KR20230019469A - 비고전적 hla-i 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체 및 그의 사용 방법 - Google Patents

비고전적 hla-i 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체 및 그의 사용 방법 Download PDF

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존 웨이단즈
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베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하
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Abstract

본원에서는 본원에 개시된 바와 같은 가변 중쇄 도메인(VH), 가변 경쇄 도메인(VL), 및 상보성 결정 영역(CDR)을 갖는, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체 뿐만 아니라, 그의 방법 및 용도를 제공한다.

Description

비고전적 HLA-I 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체 및 그의 사용 방법
관련 출원
본 개시내용은 현재 계류 중인, 2021년 3월 11일 출원된 미국 특허 출원 제17/199,258호, 및 현재 계류 중인, 2020년 6월 1일 출원된 미국 특허 가출원 제63/032,886호를 우선권 주장하며, 상기 각 특허의 전체 내용은 모든 목적을 위해 본원에서 참조로 포함된다.
서열 목록에 관한 언급
본 출원은 컴퓨터 판독가능한 형태의 서열 목록을 포함한다. 컴퓨터 판독가능한 형태는 본원에서 참조로 포함된다. 2022년 9월 12일 작성된 상기 ASCII 사본의 명칭은 ABX-006WO_SL.txt이고, 그 크기는 27,238 바이트이다.
요약
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM: antigen processing machinery) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE: bispecific T cell engager)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR: T cell receptor)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL: cytotoxic T cell)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR: complementarity determining region)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원; HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원; HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 (a) 본원에 개시된 바와 같은 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편, 또는 본원에 개시된 바와 같은 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편; 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 개시한다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원; HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 유방암, 신장암, 폐암, 난소암, 결장직장암, 췌장암, 융모막 암종, 비소세포 폐 암종(NSCLC: non-small cell lung carcinoma), 위암, 자궁경부암, 또는 두부경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수종, 백혈병 또는 림프종이다. 일부 실시양태에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML: acute myeloid leukemia), 다발성 골수종, 또는 골수형성이상 증후군이다. 일부 실시양태에서, 암은 B 세포 악성종양이다. 일부 실시양태에서, 암은 외투 세포 림프종이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원; HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 치료 유효량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 암은 유방암, 신장암, 폐암, 난소암, 결장직장암, 췌장암, 융모막 암종, 비소세포 폐 암종(NSCLC), 위암, 자궁경부암, 또는 두부경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수종, 백혈병 또는 림프종이다. 일부 실시양태에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML), 다발성 골수종, 또는 골수형성이상 증후군이다. 일부 실시양태에서, 암은 B 세포 악성종양이다. 일부 실시양태에서, 암은 외투 세포 림프종이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC: light chain)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC: heavy chain)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다.
일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
도면의 간단한 설명
본 발명의 새로운 특징은 특히 첨부된 청구범위에 기재되어 있다. 본 발명의 원리가 이용되는 예시적인 실시양태를 설명하는 하기 상세한 설명 및 첨부된 도면을 참조함으로써 본 발명의 특징 및 이점을 더욱 잘 이해할 수 있을 것이다:
도 1a-도 1d는 V-0025에 대한 클론 R4 클론 1(R4c1)의 확인 및 친화도 특징화를 예시한 것이다. (도 1a) 파지 및 (도 1b) 가용성 ELISA. 항원은 1 ㎍/ml이다. (도 1c) 결합 친화도 센서그램 및 (도 1d) 동역학적 데이터.
도 2a-도 2d는 R4c1로부터 친화도 성숙된 클론의 단리를 위해 분류 개략도의 예시적인 개요이다. 도 2a-도 2c는 제1 라운드의 친화도 성숙을 위한 각 라운드의 분류를 보여주는 세포 분류 플롯을 예시한 것이다. '별표 표시'는 분류된 집단을 나타낸다. R4 분류의 경우(도 2d), 항체 싱크로서 다양한 시점에 대해 1 μM의 R4c1-IgG1을 사용하여 10 nM의 V-0025와 함께 K오프를 이용하였다.
도 3a-도 3g는 R4c1의 친화도 성숙으로부터 확인된 클론을 예시한 것이다. 도 3a-도 3d는 100 nM의 표적 항원(V-0025)에의 결합 프로파일을 예시한 것이다. 도 3e-도 3g는 10 nM의 표적(V-0025)에의, 및 100 nM의 추가 펩티드/HLA-E 항원에의 클론의 결합 프로파일을 예시한 것이다.
도 4는 A549-B4 세포에의 R2A_1 결합을 예시한 것이다.
도 5a-도 5b는 R2A_1의 CDRL3 영역의 친화도 성숙에 의한 개선된 클론에 대한 단리 프로세스를 예시한 것이다. 도 5a는 모체 클론(R4 클론 1) 및 시작 친화도 성숙 라이브러리(R0) 및 제1 라운드 분류된 라이브러리(R1)에 의한 표적(V-0025)에의 결합을 예시한 것이다. 도 5b는 R1 친화도 성숙 라이브러리의 K오프를 예시한 것이다. 표적(V-0025)은 10 nM이고, 항체 싱크로서 15분 내지 최대 90분 동안 1 μM의 R2A_1-hIgG1이 사용되었다.
도 6a-도 6b는 결합 친화도가 모체보다 우수한 클론 단리를 위한 분류 개략도를 예시한 것이다. 친화도 성숙을 위한 (도 6a) 라운드 1 및 (도 6b) 라운드 2 분류를 보여주는 세포 분류 플롯. 별표 표시는 분류된 집단을 나타낸다. R2 분류의 경우, 항체 싱크로서 45분 동안 1 μM의 R2A_1-IgG1을 사용하여 10 nM의 V-0025와 함께 K오프를 이용하였다.
도 7은 R2A_1의 CDRL3 영역의 친화도 성숙으로부터의 클론 확인 및 1 nM 및 0.1 nM의 V-0025에의 결합 프로파일을 예시한 것이다. 화살표 표시는 상위 클론을 나타낸다.
도 8a-도 8b는 ABX0011 제조를 위한 QC 데이터를 예시한 것이다.
도 9a-도 9k는 ABX0011의 결합 친화도, 특이성 및 안정성을 예시한 것이다. ELISA에 의한 항원 (도 9a) HLA-E(클론 3D12) 및 (도 9b) ABX0011에 대한 특이성. ELISA 검정을 위해, 항체는 1 ㎍/ml로 사용하였고, HLA-E/펩티드 항원은 0.5 mg/ml로 사용하였다. 도 9c는 V-0025에의 ABX0020의 1가 친화도를 예시한 것이다. 레소센스(ResoSens) 무표지 기기(Resonant Sensors, Inc.: 미국 텍사스주 알링턴 소재)를 사용하여 표적 V-0025에 대한 ABX0011의 1가 친화도를 측정하였다(도 9c). ELISA에 의해 클론 3D12와 비교하여 ABX0011에 대한 검출 한계를 평가하였다(도 9d&e). ABX0011 및 HLA-E를 1 ㎍/mL로 사용하였고, V-0025는 1 ㎍/mL부터 0.001 ㎍/mL까지 적정되었다(도 (d). 도 9e는 표적 V-0025가 0.25 ㎍/mL로 사용된 반면, ABX0011 및 HLA-E는 2 ㎍/mL부터 3.8 pg/mL(3.8x10-6 ㎍/mL)까지 적정되었다는 것을 보여주는 것이다. ABX0011의 열안정성(도 9f)을 ELISA에 의해 평가하였다. 항체를 마우스 혈청 중에서 37℃에서 7 내지 14일 동안 인큐베이션시킨 후에 HLA-E/VMAPRTLFL(서열 번호 18)에의 ABX0011 결합을 평가하였다. 비펄싱 및 펩티드 펄싱된 K562.E 세포에의 클론 3D12 및 ABX0011의 결합 선택성(도 9g). K562.E 세포를 2 hr 동안 20 mM 펩티드로 펄싱한 후, 이어서, 1 ㎍/mL의 항체로 염색하였다. 관련 및 비관련 펩티드와 함께 ABX0012(마우스 IgG1을 갖는 ABX0011)를 사용하여 ABX0011 결합 선택성의 추가 평가를 수행하였다. 펩티드 펄싱된 K562.E 세포 및 비펄싱 K562.E 세포에 대한 HLA-E(도 9h) 및 ABX0012(도 9i) 염색. 표적 V-0025 펩티드 펄싱된 K562.E를 이용하여 ABX0011에 대한 검출 한계를 측정하였다(도 9j). 대조군은 비펄싱 K562.E 세포 및 모체 K562(HLA-E 발현 결여) 및 비관련 펩티드(V-0034, V-0044, V-0046 및 P-0550)로 펄싱된 K562.E 세포였다. 알라닌 치환된 V-0025 펩티드로 펄싱된 K562.E 세포를 이용하여 ABX0011에 대한 에피토프 맵핑을 수행하였다(도 9k).
도 10a-도 10c는 HLA-E 및 HLA-G를 발현하는 발현하는 세포에의 ABX0011 결합 특이성을 예시한 것으로(도 10a), HLA-G가 결여된 인간 말초 혈액 단핵 세포(huPBMC: human peripheral blood mononuclear cell) 및 1차 인간 제대 혈관 내피 세포(huVEC: human umbilical vascular endothelial cell)에서는 어떤 결합도 관찰되지 않았다(도 10b 및 도 10c). 1 ㎍/mL로 항체 결합 연구를 수행하였다. (도 10a) IFNγ 자극받은 JEG3 야생형(WT: wild type, 상단 패널), Eko(중간 패널) 및 Tap-1ko(하단 패널)에의 결합. (도 10b) huPBMC에의 결합 및 (도 10c) huVEC에의 결합.
도 11a-도 11b는 HLA-E 및 HLA-G, 둘 모두를 발현하거나(THP-1 및 OCI-AML3), 또는 오직 HLA-E만을 발현하는(KG-1) AML 세포주에의 결합을 예시한 것이다. 3D12(HLA-E), MEM-G/09(HLA-G) 및 W632(범 HLA I)를 사용하여 1 ug/ml 항체로 염색된 AML 세포(도 11a). ABX0012(마우스 IgG1을 갖는 ABX0011)가 적정되었고(10 내지 0.004 mg/ml), 표적 양성 AML 세포주에의 결합이 관찰되었다(도 11b).
도 12a-도 12d는 표적을 발현하는 종양 세포주에 대한 ABX0011 매개 NK 세포독성을 예시한 것이다. NK 세포를 이소타입 대조군(hIgG1)과 V-0025 펩티드 펄싱된 K562.E 세포와 함께 또는 THP-1 세포와 함께 공동 배양하였다. CD107a 양성 NK 세포 및 CD107a 양성 NKG2A+ NK 세포의 빈도가 제시되어 있다(도 12a 및 도 12b). 사멸 표적 세포(K562.E) 및 THP-1 세포의 빈도가 각각 도 12c 및 도 12d에 제시되어 있다.
도 13a-도 13b는 항CD3 scFv 단편에 공유적으로 연결된 ABX0011의 VL 및 VH 도메인을 함유하는 이중특이적 T 세포 인게이저인 ABX0030 제조를 위한 QC 데이터를 예시한 것이다.
도 14는 ABX0030에 대한 친화도 분석을 예시한 것이다.
도 15는 K562.E 세포에의 ABX0030 결합이 펩티드 특이적이라는 것을 예시한 것이다. V-0025 표적 펩티드로 펄시된 K562.E 세포만이 용량에 의존하는 방식으로 ABX0030으로 염색되었다. 대조군 세포, 모체 K562 및 펩티드 부재의 K562.E는 ABX0030으로 염색되지 않았다.
도 16은 ABX0030이 인간 CD3+ 세포를 염색하고, CD3neg 세포는 염색하지 않는다는 것을 도시한 예시적인 히스토그램이다. GAH-APC 접합체 및 항CD3(클론 SK7)으로 염색된 PBMC(좌측 하단 히스토그램). 항CD4 및 GAH-APC 접합체로 염색된 PBMC(좌측 상단 히스토그램). ABX0030 + GAH-APC 접합체(SK7 Ab 부재)로 염색된 CD3+ 세포(우측 상단 히스토그램). 항CD-4-PE 및 ABX0030 + GAH-APC 접합체에 의한 이중 염색(우측 상단 히스토그램). 본 패널에서 두 CD3+ 세포 집단은 CD4+ 및 CD8+ T 세포를 나타낸다는 것에 주의한다. ABX0030 및 클론 SK7-PE를 이용한 CD3+ 세포의 이중 염색(우측 하단 히스토그램).
도 17a-도 17c는 CD8+ T 세포를 특이적으로 활성화시키고, 표적 양성 세포의 T 세포 용해를 재유도하는 ABX0030 성능을 예시한 것이다. 도 17a는 ABX0030에 의한, V-0025 표적 펩티드로 펄싱된 K562.E 세포의 특이적인 재유도된 T 세포 용해를 보여주는 것이다. ABX0030이 10,000 pM(최고 농도)으로 사용되었을 때, K562.E(비펄싱) 세포에 대해 일부 용해 활성이 관찰되었다. ABX0030이 T 세포를 비특이적으로 활성화시킬 수 있는지 여부를 확인하기 위해 CD8+ T 세포 CD25 및 CD107a 발현 또한 정량화하였다. (도 17b 및 도 17c) ABX0030은 K562.E 비펄싱 세포의 존재하에 최소의 CD8+ T 세포 활성화를 보였다(표적 부재).
도 18a-도 18e는 THP-1 세포의 CD8+ T 세포 용해를 재유도하는 ABX0030의 강력한 활성을 예시한 것이다. 도 18a는 THP-1 세포의 CD8+ T 세포 용해를 재유도하는 ABX0030의 용량 의존적 효과(10000 내지 80 pM)를 보여주는 것이다. 도 18b는 CD25+ CD8+ T 세포의 빈도에 미치는 ABX0030의 용량 의존적 효과를 보여주는 것이다. THP-1 세포의 존재하에 CD8+ T 세포에 대한 ABX0030 효과를 입증하는 추가 마커는 CD107+ CD8+ T 세포의 빈도 증가(도 18c), 및 퍼포린(도 18d) 및 IFNγ(도 18e) 양성 CD8+ T 세포의 빈도 증가이다.
도 19a-도 19b는 말초에서 면역 세포는 ABX0012에 결합하지 않는다는 것을 예시한 것이다. 전체 PBMC, 농축된 또는 정제된 세포를 HLA-E, HLA-G 또는 ABX0012 발현에 대하여 시험하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. 혈소판 염색은 2명의 기증자의 것을 나타낸다. B 세포 염색은 6명의 기증자의 것을 나타낸다. T 세포 및 NK 세포 염색은 10명의 기증자의 것을 나타낸다. 호중구 및 호산구 염색은 7명의 기증자의 것을 나타낸다. DC 염색은 4명의 기증자의 것을 나타낸다. 단핵구 염색은 4명의 기증자의 것을 나타낸다. 대식세포 염색은 10명의 기증자의 것을 나타낸다. N/T 비시험을 의미한다.
도 20a-도 20b는 IFNγ에 의한 PBMC 자극이 ABX0012 결합을 유도하지 않는다는 것을 예시한 것이다. PBMC를 밤새도록 IFNγ로 자극시키거나(도 20b), 또는 자극시키지 않고(도 20a), HLA-E(클론 3D12), 변성된 HLA-E(클론 MEM-E/02) 또는 ABX0023 발현에 대해 시험하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. 염색은 2명의 기증자의 것을 나타낸다.
도 21은 HLA-E 양성 HLA-G 양성 세포주가 비자극하에 ABX0012 결합을 나타낸다는 것을 예시한 것이다. 대개는 세포주 Fc 수용체 발현에 의존하여 염색을 위해 ABX0012(마우스 Fc) 또는 ABX0011(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다.
도 22는 비자극하에 ABX0012 결합을 나타내는 세포주는 IFNγ 자극하에 ABX0012 결합 증가를 보인다는 것을 예시한 것이다. 세포를 24 hr 동안 IFNγ로 자극시켰다. 대개는 세포주 Fc 수용체 발현에 의존하여 염색을 위해 ABX0012(마우스 Fc) 또는 ABX0011(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다.
도 23은 HLA-E 부재하의 세포주는 ABX0011 결합을 보이지 않는다는 것을 예시한 것이다. 염색을 위해 ABX0011(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다.
도 24a-도 24b는 HLA-G 부재하의 세포주는 ABX0012 결합을 보이지 않는다는 것을 예시한 것이다. 세포를 (도 24a) 비자극시키거나, 또는 도 24b) 24 hr 동안 IFNγ로 자극시켰다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. N/T 비시험을 의미한다.
도 25a-도 25b는 ABX0012 결합을 위해서는 HLA-E 및 Tap1 펩티드 프로세싱이 요구된다는 것을 예시한 것이다. (도 25a) JEG3 세포를 염색 전 24 hr 동안 IFNγ로 24 hr 동안 자극시켰다. (도 25b) OCI-AML3 세포를 비자극시켰다. 염색을 위해 ABX0012(마우스 Fc) 또는 ABX0011(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. N/T 비시험을 의미한다.
도 26은 AML PBMC가 ABX0012에 결합한다는 것을 예시한 것이다. CD45dim 세포를 건강한 PBMC(n=6), AML PBMC(n=18), 제대혈(n=3)에서, 및 건강한 골수(n=3)에서 ABX0012 결합에 대해 시험하였다. 결합률(%)은 마우스 IgG1 이소타입 대조군에 의한 결합률(%)이 감산된 ABX0012에 의한 결합률(%)로 계산된다. **p=0.0074.
도 27은 ABX-0012는 특이적 펩티드로 펄싱된 K562.E 세포를 염색한다. K562 및 K562.HLA-E + V-0025 (VMAPRTLFL) 펩티드(서열 번호 18) 펄싱된 세포를 펠릿화하고, OCI 화합물로 처리하고, 급속 냉동시켜 면역조직화학법을 위한 냉동된 세포 블록을 제조하였다. ABX-0012 항체(1.95 ug/ml)를 사용하여K562.E + V-0025 및 K562 세포를 염색하였다. 상단 패널은 양성 ABX-0012 염색을 보여주는 반면, 대조군 세포(하단 패널)는 염색되지 않는다. 상기 관찰결과를 통해 ABX-0012를 사용하여 냉동 조직 절편을 염색하는 방법을 확인하였다.
도 28은 인간 태반 조직 및 구체적으로, 영양막 세포의 양성 ABX-0012 염색을 예시한 것이다.
도 29a 및 도 29b는 두부경부 종양 및 정상 인접 조직(NAT: normal adjacent tissue)의 냉동 절편 샘플을 예시한 것이다. 도 29a는 (좌측) 항HLA-E 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색 및 (우측) ABX0012 항체(1.95 ug/ml)에 의한 염색을 보여주는 것이다. 도 29b는 (좌측) NAT는 항HLA-E 항체로 염색되지만, ABX0023 항체로 염색되지 않는다는 것(우측)을 보여주는 것이다.
도 30은 결장 선암종 및 NAT의 냉동 절편 샘플을 예시한 것이다. 좌측 패널은 항HLA-E 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색을 보여주는 것이고, 우측 패널은 ABX0012 항체(1.95 ug/ml)에 의한 염색을 보여주는 것이다.
도 31a-도 31b는 폐 편평 세포 암종 및 NAT의 냉동 절편 샘플을 예시한 것이다. 도 31a는 (좌측 패널) 항HLA-E 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색 및 (우측 패널) ABX0012 항체(1.95 ug/ml)에 의한 염색을 보여주는 것이다. 도 31b는 정상 인접 폐 조직의 ABX-0012 염색은 보이지 않는다.
상세한 설명
특정 실시양태에서, 본원에서는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 적어도 하나의 중쇄 및 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 적어도 하나의 경쇄를 포함하는 항체를 개시한다. 각 VH 및 VL은 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 특정 실시양태에서, 추가로 본원에서는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체를 투여함으로써 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 암 세포에 대한 면역 반응을 조정함으로써 암을 치료한다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다.
암 치료에 대한 전통적인 접근법으로는 수술, 방사선, 화학요법 및 호르몬 요법을 포함하였다. 그러나, 상기 요법은 그 자체로는 효과가 입증되지 않았다. 암을 예방 및/또는 치료하기 위한 대체 요법의 개발이 중요하다. 보다 최근에는 항체 및 T 림프구를 이용하는 면역요법 및 유전자 요법 접근법이 암 치료를 위한 새롭고 유망한 방법으로 부상했다.
인간에서 인간 백혈구 항원(HLA: human leukocyte antigen)으로 지정된 주조직적합성 복합체(MHC: major histocompatibility complex) 분자는 신체의 질환 인식 및 암 및 침입 항원에 대하여 생성된 면역 반응에서 중요한 역할을 한다. HLA 유전자 패밀리는 2개의 하위그룹, 즉, HLA 클래스 I(HLA-I) 및 HLA 클래스 II(HLA-II)으로 나뉘며, HLA-I은 고전적 HLA-I 및 비고전적 HLA-I로 추가로 나뉜다. 각 HLA 분자는 세포 내에서 한 펩티드와 복합체를 형성한다. 암 세포에서 펩티드/HLA 복합체 중 일부는 면역계가 이들 세포를 인식하고, 사멸할 수 있도록 고유하게 제시된다. 상기 고유한 펩티드/HLA 복합체로 데코레이팅된 세포는 세포독성 T 세포(CTL)에 의해 인식되고 사멸된다. 암 세포는 고전적 HLA-I 발현의 하향조절을 보이지만, 비고전적 HLA-I 발현(예컨대, HLA-E)은 상향조절을 보인다. 따라서, 암 세포에서 상향조절된 고유하게 제시된 비고전적 HLA-I-펩티드 복합체는 암 치료를 위한 혁신적인 면역요법을 개발하기 위한 새로운 표적이 된다.
특정 용어
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 청구된 주제가 속하는 기술 분야의 숙련자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 전술한 일반적인 설명 및 다음의 상세한 설명은 단지 예시적인 것이고, 설명을 위한 것이며, 청구된 주제를 제한하지 않는 것으로 이해되어야 한다. 본원에서 사용된 섹션 표제는 구성 목적으로만 사용되며, 설명된 주제를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
본원에서 사용되는 바, 단수 형태 "하나"("a," "an") 및 "그"는 문맥상 명백하게 달리 명시되지 않는 한, 복수 지시대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어 "한 항체"에 대한 언급은 복수의 항체들을 포함하고, 일부 실시양태에서 "한 항체"에 대한 언급은 다수의 항체들을 포함하는 등 그러하다.
본원에서 사용되는 바, 모든 수치 값 또는 수치 범위는 문맥상 명백하게 달리 명시되지 않는 한, 상기 범위 내에 있거나, 또는 그를 포함하는 전체 정수 및 상기 범위 내에 있거나, 또는 그를 포함하는 값 또는 정수의 분수를 포함한다. 따라서, 예를 들어, 90-100% 범위에 대한 언급은 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 95%, 97% 등을 포함할 뿐만 아니라, 91.1%, 91.2%, 91.3 %, 91.4%, 91.5% 등, 92.1%, 92.2%, 92.3%, 92.4%, 92.5% 등을 포함한다. 또 다른 예에서, 1-5,000배 범위에 대한 언급은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20배 등 뿐만 아니라 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5배 등, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5배 등을 포함한다.
본원에서 사용되는 바, "약" 수치는 상기 수치를 포함하고, 상기 수치 아래로 10%에서부터 상기 수치 위로 10% 범위에 이르는 범위를 지칭한다. "약" 범위는 상기 범위의 하한 아래로 10%에서 상기 범위의 상한 위로 10%에 이르는 것을 의미한다.
본원에서 사용되는 바, 용어 "MHC"는 주조직적합성 항원을 명시하는 유전자 유전자좌 세트인 주조직적합성 복합체를 지칭한다. 본원에서 사용되는 바, 용어 "HLA"는 인간에서 발견되는 조직적합성 항원인 인간 백혈구 항원을 지칭한다. 본원에서 사용되는 바, "HLA"는 인간 형태의 "MHC"이고, 본 용어는 상호교환적으로 사용된다.
본원에서 사용되는 바, "항체"는 특정 항원에 대한 결합 특이성을 나타내는 당단백질을 지칭한다. 본원에서 항체는 또한 "항원 결합부" 또는 항원에 결합할 수 있는 항체의 단편을 포함한다. 본 용어는 다중클론, 단일클론, 단일특이적, 다중특이적(예컨대, 이중특이적 항체), 천연, 인간화, 인간, 키메라, 합성, 재조합, 하이브리드, 돌연변이화된, 이식된, 항체 단편(예컨대, 전장 항체의 일부, 일반적으로 그의 항원 결합 영역 또는 가변 영역, 예컨대, Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 단편), 및 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 시험관내에서 생성된 항체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 본 용어는 또한 단일 쇄 항체, 예컨대, 가변 중쇄와 가변 경쇄가 (직접 또는 펩티드 링커를 통해) 함께 연결되어 연속 폴리펩티드를 형성하는 단일 쇄 Fv(sFv 또는 scFv) 항체를 포함한다.
본원에서 사용되는 바, "CDR"은 면역글로불린(Ig) 초가변 도메인을 지칭한다. CDR은 임의의 적합한 방식으로 정의된다. 일부 실시양태에서, CDR은 코티아(Chothia) 넘버링 체계, 카바트(Kabat) 넘버링 체계, 카바트 및 코티아의 조합, AbM 정의, 콘택트 정의, 및/또는 카바트, 코티아, AbM, 및/또는 콘택트 정의의 조합 중 임의의 것에 따라 정의될 수 있고; 이는 다른 결과를 초래할 수 있다.
본원에서 사용되는 바, 임의의 결합제, 예컨대, 항체의 맥락에서 "선택적으로 결합한다"라는 용어는 예컨대, 높은 친화도로 항원 또는 에피토프에는 특이적으로 결합하지만, 관련 없는 다른 항원 또는 에피토프에는 유의적으로 결합하지 않는 결합제를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바, 용어 "신생항원" 또는 "네오펩티드"는 상호교환적으로 사용되며, 건강한 세포와 비교하여 이환된 세포, 또는 스트레스를 받은 세포(예컨대, 암 세포)에 의해 차별적으로 발현된 펩티드를 지칭한다.
용어 "수용자," "개체," "피험체," "숙주" 및 "환자"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 일부 경우에서, 진단, 치료 또는 요법이 요구되는 임의의 포유동물 피험체, 특히, 인간을 지칭한다. 상기 용어 중 어느 것도 의료진의 감독을 필요로 하지 않는다.
본원에서 사용되는 바, "치료," "치료하는" 등의 용어는 일부 경우에서는 효과를 얻기 위한 목적으로 작용제를 투여하거나, 또는 시술을 수행하는 것을 지칭한다. 그 효과는 질환 또는 그의 증상을 완전히 또는 부분적으로 예방한다는 면에서 예방적일 수 있고/거나, 질환 및/또는 질환의 증상에 대한 부분적 또는 완전한 치유를 달성한다는 면에서 치료적일 수 있다. 본원에서 사용되는 바, "치료"는 포유동물, 특히, 인간에서 질환 또는 장애(예컨대, 암)의 치료를 포함할 수 있고, (a) (예컨대, 원발성 질환과 연관이 있거나, 또는 그에 의해 유발될 수 있는 질환을 포함하는) 질환에 걸리기 쉬울 수 있지만, 아직 질환을 앓는 진단받지는 않은 피험체에서 질환 또는 질환 증상이 발생하지 못하게 예방하는 것; (b) 질환을 억제시키는 것, 즉, 그의 발생을 정지시키는 것; 및 (c) 질환을 완화시키는 것, 즉, 질환을 퇴행시키는 것을 포함한다. 치료는 예컨대, 완화; 차도; 증상 감소 또는 질환 병태를 환자가 더 견딜 수 있게 만드는 것; 퇴행 또는 쇠퇴 속도를 저속화시키는 것; 또는 퇴행의 최종점을 덜 쇠약한 상태로 만드는 것과 같은, 임의의 객관적 또는 주관적 파라미터를 비롯한, 암의 치료 또는 호전 또는 예방의 임의의 성공 지표를 지칭할 수 있다. 증상의 치료 또는 호전은 의사의 검사 결과를 비롯한, 하나 이상의 객관적 또는 주관적 파라미터에 기초한다. 따라서, "치료하는"이라는 용어는 질환(예컨대, 암)과 연관된 증상 또는 병태의 발생을 예방하거나, 또는 지연시키거나, 완화시키거나, 저지하거나, 또는 억제하기 위해 본 발명의 화합물 또는 작용제를 투여하는 것을 포함한다. "치료 효과"라는 용어는 피험체에서 질환, 질환의 증상 또는 질환의 부작용의 감소, 제거 또는 예방을 지칭한다.
일부 경우에서, "치료 유효량"은 질환을 치료하기 위해 피험체에게 투여되었을 때, 그 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미한다.
"동일성(%)"은 두 서열(뉴클레오티드 또는 아미노산)이 정렬되었을 때 동일한 위치에 동일한 잔기를 갖는 정도를 지칭한다. 예를 들어, "아미노산 서열은 서열 번호 Y와 X% 동일하다"라는 것은 서열 번호 Y에 대한 아미노산 서열의 동일성(%)을 지칭하고, 아미노산 서열 중 잔기의 X%가 서열 번호 Y에 개시된 서열의 잔기와 동일하다는 것으로 상세하게 설명된다. 일반적으로, 이러한 계산을 위해 컴퓨터 프로그램이 사용된다. 서열 쌍을 비교하고, 정렬하는 예시적인 프로그램은 ALIGN(문헌 [Myers and Miller, 1988]), FASTA(문헌 [Pearson and Lipman, 1988]; [Pearson, 1990]) 및 갭형성 BLAST(문헌 [Altschul et al., 1997]), BLASTP, BLASTN, 또는 GCG(문헌 [Devereux et al., 1984])를 포함한다.
주조직적합성 복합체( MHC ) 또는 인간 백혈구 항원( HLA )
인간에서 인간 백혈구 항원(HLA)으로도 명명되는 주조직적합성 복합체(MHC)는 세포 건강 상태에 대한 통찰력을 제공함으로써 프로테오믹 스캐닝 칩으로 작용하는 유핵 세포의 표면에서 발현되는 당단백질이다. 이는 정상적인 숙주 세포 단백질, 암 세포, 염증 세포 및 박테리아, 바이러스 및 기생충 감염 세포에서 지속적으로 펩티드를 샘플링하고, T 림프구가 인식할 수 있도록 세포 표면 상에 짧은 펩티드를 제시한다. 제시된 펩티드는 프레임 밖의 단백질로부터 또는 인트론에 삽입된 서열로부터, 또는 통상적인 메티오닌 코돈인 ATG 이외의 코돈에서 번역이 개시되는 단백질로부터 유래될 수도 있다.
마우스 및 인간에는 두 부류의 MHC, 즉, MHC I 및 MHC II가 존재한다. MHC I은 고전적 및 비고전적 MHC I 하위그룹을 포함한다.
고전적 MHC I 또는 HLA -I
고전적 MHC I 분자는 인간에서는 HLA-A, HLA-B 및 HLA-C, 및 마우스에서는 H-2-K, H-2-D, H-2-B 및 H-2-L을 포함한다. 고전적 MHC I 분자는 HLA-A의 2,735개 초과의 대립유전자, HLA-B의 3,455개 초과의 대립유전자 및 HLA-C의 2,259개 초과의 대립유전자로 고도로 다형성이다. 고전적 MHC I은 모든 유핵 세포의 표면 상에서 발현되며, CD8 T 림프구에 펩티드를 제시한다. 세포 기구에 있는 단백질 중 30%는 빠르게 분해되며, 고전적 MHC I 항원 제시의 주요 기질이다.
고전적 MHC I 분자에 의해 제시되는 펩티드의 경우, 단백질은 먼저 프로테아좀에서의 단백질 분해로 시작하여 펩티드의 소포체(ER: endoplasmic reticulum) 내로의 수송체 연관 단백질(TAP: Transporter associated protein) 의존성 수송을 거쳐 HLA 펩티드 결합 포켓으로의 펩티드 로딩으로 끝나는 통상적인 프로세싱 경로(유비퀴틴 프로테아좀 시스템)를 통해 프로세싱된다. 통상적인 프로세싱 경로에 기여하는 단백질은 집합적으로 항원 프로세싱 기구(APM)로 알려져 있으며, 프로테아좀, TAP 복합체, 타파신, 소포체 아미노 펩티다제(ERAAP: endoplasmic reticulum amino peptidase), 결합 면역글로불린 단백질(BiP: binding immunoglobulin protein), 클라넥신 및 칼레티쿨린을 포함한다. 프로테아좀 서브유닛, TAP1/2, ErP57 또는 칼레티쿨린이 결여된 세포는 그의 표면에 감소된 개수의 고전적 MHC I 분자를 갖는다.
비고전적 MHC I 또는 HLA -I
비고전적 MHC I 분자는 HLA-E, HLA-F 및 HLA-G를 포함하고, 제한된 다형성을 갖는다. 이는 선천 및 적응 면역 반응을 조절하는 역할을 한다. 비고전적 MHC I 분자는 건강 및 질환 상태에서 통상적인 프로세싱 경로 및 대안적 프로세싱 경로, 둘 모두에 의해 생성된 펩티드를 제시하고, 질환 병태(예컨대, 암)에서 표적화하기 위한 새로운 마커 세트를 나타낸다.
HLA -E
비고전적 MHC 클래스 I 분자인 HLA-E는 비다형성이다. 자연에서 13개의 HLA-E 대립유전자는 오직 두 기능적 변이체, 즉, HLAE* 0101 및 HLA-E*0103으로만 확인되었다. HLA-E*0101(HLA-E107R)과 *0103(HLA-E107G)의 차이는 펩티드 결합 포켓 외부에 있는 위치 107에서의 단일 아미노산 차이이다. 고전적 MHC I 분자와 유사하게, HLA-E는 핵이 있는 모든 세포에서 발현되지만, 일반적으로 더 낮은 수준으로 발현된다. 세포 및 조직에서의 HLA-E 분자 발현은 일반적으로 스트레스 및 질환 중에 증가한다. 따라서, HLA-E는 건강한 세포와 비교하여 스트레스를 받은 세포, 또는 이환된 세포(예컨대, 암 세포)에서 차별적으로 발현된다.
건강한 세포에서, HLA-E는 수용체 CD94/NKG2와의 인게이징을 통해 NK 세포 및 CD8 T 세포의 서브세트의 활성을 억제시키거나, 또는 자극하기 위해 고전적 MHC 분자 및 비고전적 HLA-G 분자로부터 유래된 펩티드를 제시한다. HLA-E에 의해 제시된 특정 펩티드에 따라 HLA-E 복합체는 CD94/NKG2A 또는 CD94/NKG2C와 인게이징하여 각각 NK 세포 및 CD8 T 세포의 서브세트를 억제시키거나, 또는 활성화시킨다.
고전적 HLA-I 분자로부터 생성된 신호 펩티드와 공통된 특징을 갖는 또 다른 신호 펩티드는 비고전적 HLA-G로부터 생성된 신호 펩티드이다. 정상적인 생리학적 조건하에서의 HLA-G 발현은 엄격하게 조절되며, 신체내 비교적 조직 및 세포에서 제한된 발현이 관찰된다. HLA-G는 면역 관용 분자로서 중요한 역할을 하며, 그의 발현은 암 조직/세포에서 관찰된다. 또한, HLA-G로부터의 신호 펩티드는 통상적인 항원 프로세싱 경로에 의해 프로세싱되고, 펩티드 수송체 TAP에 의해 소포체로 전달된다. 일부 실시양태에서, 신호 펩티드는 VMAPRTLFL(서열 번호 18)이다
암 세포에서의 HLA-E 발현 및 펩티드 제시
APM의 하나 이상의 성분이 결핍된 세포는 APM 의존성 통상적인 프로세싱 경로와 독립적인 대안적 프로세싱 경로를 통해 MHC 클래스 I 분자로 펩티드를 로딩한다. APM 결핍 세포는 그의 표면에 감소된 개수의 고전적 MHC I 분자를 가질 뿐만 아니라, HLA-E 분자의 세포 표면 밀도의 증가 및 제시된 펩티드 레퍼토리의 증가를 나타낸다. 대안적 프로세싱 경로는 건강한 세포 및 이환된 세포, 둘 모두에서 구성적으로 작동이 시작되고, 펩티드를 생산한다. 그러나, 상기 펩티드는 건강한 세포에 의해서는 제시되지 않고; 대신, 이환된 세포, 또는 스트레스를 받은 세포에서만 제시된다. 따라서, "손상된 펩티드 프로세싱과 연관된 T 세포 에피토프"(TEIPP:T-cell epitopes associated with impaired peptide processing)로도 공지된, APM 결핍 세포에 의해 생성된 상이한 펩티드 레퍼토리는 암 세포에 고유한 새로운 표적을 나타내고, 암 치료에서 치료제 개발을 위한 이상적인 표적을 나타낸다.
스트레스를 받았거나, 또는 이환된 상태(예컨대, 암)에서, 스트레스를 받은 세포 또는 이환된 세포(예컨대, 암 세포)는 HLA-E 및 고전적 MHC 분자 또는 비고전적 HLA-G 분자로부터 유래된 펩티드를 포함하는 복합체를 차별적으로 발현한다. HLA-E 및 비고전적 HLA-G 분자로부터 유래된 펩티드를 포함하는 복합체는 건강한 세포와 비교하여 스트레스를 받은 세포 또는 이환된 세포에서 차별적으로 발현된다. 이 복합체를 표적화하면 복합체를 발현하는 세포에 대한 면역 반응이 유도된다.
MHC 　II 또는 HLA -II
MHC II 분자는 인간에서 HLA-DM, HLA-DO, HLA-DP, HLA-DQ 및 HLA-DR을 포함하고, 마우스에서 H-2 I-A 및 H-2 I-E를 포함한다. MHC II 발현은 B 세포, 수지상 세포, 대식세포, 활성화된 T 세포 및 흉선 상피 세포로 더 제한되며, MHC II 분자는 CD4 림프구에 펩티드를 제시한다.
비고전적 HLA -I(예컨대, HLA -E) 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체
특정 실시양태에서, 본원에서는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 적어도 하나의 중쇄 및 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 적어도 하나의 경쇄를 포함한다. 각 VH 및 VL은 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. VH 및 VL 및 CDR의 아미노산 서열이 항체의 항원 결합 특이성 및 항원 결합 강도를 결정한다. VH 및 VL 및 CDR의 아미노산 서열이 표 1에 요약되어 있다.
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 및 비관련 신생항원을 포함하는 복합체에 결합 친화도를 갖지 않는다.
일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA-E, HLA-F, HLA-G, 또는 HLA-H이다. 일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA-E이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0103이다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체 및 HLA-E*0103 및 신생항원의 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 복합체는 HLA-E 및 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 신생항원을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 뮤린 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 카멜리드 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간화 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 단일 도메인 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일 도메인 항체는 카멜리드 단일 도메인 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3ε 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 다기능성 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 치료 모이어티는 세포독소, 화학요법 약물, 면역억제제, 및 방사성동위원소를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 세포독소 또는 세포독성제는 세포에 유해한(예컨대, 세포를 사멸시키는) 임의의 작용제를 포함한다. 예로는 탁솔, 사이토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티디움 브로마이드, 에메틴, 미토마이신, 에토포시드, 테노포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 독소루비신, 다우노루비신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미토산트론, 미트라마이신, 악티노마이신 D, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 및 퓨로마이신 및 그의 유사체 또는 동족체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 화학요법제로는 항대사물질(예컨대, 메토트렉세이트, 6-메르캅토푸린, 6-티오구아닌, 시타라빈, 플루다라빈, 5-플루오로우라실, 데카르바진, 하이드록시우레아, 아자티프린, 젬시타빈 및 클라드리빈), 알킬화제(예컨대, 메클로레타민, 티오에파, 클로람부실, 멜팔란, 카르무스틴(BSNU) 및 로무스틴(CCNU), 사이클로포스파미드, 부술판, 디브로모만닛톨, 스트렙토조토신, 미토마이신 C, 및 시스-디클로로디아민 백금(II)(DDP) 시스플라틴), 안트라사이클린(예컨대, 다우노루비신(이전의 다우노마이신) 및 독소루비신), 항생제(예컨대, 닥티노마이신(이전의 악티노마이신), 블레오마이신, 미트라마이신 및 안트라마이신(AMC)), 및 항유사분열제(예컨대, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 도세탁셀, 파클리탁셀 및 비노렐빈)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 방사성동위원소로는 아이오딘-131, 이트륨-90 또는 인듐-111을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 치료 모이어티의 추가 예로는 원하는 생물학적 활성을 갖는 단백질 또는 폴리펩티드가 있다. 상기 단백질은 예를 들어, 효소적으로 활성인 독소, 또는 그의 활성 단편, 예컨대, 아브린, 리신 A, 슈도모나스 외독소, 또는 디프테리아 독소; 단백질, 예컨대, 종양 괴사 인자 또는 인터페론-γ; 또는 생물학적 반응 조절물질, 예컨대, 예를 들어, 림포카인, 인터루킨-1(IL-1), 인터루킨-2(IL-2), 인터루킨-6(IL-6), 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF: granulocyte macrophage colony stimulating factor), 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF: granulocyt colony stimulating factor), 또는 다른 성장 인자를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 NK 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, TCR과 연관된 CD3 단백질에의 항체의 선택적 결합은 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
항체 가변 도메인(VL 및 VH)
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 경쇄를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 중쇄를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH) 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄 가변 도메인(VL) 및 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL), 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
항체 중쇄 및 경쇄
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC)를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄(HC)를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC) 및 중쇄(HC)를 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄(HC)를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC) 및 중쇄(HC)를 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC)를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄(HC)를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC) 및 중쇄(HC)를 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
항체 상보성 결정 영역( CDR )
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 경쇄를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 경쇄 상보성 결정 영역(CDR) 및 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
이중특이적 항체
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3ε 단백질에 결합한다.
일부 실시양태에서, BiTE는 항CD3 항체, 또는 그의 단편, 예컨대, UCHT1, OKT3, F6A, L2K, 무로모나브, 오텔릭시주맙, 테플리주맙, 비실리주맙, CD3-12, MEM-57, 4D10A6, CD3D, 또는 TR66을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
치료 방법
본원에서는 본원에 개시된 바와 같은, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 및 비관련 신생항원을 포함하는 복합체에 결합 친화도를 갖지 않는다.
일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA-E, HLA-F, HLA-G, 또는 HLA-H이다. 일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA-E이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0103이다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 복합체는 HLA-E 및 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 신생항원을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH) 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL), 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E를 포함하고, 신생항원은 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E를 포함하고, 신생항원은 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E를 포함하고, 신생항원은 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 뮤린 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 카멜리드 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간화 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 단일 도메인 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일 도메인 항체는 카멜리드 단일 도메인 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3ε 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 다기능성 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 치료 모이어티는 세포독소, 화학요법 약물, 면역억제제, 및 방사성동위원소를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 세포독소 또는 세포독성제는 세포에 유해한(예컨대, 세포를 사멸시키는) 임의의 작용제를 포함한다. 예로는 탁솔, 사이토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티디움 브로마이드, 에메틴, 미토마이신, 에토포시드, 테노포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 독소루비신, 다우노루비신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미토산트론, 미트라마이신, 악티노마이신 D, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 및 퓨로마이신 및 그의 유사체 또는 동족체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 화학요법제로는 항대사물질(예컨대, 메토트렉세이트, 6-메르캅토푸린, 6-티오구아닌, 시타라빈, 플루다라빈, 5-플루오로우라실, 데카르바진, 하이드록시우레아, 아자티프린, 젬시타빈 및 클라드리빈), 알킬화제(예컨대, 메클로레타민, 티오에파, 클로람부실, 멜팔란, 카르무스틴(BSNU) 및 로무스틴(CCNU), 사이클로포스파미드, 부술판, 디브로모만닛톨, 스트렙토조토신, 미토마이신 C, 및 시스-디클로로디아민 백금(II)(DDP) 시스플라틴), 안트라사이클린(예컨대, 다우노루비신(이전의 다우노마이신) 및 독소루비신), 항생제(예컨대, 닥티노마이신(이전의 악티노마이신), 블레오마이신, 미트라마이신 및 안트라마이신(AMC)), 및 항유사분열제(예컨대, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 도세탁셀, 파클리탁셀 및 비노렐빈)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 방사성동위원소로는 아이오딘-131, 이트륨-90 또는 인듐-111을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 치료 모이어티의 추가 예로는 원하는 생물학적 활성을 갖는 단백질 또는 폴리펩티드가 있다. 상기 단백질은 예를 들어, 효소적으로 활성인 독소, 또는 그의 활성 단편, 예컨대, 아브린, 리신 A, 슈도모나스 외독소, 또는 디프테리아 독소; 단백질, 예컨대, 종양 괴사 인자 또는 인터페론-γ; 또는 생물학적 반응 조절물질, 예컨대, 예를 들어, 림포카인, 인터루킨-1(IL-1), 인터루킨-2(IL-2), 인터루킨-6(IL-6), 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF), 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF), 또는 다른 성장 인자를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 NK 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, TCR과 연관된 CD3 단백질에의 항체의 선택적 결합은 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다.
일부 실시양태에서, 암은 유방암이다. 일부 실시양태에서, 암은 신장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암이다. 일부 실시양태에서, 암은 난소암이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장직장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 췌장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 융모막 암종이다. 일부 실시양태에서, 암은 비소세포 폐 암종(NSCLC). 일부 실시양태에서, 암은 위암이다. 일부 실시양태에서, 암은 자궁경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 두부경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 백혈병이다. 일부 실시양태에서, 암은 림프종이다. 일부 실시양태에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML)이다. 일부 실시양태에서, 암은 다발성 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수형성이상 증후군이다. 일부 실시양태에서, 암은 B 세포 악성종양이다. 일부 실시양태에서, 암은 외투 세포 림프종이다.
일부 실시양태에서, 암 세포는 신생항원을 차별적으로 발현한다. 일부 실시양태에서, 암 세포는 HLA-E를 차별적으로 발현한다. 일부 실시양태에서, 암 세포는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체를 차별적으로 발현한다.
본원에 개시된 방법과 함께 사용하기 위해 임의의 적합한 투여 경로가 고려된다. 일부 실시양태에서, 항체는 정맥내 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 피하 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 국소적으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 전신으로(예컨대, 정맥내, 근육내, 피하, 피내, 경구적으로, 비내로, 설하로) 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 고약, 로션 또는 에멀젼으로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 항체는 액제로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 항체는 국부, 경구, 협측 또는 비강 투여용으로 제제화된다.
일부 실시양태에서, 개체는 항체 투여 전에 모니터링된다. 증상이 확인되고, 그의 중증도가 평가된다. 본원에 기술된 바와 같은 항체는 단독으로 또는 본원에서 논의되거나, 또는 당업자에게 공지된 바와 같이 단독으로 또는 시간 경과에 따라 다회에 걸쳐 추가 치료와 함께 조합하여 투여된다. 일부 실시양태에서, 치료 요법의 효능이 측정되도록 개체를 모니터링한다. 일부 실시양태에서, 치료 요법은 예비 치료 결과에 반응하여 수정되고, 이로써, 치료 용량 또는 빈도 또는 용량 및 빈도는 증상 완화, 부작용 감소, 또는 증상 완화와 부작용 감소의 조합을 고려하여 피험체의 반응을 원하는 수준으로 달성할 수 있도록 변경된다.
약학적 조성물
본원에서는 또한 (a) 본원에 개시된 바와 같은 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체, 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 개시한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH) 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL), 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E를 포함하고, 신생항원은 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E를 포함하고, 신생항원은 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E를 포함하고, 신생항원은 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 조성물과 함께 사용하기 위한 부형제로는 말레산, 타르타르산, 락트산, 시트르산, 아세트산, 중탄산나트륨, 인산나트륨, 히스티딘, 글리신, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 염화아연, 물, 덱스트로스, N-메틸피롤리돈, 디메틸 술폭시드, N,N-디메틸아세트아미드, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 디에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르 및 계면활성제 폴리옥시에틸렌-소르비탄 모노올레이트를 포함한다.
일부 실시양태에서, 조성물은 추가적인 치료제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 치료제는 화학요법제이다. 화학요법제로는 다른 것들 중에서도 특히 세포독성제, 항대사제(예컨대, 폴레이트 길항제, 퓨린 유사체, 피리미딘 유사체 등), 토포이소머라제 억제제(예컨대, 캄프토테신 유도체, 안트라센디온, 안트라사이클린, 에피포도필로톡신, 퀴놀린 알칼로이드 등), 항미세관제(예컨대, 탁산, 빈카 알칼로이드), 단백질 합성 억제제(예컨대, 세팔로탁신, 캄프토테신 유도체, 퀴놀린 알칼로이드), 알킬화제(예컨대, 알킬 술포네이트, 에틸렌이민, 질소 머스타드, 니트로소우레아, 백금 유도체, 트리아젠 등), 알칼로이드, 테르페노이드 및 키나제 억제제를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 항체 및 치료제는 동일한 제제에 있다. 일부 실시양태에서, 항체 및 치료제는 상이한 제제에 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기술된 항체는 다른 치료제의 투여 이전에 사용된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기술된 항체는 다른 치료제의 투여와 동시에 사용된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기술된 항체는 다른 치료제의 투여 이후에 사용된다.
약학적 제제는 특정 국소, 국부 또는 전신 투여 또는 전달 경로와 호환되도록 제조된다. 따라서, 약학적 제제는 특정 경로에 의한 투여에 적합한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다. 본원의 조성물에 대한 투여 경로의 구체적인 비제한적 예로는 비경구, 예컨대, 정맥내, 동맥내, 피내, 근육내, 피하, 흉막내, 경피(국부), 경점막, 두개내, 척수내, 안구내, 직장, 경구(소화관), 점막 투여, 및 치료 방법 또는 투여 프로토콜에 적합한 임의의 다른 제제가 있다.
비경구 적용에 사용되는 액제 또는 현탁제는 멸균 희석제, 예컨대, 주사용수, 염수 용액, 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 합성 용매; 항박테리아제, 예컨대, 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대, 아스코르브산 또는 중황산나트륨; 킬레이트제, 예컨대, 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트; 및 장성 조정제, 예컨대, 염화나트륨 또는 덱스트로스를 포함한다. 일부 실시예에서, pH는 예컨대, 염산 또는 수산화나트륨과 같은 산 또는 염기로 조정된다.
주사용 약학적 제제는 멸균 수성 액제(수용성인 경우) 또는 분산제 및 멸균 주사용 액제 또는 분산제의 즉석 제조를 위한 멸균 산제를 포함한다. 정맥내 투여를 위해 적합한 담체로는 생리 식염수, 정균수, 크레모포 EL(Cremophor EL)™(BASF, 미국 뉴저지주 파시파니 소재) 또는 포스페이트 완충처리된 염수(PBS: phosphate buffered saline)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 담체는 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등) 또는 그의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질이다. 일부 실시양태에서, 유동성은 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅 사용에 의해, 분산제인 경우, 필요한 입자 크기 유지에 의해, 및 계면활성제 사용에 의해 유지된다. 항박테리아제 및 항진균제는 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산 및 티메로살을 포함한다. 등장화제, 예를 들어, 당; 다가알콜, 예컨대, 만닛톨 또는 소르비톨을 포함하거나; 또는 일부 실시양태에서, 염화나트륨이 본 조성물에 포함된다. 일부 경우에서, 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어, 모노스테아르산알루미늄 또는 젤라틴이 주사용 조성물의 흡수를 연장시키는 제제도 포함된다.
멸균 주사용 제제는 상기 성분 중 하나 또는 조합과 함께 적절한 용매에 필요한 양의 활성 조성물을 혼입함으로써 제조된다. 일반적으로, 분산제는 기초 분산 매질 및 임의의 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클에 활성 조성물을 혼입함으로써 제조된다. 멸균 주사용 액제의 제조를 위한 멸균 산제의 경우, 제조 방법은 예를 들어, 이를 통해 이전에 제조된 그의 액제로부터 활성 성분의 산제와 임의의 추가의 원하는 성분이 수득되는 진공 건조 및 동결 건조를 포함한다.
경점막 또는 경피 투여를 위해, 투과될 장벽에 적절한 침투제가 제제에 사용된다. 이러한 침투제는 당업계에 공지되어 있고, 예를 들어, 경점막 투여를 위해, 계면활성제, 담즙산염 및 푸시딘산 유도체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 경점막 투여는 비강 스프레이, 흡입 장치(예컨대, 흡인기) 또는 좌제의 사용을 통해 달성된다. 경피 투여를 위해, 활성 화합물은 연고, 고약, 젤, 크림 또는 패치로 제제화된다.
일부 실시양태에서, 약학적 제제는 예컨대, 방출 조절형 제제 또는 시간 지연 물질, 예컨대, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 스테아레이트와 같은, 신체로부터의 급속한 제거를 방지하는 담체와 함께 제조된다. 일부 실시양태에서, 제제는 또한 국소, 국부 또는 전신 전달 또는 조절형 또는 지속 방출을 달성하기 위해 예컨대, 임플란트 및 마이크로캡슐화된 전달 시스템과 같은 제조 물품을 사용하여 전달된다.
실시예
하기 실시예는 본 발명의 다양한 실시양태를 예시하기 위한 목적으로 제공되고, 어느 방식으로든 본 발명을 제한하는 것을 의미하지 않는다. 본원에 기술된 방법과 함께 본 실시예는 현재 바람직한 실시양태를 대표하고, 예시적이며, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 당업자는 청구범위의 범주에 의해 정의된 바와 같이 본 발명의 정신 내에 포함되는 그 안의 변경 및 다른 용도를 착안해 낼 수 있을 것이다.
실시예 1. 항체 생성
먼저, R4 클론 1(R4c1)을 반합성 인간 항체 파지 라이브러리로부터 단리시켰다. 간략하면, 이는 하기와 같이 수행하였다. 크리에이티브 바이오랩스(Creative Biolabs)(HuScL-2 파지 라이브러리)에 의해 구성된 인간 scFv 항체 파지 디스플레이 라이브러(1.42 x 109 클론)를 사용하여 HLA-G 신호 펩티드/HLA-E*0103 복합체(ABI-V-0025; VMAPRTLFL(서열 번호 18))에 대해 스크리닝하였다. 간략하면, 5개의 내부 펩티드/HLA-A2*0201 복합체(ABI-AV-007-Biot, ABI-AV-0010-Biot, ABI-AV-0014-Biot, ABI-AV-0019 및 ABI-AB-0030-Biot) 믹스 30 ㎍을 고갈 및 사전 차단을 위해 사용한 후, 50 ㎍의 ABI-V-0025을 이용하여 농축을 수행하였다. 파지 라이브러리의 농축 계수는 2.73x106(파지 입력량: 5x1011, 파지 출력량: 1.83x105)이었다. 상기 프로세스를 제2 라운드의 바이오패닝 동안 반복하였고, 농축 계수는 4.03x102였다. 상기 프로세스를 제3 라운드의 바이오패닝 동안 반복하였지만, 고갈을 위해 복합체 믹스 20 ㎍을 사용하였다(농축 계수 2.31x102). 제4 라운드의 바이오패닝을 위해, 고갈 및 사전 차단을 위해 50 ㎍의 ABI-V-0018을 사용한 후, 이어서, 농축을 위해, 50 ㎍의 ABI-V-0025를 사용하였다(농축 계수 44). 제4 라운드의 바이오패닝의 파지 출력물로부터, 40개의 클론을 취하고, 시퀀싱하여 하나의 고유한 서열을 밝혀냈다. 이 클론을 R4 클론 1(R4c1)로 지정하였다(도 1a-도 1b). R4c1 항체의 친화도를 측정하기 위해, 0.1% BSA, 0.1% 트윈(Tween)20, PBS 희석/세척 완충제 중에서 희석하고, 포르테바이오 옥테트 프로테인 A(ForteBio Octet Protein A) 바이오센서 팁에 20 ug/ml로 50초 동안 고정화시켰다. 이어서, 팁을 희석/세척 완충액 중에서 50초 동안 세척하였다. 6개 농도의 (희석/세척 완충제 중 100 ug/ml에서 시작하는 연속 희석액) 정규 0025-E 01:03 단량체 복합체를 150초 동안에 걸쳐 항체 결합 회합을 측정한 후, 이어서, 바로 150초 동안 해리(희석/세척 완충제)로 이어졌다(도 1c). 클론 R4(클론 1)에 대한 평형 해리 상수(KD)는 411 nM인 것으로 측정되었다(도 1d).
R4c1의 친화도 성숙: 사이클 2: V-0025에 대한 클론 R4c1의 결합 친화도를 증가시키기 위해, CDRH3 중에서 2개의 아미노산을 변경함으로써 R4c1 scFv 구성물을 효모 벡터로 클로닝하여 R4c1 돌연변이체의 라이브러리를 생성하였다. 간략하면, 생성된 효모 디스플레이 라이브러리는 100 mM 아세트산리튬(LiAc, Sigma) + 10 mM 디티오트레이톨(DTT, Sigma) 중에서 인큐베이션시킴으로써 형질전환을 위해 제조된 EBY100 효모 컴피턴트 세포를 사용하였다. 1 ㎍의 scFv 클론, 및 GAL1 프로모터 뒤에 Aga2 및 scFv 뒤에 플래그(DYKDDDDK) 에피토프 태그(서열 번호 38)를 포함하도록 변경된 100 ng의 pYES3(ThermoFisher)을 이용하여, 10 mM LiAc 중 2 mm 큐벳(BioRad)당 60 OD의 제조된 효모와 함께 진펄서(GenePulser)(BioRad)를 이용하여 전기천공을 달성하였다. 형질전환체의 개수를 측정하기 위해, 형질전환된 효모의 1/10, 1/100 및 1/1000 희석액 100 ㎕를 트립토판 및 우라실이 결핍된 글루코스 플레이트(D-UT, Teknova) 상에 스프레드하였다. 30℃에서 2일 동안 인큐베이션시킨 후, 형질전환 효율을 계산하였다. 이어서, PCR에 의한 삽입 다양성을 위해 무작위 클론을 취하였다. 트립토판 및 우라실이 결핍된 글루코스(D-UT, Teknova)를 포함하는 CM 브로쓰 중에서 200 rpm으로 진탕시키면서 30℃에서 효모를 성장시켰다. 0.1% 라피노스(Sigma)로 보충되고, 트립토판 및 우라실이 결핍된 갈락토스(D-UT, Teknova)(GR-UT)를 포함하는 CM 브로쓰 중에서 적어도 20 hr 동안 효모를 성장시킴으로써 scFv 표면 유도를 달성하였다.
효모를 회전시키면서 실온에서 30분 내지 1시간 동안 PBS 0.05% 트윈 중의 2% BSA(차단 완충제)로 먼저 차단시킨 후 염색하였다. 이어서, 효모를 단량체 농도에 따라 30분 내지 90분 동안 얼음 상에서 비오티닐화된 펩티드/HLA 복합체 단량체와 함께 인큐베이션시켰다. 얼음 상에서 30분 동안 스트렙타비딘 PE(ThermoFisher) 및 DYKDDDDK 에피토프 태그(서열 번호 38) 알렉사 플루오르(Alexa Fluor) 488(R&D Systems)로 2차 표지를 달성하였다. LSR II 유세포 분석기(BD Biosciences) 또는 CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 사용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어(Flowjo Software) 버전 10 또는 FACSDiva(BD Biosciences)를 사용하여 데이터를 작성하였다.
라이브러리 크기의 적어도 10배의 커버리지를 이용하여 자기 활성화 세포 분류(MACS: magnetic-activated cell sorting) 또는 형광 활성화 세포 분류(FACS: fluorescence-activated cell sorting)에 의해 스크리닝을 달성하였다. MACS 스크리닝을 위해, 효모를 회전시키면서 실온에서 30분 내지 1시간 동안 PBS 0.05% 트윈 중의 2% BSA(차단 완충제)로 먼저 차단시켰다. 이어서, 비오티닐화된 펩티드/HLA 복합체 단량체를 1 μM로 30분 동안 얼음 상에서 인큐베이션시켰다. 스트렙타비딘 마이크로비드(Miltenyi Biotec)를 이용하여 2차 표지를 달성하였다. 표지된 효모를 MACS 분리기(Miltenyi Biotec)의 MACS 칼럼 상에 부었다. 칼럼에 결합된 효모를 수확하고, 농축 집단으로 간주하였다. FACS 스크리닝을 위해, 유세포 분석법 섹션에 기술된 바와 같이 효모를 제조하였다. FACS 아리아 II(FACS Aria II)(BD Bioscience)를 사용하여 샘플을 분류하였다. 분류된 효모를 농축 집단으로 간주하였다.
플레이팅하여 고유한 scFv 클론을 확인하였다. 30℃에서 2일 후, 개별 콜로니를 취하고, PCR에 의해 분석하였다. 선택된 클론의 전장의 인간 IgG1을 Expi293F(ThermoFisher) 세포에서 생성하였다. 간략하면, 항체 가변 영역을 인간 카파 경쇄 불변 영역(pFUSE2ss-CLIg-hK, Invivogen) 및 인간 IgG1 불변 영역(pFUSEss-CHIg-hG1, Invivogen) 서열이 매칭되는 포유동물 발현 벡터로 서브클로닝하였다. 벡터를 2:3 경쇄:중쇄 비로 형질감염시켰다. 항체를 단백질 A 수지(Genscript)를 이용하여 정제하고, 전기영동에 의해 환원 및 비환원 조건에서 확인하였다.
제1 라운드의 선별은 1 μM의 V-0025를 이용하여 수행하였다. 게이팅은 모체(R4c1)에 의한 결합에 기초하였으며; 모체는 V-0025에 대하여 0.11%인 것으로 나타난 반면, 사이클 2 라이브러리는 1.66%를 보였으며, 이는 더 높은 친화도의 결합제가 존재한다는 것을 시사하는 것이다(도 2a). 라운드 2 분류는 100 nM V-0025를 사용하였다. 사이클 2 라이브러리는 0.23% 결합을 보인 반면, 모체는 0%인 것으로 나타났고; 음성 대조군(V-0018)에 대해서는 결합이 관찰되지 않았다(도 2b). 제3 라운드의 분류는 10 nM V-0025를 사용하였고, 여기서, 1.05%의 결합이 관찰되었다(도 2c). 최종 라운드의 분류는 K오프를 도입하였고; 간략하면, V-0025를 100 nM로 30분 동안 인큐베이션시킨 후, 전장 hIgG1 포맷의 R4c1(R4c1-IgG1)와 함께 인큐베이션시켰다. R4c1-IgG1을 항체 싱크로서 작용하도록 다양한 시점에 500 nM로 첨가하였다. 따라서, K오프 압력을 사용하여 최종 라운드의 분류를 수행하여 상위 클론을 선택하였(도 2d). 고유한 클론을 확인하기 위해, 개별 콜로니를 취하고, 시퀀싱하였다(n=48). 10개의 고유한 클론이 확인되었고(표 2), 결합 친화도를 모체 클론과 비교하였다. 고유한 클론 중에서 6개의 클론은 모체와 비교하여 V-0025에 대해 적어도 100배 더 큰 결합을 갖는 것으로 나타났다(도 3a-도 3d). 한 클론(클론 R2A_1)은 증가된 결합 친화도를 갖는 것 뿐만 아니라, 우수한 선택성 또한 보였고, 이를 추가 분석을 위해 선택하였다(도 3e-도 3g).
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클론 R2A _1의 특징화 : ELISA에 의한 시험을 위해 및 세포 염색을 위해 클론 R2A_1을 scFv를 전장 hIgG1로 전환시켰다. ELISA 데이터에 기초하여, 친화도는 약 20 nM인 것으로 측정되었고(데이터는 제시되지 않음), 이는 모체 클론인 R4c1과 비교하여 친화도가 10배 초과로 증가하였다는 것을 나타낸다. 항체의 안정성을 체크하기 위해, 항체를 37℃에서 72 hr 동안 보관한 후 결합을 비교하였다. 도 4에 제시된 바와 같이, 항체를 37℃에서 72 hr 동안 보관하였을 때, A549-B4 세포에의 R2A_1의 결합은 심하게 손상되었다.
클론 R2A _1의 안전화: R2A_1의 안정성을 증가시키기 위해, VH 및 VL 둘 모두의 프레임워크 영역 중의 아미노산에 대해 수개의 변경이 이루어졌다. VL의 경우, CDRL2를그의 생식계열(IGKV1-39)과 매칭되도록 변형시켰다. 이는 또한 N-연결 글리코실화 부위를 제거하였다. VH의 경우, 프레임워크 영역 1에서, Gln5를 생식계열(Leu5)과 매칭되도록 변이시켰다. 또한, 프레임워크 영역 1에서, Met18을 생식계열(Leu18)과 매칭되도록 변이시켰다. 안정화된 클론을 R4c1 H1-L1로 지칭하였다. 디스플레이를 위해 scFv 서열을 효모 내로 삽입하고, 모체(R2A_1)와 비교하였다. 친화도가 일부 손실되기는 하였지만, 특이성은 변경되지 않았다(데이터는 제시되지 않음).
더 큰 친화도 및 더 광범위한 특이성을 갖는 항체를 생성하기 위해, R4c1-H1-L1에 기초하여 효모 디스플레이 라이브러리를 생성하고, CDRL3 영역에 4개의 아미노산 돌연변이를 도입하였으며, 이는 CDRL3 서열 중 44%가 모체로부터 잠재적으로 변경될 수 있다는 것을 의미한다. 도 5a(R0)에 제시된 바와 같이, 모체보다 표적에 대하여 더 큰 결합을 보인 선택 그룹이 존재하기는 하였지만, 표적에 대해 결합을 보인 클론은 거의 없었다. 10 nM 표적을 사용하여 분류를 수행하였고(R1 선별), 여기서, 모체보다 결합 친화도가 더 큰 선택 클론에 대해서만이 오직 게이팅되었다(도 6a). R1 라이브러리를 표적에의 결합에 대해 체크하고, 모체와 비교하여 친화도가 개선된 클론 결합수는 실질적으로 증가한 것으로 관찰되었다(도 5a, R1). 친화도가 증진된 클론을 선별하기 위해, R1 라이브러리에 대해 K오프 압력을 가하였다. 간략하면, 라이브러리를 10 nM 표적과 함께 인큐베이션시켰다. 세척 후, 전장 IgG1로서 1 μM 모체 클론을 항체 싱크로서 작용하도록 15 내지 120분 동안 첨가하였다. 계속해서 표적에 대해 결합을 보인 임의의 효모는 모체 클론과 비교하여 더욱 큰 K오프를 나타내었다. 도 5b에 제시된 바와 같이, 심지어 항체 싱크로 120분 경과 후에도 결합을 유지한 효모 클론이 관찰되었다. 이러한 고도로 개선된 클론을 선별하기 위해, 항체 싱크로서 45분 동안 10 nM 표적 및 1 μM 모체 클론-IgG로 K오프를 이용하여 최종 분류(R2 분류)를 수행하였고, 분류 게이트를 수행하여 최고치의 친화도를 갖는 클론만을 수집하였다(도 6b). 분류 후, 개별 클론을 단리시키고, 시퀀싱 하였다(n=60). 12개의 고유한 클론이 발견되었고(표 3), 1 및 0.1 nM에서 표적에의 결합에 대해 체크하였다(도 7). 추가 시험을 위해 표적에 결합하는 상위 클론을 선택하였다(도 7 검은색 화살표 표시).
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실시예 2. ELISA, FACS 및 무표지 기술에 의한 상위 클론의 특징화
효모 디스플레이로부터 확인된 상위 클론을 hIgG1로 제조하고, 특이성 및 친화도에 대해 시험하였다. R2-C02는 높은 친화도 및 우수한 특이성을 보였다(데이터는 제시되지 않음). R2-C02를 ABX0011(또는 ABX-11)로 명명하였고, 1 L 일시적 형질감염 프로토콜에 따라 CHO 세포에서 생산한 후, 단백질-A 친화도 크로마토그래피에 의한 정제하였다. SDS-PAGE 환원(중쇄 및 경쇄를 나타내는 2개의 밴드) 및 비환원(~150 kD에서 단일 밴드)(도 8a)에 의해, 및 크기 배제 크로마토그래피에 의한 단일 피크 관찰(도 8b)에 의해 샘플 순도를 측정하였다. ABX0011을 먼저 광범위한 펩티드/HLA 복합체 어레이에 대해 시험하였다. 도 9a에 제시된 바와 같이, HLA-E 클론 3D12는 펩티드-공(empty) HLA-E를 비롯한 모든 HLA-E 복합체에 결합한다. 그러나, ABX0011은 오직 비고전적 HLA, HLA-G 신호 펩티드/HLA-E 복합체만 인식하였고, 이는 고전적 HLA로부터의 밀접하게 관련된 신호 펩티드는 인식하지 못했다(도 9b). 추가로, 이는 어떤 추가의 펩티드/HLA-E 복합체 또는 어떤 펩티드/HLA-A2 복합체도 인식하지 못했다. ELISA를 실행하기 위해, 고순도 HLA-E 01:03 및 HLA-A2 02:01 단량체 복합체(0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 희석/세척 완충제 중 희석)를 뉴트라비딘 코팅된 마이크로어레이 플레이트에 0.25 ug/ml로 RT에서 1시간 동안 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 희석/세척 완충제 중에서 1 ug/ml로 희석된 항체를 RT에서 1시간 동안 인큐베이션시킨 후, 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 항마우스 및 항인간 HRP 접합체를 희석/세척 완충제 중에서 1:5000으로 희석하고, RT에서 30분 동안 인큐베이션시킨 후, 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. TMB 기질을 플레이트 웰에 첨가하고, 50 ul/웰로 15분 동안 인큐베이션시켰다. 450 nm 흡광도에서 플레이트를 판독하기 전에 1 N HCl 정지액을 50 ㎕/웰로 첨가하였다.
ABX0011이 2개의 상이한 표현형의 HLA-E, 즉, HLA-E 01:03 및 HLA-E 01:01에 의해 제시된 고전적 HLA I 신호 펩티드를 인식하였는지 여부를 측정하기 위해, 각 단량체 복합체를 상기 기술된 바와 같이 ELISA에서 사용하였다. 두 HLA-E 대립유전자; HLA-E*0101 및 *0103에서 HLA-G 신호 펩티드에의 결합 사이에는 어떤 차이도 관찰되지 않았다(도 9b).
ABX0011에 대한 친화도 측정: 무표지 기술(Resonant Sensors, Inc., ResoSens 기기)을 사용하여 ABX0011의 결합 친화도를 측정하였다. 해리 평형 상수(KD)는 7.9 nM 또는 R4c1 클론 대비 50배 초과로 개선된 것으로 밝혀졌다(도 1d, 도 9c). 친화도를 측정하는 방법은 하기와 같았다. 결합이 평형에 도달할 때까지 (PBS 완충제 중에 희석된) 써모피셔 캡쳐 셀렉트™ 비오틴(Thermofisher Capture Select™ Biotin) 항IgG-Fc (Hu)를 뉴트라비딘 코팅된 바이오네틱(Bionetic) 무표지 마이크로어레이 플레이트에 5 ㎍/ml로 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 희석/세척 완충제로 3X 세척하였다. ABX0011(희석/세척 완충제 중 5 ㎍/ml)은 결합이 평형에 도달할 때까지 항IgG-Fc에 의해 포획되었다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 3X 세척하였다. V-0025 HLA-E 01:03 단량체 복합체(희석/세척 완충제 중에서 5 ㎍/ml에서 시작하는 연속 희석액)를 웰에 첨가하고, 20분 동안 인큐베이션시켜 결합 회합을 측정한 후 즉시 대략 25분 동안 해리(희석/세척 완충제)로 이어졌다. 결합 친화도는 트레이스드로어(Tracedrawer) 동역학적 분석 소프트웨어를 사용하여 계산하였다.
ELISA에 의해 ABX0011 검출 감도를 관찰할 수 있다. 간략하면, V-0025 HLA-E 01:03 단량체 복합체(0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 완충제 중에서 2 ㎍/ml에서 시작하는 연속 희석액)를 RT에서 1시간 동안 뉴트라비딘 코팅된 마이크로어레이 플레이트 상에 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 항체를 희석/세척 완충제 중에 1 ㎍/ml로 희석시키고, RT에서 1시간 동안 인큐베이션시킨 후, 이어서, 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 항마우스 및 항인간 HRP 접합체를 희석/세척 완충제 중에서 1:5000으로 희석하고, RT에서 30분 동안 인큐베이션시킨 후, 이어서, 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. TMB 기질을 50 ul/웰로 15분 동안 인큐베이션시켰다. 1 N HCl 정지액을 50 ㎕/웰로 첨가하고, 450 nm로 플레이트를 판독한다. 도 9d에서, ABX0011 및 HLA-E는 1 ㎍/mL로 결합하였고, 항원의 V-0025의 적정에 대해 적정하였다. 유사하게, 도 9e에서, V-0025를 0.25 ㎍/mL로 결합시키고, 도 9a에 대해 기술된 바와 같은 유사한 ELISA 프로토콜을 사용하여 ABX0011 및 HLA-E의 적정에 대해 시험하였다. 안정성을 체크하기 위해, ABX0011을 37℃에서 7 내지 14일 동안 그대로 방치한 후, 이어서, 4℃에서 보관된 ABX0011에 대해 체크하였다. ABX0011을 37℃에서 7 내지 14일 동안 인큐베이션된 마우스 혈청 중에서 1 ㎍/ml로 희석시키고(4℃ 대조군은 시험 당시 혈청 중에서 제조하였고), HLA-E 01:03 단량체 복합체가 고정화되어 있는 웰에 첨가하고, 상기 기술된 바와 같이 ELISA를 실행하였다. 도 9f에 제시된 바와 같이, 결합은 변경되지 않았으며, 이는 ABX0011의 안정성이 우수하다는 것을 시사하는 것이다.
특이성을 추가로 특징화하기 위해, HLA-E를 발현하도록 형질감염된 K-562 세포를 먼저 V-0025 펩티드로 펩티드 펄싱한 후, 이어서, HLA-E 및 ABX0011에의 결합에 대해 시험하였다. 도 9g에 제시된 바와 같이, V-0025 펩티드 펄싱된 세포는 펩티드 부재인 것(비펄싱)과 비교하여 HLA-E 발현의 증가에 기초하여 로딩을 보였다. ABX0011은 HLA-E에 로딩된 HLA-G에 대해 특이성을 보여주었으며, 비펄싱 세포에는 결합하지 않았다(도 9g). 이어서, HLA-E를 발현하도록 형질감염된 K562 세포를 고전적 HLA 신호 펩티드, 비고전적 HLA 신호 펩티드, 및 2개의 다른 HLA-E 결합 펩티드, 즉, V-0038 및 P-0550 모두를 이용하여 펄싱하였다. 펩티드 펄싱된 세포 모두 펩티드 부재인 것(비펄싱)과 비교하여 HLA-E 발현의 증가에 기초하여 로딩을 보였다(도 9h). 추가로, (ABX0012로 예시되는) ABX0011은 HLA-E를 발현하는 K562 세포 중의 V-0025 펩티드만을 인식하였다(도 9i). 배경 염색은 대략 500개의 항체 분자/세포였다. ABX0011의 우수한 결합 특이성을 추가로 평가하기 위해, HLA-E를 발현하는 K562 세포를 20 ㎍/ml의 V-0025, V-0034, V-0044, V-0046, P-0550으로 펩티드 펄싱하거나, 또는 비펄싱 상태 그대로 남겨두고, 이어서, 10 내지 <0.001 ㎍/ml 범위의 다양한 농도의 ABX0011로 염색하였다. 추가로, ABX0011은 오직 V-0025 펩티드에 대해서만 특이성을 보였고, 10 ug/ml 농도로 사용되었을 때, 밀접하게 관련된 두 펩티드, V-0044 및 V-0046이 단지 최소로 검출되었다(도 9j).
V-0025(HLA-G 신호 펩티드)에 대한 펩티드 서열에 기초한 알라닌 스캔은 펩티드/HLA-E 복합체에의 ABX0011의 결합이 주로 위치 8 및 위치 9의 펩티드에 의존하며, 덜 의존하기는 하지만, 아미노산 위치 2, 7 및 9에서의 접촉도 중요하다는 것을 나타내었다(도 9k). 전반적으로, 상기 결과는 ABX0011이 비고전적 HLA-G 펩티드 신호 서열에 대해 높은 친화도 및 안정성으로 선택성을 나타낸다는 것을 시사하는 것이다.
실시예 3. ABX0011은 표적 양성 암 세포주에 선택적으로 결합한다
특이성을 확인하기 위해, 다양한 종양 세포주, 인간 말초 혈액 단핵 세포(huPBMC) 및 1차 인간 제대 혈관 내피 세포(huVEC)에서 ABX0011의 결합을 시험하였다. HLA-E는 정상 태반 영양막에서 고도로 발현되는 것으로 알려져 있기 때문에, 융모막 암종 영양막 세포주 JEG-3을 HLA-E 및 ABX0011 모두에 의한 결합에 대한 양성 대조군으로 사용하였다(도 10a). HLA-E/펩티드 복합체에 대한 ABX0011의 제한을 확인하기 위해, HLA-E 결핍 JEG-3(JEG-3 Eko)에서 결합을 시험하였다. 도 10a, 중간 패널에 제시된 바와 같이, HLA-E 및 ABX0011은 JEG-3 Eko 세포에 결합할 수 없었다. HLA-G 신호 펩티드가 Tap1/2 발현에 의존하는지 확인하기 위해, ABX0011을 사용하여 Tap-1 녹 아웃 JEG-3 세포(JEG-3 Tap-1ko)를 염색하였다. 도 10a, 하단 패널에 제시된 바와 같이, Tap-1 부재하에 여전히 일부 HLA-E의 발현이 존재하지만, ABX0011은 결합을 나타내지 않으며, 이는 오직 통상적인 경로를 통해 프로세싱되는 HLA-G 신호 펩티드만을 인식한다는 것을 시사하는 것이다. huPBMC 및 huVEC 세포를 이용하였을 때 특이성은 유사하게 나타났다. 인간 PBMC, 특히, B 세포 및 NK 세포는 HLA-E를 높은 수준으로 발현한다(도 10b). 그에 반해, 건강한 huPBMC는 HLA-G를 발현하지 않고, 따라서, huPBMC는 ABX0011과의 결합을 보이지 않는다(도 10b). 추가로, O/N IFN-g 처리 후 huVEC는 HLA-E를 높은 수준으로 발현한다. 그러나, (ABX0010으로 예시된) ABX0011은 IFN-g 처리 부재 또는 존재하에서 huVEC에 결합하지 않는다(도 10c).
HLA-E는 여러 유형의 암에서 증가되어 있는 것으로 공지되어 있다. 따라서, 여러 암 세포주를 HLA-E 발현 및 ABX0011 결합에 대해 분석하였다. HLA-E는 세포가 스트레스를 받거나, 자극을 받을 때, 상향조절되기 때문에, 비자극 세포 및 IFNγ 자극받은 세포, 둘 모두에서 결합을 관찰하였다. 도 11a는 HLA-E 및 HLA-G를 발현하고, 자극 부재하에 ABX0011에 결합하는 두 세포주(THP-1 및 OCI-AML3), 및 HLA-E를 발현하고, HLA-G는 발현하지 않고, ABX0011에 결합하지 않는 한 세포주(KG-1)를 도시한 것이다. 추가로, 다양한 농도(10 내지 <0.001 ㎍/ml)를 사용하였을 때 (ABX-0012에 의해 예시되는) ABX0011과의 AML 세포주에의 결합을 통해 ABX0011에 대한 우수한 선택성이 밝혀졌다(도 11b). 본 결과는 ABX0011이 AML 암 뿐만 아니라, HLA-E 및 HLA-G, 둘 모두를 발현하는 다른 암을 표적하는 데 사용될 수 있다는 것을 시사하는 것이다. HLA-E를 발현하는 K562 세포, 및 돌연변이화된 JEG3 세포는 (Thorbald van Hall; 라이덴 대학 의료 센터)로부터 획득하였다. 일부 경우에서, 세포는 HLA-E 발현을 유도하기 위해 밤새도록 IFNγ(10 ng/ml) 자극을 필요로 하였다.
모든 세포 결합 연구를 위해(마우스 IgG1을 갖는 ABX0011인 ABX0012 제외), 세포를 실온에서 5-10 min 동안 항인간 CD16(클론 KD1), 항인간 CD32(클론 AT10), 및 항인간 CD64(클론 10.1)(Bio-Rad)로 또는 휴먼 스투스테인 FcX(Human TruStain FcX)(BioLegend)로 차단한 후, 100 ㎕에서 4℃에서 30 min 동안 1 ㎍/mL의 ABX0011 또는 hIgG1(클론 QA16A12, BioLegend)로, 또는 AF647 표지된 ABX0011 또는 hIgG1로, 및 PE 또는 PE-Cy7 중의 HLA-E(클론 3D12, BioLegend)로 표면 염색하였다. 이어서, 세포를 염색 완충제(2 mM EDTA를 포함하는 PBS)로 세척한 후, 이어서, 염소-항인간/AF647(Jackson ImmunoResearch) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(zombie/aqua viability stain)(BioLegend)를 포함하는 2차 염색 칵테일로 세척하였다. 세포를 100 ㎕에서 4℃에서 30 min 동안 인큐베이션시켰다. 세포를 염색 완충제로 2회 세척하고, 플루오로픽스(BioLegend)를 사용하여 고정시켰다. LSR II 유세포 분석기(BD Biosciences) 또는 CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 이용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
실시예 4. ABX0011은 표적 세포의 NK 매개 항체 의존성 세포 세포독성( ADCC : antibody-dependent cellular cytotoxicity )을 유도한다
이들 연구의 주요 목적은 ABX0011의 능력을 측정하고, 표적 세포의 NK 세포 매개 ADCC를 유도하는 것이었다. ADCC를 유도하는 ABX0011의 능력을 시험하기 위해, 1차 인간 NK 세포를 ABX0011의 존재하에 다양한 종양 표적 세포와 함께 공동 배양하였다. 건강한 지원자들의 혈액을 카터 블러드케어(Carter BloodCare)로부터 획득하였다. PBMC는 피콜-플라크 플러스(Ficoll-Paque PLUS)(GE Healthcare) 또는 림포그렙(Lymphoprep)(StemCell Technologies)를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단리시켰다. 이지셉(EasySep) 인간 NK 세포 농축 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 자연 살해(NK: Natural Killer) 세포를 정제하였다.
도 12a에 제시된 바와 같이, 펩티드 펄싱된 K562.E 세포와 함께 NK 세포를 4시간 동안 공동 배양한 후, ABX0011은 이소타입 대조군과 비교하여 용량에 의존하는 방식으로 K562.E 세포의 사멸을 유의적으로 증가시켰고(도 12a), CD107a 발현 발현을 상향조절할 수 있었고(도 12b), 더욱 구체적으로, NKG2A+ NK 세포 상의 CD107a 발현 증가를 유도할 수 있었다(도 12c). THP-1 세포를 사용하였을 때에도 유사한 결과가 관찰되었다(도 12d). 본 결과는 ABX0011이 NK 세포 ADCC 활성을 유도함으로써 종양 세포독성을 촉진시키는 데 사용될 수 있다는 것을 시사하는 것이다.
실시예 5. T 세포를 재표적화하여 종양 표적 세포를 용해시킬 수 있는 이중특이적 항체 생성
CD3+ T 세포를 활성화시켜 종양 세포를 사멸시킬 수 있는 이중특이적 항체로서 ABX0030을 구성하였다. 비글리코실화된(N297D 돌연변이) 인간 IgG1 스캐폴드에서 클론 SP34(마우스 항인간 CD3e)의 단일 쇄(scFv)에 커플링된 ABX0011(Fab)을 함유하는 Fab-Fc-scFv 구성물로서 ABX0030을 제조하였다. 20개의 아미노산 링커(GKPGSGKPGSGKPGSGKPGS(서열 번호 24))를 사용하여 ABX0011 Fab와 SP34 scFv를 공유적으로 연결시켰다. 일시적으로 형질감염된 CHO 세포에서 ABX0030을 생성하고, 단백질-A 친화도 칼럼에서 정제하였다. ABX0030을 환원성 SDS-PAGE 겔에서 전개시켰고, 예상되는 MW에서 예측되는 두 밴드를 나타내었다(ABX0011 경쇄의 경우, 25 kD, 경쇄가 없는 ABX0030의 경우, ~55 kD)(도 13a). ABX0030 중 91% 초과는 분석 SEC-HPLC 칼럼에서 단일 피크로 이동한다(도 13b)
무표지 검정법(ResoSens 기기, Resonant Sensors, Inc)을 이용하여 ABX0030의 결합 친화도를 측정하였다. 간략하면, 결합이 평형에 도달할 때까지, V-0025 HLA-E 01:03 단량체 복합체(0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 완충제 중 희석)를 뉴트라비딘 코팅된 바이오네틱 무표지 마이크로어레이 플레이트에 5 ㎍/ml로 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 3X 세척하였다. ABX0030(희석/세척 완충제 중에서 10 ㎍/ml에서 시작하는 연속 희석액) 결합 회합을 대략 20분 동안 평가한 후 즉시 대략 15분 동안 해리(희석/세척 완충제)로 이어졌다. 트레이스드로어 동역학적 분석 소프트웨어를 사용하여 결합 친화도를 계산하였다. 관찰결과, 해리 평형 상수는 8.97 nM인 것으로 나타났다(도 14).
ABX0030의 결합 특성: 표적 종양 세포에의 ABX0030 결합을 먼저 확인하였다. 도 15에 제시된 바와 같이, ABX0030은 모체 클론(ABX0011)과 유사하게 HLA-E를 발현하는 V-0025 펩티드 펄싱된 K562 세포에 결합한다. HLA-E 음성 모체 K562 세포는 ABX0030에의 결합을 보이지 않기 때문에 상기 결합은 HLA-E 제한적인 것이다(도 15). 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)에서 T 세포에의 결합을 사용하여 항CD3 아암을 확인하였다(도 16). K562 세포주를 ATCC로부터 획득하였다. HLA-E를 발현하는 K562 세포인 세포는 (Dr. Thorbald van Hall)(라이덴 대학 의료 센터: 네덜란드 소재))로부터 획득하였다. 공급업체의 권고사항에 따라 세포를 배양하였다. 세포 결합에 대해, 세포를 항인간 CD16(클론 KD1), 항인간 CD32(클론 AT10), 및 항인간 CD64(클론 10.1)(Bio-Rad)로, 또는 휴먼 스투스테인 FcX(BioLegend)로 실온에서 5-10 min 동안 차단한 후, 1 ㎍/mL 비표지 항체로 또는 AF647 표지된 항체로, 및 HLA-E/PE-Cy7(클론 3D12, BioLegend)로 4℃에서 30 min 동안 50-100 ㎕에서 표면 염색하였다. 이어서, 세포를 염색 완충제(2 mM EDTA를 포함하는 PBS)로 세척한 후, 염소-항인간 또는 염소-항마우스/AF647(비표지 항체를 사용하는 경우, Jackson ImmunoResearch) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(BioLegend)를 포함하는 2차 염색 칵테일로 세척하였다. 세포를 4℃에서 30 min 동안 50 ㎕에서 인큐베이션시켰다. 세포를 염색 완충제로 2회 세척하고, 플로우로픽스(BioLegend)를 사용하여 고정시켰다. CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 이용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
ABX0030은 1차 CTL의 표적 특이적 세포 독성을 증진시킨다: ABX0030의 활성을 평가하기 위해, 1차 인간 CTL을 K562(HLA-E 양성) 또는 V-0025 펩티드로 펄싱된 K562.E와 함께 공동 배양하고, ABX0030을 적정하면서 시험하였다. 도 17a에 제시된 바와 같이, ABX0030은 표적 특이적 방식으로 용량 의존성 세포독성을 유도하였고; 비펄싱 K562.E 세포는 어떤 영향도 받지 않았다. 추가로, ABX0030은 표적 음성 K562.E 세포와 함께 배양된 CD8+ T 세포에서 CD25(48 hr)(도 17b) 및 IFNγ(48 hr)(도 17c)의 발현을 유도하지 않는다.
이러한 결과는 THP-1 세포를 사용하여 확인되었다(도 11a에 제시된 ABX0011 결합 데이터). 48 hr 공동 배양 후, ABX030은 용량에 의존하는 방식으로 세포독성을 유도하였다(도 18a). ABX0030은 또한 CD25, CD107a, 퍼포린 및 IFNγ의 용량 의존적 유도에 의해 나타난 바와 같이 CD8+ T 세포 활성화도 유도할 수 있었다(도 18b-도 18e). 상기 결과는 ABX0030이 표적 특이적 방식으로 CD8+ T 세포에 의해 종양 세포의 용해를 증진시킬 수 있다는 것을 시사하는 것이다.
시험관내 T 세포 활성화 검정을 수행하기 위해, 건강한 지원자들의 혈액을 카터 블러드케어(미국 텍사스주 알링턴 소재)로부터 획득하였다. PBMC는 피콜-플라크 플러스(GE Healthcare) 또는 림포그렙(StemCell Technologies)를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단리시켰다. 이지셉 인간 CD8+ T 세포 농축 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 CD8+ T 세포를 정제하였다. 농축된 인간 CD8+ T 세포(CTL)를 1x106/ml로 밤새도록 휴지시켰다. 표적 세포를 CFSE(Themofisher)로 표지하고, 10:1(E:T)의 비로 휴지된 CTL에 첨가하였다. CD3/CD28 자극(ImmunoCult 인간 CD3/CD28 T 세포 활성화제, StemCell Technologies)을 양성 대조군으로 사용하였다. 배양 마지막 4 hr 동안, 모넨신 및 항인간 CD107a/BV421(BioLegend)을 모든 웰에 첨가하였다. 세포를 24 내지 48 hr 후에 수확하였다. 세포를 항인간 CD8/APC(BioLegend), 항인간 CD25/PE-Cy7(Tonbo) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(BioLegend)로 염색하였다. 세포내 염색을 위해, BD 사이토픽스/사이토펌(BD cytofix/cytoperm) 용액(BD)을 사용하여 세포를 고정시키고, 투과시키고, 항인간 퍼포린/PERCP-CY5.5(BioLEgend) 및 항인간 IFNγ/PE-데이즐(PE-Dazzle) 594(Biolegend)로 염색하였다. CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 사용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
Figure pct00006
실시예 6 ABX0016은 말초에서 면역 세포에 결합하지 않는다
ABX0016의 면역 세포에의 결합을 시험하기 위해, 면역 세포를 하기 기술되는 바와 같이 정제, 배양, 염색하고, 유세포 분석법에 의해 평가하였다.
인간 1차 세포
시험관내 T 세포 활성화 검정을 수행하기 위해, 건강한 지원자들의 혈액을 카터 블러드케어로부터 획득하였다. PBMC는 피콜-플라크 플러스(GE Healthcare) 또는 림포그렙(StemCell Technologies)를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단리시켰다. 이지셉 인간 T 세포 단리 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 전체 T 세포를 정제하였다. 자연 살해(NK) 세포는 이지셉 인간 NK 세포 농축 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 정제하였다. 이지셉 직접 인간 호중구 단리 키트(StemCell Technologies)를 사용하여 호중구를 정제하였다. 이지셉 직접 인간 호산구 단리 키트(StemCell Technologies)를 사용하여 호산구를 정제하였다. 수지상 세포(DC: dendritic cell)를 이지셉 인간 범 DC 사전 농축 키트(StemCell Technologies)를 사용하여 정제하였다. 단핵구(MO)를 CD16 고갈 없이 이지셉 인간 단핵구 단리 키트 또는 이지셉 인간 단핵구 농축 키트(둘 모두 StemCell Technologies)를 이용하여 정제하였다. 혈소판은 농도 구배 분리 후 PBMC를 세척한 후에 상청액을 수집함으로써 PBMC 프로세싱 동안 농축시켰다. 제대혈 및 건강한 골수를 스템익스프레스(StemExpress)로부터 획득하였다. 제대혈 PBMC는 피콜-플라크 플러스(Ficoll-Paque PLUS)(GE Healthcare) 또는 림포그렙(Lymphoprep)(StemCell Technologies)를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단리시켰다. AML 환자 PBMC를 수집하고, 챔피언스 온콜로지(Champions Oncology)에 의해 염색하였고, 유세포 분석법에 의한 분석은 사내에서 수행하였다.
IFNγ로 밤새도록 자극시킬 때, 1% 페니실린-스트렙토마이신, HEPES 완충제, 2 mM L-글루타민, 1% 비필수 아미노산, 피루브산나트륨 및 10% 우태아 혈청(Millipore Sigma)으로 보충된 RPMI-640 배지(ATCC) 중에서 PBMC를 1x106 세포/mL로 배양하였다. IFNγ를 10 ㎍/mL로 제공하고, IFNγ 부재하의 PBMC에 대해 비교하였다.
세포주
HT-1376, SKBR3, SU.86.86, RPMI-8226, THP-1, OVCAR3, LNCaP, NCI-H1355, COLO205, PANC-1, HCT-116, A549, 및 JEG-3 세포를 ATCC로부터 획득하였다. NCC-STC-K140 및 RCC-10RGB 세포를 세키스이 제노테크(Sekisui XenoTech)로부터 획득하였다. SNU-899 세포를 한국 세포주 은행(Korean cell line bank)으로부터 획득하였다. OCI-AML3 세포를 DSMZ로부터 획득하였다. JEG-3 HLA-EKO 및 Tap1KO 세포 및 OCI-AML3 HLA-EKO는 MTA하에 (Professor Throbald van Hall)로부터 획득하였다. 일부 세포는 HLA-E 발현 유도를 위해서는 밤새도록 IFNγ 자극을 필요로 하였다.
대식세포 분화
5 ㎍/mL M-CSF로 보충된 이뮤노컬트-SF 대식세포 배지(StemCell Technologies) 중에서 단핵구를 배양함으로써 대식세포를 생성하였다. 추가 배지를 4일째 첨가하였다. M0 대식세포는 6일째 M1 활성화를 위해 LPS(10 ng/mL) 및 IFNγ (50 ng/mL)를 사용하거나, 또는 M2a 활성화를 위해 IL-4(10 ng/mL)를 사용하여 활성화시켰다. 활성화 2일 후에 M1 및 M2a 대식세포를 수확하였다. 해리를 위해, M1 대식세포 경우에는 아큐타제를, M2a 대식세포 경우에는 2.5 mM EDTA를 사용하였다.
유세포 분석법
사이트클릭 항체 아지도 변형 키트(SiteClick Antibody Azido Modification kit) 및 클릭-iT AF647 sDIBO 알킨 항체 표지 키트(Click-iT AF647 sDIBO alkyne antibody labeling kit)(Thermo Fisher Scientific)를 이용하여 알렉사플루오르(AlexaFluor) 647(AF647)로 ABX0012, mIgG1 및 MEM-E/02를 표지하였다.
비표지 항체를 이용한 세포 결합의 경우, 세포를 4℃에서 30 min 동안 100 ㎕에서 1 내지 5 ㎍/mL의 ABX0012, ABX0011, 마우스 이소타입 IgG1(MOPC-21, BioLegend), 인간 이소타입 IgG1(QA16A12, BioLegend), 3D12(BioLegend), 또는 MEM-E/02(BioRad)로 염색하였다. 이어서, 세포를 염색 완충제(2 mM EDTA를 포함하는 PBS)로 세척한 후, 이어서, 염소-항인간/AF647(Jackson ImmunoResearch) 또는 염소-항마우스/AF647(Thermo Fisher Scientific) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(BioLegend)를 포함하는 2차 염색 칵테일로 세척하였다. 세포를 4℃에서 30 min 동안 100 ㎕에서 인큐베이션시켰다. 세포를 염색 완충제로 2회 세척하고, 100 ㎕ 염색 완충제 중에서 획득하였다. 표지된 항체를 이용한 세포 결합의 경우, 세포를 4℃에서 30 min 동안 100 ㎕에서 항체 염색 칵테일과 함께 인큐베이션시킨 후, 이어서, 염색 완충제로 2회 세척하고, 100 ㎕ 염색 완충제 중에서 획득하였다. 세포를 염색과 같은 날에 획득할 수 없다면, 100 ㎕ 플로우로픽스 완충제(BioLegend)를 이용하여 세포를 고정시켰다. CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 이용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
항HLA-E(3D12)/PE-Cy7, 항CD3(HIT3a)/APC-Cy7, 항CD3(SK7)/APC-Cy7, 항CD4(RPA-T4)/PerCP-Cy5.5, 항CD8(RPT-T8)/BV605, 항CD14(M5E2)/FITC, 항CD16(3G8)/PacificBlue, 항CD19(HIB19)/FITC, 항CD20(2H7)/BV421, 항CD33(WM53)/BV650, 항CD34(561)/AF700, 항CD45(HI30)/FITC, 항CD56 (5.1H11)/AF700, 항Lineage 칵테일/FITC 및 항Siglec-8(7C9)/PE를 바이오레전드(BioLegend)로부터 구입하였다. 항CD56(B159)/PE-CF594를 BD 바이오사이언스(BD BioScience)로부터 구입하였다. 항CD3(HIT3a)/FITC 및 항CD4(OKT4)/PE를 톤보 바이오사이언시스(Tonbo Biosciences)로부터 구입하였다. 항HLA-G(MEM-G/09)/PE를 써모 피셔 사이언티픽(Thermo Fisher Scientific)으로부터 구입하였다.
면역 세포는 HLA-E를 발현하는 것으로 알려져 있기 때문에, ABX0012에의 결합에 대해 시험하였다. 모든 면역 세포 서브세트는 HLA-E를 발현하는 반면, 어느 것도 HLA-G 발현 또는 ABX0012에 의한 결합을 보이지 않았다(도 9). 세포가 스트레스를 받거나, 자극을 받았을 때, HLA-E가 상향조절될 수 있기 때문에, IFNγ 자극하에 및 그의 부재하에 PBMC에서 ABX0012 결합을 시험하였다. HLA-E 클론 3D12는 자극하에 결합이 약간 증가한 반면, 펩티드 또는 B2M 부재하에 HLA-E를 인식하는 HLA-E 클론 MEM-E/02만이 상향조절되었고; ABX0012 결합에는 변화가 없었다(도 20). 본 데이터는 ABX0012가 면역 세포에 대해 표적에서 벗어난 활성이 거의 없어야 한다는 것을 시사한다.
실시예 7 ABX0012 결합은 HLA -E 및 고전적 HLA -G 발현을 필요로 한다
ABX0012에 결합하는 종양 세포주를 확인하기 위해, 다양한 세포주를 그의HLA-E 및 HLA-G 발현에 대해 분석하였다. 여러 세포를 확인하였고(도 21), ABX0012 결합은 IFNγ 자극하에 증가하였다(도 22). HLA-E는 발현하지 않고, HLA-G를 발현하는 세포주(도 23)에서 및 HLA-G는 발현하지 않고, HLA-E를 발현하는 세포주(도 24a)에서 시험함으로써 HLA-E 선택성을 확인하였다. 세포를 IFNγ로 자극시킴으로써 그의 선택성은 변경되지 않았다(도 24b). 상기 FACS 데이터는 HLA-E가 결여된 세포는 ABX0011/12로 염색되지 않는다는 점을 강조하기 위해 사용된다는 점은 주목할 가치가 있다. 이 데이터는 해당 암 유형의 모든 종양 세포를 대표하지 않는다. 이들은 ABX0012의 선택성을 강조하기 위해서만 제시된다. ABX0012의 HLA-E 복합체에의 추가 선택성은 동질유전자 세포주를 시험함으로써 확인하였다. 도 25a, 중간 패널에 제시된 바와 같이, HLA-E 및 ABX0012는 JEG-3 Eko 세포에 결합할 수 없었다. ABX0012는 오직 TAP 발현이 필요한 HLA-G 펩티드/HLA-E 복합체만을 인식하는지 확인하기 위해, Tap-1 녹 아웃 JEG-3 세포(JEG-3 Tap-1ko)에서 결합을 시험하였다. 도 25a, 우측 패널에 제시된 바와 같이, Tap-1 부재하에 여전히 일부 HLA-E의 발현이 존재하지만, ABX0012는 결합을 나타내지 않으며, 이는 오직 고전적 경로를 통해 프로세싱되는 펩티드(HLA-G)만을 인식한다는 것을 시사하는 것이다. HLA-E 결핍 OCI-AML3 사용하였을 때에도 유사한 결과가 관찰되었다(도 25b).
실시예 8 ABX0012는 혈액 중 급성 골수성 백혈병( AML ) 골수성 아세포에 결합한다
ABX0012의 AML 세포주, THP-1 및 OCI-AML3에의 결합에 기초하여, AML 환자 PBMC를 ABX012 결합에 대해 시험하였다. 도 26에 제시된 바와 같이, AML PBMC는 건강한 PBMC와 비교하여 유의적으로 더 큰 비율로 ABX0012 양성 세포를 가졌다. 조혈 줄기 세포 및 전구 세포 집단이 ABX0012로 염색되지 않았다는 것을 확인하기 위해, 건강한 골수 및 제대혈을 시험하였다. 건강한 골수 및 제대혈은 건강한 PBMC와 유사한 수준의 ABX0012를 나타냈다(도 26). 건강한 골수 및 제대혈에서 ABX0012의 수준은 AML PBMC보다 유의적으로 더 낮지는 않았지만, 이는 기증자 수가 적기 때문이다. 상기 데이터는 AML이 ABX0012 요법의 적응증이 될 수 있다는 것을 시사한다.
실시예 9 냉동 세포 블록을 이용한 염색 프로토콜 검증
조직 샘플의 면역조직화학법(IHC) 염색을 분석하기 위해, 냉동 세포 블록에 대해 IHC 염색을 시험하였다. 인간 냉동 조직(종양 및 정상 인접 조직(NAT))의 블록을 프로테오지넥스(ProteoGenex: 미국 캘리포니아주 잉글우드 소재)에서 구입하고, OCT 화합물에 포매시켰다. 마이크로톰-크라이오스탯을 이용하여 샘플을 절단하고, 슬라이드에 장착하였다. 면역조직화학법(IHC) 염색은 노보비타 히스토패쓰 라보라토리, LLC(NovoVita Histopath Laboratory, LLC: 미국 메사추세츠주 케임브리지 소재)에서 수행하였다. 간략하면, 냉동 조직 슬라이드를 20분 동안 대기 건조시킨 후, 벤타나 XT 디스커버리 울트라-기기(Ventana XT discovery ultra-instrument)(Ventana Medical Systems: 미국 애리조나주 투손 소재)에 습식 로딩하였다. 이어서, 슬라이드를 1x 벤타나 반응 완충제(카탈로그 번호 950-300)로 세정한 후, 퍼옥시다제 억제제 CM(Ventana)으로 12 min 동안 처리하여 내인성 퍼옥시다제를 차단하였다. 1x 벤타나 반응 완충제로 세정한 후, 슬라이드를 37℃로 가온시키고, 2.25 ug/ml의 1차 항체(항-HLA-E(MEM-E/02, AbCam), 마우스 IgG1 이소타입 대조군, 또는 ABX-0012)와 함께 60 min 동안 인큐베이션시켰다. 슬라이드를 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하고, 파인픽스(FineFix) 작업 용액(Milestone: 미시간주 칼라마주 소재, #70147WG)과 함께 4 min 동안 인큐베이션시키고(고정 후 단계), 3x 세정하였다. 디스커버리(Discovery) 항마우스 HQ(Ventana, 카탈로그 번호 760-4814)를 24 min 동안 슬라이드에 적용하고, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하였다. DISC 항HQ HRP 한방울(Ventana, 카탈로그 번호 760-4820)을 슬라이드에 적용하고, 24 min 동안 인큐베이션시키고, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하였다. 이어서, 디스커버리 크로모맵 DAB(Discovery ChromoMap DAB) 키트 한 방울(Ventana, 카탈로그 번호 760-159) 및 CM H2O2 한 방울(Ventana)을 슬라이드에 적용하고, 8 min 동안 인큐베이션시킨 후, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하였다. 이어서, 구리 CM 한 방울(Ventana)을 슬라이드에 적용하고, 4 min 동안 인큐베이션시킨 후, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정한 후, 헤마톡실린 한 방울(대조염색)을 12 min 동안 슬라이드에 적용하였다. 벤타나 반응 완충제로 세정(2x)한 후, 블루잉 리에이전트(Bluing Reagent) 한 방울(대조염색 후)을 적용하고, 8 min 후, 슬라이드를 벤타나 반응 완충제로 2x 세정하였다. 이어서, 슬라이드를 벤타나 XT로부터 제거하고, 식기 세척 세제로 세척하고, 탈수를 위해 알콜 및 크실렌으로 처리하였다. 커버슬립을 슬라이드에 가하고, 디스커버리 울트라 기기 상에서 슬라이드를 판독하였다.
K562 세포, 또는 2 hr 동안 20 ug/ml의 V-0025(VMAPRTLFL) 펩티드(서열 번호 18)로 펄싱된 HLA-E(K562.E)로 형질감염된 K562 세포의 세포 블록을 ABX0012(마우스 IgG1로 치환된 ABX0011)를 1.95 ug/ml로 사용하고, 항HLA-E(MEM-E/02) 항체 및 마우스 IgG1 이소타입 대조군 항체를 2.25 ug/ml로 사용하여 염색하였다(도 27). 이미지는 ABX0012가 K562 세포(-)가 아닌 K562.E + V-0025 펩티드 펄싱된 세포에 대해 강하게(3개 중 3+++) 염색한다는 것을 보여준다. 상기 데이터는 ABX0012가 HLA-E/V-0025를 제시하는 세포에 선택적으로 결합한다는 것을 보여주고, 이는 면역조직화학법(IHC) 염색 프로토콜을 검증한다.
실시예 10 양성 대조군 조직 염색
ABX0012에 대한 양성 대조군으로서 신선한 냉동 인간 태반 조직을 사용하였다. 영양막 세포는 HLA-E 및 HLA-G를 발현하는 것으로 널리 공지되어 있고, 따라서, ABX0012에 의한 염색이 태반 조직에서 예상되었다. 도 28에서, ABX0012은 태반 조직에서 영양막 세포의 강한(2++ 내지 3+++) 염색을 나타내고, HLA-E + 정규 리더 서열 펩티드가 영양막 세포의 표면 상에 존재한다는 것을 입증한다.
실시예 11 ABX0012는 두부경부 종양 조직을 염색한다
도 29는 두부경부 환자로부터 수집된 냉동 종양 조직을 염색한 ABX0012의 대표적인 이미지이다. 도 29a 좌측 패널은 항-HLA-E 항체(클론 MEM-E/02)로의 강한 종양 세포 염색을 보여준다. 동일한 패널은 MEM-E/02 항체로의 간질 영역의 염색을 보여준다. 우측 패널은 종양 조직의 ABX0012 항체 염색을 보여준다. 종양 간질은 강한 염색(3+++)을 보이는 반면, 종양 세포는 약한 정도 내지 중간 정도의 염색을 보인다. 이미지는 표적, HLA-E + 리더 서열 비고전적 HLA-G(VMAPRTLFL (서열 번호 18))가 부경부암 환자의 종양 조직에 존재한다는 것을 나타낸다. 도 29b는 MEM-E/02(좌측) 및 ABX0012(우측)로 염색된 정상 인접 조직(NAT)의 이미지를 보여준다. NAT 상피는 HLA-E 발현에 대해 양성이지만(좌측 패널), ABX0012 염색의 부재는 NAT 상피에 HLA-E/VMAPRTLFL 펩티드(서열 번호 18) 복합체가 없다는 것을 나타낸다(우측 패널).
실시예 12 ABX0012는 결장 선암종 종양 조직을 염색한다
결장 선암종 종양 조직에서 ABX0012 표적 결합 선택성을 평가하기 위해, 조직을 하기 기술되는 바와 같이 염색하고, 분석하였다. 항HLA-E(좌측; 10x 확대) 또는 ABX-0012(우측; 10x 확대)으로 염색된 신선한 냉동 인간 결장 선암종 조직을 보여주는 대표적인 이미지. 도 30은 종양 및 간질 영역 둘 모두에서의 HLA-E 발현(상단(1.4x 확대 & 하단 14.4x,좌측) 및 종양(2++) 및 간질(3++) 영역 둘 모두에서 ABX0012에 의해 검출가능한HLA-E/VMAPRTLFL 펩티드(서열 번호 18) 복합체(상단 1.4x 확대 및 하단 14.4x, 우측)를 나타낸다.
실시예 13 ABX0012는 폐 편평 암종 조직을 염색한다
대표적인 이미지는 항HLA-E(좌측, 상단 10x 확대) 또는 ABX0012(우측; 10x 확대)으로 염색된 신선한 냉동 폐 편평 암종 조직을 보여준다. 도 31a는 항HLA-E 항체(2++) 또는 ABX0012(1+ 내지 2++)으로의 종양 및 간질 염색을 보여주는 것으로, 이는 폐암 중의 HLA-E 및 HLA-E/VMAPRTLFL 펩티드(서열 번호 18) 복합체 발현을 나타내는 것이다. 도 31b는 ABX0012가 정상 인접 폐 조직을 염색하지 않는다는 것을 보여주며, 이는 VMAPRTLFL 펩티드(서열 번호 18)가 로딩된 HLA-E가 정상 폐 조직에는 존재하지 않다는 것을 시사하는 것이다.
본 발명의 바람직한 실시양태가 본원에 도시되고, 기술되었지만, 상기 실시양태는 단지 예로서 제공된다는 것이 당업자에게 자명할 것이다. 이제 당업자는 본 발명으로부터 벗어남 없이 다수의 변형, 변경, 및 치환을 착안해 낼 수 있을 것이다. 본원에 기술된 실시양태에 대한 다양한 대안이 사용될 수 있다는 것을 이해하여야 한다. 하기 청구범위는 본 발명의 범주를 정의하고, 이들 청구범위의 범주 내에 있는 방법 및 구조 및 그의 등가물은 그에 의해 포함되는 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> BOEHRINGER INGELHEIM PHARMACEUTICALS, INC. <120> ANTIBODIES TARGETING A COMPLEX COMPRISING NON-CLASSICAL HLA-I AND NEOANTIGEN AND THEIR METHODS OF USE <130> ABX-006WO <140> PCT/US2021/035291 <141> 2021-06-01 <150> 17/199,258 <151> 2021-03-11 <150> 63/032,886 <151> 2020-06-01 <160> 38 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 1 Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 1 5 <210> 2 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 2 Ala Ala Ser 1 <210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 3 Gln Gln Ala Ala Ala Tyr Pro Ser Leu 1 5 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 4 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala 1 5 <210> 5 <211> 8 <212> PRT 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Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr 370 375 380 Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser Tyr Phe Val Tyr 385 390 395 400 Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe 405 410 415 Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys 420 425 430 Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys 435 440 <210> 24 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 24 Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly 1 5 10 15 Lys Pro Gly Ser 20 <210> 25 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 25 Val Met Ala Pro Arg Thr Leu Ile Leu 1 5 <210> 26 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 26 Val Met Ala Pro Arg Thr Leu Val Leu 1 5 <210> 27 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of 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Claims (302)

  1. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  2. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  3. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  4. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  5. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  9. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  10. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  15. 제14항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  18. 제17항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  24. 제23항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  25. 제23항 또는 제24항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  26. 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  30. 제29항에 있어서, 면역 반응이 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  31. 제30항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  32. 제30항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  33. 제29항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  34. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  35. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  36. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  37. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  38. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  39. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  40. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  41. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  42. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  43. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  44. 제34항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  45. 제34항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  46. 제34항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  47. 제34항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  48. 제47항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  49. 제34항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  50. 제34항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  51. 제50항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  52. 제34항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  53. 제34항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  54. 제34항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  55. 제34항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  56. 제34항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  57. 제56항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  58. 제56항 또는 제57항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  59. 제56항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  60. 제34항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  61. 제34항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  62. 제34항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  63. 제62항에 있어서, 면역 반응이 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  64. 제63항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  65. 제62항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  66. 제62항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  67. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  68. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  69. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  70. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  71. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  72. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  73. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  74. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  75. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  76. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  77. 제67항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  78. 제67항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  79. 제67항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  80. 제67항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  81. 제67항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  82. 제67항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  83. 제82항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  84. 제67항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  85. 제67항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  86. 제85항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  87. 제67항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  88. 제67항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  89. 제67항 내지 제88항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  90. 제67항 내지 제89항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  91. 제67항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  92. 제91항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  93. 제91항 또는 제92항에 있어서, BiTE가 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  94. 제91항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  95. 제91항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  96. 제91항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  97. 제67항 내지 제96항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  98. 제67항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  99. 제67항 내지 제98항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  100. 제99항에 있어서, 면역 반응이 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  101. 제100항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  102. 제99항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  103. 제99항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  104. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  105. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  106. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  107. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  108. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  109. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  110. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  111. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  112. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  113. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  114. 제104항 내지 제113항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  115. 제104항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  116. 제104항 내지 제115항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  117. 제104항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  118. 제104항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  119. 제104항 내지 제118항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  120. 제119항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  121. 제104항 내지 제120항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  122. 제104항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  123. 제122항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  124. 제104항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  125. 제104항 내지 제124항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  126. 제104항 내지 제125항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  127. 제104항 내지 제126항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  128. 제104항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  129. 제128항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  130. 제128항 또는 제129항에 있어서, BiTE가 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  131. 제128항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  132. 제128항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  133. 제128항 내지 제132항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  134. 제104항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  135. 제104항 내지 제134항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  136. 제104항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  137. 제136항에 있어서, 면역 반응이 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  138. 제137항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  139. 제136항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  140. 제136항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  141. (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  142. 제141항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  143. (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  144. 제143항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  145. 제141항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체가 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 이중특이적 항체.
  146. 제141항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체가 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 이중특이적 항체.
  147. 제141항 내지 제146항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체가 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 이중특이적 항체.
  148. 제141항 내지 제147항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 이중특이적 항체.
  149. 제148항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 이중특이적 항체.
  150. 제141항 내지 제149항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 이중특이적 항체.
  151. 제141항 내지 제150항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 이중특이적 항체.
  152. 제151항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 이중특이적 항체.
  153. 제141항 내지 제152항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 이중특이적 항체.
  154. 제141항 내지 제153항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 이중특이적 항체.
  155. 제154항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 이중특이적 항체.
  156. 제141항 내지 제155항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 이중특이적 항체.
  157. 제141항 내지 제156항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  158. 제141항 내지 제157항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 이중특이적 항체.
  159. 제158항에 있어서, 면역 반응이 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  160. 제159항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 이중특이적 항체.
  161. 제158항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  162. 제158항에 있어서, 세포가 암 세포인 이중특이적 항체.
  163. (a) 제1항 내지 제140항 중 어느 한 항에 따른 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편, 또는 제141항 내지 제162항 중 어느 한 항에 따른 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편; 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
  164. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  165. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  166. 제164항 또는 제165항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  167. 제164항 내지 제166항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  168. 제164항 내지 제167항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  169. 제164항 내지 제168항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  170. 제164항 내지 제169항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  171. 제164항 내지 제170항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 방법.
  172. 제164항 내지 제171항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 방법.
  173. 제164항 내지 제172항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  174. 제164항 내지 제173항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 방법.
  175. 제164항 내지 제174항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 방법.
  176. 제164항 내지 제175항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  177. 제176항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  178. 제164항 내지 제177항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 방법.
  179. 제164항 내지 제178항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 방법.
  180. 제179항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  181. 제164항 내지 제180항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 방법.
  182. 제164항 내지 제181항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 방법.
  183. 제164항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 방법.
  184. 제164항 내지 제183항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 방법.
  185. 제164항 내지 제184항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 방법.
  186. 제185항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 방법.
  187. 제185항 또는 제186항에 있어서, BiTE가 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  188. 제185항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  189. 제185항 내지 제188항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  190. 제185항 내지 제189항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  191. 제164항 내지 제190항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 방법.
  192. 제164항 내지 제191항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 방법.
  193. 제164항 내지 제192항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 방법.
  194. 제193항에 있어서, 면역 반응이 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  195. 제194항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 방법.
  196. 제193항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  197. 제164항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 유방암, 신장암, 폐암, 난소암, 결장직장암, 췌장암, 융모막 암종, 비소세포 폐 암종(NSCLC), 위암, 자궁경부암, 또는 두부경부암인 방법.
  198. 제164항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 골수종, 백혈병 또는 림프종인 방법.
  199. 제164항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 급성 골수성 백혈병(AML), 다발성 골수종, 또는 골수형성이상 증후군인 방법.
  200. 제164항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 B 세포 악성종양인 방법.
  201. 제164항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 외투 세포 림프종인 방법.
  202. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의,
    (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  203. 제199항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 방법.
  204. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의,
    (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  205. 제204항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 방법.
  206. 제202항 내지 제205항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  207. 제202항 내지 제206항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 방법.
  208. 제202항 내지 제207항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 방법.
  209. 제202항 내지 제208항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  210. 제209항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  211. 제202항 내지 제210항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 방법.
  212. 제202항 내지 제211항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 방법.
  213. 제212항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  214. 제202항 내지 제213항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 방법.
  215. 제202항 내지 제214항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 방법.
  216. 제202항 내지 제215항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 방법.
  217. 제216항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 방법.
  218. 제202항 내지 제217항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 방법.
  219. 제202항 내지 제218항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 방법.
  220. 제202항 내지 제219항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 방법.
  221. 제220항에 있어서, 면역 반응이 (i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  222. 제221항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 방법.
  223. 제221항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  224. 제202항 내지 제223항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체가 치료 유효량으로 투여되는 것인 방법.
  225. 제202항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 유방암, 신장암, 폐암, 난소암, 결장직장암, 췌장암, 융모막 암종, 비소세포 폐 암종(NSCLC), 위암, 자궁경부암, 또는 두부경부암인 방법.
  226. 제202항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 골수종, 백혈병 또는 림프종인 방법.
  227. 제202항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 급성 골수성 백혈병(AML), 다발성 골수종, 또는 골수형성이상 증후군인 방법.
  228. 제202항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 B 세포 악성종양인 방법.
  229. 제202항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 외투 세포 림프종인 방법.
  230. 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  231. 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  232. 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  233. 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  234. 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  235. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  236. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  237. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  238. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  239. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  240. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  241. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  242. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  243. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  244. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  245. 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  246. 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  247. 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  248. 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  249. 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  250. 제245항 내지 제249항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  251. 제245항 내지 제249항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  252. 제245항 내지 제249항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  253. 제245항 내지 제249항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  254. 제245항 내지 제249항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  255. 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  256. 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  257. 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  258. 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  259. 서열 번호 20으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  260. 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  261. 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  262. 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  263. 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  264. 서열 번호 21로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  265. 제255항 내지 제264항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  266. 제255항 내지 제264항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  267. 제255항 내지 제264항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  268. 제255항 내지 제264항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  269. 제255항 내지 제264항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 19로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  270. 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  271. 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  272. 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  273. 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  274. 서열 번호 23으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  275. 제270항 내지 제274항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  276. 제270항 내지 제274항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  277. 제270항 내지 제274항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  278. 제270항 내지 제274항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  279. 제270항 내지 제274항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 22로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  280. 제230항 내지 제279항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  281. 제230항 내지 제280항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  282. 제230항 내지 제281항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  283. 제230항 내지 제282항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  284. 제283항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  285. 제230항 내지 제284항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 18(VMAPRTLFL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 방법.
  286. 제230항 내지 제284항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  287. 제286항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  288. 제230항 내지 제287항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  289. 제230항 내지 제289항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  290. 제230항 내지 제289항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  291. 제230항 내지 제290항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  292. 제230항 내지 제291항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  293. 제292항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  294. 제292항 또는 제293항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  295. 제292항 또는 제293항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  296. 제280항 내지 제295항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  297. 제280항 내지 제296항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  298. 제280항 내지 제297항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  299. 제298항에 있어서, 면역 반응이(i) NK 세포, (ii) T 세포, 또는 (iii) NK 세포 및 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  300. 제299항에 있어서, T 세포가 CD4+ T 세포 또는 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  301. 제300항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  302. 제298항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
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