KR20230019468A - 비고전적 hla-i 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체 및 그의 사용 방법 - Google Patents

비고전적 hla-i 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체 및 그의 사용 방법 Download PDF

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존 웨이단즈
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베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하
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Abstract

본원에서는 본원에 개시된 바와 같은 가변 중쇄 도메인(VH), 가변 경쇄 도메인(VL), 및 상보성 결정 영역(CDR)을 갖는, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체 뿐만 아니라, 그의 방법 및 용도를 제공한다.

Description

비고전적 HLA-I 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체 및 그의 사용 방법
관련 출원
본 개시내용은 현재 계류 중인, 2021년 3월 11일 출원된 미국 특허 출원 제17/199,205호, 및 현재 계류 중인, 2020년 6월 1일 출원된 미국 특허 가출원 제63/032,747호를 우선권 주장하며, 상기 각 특허의 전체 내용은 모든 목적을 위해 본원에서 참조로 포함된다.
서열 목록에 관한 언급
본 출원은 컴퓨터 판독가능한 형태의 서열 목록을 포함한다. 컴퓨터 판독가능한 형태는 본원에서 참조로 포함된다. 2022년 9월 12일 작성된 상기 ASCII 사본의 명칭은 ABX-005WO_SL.txt이고, 그 크기는 37,602 바이트이다.
요약
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM: antigen processing machinery) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE: bispecific T cell engager)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR: T cell receptor)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL: cytotoxic T cell)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR: complementarity determining region)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 (a) 본원에 개시된 바와 같은 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편, 또는 본원에 개시된 바와 같은 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편; 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 개시한다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 유방암이다. 일부 실시양태에서, 암은 신장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암이다. 일부 실시양태에서, 암은 난소암이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장직장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 췌장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 융모막 암종이다. 일부 실시양태에서, 암은 비소세포 폐 암종(NSCLC: non-small cell lung carcinoma)이다. 일부 실시양태에서, 암은 위암이다. 일부 실시양태에서, 암은 자궁경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 두부경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 백혈병이다. 일부 실시양태에서, 암은 림프종이다. 일부 실시양태에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML: acute myeloid leukemia)이다. 일부 실시양태에서, 암은 다발성 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수형성이상 증후군이다. 일부 실시양태에서, 암은 B 세포 악성종양이다. 일부 실시양태에서, 암은 외투 세포 림프종이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 치료 유효량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 암은 유방암이다. 일부 실시양태에서, 암은 신장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암이다. 일부 실시양태에서, 암은 난소암이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장직장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 췌장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 융모막 암종이다. 일부 실시양태에서, 암은 비소세포 폐 암종(NSCLC)이다. 일부 실시양태에서, 암은 위암이다. 일부 실시양태에서, 암은 자궁경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 두부경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 백혈병이다. 일부 실시양태에서, 암은 림프종이다. 일부 실시양태에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML)이다. 일부 실시양태에서, 암은 다발성 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수형성이상 증후군이다. 일부 실시양태에서, 암은 B 세포 악성종양이다. 일부 실시양태에서, 암은 외투 세포 림프종이다.
특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC: light chain)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC: heavy chain)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 특정 실시양태에서, 본원에서는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 개시한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103이다. 일부 실시양태에서, 항체는 (a) HLA-E*0101 및 신생항원; (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는 (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 다기능성 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 세포에서 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
도면의 간단한 설명
본 발명의 새로운 특징은 특히 첨부된 청구범위에 기재되어 있다. 본 발명의 원리가 이용되는 예시적인 실시양태를 설명하는 하기 상세한 설명 및 첨부된 도면을 참조함으로써 본 발명의 특징 및 이점을 더욱 잘 이해할 수 있을 것이다:
도 1a-도 1d는 V-0025 및 V-0018(대조군)에 대한 R4 클론 1(R4c1)의 CDRH3 영역의 확인 및 친화도 특징화를 예시한 것이다. 파지(도 1a) 및 가용성 ELISA(도 1b). 항원은 1 ㎍/ml이다. 결합 친화도 센서그램(도 1c) 및 동역학적 데이터(도 1d).
도 2a-도 2d는 친화도 성숙된 R4c1의 단리를 위해 분류 개략도의 예시적인 개요이다. 도 2a-도 2c는 제1 라운드의 친화도 성숙을 위한 각 라운드의 분류를 보여주는 세포 분류 플롯을 예시한 것이다. '별표 표시'는 분류된 집단을 나타낸다. R4 분류의 경우(도 2d), 항체 싱크로서 다양한 시점에 대해 1 μM의 R4c1-IgG1을 사용하여 10 nM의 V-0025와 함께 K오프를 이용하였다.
도 3a-도 3g는 R4c1의 친화도 성숙으로부터 확인된 클론을 예시한 것이다. 도 3a-도 3d는 100 nM의 표적 항원(V-0025)에의 결합 프로파일을 예시한 것이다. 도 3e-도 3g는 10 nM의 표적(V-0025)에의, 및 100 nM의 추가 펩티드/HLA-E 항원에의 클론의 결합 프로파일을 예시한 것이다.
도 4는 A549-B4 세포에의 R2A_1 결합을 예시한 것이다.
도 5a-도 5b는 R2A_1의 CDRL3 영역의 친화도 성숙에 의한 개선된 클론에 대한 단리 프로세스를 예시한 것이다. 도 5a는 모체 클론(R2A_1) 및 시작 친화도 성숙 라이브러리(R0) 및 제1 라운드 분류된 라이브러리(R1)에 의한 표적(V-0025)에의 결합을 예시한 것이다. 도 5b는 R1 친화도 성숙 라이브러리의 K오프를 예시한 것이다. 표적(V-0025)은 10 nM이고, 항체 싱크로서 15분 내지 최대 90분 동안 1 μM의 R2A_1-hIgG1이 사용되었다.
도 6a-도 6b는 결합 친화도가 모체보다 우수한 클론 단리를 위한 분류 개략도를 예시한 것이다. 친화도 성숙을 위한 라운드 1(도 6a) 및 라운드 2(도 6b) 분류를 보여주는 세포 분류 플롯. 별표 표시는 분류된 집단을 나타낸다. R2 분류의 경우, 항체 싱크로서 45분 동안 1 μM의 R2A_1-IgG1을 사용하여 10 nM의 V-0025와 함께 K오프를 이용하였다.
도 7은 R2A_1의 CDRL3 영역의 친화도 성숙으로부터의 클론 확인 및 1 nM 및 0.1 nM의 V-0025에의 결합 프로파일을 예시한 것이다. 화살표 표시는 상위 클론을 나타낸다.
도 8a-도 8b는 ABX0020 제조를 위한 QC 데이터를 예시한 것이다.
도 9a-도 9j는 ABX0020의 친화도, 특이성 및 안정성을 예시한 것이다. HLA-E 클론 3D12(도 9a) 및 ABX0020(도 9b)에 의한 펩티드/HLA-E 복합체에 대한 특이성. 항체는 1 ㎍/ml로 사용하였고, 항원은 0.25 ㎍/ml로 사용하였다. 도 9c는 V-0025에의 ABX0020의 1가 친화도를 예시한 것이다. 도 9d는 V-0034의 적정을 도시한 것이다. ABX0020 및 HLA-E를 1 ㎍/mL로 사용하였고, V-0034는 2 ㎍/mL부터 122 pg/mL(1.22x10-4 ㎍/mL)까지 적정되었다. 도 9e는 항체의 적정을 도시한 것이다. V-0034는 0.25 ㎍/mL로 사용하였고, ABX0020 및 HLA-E는 2 ㎍/mL부터 122 pg/mL(1.22x10-4 ㎍/mL)까지 적정되었다. 도 9f는 ABX0020의 열안정성을 예시한 것이다. 1 ㎍/ml의 항체 및 0.25 ㎍/ml의 항원을 이용하여 37℃에서 7 내지 14일 동안 인큐베이션시킨 것과 비교된 4℃에서의 결합 친화도. 도 9g는 HLA-E의 펩티드 펄싱된 K562.E 세포에의 결합을 도시한 것이다. K562.E 세포를 2시간 동안 2 μM 펩티드로 펄싱한 후, 이어서, 1 ㎍/mL의 항체로 염색하였다. 도 9h는 ABX0020의 펩티드 펄싱된 K562.E 세포에의 결합을 도시한 것이다. K562.E 세포를 2시간 동안 2 μM 펩티드로 펄싱한 후, 이어서, 1 ㎍/mL의 항체로 염색하였다. 도 9i는 ABX0020의 펩티드 펄싱된 K562.E 세포에의 결합을 도시한 것이다. K562.E 세포를 2시간 동안 2 μM 펩티드로 펄싱한 후, 이어서, 1 ㎍/mL의 항체로 염색하였다.
도 10a-도 10b는 ABX0020이 유사하게 HLA-E*0101 및 HLA-E*0103에 결합한다는 것을 예시한 것이다. 도 10a는 1 ㎍/mL의 HLA-E에 의한 결합을 도시한 것이다. 도 10b는 1 ㎍/mL의 ABX0020에 의한 결합을 도시한 것이다.
도 11a-도 11d는 ABX0020이 다양한 종양 세포주에 결합한다는 것을 예시한 것이다. 1 ㎍/mL의 항체 결합. 도 11a는 IFNγ 자극받은 JEG3 야생형 세포(WT: wild type, 상단 패널), JEG3 EKO 세포(중간 패널) 및 JEG3 Tap-1KO 세포(하단 패널)에의 결합을 예시한 것이다. 도 11b는 WT K-562 세포(상단 패널), HLA-E+ K-562 세포(중간 패널) 및 2 μM 펩티드로 펄싱된 HLA-E+ K-562 세포에의 결합을 예시한 것이다. 도 11a-도 11b, 연회색 실선 표시는 이소타입을 나타내는 반면, 검은색 외곽선 표시는 HLA-E 또는 ABX0020을 나타낸다. 도 11c는 비자극(검은색 점선 표시) 및 IFNγ 자극받은 (검은색 실선 표시) THP-1 세포(상단 패널), RPMI-8226 세포(중간 패널) 및 JY-A2 세포(하단 패널)에서의 결합을 예시한 것이다. 도 11d는 IFNγ 자극받은(검은색 실선 표시) COLO-205 세포(상단 패널), PANC-1 세포(상단 패널로부터 2번째), A549-D5 세포(하단 패널로부터 2번째) 및 JVM2 세포(하단 패널)에의 결합을 예시한 것이다. 도 11c-도 11d, 회색 실선 표시는 이소타입을 나타내고, 점선 표시는 비자극 세포를 나타낸다.
도 12a-도 12i는 ABX0020이 표적을 발현하는 종양 세포주에 대한 NK 세포독성을 증진시킨다는 것을 예시한 것이다. (도 12a-도 12b). 도 12a는 사멸 표적 세포의 빈도를 예시한 것이다. NK 세포를 MabCtrl(이소타입 대조군), ABX0020, ABX0021 또는 ABX0022와 IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 4 hr 동안 공동 배양하였다. 도 12b는 CD107a+ NK 세포의 빈도를 예시한 것이다. N = 6. NK 세포를 MabCtrl(이소타입 대조군), ABX0020, ABX0021 또는 ABX0022와 IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 4 hr 동안 공동 배양하였다. (도 12c-도 12d) 도 12c는 MabCtrl, αNKG2A 또는 ABX002와 비자극 및 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 24 hr 동안 공동 배양된 NK 세포를 도시한 것이다. 도 12d는 MabCtrl, αNKG2A 또는 ABX0021과 IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 24 hr 동안 공동 배양된 NK 세포를 도시한 것이다. 도 12c 및 12d 모두 LDH 방출에 의해 측정된 바와 같은 세포독성(%)을 나타내며, 여기서, 표적 단독인 것을 0으로 세팅하였다. N = 6. 도 12e는 hIgG(이소타입 대조군) αNKG2A 또는 ABX0021과 4 hr 동안 펩티드 펄싱된 HLA-E+ K-562 세포(K562.E)와 함께 공동 배양된 NK 세포를 도시한 것이다. 사멸 K562.E의 비율(%)이 제시되어 있다. N = 8. 도 12f는 MabCtrl, ABX0020, ABX0021 또는 ABX0022와 24 hr 동안 비자극 RPMI 8226과 함께 공동 배양된 NK 세포를 도시한 것이다. 사멸 RPMI 8226의 빈도가 제시되어 있다. N = 4. 도 12g는 hIgG1, αNKG2A와, 또는 ABX0020 또는 ABX0022 적정하에 4 hr 동안 IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 공동 배양된 NK 세포를 도시한 것이다. 도 12g는 사멸 표적 세포의 빈도를 보여주는 것이다. 도 12h는 hIgG1, αNKG2A와, 또는 ABX0020 또는 ABX0022 적정하에 4 hr 동안 IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 공동 배양된 NK 세포를 도시한 것이다. 도 12h는 CD107a+ NK 세포의 빈도를 보여주는 것이다. N = 6. 도 12i는 hIgG1(대조군), 세툭시맙, ABX0020, ABX0021, 또는 ABX0020 또는 ABX0021과 세툭시맙의 조합과 4 hr 동안 IFNγ 자극받은 COLO-205 세포와 함께 공동 배양된 NK 세포를 도시한 것이다. 사멸 COLO-205 세포의 빈도가 제시되어 있다. N = 11. 달리 명시되지 않는 한, MabCtrl, hIgG1, ABX0020, ABX0021 및 αNKG2A는 10 ㎍/mL로 사용하였다. 달리 명시되지 않는 한, ABX0022는 1㎍/mL로 사용하였다. 세툭시맙은 0.1 ㎍/mL로 사용하였다. 이펙터 대 표적 비(E:T)는 10:1로 세팅하였다. 플롯은 박스 및 위스커로 제시되어 있고, 여기서, 평균은 크로스로 표시되어 있다. 위스커는 25번째 백분위수에서 1.5 x IQR을 감산한 값(사분위간 거리; 25번째 백분위수와 75번째 백분위수 사이의 차)으로 그려진다. 이상치는 개별적으로 플롯팅되어 있다. *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001.
도 13은 ABX0020이 항원 특이적 CD8+ T 세포의 억제를 촉발시키고, 표적 세포의 용해를 촉진시킨다는 것을 예시한 것이다. 본 연구에서 2명의 상이한 기증자의 플루 항원(M1) 특이적 CTL 세포주를 사용하였다. (기증자 A) CTL 세포주는 라이덴 대학 의료 센터(Leiden University Medical Center: 네덜란드 소재)의 (Professor van Hall)로부터 제공받았고, (기증자 B) CTL 세포주는 아스타르트 바이올로직스(Astarte Biologics: 미국 워싱턴주 소재))로부터 구입하였다.
도 14a-도 14b는 ABX0040 이중특이적 T 세포 인게이저의 디자인 및 특징화를 도시한 것이다.
도 15는 ABX0040의 친화도 분석을 예시한 것이다.
도 16a-도 16b는 종양 세포주에 대한 ABX0040 염색이 HLA-E 제한적이라는 것을 예시하는 것이다. ABX0040은 JEG3 야생형 세포는 염색하지만, HLA-E가 결여된 JEG3 세포는 염색하지 않는다. ABX0023(마우스 IgG로부터 유래된 ABX0020)을 대조군으로 사용하였다.
도 17은 ABX0040이 표적 양성 THP-1 AML 세포를 염색한다는 것을 예시한 것이다. THP-1 세포를 인간 IFN-g(10 ng/ml)의 존재하에 O/N 인큐베이션시킨 후, 이어서, 1 ㎍/ml ABX0040으로 염색하였다. 염소 항인간 IgG(GAH)-APC 접합체를 이용하여 결합된 ABX0040을 검출하였다.
도 18a-도 18e는 ABX0040이 인간 CD3+ 세포를 염색하고, CD3neg 세포는 염색하지 않는다는 것을 도시한 예시적인 히스토그램이다. 도 18a는 GAH-APC 접합체 및 항CD3(클론 SK7)으로 염색된 PBMC를 도시한 것이다. 도 18b는 항CD4 및 GAH-APC 접합체로 염색된 PBMC를 도시한 것이다. 도 18c는 ABX0040 + GAH-APC 접합체(SK7 Ab 부재)로 염색된 CD3+ 세포를 도시한 것이다. 도 18d는 항CD4-PE 및 ABX0040 + GAH-APC 접합체에 의한 이중 염색을 도시한 것이다. 본 패널에서 두 CD3+ 세포 집단은 CD4+ 및 CD8+ T 세포를 나타낸다는 것에 주의한다. 도 18e는 ABX0040 및 클론 SK7-PE를 이용한 CD3+ 세포의 이중 염색을 도시한 것이다. ABX0040을 1 ㎍/mL로 이용하였다.
도 19a-도 19c는 ABX0040이 표적 양성 K562.E 세포의 CD8+ T 세포 용해를 매개한다는 것을 예시한 것이다. 세포독성(%)은 사멸 표적 세포의 빈도에 의해 측정하였고, 여기서, 표적 단독인 것을 0으로 세팅하였다. 5:1의 이펙터 대 표적 비(E:T)를 이용하여 48 hr 후 세포를 수확하였다(도 19a). 도 19b-19c는 CD8+ T 세포 활성화, 구체적으로, CD107a(도 19b) 및 IFNγ 발현(도 19c)에 미치는 ABX0040 용량 의존적 효과를 보여주는 것이다.
도 20a-도 20e는 ABX0040이 THP-1 AML 세포의 CD8+ T 세포 사멸을 매개한다는 것을 예시한 것이다. 도 20a는 THP-1 세포의 CD8+ T 세포 세포독성을 재유도하는 ABX0040의 용량 의존적 효과(1000 내지 80 pM)를 보여주는 것이다. 세포독성(%)은 사멸 THP-1 세포의 빈도에 의해 측정하였고, 여기서, 표적 단독인 것을 0으로 세팅하였다. 도 20a-20e는 CD8+ T 세포 활성화, 구체적으로, CD25(도 20b), CD107a(도 20c), 퍼포린(도 20d), 및 IFNγ(도 20e) 발현에 미치는 ABX0040 용량 의존적 효과를 보여주는 것이다. 5:1의 이펙터 대 표적 비(E:T)를 이용하여 48 hr 후 세포를 수확하였다
도 21a-도 21b는 ABX0040이 NK 세포를 활성화시키는 체크포인트 차단 활성을 나타낸다는 것으로 예시한 것이다. NK 세포를 24 hr 동안 K562.E 세포(도 21a) 또는 RPMI-8226 세포(도 21b)와 함께 공동 배양하였다. 두 도면 모두 LDH 방출에 의해 측정된 바와 같은 세포독성(%)을 나타내며, 여기서, 표적 단독인 것을 0으로 세팅하였다. 항체는 10 ㎍/mL로 사용하였다.
도 22a-도 22b는 ABX0023이 면역 세포에 결합한다는 것을 예시한 것이다. 면역 세포는 HLA-E 및 고전적 HLA 타입 I을 발현하지만, 오직 NK 세포 및 단핵구는 ABX0023에 의한 결합을 나타낸다. 전체 PBMC, 농축된 또는 정제된 세포를 HLA-E, 고전적 HLA 타입 I(HLA-A,B,C), 또는 ABX0023 발현에 대하여 시험하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타내고, 혈소판 염색은 2명의 기증자의 것을 나타낸다. B 세포 염색은 6명의 기증자의 것을 나타낸다. T 세포 및 NK 세포 염색은 10명의 기증자의 것을 나타낸다. 호중구 및 호산구 염색은 7명의 기증자의 것을 나타낸다. DC 염색은 4명의 기증자의 것을 나타낸다. 단핵구 염색은 4명의 기증자의 것을 나타낸다. 대식세포 염색은 10명의 기증자의 것을 나타낸다. N/T는 비시험을 의미한다.
도 23a-도 23b는 IFNγ에 의한 PBMC 자극이 ABX0023 결합을 유도하지 않는다는 것을 예시한 것이다. PBMC를 밤새도록 IFNγ로 자극시키거나(도 23b), 또는 자극시키지 않고(도 23a), HLA-E(클론 3D12), 변성된 HLA-E(클론 MEM-E/02) 또는 ABX0023 발현에 대해 시험하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. 염색은 2명의 기증자의 것을 나타낸다.
도 24는 HLA-E 양성 HLA-A 클래스 I 양성 세포주가 비자극하에 ABX0023 결합을 나타낸다는 것을 예시한 것이다. 세포주 Fc 수용체 발현에 의존하여 염색을 위해 ABX0023(마우스 Fc) 또는 ABX0020(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. N/T는 비시험을 의미한다.
도 25는 비자극하에 ABX0023 결합을 나타내는 세포주는 IFNγ 자극하에 ABX0023 결합 증가를 보인다는 것을 예시한 것이다. 세포를 24 hr 동안 IFNγ로 자극시켰다. 세포주 Fc 수용체 발현에 의존하여 염색을 위해 ABX0023(마우스 Fc) 또는 ABX0020(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. N/T는 비시험을 의미한다.
도 26a-도 26b는 일부 세포주는 ABX0023 결합을 위해서는 IFNγ 자극이 요구된다는 것을 예시한 것이다. 세포를 배양물 중에서 그대로 유지시키거나(도 26a), 또는 염색 전 24 hr 동안 IFNγ로 자극시켰다(도 26b). 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. N/T는 비시험을 의미한다.
도 27은 HLA-E가 없는 세포주는 ABX0023 결합을 보이지 않는다는 것을 예시한 것이다. 염색을 위해 ABX0023(마우스 Fc) 또는 ABX0020(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다.
도 28a-도 28b는 ABX0023 결합을 위해서는 HLA-E 및 Tap1 펩티드 프로세싱이 요구된다는 것을 예시한 것이다. (도 28a) JEG3 세포를 염색 전 24 hr 동안 IFNγ로 24 hr 동안 자극시켰다. (도 28b) OCI-AML3 세포를 비자극시켰다. 염색을 위해 ABX0023(마우스 Fc) 또는 ABX0020(인간 Fc)을 사용하였다. 회색은 이소타입 염색을 나타내고, 검은색 선 표시는 항체 염색을 나타낸다. N/T는 비시험을 의미한다.
도 29는 ABX0023이 특정 펩티드로 펄싱된 K562.E 세포를 염색한다는 것을 예시한 것이다. K562 및 K562.HLA-E + V-0025(VMAPRTLFL) 펩티드(서열 번호 18) 펄싱된 세포를 펠릿화하고, OCI 화합물로 처리하고, 급속 냉동시켜 면역조직화학법을 위한 냉동된 세포 블록을 제조하였다. ABX0023 항체(2.25 ug/ml)를 사용하여 K562.E + V-0025 및 K562 세포를 염색하였다. 좌측 패널은 양성 ABX0023 염색을 보여주는 반면, 대조군 세포(우측 패널)는 염색되지 않는다.
도 30은 인간 태반 조직 및 구체적으로, 영양막 세포의 양성 ABX0023 염색을 예시한 것이다.
도 31a-도 31b는 두부경부 종양 및 정상 인접 조직(NAT: normal adjacent tissue)의 냉동 절편 샘플을 예시한 것이다. 도 31a는 (좌측 패널) 항HLA-E 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색 및 (우측 패널) ABX0023 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색을 보여주는 것이다. 도 31b는 (좌측 패널) NAT는 항HLA-E 항체로 염색되지만, (우측 패널) ABX0023 항체로 염색되지 않는다는 것을 보여주는 것이다.
도 32a-도 32b는 결장 선암종 및 NAT의 냉동 절편 샘플을 예시한 것이다. 도 32a는 (좌측 패널) 항HLA-E 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색 및 (우측 패널) ABX0023 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색을 보여주는 것이다. 도 32b는 정상 인접 결장 조직의 ABX0023 염색은 거의 없는 것에서부터 전혀 없다는 것을 보여주는 것이다.
도 33a-도 33b는 폐 편평 세포 암종 및 NAT의 냉동 절편 샘플을 예시한 것이다. 도 33a는 (좌측 패널) 항HLA-E 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색 및 (우측 패널) ABX0023 항체(2.25 ug/ml)에 의한 염색을 보여주는 것이다. 도 33b는 정상 인접 폐 조직의 ABX0023 염색은 보이지 않는다.
도 34는 결장 선암종 조직 샘플 중 표적에의 ABX0023 결합 선택성을 입증하는 것이다.
상세한 설명
특정 실시양태에서, 본원에서는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 적어도 하나의 중쇄 및 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 적어도 하나의 경쇄를 포함하는 항체를 개시한다. 각 VH 및 VL은 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 특정 실시양태에서, 추가로 본원에서는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체를 투여함으로써 암을 치료하는 방법을 개시한다. 일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 암 세포에 대한 면역 반응을 조정함으로써 암을 치료한다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다.
암 치료에 대한 전통적인 접근법으로는 수술, 방사선, 화학요법 및 호르몬 요법을 포함하였다. 그러나, 상기 요법은 그 자체로는 효과가 입증되지 않았다. 암을 예방 및/또는 치료하기 위한 대체 요법의 개발이 중요하다. 보다 최근에는 항체 및 T 림프구를 이용하는 면역요법 및 유전자 요법 접근법이 암 치료를 위한 새롭고 유망한 방법으로 부상했다.
인간에서 인간 백혈구 항원(HLA: human leukocyte antigen)으로 지정된 주조직적합성 복합체(MHC: major histocompatibility complex) 분자는 신체의 질환 인식 및 암 및 침입 항원에 대하여 생성된 면역 반응에서 중요한 역할을 한다. HLA 유전자 패밀리는 2개의 하위그룹, 즉, HLA 클래스 I(HLA-I) 및 HLA 클래스 II(HLA-II)으로 나뉘며, HLA-I은 고전적 HLA-I 및 비고전적 HLA-I로 추가로 나뉜다. 각 HLA 분자는 세포 내에서 한 펩티드와 복합체를 형성한다. 암 세포에서 펩티드/HLA 복합체 중 일부는 면역계가 이들 세포를 인식하고, 사멸할 수 있도록 고유하게 제시된다. 상기 고유한 펩티드/HLA 복합체로 데코레이팅된 세포는 세포독성 T 세포(CTL)에 의해 인식되고 사멸된다. 암 세포는 고전적 HLA-I 발현의 하향조절을 보이지만, 비고전적 HLA-I 발현(예컨대, HLA-E)은 상향조절을 보인다. 따라서, 암 세포에서 상향조절된 고유하게 제시된 비고전적 HLA-I-펩티드 복합체는 암 치료를 위한 혁신적인 면역요법을 개발하기 위한 새로운 표적이 된다.
특정 용어
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 청구된 주제가 속하는 기술 분야의 숙련자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 전술한 일반적인 설명 및 다음의 상세한 설명은 단지 예시적인 것이고, 설명을 위한 것이며, 청구된 주제를 제한하지 않는 것으로 이해되어야 한다. 본원에서 사용된 섹션 표제는 구성 목적으로만 사용되며, 설명된 주제를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
본원에서 사용되는 바, 단수 형태 "하나"("a," "an") 및 "그"는 문맥상 명백하게 달리 명시되지 않는 한, 복수 지시대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어 "한 항체"에 대한 언급은 복수의 항체들을 포함하고, 일부 실시양태에서 "한 항체"에 대한 언급은 다수의 항체들을 포함하는 등 그러하다.
본원에서 사용되는 바, 모든 수치 값 또는 수치 범위는 문맥상 명백하게 달리 명시되지 않는 한, 상기 범위 내에 있거나, 또는 그를 포함하는 전체 정수 및 상기 범위 내에 있거나, 또는 그를 포함하는 값 또는 정수의 분수를 포함한다. 따라서, 예를 들어, 90-100% 범위에 대한 언급은 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 95%, 97% 등을 포함할 뿐만 아니라, 91.1%, 91.2%, 91.3 %, 91.4%, 91.5% 등, 92.1%, 92.2%, 92.3%, 92.4%, 92.5% 등을 포함한다. 또 다른 예에서, 1-5,000배 범위에 대한 언급은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20배 등 뿐만 아니라 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5배 등, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5배 등을 포함한다.
본원에서 사용되는 바, "약" 수치는 상기 수치를 포함하고, 상기 수치 아래로 10%에서부터 상기 수치 위로 10% 범위에 이르는 범위를 지칭한다. "약" 범위는 상기 범위의 하한 아래로 10%에서 상기 범위의 상한 위로 10%에 이르는 것을 의미한다.
본원에서 사용되는 바, 용어 "MHC"는 주조직적합성 항원을 명시하는 유전자 유전자좌 세트인 주조직적합성 복합체를 지칭한다. 본원에서 사용되는 바, 용어 "HLA"는 인간에서 발견되는 조직적합성 항원인 인간 백혈구 항원을 지칭한다. 본원에서 사용되는 바, "HLA"는 인간 형태의 "MHC"이고, 본 용어는 상호교환적으로 사용된다.
본원에서 사용되는 바, "항체"는 특정 항원에 대한 결합 특이성을 나타내는 당단백질을 지칭한다. 본원에서 항체는 또한 "항원 결합부" 또는 항원에 결합할 수 있는 항체의 단편을 포함한다. 본 용어는 다중클론, 단일클론, 단일특이적, 다중특이적(예컨대, 이중특이적 항체), 천연, 인간화, 인간, 키메라, 합성, 재조합, 하이브리드, 돌연변이화된, 이식된, 항체 단편(예컨대, 전장 항체의 일부, 일반적으로 그의 항원 결합 영역 또는 가변 영역, 예컨대, Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 단편), 및 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 시험관내에서 생성된 항체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 본 용어는 또한 단일 쇄 항체, 예컨대, 가변 중쇄와 가변 경쇄가 (직접 또는 펩티드 링커를 통해) 함께 연결되어 연속 폴리펩티드를 형성하는 단일 쇄 Fv(sFv 또는 scFv) 항체를 포함한다.
본원에서 사용되는 바, "CDR"은 면역글로불린(Ig) 초가변 도메인을 지칭한다. CDR은 임의의 적합한 방식으로 정의된다. 일부 실시양태에서, CDR은 코티아(Chothia) 넘버링 체계, 카바트(Kabat) 넘버링 체계, 카바트 및 코티아의 조합, AbM 정의, 콘택트 정의, 및/또는 카바트, 코티아, AbM, 및/또는 콘택트 정의의 조합 중 임의의 것에 따라 정의될 수 있고; 이는 다른 결과를 초래할 수 있다.
본원에서 사용되는 바, 임의의 결합제, 예컨대, 항체의 맥락에서 "선택적으로 결합한다"라는 용어는 예컨대, 높은 친화도로 항원 또는 에피토프에는 특이적으로 결합하지만, 관련 없는 다른 항원 또는 에피토프에는 유의적으로 결합하지 않는 결합제를 지칭한다.
본원에서 사용되는 바, 용어 "신생항원" 또는 "네오펩티드"는 상호교환적으로 사용되며, 건강한 세포와 비교하여 이환된 세포, 또는 스트레스를 받은 세포(예컨대, 암 세포)에 의해 차별적으로 발현된 펩티드를 지칭한다.
용어 "수용자," "개체," "피험체," "숙주" 및 "환자"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 일부 경우에서, 진단, 치료 또는 요법이 요구되는 임의의 포유동물 피험체, 특히, 인간을 지칭한다. 상기 용어 중 어느 것도 의료진의 감독을 필요로 하지 않는다.
본원에서 사용되는 바, "치료," "치료하는" 등의 용어는 일부 경우에서는 효과를 얻기 위한 목적으로 작용제를 투여하거나, 또는 시술을 수행하는 것을 지칭한다. 그 효과는 질환 또는 그의 증상을 완전히 또는 부분적으로 예방한다는 면에서 예방적일 수 있고/거나, 질환 및/또는 질환의 증상에 대한 부분적 또는 완전한 치유를 달성한다는 면에서 치료적일 수 있다. 본원에서 사용되는 바, "치료"는 포유동물, 특히, 인간에서 질환 또는 장애(예컨대, 암)의 치료를 포함할 수 있고, (a) (예컨대, 원발성 질환과 연관이 있거나, 또는 그에 의해 유발될 수 있는 질환을 포함하는) 질환에 걸리기 쉬울 수 있지만, 아직 질환을 앓는 진단받지는 않은 피험체에서 질환 또는 질환 증상이 발생하지 못하게 예방하는 것; (b) 질환을 억제시키는 것, 즉, 그의 발생을 정지시키는 것; 및 (c) 질환을 완화시키는 것, 즉, 질환을 퇴행시키는 것을 포함한다. 치료는 예컨대, 완화; 차도; 증상 감소 또는 질환 병태를 환자가 더 견딜 수 있게 만드는 것; 퇴행 또는 쇠퇴 속도를 저속화시키는 것; 또는 퇴행의 최종점을 덜 쇠약한 상태로 만드는 것과 같은, 임의의 객관적 또는 주관적 파라미터를 비롯한, 암의 치료 또는 호전 또는 예방의 임의의 성공 지표를 지칭할 수 있다. 증상의 치료 또는 호전은 의사의 검사 결과를 비롯한, 하나 이상의 객관적 또는 주관적 파라미터에 기초한다. 따라서, "치료하는"이라는 용어는 질환(예컨대, 암)과 연관된 증상 또는 병태의 발생을 예방하거나, 또는 지연시키거나, 완화시키거나, 저지하거나, 또는 억제하기 위해 본 발명의 화합물 또는 작용제를 투여하는 것을 포함한다. "치료 효과"라는 용어는 피험체에서 질환, 질환의 증상 또는 질환의 부작용의 감소, 제거 또는 예방을 지칭한다.
일부 경우에서, "치료 유효량"은 질환을 치료하기 위해 피험체에게 투여되었을 때, 그 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미한다.
"동일성(%)"은 두 서열(뉴클레오티드 또는 아미노산)이 정렬되었을 때 동일한 위치에 동일한 잔기를 갖는 정도를 지칭한다. 예를 들어, "아미노산 서열은 서열 번호 Y와 X% 동일하다"라는 것은 서열 번호 Y에 대한 아미노산 서열의 동일성(%)을 지칭하고, 아미노산 서열 중 잔기의 X%가 서열 번호 Y에 개시된 서열의 잔기와 동일하다는 것으로 상세하게 설명된다. 일반적으로, 이러한 계산을 위해 컴퓨터 프로그램이 사용된다. 서열 쌍을 비교하고, 정렬하는 예시적인 프로그램은 ALIGN(문헌 [Myers and Miller, 1988]), FASTA(문헌 [Pearson and Lipman, 1988]; [Pearson, 1990]) 및 갭형성 BLAST(문헌 [Altschul et al., 1997]), BLASTP, BLASTN, 또는 GCG(문헌 [Devereux et al., 1984])를 포함한다.
주조직적합성 복합체( MHC ) 또는 인간 백혈구 항원( HLA )
인간에서 인간 백혈구 항원(HLA)으로도 명명되는 주조직적합성 복합체(MHC)는 세포 건강 상태에 대한 통찰력을 제공함으로써 프로테오믹 스캐닝 칩으로 작용하는 유핵 세포의 표면에서 발현되는 당단백질이다. 이는 정상적인 숙주 세포 단백질, 암 세포, 염증 세포 및 박테리아, 바이러스 및 기생충 감염 세포에서 지속적으로 펩티드를 샘플링하고, T 림프구가 인식할 수 있도록 세포 표면 상에 짧은 펩티드를 제시한다. 제시된 펩티드는 프레임 밖의 단백질로부터 또는 인트론에 삽입된 서열로부터, 또는 통상적인 메티오닌 코돈인 ATG 이외의 코돈에서 번역이 개시되는 단백질로부터 유래될 수도 있다.
마우스 및 인간에는 두 부류의 MHC, 즉, MHC I 및 MHC II가 존재한다. MHC I은 고전적 및 비고전적 MHC I 하위그룹을 포함한다.
고전적 MHC I 또는 HLA -I
고전적 MHC I 분자는 인간에서는 HLA-A, HLA-B 및 HLA-C, 및 마우스에서는 H-2-K, H-2-D, H-2-B 및 H-2-L을 포함한다. 고전적 MHC I 분자는 HLA-A의 2,735개 초과의 대립유전자, HLA-B의 3,455개 초과의 대립유전자 및 HLA-C의 2,259개 초과의 대립유전자로 고도로 다형성이다. 고전적 MHC I은 모든 유핵 세포의 표면 상에서 발현되며, CD8 T 림프구에 펩티드를 제시한다. 세포 기구에 있는 단백질 중 30%는 빠르게 분해되며, 고전적 MHC I 항원 제시의 주요 기질이다.
고전적 MHC I 분자에 의해 제시되는 펩티드의 경우, 단백질은 먼저 프로테아좀에서의 단백질 분해로 시작하여 펩티드의 소포체(ER: endoplasmic reticulum) 내로의 수송체 연관 단백질(TAP: Transporter associated protein) 의존성 수송을 거쳐 HLA 펩티드 결합 포켓으로의 펩티드 로딩으로 끝나는 통상적인 프로세싱 경로(유비퀴틴 프로테아좀 시스템)를 통해 프로세싱된다. 통상적인 프로세싱 경로에 기여하는 단백질은 집합적으로 항원 프로세싱 기구(APM)로 알려져 있으며, 프로테아좀, TAP 복합체, 타파신, 소포체 아미노 펩티다제(ERAAP: endoplasmic reticulum amino peptidase), 결합 면역글로불린 단백질(BiP: binding immunoglobulin protein), 클라넥신 및 칼레티쿨린을 포함한다. 프로테아좀 서브유닛, TAP1/2, ErP57 또는 칼레티쿨린이 결여된 세포는 그의 표면에 감소된 개수의 고전적 MHC I 분자를 갖는다.
비고전적 MHC I 또는 HLA -I
비고전적 MHC I 분자는 HLA-E, HLA-F 및 HLA-G를 포함하고, 제한된 다형성을 갖는다. 이는 선천 및 적응 면역 반응을 조절하는 역할을 한다. 비고전적 MHC I 분자는 건강 및 질환 상태에서 통상적인 프로세싱 경로 및 대안적 프로세싱 경로, 둘 모두에 의해 생성된 펩티드를 제시하고, 질환 병태(예컨대, 암)에서 표적화하기 위한 새로운 마커 세트를 나타낸다.
HLA -E
비고전적 MHC 클래스 I 분자인 HLA-E는 비다형성이다. 자연에서 13개의 HLA-E 대립유전자는 오직 두 기능적 변이체, 즉, HLAE* 0101 및 HLA-E*0103으로만 확인되었다. HLA-E*0101(HLA-E107R)과 *0103(HLA-E107G)의 차이는 펩티드 결합 포켓 외부에 있는 위치 107에서의 단일 아미노산 차이이다. 고전적 MHC I 분자와 유사하게, HLA-E는 핵이 있는 모든 세포에서 발현되지만, 일반적으로 더 낮은 수준으로 발현된다. 세포 및 조직에서의 HLA-E 분자 발현은 일반적으로 스트레스 및 질환 중에 증가한다. 따라서, HLA-E는 건강한 세포와 비교하여 스트레스를 받은 세포, 또는 이환된 세포(예컨대, 암 세포)에서 차별적으로 발현된다.
건강한 세포에서, HLA-E는 수용체 CD94/NKG2와의 인게이징을 통해 NK 세포 및 CD8 T 세포의 서브세트의 활성을 억제시키거나, 또는 자극하기 위해 고전적 MHC 분자로부터 유래된 펩티드를 제시한다는 가설을 세웠다. HLA-E에 의해 제시된 특정 펩티드에 따라 HLA-E 복합체는 CD94/NKG2A 또는 CD94/NKG2C와 인게이징하여 각각 NK 세포 및 CD8 T 세포의 서브세트를 억제시키거나, 또는 활성화시킨다.
고전적 HLA-I 분자로부터 생성된 신호 펩티드와 공통된 특징을 갖는 또 다른 신호 펩티드는 비고전적 HLA-G로부터 생성된 신호 펩티드이다. 정상적인 생리학적 조건하에서의 HLA-G 발현은 엄격하게 조절되며, 신체내 비교적 조직 및 세포에서 제한된 발현이 관찰된다. HLA-G는 면역 관용 분자로서 중요한 역할을 하며, 그의 발현은 암 조직/세포에서 관찰된다. 또한, HLA-G로부터의 신호 펩티드는 통상적인 항원 프로세싱 경로에 의해 프로세싱되고, 펩티드 수송체 TAP에 의해 소포체로 전달된다. 일부 실시양태에서, 신호 펩티드는 VMAPRTLFL(서열 번호 18)이다
암 세포에서의 HLA -E 발현 및 펩티드 제시
APM의 하나 이상의 성분이 결핍된 세포는 APM 의존성 통상적인 프로세싱 경로와 독립적인 대안적 프로세싱 경로를 통해 MHC 클래스 I 분자로 펩티드를 로딩한다. APM 결핍 세포는 그의 표면에 감소된 개수의 고전적 MHC I 분자를 가질 뿐만 아니라, HLA-E 분자의 세포 표면 밀도의 증가 및 제시된 펩티드 레퍼토리의 증가를 나타낸다. 대안적 프로세싱 경로는 건강한 세포 및 이환된 세포, 둘 모두에서 구성적으로 작동이 시작되고, 펩티드를 생산한다. 그러나, 상기 펩티드는 건강한 세포에 의해서는 제시되지 않고; 대신, 이환된 세포, 또는 스트레스를 받은 세포에서만 제시된다. 따라서, "손상된 펩티드 프로세싱과 연관된 T 세포 에피토프"(TEIPP:T-cell epitopes associated with impaired peptide processing)로도 공지된, APM 결핍 세포에 의해 생성된 상이한 펩티드 레퍼토리는 암 세포에 고유한 새로운 표적을 나타내고, 암 치료에서 치료제 개발을 위한 이상적인 표적을 나타낸다.
스트레스를 받았거나, 또는 이환된 상태(예컨대, 암)에서, 스트레스를 받은 세포 또는 이환된 세포(예컨대, 암 세포)는 HLA-E 및 고전적 MHC 분자 또는 비고전적 HLA-G 분자로부터 유래된 펩티드를 포함하는 복합체를 차별적으로 발현한다. HLA-E 및 고전적 MHC 분자 또는 비고전적 HLA-G 분자로부터 유래된 펩티드를 포함하는 복합체는 건강한 세포와 비교하여 스트레스를 받은 세포 또는 이환된 세포에서 차별적으로 발현된다. 이 복합체를 표적화하면 NK 세포 및 CD8 T 세포의 서브세트 상의 수용체와 복합체의 억제 상호작용이 차단되고, 이로써, 복합체를 발현하는 세포에 대한 면역 반응이 유도된다.
MHC 　II 또는 HLA -II
MHC II 분자는 인간에서 HLA-DM, HLA-DO, HLA-DP, HLA-DQ 및 HLA-DR을 포함하고, 마우스에서 H-2 I-A 및 H-2 I-E를 포함한다. MHC II 발현은 B 세포, 수지상 세포, 대식세포, 활성화된 T 세포 및 흉선 상피 세포로 더 제한되며, MHC II 분자는 CD4 림프구에 펩티드를 제시한다.
비고전적 HLA -I(예컨대, HLA -E) 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체
특정 실시양태에서, 본원에서는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체를 표적화하는 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 적어도 하나의 중쇄 및 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 적어도 하나의 경쇄를 포함한다. 각 VH 및 VL은 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. VH 및 VL 및 CDR의 아미노산 서열이 항체의 항원 결합 특이성 및 항원 결합 강도를 결정한다. VH 및 VL 및 CDR의 아미노산 서열이 표 1에 요약되어 있다.
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 및 비관련 신생항원을 포함하는 복합체에 결합 친화도를 갖지 않는다.
일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA-E, HLA-F, HLA-G, 또는 HLA-H이다. 일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA-E이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0103이다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체 및 HLA-E*0103 및 신생항원의 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 복합체는 HLA-E 및 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 및 서열 번호 29(VTAPRTVLL)로 구성된 군으로부터 선택되는 신생항원을 포함한다. 일부 실시양태에서, 복합체는 HLA-E 및 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 및 서열 번호 27(VMAPRTVLL)로 구성된 군으로부터 선택되는 신생항원을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 뮤린 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 카멜리드 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간화 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 단일 도메인 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일 도메인 항체는 카멜리드 단일 도메인 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3ε 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 다기능성 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 치료 모이어티는 세포독소, 화학요법 약물, 면역억제제, 및 방사성동위원소를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 세포독소 또는 세포독성제는 세포에 유해한(예컨대, 세포를 사멸시키는) 임의의 작용제를 포함한다. 예로는 탁솔, 사이토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티디움 브로마이드, 에메틴, 미토마이신, 에토포시드, 테노포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 독소루비신, 다우노루비신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미토산트론, 미트라마이신, 악티노마이신 D, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 및 퓨로마이신 및 그의 유사체 또는 동족체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 화학요법제로는 항대사물질(예컨대, 메토트렉세이트, 6-메르캅토푸린, 6-티오구아닌, 시타라빈, 플루다라빈, 5-플루오로우라실, 데카르바진, 하이드록시우레아, 아자티프린, 젬시타빈 및 클라드리빈), 알킬화제(예컨대, 메클로레타민, 티오에파, 클로람부실, 멜팔란, 카르무스틴(BSNU) 및 로무스틴(CCNU), 사이클로포스파미드, 부술판, 디브로모만닛톨, 스트렙토조토신, 미토마이신 C, 및 시스-디클로로디아민 백금(II)(DDP) 시스플라틴), 안트라사이클린(예컨대, 다우노루비신(이전의 다우노마이신) 및 독소루비신), 항생제(예컨대, 닥티노마이신(이전의 악티노마이신), 블레오마이신, 미트라마이신 및 안트라마이신(AMC)), 및 항유사분열제(예컨대, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 도세탁셀, 파클리탁셀 및 비노렐빈)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 방사성동위원소로는 아이오딘-131, 이트륨-90 또는 인듐-111을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 치료 모이어티의 추가 예로는 원하는 생물학적 활성을 갖는 단백질 또는 폴리펩티드가 있다. 상기 단백질은 예를 들어, 효소적으로 활성인 독소, 또는 그의 활성 단편, 예컨대, 아브린, 리신 A, 슈도모나스 외독소, 또는 디프테리아 독소; 단백질, 예컨대, 종양 괴사 인자 또는 인터페론-γ; 또는 생물학적 반응 조절물질, 예컨대, 예를 들어, 림포카인, 인터루킨-1(IL-1), 인터루킨-2(IL-2), 인터루킨-6(IL-6), 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF: granulocyte macrophage colony stimulating factor), 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF: granulocyt colony stimulating factor), 또는 다른 성장 인자를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 세포는 암 세포이다.
항체 가변 도메인( VL 및 VH )
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 경쇄를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 중쇄를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH) 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄 가변 도메인(VL) 및 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL), 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
항체 중쇄 및 경쇄
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC)를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄(HC)를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC) 및 중쇄(HC)를 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄(HC)를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC) 및 중쇄(HC)를 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄(HC)를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC) 및 중쇄(HC)를 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC)를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄(HC)를 갖는 것인 항체를 추가로 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄(LC) 및 중쇄(HC)를 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
항체 상보성 결정 영역( CDR )
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 경쇄를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다.
본원에서는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 항체는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 중쇄를 갖는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
본원에서는 또한 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체로서, 경쇄 상보성 결정 영역(CDR) 및 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 항체를 개시한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
이중특이적 항체
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3ε 단백질에 결합한다.
일부 실시양태에서, BiTE는 항CD3 항체, 또는 그의 단편, 예컨대, UCHT1, OKT3, F6A, L2K, 무로모나브, 오텔릭시주맙, 테플리주맙, 비실리주맙, CD3-12, MEM-57, 4D10A6, CD3D, 또는 TR66을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
치료 방법
본원에서는 암 치료를 필요로 하는 개체에게 본원에 개시된 바와 같은, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체를 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 암은 유방암이다. 일부 실시양태에서, 암은 신장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암이다. 일부 실시양태에서, 암은 난소암이다. 일부 실시양태에서, 암은 결장직장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 췌장암이다. 일부 실시양태에서, 암은 융모막 암종이다. 일부 실시양태에서, 암은 비소세포 폐 암종(NSCLC)이다. 일부 실시양태에서, 암은 위암이다. 일부 실시양태에서, 암은 자궁경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 두부경부암이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 백혈병이다. 일부 실시양태에서, 암은 림프종이다. 일부 실시양태에서, 암은 급성 골수성 백혈병(AML)이다. 일부 실시양태에서, 암은 다발성 골수종이다. 일부 실시양태에서, 암은 골수형성이상 증후군이다. 일부 실시양태에서, 암은 B 세포 악성종양이다. 일부 실시양태에서, 암은 외투 세포 림프종이다.
일부 실시양태에서, 암 세포는 신생항원을 차별적으로 발현한다. 일부 실시양태에서, 암 세포는 HLA-E를 차별적으로 발현한다. 일부 실시양태에서, 암 세포는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체를 차별적으로 발현한다.
일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는다. 일부 실시양태에서, 항체는 비고전적 HLA-I 및 비관련 신생항원을 포함하는 복합체에 결합 친화도를 갖지 않는다.
일부 실시양태에서, 신생항원은 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다. 일부 실시양태에서, 신생항원은 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA- E, HLA-F, HLA-G, 또는 HLA-H이다. 일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I는 HLA-E이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0101이다. 일부 실시양태에서, HLA-E는 HLA-E*0103이다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E*0101 및 신생항원을 포함하는 복합체, 및 HLA-E*0103 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 복합체는 HLA-E 및 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 및 서열 번호 29(VTAPRTVLL). 일부 실시양태에서, 복합체는 HLA-E, 및 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 및 서열 번호 27(VMAPRTVLL)로 구성된 군으로부터 선택되는 신생항원을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 뮤린 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 카멜리드 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간화 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 TCR 유사 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 단일 도메인 항체이다. 일부 실시양태에서, 단일 도메인 항체는 카멜리드 단일 도메인 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 다중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)이다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, BiTE는 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3ε 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 다기능성 항체이다.
일부 실시양태에서, 항체는 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함한다. 치료 모이어티는 세포독소, 화학요법 약물, 면역억제제, 및 방사성동위원소를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 세포독소 또는 세포독성제는 세포에 유해한(예컨대, 세포를 사멸시키는) 임의의 작용제를 포함한다. 예로는 탁솔, 사이토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티디움 브로마이드, 에메틴, 미토마이신, 에토포시드, 테노포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 독소루비신, 다우노루비신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미토산트론, 미트라마이신, 악티노마이신 D, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 및 퓨로마이신 및 그의 유사체 또는 동족체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 화학요법제로는 항대사물질(예컨대, 메토트렉세이트, 6-메르캅토푸린, 6-티오구아닌, 시타라빈, 플루다라빈, 5-플루오로우라실, 데카르바진, 하이드록시우레아, 아자티프린, 젬시타빈 및 클라드리빈), 알킬화제(예컨대, 메클로레타민, 티오에파, 클로람부실, 멜팔란, 카르무스틴(BSNU) 및 로무스틴(CCNU), 사이클로포스파미드, 부술판, 디브로모만닛톨, 스트렙토조토신, 미토마이신 C, 및 시스-디클로로디아민 백금(II)(DDP) 시스플라틴), 안트라사이클린(예컨대, 다우노루비신(이전의 다우노마이신) 및 독소루비신), 항생제(예컨대, 닥티노마이신(이전의 악티노마이신), 블레오마이신, 미트라마이신 및 안트라마이신(AMC)), 및 항유사분열제(예컨대, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 도세탁셀, 파클리탁셀 및 비노렐빈)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 적합한 방사성동위원소로는 아이오딘-131, 이트륨-90 또는 인듐-111을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 치료 모이어티의 추가 예로는 원하는 생물학적 활성을 갖는 단백질 또는 폴리펩티드가 있다. 상기 단백질은 예를 들어, 효소적으로 활성인 독소, 또는 그의 활성 단편, 예컨대, 아브린, 리신 A, 슈도모나스 외독소, 또는 디프테리아 독소; 단백질 예컨대, 종양 괴사 인자 또는 인터페론-γ; 또는 생물학적 반응 조절물질, 예컨대, 예를 들어, 림포카인, 인터루킨-1(IL-1), 인터루킨-2(IL-2), 인터루킨-6(IL-6), 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF), 과립구 콜로니 자극 인자 (G-CSF), 또는 다른 성장 인자를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합은 면역 반응을 유도한다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 T 세포의 활성화를 포함한다. 일부 실시양태에서, T 세포는 CD8+ T 세포이다. 일부 실시양태에서, 면역 반응은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL) 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일하고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하고, 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
본원에 개시된 방법과 함께 사용하기 위해 임의의 적합한 투여 경로가 고려된다. 일부 실시양태에서, 항체는 정맥내 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 피하 투여에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 국소적으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 전신으로(예컨대, 정맥내, 근육내, 피하, 피내, 경구적으로, 비내로, 설하로) 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 고약, 로션 또는 에멀젼으로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 항체는 액제로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 항체는 국부, 경구, 협측 또는 비강 투여용으로 제제화된다.
일부 실시양태에서, 개체는 항체 투여 전에 모니터링된다. 증상이 확인되고, 그의 중증도가 평가된다. 본원에 기술된 바와 같은 항체는 단독으로 또는 본원에서 논의되거나, 또는 당업자에게 공지된 바와 같이 단독으로 또는 시간 경과에 따라 다회에 걸쳐 추가 치료와 함께 조합하여 투여된다. 일부 실시양태에서, 치료 요법의 효능이 측정되도록 개체를 모니터링한다. 일부 실시양태에서, 치료 요법은 예비 치료 결과에 반응하여 수정되고, 이로써, 치료 용량 또는 빈도 또는 용량 및 빈도는 증상 완화, 부작용 감소, 또는 증상 완화와 부작용 감소의 조합을 고려하여 피험체의 반응을 원하는 수준으로 달성할 수 있도록 변경된다.
약학적 조성물
본원에서는 또한 (a) 본원에 개시된 바와 같은 비고전적 HLA-I(예컨대, HLA-E) 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체, 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 개시한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 LC 및 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 HC를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄(LC) 및 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄(HC)를 포함한다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, LC는 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖고, HC는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 도메인(VL) 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, VL은 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일하고, VH는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR 서열 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하고, 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 약 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열 번호 1로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열 번호 2로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 서열 번호 3으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3, 서열 번호 4로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열 번호 5로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열 번호 6으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3 중 적어도 하나를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 이중특이적 항체이다. 일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC); 또는 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및 (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 70% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 이중특이적 항체는 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 조성물과 함께 사용하기 위한 부형제로는 말레산, 타르타르산, 락트산, 시트르산, 아세트산, 중탄산나트륨, 인산나트륨, 히스티딘, 글리신, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 염화아연, 물, 덱스트로스, N-메틸피롤리돈, 디메틸 술폭시드, N,N-디메틸아세트아미드, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 디에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르 및 계면활성제 폴리옥시에틸렌-소르비탄 모노올레이트를 포함한다.
일부 실시양태에서, 조성물은 추가적인 치료제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 치료제는 화학요법제이다. 화학요법제로는 다른 것들 중에서도 특히 세포독성제, 항대사제(예컨대, 폴레이트 길항제, 퓨린 유사체, 피리미딘 유사체 등), 토포이소머라제 억제제(예컨대, 캄프토테신 유도체, 안트라센디온, 안트라사이클린, 에피포도필로톡신, 퀴놀린 알칼로이드 등), 항미세관제(예컨대, 탁산, 빈카 알칼로이드), 단백질 합성 억제제(예컨대, 세팔로탁신, 캄프토테신 유도체, 퀴놀린 알칼로이드), 알킬화제(예컨대, 알킬 술포네이트, 에틸렌이민, 질소 머스타드, 니트로소우레아, 백금 유도체, 트리아젠 등), 알칼로이드, 테르페노이드 및 키나제 억제제를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 항체 및 치료제는 동일한 제제에 있다. 일부 실시양태에서, 항체 및 치료제는 상이한 제제에 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기술된 항체는 다른 치료제의 투여 이전에 사용된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기술된 항체는 다른 치료제의 투여와 동시에 사용된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기술된 항체는 다른 치료제의 투여 이후에 사용된다.
약학적 제제는 특정 국소, 국부 또는 전신 투여 또는 전달 경로와 호환되도록 제조된다. 따라서, 약학적 제제는 특정 경로에 의한 투여에 적합한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다. 본원의 조성물에 대한 투여 경로의 구체적인 비제한적 예로는 비경구, 예컨대, 정맥내, 동맥내, 피내, 근육내, 피하, 흉막내, 경피(국부), 경점막, 두개내, 척수내, 안구내, 직장, 경구(소화관), 점막 투여, 및 치료 방법 또는 투여 프로토콜에 적합한 임의의 다른 제제가 있다.
비경구 적용에 사용되는 액제 또는 현탁제는 멸균 희석제, 예컨대, 주사용수, 염수 용액, 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 합성 용매; 항박테리아제, 예컨대, 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대, 아스코르브산 또는 중황산나트륨; 킬레이트제, 예컨대, 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트; 및 장성 조정제, 예컨대, 염화나트륨 또는 덱스트로스를 포함한다. 일부 실시예에서, pH는 예컨대, 염산 또는 수산화나트륨과 같은 산 또는 염기로 조정된다.
주사용 약학적 제제는 멸균 수성 액제(수용성인 경우) 또는 분산제 및 멸균 주사용 액제 또는 분산제의 즉석 제조를 위한 멸균 산제를 포함한다. 정맥내 투여를 위해 적합한 담체로는 생리 식염수, 정균수, 크레모포 EL(Cremophor EL)™(BASF, 미국 뉴저지주 파시파니 소재) 또는 포스페이트 완충처리된 염수(PBS: phosphate buffered saline)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 담체는 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등) 또는 그의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질이다. 일부 실시양태에서, 유동성은 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅 사용에 의해, 분산제인 경우, 필요한 입자 크기 유지에 의해, 및 계면활성제 사용에 의해 유지된다. 항박테리아제 및 항진균제는 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산 및 티메로살을 포함한다. 등장화제, 예를 들어, 당; 다가알콜, 예컨대, 만닛톨 또는 소르비톨을 포함하거나; 또는 일부 실시양태에서, 염화나트륨이 본 조성물에 포함된다. 일부 경우에서, 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어, 모노스테아르산알루미늄 또는 젤라틴이 주사용 조성물의 흡수를 연장시키는 제제도 포함된다.
멸균 주사용 제제는 상기 성분 중 하나 또는 조합과 함께 적절한 용매에 필요한 양의 활성 조성물을 혼입함으로써 제조된다. 일반적으로, 분산제는 기초 분산 매질 및 임의의 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클에 활성 조성물을 혼입함으로써 제조된다. 멸균 주사용 액제의 제조를 위한 멸균 산제의 경우, 제조 방법은 예를 들어, 이를 통해 이전에 제조된 그의 액제로부터 활성 성분의 산제와 임의의 추가의 원하는 성분이 수득되는 진공 건조 및 동결 건조를 포함한다.
경점막 또는 경피 투여를 위해, 투과될 장벽에 적절한 침투제가 제제에 사용된다. 이러한 침투제는 당업계에 공지되어 있고, 예를 들어, 경점막 투여를 위해, 계면활성제, 담즙산염 및 푸시딘산 유도체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 경점막 투여는 비강 스프레이, 흡입 장치(예컨대, 흡인기) 또는 좌제의 사용을 통해 달성된다. 경피 투여를 위해, 활성 화합물은 연고, 고약, 젤, 크림 또는 패치로 제제화된다.
일부 실시양태에서, 약학적 제제는 예컨대, 방출 조절형 제제 또는 시간 지연 물질, 예컨대, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 스테아레이트와 같은, 신체로부터의 급속한 제거를 방지하는 담체와 함께 제조된다. 일부 실시양태에서, 제제는 또한 국소, 국부 또는 전신 전달 또는 조절형 또는 지속 방출을 달성하기 위해 예컨대, 임플란트 및 마이크로캡슐화된 전달 시스템과 같은 제조 물품을 사용하여 전달된다.
실시예
하기 실시예는 본 발명의 다양한 실시양태를 예시하기 위한 목적으로 제공되고, 어느 방식으로든 본 발명을 제한하는 것을 의미하지 않는다. 본원에 기술된 방법과 함께 본 실시예는 현재 바람직한 실시양태를 대표하고, 예시적이며, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 당업자는 청구범위의 범주에 의해 정의된 바와 같이 본 발명의 정신 내에 포함되는 그 안의 변경 및 다른 용도를 착안해 낼 수 있을 것이다.
실시예 1. 항체 생성
먼저, R4 클론을 반합성 인간 항체 파지 라이브러리로부터 단리시켰다. 간략하면, 이는 하기와 같이 수행하였다. 크리에이티브 바이오랩스(Creative Biolabs)(HuScL-2 파지 라이브러리)에 의해 구성된 인간 scFv 항체 파지 디스플레이 라이브러(1.42 x 109 클론)를 사용하여 HLA-G 신호 펩티드/HLA-E*0103 복합체(ABI-V-0025; VMAPRTLFL(서열 번호 18))에 대해 스크리닝하였다. 간략하면, 5개의 내부 펩티드/HLA-A2*0201 복합체(ABI-AV-007-Biot, ABI-AV-0010-Biot, ABI-AV-0014-Biot, ABI-AV-0019 및 ABI-AB-0030-Biot) 믹스 30 ㎍을 고갈 및 사전 차단을 위해 사용한 후, 50 ㎍의 ABI-V-0025을 이용하여 농축을 수행하였다. 파지 라이브러리의 농축 계수는 2.73x106(파지 입력량: 5x1011, 파지 출력량: 1.83x105)이었다. 상기 프로세스를 제2 라운드의 바이오패닝 동안 반복하였고, 농축 계수는 4.03x102였다. 상기 프로세스를 제3 라운드의 바이오패닝 동안 반복하였지만, 고갈을 위해 복합체 믹스 20 ㎍을 사용하였다(농축 계수 2.31x102). 제4 라운드의 바이오패닝을 위해, 고갈 및 사전 차단을 위해 50 ㎍의 ABI-V-0018을 사용한 후, 이어서, 농축을 위해, 50 ㎍의 ABI-V-0025를 사용하였다(농축 계수 44). 제4 라운드의 바이오패닝의 파지 출력물로부터, 40개의 클론을 취하고, 시퀀싱하여 하나의 고유한 서열을 밝혀냈다. 이 클론을 R4(클론 1)로 지정하였다(도 1a-도 1b). R4 항체의 친화도를 측정하기 위해, 0.1% BSA, 0.1% 트윈(Tween)20, PBS 희석/세척 완충제 중에서 희석하고, 포르테바이오 옥테트 프로테인 A(ForteBio Octet Protein A) 바이오센서 팁에 20 ug/ml로 50초 동안 고정화시켰다. 이어서, 팁을 희석/세척 완충액 중에서 50초 동안 세척하였다. 6개 농도의 (희석/세척 완충제 중 100 ug/ml에서 시작하는 연속 희석액) 정규 0025-E 01:03 단량체 복합체를 150초 동안에 걸쳐 항체 결합 회합을 측정한 후, 이어서, 바로 150초 동안 해리(희석/세척 완충제)로 이어졌다(도 1c). 클론 R4(클론 1)에 대한 평형 해리 상수(KD)는 411 nM인 것으로 측정되었다(도 1d).
R4의 친화도 성숙: 사이클 2: V-0025에 대한 클론 R4의 결합 친화도를 증가시키기 위해, CDRH3 중에서 2개의 아미노산을 변경함으로써 R4 scFv 구성물을 효모 벡터로 클로닝하여 R4 돌연변이체의 라이브러리를 생성하였다. 간략하면, 생성된 효모 디스플레이 라이브러리는 100 mM 아세트산리튬(LiAc, Sigma) + 10 mM 디티오트레이톨(DTT, Sigma) 중에서 인큐베이션시킴으로써 형질전환을 위해 제조된 EBY100 효모 컴피턴트 세포를 사용하였다. 1 ㎍의 scFv 클론, 및 GAL1 프로모터 뒤에 Aga2 및 scFv 뒤에 플래그(DYKDDDDK) 에피토프 태그(서열 번호 36)를 포함하도록 변경된 100 ng의 pYES3(ThermoFisher)을 이용하여, 10 mM LiAc 중 2 mm 큐벳(BioRad)당 60 OD의 제조된 효모와 함께 진펄서(GenePulser)(BioRad)를 이용하여 전기천공을 달성하였다. 형질전환체의 개수를 측정하기 위해, 형질전환된 효모의 1/10, 1/100 및 1/1000 희석액 100 ㎕를 트립토판 및 우라실이 결핍된 글루코스 플레이트(D-UT, Teknova) 상에 스프레드하였다. 30℃에서 2일 동안 인큐베이션시킨 후, 형질전환 효율을 계산하였다. 이어서, PCR에 의한 삽입 다양성을 위해 무작위 클론을 취하였다. 트립토판 및 우라실이 결핍된 글루코스(D-UT, Teknova)를 포함하는 CM 브로쓰 중에서 200 rpm으로 진탕시키면서 30℃에서 효모를 성장시켰다. 0.1% 라피노스(Sigma)로 보충되고, 트립토판 및 우라실이 결핍된 갈락토스(D-UT, Teknova)(GR-UT)를 포함하는 CM 브로쓰 중에서 적어도 20 hr 동안 효모를 성장시킴으로써 scFv 표면 유도를 달성하였다.
효모를 회전시키면서 실온에서 30분 내지 1시간 동안 PBS 0.05% 트윈 중의 2% BSA(차단 완충제)로 먼저 차단시킨 후 염색하였다. 이어서, 효모를 단량체 농도에 따라 30분 내지 90분 동안 얼음 상에서 비오티닐화된 펩티드/HLA 복합체 단량체와 함께 인큐베이션시켰다. 얼음 상에서 30분 동안 스트렙타비딘 PE(ThermoFisher) 및 DYKDDDDK 에피토프 태그(서열 번호 36) 알렉사 플루오르(Alexa Fluor) 488(R&D Systems)로 2차 표지를 달성하였다. LSR II 유세포 분석기(BD Biosciences) 또는 CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 사용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어(Flowjo Software) 버전 10 또는 FACSDiva(BD Biosciences)를 사용하여 데이터를 작성하였다.
라이브러리 크기의 적어도 10배의 커버리지를 이용하여 자기 활성화 세포 분류(MACS: magnetic-activated cell sorting) 또는 형광 활성화 세포 분류(FACS: fluorescence-activated cell sorting)에 의해 스크리닝을 달성하였다. MACS 스크리닝을 위해, 효모를 회전시키면서 실온에서 30분 내지 1시간 동안 PBS 0.05% 트윈 중의 2% BSA(차단 완충제)로 먼저 차단시켰다. 이어서, 비오티닐화된 펩티드/HLA 복합체 단량체를 1 μM로 30분 동안 얼음 상에서 인큐베이션시켰다. 스트렙타비딘 마이크로비드(Miltenyi Biotec)를 이용하여 2차 표지를 달성하였다. 표지된 효모를 MACS 분리기(Miltenyi Biotec)의 MACS 칼럼 상에 부었다. 칼럼에 결합된 효모를 수확하고, 농축 집단으로 간주하였다. FACS 스크리닝을 위해, 유세포 분석법 섹션에 기술된 바와 같이 효모를 제조하였다. FACS 아리아 II(FACS Aria II)(BD Bioscience)를 사용하여 샘플을 분류하였다. 분류된 효모를 농축 집단으로 간주하였다.
플레이팅하여 고유한 scFv 클론을 확인하였다. 30℃에서 2일 후, 개별 콜로니를 취하고, PCR에 의해 분석하였다. 선택된 클론의 전장의 인간 IgG1을 Expi293F(ThermoFisher) 세포에서 생성하였다. 간략하면, 항체 가변 영역을 인간 카파 경쇄 불변 영역(pFUSE2ss-CLIg-hK, Invivogen) 및 인간 IgG1 불변 영역(pFUSEss-CHIg-hG1, Invivogen) 서열이 매칭되는 포유동물 발현 벡터로 서브클로닝하였다. 벡터를 2:3 경쇄:중쇄 비로 형질감염시켰다. 항체를 단백질 A 수지(Genscript)를 이용하여 정제하고, 전기영동에 의해 환원 및 비환원 조건에서 확인하였다.
제1 라운드의 선별은 1 μM의 V-0025를 이용하여 수행하였다. 게이팅은 모체(R4)에 의한 결합에 기초하였으며; 모체는 V-0025에 대하여 0.11%인 것으로 나타난 반면, 사이클 2 라이브러리는 1.66%를 보였으며, 이는 더 높은 친화도의 결합제가 존재한다는 것을 시사하는 것이다(도 2a). 라운드 2 분류는 100 nM V-0025를 사용하였다. 사이클 2 라이브러리는 0.23% 결합을 보인 반면, 모체는 0%인 것으로 나타났고; 음성 대조군(V-0018)에 대해서는 결합이 관찰되지 않았다(도 2b). 제3 라운드의 분류는 10 nM V-0025를 사용하였고, 여기서, 1.05%의 결합이 관찰되었다(도 2c). 최종 라운드의 분류는 K오프를 도입하였고; 간략하면, V-0025를 100 nM로 30분 동안 인큐베이션시킨 후, 전장 hIgG1 포맷의 R4(R4-IgG1)와 함께 인큐베이션시켰다. R4-IgG1을 항체 싱크로서 작용하도록 다양한 시점에 500 nM로 첨가하였다. 따라서, K오프 압력을 사용하여 최종 라운드의 분류를 수행하여 상위 클론을 선택하였(도 2d). 고유한 클론을 확인하기 위해, 개별 콜로니를 취하고, 시퀀싱하였다(n=48). 10개의 고유한 클론이 확인되었고(표 2), 결합 친화도를 모체 클론과 비교하였다. 고유한 클론 중에서 6개의 클론은 모체와 비교하여 V-0025에 대해 적어도 100배 더 큰 결합을 갖는 것으로 나타났다(도 3a-도 3d). 한 클론(클론 R2A_1)은 증가된 결합 친화도를 갖는 것 뿐만 아니라, 우수한 선택성 또한 보였고, 이를 추가 분석을 위해 선택하였다(도 3e-도 3g).
Figure pct00005
클론 R2A _1의 특징화 : ELISA에 의한 시험을 위해 및 세포 염색을 위해 클론 R2A_1을 scFv를 전장 hIgG1로 전환시켰다. ELISA 데이터에 기초하여, 친화도는 약 20 nM인 것으로 측정되었고(데이터는 제시되지 않음), 이는 모체 클론인 R4와 비교하여 친화도가 10배 초과로 증가하였다는 것을 나타낸다. 항체의 안정성을 체크하기 위해, 항체를 37℃에서 72 hr 동안 보관한 후 결합을 비교하였다. 도 4에 제시된 바와 같이, 항체를 37℃에서 72 hr 동안 보관하였을 때, A549-B4 세포에의 R2A_1의 결합은 심하게 손상되었다.
클론 R2A _1의 안전화: R2A_1의 안정성을 증가시키기 위해, VH 및 VL 둘 모두의 프레임워크 영역 중의 아미노산에 대해 수개의 변경이 이루어졌다. VL의 경우, CDRL2를그의 생식계열(IGKV1-39)과 매칭되도록 변형시켰다. 이는 또한 N-연결 글리코실화 부위를 제거하였다. VH의 경우, 프레임워크 영역 1에서, Gln5를 생식계열(Leu5)과 매칭되도록 변이시켰다. 또한, 프레임워크 영역 1에서, Met18을 생식계열(Leu18)과 매칭되도록 변이시켰다. 안정화된 클론을 R4c1 H1-L1로 지칭하였다. 디스플레이를 위해 scFv 서열을 효모 내로 삽입하고, 모체(R2A_1)와 비교하였다. 친화도가 일부 손실되기는 하였지만, 특이성은 변경되지 않았다(데이터는 제시되지 않음).
더 큰 친화도 및 더 광범위한 특이성을 갖는 항체를 생성하기 위해, R4c1-H1-L1에 기초하여 효모 디스플레이 라이브러리를 생성하고, CDRL3 영역에 4개의 아미노산 돌연변이를 도입하였으며, 이는 CDRL3 서열 중 44%가 모체로부터 잠재적으로 변경될 수 있다는 것을 의미한다. 도 5a(R0)에 제시된 바와 같이, 모체보다 표적에 대하여 더 큰 결합을 보인 선택 그룹이 존재하기는 하였지만, 표적에 대해 결합을 보인 클론은 거의 없었다. 10 nM 표적을 사용하여 분류를 수행하였고(R1 선별), 여기서, 모체보다 결합 친화도가 더 큰 선택 클론에 대해서만이 오직 게이팅되었다(도 6a). R1 라이브러리를 표적에의 결합에 대해 체크하고, 모체와 비교하여 친화도가 개선된 클론 결합수는 실질적으로 증가한 것으로 관찰되었다(도 5a, R1). 친화도가 증진된 클론을 선별하기 위해, R1 라이브러리에 대해 Koff 압력을 가하였다. 간략하면, 라이브러리를 10 nM 표적과 함께 인큐베이션시켰다. 세척 후, 전장 IgG1로서 1 μM 모체 클론을 항체 싱크로서 작용하도록 15 내지 120분 동안 첨가하였다. 계속해서 표적에 대해 결합을 보인 임의의 효모는 모체 클론과 비교하여 더욱 큰 K오프를 나타내었다. 도 5b에 제시된 바와 같이, 심지어 항체 싱크로 120분 경과 후에도 결합을 유지한 효모 클론이 관찰되었다. 이러한 고도로 개선된 클론을 선별하기 위해, 항체 싱크로서 45분 동안 10 nM 표적 및 1 μM 모체 클론-IgG로 K오프를 이용하여 최종 분류(R2 분류)를 수행하였고, 분류 게이트를 수행하여 최고치의 친화도를 갖는 클론만을 수집하였다(도 6b). 분류 후, 개별 클론을 단리시키고, 시퀀싱 하였다(n=60). 21개의 고유한 클론이 발견되었고(표 3), 1 및 0.1 nM에서 표적에의 결합에 대해 체크하였다(도 7). 추가 시험을 위해 표적에의 결합이 상위에 있는 3개(클론 R2-A01, R2-A12, R2-C09, 도 7 검은색 화살표 표시)를 선택하였다.
Figure pct00006
실시예 2. ELISA, FACS 및 무표지 기술에 의한 상위 클론의 특징화
효모 디스플레이로부터 확인된 상위 3개의 클론을 hIgG1로 제조하고, 특이성 및 친화도에 대해 시험하였다. 시험된 3개의 클론 중 R2-A12는 가장 우수한 친화도 및 가장 광범위한 특이성을 보였다(데이터는 제시되지 않음). R2-A12를 ABX0020으로 명명하였고, 1 L 일시적 형질감염 프로토콜에 따라 CHO 세포에서 생산한 후, 단백질-A 친화도 크로마토그래피에 의한 정제하였다. SDS-PAGE 환원(중쇄 및 경쇄를 나타내는 2개의 밴드) 및 비환원(~150 kD에서 단일 밴드)(도 8a)에 의해, 및 크기 배제 크로마토그래피에 의한 단일 피크 관찰(도 8b)에 의해 샘플 순도를 측정하였다. ABX0020을 먼저 광범위한 펩티드/HLA 복합체 어레이에 대해 시험하였다. 도 9a에 제시된 바와 같이, HLA-E 클론 3D12는 펩티드-공(empty) HLA-E를 비롯한 모든 HLA-E 복합체에 결합한다. 그러나, ABX0020은 고전적 HLA 신호 펩티드/HLA-E 복합체에 특이적이었다(도 9b). 이는 또한 비고전적 HLA, HLA-G 신호 펩티드/HLA-E 복합체도 인식하였다. 이는 어떤 추가의 펩티드/HLA-E 복합체 또는 어떤 펩티드/HLA-A2 복합체도 인식하지 못했다. HLA-E(Qa1b)의 마우스 동족체와의 교차 반응성도 관찰되지 않았다. ELISA를 위해, 고순도 HLA-E 01:03 및 HLA-A2 02:01 단량체 복합체(0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 희석/세척 완충제 중 희석)를 뉴트라비딘 코팅된 마이크로어레이 플레이트에 0.25 ㎍/ml로 RT에서 1시간 동안 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 희석/세척 완충제 중에서 1 ㎍/ml로 희석된 항체를 RT에서 1시간 동안 인큐베이션시킨 후, 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 항마우스 및 항인간 HRP 접합체를 희석/세척 완충제 중에서 1:5000으로 희석하고, RT에서 30분 동안 인큐베이션시킨 후, 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. TMB 기질을 플레이트 웰에 첨가하고, 50 ul/웰로 15분 동안 인큐베이션시켰다. 450 nm 흡광도에서 플레이트를 판독하기 전에 1 N HCl 정지액을 50 ul/웰로 첨가하였다.
ABX0020이 2개의 상이한 표현형의 HLA-E, 즉, HLA-E 01:03 및 HLA-E 01:01에 의해 제시된 고전적 HLA I 신호 펩티드를 인식하였는지 여부를 측정하기 위해, 각 단량체 복합체를 상기 기술된 바와 같이 ELISA에서 사용하였다. 두 HLA-E 대립유전자; HLA-E*0101 및 *0103에서 펩티드에의 결합 사이에는 어떤 차이도 관찰되지 않았다(도 10a-도 10b).
ABX0020에 대한 친화도 측정: 무표지 기술(Resonant Sensors, Inc., ResoSens 기기)을 사용하여 ABX0020의 결합 친화도를 측정하였다. 해리 평형 상수(KD)는 1.87 nM 또는 R4 클론 대비 200배 초과로 개선된 것으로 밝혀졌다(도 9c). 친화도를 측정하는 방법은 하기와 같았다. 결합이 평형에 도달할 때까지 (PBS 완충제 중에 희석된) 써모피셔 캡쳐 셀렉트™ 비오틴(Thermofisher Capture Select™ Biotin) 항IgG-Fc (Hu)를 뉴트라비딘 코팅된 바이오네틱(Bionetic) 무표지 마이크로어레이 플레이트에 5 ug/ml로 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 희석/세척 완충제로 3X 세척하였다. ABX0020(희석/세척 완충제 중 5 ug/ml)은 결합이 평형에 도달할 때까지 항IgG-Fc에 의해 포획되었다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 3X 세척하였다. V-0025 HLA-E 01:03 단량체 복합체(희석/세척 완충제 중에서 5 ug/ml에서 시작하는 연속 희석액)를 웰에 첨가하고, 20분 동안 인큐베이션시켜 결합 회합을 측정한 후 즉시 대략 25분 동안 해리(희석/세척 완충제)로 이어졌다. 결합 친화도는 트레이스드로어(Tracedrawer) 동역학적 분석 소프트웨어를 사용하여 계산하였다.
ELISA에 의해 ABX0020 검출 감도를 관찰할 수 있다. 간략하면, V-0034 HLA-E 01:03 단량체 복합체(0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 완충제 중에서 2 ㎍/ml에서 시작하는 연속 희석액)를 RT에서 1시간 동안 뉴트라비딘 코팅된 마이크로어레이 플레이트 상에 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 항체를 희석/세척 완충제 중에 1 ㎍/ml로 희석시키고, RT에서 1시간 동안 인큐베이션시킨 후, 이어서, 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. 항마우스 및 항인간 HRP 접합체를 희석/세척 완충제 중에서 1:5000으로 희석하고, RT에서 30분 동안 인큐베이션시킨 후, 이어서, 희석/세척 완충제 중에서 5X 세척하였다. TMB 기질을 50 ㎕/웰로 15분 동안 인큐베이션시켰다. 1 N HCl 정지액을 50 ㎕/웰로 첨가하고, 450 nm로 플레이트를 판독한다. 도 9d에서, ABX0020 및 HLA-E는 1 ㎍/mL로 결합하였고, 항원의 V-0034의 적정에 대해 적정하였다. 유사하게, 도 9e에서, V-0034를 0.25 ㎍/mL로 결합시키고, 도 9d에 대해 기술된 바와 같은 유사한 ELISA 프로토콜을 사용하여 ABX0020 및 HLA-E의 적정에 대해 시험하였다. 안정성을 체크하기 위해, ABX0020을 37℃에서 7 내지 14일 동안 그대로 방치한 후, 이어서, 4℃에서 보관된 ABX0020에 대해 체크하였다. ABX0020을 37℃에서 7 내지 14일 동안 인큐베이션된 마우스 혈청 중에서 1 ㎍/ml로 희석시키고(4℃ 대조군은 시험 당시 혈청 중에서 제조하였고), HLA-E 01:03 단량체 복합체가 고정화되어 있는 웰에 첨가하고, 상기 기술된 바와 같이 ELISA를 실행하였다. 도 9f에 제시된 바와 같이, 결합은 변경되지 않았으며, 이는 ABX0020의 안정성이 우수하다는 것을 시사하는 것이다.
특이성을 추가로 특징화하기 위해, HLA-E를 발현하도록 형질감염된 K-562 세포(K562.E)를 다수의 펩티드로 펩티드 펄싱한 후, 이어서, HLA-E 및 ABX0020에의 결합에 대해 시험하였다. 도 9g에 제시된 바와 같이, 펩티드 펄싱된 것은 모두 펩티드 부재인 것(비펄싱)과 비교하여 HLA-E 발현의 증가에 기초하여 로딩을 보였다. ABX0020은 HLA-E에 로딩된 고전적 HLA 및 비고전적 HLA 신호 펩티드 HLA-G에 대해 특이성을 보여주었으며, 시험된 3개의 추가 펩티드에는 결합하지 않았다(도 9h). V-0025(HLA-G 신호 펩티드)에 대한 펩티드 서열에 기초한 알라닌 스캔은 펩티드/HLA-E 복합체에의 ABX0020의 결합이 주로 위치 8 및 위치 9의 펩티드에 의존한다는 것을 나타내었다(도 9i). 전반적으로, 상기 결과는 ABX0020이 고전적 HLA 펩티드 신호 서열 및 비고전적 HLA-G 펩티드 신호 서열에 대해 높은 친화도 및 안정성으로 광범위한 선택성을 나타낸다는 것을 시사하는 것이다.
실시예 3. ABX0020은 표적 양성 암 세포주에 선택적으로 결합한다
특이성을 확인하기 위해, 다양한 종양 세포주에서 ABX0020의 결합을 시험하였다. HLA-E는 정상 태반 영양막에서 고도로 발현되는 것으로 알려져 있기 때문에, 융모막 암종 영양막 세포주 JEG-3을 HLA-E 및 ABX0020 모두에 의한 결합에 대한 양성 대조군으로 사용하였다(도 11a). HLA-E/펩티드 복합체에 대한 ABX0020의 제한을 확인하기 위해, HLA-E 결핍 JEG-3(JEG-3 Eko)에서 결합을 시험하였다. 도 11a, 중간 패널에 제시된 바와 같이, HLA-E 및 ABX0020은 JEG-3 Eko 세포에 결합할 수 없었다. ABX0020은 오직 TAP 발현을 필요로 하는 정규 펩티드/HLA-E 복합체를 인식하는지 확인하기 위해, Tap-1 녹 아웃 JEG-3 세포(JEG-3 Tap-1ko)에서 결합을 시험하였다. 도 11a, 하단 패널에 제시된 바와 같이, Tap-1 부재하에 여전히 일부 HLA-E의 발현이 존재하지만, ABX0020은 결합을 나타내지 않으며, 이는 오직 통상적인 경로, 즉, 고전적 및 비고전적 HLA I 신호 펩티드를 통해 프로세싱되는 신호 펩티드만을 인식한다는 것을 시사하는 것이다. K-562 세포를 사용하였을 때, 특이성이 유사하게 나타났다. 야생형(WT)은 HLA-E를 발현하지 않지만, 일단 HLA-E가 녹 인되면, HLA-E 및 ABX0020 모두에서 결합이 관찰된다(도 11b 상단 및 중간 패널). 이는 K562.E 세포가 내인성 HLA 단백질, HLA-A*1101 및 HLA-C*w05를 세포질 수준으로 발현하기 때문이다(도 11b 하단 패널). 세포 염색에 사용하기 전에 K562.E 세포를 2 hr 내지 밤새도록 2 μM의 펩티드로 펄싱하여 펩티드 로딩 연구를 수행하였다. 이 데이터는 HLA-E+ 세포에 대한 ABX0020의 특이성을 다시 한 번 예시한다.
HLA-E는 여러 유형의 암에서 증가되어 있는 것으로 공지되어 있다. 따라서, 광범위한 암 세포주를 HLA-E 발현 및 ABX0020 결합에 대해 분석하였다. HLA-E는 세포가 스트레스를 받거나, 자극을 받을 때, 상향조절될 수 있기 때문에, 비자극 세포 및 IFNγ 자극받은 세포, 둘 모두에서 결합을 관찰하였다. 도 11c는 HLA-E를 발현하고, 자극 부재하에 ABX0020에 결합하지만, 대개는 자극을 통해 결합이 증가하는 것인 세포주를 도시한 것이다. 흥미롭게도, 이들 세포는 모두 THP-1(급성 골수성 백혈병), RPMI 8226(다발성 골수종) 및 JY-A2(EBV 형질전환된 B 림프아세포양 세포)를 포함하는 백혈구 기원의 것이다. ABX0020 결합을 위해 자극을 필요로 한 세포주는 COLO 205(결장직장 선암종), PANC-1(췌장 상피 암종), A549-D5(폐암종) 및 JVM-2(EBV 형질전환 림프아구)를 포함한다(도 11d). 상기 결과는 ABX0020이 여러 유형의 암을 표적화하는 데 사용될 수 있다는 것을 시사하는 것이다. K-562, THP-1, RPMI-8226, COLO205, PANC-1, JVM-2 세포를 ATCC로부터 획득하였다. HLA-E를 발현하는 K-562 세포(K562.E), JY-A2 및 돌연변이화된 JEG3 세포는 (Thorbald van Hall; 라이덴 대학 의료 센터)로부터 획득하였다. A5495-D5는 Crisper-Cas9 기술(Applied Stem Cell: 미국 캘리포니아주 소재)을 사용하여 HLA-E를 발현하도록 변경된, ATCC에서 획득한 A549 세포였다. 일부 경우에서, 세포는 HLA-E 발현을 유도하기 위해 밤새도록 IFNγ(10 ng/ml) 자극을 필요로 하였다.
모든 세포 결합 연구를 위해, 세포를 실온에서 5-10 min 동안 항인간 CD16(클론 KD1), 항인간 CD32(클론 AT10), 및 항인간 CD64(클론 10.1)(Bio-Rad)로 또는 휴먼 스투스테인 FcX(Human TruStain FcX)(BioLegend)로 차단한 후, 100 ㎕에서 4℃에서 30 min 동안 1 ㎍/mL의 ABX0020 또는 hIgG1(클론 QA16A12, BioLegend)로, 또는 AF647 표지된 ABX0020 또는 hIgG1로, 및 PE 또는 PE-Cy7 중의 HLA-E(클론 3D12, BioLegend)로 표면 염색하였다. 이어서, 세포를 염색 완충제(2 mM EDTA를 포함하는 PBS)로 세척한 후, 이어서, 염소-항인간(GAH)/APC(Jackson ImmunoResearch) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(zombie/aqua viability stain)(BioLegend)를 포함하는 2차 염색 칵테일로 세척하였다. 세포를 100 ㎕에서 4℃에서 30 min 동안 인큐베이션시켰다. 세포를 염색 완충제로 2회 세척하고, 플루오로픽스(BioLegend)를 사용하여 고정시켰다. LSR II 유세포 분석기(BD Biosciences) 또는 CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 이용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
실시예 4. ABX0020 /21/22는 HLA - E:NKG2A 체크포인트 경로를 차단하여 NK 세포의 세포 독성을 개선시킨다
수용체인 NKG2A는 일반적으로 말초 혈액 중 NK 세포의 최대 60%에서 발현되며, NKG2A+ NK 세포의 빈도는 종양 미세환경에서 90% 정도로 높은 것으로 보고되었다. 이들 연구의 주요 목적은 종양 세포에 발현된 HLA-E/신호 펩티드 복합체에 결합함으로써 HLA-E:NKG2A 축을 억제하여 NK 세포 매개 사멸을 촉발시킬 수 있는 ABX0020 및 유도체 ABX0021 및 ABX0022의 능력을 결정하는 것이었다. HLA-E/NKG2A 억제 축을 차단하는 ABX0020의 능력을 시험하기 위해, 1차 인간 NK 세포를 ABX0020의 존재하에 다양한 종양 표적 세포와 함께 공동 배양하였다. 건강한 지원자들의 혈액을 카터 블러드케어(Carter BloodCare)로부터 획득하였다. PBMC는 피콜-플라크 플러스(Ficoll-Paque PLUS)(GE Healthcare) 또는 림포그렙(Lymphoprep)(StemCell Technologies)를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단리시켰다. 이지셉(EasySep) 인간 NK 세포 농축 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 자연 살해(NK: Natural Killer) 세포를 정제하였다.
IgG1이 FC 수용체를 자극할 수 있기 때문에, ABX0020 또한 a-글리코실화된 것(ABX0021)으로, 및 항체 의존성 세포 세포독성(ADCC) 활성이 증진된 것(ABX0022)으로서 시험하였다. 도 12a에 제시된 바와 같이, IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 NK 세포를 4시간 동안 공동 배양한 후, ABX0020 및 ABX0022는 JY-A2의 사멸을 유의적으로 증가시켰고(도 12a), NK CD107A 발현을 상향조절할 수 있었다(도 12b). ABX0021은 더 오랜 시간에 걸쳐 시험했을 때 사멸이 증가한 것으로 나타났다. 24시간 공동 배양 후, 자극받지 않은 JY-A2 세포(도 12c) 및 IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포(도 12d), 둘 모두의 ABX0021 매개 사멸. K562.E 세포를 사용하였을 때에도 또한 유사한 결과가 관찰되었다(도 12e). ABX0020 및 ABX0022와 비교하여 ABX0021의 성능은 또한 자극받지 않은 RPMI 8226 세포와 24시간 동안 공동배양된 NK 세포에서 시험하였을 때에도 명백하였다(도 12f). 용량 의존적 효과를 밝혀내기 위해, IFNγ 자극받고, 펩티드 펄싱된 JY-A2 세포와 함께 공동 배양된 NK 세포에서 ABX0020 및 ABX0022를 10 ㎍/mL 내지 0.1 ㎍/mL로부터 적정하였다(도 12g). ABX0022는 증진되 ADCC 효과를 갖도록 돌연변이화되었기 때문에, 심지어 0.1 ㎍/mL에서도 ABX0020보다 훨씬 더 큰 사멸 및 활성화(CD107A에 의해 측정)를 보였지만(도 12h). NK 세포의 표면 상의 NKG2A를 표적화하는 것과 비교하여 유의적인 개선을 보였다.
마지막으로, ABX0020 패밀리의 잠재적 시너지 효과를 시험하기 위해, COLO 205 표적 세포와 공동배양된 NK 세포에서 ABX0020 및 ABX0021을 단독으로 또는 세툭시맙(항 -EGFR)과 함께 사용하였다. ABX0020 단독은 ABX0021과 비교하여 더욱 큰 사멸 증진을 보였다. ABX0021은 세툭시맙과 조합되었을 때, 세툭시맙 단독에 비하여 사멸을 유의적으로 개선시키는 작용을 할 수 있었다(도 12i).
본 결과는 ABX0020이 HLA-E:NKG2A 축을 차단함으로써 NK 세포 활성화 및 세포 독성을 촉진시키는 데 사용될 수 있다는 것을 시사한다. 추가로, ABX0020 및 유도체는 ADCC 활성을 비롯한 추가 경로를 통해 및 추가 항체 치료제와 함께 조합하여 작용할 수 있다.
실시예 5. ABX0020 및 ABX0021은 HLA - E:NKG2A 축 차단을 통해 항원 특이적 CTL 에 의해 매개되는 표적 사멸을 개선시킨다
종양 침윤 CD8+ T 세포는 NKG2A 억제 수용체의 발현을 상향조절하고, 상기 경로를 통해 매개된 T 세포 억제는 NKG2A에 대한 항체를 사용하여 가역적이다. 추가로, 항종양 반응은 Qa-1b가 없는 마우스 종양에서CD8+ T 세포에 의해 매개되지만, Qa-1b를 발현하는 종양 세포에 대해서는 매개되지 않는다. 본원에는 ABX0020은 T 세포 이펙터 기능을 촉발시키기 위해 HLA-E/펩티드 복합체에 결합함으로써 HLA-E:NKG2A 억제 경로를 방해한다는 것을 예시하는 결과가 제시되어 있다.
항원 특이적 T 세포 반응을 증진시킬 수 있는 능력이 있는 체크포인트 차단 항체로서 ABX0020을 확립하기 위해, 플루(Flu) 특이적 CD8+ T 세포를 공동 배양 검정법에서 JY-A2 표적 세포와 함께 사용하여 T 세포 용해 활성을 측정하였다. 간략하면, PD-L1, HLA-E 및 HLA-A2를 발현하는 JY-A2 세포를 특정 플루 펩티드 M1로 펄싱하고, 칼세인(Calcein) AM 방출 방출 검정법에서 세포용해 활성을 측정하였다. 항M1/플루 특이적 T 세포주는 (Dr. Thorbald van Hall)에 의해 제공받은 반면, 동일한 M1/HLA-A2 표적에 대한 제2 CTL 세포주는 아스타르트 바이올로직스 (카탈로그 번호 1039)로부터 구입하였다. 세포독성 검정법을 수행하기 전, T 세포를 이뮤노컬트-XF T 세포 확장 배지(ImmunoCult-XF T cell Expansion Medium)(카탈로그 10981, StemCell Technologies)와 함께 제공받은 표준 프로토콜을 이용하여, 인간 재조합 IL-2(10 ng/mL) 및 IL-15(20 ng/mL)이 보충된 이뮤노컬트-XF T 세포 확장 배지 중에서 이뮤노컬트 인간 CD3/CD28 T 세포 활성화제와 함께 10일 동안에 걸쳐 확장시켰다. JY-A2 세포를 밤새도록 IFNγ로 자극시킨 후, 이어서, 1시간 동안 M1-플루 펩티드로 펄싱하고, 칼세인-AM(1.0 μM/mL)으로 염색한 후, CD8+ T 세포와 함께 공동배양하였다. 공동 배양물을 항NKG2a, ABX0021, ABX0020 또는 이소타입 대조군 항체와 함께, 및 그의 부재하에서 인큐베이션시켰다. 공식 [(시험 방출 - 자발적 방출)/(최대 방출 - 자발적 방출)] x 100에 따라 비(specific)용해를 계산하였다. 자발적 방출은 배지 단독인 것에서의 표적 세포로부터의 칼세인-AM 방출을 나타내고, 최대 방출은 배지 2% 트리톤(Triton) X-100 중에서 용해된 표적 세포로부터의 칼세인-AM 방출이며, 이는 각각 적어도회 3개의 복제 웰에서 측정되었다. 제시된 데이터는 JY-A2 표적 세포 용해의 빈도이다. p 값은 독립 스튜던트 t 검정을 사용하여 계산되고; 결과는 평균 +/- SD로 제시된다.
모든 통계 분석은 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 소프트웨어 버전 8(GraphPad)을 사용하여 수행하였다. 통계적 유의도는 윌콕슨 대응 쌍별 부호 순위 검정(Wilcoxon matched-pairs signed rank test)을 사용하여 결정되었다. 유의도는 p <0.05로 설정하였다.
도 13에 제시된 바와 같이, 이소타입 대조군(MAB 대조군)의 존재하에 또는 항체 부재하에(부재) CD8+ T 세포는HLA-E/신호 펩티드 복합체와의 상호작용을 통한 T 세포 억제에 기인하는 유의적인 사멸은 보이지 않았다. 그에 반해, αNKG2A, ABX0020 또는 ABX0021 첨가시, 배양 웰에서 표적 세포 용해가 현저시 증가한 것으로 관찰되었다. 상이한 두 CD8+ T 세포주의 세포용해 활성(도 13)은 MabCtrl과 비교하여 αNKG2A, ABX0020 및 ABX0021의 존재하에서 표적 세포 용해가 대략 2배 증가한 것으로 나타났고, "부재" 대조군과의 비교시에서 표적 세포 용해가 대략 4배 증가한 것으로 나타났다. ABX0020, ABX0021(a-글리코실화) 또는 αNKG2A 존재하에서의 표적 세포 용해에 있어 기증자 간에는 어떤 차이도 관찰되지 않았다.
이들 데이터는 HLA-E:NKG2A 경로가 T 세포 세포용해 활성을 억제하고, ABX0020을 사용 하여 상기 경로를 차단하는 것이 CD8+ T 세포에 의한 억제를 역전시키고, 표적(종양) 세포 사멸을 촉발시킬 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 6. T 세포를 활성화시키고 , HLA - E:NKG2A 축을 차단하여 NK 및 T 세포의 억제를 방출할 수 있는 이중특이적 항체의 생성
CD3+ T 세포를 활성화시키고, 동시에 HLA-E:NKG2A 체크포인트 경로를 억제시킬 수 있는 이중특이적 항체로서 ABX0040을 구성하였다. 비글리코실화된(N297D 돌연변이) 인간 IgG1 스캐폴드에서 클론 SP34(마우스 항인간 CD3e)의 단일 쇄(scFv)에 커플링된 ABX0020(Fab)을 함유하는 Fab-Fc-scFv 구성물로서 ABX0040을 제조하였다(도 14a). 20개의 아미노산 링커(GKPGSGKPGSGKPGSGKPGS(서열 번호 51))를 사용하여 ABX0020 Fab와 SP34 scFv를 공유적으로 연결시켰다. 일시적으로 형질감염된 CHO 세포에서 ABX0040을 생성하고, 단백질-A 친화도 칼럼에서 정제하였다. ABX0040을 환원성 SDS-PAGE 겔에서 전개시켰고, 예상되는 MW에서 예측되는 두 밴드를 나타내었다(ABX0020 경쇄의 경우, 25 kD, 경쇄가 없는 ABX0040의 경우, ~55 kD). ABX0040 중 91% 초과는 분석 SEC-HPLC 칼럼에서 단일 피크로 이동한다(도 14b).
무표지 검정법(ResoSens 기기, Resonant Sensors, Inc)을 이용하여 ABX0040의 결합 친화도를 측정하였다. 간략하면, 결합이 평형에 도달할 때까지, V-0025 HLA-E 01:03 단량체 복합체(0.1% BSA, 0.1% 트윈20, PBS 완충제 중 희석)를 뉴트라비딘 코팅된 바이오네틱 무표지 마이크로어레이 플레이트에 5 ㎍/ml로 고정화시켰다. 이어서, 플레이트를 희석/세척 완충제 중에서 3X 세척하였다. ABX0040(희석/세척 완충제 중에서 10 ㎍/ml에서 시작하는 연속 희석액) 결합 회합을 대략 20분 동안 평가한 후 즉시 대략 15분 동안 해리(희석/세척 완충제)로 이어졌다. 트레이스드로어 동역학적 분석 소프트웨어를 사용하여 결합 친화도를 계산하였다. 관찰결과, 해리 평형 상수는 1.57 nM인 것으로 나타났다(도 15).
ABX0040의 결합 특성: 표적 종양 세포에의 ABX0040 결합을 먼저 확인하였다. 도 16에 제시된 바와 같이, ABX0040은 모체 클론(ABX0023)과 유사하게 야생형(WT) JEG3 세포에 결합한다. HLA-E 녹 아웃 JEG3 세포는 ABX0040에의 결합을 보이지 않기 때문에 상기 결합은 HLA-E 제한적인 것이다(도 16a-도 16b). 이는 HLA-E 발현을 상향조절하기 위해 IFNγ로 밤새도록 자극시킨 THP-1 세포를 사용하여 확인하였다(도 17). 말초 혈액 단핵 세포(PBMC: peripheral blood mononuclear cell) 중 T 세포에의 결합을 사용하여 항CD3 아암을 확인 하였다(도 18a-도 18e). JEG3, THP-1, K-562 및 RPMI 8226 세포주를 ATCC로부터 획득하였다. HLA-E를 발현하는 K-562 세포 HLA-E 녹 아웃 JEG3 세포는 (Dr. Thorbald van Hall)(라이덴 대학 의료 센터: 네덜란드 소재))로부터 획득하였다. 공급업체의 권고사항에 따라 세포를 배양하였다. 세포 결합에 대해, 세포를 항인간 CD16(클론 KD1), 항인간 CD32(클론 AT10), 및 항인간 CD64(클론 10.1)(Bio-Rad)로, 또는 휴먼 스투스테인 FcX(BioLegend)로 실온에서 5-10 min 동안 차단한 후, 1 ㎍/mL 비표지 항체로 또는 AF647 표지된 항체로, 및 HLA-E/PE-Cy7(클론 3D12, BioLegend)로 4℃에서 30 min 동안 50-100 ㎕에서 표면 염색하였다. 이어서, 세포를 염색 완충제(2 mM EDTA를 포함하는 PBS)로 세척한 후, 염소-항인간 또는 염소-항마우스/AF647(비표지 항체를 사용하는 경우, Jackson ImmunoResearch) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(BioLegend)를 포함하는 2차 염색 칵테일로 세척하였다. 세포를 4℃에서 30 min 동안 50 ㎕에서 인큐베이션시켰다. 세포를 염색 완충제로 2회 세척하고, 플로우로픽스(BioLegend)를 사용하여 고정시켰다. CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 이용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
ABX0040은 1차 CTL의 표적 특이적 세포 독성을 증진시킨다: ABX0040의 활성을 평가하기 위해, 1차 인간 CTL을 모체 K562(HLA-E 음성) 또는 K562.E(HLA-E 양성)와 함께 공동 배양하고, ABX0040을 적정하면서 시험하였다. 도 19a에 제시된 바와 같이, ABX0040은 표적 특이적 방식으로 용량 의존성 세포독성을 유도하였고; HLA-E 음성 세포(K562 모체)는 어떤 영향도 받지 않았다. ABX0040은 또한 표적 양성 종양 세포와 함께 배양된 CD8+ T 세포에서 CD107a(24 hr)(도 19b) 및 IFNγ(48 hr)(도 19c)의 발현을 유도하였다.
이러한 결과는 THP-1 세포를 사용하여 확인되었다(도 17에 제시된 결합 데이터). 48 hr 공동 배양 후, ABX040은 용량에 의존하는 방식으로 세포독성을 유도하였다(도 20a). ABX0040은 또한 CD25, CD107a, 퍼포린 및 IFNγ의 용량 의존적 유도에 의해 나타난 바와 같이 CD8+ T 세포 활성화도 유도할 수 있었다(도 20b-도 20e). 상기 결과는 ABX0040이 표적 특이적 방식으로 CD8+ T 세포에 의해 종양 세포의 용해를 증진시킬 수 있다는 것을 시사하는 것이다.
시험관내 T 세포 활성화 검정을 수행하기 위해, 건강한 지원자들의 혈액을 카터 블러드케어(미국 텍사스주 알링턴 소재)로부터 획득하였다. PBMC는 피콜-플라크 플러스(GE Healthcare) 또는 림포그렙(StemCell Technologies)를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단리시켰다. 이지셉 인간 CD8+ T 세포 농축 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 CD8+ T 세포를 정제하였다. 농축된 인간 CD8+ T 세포(CTL)를 1x106/ml로 밤새도록 휴지시켰다. 표적 세포를 CFSE(Themofisher)로 표지하고, 10:1(E:T)의 비로 휴지된 CTL에 첨가하였다. CD3/CD28 자극(ImmunoCult 인간 CD3/CD28 T 세포 활성화제, StemCell Technologies)을 양성 대조군으로 사용하였다. 배양 마지막 4 hr 동안, 모넨신 및 항인간 CD107a/BV421(BioLegend)을 모든 웰에 첨가하였다. 세포를 24 내지 48 hr 후에 수확하였다. 세포를 항인간 CD8/APC(BioLegend), 항인간 CD25/PE-Cy7(Tonbo) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(BioLegend)로 염색하였다. 세포내 염색을 위해, BD 사이토픽스/사이토펌(BD cytofix/cytoperm) 용액(BD)을 사용하여 세포를 고정시키고, 투과시키고, 항인간 퍼포린/PERCP-CY5.5(BioLEgend) 및 항인간 IFNγ/PE-데이즐(PE-Dazzle) 594(Biolegend)로 염색하였다. CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 사용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
모체 항체(ABX0021)는 HLA-E/NKG2A 축에서 체크포인트 차단제로 작용하는 것으로 밝혀졌는 바, ABX0040의 체체크포인트 차단 활성을 평가하였다. 도 21a-도 21b에 제시된 바와 같이, ABX0040 및 ABX0021, 둘 모두 K562.E 및 RPMI 8226 세포와 함께 공동 배양된 NK 세포의 세포독성을 증진시켰다. 본 검정에 사용된 NK 세포를 이지셉 인간 NK 세포 농축 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 정제하였다. 본 검정은 IL-2(R&D systems)와 함께 1x106/mL로 인큐베이션된 인간 NK 세포를 이용하여 수행하였다. 밤새도록 자극시킨 후, CFSE(Thermo Fisher) 표지된 표적 세포를 3:1(E:T)의 비로 첨가하였다. 항체를 10 ㎍/mL로 사용하였다. 상청액을 락테이트 데하이드로게나제(LDH: lactate dehydrogenase, Roche)에 대해 시험하였다. 바이오테크 시너지 2(BioTek Synergy 2) 플레이트 판독기(Agilent)를 사용하여 플레이트를 450 nM에서 판독하였다. 상기 결과는 ABX0040이 CD8+ T 세포에서 세포독성을 증진시키는 것 외에도 NK 세포에서 체크포인트 차단제로서 작용할 수 있다는 것을 시사한다.
Figure pct00007
실시예 7 ABX0023은 말초에서 면역 세포에 결합하지 않는다
ABX0023의 면역 세포에의 결합을 시험하기 위해, 면역 세포를 하기 기술되는 바와 같이 정제, 배양, 염색하고, 유세포 분석법에 의해 평가하였다.
인간 1차 세포
시험관내 T 세포 활성화 검정을 수행하기 위해, 건강한 지원자들의 혈액을 카터 블러드케어로부터 획득하였다. PBMC는 피콜-플라크 플러스(GE Healthcare) 또는 림포그렙(StemCell Technologies)를 사용하여 밀도 구배 원심분리에 의해 단리시켰다. 이지셉 인간 T 세포 단리 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 전체 T 세포를 정제하였다. 자연 살해(NK) 세포는 이지셉 인간 NK 세포 농축 키트(Stemcell Technologies)를 사용하여 정제하였다. 이지셉 직접 인간 호중구 단리 키트(StemCell Technologies)를 사용하여 호중구를 정제하였다. 이지셉 직접 인간 호산구 단리 키트(StemCell Technologies)를 사용하여 호산구를 정제하였다. 수지상 세포(DC: dendritic cell)를 이지셉 인간 범 DC 사전 농축 키트(StemCell Technologies)를 사용하여 정제하였다. 단핵구(MO)를 CD16 고갈 없이 이지셉 인간 단핵구 단리 키트 또는 이지셉 인간 단핵구 농축 키트(둘 모두 StemCell Technologies)를 이용하여 정제하였다. 혈소판은 농도 구배 분리 후 PBMC를 세척한 후에 상청액을 수집함으로써 PBMC 프로세싱 동안 농축시켰다.
IFNγ로 밤새도록 자극시킬 때, 1% 페니실린-스트렙토마이신, HEPES 완충제, 2 mM L-글루타민, 1% 비필수 아미노산, 피루브산나트륨 및 10% 우태아 혈청(Millipore Sigma)으로 보충된 RPMI-640 배지(ATCC) 중에서 PBMC를 1x106 세포/mL로 배양하였다. IFNγ를 10 ㎍/mL로 제공하고, IFNγ 부재하의 PBMC에 대해 비교하였다.
세포주
HT-1376, SKBR3, SU.86.86, RPMI-8226, THP-1, OVCAR3, LNCaP, NCI-H1355, COLO205, PANC-1, HCT-116, A549, 및 JEG-3 세포를 ATCC로부터 획득하였다. NCC-STC-K140 및 RCC-10RGB 세포를 세키스이 제노테크(Sekisui XenoTech)로부터 획득하였다. SNU-899 세포를 한국 세포주 은행(Korean cell line bank)으로부터 획득하였다. OCI-AML3 세포를 DSMZ로부터 획득하였다. JEG-3 HLA-EKO 및 Tap1KO 세포 및 OCI-AML3 HLA-EKO는 (Professor Throbald van Hall)로부터 획득하였다. 일부 세포를 24시간 동안 IFNγ(10 ㎍/mL)로 자극시켰다.
대식세포 분화
5 ㎍/mL M-CSF로 보충된 이뮤노컬트-SF 대식세포 배지(StemCell Technologies) 중에서 단핵구를 배양함으로써 대식세포를 생성하였다. 추가 배지를 4일째 첨가하였다. M0 대식세포는 6일째 M1 활성화를 위해 LPS(10 ng/mL) 및 IFNγ (50 ng/mL)를 사용하거나, 또는 M2a 활성화를 위해 IL-4(10 ng/mL)를 사용하여 활성화시켰다. 활성화 2일 후에 M1 및 M2a 대식세포를 수확하였다. 해리를 위해, M1 대식세포 경우에는 아큐타제를, M2a 대식세포 경우에는 2.5 mM EDTA를 사용하였다.
유세포 분석법
사이트클릭 항체 아지도 변형 키트(SiteClick Antibody Azido Modification kit) 및 클릭-iT AF647 sDIBO 알킨 항체 표지 키트(Click-iT AF647 sDIBO alkyne antibody labeling kit)(Thermo Fisher Scientific)를 이용하여 알렉사플루오르(AlexaFluor) 647(AF647)로 ABX0023, mIgG1 및 MEM-E/02를 표지하였다.
비표지 항체를 이용한 세포 결합의 경우, 세포를 4℃에서 30 min 동안 100 ㎕에서 1 내지 5 ㎍/mL의 ABX0023, ABX0020, 마우스 이소타입 IgG1(MOPC-21, BioLegend), 인간 이소타입 IgG1(QA16A12, BioLegend), 3D12(BioLegend), 또는 MEM-E/02(BioRad)로 염색하였다. 이어서, 세포를 염색 완충제(2 mM EDTA를 포함하는 PBS)로 세척한 후, 이어서, 염소-항인간/AF647(Jackson ImmunoResearch) 또는 염소-항마우스/AF647(Thermo Fisher Scientific) 및 좀비/아쿠아 생존능 염료(BioLegend)를 포함하는 2차 염색 칵테일로 세척하였다. 세포를 4℃에서 30 min 동안 100 ㎕에서 인큐베이션시켰다. 세포를 염색 완충제로 2회 세척하고, 100 ㎕ 염색 완충제 중에서 획득하였다. 표지된 항체를 이용한 세포 결합의 경우, 세포를 4℃에서 30 min 동안 100 ㎕에서 항체 염색 칵테일과 함께 인큐베이션시킨 후, 이어서, 염색 완충제로 2회 세척하고, 100 ㎕ 염색 완충제 중에서 획득하였다. 일부 세포는 인간 TruStain FcX Fc 수용체 차단액(BioLegend)과 함께 실온에서 5-10 min 동안 인큐베이션시킴으로써 염색하기 전에 Fc 수용체 차단을 필요로 하였다. 세포를 염색과 같은 날에 획득할 수 없다면, 100 ㎕ 플로우로픽스 완충제(BioLegend)를 이용하여 세포를 고정시켰다. CytoFLEX S(Beckmen Coulter)를 이용하여 샘플을 획득하였다. 플로우조 소프트웨어 버전 10(BD Biosciences)을 이용하여 데이터를 작성하였다.
항HLA-E(3D12)/PE-Cy7, 항CD3(HIT3a)/APC-Cy7, 항CD4(RPA-T4)/PerCP-Cy5.5, 항CD8(RPT-T8)/BV605, 항CD14(M5E2)/FITC, 항CD16(3G8)/PacificBlue, 항CD19(HIB19)/FITC, 항CD20(2H7)/BV421항CD56(5.1H11)/AF700, 항Siglec-8(7C9)/PE 및 항HLA-A,B,C (W6/32)/AF488을 바이오레전드(BioLegend)로부터 구입하였다. 항CD56(B159)/PE-CF594를 BD 바이오사이언스(BD BioScience)로부터 구입하였다. 항CD3(HIT3a)/FITC 및 항CD4(OKT4)/PE를 톤보 바이오사이언시스(Tonbo Biosciences)로부터 구입하였다.
면역 세포는 HLA-E 및 고전적 HLA 타입 I를 발현하는 것으로 알려져 있기 때문에, ABX0023에의 결합에 대해 시험하였다. 혈소판 및 DC를 제외한 모든 면역 세포 서브세트는 HLA-E를 발현하는 반면, NK 세포, 단핵구(MO) 및 MO 유래 대식세포만이 ABX0023에 의한 결합을 나타내었지만(도 22), 이는 기증자에 의존하는 것일 수 있다. 세포가 스트레스를 받거나, 자극을 받았을 때, HLA-E가 상향조절될 수 있기 때문에9 , 10, IFNγ 자극하에 및 그의 부재하에 PBMC에서 ABX0023 결합을 시험하였다. HLA-E 클론 3D12는 자극하에 결합이 약간 증가한 반면, 펩티드 또는 B2M(중쇄 특이적) 부재하에 HLA-E를 인식하는 HLA-E 클론 MEM-E/02만이 상향조절되었고; ABX0023 결합에는 변화가 없었다(도 23). 본 데이터는 ABX0023이 말초에서 면역 세포에 대해 표적에서 벗어난 활성이 거의 없어야 한다는 것을 시사한다.
실시예 8 ABX0023 결합은 HLA -E 및 고전적 HLA 타입 I 발현을 필요로 한다
ABX0023에 결합하는 종양 세포주를 확인하기 위해, 다양한 세포주를 그의 HLA-E 및 HLA-A,B,C(고전적 HLA 타입 I) 발현에 대해 분석하였다. 자극 부재하에 ABX0023에 결합하는 세포주(도 24 및 25) 및 ABX0023 결합을 위해 IFNγ 자극을 필요로 하는 세포주(도 26), 이 두 타입의 세포주를 관찰하였다. 자극 부재하에 ABX0023에 결합하는 세포주(도 24)는 IFNγ 자극으로 ABX0023 결합 증가를 보인다(도 25). 흥미롭게도, 일부 세포주는 HLA-E 및 HLA-A,B,C 둘 모두를 높은 수준 발현하지만, 자극 부재하에서는 어떤 ABX0023 결합도 나타내지 않는다(도 26).
고전적 HLA 타입 I는 발현하지만, HLA-E는 발현하지 않는 종양 세포주를 시험함으로써 HLA-E 선택성을 확인하였다(도 27). ABX0020/23의 HLA-E 복합체에의 추가 선택성은 동질유전자 세포주를 시험함으로써 확인하였다. 도 28a, 중간 패널에 제시된 바와 같이, HLA-E 및 ABX0020/23은 JEG-3 Eko 세포에 결합할 수 없었다. ABX0020/23은 오직 TAP 발현이 필요한 정규 펩티드/HLA-E 복합체만을 인식하는지 확인하기 위해, Tap-1 녹 아웃 JEG-3 세포(JEG-3 Tap-1ko)에서 결합을 시험하였다. 도 28a, 우측 패널에 제시된 바와 같이, Tap-1 부재하에 여전히 일부 HLA-E의 발현이 존재하지만, ABX0020/23은 결합을 나타내지 않으며, 이는 오직 통상적인 경로, 즉, 고전적 경로, 즉, 고전적 및 비고전적 HLA 펩티드를 통해 프로세싱되는 펩티드만을 인식한다는 것을 시사하는 것이다. HLA-E 결핍 OCI-AML3 사용하였을 때에도 유사한 결과가 관찰되었다(도 28b).
실시예 9 냉동 세포 블록을 이용한 염색 프로토콜 검증
조직 샘플의 면역조직화학법(IHC) 염색을 분석하기 위해, 냉동 세포 블록에 대해 IHC 염색을 시험하였다. 인간 냉동 조직(종양 및 정상 인접 조직(NAT))의 블록을 프로테오지넥스(ProteoGenex: 미국 캘리포니아주 잉글우드 소재)에서 구입하고, OCT 화합물에 포매시켰다. 마이크로톰-크라이오스탯을 이용하여 샘플을 절단하고, 슬라이드에 장착하였다. 면역조직화학법(IHC) 염색은 노보비타 히스토패쓰 라보라토리, LLC(NovoVita Histopath Laboratory, LLC: 미국 메사추세츠주 케임브리지 소재)에서 수행하였다. 간략하면, 냉동 조직 슬라이드를 20분 동안 대기 건조시킨 후, 벤타나 XT 디스커버리 울트라-기기(Ventana XT discovery ultra-instrument)(Ventana Medical Systems: 미국 애리조나주 투손 소재)에 습식 로딩하였다. 이어서, 슬라이드를 1x 벤타나 반응 완충제(카탈로그 번호 950-300)로 세정한 후, 퍼옥시다제 억제제 CM(Ventana)으로 12 min 동안 처리하여 내인성 퍼옥시다제를 차단하였다. 1x 벤타나 반응 완충제로 세정한 후, 슬라이드를 37℃로 가온시키고, 2.25 ug/ml의 1차 항체(항-HLA-E(MEM-E/02, AbCam), 마우스 IgG1 이소타입 대조군, 또는 ABX-0023)와 함께 60 min 동안 인큐베이션시켰다. 슬라이드를 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하고, 파인픽스(FineFix) 작업 용액(Milestone: 미시간주 칼라마주 소재, #70147WG)과 함께 4 min 동안 인큐베이션시키고(고정 후 단계), 3x 세정하였다. 디스커버리(Discovery) 항마우스 HQ(Ventana, 카탈로그 번호 760-4814)를 24 min 동안 슬라이드에 적용하고, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하였다. DISC 항HQ HRP 한방울(Ventana, 카탈로그 번호 760-4820)을 슬라이드에 적용하고, 24 min 동안 인큐베이션시키고, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하였다. 이어서, 디스커버리 크로모맵 DAB(Discovery ChromoMap DAB) 키트 한 방울(Ventana, 카탈로그 번호 760-159) 및 CM H2O2 한 방울(Ventana)을 슬라이드에 적용하고, 8 min 동안 인큐베이션시킨 후, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정하였다. 이어서, 구리 CM 한 방울(Ventana)을 슬라이드에 적용하고, 4 min 동안 인큐베이션시킨 후, 벤타나 반응 완충제로 3x 세정한 후, 헤마톡실린 한 방울(대조염색)을 12 min 동안 슬라이드에 적용하였다. 벤타나 반응 완충제로 세정(2x)한 후, 블루잉 리에이전트(Bluing Reagent) 한 방울(대조염색 후)을 적용하고, 8 min 후, 슬라이드를 벤타나 반응 완충제로 2x 세정하였다. 이어서, 슬라이드를 벤타나 XT로부터 제거하고, 식기 세척 세제로 세척하고, 탈수를 위해 알콜 및 크실렌으로 처리하였다. 커버슬립을 슬라이드에 가하고, 디스커버리 울트라 기기 상에서 슬라이드를 판독하였다.
K562 세포, 또는 2 hr 동안 20 ug/ml의 V-0025(VMAPRTLFL) 펩티드(서열 번호 18)로 펄싱된 HLA-E(K562.E)로 형질감염된 K562 세포의 세포 블록을 ABX0023(마우스 IgG1로 치환된 ABX0020), 항HLA-E(MEM-E/02) 항체 및 마우스 IgG1 이소타입 대조군 항체를 2.25 ug/ml로 사용하여 염색하였다(도 29). 이미지는 ABX-0023이 K562 세포(-)가 아닌 K562.E + V-0025 펩티드 펄싱된 세포에 대해 강하게(3개 중 3+++) 염색한다는 것을 보여준다. 상기 데이터는 ABX-0023이 HLA-E/V-0025를 제시하는 세포에 선택적으로 결합한다는 것을 보여주고, 이는 면역조직화학법(IHC) 염색 프로토콜을 검증한다.
실시예 10 양성 대조군 조직 염색
ABX-0023에 대한 양성 대조군으로서 신선한 냉동 인간 태반 조직을 사용하였다. 영양막 세포는 HLA-E, 및 HLA-C 및 일부 고전적 HLA I, 예컨대, HLA-C 및 HLA-G, 둘 모두 발현하는 것으로 널리 공지되어 있다. 따라서, ABX-0023에 의한 염색은 태반 조직에서 예상된다. 도 30에서, ABX-0023은 태반 조직에서 영양막 세포의 강한(2++ 내지 3+++) 염색을 나타내고, HLA-E + 정규 리더 서열 펩티드가 영양막 세포의 표면 상에 존재한다는 것을 입증한다.
실시예 11 ABX -0023은 두부경부 종양 조직을 염색한다
두부경부 종양 조직에서 ABX-0023 표적 결합 선택성을 평가하기 위해, 조직을 하기 기술되는 바와 같이 염색하고, 분석하였다. 도 31은 두부경부 환자로부터 수집된 냉동 종양 조직을 염색한 ABX-0023의 대표적인 이미지이다. 도 31a 좌측 패널은 항-HLA-E 항체(클론 MEM-E/02)로의 강한 종양 세포 염색을 보여준다. 동일한 패널은 MEM-E/02 항체로의 간질 영역의 염색을 보여준다. 우측 패널은 종양 조직의 ABX-0023 항체 염색을 보여준다. 종양 간질은 강한 염색(3+++)을 보이는 반면, 종양 세포는 약한 정도 내지 중간 정도의 염색을 보인다. 이미지는 고전적 HLA 클래스 I 또는 비고전적 HLA-G의 표적 HLA-E + 리더 서열이 두부경부암 환자의 종양 조직에 존재한다는 것을 나타낸다. 도 31b는 MEM-E/02(좌측) 및 ABX0023(우측)으로 염색된 정상 인접 조직(NAT)의 이미지를 보여준다. NAT 상피는 HLA-E 발현에 대해 양성이지만(좌측), ABX-0023 염색의 부재는 NAT 상피에 HLA-E/펩티드 복합체가 없다는 것을 나타낸다(우측).
실시예 12 ABX -0023은 결장 선암종 종양 조직을 염색한다
결장 선암종 종양 조직에서 ABX-0023 표적 결합 선택성을 평가하기 위해, 조직을 하기 기술되는 바와 같이 염색하고, 분석하였다. 항HLA-E(좌측; 10x 확대) 또는 ABX-0023(우측; 10x 확대)으로 염색된 신선한 냉동 인간 결장 선암종 조직을 보여주는 대표적인 이미지. 도 32a는 종양 및 간질 영역 둘 모두에서의 HLA-E 발현(좌측) 및 종양(2++) 및 간질(3++) 영역 둘 모두에서 검출가능한 HLA-E/리더 서열 복합체를 나타낸다. 도 32b는 ABX-0023은 정상 결장 조직은 염색하지 않고, 점막 조직을 약하게 염색(1+)한다는 것을 보여준다.
실시예 13 ABX -0023은 폐 편평 암종 조직을 염색한다
폐 편평 암종 조직에서 ABX-0023 표적 결합 선택성을 평가하기 위해, 조직을 하기 기술되는 바와 같이 염색하고, 분석하였다. 대표적인 이미지는 항HLA-E(좌측, 상단 10x 확대) 또는 ABX-0023(우측; 10x 확대)으로 염색된 신선한 냉동 폐 편평 암종 조직을 보여준다. 도 33a는 항HLA-E 항체(2++) 또는 ABX-0023(1+ 내지 2++)으로의 종양 및 간질 염색을 보여주는 것으로, 이는 폐암 중의 HLA-E 및 HLA-E/리더 서열 펩티드 복합체를 나타내는 것이다. 도 33b는 ABX-0023이 정상 인접 폐 조직을 염색하지 않는다는 것을 보여주며, 이는 고전적 HLA I 또는 비고전적 HLA 로부터의 리더 서열 펩티드가 로딩된 HLA-E가 정상 폐 조직에는 존재하지 않다는 것을 시사하는 것이다.
실시예 14 경쟁 검정법은 ABX -0023 결합이 리더 서열 펩티드가 로딩된 HLA -E에 특이적이라는 것을 입증한다.
종양 조직에서 ABX-0023 표적 결합 선택성을 평가하기 위해, 결장암 조직으로부터의 신선한 동결 절편을 ABX-0023으로 염색하였다. 도 34의 상단 패널은 ABX-0023이 결장 선암종 조직에서 종양 및 간질 둘 모두를 염색한다는 것을 보여준다. 도 34의 좌측 하단 패널에서, ABX-0023은 20ug/ml의 HLA-E/V-0025(VMAPRTLFL) 펩티드 복합체와 혼합한 후 종양 조직 염색으로부터 차단된다. 그에 반해, 도 34 우측 하단 패널은 ABX-0023이 HLA-E/P-0550 대조군 펩티드 복합체의 존재하에 종양 조직의 염색을 유지한다는 것을 보여준다.
실시예 15- 인간 IL-15 트랜스제닉 NOG 마우스에서 NK 생존 및 기능 측정
CD94/NK 그룹 2 구성원 A(NKG2A: NK group 2 member A) 이종이량체 수용체는 가장 뛰어난 자연 살해(NK) 세포 억제 수용체 중 하나이다. 고전적인 HLA 클래스 I 또는 HLA-G의 리더 서열 펩티드를 포함하는 리간드, HLA-E의 NKG2A에의 결합은 두 억제 면역 수용체 티로신 기반 억제 모티프를 통해 억제 신호 전달을 전달하여 NK 및 CD8+ T 세포 사이토카인 분비 및 세포 독성을 억제시킨다. 생체내에서 ABX0020/21/22의 치료 이점을 평가하기 위해, 인간 NK 세포를 EasySep™ 인간 NK 세포 농축 키트(Stemcell 선별 프로토콜)를 사용하여 연막 또는 류코팩(leukopak)으로부터 단리시켰다. 기증자 NK 세포는 마우스 항인간 NKG2A 항체(클론 Z199, Beckman Coulter)를 사용하여 NKG2A 수용체 발현에 대해 염색하고, NKG2A 수용체 발현은 평균 20% 내지 60% 범위였다. 인간 NK 세포는 IL-2 또는 IL-15 사이토카인을 첨가하지 않으면 마우스에서 장기간 생존하지 못하기 때문에, 인간 IL-15 발현 트랜스제닉 NOG 마우스(Taconic)를 선택하고, 1x106개의 새로 단리된 인간 NK 세포를 꼬리 정맥을 통해 주사하였다. 주사 후 2주째 마우스를 출혈시키고, 세포를 항NKG2A 항체를 포함하는 항체 패널로 염색하고, 분석하였다. 기증자 1로부터의 NK 세포 중 79.4%는 NKG2A+ CD56+ CD16+이고, 주사 2주 후 마우스로부터 회수된 NK 세포는 NKG2A+ NK 세포의 빈도가 92.3%로 증가하였다. 기증자 2로부터의 NK 세포는 마우스에 주입하기 전에 73.7% NKG2A++였고, 주입 후 2주째 88.7% NKG2A+ NK 세포로 증가하였다. 주사 후 8주 동안 마우스를 추적 조사하였고, NKG2A+ NK 세포는 NKG2A+ 빈도 수준을 ~90%로 유지하는 것으로 밝혀졌다. 간 및 비장에서도 NKG2A+ NK 세포가 상당히 존재하는 것으로 나타났다.
실시예 16 - 인간 IL-15 트랜스제닉 NOG 마우스 및 인간 종양 세포주를 사용한 ABX0020/21/22의 생체내 검증
도 24에 제시된 바와 같이, 다수의 종양 세포주는 ABX0023으로 염색하여 입증된 바와 같이 리더 서열 펩티드가 로딩된 HLA-E를 구성적으로 발현한다. ABX0020/21/22의 차단 활성을 평가하기 위해, 인간 IL-15 트랜스제닉 NOG 마우스에 꼬리 정맥 주사를 통해 백만 개의 새로 단리된 인간 NK 세포를 주사할 수 있다. 주사 2주 후, 1 x106개의 종양 세포(즉, NCC-STC-K140, SKBR3, SU86.86)를 마우스의 옆구리에 피하 주사할 수 있다. 치료는 ABX0020/21/22(10 mg/kg)로 복강내(ip) 제공될 수 있으며, 종양이 100 ㎣의 평균 부피에 도달할 때(0일째) 시작할 수 있다. 15일째까지 매 3일마다 ip를 통해 추가 5회 용량의 항체 요법을 제공할 수 있다. 마우스의 체중을 측정하고, 디지털 캘리퍼스를 사용하여 2x/주로 종양을 측정할 수 있다. 판독값은 종양 성장 억제일 수 있다.
또 다른 예에서, 급성 골수성 세포주인 OCI-AML3-루시페라아제는 백만 개의 인간 NK 세포를 받은 후 2주 후에 인간 IL-15 트랜스제닉 NOG 마우스의 꼬리 정맥을 통해 주사할 수 있다. 치료는 ABX0020/21/22(10 mg/kg)로 복강내(ip) 제공될 수 있으며, 종양이 100 ㎣의 평균 부피에 도달할 때(0일째) 시작할 수 있다. 15일째까지 매 3일마다 ip를 통해 추가 5회 용량의 항체 요법을 제공할 수 있다. IVIS 광학 이미징 시스템(Perkin Elmer)을 사용하여 매간 생물발광 판독을 수행할 수 있다. 이미지를 포착하고, 데이터를 광자/초로 플롯팅하고, 분석할 수 있다. 추가로, 마우스 체중 을2x/주로 측정할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시양태가 본원에 도시되고, 기술되었지만, 상기 실시양태는 단지 예로서 제공된다는 것이 당업자에게 자명할 것이다. 이제 당업자는 본 발명으로부터 벗어남 없이 다수의 변형, 변경, 및 치환을 착안해 낼 수 있을 것이다. 본원에 기술된 실시양태에 대한 다양한 대안이 사용될 수 있다는 것을 이해하여야 한다. 하기 청구범위는 본 발명의 범주를 정의하고, 이들 청구범위의 범주 내에 있는 방법 및 구조 및 그의 등가물은 그에 의해 포함되는 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> BOEHRINGER INGELHEIM PHARMACEUTICALS, INC. <120> ANTIBODIES TARGETING A COMPLEX COMPRISING NON-CLASSICAL HLA-I AND NEOANTIGEN AND THEIR METHODS OF USE <130> ABX-005WO <140> PCT/US2021/035290 <141> 2021-06-01 <150> 17/199,205 <151> 2021-03-11 <150> 63/032,747 <151> 2020-06-01 <160> 60 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 1 Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 1 5 <210> 2 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 2 Ala Ala Ser 1 <210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 3 Gln Gln Ser Ala Thr Tyr Trp Asp Met 1 5 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 4 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala 1 5 <210> 5 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 5 Ile Ala Tyr Gly Gly Gly Ala Thr 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 6 Ala Lys Gly Leu Ser Asn Phe Asp Tyr 1 5 <210> 7 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 7 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ala Thr Tyr Trp Asp 85 90 95 Met Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 8 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 8 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ala Tyr Gly Gly Gly Ala Thr Ala Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Gly Leu Ser Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 9 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 9 Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser Asn Tyr 1 5 <210> 10 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 10 Gly Thr Asn 1 <210> 11 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 11 Ala Leu Trp Tyr Ser Asn Leu Trp Val 1 5 <210> 12 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 12 Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr Ala 1 5 <210> 13 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 13 Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr 1 5 10 <210> 14 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 14 Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Val Ser Trp Phe Ala Tyr 1 5 10 15 <210> 15 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 15 Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu 1 5 10 15 Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser 20 25 30 Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe 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<400> 22 000 <210> 23 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 23 Val Met Ala Pro Gln Ala Leu Leu Leu 1 5 <210> 24 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 24 Val Met Ala Pro Arg Ala Leu Leu Leu 1 5 <210> 25 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 25 Val Met Ala Pro Arg Thr Leu Leu Leu 1 5 <210> 26 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 26 Val Met Ala Pro Arg Thr Leu Thr Leu 1 5 <210> 27 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 27 Val Met Ala Pro Arg Thr Val Leu Leu 1 5 <210> 28 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 28 Val Met Pro Pro Arg Thr Leu Leu Leu 1 5 <210> 29 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 29 Val Thr Ala Pro Arg Thr Val Leu Leu 1 5 <210> 30 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 30 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ala Tyr Gly Gly Gly Ala Thr Ala Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Gly Leu Ser Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125 Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 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<400> 33 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ala Tyr Gly Gly Gly Ala Thr Ala Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Gly Leu Ser Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125 Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 165 170 175 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190 Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205 Lys Val Asp 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Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(6) <223> Any amino acid <400> 38 Gly Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Trp Leu Met 1 5 <210> 39 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(6) <223> Any amino acid <400> 39 Gly Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Trp Arg Met 1 5 <210> 40 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(6) <223> Any amino acid <400> 40 Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa His Asp Val 1 5 <210> 41 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(6) <223> Any amino acid <400> 41 Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa Trp Val Ala 1 5 <210> 42 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(6) <223> Any amino acid <400> 42 Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa Trp Val Val 1 5 <210> 43 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> Any amino acid <400> 43 Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Xaa Phe Arg Pro 1 5 <210> 44 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> Any amino acid <400> 44 Xaa Xaa Xaa Xaa Asn Xaa Trp Met Pro 1 5 <210> 45 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> Any amino acid <400> 45 Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa His Thr Pro 1 5 <210> 46 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> Any amino acid <400> 46 Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Trp Glu Gly 1 5 <210> 47 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> Any amino acid <400> 47 Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Tyr Asp Val 1 5 <210> 48 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(2) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(6) <223> Any amino acid <400> 48 Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Trp Asp Met 1 5 <210> 49 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of 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Claims (282)

  1. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  2. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  3. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  4. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  5. 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  9. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  10. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  14. 제13항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  18. 제17항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  24. 제23항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  25. 제23항 또는 제24항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  26. 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  30. 제29항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  31. 제30항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  32. 제30항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  33. 제29항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  34. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  35. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  36. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  37. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  38. 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  39. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  40. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  41. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  42. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  43. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  44. 제34항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  45. 제34항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  46. 제34항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  47. 제46항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  48. 제34항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  49. 제34항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  50. 제34항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  51. 제50항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  52. 제34항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  53. 제34항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  54. 제34항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  55. 제34항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  56. 제34항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  57. 제56항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  58. 제56항 또는 제57항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  59. 제56항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  60. 제34항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  61. 제34항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  62. 제34항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  63. 제62항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  64. 제63항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  65. 제62항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  66. 제62항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  67. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  68. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  69. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  70. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  71. 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  72. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  73. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  74. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  75. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  76. 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  77. 제67항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  78. 제67항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  79. 제67항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  80. 제67항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  81. 제67항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  82. 제81항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  83. 제67항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  84. 제67항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  85. 제67항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  86. 제85항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  87. 제67항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  88. 제67항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  89. 제67항 내지 제88항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  90. 제67항 내지 제89항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  91. 제67항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  92. 제91항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  93. 제91항 또는 제92항에 있어서, BiTE가 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  94. 제91항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  95. 제91항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  96. 제91항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  97. 제67항 내지 제96항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  98. 제67항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  99. 제67항 내지 제98항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  100. 제99항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  101. 제100항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  102. 제99항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  103. 제99항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  104. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  105. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  106. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  107. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  108. 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  109. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  110. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  111. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  112. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  113. 제104항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 항원 결합 단편이 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  114. 제104항 내지 제113항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  115. 제104항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 단일클론 항체.
  116. 제104항 내지 제115항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  117. 제104항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  118. 제104항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  119. 제118항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  120. 제104항 내지 제119항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  121. 제104항 내지 제120항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  122. 제104항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  123. 제122항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  124. 제104항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  125. 제104항 내지 제124항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  126. 제104항 내지 제125항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  127. 제104항 내지 제126항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  128. 제104항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  129. 제128항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  130. 제128항 또는 제129항에 있어서, BiTE가 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  131. 제128항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  132. 제128항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  133. 제128항 내지 제132항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  134. 제104항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  135. 제104항 내지 제134항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  136. 제104항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  137. 제136항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  138. 제137항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  139. 제136항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  140. 제136항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
  141. (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  142. 제141항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  143. (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  144. 제143항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  145. 제141항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체가 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 이중특이적 항체.
  146. 제141항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체가 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 이중특이적 항체.
  147. 제141항 내지 제146항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 이중특이적 항체.
  148. 제147항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 이중특이적 항체.
  149. 제141항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 이중특이적 항체.
  150. 제141항 내지 제149항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 이중특이적 항체.
  151. 제141항 내지 제150항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 이중특이적 항체.
  152. 제151항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 이중특이적 항체.
  153. 제141항 내지 제152항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 이중특이적 항체.
  154. 제104항 내지 제153항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 이중특이적 항체.
  155. 제154항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 이중특이적 항체.
  156. 제141항 내지 제155항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 이중특이적 항체.
  157. 제141항 내지 제156항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  158. 제141항 내지 제157항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 이중특이적 항체.
  159. 제158항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  160. 제159항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 이중특이적 항체.
  161. 제158항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 이중특이적 항체.
  162. 제158항에 있어서, 세포가 암 세포인 이중특이적 항체.
  163. (a) 제1항 내지 제140항 중 어느 한 항에 따른 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편, 또는 제141항 내지 제162항 중 어느 한 항에 따른 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편; 및 (b) 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
  164. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  165. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의, 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  166. 제164항 또는 제165항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  167. 제164항 내지 제166항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  168. 제164항 내지 제167항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  169. 제164항 내지 제168항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  170. 제164항 내지 제169항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 (b) 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 것인 방법.
  171. 제164항 내지 제170항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 포함하는 것인 방법.
  172. 제164항 내지 제171항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 것인 방법.
  173. 제164항 내지 제172항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  174. 제164항 내지 제173항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 방법.
  175. 제164항 내지 제174항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  176. 제175항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  177. 제164항 내지 제176항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 방법.
  178. 제164항 내지 제177항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 방법.
  179. 제164항 내지 제178항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E는 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 방법.
  180. 제179항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  181. 제164항 내지 제180항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 방법.
  182. 제164항 내지 제181항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 방법.
  183. 제164항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 방법.
  184. 제164항 내지 제183항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 방법.
  185. 제164항 내지 제184항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 방법.
  186. 제185항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 방법.
  187. 제185항 또는 제186항에 있어서, BiTE가 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  188. 제185항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  189. 제185항 내지 제188항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  190. 제185항 내지 제189항 중 어느 한 항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 방법.
  191. 제164항 내지 제190항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 방법.
  192. 제164항 내지 제191항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 방법.
  193. 제164항 내지 제192항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 방법.
  194. 제193항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  195. 제194항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 방법.
  196. 제193항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  197. 제164항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 유방암, 신장암, 폐암, 난소암, 결장직장암, 췌장암, 융모막 암종, 비소세포 폐 암종(NSCLC), 위암, 자궁경부암, 또는 두부경부암인 방법.
  198. 제164항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 백혈병, 림프종 또는 골수종인 방법.
  199. 제164항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 다발성 골수종(MM), 급성 골수성 백혈병(AML), 또는 골수형성이상 증후군인 방법.
  200. 제164항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 B 세포 악성종양인 방법.
  201. 제164항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 외투 세포 림프종인 방법.
  202. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의,
    (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 또는 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  203. 제201항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 또는 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 방법.
  204. 암 치료를 필요로 하는 개체에게 유효량의,
    (a) 서열 번호 1-3으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 4-6으로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및
    (b) 서열 번호 9-11로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 상보성 결정 영역(CDR); 및 서열 번호 12-14로 기재된 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)
    을 포함하는 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  205. 제204항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) 서열 번호 7로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 8로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH); 및
    (b) 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL); 및 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)
    을 포함하는 것인 방법.
  206. 제201항 내지 제205항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  207. 제201항 내지 제206항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 방법.
  208. 제201항 내지 제207항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  209. 제208항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 방법.
  210. 제201항 내지 제209항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 방법.
  211. 제201항 내지 제210항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 방법.
  212. 제201항 내지 제211항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 방법.
  213. 제212항에 있어서, 이중특이적 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 방법.
  214. 제201항 내지 제213항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 방법.
  215. 제201항 내지 제214항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 방법.
  216. 제201항 내지 제215항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 방법.
  217. 제216항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 방법.
  218. 제201항 내지 제217항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 방법.
  219. 제201항 내지 제218항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 방법.
  220. 제201항 내지 제219항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 방법.
  221. 제220항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  222. 제221항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 방법.
  223. 제220항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 방법.
  224. 제201항 내지 제223항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이적 항체가 치료 유효량으로 투여되는 것인 방법.
  225. 제201항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 유방암, 신장암, 폐암, 난소암, 결장직장암, 췌장암, 융모막 암종, 비소세포 폐 암종(NSCLC), 위암, 자궁경부암, 또는 두부경부암인 방법.
  226. 제201항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 백혈병, 림프종 또는 골수종인 방법.
  227. 제201항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 다발성 골수종(MM), 급성 골수성 백혈병(AML), 또는 골수형성이상 증후군인 방법.
  228. 제201항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 B 세포 악성종양인 방법.
  229. 제201항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 외투 세포 림프종인 방법.
  230. 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  231. 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  232. 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  233. 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  234. 서열 번호 31로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  235. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  236. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  237. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  238. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  239. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 30으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  240. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  241. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  242. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  243. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  244. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 32로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  245. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  246. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  247. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  248. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  249. 제230항 내지 제234항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 33으로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  250. 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  251. 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  252. 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  253. 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  254. 서열 번호 35로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄(LC)를 포함하는 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  255. 제250항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  256. 제250항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  257. 제250항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  258. 제250항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  259. 제250항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 서열 번호 34로 기재된 아미노산 서열과 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄(HC)를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  260. 제230항 내지 제259항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  261. 제230항 내지 제260항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 (i) HLA-E 단독; 또는 (ii) 신생항원 단독인 것에 결합 친화도를 갖지 않는 것인 단일클론 항체.
  262. 제230항 내지 제261항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 항원 프로세싱 기구(APM) 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  263. 제262항에 있어서, 신생항원이 TAP1/2 능숙한 세포에 의해 발현되는 것인 단일클론 항체.
  264. 제230항 내지 제263항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 20(VTAPRTLLL), 서열 번호 21(IMAPRTLVL), 서열 번호 23(VMAPQALLL), 서열 번호 24(VMAPRALLL), 서열 번호 25(VMAPRTLLL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 서열 번호 27(VMAPRTVLL), 서열 번호 28(VMPPRTLLL), 또는 서열 번호 29(VTAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  265. 제230항 내지 제264항 중 어느 한 항에 있어서, 신생항원이 서열 번호 17(VMAPRTLIL), 서열 번호 18(VMAPRTLFL), 서열 번호 19(VMAPRTLVL), 서열 번호 26(VMAPRTLTL), 또는 서열 번호 27(VMAPRTVLL)에 따른 서열을 포함하거나, 본질적으로 그로 구성되거나, 또는 그로 구성된 것인 단일클론 항체.
  266. 제230항 내지 제265항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E가 HLA-E*0101 또는 HLA-E*0103인 단일클론 항체.
  267. 제266항에 있어서, 항체가
    (a) HLA-E*0101 및 신생항원;
    (b) HLA-E*0103 및 신생항원; 또는
    (c) HLA-E*0101 및 신생항원, 및 HLA-E*0103 및 신생항원
    을 포함하는 복합체에 선택적으로 결합하는 것인 단일클론 항체.
  268. 제230항 내지 제267항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 뮤린 항체, 키메라 항체, 카멜리드 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체인 단일클론 항체.
  269. 제230항 내지 제268항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 TCR 유사 항체인 단일클론 항체.
  270. 제230항 내지 제269항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다중특이적 항체인 단일클론 항체.
  271. 제230항 내지 제270항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 항체인 단일클론 항체.
  272. 제230항 내지 제271항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 이중특이적 T 세포 인게이저(BiTE)인 단일클론 항체.
  273. 제272항에 있어서, BiTE가 T 세포 수용체(TCR)와 연관된 CD3 단백질에 결합하는 것인 단일클론 항체.
  274. 제272항 또는 제273항에 있어서, BiTE가 서열 번호 15로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인(VL)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  275. 제272항 또는 제273항에 있어서, BiTE가 서열 번호 16으로 기재된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인(VH)을 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  276. 제230항 내지 제275항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 다기능성 항체인 단일클론 항체.
  277. 제230항 내지 제276항 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 그의 항원 결합 단편 항체가 접합된 치료 모이어티를 추가로 포함하는 것인 단일클론 항체.
  278. 제230항 내지 제277항 중 어느 한 항에 있어서, HLA-E 및 신생항원을 포함하는 복합체에의 항체의 선택적 결합이 세포에서 면역 반응을 유도하는 것인 단일클론 항체.
  279. 제278항에 있어서, 면역 반응이 T 세포의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  280. 제279항에 있어서, T 세포가 CD8+ T 세포인 단일클론 항체.
  281. 제280항에 있어서, 면역 반응이 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함하는 것인 단일클론 항체.
  282. 제281항에 있어서, 세포가 암 세포인 단일클론 항체.
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