어도 20주, 또는 적어도 25주 동안 유리 Aβ1-42 수준(예컨대, 혈장 및/또는 CSF 수준)을 감소시킨다. 전형적으로, 본 발명의 결합 구성원은 전형적으로 적어도 10주 동안 유리 Aβ1-42 수준(예컨대, 혈장 및/또는 CSF 수준)을 감소시킨다. 본 발명의 결합 구성원은 같은 기간 동안 전체 Aβ1-42(예컨대, 혈장 및/또는 CSF) 수준을 증가시킬 수 있다.

추가의 비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 동안 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여 CSF 유리 Aβ1-42 수준을 적어도 50%, 바람직하게는 적어도 70%, 더욱 바람직하게는 적어도 80%, 더욱더 바람직하게는 적어도 90% 감소시킬 수 있다. 본 발명의 결합 구성원은 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 동안 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 CSF 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여 CSF 전체 Aβ1-42 수준을 적어도 200% 증가시킬 수 있다.

추가의 비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원은 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 f또는 적어도 12주 동안 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여 혈장 유리 Aβ1-42 수준을 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 90% 감소시킬 수 있다. 본 발명의 결합 구성원은 적어도 5주 동안, 바람직하게는 적어도 10주 동안, 더욱 바람직하게는 f또는 적어도 12주 동안 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여 혈장 전체 Aβ1-42 수준을 적어도 200% 증가시킬 수 있다.

다른 바이오마커

본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료가 신경 축삭 손상 및/또는 아밀로이드증, 또는 신경 축삭 손상 및/또는 아밀로이드증과 연관된 질환 또는 장애에 대한 다른 바이오마커에 대해 미치는 효과 또한 본 발명에 따라 측정 또는 모니터링될 수 있다. 대안적으로 및/또는 추가로, 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료가 건강한 신경 축삭, 신경보호 상태 및/또는 항아밀로이드생성 상태를 나타내는 다른 바이오마커에 대해 미치는 효과 또한 본 발명에 따라 측정 또는 모니터링될 수 있다.

본 발명에 따라 모니터링 또는 측정될 수 있는 다른 바이오마커의 비제한적인 예로는 pTau₁₈₁ 및 tTau를 포함한다. 결합 구성원은 치료 이전과 비교하여 결합 구성원을 이용한 치료 이후의 다른 바이오마커, 예컨대, pTau₁₈₁ 및 tTau 수준(예컨대, 혈장 및/또는 CSF)에 어떤 영향도 미치지 않거나, 또는 최소한의 영향을 미칠 수 있다.

아밀로이드 관련 영상학적 비정상 소견(ARIA: Amyloid -Related Imaging Abnormality)

아밀로이드 관련 영상학적 비정상 소견(ARIA)은 알츠하이머병 환자의 신경 영상에서 관찰되는 비정상적인 차이로, 종래 아밀로이드 변형 요법과 연관이 있다. ARIA에는 2가지 유형: ARIA-E 및 ARIA-H가 있다.

ARIA-E는 혈액-뇌-장벽의 밀착 연접부의 파괴를 포함하고, 그 결과 유체의 누출 및 축적을 초래하는 뇌부종을 특징으로 한다. ARIA-E는 자기 공명 이미징(MRI: magnetic resonance imaging)에 의해 검출될 수 있으며, 이는 혈관성 부종(VE: vasogenic oedema) 및/또는 액체 감쇠 역전 회복(FLAIR: fluid-attenuated inversion recovery)에서 열구 삼출의 증거를 식별할 수 있다. 증상은 체액 축적의 위치와 정도에 따라 다양할 수 있으며, 정신 상태 변화, 두통, 구토/구역 및 보행 장애를 포함한다.

ARIA-H는 종종 혈철증을 동반하는 대뇌 미세출혈(mH: microhaemorrhag)을 특징으로 한다. 이는 대뇌 아밀로이드 혈관병증(CAA: cerebral amyloid angiopathy)의 특징으로 T2*-가중 기울기 에코(T2*-GRE: T2*-weighted gradient echo) 또는 감수성 가중 이미징(SWI: susceptibility-weighted imaging)에서 헤모시데린 침착 및 표재 철침착의 신호를 특징으로 하는 작고, 둥글고, 강도가 낮은 병변으로 식별될 수 있다. mH는 ≤10mm로 정의될 수 있으며, 경우에 따라 ≤5mm로 정의될 수 있다.

전형적으로, 본 발명의 결합 구성원을 이용한 치료가 ARIA-E 및/또는 ARIA-H, 바람직하게는 ARIA-E 및 ARIA-H 둘 모두에 대해 임의의 ARIA의 발생을 증가시키지 않는다.

비제한적인 예로서, 본 발명의 결합 구성원으로 치료된 환자에서 ARIA-E 및/또는 ARIA-H, 바람직하게는 ARIA-E 및 ARIA-H 둘 모두의 발생은 적어도 5주, 바람직하게는 적어도 10주, 더욱 바람직하게는 적어도 12주 이상, 예컨대, 적어도 15주, 적어도 20주, 적어도 25주 동안 증가하지 않을 수 있다.

요법 및 스크리닝

본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하고;

여기서, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인, 환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법을 제공한다.

본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게 결합 구성원의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하고, 여기서, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인, 환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 사용하기 위한, 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원을 추가로 제공한다.

본 발명은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게 결합 구성원의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하고, 여기서, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인, 환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법을 위한 약제의 제조에서의 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원의 용도를 제공한다.

본원에서 사용되는 바, "치료하다" 또는 "치료하는"이라는 용어는 예방적 치료(예컨대, 신경 축삭 손상의 발병을 방지하기 위한 치료) 및 교정 치료(이미 신경 축삭 손상을 앓고 있는 피험체 치료)를 포함한다. 바람직하게는 본원에서 사용되는 바, "치료하다" 또는 "치료하는"이라는 용어는 교정 치료를 의미한다. "치료하다" 또는 "치료하는"이라는 용어는 신경 축삭 손상, 그의 증상 및 그와 연관된 질환/장애를 모두 치료하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, "치료하다" 또는 "치료하는"이라는 용어는 신경 축삭 손상의 증상을 지칭한다. 한 실시양태에서, "치료"는 본원에 기술된 바와 같이 환자의 NfL 수준 감소를 제공하는 것으로 정의될 수 있다. 예를 들어, 환자의 혈장 NfL 수준은적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20% 감소될 수 있고/있거나, 환자의 CSF NfL 수준은 (예컨대, 본원에 더욱 상세하게 기술된 바와 같이) 바람직하게는 Aβ1-42 결합 구성원으로 치료된 후 8-16주 이내에 억제제를 이용한 치료 이전의 환자의 혈장 및/또는 CSF NfL 수준과 비교하여 Aβ1-42를 이용한 치료 후 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 50% 감소될 수 있다.

따라서, Aβ1-42 결합 구성원(예컨대, 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체)는 피험체에게 치료 유효량 또는 예방 유효량으로 투여될 수 있다.

"치료 유효량"은 추가의 신경 축삭 손상, 또는 그의 증상 또는 그와 연관된 질환을 예방하기 위해(또는 신경 축삭 손상을 치료하기 위해) 환자에 단독으로 투여되거나, 또는 조합하여 투여될 때, 신경 축삭 손상, 또는 그의 증상, 또는 연관된 질환을 치료하는 데 충분한 Aβ1-42 결합 구성원의 임의의 양이다. "예방 유효량"은 피험체에게 단독으로 또는 조합하여 투여되었을 때, 신경 축삭 손상(또는 그의 증상, 또는 그와 연관된 질환)의 발병 또는 재발을 억제 또는 지연시키는 Aβ1-42 결합 구성원의 임의의 양이다. 일부 실시양태에서, 예방 유효량은 신경 축삭 손상의 발병 또는 재발을 완전히 예방한다. 발병을 "억제시킨다는 것"은 신경 축삭 손상 발병(또는 그의 증상 또는 그와 연관된 질환)의 가능성을 감소시키거나, 또는 발병을 완전히 예방하는 것을 의미한다. (특히, Aβ1-42 결합 구성원이 본 발명의 항체, 특히, MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체일 경우), 치료 유효량 및/또는 예방 유효량의 예는 200 mg, 300 mg, 900 mg 또는 1800 mg으로, 바람직하게는 (예컨대, 본원에 더욱 상세하게 기술되는 바와 같이) 매 4주마다 1회 빈도로 투여된다.

"피험체," "개체" 및 "환자"라는 용어는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 포유동물 피험체를 지칭한다. 일반적으로, 환자는 인간일 수 있고; 다시 말해, 한 실시양태에서, "환자"는 인간이다. 환자는 이전에 신경 축삭 손상 발병(또는 그의 증상 또는 그와 연관된 질환) 진단을 받은 적이 없는 환자일 수 있다. 대안적으로, 환자는 이전에 신경 축삭 손상 발병(또는 그의 증상 또는 그와 연관된 질환) 진단을 받은 적이 있는 환자일 수 있다. 환자는 또한 질환 위험 인자를 보이는 환자, 또는 신경 축삭 손상 발병(또는 그의 증상 또는 그와 연관된 질환)에 대해 무증상인 환자일 수 있다. 환자는 또한 신경 축삭 손상 발병(또는 그의 증상 또는 그와 연관된 질환)을 앓고 있거나, 또는 발생 위험이 있는 환자일 수 있다.

투여 경로는 경구, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 피하, 직장 또는 질, 흡입, 국소 또는 그의 조합으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는 투여 경로는 정맥내 또는 피하이다. 따라서, Aβ1-42 결합 구성원은 본 발명의 방법에서 환자에게 정맥내 또는 피하로 투여될 수 있다.

상기 기술된 바와 같이, 본 발명은 신경 축삭 손상의 예방을 제공하고, 따라서, 신경 축삭 손상과 연관된 질환, 예컨대, AD를 위한 신경 축삭 손상 치료를 제공한다.

"치료 이전"이라는 용어는 본원에서 "기준선"이라는 용어와 상호교환적으로 사용될 수 있으며, "기준선"은 치료 개시 직전(또는 바로 전) 시점을 의미한다.

NfL 수준 및 본원에서 언급된 다른 분자 또는 마커 중 임의의 것(예컨대, 유리 Aβ1-42)은 본원에 기술된 임의의 적절한 수단, 예 및 바람직한 수단에 의해 측정될 수 있다. 비제한적인 예로서, Aβ1-42 결합 구성원은 Aβ1-42 결합 구성원을 이용한 치료 이후 8-16주 이내(바람직하게는 12주 이내, 더욱 바람직하게는 3주 이내) 환자의 NfL 수준을 감소시킬 수 있다. 다시 말해, Aβ1-42 결합 구성원 투여는 치료 이후 8-16주 이내 환자에서의 NfL 수준을 감소(예컨대, 하락)시킨다. 바람직하게는 Aβ1-42 결합 구성원 투여는 치료 이후 12주 이내, 더욱더 바람직하게는 치료 이후 3주 이내 환자에서의 NfL 수준을 감소(예컨대, 하락)시킬 수 있다.

Aβ1-42 결합 구성원은 8-16주 이내(바람직하게는 12주 이내, 더욱 바람직하게는 10주 이내, 더욱더 바람직하게는 5주 이내) 기준선으로부터 환자의 NfL 수준을 감소시킬 수 있다. 다시 말해, Aβ1-42 결합 구성원 투여는 8-16주 이내 기준선으로부터 환자에서의 NfL 수준을 감소(예컨대, 하락)시킨다. 바람직하게는 Aβ1-42 결합 구성원 투여는 12주 이내, 더욱 바람직하게는 10주 이내, 더욱더 바람직하게는 5주 이내 기준선으로부터 환자에서의 NfL 수준을 감소(예컨대, 하락)시킬 수 있다.

NfL 또는 다른 분자 또는 마커 중 임의의 것의 감소(예컨대, 하락)는 수주 또는 수개월 동안의 치료 이후 및/또는 그 동안에 지속(예컨대, 유지)될 수 있다.

Aβ1-42 결합 구성원은 적어도 16주 동안 환자에서 NfL을 감소시킬 수 있다. 예를 들어, Aβ1-42 결합 구성원 투여는 적어도 5, 10, 12, 16, 18, 20, 22, 24, 38, 32, 36, 또는 40주 동안 환자에서 (예컨대, 지속되는 방식으로) NfL 수준을 감소시킬 수 있다. 예를 들어, Aβ1-42 결합 구성원 투여는 적어도 5주 동안 환자에서 (예컨대, 지속되는 방식으로) NfL 수준을 감소시킬 수 있다. Aβ1-42 결합 구성원 투여는 적어도 10주 동안 환자에서 (예컨대, 지속되는 방식으로) NfL 수준을 감소시킬 수 있다. 예를 들어, Aβ1-42 결합 구성원 투여는 적어도 20주 동안 환자에서 (예컨대, 지속되는 방식으로) NfL 수준을 감소시킬 수 있다

본 발명의 방법 및 결합 구성원은 신경 축삭 손상의 예방에서, 및 이로써, 신경퇴행 질환, 예컨대, AD와 연관된 신경 축삭 손상 치료에서 유용성을 갖는다. 본원에서 사용되는 바, 용어 "신경 축삭 손상"은 축삭 분리(즉시 및 지연된 이차 분리 모두), 축삭 세포골격의 파괴, 축삭 수송 중단, 진행성 종창 및 퇴행을 포함한다. 이러한 손상은 조직학적 분석 또는 다른 적절한 이미징 기술을 통해 관찰할 수 있다. 추가로, 예컨대, MRI 및 CAT 스캔과 같은 표준 임상 이미징 기술을 사용하여 신경 축삭 손상을 검출할 수 있으며, 이러한 기술은 당업계에서 통상적인 것이다.

추가로, 본 발명의 방법 및 결합 구성원은 신경 축삭 손상의 증상의 치료에서 유용성을 갖는다. 상기 증상의 비제한적인 예로는 정신 상태 변화, 두통, 구토/구역 및 보행 장애를 포함한다.

신경 축삭 손상은 알츠하이머병을 비롯한, 다수의 신경퇴행 질환 및 장애과 연관이 있다. 따라서, 본 발명의 방법 및 결합 구성원은 신경 축삭 손상과 연관된 (적어도 부분적으로 그에 의해 유발된 질환/장애 포함) 질환 및 장애 치료에서 유용성을 갖는다. 바람직하게 본 발명의 방법 및 결합 구성원은 AD 치료에서, 특히, 바람직하게는 경증 내지 중등도 AD 및/또는 증상 발현 전 AD(이는 또한 임상전 AD로도 지칭) 치료에서 유용성을 갖는다. 본 발명의 방법 및 결합 구성원은 AD에 기인하는 경도 인지 장애(MCI: mild cognitive impairment) 치료에서 유용성을 가질 수 있다.

AD는 문헌 [McKhann et al. (Alzheimers Dement. 2011 May; 7(3): 263-269)] 및 [Albert et al. (Alzheimers Dement. 2011 May; 7(3): 270-279)](상기 문헌은 각각 그 전문이 본원에서 참조로 포함)에 기재된 기준을 사용하여 경증 내지 중등도 AD로 분류될 수 있다. 간략하면, 경증 내지 중등도 AD는 (i) 환자의 인지 변화에 관한 우려; (ii) 하나 이상의 인지 영역(기억력, 실행 기능, 주의력, 언어 및 시공간 기술 포함)의 손상; (iii) 기능적 능력의 독립성을 유지하면서, 복잡한 기능적 작업을 수행하는 경미한 문제; 및 (iv) 치매 부재를 특징으로 할 수 있다. 경증/중등도/중증으로의 AD의 분류는 표준 임상 관행이며, 용어 "경증 내지 중등도 AD"의 의미는 당업자에 의해 쉽게 이해될 것이다.

미국 국립 보건원 및 알츠하이머 협회(NIH-AA: National Institutes of Health and the Alzheimer's Association) 가이드라인에 따르면, 증상 발현 전 AD는 아밀로이드 축적 및 다른 신경 세포 변화를 비롯한, 환자의 뇌 변화를 기반으로 진단할 수 있지만, 중요한 임상 증상은 상기 환자에서 아직 뚜렷하지 않다.

NIH-AA에 따르면, 경도 인지 장애(MCI)는 개인의 연령 및 교육 수준에 비해 정상 수준보다 크지만, 상기 개인의 독립성을 방해하지는 않는 기억력 및/또는 다른 사고 문제로 정의된다. MCI 진단에는 전형적으로 하기: (i) 이전 기능 대비 인지 변화에 대한 우려; (ii) 개인의 연령 및 교육 수준에 대해 예상되는 것에 비해 큰, 기억력 및 문제 해결과 같은 하나 이상의 인지 기능 손상(기억력은 MCI에서 더 중증의 AD 치매로 진행하는 사람들 사이에서 가장 일반적으로 손상되는 기능이다); (iii) 일부 복잡한 작업이 이전보다 더 어려울 수 있지만, 일상 생활에서 독립적으로 기능할 수 있는 능력은 유지; 및 (iv) 치매 부재가 모두 요구된다. 점진적인 쇠퇴의 증거를 얻기 위해 인지에 대한 장기 평가를 수행할 수 있다. MCI가 AD로 인한 것이며, 예컨대, 다른 뇌 질환, 약물 투여, 우울증 또는 큰 삶의 변화와 같은 다른 원인에 기인하는 것이 아님을 확인하기 위해 추가 진단 검사를 수행할 수 있다.

본 발명은 또한 결합 구성원을 이용한 치료 이전 및 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 NfL 수준을 측정하는 것을 포함하고, 여기서, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 NfL 수준이 감소되었다면, 신경 축삭 손상을 치료하는 방법은 유효한 것인, 본원에서 정의된 바와 같은 치료 방법의 효능을 평가하는 방법을 제공한다. NfL 수준 감소는 본원에 기술된 바와 같을 수 있다. 비제한적인 예로서, 환자의 혈장 중 NfL 수준이 결합 구성원을 이용한 치료 이후 감소되고, 임의로 혈장 NfL 수준 감소가 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20% 감소라면, 본 발명의 치료는 유효한 것으로 간주될 수 있다. 추가의 비제한적인 예로서, 환자의 CSF 중 NfL 수준이 결합 구성원을 이용한 치료 이후 감소되고, 임의로 CSF NfL 수준 감소가 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 50% 감소라면, 본 발명의 치료는 유효한 것으로 간주될 수 있다.

본 발명의 치료 효능은 또한 유사한 방식으로 본원에 기술된 다른 분자/마커 중 임의의 것의 수준을 평가함으로써 측정될 수 있다. 예를 들어, 본원에 정의된 바와 같은 치료 방법의 효능을 평가하는 상기 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전 및 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 (혈장 및/또는 CSF 중) 유리 Aβ1-42 수준을 측정하는 것을 포함하고, 여기서, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 (혈장 및/또는 CSF 중) 유리 Aβ1-42와 비교하여 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 (혈장 및/또는 CSF 중) 유리 Aβ1-42 수준이 감소되었다면, 치료 방법은 유효한 것이다. 다른 분자/마커(예컨대, 유리 Aβ1-42) 중 임의의 것의 수준 감소/증가는 본원에 기술된 바와 같을 수 있다. 대안적으로, 또는 추가로, 본 발명의 치료 효능은 또한 신경 축삭 손상(또는 그의 증상 또는 연관된 질환)의 성공적인 치료의 다른 임상 지표를 평가함으로써 결정될 수 있다. 예를 들어, 본 발명이 AD를 치료하기 위해 사용되는 경우, 결합 구성원을 이용하여 치료받지 않은 개체와 비교하여, AD의 임상 증상(본원에 기술된 것 포함)의 임의의 감소, 및/또는 또는 AD의 더욱 중증인 AD로의 진행 저속화가 치료의 유효성 여부를 결정하기 위해 NfL 수준(및/또는 본원의 다른 분자/마커 중 임의의 것의 임의의 수준)을 평가하는 것과 함께 조합하여 사용될 수 있다.

본 발명의 치료 효능을 결정하는 방법은 본 발명의 다른 분자/마커 중 임의의 것(특히, (혈장 및/또는 CSF 중) 유리 Aβ1-42)의 수준을 평가하는 것과 함께 조합하여 NfL 수준을 평가하는 것을 포함할 수 있다.

본 발명의 방법은 아밀로이드에 대해 양성인 환자에서 수행될 수 있다. 본 발명의 방법은 (i) 아밀로이드에 대해 양성(A+); (ii) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 tau에 대해 음성(T-); (iii) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); (iv) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 음성(T-) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); (v) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 tau에 대해 양성(T+); (vi) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+); (vii) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 양성(T+) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+); (viii) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 양성(T+) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); 또는 (ix) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 음성(T-) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+)인 환자에서 수행될 수 있다. 아밀로이드/tau/신경퇴행에 대해 양성인 환자는 본원에서 상호교환적으로 양성 아밀로이드/tau/신경퇴행 상태인 환자로도 지칭될 수 있다. 유사하게, 아밀로이드/tau/신경퇴행에 대해 음성인 환자는 본원에서 상호교환적으로 음성 아밀로이드/tau/신경퇴행 상태인 환자로도 지칭될 수 있다.

따라서, 본 발명의 방법은 환자가 아밀로이드 양성인지 확인하는 하나 이상의 단계를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 방법은 (i) 아밀로이드에 대해 양성(A+); (ii) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 tau에 대해 음성(T-); (iii) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); (iv) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 음성(T-) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); (v) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 tau에 대해 양성(T+); (vi) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+); (vii) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 양성(T+) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+); (viii) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 양성(T+) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); 또는 (ix) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 음성(T-) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+)인 환자를 확인하는 하나 이상의 단계를 포함할 수 있다.

환자의 아밀로이드 상태, tau 상태 및/또는 신경퇴행 상태 여부를 평가하는 것은 전형적으로 알츠하이머병에 대한 진단 가이드라인, 구체적으로 문헌 [Cummings in Alzheimer's & Dementia (2019) 15:172-178] (본원에서 그 전문이 참조로 포함, 특히 표 1 및 2 참조) 및 [Jack et al. (Neurology (2016) 87(5):539-547] (또한 본원에서 그 전문이 참조로 포함)에 기술된 바와 같은 미국 국립 노화 연구소 알츠하이머 협회(NIA-AA) 연구 프레임워크 아밀로이드, Tau, 신경퇴행(ATN) 분류(National Institute on Aging's Alzheimer's Association (NIA-AA) Research Framework's Amyloid, Tau, Neurodegeneration (ATN) classification)에 따라 수행된다. 따라서, 환자의 아밀로이드 상태는 CSF 마커 및/또는 이미징 마커를 사용하여 결정될 수 있고, 여기서, 임의로 아밀로이드에 대한 CSF 마커는 CSF Aβ1-42이고/이거나, 아밀로이드에 대한 이미징 마커는 아밀로이드 이미징이다. 환자의 아밀로이드 상태를 결정하는 다른 수단 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, 아밀로이드의 혈장 바이오마커가 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 아밀로이드에 대한 추가의 바이오마커가 개발됨에 따라, 그리고, 그러한 바이오마커가 개발되었을 때, 이들은 또한 본 발명에 따른 치료에 적합한 환자인지 확인하기 위하여 환자의 아밀로이드 상태를 결정하는 데에도 사용될 수 있다.

환자의 tau 상태는 CSF 마커 및/또는 이미징 마커를 사용하여 결정될 수 있고, 여기서, 임의로 아밀로이드에 대한 tau 마커는 CSF 포스포르-tau(p-tau)이고/이거나, tau에 대한 이미징 마커는 tau 이미징, 예컨대, tau 양전자 방출 단층촬영 (PET: positron emission tomography)이다. 환자의 신경퇴행 상태는 CSF 마커 및/또는 이미징 마커를 사용하여 결정될 수 있고, 여기서, 임의로 신경퇴행에 대한 CSF 마커는 CSF 전체 tau(tTau 또는 t-tau)이고/이거나, 신경퇴행에 대한 이미징 마커는 자기 공명 이미징(MRI) 위축 또는 플루오로데옥시글루코스(FDG) PET이다. CSF 및/또는 이미징 마커 선택은 아밀로이드, tau 및 신경퇴행 각각에 대해 독립적으로 선택될 수 있다. 의심의 여지를 없애기 위해, 과도한 부담 없이, (예컨대, 문헌 [Alzheimer's & Dementia (2019) 15:172-178]에 기술된 바와 같이) 상기 CSF 및/또는 이미징 마커를 이용하여 환자의 아밀로이드 상태, tau 상태 및/또는 신경퇴행 상태를 결정하여 본 발명에 따른 치료에 적합한 환자인지 확인하는 것은 당업자의 통상의 일반적인 관행 범위 내에 충분히 포함되어 있다. 비제한적인 예로서, 건강한 대조군/참조 집단에 기초한 95번째 백분위수는 양성 또는 음성 아밀로이드 상태, tau 상태 및/또는 신경퇴행 상태를 결정하기 위한 컷오프로 사용될 수 있다. 대안적인 접근법은 전형적인 AD 치매에서 보이는 값의 (가장 일반적인) 10번째 백분위수에 기초하여 선택한 컷오프 포인트일 수 있다. AD 환자 진단하고, 이로써, 본 발명이 도움이 될 수 있는 환자임을 진단하는 방법에 관한 추가 논의는 문헌 [Alzheimers Dis. (2017) 57(3):645-665](그 전문이 본원에서 참조로 포함)에서 살펴볼 수 있다. 인지 및/또는 기능 평가를 포함한 다른 통상의 진단/스크리닝 기준 또한 사용될 수 있다. 비제한적인 예로서, 경증-중등도 AD에 대한 통상의 진단/스크리닝 기준은 AD에 대한 간이 정신 상태 검사(MMSE: Mini-Mental State Exam) 점수 16 내지 26, 및/또는 로젠 수정된 하친스키 허혈 점수(Rosen Modified Hachinski Ischemic score) ≤ 4를 포함한다. 또한, 이들 예시적인 방법도 당업자의 통상의 관행 범위 내에 충분히 포함되어 있다.

본 발명은 또한 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 환자에서의 NfL 수준을 측정하는 것을 포함하고, 여기서, 환자의 (i) 결합 구성원을 이용한 치료 이전 혈장 NfL 농도가 ≥ 20 pg/ml, ≥ 15 pg/ml, ≥ 12 pg/ml 또는 ≥ 10 pg/ml, 바람직하게는 ≥ 15 pg/ml이고/이거나; (ii) 결합 구성원을 이용한 치료 이전 CSF NfL 농도가 ≥ 1 ng/ml, ≥ 800 pg/ml, ≥ 600 pg/ml 또는 ≥ 500 pg/ml, 바람직하게는 ≥ 600 pg/ml인 경우에는 환자가 치료 방법에 적합한 것으로 확인되는 것인, 본 발명의 치료 방법에 적합한 환자인지 확인하는 방법(이는 또한 상호교환적으로 본 발명의 치료 방법에 대한 적합성을 스크리닝하는 방법으로도 지칭)을 제공한다.

본 발명의 치료 방법에 적합한 환자인지 확인하는 것은 또한 본원에 기술된 다른 분자/마커 중 임의의 것의 수준을 유사한 방식으로 평가함으로써 결정될 수 있다. 예를 들어, 본원에서 정의된 바와 같은 치료 방법에 적합한 환자인지 확인하기 위한 상기 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 환자에서 (혈장 및/또는 CSF 중) 유리 Aβ1-42 수준을 측정하는 것을 포함할 수 있고, 여기서, (혈장 및/또는 CSF 중) 유리 Aβ1-42 수준이 본원에 기술된 바와 같은 기준선 수준을 초과하는 경우에는 환자가 치료에 적합한 것으로 확인된다. 다른 분자/마커 중 임의의 것(예컨대, 유리 Aβ1-42)의 기준선/치료 이전 수준은 본원에 기술된 바와 같을 수 있다. 비제한적인 예로서, 환자의 치료 이전 CSF 중 Aβ1-42 수준이 인노제네틱스(Innogenetics) 연구 전용(RUO: Research Use Only) 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA)을 사용하여 측정된 바, ≤ 약 550 pg/mL 또는 ≤ 약 550 ng/L이거나, 또는 (컷오프가 사용되는 검정법에 따라 달라질 수 있는 바) 다른 이용가능한 검정법을 사용하였을 때 상응하는 Aβ1-42 수준인 경우, 환자는 본 발명에 따른 치료에 적합할 수 있다. (인노제네틱스 RUO ELISA를 사용하였을 때) CSF 중 Aβ1-42 수준이 ≤ 약 550 pg/mL 또는 ≤ 약 550 ng/L인 것은 높은 아밀로이드 플라크 부하를 나타내는 것으로, 이는 즉, 환자가 아밀로이드에 대해 양성(A+)이라는 것을 시사하는 것이다. 상기 컷오프 또는 임계치는 치료를 위해 경증-중등도 AD 환자를 확인하는 데 유용할 수 있지만, 적절한 컷오프/임계치는 치료하고자 하는 환자 집단, 예를 들어, 증상 발현 전/임상 전 AD 환자 또는 AD 또한 앓고 있는 다운 증후군(DS: Down syndrome)을 앓는 개체에 따라 달라질 수 있다. 아밀로이드/Aβ1-42를 측정하고, 다른 AD 환자 집단의 진단에 도움이 되는 것으로 알려진 컷오프/임계치 값에 기초하여 본 발명에 따른 치료에 적합한 환자인지 확인하기 위해 본원에 기술된 것과 같은 표준 기술을 사용하는 것은 임상의의 통상적인 기술 범위 내에 있다.

대안적으로, 또는 추가로, 본 발명의 치료에 적합한 환자인지 확인하는 것은 또한 신경 축삭 손상(또는 그의 증상 또는 연관된 질환)의 다른 임상 지표를 평가함으로써 결정될 수 있다. 예를 들어, 본 발명이 AD를 치료하기 위해 사용되는 경우, (본원에 기술된 바와 같은 표준 임상 분류/분류 기준을 이용한) 환자의 AD 임상 증상에 대한 임상의의 분류가 환자가 치료에 적합한지 여부를 결정하기 위해 NfL 수준(및/또는 본원의 다른 분자/마커 중 임의의 것의 임의의 수준)을 평가하는 것과 함께 조합하여 사용될 수 있다.

특히, 본 발명은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 적합한 마커(예컨대, CSF 마커, 혈장 마커 및/또는 이미징 마커)를 이용하여 환자의 아밀로이드 상태를 평가하는 단계를 포함하고, 여기서, 환자의 아밀로이드 상태가 양성일 때, 환자는 본 발명에 따른 치료에 적합한 것으로 확인되는 것인, 본 발명에 따른 치료에 적합한 환자인지 확인하는 방법을 제공한다. 상기 확인 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 환자의 (i) tau 상태; (ii) 신경퇴행 상태; 또는 (iii) tau 상태 및 신경퇴행 상태를 평가하는 것을 추가로 포함할 수 있고, 여기서, CSF 마커 및/또는 이미징 마커는 tau 및/또는 신경퇴행에 대해 독립적으로 선택되고, 여기서, 환자가 (i) 아밀로이드에 대해 양성(A+); (ii) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 tau에 대해 음성(T-); (iii) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); (iv) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 음성(T-) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); (v) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 tau에 대해 양성(T+); (vi) 아밀로이드에 대해 양성(A+) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+); (vii) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 양성(T+) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+); (viii) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 양성(T+) 및 신경퇴행에 대해 음성(N-); 또는 (ix) 아밀로이드에 대해 양성(A+), tau에 대해 음성(T-) 및 신경퇴행에 대해 양성(N+)인 경우, 환자는 치료 방법에 적합한 것으로 확인된다.

환자의 아밀로이드 상태, tau 상태 및/또는 신경퇴행 상태 여부를 평가하는 것은 본원에 기술된 바와 같이 수행된다. 아밀로이드, tau 및 신경퇴행에 대한 CSF 이미징 마커는 본원에 기술되어 있다.

본 발명의 치료에 적합한 환자인지 확인하는 방법은 본 발명의 다른 분자/마커 중 임의의 것(특히, (혈장 및/또는 CSF 중) 유리 Aβ1-42)의 수준을 평가하는 것과 함께 조합하여 및/또는 AD에 대한 임의의 다른 표준 마커 또는 평가와 함께 조합하여 NfL 수준을 평가하는 것을 포함할 수 있다.

키트

본 발명은 (i) 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 제1 결합 구성원; 및 (ii) NfL에 특이적으로 결합하는 제2 결합 구성원을 포함하는 키트를 추가로 제공한다. 전형적으로 제1 결합 구성원은 본원에 정의된 바와 같은 본 발명의 항체, 바람직하게는 MEDI1814/Abet0380-GL 또는 Abet0380 항체 또는 그의 기능적 변이체이다. 전형적으로 (NfL에 특이적으로 결합하는) 제2 결합 구성원은 항체이다.

제1 결합 구성원 및/또는 제2 결합 구성원은 샘플에서 반응성이 측정될 수 있도록 본원에 기술된 바와 같은 검출 시약을 사용하여 표지될 수 있다. 추가로, Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 (제1) 결합 구성원 및/또는 NfL에 특이적으로 결합하는 (제2) 결합 구성원은 고체 지지체에 부착되거나, 또는 부착되지 않을 수 있다.

키트 부품은 일반적으로 멸균 상태이며, 밀봉된 바이알 또는 다른 용기에 담겨 있다. 키트는 진단 분석 또는 본원에 기술된 다른 방법에 사용될 수 있다.

키트는 방법, 예컨대, 본 발명에 따른 방법에서 부품의 사용 설명서를 포함할 수 있다. 상기 방법을 수행하는 것을 지원하거나, 또는 그를 가능하게 하는 보조 물질이 본 발명의 키트 내에 포함될 수 있다. 보조 물질은 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 (제1) 결합 구성원에 결합하는 제3의 상이한 결합 구성원 및/또는 NfL에 특이적으로 결합하는 (제2) 결합 구성원에 결합하는 제4의 상이한 결합 구성원을 포함한다. 전형적으로 제3 및 제4 결합 구성원 중 어느 하나 또는 둘 모두는 항체이고, 각각은 임의로 본원에 기술된 바와 같은 검출제(예컨대, 형광 표지, 방사성 동위원소 또는 효소)에 접합될 수 있다. 항체 기반 키트는 또한 면역침전을 수행하기 위한 비드를 포함할 수 있다.

키트의 각 부품은 일반적으로 그 자체의 적절한 용기에 들어 있다. 따라서, 이들 키트는 일반적으로 각 부품에 적합한 별개의 용기를 포함한다(각각의 결합 구성원이 존재). 추가로, 키트는 검정법을 수행하기 위한 설명서 및 검정법을 수행하여 얻은 데이터를 해석하고, 분석하기 위한 방법을 포함할 수 있다.

서열 상동성

제한 없이, 전역 방법, 국소적 방법 및 하이브리드 방법, 예를 들어, 예컨대, 세그먼트 접근 방법을 비롯한, 임의의 다양한 서열 정렬 방법을 사용하여 동일성(%)을 결정할 수 있다. 동일성(%)을 결정하기 위한 프로토콜은 당업자의 범주 내의 통상적인 절차이다. 전역 방법은 분자의 처음부터 끝까지 서열들을 정렬하고, 개별 잔기 쌍의 스코어의 합산 및 갭 페널티의 부과에 의해 최상의 정렬을 결정한다. 비제한적인 방법으로는 예컨대, CLUSTAL W(예컨대, 문헌 [Julie D. Thompson et al., CLUSTAL W: Improving the Sensitivity of Progressive Multiple Sequence Alignment Through Sequence Weighting, Position-Specific Gap Penalties and Weight Matrix Choice, 22(22) Nucleic Acids Research 4673-4680 (1994)] 참조); 및 반복 정련(예컨대, 문헌 [Osamu Gotoh, Significant Improvement in Accuracy of Multiple Protein. Sequence Alignments by Iterative Refinement as Assessed by Reference to Structural Alignments, 264(4) J. MoI. Biol. 823-838 (1996)] 참조)을 포함한다. 국소적 방법은 모든 입력 서열들이 공유하는 하나 이상의 보존된 모티프를 식별하여 서열들을 정렬한다. 비제한적인 방법으로는 예컨대, 매치-박스(Match-box)(예컨대, 문헌 [Eric Depiereux and Ernest Feytmans, Match-Box: A Fundamentally New Algorithm for the Simultaneous Alignment of Several Protein Sequences, 8(5) CABIOS 501-509 (1992)]; 깁스 샘플링(Gibbs sampling)(예컨대, 문헌 [C. E. Lawrence et al., Detecting Subtle Sequence Signals: A Gibbs Sampling Strategy for Multiple Alignment, 262(5131) Science 208-214 (1993)] 참조); 얼라인-M(Align-M)(예컨대, 문헌 [Ivo Van WaIIe et al., Align-M - A New Algorithm for Multiple Alignment of Highly Divergent Sequences, 20(9) Bioinformatics:1428-1435 (2004)] 참조)을 포함한다.

따라서, 서열 동일성(%)은 종래 방법에 의해 결정된다. 예를 들어, 문헌 [Altschul et al., Bull. Math. Bio. 48: 603-16, 1986] 및 [Henikoff and Henikoff, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915-19, 1992]를 참조한다. 간략하면, 정렬 스코어가 최적화되도록 하기 제시되는 바와 같이 갭 개방 패널티 10, 갭 확장 패널티 1, 및 (Henikoff and Henikoff)(상기 문헌 동일)의 "blosum 62" 스코어링 매트릭스를 사용하여 두 아미노산 서열을 정렬한다(아미노산은 표준 1문자 코드로 표시).

2개 이상의 핵산 또는 아미노산 서열 사이의 "서열 동일성(%)"은 서열들이 공유하는 동일한 위치의 개수의 함수이다. 따라서, 동일성(%)은 동일한 뉴클레오티드/아미노산의 개수를 뉴클레오티드/아미노산 총 개수로 나눈 값에 100을 곱한 것으로 계산될 수 있다. 서열 동일성(%) 계산은 또한 갭의 개수, 및 2개 이상의 서열의 정렬을 최적화하기 위해 도입될 필요가 있는 각각의 갭의 길이를 고려할 수 있다. 2개 이상의 서열 사이의 서열 비교 및 동일성(%) 결정은 예컨대, BLAST와 같은 특정한 수학적 알고리즘을 사용하여 수행될 수 있으며, 이는 당업자에게 친숙할 것이다.

서열 동일성을 결정하기 위한 정렬 스코어

이어서, 동일성(%)은 하기와 같이 계산된다:

.

실질적으로 상동성인 폴리펩티드들은 하나 이상의 아미노산 치환, 결실 또는 부가를 갖는 것을 특징으로 한다. 이러한 변이는 바람직하게는 사소한 성질의 것, 즉, 보존적 아미노산 치환(본원에 기술) 및 폴리펩티드의 폴딩 또는 활성에 유의적인 영향을 미치지 않는 다른 치환; 전형적으로 1 내지 약 30개의 아미노산의 작은 결실; 및 작은 아미노- 또는 카복실-말단 연장부, 예컨대, 아미노-말단 메티오닌 잔기, 최대 약 20-25개 잔기의 작은 링커 펩티드, 또는 친화성 태그이다.

20개의 표준 아미노산 이외에도, 비표준 아미노산(예컨대, 4-하이드록시프롤린, 6-N-메틸 리신, 2-아미노이소부티르산, 이소발린 및 α-메틸 세린)이 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 잔기를 치환할 수 있다. 제한된 수의 비보존적 아미노산, 유전자 코드에 의해 코딩되지 않는 아미노산 및 비천연 아미노산이 폴리펩티드 아미노산 잔기를 치환할 수 있다. 본 발명의 폴리펩티드는 또한 비자연적으로 발생된 아미노산 잔기를 포함할 수 있다.

비자연적으로 발생된 아미노산으로는 제한 없이, 트랜스-3-메틸프롤린, 2,4-메타노-프롤린, 시스-4-하이드록시프롤린, 트랜스-4-하이드록시-프롤린, N-메틸글리신, 알로-트레오닌, 메틸-트레오닌, 하이드록시-에틸시스테인, 하이드록시에틸호모-시스테인, 니트로-글루타민, 호모글루타민, 피페콜산, tert-류신, 노르발린, 2-아자페닐알라닌, 3-아자페닐-알라닌, 4-아자페닐-알라닌, 및 4-플루오로페닐알라닌을 포함한다. 비자연적으로 발생된 아미노산 잔기를 단백질에 혼입시키기 위한 여러 방법이 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 넌센스 돌연변이가 화학적으로 아미노아실화된 억제자 tRNA를 사용하여 억제되는 시험관내 시스템이 사용될 수 있다. 아미노산을 합성하고, tRNA를 아미노아실화하는 방법은 당업계에 공지되어 있다. 넌센스 돌연변이를 갖는 플라스미드의 전사 및 번역은 E. 콜라이(E. coli) S30 추출물과 상업적으로 이용가능한 효소 및 다른 시약을 포함하는 무세포 시스템에서 수행된다. 단백질은 크로마토그래피로 정제된다. 예를 들어, 문헌 [Robertson et al., J. Am. Chem. Soc. 113:2722, 1991]; [Ellman et al., Methods Enzymol. 202:301, 1991]; [Chung et al., Science 259:806-9, 1993]; 및 [Chung et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:10145-9, 1993]을 참조한다. 두 번째 방법에서, 번역은 돌연변이된 mRNA 및 화학적으로 아미노아실화된 억제자 tRNA의 미세주입에 의해 제노푸스(Xenopus) 난모세포에서 수행된다(문헌 [Turcatti et al., J. Biol. Chem. 271:19991-8, 1996]). 세 번째 방법 내에서, E. 콜라이 세포는 대체하고자 하는 천연 아미노산(예컨대, 페닐알라닌)의 부재 및 원하는 비자연적으로 발생된 아미노산(예컨대, 2-아자페닐알라닌, 3-아자페닐알라닌, 4-아자페닐알라닌, 또는 4-플루오로페닐알라닌)의 존재하에서 배양된다. 비자연적으로 발생된 아미노산은 그의 천연 대응물 대신에 폴리펩티드에 혼입된다. 문헌 [Koide et al., Biochem. 33:7470-6, 1994]를 참조한다. 자연적으로 발생된 아미노산 잔기는 시험관내 화학적 변형에 의해 비자연적으로 발생된 종으로 전환될 수 있다. 화학적 변형은 치환 범위를 추가로 확장하기 위해 부위 지정 돌연변이유발과 조합될 수 있다(문헌 [Wynn and Richards, Protein Sci. 2:395-403, 1993]).

제한된 수의 비보존적 아미노산, 유전자 코드에 의해 코딩되지 않는 아미노산, 비자연적으로 발생된 아미노산 및 비천연 아미노산이 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 잔기를 대체할 수 있다.

본 발명의 폴리펩티드의 필수 아미노산은 예컨대, 부위 지정 돌연변이유발 또는 알라닌 스캐닝 돌연변이유발과 같은, 당업계에 공지된 절차에 따라 확인될 수 있다(문헌 [Cunningham and Wells, Science 244: 1081-5, 1989]). 생물학적 상호작용 부위는 또한 추정 접촉 부위 아미노산의 돌연변이와 함께 핵 자기 공명, 결정학, 전자 회절 또는 광친화성 표지와 같은 기술에 의해 결정되는 바와 같은 구조의 물리적 분석에 의해 결정될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [de Vos et al., Science 255:306-12, 1992]; [Smith et al., J. Mol. Biol. 224:899-904, 1992]; [Wlodaver et al., FEBS Lett. 309:59-64, 1992]를 참조한다. 필수 아미노산들의 동일성은 또한 본 발명의 폴리펩티드의 관련 성분(예를 들어, 전위 또는 프로테아제 성분)과의 상동성의 분석으로부터 추론될 수 있다.

예컨대, 문헌 [Reidhaar-Olson and Sauer (Science 241:53-7, 1988)] 또는 [Bowie and Sauer (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:2152-6, 1989)]에 개시된 것과 같은 공지된 돌연변이유발 및 스크리닝 방법을 사용하여 다중 아미노산 치환을 수행하고, 시험할 수 있다. 간략하면, 상기 저자는 폴리펩티드에서 2개 이상의 위치를 동시에 무작위화하고, 기능성 폴리펩티드를 선택한 후, 돌연변이유발된 폴리펩티드를 시퀀싱하여 각 위치에서의 허용가능한 치환의 스펙트럼을 결정하는 방법을 개시한다. 사용될 수 있는 다른 방법은 파지 디스플레이(예컨대, 문헌 [Lowman et al., Biochem. 30:10832-7, 1991]; 미국 특허 제5,223,409호(Ladner et al.); Huse, WIPO 공개 WO 92/06204) 및 영역-유도 돌연변이유발(문헌 [Derbyshire et al., Gene 46:145, 1986]; [Ner et al., DNA 7:127, 1988])을 포함한다.

서열 정보

MEDI1814/Abet0380-GL 및 Abet0380HCDR1(서열 번호 1)

YQTMW

MEDI1814/Abet0380-GL 및 Abet0380HCDR2(서열 번호 2)

VIGKTNENIAYADSVKG

MEDI1814/Abet0380-GL 및 Abet0380HCDR3(서열 번호 3)

EWMDHSRPYYYYGMDV

MEDI1814/Abet0380-GL 및 Abet0380LCDR1(서열 번호 4)

SGHNLEDKFAS

MEDI1814/Abet0380-GL 및 Abet0380LCDR2(서열 번호 5)

RDDKRPS

MEDI1814/Abet0380-GL 및 Abet0380LCDR3(서열 번호 6)

SSQDTVTRV

Abet0380VH(서열 번호 7)(CDR 굵은체 및 밑줄체로 표시)

Abet0380VL(서열 번호 8)(CDR 굵은체 및 밑줄체로 표시)

MEDI1814/Abet0380-GL VH(서열 번호 9)(CDR 굵은체 및 밑줄체로 표시)

MEDI1814/Abet0380-GL VL(서열 번호 10)(CDR 굵은체 및 밑줄체로 표시)

예시적인 Aβ1-42 아미노산 서열(서열 번호 11)

DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA

예시적인 NfL 아미노산 서열(서열 번호 12)

.

본 발명은 이제 하기 비제한적 실시예에 의해 예시될 것이다. 하기 실시예는 본 개시내용의 구체적인 실시양태 및 그의 다양한 용도를 예시한다. 그들은 설명의 목적으로만 제시되며, 어떤 식으로든 본 개시내용의 범주를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.

실시예

실시예 1. 동물에서의 약동학적 성질 및 약물 대사

MEDI1814의 약동학적 성질(PK) 및 독성동태학적 성질(TK)을 스프라구 돌리(Sprague-Dawley) 래트, C57BL/6 마우스 및 시노몰구스 원숭이에서 평가하였다.

스프라구 돌리 래트에서, 10 mg/kg 정맥내로(IV), 100 mg/kg IV, 또는 75 mg/kg 피하로(SC)의 14주간의 매주 투여 후, MEDI1814는 선형 및 용량 비례 TK를 보였다(데이터는 제시되지 않음). 대조군/비히클 군과 비교하여 전체 CSF Aβ42 수준이 용량에 의존하는 방식으로 최대 36배 증가한 것으로 관찰되었다. 활성제 처리군의 거의 모든 동물에서 CSF의 유리 Aβ42 수준은 정량 하한(LLOQ) 미만이었다.

시노몰구스 원숭이에서, 10 mg/kg IV, 100 mg/kg IV, 또는 75 mg/kg SC의 14주간의 매주 투여 후, MEDI1814는 1차 투여 후 선형 및 용량 비례 TK를 보였고, TK 노출은 마지막 투여 후, TK 노출은 용량에 비례하는 방식보다 약간 더 크게 증가하였다(데이터는 제시되지 않음). 개별 MEDI1814 CSF 농도는 모든 투여군에 대한 혈청 농도의 0.01% 내지 0.1% 범위였다. 처리 단계에서 용량에 의존하는 방식으로 전체 혈장 Aβ42는 최대 2057배 증가 및 전체 CSF Aβ42는 최대 7.7배 증가한 것으로 관찰되었으며, 이는 표적 참여를 시사하는 것이다. 치료 단계 종료시 모든 용량 수준에서 거의 완전한(≥ 95%) CSF 유리 Aβ42 억제가 달성되었다.

Aβ42 단독에 결합하는 MEDI1814의 특이성은 CSF Aβ40에 대해 효과가 없는 것으로 확인되었다(데이터는 제시되지 않음).

시험된 래트 또는 시노몰구스 원숭이 코호트에서 독성에 대한 표적 기관이 확인되지 않았다(데이터는 제시되지 않음).

실시예 2. AD 치료를 위한 MEDI1814의 단일 용량 상승(SAD: Single-ascending dose) 및 다중 용량 상승(MAD: Multiple-ascending dose)

경증 내지 중등도 AD를 앓는 피험체에서 위약 대비 MEDI1814의 안전성 및 내약성을 평가하고, 또한 경증 내지 중등도 AD를 앓는 피험체에서 MEDI1814의 약동학적 성질(PK), 약력학적 성질(PD) 및 면역원성도 평가하기 위해, 본 발명자들은 55 내지 85세 사이의 경증 내지 중등도 AD를 앓는 피험체에서의 다중 센터, 무작위, 이중 맹검, 위약 대조, 인터리브 단일 및 다중 용량 상승 연구를 개발하였다.

55 내지 85세 사이의(55세 및 85세 포함) 경증 내지 중등도 AD를 앓는 남성, 및 폐경 후 또는 외과적으로 불임인 여성 피험체가 본 단일 및 다중 용량 상승 연구에 등록되었다. 포함 기준으로 하기를 포함하였다:

·체질량 지수(BMI: Body mass index) 17 내지 32 kg/㎡(17 및 32 kg/㎡ 포함) 및 체중 50 내지 120 kg(50 및 120 kg 포함).

· 로젠 수정된 하친스키 허혈 점수 ≤ 4.

· 가능한 AD의 인지 및 기능적 증상이 무작위화 6개월 전에 존재했다는 요건과 함께, 환자 병력 및 현장 평가에 기초하여 미국 국립 노화 연구소-알츠하이머 협회(NIA-AA: National Institute of Aging-Alzheimer's Association) 기준에 따른 경증 내지 중등도 AD.

· MMSE 점수 16 내지 26(오직 스크리닝시에만 16 및 26 포함).

· 스크리닝 기간 중 MRI 스캔, AD로 인한 치매 진단과 일치하는 결과, 즉, 중앙 MRI 판독기에 의해 측정된, 예컨대, 중증 백질 질환(혈관성 치매 암시)과 같은 치매의 또 다른 병인을 나타내지 않는 결과.

· 아밀로이드증의 바이오마커 증거가 있는 피험체를 연구하기 위해, 스크리닝시, 높은 아밀로이드 플라크 부하를 나타내는 것인, CSF Aβ(1-42)가 < 550 pg/mL 또는 ng/L인 AD 피험체만 [(인노제네틱스 연구 전용(RUO) 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA) 사용)] MAD 코호트에 포함되었다.

· 피험체 및 간병인/정보 제공자(경증 내지 중등도 AD를 앓는 피험체의 경우)는 영어, 스페인어 또는 한국어로 유창하게 읽고, 쓰고, 말할 수 있어야 한다.

· 피험체는 뇌 MRI 및 요추 천자를 포함하여 연구원이 판단한 대로 모든 예정된 평가를 이해하고, 참여하며, 모든 필수 테스트 및 절차를 완료할 수 있는 정신적 및 신체적 능력이 있어야 한다.

· 연구원의 의견에 따르면, 피험체 및 간병인/정보 제공자(경증 내지 중등도 AD를 앓는 피험체의 경우)는 가능하게는 연구 프로토콜을 준수하고, 연구를 완료할 가능성이 높은 것으로 간주되어야 한다.

· 피험체는 신뢰할 수 있는 정보 제공자(예컨대, 배우자) 또는 정기적으로 연락하는 간병인(즉, 최소 주 3회; 대면 방문/전화 연락의 조합이 허용)이 있어야 한다. 동일한 정보 제공자 또는 간병인이 모든 연구 방문에 참여하여야 하고, 연구 평가에 의미 있는 입력을 제공할 수 있도록 충분한 피험체 상호작용이 있어야 한다. 이에 대한 증거는 소스 문서에 문서화하여야 한다.

· 피험체는 연구의 성격을 이해하여야 하며, 연구 관련 절차를 시작하기 전에 서명 및 날짜가 기재된 서면 동의서를 제공하여야 한다. 정보에 입각한 동의를 제공할 수 없는 것으로 간주되는 피험체는 현지 법률 및 규정에 따라 피험체의 법적 대리인으로부터 서명되고 날짜가 기재된 서면 ICF를 받은 경우 등록할 수 있다.

배제 기준으로는 하기를 포함하였다:

· 전측두엽 치매, 루이소체병, 혈관성 치매, 헌팅턴병 또는 동반 파킨슨병, 다운 증후군, 외상 후 병태, 다발성 경화증, 진행성 핵상 마비(PSNP: progressive supranuclear palsy), 또는 다른 운동 장애, 또는 치매 또는 인지 장애 를 유발하는 활동성 자가면역 또는 신경면역학적 장애를 비롯한, 피험체의 치매의 이유를 댈 수 있거나, 또는 그의 원인될 수 있는, 알츠하이머 이외의 다른 임의의 의학적 병태를 앓는 경우.

· 뇌 MRI 스캔 스크리닝시 하기와 같은 특정 소견을 보이는 경우: > 4 미세출혈; 경색 또는 뇌내(거대) 출혈 > 1 cm(직경); > 4 열공 경색; 표재성 철침착증; 동맥류; 동정맥 기형; 뇌 타박상의 증거, 뇌연화증; 공간 점유 병변, 여기서, 상기 기준에 기초한 자격에 대한 최종 결정은 중앙 MRI 판독기에 의해 이루어진다. 다른 비혈관성 뇌 이상(예컨대, 뇌종양, 뇌수종)이 있는 경우, 연구원의 의견에 따라(필요한 경우 후원자와 협의하여), 이들이 환자의 현재 인지 또는 기능 저하의 원인이 되거나, 시험에 완전히 참여할 수 있는 능력을 손상시키거나, 또는 출혈의 위험을 증가시킬 수 있다면, 상기 피험체는 배제되었다.

경증 내지 중등도 AD를 앓는 피험체의 SAD 코호트로부터 이용가능한 데이터를 기반으로 MEDI1814는 건강한 노인 피험체에서도 연구될 수 있다. 스크리닝시, 아밀로이드증을 앓지 않음을 나타내는 것인, CSF Aβ(1-42)가 > 550 pg/mL 또는 ng/L인 피험체만 [(인노제네틱스 RUO 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA) 사용)] 건강한 노인 코호트(SAD)에 포함되었다.

환자 인구 통계 자료가 표 2에 제시되어 있다.

피험체에 대한 위험을 최소화하기 위해, 초기에 단일 용량 상승으로 투여하고, 평가했으며, 한 투여량 수준 코호트에서 다음의 더 높은 투여량 수준 코호트로 의 상승 전, 및 다중 용량 투여(MAD) 전에 안전성, 내약성 및 PD 데이터를 평가하였다.

연구의 SAD 파트는 최대 49일(7주) 스크리닝 기간, MEDI1814 또는 위약의 단일 투여 및 추적 기간으로 총 대략 113일로 구성된다.

5개의 SAD 코호트가 IV 용량 증량(25 mg, 100 mg, 300 mg, 900 mg, 1800 mg)에 사용되었다. 인간 대상 최초(FTIH: First time in human) 연구의 시작 용량은 최대 권장 시작 용량(MRSD: maximum recommended starting dose)보다 대략 8배 낮았다. MRSD는 시노몰구스 원숭이에서의 비임상 연구에서 NOAEL이 100 mg/kg IV인 것에 기초하여 결정되었다(제시되지 않음). 알로메트릭 스케일 팩터 3.1 및 안전 계수 10을 NOAEL(100 mg/kg IV)에 적용하여 계산된 것으로, MRSD는 3.2 mg/kg(또는 192 mg)이다. 시노몰구스 원숭이에서의 독성 연구는 25 mg의 시작 용량에 대해 446배(C_max 기반) 및 189배(AUC 기반)의 안전 마진인 안전 마진을 제공한다. 래트 및 시노몰구스 원숭이에 대해 유사한 안전 마진이 결정되었다. 인간 투여를 위한 안전 마진은 하기과 같은 이유로 시노몰구스 원숭이에서 달성된 노출을 기반으로 한다: 유사한 노출에서 어느 종에서도 독성은 관찰되지 않았고; 처리군에서 최대 대략 33%의 래트가 ADA 양성이었고, TK 노출에 영향을 미쳤으며; 시노몰구스 원숭이로부터 더 많은 PK 및 PD 데이터를 이용할 수 있었다.

적절한 안전 마진을 유지하면서, 혈장 및 CSF에서 더 높고, 지속적인 표적 억제를 얻을 수 있는 용량 수준을 달성하기 위해, 25, 100, 300, 900 및 1800 mg IV MEDI1814의 단일 IV 용량 증량 계획을 디자인하였다. 선택된 용량 범위는 예측된 유리 Aβ-42 억제 및 NOAEL과 관련하여 상당한 안전 마진을 기반으로 하였다.

스크리닝 및 등록 후, 1일째 기준선 절차 및 사전 용량 평가 수행 후(데이터는 제시되지 않음), 적격 피험체는 이중 맹검 방식으로 MEDI1814 또는 위약을 단일 주입 받았다. 단일 피하(SC) SAD 코호트는 100 mg의 용량을 받았다. SC SAD 코호트에 대한 모든 평가 및 샘플 수집은 IV 코호트와 동일하였다.

1일째 투여 후, 안전성과 내약성을 평가하고, 주입 후 최대 24시간까지 정의된 시점에서 약동학적 성질(PK) 및 약력학적 성질(PD) 및 바이오마커 분석을 위해 혈액 샘플을 채취하였다. 피험체는 퇴원은 전 주입 후 적어도 24시간 동안 임상 연구 유닛(CRU: clinical research unit)에 남아 있었다. 혈액 및 뇌척수액(CSF) 샘플링과 함께 추가의 안전성 및 내약성 평가를 정의된 시점에서 추적 기간이 끝날 때까지 수행하였다.

표준 평가를 사용하여 부작용(AE: adverse effect), 신체 및 신경학적 검사, 활력 징후, 구강 온도, 호흡률, 체중, 12 리드 비디지털 및 디지털 ECG, 원격 측정 및 임상 실험실 테스트를 포함한 안전성 및 내약성을 평가하였다. 혈관성 부종의 잠재적 위험이 있는 약물에 대해 특이적인 MRI 안전성 평가와 같이, 예컨대, C-SSRS 및 MMSE와 같이 정신과적 영향을 미칠 수 있는 약물에 대해 특이적인 안전성 및 내약성 평가도 포함하였다.

MEDI1814의 단일 및 다중 용량 PK를 평가하기 위해 빈번한 PK 샘플링을 연구에 포함하였다.

본 연구 및 향후 연구를 위한 용량 선택에 대한 정보를 알아내기 위해 Aβ(1-42)의 혈장 및 CSF 수준 측정 및 Aβ 수준과 MEDI1814 PK 사이의 관계 탐색을 포함하는 PD 평가를 포함하였다.

건강한 집단에서 MEDI1814의 PK 및 PD 효과를 조사하고, 이를 경증 내지 중등도 AD 환자에서 나타나는 것과 비교하기 위해 임의적인 건강한 노인 코호트를 포함할 수 있다. 상기 코호트는 전형적으로 AD 코호트에서 보이는 PK/PD 효과가 예상과 다를 경우 시작될 것이다. 이어서, 건강한 노인 피험체에서의 PK/PD 분석은 표적 참여 정도 및 아밀로이드증이 약력학적 성질에 미치는 효과에 대한 정보를 제공할 것이다.

안전성 모니터링의 일부로 스크리닝시 및 주입 후 5주째에 뇌 MRI 스캔을 수행하였다.

스크리닝시(1일째) 및 주입 후 4주째(29일째)에 SAD 코호트에 대해 약동학적(PK) 파라미터 및 약력학적(PD) 바이오마커의 CSF 분석을 위한 요추 천자를 수행하였다.

연구의 다중 용량 상승(MAD) 파트는 최대 49일(7주) 스크리닝 기간, 8주 처리 기간 및 추적 기간으로, 총 대략 169일로 구성된다.

IV 용량 증량에 3개의 MAD 코호트가 사용되었다. 처리 기간 동안 각 피험체는 MEDI1814 또는 위약을 3회 주입받았으며, 각 주입은 4주(Q4W) 간격을 두고 이루어졌다. MAD는 이전 SAD 코호트로부터 충분한 안전성, 내약성, PK 및 CSF Aβ(1-42) 데이터가 이용가능한 경우에만 시작되었다. MAD를 시작하려면 하기 조건이 충족되어야 한다:

1. MAD 연구의 제1 투여량 수준에서 정상 상태에서 예상되는 노출은 현재까지 달성된 예상 최대 단일 용량 노출을 초과하지 않으며, SAD에서 안전하고, 내약성을 띠는 것으로 간주된다.

2. 현재까지 SAD에 대해 수행된 어떤 패널도 용량 증량 중단 기준을 충족하지 않는다.

3. > 30%의 CSF Aβ(1-42) 저하를 가져올 것으로 예상되는 혈청 MEDI1814 농도를 초래하는 수준에서 투여할 수 있는 능력.

한 투여량 수준 코호트에서 다음으로 더 높은 투여량 수준 코호트로 증량하기로 한 결정은 주어진 코호트에서 적어도 6명의 피험체가 그의 3차 주입을 받은 후에 이루어졌다.

1일째 스크리닝 및 등록 후, 기준선 절차 및 사전 용량 평가 수행 후, 적격 피험체는 이중 맹검 방식으로 MEDI1814 또는 위약을 단일 주입 받았다. 주입 후 최대 24시간까지 정의된 시점에서 안전성 및 내약성을 평가하고, PK 및 PD 바이오마커 분석을 위해 혈액 샘플을 채취하였다. 피험체는 퇴원은 전 주입 후 적어도 24시간 동안 CRU에 남아 있었다.

4, 8, 15, 22, 및 29일째, 피험체는 안전성 평가 및 혈액 샘플링을 위해 CRU로 복귀하였다. MEDI1814 또는 위약의 2차 및 3차 주입은 투여 전 평가 수행 후, 각각 29일째 및 57일째에 수행되었다. 피험체는 2차 및 3차 주입 후 적어도 4시간 동안 CRU에 남아 있었다. 모든 피험체에 대해 안전성 평가, 혈액 및 CSF 샘플링은 추적 관찰 기간이 끝날 때까지 처리 중 정의된 시점에서 수행되었다. 안전성 모니터링의 일부로 스크리닝시 및 최종 주입 후 5주째에 뇌 MRI 스캔을 수행하였다.

스크리닝시(1일째) 및 최종 주입 후 4주째에 PK 파라미터 및 PD 바이오마커의 CSF 분석을 위한 요추 천자를 수행하였다.

추가 MAD 코호트는 MEDI1814를 200mg SC 주사로 받았다. 모든 평가 및 샘플 수집은 IV 코호트에서의 것과 동일하였다

약동학적 변수의 계산 또는 도출

MEDI1814 농도 데이터 및 요약 통계는 변수, 예컨대, N, 평균, 표준 편차, 중간값, 최대값, 최소값, 변동 계수 및 기하 평균을 포함하였다. 개별 및 평균 MEDI1814 농도-시간 프로파일이 작성되고, 보고서에 포함될 것이다.

Phoenix® WinNonlin® v6.2(또는 더 높은 버전의 것)를 사용하여 비구획 분석 접근법을 이용하여 MEDI1814에 대한 하기 PK 파라미터를 결정하였다.

SAD 부분:

최대 혈청 농도(C_max), C_max까지의 소요 시간(t_max), 최소 혈청 농도(C_min), 최종 반감기(t_1/2), 0부터 마지막 측정가능 농도까지의 혈청 농도-시간 곡선하 면적(AUC₀ _-t) 및 0부터 무한대까지의 혈청 농도-시간 곡선하 면적(AUC₀ _-∞), 외삽으로 구한 AUC의 백분율(%AUC_ex), 클리어런스(CL), 및 최종 단계 동안의 분포 부피(V_z).

MAD 부분:

1차 투여: 최대 혈청 농도(C_max), C_max까지의 소요 시간(t_max), 최소 혈청 농도 (C_min), 및 1차 투여 기간 동안의 혈청 농도-시간 곡선하 면적(AUC_0-τ).

3차 투여: 최대 혈청 농도(C_max), C_max까지의 소요 시간(t_max), 최소 혈청 농도 (C_min), 최종 반감기(t_1/2), 투여 기간 동안의 혈청 농도-시간 곡선하 면적(AUC₀ _-τ), 클리어런스(CL), 최종 단계 동안의 분포 부피(V_z), 정상 상태에서의 분포 부피(V_ss) 및 축적비.

면역원성 결과는 MEDI1814에 대한 검출가능한 ADA가 발생한 피험체의 수와 비율(%)을 요약하여 기술적으로 분석하였다. 면역원성 역가는 ADA의 존재에 대해 양성으로 확인된 샘플에 대해 보고될 것이다. PK, 약력학적 성질, 및 안전성에 대한 면역원성의 효과를 평가하였다.

하기 PD 파라미터를 결정하였다: 혈장 및 CSF 중 바이오마커[Aβ(1-40) 전체, Aβ(1-42) 전체 및 유리, 및 Aβ 올리고머]의 기준선(투여 전 1일째) 프로파일로부터의 개별, 평균 및 상대적 변화가 생성되었다. 변수, 예컨대, N, 평균, 표준 편차, 중간값, 최대값, 최소값, 변동 계수, 기하평균 등을 결정하였다. 적절한 경우, 비구획 방법을 사용하여 하나 이상의 바이오마커에 대한 PD 파라미터를 도출할 수 있다. Phoenix® WinNonlin® v6.2(또는 더 높은 버전의 것); 또는 SAS® 버전 8.2(SAS® Version 8.2), 또는 또는 더 높은 버전의 것을 사용하여 PD 계산을 수행할 수 있다.

하기 MCIS 변수 또한 평가하였다: 기억 수행 지수(범위 0-100), 회상 패턴(범위 정상 미만에서부터 정상까지), 전체 즉각 회상(범위 0-30), 지연 회상 추정치(범위 0-10), 지연 유리 회상(범위 0-10), 지연 단서 회상 가능(범위 0-10), 지연 회상 불가(범위 0-10) 및 동물 회상(범위 0-9).

결과

77명 AD 환자는 (IV 및 SC 투여에 의해) 단일 또는 다중 용량으로서 최대 1800 mg으로 위약 또는 MEDI1814를 받았다.

MEDI1814는 모든 SAD 및 MAD 코호트에 대해 IV 및 SC, 두 투여 경로를 통해 내약성이 우수한 강력한 안전성 프로파일을 입증하였다. 이상 사례(AE: adverse event)의 발생에서 명백한 용량 관련 경향은 없었다. 중대한 부작용(SAE: significant adverse effect)은 보고되지 않았다. 보고된 모든 AE는 강도가 경증 내지 중등도였다. 중증 이상 사례(SAE: serious adverse event), 이상 사례 또는 사망으로 인한 중단은 보고되지 않았다.

활력 징후, 심전도 파라미터, 실험실 결과 또는 추적 신체 및 신경학적 검사에서 임상적으로 유의적인 변화는 없었다. 치료 후 인지 저하 (MMSE 데이터, 제시되지 않음) 또는 자살 생각 또는 행동(컬럼비아 대학 자살 심각성 평가 척도(Columbia-Suicide Severity Rating Scale) 데이터, 제시되지 않음)의 징후는 없었다. 중요한 것은 자기 공명 이미징(MRI) 평가에서 부종 형성(ARIA-E) 또는 헤모시데린 침착(ARIA-H)과 관련하여 아밀로이드 관련 이미징 이상 발생이 나타나지 않았다는 것이다. 면역원성을 암시하는 항약물 항체는 본 연구의 어느 피험체에서도 검출되지 않았다(모든 역가 < 50).

실시예 3. MEDI1814 처리가 유리 Aβ1 -42, 전체 Aβ1 -42 및 전체 Aβ1 -40의 CSF 수준에 미치는 효과

실시예 2의 SAD 코호트의 경우, 처리 후 29일째, 및 MAD 코호트의 경우, 처리 후 85일째에 유리 Aβ1-42, 전체 Aβ1-42 및 전체 Aβ1-40의 CSF 수준을 측정하였다.

단일 MEDI1814 투여 후 29일째 기준선 대비 CSF 유리 Aβ1-42의 용량에 의존하는 감소, 및 전체 Aβ1-42의 증가가 관찰되었고, 이는 중앙 구획에서 Aβ1-42의 항체 매개 표적 관여와 일치하는 프로필이다(도 1, 상단 그래프). CSF 유리 Aβ1-42는 최고 용량 코호트(300-1800 mg IV)에서 약 -90%(중간값) 감소되었지만, 초기 용량: -72%(100 mg IV), -11%(100 mg SC), -34%(25 mg IV)의 경우 및 위약의 경우(-8%) 더 낮은 수준의 억제가 관찰되었다(도 1, 상단 그래프). MEDI1814 용량 범위에 걸쳐 유리 Aβ1-42에 대해 관찰된 CSF 프로파일은 시노몰구스 원숭이 데이터에 기초한 PK/PD 모델을 사용하여 예측된 것과 대체로 일치하였다. 용량 범위 25 - 300 mg IV에 걸쳐 관찰된 유리 Aβ1-42 억제 수준이 예측된 것보다 컸지만, 900 mg 및 1800 mg IV 투여 후에는 예상대로 거의 최대 수준에 달하는 억제가 관찰되었다(도 1, 상단 그래프).

더 높은 용량 수준에서는 예상대로 위약의 경우, +0.2%인 것과 비교하여 전체 Aβ1-42가 상당히 증가한 것으로 관찰되었다: +273%(중간값, 1800 mg IV), +323%(900 mg IV), +135%(300 mg IV)(도 1, 중간 그래프). 용량 범위에 걸쳐 기준선으로부터의 변화율(%)에 대한 MEDI1814-위약 차이는 CSF 유리 Aβ1-42의 경우, -27% 내지 -124% 범위이고, 전체 A1-β42의 경우, +13% 내지 +332% 범위였다(각각 도 1, 상단 및 중간 그래프). 그러나, Aβ1-42에 대한 MEDI1814의 알려진 선택성을 유지하면서, CSF 전체 Aβ1-40 수준의 기준선으로부터의 유의적인 변화 또는 Aβ1-40에 대한 MEDI1814-위약 차이는 관찰되지 않았다(도 1, 하단 그래프).

다중 용량의 MEDI1814을 받은 MAD 코호트의 경우, 85일째 유사한 용량 관련 CSF 바이오마커 반응이 관찰되었다. CSF 유리 Aβ1-42는 -4%(중간값, 위약), -50%(300 mg IV), -67%(200 mg SC), 및 900 및 1800 mg MEDI1814 IV 용량의 경우, 약 -95% 감소되었다(도 1, 상단 그래프). CSF 유리 Aβ1-42 억제에 대해 관찰된 프로파일은 시노몰구스 원숭이 데이터를 사용하여 예측된 PK-PD 프로파일과 완전히 일치하였다(데이터는 제시되지 않음). 그에 반해, 위약의 경우, 약 -30%인 것과 비교하여, CSF 전체 Aβ1-42는 MEDI1814 용량 범위에 걸쳐 약 +70-800%(중간값) 증가한 것으로 관찰되었다(도 1, 중간 그래프). 상기 프로파일은 유리 Aβ1-42(900 mg 및 1800 mg IV 용량에서 약 -90%) 및 전체 Aβ42(1800 mg IV 용량의 경우, 약 +860%)의 기준선으로부터의 변화에 있어 MEDI1814-위약 차이에 다시 반영되었다(도 1, 각각 상단 및 중간 그래프). 다중 용량 요법을 통해 MEDI1814 투여 후 CSF 전체 Aβ1-40 프로파일에 있어 어떤 유의적인 변화도 없다는 것이 추가로 확인되었다(도 1, 하단 그래프).

MEDI1814의 PK 특성은 단일 및 다중 투여 패러다임(SAD 및 MAD 코호트)에 걸쳐 일관되었다. 혈청 노출은 용량에 비례하는 것으로 관찰되었으며, 농도는 유사한 제거율(유효 평균 혈청 반감기 약 14 내지 20일)과 함께 2상 방식으로 감소하였다. 정상 상태(다중 용량 투여 후 57일째)에서 MEDI1814의 평균 클리어런스는 -1일째 145-223 ml 범위였다. 상기 기간 동안 MEDI1814의 혈청 축적은 중간 정도였다[C_max의 경우, 0.75 내지 1.15배, AUC의 경우, 0.83 내지 1.62배; 모든 용량에 걸친 평균]. 다중 SC 투여 후 정상 상태에서 중간값 t_max는 14일이었다. 단일 100 mg SC 투여 후 MEDI1814 생체이용률은 33%였다(참조로 100 mg IV 용량 사용시의 AUC₀ _-∞ 기준). MEDI1814는 두 단일 및 반복 용량 투여 후 ≥ 300 mg의 용량에서 CSF에서 정량화할 수 있었다(제시되지 않음). CSF:혈청 농도 비는 1회 투여 후에는 0.09 내지 0.3% 범위이고, 다중 투여 후에는 0.08 내지 0.59% 범위였다.

혈장 전체 Aβ1-42 농도는 단일 용량 MEDI1814 투여 후 연구된 용량에 걸쳐 높은 정도의 가변성을 보였다. 그러나, 위약 투여와 비교하여 MEDI1814의 모든 투여 후 평균 혈장 전체 Aβ1-42 농도에서 현저한 증가가 있었다(제시되지 않음). 혈장 전체 Aβ1-42 프로파일의 후속 감소는 각각의 MEDI1814 혈청 농도-시간 프로파일(제시되지 않음)과 일치하였고, 113일째까지 전체 Aβ1-42 농도의 유지는 용량 의존하는 것으로 나타났다. 유사하게, MEDI1814의 다중 용량의 경우, 혈장 전체 Aβ1-42 프로파일은 각각의 PK 프로파일을 따르는 것으로 나타났다(제시되지 않음). 전체 혈장 Aβ1-42 증가는 단일 용량의 경우보다 실질적으로 더 큰 것으로 관찰되었으며, 이는 알려진 바와 같이, 투여가 반복됨에 따라 MEDI1814가 축적된다는 것을 반영하는 것이다.

실시예 4. MEDI1814 처리가 NfL , pTau , tTau 및 Ng의 혈장 및 CSF 수준에 미치는 효과

실시예 2의 MAD 코호트의 경우, 처리 후 85일째에 NfL, pTau, tTau 및 Ng의 혈장 및 CSF 수준을 측정하였다. 사용된 검정법은 표 3에 제시되어 있다.

CSF 중 NfL 수준은 MEDI1814 처리 후 MAD IV 1800 mg 코호트에서 감소하였고, 두 검정 방법 모두 사용하여 대략 50% 감소된 것으로 관찰되었다. 혈장 중 NfL 수준은 MAD IV 1800 mg 코호트에서 감소하였고, 20% 초과로 감소된 것으로 관찰되었다(도 2). 기준선과 비교하여, MAD 코호트에 대한 투여 후 85일째에 혈장과 CSF NfL 수준 사이에 양의 상관관계가 관찰되었다(도 3).

임의의 MAD 코호트에 대한 CSF 또는 혈장 중 pTau₁₈₁ 수준의 유의적인 변화는 없었다(각각 도 4 상단 및 중간 그래프). 대조적으로, pTau₂₁₇의 평균 혈장 수준에서 25% 초과의 감소가 MAD IV 1800 mg 코호트에서 관찰되었다.

임의의 MAD 코호트에 대한 CSF 중 tTau 수준의 유의적인 변화는 없었다(도 5, 상단 그래프).

MAD IV 코호트의 경우, CSF 중 Ng의 평균 수준은 비록 통계적으로 유의적이지는 않았지만, MEDI1814 처리 후 감소된 것으로 나타났다(도 5, 하단 그래프).

SEQUENCE LISTING <110> MEDIMMUNE LIMITED ELI LILLY AND COMPANY <120> PREVENTION OF AXONAL DAMAGE <130> P66838WO <150> US 63/043,872 <151> 2020-06-25 <160> 12 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Tyr Gln Thr Met Trp 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Val Ile Gly Lys Thr Asn Glu Asn Ile Ala Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Glu Trp Met Asp His Ser Arg Pro Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 1 5 10 15 <210> 4 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Ser Gly His Asn Leu Glu Asp Lys Phe Ala Ser 1 5 10 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Arg Asp Asp Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Ser Ser Gln Asp Thr Val Thr Arg Val 1 5 <210> 7 <211> 125 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 7 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Met Gly Asn Phe Asn Tyr Gln 20 25 30 Thr Met Trp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Val Ile Gly Lys Thr Asn Glu Asn Ile Ala Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Trp Met Asp His Ser Arg Pro Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 110 Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 8 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly His Asn Leu Glu Asp Lys Phe Ala 20 25 30 Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Arg Asp Asp Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Ala Ser 50 55 60 Asn Ser Gly His Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Thr 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Gln Asp Thr Val Thr Arg Val 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 9 <211> 125 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 9 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Met Gly Asn Phe Asn Tyr Gln 20 25 30 Thr Met Trp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Val Ile Gly Lys Thr Asn Glu Asn Ile Ala Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Trp Met Asp His Ser Arg Pro Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 110 Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 10 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly His Asn Leu Glu Asp Lys Phe Ala 20 25 30 Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Arg Asp Asp Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Ala Ser 50 55 60 Asn Ser Gly His Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Met 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Gln Asp Thr Val Thr Arg Val 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 11 <211> 42 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His Gln Lys 1 5 10 15 Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala Ile Ile 20 25 30 Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val Ile Ala 35 40 <210> 12 <211> 543 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Met Ser Ser Phe Ser Tyr Glu Pro Tyr Tyr Ser Thr Ser Tyr Lys Arg 1 5 10 15 Arg Tyr Val Glu Thr Pro Arg Val His Ile Ser Ser Val Arg Ser Gly 20 25 30 Tyr Ser Thr Ala Arg Ser Ala Tyr Ser Ser Tyr Ser Ala Pro Val Ser 35 40 45 Ser Ser Leu Ser Val Arg Arg Ser Tyr Ser Ser Ser Ser Gly Ser Leu 50 55 60 Met Pro Ser Leu Glu Asn Leu Asp Leu Ser Gln Val Ala Ala Ile Ser 65 70 75 80 Asn Asp Leu Lys Ser Ile Arg Thr Gln Glu Lys Ala Gln Leu Gln Asp 85 90 95 Leu Asn Asp Arg Phe Ala Ser Phe Ile Glu Arg Val His Glu Leu Glu 100 105 110 Gln Gln Asn Lys Val Leu Glu Ala Glu Leu Leu Val Leu Arg Gln Lys 115 120 125 His Ser Glu Pro Ser Arg Phe Arg Ala Leu Tyr Glu Gln Glu Ile Arg 130 135 140 Asp Leu Arg Leu Ala Ala Glu Asp Ala Thr Asn Glu Lys Gln Ala Leu 145 150 155 160 Gln Gly Glu Arg Glu Gly Leu Glu Glu Thr Leu Arg Asn Leu Gln Ala 165 170 175 Arg Tyr Glu Glu Glu Val Leu Ser Arg Glu Asp Ala Glu Gly Arg Leu 180 185 190 Met Glu Ala Arg Lys Gly Ala Asp Glu Ala Ala Leu Ala Arg Ala Glu 195 200 205 Leu Glu Lys Arg Ile Asp Ser Leu Met Asp Glu Ile Ser Phe Leu Lys 210 215 220 Lys Val His Glu Glu Glu Ile Ala Glu Leu Gln Ala Gln Ile Gln Tyr 225 230 235 240 Ala Gln Ile Ser Val Glu Met Asp Val Thr Lys Pro Asp Leu Ser Ala 245 250 255 Ala Leu Lys Asp Ile Arg Ala Gln Tyr Glu Lys Leu Ala Ala Lys Asn 260 265 270 Met Gln Asn Ala Glu Glu Trp Phe Lys Ser Arg Phe Thr Val Leu Thr 275 280 285 Glu Ser Ala Ala Lys Asn Thr Asp Ala Val Arg Ala Ala Lys Asp Glu 290 295 300 Val Ser Glu Ser Arg Arg Leu Leu Lys Ala Lys Thr Leu Glu Ile Glu 305 310 315 320 Ala Cys Arg Gly Met Asn Glu Ala Leu Glu Lys Gln Leu Gln Glu Leu 325 330 335 Glu Asp Lys Gln Asn Ala Asp Ile Ser Ala Met Gln Asp Thr Ile Asn 340 345 350 Lys Leu Glu Asn Glu Leu Arg Thr Thr Lys Ser Glu Met Ala Arg Tyr 355 360 365 Leu Lys Glu Tyr Gln Asp Leu Leu Asn Val Lys Met Ala Leu Asp Ile 370 375 380 Glu Ile Ala Ala Tyr Arg Lys Leu Leu Glu Gly Glu Glu Thr Arg Leu 385 390 395 400 Ser Phe Thr Ser Val Gly Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Ser Gln Ser Ser 405 410 415 Gln Val Phe Gly Arg Ser Ala Tyr Gly Gly Leu Gln Thr Ser Ser Tyr 420 425 430 Leu Met Ser Thr Arg Ser Phe Pro Ser Tyr Tyr Thr Ser His Val Gln 435 440 445 Glu Glu Gln Ile Glu Val Glu Glu Thr Ile Glu Ala Ala Lys Ala Glu 450 455 460 Glu Ala Lys Asp Glu Pro Pro Ser Glu Gly Glu Ala Glu Glu Glu Glu 465 470 475 480 Lys Asp Lys Glu Glu Ala Glu Glu Glu Glu Ala Ala Glu Glu Glu Glu 485 490 495 Ala Ala Lys Glu Glu Ser Glu Glu Ala Lys Glu Glu Glu Glu Gly Gly 500 505 510 Glu Gly Glu Glu Gly Glu Glu Thr Lys Glu Ala Glu Glu Glu Glu Lys 515 520 525 Lys Val Glu Gly Ala Gly Glu Glu Gln Ala Ala Lys Lys Lys Asp 530 535 540

Claims

환자에서 알츠하이머병(AD)을 치료하는 방법으로서, 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원의 결합의 치료 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인 방법.
환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법으로서, 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게, 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하고,
결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 결합 구성원은 환자의 혈장 중 NfL 수준을 감소시키는 것인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 결합 구성원은 환자의 뇌척수액(CSF) 중 NfL 수준을 감소시키는 것인 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 결합 구성원은 상기 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여, NfL 수준을 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 20%, 더욱 바람직하게는 적어도 30%, 더욱더 바람직하게는 적어도 50% 감소시키는 것인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, NfL 수준은 ELISA, 임의로 SIMOA-HD1에 의해 측정되는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 아밀로이드에 대해 양성이고, 임의로 환자는
(a) tau에 대해 음성;
(b) 신경퇴행에 대해 음성;
(c) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 음성;
(d) tau에 대해 양성
(e) 신경퇴행에 대해 양성;
(f) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 양성;
(g) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 음성; 또는
(h) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 양성인 방법.
제7항에 있어서, 환자를 아밀로이드 양성으로 확인하고, 임의로 환자를
(a) tau에 대해 음성;
(b) 신경퇴행에 대해 음성;
(c) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 음성;
(d) tau에 대해 양성
(e) 신경퇴행에 대해 양성;
(f) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 양성;
(g) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 음성; 또는
(h) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 양성으로 확인하는 것을 포함하는 방법.
제7항 또는 제8항에 있어서, (i) 아밀로이드 양성 또는 음성; (ii) tau 양성 또는 음성; 및/또는 (iii) 신경퇴행 양성 또는 음성인 환자 상태가
(a) CSF 마커;
(b) 혈장 마커; 및/또는
(c) 이미징 마커
에 기초하여 독립적으로 결정되는 것인 방법.
제9항에 있어서,
(a) (i) 아밀로이드에 대한 CSF 마커가 CSF Aβ1-42이고/이거나; (ii) tau에 대한 CSF 마커가 CSF 포스포-tau이고/이거나; (iii) 신경퇴행에 대한 CSF 마커가 CSF 전체 tau이고/이거나;
(b) (i) 아밀로이드에 대한 이미징 마커가 아밀로이드 이미징이고/이거나; (ii) tau에 대한 이미징 마커가 tau 이미징이고/이거나; (iii) 신경퇴행에 대한 이미징 마커가 자기 공명 이미징 또는 플루오로데옥시글루코스 양전자 방출 단층촬영인 방법.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원은 항체인 방법.
제11항에 있어서, 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 항체는 500 pM 이하의 해리 상수(K_D)로 Aβ1-42에 결합하고, Aβ1-40에 결합하지 않거나 1 mM 초과의 K_D로 Aβ1-40에 결합하는 것인 방법.
제11항 또는 제12항에 있어서, 항체는
(a) Abet0380 HCDRS의 아미노산 서열이
HCDR1 서열 번호 1
HCDR2 서열 번호 2
HCDR3 서열 번호 3인 MEDI1814 HCDR 세트를 포함하거나, 또는
1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 MEDI1814 HCDR 세트를 포함하는 VH 도메인; 및
(b) MEDI1814 LCDRS의 아미노산 서열이
LCDR1 서열 번호 4
LCDR2 서열 번호 5
LCDR3 서열 번호 6인 MEDI1814 LCDR 세트를 포함하거나, 또는
1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 MEDI1814 LCDR 세트를 포함하는 VL 도메인
을 포함하는 것인 방법.
제13항에 있어서, 항체는
(a) (i) 서열 번호 9의 아미노산 서열이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 MEDI1814 VH 도메인; 및 서열 번호 10의 아미노산 서열이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 MEDI1814 VL 도메인; 또는
(b) (i) 서열 번호 7의 아미노산 서열 또는 그의 생식세포계열화 버전이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 Abet0380 VH 도메인; 및 (ii) 서열 번호 8의 아미노산 서열 또는 그의 생식세포계열화 버전이거나, 또는 1 또는 2 개의 아미노산 돌연변이를 갖는 상기 아미노산 서열을 포함하는 Abet0380 VL 도메인
을 포함하는 것인 방법.
제11항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 수탁 번호 41890 하에 기탁된 Abet0380-GL 핵산 서열에 의해 코딩된 VH 및 VL 도메인을 포함하는 것인 방법.
제11항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 인간 IgG, 임의로 인간 IgG1 또는 인간 IgG2인 방법.
제16항에 있어서, 항체는 인간 IgG1-TM, IgG1-YTE 또는 IgG1-TM-YTE인 방법.
제11항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 ≥200 mg의 용량으로 투여되고, 임의로 항체는 약 200 mg의 용량으로, 더욱 바람직하게는 약 300 mg의 용량으로, 더욱더 바람직하게는 약 900 mg의 용량으로, 또는 더욱더 바람직하게는 약 1800 mg의 용량으로 투여되는 것인 방법.
제11항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 3.5주 내지 4.5주 간격으로 투여되고; 임의로 항체는 4주 간격으로(Q4W) 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 결합 구성원은 환자에게 정맥내로 또는 피하로 투여되는 것인 방법.
제2항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 신경 축삭 손상은 알츠하이머병(AD), 임의로 경증 내지 중등도 AD, 증상 발현 전 AD, 및/또는 AD에 기인한 경도 인지 장애와 연관된 것인 방법.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 결합 구성원은, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 pTau217 수준과 비교하여, 환자에서의 pTau217 수준을 감소시키는 것인 방법.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 결합 구성원은, (i) 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 유리 Aβ1-42 수준과 비교하여, 환자에서의 유리 Aβ1-42 수준을 감소시키고/시키거나; 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 전체 Aβ1-42 수준과 비교하여, 환자에서의 전체 Aβ1-42 수준을 증가시키는 것인 방법.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 결합 구성원은 약학적 조성물 내에 포함되는 것인 방법.
환자에서 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 사용하기 위한, 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원으로서, 방법은 신경 축삭 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 환자에게 결합 구성원의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함하고, 결합 구성원은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 신경필라멘트 경쇄(NfL) 수준과 비교하여, 환자에서의 NfL 수준을 감소시키는 것인 결합 구성원.
제1항 및 제3항 내지 제24항 중 어느 한 항에 정의된 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 제2항 내지 제24항 중 어느 한 항에 정의된 신경 축삭 손상을 예방하는 방법의 효능을 평가하는 방법으로서, 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전 및 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 NfL 수준을 측정하는 것을 포함하고, 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자에서의 NfL 수준과 비교하여 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자에서의 NfL 수준이 감소되었다면, 신경 축삭 손상을 예방하는 방법은 유효한 것인 방법.
제26항에 있어서, 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법은, 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자의 혈장 중 NfL 수준이 감소되고, 임의로 혈장 NfL 수준 감소가 적어도 30% 감소라면, 유효한 것인 방법.
제26항 또는 제27항에 있어서, 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법은, 결합 구성원을 이용한 치료 이후 환자의 CSF 중 NfL 수준이 감소되고, 임의로 CSF NfL 수준 감소가 적어도 30% 감소라면, 유효한 것인 방법.
제1항 및 제3항 내지 제24항 중 어느 한 항에 정의된 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 제2항 내지 제24항 중 어느 한 항에 정의된 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 적합한 환자인지 확인하는 방법으로서, 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전에 CSF 마커, 혈장 마커 및/또는 이미징 마커를 이용하여 환자의 아밀로이드 상태를 평가하는 것을 포함하고, 환자의 아밀로이드 상태가 아밀로이드 양성인 경우에는 환자가 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 적합한 것으로 확인되는 것인 방법.
제29항에 있어서, 방법은 결합 구성원을 이용한 치료 이전의 환자의 (i) tau 상태; (ii) 신경퇴행 상태; 또는 (iii) tau 상태 및 신경퇴행 상태를 평가하는 것을 추가로 포함하고, CSF 마커 및/또는 이미징 마커는 tau 및/또는 신경퇴행에 대해 독립적으로 선택되며, 환자가
(a) tau에 대해 음성;
(b) 신경퇴행에 대해 음성;
(c) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 음성;
(d) tau에 대해 양성
(e) 신경퇴행에 대해 양성;
(f) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 양성;
(g) tau에 대해 양성 및 신경퇴행에 대해 음성; 또는
(h) tau에 대해 음성 및 신경퇴행에 대해 양성인 경우에는 환자가 알츠하이머병을 치료하는 방법, 또는 신경 축삭 손상을 예방하는 방법에 적합한 것으로 확인되는 것인 방법.
제29항 또는 제30항에 있어서,
(a) (i) 아밀로이드에 대한 CSF 마커가 CSF Aβ1-42이고/이거나; (ii) tau에 대한 CSF 마커가 CSF 포스포-tau이고/이거나; (iii) 신경퇴행에 대한 CSF 마커가 CSF 전체 tau이고/이거나;
(b) (i) 아밀로이드에 대한 이미징 마커가 아밀로이드 이미징이고/이거나; (ii) tau에 대한 이미징 마커가 tau 이미징이고/이거나; (iii) 신경퇴행에 대한 이미징 마커가 자기 공명 이미징 또는 플루오로데옥시글루코스 양전자 방출 단층촬영인 방법.
(i) 인간 아밀로이드 베타 1-42 펩티드(Aβ1-42)에 선택적으로 결합하는 결합 구성원; 및 (ii) NfL에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 키트로서, 임의로, 인간 Aβ1-42에 선택적으로 결합하는 결합 구성원은 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 정의된 항체인 키트.