CN116157157A - 靶向包含非典型hla-i和新抗原的复合物的抗体及其使用方法 - Google Patents

靶向包含非典型hla-i和新抗原的复合物的抗体及其使用方法 Download PDF

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Abstract

本文提供了选择性地结合包含非典型HLA‑I(例如HLA‑E)和新抗原(neoantigen)的复合物的具有如本文公开的可变重链结构域(VH)、可变轻链结构域(VL)和互补决定区(CDR)的抗体，以及其方法和用途。

Description

靶向包含非典型HLA-I和新抗原的复合物的抗体及其使用 方法
相关申请
本申请要求2021年3月11日提交的现在待审的美国专利申请第17/199,258号和2020年6月1日提交的现在待审的美国临时专利申请第63/032,886号的优先权；其每一个的全部内容通过引用并入本文用于所有目的。
概述
在某些实施方案中，本文公开了包含轻链可变结构域(VL)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链可变结构域(VL)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链可变结构域(VL)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链可变结构域(VL)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链可变结构域(VL)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞(antigen processingmachinery(APM)-proficient cell)表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞(TAP1/2-proficient cell)表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：(a)HLA-E*0101和新抗原；(b)HLA-E*0103和新抗原；或(c)HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，细胞是癌细胞。
在某些实施方案中，本文公开了包含重链可变结构域(VH)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链可变结构域(VH)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链可变结构域(VH)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链可变结构域(VH)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链可变结构域(VH)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：(a)HLA-E*0101和新抗原；(b)HLA-E*0103和新抗原；或(c)HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，细胞是癌细胞。
在某些实施方案中，本文公开了包含轻链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：HLA-E*0101和新抗原；HLA-E*0103和新抗原；或者HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ IDNO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+ T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，细胞是癌细胞。
在某些实施方案中，本文公开了包含重链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ IDNO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：(a)HLA-E*0101和新抗原；(b)HLA-E*0103和新抗原；或(c)HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ IDNO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+ T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，细胞是癌细胞。
在某些实施方案中，本文公开了双特异性抗体或其抗原结合片段，包含：轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；和轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，双特异性抗体包含：(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了双特异性抗体或其抗原结合片段，包含：轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；和轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ IDNO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，双特异性抗体包含：(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ IDNO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，双特异性抗体选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，双特异性抗体对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，双特异性抗体对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：HLA-E*0101和新抗原；HLA-E*0103和新抗原；或者HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+ T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，细胞是癌细胞。
在某些实施方案中，本文公开了药物组合物，所述药物组合物包含：(a)本文公开的单克隆抗体或其抗原结合片段，或本文公开的双特异性抗体或其抗原结合片段；和(b)药学上可接受的载体或赋形剂。
在某些实施方案中，本文公开了治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向所述个体施用有效量的包含轻链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向所述个体施用有效量的包含重链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：HLA-E*0101和新抗原；HLA-E*0103和新抗原；或者HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+ T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，癌症是乳腺癌、肾癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、绒毛膜癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、胃癌、宫颈癌或头颈癌。在一些实施方案中，癌症是骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。在一些实施方案中，癌症是急性髓系白血病(AML)、多发性骨髓瘤或骨髓增生异常综合征。在一些实施方案中，癌症是B细胞恶性肿瘤。在一些实施方案中，癌症是套细胞淋巴瘤。
在某些实施方案中，本文公开了治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向个体施用有效量的双特异性抗体或其抗原结合片段，所述双特异性抗体或其抗原结合片段包含：轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；和轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，双特异性抗体包含：轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向个体施用有效量的双特异性抗体或其抗原结合片段，所述双特异性抗体或其抗原结合片段包含：轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；和轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，双特异性抗体包含：轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ IDNO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，双特异性抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：HLA-E*0101和新抗原；HLA-E*0103和新抗原；或者HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，双特异性抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+ T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，双特异性抗体以治疗有效量施用。在一些实施方案中，癌症是乳腺癌、肾癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、绒毛膜癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、胃癌、宫颈癌或头颈癌。在一些实施方案中，癌症是骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。在一些实施方案中，癌症是急性髓系白血病(AML)、多发性骨髓瘤或骨髓增生异常综合征。在一些实施方案中，癌症是B细胞恶性肿瘤。在一些实施方案中，癌症是套细胞淋巴瘤。
在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含轻链(LC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQID NO:21列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQID NO:19列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，本文公开了包含重链(HC)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的HLA-E不具有结合亲和力。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。在一些实施方案中，抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：(a)HLA-E*0101和新抗原；(b)HLA-E*0103和新抗原；或(c)HLA-E*0101和新抗原，以及HLA-E*0103和新抗原。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。在一些实施方案中，单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。在一些实施方案中，抗体与包含HLA-E和新抗原的复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD4+ T细胞或CD8+T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，细胞是癌细胞。
附图简述
本发明的新颖特征在所附权利要求中具体地阐述。通过参考以下详细描述和附图将获得对本发明的特征和优点的更好理解，该详细描述阐述了利用本发明的原理的说明性实施方案，在附图中：
图1A-图1D示例了克隆R4克隆1(R4c1)的鉴定和针对V-0025的亲和力表征。(图1A)噬菌体和(图1B)单克隆可溶性ELISA。抗原为1μg/ml。(图1C)结合亲和力感测图和(图1D)动力学数据。
图2A-图2D是从R4c1分离亲和力成熟的克隆的分选示意图的示例性概述。图2A-图2C示例了显示第一轮亲和力成熟的每一轮分选的细胞分选图。“星号”指示分选的群体。对于R4分选(图2D)，利用与10nM的V-0025的Koff，使用1μM的R4c1-IgG1持续不同的时间点作为抗体池(antibody sink)。
图3A-图3G示例了从R4c1的亲和力成熟鉴定的克隆。图3A-图3D示例了与100nM的靶抗原(V-0025)的结合谱。图3E-图3G示例了克隆R2A_1与10nM的靶(V-0025)和与100nM的其他肽/HLA-E抗原的结合谱。
图4示例了R2A_1与A549-B4细胞的结合。
图5A-图5B示例了用于通过R2A_1的CDRL3区的亲和力成熟的改进的克隆的分离过程。图5A示例了亲本克隆(R4克隆1)和起始亲和力成熟文库(R0)及第一轮分选文库(R1)与靶(V-0025)的结合。图5B示例了R1亲和力成熟文库的Koff。靶(V-0025)为10nM，并且1μM的R2A_1-hIgG1持续15分钟上至90分钟作为抗体池。
图6A-图6B示例了分离具有比亲本更大结合亲和力的克隆的分选示意图。示出亲和力成熟的(图6A)第1轮和(图6B)第2轮分选的细胞分选图。星号指示分选的群体。对于R2分选，利用与10nM的V-0025的Koff，使用1μM的R2A_1-IgG1持续45分钟作为抗体池。
图7示例了来自R2A_1的CDRL3区的亲和力成熟的克隆的鉴定和与1nM和0.1nM的V-0025的结合谱。箭头指示排名最前的克隆。
图8A-图8B示例了ABX0011的产生的QC数据。
图9A-图9K示例了ABX0011的结合特异性、亲和力和稳定性。通过ELISA分析对抗原的特异性，(图9A)HLA-E(克隆3D12)和(图9B)ABX0011。对于ELISA测定，抗体以1mg/ml使用并且HLA-E/肽抗原以0.5mg/ml使用。ABX0011对靶V-0025的单价亲和力使用ResoSens无标记仪器(Resonant Sensors,Inc.Arlington,TX)确定(图9C)。与克隆3D12相比，ABX0011的检测限通过ELISA评估(图9D&图9E)。ABX0011和HLA-E以1μg/mL使用，而V-0025从1μg/mL降至0.001μg/mL进行滴定(图D)。图9E示出靶V-0025以0.25μg/mL使用，而ABX0011和HLA-E从2μg/mL降至3.8pg/mL(3.8×10-6μg/mL)进行滴定。ABX0011的热稳定性(图9F)通过ELISA评估。将抗体在小鼠血清中于37℃孵育7至14天后，评价ABX0011与HLA-E/VMAPRTLFL的结合。克隆3D12和ABX0011与未脉冲的K562.E细胞和肽脉冲的K562.E细胞的结合选择性(图9G)。将K562.E细胞用20mM肽脉冲2小时，然后用1μg/mL抗体染色。使用ABX0012(具有小鼠IgG1的ABX0011)与相关肽和无关肽进行ABX0011结合选择性的进一步评估。对肽脉冲和未脉冲的K562.E细胞的HLA-E(图9H)和ABX0012(图9I)染色。ABX0011的检测限用靶V-0025肽脉冲的K562.E确定(图9J)。对照是未脉冲的K562.E细胞和亲本K562(缺乏HLA-E表达)以及用无关肽(V-0034、V-0044、V-0046和P-0550)脉冲的K562.E细胞。ABX0011的表位作图使用用丙氨酸取代的V-0025肽脉冲的K562.E细胞进行(图9K)。
图10A-图10C示例了ABX0011与表达HLA-E和HLA-G的细胞系的结合特异性(图10A)，并且未观察到与缺乏HLA-G的人类外周血单个核细胞(huPBMC)和原代人类脐血管内皮细胞(huVEC)的结合(图10B和图10C)。抗体结合研究以1μg/mL进行。(图10A)与IFNγ刺激的JEG3野生型(WT，上图)、Eko(中图)和Tap-1ko(下图)的结合。(图10B)与huPBMC的结合和(图10C)与huVEC的结合。
图11A-图11B示例了与表达HLA-E和HLA-G两者的AML细胞系(THP-1和OCI-AML3)或仅表达HLA-E的AML细胞系(KG-1)的结合。使用3D12(HLA-E)、MEM-G/09(HLA-G)和W632(泛HLA I)以1ug/ml抗体对AML细胞进行染色(图11A)。滴定(10mg/ml至0.004mg/ml)ABX0012(具有小鼠IgG1的ABX0011)并观察到与靶阳性AML细胞系的结合(图11B)。
图12A-图12D示例了ABX0011介导的针对表达靶的肿瘤细胞系的NK细胞毒性。将NK细胞与V-0025肽脉冲的K562.E细胞或与THP-1细胞和同种型对照(hIgG1)共培养。示出了CD107a阳性NK细胞和CD107a阳性NKG2A+NK细胞的频率(图12A和图12B)。死亡的靶细胞(K562.E)和THP-1细胞的频率分别在图12C和图12D中示出。
图13A-图13B示例了ABX0030的产生的QC数据，ABX0030是一种双特异性T细胞衔接器，包含与抗CD3 scFv片段共价连接的ABX0011的VL和VH结构域。
图14示例了ABX0030的亲和力分析。
图15示例了ABX0030与K562.E细胞的结合是肽特异性的。只有用V-0025靶肽脉冲的K562.E细胞被ABX0030以剂量依赖性方式染色。对照细胞(亲本K562和没有肽的K562.E)不被ABX0030染色。
图16是说明ABX0030将人类CD3+细胞而不是CD3阴性细胞染色的示例性直方图。用GAH-APC缀合物和抗CD3(克隆SK7)染色的PBMC(左下直方图)。用抗CD4和GAH-APC缀合物染色的PBMC(左上直方图)。用ABX0030+GAH-APC缀合物(无SK7 Ab)对CD3+细胞染色(右上直方图)。用抗CD-4-PE和ABX0030+GAH-APC缀合物进行双重染色(右上直方图)。注意，在该图中，代表CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的两个CD3+细胞群体。使用ABX0030和克隆SK7-PE对CD3+细胞进行双重染色(右下直方图)。
图17A-图17C示例了ABX0030特异性激活CD8+ T细胞和改变T细胞裂解靶阳性细胞的性能。图17A示出ABX0030特异性改变T细胞裂解用V-0025靶肽脉冲的K562.E细胞。当ABX0030以10,000pM(最高浓度)使用时，观察到针对K562.E(未脉冲)细胞的一些裂解活性。CD8+ T细胞CD25和CD107a的表达也被定量，以确定ABX0030是否可以非特异性地激活T细胞。(图17B和图17C)ABX0030在存在K562.E未脉冲细胞(无靶)的情况下表现出CD8+ T细胞的较小激活。
图18A-图18E示例了ABX0030改变CD8+ T细胞裂解THP-1细胞的有效活性。图18A示出ABX0030改变CD8+ T裂解THP-1细胞的剂量依赖性作用(10000pM至80pM)。ABX0030在存在THP-1细胞的情况下激活CD8+ T细胞。图18B示出ABX0030对CD25+CD8+ T细胞频率的剂量依赖性效应。显示在存在THP-1细胞的情况下ABX0030对CD8+ T细胞的作用的另外的标志是CD107+CD8+ T细胞频率的增加(图18C)，以及穿孔素(图18D)和IFNγ(图18E)阳性CD8+ T细胞频率的增加。
图19A-图19B示例了外周免疫细胞不与ABX0012结合。测试了总PBMC、富集或纯化的细胞的HLA-E、HLA-G或ABX0012的表达。灰色代表同种型染色，并且黑色线代表抗体染色。血小板染色是2名供体的代表。B细胞染色是6名供体的代表。T细胞和NK细胞染色是10名供体的代表。中性粒细胞和嗜酸性粒细胞染色是7名供体的代表。DC染色是4名供体的代表。单核细胞染色是4名供体的代表。巨噬细胞染色是10名供体的代表。N/T表示未测试。
图20A-图20B示例了用IFNγ刺激PBMC不诱导ABX0012结合。将PBMC用(图20B)或不用(图20A)IFNγ刺激过夜并测试HLA-E(克隆3D12)、变性的HLA-E(克隆MEM-E/02)或ABX0023的表达。灰色代表同种型染色，并且黑色线代表抗体染色。染色是2名供体的代表。
图21示例了HLA-E阳性HLA-G阳性细胞系在没有刺激的情况下表现出ABX0012结合。主要取决于细胞系Fc受体表达，将ABX0012(小鼠Fc)或ABX0011(人类Fc)用于染色。灰色代表同种型染色，并且黑色线代表抗体染色。
图22示例了在没有刺激的情况下表现出ABX0012结合的细胞系在IFNγ刺激时显示ABX0012结合的增加。用IFNγ刺激细胞24小时。主要取决于细胞系Fc受体表达，将ABX0012(小鼠Fc)或ABX0011(人类Fc)用于染色。灰色代表同种型染色，并且黑色线代表抗体染色。
图23示例了没有HLA-E的细胞系不表现出ABX0011结合。ABX0011(人类Fc)用于染色。灰色代表同种型染色，并且黑色线代表抗体染色。
图24A-图24B示例了没有HLA-G的细胞系不表现出ABX0012结合。细胞未受刺激(图24A)或用IFNγ刺激(图24B)24小时。灰色代表同种型染色，并且黑色线代表抗体染色。N/T表示未测试。
图25A-图25B示例了ABX0012结合需要HLA-E和Tap1肽加工。(图25A)在染色前用IFNγ刺激JEG3细胞24小时。(图25B)OCI-AML3细胞未受刺激。ABX0012(小鼠Fc)或ABX0011(人类Fc)用于染色。灰色代表同种型染色，并且黑色线代表抗体染色。N/T表示未测试。
图26示例了AML PBMC与ABX0012结合。测试健康PBMC(n＝6)、AML PBMC(n＝18)、脐带血(n＝3)和健康骨髓(n＝3)中CD45dim细胞的ABX0012结合。结合百分比计算为被ABX0012结合的百分比减去被小鼠IgG1同种型对照结合的百分比。**p＝0.0074。
图27示例了ABX-0012将用特定肽脉冲的K562.E细胞染色。使K562和K562.HLA-E+V-0025(VMAPRTLFL)肽脉冲的细胞成团(pellet)，用OCI化合物处理，并快速冷冻，以制备用于免疫组织化学的冷冻细胞块。使用ABX-0012抗体(1.95ug/ml)对K562.E+V-0025和K562细胞进行染色。上图示出阳性ABX-0012染色，而对照细胞(下图)未染色。这些结果证实了使用ABX-0012对冷冻组织切片进行染色的方法。
图28示例了人类胎盘组织并且特别是滋养层细胞的阳性ABX-0012染色。
图29A和图29B示例了头颈部肿瘤和正常邻近组织(NAT)的冷冻切片样品。图29A示出(左图)被抗HLA-E抗体(2.25ug/ml)染色，和(右图)被ABX0012抗体(1.95ug/ml)染色。图29B示出(左图)NAT被抗HLA-E抗体染色，但NAT未被ABX-0012抗体染色(右图)。
图30示例了结肠腺癌和NAT的冷冻切片样品。左图示出用抗HLA-E抗体(2.25ug/ml)染色，并且右图示出用ABX0012抗体(1.95ug/ml)染色。
图31A-图31B示例了肺鳞状细胞癌和NAT的冷冻切片样品。图31A示出(左图)用抗HLA-E抗体(2.25ug/ml)染色，和(右图)用ABX0012抗体(1.95ug/ml)染色。图31B示出正常邻近肺组织未被ABX-0012染色。
详细描述
在某些实施方案中，本文公开了抗体，所述抗体包含至少一条包含重链可变结构域(VH)的重链和至少一条包含轻链可变结构域(VL)的轻链。每个VH和VL包含三个互补决定区(CDR)。在一些实施方案中，抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，双特异性抗体是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，双特异性抗体结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在某些实施方案中，本文还公开了通过施用选择性地结合包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的抗体来治疗癌症的方法。在一些实施方案中，选择性地结合包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的抗体调节针对癌细胞的免疫应答，从而治疗癌症。在一些实施方案中，抗体是双特异性抗体。
治疗癌症的传统方法包括手术、放射、化疗和激素疗法。然而，这样的疗法本身并未证明有效。开发用于预防和/或治疗癌症的代替疗法至关重要。最近，利用抗体和T淋巴细胞的免疫疗法和基因疗法已经成为用于治疗癌症的新的且有前景的方法。
在人类中被称为人类白细胞抗原(HLA)的主要组织相容性复合物(MHC)分子，在身体识别疾病以及由此产生的对癌症和侵袭抗原的免疫应答中起关键作用。HLA基因家族分为两个亚组，即HLA I类(HLA-I)和HLA II类(HLA-II)，其中HLA-I进一步分为典型HLA-I和非典型HLA-I。每种HLA分子与来自细胞内的一种肽形成复合物。在癌细胞上，一些肽/HLA复合物被独特地呈递，这使得免疫系统能够识别并杀伤这些细胞。用这些独特的肽/HLA复合物装饰的细胞被细胞毒性T细胞(CTL)识别和杀伤。癌细胞显示典型HLA-I表达的下调，但非典型HLA-I(例如HLA-E)表达的上调。因此，在癌细胞上上调的独特呈递的非典型HLA-I-肽复合物是开发用于治疗癌症的创新免疫疗法的新靶。
某些术语
除非另外定义，否则本文使用的所有技术术语和科学术语具有与要求保护的主题所属领域的技术人员通常理解的相同的含义。应理解，前述一般描述和以下详细描述仅是示例性的和说明性的，而不限制任何要求保护的主题。本文使用的章节标题仅用于组织目的，并不应被解释为限制所描述的主题。
除非上下文另外清楚指明，否则如本文使用的单数形式“一(a)”、“一(an)”和“该(the)”包括复数指代物。因此，例如，提及“抗体”包括多于一种抗体，并且在一些实施方案中提及“抗体”包括多种抗体，等等。
除非上下文另外清楚指明，否则如本文使用的，所有数值或数值范围包括这样的范围内或涵盖这样的范围的全部整数以及范围内或涵盖范围的值或整数的分数。因此，例如，提及90-100％的范围包括91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％等，以及91.1％、91.2％、91.3％、91.4％、91.5％等，92.1％、92.2％、92.3％、92.4％、92.4％、92.5％等，诸如此类。在另一实例中，提及1-5,000倍的范围包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20倍等，以及1.1、1.2、1.3、1.4、1.5倍等，2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.5倍等，诸如此类。
如本文使用的，“约”数字，是指包括该数字并且范围从低于该数字10％至高于该数字10％的范围。“约”范围是指低于该范围下限10％，跨越至高于该范围上限10％。
如本文所用，术语“MHC”是指主要组织相容性复合物，其是一组指定主要组织相容性抗原的基因座。如本文所用，术语“HLA”是指人类白细胞抗原，其是在人体中发现的组织相容性抗原。如本文所用，“HLA”是“MHC”的人类形式，并且这些术语可以互换使用。
如本文所用，“抗体”是指对特定抗原表现出结合特异性的糖蛋白。本文的抗体还包括抗体的能够与抗原结合的“抗原结合部分”或片段。该术语包括但不限于，多克隆抗体、单克隆抗体、单特异性抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、天然抗体、人源化抗体、人类抗体、嵌合抗体、合成抗体、重组抗体、杂合抗体、突变抗体、嫁接抗体、抗体片段(例如，全长抗体的一部分，通常是抗原结合片段或其可变区，例如，Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段和Fv片段)以及体外产生的抗体，只要它们表现期望的生物活性。该术语还包括单链抗体，例如，单链Fv(sFv或scFv)抗体，其中可变重链和可变轻链连接在一起(直接或通过肽接头)以形成连续多肽。
如本文所用，“CDR”是指免疫球蛋白(Ig)高变结构域。CDR由任何合适的方式定义。在一些实施方案中，CDR可以根据Chothia编号方案、Kabat编号方案、Kabat和Chothia的组合、AbM定义、接触定义和/或Kabat、Chothia、AbM和/或接触定义的组合中的任何一个来定义；并且可能产生不同的结果。
如本文所用，在任何结合剂(例如抗体)的上下文中的术语“选择性地结合”是指结合剂诸如以高亲和力特异性地结合抗原或表位，并且不显著结合其他无关的抗原或表位。
如本文所用，术语“新抗原”或“新肽”可互换使用，并指与健康细胞相比，由病变或应激细胞(例如癌细胞)差异表达的肽。
术语“接受者”、“个体”、“受试者”、“宿主”和“患者”在本文可互换地使用，并且在一些情况下指期望诊断、治疗或疗法的任何哺乳动物受试者，特别地人类。这些术语都不要求医务人员的监督。
如本文使用的，术语“治疗(treatment)”、“治疗(treating)”等，在一些情况下，是指为了获得某种效果的目的而施用某种剂或进行某种程序。所述效果在完全或部分预防疾病或其症状方面可以是预防性的，和/或在实现部分或完全治愈疾病和/或疾病的症状方面可以是治疗性的。如本文使用的“治疗”可以包括对哺乳动物特别是人类的疾病或紊乱(例如癌症)的治疗，并且包括：(a)预防疾病或疾病的症状在可能易患该疾病但尚未被诊断患有该疾病(例如，包括可能与原发病相关或由原发病引起的疾病)的受试者中发生；(b)抑制疾病，即，阻止其发展；以及(c)缓解疾病，即，引起疾病消退。治疗可以指在治疗或改善或预防癌症方面的任何成功征象，包括任何客观或主观的参数，诸如症状的减轻、缓解、减弱；或者使疾病状况对患者更可忍受；减慢退化或衰退的速率；或者使退化的终点不那么衰弱。症状的治疗或改善基于一个或更多个客观或主观的参数；包括医师检查的结果。相应地，术语“治疗”包括施用本发明的化合物或剂，以预防或延迟、减轻或阻止或抑制与疾病(例如，癌症)相关的症状或状况的发展。术语“治疗效果”是指减少、消除或预防受试者的疾病、疾病的症状或疾病的副作用。
在一些情况下，“治疗有效量”是指当向受试者施用用于治疗疾病时，足以实现该疾病治疗的量。
“同一性百分比(％)”是指两个序列(核苷酸或氨基酸)在比对中的相同位置处具有相同残基的程度。例如，“氨基酸序列与SEQ ID NO:Y X％相同”是指氨基酸序列与SEQ IDNO:Y的同一性百分比并且详细说明为氨基酸序列中X％的残基与SEQ ID NO:Y中公开的序列的残基相同。通常，应用计算机程序进行这样的计算。比较和比对序列对的示例性程序包括ALIGN(Myers和Miller,1988)、FASTA(Pearson和Lipman,1988；Pearson,1990)和空位BLAST(Altschul等人,1997)、BLASTP、BLASTN或GCG(Devereux等人,1984)。
主要组织相容性复合物(MHC)或人类白细胞抗原(HLA)
主要组织相容性复合物(MHC)，在人类中也称为人类白细胞抗原(HLA)，是在有核细胞表面上表达的糖蛋白，通过提供对细胞健康状态的洞察来充当蛋白质组扫描芯片。它们从正常宿主细胞蛋白质、癌细胞、发炎细胞以及细菌、病毒和寄生物感染的细胞持续对肽进行取样，并在细胞表面呈递短肽以供T淋巴细胞识别。所呈递的肽也可以来源于不符合读框或内含子中嵌入的序列的蛋白质，或来源于其翻译始于常规甲硫氨酸密码子ATG以外的密码子的蛋白质。
在小鼠和人类中有两类MHC，即MHC I和MHC II。MHC I包括典型和非典型MHC I亚组。
典型MHC I或HLA-I
典型MHC I分子包括人类中的HLA-A、HLA-B和HLA-C，以及小鼠中的H-2-K、H-2-D、H-2-B和H-2-L。典型MHC I分子具有高度多态性，具有超过2,735个HLA-A等位基因、3,455个HLA-B等位基因和2,259个HLA-C等位基因。典型MHC I表达在所有有核细胞表面上，并向CD8T淋巴细胞呈递肽。细胞机制中30％的蛋白质被快速降解，并且是典型MHC I抗原呈递的主要底物。
对于由典型MHC I分子呈递的肽，首先通过常规加工途径(泛素蛋白酶体系统)加工蛋白质，该途径从蛋白酶体的蛋白质降解和肽的转运蛋白相关蛋白(TAP)依赖性转运到内质网(ER)中开始，并以肽装载到HLA肽结合袋中结束。有助于常规加工途径的蛋白质统称为抗原加工机构(APM)，并且包括蛋白酶体、TAP复合物、tapasin、内质网氨基肽酶(ERAAP)、结合免疫球蛋白(BiP)、钙连蛋白(clanexin)和钙网蛋白(calreticulin)。缺乏蛋白酶体亚基、TAP1/2、ErP57或钙网蛋白的细胞在其表面上具有数量减少的典型MHC I分子。
非典型MHC I或HLA-I
非典型MHC I分子包括HLA-E、HLA-F和HLA-G，并且具有有限的多态性。它们在调节先天和适应性免疫应答中起作用。非典型MHC I分子在健康和疾病状态下呈递由常规加工途径和替代加工途径两者产生的肽，并代表一组用于在疾病状态(例如癌症)下靶向的新标志物。
HLA-E
非典型MHC I类分子HLA-E是非多态性的。在自然界中，已鉴定出13种HLA-E等位基因，仅有两种功能变体，即HLAE*0101和HLA-E*0103。HLA-E*0101(HLA-E107R)和*0103(HLA-E107G)之间的差异是在肽结合口袋外的位置107处的单个氨基酸差异。类似于典型MHC I分子，HLA-E在所有有核细胞中表达，但通常水平较低。在应激和疾病期间，细胞和组织中的HLA-E分子表达通常增加。因此，与健康细胞相比，HLA-E在应激或病变细胞(例如癌细胞)上差异地表达。
在健康细胞中，HLA-E呈递源自典型MHC分子和非典型HLA-G分子的肽，通过接合受体CD94/NKG2来抑制或刺激NK细胞和CD8 T细胞亚群的活性。取决于HLA-E呈递的特定肽，HLA-E复合物接合CD94/NKG2A或CD94/NKG2C以分别抑制或激活NK细胞和CD8 T细胞亚群。
另一种与由典型HLA-I分子产生的信号肽具有共同特征的信号肽是由非典型HLA-G产生的信号肽。在正常生理条件下HLA-G表达受到严格调节，在体内相对较少的组织和细胞中发现有限的表达。HLA-G作为免疫耐受分子起着关键作用，并且在癌症组织/细胞中观察到其表达。此外，来自HLA-G的信号肽通过常规抗原加工途径加工，并通过肽转运蛋白TAP递送至内质网。在一些实施方案中，信号肽是VMAPRTLFL(SEQ ID NO:18)。
HLA-E在癌细胞中的表达及肽呈递
缺乏APM的一种或更多种组分的细胞通过独立于APM依赖性常规加工途径的替代加工途径将肽装载到MHC I类分子中。APM缺陷型细胞不仅其表面上典型MHC I分子的数量减少，而且还显示HLA-E分子的细胞表面密度增加以及所呈递的肽库增加。在健康细胞和病变细胞两者中，替代加工途径组成性地开启并产生肽。然而，这些肽不是由健康细胞呈递的；相反，它们只在于病变或应激的细胞中呈递。因此，由APM缺陷型细胞产生的不同肽库，也称为“与受损肽加工相关的T细胞表位”(TEIPP)，代表了癌细胞特有的新靶，并代表了癌症治疗中治疗开发的理想靶。
在应激或病变状态(例如癌症)中，应激或病变细胞(例如癌细胞)差异地表达包含HLA-E和源自非典型HLA-G分子的肽的复合物。与健康细胞相比，包含HLA-E和源自非典型HLA-G分子的肽的复合物在应激或病变细胞上差异地表达。靶向该复合物诱导针对表达该复合物的细胞的免疫应答。
MHC II或HLA-II
人类的MHC II分子包括HLA-DM、HLA-DO、HLA-DP、HLA-DQ和HLA-DR，并且小鼠的包括H-2I-A和H-2I-E。MHC II的表达更局限于B细胞、树突状细胞、巨噬细胞、激活的T细胞和胸腺上皮细胞，并且MHC II分子向CD4淋巴细胞呈递肽。
靶向包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的抗体
在某些实施方案中，本文公开了靶向包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的抗体。在一些实施方案中，抗体包含至少一条包含重链可变结构域(VH)的重链和至少一条包含轻链可变结构域(VL)的轻链。每个VH和VL包含三个互补决定区(CDR)。VH和VL和CDR的氨基酸序列决定抗体的抗原结合特异性和抗原结合强度。表1总结了VH和VL以及CDR的氨基酸序列。
表1.抗体
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Figure BDA0004113482970000321
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在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体对单独的非典型HLA-I不具有结合亲和力。在一些实施方案中，抗体对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，抗体对包含非典型HLA-I和无关新抗原的复合物不具有结合亲和力。
在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
在一些实施方案中，非典型HLA-I是HLA-E、HLA-F、HLA-G或HLA-H。在一些实施方案中，非典型HLA-I是HLA-E。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0103。
在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E*0101和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E*0103和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E*0101和新抗原的复合物，以及HLA-E*0103和新抗原的复合物。在一些实施方案中，复合物包含HLA-E和根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的新抗原。
在一些实施方案中，抗体是鼠抗体。在一些实施方案中，抗体是嵌合抗体。在一些实施方案中，抗体是骆驼科动物抗体。在一些实施方案中，抗体是人源化抗体。在一些实施方案中，抗体是人类抗体。
在一些实施方案中，抗体是TCR样抗体。在一些实施方案中，抗体是单结构域抗体。在一些实施方案中，单结构域抗体是骆驼科动物单结构域抗体。
在一些实施方案中，抗体是多特异性抗体。在一些实施方案中，抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，抗体是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3ε蛋白。在一些实施方案中，抗体是多功能抗体。
在一些实施方案中，抗体还包含缀合的治疗部分。治疗部分包括但不限于，细胞毒素、化疗药物、免疫抑制剂和放射性同位素。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害(例如杀伤)的任何剂。实例包括但不限于，紫杉醇、松胞菌素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、吐根碱、丝裂霉素、依托泊苷、替诺泊苷、长春新碱、长春花碱、秋水仙碱、多柔比星、柔红霉素、二羟基蒽二酮、米托蒽醌、光神霉素、放线菌素D、1-脱氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔和嘌呤霉素及其类似物或同系物。合适的化疗剂包括但不限于抗代谢物(例如，甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、阿糖胞苷、氟达拉滨、5-氟尿嘧啶、达卡巴嗪、羟基脲、巯唑嘌呤、吉西他滨和克拉屈滨)、烷化剂(例如，氮芥、噻替派、苯丁酸氮芥、美法仑、卡莫司汀(BSNU)和洛莫司汀(CCNU)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露糖醇、链脲佐菌素、丝裂霉素C和顺-二氯二胺铂(II)(DDP)顺铂)、蒽环类(例如道诺霉素(以前的柔红霉素)和多柔比星)、抗生素(例如更生霉素(以前的放线菌素)、博莱霉素、光神霉素和氨茴霉素(AMC))和抗有丝分裂剂(例如长春新碱、长春花碱、多西紫杉醇、紫杉醇和长春瑞宾)。合适的放射性同位素包括但不限于，碘-131、钇-90或铟-111。治疗部分的另外实例是具有所需生物活性的蛋白质或多肽。这样的蛋白质可以包括例如酶活性毒素或其活性片段，如相思豆毒蛋白、蓖麻毒素A、假单胞菌外毒素或白喉毒素；蛋白质，如肿瘤坏死因子或干扰素-γ；或生物反应调节剂，例如淋巴因子、白细胞介素-1(Il-1)、白细胞介素-2(Il-2)、白细胞介素-6(IL-6)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或其他生长因子。
在一些实施方案中，抗体与包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的选择性结合诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括NK细胞的激活。在一些实施方案中，抗体与和TCR缔合的CD3蛋白的选择性结合诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD8+ T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。在一些实施方案中，细胞是癌细胞。
抗体可变结构域(VL和VH)
本文公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有包含轻链可变结构域(VL)的轻链。在一些实施方案中，抗体包含轻链可变结构域(VL)，轻链可变结构域(VL)具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有包含重链可变结构域(VH)的重链。在一些实施方案中，抗体包含重链可变结构域(VH)，重链可变结构域(VH)具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体包含轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)。在一些实施方案中，抗体包含轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，轻链可变结构域(VL)具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，重链可变结构域(VH)具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且VH具有与SEQ IDNO:8列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
抗体重链和轻链
本文公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有轻链(LC)。在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)，所述轻链(LC)具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有重链(HC)。在一些实施方案中，抗体包含HC，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体包含轻链(LC)和重链(HC)。在一些实施方案中，抗体包含LC和HC，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有重链(HC)。在一些实施方案中，抗体包含HC，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体包含轻链(LC)和重链(HC)。在一些实施方案中，抗体包含LC和HC，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有轻链(LC)。在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)，所述轻链(LC)具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有重链(HC)。在一些实施方案中，抗体包含HC，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体包含轻链(LC)和重链(HC)。在一些实施方案中，抗体包含LC和HC，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
抗体互补决定区(CDR)
本文公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有包含轻链互补决定区(CDR)的轻链。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体具有包含重链互补决定区(CDR)的重链。在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
本文还公开了选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体，所述抗体包含轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ IDNO:1列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ IDNO:4列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR3。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ IDNO:5列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ IDNO:3列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ IDNO:5列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR3。
双特异性抗体
在一些实施方案中，本文公开的抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，双特异性抗体是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3ε蛋白。
在一些实施方案中，BiTE包括抗CD3抗体或其片段，诸如UCHT1、OKT3、F6A、L2K、莫罗单抗(muromonab)、奥利昔珠单抗(otelixizumab)、teplizumab、维西珠单抗(visilizumab)、CD3-12、MEM-57、4D10A6、CD3D或TR66。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；或重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；或重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；或重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；或重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；或重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；或重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区具有与SEQ IDNO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)或具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区具有与SEQ IDNO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)或具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
治疗方法
本文提供了治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括施用本文公开的选择性地结合包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的抗体。
在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体对单独的非典型HLA-I不具有结合亲和力。在一些实施方案中，抗体对单独的新抗原不具有结合亲和力。在一些实施方案中，抗体对包含非典型HLA-I和无关新抗原的复合物不具有结合亲和力。
在一些实施方案中，新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。在一些实施方案中，新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
在一些实施方案中，非典型HLA-I是HLA-E、HLA-F、HLA-G或HLA-H。在一些实施方案中，非典型HLA-I是HLA-E。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0101。在一些实施方案中，HLA-E是HLA-E*0103。
在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E*0101和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E*0103和新抗原的复合物。在一些实施方案中，抗体选择性地结合包含HLA-E*0101和新抗原的复合物，以及HLA-E*0103和新抗原的复合物。在一些实施方案中，复合物包含HLA-E和根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的新抗原。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)，所述轻链(LC)具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链(HC)，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)和重链(HC)，所述轻链(LC)具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链(HC)，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)和重链(HC)，所述轻链(LC)具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)，所述轻链(LC)具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链(HC)，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)和重链(HC)，所述轻链(LC)具有与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链可变结构域(VL)，轻链可变结构域(VL)具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链可变结构域(VH)，重链可变结构域(VH)具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，轻链可变结构域(VL)具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，重链可变结构域(VH)具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ IDNO:1列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ IDNO:4列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR3。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ IDNO:5列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ IDNO:3列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ IDNO:5列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR3。
在一些实施方案中，抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ IDNO:7列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQID NO:8列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ IDNO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)或具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ IDNO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)或具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体是鼠抗体。在一些实施方案中，抗体是嵌合抗体。在一些实施方案中，抗体是骆驼科动物抗体。在一些实施方案中，抗体是人源化抗体。在一些实施方案中，抗体是人类抗体。
在一些实施方案中，抗体是TCR样抗体。在一些实施方案中，抗体是单结构域抗体。在一些实施方案中，单结构域抗体是骆驼科动物单结构域抗体。
在一些实施方案中，抗体是多特异性抗体。在一些实施方案中，抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，抗体是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。在一些实施方案中，BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3ε蛋白。在一些实施方案中，抗体是多功能抗体。
在一些实施方案中，抗体还包含缀合的治疗部分。治疗部分包括但不限于，细胞毒素、化疗药物、免疫抑制剂和放射性同位素。细胞毒素或细胞毒性剂包括对细胞有害(例如杀伤)的任何剂。实例包括但不限于，紫杉醇、松胞菌素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、吐根碱、丝裂霉素、依托泊苷、替诺泊苷、长春新碱、长春花碱、秋水仙碱、多柔比星、柔红霉素、二羟基蒽二酮、米托蒽醌、光神霉素、放线菌素D、1-脱氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔和嘌呤霉素及其类似物或同系物。合适的化疗剂包括但不限于抗代谢物(例如，甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、阿糖胞苷、氟达拉滨、5-氟尿嘧啶、达卡巴嗪、羟基脲、巯唑嘌呤、吉西他滨和克拉屈滨)、烷化剂(例如，氮芥、噻替派、苯丁酸氮芥、美法仑、卡莫司汀(BSNU)和洛莫司汀(CCNU)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露糖醇、链脲佐菌素、丝裂霉素C和顺-二氯二胺铂(II)(DDP)顺铂)、蒽环类(例如道诺霉素(以前的柔红霉素)和多柔比星)、抗生素(例如更生霉素(以前的放线菌素)、博莱霉素、光神霉素和氨茴霉素(AMC))和抗有丝分裂剂(例如长春新碱、长春花碱、多西紫杉醇、紫杉醇和长春瑞宾)。合适的放射性同位素包括但不限于，碘-131、钇-90或铟-111。治疗部分的另外实例是具有所需生物活性的蛋白质或多肽。这样的蛋白质可以包括例如酶活性毒素或其活性片段，如相思豆毒蛋白、蓖麻毒素A、假单胞菌外毒素或白喉毒素；蛋白质，如肿瘤坏死因子或干扰素-γ；或生物反应调节剂，例如淋巴因子、白细胞介素-1(Il-1)、白细胞介素-2(Il-2)、白细胞介素-6(IL-6)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或其他生长因子。
在一些实施方案中，抗体与包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的选择性结合诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括NK细胞的激活。在一些实施方案中，抗体与和TCR缔合的CD3蛋白的选择性结合诱导免疫应答。在一些实施方案中，免疫应答包括T细胞的激活。在一些实施方案中，T细胞是CD8+ T细胞。在一些实施方案中，免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
在一些实施方案中，癌症是乳腺癌。在一些实施方案中，癌症是肾癌。在一些实施方案中，癌症是肺癌。在一些实施方案中，癌症是卵巢癌。在一些实施方案中，癌症是结肠直肠癌。在一些实施方案中，癌症是胰腺癌。在一些实施方案中，癌症是绒毛膜癌。在一些实施方案中，肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方案中，癌症是胃癌。在一些实施方案中，癌症是宫颈癌。在一些实施方案中，癌症是头颈癌。在一些实施方案中，癌症是骨髓瘤。在一些实施方案中，癌症是白血病。在一些实施方案中，癌症是淋巴瘤。在一些实施方案中，癌症是急性髓系白血病(AML)。在一些实施方案中，癌症为多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，癌症是骨髓增生异常综合征。在一些实施方案中，癌症是B细胞恶性肿瘤。在一些实施方案中，癌症是套细胞淋巴瘤。
在一些实施方案中，癌细胞差异表达新抗原。在一些实施方案中，癌细胞差异表达HLA-E。在一些实施方案中，癌细胞差异表达包含HLA-E和新抗原的复合物。
设想任何合适的施用途径用于与本文公开的方法一起使用。在一些实施方案中，抗体通过静脉内施用来施用。在一些实施方案中，抗体通过皮下施用来施用。在一些实施方案中，局部施用抗体。在一些实施方案中，抗体被全身施用(例如，静脉内、肌肉内、皮下、皮内、口服、鼻内、舌下)。在一些实施方案中，抗体被配制成药膏、洗剂或乳剂。在一些实施方案中，抗体被配制成溶液。在一些实施方案中，抗体被配制用于局部、口服、含服或鼻腔施用。
在一些实施方案中，在施用抗体之前监测个体。鉴定症状并评估其严重程度。如本文讨论的或本领域技术人员已知的，在一定时间内，单独或与另外的治疗组合施用本文所述的抗体。在一些实施方案中，监测个体以确定治疗方案的功效。在一些实施方案中，响应于初步治疗结果修改治疗方案，使得改变治疗剂量或频率或剂量和频率，以便根据症状减轻、副作用减少或症状减轻和副作用减少的组合来获得期望的受试者响应水平。
药物组合物
本文还公开了药物组合物，所述药物组合物包含(a)选择性地结合本文公开的包含非典型HLA-I(例如HLA-E)和新抗原的复合物的抗体，和(b)药学上可接受的载体或赋形剂。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)，所述轻链(LC)具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链(HC)，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)和重链(HC)，所述轻链(LC)具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链(HC)，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)和重链(HC)，所述轻链(LC)具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)，所述轻链(LC)具有与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链(HC)，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链(LC)和重链(HC)，所述轻链(LC)具有与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链(HC)具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，LC具有与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且HC具有与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，并且VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，VL具有与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列，并且VH具有与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含重链CDR序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约70％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体包含轻链CDR序列和重链CDR序列，所述轻链CDR序列具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列，所述重链CDR序列具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少约100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ IDNO:1列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，和具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR3。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR2，具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR2，具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ IDNO:4列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR2，具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR3。
在一些实施方案中，选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物的抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ IDNO:5列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约70％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ IDNO:3列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ ID NO:5列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列至少约75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列的重链CDR3。在一些实施方案中，抗体包含以下中的至少一个：具有与SEQ ID NO:1列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR1，具有与SEQ ID NO:2列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR2，具有与SEQ ID NO:3列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的轻链CDR3，具有与SEQ ID NO:4列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR1，具有与SEQ IDNO:5列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR2，和具有与SEQ ID NO:6列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列的重链CDR3。
在一些实施方案中，抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ IDNO:7列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQID NO:8列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:20列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:21列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQ ID NO:23列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链(LC)或重链(HC)，所述轻链(LC)包含与SEQ ID NO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链(HC)包含与SEQID NO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列；所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ IDNO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)或具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少70％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区具有与SEQ IDNO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，双特异性抗体包含(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)或具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，用于与本文公开的组合物一起使用的赋形剂包括马来酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、碳酸氢钠、磷酸钠、组氨酸、甘氨酸、氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化锌、水、右旋糖、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、二乙二醇单乙醚和表面活性剂聚氧乙烯-脱水山梨醇单油酸酯。
在一些实施方案中，组合物还包含另外的治疗剂。在一些实施方案中，治疗剂是化疗剂。化疗剂可包括，除了其他以外，细胞毒性剂、抗代谢剂(例如，叶酸拮抗剂、嘌呤类似物、嘧啶类似物等)、拓扑异构酶抑制剂(例如，喜树碱衍生物、蒽二酮、蒽环类、表鬼臼毒素、喹啉生物碱等)、抗微管剂(例如，紫杉烷类、长春花生物碱)、蛋白质合成抑制剂(例如，三尖杉碱、喜树碱衍生物、喹啉生物碱)、烷化剂(例如，烷基磺酸酯、乙烯亚胺、氮芥、亚硝基脲、铂衍生物、三氮烯等)、生物碱、萜类化合物和激酶抑制剂。
在一些实施方案中，抗体和治疗剂处于同一制剂中。在一些实施方案中，抗体和治疗剂处于不同的制剂中。在一些实施方案中，在施用其他治疗剂之前使用本文所述的抗体。在一些实施方案中，在施用其他治疗剂的同时使用本文所述的抗体。在一些实施方案中，在施用其他治疗剂之后使用本文所述的抗体。
药物制剂被制成与特定的局部、区域或全身施用或递送途径相容。因此，药物制剂包含适合通过特定途径施用的载体、稀释剂或赋形剂。本文组合物施用途径的具体非限制性实例是肠胃外，例如静脉内、动脉内、皮内、肌肉内、皮下、胸膜内、透皮(表面(topical))、经粘膜、颅内、脊柱内、眼内、直肠、口服(消化道)、粘膜施用，以及适用于治疗方法或施用方案的任何其他制剂。
用于肠胃外应用的溶液或悬浮液包含：无菌稀释剂诸如注射用水、盐水溶液、不挥发油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶剂；抗细菌剂诸如苄醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂诸如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂诸如乙二胺四乙酸；缓冲剂诸如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐；以及用于调节张力的剂诸如氯化钠或右旋糖。在一些实施方案中，用酸或碱诸如盐酸或氢氧化钠来调节pH。
用于注射的药物制剂可以包括无菌水溶液(在水溶性的情况下)或分散体和用于临时制备无菌的可注射溶液或分散体的无菌粉末。对于静脉内施用，合适的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF,Parsippany,N.J.)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。在一些实施方案中，载体是含有例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)的溶剂或分散介质或其合适的混合物。在一些实施方案中，维持流动性，例如，通过使用包衣诸如卵磷脂，在分散体的情况下通过维持要求的粒径，以及通过使用表面活性剂。抗细菌剂和抗真菌剂包括，例如，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸和硫柳汞。在一些实施方案中，组合物中包含等渗剂，例如糖；多元醇，诸如甘露醇或山梨醇；或氯化钠。在一些情况下，还包含延迟吸收的剂，例如单硬脂酸铝或明胶延长可注射组合物的吸收。
无菌注射制剂通过将所需量的活性组合物掺入具有上述成分的一种或组合的适当溶剂中来制备。通常，分散体通过将活性组合物掺入含有基础分散介质和任何其他成分的无菌媒介物中来制备。在用于制备无菌的可注射溶液的无菌粉末的情况中，制备方法包括例如真空干燥和冷冻干燥，其从之前制备的活性成分加任何另外的所需成分的溶液产生活性成分加任何另外的所需成分的粉末。
对于经黏膜或透皮施用，在制剂中使用适于待渗透的屏障的渗透剂。此类渗透剂是本领域已知的，并且包括例如，对于经粘膜施用，去污剂、胆盐和夫西地酸(fusidicacid)衍生物。在一些实施方案中，通过使用鼻喷雾剂、吸入装置(例如，吸气器(aspirator))或栓剂来实现经粘膜施用。对于透皮施用，活性化合物被配制成软膏、药膏、凝胶、乳膏或贴剂。
在一些实施方案中，药物制剂用防止从体内快速消除的载体制备，诸如控释制剂或延时材料，诸如单硬脂酸甘油酯或硬脂酸甘油酯。在一些实施方案中，制剂还使用诸如植入物和微胶囊递送系统的制品来递送，以实现局部、区域或全身递送或受控或持续释放。
实施例
以下实施例是为了说明本发明的多种实施方案而给出，并不意味着以任何方式限制本发明。本发明实施例以及本文描述的方法目前代表优选实施方案，是示例性的，并且不旨在作为对本发明范围的限制。本领域技术人员将会想到其中的变化和其他用途，其包含在由权利要求书的范围限定的本发明精神内。
实施例1.抗体的产生
R4克隆1(R4c1)首先从半合成人类抗体噬菌体文库分离。简而言之，这如下进行。使用由Creative Biolabs构建的人类scFv抗体噬菌体展示文库(1.42×109个克隆)(HuScL-2噬菌体文库)针对HLA-G信号肽/HLA-E*0103复合物(ABI-V-0025；VMAPRTLFL)进行筛选。简而言之，使用30μg五种内部肽/HLA-A2*0201复合物(ABI-AV-007-Biot、ABI-AV-0010-Biot、ABI-AV-0014-Biot、ABI-AV-0019和ABI-AB-0030-Biot)的混合物进行消耗和预封闭，然后用50μg ABI-V-0025富集。噬菌体文库的富集倍数为2.73×106(噬菌体输入：5×1011，噬菌体输出：1.83×105)。对于第二轮生物淘选重复该过程，富集倍数为4.03×102。对于第三轮生物淘选重复该过程，但使用20μg复合物混合物进行消耗(富集倍数2.31×102)。对于第四轮生物淘选，使用50μg ABI-V-0018进行消耗和预封闭，然后用50μg ABI-V-0025富集(富集倍数44)。从第四轮生物淘选的噬菌体输出中，挑选了40个克隆并测序，揭示了一个独特的序列。该克隆被命名为R4克隆1(R4c1)(图1A-图1B)。为了确定R4c1抗体的亲和力，将其在0.1％BSA、0.1％Tween20、PBS稀释/洗涤缓冲液中稀释，并以20ug/ml固定在ForteBio Octet Protein A生物传感器尖头上50秒。随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤尖头50秒。使用六种浓度(在稀释/洗涤缓冲液中从100ug/ml开始的系列稀释)的规范0025-E01:03单体复合物在150秒的过程中测量抗体结合缔合，紧接着解离(稀释/洗涤缓冲液)150秒(图1C)。确定克隆R4(克隆1)的平衡解离常数(KD)为411nM(图1D)。
R4c1的亲和力成熟：循环2：为了增加克隆R4c1与V-0025的结合亲和力，将R4c1scFv构建体克隆到酵母载体中，通过改变CDRH3区中的两个氨基酸来创建R4c1突变体文库。简而言之，使用EBY100酵母感受态细胞生成酵母展示文库，所述EBY100酵母感受态细胞通过在100mM乙酸锂(LiAc,Sigma)加10mM二硫苏糖醇(DTT,Sigma)中孵育来制备用于转化。使用GenePulser(BioRad)，用每2mm比色杯(BioRad)10mM LiAc中60OD制备的酵母，用被改变为在GAL1启动子后包括Aga2并且在scFv后包括Flag(DYKDDDDK)表位标签的1μg scFv克隆和100ng pYES3(ThermoFisher)实现电穿孔。为了确定转化体的数量，将100μL的1/10、1/100和1/1000稀释的转化酵母铺展在减去色氨酸和尿嘧啶的葡萄糖平板(D-UT，Teknova)上。在30℃孵育2天后计算转化效率。然后挑选随机克隆通过PCR进行插入多样性分析。使酵母在30℃在含有葡萄糖减去色氨酸和尿嘧啶的CM培养液(D-UT，Teknova)中以200rpm摇动生长。通过使酵母在补充有0.1％棉子糖(Sigma)的含有半乳糖减去色氨酸和尿嘧啶的CM培养液(G-UT，Teknova)(GR-UT)中生长至少20小时来实现scFv表面诱导。
首先用含2％BSA的PBS 0.05％Tween(封闭缓冲液)在室温旋转封闭30分钟至1小时后，对酵母染色。然后将酵母与生物素化肽/HLA复合物单体在冰上孵育30分钟至90分钟，这取决于单体浓度。用链霉亲和素PE(ThermoFisher)和DYKDDDDK表位标签Alexa Fluor488(R&D Systems)在冰上持续30分钟实现二级标记。使用LSR II流式细胞仪(BDBiosciences)或CytoFLEX S(Beckmen Coulter)对样品进行采集。使用Flowjo软件版本10或FACSDiva(BD Biosciences)准备数据。
通过磁激活细胞分选(MACS)或荧光激活细胞分选(FACS)实现筛选，使用至少十倍的文库大小覆盖率。对于MACS筛选，首先将酵母用含2％BSA的PBS 0.05％Tween(封闭缓冲液)在室温旋转封闭30分钟至1小时。然后用生物素化的肽/HLA复合物单体以1μM在冰上孵育30分钟。使用链霉亲和素微珠(Miltenyi Biotec)实现二级标记。将标记的酵母倒在MACS分离器(Miltenyi Biotec)上的MACS柱上。收获结合到柱上的酵母，并将其视为富集的群体。对于FACS筛选，如流式细胞术部分所述的准备酵母。使用FACS Aria II(BDBioscience)对样品进行分选。分选的酵母被视为富集的群体。
通过铺板鉴定了独特的scFv克隆。在30℃两天后，挑选个体菌落并通过PCR分析。在Expi293F(ThermoFisher)细胞中产生所选克隆的全长人类IgG1。简而言之，将抗体可变区亚克隆到具有匹配的人类κ轻链恒定区(pFUSE2ss-CLIg-hK，Invivogen)和人类IgG1恒定区(pFUSEss-CHIg-hG1，Invivogen)序列的哺乳动物表达载体中。以2:3的轻链:重链比转染载体。用蛋白A树脂(Genscript)纯化抗体，并在还原和非还原条件下通过电泳确认。
使用1μM V-0025进行第一轮选择。门控基于被亲本(R4c1)的结合；亲本对V-0025表现出0.11％的结合，而循环2文库表现出1.66％的结合，表明存在更高亲和力的结合物(图2A)。第二轮使用100nM V-0025。循环2文库显示出0.23％的结合，而亲本显示出0％的结合；未观察到与阴性对照(V-0018)的结合(图2B)。第三轮分选使用10nM V-0025，观察到1.05％的结合(图2C)。最后一轮分选包含了Koff；简而言之，将V-0025以100nM孵育30分钟，然后与全长hIgG1形式的R4c1(R4c1-IgG1)一起孵育。R4c1-IgG1以500nM加入，持续不同的时间点，以用作抗体池。因此，使用Koff压力进行最后一轮分选以选择排名靠前的克隆(图2D)。为了鉴定独特的克隆，挑选个体菌落并测序(n＝48)。鉴定出10个独特的克隆(表2)并与亲本克隆比较结合亲和力。在独特的克隆之中，6个克隆显示与亲本相比与V-0025的结合大至少100倍(图3A-图3D)。一个克隆(克隆R2A_1)除了具有增加的结合亲和力外，还表现出优越的选择性，并被选择用于另外的分析(图3E-图3G)。
表2.独特的克隆和序列修饰
索引 名称 CDRH3
1 亲本 XXXXXXX
2 R2A_1 XLXNXXX
3 R2A_3 XHXTXXX
4 R2A_8 XHXAXXX
5 R2B_1 XHXNXXX
6 R2B_3 XHXRXXX
7 R2B_8 XHXWXXX
8 oR2A_1 XYXTXXX
9 oR2A_2 XVXXXXX
10 oR2A_3 XLXSXXX
11 R3A2 XHXVXXX
克隆R2A_1的表征：将克隆R2A_1从scFv转化为全长hIgG1，用于ELISA检测和细胞染色。基于ELISA数据，测量亲和力为约20nM(数据未示出)，这代表与亲本克隆R4c1相比亲和力增加了10倍以上。为了检查抗体的稳定性，将抗体在37℃储存72小时后对结合进行比较。如图4所示，当抗体已经在37℃储存72hr时，R2A_1与A549-B4细胞的结合严重受损。
克隆R2A_1的稳定：为了提高R2A1的稳定性，对VH和VL两者的框架区的氨基酸进行了一些改变。对于VL，修改了CDRL2以匹配其种系(IGKV1-39)。这也去除了一个N-连接的糖基化位点。对于VH，在框架区1中，改变了Gln5以匹配种系(Leu5)。同样在框架区1中，改变了Met18以匹配种系(Leu18)。稳定的克隆被称为R4c1 H1-L1。将scFv序列插入酵母中进行展示，并与亲本(R2A_1)进行比较。虽然亲和力有一些损失，但特异性没有改变(数据未示出)。
为了产生具有更大亲和力和更宽特异性的抗体，基于R4c1-H1-L1产生了酵母展示文库，并在CDRL3区引入了四个氨基酸突变，这意味着44％的CDRL3序列可能潜在地从亲本改变。如图5A(R0)所示，尽管存在具有与靶结合比亲本更强的选择组，但是非常少的克隆显示出与靶结合。使用10nM的靶进行分选，进行门控以仅选择具有比亲本更大结合亲和力的克隆(选出R1)(图6A)。检查R1文库与靶的结合，并且观察到与亲本相比结合亲和力提高的克隆的数量大幅增加(图5A，R1)。为了选择具有增强亲和力的克隆，使R1文库经受Koff压力。简而言之，将文库与10nM靶一起孵育。洗涤后，加入1μM为全长IgG1的亲本克隆持续15分钟至120分钟，作为抗体池。任何仍然显示与靶结合的酵母表明与亲本克隆相比更小的Koff。如图5B所示，观察到即使在抗体池中120分钟后仍保持与靶结合的酵母克隆。为了选择这些高度改进的克隆，使用与10nM的靶的Koff以及1μM的亲本克隆-IgG1持续45分钟作为抗体池进行最终分选，进行分选门控以仅收集具有最高亲和力的克隆(选出R2)(图6B)。分选后，分离个体克隆并测序(n＝60)。发现12个独特的克隆(表3)并检查与1nM和0.1nM的靶的结合(图7)。选择具有与靶结合的排名靠前的克隆用于另外的测试(克隆R2-C02)(图7黑色箭头)。
表3.独特克隆
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实施例2.通过ELISA、FACS和无标记技术表征排名靠前的克隆
将从酵母展示中鉴定的排名靠前的克隆制成hIgG1，并测试特异性和亲和力。R2-C02表现出高亲和力和良好的特异性(数据未示出)。R2-C02被命名为ABX0011(或ABX-11)并且使用1-L瞬时转染方案在CHO细胞中产生，随后通过蛋白-A亲和色谱法纯化。样品纯度通过还原SDS-PAGE(代表重链和轻链的两条带)和非还原SDS-PAGE(～150kD的单条带)(图8A)和通过尺寸排阻色谱法观察到单峰(图8B)确定。ABX0011首先针对广泛的肽/HLA复合物阵列进行测试。如图9A所示，HLA-E克隆3D12与所有HLA-E复合物结合，包括无肽(peptide-empty)的HLA-E。然而，ABX0011只识别非典型HLA、HLA-G信号肽/HLA-E复合物，而不识别来自典型HLA的密切相关的信号肽(图9B)。此外，ABX0011不识别任何另外的肽/HLA-E复合物或任何肽/HLA-A2复合物。对于ELISA运行，将高纯度的HLA-E01:03和HLA-A2 02:01单体复合物(在0.1％BSA、0.1％Tween20、PBS稀释/洗涤缓冲液中稀释)以0.25μg/ml固定在中性亲和素(neutravidin)包被的微阵列板上，在室温(RT)持续1小时。随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤平板5次。将在稀释/洗涤缓冲液中稀释至1μg/ml的抗体在室温孵育1小时，并且随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤平板5次。将抗小鼠和抗人类HRP缀合物在稀释/洗涤缓冲液中1:5000稀释，并在室温孵育30分钟，然后随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤5次。将TMB底物以50ul/孔加入到平板孔中，并孵育15分钟。以50μl/孔加入1N HCl终止溶液，然后在450nm处读取平板吸光度。
为了确定ABX0011是否识别由HLA-E的两种不同表型(即HLA-E01:03和HLA-E 01:01)呈递的典型HLAI信号肽，如上所述，在ELISA中使用各自的单体复合物。在与两个HLA-E等位基因(HLA-E*0101和HLA-E*0103)中的HLA-G信号肽的结合之间没有观察到差异(图9B)。
ABX0011的亲和力确定：使用无标记技术(Resonant Sensors,Inc.，ResoSens仪器)确定ABX0011的结合亲和力。发现解离平衡常数(KD)为7.9nM或比R4c1克隆提高超过50倍(图1D、图9C)。用于确定亲和力的方法如下。将Thermofisher Capture SelectTM生物素抗IgG-Fc(Hu)(稀释的PBS缓冲液)以5ug/ml固定在中性亲和素包被的Bionetic无标记微阵列板上，直到结合达到平衡。随后用0.1％BSA、0.1％Tween20、PBS稀释/洗涤缓冲液洗涤平板3次。ABX0011(稀释/洗涤缓冲液中5μg/ml)被抗IgG-Fc捕获，直到结合达到平衡。随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤平板3次。将V-0025HLA-E 01:03单体复合物(在稀释/洗涤缓冲液中从5μg/ml开始系列稀释)加入孔中，并允许孵育20分钟以确定结合缔合，并且然后随后立即解离(稀释/洗涤缓冲液)约25分钟。使用Tracedrawer动力学分析软件计算结合亲和力。
可以通过ELISA观察ABX0011检测灵敏度。简而言之，将V-0025HLA-E 01:03单体复合物(在0.1％BSA、0.1％Tween20、PBS缓冲液中从2μg/ml开始系列稀释)在中性亲和素包被的微阵列板上在室温固定1小时。随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤平板5次。将抗体在稀释/洗涤缓冲液中稀释至1μg/ml，并在室温孵育1小时，并且随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤5次。将抗小鼠和抗人类HRP缀合物在稀释/洗涤缓冲液中1:5000稀释，并在室温孵育30分钟，并且然后随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤5次。TMB底物以50μL/孔孵育15分钟。以50μL/孔加入1N HCl终止溶液，并在450nm处读取平板。在图9D中，ABX0011和HLA-E以1μg/mL结合，并针对抗原V-0025的滴定进行测试。类似地，在图9E中，V-0025以0.25μg/mL结合，并使用如对图9A描述的类似的ELISA方案针对ABX0011和HLA-E的滴定进行测试。为了检查稳定性，将ABX0011在37℃放置7至14天，然后对照在4℃储存的ABX0011进行检查。将ABX0011在小鼠血清中稀释至1μg/ml，在37℃孵育7天和14天(4℃对照在测试时在血清中制备)并添加到具有固定的HLA-E 01:03单体复合物的孔中，并如上所述在ELISA中运行。如图9F所示，结合没有改变，表明ABX0011具有良好的稳定性。
为了进一步表征特异性，首先用V-0025肽对转染表达HLA-E的K562细胞进行肽脉冲，然后测试与HLA-E和ABX0011的结合。如图9G所示，基于与无肽(未脉冲)相比HLA-E表达的增加，V-0025肽脉冲的细胞显示装载。ABX0011对装载于HLA-E上的HLA-G显示特异性，不与未脉冲的细胞结合(图9G)。接下来用所有典型HLA信号肽、非典型HLA信号肽和两种其他的HLA-E结合肽(V-0038和P-0550)脉冲被转染以表达HLA-E的K562细胞。基于与无肽(未脉冲)相比HLA-E表达的增加，所有肽脉冲的细胞显示装载(图9H)。同样，ABX0011(如ABX0012所示例)仅识别表达HLA-E的K562细胞中的V-0025肽(图9I)。背景染色为大约500个抗体分子/细胞。为了进一步评估ABX0011的良好结合特异性，将表达HLA-E的K562细胞用20μg/ml的V-0025、V-0034、V-0044、V-0046、P-0550肽脉冲或不脉冲，并且然后用范围从10μg/ml到<0.001μg/ml的不同浓度的ABX0011染色。同样，ABX0011仅显示出对V-0025肽的选择性，当以10ug/ml的浓度使用时，仅最低限度地检测到两种密切相关的肽V-0044和V-0046(图9J)。
基于V-0025(HLA-G信号肽)的肽序列的丙氨酸扫描表明，ABX0011与肽/HLA-E复合物的结合主要依赖于位置8处的氨基酸，在位置2、7和9处具有依赖性较小但仍重要的接触(图9K)。总之，这些结果表明，ABX0011对非典型HLA-G肽信号序列表现出选择性，具有高亲和力和稳定性。
实施例3.ABX0011选择性地结合靶阳性癌细胞系
为了证实特异性，在多种肿瘤细胞系、人类外周血单个核细胞(huPBMC)和原代人类脐血管内皮细胞(huVEC)中测试了ABX0011的结合。由于已知HLA-E在正常胎盘滋养层中高表达，所以绒毛膜癌滋养层细胞系JEG-3被用作被HLA-E和ABX0011两者结合的阳性对照(图10A)。为了证实ABX0011对HLA-E/肽复合物的限制，在HLA-E缺陷型JEG-3(JEG-3Eko)中测试结合。如图10A中间图所示，HLA-E和ABX0011不能与JEG-3Eko细胞结合。为了证实HLA-G信号肽依赖于Tap1/2表达，使用ABX0011对Tap-1敲除的JEG3细胞(JEG-3Tap-1ko)进行染色。如图10A下图所示，在没有Tap-1的情况下HLA-E仍然有一些表达，但是，ABX0011没有表现出结合，表明它只识别通过常规途径加工的HLA-G信号肽。使用huPBMC和huVEC细胞类似地显示了特异性。人类PBMC，特别是B细胞和NK细胞表达高水平的HLA-E(图10B)。与之相比，健康huPBMC不表达HLA-G，并且因此huPBMC缺乏与ABX0011的结合(图10B)。此外，用IFN-γ过夜处理后的huVEC表达高水平的HLA-E。然而，在不存在或存在IFN-γ处理的情况下，ABX0011(如ABX0010所示例)不结合huVEC(图10C)。
已知HLA-E在多种类型的癌症中增加。因此，分析了若干种癌细胞系的HLA-E表达和ABX0011结合。由于当细胞受到应激或刺激时HLA-E上调，因此在未受刺激的细胞和IFNγ刺激的细胞两者中观察了结合。图11A说明了两种表达HLA-E和HLA-G并在没有刺激的情况下结合ABX0011的细胞系(THP-1和OCI-AML3)，以及一种表达HLA-E而不表达HLA-G且不结合ABX0011的细胞系(KG-1)。此外，使用浓度范围(10μg/ml至<0.001μg/ml)的ABX0011(如ABX-0012所示例)与AML细胞系结合显示出ABX0011的良好选择性(图11B)。这些结果表明，ABX0011可以用于靶向AML癌症以及表达HLA-E和HLA-G两者的其他癌症。表达HLA-E的K562细胞和突变的JEG3细胞从(Thorbald van Hall；Leiden University Medical Center)获得。在一些情况下，细胞需要用IFNγ(10ng/ml)刺激过夜以诱导HLA-E表达。
对于所有细胞结合研究(除了ABX0012(具有小鼠IgG1的ABX0011))，将细胞在室温用抗人类CD16(克隆KD1)、抗人类CD32(克隆AT10)和抗人类CD64(克隆10.1)(Bio-Rad)或用人类TruStain FcX(BioLegend)封闭5-10分钟，然后在4℃在100μL中用1μg/mL的ABX0011或hIgG1(克隆QA16A12,BioLegend)或用AF647标记的ABX0011或hIgG1，并用PE或PE-Cy7形式的HLA-E(克隆3D12,BioLegend)进行30分钟表面染色。然后用染色缓冲液(含2mM EDTA的PBS)洗涤细胞，随后进行包含山羊抗人类/AF647(Jackson ImmunoResearch)和zombie/aqua生存力染料(BioLegend)的混合物二级染色。细胞在100μL中于4℃孵育30分钟。用染色缓冲液洗涤细胞两次，并用fluorofix(BioLegend)固定。使用LSR II流式细胞仪(BDBiosciences)或CytoFLEX S(Beckmen Coulter)对样品进行采集。使用Flowjo软件版本10(BD Biosciences)准备数据。
实施例4.ABX0011诱导NK介导的针对靶细胞的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)
这些研究的主要目的是确定ABX0011诱导NK细胞介导的针对靶细胞的ADCC的能力。为了测试ABX0011诱导ADCC的能力，在存在ABX0011的情况下，将原代人类NK细胞与各种肿瘤靶细胞共培养。来自健康志愿者的血液从Carter BloodCare获得。使用Ficoll-PaquePLUS(GE Healthcare)或Lymphoprep(StemCell Technologies)通过密度梯度离心分离PBMC。使用EasySep人类NK细胞富集试剂盒(StemCell Technologies)纯化天然杀伤(NK)细胞。
如图12A所示，在NK细胞与肽脉冲的K562.E细胞共培养4小时后，与同种型对照相比，ABX0011能够以剂量依赖的方式显著增加对K562.E细胞的杀伤(图12A)，并上调NKCD107a表达(图12B)，并且更具体地诱导NKG2A+NK细胞上CD107a表达的增加(图12C)。当使用THP-1细胞时也发现了类似的结果(图12D)。这些结果表明，可以使用ABX0011通过诱导NK细胞ADCC活性来促进肿瘤细胞毒性。
实施例5.产生能够重新靶向T细胞以裂解肿瘤靶细胞的双特异性抗体
将ABX0030构建为能够激活CD3+ T细胞以杀伤肿瘤细胞的双特异性抗体。将ABX0030制备为Fab-Fc-scFv构建体，其包含与非糖基化(N297D突变)人类IgG1支架上的克隆SP34(小鼠抗人类CD3e)的单链(scFv)偶联的ABX0011(Fab)。使用20个氨基酸的接头(GKPGSGKPGSGKPGSGKPGS)将ABX0011 Fab与SP34 scFv共价连接。ABX0030在瞬时转染的CHO细胞中产生，并在蛋白-A亲和柱上纯化。将ABX0030在还原性SDS-PAGE凝胶上运行，并且在预期的MW处显示了预期的两条带(ABX0011轻链为25kD，并且不具有轻链的ABX0030为～55kD)(图13A)。在分析SEC-HPLC柱上大于91％的ABX0030作为单峰迁移(图13B)。
ABX0030的结合亲和力使用无标记测定(ResoSens仪器，Resonant Sensors,Inc)确定。简言之，将V-0025HLA-E 01:03单体复合物(在0.1％BSA、0.1％Tween20、PBS缓冲液中稀释)以5μg/ml固定在中性亲和素包被的Bionetic无标记微阵列板上，直到结合达到平衡。随后在稀释/洗涤缓冲液中洗涤平板3次。评价ABX0030(在稀释/洗涤缓冲液中从10μg/ml开始的系列稀释)结合缔合约20分钟，并且然后立即解离(稀释/洗涤缓冲液)约15分钟。使用Tracedrawer动力学分析软件计算结合亲和力。结果显示解离平衡常数为8.97nM(图14)。
ABX0030的结合特性：首先确认ABX0030与靶肿瘤细胞的结合。如图15所示，ABX0030与亲本克隆(ABX0011)类似地结合V-0025肽脉冲的表达HLA-E的K562细胞。这种结合是HLA-E限制性的，因为HLA-E阴性亲本K562细胞未表现出与ABX0030的结合(图15)。与外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞的结合用于确认抗CD3臂(图16)。K562细胞系从ATCC获得。表达HLA-E的K562细胞从(Thorbald van Hall博士,Leiden University Medical Center,Netherlands)获得。按照供应商的建议培养细胞。对于细胞结合，用抗人类CD16(克隆KD1)、抗人类CD32(克隆AT10)和抗人类CD64(克隆10.1)(Bio-Rad)或人类TruStain FcX(BioLegend)在室温封闭细胞5-10分钟，然后在4℃在50-100μL中用1μg/mL的未标记的抗体或用AF647标记的抗体并用HLA-E/PE-Cy7(克隆3D12，BioLegend)进行30分钟表面染色。然后用染色缓冲液(含2mM EDTA的PBS)洗涤细胞，随后进行包含山羊抗人类或山羊抗小鼠/AF647(如果使用未标记的抗体，Jackson ImmunoResearch)和zombie/aqua生存力染料(BioLegend)的混合物二级染色。细胞在50μL中于4℃孵育30分钟。用染色缓冲液洗涤细胞两次，并用fluorofix(BioLegend)固定。使用CytoFLEX S(Beckmen Coulter)对样品进行采集。使用FlowJo软件版本10(BD Biosciences)准备数据。
ABX0030增强原代CTL的靶特异性细胞毒性：为了评估ABX0030的活性，将原代人类CTL与K562(HLA-E阳性)或用V-0025肽脉冲的K562.E共培养，并测试ABX0030的滴定。如图17A所示，ABX0030以靶特异性方式诱导剂量依赖性细胞毒性；未脉冲的K562.E细胞不受影响。此外，ABX0030未诱导与靶阴性K562.E细胞一起培养的CD8+ T细胞中CD25(48小时)(图17B)和IFNγ(48小时)(图17C)的表达。
使用THP-1细胞确认这些结果(图11A中示出的ABX0011结合数据)。共培养48小时后，ABX030以剂量依赖性方式诱导细胞毒性(图18A)。ABX0030还能够诱导CD8+ T细胞激活，如CD25、CD107a、穿孔素和IFNγ的剂量依赖性诱导所示(图18B-图18E)。这些结果表明，ABX0030以靶特异性的方式增强CD8+ T细胞对肿瘤细胞的裂解。
为了进行体外T细胞激活测定，从Carter BloodCare(Arlington,TX)获得来自健康志愿者的血液。使用Ficoll-Paque PLUS(GE Healthcare)或Lymphoprep(StemCellTechnologies)通过密度梯度离心分离PBMC。使用EasySep人类CD8+ T细胞富集试剂盒(StemCell Technologies)纯化CD8+ T细胞。将富集的人类CD8+ T细胞(CTL)以1×106/mL静置过夜。用CFSE(ThemoFisher)标记靶细胞，并以10:1的比(E:T)加入到静息CTL中。CD3/CD28刺激(ImmunoCult人类CD3/CD28 T细胞激活剂，StemCell Technologies)用作阳性对照。在培养的最后4小时，向所有孔中加入莫能菌素和抗人类CD107a/BV421(BioLegend)。24至48小时后收获细胞。用抗人类CD8/APC(BioLegend)、抗人类CD25/PE-Cy7(Tonbo)和Zombie/Aqua生存力标志物(BioLegend)对细胞进行染色。对于细胞内染色，使用BDcytofix/cytoperm溶液(BD)固定和透化细胞，并用抗人类穿孔素/PerCP-Cy5.5(BioLEgend)和抗人类IFNγ/PE-Dazzle 594(BioLegend)染色。使用CytoFLEX S(BeckmenCoulter)对样品进行采集。使用FlowJo软件版本10(BD Biosciences)准备数据。
表4.肽/HLA复合物列表
Figure BDA0004113482970000941
实施例6 ABX0012不与外周的免疫细胞结合
为了测试ABX0012与免疫细胞的结合，如下所述，对免疫细胞进行纯化、培养、染色并通过流式细胞术评估。
人类原代细胞
来自健康志愿者的血液从Carter BloodCare获得。使用Ficoll-Paque PLUS(GEHealthcare)或Lymphoprep(StemCell Technologies)通过密度梯度离心分离PBMC。使用EasySep人类T细胞分离试剂盒(StemCell Technologies)纯化总T细胞。使用EasySep人类NK细胞富集试剂盒(StemCell Technologies)纯化天然杀伤(NK)细胞。使用EasySep直接人类中性粒细胞分离试剂盒(StemCell Technologies)纯化中性粒细胞。使用EasySep直接人类嗜酸性粒细胞分离试剂盒(StemCell Technologies)纯化嗜酸性粒细胞。使用EasySep人类泛DC预富集试剂盒(StemCell Technologies)纯化树突状细胞(DC)。使用EasySep人类单核细胞分离试剂盒或在不消耗CD16的情况下使用EasySep人类单核细胞富集试剂盒(均来自StemCell Technologies)纯化单核细胞(MO)。在PBMC处理过程中，通过在密度梯度分离后洗涤PBMC后收集上清液来富集血小板。脐带血和健康骨髓从StemExpress获得。使用Ficoll-Paque PLUS(GE Healthcare)或Lymphoprep(StemCell Technologies)通过密度梯度离心分离脐带血PBMC。AML患者PBMC由Champions Oncology收集和染色，流式细胞术分析在内部进行。
当用IFNγ刺激过夜时，将PBMC以1×106个细胞/mL在补充有1％青霉素-链霉素、HEPES缓冲液、2mM L-谷氨酰胺、1％非必需氨基酸、丙酮酸钠和10％胎牛血清(MilliporeSigma)的RPMI-640培养基(ATCC)中培养。IFNγ以10μg/mL提供，并与未用IFNγ的PBMC进行比较。
细胞系
HT-1376、SKBR3、SU.86.86、RPMI-8226、THP-1、OVCAR3、LNCaP、NCI-H1355、COLO205、PANC-1、HCT-116、A549和JEG-3细胞从ATCC获得。NCC-STC-K140和RCC-10RGB细胞从Sekisui XenoTech获得。SNU-899细胞从韩国细胞系库(Korean cell line bank)获得。OCI-AML3细胞从DSMZ获得。JEG-3HLA-EKO和Tap1KO细胞及OCI-AML3 HLA-EKO从MTA的Throbald van Hall教授处获得。一些细胞需要用IFNγ刺激过夜以诱导HLA-E表达。
巨噬细胞分化
通过在补充有5μg/mL M-CSF(StemCell Technologies)的Immunocult-SF巨噬细胞培养基中培养单核细胞产生巨噬细胞。在第4天添加另外的培养基。在第6天，使用LPS(10ng/mL)和IFNγ(50ng/mL)激活M0巨噬细胞以得到M1激活，或使用IL-4(10ng/mL)激活M0巨噬细胞以得到M2a激活。激活2天后收获M1和M2a巨噬细胞。对于解离，accutase用于M1巨噬细胞，并且2.5mM EDTA用于M2a巨噬细胞。
流式细胞术
使用SiteClick抗体叠氮基修饰试剂盒和Click-iT AF647 sDIBO炔烃抗体标记试剂盒(Thermo Fisher Scientific)用AlexaFluor 647(AF647)标记ABX0012、mIgG1和MEM-E/02。
对于使用未标记的抗体的细胞结合，在100μL中将细胞用ABX0012、ABX0011、小鼠同种型IgG1(MOPC-21，BioLegend)、人类同种型IgG1(QA16A12，BioLegend)、3D12(BioLegend)或MEM-E/02(BioRad)以1μg/mL至5μg/mL的浓度在4℃染色30分钟。然后用染色缓冲液(含2mM EDTA的PBS)洗涤细胞，随后进行包含山羊抗人类/AF647(JacksonImmunoResearch)或山羊抗小鼠/AF647(Thermo Fisher Scientific)和zombie/aqua生存力染料(BioLegend)的混合物二级染色。细胞在100μL中于4℃孵育30分钟。将细胞用染色缓冲液洗涤两次，并在100μL染色缓冲液中进行采集。对于使用标记的抗体的细胞结合，在4℃在100μL中将细胞与抗体染色混合物一起孵育30min，然后用染色缓冲液洗涤两次，并在100μL染色缓冲液中进行采集。如果不能在染色当天对细胞进行采集，则将其用100μL的FluoroFix缓冲液(BioLegend)固定。使用CytoFLEX S(Beckmen Coulter)对样品进行采集。使用Flowjo软件版本10(BD Biosciences)准备数据。
抗HLA-E(3D12)/PE-Cy7、抗CD3(HIT3a)/APC-Cy7、抗CD3(SK7)/APC-Cy7、抗CD4(RPA-T4)/PerCP-Cy5.5、抗CD8(RPT-T8)/BV605、抗CD14(M5E2)/FITC、抗CD16(3G8)/PacificBlue、抗CD19(HIB19)/FITC、抗CD20(2H7)/BV421、抗CD33(WM53)/BV650、抗CD34(561)/AF700、抗CD45(HI30)/FITC、抗CD56(5.1H11)/AF700、抗谱系混合物/FITC和抗Siglec-8(7C9)/PE购自BioLegend。抗CD56(B159)/PE-CF594购自BD BioScience。抗CD3(HIT3a)/FITC和抗CD4(OKT4)/PE购自Tonbo Biosciences。抗HLA-G(MEM-G/09)/PE购自Thermo Fisher Scientific。
由于已知免疫细胞表达HLA-E，因此测试了它们与ABX0012的结合。虽然所有免疫细胞都表达HLA-E，但全都未显示HLA-G的表达或被ABX0012结合(图19)。因为当细胞受到应激或刺激时HLA-E可以上调，因此在有IFNγ刺激和没有IFNγ刺激的情况下，测试ABX0012在PBMC中的结合。虽然HLA-E克隆3D12在刺激的情况下表现出轻微的结合增加，但只有HLA-E克隆MEM-E/02(其识别没有肽或B2M的HLA-E)上调；ABX0012结合没有变化(图20)。该数据表明，ABX0011应该对免疫细胞没有脱靶活性。
实施例7ABX0012结合要求HLA-E和典型HLA-G表达
为了鉴定与ABX0012结合的细胞系，分析了各种细胞系的HLA-E和HLA-G的表达。鉴定了若干种细胞系(图21)，并且IFNγ刺激增加了ABX0012结合(图22)。通过测试表达HLA-G但不表达HLA-E的细胞系(图23)和表达HLA-E但不表达HLA-G的细胞系(图24A)来确认HLA-E选择性。用IFNγ刺激细胞不会改变这种选择性(图24B)。值得注意的是，这些FACS数据用于强调，缺乏HLA-E的细胞不被ABX0011/12染色。这些数据并不代表该癌症类型的所有肿瘤细胞。示出这些只是为了突出ABX0012的选择性。通过测试等基因细胞系证实了ABX0012对HLA-E复合物的另外选择性。如图25A中间图所示，HLA-E和ABX0012不能与JEG-3Eko细胞结合。为了确认ABX0012只识别需要TAP表达的HLA-G肽/HLA-E复合物，在Tap-1敲除的JEG-3细胞(JEG-3Tap-1ko)中测试结合。如图25A右图所示，在没有Tap-1的情况下，HLA-E仍有一些表达，然而，ABX0012没有表现出结合，表明它仅识别通过典型途径加工的肽(HLA-G)。使用HLA-E缺陷型OCI-AML3观察到相似结果(图25B)。
实施例8 ABX0012与血液中急性髓细胞性白血病(AML)髓母细胞结合
基于ABX0012与AML细胞系THP-1和OCI-AML3的结合，测试了AML患者PBMC的ABX012结合。如图26所示，与健康PBMC相比，AML PBMC具有显著更高百分比的ABX0012阳性细胞。为了确认造血干细胞和祖细胞群体不被ABX0012染色，测试了健康骨髓和脐带血。健康骨髓和脐带血表现出与健康PBMC相似的ABX0012水平(图26)。虽然健康骨髓和脐带血的ABX0012水平并不显著低于AML PBMC的ABX0012水平，但这是供体数量少导致的结果。该数据表明，AML可以是ABX0011治疗的适应症。
实施例9使用冷冻细胞块验证染色方案
为了分析组织样品的免疫组织化学(IHC)染色，对冷冻细胞块测试IHC染色。人类冷冻组织块(肿瘤和正常邻近组织(NAT))的块购自ProteoGenex(Inglewood,CA)并包埋在OCT化合物中。使用切片机-低温恒温器对样品进行切片，并在载玻片上封固。免疫组织化学(IHC)染色由NovoVita Histopath Laboratory,LLC.(Cambridge,MA)进行。简而言之，将冷冻组织载玻片风干20分钟，然后湿装到Ventana XT discovery ultra-instrument(Ventana Medical Systems，Tucson，AZ)上。然后用1x Ventana反应缓冲液(Cat.#950-300)冲洗载玻片，然后用过氧化物酶抑制剂CM(Ventana)处理12分钟以阻断内源性过氧化物酶。用1x Ventana反应缓冲液冲洗后，将载玻片温热至37℃并与2.25ug/ml一抗(抗HLA-E(MEM-E/02，AbCam)、小鼠IgG1同种型对照或AB0012)一起孵育60分钟。用Ventana反应缓冲液冲洗载玻片3次，并用FineFix工作溶液(Milestone，Kalamazoo，MI，Cat.#70147WG)孵育4分钟(后固定步骤)并冲洗3次。将Discovery抗小鼠HQ(Ventana,Cat.#760-4814)施加到载玻片，持续24分钟，使用Ventana反应缓冲液冲洗3次。将一滴DISC抗HQ HRP(Ventana,Cat.#760-4820)施加到载玻片，孵育24分钟，并用Ventana反应缓冲液冲洗3次。接下来，将Discovery ChromoMap DAB试剂盒(Ventana,Cat.#760-159)的一滴和一滴CM H2O2(Ventana)施加到载玻片，孵育8分钟，然后用Ventana反应缓冲液冲洗3次。然后将一滴铜CM(Ventana)施加到载玻片，孵育4分钟，随后用Ventana反应缓冲液冲洗3次，然后将一滴苏木精(复染)施加到载玻片，持续12分钟。用Ventana反应缓冲液冲洗(2次)后，施加一滴BluingReagent(后复染)，并且8分钟后，用Ventana反应缓冲液冲洗载玻片2次。然后从Ventana XT中取出载玻片，用洗碗去污剂(dishwash detergent)洗涤，并用酒精和二甲苯处理脱水。将盖玻片加到载玻片上，并在Discovery Ultra仪器上读取载玻片。
以1.95ug/ml使用ABX0012，以2.25ug/ml使用抗HLA-E(MEM-E/02)抗体和小鼠IgG1同种型对照抗体，对K562细胞或用20ug/ml V-0025(VMPRTLFL)肽脉冲2小时的HLA-E转染的K562细胞(K562.E)的细胞块进行染色(图27)。图像显示，ABX0012对K562.E+V-0025肽脉冲的细胞强烈染色(3个+++，共3个)，而未对K562细胞强烈染色(-)。这些数据表明ABX0012选择性地与呈递HLA-E/V-0025的细胞结合，并验证了免疫组织化学(IHC)染色方案。
实施例10对阳性对照组织染色
新鲜冷冻人类胎盘组织用作ABX0012的阳性对照。熟知的是，滋养层细胞表达HLA-E和HLA-G，并且因此预期在胎盘组织中被ABX0012染色。在图28中，ABX0012显示出对胎盘组织中滋养层细胞的强烈(2++至3+++)染色，并证明，HLA-E+典型前导序列肽存在于滋养层细胞的表面上。
实施例11ABX0012对头颈部肿瘤组织染色
图29是冷冻的从头颈部患者收集的肿瘤组织的ABX0012染色的代表性图像。图29A左图示出了抗HLA-E抗体(克隆MEM-E/02)的强烈肿瘤细胞染色。同一图示出了MEM-E/02抗体对基质区域的染色。右图示出了肿瘤组织的ABX0012抗体染色。肿瘤基质显示强烈染色(3+++)，而肿瘤细胞显示弱至中度染色。图像表明，靶，即HLA-E+前导序列非典型HLA-G(VMAPRTLFL)存在于头颈癌患者的肿瘤组织中。图29B示出了用MEM-E/02(左图)和ABX0012(右图)染色的正常邻近组织(NAT)的图像。注意，NAT上皮对HLA-E表达呈阳性(左图)，然而不存在ABX0012染色表明NAT上皮中缺乏HLA-E/VMAPRTLFL肽复合物(右图)。
实施例12ABX0012对结肠腺癌肿瘤组织染色
示出用抗HLA-E(左图；10倍放大)或ABX-0012(右图；10倍放大)染色的新鲜冷冻人类结肠腺癌组织的代表性图像。图30示出了肿瘤和基质区域两者中的HLA-E表达(上图1.4倍放大，以及下图14.4倍，左图)，以及在肿瘤(2++)和基质(3+++)区域中ABX0012可检测的HLA-E/VMAPRTLFL肽复合物(上图1.4倍放大，以及下图14.4倍，右图)。
实施例13ABX0012对肺鳞状细胞癌组织染色
示出用抗HLA-E(左图，顶部10倍放大)或ABX0012(右图；10倍放大)染色的新鲜冷冻肺鳞状细胞癌组织的代表性图像。图31A示出肿瘤和基质被抗HLA-E抗体(2++)或ABX0012(1+至2++)两者染色，分别表明肺癌中HLA-E和HLA-E/VMAPRTLFL肽复合物的表达。图31B示出ABX0012未对正常邻近肺组织染色，表明正常肺组织中不存在装载有VMAPRTLFL肽的HLA-E。
虽然本文已经示出和描述了本发明的优选实施方案，但对于本领域技术人员将明显的是，这样的实施方案只是以实例的方式提供的。在不脱离本发明的情况下，本领域技术人员现在将会想到许多变化、改变和替换。应当理解，可以采用本文描述的实施方案的各种替代选择。意图所附权利要求书限定本发明的范围，并且由此涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等效物。

Claims (302)

1.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
2.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
3.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
4.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
5.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
7.根据权利要求1-5中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
8.根据权利要求1-5中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
9.根据权利要求1-5中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
10.根据权利要求1-5中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
15.根据权利要求14所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的单克隆抗体，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
18.根据权利要求17所述的单克隆抗体，其中所述抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
20.根据权利要求1-19中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。
21.根据权利要求1-20中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。
22.根据权利要求1-21中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。
23.根据权利要求1-22中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
24.根据权利要求23所述的单克隆抗体，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
25.根据权利要求23-24中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
26.根据权利要求23-25中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
27.根据权利要求1-26中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
28.根据权利要求1-27中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
29.根据权利要求1-28中任一项所述的单克隆抗体，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
30.根据权利要求29所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
31.根据权利要求30所述的单克隆抗体，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
32.根据权利要求30所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
33.根据权利要求29所述的单克隆抗体，其中所述细胞是癌细胞。
34.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
35.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
36.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
37.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
38.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
39.根据权利要求34-38中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
40.根据权利要求34-38中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
41.根据权利要求34-38中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
42.根据权利要求34-38中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
43.根据权利要求34-38中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
44.根据权利要求34-43中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
45.根据权利要求34-44中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
46.根据权利要求34-45中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
47.根据权利要求34-46中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
48.根据权利要求47所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
49.根据权利要求34-48中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
50.根据权利要求34-49中任一项所述的单克隆抗体，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
51.根据权利要求50所述的单克隆抗体，其中所述抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
52.根据权利要求34-51中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
53.根据权利要求34-52中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。
54.根据权利要求34-53中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。
55.根据权利要求34-54中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。
56.根据权利要求34-55中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
57.根据权利要求56所述的单克隆抗体，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
58.根据权利要求56-57中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
59.根据权利要求56-58中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
60.根据权利要求34-59中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
61.根据权利要求34-60中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
62.根据权利要求34-61中任一项所述的单克隆抗体，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
63.根据权利要求62所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
64.根据权利要求63所述的单克隆抗体，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
65.根据权利要求62所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
66.根据权利要求62所述的单克隆抗体，其中所述细胞是癌细胞。
67.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
68.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。
69.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。
70.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。
71.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
72.根据权利要求67-71中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
73.根据权利要求67-71中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。
74.根据权利要求67-71中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。
75.根据权利要求67-71中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。
76.根据权利要求67-71中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
77.根据权利要求67-76中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
78.根据权利要求67-77中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
79.根据权利要求67-78中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
80.根据权利要求67-79中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
81.根据权利要求67-80中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
82.根据权利要求67-81中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
83.根据权利要求82所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
84.根据权利要求67-83中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
85.根据权利要求67-84中任一项所述的单克隆抗体，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
86.根据权利要求85所述的单克隆抗体，其中所述抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
87.根据权利要求67-86中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
88.根据权利要求67-87中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。
89.根据权利要求67-88中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。
90.根据权利要求67-89中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。
91.根据权利要求67-90中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
92.根据权利要求91所述的单克隆抗体，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
93.根据权利要求91-92中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ IDNO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
94.根据权利要求91-93中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ IDNO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
95.根据权利要求91-94中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
96.根据权利要求91-95中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
97.根据权利要求67-96中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
98.根据权利要求67-97中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
99.根据权利要求67-98中任一项所述的单克隆抗体，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
100.根据权利要求99所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
101.根据权利要求100所述的单克隆抗体，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
102.根据权利要求99所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
103.根据权利要求99所述的单克隆抗体，其中所述细胞是癌细胞。
104.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
105.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。
106.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。
107.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。
108.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
109.根据权利要求104-108中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
110.根据权利要求104-108中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。
111.根据权利要求104-108中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。
112.根据权利要求104-108中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。
113.根据权利要求104-108中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或抗原结合片段包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
114.根据权利要求104-113中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
115.根据权利要求104-114中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
116.根据权利要求104-115中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
117.根据权利要求104-116中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
118.根据权利要求104-117中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
119.根据权利要求104-118中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
120.根据权利要求119所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
121.根据权利要求104-120中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
122.根据权利要求104-121中任一项所述的单克隆抗体，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
123.根据权利要求122所述的单克隆抗体，其中所述抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
124.根据权利要求104-123中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
125.根据权利要求104-124中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。
126.根据权利要求104-125中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。
127.根据权利要求104-126中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。
128.根据权利要求104-127中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
129.根据权利要求128所述的单克隆抗体，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
130.根据权利要求128-129中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
131.根据权利要求128-130中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
132.根据权利要求128-131中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
133.根据权利要求128-132中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
134.根据权利要求104-133中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
135.根据权利要求104-134中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
136.根据权利要求104-135中任一项所述的单克隆抗体，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
137.根据权利要求136所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
138.根据权利要求137所述的单克隆抗体，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
139.根据权利要求136所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
140.根据权利要求136所述的单克隆抗体，其中所述细胞是癌细胞。
141.一种双特异性抗体或其抗原结合片段，包含：
(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；以及
(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
142.根据权利要求141所述的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体包含：
(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和
(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
143.一种双特异性抗体或其抗原结合片段，包含：
(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；以及
(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
144.根据权利要求143所述的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体包含：
(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和
(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
145.根据权利要求141-144中任一项所述的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
146.根据权利要求141-145中任一项所述的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
147.根据权利要求141-146中任一项所述的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
148.根据权利要求141-147中任一项所述的双特异性抗体，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
149.根据权利要求148所述的双特异性抗体，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
150.根据权利要求141-149中任一项所述的双特异性抗体，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
151.根据权利要求141-150中任一项所述的双特异性抗体，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
152.根据权利要求151所述的双特异性抗体，其中所述抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
153.根据权利要求141-152中任一项所述的双特异性抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
154.根据权利要求104-153中任一项所述的双特异性抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
155.根据权利要求154所述的双特异性抗体，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
156.根据权利要求141-155中任一项所述的双特异性抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
157.根据权利要求141-156中任一项所述的双特异性抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
158.根据权利要求141-157中任一项所述的双特异性抗体，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
159.根据权利要求158所述的双特异性抗体，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
160.根据权利要求159所述的双特异性抗体，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
161.根据权利要求158所述的双特异性抗体，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
162.根据权利要求158所述的双特异性抗体，其中所述细胞是癌细胞。
163.一种药物组合物，所述药物组合物包含：(a)根据权利要求1-140中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，或根据权利要求141-162中任一项所述的双特异性抗体或其抗原结合片段；和(b)药学上可接受的载体或赋形剂。
164.一种治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向所述个体施用有效量的包含轻链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
165.一种治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向所述个体施用有效量的包含重链互补决定区(CDR)的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
166.根据权利要求164或权利要求165所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
167.根据权利要求164-166中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少90％相同的氨基酸序列。
168.根据权利要求164-167中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少95％相同的氨基酸序列。
169.根据权利要求164-168中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少99％相同的氨基酸序列。
170.根据权利要求164-169中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含(a)轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列；和(b)重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种100％相同的氨基酸序列。
171.根据权利要求164-170中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
172.根据权利要求164-171中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
173.根据权利要求164-172中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
174.根据权利要求164-173中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
175.根据权利要求164-174中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
176.根据权利要求164-175中任一项所述的方法，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
177.根据权利要求176所述的方法，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
178.根据权利要求164-177中任一项所述的方法，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
179.根据权利要求164-178中任一项所述的方法，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
180.根据权利要求179所述的方法，其中所述抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
181.根据权利要求164-180中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
182.根据权利要求164-181中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。
183.根据权利要求164-182中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。
184.根据权利要求164-183中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。
185.根据权利要求164-184中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
186.根据权利要求185所述的方法，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
187.根据权利要求185-186中任一项所述的方法，其中所述BiTE还包含轻链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
188.根据权利要求185-187中任一项所述的方法，其中所述BiTE还包含重链互补决定区(CDR)，所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
189.根据权利要求185-188中任一项所述的方法，其中所述BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
190.根据权利要求185-189中任一项所述的方法，其中所述BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
191.根据权利要求164-190中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
192.根据权利要求164-191中任一项所述的方法，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
193.根据权利要求164-192中任一项所述的方法，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
194.根据权利要求193所述的方法，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
195.根据权利要求194所述的方法，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
196.根据权利要求193所述的方法，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
197.根据权利要求164-196中任一项所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌、肾癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、绒毛膜癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、胃癌、宫颈癌或头颈癌。
198.根据权利要求164-196中任一项所述的方法，其中所述癌症是骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。
199.根据权利要求164-196中任一项所述的方法，其中所述癌症是急性髓系白血病(AML)、多发性骨髓瘤或骨髓增生异常综合征。
200.根据权利要求164-196中任一项所述的方法，其中所述癌症是B细胞恶性肿瘤。
201.根据权利要求164-196中任一项所述的方法，其中所述癌症是套细胞淋巴瘤。
202.一种治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向所述个体施用有效量的双特异性抗体或其抗原结合片段，所述双特异性抗体或其抗原结合片段包含：
(a)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；以及
(b)轻链互补决定区(CDR)或重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
203.根据权利要求199所述的方法，其中所述双特异性抗体包含：
(a)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和
(b)轻链可变结构域(VL)或重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
204.一种治疗有相应需要的个体的癌症的方法，包括向所述个体施用有效量的双特异性抗体或其抗原结合片段，所述双特异性抗体或其抗原结合片段包含：
(a)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:1-3列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:4-6列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；以及
(b)轻链互补决定区(CDR)和重链互补决定区(CDR)，所述轻链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:9-11列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列；所述重链互补决定区(CDR)具有与SEQ ID NO:12-14列出的氨基酸序列中的至少一种至少80％相同的氨基酸序列。
205.根据权利要求204所述的方法，其中所述双特异性抗体包含：
(a)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:7列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:8列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列；和
(b)轻链可变结构域(VL)和重链可变结构域(VH)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
206.根据权利要求202-205中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
207.根据权利要求202-206中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
208.根据权利要求202-207中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
209.根据权利要求202-208中任一项所述的方法，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
210.根据权利要求209所述的方法，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
211.根据权利要求202-210中任一项所述的方法，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
212.根据权利要求202-211中任一项所述的方法，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
213.根据权利要求212所述的方法，其中所述双特异性抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
214.根据权利要求202-213中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
215.根据权利要求202-214中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。
216.根据权利要求202-215中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
217.根据权利要求216所述的方法，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
218.根据权利要求202-217中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
219.根据权利要求202-218中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
220.根据权利要求202-219中任一项所述的方法，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
221.根据权利要求220所述的方法，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
222.根据权利要求221所述的方法，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
223.根据权利要求221所述的方法，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
224.根据权利要求202-223中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体以治疗有效量施用。
225.根据权利要求202-224中任一项所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌、肾癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、绒毛膜癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、胃癌、宫颈癌或头颈癌。
226.根据权利要求202-224中任一项所述的方法，其中所述癌症是骨髓瘤、白血病或淋巴瘤。
227.根据权利要求202-224中任一项所述的方法，其中所述癌症是急性髓系白血病(AML)、多发性骨髓瘤或骨髓增生异常综合征。
228.根据权利要求202-224中任一项所述的方法，其中所述癌症是B细胞恶性肿瘤。
229.根据权利要求202-224中任一项所述的方法，其中所述癌症是套细胞淋巴瘤。
230.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
231.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
232.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
233.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
234.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
235.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
236.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
237.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
238.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
239.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
240.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
241.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
242.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
243.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
244.根据权利要求230-234中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
245.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
246.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
247.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
248.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
249.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
250.根据权利要求245-249中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
251.根据权利要求245-249中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
252.根据权利要求245-249中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
253.根据权利要求245-249中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
254.根据权利要求245-249中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
255.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
256.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
257.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
258.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
259.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:20列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
260.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
261.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
262.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
263.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
264.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:21列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
265.根据权利要求255-264中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
266.根据权利要求255-264中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
267.根据权利要求255-264中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
268.根据权利要求255-264中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
269.根据权利要求255-264中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:19列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
270.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
271.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
272.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
273.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
274.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，包含重链(HC)，所述重链(HC)包含与SEQ IDNO:23列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
275.根据权利要求270-274中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
276.根据权利要求270-274中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。
277.根据权利要求270-274中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。
278.根据权利要求270-274中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列至少99％相同的氨基酸序列。
279.根据权利要求270-274中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含轻链(LC)，所述轻链(LC)包含与SEQ IDNO:22列出的氨基酸序列100％相同的氨基酸序列。
280.根据权利要求230-279中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段选择性地结合包含HLA-E和新抗原的复合物。
281.根据权利要求230-280中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述HLA-E不具有结合亲和力。
282.根据权利要求230-281中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段对单独的所述新抗原不具有结合亲和力。
283.根据权利要求230-282中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于抗原加工机构(APM)的细胞表达。
284.根据权利要求283所述的单克隆抗体，其中所述新抗原由精于TAP1/2的细胞表达。
285.根据权利要求230-284中任一项所述的单克隆抗体，其中所述新抗原包括以下、基本上由以下组成或由以下组成：根据SEQ ID NO:18(VMAPRTLFL)的序列。
286.根据权利要求230-284中任一项所述的单克隆抗体，其中所述HLA-E是HLA-E*0101或HLA-E*0103。
287.根据权利要求286所述的单克隆抗体，其中所述抗体选择性地结合复合物，所述复合物包含：
(a)所述HLA-E*0101和所述新抗原；
(b)所述HLA-E*0103和所述新抗原；或者
(c)所述HLA-E*0101和所述新抗原，以及所述HLA-E*0103和所述新抗原。
288.根据权利要求230-287中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是鼠抗体、嵌合抗体、骆驼科动物抗体、人源化抗体或人类抗体。
289.根据权利要求230-289中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是TCR样抗体。
290.根据权利要求230-289中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多特异性抗体。
291.根据权利要求230-290中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性抗体。
292.根据权利要求230-291中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是双特异性T细胞衔接器(BiTE)。
293.根据权利要求292所述的单克隆抗体，其中所述BiTE结合与T细胞受体(TCR)缔合的CD3蛋白。
294.根据权利要求292-293中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含轻链可变结构域(VL)，所述轻链可变结构域(VL)包含与SEQ ID NO:15列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
295.根据权利要求292-293中任一项所述的单克隆抗体，其中所述BiTE还包含重链可变结构域(VH)，所述重链可变结构域(VH)包含与SEQ ID NO:16列出的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列。
296.根据权利要求280-295中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段是多功能抗体。
297.根据权利要求280-296中任一项所述的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体或其抗原结合片段抗体还包含缀合的治疗部分。
298.根据权利要求280-297中任一项所述的单克隆抗体，其中所述抗体与包含所述HLA-E和所述新抗原的所述复合物的选择性结合在细胞中诱导免疫应答。
299.根据权利要求298所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括(i)NK细胞的激活、(ii)T细胞的激活或(iii)NK细胞和T细胞的激活。
300.根据权利要求299所述的单克隆抗体，其中所述T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。
301.根据权利要求300所述的单克隆抗体，其中所述免疫应答包括细胞毒性T细胞(CTL)的激活。
302.根据权利要求298所述的单克隆抗体，其中所述细胞是癌细胞。
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