KR20230005929A - 살충 조합물 - Google Patents
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Abstract
신규한 살충 조합물, 조성물, 및 이들을 사용하는 방법이 제공된다. 본 발명은 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIPS)와 살충 작용제(IA)의 조합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 곤충의 방제를 위한 상기 조합물 및 조성물의 용도를 설명한다. 본원에서, 본 발명자들은 CRIP를 인코딩하는 유전자; CRIP와 IA를 포함하는 조성물 및 조합물; 및 해충의 방제에 유용한 이들을 사용하는 방법을 설명한다.
Description
관련 출원의 교차 참조
본 출원은 2020년 5월 1일자 출원된 미국 임시 출원 제63/019,219호에 대한 이익 및 우선권을 주장하며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
서열목록
본 출원은 2021년 4월 28일자 오후 10시 7분에 생성되어 본 출원과 함께 전자문서로 제출된 파일명 "225312-491452_ST25.txt"(1.41 MB)의 서열목록 전체를 참조로 포함한다.
기술분야
해충의 방제 및/또는 박멸을 위한 시스테인 풍부 살충 단백질(CRIP: Cysteine Rich Insecticidal Protein)과 살충 작용제(IA: Insecticidal Agent), 예를 들어 화학 물질, 분자, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 독소(toxin), 독물(toxicant), 독(poison), 살충제(insecticide), 농약(pesticide), 유기 화합물, 무기 화합물, 원핵생물 유기체 또는 진핵생물 유기체(및 상기 원핵생물 또는 진핵생물 유기체로부터 생성된 작용제)의 신규한 살충 조합물이 설명되고 청구된다.
수많은 곤충은 질환의 매개체이다. 아노펠레스(Anopheles) 속의 모기는 지카 바이러스(Zik virus), 치쿤군야 바이러스(Chikunguny virus), 및 트리파노소마(Trypanosoma) 속의 원생동물에 의해 유발되는 질환인 말라리아의 주요 매개체이다. 아에데스 아에깁티(Aedes aegypti)는 황열병과 뎅기열을 유발하는 바이러스의 주요 매개체이다. 다양한 유형의 뇌염의 병원(causal agent)인 다른 바이러스 또한 아에데스 종 모기에 의해 운반된다. 사상충증을 유발하는 기생 회충인 우체레리아 반크로프티(Wuchereria bancrofti)와 브루기아 말라이(Brugia malayi)는 통상적으로 쿨렉스(Culex), 만소니아(Mansonia) 및 아노펠레스 속의 모기에 의해 전파된다.
말파리와 사슴파리는 야토병(파스테우렐라 툴라렌시스(Pasteurella tularensis))과 탄저병(바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis))의 박테리아 병원체뿐 아니라, 열대 아프리카에서 로아사상충증(loiasis)을 유발하는 기생 회충(로아 로아(Loa loa))을 전달할 수 있다.
히펠라테스(Hippelates) 속의 눈각다귀(eye gnat)는 요스(yaws)를 유발하는 스피로카에테(spirochaete) 병원체(트레포네마 페르테누(Treponema pertenue))를 운반할 수 있으며, 결막염(핑크아이(pinkeye))을 전파할 수도 있다. 글로시나(Glossina) 속의 체체파리는 아프리카 수면병을 유발하는 원생동물 병원체(트리파노소마 감비엔세(Trypanosoma gambiense) 및 트리파노소마 로데시엔세(T. rhodesiense))를 전달한다. 플레보토무스(Phlebotomus) 속의 모래파리는 남미에서 카리온병(Carrion's disease)(오로야열(Oroyo fever))을 유발하는 박테리아(바르토넬라 바실리포르미스(Bartonella bacilliformis))의 매개체이다. 이는, 아시아와 북아프리카에서, 모래파리열(파파타시열(Pappataci fever))을 유발하는 바이러스 인자뿐 아니라, 리슈만편모충증(Leishmaniasis)을 유발하는 원생동물 병원체(레이시마니아(Leishmania) 종)를 전파한다.
따라서, 우리가 식량으로 의존하는 작물을 보존하고, 인간 및 동물의 건강을 보호하기 위해, 효과적인 살충 처리가 필요하다.
본원에서, 본 발명자들은 살충 작용제(IA)와 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)의 조합물을 설명한다. IA는 하나 이상의 화학 물질, 분자, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 독소, 독물, 독, 살충제, 농약, 유기 화합물, 무기 화합물, 원핵생물 유기체 및/또는 이로부터의 생성물(예컨대, 박테리아 독소), 또는 진핵생물 유기체 및/또는 이로부터의 생성물(예컨대, 진균 독소)이다. IA는 단독으로 사용되는 임의의 IA의 상가 효과(additive effect)보다 더 큰 살충 효과를 제공하기 위해 조합될 수 있다.
CRIP는, 일부 구현예에서, 디설파이드 결합(disulfide bond)을 형성할 수 있는 시스테인 잔기를 보유하는 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 단백질이며; 이러한 디설파이드 결합은 매우 다양한 관련 없는 단백질 패밀리에서 관찰되는 스캐폴딩 모티프를 생성한다. CRIP 패밀리에 속하는 펩타이드의 일례는 저해제 시스틴 매듭(ICK: inhibitor cystine knot) 펩타이드이다. ICK 펩타이드는 살충 활성을 갖는 다수의 분자를 포함한다. 이러한 ICK 펩타이드는 종종 자연 발생 생물학적 표적 종, 통상적으로 일부 유형의 곤충 또는 거미류에 독성이 있다. 종종, ICK 펩타이드는 전갈 또는 거미의 독액과 같은 절지동물 기원의 것일 수 있다.
본원에서, 본 발명자들은 IA와 CRIP의 신규한 살충 조합물을 설명한다. 예를 들어, 본 발명자들은 특히, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하는 살충 효과가 있는 조합물, 및 우리가 식량으로 의존하는 작물을 보존하고, 인간 및 동물 건강을 보호하기 위해 이러한 조합물을 사용하는 방법을 설명한다.
본 발명은 CRIP와 IA를 조합하여, 단독으로 사용되는 임의의 IA 또는 CRIP의 상가적 살충 효과보다 더 큰 살충 효과를 제공하는 방법을 설명한다. 본 개시내용은 곤충, 심지어 살충제 내성 곤충을, 심지어 저용량으로 사멸시키고 방제하기 위해 CRIP와 IA의 조합물을 제조하고 사용하는 방법을 설명한다. 이론에 구애됨 없이, CRIP와 IA에 대한 본 발명자들의 이해를 통해, 당업자에게 식물을 보호하고 곤충을 방제하기 위한 신규한 방법, 조성물, 화합물(단백질 및 펩타이드) 및 절차를 생성하는 것을 교시할 수 있다.
본 개시내용은 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물로서, 여기서 IA는 박테리아 독소; 진균 독소; 렉틴; 아자디라크타 인디카(Azadirachta indica) 화합물; 붕소 화합물; 바이러스; 또는 이들의 조합이고; CRIP는 U1-아가톡신(agatoxin)-Ta1b 펩타이드; U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 말미잘 독소; Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 포네우트리아(Phoneutria) 독소; 또는 아트라코톡신(ACTX: Atracotoxin)인 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 포함하고, 부형제를 추가로 포함하는 조성물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키(Bacillus thuringiensis ssp. kurstaki) 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 뷰베리아 바시아나(Beauveria bassiana) 균주 ANT-03 포자와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스(Bacillus thuringiensis ssp. tenebrionis) 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스(Bacillus thuringiensis ssp. israelensis) 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 포토랍두스 루미네센스(Photorhabdus luminescens) 독소와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 포토랍두스 루미네센스 독소는 TcaA(서열번호 616), TcaB(서열번호 617), TcaC(서열번호 618) 및 TcaZ(서열번호 619)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체(Tca)이고; ACTX 펩타이드는 U+2-ACTX-Hv1a 독소(서열번호 61)인 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 갈란투스 니발리스(Galanthus nivalis) 응집소(GNA)와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 GNA는 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열을 갖고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 아자디라크틴(Azadirachtin)과 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 아자디라크틴은 화학식 C35H44O16을 갖는 아자디라크틴이고; ACTX는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 붕산 화합물과 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 붕산 화합물은 화학식 H3BO3을 갖고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 시디아 포모넬라(Cydia pomonella) 과립병바이러스(granulovirus)(CpGV)와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 CpGV는 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스이고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 곤충을 방제하기 위해 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 IA의 조합물을 제공하는 단계와, 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충을 방제하기 위해 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 IA의 조합물을 제공하는 단계, 이어서 상기 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 설명한다.
또한, 본 개시내용은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물의 살충 유효량을 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 설명한다.
도 1은, (1) U+2-ACTX-Hv1a와 Bti; (2) Bti 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a 단독; 및 (4) 대조군(물)을 사용한 식이 혼입 검정(diet incorporation assay) 후 아에데스 아에깁티(모기) 유충의 24시간 사멸률을 도시한 그래프를 나타낸다.
도 2는, Γ-CNTX-Pn1a와 조합된 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Bacillus thuringiensis var. kurstaki) 독소(Btk)를 이용한 엽면 살포 검정(foliar spray assay) 후 인시목(Lepidopteran) 종인 파밤나방(beet armyworm)(스포도프테라 엑시구아(Spodoptera exigua))의 3일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, 처리물은 (1) Γ-CNTX-Pn1a 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) Γ-CNTX-Pn1a와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)이었다.
도 3은, Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 조합된 Btk를 이용한 엽면 살포 검정 후 인시목 종인 파밤나방(스포도프테라 엑시구아)의 3일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, (1) AVP 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) AVP와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)을 시험하였다. 여기서 시험된 AVP는 AVPb였다.
도 4는, 0분, 20분, 40분, 60분, 180분 및 1260분 후, 모의 인시목 내장 환경인 헬리코베르파 제아(Helicoverpa zea) 내장 추출물(HGE)에서 WT-Ta1b 분해를 평가하는 크로마토그램을 나타낸다. 박스는 주요 피크와 부수적인 피크를 나타내기 때문에, WT-Ta1b의 분해를 나타낸다. 내포된 삽입물은 크로마토그램의 확대 및 축소 보기를 보여준다. 박스는 2개의 숄더(shoulder)의 존재로 인해 입증되는 단백질분해 사건을 나타내는 피크를 강조 표시한다: 주요 피크 우측에 있는 더 작은 "숄더"는 부분 단백질분해 사건을 나타냄.
도 5는, 0분, 20분, 40분, 60분, 180분 및 1260분 후, 모의 인시목 내장 환경인 헬리코베르파 제아 내장 추출물(HGE)에서 TVP-R9Q 분해를 평가하는 크로마토그램을 나타낸다. 박스는 단일 피크의 존재를 나타내기 때문에, TVP-R9Q의 안정성을 나타낸다. 내포된 삽입물은 크로마토그램의 확대 및 축소 보기를 보여준다. 여기서, (박스에 도시된) 단일 주요 피크의 존재는 TVP-R9Q 펩타이드의 안정성을 나타낸다.
도 6은, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레(corn earworm))에 대해 WT-Ta1b, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 고엽 검정(defoliation assay)의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) WT-Ta1b 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) WT-Ta1b와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 7은, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레)에 대해 TVP-R9Q, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 고엽 검정의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) TVP-R9Q 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) TVP-R9Q와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 8은, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레)에 대해 WT-Ta1b, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 사멸률 검정의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) WT-Ta1b 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) WT-Ta1b와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 9는, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레)에 대해 TVP-R9Q, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 사멸률 검정의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) TVP-R9Q 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) TVP-R9Q와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 10은, (1) U+2-ACTX-Hv1a 단독; (2) Btt 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소의 조합물; 또는 (4) 미처리 대조군(물)을 이용한 식이 혼입 검정 후 딱정벌레목(Coleopteran) 종인 대왕거저리(Darkling Beetle)(알피토비우스 디아페리누스(Alphitobius diaperinus))의 4일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다.
도 11은, (1) U+2-ACTX-Hv1a 단독; (2) Btt 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소의 조합물; 또는 (4) 미처리 대조군(물)을 이용하여 분무한 경우 콜로라도 감자 딱정벌레(Colorado potato beetle)(렙티노타르사 데셈리네아타(Leptinotarsa decemlineata))의 4일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다.
도 12는, (a) 물; (b) 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체 추출물 단독(4.75% v/v); (c) 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v); 및 (d) 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체 추출물(4.75% w/v)과 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v)로 처리된 옥수수 귀벌레 유충의 4일차 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 13은, (a) 0 mg/mL GNA(0% w/v)와 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 2.5 mg/mL GNA(0.25% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 mg/mL GNA(0% w/v); 5 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.5% w/v); 및 (d) 2.5 mg/mL GNA(0.25% w/v); 5 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.5% w/v)로 처리된 후 3일차에 옥수수 귀벌레 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다. 사멸 비율(proportional mortality)은 실험 과정에 걸쳐 사멸한 개별 곤충의 비율, 즉, 총 개체 수 중 사멸한 개체의 수를 나타낸다.
도 14는, (a) 키티나아제 0 μL/L(0% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 0 mg/mL(0% w/v); 수크로오스(10% w/v); (b) 키티나아제 100 μL/L(0.01% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 0 mg/mL(0% w/v); 수크로오스(10% w/v); (c) 키티나아제 0 μL/L(0% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 5 mg/mL(0.5% w/v); 수크로오스(10% w/v); 및 (d) 키티나아제 100 μL/L(0.01% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 5 mg/mL(0.5% w/v); 수크로오스(10% w/v)로 처리된 후 3일차에 가을 거염벌레(Fall armyworm)(스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda)) 유충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 15는, 곤충 성장 조절제인 아자디라크틴의 화학 구조를 도시한 것이다.
도 16은, (a) 0 μL/L 아자디라크틴(0% v/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 80 μL/L 아자디라크틴(0.008% v/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 μL/L 아자디라크틴(0% v/v); 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v); 및 (d) 80 μL/L 아자디라크틴(0.008% v/v); 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v)로 처리된 후 3일차에 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 17은, 하기로 처리된 후 3일차에 외미거저리(Lesser mealworm)(알피토비우스 디아페리누스) 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다: (a) 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); 0 mg/mL 붕산(0% w/v)(대조군); (b) 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); 2.5 mg/mL 붕산(0.25% w/v); (c) 1 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.1% w/v); 0 mg/mL 붕산(0% w/v); 및 (d) 1 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.1% w/v); 2.5 mg/mL 붕산(0.25% w/v). 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 18은, 하기로 처리된 후 7일차에 코들링나방(Codling Moth)(시디아 포모넬라) 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다: (a) 0 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 1.2 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0.12% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소; 2 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v); 및 (d) 1.2 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0.12% w/v); 2 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v). 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 19는, 하기로 처리된 후 2일차에 코들링나방(시디아 포모넬라) 유충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다: (a) 0 μL/L의 CpGV(0% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 58.5 μL/L의 CpGV(0.00585% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 μL/L의 CpGV(0% w/v); 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v); 및 (d) 58.5 μL/L의 CpGV(0.00585% w/v); 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v). 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 20은, 노발루론(Novaluron)과 U+2-ACTX-Hv1a의 식이 혼입 검정 결과를 나타낸 그래프를 도시한 것으로, 3일 후 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)의 사멸률을 평가한 것이다. 여기에 나타난 바와 같이, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 식이 혼입 검정에서 노발루론과 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다. 여기서, "U+2"는 U+2-ACTX-Hv1a를 나타낸다. 노발루론의 농도는 하기와 같았다: (a) 80 μL/L의 노발루론(0.008% w/v); (b) 8 μL/L의 노발루론(0.0008% w/v); (c) 0.8 μL/L의 노발루론(0.00008% w/v); 및 (d) 0 μL/L의 노발루론(0% w/v). 10 ppt의 Spear는 1 mg/mL(1% w/v)의 U+2-ACTX-Hv1a에 해당한다.
도 21은, 나노입자와 U+2-ACTX-Hv1a의 식이 혼입 검정 결과를 나타낸 그래프를 도시한 것으로, 3일 후 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)의 사멸률을 평가한 것이다. 여기에 나타난 바와 같이, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 식이 혼입 검정에서 나노입자와 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다. 여기서, "Spear"는 U+2-ACTX-Hv1a를 나타낸다. 나노입자의 농도는 하기와 같았다: (a) 50 nm 아민화된 실리카(2700 ppm); (b) 50 실리카(2575 ppm); (c) 20 nm 실리카(1177 ppm); 및 (d) 10 nm 실리카(12500 ppm). 여기서, "U+2"는 5 ppt의 U+2-ACTX-Hv1a, 즉, 0.5 mg/mL(조성물의 총 부피의 0.5% w/v)의 U+2-ACTX-Hv1a에 해당한다. 사멸 비율 = 사멸한 곤충의 수를 곤충의 총 수로 나눈 값. "UTC"는 미처리 대조군(물)을 의미한다.
도 22는, 3일 후 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)에 대한 크리올라이트(cryolite)와 U+2-ACTX-Hv1a의 식이 혼입 검정의 사멸률 용량 반응을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기에 나타난 바와 같이, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 식이 혼입 검정에서 크리올라이트와 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다. 여기서, "U+2"는 U+2-ACTX-Hv1a를 나타낸다. 나노입자의 농도는 하기와 같았다: (a) 10000 ppm; (b) 2000 ppm; (c) 400 ppm; 및 (d) 0 ppm. 여기서, 10 ppt의 "U+2"(즉, U+2-ACTX-Hv1a)는 1 mg/mL(조성물의 총 부피의 1% w/v)의 U+2-ACTX-Hv1a에 해당한다. 사멸 비율 = 사멸한 곤충의 수를 곤충의 총 수로 나눈 값.
도 2는, Γ-CNTX-Pn1a와 조합된 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Bacillus thuringiensis var. kurstaki) 독소(Btk)를 이용한 엽면 살포 검정(foliar spray assay) 후 인시목(Lepidopteran) 종인 파밤나방(beet armyworm)(스포도프테라 엑시구아(Spodoptera exigua))의 3일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, 처리물은 (1) Γ-CNTX-Pn1a 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) Γ-CNTX-Pn1a와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)이었다.
도 3은, Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 조합된 Btk를 이용한 엽면 살포 검정 후 인시목 종인 파밤나방(스포도프테라 엑시구아)의 3일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, (1) AVP 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) AVP와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)을 시험하였다. 여기서 시험된 AVP는 AVPb였다.
도 4는, 0분, 20분, 40분, 60분, 180분 및 1260분 후, 모의 인시목 내장 환경인 헬리코베르파 제아(Helicoverpa zea) 내장 추출물(HGE)에서 WT-Ta1b 분해를 평가하는 크로마토그램을 나타낸다. 박스는 주요 피크와 부수적인 피크를 나타내기 때문에, WT-Ta1b의 분해를 나타낸다. 내포된 삽입물은 크로마토그램의 확대 및 축소 보기를 보여준다. 박스는 2개의 숄더(shoulder)의 존재로 인해 입증되는 단백질분해 사건을 나타내는 피크를 강조 표시한다: 주요 피크 우측에 있는 더 작은 "숄더"는 부분 단백질분해 사건을 나타냄.
도 5는, 0분, 20분, 40분, 60분, 180분 및 1260분 후, 모의 인시목 내장 환경인 헬리코베르파 제아 내장 추출물(HGE)에서 TVP-R9Q 분해를 평가하는 크로마토그램을 나타낸다. 박스는 단일 피크의 존재를 나타내기 때문에, TVP-R9Q의 안정성을 나타낸다. 내포된 삽입물은 크로마토그램의 확대 및 축소 보기를 보여준다. 여기서, (박스에 도시된) 단일 주요 피크의 존재는 TVP-R9Q 펩타이드의 안정성을 나타낸다.
도 6은, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레(corn earworm))에 대해 WT-Ta1b, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 고엽 검정(defoliation assay)의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) WT-Ta1b 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) WT-Ta1b와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 7은, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레)에 대해 TVP-R9Q, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 고엽 검정의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) TVP-R9Q 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) TVP-R9Q와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 8은, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레)에 대해 WT-Ta1b, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 사멸률 검정의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) WT-Ta1b 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) WT-Ta1b와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 9는, 인시목 종인 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레)에 대해 TVP-R9Q, Btk 독소, 및 이들의 조합물을 시험한 경우 사멸률 검정의 결과를 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 처리물은 하기와 같았다: (1) TVP-R9Q 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) TVP-R9Q와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제). 여기서, Btk 독소는 "Btk"로 표시된다.
도 10은, (1) U+2-ACTX-Hv1a 단독; (2) Btt 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소의 조합물; 또는 (4) 미처리 대조군(물)을 이용한 식이 혼입 검정 후 딱정벌레목(Coleopteran) 종인 대왕거저리(Darkling Beetle)(알피토비우스 디아페리누스(Alphitobius diaperinus))의 4일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다.
도 11은, (1) U+2-ACTX-Hv1a 단독; (2) Btt 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소의 조합물; 또는 (4) 미처리 대조군(물)을 이용하여 분무한 경우 콜로라도 감자 딱정벌레(Colorado potato beetle)(렙티노타르사 데셈리네아타(Leptinotarsa decemlineata))의 4일 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다.
도 12는, (a) 물; (b) 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체 추출물 단독(4.75% v/v); (c) 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v); 및 (d) 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체 추출물(4.75% w/v)과 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v)로 처리된 옥수수 귀벌레 유충의 4일차 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 13은, (a) 0 mg/mL GNA(0% w/v)와 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 2.5 mg/mL GNA(0.25% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 mg/mL GNA(0% w/v); 5 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.5% w/v); 및 (d) 2.5 mg/mL GNA(0.25% w/v); 5 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.5% w/v)로 처리된 후 3일차에 옥수수 귀벌레 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다. 사멸 비율(proportional mortality)은 실험 과정에 걸쳐 사멸한 개별 곤충의 비율, 즉, 총 개체 수 중 사멸한 개체의 수를 나타낸다.
도 14는, (a) 키티나아제 0 μL/L(0% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 0 mg/mL(0% w/v); 수크로오스(10% w/v); (b) 키티나아제 100 μL/L(0.01% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 0 mg/mL(0% w/v); 수크로오스(10% w/v); (c) 키티나아제 0 μL/L(0% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 5 mg/mL(0.5% w/v); 수크로오스(10% w/v); 및 (d) 키티나아제 100 μL/L(0.01% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 5 mg/mL(0.5% w/v); 수크로오스(10% w/v)로 처리된 후 3일차에 가을 거염벌레(Fall armyworm)(스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda)) 유충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 15는, 곤충 성장 조절제인 아자디라크틴의 화학 구조를 도시한 것이다.
도 16은, (a) 0 μL/L 아자디라크틴(0% v/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 80 μL/L 아자디라크틴(0.008% v/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 μL/L 아자디라크틴(0% v/v); 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v); 및 (d) 80 μL/L 아자디라크틴(0.008% v/v); 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v)로 처리된 후 3일차에 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 17은, 하기로 처리된 후 3일차에 외미거저리(Lesser mealworm)(알피토비우스 디아페리누스) 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다: (a) 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); 0 mg/mL 붕산(0% w/v)(대조군); (b) 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); 2.5 mg/mL 붕산(0.25% w/v); (c) 1 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.1% w/v); 0 mg/mL 붕산(0% w/v); 및 (d) 1 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.1% w/v); 2.5 mg/mL 붕산(0.25% w/v). 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 18은, 하기로 처리된 후 7일차에 코들링나방(Codling Moth)(시디아 포모넬라) 신생충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다: (a) 0 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 1.2 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0.12% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소; 2 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v); 및 (d) 1.2 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0.12% w/v); 2 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v). 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 19는, 하기로 처리된 후 2일차에 코들링나방(시디아 포모넬라) 유충의 사멸률을 나타내는 그래프를 도시한 것이다: (a) 0 μL/L의 CpGV(0% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군); (b) 58.5 μL/L의 CpGV(0.00585% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); (c) 0 μL/L의 CpGV(0% w/v); 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v); 및 (d) 58.5 μL/L의 CpGV(0.00585% w/v); 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v). 여기서, % w/v는 조성물의 총 부피의 % w/v이며, 나머지는 물이다.
도 20은, 노발루론(Novaluron)과 U+2-ACTX-Hv1a의 식이 혼입 검정 결과를 나타낸 그래프를 도시한 것으로, 3일 후 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)의 사멸률을 평가한 것이다. 여기에 나타난 바와 같이, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 식이 혼입 검정에서 노발루론과 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다. 여기서, "U+2"는 U+2-ACTX-Hv1a를 나타낸다. 노발루론의 농도는 하기와 같았다: (a) 80 μL/L의 노발루론(0.008% w/v); (b) 8 μL/L의 노발루론(0.0008% w/v); (c) 0.8 μL/L의 노발루론(0.00008% w/v); 및 (d) 0 μL/L의 노발루론(0% w/v). 10 ppt의 Spear는 1 mg/mL(1% w/v)의 U+2-ACTX-Hv1a에 해당한다.
도 21은, 나노입자와 U+2-ACTX-Hv1a의 식이 혼입 검정 결과를 나타낸 그래프를 도시한 것으로, 3일 후 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)의 사멸률을 평가한 것이다. 여기에 나타난 바와 같이, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 식이 혼입 검정에서 나노입자와 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다. 여기서, "Spear"는 U+2-ACTX-Hv1a를 나타낸다. 나노입자의 농도는 하기와 같았다: (a) 50 nm 아민화된 실리카(2700 ppm); (b) 50 실리카(2575 ppm); (c) 20 nm 실리카(1177 ppm); 및 (d) 10 nm 실리카(12500 ppm). 여기서, "U+2"는 5 ppt의 U+2-ACTX-Hv1a, 즉, 0.5 mg/mL(조성물의 총 부피의 0.5% w/v)의 U+2-ACTX-Hv1a에 해당한다. 사멸 비율 = 사멸한 곤충의 수를 곤충의 총 수로 나눈 값. "UTC"는 미처리 대조군(물)을 의미한다.
도 22는, 3일 후 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)에 대한 크리올라이트(cryolite)와 U+2-ACTX-Hv1a의 식이 혼입 검정의 사멸률 용량 반응을 나타내는 그래프를 도시한 것이다. 여기에 나타난 바와 같이, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 식이 혼입 검정에서 크리올라이트와 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다. 여기서, "U+2"는 U+2-ACTX-Hv1a를 나타낸다. 나노입자의 농도는 하기와 같았다: (a) 10000 ppm; (b) 2000 ppm; (c) 400 ppm; 및 (d) 0 ppm. 여기서, 10 ppt의 "U+2"(즉, U+2-ACTX-Hv1a)는 1 mg/mL(조성물의 총 부피의 1% w/v)의 U+2-ACTX-Hv1a에 해당한다. 사멸 비율 = 사멸한 곤충의 수를 곤충의 총 수로 나눈 값.
정의
"5'-말단" 및 "3'-말단"은 뉴클레오타이드 중합체(예를 들어, DNA)의 방향성, 즉, 말단-대-말단 배향을 나타낸다. 폴리뉴클레오타이드의 5'-말단은 5번째 탄소가 있는 폴리뉴클레오타이드의 말단이다.
"5'- 및 3'-상동성 아암(arm)" 또는 "5' 및 3' 아암" 또는 "좌측 및 우측 아암"은 숙주 유기체의 염색체 유전자좌의 성공적인 유전자 변형을 달성하기 위해 숙주 유기체에서 표적 게놈 서열 및/또는 관심 내인성 유전자와 상동적으로 재조합하는 벡터 및/또는 표적화 벡터의 폴리뉴클레오타이드 서열을 나타낸다.
"Γ-CNTX-Pn1a" 또는 "γ-CNTX-Pn1a" 또는 "감마-CNTX-Pn1a" 또는 "감마"는 브라질 무장 거미(Brazilian armed spider)인 포네우트리아 니그리벤테르(Phoneutria nigriventer)에서 유도된 살충 신경독소를 나타낸다. Γ-CNTX-Pn1a는 이온성 글루타메이트 수용체(GRIN)의 N-메틸-D-아스파르테이트(NMDA) 아형과 소듐 채널을 표적으로 한다.
"ω/κ-HXTX-Hv1a" 또는 "오메가/카파-HXTX-Hv1a"는 호주 블루마운틴 깔대기 그물 거미(Australian Blue Mountain Funnel-web Spider), 하드로니케 베르수타(Hadronyche versuta)에서 유도된 살충 독소를 나타낸다. ω/κ-HXTX-Hv1a는 ACTX 펩타이드의 한 유형, 즉, 아트라시나에(Atracinae) 과에 속하는 거미에서 단리된 살충 ICK 펩타이드 패밀리이다. ω/κ-HXTX-Hv1a는 니코틴성 아세틸콜린 수용체의 양성 알로스테릭(allosteric) 조절제이며, 또한 곤충 전압 개폐형 Ca2+ 채널과 전압 개폐형 K+ 채널에 대한 이중 안타고니스트일 수 있다. 문헌[Chambers et al., Insecticidal spider toxins are high affinity positive allosteric modulators of the nicotinic acetylcholine receptor. FEBS Lett. 2019 Jun;593(12):1336-1350]; 및 문헌[Windley et al., Lethal effects of an insecticidal spider venom peptide involve positive allosteric modulation of insect nicotinic acetylcholine receptors. Neuropharmacology. 2017 Dec;127:224-242] 참조(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
"ACTX" 또는 "ACTX 펩타이드" 또는 "아트라코톡신"은 아트라시나에 과에 속하는 거미에서 단리된 살충 ICK 펩타이드의 패밀리를 나타낸다. 하나의 이러한 거미는 하드로니케 베르수타라는 학명을 가진 호주 블루마운틴 깔대기 그물 거미로 알려져 있다. 이러한 종에서 유래한 ACTX 펩타이드의 2가지 예는 오메가 펩타이드와 U 펩타이드이다.
"ADN1 프로모터"는 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe) 접착 결함 단백질 1 유전자에서 유도된 프로모터 서열로 구성된 DNA 분절을 나타낸다.
"알파-MF 신호" 또는 "αMF 분비 신호"는 초기 재조합 폴리펩타이드를 분비 경로로 지시하는 단백질을 나타낸다.
"농업적으로 허용 가능한 담체"는 농약 제형 기술에서 통상적으로 사용되는 모든 아쥬반트, 불활성 구성요소, 분산제, 계면활성제, 점착제, 결합제 등을 포함하며; 이는 농약 제형 분야의 당업자에게 널리 공지되어 있다.
"농업적으로 허용 가능한 염"은 본원에서 "약제학적으로 허용 가능한 염"이라는 용어와 동의어로 사용된다.
"아그로감염(agroinfection)"은 아그로박테리아 투메파시엔스(Agrobacteria tumefaciens) 또는 아그로박테리아 리조게네스(grobacteria rhizogenes)를 사용하여 DNA를 식물 세포에 도입하는 식물 형질전환 방법을 의미한다.
"정렬"은 서로에 대한 관계를 결정하기 위해 둘 이상의 서열(예를 들어, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, 아미노산, 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질 서열)을 비교하는 방법을 나타낸다. 정렬은 전형적으로 다양한 알고리즘을 적용하는 컴퓨터 프로그램을 통해 수행되지만, 수동으로 정렬을 수행하는 것도 가능하다. 정렬 프로그램은 전형적으로 가능한 최적 정렬 점수에 도달하기 위해 다양한 전략을 이용하여, 서열을 가능한 정렬을 반복하고 대체 표(substitution table)를 사용하여 정렬에 점수를 매긴다. 통상적으로 사용되는 정렬 알고리즘에는, 비제한적으로, CLUSTALW(문헌[Thompson J. D., Higgins D. G., Gibson T. J., CLUSTAL W: improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, position-specific gap penalties and weight matrix choice, Nucleic Acids Research 22: 4673-4680, 1994] 참조); CLUSTALV(문헌[Larkin M. A., et al., CLUSTALW2, ClustalW and ClustalX version 2, Bioinformatics 23(21): 2947-2948, 2007] 참조); Mafft; Kalign; ProbCons; 및 T-Coffee(문헌[Notredame et al., T-Coffee: A novel method for multiple sequence alignments, Journal of Molecular Biology 302: 205-217, 2000] 참조)가 포함된다. 전술한 알고리즘 중 하나 이상을 구현하는 예시적인 프로그램에는, 비제한적으로, DNAStar(DNAStar, Inc. 3801 Regent St. Madison, Wis. 53705)의 MegAlign, MUSCLE, T-Coffee, CLUSTALX, CLUSTALV, JalView, Phylip, 및 Accelrys(Accelrys, Inc., 10188 Telesis Ct, Suite 100, San Diego, Calif. 92121)의 Discovery Studio가 포함된다. 일부 구현예에서, 정렬은 2개 서열 사이의 유사성을 최대화하기 위해 비교하고자 하는 서열 중 하나 또는 둘 모두에 "위상 이동" 및/또는 "갭(gap)"을 도입할 것이며, 점수를 매기는 것은 정렬된 서열의 관계를 정량적으로 표현하는 과정을 나타낸다.
"알파-MF 신호" 또는 "αMF 분비 신호"는 초기 재조합 폴리펩타이드를 분비 경로로 지시하는 단백질을 나타낸다.
"거미류"는 절지동물의 한 강(class)를 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 거미류는 거미, 전갈, 진드기, 응애, 소경거미(harvestmen) 또는 피일류를 의미할 수 있다.
"Av2" 또는 "ATX-II" 또는 "신경독소 2" 또는 "아네모니아 비리디스(Anemonia viridis) 독소 2" 또는 "δ-AITX-Avd1c"는 아네모니아 술카타(Anemonia sulcata)의 독액에서 단리된 독소를 나타낸다. Av2 폴리펩타이드의 하나의 예는 서열번호 588의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드이다.
"Av3"은 전압 개폐형 소듐 채널의 α-서브유닛 III 상의 수용체 부위 3을 표적으로 할 수 있는 말미잘, 아네모니아 비리디스에서 단리된 폴리펩타이드를 나타낸다. Av3 폴리펩타이드의 하나의 예는 서열번호 44(NCBI 수탁번호 P01535.1)의 아미노산 서열을 갖는 Av3 폴리펩타이드이다.
"AVP" 또는 "Av3 변이체 폴리펩타이드"는 비자연 발생 폴리펩타이드 및/또는 폴리뉴클레오타이드 서열을 생성하도록 변경된 Av3 폴리펩타이드 서열 및/또는 변이체 Av3 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 폴리펩타이드를 나타낸다.
"BAAS"는 보리 알파-아밀라아제 신호 펩타이드를 의미하며, ERSP의 일례이다. BAAS의 하나의 예는 서열번호 37(NCBI 수탁번호 AAA32925.1)의 아미노산 서열을 갖는 BAAS이다.
"바이오매스"는 임의의 측정된 식물 생성물을 나타낸다.
"이원 벡터" 또는 "이원 발현 벡터"는 대장균(E. coli) 균주와 아그로박테리움 균주 둘 모두에서 자체 복제 가능한 발현 벡터를 의미한다. 또한, 벡터는 아그로박테리움에 의해 복제되어 식물 세포로 전달되는 독성 유전자에 의해 인식되는 좌측 및 우측 경계 서열로 묶인 DNA(종종 t-DNA로 지칭됨)의 영역을 함유한다.
"bp" 또는 "염기쌍"은 서로 결합된 2개의 화학적 염기를 포함하는 분자를 나타낸다. 예를 들어, DNA 분자는 2개의 권선(winding) 가닥으로 이루어지며, 여기서 각각의 가닥은 데옥시리보오스와 포스페이트기가 교대로 이루어진 백본을 갖는다. 각각의 데옥시리보오스에는 4개의 염기, 즉, 아데닌(A), 시토신(C), 구아닌(G) 또는 티민(T) 중 하나가 부착되며, 여기서 아데닌은 티민과 염기쌍을 형성하고, 시토신은 구아닌과 염기쌍을 형성한다.
"Bt 독소"는 바실러스 투린기엔시스(Bt), 즉, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk), 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt) 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)와 같은 그람 양성 포자 형성 박테리아에 의해 생성된 발효 고형물, 포자 및 독소를 나타낸다. 포자형성 동안, 바실러스 투린기엔시스는 살충 작용을 갖는 δ-내독소로 불리는 결정 단백질(즉, 단백질성 내포물)을 생성한다. 일부 구현예에서, Bt 독소는 결정(Cry) 단백질, 세포용해(Cyt) 단백질, 식물생장 살충 단백질(Vip), 또는 바실러스 투린기엔시스에 의해 생성된 다른 독소일 수 있다.
"Bt 내성인" 또는 "Bt 내성" 또는 "Bt 내성 곤충" 또는 "바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충"은 해당 해충 종에 대해 사용될 때 예상되는 방제 수준을 달성하기 위해 생성물(예를 들어, Bt)의 반복된 실패에 반영되는 해충 집단 감수성의 유전 가능한 변화를 나타낸다.
"C-말단"은 폴리펩타이드의 말단에 위치하는 유리 카르복실기(즉, -COOH)를 나타낸다.
"cDNA" 또는 "카피 DNA" 또는 "상보적 DNA"는 RNA의 분자에 상보적인 분자를 나타낸다. 일부 구현예에서, cDNA는 단일 가닥 또는 이중 가닥일 수 있다. 일부 구현예에서, cDNA는 역전사효소에 의해 촉매화되는 반응에서 단일 가닥 RNA 주형으로부터 합성된 이중 가닥 DNA일 수 있다. 또 다른 구현예에서, "cDNA"는 천연 성숙 mRNA 종에서 발견되는 서열 요소의 배열을 공유하는 모든 핵산을 나타내며, 여기서 서열 요소는 엑손과 3' 및 5' 비코딩 영역이다. 통상적으로, mRNA 종은 핵 RNA 스플라이싱에 의해 개재 인트론이 제거되어, 단백질을 인코딩하는 연속적인 오픈 리딩 프레임(open reading frame)을 형성하는 인접한 엑손을 가지고 있다. 일부 구현예에서, "cDNA"는 mRNA 주형과 상보적이며 이에서 유도된 DNA를 나타낸다.
"CEW"는 옥수수 귀벌레를 나타낸다.
"절단 가능한 링커"는 링커를 참조한다.
"클로닝"은 하나의 공급원으로부터의 DNA 분절(예를 들어, 통상적으로 관심 유전자, 예를 들어 tvp)을 삽입하고, 이를 또 다른 공급원(예를 들어, 통상적으로 벡터, 예를 들어 플라스미드)으로부터의 DNA 분절과 재조합하고, 통상적으로 재조합된 DNA를 박테리아 또는 효모 숙주로 형질전환시키는 방식으로 재조합된 DNA 또는 "재조합 DNA"가 복제되도록 지시하는 과정 및/또는 방법을 나타낸다.
"키메라 유전자"는 새로운 유전자를 생성하기 위해 하나 이상의 코딩 서열의 일부에서 유도된 유전자를 인코딩하는 DNA 서열을 의미한다.
"코딩 서열" 또는 "CDS"는 적절한 조절 서열의 제어, 및 필요한 전사 및/또는 번역 분자 인자 존재 하에 위치하는 경우, 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질로 전사(예를 들어, DNA의 경우) 또는 번역(예를 들어, mRNA의 경우)될 수 있는 폴리뉴클레오타이드 또는 핵산 서열을 나타낸다. 코딩 서열의 경계는 5' (아미노) 말단의 번역 개시 코돈과 3' (카르복시) 말단의 번역 종결 코돈에 의해 결정된다. 전사 종결 서열은 통상적으로 코딩 서열에 대해 3'에 위치할 것이다. 일부 구현예에서, 코딩 서열은 5' 및/또는 3' 말단에서 미번역 영역으로 플랭킹될 수 있다. 일부 구현예에서, 코딩 서열은 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질 생성물을 생성하는 데 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 코딩 서열은 또 다른 코딩 서열 또는 핵 국소화 신호와 같은 국소화 신호에 융합되거나 융합되지 않을 수 있다. 일부 구현예에서, 코딩 서열은 벡터 또는 발현 구조체에 클로닝될 수 있거나, 게놈에 통합될 수 있거나, DNA 단편으로 존재할 수 있다.
"코돈 최적화"는 하나 이상의 내인성, 천연 및/또는 야생형 코돈이, 궁극적으로 여전히 동일한 아미노산을 코딩하지만, 해당 숙주에서 선호되는 코돈으로 대체되는 유전자의 생성을 나타낸다.
"조합"은 둘 이상의 항목 사이의 임의의 회합(association)을 나타낸다. 회합은 공간적, 시간적일 수 있고/있거나, 공통 목적을 위해 둘 이상의 항목을 사용하는 것을 나타낸다. 예를 들어, 조합은 하기 (1)과 (2)의 임의의 시공간적 회합, 혼합 또는 순열일 수 있다: (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; 및 (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA), 여기서 (1)과 (2)는 곤충 해충이 죽거나, 움직임을 멈추거나 느리게 하도록; 섭식을 멈추거나 느리게 하도록; 성장을 멈추거나 느리게 하도록; (예를 들어, 탐색, 먹이 찾기, 수면 행동 및/또는 짝짓기와 관련하여) 혼란스럽게 되도록; 번데기가 되는 것을 실패하도록; 번식을 방해하도록; 및/또는 곤충이 자손을 생성하는 것을 막고/막거나 곤충이 번식력이 있는 자손을 생성하는 것을 막도록 곤충 해충을 방제 또는 퇴치하는 공통 목적을 위해 사용됨.
문맥상 달리 명백하게 제시되지 않는 한, "조합"이라는 용어는 하기 (1)과 (2)의, 임의의 순서로의, 동시, 개별 또는 순차적 투여를 포함할 수 있다: (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; 및 (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA).
일부 구현예에서, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA)는, 해충 또는 해충의 서식지가 (1)과 (2) 둘 모두에의 동시 노출에 노출되거나, 해충으로부터 보호되어야 하는 서식지(예를 들어, 식물)가 (1)과 (2) 둘 모두에의 동시 노출로 처리될 때, "조합물" 또는 "조합으로" 투여되는 것으로 간주된다고 이해될 것이다. 일부 구현예에서, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA)는 각각, 순차적으로 또는 상이한 일정에 따라 투여될 수 있으며, 실제로 상이한 작용제의 개별 용량이 동시에 또는 동일한 조성물로 투여될 필요는 없다. 오히려, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA) 둘 모두가, 살충 효과를 유지하는 한(즉, 살충 활성을 가짐), 이들은 "조합으로" 투여되는 것으로 간주된다.
일부 구현예에서, "조합"은 하기 (1)과 (2)의 동시 투여를 나타낸다: (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; 및 (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA).
일부 구현예에서, "조합"은 하기 (1)과 (2)의 별도의 투여를 나타낸다: (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; 및 (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA).
또 다른 구현예에서, "조합"은 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA)의, 임의의 순서로의 순차적 투여를 나타낸다.
본 발명의 일부 구현예에서, 즉, 조합의 투여가 순차적 또는 개별적인 경우, 제2 구성요소 투여의 지연은 조합 전체, 즉, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA)의 조합물의 유익한 효과를 상실하지 않도록 해야 한다. 둘 이상의 구성요소의 조합이 별도로 또는 순차적으로 투여되는 경우, 각각의 구성요소의 투여 방식은 다른 구성요소와 상이하며 독립적일 수 있다고 이해될 것이다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합은, 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 동일한 날에 투여될 수 있다. 다른 구현예에서, 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합은, 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 동일한 주 또는 동일한 달에 투여될 수 있다.
일부 구현예에서, 조합은 "혼합물"일 수 있다. 본원에 사용된 "혼합물"은 서로 물리적 및/또는 화학적으로 접촉하고 있는 둘 이상의 작용제, 예를 들어 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA)의 조합물을 나타낸다.
"상보적"은, 당업자가 이해하는 바와 같이, 2개의 폴리뉴클레오타이드의 상호작용 표면이 함께 위상적으로 호환되거나 매칭됨을 의미한다. 따라서, 2개의 서열이 서로 혼성화되어 안정한 역평행 이중 가닥 핵산 구조를 형성할 수 있는 경우, 이들은 서로 "상보적"이다. 제1 폴리뉴클레오타이드의 뉴클레오타이드 서열이 제2 폴리뉴클레오타이드의 폴리뉴클레오타이드 결합 파트너의 뉴클레오타이드 서열과 실질적으로 동일하거나, 제1 폴리뉴클레오타이드가 엄격한 혼성화 조건 하에서 제2 폴리뉴클레오타이드에 혼성화될 수 있는 경우, 제1 폴리뉴클레오타이드는 제2 폴리뉴클레오타이드에 상보적이다. 따라서, 서열이 5'-TATAC-3'인 폴리뉴클레오타이드는 서열이 5'-GTATA-3'인 폴리뉴클레오타이드에 상보적이다.
"조건화된 배지(conditioned medium)"는 세포에 의해 사용되었고 세포 유래 물질이 풍부하지만 세포를 함유하지 않는 세포 배양 배지를 의미한다.
"청자고둥(cone shell)" 또는 "원뿔 달팽이(cone snail)" 또는 "원뿔(cone)"은 포식성 해양 복족류의 코누스(Conus) 속에 속하는 유기체를 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 청자고둥은 하기 종 중 하나일 수 있다: 코누스 아마디스(Conus amadis); 코누스 카투스(Conus catus); 코누스 에르미네우스(Conus ermineus); 코누스 게오그라푸스(Conus geographus); 코누스 글로리아마리스(Conus gloriamaris); 코누스 키노시타이(Conus kinoshitai); 코누스 마구스(Conus magus); 코누스 마르모레우스(Conus marmoreus); 코누스 푸르푸라센스(Conus purpurascens); 코누스 스테르쿠스무스카룸(Conus stercusmuscarum); 코누스 스트리아투스(Conus striatus); 코누스 텍스틸(Conus textile); 또는 코누스 툴리파(Conus tulipa).
"코노톡신(conotoxin)"은 신경 전달을 방해하는 방식으로 작용하는 청자고둥에서 단리된 독소를 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 코노톡신은 α-, ω-, μ-, δ- 또는 κ-코노톡신일 수 있다. 간략하게, α-코노톡신(및 αA-&φ-코노톡신)은 니코틴성 리간드 개폐형 채널을 표적으로 하고; ω-코노톡신은 전압 개폐형 칼슘 채널을 표적으로 하고; μ-코노톡신은 전압 개폐형 소듐 채널을 표적으로 하고; δ-코노톡신은 전압 개폐형 소듐 채널을 표적으로 하고; κ-코노톡신은 전압 개폐형 포타슘 채널을 표적으로 한다.
"카피 수"는 임의의 시간에 숙주 세포에 존재하는 벡터, 발현 카세트, 증폭 유닛, 유전자 또는 실제로 임의의 정의된 뉴클레오타이드 서열의 동일한 카피의 수를 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 유전자 또는 또 다른 정의된 염색체 뉴클레오타이드 서열은 염색체 상에 1개, 2개 또는 그 이상의 카피로 존재할 수 있다. 자가 복제 벡터는 숙주 세포 당 1개 또는 수백 개 카피로 존재할 수 있다.
"CRIP"는 시스테인 풍부 살충 펩타이드를 나타낸다. CRIP는, 일부 구현예에서, 시스테인 잔기 사이에 디설파이드 결합을 형성하도록 작동 가능한, 시스테인 잔기가 풍부한 펩타이드이다. 일부 구현예에서, CRIP는, 시스테인이 2개, 3개 또는 4개의 디설파이드 결합을 형성하는 적어도 10개의 아미노산을 갖는 단백질 또는 펩타이드 중에서 적어도 4개, 때때로 6개, 때때로 8개의 시스테인 아미노산을 함유한다. 일부 구현예에서, 디설파이드 결합은 살충 펩타이드의 접힘(folding), 3차원 구조 및 활성에 기여한다. 시스테인-시스테인 디설파이드 결합과 이들이 형성하는 3차원 구조는, 이러한 살충 펩타이드의 살충 특성에서 중요한 역할을 한다. 일부 구현예에서, CRIP는 저해제 시스틴 매듭(ICK) 모티프를 포함하거나 포함하지 않을 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ICK 모티프가 있는 CRIP는 거미 유래의 ACTX 펩타이드일 수 있으며; 다른 구현예에서, ICK 모티프가 없는 CRIP, 즉, 비-ICK CRIP는, 말미잘에서 단리된 펩타이드인 Av2 및 Av3과 같은 펩타이드일 수 있다. 비-ICK CRIP는 2개 내지 4개의 디설파이드 결합을 형성하는 4개 내지 8개의 시스테인을 가질 수 있다. 이러한 시스테인-시스테인 디설파이드 결합 안정화된 독성 펩타이드(CRIP)는 환경에 노출될 때 주목할 만한 안정성을 나타낼 수 있다. 다수의 CRIP는 거미, 전갈, 뱀, 바다 달팽이 및 말미잘과 같은 독성 동물에서 단리되며, 이들은 곤충에 독성이 있다.
"CRIP 구조체"는 작동 가능하게 연결된 폴리펩타이드 분절(예를 들어, CRIP-살충 단백질)의 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 모티프의 3차원 배열/배향을 나타낸다. 예를 들어, CRIP 발현 ORF는 하기 구성요소 또는 모티프 중 하나 이상을 포함할 수 있다: CRIP; 소포체 신호 펩타이드(ERSP); 링커 펩타이드(L); 번역 안정화 단백질(STA); 또는 이들의 임의의 조합. 그리고, 본원에 사용된 "CRIP 구조체"라는 용어는 구조 모티프의 지정 및/또는 배향을 설명하기 위해 사용된다. 즉, CRIP 구조체는 주어진 CRIP 발현 ORF 내 함유된 구성요소 또는 모티프의 배열과 배향을 설명한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP 구조체는, 비제한적으로, 하기 CRIP-살충 단백질 중 하나의 배향을 설명한다: ERSP-CRIP; ERSP-(CRIP)N; ERSP-CRIP-L; ERSP-(CRIP)N-L; ERSP-(CRIP-L)N; ERSP-L-CRIP; ERSP-L-(CRIP)N; ERSP-(L-CRIP)N; ERSP-STA-CRIP; ERSP-STA-(CRIP)N; ERSP-CRIP-STA; ERSP-(CRIP)N-STA; ERSP-(STA-CRIP)N; ERSP-(CRIP-STA)N; ERSP-L-CRIP-STA; ERSP-L-STA-CRIP; ERSP-L-(CRIP-STA)N; ERSP-L-(STA-CRIP)N; ERSP-L-(CRIP)N-STA; ERSP-(L-CRIP)N-STA; ERSP-(L-STA-CRIP)N; ERSP-(L-CRIP-STA)N; ERSP-(L-STA)N-CRIP; ERSP-(L-CRIP)N-STA; ERSP-STA-L-CRIP; ERSP-STA-CRIP-L; ERSP-STA-L-(CRIP)N; ERSP-(STA-L)N-CRIP; ERSP-STA-(L-CRIP)N; ERSP-(STA-L-CRIP)N; ERSP-STA-(CRIP)N-L; ERSP-STA-(CRIP-L)N; ERSP-(STA-CRIP)N-L; ERSP-(STA-CRIP-L)N; ERSP-CRIP-L-STA; ERSP-CRIP-STA-L; ERSP-(CRIP)N-STA-L; ERSP-(CRIP-L)N-STA; ERSP-(CRIP-STA)N-L; ERSP-(CRIP-L-STA)N; 또는 ERSP-(CRIP-STA-L)N(여기서, N은 1 내지 200 범위의 정수임). 또한, "구조 모티프"를 참조한다.
"CRIP ORF 다이어그램"은 다이어그램 또는 방정식 형태로 작성된 하나 이상의 CRIP ORF의 조성을 나타낸다. 예를 들어, "CRIP ORF 다이어그램"은 ORF 내 함유된 DNA 분절에 대한 약어 또는 축약형 참조를 사용하여 작성될 수 있다. 따라서, 하나의 예에서, "CRIP ORF 다이어그램"은, 방정식 형태로, DNA 분절을, 각각, "ersp"(즉, ERSP 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열); "링커" 또는 "L"(즉, 링커 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열); "sta"(즉, STA 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열) 및 "crip"(즉, CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열)로 도식화하는 방식으로, ERSP, L, STA 및 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절을 설명할 수 있다. CRIP ORF 다이어그램의 예는, "ersp-sta-(링커 i-crip j)N" 또는 "ersp-(crip j-링커 i)N-sta" 및/또는 이들의 DNA 분절의 임의의 조합이다.
"CRIP 폴리뉴클레오타이드"는 하나 이상의 비-CRIP 폴리펩타이드 또는 단백질에 더하여 하나 이상의 CRIP를 포함하는 살충 단백질을 발현 및/또는 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드의 그룹을 나타낸다.
"CRIP-살충 단백질"은 하기 (1)과 (2)로 이루어진 임의의 단백질, 펩타이드, 폴리펩타이드, 아미노산 서열, 입체배치 또는 배열을 나타낸다: (1) 적어도 하나의 CRIP, 또는 둘 이상의 CRIP와, (2) 추가의 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질, 여기서 상기 추가의 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질은 하기 중 하나 이상을 수행하는 능력이 있음: (a) 곤충이 CRIP-살충 단백질에 노출될 때, CRIP 단독에 비해 사멸률을 증가시키고/시키거나 곤충의 성장을 저해함; (b) 예를 들어 숙주 세포 또는 발현 시스템에서 상기 CRIP-살충 단백질의 발현을 증가시킴; 및/또는 (c) CRIP-살충 단백질의 번역 후 처리에 영향을 미침.
일부 구현예에서, 살충 단백질은 본원에 개시된 바와 같은 하나 이상의 CRIP를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 둘 이상의 CRIP를 포함하는 중합체일 수 있다. 일부 구현예에서, 살충 단백질은 CRIP 동종중합체, 예를 들어 동일한 CRIP인 둘 이상의 CRIP 단량체를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 살충 단백질은 CRIP 이종중합체, 예를 들어 CRIP 단량체가 상이한 둘 이상의 CRIP 단량체를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은, 적절하게 접힐 때 또는 가장 자연스러운 열역학적 상태에서, 하나 이상의 곤충에 대해 살충 활성을 발휘하는 아미노산의 중합체일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은, CRIP가 링커 펩타이드, 예를 들어 절단 가능한 및/또는 절단 가능하지 않은 링커를 통해 작동 가능하게 연결된 둘 이상의 CRIP를 포함하는 중합체일 수 있다. 일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 안정화 도메인(STA); 소포체 신호전달 단백질(ERSP); 곤충 절단 가능한 또는 곤충 절단 가능하지 않은 링커(L); 및/또는 이들의 임의의 다른 조합과 같은 하나 이상의 단백질과 작동 가능하게 연결된 하나 이상의 CRIP를 나타낼 수 있다. 일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 (1) 야생형 CRIP 단백질과, (2) 추가의 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질, 예를 들어 ERSP; 링커; STA; UBI; 또는 히스티딘 태그 또는 유사한 마커를 포함하는 비자연 발생 단백질일 수 있다.
"배양물" 또는 "세포 배양물"은 인공적인 시험관내 환경에서 세포를 유지하는 것을 나타낸다.
"배양"은 다양한 종류의 배지 상 또는 내에서 유기체를 번식시키는 것을 나타낸다. 예를 들어, "배양"이라는 용어는 액체 또는 고체 배지 내 적합한 조건 하에서 세포 집단을 성장시키는 것을 의미할 수 있다. 일부 구현예에서, 배양은 (전형적으로 용기 또는 반응 기 내에서의) 관심 이종 폴리펩타이드 및/또는 다른 목적하는 최종 생성물의 발효적 재조합 생산을 나타낸다.
"시스틴"은 산화된 시스테인 이량체를 나타낸다. 시스틴은 2개의 시스테인 분자의 산화를 통해 수득된 황 함유 아미노산이며, 디설파이드 결합으로 연결되어 있다.
"제한 배지(defined medium)"는 공지된 화학 구성요소로 구성되어 있지만, 효모 추출물 또는 펩톤과 같은 미정제 단백질성 추출물 또는 부산물을 함유하지 않는 배지를 의미한다.
"축퇴" 또는 "코돈 축퇴"는 하나의 아미노산이 상이한 뉴클레오타이드 코돈에 의해 인코딩될 수 있는 현상을 나타낸다. 따라서, 단백질 또는 폴리펩타이드를 인코딩하는 핵산 분자의 핵산 서열은 축퇴로 인해 달라질 수 있다. 유전자 코드의 축퇴로 인해, 다수의 핵산 서열은 특정 활성을 갖는 주어진 폴리펩타이드를 인코딩할 수 있으며; 이러한 기능적으로 동등한 변이체가 본원에서 고려된다.
"데스메틸리모신 B(Desmethyllimocin B)"는 [(5R,7R,8R,9R,10R,13S,17S)-17-[(3R)-5-히드록시옥솔란-3-일]-4,4,8,10,13-펜타메틸-3,16-디옥소-6,7,9,11,12,17-헥사히드로-5H-시클로펜타[a]페난트렌-7-일] 아세테이트를 나타낸다.
"디설파이드 결합"은 측쇄 상의 2개의 티올기의 커플링에 의해 유도된 2개의 시스테인 아미노산 사이의 공유결합을 의미한다.
"DNA"는 단일 가닥 또는 이중 가닥 형태로 배열될 수 있는, 하나 이상의 데옥시리보뉴클레오타이드 또는 뉴클레오타이드(즉, 아데닌 [A], 구아닌 [G], 티민 [T] 또는 시토신 [C])의 중합체를 포함하는 데옥시리보핵산을 나타낸다. 예를 들어, 하나 이상의 뉴클레오타이드는 폴리뉴클레오타이드를 생성한다.
"dNTP"는 DNA와 RNA를 구성하는 뉴클레오시드 트리포스페이트를 나타낸다.
"이중 발현 카세트"는 동일한 벡터 상에 함유된 2개의 이종 폴리펩타이드 발현 카세트를 나타낸다.
"이중 전이유전자 펩타이드 발현 벡터" 또는 "이중 전이유전자 발현 벡터"는 이종 폴리펩타이드 발현 카세트의 2개의 카피를 함유하는 효모 발현 벡터를 의미한다.
"내인성"은 자연적으로 발생하고/하거나 유기체에 존재하는 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질 또는 과정, 예를 들어 특정 유전자 조작 전 숙주 세포에 이미 존재하는 분자 또는 활성을 나타낸다.
"인핸서 요소"는 인핸서 요소 부재 하에서 프로모터로 인해 생성되는 전사 활성에 비해 프로모터에 대해 증가된 전사 활성을 발휘할 수 있는, 프로모터에 작동 가능하게 연결된 DNA 서열을 나타낸다.
"ER" 또는 "소포체"는 일부 번역 후 변형 과정이 일어나는 모든 진핵생물에 대해 공통적인 세포하 세포소기관이다.
"ERSP" 또는 "소포체 신호 펩타이드"는 단백질 번역 리보솜/mRNA 복합체를 세포질 내 ER로 이동시키는, CRIP를 인코딩하는 mRNA 분자의 단백질 번역 동안 숙주 세포 신호 인식 입자에 의해 인식되고 결합되는 아미노산의 N-말단 서열이다. 결과는, 단백질 번역이 계속되는 ER에 도킹할 때까지 단백질 번역이 중단되고, 생성된 단백질이 ER에 주입된다.
"ersp"는 펩타이드 ERSP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 나타낸다.
"ER 트래피킹(trafficking)"은 번역 후 변형, 분류 및 수송을 위해 세포 발현된 단백질을 ER로 수송하는 것을 의미한다.
"부형제"는 본 발명의 활성 성분(즉, CRIP 또는 CRIP-살충 단백질)과 함께(예를 들어, 동시에) 또는 이에 후속하여 제형화되는 임의의 약리학적으로 불활성인 천연 또는 합성 구성요소 또는 물질을 나타낸다. 일부 구현예에서, 부형제는 본 발명의 CRIP 또는 CRIP-살충 단백질과 함께 투여될 수 있고/있거나 본 발명의 조성물을 제조하는 데 유용한, 임의의 첨가제, 아쥬반트, 결합제, 증량제, 담체, 코팅제, 희석제, 붕해제, 충전제, 활택제, 윤활제, 보존제, 비히클 또는 이들의 조합일 수 있다. 부형제는 비독성이며 조성물의 다른 구성요소와 상호작용하지 않는 당업계에 공지된 임의의 이러한 재료를 포함한다. 일부 구현예에서, 부형제는 조성물을 증량시킬 목적으로(따라서 종종 증량제, 충전제 또는 희석제로 지칭됨) 조성물을 제조할 때 CRIP 또는 CRIP-살충 단백질과 함께 제형화될 수 있다. 다른 구현예에서, 부형제는 최종 투여 형태에서 활성 성분에 증강을 부여하기 위해, 예컨대 흡수 및/또는 가용성을 촉진시키기 위해 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 부형제는 안정성을 제공하거나 오염(예를 들어, 미생물 오염)을 방지하기 위해 사용될 수 있다. 다른 구현예에서, 부형제는 조성물(예를 들어, 건조 과립 또는 건조 유동성 분말의 물리적 형태인 조성물)에 물리적 특성을 부여하기 위해 사용될 수 있다. 부형제에 대한 언급은 하나의 부형제와 하나 초과의 부형제를 모두를 포함한다. 적합한 약제학적 부형제는 문헌[E.W. Martin, Remington's pharmaceutical Sciences]에 기재되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
"발현 카세트"는 (1) 관심 DNA 서열, 예를 들어CRIP를 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드와, 하기 중 하나 이상을 나타낸다: (2) 프로모터, 종결인자 및/또는 인핸서 요소; (3) 적절한 mRNA 안정화 폴리아데닐화 신호; (4) 내부 리보솜 진입 부위(IRES); (5) 인트론; 및/또는 (6) 전사 후 조절 요소. (1)과, (2) 내지 (6) 중 적어도 하나의 조합을 "발현 카세트"라고 한다. 일부 구현예에서, 벡터에 클로닝되는 다수의 발현 카세트가 존재할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP를 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 제1 발현 카세트가 존재할 수 있다. 대안적인 구현예에서, 각각 CRIP를 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 2개의 발현 카세트(즉, 이중 발현 카세트)가 존재한다. 다른 구현예에서, CRIP를 인코딩하도록 작동 가능한 3개의 발현 카세트(즉, 삼중 발현 카세트)가 존재한다. 일부 구현예에서, 이중 발현 카세트는 제1 발현 카세트를 함유하는 벡터에 제2 발현 카세트를 서브클로닝하는 방식으로 생성될 수 있다. 일부 구현예에서, 삼중 발현 카세트는 제1 발현 카세트와 제2 발현 카세트를 함유하는 벡터에 제3 발현 카세트를 서브클로닝하는 방식으로 생성될 수 있다. 발현 카세트 및 클로닝 기술에 관한 방법은 당업계에 널리 공지되어 있으며 본원에 설명되어 있다. 또한, CRIP 발현 카세트를 참조한다.
"발현 ORF"는 단백질 복합체를 인코딩하는 뉴클레오타이드를 의미하며, 이는 ORF의 뉴클레오타이드로 정의된다.
"FECT"는 코팅 단백질 유전자와 삼중 유전자 블록이 제거된 여우꼬리 모자이크 바이러스(Foxtail mosaic virus)를 사용하는 일시적 식물 발현 시스템을 의미한다.
"발효 맥주(fermentation beer)"는 이용된 발효 배지, 즉, 형질전환된 숙주 세포(예를 들어, 본 발명의 CRIP를 발현하도록 작동 가능한 효모 세포)로 접종되고 이에 의해 소비된 유기체의 제거 후 발효 배지 상청액을 나타낸다. 일부 구현예에서, 발효 맥주는 형질전환된 숙주 세포의 발효 후 회수된 용액을 나타낸다. "발효"라는 용어는 광범위하게 발효 산물(예를 들어, 본 발명의 하나 이상의 펩타이드)을 생성하기 위한 제어된 조건(예를 들어, 온도, 산소, pH, 영양소 등) 하에서의 미생물에 의한 유기 물질(예를 들어, 탄소 기질) 영양소 물질의 효소적, 및 혐기성 또는 호기성 분해를 나타낸다. 발효는 전형적으로 혐기성 조건 하에서 일어나는 과정을 설명하지만, 본원에 사용된 "발효"라는 용어는 산소의 존재 하에서 일어나는 과정도 존재할 수 있기 때문에, 본원에 사용되는 상기 용어는 엄격한 혐기성 조건에만 한정되는 것으로 의도되지 않는다.
"발효 고형물(들)"은 효모 기반 발효 과정 동안 발효 맥주로부터 남는 고형물(용해된 것 포함)을 나타내며, 이는 본질적으로 염, 복합체 단백질 공급원, 비타민 및 분자량 컷오프가 약 200 kDa 내지 약 1 kDa인 추가 효모 부산물로 이루어진다.
"GFP"는 해파리, 아에쿠오레아 빅토리아(Aequorea victoria) 유래의 녹색 형광 단백질을 의미한다.
"HIS" 또는 "His"는 히스티딘을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "HIS" 또는 His"는 히스티딘 태그, 예를 들어 서열번호 591에 제시된 아미노산 서열을 갖는 히스티딘 태그를 나타낼 수 있다.
"상동"은 2개의 폴리펩타이드 또는 2개의 핵산 분자 사이의 서열 유사성 또는 서열 동일성을 나타낸다. 2개의 비교되는 서열 둘 모두의 위치가 동일한 염기 또는 아미노산 단량체 서브유닛에 의해 점유되는 경우, 예를 들어 2개의 DNA 분자 각각의 위치가 아데닌에 의해 점유되는 경우, 분자는 해당 위치에서 상동이다. 2개의 서열 사이의 상동성%는 2개의 서열이 공유하는 매칭 또는 상동 위치의 수를 비교하는 위치의 수로 나누고 100을 곱한 함수이다. 따라서, 일부 구현예에서, "상동"이라는 용어는 2개의 폴리펩타이드 분자 또는 2개의 핵산 분자 사이의 서열 유사성을 나타낸다. 2개의 비교되는 서열 둘 모두의 위치가 동일한 염기 또는 아미노산 단량체 서브유닛에 의해 점유되는 경우, 예를 들어 2개의 DNA 분자 각각의 위치가 아데닌에 의해 점유되는 경우, 분자는 해당 위치에서 상동이다. 2개의 서열 사이의 상동성은 2개의 서열이 공유하는 매칭 또는 상동 위치의 수의 함수이다. 예를 들어, 2개의 서열 내 10개 위치 중 6개가 매칭되거나 상동인 경우, 2개의 서열은 60% 상동이다. 예로서, DNA 서열 ATTGCC와 TATGGC는 50% 상동성을 공유한다.
핵산과 관련하여 사용될 때 "상동성"이라는 용어는, 상보성의 정도를 나타낸다. 부분 상동성일 수 있거나, 완전 상동성, 따라서 동일할 수 있다. "서열 동일성"은 둘 이상의 핵산 사이의 관련성의 척도를 나타내며, 총 비교 길이에 대한 백분율로 제공된다. 동일성 계산은 각각의 더 큰 서열에서 동일하며 동일한 상대 위치에 있는 뉴클레오타이드 잔기를 고려한다.
"상동 재조합"은 DNA의 분절이 동일한 영역(상동) 또는 거의 동일한 영역을 보유하는 또 다른 분절로 치환되는 사건을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "상동 재조합"은 뉴클레오타이드 서열이 2개의 유사하거나 동일한 DNA 분자 사이에서 교환되는 일종의 유전자 재조합을 나타낸다. 간략하게, 상동 재조합은 이중 가닥 파손으로 공지된, 두 개의 DNA 가닥 모두에서 일어나는 유해한 파손을 정확하게 복구하기 위해 세포에서 가장 광범위하게 사용된다. 상동 재조합은 상이한 유기체 및 세포 유형에 따라 광범위하게 달라지지만, 대부분의 형태는 하기와 같은 동일한 기본 단계를 포함한다: 이중 가닥 파손이 일어난 후, 파손된 부분의 5' 말단 주변의 DNA 절편이 절제라고 불리는 과정에서 절단된다. 후속되는 가닥 침입 단계에서, 파손된 DNA 분자의 돌출된 3' 말단이 파손되지 않은 유사하거나 동일한 DNA 분자를 "침입"한다. 가닥 침입 후, 사건의 추가 순서는 2가지 주요 경로, 즉, 이중 가닥 파손 복구 경로 또는 합성 의존적 가닥 어닐링 경로 중 하나를 따를 수 있다. 상동 재조합은 생물의 3역 분류(three domains of life)뿐 아니라 바이러스에 걸쳐 보존되기 때문에, 거의 보편적인 생물학적 메커니즘인 것으로 시사된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 상동 재조합은 부위 특이적 통합(SSI: site specific integration) 서열을 사용하여 일어날 수 있으며, 이에 따라 뉴클레오타이드 조성이 실질적으로 유사한 핵산 서열 사이에서 가닥 교환 교차 사건이 존재한다. 이러한 교차 사건은 본 발명의 표적화 구조체 내 함유된 서열(즉, SSI 서열)과 내인성 게놈 핵산 서열(예를 들어, 펩타이드 서브유닛을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드) 사이에서 일어날 수 있다. 또한, 일부 구현예에서, 하나 초과의 부위 특이적 상동 재조합 사건이 일어날 수 있으며, 이는 표적화 구조체 내 함유된 핵산 서열이 내인성 게놈 서열 내 존재하는 특정 서열을 대체하는 대체 사건을 유도할 수 있다.
"ICK 모티프" 또는 "ICK 모티프 단백질" 또는 "저해제 시스틴 매듭 모티프" 또는 "ICK 펩타이드" 또는 "시스틴 매듭 모티프" 또는 "시스틴 매듭 펩타이드"는 3개의 디설파이드 브릿지를 갖는 적어도 6개의 반(half)-시스틴 코어 아미노산을 갖는 16개 내지 60개 아미노산 펩타이드를 나타내며, 여기서 3개의 디설파이드 브릿지는 공유결합이고, 6개의 반-시스틴 잔기 중 공유 디설파이드 결합은 N-말단 아미노산에서 출발한 6개의 코어 반-시스틴 아미노산의 제1 반-시스틴과 제4 반-시스틴, 제2 반-시스틴과 제5 반-시스틴, 및 제3 반-시스틴과 제6 반-시스틴 사이에 있다. 일반적으로, 이러한 유형의 펩타이드는, 통상적으로 모티프의 제4 코어 반-시스틴과 제6 코어 반-시스틴 사이에 위치하는 잔기로 구성된 베타-헤어핀 2차 구조를 포함하며, 여기서 헤어핀은 모티프의 3개의 디설파이드 결합에 의해 제공되는 구조적 가교 결합에 의해 안정화된다. 추가의 시스테인/시스틴 또는 반-시스틴 아미노산이 저해제 시스틴 매듭 모티프 내에 존재할 수 있다는 점에 유의해야 한다.
"ick"는 ICK 모티프 단백질을 인코딩하는 뉴클레오타이드를 의미한다.
"ICK 모티프 단백질 발현 ORF" 또는 "발현 ORF"는 ICK 모티프 단백질 복합체를 인코딩하는 뉴클레오타이드를 의미하며, ORF의 뉴클레오타이드로 정의된다.
"ICK 모티프 단백질 발현 벡터" 또는 "ICK 발현 벡터" 또는 "ICK 모티프 발현 벡터"는 발현 ORF를 함유하는 이원 벡터를 의미한다. 이원 벡터는 또한 ORF 및 이것이 인코딩하는 단백질의 발현을 촉진시키기 위해 발현 ORF를 둘러싸는 필수 전사 프로모터와 종결인자 서열을 함유한다.
"동일성"은 둘 이상의 폴리펩타이드 서열 또는 둘 이상의 폴리뉴클레오타이드 서열을 비교하는 방식으로 결정되는, 이러한 서열 사이의 관계를 나타낸다. "동일성"이라는 용어는 또한 경우에 따라 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드 서열의 스트링 사이의 매치에 의해 결정되는, 이러한 서열 사이의 서열 관련성 정도를 의미한다. "동일성"과 "유사성"은, 비제한적으로, 하기를 포함하는, 당업자에게 공지된 다수의 방법 중 어느 하나에 의해 용이하게 계산될 수 있다: 문헌[Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988]; 문헌[Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993]; 문헌[Computer Analysis of Sequence Data, Part 1, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994], 문헌[Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987]; 문헌[Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991]; 및 문헌[Carillo, H., and Lipman, D., SIAM J. Applied Math., 48: 1073 (1988)](상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨). 나아가, 동일성과 유사성을 결정하는 방법은 공개적으로 이용 가능한 컴퓨터 프로그램으로 체계화된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 2개의 서열 사이의 동일성과 유사성을 결정하는 방법에는, 비제한적으로, GCG 프로그램 패키지(문헌[Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research 12(1): 387 (1984)]), BLASTP, BLASTN 및 FASTA(문헌[Altschul, S. F. et al., J. Molec. Biol. 215: 403-410 (1990)])가 포함된다. BLAST X 프로그램은 NCBI 및 다른 공급원(문헌[BLAST Manual, Altschul, S., et al., NCBI NLM NIH Bethesda, Md. 20894]; 문헌[Altschul, S., et al., J. Mol. Biol. 215: 403-410 (1990)])에서 공개적으로 이용 가능하며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
"IGER"은 1개 문자 코드(one letter code)의 실제 서열을 기반으로 한 짧은 펩타이드의 명칭을 의미한다. 이는 개재 링커의 일례이다.
"생체내"는 자연 환경(예를 들어, 동물 또는 세포), 및 자연 환경 내에서 일어나는 과정 또는 반응을 나타낸다.
"비활성"은 어떤 것이 사용 상태가 아닌 상태, 예를 들어 휴면 상태 및/또는 작동하지 않는 상태를 나타낸다. 예를 들어, 유전자의 맥락에서 사용되거나 유전자를 언급할 때, 비활성이라는 용어는 상기 유전자가 더 이상 유전자 산물을 활발하게 합성하지 않거나, 상기 유전자 산물이 단백질로 번역되지 않거나, 다르게는 유전자가 정상적인 기능을 수행하지 않는 것을 의미한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 비활성이라는 용어는, 유전자의 RNA 전사 실패, RNA 처리(예를 들어, pre-mRNA 처리; RNA 스플라이싱; 또는 다른 전사 후 변형) 실패; 비코딩 RNA 성숙에 대한 간섭; (예를 들어, 핵에서 세포질로의) RNA 방출에 대한 간섭; 번역; 단백질 접힘, 전위, 단백질 수송에 대한 간섭; 및/또는 분자 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 전사 인자, 조절제, 저해제, 또는 상기 언급한 과정 중 임의의 것에 참여하는 다른 인자 중 임의의 것에 대한 저해 및/또는 간섭을 나타낼 수 있다.
"작동 불가능한"은 기능하지 않거나, 오작동하거나 또는 더 이상 기능할 수 없는 상태를 나타낸다. 예를 들어, 유전자의 맥락에서 사용되거나 유전자를 언급할 때, 작동 불가능한이라는 용어는, 상기 유전자가, 영구적으로 또는 일시적으로, 더 이상 이것이 정상적으로 작동하는 바와 같이 작동할 수 없다는 것을 의미한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "작동 불가능한"은, 유전자가 더 이상 유전자 산물을 합성하지 않거나, 상기 유전자 산물이 단백질로 번역되지 않거나, 다르게는 유전자가 정상적인 기능을 수행할 수 없는 것을 의미한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 작동 불가능한이라는 용어는, 유전자의 RNA 전사 실패, RNA 처리(예를 들어, pre-mRNA 처리; RNA 스플라이싱; 또는 다른 전사 후 변형) 실패; 비코딩 RNA 성숙에 대한 간섭; (예를 들어, 핵에서 세포질로의) RNA 방출에 대한 간섭; 번역; 단백질 접힘, 전위, 단백질 수송에 대한 간섭; 및/또는 분자 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 전사 인자, 조절제, 저해제, 또는 상기 언급한 과정 중 임의의 것에 참여하는 다른 인자 중 임의의 것에 대한 저해 및/또는 간섭을 나타낼 수 있다.
"곤충"은 "곤충강(Insecta)"에 속하는 모든 유기체를 포함한다. "성체 전(pre-adult)" 곤충이라는 용어는, 예를 들어 알, 유충 및 약충(nymph)을 포함하는, 성체 단계 이전 유기체의 임의의 형태를 나타낸다. 본원에 사용된 "곤충"이라는 용어는, 모든 작물, 채소 및 나무에 침입하는 것으로 알려진 진드기 및 곤충을 포함하는 임의의 절지동물 및 선충을 나타내며, 이에는 임업, 원예 및 농업 분야에서 해충으로 간주되는 곤충이 포함된다. 본원에 개시된 방법으로 보호될 수 있는 특정 작물의 예는, 대두, 옥수수, 면화, 알파파 및 채소 작물이다. 특정 작물 및 곤충의 목록은 본원에 포함되어 있다.
"곤충 내장 환경" 또는 "내장 환경"은 곤충 또는 곤충 유충의 전장, 중장 또는 후장 내에서 발견되는 특정 pH 및 프로테이나아제 조건을 의미한다.
"곤충 혈림프 환경"은 곤충 또는 곤충 유충 내에서 발견되는 특정 pH 및 프로테이나아제 조건을 의미한다.
"살충 활성"은, 곤충이 화합물, 작용제 또는 펩타이드에 노출될 때 또는 노출된 후, 곤충이 죽거나, 움직임을 멈추거나 느리게 하는 것; 섭식을 멈추거나 느리게 하는 것; 성장을 멈추거나 느리게 하는 것; (예를 들어, 탐색, 먹이 찾기, 수면 행동 및/또는 짝짓기와 관련하여) 혼란스러워하는 것; 번데기가 되는 것을 실패하는 것; 번식을 방해하는 것; 및/또는 곤충이 자손을 생성하는 것을 막고/막거나 곤충이 번식력이 있는 자손을 생성하는 것을 막는 것을 의미한다.
"살충 작용제" 또는 "IA" 또는 "작용제"는 하나 이상의 화학 물질, 분자, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, RNA, DNA, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 지질, 당지질, 효소, 독소, 독물, 독, 살충제, 농약, 유기 화합물, 무기 화합물, 바이러스, 원핵생물 유기체 또는 진핵생물 유기체(및 상기 원핵생물 또는 진핵생물 유기체로부터 생성된 작용제)를 나타낸다. 일부 구현예에서, IA에는, 비제한적으로, RNAi; 위독(stomach poison); 유형 0 키틴 생합성 저해제; 유형 1 키틴 생합성 저해제; 곤충 바이러스; 아자디라크타 인디카에서 단리된 화합물; MOA가 알려지지 않은 화합물; 박테리아(및 이로부터의 생성물); 진균(및 이로부터의 생성물); 선충(및 이로부터의 생성물); 식물 에센스; 기계적 교란제; 형광 증백제; 실리카 나노스피어; 키티나아제; 렉틴; 막 공격 복합체/퍼포린(MACPF: Membrane Attack Complex/Perforin) 단백질; 식물 바이러스 외피 단백질-독소 융합체; 글리칸 결합 도메인/독소 융합 단백질; 아세틸콜린에스테라아제(AchE: acetylcholinesterase) 저해제; GABA 개폐형 클로라이드 채널 차단제; 소듐 채널 조절제; 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 경쟁 조절제; 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 알로스테릭 조절제-부위 I; 글루타메이트 개폐형 클로라이드 채널(GluCl) 알로스테릭 조절제; 유충 호르몬 모방체; 기타 비특이적(다중부위) 저해제; 현음 기관 TRPV 채널 조절제; 응애 성장 저해제; 미토콘드리아 ATP 신타아제 저해제; 양성자 구배의 파괴를 통한 산화적 인산화의 언커플러(uncoupler); 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 채널 차단제; 탈피 교란제(쌍시목); 엑디손(Ecdysone) 수용체 아고니스트; 옥토파민(Octopamine) 수용체 아고니스트; 미토콘드리아 복합체 III 전자 수송 저해제; 미토콘드리아 복합체 I 전자 수송 저해제; 전압 의존성 소듐 채널 차단제; 아세틸 조효소 A 카르복실라아제 저해제; 미토콘드리아 복합체 IV 전자 수송 저해제; 미토콘드리아 복합체 II 전자 수송 저해제; 리아노딘(Ryanodine) 수용체 조절제; 현음 기관 조절제-정의되지 않은 표적 부위; 또는 GABA 개폐형 클로라이드 채널 알로스테릭 조절제의 범주에서 선택되는 구성원이 포함된다. 일부 구현예에서, 살충 작용제는 아미노산, 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질의 중합체일 수 있으며; 이러한 펩타이드-IA는 본원에 기재된 바와 같은 펩타이드 및/또는 단백질과 관련된 방법 중 임의의 것에 따라 제조 및/또는 사용될 수 있다.
"통합 발현 벡터" 또는 "통합 벡터"는 효모 세포 게놈의 특정 유전자좌에 그 자체가 삽입되어 안정적으로 효모 게놈의 일부가 될 수 있는 효모 발현 벡터를 의미한다.
"살충제 내성인" 또는 "살충제 내성" 또는 "살충제 내성 곤충"은 해당 해충 종에 대해 사용될 때 예상되는 방제 수준을 달성하기 위해 상기 살충제의 반복된 실패에 반영되는 살충제에 대한 해충 집단 감수성의 유전 가능한 변화를 나타낸다.
"개재 링커"는 단백질의 상이한 부분을 분리하는 단백질 내 짧은 펩타이드 서열, 또는 업스트림 DNA 서열과 다운스트림 DNA 서열을 분리하기 위해 ORF 내 리딩 프레임에 배치되는 짧은 DNA 서열을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 단백질이 번역 동안 이의 독립적인 2차 및 3차 구조 형성을 달성하도록 하기 위해 개재 링커가 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 개재 링커는 식물 세포 환경, 곤충 및/또는 인시목 내장 환경, 및 곤충 혈림프 및 인시목 혈림프 환경에서 절단하는 데 민감하거나 대해 이에 저항성이 있을 수 있다.
"단리된"은 자연 환경에서 특정 물질 및/또는 구성요소를 분리하는 것을 나타내며, 예를 들어 주어진 속 또는 종에서 단리된 독소는 독소가 자연 환경에서 분리되었음(예를 들어, WT 유기체에서 취해졌음)을 의미한다.
"카파-ACTX 펩타이드"는 곤충 칼슘 활성화 포타슘(KCa) 채널(Slo-유형)을 저해하는 흥분성 독소를 나타낸다. 본원에 사용되는 "카파-ACTX 펩타이드"는 호주 블루마운틴 깔대기 그물 거미, 하드로니케 베르수타에서 단리된 펩타이드, 또는 이의 변이체를 나타낼 수 있다.
"kb"는 킬로베이스, 즉, 1000개의 염기를 나타낸다. 본원에 사용된 "kb"라는 용어는 핵산 분자의 길이를 의미한다. 예를 들어, 1 kb는 길이가 1000개 뉴클레오타이드인 핵산 분자를 나타낸다. 길이가 1 kb인 이중 가닥 DNA의 길이는 2000개의 뉴클레오타이드(즉, 각 가닥에 1000개)를 함유한다. 대안적으로, 길이가 1 kb인 단일 가닥 RNA의 길이는 1000개의 뉴클레오타이드를 함유한다.
"kDa"은 1,000 달톤(dalton)에 해당하는 단위인 킬로달톤을 나타내며; "달톤" 또는 "Da"는 분자량(MW)의 단위이다.
"녹인(knock in 또는 knock-in)” 또는 "녹킹인(knocking-in)"은 내인성 유전자를 외인성 또는 이종 유전자, 또는 이의 일부로 대체하는 것을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "녹인"이라는 용어는, 상동 재조합에 의해 목적하는 단백질을 인코딩하는 핵산 서열을 표적 유전자 유전자좌에 도입하여 목적하는 단백질을 발현시키는 것을 나타낸다. 일부 구현예에서, "녹인" 돌연변이는 유전자 서열을 변형시켜 기능상실(loss-of-function) 또는 기능획득(gain-of-function) 돌연변이를 생성할 수 있다. "녹인"이라는 용어는, 외인성 또는 이종 폴리뉴클레오타이드 서열 또는 이의 단편이 게놈(예를 들어, "녹인을 수행하였음" 또는 "이종 유전자를 녹인하였음"), 또는 생성된 세포 및/또는 유기체(예를 들어, 세포가 "녹인"이거나 동물이 "녹인"임)에 도입되는 절차를 나타낼 수 있다.
"녹아웃(knock out, knockout 또는 knock-out)" 또는 "녹킹아웃(knocking-out)"은 세포에서 내인성 DNA 서열에 의해 인코딩되는 단백질의 발현 유전자 산물(예를 들어, mRNA)의 부분 또는 완전 억제를 나타낸다. 일부 구현예에서, "녹아웃"은 전체 유전자, 또는 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질을 인코딩하는 유전자 일부의 표적화된 결실에 의해 달성될 수 있다. 그 결과, 결실은 유전자를 비활성, 부분적으로 비활성, 작동 불가능, 부분적으로 작동 불가능하게 되도록 만들거나, 다르게는 전체 유기체 내 임의의 세포 및/또는 해당 유전자가 정상적으로 발현되는 세포에서 유전자 또는 이의 산물의 발현을 감소시킬 수 있다. "녹아웃"이라는 용어는, 내인성 유전자가 완전히 또는 부분적으로 비활성 또는 작동 불가능하게 되도록 만들거나(예를 들어, "녹아웃을 수행하였음" 또는 "내인성 유전자를 녹아웃시켰음"), 또는 생성된 세포 및/또는 유기체(예를 들어, 세포가 "녹아웃"이거나 동물이 "녹아웃"임)가 완전히 또는 부분적으로 비활성 또는 작동 불가능하게 되도록 만드는 절차를 나타낼 수 있다.
"녹다운 용량 50" 또는 "KD50"은 집단, 예를 들어 무스카 도메스티카(Musca domestica)(일반 집파리) 및/또는 아에데스 아에깁티(모기) 집단의 50%에서 마비 또는 움직임의 중단을 유발하는 데 필요한 용량의 중앙값을 나타낸다.
"l" 또는 "링커"는 링커 펩타이드를 인코딩하는 뉴클레오타이드를 나타낸다.
적절한 문맥에서 "L"은 번역 안정화 단백질(STA)을 추가의 폴리펩타이드, 예를 들어 이종 펩타이드 및/또는 다중 이종 펩타이드와 연결하는 링커 펩타이드를 나타낸다. 아미노산을 언급할 때, "L"은 또한 류신을 의미할 수 있다.
"LAC4 프로모터" 또는 "Lac4 프로모터"는 클루이베로마이세스 락티스(K. lactis) β-갈락토시다아제 유전자에서 유도된 프로모터 서열로 구성된 DNA 분절을 나타낸다. LAC4 프로모터는 효모로 형질전환된 외인성 유전자의 발현을 유도하는 데 사용되는 강력하고 유도 가능한 리포터이다.
"LAC4 종결인자" 또는 "Lac4 종결인자"는 클루이베로마이세스 락티스 β-갈락토시다아제 유전자에서 유도된 전사 종결인자 서열로 구성된 DNA 분절을 나타낸다.
"LD20"은 집단의 20%를 사멸시키는 데 필요한 용량을 나타낸다.
"LD50"은 집단의 50%를 사멸시키는 데 필요한 용량을 의미하는 치사량 50을 나타낸다.
"인시목 내장 환경"은 인시목 곤충 또는 유충의 전장, 중장 또는 후장 내에서 발견되는 특정 pH 및 프로테이나아제 조건을 의미한다.
"인시목 혈림프 환경"은 인시목 곤충 또는 유충 내에서 발견되는 특정 pH 및 프로테이나아제 조건을 의미한다.
"링커" 또는 "펩타이드 링커" 또는 "L" 또는 "개재 링커"는 2개의 펩타이드를 함께 연결하도록 작동 가능한 짧은 펩타이드 서열을 나타낸다. 링커는 또한 업스트림 DNA 서열과 다운스트림 DNA 서열을 분리하기 위해 ORF의 리딩 프레임에 배치되는 짧은 DNA 서열을 나타낼 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 곤충 프로테아제에 의해 절단 가능할 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 단백질이 번역 동안 이의 독립적인 2차 및 3차 구조 형성을 달성하게 할 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 식물 세포 환경, 곤충 및/또는 인시목 내장 환경, 및/또는 곤충 혈림프 및 인시목 혈림프 환경에서 절단하는 데 민감하거나 대해 이에 저항성이 있을 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 프로테아제에 의해 절단될 수 있으며, 예를 들어, 일부 구현예에서, 링커는 식물 프로테아제(예를 들어, 파파인(papain), 브로멜라인(bromelain), 피신(ficin), 악티니딘(actinidin), 진기바인(zingibain) 및/또는 카르도신(cardosin)), 곤충 프로테아제, 진균 프로테아제, 척추동물 프로테아제, 무척추동물 프로테아제, 박테리아 프로테아제, 포유류 프로테아제, 파충류 프로테아제 또는 조류 프로테아제에 의해 절단될 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 절단 가능하거나 절단 가능하지 않을 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 이원 또는 삼원 영역을 포함하며, 여기서 각각의 영역은 적어도 2가지 유형의 프로테아제(이중 하나는 곤충 및/또는 선충 프로테아제이고, 다른 하나는 인간 프로테아제임)에 의해 절단 가능하다. 일부 구현예에서, 링커는 하기 (적어도) 3가지 역할 중 하나를 가질 수 있다: 곤충 내장 환경에서 절단되는 것, 식물 세포에서 절단되는 것 또는 의도적으로 절단되지 않도록 설계되는 것.
"배지"는 세포 배양물에서 세포를 배양하기 위한 영양분이 있는 용액을 나타낸다.
"MOA"는 작용 메커니즘을 나타낸다.
"분자량(MW)"은 분자의 질량 또는 중량을 나타내며, 이는 전형적으로 "달톤(Da)" 또는 킬로달톤(kDa)으로 측정된다. 일부 구현예에서, MW는 소듐 도데실 설페이트 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(SDS-PAGE), 분석용 초원심분리 또는 광산란을 사용하여 계산될 수 있다. 일부 구현예에서, SDS-PAGE 방법은 하기와 같다: 관심 샘플을 분자량 표준물 세트를 이용하여 겔에서 분리시킨다. 샘플을 실행한 후, 겔을 목적하는 염색으로 처리하고, 이어서 약 2시간 내지 14시간 동안 탈색한다. 다음 단계는 표준물 및 관심 단백질의 상대적인 이동 거리(Rf)를 결정하는 것이다. 이동 거리는 하기 방정식을 사용하여 결정할 수 있다:
식 (III)
다음으로, 표준물 밴드에 대해 얻은 값에 기반하여 MW의 로그를 결정할 수 있으며; 예를 들어, 일부 구현예에서, SDS-변성 폴리펩타이드의 분자량 및 이의 상대적인 이동 거리(Rf)의 로그를 그래프로 플롯팅한다. 그래프로 플롯팅한 후, 유도된 값을 내삽하여 알려지지 않은 단백질 밴드의 분자량을 제공한다.
"모티프"는 일부 생물학적 유의성을 갖는 것과 관련이 있고/있거나, 일부 효과를 발휘하거나 일부 생물학적 과정에 관여하는 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드 서열을 나타낸다.
"다중 클로닝 부위" 또는 "MCS"는 관심 DNA 서열이 삽입될 수 있는 다수의 제한 부위를 함유하는 벡터에서 발견되는 DNA 분절을 나타낸다.
"돌연변이체"는 (예를 들어, 뉴클레오타이드 서열 또는 아미노산 서열에서) 변경 또는 변이를 갖는 유기체, DNA 서열, 아미노산 서열, 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질로서, 이는 상기 유기체 및/또는 서열을 자연 발생 또는 야생형 유기체, 야생형 서열, 및/또는 돌연변이체와 비교되는 참조 서열과 상이하게 만든다. 일부 구현예에서, 이러한 변경 또는 변이는 하나 이상의 뉴클레오타이드 및/또는 아미노산 치환 또는 변형(예를 들어, 결실 또는 부가)일 수 있다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 치환 또는 변형은 보존적일 수 있으며; 여기서, "돌연변이체"에서의 이러한 보존적 아미노산 치환 및/또는 변형은 비돌연변이체 형태와 비교하여 돌연변이체의 활성을 실질적으로 감소시키지 않는다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "돌연변이체"는 서열번호로 표시된 바와 같이, 개시된 및/또는 청구된 서열을 갖는 펩타이드와 비교할 때 하나 이상의 보존적 아미노산 치환을 보유한다.
"N-말단"은 폴리펩타이드의 개시 또는 시작 부분에 위치하는 유리 아미노기(즉, -NH2)를 나타낸다.
"NCBI"는 미국 국립생물정보센터(National Center for Biotechnology Information)를 나타낸다.
"nm"은 나노미터를 나타낸다.
"비-ICK CRIP"는 2개 내지 4개 디설파이드 결합을 형성하는 4개 내지 8개 시스테인을 갖는 펩타이드를 나타낸다. 비-ICK 펩타이드는 ICK 펩타이드가 아닌 시스틴 매듭 펩타이드를 포함한다. 비-ICK 펩타이드는 ICK와 상이한 디설파이드 결합 연결 패턴을 가질 수 있다. 비-ICK CRIP의 예는, 말미잘에서 단리된 Av2 및 Av3과 같은 펩타이드이며; 이러한 말미잘 펩타이드는 곤충 말초신경계(PNS)에서 소듐 채널을 조절하는 화합물 부류의 예이다.
"비극성 아미노산"은 약한 소수성인 아미노산이며, 이에는 글리신, 알라닌, 프롤린, 발린, 류신, 이소류신, 페닐알라닌 및 메티오닌이 포함된다. 글리신 또는 gly은 본 발명의 디펩타이드에 대한 가장 바람직한 비극성 아미노산이다.
"정규화된 펩타이드 수율"은 펩타이드 수율이 측정되는 시점에서 상응하는 세포 밀도로 나눈 조건화된 배지의 펩타이드 수율을 의미한다. 펩타이드 수율은 부피 단위로 생성된 펩타이드의 질량, 예를 들어 리터 당 mg 또는 mg/L, 또는 HPLC 크로마토그래프에서 생성된 펩타이드의 UV 흡광도 피크 면적, 예를 들어 mAu.sec.로 표시될 수 있다. 세포 밀도는 600 nm 파장(OD600)에서의 배양물의 가시광선 흡광도로 표시될 수 있다.
"OD"는 광학 밀도를 나타낸다. 전형적으로, OD는 분광광도계를 사용하여 측정된다. 세포 집단의 시간 경과에 따른 성장을 측정할 때, OD600이 UV 분광광도법보다 선호되는 데; 이는 600 nm 파장에서는, 세포가 너무 강한 UV 광 하에 있을 때와 같이 손상되지 않기 때문이다.
“OD660nm” 또는 "OD660nm"는 660 나노미터(nm)에서의 광학 밀도를 나타낸다.
“오메가 펩타이드” 또는 "오메가 독소" 또는 "오메가-ACTX-Hv1a" 또는 "천연 오메가ACTX-Hv1a"는 모두 호주 블루마운틴 깔대기 그물 거미, 하드로니케 베르수타로 알려진 거미에서 처음으로 단리된 ACTX 펩타이드를 나타낸다. 오메가 펩타이드는 니코틴성 아세틸콜린 수용체의 양성 알로스테릭 조절제이며, 이는 또한 곤충 전압 개폐형 Ca2+ 채널과 전압 개폐형 K+ 채널에 대한 이중 안타고니스트일 수 있다. 문헌[Chambers et al., Insecticidal spider toxins are high affinity positive allosteric modulators of the nicotinic acetylcholine receptor. FEBS Lett. 2019 Jun; 593(12):1336-1350]; 및 문헌[Windley et al., Lethal effects of an insecticidal spider venom peptide involve positive allosteric modulation of insect nicotinic acetylcholine receptors. Neuropharmacology. 2017 Dec; 127:224-242] 참조(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
"1개 문자 코드"는 단백질의 1차 구조에서 다양한 아미노산을 구별하기 위해 1개 문자 코드로 열거된 펩타이드 서열을 의미한다: 알라닌=A, 아르기닌=R, 아스파라긴=N, 아스파르트산=D, 아스파라긴 또는 아스파르트산=B, 시스테인=C, 글루탐산=E, 글루타민=Q, 글루타민 또는 글루탐산=Z, 글리신=G, 히스티딘=H, 이소류신=I, 류신=L, 리신=K, 메티오닌=M, 페닐알라닌=F, 프롤린=P, 세린=S, 트레오닌=T, 트립토판=W, 티로신=Y, 및 발린=V.
"작동 가능한"은 사용할 수 있는 능력, 어떤 것을 수행할 수 있는 능력 및/또는 일부 기능 또는 결과를 달성할 수 있는 능력을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "작동 가능한"은 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드, DNA 서열, RNA 서열, 또는 다른 뉴클레오타이드 서열 또는 유전자의 능력을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 단백질을 인코딩하도록 작동 가능할 수 있으며, 이는 폴리뉴클레오타이드에 단백질을 생성하는 능력(예를 들어, mRNA를 전사시켜, 결국 단백질로 번역시킴)을 부여하는 정보가 함유되어 있다는 것을 의미한다.
"작동 가능하게 연결된"은 이와 같이 설명된 구성요소들이 의도된 방식으로 기능하도록 허용하는 관계에 있는 병치(juxtaposition)를 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 작동 가능하게 연결된은 둘 이상의 DNA, 펩타이드 또는 폴리펩타이드 서열을 나타낼 수 있다. 다른 구현예에서, 작동 가능하게 연결된은, 하나의 DNA 서열의 전사 활성화가 다른 하나의 DNA 서열에 작용할 수 있도록 2개의 인접한 DNA 서열이 함께 배치되어 있는 것을 의미할 수 있다. 또 다른 구현예에서, "작동 가능하게 연결된"이라는 용어는, 둘 이상의 펩타이드 및/또는 폴리펩타이드가 단일 폴리펩타이드 사슬을 생성하는 방식으로 연결되어 있는 둘 이상의 펩타이드 및/또는 폴리펩타이드를 나타낼 수 있으며; 대안적으로, 작동 가능하게 연결된이라는 용어는, 하나의 펩타이드가 다른 하나의 펩타이드에 일부 영향을 미치는 방식으로 연결되어 있는 둘 이상의 펩타이드를 나타낼 수 있다. 또 다른 구현예에서, 작동 가능하게 연결된은, 하나의 전사 활성화가 다른 하나에 작용할 수 있도록 2개의 인접한 DNA 서열이 함께 배치되어 있는 것을 의미할 수 있다.
"ORF" 또는 "오픈 리딩 프레임"은 하나 이상의 폴리펩타이드 서열을 인코딩하는, 번역 개시 신호(예를 들어, 각각, AUG 또는 ATG)와 공지된 종결 코돈 중 임의의 하나 이상 사이에 있는 RNA 또는 DNA 서열의 길이를 나타낸다. 달리 말하면, ORF는, 리보솜이 종결 코돈과 만나지 않았기 때문에 판독(즉, 초기 단백질에 아미노산을 부가함)을 지속할 수 있는 한 RNA 코드를 번역하는 리보솜의 관점에서 본 참조 프레임을 설명한다. 따라서, "오픈 리딩 프레임" 또는 "ORF"는 코딩 서열의 번역 개시 코돈과 종결 코돈 사이에 인코딩된 아미노산 서열을 나타낸다. 본원에서, "개시 코돈"과 "종결 코돈"이라는 용어는, 각각, 단백질 합성(mRNA 번역)의 개시 및 사슬 종결을 지정하는 코딩 서열 내 3개의 인접한 뉴클레오타이드 단위(즉, 코돈)를 나타낸다.
일부 구현예에서, ORF는 개시 코돈(통상적으로 DNA의 경우 ATG, 및 RNA의 경우 AUG)으로 시작하여 종결 코돈(통상적으로 UAA, UAG 또는 UGA)으로 종결되는 코돈의 연속 스트레치이다. 다른 구현예에서, ORF는 번역 개시 신호(예를 들어, AUG 또는 ATG)와 공지된 종결 코돈 중 임의의 하나 이상 사이에 있는 RNA 또는 DNA 서열의 길이일 수 있으며, 여기서 상기 RNA 또는 DNA 서열의 길이는 하나 이상의 폴리펩타이드 서열을 인코딩한다. 일부 다른 구현예에서, ORF는 ATG 개시 코돈으로 시작하여 TGA, TAA 또는 태그 종결 코돈으로 종결되는 단백질을 인코딩하는 DNA 서열일 수 있다. ORF는 또한 DNA가 인코딩하는 번역된 단백질을 의미할 수 있다. 일반적으로, 당업자는 "오픈 리딩 프레임"의 가장 넓은 정의가 단순히 종결 코돈을 함유하지 않는 일련의 코돈을 고려한다는 사실에 기반하여, "오픈 리딩 프레임" 및 "ORF"라는 용어를 "코딩 서열"이라는 용어와 구별한다. 따라서, ORF는 인트론을 함유할 수 있지만, 코딩 서열은 리보솜 번역 기구에 의해 실제로 아미노산으로 번역되는 코돈으로 나뉠 수 있는 뉴클레오타이드(예를 들어, 연결된 엑손)를 참조로 구별되며(즉, 코딩 서열은 인트론을 함유하지 않음); 본원에 사용된 "코딩 서열"; "CDS"; "오픈 리딩 프레임"; 및 "ORF"라는 용어는 상호 교환적으로 사용된다.
"탈재조합된(out-recombined)" 또는 "탈재조합"은 생체내 상동 재조합 동안 2개의 부위 특이적 재조합 부위(예를 들어, 표적 벡터의 상동성 아암에 상동인 표적 유전자의 5'- 및 3'- 뉴클레오타이드 서열)가 플랭킹된 유전자 및/또는 폴리뉴클레오타이드 서열(예를 들어, 내인성 유전자)의 제거를 나타낸다. "녹아웃"을 참조한다.
"부포자(parasporal) 결정 독소"는 하나 이상의 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 단백질을 함유하는 이중 피라미드형 결정인, 부포자체 또는 부포자 결정의 일부인 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 단백질 중 임의의 것을 나타낸다. 부포자체 또는 부포자 결정이 곤충에 의해 섭취되는 경우, 이러한 독소 함유 부포자 결정은 알칼리성 장액에서 용해된 후, 독소전구물질의 중장 프로테아제를 통해 절단되어, 활성 펩타이드 독소, 예를 들어 δ-내독소를 생성한다.
"펩타이드 발현 카세트" 또는 "발현 카세트"는 생물학적 발현 시스템에서 살충 단백질의 전사를 완료하는 데 필요한 모든 DNA 요소로 구성된 DNA 서열을 의미한다. 본원에 기재된 방법에서, 이에는 전사 프로모터, α-교배 인자 신호 서열을 인코딩하는 DNA 서열, 절단 부위, 살충 단백질 전이유전자, 종결 코돈 및 전사 종결인자가 포함된다.
"펩타이드 발현 벡터"는 이종 펩타이드 전이유전자를 함유하는 숙주 유기체 발현 벡터를 의미한다.
"펩타이드 발현 효모 균주", "펩타이드 발현 균주" 또는 "펩타이드 생산 균주"는 이종 펩타이드를 생산할 수 있는 효모 균주를 의미한다.
"펩타이드-IA"는 아미노산, 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 단백질인 살충 작용제를 나타낸다.
"펩타이드 전이유전자" 또는 "살충 펩타이드 전이유전자" 또는 "살충 단백질 전이유전자"는 관심 펩타이드를 인코딩하고 생물학적 발현 시스템에서 번역될 수 있는 DNA 서열을 나타낸다.
"펩타이드 수율"은 펩타이드 발현 효모 균주의 세포로부터 생산된 조건화된 배지 내 살충 펩타이드 농도를 의미한다. 이는 부피 단위로 생성된 펩타이드의 질량, 예를 들어 리터 당 mg 또는 mg/L, 또는 HPLC 크로마토그래프에서 생성된 펩타이드의 UV 흡광도 피크 면적, 예를 들어 mAu.sec.로 표시될 수 있다.
"위식막(peritrophic membrane)"은 소화를 가능하게 하고 내장 벽도 보호하면서 내장을 통한 이동을 도울 수 있는, 대형 먹이 입자를 포획하는 곤충 내장 내부의 내층을 의미한다.
"해충"에는, 비제한적으로, 곤충, 진균, 박테리아, 선충, 응애, 진드기 등이 포함된다.
"살충 유효량"은 적어도 하나의 해충의 사멸을 유도할 수 있거나, 해충 성장, 섭식 또는 정상적인 생리학적 발달을 현저하게 감소시킬 수 있는 농약의 양을 나타낸다. 이러한 양은, 예를 들어 방제하고자 하는 특정 표적 해충, 처리하고자 하는 특정 환경, 위치, 식물, 작물 또는 농업 현장, 환경 조건, 및 살충 효과 폴리펩타이드 조성물의 적용 방법, 속도, 농도, 안정성 및 양과 같은 인자에 따라 달라질 것이다. 제형은 또한 기후 조건, 환경 고려사항 및/또는 적용 빈도 및/또는 해충 침입의 심각성에 따라 달라질 수 있다.
"약제학적으로 허용 가능한 염"은 농업적으로 허용 가능한 염과 동의어이며, 본원에서 이는 이의 산 또는 염기 염을 제조하는 방식으로 변형된 화합물을 나타낸다.
"식물"은 전체 식물, 식물 조직, 식물 기관(예를 들어, 잎, 줄기, 뿌리 등), 종자, 식물 세포, 번식체, 배아 및 이들의 자손을 의미할 수 있다. 식물 세포는 분화되거나 미분화될 수 있다(예를 들어, 캘러스(callus), 현탁 배양 세포, 원형질체, 잎 세포, 뿌리 세포, 체관부 세포 및 꽃가루).
"식물 유전자이식 단백질"은 이를 인코딩하는 DNA 또는 RNA가 하나 이상의 식물 세포 내로 전달된 후 식물에서 발현되는 이종 종 유래의 단백질을 의미한다.
"식물 절단 가능한 링커"는 식물 프로테아제 인식 부위를 함유하고 식물 세포에서 단백질 발현 과정 동안 절단될 수 있는, 절단 가능한 링커 펩타이드, 또는 절단 가능한 링커 펩타이드를 인코딩하는 뉴클레오타이드를 의미한다.
"식물 혼입 보호제" 또는 "PIP"는 유전자이식 식물에 의해 생성되는 살충 단백질, 및 식물이 단백질을 생산하는 데 필요한 유전 물질을 의미한다.
"플라스미드"는 관심 유전자에 대한 담체로 작용하며, 유기체로 형질전환되거나 트랜스펙션될 때, 숙주 유기체와 독립적으로 플라스미드 내에 함유된 DNA 서열을 복제하고 발현시킬 수 있는 DNA 분절을 나타낸다. 플라스미드는 벡터의 일종이며, "클로닝 벡터"(즉, DNA 단편을 클로닝하고 일부 선별 지시자를 통해 플라스미드를 운반하는 숙주 집단을 선별하는 데 사용되는 단순 플라스미드) 또는 "발현 플라스미드"(즉, 대량의 폴리뉴클레오타이드 및/또는 폴리펩타이드를 생산하는 데 사용되는 플라스미드)일 수 있다.
"극성 아미노산"은 극성인 아미노산으로, 이에는 세린, 트레오닌, 시스테인, 아스파라긴, 글루타민, 히스티딘, 트립토판 및 티로신이 포함되고; 바람직한 극성 아미노산은 세린, 트레오닌, 시스테인, 아스파라긴 및 글루타민이며; 여기서 세린이 가장 고도로 바람직하다.
"폴리뉴클레오타이드"는 임의의 길이의 뉴클레오타이드(예를 들어, 리보뉴클레오타이드, 데옥시리보뉴클레오타이드, 또는 이의 유사체)의 중합체 형태; 예를 들어 둘 이상의 리보뉴클레오타이드 또는 데옥시리보뉴클레오타이드의 서열을 나타낸다. 본원에 사용된 "폴리뉴클레오타이드"라는 용어는, 이중 및 단일 가닥 DNA뿐 아니라, 이중 및 단일 가닥 RNA를 포함하며; 이는 또한 폴리뉴클레오타이드의 변형된 및 미변형된 형태를 포함한다(폴리뉴클레오타이드에 대한 및 폴리뉴클레오타이드의 변형은, 예를 들어 메틸화, 인산화, 및/또는 캡핑을 포함할 수 있음). 일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 하기 중 하나일 수 있다: 유전자 또는 유전자 단편(예를 들어, 프로브, 프라이머, EST 또는 SAGE 태그); 게놈 DNA; 게놈 DNA 단편; 엑손; 인트론; 메신저 RNA(mRNA); 전달 RNA; 리보솜 RNA; 리보자임; cDNA; 재조합 폴리뉴클레오타이드; 분지형 폴리뉴클레오타이드; 플라스미드; 벡터; 임의의 서열의 단리된 DNA; 임의의 서열의 단리된 RNA; 핵산 프로브; 전술한 것들 중 임의의 것의 프라이머 또는 증폭된 카피.
또 다른 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 유전자의 오픈 리딩 프레임을 인코딩하도록 작동 가능한 뉴클레오타이드의 중합체 형태를 나타낼 수 있다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 cDNA를 나타낼 수 있다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 3차원 구조를 가질 수 있으며, 공지되거나 공지되지 않은 임의의 기능을 수행할 수 있다. 폴리뉴클레오타이드의 구조는 또한 폴리뉴클레오타이드의 방향성을 나타내는 5'- 또는 3'-단부 또는 말단에 의해 참조될 수 있다. 폴리뉴클레오타이드의 단일 가닥에서 인접한 뉴클레오타이드는 전형적으로 3' 탄소와 5' 탄소 사이의 포스포디에스테르 결합에 의해 연결된다. 하지만, 메틸렌, 포스포르아미데이트 연결 등을 포함하는 연결과 같은 상이한 뉴클레오타이드간 연결이 또한 사용될 수 있다. 이는, 각각의 5' 및 3' 탄소가 5' 및 3' 단부 또는 말단으로 불릴 수 있는 폴리뉴클레오타이드의 각 말단에 노출될 수 있음을 의미한다. 5' 및 3' 말단은 또한, 각각, 포스포릴(PO4) 및 히드록실(OH) 말단으로 불릴 수 있는 데, 이는 해당 말단에 이러한 화학기가 부착되어 있기 때문이다. 폴리뉴클레오타이드라는 용어는 또한 이중 가닥 분자와 단일 가닥 분자를 모두 나타낸다. 달리 명시되거나 요구되지 않는 한, 폴리뉴클레오타이드를 제조하거나 사용하는 임의의 구현예는, 이중 가닥 형태와, 이중 가닥 형태를 구성하는 것으로 알려져 있거나 예측되는 2개의 상보적 단일 가닥 형태 각각을 모두 포함한다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 변형된 뉴클레오타이드, 예컨대 메틸화된 뉴클레오타이드 및 뉴클레오타이드 유사체(비천연 염기를 갖는 뉴클레오타이드, 아자퓨린 또는 데아자 퓨린 등과 같은 변형된 천연 염기를 갖는 뉴클레오타이드 등 포함)를 포함할 수 있다. 존재하는 경우, 뉴클레오타이드 구조에 대한 변형은 폴리뉴클레오타이드의 조립 전 또는 후에 부여될 수 있다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 또한, 예컨대 표지화 구성요소와의 접합에 의해 중합 후 추가로 변형될 수 있다. 또한, 폴리뉴클레오타이드 내 뉴클레오타이드의 서열에 비뉴클레오타이드 구성요소가 개재될 수 있다. 폴리뉴클레오타이드의 하나 이상의 말단은 해당 말단이 다른 폴리뉴클레오타이드와 특정한 방식으로 상호작용하는 것(예를 들어, 공유결합을 형성함)을 방지하기 위해 보호되거나 달리 변형될 수 있다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 하기 4가지 뉴클레오타이드 염기의 특정 서열로 구성될 수 있다: 아데닌(A); 시토신(C); 구아닌(G); 및 티민(T). 예를 들어, 폴리뉴클레오타이드가 RNA인 경우 티민에 대한 천연 대체물로 우라실(U)이 또한 존재할 수 있다. 우라실은 DNA에서도 사용될 수 있다. 따라서, "서열"이라는 용어는, 천연 및 비천염 염기를 포함하는 폴리뉴클레오타이드 또는 임의의 핵산 분자의 알파벳 표시를 나타낸다.
"RNA 분자" 또는 리보핵산 분자라는 용어는, 데옥시리보오스 당보다는 리보오스 당, 및 전형적으로 피리미딘 염기 중 하나로서 티민보다는 우라실을 갖는 폴리뉴클레오타이드를 나타낸다. 본 발명의 RNA 분자는 일반적으로 단일 가닥이지만, 이중 가닥일 수도 있다. RNA 샘플의 RNA 분자의 맥락에서, RNA 분자는 이것이 전사되는 DNA 가닥과 상보적인 뉴클레오타이드 염기의 선형 서열을 갖는, 세포 핵, 미토콘드리아 또는 엽록체에서 DNA로부터 전사되는 단일 가닥 분자를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 하나 이상의 이종 조절 요소를 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 조절 요소는 하나 이상의 프로모터; 인핸서; 사일런서(silencer); 작동인자; 스플라이싱 신호; 폴리아데닐화 신호; 종결 신호; RNA 방출 요소, 내부 리보솜 진입 부위(IRES); poly-U 서열; 또는 이들의 조합이다.
"전사 후 유전자 침묵" 또는 "PTGS"는 유전자의 발현을 억제하는 살아있는 세포에서의 세포 과정을 의미한다.
"전사 후 조절 요소"는 전사된 후 mRNA에 영향을 미치는 DNA 분절 및/또는 메커니즘이다. 전사 후 메커니즘에는, 스플라이싱 사건, 캡핑, Poly (A) 테일의 부가, 및 당업자에게 공지된 다른 메커니즘이 포함된다.
"프로모터"는 RNA 폴리머라아제가 결합하여 유전자의 전사를 개시하는 DNA의 영역을 나타낸다.
"단백질"은 본 명세서에서"펩타이드" 및/또는 "폴리펩타이드"와 동일한 의미를 갖는다.
"비율"은 하나의 값이 다른 값을 함유하거나 다른 값에 포함되는 횟수를 나타내는 2개의 양 사아의 정량적 관계를 나타낸다.
"리딩 프레임"은 이중 가닥 DNA 분자의 6개의 가능한 리딩 프레임 중 하나(각 방향으로 3개)를 나타낸다. 사용되는 리딩 프레임은 어떠한 코돈이 DNA 분자의 코딩 서열 내에서 아미노산을 인코딩하는 데 사용되는 지를 결정한다. 일부 구현예에서, 리딩 프레임은 폴리뉴클레오타이드 및/또는 핵산(예를 들어, DNA 또는 RNA)에서 뉴클레오타이드의 서열을 연속적인 비중첩 삼중항 세트로 분할하는 방식이다.
"재조합 DNA" 또는 "rDNA"는 둘 이상의 상이한 DNA 분절로 구성된 DNA를 나타낸다.
"재조합 벡터"는 외래 DNA가 삽입된 DNA 플라스미드 벡터를 의미한다.
"조절 요소"는 핵산 서열의 발현 및/또는 처리의 일부 양태를 제어하는 유전 요소를 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 조절 요소는 전사 시 및 전사 후 수준에서 발견될 수 있다. 조절 요소는 시스-조절 요소(CRE) 또는 트랜스-조절 요소(TRE)일 수 있다. 일부 구현예에서, 조절 요소는 하나 이상의 프로모터; 인핸서; 사일런서; 작동인자; 스플라이싱 신호; 폴리아데닐화 신호; 종결 신호; RNA 방출 요소, 내부 리보솜 진입 부위(IRES); poly-U 서열; 및/또는 예를 들어 발현을 증가 또는 감소시키고/시키거나 구성적 발현을 유도하기 위해 조직 특이적 방식으로; 시간 의존적 방식으로 유전자 발현에 영향을 미치는 다른 요소일 수 있다.
"제한 효소" 또는 "제한 엔도뉴클레아제"는 특정 제한 부위에서 DNA를 절단하는 효소를 나타낸다. 예를 들어, 제한 효소는 EcoRI, SacII 또는 BstXI 제한 부위에서 플라스미드를 절단하여 플라스미드가 선형화되게 하고, 관심 DNA가 결찰되게 할 수 있다.
"제한 부위"는 4개 내지 8개의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 DNA 상의 위치를 나타내며, 이의 서열은 특정 제한 효소에 의해 인식된다.
"살라닌(salannin)"은 살충 활성을 갖는 아자디라크타 인디카에서 단리된 화학적 화합물을 나타낸다. 일부 구현예에서, 살라닌의 분자식은 C34H44O9이고, 분자량은 596.7 g/mol이다.
"말미잘"은 악티니아리아(Actiniaria) 목의 해양 동물 군을 나타낸다. 말미잘은 다수의 말미잘이 보유하는 다채로운 색상의 외관으로 인해, 육생 현화 식물인 아네모네의 이름을 따서 명명되었다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 말미잘은 하기 종 중 하나이다: 악티니아 에퀴나(Actinia equina); 아네모니아 에리트라에아(Anemonia erythraea); 아네모니아 술카타; 아네모니아 비리디스; 안토플레우라 엘레간티시마(Anthopleura elegantissima); 안토플레우라 푸스코비리디스(Anthopleura fuscoviridis); 안토플레우라 잔토그라미카(Anthopleura xanthogrammica); 부노도소마 카이사룸(Bunodosoma caissarum); 부노도소마 칸기쿰; 부노도소마 그라눌리페라(Bunodosoma granulifera); 헤테락티스 크리스파(Heteractis crispa); 파라시시오니스 악티노스톨로이데스(Parasicyonis actinostoloides); 라디안투스 파우모텐시스(Radianthus paumotensis); 또는 스토이칵티스 헬리안투스(Stoichactis helianthus).
"선택 유전자"는 유전적으로 변형된 유기체가 선택적 압력 하에서 성장할 수 있는 이점을 부여하는 유전자를 의미한다.
"혈청형(serovar 또는 serotype)"은 특징적인 항원 세트에 의해 구별되는 밀접하게 관련된 미생물의 그룹을 나타낸다. 일부 구현예에서, 혈청형은 항원적으로 및 혈청학적으로 구별되는 다양한 미생물이다.
"sp."는 종(species)을 나타낸다.
"ssp." 또는 "subsp."는 아종(subspecies)을 나타낸다.
"서브클로닝" 또는 "서브클로닝된"은 하나의 벡터에서 또 다른, 통상적으로 유리한 벡터로 DNA를 전달하는 과정을 나타낸다. 예를 들어, 돌연변이체 또는 펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 pKLAC1 플라스미드로 형질전환된 효모 콜로니의 선택 후 pKlac1 플라스미드에 서브클로닝될 수 있다.
"SSI"는 맥락에 따라 달라지는 두문자어이다. 일부 맥락에서, 이는, 생체내 상동 재조합이 숙주 유기체의 게놈 내 특정 부위에서 일어나는 것을 가능하게 하는 서열을 나타내는 데 사용되는 "부위 특이적 통합(site-specific integration)"을 나타낼 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서, "부위 특이적 통합"이라는 용어는, 전이유전자를 숙주 유기체의 게놈 내 표적 부위로 지시하여, 관심 유전자를 숙주 유기체의 사전 선택된 게놈 위치로 통합시킬 수 있는 과정을 나타낸다. 하지만, 다른 맥락에서, SSI는 벽, 창문, 바닥 및 천장과 같이 매개체가 존재하는 표면에 가변적인 분무 가능한 부피의 살충제를 분무하는 기술인 "실내 표면 분무(surface spraying indoor)"를 나타낼 수 있다.
"STA" 또는 "번역 안정화 단백질" 또는 "안정화 도메인" 또는 "안정화 단백질"(본원에서 상호 교환적으로 사용됨)은 단백질 분해의 세포 과정에 의해 표적화되지 않고 세포에 축적될 수 있는 충분한 3차 구조를 갖는 펩타이드 또는 단백질을 의미한다. 단백질의 길이는 5개 내지 50개 아미노산일 수 있다. 번역 안정화 단백질은 ORF에서 살충 단백질 또는 CRIP를 인코딩하는 서열에 작동 가능하게 연결된 단백질에 대한 DNA 서열에 의해 코딩된다. 작동 가능하게 연결된 STA는 CRIP의 업스트림 또는 다운스트림에 존재할 수 있으며, 이는 개재 서열이 DNA 서열 중 임의의 것의 프레임 시프트를 유도하지 않는 한 2개의 서열(STA 및 CRIP) 사이에 임의의 개재 서열을 가질 수 있다. 번역 안정화 단백질은 또한 내장 벽을 가로질러 곤충의 혈림프 내로 CRIP의 전달을 증가시키는 활성을 가질 수 있다.
"sta"는 번역 안정화 단백질을 인코딩하는 뉴클레오타이드를 의미한다.
"구조 모티프"는 펩타이드 및/또는 폴리펩타이드의 3차원 배열, 및/또는 작동 가능하게 연결된 폴리펩타이드 분절의 배열을 나타낸다. 예를 들어, ERSP 모티프, STA 모티프, 링커 모티프 및 CRIP 폴리펩타이드 모티프를 갖는 폴리펩타이드는 ERSP-STA-L-CRIP의 모든 "구조 모티프"를 갖는다. 또한, "CRIP 구조체"를 참조한다.
"Ta1b" 또는 "U1-아가톡신-Ta1b" 또는 "Ta1bWT" 또는 "야생형 U1-아가톡신-Ta1b"는 호보(Hobo) 거미, 에라티게나 아그레스티스(Eratigena agrestis)에서 단리된 폴리펩타이드를 나타낸다. U1-아가톡신-Ta1b의 하나의 예는 서열번호 1(NCBI 수탁번호 O46167.1)의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드이다.
"Ta1b 변이체 폴리뉴클레오타이드" 또는 "U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리뉴클레오타이드"는 하나 이상의 TVP를 포함하는 살충 단백질을 발현 및/또는 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드의 그룹을 나타낸다. "U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리뉴클레오타이드"라는 용어는, 벡터 내 내포물인 TVP 발현 ORF 내 함유된 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리뉴클레오타이드 서열을 설명하기 위해 사용되는 경우, 및/또는 살충 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 설명하는 경우, "tvp" 및/또는 "Tvp"로 기재된다.
"독소"는 독액 및/또는 독, 특히 특정 동물, 고등 식물 및 병원성 박테리아에 의해 생산된 단백질 또는 접합된 단백질을 나타낸다. 일반적으로, "독소"라는 용어는 천연 생성물, 예를 들어 전갈, 거미, 뱀, 독버섯 등에서 발견되는 분자 및 펩타이드에 대한 것이지만, "독물"이라는 용어는 사람이 만든 생성물 및/또는 인공 생성물, 예를 들어 사람이 만든 화학 농약에 대한 것이다. 하지만, 본원에 사용된 "독소" 및 "독물"이라는 용어는 동의어로 사용된다.
"트랜스펙션"과 "형질전환"은 모두 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA(예를 들어, CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 함유하는 벡터)를 숙주 유기체(예를 들어, 원핵생물 또는 진핵생물)에 도입하는 과정을 나타낸다. 일반적으로, 당업자는 때때로 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA가 박테리아 세포에 도입되는 과정을 설명하기 위해 "형질전환"이라는 용어를 사용하고; 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA를 진핵생물 세포에 도입하는 것을 설명하는 과정에 대해 "트랜스펙션"이라는 용어를 사용한다. 하지만, 본원에 사용된 "형질전환"과 "트랜스펙션"이라는 용어는, 과정이 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA를 원핵생물(예를 들어, 박테리아) 또는 진핵생물(예를 들어, 효모, 식물 또는 동물)에 도입하는 것을 설명하는 지에 관계없이, 동의어로 사용된다.
"전이유전자"는 식물로 형질전환되는 단백질을 인코딩하는 이종 DNA 서열을 의미한다.
"유전자이식 숙주 세포"는 유전자로 형질전환되고, 추가적인 선택 유전자를 통해 유전자이식 상태에 대해 선택된 세포를 의미한다.
"유전자이식 식물"은 식물의 모든 세포가 해당 전이유전자를 함유하도록 외래 DNA로 형질전환된 단일 세포에서 유도된 식물을 의미한다.
"일시적 발현 시스템"은 무장 해제된(disarmed) 식물 바이러스를 인코딩하는 DNA를 이것이 발현되는 식물 세포에 전달하는 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) 기반 시스템을 의미한다. 식물 바이러스는 TSP의 최대 40%인 고농도에서 관심 단백질을 발현하도록 조작되었다.
"삼중 발현 카세트"는 동일한 벡터에 함유된 3개의 CRIP 발현 카세트를 나타낸다.
"TRBO"는 바이러스 코팅 단백질 유전자가 제거된 담배 모자이크 바이러스를 사용하는 일시적 식물 발현 시스템을 의미한다.
"TSP" 또는 "총 가용성 단백질"은 식물 조직 샘플에서 추출되어 추출 완충액에 가용화될 수 있는 단백질의 총량을 의미한다.
"TVP" 또는 "U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)" 또는 "Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)"는, 비자연 발생 폴리펩타이드 및/또는 폴리뉴클레오타이드 서열을 생성하도록 변경된, 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 폴리펩타이드 서열 및/또는 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열의 돌연변이체 또는 변이체를 나타낸다. 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 예시적인 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 폴리펩타이드 서열이 본원에 제공된다. 신호 서열 "MKLQLMICLVLLPCFFC"(서열번호 59)을 포함하는 서열번호 48(NCBI 수탁번호 O46167.1)의 아미노산 서열을 갖는 예시적인 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 전구체 폴리펩타이드 서열이 본원에 제공된다. 일부 구현예에서, TVP는 표 1에 열거된 아미노산 서열 중 임의의 것에 따른 아미노산 서열을 가질 수 있다. 따라서, "TVP"라는 용어는, 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 대해 하나 이상의 돌연변이를 갖는 펩타이드를 나타낸다. 일부 구현예에서, TVP는 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열을 가질 수 있다:
E-P-D-E-I-C-R-X
1
-X
2
-M-X
3
-N-K-E-F-T-Y-X
4
-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X
5
-N-D-V-Y-Z
1
-A-C-H-E-A-Q-X
6
-X
7
화학식 (I)
여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않음.
일부 구현예에서, TVP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열을 가질 수 있다:
E-P-D-E-I-C-R-A-X
1
-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z
1
-A-C-H-E-A-Q-K-G
화학식 (II)
여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A임.
"U-ACTX-Hv1a" 또는 "하이브리드 펩타이드" 또는 "하이브리드 독소" 또는 "하이브리드-ACTX-Hv1a" 또는 "천연 하이브리드 ACTX-Hv1a" 또는 "U 펩타이드" 또는 "U 독소" 또는 "천연 U" 또는 "천연 U-ACTX-Hv1a"는, 모두 호주 블루마운틴 깔대기 그물 거미, 하드로니케 베르수타로 알려진 거미에서 발견된 ACTX 펩타이드를 나타낸다. U-ACTX-Hv1a는 니코틴성 아세틸콜린 수용체의 양성 알로스테릭 조절제이며, 이는 또한 곤충 전압 개폐형 Ca2+ 채널과 전압 개폐형 K+ 채널에 대한 이중 안타고니스트일 수 있다. 문헌[Chambers et al., Insecticidal spider toxins are high affinity positive allosteric modulators of the nicotinic acetylcholine receptor. FEBS Lett. 2019 Jun; 593(12):1336-1350]; 및 문헌[Windley et al., Lethal effects of an insecticidal spider venom peptide involve positive allosteric modulation of insect nicotinic acetylcholine receptors. Neuropharmacology. 2017 Dec; 127:224-242] 참조(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨). 예시적인 U-ACTX-Hv1a 펩타이드는 서열번호 60에 제공되어 있다.
"U+2 펩타이드" 또는 "U+2 단백질" 또는 "U+2 독소" 또는 "U+2" 또는 "U+2-ACTX-Hv1a" 또는 "Spear"는 모두 천연 펩타이드에 작동 가능하게 연결된 추가의 디펩타이드를 갖는 U-ACTX-Hv1a를 나타낸다. U 펩타이드에 작동 가능하게 연결된 추가의 디펩타이드는 "+2" 또는 "플러스 2"로 표시되며, 본원에 논의된 고유한 특성을 갖는 "U+2 펩타이드"를 생성할 수 있는 몇 가지 펩타이드 중에서 선택될 수 있다. 일부 바람직한 구현예에서, 디펩타이드는 "GS"이며; 예시적인 U+2-ACTX-Hv1a 펩타이드는 서열번호 61에 제시되어 있다.
"UBI"는 유비퀴틴을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, UBI는 제아 메이스(Zea mays)에서 단리된 유비퀴틴 단량체를 나타낼 수 있다.
"var."는 품종(varietas) 또는 변종을 나타낸다. "var."라는 용어는 종 수준 및/또는 아종(존재하는 경우) 아래에 있는 분류 범주를 나타내는 데 사용된다. 일부 구현예에서, "var."라는 용어는, 미미하지만 영구적이거나 유전 가능한 특징이 동일한 아종 또는 종의 다른 구성원과 상이한 구성원을 나타낸다.
"변이체" 또는 "변이체 서열" 또는 "변이체 펩타이드"는 하나 이상의 보존적 아미노산 치환 또는 보존적 변형을 보유하는 아미노산 서열을 나타낸다. "변이체"에서 보존적 아미노산 치환은 변이가 없는 형태와 비교하여 변이체의 활성을 실질적으로 감소시키지 않는다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "변이체"는 서열번호로 표시된 바와 같이, 개시된 및/또는 청구된 서열을 갖는 펩타이드와 비교할 때 하나 이상의 보존적 아미노산 치환을 보유한다.
"벡터"는 관심 외래 유전자(예를 들어, crip)를 수용하는 DNA 분절을 나타내다. 관심 유전자는 "삽입물" 또는 "전이유전자"로 공지되어 있다.
"Vip" 또는 "VIP" 또는 "식물생장 살충 단백질"은 식물생장으로 성장된 Bt 균주의 상청액을 가능한 살충 활성에 대해 스크리닝하여 발견된 단백질을 나타낸다. Vip는 Cry 단백질과 유사성이 없거나 거의 없다. 본 문헌에서 특히 및 우선적으로 사용되는 것은 인시목 활성을 갖는 VIP3 또는 Vip3 단백질이라고 불리는 것이다. Vip는 Bt cry 펩타이드와 유사한 작용 방식을 갖는 것으로 여겨진다.
"유리화"는 물질을 유리와 같은 비정질 물질로 전환시키는 과정을 나타낸다. 유리와 같은 비정질 고체는 임의의 결정질 구조가 없을 수 있다. 유리질 고체의 고체화는 유리 전이 온도(Tg)에서 일어난다.
"야생형" 또는 "WT"는 자연 발생 상태 또는 조건에서 발견 및/또는 관찰된 바와 같은, 유기체, 폴리뉴클레오타이드 서열 및/또는 폴리펩타이드 서열의 표현형 및/또는 유전형(즉, 외관 또는 서열)을 나타낸다.
"효모 발현 벡터" 또는 "발현 벡터" 또는 "벡터"는 이종 유전자 및/또는 발현 카세트를 효모 세포에 도입하여 전사 및 번역되게 할 수 있는 플라스미드를 의미한다.
"수율"은 펩타이드의 생산을 나타내며, 증가된 수율은 증가된 생산량, 증가된 생산 속도, 증가된 평균 수율 또는 수율 중간값, 및 더 높은 수율의 증가된 빈도를 의미할 수 있다. "식물의 수율"에서와 같이 식물 작물 성장 및/또는 생산과 관련하여 사용될 때 "수율"이라는 용어는, 식물에 의해 생산된 바이오매스의 질 및/또는 양을 나타낸다.
본 명세서 전반에 걸쳐, 달리 구체적으로 언급되지 않거나 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 단일 단계, 물질의 조성, 단계들의 그룹 또는 물질의 조성들의 그룹에 대한 언급은, 하나 및 복수(즉, 하나 이상)의 단계, 물질의 조성, 단계들의 그룹 또는 물질의 조성들의 그룹을 포함하는 것으로 간주되어야 한다.
본 개시내용은, 달리 지시되지 않는 한, 분자 생물학, 미생물학, 바이러스학, 재조합 DNA 기술, 고체상 및 액체 핵산 합성, 용액 중 펩타이드 합성, 고체상 펩타이드 합성, 면역학, 세포 배양 및 제형에 대한 통상적인 기술을 사용하여 과도한 실험 없이 수행된다. 이러한 절차는, 예를 들어 하기 문헌에 기재되어 있다: 문헌[Sambrook, Fritsch & Maniatis, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, New York, Second Edition (1989)] Vol I, II 및 III 전체; 문헌[DNA Cloning: A Practical Approach, Vols. I and II (D. N. Glover, ed., 1985), IRL Press, Oxford] 본문 전체; 문헌[Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach (M. J. Gait, ed, 1984) IRL Press, Oxford] 본문 전체, 및 특히 그 안의 Gait의 논문, pp1-22; Atkinson 등의 논문, pp35-81; Sproat 등의 논문, pp 83-115; 및 Wu 등의 논문, pp 135-151; 문헌[4. Nucleic Acid Hybridization: A Practical Approach (B. D. Hames & S. J. Higgins, eds., 1985) IRL Press, Oxford] 본문 전체; 문헌[Immobilized Cells and Enzymes: A Practical Approach (1986) IRL Press, Oxford] 본문 전체; 문헌[Perbal, B., A Practical Guide to Molecular Cloning (1984)]; 문헌[Methods In Enzymology (S. Colowick and N. Kaplan, eds., Academic Press, Inc.)] 시리즈 전체; 문헌[J. F. Ramalho Ortigao, "The Chemistry of Peptide Synthesis" In: Knowledge database of Access to Virtual Laboratory website (Interactiva, Germany)]; 문헌[Sakakibara, D., Teichman, J., Lien, E. Land Fenichel, R. L. (1976). Biochem. Biophys. Res. Commun. 73 336-342]; 문헌[Merrifield, R. B. (1963). J. Am. Chem. Soc. 85, 2149-2154]; 문헌[Barany, G. and Merrifield, R. B. (1979) in "The Peptides" (Gross, E. and Meienhofer, 3. eds.), vol. 2, pp. 1-284, Academic Press, New York. 12. Wiinsch, E., ed. (1974)]; 문헌[Synthese von Peptiden in Houben-Weyls Metoden der Organischen Chemie (Muler, E., ed.), vol. 15, 4th ed., Parts 1 and 2, Thieme, Stuttgart]; 문헌[Bodanszky, M. (1984) Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Heidelberg]; 문헌[Bodanszky, M. & Bodanszky, A. (1984) The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Heidelberg]; 문헌[Bodanszky, M. (1985) Int. J. Peptide Protein Res. 25, 449-474]; 문헌[Handbook of Experimental Immunology, Vols. I-IV (D. M. Weir and C. C. Blackwell, eds., 1986, Blackwell Scientific Publications)]; 및 문헌[Animal Cell Culture: Practical Approach, Third Edition (John R. W. Masters, ed., 2000)](이러한 참고문헌은 각각 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
본 명세서 전반에 걸쳐, 문맥상 달리 요구되지 않는 한, "포함하다"라는 단어와 "포함하는" 등과 같은 이의 변형은, 명시된 단계 또는 요소 또는 정수, 또는 단계들 또는 요소들 또는 정수들의 그룹을 포함한다는 것을 의미하지만, 임의의 다른 단계 또는 요소 또는 정수, 또는 단계들 또는 요소들 또는 정수들의 그룹을 배제하지 않는 것으로 이해될 것이다.
본원에 언급된 모든 특허 출원, 특허 및 인쇄된 간행물은, 각각의 개별 간행물, 특허 또는 특허 출원의 전문이 참조로 인용되는 것으로서 구체적으로 및 개별적으로 표시된 바와 동일한 정도로 그 전문이 본원에 참조로 인용된다. 그리고, 본원에 인용된 모든 특허 출원, 특허 및 인쇄된 간행물은, 임의의 정의, 주제 면책조항 또는 부정을 제외하고, 포함된 자료가 본원의 명시적 개시내용과 일치하지 않는 범위(이러한 경우 본 개시내용의 언어가 우선함)를 제외하고, 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
시스테인 풍부 살충 단백질(CRIP)
본 발명은 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 제공한다. 몇 가지 유형의 CRIP가 본원에서 고려되고 교시된다. 본 발명의 살충 작용제(IA)와 조합으로 사용될 수 있는 본 발명의 CRIP는 하기에 상세하게 설명되어 있다. 본 발명의 조합물에 적합하고 하기에서 고려되는 모든 CRIP는 CRIP-살충 단백질을 포함한다.
거미 펩타이드 및 독소
일부 구현예에서, CRIP는 하기 중 하나에서 단리된 거미 독소 펩타이드 또는 단백질일 수 있다: 포네우트리아 니그리벤테르; 알라겔레나 오풀렌타(Allagelena opulenta); 쿠피에니우스 살레이(Cupiennius salei); 플렉트레우리스 트리스티스(Plectreurys tristis); 코레미오크네미스 발리다(Coremiocnemis valida); 하플로펠마 후웨눔(Haplopelma huwenum); 아겔레나 오리엔탈리스(Agelena orientalis); 알라겔레나 오풀렌타; 세게스트리아 플로렌티나(Segestria florentina); 아포마스투스 슈린게리(Apomastus schlingeri); 포네우트리아 케이세린기(Phoneutria keyserlingi); 마크로텔레 기가스(Macrothele gigas); 마크로텔레 라베니(Macrothele raveni); 미술레나 브라들레이(Missulena bradleyi); 피레네이테가 룩투오사(Pireneitega luctuosa); 포네우트리아 레이디(Phoneutria reidyi); 일라와라 위샤르티(Illawara wisharti); 유크라토셀루스 콘스트릭투스(Eucratoscelus constrictus); 아겔레놉시스 아페르타(Agelenopsis aperta); 홀로레나 쿠르타(Hololena curta); 옥시오페스 리네아투스(Oxyopes lineatus); 브라키펠마 알비셉스(Brachypelma albiceps); 또는 브라키펠마 스미티(Brachypelma smithi).
일부 구현예에서, CRIP는 하드로니케 베르수타, 또는 블루마운틴 깔대기 그물 거미, 하드로니케 베네나타(Hadronyche venenata), 아트락스 로부스투스(Atrax robustus), 아트락스 포르미다빌리스(Atrax formidabilis) 또는 아트락스 인펜수스(Atrax infensus)에서 단리될 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP는 하기 거미 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 독소 중 임의의 것일 수 있다: U+2-ACTX-Hv1a; Γ-CNTX-Pn1a; U13-크테니톡신(ctenitoxin)-Pn1a, U13-크테니톡신-Pn1b, U13-크테니톡신-Pn1c, U1-아가톡신-Aop1a, U1-크테니톡신-Cs1a, U1-네메톡신(nemetoxi)-Csp1a, U1-네메톡신-Csp1b, U1-네메톡신-Csp1c, U1-플레크톡신(plectoxin)-Pt1a, U1-플레크톡신-Pt1b, U1-플레크톡신-Pt1c, U1-플레크톡신-Pt1d, U1-플레크톡신-Pt1f, U1-테라포톡신(theraphotoxin)-Cv1a, U1-테라포톡신-Hh1a_1, U1-테라포톡신-Hh1a_2, U1-테라포톡신-Hh1a_3, U1-테라포톡신-Hh1b, U1-테라포톡신-Hh1c_1, U1-테라포톡신-Hh1c_2, U1-테라포톡신-Hh1d, U1-테라포톡신-Hh1e, U1-테라포톡신-Hh1f_1, U1-테라포톡신-Hh1f_2, U1-테라포톡신-Hh1f_3, U1-테라포톡신-Hh1f_4, U1-테라포톡신-Hh1g, U2-아가톡신-Ao1a, U2-아가톡신-Aop1a, U2-크테니톡신-Cs1a, U2-크테니톡신-Pn1a, U2-시르타우톡신(cyrtautoxin)-As1a, U2-세게스트리톡신(segestritoxin)-Sf1a, U2-세게스트리톡신-Sf1b, U2-세게스트리톡신-Sf1c, U2-세게스트리톡신-Sf1d, U2-세게스트리톡신-Sf1e, U2-세게스트리톡신-Sf1f, U2-세게스트리톡신-Sf1g, U2-세게스트리톡신-Sf1h, U2-테라포톡신-Hh1a, U3-시르타우톡신-As1a, U3-플레크톡신-Pt1a, U5-크테니톡신-Pn1a, U7-크테니톡신-Pk1a, β-헥사톡신(hexatoxin)-Mg1a, β-헥사톡신-Mr1a, Γ-크테니톡신-Pn1a, δ-악티노포디톡신(actinopoditoxin)-Mb1a, δ-아마우로비톡신(Amaurobitoxin)-Pl1a, δ-아마우로비톡신-Pl1b, δ-아마우로비톡신-Pl1c, δ-아마우로비톡신-Pl1d, δ-크테니톡신-Asp2e, δ-크테니톡신-Pn1a_1, δ-크테니톡신-Pn1a_2, δ-크테니톡신-Pn1b, δ-크테니톡신-Pn2a, δ-크테니톡신-Pn2b, δ-크테니톡신-Pn2cδ-크테니톡신-Pr2d, δ-헥사톡신-Ar1a, δ-헥사톡신-Hv1a, δ-헥사톡신-Hv1b, δ-헥사톡신-Iw1a, δ-헥사톡신-Mg1a, δ-헥사톡신-Mg1b, κ-헥사톡신-Hf1a, κ-헥사톡신-Hv1a, κ-헥사톡신-Hv1b, κ-헥사톡신-Hv1c_1, κ-헥사톡신-Hv1c_2, κ-헥사톡신-Hv1c_3, κ-헥사톡신-Hv1c_4, κ-헥사톡신-Hv1d, κ-헥사톡신-Hv1e, κ-테라포톡신-Ec2a, κ-테라포톡신-Ec2b, μ-아가톡신-Aa1a, μ-아가톡신-Aa1b, μ-아가톡신-Aa1c, μ-아가톡신-Aa1d, μ-아가톡신-Aa1e, μ-아가톡신-Aa1f, μ-아가톡신-Hc1a, μ-아가톡신-Hc1b, μ-아가톡신-Hc1c, μ-헥사톡신-Mg1a, μ-헥사톡신-Mg1b, μ-헥사톡신-Mg1c, μ-헥사톡신-Mg2a, μ-테라포톡신-Hh1a, ω-악티노포디톡신-Mb1a, ω-아가톡신-Aa4a, ω-아가톡신-Aa4b, ω-아가톡신-Aa4c, ω-헥사톡신-Ar1a_1, ω-헥사톡신-Ar1a_3, ω-헥사톡신-Ar1b_1, ω-헥사톡신-Ar1d_1, ω-헥사톡신-Ar1d_4, ω-헥사톡신-Ar1e_1, ω-헥사톡신-Ar1f, ω-헥사톡신-Ar1g_1, ω-헥사톡신-Ar1h, ω-헥사톡신-Ar2a, ω-헥사톡신-Ar2b, ω-헥사톡신-Ar2c, ω-헥사톡신-Ar2d, ω-헥사톡신-Ar2e_1, ω-헥사톡신-Ar2e_2, ω-아트라코톡신-Asp2a, ω-헥사톡신-Asp2b, ω-헥사톡신-Hf1a, ω-헥사톡신-Hi1a_1, ω-헥사톡신-Hi1a_2, ω-헥사톡신-Hi1a_3, ω-헥사톡신-Hi1b_1, ω-헥사톡신-Hi1b_10, ω-헥사톡신-Hi1b_2, ω-헥사톡신-Hi1b_5, ω-헥사톡신-Hi1b_8, ω-헥사톡신-Hi1c_1, ω-헥사톡신-Hi1c_2, ω-헥사톡신-Hv1a, ω-헥사톡신-Hv1b, ω-헥사톡신-Hv1c, ω-헥사톡신-Hv1d, ω-헥사톡신-Hv1e, ω-헥사톡신-Hv1f, ω-헥사톡신-Hv1g_1, ω-헥사톡신-Hv1g_5, ω-헥사톡신-Hv1g_6, ω-헥사톡신-Hv2a, ω-헥사톡신-Hv2b_1, ω-헥사톡신-Hv2b_2, ω-헥사톡신-Hv2b_3, ω-헥사톡신-Hv2b_4, ω-헥사톡신-Hv2b_5, ω-헥사톡신-Hv2b_6, ω-헥사톡신-Hv2b_7, ω-헥사톡신-Hv2c, ω-헥사톡신-Hv2d_1, ω-헥사톡신-Hv2d_2, ω-헥사톡신-Hv2d_3, ω-헥사톡신-Hv2e, ω-헥사톡신-Hv2f, ω-헥사톡신-Hv2g, ω-헥사톡신-Hv2h_1, ω-헥사톡신-Hv2h_2, ω-헥사톡신-Hv2i, ω-헥사톡신-Hv2j_1, ω-헥사톡신-Hv2j_2, ω-헥사톡신-Hv2k, ω-헥사톡신-Hv2l, ω-헥사톡신-Hv2m_1, ω-헥사톡신-Hv2m_2, ω-헥사톡신-Hv2m_3, ω-헥사톡신-Hv2n, ω-헥사톡신-Hv2o, ω-헥사톡신-Hvn1a, ω-헥사톡신-Hvn1b_1, ω-헥사톡신-Hvn1b_2, ω-헥사톡신-Hvn1b_3, ω-헥사톡신-Hvn1b_4, ω-헥사톡신-Hvn1b_6, ω-헥사톡신-Iw2a, ω-옥소톡신(oxotoxin)-Ol1b, ω-플레크톡신-Pt1a, ω-테라포톡신-Asp1a, ω-테라포톡신-Asp1f, ω-테라포톡신-Asp1g, ω-테라포톡신-Ba1a, ω-테라포톡신-Ba1b, ω-테라포톡신-Bs1a, ω-테라포톡신-Bs2a 또는 ω-테라포톡신-Hh2a.
일부 구현예에서, CRIP는 서열번호 192 내지 278 및 281 내지 370 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 거미 독소 펩타이드 또는 단백질일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 192 내지 278 및 281 내지 370에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 CRIP를 인코딩할 수 있다.
ACTX 펩타이드
일부 구현예에서, CRIP는 ACTX 펩타이드일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP는 하기 ACTX 펩타이드 중 하나 이상일 수 있다: U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, rκ-ACTX-Hv1c, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω-ACTX-Hv1a+2.
예시적인 ACTX 펩타이드에는, 하기가 포함된다: 아미노산 서열 "QYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 60)을 갖는 U-ACTX-Hv1a; 아미노산 서열 "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a; 아미노산 서열 "SPTCIPSGQPCPYNENCCSQSCTFKENENGNTVKRCD"(서열번호 62)을 갖는 오메가-ACTX-Hv1a; 아미노산 서열 "GSSPTCIPSGQPCPYNENCCSQSCTFKENENGNTVKRCD"(서열번호 63)을 갖는 "ω+2-ACTX-Hv1a+2"(또는 오메가+2-ACTX-Hv1a); 및 아미노산 서열 "GSAICTGADRPCAACCPCCPGTSCKAESNGVSYCRKDEP"(서열번호 64)을 갖는 카파+2-ACTX-Hv1a(또는 κ+2-ACTX-Hv1a).
일부 구현예에서, CRIP는 아미노산 서열 "AICTGADRPCAACCPCCPGTSCKAESNGVSYCRKDEP"(서열번호 594)을 갖는 "카파-ACTX-Hv1a"(또는 κ+2-ACTX-Hv1a)일 수 있다.
일부 구현예에서, ACTX 펩타이드는 서열번호 60 내지 64, 192 내지 370 및 594와 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, ACTX 펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 60 내지 64 및 594에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 ACTX 펩타이드를 인코딩할 수 있다.
Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드
일부 바람직한 구현예에서, CRIP는 Γ-CNTX-Pn1a 또는 γ-CNTX-Pn1a 독소일 수 있다. Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드는 브라질 무장 거미, 포네우트리아 니그리벤테르에서 유도된 살충 신경독소이다. Γ-CNTX-Pn1a는 이온성 글루타메이트 수용체(GRIN)의 N-메틸-D-아스파르테이트(NMDA) 아형과 소듐 채널을 표적으로 한다. 예시적인 야생형 전장 Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드는 하기 아미노산 서열을 갖는다: MKVAIVFLSLLVLAFASESIEENREEFPVEESARCADINGACKSDCDCCGDSVTCDCYWSDSCKCRESNFKIGMAIRKKFC(서열번호 689)(NCBI 수탁번호 P59367). "GSCADINGACKSDCDCCGDSVTCDCYWSDSCKCRESNFKIGMAIRKKFC"(서열번호 65)의 아미노산 서열을 갖는 재조합 성숙 Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드가 제공된다.
일부 구현예에서, Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드는 서열번호 65와 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드를 인코딩할 수 있다.
야생형 U1-아가톡신 및 TVP
"호보 거미"(에라티게나 아그레스티스, 이전에는 테게나리아 아그레스티스(Tegenaria agrestis))는 가게거미과(Agelenidae) 거미의 구성원인 독성 거미, 또는 깔대기 그물 위버(funnel web weaver)이다. 문헌[Ingale A, Antigenic epitopes prediction and MHC binder of a paralytic insecticidal toxin (ITX-1) of Tegenaria agrestis (hobo spider). 4 August 2010 Volume 2010:2 pp 97-103] 참조. 호보 거미의 독액은 살충 활성을 보유하는 것으로 시사되었다. 문헌[Johnson et al., Novel insecticidal peptides from Tegenaria agrestis spider venom may have a direct effect on the insect central nervous system. Arch Insect Biochem Physiol. 1998; 38(1):19-31]; 문헌[Klint et al., Production of Recombinant Disulfide-Rich Venom Peptides for Structural and Functional Analysis via Expression in the Periplasm of E. coli. PLoS One. 2013; 8(5): e63865] 참조.
호보 거미는, 가게거미과의 몇몇 다른 거미와 함께, 살충 활성을 나타내는 아가톡신 함유 독액을 생성한다. 아가톡신은 표적 종에 따라 다양한 살충 효과를 유도할 수 있는 화학적으로 다양한 독소 그룹으로; 예를 들어, 아가톡신은 딱정벌레목, 인시목 및 쌍시목에서 서서히 발병하는 강직성 마비를 유발하고; 집파리(무스카 도메스티카)의 중추신경계(CNS)에서 뉴런 점화 속도를 증가시키고; 다른 곤충(예를 들어, 검정파리(blowfly), 루실리아 쿠프리아(Lucilia cuprina))에 치명적이다. 따라서, 아가톡신은 CNS를 표적으로 하는 것으로 시사된다. 문헌[Undheim et al., Weaponization of a hormone: convergent recruitment of hyperglycemic hormone into the venom of arthropod predators. Structure 23: 1283-1292], 및 문헌[Johnson et al., Novel insecticidal peptides from Tegenaria agrestis spider venom may have a direct effect on the insect central nervous system. Arch. Insect Biochem. Physiol. 38:19-31(1998)] 참조.
아가톡신의 2가지 유형에는 U1-아가톡신-Ta1a와 U1-아가톡신-Ta1b가 포함되며, 이 둘은 모두 나선형 절지동물 신경펩타이드 유래(HAND: helical arthropod-neuropeptide-derived) 독소 패밀리의 구성원이다. 거미 이외에, 이러한 독소는 지네의 독액에서도 발견될 수 있다. 아가톡신은 고대 엑디소조안(ecdysozoan) 호르몬 패밀리, 즉, 이온 수송 펩타이드/갑각류 혈당상승 호르몬(crustacean hyperglycemic hormone)(ITP/CHH) 패밀리의 진화 파생물이다. 문헌[Undheim et al., Weaponization of a hormone: convergent recruitment of hyperglycemic hormone into the venom of arthropod predators. Structure 23: 1283-1292], 및 문헌[Johnson et al., Novel insecticidal peptides from Tegenaria agrestis spider venom may have a direct effect on the insect central nervous system. Arch. Insect Biochem. Physiol. 38:19-31(1998)] 참조.
호보 거미 유래 U1-아가톡신-Ta1b 독소는, 아미노산 위치 1 내지 17의 신호 펩타이드와 아미노산 위치 18 내지 68의 성숙 독소를 포함하는 "MKLQLMICLVLLPCFFCEPDEICRARMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYTACHEAQKG(서열번호 48)"의 전장 아미노산 서열을 갖는다(상기 동일한 문헌 참조). 상기 단백질은 β-가닥 없이 4개의 단단하게 패킹된 α-나선을 포함하며, 성숙 독소의 분자 질량은 5700.39 달톤(Da)이다(상기 동일한 문헌 참조).
하기 아미노산 서열을 갖는 에라티게나 아그레스티스 유래의 예시적인 성숙 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 폴리펩타이드가 제공된다: "EPDEICRARMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYTACHEAQKG"(서열번호 1).
단백질 처리 동안, 성숙 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 독소는 C-말단 글리신의 절제 사건을 거쳐, 하기 아미노산 서열을 생성한다: EPDEICRARMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYTACHEAQK(서열번호 60). 후속 번역 후 사건은 C-말단 아미드화를 갖는 성숙 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 독소를 생성한다.
U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는 몇 가지 점에서 야생형 U1-아가톡신-Ta1b(서열번호 1)와 상이한 돌연변이체 또는 변이체이며, 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 변이는 아미노산 치환, 결실 또는 부가; 또는 아미노산 치환, 결실 또는 부가를 유도하는 야생형 U1-아가톡신-Ta1b를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드로의 변화일 수 있다. 이러한 변이의 결과는, 야생형 U1-아가톡신-Ta1b에 비해 하나 이상의 곤충 종에 대해 증강된 살충 활성을 보유하는 비자연 발생 폴리펩타이드 및/또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열이다.
일부 구현예에서, TVP는, 표 1에 제시된 바와 같은, 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654에 따른 아미노산 서열을 가질 수 있다.
일부 구현예에서, 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654에 따른 서열을 갖는 폴리뉴클레오타이드 서열은, TVP를 인코딩하도록 작동 가능하다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 표 2에 제시된 폴리뉴클레오타이드는 TVP를 인코딩하도록 작동 가능하다.
예시적인 TVP
TVP, 및 TVP를 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드에 대한 예시적인 설명은 국제 출원 PCT/US21/28254에 제공되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, TVP는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 하나 이상의 돌연변이를 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, TVP는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 제1, 제2 또는 제3 돌연변이를 가질 수 있다.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3는 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않음.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 가짐.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고; X7은 글리신임.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고; X7은 존재하지 않음.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고; X6과 X7은 존재하지 않음.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3는 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 포함함.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3는 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 서열번호 17 내지 30, 54 내지 58, 또는 655 내지 688 중 어느 하나에 제시된 폴리뉴클레오타이드 서열, 또는 이의 상보적 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩됨.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3는 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 둘 이상의 TVP의 동종중합체 또는 이종중합체를 추가로 포함하고; 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이함.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3는 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 TVP를 포함하는 융합된 단백질이고; 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있음.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3는 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 TVP를 포함하는 융합된 단백질이고; 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있고; 링커는 곤충의 내장 또는 혈림프 내부에서 절단 가능함.
일부 구현예에서, 링커는 서열번호 61 내지 70 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3는 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; Z1이 T 또는 S인 경우, TVP는 글리코실화됨.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 아미노산 서열 "EPDEICRAQMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYAACHEAQKG"(서열번호 51)에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP일 수 있다.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A임.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A이고; Z1이 T인 경우, TVP는 글리코실화됨.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는, 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A이고; 여기서 약제학적으로 허용 가능한 염의 경우, X1은 Q이고; Z1은 A임.
일부 구현예에서, 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)는 서열번호 2, 49 또는 51 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 대한 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 TVP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염일 수 있다.
일부 구현예에서, TVP는 하기 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함할 수 있다: "EPDEICRAQMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYAACHEAQKG"(서열번호 51).
일부 바람직한 구현예에서, TVP는 TVP-R9Q/T43A(서열번호 51)일 수 있다.
다양한 구현예에서, TVP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 식물 세포, 효모 세포 또는 박테리아 세포를 형질전환시키는 데 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 살충성 TVP 유전자이식 단백질은 당업자에게 공지된 임의의 방식으로 식물 또는 이의 부분의 표면에 분무되거나 달리 적용될 수 있는 조성물로 제형화될 수 있다. 따라서, 숙주 세포, 예를 들어 식물 세포에서 적절한 조건 하에서 하나 이상의 TVP를 인코딩하도록 작동 가능한 DNA 구조체가 본원에 제공된다. 식물 세포의 기생 곤충에 의한 해충 감염을 방제하는 방법은, 본원에 기재된 바와 같은 TVP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 재조합 기술을 통해 식물, 식물 조직 또는 식물 세포에 투여 또는 도입하는 단계와, 해충에 노출된 현장에서 상기 재조합적으로 변경된 식물, 식물 조직 또는 식물 세포를 성장시키는 단계를 포함한다. 대안적으로, TVP는 TVP와 부형제로 이루어진 분무 가능한 조성물로 제형화되고, 직접 적용을 통해 감수성이 있는 식물에 직접 적용될 수 있어, 감염성 곤충이 TVP를 섭취하면 유해한 영향을 줄 수 있다.
전갈 펩타이드 및 독소
일부 구현예에서, CRIP는 하기 전갈 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 독소 중 임의의 것일 수 있다: 임페라톡신(Imperatoxin)-A(IpTxa), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 10.2(코바톡신(Cobatoxin)-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 11.1(파라부톡신(Parabutoxin)-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 11.2(파라부톡신-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 11.3(파라부톡신-10), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 12.1(부탄톡신(Butantoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 12.2(부탄톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 12.3(부탄톡신 유사 펩타이드), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 15.1(펩타이드 Aa1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 15.3(독소 AmmTX3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 15.6(디스크레핀(Discrepin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 16.1(타물로톡신(Tamulotoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 19.1(신경독소 BmBKTx1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.3(이베리오톡신(Iberiotoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.4(림바토톡신(Limbatotoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.7(Lqh 15-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.9(혼고톡신(Hongotoxin)-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.10(파라부톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.11(슬로톡신(Slotoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.13(카리브도톡신(Charybdotoxin) c), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.1(녹시우스톡신(Noxiustoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.2(마르가톡신(Margatoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.3(CllTx1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.4(녹시우스톡신-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.5(혼고톡신-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.6(혼고톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.7(CllTx2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.8(독소 Ce1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.9(독소 Ce2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.10(독소 Ce3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.11(독소 Ce4), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.12(독소 Ce5), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.1(칼리오톡신(Kaliotoxin)-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.2(아기톡신(Agitoxin)-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.3(아기톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.4(아기톡신-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.7(OsK-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.8(카리브도톡신 유사 펩타이드 Bs 6), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.9(칼리오톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 4.1(티티우스톡신(Tityustoxin) K-알파), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 4.3(독소 TdK1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 4.4(독소 Tc30), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.1(레이우로톡신(Leiurotoxin)-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.2(레이우로톡신 I 유사 독소 P05), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.4(타마핀(Tamapin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.5(타마핀-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.1(포타슘 채널 차단 독소 1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.2(마우로톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.3(신경독소 HsTX1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.12(아누로크톡신(Anuroctoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.13(스피녹신(Spinoxin)), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.14(HgeTx1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 7.2(독소 PiTX-K-베타), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.2(에르그톡신(Ergtoxin) 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.3(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.4(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.5(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.6(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 4.2(에르그톡신 유사 단백질 5), 인섹토톡신(Insectotoxin)-I1, 작은 독소(펩타이드 I), 인섹토톡신-I3(BeI3), 인섹토톡신-I4(BeI4), 인섹토톡신-I5A, 신경독소 8(신경독소 VIII), 가능성이 있는 독소 Lqh 8/6, 신경독소 9(신경독소 IX), 마우로칼신(MCa: Maurocalcin), 클로로톡신(Chlorotoxin) 유사 펩타이드 Bs 14(Bs14), 클로로톡신(CTX), 신경독소 P2, 인섹토톡신-I5(BeI5), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.15(헤미톡신(Hemitoxin)), 독소 GaTx1, AahIT1, 파이오도톡신(Phaiodotoxin), BaIT2, BotIT1, BotIT2, BmK M1, BmK-M2, BmK-M4, BmK-M7, BmK IT-AP, Bom3, Bom4, BjaIT, Bj-xtrIT, BjIT2, LqhaIT, Lqhb1, LqhIT2, LqhdprIT3a, Lgh-xtrIT, Lqh3, Lqh6, Lqh7, LqqIT1, LqqIT2, Lqq3, OD1, Ts1 또는 Tz1.
일부 구현예에서, CRIP는 서열번호 88 내지 191 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 전갈 펩타이드일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP는 임페라톡신일 수 있다. 임페라톡신은 아프리카 전갈(판디누스 임페라토르(Pandinus imperator))의 독액에서 유도된 펩타이드 독소이다.
일부 구현예에서, CRIP는 임페라톡신일 수 있으며, 여기서 임페라톡신은 임페라톡신 A(IpTx-a) 또는 이의 변이체이다. 일부 구현예에서, IpTx-a는 GDCLPHLKRCKADNDCCGKKCKRRGTNAEKRCR(서열번호 66)의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, CRIP는 AaIT1 독소일 수 있다. 단백질 독소, AalT1은, 북아프리카 사막 전갈(안드록토누스 아우스트랄리스(Androctonus australis)) 유래의 소듐 채널 부위 4 독소이다. 예시적인 AaIT1 독소는 서열번호 88(NCBI 수탁번호 P01497.2)에 따른 아미노산 서열을 갖는 펩타이드이다. AaIT1은 활성화 반응 에너지 장벽을 낮추어 곤충 소듐 채널을 강제로 개방시키는 부위 4 독소이다.
일부 구현예에서, 전갈 펩타이드는 서열번호 66, 88 내지 191과 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 전갈 펩타이드 또는 독소를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 66, 88 내지 191에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 전갈 펩타이드 또는 독소를 인코딩할 수 있다.
말미잘 펩타이드 및 독소
일부 구현예에서, CRIP는 말미잘에서 단리될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 말미잘은 악티니아 에퀴나; 아네모니아 에리트라에아; 아네모니아 술카타; 아네모니아 비리디스; 안토플레우라 엘레간티시마; 안토플레우라 푸스코비리디스; 안토플레우라 잔토그라미카; 부노도소마 카이사룸; 부노도소마 칸기쿰; 부노도소마 그라눌리페라; 헤테락티스 크리스파; 파라시시오니스 악티노스톨로이데스; 라디안투스 파우모텐시스; 또는 스토이칵티스 헬리안투스일 수 있다. 또 다른 구현예에서, 말미잘 독소는 Av2; Av3; 또는 이의 변이체일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP는 하기 말미잘 독소 중 하나일 수 있다: 독소 AETX-1(AETX I), 독소 APETx1, 독소 APETx2, 항고혈압성 단백질 BDS-1(혈압 강하 물질 I), 항고혈압성 단백질 BDS-2(혈압 강하 물질 II), 신경독소 Bg-2(Bg II), 신경독소 Bg-3(Bg III), 독소 APE 1-1, 독소 APE 1-2, 신경독소-1(독소 ATX-I), 신경독소-1(신경독소 I), 신경독소 1(독소 RTX-I), 신경독소 1(독소 SHP-I), 독소 APE 2-1, 독소 APE 2-2, 신경독소-2(독소 ATX-II)(일명 AV2), 신경독소-2(독소 AFT-II), 신경독소 2(독소 RTX-II), 신경독소 2(신경독소 II), 신경독소 3 동족체(신경독소 III 동족체), 신경독소 3(독소 RTX-III), 신경독소 3(신경독소-III), 신경독소 4(독소 RTX-IV), 신경독소-5(독소 ATX-V), 신경독소 5(독소 RTX-V), 안토플레우린(Anthopleurin)-A(독소 AP-A), 안토플레우린-B(독소 AP-B), 안토플레우린-C(독소 AP-C), 포타슘 채널 독소 Aek, 포타슘 채널 독소 Bgk, 주요 신경독소 BcIII, 신경독소 BcIV, 칸기톡신(CGTX: Cangitoxin), 포타슘 채널 독소 ShK, 독소 PCR1(PCR1-2), 독소 PCR2(PCR2-5), 독소 PCR3(PCR2-1), 독소 PCR4(PCR2-10), 독소 PCR6(PCR3-7), 칸기톡신-2(칸기톡신 II) 또는 칸기톡신-3(칸기톡신 III).
일부 구현예에서, CRIP는 서열번호 371 내지 411에 제시된 아미노산 서열을 갖는 말미잘 펩타이드일 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 CRIP는 자신을 방어하는 데 사용되는 다양한 독소를 보유하는 말미잘, 아네모니아 비리디스에서 유도된 하나 이상의 폴리펩타이드일 수 있다. 아네모니아 비리디스에서 유도된 독소 중 하나는 신경독소 "Av3"이다. Av3은 수용체 부위 3에서 전압 개폐형 소듐(Na+) 채널의 비활성화를 저해하여 수축성 마비를 유도하는 III형 말미잘 독소이다. Av3 독소가 부위 3에 결합하면, 소듐 채널의 비활성화된 상태가 불안정해지고, 이는 결국 채널을 개방된 상태로 유지시킨다(문헌[Blumenthal et al., Voltage-gated sodium channel toxins: poisons, probes, and future promise. Cell Biochem Biophys. 2003; 38(2):215-38] 참조). Av3은 갑각류 및 곤충 소듐 채널에 대해 높은 선택성을 나타내고, 포유류 소듐 채널에 대해 낮은 선택성을 나타낸다(문헌[Moran et al., Sea anemone toxins affecting voltage-gated sodium channels - molecular and evolutionary features, Toxicon. 2009 Dec 15; 54(8): 1089-1101] 참조). 서열번호 44의 아미노산 서열을 갖는 아네모니아 비리디스 유래의 예시적인 Av3 폴리펩타이드가 제공된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 CRIP는 Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP)일 수 있다. 일부 구현예에서, AVP는 서열번호 44로부터 하기 아미노산 변이를 가질 수 있다: 서열번호 44에 대해 R1K의 N-말단 아미노산 치환, 야생형 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"에서 "KSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"(서열번호 45)로 폴리펩타이드 서열의 변경; 서열번호 44에 대해 C-말단 아미노산이 결실될 수 있음, 야생형 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"에서 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPK"(서열번호 46)로 폴리펩타이드 서열의 변경; 및/또는 N-말단 돌연변이 및 C-말단 돌연변이, 여기서 N-말단 아미노산은 서열번호 44에 대해 R1K의 치환을 가질 수 있고, C-말단 아미노산은 서열번호 44에 대해 결실되어 폴리펩타이드 서열을 야생형 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"에서 "KSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPK"(서열번호 47)로 변경할 수 있음.
일부 구현예에서, 예시적인 Av3 펩타이드 또는 이의 변이체는, 2019년 9월 13일차 출원된 "Av3 Mutant Insecticidal Polypeptides and Methods for Producing and Using Same"이라는 발명의 명칭의 본 출원인의 PCT 출원(출원 번호 PCT/US19/51093)에 기재되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용, 및 Av3 펩타이드 또는 이의 변이체에 대한 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 말미잘 펩타이드는 서열번호 44 내지 47, 및 371 내지 411과 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 말미잘 펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 44 내지 47, 및 371 내지 411에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 말미잘 펩타이드를 인코딩할 수 있다.
청자고둥 펩타이드 및 코노톡신
코노톡신은 청자고둥에서 단리된 독소이며; 이러한 독소는 신경 전달을 방해하는 방식으로 작용한다. 코노톡신의 예에는, α-, ω-, μ-, δ- 및 κ-코노톡신이 포함된다. 간략하게, α-코노톡신(및 αA-&φ-코노톡신)은 니코틴성 리간드 개폐형 채널을 표적으로 하고; ω-코노톡신은 전압 개폐형 칼슘 채널을 표적으로 하고; μ-코노톡신은 전압 개폐형 소듐 채널을 표적으로 하고; δ-코노톡신은 전압 개폐형 소듐 채널을 표적으로 하고; κ-코노톡신은 전압 개폐형 포타슘 채널을 표적으로 한다.
일부 구현예에서, CRIP는 코누스 속에 속하는 유기체에서 단리될 수 있으며, 여기서 단리된 펩타이드는 코노톡신이다.
일부 구현예에서, CRIP는 코누스 아마디스; 코누스 카투스; 코누스 에르미네우스; 코누스 게오그라푸스; 코누스 글로리아마리스; 코누스 키노시타이; 코누스 마구스; 코누스 마르모레우스; 코누스 푸르푸라센스; 코누스 스테르쿠스무스카룸; 코누스 스트리아투스; 코누스 텍스틸; 또는 코누스 툴리파에서 단리될 수 있다.
기타 CRIP
일부 구현예에서, CRIP는 절지동물, 거미, 전갈, 곤충, 꿀벌, 말벌, 지네, 갑각류, 파충류, 뱀, 도마뱀, 양서류, 개구리, 도롱뇽, 연체동물, 청자고둥, 자포동물, 말미잘, 해파리, 수생동물, 두족류, 문어, 오징어, 갑오징어, 어류 또는 포유류에서 생성되고/되거나 단리된 독소, 펩타이드 또는 단백질(다르게는 독액 또는 독 펩타이드 또는 단백질로 공지되어 있음)일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP는 뱀 독액, 또는 이로부터의 독소일 수 있다.
CRIP-살충 단백질
CRIP-살충 단백질은 하기 (1)과 (2)로 이루어진 임의의 단백질, 펩타이드, 폴리펩타이드, 아미노산 서열, 입체배치 또는 배열이다: (1) 적어도 하나의 CRIP 또는 둘 이상의 CRIP; 및 (2) 예를 들어, 일부 구현예에서, 하기를 수행하는 능력을 갖는 추가의 비-CRIP 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질: 곤충이 CRIP-살충 단백질에 노출될 때, CRIP 단독에 비해 사멸률을 증가시키고/시키거나 및/또는 곤충의 성장을 저해함; 예를 들어 숙주 세포 또는 발현 시스템에서 상기 CRIP-살충 단백질의 발현을 증가시킴; 및/또는 CRIP-살충 단백질의 번역 후 처리에 영향을 미침.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 둘 이상의 CRIP를 포함하는 중합체일 수 있다. 일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은, CRIP가 링커 펩타이드, 예를 들어 절단 가능한 및/또는 절단 가능하지 않은 링커를 통해 작동 가능하게 연결된 둘 이상의 CRIP를 포함하는 중합체일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 안정화 도메인(STA); 소포체 신호전달 단백질(ERSP); 곤충 절단 가능한 또는 곤충 절단 가능하지 않은 링커(L); 및/또는 이들의 임의의 다른 조합과 같은 하나 이상의 단백질과 작동 가능하게 연결된 하나 이상의 CRIP를 나타낼 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 (1) 야생형 CRIP와, (2) 추가의 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질, 예를 들어 ERSP; 링커; STA; UBI; 또는 히스티딘 태그 또는 유사한 마커를 포함하는 비자연 발생 단백질일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 (1) 야생형 CRIP와, (2) 비자연 발생 CRIP를 포함하는 비자연 발생 단백질일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 (1) 야생형 CRIP; (2) 비자연 발생 CRIP; 및 (3) 추가의 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질, 예를 들어 ERSP; 링커; STA; UBI; 또는 히스티딘 태그 또는 유사한 마커를 포함하는 비자연 발생 단백질일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 본원에 기재된 CRIP 중 임의의 것을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 단백질은 본원에 개시된 바와 같은 하나 이상의 CRIP를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 살충 단백질은 CRIP 동종중합체, 예를 들어 동일한 CRIP인 둘 이상의 CRIP 단량체를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 살충 단백질은 CRIP 이종중합체, 예를 들어 CRIP 단량체가 상이한 둘 이상의 CRIP 단량체를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 단백질은 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 CRIP를 포함하는 융합된 단백질을 포함할 수 있으며, 여기서 각각의 CRIP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 단백질은 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 CRIP를 포함하는 융합된 단백질을 포함할 수 있으며, 여기서 각각의 CRIP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있고, 링커는 곤충의 내장 또는 혈림프 내부에서 절단 가능하다.
일부 구현예에서, 살충 단백질은 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 CRIP를 포함하는 융합된 단백질을 포함할 수 있으며, 여기서 각각의 CRIP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있고, 링커는 포유류의 내장 내부에서 절단 가능하다.
절단 가능한 링커와 절단 가능하지 않은 링커의 생성을 위한 예시적인 방법은 미국 특허 출원 제15/727,277호; 및 PCT 출원 PCT/US2013/030042에서 확인할 수 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
CRIP 또는 펩타이드-IA를 생산하는 방법
단백질을 생산하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있으며, 이용 가능한 다양한 기술이 존재한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 단백질은 재조합 방법을 사용하여 생산되거나, 화학적으로 합성될 수 있다. 본 개시내용은 CRIP, CRIP-살충 단백질 및 기타 펩타이드 살충 작용제(펩타이드-IA)를 생산하는 방법을 제공한다. 이러한 방법은 하기에 상세하게 설명된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 CRIP는 단백질을 생산하는 임의의 공지된 방법을 사용하여 생성될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 비제한적으로, CRIP는 효모 발현 시스템 또는 박테리아 발현 시스템과 같은 재조합 발현 시스템을 사용하여 생성될 수 있다. 하지만, 당업자는, 다른 단백질 생산 방법이 이용 가능하다는 것을 인식할 것이다.
일부 구현예에서, 본 발명은 재조합 발현 시스템을 사용하여 CRIP를 생산하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 CRIP를 생산하는 방법을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 상기 방법은 하기 단계를 포함한다: (a) CRIP를 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드 또는 이의 상보적 뉴클레오타이드 서열을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진 제1 발현 카세트를 포함하는 벡터를 제조하는 단계; (b) 상기 벡터를 숙주 세포, 예를 들어 박테리아 또는 효모, 또는 곤충, 또는 식물 세포, 또는 동물 세포에 도입하는 단계; 및 (c) CRIP의 발현 및 성장 배지로의 분비를 가능하게 하도록 작동 가능한 조건 하에 성장 배지에서 효모 균주를 성장시키는 단계. 일부 관련 구현예에서, 숙주 세포는 효모 세포이다.
본 발명은 매우 다양한 숙주 세포에서 실행 가능하다(하기 숙주 세포 섹션 참조). 실제로, 본 발명의 최종 사용자는 사용자가 선택한 임의의 숙주 세포에서 본 교시내용을 실행할 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서, 숙주 세포는 최종 사용자의 요구사항을 충족시키는 임의의 숙주 세포일 수 있으며; 즉, 일부 구현예에서, CRIP의 발현은 다양한 숙주 세포를 사용하여 본원의 교시에 따라 수행될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 사용자는 또 다른 것이 아니라 하나의 특정 유형의 숙주 세포(예를 들어, 효모 세포 또는 박테리아 세포)를 사용하기를 원할 수 있으며; 주어진 숙주 세포의 선호도는 가용성에서 비용에 이르기까지 다양할 수 있다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 일부 구현예에서, 본 발명은 CRIP를 생산하는 방법을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 상기 방법은 하기 단계를 포함한다: (a) CRIP를 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드 또는 이의 상보적 뉴클레오타이드 서열을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진 제1 발현 카세트를 포함하는 벡터를 제조하는 단계; (b) 상기 벡터를 숙주 세포, 예를 들어 박테리아 또는 효모, 또는 곤충, 또는 식물 세포, 또는 동물 세포에 도입하는 단계; 및 (c) CRIP의 발현 및 성장 배지로의 분비를 가능하게 하도록 작동 가능한 조건 하에 성장 배지에서 효모 균주를 성장시키는 단계. 일부 관련 구현예에서, 숙주 세포는 효모 세포이다.
야생형 CRIP의 단리 및 돌연변이화
CRIP 또는 펩타이드-살충 작용제(펩타이드-IA)는 공급원에서 직접 얻을 수 있다(예를 들어, 상기 CRIP 또는 펩타이드-IA를 동물에서 단리함). 돌연변이형 CRIP 또는 펩타이드-IA는 야생형 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열에 돌연변이를 생성하는 단계; 상기 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열을 적절한 벡터 내로 삽입하는 단계; CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드가 발현되는 방식으로 숙주 유기체를 형질전환시키는 단계; 목적하는 양의 CRIP 또는 펩타이드-IA를 생성하기 위해 숙주 유기체를 배양하는 단계; 이어서 숙주 유기체 내부 및/또는 주변에서 CRIP 또는 펩타이드-IA를 정제하는 단계를 통해 생성될 수 있다.
야생형 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열에 돌연변이를 생성하는 단계는 당업자에게 널리 공지된 다양한 수단을 통해 달성될 수 있다. 돌연변이유발 방법에는, 쿤켈(Kunkel) 방법; 카세트 돌연변이유발; PCR 부위 지향적 돌연변이유발; "완벽한 살인자(perfect murder)" 기술(delitto perfetto); PCR과 하나의 재순환 가능한 마커를 이용한 직접 유전자 결실 및 부위 특이적 돌연변이유발; 긴 상동 영역을 사용하고 PCR과 하나의 재순환 가능한 마커를 이용한 직접 유전자 결실 및 부위 특이적 돌연변이유발; 전좌 "팝인 팝아웃(pop-in pop-out)" 방법; 및 CRISPR-Cas 9가 포함된다. 부위 지향적 돌연변이유발의 예시적인 방법은 문헌[Ruvkun & Ausubel, A general method for site-directed mutagenesis in prokaryotes. Nature. 1981 Jan 1; 289(5793):85-8]; 문헌[Wallace et al., Oligonucleotide directed mutagenesis of the human beta-globin gene: a general method for producing specific point mutations in cloned DNA. Nucleic Acids Res. 1981 Aug 11; 9(15):3647-56]; 문헌[Dalbadie-McFarland et al., Oligonucleotide-directed mutagenesis as a general and powerful method for studies of protein function. Proc Natl Acad Sci U S A. 1982 Nov; 79(21):6409-13]; 문헌[Bachman. Site-directed mutagenesis. Methods Enzymol. 2013; 529:241-8]; 문헌[Carey et al., PCR-mediated site-directed mutagenesis. Cold Spring Harb Protoc. 2013 Aug 1; 2013(8):738-42]; 및 문헌[Cong et al., Multiplex genome engineering using CRISPR/Cas systems. Science. 2013 Feb 15; 339(6121):819-23]에서 확인할 수 있으며, 상기 언급된 모든 참고문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
야생형 CRIP, 예를 들어 거미, 전갈 및/또는 기타 독소는 독액에서 단리될 수 있다. 예를 들어, 거미 독액은 당업자에게 공지된 임의의 기술을 사용하여 거미(예를 들어, 에라티게나 아그레스티스와 같은 거미)의 독샘에서 단리될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 독액은 미국 특허 제5,688,764호에 기재된 방법에 따라 거미에서 단리될 수 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
야생형 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열은 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열에 대해 지시된 프라이머 프로브를 사용하여 게놈 라이브러리를 스크리닝하는 방식으로 얻을 수 있다. 대안적으로, 야생형 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열 및/또는 돌연변이형 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열은 화학적으로 합성될 수 있다. 예를 들어, CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열 및/또는 돌연변이형 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 서열은 포스포르아미다이트; 트리에스테르, 포스파이트 또는 H-포스포네이트 방법과 같은 올리고뉴클레오타이드 합성 방법을 사용하여 생성될 수 있다. 문헌[Engels, J. W. and Uhlmann, E. (1989), Gene Synthesis (New Synthetic Methods (77)). Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 28: 716-734] 참조(상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드의 화학적 합성
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열은, GENEWIZ®(예를 들어, TurboGENETM; PriorityGENE; 및 FragmentGENE), 또는 SIGMA-ALDRICH®(예를 들어, Custom DNA and RNA Oligos Design and Order Custom DNA Oligos)에서 제공되는 것들과 같은 상업적으로 입수 가능한 폴리뉴클레오타이드 합성 서비스를 사용하여 화학적으로 합성될 수 있다. DNA 및/또는 맞춤형 화학적 합성 폴리뉴클레오타이드를 생성하는 예시적인 방법은 당업계에 널리 공지되어 있고, 1995년 2월 13일자 출원된 미국 특허 제5,736,135호, 일련 번호 제08/389,615호에 예시적으로 제공되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다. 또한, 문헌[Agarwal, et al., Chemical synthesis of polynucleotides. Angew Chem Int Ed Engl. 1972 Jun; 11(6):451-9]; 문헌[Ohtsuka et al., Recent developments in the chemical synthesis of polynucleotides. Nucleic Acids Res. 1982 Nov 11; 10(21): 6553-6570]; 문헌[Sondek & Shortle. A general strategy for random insertion and substitution mutagenesis: substoichiometric coupling of trinucleotide phosphoramidites. Proc Natl Acad Sci U S A. 1992 Apr 15; 89(8): 3581-3585]; 문헌[Beaucage S. L., et al., Advances in the Synthesis of Oligonucleotides by the Phosphoramidite Approach. Tetrahedron, Elsevier Science Publishers, Amsterdam, NL, vol. 48, No. 12, 1992, pp. 2223-2311]; 문헌[Agrawal (1993) Protocols for Oligonucleotides and Analogs: Synthesis and Properties; Methods in Molecular Biology Vol. 20] 참조(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
폴리뉴클레오타이드를 화학적으로 합성하면 상기 서열 내 뉴클레오타이드의 배열(즉, 시토신 [C], 구아닌 [G], 아데닌 [A] 또는 티민 [T] 분자의 배열)에 기반하여 목적하는 폴리펩타이드를 생성하도록 맞춤화된 DNA 서열이 생성될 수 있고; 화학적으로 합성된 DNA 폴리뉴클레오타이드로부터 전사된 mRNA 서열은 아미노산의 서열로 번역될 수 있으며, 여기서 각각의 아미노산은 mRNA 서열의 코돈에 상응한다. 따라서, mRNA 서열로부터 번역되는 폴리펩타이드 사슬의 아미노산 조성은 20개 아미노산 중 어느 것이 성장하는 폴리펩타이드에 부가될 것인 지를 결정하는 기본 코돈을 변화시키는 방식으로 변경될 수 있으며; 따라서, 삽입, 치환, 결실 및 프레임시프트와 같은 DNA의 돌연변이는 기본 코돈에 따라 아미노산 삽입, 치환 또는 결실을 유발할 수 있다.
화학적으로 합성된 DNA 폴리뉴클레오타이드 서열 및/또는 돌연변이유발을 통해 변경된 야생형 DNA 폴리뉴클레오타이드 서열로부터 CRIP 또는 펩타이드-IA를 얻는 것은, DNA 서열을 적절한 벡터에 클로닝하는 방식으로 달성될 수 있다. 당업자에게 공지된 이용 가능한 다양한 발현 벡터, 숙주 유기체 및 클로닝 전략이 존재한다. 예를 들어, 벡터는 이종 유전자 및/또는 발현 카세트를 효모 세포에 도입하여 전사 및 번역되게 할 수 있는 플라스미드일 수 있다. "벡터"라는 용어는, 핵산 서열이 복제될 수 있는 세포 내로의 도입을 위해 삽입될 수 있는 담체 핵산 분자를 나타내기 위해 사용된다. 벡터는 복제 기점(ORI); 선별이 가능하도록 항생제 내성을 부여하는 유전자; 다중 클로닝 부위; 프로모터 영역; 비박테리아 트랜스펙션을 위한 선별 마커; 및 프라이머 결합 부위와 같은 "벡터 요소"를 함유할 수 있다. 핵산 서열은 "외인성"일 수 있으며, 이는 벡터가 도입되는 세포에 대해 이질적이거나, 서열이 세포 내 서열과 상동이지만 서열이 통상적으로 발견되지 않는 숙주 세포 핵산 내 위치에 있다는 것을 의미한다. 벡터에는 플라스미드, 코스미드, 바이러스(박테리오파지, 동물 바이러스 및 식물 바이러스) 및 인공 염색체(예를 들어, YAC)가 포함된다. 당업자는 Sambrook 등의 문헌(1989)과 Ausubel 등의 문헌(1996)에 기재된 표준 재조합 기술을 통해 벡터를 구축할 수 있을 것이다(상기 문헌들은 모두 본원에 참조로 인용됨). CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드를 인코딩하는 것에 더하여, 벡터는 표적화 분자를 인코딩할 수 있다. 표적화 분자는 목적하는 핵산을 특정 조직, 세포 또는 다른 위치로 지시하는 분자이다.
벡터 및 형질전환
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드는 다양한 클로닝 전략, 및 당업자가 용이하게 이용 가능한 상업용 클로닝 키트 및 재료를 사용하여 벡터에 클로닝될 수 있다. 예를 들어, CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드는 SnapFast; Gateway; TOPO; Gibson; LIC; InFusionHD; 또는 Electra 전략과 같은 전략을 사용하여 벡터에 클로닝될 수 있다. CRIP 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용될 수 있는 다수의 상업적으로 입수 가능한 벡터가 존재한다. 예를 들어, 폴리머라아제 연쇄 반응(PCR)을 사용하여 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드를 생성하고, 실온에서 5분 동안 pCRTMII-TOPO 벡터 또는 PCRTM2.1-TOPO® 벡터(Invitrogen에서 TOPO® TA Cloning ® 키트로 상업적으로 입수 가능함)와 조합한 후; TOPO® 반응액을 이후에 색상 변화에 기반하여 선택될 수 있는 적격 세포로 형질전환 시킬 수 있다(문헌[Janke et al., A versatile toolbox for PCR-based tagging of yeast genes: new fluorescent proteins, more markers and promoter substitution cassettes. Yeast. 2004 Aug; 21(11):947-62]; 또한 문헌[Adams et al. Methods in Yeast Genetics. Cold Spring Harbor, NY, 1997] 참조(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨)).
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 플라스미드, 코스미드, 바이러스(박테리오파지, 동물 바이러스 및 식물 바이러스) 및/또는 인공 염색체(예를 들어, YAC)와 같은 벡터에 클로닝될 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 숙주로 대장균을 사용하여 하기를 수행하는 방식으로, 벡터, 예를 들어 플라스미드 벡터 내로 삽입될 수 있다: 관심 DNA 분절을 삽입하는 데 필요한 제한 효소를 사용하여 벡터 DNA 약 2 μg 내지 5 μg을 소화시킨 후, 완전한 소화를 달성하기 위해 밤새 인큐베이션시키고(자가 결찰/재순환을 회피하기 위해 알칼리성 포스파타아제를 사용하여 5'-말단을 탈인산화시킬 수 있음); 소화된 벡터를 겔 정제함. 다음으로, 관심 DNA 분절, 예를 들어 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 PCR을 통해 증폭시키고, 당업자에게 공지된 기술을 사용하여(예를 들어, PCR 클린업 키트를 사용하여) PCR 반응물로부터 임의의 과량의 효소, 프라이머, 혼입되지 않은 dNTP, 짧은-실패한 PCR 생성물, 및/또는 염을 제거한다. 하기를 포함하는 혼합물을 생성하여 관심 DNA 분절을 벡터에 결찰시킨다: 약 20 ng의 벡터; 약 100 ng 내지 1,000 ng의 관심 DNA 분절; 2 μL의 10x 완충액(즉, 30 mM Tris-HCl, 4 mM MgCl2, 26 μM NAD, 1 mM DTT, 50 μg/ml BSA, pH 8, 25℃에서 보관); 1 μL의 T4 DNA 리가아제; H2O를 첨가하여 전체의 총 부피를 20 μL로 만듬. 이어서, 결찰 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하거나, 16℃에서 밤새 인큐베이션할 수 있다. 이어서, 결찰 반응액(즉, 약 1 μL)을, 예를 들어 전기천공 또는 화학적 방법을 사용하여 적격 세포로 형질전환시키고, 콜로니 PCR을 수행하여 관심 DNA 분절을 함유하는 벡터를 식별할 수 있다.
일부 구현예에서 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는, CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF를 함께 구성하는 다른 DNA 분절과 함께, 숙주 효모 세포로부터의 분비를 위해 설계될 수 있다. CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF를 설계하는 예시적인 방법은 하기와 같다: ORF는 신호 펩타이드 서열로 시작하여, 이어서 Kex2 절단 부위(리신-아르기닌)를 인코딩하는 DNA 서열, 이어서 5'-말단에 글리신-세린 코돈이 부가된 CRIP 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드 전이유전자, 최종적으로 3'-말단에 종결 코돈을 가질 수 있음. 이어서, 모든 이러한 요소는 효모 세포에서 단일 오픈 리딩 프레임(ORF)으로서 융합 펩타이드로 발현된다. α-교배 인자(αMF) 신호 서열은 재조합 효모의 내인성 분비 경로를 통해 재조합 살충 펩타이드의 대사 처리를 촉진시키기 위해 가장 흔히 사용되며, 즉, 발현된 융합 펩타이드가 전형적으로 소포체에 진입하고, 여기서 α-교배 인자 신호 서열이 신호 펩티다아제 활성에 의해 제거되고, 이어서 생성된 전구-살충 펩타이드가 골지체에 트래피킹되고, 여기서 상기 언급된 리신-아르기닌 디펩타이드가 Kex2 엔도프로테아제에 의해 완전히 제거되고, 그 후 성숙 폴리펩타이드(즉, CRIP 또는 펩타이드-IA)가 세포 밖으로 분비된다.
일부 구현예에서, 재조합 효모 세포에서 폴리펩타이드 발현 수준은 특정 숙주 효모 종에 기반하여 코돈을 최적화하는 방식으로 증강될 수 있다. 주어진 숙주 유기체의 내인성 오픈 리딩 프레임에서 관찰되는 코돈의 자연 발생 빈도는 고효율 발현을 위해 반드시 최적화될 필요가 없다. 나아가, 상이한 효모 종(예를 들어, 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis), 피키아 파스토리스(Pichia pastoris), 사카로마이세스 세레비시아에(Saccharomyces cerevisiae) 등)은 고효율 발현을 위한 상이한 최적 코돈을 갖는다. 따라서, 신호 서열, Kex2 절단 부위, 및 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 서열 요소를 포함하는 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF에 대해 코돈 최적화가 고려되어야 하는 데, 이는 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF가 재조합 효모 세포에서 하나의 융합 펩타이드로서 초기에 번역되기 때문이다.
일부 구현예에서, 코돈 최적화된 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF는 효모 발현을 위한 효모 특이적 발현 벡터 내로 결찰될 수 있다. 에피솜 벡터와 통합 벡터를 비롯하여 효모 발현에 이용 가능한 다수의 발현 벡터가 존재하며, 이들은 통상적으로 특정 효모 균주에 대해 설계된다. 펩타이드 생산에 사용되는 특정 효모 발현 시스템을 고려하여 적절한 발현 벡터를 신중하게 선택해야 한다. 일부 구현예에서, 형질전환된 효모 세포의 염색체 내로 통합되고, 세포 분열 및 증식 주기를 통해 안정하게 유지되는 통합 벡터가 사용될 수 있다. 통합 DNA 서열은 형질전환된 효모 종에서 표적화된 게놈 DNA 유전자좌에 상동이며, 이러한 통합 서열에는 pLAC4, 25S rDNA, pAOX1 및 TRP2 등이 포함된다. 살충 펩타이드 전이유전자의 위치는 통합 DNA 서열에 인접하거나(삽입 벡터) 통합 DNA 서열 내에 존재할 수 있다(대체 벡터).
일부 구현예에서, 발현 벡터는 대장균에서 DNA 제조를 위한 대장균 요소, 예를 들어 대장균 복제 기점, 항생제 선별 마커 등을 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 벡터는 관심 전이유전자의 발현에 필요한 일련의 서열 요소, 예를 들어 전사 프로모터, 종결인자, 효모 선별 마커, 숙주 효모 DNA에 상동인 통합 DNA 서열 등을 함유할 수 있다. 천연 및 조작된 프로모터를 비롯하여 이용 가능한 다수의 적합한 효모 프로모터, 예를 들어 pLAC4, pAOX1, pUPP, pADH1, pTEF, pGal1 등과 같은 효모 프로모터가 존재하며, 일부 구현예에서는 다른 것들이 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 아세트아미드 원영양성(prototrophy) 선별; 제오신(zeocin) 내성 선별; 게네티신(geneticin) 내성 선별; 노우르세오트리신(nourseothricin) 내성 선별; 우라실 결핍 선별; 및/또는 기타 선별 방법과 같은 선별 방법이 사용될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 아스페르길루스 니둘란스(Aspergillus nidulans) amdS 유전자가 선별 마커로 사용될 수 있다. 예시적인 선별 마커 사용 방법은 미국 특허 제6,548,285호(1997년 4월 3일자 출원); 제6,165,715호(1998년 6월 22일자 출원); 및 제6,110,707호(1997년 1월 17일자 출원)에서 확인할 수 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 pKLAC1 플라스미드 내로 삽입될 수 있다. pKLAC1은 New England Biolabs® Inc.(항목 번호(NEB #E1000))에서 상업적으로 입수 가능하다. pKLAC1은 효모 클루이베로마이세스 락티스에서 재조합 단백질(예를 들어, CRIP 또는 펩타이드-IA)의 고수준 발현을 달성하도록 설계되었다. pKLAC1 플라스미드는 단독으로, 또는 클루이베로마이세스 락티스 단백질 발현 키트의 일부로 주문될 수 있다. pKLAC1 플라스미드는 SacII 또는 BstXI 제한 효소를 사용하여 선형화될 수 있으며, αMF 분비 신호의 MCS 다운스트림을 보유한다. αMF 분비 신호는 재조합 단백질을 분비 경로로 지시하며, 이는 후속으로 Kex2를 통해 절단되어, 예를 들어 CRIP 또는 펩타이드-IA를 생성한다. Kex2는 분비 경로의 전구단백질 활성화에 관여하고, 상업적으로 입수 가능한(PeproTech®; 항목 번호 450-45), 칼슘 의존성 세린 프로테아제이다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 pKlac1 플라스미드 내로 삽입되거나, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드와 결찰된 pKLAC1 플라스미드로 형질전환된 효모 콜로니의 선별 후 pKlac1 플라스미드에 서브클로닝될 수 있다. CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드와 결찰된 pKLAC1 플라스미드로 형질전환된 효모, 예를 들어 클루이베로마이세스 락티스는, 형질전환된 효모 세포가 유일한 질소 공급원으로 아세트아미드를 함유하는 YCB 배지에서 성장할 수 있도록 하는 아세트아미다아제(amdS)에 기반하여 선택될 수 있다. CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드와 결찰된 pKLAC1 플라스미드로 형질전환된 양성 효모 콜로니가 식별되면.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 당업자가 용이하게 이용 가능한 다른 상업적으로 입수 가능한 플라스미드 및/또는 벡터 내로 삽입될 수 있으며, 예를 들어 플라스미드는 Addgene(비영리 플라스미드 보관소); GenScript®; Takara®; Qiagen®; 및 PromegaTM에서 입수 가능하다.
일부 구현예에서, TVP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 당업자가 용이하게 이용 가능한 다른 상업적으로 입수 가능한 플라스미드 및/또는 벡터 내로 삽입될 수 있으며, 예를 들어 플라스미드는 Addgene(비영리 플라스미드 보관소); GenScript®; Takara®; Qiagen®; 및 PromegaTM에서 입수 가능하다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 CRIP 발현 카세트로 형질전환된 효모 세포는 효모 배양물에서 CRIP를 배지 1리터 당 적어도 70 mg/L, 적어도 80 mg/L, 적어도 90 mg/L, 적어도 100 mg/L, 적어도 110 mg/L, 적어도 120 mg/L, 적어도 130 mg/L, 적어도 140 mg/L, 적어도 150 mg/L, 적어도 160 mg/L, 적어도 170 mg/L, 적어도 180 mg/L, 적어도 190 mg/L, 200 mg/L, 적어도 500 mg/L, 적어도 750 mg/L, 적어도 1,000 mg/L, 적어도 1,250 mg/L, 적어도 1,500 mg/L, 적어도 1,750 mg/L, 적어도 2,000 mg/L, 적어도 2,500 mg/L, 적어도 3,000 mg/L, 적어도 3,500 mg/L, 적어도 4,000 mg/L, 적어도 4,500 mg/L, 적어도 5,000 mg/L, 적어도 5,500 mg/L, 적어도 6,000 mg/L, 적어도 6,500 mg/L, 적어도 7,000 mg/L, 적어도 7,500 mg/L, 적어도 8,000 mg/L, 적어도 8,500 mg/L, 적어도 9,000 mg/L, 적어도 9,500 mg/L, 적어도 10,000 mg/L, 적어도 11,000 mg/L, 적어도 12,000 mg/L, 적어도 12,500 mg/L, 적어도 13,000 mg/L, 적어도 14,000 mg/L, 적어도 15,000 mg/L, 적어도 16,000 mg/L, 적어도 17,000 mg/L, 적어도 17,500 mg/L, 적어도 18,000 mg/L, 적어도 19,000 mg/L, 적어도 20,000 mg/L, 적어도 25,000 mg/L, 적어도 30,000 mg/L, 적어도 40,000 mg/L, 적어도 50,000 mg/L, 적어도 60,000 mg/L, 적어도 70,000 mg/L, 적어도 80,000 mg/L, 적어도 90,000 mg/L, 또는 적어도 100,000 mg/L의 CRIP의 수율로 생산할 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 하나 이상의 발현 카세트는 벡터 내로 삽입되어, 배지(효모 발효 브로스(fermentation broth)의 상청액) 1리터 당 하기 범위의 CRIP 수율을 생성할 수 있다: 약 100 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 110 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 120 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 130 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 140 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 150 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 160 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 170 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 180 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 190 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 200 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 250 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 750 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 1000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 1000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 1500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 2000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 2500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 3000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 3500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 4000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 4500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 5000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 5500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 6000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 6500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 7000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 7500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 8000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 8500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 9000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 9500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 10000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 10500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 11000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 11500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 12000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 12500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 13000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 13500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 14000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 14500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 15000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 15500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 16000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 16500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 17000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 17500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 18000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 18500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 19000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 19500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 20000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 20500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 21000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 21500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 22000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 22500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 23000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 23500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 24000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 24500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 25000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 25500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 26000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 26500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 27000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 27500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 28000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 28500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 29000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 29500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 30000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 30500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 31000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 31500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 32000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 32500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 33000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 33500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 34000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 34500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 35000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 35500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 36000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 36500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 37000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 37500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 38000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 38500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 39000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 39500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 40000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 40500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 41000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 41500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 42000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 42500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 43000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 43500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 44000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 44500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 45000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 45500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 46000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 46500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 47000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 47500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 48000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 48500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 49000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 49500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 50000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 50500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 51000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 51500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 52000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 52500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 53000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 53500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 54000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 54500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 55000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 55500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 56000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 56500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 57000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 57500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 58000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 58500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 59000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 59500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 60000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 60500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 61000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 61500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 62000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 62500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 63000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 63500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 64000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 64500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 65000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 65500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 66000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 66500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 67000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 67500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 68000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 68500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 69000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 69500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 70000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 70500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 71000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 71500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 72000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 72500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 73000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 73500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 74000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 74500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 75000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 75500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 76000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 76500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 77000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 77500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 78000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 78500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 79000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 79500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 80000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 80500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 81000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 81500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 82000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 82500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 83000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 83500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 84000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 84500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 85000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 85500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 86000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 86500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 87000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 87500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 88000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 88500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 89000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 89500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 90000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 90500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 91000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 91500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 92000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 92500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 93000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 93500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 94000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 94500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 95000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 95500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 96000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 96500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 97000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 97500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 98000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 98500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 99000 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 또는 약 99500 mg/L 내지 약 100,000 mg/L의 CRIP.
일부 구현예에서, CRIP를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 하나 이상의 발현 카세트는 벡터 내로 삽입되어, 배지(효모 발효 브로스의 상청액) 1리터 당 하기 범위의 CRIP 수율을 생성할 수 있다: 약 100 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 99500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 99000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 98500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 98000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 97500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 97000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 96500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 96000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 95500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 95000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 94500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 94000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 93500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 93000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 92500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 92000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 91500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 91000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 90500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 90000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 89500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 89000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 88500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 88000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 87500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 87000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 86500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 86000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 85500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 85000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 84500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 84000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 83500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 83000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 82500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 82000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 81500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 81000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 80500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 80000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 79500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 79000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 78500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 78000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 77500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 77000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 76500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 76000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 75500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 75000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 74500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 74000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 73500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 73000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 72500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 72000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 71500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 71000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 70500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 70000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 69500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 69000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 68500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 68000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 67500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 67000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 66500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 66000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 65500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 65000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 64500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 64000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 63500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 63000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 62500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 62000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 61500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 61000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 60500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 60000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 59500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 59000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 58500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 58000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 57500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 57000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 56500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 56000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 55500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 55000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 54500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 54000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 53500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 53000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 52500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 52000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 51500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 51000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 50500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 50000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 49500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 49000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 48500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 48000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 47500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 47000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 46500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 46000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 45500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 45000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 44500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 44000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 43500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 43000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 42500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 42000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 41500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 41000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 40500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 40000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 39500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 39000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 38500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 38000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 37500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 37000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 36500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 36000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 35500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 35000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 34500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 34000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 33500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 33000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 32500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 32000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 31500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 31000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 30500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 30000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 29500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 29000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 28500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 28000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 27500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 27000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 26500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 26000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 25500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 25000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 24500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 24000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 23500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 23000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 22500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 22000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 21500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 21000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 20500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 20000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 19500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 19000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 18500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 18000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 17500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 17000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 16500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 16000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 15500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 15000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 14500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 14000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 13500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 13000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 12500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 12000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 11500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 11000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 10500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 10000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 9500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 9000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 8500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 8000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 7500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 7000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 6500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 6000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 5500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 5000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 4500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 4000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 3500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 3000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 2500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 2000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 1500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 1000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 1000 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 750 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 500 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 250 mg/L; 약 100 mg/L 내지 약 100 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 110 mg/L의 CRIP.
CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 DNA 폴리뉴클레오타이드 서열에 더하여, 조절 요소로 알려진 추가의 DNA 분절이 외래 DNA 또는 전이유전자의 증강된 발현을 가능하게 하는 벡터에 클로닝될 수 있으며; 이러한 추가 DNA 분절의 예에는 (1) 프로모터, 종결인자 및/또는 인핸서 요소; (2) 적절한 mRNA 안정화 폴리아데닐화 신호; (3) 내부 리보솜 진입 부위(IRES); (4) 인트론; 및 (5) 전사 후 조절 요소가 포함된다. 관심 DNA 분절과 전술한 시스-작용 요소 중 어느 하나의 조합을 "발현 카세트"라고 한다.
단일 발현 카세트는 상기 언급된 조절 요소 중 하나 이상과, CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 함유할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트는 CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드와, α-MF 신호; Kex2 부위; LAC4 종결인자; ADN1 프로모터; 및 5'-말단 및 3'-말단에 LAC4 프로모터가 플랭킹된 아세트아미다아제(amdS) 선별 마커를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 벡터에 클로닝되는 다수의 발현 카세트가 존재할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 제1 발현 카세트가 존재할 수 있다. 대안적인 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하도록 작동 가능한 2개의 발현 카세트(즉, 이중 발현 카세트)가 존재한다. 다른 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하도록 작동 가능한 3개의 발현 카세트(즉, 삼중 발현 카세트)가 존재한다.
일부 구현예에서, 이중 발현 카세트는 제1 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트를 함유하는 벡터에 제2 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트를 서브클로닝하는 방식으로 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, 삼중 발현 카세트는 제1 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트와 제2 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트를 함유하는 벡터에 제3 발현 카세트를 서브클로닝하는 방식으로 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트로 형질전환된 효모 세포는 효모 배양물에서 CRIP 또는 펩타이드-IA를 배지 1리터 당 적어도 70 mg/L, 적어도 80 mg/L, 적어도 90 mg/L, 적어도 100 mg/L, 적어도 110 mg/L, 적어도 120 mg/L, 적어도 130 mg/L, 적어도 140 mg/L, 적어도 150 mg/L, 적어도 160 mg/L, 적어도 170 mg/L, 적어도 180 mg/L, 적어도 190 mg/L, 200 mg/L, 적어도 500 mg/L, 적어도 750 mg/L, 적어도 1,000 mg/L, 적어도 1,250 mg/L, 적어도 1,500 mg/L, 적어도 1,750 mg/L, 적어도 2,000 mg/L, 적어도 2,500 mg/L, 적어도 3,000 mg/L, 적어도 3,500 mg/L, 적어도 4,000 mg/L, 적어도 4,500 mg/L, 적어도 5,000 mg/L, 적어도 5,500 mg/L, 적어도 6,000 mg/L, 적어도 6,500 mg/L, 적어도 7,000 mg/L, 적어도 7,500 mg/L, 적어도 8,000 mg/L, 적어도 8,500 mg/L, 적어도 9,000 mg/L, 적어도 9,500 mg/L, 적어도 10,000 mg/L, 적어도 11,000 mg/L, 적어도 12,000 mg/L, 적어도 12,500 mg/L, 적어도 13,000 mg/L, 적어도 14,000 mg/L, 적어도 15,000 mg/L, 적어도 16,000 mg/L, 적어도 17,000 mg/L, 적어도 17,500 mg/L, 적어도 18,000 mg/L, 적어도 19,000 mg/L, 적어도 20,000 mg/L, 적어도 25,000 mg/L, 적어도 30,000 mg/L, 적어도 40,000 mg/L, 적어도 50,000 mg/L, 적어도 60,000 mg/L, 적어도 70,000 mg/L, 적어도 80,000 mg/L, 적어도 90,000 mg/L, 또는 적어도 100,000 mg/L의 CRIP 또는 펩타이드-IA의 수율로 생산할 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 하나 이상의 발현 카세트가 벡터, 예를 들어 pKlac1 플라스미드에 삽입되어, 약 100 mg/L의 CRIP 또는 펩타이드-IA(효모 발효 브로스의 상청액)의 수율을 생성할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 2개의 발현 카세트가 벡터, 예를 들어 pKS482 플라스미드에 삽입되어, 약 2 g/L의 CRIP 또는 펩타이드-IA(효모 발효 브로스의 상청액)의 수율을 생성할 수 있다. 대안적으로, 일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 3개의 발현 카세트가 벡터, 예를 들어 pKlac1T 플라스미드에 삽입될 수 있다.
일부 구현예에서, 최적화된 CRIP 또는 펩타이드-IA 전이유전자의 하나 이상의 카피를 클루이베로마이세스 락티스 게놈 내로 통합시킬 수 있도록 하기 위해 다수의 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트가 효모로 트랜스펙션될 수 있다. 다수의 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트를 클루이베로마이세스 락티스 게놈 내로 도입하는 예시적인 방법은 하기와 같다: 온전한 LAC4 프로모터 요소, 코돈 최적화된 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF 요소 및 pLAC4 종결인자 요소를 포함하는 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트 DNA 서열을 합성하고; 온전한 발현 카세트를 pKS477의 pLAC4 종결인자의 다운스트림인 Sal I 제한 부위와 Kpn I 제한 부위 사이의 pKlac1 벡터에 결찰시켜 이중 전이유전자 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 벡터, pKS482를 생성하고; 이어서 Sac II 제한 엔도뉴클레아제를 사용하여 이중 전이유전자 벡터, pKS482를 선형화시키고, 전기천공을 통해 클루이베로마이세스 락티스의 YCT306 균주로 형질전환시킨다. 이어서, 생성된 효모 콜로니를 아세트아미다아제 발현 세포만 질소의 대사 공급원으로서 효율적으로 사용할 수 있는, 5 mM 아세트아미드가 보충된 YCB 한천 플레이트 상에서 성장시킨다. 효모 콜로니를 평가하기 위해, pKS482 효모 플레이트에서 약 100개 내지 400개 콜로니를 선택할 수 있다. 콜로니의 접종물을 각각 탄소 공급원으로서 2% 당 알코올이 첨가된 한정된 클루이베로마이세스 락티스 배지 2.2 mL에서 배양한다. 배양물을 280 rpm에서 진탕시키면서 23.5℃에서 6일 동안 배양한 후, 배양물 내 세포 밀도는 600 nm(OD600)에서의 광 흡광도로 표시될 때 최대 수준에 도달할 것이다. 이어서, 4,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 세포를 배양액으로부터 제거하고, HPLC 수율 분석을 위해 생성된 상청액(조건화된 배지)를 0.2 μm 멤브레인을 통해 여과한다.
펩타이드의 화학적 합성
펩타이드 합성, 또는 펩타이드 및/또는 폴리펩타이드의 화학적 합성을 사용하여 CRIP 또는 펩타이드-IA를 생성할 수 있다: 이러한 방법은 당업자에 의해 및/또는 상업적 판매회사(예를 들어, GenScript®; Piscataway, New Jersey)의 사용을 통해 수행될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 화학적 펩타이드 합성은 액체상 펩타이드 합성(LPPS) 또는 고체상 펩타이드 합성(SPPS)을 사용하여 달성될 수 있다.
일부 구현예에서, 펩타이드 합성은 일반적으로 후속 아미노산의 카르복실기를 선행 아미노산의 N-말단에 커플링시켜 초기 폴리펩타이드 사슬을 생성하는 전략을 사용하여 달성될 수 있으며, 이러한 방법은 자연에서 일어나는 폴리펩타이드 합성의 유형이다.
펩타이드 탈보호는 폴리펩타이드의 화학적 합성에서 중요한 첫 번째 단계이다. 펩타이드 탈보호는 아미노산의 관능기가 원치 않거나 비특이적인 반응 또는 부반응에 참여하는 것을 방지하기 위해 화학물질을 사용하여 아미노산의 반응성기를 차단하는 과정이며; 즉, 아미노산은 이러한 바람직하지 않은 반응에 참여하는 것으로부터 "보호된다".
펩타이드 사슬을 합성하기 전, 아미노산은 사슬이 형성되도록(즉, 아미노산이 결합하도록) 하기 위해 "탈보호"되어야 한다. N-말단을 보호하는 데 사용되는 화학물질에는 9-플루오레닐메톡시카르보닐(Fmoc)과 tert-부톡시카르보닐(Boc)이 포함되며, 이들은 각각 약염기(예를 들어, 피페리딘)와 중간 정도의 강산(예를 들어, 트리플루오로아세트산(TFA))을 사용하여 제거될 수 있다.
필요한 C-말단 보호제는 사용되는 화학적 펩타이드 합성 전략의 유형에 따라 달라진다: 예를 들어, LPPS는 C-말단 아미노산의 보호를 필요로 하지만, SPPS는 보호기로 작용하는 고체 지지체로 인해 필요하지 않다. 측쇄 아미노산은 개별 펩타이드 서열과 N-말단 보호 전략에 따라 달라지는 몇 가지 상이한 보호기의 사용을 필요로 하지만; 전형적으로, 측쇄 아미노산을 위해 사용되는 보호기는 tert-부틸(tBu) 또는 벤질(Bzl) 보호기를 기반으로 한다.
펩타이드 합성 절차의 다음 단계는 아미노산 커플링이다. 아미노산 커플링을 수행하기 위해서는, 들어오는 아미노산의 C-말단 카르복실산이 활성화되어야 한다: 이는 들어오는 아미노산의 카르복실기와 반응하여 O-아실이소우레아 중간체를 형성하는 디이소프로필카르보디이미드(DIC) 또는 디시클로헥실카르보디이미드(DCC)와 같은 카르보디이미드를 사용하여 수행될 수 있다. 이어서, O-아실이소우레아 중간체가 성장하는 펩타이드 사슬의 N-말단 상에 있는 1차 아미노기를 통한 친핵성 공격을 통해 대체된다. 카르보디이미드에 의해 생성된 반응성 중간체는 아미노산의 라세미화를 유도할 수 있다. 아미노산의 라세미화를 회피하기 위해, O-아실이소우레아 중간체와 반응하도록 1-히드록시벤조트리아졸(HOBt)과 같은 시약이 첨가된다. 사용될 수 있는 다른 커플링제에는, 추가의 활성화 염기와 함께, 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(HBTU) 및 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트(BOP)가 포함된다. 최종적으로, 아미노산 탈보호 및 커플링에 이어,
합성 과정의 마지막에, 폴리펩타이드로부터 보호기의 제거가 일어나야 하며, 이러한 과정은 통상적으로 산분해를 통해 일어난다. 펩타이드 절단에 필요한 시약을 결정하는 것은 사용되는 보호 체계 및 전반적인 합성 방법과 상관관계가 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, Bzl 및 Boc 기를 절단하는 데 브롬화수소(HBr); 플루오린화수소(HF); 또는 트리플루오로메탄 설폰산(TFMSA)이 사용될 수 있다. 대안적으로, 다른 구현예에서, TFA와 같은 덜 강한 산은 tBut 및 Fmoc 기의 산분해를 가능하게 할 수 있다. 최종적으로, 펩타이드가 펩타이드의 물리화학적 특징(예를 들어, 전하, 크기, 소수성 등)에 기반하여 정제될 수 있다. 펩타이드를 정제하는 데 사용될 수 있는 기술에는, 역상 크로마토그래피(RPC); 크기 배제 크로마토그래피; 분할 크로마토그래피; 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC); 및 이온 교환 크로마토그래피(IEC)를 포함하는 정제 기술이 포함된다.
예시적인 펩타이드 합성 방법은 문헌[Anderson G. W. and McGregor A. C. (1957) T-butyloxycarbonylamino acids and their use in peptide synthesis. Journal of the American Chemical Society. 79, 6180-3]; 문헌[Carpino L. A. (1957) Oxidative reactions of hydrazines. Iv. Elimination of nitrogen from 1, 1-disubstituted-2-arenesulfonhydrazides1-4. Journal of the American Chemical Society. 79, 4427-31]; 문헌[McKay F. C. and Albertson N. F. (1957) New amine-masking groups for peptide synthesis. Journal of the American Chemical Society. 79, 4686-90]; 문헌[Merrifield R. B. (1963) Solid phase peptide synthesis. I. The synthesis of a tetrapeptide. Journal of the American Chemical Society. 85, 2149-54]; 문헌[Carpino L. A. and Han G. Y. (1972) 9-fluorenylmethoxycarbonyl amino-protecting group. The Journal of Organic Chemistry. 37, 3404-9]; 및 문헌[A Lloyd-Williams P. et al. (1997) Chemical approaches to the synthesis of peptides and proteins. Boca Raton: CRC Press. 278]; 미국 특허 제3,714,140호(1971년 3월 16일자 출원); 제4,411,994호(1978년 6월 8일자 출원); 제7,785,832호(2006년 1월 20일자 출원); 제8,314,208호(2006년 2월 10일자 출원); 및 제10,442,834호(2015년 10월 2일자 출원); 및 미국 특허 출원 제2005/0165215호(2004년 12월 23일자 출원)에서 확인할 수 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
폴리뉴클레오타이드, 펩타이드 및 CRIP를 생성하는 추가의 예시적인 방법은 미국 특허 출원 공개공보 제20150148288 A1호에서 확인할 수 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
본원에 기재된 방법 중 임의의 것을 사용하여 본원에 기재된 바와 같은 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA 중 임의의 것을 생성할 수 있다.
세포 배양 및 형질전환 기술
"형질전환"과 "트랜스펙션"이라는 용어는 모두 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA를 숙주 유기체에 도입하는 과정을 설명한다. 일반적으로, 당업자는 때때로 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA가 박테리아 세포에 도입되는 과정을 설명하기 위해 "형질전환"이라는 용어를 사용하고; 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA를 진핵생물 세포에 도입하는 것을 설명하는 과정에 대해 "트랜스펙션"이라는 용어를 사용한다. 하지만, 본원에 사용된 "형질전환"과 "트랜스펙션"이라는 용어는, 과정이 외인성 및/또는 이종 DNA 또는 RNA를 원핵생물(예를 들어, 박테리아) 또는 진핵생물(예를 들어, 효모, 식물 또는 동물)에 도입하는 것을 설명하는 지에 관계없이, 동의어로 사용된다.
일부 구현예에서, 숙주 세포는 하기 방법을 사용하여 형질전환될 수 있다: 전기천공; 세포 스퀴징(cell squeezing); 미세주사; 임팔펙션(impalefection); 정수압의 사용; 소노포레이션(sonoporation); 광학 트랜스펙션; 연속 주입; 리포펙션; 아데노바이러스, 아데노연관바이러스, 렌티바이러스, 단순헤르페스바이러스 및 레트로바이러스와 같은 바이러스의 사용; 화학적 포스페이트 방법; DEAE-덱스트란 또는 폴리에틸렌이민(PEI)을 통한 세포내이입; 원형질체 융합; 유체역학적 전달; 마그네토펙션(magnetofection); 핵감염; 및/또는 기타. 트랜스펙션 및/또는 형질전환 기술에 관한 예시적인 방법은 문헌[Makrides (2003), Gene Transfer and Expression in Mammalian Cells, Elvesier; Wong, TK & Neumann, E. Electric field mediated gene transfer. Biochem. Biophys. Res. Commun. 107, 584-587 (1982)]; 문헌[Potter & Heller, Transfection by Electroporation. Curr Protoc Mol Biol. 2003 May; CHAPTER: Unit-9.3]; 문헌[Kim & Eberwine, Mammalian cell transfection: the present and the future. Anal Bioanal Chem. 2010 Aug; 397(8): 3173-3178]에서 확인할 수 있으며, 이러한 참고문헌들은 각각 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
전기천공은 전기를 세포에 가하여 세포막을 투과성으로 만드는 기술로, 이는 결국 외인성 DNA가 세포 내로 도입되게 한다. 전기천공은 당업자에게 널리 공지되어 있으며, 전기천공을 달성하는 데 필요한 도구 및 장치는 상업적으로 입수 가능하다(예를 들어, Gene Pulser Xcell™ Electroporation Systems, Bio-Rad®; Neon® Transfection System for Electroporation, Thermo-Fisher Scientific; 및 기타 도구 및/또는 장치). 예시적인 전기천공 방법은 문헌[Potter & Heller, Transfection by Electroporation. Curr Protoc Mol Biol. 2003 May; CHAPTER: Unit-9.3]; 문헌[Saito (2015) Electroporation Methods in Neuroscience. Springer press]; 문헌[Pakhomov et al., (2017) Advanced Electroporation Techniques in Biology and Medicine. Taylor & Francis]에 예시되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 전기천공은 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 함유하는 벡터를 효모에 도입하는 데, 예를 들어 CRIP 또는 펩타이드-IA를 pKlac1 플라스미드에 클로닝하고, 전기천공을 통해 클루이베로마이세스 락티스 세포로 형질전환시키는 데 사용될 수 있으며, 이는 하기 단계를 통해 달성될 수 있다: 약 10 mL 내지 200 mL의 효모 추출물 펩톤 덱스트로오스(YEPD)에 적합한 효모 종, 예를 들어 클루이베로마이세스 락티스, 클루이베로마이세스 마르시아누스(Kluyveromyces marxianus), 사카로마이세스 세레비시아에, 피키아 파스토리스 등을 접종하고, 효모 배양물의 초기 지수 단계(예를 들어, 약 0.6 내지 2 x 108개 세포/mL)까지 진탕기 상에서 30℃에서 인큐베이션하는 단계; 멸균 원심분리 튜브에 효모를 수거하여 4℃, 3000 rpm에서 5분 동안 원심분리하고(주의: 절차 동안 세포를 차갑게 유지), 40 mL의 얼음 냉각된 멸균 탈이온수로 세포를 세척하고, 세포를 23,000 rpm에서 5분 동안 펠릿화하는 단계; 세척 단계를 반복하고, 20 mL의 1 M 발효 당, 예를 들어 갈락토오스, 말토오스, 라토트리오스, 수크로오스, 프룩토오스 또는 글루코오스, 및/또는 당 알코올, 예를 들어 에리트리톨, 수소첨가된 전분 가수분해물, 이소말트, 락티톨, 말티톨, 만니톨 및 자일리톨 중에 세포를 재현탁시킨 후, 3,000 rpm에서 5분 동안 회전시키는 단계; 적절한 부피의 얼음 냉각된 1 M 발효 당, 예를 들어 갈락토오스, 말토오스, 라토트리오스, 수크로오스, 프룩토오스 또는 글루코오스, 및/또는 당 알코올, 예를 들어 에리트리톨, 수소첨가된 전분 가수분해물, 이소말트, 락티톨, 말티톨, 만니톨 및 자일리톨을 이용하여 최종 세포 밀도 3x109개 세포/mL까지 세포를 재현탁시키는 단계; 사전 냉각된 0.2 cm 전기천공 큐벳(주의: 샘플이 알루미늄 큐벳의 양쪽 측면과 접촉하고 있는 지 확인)에서 40 μl의 효모 현탁액을 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 선형 폴리뉴클레오타이드(약 1 μg)를 함유하는 벡터 약 1 μl 내지 4 μl과 혼합하는 단계; RC 회로의 5 ms의 최적 시간 상수를 위해 2000 V에서 단일 펄스를 제공한 후, 세포를 0.5 ml의 YED 및 0.5 mL의 1 M 발효 당, 예를 들어 갈락토오스, 말토오스, 라토트리오스, 수크로오스, 프룩토오스 또는 글루코오스, 및/또는 당 알코올, 예를 들어 에리트리톨, 수소첨가된 전분 가수분해물, 이소말트, 락티톨, 말티톨, 만니톨 및 자일리톨 혼합물에서 회수하고, 선별 플레이트 상에 확산시키는 단계.
일부 구현예에서, 전기천공은 하기 단계를 통해 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 함유하는 벡터를 식물 원형질체에 도입하는 데 사용될 수 있다: 원형질체 용액(예를 들어, 약 8 mL의 10 mM 2-[N-모르폴리노]에탄설폰산(MES), pH 5.5; 0.01%(w/v) 펙틸라아제(pectylase); 1%(w/v) 마세로자임(macerozyme); 40 mM CaCl2; 및 0.4 M 만니톨) 중에서 멸균 식물 물질을 인큐베이션하고, 혼합물을 30℃에서 약 3시간 내지 6시간 동안 회전식 진탕기에 첨가하여 원형질체를 생성하는 단계; 80 μm-메쉬 나일론 스크린 여과를 통해 잔해물을 제거하는 단계; 스크린을 약 4 ml의 식물 전기천공 완충액(예를 들어, 5 mM CaCl2; 0.4 M 만니톨; 및 PBS)을 이용하여 헹구는 단계; 멸균 15 mL 원추형 원심분리 튜브에 원형질체를 조합한 후, 약 300 × g에서 약 5분 동안 원심분리하는 단계; 원심분리 후, 상청액을 폐기하고, 5 mL의 식물 전기천공 완충액을 이용하여 세척하는 단계; 원형질체를 식물 전기천공 완충액 중에 액체 1 mL 당 약 1.5 x 106개 내지 2 x 106개 원형질체로 재현탁시키는 단계; 약 0.5 mL의 원형질체 현탁액을 얼음 위에 고정한 하나 이상의 전기천공 큐벳에 옮기고, 벡터를 첨가하는 단계(주의: 안정한 형질전환의 경우, 벡터는 상기 기재된 제한 방법 중 어느 하나를 사용하여 선형화되어야 하며, 약 1 μg 내지 10 μg의 벡터가 사용될 수 있고; 일시적 발현의 경우, 벡터는 초나선 상태로 유지될 수 있으며, 약 10 μg 내지 40 μg의 벡터가 사용될 수 있음); 벡터와 원형질체 현탁액을 혼합하는 단계; 큐벳을 전기천공 기기에 위치시키고, 약 1 kV 내지 2 kV(반응을 최적화시키는 동안 초기에 3 μF 내지 25 μF의 정전용량이 사용될 수 있음)로 1회 이상 충격을 가하는 단계; 큐벳을 다시 얼음으로 옮기는 단계; 형질전환된 세포를 완전 배지에 20배 희석하는 단계; 및 약 48시간 후 원형질체를 수거하는 단계.
숙주 세포
본 발명의 방법, 조성물, CRIP 및 펩타이드-IA는 임의의 세포 유형, 예를 들어 진핵생물 또는 원핵생물 세포에서 구현될 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 원핵생물이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 숙주 세포는 그람 음성 또는 그람 양성 유기체와 같은 원시세균(Archaebacteria) 또는 진정세균(Eubacteria)일 수 있다. 유용한 박테리아의 예에는, 에스케리키아(Escherichia)(예를 들어, 대장균), 바실리(Bacilli)(예를 들어, 바실러스 서브틸리스(B. subtilis)), 엔테로박테리아(Enterobacteria), 슈도모나스(Pseudomonas) 종(예를 들어, 슈도모나스 아에루기노사(P. aeruginosa)), 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium), 세라티아 마르세스칸스(Serratia marcescans), 클레브시엘라(Klebsiella), 프로테우스(Proteus), 시겔라(Shigella), 리조비아(Rhizobia), 비트레오실라(Vitreoscilla) 또는 파라코쿠스(Paracoccus)가 포함된다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 단세포성 세포이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 숙주 세포는 그람 양성 박테리아와 같은 박테리아 세포일 수 있다.
일부 구현예에서, 숙주 세포는 하기로 이루어지는 속에서 선택되는 박테리아일 수 있다: 칸디다투스 클로라시도박테리움(Candidatus Chloracidobacterium), 아르트로박테르(Arthrobacter), 코리네박테리움(Corynebacterium), 프란키아(Frankia), 미크로코쿠스(Micrococcus), 마이코박테리움(Mycobacterium), 프로피오니박테리움(Propionibacterium), 스트렙토마이세스(Streptomyces), 아쿠이펙스 박테로이데스(Aquifex Bacteroides), 포르피로모나스(Porphyromonas), 박테로이데스, 포르피로모나스, 플라보박테리움(Flavobacterium), 클라미디아(Chlamydia), 프로스테코박테르(Prosthecobacter), 베루코미크로비움(Verrucomicrobium), 클로로플렉수스(Chloroflexus), 크루코쿠스(Chroococcus), 메리스모페디아(Merismopedia), 시네코코쿠스(Synechococcus), 아나바에나(Anabaena), 노스톡(Nostoc), 스피룰리나(Spirulina), 트리코데스미움(Trichodesmium), 플레우로캅사(Pleurocapsa), 프로클로로코쿠스(Prochlorococcus), 프로클로론(Prochloron), 바실러스(Bacillus), 리스테리아(Listeria), 스타필로코쿠스(Staphylococcus), 클로스트리디움(Clostridium), 데할로박테르(Dehalobacter), 에풀로피시움(Epulopiscium), 루미노코쿠스(Ruminococcus), 엔테로코쿠스(Enterococcus), 락토바실러스(Lactobacillus), 스트렙토코쿠스(Streptococcus), 에리시펠로트릭스(Erysipelothrix), 마이코플라즈마(Mycoplasma), 렙토스피릴룸(Leptospirillum), 니트로스피라(Nitrospira), 테르모데설포박테리움(Thermodesulfobacterium), 겜마타(Gemmata), 피렐룰라(Pirellula), 플란크토마이세스(Planctomyces), 카울로박테르(Caulobacter), 아그로박테리움, 브라디리조비움(Bradyrhizobium), 브루셀라(Brucella), 메틸로박테리움(Methylobacterium), 프로스테코미크로비움(Prosthecomicrobium), 리조비움(Rhizobium), 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas), 시노리조비움(Sinorhizobium), 로도박테르(Rhodobacter), 로세오박테르(Roseobacter), 아세토박테르(Acetobacter), 로도스피릴룸(Rhodospirillum), 리케치아(Rickettsia), 리케치아 코노리(Rickettsia conorii), 미토콘드리아(Mitochondria), 울바키아(Wolbachia), 에리트로박테르(Erythrobacter), 에리트로미크로비움(Erythromicrobium), 스핑고모나스(Sphingomonas), 알칼리게네스(Alcaligenes), 부크홀데리아(Burkholderia), 렙토트릭스(Leptothrix), 스파에로틸루스(Sphaerotilus), 티오바실러스(Thiobacillus), 네이세리아(Neisseria), 니트로소모나스(Nitrosomonas), 갈리오넬라(Gallionella), 스피릴룸(Spirillum), 아조아르쿠스(Azoarcus), 아에로모나스(Aeromonas), 숙시노모나스(Succinomonas), 숙시니비브리오(Succinivibrio), 루미노박테르(Ruminobacter), 니트로소코쿠스(Nitrosococcus), 티오캅사(Thiocapsa), 엔테로박테르(Enterobacter), 에스케리키아, 클레브시엘라, 살모넬라(Salmonella), 시겔라, 위글레스워르티아(Wigglesworthia), 예르시니아(Yersinia), 콕시엘라(Coxiella), 레지오넬라(Legionella), 할로모나스(Halomonas), 파스테우렐라(Pasteurella), 아시네토박테르(Acinetobacter), 아조토박테르(Azotobacter), 슈도모나스, 시크로박테르(Psychrobacter), 베기아토아(Beggiatoa), 티오마르가리타(Thiomargarita), 비브리오(Vibrio), 잔토모나스(Xanthomonas), 브델로비브리오(Bdellovibrio), 캄필로박테르(Campylobacter), 헬리코박테르(Helicobacter), 믹소코쿠스(Myxococcus), 데설포사르시나(Desulfosarcina), 게오박테르(Geobacter), 데설푸로모나스(Desulfuromonas), 보렐리아(Borrelia), 렙토스피라(Leptospira), 트레포네마(Treponema), 페트로토가(Petrotoga), 테르모토가(Thermotoga), 데이노코쿠스(Deinococcus) 또는 테르무스(Thermus).
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 하기 박테리아 종 중 하나에서 선택될 수 있다: 바실러스 알칼로필루스(Bacillus alkalophilus), 바실러스 아밀로리쿠에파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 바실러스 브레비스(Bacillus brevis), 바실러스 시르쿨란스(Bacillus circulans), 바실러스 코아굴란스(Bacillus coagulans), 바실러스 라우투스(Bacillus lautus), 바실러스 렌투스(Bacillus lentus), 바실러스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium), 바실러스 스테아로테르모필루스(Bacillus stearothermophilus), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 투린기엔시스, 스트렙토마이세스 리비단스(Streptomyces lividans), 스트렙토마이세스 무리누스(Streptomyces murinus), 스트렙토마이세스 코엘리콜로르(Streptomyces coelicolor), 스트렙토마이세스 알비칸스(Streptomyces albicans), 스트렙토마이세스 그리세우스(Streptomyces griseus), 스트렙토마이세스 플리카토스포루스(Streptomyces plicatosporus), 에스케리키아 알베르티(Escherichia albertii), 에스케리키아 블라타에(Escherichia blattae), 에스케리키아 콜리(Escherichia coli), 에스케리키아 페르구소니(Escherichia fergusonii), 에스케리키아 헤르만니(Escherichia hermannii), 에스케리키아 세네갈렌시스(Escherichia senegalensis), 에스케리키아 불네리스(Escherichia vulneris), 슈도모나스 아비에타니필라(Pseudomonas abietaniphila), 슈도모나스 아가리시(Pseudomonas agarici), 슈도모나스 아가롤리티쿠스(Pseudomonas agarolyticus), 슈도모나스 알칼리필라(Pseudomonas alcaliphila), 슈도모나스 알기노보라(Pseudomonas alginovora), 슈도모나스 안데르소니(Pseudomonas andersonii), 슈도모나스 안타르크티카(Pseudomonas antarctica), 슈도모나스 아스플레니(Pseudomonas asplenii), 슈도모나스 아젤라이카(Pseudomonas azelaica), 슈도모나스 바투미시(Pseudomonas batumici), 슈도모나스 보레알리스(Pseudomonas borealis), 슈도모나스 브라시카세아룸(Pseudomonas brassicacearum), 슈도모나스 클로리티디스무탄스(Pseudomonas chloritidismutans), 슈도모나스 크레모리콜로라타(Pseudomonas cremoricolorata), 슈도모나스 디테르페니펠라(Pseudomonas diterpeniphila), 슈도모나스 필리신덴스(Pseudomonas filiscindens), 슈도모나스 프레데릭스베르겐시스(Pseudomonas frederiksbergensis), 슈도모나스 긴게리(Pseudomonas gingeri), 슈도모나스 그라미니스(Pseudomonas graminis), 슈도모나스 그리몬티(Pseudomonas grimontii), 슈도모나스 할로데니트리피칸스(Pseudomonas halodenitrificans), 슈도모나스 할로필라(Pseudomonas halophila), 슈도모나스 히비스시콜라(Pseudomonas hibiscicola), 슈도모나스 히드로게노보라(Pseudomonas hydrogenovora), 슈도모나스 인디카(Pseudomonas indica), 슈도모나스 자포니카(Pseudomonas japonica), 슈도모나스 제세니(Pseudomonas jessenii), 슈도모나스 킬로넨시스(Pseudomonas kilonensis), 슈도모나스 코린시스(Pseudomonas koreensis), 슈도모나스 리니(Pseudomonas lini), 슈도모나스 루리다(Pseudomonas lurida), 슈도모나스 루테아(Pseudomonas lutea), 슈도모나스 마르기나타(Pseudomonas marginata), 슈도모나스 메리디아나(Pseudomonas meridiana), 슈도모나스 메소아시도필라(Pseudomonas mesoacidophila), 슈도모나스 파카스트렐라에(Pseudomonas pachastrellae), 슈도모나스 팔레로니아나(Pseudomonas palleroniana), 슈도모나스 파라풀바(Pseudomonas parafulva), 슈도모나스 파보난세아에(Pseudomonas pavonanceae), 슈도모나스 프로테올리카(Pseudomonas proteolyica), 슈도모나스 프시크로필라(Pseudomonas psychrophila), 슈도모나스 프시크로톨레란스(Pseudomonas psychrotolerans), 슈도모나스 푸디카(Pseudomonas pudica), 슈도모나스 라토니스(Pseudomonas rathonis), 슈도모나스 레악탄스(Pseudomonas reactans), 슈도모나스 리조스파에라에(Pseudomonas rhizosphaerae), 슈도모나스 살모노니(Pseudomonas salmononii), 슈도모나스 테르마에룸(Pseudomonas thermaerum), 슈도모나스 테르모카르복시도보란스(Pseudomonas thermocarboxydovorans), 슈도모나스 테르모톨레란스(Pseudomonas thermotolerans), 슈도모나스 티베르발렌시스(Pseudomonas thivervalensis), 슈도모나스 움손겐시스(Pseudomonas umsongensis), 슈도모나스 반코우베렌시스(Pseudomonas vancouverensis), 슈도모나스 위스콘시넨시스(Pseudomonas wisconsinensis), 슈도모나스 잔토마리나(Pseudomonas xanthomarina), 슈도모나스 지아메넨시스(Pseudomonas xiamenensis), 슈도모나스 아에루기노사, 슈도모나스 알칼리게네스(Pseudomonas alcaligenes), 슈도모나스 안구일리셉티카(Pseudomonas anguilliseptica), 슈도모나스 시트로넬로리스(Pseudomonas citronellolis), 슈도모나스 플라베센스(Pseudomonas flavescens), 슈도모나스 진주엔시스(Pseudomonas jinjuensis), 슈도모나스 멘도시나(Pseudomonas mendocina), 슈도모나스 니트로레두센스(Pseudomonas nitroreducens), 슈도모나스 올레오보란스(Pseudomonas oleovorans), 슈도모나스 슈도알칼리게네스(Pseudomonas pseudoalcaligenes), 슈도모나스 레시노보란스(Pseudomonas resinovorans), 슈도모나스 스트라미나에(Pseudomonas straminae), 슈도모나스 아우란티아카(Pseudomonas aurantiaca), 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis), 슈도모나스 프라기(Pseudomonas fragi), 슈도모나스 룬덴시스(Pseudomonas lundensis), 슈도모나스 타에트롤렌스(Pseudomonas taetrolens), 슈도모나스 아조토포르만스(Pseudomonas azotoformans), 슈도모나스 브레네리(Pseudomonas brenneri), 슈도모나스 세드리나(Pseudomonas cedrina), 슈도모나스 콘겔란스(Pseudomonas congelans), 슈도모나스 코루가타(Pseudomonas corrugata), 슈도모나스 코스탄티니(Pseudomonas costantinii), 슈도모나스 엑스트레모리엔탈리스(Pseudomonas extremorientalis), 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluorescens), 슈도모나스 풀기다(Pseudomonas fulgida), 슈도모나스 게사르디(Pseudomonas gessardii), 슈도모나스 리바넨시스(Pseudomonas libanensis), 슈도모나스 만델리(Pseudomonas mandelii), 슈도모나스 마르기날리스(Pseudomonas marginalis), 슈도모나스 메디테라네아(Pseudomonas mediterranea), 슈도모나스 미굴라에(Pseudomonas migulae), 슈도모나스 무시돌렌스(Pseudomonas mucidolens), 슈도모나스 오리엔탈리스(Pseudomonas orientalis), 슈도모나스 포아에(Pseudomonas poae), 슈도모나스 로데시아에(Pseudomonas rhodesiae), 슈도모나스 신잔타(Pseudomonas synxantha), 슈도모나스 톨라시(Pseudomonas tolaasii), 슈도모나스 트리비알리스(Pseudomonas trivialis), 슈도모나스 베로니(Pseudomonas veronii), 슈도모나스 데니트리피칸스(Pseudomonas denitrificans), 슈도모나스 페르투시노게나(Pseudomonas pertucinogena), 슈도모나스 풀바(Pseudomonas fulva), 슈도모나스 몬테일리(Pseudomonas monteilii), 슈도모나스 모셀리(Pseudomonas mosselii), 슈도모나스 오리지하비탄스(Pseudomonas oryzihabitans), 슈도모나스 플레코글로시시다(Pseudomonas plecoglossicida), 슈도모나스 푸티다(Pseudomonas putida), 슈도모나스 발레아리카(Pseudomonas balearica), 슈도모나스 루테올라(Pseudomonas luteola) 또는 슈도모나스 스투체리(Pseudomonas stutzeri), 수도모나스 아벨라나에(Pseudomonas avellanae), 슈도모나스 카나비나(Pseudomonas cannabina), 슈도모나스 카리카파피아에(Pseudomonas caricapapyae), 슈도모나스 시코리(Pseudomonas cichorii), 슈도모나스 코로나파시엔스(Pseudomonas coronafaciens), 슈도모나스 푸스코바기나에(Pseudomonas fuscovaginae), 슈도모나스 트레마에(Pseudomonas tremae) 또는 슈도모나스 비리디플라바(Pseudomonas viridiflava).
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 진핵생물일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 하기 계통군에 속하는 세포일 수 있다: 후편모생물(Opisthokonta); 녹색식물(Viridiplantae)(예를 들어, 조류(algae) 및 식물); 아메바류(Amebozoa); 사족충류(Cercozoa); 피하낭류(Alveolata); 해양 편모류(Marine flagellates); 부등편모조류(Heterokonta); 반상크리스타류(Discicristata); 또는 엑스카바타(Excavata).
일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은, 예를 들어 후생동물(Metazoan), 동정편모충류(Choanoflagellata) 또는 진균인 숙주 세포를 사용하여 달성될 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은 진균인 숙주 세포를 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 숙주 세포는 하기 진핵생물 문에 속하는 세포일 수 있다: 자낭균류(Ascomycota), 담자균류(Basidiomycota), 호상균류(Chytridiomycota), 미포자충류(Microsporidia) 또는 접합균류(Zygomycota).
일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은 하기 속 중 하나에 속하는 진균인 숙주 세포를 사용하여 달성될 수 있다: 아스페르길루스(Aspergillus), 클라도스포리움(Cladosporium), 마그나포르테(Magnaporthe), 모르켈라(Morchella), 네우로스포라(Neurospora), 페니실리움(Penicillium), 사카로마이세스(Saccharomyces), 크립토코쿠스(Cryptococcus) 또는 우스틸라고(Ustilago).
일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은 하기 종 중 하나에 속하는 진균인 숙주 세포를 사용하여 달성될 수 있다: 사카로마이세스 세레비시아에, 사카로마이세스 보울라르디(Saccharomyces boulardi), 사카로마이세스 우바룸(Saccharomyces uvarum); 아스페르길루스 플라버스(Aspergillus flavus), 아스페르길루스 테레우스(A. terreus), 아스페르길루스 아와모리(A. awamori); 클라도스포리움 엘라툼(Cladosporium elatum), 클라도스포리움 헤르바룸(Cl. Herbarum), 클라도스포리움 스파에로스페르뭄(Cl. Sphaerospermum), 클라도스포리움 클라도스포리오이데스(Cl. Cladosporioides); 마그나포르테 그리세아(Magnaporthe grisea), 마그나포르테 오리자에(Magnaporthe oryzae), 마그나포르테 리조필라(Magnaporthe rhizophila); 모르켈라 델리시오사(Morchella deliciosa), 모르켈라 에스쿨렌타(Morchella esculenta), 모르켈라 코니카(Morchella conica); 네우로스포라 크라사(Neurospora crassa), 네우로스포라 인테르메디아(Neurospora intermedia), 네우로스포라 테트라스페르마(Neurospora tetrasperma); 페니실리움 노타툼(Penicillium notatum), 페니실리움 크리소게눔(Penicillium chrysogenum), 페니실리움 로쿠에포르티(Penicillium roquefortii) 또는 페니실리움 심플리시시뭄(Penicillium simplicissimum).
일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은 클루이베로마이세스 락티스, 클루이베로마이세스 마르시아누스, 사카로마이세스 세레비시아에 또는 피키아 파스토리스인 숙주 세포를 사용하여 달성될 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 하기 속 중 하나에 속하는 진균일 수 있다: 아스페르길루스, 클라도스포리움, 마그나포르테, 모르켈라, 네우로스포라, 페니실리움, 사카로마이세스, 크립토코쿠스 또는 우스틸라고.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 사카로마이세타세아에(Saccharomycetaceae) 과의 구성원일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 숙주 세포는 사카로마이세타세아에 과 내 하기 속 중 하나일 수 있다: 브레타노마이세스(Brettanomyces), 칸디다(Candida), 시테로마이세스(Citeromyces), 시니클로마이세스(Cyniclomyces), 데바리오마이세스(Debaryomyces), 이사트켄키아(Issatchenkia), 카자크스타니아(Kazachstania), 클루이베로마이세스, 코마가타엘라(Komagataella), 쿠라이시아(Kuraishia), 라칸세아(Lachancea), 로데로마이세스(Lodderomyces), 나카세오마이세스(Nakaseomyces), 파키솔렌(Pachysolen), 피키아(Pichia), 사카로마이세스, 스파타스포라(Spathaspora), 테트라피시스포라(Tetrapisispora), 반데르왈토지마(Vanderwaltozyma), 토룰라스포라(Torulaspora), 윌리옵시스(Williopsis), 지고사카로마이세스(Zygosaccharomyces) 또는 지고토룰라스포라(Zygotorulaspora).
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 하기 중 하나일 수 있다: 아스페르길루스 플라버스, 아스페르길루스 테레우스, 아스페르길루스 아와모리, 클라도스포리움 엘라툼, 클라도스포리움 헤르바룸, 클라도스포리움 스파에로스페르뭄, 클라도스포리움 클라도스포리오이데스, 마그나포르테 그리세아, 마그나포르테 오리자에, 마그나포르테 리조필라, 모르켈라 델리시오사, 모르켈라 에스쿨렌타, 모르켈라 코니카, 네우로스포라 크라사, 네우로스포라 인테르메디아, 네우로스포라 테트라스페르마, 페니실리움 노타툼, 페니실리움 크리소게눔, 페니실리움 로쿠에포르티 또는 페니실리움 심플리시시뭄.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 칸디다 속 내 종일 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포는 하기 중 하나일 수 있다: 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 아스칼라피다룸(Candida ascalaphidarum), 칸디다 암픽시아에(Candida amphixiae), 칸디다 안타르크티카(Candida antarctica), 칸디다 아르겐테아(Candida argentea), 칸디다 아틀란티카(Candida atlantica), 칸디다 아트모스파에리카(Candida atmosphaerica), 칸디다 아우리스(Candida auris), 칸디다 블란키(Candida blankii), 칸디다 블라타에(Candida blattae), 칸디다 브라카렌시스(Candida bracarensis), 칸디다 브로멜리아세아룸(Candida bromeliacearum), 칸디다 카르포필리아(Candida carpophila), 칸디다 카르바잘리스(Candida carvajalis), 칸디다 세람비시다룸(Candida cerambycidarum), 칸디다 카울리오데스(Candida chauliodes), 칸디다 코리달리스(Candida corydalis), 칸디다 도세이(Candida dosseyi), 칸디다 두블리니엔시스(Candida dubliniensis), 칸디다 에르가텐시스(Candida ergatensis), 칸디다 프룩투스(Candida fructus), 칸디다 글라브라타(Candida glabrata), 칸디다 페르멘타티(Candida fermentati), 칸디다 구일리에르몬디(Candida guilliermondii), 칸디다 하에물로니(Candida haemulonii), 칸디다 후밀리스(Candida humilis), 칸디다 인섹타멘스(Candida insectamens), 칸디다 인섹토룸(Candida insectorum), 칸디다 인테르메디아, 칸디다 제프레시(Candida jeffresii) 또는 칸디다 케피르(Candida kefyr).
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 클루이베로마이세스 속 내 종일 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포는 하기 중 하나일 수 있다: 클루이베로마이세스 아에스투아리(Kluyveromyces aestuarii), 클루이베로마이세스 돕잔스키(Kluyveromyces dobzhanskii), 클루이베로마이세스 락티스, 클루이베로마이세스 마르시아누스, 클루이베로마이세스 논페르멘탄스(Kluyveromyces nonfermentans) 또는 클루이베로마이세스 위케라미(Kluyveromyces wickerhamii).
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 피키아 속 내 종일 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포는 하기 중 하나일 수 있다: 피키아 파리노세(Pichia farinose), 피키아 아노말라(Pichia anomala), 피키아 히디(Pichia heedii), 피키아 구일리에르몬디, 피키아 클루이베리(Pichia kluyveri), 피키아 멤브라니파시엔스(Pichia membranifaciens), 피키아 노르베겐시스(Pichia norvegensis), 피키아 오메리(Pichia ohmeri), 피키아 파스토리스, 피키아 메타놀리카(Pichia methanolica) 또는 피키아 서브펠리쿨로사(Pichia subpelliculosa).
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 사카로마이세스 속 내 종일 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포는 하기 중 하나일 수 있다: 사카로마이세스 아르보리콜루스(Saccharomyces arboricolus), 사카로마이세스 바야누스(Saccharomyces bayanus), 사카로마이세스 불데리(Saccharomyces bulderi), 사카로마이세스 카리오카누스(Saccharomyces cariocanus), 사카로마이세스 카리오쿠스(Saccharomyces cariocus), 사카로마이세스 세레비시아에, 사카로마이세스 세레비시아에 변종 보울라르디, 사카로마이세스 케발리에리(Saccharomyces chevalieri), 사카로마이세스 다이레넨시스(Saccharomyces dairenensis), 사카로마이세스 엘립소이데우스(Saccharomyces ellipsoideus), 사카로마이세스 에우바야누스(Saccharomyces eubayanus), 사카로마이세스 엑시구오우스(Saccharomyces exiguous), 사카로마이세스 플로렌티누스(Saccharomyces florentinus), 사카로마이세스 프라길리스(Saccharomyces fragilis), 사카로마이세스 쿠드리아브제비(Saccharomyces kudriavzevii), 사카로마이세스 마르티니아에(Saccharomyces martiniae), 사카로마이세스 미카타에(Saccharomyces mikatae), 사카로마이세스 모나센시스(Saccharomyces monacensis), 사카로마이세스 노르벤시스(Saccharomyces norbensis), 사카로마이세스 파라독수스(Saccharomyces paradoxus), 사카로마이세스 파스토리아누스(Saccharomyces pastorianus), 사카로마이세스 스펜세로룸(Saccharomyces spencerorum), 사카로마이세스 투리센시스(Saccharomyces turicensis), 사카로마이세스 우니스포루스(Saccharomyces unisporus), 사카로마이세스 우바룸 또는 사카로마이세스 조나투스(Saccharomyces zonatus).
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 하기 중 하나일 수 있다: 사카로마이세스 세레비시아에, 피키아 파스토리스, 피키아 메타놀리카, 스키조사카로마이세스 폼베 또는 한세눌라 아노말라(Hansenula anomala).
재조합 CRIP 또는 펩타이드-IA를 생성하기 위해 숙주 유기체로서 효모 세포를 사용하는 것은 당업자에게 널리 공지된 예외적인 방법이다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법 및 조성물은, 비제한적으로, 사카로마이세스, 피키아, 클루이베로마이세스, 한세눌라, 야로위아(Yarrowia) 또는 스키조사카로마이세스 속의 임의의 종을 포함하는 임의의 종의 효모를 이용하여 수행될 수 있으며, 사카로마이세스 종에는 사카로마이세스의 임의의 종, 예를 들어 하기 균주에서 선택되는 사카로마이세스 세레비시아에 종이 포함된다: INVSc1, YNN27, S150-2B, W303-1B, CG25, W3124, JRY188, BJ5464, AH22, GRF18, W303-1A 및 BJ3505. 일부 구현예에서, 피키아의 임의의 종, 예를 들어 피키아 종, 피키아 파스토리스, 예를 들어 피키아 파스토리스를 포함하는 피키아 종의 구성원은 하기 균주에서 선택된다: Bg08, Y-11430, X-33, GS115, GS190, JC220, JC254, GS200, JC227, JC300, JC301, JC302, JC303, JC304, JC305, JC306, JC307, JC308, YJN165, KM71, MC100-3, SMD1163, SMD1165, SMD1168, GS241, MS105, 임의의 pep4 녹아웃 균주 및 임의의 prb1 녹아웃 균주뿐 아니라, 하기 균주에서 선택되는 피키아 파스토리스: Bg08, X-33, SMD1168 및 KM71. 일부 구현예에서, 클루이베로마이세스의 임의의 종, 예를 들어 클루이베로마이세스 락티스를 포함하는 임의의 클루이베로마이세스 종이 본원에 기재된 방법을 수행하기 위해 사용될 수 있으며, 본 발명자들은 클루이베로마이세스 락티스 균주가 하기 균주에서 선택될 수 있지만, 반드시 그럴 필요가 있는 것은 아님을 교시한다: GG799, YCT306, YCT284, YCT389, YCT390, YCT569, YCT598, NRRL Y-1140, MW98-8C, MS1, CBS293.91, Y721, MD2/1, PM6-7A, WM37, K6, K7, 22AR1, 22A295-1, SD11, MG1/2, MSK110, JA6, CMK5, HP101, HP108 및 PM6-3C, 이에 더하여, 클루이베로마이세스 락티스 종은 GG799, YCT306 및 NRRL Y-1140에서 선택됨.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 아스페르길루스 오리자에일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 아스페르길루스 자포니쿠스(Aspergillus japonicus)일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 아스페르길루스 니게르(Aspergillus niger)일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 바실러스 리케니포르미스일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 바실러스 서브틸리스일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 데 사용되는 숙주 세포는 트리코데르마 리세이(Trichoderma reesei)일 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은, 비제한적으로, 한세눌라의 임의의 종, 및 바람직하게는 한세눌라 폴리모르파(Hansenula polymorpha)를 포함하는 한세눌라 종의 임의의 종을 포함하는 효모인 숙주 세포를 사용하여 달성될 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은, 비제한적으로, 야로위아 종의 임의의 종, 예를 들어 야로위아 리폴리티카(Yarrowia lipolytica)를 포함하는 임의의 종의 효모를 이용하여 달성될 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 절차 및 방법은, 비제한적으로, 스키조사카로마이세스의 임의의 종, 및 바람직하게는 스키조사카로마이세스 폼베를 포함하는 스키조사카로마이세스 종의 임의의 종을 포함하는 임의의 종의 효모를 이용하여 달성될 수 있다.
효모 세포 배양
일부 구현예에서, 클루이베로마이세스 락티스, 사카로마이세스 세레비시아에, 피키아 파스토리스 등과 같은 효모 종이 숙주 유기체로 사용될 수 있다. 효모 세포 배양 기술은 당업자에게 널리 공지되어 있다. 예시적인 효모 세포 배양 방법은 문헌[Evans, Yeast Protocols. Springer (1996)]; 문헌[Bill, Recombinant Protein Production in Yeast. Springer (2012)]; 문헌[Hagan et al., Fission Yeast: A Laboratory Manual, CSH Press (2016)]; 문헌[Konishi et al., Improvement of the transformation efficiency of Saccharomyces cerevisiae by altering carbon sources in pre-culture. Biosci Biotechnol Biochem. 2014; 78(6):1090-3]; 문헌[Dymond, Saccharomyces cerevisiae growth media. Methods Enzymol. 2013; 533:191-204]; 문헌[Looke et al., Extraction of genomic DNA from yeasts for PCR-based applications. Biotechniques. 2011 May; 50(5):325-8]; 및 문헌[Romanos et al., Culture of yeast for the production of heterologous proteins. Curr Protoc Cell Biol. 2014 Sep 2; 64:20.9.1-16]에서 확인할 수 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
효모 세포 발효 배지 및 스톡에 대한 레시피는 하기에 기재되는 바와 같다: (1) MSM 배지 레시피: 2 g/L 시트르산소듐 2수화물; 1 g/L 황산칼슘 2수화물(0.79 g/L 무수 황산칼슘); 42.9 g/L 일염기성 인산포타슘; 5.17 g/L 황산암모늄; 14.33 g/L 황산포타슘; 11.7 g/L 황산마그네슘 7수화물; 2 mL/L PTM1 미량 염 용액; 0.4 ppm 비오틴(500X, 200 ppm 스톡); 1% 내지 2% 순수한 글리세롤 또는 다른 탄소 공급원. (2) PTM1 미량 염 용액: 황산구리-5H2O 6.0 g; 요오드화소듐 0.08 g; 황산망간-H2O 3.0 g; 몰리브덴산소듐-2H2O 0.2 g; 붕산 0.02 g; 염화코발트 0.5 g; 염화아연 20.0 g; 황산제1철-7H2O 65.0 g; 비오틴 0.2 g; 황산 5.0 ml; 최종 부피 1리터까지 물을 첨가함. 클루이베로마이세스 락티스 제한 배지(DMSor)에 대한 예시적인 조성은 하기와 같다: 11.83 g/L KH2PO4, 2.299 g/L K2HPO4, 20 g/L의 발효 당, 예를 들어 갈락토오스, 말토오스, 라토트리오스, 수크로오스, 프룩토오스 또는 글루코오스, 및/또는 당 알코올, 예를 들어 에리트리톨, 수소첨가된 전분 가수분해물, 이소말트, 락티톨, 말티톨, 만니톨 및 자일리톨, 1 g/L MgSO4.7H2O, 10 g/L (NH4)SO4, 0.33 g/L CaCl2.2H2O, 1 g/L NaCl, 1 g/L KCl, 5 mg/L CuSO4.5H2O, 30 mg/L MnSO4.H2O, 10 mg/L ZnCl2, 1 mg/L KI, 2 mg/L CoCl2.6H2O, 8 mg/L Na2MoO4.2H2O, 0.4 mg/L H3BO3, 15 mg/L FeCl3.6H2O, 0.8 mg/L 비오틴, 20 mg/L Ca-판토테네이트, 15 mg/L 티아민, 16 mg/L 미오-이노시톨, 10 mg/L 니코틴산 및 4 mg/L 피리독신.
효모 세포는 접종 후 멸균된 공기 투과성 덮개로 밀봉되는 48웰 딥웰 플레이트에서 배양할 수 있다. 플레이트 상에서 배양된 효모, 예를 들어 클루이베로마이세스 락티스의 콜로니를 선택하여, 딥웰 플레이트에 웰 당 DMSor로 구성된 배지를 2.2 mL 접종할 수 있다. 접종된 딥웰 플레이트를 냉장 인큐베이터-진탕기에서 280 rpm으로 진탕시키면서 23.5℃에서 6일 동안 성장시킬 수 있다. 접종 후 6일차에, 조건화된 배지를 4000 rpm으로 10분 동안 원심분리하여 수거해야 하며, 0.22 μm 멤브레인이 있는 필터 플레이트를 사용하여 여과하고, 여기서 여과된 배지를 HPLC 분석에 적용한다.
효모 형질전환, 펩타이드 정제 및 분석
예시적인 효모 형질전환 방법은 하기와 같다: CRIP ORF, CRIP-살충 단백질 ORF 또는 펩타이드-IA ORF를 운반하는 발현 벡터를 효모 세포로 형질전환시킨다. 먼저, 발현 벡터를 통상적으로 상동 재조합을 통한 염색체 통합을 촉진시키기 위해 특정 제한 효소 절단에 의해 선형화시킨다. 이어서, 선형 발현 벡터를 화학적 또는 전기천공 형질전환 방법에 의해 효모 세포로 형질전환시키고, 상동 재조합에 의해 효모 게놈의 표적화된 유전자좌에 통합시킨다. 통합은 동일한 염색체 유전자좌에서 수차례 일어날 수 있기 때문에, 형질전환된 효모 세포의 게놈은 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 카세트의 다수의 카피를 함유할 수 있다. 발현 벡터로 조작되고, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA ORF와 함께 효모 염색체에 공동 통합된 선별 마커를 선호하는 성장 조건을 사용하여 성공적으로 형질전환된 효모 세포를 식별할 수 있으며; 이러한 마커의 예에는, 비제한적으로, 아세트아미드 원영양성, 제오신 내성, 게네티신 내성, 노우르세오트리신 내성 및 우라실 원영양성이 포함된다.
예측 불가능하고 가변적인 요인, 예컨대 유전자 및 유전자의 네트워크의 후성적 변형, 및 형질전환 절차를 거치는 집단 내 개별 세포에서 일어나는 통합 사건의 수 변동의 영향으로 인해, 주어진 형질전환 과정의 개별 효모 콜로니는 CRIP ORF, CRIP-살충 단백질 ORF 또는 펩타이드-IA ORF를 생산하는 능력이 다를 것이다. 따라서, CRIP 또는 펩타이드-IA 전이유전자를 운반하는 유전자이식 효모 콜로니는 고수율 균주에 대해 스크리닝되어야 한다. 이러한 스크리닝을 위한 2가지 효과적인 방법(각각 후속 분석을 위한 조건화된 배지 샘플을 제공하기 위해 유전자이식 효모의 소규모 배양물의 성장에 의존함)은 역상 HPLC 또는 집파리 주입 절차를 사용하여 양성 유전자이식 효모 콜로니로부터 조건화된 배지 샘플을 분석한다.
유전자이식 효모 배양은 각 튜브에 5 mL 내지 10 mL의 제한 배지가 첨가된 14 mL 둥근 바닥 폴리프로필렌 배양 튜브를 사용하거나, 각 웰에 2.2 mL의 제한 배지가 첨가된 48웰 딥웰 배양 플레이트에서 수행할 수 있다. 후속 스크리닝 단계를 위해 수거된 조건화된 배지에서 단백질 배경을 감소시키기 위해, 미정제 단백질성 추출물, 또는 효모 추출물 또는 펩톤과 같은 부산물을 함유하지 않는 제한 배지가 배양에 사용된다. 배양은 최대 세포 밀도에 이를 때까지 최적 온도에서, 예를 들어 클루이베로마이세스 락티스의 경우 23.5℃에서 약 5일 내지 6일 동안 수행된다. 이제 형질전환된 효모 세포에 의해 CRIP 또는 펩타이드-IA가 생산되고, 세포에서 나와 성장 배지로 분비된다. 스크리닝을 위한 샘플을 제조하기 위해, 원심분리를 통해 배양액에서 세포를 제거하고, 상청액을 조건화된 배지로 수집한 후, 0.22 μm 필터 멤브레인을 통해 여과하여 세척하고, 균주 스크리닝을 준비한다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA로 형질전환된 양성 효모 콜로니는 추정 효모 콜로니의 역상 HPLC(rpHPLC) 스크리닝을 통해 스크리닝될 수 있다. 이러한 스크리닝 방법에서, 결합된 상이 C18인 HPLC 분석 컬럼이 사용될 수 있다. 아세토니트릴과 물이 이동상 용매로 사용되고, 220 nm로 설정된 UV 흡광도 검출기가 펩타이드 검출에 사용된다. 적절한 양의 조건화된 배지 샘플을 rpHPLC 시스템에 로딩하고, 이동상 용매의 선형 구배로 용리한다. HPLC 크로마토그래프에서 살충 펩타이드의 해당 피크 면적을 사용하여 조건화된 배지 내 CRIP 또는 펩타이드-IA 농도를 정량화한다. 알려진 양의 순수한 CRIP 또는 펩타이드-IA를 동일한 HPLC 프로토콜을 이용하여 동일한 rpHPLC 컬럼을 통해 실행하여 펩타이드의 머무름 시간을 확인하고, 정량화를 위한 표준 펩타이드 HPLC 곡선을 생성한다.
양성 클루이베로마이세스 락티스 세포의 예시적인 역상 HPLC 스크리닝 과정은 하기와 같다: CRIP ORF, CRIP-살충 단백질 ORF 또는 펩타이드-IA ORF를 발현 벡터, pKLAC1 내에 삽입하고, 클루이베로마이세스 락티스 균주, YCT306(New England Biolabs, Ipswich, MA, USA)으로 형질전환시킬 수 있다. pKLAC1 벡터는 통합 발현 벡터이다. CRIP 또는 펩타이드-IA 전이유전자가 pKLAC1에 클로닝되고, YCT306으로 형질전환되면, 이의 발현은 LAC4 프로모터에 의해 제어되었다. 생성된 형질전환된 콜로니는 α-교배 인자 신호 펩타이드, Kex2 절단 부위, 및 성숙 CRIP 또는 펩타이드-IA를 포함하는 프리-프로펩타이드를 생산하였다. α-교배 인자 신호 펩타이드는 프리-프로펩타이드가 내인성 분비 경로로 들어가는 것을 안내하며, 성숙 CRIP 또는 펩타이드-IA는 성장 배지로 방출된다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA 발현을 위한 코돈 최적화는 2차례 수행될 수 있다: 예를 들어, 첫 번째 회차에서, 고발현 DNA 서열의 일부 공통 특성에 기반하여, α-교배 인자 신호 펩타이드, Kex2 절단 부위 및 CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하는 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF의 다수의 변이체를 설계하고, 클루이베로마이세스 락티스의 YCT306 균주에서 이의 발현 수준을 평가하여 초기 클루이베로마이세스 락티스 발현 알고리즘을 생성함; 두 번째 최적화 회차에서, 초기 클루이베로마이세스 락티스 발현 알고리즘에 기반하여 추가 변이형 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 ORF를 설계하여 클루이베로마이세스 락티스 발현 알고리즘을 추가로 미세조정하고, 클루이베로마이세스 락티스에서 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현에 대한 최상의 ORF를 식별함. 일부 구현예에서, 전술한 최적화로부터 생성된 DNA 서열은 α-MF 신호 펩타이드, Kex2 절단 부위, 및 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 오픈 리딩 프레임을 가질 수 있으며, 이는 Hind III 및 Not I 제한 부위를 사용하여 pKLAC1 벡터에 클로닝되어 CRIP 또는 펩타이드-IA 발현 벡터를 생성할 수 있다.
일부 구현예에서, 효모, 피키아 파스토리스가 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA, 발현 카세트로 형질전환될 수 있다. 피키아 파스토리스(P. pastoris)를 형질전환시키는 예시적인 방법은 하기와 같다: 벡터, pJUGαKR 및 pJUZαKR을 사용하여 CRIP 또는 펩타이드-IA를 피키아 파스토리스로 형질전환시킬 수 있다. pJUGαKR 및 pJUZαKR 벡터는 Biogrammatics(Carlsbad, California, USA)에서 입수 가능하다. 두 가지 벡터는 모두 통합 벡터이며, 이종 전이유전자 발현을 증강시키기 위해 우라실 포스포리보실트랜스퍼라아제 프로모터(pUPP)를 사용한다. 2가지 벡터 사이의 유일한 차이는, pJUGαKR은 숙주 효모에 G418 내성을 제공하지만, pJUZαKR은 제오신 내성을 제공한다는 점이다. 2가지 효모 발현 벡터에의 서브클로닝을 위해 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 상보적 올리고뉴클레오타이드 쌍을 설계하고 합성한다. 혼성화 반응은 상응하는 상보적 올리고뉴클레오타이드를 30 mM NaCl, 10 mM Tris-Cl(모두 최종 농도), pH 8 중에 최종 농도 20 μM로 혼합한 후, 95℃에서 20분 동안 인큐베이션하고, 이어서 92℃에서 시작하여 20분마다 3℃ 온도 강하로 17℃에서 종결되는 9시간 인큐베이션을 수행하는 방식으로 수행된다. 혼성화 반응은 CRIP 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 DNA 단편을 생성할 것이다. 2가지 피키아 파스토리스 벡터를 BsaI-HF 제한 효소로 소화시킨 후, 반응의 이중 가닥 DNA 생성물을 표준 절차를 사용하여 선형화된 피키아 파스토리스 벡터에 서브클로닝한다. 서브클론의 서열을 확인한 후, 플라스미드 분취액을 전기천공에 의해 피키아 파스토리스 균주, Bg08로 트랜스펙션시킨다. 각각, 벡터 pJUZαKR 및 pJUGαKR로 조작된 요소에 의해 부여된 제오신 또는 G418에 대한 내성에 기반하여 선택된 생성된 형질전환된 효모를, 본원에 기재된 바와 같이 배양하고 스크리닝할 수 있다.
ORF 및 이의 구성요소에 대한 상세한 설명은 하기에 제공된다.
효모 펩타이드 수율 스크리닝 및 평가
펩타이드 수율은 당업자에게 공지된 방법(예를 들어, 모세관 겔 전기영동(CGE), 웨스턴 블롯 분석 등) 중 임의의 것에 의해 결정될 수 있다. 본원에 기재되고 당업계에 공지된 바와 같은 활성 검정은 또한 펩타이드 수율에 대한 정보를 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 또는 당업계에 공지된 임의의 다른 방법이 펩타이드 수율을 평가하는 데 사용될 수 있다.
정량화 검정
일부 구현예에서, 비제한적으로, CRIP 펩타이드 수율은 하기를 사용하여 측정될 수 있다: HPLC; 질량분석법(MS) 및 관련 기술; LC/MS/MS; 역상 단백질 어레이(RPPA); 면역조직화학; ELISA; 현탁액 비드 어레이, 질량분석법; 도트 블롯(dot blot); SDS-PAGE; 모세관 겔 전기영동(CGE); 웨스턴 블롯 분석; Bradford 검정; 260 nm에서 UV 흡광도 측정; Lowry 검정; Smith 구리/비신코닌산 검정; 분비 검정; Pierce 단백질 검정; 뷰렛 반응(Biuret reaction) 등. 예시적인 단백질 정량화 방법은 문헌[Stoscheck, C. 1990 "Quantification of Protein" Methods in Enzymology, 182:50-68]; 문헌[Lowry, O. Rosebrough, A., Farr, A. and Randall, R. 1951 J. Biol. Chem. 193:265]; 문헌[Smith, P. et al., (1985) Anal. Biochem. 150:76-85]; 문헌[Bradford, M. 1976 "A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding" Anal. Biochem. 72:248-254]; 문헌[Cabib, E. and Polacheck, I. 1984 "Protein assay for dilute solutions." Methods in Enzymology, 104:318-328]; 문헌[Turcanu, Victor; Williams, Neil A. (2001). "Cell identification and isolation on the basis of cytokine secretion: A novel tool for investigating immune responses." Nature Medicine. 7 (3): 373-376]; 미국 특허 제6,391,649호에 제공되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
다른 구현예에서, CRIP 펩타이드 수율은, 비제한적으로, 하기를 포함하는 방법을 사용하여 정량화 및/또는 평가될 수 있다: 배양물 부피 당 재조합 단백질 질량(예를 들어, 배양물 1리터 당 단백질 그램 또는 밀리그램); (예를 들어, 불용성 구성요소 중 단백질 양으로의 재조합 단백질 추출 상청액)에서 결정된 세포 용해 후 얻은 재조합 단백질 불용성 침전의 % 또는 분율; 활성 단백질의 백분율 또는 분율(예를 들어, 단백질 양으로 사용되는 활성 단백질의 양/분석); 총 세포 단백질(tcp) 백분율 또는 분율; 및/또는 백분율 또는 비율로의 단백질/세포 및 건조 바이오매스의 양.
일부 구현예에서, 수율이 배양물 부피의 관점에서 표현되는 경우, 특히 상이한 배양물 사이의 수율을 비교할 때 배양물 세포 밀도가 고려될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명은 총 세포 단백질(tcp)의 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 약 15%, 약 20%, 약 25%, 약 30%, 약 40%, 약 45%, 약 50%, 약 55%, 약 60%, 약 65%, 약 70%, 약 75% 또는 그 이상인 이종 폴리펩타이드를 생산하는 방법을 제공한다. "총 세포 단백질%"는 응집체 세포 단백질 백분율로서의 숙주 세포 내 이종 폴리펩타이드의 양이다. 총 세포 단백질%를 결정하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다.
"총 세포 단백질(tcp)" 또는 "총 세포 단백질%(% tcp)"는 응집체 세포 단백질 백분율로서의 숙주 세포 내 단백질 또는 폴리펩타이드의 양이다. 총 세포 단백질%를 결정하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다.
일부 구현예에서, HPLC 가 펩타이드 수율을 정량화하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA 수율은 Onyx monolithic 4.5 x 100 mm, C18 역상 분석용 HPLC 컬럼 및 자동 주입기가 장착된 Agilent 1100 HPLC 시스템을 사용하여 평가될 수 있다. Onyx 모놀리식 4.5 x 100 mm, C18 역상 분석용 HPLC 컬럼 및 자동 주입기가 장착된 Agilent 1100 HPLC 시스템의 예시적인 사용은 하기와 같다: 형질전환된 클루이베로마이세스 락티스 세포에서 여과된 조건화된 배지 샘플을 Onyx monolithic 4.5 x 100 mm, C18 역상 분석용 HPLC 컬럼 및 자동 주입기가 장착된 Agilent 1100 HPLC 시스템을 사용하여, HPLC 분석에 사용되는 2가지 이동상 용매를 구성하는 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 HPLC 등급 물과 아세토니트릴을 분석하는 방식으로 분석하고; HPLC 크로마토그래프를 사용하여 CRIP 또는 펩타이드-IA 모두의 피크 면적을 분석한 후, 이를 사용하여 조건화된 배지 중 펩타이드 농도를 계산하고, 이를 정규화된 펩타이드 수율로서 상응하는 최종 세포 밀도(OD600 측정치로 결정됨)로 추가로 정규할 수 있다.
활성 검정
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA로 형질전환된 양성 효모 콜로니는 집파리 주입 검정을 사용하여 스크리닝될 수 있다. CRIP 또는 펩타이드-IA는 등쪽 흉부의 체벽을 통해 계량된 용량으로 주입될 때 집파리를 마비/사멸시킬 수 있다. CRIP 또는 펩타이드-IA의 효능은, 각각, 주입된 집파리의 50% 녹다운 비율 또는 사멸률을 유발하는 펩타이드의 마비/치사량 중앙값(PD50/LD50)으로 정의될 수 있다. 순수한 CRIP 또는 펩타이드-IA를 통상적으로 집파리 주입 검정에 사용하여 표준 용량 반응 곡선을 생성하고, 이로부터 PD50/LD50 값을 결정할 수 있다. 순수한 CRIP 또는 펩타이드-IA의 표준 용량 반응 곡선의 분석에서 얻은 PD50/LD50 값을 사용하면, 상응하는 조건화된 배지의 연속 희석으로 수행된 집파리 주입 검정을 사용하여 형질전환된 효모에 의해 생산된 CRIP 또는 펩타이드-IA의 정량화를 달성할 수 있다.
예시적인 집파리 주입 생물검정은 하기와 같다: 집파리 주입 생물검정으로부터 전체 용량 반응 곡선을 생성하기 위해 조건화된 배지를 연속으로 희석한다. 주입 전, CO2를 이용하여 성체 집파리(무스카 도메스티카)를 고정시키고, 주입을 위해 12 mg 내지 18 mg 집파리를 선택한다. 1 cc 시린지 및 30-게이지 니들이 장착된 마이크로어플리케이터(microapplicator)를 사용하여 연속 희석된 조건화된 배지 샘플의 용량(파리 당 0.5 μL)을 등쪽 흉부의 체벽을 통해 집파리에 주입한다. 주입된 집파리를 습한 여과지가 있고 뚜껑에 호흡 구멍이 있는 폐쇄된 용기에 위치시키고, 주입 24시간 후에 녹다운 비율 또는 사멸률 점수로 검사한다. 정규화된 수율을 계산한다. 펩타이드 수율은 mg/L 단위로의 조건화된 배지 중 펩타이드 농도를 의미한다. 하지만, 펩타이드 수율이 항상 균주 생산 속도를 정확하게 비교하기에 충분한 것은 아니다. 개별 균주는 성장 속도가 상이할 수 있기 때문에, 배양물이 수거될 때, 상이한 배양물의 세포 밀도가 다를 수 있다. 세포 밀도가 높은 배양물은 균주의 펩타이드 생산 속도가 더 높은 또 다른 균주보다 생산 속도가 낮더라도 배지 중 펩타이드 농도가 더 높을 수 있다. 따라서, "정규화된 수율"이라는 용어는 펩타이드 수율을 상응하는 배양물 중 세포 밀도로 나눈 값으로, 이는 균주 간 펩타이드 생산 속도의 비교를 더 용이하게 한다. 세포 밀도는 600 nm에서의 흡광도로 표시되며, 이의 단위는 "A"(흡광도 단위)이다.
CRIP 또는 펩타이드-IA로의 형질전환을 거친 효모 콜로니를 스크리닝하면 수백개의 잠재적인 콜로니로부터 고수율 효모 균주를 식별할 수 있다. 이러한 균주를 본원에 기재된 최적화된 발효 배지 및 발효 조건을 사용하여 생물반응기에서 발효시켜, CRIP 또는 펩타이드-IA를 적어도 4 g/L 또는 적어도 3 g/L 또는 적어도 2 g/L의 수율로 달성할 수 있다. 더 높은 생산 속도(mg/L로 표시됨)는, 약 100 mg/L 내지 약 100,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 90,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 80,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 70,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 60,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 50,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 40,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 30,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 20,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 17,500 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 15,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 12,500 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 10,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 9,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 8,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 7,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 6,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 5,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 약 3,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 2,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 1,500 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 1,000 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 750 mg/L; 또는 약 100 mg/L 내지 500 mg/L; 또는 약 150 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 200 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 300 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 400 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 500 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 750 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 1,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 1,250 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 1,500 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 2,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 2,500 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 3,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 3,500 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 4,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 4,500 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 5,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 6,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 7,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 8,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 9,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 10,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 12,500 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 15,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 17,500 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 20,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 30,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 40,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 50,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 60,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 70,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 80,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 약 90,000 mg/L 내지 100,000 mg/L; 또는 상기 제공된 임의의 값의 임의의 범위, 또는 전환 전 펩타이드를 생산하는 데 사용된 바와 동일하거나 유사한 생산 방법을 사용하여 전환 전 펩타이드를 이용하여 달성될 수 있는 것보다 훨씬 더 큰 수율일 수 있다.
전술한 방법 중 임의의 것을 사용하고/하거나 맞춤화하여 CRIP 및/또는 펩타이드-IA(예를 들어, 이러한 방법에 적합한 살충 작용제, 예를 들어 아미노산, 펩타이드 및/또는 단백질의 중합체)를 생산할 수 있다. 예를 들어, 전술한 방법 중 임의의 것을 사용하여, 비제한적으로, ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, rκ-ACTX-Hv1c, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω-ACTX-Hv1a+2); Γ-CNTX-Pn1a; U1-아가톡신-Ta1b; TVP; Av2; Av3; AVP; 및/또는 Bt 독소(예를 들어, Cry 독소, Cyt 독소 또는 Vip)를 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 CRIP 또는 펩타이드-IA 중 임의의 것을 생산, 생성, 제조, 발현, 전사, 번역, 합성 또는 달리 형성할 수 있다.
배양 및 발효 조건
세포 배양 기술은 당업계에 널리 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 배양 방법 및/또는 재료는 선택된 숙주 세포에 기반한 적합화를 반드시 필요로 할 것이며; 이러한 적합화(예를 들어, pH, 온도, 배지 함량 등의 변경)는 당업자에게 널리 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 임의의 공지된 배양 기술을 이용하여 본 발명의 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산할 수 있다.
예시적인 배양 방법은 미국 특허 제3,933,590호; 제3,946,780호; 제4,988,623호; 제5,153,131호; 제5,153,133호; 제5,155,034호; 제5,316,905호; 제5,330,908호; 제6,159,724호; 제7,419,801호; 제9,320,816호; 제9,714,408호; 및 제10,563,169호에 제공되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
효모 배양
효모 세포 배양 기술은 당업자에게 널리 공지되어 있다. 예시적인 효모 세포 배양 방법은 문헌[Evans, Yeast Protocols. Springer (1996)]; 문헌[Bill, Recombinant Protein Production in Yeast. Springer (2012)]; 문헌[Hagan et al., Fission Yeast: A Laboratory Manual, CSH Press (2016)]; 문헌[Konishi et al., Improvement of the transformation efficiency of Saccharomyces cerevisiae by altering carbon sources in pre-culture. Biosci Biotechnol Biochem. 2014; 78(6):1090-3]; 문헌[Dymond, Saccharomyces cerevisiae growth media. Methods Enzymol. 2013; 533:191-204]; 문헌[Looke et al., Extraction of genomic DNA from yeasts for PCR-based applications. Biotechniques. 2011 May; 50(5):325-8]; 및 문헌[Romanos et al., Culture of yeast for the production of heterologous proteins. Curr Protoc Cell Biol. 2014 Sep 2; 64:20.9.1-16]에서 확인할 수 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
효모는 다양한 배지에서 배양될 수 있으며, 예를 들어, 일부 구현예에서, 효모는 최소 배지; YPD 배지; 효모 합성 탈락 배지(yeast synthetic drop-out medium); 효모 질소 베이스(Yeast Nitrogen Base)(아미노산 포함 또는 미포함 YNB); YEPD 배지; ADE D 배지; ADE DS" 배지; LEU D 배지; HIS D 배지; 또는 무기염(mineral salt) 배지에서 배양될 수 있다.
일부 구현예에서, 효모는 최소 배지에서 배양될 수 있다. 일부 구현예에서, 최소 배지 성분은 하기로 구성될 수 있다: 2% 당; 인산염 완충액, pH 6.0; 황산마그네슘; 염화칼슘; 황산암모늄; 염화소듐; 염화포타슘; 황산구리; 황산망간; 염화아연; 요오드화포타슘; 염화코발트; 몰리브덴산소듐; 붕산; 염화철; 비오틴; 판토텐산칼슘; 티아민; 미오-이노시톨; 니코틴산; 및 피리독신.
일부 구현예에서, 효모는 YPD 배지에서 배양될 수 있다. YPD 배지는 세균학적 펩톤, 효모 추출물 및 글루코오스로 구성된다.
일부 구현예에서, 효모는 효모 합성 탈락 배지에서 배양될 수 있으며, 이러한 배지는 필요한 구성요소가 결여된 배지에서 상기 형질전환체가 성장할 수 있게 하는 플라스미드로 형질전환된 특정 배지 구성요소가 없이는 성장할 수 없는 영양 요구성 돌연변이 균주를 구별하는 데 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 효모는 질소, 비타민, 미량 원소 및 염으로 구성된 효모 질소 베이스(아미노산 포함 또는 미포함 YNB)를 사용하여 배양될 수 있다.
일부 구현예에서, 배지는 YEPD 배지, 예를 들어 2% D-글루코오스, 2% BACTO 펩톤(Difco Laboratories, Detroit, MI), 1% BACTO 효모 추출물(Difco), 0.004% 아데닌 및 0.006% L-류신으로 구성된 배지; 또는 탄소 공급원이 당 알코올, 예를 들어 글리세롤 또는 소르비톨인 이의 변형일 수 있다.
일부 구현예에서, 배지는 ADE D 배지, 예를 들어 0.056% Ade-Trp-Thr 분말, 0.67% 아미노산 미함유 효모 질소 베이스, 2% D-글루코오스 및 0.5% 200× 트립토판, 트레오닌 용액으로 구성된 배지; 또는 탄소 공급원이 당 알코올, 예를 들어 글리세롤 또는 소르비톨인 이의 변형일 수 있다.
일부 구현예에서, 배지는 ADE DS" 배지, 예를 들어 0.056% Ade-Trp-Thr 분말, 0.67% 아미노산 미함유 효모 질소 베이스, 2% D-글루코오스, 0.5% 200× 트립토판, 트레오닌 용액 및 18.22% D-소르비톨로 구성된 배지; 또는 탄소 공급원이 전적으로 당 알코올, 예를 들어 글리세롤 또는 소르비톨인 이의 변형일 수 있다.
일부 구현예에서, 배지는 LEU D 배지, 예를 들어 0.052% Leu-Trp-Thr 분말, 0.67% 아미노산 미함유 효모 질소 베이스, 2% D-글루코오스 및 0.5% 200× 트립토판, 트레오닌 용액으로 구성된 배지; 또는 탄소 공급원이 당 알코올, 예를 들어 글리세롤 또는 소르비톨인 이의 변형일 수 있다.
일부 구현예에서, 배지는 HIS D 배지, 예를 들어 0.052% His-Trp-Thr 분말, 0.67% 아미노산 미함유 효모 질소 베이스, 2% D-글루코오스 및 0.5% 200× 트립토판, 트레오닌 용액으로 구성된 배지; 또는 탄소 공급원이 당 알코올, 예를 들어 글리세롤 또는 소르비톨인 이의 변형일 수 있다.
일부 구현예에서, 무기염 배지가 사용될 수 있다. 무기염 배지는 무기염과 탄소 공급원, 예를 들어 글루코오스, 수크로오스 또는 글리세롤로 이루어져 있다. 무기염 배지의 예에는, 예를 들어 M9 배지, 슈도모나스 배지(ATCC 179) 및 Davis 및 Mingioli 배지가 포함된다. 문헌[Davis & Mingioli (1950) J. Bact. 60:17-28] 참조. 무기염 배지를 제조하는 데 사용되는 무기염에는, 예를 들어 인산포타슘, 황산암모늄 또는 염화암모늄, 황산마그네슘 또는 염화마그네슘, 및 미량 무기물, 예컨대 염화칼슘, 보레이트, 및 철, 구리, 망간 및 아연의 황산염 중에서 선택되는 것들이 포함된다. 전형적으로, 펩톤, 트립톤, 아미노산 또는 효모 추출물과 같은 유기 질소 공급원은 무기염 배지에 포함되지 않는다. 대신, 무기 질소 공급원이 사용되며, 이는, 예를 들어 암모늄 염, 수성 암모니아 및 가스성 암모니아 중에서 선택될 수 있다. 무기염 배지는 전형적으로 탄소 공급원으로 글루코오스 또는 글리세롤을 함유할 것이다.
무기염 배지와 비교하여, 최소 배지는 또한 무기염과 탄소 공급원을 함유할 수 있지만, 예를 들어 낮은 수준의 아미노산, 비타민, 펩톤 또는 다른 성분이 보충될 수 있으며, 이들은 매우 최소 수준으로 첨가된다. 배지는 당업계, 예를 들어 미국 특허 출원 공개공보 제2006/0040352호에 기재된 방법을 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다. 본 발명의 방법에 유용한 배양 절차 및 무기염 배지에 대한 상세한 설명은 문헌[Riesenberg, D et al., 1991, "High cell density cultivation of Escherichia coli at controlled specific growth rate," J. Biotechnol. 20 (1):17-27]에 기재되어 있다.
일부 구현예에서, 유일한 탄소 공급원으로 2% 글루코오스, 갈락토오스, 소르비톨 또는 글리세롤이 보충된 최소 배지에서 클루이베로마이세스 락티스를 성장시킨다. 배양물을, β-갈락토시다아제 측정의 경우 30℃에서 중간 로그 단계(mid-log phase)(24시간 내지 48시간)까지, 또는 이종 단백질 발현의 경우 23.5℃에서 6일 동안 인큐베이션한다.
일부 구현예에서, 효모 세포는 접종 후 멸균된 공기 투과성 덮개로 밀봉되는 48웰 딥웰 플레이트에서 배양할 수 있다. 플레이트 상에서 배양된 효모, 예를 들어 클루이베로마이세스 락티스의 콜로니를 선택하여, 딥웰 플레이트에 웰 당 DMSor로 구성된 배지를 2.2 mL 접종할 수 있다. 접종된 딥웰 플레이트를 냉장 인큐베이터-진탕기에서 280 rpm으로 진탕시키면서 23.5℃에서 6일 동안 성장시킬 수 있다. 접종 후 6일차에, 조건화된 배지를 4000 rpm으로 10분 동안 원심분리하여 수거해야 하며, 0.22 μm 멤브레인이 있는 필터 플레이트를 사용하여 여과하고, 여기서 여과된 배지를 HPLC 분석에 적용한다.
일부 구현예에서, 클루이베로마이세스 락티스, 사카로마이세스 세레비시아에, 피키아 파스토리스 등과 같은 효모 종, 및/또는 본원에 기재된 방법을 사용하여 변형시키고자 하는 효모가 숙주 유기체로 사용될 수 있다.
온도 및 pH 조건은 배양 단계 및 선택된 숙주 세포 종에 따라 달라질 것이다. 세포 배양에서 온도 및 pH와 같은 변수는 당업자에게 널리 공지되어 있다.
pH 수준은 효모 배양에서 중요하다. 당업자는, 배양 과정이 효모 배양 시작뿐 아니라 배양의 유지를 포함한다는 것을 이해할 것이다. 효모 배양은 임의의 pH 수준에서 시작될 수 있지만, 효모 배양 배지는 시간 경과에 따라 더 산성이 될 수 있기 때문에(즉, pH가 낮아짐), 배양 과정 동안 pH 수준을 모니터링하는 데 주의를 기울여야 한다.
본 발명의 일부 구현예에서, 효모는 사용되는 효모 종, 배양 단계 및/또는 온도에 기반하여 지시되는 pH 수준의 배지에서 성장된다. 따라서, 일부 구현예에서, pH 수준은 약 2 내지 약 10 범위 내에 있을 수 있다. 당업자는, 대부분의 미생물에 대한 최적 pH가 중성점(pH 7.0)이라는 것을 이해할 것이다. 하지만, 일부 구현예에서, 일부 진균 종은 산성 환경을 선호하기 때문에, 일부 구현예에서, pH는 2 내지 6.5 범위일 수 있다. 일부 구현예에서, pH는 약 4 내지 약 4.5 범위일 수 있다. 일부 진균 종(예를 들어, 곰팡이)은 약 2 내지 약 8.5의 pH 범위에서 성장할 수 있지만, 산성 pH를 선호한다. 문헌[Mountney & Gould, Practical food microbiology and technology. 1988. Ed. 3]; 및 문헌[Pena et al., Effects of high medium pH on growth, metabolism and transport in Saccharomyces cerevisiae. FEMS Yeast Res. 2015 Mar;15(2):fou005] 참조.
다른 구현예에서, pH는 약 5.7 내지 5.9, 5.8 내지 6.0, 5.9 내지 6.1, 6.0 내지 6.2, 6.1 내지 6.3, 6.2 내지 6.5, 6.4 내지 6.7, 6.5 내지 6.8, 6.6 내지 6.9, 6.7 내지 7.0, 6.8 내지 7.1, 6.9 내지 7.2, 7.0 내지 7.3, 7.1 내지 7.4, 7.2 내지 7.5, 7.3 내지 7.6, 7.4 내지 7.7, 7.5 내지 7.8, 7.6 내지 7.9, 7.7 내지 8.0, 7.8 내지 8.1, 7.9 내지 8.2, 8.0 내지 8.3, 8.1 내지 8.4, 8.2 내지 8.5, 8.3 내지 8.6, 8.4 내지 8.7, 또는 8.5 내지 8.8이다.
일부 구현예에서, 배지의 pH는 적어도 5.5일 수 있다. 다른 양태에서, 배지의 pH 수준은 약 5.5일 수 있다. 다른 양태에서, 배지의 pH 수준은 4 내지 8일 수 있다. 일부 경우에, 배지는 5.5 내지 8의 pH 수준으로 유지된다. 다른 양태에서, 배지의 pH 수준은 6 내지 8이다. 일부 경우에, 배지의 pH 수준은 6 내지 8의 pH 수준으로 유지된다. 일부 구현예에서, 효모는 6.1 내지 8.1의 pH 수준에서 성장 및/또는 유지된다. 일부 구현예에서, 효모는 6.2 내지 8.2의 pH 수준에서 성장 및/또는 유지된다. 일부 구현예에서, 효모는 6.3 내지 8.3의 pH 수준에서 성장 및/또는 유지된다. 일부 구현예에서, 효모는 6.4 내지 8.4의 pH 수준에서 성장 및/또는 유지된다. 일부 구현예에서, 효모는 5.5 내지 8.5의 pH 수준에서 성장 및/또는 유지된다. 일부 구현예에서, 효모는 6.5 내지 8.5의 pH 수준에서 성장 및/또는 유지된다. 일부 구현예에서, 효모는 약 5.6, 5.7, 5.8 또는 5.9의 pH 수준에서 성장된다. 일부 구현예에서, 효모는 약 6의 pH 수준에서 성장된다. 일부 구현예에서, 효모는 약 6.5의 pH 수준에서 성장된다. 일부 구현예에서, 효모는 약 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9 또는 7.0의 pH 수준에서 성장된다. 일부 구현예에서, 효모는 약 7, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9 또는 8.0의 pH 수준에서 성장된다. 일부 구현예에서, 효모는 8 초과의 pH 수준에서 성장된다.
일부 구현예에서, 배지의 pH는 2 내지 8.5의 pH 범위일 수 있다. 특정 구현예에서, pH는 약 4.0, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6.0, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8.0, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7 또는 8.8이다.
예시적인 효모 배양 방법은 "Repressible yeast promoters"(1991년 12월 20일자 출원; 출원인 Ciba-Geigy Corporation)라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,436,136호; "Yeast expression systems, methods of producing polypeptides in yeast, and compositions relating to same"(2001년 7월 26일자 출원; 출원인 Phoenix pharmacologies, Inc., Lexington, KY)라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,645,739호; 및 "Medium for yeasts"(2013년 8월 23일자 출원; 출원인 Yamaguchi University)라는 발명의 명칭의 미국 특허 제10,023,836호에서 확인할 수 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
발효
본 발명은 임의의 발효 형식으로 숙주 유기체를 배양하는 것을 고려한다. 예를 들어, 회분식, 유가식, 반연속식 및 연속식 발효 방식이 본원에서 이용될 수 있다.
발효는 임의의 규모로 수행될 수 있다. 본 발명에 따라 고려되는 방법 및 기술은 임의의 규모로의 재조합 단백질 발현에 유용하다. 따라서, 일부 구현예에서, 예를 들어, 마이크로리터 규모, 밀리리터 규모, 센티리터 규모 및 데시리터 규모 발효 부피가 사용될 수 있으며, 1리터 및 그 이상의 발효 부피가 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 발효 부피는 약 1리터 이상이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 발효 부피는 약 1리터 내지 약 100리터이다. 일부 구현예에서, 발효 부피는 약 1리터, 약 2리터, 약 3리터, 약 4리터, 약 5리터, 약 6리터, 약 7리터, 약 8리터, 약 9리터 또는 약 10리터이다. 일부 구현예에서, 발효 부피는 약 1리터 내지 약 5리터, 약 1리터 내지 약 10리터, 약 1리터 내지 약 25리터, 약 1리터 내지 약 50리터, 약 1리터 내지 약 75리터, 약 10리터 내지 약 25리터, 약 25리터 내지 약 50리터, 또는 약 50리터 내지 약 100리터이다. 다른 구현예에서, 발효 부피는 5리터, 10리터, 15리터, 20리터, 25리터, 50리터, 75리터, 100리터, 200리터, 500리터, 1,000리터, 2,000리터, 5,000리터, 10,000리터 또는 50,000리터이다.
일부 구현예에서, 발효 배지는 세포를 성장 및/또는 유지시키기 위해 사용되는 영양 용액일 수 있다. 비제한적으로, 이러한 용액은 통상적으로 하기 범주 중 하나 이상으로부터의 적어도 하나의 구성요소를 제공한다: (1) 통상적으로 탄소 공급원, 예를 들어 글루코오스 형태의 에너지 공급원; (2) 모든 필수 아미노산, 및 통상적으로 20개 아미노산 기본 세트; (3) 저농도에서 요구되는 비타민 및/또는 기타 유기 화합물; (4) 유리 지방산 또는 지질, 예를 들어 리놀레산; 및 (5) 미량 원소(여기서 미량 원소는 전형적으로 매우 저농도, 통상적으로 마이크로몰 범위로 요구되는 무기 화합물 또는 자연 발생 원소로 정의됨).
일부 구현예에서, 발효 배지는 세포 배양 배지 또는 본원에 기재된 임의의 다른 배지와 동일할 수 있다. 일부 구현예에서, 발효 배지는 세포 배양 배지와 상이할 수 있다. 일부 구현예에서, 발효 배지는 단백질의 대규모 생산을 수용하기 위해 변형될 수 있다.
일부 구현예에서, 발효 배지는 하기 범주 중 임의의 것으로부터의 하나 이상의 구성요소로 선택적으로 보충될 수 있다: (1) 호르몬 및 다른 성장인자, 예컨대 혈청, 인슐린, 트랜스페린 등; (2) 염, 예를 들어 마그네슘, 칼슘 및 인산염; (3) 완충액, 예컨대 HEPES; (4) 뉴클레오시드 및 염기, 예컨대 아데노신, 티미딘 등; (5) 단백질 및 조직 가수분해물, 예를 들어 정제된 젤라틴, 식물 물질 또는 동물 부산물로부터 수득될 수 있는 펩톤 또는 펩톤 혼합물; (6) 항생제, 예컨대 겐타마이신(gentamycin); 및 (7) 세포 보호제, 예를 들어 Pluronic 폴리올.
일부 구현예에서, 발효 배지의 pH는 pH 완충액 및 당업자에게 공지된 방법을 사용하여 유지될 수 있다. 발효 동안 pH의 제어는 또한 수성 암모니아를 사용하여 달성될 수 있다. 일부 구현예에서, 발효 배지의 pH는 사용되는 유기체의 바람직한 pH에 기반하여 선택될 것이다. 따라서, 일부 구현예에서, 숙주 세포 및 온도에 따라, pH는 약 1 내지 약 10 범위일 수 있다.
일부 구현예에서, 발효 배지의 pH는 pH 2 내지 8.5의 범위일 수 있다. 특정 구현예에서, pH는 약 4.0, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6.0, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8.0, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7 또는 8.8이다.
다른 구현예에서, pH는 약 5.7 내지 5.9, 5.8 내지 6.0, 5.9 내지 6.1, 6.0 내지 6.2, 6.1 내지 6.3, 6.2 내지 6.5, 6.4 내지 6.7, 6.5 내지 6.8, 6.6 내지 6.9, 6.7 내지 7.0, 6.8 내지 7.1, 6.9 내지 7.2, 7.0 내지 7.3, 7.1 내지 7.4, 7.2 내지 7.5, 7.3 내지 7.6, 7.4 내지 7.7, 7.5 내지 7.8, 7.6 내지 7.9, 7.7 내지 8.0, 7.8 내지 8.1, 7.9 내지 8.2, 8.0 내지 8.3, 8.1 내지 8.4, 8.2 내지 8.5, 8.3 내지 8.6, 8.4 내지 8.7, 또는 8.5 내지 8.8이다.
일부 구현예에서, 예를 들어 에스케리키아 콜리(대장균)가 사용되는 경우, 최적 pH는 온도에 따라 6.5 내지 7.5 범위이다.
다른 구현예에서, 예를 들어 효모 균주가 사용되는 경우, pH는 약 4.0 내지 8.0 범위일 수 있다.
일부 구현예에서, 중성 pH, 즉 약 7.0의 pH가 사용될 수 있다.
당업자는, 발효 동안, pH 수준이 기질 및 대사 화합물의 전환 및 생성으로 인해 이동할 수 있다는 것을 이해할 것이다.
일부 구현예에서, pH의 변화를 회피하기 위해 발효 배지에 완충액 또는 다른 화학물질이 보충될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, Ca(OH)2, CaCO3, NaOH 또는 NH4OH가, 예를 들어 산업 공정 동안 일부 효모 종에서 일어나는 산성 화합물의 생성을 중화시키기 위해 발효 배지에 첨가될 수 있다.
온도는 발효 과정에서 또 다른 중요한 고려사항이며; pH 고려사항과 같이 온도는 선택되는 숙주 세포 유형에 따라 달라질 것이다.
일부 구현예에서, 발효 온도는 약 4℃ 내지 약 42℃로 유지된다. 특정 구현예에서, 발효 온도는 약 4℃, 약 5℃, 약 6℃, 약 7℃, 약 8℃, 약 9℃, 약 10℃, 약 11℃, 약 12℃, 약 13℃, 약 14℃, 약 15℃, 약 16℃, 약 17℃, 약 18℃, 약 19℃, 약 20℃, 약 21℃, 약 22℃, 약 23℃, 약 24℃, 약 25℃, 약 26℃, 약 27℃, 약 28℃, 약 29℃, 약 30℃, 약 31℃, 약 32℃, 약 33℃, 약 34℃, 약 35℃, 약 36℃, 약 37℃, 약 38℃, 약 39℃, 약 40℃, 약 41℃ 또는 약 42℃이다.
다른 구현예에서, 발효 온도는 약 25℃ 내지 약 27℃, 약 25℃ 내지 약 28℃, 약 25℃ 내지 약 29℃, 약 25℃ 내지 약 30℃, 약 25℃ 내지 약 31℃, 약 25℃ 내지 약 32℃, 약 25℃ 내지 약 33℃, 약 26℃ 내지 약 28℃, 약 26℃ 내지 약 29℃, 약 26℃ 내지 약 30℃, 약 26℃ 내지 약 31℃, 약 26℃ 내지 약 32℃, 약 27℃ 내지 약 29℃, 약 27℃ 내지 약 30℃, 약 27℃ 내지 약 31℃, 약 27℃ 내지 약 32℃, 약 26℃ 내지 약 33℃, 약 28℃ 내지 약 30℃, 약 28℃ 내지 약 31℃, 약 28℃ 내지 약 32℃, 약 29℃ 내지 약 31℃, 약 29℃ 내지 약 32℃, 약 29℃ 내지 약 33℃, 약 30℃ 내지 약 32℃, 약 30℃ 내지 약 33℃, 약 31℃ 내지 약 33℃, 약 31℃ 내지 약 32℃, 약 30℃ 내지 약 33℃, 또는 약 32℃ 내지 약 33℃로 유지된다.
다른 구현예에서, 온도는 발효 동안, 예를 들어 발효 단계에 따라 변경된다.
발효는 당업자에게 공지된 다양한 미생물을 이용하여 달성될 수 있다. CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA의 대규모 생산에 적합한 미생물에는 본원에 열거된 임의의 미생물이 포함된다. 일부 구현예에서, 미생물의 비제한적인 예에는, 사카로마이세스 속(비제한적으로, 사카로마이세스 세레비시아에(베이커(baker) 효모), 사카로마이세스 디스타티쿠스(S. distaticus), 사카로마이세스 우바룸을 포함함), 클루이베로마이세스 속(비제한적으로, 클루이베로마이세스 마르시아누스, 클루이베로마이세스 프라길리스(K. fragilis)를 포함함), 칸디다 속(비제한적으로, 칸디다 슈도트로피칼리스(C. pseudotropicalis) 및 칸디다 브라시카에(C. brassicae)를 포함함), 피키아 스티피티스(Pichia stipitis)(칸디다 쉐하타에(Candida shehatae)의 친족), 클라비스포라(Clavispora) 속(비제한적으로, 클라비스포라 루시타니아에(C. lusitaniae) 및 클라비스포라 오푼티아에(C. opuntiae)를 포함함), 파키솔렌 속(비제한적으로, 파키솔렌 타노필루스(P. tannophilus)를 포함함), 브레타노마이세스(Bretannomyces) 속(비제한적으로, 예를 들어 브레타노마이세스 클라우세니(B. clausenii)를 포함함)의 균주가 포함된다. 다른 적합한 미생물에는, 예를 들어 지모모나스 모빌리스(Zymomonas mobilis), 클로스트리디움 종(비제한적으로, 클로스트리디움 테르모셀룸(C. thermocellum); 클로스트리디움 사카로부틸아세토니쿰(C. saccharobutylacetonicum), 클로스트리디움 사카로부틸리쿰(C. saccharobutylicum), 클로스트리디움 푸니세움(C. Puniceum), 클로스트리디움 베이제른키(C. beijernckii) 및 클로스트리디움 아세틸부틸리쿰(C. acetobutylicum)을 포함함), 모닐리엘라 폴리니스(Moniliella pollinis), 모닐리엘라 메가킬리엔시스(Moniliella megachiliensis), 락토바실러스(Lactobacillus) 종, 야로위아 리폴리티카, 아우레오바시디움(Aureobasidium) 종, 트리코스포로노이데스(Trichosporonoides) 종, 트리고놉시스 바리아빌리스(Trigonopsis variabilis), 트리코스포론(Trichosporon) 종, 모닐리엘라 아세토아부탄스(Moniliella acetoabutans) 종, 티풀라 바리아빌리스(Typhula variabilis), 칸디다 마그놀리아스(Candida magnolias), 우스틸라기노마이세테스(Ustilaginomycetes) 종, 슈도지마 츄쿠바엔시스(Pseudozyma tsukubaensis), 지고사카로마이세스, 데바리오마이세스, 한세눌라 및 피키아 속의 효모 종, 및 토룰라(Torula) 속 데마티오이드(dematioid)의 진균이 포함된다. 예를 들어, 문헌[Philippidis, G. P., 1996, Cellulose bioconversion technology, in Handbook on Bioethanol: Production and Utilization, Wyman, C. E., ed., Taylor & Francis, Washington, D.C., 179-212] 참조.
발효 배지는 숙주 세포 및/또는 최종 사용자의 필요에 따라 선택될 수 있다. 예를 들어 탄소 이외의 임의의 필요한 보충물이 또한 단독으로, 또는 복합체 질소 공급원과 같은 또 다른 보충물 또는 배지와의 혼합물로 도입된 적절한 농도로 포함될 수 있다.
효모 발효
효모를 사용하는 발효 방법은 당업자에게 널리 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 회분식 발효가 본원에 제공된 방법에 따라 사용될 수 있으며; 다른 구현예에서, 연속식 발효 절차가 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 회분식 발효 방법을 사용하여 본 발명의 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산할 수 있다. 간략하게, 회분식 발효 방법은 폐쇄된 시스템을 이용하여 수행되는 발효의 유형을 나타내며, 여기서 배지의 조성은 발효 시작 시에 결정되어 발효 동안 인위적 변경에 적용되지 않는다(즉, 발효 시작 시에 배지에 하나 이상의 효모 세포를 접종하고, 사용자에 의한 중단 없이 발효가 진행됨). 전형적으로, 회분식 발효 시스템에서, 시스템의 대사산물 및 바이오매스 조성은 발효가 중단될 때까지 지속적으로 변경된다. 회분식 배양 내에서, 효모 세포는 정적 지연 단계를 거쳐 고성장 로그 단계로, 최종적으로 성장 속도가 감소되거나 중단되는 정지 단계로 이동한다. 처리되지 않는 경우, 정지 단계의 효모 세포는 결국 사멸한다. 회분식 방법에서, 로그 단계의 효모 세포는 일반적으로 최종 생성물 합성의 대부분을 담당한다.
일부 구현예에서, 유가식 발효를 사용하여 본 발명의 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산할 수 있다. 간략하게, 유가식 발효는 (상기 기재된) 전형적인 회분식 방법과 유사하지만, 유가식 방법의 기질은 발효가 진행됨에 따라 증분으로 첨가된다. 유가식 발효는 이화산물 억제가 효모 세포 대사를 저해할 수 있는 경우, 및 배지에 제한된 양의 기질을 갖는 것이 바람직한 경우에 유용하다. 일반적으로, 유가식 시스템에서 기질 농도의 측정치는 pH, 용존 산소, 폐가스(예를 들어, CO2) 분압 등과 같은 대사를 반영하는 측정 가능한 인자의 변화에 기반하여 추정된다.
일부 구현예에서, 하기와 같이 유가식 발효 절차를 사용하여 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산할 수 있다: 생산 유기체(예를 들어, 변형된 효모 세포)를, 5 g/L 인산포타슘, 2.5 g/L 염화암모늄, 0.5 g/L 황산마그네슘, 30 g/L 옥수수 침지액, 및 초기 제1 및 제2 탄소 공급원 농도 20 g/L를 함유하는 5 L 브로스를 사용하여, N2/CO2 혼합물이 살포된 10 L 생물반응기에서 배양한다. 변형된 효모 세포가 성장하고 탄소 공급원을 이용함에 따라, 대략적으로 탄소 공급원 소비와 균형을 이루는 속도로 추가의 70% 탄소 공급원 혼합물을 생물반응기에 공급한다. 생물반응기의 온도는 일반적으로 30℃로 유지된다. 대략 24시간 이상 동안 성장이 계속되어, 이종 펩타이드는가 목적하는 농도, 예를 들어 약 5 g/L 내지 10 g/L의 세포 밀도에 도달한다. 배양 기간이 완료되면, 발효기 내용물을 원심분리기와 같은 세포 분리기에 통과시켜 세포 및 세포 잔해물을 제거하고, 발효 브로스를 생성물 분리 장치로 옮길 수 있다. 당업계에 널리 공지된 표준 분리 절차에 따라 이종 펩타이드의 단리가 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 연속식 발효를 사용하여 본 발명의 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산할 수 있다. 간략하게, 연속식 발효는 발효 배지가 생물반응기에 연속적으로 첨가되고, 대략 동일한 양의 조건화된 배지가 처리를 위해 동시에 제거되는 개방된 시스템을 이용한 발효를 나타낸다. 연속식 발효는 일반적으로 배양물을 고밀도로 유지하며, 여기서 효모 세포는 주로 로그 단계 성장 중에 있다. 전형적으로, 연속식 발효 방법은 정상 상태 성장 조건을 유지하기 위해 수행되며, 배지 배출로 인한 효모 세포 손실은 발효 시 세포 성장 속도와 균형을 이루어야 한다.
일부 구현예에서, 하기와 같이 연속식 발효 방법을 사용하여 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산할 수 있다: 변형된 효모 균주를 생물반응기 장치, 및 초기 제1 및 제2 탄소 공급원이, 예를 들어 약 30 g/L 내지 50 g/L인 배지 조성을 사용하여 배양할 수 있다. 탄소 공급원이 소진되면, 동일한 조성의 공급 배지가 약 0.5 L/hr 내지 1 L/hr의 속도로 연속적으로 공급되며, 액체는 동일한 속도로 배출된다. 생물반응기에서 이종 펩타이드의 농도는 일반적으로 세포 밀도와 함께 일정하게 유지된다. 온도는 일반적으로 30℃로 유지되며, pH는 일반적으로 필요한 경우 농축 NaOH 및 HCl을 사용하여 약 4.5로 유지된다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하는 경우, 생물반응기를, 예를 들어 약 1개월 동안 계속 작동시킬 수 있으며, 이때 목표 화학 화합물 농도의 일관성을 보장하기 위해 매일 또는 필요에 따라 샘플을 취할 수 있다. 연속식 방식에서, 발효기 내용물은 새로운 공급 배지가 공급될 때마다 지속적으로 제거된다. 이어서, 세포, 배지 및 이종 펩타이드를 함유하는 출구 스트림을, 세포 및 세포 잔해물을 제거하거나 제거하지 않으면서, 연속 생성물 분리 절차에 적용할 수 있으며, 관심 펩타이드로부터 유기 생성물을 분리하기 위해 당업계에 널리 공지된 연속 분리 방법에 따라 수행할 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 효모 세포를, 예를 들어 호기성 생물반응기에 유가식 공정을 사용하여 성장시킬 수 있다. 간략하게, 반응기를 탄소 공급원 및 기타 시약을 포함하는 배지로 약 20% 내지 약 70% 용량으로 충전한다. 온도 및 pH는 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 화학물질을 사용하여 유지된다. 산소 수준은 교반과 함께 간헐적으로 공기를 살포하는 방식으로 유지된다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 본 발명은 호기성 생물반응기에서 유가식 공정을 사용하는 방법으로서, 여기서 반응기가 약 20%; 21%; 22%; 23%; 24%; 25%; 26%; 27%; 28%; 29%; 30%; 31%; 32%; 33%; 34%; 35%; 36%; 37%; 38%; 39%; 40%; 41%; 42%; 43%; 44%; 45%; 46%; 47%; 48%; 49%; 50%; 51%; 52%; 53%; 54%; 55%; 56%; 57%; 58%; 59%; 60%; 61%; 62%; 63%; 64%; 65%; 66%; 67%; 68%; 69% 또는 70% 용량으로 충전되는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 생산하기 위해 호기성 생물반응기를 사용하는 유가식 발효 방법으로서, 여기서 배지가 풍부한 배양 배지인 방법을 제공한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 탄소 공급원은 글루코오스, 소르비톨 또는 락토오스일 수 있다.
일부 구현예에서, 글루코오스의 양은 배지의 약 2 g/L; 3 g/L; 4 g/L; 5 g/L; 6 g/L; 7 g/L; 8 g/L; 9 g/L; 10 g/L; 11 g/L; 12 g/L; 13 g/L; 14 g/L; 15 g/L; 16 g/L; 17 g/L; 18 g/L; 19 g/L; 20 g/L; 21 g/L; 22 g/L; 23 g/L; 24 g/L; 25 g/L; 26 g/L; 27 g/L; 28 g/L; 29 g/L 또는 30 g/L일 수 있다.
일부 구현예에서, 소르비톨의 양은 배지의 약 2 g/L; 3 g/L; 4 g/L; 5 g/L; 6 g/L; 7 g/L; 8 g/L; 9 g/L; 10 g/L; 11 g/L; 12 g/L; 13 g/L; 14 g/L; 15 g/L; 16 g/L; 17 g/L; 18 g/L; 19 g/L; 20 g/L; 21 g/L; 22 g/L; 23 g/L; 24 g/L; 25 g/L; 26 g/L; 27 g/L; 28 g/L; 29 g/L 또는 30 g/L일 수 있다.
일부 구현예에서, 락토오스의 양은 배지의 약 2 g/L; 3 g/L; 4 g/L; 5 g/L; 6 g/L; 7 g/L; 8 g/L; 9 g/L; 10 g/L; 11 g/L; 12 g/L; 13 g/L; 14 g/L; 15 g/L; 16 g/L; 17 g/L; 18 g/L; 19 g/L; 20 g/L; 21 g/L; 22 g/L; 23 g/L; 24 g/L; 25 g/L; 26 g/L; 27 g/L; 28 g/L; 29 g/L 또는 30 g/L일 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명은 호기성 생물반응기를 사용하는 유가식 발효 방법으로서, 여기서 배지에 인산, 황산칼슘, 황산포타슘, 황산마그네슘 7수화물, 수산화포타슘 및/또는 옥수수 침지액 중 하나 이상이 보충되는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 배지에는 배지에 대해 약 2 g/L; 3 g/L; 4 g/L; 5 g/L; 6 g/L; 7 g/L; 8 g/L; 9 g/L; 10 g/L; 11 g/L; 12 g/L; 13 g/L; 14 g/L; 15 g/L; 16 g/L; 17 g/L; 18 g/L; 19 g/L; 20 g/L; 21 g/L; 22 g/L; 23 g/L; 24 g/L; 25 g/L; 26 g/L; 27 g/L; 28 g/L; 29 g/L 또는 30 g/L의 양으로 인산이 보충될 수 있다.
일부 구현예에서, 배지에는 배지에 대해 약 0.05 g/L; 0.15 g/L; 0.25 g/L; 0.35 g/L; 0.45 g/L; 0.55 g/L; 0.65 g/L; 0.75 g/L; 0.85 g/L; 0.95 g/L; 1.05 g/L; 1.15 g/L; 1.25 g/L; 1.35 g/L; 1.45 g/L; 1.55 g/L; 1.65 g/L; 1.75 g/L; 1.85 g/L; 1.95 g/L; 2.05 g/L; 2.15 g/L; 2.25 g/L; 2.35 g/L; 2.45 g/L; 2.55 g/L; 2.65 g/L; 2.75 g/L; 2.85 g/L 또는 2.95 g/L의 양으로 황산칼슘이 보충될 수 있다.
일부 구현예에서, 배지에는 배지에 대해 약 2 g/L; 2.5 g/L; 3 g/L; 3.5 g/L; 4 g/L; 4.5 g/L; 5 g/L; 5.5 g/L; 6 g/L; 6.5 g/L; 7 g/L; 7.5 g/L; 8 g/L; 8.5 g/L; 9 g/L; 9.5 g/L; 10 g/L; 10.5 g/L; 11 g/L; 11.5 g/L; 12 g/L; 12.5 g/L; 13 g/L; 13.5 g/L; 14 g/L; 14.5 g/L; 15 g/L; 15.5 g/L; 16 g/L; 16.5 g/L; 17 g/L; 17.5 g/L; 18 g/L; 18.5 g/L; 19 g/L; 19.5 g/L 또는 20 g/L의 양으로 황산포타슘이 보충될 수 있다.
일부 구현예에서, 배지에는 배지에 대해 약 0.25 g/L; 0.5 g/L; 0.75 g/L; 1 g/L; 1.25 g/L; 1.5 g/L; 1.75 g/L; 2 g/L; 2.25 g/L; 2.5 g/L; 2.75 g/L; 3 g/L; 3.25 g/L; 3.5 g/L; 3.75 g/L; 4 g/L; 4.25 g/L; 4.5 g/L; 4.75 g/L; 5 g/L; 5.25 g/L; 5.5 g/L; 5.75 g/L; 6 g/L; 6.25 g/L; 6.5 g/L; 6.75 g/L; 7 g/L; 7.25 g/L; 7.5 g/L; 7.75 g/L; 8 g/L; 8.25 g/L; 8.5 g/L; 8.75 g/L; 9 g/L; 9.25 g/L; 9.5 g/L; 9.75 g/L; 10 g/L; 10.25 g/L; 10.5 g/L; 10.75 g/L; 11 g/L; 11.25 g/L; 11.5 g/L; 11.75 g/L; 12 g/L; 12.25 g/L; 12.5 g/L; 12.75 g/L; 13 g/L; 13.25 g/L; 13.5 g/L; 13.75 g/L; 14 g/L; 14.25 g/L; 14.5 g/L; 14.75 g/L 또는 15 g/L의 양으로 황산마그네슘 7수화물이 보충될 수 있다.
일부 구현예에서, 배지에는 배지에 대해 약 0.25 g/L; 0.5 g/L; 0.75 g/L; 1 g/L; 1.25 g/L; 1.5 g/L; 1.75 g/L; 2 g/L; 2.25 g/L; 2.5 g/L; 2.75 g/L; 3 g/L; 3.25 g/L; 3.5 g/L; 3.75 g/L; 4 g/L; 4.25 g/L; 4.5 g/L; 4.75 g/L; 5 g/L; 5.25 g/L; 5.5 g/L; 5.75 g/L; 6 g/L; 6.25 g/L; 6.5 g/L; 6.75 g/L 또는 7 g/L의 양으로 수산화포타슘이 보충될 수 있다.
일부 구현예에서, 배지에는 배지에 대해 약 5 g/L; 6 g/L; 7 g/L; 8 g/L; 9 g/L; 10 g/L; 11 g/L; 12 g/L; 13 g/L; 14 g/L; 15 g/L; 16 g/L; 17 g/L; 18 g/L; 19 g/L; 20 g/L; 21 g/L; 22 g/L; 23 g/L; 24 g/L; 25 g/L; 26 g/L; 27 g/L; 28 g/L; 29 g/L; 30 g/L; 31 g/L; 32 g/L; 33 g/L; 34 g/L; 35 g/L; 36 g/L; 37 g/L; 38 g/L; 39 g/L; 40 g/L; 41 g/L; 42 g/L; 43 g/L; 44 g/L; 45 g/L; 46 g/L; 47 g/L; 48 g/L; 49 g/L; 50 g/L; 51 g/L; 52 g/L; 53 g/L; 54 g/L; 55 g/L; 56 g/L; 57 g/L; 58 g/L; 59 g/L; 60 g/L; 61 g/L; 62 g/L; 63 g/L; 64 g/L; 65 g/L; 66 g/L; 67 g/L; 68 g/L; 69 g/L 또는 70 g/L의 양으로 옥수수 침지액이 보충될 수 있다.
일부 구현예에서, 반응기의 온도는 약 15℃ 내지 약 45℃로 유지될 수 있다. 일부 구현예에서, 반응기의 온도는 약 20℃, 21℃, 22℃, 23℃, 24℃, 25℃, 26℃, 27℃, 28℃, 29℃, 30℃, 31℃, 32℃, 33℃, 34℃, 35℃, 36℃, 37℃, 38℃, 39℃ 또는 40℃일 수 있다.
일부 구현예에서, pH 수준은 약 3 내지 약 6일 수 있다. 일부 구현예에서, pH는 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9 또는 6.0일 수 있다.
일부 구현예에서, pH는 하나 이상의 화학물질의 첨가를 통해 일정한 수준으로 유지될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, pH를 유지하기 위해 수산화암모늄이 첨가될 수 있다. 일부 구현예에서, 수산화암모늄은 배지 중에 수산화암모늄이 약 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19% 또는 20%인 수산화암모늄 수준으로 첨가될 수 있다.
일부 구현예에서, 산소 수준은 살포를 통해 유지될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 용존 산소는 0.5 부피/부피/분 내지 1.5 부피/부피/분으로 공기를 살포하고, 10% 내지 30%의 설정점을 유지하기 위해 교반을 증가시키는 방식으로 유지될 수 있다.
일부 구현예에서, 반응기의 접종은 약 2.5 g/L 내지 약 50 g/L의 탄소 공급원, 예를 들어 글루코오스, 소르비톨 또는 락토오스를 포함하는 밤샘 종자 배양물(overnight seed culture)에 기반하여 달성될 수 있다. 일부 구현예에서, 밤샘 종자 배양물은 옥수수 침지액, 예를 들어 약 2.5 g/L 내지 약 50 g/L의 옥수수 침지액을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 접종 백분율은 초기 충전 부피의 약 5% 내지 20% 범위일 수 있다. 접종 후, 반응기가 충전되고/되거나 목적하는 상청액 펩타이드 농도가 달성될 때까지, 선택된 탄소 공급원의 약 50% 내지 약 80% 용액이 반응기에 공급될 수 있다. 일부 구현예에서, 반응기를 충전하는 데 필요한 시간은 약 86시간 내지 약 160시간 범위일 수 있다. 일부 구현예에서, 목적하는 펩타이드 농도에 도달하는 데 필요한 양은 약 0.8 g/L 내지 약 1.2 g/L 범위일 수 있다. 발효가 완료되면, 내용물을 세포 분리 장치에 통과시키고, 물질의 의도된 용도에 따라 선택적으로 농축시킨다.
효모 발효 배지에 대한 추가의 레시피가 본원에 제공된다:
효모 세포 발효 배지 및 스톡에 대한 레시피는 하기에 기재되는 바와 같다: (1) MSM 배지 레시피: 2 g/L 시트르산소듐 2수화물; 1 g/L 황산칼슘 2수화물(0.79 g/L 무수 황산칼슘); 42.9 g/L 일염기성 인산포타슘; 5.17 g/L 황산암모늄; 14.33 g/L 황산포타슘; 11.7 g/L 황산마그네슘 7수화물; 2 mL/L PTM1 미량 염 용액; 0.4 ppm 비오틴(500X, 200 ppm 스톡); 1% 내지 2% 순수한 글리세롤 또는 다른 탄소 공급원. (2) PTM1 미량 염 용액: 황산구리-5H2O 6.0 g; 요오드화소듐 0.08 g; 황산망간-H2O 3.0 g; 몰리브덴산소듐-2H2O 0.2 g; 붕산 0.02 g; 염화코발트 0.5 g; 염화아연 20.0 g; 황산제1철-7H2O 65.0 g; 비오틴 0.2 g; 황산 5.0 ml; 최종 부피 1리터까지 물을 첨가함. 클루이베로마이세스 락티스 제한 배지(DMSor)에 대한 예시적인 조성은 하기와 같다: 11.83 g/L KH2PO4, 2.299 g/L K2HPO4, 20 g/L의 발효 당, 예를 들어 갈락토오스, 말토오스, 라토트리오스, 수크로오스, 프룩토오스 또는 글루코오스, 및/또는 당 알코올, 예를 들어 에리트리톨, 수소첨가된 전분 가수분해물, 이소말트, 락티톨, 말티톨, 만니톨 및 자일리톨, 1 g/L MgSO4.7H2O, 10 g/L (NH4)SO4, 0.33 g/L CaCl2.2H2O, 1 g/L NaCl, 1 g/L KCl, 5 mg/L CuSO4.5H2O, 30 mg/L MnSO4.H2O, 10 mg/L ZnCl2, 1 mg/L KI, 2 mg/L CoCl2.6H2O, 8 mg/L Na2MoO4.2H2O, 0.4 mg/L H3BO3, 15 mg/L FeCl3.6H2O, 0.8 mg/L 비오틴, 20 mg/L Ca-판토테네이트, 15 mg/L 티아민, 16 mg/L 미오-이노시톨, 10 mg/L 니코틴산 및 4 mg/L 피리독신.
펩타이드 분해
단백질, 폴리펩타이드 및 펩타이드는 생물학적 샘플과 용액(예를 들어, 세포 배양 및/또는 발효 동안) 둘 모두에서 분해된다. 펩타이드 분해(예를 들어, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA의 분해)를 검출하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다. 펩타이드 분해(예를 들어, 발효 동안)를 검출하는 널리 공지된 방법 중 임의의 것이 본원에서 이용될 수 있다.
일부 구현예에서, 펩타이드 분해는 동위원소 표지화 기술; 액체 크로마토그래피/질량분석법(LC/MS); HPLC; 방사성 아미노산 혼입, 및 예를 들어 신틸레이션 계수를 통한 후속 검출; 리포터 단백질, 예를 들어 (예를 들어, 형광, 분광학, 발광측정 등에 의해) 검출될 수 있는 단백질의 사용; 하나 이상의 생물발광 단백질 및/또는 형광 단백질, 및/또는 이들의 융합체의 형광 강도; 펄스 추적 분석(예를 들어, 방사성 아미노산으로 세포를 펄스 표지하고, 미표지된 전구체를 추적하면서 표지된 단백질의 붕괴를 추적하고, 단백질 합성을 정지시키고, 시간에 따른 총 단백질 수준의 붕괴를 측정함); 시클로헥시미드 추적 검정을 사용하여 검출될 수 있다.
일부 구현예에서, 검정을 사용하여 펩타이드 분해를 검출할 수 있으며, 여기서 샘플은 펩타이드의 분해를 통해 생산된 상기 샘플 내 유리 1차 아민과 반응하도록 작동 가능한 비형광 화합물과 접촉한 후, 정량화되고 표준물과 비교될 수 있는 형광 신호를 생성한다. 본 개시내용에 따라 유리 아민을 위한 형광 태그로 이용될 수 있는 비형광 화합물의 예는, 3-(4-카르복시벤조일)퀴놀린-2-카르복스알데히드(CBQCA), 플루오레스카민(fluorescamine) 및 o-프탈디알데히드이다.
일부 구현예에서, 리포터 단백질로부터 판독 신호를 결정하는 방법은 리포터 단백질의 성질에 따라 달라진다. 예를 들어, 형광 리포터 단백질의 경우, 판독 신호는 형광 신호의 강도에 해당한다. 판독 신호는, 예를 들어 분광법, 형광법, 광도법 및/또는 발광법 기반 방법 및 검출 시스템을 사용하여 측정될 수 있다. 이러한 방법 및 검출 시스템은 당업계에 널리 공지되어 있다.
일부 구현예에서, 당업자에게 공지된 표준 면역학적 절차를 사용하여 펩타이드 분해를 검출할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 펩타이드 분해는 검출 가능한 항체를 이용하는 면역검정을 사용하여 샘플에서 검출될 수 있다. 이러한 면역검정에는, 예를 들어 응집 검정, ELISA, Pandex 미세형광측정 검정, 유세포분석, 혈청 진단 검정 및 면역조직화학적 염색 절차가 포함되며, 이들 모두 당업계에 널리 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 하나의 샘플에서의 수준(예를 들어, 형광)을 표준물과 비교할 수 있다. 당업계에 널리 공지된 다양한 수단을 통해 항체를 검출 가능하게 만들 수 있다. 예를 들어, 검출 가능한 마커가 항체에 직접적으로 또는 간접적으로 부착될 수 있다. 유용한 마커에는, 예를 들어 방사성뉴클레오타이드, 효소, 형광원, 발색원 및 화학발광 표지가 포함된다.
펩타이드 분해를 검출하는 예시적인 방법은 미국 특허 제5,766,927호; 제7,504,253호; 제9,201,073호; 제9,429,566호; 미국 특허 출원 제20120028286호; 문헌[Eldeeb et al., A molecular toolbox for studying protein degradation in mammalian cells. J Neurochem. 2019 Nov;151(4):520-533]; 및 문헌[Buchanan et al., Cycloheximide Chase Analysis of Protein Degradation in Saccharomyces cerevisiae. J Vis Exp. 2016; (110): 53975]에 제공되어 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
식물 또는 이의 부분으로의 CRIP 혼입
본원에 기재된 바와 같은 CRIP, CRIP-살충 단백질 및 펩타이드-IA, 및/또는 본원에 기재된 바와 같은 적어도 하나의 CRIP 또는 펩타이드-IA를 포함하는 살충 단백질은, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA, 및/또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열의 안정한 또는 일시적 발현을 위해 식물, 식물 조직, 식물 세포, 식물 종자 및/또는 이의 식물 부분에 혼입될 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA는 당업계에 공지된 재조합 기술을 사용하여 식물에 혼입될 수 있다. 일부 구현예에서, CRIP 또는 펩타이드-IA, 또는 적어도 하나의 CRIP 또는 펩타이드-IA를 포함하는 살충 단백질은 하나 이상의 CRIP 또는 펩타이드-IA 단량체를 포함할 수 있는 살충 단백질의 형태일 수 있다. 다른 구현예에서, 적어도 하나의 CRIP 또는 펩타이드-IA를 포함하는 살충 단백질은 또한 하나 이상의 비-CRIP 또는 비-IA 폴리펩타이드 또는 단백질, 예를 들어 하나 이상의 CRIP 또는 펩타이드-IA에 작동 가능하게 연결된 소포체 신호 펩타이드를 포함할 수 있다.
유전자이식 식물, 식물 조직, 식물 세포 및 식물 종자에 대해 본 섹션에 사용된 "CRIP" 또는 "펩타이드-IA"라는 용어는 또한, 하나 이상의 비-CRIP 또는 비-IA 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질에 더하여 하나 이상의 CRIP 또는 펩타이드-IA를 포함하는 살충 단백질을 포함하며, "CRIP 폴리뉴클레오타이드" 또는 "IA 폴리뉴클레오타이드"는 유사하게 하나 이상의 비-CRIP 또는 비-IA 폴리펩타이드 또는 단백질에 더하여 하나 이상의 CRIP 또는 펩타이드-IA를 포함하는 살충 단백질을 발현 및/또는 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드의 그룹을 포함하기 위해 사용된다.
CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 식물에 혼입시키는 목표(즉, CRIP 또는 펩타이드-IA를 발현하는 유전자이식 식물을 제조하기 위해서)는, 곤충에 의해 소비되는 식물 조직에서 발현되는 유전자이식 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA의 곤충 소비를 통해 살충 단백질을 해충에게 전달하는 것이다. 곤충(예를 들어, 유전자이식 식물을 섭식하는 곤충)이 이의 먹이를 통해 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 소비하면, 소비된 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA는 성장을 저해하거나, 움직임을 방해하거나 심지어 곤충을 사멸시키는 능력을 가질 수 있다. 따라서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드, 및/또는 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA 폴리펩타이드를 발현하는 유전자이식 식물은, 비제한적으로, 표피(예를 들어, 엽육); 주피; 체관부; 목질부; 실질; 후각조직(collenchyma); 후막조직(sclerenchyma); 및 1차 및 2차 분열조직을 포함하는 다양한 식물 조직에서 상기 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA 폴리뉴클레오타이드/폴리펩타이드를 발현할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열은 포스포에놀피루베이트 카르복실라아제 프로모터를 함유하는 조절 영역에 작동 가능하게 연결되어, 식물의 엽육 조직에서 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA의 발현을 유도할 수 있다.
CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA, 및/또는 CRIP/펩타이드-IA를 발현하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드를 발현하는 유전자이식 식물은 당업자에게 널리 공지된 다양한 방법 및 프로토콜 중 어느 하나에 의해 생성될 수 있으며; 이러한 본 발명의 방법은 뉴클레오타이드 구조체를 사용되는 식물에 도입하는 특정 방법을 필요로 하지 않고, 단지 뉴클레오타이드 구조체가 식물의 적어도 하나의 세포의 내부에 접근할 수 있다는 것만을 필요로 한다. 뉴클레오타이드 구조체를 식물에 도입하는 방법은 당업계에 공지되어 있으며, 이에는, 비제한적으로, 안정한 형질전환 방법, 일시적 형질전환 방법 및 바이러스 매개 방법이 포함된다. "유전자이식 식물" 또는 "형질전환된 식물" 또는 "안정적으로 형질전환된" 식물 또는 세포 또는 조직은, 식물 세포 내에 혼입 또는 통합된 외인성 핵산 서열 또는 DNA 단편을 갖는 식물을 나타낸다. 이러한 핵산 서열에는, 외인성이거나 형질전환되지 않은 식물 세포에 존재하지 않는 것들뿐 아니라, 내인성이거나 형질전환되지 않은 식물 세포에 존재할 수 있는 것들도 포함된다. "이종"은 일반적으로 이들이 존재하고, 감염, 트랜스펙션, 미세주사, 전기천공, 미세투영 등에 의해 세포에 첨가된 세포 또는 천연 게놈의 일부에 내인성이 아닌 핵산 서열을 나타낸다.
식물 세포의 형질전환은 당업계에 공지된 몇 가지 기술 중 하나에 따라 수행될 수 있다. 전형적으로, 관심 외인성 또는 이종 펩타이드 또는 폴리펩타이드(예를 들어, CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA)를 발현하는 구조체는, 유전자의 전사를 유도하는 프로모터뿐 아니라, 전사 종결 및 폴리아데닐화를 가능하게 하는 3' 미번역 영역을 함유할 수 있다. 이러한 구조체의 설계 및 구조화는 당업계에 널리 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 유전자는, 생성된 펩타이드가 분비되거나, 달리 식물 세포 내에서 특정 영역 및/또는 세포소기관으로 표적화되도록 조작될 수 있다. 예를 들어, 유전자는 펩타이드를 소포체로 전달하는 것을 용이하게 하는 신호 펩타이드를 함유하도록 조작될 수 있다. 또한, 인트론의 mRNA 처리가 발현에 필요하기 때문에, 인트론을 함유하도록 식물 발현 카세트를 조작하는 것이 바람직할 수 있다.
전형적으로, 식물 발현 카세트는 식물 형질전환 벡터 내로 삽입될 수 있다. 이러한 식물 형질전환 벡터는 식물 형질전환을 달성하는 데 필요한 하나 이상의 DNA 벡터로 구성될 수 있다. 예를 들어, 하나 초과의 인접한 DNA 분절로 구성된 식물 형질전환 벡터를 이용하는 것이 당업계에서 통상적인 관행이다. 이러한 벡터는 당업계에서 종종 "이원 벡터"로 지칭된다. 이원 벡터뿐 아니라 헬퍼 플라스미드를 갖는 벡터가 아그로박테리움 매개 형질전환에 가장 흔히 사용되며, 여기서 효율적인 형질전환을 달성하는 데 필요한 DNA 분절의 크기 및 복잡성은 상당히 크기 때문에, 기능을 별도의 DNA 분자로 분리하는 것이 유리하다. 이원 벡터는 전형적으로 T-DNA 전달에 필요한 시스-작용 서열(예컨대, 좌측 경계와 우측 경계), 식물 세포에서 발현을 가능하게 하도록 조작된 선별 마커, 및 "관심 유전자"(유전자이식 식물의 생성이 요구되는 식물 세포에서 발현을 가능하게 하도록 조작된 유전자)를 함유하는 플라스미드 벡터를 함유한다. 이러한 플라스미드 벡터에는 박테리아 복제에 필요한 서열이 또한 존재한다. 시스-작용 서열은 식물 세포로의 효율적인 전달 및 식물 세포에서의 발현을 가능하게 하는 방식으로 배열된다. 예를 들어, 선별 마커 유전자와 CRIP/펩타이드-IA는 좌측 경계와 우측 경계 사이에 위치한다. 종종, 제2 플라스미드 벡터는 아그로박테리움에서 식물 세포로의 T-DNA 전달을 매개하는 트랜스-작용 인자를 함유한다. 이러한 플라스미드는 종종, 당업계에서 이해되는 바와 같이(문헌[Hellens and Mullineaux (2000) Trends in Plant Science 5:446-451]), 아그로박테리움에 의한 식물 세포의 감염, 및 경계 서열에서의 절단 및 바이러스 매개 DNA 전달에 의한 DNA의 전달을 가능하게 하는 독성 기능(Vir 유전자)을 함유한다. 몇 가지 유형의 아그로박테리움 균주(예를 들어, LBA4404, GV3101, EHA101, EHA105 등)가 식물 형질전환에 사용될 수 있다. 제2 플라스미드 벡터는 미세투영, 미세주사, 전기천공, 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 다른 방법을 통해 식물을 형질전환시키는 데 필요하지 않다.
일반적으로, 식물 형질전환 방법은 이종 DNA를 표적 식물 세포(예를 들어, 미성숙 또는 성숙 배아, 현탁 배양물, 미분화된 캘러스, 원형질체 등)로 전달한 후, 형질전환되지 않은 세포 덩어리의 그룹으로부터 형질전환된 식물 세포를 회수하기 위해 (선별 마커 유전자에 따라) 적절한 선별의 최대 역치 수준을 적용하는 것을 포함한다. 외식편은 전형적으로 동일한 배지의 새로운 공급 장치로 옮겨져, 일상적으로 배양된다. 후속으로, 형질전환된 세포는 최대 역치 수준으로 선별제가 보충된 재생 배지에 배치된 후 싹(shoot)으로 분화된다. 이어서, 싹은 발근된 싹 또는 묘목을 회수하기 위해 선택적 발근 배지로 옮겨진다. 이어서, 유전자이식 묘목은 성숙 식물로 성장하고, 번식력이 있는 종자를 생성한다(예를 들어, 문헌[Hiei et al. (1994) The Plant Journal 6:271-282]; 문헌[Ishida et al. (1996) Nature Biotechnology 14:745-750]). 외식편은 전형적으로 동일한 배지의 새로운 공급 장치로 옮겨져, 일상적으로 배양된다. 유전자이식 식물을 생성하는 기술 및 방법에 대한 일반적인 설명은 문헌[Ayres and Park (1994) Critical Reviews in Plant Science 13:219-239] 및 문헌[Bommineni and Jauhar (1997) Maydica 42:107-120]에서 확인할 수 있다. 형질전환된 물질은 다수의 세포를 함유하기 때문에, 형질전환된 세포와 형질전환되지 않은 세포는 모두 적용된 표적 캘러스 또는 조직 또는 세포 그룹의 임의의 조각에 존재한다. 형질전환되지 않은 세포를 사멸시키고 형질전환된 세포가 증식하도록 하는 능력은 형질전환된 식물 배양물을 생성한다. 종종, 형질전환되지 않은 세포를 제거하는 능력은 형질전환된 식물 세포의 신속한 회수 및 유전자이식 식물의 성공적인 생성에 한계가 있다.
형질전환 프로토콜뿐 아니라 뉴클레오타이드 서열을 식물에 도입하는 프로토콜은, 형질전환을 위해 표적화된 식물 또는 식물 세포의 유형, 즉, 외떡잎 또는 쌍떡잎 식물에 따라 달라질 수 있다. 유전자이식 식물의 생성은, 비제한적으로, 미세주사, 전기천공, 직접 유전자 전달, 아그로박테리움에 의한 이종 DNA의 식물 세포로의 도입(아그로박테리아 매개 형질전환), 입자에 부착된 이종 외래 DNA가 있는 식물 세포의 공격, 탄도 입자 가속, 에어로졸 빔 형질전환, Lec1 형질전환, 및 DNA를 전달하는 다양한 다른 비입자 직접 매개 방법을 포함하는 몇 가지 방법 중 하나를 통해 수행될 수 있다. 예시적인 형질전환 프로토콜은 미국 출원 공개공보 제20010026941호; 미국 특허 제4,945,050호; 국제 출원 공개공보 WO 91/00915; 및 미국 출원 공개공보 제2002015066호에 개시되어 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
엽록체가 또한 용이하게 형질전환될 수 있으며, 엽록체의 형질전환에 대한 방법은 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Svab et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8526-8530]; 문헌[Svab and Maliga (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:913-917]; 문헌[Svab and Maliga (1993) EMBO J. 12:601-606] 참조(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨). 엽록체 형질전환 방법은 선별 마커를 함유하는 DNA의 입자 총(gun) 전달, 및 상동 재조합을 통한 색소체(plastid) 게놈으로의 DNA의 표적화에 따라 달라진다. 또한, 색소체 형질전환은 핵 인코딩되고 색소체를 지향하는 RNA 폴리머라아제의 조직 선호 발현에 의한 침묵 색소체 매개 전이유전자의 전사활성화에 의해 달성될 수 있다. 이러한 시스템은 문헌[McBride et al. (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:7301-7305]에 보고되어 있다.
이종 외래 DNA를 식물 세포에 통합시킨 후, 당업자는 형질전환되지 않은 세포를 사멸시키기 위해 배지에 적절한 선별 화학물질/시약(예를 들어, 항생제)의 최대 역치 수준을 적용하고, 상기 생존 세포를 정기적으로 새로운 배지로 이동시키는 방식으로 이러한 선별 처리로부터 생존하는 추정적으로 형질전환된 세포를 분리하고 성장시킬 수 있다. 적절한 선별을 이용한 연속 계대 및 접종을 통해, 당업자는 플라스미드 벡터로 형질전환된 세포를 식별하고 증식시킨다. 분자적 및 생화학적 방법을 사용하여 유전자이식 식물의 게놈에 통합된 관심 이종 유전자의 존재를 확인할 수 있다.
형질전환된 세포는 당업자에게 공지된 통상의 방법에 따라 식물로 성장할 수 있다. 예를 들어, 문헌[McCormick et al. (1986) Plant Cell Reports 5:81-84] 참조(상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨). 이어서, 이러한 식물은 성장하고, 동일한 형질전환된 균주 또는 상이한 균주로 수분되어, 식별된 목적하는 표현형 특징의 구성적 발현을 갖는 혼성체를 생성할 수 있다. 목적하는 표현형 특징의 발현이 안정적으로 유지되고 유전되도록 2대 이상을 성장시킬 수 있으며, 목적하는 표현형 특징의 발현이 달성되도록 종자를 수확할 수 있다. 이러한 방식으로, 본 개시내용은 게놈에 안정적으로 통합된 본 발명의 뉴클레오타이드 구조체, 예를 들어 본 발명의 발현 카세트를 갖는 형질전환된 종자("유전자이식 종자"로도 지칭됨)를 제공한다.
다양한 구현예에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 바와 같은 곤충 프로테이나아제, 프로테아제 및 펩티다아제(본원에서 집합적으로 "프로테아제"로 지칭됨)에 대한 기질로 작용하는 적어도 하나의 CRIP/펩타이드-IA를 포함하는 살충 단백질을 제공한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 CRIP 또는 펩타이드-IA, 및/또는 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 펩타이드-IA를 포함하는 조성물의 발현을 수용할 수 있는 유전자이식 식물 또는 이의 부분은 하기를 포함할 수 있다: 알팔파, 바나나, 보리, 콩, 브로콜리, 양배추, 카놀라, 당근, 카사바, 피마자, 콜리플라워, 셀러리, 병아리콩, 배추, 감귤류, 코코넛, 커피, 옥수수, 클로버, 목화, 쑥, 오이, 더글라스 전나무(Douglas fir), 가지, 유칼립투스, 아마, 마늘, 포도, 홉, 리크, 양상추, 로블롤리 소나무(Loblolly pine), 수수, 멜론, 너트, 귀리, 올리브, 양파, 관상용 풀, 야자, 목초, 완두콩, 땅콩, 고추, 비둘기콩, 소나무, 감자, 포플러, 호박, 라디아타 소나무(Radiata pine), 무, 유채, 쌀, 대목, 호밀, 홍화, 관목, 수수, 남송, 대두, 시금치, 호박, 딸기, 사탕무, 사탕수수, 해바라기, 사탕옥수수, 스위트검, 고구마, 스위치그래스, 차, 담배, 토마토, 라이밀, 잔디, 수박 및 밀 식물. 일부 구현예에서, 유전자이식 식물은 본원에 기재된 DNA 구조체로 초기에 형질전환된 세포로부터 성장할 수 있다. 다른 구현예에서, 유전자이식 식물은 특정 조직 또는 식물 부분, 예를 들어 잎, 줄기, 꽃, 꽃받침, 과실, 뿌리 또는 종자, 또는 이들의 조합에서 인코딩된 CRIP/펩타이드-IA 조성물을 발현할 수 있다.
전술한 식물 혼입 방법/기술 중 임의의 것을 사용하여 CRIP 및/또는 펩타이드-IA(예를 들어, 이러한 방법에 적합한 살충 작용제, 예를 들어 아미노산, 펩타이드 또는 단백질의 중합체)를 생산할 수 있다. 예를 들어, 전술한 방법 중 임의의 것을 사용하여, 비제한적으로, ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, rκ-ACTX-Hv1c, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω-ACTX-Hv1a+2); Γ-CNTX-Pn1a; U1-아가톡신-Ta1b; TVP; Av2; Av3; AVP; 및/또는 Bt 독소(예를 들어, Cry 독소, Cyt 독소 또는 Vip)를 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 CRIP 또는 펩타이드-IA 중 임의의 것을 생산, 생성, 제조, 발현, 전사, 번역, 합성 또는 달리 형성할 수 있다.
절단 가능한 링커 및 절단 가능하지 않은 링커를 갖는 단백질
일부 구현예에서, 적어도 하나의 CRIP(또는 펩타이드-IA)를 포함하는 살충 단백질은 절단 가능한 펩타이드에 작동 가능하게 연결될 수 있다. 다른 구현예에서, 적어도 하나의 CRIP(또는 펩타이드-IA)를 포함하는 살충 단백질은 절단 가능하지 않은 펩타이드에 작동 가능하게 연결될 수 있다.
일부 구현예에서, 적어도 하나의 CRIP/펩타이드-IA를 포함하는 살충 단백질은 둘 이상의 절단 가능한 펩타이드를 가질 수 있으며, 여기서 살충 단백질은 곤충 절단 가능한 링커(L)를 포함하고, 곤충 절단 가능한 링커는 프레임 내에서 (CRIP-L)n(여기서, "n"은 1 내지 200, 또는 1 내지 100, 또는 1 내지 10 범위의 정수임)을 포함하는 구조체와 융합된다. 또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 CRIP를 포함하고 본원에 기재된 살충 단백질은 곤충 절단 가능한 링커(L) 및/또는 반복 구조체 (L-CRIP)n 또는 (CRIP-L)n(여기서, "n"은 1 내지 200, 또는 1 내지 100, 또는 1 내지 10 범위의 정수임)와 작동 가능하게 연결된, CRIP와 작동 가능하게 연결된 소포체 신호 펩타이드(ERSP)를 포함한다.
다양한 구현예에서, 예시적인 살충 단백질은 하기를 포함하는 단백질 구조체를 포함할 수 있다: (ERSP)-(CRIP-L)n; (ERSP)-(L)-(CRIP-L)n; (ERSP)-(L-CRIP)n; (ERSP)-(L-CRIP)n-(L)(여기서, "n"은 1 내지 200, 또는 1 내지 100, 또는 1 내지 10 범위의 정수임). 상기 기재된 다양한 관련 구현예에서, CRIP는 상기 언급된 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드이고, L은 절단 가능하지 않은 또는 절단 가능한 펩타이드이고, n은 1 내지 200 범위의 정수, 바람직하게는 1 내지 100 범위의 정수, 및 더욱 바람직하게는 1 내지 10 범위의 정수이다. 일부 구현예에서, 살충 단백질은 동일하거나 상이한 CRIP 펩타이드와 동일하거나 상이한 곤충 절단 가능한 펩타이드를 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, C-말단 CRIP는 이의 C-말단에서 곤충 내장 환경에서 절단되도록 작동 가능한 절단 가능한 펩타이드와 작동 가능하게 연결된다. 일부 구현예에서, N-말단 CRIP는 이의 N-말단에서 곤충 내장 환경에서 절단되도록 작동 가능한 절단 가능한 펩타이드와 작동 가능하게 연결된다.
곤충 내장 환경에서 발견되는 이용 가능한 프로테아제 및 펩티다아제 중 일부는 곤충의 생애 단계에 따라 달라지는데, 이러한 효소가 종종 공간적으로 및 시간적으로 발현되기 때문이다. 곤충의 소화 시스템은 소화관과 관련 샘으로 구성된다. 음식물이 입으로 들어가고, 소화 프로테아제 및 펩티다아제를 함유하거나 함유하지 않을 수 있는 분비물과 혼합된다. 전장과 후장은 기원이 외배엽이다. 전장은 일반적으로 날 음식물의 저장 창고 역할을 한다. 전장에서부터, 음식물의 별개의 덩어리는 중장(중간창자 또는 위)으로 이동한다. 중장은 음식물 영양소의 소화 및 흡수 장소이다. 일반적으로, 중장에서 특정 프로테아제 및 펩티다아제의 존재는 내장의 pH를 따른다. 인간 위장계의 특정 프로테아제 및 펩티다아제에는, 펩신, 트립신, 키모트립신, 엘라스타아제, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티다아제 및 디펩티다아제가 포함된다.
곤충 내장 환경은 초식동물 종의 소화계에서 소화 동안 펩타이드와 단백질이 분해되는 영역을 포함한다. 곤충 내장 환경에서 발견되는 이용 가능한 프로테아제 및 펩티다아제 중 일부는 하기를 포함할 수 있다: (1) 세린 프로테아제; (2) 시스테인 프로테아제; (3) 아스파르트산 프로테아제, 및 (4) 메탈로프로테아제.
초식성 곤충의 소화 시스템에서 2가지 우세한 프로테아제 부류는 세린 프로테아제와 시스테인 프로테아제이다. Murdock 등의 문헌(1987)에는 딱정벌레목에 속하는 다양한 해충의 중장 효소에 대한 정교한 연구가 수행되어 있으며, Srinivasan 등의 문헌(2008)에는 인시목에 속하는 해충의 중장 효소에 대해 보고되어 있다. 세린 프로테아제는 유충 내장 환경에서 지배적이고, 인시목에서 총 소화 활성의 약 95%에 기여하는 것으로 공지되어 있지만, 딱정벌레목 종은 시스테인 프로테아제를 포함하여 보다 넓은 범위의 우세한 내장 프로테아제를 가지고 있다.
파파인 패밀리는 광범위한 특이성을 갖는 엔도펩티다아제(예컨대 파파인), 매우 좁은 특이성을 갖는 엔도펩티다아제(예컨대 글리실 엔도펩티다아제), 아미노펩티다아제, 디펩티딜펩티다아제, 및 엔도펩티다아제 활성과 엑소 펩티다아제 활성을 모두 갖는 펩티다아제(예컨대, 카텝신 B 및 H)를 포함하여 매우 다양한 활성을 갖는 펩티다아제를 함유한다. 다양한 곤충의 중장에서 발견되는 다른 예시적인 프로테이나아제에는, 트립신 유사 효소, 예를 들어 트립신 및 키모트립신, 펩신, 카르복시펩티다아제-B 및 아미노트리펩티다아제가 포함된다.
세린 프로테아제는 거의 모든 동물 및 미생물에 광범위하게 분포되어 있다(Joanitti 등의 문헌(2006)). 고등 유기체에서, 유전자의 거의 2%가 이러한 효소를 코딩한다(Barrette-Ng 등의 문헌(2003)). 숙주 유기체의 유지 및 생존에 필수 불가결한 세린 프로테아제는 다수의 생물학적 과정에서 핵심 역할을 한다. 세린 프로테아제는 고전적으로 기질 특이성, 특히 P1의 잔기에 따라 분류된다: 트립신 유사(P1에서 Lys/Arg 선호), 키모트립신 유사(P1에서 Phe/Tyr/Leu과 같은 큰 소수성 잔기) 또는 엘라스타아제 유사(P1에서 Ala/Val과 같은 작은 소수성 잔기)(Tyndall 등의 문헌(2005)에 따라 수정됨). 세린 프로테아제는 중심 촉매 기구가 3개의 불변 잔기, 즉, 아스파르트산, 히스티딘 및 고유 반응성 세린으로 구성된 단백질분해 효소의 한 부류이며, 이에 따라 "촉매 삼합체(catalytic triad)"라는 명칭을 갖게 된다. Asp-His-Ser 삼합체는 적어도 4개의 상이한 구조 맥락에서 확인할 수 있다(Hedstrom, 2002). 세린 프로테아제의 이러한 4개의 클랜(clan)은 키모트립신, 서브틸리신, 카르복시펩티다아제 Y 및 Clp 프로테아제로 대표된다. 가장 상세하게 연구된 키모트립신 유사 클랜의 3가지 세린 프로테아제는 키모트립신, 트립신 및 엘라스타아제이다. 보다 최근에, Ser-His-Glu, Ser-Lys/His, His-Ser-His 및 N-말단 Ser를 포함하는 신규한 촉매 삼합체 및 이합체를 갖는 세린 프로테아제가 소화에서의 역할에 대해 발견되었다.
곤충의 내장 환경에서 발견되는 잘 연구된 소화 효소의 한 부류는 시스테인 프로테아제 부류이다. "시스테인 프로테아제"라는 용어는, 효소의 촉매 부위에 시스테인 잔기의 고도로 반응성인 티올기를 보유하는 프로테아제를 설명하기 위한 것으로 의도된다. 다수의 초식성 곤충과 식물 기생 선충이 적어도 부분적으로 단백질 소화를 위해 중장 시스테인 프로테아제에 의존한다는 증거가 있다. 이에는, 비제한적으로, 반시목(Hemiptera), 특히 호박노린재(아나사 트리스티스(Anasa tristis)); 풀색노린재(아크로스테르눔 힐라레(Acrosternum hilare)); 립토르투스 클라바투스(Riptortus clavatus); 및 현재까지 조사된 거의 모든 딱정벌레목, 특히, 콜로라도 감자 딱정벌레(렙티노타르사 데셈리네아타(Leptinotarsa decemlineata)); 세줄무늬 감자 딱정벌레(레마 트리리네아타(Lema trilineata)); 아스라파거스 딱정벌레(크리오세리스 아스파라기(Crioceris asparagi)); 멕시코 콩 딱정벌레(에필라크나 바리베스티스(epilachna varivestis)); 붉은 밀가루 딱정벌레(트리올리움 카스타네움(Triolium castaneum)); 가짜쌀도둑 딱정벌레(confused flour beetle)(트리볼리움 콘푸숨(Tribolium confusum)); 벼룩 딱정벌레(카에토크네마(Chaetocnema) 종, 할티카(Haltica) 종 및 에피트릭스(Epitrix) 종); 옥수수 뿌리벌레(디아브로티카(Diabrotica) 종); 동부콩바구미(칼로소브루쿠스 아쿨라투(Callosobruchus aculatue)); 목화바구미(안토노무스 그란디스(Antonomus grandis)); 쌀바구미(시토필루스 오리자(Sitophilus oryza)); 옥수수바구미(시토필루스 제아마이스(Sitophilus zeamais)); 곡물바구미(시토필루스 그라나리우스(Sitophilus granarius)); 이집트 알팔파 바구미(히페라 포스티카(Hypera postica)); 콩바구미(아칸토실리데스 옵텍투스(Acanthoseelides obtectus)); 가루좀벌레(lesser grain borer)(리조페르타 도미니카(Rhyzopertha dominica)); 황색밀웜(테네브리오 몰리토르(Tenebrio molitor)); 총채벌레목(Thysanoptera), 특히, 꽃노랑총채벌레(western flower thrip)(프란클리니 엘라 오시덴탈리스(Franklini ella occidentalis)); 쌍시목, 특히, 잎나방벌레 종(리리오미자 트리폴리(Liriomyza trifolii)); 식물 기생 선충, 특히 감자 낭포 선충(글로보데라(Globodera) 종), 비트 낭포 선충(헤테로데라 스카크티(Heterodera schachtii)) 및 뿌리혹 선충(멜로이도기네(Meloidogyne) 종)이 포함된다.
소화 효소의 또 다른 부류는 아스파르트산 프로테아제이다. "아스파르트산 프로테아제"라는 용어는, 효소의 촉매 부위에 2개의 고도로 반응성인 아스파르트산 잔기를 보유하고, 거의 모든 알려진 아스파르트산 프로테아제의 저분자량 저해제인 펩스타틴과의 특이적 저해를 특징을 하는 프로테아제를 설명하기 위한 것으로 의도된다. 다수의 초식성 곤충이, 부분적으로, 가장 흔히 시스테인 프로테아제와 함께 단백질 소화를 위해 중장 아스파르트산 프로테아제에 의존한다는 증거가 있다. 이에는, 비제한적으로, 반시목, 특히(로드니우스 프로릭수스(Rhodnius prolixus)) 및 빈대(시멕스(Cimex) 종) 및 피마티다에(Phymatidae), 노린재과(Pentatomidae), 긴노린재과(Lygaeidae) 및 물장군과(Belostomatidae)의 구성원; 딱정벌레목, 가뢰과(Meloidae), 잎벌레과(Chrysomelidae), 무당벌레과(Coccinelidae) 및 콩바구미과(Bruchidae)의 구성원, 머리대장하목(Cucujiformia) 계열에 속하는 모든 것, 특히, 콜로라도 감자 딱정벌레(렙티노타르사 데셈리네아타), 세줄무늬 감자 딱정벌레(레마 트리리네아타); 남부 및 서부 옥수수 뿌리벌레(디아브로티카 운데심푼크타타(Diabrotica undecimpunctata) 및 디아브로티카 비르기페라(D. virgifera)), 목화바구미(안토노무스 그란디스), 호박노린재(아나사 트리스티스); 벼룩 딱정벌레(필로트레타 크루시페라(Phyllotreta crucifera)), 브루키드 딱정벌레(bruchid beetle)(칼로소브루쿠스 마쿨라투스(Callosobruchus maculatus)), 멕시코 콩 딱정벌레(에필라크나 바리베스티스), 대두 잎나방벌레(오돈토타 호르니(Odontota horni)), 가장자리 물집 딱정벌레(margined blister beetle)(에피카우타 페스티페라(Epicauta pestifera)) 및 붉은 밀가루 딱정벌레(트리올리움 카스타네움); 쌍시목, 특히 집파리(무스카 도메스티카)가 포함된다(문헌[Terra and Ferreira (1994) Comn. Biochem. Physiol. 109B: 1-62]; 문헌[Wolfson and Murdock (1990) J. Chem. Ecol. 16: 1089-1102]).
식물로의 폴리뉴클레오타이드 혼입
유전자이식 식물에서 이종 폴리펩타이드 발현에 대한 도전은 숙주 유기체에서 발현 시 도입된 폴리펩타이드가 목적하는 효과(예를 들어, 살충 활성)를 유지하는 것이며; 이러한 효과를 유지하는 한 가지 방법은 작동 가능하게 연결된 소포체 신호 펩타이드(ERSP)의 사용을 통해 적절한 단백질 접힘의 가능성을 증가시키는 것이다. 유전자이식 단백질의 효과를 유지하는 또 다른 방법은 번역 안정화 단백질(STA)을 혼입시키는 것이다.
소포체 신호 펩타이드(ERSP)
ER에 대한 재조합 단백질의 세포하 표적화는 상기 재조합 단백질에 작동 가능하게 연결된 ERSP의 사용을 통해 달성될 수 있으며; 이는 이러한 단백질의 정확한 조립 및/또는 접힘을 가능하게 하고, 식물에 이러한 재조합 단백질이 높은 수준으로 축적되게 한다. 세포내 저장으로의 숙주 단백질의 구획화에 관한 예시적인 방법은 문헌[McCormick et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96(2):703-708, 1999]; 문헌[Staub et al., Nature Biotechnology 18:333-338, 2000]; 문헌[Conrad et al., Plant Mol. Biol. 38:101-109, 1998]; 및 문헌[Stoger et al., Plant Mol. Biol. 42:583-590, 2000]에 개시되어 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다. 따라서, 재조합 단백질의 정확한 조립 및/또는 접힘을 달성하기 위한 하나의 방법은, 소포체 신호 펩타이드(ERSP)를 관심 재조합 단백질에 작동 가능하게 연결하는 것이다.
일부 구현예에서, 소포체 신호 펩타이드(ERSP)를 포함하는 펩타이드는 CRIP에 작동 가능하게 연결될 수 있으며(ERSP-CRIP로 지정됨), 여기서 상기 ERSP는 상기 펩타이드의 N-말단이고, ERSP 펩타이드의 길이는 3개 내지 60개 아미노산, 5개 내지 50개 아미노산, 20개 내지 30개 아미노산이고/이거나, 펩타이드는 BAAS, 또는 담배 엑스텐신 신호 펩타이드, 또는 변형된 담배 엑스텐신 신호 펩타이드, 또는 주니페루스 아쉐이(Juniperus ashei)의 Jun a 3 신호 펩타이드이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 식물은 소포체 신호 펩타이드(ERSP) 및/또는 CRIP로 본원에 기재된 펩타이드 중 임의의 것을 코딩하는 뉴클레오타이드로 형질전환될 수 있다.
일부 구현예에서, 소포체 신호 펩타이드(ERSP)로 구성된 단백질은 개재 링커 펩타이드(L 또는 링커)에 작동 가능하게 연결된 CRIP에 작동 가능하게 연결될 수 있으며(ERSP-L-CRIP 또는 ERSP-CRIP-L로 지정됨), 여기서 상기 ERSP는 상기 단백질의 N-말단이고, 상기 L 또는 링커는 CRIP의 N-말단 측(업스트림) 또는 CRIP의 C-말단 측(다운스트림)에 있을 수 있다. ERSP-L-CRIP 또는 ERSP-CRIP-L로 지정된 단백질로서, 본원에 기재된 ERSP 또는 CRIP 중 임의의 것을 포함하고, 여기서 상기 L은 절단 불가능한 링커 펩타이드, 또는 단백질 발현 과정 동안 식물 세포에서 절단 가능할 수 있거나 곤충 내장 환경 및 혈림프 환경에서 절단 가능할 수 있는 절단 가능한 링커 펩타이드일 수 있으며, 하기 서열을 포함하여 본 문헌에서 설명되거나 교시된 개재 링커 펩타이드(링커) 중 임의의 것으로 구성된 것인 단백질: IGER(서열번호 31), EEKKN(서열번호 32) 및 ETMFKHGL(서열번호 33).
일부 구현예에서, 소포체 신호 펩타이드(ERSP)를 포함하는 단백질은 CRIP에 작동 가능하게 연결될 수 있으며, 이는 차례로 번역 안정화 단백질(STA)에 작동 가능하게 연결된다. 본원에서, 이러한 구성은 ERSP-STA-CRIP 또는 ERSP-CRIP-STA로 지정되며, 여기서 상기 ERSP는 상기 단백질의 N-말단이고, 상기 STA는 CRIP의 N-말단 측(업스트림) 또는 CRIP의 C-말단 측(다운스트림)에 있을 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 ERSP 또는 CRIP 중 임의의 것을 포함하는 ERSP-STA-CRIP 또는 ERSP-CRIP-STA로 지정된 단백질은, STA, 예를 들어 GFP(녹색 형광 단백질; 서열번호 34; NCBI 수탁번호 P42212) 또는 Jun a 3(주니페루스 아쉐이; 서열번호 36; NCBI 수탁번호 P81295.1)를 포함하여 본 문헌에서 설명되거나 교시된 번역 안정화 단백질 중 임의의 것에 작동 가능하게 연결될 수 있다.
식물은, 예를 들어 상기 기재된 트랜스펙션 방법 중 어느 하나를 사용하여 CRIP, 또는 하나 이상의 CRIP 및 하나 이상의 비-CRIP 펩타이드, 폴리펩타이드 또는 단백질을 포함하는 살충 단백질을 인코딩하는 DNA 서열로 일시적으로 또는 안정적으로 트랜스펙션될 수 있으며; 대안적으로, 식물은 ERSP, 링커, 및/또는 폴리뉴클레오타이드를 인코딩하는 STA 단백질에 작동 가능하게 연결된 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드로 트랜스펙션될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 유전자이식 식물 또는 식물 게놈은 소포체 신호 펩타이드(ERSP); CRIP; 및/또는 개재 링커 펩타이드(링커, L)를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하도록 트랜스펙션되어, 이종 DNA로부터 전사된 mRNA가 형질전환된 식물에서 발현되게 할 수 있다.
본 개시내용은, 비제한적으로, 외떡잎 및 쌍떡잎 식물을 포함하는 임의의 식물 종의 형질전환에 사용될 수 있다. 유전자이식 접근법 또는 PEP가 특히 유용한 접근법일 수 있는 작물에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 알팔파, 목화, 토마토, 옥수수, 밀, 옥수수, 사탕옥수수, 자주개자리(lucerne), 대두, 수수, 들판 완두콩(field pea), 아마인, 홍화, 유채, 유채씨유, 쌀, 대두, 보리, 해바라기, 나무(침엽수 및 낙엽수 포함), 꽃(상업적으로 및 온실에서 재배되는 것들 포함), 들판 루핀(field lupin), 스위치그래스(switchgrass), 사탕수수, 감자, 토마토, 담배, 십자화과, 고추, 사탕무, 보리, 유채씨유, 브라시카(Brassica) 종, 호밀, 기장, 땅콩, 고구마, 카사야(cassaya), 커피, 코코넛, 파인애플, 감귤나무, 코코아, 차, 바나나, 아보카도, 무화과, 구아바, 망고, 올리브, 파파야, 캐슈, 마카다미아, 아몬드, 오트, 채소, 관상용 식물 및 침엽수.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 CRIP 발현 오픈 리딩 프레임(ORF)은 식물이 mRNA를 발현할 수 있게 하는 폴리뉴클레오타이드 서열로서, 이는 차례로 펩타이드로 번역되어 상기 단백질이 하나 이상의 해충을 저해 및/또는 사멸시키는 데 충분한 용량을 제공하는 정도로 발현되고, 적절하게 접히고/접히거나, 축적될 것이다. 하나의 구현예에서, 단백질 CRIP 발현 ORF의 예는 시스테인 풍부 살충 단백질(crip), "ersp"(즉, ERSP 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열), "링커"(즉, 링커 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열), "sta"(즉, STA 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열), 또는 이들의 임의의 조합일 수 있으며, 하기 방정식 형식으로 설명될 수 있다:
ersp-sta-(링커 i-crip j)n 또는 ersp-(crip j-링커 i)n-sta
폴리뉴클레오타이드 방정식의 전술한 예시적인 구현예는 하기 단백질 복합체가 발현되게 할 것이다: ERSP-STA-(링커I-CRIPJ)N, 각각의 구성요소를 분리하기 위한 대시(dash) 기호와 함께 4개의 가능한 펩타이드 구성요소를 함유함. ersp의 뉴클레오타이드 구성요소는 식물 소포체 트래피킹 신호 펩타이드(ERSP)를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절이다. sta의 구성요소는 식물에서 발현되는 CRIP의 축적을 돕는 번역 안정화 단백질(STA)을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절이지만, 일부 구현예에서, CRIP 발현 ORF에 sta를 포함시키는 것이 필요하지 않을 수 있다. 링커 i의 구성요소는 CRIP를 ORF에 함유된 다른 구성요소 및 번역 안정화 단백질과 분리하기 위한 개재 링커 펩타이드(L 또는 링커)를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절이다. 아래첨자 "i"는, 일부 구현예에서, 상이한 유형의 링커 펩타이드가 CRIP 발현 ORF에 사용될 수 있음을 나타낸다. 구성요소 "crip"는 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절을 나타낸다. 아래첨자 "j"는, 상이한 CRIP 폴리뉴클레오타이드가 CRIP 발현 ORF에 포함될 수 있음을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CRIP 폴리뉴클레오타이드 서열은 아미노산 치환 또는 아미노산 결실이 있는 CRIP를 인코딩할 수 있다. "(링커 i-crip j)n"에 제시된 아래첨자 "n"은, 개재 링커 펩타이드 및 CRIP를 인코딩하는 뉴클레오타이드의 구조가 동일한 CRIP 발현 ORF의 동일한 오픈 리딩 프레임에서 "n"회 반복될 수 있음을 나타내며, 여기서 "n"은 1 내지 10의 임의의 정수일 수 있고; "n"은 1 내지 10일 수 있고, 구체적으로 "n"은 1, 2, 3, 4 또는 5일 수 있고, 일부 구현예에서 "n"은 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 반복부는 상이한 개재 링커(링커)와 상이한 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절을 함유할 수 있다. 동일한 CRIP 발현 ORF 내 반복부를 포함하는 상이한 폴리뉴클레오타이드 분절은 모두 동일한 번역 프레임 내에 있다. 일부 구현예에서, CRIP 발현 ORF에 sta 폴리뉴클레오타이드를 포함시키는 것이 필요하지 않을 수 있다. 예를 들어, ersp 폴리뉴클레오타이드 서열은 링커 없이 CRIP 변이체 폴리뉴클레오타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 직접 연결될 수 있다.
전술한 예시적인 방정식에서, 폴리펩타이드 "CRIP"를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 "crip"는 본원에 기재된 바와 같은 임의의 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, "crip" 폴리뉴클레오타이드는, 비제한적으로, ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, rκ-ACTX-Hv1c, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω-ACTX-Hv1a+2); Γ-CNTX-Pn1a; U1-아가톡신-Ta1b; TVP; Av2; Av3; 또는 AVP를 포함하는 CRIP를 인코딩할 수 있다. 또한, 전술한 방정식은 또한 Bt 독소(예를 들어, Cry 독소, Cyt 독소 또는 Vip)와 같은 펩타이드-IA(예를 들어, 이러한 방법에 적합한 살충 작용제, 예를 들어 아미노산, 펩타이드 또는 단백질의 중합체)를 인코딩하는 데 사용될 수 있다.
전술한 예시적인 방정식에서, 폴리펩타이드 "CRIP"를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 "crip"는, 본원에 기재된 바와 같은 임의의 CRIP, 예를 들어 하기와 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열일 수 있다: 서열번호 192 내지 370 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 거미 펩타이드; 서열번호 60 내지 64, 192 내지 370 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, κ-ACTX-Hv1a, κ+2-ACTX-Hv1a, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω+2-ACTX-Hv1a); 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a; 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 서열번호 66, 88 내지 191 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 전갈 펩타이드; 서열번호 371 내지 411 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 말미잘 펩타이드; 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열을 갖는 아네모니아 비리디스 유래의 Av3 폴리펩타이드; 서열번호 45 내지 47 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 또는 코노톡신.
일부 구현예에서, CRIP ORF는 이의 5'-말단에서 ersp로 시작한다. CRIP가 유전자이식 식물에서 발현될 때 적절하게 접히고 기능성이 되도록 하기 위해, 이는 프레임 내에서 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드와 융합된 ersp 뉴클레오타이드를 가져야 한다. 세포 번역 과정 동안, 번역된 ERSP는 신호 인식 입자로 불리는 세포 구성요소와의 결합을 통해 번역되는 CRIP가 식물 세포의 소포체(ER) 내에 삽입되도록 지시할 수 있다. ER 내에서, ERSP 펩타이드는 신호 펩티다아제에 의해 절단되고, CRIP는 ER로 방출되며, 여기서 CRIP는 번역 후 변형 과정, 예를 들어 디설파이드 결합 형성 동안 적절하게 접힌다. 임의의 추가적인 머무름 단백질 신호 없이, 단백질은 ER을 통해 골지체로 수송되며, 여기서 이는 최종적으로 원형질막 외부와 아포플라스틱(apoplastic) 공간 내로 분비된다. CRIP는 식물에서 살충 용량에 도달하기 위해 아포플라스틱 공간에 효율적으로 축적될 수 있다.
ERSP 펩타이드는 식물 번역된 CRIP 복합체의 N-말단 영역에 있으며, ERSP 부분은 약 3개 내지 60개 아미노산으로 구성된다. 일부 구현예에서, 이는 5개 내지 50개 아미노산이다. 일부 구현예에서, 이는 10개 내지 40개 아미노산이지만, 가장 흔히 15개 내지 20개; 20개 내지 25개; 또는 25개 내지 30개 아미노산으로 구성된다. ERSP는 단백질의 수송을 지시하기 때문에 신호 펩타이드로 불린다. 신호 펩타이드는 표적화 신호, 신호 서열, 수송 펩타이드 또는 국소화 신호로도 불릴 수 있다. ER 트래피킹을 위한 신호 펩타이드의 길이는 종종 15개 내지 30개 아미노산 잔기이며, 양으로 하전된 아미노 말단과, 극성이지만 하전되지 않은 카르복시 말단 영역으로 플랭킹된 소수성 잔기의 코어로 구성된 3부(tripartite) 구조를 갖는다. (문헌[Zimmermann, et al, "Protein translocation across the ER membrane," Biochimica et Biohysica Acta, 2011, 1808: 912-924]).
다수의 ERSP가 공지되어 있다. ERSP가 식물 ERSP에서 유도될 필요는 없으며, 비식물 ERSP도 본원에 기재된 절차를 이용하여 작동될 수 있다. 하지만, 다수의 식물 ERSP가 널리 공지되어 있으며, 본 발명자들은 본원에서 일부 식물 유래 ERSP를 설명한다. 예를 들어, BAAS는 식물, 호르데움 불가레(Hordeum vulgare)에서 유도된 것으로, 하기와 같은 아미노산 서열을 갖는다: MANKHLSLSLFLVLLGLSASLASG(서열번호 37)
식물의 아포플라스틱 공간으로 발현되고 방출되는 것으로 알려진 단백질의 게놈 서열에서 선택되는 식물 ERSP는, BAAS, 당근 엑스텐신 및 담배 PR1과 같은 예를 포함한다. 하기 참고문헌은 추가의 설명을 제공하며, 이러한 참고문헌들은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다. 문헌[De Loose, M. et al. "The extensin signal peptide allows secretion of a heterologous protein from protoplasts" Gene, 99 (1991) 95-100](De Loose, M. 등은 단백질의 소포체로의 전위를 위한 전형적인 신호 펩타이드를 함유하는 서열인, 니코티아나 플룸바기니폴리아(Nicotiana plumbaginifolia)로부터의 확장 인코딩 유전자의 구조분석을 설명하였음); 문헌[Chen, M.H. et al. "Signal peptide-dependent targeting of a rice alpha-amylase and cargo proteins to plastids and extracellular compartments of plant cells" Plant Physiology, 2004 Jul; 135(3): 1367-77. Epub 2004 Jul 2](Chen, M.H. 등은 유전자이식 담배에서 신호 펩타이드 존재 유무 하의 α-아밀라아제의 발현을 분석하는 방식으로 식물 세포에서 α-아밀라아제의 세포하 국소화를 연구하였음). 이러한 참고문헌 등은 본원에 기재된 방법, 절차, 및 펩타이드, 단백질 및 뉴클레오타이드 복합체 및 구조체에 사용될 수 있는 신호 펩타이드를 교시하고 개시한다.
담배 엑스텐신 신호 펩타이드 모티프는 ERSP이다(문헌[Memelink et al, the Plant Journal, 1993, V4: 1011-1022]; 또한 문헌[Pogue GP et al, Plant Biotechnology Journal, 2010, V8: 638-654] 참조). 일부 구현예에서, CRIP ORF는 담배 엑스텐신 신호 펩타이드 모티프를 가질 수 있다. 하나의 구현예에서, CRIP ORF는 서열번호 38에 따른 엑스텐신 모티프를 가질 수 있다. 또 다른 구현예에서, CRIP ORF는 서열번호 39에 따른 엑스텐신 모티프를 가질 수 있다.
엑스텐신 신호 모티프가 있는 구현예를 생성하는 방법에 대한 예시적인 예는 하기와 같다: 4개의 합성 DNA 프라이머가 있는 올리고 연장 PCR을 사용하여 엑스텐신 모티프를 인코딩하는 DNA 서열(예를 들어, 서열번호 40 또는 서열번호 41에 제시된 DNA 서열)을 설계하고; 주형으로 작용하는 엑스텐신 DNA 서열과 함께 PCR을 사용하여 말단 부위, 예를 들어 5'-말단에 있는 Pac I 제한 부위 및 3'-말단에 있는 GFP 서열 5'-말단과 같은 제한 부위를 추가하여 단편을 생성할 수 있으며; 단편을 정방향 PCR 프라이머로 사용하여 CRIP ORF를 인코딩하는 DNA 서열, 예를 들어 pFECT 벡터에 함유된 "gfp-l-CRIP"를 증폭시켜, (N' 말단에서 C' 말단으로) "ERSP-GFP-L-CRIP"(여기서 ERSP는 엑스텐신임)를 인코딩하는 CRIP ORF를 생성한다. 이어서, 생성된 DNA 서열을 ECT 벡터의 Pac I 및 Avr II 제한 부위에 클로닝하여, GFP 융합된 CRIP의 일시적 식물 발현을 위한 pFECT-CRIP 벡터를 생성할 수 있다.
일부 구현예에서, 예시적인 발현 시스템은, CRIP ORF를 함유하는 FECT 발현 벡터가 아그로박테리움, GV3101로 형질전환되고, 형질전환된 GV3101이 CRIP ORF의 일시적 발현을 위해 담배잎에 주입되는 것을 포함할 수 있다.
번역 안정화 단백질(STA)
번역 안정화 단백질(STA)은 식물 조직에서 CRIP의 양을 증가시킬 수 있다. CRIP ORF 중 하나인 ERSP-CRIP는 트랜스펙션된 식물에서 적절하게 접힌 CRIP를 발현하는 데 충분하지만, 일부 구현예에서, 해충 손상으로부터 식물의 효과적인 보호를 위해서는 식물 발현된 CRIP가 축적되어야 할 수 있다. 적절하게 구조화된 CRIP ORF의 트랜스펙션을 이용하여, 유전자이식 식물은 더 많은 양의 정확하게 접힌 CRIP를 발현하고 축적할 수 있다. 식물이 더 많은 양의 적절하게 접힌 CRIP를 축적하는 경우, 식물을 공격하고 먹는 해충을 보다 용이하게 대항, 저해 및/또는 사멸시킬 수 있다. 유전자이식 조직에 폴리펩타이드의 축적을 증가시키는 하나의 방법은 번역 안정화 단백질(STA)을 사용하는 것이다. 번역 안정화 단백질은 식물 조직에 CRIP의 축적을 유의하게 증가시키는 데 사용될 수 있기 때문에, 해충 저항성과 관련하여 CRIP로 트랜스펙션된 식물의 효능을 증가시킬 수 있다. 번역 안정화 단백질은 단백질 분해의 세포 과정에 의해 표적화되지 않고 세포에 축적될 수 있는 충분한 3차 구조를 갖는 단백질이다. 하기 방정식은 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리뉴클레오타이드 서열과 융합된 안정화 단백질을 인코딩하는 CRIP ORF의 예 중 하나를 설명한다:
ersp-sta-l-crip 또는 ersp-crip-l-sta
일부 구현예에서, 번역 안정화 단백질은 또 다른 단백질의 도메인일 수 있거나, 전체 단백질 서열을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 번역 안정화 단백질은 5개 내지 50개 아미노산, 50개 내지 250개 아미노산(예를 들어, GNA), 250개 내지 750개 아미노산(예를 들어, 키티나아제) 및 750개 내지 1500개 아미노산(예를 들어, 인한신(enhancin))일 수 있다.
단백질 또는 단백질 도메인은 번역 안정화 이외에 유용한 특징을 갖지 않거나, 번역 안정화에 더하여 다른 유용한 특징을 가질 수 있는 단백질을 함유할 수 있다. 번역 안정화 단백질의 하나의 구현예는 CRIP를 포함하는 융합 단백질의 중합체일 수 있다. 번역 안정화 단백질의 사용을 예시하기 위해 번역 안정화 단백질의 특정예가 본원에 제공된다. 이러한 예는 어떠한 방식으로든 본 개시내용 또는 청구범위를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 유용한 번역 안정화 단백질은 당업계에 널리 공지되어 있으며, 이러한 유형의 임의의 단백질이 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 펩타이드의 생산을 평가하고 시험하는 절차는 모두 당업계에 공지되어 있고 본원에 기재되어 있다. 하나의 번역 안정화 단백질의 하나의 예는 녹색 형광 단백질(GFP)(서열번호 34; NCBI 수탁번호 P42212.1)이다.
번역 안정화 단백질의 추가 예는 하기 참고문헌에서 확인할 수 있으며, 이들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다: 문헌[Kramer, K.J. et al. "Sequence of a cDNA and expression of the gene encoding epidermal and gut chitinases of Manduca sexta" Insect Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 23, Issue 6, September 1993, pp. 691-701](Kramer, K.J. 등은 담배 박각시벌레, 만두카 섹스타(Manduca sexta)로부터 키티나아제 인코딩 cDNA를 단리하고 시퀀싱하였음); 문헌[Hashimoto, Y. et al. "Location and nucleotide sequence of the gene encoding the viral enhancing factor of the Trichoplusia ni granulosis virus" Journal of General Virology, (1991), 72, 2645-2651](Hashimoto, Y. 등은 트리코플루시아 니(Trichoplusia ni) 과립병바이러스의 바이러스 증강 인자를 인코딩하는 유전자를 클로닝하고, 완전한 뉴클레오타이드 서열을 결정하였음). 이러한 참고문헌 등은 본원에 기재된 방법, 절차, 및 펩타이드, 단백질 및 뉴클레오타이드 복합체 및 구조체에 사용될 수 있는 번역 안정화 단백질을 교시하고 개시한다.
일부 구현예에서, CRIP ORF는 STA, 예를 들어 Jun a 3을 함유하는 CRIP ORF를 사용하여 식물, 예를 들어 담배 식물, 니코티아나 벤타미아나(Nicotiana benthamiana)로 형질전환될 수 있다. 성숙 Jun a 3은 일부 사람들에게는 알레르겐이기도 한 약 30 kDa의 식물 방어 단백질이다. Jun a 3은 주니페루스 아쉐이 나무에서 생산되며, 일부 구현예에서, 번역 안정화 단백질(STA)로 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, Jun a 3 아미노산 서열은 서열번호 36에 제시된 서열일 수 있다. 다른 구현예에서, Jun a 3 아미노산 서열은 서열번호 42에 제시된 서열일 수 있다.
링커
링커 단백질은 CRIP ORF를 포함하는 상이한 모티프의 적절한 접힘을 돕는다. 본 발명에 기재된 CRIP ORF는 또한 CRIP을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열(crip)과 번역 안정화 단백질(sta) 사이, 또는 발현 ORF가 다수의 CRIP 도메인 발현을 포함하는 경우, CRIP를 인코딩하는 다수의 폴리뉴클레오타이드 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열, 즉, (l-crip) N 또는 (crip-l) N 사이에 개재 링커 펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 개재 링커 펩타이드(링커 또는 L)는 발현된 CRIP 복합체의 상이한 부분들을 분리하고, 발현 과정 동안 복합체의 상이한 부분의 적절한 접힘을 돕는다. 발현된 CRIP 복합체에서, 상이한 기능성 도메인을 분리하기 위해 상이한 개재 링커 펩타이드가 포함될 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 CRIP에 부착되며, 이러한 2가 기는 보호하고자 하는 식물에 적절하게 접힌 CRIP의 축적을 용이하게 하기 위해 최대 10회(N=1 내지 10) 및 가능하게는 심지어 10회 초과로 반복될 수 있다.
일부 구현예에서, 개재 링커 펩타이드의 길이는 1개 내지 30개 아미노산일 수 있다. 하지만, 이는 식물에서 발현된 CRIP의 필수 구성요소는 아니다. 절단 가능한 링커 펩타이드는 형질전환된 식물에서 발현된 CRIP 복합체로부터 적절하게 CRIP를 방출시키도록 CRIP ORF에 대해 설계되어, 해충 손상과 관련하여 CRIP가 식물에 제공하는 보호를 개선시킬 수 있다. 개재 링커 펩타이드의 하나의 유형은 식물 절단 가능한 링커 펩타이드이다. 이러한 유형의 링커 펩타이드는 식물 번역 후 변형 동안 발현된 CRIP ORF 복합체로부터 완전히 제거될 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서, 이러한 유형의 개재 링커 펩타이드에 의해 연결된 적절하게 접힌 CRIP는 식물에서 번역 후 변형 동안 발현된 CRIP ORF 복합체로부터 식물 세포에 방출될 수 있다.
또 다른 유형의 절단 가능한 개재 링커 펩타이드는 식물에서 발현 과정 동안 절단 가능하지 않다. 하지만, 이는 세린, 트레오닌, 시스테인, 아스파르테이트 프로테아제 또는 메탈로프로테아제에 특이적인 프로테아제 절단 부위를 갖는다. 절단 가능한 링커 펩타이드의 유형은 곤충 및 인시목 내장 환경 및/또는 곤충 혈림프 및 인시목 혈림프 환경에서 발견되는 프로테아제에 의해 소화되어, 곤충 내장 또는 혈림프에 CRIP를 방출할 수 있다. 본 개시내용에 교시된 정보를 사용하여 본 발명에서 유용한 링커의 다른 예를 만들거나 찾는 것은 당업자에게 일상적인 것이어야 한다.
일부 구현예에서, CRIP ORF는 절단 가능한 유형의 개재 링커, 예를 들어 "IGER"(서열번호 31)의 아미노산 코드를 갖는 서열번호 31에 열거된 유형을 함유할 수 있다. 개재 링커 또는 링커의 분자량은 473.53 달톤이다. 다른 구현예에서, 개재 링커 펩타이드(링커)는 또한 임의의 유형의 프로테아제 절단 부위가 없는 것, 즉, 절단 불가능한 개재 링커 펩타이드, 예를 들어 링커 "ETMFKHGL"(서열번호 33)일 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP-살충 단백질은 둘 이상의 절단 가능한 펩타이드를 가질 수 있으며, 여기서 살충 단백질은 곤충 절단 가능한 링커(L)를 포함하고, 곤충 절단 가능한 링커는 프레임 내에서 (CRIP-L)n(여기서, "n"은 1 내지 200, 또는 1 내지 100, 또는 1 내지 10 범위의 정수임)을 포함하는 구조체와 융합된다. 또 다른 구현예에서, 본원에 기재된 CRIP-살충 단백질은 곤충 절단 가능한 링커(L) 및/또는 반복 구조체 (L-CRIP)n 또는 (CRIP-L)n(여기서, "n"은 1 내지 200, 또는 1 내지 100, 또는 1 내지 10 범위의 정수임)와 작동 가능하게 연결된, CRIP와 작동 가능하게 연결된 소포체 신호 펩타이드(ERSP)를 포함한다.
일부 구현예에서, 소포체 신호 펩타이드(ERSP)를 포함하는 단백질은 CRIP 및 개재 링커 펩타이드(L 또는 링커)에 작동 가능하게 연결될 수 있으며; 이러한 구조체는 ERSP-L-CRIP 또는 ERSP-CRIP-L로 지정되고, 여기서 상기 ERSP는 상기 단백질의 N-말단이고, 상기 L 또는 링커는 CRIP의 N-말단 측(업스트림) 또는 CRIP의 C-말단 측(다운스트림)에 있을 수 있다. 본원에 기재된 ERSP 또는 CRIP 중 임의의 것을 포함하는 ERSP-L-CRIP 또는 ERSP-CRIP-L로 지정된 단백질은, 절단 불가능한 링커 펩타이드, 또는 단백질 발현 과정 동안 식물 세포에서 절단 가능할 수 있거나 곤충 내장 환경 및/또는 혈림프 환경에서 절단 가능할 수 있는 절단 가능한 링커 펩타이드일 수 있는 링커 "L"을 가질 수 있다.
전술한 링커, 및 이를 제조 및 사용하는 방법에 대한 예시적인 설명은, 미국 특허 출원 공개공보 US20180362598A1호에 제공되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
개재 링커 펩타이드의 다른 예는 하기 참고문헌에서 확인할 수 있으며, 이들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다: 문헌[Heath et al. "Characterization of the protease processing sites in a multidomain proteinase inhibitor precursor from Nicotiana alata" European Journal of Biochemistry, 1995; 230: 250-257]에서, 식물 발현된 세린 프로테이나아제 저해제 전구체는 6개의 동일한 링커 펩타이드에 의해 분리되는 5개의 동종 단백질 저해제를 함유하는 것으로 확인되었다. 문헌[Chang, H.C. et al. "De novo folding of GFP fusion proteins: high efficiency in eukaryotes but not in bacteria" Journal of Molecular Biology, 2005 Oct 21; 353(2): 397-409]에는 6개의 상이한 링커를 통한 녹색 형광 단백질의 접힘 거동 비교가 연구되어 있다. 문헌[Daskalova, S.M. et al. "Engineering of N. benthamiana L. plants for production of N-acetylgalactosamine-glycosylated proteins" BMC Biotechnology, 2010 Aug 24; 10: 62]에서, 인간 GalNAc-T 패밀리의 이소형인, GalNAc-T2는 니코티아나 벤타미아나(N. benthamiana) 식물에서 발현 시 이의 국소화 및 기능성을 유지하는 것으로 나타났다. 스트로뮬(stromule)을 통해 이동하는 내인성 색소체 단백질의 능력은 문헌[Kwok, E.Y. et al. "GFP-labelled Rubisco and aspartate aminotransferase are present in plastid stromules and traffic between plastids" Journal of Experimental Botany, 2004 Mar; 55(397): 595-604. Epub 2004 Jan 30]에 나타나있다. 담배 모자이크 바이러스(TMV) 비리온의 표면을, 모기 데카펩타이드 호르몬, 트립신 조절 난소성 인자(TMOF: trypsin-modulating oostatic factor)로 조작하는 것에 대한 보고서는 문헌[Borovsky, D. et al. "Expression of Aedes trypsin-modulating oostatic factor on the virion of TMV: A potential larvicide" Proc Natl Acad Sci, 2006 December 12; 103(50): 18963-18968]에 작성되어 있다. 이러한 참고문헌 등은 본원에 기재된 방법, 절차, 및 펩타이드, 단백질 및 뉴클레오타이드 복합체 및 구조체에 사용될 수 있는 개재 링커를 교시하고 개시한다.
CRIP ORF 및 CRIP 구조체
"CRIP ORF"는 CRIP, 및/또는 하나 이상의 안정화 단백질, 분비 신호 또는 표적 지시 신호, 예를 들어 ERSP 또는 STA를 인코딩하는 뉴클레오타이드를 나타내며, 번역할 수 있는 능력을 갖는 ORF의 뉴클레오타이드로 정의된다. 따라서, "CRIP ORF 다이어그램"은 다이어그램 또는 방정식 형태로 작성된 하나 이상의 CRIP ORF의 조성을 나타낸다. 예를 들어, "CRIP ORF 다이어그램"은 발현 ORF 내 함유된 DNA 분절에 대한 약어 또는 축약형 참조를 사용하여 작성될 수 있다. 따라서, 하나의 예에서, "CRIP ORF 다이어그램"은 DNA 분절을 방정식 형태로, 각각, "ersp"(즉, ERSP 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열); "링커" 또는 "L"(즉, 링커 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열); "sta"(즉, STA 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열) 및 "crip"(즉, CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열)로 도식화하는 방식으로, ERSP, 링커, STA 및 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절을 설명할 수 있다. CRIP ORF 다이어그램의 예는, "ersp-sta-(링커 i-crip j)N" 또는 "ersp-(crip j-링커 i)N-sta" 및/또는 이들의 DNA 분절의 임의의 조합이다.
하기 방정식은 ERSP, STA, 링커 및 CRIP를 인코딩하는 CRIP ORF의 2개의 예를 설명한다:
ersp-sta-l-crip 또는 ersp-crip-l-sta
일부 구현예에서, 본원에 기재된 CRIP 오픈 리딩 프레임(ORF)은 식물이 mRNA를 발현할 수 있게 하는 폴리뉴클레오타이드 서열로서, 이는 차례로 적절하게 접히게 되는 펩타이드로 번역되고/되거나, 상기 단백질이 하나 이상의 해충을 저해 및/또는 사멸시키는 데 충분한 용량을 제공하는 정도로 축적될 것이다. 하나의 구현예에서, 단백질 CRIP ORF의 예는 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드(crip), "ersp"(즉, ERSP 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열), "링커"(즉, 링커 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열), "sta"(즉, STA 폴리펩타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열), 또는 이들의 임의의 조합일 수 있으며, 하기 방정식 형식으로 설명될 수 있다:
ersp-sta-(링커 i-crip j)n 또는 ersp-(crip j-링커 i)n-sta
폴리뉴클레오타이드 방정식의 전술한 예시적인 구현예는 하기 단백질 복합체가 발현되게 할 것이다: ERSP-STA-(링커I-CRIPJ)N, 각각의 구성요소를 분리하기 위한 대시(dash) 기호와 함께 4개의 가능한 펩타이드 구성요소를 함유함. ersp의 뉴클레오타이드 구성요소는 식물 소포체 트래피킹 신호 펩타이드(ERSP)를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절이다. sta의 구성요소는 식물에서 발현되는 CRIP의 축적을 돕는 번역 안정화 단백질(STA)을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절이지만, 일부 구현예에서, CRIP ORF에 sta를 포함시키는 것이 필요하지 않을 수 있다. 링커 i의 구성요소는 CRIP를 ORF에 함유된 다른 구성요소 및 번역 안정화 단백질과 분리하기 위한 개재 링커 펩타이드(L 또는 링커)를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절이다. 아래첨자 "i"는, 일부 구현예에서, 상이한 유형의 링커 펩타이드가 CRIP ORF에 사용될 수 있음을 나타낸다. 구성요소 "crip"는 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절을 나타낸다. 아래첨자 "j"는, 상이한 폴리뉴클레오타이드가 CRIP ORF에 포함될 수 있음을 나타낸다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드 서열은 상이한 아미노산 치환을 갖는 CRIP를 인코딩할 수 있다. "(링커 i-crip j)n"에 제시된 아래첨자 "n"은, 개재 링커 펩타이드 및 CRIP를 인코딩하는 뉴클레오타이드의 구조가 동일한 CRIP ORF의 동일한 오픈 리딩 프레임에서 "n"회 반복될 수 있음을 나타내며, 여기서 "n"은 1 내지 10의 임의의 정수일 수 있고; "n"은 1 내지 10일 수 있고, 구체적으로 "n"은 1, 2, 3, 4 또는 5일 수 있고, 일부 구현예에서 "n"은 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 반복부는 상이한 개재 링커(링커)와 상이한 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 분절을 함유할 수 있다. 동일한 CRIP ORF 내 반복부를 포함하는 상이한 폴리뉴클레오타이드 분절은 모두 동일한 번역 프레임 내에 있다. 일부 구현예에서, CRIP ORF에 sta 폴리뉴클레오타이드를 포함시키는 것이 필요하지 않을 수 있다. 예를 들어, ersp 폴리뉴클레오타이드 서열은 링커 없이 CRIP 변이체 폴리뉴클레오타이드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 직접 연결될 수 있다.
전술한 예시적인 방정식에서, 폴리펩타이드 "CRIP"를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 "crip"는, 본원에 기재된 바와 같은 임의의 CRIP, 예를 들어 하기와 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열일 수 있다: 서열번호 192 내지 370 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 거미 펩타이드; 서열번호 60 내지 64, 192 내지 370 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, κ-ACTX-Hv1a, κ+2-ACTX-Hv1a, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω+2-ACTX-Hv1a); 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a; 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 서열번호 66, 88 내지 191 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 전갈 펩타이드; 서열번호 371 내지 411 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 말미잘 펩타이드; 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열을 갖는 아네모니아 비리디스 유래의 Av3 폴리펩타이드; 서열번호 45 내지 47 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 또는 코노톡신.
일부 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 하기 CRIP 구조체 배향 및/또는 배열을 갖는 CRIP-살충 단백질을 인코딩하도록 작동 가능하다: ERSP-CRIP; ERSP-(CRIP)N; ERSP-CRIP-L; ERSP-(CRIP)N-L; ERSP-(CRIP-L)N; ERSP-L-CRIP; ERSP-L-(CRIP)N; ERSP-(L-CRIP)N; ERSP-STA-CRIP; ERSP-STA-(CRIP)N; ERSP-CRIP-STA; ERSP-(CRIP)N-STA; ERSP-(STA-CRIP)N; ERSP-(CRIP-STA)N; ERSP-L-CRIP-STA; ERSP-L-STA-CRIP; ERSP-L-(CRIP-STA)N; ERSP-L-(STA-CRIP)N; ERSP-L-(CRIP)N-STA; ERSP-(L-CRIP)N-STA; ERSP-(L-STA-CRIP)N; ERSP-(L-CRIP-STA)N; ERSP-(L-STA)N-CRIP; ERSP-(L-CRIP)N-STA; ERSP-STA-L-CRIP; ERSP-STA-CRIP-L; ERSP-STA-L-(CRIP)N; ERSP-(STA-L)N-CRIP; ERSP-STA-(L-CRIP)N; ERSP-(STA-L-CRIP)N; ERSP-STA-(CRIP)N-L; ERSP-STA-(CRIP-L)N; ERSP-(STA-CRIP)N-L; ERSP-(STA-CRIP-L)N; ERSP-CRIP-L-STA; ERSP-CRIP-STA-L; ERSP-(CRIP)N-STA-L; ERSP-(CRIP-L)N-STA; ERSP-(CRIP-STA)N-L; ERSP-(CRIP-L-STA)N; 또는 ERSP-(CRIP-STA-L)N(여기서, N은 1 내지 200 범위의 정수임).
일부 구현예에서, 본원에 기재된 CRIP ORF 및/또는 CRIP 구조체 중 임의의 것은 재조합적으로 생산될 수 있으며, 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에 기재된 CRIP ORF 및/또는 CRIP 구조체 중 임의의 것은 세포 배양물에서, 예를 들어 효모 세포에 의해 생산될 수 있다.
상기 언급된 방법 중 임의의 것 및/또는 본원에 기재된 방법 중 임의의 것을 사용하여, 식물 또는 이의 식물 부분에, 본원에 기재된 바와 같은 CRIP 또는 CRIP-살충 단백질 중 임의의 하나 이상; 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 또는 77 내지 110의 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 CRIP 또는 CRIP-살충 단백질을 발현하도록 작동 가능한 하나 이상의 폴리뉴클레오타이드를 혼입할 수 있다.
본 개시내용은, 비제한적으로, 외떡잎 및 쌍떡잎 식물을 포함하는 임의의 식물 종의 형질전환에 사용될 수 있다. 유전자이식 접근법 또는 PEP가 특히 유용한 접근법일 수 있는 작물에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 알팔파, 목화, 토마토, 옥수수, 밀, 옥수수, 사탕옥수수, 자주개자리, 대두, 수수, 들판 완두콩, 아마인, 홍화, 유채, 유채씨유, 쌀, 대두, 보리, 해바라기, 나무(침엽수 및 낙엽수 포함), 꽃(상업적으로 및 온실에서 재배되는 것들 포함), 들판 루핀, 스위치그래스, 사탕수수, 감자, 토마토, 담배, 십자화과, 고추, 사탕무, 보리, 유채씨유, 브라시카 종, 호밀, 기장, 땅콩, 고구마, 카사야, 커피, 코코넛, 파인애플, 감귤나무, 코코아, 차, 바나나, 아보카도, 무화과, 구아바, 망고, 올리브, 파파야, 캐슈, 마카다미아, 아몬드, 오트, 채소, 관상용 식물 및 침엽수.
폴리뉴클레오타이드를 이용한 식물의 형질전환
일부 구현예에서, 상기 및 본원에 기재된 CRIP ORF 및 CRIP 구조체는 일시적으로 또는 안정적으로 식물에서 CRIP를 발현시키기 위해 임의의 식물 발현 벡터에 클로닝될 수 있다.
일시적 식물 발현 시스템은 일부 구성요소의 필요성, 일부 구성요소의 코돈 최적화, 각 구성요소의 순서 최적화 등을 포함하여, 식물에서 일부 특정 CRIP 발현을 위해 CRIP ORF의 구조를 신속하게 최적화하는 데 사용될 수 있다. 일시적인 식물 발현 벡터는 종종 식물 바이러스 게놈에서 유도된다. 식물 바이러스 벡터는 식물 바이러스의 감염 특성으로 인해 식물에서 빠르고 높은 수준의 외래 유전자 발현에 이점을 제공한다. 식물 바이러스 게놈의 전체 길이가 벡터로 사용될 수 있지만, 종종 바이러스 구성요소, 예를 들어 외피 단백질이 결실되고, 유전자이식 ORF가 그 자리에 서브클로닝된다. CRIP ORF는 바이러스 벡터를 생성하기 위해 이러한 부위에 서브클로닝될 수 있다. 이러한 바이러스 벡터는, 예를 들어 식물 상처, 분무식 등을 통해 자체적으로 감염성이 되기 때문에 식물에 기계적으로 도입될 수 있다. 이는 또한, 바이러스 벡터를 뿌리혹병 박테리아, 아그로박테리움 투메파시엔스, 또는 모상근 박테리아, 아그로박테리움 리조게네스(Agrobacterium rhizogenes)의 T-DNA에 클로닝하는 방식으로 아그로감염을 통해 식물로 트랜스펙션될 수 있다. 이러한 벡터에서 CRIP의 발현은 RNA 바이러스의 복제에 의해 제어되며, 복제를 위한 mRNA로의 바이러스 번역은 강력한 바이러스 프로모터, 예를 들어 콜리플라워 모자이크 바이러스 유래 35S 프로모터에 의해 제어된다. CRIP ORF를 갖는 바이러스 벡터는 통상적으로 대장균 균주와 아그로박테리움 균주 둘 모두에서 자체 복제될 수 있는 이원 벡터의 T-DNA 영역에 클로닝된다. 식물의 일시적 트랜스펙션은 식물 잎에 CRIP 발현을 위한 바이러스 벡터를 함유하는 아그로박테리움 세포를 침윤시키는 방식으로 수행될 수 있다. 일시적으로 형질전환된 식물에서, 전사 후 유전자 침묵(PTGS)으로 인해 외래 단백질 발현이 단기간 내에 중단되는 것이 일반적이다. 때때로, PTGS 억제 단백질 유전자는 CRIP ORF의 발현을 유도하는 동일한 유형의 바이러스 벡터를 이용하여 일시적으로 식물 내로 동시 형질전환될 필요가 있다. 이는 식물에서 CRIP의 발현을 개선시키고 연장시킨다. 가장 흔히 사용되는 PTGS 억제 단백질은 토마토 덤불 위축 바이러스(TBSV: tomato bushy stunt virus)에서 발견되는 P19 단백질이다.
일부 구현예에서, 식물의 일시적 트랜스펙션은 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 용이하게 이용 가능한 벡터 중 어느 하나(상기 참조)와 재조합하는 방식으로 달성될 수 있으며, 마커 또는 신호(예를 들어, GFP 방출)를 사용하여 확인될 수 있다. 일부 구현예에서, 일시적으로 트랜스펙션된 식물은 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 벡터에서 GFP-하이브리드 융합 단백질을 인코딩하는 DNA와 재조합하고, 상기 벡터를 표적화된 발현을 위해 설계된 상이한 FECT 벡터를 사용하여 식물(예를 들어, 담배)로 트랜스펙션시키는 방식으로 생성될 수 있다. 일부 구현예에서, CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 APO(아포플라스트 국소화) 축적을 위한 pFECT 벡터; CYTO(세포질 국소화) 축적을 위한 pFECT 벡터; 또는 ER(소포체 국소화) 축적을 위한 ersp 함유 pFECT 벡터와 재조합될 수 있다.
예시적인 일시적 식물 형질전환 전략은, 고효율, 용이성 및 저비용으로 인해 식물 바이러스 벡터를 사용하는 아그로감염이다. 일부 구현예에서, 담배 모자이크 바이러스 과발현 시스템(문헌[TRBO, Lindbo JA, Plant Physiology, 2007, V145: 1232-1240] 참조)은 CRIP를 이용하여 식물을 일시적으로 형질전환시키는 데 사용될 수 있다. TRBO DNA 벡터는 바이러스 코팅 단백질을 인코딩하는 유전자 없이 담배 모자이크 바이러스 RNA의 발현을 유도하는 CaMV 35S 프로모터를 함유하는, 아그로감염을 위한 T-DNA 영역을 갖는다. 나아가, 이러한 시스템은 "무장 해제된" 바이러스 게놈을 사용하기 때문에, 바이러스 식물에서 식물로의 전달이 효과적으로 방지될 수 있다.
또 다른 구현예에서, FECT 바이러스 일시적 식물 발현 시스템은 CRIP를 이용하여 식물을 일시적으로 형질전환시키는 데 사용될 수 있다(문헌[Liu Z & Kearney CM, BMC Biotechnology, 2010, 10:88] 참조). FECT 벡터는 바이러스 코팅 단백질을 인코딩하는 유전자 및 삼중 유전자 블록 없이 여우꼬리 모자이크 바이러스 RNA의 발현을 유도하는 CaMV 35S 프로모터를 함유하는, 아그로감염을 위한 T-DNA 영역을 함유한다. 나아가, 이러한 시스템은 "무장 해제된" 바이러스 게놈을 사용하기 때문에, 바이러스 식물에서 식물로의 전달이 효과적으로 방지될 수 있다. 도입된 이종 유전자를 효율적으로 발현하기 위해, FECT 발현 시스템은 도입된 T-DNA의 전사 후 유전자 침묵(PTGS)을 방지하기 위해 추가로 토마토 덤불 위축 바이러스 유래 RNA 침묵 억제 단백질인 P19를 공동 발현해야 한다. (TRBO 발현 시스템은 cP19의 공동 발현을 필요로 하지 않음).
일부 구현예에서, CRIP ORF는 하기와 같이 설명될 수 있는 일련의 번역으로 융합된 구조를 인코딩하도록 설계될 수 있다: N'-ERSP-STA-L-CRIP-C'(여기서, "N'" 및 "C'"는, 각각 N-말단 및 C-말단 아미노산을 나타내고, ERSP 모티프는 보리 알파-아밀라아제 신호 펩타이드(BAAS)(서열번호 37)일 수 있고; 안정화 단백질(STA)은 GFP(서열번호 34)일 수 있고; 링커 펩타이드 "L"은 IGER(서열번호 31)일 수 있음). 일부 구현예에서, ersp-sta-l-CRIP ORF는 제한 부위, 예를 들어 5'-말단에 있는 Pac I 제한 부위와 3'-말단에 있는 Avr II 제한 부위를 포함하도록 화학적으로 합성될 수 있다. 일부 구현예에서, CRIP ORF는 FECT 일시적 식물 발현 시스템(pFECT-CRIP)을 위한 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 발현 벡터를 생성하기 위해 FECT 발현 벡터(pFECT)의 Pac I 및 Avr II 제한 부위에 클로닝될 수 있다. FECT 발현 시스템에서 발현을 최대화하기 위해, 일부 구현예는 공동 형질전환을 위해 생성된 RNA 침묵 억제 단백질 P19(pFECT-P19)를 발현하는 FECT 벡터를 가질 수 있다.
일부 구현예에서, U1-아가톡신-Ta1b 변이체 발현 벡터는, 예를 들어 일상적인 PCR 절차를 수행하고, 상기 기재된 CRIP ORF의 3'-말단에 Not I 제한 부위를 부가한 후, CRIP ORF를 TRBO 발현 벡터(pTRBO-CRIP)의 Pac I 및 Not I 제한 부위에 클로닝하는 방식으로 TRBO 일시적 식물 발현 시스템에서의 사용을 위해 재조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 아그로박테리움 투메파시엔스 균주, 예를 들어 상업적으로 입수 가능한 GV3101 세포는, 하나 이상의 일시적 발현 시스템, 예를 들어 FECT 및 TRBO 발현 시스템을 사용하여 식물 조직(예를 들어, 담배잎)에서 CRIP ORF의 일시적 발현을 위해 사용될 수 있다. 이러한 일시적 트랜스펙션 프로토콜의 예시적인 예시는 하기를 포함한다: GV3101의 밤새 배양을 사용하여 200 mL의 Luria-Bertani(LB) 배지를 접종할 수 있고; 세포를 OD600이 0.5 내지 0.8인 로그 단계까지 성장시킬 수 있고; 이어서, 세포를 4℃에서 10분 동안 5000 rpm으로 원심분리하여 펠릿화할 수 있고; 이어서, 세포를 10 mL의 사전 냉각시킨 TE 완충액(Tris-HCl 10 mM, EDTA 1 mM, pH 8.0)으로 1회 세정한 후, 20 mL의 LB 배지에 재현탁시킬 수 있고; 이어서, GV3101 세포 현탁액을 1.5 mL 마이크로튜브에 250 μL 분획으로 분취할 수 있고; 이어서, 분취액을 액체 질소에서 급속 동결시키고 후속 형질전환을 위해 -80℃ 동결기에서 보관할 수 있다. 이어서, pFECT-CRIP 및 pTRBO-CRIP 벡터를 하기와 같이 동결-해동 방법을 사용하여 적격 GV3101 세포로 형질전환시킬 수 있다: 보관된 적격 GV3101 세포를 얼음 위해서 해동시키고, 1 μg 내지 5 μg의 순수한 DNA(pFECT-CRIP 또는 pTRBO-CRIP 벡터)와 혼합한다. 세포-DNA 혼합물을 얼음 위에서 5분 동안 유지시키고, 5분 동안 -80℃로 옮기고, 37℃ 수조에서 5분 동안 인큐베이션한다. 이어서, 동결-해동 처리된 세포를 1 mL LB 배지에 희석하고, 실온에서 2시간 내지 4시간 동안 흔들 테이블 상에서 진탕시킨다. 이어서, 세포-DNA 혼합물 200 μL 분취액을 적절한 항생제(10 μg/mL 리팜피신, 25 μg/mL 겐타마이신 및 50 μg/mL 카나마이신이 pFECT-CRIP 형질전환 및 pTRBO-CRIP 형질전환 둘 모두에 사용될 수 있음)가 함유된 LB 한천 플레이트 상에 확산시키고, 28℃에서 2일 동안 인큐베이션한다. 이어서, 생성된 형질전환된 콜로니를 선택하고, 형질전환된 DNA 분석 및 형질전환된 GV3101 세포의 글리세롤 스톡 제조에 적절한 항생제가 함유된 LB 배지 6 mL 분취액에서 배양한다.
일부 구현예에서, 식물 조직, 예를 들어 담배잎의 일시적 형질전환은 3 mL 무바늘 시린지를 이용하여 잎 주사(leaf injection)를 사용하여 수행될 수 있다. 하나의 예시적인 예에서, 형질전환된 GV3101 세포를 (상기 기재된 바와 같은) 적절한 항생제가 함유된 LB 플레이트 상에 스트리킹하고, 28℃에서 2일 동안 인큐베이션한다. 형질전환된 GV3101 세포의 콜로니를 5 ml의 LB-MESA 배지(10 mM MES 및 20 μM 아세토시린곤이 보충된 LB 배지) 및 상기 기재된 동일한 항생제에 접종하고, 28℃에서 밤새 성장시킨다. 밤샘 배양물의 세포를 5000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 수집하고, 유도 배지(10 mM MES, 10 mM MgCl2, 100 μM 아세토시린곤)에 최종 OD600 1.0으로 재현탁시킨다. 이어서, 세포를 유도 배지에서 실온에서 2시간 내지 밤새 인큐베이션한 후, 담배잎의 일시적 형질전환을 준비한다. 처리된 세포를 3 mL 무바늘 시린지를 사용한 주사를 통해 니코티아나 벤타미아나 식물의 부착된 잎의 밑면에 침투시킬 수 있다.
일부 구현예에서, 일시적 형질전환은 GV3101 세포의 한 집단을 pFECT-CRIP 또는 pTRBO-CRIP로 트랜스펙션시키고, 또 다른 집단을 pFECT-P19로 트랜스펙션시고, 2개의 세포 집단을 함께 동일한 양으로 혼합하여, 3 mL 시린지를 이용한 주사를 통해 담배잎에 침투시키는 방식으로 달성될 수 있다.
CRIP를 인코딩하도록 작동 가능한 폴리뉴클레오타이드의 안정한 통합이 또한 본 개시내용에 따라 가능하며, 예를 들어 CRIP ORF는 또한 안정한 식물 형질전환 기술을 사용하여 식물 게놈에 통합될 수 있고, 이에 따라 CRIP이 식물에서 안정적으로 발현되어, 형질전환된 식물을 대대로 보호할 수 있다. 식물의 안정한 형질전환을 위해, CRIP 발현 벡터는 원형 또는 선형일 수 있다. CRIP ORF, CRIP 발현 카세트, 및/또는 안정한 식물 형질전환을 위해 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 갖는 벡터는 당업자의 지식에 기반하고/하거나, Gene Designer 2.0(Atum Bio); VectorBuilder(Cyagen); SnapGene® viewer; GeneArtTM Plasmid Construction Service(Thermo-Fisher Scientific); 및/또는 기타 상업적으로 입수 가능한 플라스미드 설계 서비스와 같은 예측 벡터 설계 도구를 사용하여 식물에서 최적 발현을 위해 신중하게 설계되어야 한다. 문헌[Tolmachov, Designing plasmid vectors. Methods Mol Biol. 2009; 542:117-29] 참조. CRIP의 발현은 통상적으로 유전자이식 식물의 일부 또는 모든 세포에서 전사를 촉진시키는 프로모터에 의해 제어된다. 프로모터는 강력한 식물 바이러스 프로모터, 예를 들어 콜리플라워 모자이크 바이러스(CaMV) 유래 구성적 35S 프로모터일 수 있고; 이는 또한 강력한 식물 프로모터, 예를 들어 아라비돕시스 탈리아나(Arabidopsis thaliana) 유래 히드로퍼옥시드 리아제 프로모터(pHPL); 대두 유래 글리신 맥스 폴리유비퀴틴(Gmubi: Glycine max polyubiquitin) 프로모터; 상이한 식물 종(쌀, 옥수수, 감자 등) 유래 유비퀴틴 프로모터 등일 수 있다. 식물 전사 종결인자는 종종 RNA 폴리머라아제와 mRNA의 전사를 중단시키기 위해 ORF의 종결 코돈 이후에 존재한다. CRIP 발현을 평가하기 위해, 리포터 유전자가 CRIP 발현 벡터, 예를 들어 GUS 염색 검정용 베타-글루코시다아제 유전자(GUS), UV 광 하에서의 녹색 형광 검출용 녹색 형광 단백질(GFP) 유전자 등에 포함될 수 있다. 형질전환된 식물의 선별을 위해, 선별 마커 유전자가 통상적으로 CRIP 발현 벡터에 포함된다. 일부 구현예에서, 마커 유전자 발현 산물은 특정 항생제, 예를 들어 카나마이신, 히그로마이신 등, 또는 특정 제초제, 예를 들어 글리포세이트(glyphosate) 등에 대해 내성이 있는 형질전환된 식물을 제공할 수 있다. 아그로감염 기술이 식물 형질전환에 적용되는 경우, T-DNA 부분을 식물로 수송하기 위해 T-DNA 좌측 경계 서열과 우측 경계 서열이 또한 CRIP 발현 벡터에 포함된다.
구축된 CRIP 발현 벡터는 다수의 트랜스펙션 기술을 사용하여 식물 세포 또는 조직으로 트랜스펙션될 수 있다. 아그로감염은 아그로박테리움 투메파시엔스 균주 또는 아그로박테리움 리조게네스 균주를 사용하여 식물을 형질전환시키는 가장 대중적인 방법이다. 입자 충격(유전자총(Gene Gun 또는 Biolistics)으로도 불림) 기술 또한 식물 트랜스펙션의 가장 일반적인 방법이다. 다른 덜 일반적인 트랜스펙션 방법에는, 조직 전기천공, 탄화규소 위스커(silicon carbide whisker), DNA 직접 주입 등이 포함된다. 트랜스펙션 후, 트랜스펙션된 식물 세포 또는 조직을 식물 재생 배지에 위치시켜 성공적으로 트랜스펙션된 식물 세포 또는 조직을 유전자이식 식물로 재생시킨다.
형질전환된 식물의 평가는 DNA 수준, RNA 수준 및 단백질 수준에서 수행될 수 있다. 안정적으로 형질전환된 식물은 모든 이러한 수준에서 평가될 수 있으며, 일시적으로 형질전환된 식물은 통상적으로 단백질 수준만 평가된다. CRIP ORF를 안정적으로 형질전환된 식물의 게놈에 통합시키는 것을 보장하기 위해, 안정적으로 형질전환된 식물 조직에서 게놈 DNA를 추출하고, PCR 또는 서던 블롯을 사용하여 분석할 수 있다. 안정적으로 형질전환된 식물에서 CRIP의 발현은, 예를 들어 노던 블롯(northern blot) 또는 RT-PCR을 사용하여 형질전환된 식물 조직에서 추출된 총 mRNA를 분석하는 방식으로 RNA 수준에서 평가될 수 있다. 형질전환된 식물에서 CRIP의 발현은 또한 직접 단백질 수준으로 평가될 수 있다. 형질전환된 식물에서 CRIP의 발현을 평가하는 다수의 방법이 존재한다. 리포터 유전자가 CRIP ORF에 포함되어 있는 경우, 리포터 유전자 검정이 수행될 수 있으며, 예를 들어, 일부 구현예에서, GUS 리포터 유전자 발현에 대한 GUS 염색 검정, GFP 리포터 유전자 발현에 대한 녹색 형관 검출 검정, 루시퍼라아제 리포터 유전자 발현에 대한 루시퍼라아제 검정 및/또는 다른 리포터 기술이 이용될 수 있다.
일부 구현예에서, 샘플 내 총 단백질 수준을 평가하기 위하여, Bradford 검정을 사용하여 CRIP의 발현을 직접 평가하기 위해 형질전환된 식물 조직에서 총 단백질을 추출할 수 있다.
일부 구현예에서, 분석용 HPLC 크로마토그래피 기술, 웨스턴 블롯 기술 또는 iELISA 검정을 채택하여 형질전환된 식물 조직으로부터 추출된 총 단백질 샘플에서 CRIP를 정성적으로 또는 정량적으로 평가할 수 있다. CRIP 발현은 또한 곤충 생물검정에서 형질전환된 식물 조직으로부터 추출된 총 단백질 샘플을 사용하여 평가될 수 있으며, 예를 들어, 일부 구현예에서, 형질전환된 식물 조직 또는 전체 형질전환된 식물 자체를 곤충 생물검정에 사용하여 CRIP 발현 및 식물에 보호를 제공하는 이의 능력을 평가할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 식물, 식물 조직, 식물 세포, 식물 종자 또는 이의 부분은, 하나 이상의 CRIP, 또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 식물, 식물 조직, 식물 세포, 식물 종자 또는 이의 부분은, 하나 이상의 CRIP, 또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함할 수 있으며, 상기 CRIP는 본원에 기재된 바와 같은 임의의 CRIP이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 식물, 식물 조직, 식물 세포, 식물 종자 또는 이의 부분은, 비제한적으로, 하기 중 하나 이상을 포함하는 CRIP를 포함할 수 있다: ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, rκ-ACTX-Hv1c, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω-ACTX-Hv1a+2); Γ-CNTX-Pn1a; U1-아가톡신-Ta1b; TVP; Av2; Av3; 또는 AVP. 또한, 상기 방법 및 기술을 사용하여 Bt 독소(예를 들어, Cry 독소, Cyt 독소 또는 Vip)와 같은 펩타이드-IA(예를 들어, 이러한 방법에 적합한 살충 작용제, 예를 들어 중합체, 펩타이드 또는 단백질)를 포함하는 식물, 식물 조직, 식물 세포, 식물 종자 또는 이의 부분을 생성할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 식물, 식물 조직, 식물 세포, 식물 종자 또는 이의 부분은 하나 이상의 CRIP, 또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함할 수 있으며, 여기서 상기 CRIP는 하기와 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다: 서열번호 192 내지 370 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 거미 펩타이드; 서열번호 60 내지 64, 192 내지 370 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, κ-ACTX-Hv1a, κ+2-ACTX-Hv1a, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω+2-ACTX-Hv1a); 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a; 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 서열번호 66, 88 내지 191 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 전갈 펩타이드; 서열번호 371 내지 411 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 말미잘 펩타이드; 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열을 갖는 아네모니아 비리디스 유래의 Av3 폴리펩타이드; 서열번호 45 내지 47 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 또는 코노톡신.
CRIP로의 성공적인 형질전환 확인
이종 외래 DNA를 식물 세포에 도입한 후, 식물 게놈에서 이종 유전자의 형질전환 또는 통합은 통합된 유전자와 관련된 핵산, 단백질 및 대사산물의 분석과 같은 다양한 방법을 통해 확인된다.
PCR 분석은 토양으로의 이식 전 초기 단계에서 혼입된 유전자의 존재에 대해 형질전환된 세포, 조직 또는 싹을 스크리닝하는 신속한 방법이다(문헌[Sambrook and Russell (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.]). PCR은 관심 유전자 또는 아그로박테리움 벡터 배경 등에 특이적인 올리고뉴클레오타이드 프라이머를 사용하여 수행된다.
식물 형질전환은 게놈 DNA의 서던 블롯 분석으로 확인할 수 있다(상기 Sambrook 및 Russell의 문헌(2001)). 일반적으로, 총 DNA를 형질전환된 식물에서 추출하고, 적절한 제한 효소로 소화시키고, 아가로오스 겔에 분획화시키고, 니트로셀룰로오스 또는 나일론 막으로 옮긴다. 이어서, 표준 기술(상기 Sambrook 및 Russell의 문헌(2001))에 따라 식물 게놈으로 도입된 유전자의 통합을 확인하기 위해 막 또는 "블롯"을, 예를 들어 방사성표지된 32P 표적 DNA 단편으로 탐침한다.
노던 블롯 분석에서, RNA를 형질전환된 식물의 특정 조직에서 단리하고, 포름알데히드 아가로오스 겔에 분획화시키고, 당업계에서 통상적으로 사용되는 표준 절차에 따라 나일론 필터 상에 블롯팅한다(상기 Sambrook 및 Russell의 문헌(2001)). 이어서, 당업계에 공지된 방법(상기 Sambrook 및 Russell의 문헌(2001))에 따라 필터를 CRIP에서 유도된 방사성 프로브에 혼성화시키는 방식으로 CRIP를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 의해 인코딩된 RNA의 발현을 시험한다.
CRIP 상에 존재하는 하나 이상의 에피토프에 결합하는 항체를 사용하여 표준 절차(상기 Sambrook 및 Russell의 문헌(2001))에 따라 CRIP 유전자에 의해 인코딩되는 단백질의 존재를 확인하기 위해, 유전자이식 식물에 대해 웨스턴 블롯, 생화학적 검정 등을 수행할 수 있다.
식물 형질전환의 성공, 예를 들어 클로람페니콜, 아미노글리코시드 G418, 히그로마이신 등에 대한 내성을 결정하기 위해 다수의 마커가 개발되었다. 엽록체 대사에 관여하는 산물을 인코딩하는 다른 유전자가 또한 선별 마커로 사용될 수 있다. 예를 들어, 글리포세이트, 브로목시닐 또는 이미다졸리논과 같은 식물 제초제에 대한 내성을 제공하는 유전자가 특히 사용될 수 있다. 이러한 유전자는 보고되어 있다(문헌[Stalker et al. (1985) J. Biol. Chem. 263:6310-6314(브로목시닐 내성 니트릴라아제 유전자)]; 및 문헌[Sathasivan et al. (1990) Nucl. Acids Res. 18:2188(AHAS 이미다졸리논 내성 유전자)]. 추가로, 본원에 개시된 유전자는 박테리아, 효모 또는 식물 세포의 형질전환을 평가하기 위한 마커로서 유용하다. 식물, 식물 기관(예를 들어, 잎, 줄기, 뿌리 등), 종자, 식물 세포, 번식체, 배아 또는 이들의 자손에서 전이유전자의 존재를 검출하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다. 하나의 구현예에서, 전이유전자의 존재는 살충 활성을 시험하는 방식으로 검출된다.
CRIP 및/또는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리뉴클레오타이드를 발현하는 번식력이 있는 식물이 살충 활성에 대해 시험될 수 있으며, 최적 활성을 나타내는 식물이 추가 육종을 위해 선택될 수 있다. 해충 활성을 검정하기 위한 방법이 당업계에서 이용 가능하다. 일반적으로, 단백질을 혼합하여, 섭식 검정에 사용한다. 예를 들어, 문헌[Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78:290-293] 참조.
일부 구현예에서, 일시적 트랜스펙션 절차의 성공 평가는 리포터 유전자, 예를 들어 GFP의 발현에 기반하여 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, GFP는 FECT 및/또는 TRBO 벡터로 형질전환된 담배잎에서 UV 광 하에서 검출될 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP 발현은 식물(예를 들어, 담배)에서 정량적으로 평가될 수 있다. 담배 식물에서 CRIP 정량화를 예시하는 예시적인 절차는 하기와 같다: 1000 μL 피펫 팁의 큰 개구부를 이용하여 잎을 펀칭하여 형질전환된 잎 조직의 디스크 100 mg을 수집한다. 수집된 잎 조직을 5/32" 직경 스테인리스강 분쇄 볼이 있는 2 mL 마이크로튜브에 위치시키고, -80℃에서 1시간 동안 동결시킨 후, Troemner-Talboys 고속 균질기를 사용하여 균질화시킨다. 다음으로, 얼음 냉각시킨 TSP-SE1 추출 용액(인산소듐 용액 50 mM, 1:100 희석된 프로테아제 저해제 칵테일, EDTA 1 mM, DIECA 10 mM, PVPP 8%, pH 7.0) 750 μL를 튜브에 첨가하고, 볼텍싱한다. 이어서, 마이크로튜브를 실온에서 15분 동안 정치시키고, 16,000 g으로 4℃에서 15분 동안 원심분리하고; 생성된 상청액 100 μL를 취하여 바닥에 빈 수용 Costar 마이크로티터 플레이트가 있는 0.45 μm Millipore MultiScreen 필터 마이크로티터 플레이트의 사전 Sephadex G-50 패킹된 컬럼에 로딩한다. 이어서, 마이크로티터 플레이트를 800 g으로 4℃에서 2분 동안 원심분리한다. 본원에서 담배잎의 총 가용성 단백질 추출물(TSP 추출물)로 불리는 생성된 여과액을 정량적 분석을 위해 준비한다.
일부 구현예에서, TSP 추출물의 총 가용성 단백질 농도는 Pierce Coomassie Plus 단백질 검정을 사용하여 추정될 수 있다. 농도가 알려진 BSA 단백질 표준물을 사용하여 단백질 정량화 표준 곡선을 생성할 수 있다. 예를 들어, 각각의 TSP 추출물 2 μL를 Coomassie Plus 단백질 검정 키트의 발색 시약(CPPA reagent) 200 μL와 혼합하고, 10분 동안 인큐베이션할 수 있다. 이어서, 제어 소프트웨어로 SoftMax Pro를 사용하고 SpectroMax-M2 플레이트 판독기를 사용하여 OD595를 판독하는 방식으로 발색 반응을 평가할 수 있다. 총 가용성 단백질의 농도는, 각각, FECT 및 TRBO를 통해 형질전환된 식물로부터의 TSP 추출물에서 약 0.788 ± 0.20 μg/μL 또는 약 0.533 ± 0.03 μg/μL일 수 있으며, 결과는 iELISA 검정을 위해 TSP에서 발현된 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 펩타이드의 백분율(%TSP)을 계산하는 데 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 간접적인 ELISA(iELISA) 검정을 사용하여 FECT 및/또는 TRBO 발현 시스템으로 일시적으로 형질전환된 담배잎에서 CRIP 함량을 정량적으로 평가할 수 있다. CRIP를 정량화하기 위해 iELISA를 사용하는 예시적인 예는 하기와 같다: 잎 TSP 추출물 5 μL를 Immulon 2HD 96웰 플레이트의 웰에서 CB2 용액(Immunochemistry Technologies) 95 μL로 희석하고, 필요에 따라 연속 희석을 수행하고; 이어서 추출물 샘플에서 얻은 잎 단백질로 실온에서 암실에서 3시간 동안 웰 벽을 코팅한 후, CB2 용액을 제거하고; 각각의 웰을 200 μL PBS(Gibco)로 2회 세척하고; 150 μL 차단 용액(5% 무지방 분유가 포함된 PBS 중 차단 BSA)을 각각의 웰에 첨가하고, 실온에서 암실에서 1시간 동안 인큐베이션하고; 차단 용액을 제거한 후, 웰을 PBS로 세척하고, CRIP에 대한 1차 항체 100 μL(맞춤형 항체는 ProMab Biotechnologies, Inc.에서 상업적으로 입수 가능하거나; GenScript®이거나; 당업자에게 용이하게 이용할 수 있는 지식을 사용하여 형성함); 차단 용액 중에 1:250 희석으로 희석된 항체를 각각의 웰에 첨가하고, 실온에서 암실에서 1시간 동안 인큐베이션하고; 1차 항체를 제거하고, 각각의 웰을 PBS로 4회 세척하고; HRP-접합된 2차 항체(즉, 차단 용액에서 1:1000 희석으로 사용되는 1차 항체를 생성하는 데 사용되는 숙주 종에 대한 항체) 100 μL를 각각의 웰에 첨가하고, 실온에서 암실에서 1시간 동안 인큐베이션하고; 2차 항체를 제거하고, 웰을 PBS 100 μL로 세척하고; 기질 용액(ABTS 퍼옥시다아제 기질 용액 A 및 용액 B의 1:1 혼합물, KPL)을 각각의 웰에 첨가하고, 충분한 발색이 명백해질 때까지 발색 반응을 진행시키고; 퍼옥시다제 중지 용액 100 μL를 각각의 웰에 첨가하여 반응을 중단시키고; 플레이트 내 각각의 반응 혼합물의 흡광도를 제어 소프트웨어로 SoftMax Pro를 사용하는 SpectroMax-M2 플레이트 판독기를 사용하여 405 nm에서 판독하고; 순수한 CRIP 샘플의 연속 희석된 알려진 농도를 iELISA 검정에서 상기 기재된 바와 동일한 방식으로 처리하여 정량 분석을 위한 질량-흡광도 표준 곡선을 생성할 수 있다. 발현된 CRIP는 iELISA에 의해 FECT 형질전환된 담배의 잎 TSP 추출물에서 약 3.09 ± 1.83 ng/μL로; TRBO 형질전환된 담배의 잎 TSP 추출물에서 약 3.56 ± 0.74 ng/μL로 검출될 수 있다. 대안적으로, 발현된 CRIP는 FECT 형질전환된 식물의 경우 약 0.40% 총 가용성 단백질(%TSP) 및 TRBO 형질전환된 식물의 경우 약 0.67% TSP일 수 있다.
살충 작용제(IA)
살충 작용제(IA)는 적어도 일부 살충 활성을 보유하는 화학 물질, 분자, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 독소, 독물, 독, 살충제, 농약, 유기 화합물, 무기 화합물, 원핵생물 유기체 또는 진핵생물 유기체(및 상기 원핵생물 또는 진핵생물 유기체로부터 생성된 작용제)이다.
일부 구현예에서, IA는 살충 활성을 나타내는 하나 이상의 화학 물질, 분자, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 독, 살충제, 농약, 유기 화합물, 무기 화합물, 또는 이들의 조합일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 살충 활성을 나타내는 원핵생물 유기체, 진핵생물 유기체, 또는 이로부터 생성된 작용제일 수 있다.
일부 구현예에서, IA에는, 비제한적으로, 하기 범주로부터 선택되는 구성원이 포함된다: RNAi; 위독; 유형 0 키틴 생합성 저해제; 유형 1 키틴 생합성 저해제; 곤충 바이러스; 아자디라크타 인디카에서 단리된 화합물; MOA가 알려지지 않은 화합물; 박테리아(및 이로부터의 생성물); 진균(및 이로부터의 생성물); 선충(및 이로부터의 생성물); 식물 에센스; 기계적 교란제; 형광 증백제; 실리카 나노스피어; 키티나아제; 렉틴; 막 공격 복합체/퍼포린(MACPF) 단백질; 식물 바이러스 외피 단백질-독소 융합체; 글리칸 결합 도메인/독소 융합 단백질; 아세틸콜린에스테라아제(AchE) 저해제; GABA 개폐형 클로라이드 채널 차단제; 소듐 채널 조절제; 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 경쟁 조절제; 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 알로스테릭 조절제-부위 I; 글루타메이트 개폐형 클로라이드 채널(GluCl) 알로스테릭 조절제; 유충 호르몬 모방체; 기타 비특이적(다중부위) 저해제; 현음 기관 TRPV 채널 조절제; 응애 성장 저해제; 미토콘드리아 ATP 신타아제 저해제; 양성자 구배의 파괴를 통한 산화적 인산화의 언커플러; 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 채널 차단제; 탈피 교란제(쌍시목); 엑디손 수용체 아고니스트; 옥토파민 수용체 아고니스트; 미토콘드리아 복합체 III 전자 수송 저해제; 미토콘드리아 복합체 I 전자 수송 저해제; 전압 의존성 소듐 채널 차단제; 아세틸 조효소 A 카르복실라아제 저해제; 미토콘드리아 복합체 IV 전자 수송 저해제; 미토콘드리아 복합체 II 전자 수송 저해제; 리아노딘 수용체 조절제; 현음 기관 조절제-정의되지 않은 표적 부위; 또는 GABA 개폐형 클로라이드 채널 알로스테릭 조절제.
일부 바람직한 구현예에서, 살충 작용제(IA)는 하기에서 선택될 수 있다: RNAi: 예컨대 dsRNA(예를 들어, WupA dsRNA); 위독: 예를 들어, 비소제, 예컨대 "파리스 그린(Paris green)" 또는 구리 아세토아르세나이트, 납 아르세네이트, 칼슘 아르세네이트; 플루오린 화합물(예를 들어, 플루오린화소듐); 보레이트(예를 들어, 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트, 소듐 메타보레이트, 소듐 테트라보레이트 10수화물, 산화붕소, 탄화붕소, 질화붕소, 삼브롬화붕소, 삼염화붕소 또는 삼플루오린화붕소); 유형 0 키틴 생합성 저해제: 예를 들어, 벤조일우레아(예를 들어, 비스트리플루론(bistrifluron), 클로르플루아주론(chlorfluazuron), 디플루벤주론(diflubenzuron), 플루시시클록수론(flucycloxuron), 플루페녹수론(flufenoxuron), 헥사플루무론(hexaflumuron), 루페누론(lufenuron), 노발루론, 노비플루무론(noviflumuron), 테플루벤주론(teflubenzuron) 또는 트리플루무론(트리플루무론)); 유형 1 키틴 생합성 저해제: 예를 들어, 부프로페진(buprofezin); 곤충 바이러스: 예를 들어, 바큘로바이러스과 바이러스(예를 들어, 베타바큘로바이러스(Betabaculoviruse), 예컨대 과립병바이러스(GV) 및 핵다각체병바이러스(NPVS: nucleopolyhedroviruse), 예를 들어, 시디아 포모넬라 GV, 타우마토티비아 류코트레타(Thaumatotibia leucotreta) GV, 안티카르시아 겜마탈리스(Anticarsia gemmatalis) MNPV 또는 헬리코베르파 아르미게라(Helicoverpa armigera) NPV); 및 파르보바이러스과(Parvoviridae) 바이러스(예를 들어, 주노니아 코에니아(Junonia coenia) 덴소바이러스(densovirus)(JcDNV)); 아자디라크타 인디카에서 단리된 화합물: 예를 들어, 아자디라크틴; 아자디라디온(azadiradione); 아자디라디오놀리드(azadiradionolide); 데아세틸게두닌(deacetylgedunin); 데아세틸아자디라크티놀(deacetylazadirachtinol); 데스푸라노아자디라디온(desfuranoazadiradione); 에폭시아자디라디온; 게두닌(gedunin); 마흐무딘(mahmoodin); 님프루이틴(neemfruitin) A; 님프루이틴 B; 님볼리드(nimbolide); 님빈(nimbin); 니몰리시놀(nimolicinol); 오키닌 아세테이트(ohchinin acetate); 살라닌; 살라놀(salannol); 알파-니모락톤(nimolactone); 베타-니모락톤; 2',3'-디히드로살라닌; 3-데아세틸살라닌; 6-데아세틸님빈; 7-아세틸-16,17-데히드로-16-히드록시네오트리킬레논; 7-벤조일님보시놀; 7-데아세틸-7-벤조일에폭시아자디라디온; 7-데아세틸-7-벤조일게두닌; 7-데아세틸-17-에피니몰리시놀; 15-히드록시아자디라디온; 17-에피-17-히드록시아자디라디온; 17-에피아자디라디온; 20,21,22,23-테트라히드로-23-옥소아자디론; 22,23-디히드로니모시놀; 또는 28-데옥소님볼리드; MOA가 알려지지 않은 화합물: 예를 들어, 벤족시메이트, 브로모프로필레이트, 키노메티오나트(chinomethionat), 디코폴(dicofol), 석회황합제(lime sulfur), 피리달릴(pyridalyl) 또는 황; 박테리아: 발효 고형물, 포자, 독소, 및/또는 이로부터의 생성물 포함, 예를 들어, 브레비바실러스 브레비스(Brevibacillus brevis); 브레비바실러스 브레비스 독소(예를 들어, TIC4670 베타 공극 형성 단백질); 알칼리게네스 파에칼리스(Alcaligenes faecalis); 알칼리게네스 파에칼리스 독소(예를 들어, AfIP-1A/1B); 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis); 슈도모나스 클로로라피스 독소(예를 들어, PIP-72Aa); 예르시니아 엔토모파가(Yersinia entomophaga)(예를 들어, 예르시니아 엔토모파가 MH96); 예르시니아 누르미(Yersinia nurmii); 포토랍두스 루미네센스; 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체(Tca); 부르크홀데리아 종(Burkholderia spp), 또는 볼바키에 피피엔티스(Wolbachie pipientis); 바실러스 투린기엔시스(예를 들어, 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스, 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이(Bacillus thuringiensis var. aizawai), 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키, 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오넨시스(Bacillus thuringiensis var. tenebrionensis); 또는 바실러스 스파에리쿠스(Bacillus sphaericus)); 바실러스 투린기엔시스 독소, 예를 들어 부포자 결정 독소(예를 들어, δ-내독소, 예컨대 Cry 독소, Cyt 독소); 또는 분비된 단백질(예를 들어, 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질); 진균: 이의 부분 및/또는 생성물 포함, 예를 들어, 아스코마이세테(Ascomycete) 진균, 예컨대 코르디시피타세아에(Cordycipitaceae) 과의 진균(예를 들어, 뷰베리아 바시아나 또는 코르디셉스 바시아나(Cordyceps bassiana), 및/또는 이로부터의 독소); 메타리지움 아니소플리아에(Metarhizium anisopliae)(예를 들어, 균주 F52) 및 이로부터의 생성물; 또는 파에실로마이세스 푸모소로세우스(Paecilomyces fumosoroseus)(예를 들어, 아폽카(Apopka) 균주 97) 및 이로부터의 생성물, 또는 선충 스테이네르네마 글라세리(Steinernema glaseri) 및 이의 생성물; 선충: 예를 들어, 스테이네르네마 글라세리 또는 헤테로랍디티스 박테리오포라(Heterorhabditis bacteriophora); 식물 에센스: 합성물 및/또는 추출물 또는 미정제 오일, 예컨대 디스파니아 암브로시오이데스(Dysphania ambrosioides) 또는 암브로시오이데스 근친종 추출물, 글리세롤 또는 프로판디올 님오일(Neem oil)과의 지방산 모노에스테르; 기계적 교란제: 예컨대 규조토, 광물질, 및/또는 합성/천연 섬유; 형광 증백제: 예를 들어, Calcofluor White M2R; 실리카 나노스피어: 예를 들어, NanoXact 실리카 나노스피어; 키티나아제: 예를 들어, 스트렙토마이세스 그리세우스 유래 키티나아제; 렉틴: 예를 들어, 갈란투스 니발리스 응집소(GNA); 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra) 렉틴(SNA); 마악키아 아무렌시스(Maackia amurensis)-II(MAL-II); 에리트리나 크리스타갈리(Erythrina cristagalli) 렉틴(ECL); 리시누스 코무니스(Ricinus communis) 응집소-I(RCA); 땅콩 응집소(PNA); 밀배아 응집소(WGA); 그리포니아 심플리시폴리아(Griffonia simplicifolia)-II(GSL-II); Con A; 렌스 쿨리나리스(Lens culinaris) 응집소(LCA); 만노오스 결합 렉틴(MBL); BanLec; 갈렉틴; 파세올루스 불가리스(Phaseolus vulgaris) 백혈구응집소(PHA-L); 파세올루스 불가리스 적혈구응집소(PHA-E); 또는 다투라 스트라모니움(Datura stramonium) 렉틴(DSL); 막 공격 복합체/퍼포린(MACPF) 단백질: 예를 들어, 양치식물에서 단리된 MACPF; 또는 크로모박테리아에서 단리된 GNIP1Aa; 식물 바이러스 외피 단백질-독소 융합체: 예를 들어, 완두콩 돌기 모자이크 바이러스(Pea enation mosaic virus)(PEMV) 융합체; 또는 POC 진딧물 방제제; 글리칸 결합 도메인/독소 융합 단백질: 예를 들어, 예르시니아 엔토모파가 MH96의 키티나아제 글리칸 결합 도메인, 스노드롭(snowdrop) 렉틴의 글리칸 결합 도메인, 식물 루테오바이러스(Luteovirus)의 글리칸 결합 도메인 및/또는 곤충 파르보바이러스과 또는 바큘로바이러스과 바이러스의 글리칸 결합 도메인.
또 다른 구현예에서, 살충 작용제(IA)는 하기 군에서 선택될 수 있다: 아세틸콜린에스테라아제(AchE) 저해제: 예를 들어, 카르바메이트류(예를 들어, 알라니카르브(alanycarb), 알디카르브(aldicarb), 벤디오카르브(bendiocarb), 벤푸라카르브(benfuracarb), 부토카르복심(butocarboxim), 부톡시카르복심(butoxycarboxim), 카르바릴(carbaryl), 카르보푸란(carbofuran), 카르보설판(carbosulfan), 에티오펜카르브(ethiofencarb), 페노부카르브(fenobucarb), 포르메타네이트(formetanate), 푸라티오카르브(furathiocarb), 이소프로카르브(isoprocarb), 메티오카르브(methiocarb), 메토밀(methomyl), 메톨카르브(metolcarb), 옥사밀(oxamyl), 피리미카르브(pirimicarb), 프로폭수르(propoxur), 티오카르브(thiodicarb), 티오파녹스(thiofanox), 트리아자메이트(triazamate), 트리메타카르브(trimethacarb), xmc 및 자일릴카르브(xylylcarb)); 및 유기인산염류(예를 들어, 아세페이트(acephate), 아자메티포스(azamethiphos), 아진포스(azinphos)-에틸, 아진포스-메틸, 카두사포스(cadusafos), 클로레톡시포스(chlorethoxyfos), 클로르펜빈포스(chlorfenvinphos), 클로르메포스(chlormephos), 클로르피리포스(chlorpyrifos), 클로르피리포스-메틸, 쿠마포스(coumaphos), 시아노포스(cyanophos), 데메톤(demeton)-s-메틸, 디아지논(diazinon), 디클로르보스(dichlorvos)/ddvp, 디크로토포스(dicrotophos), 디메토에이트(dimethoate), 디메틸빈포스(dimethylvinphos), 디설포톤(disulfoton), epn, 에티온(ethion), 에토프로포스(ethoprophos), 팜푸르(famphur), 페나미포스(fenamiphos), 페니트로티온(fenitrothion), 펜티온(fenthion), 포스티아제이트(fosthiazate), 헵테노포스(heptenophos), 이소펜포스(isofenphos), 이속사티온(isoxathion), 말라티온(malathion), 메카르밤(mecarbam), 메타미도포스(methamidophos), 메티다티온(methidathion), 메빈포스(mevinphos), 모노크로토포스(monocrotophos), 날레드(naled), 오메토에이트(omethoate), 옥시데메톤-메틸, 파라티온(parathion), 파라티온-메틸, 펜토에이트(phenthoate), 포살론(phosalone), 포레이트(phorate), 포스메트(phosmet), 포스파미돈(phosphamidon), 폭심(phoxim), 프로페노포스(profenofos), 프로페탐포스(propetamphos), 프로티오포스(prothiofos), 피라클로포스(pyraclofos), 피리다펜티온(pyridaphenthion), 퀴날포스(quinalphos), 설포텝(sulfotep), 테부피림포스(tebupirimfos), 테메포스(temephos), 테르부포스(terbufos), 테트라클로르빈포스(tetrachlorvinphos), 티오메톤(thiometon), 트리아조포스(triazophos), 트리클로르폰(trichlorfon), 바미도티온(vamidothion), 피리미포스(pirimiphos)-메틸, 이미시아포스(imicyafos) 및 이소프로필 o-(메톡시아미노티오-포스포릴)살리실레이트); GABA 개폐형 클로라이드 채널 차단제: 예를 들어, 시클로디엔 유기염소류(예를 들어, 클로르단(chlordane) 및 엔도설판(endosulfan)); 및 페닐피라졸류(피프롤류)(예를 들어, 에티프롤(ethiprole) 및 피프로닐(fipronil)); 소듐 채널 조절제: 예를 들어, 피레트로이드류 및 피레트린류(예를 들어, 아크리나트린(acrinathrin), 알레트린(allethrin), d-시스-트랜스 알레트린, d-트랜스 알레트린, 비펜트린(bifenthrin), 비오알레트린(bioallethrin), 비오알레트린 s-시클로펜테닐, 비오레스메트린(bioresmethrin), 시클로프로트린(cycloprothrin), 시플루트린(cyfluthrin), 베타-시플루트린, 시할로트린(cyhalothrin), 람다-시할로트린, 감마-시할로트린, 시페르메트린(cypermethrin), 알파-시페르메트린, 베타-시페르메트린, 쎄타-시페르메트린, 제타-시페르메트린, 시페노트린(cyphenothrin) [(1r)-트랜스-이성질체], 델타메트린(deltamethrin), 엠펜트린(empenthrin) [(ez)-(1r)-이성질체], 에스펜발레레이트(esfenvalerate), 에토펜프록스(etofenprox), 펜프로파트린(fenpropathrin), 펜발레레이트(fenvalerate), 플루시트리네이트(flucythrinate), 플루메트린(flumethrin), 타우-플루발리네이트(fluvalinate), 카다트린(kadathrin), 피레트린(피레트룸(pyrethrum)), 할펜프록스(halfenprox), 페노트린(phenothrin) [(1r)-트랜스-이성질체], 프랄레트린(prallethrin), 레스메트린(resmethrin), 실라플루오펜(silafluofen), 테플루트린(tefluthrin), 테트라메트린(tetramethrin), 테트라메트린 [(1r)-이성질체], 트랄로메트린(tralomethrin), 트랜스플루트린(transfluthrin) 및 페르메트린); DDT; 또는 메톡시클로르(methoxychlor); 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 경쟁 조절제: 예를 들어, 네오티코티노이드류(예를 들어, 아세타미프리드(acetamiprid,), 클로티아니딘(clothianidin), 디노테푸란(dinotefuran), 이미다클로프리드(imidacloprid), 니텐피람(nitenpyram), 티아클로프리드(thiacloprid), 티아메톡삼(thiamethoxam)); 니코틴; 설폭시민류(예를 들어, 설폭사플로르(sulfoxaflor)); 부테놀리드류(예를 들어, 플루피라디푸론(flupyradifurone)); 및 메소이온성 화합물(예를 들어, 트리플루메조피림(triflumezopyrim)); 니코틴성 아세틸콜린 수용체 (nAchR) 알로스테릭 조절제-부위 I: 예를 들어, 스피노신류(예를 들어, 스피네토람(spinetoram) 및 스피노사드(spinosad)); 글루타메이트 개폐형 클로라이드 채널(GluCl) 알로스테릭 조절제: 예를 들어, 아베르멕틴류 및 밀베마이신류(예를 들어, 아바멕틴(abamectin), 에마멕틴(emamectin) 벤조에이트, 레피멕틴(lepimectin) 및 밀베멕틴(milbemectin)); 유충 호르몬 모방체: 예를 들어, 유충 호르몬 유사체(예를 들어, 히드로프렌(hydroprene), 키노프렌(kinoprene) 및 메토프렌(methoprene)); 페녹시카르브(fenoxycarb); 및 피리프록시펜(pyriproxyfen); 기타 비특이적(다중부위) 저해제: 예를 들어, 알킬 할라이드류(예를 들어, 메틸 브로마이드 및 기타 알킬 할라이드); 클로로피크린(chloropicrin); 타르타르 에메틱(tartar emetic); 및 메틸 이소티오시아네이트 생성제(예를 들어, 다조메트(dazomet) 및 메탐(metam)); 현음 기관 TRPV 채널 조절제: 예를 들어, 피리딘 아조메틴 유도체(예를 들어, 피메트로진(pymetrozine) 및 피리플루퀴나존(pyrifluquinazon)); 및 피로펜류(예를 들어, 아피도피로펜(afidopyropen)); 응애 성장 저해제: 예를 들어, 클로펜테진(clofentezine); 디플로비다진(diflovidazin); 헥시티아족스(hexythiazox); 및 에톡사졸(etoxazole); 미토콘드리아 ATP 신타아제 저해제: 예를 들어, 디아펜티우론(diafenthiuron); 유기주석 살비제(예를 들어, 아조시클로틴(azocyclotin), 시헥사틴(cyhexatin) 및 펜부타틴(fenbutatin) 옥시드); 프로파르자이트(propargite); 및 테트라디폰(tetradifon); 양성자 구배의 파괴를 통한 산화적 인산화의 언커플러: 예를 들어, 피롤류, 디니트로페놀류 및 설플루라미드(sulfluramid)(예를 들어, 클로르페나피르(chlorfenapyr), DNOC 및 설플루라미드); 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 채널 차단제: 예를 들어, 네레이스톡신(nereistoxin) 유사체, 예컨대 벤설탑(bensultap), 카르탑(cartap) 히드로클로라이드, 티오시클람(thiocyclam), 티오설탑(thiosultap)-소듐; 탈피 교란제(쌍시목): 예를 들어, 시로마진(cyromazine); 엑디손 수용체 아고니스트: 예를 들어, 디아실히드라진류, 예컨대 크로마페노자이드(chromafenozide), 할로페노자이드(halofenozide), 메톡시페노자이드(methoxyfenozide) 및 테부페노자이드(tebufenozide); 옥토파민 수용체 아고니스트: 예를 들어, 아미트라즈(amitraz); 미토콘드리아 복합체 III 전자 수송 저해제: 예를 들어, 히드라메틸논(hydramethylnon); 아세퀴노실(acequinocyl); 플루아크리피림(fluacrypyrim); 및 비페나제이트(bifenazate); 미토콘드리아 복합체 I 전자 수송 저해제: 예를 들어, METI 살비제 및 살충제(예를 들어, 페나자퀸(fenazaquin), 펜피록시메이트(fenpyroximate), 피리미디펜(pyrimidifen), 피리다벤(pyridaben), 테부펜피라드(tebufenpyrad) 및 톨펜피라드(tolfenpyrad)); 및 로테논(rotenone); 전압 의존성 소듐 채널 차단제: 예를 들어, 옥사디아진류(예를 들어, 인독사카르브(indoxacarb)); 및 세미카르바존류(예를 들어, 메타플루미존); 아세틸 조효소 A 카르복실라아제 저해제: 예를 들어, 테트론산 및 테트람산 유도체(예를 들어, 스피로디클로펜(spirodiclofen), 스피로메시펜(spiromesifen), 스피로피디온(spiropidion) 및 스피로테트라마트(spirotetramat)); 미토콘드리아 복합체 IV 전자 수송 저해제: 예를 들어, 인화물(예를 들어, 인화알루미늄, 인화칼슘, 포스핀 및 인화아연); 및 시안화물(예를 들어, 시안화칼슘, 시안화포타슘 및 시안화소듐); 미토콘드리아 복합체 II 전자 수송 저해제: 예를 들어, 베타-케토니트릴 유도체(예를 들어, 시에노피라펜(cyenopyrafen) 및 시플루메토펜(cyflumetofen)); 및 카르복사닐리드류(예를 들어, 피플루부미드(pyflubumide)); 리아노딘 수용체 조절제: 예를 들어, 디아미드류, 예컨대 클로란트라닐리프롤(chlorantraniliprole), 시안트라닐리프롤(cyantraniliprole), 시클라닐리프롤(cyclaniliprole), 플루벤디아미드(flubendiamide) 및 테트라닐리프롤(tetraniliprole); 현음 기관 조절제-정의되지 않은 표적 부위: 예를 들어, 플로니카미드(flonicamid); 또는 GABA 개폐형 클로라이드 채널 알로스테릭 조절제: 예를 들어, 메타-디아미드류 및 이속사졸린류, 예컨대 브로플라닐리드(broflanilide), 플룩사메타미드(fluxametamide).
일부 구현예에서, IA는 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, 유전자, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질 또는 효소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 식물에서 발현될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 식물, 식물 조직, 식물 세포, 식물 종자 또는 이의 식물 부분에서 발현되도록 작동 가능한 IA는, 하기 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스, 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키, 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오넨시스 및/또는 바실러스 스파에리쿠스로 알려진 유기체에서 단리된 뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드 및/또는 단백질; 키티나아제; 갈란투스 니발리스 응집소; WupA dsRNA; TIC4670 베타 공극 형성 단백질; AfIP-1A/1B, PIP-72Aa, 루테오바이러스 CP-독소 융합체; 예르시니아 엔토모파가 MH96의 키티나아제 글리칸 결합 도메인; 독소에 융합된 스노드롭 렉틴의 글리칸 결합 도메인; 독소에 융합된 식물 루테오바이러스의 글리칸 결합 도메인; 및 독소에 융합된 곤충 파르보바이러스과 또는 바큘로바이러스과 외피 단백질 바이러스의 글리칸 결합 도메인.
IA: 진균 및 진균 독소
곤충병원성 진균은 곤충 및/또는 무척추동물의 기생충 및/또는 질환으로 작용할 수 있는 진균이다. 명칭에서 알 수 있듯이, 곤충병원성 진균은 막으로 명확하게 정의된 핵을 갖는 진핵생물 유기체이다. 곤충병원성 진균은 효모에서와 같이 단일 세포 유기체(즉, 단세포)일 수 있으며; 대안적으로, 이는 균사로 알려진 사상 단위(filamentous unit)를 통해 다세포로 형성되어 균사체를 형성할 수 있다. 균사는 횡벽(transverse wall)에 의해 분리되는 단일 핵 또는 다중 핵 분절로 형성된다.
진균 번식 단위는 포자 또는 분생자로 공지되어 있다. 곤충병원성 진균과 관련되는 경우, 표적 곤충은 통상적으로 이러한 번식 단위에 의해 감염된다. 일반적으로, 곤충병원성 진균에 의한 곤충의 감염은 통상적으로 3 단계로 나뉜다: (1) 곤충의 각피에의 접착 및 이에서의 포자 발아; (2) 곤충의 혈구 내 침투; 및 (3) 일반적으로 곤충의 사멸로 종결되는 진균 발생. 문헌[Tanada, Y., & Kaya, H. K. (1993), Insect Pathology. San Diego. Academic Press] 참조.
간략하게, 발병기전의 일반적인 경로는 하기와 같이 설명된다: 곤충병원성 진균이 각피를 관통하면, 혈구로 이동하고, 여기서 균사가 균사체 또는 분아포자 및/또는 원형질체로 전환된다. 이어서, 이는 곤충 몸의 모든 부분으로 퍼져, 궁극적으로 내부 기관을 파괴한다. 곤충의 사멸은 영양 결핍, 곤충 조직의 침입 및 파괴, 및 진균에 의해 생산되는 독성 물질로 인한 대사 불균형으로 인해 발생한다. 문헌[Gillespie, A.T. and Claydon, N. The use of entomogenous fungi for pest control and the role of toxins in pathogenesis. (1989), Pestic. Sci., 27: 203-215] 참조.
곤충의 공동 내에서, 감염 성공은 진균이 신속하게 성장하고, 곤충 내부에서 발견되는 벽을 투과하고, 곤충이 생성할 수 있는 독성 물질을 견뎌내야 하는 유전적 잠재력뿐 아니라, 곤충의 방어 메커니즘에 따라 달라질 것이다. 곤충의 1차 방어 메커니즘은 이물질의 캡슐화 및 멜라닌화이다.
곤충의 면역 장벽이 극복되면, 진균은 부생학적으로 성장하고, 균사체 덩어리를 형성하고, 혈구 내에 생식 구조를 생성한다. 적절한 습도와 온도 조건 하의 곤충에서 포자와 무균 균사가 방출된다. 포자 생성, 언로딩(unloading), 분산, 생존 및 발아 과정은 환경 조건에 따라 달라진다. 곤충 사체에 의해 생성된 엄청난 수의 포자는 부분적으로 생존하지 못하는 대다수의 높은 확률을 보상한다. 문헌[A.E. Hajek & R.J St. Leger, Interactions Between Fungal Pathogens and Insect Hosts, Annual Review of Entomology 1994 39:1, 293-322] 참조.
일부 구현예에서, IA는 곤충병원성 진균 또는 이에서 유도된 생성물, 예를 들어 균사, 포자 또는 생식 구조일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 곤충병원성 진균으로부터 생성된 펩타이드, 단백질 또는 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 아스코마이세테 진균 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 코르디시피타세아에 과의 진균 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 아칸토마이세스(Akanthomyces) 독소; 아스코폴리포러스(Ascopolyporus) 독소; 뷰베리아(Beauveria) 독소; 비자사무하(Beejasamuha) 독소; 코르디셉스 독소; 코레미옵시스(Coremiopsis) 독소; 엔교돈티움(Engyodontium) 독소; 기벨룰라(Gibellula) 독소; 히페르데르미움(Hyperdermium) 독소; 인섹티콜라(Insecticola) 독소; 이사리아(Isaria) 독소; 레카니실리움(Lecanicillium) 독소; 미크로힐룸(Microhilum) 독소; 피토코르디셉스(Phytocordyceps) 독소; 슈도기벨룰라(Pseudogibellula) 독소; 로티페로프토라(Rotiferophthora) 독소; 심플리실리움(Simplicillium) 독소; 또는 토루비엘라(Torrubiella) 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 속에서 선택되는 유기체 또는 이로부터의 독소일 수 있다: 뷰베리아; 메타리지움; 파에실로마이세스; 레카니실리움; 노무라에아(Nomuraea); 이사리아; 히르수텔라(Hirsutella); 소로스포렐라(Sorosporella); 아스페르길루스; 코르디셉스; 엔토모프토라(Entomophthora); 주프토라(Zoophthora); 판도라(Pandora); 엔토모파가; 코니디오볼루스(Conidiobolus) 및 바시디오볼루스(Basidiobolus).
일부 구현예에서, IA는 뷰베리아 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기일 수 있다: 뷰베리아 알바(Beauveria alba) 독소; 뷰베리아 아모르파(Beauveria amorpha) 독소; 뷰베리아 아레나리아(Beauveria arenaria) 독소; 뷰베리아 아시아티카(Beauveria asiatica) 독소; 뷰베리아 아우스트랄리스(Beauveria australis) 독소; 뷰베리아 바시아나 독소; 코르디셉스 바시아나 독소; 뷰베리아 브롱니아르티(Beauveria brongniartii) 독소; 뷰베리아 브룸프티(Beauveria brumptii) 독소; 뷰베리아 칼레도니카(Beauveria caledonica) 독소; 뷰베리아 키로멘시스(Beauveria chiromensis) 독소; 뷰베리아 코코룸(Beauveria coccorum) 독소; 뷰베리아 크레타세아(Beauveria cretacea) 독소; 뷰베리아 실린드로스포라(Beauveria cylindrospora) 독소; 뷰베리아 델라크로이시(Beauveria delacroixii) 독소; 뷰베리아 덴사(Beauveria densa) 독소; 뷰베리아 데펜덴스(Beauveria dependens) 독소; 뷰베리아 도리포라에(Beauveria doryphorae) 독소; 뷰베리아 에푸사(Beauveria effusa) 독소; 뷰베리아 에피가에아(Beauveria epigaea) 독소; 뷰베리아 펠리나(Beauveria felina) 독소; 뷰베리아 게오데스(Beauveria geodes) 독소; 뷰베리아 글로불리페라(Beauveria globulifera) 독소; 뷰베리아 헤이미(Beauveria heimii) 독소; 뷰베리아 호플로켈리(Beauveria hoplocheli) 독소; 뷰베리아 키푸카에(Beauveria kipukae) 독소; 뷰베리아 락사(Beauveria laxa) 독소; 뷰베리아 말라위엔시스(Beauveria malawiensis) 독소; 뷰베리아 메도겐시스(Beauveria medogensis) 독소; 뷰베리아 멜로론타에(Beauveria melolonthae) 독소; 뷰베리아 누비콜라(Beauveria nubicola) 독소; 뷰베리아 오리자에 독소; 뷰베리아 파라독사(Beauveria paradoxa) 독소; 뷰베리아 파라넨시스(Beauveria paranensis) 독소; 뷰베리아 파라시티카(Beauveria parasitica) 독소; 뷰베리아 페텔로티(Beauveria petelotii) 독소; 뷰베리아 슈도바시아나(Beauveria pseudobassiana) 독소; 뷰베리아 릴레이(Beauveria rileyi) 독소; 뷰베리아 루브라(Beauveria rubra) 독소; 뷰베리아 시오타에(Beauveria shiotae) 독소; 뷰베리아 소볼리페라(Beauveria sobolifera) 독소; 뷰베리아 스피카타(Beauveria spicata) 독소; 뷰베리아 스테파노데리스(Beauveria stephanoderis) 독소; 뷰베리아 설푸레센스(Beauveria sulfurescens) 독소; 뷰베리아 순기(Beauveria sungii) 독소; 뷰베리아 테넬라(Beauveria tenella) 독소; 뷰베리아 툰드렌시스(Beauveria tundrensis) 독소; 뷰베리아 벨라타(Beauveria velata) 독소; 뷰베리아 바로아에(Beauveria varroae) 독소; 뷰베리아 베르미코니아(Beauveria vermiconia) 독소; 뷰베리아 벡산스(Beauveria vexans) 독소; 뷰베리아 비안나이(Beauveria viannai) 독소; 또는 뷰베리아 비렐라(Beauveria virella) 독소.
일부 구현예에서, IA는 뷰베리아 바시아나 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 뷰베리신(beauvericin)일 수 있다.
뷰베리신은 다양한 푸사리움(Fusarium) 종뿐 아니라, 진균 뷰베리아 바시아나에 의해 생성되는 진균 독소이다. 뷰베리신은 곤충뿐 아니라, 인간 세포주와 쥣과 세포주 모두에 독성 효과가 있는 고리형 펩타이드이다. 뷰베리신의 활성은 화합물의 이온운반 특성으로 인한 것이다. 뷰베리신은 알칼리 금속 양이온과 복합체를 형성할 수 있으며, 세포막을 통한 이온 수송에 영향을 미친다. 또한, 뷰베리신은 콜레스테롤 아세틸트랜스퍼라아제의 가장 강력한 저해제 중 하나로 보고되어 있다. 뷰베리신은 또한 세포자멸사와 매우 유사한 유형의 세포 사멸을 유도하는 것으로 나타나 있다. 정황 증거에 따르면, 뷰베리신은 다른 푸사리움 독소와 협력하여 부가적인 독성 효과를 유발한다.
일부 구현예에서, IA는 화학식 C45H57N3O9를 갖는 뷰베리신일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 화학식 C46H59N3O9를 갖는 "뷰베리신 A" 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 화학식 C47H61N3O9를 갖는 "뷰베리신 B" 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자일 수 있다.
곤충의 방제 및/또는 저해를 위해 진균 및 진균 독소를 생산, 제조 및 사용하는 예시적인 방법은 하기 문헌에 개시되어 있다: "Fungal strain Beauveria sp. MTCC 5184 and a process for the preparation of enzymes therefrom"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제9,217,140호; "Mycoinsecticides against an insect of the grasshopper family"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,261,553호; "Bio-pesticide and method for pest control"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제8,709,399호; "Methods and materials for control of insects such as pecan weevils"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제7,241,612호; 및 "Biocontrol of Varroa mites with Beauveria bassiana,"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제8,226,938호(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
IA: 렉틴
렉틴은 세포막의 유리 탄수화물 및/또는 당접합체를 특정 방식으로 인식하고, 이에 가역적으로 결합할 수 있는 폴리펩타이드이다. 렉틴은 글리칸 결합 단백질(GBP)의 2가지 군 중 하나이며, 다른 군은 황산화된 글리코사미노글리칸(GAG) 결합 단백질이다. 동물, 식물, 진균, 원생생물, 고세균, 박테리아 및 바이러스계에서 발견되는 렉틴은 기원 유기체에 따라 고도로 가변적인 생물학적 기능을 갖는다. 예를 들어, 포유류에서, 내인성 렉틴은 세포-세포외 기질(ECM); 생식자(gamete) 수정; 세포-세포 자가 인식; 배아 발달; 세포 성장, 분화, 신호전달, 접착 및 이동; 세포자멸사; 숙주-병원체 상호작용; 면역조절 및 염증; 당단백질 접힘 및 경로설정(routing); 유사분열 유도; 및 항상성에 관여한다.
전형적으로, 렉틴은 세포막 또는 유리 탄수화물(예를 들어, 다당류, 당단백질 또는 당지질)에 결합하는 탄수화물에, 높은 특이성을 갖는 가역적 방식으로, 결합하는 능력이 있는 적어도 하나의 비촉매 도메인을 보유한다. 이러한 도메인은 탄수화물 인식 도메인(CRD)으로 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 렉틴의 예는 하기를 포함할 수 있다: 잭 빈(jack bean)에서 단리된 콘카나발린 A(ConA: Concanavalin A). ConA는 글루코오스, 만노오스, 및 만노오스 및/또는 글루코오스의 글리코시드에 결합한다. 밀배아 응집소(WGA)는 N-아세틸글루코사민 및 이의 글리코시드에 결합하는 또 다른 렉틴이다. 붉은강낭콩 렉틴은 N-아세틸글루코사민에 결합하고, 땅콩 응집소는 갈락토오스 및 갈락토시드에 결합한다. 렉틴 구조 및 생물학에 대한 예시적인 검토는 문헌[Essentials of Glycobiology, 3rd edition. Varki A, Cummings RD, Esko JD, et al., editors. Cold Spring Harbor (NY): Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2015-2017]에서 확인할 수 있다.
이의 다양한 역할 및 구조로 인해, 렉틴은 여러 기준에 따라 분류될 수 있으며, 예를 들어 렉틴은 세포 국소화에 기반하여 분류될 수 있다(예를 들어, 세포외 렉틴, 세포내 소포체(ER) 렉틴, 골지 렉틴, 세포질 렉틴, 막결합 렉틴). 문헌[Lakhtin et al., Lectins of living organisms. The overview. Anaerobe. 2011 Dec;17(6):452-5] 참조(상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
구조 또는 서열의 유사성이 또한 렉틴을 분류하는 데 사용될 수 있다(예를 들어, 베타 프리즘 렉틴(B형), 칼슘 의존성 렉틴(C형), 피콜린-피브리노겐/콜라겐 도메인을 갖는 렉틴(F형), 마늘 및 스노드롭 렉틴(G형), 히알루로난 결합 단백질 또는 히알라드헤린(hyaladherin)(H형), 면역글로불린 수퍼패밀리 렉틴(I형), 조콥(jocob) 및 관련 렉틴(J형), 콩류 종자 렉틴(L형), 알파 만노시다아제 관련 렉틴(M형), 뉴클레오타이드 포스포히드롤라아제 렉틴(N형), 리신 렉틴(R형), 타키플레우스 트리덴타투스(Tachypleus tridentatus)(T형), 밀배아 응집소(W형), 제노푸스(Xenopus) 알 렉틴(X형)). 문헌[Kumar et al., Biological role of lectins: A review. J. Orofac. Sci. 2012;4:20-25] 참조(상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
대안적으로, 탄수화물 특이성이 또한 렉틴을 분류하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 동물 및 식물에 기반하여(예를 들어, d-만노오스(d-글루코오스) 결합 렉틴, 2-아세트아미도-2-데옥시글루코오스 결합 렉틴, 2-아세트아미도-2-데옥시갈락토오스 결합 렉틴, d-갈락토오스 결합 렉틴, l-푸코오스 결합 렉틴, 기타 렉틴); 또는 모든 유기체에 기반하여(예를 들어, 글루코오스/만노오스 결합 렉틴, 갈락토오스 및 N-아세틸-d-갈락토사민 결합 렉틴, l-푸코오스 결합 렉틴, 시알산 결합 렉틴). 문헌[Goldstein I.J., & Hayes C.E. The Lectins: Carbohydrate-binding proteins of plants and animals. Adv. Carbohydr. Chem. Biochem. 1978;35:127-340]; 및 문헌[Kumar et al., Biological role of lectins: A review. J. Orofac. Sci. 2012;4:20-25] 참조(상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
렉틴의 결합 도메인 특징분석은 X선 공결정학, NMR, 및 관련 접촉물 및 단백질 역학의 MS 맵핑; 표지된 합텐에 대한 평형 투석; 여과(예를 들어, 막)를 이용한 평형 결합; 원심분리(가용화된 수용체)와 함께 PEG에 의해 중단된 평형 결합; 다가 리간드의 사용; 다가 수용체 프로브의 사용; Biacore 실시간 동역학; 및/또는 세포 접착 속도, 예를 들어 고정된 글리칸 또는 수용체에 대한 전단 하의 유동 평가를 통해 달성될 수 있다.
렉틴 서열, 3D X선 구조, 및 렉틴에 관한 참조문헌은, 웹사이트: https://www.unilectin.eu/unilectin3D/에서 입수할 수 있으며; 문헌[Bonnardel et al., UniLectin3D, a database of carbohydrate binding proteins with curated information on 3D structures and interacting ligands. Nucleic Acids Res. 2019 Jan 8;47(D1):D1236-D1244]을 참조한다(상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
일부 구현예에서, IA는 렉틴일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 CRIP에 융합되지도 작동 가능하게 연결되지도 않은 렉틴일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 중 하나일 수 있다: 갈란투스 니발리스 응집소(GNA); 삼부쿠스 니그라 렉틴(SNA); 마악키아 아무렌시스-II(MAL-II); 에리트리나 크리스타갈리 렉틴(ECL); 리시누스 코무니스 응집소-I(RCA); 땅콩 응집소(PNA); 밀배아 응집소(WGA); 그리포니아 심플리시폴리아-II(GSL-II); Con A; 렌스 쿨리나리스 응집소(LCA); 만노오스 결합 렉틴(MBL); BanLec; 갈렉틴; 파세올루스 불가리스 백혈구응집소(PHA-L); 파세올루스 불가리스 적혈구응집소(PHA-E); 및/또는 다투라 스트라모니움 렉틴(DSL).
일부 구현예에서, IA는 표 3에 열거된 렉틴 중 하나 이상일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 렉틴은 서열번호 35, 595 내지 615 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열 또는 이의 변이체와 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 가질 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 서열번호 35, 595 내지 615 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
IA: 키티나아제
일부 구현예에서, IA는 키티나아제일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 트리코데르마 비리데(Trichoderma viride) 유래 키티나아제일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 서열번호 620에 제시된 아미노산 서열을 갖는 키티나아제일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 서열번호 620에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 키티나아제일 수 있다.
IA: 아자디라크타 인디카 화합물
아자디라크타 인디카(님, 님나무 또는 인디안 라일락(Indian lilac)으로도 공지되어 있음)는 마호가니과, 멜리아세아에(Meliaceae)의 나무이다. 인도 아대륙이 원산지인 아자디라크타 인디카는 전형적으로 열대 및 아열대 지역에서 자란다.
아자디라크타 인디카는 수세기 동안 농약의 공급원으로 사용되어 왔다. 다양한 님 종자 추출물, 특히 친수성 테트라노르트리테르페노이드(tetranortriterpenoid) 아자디라크틴을 함유하는 것은, 다양한 목에 속하는 다수의 곤충 종의 섭식 행동, 변태(곤충 성장 조절[IGR] 효과), 생식력 및 적응도에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다.
아자디라크틴은 님나무(아자디라크타 인디카)에서 추출된 리미노이드 계열의 테트라노르트리테르페노이드 식물 살충제이다. 이는 과잉 산소 기능성을 자랑하며, 에놀 에테르, 아세탈, 헤미아세탈 및 4중 치환된 옥시란뿐 아니라, 다양한 카르복실산 에스테르를 포함하는 고도로 산화된 테트라노르트리테르페노이드이다.
아자디라크틴은 곤충 호르몬 "엑디손"과 구조적으로 유사하다. 이러한 호르몬은 전형적으로 곤충이 유충에서 번데기로, 성충으로 변할 때 변태 과정을 제어한다. 아자디라크틴은 주로 "엑디손 차단제"로 작용한다. 이는 곤충의 필수 호르몬의 생산과 방출을 차단한다. 그 결과, 곤충은 탈피를 할 수 없다. 아자디라크틴은 또한 곤충의 짝짓기와 생식 의사소통을 방해하고, 유충과 성충을 파괴하고, 암컷이 알을 낳지 못하게 하고, 성충을 생식불능으로 만들고, 섭식을 못하게 하는 것으로 알려져 있다.
일부 구현예에서, IA는 아자디라크타 인디카 화합물일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 아자디라크틴; 아자디라디온; 아자디라디오놀리드; 데아세틸게두닌; 데아세틸아자디라크티놀; 데스푸라노아자디라디온; 에폭시아자디라디온; 게두닌; 마흐무딘; 님프루이틴 A; 님프루이틴 B; 님볼리드; 님빈; 니몰리시놀; 오키닌 아세테이트; 살라닌; 살라놀; 알파-니모락톤; 베타-니모락톤; 2',3'-디히드로살라닌; 3-데아세틸살라닌; 6-데아세틸님빈; 7-아세틸-16,17-데히드로-16-히드록시네오트리킬레논; 7-벤조일님보시놀; 7-데아세틸-7-벤조일에폭시아자디라디온; 7-데아세틸-7-벤조일게두닌; 7-데아세틸-17-에피니몰리시놀; 15-히드록시아자디라디온; 17-에피-17-히드록시아자디라디온; 17-에피아자디라디온; 20,21,22,23-테트라히드로-23-옥소아자디론; 22,23-디히드로니모시놀; 또는 28-데옥소님볼리드일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 아자디라크틴일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 화학식을 갖는 아자디라크틴일 수 있다: C35H44O16.
아자디라크틴을 추출하는 예시적인 방법은 "Azadirachtin extraction process"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,312,738호에 개시되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
님 종자 물질로부터 아자디라크틴 농축물을 제조하는 예시적인 방법은 "Method for producing azadirachtin concentrates from neem seed materials"라는 발명의 명칭의 PCT 출원 WO1995002962A1에 개시되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
아자디라크틴을 정제하는 예시적인 정제 방법은 "Process for preparing purified Azadirachtin in powder form from neem seeds and storage stable aqueous composition containing Azadirachtin"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,736,145호에 개시되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
아자디라크틴을 포함하는 조성물을 생성하고 보관하는 예시적인 방법은 "Storage stable pesticide formulations containing azadirachtin"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,811,790호에 개시되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
아자디라크틴을 제조하고 사용하는 예시적인 방법은 "Pesticide and a method of controlling a wide variety of pests"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제9,635,858호에 개시되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
예시적인 아자디라크틴 추출물 및 조성물은 "Insecticidal hydrogenated neem extracts"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제4,943,434호; "Hydrophic extracted neem oil-a novel insecticide"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,411,736호; 및 "Insecticidal compositions derived from neem oil and neem wax fractions"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,372,817호에 개시되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
IA: 붕소 화합물
일부 구현예에서, IA는 붕소 화합물일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 붕산, 디보론 테트라히드록시드, 보레이트, 산화붕소, 보란, 또는 전술한 것들 중 임의의 것의 임의의 조합일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 수성 매질에서 붕소의 산화물을 생성하는 보란 및/또는 보레이트 에스테르일 수 있다.
일부 구현예에서, 붕소 화합물은 붕산, 보레이트(예를 들어, 염기성 소듐 보레이트(보락스)), 또는 붕산과 보레이트의 혼합물이다.
일부 구현예에서, IA는 보레이트일 수 있다. 적합한 보레이트에는, 비제한적으로, 퍼보레이트, 메타보레이트, 테트라보레이트, 옥타보레이트, 보레이트 에스테르, 및 전술한 것들 중 임의의 것의 임의의 조합이 포함된다. 바람직한 보레이트에는, 비제한적으로, 금속성 보레이트(예를 들어, 소듐 보레이트, 아연 보레이트 및 포타슘 보레이트), 예컨대 디소듐 테트라보레이트 10수화물, 디소듐 옥타보레이트 4수화물, 소듐 메타보레이트, 소듐 퍼보레이트 1수화물, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 테트라보레이트 5수화물, 소듐 테트라보레이트, 구리 메타보레이트, 아연 보레이트, 바륨 메타보레이트, 및 이들의 임의의 조합이 포함된다.
일부 구현예에서, IA는 보락스(예를 들어, 소듐 보레이트 10수화물-10몰 Na2B4O7.10H2O 또는 소듐 보레이트 5수화물-5몰 Na2B4O7.5H2O)일 수 있다.
다른 구현예에서, IA는 보락스에 대한 대체물로서 유효량으로 이용될 수 있는(또는 보락스와 또는 서로 조합하여 유효량으로 이용될 수 있는) 붕소 화합물일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 무수 보락스(Na2B4O7); 암모늄 테트라보레이트((NH4)2B4O7.4H2O); 암모늄 펜타보레이트((NH4)2B10O16.8H2O); 포타슘 펜타보레이트(K2B10O16.8H2O); 포타슘 테트라보레이트(K2B4O7.4H2O); 소듐 메타보레이트((8몰) Na2B2O4.8H2O); 소듐 메타보레이트((4몰) Na2B2O4.4H2O); 디소듐 테트라보레이트 10수화물(Na2B4O7.10H2O); 디소듐 테트라보레이트 5수화물(Na2B4O7.5H2O); 디소듐 옥타보레이트 4수화물(Na2B8O13.4H2O); 또는 이들의 조합일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트, 소듐 메타보레이트, 소듐 테트라보레이트 10수화물, 산화붕소, 탄화붕소, 질화붕소, 삼브롬화붕소, 삼염화붕소 및 삼플루오린화붕소로 이루어지는 군에서 선택되는 붕소 화합물일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 붕산일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 화학식 H3BO3을 갖는 붕산일 수 있다.
붕소 화합물 및/또는 붕소 함유 화합물을 제조하고 사용하는 것을 설명하는 예시적인 방법은, "Insecticide"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제490,688호; "Insectifuge"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제1,029,203호; "Composition and method of preparing roach tablets"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제1,636,688호; "Termite bait composition"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제4,363,798호; "Pest exterminating composition"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제4,959,221호; "Pest-controlling composition"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,871,780호; 및 "Dual-action pest control formulation and method"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제8,778,372호에 개시되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
IA: 바이러스
일부 구현예에서, IA는 곤충 종과 접촉할 때 살충 활성을 보유하는 바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 DNA 바이러스 또는 RNA 바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 아스코바이러스(ascovirus); 바큘로바이러스; 덴소바이러스; 엔토모폭스바이러스(entomopoxvirus); 히트로사바이러스(hytrosavirus); 이리도바이러스(iridovirus); 누디바이러스(nudivirus); 폴리드나바이러스(polydnavirus); 디시스트로바이러스(dicistrovirus); 이플라바이러스(iflavirus); 노다바이러스(nodavirus); 테트라바이러스(tetravirus); 또는 시포바이러스(cypovirus)일 수 있다.
아스코바이러스과
바이러스
일부 구현예에서, IA는 아스코바이러스과의 바이러스일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 아스코바이러스, 예컨대 헬리오티스 비레센스(Heliothis virescens) 아스코바이러스 3a; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3b; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3c; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3d; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3e; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3f; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3g; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3h; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3j; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1a; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2a; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3i; 스포도프테라 아스코바이러스; 스포도프테라 엑시구아 아스코바이러스 5a; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1c; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1d; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2b; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2c; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2d; 또는 트리코플루시아 니 아스코바이러스 6b일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 아스코바이러스과의 바이러스일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 토우르스바이러스(toursvirus), 예컨대 디아드로무스 풀켈루스(Diadromus pulchellus) 토우르스바이러스; 디아드로무스 풀켈루스 아스코바이러스 4a; 또는 다시네우라 주주비폴리아(Dasineura jujubifolia) 토우르스바이러스 2a일 수 있다.
덴소바이러스과
바이러스
일부 구현예에서, IA는 덴소바이러스과의 바이러스일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 암비덴소바이러스(Ambidensovirus)일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 암비덴소바이러스일 수 있다: 아스테로이드(Asteroid) 암비덴소바이러스 1; 불가사리 관련 덴소바이러스; 블라토데안(Blattodean) 암비덴소바이러스 1; 페리플라네타 풀리기노사(Periplaneta fuliginosa) 덴소바이러스; 페리플라네타 풀리기노사 덴소바이러스 Guo/2000; 블라토데안 암비덴소바이러스 2; 블라텔라 게르마니카(Blattella germanica) 덴소바이러스 1; 십각목(Decapod) 암비덴소바이러스 1; 케락스 쿠아드리카리나투스(Cherax quadricarinatus) 덴소바이러스; 쌍시목 암비덴소바이러스 1; 쿨렉스 피피엔스(Culex pipiens) 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 1; 플라노코쿠스 시트리(Planococcus citri) 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 2; 디사피스 플란타기네아(Dysaphis plantaginea) 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 3; 미주스 페르시카에(Myzus persicae) 덴소바이러스; 미주스 페르시카에 니코티아나에(Myzus persicae nicotianae) 덴소바이러스; 막시목(Hymenopteran) 암비덴소바이러스 1; 솔레놉시스 인빅타(Solenopsis invicta) 덴소바이러스; 인시목 암비덴소바이러스 1; 갈레리아 멜로넬라(Galleria mellonella) 덴소바이러스; 주노니아 코에니아 덴소바이러스; 주노니아 코에니아 덴소바이러스 pBRJ/1990; 미팀나 로레이(Mythimna loreyi) 덴소바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스(Pseudoplusia includens) 덴소바이러스; 메뚜기목(Orthopteran) 암비덴소바이러스 1; 아케타 도메스티카(Acheta domestica) 덴소바이러스; 미분류 암비덴소바이러스; 테트라니쿠스 우르티카에(Tetranychus urticae) 관련 암비덴소바이러스; 미분류 덴소바이러스; 암비덴소바이러스 CaaDV1; 암비덴소바이러스 CaaDV2; 아트라토 덴소(Atrato Denso) 유사 바이러스; 아트라토 덴소 유사 바이러스 1; 덴소바이러스 SC1065; 덴소바이러스 SC1118; 덴소바이러스 SC116; 덴소바이러스 SC2121; 덴소바이러스 SC2209; 덴소바이러스 SC2228; 덴소바이러스 SC2886; 덴소바이러스 SC3749; 덴소바이러스 SC3908; 덴소바이러스 SC4092; 덴소바이러스 SC444; 덴소바이러스 SC525; 디아포리나 시트리(Diaphorina citri) 덴소바이러스; 디아트라에아 사카랄리스(Diatraea saccharalis) 덴소바이러스; 루핀(Lupine) 배설물 관련 덴소바이러스; 루핀 배설물 관련 덴소바이러스 2; 또는 암비덴소바이러스 종.
엔토모폭스바이러스과
바이러스
일부 구현예에서, IA는 엔토모폭스바이러스과의 바이러스일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 알파엔토모폭스바이러스; 베타엔토모폭스바이러스; 디아카스미모르파(Diachasmimorpha) 엔토모폭스바이러스; 멜라노플루스 산구이니페스(Melanoplus sanguinipes) 엔토모폭스바이러스; 또는 일부 지금까지 미분류된 엔토모폭스바이러스과 바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 엔토모폭스바이러스과 바이러스일 수 있다: 아노말라 쿠프레아(Anomala cuprea) 엔토모폭스바이러스; 아독소피에스 혼마이(Adoxophyes honmai) 엔토모폭스바이러스; 아독소피에스 혼마이 엔토모폭스바이러스 'L'; 암삭타 무레이(Amsacta moorei) 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 비에니스(Choristoneura biennis) 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나(Choristoneura fumiferana) 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 로사세아나(Choristoneura rosaceana) 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 엔토모폭스바이러스 'L'; 헬리오티스 아르미게라(Heliothis armigera) 엔토모폭스바이러스; 미팀나 세파라타(Mythimna separata) 엔토모폭스바이러스; 미팀나 세파라타 엔토모폭스바이러스 'L'; 미분류 베타엔토모폭스바이러스; 디아카스미모르파 론기카우다타(Diachasmimorpha longicaudata) 엔토모폭스바이러스; 멜라노플루스 산구이니페스 엔토모폭스바이러스 'O'; 아나크리디움 아에깁티움(Anacridium aegyptium) 엔토모폭스바이러스; 칼립타무스 이탈리쿠스(Calliptamus italicus) 엔토모폭스바이러스; 키로노무스 데코루스(Chironomus decorus) 엔토모폭스바이러스; 곰포세루스 시비리쿠스(Gomphocerus sibiricus) 엔토모폭스바이러스; 호모나 코페아리아(Homona coffearia) 엔토모폭스바이러스; 리네피테마 후밀레(Linepithema humile) 엔토모폭스바이러스 1; 오에달레우스 아시아티쿠스(Oedaleus asiaticus) 엔토모폭스바이러스; 또는 슈달레티아 세파라타(Pseudaletia separata) 엔토모폭스바이러스.
이리도바이러스과
바이러스
일부 구현예에서, IA는 이리도바이러스과 바이러스, 예를 들어 이리도바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 이리도바이러스과 바이러스일 수 있다: 티풀라 이리데센트 바이러스(Tipula iridescent virus); 무척추동물 이리데센트 바이러스 31; 아르마딜리디움 불가레(Armadillidium vulgare) 이리데센트 바이러스; 포필리아 자포니카(Popillia japonica) 이리데센트 바이러스; 포르셀리오 스카베르(Porcellio scaber) 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 6; 그릴루스 비마쿨라투스(Gryllus bimaculatus) 이리도바이러스; 미분류 이리도바이러스; 아세테스 에리트라에우스(Acetes erythraeus) 이리도바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 이리데센트 바이러스; 아르마딜리디움 데코룸(Armadillidium decorum) 이리데센트 바이러스; 바라문디 퍼치(Barramundi perch) 이리도바이러스; 블루길 개복치(Bluegill sunfish) 이리도바이러스; 일반 주둥치 이리도바이러스; 크림슨 스내퍼(Crimson snapper) 이리도바이러스; 데캅테루스 마크로소마(Decapterus macrosoma) 이리도바이러스; 가자 미누타(Gazza minuta) 이리도바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 16; 코스텔리트라 제알란디카(Costelytra zealandica) 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 2; 세리세스티스(Sericesthis) 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 23; 헤테로니쿠스 아라토르(Heteronychus arator) 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 24; 아피스 세라나(Apis cerana) 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 29; 테네브리오 몰리토르 이리데센트 바이러스; 이리도바이러스 바라문디/Quang Ninh/VNM/2008; 이리도바이러스 IV31; 일본 바다배스(Japanese sea bass) 이리도바이러스; 라고세팔루스 셀레라투스(Lagocephalus sceleratus) 이리도바이러스; 라테스 칼카리페르(Lates calcarifer) 이리도바이러스; 레이오그나투스 스플렌덴스(Leiognathus splendens) 이리도바이러스; 마블 고비(Marble goby) 이리도바이러스; 구형 배트피쉬(Orbiculate batfish) 이리도바이러스; 파라프리스티포마 트릴리네아툼(Parapristipoma trilineatum) 이리도바이러스; 퍼치(Perch) 이리도바이러스 603-2/중국; 폴리닥틸루스 섹타리우스(Polydactylus sextarius) 이리도바이러스; 포르셀리오 시쿨로시덴탈리스(Porcellio siculoccidentalis) 이리데센트 바이러스; 피랄타 루테올라(Pyrrhalta luteola) 이리데센트 바이러스; 라나 템포라리아(Rana temporaria) 영국 이리도바이러스 1; 라나 템포라리아 영국 이리도바이러스 2; 실버 씨브림(Silver sea bream) 이리도바이러스; 가물치(Snakehead) 이리도바이러스; 돌가자미(Stone flounder) 이리도바이러스 603-3/중국; 돌가자미 이리도바이러스 724/중국; 철갑상어(Sturgeon) 이리도바이러스; 시노두스 인디쿠스(Synodus indicus) 이리도바이러스; 또는 트리코니스쿠스 파노르미덴시스(Trichoniscus panormidensis) 이리데센트 바이러스.
누디바이러스과
바이러스
일부 구현예에서, IA는 누디바이러스과 바이러스, 예를 들어 알파누디바이러스, 베타누디바이러스, 또는 일부 지금까지 미분류된 누디바이러스과 바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 누디바이러스과 바이러스일 수 있다: 그릴루스 비마쿨라투스 누디바이러스; 오릭테스 리노세로스(Oryctes rhinoceros) 누디바이러스; 헬리오티스 제아(Heliothis zea) 누디바이러스; 헬리코베르파 제아 누디바이러스 2; 알로미리나 바이러스(Allomyrina virus); 드로소필라 이누빌라(Drosophila innubila) 누디바이러스; 드로소필라 누디바이러스 RLU-2011; 에스파르토 바이러스(Esparto virus); 호마루스 감마루스(Homarus gammarus) 누디바이러스; 칼리테아 바이러스(Kallithea virus); 마크로브라키움(Macrobrachium) 누디바이러스 CN-SL2011; 마우테른바흐 바이러스(Mauternbach virus); 닐라파르바타 루겐스(Nilaparvata lugens) 내인성 누디바이러스; 페나에우스 모노돈(Penaeus monodon) 누디바이러스; 티풀라 올레라세아(Tipula oleracea) 누디바이러스; 또는 토멜로소 바이러스(Tomelloso virus).
이플라바이러스과
바이러스
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 이플라바이러스과 바이러스일 수 있다: 안테라에아 페르니(Antheraea pernyi) 이플라바이러스; 브레비코리네 브라시카에 바이러스(Brevicoryne brassicae virus); 브레비코리네 브라시카에 바이러스-UK; 날개기형바이러스(Deformed wing virus); 카쿠고 바이러스(Kakugo virus); VDV-1/DWV 재조합; 디노캄푸스 코시넬라에 마비 바이러스(Dinocampus coccinellae paralysis virus); 엑트로피스 오블리쿠아 바이러스(Ectropis obliqua virus); 엑트로피스 오블리쿠아 피코르나 유사 바이러스; 감염성 무름병(flacherie) 바이러스; 감염성 무름병 바이러스 누에 단리물; 익소데스 홀로시클루스(Ixodes holocyclus) 이플라바이러스; 리구스 리네올라리스 바이러스(Lygus lineolaris virus) 1; 리만트리아 디스파르(Lymantria dispar) 이플라바이러스 1; 닐라파르바타 루겐스 꿀 바이러스 1; 페리나 누다 바이러스(Perina nuda virus); 삭브루드 바이러스(Sacbrood virus); 삭브루드 바이러스 CSBV-LN/중국/2009; 느린 꿀벌 마비 바이러스; 스포도프테라 엑시구아 이플라바이러스 1; 스포도프테라 엑시구아 이플라바이러스 2; 바로아 데스트룩토르 바이러스(Varroa destructor virus) 1; 미분류 이플라바이러스; ACT 벼룩 이플라바이러스; 아에데스 벡산스(Aedes vexans) 이플라바이러스; 아르미게레스(Armigere) 이플라바이러스; 박쥐 이플라바이러스; 꿀벌 이플라바이러스 1; 블랙베리 이플라바이러스 A; 블랙베리 이플라바이러스 B; 봄빅스 모리(Bombyx mori) 이플라바이러스; 브레베스(Breves) 이플라바이러스; 배추좀나방(Diamondback moth) 이플라바이러스; 포르미카 엑섹타 바이러스(Formica exsecta virus) 2; 하에마피살리스 플라바(Haemaphysalis flava) 이플라바이러스; 헬리코니우스 에라토(Heliconius erato) 이플라바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 이플라바이러스; 깔다구 이플라바이러스 90C0; 미니옵테루스 풀리기노수스(Miniopterus fuliginosus) 이플라바이러스; 모쿠 바이러스(Moku virus); 나소니아 비트리페니스(Nasonia vitripennis virus) 바이러스; 피리잘(Pirizal) 이플라바이러스; 프사모테틱스 알리에누스(Psammotettix alienus) 이플라바이러스 1; 론도니아(Rondonia) 이플라바이러스 1; 론도니아 이플라바이러스 2; 스카포이데우스 티타누스(Scaphoideus titanus) 이플라바이러스 1; 스카포이데우스 티타누스 이플라바이러스 2; VDV-1/DWV 재조합 4; 베스파 벨루티나(Vespa velutina) 모쿠 바이러스; 또는 자이스티쿠스 크리스타투스(Xysticus cristatus) 이플라바이러스.
바큘로바이러스과
바이러스
일부 구현예에서, IA는 바큘로바이러스과의 바이러스일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 알파바큘로바이러스, 베타바큘로바이러스, 델타바큘로바이러스, 감마바큘로바이러스 또는 지금까지 미분류된 바큘로바이러스과 바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 알파바큘로바이러스 바이러스일 수 있다: 아독소피에스 혼마이 핵다각체병바이러스(nucleopolyhedrovirus); 아그로티스 입실론(Agrotis ipsilon) 다중 핵다각체병바이러스; 아그로티스 세게툼(Agrotis segetum) 핵다각체병바이러스 A; 아그로티스 세게툼 핵다각체병바이러스 B; 안테라에아 페르니 핵다각체병바이러스; 안테라에아 프로일레이(Antheraea proylei) 핵다각체병바이러스; 필로사미아 신티아 리시니(Philosamia cynthia ricini) 핵다각체병바이러스 바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 다중 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 칼리포르니카(Autographa californica) 다중 핵다각체병바이러스; 아나그라파 팔시페라(Anagrapha falcifera) MNPV; 아우토그라파 칼리포르니카 핵다각체병바이러스; 갈레리아 멜로넬라 MNPV; 플루텔라 자일로스텔라(Plutella xylostella) 다중 핵다각체병바이러스; 라키플루시아(Rachiplusia) 누(nu) MNPV; 라키플루시아 오우(ou) MNPV; 봄빅스 모리 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나(Bombyx mandarina) 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스 S2; 봄빅스 모리 핵다각체병바이러스 K1; 부주라 수프레사리아(Buzura suppressaria) 핵다각체병바이러스; 카톱실리아 포모나(Catopsilia pomona) 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 DEF 다중 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 다중 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스(Choristoneura occidentalis) 알파바큘로바이러스; 코리스토네우라 무리나나(Choristoneura murinana) 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 칼시테스(Chrysodeixis chalcites) 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 칼시테스 SNPV TF1-A; 크리소데익시스 인클루덴스(Chrysodeixis includens) 핵다각체병바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 SNPV IE; 클라니스 빌리네아타(Clanis bilineata) 핵다각체병바이러스; 다시키라 푸디분다(Dasychira pudibunda) 핵다각체병바이러스; 엑트로피스 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 에피피아스 포스트비타나(Epiphyas postvittana) 핵다각체병바이러스; 유프록티스 슈도콘스페르사(Euproctis pseudoconspersa) 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 NPV NNg1; 헬리코베르파 아르미게라 NPV 균주 호주; 헬리코베르파 아르미게라 핵다각체병바이러스 G4; 헬리코베르파 아르미게라 SNPV; 헬리코베르파 SNPV AC53; 헬리코베르파 제아 단일 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카(Hemileuca) 종 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 종 핵다각체병바이러스; 히판트리아 쿠네아(Hyphantria cunea) 핵다각체병바이러스; 람브디나 피셀라리아(Lambdina fiscellaria) 핵다각체병바이러스; 레우카니아 세파라타(Leucania separata) 핵다각체병바이러스; 로노미아 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 로노미아 오블리쿠아 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 디스파르 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 자일리나(Lymantria xylina) 핵다각체병바이러스; 마메스트라 브라시카에(Mamestra brassicae) 다중 핵다각체병바이러스; 마메스트라 콘피구라타(Mamestra configurata) 핵다각체병바이러스 A; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스 B; 헬리코베르파 아르미게라 다중 핵다각체병바이러스; 마루카 비트라타(Maruca vitrata) 핵다각체병바이러스; 미팀나 우니푼크타(Mythimna unipuncta) 핵다각체병바이러스; 오페로프테라 브루마타(Operophtera brumata) 핵다각체병바이러스; 오르기아 류코스티그마(Orgyia leucostigma) 핵다각체병바이러스; 오르기아 슈도츄가타(Orgyia pseudotsugata) 다중 핵다각체병바이러스; 옥시플락스 오크라세아(Oxyplax ochracea) 핵다각체병바이러스; 페리고니아 루스카(Perigonia lusca) 핵다각체병바이러스; 페리고니아 루스카 단일 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑시구아 다중 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑시구아 핵다각체병바이러스(균주 US); 스포도프테라 프루기페르다 다중 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스(Spodoptera littoralis) 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리투라(Spodoptera litura) 핵다각체병바이러스; 수크라 주주바(Sucra jujuba) 핵다각체병바이러스; 티사노플루시아 오리칼세아(Thysanoplusia orichalcea) 핵다각체병바이러스; 트리코플루시아 니 단일 핵다각체병바이러스; 위세아나 시그타나(Wiseana signata) 핵다각체병바이러스; 미분류 알파바큘로바이러스; 아브락사스 그로술라리아타(Abraxas grossulariata) 핵다각체병바이러스; 악티아스 셀레네(Actias selene) 핵다각체병바이러스; 아독소피에스 오라나(Adoxophyes orana) 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 바닐라에(Agraulis vanillae) MNPV; 아그로티스 엑스클라마티오니스(Agrotis exclamationis) 핵다각체병바이러스; 아그로티스 입실론 다중 캡시드 핵다각체병바이러스; 아모르비아 쿠네아캅사(Amorbia cuneacapsa) 핵다각체병바이러스; 아모르비아 쿠네아나(Amorbia cuneana) 핵다각체병바이러스; 암펠로파가 루비기노사(Ampelophaga rubiginosa) 핵다각체병바이러스; 암삭타 알비스트리가(Amsacta albistriga) 핵다각체병바이러스; 아나그라파 팔시페라 다중 핵다각체병바이러스; 안테라에아 폴리페무스(Antheraea polyphemus) 핵다각체병바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 핵다각체병바이러스; 아포케이마 시네라리움(Apocheima cinerarium) 핵다각체병바이러스; 아포리아 크라타에기(Aporia crataegi) 핵다각체병바이러스; 아르킵스 세라시보라누스(Archips cerasivoranus) 핵다각체병바이러스; 아르킵스 로사누스(Archips rosanus) 핵다각체병바이러스; 아타쿠스 리시니(Attacus ricini) 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 빌로바(Autographa biloba) 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 감마 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 니그리시그나(Autographa nigrisigna) 핵다각체병바이러스; 보아르미아 비스토르타타(Boarmia bistortata) 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스; 부세올라 푸스카(Busseola fusca) 핵다각체병바이러스; 카트포실리아 포모나(Catposilia pomona) 핵다각체병바이러스; 세랍테릭스 그라미니스(Cerapteryx graminis) 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 디베르사나(Choristoneura diversana) 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 핵다각체병바이러스; 코리자그로티스 아욱실리아리스(Chorizagrotis auxiliaris) 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 인클루덴스 NPV; 콜로라디아 판도라(Coloradia pandora) 알파바큘로바이러스; 콜로라디아 판도라 핵다각체병바이러스; 콘딜로리자 베스티기알리스(Condylorrhiza vestigialis) MNPV; 콘딜로리자 베스티기알리스 다중 핵다각체병바이러스; 크립토플레비아 펠타스티카(Cryptophlebia peltastica) 핵다각체병바이러스; 시클로프라그마 운단스(Cyclophragma undans) 핵다각체병바이러스; 다시키라 플라기아타(Dasychira plagiata) 핵다각체병바이러스; 덴드롤리무스 키쿠키(Dendrolimus kikuchii) 핵다각체병바이러스; 디아파니아 풀베룰렌탈리스(Diaphania pulverulentalis) 핵다각체병바이러스; 디오네 주노(Dione juno) MNPV tmk1/ARG/2003; 디오네 주노 핵다각체병바이러스; 디르피아 페루비아누스(Dirphia peruvianus) 핵다각체병바이러스; 엑트로피스 그리세센스(Ectropis grisescens) 핵다각체병바이러스; 에피노티아 그라니탈리스(Epinotia granitalis) 핵다각체병바이러스; 유프록티스 디그라마(Euproctis digramma) 핵다각체병바이러스; 길피니아 헤르시니아에(Gilpinia hercyniae) 핵다각체병바이러스; 헬리코니우스 에라토 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아술타(Helicoverpa assulta) 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 겔로토포에온(Helicoverpa gelotopoeon) 단일 핵다각체병바이러스; 헬리오티스 펠티게라(Heliothis peltigera) SNPV; 헬리오티스 제아 핵다각체병바이러스; 헤메로캄파 베투스타(Hemerocampa vetusta) 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 알파바큘로바이러스; 히포시드라 인픽사리아(Hyposidra infixaria) NPV; 히포시드라 탈라카(Hyposidra talaca) NPV; 이라고이데스 파시아타(Iragoides fasciata) 핵다각체병바이러스; 주노니아 코에니아 핵다각체병바이러스; 류코마 살리시스(Leucoma salicis) 핵다각체병바이러스; 리만트리아 마투라(Lymantria mathura) 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 모나카(Lymantria monacha) 핵다각체병바이러스; 리만트리아 자일리나 핵다각체병바이러스 2; 말라코소마(Malacosoma) 알파바큘로바이러스; 말라코소마 아메리카눔(Malacosoma americanum) 핵다각체병바이러스; 말라코소마 칼리포르니쿰(Malacosoma californicum) 핵다각체병바이러스; 말라코소마 칼리포르니쿰 플루비알레(Malacosoma californicum pluviale) 핵다각체병바이러스; 말라코소마 디스트리아(Malacosoma disstria) 핵다각체병바이러스; 말라코소마 뉴스트리아(Malacosoma neustria) 핵다각체병바이러스; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스; 네오파시아(Neophasia) 알파바큘로바이러스; 네피티아 판타스마리아(Nepytia phantasmaria) 핵다각체병바이러스; 님팔리스 이오(Nymphalis io) 핵다각체병바이러스; 오크 자벌레(Oak looper) 알파바큘로바이러스; 오피우사 디스준겐스(Ophiusa disjungens) 핵다각체병바이러스; 오르기아 아나르토이데스(Orgyia anartoides) 핵다각체병바이러스; 오르기아 에리카에(Orgyia ericae) 핵다각체병바이러스; 오르기아 슈도츄가타 단일 캡시드 핵다각체병바이러스; 파놀리스 플라메아(Panolis flammea) 핵다각체병바이러스; 페리드로마(Peridroma) 알파바큘로바이러스; 페리드로마 마르가리토사(Peridroma margaritosa) 핵다각체병바이러스; 페리나 누다 핵다각체병바이러스; 프리가니디아 칼리포르니카(Phryganidia californica) 핵다각체병바이러스; 플루시아 아쿠타(Plusia acuta) 핵다각체병바이러스; 플루시아 오리칼세아(Plusia orichalcea) 핵다각체병바이러스; 플루텔라 마쿨리페니스(Plutella maculipennis) 핵다각체병바이러스; 슈달레티아 알파바큘로바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 핵다각체병바이러스; 프테롤로세라 암플리코르니스(Pterolocera amplicornis) 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누(Rachiplusia nu) 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누 단일 핵다각체병바이러스; 사미아 신티아(Samia cynthia) 핵다각체병바이러스; 스필라르크티아 오블리쿠아(Spilarctia obliqua) 핵다각체병바이러스; 스필로소마 오블리쿠아(Spilosoma obliqua) 핵다각체병바이러스; 스필로소마 파스마(Spilosoma phasma) 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 코스미오이데스(Spodoptera cosmioides) 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 에리다니아(Spodoptera eridania) 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑셈프타(Spodoptera exempta) 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 다중 캡시드 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리투라 MNPV; 스포도프테라 리투라 핵다각체병바이러스 II; 스포도프테라 테리콜라(Spodoptera terricola) 핵다각체병바이러스; 티네올라 비셀리엘라(Tineola bisselliella) 핵다각체병바이러스; 트로이데스 아에아쿠스(Troides aeacus) 핵다각체병바이러스; 위세아나 세르비나타(Wiseana cervinata) 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 종 핵다각체병바이러스; 말라코소마 종 알파바큘로바이러스; 말라코소마 종 핵다각체병바이러스; 네오파시아 종 알파바큘로바이러스; 또는 미확인 핵다각체병바이러스.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 베타바큘로바이러스 바이러스일 수 있다: 아독소피에스 오라나 과립병바이러스; 아그로티스 세게툼 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에(Artogeia rapae) 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에(Pieris brassicae) 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타(Clostera anachoreta) 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스(Clostera anastomosis) 과립병바이러스 A; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난(Clostera anastomosis granulovirus Henan); 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스(Cnaphalocrocis medinalis) 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타(Cryptophlebia leucotreta) 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마(Epinotia aporema) 과립병바이러스; 에리니스 엘로(Erinnyis ello) 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스(Harrisina brillians) 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에(Lacanobia oleracea) 과립병바이러스; 모시스 라티페스(Mocis latipes) 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A; 슈달라티아 우니푼크타(Pseudalatia unipuncta) 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라(Phthorimaea operculella) 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라(Plodia interpunctella) 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸(Xestia c-nigrum) 과립병바이러스; 아카에아 자나타(Achaea janata) 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나(Amelia pallorana) 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타(Andraca bipunctata) 과립병바이러스; 아우토그라파 감마 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라(Caloptilia theivora) 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스(Choristoneura viridis) 베타바큘로바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스; 크네파시아 론가나(Cnephasia longana) 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아(Estigmene acrea) 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르(Euxoa ochrogaster) 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아(Hoplodrina ambigua) 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아 과립병바이러스; 나타다 나라리아(Natada nararia) 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아(Nephelodes emmedonia) 과립병바이러스; 판데미스 리미타타(Pandemis limitata) 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라(Peridorma morpontora) 과립병바이러스; 피에리스 라파에(Pieris rapae) 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라(Plathypena scabra) 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스; 스코토그라마 트리폴리(Scotogramma trifolii) 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아(Spodoptera androgea) 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라(Tecia solanivora) 과립병바이러스; 또는 모시스 종 과립병바이러스.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 델타바큘로바이러스 바이러스일 수 있다: 쿨렉스 니그리팔푸스(Culex nigripalpus) 핵다각체병바이러스; 또는 쿨렉스 니그리팔푸스 NPV 플로리다/1997.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 감마바큘로바이러스 바이러스일 수 있다: 네오디프리온 레콘테이(Neodiprion lecontei) 핵다각체병바이러스; 네오디프리온 레콘테이 NPV(균주 캐나다); 네오디프리온 세르티페르(Neodiprion sertifer) 핵다각체병바이러스; 미분류 감마바큘로바이러스; 또는 네오디프리온 아비에티스(Neodiprion abietis) NPV.
일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 일부 지금까지 미분류된 바큘로바이러스과 바이러스일 수 있다: 아카에아 파베르(Achaea faber) 핵다각체병바이러스; 아에데스 솔리시탄스(Aedes sollicitans) 핵다각체병바이러스; 아글라이스 우르티카에(Aglais urticae) 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 바닐라에 핵다각체병바이러스; 아노미스 사불리페라(Anomis sabulifera) 핵다각체병바이러스; 안테라에아 야마마이(Antheraea yamamai) 핵다각체병바이러스; 안토필라 파브리시아나(Anthophila fabriciana) 과립병바이러스; 아로아 디스칼리스(Aroa discalis) 핵다각체병바이러스; 바큘로바이러스 페나에이(Baculovirus penaei); 카드라 카우텔라(Cadra cautella) 핵다각체병바이러스; 칼리옵시스 주노디(Chaliopsis junodi) 핵다각체병바이러스; 코테시아 마르기니벤트리스(Cotesia marginiventris) 바큘로바이러스; 시노사르가 오르나타(Cynosarga ornata) 핵다각체병바이러스; 다르나 나라리아(Darna nararia) 과립병바이러스; 다르나 트리마(Darna trima) 과립병바이러스; 에라니스 데폴리아리아(Erannis defoliaria) 핵다각체병바이러스; 유플렉시아 루시파라(Euplexia lucipara) 과립병바이러스; 유프록티스 크리소로에아(Euproctis chrysorrhoea) 핵다각체병바이러스; 유프록티스 시밀리스(Euproctis similis) 핵다각체병바이러스; 생식선 특이적 바이러스; 호모나 코페아리아 과립병바이러스; 히블라에아 푸에라(Hyblaea puera) 핵다각체병바이러스; 이다에아 세리아타(Idaea seriata) 핵다각체병바이러스; 주노니아 코에니아 과립병바이러스; 라시오캄파 쿠에르쿠스(Lasiocampa quercus) 핵다각체병바이러스; 레미라 임파릴리스(Lemyra imparilis) 핵다각체병바이러스; 마하세나 코르베티(Mahasena corbetti) 핵다각체병바이러스; 멜란크라 페르시카리아에(Melanchra persicariae) 과립병바이러스; 오페로프테라 브루세아타(Operophtera bruceata) 핵다각체병바이러스; 오르기아 안티쿠아(Orgyia antiqua) 핵다각체병바이러스; 오르기아 믹스타(Orgyia mixta) 핵다각체병바이러스; 파키트리나 필라르기리아(Pachytrina philargyria) 핵다각체병바이러스; 파레우카에테스 슈도인술라타(Pareuchaetes pseudoinsulata) 핵다각체병바이러스; 페나에우스 모노돈 핵다각체병바이러스; 팔레라 부세팔라(Phalera bucephala) 핵다각체병바이러스; 폴리고니아 c-알붐(Polygonia c-album) 핵다각체병바이러스; 사미아 리시니(Samia ricini) 핵다각체병바이러스; 스필로소마 루테아(Spilosoma lutea) 과립병바이러스; 스포도프테라 알불라(Spodoptera albula) 핵다각체병바이러스; 트라발라 비슈노우(Trabala vishnou) 핵다각체병바이러스; 우라노타에니아 사피리나(Uranotaenia sapphirina) 핵다각체병바이러스; 우르바누스 프로테우스(Urbanus proteus) 핵다각체병바이러스; 우테테이사 풀켈라(Utetheisa pulchella) 핵다각체병바이러스; 바네사 아탈란타(Vanessa atalanta) 핵다각체병바이러스; 바네사 카르두이(Vanessa cardui) 핵다각체병바이러스; 위세아나 세르비나타 과립병바이러스; 또는 바큘로바이러스과 종.
일부 구현예에서, IA는 바큘로바이러스과 바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 베타바큘로바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 아독소피에스 오라나 과립병바이러스; 아그로티스 세게툼 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 A; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마 과립병바이러스; 에리니스 엘로 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에 과립병바이러스; 모시스 라티페스 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A; 슈달라티아 우니푼크타 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸 과립병바이러스; 미분류 베타바큘로바이러스; 아카에아 자나타 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타 과립병바이러스; 아우토그라파 감마 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스 베타바큘로바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스; 크네파시아 론가나 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아 과립병바이러스; 나타다 나라리아 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아 과립병바이러스; 판데미스 리미타타 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라 과립병바이러스; 피에리스 라파에 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스; 스코토그라마 트리폴리 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라 과립병바이러스; 또는 모시스 종 과립병바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 시디아 포모넬라 과립병바이러스일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스일 수 있다.
시디아 포모넬라 과립병바이러스의 예시적인 완전 게놈의 NCBI 수탁번호는 NC_002816.1이며; 문헌[Lugue et al., The complete sequence of the Cydia pomonella granulovirus genome. J Gen Virol. 2001 Oct;82(Pt 10):2531-2547]을 또한 참조한다(상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용됨).
예시적인 곤충 바이러스, 곤충 바이러스 서열, 및 이를 제조하고 사용하는 방법 등은, "Insecticidal compositions and process for preparation thereof"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,560,909호; "Novel virus composition to protect agricultural commodities from insects"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,023,182호; "Recombinant insect virus with reduced capacity for host-to-host transmission in the environment and methods to produce said virus"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,130,074호; "Insect viruses and their uses in protecting plants"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,177,075호; "Production of adeno-associated virus in insect cells"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제7,271,002호; "Baculovirus for the control of insect pests"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,042,843호; "DNA sequence coding for a polypeptide which enhances virus infection of host insects"라는 발명의 명칭의 WIPO 공개공보 WO1997008197A1; 및 "Insect viruses, sequences, insecticidal compositions and methods"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제5,858,353호에 기재되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
IA: 박테리아 및 박테리아 독소
일부 구현예에서, IA는 곤충과 접촉할 때 살충 활성을 보유하는 박테리아일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 박테리아에서 단리된 펩타이드 또는 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 박테리아 독소일 수 있다.
포토랍두스 및/또는 이로부터의 독소
일부 구현예에서, IA는 제노랍두스(Xenorhabdus) 속 또는 포토랍두스 속에 속하는 박테리아에서 단리된 박테리아 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 포토랍두스 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 포토랍두스 독소일 수 있다: 포토랍두스 아쿠르스티(Photorhabdus akhurstii) 독소; 포토랍두스 아심비오티카(Photorhabdus asymbiotica) 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카(Photorhabdus asymbiotica subsp. asymbiotica) 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 ATCC 43949 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스(Photorhabdus australis) 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 DSM 17609 독소; 포토랍두스 보데이(Photorhabdus bodei) 독소; 포토랍두스 카리베아넨시스(Photorhabdus caribbeanensis) 독소; 포토랍두스 시네레아(Photorㅎhabdus cinerea) 독소; 포토랍두스 하이나넨시스(Photorhabdus hainanensis) 독소; 포토랍두스 헤테로랍디티스(Photorhabdus heterorhabditis) 독소; 포토랍두스 카야이(Photorhabdus kayaii) 독소; 포토랍두스 카니(Photorhabdus khanii) 독소; 포토랍두스 카니 NC19 독소; 포토랍두스 카니 아종 구아나주아텐시스(Photorhabdus khanii subsp. guanajuatensis) 독소; 포토랍두스 클레이니(Photorhabdus kleinii) 독소; 포토랍두스 라우몬디(Photorhabdus laumondii) 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 클라르케이(Photorhabdus laumondii subsp. clarkei) 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디(Photorhabdus laumondii subsp. laumondii) 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 TTO1 독소; 포토랍두스 루미네센스 독소; 포토랍두스 루미네센스 BA1 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII H75HRPL105 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII HiPL101 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스(Photorhabdus luminescens subsp. luminescens) 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 ATCC 29999 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 멕시카나(Photorhabdus luminescens subsp. mexicana) 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 소노렌시스(Photorhabdus luminescens subsp. sonorensis) 독소; 포토랍두스 남나오넨시스(Photorhabdus namnaonensis) 독소; 포토랍두스 노에니에푸텐시스(Photorhabdus noenieputensis) 독소; 포토랍두스 스타케브란드티(Photorhabdus stackebrandtii) 독소; 포토랍두스 타스마니엔시스(Photorhabdus tasmaniensis) 독소; 포토랍두스 템페라타(Photorhabdus temperata) 독소; 포토랍두스 템페라타 J3 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 포라메(Photorhabdus temperata subsp. phorame) 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타(Photorhabdus temperata subsp. temperata) 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 M1021 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 Meg1 독소; 포토랍두스 트라센시스(Photorhabdus thracensis) 독소; 미분류 포토랍두스 독소; 포토랍두스 종 독소; 포토랍두스 종 3014 독소; 포토랍두스 종 3240 독소; 포토랍두스 종 Az29 독소; 포토랍두스 종 BS21 독소; 포토랍두스 종 CbKj163 독소; 포토랍두스 종 CRCIA-P01 독소; 포토랍두스 종 ENY 독소; 포토랍두스 종 FL2122 독소; 포토랍두스 종 FL480 독소; 포토랍두스 종 FsIw96 독소; 포토랍두스 종 GDd233 독소; 포토랍두스 종 H3086 독소; 포토랍두스 종 H3107 독소; 포토랍두스 종 H3240 독소; 포토랍두스 종 HB301 독소; 포토랍두스 종 HB78 독소; 포토랍두스 종 HB89 독소; 포토랍두스 종 HIT 독소; 포토랍두스 종 HO1 독소; 포토랍두스 종 HUG-39 독소; 포토랍두스 종 IT 독소; 포토랍두스 종 JUN 독소; 포토랍두스 종 KcTs129 독소; 포토랍두스 종 KJ13.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ14.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ24.5 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ29.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ37.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ7.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ8.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.4 TH 독소; 포토랍두스 종 KMD74 독소; 포토랍두스 종 KOH 독소; 포토랍두스 종 MID10 독소; 포토랍두스 종 MOL 독소; 포토랍두스 종 MSW_058 독소; 포토랍두스 종 MSW_079 독소; 포토랍두스 종 NK2.1 TH 독소; 포토랍두스 종 NK2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 NnMt2h 독소; 포토랍두스 종 NP1 독소; 포토랍두스 종 OH10 독소; 포토랍두스 종 OnIr40 독소; 포토랍두스 종 OnKn2 독소; 포토랍두스 종 PB10.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB16.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB32.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB37.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB39.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB41.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB45.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB50.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB51.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB52.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB54.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB59.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB6.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB68.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB7.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB78.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.4 TH 독소; 포토랍두스 종 Pjun 독소; 포토랍두스 종 RW14-46 독소; 포토랍두스 종 S10-54 독소; 포토랍두스 종 S12-55 독소; 포토랍두스 종 S14-60 독소; 포토랍두스 종 S15-56 독소; 포토랍두스 종 S5P8-50 독소; 포토랍두스 종 S7-51 독소; 포토랍두스 종 S8-52 독소; 포토랍두스 종 S9-53 독소; 포토랍두스 종 SJ2 독소; 포토랍두스 종 SN259 독소; 포토랍두스 종 SP1.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP16.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP21.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP3.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP7.3 TH 독소; 포토랍두스 종 TyKb140 독소; 포토랍두스 종 UK76 독소; 포토랍두스 종 VMG 독소; 포토랍두스 종 WA21C 독소; 포토랍두스 종 WkSs43 독소; 포토랍두스 종 Wx13 독소; 포토랍두스 종 X4 독소; 포토랍두스 종 YNb90 독소; 및 포토랍두스 종 ZM 독소.
일부 구현예에서, IA는 포토랍두스 루미네센스 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 a"(Tca)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 c"(Tcc)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 d"(Tcd)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 TcaA 단백질(서열번호 616), TcaB 단백질(서열번호 617), TcaC 단백질(서열번호 618) 및 TcaZ 단백질(서열번호 619)을 포함하는 Tca일 수 있다.
예시적인 포토랍두스 루미네센스 독소 펩타이드, 뉴클레오타이드, 서열, 이를 제조하고 사용하는 방법은, "Mixing and matching TC proteins for pest control"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제7,491,698호; "Insecticidal toxins from Photorhabdus luminescens and nucleic acid sequences coding therefor"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,281,413호; "Toxin genes from the bacteria Xenorhabdus nematophilus and Photorhabdus luminescens"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,630,619호; "Insecticidal protein toxins from Photorhabdus"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제6,528,484호; "DNA sequences from tcd genomic region of Photorhabdus luminescens"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제7,777,100호; "DNA Sequences from Photorhabdus luminescens"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제7,161,062호; "Insecticidal protein toxins from Photorhabdus"라는 발명의 명칭의 미국 특허 출원 공개공보 제20030207806호; "Sequence of the Photorhabdus luminescens strain tt01 genome and uses"라는 발명의 명칭의 미국 특허 출원 공개공보 제20070020625 A1호; 및 "tcdB2 protein from Photorhabdus luminescens W-14"라는 발명의 명칭의 미국 특허 제7,268,275호에 기재되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
예르시니아 유기체 및 이로부터의 생성물
일부 구현예에서, IA는 예르시니아 속에 속하는 하나 이상의 유기체일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 예르시니아 속에 속하는 유기체에서 단리된 하나 이상의 펩타이드일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 종 중 하나 이상일 수 있다: 예르시니아 알도바에이브(Yersinia aldovaeyb), 예르시니아 알렉시시아에(Yersinia aleksiciae), 예르시니아 베르코비에리(Yersinia bercovieri), 예르시니아 카나리아에(Yersinia canariae), 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica), 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica subsp. enterocolitica), 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 팔레아르크티카(Yersinia enterocolitica subsp. palearctica), 예르시니아 엔토모파가, 예르시니아 프레데릭세니(Yersinia frederiksenii), 예르시니아 히베르니카(Yersinia hibernica), 예르시니아 인테르메디아, 예르시니아 크리스텐세니(Yersinia kristensenii), 예르시니아 크리스텐세니 아종 크리스텐세니(Yersinia kristensenii subsp. kristensenii), 예르시니아 크리스텐세니 아종 로케스테렌시스(Yersinia kristensenii subsp. rochesterensis), 예르시니아 마실리엔시스(Yersinia massiliensis), 예르시니아 몰라레티(Yersinia mollaretii), 예르시니아 누르미, 예르시니아 페카네니(Yersinia pekkanenii), 예르시니아 페스티스(Yersinia pestis), 예르시니아 페스티스 아종 페스티스(Yersinia pestis subsp. pestis), 예르시니아 페스티스 아종 메디에발리스(Yersinia pestis subsp. medievalis), 예르시니아 페스티스 아종 오리엔탈리스(Yersinia pestis subsp. orientalis), 예르시니아 슈도투베르쿨로시스(Yersinia pseudotuberculosis), 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 페스티스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 슈도투베르쿨로시스(Yersinia pseudotuberculosis subsp. pseudotuberculosis), 예르시니아 로데이(Yersinia rohdei), 예르시니아 루케리(Yersinia ruckeri), 예르시니아 시밀리스(Yersinia similis) 또는 예르시니아 와우테르시(Yersinia wautersii).
일부 구현예에서, IA는 하기 종 중 하나 이상에서 단리된 하나 이상의 펩타이드일 수 있다: 예르시니아 알도바에이브, 예르시니아 알렉시시아에, 예르시니아 베르코비에리, 예르시니아 카나리아에, 예르시니아 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 팔레아르크티카, 예르시니아 엔토모파가, 예르시니아 프레데릭세니, 예르시니아 히베르니카, 예르시니아 인테르메디아, 예르시니아 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 로케스테렌시스, 예르시니아 마실리엔시스, 예르시니아 몰라레티, 예르시니아 누르미, 예르시니아 페카네니, 예르시니아 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 메디에발리스, 예르시니아 페스티스 아종 오리엔탈리스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 페스티스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 로데이, 예르시니아 루케리, 예르시니아 시밀리스 또는 예르시니아 와우테르시.
일부 구현예에서, IA는 예르시니아 엔토모파가 또는 예르시니아 누르미일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 예르시니아 엔토모파가 또는 예르시니아 누르미에서 단리된 하나 이상의 펩타이드일 수 있다.
간략하게, 예르시니아 엔토모파가는 뉴질랜드 딱정벌레 유충(New Zealand grass grub)의 병든 유충에서 단리된 그람 음성, 막대형, 비-포자 형성 박테리아이다. 마찬가지로, 예르시니아 누르미 또한 변형된 분위기에서 포장된 구이용 영계에서 유래했지만 그람 음성, 막대형 균주이다. 문헌[Hurst et al., The main virulence determinant of Yersinia entomophaga MH96 is a broad-host-range toxin complex active against insects. J Bacteriol. 2011 Apr;193(8):1966-80]; 및 문헌[Landsberg et al., 3D structure of the Yersinia entomophaga toxin complex and implications for insecticidal activity. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011 Dec 20;108(51):20544-9] 참조.
일부 구현예에서, IA는 예르시니아 엔토모파가 박테리아 및/또는 이로부터의 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하나 이상의 예르시니아 누르미 박테리아 및/또는 이로부터의 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하나 이상의 예르시니아 엔토모파가 박테리아 및/또는 이로부터의 독소, 및 하나 이상의 예르시니아 누르미 박테리아 및/또는 이로부터의 독소일 수 있다.
예르시니아 및 예르시니아 독소 함유 혼합물을 제조하고 사용하는 예시적인 방법은 "COMBINATIONS OF YERSINIA ENTOMOPHAGA AND PESTICIDES OR OTHER SUBSTANCES"라는 발명의 명칭의 PCT 출원 WO2018175677A1(출원인: Novozymes Bioag A/S)에 개시되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
바실러스 투린기엔시스 유기체 및 이로부터의 생성물
"Bt"는 바실러스 투린기엔시스로 불리는 박테리아의 이니셜이다. Bt 박테리아는 다수의 곤충에 독성인 펩타이드 패밀리를 생성한다. Bt 독성 펩타이드는 2가지 주요 유형의 독소, 즉, 세포용해소(Cyt: cytolysin)와 결정 Bt 단백질(Cry)에 해당하는 부포자 결정질 단백질 내포물(통상적으로 결정으로 지칭됨)을 생성하는 능력으로 널리 공지되어 있다. 1980년대 초 최초 결정 단백질 유전자의 클로닝 및 시퀀싱 이후, 다수의 다른 유전자가 특징분석되었으며, 현재는 Crickmore 등의 문헌(1998)의 명명법에 따라 분류된다. 일반적으로, Cyt 단백질은 딱정벌레목(딱정벌레)과 쌍시목(파리)의 곤충 목에 대해 독성이고, Cry 단백질은 인시목(나방 및 나비)을 표적으로 한다. Cry 단백질은 중장(상피) 세포의 막에 있는 특정 수용체에 결합하여 해당 세포를 파열시킨다. Cry 단백질이 상피 세포에서 결합할 수 있는 특정 수용체를 찾을 수 없는 경우, 이는 독성이 아니다. Bt 균주는 Cyt 및 Cry 단백질의 상이한 보체를 가질 수 있기 때문에, 이들의 숙주 범위를 정의한다. 다수의 Cry 단백질을 인코딩하는 유전자가 식별되었다.
현재, 목 특이성에 기반하여 살충성 Bt 부포자 펩타이드의 4개의 주요 병원형(pathotype)이 존재한다: 인시목 특이적(CryI, 현재 Cry1), 딱정벌레목 특이적(CryIII, 현재 Cry3), 쌍시목 특이적(CryIV, 현재 Cry4, Cry 10, Cry11; 및 CytA, 현재 Cyt1A), 및 이중(인시목 및 쌍시목) 특이성이 있는 것으로 알려진 유일한 과인 CryII(현재 Cry2). 이제 목 교차(cross-order) 활성은 다수의 경우에서 명백하다.
명명법은 발산 정도에 기반하여 순위를 통합하는 고유한 명칭을 정기준표본(holotype) 서열에 부여하며, 1차(아라비아 숫자), 2차(대문자) 및 3차(소문자) 순위 사이의 경계는 대략 95%, 78% 및 45% 동일성을 나타낸다. 4번째 순위(또 다른 아라비아 숫자)는 동일하거나 약간만 상이한 서열을 갖는 정기준표본 독소 유전자의 독립적인 단리를 나타내는 데 사용된다. 현재, 명명법은 55개 cry 패밀리와 2개 cyt 패밀리로 그룹화되는 174개 정기준표본 서열을 구별한다(문헌[Crickmore, N., Zeigler, D.R., Schnepf, E., Van Rie, J., Lereclus, D., Daum, J, Bravo, A., Dean, D.H., B. thuringiensis toxin nomenclature]). 이러한 결정 단백질 및 이를 생산하는 유전자 중 임의의 것을 사용하여 본 발명에 적합한 Bt 관련 독소를 생산할 수 있다.
본 발명의 설명에는, 다른 박테리아에 의해 생산되는 고도로 관련된 결정 단백질의 패밀리가 또한 포함된다. 클로스트리디움 비페르멘탄스(Clostridium bifermentans) 유래의 Cry16 및 Cry17(Barloy 등의 문헌(1996, 1998)), 바실러스 포필리아에(Bacillus popilliae) 유래의 Cry 18(Zhang 등의 문헌(1997)), 파에니바실러스 렌티모르비스(Paenibacillus lentimorbis) 유래의 Cry43(Yokoyama 등의 문헌(2004)) 및 바실러스 스파에리쿠스에 의해 생산되는 이원 Cry48/Cry49(Jones 등의 문헌(2008)). 본원에 포함되는 S층 단백질(Pena 등의 문헌(2006))과 같은 다른 결정질 또는 분비된 살충 단백질은, 단일 아미노산 치환을 통해 변형된 것을 제외하고는, 유전적으로 변경된 결정 단백질이다(예를 들어, Lambert 등의 문헌(1996)). 이러한 유전자 중 임의의 것을 사용하여 본 발명에 적합한 Bt 관련 독소를 생산할 수 있다.
자연 발생 대립유전자 변이체는 하기 개략되는 폴리머라아제 연쇄 반응(PCR) 및 혼성화 기술과 같은 널리 공지된 분자 생물학 기술을 사용하여 식별될 수 있다. 변이체 뉴클레오타이드 서열은 또한, 예를 들어 부위 지향적 돌연변이유발을 사용하여 생성되었지만, 하기 논의되는 바와 같이 본 개시내용에 개시된 Bt 단백질을 여전히 인코딩하는 합성적으로 유도된 뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 본 개시내용에 포함되는 변이체 단백질은 천연 단백질의 목적하는 생물학적 활성을 보유한다는 점에서, 즉, 살충 활성을 유지한다는 점에서 생물학적으로 활성이다. "활성을 유지한다"는, 변이체가 천연 단백질의 살충 활성의 적어도 약 30%, 적어도 약 50%, 적어도 약 70% 또는 적어도 약 80%를 갖는 것으로 의도된다. 살충 활성을 측정하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Czapla and Lang (1990) J. Econ. Entomol. 83: 2480-2485]; 문헌[Andrews et al. (1988) Biochem. J. 252:199-206]; 문헌[Marrone et al. (1985) J. of Economic Entomology 78:290-293]; 및 미국 특허 제5,743,477호 참조(이들 참고문헌은 모두 그 전문이 본원에 참조로 인용되고, 번호로 식별된 모든 서열은 구체적으로 참조로 포함됨).
Bt 단백질 및 유전자 설명은 Bt 독소 및 해당 참고문헌을 포함하는 하기 표에 설명되어 있으며, 이들 각각의 참조문헌은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
CRIP 및 IA를 포함하는 신규한 혼합물, 제형 및/또는 조성물을 사용하여 해충, 예컨대 곤충을 방제, 사멸 및/또는 저해할 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 유기체일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스 아종은 하기 아종 중 하나일 수 있다: 아이자와이; 아이자와이/파시피쿠스(pacificus); 알레스티; 아마기엔시스(amagiensis); 안달로우시엔시스(andalousiensis); 아르겐티넨시스(argentinensis); 아스투리엔시스(asturiensis); 아조렌시스(azorensis); 발레아리카; 베를리네르(berliner); 볼리비아(bolivia); 브라실렌시스(brasilensis); 카메로운(cameroun); 카나덴시스(canadensis); 찬파이시스(chanpaisis); 키넨시스(chinensis); 콜메리(colmeri); 코레아넨시스(coreanensis); 다코타; 다름스타디엔시스(darmstadiensis); 덴드롤리무스(dendrolimus); 엔토모시두스(entomocidus); 엔토모시두스/서브톡시쿠스(subtoxicus); 피니티무스(finitimus); 푸쿠오카엔시스(fukuokaensis); 갈레키아에(galechiae); 갈레리아에(galleriae); 그라시오센시스(graciosensis); 구이얀기엔시스(guiyangiensis); 히고(higo); 후아존겐시스(huazhongensis); 이베리카(iberica); 인디아나(indiana); 이스라엘렌시스; 이스라엘렌시스/토키기엔시스(tochigiensis); 자포넨시스(japonensis); 제가테산(jegathesan); 진곤기엔시스(jinghongiensis); 케니아에(kenyae); 킴(kim); 쿠맘토엔시스(kumamtoensis); 쿠르스타키; 큐슈엔시스(kyushuensis); 리시스(leesis); 론드리나(londrina); 말라옌시스(malayensis); 메델린(medellin); 멕시카넨시스(mexicanensis); 모기(mogi); 몬테레이(monterrey); 모리소니(morrisoni); 무주(muju); 나바렌시스(navarrensis); 네오레오넨시스(neoleonensis); 니게리엔시스(nigeriensis); 노보시비르스크(novosibirsk); 오스트리니아에(ostriniae); 오스왈도크루지(oswaldocruzi); 파한기(pahangi); 파키스타니(pakistani); 팔마니올렌시스(palmanyolensis); 핀글루온시스(pingluonsis); 피레나이카(pirenaica); 폴로니엔시스(poloniensis); 폰디케리엔시스(pondicheriensis); 풀시엔시스(pulsiensis); 롱세니(rongseni); 로스킬디엔시스(roskildiensis); 샌디에고(san diego); 세오울렌시스(seoulensis); 샨돈기엔시스(shandongiensis); 실로(silo); 시넨시스(sinensis); 순케온(sooncheon); 소토(sotto); 소토/덴드롤리무스; 서브톡시쿠스; 수미요시엔시스(sumiyoshiensis); 실베스트리엔시스(sylvestriensis); 테네브리오니스; 타일란덴시스(thailandensis); 톰프소니(thompsoni); 투린기엔시스; 토키기엔시스; 토구치니(toguchini); 토호쿠엔시스(tohokuensis); 톨워르티(tolworthi); 토우마노피(toumanoffi); 바젠시스(vazensis); 라티슬라비엔시스(wratislaviensis); 우하넨시스(wuhanensis); 지아구안기엔시스(xiaguangiensis); 요수(yosoo); 윤나넨시스(yunnanensis); 자오돈겐시스(zhaodongensis); str. Al Hakam; 또는 콘쿠키안(konkukian).
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 또는 품종일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 바실러스 투린기엔시스 변종일 수 있다: 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3(Bacillus thuringiensis var. kunthalanags3); 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24(Bacillus thuringiensis var. kunthalaRX24); 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 바실러스 투린기엔시스 str. Al Hakam; 바실러스 투린기엔시스 T01-328; 바실러스 투린기엔시스 YBT-1518; 또는 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 혈청형일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 하기 군에서 선택되는 바실러스 투린기엔시스 혈청형일 수 있다: 바실러스 투린기엔시스 AKS-7; 바실러스 투린기엔시스 Bt18247; 바실러스 투린기엔시스 Bt18679; 바실러스 투린기엔시스 Bt407; 바실러스 투린기엔시스 DAR 81934; 바실러스 투린기엔시스 DB27; 바실러스 투린기엔시스 F14-1; 바실러스 투린기엔시스 FC1; 바실러스 투린기엔시스 FC10; 바실러스 투린기엔시스 FC2; 바실러스 투린기엔시스 FC6; 바실러스 투린기엔시스 FC7; 바실러스 투린기엔시스 FC8; 바실러스 투린기엔시스 FC9; 바실러스 투린기엔시스 HD-771; 바실러스 투린기엔시스 HD-789; 바실러스 투린기엔시스 HD1002; 바실러스 투린기엔시스 IBL 200; 바실러스 투린기엔시스 IBL 4222; 바실러스 투린기엔시스 JM-Mgvxx-63; 바실러스 투린기엔시스 LDC 391; 바실러스 투린기엔시스 LM1212; 바실러스 투린기엔시스 MC28; 바실러스 투린기엔시스 Sbt003; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 다코타; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 히고; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 이스라엘렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 킴; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿠르스타키; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 리시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 메델린; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 모기; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 무주; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 파한기; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 실로; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 순케온; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 소토; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 테네브리오니스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 요수; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 자오돈겐시스; 바실러스 투린기엔시스 str. Al Hakam; 바실러스 투린기엔시스 T01-328; 바실러스 투린기엔시스 YBT-1518; 및 바실러스 투린기엔시스 혈청형 콘쿠키안.
일부 바람직한 구현예에서, IA는 하기 유기체 중 하나일 수 있다: 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스, 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키 또는 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오넨시스.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스에서 단리된 단백질일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스, 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키 또는 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오넨시스에서 단리된 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 MTX2 독소, 예를 들어 리시니바실러스 스파에리쿠스(Lysinibacillus sphaericus)에서 단리된 MTX2 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 Bin 유사 독소, 예를 들어 리시니바실러스 스파에리쿠스에서 단리된 Bin 유사 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti) 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144 Bti 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk) 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 c바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 Btk 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt) 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176 Btt 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스에서 단리된 IA는 상업적으로 입수 가능한 제품에 포함되어 있을 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA를 포함하는 상업적으로 입수 가능한 제품은 Becker Microbial Products, Inc.의 AQUABAC XT®; VALENT® U.S.A. LLC Agricultural Products의 NOVODOR® FC; 및/또는 AEF Global Inc의 BioProtec PlusTM일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하나 이상의 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 세포일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 세포에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 및/또는 살충 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하나 이상의 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176 세포일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176 세포에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 및/또는 살충 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하나 이상의 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144 세포일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144 세포에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 및/또는 살충 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 성분으로 이루어진, AQUABAC XT®일 수 있다: 6% 내지 10%(약 8%) 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144 고형물, 포자 및 살충 독소(여기서 상기 살충 독소는 δ-내독소이고, 1,200 국제 독성 단위(International Toxic Unit)(ITU/mg)(48억 4천만 ITU/갤런 또는 12억 ITU/리터)에 해당함); 및 약 92% 기타/비활성 성분.
일부 구현예에서, IA는 10% 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176 발효 고형물 및 용해물(제품 1 g 당 15,000 렙티노타르사 단위(LTU: Leptinotarsa Unit)(제품 1 쿼트 당 1,630만 LTU에 해당함)의 효능을 가짐)과, 90% 기타/비활성 성분으로 이루어진 NOVODOR® FC(또는 유동성 농축물)일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 14.49% 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 발효 고형물, 포자 및 살충 독소(제품 1 mg 당 17,500 양배추 자벌레 단위(CLU: Cabbage Looper Unit)(제품 1 갤런 당 760억 CLU에 해당함)의 효능을 가짐)와, 85.51% 기타/비활성 성분으로 이루어진 BioProtec PlusTM일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 δ-내독소(예를 들어, 결정(Cry) 독소 및/또는 세포용해(Cyt) 독소); 식물생장 살충 단백질(Vip); 분비된 살충 단백질(Sip); 또는 Bin 유사 독소인 Bt 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 서열번호 412 내지 587 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Bt 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 서열번호 412 내지 461 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Cry 단백질일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 서열번호 462 내지 481 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Cyt 단백질일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 서열번호 482 내지 587 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Vip일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 Cry 단백질 중 하나 이상일 수 있다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1, 및/또는 Cry78Aa1.
일부 구현예에서, IA는 본원에 기재된 또는 표 7에 제시된 Cry 독소 중 임의의 것일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 하기 Cyt 단백질 중 하나 이상일 수 있다: Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및/또는 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, IA는 본원에 기재된 또는 표 8에 제시된 임의의 Cyt 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, IA는 Vip1, Vip2, Vip3 또는 Vip4 패밀리에 속하는 단백질일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 하기 Vip 단백질 중 하나 이상일 수 있다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및/또는 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, IA는 본원에 기재된 또는 표 9에 제시된 임의의 Vip 단백질일 수 있다.
CRIP와 IA 조합물
상기 언급된 CRIP 또는 IA 중 임의의 것을 사용하여 본 발명 혼합물 및/또는 조성물을 생성할 수 있으며, 여기서 상기 혼합물 및/또는 조성물은 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 다른 IA를 포함한다.
이러한 서열 또는 본원에 언급된 서열과 상동성을 갖는 언급된 서열의 상동 변이체가 본원에서 확인된 폴리펩타이드를 참조로 설명되고 본원에 포함되며, 여기서 모든 상동 서열은 본원에 개시된 서열 중 임의의 것 또는 참조로 포함된 임의의 서열과 하기 동일성% 중 적어도 임의의 것을 갖는다: 상기 언급된 서열에서 확인된 임의의 및 모든 서열, 및 본원에서 확인된 임의의 다른 서열(본 출원의 서열목록의 임의의 및 모든 서열 포함)과 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 또는 그 이상의 동일성, 또는 100% 동일성. 본원에 사용된 상동 또는 상동성이라는 용어가 50% 이상과 같은 수와 함께 사용되는 경우, 이는 2개의 펩타이드 사이의 동일성% 또는 유사성%를 의미한다. 상동 또는 상동성이 숫자% 없이 사용되는 경우, 이는 국소 독성 및 유사한 크기와 같은 공통 물리적 및 기능성 양태를 공유한다는 점에서 진화적 또는 발달적 양태에서 밀접하게 관련이 있는 2개의 펩타이드 서열을 나타낸다(즉, 동족체는 본원에 구체적으로 언급되거나 상기와 같이 본원에서 참조로 확인된 펩타이드의 100% 더 긴 길이 또는 50% 더 짧은 길이 내에 있음).
일부 구현예에서, 혼합물은 본원에 기재된 임의의 CRIP와 본원에 기재된 임의의 IA로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 혼합물은 하나 이상의 IA와 조합된 하나 이상의 CRIP를 포함할 수 있으며; 여기서 혼합물은 부형제를 추가로 포함한다.
CRIP와 IA 조합물
일부 구현예에서, 표 A에 제시된 CRIP 중 임의의 하나 이상은 표 B에 제시된 IA 중 하나 이상과 조합될 수 있다.
하기 표 A와 표 B는, 각각, 본 발명의 바람직한 CRIP와 IA를 나타낸다. 두 개의 표 모두 "그룹 번호" 및 "그룹 명칭"으로 제공되며; 이러한 지정은 주어진 CRIP 또는 IA가 속하는 범주를 식별한다. CRIP 그룹 번호에는 앞에 로마 숫자 "I"가 붙는다(예를 들어, I1, I2, I3 등). 살충 작용제(IA) 그룹 번호에는 앞에 로마 숫자 "II"가 붙는다(예를 들어, II2, II3, II3 등). 더 높은 수준의 특이성은 "CRIP 번호"와 "IA 번호"로 제공되며; 이러한 지정은 특정한 CRIP 또는 IA를 식별한다. CRIP 번호에는 앞에 "A"가 붙는다(예를 들어, A1, A2, A3 등). IA 번호에는 앞에 "B"가 붙는다(예를 들어, B1, B2, B3 등).
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 A에서 선택되는 하나 이상의 CRIP 또는 이들의 조합과, 표 B에서 선택되는 하나 이상의 살충 작용제(IA) 또는 이들의 조합을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 IA 그룹 II1; II2; II3; II4; II5; II6; II7; II8; II9; II10; II11; II12; II13; II14; II15; II16; II17; II18; II19; II20; II21; II22; II23; II24; II25; II26; II27; II28; II29; II30; II31; II32; II33; II34; II35; II36; II37; II38; II39; II40; II41; II42; II43; II44; II45 중 임의의 하나 이상 또는 이들의 조합과 조합된, CRIP 그룹 I1; I2; I3; I4; I5; I6; I7 중 어느 하나 또는 이들의 조합에서 선택되는 하나 이상의 CRIP를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 하기에서 선택되는 IA와 조합된, A1; A2; A3; A4; A5; A6; A7; A8; A9; A10; A11; A12; A13; A14; A15; A16; A17; A18; A19; A20; A21; A22; A23; A24; A25; A26; A27; A28; A29; A30; A31; A32; A33; A34; A35; A36; A37; A38; A39; A40; A41; A42; A43; A44; A45; A46; A47; A48; A49; A50; A51; A52; A53; A54; A55; A56; A57; A58; A59; A60; A61; A62; A63; A64; A65; A66; A67; A68; 또는 이들의 조합에서 선택되는 CRIP를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다: B1; B2; B3; B4; B5; B6; B7; B8; B9; B10; B11; B12; B13; B14; B15; B16; B17; B18; B19; B20; B21; B22; B23; B24; B25; B26; B27; B28; B29; B30; B31; B32; B33; B34; B35; B36; B37; B38; B39; B40; B41; B42; B43; B44; B45; B46; B47; B48; B49; B50; B51; B52; B53; B54; B55; B56; B57; B58; B59; B60; B61; B62; B63; B64; B65; B66; B67; B68; B69; B70; B71; B72; B73; B74; B75; B76; B77; B78; B79; B80; B81; B82; B83; B84; B85; B86; B87; B88; B89; B90; B91; B92; B93; B94; B95; B96; B97; B98; B99; B100; B101; B102; B103; B104; B105; B106; B107; B108; B109; B110; B111; B112; B113; B114; B115; B116; B117; B118; B119; B120; B121; B122; B123; B124; B125; B126; B127; B128; B129; B130; B131; B132; B133; B134; B135; B136; B137; B138; B139; B140; B141; B142; B143; B144; B145; B146; B147; B148; B149; B150; B151; B152; B153; B154; B155; B156; B157; B158; B159; B160; B161; B162; B163; B164; B165; B166; B167; B168; B169; B170; B171; B172; B173; B174; B175; B176; B177; B178; B179; B180; B181; B182; B183; B184; B185; B186; B187; B188; B189; B190; B191; B192; B193; B194; B195; B196; B197; B198; B199; B200; B201; B202; B203; B204; B205; B206; B207; B208; B209; B210; B211; B212; B213; B214; B215; B216; B217; B218; B219; B220; B221; B222; B223; B224; B225; B226; B227; B228; B229; B230; B231; B232; B233; B234; B235; B236; B237; B238; B239; B240; B241; B242; B243; B244; B245; B246; B247; B248; B249; B250; B251; B252; B253; B254; B255; B256; B257; B258; B259; B260; B261; B262; B263; B264; B265; B266; B267; B268; B269; B270; B271; B272; B273; B274; B275; B276; B277; B278; B279; B280; B281; B282; B283; B284; B285; B286; B287; B288; B289; B290; B291; B292; B293; B294; B295; B296; B297; B298; B299; B300; B301; B302; B303; B304; B305; B306; B307; B308; B309; B310; B311; B312; B313; B314; B315; B316; B317; B318; B319; B320; B321; B322; B323; B324; B325; B326; B327; B328; B329; B330; B331; B332; B333; B334; B335; B336; B337; B338; B339; B340; B341; B342; B343; B344; B345; B346; B347; B348; B349; B350; B351; B352; B353; B354; B355; B356; B357; B358; B359; B360; B361; B362; B363; B364; B365; B366; B367; B368; B369; B370; B371; B372; B373; B374; B375; B376; B377; B378; B379; B380; B381; B382; B383; B384; B385; B386; B387; B388; B389; B390; B391; B392; B393; B394; B395; B396; B397; B398; B399; B400; B401; B402; B403; B404; B405; B406; B407; B408; B409; B410; B411; B412; B413; B414; B415; B416; B417; B418; B419; B420; B421; B422; B423; B424; B425; B426; B427; B428; B429; B430; B431; B432; B433; B434; B435; B436; B437; B438; B439; B440; B441; B442; B443; B444; B445; B446; B447; B448; B449; B450; B451; B452; B453; B454; B455; B456; B457; B458; B459; B460; B461; B462; B463; B464; B465; B466; B467; B468; B469; B470; B471; B472; B473; B474; B475; B476; B477; B478; B479; 또는 이들의 조합.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A1을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A2를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A3을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A4를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A5를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A6을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A7을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A8을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A9를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A10을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A11을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A12를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A13을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A14를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A15를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A16을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A17을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A18을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A19를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A20을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A21을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A22를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A23을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A24를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A25를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A26을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A27을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A28을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A29를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A30을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A31을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A32를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A33을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 표 B의 B1 내지 B479로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 조합된, 표 A의 CRIP A34를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 A1; A2; A3; A4; A5; A6; A7; A8; A9; A10; A11; A12; A13; A14; A15; A16; A17; A18; A19; A20; A21; A22; A23; A24; A25; A26; A27; A28; A29; A30; A31; A32; A33; A34; A35; A36; A37; A38; A39; A40; A41; A42; A43; A44; A45; A46; A47; A48; A49; A50; A51; A52; A53; A54; A55; A56; A57; A58; A59; A60; A61; A62; A63; A64; A65; A66; A67; 또는 A68에서 선택되는 표 A의 CRIP를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있으며; 여기서 상기 CRIP는, 각각, 서열번호 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11; 12; 13; 14; 15; 49; 50; 51; 52; 53; 621; 622; 623; 624; 625; 626; 627; 628; 629; 630; 631; 632; 633; 634; 635; 636; 637; 638; 639; 640; 641; 642; 643; 644; 645; 646; 647; 648; 649; 650; 651; 652; 653; 654; 66; 88; 588; 44; 45; 46; 47; 60; 61; 62; 63; 64; 594; 또는 65에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일하거나, 적어도 55% 동일하거나, 적어도 60% 동일하거나, 적어도 65% 동일하거나, 적어도 70% 동일하거나, 적어도 75% 동일하거나, 적어도 80% 동일하거나, 적어도 81% 동일하거나, 적어도 82% 동일하거나, 적어도 83% 동일하거나, 적어도 84% 동일하거나, 적어도 85% 동일하거나, 적어도 86% 동일하거나, 적어도 87% 동일하거나, 적어도 88% 동일하거나, 적어도 89% 동일하거나, 적어도 90% 동일하거나, 적어도 91% 동일하거나, 적어도 92% 동일하거나, 적어도 93% 동일하거나, 적어도 94% 동일하거나, 적어도 95% 동일하거나, 적어도 96% 동일하거나, 적어도 97% 동일하거나, 적어도 98% 동일하거나, 적어도 99% 동일하거나, 적어도 99.5% 동일하거나, 적어도 99.6% 동일하거나, 적어도 99.7% 동일하거나, 적어도 99.8% 동일하거나, 적어도 99.9% 동일하거나 100% 동일하다.
일부 구현예에서, 본 발명의 혼합물은 CRIP와 IA를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있으며; 여기서 CRIP 펩타이드는 서열번호 192 내지 370 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 거미 펩타이드; 서열번호 60 내지 64, 192 내지 370 및 594중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, κ-ACTX-Hv1a, κ+2-ACTX-Hv1a, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω+2-ACTX-Hv1a); 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a; 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 서열번호 66, 88 내지 191 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 전갈 펩타이드; 서열번호 371 내지 411 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 말미잘 펩타이드; 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열을 갖는 아네모니아 비리디스 유래 Av3 폴리펩타이드; 서열번호 45 내지 47 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 또는 코노톡신과 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있고; IA는 표 B에 열거된 IA이며, 여기서 IA는 B1; B2; B3; B4; B5; B6; B7; B8; B9; B10; B11; B12; B13; B14; B15; B16; B17; B18; B19; B20; B21; B22; B23; B24; B25; B26; B27; B28; B29; B30; B31; B32; B33; B34; B35; B36; B37; B38; B39; B40; B41; B42; B43; B44; B45; B46; B47; B48; B49; B50; B51; B52; B53; B54; B55; B56; B57; B58; B59; B60; B61; B62; B63; B64; B65; B66; B67; B68; B69; B70; B71; B72; B73; B74; B75; B76; B77; B78; B79; B80; B81; B82; B83; B84; B85; B86; B87; B88; B89; B90; B91; B92; B93; B94; B95; B96; B97; B98; B99; B100; B101; B102; B103; B104; B105; B106; B107; B108; B109; B110; B111; B112; B113; B114; B115; B116; B117; B118; B119; B120; B121; B122; B123; B124; B125; B126; B127; B128; B129; B130; B131; B132; B133; B134; B135; B136; B137; B138; B139; B140; B141; B142; B143; B144; B145; B146; B147; B148; B149; B150; B151; B152; B153; B154; B155; B156; B157; B158; B159; B160; B161; B162; B163; B164; B165; B166; B167; B168; B169; B170; B171; B172; B173; B174; B175; B176; B177; B178; B179; B180; B181; B182; B183; B184; B185; B186; B187; B188; B189; B190; B191; B192; B193; B194; B195; B196; B197; B198; B199; B200; B201; B202; B203; B204; B205; B206; B207; B208; B209; B210; B211; B212; B213; B214; B215; B216; B217; B218; B219; B220; B221; B222; B223; B224; B225; B226; B227; B228; B229; B230; B231; B232; B233; B234; B235; B236; B237; B238; B239; B240; B241; B242; B243; B244; B245; B246; B247; B248; B249; B250; B251; B252; B253; B254; B255; B256; B257; B258; B259; B260; B261; B262; B263; B264; B265; B266; B267; B268; B269; B270; B271; B272; B273; B274; B275; B276; B277; B278; B279; B280; B281; B282; B283; B284; B285; B286; B287; B288; B289; B290; B291; B292; B293; B294; B295; B296; B297; B298; B299; B300; B301; B302; B303; B304; B305; B306; B307; B308; B309; B310; B311; B312; B313; B314; B315; B316; B317; B318; B319; B320; B321; B322; B323; B324; B325; B326; B327; B328; B329; B330; B331; B332; B333; B334; B335; B336; B337; B338; B339; B340; B341; B342; B343; B344; B345; B346; B347; B348; B349; B350; B351; B352; B353; B354; B355; B356; B357; B358; B359; B360; B361; B362; B363; B364; B365; B366; B367; B368; B369; B370; B371; B372; B373; B374; B375; B376; B377; B378; B379; B380; B381; B382; B383; B384; B385; B386; B387; B388; B389; B390; B391; B392; B393; B394; B395; B396; B397; B398; B399; B400; B401; B402; B403; B404; B405; B406; B407; B408; B409; B410; B411; B412; B413; B414; B415; B416; B417; B418; B419; B420; B421; B422; B423; B424; B425; B426; B427; B428; B429; B430; B431; B432; B433; B434; B435; B436; B437; B438; B439; B440; B441; B442; B443; B444; B445; B446; B447; B448; B449; B450; B451; B452; B453; B454; B455; B456; B457; B458; B459; B460; B461; B462; B463; B464; B465; B466; B467; B468; B469; B470; B471; B472; B473; B474; B475; B476; B477; B478; B479; 또는 이들의 조합이다.
일부 구현예에서, CRIP 대 IA의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 혼합물 중 CRIP와 IA의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(혼합물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 CRIP와 하나 이상의 IA를 포함하는 전술한 혼합물, 조성물 또는 제형 중 임의의 것은, 부형제를 추가로 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있다.
하나 이상의 CRIP와 하나 이상의 IA를 포함하는 전술한 혼합물 또는 조성물 중 임의의 것은, 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. CRIP 대 IA의 비는 표적화되는 곤충 해충과 사용자의 필요에 따라 달라질 것이다.
나아가, 하나 이상의 CRIP와 하나 이상의 IA를 포함하는 전술한 혼합물 또는 조성물 중 임의의 것은, 기타 화합물과 동시에 또는 연속적으로, 처리되는 작물 영역 또는 식물에 적용될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 기타 화합물은 비료, 제초제, 동결보호제, 계면활성제, 세제, 살충 비누, 휴면 오일(dormant oil), 중합체, 및/또는 제형의 단일 적용 후 표적 영역의 장기간 투여를 가능하게 하는 지효성 또는 생분해성 담체 제형일 수 있다. 기타 화합물은 또한, 목적하는 경우, 제형 분야에서 통상적으로 이용되는 추가의 농업적으로 허용 가능한 담체, 계면활성제 또는 적용 촉진성 아쥬반트와 함께인, 선택적 제초제, 화학적 살충제, 살바이러스제, 살미생물제, 살아마바제, 농약, 살진균제, 살세균제, 살선충제, 살연체동물제 또는 이러한 제제 중 몇 가지의 혼합물일 수 있다. 일부 구현예에서, 적합한 담체와 아쥬반트는 고체 또는 액체일 수 있으며, 제형화 기술에 통상적으로 이용되는 물질, 예를 들어 천연 또는 재생 광물질, 용매, 분산제, 습윤제, 점착제, 결합제 또는 비료에 해당할 수 있다. 마찬가지로, 전술한 혼합물, 조성물 또는 제형 중 임의의 것은 살충 제형의 표적 해충에 의해 섭식 또는 소화되도록 식용 "미끼"로 준비하거나 해충 "덫"으로 만들 수 있다.
조성물 및 제형
본원에 사용된 "조성물"과 "제형"이라는 용어는 상호 교환적으로 사용된다.
% v/v; % w/w; 및 % w/v
본원에 사용된 "v/v" 또는 "% v/v" 또는 "부피 당 부피"는 용액의 부피 농도를 나타낸다("v/v"는 부피 당 부피를 나타냄). 본원에서, v/v는 용액의 구성요소가 모두 액체인 경우에 사용될 수 있다. 예를 들어, 성분 X 50 mL가 물 50 mL로 희석되는 경우, 총 부피 100 mL 중에 성분 X가 50 mL 존재할 것이기 때문에; 이는 "성분 X 50% v/v"로 표시될 수 있다. 부피 당 부피%(% v/v)는 하기와 같이 계산된다: (용질 부피(mL)/용액 부피(100 mL)); 예를 들어, % v/v = 용질의 mL/용액 100 mL.
본원에 사용된, "w/w" 또는 "% w/w" 또는 "중량 당 중량" 또는 "wt/wt" 또는 "% wt/wt"는 제형 또는 용액의 중량 농도, 즉, 중량 중 중량%를 나타낸다("w/w"는 중량 당 중량을 나타냄). 본원에서, w/w는 용액 또는 혼합물 100 g 중 구성성분의 그램(g) 수를 나타낸다. 예를 들어, 성분 X 30 g과 물 70 g으로 이루어진 혼합물은 "성분 X 30% w/w"로 표시될 수 있다. 중량 당 중량%(% w/w)는 하기와 같이 계산된다: (용질 중량(g)/용액 중량(g)) x 100; 또는 (용질 질량(g)/용액 질량(g)) x 100.
본원에 사용된, "w/v" 또는 "% w/v" 또는 "부피 당 중량"은 용액의 질량 농도, 즉, 부피 중 중량%를 나타낸다("w/v"는 부피 당 중량을 나타냄). 본원에서, w/v는 용액 100 mL 중 구성성분의 그램(g) 수를 나타낸다. 예를 들어, 성분 X 1 g이 총 부피 100 mL를 만드는 데 사용되는 경우, "성분 X 1% w/v 용액"이 만들어진다. 부피 당 중량%(% w/v)는 하기와 같이 계산된다: (용질 질량(g)/용액 부피(mL)) x 100.
(1) CRIP, CRIP-살충 단백질, 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 이들의 조합과, (2) 하나 이상의 살충 작용제, 예를 들어 농화학적 조성물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진 조성물은, 비제한적으로, 에어로졸 및/또는 에어로졸화된 제품, 예를 들어 스프레이, 훈증제, 분말, 분진 및/또는 가스; 종자 드레싱; 경구 제제(예를 들어, 곤충 먹이 등); TVP, TVP-살충 단백질 및/또는 TVP ORF를 (일시적으로 및/또는 안정적으로) 발현 및/또는 생산하는 유전자이식 유기체, 예를 들어 식물 또는 동물을 포함할 수 있다.
조성물은 분말, 분진, 펠릿, 과립, 스프레이, 에멀젼, 콜로이드, 용액 등으로 제형화될 수 있으며, 폴리펩타이드를 포함하는 세포 배양물의 건조, 동결건조, 균질화, 추출, 여과, 원심분리, 침강 또는 농축과 같은 통상적인 수단을 통해 제조될 수 있다. 적어도 하나의 이러한 살충 폴리펩타이드를 함유하는 모든 이러한 조성물에, 폴리펩타이드는 약 1 중량% 내지 약 99 중량%의 농도로 존재할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 살충제 조성물은 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을, 목적하는 농업적으로 허용 가능한 담체와 제형화하는 방식으로 제조될 수 있다. 조성물은 투여 전 동결건조, 동결-건조, 건조와 같은 적절한 수단으로, 또는 수성 담체, 배지 또는 적합한 희석제, 예컨대 염수 및/또는 기타 완충액 중에 제형화될 수 있다. 일부 구현예에서, 제형화된 조성물은 분진 또는 과립형 물질, 또는 오일(식물성 또는 광물성) 중 현탁액, 또는 물 또는 오일/물 에멀젼, 또는 수화제(wettable powder) 형태이거나, 농업적 적용에 적합한 임의의 다른 담체 물질과 조합된 형태일 수 있다. 적합한 농업용 담체는 고체 또는 액체일 수 있으며, 이는 당업계에 널리 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 제형은 하나 이상의 고체 또는 액체 아쥬반트와 혼합되고, 예를 들어 통상적인 제형 기술을 사용하여 살충 조성물을 적합한 아쥬반트와 함께 균질하게 혼합, 블렌딩 및/또는 분쇄하는 다양한 수단을 통해 제조될 수 있다. 적합한 제형 및 적용 방법은 미국 특허 제6,468,523호에 기재되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 조성물은 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 살충 작용제; 및 부형제를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조성물은 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 살충 작용제; 및 부형제를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조성물은 하기를 포함하거나, 본질적으로 하기로 이루어지거나 또는 하기로 이루어지는다: (1) CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 하나 이상의 살충 작용제; 및 (3) 부형제.
약제학적으로 허용 가능한 염
본원에 사용된 "약제학적으로 허용 가능한 염"과 "농업적으로 허용 가능한 염"이라는 용어는 동의어이다. 일부 구현예에서, 적용 가능한 경우, 본원에 기재된 CRIP, CRIP-살충 단백질 및/또는 살충 작용제의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물, 용매화물, 결정 형태 및 개별 이성질체, 거울상이성질체, 호변이성질체, 부분입체이성질체 및 전구약물이 이용될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 약제학적으로 허용 가능한 염은 모 화합물의 목적하는 약리학적 활성을 보유한다. 이러한 염에는 하기가 포함된다: 무기산을 이용하여 형성된 산 부가 염; 유기산을 이용하여 이용된 산 부가 염; 또는 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어 알칼리 금속 이온, 알루미늄 이온으로 대체되거나; 에탄올아민 등과 같은 유기 염기와 배위하는 경우 형성되는 염.
일부 구현예에서, 약제학적으로 허용 가능한 염에는 통상적인 독성 또는 비독성 염이 포함된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 통상적인 비독성 염에는 푸마레이트, 포스페이트, 시트레이트, 클로르히드레이트 등과 같은 것들이 포함된다. 일부 구현예에서, 본 발명의 약제학적으로 허용 가능한 염은 통상적인 화학적 방법을 통해 모 화합물로부터 합성될 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 염은 이러한 화합물의 유리 산 또는 염기 형태를 화학량론적 양의 적절한 염기 또는 산과 물 또는 유기 용매, 또는 이 둘의 혼합물 중에서 반응시키는 방식으로 제조될 수 있다. 일부 구현예에서, 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴과 같은 비수성 매질이 바람직하다. 적합한 염의 목록은 문헌[Remington's pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418]에서 확인할 수 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 하기 중 하나일 수 있다: 히드로클로라이드; 소듐; 설페이트; 아세테이트; 포스페이트 또는 디포스페이트; 클로라이드; 포타슘; 말레에이트; 칼슘; 시트레이트; 메실레이트; 니트레이트; 타르타레이트; 알루미늄; 또는 글루코네이트.
일부 구현예에서, 염을 형성하는 데 사용될 수 있는 약제학적으로 허용 가능한 산의 목록은 하기일 수 있다: 글리콜산; 히푸르산; 브롬화수소산; 염산; 이소부티르산; 락트산(DL); 락토비온산; 라우르산; 말레산; 말산(- L); 말론산; 만델산(DL); 메탄설폰산; 나프탈렌-1,5-디설폰산; 나프탈렌-2-설폰산; 니코틴산; 질산; 올레산; 옥살산; 팔미트산; 파모산; 인산; 프로피온산; 피로글루탐산(- L); 살리실산; 세바스산; 스테아르산; 석신산; 황산; 타르타르산(+ L); 티오시안산; 톨루엔설폰산(p); 운데실렌산; 1-히드록시-2-나프토산; 2,2-디클로로아세트산; 2-히드록시에탄설폰산; 2-옥소글루타르산; 4-아세트아미도벤조산; 4-아미노살리실산; 아세트산; 아디프산; 아스코르브산(L); 아스파르트산(L); 벤젠설폰산; 벤조산; 캄포르산(+); 캄포르-10-설폰산(+); 카프르산(데칸산); 카프로산(헥산산); 카프릴산(옥탄산); 탄산; 신남산; 시트르산;' 시클람산; 도데실황산; 에탄-1,2-디설폰산; 에탄설폰산; 포름산; 푸마르산; 갈락타르산; 겐티스산; 글루코헵톤산(D); 글루콘산(D); 글루쿠론산(D); 글루탐산; 글루타르산; 또는 글리세로인산.
일부 구현예에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 임의의 유기 또는 무기 부가 염일 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 염은 유리산으로 무기산과 유기산을 사용할 수 있다. 무기산은 염산, 브롬산, 질산, 황산, 과염소산, 인산 등일 수 있다. 유기산은 시트르산, 아세트산, 락트산, 말레산, 푸마르산, 글루콘산, 메탄설폰산, 글루콘산, 석신산, 타르타르산, 갈락투론산, 엠본산(embonic acid), 글루탐산, 아스파르트산, 옥살산, (D) 또는 (L) 말산, 말레산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 살리실산, 시트르산, 벤조산, 말론산 등일 수 있다.
일부 구현예에서, 염은 알칼리 금속 염(소듐 염, 포타슘 염 등)과 알칼리 토금속 염(칼슘 염, 마그네슘 염 등)을 포함한다. 예를 들어, 산 부가 염은 아세테이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 바이카르보네이트/카르보네이트, 바이설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 에디실레이트, 에실레이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 히벤제이트, 히드로클로라이드/클로라이드, 히드로브로마이드/브로마이드, 히드로요오다이드/요오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프탈레이트, 2-납실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/히드로겐 포스페이트/디히드로겐 포스페이트, 사카레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트리플루오로아세테이트, 알루미늄, 아르기닌, 벤자틴, 칼슘, 콜린, 디에틸아민, 디올라민, 글리신, 리신, 마그네슘, 메글루민, 올라민, 포타슘, 소듐, 트로메타민, 아연 염 등을 포함할 수 있으며, 그 중에서, 히드로클로라이드 또는 트리플루오로아세테이트가 사용될 수 있다.
또 다른 구현예에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 아세트산, 프로피온산, 부티르산, 포름산, 트리플루오로아세트산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 스테아르산, 석신산, 에틸석신산, 락토비온산, 글루콘산, 글루코헵톤산, 벤조산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 2-히드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산, 라우릴황산, 말산, 아스파르트산, 글루탐산, 아디프산, 시스테인, N-아세틸시스테인, 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산, 요오드화수소산, 니코틴산, 옥살산, 피크르산, 티오시안산, 운데칸산, 폴리아크릴레이트 또는 카르복시비닐 중합체와 같은 산을 이용한 염일 수 있다.
일부 구현예에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 무기 또는 유기 염기로부터 제조될 수 있다. 무기 염기에서 유도된 염에는, 비제한적으로, 소듐, 포타슘, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 2가 철, 아연, 구리, 2가 망간, 알루미늄, 3가 철, 3가 망간 염 등이 포함된다. 바람직한 무기 염은 암모늄, 소듐, 포타슘, 칼슘 및 마그네슘 염이다. 유기 염기에서 유도된 염에는, 비제한적으로, 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 에탄올아민, 2-디메틸아미노에탄올, 트로메타민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌디아민, 글루코사민, N-알킬글루카민, 테오브로민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘 등을 포함하는, 1차, 2차 및 3차 아민, 자연 발생 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 및 고리형 아민의 염이 포함된다. 바람직한 유기 염기는 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 피페리딘, 트로메타민 및 콜린이다.
일부 구현예에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 타당한 의학적 판단의 범위 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등 없이 인간 및 하등 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하며, 합리적인 이익/위험 비율에 상응하는 염을 나타낸다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 당업계에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, S. M. Berge 등은 문헌[J. pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977)]에 약제학적으로 허용 가능한 염을 상세하게 설명하였으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 본 발명의 염은 본 발명의 화합물의 최종 단리 및 정제 동안 그 자리에서, 또는 별도로 유리 염기 관능기를 적합한 유기산과 반응시키는 방식으로 제조될 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 비독성 산 부가 염의 예는, 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산 및 과염소산과 같은 무기산, 또는 아세트산, 옥살산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 석신산 또는 말론산과 같은 유기산을 이용하여, 또는 이온 교환과 같은 당업계에서 사용되는 다른 방법을 사용하여 형성된 아미노기의 염이다. 다른 약제학적으로 허용 가능한 염에는, 아디페이트, 알기네이트, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이설페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르설포네이트, 시트레이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글리세로포스페이트, 글루코네이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 요오드화수소, 2-히드록시-에탄설포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 설페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 석시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔설포네이트, 운데카노에이트, 발레레이트 염 등이 포함된다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염에는 소듐, 리튬, 포타슘, 칼슘, 마그네슘 등이 포함된다. 추가의 약제학적으로 허용 가능한 염에는, 적절한 경우, 비독성 암모늄, 4차 암모늄, 및 할라이드, 히드록시드, 카르복실레이트, 설페이트, 포스페이트, 니트레이트, 저급 알킬 설포네이트 및 아릴 설포네이트와 같은 반대이온을 사용하여 형성된 아민 양이온이 포함된다.
약제학적으로 허용 가능한 염에 대한 예시적인 설명은 문헌[P. H. Stahl and C. G. Wermuth, (editors), Handbook of pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, John Wiley & Sons, Aug 23, (2002)]에 제공되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
분무 가능한 조성물
본 발명의 스프레이 제품의 예는 농업용 현장 분무 가능한 제형과, 주거 또는 상업용 공간의 내부 공간에 사용하기 위한 실내 스프레이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와, B1 내지 B479 중 하나 이상의 살충 작용제의 조합물을 포함하는 잔류 스프레이 또는 공간 스프레이를 사용하여 실내 공간에서 곤충 해충을 감소시키거나 제거할 수 있다.
실내 표면 분무(SSI)는 벽, 창문, 바닥 및 천장과 같이 매개체가 존재하는 실내 표면에 가변적인 분무 가능한 부피의 살충제를 적용하는 기술이다. 가변적인 분무 가능한 부피의 주요 목표는 곤충 해충(예를 들어, 파리, 벼룩, 진드기 또는 모기 매개체)의 수명을 단축시켜, 질환 전파를 감소시키거나 방해하는 것이다. 이차적인 영향은 처리 영역 내 곤충 해충의 밀도를 감소시키는 것이다. SSI는 라임병(Lyme disease), 살모넬라, 치쿤군야 바이러스, 지카 바이러스 및 말라리아와 곤충 해충 매개 질환을 방제하는 방법에 사용될 수 있으며, 리슈만편모충증 및 샤가스병과 같이 곤충 매개체에 의해 운반되는 기생충의 관리에도 사용될 수 있다. 지카 바이러스, 치쿤군야 바이러스 및 말라리아를 보유하는 다수의 모기 매개체는 혈액을 섭취한 후 집안에 머무르는 인간과 관계가 있는 모기 매개체를 포함한다. 이러한 모기는 (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합물을 포함하는 분무 가능한 조성물을 이용한 실내 표면 분무(SSI)를 통한 방제에 특히 취약하다. 명칭에서 알 수 있듯이, SSI는 잔류 살충제가 있는 집안의 벽과 다른 표면 상에 조성물을 적용하는 것을 포함한다.
하나의 구현예에서, (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 조성물은, 이러한 표면과 접촉하게 되는 곤충 해충을 녹다운시킬 것이다. SSI는 사람들이 모기에 물리는 것을 직접적으로 방지하지 못한다. 오히려, 이는 통상적으로 피를 먹은 후의 곤충 해충이 분무된 표면 상에 머물게 되는 경우에 이를 방제한다. 따라서, SSI는 다른 사람에게 감염이 전파되는 것을 방지한다. 효과적이기 위해서, SSI는 해당 영역에 매우 높은 비율로 적용되어야 한다(통상적으로 40% 내지 80% 초과). 따라서, 양호한 잔류 효능과 허용 가능한 냄새를 갖는 본 발명에 따른 스프레이는, 통합된 곤충 해충 매개체 관리 또는 방제 용액의 구성 요소로서 특히 적합하다.
활성 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제가 페인트로 벽 또는 천장과 같은 주거지의 표면에 결합되어야 하는 SSI와 대조적으로, 예를 들어 본 발명의 공간 스프레이 제품은 주어진 기간 동안 일정 부피의 공기를 통해 분포되도록 다수의 작은 살충 액적 생성에 의존한다. 이러한 액적이 표적 곤충 해충에 영향을 미치는 경우, 이는 곤충 해충을 방제하기에 효과적인 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제의 녹다운 유효 용량을 전달한다. 공간 스프레이를 생성하는 전통적인 방법에는, 연막소독(thermal fogging)(이에 의해, 짙은 안개처럼 보이는, (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 조성물의 고밀도 구름이 생성됨)과 초미량살포법(ULV: Ultra Low Volume)(이에 의해, 냉각된 기계적인 에어로졸 생성 기계에 의해 액적이 생성됨)이 포함된다. 에어로졸 캔과 같은 즉시 사용 가능한 에어로졸이 사용될 수 있다.
넓은 영역을 한 번에 처리할 수 있기 때문에, 전술한 방법은 특정 영역에서 날아다니는 곤충 해충 집단을 신속하게 감소시키는 매우 효과적인 방법이다. 그리고, 적용 후 매우 제한된 잔류 활성이 존재하기 때문에, 충분한 효과를 얻기 위해서는 5일 내지 7일 간격으로 반복해야 한다. 이러한 방법은 곤충 해충 수의 신속한 감소가 필요한 전염병 상황에서 특히 효과적일 수 있다. 따라서, 이는 도시 뎅기열 방제 캠페인에 사용될 수 있다.
효과적인 공간 분무법은 일반적으로 하기 특정 원리에 따라 달라진다. 표적 곤충은 통상적으로 스프레이 구름을 통해 날아다닌다(또는 때때로 노출된 표면 상에 머무르는 동안 영향을 받음). 따라서, 스프레이 액적과 표적 곤충 사이의 접촉 효율이 중요하다. 이는, 스프레이 액적이 최적 기간 동안 공기 중에 남아있는 지와 스프레이 액적에 정확한 용량의 살충제가 포함되어 있는 지를 확인하는 방식으로 달성된다. 이러한 2가지 문제는 액적 크기를 최적화하는 방식으로 주로 해결된다. 액적이 너무 크면, 땅에 너무 빨리 떨어지며 적용 동안 마주치게 되는 초목 또는 다른 장애물을 관통하지 못한다(적용 유효 영역을 제한함). 이러한 큰 액적 중 하나가 개별 곤충에 영향을 미치는 경우, 이는 또한 개별 곤충 당 고용량이 전달되기 때문에 "과잉치사"가 된다. 액적이 너무 작으면, 공기역학으로 인해 표적 곤충에 증착되지 못하거나(충돌 없음) 대류에 의해 대기로 상승할 수 있다. 공간 분무 적용의 경우 액적의 최적 크기는 체적 중간 직경(VMD: Volume Median Diameter)이 10 미크론 내지 25 미크론인 액적이다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
발포체
(1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 본 발명의 활성 조성물은, 에어로졸화된 발포체 적용을 포함하는 에어로졸 기반 적용으로서 스프레이 제품으로 이용 가능할 수 있다. 가압된 캔은 에어로졸 형성을 위한 전형적인 수단이다. CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제와 호환 가능한 에어로졸 추진제가 사용된다. 바람직하게는, 액화 가스형 추진제가 사용된다.
적합한 추진제에는 압축 공기, 이산화탄소, 부탄 및 질소가 포함된다. 활성 화합물 조성물 중 추진제의 농도는 피리딘 조성물의 약 5 중량% 내지 약 40 중량%, 바람직하게는 (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 조성물의 약 15 중량% 내지 약 30 중량%이다.
하나의 구현예에서, TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 제형은 또한 하나 이상의 발포제를 포함할 수 있다. 사용될 수 있는 발포제에는 소듐 라우레스 설페이트, 코카미드 DEA 및 코카미도프로필 베타인이 포함된다. 바람직하게는, 소듐 라우레스 설페이트, 코카미드 DEA 및 코카미도프로필이 조합으로 사용된다. 활성 화합물 조성물 중 발포제(들)의 농도는 조성물의 약 10 중량% 내지 약 25 중량%, 더욱 바람직하게는 15 중량% 내지 20 중량%이다.
이러한 제형이 발포제를 함유하지 않는 에어로졸 적용에 사용되는 경우, 본 발명의 활성 조성물은 사용 직전 혼합할 필요 없이 사용될 수 있다. 하지만, 발포제를 함유하는 에어로졸 제형은 사용 직전 혼합(즉, 진탕)이 필요하다. 또한, 발포제를 함유하는 제형이 장기간 동안 사용되는 경우, 이는 사용 동안 주기적 간격으로 추가 혼합이 필요할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
연소 제형(burning formulation)
일부 구현예에서, 주거 지역은 또한, 상기 조성물을 함유하는 양초, 연기 코일(smoke coil) 또는 향 조각과 같은 연소 제형을 사용하는 방식으로 활성 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제 조성물로 처리될 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물은, 예를 들어 전기적으로 또는 연소에 의해 가열 시 살충 조성물이 방출되는 "가열된" 공기 청정제와 같은 가정용 제품으로 제형화될 수 있다. (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 본 발명의 활성 화합물 조성물은, 에어로졸, 모기 코일, 및/또는 증발기 또는 분무기와 같은 스프레이 제품으로 이용 가능할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
섬유 처리
일부 구현예에서, (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 살충 효과 조성물을 함유하는 섬유 및 의복을 제조할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 중합체성 재료, 섬유, 실, 직물, 망사 또는 기재 중 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제의 농도는, 예를 들어 0.05 중량% 내지 15 중량%, 바람직하게는 0.2 중량% 내지 10 중량%, 더욱 바람직하게는 0.4 중량% 내지 8 중량%, 특히 0.5 중량% 내지 5 중량%, 예컨대 1 중량% 내지 3 중량%의 비교적 넓은 농도 범위 내에서 달라질 수 있다.
유사하게, (표면 처리용이든, 섬유, 실, 망사, 직물의 코팅용이든) (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 조성물의 농도는, 예를 들어 0.1 중량% 내지 70 중량%, 예컨대 0.5 중량% 내지 50 중량%, 바람직하게는 1 중량% 내지 40 중량%, 더욱 바람직하게는 5 중량% 내지 30 중량%, 특히 10 중량% 내지 20 중량%의 비교적 넓은 농도 범위 내에서 달라질 수 있다.
CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제의 농도는 녹다운 효능, 내구성 및 독성과 관련된 요건이 충족되도록 적용 분야에 따라 선택될 수 있다. 재료의 특성을 조정할 수도 있기 때문에, 이러한 방식으로 맞춤형 직물 섬유를 얻을 수 있다.
따라서, CRIP 또는 살충 작용제의 유효량은 특정 사용 패턴, 방제에 가장 바람직한 곤충 해충, 및 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제가 사용되는 환경에 따라 달라질 수 있다. 따라서, CRIP 또는 살충 작용제의 유효량은 곤충 해충의 방제가 달성되기에 충분하다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
표면 처리 조성물
일부 구현예에서, 본 개시내용은 건물 내부 벽, 바닥 및 천장의 코팅, 및 기재 또는 무생물 재료의 코팅을 위한, (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 조성물 또는 제형을 제공한다. (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 본 발명의 조성물은, 목적을 염두해 두고 공지된 기술을 사용하여 제조될 수 있다. (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 조성물의 제제는 또한, 화합물의 표면 또는 다른 기재에의 결합을 용이하게 하는 결합제를 함유하도록 제형화될 수 있다. 결합에 유용한 작용제는 당업계에 공지되어 있으며, 중합체 형태인 경향이 있다. 특정한 다공성 및/또는 결합 특성을 갖는 벽 표면에 적용되는 조성물에 적합한 결합제 유형은 섬유, 실, 직물 또는 망사와 비교하여 상이할 수 있기 때문에, 당업자는 공지된 교시에 기반하여, 목적하는 표면 및/또는 기재에 기반하여 적합한 결합제를 선택할 수 있다.
전형적인 결합제는 폴리비닐 알코올, 개질된 전분, 폴리비닐 아크릴레이트, 폴리아크릴, 폴리비닐 아세테이트 공중합체, 폴리우레탄 및 개질된 식물성 오일이다. 적합한 결합제는 매우 다양한 중합체 및 공중합체, 및 이들의 조합에서 유도된 라텍스 분산액을 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물에서 결합제로서 사용하기에 적합한 라텍스는, 공중합된 3개 이상의 상이한 단량체 종을 함유하는 중합체뿐 아니라, 실리콘 또는 폴리우레탄의 분산후 현탁액을 포함하여, 스티렌, 알킬 스티렌, 이소프렌, 부타디엔, 아크릴로니트릴, 저급 알킬 아크릴레이트, 비닐 클로라이드, 비닐리덴 클로라이드, 저급 카르복실산의 비닐 에스테르, 및 알파, 베타-에틸렌계 불포화 카르복실산의 중합체 및 공중합체를 포함한다. 활성 성분을 다른 표면에 결합시키기 위한 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE) 중합체가 또한 적합할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
분산제
일부 예시적인 구현예에서, 본 개시내용에 따른 살충 제형은 (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제, 예를 들어 희석제 또는 담체(예를 들어, 물), 중합체성 결합제, 및/또는 분산제, 중합제, 유화제, 증점제, 알코올, 방향제, 또는 당업계에 공지된 분무 가능한 살충제의 제조에 사용되는 임의의 다른 불활성 부형제와 같은 추가 구성요소의 조합을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함하는 조성물은, 현탁액 또는 캡슐 현탁액과 같은 다수의 상이한 형태 또는 제형 유형으로 제조될 수 있다. 당업자는 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제의 특성, 이의 용도 및 또한 이의 적용 유형에 기반하여 관련 조성물을 제조할 수 있다. 예를 들어, 본 개시내용의 방법, 구현예 및 다른 양태에 사용되는 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제는, 현탁액 또는 캡슐 현탁액 제형으로 캡슐화될 수 있다. 캡슐화된 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제는 개선된 세척 견뢰도(wash-fastness), 및 또한 더 긴 활성 기간을 제공할 수 있다. 상기 제형은 유기 기반 또는 수성 기반, 바람직하게는 수성 기반일 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
마이크로캡슐화
본 개시내용에 따른 조성물 및 방법에 사용하기에 적합한 마이크로캡슐화된 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제는 당업계에 공지된 임의의 적합한 기술을 이용하여 제조될 수 있다. 예를 들어, 재료를 마이크로캡슐화하는 다양한 공정들이 이전이 개발되었다. 이러한 공정은 3가지 범주로 나뉠 수 있다: 물리적 방법, 상 분리 및 계면 반응. 물리적 방법 범주에서, 마이크로캡슐 벽 재료와 코어 입자가 물리적으로 결합되고, 벽 재료가 코어 입자 주위를 흐르면서 마이크로캡슐이 형성된다. 상 분리 범주에서, 마이크로캡슐은, 벽 재료가 용해되고 코아세르베이션(coacervation)에 의해 연속상으로부터 물리적으로 분리되어 코어 입자 주위에 증착되는 비혼화성 연속상에 코어 재료를 유화 또는 분산시키는 방식으로 형성된다. 계면 반응 범주에서, 마이크로캡슐은 비혼화성 연속상에 코어 재료를 유화 또는 분산시켜 코어 입자의 표면에서 계면 중합 반응이 일어나게 하는 방식으로 형성된다. 마이크로캡슐에 존재하는 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제의 농도는 마이크로캡슐의 0.1 중량% 내지 60 중량%로 달라질 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 분무 가능한 조성물은 약 0.005 wt% 내지 약 99 wt% 범위의, 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합을 포함하는 양을 함유할 수 있다.
키트, 제형, 분산제, 및 이들의 성분
본 개시내용에 따른 조성물((1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함함), 방법, 구현예 및 다른 양태에 사용되는 제형은, 모든 성분을 물과 함께 혼합하고, 선택적으로 적합한 혼합 및/또는 분산 골재를 사용하는 방식으로 형성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 제형은 10℃ 내지 70℃, 바람직하게는 15℃ 내지 50℃, 더욱 바람직하게는 20℃ 내지 40℃의 온도에서 형성된다. 일반적으로, (A), (B), (C) 및/또는 (D) 중 하나 이상을 포함하는 제형이 가능하며, 여기서 CRIP 및 살충 작용제(농약으로서) (A); 고형 중합체 (B); 선택적 추가 첨가제 (D)를 사용하고; 이들을 수성 구성요소 (C) 중에 분산시킬 수 있다. 결합제가 본 발명의 조성물((1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함함)에 존재하는 경우, 이전에 별도로 준비한, 물 중 중합체성 결합제 (B)의 분산액과, 물 중 CRIP, CRIP-살충 단백질 또는 살충 작용제 (A)의 수성 제형을 사용하는 것이 바람직하다. 이러한 별도의 제형은 각각의 제형에서 (A) 및/또는 (B)의 안정화를 위한 추가의 첨가제를 함유할 수 있으며, 상업적으로 입수 가능하다. 두 번째 공정 단계에서, 이러한 미가공 제형과 선택적으로 추가의 물(구성요소 (C))이 첨가된다. 또한, 예를 들어 (A) 및/또는 (B)의 사전 형성된 분산액을 사용하고, 이를 고형 (A) 및/또는 (B)와 혼합하는 것과 같이, 전술한 계획에 기반하여 상기 언급된 성분들을 조합하는 것도 가능하다. 중합체성 결합제 (B)의 분산액은 화학 제조업체에서 제조한 사전 제조된 분산액일 수 있다.
나아가, "수제(hand-made)" 분산액, 즉, 최종 사용자에 의해 소규모로 제조된 분산액을 사용하는 것 또한 본 발명의 범위 내에 속한다. 이러한 분산액은, 물 중에 약 20%의 결합제 (B) 혼합물을 제공하고, 혼합물을 90℃ 내지 100℃의 온도로 가열하고, 혼합물을 몇 시간 동안 집중적으로 교반하는 방식으로 제조될 수 있다. 최종 사용자가 본 발명에 따른 공정을 용이하게 사용할 수 있도록 최종 제품으로 제형을 제조하는 것도 가능하다. 물론, 유사하게, 최종 사용자가 추가의 물 (C)를 이용하여 용도에 맞는 목적하는 농도로 희석할 수 있는 농축물을 제조하는 것도 가능하다.
일 구현예에서, SSI 적용 또는 코팅 제형((1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함함)에 적합한 조성물((1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제의 조합을 포함함)은, 활성 성분과 담체, 예컨대 물을 함유하며, 또한 분산제, 습윤제, 동결 방지제, 증점제, 보존제, 유화제, 및 결합제 또는 스티커에서 선택되는 하나 이상의 보조 제형화제를 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 살충 작용제의 예시적인 고체 제형은 일반적으로 목적하는 입자 크기로 밀링되며, 여기서 입자 크기 분포 d(0.5)는 일반적으로 3 μm 내지 20 μm, 바람직하게는 5 μm 내지 15 μm, 특히 7 μm 내지 12 μm이다.
나아가, 상기 제형을, 적어도 (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합물 (A)를 포함하는 제1 구성요소와, 적어도 하나의 중합체성 결합제 (B)를 포함하는 제2 구성요소를 포함하는 키트로 최종 사용자에게 배송하는 것도 가능하다. 추가 첨가제 (D)는 키트의 제3 개별 구성요소일 수 있거나, 구성요소 (A) 및/또는 (B)와 미리 혼합되어 있을 수 있다. 최종 사용자는 키트의 구성요소에 단지 물 (C)를 첨가하고 혼합하는 방식으로 제형을 제조할 수 있다. 키트의 구성요소는 또한 물 중에 있는 제형일 수 있다. 물론, 구성요소 중 하나의 수성 제형을 다른 구성요소(들)의 건조 제형과 조합하는 것도 가능하다. 일례로서, 키트는, (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합물 (A)와 선택적으로 물 (C)를 포함하는 하나의 제형과, 적어도 하나의 중합체성 결합제 (B), 구성요소 (C)로서의 물 및 선택적으로 구성요소 (D)의 제2 별도의 제형으로 이루어질 수 있다.
구성요소 (A), (B), (C) 및 선택적으로 (D)의 농도는 코팅/처리에 사용되는 기술에 따라 당업자에 의해 선택될 수 있다. 일반적으로, (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제의 조합물 (A)의 양은, 조성물의 중량을 기준으로, 50 중량% 이하, 바람직하게는 1 중량% 내지 50 중량%, 예컨대 10 중량% 내지 40 중량%, 특히 15 중량% 내지 30 중량%일 수 있다. 중합체성 결합제 (B)의 양은, 조성물의 중량을 기준으로, 0.01 중량% 내지 30 중량%, 바람직하게는 0.5 중량% 내지 15 중량%, 더욱 바람직하게는 1 중량% 내지 10 중량%, 특히 1 중량% 내지 5 중량% 범위일 수 있다. 존재하는 경우, 일반적으로, 추가 구성요소 (D)의 양은, 조성물의 중량을 기준으로, 0.1 중량% 내지 20 중량%, 바람직하게는 0.5 중량% 내지 15 중량%이다. 존재하는 경우, 안료 및/또는 염료 및/또는 항료의 적합한 양은, 조성물의 중량을 기준으로, 일반적으로 0.01 중량% 내지 5 중량%, 바람직하게는 0.1 중량% 내지 3 중량%, 더욱 바람직하게는 0.2 중량% 내지 2 중량%이다. 전형적인 즉시 사용 가능한 제형은 구성요소 (A), (B), 및 선택적으로 (D)를 0.1% 내지 40%, 바람직하게는 1% 내지 30%로 포함하고, 나머지 양은 물 (C)이다. 최종 사용자가 희석해야 할 농축물의 전형적인 농도는 구성요소 (A), (B), 및 선택적으로 (D)가 5% 내지 70%, 바람직하게는 10% 내지 60%를 차지할 수 있고, 나머지 양은 물 (C)일 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 CRIP, 또는 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 살충 작용제 중 임의의 것, 및/또는 이에 관한 방법 중 임의의 것을 사용하여, 본원에 기재된 바와 같은 전술한 분무 가능한 조성물, 제형 및/또는 키트 중 임의의 것을 생성할 수 있다.
TVP 조성물
유리화
유리화는, 경질의 무정형 유리질 당 매트릭스 내 펩타이드의 고정화를 통해 펩타이드의 반응 동역학이 느려지는 과정을 설명하며, 이는 펩타이드의 분해를 극적으로 느리게 한다. 문헌[Slade et al., Beyond water activity: recent advances based on an alternative approach to the assessment of food quality and safety, Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 30 (1991) 115-360] 참조. 펩타이드의 펴짐(unfolding) 및 다른 분해 메커니즘은 펩타이드의 분자 이동성에 따라 달라지기 때문에, 유리화는 이러한 분해를 느리게 한다. 문헌[Change et al., Mechanism of protein stabilization by sugars during freeze-drying and storage: native structure preservation, specific interaction, and/or immobilization in a glassy matrix?, J Pharm. Sci. 94 (2005) 1427-1444]; 및 문헌[G.O. Poinar and R. Hess, Ultrastructure of 40-million-year-old insect tissue, Science 80 (215) (1982) 1241-1242] 참조.
유리화, 및 펩타이드의 안정화에서의 이의 고려사항에 대한 예시적인 설명은, 문헌[Mensink et al., How sugars protect proteins in the solid state and during drying (review): Mechanisms of stabilization in relation to stress conditions. Eur J Pharm Biopharm. 2017 May;114:288-295]에 제공되어 있으며; 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, CRIP 또는 CRIP-살충 단백질, 예를 들어 본 발명의 TVP는 유리화될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본 발명의 TVP는 유리화 공정을 사용하여 안정화될 수 있다.
일부 구현예에서, 유리화는 당의 사용을 통해 일어날 수 있다. 일부 구현예에서, 당은 트레할로오스일 수 있다.
트레할로오스
트레할로오스는 2개의 α-글루코오스 단위 사이의 1,1-글리코시드 결합에 의해 형성된 이당류이다. 일부 구현예에서, 트레할로오스의 분자식은 C12H22O11이며; 분자량은 342.3 g/mol이다.
트레할로오스는 자연에서 이당류로, 및 또한 일부 중합체에서 단량체로 발견되지만; 자연에서 발견되지 않는 일부 트레할로오스 이성질체가 존재한다. 문헌[Elbein et al., New insights on trehalose: a multifunctional molecule. Glycobiology. 2003 Apr;13(4):17R-27R] 참조.
트레할로오스는 열, 동결 및 건조와 같은 스트레스에 대해 단백질과 세포를 안정화시키는 것으로 나타났다. 문헌[K. Lippert and E. Galinski, Appl. Microbiol. Biotechnol., 1992, 37, 61-65]; 문헌[J. K. Kaushik and R. Bhat, J. Biol. Chem., 2003, 278, 26458-26465]; 문헌[R. P. Baptista, S. Pedersen, G. J. Cabrita, D. E. Otzen, J. M. Cabral and E. P. Melo, Biopolymers, 2008, 89, 538-547]; 문헌[Guo et al., Nat. Biotechnol., 2000, 18, 168-171]; 문헌[Hengherr et al., FEBS J., 2008, 275, 281-288]; 문헌[Crowe et al., Science, 1984, 223, 701-703]; 문헌[Beattie et al., Diabetes, 1997, 46, 519-523]; 문헌[P. Sundaramurthi and R. Suryanarayanan, J. Phys. Chem. Lett., 2009, 1, 510-514]; 문헌[Duong et al., Appl. Environ. Microbiol., 2006, 72, 1218-1225] 참조.
실제로, 일부 동물은 환경적 스트레스에 반응하여 트레할로오스를 유의한 수준으로 축적하기 때문에, 생물학적 분자를 안정화시키는 트레할로오스의 능력이 강조된다. 문헌[P. Westh and H. Ramlev, J. Exp. Zool., 1991, 258, 303-311]; 및 문헌[K. A. C. Madin and J. H. Crowe, J. Exp. Zool., 1975, 193, 335-342] 참조. 나아가, 트레할로오스는 일반적으로 안전한 것으로 간주되며, 여러 의약품에서 안정화제로 사용된다. 문헌[N. K. Jain and I. Roy, Protein Sci., 2009, 18, 24-36]; 및 문헌[S. Ohtake and Y. J. Wang, J. Pharm. Sci., 2011, 100, 2020-2053] 참조.
트레할로오스의 사용은 당업계에 널리 공지되어 있다. 트레할로오스는 상업적 공급원에서 용이하게 입수 가능하다. 예를 들어, D-(+)-트레할로오스 2수화물(제품 번호 T9531)과 트레할로오스(제품 번호 PHR1344 및 1673715)는 Sigma Aldrich(Sigma-Aldrich Corp. St. Louis, MO, USA)에서 입수 가능하다.
CAS(Chemical Abstracts Service) 등록 번호 99-20-7(무수); 및 CAS 등록 번호 6138-23-4(무수)의 예시적인 트레할로오스 분자가 본원에 제공된다. 본 개시내용의 예시적인 트레할로오스 화합물의 PubChem CID 번호는 7427이다.
펩타이드를 안정화시키기 위해 트레할로오스를 사용하는 것에 대한 예시적인 설명은 미국 특허 제6,165,981호; 제6,171,586호; 제6,991,790호; 제7,956,028호; 제10,273,333호; 및 제10,588,957호에 제공되어 있으며; 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
조성물에서 트레할로오스의 제조 및 사용에 대한 예시적인 설명은 미국 특허 제7,678,764호에 제공되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
TVP 조성물 및 이의 구성요소의 범위 및 설명
본원에 사용된 "제형" 및 "조성물"은 동의어이다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)와, TVP, TVP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 제형은, 액체 농축물, 수화제 또는 과립 제형일 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 TVP, TVP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 중 임의의 것은, 하기 기재되는 제형 중 임의의 것에 사용될 수 있으며, 예를 들어 전술한 TVP, TVP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 중 임의의 것은 수화제 또는 과립 제형; 또는 액체 농축물 제형에 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 제형은 하기를 포함하거나, 본질적으로 하기로 이루어지거나 또는 하기로 이루어지는다: (1) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B에 열거된 것들); (2) TVP, TVP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 및 (3) 하나 이상의 부형제; 여기서 부형제는 트레할로오스; 이염기성 인산포타슘(K2HPO4); 일염기성 인산포타슘(KH2PO4); 말토덱스트린; 및 BIT를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어짐.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 트레할로오스의 농도를, 총 제형의 중량을 기준으로, 약 0.01%, 0.02%, 0.03%, 0.04%, 0.05%, 0.06%, 0.07%, 0.08%, 0.09%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.5%, 0.6%, 0.7%, 0.8%, 0.9%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.1%, 99.2%, 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9%로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 트레할로오스의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 99.9%; 약 1% 내지 약 99.9%; 약 2% 내지 약 99.9%; 약 3% 내지 약 99.9%; 약 4% 내지 약 99.9%; 약 5% 내지 약 99.9%; 약 6% 내지 약 99.9%; 약 7% 내지 약 99.9%; 약 8% 내지 약 99.9%; 약 9% 내지 약 99.9%; 약 10% 내지 약 99.9%; 약 11% 내지 약 99.9%; 약 12% 내지 약 99.9%; 약 13% 내지 약 99.9%; 약 14% 내지 약 99.9%; 약 15% 내지 약 99.9%; 약 16% 내지 약 99.9%; 약 17% 내지 약 99.9%; 약 18% 내지 약 99.9%; 약 19% 내지 약 99.9%; 약 20% 내지 약 99.9%; 약 21% 내지 약 99.9%; 약 22% 내지 약 99.9%; 약 23% 내지 약 99.9%; 약 24% 내지 약 99.9%; 약 25% 내지 약 99.9%; 약 26% 내지 약 99.9%; 약 27% 내지 약 99.9%; 약 28% 내지 약 99.9%; 약 29% 내지 약 99.9%; 약 30% 내지 약 99.9%; 약 31% 내지 약 99.9%; 약 32% 내지 약 99.9%; 약 33% 내지 약 99.9%; 약 34% 내지 약 99.9%; 약 35% 내지 약 99.9%; 약 36% 내지 약 99.9%; 약 37% 내지 약 99.9%; 약 38% 내지 약 99.9%; 약 39% 내지 약 99.9%; 약 40% 내지 약 99.9%; 약 41% 내지 약 99.9%; 약 42% 내지 약 99.9%; 약 43% 내지 약 99.9%; 약 44% 내지 약 99.9%; 약 45% 내지 약 99.9%; 약 46% 내지 약 99.9%; 약 47% 내지 약 99.9%; 약 48% 내지 약 99.9%; 약 49% 내지 약 99.9%; 약 50% 내지 약 99.9%; 약 51% 내지 약 99.9%; 약 52% 내지 약 99.9%; 약 53% 내지 약 99.9%; 약 54% 내지 약 99.9%; 약 55% 내지 약 99.9%; 약 56% 내지 약 99.9%; 약 57% 내지 약 99.9%; 약 58% 내지 약 99.9%; 약 59% 내지 약 99.9%; 약 60% 내지 약 99.9%; 약 61% 내지 약 99.9%; 약 62% 내지 약 99.9%; 약 63% 내지 약 99.9%; 약 64% 내지 약 99.9%; 약 65% 내지 약 99.9%; 약 66% 내지 약 99.9%; 약 67% 내지 약 99.9%; 약 68% 내지 약 99.9%; 약 69% 내지 약 99.9%; 약 70% 내지 약 99.9%; 약 71% 내지 약 99.9%; 약 72% 내지 약 99.9%; 약 73% 내지 약 99.9%; 약 74% 내지 약 99.9%; 약 75% 내지 약 99.9%; 약 76% 내지 약 99.9%; 약 77% 내지 약 99.9%; 약 78% 내지 약 99.9%; 약 79% 내지 약 99.9%; 약 80% 내지 약 99.9%; 약 81% 내지 약 99.9%; 약 82% 내지 약 99.9%; 약 83% 내지 약 99.9%; 약 84% 내지 약 99.9%; 약 85% 내지 약 99.9%; 약 86% 내지 약 99.9%; 약 87% 내지 약 99.9%; 약 88% 내지 약 99.9%; 약 89% 내지 약 99.9%; 약 90% 내지 약 99.9%; 약 91% 내지 약 99.9%; 약 92% 내지 약 99.9%; 약 93% 내지 약 99.9%; 약 94% 내지 약 99.9%; 약 95% 내지 약 99.9%; 약 96% 내지 약 99.9%; 약 97% 내지 약 99.9%; 약 98% 내지 약 99.9%; 또는 약 99% 내지 약 99.9% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 트레할로오스의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 99%; 약 0.1% 내지 약 98%; 약 0.1% 내지 약 97%; 약 0.1% 내지 약 96%; 약 0.1% 내지 약 95%; 약 0.1% 내지 약 94%; 약 0.1% 내지 약 93%; 약 0.1% 내지 약 92%; 약 0.1% 내지 약 91%; 약 0.1% 내지 약 90%; 약 0.1% 내지 약 89%; 약 0.1% 내지 약 88%; 약 0.1% 내지 약 87%; 약 0.1% 내지 약 86%; 약 0.1% 내지 약 85%; 약 0.1% 내지 약 84%; 약 0.1% 내지 약 83%; 약 0.1% 내지 약 82%; 약 0.1% 내지 약 81%; 약 0.1% 내지 약 80%; 약 0.1% 내지 약 79%; 약 0.1% 내지 약 78%; 약 0.1% 내지 약 77%; 약 0.1% 내지 약 76%; 약 0.1% 내지 약 75%; 약 0.1% 내지 약 74%; 약 0.1% 내지 약 73%; 약 0.1% 내지 약 72%; 약 0.1% 내지 약 71%; 약 0.1% 내지 약 70%; 약 0.1% 내지 약 69%; 약 0.1% 내지 약 68%; 약 0.1% 내지 약 67%; 약 0.1% 내지 약 66%; 약 0.1% 내지 약 65%; 약 0.1% 내지 약 64%; 약 0.1% 내지 약 63%; 약 0.1% 내지 약 62%; 약 0.1% 내지 약 61%; 약 0.1% 내지 약 60%; 약 0.1% 내지 약 59%; 약 0.1% 내지 약 58%; 약 0.1% 내지 약 57%; 약 0.1% 내지 약 56%; 약 0.1% 내지 약 55%; 약 0.1% 내지 약 54%; 약 0.1% 내지 약 53%; 약 0.1% 내지 약 52%; 약 0.1% 내지 약 51%; 약 0.1% 내지 약 50%; 약 0.1% 내지 약 49%; 약 0.1% 내지 약 48%; 약 0.1% 내지 약 47%; 약 0.1% 내지 약 46%; 약 0.1% 내지 약 45%; 약 0.1% 내지 약 44%; 약 0.1% 내지 약 43%; 약 0.1% 내지 약 42%; 약 0.1% 내지 약 41%; 약 0.1% 내지 약 40%; 약 0.1% 내지 약 39%; 약 0.1% 내지 약 38%; 약 0.1% 내지 약 37%; 약 0.1% 내지 약 36%; 약 0.1% 내지 약 35%; 약 0.1% 내지 약 34%; 약 0.1% 내지 약 33%; 약 0.1% 내지 약 32%; 약 0.1% 내지 약 31%; 약 0.1% 내지 약 30%; 약 0.1% 내지 약 29%; 약 0.1% 내지 약 28%; 약 0.1% 내지 약 27%; 약 0.1% 내지 약 26%; 약 0.1% 내지 약 25%; 약 0.1% 내지 약 24%; 약 0.1% 내지 약 23%; 약 0.1% 내지 약 22%; 약 0.1% 내지 약 21%; 약 0.1% 내지 약 20%; 약 0.1% 내지 약 19%; 약 0.1% 내지 약 18%; 약 0.1% 내지 약 17%; 약 0.1% 내지 약 16%; 약 0.1% 내지 약 15%; 약 0.1% 내지 약 14%; 약 0.1% 내지 약 13%; 약 0.1% 내지 약 12%; 약 0.1% 내지 약 11%; 약 0.1% 내지 약 10%; 약 0.1% 내지 약 9%; 약 0.1% 내지 약 8%; 약 0.1% 내지 약 7%; 약 0.1% 내지 약 6%; 약 0.1% 내지 약 5%; 약 0.1% 내지 약 4%; 약 0.1% 내지 약 3%; 약 0.1% 내지 약 2%; 약 0.1% 내지 약 1%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.5% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 40%; 약 0.5% 내지 약 40%; 약 1% 내지 약 40%; 약 2% 내지 약 40%; 약 3% 내지 약 40%; 약 4% 내지 약 40%; 약 5% 내지 약 40%; 약 6% 내지 약 40%; 약 7% 내지 약 40%; 약 8% 내지 약 40%; 약 9% 내지 약 40%; 약 10% 내지 약 40%; 약 11% 내지 약 40%; 약 12% 내지 약 40%; 약 13% 내지 약 40%; 약 14% 내지 약 40%; 약 15% 내지 약 40%; 약 16% 내지 약 40%; 약 17% 내지 약 40%; 약 18% 내지 약 40%; 약 19% 내지 약 40%; 약 20% 내지 약 40%; 약 21% 내지 약 40%; 약 22% 내지 약 40%; 약 23% 내지 약 40%; 약 24% 내지 약 40%; 약 25% 내지 약 40%; 약 26% 내지 약 40%; 약 27% 내지 약 40%; 약 28% 내지 약 40%; 약 29% 내지 약 40%; 약 30% 내지 약 40%; 약 31% 내지 약 40%; 약 32% 내지 약 40%; 약 33% 내지 약 40%; 약 34% 내지 약 40%; 약 35% 내지 약 40%; 약 36% 내지 약 40%; 약 37% 내지 약 40%; 약 38% 내지 약 40%; 또는 약 39% 내지 약 40% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 40%; 약 0.1% 내지 약 39%; 약 0.1% 내지 약 38%; 약 0.1% 내지 약 37%; 약 0.1% 내지 약 36%; 약 0.1% 내지 약 35%; 약 0.1% 내지 약 34%; 약 0.1% 내지 약 33%; 약 0.1% 내지 약 32%; 약 0.1% 내지 약 31%; 약 0.1% 내지 약 30%; 약 0.1% 내지 약 29%; 약 0.1% 내지 약 28%; 약 0.1% 내지 약 27%; 약 0.1% 내지 약 26%; 약 0.1% 내지 약 25%; 약 0.1% 내지 약 24%; 약 0.1% 내지 약 23%; 약 0.1% 내지 약 22%; 약 0.1% 내지 약 21%; 약 0.1% 내지 약 20%; 약 0.1% 내지 약 19%; 약 0.1% 내지 약 18%; 약 0.1% 내지 약 17%; 약 0.1% 내지 약 16%; 약 0.1% 내지 약 15%; 약 0.1% 내지 약 14%; 약 0.1% 내지 약 13%; 약 0.1% 내지 약 12%; 약 0.1% 내지 약 11%; 약 0.1% 내지 약 10%; 약 0.1% 내지 약 9%; 약 0.1% 내지 약 8%; 약 0.1% 내지 약 7%; 약 0.1% 내지 약 6%; 약 0.1% 내지 약 5%; 약 0.1% 내지 약 4%; 약 0.1% 내지 약 3%; 약 0.1% 내지 약 2%; 약 0.1% 내지 약 1%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.5% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 20%; 약 0.5% 내지 약 20%; 약 1% 내지 약 20%; 약 2% 내지 약 20%; 약 3% 내지 약 20%; 약 4% 내지 약 20%; 약 5% 내지 약 20%; 약 6% 내지 약 20%; 약 7% 내지 약 20%; 약 8% 내지 약 20%; 약 9% 내지 약 20%; 약 10% 내지 약 20%; 약 11% 내지 약 20%; 약 12% 내지 약 20%; 약 13% 내지 약 20%; 약 14% 내지 약 20%; 약 15% 내지 약 20%; 약 16% 내지 약 20%; 약 17% 내지 약 20%; 약 18% 내지 약 20%; 또는 약 19% 내지 약 20% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 20%; 약 0.1% 내지 약 19%; 약 0.1% 내지 약 18%; 약 0.1% 내지 약 17%; 약 0.1% 내지 약 16%; 약 0.1% 내지 약 15%; 약 0.1% 내지 약 14%; 약 0.1% 내지 약 13%; 약 0.1% 내지 약 12%; 약 0.1% 내지 약 11%; 약 0.1% 내지 약 10%; 약 0.1% 내지 약 9%; 약 0.1% 내지 약 8%; 약 0.1% 내지 약 7%; 약 0.1% 내지 약 6%; 약 0.1% 내지 약 5%; 약 0.1% 내지 약 4%; 약 0.1% 내지 약 3%; 약 0.1% 내지 약 2%; 약 0.1% 내지 약 1%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.5% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 말토덱스트린의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 99.9%; 약 1% 내지 약 99.9%; 약 2% 내지 약 99.9%; 약 3% 내지 약 99.9%; 약 4% 내지 약 99.9%; 약 5% 내지 약 99.9%; 약 6% 내지 약 99.9%; 약 7% 내지 약 99.9%; 약 8% 내지 약 99.9%; 약 9% 내지 약 99.9%; 약 10% 내지 약 99.9%; 약 11% 내지 약 99.9%; 약 12% 내지 약 99.9%; 약 13% 내지 약 99.9%; 약 14% 내지 약 99.9%; 약 15% 내지 약 99.9%; 약 16% 내지 약 99.9%; 약 17% 내지 약 99.9%; 약 18% 내지 약 99.9%; 약 19% 내지 약 99.9%; 약 20% 내지 약 99.9%; 약 21% 내지 약 99.9%; 약 22% 내지 약 99.9%; 약 23% 내지 약 99.9%; 약 24% 내지 약 99.9%; 약 25% 내지 약 99.9%; 약 26% 내지 약 99.9%; 약 27% 내지 약 99.9%; 약 28% 내지 약 99.9%; 약 29% 내지 약 99.9%; 약 30% 내지 약 99.9%; 약 31% 내지 약 99.9%; 약 32% 내지 약 99.9%; 약 33% 내지 약 99.9%; 약 34% 내지 약 99.9%; 약 35% 내지 약 99.9%; 약 36% 내지 약 99.9%; 약 37% 내지 약 99.9%; 약 38% 내지 약 99.9%; 약 39% 내지 약 99.9%; 약 40% 내지 약 99.9%; 약 41% 내지 약 99.9%; 약 42% 내지 약 99.9%; 약 43% 내지 약 99.9%; 약 44% 내지 약 99.9%; 약 45% 내지 약 99.9%; 약 46% 내지 약 99.9%; 약 47% 내지 약 99.9%; 약 48% 내지 약 99.9%; 약 49% 내지 약 99.9%; 약 50% 내지 약 99.9%; 약 51% 내지 약 99.9%; 약 52% 내지 약 99.9%; 약 53% 내지 약 99.9%; 약 54% 내지 약 99.9%; 약 55% 내지 약 99.9%; 약 56% 내지 약 99.9%; 약 57% 내지 약 99.9%; 약 58% 내지 약 99.9%; 약 59% 내지 약 99.9%; 약 60% 내지 약 99.9%; 약 61% 내지 약 99.9%; 약 62% 내지 약 99.9%; 약 63% 내지 약 99.9%; 약 64% 내지 약 99.9%; 약 65% 내지 약 99.9%; 약 66% 내지 약 99.9%; 약 67% 내지 약 99.9%; 약 68% 내지 약 99.9%; 약 69% 내지 약 99.9%; 약 70% 내지 약 99.9%; 약 71% 내지 약 99.9%; 약 72% 내지 약 99.9%; 약 73% 내지 약 99.9%; 약 74% 내지 약 99.9%; 약 75% 내지 약 99.9%; 약 76% 내지 약 99.9%; 약 77% 내지 약 99.9%; 약 78% 내지 약 99.9%; 약 79% 내지 약 99.9%; 약 80% 내지 약 99.9%; 약 81% 내지 약 99.9%; 약 82% 내지 약 99.9%; 약 83% 내지 약 99.9%; 약 84% 내지 약 99.9%; 약 85% 내지 약 99.9%; 약 86% 내지 약 99.9%; 약 87% 내지 약 99.9%; 약 88% 내지 약 99.9%; 약 89% 내지 약 99.9%; 약 90% 내지 약 99.9%; 약 91% 내지 약 99.9%; 약 92% 내지 약 99.9%; 약 93% 내지 약 99.9%; 약 94% 내지 약 99.9%; 약 95% 내지 약 99.9%; 약 96% 내지 약 99.9%; 약 97% 내지 약 99.9%; 약 98% 내지 약 99.9%; 또는 약 99% 내지 약 99.9% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 말토덱스트린의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 99%; 약 0.1% 내지 약 98%; 약 0.1% 내지 약 97%; 약 0.1% 내지 약 96%; 약 0.1% 내지 약 95%; 약 0.1% 내지 약 94%; 약 0.1% 내지 약 93%; 약 0.1% 내지 약 92%; 약 0.1% 내지 약 91%; 약 0.1% 내지 약 90%; 약 0.1% 내지 약 89%; 약 0.1% 내지 약 88%; 약 0.1% 내지 약 87%; 약 0.1% 내지 약 86%; 약 0.1% 내지 약 85%; 약 0.1% 내지 약 84%; 약 0.1% 내지 약 83%; 약 0.1% 내지 약 82%; 약 0.1% 내지 약 81%; 약 0.1% 내지 약 80%; 약 0.1% 내지 약 79%; 약 0.1% 내지 약 78%; 약 0.1% 내지 약 77%; 약 0.1% 내지 약 76%; 약 0.1% 내지 약 75%; 약 0.1% 내지 약 74%; 약 0.1% 내지 약 73%; 약 0.1% 내지 약 72%; 약 0.1% 내지 약 71%; 약 0.1% 내지 약 70%; 약 0.1% 내지 약 69%; 약 0.1% 내지 약 68%; 약 0.1% 내지 약 67%; 약 0.1% 내지 약 66%; 약 0.1% 내지 약 65%; 약 0.1% 내지 약 64%; 약 0.1% 내지 약 63%; 약 0.1% 내지 약 62%; 약 0.1% 내지 약 61%; 약 0.1% 내지 약 60%; 약 0.1% 내지 약 59%; 약 0.1% 내지 약 58%; 약 0.1% 내지 약 57%; 약 0.1% 내지 약 56%; 약 0.1% 내지 약 55%; 약 0.1% 내지 약 54%; 약 0.1% 내지 약 53%; 약 0.1% 내지 약 52%; 약 0.1% 내지 약 51%; 약 0.1% 내지 약 50%; 약 0.1% 내지 약 49%; 약 0.1% 내지 약 48%; 약 0.1% 내지 약 47%; 약 0.1% 내지 약 46%; 약 0.1% 내지 약 45%; 약 0.1% 내지 약 44%; 약 0.1% 내지 약 43%; 약 0.1% 내지 약 42%; 약 0.1% 내지 약 41%; 약 0.1% 내지 약 40%; 약 0.1% 내지 약 39%; 약 0.1% 내지 약 38%; 약 0.1% 내지 약 37%; 약 0.1% 내지 약 36%; 약 0.1% 내지 약 35%; 약 0.1% 내지 약 34%; 약 0.1% 내지 약 33%; 약 0.1% 내지 약 32%; 약 0.1% 내지 약 31%; 약 0.1% 내지 약 30%; 약 0.1% 내지 약 29%; 약 0.1% 내지 약 28%; 약 0.1% 내지 약 27%; 약 0.1% 내지 약 26%; 약 0.1% 내지 약 25%; 약 0.1% 내지 약 24%; 약 0.1% 내지 약 23%; 약 0.1% 내지 약 22%; 약 0.1% 내지 약 21%; 약 0.1% 내지 약 20%; 약 0.1% 내지 약 19%; 약 0.1% 내지 약 18%; 약 0.1% 내지 약 17%; 약 0.1% 내지 약 16%; 약 0.1% 내지 약 15%; 약 0.1% 내지 약 14%; 약 0.1% 내지 약 13%; 약 0.1% 내지 약 12%; 약 0.1% 내지 약 11%; 약 0.1% 내지 약 10%; 약 0.1% 내지 약 9%; 약 0.1% 내지 약 8%; 약 0.1% 내지 약 7%; 약 0.1% 내지 약 6%; 약 0.1% 내지 약 5%; 약 0.1% 내지 약 4%; 약 0.1% 내지 약 3%; 약 0.1% 내지 약 2%; 약 0.1% 내지 약 1%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.5% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 말토덱스트린은, 총 제형의 wt/wt로, 약 2% 내지 약 20%; 약 3% 내지 약 20%; 약 4% 내지 약 20%; 약 5% 내지 약 20%; 약 6% 내지 약 20%; 약 7% 내지 약 20%; 약 8% 내지 약 20%; 약 9% 내지 약 20%; 약 10% 내지 약 20%; 약 11% 내지 약 20%; 약 12% 내지 약 20%; 약 13% 내지 약 20%; 약 14% 내지 약 20%; 약 15% 내지 약 20%; 약 16% 내지 약 20%; 약 17% 내지 약 20%; 약 18% 내지 약 20%; 또는 약 19% 내지 약 20% 범위의 덱스트로오스 등가물을 가질 수 있다.
일부 구현예에서, 말토덱스트린은, 총 제형의 wt/wt로, 약 2% 내지 약 20%; 약 2% 내지 약 19%; 약 2% 내지 약 18%; 약 2% 내지 약 17%; 약 2% 내지 약 16%; 약 2% 내지 약 15%; 약 2% 내지 약 14%; 약 2% 내지 약 13%; 약 2% 내지 약 12%; 약 2% 내지 약 11%; 약 2% 내지 약 10%; 약 2% 내지 약 9%; 약 2% 내지 약 8%; 약 2% 내지 약 7%; 약 2% 내지 약 6%; 약 2% 내지 약 5%; 약 2% 내지 약 4%; 또는 약 2% 내지 약 3% 범위의 덱스트로오스 등가물을 가질 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 벤즈이소티아졸리논(BIT)의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.01% 내지 약 1%; 약 0.025% 내지 약 1%; 약 0.05% 내지 약 1%; 약 0.075% 내지 약 1%; 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.125% 내지 약 1%; 약 0.15% 내지 약 1%; 약 0.175% 내지 약 1%; 약 0.2% 내지 약 1%; 약 0.225% 내지 약 1%; 약 0.25% 내지 약 1%; 약 0.275% 내지 약 1%; 약 0.3% 내지 약 1%; 약 0.325% 내지 약 1%; 약 0.35% 내지 약 1%; 약 0.375% 내지 약 1%; 약 0.4% 내지 약 1%; 약 0.425% 내지 약 1%; 약 0.45% 내지 약 1%; 약 0.475% 내지 약 1%; 약 0.5% 내지 약 1%; 약 0.525% 내지 약 1%; 약 0.55% 내지 약 1%; 약 0.575% 내지 약 1%; 약 0.6% 내지 약 1%; 약 0.625% 내지 약 1%; 약 0.65% 내지 약 1%; 약 0.675% 내지 약 1%; 약 0.7% 내지 약 1%; 약 0.725% 내지 약 1%; 약 0.75% 내지 약 1%; 약 0.775% 내지 약 1%; 약 0.8% 내지 약 1%; 약 0.825% 내지 약 1%; 약 0.85% 내지 약 1%; 약 0.875% 내지 약 1%; 약 0.9% 내지 약 1%; 약 0.925% 내지 약 1%; 약 0.95% 내지 약 1%; 또는 약 0.975% 내지 약 1% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 벤즈이소티아졸리논(BIT)의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.01% 내지 약 1%; 약 0.01% 내지 약 0.975%; 약 0.01% 내지 약 0.95%; 약 0.01% 내지 약 0.925%; 약 0.01% 내지 약 0.9%; 약 0.01% 내지 약 0.875%; 약 0.01% 내지 약 0.85%; 약 0.01% 내지 약 0.825%; 약 0.01% 내지 약 0.8%; 약 0.01% 내지 약 0.775%; 약 0.01% 내지 약 0.75%; 약 0.01% 내지 약 0.725%; 약 0.01% 내지 약 0.7%; 약 0.01% 내지 약 0.675%; 약 0.01% 내지 약 0.65%; 약 0.01% 내지 약 0.625%; 약 0.01% 내지 약 0.6%; 약 0.01% 내지 약 0.575%; 약 0.01% 내지 약 0.55%; 약 0.01% 내지 약 0.525%; 약 0.01% 내지 약 0.5%; 약 0.01% 내지 약 0.475%; 약 0.01% 내지 약 0.45%; 약 0.01% 내지 약 0.425%; 약 0.01% 내지 약 0.4%; 약 0.01% 내지 약 0.375%; 약 0.01% 내지 약 0.35%; 약 0.01% 내지 약 0.325%; 약 0.01% 내지 약 0.3%; 약 0.01% 내지 약 0.275%; 약 0.01% 내지 약 0.25%; 약 0.01% 내지 약 0.225%; 약 0.01% 내지 약 0.2%; 약 0.01% 내지 약 0.175%; 약 0.01% 내지 약 0.15%; 약 0.01% 내지 약 0.125%; 약 0.01% 내지 약 0.1%; 약 0.01% 내지 약 0.075%; 약 0.01% 내지 약 0.05%; 또는 약 0.01% 내지 약 0.025% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, BIT는 1,2-벤즈이소티아졸린-3-온일 수 있다. CAS 번호 2634-33-5의 예시적인 1,2-벤즈이소티아졸린-3-온이 본원에 제공된다. 1,2-벤즈이소티아졸린-3-온을 제조하는 방법을 설명하는 예시적인 설명은 WIPO 공개공보 WO2014173716A1에 제공되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다. 또한, 1,2-벤즈이소티아졸린-3-온은 상업적 공급업체에서 쉽게 입수할 수 있으며, 예를 들어 Lonza Group Ltd.(Muenchensteinerstrasse 38, CH-4002 Basel, Switzerland)에서 입수 가능한 1,2-벤즈이소티아졸린-3-온의 9.25% 수용액인 PROXEL® AQ Preservative이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 리그노설포네이트의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.125% 내지 약 1%; 약 0.15% 내지 약 1%; 약 0.175% 내지 약 1%; 약 0.2% 내지 약 1%; 약 0.225% 내지 약 1%; 약 0.25% 내지 약 1%; 약 0.275% 내지 약 1%; 약 0.3% 내지 약 1%; 약 0.325% 내지 약 1%; 약 0.35% 내지 약 1%; 약 0.375% 내지 약 1%; 약 0.4% 내지 약 1%; 약 0.425% 내지 약 1%; 약 0.45% 내지 약 1%; 약 0.475% 내지 약 1%; 약 0.5% 내지 약 1%; 약 0.525% 내지 약 1%; 약 0.55% 내지 약 1%; 약 0.575% 내지 약 1%; 약 0.6% 내지 약 1%; 약 0.625% 내지 약 1%; 약 0.65% 내지 약 1%; 약 0.675% 내지 약 1%; 약 0.7% 내지 약 1%; 약 0.725% 내지 약 1%; 약 0.75% 내지 약 1%; 약 0.775% 내지 약 1%; 약 0.8% 내지 약 1%; 약 0.825% 내지 약 1%; 약 0.85% 내지 약 1%; 약 0.875% 내지 약 1%; 약 0.9% 내지 약 1%; 약 0.925% 내지 약 1%; 약 0.95% 내지 약 1%; 또는 약 0.975% 내지 약 1% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 리그노설포네이트의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.1% 내지 약 0.975%; 약 0.1% 내지 약 0.95%; 약 0.1% 내지 약 0.925%; 약 0.1% 내지 약 0.9%; 약 0.1% 내지 약 0.875%; 약 0.1% 내지 약 0.85%; 약 0.1% 내지 약 0.825%; 약 0.1% 내지 약 0.8%; 약 0.1% 내지 약 0.775%; 약 0.1% 내지 약 0.75%; 약 0.1% 내지 약 0.725%; 약 0.1% 내지 약 0.7%; 약 0.1% 내지 약 0.675%; 약 0.1% 내지 약 0.65%; 약 0.1% 내지 약 0.625%; 약 0.1% 내지 약 0.6%; 약 0.1% 내지 약 0.575%; 약 0.1% 내지 약 0.55%; 약 0.1% 내지 약 0.525%; 약 0.1% 내지 약 0.5%; 약 0.1% 내지 약 0.475%; 약 0.1% 내지 약 0.45%; 약 0.1% 내지 약 0.425%; 약 0.1% 내지 약 0.4%; 약 0.1% 내지 약 0.375%; 약 0.1% 내지 약 0.35%; 약 0.1% 내지 약 0.325%; 약 0.1% 내지 약 0.3%; 약 0.1% 내지 약 0.275%; 약 0.1% 내지 약 0.25%; 약 0.1% 내지 약 0.225%; 약 0.1% 내지 약 0.2%; 약 0.1% 내지 약 0.175%; 약 0.1% 내지 약 0.15%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.125% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 석고의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.125% 내지 약 1%; 약 0.15% 내지 약 1%; 약 0.175% 내지 약 1%; 약 0.2% 내지 약 1%; 약 0.225% 내지 약 1%; 약 0.25% 내지 약 1%; 약 0.275% 내지 약 1%; 약 0.3% 내지 약 1%; 약 0.325% 내지 약 1%; 약 0.35% 내지 약 1%; 약 0.375% 내지 약 1%; 약 0.4% 내지 약 1%; 약 0.425% 내지 약 1%; 약 0.45% 내지 약 1%; 약 0.475% 내지 약 1%; 약 0.5% 내지 약 1%; 약 0.525% 내지 약 1%; 약 0.55% 내지 약 1%; 약 0.575% 내지 약 1%; 약 0.6% 내지 약 1%; 약 0.625% 내지 약 1%; 약 0.65% 내지 약 1%; 약 0.675% 내지 약 1%; 약 0.7% 내지 약 1%; 약 0.725% 내지 약 1%; 약 0.75% 내지 약 1%; 약 0.775% 내지 약 1%; 약 0.8% 내지 약 1%; 약 0.825% 내지 약 1%; 약 0.85% 내지 약 1%; 약 0.875% 내지 약 1%; 약 0.9% 내지 약 1%; 약 0.925% 내지 약 1%; 약 0.95% 내지 약 1%; 또는 약 0.975% 내지 약 1% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 석고의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.1% 내지 약 0.975%; 약 0.1% 내지 약 0.95%; 약 0.1% 내지 약 0.925%; 약 0.1% 내지 약 0.9%; 약 0.1% 내지 약 0.875%; 약 0.1% 내지 약 0.85%; 약 0.1% 내지 약 0.825%; 약 0.1% 내지 약 0.8%; 약 0.1% 내지 약 0.775%; 약 0.1% 내지 약 0.75%; 약 0.1% 내지 약 0.725%; 약 0.1% 내지 약 0.7%; 약 0.1% 내지 약 0.675%; 약 0.1% 내지 약 0.65%; 약 0.1% 내지 약 0.625%; 약 0.1% 내지 약 0.6%; 약 0.1% 내지 약 0.575%; 약 0.1% 내지 약 0.55%; 약 0.1% 내지 약 0.525%; 약 0.1% 내지 약 0.5%; 약 0.1% 내지 약 0.475%; 약 0.1% 내지 약 0.45%; 약 0.1% 내지 약 0.425%; 약 0.1% 내지 약 0.4%; 약 0.1% 내지 약 0.375%; 약 0.1% 내지 약 0.35%; 약 0.1% 내지 약 0.325%; 약 0.1% 내지 약 0.3%; 약 0.1% 내지 약 0.275%; 약 0.1% 내지 약 0.25%; 약 0.1% 내지 약 0.225%; 약 0.1% 내지 약 0.2%; 약 0.1% 내지 약 0.175%; 약 0.1% 내지 약 0.15%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.125% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 소르비톨의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.5% 내지 약 8%; 약 0.75% 내지 약 8%; 약 1% 내지 약 8%; 약 1.25% 내지 약 8%; 약 1.5% 내지 약 8%; 약 1.75% 내지 약 8%; 약 2% 내지 약 8%; 약 2.25% 내지 약 8%; 약 2.5% 내지 약 8%; 약 2.75% 내지 약 8%; 약 3% 내지 약 8%; 약 3.25% 내지 약 8%; 약 3.5% 내지 약 8%; 약 3.75% 내지 약 8%; 약 4% 내지 약 8%; 약 4.25% 내지 약 8%; 약 4.5% 내지 약 8%; 약 4.75% 내지 약 8%; 약 5% 내지 약 8%; 약 5.25% 내지 약 8%; 약 5.5% 내지 약 8%; 약 5.75% 내지 약 8%; 약 6% 내지 약 8%; 약 6.25% 내지 약 8%; 약 6.5% 내지 약 8%; 약 6.75% 내지 약 8%; 약 7% 내지 약 8%; 약 7.25% 내지 약 8%; 약 7.5% 내지 약 8%; 또는 약 7.75% 내지 약 8% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 소르비톨의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.5% 내지 약 8%; 약 0.5% 내지 약 7.75%; 약 0.5% 내지 약 7.5%; 약 0.5% 내지 약 7.25%; 약 0.5% 내지 약 7%; 약 0.5% 내지 약 6.75%; 약 0.5% 내지 약 6.5%; 약 0.5% 내지 약 6.25%; 약 0.5% 내지 약 6%; 약 0.5% 내지 약 5.75%; 약 0.5% 내지 약 5.5%; 약 0.5% 내지 약 5.25%; 약 0.5% 내지 약 5%; 약 0.5% 내지 약 4.75%; 약 0.5% 내지 약 4.5%; 약 0.5% 내지 약 4.25%; 약 0.5% 내지 약 4%; 약 0.5% 내지 약 3.75%; 약 0.5% 내지 약 3.5%; 약 0.5% 내지 약 3.25%; 약 0.5% 내지 약 3%; 약 0.5% 내지 약 2.75%; 약 0.5% 내지 약 2.5%; 약 0.5% 내지 약 2.25%; 약 0.5% 내지 약 2%; 약 0.5% 내지 약 1.75%; 약 0.5% 내지 약 1.5%; 약 0.5% 내지 약 1.25%; 약 0.5% 내지 약 1%; 또는 약 0.5% 내지 약 0.75% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 소듐 벤조에이트의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.125% 내지 약 1%; 약 0.15% 내지 약 1%; 약 0.175% 내지 약 1%; 약 0.2% 내지 약 1%; 약 0.225% 내지 약 1%; 약 0.25% 내지 약 1%; 약 0.275% 내지 약 1%; 약 0.3% 내지 약 1%; 약 0.325% 내지 약 1%; 약 0.35% 내지 약 1%; 약 0.375% 내지 약 1%; 약 0.4% 내지 약 1%; 약 0.425% 내지 약 1%; 약 0.45% 내지 약 1%; 약 0.475% 내지 약 1%; 약 0.5% 내지 약 1%; 약 0.525% 내지 약 1%; 약 0.55% 내지 약 1%; 약 0.575% 내지 약 1%; 약 0.6% 내지 약 1%; 약 0.625% 내지 약 1%; 약 0.65% 내지 약 1%; 약 0.675% 내지 약 1%; 약 0.7% 내지 약 1%; 약 0.725% 내지 약 1%; 약 0.75% 내지 약 1%; 약 0.775% 내지 약 1%; 약 0.8% 내지 약 1%; 약 0.825% 내지 약 1%; 약 0.85% 내지 약 1%; 약 0.875% 내지 약 1%; 약 0.9% 내지 약 1%; 약 0.925% 내지 약 1%; 약 0.95% 내지 약 1%; 또는 약 0.975% 내지 약 1% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 소듐 벤조에이트의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.1% 내지 약 0.975%; 약 0.1% 내지 약 0.95%; 약 0.1% 내지 약 0.925%; 약 0.1% 내지 약 0.9%; 약 0.1% 내지 약 0.875%; 약 0.1% 내지 약 0.85%; 약 0.1% 내지 약 0.825%; 약 0.1% 내지 약 0.8%; 약 0.1% 내지 약 0.775%; 약 0.1% 내지 약 0.75%; 약 0.1% 내지 약 0.725%; 약 0.1% 내지 약 0.7%; 약 0.1% 내지 약 0.675%; 약 0.1% 내지 약 0.65%; 약 0.1% 내지 약 0.625%; 약 0.1% 내지 약 0.6%; 약 0.1% 내지 약 0.575%; 약 0.1% 내지 약 0.55%; 약 0.1% 내지 약 0.525%; 약 0.1% 내지 약 0.5%; 약 0.1% 내지 약 0.475%; 약 0.1% 내지 약 0.45%; 약 0.1% 내지 약 0.425%; 약 0.1% 내지 약 0.4%; 약 0.1% 내지 약 0.375%; 약 0.1% 내지 약 0.35%; 약 0.1% 내지 약 0.325%; 약 0.1% 내지 약 0.3%; 약 0.1% 내지 약 0.275%; 약 0.1% 내지 약 0.25%; 약 0.1% 내지 약 0.225%; 약 0.1% 내지 약 0.2%; 약 0.1% 내지 약 0.175%; 약 0.1% 내지 약 0.15%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.125% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 포타슘 소르베이트의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.125% 내지 약 1%; 약 0.15% 내지 약 1%; 약 0.175% 내지 약 1%; 약 0.2% 내지 약 1%; 약 0.225% 내지 약 1%; 약 0.25% 내지 약 1%; 약 0.275% 내지 약 1%; 약 0.3% 내지 약 1%; 약 0.325% 내지 약 1%; 약 0.35% 내지 약 1%; 약 0.375% 내지 약 1%; 약 0.4% 내지 약 1%; 약 0.425% 내지 약 1%; 약 0.45% 내지 약 1%; 약 0.475% 내지 약 1%; 약 0.5% 내지 약 1%; 약 0.525% 내지 약 1%; 약 0.55% 내지 약 1%; 약 0.575% 내지 약 1%; 약 0.6% 내지 약 1%; 약 0.625% 내지 약 1%; 약 0.65% 내지 약 1%; 약 0.675% 내지 약 1%; 약 0.7% 내지 약 1%; 약 0.725% 내지 약 1%; 약 0.75% 내지 약 1%; 약 0.775% 내지 약 1%; 약 0.8% 내지 약 1%; 약 0.825% 내지 약 1%; 약 0.85% 내지 약 1%; 약 0.875% 내지 약 1%; 약 0.9% 내지 약 1%; 약 0.925% 내지 약 1%; 약 0.95% 내지 약 1%; 또는 약 0.975% 내지 약 1% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 포타슘 소르베이트의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.1% 내지 약 0.975%; 약 0.1% 내지 약 0.95%; 약 0.1% 내지 약 0.925%; 약 0.1% 내지 약 0.9%; 약 0.1% 내지 약 0.875%; 약 0.1% 내지 약 0.85%; 약 0.1% 내지 약 0.825%; 약 0.1% 내지 약 0.8%; 약 0.1% 내지 약 0.775%; 약 0.1% 내지 약 0.75%; 약 0.1% 내지 약 0.725%; 약 0.1% 내지 약 0.7%; 약 0.1% 내지 약 0.675%; 약 0.1% 내지 약 0.65%; 약 0.1% 내지 약 0.625%; 약 0.1% 내지 약 0.6%; 약 0.1% 내지 약 0.575%; 약 0.1% 내지 약 0.55%; 약 0.1% 내지 약 0.525%; 약 0.1% 내지 약 0.5%; 약 0.1% 내지 약 0.475%; 약 0.1% 내지 약 0.45%; 약 0.1% 내지 약 0.425%; 약 0.1% 내지 약 0.4%; 약 0.1% 내지 약 0.375%; 약 0.1% 내지 약 0.35%; 약 0.1% 내지 약 0.325%; 약 0.1% 내지 약 0.3%; 약 0.1% 내지 약 0.275%; 약 0.1% 내지 약 0.25%; 약 0.1% 내지 약 0.225%; 약 0.1% 내지 약 0.2%; 약 0.1% 내지 약 0.175%; 약 0.1% 내지 약 0.15%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.125% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 EDTA의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.125% 내지 약 1%; 약 0.15% 내지 약 1%; 약 0.175% 내지 약 1%; 약 0.2% 내지 약 1%; 약 0.225% 내지 약 1%; 약 0.25% 내지 약 1%; 약 0.275% 내지 약 1%; 약 0.3% 내지 약 1%; 약 0.325% 내지 약 1%; 약 0.35% 내지 약 1%; 약 0.375% 내지 약 1%; 약 0.4% 내지 약 1%; 약 0.425% 내지 약 1%; 약 0.45% 내지 약 1%; 약 0.475% 내지 약 1%; 약 0.5% 내지 약 1%; 약 0.525% 내지 약 1%; 약 0.55% 내지 약 1%; 약 0.575% 내지 약 1%; 약 0.6% 내지 약 1%; 약 0.625% 내지 약 1%; 약 0.65% 내지 약 1%; 약 0.675% 내지 약 1%; 약 0.7% 내지 약 1%; 약 0.725% 내지 약 1%; 약 0.75% 내지 약 1%; 약 0.775% 내지 약 1%; 약 0.8% 내지 약 1%; 약 0.825% 내지 약 1%; 약 0.85% 내지 약 1%; 약 0.875% 내지 약 1%; 약 0.9% 내지 약 1%; 약 0.925% 내지 약 1%; 약 0.95% 내지 약 1%; 또는 약 0.975% 내지 약 1% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 EDTA의 농도를, 총 제형의 wt/wt로, 약 0.1% 내지 약 1%; 약 0.1% 내지 약 0.975%; 약 0.1% 내지 약 0.95%; 약 0.1% 내지 약 0.925%; 약 0.1% 내지 약 0.9%; 약 0.1% 내지 약 0.875%; 약 0.1% 내지 약 0.85%; 약 0.1% 내지 약 0.825%; 약 0.1% 내지 약 0.8%; 약 0.1% 내지 약 0.775%; 약 0.1% 내지 약 0.75%; 약 0.1% 내지 약 0.725%; 약 0.1% 내지 약 0.7%; 약 0.1% 내지 약 0.675%; 약 0.1% 내지 약 0.65%; 약 0.1% 내지 약 0.625%; 약 0.1% 내지 약 0.6%; 약 0.1% 내지 약 0.575%; 약 0.1% 내지 약 0.55%; 약 0.1% 내지 약 0.525%; 약 0.1% 내지 약 0.5%; 약 0.1% 내지 약 0.475%; 약 0.1% 내지 약 0.45%; 약 0.1% 내지 약 0.425%; 약 0.1% 내지 약 0.4%; 약 0.1% 내지 약 0.375%; 약 0.1% 내지 약 0.35%; 약 0.1% 내지 약 0.325%; 약 0.1% 내지 약 0.3%; 약 0.1% 내지 약 0.275%; 약 0.1% 내지 약 0.25%; 약 0.1% 내지 약 0.225%; 약 0.1% 내지 약 0.2%; 약 0.1% 내지 약 0.175%; 약 0.1% 내지 약 0.15%; 또는 약 0.1% 내지 약 0.125% 범위로 포함한다.
일부 구현예에서 본 발명의 제형은 약 5 내지 약 11; 약 5.5 내지 약 11; 약 6 내지 약 11; 약 6.5 내지 약 11; 약 7 내지 약 11; 약 7.5 내지 약 11; 약 8 내지 약 11; 약 8.5 내지 약 11; 약 9 내지 약 11; 약 9.5 내지 약 11; 약 10 내지 약 11; 또는 약 10.5 내지 약 11 범위의 pH에서 제형화될 수 있다.
일부 구현예에서 본 발명의 제형은 약 5 내지 약 11; 약 5 내지 약 10.5; 약 5 내지 약 10; 약 5 내지 약 9.5; 약 5 내지 약 9; 약 5 내지 약 8.5; 약 5 내지 약 8; 약 5 내지 약 7.5; 약 5 내지 약 7; 약 5 내지 약 6.5; 약 5 내지 약 6; 또는 약 5 내지 약 5.5 범위의 pH에서 제형화될 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 제형은 과립 형태(과립 제형)으로 제형화될 수 있다. 과립 제형을 생성하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있으며, 이에는 결정화, 침전, 팬-코팅, 유동층 코팅, 응집(예를 들어, 유동층 응집), 회전 분무, 압출, 프릴링(prilling), 구형화, 크기 감소 방법, 드럼 과립화 및/또는 고전단 과립화 등이 포함된다.
일부 구현예에서, 과립 제형은 응집, 예를 들어 분무-건조 응집; 재습윤 응집; 유동층 응집 등을 통해 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, 응집의 유형은 유동층 응집일 수 있다. 유동층 응집의 예시적인 방법은 미국 특허 제7,582,147호에 제공되어 있으며; 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 과립 제형은 유동층 응집 등을 통해 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, 과립 제형은 활성 및 불활성 성분을 유동층 내 블랭크(blank) 담체 상에 분무하는 방식으로 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, 과립 제형은 활성 및 불활성 성분(부형제)을 블랭크 담체 상에 분무하고, 팬 과립기에서 과립화하는 방식으로 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, 과립 제형은 활성 및 불활성 분말(즉, 본원에 기재된 하나 이상의 부형제)과 물을 혼합하고, 후속으로 성분들을 압출기에 통과시켜 과립화하는 방식으로 생성될 수 있다.
일부 구현예에서, 과립 제형은 활성 및 불활성 분말(즉, 본원에 기재된 하나 이상의 부형제)과 물을 혼합하고, 롤 압축으로 과립화하는 방식으로 생성될 수 있다.
예시적인 조합물, 조성물 및 제품
본 개시내용은 하나 이상의 CRIP와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물, 조성물 및 제품을 고려한다.
본원에 기재된 바와 같은 CRIP와 본원에 기재된 바와 같은 IA(예를 들어, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA의 혼합물)를 이용한 조합물, 조성물, 제품, 폴리펩타이드 및/또는 식물을 사용하여, 해충, 이의 성장, 및/또는 이의 작용에 의해 유발되는 손상, 특히 식물에 대한 손상을 방제할 수 있다.
A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA의 조합을 포함하는 조성물은 농화학적 조성물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 농화학적 조성물은, 비제한적으로, 에어로졸 및/또는 에어로졸화된 제품, 예를 들어 스프레이, 훈증제, 분말, 분진 및/또는 가스; 종자 드레싱; 경구 제제(예를 들어, 곤충 먹이 등); CRIP 및/또는 CRIP ORF(일시적으로 및/또는 안정적으로) 및 펩타이드 IA를 발현 및/또는 생산하는 유전자이식 유기체, 예를 들어 식물 또는 동물을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA를 포함하는 조합물 또는 조성물은, 본원에 기재된 바와 같은 다른 살충제 단백질 및/또는 농약과 함께, 동시에 또는 순차적으로, 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 조성물 또는 조합물은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA의 조합물과, 또 다른 유기체 유래의 하나 이상의 펩타이드 또는 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 조성물 또는 조합물은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA의 조합물과, 거미, 전갈, 말미잘, 청자고둥, 뱀, 도마뱀 또는 해파리 유래의 하나 이상의 펩타이드 또는 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 개시내용의 활성 성분은 조성물의 형태로 적용될 수 있으며, 기타 화합물과 동시에 또는 연속적으로, 처리되는 작물 영역 또는 식물에 적용될 수 있다. 이러한 화합물은 비료, 제초제, 동결보호제, 계면활성제, 세제, 살충 비누, 휴면 오일, 중합체, 및/또는 제형의 단일 적용 후 표적 영역의 장기간 투여를 가능하게 하는 지효성 또는 생분해성 담체 제형일 수 있다. 이는 또한, 목적하는 경우, 제형 분야에서 통상적으로 이용되는 추가의 농업적으로 허용 가능한 담체, 계면활성제 또는 적용 촉진성 아쥬반트와 함께인, 선택적 제초제, 화학적 살충제, 살바이러스제, 살미생물제, 살아마바제, 농약, 살진균제, 살세균제, 살선충제, 살연체동물제 또는 이러한 제제 중 몇 가지의 혼합물일 수 있다. 적합한 담체와 아쥬반트는 고체 또는 액체일 수 있으며, 제형화 기술에 통상적으로 이용되는 물질, 예를 들어 천연 또는 재생 광물질, 용매, 분산제, 습윤제, 점착제, 결합제 또는 비료에 해당할 수 있다. 마찬가지로, 제형은 살충 제형의 표적 해충에 의해 섭식 또는 소화되도록 식용 "미끼"로 준비하거나 해충 "덫"으로 만들 수 있다.
본 개시내용의 본원에 기재된 방법에 따라 생산된 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA의 조합을 함유하는 본 개시내용의 활성 성분 또는 본 개시내용의 농화학적 조성물을 적용하는 방법에는, 잎 적용, 종자 코팅 및 토양 적용이 포함된다. 일부 구현예에서, 적용 횟수와 적용 속도는 해당 해충에 의한 침입 강도에 따라 달라진다.
조성물은 분말, 분진, 펠릿, 과립, 스프레이, 에멀젼, 콜로이드, 용액 등으로 제형화될 수 있으며, 폴리펩타이드를 포함하는 세포 배양물의 건조, 동결건조, 균질화, 추출, 여과, 원심분리, 침강 또는 농축과 같은 통상적인 수단을 통해 제조될 수 있다. 적어도 하나의 이러한 살충 폴리펩타이드를 함유하는 모든 이러한 조성물에, 폴리펩타이드는 약 1 중량% 내지 약 99 중량%의 농도로 존재할 수 있다.
일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA의 조합을 함유하는 조성물은, 본 발명의 방법에 의해 주어진 영역에서 사멸하거나 수가 감소할 수 있는 감수성 해충, 예를 들어 인시목 및/또는 딱정벌레목 해충에 의한 침입을 방지하기 위해 환경 영역에 예방적으로 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, 해충은 살충 유효량의 폴리펩타이드를 섭취하거나 이와 접촉하게 된다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 살충제 조성물은 박테리아, 효모 또는 다른 세포, 결정 및/또는 포자 현탁액, 또는 단리된 단백질 구성요소를 목적하는 농업적으로 허용 가능한 담체와 함께 제형화하는 방식으로 제조될 수 있다. 조성물은 투여 전 동결건조, 동결-건조, 건조와 같은 적절한 수단으로, 또는 수성 담체, 배지 또는 적합한 희석제, 예컨대 염수 및/또는 기타 완충액 중에 제형화될 수 있다. 일부 구현예에서, 제형화된 조성물은 분진 또는 과립형 물질, 또는 오일(식물성 또는 광물성) 중 현탁액, 또는 물 또는 오일/물 에멀젼, 또는 수화제 형태이거나, 농업적 적용에 적합한 임의의 다른 담체 물질과 조합된 형태일 수 있다. 적합한 농업용 담체는 고체 또는 액체일 수 있으며, 이는 당업계에 널리 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 제형은 하나 이상의 고체 또는 액체 아쥬반트와 혼합되고, 예를 들어 통상적인 제형 기술을 사용하여 살충 조성물을 적합한 아쥬반트와 함께 균질하게 혼합, 블렌딩 및/또는 분쇄하는 다양한 수단을 통해 제조될 수 있다. 적합한 제형 및 적용 방법은 미국 특허 제6,468,523호에 기재되어 있으며, 상기 문헌은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA의 조합을 포함하는 조성물은 또한 추가 성분, 예를 들어 제초제, 화학적 살충제, 살바이러스제, 살미생물제, 살아마바제, 농약, 살진균제, 살세균제, 살선충제, 살연체동물제, 폴리펩타이드, 및/또는 전술한 것들 중 하나 이상의 혼합물을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물은 제형, 예를 들어 극성 비양성자성 용매 및/또는 물로 구성된 제형에 포함될 수 있고/있거나, 여기서 극성 비양성자성 용매는 1 wt% 내지 99 wt%의 양으로 존재하고, 극성 양성자성 용매는 1 wt% 내지 99 wt%의 양으로 존재하고, 물은 0 wt% 내지 98 wt%의 양으로 존재한다. 극성 비양성자성 용매 제형은 MSO를 함유하는 경우에 특히 효과적이다. MSO는 약 80% 내지 85%의 석유 오일의 양으로의 대두 오일의 메틸 에스테르와 15% 내지 20%의 계면활성제를 사용하는 메틸화된 종자 오일과 계면활성제 블렌드이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물은 2가지 유형의 구성요소를 포함하며, 여기서 제1 유형의 구성요소는 살충 작용제(IA)이고, 제2 유형의 구성요소는 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)이며, 여기서 IA도 CRIP도 융합 단백질의 일부가 아니고; 조합물은 살충 효과를 생성하고; IA 대 CRIP의 비는 약 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000이다.
조합물: 말미잘 독소와 살충 작용제(IA)
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와 말미잘에서 유도된 하나 이상의 폴리펩타이드를 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 말미잘 폴리펩타이드는 하기에서 단리될 수 있다: 악티니아 에퀴나; 아네모니아 에리트라에아; 아네모니아 술카타; 아네모니아 비리디스; 안토플레우라 엘레간티시마; 안토플레우라 푸스코비리디스; 안토플레우라 잔토그라미카; 부노도소마 카이사룸; 부노도소마 칸기쿰; 부노도소마 그라눌리페라; 헤테락티스 크리스파; 파라시시오니스 악티노스톨로이데스; 라디안투스 파우모텐시스; 또는 스토이칵티스 헬리안투스. 또 다른 구현예에서, 말미잘 독소는 Av2; Av3; 또는 이의 변이체일 수 있다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와 하기 말미잘 독소 중 하나 이상을 포함한다: 독소 AETX-1(AETX I), 독소 APETx1, 독소 APETx2, 항고혈압성 단백질 BDS-1(혈압 강하 물질 I), 항고혈압성 단백질 BDS-2(혈압 강하 물질 II), 신경독소 Bg-2(Bg II), 신경독소 Bg-3(Bg III), 독소 APE 1-1, 독소 APE 1-2, 신경독소-1(독소 ATX-I), 신경독소-1(신경독소 I), 신경독소 1(독소 RTX-I), 신경독소 1(독소 SHP-I), 독소 APE 2-1, 독소 APE 2-2, 신경독소-2(독소 ATX-II)(일명 AV2), 신경독소-2(독소 AFT-II), 신경독소 2(독소 RTX-II), 신경독소 2(신경독소 II), 신경독소 3 동족체(신경독소 III 동족체), 신경독소 3(독소 RTX-III), 신경독소 3(신경독소-III), 신경독소 4(독소 RTX-IV), 신경독소-5(독소 ATX-V), 신경독소 5(독소 RTX-V), 안토플레우린-A(독소 AP-A), 안토플레우린-B(독소 AP-B), 안토플레우린-C(독소 AP-C), 포타슘 채널 독소 Aek, 포타슘 채널 독소 Bgk, 주요 신경독소 BcIII, 신경독소 BcIV, 칸기톡신(CGTX), 포타슘 채널 독소 ShK, 독소 PCR1(PCR1-2), 독소 PCR2(PCR2-5), 독소 PCR3(PCR2-1), 독소 PCR4(PCR2-10), 독소 PCR6(PCR3-7), 칸기톡신-2(칸기톡신 II) 또는 칸기톡신-3(칸기톡신 III).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 371 내지 411에 제시된 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 말미잘 폴리펩타이드를 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 자신을 방어하는 데 사용되는 다양한 독소를 보유하는 말미잘, 아네모니아 비리디스에서 유도된 하나 이상의 폴리펩타이드를 포함한다. 아네모니아 비리디스에서 유도된 독소 중 하나는 신경독소 "Av3"이다. Av3은 수용체 부위 3에서 전압 개폐형 소듐(Na+) 채널의 비활성화를 저해하여 수축성 마비를 유도하는 III형 말미잘 독소이다. Av3 독소가 부위 3에 결합하면, 소듐 채널의 비활성화된 상태가 불안정해지고, 이는 결국 채널을 개방된 상태로 유지시킨다(문헌[Blumenthal et al., Voltage-gated sodium channel toxins: poisons, probes, and future promise. Cell Biochem Biophys. 2003; 38(2):215-38] 참조). Av3은 갑각류 및 곤충 소듐 채널에 대해 높은 선택성을 나타내고, 포유류 소듐 채널에 대해 낮은 선택성을 나타낸다(문헌[Moran et al., Sea anemone toxins affecting voltage-gated sodium channels - molecular and evolutionary features, Toxicon. 2009 Dec 15; 54(8): 1089-1101] 참조).
서열번호 44의 아미노산 서열을 갖는 아네모니아 비리디스 유래의 예시적인 Av3 폴리펩타이드가 제공된다. AVP 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 AVP와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 말미잘 Av3에서 유도된 하나 이상의 폴리펩타이드를 포함하며, 예를 들어 하나 이상의 Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP)는 서열번호 44로부터 하기 아미노산 변이를 가질 수 있다: 서열번호 44에 대해 R1K의 N-말단 아미노산 치환, 야생형 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"에서 "KSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"(서열번호 45)로 폴리펩타이드 서열의 변경; 서열번호 44에 대해 C-말단 아미노산이 결실될 수 있음, 야생형 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"에서 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPK"(서열번호 46)로 폴리펩타이드 서열의 변경; 및/또는 N-말단 돌연변이 및 C-말단 돌연변이, 여기서 N-말단 아미노산은 서열번호 44에 대해 R1K의 치환을 가질 수 있고, C-말단 아미노산은 서열번호 44에 대해 결실되어 폴리펩타이드 서열을 야생형 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"에서 "KSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPK"(서열번호 47)로 변경할 수 있음.
AVP 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 AVP와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 곤충을 방제하는 방법은 AVP를 곤충에 적용하는 단계와, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 상기 곤충에 적용하는 단계를 포함한다. 전술한 적용은 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, AVP와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 살충제 내성 곤충(예를 들어, Bt 내성 곤충)에 적용될 수 있다. AVP 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 AVP와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 예시적인 Av3 펩타이드 또는 이의 변이체는, 2019년 9월 13일차 출원된 "Av3 Mutant Insecticidal Polypeptides and Methods for Producing and Using Same"이라는 발명의 명칭의 본 출원인의 PCT 출원(출원 번호 PCT/US19/51093)에 기재되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용, 및 Av3 펩타이드 또는 이의 변이체에 대한 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 44 내지 47, 및 371 내지 411에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 말미잘 펩타이드를 포함한다.
조합물: 거미 독소와 살충 작용제(IA)
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 거미에서 유도된, 단리된 및/또는 유래한 하나 이상의 폴리펩타이드를 포함한다.
일부 구현예에서, 거미 독소는 하기 종 중 하나에서 단리될 수 있다: 포네우트리아 니그리벤테르; 알라겔레나 오풀렌타; 쿠피에니우스 살레이; 플렉트레우리스 트리스티스; 코레미오크네미스 발리다; 하플로펠마 후웨눔; 아겔레나 오리엔탈리스; 알라겔레나 오풀렌타; 세게스트리아 플로렌티나; 아포마스투스 슈린게리; 포네우트리아 케이세린기; 마크로텔레 기가스; 마크로텔레 라베니; 미술레나 브라들레이; 피레네이테가 룩투오사; 포네우트리아 레이디; 일라와라 위샤르티; 유크라토셀루스 콘스트릭투스; 아겔레놉시스 아페르타; 홀로레나 쿠르타; 옥시오페스 리네아투스; 브라키펠마 알비셉스; 또는 브라키펠마 스미티.
일부 구현예에서, 거미 독소는 하드로니케 베르수타(블루마운틴 깔대기 그물 거미로도 알려짐), 하드로니케 베네나타, 아트락스 로부스투스, 아트락스 포르미다빌리스 또는 아트락스 인펜수스에서 단리될 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 하기 거미 독소 중 하나 이상과 조합될 수 있다: U13-크테니톡신-Pn1a, U13-크테니톡신-Pn1b, U13-크테니톡신-Pn1c, U1-아가톡신-Aop1a, U1-크테니톡신-Cs1a, U1-네메톡신-Csp1a, U1-네메톡신-Csp1b, U1-네메톡신-Csp1c, U1-플레크톡신-Pt1a, U1-플레크톡신-Pt1b, U1-플레크톡신-Pt1c, U1-플레크톡신-Pt1d, U1-플레크톡신-Pt1f, U1-테라포톡신-Cv1a, U1-테라포톡신-Hh1a_1, U1-테라포톡신-Hh1a_2, U1-테라포톡신-Hh1a_3, U1-테라포톡신-Hh1b, U1-테라포톡신-Hh1c_1, U1-테라포톡신-Hh1c_2, U1-테라포톡신-Hh1d, U1-테라포톡신-Hh1e, U1-테라포톡신-Hh1f_1, U1-테라포톡신-Hh1f_2, U1-테라포톡신-Hh1f_3, U1-테라포톡신-Hh1f_4, U1-테라포톡신-Hh1g, U2-아가톡신-Ao1a, U2-아가톡신-Aop1a, U2-크테니톡신-Cs1a, U2-크테니톡신-Pn1a, U2-시르타우톡신-As1a, U2-세게스트리톡신-Sf1a, U2-세게스트리톡신-Sf1b, U2-세게스트리톡신-Sf1c, U2-세게스트리톡신-Sf1d, U2-세게스트리톡신-Sf1e, U2-세게스트리톡신-Sf1f, U2-세게스트리톡신-Sf1g, U2-세게스트리톡신-Sf1h, U2-테라포톡신-Hh1a, U3-시르타우톡신-As1a, U3-플레크톡신-Pt1a, U5-크테니톡신-Pn1a, U7-크테니톡신-Pk1a, β-헥사톡신-Mg1a, β-헥사톡신-Mr1a, Γ-크테니톡신-Pn1a, δ-악티노포디톡신-Mb1a, δ-아마우로비톡신-Pl1a, δ-아마우로비톡신-Pl1b, δ-아마우로비톡신-Pl1c, δ-아마우로비톡신-Pl1d, δ-크테니톡신-Asp2e, δ-크테니톡신-Pn1a_1, δ-크테니톡신-Pn1a_2, δ-크테니톡신-Pn1b, δ-크테니톡신-Pn2a, δ-크테니톡신-Pn2b, δ-크테니톡신-Pn2cδ-크테니톡신-Pr2d, δ-헥사톡신-Ar1a, δ-헥사톡신-Hv1a, δ-헥사톡신-Hv1b, δ-헥사톡신-Iw1a, δ-헥사톡신-Mg1a, δ-헥사톡신-Mg1b, κ-헥사톡신-Hf1a, κ-헥사톡신-Hv1a, κ-헥사톡신-Hv1b, κ-헥사톡신-Hv1c_1, κ-헥사톡신-Hv1c_2, κ-헥사톡신-Hv1c_3, κ-헥사톡신-Hv1c_4, κ-헥사톡신-Hv1d, κ-헥사톡신-Hv1e, κ-테라포톡신-Ec2a, κ-테라포톡신-Ec2b, μ-아가톡신-Aa1a, μ-아가톡신-Aa1b, μ-아가톡신-Aa1c, μ-아가톡신-Aa1d, μ-아가톡신-Aa1e, μ-아가톡신-Aa1f, μ-아가톡신-Hc1a, μ-아가톡신-Hc1b, μ-아가톡신-Hc1c, μ-헥사톡신-Mg1a, μ-헥사톡신-Mg1b, μ-헥사톡신-Mg1c, μ-헥사톡신-Mg2a, μ-테라포톡신-Hh1a, ω-악티노포디톡신-Mb1a, ω-아가톡신-Aa4a, ω-아가톡신-Aa4b, ω-아가톡신-Aa4c, ω-헥사톡신-Ar1a_1, ω-헥사톡신-Ar1a_3, ω-헥사톡신-Ar1b_1, ω-헥사톡신-Ar1d_1, ω-헥사톡신-Ar1d_4, ω-헥사톡신-Ar1e_1, ω-헥사톡신-Ar1f, ω-헥사톡신-Ar1g_1, ω-헥사톡신-Ar1h, ω-헥사톡신-Ar2a, ω-헥사톡신-Ar2b, ω-헥사톡신-Ar2c, ω-헥사톡신-Ar2d, ω-헥사톡신-Ar2e_1, ω-헥사톡신-Ar2e_2, ω-아트라코톡신-Asp2a, ω-헥사톡신-Asp2b, ω-헥사톡신-Hf1a, ω-헥사톡신-Hi1a_1, ω-헥사톡신-Hi1a_2, ω-헥사톡신-Hi1a_3, ω-헥사톡신-Hi1b_1, ω-헥사톡신-Hi1b_10, ω-헥사톡신-Hi1b_2, ω-헥사톡신-Hi1b_5, ω-헥사톡신-Hi1b_8, ω-헥사톡신-Hi1c_1, ω-헥사톡신-Hi1c_2, ω-헥사톡신-Hv1a, ω-헥사톡신-Hv1b, ω-헥사톡신-Hv1c, ω-헥사톡신-Hv1d, ω-헥사톡신-Hv1e, ω-헥사톡신-Hv1f, ω-헥사톡신-Hv1g_1, ω-헥사톡신-Hv1g_5, ω-헥사톡신-Hv1g_6, ω-헥사톡신-Hv2a, ω-헥사톡신-Hv2b_1, ω-헥사톡신-Hv2b_2, ω-헥사톡신-Hv2b_3, ω-헥사톡신-Hv2b_4, ω-헥사톡신-Hv2b_5, ω-헥사톡신-Hv2b_6, ω-헥사톡신-Hv2b_7, ω-헥사톡신-Hv2c, ω-헥사톡신-Hv2d_1, ω-헥사톡신-Hv2d_2, ω-헥사톡신-Hv2d_3, ω-헥사톡신-Hv2e, ω-헥사톡신-Hv2f, ω-헥사톡신-Hv2g, ω-헥사톡신-Hv2h_1, ω-헥사톡신-Hv2h_2, ω-헥사톡신-Hv2i, ω-헥사톡신-Hv2j_1, ω-헥사톡신-Hv2j_2, ω-헥사톡신-Hv2k, ω-헥사톡신-Hv2l, ω-헥사톡신-Hv2m_1, ω-헥사톡신-Hv2m_2, ω-헥사톡신-Hv2m_3, ω-헥사톡신-Hv2n, ω-헥사톡신-Hv2o, ω-헥사톡신-Hvn1a, ω-헥사톡신-Hvn1b_1, ω-헥사톡신-Hvn1b_2, ω-헥사톡신-Hvn1b_3, ω-헥사톡신-Hvn1b_4, ω-헥사톡신-Hvn1b_6, ω-헥사톡신-Iw2a, ω-옥소톡신-Ol1b, ω-플레크톡신-Pt1a, ω-테라포톡신-Asp1a, ω-테라포톡신-Asp1f, ω-테라포톡신-Asp1g, ω-테라포톡신-Ba1a, ω-테라포톡신-Ba1b, ω-테라포톡신-Bs1a, ω-테라포톡신-Bs2a 또는 ω-테라포톡신-Hh2a.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 서열번호 192 내지 278, 및 281 내지 370에 제시된 아미노산을 갖는 하나 이상의 거미 독소와 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 하나 이상의 ACTX 펩타이드와 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 하기 ACTX 펩타이드 중 하나 이상과 조합될 수 있다: U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, rκ-ACTX-Hv1c, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω-ACTX-Hv1a+2.
예시적인 ACTX 펩타이드에는, 하기가 포함된다: 아미노산 서열 "QYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 60)을 갖는 U-ACTX-Hv1a; 아미노산 서열 "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a; 아미노산 서열 "SPTCIPSGQPCPYNENCCSQSCTFKENENGNTVKRCD"(서열번호 62)을 갖는 오메가-ACTX-Hv1a; 아미노산 서열 "GSSPTCIPSGQPCPYNENCCSQSCTFKENENGNTVKRCD"(서열번호 63)을 갖는 오메가-헥사톡신-Ar1d; 및 아미노산 서열 "GSAICTGADRPCAACCPCCPGTSCKAESNGVSYCRKDEP"(서열번호 64)을 갖는 카파-헥사톡신-Hv1c.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B7, B9 내지 B40, 및 B42 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 상기 언급된 예시적인 ACTX 펩타이드 중 하나 이상과 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하나 이상의 U-ACTX 펩타이드, 오메가-ACTX 펩타이드 및/또는 카파-ACTX 펩타이드를 포함한다. ACTX 펩타이드 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B7, B9 내지 B40, 및 B42 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 ACTX와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 곤충을 방제하는 방법은 ACTX 펩타이드를 곤충에 적용하는 단계와, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 상기 곤충에 적용하는 단계를 포함한다. 전술한 적용은 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, ACTX 펩타이드와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 살충제 내성 곤충(예를 들어, Bt 내성 곤충)에 적용될 수 있다. ACTX 펩타이드 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 ACTX 펩타이드와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 192 내지 278 및 281 내지 370에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 거미 독소를 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B7, B9 내지 B40, 및 B42 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 60 내지 64 및 594에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 ACTX를 포함한다.
Γ-CNTX-Pn1a와 살충 작용제(IA)
일부 바람직한 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 하나 이상의 Γ-CNTX-Pn1a 또는 γ-CNTX-Pn1a 독소와 조합될 수 있다. Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드는 브라질 무장 거미, 포네우트리아 니그리벤테르에서 유도된 살충 신경독소이다. Γ-CNTX-Pn1a는 이온성 글루타메이트 수용체(GRIN)의 N-메틸-D-아스파르테이트(NMDA) 아형과 소듐 채널을 표적으로 한다. 예시적인 Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드는 MKVAIVFLSLLVLAFASESIEENREEFPVEESARCADINGACKSDCDCCGDSVTCDCYWSDSCKCRESNFKIGMAIRKKFC(서열번호 65)의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 곤충을 방제하는 방법은 Γ-CNTX-Pn1a를 곤충에 적용하는 단계와, IA를 상기 곤충에 적용하는 단계를 포함한다. 전술한 적용은 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, Γ-CNTX-Pn1a와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (Γ-CNTX-Pn1a) 내성 곤충에 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, Γ-CNTX-Pn1a와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (Bt 독소) 내성 곤충에 적용될 수 있다. Γ-CNTX-Pn1a 대 IA의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 Γ-CNTX-Pn1a와 TVP의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 Γ-CNTX-Pn1a와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 모두 포함한다. 조합물 또는 조성물은, 건조 중량 기준으로, 대략 하기 비 중 임의의 것 또는 전부에서 선택되는 Γ-CNTX-Pn1a 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비를 가질 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 일부 구현예에서, 조성물은, 건조 중량 기준으로, 대략 하기 비에서 선택되는 Γ-CNTX-Pn1a 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비를 가질 수 있다: 0:50, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 0.5:99.5, 0.1:99.9 및 0.01:99.99, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 Γ-CNTX-Pn1a 펩타이드를 포함한다.
야생형 U1-아가톡신, TVP 및 살충 작용제(IA)
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않음.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 가짐.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고; X7은 글리신임.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고; X7은 존재하지 않음.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고; X6 및 X7은 존재하지 않음.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 서열번호 2 내지 15 또는 49 내지 53 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 포함함.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 서열번호 17 내지 30 또는 54 내지 58 중 어느 하나에 제시된 폴리뉴클레오타이드 서열, 또는 이의 상보적 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩됨.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 둘 이상의 TVP의 동종중합체 또는 이종중합체를 추가로 포함하고; 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이함.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 TVP를 포함하는 융합된 단백질이고; 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있음.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; TVP는 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 TVP를 포함하는 융합된 단백질이고; 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있고; 링커는 곤충의 내장 또는 혈림프 내부에서 절단 가능함.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 적어도 95% 또는 적어도 96% 또는 적어도 97% 또는 적어도 98% 또는 적어도 99% 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 TVP를 포함한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; Z1이 T인 경우, TVP는 글리코실화됨.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 TVP를 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 야생형 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드를 포함한다.
조합물: 전갈 독소와 살충 작용제(IA)
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 전갈에서 단리된 하나 이상의 독소와 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 하기 독소에서 선택되는 하나 이상의 전갈 독소를 포함한다: 임페라톡신-A(IpTxa), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 10.2(코바톡신-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 11.1(파라부톡신-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 11.2(파라부톡신-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 11.3(파라부톡신-10), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 12.1(부탄톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 12.2(부탄톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 12.3(부탄톡신 유사 펩타이드), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 15.1(펩타이드 Aa1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 15.3(독소 AmmTX3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 15.6(디스크레핀), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 16.1(타물로톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 19.1(신경독소 BmBKTx1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.3(이베리오톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.4(림바토톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.7(Lqh 15-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.9(혼고톡신-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.10(파라부톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.11(슬로톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 1.13(카리브도톡신 c), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.1(녹시우스톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.2(마르가톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.3(CllTx1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.4(녹시우스톡신-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.5(혼고톡신-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.6(혼고톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.7(CllTx2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.8(독소 Ce1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.9(독소 Ce2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.10(독소 Ce3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.11(독소 Ce4), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 2.12(독소 Ce5), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.1(칼리오톡신-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.2(아기톡신-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.3(아기톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.4(아기톡신-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.7(OsK-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.8(카리브도톡신 유사 펩타이드 Bs 6), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 3.9(칼리오톡신-3), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 4.1(티티우스톡신 K-알파), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 4.3(독소 TdK1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 4.4(독소 Tc30), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.1(레이우로톡신-1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.2(레이우로톡신 I 유사 독소 P05), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.4(타마핀), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 5.5(타마핀-2), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.1(포타슘 채널 차단 독소 1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.2(마우로톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.3(신경독소 HsTX1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.12(아누로크톡신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.13(스피녹신), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.14(HgeTx1), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 7.2(독소 PiTX-K-베타), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.2(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.3(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.4(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.5(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 1.6(에르그톡신 유사 단백질 1), 포타슘 채널 독소 감마-KTx 4.2(에르그톡신 유사 단백질 5), 인섹토톡신-I1, 작은 독소(펩타이드 I), 인섹토톡신-I3(BeI3), 인섹토톡신-I4(BeI4), 인섹토톡신-I5A, 신경독소 8(신경독소 VIII), 가능성이 있는 독소 Lqh 8/6, 신경독소 9(신경독소 IX), 마우로칼신(MCa), 클로로톡신 유사 펩타이드 Bs 14(Bs14), 클로로톡신(CTX), 신경독소 P2, 인섹토톡신-I5(BeI5), 포타슘 채널 독소 알파-KTx 6.15(헤미톡신), 독소 GaTx1, AahIT1, 파이오도톡신, BaIT2, BotIT1, BotIT2, BmK M1, BmK-M2, BmK-M4, BmK-M7, BmK IT-AP, Bom3, Bom4, BjaIT, Bj-xtrIT, BjIT2, LqhaIT, Lqhb1, LqhIT2, LqhdprIT3a, Lgh-xtrIT, Lqh3, Lqh6, Lqh7, LqqIT1, LqqIT2, Lqq3, OD1, Ts1, Tz1, 또는 이들의 조합.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 88 내지 191에 제시된 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 전갈 독소를 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와 하나 이상의 전갈 독소를 포함하며, 여기서 독소는 임페라톡신일 수 있다. 임페라톡신은 아프리카 전갈(판디누스 임페라토르)의 독액에서 유도된 펩타이드 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와 하나 이상의 임페라톡신을 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와 하나 이상의 임페라톡신을 포함하며, 여기서 임페라톡신은 임페라톡신 A(IpTx-a) 또는 이의 변이체이다. 일부 구현예에서, IpTx-a는 GDCLPHLKRCKADNDCCGKKCKRRGTNAEKRCR(서열번호 66)의 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 곤충을 방제하는 방법은 IpTx-a를 곤충에 적용하는 단계와, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 상기 곤충에 적용하는 단계를 포함한다. 전술한 적용은 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, IpTx-a와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (IpTx-a) 내성 곤충에 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, IpTx-a와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (Bt 독소) 내성 곤충에 적용될 수 있다. IpTx-a 대 IA의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 IpTx-a와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 IpTx-a와 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 모두 포함한다. 조합물 또는 조성물은, 건조 중량 기준으로, 대략 하기 비 중 임의의 것 또는 전부에서 선택되는 IpTx-a 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비를 가질 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 일부 구현예에서, 조성물 또는 조성물은, 건조 중량 기준으로, 대략 하기 비에서 선택되는 IpTx-a 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비를 가질 수 있다: 0:50, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 0.5:99.5, 0.1:99.9 및 0.01:99.99, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 하나 이상의 AaIT1 독소와 조합될 수 있다. 단백질 독소, AalT1은, 북아프리카 사막 전갈(안드록토누스 아우스트랄리스) 유래의 소듐 채널 부위 4 독소이다. 예시적인 AaIT1 독소는 서열번호 88(NCBI 수탁번호 P01497.2)에 따른 아미노산 서열을 갖는 펩타이드이다. AaIT1은 활성화 반응 에너지 장벽을 낮추어 곤충 소듐 채널을 강제로 개방시키는 부위 4 독소이다.
일부 구현예에서, 곤충을 방제하는 방법은 AaIT1을 곤충에 적용하는 단계와, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 상기 곤충에 적용하는 단계를 포함한다. 전술한 적용은 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, AaIT1과 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (AaIT1) 내성 곤충에 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, AaIT1과 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (Bt 독소) 내성 곤충에 적용될 수 있다. AaIT1 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 AaIT1과 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와, 서열번호 66, 88 내지 191에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 전갈 펩타이드 또는 전갈 독소를 포함한다.
조합물: 코노톡신과 살충 작용제(IA)
코노톡신은 청자고둥에서 단리된 독소이며; 이러한 독소는 신경 전달을 방해하는 방식으로 작용한다. 코노톡신의 예에는, α-, ω-, μ-, δ- 및 κ-코노톡신이 포함된다. 간략하게, α-코노톡신(및 αA-&φ-코노톡신)은 니코틴성 리간드 개폐형 채널을 표적으로 하고; ω-코노톡신은 전압 개폐형 칼슘 채널을 표적으로 하고; μ-코노톡신은 전압 개폐형 소듐 채널을 표적으로 하고; δ-코노톡신은 전압 개폐형 소듐 채널을 표적으로 하고; κ-코노톡신은 전압 개폐형 포타슘 채널을 표적으로 한다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 코누스 속에 속하는 유기체에서 단리된 하나 이상의 펩타이드와 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 코누스 속에 속하는 유기체에서 단리된 하나 이상의 펩타이드와 조합될 수 있으며, 여기서 단리된 펩타이드는 코노톡신이다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 코누스 아마디스; 코누스 카투스; 코누스 에르미네우스; 코누스 게오그라푸스; 코누스 글로리아마리스; 코누스 키노시타이; 코누스 마구스; 코누스 마르모레우스; 코누스 푸르푸라센스; 코누스 스테르쿠스무스카룸; 코누스 스트리아투스; 코누스 텍스틸; 또는 코누스 툴리파에서 단리된 하나 이상의 펩타이드와 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)는 하나 이상의 α-코노톡신, αA-코노톡신, φ-코노톡신, ω-코노톡신, μ-코노톡신, δ-코노톡신 또는 κ-코노톡신과 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 곤충을 방제하는 방법은 코노톡신을 곤충에 적용하는 단계와, 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 상기 곤충에 적용하는 단계를 포함한다. 전술한 적용은 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, 코노톡신과 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (코노톡신) 내성 곤충에 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, 코노톡신과 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 (Bt 독소) 내성 곤충에 적용될 수 있다. 코노톡신 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 코노톡신과 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 코노톡신과 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 모두 포함한다. 조합물 또는 조성물은, 건조 중량 기준으로, 대략 하기 비 중 임의의 것 또는 전부에서 선택되는 코노톡신 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비를 가질 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 일부 구현예에서, 조성물 또는 조성물은, 건조 중량 기준으로, 대략 하기 비에서 선택되는 코노톡신 대 살충 작용제(IA)(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 비를 가질 수 있다: 0:50, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 0.5:99.5, 0.1:99.9 및 0.01:99.99, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합.
조합물: 진균/진균 독소와 CRIP
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 곤충병원성 진균이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 곤충병원성 진균에서 생산된 펩타이드, 단백질 또는 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 아스코마이세테 진균 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 코르디시피타세아에과 진균 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 아칸토마이세스 독소; 아스코폴리포러스 독소; 뷰베리아 독소; 비자사무하 독소; 코르디셉스 독소; 코레미옵시스 독소; 엔교돈티움 독소; 기벨룰라 독소; 히페르데르미움 독소; 인섹티콜라 독소; 이사리아 독소; 레카니실리움 독소; 미크로힐룸 독소; 피토코르디셉스 독소; 슈도기벨룰라 독소; 로티페로프토라 독소; 심플리실리움 독소; 또는 토루비엘라 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 속에서 선택되는 진균 유기체 또는 이로부터의 독소이다. 뷰베리아; 메타리지움; 파에실로마이세스; 레카니실리움; 노무라에아; 이사리아; 히르수텔라; 소로스포렐라; 아스페르길루스; 코르디셉스; 엔토모프토라; 주프토라; 판도라; 엔토모파가; 코니디오볼루스 및 바시디오볼루스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 뷰베리아 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 독소 중 하나이다: 뷰베리아 알바 독소; 뷰베리아 아모르파 독소; 뷰베리아 아레나리아 독소; 뷰베리아 아시아티카 독소; 뷰베리아 아우스트랄리스 독소; 뷰베리아 바시아나 독소; 코르디셉스 바시아나 독소; 뷰베리아 브롱니아르티 독소; 뷰베리아 브룸프티 독소; 뷰베리아 칼레도니카 독소; 뷰베리아 키로멘시스 독소; 뷰베리아 코코룸 독소; 뷰베리아 크레타세아 독소; 뷰베리아 실린드로스포라 독소; 뷰베리아 델라크로이시 독소; 뷰베리아 덴사 독소; 뷰베리아 데펜덴스 독소; 뷰베리아 도리포라에 독소; 뷰베리아 에푸사 독소; 뷰베리아 에피가에아 독소; 뷰베리아 펠리나 독소; 뷰베리아 게오데스 독소; 뷰베리아 글로불리페라 독소; 뷰베리아 헤이미 독소; 뷰베리아 호플로켈리 독소; 뷰베리아 키푸카에 독소; 뷰베리아 락사 독소; 뷰베리아 말라위엔시스 독소; 뷰베리아 메도겐시스 독소; 뷰베리아 멜로론타에 독소; 뷰베리아 누비콜라 독소; 뷰베리아 오리자에 독소; 뷰베리아 파라독사 독소; 뷰베리아 파라넨시스 독소; 뷰베리아 파라시티카 독소; 뷰베리아 페텔로티 독소; 뷰베리아 슈도바시아나 독소; 뷰베리아 릴레이 독소; 뷰베리아 루브라 독소; 뷰베리아 시오타에 독소; 뷰베리아 소볼리페라 독소; 뷰베리아 스피카타 독소; 뷰베리아 스테파노데리스 독소; 뷰베리아 설푸레센스 독소; 뷰베리아 순기 독소; 뷰베리아 테넬라 독소; 뷰베리아 툰드렌시스 독소; 뷰베리아 벨라타 독소; 뷰베리아 바로아에 독소; 뷰베리아 베르미코니아 독소; 뷰베리아 벡산스 독소; 뷰베리아 비안나이 독소; 또는 뷰베리아 비렐라 독소.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 뷰베리아 바시아나 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 뷰베리신이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 화학식 C45H57N3O9을 갖는 뷰베리신이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 화학식 C46H59N3O9을 갖는 "뷰베리신 A" 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 화학식 C47H61N3O9을 갖는 "뷰베리신 B" 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하며, 여기서 IA는 아스코마이세테 진균 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 코르디시피타세아에과 진균 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 아칸토마이세스 독소; 아스코폴리포러스 독소; 뷰베리아 독소; 비자사무하 독소; 코르디셉스 독소; 코레미옵시스 독소; 엔교돈티움 독소; 기벨룰라 독소; 히페르데르미움 독소; 인섹티콜라 독소; 이사리아 독소; 레카니실리움 독소; 미크로힐룸 독소; 피토코르디셉스 독소; 슈도기벨룰라 독소; 로티페로프토라 독소; 심플리실리움 독소; 또는 토루비엘라 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 뷰베리아 독소이다.
조합물: 렉틴과 CRIP
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물은 하나 이상의 IA와 하나 이상의 CRIP를 포함할 수 있으며, 여기서 IA는 CRIP에 융합되지도 작동 가능하게 연결되지도 않고, IA는 갈란투스 니발리스 응집소(GNA)이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 렉틴이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 렉틴이고, 상기 렉틴은 CRIP에 융합되지도 작동 가능하게 연결되지도 않는다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 렉틴 중 하나일 수 있다: 갈란투스 니발리스 응집소(GNA); 삼부쿠스 니그라 렉틴(SNA); 마악키아 아무렌시스-II(MAL-II); 에리트리나 크리스타갈리 렉틴(ECL); 리시누스 코무니스 응집소-I(RCA); 땅콩 응집소(PNA); 밀배아 응집소(WGA); 그리포니아 심플리시폴리아-II(GSL-II); Con A; 렌스 쿨리나리스 응집소(LCA); 만노오스 결합 렉틴(MBL); BanLec; 갈렉틴; 파세올루스 불가리스 백혈구응집소(PHA-L); 파세올루스 불가리스 적혈구응집소(PHA-E); 및/또는 다투라 스트라모니움 렉틴(DSL).
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 서열번호 35, 595 내지 615에서 선택되는 아미노산 서열, 또는 이의 변이체를 갖는 렉틴이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 렉틴 중 하나이다: 갈란투스 니발리스 응집소(GNA)(서열번호 35); 삼부쿠스 니그라(유럽 엘더) 렉틴(SNA)(서열번호 596); 마악키아 아무렌시스 종자 유래 백혈구응집 렉틴(MAL)(서열번호 597); 에리트리나 크리스타갈리 렉틴(ECL)(서열번호 598); 리시누스 코무니스 응집소-I(RCA)(서열번호 599); 땅콩 응집소(PNA)(서열번호 600); 응집소 이소렉틴 1(WGA1)(서열번호 601); 콘카나발린-A(CNA) 전구체(서열번호 602); 자칼린 유사 렉틴(사슬 A)(서열번호 603); 렉틴 알파-1 사슬(서열번호 604); 렉틴 CaBo(서열번호 605); 렉틴 ConGF(서열번호 606); 만노오스 특이적 렉틴 알파 사슬(서열번호 607); 베타-갈락토시드 특이적 렉틴 1(서열번호 608); 갈렉틴-3(서열번호 609); 만노오스/글루코오스 특이적 렉틴 Cramoll(서열번호 610); 베타-갈락토시드 특이적 렉틴 3(서열번호 611); 락토오스 결합 렉틴-2(서열번호 612); 갈렉틴-1(서열번호 613); 알파-N-아세틸갈락토사민 특이적 렉틴(서열번호 614); Favin(서열번호 615); 또는 이들의 조합.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 서열번호 35, 595 내지 615 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
조합물: 키티나아제와 CRIP
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 키티나아제이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 트리코데르마 비리데 유래의 키티나아제이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 서열번호 620에 제시된 아미노산 서열을 갖는 키티나아제이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 서열번호 620에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 81%, 적어도 82%, 적어도 83%, 적어도 84%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 적어도 99.5%, 적어도 99.6%, 적어도 99.7%, 적어도 99.8%, 적어도 99.9% 또는 100% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 키티나아제일 수 있다.
조합물: 아자디라크타 인디카 화합물과 CRIP
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 아자디라크타 인디카 화합물이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 아자디라크틴; 아자디라디온; 아자디라디오놀리드; 데아세틸게두닌; 데아세틸아자디라크티놀; 데스푸라노아자디라디온; 에폭시아자디라디온; 게두닌; 마흐무딘; 님프루이틴 A; 님프루이틴 B; 님볼리드; 님빈; 니몰리시놀; 오키닌 아세테이트; 살라닌; 살라놀; 알파-니모락톤; 베타-니모락톤; 2',3'-디히드로살라닌; 3-데아세틸살라닌; 6-데아세틸님빈; 7-아세틸-16,17-데히드로-16-히드록시네오트리킬레논; 7-벤조일님보시놀; 7-데아세틸-7-벤조일에폭시아자디라디온; 7-데아세틸-7-벤조일게두닌; 7-데아세틸-17-에피니몰리시놀; 15-히드록시아자디라디온; 17-에피-17-히드록시아자디라디온; 17-에피아자디라디온; 20,21,22,23-테트라히드로-23-옥소아자디론; 22,23-디히드로니모시놀; 또는 28-데옥소님볼리드이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 아자디라크틴이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 화학식을 갖는 아자디라크틴이다: C35H44O16.
조합물: 붕소 화합물과 CRIP
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 붕소 화합물이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 붕산, 디보론 테트라히드록시드, 보레이트, 산화붕소, 보란, 또는 이들의 조합이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 수성 매질에서 붕소의 산화물을 생성하는 보란 및/또는 보레이트 에스테르이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 붕산, 보레이트(예를 들어, 염기성 소듐 보레이트(보락스)), 또는 붕산과 보레이트의 혼합물이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 보레이트이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 중 하나이다: 퍼보레이트, 메타보레이트, 테트라보레이트, 옥타보레이트, 보레이트 에스테르, 금속성 보레이트(예를 들어, 소듐 보레이트, 아연 보레이트 및 포타슘 보레이트), 디소듐 테트라보레이트 10수화물, 디소듐 옥타보레이트 4수화물, 소듐 메타보레이트, 소듐 퍼보레이트 1수화물, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 테트라보레이트 5수화물, 소듐 테트라보레이트, 구리 메타보레이트, 아연 보레이트, 바륨 메타보레이트, 또는 이들의 임의의 조합.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 보락스(예를 들어, 소듐 보레이트 10수화물-10몰 Na2B4O7.10H2O 또는 소듐 보레이트 5수화물-5몰 Na2B4O7.5H2O)이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 보락스에 대한 대체물로서 유효량으로 이용될 수 있는(또는 보락스와 또는 서로 조합하여 유효량으로 이용될 수 있는) 붕소 화합물이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 무수 보락스(Na2B4O7); 암모늄 테트라보레이트((NH4)2B4O7.4H2O); 암모늄 펜타보레이트((NH4)2B10O16.8H2O); 포타슘 펜타보레이트(K2B10O16.8H2O); 포타슘 테트라보레이트(K2B4O7.4H2O); 소듐 메타보레이트((8몰) Na2B2O4.8H2O); 소듐 메타보레이트((4몰) Na2B2O4.4H2O); 디소듐 테트라보레이트 10수화물(Na2B4O7.10H2O); 디소듐 테트라보레이트 5수화물(Na2B4O7.5H2O); 디소듐 옥타보레이트 4수화물(Na2B8O13.4H2O); 또는 이들의 조합이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트, 소듐 메타보레이트, 소듐 테트라보레이트 10수화물, 산화붕소, 탄화붕소, 질화붕소, 삼브롬화붕소, 삼염화붕소 및 삼플루오린화붕소로 이루어지는 군에서 선택되는 붕소 화합물이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 붕산이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 화학식 H3BO3을 갖는 붕산이다.
조합물: 바이러스와 CRIP
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 아스코바이러스과 바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 아스코바이러스, 예컨대 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3a; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3b; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3c; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3d; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3e; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3f; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3g; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3h; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3j; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1a; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2a; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3i; 스포도프테라 아스코바이러스; 스포도프테라 엑시구아 아스코바이러스 5a; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1c; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1d; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2b; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2c; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2d; 또는 트리코플루시아 니 아스코바이러스 6b이다.
일부 구현예에서, IA는 아스코바이러스과의 바이러스일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, IA는 토우르스바이러스, 예컨대 디아드로무스 풀켈루스 토우르스바이러스; 디아드로무스 풀켈루스 아스코바이러스 4a; 또는 다시네우라 주주비폴리아 토우르스바이러스 2a일 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 덴소바이러스과의 바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 암비덴소바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 암비덴소바이러스이다: 아스테로이드 암비덴소바이러스 1; 불가사리 관련 덴소바이러스; 블라토데안 암비덴소바이러스 1; 페리플라네타 풀리기노사 덴소바이러스; 페리플라네타 풀리기노사 덴소바이러스 Guo/2000; 블라토데안 암비덴소바이러스 2; 블라텔라 게르마니카 덴소바이러스 1; 십각목 암비덴소바이러스 1; 케락스 쿠아드리카리나투스 덴소바이러스; 쌍시목 암비덴소바이러스 1; 쿨렉스 피피엔스 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 1; 플라노코쿠스 시트리 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 2; 디사피스 플란타기네아 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 3; 미주스 페르시카에 덴소바이러스; 미주스 페르시카에 니코티아나에 덴소바이러스; 막시목 암비덴소바이러스 1; 솔레놉시스 인빅타 덴소바이러스; 인시목 암비덴소바이러스 1; 갈레리아 멜로넬라 덴소바이러스; 주노니아 코에니아 덴소바이러스; 주노니아 코에니아 덴소바이러스 pBRJ/1990; 미팀나 로레이 덴소바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 덴소바이러스; 메뚜기목 암비덴소바이러스 1; 아케타 도메스티카 덴소바이러스; 미분류 암비덴소바이러스; 테트라니쿠스 우르티카에 관련 암비덴소바이러스; 미분류 덴소바이러스; 암비덴소바이러스 CaaDV1; 암비덴소바이러스 CaaDV2; 아트라토 덴소 유사 바이러스; 아트라토 덴소 유사 바이러스 1; 덴소바이러스 SC1065; 덴소바이러스 SC1118; 덴소바이러스 SC116; 덴소바이러스 SC2121; 덴소바이러스 SC2209; 덴소바이러스 SC2228; 덴소바이러스 SC2886; 덴소바이러스 SC3749; 덴소바이러스 SC3908; 덴소바이러스 SC4092; 덴소바이러스 SC444; 덴소바이러스 SC525; 디아포리나 시트리 덴소바이러스; 디아트라에아 사카랄리스 덴소바이러스; 루핀 배설물 관련 덴소바이러스; 및 루핀 배설물 관련 덴소바이러스 2.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 엔토모폭스바이러스과의 바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 알파엔토모폭스바이러스; 베타엔토모폭스바이러스; 디아카스미모르파 엔토모폭스바이러스; 멜라노플루스 산구이니페스 엔토모폭스바이러스; 또는 일부 지금까지 미분류된 엔토모폭스바이러스과 바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 엔토모폭스바이러스과 바이러스이다: 아노말라 쿠프레아 엔토모폭스바이러스; 아독소피에스 혼마이 엔토모폭스바이러스; 아독소피에스 혼마이 엔토모폭스바이러스 'L'; 암삭타 무레이 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 비에니스 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 엔토모폭스바이러스 'L'; 헬리오티스 아르미게라 엔토모폭스바이러스; 미팀나 세파라타 엔토모폭스바이러스; 미팀나 세파라타 엔토모폭스바이러스 'L'; 미분류 베타엔토모폭스바이러스; 디아카스미모르파 론기카우다타 엔토모폭스바이러스; 멜라노플루스 산구이니페스 엔토모폭스바이러스 'O'; 아나크리디움 아에깁티움 엔토모폭스바이러스; 칼립타무스 이탈리쿠스 엔토모폭스바이러스; 키로노무스 데코루스 엔토모폭스바이러스; 곰포세루스 시비리쿠스 엔토모폭스바이러스; 호모나 코페아리아 엔토모폭스바이러스; 리네피테마 후밀레 엔토모폭스바이러스 1; 오에달레우스 아시아티쿠스 엔토모폭스바이러스; 및 슈달레티아 세파라타 엔토모폭스바이러스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 이리도바이러스과 바이러스, 예를 들어 이리도바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 이리도바이러스과 바이러스이다: 티풀라 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 31; 아르마딜리디움 불가레 이리데센트 바이러스; 포필리아 자포니카 이리데센트 바이러스; 포르셀리오 스카베르 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 6; 그릴루스 비마쿨라투스 이리도바이러스; 미분류 이리도바이러스; 아세테스 에리트라에우스 이리도바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 이리데센트 바이러스; 아르마딜리디움 데코룸 이리데센트 바이러스; 바라문디 퍼치 이리도바이러스; 블루길 개복치 이리도바이러스; 일반 주둥치 이리도바이러스; 크림슨 스내퍼 이리도바이러스; 데캅테루스 마크로소마 이리도바이러스; 가자 미누타 이리도바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 16; 코스텔리트라 제알란디카 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 2; 세리세스티스 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 23; 헤테로니쿠스 아라토르 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 24; 아피스 세라나 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 29; 테네브리오 몰리토르 이리데센트 바이러스; 이리도바이러스 바라문디/Quang Ninh/VNM/2008; 이리도바이러스 IV31; 일본 바다배스 이리도바이러스; 라고세팔루스 셀레라투스 이리도바이러스; 라테스 칼카리페르 이리도바이러스; 레이오그나투스 스플렌덴스 이리도바이러스; 마블고비 이리도바이러스; 구형 배트피쉬 이리도바이러스; 파라프리스티포마 트릴리네아툼 이리도바이러스; 퍼치 이리도바이러스 603-2/중국; 폴리닥틸루스 섹타리우스 이리도바이러스; 포르셀리오 시쿨로시덴탈리스 이리데센트 바이러스; 피랄타 루테올라 이리데센트 바이러스; 라나 템포라리아 영국 이리도바이러스 1; 라나 템포라리아 영국 이리도바이러스 2; 실버 씨브림 이리도바이러스; 가물치 이리도바이러스; 돌가자미 이리도바이러스 603-3/중국; 돌가자미 이리도바이러스 724/중국; 철갑상어 이리도바이러스; 시노두스 인디쿠스 이리도바이러스; 및 트리코니스쿠스 파노르미덴시스 이리데센트 바이러스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 누디바이러스과 바이러스, 예를 들어 알파누디바이러스, 베타누디바이러스, 또는 일부 지금까지 미분류된 누디바이러스과 바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 누디바이러스과 바이러스이다: 그릴루스 비마쿨라투스 누디바이러스; 오릭테스 리노세로스 누디바이러스; 헬리오티스 제아 누디바이러스; 헬리코베르파 제아 누디바이러스 2; 알로미리나 바이러스; 드로소필라 이누빌라 누디바이러스; 드로소필라 누디바이러스 RLU-2011; 에스파르토 바이러스; 호마루스 감마루스 누디바이러스; 칼리테아 바이러스; 마크로브라키움 누디바이러스 CN-SL2011; 마우테른바흐 바이러스; 닐라파르바타 루겐스 내인성 누디바이러스; 페나에우스 모노돈 누디바이러스; 티풀라 올레라세아 누디바이러스; 및 토멜로소 바이러스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 이플라바이러스과 바이러스이다: 안테라에아 페르니 이플라바이러스; 브레비코리네 브라시카에 바이러스; 브레비코리네 브라시카에 바이러스-UK; 날개기형바이러스; 카쿠고 바이러스; VDV-1/DWV 재조합; 디노캄푸스 코시넬라에 마비 바이러스; 엑트로피스 오블리쿠아 바이러스; 엑트로피스 오블리쿠아 피코르나 유사 바이러스; 감염성 무름병 바이러스; 감염성 무름병 바이러스 누에 단리물; 익소데스 홀로시클루스 이플라바이러스; 리구스 리네올라리스 바이러스 1; 리만트리아 디스파르 이플라바이러스 1; 닐라파르바타 루겐스 꿀 바이러스 1; 페리나 누다 바이러스; 삭브루드 바이러스; 삭브루드 바이러스 CSBV-LN/중국/2009; 느린 꿀벌 마비 바이러스; 스포도프테라 엑시구아 이플라바이러스 1; 스포도프테라 엑시구아 이플라바이러스 2; 바로아 데스트룩토르 바이러스 1; 미분류 이플라바이러스; ACT 벼룩 이플라바이러스; 아에데스 벡산스 이플라바이러스; 아르미게레스 이플라바이러스; 박쥐 이플라바이러스; 꿀벌 이플라바이러스 1; 블랙베리 이플라바이러스 A; 블랙베리 이플라바이러스 B; 봄빅스 모리 이플라바이러스; 브레베스 이플라바이러스; 배추좀나방 이플라바이러스; 포르미카 엑섹타 바이러스 2; 하에마피살리스 플라바 이플라바이러스; 헬리코니우스 에라토 이플라바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 이플라바이러스; 깔다구 이플라바이러스 90C0; 미니옵테루스 풀리기노수스 이플라바이러스; 모쿠 바이러스; 나소니아 비트리페니스 바이러스; 피리잘 이플라바이러스; 프사모테틱스 알리에누스 이플라바이러스 1; 론도니아 이플라바이러스 1; 론도니아 이플라바이러스 2; 스카포이데우스 티타누스 이플라바이러스 1; 스카포이데우스 티타누스 이플라바이러스 2; VDV-1/DWV 재조합 4; 베스파 벨루티나 모쿠 바이러스; 또는 자이스티쿠스 크리스타투스 이플라바이러스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 바큘로바이러스과의 바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 알파바큘로바이러스, 베타바큘로바이러스, 델타바큘로바이러스, 감마바큘로바이러스, 또는 지금까지 미분류된 바큘로바이러스과 바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 알파바큘로바이러스 바이러스이다: 아독소피에스 혼마이 핵다각체병바이러스; 아그로티스 입실론 다중 핵다각체병바이러스; 아그로티스 세게툼 핵다각체병바이러스 A; 아그로티스 세게툼 핵다각체병바이러스 B; 안테라에아 페르니 핵다각체병바이러스; 안테라에아 프로일레이 핵다각체병바이러스; 필로사미아 신티아 리시니 핵다각체병바이러스 바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 다중 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 칼리포르니카 다중 핵다각체병바이러스; 아나그라파 팔시페라 MNPV; 아우토그라파 칼리포르니카 핵다각체병바이러스; 갈레리아 멜로넬라 MNPV; 플루텔라 자일로스텔라 다중 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누 MNPV; 라키플루시아 오우 MNPV; 봄빅스 모리 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스 S2; 봄빅스 모리 핵다각체병바이러스 K1; 부주라 수프레사리아 핵다각체병바이러스; 카톱실리아 포모나 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 DEF 다중 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 다중 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 알파바큘로바이러스; 코리스토네우라 무리나나 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 칼시테스 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 칼시테스 SNPV TF1-A; 크리소데익시스 인클루덴스 핵다각체병바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 SNPV IE; 클라니스 빌리네아타 핵다각체병바이러스; 다시키라 푸디분다 핵다각체병바이러스; 엑트로피스 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 에피피아스 포스트비타나 핵다각체병바이러스; 유프록티스 슈도콘스페르사 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 NPV NNg1; 헬리코베르파 아르미게라 NPV 균주 호주; 헬리코베르파 아르미게라 핵다각체병바이러스 G4; 헬리코베르파 아르미게라 SNPV; 헬리코베르파 SNPV AC53; 헬리코베르파 제아 단일 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 종 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 sp. 핵다각체병바이러스; 히판트리아 쿠네아 핵다각체병바이러스; 람브디나 피셀라리아 핵다각체병바이러스; 레우카니아 세파라타 핵다각체병바이러스; 로노미아 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 로노미아 오블리쿠아 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 디스파르 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 자일리나 핵다각체병바이러스; 마메스트라 브라시카에 다중 핵다각체병바이러스; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스 A; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스 B; 헬리코베르파 아르미게라 다중 핵다각체병바이러스; 마루카 비트라타 핵다각체병바이러스; 미팀나 우니푼크타 핵다각체병바이러스; 오페로프테라 브루마타 핵다각체병바이러스; 오르기아 류코스티그마 핵다각체병바이러스; 오르기아 슈도츄가타 다중 핵다각체병바이러스; 옥시플락스 오크라세아 핵다각체병바이러스; 페리고니아 루스카 핵다각체병바이러스; 페리고니아 루스카 단일 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑시구아 다중 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑시구아 핵다각체병바이러스(균주 US); 스포도프테라 프루기페르다 다중 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리투라 핵다각체병바이러스; 수크라 주주바 핵다각체병바이러스; 티사노플루시아 오리칼세아 핵다각체병바이러스; 트리코플루시아 니 단일 핵다각체병바이러스; 위세아나 시그타나 핵다각체병바이러스; 미분류 알파바큘로바이러스; 아브락사스 그로술라리아타 핵다각체병바이러스; 악티아스 셀레네 핵다각체병바이러스; 아독소피에스 오라나 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 바닐라에 MNPV; 아그로티스 엑스클라마티오니스 핵다각체병바이러스; 아그로티스 입실론 다중 캡시드 핵다각체병바이러스; 아모르비아 쿠네아캅사 핵다각체병바이러스; 아모르비아 쿠네아나 핵다각체병바이러스; 암펠로파가 루비기노사 핵다각체병바이러스; 암삭타 알비스트리가 핵다각체병바이러스; 아나그라파 팔시페라 다중 핵다각체병바이러스; 안테라에아 폴리페무스 핵다각체병바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 핵다각체병바이러스; 아포케이마 시네라리움 핵다각체병바이러스; 아포리아 크라타에기 핵다각체병바이러스; 아르킵스 세라시보라누스 핵다각체병바이러스; 아르킵스 로사누스 핵다각체병바이러스; 아타쿠스 리시니 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 빌로바 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 감마 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 니그리시그나 핵다각체병바이러스; 보아르미아 비스토르타타 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스; 부세올라 푸스카 핵다각체병바이러스; 카트포실리아 포모나 핵다각체병바이러스; 세랍테릭스 그라미니스 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 디베르사나 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 핵다각체병바이러스; 코리자그로티스 아욱실리아리스 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 인클루덴스 NPV; 콜로라디아 판도라 알파바큘로바이러스; 콜로라디아 판도라 핵다각체병바이러스; 콘딜로리자 베스티기알리스 MNPV; 콘딜로리자 베스티기알리스 다중 핵다각체병바이러스; 크립토플레비아 펠타스티카 핵다각체병바이러스; 시클로프라그마 운단스 핵다각체병바이러스; 다시키라 플라기아타 핵다각체병바이러스; 덴드롤리무스 키쿠키 핵다각체병바이러스; 디아파니아 풀베룰렌탈리스 핵다각체병바이러스; 디오네 주노 MNPV tmk1/ARG/2003; 디오네 주노 핵다각체병바이러스; 디르피아 페루비아누스 핵다각체병바이러스; 엑트로피스 그리세센스 핵다각체병바이러스; 에피노티아 그라니탈리스 핵다각체병바이러스; 유프록티스 디그라마 핵다각체병바이러스; 길피니아 헤르시니아에 핵다각체병바이러스; 헬리코니우스 에라토 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아술타 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 겔로토포에온 단일 핵다각체병바이러스; 헬리오티스 펠티게라 SNPV; 헬리오티스 제아 핵다각체병바이러스; 헤메로캄파 베투스타 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 알파바큘로바이러스; 히포시드라 인픽사리아 NPV; 히포시드라 탈라카 NPV; 이라고이데스 파시아타 핵다각체병바이러스; 주노니아 코에니아 핵다각체병바이러스; 류코마 살리시스 핵다각체병바이러스; 리만트리아 마투라 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 모나카 핵다각체병바이러스; 리만트리아 자일리나 핵다각체병바이러스 2; 말라코소마 알파바큘로바이러스; 말라코소마 아메리카눔 핵다각체병바이러스; 말라코소마 칼리포르니쿰 핵다각체병바이러스; 말라코소마 칼리포르니쿰 플루비알레 핵다각체병바이러스; 말라코소마 디스트리아 핵다각체병바이러스; 말라코소마 뉴스트리아 핵다각체병바이러스; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스; 네오파시아 알파바큘로바이러스; 네피티아 판타스마리아 핵다각체병바이러스; 님팔리스 이오 핵다각체병바이러스; 오크 자벌레 알파바큘로바이러스; 오피우사 디스준겐스 핵다각체병바이러스; 오르기아 아나르토이데스 핵다각체병바이러스; 오르기아 에리카에 핵다각체병바이러스; 오르기아 슈도츄가타 단일 캡시드 핵다각체병바이러스; 파놀리스 플라메아 핵다각체병바이러스; 페리드로마 알파바큘로바이러스; 페리드로마 마르가리토사 핵다각체병바이러스; 페리나 누다 핵다각체병바이러스; 프리가니디아 칼리포르니카 핵다각체병바이러스; 플루시아 아쿠타 핵다각체병바이러스; 플루시아 오리칼세아 핵다각체병바이러스; 플루텔라 마쿨리페니스 핵다각체병바이러스; 슈달레티아 알파바큘로바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 핵다각체병바이러스; 프테롤로세라 암플리코르니스 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누 단일 핵다각체병바이러스; 사미아 신티아 핵다각체병바이러스; 스필라르크티아 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 스필로소마 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 스필로소마 파스마 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 코스미오이데스 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 에리다니아 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑셈프타 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 다중 캡시드 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리투라 MNPV; 스포도프테라 리투라 핵다각체병바이러스 II; 스포도프테라 테리콜라 핵다각체병바이러스; 티네올라 비셀리엘라 핵다각체병바이러스; 트로이데스 아에아쿠스 핵다각체병바이러스; 위세아나 세르비나타 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 종 핵다각체병바이러스; 말라코소마 종 알파바큘로바이러스; 말라코소마 종 핵다각체병바이러스; 네오파시아 종 알파바큘로바이러스; 및 미확인 핵다각체병바이러스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 베타바큘로바이러스 바이러스이다: 아독소피에스 오라나 과립병바이러스; 아그로티스 세게툼 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 A; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마 과립병바이러스; 에리니스 엘로 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에 과립병바이러스; 모시스 라티페스 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A; 슈달라티아 우니푼크타 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸 과립병바이러스; 아카에아 자나타 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타 과립병바이러스; 아우토그라파 감마 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스 베타바큘로바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스; 크네파시아 론가나 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아 과립병바이러스; 나타다 나라리아 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아 과립병바이러스; 판데미스 리미타타 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라 과립병바이러스; 피에리스 라파에 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스; 스코토그라마 트리폴리 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라 과립병바이러스; 및 모시스 종 과립병바이러스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 델타바큘로바이러스 바이러스이다: 쿨렉스 니그리팔푸스 핵다각체병바이러스; 및 쿨렉스 니그리팔푸스 NPV 플로리다/1997.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 감마바큘로바이러스 바이러스이다: 네오디프리온 레콘테이 핵다각체병바이러스; 네오디프리온 레콘테이 NPV(균주 캐나다); 네오디프리온 세르티페르 핵다각체병바이러스; 미분류 감마바큘로바이러스; 및 네오디프리온 아비에티스 NPV.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 군에서 선택되는 지금까지 미분류된 바큘로바이러스과 바이러스이다: 아카에아 파베르 핵다각체병바이러스; 아에데스 솔리시탄스 핵다각체병바이러스; 아글라이스 우르티카에 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 바닐라에 핵다각체병바이러스; 아노미스 사불리페라 핵다각체병바이러스; 안테라에아 야마마이 핵다각체병바이러스; 안토필라 파브리시아나 과립병바이러스; 아로아 디스칼리스 핵다각체병바이러스; 바큘로바이러스 페나에이; 카드라 카우텔라 핵다각체병바이러스; 칼리옵시스 주노디 핵다각체병바이러스; 코테시아 마르기니벤트리스 바큘로바이러스; 시노사르가 오르나타 핵다각체병바이러스; 다르나 나라리아 과립병바이러스; 다르나 트리마 과립병바이러스; 에라니스 데폴리아리아 핵다각체병바이러스; 유플렉시아 루시파라 과립병바이러스; 유프록티스 크리소로에아 핵다각체병바이러스; 유프록티스 시밀리스 핵다각체병바이러스; 생식선 특이적 바이러스; 호모나 코페아리아 과립병바이러스; 히블라에아 푸에라 핵다각체병바이러스; 이다에아 세리아타 핵다각체병바이러스; 주노니아 코에니아 과립병바이러스; 라시오캄파 쿠에르쿠스 핵다각체병바이러스; 레미라 임파릴리스 핵다각체병바이러스; 마하세나 코르베티 핵다각체병바이러스; 멜란크라 페르시카리아에 과립병바이러스; 오페로프테라 브루세아타 핵다각체병바이러스; 오르기아 안티쿠아 핵다각체병바이러스; 오르기아 믹스타 핵다각체병바이러스; 파키트리나 필라르기리아 핵다각체병바이러스; 파레우카에테스 슈도인술라타 핵다각체병바이러스; 페나에우스 모노돈 핵다각체병바이러스; 팔레라 부세팔라 핵다각체병바이러스; 폴리고니아 c-알붐 핵다각체병바이러스; 사미아 리시니 핵다각체병바이러스; 스필로소마 루테아 과립병바이러스; 스포도프테라 알불라 핵다각체병바이러스; 트라발라 비슈노우 핵다각체병바이러스; 우라노타에니아 사피리나 핵다각체병바이러스; 우르바누스 프로테우스 핵다각체병바이러스; 우테테이사 풀켈라 핵다각체병바이러스; 바네사 아탈란타 핵다각체병바이러스; 바네사 카르두이 핵다각체병바이러스; 및 위세아나 세르비나타 과립병바이러스.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 아독소피에스 오라나 과립병바이러스; 아그로티스 세게툼 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 A; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마 과립병바이러스; 에리니스 엘로 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에 과립병바이러스; 모시스 라티페스 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A; 슈달라티아 우니푼크타 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸 과립병바이러스; 미분류 베타바큘로바이러스; 아카에아 자나타 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타 과립병바이러스; 아우토그라파 감마 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스 베타바큘로바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스; 크네파시아 론가나 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아 과립병바이러스; 나타다 나라리아 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아 과립병바이러스; 판데미스 리미타타 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라 과립병바이러스; 피에리스 라파에 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스; 스코토그라마 트리폴리 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라 과립병바이러스; 또는 모시스 종 과립병바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 시디아 포모넬라 과립병바이러스이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스이다.
조합물: 박테리아/박테리아 독소와 CRIP
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 박테리아이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 박테리아에서 단리된 펩타이드 또는 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 박테리아 독소이다.
포토랍두스 및/또는 이로부터의 독소
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 제노랍두스 속 또는 포토랍두스 속에 속하는 박테리아에서 단리된 박테리아 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 포토랍두스 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 포토랍두스 독소이다: 포토랍두스 아쿠르스티 독소; 포토랍두스 아심비오티카 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 ATCC 43949 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 DSM 17609 독소; 포토랍두스 보데이 독소; 포토랍두스 카리베아넨시스 독소; 포토랍두스 시네레아 독소; 포토랍두스 하이나넨시스 독소; 포토랍두스 헤테로랍디티스 독소; 포토랍두스 카야이 독소; 포토랍두스 카니 독소; 포토랍두스 카니 NC19 독소; 포토랍두스 카니 아종 구아나주아텐시스 독소; 포토랍두스 클레이니 독소; 포토랍두스 라우몬디 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 클라르케이 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 TTO1 독소; 포토랍두스 루미네센스 독소; 포토랍두스 루미네센스 BA1 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII H75HRPL105 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII HiPL101 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 ATCC 29999 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 멕시카나 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 소노렌시스 독소; 포토랍두스 남나오넨시스 독소; 포토랍두스 노에니에푸텐시스 독소; 포토랍두스 스타케브란드티 독소; 포토랍두스 타스마니엔시스 독소; 포토랍두스 템페라타 독소; 포토랍두스 템페라타 J3 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 포라메 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 M1021 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 Meg1 독소; 포토랍두스 트라센시스 독소; 미분류 포토랍두스 독소; 포토랍두스 종 독소; 포토랍두스 종 3014 독소; 포토랍두스 종 3240 독소; 포토랍두스 종 Az29 독소; 포토랍두스 종 BS21 독소; 포토랍두스 종 CbKj163 독소; 포토랍두스 종 CRCIA-P01 독소; 포토랍두스 종 ENY 독소; 포토랍두스 종 FL2122 독소; 포토랍두스 종 FL480 독소; 포토랍두스 종 FsIw96 독소; 포토랍두스 종 GDd233 독소; 포토랍두스 종 H3086 독소; 포토랍두스 종 H3107 독소; 포토랍두스 종 H3240 독소; 포토랍두스 종 HB301 독소; 포토랍두스 종 HB78 독소; 포토랍두스 종 HB89 독소; 포토랍두스 종 HIT 독소; 포토랍두스 종 HO1 독소; 포토랍두스 종 HUG-39 독소; 포토랍두스 종 IT 독소; 포토랍두스 종 JUN 독소; 포토랍두스 종 KcTs129 독소; 포토랍두스 종 KJ13.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ14.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ24.5 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ29.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ37.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ7.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ8.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.4 TH 독소; 포토랍두스 종 KMD74 독소; 포토랍두스 종 KOH 독소; 포토랍두스 종 MID10 독소; 포토랍두스 종 MOL 독소; 포토랍두스 종 MSW_058 독소; 포토랍두스 종 MSW_079 독소; 포토랍두스 종 NK2.1 TH 독소; 포토랍두스 종 NK2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 NnMt2h 독소; 포토랍두스 종 NP1 독소; 포토랍두스 종 OH10 독소; 포토랍두스 종 OnIr40 독소; 포토랍두스 종 OnKn2 독소; 포토랍두스 종 PB10.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB16.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB32.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB37.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB39.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB41.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB45.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB50.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB51.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB52.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB54.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB59.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB6.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB68.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB7.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB78.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.4 TH 독소; 포토랍두스 종 Pjun 독소; 포토랍두스 종 RW14-46 독소; 포토랍두스 종 S10-54 독소; 포토랍두스 종 S12-55 독소; 포토랍두스 종 S14-60 독소; 포토랍두스 종 S15-56 독소; 포토랍두스 종 S5P8-50 독소; 포토랍두스 종 S7-51 독소; 포토랍두스 종 S8-52 독소; 포토랍두스 종 S9-53 독소; 포토랍두스 종 SJ2 독소; 포토랍두스 종 SN259 독소; 포토랍두스 종 SP1.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP16.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP21.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP3.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP7.3 TH 독소; 포토랍두스 종 TyKb140 독소; 포토랍두스 종 UK76 독소; 포토랍두스 종 VMG 독소; 포토랍두스 종 WA21C 독소; 포토랍두스 종 WkSs43 독소; 포토랍두스 종 Wx13 독소; 포토랍두스 종 X4 독소; 포토랍두스 종 YNb90 독소; 및 포토랍두스 종 ZM 독소.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 포토랍두스 루미네센스 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 a"(Tca)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 c"(Tcc)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 d"(Tcd)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 TcaA 단백질(서열번호 616), TcaB 단백질(서열번호 617), TcaC 단백질(서열번호 618) 및 TcaZ 단백질(서열번호 619)을 포함하는 Tca이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 서열번호 616 내지 619에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 a"(Tca)이다.
예르시니아 유기체 및 이로부터의 생성물
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 예르시니아 속에 속하는 하나 이상의 유기체이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 예르시니아 속에 속하는 유기체에서 단리된 하나 이상의 펩타이드이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 종 중 하나 이상이다: 예르시니아 알도바에이브, 예르시니아 알렉시시아에, 예르시니아 베르코비에리, 예르시니아 카나리아에, 예르시니아 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 팔레아르크티카, 예르시니아 엔토모파가, 예르시니아 프레데릭세니, 예르시니아 히베르니카, 예르시니아 인테르메디아, 예르시니아 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 로케스테렌시스, 예르시니아 마실리엔시스, 예르시니아 몰라레티, 예르시니아 누르미, 예르시니아 페카네니, 예르시니아 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 메디에발리스, 예르시니아 페스티스 아종 오리엔탈리스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 페스티스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 로데이, 예르시니아 루케리, 예르시니아 시밀리스 또는 예르시니아 와우테르시.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하기 종 중 하나 이상에서 단리된 하나 이상의 펩타이드이다: 예르시니아 알도바에이브, 예르시니아 알렉시시아에, 예르시니아 베르코비에리, 예르시니아 카나리아에, 예르시니아 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 팔레아르크티카, 예르시니아 엔토모파가, 예르시니아 프레데릭세니, 예르시니아 히베르니카, 예르시니아 인테르메디아, 예르시니아 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 로케스테렌시스, 예르시니아 마실리엔시스, 예르시니아 몰라레티, 예르시니아 누르미, 예르시니아 페카네니, 예르시니아 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 메디에발리스, 예르시니아 페스티스 아종 오리엔탈리스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 페스티스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 로데이, 예르시니아 루케리, 예르시니아 시밀리스 또는 예르시니아 와우테르시.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 예르시니아 엔토모파가 또는 예르시니아 누르미이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 예르시니아 엔토모파가 또는 예르시니아 누르미에서 단리된 하나 이상의 펩타이드이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 "Yen-TC" 독소 복합체(TC)이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하나 이상의 TC 단백질이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 TcA, TcB 및 TcC이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 예르시니아 엔토모파가 박테리아 및/또는 이로부터의 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하나 이상의 예르시니아 누르미 박테리아 및/또는 이로부터의 독소이다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 살충 작용제(IA)와 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)를 포함하며, 여기서 IA는 하나 이상의 예르시니아 엔토모파가 박테리아 및/또는 이로부터의 독소, 및 하나 이상의 예르시니아 누르미 박테리아 및/또는 이로부터의 독소이다.
조합물: Bt 독소, CRIP, 및 이들의 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 IA 그룹 번호 8; 예를 들어 IA 번호 B124 내지 B150에 포함된 하나 이상의 IA와 조합된 표 A의 임의의 하나 이상의 CRIP를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 하기를 포함할 수 있다: (1) A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP; 및 (2) 하나 이상의 Bt 펩타이드 및/또는 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 하기를 포함할 수 있다: (1) A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP; 및 (2) 하나 이상의 Bt 펩타이드; 여기서 조합물 또는 조성물은 추가 작용제(예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 농약 및/또는 살충제)를 추가로 포함함.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 하기를 포함할 수 있다: (1) A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP; 및 (2) 하나 이상의 Bt 펩타이드; 여기서 조합물 또는 조성물은 부형제를 추가로 포함함.
일부 구현예에서, 곤충을 방제하는 방법은 바실러스 투린기엔시스(Bt) 단백질을 곤충의 서식지에 적용하는 단계, 이어서 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP를 상기 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 Bt 및/또는 CRIP는 동시에 또는 순차적으로 적용된다.
일부 구현예에서, 조합물 및/또는 조성물은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와, 본원에 기재된 및/또는 본원의 표에 열거된 및/또는 서열목록에 제시된 바와 같은 하나 이상의 Bt 독소, 예를 들어 Cry 단백질, Cyt 단백질 또는 Vip 단백질을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP는 바실러스 투린기엔시스에서 단리된 단백질과 조합될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP는 δ-내독소(예를 들어, 결정(Cry) 독소 및/또는 세포용해(Cyt) 독소); 식물생장 살충 단백질(Vip); 분비된 살충 단백질(Sip); 또는 Bin 유사 독소와 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 부포자 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신(sphaericolysin), 알베올리신(alveolysin) 또는 인한신 유사 단백질인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 부포자 결정 독소이고, 부포자 결정 독소는 δ-내독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 δ-내독소, 즉, 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신(aerolysin) 패밀리 독소 또는 시톨리신(cytolysin)인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 δ-내독소, 즉, 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 δ-내독소, 즉, 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 하기 Cry 단백질 중 하나 이상과 조합된, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP를 포함한다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1, 및/또는 Cry78Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 하나 이상의 Bt 독소와 조합된 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP를 포함하며, 여기서 상기 Bt 독소는 Cry 독소, Cyt 독소 또는 Vip 독소(예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 Cry, Cyt 또는 Vip 중 임의의 것)이다.
일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP는 서열번호 412 내지 461에 제시된 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 Cry 단백질과 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 하기 Cyt 단백질 중 하나 이상과 조합된, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP를 포함한다: Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및/또는 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 462 내지 481에 제시된 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 Cyt 단백질과 조합된, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP를 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질, 즉, 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질, 즉, Vip인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서; 여기서 Bt 독소는 Vip, 즉, Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP는 하기 Vip 단백질 중 하나 이상과 조합될 수 있다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및/또는 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP는 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 Vip 단백질과 조합될 수 있다.
A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 하나 이상의 Bt 펩타이드를 포함하는 전술한 조합물 또는 조성물 중 임의의 것은, 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. CRIP 대 Bt 펩타이드의 비는 표적화되는 곤충 해충과 사용자의 필요에 따라 달라질 것이다.
일부 구현예에서, Bt 단백질과 CRIP는 (Bt 단백질) 내성 곤충에 적용될 수 있다. Bt 대 CRIP의 비는, 건조 중량 기준으로, 적어도 약 하기 비에서 선택될 수 있다: 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개의 임의의 조합. 조성물 중 Bt와 CRIP의 총 농도는 하기 농도%에서 선택된다: 0%, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 또는 100%, 또는 이러한 값들 중 임의의 2개 사이의 임의의 범위(조성물의 나머지%는 부형제로 구성됨).
일부 구현예에서, 하나 이상의 CRIP는 제형, 예를 들어 극성 비양성자성 용매 및/또는 물로 구성된 제형에 포함될 수 있고/있거나, 여기서 극성 비양성자성 용매는 1 wt% 내지 99 wt%의 양으로 존재하고, 극성 양성자성 용매는 1 wt% 내지 99 wt%의 양으로 존재하고, 물은 0 wt% 내지 98 wt%의 양으로 존재한다. 일부 구현예에서, 제형은 CRIP와, 또 다른 IA, 예를 들어 Bt 단백질을 포함한다. 일부 구현예에서, Bt 단백질은 상업적으로 입수 가능한 제품(예를 들어, DiPel®) 내에 함유되어 있다. 극성 비양성자성 용매 제형은 MSO를 함유하는 경우에 특히 효과적이다. MSO는 약 80% 내지 85%의 석유 오일의 양으로의 대두 오일의 메틸 에스테르와 15% 내지 20%의 계면활성제를 사용하는 메틸화된 종자 오일과 계면활성제 블렌드이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스(Bt) 단백질과 CRIP를 포함할 수 있으며, 여기서 Bt 펩타이드는 MTX2 독소, 예를 들어 리시니바실러스 스파에리쿠스에서 단리된 MTX2 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스(Bt) 단백질과 CRIP를 포함할 수 있으며, 여기서 Bt 펩타이드는 Bin 유사 독소, 예를 들어 리시니바실러스 스파에리쿠스에서 단리된 Bin 유사 독소일 수 있다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스(Bt) 단백질과 CRIP를 포함할 수 있으며, 여기서 Bt 펩타이드는 바실러스 투린기엔시스 아종에서 단리될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스 아종은 하기 아종 중 하나일 수 있다: 아이자와이; 아이자와이/파시피쿠스; 알레스티; 아마기엔시스; 안달로우시엔시스; 아르겐티넨시스; 아스투리엔시스; 아조렌시스; 발레아리카; 베를리네르; 볼리비아; 브라실렌시스; 카메로운; 카나덴시스; 찬파이시스; 키넨시스; 콜메리; 코레아넨시스; 다코타; 다름스타디엔시스; 덴드롤리무스; 엔토모시두스; 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 피니티무스; 푸쿠오카엔시스; 갈레키아에; 갈레리아에; 그라시오센시스; 구이얀기엔시스; 히고; 후아존겐시스; 이베리카; 인디아나; 이스라엘렌시스; 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 자포넨시스; 제가테산; 진곤기엔시스; 케니아에; 킴; 쿠맘토엔시스; 쿠르스타키; 큐슈엔시스; 리시스; 론드리나; 말라옌시스; 메델린; 멕시카넨시스; 모기; 몬테레이; 모리소니; 무주; 나바렌시스; 네오레오넨시스; 니게리엔시스; 노보시비르스크; 오스트리니아에; 오스왈도크루지; 파한기; 파키스타니; 팔마니올렌시스; 핀글루온시스; 피레나이카; 폴로니엔시스; 폰디케리엔시스; 풀시엔시스; 롱세니; 로스킬디엔시스; 샌디에고; 세오울렌시스; 샨돈기엔시스; 실로; 시넨시스; 순케온; 소토; 소토/덴드롤리무스; 서브톡시쿠스; 수미요시엔시스; 실베스트리엔시스; 테네브리오니스; 타일란덴시스; 톰프소니; 투린기엔시스; 토키기엔시스; 토구치니; 토호쿠엔시스; 톨워르티; 토우마노피; 바젠시스; 라티슬라비엔시스; 우하넨시스; 지아구안기엔시스; 요수; 윤나넨시스; 자오돈겐시스; str. Al Hakam; 또는 콘쿠키안.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스(Bt) 단백질과 CRIP를 포함할 수 있으며, 여기서 Bt 펩타이드는 하기 군에서 선택되는 바실러스 투린기엔시스 변종에서 단리된다: 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 바실러스 투린기엔시스 str. Al Hakam; 바실러스 투린기엔시스 T01-328; 바실러스 투린기엔시스 YBT-1518; 또는 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스(Bt) 단백질과 CRIP를 포함할 수 있으며, 여기서 Bt 펩타이드는 바실러스 투린기엔시스 혈청형에서 단리된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, Bt 펩타이드는 하기 군에서 선택되는 바실러스 투린기엔시스 혈청형일 수 있다: 바실러스 투린기엔시스 AKS-7; 바실러스 투린기엔시스 Bt18247; 바실러스 투린기엔시스 Bt18679; 바실러스 투린기엔시스 Bt407; 바실러스 투린기엔시스 DAR 81934; 바실러스 투린기엔시스 DB27; 바실러스 투린기엔시스 F14-1; 바실러스 투린기엔시스 FC1; 바실러스 투린기엔시스 FC10; 바실러스 투린기엔시스 FC2; 바실러스 투린기엔시스 FC6; 바실러스 투린기엔시스 FC7; 바실러스 투린기엔시스 FC8; 바실러스 투린기엔시스 FC9; 바실러스 투린기엔시스 HD-771; 바실러스 투린기엔시스 HD-789; 바실러스 투린기엔시스 HD1002; 바실러스 투린기엔시스 IBL 200; 바실러스 투린기엔시스 IBL 4222; 바실러스 투린기엔시스 JM-Mgvxx-63; 바실러스 투린기엔시스 LDC 391; 바실러스 투린기엔시스 LM1212; 바실러스 투린기엔시스 MC28; 바실러스 투린기엔시스 Sbt003; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 다코타; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 히고; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 이스라엘렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 킴; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 쿠르스타키; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 리시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 메델린; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 모기; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 무주; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 파한기; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 실로; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 순케온; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 소토; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 테네브리오니스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 요수; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 혈청형 자오돈겐시스; 바실러스 투린기엔시스 str. Al Hakam; 바실러스 투린기엔시스 T01-328; 바실러스 투린기엔시스 YBT-1518; 및 바실러스 투린기엔시스 혈청형 콘쿠키안.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스(Bt) 단백질과 CRIP를 포함할 수 있으며, 여기서 Bt 펩타이드는 하기에서 단리된다: 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스, 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키 또는 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오넨시스.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; Bt 독소는 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti) 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; Bt 독소는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144 Bti 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; Bt 독소는 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk) 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; Btk 독소는 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 Btk 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; Bt 독소는 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt) 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; Btt 독소는 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176 Btt 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; CRIP 대 Bt 독소의 비는 약 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고, Bt 독소 대 CRIP의 비는 약 1:1 내지 약 1:200인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소를 포함하는 조합물로서, 여기서 조합물은 살충 효과를 생성하고; Bt 독소 대 CRIP의 비는 약 1:115인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 IA를 포함하는 조합물로서, 여기서 CRIP는 TVP이고, IA는 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소이고; 조합물은 살충 효과를 생성하고; TVP는 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 조합물을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q 또는 N이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T 또는 A이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; Z1이 T인 경우, TVP는 글리코실화됨.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 CRIP와 본원에 기재된 바와 같은 Bt 독소의 조합물 중 임의의 것은 부형제를 추가로 포함할 수 있다.
A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP와 Bt 독소를 포함하는 전술한 조합물 또는 조성물 중 임의의 것은, 동일한 또는 별개의 조성물로, 동시에 및/또는 순차적으로 적용될 수 있다. CRIP 대 IA, 즉, 하나 이상의 화학 물질, 분자, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, 독소, 독물, 독, 살충제, 농약, 유기 화합물, 무기 화합물, 원핵생물 유기체 또는 진핵생물 유기체, 및 상기 원핵생물 또는 진핵생물 유기체로부터 생성된 작용제의 비는, 표적화되는 곤충 해충과 사용자의 필요에 따라 달라질 것이다.
CRIP와 Bt 독소를 포함하는 전술한 조합물 또는 조성물 중 임의의 것은, 기타 화합물과 동시에 또는 연속적으로, 처리되는 작물 영역 또는 식물에 적용될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 비료, 제초제, 동결보호제, 계면활성제, 세제, 살충 비누, 휴면 오일, 중합체, 및/또는 제형의 단일 적용 후 표적 영역의 장기간 투여를 가능하게 하는 지효성 또는 생분해성 담체 제형일 수 있다. 기타 화합물은 또한, 목적하는 경우, 제형 분야에서 통상적으로 이용되는 추가의 농업적으로 허용 가능한 담체, 계면활성제 또는 적용 촉진성 아쥬반트와 함께인, 선택적 제초제, 화학적 살충제, 살바이러스제, 살미생물제, 살아마바제, 농약, 살진균제, 살세균제, 살선충제, 살연체동물제 또는 이러한 제제 중 몇 가지의 조합물일 수 있다. 일부 구현예에서, 적합한 담체와 아쥬반트는 고체 또는 액체일 수 있으며, 제형화 기술에 통상적으로 이용되는 물질, 예를 들어 천연 또는 재생 광물질, 용매, 분산제, 습윤제, 점착제, 결합제 또는 비료에 해당할 수 있다. 마찬가지로, 전술한 조합물, 조성물 또는 제형 중 임의의 것은 살충 제형의 표적 해충에 의해 섭식 또는 소화되도록 식용 "미끼"로 준비하거나 해충 "덫"으로 만들 수 있다.
본 발명의 사용 방법
식물, 식물 부분 및 종자를 보호하는 방법
일부 구현예에서, 본 개시내용은, 무척추동물 해충 또는 이의 환경, 식물 표면 또는 이의 부분을 포함하는 고체 표면을, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 조합물의 생물학적 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 농경학적 및/또는 비농경학적 적용으로 무척추동물 해충을 방제하는 방법을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은, 무척추동물 해충 또는 이의 환경, 식물 표면 또는 이의 부분을 포함하는 고체 표면을, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 조성물 또는 조합물의 생물학적 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 농경학적 및/또는 비농경학적 적용으로 무척추동물 해충을 방제하는 방법을 포함한다. 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 적합한 조성물의 예에는, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)가 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)와 동일한 조성물 상 또는 내에(예를 들어, 과립 조성물의 일부로, 또는 개별 과립 상에) 존재하는 조성물로 제형화된, 액체 용액, 에멀젼, 분말, 과립, 나노입자, 마이크로입자 또는 상기의 조합이 포함된다.
일부 구현예에서, 무척추동물 해충으로부터 농작물을 보호하기 위해서 본 발명의 화합물, 조합물 또는 조성물과의 접촉을 달성하기 위해, 화합물 또는 조성물은 전형적으로 파종 전 작물의 종자에, 작물 식물의 경엽(예를 들어, 잎, 줄기, 꽃, 과실)에, 또는 작물이 식재되기 전 또는 후 토양 또는 다른 성장 매체에 적용된다.
접촉 방법의 하나의 구현예는 분무를 이용한 것이다. 대안적으로, 본 발명의 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 과립 조성물은 식물 경엽 또는 토양에 적용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한, 액체 제형의 토양 관주(soil drench), 토양에 대한 과립 제형, 육모 상자 처리 또는 이식물의 침지로 적용되는 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물과 식물을 접촉시키는 방식으로 식물 흡수를 통해 효과적으로 전달될 수 있다. 주목할 점은, 토양 관주 액체 제형 형태의 본 개시내용의 조성물이다. 또한, 주목할 점은, 무척추동물 해충 또는 이의 환경을, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 생물학적 유효량, 또는 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)의 생물학적 유효량을 포함하는 조성물과 접촉시키는 단계를 포함하는 무척추동물 해충을 방제하는 방법이다. 추가로 주목할 점은, 일부 예시적인 구현예에서, 예시적인 방법은 환경이 토양이고, 조성물이 토양 관주 제형으로 토양에 적용되는 방법을 포함한다는 점이다. 추가로 주목할 점은, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)가 침입 장소에의 국소 적용으로도 효과적이라는 점이다. 다른 접촉 방법에는, 직접 및 잔류 스프레이, 공중 스프레이, 겔, 종자 코팅, 마이크로캡슐화, 전신 흡수, 미끼, 귀표, 볼루스, 분무기, 훈증제, 에어로졸, 분진 및 다수의 기타 수단을 통한 본 발명의 화합물 또는 조성물의 적용이 포함된다. 접촉 방법의 하나의 구현예는 본 발명의 화합물 또는 조성물을 포함하는 형태적으로 안정한 비료 과립, 스틱 또는 정제이다. 본 발명의 화합물은 또한 무척추동물 방제 장치(예를 들어, 곤충 그물, 의류에의 적용, 캔들 제형에의 적용 등)를 제작하기 위한 재료에 함침될 수 있다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물은 또한 무척추동물 해충으로부터 종자를 보호하기 위한 종자 처리에 유용하다. 본 개시내용 및 청구범위의 맥락에서, 종자 처리는, 전형적으로 본 발명의 조성물로 제형화된, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물의 생물학적 유효량을 종자와 접촉시키는 것을 의미한다. 이러한 종자 처리는 무척추동물 토양 해충으로부터 토양을 보호하고, 일반적으로 발아 종자로부터 발달하는 묘목의 토양과 접촉하고 있는 뿌리 및 다른 식물을 보호할 수 있다. 종자 처리는 또한 발달하는 식물 내에서 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물의 전위에 의해 경엽 보호를 제공할 수 있다. 종자 처리는 특수 형질이 발현되도록 유전적으로 형질전환된 식물이 발아하게 되는 종자를 포함하여 모든 유형의 종자에 적용될 수 있다. 또한, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물은 식물 또는 이의 부분, 예를 들어 바실러스 투린기엔시스 독소 또는 단백질 결정과 같은 무척추동물 해충에 독성이 있는 단백질로 이미 형질전환된 식물 세포 또는 식물 종자, 또는 글리포세이트에 대한 내성을 제공하는 글리포세이트 아세틸트랜스퍼라아제와 같은 제초제 내성을 발현하는 것들로 형질전환될 수 있다. 대표적인 예에는, 바실러스 투린기엔시스 독소 및/또는 단백질 결정과 같은 무척추동물 해충에 독성이 있는 단백질을 발현하는 것들, 또는 글리포세이트에 대한 내성을 제공하는 글리포세이트 아세틸트랜스퍼라아제와 같은 제초제 내성을 발현하는 것들이 포함된다.
종자 처리의 하나의 방법은, 종자를 파종하기 전 종자에 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물(즉, 제형화된 조성물 또는 조합물)을 분무하거나 살포하는 방식이다. 종차 처리용으로 제형화된 조성물은 일반적으로 필름 형성제 또는 접착제를 포함한다. 따라서, 전형적으로, 본 개시내용의 종자 코팅 조성물은 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물의 생물학적 유효량과, 필름 형성제 또는 접착제를 포함한다. 종자는 유동성 현탁액 농축물을 직접 종자의 텀블링 베드에 분무한 후, 종자를 건조시키는 방식으로 코팅될 수 있다. 대안적으로, 수화제, 용액, 유현탁액(suspoemulsion), 유화성 농축물 및 수중 에멀젼과 같은 다른 제형 유형이 종자에 분무될 수 있다. 이러한 공정은 종자에 필름 코팅을 적용하는 데 특히 유용하다. 다양한 코팅 기계 및 공정이 당업자에게 이용 가능하다. 적합한 공정은 문헌[P. Kosters et al., Seed Treatment: Progress and Prospects, 1994 BCPC Monograph No. 57] 및 상기 문헌에 열거된 참고문헌에 열거된 것들을 포함하며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
처리된 종자는 전형적으로 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물을, 종자 100 kg 당 약 0.01 g 내지 1 kg 범위의 양으로(즉, 처리 전 종자의 약 0.00001 중량% 내지 1 중량%) 포함한다. 종자 처리용으로 제형화된 유동성 현탁액은 전형적으로 활성 성분 약 0.5% 내지 약 70%, 필름 형성 접착제 약 0.5% 내지 약 30%, 분산제 약 0.5% 내지 약 20%, 증점제 0% 내지 약 5%, 안료 및/또는 염료 0% 내지 약 5%, 소포제 0% 내지 약 2%, 보존제 0% 내지 약 1%, 및 휘발성 액체 희석제 0% 내지 약 75%를 포함한다.
조합물 및 조성물의 사용 방법
일부 구현예에서, 본 발명은 곤충을 방제하기 위해, 살충 효과를 생성하는 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물을 제공하는 단계; 이어서 상기 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 곤충을 방제하기 위해, 살충 효과를 생성하는 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 여기서 곤충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 아케마 스핑크스 나방(Achema Sphinx Moth)(박각시벌레)(유모르파 아케몬(Eumorpha achemon)); 알파파 모충(Alfalfa Caterpillar)(콜리아스 유리테메(Colias eurytheme)); 아몬드 나방(Almond Moth)(카우드라 카우텔라(Caudra cautella)); 아모르비아 나방(Amorbia Moth)(아모르비아 후메로사나(Amorbia humerosana)); 거염벌레(Armyworm)(스포도프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(Artichoke Plume Moth)(플라티프틸리아 카르두이닥틸라(Platyptilia carduidactyla)); 아잘레아 모충(Azalea Caterpillar)(다타나 마조르(Datana major)); 도롱이벌레(Bagworm)(티리도프테릭스 에페메라에포르미스(Thyridopteryx ephemeraeformis)); 바나나 나방(Banana Moth)(히페르콤페 스크리보니아(Hypercompe scribonia)); 바나나 팔랑나비(Banana Skipper)(에리오노타 트락스(Erionota thrax)); 블랙헤드 싹벌레(Blackheaded Budworm)(아클레리스 글로베라나(Acleris gloverana)); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(Spring Cankerworm)(팔레아크리타 메리카타(Paleacrita merriccata)); 체리 과일벌레(Cherry Fruitworm)(그라폴리타 파카르디(Grapholita packardi)); 중국 표식 나방(China Mark Moth)(님풀라 스타그나타(Nymphula stagnata)); 감귤류 야도충(Citrus Cutworm)(자일로미게스 쿠리알리스(Xylomyges curialis)); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(Cranberry Fruitworm)(아크로바시스 바시니(Acrobasis vaccinii)); 십자줄무늬 양배추벌레(Cross-striped Cabbageworm)(에베르게스티스 리모살리스(Evergestis rimosalis)); 야도충(녹투이드(Noctuid) 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(Douglas Fir Tussock Moth)(오르기아 슈도츄가타(Orgyia pseudotsugata)); 엘로 나방(Ello Moth)(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(Elm Spanworm)(에노모스 서브시그나리아(Ennomos subsignaria)); 유럽 포도덩굴 나방(European Grapevine Moth)(로베시아 보트라나(Lobesia botrana)); 유럽 팔랑나비(European Skipper)(티멜리쿠스 리네올라(Thymelicus lineola)(에섹스 팔랑나비(Essex Skipper))); 가을 웹웜(Fall Webworm)(멜리소푸스 라티페레아누스(Melissopus latiferreanus)); 필버트 잎말이나방(Filbert Leafroller)(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(Fruittree Leafroller)(아르킵스 아르기로스필리아(Archips argyrospilia)); 포도열매 나방(Grape Berry Moth)(파랄로베시아 비테아나(Paralobesia viteana)); 포도 잎말이나방(Grape Leafroller)(플라티노타 스툴타나(Platynota stultana)); 포도잎 스켈레토나이저(Grapeleaf Skeletonizer)(하리시나 아메리카나(Harrisina americana)) (땅에서만); 녹색 클로버벌레(Green Cloverworm)(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(Greenstriped Mapleworm)(드리오캄파 루비쿤다(Dryocampa rubicunda)); 군모소스-바트라케드라(Gummosos-Batrachedra); 코모사에(Comosae)(호드게스(Hodges)); 집시 나방(Gypsy Moth)(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(Hemlock Looper)(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(Imported Cabbageworm)(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오(Automeris io)); 잭 파인 싹벌레(Jack Pine Budworm)(코리스토네우라 피누스(Choristoneura pinus)); 밝은갈색 사과 나방(Light Brown Apple Moth)(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(Melonworm)(디아파니아 히알리나타(Diaphania hyalinata)); 미모사 웹웜(Mimosa Webworm)(호마다울라 아니소센트라(Homadaula anisocentra)); 부등변줄무늬 잎말이나방(Obliquebanded Leafroller)(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(Oleander Moth)(신토메이다 에필라이스(Syntomeida epilais)); 잡식성 잎말이나방(Omnivorous Leafroller)(플라이노타 스툴타나(Playnota stultana)); 잡식성 자벌레(Omnivorous Looper)(사불로데스 아에그로타타(Sabulodes aegrotata)); 오렌지독(Orangedog)(파필리오 크레스폰테스(Papilio cresphontes)); 오렌지 토르트릭스(Orange Tortrix)(아르기로타에니아 시트라나(Argyrotaenia citrana)); 동양 과일 나방(Oriental Fruit Moth)(그라폴리타 몰레스타(Grapholita molesta)); 복숭아 가지 천공충(Peach Twig Borer)(아나르시아 리네아텔라(Anarsia lineatella)); 소나무 나비(Pine Butterfly)(네오파시아 메나피아(Neophasia menapia)); 꼬투리벌레(Podworm)(헬리오베르파 제아(Heliocoverpa zea)); 붉은줄무늬 잎말이나방(Redbanded Leafroller)(아르기로타에니아 벨루티나나(Argyrotaenia velutinana)); 붉은혹 모충(Redhumped Caterpillar)(스키주라 콘시나(Schizura concinna)); 린드웜(Rindworm) 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(Saddleback Caterpillar)(시비네 스티물레아(Sibine stimulea)); 안장 돌출형 모충(Saddle Prominent Caterpillar)(헤테로캄파 구티비타(Heterocampa guttivitta)); 염습지 모충(Saltmarsh Caterpillar)(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(Sod Webworm)(크람부스(Crambus) 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(Fall Cankerworm)(알소필라 포메타리아(Alsophila pometaria)); 가문비나무 싹벌레(Spruce Budworm)(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(Tent Caterpillar)(각종 라시오캄프과(Lasiocampidae)); 테클라-테클라 바실리데스(Thecla-Thecla Basilides)(게이르(Geyr))(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(Tobacco Hornworm)(에페스티아 엘루텔라(Ephestia elutella)); 술이달린 사과 싹나방(Tufted Apple Budmoth)(플라티노타 이다에우살리스(Platynota idaeusalis)); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아(Peridroma saucia)); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나(Platynota flavedana)); 벨벳콩 모충(Velvetbean Caterpillar)(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(Walnut Caterpillar)(다타나 인테게리마(Datana integerrima)); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(Western Tussock Moth)(오르기아 베투스타(Orgyia vetusta)); 남부 옥수수대 천공충(Southern Cornstalk Borer)(디아트라에아 크람비도이데스(Diatraea crambidoides)); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미(Filbert weevil); 벼물 바구미(Ricewater weevil); 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀(Tea shot-hole borer); 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충(Coffee berry borer); 새포아풀 바구미(Annual blue grass weevil)(리스트로노투스 마쿨리콜리스(Listronotus maculicollis)); 아시아 정원 딱정벌레(Asiatic garden beetle)(말라데라 카스타네아(Maladera castanea)); 유럽 풍뎅이(European chafer)(리조트로쿠스 마잘리스(Rhizotroqus majalis)); 녹색 풍뎅이(Green June beetle)(코티니스 니티다(Cotinis nitida)); 일본 딱정벌레(Japanese beetle)(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(May or June beetle)(필로파가(Phyllophaga) 종); 북부 마스크 풍뎅이(Northern masked chafer)(시클로세팔라 보레알리스(Cyclocephala borealis)); 동양 딱정벌레(Oriental beetle)(아노말라 오리엔탈리스(Anomala orientalis)); 남부 마스크 풍뎅이(Southern masked chafer)(시클로세팔라 루리다(Cyclocephala lurida)); 바구미(Billbug)(쿠르쿨리오노이데아(Curculionoidea)); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스(Chilo suppressalis); 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스(Culex quinquefasciatus); 디아브로티카 비르기페라(Diabrotica virgifera); 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스(Ostrinia furnacalis); 오스트리니아 누빌라리스(Ostrinia nubilalis); 펙티노포라 고시피엘라(Pectinophora gossypiella); 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라(Xanthogaleruca luteola).
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충을 방제하기 위해, 살충 효과를 생성하는 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물을 제공하는 단계; 이어서 상기 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충을 방제하기 위해, 살충 효과를 생성하는 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 여기서 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 효과를 생성하는 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물의 살충 유효량을, 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 각각의 살충 펩타이드의 조합물이 살충 효과를 생성하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물의 살충 유효량을, 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 각각의 살충 펩타이드의 조합물이 살충 효과를 생성하고; 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A68 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물의 살충 유효량을, 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 각각의 살충 펩타이드의 조합물이 살충 효과를 생성하고, 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
조합물: Bt 독소와 WT-Ta1b의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 박테리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 박테리아 독소는 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 및 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 부포자 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신, 알베올리신 또는 인한신 유사 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 부포자 결정 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 부포자 결정 독소는 δ-내독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신 패밀리 독소 또는 시톨리신이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1 또는 Cry78Aa1, Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Cry 독소 또는 Cyt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Cry 독소 또는 Cyt 독소는 서열번호 412 내지 481에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 Vip이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip 단백질은 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19; 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176; 또는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: Bt 독소와 TVP의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 박테리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 박테리아 독소는 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 및 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 부포자 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신, 알베올리신 또는 인한신 유사 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 부포자 결정 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 부포자 결정 독소는 δ-내독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신 패밀리 독소 또는 시톨리신이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1 또는 Cry78Aa1, Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Cry 독소 또는 Cyt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Cry 독소 또는 Cyt 독소는 서열번호 412 내지 481에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 Vip이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip 단백질은 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19; 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176; 또는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19; 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176; 또는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: Bt 독소와 AVP의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 박테리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 박테리아 독소는 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 및 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 부포자 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신, 알베올리신 또는 인한신 유사 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 부포자 결정 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 부포자 결정 독소는 δ-내독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신 패밀리 독소 또는 시톨리신이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1 또는 Cry78Aa1, Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Cry 독소 또는 Cyt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Cry 독소 또는 Cyt 독소는 서열번호 412 내지 481에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 Vip이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip 단백질은 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19; 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176; 또는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: Bt 독소와 Γ-CNTX-Pn1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 박테리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 박테리아 독소는 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 및 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 부포자 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신, 알베올리신 또는 인한신 유사 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 부포자 결정 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 부포자 결정 독소는 δ-내독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신 패밀리 독소 또는 시톨리신이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1 또는 Cry78Aa1, Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Cry 독소 또는 Cyt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Cry 독소 또는 Cyt 독소는 서열번호 412 내지 481에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 Vip이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip 단백질은 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19; 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176; 또는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: 진균 독소와 U+2-ACTX-Hv1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 진균 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 진균 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 진균 독소는 아스코마이세테 진균 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 진균 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 진균 독소는 아칸토마이세스 독소; 아스코폴리포러스 독소; 뷰베리아 독소; 비자사무하 독소; 코르디셉스 독소; 코레미옵시스 독소; 엔교돈티움 독소; 기벨룰라 독소; 히페르데르미움 독소; 인섹티콜라 독소; 이사리아 독소; 레카니실리움 독소; 미크로힐룸 독소; 피토코르디셉스 독소; 슈도기벨룰라 독소; 로티페로프토라 독소; 심플리실리움 독소; 또는 토루비엘라 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 진균 유기체 또는 이로부터의 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 진균 유기체 또는 이로부터의 독소는 하기 속에서 선택된다: 뷰베리아; 메타리지움; 파에실로마이세스; 레카니실리움; 노무라에아; 이사리아; 히르수텔라; 소로스포렐라; 아스페르길루스; 코르디셉스; 엔토모프토라; 주프토라; 판도라; 엔토모파가; 코니디오볼루스 및 바시디오볼루스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 하기 독소 중 하나를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 뷰베리아 알바 독소; 뷰베리아 아모르파 독소; 뷰베리아 아레나리아 독소; 뷰베리아 아시아티카 독소; 뷰베리아 아우스트랄리스 독소; 뷰베리아 바시아나 독소; 코르디셉스 바시아나 독소; 뷰베리아 브롱니아르티 독소; 뷰베리아 브룸프티 독소; 뷰베리아 칼레도니카 독소; 뷰베리아 키로멘시스 독소; 뷰베리아 코코룸 독소; 뷰베리아 크레타세아 독소; 뷰베리아 실린드로스포라 독소; 뷰베리아 델라크로이시 독소; 뷰베리아 덴사 독소; 뷰베리아 데펜덴스 독소; 뷰베리아 도리포라에 독소; 뷰베리아 에푸사 독소; 뷰베리아 에피가에아 독소; 뷰베리아 펠리나 독소; 뷰베리아 게오데스 독소; 뷰베리아 글로불리페라 독소; 뷰베리아 헤이미 독소; 뷰베리아 호플로켈리 독소; 뷰베리아 키푸카에 독소; 뷰베리아 락사 독소; 뷰베리아 말라위엔시스 독소; 뷰베리아 메도겐시스 독소; 뷰베리아 멜로론타에 독소; 뷰베리아 누비콜라 독소; 뷰베리아 오리자에 독소; 뷰베리아 파라독사 독소; 뷰베리아 파라넨시스 독소; 뷰베리아 파라시티카 독소; 뷰베리아 페텔로티 독소; 뷰베리아 슈도바시아나 독소; 뷰베리아 릴레이 독소; 뷰베리아 루브라 독소; 뷰베리아 시오타에 독소; 뷰베리아 소볼리페라 독소; 뷰베리아 스피카타 독소; 뷰베리아 스테파노데리스 독소; 뷰베리아 설푸레센스 독소; 뷰베리아 순기 독소; 뷰베리아 테넬라 독소; 뷰베리아 툰드렌시스 독소; 뷰베리아 벨라타 독소; 뷰베리아 바로아에 독소; 뷰베리아 베르미코니아 독소; 뷰베리아 벡산스 독소; 뷰베리아 비안나이 독소; 또는 뷰베리아 비렐라 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 바시아나 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 바시아나 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 뷰베리아 바시아나 독소는 뷰베리신이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리신을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 뷰베리신은 화학식 C45H57N3O9을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리신을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 뷰베리신은 화학식 C46H59N3O9을 갖는 "뷰베리신 A" 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 뷰베리신 독소는 화학식 C45H57N3O9을 갖는 뷰베리신 독소; 화학식 C46H59N3O9을 갖는 뷰베리신 A 독소; 또는 화학식 C47H61N3O9을 갖는 뷰베리신 B 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리신을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 뷰베리신은 화학식 C47H61N3O9을 갖는 "뷰베리신 B" 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 바시아나 유기체를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 뷰베리아 바시아나 유기체에서 단리된 포자를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 바시아나 유기체를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 뷰베리아 바시아나 유기체는 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 뷰베리아 바시아나 유기체에서 단리된 포자를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 뷰베리아 바시아나 포자는 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아스코마이세테 진균 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 코르디시피타세아에과 진균 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 아칸토마이세스 독소; 아스코폴리포러스 독소; 뷰베리아 독소; 비자사무하 독소; 코르디셉스 독소; 코레미옵시스 독소; 엔교돈티움 독소; 기벨룰라 독소; 히페르데르미움 독소; 인섹티콜라 독소; 이사리아 독소; 레카니실리움 독소; 미크로힐룸 독소; 피토코르디셉스 독소; 슈도기벨룰라 독소; 로티페로프토라 독소; 심플리실리움 독소; 또는 토루비엘라 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9%로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: Bt 독소와 U+2-ACTX-Hv1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 박테리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 박테리아 독소는 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 및 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 부포자 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신, 알베올리신 또는 인한신 유사 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 부포자 결정 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 부포자 결정 독소는 δ-내독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신 패밀리 독소 또는 시톨리신이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 δ-내독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 δ-내독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1 또는 Cry78Aa1, Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Cry 독소 또는 Cyt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Cry 독소 또는 Cyt 독소는 서열번호 412 내지 481에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Bt 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Bt 독소는 분비된 단백질이고, 여기서 분비된 단백질은 Vip이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 Vip를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 Vip 단백질은 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19; 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176; 또는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: 기타 박테리아 독소와 U+2-ACTX-Hv1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 박테리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 박테리아 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 박테리아 독소는 제노랍두스 속 또는 포토랍두스 속에 속하는 박테리아에서 단리된다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 포토랍두스 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 포토랍두스 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 포토랍두스 독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 포토랍두스 아쿠르스티 독소; 포토랍두스 아심비오티카 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 ATCC 43949 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 DSM 17609 독소; 포토랍두스 보데이 독소; 포토랍두스 카리베아넨시스 독소; 포토랍두스 시네레아 독소; 포토랍두스 하이나넨시스 독소; 포토랍두스 헤테로랍디티스 독소; 포토랍두스 카야이 독소; 포토랍두스 카니 독소; 포토랍두스 카니 NC19 독소; 포토랍두스 카니 아종 구아나주아텐시스 독소; 포토랍두스 클레이니 독소; 포토랍두스 라우몬디 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 클라르케이 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 TTO1 독소; 포토랍두스 루미네센스 독소; 포토랍두스 루미네센스 BA1 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII H75HRPL105 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII HiPL101 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 ATCC 29999 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 멕시카나 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 소노렌시스 독소; 포토랍두스 남나오넨시스 독소; 포토랍두스 노에니에푸텐시스 독소; 포토랍두스 스타케브란드티 독소; 포토랍두스 타스마니엔시스 독소; 포토랍두스 템페라타 독소; 포토랍두스 템페라타 J3 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 포라메 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 M1021 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 Meg1 독소; 포토랍두스 트라센시스 독소; 미분류 포토랍두스 독소; 포토랍두스 종 독소; 포토랍두스 종 3014 독소; 포토랍두스 종 3240 독소; 포토랍두스 종 Az29 독소; 포토랍두스 종 BS21 독소; 포토랍두스 종 CbKj163 독소; 포토랍두스 종 CRCIA-P01 독소; 포토랍두스 종 ENY 독소; 포토랍두스 종 FL2122 독소; 포토랍두스 종 FL480 독소; 포토랍두스 종 FsIw96 독소; 포토랍두스 종 GDd233 독소; 포토랍두스 종 H3086 독소; 포토랍두스 종 H3107 독소; 포토랍두스 종 H3240 독소; 포토랍두스 종 HB301 독소; 포토랍두스 종 HB78 독소; 포토랍두스 종 HB89 독소; 포토랍두스 종 HIT 독소; 포토랍두스 종 HO1 독소; 포토랍두스 종 HUG-39 독소; 포토랍두스 종 IT 독소; 포토랍두스 종 JUN 독소; 포토랍두스 종 KcTs129 독소; 포토랍두스 종 KJ13.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ14.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ24.5 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ29.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ37.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ7.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ8.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.4 TH 독소; 포토랍두스 종 KMD74 독소; 포토랍두스 종 KOH 독소; 포토랍두스 종 MID10 독소; 포토랍두스 종 MOL 독소; 포토랍두스 종 MSW_058 독소; 포토랍두스 종 MSW_079 독소; 포토랍두스 종 NK2.1 TH 독소; 포토랍두스 종 NK2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 NnMt2h 독소; 포토랍두스 종 NP1 독소; 포토랍두스 종 OH10 독소; 포토랍두스 종 OnIr40 독소; 포토랍두스 종 OnKn2 독소; 포토랍두스 종 PB10.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB16.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB32.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB37.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB39.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB41.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB45.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB50.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB51.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB52.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB54.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB59.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB6.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB68.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB7.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB78.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.4 TH 독소; 포토랍두스 종 Pjun 독소; 포토랍두스 종 RW14-46 독소; 포토랍두스 종 S10-54 독소; 포토랍두스 종 S12-55 독소; 포토랍두스 종 S14-60 독소; 포토랍두스 종 S15-56 독소; 포토랍두스 종 S5P8-50 독소; 포토랍두스 종 S7-51 독소; 포토랍두스 종 S8-52 독소; 포토랍두스 종 S9-53 독소; 포토랍두스 종 SJ2 독소; 포토랍두스 종 SN259 독소; 포토랍두스 종 SP1.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP16.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP21.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP3.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP7.3 TH 독소; 포토랍두스 종 TyKb140 독소; 포토랍두스 종 UK76 독소; 포토랍두스 종 VMG 독소; 포토랍두스 종 WA21C 독소; 포토랍두스 종 WkSs43 독소; 포토랍두스 종 Wx13 독소; 포토랍두스 종 X4 독소; 포토랍두스 종 YNb90 독소; 및 포토랍두스 종 ZM 독소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 포토랍두스 루미네센스 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 포토랍두스 루미네센스 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 포토랍두스 루미네센스 독소는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 a"(Tca)를 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 포토랍두스 루미네센스 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 포토랍두스 루미네센스 독소는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 c"(Tcc)를 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 포토랍두스 루미네센스 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 포토랍두스 루미네센스 독소는 포토랍두스 루미네센스 "독소 복합체 d"(Tcd)를 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, TcaA 단백질(서열번호 616), TcaB 단백질(서열번호 617), TcaC 단백질(서열번호 618) 및 TcaZ 단백질(서열번호 619)을 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소, 또는 이의 추출물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 예르시니아 속에 속하는 하나 이상의 유기체를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 예르시니아 속에 속하는 유기체에서 단리된 하나 이상의 펩타이드를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 하기 종 중 하나 이상을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 예르시니아 알도바에이브, 예르시니아 알렉시시아에, 예르시니아 베르코비에리, 예르시니아 카나리아에, 예르시니아 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 팔레아르크티카, 예르시니아 엔토모파가, 예르시니아 프레데릭세니, 예르시니아 히베르니카, 예르시니아 인테르메디아, 예르시니아 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 로케스테렌시스, 예르시니아 마실리엔시스, 예르시니아 몰라레티, 예르시니아 누르미, 예르시니아 페카네니, 예르시니아 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 메디에발리스, 예르시니아 페스티스 아종 오리엔탈리스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 페스티스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 로데이, 예르시니아 루케리, 예르시니아 시밀리스 또는 예르시니아 와우테르시.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 하기 종 중 하나 이상에서 단리된 하나 이상의 펩타이드를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 예르시니아 알도바에이브, 예르시니아 알렉시시아에, 예르시니아 베르코비에리, 예르시니아 카나리아에, 예르시니아 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 엔테로콜리티카, 예르시니아 엔테로콜리티카 아종 팔레아르크티카, 예르시니아 엔토모파가, 예르시니아 프레데릭세니, 예르시니아 히베르니카, 예르시니아 인테르메디아, 예르시니아 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 크리스텐세니, 예르시니아 크리스텐세니 아종 로케스테렌시스, 예르시니아 마실리엔시스, 예르시니아 몰라레티, 예르시니아 누르미, 예르시니아 페카네니, 예르시니아 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 페스티스, 예르시니아 페스티스 아종 메디에발리스, 예르시니아 페스티스 아종 오리엔탈리스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 페스티스, 예르시니아 슈도투베르쿨로시스 아종 슈도투베르쿨로시스, 예르시니아 로데이, 예르시니아 루케리, 예르시니아 시밀리스 또는 예르시니아 와우테르시.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 예르시니아 엔토모파가 또는 예르시니아 누르미를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 예르시니아 엔토모파가 또는 예르시니아 누르미에서 단리된 하나 이상의 펩타이드를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 예르시니아 엔토모파가 박테리아 및/또는 이로부터의 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 하나 이상의 예르시니아 누르미 박테리아 및/또는 이로부터의 독소를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, TcaA 단백질(서열번호 616), TcaB 단백질(서열번호 617), TcaC 단백질(서열번호 618) 및 TcaZ 단백질(서열번호 619)을 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체, 또는 이의 추출물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, TcaA 단백질(서열번호 616), TcaB 단백질(서열번호 617), TcaC 단백질(서열번호 618) 및 TcaZ 단백질(서열번호 619)을 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체, 또는 이의 추출물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: GNA와 U+2-ACTX-Hv1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 렉틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 렉틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 렉틴은 하기 중 하나 이상이다: 갈란투스 니발리스 응집소(GNA); 삼부쿠스 니그라 렉틴(SNA); 마악키아 아무렌시스-II(MAL-II); 에리트리나 크리스타갈리 렉틴(ECL); 리시누스 코무니스 응집소-I(RCA); 땅콩 응집소(PNA); 밀배아 응집소(WGA); 그리포니아 심플리시폴리아-II(GSL-II); Con A; 렌스 쿨리나리스 응집소(LCA); 만노오스 결합 렉틴(MBL); BanLec; 갈렉틴; 파세올루스 불가리스 백혈구응집소(PHA-L); 파세올루스 불가리스 적혈구응집소(PHA-E); 및/또는 다투라 스트라모니움 렉틴(DSL).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 렉틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 렉틴은 갈란투스 니발리스 응집소(GNA)이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 렉틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 렉틴은 서열번호 35, 595 내지 615 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 렉틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 렉틴은 하기 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다: "MAKASLLILATIFLGVITPSCLSENILYSGETLPTGGFLSSGSFVFIMQEDCNLVLYNVDKPIWATNTGGLSSDCSLSMQNDGNLVVFTPSNKPIWASNTDGQNGNYVCILQKDRNVVIYGTNRWATGTYTGAVGIPESPPSEKYPSAGKIKLVTAK"(서열번호 35).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 렉틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 렉틴은 하기 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는다: "MAKASLLILAAIFLGVITPSCLSDNILYSGETLSTGEFLNYGSFVFIMQEDCNLVLYDVDKPIWATNTGGLSRSCFLSMQTDGNLVVYNPSNKPIWASNTGGQNGNYVCILQKDRNVVIYGTDRWATGTHTGLVGIPASPPSEKYPTAGKIKLVTAK"(서열번호 595).
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 GNA를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 서열번호 595에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 GNA를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 GNA를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 GNA의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 서열번호 595에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 GNA를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 595에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 GNA의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: 아자디라크틴과 U+2-ACTX-Hv1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 아자디라크타 인디카(님, 님나무 또는 인디안 라일락으로도 공지되어 있음)에서 단리된 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아자디라크타 인디카 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 하기 중 하나 이상을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 아자디라크틴; 아자디라디온; 아자디라디오놀리드; 데아세틸게두닌; 데아세틸아자디라크티놀; 데스푸라노아자디라디온; 에폭시아자디라디온; 게두닌; 마흐무딘; 님프루이틴 A; 님프루이틴 B; 님볼리드; 님빈; 니몰리시놀; 오키닌 아세테이트; 살라닌; 살라놀; 알파-니모락톤; 베타-니모락톤; 2',3'-디히드로살라닌; 3-데아세틸살라닌; 6-데아세틸님빈; 7-아세틸-16,17-데히드로-16-히드록시네오트리킬레논; 7-벤조일님보시놀; 7-데아세틸-7-벤조일에폭시아자디라디온; 7-데아세틸-7-벤조일게두닌; 7-데아세틸-17-에피니몰리시놀; 15-히드록시아자디라디온; 17-에피-17-히드록시아자디라디온; 17-에피아자디라디온; 20,21,22,23-테트라히드로-23-옥소아자디론; 22,23-디히드로니모시놀; 또는 28-데옥소님볼리드.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아자디라크틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아자디라크틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 아자디라크틴은 하기 화학식을 갖는다: C35H44O16.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아자디라크틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 아자디라크틴은 화학식 C35H44O16을 갖고, 조합물 또는 조성물은 아자디라크틴(화학식 C35H44O16을 갖는 아자디라크틴)의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아자디라크틴을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 아자디라크틴은 화학식 C35H44O16을 갖고, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: 붕산과 U+2-ACTX-Hv1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 붕산, 디보론 테트라히드록시드, 보레이트, 산화붕소, 보란, 또는 전술한 것들 중 임의의 것의 임의의 조합이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 수성 매질에서 붕소의 산화물을 생성하는 보란 및/또는 보레이트 에스테르이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 붕산, 보레이트(예를 들어, 염기성 소듐 보레이트(보락스)), 또는 붕산과 보레이트의 혼합물이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 보레이트이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 보레이트를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 보레이트는 퍼보레이트, 메타보레이트, 테트라보레이트, 옥타보레이트, 보레이트 에스테르, 및 이들의 임의의 조합에서 선택된다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 보레이트이고, 여기서 보레이트는 하기에서 선택된다: 금속성 보레이트(예를 들어, 소듐 보레이트, 아연 보레이트 및 포타슘 보레이트), 예컨대 디소듐 테트라보레이트 10수화물, 디소듐 옥타보레이트 4수화물, 소듐 메타보레이트, 소듐 퍼보레이트 1수화물, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 테트라보레이트 5수화물, 소듐 테트라보레이트, 구리 메타보레이트, 아연 보레이트, 바륨 메타보레이트, 및 이들의 임의의 조합.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 보락스(예를 들어, 소듐 보레이트 10수화물-10몰 Na2B4O7.10H2O 또는 소듐 보레이트 5수화물-5몰 Na2B4O7.5H2O)이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 보락스에 대한 대체물로서 유효량으로 이용될 수 있는(또는 보락스와 또는 서로 조합하여 유효량으로 이용될 수 있는) 붕소 화합물이다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 보락스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 보락스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 보락스는 하기에서 선택된다: 무수 보락스(Na2B4O7); 암모늄 테트라보레이트((NH4)2B4O7.4H2O); 암모늄 펜타보레이트((NH4)2B10O16.8H2O); 포타슘 펜타보레이트(K2B10O16.8H2O); 포타슘 테트라보레이트(K2B4O7.4H2O); 소듐 메타보레이트((8몰) Na2B2O4.8H2O); 소듐 메타보레이트((4몰) Na2B2O4.4H2O); 디소듐 테트라보레이트 10수화물(Na2B4O7.10H2O); 디소듐 테트라보레이트 5수화물(Na2B4O7.5H2O); 디소듐 옥타보레이트 4수화물(Na2B8O13.4H2O); 또는 이들의 조합.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕소 화합물을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕소 화합물은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트, 소듐 메타보레이트, 소듐 테트라보레이트 10수화물, 산화붕소, 탄화붕소, 질화붕소, 삼브롬화붕소, 삼염화붕소 및 삼플루오린화붕소.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕산을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 붕산을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 붕산은 화학식 H3BO3을 갖는다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 화학식 H3BO3을 갖는 붕산을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 화학식 H3BO3을 갖는 붕산을 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 화학식 H3BO3을 갖는 붕산의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
조합물: 바이러스와 U+2-ACTX-Hv1a의 예시적인 조합
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 곤충 종과 접촉할 때 살충 활성을 보유하는 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, DNA 바이러스 또는 RNA 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 아스코바이러스; 바큘로바이러스; 덴소바이러스; 엔토모폭스바이러스; 히트로사바이러스; 이리도바이러스; 누디바이러스; 폴리드나바이러스; 디시스트로바이러스; 이플라바이러스; 노다바이러스; 테트라바이러스; 또는 시포바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아스코바이러스과의 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 아스코바이러스, 예컨대 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3a; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3b; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3c; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3d; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3e; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3f; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3g; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3h; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3j; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1a; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2a; 헬리오티스 비레센스 아스코바이러스 3i; 스포도프테라 아스코바이러스; 스포도프테라 엑시구아 아스코바이러스 5a; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1c; 스포도프테라 프루기페르다 아스코바이러스 1d; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2b; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2c; 트리코플루시아 니 아스코바이러스 2d; 또는 트리코플루시아 니 아스코바이러스 6b를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 아스코바이러스과의 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 토우르스바이러스, 예컨대 디아드로무스 풀켈루스 토우르스바이러스; 디아드로무스 풀켈루스 아스코바이러스 4a; 또는 다시네우라 주주비폴리아 토우르스바이러스 2a를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 덴소바이러스과의 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 암비덴소바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 암비덴소바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 아스테로이드 암비덴소바이러스 1; 불가사리 관련 덴소바이러스; 블라토데안 암비덴소바이러스 1; 페리플라네타 풀리기노사 덴소바이러스; 페리플라네타 풀리기노사 덴소바이러스 Guo/2000; 블라토데안 암비덴소바이러스 2; 블라텔라 게르마니카 덴소바이러스 1; 십각목 암비덴소바이러스 1; 케락스 쿠아드리카리나투스 덴소바이러스; 쌍시목 암비덴소바이러스 1; 쿨렉스 피피엔스 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 1; 플라노코쿠스 시트리 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 2; 디사피스 플란타기네아 덴소바이러스; 반시목 암비덴소바이러스 3; 미주스 페르시카에 덴소바이러스; 미주스 페르시카에 니코티아나에 덴소바이러스; 막시목 암비덴소바이러스 1; 솔레놉시스 인빅타 덴소바이러스; 인시목 암비덴소바이러스 1; 갈레리아 멜로넬라 덴소바이러스; 주노니아 코에니아 덴소바이러스; 주노니아 코에니아 덴소바이러스 pBRJ/1990; 미팀나 로레이 덴소바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 덴소바이러스; 메뚜기목 암비덴소바이러스 1; 아케타 도메스티카 덴소바이러스; 미분류 암비덴소바이러스; 테트라니쿠스 우르티카에 관련 암비덴소바이러스; 미분류 덴소바이러스; 암비덴소바이러스 CaaDV1; 암비덴소바이러스 CaaDV2; 아트라토 덴소 유사 바이러스; 아트라토 덴소 유사 바이러스 1; 덴소바이러스 SC1065; 덴소바이러스 SC1118; 덴소바이러스 SC116; 덴소바이러스 SC2121; 덴소바이러스 SC2209; 덴소바이러스 SC2228; 덴소바이러스 SC2886; 덴소바이러스 SC3749; 덴소바이러스 SC3908; 덴소바이러스 SC4092; 덴소바이러스 SC444; 덴소바이러스 SC525; 디아포리나 시트리 덴소바이러스; 디아트라에아 사카랄리스 덴소바이러스; 루핀 배설물 관련 덴소바이러스; 루핀 배설물 관련 덴소바이러스 2; 또는 암비덴소바이러스 종.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 엔토모폭스바이러스과의 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 알파엔토모폭스바이러스; 베타엔토모폭스바이러스; 디아카스미모르파 엔토모폭스바이러스; 멜라노플루스 산구이니페스 엔토모폭스바이러스; 또는 일부 지금까지 미분류된 엔토모폭스바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 엔토모폭스바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 아노말라 쿠프레아 엔토모폭스바이러스; 아독소피에스 혼마이 엔토모폭스바이러스; 아독소피에스 혼마이 엔토모폭스바이러스 'L'; 암삭타 무레이 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 비에니스 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 엔토모폭스바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 엔토모폭스바이러스 'L'; 헬리오티스 아르미게라 엔토모폭스바이러스; 미팀나 세파라타 엔토모폭스바이러스; 미팀나 세파라타 엔토모폭스바이러스 'L'; 미분류 베타엔토모폭스바이러스; 디아카스미모르파 론기카우다타 엔토모폭스바이러스; 멜라노플루스 산구이니페스 엔토모폭스바이러스 'O'; 아나크리디움 아에깁티움 엔토모폭스바이러스; 칼립타무스 이탈리쿠스 엔토모폭스바이러스; 키로노무스 데코루스 엔토모폭스바이러스; 곰포세루스 시비리쿠스 엔토모폭스바이러스; 호모나 코페아리아 엔토모폭스바이러스; 리네피테마 후밀레 엔토모폭스바이러스 1; 오에달레우스 아시아티쿠스 엔토모폭스바이러스; 또는 슈달레티아 세파라타 엔토모폭스바이러스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 이리도바이러스과 바이러스, 예를 들어 이리도바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 이리도바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 티풀라 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 31; 아르마딜리디움 불가레 이리데센트 바이러스; 포필리아 자포니카 이리데센트 바이러스; 포르셀리오 스카베르 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 6; 그릴루스 비마쿨라투스 이리도바이러스; 미분류 이리도바이러스; 아세테스 에리트라에우스 이리도바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 이리데센트 바이러스; 아르마딜리디움 데코룸 이리데센트 바이러스; 바라문디 퍼치 이리도바이러스; 블루길 개복치 이리도바이러스; 일반 주둥치 이리도바이러스; 크림슨 스내퍼 이리도바이러스; 데캅테루스 마크로소마 이리도바이러스; 가자 미누타 이리도바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 16; 코스텔리트라 제알란디카 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 2; 세리세스티스 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 23; 헤테로니쿠스 아라토르 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 24; 아피스 세라나 이리데센트 바이러스; 무척추동물 이리데센트 바이러스 29; 테네브리오 몰리토르 이리데센트 바이러스; 이리도바이러스 바라문디/Quang Ninh/VNM/2008; 이리도바이러스 IV31; 일본 바다배스 이리도바이러스; 라고세팔루스 셀레라투스 이리도바이러스; 라테스 칼카리페르 이리도바이러스; 레이오그나투스 스플렌덴스 이리도바이러스; 마블고비 이리도바이러스; 구형 배트피쉬 이리도바이러스; 파라프리스티포마 트릴리네아툼 이리도바이러스; 퍼치 이리도바이러스 603-2/중국; 폴리닥틸루스 섹타리우스 이리도바이러스; 포르셀리오 시쿨로시덴탈리스 이리데센트 바이러스; 피랄타 루테올라 이리데센트 바이러스; 라나 템포라리아 영국 이리도바이러스 1; 라나 템포라리아 영국 이리도바이러스 2; 실버 씨브림 이리도바이러스; 가물치 이리도바이러스; 돌가자미 이리도바이러스 603-3/중국; 돌가자미 이리도바이러스 724/중국; 철갑상어 이리도바이러스; 시노두스 인디쿠스 이리도바이러스; 또는 트리코니스쿠스 파노르미덴시스 이리데센트 바이러스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 누디바이러스과 바이러스, 예를 들어 알파누디바이러스, 베타누디바이러스 또는 일부 지금까지 미분류된 누디바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 누디바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 그릴루스 비마쿨라투스 누디바이러스; 오릭테스 리노세로스 누디바이러스; 헬리오티스 제아 누디바이러스; 헬리코베르파 제아 누디바이러스 2; 알로미리나 바이러스; 드로소필라 이누빌라 누디바이러스; 드로소필라 누디바이러스 RLU-2011; 에스파르토 바이러스; 호마루스 감마루스 누디바이러스; 칼리테아 바이러스; 마크로브라키움 누디바이러스 CN-SL2011; 마우테른바흐 바이러스; 닐라파르바타 루겐스 내인성 누디바이러스; 페나에우스 모노돈 누디바이러스; 티풀라 올레라세아 누디바이러스; 또는 토멜로소 바이러스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 이플라바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 안테라에아 페르니 이플라바이러스; 브레비코리네 브라시카에 바이러스; 브레비코리네 브라시카에 바이러스-UK; 날개기형바이러스; 카쿠고 바이러스; VDV-1/DWV 재조합; 디노캄푸스 코시넬라에 마비 바이러스; 엑트로피스 오블리쿠아 바이러스; 엑트로피스 오블리쿠아 피코르나 유사 바이러스; 감염성 무름병 바이러스; 감염성 무름병 바이러스 누에 단리물; 익소데스 홀로시클루스 이플라바이러스; 리구스 리네올라리스 바이러스 1; 리만트리아 디스파르 이플라바이러스 1; 닐라파르바타 루겐스 꿀 바이러스 1; 페리나 누다 바이러스; 삭브루드 바이러스; 삭브루드 바이러스 CSBV-LN/중국/2009; 느린 꿀벌 마비 바이러스; 스포도프테라 엑시구아 이플라바이러스 1; 스포도프테라 엑시구아 이플라바이러스 2; 바로아 데스트룩토르 바이러스 1; 미분류 이플라바이러스; ACT 벼룩 이플라바이러스; 아에데스 벡산스 이플라바이러스; 아르미게레스 이플라바이러스; 박쥐 이플라바이러스; 꿀벌 이플라바이러스 1; 블랙베리 이플라바이러스 A; 블랙베리 이플라바이러스 B; 봄빅스 모리 이플라바이러스; 브레베스 이플라바이러스; 배추좀나방 이플라바이러스; 포르미카 엑섹타 바이러스 2; 하에마피살리스 플라바 이플라바이러스; 헬리코니우스 에라토 이플라바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 이플라바이러스; 깔다구 이플라바이러스 90C0; 미니옵테루스 풀리기노수스 이플라바이러스; 모쿠 바이러스; 나소니아 비트리페니스 바이러스; 피리잘 이플라바이러스; 프사모테틱스 알리에누스 이플라바이러스 1; 론도니아 이플라바이러스 1; 론도니아 이플라바이러스 2; 스카포이데우스 티타누스 이플라바이러스 1; 스카포이데우스 티타누스 이플라바이러스 2; VDV-1/DWV 재조합 4; 베스파 벨루티나 모쿠 바이러스; 또는 자이스티쿠스 크리스타투스 이플라바이러스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 바큘로바이러스과의 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 알파바큘로바이러스, 베타바큘로바이러스, 델타바큘로바이러스, 감마바큘로바이러스 또는 지금까지 미분류된 바큘로바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 알파바큘로바이러스 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 아독소피에스 혼마이 핵다각체병바이러스; 아그로티스 입실론 다중 핵다각체병바이러스; 아그로티스 세게툼 핵다각체병바이러스 A; 아그로티스 세게툼 핵다각체병바이러스 B; 안테라에아 페르니 핵다각체병바이러스; 안테라에아 프로일레이 핵다각체병바이러스; 필로사미아 신티아 리시니 핵다각체병바이러스 바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 다중 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 칼리포르니카 다중 핵다각체병바이러스; 아나그라파 팔시페라 MNPV; 아우토그라파 칼리포르니카 핵다각체병바이러스; 갈레리아 멜로넬라 MNPV; 플루텔라 자일로스텔라 다중 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누 MNPV; 라키플루시아 오우 MNPV; 봄빅스 모리 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스 S2; 봄빅스 모리 핵다각체병바이러스 K1; 부주라 수프레사리아 핵다각체병바이러스; 카톱실리아 포모나 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 DEF 다중 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 다중 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 알파바큘로바이러스; 코리스토네우라 무리나나 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 로사세아나 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 칼시테스 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 칼시테스 SNPV TF1-A; 크리소데익시스 인클루덴스 핵다각체병바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 SNPV IE; 클라니스 빌리네아타 핵다각체병바이러스; 다시키라 푸디분다 핵다각체병바이러스; 엑트로피스 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 에피피아스 포스트비타나 핵다각체병바이러스; 유프록티스 슈도콘스페르사 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 NPV NNg1; 헬리코베르파 아르미게라 NPV 균주 호주; 헬리코베르파 아르미게라 핵다각체병바이러스 G4; 헬리코베르파 아르미게라 SNPV; 헬리코베르파 SNPV AC53; 헬리코베르파 제아 단일 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 종 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 sp. 핵다각체병바이러스; 히판트리아 쿠네아 핵다각체병바이러스; 람브디나 피셀라리아 핵다각체병바이러스; 레우카니아 세파라타 핵다각체병바이러스; 로노미아 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 로노미아 오블리쿠아 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 디스파르 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 자일리나 핵다각체병바이러스; 마메스트라 브라시카에 다중 핵다각체병바이러스; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스 A; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스 B; 헬리코베르파 아르미게라 다중 핵다각체병바이러스; 마루카 비트라타 핵다각체병바이러스; 미팀나 우니푼크타 핵다각체병바이러스; 오페로프테라 브루마타 핵다각체병바이러스; 오르기아 류코스티그마 핵다각체병바이러스; 오르기아 슈도츄가타 다중 핵다각체병바이러스; 옥시플락스 오크라세아 핵다각체병바이러스; 페리고니아 루스카 핵다각체병바이러스; 페리고니아 루스카 단일 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑시구아 다중 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑시구아 핵다각체병바이러스(균주 US); 스포도프테라 프루기페르다 다중 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리투라 핵다각체병바이러스; 수크라 주주바 핵다각체병바이러스; 티사노플루시아 오리칼세아 핵다각체병바이러스; 트리코플루시아 니 단일 핵다각체병바이러스; 위세아나 시그타나 핵다각체병바이러스; 미분류 알파바큘로바이러스; 아브락사스 그로술라리아타 핵다각체병바이러스; 악티아스 셀레네 핵다각체병바이러스; 아독소피에스 오라나 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 바닐라에 MNPV; 아그로티스 엑스클라마티오니스 핵다각체병바이러스; 아그로티스 입실론 다중 캡시드 핵다각체병바이러스; 아모르비아 쿠네아캅사 핵다각체병바이러스; 아모르비아 쿠네아나 핵다각체병바이러스; 암펠로파가 루비기노사 핵다각체병바이러스; 암삭타 알비스트리가 핵다각체병바이러스; 아나그라파 팔시페라 다중 핵다각체병바이러스; 안테라에아 폴리페무스 핵다각체병바이러스; 안티카르시아 겜마탈리스 핵다각체병바이러스; 아포케이마 시네라리움 핵다각체병바이러스; 아포리아 크라타에기 핵다각체병바이러스; 아르킵스 세라시보라누스 핵다각체병바이러스; 아르킵스 로사누스 핵다각체병바이러스; 아타쿠스 리시니 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 빌로바 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 감마 핵다각체병바이러스; 아우토그라파 니그리시그나 핵다각체병바이러스; 보아르미아 비스토르타타 핵다각체병바이러스; 봄빅스 만다리나 핵다각체병바이러스; 부세올라 푸스카 핵다각체병바이러스; 카트포실리아 포모나 핵다각체병바이러스; 세랍테릭스 그라미니스 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 디베르사나 핵다각체병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 핵다각체병바이러스; 코리자그로티스 아욱실리아리스 핵다각체병바이러스; 크리소데익시스 인클루덴스 NPV; 콜로라디아 판도라 알파바큘로바이러스; 콜로라디아 판도라 핵다각체병바이러스; 콘딜로리자 베스티기알리스 MNPV; 콘딜로리자 베스티기알리스 다중 핵다각체병바이러스; 크립토플레비아 펠타스티카 핵다각체병바이러스; 시클로프라그마 운단스 핵다각체병바이러스; 다시키라 플라기아타 핵다각체병바이러스; 덴드롤리무스 키쿠키 핵다각체병바이러스; 디아파니아 풀베룰렌탈리스 핵다각체병바이러스; 디오네 주노 MNPV tmk1/ARG/2003; 디오네 주노 핵다각체병바이러스; 디르피아 페루비아누스 핵다각체병바이러스; 엑트로피스 그리세센스 핵다각체병바이러스; 에피노티아 그라니탈리스 핵다각체병바이러스; 유프록티스 디그라마 핵다각체병바이러스; 길피니아 헤르시니아에 핵다각체병바이러스; 헬리코니우스 에라토 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 아술타 핵다각체병바이러스; 헬리코베르파 겔로토포에온 단일 핵다각체병바이러스; 헬리오티스 펠티게라 SNPV; 헬리오티스 제아 핵다각체병바이러스; 헤메로캄파 베투스타 핵다각체병바이러스; 헤밀레우카 알파바큘로바이러스; 히포시드라 인픽사리아 NPV; 히포시드라 탈라카 NPV; 이라고이데스 파시아타 핵다각체병바이러스; 주노니아 코에니아 핵다각체병바이러스; 류코마 살리시스 핵다각체병바이러스; 리만트리아 마투라 다중 핵다각체병바이러스; 리만트리아 모나카 핵다각체병바이러스; 리만트리아 자일리나 핵다각체병바이러스 2; 말라코소마 알파바큘로바이러스; 말라코소마 아메리카눔 핵다각체병바이러스; 말라코소마 칼리포르니쿰 핵다각체병바이러스; 말라코소마 칼리포르니쿰 플루비알레 핵다각체병바이러스; 말라코소마 디스트리아 핵다각체병바이러스; 말라코소마 뉴스트리아 핵다각체병바이러스; 마메스트라 콘피구라타 핵다각체병바이러스; 네오파시아 알파바큘로바이러스; 네피티아 판타스마리아 핵다각체병바이러스; 님팔리스 이오 핵다각체병바이러스; 오크 자벌레 알파바큘로바이러스; 오피우사 디스준겐스 핵다각체병바이러스; 오르기아 아나르토이데스 핵다각체병바이러스; 오르기아 에리카에 핵다각체병바이러스; 오르기아 슈도츄가타 단일 캡시드 핵다각체병바이러스; 파놀리스 플라메아 핵다각체병바이러스; 페리드로마 알파바큘로바이러스; 페리드로마 마르가리토사 핵다각체병바이러스; 페리나 누다 핵다각체병바이러스; 프리가니디아 칼리포르니카 핵다각체병바이러스; 플루시아 아쿠타 핵다각체병바이러스; 플루시아 오리칼세아 핵다각체병바이러스; 플루텔라 마쿨리페니스 핵다각체병바이러스; 슈달레티아 알파바큘로바이러스; 슈도플루시아 인클루덴스 핵다각체병바이러스; 프테롤로세라 암플리코르니스 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누 핵다각체병바이러스; 라키플루시아 누 단일 핵다각체병바이러스; 사미아 신티아 핵다각체병바이러스; 스필라르크티아 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 스필로소마 오블리쿠아 핵다각체병바이러스; 스필로소마 파스마 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 코스미오이데스 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 에리다니아 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 엑셈프타 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 다중 캡시드 핵다각체병바이러스; 스포도프테라 리투라 MNPV; 스포도프테라 리투라 핵다각체병바이러스 II; 스포도프테라 테리콜라 핵다각체병바이러스; 티네올라 비셀리엘라 핵다각체병바이러스; 트로이데스 아에아쿠스 핵다각체병바이러스; 위세아나 세르비나타 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 종 핵다각체병바이러스; 말라코소마 종 알파바큘로바이러스; 말라코소마 종 핵다각체병바이러스; 네오파시아 종 알파바큘로바이러스; 또는 미확인 핵다각체병바이러스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 베타바큘로바이러스 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 아독소피에스 오라나 과립병바이러스; 아그로티스 세게툼 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 A; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마 과립병바이러스; 에리니스 엘로 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에 과립병바이러스; 모시스 라티페스 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A; 슈달라티아 우니푼크타 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸 과립병바이러스; 아카에아 자나타 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타 과립병바이러스; 아우토그라파 감마 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스 베타바큘로바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스; 크네파시아 론가나 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아 과립병바이러스; 나타다 나라리아 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아 과립병바이러스; 판데미스 리미타타 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라 과립병바이러스; 피에리스 라파에 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스; 스코토그라마 트리폴리 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라 과립병바이러스; 또는 모시스 종 과립병바이러스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 델타바큘로바이러스 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 쿨렉스 니그리팔푸스 핵다각체병바이러스; 또는 쿨렉스 니그리팔푸스 NPV 플로리다/1997.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 감마바큘로바이러스 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 네오디프리온 레콘테이 핵다각체병바이러스; 네오디프리온 레콘테이 NPV(균주 캐나다); 네오디프리온 세르티페르 핵다각체병바이러스; 미분류 감마바큘로바이러스; 또는 네오디프리온 아비에티스 NPV.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 하기 군에서 선택되는 지금까지 미분류된 바큘로바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 아카에아 파베르 핵다각체병바이러스; 아에데스 솔리시탄스 핵다각체병바이러스; 아글라이스 우르티카에 핵다각체병바이러스; 아그라울리스 바닐라에 핵다각체병바이러스; 아노미스 사불리페라 핵다각체병바이러스; 안테라에아 야마마이 핵다각체병바이러스; 안토필라 파브리시아나 과립병바이러스; 아로아 디스칼리스 핵다각체병바이러스; 바큘로바이러스 페나에이; 카드라 카우텔라 핵다각체병바이러스; 칼리옵시스 주노디 핵다각체병바이러스; 코테시아 마르기니벤트리스 바큘로바이러스; 시노사르가 오르나타 핵다각체병바이러스; 다르나 나라리아 과립병바이러스; 다르나 트리마 과립병바이러스; 에라니스 데폴리아리아 핵다각체병바이러스; 유플렉시아 루시파라 과립병바이러스; 유프록티스 크리소로에아 핵다각체병바이러스; 유프록티스 시밀리스 핵다각체병바이러스; 생식선 특이적 바이러스; 호모나 코페아리아 과립병바이러스; 히블라에아 푸에라 핵다각체병바이러스; 이다에아 세리아타 핵다각체병바이러스; 주노니아 코에니아 과립병바이러스; 라시오캄파 쿠에르쿠스 핵다각체병바이러스; 레미라 임파릴리스 핵다각체병바이러스; 마하세나 코르베티 핵다각체병바이러스; 멜란크라 페르시카리아에 과립병바이러스; 오페로프테라 브루세아타 핵다각체병바이러스; 오르기아 안티쿠아 핵다각체병바이러스; 오르기아 믹스타 핵다각체병바이러스; 파키트리나 필라르기리아 핵다각체병바이러스; 파레우카에테스 슈도인술라타 핵다각체병바이러스; 페나에우스 모노돈 핵다각체병바이러스; 팔레라 부세팔라 핵다각체병바이러스; 폴리고니아 c-알붐 핵다각체병바이러스; 사미아 리시니 핵다각체병바이러스; 스필로소마 루테아 과립병바이러스; 스포도프테라 알불라 핵다각체병바이러스; 트라발라 비슈노우 핵다각체병바이러스; 우라노타에니아 사피리나 핵다각체병바이러스; 우르바누스 프로테우스 핵다각체병바이러스; 우테테이사 풀켈라 핵다각체병바이러스; 바네사 아탈란타 핵다각체병바이러스; 바네사 카르두이 핵다각체병바이러스; 위세아나 세르비나타 과립병바이러스; 또는 바큘로바이러스과 종.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 바큘로바이러스과 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 베타바큘로바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와, 하기 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다: 아독소피에스 오라나 과립병바이러스; 아그로티스 세게툼 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 A; a 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마 과립병바이러스; 에리니스 엘로 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에 과립병바이러스; 모시스 라티페스 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A; 슈달라티아 우니푼크타 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸 과립병바이러스; 미분류 베타바큘로바이러스; 아카에아 자나타 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타 과립병바이러스; 아우토그라파 감마 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스 베타바큘로바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스; 크네파시아 론가나 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아 과립병바이러스; 나타다 나라리아 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아 과립병바이러스; 판데미스 리미타타 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라 과립병바이러스; 피에리스 라파에 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스; 스코토그라마 트리폴리 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라 과립병바이러스; 또는 모시스 종 과립병바이러스.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 시디아 포모넬라 과립병바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어진다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9%로 포함한다.
일부 구현예에서, 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소와 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 조합물 또는 조성물은 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소의 농도를, 총 조성물의 약 0.0001% w/w, 0.0005% w/w, 0.001% w/w, 0.005% w/w, 0.01% w/w, 0.02% w/w, 0.03% w/w, 0.04% w/w, 0.05% w/w, 0.06% w/w, 0.07% w/w, 0.08% w/w, 0.09% w/w, 0.1% w/w, 0.2% w/w, 0.3% w/w, 0.4% w/w, 0.5% w/w, 0.6% w/w, 0.7% w/w, 0.8% w/w, 0.9% w/w, 1% w/w, 2% w/w, 3% w/w, 4% w/w, 5% w/w, 6% w/w, 7% w/w, 8% w/w, 9% w/w, 10% w/w, 11% w/w, 12% w/w, 13% w/w, 14% w/w, 15% w/w, 16% w/w, 17% w/w, 18% w/w, 19% w/w, 20% w/w, 21% w/w, 22% w/w, 23% w/w, 24% w/w, 25% w/w, 26% w/w, 27% w/w, 28% w/w, 29% w/w, 30% w/w, 31% w/w, 32% w/w, 33% w/w, 34% w/w, 35% w/w, 36% w/w, 37% w/w, 38% w/w, 39% w/w, 40% w/w, 41% w/w, 42% w/w, 43% w/w, 44% w/w, 45% w/w, 46% w/w, 47% w/w, 48% w/w, 49% w/w, 50% w/w, 51% w/w, 52% w/w, 53% w/w, 54% w/w, 55% w/w, 56% w/w, 57% w/w, 58% w/w, 59% w/w, 60% w/w, 61% w/w, 62% w/w, 63% w/w, 64% w/w, 65% w/w, 66% w/w, 67% w/w, 68% w/w, 69% w/w, 70% w/w, 71% w/w, 72% w/w, 73% w/w, 74% w/w, 75% w/w, 76% w/w, 77% w/w, 78% w/w, 79% w/w, 80% w/w, 81% w/w, 82% w/w, 83% w/w, 84% w/w, 85% w/w, 86% w/w, 87% w/w, 88% w/w, 89% w/w, 90% w/w, 91% w/w, 92% w/w, 93% w/w, 94% w/w, 95% w/w, 96% w/w, 97% w/w, 98% w/w, 99% w/w, 99.1% w/w, 99.2% w/w, 99.3% w/w, 99.4% w/w, 99.5% w/w, 99.6% w/w, 99.7% w/w, 99.8% w/w 또는 약 99.9% w/w로 포함한다.
본 발명의 사용 방법
식물, 식물 부분 및 종자를 보호하는 방법
일부 구현예에서, 본 개시내용은, 무척추동물 해충 또는 이의 환경, 식물 표면 또는 이의 부분을 포함하는 고체 표면을, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)의 조합물의 살충 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 농경학적 및/또는 비농경학적 적용으로 무척추동물 해충을 방제하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은, 무척추동물 해충 또는 이의 환경, 식물 표면 또는 이의 부분을 포함하는 고체 표면을, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조합물의 살충 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 농경학적 및/또는 비농경학적 적용으로 무척추동물 해충을 방제하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 조성물은 하기를 포함할 수 있다: (1) 표 A, 즉, A1 내지 A68에 제시된 하나 이상의 CRIP, (2) 표 B, 즉, B1 내지 B479에 제시된 하나 이상의 살충 작용제, 및 (3) 부형제.
(1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 적합한 조성물의 예에는, 액체 용액, 에멀젼, 분말, 과립, 나노입자, 마이크로입자, 또는 이들의 조합의 형태로 전달되는 비활성 성분으로 제형화된 상기 조성물이 포함된다.
일부 구현예에서, 무척추동물 해충으로부터 농작물을 보호하기 위해서 본 발명의 화합물, 혼합물 또는 조성물과의 접촉을 달성하기 위해, 화합물 또는 조성물은 전형적으로 파종 전 작물의 종자에, 작물 식물의 경엽(예를 들어, 잎, 줄기, 꽃, 과실)에, 또는 작물이 식재되기 전 또는 후 토양 또는 다른 성장 매체에 적용된다.
접촉 방법의 하나의 구현예는 분무를 이용한 것이다. 대안적으로, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 과립 조성물은, 식물 경엽 또는 토양에 적용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한, 액체 제형의 토양 관주, 토양에 대한 과립 제형, 육모 상자 처리 또는 이식물의 침지로 적용되는 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물과 식물을 접촉시키는 방식으로 식물 흡수를 통해 효과적으로 전달될 수 있다. 주목할 점은, 토양 관주 액체 제형 형태의 본 개시내용의 조성물이다. 또한 주목할 점은, 무척추동물 해충 또는 이의 환경을 본 발명의 조합물의 생물학적 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는 무척추동물 해충을 방제하는 방법이다. 추가로 주목할 점은, 일부 예시적인 구현예에서, 예시적인 방법은 토양 환경을 고려하고, 조성물이 토양 관주 제형으로 토양에 적용된다는 점이다. 추가로 주목할 점은, 본 발명의 CRIP와 IA의 조합이 침입 장소에의 국소 적용으로도 효과적이라는 점이다. 다른 접촉 방법에는, 직접 및 잔류 스프레이, 공중 스프레이, 겔, 종자 코팅, 마이크로캡슐화, 전신 흡수, 미끼, 귀표, 볼루스, 분무기, 훈증제, 에어로졸, 분진 및 다수의 기타 수단을 통한 본 발명의 화합물 또는 조성물의 적용이 포함된다. 접촉 방법의 하나의 구현예는 본 발명의 화합물 또는 조성물을 포함하는 형태적으로 안정한 비료 과립, 스틱 또는 정제이다. 본 발명의 화합물은 또한 무척추동물 방제 장치(예를 들어, 곤충 그물, 의류에의 적용, 캔들 제형에의 적용 등)를 제작하기 위한 재료에 함침될 수 있다.
일부 구현예에서, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 선택적으로 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조합물은 또한, 무척추동물 해충으로부터 종자를 보호하기 위한 종자 처리에 유용하다. 본 개시내용 및 청구범위의 맥락에서, 종자 처리는, 전형적으로 본 발명의 조성물로 제형화된, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)의 조합물의 살충 유효량을 종자와 접촉시키는 것을 의미한다. 이러한 종자 처리는 무척추동물 토양 해충으로부터 토양을 보호하고, 일반적으로 발아 종자로부터 발달하는 묘목의 토양과 접촉하고 있는 뿌리 및 다른 식물을 보호할 수 있다. 종자 처리는 또한 발달하는 식물 내에서 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)의 전위에 의해 경엽 보호를 제공할 수 있다. 종자 처리는 특수 형질이 발현되도록 유전적으로 형질전환된 식물이 발아하게 되는 종자를 포함하여 모든 유형의 종자에 적용될 수 있다. 또한, 일부 구현예에서, CRIP는 식물 또는 이의 부분, 예를 들어 이미 형질전환된 식물 세포 또는 식물 종자, 예를 들어 글리포세이트에 대한 내성을 제공하는 글리포세이트 아세틸트랜스퍼라아제와 같은 제초제 내성을 발현하는 것들로 형질전환될 수 있다.
종자 처리의 하나의 방법은, 종자를 파종하기 전 종자에, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조합물을 분무하거나 살포하는 방식이다. 종차 저리용으로 제형화된 조성물은 일반적으로 본 발명의 조합물과, 필름 형성제 또는 접착제로 이루어진다. 따라서, 전형적으로, 본 개시내용의 종자 코팅 조성물은 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)의 살충 유효량과, 필름 형성제 또는 접착제로 이루어진다. 종자는 유동성 현탁액 농축물을 직접 종자의 텀블링 베드에 분무한 후, 종자를 건조시키는 방식으로 코팅될 수 있다. 대안적으로, 수화제, 용액, 유현탁액, 유화성 농축물 및 수중 에멀젼과 같은 다른 제형 유형이 종자에 분무될 수 있다. 이러한 공정은 종자에 필름 코팅을 적용하는 데 특히 유용하다. 다양한 코팅 기계 및 공정이 당업자에게 이용 가능하다. 적합한 공정은 문헌[P. Kosters et al., Seed Treatment: Progress and Prospects, 1994 BCPC Monograph No. 57] 및 상기 문헌에 열거된 참고문헌에 열거된 것들을 포함하며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
처리된 종자는 전형적으로 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)의 조합물을, 종자 100 kg 당 약 0.01 g 내지 1 kg 범위의 양으로(즉, 처리 전 종자의 약 0.00001 중량% 내지 1 중량%) 포함한다. 종자 처리용으로 제형화된 유동성 현탁액은 전형적으로 활성 성분 약 0.5% 내지 약 70%, 필름 형성 접착제 약 0.5% 내지 약 30%, 분산제 약 0.5% 내지 약 20%, 증점제 0% 내지 약 5%, 안료 및/또는 염료 0% 내지 약 5%, 소포제 0% 내지 약 2%, 보존제 0% 내지 약 1%, 및 휘발성 액체 희석제 0% 내지 약 75%를 포함한다.
제형 및 조성물의 사용 방법
일부 구현예에서, 본 발명은 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 조성물을 제조하는 단계, 이어서 상기 조성물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 곤충을 방제하기 위해 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물을 사용하는 방법으로서, 여기서 곤충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 본 발명은 곤충으로부터 식물을 보호하는 방법으로서, 하나 이상의 CRIP 또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 발현하는 식물과, 하나 이상의 펩타이드-IA를 제공하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 곤충으로부터 식물을 보호하는 방법으로서, 하나 이상의 CRIP 또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 발현하는 식물을 제공하는 단계와, 하나 이상의 비펩타이드-IA를 상기 식물에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 조성물은 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용되는 방법을 제공한다.
본원에 기재된 조성물 중 임의의 것은, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하는 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법에 사용될 수 있다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 CRIP는 표 A, 즉, A1; A2; A3; A4; A5; A6; A7; A8; A9; A10; A11; A12; A13; A14; A15; A16; A17; A18; A19; A20; A21; A22; A23; A24; A25; A26; A27; A28; A29; A30; A31; A32; A33; A34; A35; A36; A37; A38; A39; A40; A41; A42; A43; A44; A45; A46; A47; A48; A49; A50; A51; A52; A53; A54; A55; A56; A57; A58; A59; A60; A61; A62; A63; A64; A65; A66; A67; 또는 A68에서 선택되고; 상기 CRIP는 각각, 서열번호 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11; 12; 13; 14; 15; 49; 50; 51; 52; 53; 621; 622; 623; 624; 625; 626; 627; 628; 629; 630; 631; 632; 633; 634; 635; 636; 637; 638; 639; 640; 641; 642; 643; 644; 645; 646; 647; 648; 649; 650; 651; 652; 653; 654; 66; 88; 588; 44; 45; 46; 47; 60; 61; 62; 63; 64; 594; 또는 65에 제시된 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 CRIP 펩타이드는 서열번호 192 내지 370 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 거미 펩타이드; 서열번호 60 내지 64, 192 내지 370 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 ACTX 펩타이드(예를 들어, U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, κ-ACTX-Hv1a, κ+2-ACTX-Hv1a, ω-ACTX-Hv1a 및/또는 ω+2-ACTX-Hv1a); 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a; 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 서열번호 66, 88 내지 191 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 전갈 펩타이드; 서열번호 371 내지 411 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 말미잘 펩타이드; 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열을 갖는 아네모니아 비리디스 유래 Av3 폴리펩타이드; 서열번호 45 내지 47 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 또는 코노톡신과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 갖는 펩타이드를 포함하거나, 본질적으로 이로 이루어지거나 또는 이로 이루어질 수 있고; IA는 표 B에 열거된 IA이며, 여기서 IA는 B1; B2; B3; B4; B5; B6; B7; B8; B9; B10; B11; B12; B13; B14; B15; B16; B17; B18; B19; B20; B21; B22; B23; B24; B25; B26; B27; B28; B29; B30; B31; B32; B33; B34; B35; B36; B37; B38; B39; B40; B41; B42; B43; B44; B45; B46; B47; B48; B49; B50; B51; B52; B53; B54; B55; B56; B57; B58; B59; B60; B61; B62; B63; B64; B65; B66; B67; B68; B69; B70; B71; B72; B73; B74; B75; B76; B77; B78; B79; B80; B81; B82; B83; B84; B85; B86; B87; B88; B89; B90; B91; B92; B93; B94; B95; B96; B97; B98; B99; B100; B101; B102; B103; B104; B105; B106; B107; B108; B109; B110; B111; B112; B113; B114; B115; B116; B117; B118; B119; B120; B121; B122; B123; B124; B125; B126; B127; B128; B129; B130; B131; B132; B133; B134; B135; B136; B137; B138; B139; B140; B141; B142; B143; B144; B145; B146; B147; B148; B149; B150; B151; B152; B153; B154; B155; B156; B157; B158; B159; B160; B161; B162; B163; B164; B165; B166; B167; B168; B169; B170; B171; B172; B173; B174; B175; B176; B177; B178; B179; B180; B181; B182; B183; B184; B185; B186; B187; B188; B189; B190; B191; B192; B193; B194; B195; B196; B197; B198; B199; B200; B201; B202; B203; B204; B205; B206; B207; B208; B209; B210; B211; B212; B213; B214; B215; B216; B217; B218; B219; B220; B221; B222; B223; B224; B225; B226; B227; B228; B229; B230; B231; B232; B233; B234; B235; B236; B237; B238; B239; B240; B241; B242; B243; B244; B245; B246; B247; B248; B249; B250; B251; B252; B253; B254; B255; B256; B257; B258; B259; B260; B261; B262; B263; B264; B265; B266; B267; B268; B269; B270; B271; B272; B273; B274; B275; B276; B277; B278; B279; B280; B281; B282; B283; B284; B285; B286; B287; B288; B289; B290; B291; B292; B293; B294; B295; B296; B297; B298; B299; B300; B301; B302; B303; B304; B305; B306; B307; B308; B309; B310; B311; B312; B313; B314; B315; B316; B317; B318; B319; B320; B321; B322; B323; B324; B325; B326; B327; B328; B329; B330; B331; B332; B333; B334; B335; B336; B337; B338; B339; B340; B341; B342; B343; B344; B345; B346; B347; B348; B349; B350; B351; B352; B353; B354; B355; B356; B357; B358; B359; B360; B361; B362; B363; B364; B365; B366; B367; B368; B369; B370; B371; B372; B373; B374; B375; B376; B377; B378; B379; B380; B381; B382; B383; B384; B385; B386; B387; B388; B389; B390; B391; B392; B393; B394; B395; B396; B397; B398; B399; B400; B401; B402; B403; B404; B405; B406; B407; B408; B409; B410; B411; B412; B413; B414; B415; B416; B417; B418; B419; B420; B421; B422; B423; B424; B425; B426; B427; B428; B429; B430; B431; B432; B433; B434; B435; B436; B437; B438; B439; B440; B441; B442; B443; B444; B445; B446; B447; B448; B449; B450; B451; B452; B453; B454; B455; B456; B457; B458; B459; B460; B461; B462; B463; B464; B465; B466; B467; B468; B469; B470; B471; B472; B473; B474; B475; B476; B477; B478; B479; 또는 이들의 조합인 방법을 제공한다.
TVP 조성물(화학식 I)의 사용 방법
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며, 여기서 하나 이상의 부형제는 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 트레할로오스; 말토덱스트린; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4); 일염기성 인산포타슘(KH2PO4); BIT; 및 발효 고형물.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서, 조성물의 총 중량을 기준으로, TVP 또는 TVP-살충 단백질은 약 2% wt/wt 내지 약 16% wt/wt 범위이고; 트레할로오스는 약 5% wt/wt 내지 약 40% wt/wt 범위이고; BIT는 약 0.01% wt/wt 내지 약 0.1% wt/wt 범위이고; 말토덱스트린은 약 10% wt/wt 내지 약 50% wt/wt 범위이고; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)은 약 1% wt/wt 내지 약 5% wt/wt 범위이고; 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)은 약 0.10% wt/wt 내지 약 1% wt/wt 범위이고; 발효 고형물은 약 15% wt/wt 내지 약 40% wt/w 범위인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서, 조성물의 총 중량을 기준으로, TVP 또는 TVP-살충 단백질은 약 7% wt/wt 내지 약 9% wt/wt 범위이고; 트레할로오스는 약 20% wt/wt 내지 약 30% wt/wt 범위이고; BIT는 약 0.025% wt/wt 내지 약 0.075% wt/wt 범위이고; 말토덱스트린은 약 30% wt/wt 내지 약 40% wt/wt 범위이고; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)은 약 2% wt/wt 내지 약 3% wt/wt 범위이고; 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)은 약 0.2% wt/wt 내지 약 0.6% wt/wt 범위이고; 발효 고형물은 약 20% wt/wt 내지 약 30% wt/wt 범위인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서, 조성물의 총 중량을 기준으로, TVP 또는 TVP-살충 단백질은 약 8.5% wt/wt이고; 트레할로오스는 약 25% wt/wt이고; BIT는 약 0.05% wt/wt이고; 말토덱스트린은 약 36.3% wt/wt이고; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)은 약 2.6% wt/wt이고; 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)은 약 0.4% wt/wt이고; 발효 고형물은 약 26.85% wt/wt인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 본질적으로 (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물로 이루어진 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP 또는 TVP-살충 단백질이고; 조성물은 본질적으로 하기로 이루어지는 방법을 제공한다: 조성물의 총 중량을 기준으로, 8.5% wt/wt인 TVP 또는 TVP-살충 단백질의 양; 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/wt인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP 또는 TVP-살충 단백질이고; 조성물은 하기 양을 갖는 방법을 제공한다: 조성물의 총 중량을 기준으로, 8.5% wt/wt인 TVP 또는 TVP-살충 단백질의 양; 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/wt인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; 조성물은 조성물의 총 중량의 8.5% wt/wt인 TVP의 양으로 이루어지고; 복수의 부형제는, 조성물의 총 중량의, 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/w인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양으로 이루어짐.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에서, TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에서, TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고, X7은 글리신인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에서, TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고, X7은 존재하지 않는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에서, TVP는 X1, X2, X3, X4 또는 X5에 하나의 아미노산 치환을 갖고, X6과 X7은 존재하지 않는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합과, (2) 복수의 부형제로 이루어지는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 서열번호 17 내지 30, 54 내지 58, 또는 655 내지 688 중 어느 하나에 제시된 폴리뉴클레오타이드 서열, 또는 이의 상보적 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 둘 이상의 TVP의 동종중합체 또는 이종중합체를 추가로 포함하고, 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이한 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 TVP를 포함하는 융합된 단백질이고, 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, 링커는 절단 가능한 링커인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, 절단 가능한 링커는 곤충의 내장 또는 혈림프 내부에서 절단 가능한 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 하기 화학식 (I)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-X1-X2-M-X3-N-K-E-F-T-Y-X4-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-X5-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-X6-X7, 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 A, S 또는 N이고; X2는 R, Q, N, A, G, N, L, D, V, M, I, C, E, T 또는 S이고; X3은 T 또는 P이고; X4는 K 또는 A이고; X5는 R 또는 A이고; Z1은 T, S, A, F, P, Y, K, W, H, A, G, N, L, V, M, I, Q, C, E 또는 R이고; X6은 K이거나 존재하지 않고; X7은 G이거나 존재하지 않고; 조성물은 조성물의 총 중량의 8.5% wt/wt인 TVP의 양으로 이루어지고; 복수의 부형제는, 조성물의 총 중량의, 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/w인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양으로 이루어지고; Z1이 T 또는 S인 경우, TVP는 글리코실화됨.
전술한 TVP, TVP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 중 임의의 것은, 본원 및 하기 기재되는 제형 중 임의의 것에 사용될 수 있으며, 예를 들어 전술한 TVP, TVP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 중 임의의 것은 수화제 또는 과립 제형; 또는 액체 농축물 제형에 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP 또는 TVP-살충 단백질임)과, (2) 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을, 해충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며, 여기서 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
TVP 조성물(화학식 II)의 사용 방법
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP 또는 TVP-살충 단백질임)과, (2) 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을, 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP는 본원에 기재된 TVP 중 하나 또는 임의의 조합에서 선택되고, 예를 들어 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)이고, 상기 TVP는 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A임.
본원에 기재된 조성물 중 임의의 것은, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP 또는 TVP-살충 단백질임)과, (2) 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하는 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법에 사용될 수 있다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고, CRIP는 TVP임)과, 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A이고; 하나 이상의 부형제는 트레할로오스; 말토덱스트린; 말토오스; 이염기성 인산포타슘(K2HPO4); 일염기성 인산포타슘(KH2PO4); 리그노설포네이트; 석고; 소르비톨; 소듐 벤조에이트; 포타슘 소르베이트; EDTA; 벤즈이소티아졸리논(BIT); 및 발효 고형물로 이루어지는 군에서 선택됨.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, TVP(여기서 Z1은 T이고, TVP는 글리코실화됨) 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, TVP(여기서 X1은 Q이고; Z1은 A임) 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP이고, 여기서 TVP는 서열번호 2, 49 또는 51 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열 중 임의의 것과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP이고, 여기서 TVP는 서열번호 17, 54 또는 56 중 어느 하나에 제시된 폴리뉴클레오타이드 서열, 또는 이의 상보적 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP이고, 여기서 TVP는 둘 이상의 TVP의 동종중합체 또는 이종중합체를 추가로 포함하고, 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이한 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP이고, 여기서 TVP는 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 TVP를 포함하는 융합된 단백질이고, 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 링커를 갖는 TVP이고, 여기서 링커는 절단 가능한 링커인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조성물은 절단 가능한 링커를 갖는 TVP를 포함하며, 여기서 절단 가능한 링커는 곤충의 내장 또는 혈림프 내부에서 절단 가능하다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 링커를 갖는 TVP인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고, CRIP는 TVP임)과, 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열과 적어도 50% 동일한, 적어도 55% 동일한, 적어도 60% 동일한, 적어도 65% 동일한, 적어도 70% 동일한, 적어도 75% 동일한, 적어도 80% 동일한, 적어도 81% 동일한, 적어도 82% 동일한, 적어도 83% 동일한, 적어도 84% 동일한, 적어도 85% 동일한, 적어도 86% 동일한, 적어도 87% 동일한, 적어도 88% 동일한, 적어도 89% 동일한, 적어도 90% 동일한, 적어도 91% 동일한, 적어도 92% 동일한, 적어도 93% 동일한, 적어도 94% 동일한, 적어도 95% 동일한, 적어도 96% 동일한, 적어도 97% 동일한, 적어도 98% 동일한, 적어도 99% 동일한, 적어도 99.5% 동일한, 적어도 99.6% 동일한, 적어도 99.7% 동일한, 적어도 99.8% 동일한, 적어도 99.9% 동일한 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A이고; 하나 이상의 부형제는 트레할로오스; 말토덱스트린; 말토오스; 이염기성 인산포타슘(K2HPO4); 일염기성 인산포타슘(KH2PO4); 리그노설포네이트; 석고; 소르비톨; 소듐 벤조에이트; 포타슘 소르베이트; EDTA; 벤즈이소티아졸리논(BIT); 및 발효 고형물로 이루어지는 군에서 선택되고; Z1이 T 또는 S인 경우, TVP는 글리코실화됨.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며, 여기서 하나 이상의 부형제는 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 방법을 제공한다: 트레할로오스; 말토덱스트린; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4); 일염기성 인산포타슘(KH2PO4); BIT; 및 발효 고형물.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서, 조성물의 총 중량을 기준으로, TVP 또는 TVP-살충 단백질은 약 2% wt/wt 내지 약 16% wt/wt 범위이고; 트레할로오스는 약 5% wt/wt 내지 약 40% wt/wt 범위이고; BIT는 약 0.01% wt/wt 내지 약 0.1% wt/wt 범위이고; 말토덱스트린은 약 10% wt/wt 내지 약 50% wt/wt 범위이고; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)은 약 1% wt/wt 내지 약 5% wt/wt 범위이고; 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)은 약 0.10% wt/wt 내지 약 1% wt/wt 범위이고; 발효 고형물은 약 15% wt/wt 내지 약 40% wt/w 범위인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서, 조성물의 총 중량을 기준으로, TVP 또는 TVP-살충 단백질은 약 7% wt/wt 내지 약 9% wt/wt 범위이고; 트레할로오스는 약 20% wt/wt 내지 약 30% wt/wt 범위이고; BIT는 약 0.025% wt/wt 내지 약 0.075% wt/wt 범위이고; 말토덱스트린은 약 30% wt/wt 내지 약 40% wt/wt 범위이고; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)은 약 2% wt/wt 내지 약 3% wt/wt 범위이고; 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)은 약 0.2% wt/wt 내지 약 0.6% wt/wt 범위이고; 발효 고형물은 약 20% wt/wt 내지 약 30% wt/wt 범위인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서, 조성물의 총 중량을 기준으로, TVP 또는 TVP-살충 단백질은 약 8.5% wt/wt이고; 트레할로오스는 약 25% wt/wt이고; BIT는 약 0.05% wt/wt이고; 말토덱스트린은 약 36.3% wt/wt이고; 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)은 약 2.6% wt/wt이고; 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)은 약 0.4% wt/wt이고; 발효 고형물은 약 26.85% wt/wt인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP이고; 조성물은 하기 양을 포함하는 방법을 제공한다: 조성물의 총 중량을 기준으로, 8.5% wt/wt인 TVP 또는 TVP-살충 단백질의 양; 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/wt인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합을 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP이고; 조성물은 하기 양을 포함하는 방법을 제공한다: 조성물의 총 중량을 기준으로, 8.5% wt/wt인 TVP 또는 TVP-살충 단백질의 양; 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/wt인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A이고; 조성물은 조성물의 총 중량의 8.5% wt/wt인 TVP의 양으로 이루어지고; 복수의 부형제는, 조성물의 총 중량의, 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/w인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양으로 이루어짐.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에서, Z1은 T이고, TVP는 글리코실화되는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에서, X1은 Q이고; Z1은 A인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 서열번호: 2, 49 또는 51 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 서열번호 17, 54 또는 56 중 어느 하나에 제시된 폴리뉴클레오타이드 서열, 또는 이의 상보적 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩되는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 둘 이상의 TVP의 동종중합체 또는 이종중합체를 추가로 포함하고, 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이한 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, TVP는 절단 가능한 또는 절단 가능하지 않은 링커에 의해 분리되는 둘 이상의 TVP를 포함하는 융합된 단백질이고, 각각의 TVP의 아미노산 서열은 동일하거나 상이할 수 있는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, 링커는 절단 가능한 링커인 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질에서, 절단 가능한 링커는 곤충의 내장 또는 혈림프 내부에서 절단 가능한 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물(여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 TVP, TVP-살충 단백질, 또는 이들의 조합임)과, (2) 복수의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 TVP 또는 TVP-살충 단백질, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 하기 화학식 (II)에 따른 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다: E-P-D-E-I-C-R-A-X1-M-T-N-K-E-F-T-Y-K-S-N-V-C-N-N-C-G-D-Q-V-A-A-C-E-A-E-C-F-R-N-D-V-Y-Z1-A-C-H-E-A-Q-K-G; 여기서, 폴리펩타이드는 서열번호 1에 제시된 U1-아가톡신-Ta1b의 야생형 서열에 대해 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함하며, X1은 R 또는 Q이고; Z1은 T 또는 A이고; 조성물은 조성물의 총 중량의 8.5% wt/wt인 TVP의 양으로 이루어지고; 복수의 부형제는, 조성물의 총 중량의, 25% wt/wt인 트레할로오스의 양; 0.05% wt/w인 BIT의 양; 36.3% wt/wt인 말토덱스트린의 양; 2.6% wt/wt인 무수 이염기성 인산포타슘(K2HPO4)의 양; 0.4% wt/wt인 일염기성 인산포타슘(KH2PO4)의 양; 및 26.85% wt/wt인 발효 고형물의 양으로 이루어지고; Z1이 T 또는 S인 경우, TVP는 글리코실화됨.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물의 포함하는 조성물의 살충 유효량을 해충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 TVP는 서열번호 2, 49 또는 51 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물의 포함하는 조성물의 살충 유효량을 해충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 TVP는 서열번호 2, 49 또는 51 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물의 포함하는 조성물의 살충 유효량을 해충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 TVP는 서열번호 2, 49 또는 51 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열로 이루어지는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물의 포함하는 조성물의 살충 유효량을 해충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 TVP는 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물의 포함하는 조성물의 살충 유효량을 해충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 TVP는 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 살충 작용제(IA)와 CRIP의 조합물의 포함하는 조성물의 살충 유효량을 해충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하며; 여기서 IA는 표 B에 제시된 IA, 즉, B1 내지 B479 중 임의의 하나 이상이고; CRIP는 살충성 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이고, 상기 TVP는 서열번호 51에 제시된 아미노산 서열로 이루어지는 방법을 제공한다.
(1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하는 전술한 조합물 중 임의의 것은, 본원에 기재된 조성물 및 이를 사용하는 방법, 즉, 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하고/하거나 해충의 서식지에 적용하기 위해 이를 사용하는 방법 중 임의의 것에 사용될 수 있으며, 여기서 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
작물 및 해충
이러한 방법에 의해 방제될 수 있는 특정 작물 해충 및 곤충에는 하기가 포함된다: 바퀴목(Dictyoptera)(바퀴벌레); 흰개미목(Isoptera)(흰개미); 메뚜기목(Orthoptera)(로커스트(locust), 그래스호퍼(grasshopper) 및 귀뚜라미); 쌍시목(집파리, 모기, 체체파리, 각다귀 및 초파리); 막시목(Hymenoptera)(개미, 말벌, 꿀벌, 잎벌(saw-fly), 맵시벌(ichneumon fly) 및 혹벌(gall-wasp)); 이목(Anoplura)(흡혈이(biting and sucking lice)); 벼룩목(Siphonaptera)(벼룩); 및 반시목(벌레 및 진딧물)뿐 아니라, 진드기목(진드기 및 응애)과 같은 거미류, 및 이러한 유기체 각각에 서식하는 기생충.
"해충"에는, 비제한적으로, 곤충, 진균, 박테리아, 선충, 응애, 진드기 등이 포함된다.
곤충 해충에는, 비제한적으로, 딱정벌레목, 쌍시목, 막시목, 인시목, 털이목(Mallophaga), 동시아목(Homoptera), 반시목, 메뚜기목, 총채벌레목, 집게벌레목(Dermaptera), 흰개미목, 이목, 벼룩목, 날도래목(Trichoptera) 등에서 선택되는 곤충이 포함된다. 더욱 특히, 곤충 해충에는, 딱정벌레목, 인시목 및 쌍시목이 포함된다.
살충성 폴리펩타이드를 이용한 처리에 적합한 농업, 가정 및/또는 의학적/수의학적 중요성이 있는 곤충에는, 비제한적으로, 하기 강 및 목의 구성원이 포함된다:
딱정벌레목에는 아목(suborder)인 식육아목(Adephaga)과 다식아목(Polyphaga)이 포함된다. 식육아목에는 상과(superfamily)인 딱정벌레상과(Caraboidea)와 물맴이상과(Gyrinoidea)가 포함된다. 다식아목에는 물땡땡이상과(Hydrophiloidea), 반날개상과(Staphylinoidea), 병대벌레상과(Cantharoidea), 개미붙이상과(Cleroidea), 방아벌레상과(Elateroidea), 다스킬루스상과(Dascilloidea), 여울벌레상과(Dryopoidea), 둥근가시벌레상과(Byrrhoidea), 머리대장상과(Cucujoidea), 가뢰상과(Meloidea), 꽃벼룩과(Mordelloidea), 거저리상과(Tenebrionoidea), 개나무좀상과(Bostrichoidea), 풍뎅이상과(Scarabaeoidea), 하늘소상과(Cerambycoidea), 잎벌레상과(Chrysomeloidea) 및 바구미상과(Curculionoidea)가 포함된다. 딱정벌레상과에는 길앞잡이과(Cicindelidae), 딱정벌레과(Carabidae) 및 물방개과(Dytiscidae)가 포함된다. 물맴이상과에는 물맴이과(Gyrinidae)가 포함된다. 물땡땡이상과에는 물땡땡이과(Hydrophilidae)가 포함된다. 반날개상과에는 송장벌레과(Silphidae)와 반날개과(Staphylinidae)가 포함된다. 병대벌레상과에는 병대벌레과(Cantharidae)와 반딧불이과(Lampyridae)과 포함된다. 개미붙이상과에는 개미붙이과(Cleridae)와 수시렁이과(Dermestidae)가 포함된다. 방아벌레상과에는 방아벌레과(Elateridae)와 비단벌레과(Buprestidae)가 포함된다. 머리대장상과에는 무당벌레과(Coccinellidae)가 포함된다. 가뢰상과에는 가뢰과가 포함된다. 거저리상과에는 거저리과(Tenebrionidae)가 포함된다. 풍뎅이상과에는 사슴벌레붙이과(Passalidae)와 풍뎅이과(Scarabaeidae)가 포함된다. 하늘소상과에는 하늘소과(Cerambycidae)가 포함된다. 잎벌레상과에는 잎벌레과가 포함된다. 바구미상과에는 바구미과(Curculionidae)와 나무좀과(Scolytidae)가 포함된다.
딱정벌레목의 예에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 미국콩바구미(아칸토셀리데스 옵텍투스(Acanthoscelides obtectus)), 잎벌레(leaf beetle)(아겔라스티카 알니(Agelastica alni)), 대유동방아벌레(click beetle)(아그리오테스 리네아투스(Agriotes lineatus), 아그리오테스 옵스쿠루스(Agriotes obscurus), 아그리오테스 비콜로르(Agriotes bicolor)), 곡류 해충(grain beetle)(아하스베루스 아드베나(Ahasverus advena)), 여름 샤퍼(summer schafer)(암피말론 솔스티티알리스(Amphimallon solstitialis)), 마누 좀벌레(furniture beetle)(아노비움 푼크타툼(Anobium punctatum), 안토노무스(Anthonomus) 종)(바구미), 피그미 만골드 딱정벌레(Pygmy mangold beetle)(아토마리아 리네아리스(Atomaria linearis)), 카펫 딱정벌레(안트레누스(Anthrenus) 종, 아타게누스(Attagenus) 종), 동부콩바구미(칼로소브루쿠스 마쿨라테스(Callosobruchus maculates)), 튀긴 과일 딱정벌레(fried fruit beetle)(카르포필루스 헤미프테루스(Carpophilus hemipterus)), 양배추 꼬투리 바구미(세우토린쿠스 아시밀리스(Ceutorhynchus assimilis)), 레이프 윈터 줄기 바구미(rape winter stem weevil)(세우토린쿠스 피시타르시스(Ceutorhynchus picitarsis)), 청동방아벌레(wireworm)(코노데루스 베스페르티누스(Conoderus vespertinus) 및 코노데루스 팔리(Conoderus falli)), 바나나 바구미(코스모폴리테스 소르디두스(Cosmopolites sordidus)), 뉴질랜드 딱정벌레 유충(코스텔리트라 제알란디카), 6월 딱정벌레(코티니스 니티다), 해바라기 줄기 바구미(실린드로콥투루스 아드스페르수스(Cylindrocopturus adspersus)), 라더 딱정벌레(larder beetle)(데르메스테스 라르다리우스(Dermestes lardarius)), 옥수수 뿌리벌레(디아브로티카 비르기페라, 디아브로티카 비르기페라 비르기페라 및 디아브로티카 바르베리(Diabrotica barberi)), 멕시코 콩 딱정벌레(에필라크나 바리베스티스), 올드 하우스 천공충(old house borer)(힐로트로페스 바줄루스(Hylotropes bajulus)), 자주개자리 바구미(히페라 포스티카), 샤이니 거미 딱정벌레(shiny spider beetle)(기비움 프실로이데스(Gibbium psylloides)), 담배 딱정벌레(라시오데르마 세리코르네(Lasioderma serricorne)), 콜로라도 감자 딱정벌레(렙티노타르사 데셈리네아타), 릭투스 딱정벌레(Lyctus beetle)(릭투스 종), 꽃가루 딱정벌레(멜리게테스 아에네우스(Meligethes aeneus)), 일반 콕샤퍼(common cockshafer)(멜롤론타 멜롤론타(Melolontha melolontha)), 미국 거미 딱정벌레(메지움 아메리카눔(Mezium americanum)), 금빛 거미 딱정벌레(닙투스 홀로레우쿠스(Niptus hololeucus)), 곡식 딱정벌레(오리자에필루스 수리나멘시스(Oryzaephilus surinamensis) 및 오리자에필루스 메르카토르(Oryzaephilus mercator)), 블랙 바인 바구미(black vine weevil)(오티오린쿠스 술카투스(Otiorhynchus sulcatus)), 머스타드 딱정벌레(파에돈 코클레아리아에(Phaedon cochleariae)), 십자화과 벼룩 딱정벌레(필로트레타 크루시페라에), 줄무늬 벼룩 딱정벌레(필로트레타 스트리올라타(Phyllotreta striolata)), 양배추 줄기 벼룩 딱정벌레(프실로이데스 크리소세팔라, 프티누스(Psylliodes chrysocephala, Ptinus) 종)(거미 딱정벌레), 가루좀벌레(리조페르타 도미니카(Rhizopertha dominica)), 완두콩 및 콩 바구미(시토나 리네아투스(Sitona lineatus)), 쌀 및 곡물 딱정벌레(시토필루스 오리자에(Sitophilus oryzae) 및 시토필루스 그라나리에스(Sitophilus granaries)), 붉은 해바라기씨 바구미(red sunflower seed weevil)(스미크로닉스 풀부스(Smicronyx fulvus)), 약국 딱정벌레(drugstore beetle)(스테고비움 파니세움(Stegobium paniceum)), 황색 밀웜 딱정벌레(테네브리오 몰리토르), 밀가루 딱정벌레(트리볼리움 카스타네움(Tribolium castaneum) 및 트리볼리움 콘푸숨(Tribolium confusum)), 창고 및 캐비넷 딱정벌레(트로고데르마(Trogoderma)종) 및 해바라기 딱정벌레(지고그라마 엑스클라마티오니스(Zygogramma exclamationis)).
집게벌레목(집게벌레)의 예에는, 비제한적으로, 유럽 집게벌레(포르피쿨라 아우리쿨라리아(Forficula auricularia)) 및 줄무늬 집게벌레(라비두라 리파리아(Labidura riparia))가 포함된다.
딕본테라(Dictvontera)의 예에는, 비제한적으로, 동양 바퀴벌레(블라타 오리엔탈리스(Blatta orientalis)), 독일 바퀴벌레(블라텔라 게르마니카(Blatella germanica)), 마데이라 바퀴벌레(Madeira cockroach)(류코파에아 마데라에(Leucophaea maderae)), 미국 바퀴벌레(페리플라네타 아메리카나(Periplaneta americana)) 및 먹바퀴(smokybrown cockroach)(페리플라네타 풀리기노사)가 포함된다.
디플로노다(Diplonoda)의 예에는, 비제한적으로, 점무늬 뱀 노래기(spotted snake millipede)(블라니울루스 구툴라투스(Blaniulus guttulatus)), 납작등 노래기(flat-back millipede)(브라키데스무스 수페루스(Brachydesmus superus)), 온실 노래기(옥시두스 그라실리스(Oxidus gracilis))가 포함된다.
쌍시목에는 아목인 긴뿔파리아목(Nematocera), 단각목(Brachycera) 및 집파리하목(Cyclorrhapha)이 포함된다. 긴뿔파리아목에는 각다구과(Tipulidae), 나방파리과(Psychodidae), 모기과(Culicidae), 등에모기과(Ceratopogonidae), 모기붙이과(Chironomidae), 먹파리과(Simuliidae), 털파리과(Bibionidae) 및 혹파리과(Cecidomyiidae)가 포함된다. 단각목에는 동애등애과(Stratiomyidae), 등에과(Tabanidae), 좀파리매과(Therevidae), 파리매과(Asilidae), 마이디다에(Mydidae), 재니등에과(Bombyliidae) 및 장다리파리과(Dolichopodidae)가 포함된다. 집파리하목에는 분과인 분열이마무리집단(Aschiza)과 분열이마무리집단이 포함된다. 분열이마무리집단에는 벼룩파리과(Phoridae), 꽃등에과(Syrphidae) 및 벌붙이파리과(Conopidae)가 포함된다. 분열이마무리집단에는 무판아류(Acalyptratae)와 유판아류(Calyptratae)가 포함된다. 무판아류에는 느시과(Otitidae), 과실파리과(Tephritidae), 굴파리과(Agromyzidae) 및 초파리과(Drosophilidae)가 포함된다. 유판아류에는 이파리과(Hippoboscidae), 쇠파리과(Oestridae), 기생파리과(Tachinidae), 꽃파리과(Anthomyiidae), 집파리과(Muscidae), 검정파리과(Calliphoridae) 및 쉬파리과(Sarcophagidae)가 포함된다.
쌍시목의 예에는, 비제한적으로, 집파리(무스카 도메스티카), 아프리카 툼부 파리(African tumbu fly)(코르딜로비아 안트로포파가(Cordylobia anthropophaga)), 등에모기(biting midge)(쿨리코이데스(Culicoides) 종), 벌이(bee louse)(브라울라(Braula) 종), 비트 파리(페고미아 베타에(Pegomyia betae)), 먹파리(크네피아(Cnephia) 종, 유시물리움(Eusimulium) 종, 시물리움(Simulium) 종), 말파리(bot fly)(쿠테레브라(Cuterebra) 종, 가스트로필루스(Gastrophilus) 종, 오에스트루스(Oestrus) 종), 각다귀(티풀라(Tipula) 종), 눈각다귀(히펠라테스 종), 오물 번식 파리(filth-breeding fly)(칼리포라(Calliphora) 종, 파니아(Fannia) 종, 헤르메티아(Hermetia) 종, 루실리아(Lucilia)종, 무스카(Musca) 종, 무시나(Muscina) 종, 파에니시아(Phaenicia) 종, 포르미아(Phormia) 종), 쉬파리(사르코파가(Sarcophaga) 종, 월파흐티아(Wohlfahrtia) 종); 플릿 파리(flit fly)(오시넬라 프리트(Oscinella frit)), 과실파리(다쿠스(Dacus) 종, 트로소필라(Drosophila) 종), 헤드 앤 캐논 파리(head and canon fly)(히드로테아(Hydrotea) 종), 헤시안 파리(hessian fly)(마에티올라 데스트룩토르(Mayetiola destructor)), 뿔 및 버팔로 파리(horn and buffalo fly)(하에마토비아(Haematobia) 종), 말 및 사슴 파리(크리솝스(Chrysops) 종, 하에마토포타(Haematopota) 종, 타바누스(Tabanus) 종), 양파리(louse fly)(리포프테나(Lipoptena) 종, 린키아(Lynchia) 종 및 슈도린키아(Pseudolynchia) 종), 지중해광대파리(medfly)(세라티투스(Ceratitus) 종), 모기(아에데스 종, 아노펠레스 종, 쿨렉스 종, 프소로포라(Psorophora) 종), 모래파리(플레보토무스 종, 루트조미아(Lutzomyia) 종), 천공충 파리(screw-worm fly)(크티소미아 베찌아나(Chtysomya bezziana) 및 코클리오미아 호미니보락스(Cochliomyia hominivorax)), 양에 기생하는 날개없는 흡혈파리(sheep ked)(멜로파구스(Melophagus) 종); 침파리(stable fly)(스토목시스(Stomoxys) 종), 체체파리(글로시나 종), 쇠파리(히포데르마(Hypoderma) 종)가 포함된다.
흰개미목(흰개미)에는, 비제한적으로, 수확흰개미과(Hodotermitidae), 건재흰개미과(Kalotermitidae), 원시흰개미과(Mastotermitidae), 일본흰개미(Rhinotermitidae), 세리테르미티다에(Serritermitidae), 고등흰개미과(Termitidae) 및 습재흰개미(Termopsidae)가 포함된다.
노린재목(Heteroptera)에는, 비제한적으로, 빈대(시멕스 렉툴라리우스(Cimex lectularius)), 목화 해충(cotton stainer)(디스데르쿠스 인테르메디우스(Dysdercus intermedius)), 선 해충(Sunn pest)(유리가스테르 인테그리셉스(Eurygaster integriceps)), 장님노린재(tarnished plant bug)(리구스 리네올라리스(Lygus lineolaris)), 풀색노린재(네자라 안테나타(Nezara antennata)), 남부 풀색노린재(네자라 비리둘라(Nezara viridula)) 및 트리아토미드 벌레(triatomid bug)(판스트로길루스 메기스투스(Panstrogylus megistus), 로드니우스 에쿠아도리엔시스(Rhodnius ecuadoriensis), 로드니우스 팔레스칸스(Rhodnius pallescans), 로드니우스 프로릭수스, 로드니우스 로부스투스(Rhodnius robustus), 트리아토마 디미디아타(Triatoma dimidiata), 트리아토마 인페스탄스(Triatoma infestans) 및 트리아토마 소르디다(Triatoma sordida))가 포함된다.
동시아목의 예에는, 비제한적으로, 캘리포니아 유리깍지벌레(California red scale)(아오니디엘라 아우란티(Aonidiella aurantii)), 검정콩 진딧물(아피스 파바에(Aphis fabae)), 목화 또는 멜론 진딧물(아피스 고시피(Aphis gossypii)), 초록사과 진딧물(아피스 포미(Aphis pomi)), 감귤류 가시 가루이(citrus spiny whitefly)(알레우로칸투스 스피니페루스(Aleurocanthus spiniferus)), 협죽도 깍지벌레(아스피디오투스 헤데라에(Aspidiotus hederae)), 고구마 가루이(베메시아 타바시(Bemesia tabaci)), 양배추 진딧물(브레비코리네 브라시카에(Brevicoryne brassicae)), 배 프실라(pear psylla)(카코프실라 피리콜라(Cacopsylla pyricola)), 커런트 진딧물(크립토미주스 리비스(Cryptomyzus ribis)), 포도 필록세라(grape phylloxera)(닥툴로스파이라 비티폴리아에(Daktulosphaira vitifoliae)), 감귤류 프실라(디아포리나 시트리), 감자 매미충(potato leafhopper)(엠포아스카 파바에(Empoasca fabae)), 콩 매미충(엠포아스카 솔라나(Empoasca solana)), 포도나무 매미충(엠포아스카 비티스(Empoasca vitis)), 솜진디(woolly aphid)(에리오소마 라니게룸(Eriosoma lanigerum)), 유럽 과실 깍지벌레(European fruit scale)(유레카니움 코르니(Eulecanium corni)), 복숭아가루진딧물(mealy plum aphid)(히알로프테루스 아룬디니스(Hyalopterus arundinis)), 애멸구(small brown planthopper)(라오델팍스 스트리아텔루스(Laodelphax striatellus)), 감자 진딧물(마크로시품 유포르비아에(Macrosiphum euphorbiae)), 복숭아혹진딧물(green peach aphid)(미주스 페르시카에), 끝동매미충(green rice leafhopper)(네포테틱스 신티셉스(Nephotettix cinticeps)), 벼멸구(brown planthopper)(닐라파르바타 루겐스), 충영형성 진딧물(gall-forming aphid)(펨피구스(Pemphigus) 종), 홉 진딧물(포로돈 후물리(Phorodon humuli)), 벚나무 진딧물(bird-cherry aphid)(로팔로시품 파디(Rhopalosiphum padi)), 검은 깍지벌레(black scale)(사이세티아 올레아에(Saissetia oleae)), 녹색진디(greenbug)(스키자피스 그라미눔(Schizaphis graminum)), 곡식 진딧물(시토비온 아베나에(Sitobion avenae)) 및 온실 가루이(트리알레우로데스 바포라리오룸(Trialeurodes vaporariorum))가 포함된다.
등각목(Isopoda)에는, 비제한적으로, 일반 공벌레(common pillbug)(아르마딜리디움 불가레) 및 일반 쥐며느리(woodlouse)(오니스쿠스 아셀루스(Oniscus asellus))가 포함된다.
인시목에는, 호랑나비과(Papilionidae), 흰나비과(Pieridae), 부전나비과(Lycaenidae), 네발나비과(Nymphalidae), 왕나비과(Danaidae), 잎눈나비과(Satyridae), 팔랑나비과(Hesperiidae), 박각시과(Sphingidae), 산누에나방과(Saturniidae), 자나방과(Geometridae), 불나방과(Arctiidae), 밤나방과(Noctuidae), 독나방과(Lymantriidae), 유리나방과(Sesiidae) 및 곡식좀나방과(Tineidae)가 포함된다.
인시목의 예에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 아독소피에스 오라나(여름 과실 토르트릭스 나방(summer fruit tortrix moth)), 아그로티스 입솔론(Agrotis ipsolon)(검거세미밤나방(black cutworm)), 아르킵스 포다나(Archips podana)(과실나무 토르트릭스 나방(fruit tree tortrix moth)), 부쿨라트릭스 피리보렐라(Bucculatrix pyrivorella)(배 잎나방벌레), 부쿨라트릭스 투르베리엘라(Bucculatrix thurberiella)(목화잎 천공충), 부팔루스 피니아리우스(Bupalus piniarius)(소나무 자벌레), 카르포캅사 포모넬라(Carpocapsa pomonella)(코들링나방), 킬로 수프레살리스(줄무늬 쌀 천공충), 코리스토네우라 푸미페라나(동양 가문비나무 싹벌레), 코킬리스 호스페스(Cochylis hospes)(줄무늬 해바라기 나방(banded sunflower moth)), 디아트라에아 그란디오셀라(Diatraea grandiosella)(남부 옥수수 천공충), 에알스 인술라나(Earls insulana)(이집트 목화다래벌레(Egyptian bollworm)), 유페스티아 쿠에니엘라(Euphestia kuehniella)(지중해 밀가루 나방(Mediterranean flour moth)), 유포에실리아 암비구엘라(Eupoecilia ambiguella)(유럽포도열매 나방), 유프록티스 크리소로에아(갈색꼬리나방(brown-tail moth)), 유프록티스 서브플라바(Euproctis subflava)(동양 독나방), 갈레리아 멜로넬라(꿀벌부채명나방(greater wax moth)), 헬리코베르파 아르미게라(목화다래벌레), 헬리코베르파 제아(목화다래벌레), 헬리오티스 비레센스(담배 싹벌레), 호프만노필라 슈도프레텔라(Hofmannophila pseudopretella)(갈색 집나방(brown house moth)), 호메오소마 엘렉텔룸(Homeosoma electellum)(해바라기 나방), 호모나 마그나니마(Homona magnanima)(동양 차나무 토르트릭스 나방(oriental tea tree tortrix moth)), 리토콜레티스 블란카르델라(Lithocolletis blancardella)(점무늬 텐티폼 잎말이나방(spotted tentiform leafminer)), 리만트리아 디스파르(집시 나방), 말라코소마 뉴스트리아(텐트 모충), 마메스트라 브라시카에(양배추 거염벌레), 마메스트라 콘피구라타(베르타 거염벌레(Bertha armyworm)), 박각시벌레(만두카 섹스타 및 마누두카 퀸쿠에마쿨라타(Manuduca quinquemaculata)), 오페로프테라 브루마타(겨울 나방), 오스트리니아 누빌라리스(유럽 옥수수 천공충), 파놀리스 플라메아(소나무 판도라솔나방(pine beauty moth)), 펙티노포라 고시피엘라(분홍 목화다래벌레), 필로크니스티스 시트렐라(Phyllocnistis citrella)(감귤류 잎나방벌레), 피에리스 브라시카에(양배추 하얀나비), 플루텔라 자일로스텔라(배추좀나방), 라키플루시아 니(대두 자벌레), 스필로소마 비르기니카(Spilosoma virginica)(노란 곰 나방(yellow bear moth)), 스포도프테라 엑시구아(파밤나방), 스포도프테라 프루기페르다(가을 거염벌레), 스포도프테라 리토랄리스(목화다래벌레), 스포도프테라 리투라(일반 야도충), 스포도프테라 프라에피카(Spodoptera praefica)(노란줄무늬 거염벌레), 실렙타 데로가타(Sylepta derogata)(목화명나방(cotton leaf roller)), 티네올라 비셀리엘라(웨빙 옷좀나방(webbing clothes moth)), 티네올라 펠리오넬라(Tineola pellionella)(케이스 메이킹 옷좀나방(case-making clothes moth)), 토르트릭스 비리다나(Tortrix viridana)(유럽 참나무 잎말이나방(European oak leafroller)), 트리코플루시아 니(양배추 자벌레) 및 이포노메우타 파델라(Yponomeuta padella)(작은 에르민 나방(small ermine moth)).
메뚜기목의 예에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 일반 귀뚜라미(아케타 도메스티쿠스(Acheta domesticus)), 나무 메뚜기(아나크리디움(Anacridium) 종), 이동 메뚜기(migratory locust)(로쿠스타 미그라토리아(Locusta migratoria)), 2줄무늬 메뚜기(twostriped grasshopper)(멜라노플루스 비비타투스(Melanoplus bivittatus)), 디퍼렌셜 메뚜기(differential grasshopper)(멜라노플루스 디페렌티알리스(Melanoplus dfferentialis)), 붉은다리 메뚜기(redlegged grasshopper)(멜라노플루스 페무루브룸(Melanoplus femurrubrum)), 이동 메뚜기(멜라노플루스 산구이니페스), 북부 두더지 귀뚜라미(northern mole cricket)(네오쿠르틸라 헥사덱틸라(Neocurtilla hexadectyla)), 붉은 메뚜기(red locust)(노마다크리스 셉템파시아타(Nomadacris septemfasciata)), 짧은날개 두더지 귀뚜라미(shortwinged mole cricket)(스캅테리스쿠스 아브레비아투스(Scapteriscus abbreviatus)), 남부 두더지 귀뚜라미(스캅테리스쿠스 보렐리(Scapteriscus borellii)), 황갈색 두더지 귀뚜라미(tawny mole cricket)(스캅테리스쿠스 비시누스(Scapteriscus vicinus)) 및 사막 메뚜기(desert locust)(스키스토세르카 그레가리아(Schistocerca gregaria))가 포함된다.
이목의 예에는, 비제한적으로, 소 무는 이(cattle biting louse)(보비콜라 보비스(Bovicola bovis)), 무는 이(biting lice)(다말리니아(Damalinia) 종), 고양이 이(cat louse)(펠리콜라 수브로스트라타(Felicola subrostrata)), 짧은코 소 이(shortnosed cattle louse)(하에마토피누스 엘로이스테르누스(Haematopinus eloysternus)), 꼬리-스위치 이(tail-switch louse)(하에마토피누스 쿠아드리페리우수스(Haematopinus quadriperiussus)), 호그 이(hog louse)(하에마토피누스 수이스(Haematopinus suis)), 얼굴 이(face louse)(리노그나투스 오빌루스(Linognathus ovillus)), 발 이(foot louse)(리노그나투스 페달리스(Linognathus pedalis)), 개 흡혈이(dog sucking louse)(리노그나투스 세토수스(Linognathus setosus)), 긴코 소 이(long-nosed cattle louse)(리노그나투스 비툴리(Linognathus vituli)), 닭 몸이(chicken body louse)(메나칸투스 스트라미네우스(Menacanthus stramineus)), 조류 깃이(poultry shaft louse)(메노폰 갈리나에(Menopon gallinae)), 인간 몸이(human body louse)(페디쿨루스 후마누스(Pediculus humanus)), 사면발이(pubic louse)(프티루스 푸비스(Phthirus pubis)), 작은 푸른소 이(little blue cattle louse)(솔레노포테스 카필라투스(Solenopotes capillatus)) 및 개 무는 이(dog biting louse)(트리코덱테스 카니스(Trichodectes canis))가 포함된다.
다듬이벌레목(Psocoptera)의 예에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 책벌레(booklice)(리포셀리스 보스트리코필라(Liposcelis bostrychophila), 리포셀리스 데콜로르(Liposcelis decolor), 리포셀리스 엔토모필라(Liposcelis entomophila) 및 트로기움 풀사토리움(Trogium pulsatorium))이 포함된다. 벼룩목의 예에는, 비제한적으로, 새 벼룩(세라토필루스 갈리나에(Ceratophyllus gallinae)), 개 벼룩(크테노세팔리데스 카니스(Ctenocephalides canis)), 고양이 벼룩(크테노세팔리데스 펠스(Ctenocephalides fells)), 인간 벼룩(풀렉스 이리탄스(Pulex irritans)) 및 동양 쥐 벼룩(제노프실라 케오피스(Xenopsylla cheopis))이 포함된다.
애지네목(Symphyla)의 예에는, 비제한적으로, 정원 애지네(garden symphylan)(스쿠티게렐라 이마쿨라테(Scutigerella immaculate))가 포함된다.
좀목(Thysanura)의 예에는, 비제한적으로, 회색 좀(gray silverfish)(크테놀레피스마 론기카우다타(Ctenolepisma longicaudata)), 4줄 좀(four-lined silverfish)(크테놀레피스마 쿠아드리세리아타(Ctenolepisma quadriseriata)), 일반 좀(레피스마 사카리나(Lepisma saccharina)) 및 얼룩좀(firebrat)(테노비아 도메스티카(Thennobia domestica))가 포함된다.
총채벌레목의 예에는, 비제한적으로, 담배 총채벌레(프란클리니엘라 푸스카(Frankliniella fusca)), 꽃 총채벌레(프란클리니엘라 인톤사(Frankliniella intonsa)), 꽃노랑총채벌레(프란클리니엘라 오시덴탈리스(Frankliniella occidentalis)), 목화싹 총채벌레(cotton bud thrip)(프란클리니엘라 스츌트제이(Frankliniella schultzei)), 줄무늬 온실 총채벌레(banded greenhouse thrip)(헤르시노트립스 페모랄리스(Hercinothrips femoralis)), 대두 총채벌레(네오히다토트립스 바리아빌리스(Neohydatothrips variabilis)), 켈리 감귤류 총채벌레(Kelly's citrus thrip)(페조트립스 켈리아누스(Pezothrips kellyanus)), 아보카도 총채벌레(스시르토트립스 페르세아에(Scirtothrips perseae)), 멜론 총채벌레(트립스 팔미(Thrips palmi)) 및 양파 총채벌레(트립스 타바시(Thrips tabaci))가 포함된다.
선충의 예에는, 비제한적으로, 기생 선충, 예컨대 헤테로데라 종, 멜로이도기네 종 및 글로보데라 종을 포함하는 뿌리혹, 낭포 및 병변 선충; 특히, 비제한적으로, 하기를 포함하는 낭포 선충의 구성원이 포함된다: 헤테로데라 글리시네스(Heterodera glycines)(대두 낭포 선충); 헤테로데라 스카크티(비트 낭포 선충); 헤테로데라 아베나에(Heterodera avenae)(곡물 낭포 선충); 및 글로보데라 로스토키엔시스(Globodera rostochiensis) 및 글로보데라 파일리다(Globodera pailida)(감자 낭포 선충)가 포함된다. 병변 선충에는, 비제한적으로, 프라틸렌쿠스(Pratylenchus) 종이 포함된다.
본 개시내용의 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A34 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물에 대해 감수성이 있는 다른 곤충 종에는, 공중 및 동물 건강 문제를 야기하는 절지동물 해충, 예를 들어 모기, 예를 들어 아에데스, 아노펠레스 및 쿨렉스 속의 모기, 진드기, 벼룩 및 파리 등이 포함된다.
하나의 구현예에서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A34 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물은 체외기생충을 처리하는 데 이용될 수 있다. 체외기생충에는, 비제한적으로, 벼룩, 진드기, 옴(mange), 응애, 모기, 성가시고 무는 파리, 이, 및 전술한 체외기생충 중 하나 이상을 포함하는 조합이 포함된다. "벼룩"이라는 용어에는, 벼룩목의 기생 벼룩의 보통 또는 우연 종, 및 특히 크테노세팔리데스 종, 특히, 크테노세팔리데스 펠스 및 크테노세팔리데스 카니스, 쥐 벼룩(제노프실라 케오피스) 및 인간 벼룩(풀렉스 이리탄스)이 포함된다.
주요 작물에 대한 본 발명의 곤충 해충에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 옥수수: 오스트리니아 누빌라리스, 유럽 옥수수 천공충; 아그로티스 입실론, 검거세미밤나방; 헬리코베르파 제아, 옥수수 귀벌레; 스포도프테라 프루기페르다, 가을 거염벌레; 디아트라에아 그란디오셀라, 남부 옥수수 천공충; 엘라스모팔푸스 리그노셀루스(Elasmopalpus lignosellus), 명충나방 유충(lesser cornstalk borer); 디아트라에아 사카랄리스, 사탕수수 천공충; 디아브로티카 비르기페라, 서양 옥수수 뿌리벌레; 디아브로티카 론기코르니스 바르베리(Diabrotica longicornis barberi), 북부 옥수수 뿌리벌레; 디아브로티카 운데심푼크타타 호와르디(Diabrotica undecimpunctata howardi), 남부 옥수수 뿌리벌레; 멜라노투스(Melanotus) 종, 청동방아벌레; 시클로세팔라 보레알리스, 북부 마스크 풍뎅이(굼벵이); 시클로세팔라 이마쿨라타(Cyclocephala immaculata), 남부 마스크 풍뎅이(굼벵이); 포필리아 자포니카, 일본 딱정벌레; 카에토크네마 풀리카리아(Chaetocnema pulicariapulicaria), 옥수수 벼룩 딱정벌레; 스페노포러스 마이디스(Sphenophorus maidis), 옥수수 바구미; 로팔로시품 마이디스(Rhopalosiphum maidis), 옥수수잎 진딧물; 아누라피스 마이디라디시스(Anuraphis maidiradicis), 옥수수뿌리 진딧물; 블리수스 류코프테루스 류코프테루스(Blissus leucopterus leucopterus), 긴노린재(chinch bug); 멜라노플루스 페무루브룸, 붉은다리 메뚜기; 멜라노플루스 산구이니페스, 이동 메뚜기; 힐레미아 플라투라(Hylemya platura), 옥수수씨 구더기(seedcorn maggot); 아그로미자 파르비코르니스(Agromyza parvicornis), 옥수수 반점 잎나방벌레(corn blot leafminer); 아나포트립스 옵스크루루스(Anaphothrips obscrurus), 잔디 총채벌레; 솔레놉시스 멜레스타(Solenopsis milesta), 도둑개미(thief ant); 테트라니쿠스 우르티카에, 점박이응애(twospotted spider mite); 수수: 킬로 파르텔루스(Chilo partellus), 수수 천공충; 스포도프테라 프루기페르다, 가을 거염벌레; 헬리코베르파 제아, 옥수수 귀벌레; 엘라스모팔푸스 리그노셀루스, 명충나방 유충; 펠티아 서브테라네아(Feltia subterranea), 낟알 야도충; 필로파가 크리니타(Phyllophaga crinita), 굼벵이; 엘로데스(Eleodes), 코노데루스 및 아에올루스(Aeolus) 종, 청동방아벌레; 오울레마 멜라노푸스(Oulema melanopus), 곡식 잎벌레; 카에토크네마 풀리카리아(Chaetocnema pulicaria), 옥수수 벼룩 딱정벌레; 스페노포러스 마이디스, 옥수수 바구미; 로팔로시품 마이디스, 옥수수잎 진딧물; 시파 플라바(Sipha flava), 노란 사탕수수 진딧물; 블리수스 류코프테루스 류코프테루스, 긴노린재; 콘타리니아 소르기콜라(Contarinia sorghicola), 수수 깔다구; 테트라니쿠스 신나바리누스, 카민잎응애; 테트라니쿠스 우르티카에, 점박이응애; 밀: 슈달레티아 우니푼크타타(Pseudaletia unipunctata), 거염벌레; 스포도프테라 프루기페르다, 가을 거염벌레; 엘라스모팔푸스 리그노셀루스, 명충나방 유충; 아그로티스 오르토고니아(Agrotis orthogonia), 서양 야도충; 엘라스모팔푸스 리그노셀루스, 명충나방 유충; 오울레마 멜라노푸스, 곡식 잎벌레; 히페라 푼크타타(Hypera punctata), 클로버잎 바구미; 디아브로티카 운데심푼크타타 호와르디, 남부 옥수수 뿌리벌레; 러시아 밀 진딧물; 스키자피스 그라미눔(Schizaphis graminum), 녹색진디; 마크로시품 아베나에(Macrosiphum avenae), 보리수염진딧물(English grain aphid); 멜라노플루스 페무루브룸, 붉은다리 메뚜기; 멜라노플루스 디페렌티알리스, 디퍼렌셜 메뚜기; 멜라노플루스 산구이니페스, 이동 메뚜기; 마에티올라 데스트룩토르, 헤시안 파리; 시토디플로시스 모셀라나(Sitodiplosis mosellana), 밀 깔다구; 메로미자 아메리카나(Meromyza americana), 밀줄기굴파리(wheat stem maggot); 힐레미아 코아르크타타(Hylemya coarctata), 밀줄기꽃파리(wheat bulb fly); 프란클리니엘라 푸스카, 담배 총채벌레; 세푸스 신크투스(Cephus cinctus), 밀줄기잎벌(wheat stem sawfly); 아세리아 툴리파에(Aceria tulipae), 밀 컬 응애(wheat curl mite); 해바라기: 술레이마 헬리안타나(Suleima helianthana), 해바라기 싹 나방; 호모에오소마 엘렉텔룸(Homoeosoma electellum), 해바라기 나방; 지고그라마 엑스클라마티오니스, 해바라기 딱정벌레; 보티루스 기보수스(Bothyrus gibbosus), 당근 딱정벌레; 네올라시오프테라 무르트펠드티아나(Neolasioptera murtfeldtiana), 해바라기씨 깔다구; 목화: 헬리오티스 비레센스, 목화 싹벌레; 헬리코베르파 제아, 목화다래벌레; 스포도프테라 엑시구아, 파밤나방; 펙티노포라 고시피엘라, 분홍 목화다래벌레; 안토노무스 그란디스, 목화바구미; 아피스 고시피, 목화 진딧물; 슈다토모셀리스 세리아투스(Pseudatomoscelis seriatus), 목화 벼룩잎벌레; 트리알레우로데스 아부틸로네아(Trialeurodes abutilonea), 줄무늬 날개 가루이; 리구스 리네올라리스, 장님노린재; 멜라노플루스 페무루브룸, 붉은다리 메뚜기; 멜라노플루스 디페렌티알리스, 디퍼렌셜 메뚜기; 트립스 타바시, 양파 총채벌레; 프란클리니엘라 푸스카, 담배 총채벌레; 테트라니쿠스 신나바리누스, 카민잎응애; 테트라니쿠스 우르티카에, 점박이응애; 쌀: 디아트라에아 사카랄리스, 사탕수수 천공충; 스포도프테라 프루기페르다, 가을 거염벌레; 헬리코베르파 제아, 옥수수 귀벌레; 콜라스피스 브루네아(Colaspis brunnea), 포도 콜라스피스(grape colaspis); 리소롭트루스 오리조필루스(Lissorhoptrus oryzophilus), 벼물바구미; 시토필루스 오리자에, 쌀바구미; 네포테틱스 니그로픽투스(Nephotettix nigropictus), 쌀 매미충; 블리수스 류코프테루스, 긴노린재; 아크로스테르눔 힐라레, 풀색노린재; 대두: 슈도플루시아 인클루덴스, 대두 자벌레; 안티카르시아 겜마탈리스, 벨벳콩 애벌레; 플라티페나 스카브라, 녹색클로버 벌레; 오스트리니아 누빌라리스, 유럽 옥수수 천공충; 아그로티스 입실론, 검거세미밤나방; 스포도프테라 엑시구아, 파밤나방; 헬리오티스 비레센스, 목화 싹벌레; 헬리코베르파 제아, 목화다래벌레; 에필라크나 바리베스티스, 멕시코 콩 딱정벌레; 미주스 페르시카에, 복숭아혹진딧물; 엠포아스카 파바에, 감자 매미충; 아크로스테르눔 힐라레, 풀색노린재; 멜라노플루스 페무루브룸, 붉은다리 메뚜기; 멜라노플루스 디페렌티알리스, 디퍼렌셜 메뚜기; 힐레미아 플라투라, 옥수수씨 구더기; 세리코트립스 바리아빌리스(Sericothrips variabilis), 대두 총채벌레; 트립스 타바시, 양파 총채벌레; 테트라니쿠스 투르케스타니(Tetranychus turkestani), 딸기 잎응애; 테트라니쿠스 우르티카에, 점박이응애; 보리: 오스트리니아 누빌라리스, 유럽 옥수수 천공충; 아그로티스 입실론, 검거세미밤나방; 스키자피스 그라미눔, 녹색진디; 블리수스 류코프테루스 류코프테루스, 긴노린재; 아크로스테르눔 힐라레, 풀색노린재; 유스키스투스 세르부스(Euschistus servus), 갈색 방귀벌레(brown stink bug); 델리아 플라투라(Delia platura), 옥수수씨 구더기; 마에티올라 데스트룩토르, 헤시안 파리; 페트로비아 라텐스(Petrobia latens), 갈색 밀 응애; 유채씨유: 브레비코리네 브라시카에, 양배추 진딧물; 필로트레타 크루시페라에, 벼룩 딱정벌레; 마메스트라 콘피구라타, 베르타 거염벌레; 플루텔라 자일로스텔라, 배추좀나방; 델리아 아종, 뿌리 구더기.
일부 구현예에서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A34 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물은 전술한 곤충 중 임의의 하나 이상을 처리하는 데 이용될 수 있다.
본 발명의 조합물 및 조성물에 감수성이 있는 곤충에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: Cyt 독소에 영향을 받는 과, 예컨대 바퀴목(Blattaria), 딱정벌레목, 톡토기목(Collembola), 쌍시목, 극구흡충목(Echinostomida), 반시목, 막시목, 흰개미목, 인시목, 풀잠자리목(Neuroptera), 메뚜기목, 원충목(Rhabditida), 벼룩목(Siphonoptera) 및 총채벌레목. 속 종은 하기와 같이 표시된다: 악테비아 페니카(Actebia fennica), 아그로티스 입실론, 아그로티스 세게툼, 안티카르시아 겜마탈리스, 아르기로타에니아 시트라나, 아르토게이아 라파에, 봄빅스 모리, 부세올라 푸스카, 카시레우스 마르샬(Cacyreus marshall), 킬로 수프레살리스, 코리스토네우라 푸미페라나, 코리스토네우라 오시덴탈리스, 코리스토네우라 피누스 피누스, 코리스토네우라 로사세나, 크나팔로크로시스 메디날리스, 코노포모르파 크라메렐라(Conopomorpha cramerella), 크테놉수에스티스 오블리쿠아나(Ctenopsuestis obliquana), 시디아 포모넬라, 다나우스 플렉시푸스(Danaus plexippus), 디아트라에아 사카랄리스(Diatraea saccharallis), 디아트라에아 그란디오셀라, 에아리아스 비텔라(Earias vittella), 엘라스몰팔푸스 리그노셀리우스(Elasmolpalpus lignoselius), 엘다나 사카리나(Eldana saccharina), 에페스티아 쿠에니엘라(Ephestia kuehniella), 에피노티아 아포레마, 에피피아스 포스트비타나, 갈레리아 멜로넬라, 속 - 종, 헬리코베르파 제아, 헬리코베르파 푼크티게라(H. punctigera), 헬리코베르파 아르미게라, 헬리오티스 비레센스, 히판트리아 쿠네아, 람브디나 피셀라리아, 레구미니보라 글리시니보렐라(Leguminivora glycinivorella), 로베시아 보트라나, 리만트리아 디스파르, 말라코소마 디스트리아, 마메스트라 브라시카에, 마메스트라 콘피구라타, 만두카 섹스타, 마라스미아 파트날리스(Marasmia patnalis), 마루카 비트라타, 오르기아 류코스티그마, 오스트리니아 누빌라리스, 오스트리니아 푸르나칼리스, 판데미스 피루사나(Pandemis pyrusana), 펙티노포라 고시피엘라, 페리류코프테라 코페엘라(Perileucoptera coffeella), 프토리마에아 오페르쿨렐라, 피아노토르트릭스 옥토(Pianotortrix octo), 피아티노타 스툴타나(Piatynota stultana), 피에리스 브라시카에, 플로디아 인테르푼크탈라, 플루텔라 자일로스텔라, 슈도플루시아 인클루덴스, 라키플루시아 누, 스시로포파가 인세르툴라스(Sciropophaga incertulas), 세사미아 칼라미스티스(Sesamia calamistis), 스필로소마 비르기니카, 스포도프테라 엑시구아, 스포도프테라 프루기페르다, 스포도프테라 리토랄리스, 스포도프테라 엑셈프타, 스포도프테라 리투라, 테시아 솔라니보라, 타우메토포에아 피티오캄파(Thaumetopoea pityocampa), 트리코플루시아 니, 위세아나 세르비나타, 위세아나 코풀라리스(Wiseana copularis), 위세아나 조코사(Wiseana jocosa), 블라타리아 블라텔라(Blattaria blattella), 콜렘볼라 제닐라(Collembola xenylla), 콜렘볼라 폴소미아(C. folsomia), 에키노스토미다 파시올라(Echinostomida fasciola), 헤미프테라 온코펠트루스(Hemiptera oncopeltrus), 헤미프테라 베미시아(He. bemisia), 헤미프테라 마크로시품(He. macrosiphum), 헤미프테라 로팔로시품(He. rhopalosiphum), 헤미프테라 미주스(He. myzus), 히메노프테라 디프리온(Hymenoptera diprion), 히메노프테라 아피스(Hy. apis), 히메노프테라 마크로센트루스(Hy. Macrocentrus), 히메노프테라 메테오루스(Hy. Meteorus), 히메노프테라 나소니아(Hy. Nasonia), 히메노프테라 솔레놉시스(Hy. Solenopsis), 이소포다 포르셀리오(Isopoda porcellio), 이소프테라 레티쿨리테르메스(Isoptera reticulitermes), 오르토프테라 아크타(Orthoptera Achta), 프로스티그마타 테트라니쿠스(Prostigmata tetranychus), 라비티다 아크로벨로이데스(Rhabitida acrobeloides), 라비티다 카에노랍디티스(R. caenorhabditis), 라비티다 디스톨라브렐루스(R. distolabrellus), 라비티다 파나그렐루스(R. panagrellus), 라비티다 프리스티온쿠스(R. pristionchus), 라비티다 프라틸렌쿠스(R. pratylenchus), 라비티다 안실로스토마(R. ancylostoma), 라비티다 니포스트론길루스(R. nippostrongylus), 라비티다 파나그렐루스(R. panagrellus), 라비티다 하에몬쿠스(R. haemonchus), 라비티다 멜로이도기네(R. meloidogyne) 및 시포나프테라 크테노팔리데스(Siphonaptera ctenocephalides).
본 개시내용은, 비제한적으로, 외떡잎 및 쌍떡잎 식물을 포함하는 임의의 식물 종의 형질전환에 사용될 수 있는 식물 형질전환 방법을 제공한다. 유전자이식 접근법이 특히 유용한 접근법일 수 있는 작물에는, 비제한적으로, 하기가 포함된다: 알팔파, 목화, 토마토, 옥수수, 밀, 옥수수, 사탕옥수수, 자주개자리, 대두, 수수, 들판 완두콩, 아마인, 홍화, 유채, 유채씨유, 쌀, 대두, 보리, 해바라기, 나무(침엽수 및 낙엽수 포함), 꽃(상업적으로 및 온실에서 재배되는 것들 포함), 들판 루핀, 스위치그래스, 사탕수수, 감자, 토마토, 담배, 십자화과, 고추, 사탕무, 보리, 유채씨유, 브라시카 종, 호밀, 기장, 땅콩, 고구마, 카사야, 커피, 코코넛, 파인애플, 감귤나무, 코코아, 차, 바나나, 아보카도, 무화과, 구아바, 망고, 올리브, 파파야, 캐슈, 마카다미아, 아몬드, 오트, 채소, 관상용 식물 및 침엽수.
살충제 내성 해충
살충제에 대한 내성은 살충제에 대한 해충 집단의 감수성의 유전 가능한 변화가 존재할 때 일어나며; 이러한 감수성의 변화는 살충제가 의도한 바와 같이 사용될 때 목적하는 결과 및/또는 예상되는 방제 정도를 달성하지 못하는 경우에 관찰될 수 있다. 교차 내성은, 심지어 상기 해충이 다른 살충제와 직면하지 않는 경우에도, 차례로 또 다른 상이한 살충제에 대한 내성을 부여하는 하나의 살충제에 대한 해충의 내성을 설명한다. 살충제 내성에 대한 정보는 IRAC(Insecticide Resistance Action Committee) 웹사이트(https://www.irac-online.org/)에서 확인할 수 있다. 곤충 및 기타 해충에서 살충제 내성에 대한 보고, 및 이에 관련된 살충제는 APRD(Arthropod Pesticide Resistance Database)(https://www.pesticideresistance.org/)에서 확인할 수 있다.
일부 구현예에서, 곤충 및/또는 해충은 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 곤충 및/또는 해충은 하기 살충제 중 하나 이상에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있다: 아세틸콜린에스테라아제(AchE) 저해제(예를 들어, 카르바메이트류, 예컨대 알라니카르브, 알디카르브, 벤디오카르브, 벤푸라카르브, 부토카르복심, 부톡시카르복심, 카르바릴, 카르보푸란, 카르보설판, 에티오펜카르브, 페노부카르브, 포르메타네이트, 푸라티오카르브, 이소프로카르브, 메티오카르브, 메토밀, 메톨카르브, 옥사밀, 피리미카르브, 프로폭수르, 티오카르브, 티오파녹스, 트리아자메이트, 트리메타카르브, xmc 및 자일릴카르브; 및 유기인산염류, 예컨대 아세페이트, 아자메티포스, 아진포스-에틸, 아진포스-메틸, 카두사포스, 클로레톡시포스, 클로르펜빈포스, 클로르메포스, 클로르피리포스, 클로르피리포스-메틸, 쿠마포스, 시아노포스, 데메톤-s-메틸, 디아지논, 디클로르보스/ ddvp, 디크로토포스, 디메토에이트, 디메틸빈포스, 디설포톤, epn, 에티온, 에토프로포스, 팜푸르, 페나미포스, 페니트로티온, 펜티온, 포스티아제이트, 헵테노포스, 이소펜포스, 이속사티온, 말라티온, 메카르밤, 메타미도포스, 메티다티온, 메빈포스, 모노크로토포스, 날레드, 오메토에이트, 옥시데메톤-메틸, 파라티온, 파라티온-메틸, 펜토에이트, 포살론, 포레이트, 포스메트, 포스파미돈, 폭심, 프로페노포스, 프로페탐포스, 프로티오포스, 피라클로포스, 피리다펜티온, 퀴날포스, 설포텝, 테부피림포스, 테메포스, 테르부포스, 테트라클로르빈포스, 티오메톤, 트리아조포스, 트리클로르폰, 바미도티온, 피리미포스-메틸, 이미시아포스 및 이소프로필 o-(메톡시아미노티오-포스포릴) 살리실레이트); Gaba 개폐형 클로라이드 채널 차단제(예를 들어, 시클로디엔 유기염소류, 예컨대 클로르단 및 엔도설판; 및 페닐피라졸류(피프롤), 예컨대 에티프롤 및 피프로닐); 소듐 채널 조절제(예를 들어, 피레트로이드류 및 피레트린류, 예컨대 아크리나트린, 알레트린, d-시스-트랜스 알레트린, d-트랜스 알레트린, 비펜트린, 비오알레트린, 비오알레트린 s-시클로펜테닐, 비오레스메트린, 시클로프로트린, 시플루트린, 베타-시플루트린, 시할로트린, 람다-시할로트린, 감마-시할로트린, 시페르메트린, 알파-시페르메트린, 베타-시페르메트린, 쎄타-시페르메트린, 제타-시페르메트린, 시페노트린 [(1r)-트랜스-이성질체], 델타메트린, 엠펜트린 [(ez)-(1r)-이성질체], 에스펜발레레이트, 에토펜프록스, 펜프로파트린, 펜발레레이트, 플루시트리네이트, 플루메트린, 타우-플루발리네이트, 카다트린, 피레트린류(피레트룸), 할펜프록스, 페노트린 [(1r)-트랜스-이성질체], 프랄레트린, 레스메트린, 실라플루오펜, 테플루트린, 테트라메트린, 테트라메트린 [(1r)-이성질체], 트랄로메트린, 트랜스플루트린, 페르메트린; ddt 및 메톡시클로르); 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 경쟁 조절제(예를 들어, 네오티코티노이드류, 예컨대 아세타미프리드, 클로티아니딘, 디노테푸란, 이미다클로프리드, 니텐피람, 티아클로프리드, 티아메톡삼; 니코틴; 설폭시민류, 예컨대 설폭사플로르; 부테놀리드류, 예컨대 플루피라디푸론; 및 메소이온성 화합물, 예컨대 트리플루메조피림); 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 알로스테릭 조절제-부위 I(예를 들어, 스피노신류, 예컨대 스피네토람 및 스피노사드); 글루타메이트 개폐형 클로라이드 채널(GluCl) 알로스테릭 조절제(예를 들어, 아베르멕틴류 및 밀베마이신류, 예컨대 아바멕틴, 에마멕틴 벤조에이트, 레피멕틴 및 밀베멕틴); 유충 호르몬 모방체(예를 들어, 유충 호르몬 유사체, 예컨대 히드로프렌, 키노프렌 및 메토프렌; 페녹시카르브; 및 피리프록시펜); 기타 비특이적(다중부위) 저해제(예를 들어, 알킬 할라이드류, 예컨대 메틸 브로마이드 및 기타 알킬 할라이드류; 클로로피크린; 플루오라이드류, 예컨대 크리올라이트 및 설푸릴 플루오라이드; 보레이트, 예컨대 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트 및 소듐 메타보레이트; 타르타르 에메틱; 및 메틸 이소티오시아네이트 생성제, 예컨대 다조메트 및 메탐); 현음 기관 TRPV 채널 조절제(예를 들어, 피리딘 아조메틴 유도체, 예컨대 피메트로진, 피리플루퀴나존; 및 피로펜류, 예컨대 아피도피로펜); 응애 성장 저해제(예를 들어, 클로펜테진 및 디플로비다진, 헥시티아족스, 예컨대 클로펜테진, 디플로비다진 및 헥시티아족스; 및 에톡사졸); 미토콘드리아 ATP 신타아제 저해제(예를 들어, 디아펜티우론; 유기주석 살비제, 예컨대 아조시클로틴, 시헥사틴 및 펜부타틴 옥시드; 프로파르자이트; 및 테트라디폰); 양성자 구배의 파괴를 통한 산화적 인산화의 언커플러(예를 들어, 피롤류, 디니트로페놀류 및 설플루라미드, 예를 들어, 클로르페나피르, dnoc 및 설플루라미드); 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nAchR) 채널 차단제(예를 들어, 네레이스톡신 유사체, 예컨대 벤설탑, 카르탑 히드로클로라이드, 티오시클람, 티오설탑-소듐); 엑디손 수용체 아고니스트(예를 들어, 디아실히드라진류, 예컨대 크로마페노자이드, 할로페노자이드, 메톡시페노자이드 및 테부페노자이드); 옥토파민 수용체 아고니스트(예를 들어, 아미트라즈); 미토콘드리아 복합체 III 전자 수송 저해제(예를 들어, 히드라메틸논; 아세퀴노실; 플루아크리피림; 및 비페나제이트); 미토콘드리아 복합체 I 전자 수송 저해제(예를 들어, METI 살비제 및 살충제, 예컨대 페나자퀸, 펜피록시메이트, 피리미디펜, 피리다벤, 테부펜피라드 및 톨펜피라드; 및 로테논); 전압 의존성 소듐 채널 차단제(예를 들어, 옥사디아진류, 예컨대 인독사카르브; 및 세미카르바존류, 예컨대 메타플루미존); 아세틸 조효소 A 카르복실라아제 저해제(예를 들어, 테트론산 및 테트람산 유도체, 예컨대 스피로디클로펜, 스피로메시펜, 스피로피디온 및 스피로테트라마트); 미토콘드리아 복합체 IV 전자 수송 저해제(예를 들어, 인화물, 예컨대 인화알루미늄, 인화칼슘, 포스핀 및 인화아연; 및 시안화물, 예컨대 시안화칼슘, 시안화포타슘 및 시안화소듐); 미토콘드리아 복합체 II 전자 수송 저해제(예를 들어, 베타-케토니트릴 유도체, 예컨대 시에노피라펜 및 시플루메토펜; 및 카르복사닐리드류, 예컨대 피플루부미드); 리아노딘 수용체 조절제(예를 들어, 디아미드류, 예컨대 클로란트라닐리프롤, 시안트라닐리프롤, 시클라닐리프롤, 플루벤디아미드 및 테트라닐리프롤); 현음 기관 조절제-정의되지 않은 표적 부위(예를 들어, 플로니카미드); 및/또는 GABA 개폐형 클로라이드 채널 알로스테릭 조절제(예를 들어, 메타-디아미드류 및 이속사졸린류, 예컨대 브로플라닐리드, 플룩사메타미드).
예를 들어, 일부 구현예에서, 곤충 및/또는 해충은 본원에 기재된 살충제 중 임의의 하나 이상에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조성물, 조합물 및/또는 방법은 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있는 곤충 및/또는 해충의 서식지에 적용될 수 있으며, 여기서 상기 곤충 및/또는 해충은 하기 일반적으로 알려진 곤충 및/또는 해충으로 이루어지는 군에서 선택된다: 황열병 모기; 옥수수줄기 천공충; 아시아 쌀 천공충; 집모기; 남부 집모기; 서양 옥수수 뿌리벌레; 사탕수수 천공충; 목화다래벌레; 옥수수 귀벌레; 담배 싹벌레; 콜로라도 감자 딱정벌레; 아시아 옥수수 천공충; 유럽 옥수수 천공충; 분홍 목화다래벌레; 옥수수가루 나방(Indian meal moth); 배추좀나방; 대두 자벌레; 비트 거염벌레, 레서 거염벌레; 가을 거염벌레; 이집트 목화 잎벌레(Egyptian cotton leafworm), 거염벌레; 또는 양배추 자벌레.
일부 구현예에서, 본 발명의 조성물, 조합물 및/또는 방법은 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있는 곤충 및/또는 해충의 서식지에 적용될 수 있으며, 여기서 선택된 상기 곤충 및/또는 해충은 먹파리 또는 성가신 파리(예를 들어 프시코다(Psychoda) 종 및 키로노무스 종)이다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있는 곤충 및/또는 해충은 인시목, 예를 들어 배추좀나방일 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조성물, 조합물 및/또는 방법은 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있는 곤충 및/또는 해충의 서식지에 적용될 수 있으며, 여기서 상기 곤충 및/또는 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 자벌레; 잡식성 잎말이나방; 박각시벌레; 배추흰나비 유충; 배추좀나방; 녹색 클로버벌레; 웹웜; 염습지 모충; 거염벌레; 야도충; 십자줄무늬 양배추벌레; 꼬투리벌레; 벨벳콩 모충; 대두 자벌레; 토마토 과실벌레; 벨벳콩 야도충; 멜론벌레; 린드웜 복합체; 과일나무 잎말이나방; 감귤류 야도충; 헬리오티스; 오렌지독; 감귤류 야도충; 붉은혹 모충; 텐트 모충; 가을 웹웜; 호두 모충; 녹색자벌레; 집시 나방; 얼룩덜룩 잎말이나방; 붉은줄무늬 잎말이나방; 술이달린 사과 싹나방; 동양 과일 나방; 필버트 잎말이나방; 부등변줄무늬 잎말이나방; 코들링나방; 가지 천공충; 포도잎 스켈레토나이저; 포도 잎말이나방; 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레); 오렌지 토르트릭스; 담배 싹벌레; 포도열매 나방; 자벌레; 알파파 모충; 목화다래벌레; 헤드 나방; 아모르비아 나방; 잡식성 자벌레; 엘로 나방(박각시벌레); 이오 나방; 협죽도 나방; 아잘레아 모충; 박각시벌레; 잎말이나방; 바나나 팔랑나비; 바트라케드라 코모사에(호드게스); 테클라 나방; 아티초크 플럼 나방; 멋쟁이나비(Thistle Butterfly); 도롱이벌레; 봄 및 가을 황충; 느릅나무 자벌레; 캘리포니아 오크나무벌레; 소나무 나비; 가문비나무 싹벌레; 안장 돌출형 모충; 더글라스 전나무 독나방; 서양 독나방; 블랙헤드 싹벌레; 미모사 웹웜; 잭 파인 싹벌레; 안장모양 모충; 녹색줄무늬 메이플벌레; 또는 독미나리 자벌레.
일부 구현예에서, 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있는 곤충 및/또는 해충은 콜로라도 감자 딱정벌레 또는 느릅나무 잎벌레일 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 조성물, 조합물 및/또는 방법은 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있는 곤충 및/또는 해충의 서식지에 적용될 수 있으며, 여기서 상기 곤충 및/또는 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 또는 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 본 발명의 조성물, 조합물 및/또는 방법은 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있는 곤충 및/또는 해충의 서식지에 적용될 수 있으며, 여기서 상기 곤충 및/또는 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 성체 딱정벌레이다: 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 금색 점박이 참나무 천공충(Gold spotted oak borer)(아그릴루스 콕살리스 아우로구타투스(Agrilus coxalis auroguttatus)); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 및 솝베리(Soap berry) 천공충(아그릴루스 프리오누루스(Agrilus prionurus)).
일부 구현예에서, 본 발명의 조성물, 조합물 및/또는 방법은 하나 이상의 살충제에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있는 곤충 및/또는 해충의 서식지에 적용될 수 있으며, 여기서 상기 곤충 및/또는 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 유충(일년생 굼벵이)이다: 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 및 바구미(쿠르쿨리오노이데아).
Bt 독소 내성 해충
일부 구현예에서, 곤충 및/또는 해충은 하나 이상의 살충제, 예를 들어 하나 이상의 Bt 독소에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있다. Bt 독소에 대한 예시적인 설명은 문헌[Adang et al., (2014) Diversity of bacillus thuringiensis crystal toxins and mechanism of action. In: Dhadialla, Tarlochan and Gill, Sarjeet (eds.) Insect Midgut and Insecticidal Proteins. Advances in Insect Physiology, 47. Academic Press, pp. 39-87]; 및 PCT 출원 WO2009076475에 개시되어 있으며, 상기 문헌들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
일부 구현예에서, 곤충 및/또는 해충은 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 Bt 독소에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있다.
일부 구현예에서, 곤충 및/또는 해충은 Bt 독소에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 곤충 및/또는 해충은 바실러스 투린기엔시스 독소; 바실러스 투린기엔시스 Cry11Aa 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry11Ba 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry1Ac 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry1A.105 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry1Aa 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry1Ab 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry1Da 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry1F 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry2A 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry2Ab 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry2Ab2 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry2Ae 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry4Aa 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Cry4B 단백질; 바실러스 투린기엔시스 CryIAa 단백질; 바실러스 투린기엔시스 결정 CryIC 단백질; 바실러스 투린기엔시스 CryIJa 단백질; 바실러스 투린기엔시스 HD73 포자/결정 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키 HD-1 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오네니스 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이 ATTC SD-1372 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Dipel) 단백질; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Javelin) 단백질; 바실러스 투린기엔시스 Vip3A 단백질; Cry1A.105 단백질; Cry1Ah 단백질; Cry1Ba 단백질; Cry1C 단백질; Cry1Ca 단백질; Cry1Ie 단백질; Cry2Aa 단백질; Cry3Bb1 단백질; Cry4Ba 단백질; 또는 CryIIB 단백질에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있다.
일부 구현예에서, Bt 독소에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있는 곤충 및/또는 해충은 하기 목에서 선택될 수 있다: 모기과 쌍시목; 잎벌레과 딱정벌레목; 명나방과 인시목; 뿔나방과 인시목; 명나방과 인시목; 좀나방과 인시목; 또는 밤나방과 인시목.
일부 구현예에서, Bt 독소에 대해 내성이 있거나 적어도 부분적으로 내성이 있을 수 있는 곤충 및/또는 해충은 하기 종에서 선택될 수 있다: 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 하나 이상의 CRIP(예를 들어, 표 A의 A1 내지 A34 중 하나 이상의 CRIP)와 하나 이상의 IA(예를 들어, 표 B의 B1 내지 B479 중 하나 이상의 IA)를 포함하는 조합물은 전술한 살충제 내성 곤충 또는 Bt 내성 곤충 중 임의의 것을 처리하는 데 사용될 수 있다.
예시적인 조합물 및 방법
일부 구현예에서, 본 발명은 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP)와 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물로서, 여기서 IA는 박테리아 독소; 진균 독소; 렉틴; 아자디라크타 인디카 화합물; 붕소 화합물; 바이러스; 또는 이들의 조합인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 박테리아 독소는 바실러스 투린기엔시스(Bt) 독소 또는 포토랍두스 독소이다.
일부 구현예에서, Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이; 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티; 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르; 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아; 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운; 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리; 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타; 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스; 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 히고; 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카; 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나; 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산; 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 킴; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27; 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28; 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나; 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린; 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 모기; 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이; 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 무주; 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에; 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지; 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기; 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니; 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카; 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니; 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고; 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실로; 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토; 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스; 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스; 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니; 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니; 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티; 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피; 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 요수; 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스; 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스; 및 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안 독소.
일부 구현예에서, Bt 독소는 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti).
일부 구현예에서, Bt 독소는 부포자 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신, 알베올리신 또는 인한신 유사 단백질이다.
일부 구현예에서, 부포자 결정 독소는 δ-내독소이다.
일부 구현예에서, δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신 패밀리 독소 또는 시톨리신이다.
일부 구현예에서, δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, δ-내독소는 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소이다.
일부 구현예에서, δ-내독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1 또는 Cry78Aa1, Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및 Cyt3Aa1.
일부 구현예에서, Cry 독소 또는 Cyt 독소는 서열번호 412 내지 481에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, Bt 독소는 분비된 단백질이다.
일부 구현예에서, 분비된 단백질은 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, 분비된 단백질은 Vip이다.
일부 구현예에서, Vip는 Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질이다.
일부 구현예에서, Vip는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및 Vip4Aa1.
일부 구현예에서, Vip 단백질은 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 박테리아 독소는 포토랍두스 독소이다.
일부 구현예에서, 포토랍두스 독소는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 포토랍두스 아쿠르스티 독소; 포토랍두스 아심비오티카 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 ATCC 43949 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 DSM 17609 독소; 포토랍두스 보데이 독소; 포토랍두스 카리베아넨시스 독소; 포토랍두스 시네레아 독소; 포토랍두스 하이나넨시스 독소; 포토랍두스 헤테로랍디티스 독소; 포토랍두스 카야이 독소; 포토랍두스 카니 독소; 포토랍두스 카니 NC19 독소; 포토랍두스 카니 아종 구아나주아텐시스 독소; 포토랍두스 클레이니 독소; 포토랍두스 라우몬디 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 클라르케이 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 TTO1 독소; 포토랍두스 루미네센스 독소; 포토랍두스 루미네센스 BA1 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII H75HRPL105 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII HiPL101 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 ATCC 29999 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 멕시카나 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 소노렌시스 독소; 포토랍두스 남나오넨시스 독소; 포토랍두스 노에니에푸텐시스 독소; 포토랍두스 스타케브란드티 독소; 포토랍두스 타스마니엔시스 독소; 포토랍두스 템페라타 독소; 포토랍두스 템페라타 J3 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 포라메 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 M1021 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 Meg1 독소; 포토랍두스 트라센시스 독소; 미분류 포토랍두스 독소; 포토랍두스 종 독소; 포토랍두스 종 3014 독소; 포토랍두스 종 3240 독소; 포토랍두스 종 Az29 독소; 포토랍두스 종 BS21 독소; 포토랍두스 종 CbKj163 독소; 포토랍두스 종 CRCIA-P01 독소; 포토랍두스 종 ENY 독소; 포토랍두스 종 FL2122 독소; 포토랍두스 종 FL480 독소; 포토랍두스 종 FsIw96 독소; 포토랍두스 종 GDd233 독소; 포토랍두스 종 H3086 독소; 포토랍두스 종 H3107 독소; 포토랍두스 종 H3240 독소; 포토랍두스 종 HB301 독소; 포토랍두스 종 HB78 독소; 포토랍두스 종 HB89 독소; 포토랍두스 종 HIT 독소; 포토랍두스 종 HO1 독소; 포토랍두스 종 HUG-39 독소; 포토랍두스 종 IT 독소; 포토랍두스 종 JUN 독소; 포토랍두스 종 KcTs129 독소; 포토랍두스 종 KJ13.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ14.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ24.5 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ29.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ37.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ7.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ8.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.4 TH 독소; 포토랍두스 종 KMD74 독소; 포토랍두스 종 KOH 독소; 포토랍두스 종 MID10 독소; 포토랍두스 종 MOL 독소; 포토랍두스 종 MSW_058 독소; 포토랍두스 종 MSW_079 독소; 포토랍두스 종 NK2.1 TH 독소; 포토랍두스 종 NK2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 NnMt2h 독소; 포토랍두스 종 NP1 독소; 포토랍두스 종 OH10 독소; 포토랍두스 종 OnIr40 독소; 포토랍두스 종 OnKn2 독소; 포토랍두스 종 PB10.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB16.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB32.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB37.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB39.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB41.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB45.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB50.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB51.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB52.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB54.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB59.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB6.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB68.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB7.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB78.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.4 TH 독소; 포토랍두스 종 Pjun 독소; 포토랍두스 종 RW14-46 독소; 포토랍두스 종 S10-54 독소; 포토랍두스 종 S12-55 독소; 포토랍두스 종 S14-60 독소; 포토랍두스 종 S15-56 독소; 포토랍두스 종 S5P8-50 독소; 포토랍두스 종 S7-51 독소; 포토랍두스 종 S8-52 독소; 포토랍두스 종 S9-53 독소; 포토랍두스 종 SJ2 독소; 포토랍두스 종 SN259 독소; 포토랍두스 종 SP1.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP16.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP21.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP3.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP7.3 TH 독소; 포토랍두스 종 TyKb140 독소; 포토랍두스 종 UK76 독소; 포토랍두스 종 VMG 독소; 포토랍두스 종 WA21C 독소; 포토랍두스 종 WkSs43 독소; 포토랍두스 종 Wx13 독소; 포토랍두스 종 X4 독소; 포토랍두스 종 YNb90 독소; 및 포토랍두스 종 ZM 독소.
일부 구현예에서, 포토랍두스 독소는 포토랍두스 루미네센스 독소이다.
일부 구현예에서, 진균 독소는 아스코마이세테 진균 독소이다.
일부 구현예에서, 아스코마이세테 진균 독소는 코르디시피타세아에과 진균 독소이다.
일부 구현예에서, 코르디시피타세아에 진균 독소는 아칸토마이세스 독소; 아스코폴리포러스 독소; 뷰베리아 독소; 비자사무하 독소; 코르디셉스 독소; 코레미옵시스 독소; 엔교돈티움 독소; 기벨룰라 독소; 히페르데르미움 독소; 인섹티콜라 독소; 이사리아 독소; 레카니실리움 독소; 미크로힐룸 독소; 피토코르디셉스 독소; 슈도기벨룰라 독소; 로티페로프토라 독소; 심플리실리움 독소; 또는 토루비엘라 독소이다.
일부 구현예에서, 코르디시피타세아에 진균 독소는 뷰베리아 독소이다.
일부 구현예에서, 뷰베리아 독소는 뷰베리아 알바 독소; 뷰베리아 아모르파 독소; 뷰베리아 아레나리아 독소; 뷰베리아 아시아티카 독소; 뷰베리아 아우스트랄리스 독소; 뷰베리아 바시아나 독소; 코르디셉스 바시아나 독소; 뷰베리아 브롱니아르티 독소; 뷰베리아 브룸프티 독소; 뷰베리아 칼레도니카 독소; 뷰베리아 키로멘시스 독소; 뷰베리아 코코룸 독소; 뷰베리아 크레타세아 독소; 뷰베리아 실린드로스포라 독소; 뷰베리아 델라크로이시 독소; 뷰베리아 덴사 독소; 뷰베리아 데펜덴스 독소; 뷰베리아 도리포라에 독소; 뷰베리아 에푸사 독소; 뷰베리아 에피가에아 독소; 뷰베리아 펠리나 독소; 뷰베리아 게오데스 독소; 뷰베리아 글로불리페라 독소; 뷰베리아 헤이미 독소; 뷰베리아 호플로켈리 독소; 뷰베리아 키푸카에 독소; 뷰베리아 락사 독소; 뷰베리아 말라위엔시스 독소; 뷰베리아 메도겐시스 독소; 뷰베리아 멜로론타에 독소; 뷰베리아 누비콜라 독소; 뷰베리아 오리자에 독소; 뷰베리아 파라독사 독소; 뷰베리아 파라넨시스 독소; 뷰베리아 파라시티카 독소; 뷰베리아 페텔로티 독소; 뷰베리아 슈도바시아나 독소; 뷰베리아 릴레이 독소; 뷰베리아 루브라 독소; 뷰베리아 시오타에 독소; 뷰베리아 소볼리페라 독소; 뷰베리아 스피카타 독소; 뷰베리아 스테파노데리스 독소; 뷰베리아 설푸레센스 독소; 뷰베리아 순기 독소; 뷰베리아 테넬라 독소; 뷰베리아 툰드렌시스 독소; 뷰베리아 벨라타 독소; 뷰베리아 바로아에 독소; 뷰베리아 베르미코니아 독소; 뷰베리아 벡산스 독소; 뷰베리아 비안나이 독소; 또는 뷰베리아 비렐라 독소이다.
일부 구현예에서, 렉틴은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 갈란투스 니발리스 응집소(GNA); 삼부쿠스 니그라 렉틴(SNA); 마악키아 아무렌시스-II(MAL-II); 에리트리나 크리스타갈리 렉틴(ECL); 리시누스 코무니스 응집소-I(RCA); 땅콩 응집소(PNA); 밀배아 응집소(WGA); 그리포니아 심플리시폴리아-II(GSL-II); Con A; 렌스 쿨리나리스 응집소(LCA); 만노오스 결합 렉틴(MBL); BanLec; 갈렉틴; 파세올루스 불가리스 백혈구응집소(PHA-L); 파세올루스 불가리스 적혈구응집소(PHA-E); 및 다투라 스트라모니움 렉틴(DSL).
일부 구현예에서, 렉틴은 GNA이다.
일부 구현예에서, 아자디라크타 인디카 화합물은 아자디라크틴; 아자디라디온; 아자디라디오놀리드; 데아세틸게두닌; 데아세틸아자디라크티놀; 데스푸라노아자디라디온; 에폭시아자디라디온; 게두닌; 마흐무딘; 님프루이틴 A; 님프루이틴 B; 님볼리드; 님빈; 니몰리시놀; 오키닌 아세테이트; 살라닌; 살라놀; 알파-니모락톤; 베타-니모락톤; 2',3'-디히드로살라닌; 3-데아세틸살라닌; 6-데아세틸님빈; 7-아세틸-16,17-데히드로-16-히드록시네오트리킬레논; 7-벤조일님보시놀; 7-데아세틸-7-벤조일에폭시아자디라디온; 7-데아세틸-7-벤조일게두닌; 7-데아세틸-17-에피니몰리시놀; 15-히드록시아자디라디온; 17-에피-17-히드록시아자디라디온; 17-에피아자디라디온; 20,21,22,23-테트라히드로-23-옥소아자디론; 22,23-디히드로니모시놀; 또는 28-데옥소님볼리드이다.
일부 구현예에서, 붕소 화합물은 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트, 소듐 메타보레이트, 소듐 테트라보레이트 10수화물, 산화붕소, 탄화붕소, 질화붕소, 삼브롬화붕소, 삼염화붕소 및 삼플루오린화붕소로 이루어지는 군에서 선택된다.
일부 구현예에서, 바이러스는 바큘로바이러스과 바이러스이다.
일부 구현예에서, 바큘로바이러스과 바이러스는 베타바큘로바이러스이다.
일부 구현예에서, 베타바큘로바이러스는 아독소피에스 오라나 과립병바이러스; 아그로티스 세게툼 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 A; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마 과립병바이러스; 에리니스 엘로 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에 과립병바이러스; 모시스 라티페스 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A; 슈달라티아 우니푼크타 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸 과립병바이러스; 미분류 베타바큘로바이러스; 아카에아 자나타 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타 과립병바이러스; 아우토그라파 감마 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스 베타바큘로바이러스; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스; 크네파시아 론가나 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아 과립병바이러스; 나타다 나라리아 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아 과립병바이러스; 판데미스 리미타타 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라 과립병바이러스; 피에리스 라파에 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스; 스코토그라마 트리폴리 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라 과립병바이러스; 또는 모시스 종 과립병바이러스이다.
일부 구현예에서, IA는 포토랍두스 루미네센스 독소; 뷰베리아 바시아나 독소; 갈란투스 니발리스 응집소(GNA); 아자디라크틴 화합물; 붕산; 및 시디아 포모넬라 과립병바이러스(CpGV)로 이루어지는 군에서 선택된다.
일부 구현예에서, 포토랍두스 루미네센스 독소는 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체(Tca)를 포함한다.
일부 구현예에서, Tca는 TcaA 단백질(서열번호 616), TcaB 단백질(서열번호 617), TcaC 단백질(서열번호 618) 및 TcaZ 단백질(서열번호 619)을 포함한다.
일부 구현예에서, 뷰베리아 바시아나 독소는 뷰베리신 독소이다.
일부 구현예에서, 뷰베리신 독소는 화학식 C45H57N3O9을 갖는 뷰베리신 독소; 화학식 C46H59N3O9을 갖는 뷰베리신 A 독소; 또는 화학식 C47H61N3O9을 갖는 뷰베리신 B 독소이다.
일부 구현예에서, 뷰베리아 바시아나 독소는 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자에서 단리된 뷰베리신 독소이다.
일부 구현예에서, GNA는 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, CpGV는 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다.
일부 구현예에서, Btt 독소는 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이다.
일부 구현예에서, CRIP는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 말미잘 독소; Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 포네우트리아 독소; 또는 아트라코톡신(ACTX)이다.
일부 구현예에서, U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드는 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드는 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, TVP는 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, TVP는 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, 말미잘 독소는 Av2 독소 또는 Av3 독소이다.
일부 구현예에서, Av2 독소는 서열번호 588에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, Av2 독소는 서열번호 588에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, Av3 독소는 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, Av3 독소는 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, AVP는 AVP펩타이드, AVPa-C1 펩타이드 또는 AVPb 펩타이드이다.
일부 구현예에서, AVPa 독소는 서열번호 45에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, AVPa 독소는 서열번호 45에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, AVPa-C1 독소는 서열번호 46에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, AVPa-C1 독소는 서열번호 46에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, AVPb 독소는 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, AVPb 독소는 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, CRIP는 크테니톡신(CNTX)이다.
일부 구현예에서, CNTX는 Γ-CNTX-Pn1a이다.
일부 구현예에서, Γ-CNTX-Pn1a는 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, Γ-CNTX-Pn1a는 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, CRIP는 ACTX이다.
일부 구현예에서, ACTX는 U-ACTX 펩타이드, 오메가-ACTX 펩타이드 또는 카파-ACTX 펩타이드이다.
일부 구현예에서, ACTX는 U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, κ-ACTX-Hv1a, κ+2ACTX-Hv1a, ω-ACTX-Hv1a 또는 ω+2-ACTX-Hv1a이다.
일부 구현예에서, ACTX는 서열번호 60 내지 64 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, ACTX는 서열번호 60 내지 64 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, ACTX는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, ACTX는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
일부 구현예에서, CRIP는 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 또는 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 TVP; 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP); 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a; 또는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a.
일부 구현예에서, IA 대 CRIP의 비는 약 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP는 ACTX이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 및 독소 대 ACTX의 비는 약 1:1 내지 약 1:5000이다.
일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비는 약 1:4000이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP는 ACTX이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비는 약 1:1 내지 약 1:10이다.
일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비는 약 1:9.2이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP는 AVP이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 AVP의 비는 약 1:1 내지 약 1:1.5이다.
일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 AVP의 비는 약 1:1.375이다.
일부 구현예에서, IA는 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP는 ACTX이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비는 약 1:1 내지 약 1:10이다.
일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비는 약 1:8.75이다.
일부 구현예에서, 본 발명은 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합과, (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA)를 포함하는 조합물을 포함하고; 부형제를 추가로 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 포토랍두스 루미네센스 독소와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 포토랍두스 루미네센스 독소는 TcaA(서열번호 616), TcaB(서열번호 617), TcaC(서열번호 618) 및 TcaZ(서열번호 619)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체(Tca)이고; ACTX 펩타이드는 U+2-ACTX-Hv1a 독소(서열번호 61)인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 갈란투스 니발리스 응집소(GNA)와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 GNA는 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열을 갖고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 아자디라크틴과 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 아자디라크틴은 화학식 C35H44O16을 갖는 아자디라크틴이고; ACTX는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 붕산 화합물과 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 붕산 화합물은 화학식 H3BO3을 갖고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 시디아 포모넬라 과립병바이러스(CpGV)와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 CpGV는 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스이고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 곤충을 방제하기 위해 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 IA의 조합물을 제공하는 단계와, 상기 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 곤충은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 본 발명은 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충을 방제하기 위해 (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조합물을 사용하는 방법으로서, 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 IA의 조합물을 제공하는 단계, 이어서 상기 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 본 발명은 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, (1) 하나 이상의 CRIP 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 하나 이상의 CRIP-살충 단백질 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 또는 이들의 조합; (2) 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 살충 작용제(IA); 및 (3) 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물의 살충 유효량을, 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
일부 구현예에서, 해충은 하기로 이루어지는 군에서 선택된다: 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
실시예
본 명세서의 실시예는 본 발명을 제한하려는 의도가 아니고, 본 발명을 제한하고자 사용되어서도 안 되며; 이는 단지 본 발명을 예시하기 위해서 제공된다.
실시예 1: Bti 독소와 U+2-ACTX-Hv1a
바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti) 독소와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물을 3령 아에데스 아에깁티(모기) 유충에 대해 액체 용액 검정으로 이의 살충 활성에 대해 평가하였다. 간략하게, (1) U+2-ACTX-Hv1a와 Bti 독소의 조합물; (2) Bti 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a 단독; 또는 (4) 물(미처리 대조군)을 모기 유충에 적용한 후, 사멸률을 평가하였다.
처리물
처리물은 하기 구성요소로 이루어진 조성물이었다:
(1) Bti 독소(0.25 μg/mL 또는 0.25 ppm). Bti 독소의 효과를 평가하기 위해, AQUABAC XT®(Becker Microbial Products, Inc.)를 사용하였다. AQUABAC XT®는 하기 성분으로 이루어져 있다: 6% 내지 10%(약 8%) 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144 고형물, 포자 및 살충 독소(여기서 상기 살충 독소는 δ-내독소이고, 1,200 국제 독성 단위(ITU/mg)(48억 4천만 ITU/갤런 또는 12억 ITU/리터)에 해당함); 및 약 92% 기타/비활성 성분. AQUABAC XT®는 Becker Microbial Products, Inc.(11146 N.W. 69th Place, Parkland, FL 33076, U.S.A.)에서 상업적으로 입수 가능하다: 웹사이트: https://beckermicrobialproductsinc.com/; 제품 코드 27376; EPA 등록 번호 62637-1.
(2) U+2-ACTX-Hv1a(1 mg/mL). "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a("Spear"로도 지칭됨)를 본원에 기재된 방법에 따라 얻었다.
(3) Bti 독소 + U+2-ACTX-Hv1a. Bti 독소와 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 기재된 바와 같이 준비하고 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기 구성요소로 이루어져 있었다: 조성물의 총 부피의, 0.1% w/v의 U+2-ACTX-Hv1a와 0.000025% v/v의 Bti 독소, 나머지는 물임.
(4) 대조군(물).
U+2-ACTX-Hv1a의 생성
간략하게, U+2-ACTX-Hv1a를 얻기 위해, 하기와 같은 재조합 클루이베로마이세스 락티스 발현 시스템을 사용하였다: 발현 벡터 pKLAC1과 클루이베로마이세스 락티스 균주 YCT306(둘 모두 New England Biolabs®(Ipswich, MA, USA)에서 입수 가능함). U+2-ACTX-Hv1a를 인코딩하도록 작동 가능한 코돈 최적화된 전이유전자를, LAC4 프로모터의 제어 하에서, pKLAC1에 클로닝하고, YCT306으로 형질전환시켰다. 생성된 형질전환체는 α-교배 인자 신호 펩타이드, Kex2 절단 부위 및 성숙 U+2-ACTX-Hv1a를 포함하는 프리-프로펩타이드를 생성하였다. α-교배 인자 신호 펩타이드는 프리-프로펩타이드가 내인성 분비 경로를 통과하도록 안내하고, 이어서 성숙 U+2-ACTX-Hv1a가 성장 배지로 방출된다. 이동상으로 0.1% 트리플루오로아세트산이 함유된 물과 아세토니트릴을 사용하는 역상 HPLC를 사용하여 모놀리식 C18 컬럼을 통해 성장 배지에서 U+2-ACTX-Hv1a를 정제하였다. 20% 내지 40% 아세토니트릴을 사용하는 용리 프로토콜을 사용하여 U+2-ACTX-Hv1a를 정제하였으며, 여기서 U+2-ACTX-Hv1a는 34% 내지 36% 아세토니트릴 범위에서 용리되었다. 이어서, U+2-ACTX-Hv1a 펩타이드를 계면활성제와 함께 블렌딩 및 응집시키고, 응집제로 물을 사용하여 생성된 U+2-ACTX-Hv1a 펩타이드를 습윤성 과립(WG)으로 제형화하였다. WG를 제조하는 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다.
액체 용액 검정
각각의 처리를 9회(N=9) 시험하였다. 여기서, 사용한 Bti 독소의 양은 0.25 μg/mL 또는 0.25 ppm이었다. 본 실시예에서 사용한 U+2-ACTX-Hv1a의 양은 1 mg/mL였다.
전술한 처리를 시험하기 위해, 30 mL의 물이 함유된 59 mL 컵으로 이루어진 아레나를 확립하였다. 각각의 컵에, 3령 모기 유충(N =10)을 넣었다. 먹이는 제공하지 않았다. 다음으로, 주어진 처리 용액을 컵에 첨가하고, 뚜껑으로 컵을 밀봉하였다. 이어서, 컵을 형광등 조명 하의 트레이에 위치시켰다. 각 처리에 대해 3개 복제물을 제공하였다.
24시간 후, U+2-ACTX-Hv1a와 Bti 독소의 조합물은 95% 사멸률에 해당하는 놀라운 상조 효과(synergistic effect)를 생성하였다. 대안적으로, Bti 독소 단독은 단지 57% 사멸률을 나타냈고, U+2-ACTX-Hv1a 단독은 단지 4% 사멸률을 나타냈다. 따라서, U+2-ACTX-Hv1a와 Bti 독소의 조합물은 U+2-ACTX-Hv1a와 Bti 독소의 조합에 대해 예상되는 상가 효과보다 더 큰 놀라운 상조 효과를 생성하였다. 도 1.
실시예 2: Btk 독소와 Γ-CNTX-Pn1a
바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk) 독소와 Γ-CNTX-Pn1a의 조합물을 스포도프테라 엑시구아(파밤나방)에 대해 엽면 살포 생물검정으로 이의 살충 활성에 대해 평가하였다. 간략하게, (1) Γ-CNTX-Pn1a 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) Γ-CNTX-Pn1a와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)을 잎에 분무한 후, 사멸률을 평가하였다.
처리물
처리물은 하기 구성요소로 이루어진 조성물이었다:
(1) Btk 독소(0.0107% v/v). Btk 독소를 평가하기 위해, BioProtec PlusTM(AEF Global Inc.)를 사용하였다. BioProtec PlusTM는 14.49% 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 발효 고형물, 포자 및 살충 독소(제품 1 mg 당 17,500 양배추 자벌레 단위(CLU)(제품 1 갤런 당 760억 CLU에 해당함)의 효능을 가짐)와, 85.51% 기타/비활성 성분으로 이루어져 있다. 14.49% 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 발효 고형물, 포자 및 살충 독소로 이루어진 BioProtec PlusTM는 AEF Global Inc.(925 des calfats, US-QC, Levis, G6Y9E8, Canada)에서 상업적으로 입수 가능하다: 웹사이트: http://www.aefglobal.com/en/; CAS 번호: 68038-71-1; 로트 번호: 31G18.
(2) Γ-CNTX-Pn1a(0.034% w/v, 0.152% w/v 및 0.675% w/v). 이온 교환 크로마토그래피를 사용하여 하기 기재되는 방법에 따라, "GSCADINGACKSDCDCCGDSVTCDCYWSDSCKCRESNFKIGMAIRKKFC"(서열번호 65)의 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a를 얻었다.
(3) Btk 독소 + Γ-CNTX-Pn1a. Btk 독소와 Γ-CNTX-Pn1a를 상기 기재된 바와 같이 준비하고 조합하였다. 시험한 최종 조합 조성물은 하기와 같았다:
저용량 Γ-CNTX-Pn1a: 조성물의 총 부피의, 0.034% w/v Γ-CNTX-Pn1a; 0.125% v/v Vintre; 0.0107% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
중간 용량 Γ-CNTX-Pn1a: 조성물의 총 부피의, 0.152% w/v Γ-CNTX-Pn1a; 0.125% v/v Vintre; 0.0107% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
고용량 Γ-CNTX-Pn1a: 조성물의 총 부피의, 0.675% w/v Γ-CNTX-Pn1a; 0.125% v/v Vintre; 0.0107% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
(4) 대조군(0.125% Vintre®). Vintre®(본원 및 상기 처리에 사용됨)는 8.92% 알코올 에톡실레이트와 91.08% 스프레이 아쥬반트로서 효과가 없는 구성요소로 이루어진 계면활성제이다(ORO AGRI, Inc, 990 Trophy Club Dr., Trophy Club, TX 76262 USA). Vintre는 몇몇 공급업체에서 상업적으로 입수 가능하며, 이는 당업자에게 널리 공지된 제품이다.
Γ-CNTX-Pn1a의 생성
"GSCADINGACKSDCDCCGDSVTCDCYWSDSCKCRESNFKIGMAIRKKFC"(서열번호 65)의 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a의 DNA 구조체를 코돈 최적화하고, 클루이베로마이세스 락티스 알파 교배 인자 프리/프로 서열(αMF)과의 융합체로 합성하고, pKlac1(New England Biolabs)의 NotI 및 HindIII 제한 부위에 결찰시켰다. 벡터를 SacII로 소화시켜 선형화시키고 박테리아 Ori 및 선별 마커를 제거한 후, 전기천공적격(electrocompetent) 클루이베로마이세스 락티스 세포에 전기천공하였다. 다중 유전자 카피 형질전환체를 유일한 질소 공급원으로 아세트아미드를 함유하는 선별 플레이트에서 선별하였다. Γ-CNTX-Pn1a를 발현하는 클론을 Chromolith C18 컬럼(4.6 x 100 mm) 상에서 HPLC로 평가하고, 2 mL/min의 유속으로 8분에 걸쳐 15% 내지 33% 아세토니트릴 구배로 용리하였다.
Sephadex C-25 수지를 사용하여 양이온 교환 크로마토그래피로 Γ-CNTX-Pn1a를 정제하였다. 상청액을 수지에 결합시키고, 염화소듐의 농도를 증가시키면서 용리하였다. 용리액을 투석하고, 동결건조시키고, 물에 재현탁시켰다.
엽면 살포 생물검정
바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk) 독소와 Γ-CNTX-Pn1a의 조합 효과를 인시목 종, 파밤나방(스포도프테라 엑시구아)에 대해 시험하였다. 곤충이 (1) Γ-CNTX-Pn1a 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) Γ-CNTX-Pn1a와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)과 직면했을 때 파밤나방의 사멸률을 평가하였다.
조합물의 효과를 평가하기 위해, 로메인 상추를 30 mm 직경 디스크로 절단하고, 140 ppm 표백 용액을 사용하여 멸균시키고; 디스크를 3회 세척하였다. 이어서, 로메인 상추 디스크를 스티로폼판에 고정하고, 주어진 처리물을 분무하였으며; 디스크를 뒤집고, 다시 분무하고, 건조시키고, 아레나에 위치시켰다.
아레나는 1% 한천 5 mL가 함유된 32웰 사육용 트레이였다. 각각의 웰에 하나의 로메인 상추 디스크를 위치시켜, 잎 디스크 당 단일 2령 파밤나방이 있도록 하였다. 이어서, 트레이를 28℃ 인큐베이터에 위치시켰다. 각각의 처리를 12개 디스크에서 3회 반복으로 시험하였다(N = 36).
먼저, Btk 독소와 조합한 경우의 Γ-CNTX-Pn1a를 관찰할 수 있도록, Btk 독소의 준치사 용량(sublethal dose)(즉, 집단의 대략 20%가 사멸하게 되는 용량 또는 ~LD20)을 결정하였다.
여기서, Btk 독소의 준치사 용량은 736 ppm(0.736 mg/mL)이었으며, 이는 집단의 25%의 사멸을 초래하였다. 도 2. Btk 독소의 준치사 용량을 확인하면, Γ-CNTX-Pn1a + Btk 독소 조합물에 대한 LD50 양에 도달할 때까지 Γ-CNTX-Pn1a의 용량을 증가시켰다. 따라서, 최종 조합 조성물은 하기와 같았다: (1) 저용량 Γ-CNTX-Pn1a: 조성물의 총 부피의, 0.034% w/v Γ-CNTX-Pn1a; 0.125% v/v Vintre; 0.0107% v/v Btk 독소, 나머지는 물임; (2) 중간 용량 Γ-CNTX-Pn1a: 조성물의 총 부피의, 0.152% w/v Γ-CNTX-Pn1a; 0.125% v/v Vintre; 0.0107% v/v Btk 독소, 나머지는 물임; 및 (3) 고용량 Γ-CNTX-Pn1a: 조성물의 총 부피의, 0.675% w/v Γ-CNTX-Pn1a; 0.125% v/v Vintre; 0.0107% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
도 2에 제시된 바와 같이, 1.6 mg/mL의 Γ-CNTX-Pn1a를 사용하면 6% 사멸률을 나타냈지만; 0.736 mg/mL의 Btk 독소와 조합한 경우, 사멸률은 28%로 급등하였다. 마찬가지로, 6.75 mg/mL의 Γ-CNTX-Pn1a는 3%의 사멸률을 나타냈지만; 0.736 mg/mL의 Btk 독소와 조합한 경우, 사멸률은 50%였다. 본 실시예는, Btk 독소와 Γ-CNTX-Pn1a의 조합물이 예상치 못한 결과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 3: Btk 독소와 AVP
바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키(Btk) 독소와 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)의 조합물을 스포도프테라 엑시구아(파밤나방)에 대해 엽면 살포 생물검정으로 이의 살충 활성에 대해 평가하였다. 간략하게, (1) AVP 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) AVP와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)을 잎에 분무한 후, 사멸률을 평가하였다.
처리물
처리물은 하기 구성요소로 이루어진 조성물이었다:
(1) Btk 독소(800 ppm 또는 0.8 mg/mL). Btk 독소를 평가하기 위해, BioProtec PlusTM(AEF Global Inc.)를 사용하였다. BioProtec PlusTM는 14.49% 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 발효 고형물, 포자 및 살충 독소(제품 1 mg 당 17,500 양배추 자벌레 단위(CLU)(제품 1 갤런 당 760억 CLU에 해당함)의 효능을 가짐)와, 85.51% 기타/비활성 성분으로 이루어져 있다. 14.49% 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19 발효 고형물, 포자 및 살충 독소로 이루어진 BioProtec PlusTM는 AEF Global Inc.(925 des calfats, US-QC, Levis, G6Y9E8, Canada)에서 상업적으로 입수 가능하다: 웹사이트: http://www.aefglobal.com/en/; CAS 번호: 68038-71-1; 로트 번호: 31G18.
(2) AVP (1 mg/mL, 3 mg/mL 및 9 mg/mL). 평가한 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)는 "KSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPK"(서열번호 47)의 아미노산 서열을 갖는다(AVPb). AVP를 생성하는 방법은 하기에 상세하게 제공되어 있다.
(3) Btk 독소 + AVP. Btk 독소와 AVP를 상기 기재된 양으로 준비하고 조합하였다. 시험한 최종 조합 조성물은 하기와 같았다:
저용량 AVP: 조성물의 총 부피의, 0.1% w/v AVP; 0.125% v/v Vintre; 0.0116% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
중간 용량 AVP: 조성물의 총 부피의, 0.3% w/v AVP; 0.125% v/v Vintre; 0.0116% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
고용량 AVP: 조성물의 총 부피의, 0.9% w/v AVP; 0.125% v/v Vintre; 0.0116% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
(4) 대조군(0.125% Vintre®). Vintre®는 8.92% 알코올 에톡실레이트와 91.08% 스프레이 아쥬반트로서 효과가 없는 구성요소로 이루어진 계면활성제이다(ORO AGRI, Inc, 990 Trophy Club Dr., Trophy Club, TX 76262 USA). Vintre는 몇몇 공급업체에서 상업적으로 입수 가능하며, 이는 당업자에게 널리 공지된 제품이다.
AVP의 생성
평가한 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)는 하기와 같이 얻었다: 간략하게, 아미노산 서열 "RSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPKV"(서열번호 44)을 갖는 WT-Av3 펩타이드를 주형으로 사용하여 돌연변이시켜, R1K 치환 및 C-말단 결실을 갖는 펩타이드를 생성하였다. 생성된 돌연변이 펩타이드는 아미노산 서열 "KSCCPCYWGGCPWGQNCYPEGCSGPK"(서열번호 47)을 갖는 AVPb 펩타이드이다.
먼저, pKLAC1 효모 발현 벡터(NEW ENGLAND BIOLABS®에서 입수 가능함)에 기반하여 생성되는 AVP 펩타이드 발현 벡터를 생성하는 방식으로 AVPb를 얻었다: 선별 마커로 아세트아미다아제 유전자 발현을 이용하여 AVP를 분비 펩타이드로 발현시켰다. pLB102의 발현 벡터를 제한 효소 SacII를 이용한 소화를 통해 선형화시키고; 이어서 선형 pLB102 플라스미드를 전기천공을 통해 클루이베로마이세스 락티스 세포로 형질전환시키고; 생성된 양성 형질전환 콜로니 중 96개를 배양하였다. 3% solulys 095K + 3% 글루코오스 및 50 μg/mL 카나마이신이 함유된 씨딩 배지에서 2 L 발효의 접종을 위한 생산 균주의 씨드 배양을 24시간 동안 선행하였다. 이어서, 30 mL 씨드 배양을 사용하여, 2 L 발효 탱크에 하기가 함유된 1 L 배치 배지를 접종하였다: 1 L 기본 염 배지(basal salt media)(BMS (g/L): Solulys 095K 40, 억제제 3519 0.1 mL, 85% 인산 13 mL, CaSO4 0.5, K2SO4 9.1, MgSO4.7H2O 7.5, KOH 2.1, (NH4)2SO4 5, 덱스트로오스 10), 이는 1.2% 피키아 미량 금속(Pichia Trace metal)(PTM (g/L): CuSO4.5H2O 6, NaI 0.08, MgSO4.H2O 3, NaMoO4.2H2O 0.2, H3BO3 0.02, CoCl2.6H2O 0.5, ZnCl2 20, FeSO4.6H2O 65, H2SO4 5 mL)과 2 mL 5% 억제제 7153을 포함함. 온도 27℃, pH 4.80 및 용존 산소 15%로 제어하면서 회분식 발효를 6시간 동안 지속하였다. 6시간 회분식 발효 후, 온도를 23.5℃로 낮추고, 당 알코올의 공급을 시작하여 나머지 발효 공정 동안 온도를 23.5C°로 제어하면서 120시간 동안 지속하였다. 공급 배지는 하기와 같이 점진적으로 증가하는 속도로 공급하였다: 24시간 동안 3.4 mL/hr, 30시간 동안 4.4 mL/hr, 24시간 동안 7.2 mL/hr, 12시간 동안 8.8 mL/hr 및 공급 배지가 완전히 소모될 때까지 11 mL/hr. 이동상으로 0.1% 트리플루오로아세트산이 함유된 물과 아세토니트릴을 사용하는 역상 HPLC를 사용하여 모놀리식 C18 컬럼을 통해 발효 맥주(즉, 폐배지)에서 AVP를 정제하였다. 20% 내지 40% 아세토니트릴을 사용하는 용리 프로토콜을 사용하여 AVP를 정제하였으며, 여기서 AVP는 34% 내지 36% 아세토니트릴 범위에서 용리되었다.
AVP를 수득하는 예시적인 방법은 PCT 출원 PCT/US2019/051093에 개시되어 있으며, 상기 문헌의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 인용된다.
엽면 살포 생물검정
Btk 독소와 Av3b-변이체 폴리펩타이드(AVP)의 조합 효과를 인시목 종, 파밤나방(스포도프테라 엑시구아)에 대해 시험하였다. 곤충이 (1) AVP 단독; (2) Btk 독소 단독; (3) AVP와 Btk 독소의 조합물; 또는 (4) 대조군(0.125% Vintre, 계면활성제)과 직면했을 때 파밤나방의 사멸률을 평가하였다.
조합물의 효과를 평가하기 위해, 로메인 상추를 30 mm 직경 디스크로 절단하고, 140 ppm 표백 용액을 사용하여 멸균시키고; 디스크를 3회 세척하였다. 이어서, 로메인 상추 디스크를 스티로폼판에 고정하고, 주어진 처리물을 분무하였으며; 디스크를 뒤집고, 다시 분무하고, 건조시키고, 아레나에 위치시켰다.
아레나는 1% 한천 5 mL가 함유된 32웰 사육용 트레이였다. 각각의 웰에 하나의 로메인 상추 디스크를 위치시켜, 잎 디스크 당 단일 2령 파밤나방이 있도록 하였다. 이어서, 트레이를 28℃ 인큐베이터에 위치시켰다. 각각의 처리를 12개 디스크에서 3회 반복으로 시험하였다(N = 36).
먼저, Btk 독소와 조합한 경우의 살충 펩타이드를 관찰하고, 이어서 2가지 제품 사이의 상조작용을 관찰할 수 있도록, Btk 독소의 준치사 용량(즉, 집단의 대략 20%가 사멸하게 되는 용량 또는 ~LD20)을 결정하였다.
여기서, Btk 독소의 준치사 용량은 800 ppm(0.8 mg/mL)이었으며, 이는 집단의 31%의 사멸을 초래하였다. 도 3. 이러한 시험을 위해 Btk 독소의 준치사 용량을 확인하면, AVP + Btk 독소 조합물에 대한 LD50 양에 도달할 때까지 AVP의 용량을 증가시켰다. 따라서, 최종 조합 조성물은 하기와 같았다: (1) 저용량 AVP: 조성물의 총 부피의, 0.1% w/v AVP; 0.125% v/v Vintre; 0.0116% v/v Btk 독소, 나머지는 물임; (2) 중간 용량 AVP: 조성물의 총 부피의, 0.3% w/v AVP; 0.125% v/v Vintre; 0.0116% v/v Btk 독소, 나머지는 물임; 및 (3) 고용량 AVP: 조성물의 총 부피의, 0.9% w/v AVP; 0.125% v/v Vintre; 0.0116% v/v Btk 독소, 나머지는 물임.
도 3에 제시된 바와 같이, 1.1 mg/mL의 AVP를 사용한 경우 사멸률은 5%였지만; 0.8 mg/mL의 Btk 독소와 조합한 경우 사멸률은 50%로 급등하였다. 유사하게, AVP를 3 mg/mL의 용량으로 단독으로 사용한 경우, 사멸률은 11%였지만; 0.8 mg/mL의 Btk 독소와 조합한 경우, 사멸률은 67%까지 증가하였다. 최종적으로, AVP를 3 mg/mL의 용량으로 단독으로 사용한 경우, 사멸률은 10%였지만, Btk 독소와 조합한 경우, 사멸률은 88%였다. 본 실시예는, Btk 독소와 Γ-CNTX-Pn1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 4: Btk 독소, Ta1b 및 TVP
(1) Btk 독소와 야생형 Ta1b의 조합; 또는 (2) Btk 독소와 Ta1b-변이체 폴리펩타이드(TVP)의 조합의 효과를, 각각, 주입 검정 및 엽면 생물검정으로, 인시목 종, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)에 대해 시험하였다.
WT-Ta1b와 TVP-R9Q
여기서 평가한 CRIP는 WT-Ta1b와, Ta1b-변이체 폴리펩타이드인 TVP-R9Q였다. WT-Ta1b는 하기와 같은 아미노산 서열을 갖고; "EPDEICRARMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYTACHEAQKG"(서열번호 1); TVP-R9Q는 하기와 같은 아미노산 서열을 갖는다:
"EPDEICRAQMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYTACHEAQKG"(서열번호 2).
TVP-R9Q 펩타이드를 얻기 위해, "EPDEICRARMTNKEFTYKSNVCNNCGDQVAACEAECFRNDVYTACHEAQKG"(서열번호 1)의 아미노산 서열을 갖는 야생형 Ta1b 펩타이드를 주형으로 사용하고, 잔기 위치 번호 9를 돌연변이시켜, R9Q 치환을 생성하였으며; 이에 따라 TVP-R9Q는 야생형(서열번호 1)에 비해 R9Q 아미노산 치환을 갖는다.
WT-Ta1b와 TVP-R9Q를 생성하기 위해, WT-Ta1b 또는 TVP-R9Q를 인코딩하도록 작동 가능한 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 DNA 구조체를 코돈 최적화하고, 클루이베로마이세스 락티스 알파 교배 인자 프리/프로 서열(αMF)과의 융합체로 합성하고, pKlac1(NEW ENGLAND BIOLABS®)의 NotI 및 HindIII 제한 부위에 결찰시켰다. 벡터를 SacII로 소화시켜 선형화시키고 박테리아 Ori 및 선별 마커를 제거한 후, 전기천공적격 클루이베로마이세스 락티스 세포에 전기천공하였다. 다중 유전자 카피 형질전환체를 유일한 질소 공급원으로 아세트아미드를 함유하는 선별 플레이트에서 선별하였다. WT-Ta1b 또는 TVP-R9Q를 발현하는 클론을 Chromolith C18 컬럼(4.6 x 100 mm) 상에서 HPLC로 평가하고, 2 mL/min의 유속으로 8분에 걸쳐 15% 내지 33% 아세토니트릴 구배로 용리하였다.
실시예 5: WT-Ta1b와 TVP-R9Q의 안정성 검정
TVP-R9Q는 인시목 내장 프로테아제에 대해 내성이 있다. 간략하게, TVP-R9Q와 WT-Ta1b의 분해를 하기와 같이 수행하였다: 초기 5령 헬리코베르파 제아 유충을 절개하여, 다른 조직 및 혈림프로부터 온전한 소화관을 제거하였다. 헬리코베르파 내장 추출물(HGE)을 얻기 위해, 내장 내용물을 튜브에 수집할 수 있도록 장 내벽에 작은 절개를 만들었다. 여러 절개부를 풀링하고, 즉시 사용하는 경우 얼음 위에서 보관하거나 이후에 사용하는 경우 -80℃에서 보관하였다.
야생형 Ta1b(서열번호 1)를 주형으로 사용하고, 위치 9의 아미노산 치환(즉, R9; 서열번호 1)에서 돌연변이시켜, 야생형 아미노산 서열(서열번호 1)의 위치 9(즉, R9)에 있는 아르기닌을 아미노산 Q로 치환하였다(TVP-R9Q). 인시목 내장 환경에서의 소화를 시뮬레이션하기 위해 WT-Ta1b와 TVP-R9Q를 헬리코베르파 내장 추출물(HGE)과 접촉시켰다. 여기서, WT-Ta1b와 TVP-R9Q를 20 μL HGE; 205 μL 30 mM Tris-HCl(pH 8.8)(헬리코베르파 내장 환경의 알칼리성 pH를 유지하기 위해); 및 25 μL 15.7 mg/mL의 WT-Ta1b 또는 TVP-R9Q와 함께 인큐베이션하였다.
소화된 Ta1b 또는 TVP의 샘플을 0분, 20분, 40분, 60분, 180분 및 1260분의 시점에서 수집하였다. 소화 과정을 켄칭하기 위해, 82 μL Tris-HCl(pH 8.8)과 3 μL 25% HCl을 샘플에 첨가하고, 소화된 TVP의 샘플을 역상 HPLC를 사용하여 즉시 분석하여 TVP 피크 면적을 정량화하였다. 도 4 및 도 5에 제시된 바와 같이, TVP-R9Q는 WT-Ta1b에 비해 HGE에서 안정하였다.
실시예 6: Ta1b, TVP-R9Q 및 Btk 독소의 엽면 검정
Btk 독소와 WT-Ta1b 또는 TVP-R9Q의 조합물의 효과를 평가하기 위해, 로메인 상추를 30 mm 직경 디스크로 절단하고, 140 ppm 표백 용액을 사용하여 멸균시키고; 디스크를 3회 세척하였다. 이어서, 로메인 상추 디스크를 스티로폼판에 고정하고, 주어진 처리물을 분무하였으며; 디스크를 뒤집고, 다시 분무하고, 건조시키고, 아레나에 위치시켰다.
아레나는 1% 한천 5 mL가 함유된 32웰 사육용 트레이였다. 각각의 웰에 하나의 로메인 상추 디스크를 위치시켜, 잎 디스크 당 단일 2령 파밤나방이 있도록 하였다. 이어서, 트레이를 28℃ 인큐베이터에 위치시켰다. 각각의 처리를 12개 디스크에서 4회 반복으로 시험하였다(N = 48).
처리물
처리물은 하기 구성요소로 이루어진 분무 용액 조성물이었다:
(1) WT-Ta1b(스톡 농도): WT-Ta1b 14.51 mg/mL를 0 mg/mL, 1 mg/mL, 3 mg/mL 및 9 mg/mL의 용량으로 희석하고, 0.0% w/v, 0.1% w/v, 0.3% w/v 또는 0.9% w/v의 WT-Ta1b; 0.25% v/v의 LoadUp 및 나머지가 물인 최종 제형을 위해 0.25% v/v LoadUp 계면활성제와 조합하였다.
(2) TVP-R9Q(스톡 농도): TVP-R9Q 25.46 mg/mL를 0 mg/mL, 1 mg/mL, 3 mg/mL 및 9 mg/mL의 용량으로 희석하고, 조성물의 총 부피의 0.0% w/v, 0.1% w/v, 0.3% w/v 또는 0.9% w/v의 TVP-R9Q; 0.25% v/v의 LoadUp 및 나머지가 물인 최종 제형을 위해 0.25% v/v LoadUp 계면활성제와 조합하였다.
(3) 0.25% LoadUp 계면활성제(대조군). 여기, 상기 및 하기 열거된 모든 처리에 사용된 "LoadUp"은, 하기로 이루어지는 계면활성제이다: 56.1.0% 알킬 페놀 에톡실레이트, 프로필렌 글리콜, 알킬 아민 에톡실레이트 및 황산; 및 43.9% 스프레이 아쥬반트로서 효과가 없는 다른 구성요소. LoadUp은 J.R. Simplot Company(P.O. Box 70013, Boise, ID 83707 USA)에서 입수 가능하다.
(4) Btk 독소(15 ppm Btk 독소, 또는 15 μL/mL 또는 0.015 mL/mL). 이러한 처리에서, 제형은 조성물의 총 부피의 0.0015% v/v의 Btk 독소로 이루어져 있었으며, 나머지는 물이었다.
Btk 독소를 평가하기 위해, 시판용 제품인 Leprotec®를 사용하였다. Leprotec®는 14.49% 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키(Btk) 균주 EVB-113-19 발효 고형물, 포자 및 살충 독소(제품 1 mg 당 17,500 양배추 자벌레 단위(CLU)(제품 1 갤런 당 760억 CLU에 해당함)의 효능을 가짐)와, 85.51% 기타/비활성 성분으로 이루어져 있다. Leprotec®는 AEF Global Inc.(925 des calfats, US-QC, Levis, G6Y9E8, Canada)에서 입수 가능하다: 웹사이트: http://www.aefglobal.com/en/; CAS 번호: 68038-71-1; 로트 번호: 23J19M.).
이러한 실험에서 사용하기 위한 Leprotec®의 양(즉, 15 ppm)을 선택하기 위해, 다수의 종에 대한 Leprotec®의 준치사 용량(즉, 집단의 대략 20%가 사멸하게 되는 용량 또는 ~LD20)을 확립하였다. 이러한 초기 시험으로 하기 종에 대한 Leprotec®의 준치사 용량(~LD20)을 확인하였다: 양배추 자벌레 = 2.5 ppm; 가을 거염벌레 = 383 ppm; 파밤나방 = 87 ppm; 및 옥수수 귀벌레 =15 ppm.
Leprotec®와 Ta1b 또는 TVP-R9Q의 조합 효과를 관찰하고, 이어서 이들의 조합에서 상가 효과보다 더 큰 효과가 나타나는 지 여부를 결정하기 위해, Leprotec®의 준치사 용량을 확립하기 위한 초기 작업을 수행하였다.
(5) WT-Ta1b + Btk 독소. 여기서, WT-Ta1b와 Btk 독소를 조합하였다. 스톡 농도(14.51 mg/mL)의 WT-Ta1b를 0 mg/mL, 1 mg/mL, 3 mg/mL 및 9 mg/mL의 용량으로 희석하고, 0.25% v/v LoadUp 계면활성제 및 15 ppm Btk 독소(Leprotec®; 상기 참조)와 조합하였다. 이에 따라, 조성물의 총 부피의 0.0% w/v, 0.1% w/v, 0.3% w/v 또는 0.9% w/v의 WT-Ta1b; 0.25% v/v의 LoadUp; 0.0015% v/v의 Btk 독소 및 나머지는 물인 최종 조성물을 생성하였다.
(6) TVP-R9Q + Btk 독소. 여기서, TVP-R9Q와 Btk 독소를 조합하였다. 스톡 농도(25.46 mg/mL)의 TVP-R9Q를 0 mg/mL, 1 mg/mL, 3 mg/mL 및 9 mg/mL의 용량으로 희석하고, 0.25% v/v LoadUp 계면활성제 및 15 ppm Btk 독소(Leprotec®; 상기 참조)와 조합하였다. 이에 따라, 조성물의 총 부피의 0.0% w/v, 0.1% w/v, 0.3% w/v 또는 0.9% w/v의 WT-Ta1b; 0.25% v/v의 LoadUp; 0.0015% v/v의 Btk 독소 및 나머지는 물인 최종 조성물을 생성하였다.
이어서, 전술한 처리물을 잎 디스크 상에 분무하였다.
엽면 생물검정의 결과는 도 6 내지 도 9에 제시되어 있다. 여기서, TVP-R9Q가 Btk 독소와 조합되는 경우, 이는 고엽을 감소시키고 사멸률을 증가시켰으며; 고엽 및 사멸률에 대한 이러한 효과는 TVP-R9Q 단독, Ta1b 단독, 또는 Ta1b와 Btk 독소의 조합보다 더 우수하였다.
도 9에 제시된 바와 같이, 옥수수 귀벌레 신생충에서 준치사 용량의 Leprotec와 조합한 경우 TVP-R9Q에 대한 LD50는 2 ppt(표준오차 = 0.9)였다. 도 9. 따라서, TVP-R9Q 돌연변이는 섭취 시 WT-Ta1b에 비해 살충 활성의 유의한 증가를 야기한다.
실시예 7: 식이 혼입 검정: Btt 독소와 U+2-ACTX-Hv1a
바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt) 독소와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물을 알피토비우스 디아페리누스(대왕거저리)에 대해 식이 혼입 검정으로 이의 살충 활성에 대해 평가하였다. 간략하게, 처리물은 하기와 같았다: (1) U+2-ACTX-Hv1a 단독; (2) Btt 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소의 조합물; 또는 (4) 미처리 대조군(물).
유충 단계에서 외미거저리로도 알려진 대왕거저리, 알피토비우스 디아페리누스(딱정벌레목: 거저리과)는 계사(poultry house)에서 심각한 해충이다. 딱정벌레의 유충은 바닥에 있는 닭 사료, 분뇨 및 사체를 먹는다. 또한, 닭이 먹는 경우에 유충은 질환의 매개체이다. 그리고, 유충은 스티로폼 단열재에 파고들어 건물의 열 효율을 저하시킨다.
바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스 독소(Btt 독소)와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물의 식이 혼입 효과를 딱정벌레목 종, 대왕거저리(알피토비우스 디아페리누스)에 대해 시험하였다. 곤충의 식이에 하기 처리물 중 하나를 혼입시킨 후, 대왕거저리의 사멸률을 평가하였다: (1) U+2-ACTX-Hv1a 단독; (2) Btt 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소의 조합물; 또는 (4) 미처리 대조군(물). 처리물은 하기에 기재되어 있다.
처리물
처리물은 하기 구성요소로 이루어진 조성물이었다:
(1) Btt 독소. Btt 독소를 평가하기 위해, NOVODOR® FC(VALENT® U.S.A. LLC Agricultural Products)를 사용하였다. NOVODOR® FC(또는 유동성 농축물)는 10% 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176 발효 고형물 및 용해물(제품 1 g 당 15,000 렙티노타르사 단위(LTU: Leptinotarsa Unit)(제품 1 쿼트 당 1,630만 LTU에 해당함)의 효능을 가짐)과, 90% 기타/비활성 성분으로 이루어져 있다. 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176 발효 고형물 및 용해물로 이루어진 NOVODOR® FC는, VALENT® U.S.A. LLC Agricultural Products(1333 N California Blvd, Suite 600, US-CA, Walnut Creek, 94596-8025, U.S.A.)에서 상업적으로 입수 가능하다: 웹사이트: https://www.valent.com/; 제품 코드 번호: 96017; 목록 번호: 60220; 로트 번호: 235-222-3L-00.
(2) U+2-ACTX-Hv1a(1 mg/mL). "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a("Spear"로도 지칭됨)를 액체 제형이지만 실시예 1에 기재된 방법에 따라 얻었다.
(3) Btt 독소 + U+2-ACTX-Hv1a. Bti 독소와 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 기재된 바와 같이 준비하고 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기와 같았다:
저용량 U+2-ACTX-Hv1a: 조성물의 총 부피의, 0.1% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.0040% v/v Btt 독소, 나머지는 인공 남부 옥수수 뿌리벌레 식이(Frontier Agricultural Services #F9800B)임.
중간 용량 U+2-ACTX-Hv1a: 조성물의 총 부피의, 0.3% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.0040% v/v Btt 독소, 나머지는 인공 남부 옥수수 뿌리벌레 식이(Frontier Agricultural Services #F9800B)임.
고용량 U+2-ACTX-Hv1a: 조성물의 총 부피의, 0.8% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.0040% v/v Btt 독소, 나머지는 인공 남부 옥수수 뿌리벌레 식이(Frontier Agricultural Services #F9800B)임.
(4) 대조군. 물
식이 혼입 검정
조합물의 효과를 시험하기 위해, 128웰 생물검정 트레이를 포함하는 아레나를 생성하고, 여기에 2마리(N = 2)의 1령 외미거저리를 추가하였다(즉, 웰 당 2마리 거저리). 이어서, 거저리에게 처리물 중 하나와 혼합된 남부 옥수수 뿌리벌레(SCR) 식이(Frontier Scientific, Newark, DE 19713, product No. F9800B)로 이루어진 먹이를 제공하였다. 먹이는 처리물 중 하나와 혼합된 1 mL의 한천 기반 SCR 식이로 이루어져 있었다. 65℃로 유지시킨 15 mL의 SCR 식이와 10 mL의 2.5x 처리 용액을 조합하여 스톡 먹이 혼합물을 만들었다. 이어서, 웰을 통기가 되는 뚜껑을 이용하여 고정하고, 트레이를 하기 환경 조건의 인큐베이터에 위치시켰다: 32℃; 50% 내지 70% 상대습도; 조명 없음. 각 처리 조건의 4개 복제를 완료하였다(N = 4).
다음으로, Btt 독소와 조합한 경우의 살충 펩타이드를 관찰하고, 이어서 2가지 제품 사이의 상조작용을 관찰할 수 있도록, Btt 독소의 준치사 용량(즉, 집단의 대략 20%가 사멸하게 되는 용량 또는 ~LD20)을 결정하였다.
여기서, Btt 독소의 준치사 용량은 400 ppm(0.4 mg/mL)이었으며, 이는 집단의 18%의 사멸을 초래하였다. 도 10. 이러한 실험을 위해 Btt 독소의 준치사 용량을 확인하면, U+2-ACTX-Hv1a + Btt 독소 조합물에 대한 LD50 양에 도달할 때까지 U+2-ACTX-Hv1a의 용량을 증가시켰다. 따라서, 최종 조합 조성물은 하기와 같았다: (1) 저용량 U+2-ACTX-Hv1a: 조성물의 총 부피의, 0.1% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.0040% v/v Btt 독소, 나머지는 인공 남부 옥수수 뿌리벌레 식이(Frontier Agricultural Services #F9800B)임; (2) 중간 용량 U+2-ACTX-Hv1a: 조성물의 총 부피의, 0.3% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.0040% v/v Btt 독소, 나머지는 인공 남부 옥수수 뿌리벌레 식이(Frontier Agricultural Services #F9800B)임; 및 (3) 고용량 U+2-ACTX-Hv1a: 조성물의 총 부피의, 0.8% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.0040% v/v Btt 독소, 나머지는 인공 남부 옥수수 뿌리벌레 식이(Frontier Agricultural Services #F9800B)임.
도 10에 제시된 바와 같이, 1 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a 단독을 사용한 경우 사멸률은 20%였지만; 0.4 mg/mL의 Btt 독소와 조합한 경우 사멸률은 50%로 급등하였다. 유사하게, U+2-ACTX-Hv1a를 3 mg/mL의 용량으로 단독으로 사용한 경우, 사멸률은 44%였지만; 0.4 mg/mL의 Btt 독소와 조합한 경우, 사멸률은 91%까지 증가하였다. 최종적으로, U+2-ACTX-Hv1a를 8 mg/mL의 용량으로 단독으로 사용한 경우 사멸률은 74%였다. 하지만, 8.0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a와 0.4 mg/mL의 Btt 독소를 조합한 경우, 사멸률은 95%까지 증가하였다. 본 실시예는, Btt 독소와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 8: 분무 검정: Btt 독소와 U+2-ACTX-Hv1a
콜로라도 감자 딱정벌레(렙티노타르사 데셈리네아타) 사멸률에 대한 Btt 독소와 U+2-ACTX-Hv1a가 함유된 스프레이 사용 효과를 결정하기 위해 분무 검정을 수행하였다.
대략 16마리 1령 콜로라도 감자 딱정벌레를 뒤집어진 페트리 디쉬(25 x 100 mm)에 함유된 여과지(Whatman #3, 90 mm 직경) 상에 위치시켰다. 다음으로, 작은 스프레이 병(Qosmedix)을 사용하여 콜로라도 감자 딱정벌레에 하기가 함유된 처리 용액 2 mL를 분무하였다: 물; 10 ppT(0.01 mg/mL)의 U+2-ACTX-Hv1a; 및 20 ppT(0.02 mg/mL)의 Btt 독소. 이어서, 페트리 디쉬를 파라필름으로 밀봉하고, 인큐베이터(28℃; 50% 상대습도; 조명 없음)에서 4시간 동안 보관하였다. 딱정벌레에 (1) U+2-ACTX-Hv1a 단독; (2) Btt 독소 단독; (3) U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소의 조합물; 또는 (4) 미처리 대조군(물)을 분무하였다. 스프레이 형태로 제형화되었지만, 처리물은 실시예 8에 기재된 바와 동일하였다.
분무 처리 후, 개별 딱정벌레를 사육 트레이의 웰로 옮기고, 여기서 포름알데히드가 포함된 인공 콜로라도 감자 딱정벌레 식이(Frontier Scientific, Newark, DE 19713, 제품 번호 F9380B)를 웰 당 1 mL 제공하였다. 다음 4일 동안 24시간마다 사멸률을 측정하였다.
도 11에 제시된 바와 같이, 24시간(1일) 후 U+2-ACTX-Hv1a 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 4%였다. Btt 독소 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 2%였다. U+2-ACTX-Hv1a 또는 Btt 독소 단독의 사멸률과 극명하게 대조적으로, U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소를 조합한 경우 24시간 후 사멸률은 79%였다. 이러한 상조작용 패턴은 후속 시점에서도 지속되었다. 48시간(2일) 후, U+2-ACTX-Hv1a 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 9%였다. Btt 독소 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 6%였다. U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소를 조합한 경우, 48시간에서 사멸률은 81%까지 증가하였다. 72시간(3일) 후, U+2-ACTX-Hv1a 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 7%였다. Btt 독소 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 23%였다. U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소를 조합한 경우, 72시간에서 사멸률은 72%까지 증가하였다. 최종적으로, 96시간(4일) 후, U+2-ACTX-Hv1a 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 19%였다. Btt 독소 단독으로 처리된 딱정벌레의 사멸률은 68%였다. U+2-ACTX-Hv1a와 Btt 독소를 조합한 경우, 96시간에서 사멸률은 91%까지 증가하였다.
실시예 9: 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체와 U+2-ACTX-Hv1a
포토랍두스 루미네센스는 선충 헤테로랍디티스 박테리오포라에 의해 매개되는 고도로 독성인 곤충 병원체이다. 상기 박테리아는 독소 복합체로 알려진 거대 단백질 복합체를 생성하고 분비한다. 단백질 복합체는 "독소 복합체 a" 또는 "Tca"로 지칭된다. Tca는 하기 4가지 상이한 단백질로 구성되어 있다: TcaA, TcaB, TcaC 및 TcaZ. 여기서, 포토랍두스 루미네센스 독소와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물을 이의 살충 활성에 대해 평가하였다.
처리물
(1) 포토랍두스 루미네센스 독소(4.75% v/v). 독소 복합체 a(Tca)는 ATCC(American Type Culture Collection)(10801 University Blvd. Manassas, VA 20110, USA)에서 포토랍두스 루미네센스를 구매하여 얻었다. 포토랍두스 루미네센스(제품 번호 2999; 균주: Hb [DSM 3368, HB1, NCIB 12670]; 제공자: (Thomas and Poinar), Boemare 등)를 제조업체의 권고에 따라 배양하였다. 세포를 회전시켜 독소 복합체를 정제하고, 30 분자량 컷오프(mwco) 필터를 통해 배양액을 농축시켰다. 여기서 사용한 Tca 복합체 추출물은 하기 4가지 상이한 단백질로 구성되어 있었다: TcaA(서열번호 616), TcaB(서열번호 617), TcaC(서열번호 618) 및 TcaZ(서열번호 619).
(2) U+2-ACTX-Hv1a. "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다.
(3) 포토랍두스 루미네센스 독소 + U+2-ACTX-Hv1a. 포토랍두스 루미네센스 독소와 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 처리물에 기재된 바와 같이 준비/수득하고, 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기와 같았다: 조성물의 총 부피의, 1% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 4.75% v/v 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체 추출물, 나머지는 물임.
(4) 대조군. 물.
식이 혼입 검정
옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아)에 대해 식이 혼입 생물검정을 수행하였다. 생물검정은 128웰 트레이에서 수행하였다. 각각의 웰에 주어진 처리물이 주입된 한천 기반 일반 인시목 식이 200 μL를 충전하였다(N = 16, 처리물 당 16개 웰). 각각의 웰에 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 신생충 1마리를 위치시키고, 4일에 걸쳐 생존을 평가하였다. 전술한 처리물은 하기와 같이 적용하였다:
(a) 물;
(b) 독소 복합체 단독(4.75% v/v);
(c) 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v); 및
(d) 독소 복합체(4.75% w/v)와 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v).
도 12에 제시된 바와 같이, 4일 후, Tca 단독으로 처리된 옥수수 귀벌레 유충의 사멸률은 13%였다. U+2-ACTX-Hv1a 단독으로 처리된 옥수수 귀벌레의 사멸률은 19%였다. Tca 또는 U+2-ACTX-Hv1a 단독의 사멸률과 극명하게 대조적으로, U+2-ACTX-Hv1a와 Tca 독소를 조합한 경우 4일 후 사멸률은 44%였다.
여기에서의 결과는, 옥수수 귀벌레에 대한 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체와 U+2-ACTX-Hv1a 사이의 상조작용의 증거를 제공하며; 즉, 본 실시예는, Tca와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 10: 스노드롭 렉틴(GNA)과 ACTX
스노드롭 렉틴 또는 갈란투스 니발리스(GNA)는 만노오스 결합 단백질이다. 여기서, 옥수수 귀벌레(CEW)(헬리코베르파 제아) 신생충을 GNA 및/또는 U+2-ACTX-Hv1a의 용액과 접촉시켜, 섭식 후 사멸률을 평가하였다.
처리물
(1) 스노드롭 렉틴(GNA).
서열번호 35에 제시된 바와 같은 "MAKASLLILATIFLGVITPSCLSENILYSGETLPTGGFLSSGSFVFIMQEDCNLVLYNVDKPIWATNTGGLSSDCSLSMQNDGNLVVFTPSNKPIWASNTDGQNGNYVCILQKDRNVVIYGTNRWATGTYTGAVGIPESPPSEKYPSAGKIKLVTAK"의 아미노산 서열을 갖는 GNA는 Vector Laboratories(3390 South Service Rd, Burlington, ON L7N 3J5, Canada)(카탈로그 번호 L-1240, 로트 번호 ZD1016)에서 입수하였다. U+2-ACTX-Hv1a는 본원에 기재된 바와 같이 수득하였다.
(2) U+2-ACTX-Hv1a. "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다.
(3) GNA + U+2-ACTX-Hv1a. GNA와 U+2를 상기 처리물에 기재된 바와 같이 준비/수득하고, 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기와 같았다: 조성물의 총 부피의, 0.5% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.25% w/v GNA, 나머지는 물임.
(4) 대조군. 물.
식이 혼입 검정
식이 혼입 검정은 하기와 같이 수행하였다: 먼저, 한천 위에 파라필름을 함유하는 32웰 검정 트레이를 생성하여 액적 생물검정 아레나를 구축하였다. 다음으로, 3 μL 액적(3x)을 5마리 CEW 신생충과 함께 파라필름 상에 위치시켰다. 액적을 매일 보충하였다. 이를 처리 당 4회 반복하였다.
전술한 처리물은 하기와 같이 적용하였다:
(a) 2.5 mg/mL GNA(0.25% w/v); 5 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.5% w/v);
(b) 0 mg/mL GNA(0% w/v); 5 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.5% w/v);
(c) 2.5 mg/mL GNA(0.25% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); 및
(d) 0 mg/mL GNA(0% w/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군).
유충 사멸률을 3일 동안 매일 평가하였다. 생물검정 3일차 사멸률은 도 13에 제시되어 있다.
도 13에 제시된 바와 같이, 대조군의 기준 사멸률은 20%였다. U+2-ACTX-Hv1a 단독을 5 mg/mL 용량으로 사용한 경우 사멸률은 45%였다. GNA 단독의 사멸률은 15%였다. 기준 사멸률을 빼면, U+2-ACTX-Hv1a 단독의 사멸률은 약 25%까지 변하며, GNA의 사멸률은 거의 0으로 떨어진다. 하지만, U+2-ACTX-Hv1a(5 mg/mL)와 GNA(2.5 mg/mL)의 조합물은 상조 효과를 나타내어 75% 사멸률을 나타냈으며; 기준 사멸률을 고려하여 정규화하면, U+2-ACTX-Hv1a(5 mg/mL)와 GNA(2.5 mg/mL)의 조합물의 사멸률은 약 55% 또는 U+2-ACTX-Hv1a 단독의 대략 2배에 이른다.
실시예 11: 키티나아제와 U+2-ACTX-Hv1a
키티나아제를 평가하기 위해, 가을 거염벌레(스포도프테라 프루기페르다)를 U+2-ACTX-Hv1a 및/또는 키티나아의 용량과 접촉시켜 단독 및 조합 효과를 시험하였다.
처리물
(1) 키티나아제. 키티나아제를 평가하기 위해, 트리코데르마 비리데 유래의 키티나아제를 사용하였다. 서열번호 620에 제시된 아미노산 서열을 갖는 키티나아제는 Sigma Aldrich(3050 Spruce Street, St Louis, MO 63103 U.S.A)(제품 번호 C8241-25UN; 로트 번호 128M4015V)에서 입수하였다.
(2) U+2-ACTX-Hv1a. "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다.
(3) 키티나아제 + U+2-ACTX-Hv1a. 키티나아제와 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 처리물에 기재된 바와 같이 준비/수득하고, 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기와 같았다: 조성물의 총 부피의, 0.5% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.01% w/v 키티나아제, 나머지는 물임.
(4) 대조군. 물.
식이 혼입 검정
하기 성분 농도를 함유하는3가지 액적(각각 3 μL)을 32웰 트레이의 트레이 내 5마리 신생 가을 거염벌레(스포도프테라 프루기페르다) 유충에 제시하였다:
(a) 키티나아제 0 μL/L(0% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 0 mg/mL(0% w/v); 수크로오스(10% w/v);
(b) 키티나아제 100 μL/L(0.01% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 0 mg/mL(0% w/v); 수크로오스(10% w/v);
(c) 키티나아제 0 μL/L(0% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 5 mg/mL(0.5% w/v); 수크로오스(10% w/v); 및
(d) 키티나아제 100 μL/L(0.01% w/v); U+2-ACTX-Hv1a 5 mg/mL(0.5% w/v); 수크로오스(10% w/v).
이어서, 3일 후 사멸률을 평가하였다.
도 14에 제시된 바와 같이, 미처리 대조군의 사멸률은 35%였다. 이는, 취약한 신생충의 사용, 및/또는 곤충을 사용한 식이 혼입 연구에서 일반적인 스트레스 및/또는 먹이 또는 영양소 결핍을 반영한 결과일 수 있다. 여기서, 키티나아제 단독은 대조군 처리에 비해 효과가 없었다(즉, 사멸률 35%). 따라서, 키티나아제 단독의 효과는 대조군에 비해 사멸률의 증가를 야기한다고 할 수 없다. 한편, U+2-ACTX-Hv1a는 곤충에 대해 75% 사멸률을 나타냈다. 그리고, 키티나아제와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합 처리에서는 사멸률에 대한 상가 효과보다 큰 효과가 관찰되었다(즉, 85%).
따라서, 본 실시예는, 키티나아제와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 12: 곤충 성장 조절제(아자디라크틴)와 U+2-ACTX-Hv1a
곤충 성장 조절제(IGR)는 유충 곤충이 다음 령으로 탈피하는 능력을 방해하는 작용을 한다. IGR의 작용 메커니즘(MoA)은 키틴 신타아제의 방해 및/또는 저해이다.
전술한 가설을 시험하기 위해, 옥수수 귀벌레(CEW)(헬리코베르파 제아) 신생충을 아자디라크틴, 및 아자디라크틴과 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물과 접촉시켰다. 아자디라크틴은 살충 활성이 있는 님오일 추출물에서 유도된 제형화된 살충제이다. 아자디라크틴의 화학식은 C35H44O16이고, 화학 구조는 도 15에 제시된 바와 같다.
처리물
(1) 아자디라크틴. 여기서, 아자디라크틴은 활성 성분인 아자디라크틴을 포함하는 상업적으로 입수 가능한 제품, NEEMIX® 4.5로 입수하였다. NEEMIX® 4.5(항목 번호 168600; 로트 번호 72371909; CAS 번호 11141-17-6)는 Certis USA L.L.C.(9145 Guilford Road Suite 175 Columbia, MD 21046)에서 입수하였다.
(2) U+2-ACTX-Hv1a. "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다.
(3) 아자디라크틴 + U+2-ACTX-Hv1a. 아자디라크틴과 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 처리물에 기재된 바와 같이 준비/수득하고, 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기와 같았다: 조성물의 총 부피의, 1% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.008% w/v 아자디라크틴, 나머지는 물임.
(4) 대조군. 물.
식이 혼입 검정
전술한 처리물은 하기와 같이 적용하였다:
(a) 0 μL/L 아자디라크틴(0% v/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군);
(b) 80 μL/L 아자디라크틴(0.008% v/v); 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v);
(c) 0 μL/L 아자디라크틴(0% v/v); 10 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v); 및
(c) 80 μL/L 아자디라크틴(0.008% v/v); 10 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(1% w/v).
생물검정 아레나는 128웰 트레이로 이루어져 있었다. 각각의 웰에 상기 처리물이 주입된 한천 기반 일반 인시목 식이 200 μL를 충전하였으며; 처리 당 16개 웰을 평가하였다(N = 16). 각각의 웰에 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 신생충 1마리를 위치시키고, 4일 후 생존을 평가하였다.
도 16에 제시된 바와 같이, 아자디라크틴 단독은 37.5% 사멸률을 나타냈다. U+2-ACTX-Hv1a 단독은 18.75% 사멸률을 나타냈다. 하지만, U+2-ACTX-Hv1a와 아자디라크틴의 조합물은 81.25% 사멸률을 나타냈다. 따라서, 아자디라크틴 단독에 비해 U+2-ACTX-Hv1a와 아자디라크틴의 모든 처리에서 더 높은 옥수수 귀벌레 사멸률이 관찰되었다.
따라서, 본 실시예는, 아자디라크틴과 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 13: 기타 비특이적 저해제(붕산)와 U+2-ACTX-Hv1a
기타 비특이적(다중부위) 저해제에는, 보레이트, 예컨대 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트 및 소듐 메타보레이트가 포함된다. 기타 비특이적 저해제의 효과를 평가하기 위해, 붕산 및/또는 U+2-ACTX-Hv1a를 외미거저리(알피토비우스 디아페리누스) 신생충에 대해 평가하였다.
처리물
(1) 붕산. 붕산(화학식 H3BO3)은 배급업체 VWR International, Inc.(Goshen Parkway 1310, P.O. Box 2656 West Chester, PA 19380-0906 www.vwr.com)를 통해 ThermoFisher Scientific에서 입수하였다(코드: 315181000; CAS 10043-35-3; EC: 233-139-2; 로트: A0254726).
(2) U+2-ACTX-Hv1a. "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다.
(3) 붕산 + U+2-ACTX-Hv1a. 붕산과 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 기재된 바와 같이 수득하고 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기로 이루어져 있었다: 조성물의 총 부피의, 0.1% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.25% w/v 붕산, 나머지는 물임.
(4) 대조군. 물.
식이 혼입 검정
처리 용액 및 농도는 하기와 같이 적용하였다:
(a) 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); 0 mg/mL 붕산(0% w/v)(대조군);
(b) 0 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v); 2.5 mg/mL 붕산(0.25% w/v);
(c) 1 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.1% w/v); 0 mg/mL 붕산(0% w/v); 및
(d) 1 mg/mL U+2-ACTX-Hv1a(0.1% w/v); 2.5 mg/mL 붕산(0.25% w/v).
생물검정 아레나는 128웰 트레이에서 수행하였다. 각각의 웰에 상기 처리물 중 하나가 주입된 한천 기반 남부 옥수수 뿌리벌레 식이 1 mL를 충전하였다. 처리 당 16개 웰을 충전하였다(N= 16). 이어서, 각각의 웰에 외미거저리(알피토비우스 디아페리누스) 신생충 1마리를 위치시키고, 4일에 걸쳐 생존을 평가하였다.
도 17에 제시된 바와 같이, 붕산 단독의 사멸률은 10.3%였고, U+2-ACTX-Hv1a 단독의 사멸률은 20%였다. 하지만, 붕산 또는 U+2-ACTX-Hv1a 단독의 사멸률과 극명하게 대조적으로, 붕산과 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물의 사멸률은 68.75%였다.
따라서, 본 실시예는, 붕산과 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 14: 곤충병원성 진균과 U+2-ACTX-Hv1a
뷰베리아 바시아나는 광범위한 곤충을 감염시키는 곤충병원성 진균이다. 뷰베리아 바시아나의 살충 활성은 그것이 분비하는 화합물에서 비롯된 것으로 보이며, 이는 결국 곤충 각피를 분해한다. 뷰베리아 바시아나에 의해 분비된 살충성 화합물 중 하나가 뷰베리신이다. 살충 활성이 알려진 3종의 뷰베리신이 존재한다: (1) 뷰베리신(C45H57N3O9); (2) 뷰베리신 A(C46H59N3O9); 및 (3) 뷰베리신 B(C47H61N3O9).
임의의 특정 이론에 구애됨 없이, 본원에 기재된 본 발명의 CRIP와 조합된 뷰베리아 바시아나에에 의해 생성된 화합물은, 섭취되는 경우, CRIP, 뷰베리신 및/또는 이들의 조합물의 생체이용률 및/또는 살충 효과를 증가시킬 수 있다고 가정되었다. 전술한 가설을 평가하기 위해, 코들링나방(시디아 포모넬라)을 U+2-ACTX-Hv1a 및/또는 뷰베리신의 용량과 접촉시켜 단독 및 조합 효과를 시험하였다.
처리물
(1) 뷰베리아 바시아나 독소. 뷰베리아 바시아나, 및 이로부터의 독소, 포자 및/또는 단백질을 시험하기 위해, BIOCERES® WP를 사용하였다. BIOCERES® WP는 20% 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자와 80% 기타/비활성 성분으로 구성된 제형화된 제품이다. BIOCERES® WP(로트 번호: 19206-LDBC-719-03; CAS: 63428-82-0)는 Anatis Bioprotection Inc.(278, rang Saint-Andre St-Jacques-le-Mineur, Quebec J0J 1Z0, Canada)에서 상업적으로 입수 가능하다.
(2) U+2-ACTX-Hv1a. "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다.
(3) 뷰베리아 바시아나 독소 + U+2-ACTX-Hv1a. 뷰베리아 바시아나 독소와 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 기재된 바와 같이 수득하고 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기로 이루어져 있었다: 조성물의 총 부피의, 0.2% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.12% w/v 뷰베리아 바시아나 독소, 나머지는 물임.
(4) 대조군. 물.
식이 혼입 검정
전술한 처리물은 하기와 같이 적용하였다:
(a) 0 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군);
(b) 1.2 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0.12% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v);
(c) 0 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소; 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v); 및
(d) 1.2 mg/mL 뷰베리아 바시아나 독소(0.12% w/v); 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v).
생물검정 아레나는 128웰 트레이에서 수행하였다. 각각의 웰에 상기 처리물 중 하나가 주입된 한천 기반 일반 인시목 식이 200 μL를 충전하였다. 처리 당 16개 웰을 충전하였다(N = 16, 처리 당 16개 웰). 이어서, 각각의 웰에 코들링나방(시디아 포모넬라) 신생충 1마리를 위치시키고, 7일에 걸쳐 생존을 평가하였다.
도 18에 제시된 바와 같이, 0 mg/mL의 BIOCERES® WP와 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(대조군)를 이용한 처리는 18.75% 사멸률을 나타냈다. 1.2 mg/mL의 BIOCERES® WP와 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a로 이루어진 처리물은 사멸을 초래하지 않았다. 0 mg/mL의 BIOCERES® WP와 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a를 이용한 처리는 대조군(18.75%)과 동일한 사멸률을 나타냈다. 놀랍게도, 1.2 mg/mL의 BIOCERES® WP와 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a를 조합한 처리는 50% 사멸률을 나타냈다.
따라서, 본 실시예는, BIOCERES® WP와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 15: 바큘로바이러스와 U+2-ACTX-Hv1a
바큘로바이러스과는 절지동물에 특이적인 바이러스과이다. 바큘로바이러스과 내에는, 시디아 포모넬라 과립병바이러스를 비롯하여 26종을 포함하는 베타바큘로바이러스로 알려진 속이 있다. 시디아 포모넬라 과립병바이러스(CpGV)는, 특히 시디아 포모넬라(일반적으로 코들링나방으로 알려짐)의 바이러스이다. 코들링나방 유충은 감염되기 위해서는 시디아 포모넬라 과립병바이러스의 바이러스 폐색체(OB: occlusion body)를 섭취해야 한다. 폐색체는 감염성 핵산 입자를 둘러싸고 보호하는 단백질 격자 또는 매트릭스이다.
(1) 시디아 포모넬라 과립병바이러스(CpGV). 시디아 포모넬라 과립병바이러스를 시험하기 위해, MADEX® HP를 사용하였다. MADEX® HP는 Andermatt Biocontrol AG(Stahlermatten 6, CH-6146 Grossdietwil, Switzerland; https://www.andermattbiocontrol.com/index.html)에서 제조되어, 미국에서 Certis USA LLC(9145 Guilford Road, Suite 175 Columbia, MD 21046) (https://www.certisusa.com/)를 통해 공급된다. MADEX® HP(EPA 등록 번호 69553-1; EPA 관리 번호 70051-CA-001; 로트 번호 31240799)는 하기 성분으로 이루어져 있다: 0.06% 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22; 및 99.94% 기타/비활성 성분.
(2) U+2-ACTX-Hv1a. "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다.
(3) CpGV + U+2-ACTX-Hv1a. CpGV와 U+2-ACTX-Hv1a를 상기 기재된 바와 같이 수득하고 조합하였다. 최종 조합 조성물은 하기로 이루어져 있었다: 조성물의 총 부피의, 0.2% w/v U+2-ACTX-Hv1a; 및 0.0.00585% w/v CpGV, 나머지는 물임.
(4) 대조군. 물.
식이 혼입 검정
전술한 처리물은 하기와 같이 적용하였다:
(a) 0 μL/L의 CpGV(0% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v)(대조군);
(b) 58.5 μL/L의 CpGV(0.00585% w/v); 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0% w/v);
(c) 0 μL/L의 CpGV(0% w/v); 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v); 및
(d) 58.5 μL/L의 CpGV(0.00585% w/v); 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(0.2% w/v).
생물검정 아레나는 128웰 트레이에서 수행하였다. 각각의 웰에 상기 처리물이 주입된 한천 기반 일반 인시목 식이 200 μL를 충전하였다. 이어서, 처리 당 16개 웰을 충전하였다(N= 16, 처리 당 16개 웰). 이어서, 각각의 웰에 코들링나방(시디아 포모넬라) 신생충 1마리를 위치시키고, 2일에 걸쳐 생존을 평가하였다.
도 19에 제시된 바와 같이, 0 μL/L의 MADEX® HP와 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a(대조군), 및 58.5 μL/L의 MADEX® HP와 0 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a를 이용한 처리는 모두 사멸률이 0%였다. 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a 단독을 사용한 경우 사멸률은 9%였다. 그리고, 58.5 μL/L의 MADEX® HP와 2 mg/mL의 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물의 사멸률은 38.5%였다.
따라서, 본 실시예는, MADEX® HP와 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물이 예상된 상가 효과보다 더 큰 결과를 생성하여, 예상치 못한 상조 효과를 유도하였음을 입증한다.
실시예 16: 예상치 못한 효과
전술한 실시예(즉, 실시예 1 내지 실시예 15)는 IA 또는 CRIP 단독 중 어느 하나의 상가 효과보다 큰 예상치 못한 효과가 나타났음을 보여준다. 실제로, 실시예 1 내지 실시예 15의 상가 효과보다 큰 예상치 못한 효과의 입증은, 상가 효과보다 큰 효과를 나타내지 않았던 하기 제시된 시험의 결과이다. 여기서, U+2-ACTX-Hv1a와, 노발루론, 나노입자 및 크리올라이트의 조합물은 상가 효과보다 큰 효과를 나타내지 않았다.
곤충 성장 조절제(IGR): 노발루론
곤충 성장 조절제(IGR)는 유충 곤충이 다음 령으로 탈피하는 능력을 방해하는 작용을 한다. 일반적으로, IGR의 작용 메커니즘은 곤충 내장에서 살충 펩타이드의 생체이용을 가능하게 할 수 있는 키틴 신타아제의 방해 및/또는 저해이다. 노발루론 또는 (±)-1-[3-클로로-4-(1,1,2-트리플루오로-2-트리플루오로-메톡시에톡시)페닐]-3-(2,6-디플루오로벤조일)우레아(CAS 번호 116714-46-6)는 IGR이다. 여기서, 본 발명자들은 살충 효과를 결정하기 위해 노발루론과 U+2-ACTX-Hv1a의 조합물을 시험하였다.
노발루론은 10% 노발루론과 90% 기타 성분으로 이루어진 Pedestal®의 형태로 입수하였다(OHP, Inc. P.O. Box 746 Bluffton, South Carolina, 29910 USA). 여기서, "GSQYCVPVDQPCSLNTQPCCDDATCTQERNENGHTVYYCRA"(서열번호 61)의 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a는 SPEAR®-Liquid Concentrate(로트 번호 14143019 Vestaron®, 4717 Campus Drive, Kalamazoo, MI 49008 USA)에서 입수하였다. Pedestal은 CHS1에 영향을 미치는 키틴 생합성의 저해제인 제형화된 살충제이다. 노발루론은 IRAC 15 군의 일부이다.
여기서, 하기 농도의 노발루론을 평가하는 처리를 시험하였다(U+2-ACTX-Hv1a 포함 또는 미포함):
(a) 80 μL/L의 노발루론(0.008% w/v);
(b) 8 μL/L의 노발루론(0.0008% w/v);
(c) 0.8 μL/L의 노발루론(0.00008% w/v); 및
(d) 0 μL/L의 노발루론(0% w/v).
생물검정 아레나는 하기와 같았다: 128웰 트레이를 배열하고, 여기서 각각의 웰에 상기 처리물이 주입된 한천 기반 일반 인시목 식이 200 μL를 충전하였다. 여기서, 처리 당 16개 웰을 충전하였다. 각각의 웰에 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 신생충 1마리를 위치시키고, 4일에 걸쳐 생존을 평가하였다.
도 20은 3일 후 사멸률 결과를 보여주는 그래프를 도시한 것이다. 여기에 나타난 바와 같이, 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 식이 혼입 검정에서 노발루론과 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다.
나노입자
나노입자는 마우스에서 융합막(tight junction) 이완을 유도하고, 인슐린의 경구 전달을 가능하게 한다. 인테그린이 나노입자에 의해 결합되면, 이는 MLCK 효소를 활성화시키는 신호전달 경로를 자극할 수 있다. 여기서, 5 ppt U+2-ACTX-Hv1a(0.5 mg/mL)(0.5% w/v) 포함 또는 미포함 나노입자 용액을 평가하였다. 여기서, 나노입자는 NanoXact 실리카 나노스피어(nanoCompsix, 4878 Ronson Ct Ste J, San Diego, CA 92111)의 형태로 입수하였다.
나노입자 농도는 하기와 같았다:
(a) 50 nm 아민화된 실리카(2700 ppm);
(b) 50 실리카(2575 ppm);
(c) 20 nm 실리카(1177 ppm); 및
(d) 10 nm 실리카(12500 ppm).
액적 생물검정 아레나를 한천, 납지(wax paper), 3 μL 나노입자 용액 및 헬리코베르파 제아(옥수수 귀벌레) 신생충 1마리가 포함된 128웰 트레이에서 수행하였다. 여기서, 처리 당 16개 웰(유충)을 평가하였고, 사멸 비율에 대해 3일 동안 매일 평가하였다.
"사멸 비율"은 실험 과정에 걸쳐 사멸한 개별 곤충의 비율을 나타낸다. 사멸 비율은 하기와 같은 식 (IV)에 따라 계산할 수 있다:
식 (IV)
3일 후 사멸률 결과가 도 21에 제시되어 있다. 제시된 바와 같이, 나노입자와 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다.
위독
위독 크리올라이트를 U+2-ACTX-Hv1a와 조합으로 평가하였다. 크리올라이트(Na3AlF6, 소듐 헥사플루오로알루미네이트)는 IRAC 군 8C: "기타 비특이적(다중부위) 저해제"이다. 크리올라이트는 곤충 내장에서 용해되며 플루오라이드 이온은 독성을 유발할 수 있지만, 척추동물(포유류 포함)과 같은 비표적에 대해서는 독성이 낮다.
크리올라이트 처리 농도를 하기와 같이, 10 ppt Spear(총 조성물의 1 mg/mL 또는 1% w/v) 포함 유무에 따라 평가하였다:
(a) 10000 ppm;
(b) 2000 ppm;
(c) 400 ppm; 및
(d) 0 ppm.
크리올라이트는 96% 크리올라이트(소듐 알루미노플루오라이드)와 4% 기타 성분으로 이루어진 크리올라이트의 상업적으로 입수 가능한 형태인 Prokil®의 형태로 입수하였다(Gowan®, 370 South Main Street, Yuma, Arizona 85364 USA).
생물검정 아레나는 하기와 같았다: 128웰 트레이를 배열하고, 각각의 웰에 상기 처리물이 주입된 한천 기반 일반 인시목 식이 200 μL를 충전하였다. 여기서, 처리 당 16개 웰을 충전하였다. 각각의 웰에 옥수수 귀벌레(헬리코베르파 제아) 신생충 1마리를 위치시키고, 4일에 걸쳐 생존을 평가하였다.
도 22에 제시된 바와 같이, 크리올라이트와 U+2-ACTX-Hv1a를 조합했을 때 상가 효과보다 더 크다는 증거는 없었다.
SEQUENCE LISTING
<110> Vestaron Corporation
<120> Insecticidal Combinations
<130> 225312-491452
<150> 63/019,219
<151> 2020-05-01
<160> 689
<170> PatentIn version 3.5
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<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-A8SdeltaG
<400> 26
gaaccagacg agatatgcag atcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacacag cttgtcacga ggctcagaaa 150
<210> 27
<211> 153
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9N
<400> 27
gaaccagacg agatatgcag agcaaacatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacacag cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 28
<211> 150
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9NdeltaG
<400> 28
gaaccagacg agatatgcag agcaaacatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacacag cttgtcacga ggctcagaaa 150
<210> 29
<211> 153
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-T11P
<400> 29
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg cctaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacacag cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 30
<211> 150
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-T11PdeltaG
<400> 30
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg cctaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacacag cttgtcacga ggctcagaaa 150
<210> 31
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> IGER
<400> 31
Ile Gly Glu Arg
1
<210> 32
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> EEKKN
<400> 32
Glu Glu Lys Lys Asn
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> ETMFKHGL
<400> 33
Glu Thr Met Phe Lys His Gly Leu
1 5
<210> 34
<211> 238
<212> PRT
<213> Aequorea victoria
<400> 34
Ala Ser Lys Gly Glu Glu Leu Phe Thr Gly Val Val Pro Ile Leu Val
1 5 10 15
Glu Leu Asp Gly Asp Val Asn Gly His Lys Phe Ser Val Ser Gly Glu
20 25 30
Gly Glu Gly Asp Ala Thr Tyr Gly Lys Leu Thr Leu Lys Phe Ile Cys
35 40 45
Thr Thr Gly Lys Leu Pro Val Pro Trp Pro Thr Leu Val Thr Thr Phe
50 55 60
Ser Tyr Gly Val Gln Cys Phe Ser Arg Tyr Pro Asp His Met Lys Arg
65 70 75 80
His Asp Phe Phe Lys Ser Ala Met Pro Glu Gly Tyr Val Gln Glu Arg
85 90 95
Thr Ile Ser Phe Lys Asp Asp Gly Asn Tyr Lys Thr Arg Ala Glu Val
100 105 110
Lys Phe Glu Gly Asp Thr Leu Val Asn Arg Ile Glu Leu Lys Gly Ile
115 120 125
Asp Phe Lys Glu Asp Gly Asn Ile Leu Gly His Lys Leu Glu Tyr Asn
130 135 140
Tyr Asn Ser His Asn Val Tyr Ile Thr Ala Asp Lys Gln Lys Asn Gly
145 150 155 160
Ile Lys Ala Asn Phe Lys Ile Arg His Asn Ile Glu Asp Gly Ser Val
165 170 175
Gln Leu Ala Asp His Tyr Gln Gln Asn Thr Pro Ile Gly Asp Gly Pro
180 185 190
Val Leu Leu Pro Asp Asn His Tyr Leu Ser Thr Gln Ser Ala Leu Ser
195 200 205
Lys Asp Pro Asn Glu Lys Arg Asp His Met Val Leu Leu Glu Phe Val
210 215 220
Thr Ala Ala Gly Ile Thr His Gly Met Asp Glu Leu Tyr Lys
225 230 235
<210> 35
<211> 157
<212> PRT
<213> Galanthus nivalis
<400> 35
Met Ala Lys Ala Ser Leu Leu Ile Leu Ala Thr Ile Phe Leu Gly Val
1 5 10 15
Ile Thr Pro Ser Cys Leu Ser Glu Asn Ile Leu Tyr Ser Gly Glu Thr
20 25 30
Leu Pro Thr Gly Gly Phe Leu Ser Ser Gly Ser Phe Val Phe Ile Met
35 40 45
Gln Glu Asp Cys Asn Leu Val Leu Tyr Asn Val Asp Lys Pro Ile Trp
50 55 60
Ala Thr Asn Thr Gly Gly Leu Ser Ser Asp Cys Ser Leu Ser Met Gln
65 70 75 80
Asn Asp Gly Asn Leu Val Val Phe Thr Pro Ser Asn Lys Pro Ile Trp
85 90 95
Ala Ser Asn Thr Asp Gly Gln Asn Gly Asn Tyr Val Cys Ile Leu Gln
100 105 110
Lys Asp Arg Asn Val Val Ile Tyr Gly Thr Asn Arg Trp Ala Thr Gly
115 120 125
Thr Tyr Thr Gly Ala Val Gly Ile Pro Glu Ser Pro Pro Ser Glu Lys
130 135 140
Tyr Pro Ser Ala Gly Lys Ile Lys Leu Val Thr Ala Lys
145 150 155
<210> 36
<211> 224
<212> PRT
<213> Juniperus ashei
<400> 36
Met Ala Arg Val Ser Glu Leu Ala Phe Leu Leu Ala Ala Thr Leu Ala
1 5 10 15
Ile Ser Leu His Met Gln Glu Ala Gly Val Val Lys Phe Asp Ile Lys
20 25 30
Asn Gln Cys Gly Tyr Thr Val Trp Ala Ala Gly Leu Pro Gly Gly Gly
35 40 45
Lys Arg Leu Asp Gln Gly Gln Thr Trp Thr Val Asn Leu Ala Ala Gly
50 55 60
Thr Ala Ser Ala Arg Phe Trp Gly Arg Thr Gly Cys Thr Phe Asp Ala
65 70 75 80
Ser Gly Lys Gly Ser Cys Gln Thr Gly Asp Cys Gly Gly Gln Leu Ser
85 90 95
Cys Thr Val Ser Gly Ala Val Pro Ala Thr Leu Ala Glu Tyr Thr Gln
100 105 110
Ser Asp Gln Asp Tyr Tyr Asp Val Ser Leu Val Asp Gly Phe Asn Ile
115 120 125
Pro Leu Ala Ile Asn Pro Thr Asn Ala Gln Cys Thr Ala Pro Ala Cys
130 135 140
Lys Ala Asp Ile Asn Ala Val Cys Pro Ser Glu Leu Lys Val Asp Gly
145 150 155 160
Gly Cys Asn Ser Ala Cys Asn Val Phe Lys Thr Asp Gln Tyr Cys Cys
165 170 175
Arg Asn Ala Tyr Val Asp Asn Cys Pro Ala Thr Asn Tyr Ser Lys Ile
180 185 190
Phe Lys Asn Gln Cys Pro Gln Ala Tyr Ser Tyr Ala Lys Asp Asp Thr
195 200 205
Ala Thr Phe Ala Cys Ala Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Ile Val Phe Cys
210 215 220
<210> 37
<211> 24
<212> PRT
<213> Hordeum vulgare
<400> 37
Met Ala Asn Lys His Leu Ser Leu Ser Leu Phe Leu Val Leu Leu Gly
1 5 10 15
Leu Ser Ala Ser Leu Ala Ser Gly
20
<210> 38
<211> 27
<212> PRT
<213> Nicotiana plumbaginifolia
<400> 38
Glu Met Gly Lys Met Ala Ser Leu Phe Ala Ser Leu Leu Val Val Leu
1 5 10 15
Val Ser Leu Ser Leu Ala Ser Glu Ser Ser Ala
20 25
<210> 39
<211> 26
<212> PRT
<213> Nicotiana plumbaginifolia
<400> 39
Met Gly Lys Met Ala Ser Leu Phe Ala Thr Phe Leu Val Val Leu Val
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ala Ser Glu Ser Ser Ala
20 25
<210> 40
<211> 78
<212> DNA
<213> Nicotiana plumbaginifolia
<400> 40
atgggtaaga tggcttctct gtttgcttct ctgctggttg ttctggtttc tctgtctctg 60
gcttctgaat cttctgct 78
<210> 41
<211> 78
<212> DNA
<213> Nicotiana plumbaginifolia
<400> 41
atgggtaaga tggcttctct gtttgctact tttctggttg ttctggtttc tctgtctctg 60
gcttctgaat cttctgct 78
<210> 42
<211> 224
<212> PRT
<213> Juniperus ashei
<400> 42
Lys Phe Asp Ile Lys Asn Gln Cys Gly Tyr Thr Val Trp Ala Ala Gly
1 5 10 15
Leu Pro Gly Gly Gly Lys Arg Leu Asp Gln Gly Gln Thr Trp Thr Val
20 25 30
Asn Leu Ala Ala Gly Thr Ala Ser Ala Arg Phe Trp Gly Arg Thr Gly
35 40 45
Cys Thr Phe Asp Ala Ser Gly Lys Gly Ser Cys Gln Thr Gly Asp Cys
50 55 60
Gly Gly Gln Leu Ser Cys Thr Val Ser Gly Ala Val Pro Ala Thr Leu
65 70 75 80
Ala Glu Tyr Thr Gln Ser Asp Gln Asp Tyr Tyr Asp Val Ser Leu Val
85 90 95
Asp Gly Phe Asn Ile Pro Leu Ala Ile Asn Pro Thr Asn Ala Gln Cys
100 105 110
Thr Ala Pro Ala Cys Lys Ala Asp Ile Asn Ala Val Cys Pro Ser Glu
115 120 125
Leu Lys Val Asp Gly Gly Cys Asn Ser Ala Cys Asn Val Phe Lys Thr
130 135 140
Asp Gln Tyr Cys Cys Arg Asn Ala Tyr Val Asp Asn Cys Pro Ala Thr
145 150 155 160
Asn Tyr Ser Lys Ile Phe Lys Asn Gln Cys Pro Gln Ala Tyr Ser Tyr
165 170 175
Ala Lys Asp Asp Thr Ala Thr Phe Ala Cys Ala Ser Gly Thr Asp Tyr
180 185 190
Ser Ile Val Phe Cys Met Ala Arg Val Ser Glu Leu Ala Phe Leu Leu
195 200 205
Ala Ala Thr Leu Ala Ile Ser Leu His Met Gln Glu Ala Gly Val Val
210 215 220
<210> 43
<211> 105
<212> PRT
<213> Galanthus nivalis
<400> 43
Asp Asn Ile Leu Tyr Ser Gly Glu Thr Leu Ser Thr Gly Glu Phe Leu
1 5 10 15
Asn Tyr Gly Ser Phe Val Phe Ile Met Gln Glu Asp Cys Asn Leu Val
20 25 30
Leu Tyr Asp Val Asp Lys Pro Ile Trp Ala Thr Asn Thr Gly Gly Leu
35 40 45
Ser Arg Ser Cys Phe Leu Ser Met Gln Thr Asp Gly Asn Leu Val Val
50 55 60
Tyr Asn Pro Ser Asn Lys Pro Ile Trp Ala Ser Asn Thr Gly Gly Gln
65 70 75 80
Asn Gly Asn Tyr Val Cys Ile Leu Gln Lys Asp Arg Asn Val Val Ile
85 90 95
Tyr Gly Thr Asp Arg Trp Ala Thr Gly
100 105
<210> 44
<211> 27
<212> PRT
<213> Anemonia viridis
<400> 44
Arg Ser Cys Cys Pro Cys Tyr Trp Gly Gly Cys Pro Trp Gly Gln Asn
1 5 10 15
Cys Tyr Pro Glu Gly Cys Ser Gly Pro Lys Val
20 25
<210> 45
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> AVPa
<400> 45
Lys Ser Cys Cys Pro Cys Tyr Trp Gly Gly Cys Pro Trp Gly Gln Asn
1 5 10 15
Cys Tyr Pro Glu Gly Cys Ser Gly Pro Lys Val
20 25
<210> 46
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> AVPa-C1
<400> 46
Arg Ser Cys Cys Pro Cys Tyr Trp Gly Gly Cys Pro Trp Gly Gln Asn
1 5 10 15
Cys Tyr Pro Glu Gly Cys Ser Gly Pro Lys
20 25
<210> 47
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> AVPb
<400> 47
Lys Ser Cys Cys Pro Cys Tyr Trp Gly Gly Cys Pro Trp Gly Gln Asn
1 5 10 15
Cys Tyr Pro Glu Gly Cys Ser Gly Pro Lys
20 25
<210> 48
<211> 68
<212> PRT
<213> Eratigena agrestis
<400> 48
Met Lys Leu Gln Leu Met Ile Cys Leu Val Leu Leu Pro Cys Phe Phe
1 5 10 15
Cys Glu Pro Asp Glu Ile Cys Arg Ala Arg Met Thr Asn Lys Glu Phe
20 25 30
Thr Tyr Lys Ser Asn Val Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala
35 40 45
Cys Glu Ala Glu Cys Phe Arg Asn Asp Val Tyr Thr Ala Cys His Glu
50 55 60
Ala Gln Lys Gly
65
<210> 49
<211> 51
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> T43A
<400> 49
Glu Pro Asp Glu Ile Cys Arg Ala Arg Met Thr Asn Lys Glu Phe Thr
1 5 10 15
Tyr Lys Ser Asn Val Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala Cys
20 25 30
Glu Ala Glu Cys Phe Arg Asn Asp Val Tyr Ala Ala Cys His Glu Ala
35 40 45
Gln Lys Gly
50
<210> 50
<211> 50
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> T43AdeltaG
<400> 50
Glu Pro Asp Glu Ile Cys Arg Ala Arg Met Thr Asn Lys Glu Phe Thr
1 5 10 15
Tyr Lys Ser Asn Val Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala Cys
20 25 30
Glu Ala Glu Cys Phe Arg Asn Asp Val Tyr Ala Ala Cys His Glu Ala
35 40 45
Gln Lys
50
<210> 51
<211> 51
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9Q/T43A
<400> 51
Glu Pro Asp Glu Ile Cys Arg Ala Gln Met Thr Asn Lys Glu Phe Thr
1 5 10 15
Tyr Lys Ser Asn Val Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala Cys
20 25 30
Glu Ala Glu Cys Phe Arg Asn Asp Val Tyr Ala Ala Cys His Glu Ala
35 40 45
Gln Lys Gly
50
<210> 52
<211> 50
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9Q/T43A/deltaG
<400> 52
Glu Pro Asp Glu Ile Cys Arg Ala Gln Met Thr Asn Lys Glu Phe Thr
1 5 10 15
Tyr Lys Ser Asn Val Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala Cys
20 25 30
Glu Ala Glu Cys Phe Arg Asn Asp Val Tyr Ala Ala Cys His Glu Ala
35 40 45
Gln Lys
50
<210> 53
<211> 49
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9Q/T43A/deltaG50-51
<400> 53
Glu Pro Asp Glu Ile Cys Arg Ala Gln Met Thr Asn Lys Glu Phe Thr
1 5 10 15
Tyr Lys Ser Asn Val Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala Cys
20 25 30
Glu Ala Glu Cys Phe Arg Asn Asp Val Tyr Ala Ala Cys His Glu Ala
35 40 45
Gln
<210> 54
<211> 153
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> T43A
<400> 54
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacgctg cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 55
<211> 150
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> T43AdeltaG
<400> 55
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacgctg cttgtcacga ggctcagaaa 150
<210> 56
<211> 153
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9Q/T43A
<400> 56
gaaccagacg agatatgcag agcacaaatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacgctg cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 57
<211> 150
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9Q/T43A/deltaG
<400> 57
gaaccagacg agatatgcag agcacaaatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacgctg cttgtcacga ggctcagaaa 150
<210> 58
<211> 147
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-R9Q/T43A/deltaG50-51
<400> 58
gaaccagacg agatatgcag agcacaaatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttacgctg cttgtcacga ggctcag 147
<210> 59
<211> 17
<212> PRT
<213> Eratigena agrestis
<400> 59
Met Lys Leu Gln Leu Met Ile Cys Leu Val Leu Leu Pro Cys Phe Phe
1 5 10 15
Cys
<210> 60
<211> 39
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 60
Gln Tyr Cys Val Pro Val Asp Gln Pro Cys Ser Leu Asn Thr Gln Pro
1 5 10 15
Cys Cys Asp Asp Ala Thr Cys Thr Gln Glu Arg Asn Glu Asn Gly His
20 25 30
Thr Val Tyr Tyr Cys Arg Ala
35
<210> 61
<211> 41
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> U+2-ACTX-Hv1a
<400> 61
Gly Ser Gln Tyr Cys Val Pro Val Asp Gln Pro Cys Ser Leu Asn Thr
1 5 10 15
Gln Pro Cys Cys Asp Asp Ala Thr Cys Thr Gln Glu Arg Asn Glu Asn
20 25 30
Gly His Thr Val Tyr Tyr Cys Arg Ala
35 40
<210> 62
<211> 37
<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 62
Ser Pro Thr Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn Glu Asn
1 5 10 15
Cys Cys Ser Gln Ser Cys Thr Phe Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr
20 25 30
Val Lys Arg Cys Asp
35
<210> 63
<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> Omega+2-ACTX-Hv1a
<400> 63
Gly Ser Ser Pro Thr Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn
1 5 10 15
Glu Asn Cys Cys Ser Gln Ser Cys Thr Phe Lys Glu Asn Glu Asn Gly
20 25 30
Asn Thr Val Lys Arg Cys Asp
35
<210> 64
<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> Kappa+2 ACTX-Hv1a
<400> 64
Gly Ser Ala Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala Ala Cys Cys
1 5 10 15
Pro Cys Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn Gly Val Ser
20 25 30
Tyr Cys Arg Lys Asp Glu Pro
35
<210> 65
<211> 49
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 65
Gly Ser Cys Ala Asp Ile Asn Gly Ala Cys Lys Ser Asp Cys Asp Cys
1 5 10 15
Cys Gly Asp Ser Val Thr Cys Asp Cys Tyr Trp Ser Asp Ser Cys Lys
20 25 30
Cys Arg Glu Ser Asn Phe Lys Ile Gly Met Ala Ile Arg Lys Lys Phe
35 40 45
Cys
<210> 66
<211> 33
<212> PRT
<213> Pandinus imperator
<400> 66
Gly Asp Cys Leu Pro His Leu Lys Arg Cys Lys Ala Asp Asn Asp Cys
1 5 10 15
Cys Gly Lys Lys Cys Lys Arg Arg Gly Thr Asn Ala Glu Lys Arg Cys
20 25 30
Arg
<210> 67
<211> 157
<212> PRT
<213> Galanthus nivalis
<400> 67
Met Ala Lys Ala Ser Leu Leu Ile Leu Ala Ala Ile Phe Leu Gly Val
1 5 10 15
Ile Thr Pro Ser Cys Leu Ser Asp Asn Ile Leu Tyr Ser Gly Glu Thr
20 25 30
Leu Ser Thr Gly Glu Phe Leu Asn Tyr Gly Ser Phe Val Phe Ile Met
35 40 45
Gln Glu Asp Cys Asn Leu Val Leu Tyr Asp Val Asp Lys Pro Ile Trp
50 55 60
Ala Thr Asn Thr Gly Gly Leu Ser Arg Ser Cys Phe Leu Ser Met Gln
65 70 75 80
Thr Asp Gly Asn Leu Val Val Tyr Asn Pro Ser Asn Lys Pro Ile Trp
85 90 95
Ala Ser Asn Thr Gly Gly Gln Asn Gly Asn Tyr Val Cys Ile Leu Gln
100 105 110
Lys Asp Arg Asn Val Val Ile Tyr Gly Thr Asp Arg Trp Ala Thr Gly
115 120 125
Thr His Thr Gly Leu Val Gly Ile Pro Ala Ser Pro Pro Ser Glu Lys
130 135 140
Tyr Pro Thr Ala Gly Lys Ile Lys Leu Val Thr Ala Lys
145 150 155
<210> 68
<211> 316
<212> PRT
<213> Sambucus nigra
<400> 68
Met Arg Val Ile Ala Ala Ala Met Leu Tyr Leu Tyr Ile Val Val Leu
1 5 10 15
Ala Ile Cys Ser Val Gly Ile Glu Gly Ile Glu Tyr Pro Ser Val Ser
20 25 30
Phe Asn Leu Ala Gly Ala Lys Ser Ala Thr Trp Asp Phe Leu Arg Met
35 40 45
Pro Thr Ser Arg Asn Gly Tyr Asp Asp Gly Glu Pro Ile Thr Gly Asn
50 55 60
Ile Val Gly Arg Asp Gly Leu Cys Val Asp Val Arg Asn Gly Tyr Asp
65 70 75 80
Thr Asp Gly Thr Pro Ile Gln Leu Trp Pro Cys Gly Thr Gln Arg Asn
85 90 95
Gln Gln Trp Thr Phe His Thr Asp Asp Thr Ile Arg Ser Met Gly Lys
100 105 110
Cys Met Thr Ala Asn Gly Leu Asn Asn Gly Gly Asn Ile Met Ile Phe
115 120 125
Asn Cys Ser Thr Ala Val Glu Asn Ala Ile Lys Trp Glu Val Thr Ile
130 135 140
Asp Gly Ser Ile Ile Asn Pro Ser Ser Gly Leu Val Ile Thr Ala Pro
145 150 155 160
Ser Ala Ala Ser Arg Thr Ile Leu Leu Leu Gln Asn Asn Ile Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Gln Gly Trp Thr Val Ser Asn Asn Val Gln Pro Ile Val Ala
180 185 190
Ser Ile Val Gly Phe Arg Glu Met Cys Leu Gln Ala Asn Gly Glu Asn
195 200 205
Asn Gly Val Trp Met Glu Asp Cys Glu Ala Thr Ser Leu Gln Gln Gln
210 215 220
Trp Ala Leu Phe Gly Asp Arg Thr Ile Arg Val Asn Ser Asn Arg Gly
225 230 235 240
Leu Cys Val Thr Thr Asn Gly Tyr Asn Ser Arg Asp Leu Ile Ile Ile
245 250 255
Leu Lys Cys Gln Gly Leu Pro Ser Gln Arg Trp Phe Phe Asn Ser Asp
260 265 270
Gly Ala Ile Val Asn Pro Lys Ser Lys Leu Val Met Asp Val Lys Ser
275 280 285
Ser Asn Val Ser Leu Arg Glu Ile Ile Ile Tyr Pro Ala Thr Gly Arg
290 295 300
Pro Asn Gln Gln Trp Val Thr Gln Val Leu Pro Ser
305 310 315
<210> 69
<211> 287
<212> PRT
<213> Maackia amurensis
<400> 69
Met Ala Thr Ser Asn Ser Lys Pro Thr Gln Val Leu Leu Ala Thr Phe
1 5 10 15
Leu Thr Phe Phe Phe Leu Leu Leu Asn Asn Val Asn Ser Ser Asp Glu
20 25 30
Leu Ser Phe Thr Ile Asn Asn Phe Val Pro Asn Glu Ala Asp Leu Leu
35 40 45
Phe Gln Gly Glu Ala Ser Val Ser Ser Thr Gly Val Leu Gln Leu Thr
50 55 60
Arg Val Glu Asn Gly Gln Pro Gln Lys Tyr Ser Val Gly Arg Ala Leu
65 70 75 80
Tyr Ala Ala Pro Val Arg Ile Trp Asp Asn Thr Thr Gly Ser Val Ala
85 90 95
Ser Phe Ser Thr Ser Phe Thr Phe Val Val Lys Ala Pro Asn Pro Asp
100 105 110
Ile Thr Ser Asp Gly Leu Ala Phe Tyr Leu Ala Pro Pro Asp Ser Gln
115 120 125
Ile Pro Ser Gly Ser Val Ser Lys Tyr Leu Gly Leu Phe Asn Asn Ser
130 135 140
Asn Ser Asp Ser Ser Asn Gln Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr
145 150 155 160
Phe Ala His Ser Tyr Asp Pro Trp Asp Pro Asn Tyr Arg His Ile Gly
165 170 175
Ile Asp Val Asn Gly Ile Glu Ser Ile Lys Thr Val Gln Trp Asp Trp
180 185 190
Ile Asn Gly Gly Val Ala Phe Ala Thr Ile Thr Tyr Leu Ala Pro Asn
195 200 205
Lys Thr Leu Ile Ala Ser Leu Val Tyr Pro Ser Asn Gln Thr Thr Phe
210 215 220
Ser Val Ala Ala Ser Val Asp Leu Lys Glu Ile Leu Pro Glu Trp Val
225 230 235 240
Arg Val Gly Phe Ser Ala Ala Thr Gly Tyr Pro Thr Glu Val Glu Thr
245 250 255
His Asp Val Leu Ser Trp Ser Phe Thr Ser Thr Leu Glu Ala Asn Cys
260 265 270
Asp Ala Ala Thr Glu Asn Asn Val His Ile Ala Arg Tyr Thr Ala
275 280 285
<210> 70
<211> 239
<212> PRT
<213> Erythrina cristagalli
<400> 70
Val Glu Thr Ile Ser Phe Ser Phe Ser Glu Phe Glu Pro Gly Asn Asp
1 5 10 15
Asn Leu Thr Leu Gln Gly Ala Ala Leu Ile Thr Gln Ser Gly Val Leu
20 25 30
Gln Leu Thr Lys Ile Asn Gln Asn Gly Met Pro Ala Trp Asp Ser Thr
35 40 45
Gly Arg Thr Leu Tyr Thr Lys Pro Val His Met Trp Asp Ser Thr Thr
50 55 60
Gly Thr Val Ala Ser Phe Glu Thr Arg Phe Ser Phe Ser Ile Glu Gln
65 70 75 80
Pro Tyr Thr Arg Pro Leu Pro Ala Asp Gly Leu Val Phe Phe Met Gly
85 90 95
Pro Thr Lys Ser Lys Pro Ala Gln Gly Tyr Gly Tyr Leu Gly Val Phe
100 105 110
Asn Asn Ser Lys Gln Asp Asn Ser Tyr Gln Thr Leu Ala Val Glu Phe
115 120 125
Asp Thr Phe Ser Asn Pro Trp Asp Pro Pro Gln Val Pro His Ile Gly
130 135 140
Ile Asp Val Asn Ser Ile Arg Ser Ile Lys Thr Gln Pro Phe Gln Leu
145 150 155 160
Asp Asn Gly Gln Val Ala Asn Val Val Ile Lys Tyr Asp Ala Pro Ser
165 170 175
Lys Ile Leu His Val Val Leu Val Tyr Pro Ser Ser Gly Ala Ile Tyr
180 185 190
Thr Ile Ala Glu Ile Val Asp Val Lys Gln Val Leu Pro Asp Trp Val
195 200 205
Asp Val Gly Leu Ser Gly Ala Thr Gly Ala Gln Arg Asp Ala Ala Glu
210 215 220
Thr His Asp Val Tyr Ser Trp Ser Phe Gln Ala Ser Leu Pro Glu
225 230 235
<210> 71
<211> 540
<212> PRT
<213> Ricinus communis
<400> 71
Ile Phe Pro Lys Gln Tyr Pro Ile Ile Asn Phe Thr Thr Ala Asp Ala
1 5 10 15
Thr Val Glu Ser Tyr Thr Asn Phe Ile Arg Ala Val Arg Ser His Leu
20 25 30
Thr Thr Gly Ala Asp Val Arg His Glu Ile Pro Val Leu Pro Asn Arg
35 40 45
Val Gly Leu Pro Ile Ser Gln Arg Phe Ile Leu Val Glu Leu Ser Asn
50 55 60
His Ala Glu Leu Ser Val Thr Leu Ala Leu Asp Val Thr Asn Ala Tyr
65 70 75 80
Val Val Gly Cys Arg Ala Gly Asn Ser Ala Tyr Phe Phe His Pro Asp
85 90 95
Asn Gln Glu Asp Ala Glu Ala Ile Thr His Leu Phe Thr Asp Val Gln
100 105 110
Asn Ser Phe Thr Phe Ala Phe Gly Gly Asn Tyr Asp Arg Leu Glu Gln
115 120 125
Leu Gly Gly Leu Arg Glu Asn Ile Glu Leu Gly Thr Gly Pro Leu Glu
130 135 140
Asp Ala Ile Ser Ala Leu Tyr Tyr Tyr Ser Thr Cys Gly Thr Gln Ile
145 150 155 160
Pro Thr Leu Ala Arg Ser Phe Met Val Cys Ile Gln Met Ile Ser Glu
165 170 175
Ala Ala Arg Phe Gln Tyr Ile Glu Gly Glu Met Arg Thr Arg Ile Arg
180 185 190
Tyr Asn Arg Arg Ser Ala Pro Asp Pro Ser Val Ile Thr Leu Glu Asn
195 200 205
Ser Trp Gly Arg Leu Ser Thr Ala Ile Gln Glu Ser Asn Gln Gly Ala
210 215 220
Phe Ala Ser Pro Ile Gln Leu Gln Arg Arg Asn Gly Ser Lys Phe Asn
225 230 235 240
Val Tyr Asp Val Ser Ile Leu Ile Pro Ile Ile Ala Leu Met Val Tyr
245 250 255
Arg Cys Ala Pro Pro Pro Ser Ser Gln Phe Ser Leu Leu Ile Arg Pro
260 265 270
Val Val Pro Asn Phe Asn Ala Asp Val Cys Met Asp Pro Glu Pro Ile
275 280 285
Val Arg Ile Val Gly Arg Asn Gly Leu Cys Val Asp Val Thr Gly Glu
290 295 300
Glu Phe Phe Asp Gly Asn Pro Ile Gln Leu Trp Pro Cys Lys Ser Asn
305 310 315 320
Thr Asp Trp Asn Gln Leu Trp Thr Leu Arg Lys Asp Ser Thr Ile Arg
325 330 335
Ser Asn Gly Lys Cys Leu Thr Ile Ser Lys Ser Ser Pro Arg Gln Gln
340 345 350
Val Val Ile Tyr Asn Cys Ser Thr Ala Thr Val Gly Ala Thr Arg Trp
355 360 365
Gln Ile Trp Asp Asn Arg Thr Ile Ile Asn Pro Arg Ser Gly Leu Val
370 375 380
Leu Ala Ala Thr Ser Gly Asn Ser Gly Thr Lys Leu Thr Val Gln Thr
385 390 395 400
Asn Ile Tyr Ala Val Ser Gln Gly Trp Leu Pro Thr Asn Asn Thr Gln
405 410 415
Pro Phe Val Thr Thr Ile Val Gly Leu Tyr Gly Met Cys Leu Gln Ala
420 425 430
Asn Ser Gly Lys Val Trp Leu Glu Asp Cys Thr Ser Glu Lys Ala Glu
435 440 445
Gln Gln Trp Ala Leu Tyr Ala Asp Gly Ser Ile Arg Pro Gln Gln Asn
450 455 460
Arg Asp Asn Cys Leu Thr Thr Asp Ala Asn Ile Lys Gly Thr Val Val
465 470 475 480
Lys Ile Leu Ser Cys Gly Pro Ala Ser Ser Gly Gln Arg Trp Met Phe
485 490 495
Lys Asn Asp Gly Thr Ile Leu Asn Leu Tyr Asn Gly Leu Val Leu Asp
500 505 510
Val Arg Arg Ser Asp Pro Ser Leu Lys Gln Ile Ile Val His Pro Phe
515 520 525
His Gly Asn Leu Asn Gln Ile Trp Leu Pro Leu Phe
530 535 540
<210> 72
<211> 273
<212> PRT
<213> Arachis hypogaea
<400> 72
Met Lys Pro Phe Cys Val Phe Leu Thr Phe Phe Leu Leu Leu Ala Ala
1 5 10 15
Ser Ser Lys Lys Val Asp Ser Ala Glu Thr Val Ser Phe Asn Phe Asn
20 25 30
Ser Phe Ser Glu Gly Asn Pro Ala Ile Asn Phe Gln Gly Asp Val Thr
35 40 45
Val Leu Ser Asn Gly Asn Ile Gln Leu Thr Asn Leu Asn Lys Val Asn
50 55 60
Ser Val Gly Arg Val Leu Tyr Ala Met Pro Val Arg Ile Trp Ser Ser
65 70 75 80
Ala Thr Gly Asn Val Ala Ser Phe Leu Thr Ser Phe Ser Phe Glu Met
85 90 95
Lys Asp Ile Lys Asp Tyr Asp Pro Ala Asp Gly Ile Ile Phe Phe Ile
100 105 110
Ala Pro Glu Asp Thr Gln Ile Pro Ala Gly Ser Ile Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Leu Gly Val Ser Asp Thr Lys Gly Ala Gly His Phe Val Gly Val Glu
130 135 140
Phe Asp Thr Tyr Ser Asn Ser Glu Tyr Asn Asp Pro Pro Thr Asp His
145 150 155 160
Val Gly Ile Asp Val Asn Ser Val Asp Ser Val Lys Thr Val Pro Trp
165 170 175
Asn Ser Val Ser Gly Ala Val Val Lys Val Thr Val Ile Tyr Asp Ser
180 185 190
Ser Thr Lys Thr Leu Ser Val Ala Val Thr Asn Asp Asn Gly Asp Ile
195 200 205
Thr Thr Ile Ala Gln Val Val Asp Leu Lys Ala Lys Leu Pro Glu Arg
210 215 220
Val Lys Phe Gly Phe Ser Ala Ser Gly Ser Leu Gly Gly Arg Gln Ile
225 230 235 240
His Leu Ile Arg Ser Trp Ser Phe Thr Ser Thr Leu Ile Thr Thr Thr
245 250 255
Arg Arg Ser Ile Asp Asn Asn Glu Lys Lys Ile Met Asn Met Ala Ser
260 265 270
Ala
<210> 73
<211> 212
<212> PRT
<213> Triticum aestivum
<400> 73
Met Lys Met Met Ser Thr Arg Ala Leu Ala Leu Gly Ala Ala Ala Val
1 5 10 15
Leu Ala Phe Ala Ala Ala Thr Ala Gln Ala Gln Arg Cys Gly Glu Gln
20 25 30
Gly Ser Asn Met Glu Cys Pro Asn Asn Leu Cys Cys Ser Gln Tyr Gly
35 40 45
Tyr Cys Gly Met Gly Gly Asp Tyr Cys Gly Lys Gly Cys Gln Asn Gly
50 55 60
Ala Cys Trp Thr Ser Lys Arg Cys Gly Ser Gln Ala Gly Gly Ala Thr
65 70 75 80
Cys Thr Asn Asn Gln Cys Cys Ser Gln Tyr Gly Tyr Cys Gly Phe Gly
85 90 95
Ala Glu Tyr Cys Gly Ala Gly Cys Gln Gly Gly Pro Cys Arg Ala Asp
100 105 110
Ile Lys Cys Gly Ser Gln Ala Gly Gly Lys Leu Cys Pro Asn Asn Leu
115 120 125
Cys Cys Ser Gln Trp Gly Phe Cys Gly Leu Gly Ser Glu Phe Cys Gly
130 135 140
Gly Gly Cys Gln Ser Gly Ala Cys Ser Thr Asp Lys Pro Cys Gly Lys
145 150 155 160
Asp Ala Gly Gly Arg Val Cys Thr Asn Asn Tyr Cys Cys Ser Lys Trp
165 170 175
Gly Ser Cys Gly Ile Gly Pro Gly Tyr Cys Gly Ala Gly Cys Gln Ser
180 185 190
Gly Gly Cys Asp Gly Val Phe Ala Glu Ala Ile Thr Ala Asn Ser Thr
195 200 205
Leu Leu Gln Glu
210
<210> 74
<211> 290
<212> PRT
<213> Canavalia ensiformis
<400> 74
Met Ala Ile Ser Lys Lys Ser Ser Leu Phe Leu Pro Ile Phe Thr Phe
1 5 10 15
Ile Thr Met Phe Leu Met Val Val Asn Lys Val Ser Ser Ser Thr His
20 25 30
Glu Thr Asn Ala Leu His Phe Met Phe Asn Gln Phe Ser Lys Asp Gln
35 40 45
Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly Asp Ala Thr Thr Gly Thr Asp Gly Asn
50 55 60
Leu Glu Leu Thr Arg Val Ser Ser Asn Gly Ser Pro Gln Gly Ser Ser
65 70 75 80
Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser
85 90 95
Ala Val Val Ala Ser Phe Glu Ala Thr Phe Thr Phe Leu Ile Lys Ser
100 105 110
Pro Asp Ser His Pro Ala Asp Gly Ile Ala Phe Phe Ile Ser Asn Ile
115 120 125
Asp Ser Ser Ile Pro Ser Gly Ser Thr Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe
130 135 140
Pro Asp Ala Asn Val Ile Arg Asn Ser Thr Thr Ile Asp Phe Asn Ala
145 150 155 160
Ala Tyr Asn Ala Asp Thr Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr Pro
165 170 175
Asn Thr Asp Ile Gly Asp Pro Ser Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile
180 185 190
Lys Ser Val Arg Ser Lys Lys Thr Ala Lys Trp Asn Met Gln Asn Gly
195 200 205
Lys Val Gly Thr Ala His Ile Ile Tyr Asn Ser Val Asp Lys Arg Leu
210 215 220
Ser Ala Val Val Ser Tyr Pro Asn Ala Asp Ser Ala Thr Val Ser Tyr
225 230 235 240
Asp Val Asp Leu Asp Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu
245 250 255
Ser Ala Ser Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp
260 265 270
Ser Phe Thr Ser Lys Leu Lys Ser Asn Glu Ile Pro Asp Ile Ala Thr
275 280 285
Val Val
290
<210> 75
<211> 144
<212> PRT
<213> Ananas comosus
<400> 75
Ser Gly Leu Val Lys Leu Gly Leu Trp Gly Gly Asn Glu Gly Thr Leu
1 5 10 15
Gln Asp Ile Asp Gly His Pro Thr Arg Leu Thr Lys Ile Val Ile Arg
20 25 30
Ser Ala His Ala Ile Asp Ala Leu Gln Phe Asp Tyr Val Glu Asp Gly
35 40 45
Lys Thr Phe Ala Ala Gly Gln Trp Gly Gly Asn Gly Gly Lys Ser Asp
50 55 60
Thr Ile Glu Phe Gln Pro Gly Glu Tyr Leu Ile Ala Ile Lys Gly Thr
65 70 75 80
Thr Gly Ala Leu Gly Ala Val Thr Asn Leu Val Arg Ser Leu Thr Phe
85 90 95
Ile Ser Asn Met Arg Thr Tyr Gly Pro Phe Gly Leu Glu His Gly Thr
100 105 110
Pro Phe Ser Val Pro Val Ala Ser Gly Arg Ile Val Ala Phe Tyr Gly
115 120 125
Arg Phe Gly Ser Leu Val Asp Ala Phe Gly Ile Tyr Leu Met Pro Tyr
130 135 140
<210> 76
<211> 54
<212> PRT
<213> Lathyrus hirsutus
<400> 76
Val Thr Ser Tyr Thr Leu Asn Glu Val Val Pro Leu Lys Asp Val Val
1 5 10 15
Pro Glu Trp Val Arg Ile Gly Phe Ser Ala Thr Thr Gly Ala Glu Phe
20 25 30
Ala Ala His Glu Val Leu Ser Trp Ser Phe His Ser Glu Leu Gly Gly
35 40 45
Thr Ser Ala Ser Lys Gln
50
<210> 77
<211> 281
<212> PRT
<213> Canavalia bonariensis
<400> 77
Met Ala Ile Ser Lys Lys Ser Ser Leu Tyr Leu Pro Ile Phe Thr Phe
1 5 10 15
Ile Thr Met Leu Leu Met Val Val Asn Lys Val Ser Ser Ser Thr Ala
20 25 30
Asp Ala Asn Ala Leu His Phe Thr Phe Asn Gln Phe Ser Lys Asp Gln
35 40 45
Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly Asp Ala Thr Thr Gly Thr Asp Gly Asn
50 55 60
Leu Glu Leu Thr Arg Val Ser Ser Asn Gly Ser Pro Gln Gly Asn Ser
65 70 75 80
Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser
85 90 95
Ala Val Val Ala Ser Phe Asp Ala Thr Phe Lys Phe Leu Ile Lys Ser
100 105 110
Pro Asp Ser Glu Pro Ala Asp Gly Ile Thr Phe Phe Ile Ala Asn Ile
115 120 125
Asp Ser Ser Ile Pro Ser Gly Ser Gly Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe
130 135 140
Pro Asp Ala Asn Ile Ile Lys Asn Ser Thr Thr Ile Asp Phe Asn Ala
145 150 155 160
Ala Tyr Asn Ala Asp Thr Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr Pro
165 170 175
Asn Thr Asp Ile Gly Asp Pro Asn Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile
180 185 190
Lys Ser Ile Arg Ser Lys Lys Thr Thr Arg Trp Asn Ile Gln Asn Gly
195 200 205
Lys Val Gly Thr Ala His Ile Asn Tyr Asn Ser Val Gly Lys Arg Leu
210 215 220
Ser Ala Ile Val Ser Tyr Pro Asn Ser Asp Ser Ala Thr Val Ser Tyr
225 230 235 240
Asp Val Asp Leu Asp Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu
245 250 255
Ser Ala Thr Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp
260 265 270
Ser Phe Thr Ser Lys Leu Lys Ser Asn
275 280
<210> 78
<211> 237
<212> PRT
<213> Canavalia grandiflora
<400> 78
Ala Asp Thr Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr Pro Asn Thr Asp
1 5 10 15
Ile Gly Asp Pro Asn Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile Lys Ser Ile
20 25 30
Arg Ser Lys Lys Ile Ala Lys Trp Asn Met Gln Asp Gly Lys Val Ala
35 40 45
Thr Ala His Ile Ile Tyr Asn Ser Val Gly Lys Arg Leu Ser Ala Val
50 55 60
Val Ser Tyr Pro Asn Ala Asp Ser Ala Thr Val Ser Tyr Asp Val Asp
65 70 75 80
Leu Asp Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu Ser Ala Thr
85 90 95
Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp Ser Phe Thr
100 105 110
Ser Lys Leu Lys Ser Asn Ser Thr Ala Glu Thr Asn Ala Leu His Phe
115 120 125
Thr Phe Asn Gln Phe Thr Lys Asp Gln Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly
130 135 140
Asp Ala Thr Thr Asp Ser Asp Gly Asn Leu Gln Leu Thr Arg Val Ser
145 150 155 160
Ser Asp Gly Thr Pro Gln Gly Asn Ser Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr
165 170 175
Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser Ala Val Val Ala Ser Phe Asp
180 185 190
Ala Thr Phe Thr Phe Leu Ile Lys Ser Pro Asp Ser Asp Pro Ala Asp
195 200 205
Gly Ile Thr Phe Phe Ile Ser Asn Met Asp Ser Thr Ile Pro Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe Pro Asp Ala Asn
225 230 235
<210> 79
<211> 237
<212> PRT
<213> Cymbosema roseum
<400> 79
Ala Asp Thr Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Ser Tyr Pro Asn Thr Asp
1 5 10 15
Ile Gly Asp Pro Ser Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile Lys Ser Ile
20 25 30
Arg Ser Lys Ser Thr Ala Arg Trp Asn Met Gln Thr Gly Lys Val Gly
35 40 45
Thr Ala His Ile Ser Tyr Asn Ser Val Ala Lys Arg Leu Thr Ala Val
50 55 60
Val Ser Tyr Ser Gly Ser Ser Ser Thr Thr Val Ser Tyr Asp Val Asp
65 70 75 80
Leu Asn Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu Ser Ala Thr
85 90 95
Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp Ser Phe Thr
100 105 110
Ser Lys Leu Lys Thr Asn Ser Ile Ala Asp Ala Asn Ala Leu His Phe
115 120 125
Ser Phe His Gln Phe Thr Gln Asn Pro Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly
130 135 140
Asp Ala Thr Thr Asp Ser Asp Gly Asn Leu Glu Leu Thr Lys Val Ser
145 150 155 160
Ser Ser Gly Ser Pro Gln Gly Ser Ser Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr
165 170 175
Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser Ala Val Val Ala Ser Phe Asp
180 185 190
Ala Thr Phe Thr Phe Leu Ile Lys Ser Pro Asp Ser Glu Pro Ala Asp
195 200 205
Gly Ile Thr Phe Phe Ile Ala Asn Thr Asp Thr Ser Ile Pro Ser Gly
210 215 220
Ser Ser Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe Pro Asp Ala Asn
225 230 235
<210> 80
<211> 564
<212> PRT
<213> Viscum album
<400> 80
Met Asn Gly His Leu Ala Ser Arg Arg Ala Trp Val Trp Tyr Phe Leu
1 5 10 15
Met Leu Gly Gln Val Phe Gly Ala Thr Val Lys Ala Glu Thr Lys Phe
20 25 30
Ser Tyr Glu Arg Leu Arg Leu Arg Val Thr His Gln Thr Thr Gly Glu
35 40 45
Glu Tyr Phe Arg Phe Ile Thr Leu Leu Arg Asp Tyr Val Ser Ser Gly
50 55 60
Ser Phe Ser Asn Glu Ile Pro Leu Leu Arg Gln Ser Thr Ile Pro Val
65 70 75 80
Ser Asp Ala Gln Arg Phe Val Leu Val Glu Leu Thr Asn Glu Gly Gly
85 90 95
Asp Ser Ile Thr Ala Ala Ile Asp Val Thr Asn Leu Tyr Val Val Ala
100 105 110
Tyr Gln Ala Gly Asp Gln Ser Tyr Phe Leu Arg Asp Ala Pro Arg Gly
115 120 125
Ala Glu Thr His Leu Phe Thr Gly Thr Thr Arg Ser Ser Leu Pro Phe
130 135 140
Asn Gly Ser Tyr Pro Asp Leu Glu Arg Tyr Ala Gly His Arg Asp Gln
145 150 155 160
Ile Pro Leu Gly Ile Asp Gln Leu Ile Gln Ser Val Thr Ala Leu Arg
165 170 175
Phe Pro Gly Gly Ser Thr Arg Thr Gln Ala Arg Ser Ile Leu Ile Leu
180 185 190
Ile Gln Met Ile Ser Glu Ala Ala Arg Phe Asn Pro Ile Leu Trp Arg
195 200 205
Ala Arg Gln Tyr Ile Asn Ser Gly Ala Ser Phe Leu Pro Asp Val Tyr
210 215 220
Met Leu Glu Leu Glu Thr Ser Trp Gly Gln Gln Ser Thr Gln Val Gln
225 230 235 240
Gln Ser Thr Asp Gly Val Phe Asn Asn Pro Ile Arg Leu Ala Ile Pro
245 250 255
Pro Gly Asn Phe Val Thr Leu Thr Asn Val Arg Asp Val Ile Ala Ser
260 265 270
Leu Ala Ile Met Leu Phe Val Cys Gly Glu Arg Pro Ser Ser Ser Asp
275 280 285
Val Arg Tyr Trp Pro Leu Val Ile Arg Pro Val Ile Ala Asp Asp Val
290 295 300
Thr Cys Ser Ala Ser Glu Pro Thr Val Arg Ile Val Gly Arg Asn Gly
305 310 315 320
Met Cys Val Asp Val Arg Asp Asp Asp Phe His Asp Gly Asn Gln Ile
325 330 335
Gln Leu Trp Pro Ser Lys Ser Asn Asn Asp Pro Asn Gln Leu Trp Thr
340 345 350
Ile Lys Arg Asp Gly Thr Ile Arg Ser Asn Gly Ser Cys Leu Thr Thr
355 360 365
Tyr Gly Tyr Thr Ala Gly Val Tyr Val Met Ile Phe Asp Cys Asn Thr
370 375 380
Ala Val Arg Glu Ala Thr Leu Trp Glu Ile Trp Gly Asn Gly Thr Ile
385 390 395 400
Ile Asn Pro Arg Ser Asn Leu Val Leu Ala Ala Ser Ser Gly Ile Lys
405 410 415
Gly Thr Thr Leu Thr Val Gln Thr Leu Asp Tyr Thr Leu Gly Gln Gly
420 425 430
Trp Leu Ala Gly Asn Asp Thr Ala Pro Arg Glu Val Thr Ile Tyr Gly
435 440 445
Phe Arg Asp Leu Cys Met Glu Ser Asn Gly Gly Ser Val Trp Val Glu
450 455 460
Thr Cys Val Ile Ser Gln Gln Asn Gln Arg Trp Ala Leu Tyr Gly Asp
465 470 475 480
Gly Ser Ile Arg Pro Lys Gln Asn Gln Asp Gln Cys Leu Thr Cys Gly
485 490 495
Arg Asp Ser Val Ser Thr Val Ile Asn Ile Val Ser Cys Ser Ala Gly
500 505 510
Ser Ser Gly Gln Arg Trp Val Phe Thr Asn Glu Gly Ala Ile Leu Asn
515 520 525
Leu Lys Asn Gly Leu Ala Met Asp Val Ala Gln Ala Asn Pro Lys Leu
530 535 540
Arg Arg Ile Ile Ile Tyr Pro Ala Thr Gly Lys Pro Asn Gln Met Trp
545 550 555 560
Leu Pro Val Pro
<210> 81
<211> 250
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 81
Met Ala Asp Asn Phe Ser Leu His Asp Ala Leu Ser Gly Ser Gly Asn
1 5 10 15
Pro Asn Pro Gln Gly Trp Pro Gly Ala Trp Gly Asn Gln Pro Ala Gly
20 25 30
Ala Gly Gly Tyr Pro Gly Ala Ser Tyr Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Gln
35 40 45
Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Gln Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro
50 55 60
Gly Ala Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Ala Pro Ala Pro Gly Val Tyr Pro
65 70 75 80
Gly Pro Pro Ser Gly Pro Gly Ala Tyr Pro Ser Ser Gly Gln Pro Ser
85 90 95
Ala Thr Gly Ala Tyr Pro Ala Thr Gly Pro Tyr Gly Ala Pro Ala Gly
100 105 110
Pro Leu Ile Val Pro Tyr Asn Leu Pro Leu Pro Gly Gly Val Val Pro
115 120 125
Arg Met Leu Ile Thr Ile Leu Gly Thr Val Lys Pro Asn Ala Asn Arg
130 135 140
Ile Ala Leu Asp Phe Gln Arg Gly Asn Asp Val Ala Phe His Phe Asn
145 150 155 160
Pro Arg Phe Asn Glu Asn Asn Arg Arg Val Ile Val Cys Asn Thr Lys
165 170 175
Leu Asp Asn Asn Trp Gly Arg Glu Glu Arg Gln Ser Val Phe Pro Phe
180 185 190
Glu Ser Gly Lys Pro Phe Lys Ile Gln Val Leu Val Glu Pro Asp His
195 200 205
Phe Lys Val Ala Val Asn Asp Ala His Leu Leu Gln Tyr Asn His Arg
210 215 220
Val Lys Lys Leu Asn Glu Ile Ser Lys Leu Gly Ile Ser Gly Asp Ile
225 230 235 240
Asp Leu Thr Ser Ala Ser Tyr Thr Met Ile
245 250
<210> 82
<211> 234
<212> PRT
<213> Cratylia mollis
<400> 82
Ala Asp Thr Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr Pro Asn Thr Asp
1 5 10 15
Ile Gly Asp Pro Ser Tyr Gln His Ile Gly Ile Asn Ile Lys Ser Ile
20 25 30
Arg Ser Lys Ala Thr Thr Arg Trp Asp Val Gln Asn Gly Lys Val Gly
35 40 45
Thr Ala His Ile Ser Tyr Asn Ser Val Ala Lys Arg Leu Ser Ala Val
50 55 60
Val Ser Tyr Pro Gly Gly Ser Ser Ala Thr Val Ser Tyr Asp Val Asp
65 70 75 80
Leu Asn Asn Ile Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu Ser Ala Ser
85 90 95
Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp Ser Phe Thr
100 105 110
Ser Lys Ser Asn Ser Thr Ala Asp Ala Gln Ser Leu His Phe Thr Phe
115 120 125
Asn Gln Phe Ser Gln Ser Pro Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly Asp Ala
130 135 140
Ser Thr Asp Ser Asp Gly Asn Leu Gln Leu Thr Arg Val Ser Asn Gly
145 150 155 160
Ser Pro Gln Ser Asp Ser Val Gly Arg Ala Leu Tyr Tyr Ala Pro Val
165 170 175
His Ile Trp Asp Lys Ser Ala Val Val Ala Ser Phe Asp Ala Thr Phe
180 185 190
Thr Phe Leu Ile Lys Ser Pro Asp Arg Glu Ile Ala Asp Gly Ile Ala
195 200 205
Phe Phe Ile Ala Asn Thr Asp Ser Ser Ile Pro His Gly Ser Gly Gly
210 215 220
Arg Leu Leu Gly Leu Phe Pro Asp Ala Asn
225 230
<210> 83
<211> 569
<212> PRT
<213> Viscum album
<400> 83
Met Asn Ala Val Met Asp Ser Arg Gly Ala Trp Val Ser Cys Phe Leu
1 5 10 15
Ile Leu Gly Leu Val Phe Gly Ala Thr Val Lys Ala Glu Thr Lys Phe
20 25 30
Ser Tyr Glu Arg Leu Arg Leu Arg Val Thr His Gln Thr Thr Gly Asp
35 40 45
Glu Tyr Phe Arg Phe Ile Thr Leu Leu Arg Asp Tyr Val Ser Ser Gly
50 55 60
Ser Phe Ser Asn Glu Ile Pro Leu Leu Arg Gln Ser Thr Ile Pro Val
65 70 75 80
Ser Asp Ala Gln Arg Phe Val Leu Val Glu Leu Thr Asn Gln Gly Gly
85 90 95
Asp Ser Ile Thr Ala Ala Ile Asp Val Thr Asn Leu Tyr Val Val Ala
100 105 110
Tyr Gln Ala Gly Asp Gln Ser Tyr Phe Leu Arg Asp Ala Pro Asp Gly
115 120 125
Ala Glu Arg His Leu Phe Thr Gly Thr Thr Arg Ser Ser Leu Pro Phe
130 135 140
Thr Gly Ser Tyr Thr Asp Leu Glu Arg Tyr Ala Gly His Arg Asp Gln
145 150 155 160
Ile Pro Leu Gly Ile Glu Glu Leu Ile Gln Ser Val Ser Ala Leu Arg
165 170 175
Tyr Pro Gly Gly Ser Thr Arg Ala Gln Ala Arg Ser Ile Ile Ile Leu
180 185 190
Ile Gln Met Ile Ser Glu Ala Ala Arg Phe Asn Pro Ile Phe Trp Arg
195 200 205
Val Arg Gln Asp Ile Asn Ser Gly Glu Ser Phe Leu Pro Asp Met Tyr
210 215 220
Met Leu Glu Leu Glu Thr Ser Trp Gly Gln Gln Ser Thr Gln Val Gln
225 230 235 240
Gln Ser Thr Asp Gly Val Phe Asn Asn Pro Phe Arg Leu Ala Ile Ser
245 250 255
Thr Gly Asn Phe Val Thr Leu Ser Asn Val Arg Asp Val Ile Ala Ser
260 265 270
Leu Ala Ile Met Leu Phe Val Cys Arg Asp Arg Pro Ser Ser Ser Glu
275 280 285
Val Arg Tyr Trp Pro Leu Val Ile Arg Pro Val Leu Glu Asn Ser Gly
290 295 300
Ala Val Asp Asp Val Thr Cys Thr Ala Ser Glu Pro Thr Val Arg Ile
305 310 315 320
Val Gly Arg Asp Gly Leu Cys Val Asp Val Arg Asp Gly Lys Phe His
325 330 335
Asn Gly Asn Pro Ile Gln Leu Ser Pro Cys Lys Ser Asn Thr Asp Pro
340 345 350
Asn Gln Leu Trp Thr Ile Arg Arg Asp Gly Thr Ile Arg Ser Asn Gly
355 360 365
Arg Cys Leu Thr Thr Tyr Gly Tyr Thr Ala Gly Val Tyr Val Met Ile
370 375 380
Phe Asp Cys Asn Thr Ala Val Arg Glu Ala Thr Leu Trp Gln Ile Trp
385 390 395 400
Gly Asn Gly Thr Ile Ile Asn Pro Arg Ser Asn Leu Val Leu Gly Ala
405 410 415
Ala Ser Gly Ser Ser Gly Thr Thr Leu Thr Val Gln Thr Gln Val Tyr
420 425 430
Ser Leu Gly Gln Gly Trp Leu Ala Gly Asn Asp Thr Ala Pro Arg Glu
435 440 445
Val Thr Ile Tyr Gly Phe Arg Asp Leu Cys Met Glu Ala Asn Gly Ala
450 455 460
Ser Val Trp Val Glu Thr Cys Gly Ser Ser Thr Glu Asn Gln Asn Trp
465 470 475 480
Ala Leu Tyr Gly Asp Gly Ser Ile Arg Pro Lys Gln Asn Gln Asp Gln
485 490 495
Cys Leu Thr Cys Gln Gly Asp Ser Val Ala Thr Val Ile Asn Ile Val
500 505 510
Ser Cys Ser Ala Gly Ser Ser Gly Gln Arg Trp Val Phe Thr Asn Glu
515 520 525
Gly Thr Ile Leu Asn Leu Asn Asn Gly Leu Val Met Asp Val Ala Gln
530 535 540
Ser Asn Pro Ser Leu Arg Arg Ile Ile Ile Tyr Pro Ala Thr Gly Asn
545 550 555 560
Pro Asn Gln Met Trp Leu Pro Val Pro
565
<210> 84
<211> 239
<212> PRT
<213> Cymbosema roseum
<400> 84
Ser Gly Ala Val His Phe Ser Phe Thr Lys Phe Ser Thr Ser Ser Ser
1 5 10 15
Asp Leu Thr Leu Gln Gly Ser Ala Leu Val Ser Ser Lys Gly Ser Leu
20 25 30
Lys Lys Asn Pro Ser Lys Lys Gly Lys Pro Val Asp His Ser Val Gly
35 40 45
Arg Ala Leu Tyr Arg Ser Pro Ile His Ile Trp Asp Glu Thr Thr Gly
50 55 60
Lys Val Ala Ser Phe Asp Ala Thr Phe Ser Phe Val Ser Glu Ala Pro
65 70 75 80
Ala Ile Pro Met Leu Phe Pro Ser Ser Lys Gly Glu Leu Asn Asp Glu
85 90 95
Asp Asp Thr Arg Ile Gly Gly Gln Leu Gly Val Val Asn Asp Ser Tyr
100 105 110
Asn Val Ile Arg Val Thr Val Ala Val Glu Asn Asp Gly Tyr Arg Asn
115 120 125
Arg Val Asp Pro Ser Ala Arg Pro His Ile Ser Leu Pro Ile Lys Ser
130 135 140
Val Arg Ser Lys Lys Thr Ala Lys Trp Asn Met Gln Thr Gly Lys Val
145 150 155 160
Gly Thr Ala His Ile Ser Tyr Asn Ser Val Ala Lys Arg Leu Ser Ala
165 170 175
Val Val Ser Tyr Thr Gly Asn Ser Ser Ser Thr Thr Val Ser Tyr Asp
180 185 190
Val Leu Leu Asn Leu Ala Val Leu Pro Ser Lys Val Leu Val Gly Lys
195 200 205
Thr Ala Thr Gly Leu Tyr Lys Asp His Val Glu Thr Asn Thr Ile Leu
210 215 220
Ser Trp Ser Phe Thr Ser Lys Leu Lys Thr Asn Ser Ile Ala Asp
225 230 235
<210> 85
<211> 135
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 85
Met Ala Cys Gly Leu Val Ala Ser Asn Leu Asn Leu Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Cys Leu Arg Val Arg Gly Glu Val Ala Pro Asp Ala Lys Ser Phe Val
20 25 30
Leu Asn Leu Gly Lys Asp Ser Asn Asn Leu Cys Leu His Phe Asn Pro
35 40 45
Arg Phe Asn Ala His Gly Asp Ala Asn Thr Ile Val Cys Asn Ser Lys
50 55 60
Asp Gly Gly Ala Trp Gly Thr Glu Gln Arg Glu Ala Val Phe Pro Phe
65 70 75 80
Gln Pro Gly Ser Val Ala Glu Val Cys Ile Thr Phe Asp Gln Ala Asn
85 90 95
Leu Thr Val Lys Leu Pro Asp Gly Tyr Glu Phe Lys Phe Pro Asn Arg
100 105 110
Leu Asn Leu Glu Ala Ile Asn Tyr Met Ala Ala Asp Gly Asp Phe Lys
115 120 125
Ile Lys Cys Val Ala Phe Asp
130 135
<210> 86
<211> 168
<212> PRT
<213> Patiria pectinifera
<400> 86
Met Ala Phe Phe Arg Ala Leu Cys Phe Val Leu Leu Val Gly Phe Ala
1 5 10 15
Ala Ala Cys Gln Pro Asp Cys Ser Trp Lys Cys Pro Pro Lys Cys Pro
20 25 30
Pro Met Trp Thr Phe Tyr Asn Gly Asn Cys Tyr Arg Tyr Phe Gly Thr
35 40 45
Gly Lys Thr Tyr Asp Glu Ala Glu Ser His Cys Gln Glu Phe Thr Glu
50 55 60
Val Gly Leu Gly His Leu Ala Ser Ile Ala Ser Ala Glu Glu Asn Asn
65 70 75 80
Leu Leu Leu Thr Met Trp Lys Ser Val Arg Thr Thr Thr Thr Gly Gly
85 90 95
Leu Trp Ile Gly Leu Asn Asp Gln Ala Glu Glu Gly Asn Phe Ile Trp
100 105 110
Thr Asp Gly Ser Ala Val Thr Phe Thr Asp Trp Ala Thr Thr Gln Pro
115 120 125
Asp Asn Tyr Gln Asn Glu Asp Cys Ala His Met Arg His Glu Leu Asp
130 135 140
Gly Asp Asp Arg Trp Asn Asp Ile Ala Cys Ser Arg Ala Phe Ala Tyr
145 150 155 160
Val Cys Lys Met Ser Thr Thr Asn
165
<210> 87
<211> 233
<212> PRT
<213> Vicia faba
<400> 87
Thr Asp Glu Ile Thr Ser Phe Ser Ile Pro Lys Phe Arg Pro Asp Gln
1 5 10 15
Pro Asn Leu Ile Phe Gln Gly Gly Gly Tyr Thr Thr Lys Glu Lys Leu
20 25 30
Thr Leu Thr Lys Ala Val Lys Asn Thr Val Gly Arg Ala Leu Tyr Ser
35 40 45
Leu Pro Ile His Ile Trp Asp Ser Glu Thr Gly Asn Val Ala Asp Phe
50 55 60
Thr Thr Thr Phe Ile Phe Val Ile Asp Ala Pro Asn Gly Tyr Asn Val
65 70 75 80
Ala Asp Gly Phe Thr Phe Phe Ile Ala Pro Val Asp Thr Lys Pro Gln
85 90 95
Thr Gly Gly Gly Tyr Leu Gly Val Phe Asn Gly Lys Asp Tyr Asp Lys
100 105 110
Thr Ala Gln Thr Val Ala Val Glu Phe Asp Thr Phe Tyr Asn Ala Ala
115 120 125
Trp Asp Pro Ser Asn Gly Lys Arg His Ile Gly Ile Asp Val Asn Thr
130 135 140
Ile Lys Ser Ile Ser Thr Lys Ser Trp Asn Leu Gln Asn Gly Glu Glu
145 150 155 160
Ala His Val Ala Ile Ser Phe Asn Ala Thr Thr Asn Val Leu Ser Val
165 170 175
Thr Leu Leu Tyr Pro Asn Leu Thr Gly Tyr Thr Leu Ser Glu Val Val
180 185 190
Pro Leu Lys Asp Val Val Pro Glu Trp Val Arg Ile Gly Phe Ser Ala
195 200 205
Thr Thr Gly Ala Glu Tyr Ala Thr His Glu Val Leu Ser Trp Thr Phe
210 215 220
Leu Ser Glu Leu Thr Gly Pro Ser Asn
225 230
<210> 88
<211> 88
<212> PRT
<213> Androctonus australis
<400> 88
Met Lys Phe Leu Leu Leu Phe Leu Val Val Leu Pro Ile Met Gly Val
1 5 10 15
Phe Gly Lys Lys Asn Gly Tyr Ala Val Asp Ser Ser Gly Lys Ala Pro
20 25 30
Glu Cys Leu Leu Ser Asn Tyr Cys Asn Asn Glu Cys Thr Lys Val His
35 40 45
Tyr Ala Asp Lys Gly Tyr Cys Cys Leu Leu Ser Cys Tyr Cys Phe Gly
50 55 60
Leu Asn Asp Asp Lys Lys Val Leu Glu Ile Ser Asp Thr Arg Lys Ser
65 70 75 80
Tyr Cys Asp Thr Thr Ile Ile Asn
85
<210> 89
<211> 33
<212> PRT
<213> Pandinus imperator
<400> 89
Gly Asp Cys Leu Pro His Leu Lys Arg Cys Lys Ala Asp Asn Asp Cys
1 5 10 15
Cys Gly Lys Lys Cys Lys Arg Arg Gly Thr Asn Ala Glu Lys Arg Cys
20 25 30
Arg
<210> 90
<211> 32
<212> PRT
<213> Centruroides noxius
<400> 90
Val Ala Cys Val Tyr Arg Thr Cys Asp Lys Asp Cys Thr Ser Arg Lys
1 5 10 15
Tyr Arg Ser Gly Lys Cys Ile Asn Asn Ala Cys Lys Cys Tyr Pro Tyr
20 25 30
<210> 91
<211> 37
<212> PRT
<213> Parabuthus villosus
<400> 91
Asp Glu Glu Pro Lys Glu Ser Cys Ser Asp Glu Met Cys Val Ile Tyr
1 5 10 15
Cys Lys Gly Glu Glu Tyr Ser Thr Gly Val Cys Asp Gly Pro Gln Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Ser Asp
35
<210> 92
<211> 37
<212> PRT
<213> Parabuthus villosus
<400> 92
Asp Glu Glu Pro Lys Glu Thr Cys Ser Asp Glu Met Cys Val Ile Tyr
1 5 10 15
Cys Lys Gly Glu Glu Tyr Ser Thr Gly Val Cys Asp Gly Pro Gln Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Ser Asp
35
<210> 93
<211> 36
<212> PRT
<213> Parabuthus granulatus
<400> 93
Asp Glu Glu Pro Lys Glu Thr Cys Ser Asp Asp Met Cys Val Ile Tyr
1 5 10 15
Cys Lys Gly Glu Glu Phe Ser Thr Gly Ala Cys Asp Gly Pro Gln Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Ser
35
<210> 94
<211> 40
<212> PRT
<213> Tityus serrulatus
<400> 94
Trp Cys Ser Thr Cys Leu Asp Leu Ala Cys Gly Ala Ser Arg Glu Cys
1 5 10 15
Tyr Asp Pro Cys Phe Lys Ala Phe Gly Arg Ala His Gly Lys Cys Met
20 25 30
Asn Asn Lys Cys Arg Cys Tyr Thr
35 40
<210> 95
<211> 40
<212> PRT
<213> Tityus trivittatus
<400> 95
Trp Cys Ser Thr Cys Leu Asp Leu Ala Cys Gly Ala Ser Arg Glu Cys
1 5 10 15
Tyr Asp Pro Cys Phe Lys Ala Phe Gly Arg Ala His Gly Lys Cys Met
20 25 30
Asn Asn Lys Cys Arg Cys Tyr Thr
35 40
<210> 96
<211> 40
<212> PRT
<213> Tityus costatus
<400> 96
Trp Cys Ser Thr Cys Leu Asp Leu Glu Cys Gly Ala Ser Arg Glu Cys
1 5 10 15
Tyr Asp Pro Cys Phe Lys Ala Phe Gly Arg Ala His Gly Lys Cys Met
20 25 30
Asn Asn Lys Cys Arg Cys Tyr Thr
35 40
<210> 97
<211> 37
<212> PRT
<213> Androctonus australis
<400> 97
Gln Asn Glu Thr Asn Lys Lys Cys Gln Gly Gly Ser Cys Ala Ser Val
1 5 10 15
Cys Arg Arg Val Ile Gly Val Ala Ala Gly Lys Cys Ile Asn Gly Arg
20 25 30
Cys Val Cys Tyr Pro
35
<210> 98
<211> 37
<212> PRT
<213> Androctonus mauretanicus mauretanicus
<400> 98
Gln Ile Glu Thr Asn Lys Lys Cys Gln Gly Gly Ser Cys Ala Ser Val
1 5 10 15
Cys Arg Lys Val Ile Gly Val Ala Ala Gly Lys Cys Ile Asn Gly Arg
20 25 30
Cys Val Cys Tyr Pro
35
<210> 99
<211> 38
<212> PRT
<213> Tityus discrepans
<400> 99
Gln Ile Asp Thr Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Ser Lys Cys Val Lys
1 5 10 15
Ile Cys Ile Asp Arg Tyr Asn Thr Arg Gly Ala Lys Cys Ile Asn Gly
20 25 30
Arg Cys Thr Cys Tyr Pro
35
<210> 100
<211> 36
<212> PRT
<213> Mesobuthus tamulus
<400> 100
Asp Leu Ile Asp Val Lys Cys Ile Ser Ser Gln Glu Cys Trp Ile Ala
1 5 10 15
Cys Lys Lys Val Thr Gly Arg Phe Glu Gly Lys Cys Gln Asn Arg Gln
20 25 30
Cys Arg Cys Tyr
35
<210> 101
<211> 31
<212> PRT
<213> Mesobuthus martensii
<400> 101
Ala Ala Cys Tyr Ser Ser Asp Cys Arg Val Lys Cys Val Ala Met Gly
1 5 10 15
Phe Ser Ser Gly Lys Cys Ile Asn Ser Lys Cys Lys Cys Tyr Lys
20 25 30
<210> 102
<211> 37
<212> PRT
<213> Mesobuthus tamulus
<400> 102
Gln Phe Thr Asp Val Asp Cys Ser Val Ser Lys Glu Cys Trp Ser Val
1 5 10 15
Cys Lys Asp Leu Phe Gly Val Asp Arg Gly Lys Cys Met Gly Lys Lys
20 25 30
Cys Arg Cys Tyr Gln
35
<210> 103
<211> 37
<212> PRT
<213> Centruroides limbatus
<220>
<221> misc_feature
<222> (37)..(37)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 103
Val Phe Ile Asp Val Ser Cys Ser Val Ser Lys Glu Cys Trp Ala Pro
1 5 10 15
Cys Lys Ala Ala Val Gly Thr Asp Arg Gly Lys Cys Met Gly Lys Lys
20 25 30
Cys Arg Cys Tyr Xaa
35
<210> 104
<211> 36
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 104
Gly Leu Ile Asp Val Arg Cys Tyr Asp Ser Arg Gln Cys Trp Ile Ala
1 5 10 15
Cys Lys Lys Val Thr Gly Ser Thr Gln Gly Lys Cys Gln Asn Lys Gln
20 25 30
Cys Arg Cys Tyr
35
<210> 105
<211> 36
<212> PRT
<213> Centruroides limbatus
<400> 105
His Phe Ile Asp Val Lys Cys Thr Thr Ser Lys Glu Cys Trp Pro Pro
1 5 10 15
Cys Lys Ala Ala Thr Gly Lys Ala Ala Gly Lys Cys Met Asn Lys Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Gln
35
<210> 106
<211> 37
<212> PRT
<213> Parabuthus transvaalicus
<400> 106
Glu Val Asp Met Arg Cys Lys Ser Ser Lys Glu Cys Leu Val Lys Cys
1 5 10 15
Lys Gln Ala Thr Gly Arg Pro Asn Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys
20 25 30
Lys Cys Tyr Pro Arg
35
<210> 107
<211> 37
<212> PRT
<213> Centruroides noxius
<400> 107
Thr Phe Ile Asp Val Asp Cys Thr Val Ser Lys Glu Cys Trp Ala Pro
1 5 10 15
Cys Lys Ala Ala Phe Gly Val Asp Arg Gly Lys Cys Met Gly Lys Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Tyr Val
35
<210> 108
<211> 37
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 108
Gln Phe Thr Asn Val Ser Cys Thr Thr Ser Lys Glu Cys Trp Ser Val
1 5 10 15
Cys Glu Lys Leu Tyr Asn Thr Ser Arg Gly Lys Cys Met Asn Lys Lys
20 25 30
Cys Arg Cys Tyr Ser
35
<210> 109
<211> 39
<212> PRT
<213> Centruroides noxius
<400> 109
Thr Ile Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Ser Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Glu Leu Tyr Gly Ser Ser Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Asn Asn
35
<210> 110
<211> 39
<212> PRT
<213> Centruroides margaritatus
<400> 110
Thr Ile Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Pro Pro
1 5 10 15
Cys Lys Ala Gln Phe Gly Gln Ser Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Pro His
35
<210> 111
<211> 38
<212> PRT
<213> Centruroides limpidus limpidus
<400> 111
Ile Thr Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Gln Gln Cys Leu Arg Pro
1 5 10 15
Cys Lys Asp Arg Phe Gly Gln His Ala Gly Gly Lys Cys Ile Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Pro
35
<210> 112
<211> 38
<212> PRT
<213> Centruroides noxius
<400> 112
Thr Ile Ile Asn Glu Lys Cys Phe Ala Thr Ser Gln Cys Trp Thr Pro
1 5 10 15
Cys Lys Lys Ala Ile Gly Ser Leu Gln Ser Lys Cys Met Asn Gly Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Tyr Asn Gly
35
<210> 113
<211> 39
<212> PRT
<213> Centruroides limbatus
<400> 113
Thr Val Ile Asp Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Pro Pro
1 5 10 15
Cys Lys Ala Gln Phe Gly Ile Arg Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Pro His
35
<210> 114
<211> 34
<212> PRT
<213> Centruroides limbatus
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 114
Thr Phe Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Pro Ala
1 5 10 15
Cys Lys Glu Lys Phe Gly Xaa Ala Ala Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys
20 25 30
Cys Lys
<210> 115
<211> 36
<212> PRT
<213> Centruroides limpidus limpidus
<400> 115
Thr Val Ile Asp Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Pro Pro
1 5 10 15
Cys Lys Glu Ile Tyr Gly Arg His Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys
35
<210> 116
<211> 39
<212> PRT
<213> Centruroides elegans
<400> 116
Thr Val Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Asp Leu Tyr Gly Pro His Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Asn Asn
35
<210> 117
<211> 39
<212> PRT
<213> Centruroides elegans
<400> 117
Thr Ile Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Asp Leu Tyr Gly Pro His Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Asn Asn
35
<210> 118
<211> 38
<212> PRT
<213> Centruroides elegans
<400> 118
Ile Phe Ile Asn Val Lys Cys Ser Leu Pro Gln Gln Cys Leu Arg Pro
1 5 10 15
Cys Lys Asp Arg Phe Gly Gln His Ala Gly Gly Lys Cys Ile Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Pro
35
<210> 119
<211> 39
<212> PRT
<213> Centruroides elegans
<400> 119
Thr Ile Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Leu Pro
1 5 10 15
Cys Lys Glu Ile Tyr Gly Ile His Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys Lys Cys Tyr Lys Ile
35
<210> 120
<211> 39
<212> PRT
<213> Centruroides elegans
<400> 120
Thr Ile Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Leu Pro Pro
1 5 10 15
Cys Lys Glu Ile Tyr Gly Arg His Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly
20 25 30
Lys Cys His Cys Ser Lys Ile
35
<210> 121
<211> 38
<212> PRT
<213> Androctonus mauretanicus mauretanicus
<400> 121
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Pro Gln Cys Leu Lys
1 5 10 15
Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys
20 25 30
Cys His Cys Thr Pro Lys
35
<210> 122
<211> 38
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 122
Gly Val Pro Ile Asn Val Ser Cys Thr Gly Ser Pro Gln Cys Ile Lys
1 5 10 15
Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys
20 25 30
Cys His Cys Thr Pro Lys
35
<210> 123
<211> 38
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 123
Gly Val Pro Ile Asn Val Pro Cys Thr Gly Ser Pro Gln Cys Ile Lys
1 5 10 15
Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys
20 25 30
Cys His Cys Thr Pro Lys
35
<210> 124
<211> 38
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 124
Gly Val Pro Ile Asn Val Lys Cys Thr Gly Ser Pro Gln Cys Leu Lys
1 5 10 15
Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Ile Asn Gly Lys
20 25 30
Cys His Cys Thr Pro Lys
35
<210> 125
<211> 38
<212> PRT
<213> Orthochirus scrobiculosus
<400> 125
Gly Val Ile Ile Asn Val Lys Cys Lys Ile Ser Arg Gln Cys Leu Glu
1 5 10 15
Pro Cys Lys Lys Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys
20 25 30
Cys His Cys Thr Pro Lys
35
<210> 126
<211> 38
<212> PRT
<213> Buthus sindicus
<400> 126
Gly Val Pro Ile Asn Val Lys Cys Arg Gly Ser Pro Gln Cys Ile Gln
1 5 10 15
Pro Cys Arg Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys
20 25 30
Cys His Cys Thr Pro Gln
35
<210> 127
<211> 37
<212> PRT
<213> Buthus occitanus tunetanus
<400> 127
Val Gly Ile Pro Val Ser Cys Lys His Ser Gly Gln Cys Ile Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys
20 25 30
Asp Cys Thr Pro Lys
35
<210> 128
<211> 37
<212> PRT
<213> Tityus serrulatus
<400> 128
Val Phe Ile Asn Ala Lys Cys Arg Gly Ser Pro Glu Cys Leu Pro Lys
1 5 10 15
Cys Lys Glu Ala Ile Gly Lys Ala Ala Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Tyr Pro
35
<210> 129
<211> 37
<212> PRT
<213> Tityus discrepans
<400> 129
Val Phe Ile Asn Val Lys Cys Thr Gly Ser Lys Gln Cys Leu Pro Ala
1 5 10 15
Cys Lys Ala Ala Val Gly Lys Ala Ala Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Tyr Thr
35
<210> 130
<211> 37
<212> PRT
<213> Tityus cambridgei
<400> 130
Val Phe Ile Asn Val Lys Cys Arg Gly Ser Lys Glu Cys Leu Pro Ala
1 5 10 15
Cys Lys Ala Ala Val Gly Lys Ala Ala Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys
20 25 30
Cys Lys Cys Tyr Pro
35
<210> 131
<211> 31
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 131
Ala Phe Cys Asn Leu Arg Met Cys Gln Leu Ser Cys Arg Ser Leu Gly
1 5 10 15
Leu Leu Gly Lys Cys Ile Gly Asp Lys Cys Glu Cys Val Lys His
20 25 30
<210> 132
<211> 31
<212> PRT
<213> Androctonus mauretanicus mauretanicus
<400> 132
Thr Val Cys Asn Leu Arg Arg Cys Gln Leu Ser Cys Arg Ser Leu Gly
1 5 10 15
Leu Leu Gly Lys Cys Ile Gly Val Lys Cys Glu Cys Val Lys His
20 25 30
<210> 133
<211> 31
<212> PRT
<213> Mesobuthus tamulus
<400> 133
Ala Phe Cys Asn Leu Arg Arg Cys Glu Leu Ser Cys Arg Ser Leu Gly
1 5 10 15
Leu Leu Gly Lys Cys Ile Gly Glu Glu Cys Lys Cys Val Pro Tyr
20 25 30
<210> 134
<211> 31
<212> PRT
<213> Mesobuthus tamulus
<400> 134
Ala Phe Cys Asn Leu Arg Arg Cys Glu Leu Ser Cys Arg Ser Leu Gly
1 5 10 15
Leu Leu Gly Lys Cys Ile Gly Glu Glu Cys Lys Cys Val Pro His
20 25 30
<210> 135
<211> 35
<212> PRT
<213> Pandinus imperator
<400> 135
Leu Val Lys Cys Arg Gly Thr Ser Asp Cys Gly Arg Pro Cys Gln Gln
1 5 10 15
Gln Thr Gly Cys Pro Asn Ser Lys Cys Ile Asn Arg Met Cys Lys Cys
20 25 30
Tyr Gly Cys
35
<210> 136
<211> 34
<212> PRT
<213> Scorpio maurus palmatus
<400> 136
Val Ser Cys Thr Gly Ser Lys Asp Cys Tyr Ala Pro Cys Arg Lys Gln
1 5 10 15
Thr Gly Cys Pro Asn Ala Lys Cys Ile Asn Lys Ser Cys Lys Cys Tyr
20 25 30
Gly Cys
<210> 137
<211> 34
<212> PRT
<213> Heterometrus spinifer
<400> 137
Ala Ser Cys Arg Thr Pro Lys Asp Cys Ala Asp Pro Cys Arg Lys Glu
1 5 10 15
Thr Gly Cys Pro Tyr Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys Lys Cys Asn
20 25 30
Arg Cys
<210> 138
<211> 35
<212> PRT
<213> Anuroctonus phaiodactylus
<400> 138
Gln Lys Glu Cys Thr Gly Pro Gln His Cys Thr Asn Phe Cys Arg Lys
1 5 10 15
Asn Lys Cys Thr His Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys Lys Cys Phe
20 25 30
Asn Cys Lys
35
<210> 139
<211> 34
<212> PRT
<213> Heterometrus spinifer
<400> 139
Ile Arg Cys Ser Gly Ser Arg Asp Cys Tyr Ser Pro Cys Met Lys Gln
1 5 10 15
Thr Gly Cys Pro Asn Ala Lys Cys Ile Asn Lys Ser Cys Lys Cys Tyr
20 25 30
Gly Cys
<210> 140
<211> 36
<212> PRT
<213> Hadrurus gertschi
<400> 140
Thr Gly Thr Ser Cys Ile Ser Pro Lys Gln Cys Thr Glu Pro Cys Arg
1 5 10 15
Ala Lys Gly Cys Lys His Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys
20 25 30
Met Leu Cys Leu
35
<210> 141
<211> 35
<212> PRT
<213> Pandinus imperator
<400> 141
Thr Ile Ser Cys Thr Asn Glu Lys Gln Cys Tyr Pro His Cys Lys Lys
1 5 10 15
Glu Thr Gly Tyr Pro Asn Ala Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys Lys Cys
20 25 30
Phe Gly Arg
35
<210> 142
<211> 42
<212> PRT
<213> Centruroides elegans
<400> 142
Asp Arg Asp Ser Cys Val Asp Lys Ser Arg Cys Ala Lys Tyr Gly Tyr
1 5 10 15
Tyr Gln Glu Cys Thr Asp Cys Cys Lys Lys Tyr Gly His Asn Gly Gly
20 25 30
Thr Cys Met Phe Phe Lys Cys Lys Cys Ala
35 40
<210> 143
<211> 42
<212> PRT
<213> Centruroides gracilis
<400> 143
Asp Arg Asp Ser Cys Val Asp Lys Ser Arg Cys Ala Lys Tyr Gly His
1 5 10 15
Tyr Gln Glu Cys Thr Asp Cys Cys Lys Lys Tyr Gly His Asn Gly Gly
20 25 30
Thr Cys Met Phe Phe Lys Cys Lys Cys Ala
35 40
<210> 144
<211> 42
<212> PRT
<213> Centruroides sculpturatus
<400> 144
Asp Arg Asp Ser Cys Val Asp Lys Ser Arg Cys Ala Lys Tyr Gly Tyr
1 5 10 15
Tyr Gln Glu Cys Gln Asp Cys Cys Lys Lys Ala Gly His Asn Gly Gly
20 25 30
Thr Cys Met Phe Phe Lys Cys Lys Cys Ala
35 40
<210> 145
<211> 42
<212> PRT
<213> Centruroides limpidus limpidus
<400> 145
Asp Arg Asp Ser Cys Val Asp Lys Ser Arg Cys Ser Lys Tyr Gly Tyr
1 5 10 15
Tyr Gln Glu Cys Gln Asp Cys Cys Lys Lys Ala Gly His Asn Gly Gly
20 25 30
Thr Cys Met Phe Phe Lys Cys Lys Cys Ala
35 40
<210> 146
<211> 42
<212> PRT
<213> Centruroides exilicauda
<400> 146
Asp Arg Asp Ser Cys Val Asp Lys Ser Arg Cys Ala Lys Tyr Gly Tyr
1 5 10 15
Tyr Gln Glu Cys Gln Asp Cys Cys Lys Lys Ala Gly His Ser Gly Gly
20 25 30
Thr Cys Met Phe Phe Lys Cys Lys Cys Ala
35 40
<210> 147
<211> 43
<212> PRT
<213> Centruroides noxius
<400> 147
Asp Arg Asp Ser Cys Val Asp Lys Ser Lys Cys Gly Lys Tyr Gly Tyr
1 5 10 15
Tyr Gln Glu Cys Gln Asp Cys Cys Lys Asn Ala Gly His Asn Gly Gly
20 25 30
Thr Cys Val Tyr Tyr Lys Cys Lys Cys Asn Pro
35 40
<210> 148
<211> 36
<212> PRT
<213> Buthus eupeus
<400> 148
Met Cys Met Pro Cys Phe Thr Thr Arg Pro Asp Met Ala Gln Gln Cys
1 5 10 15
Arg Ala Cys Cys Lys Gly Arg Gly Lys Cys Phe Gly Pro Gln Cys Leu
20 25 30
Cys Gly Tyr Asp
35
<210> 149
<211> 35
<212> PRT
<213> Buthus sindicus
<400> 149
Arg Cys Lys Pro Cys Phe Thr Thr Asp Pro Gln Met Ser Lys Lys Cys
1 5 10 15
Ala Asp Cys Cys Gly Gly Lys Gly Lys Gly Lys Cys Tyr Gly Pro Gln
20 25 30
Cys Leu Cys
35
<210> 150
<211> 36
<212> PRT
<213> Buthus eupeus
<400> 150
Met Cys Met Pro Cys Phe Thr Thr Asp His Gln Thr Ala Arg Arg Cys
1 5 10 15
Arg Asp Cys Cys Gly Gly Arg Gly Arg Lys Cys Phe Gly Gln Cys Leu
20 25 30
Cys Gly Tyr Asp
35
<210> 151
<211> 35
<212> PRT
<213> Buthus eupeus
<400> 151
Met Cys Met Pro Cys Phe Thr Thr Asp His Asn Met Ala Lys Lys Cys
1 5 10 15
Arg Asp Cys Cys Gly Gly Asn Gly Lys Cys Phe Gly Pro Gln Cys Leu
20 25 30
Cys Asn Arg
35
<210> 152
<211> 35
<212> PRT
<213> Buthus eupeus
<400> 152
Met Cys Met Pro Cys Phe Thr Thr Asp Pro Asn Met Ala Lys Lys Cys
1 5 10 15
Arg Asp Cys Cys Gly Gly Asn Gly Lys Cys Phe Gly Pro Gln Cys Leu
20 25 30
Cys Asn Arg
35
<210> 153
<211> 36
<212> PRT
<213> Buthus occitanus tunetanus
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (32)..(33)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 153
Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Gln Asn Tyr Asn Cys Val Tyr Thr Cys
1 5 10 15
Phe Lys Asn Asp Tyr Cys Asn Asp Ile Cys Thr Lys Asn Gly Ala Xaa
20 25 30
Xaa Gly Tyr Cys
35
<210> 154
<211> 38
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 154
Arg Cys Ser Pro Cys Phe Thr Thr Asp Gln Gln Met Thr Lys Lys Cys
1 5 10 15
Tyr Asp Cys Cys Gly Gly Lys Gly Lys Gly Lys Cys Tyr Gly Pro Gln
20 25 30
Cys Ile Cys Ala Pro Tyr
35
<210> 155
<211> 33
<212> PRT
<213> Buthus occitanus tunetanus
<400> 155
Ala Glu Ile Lys Val Arg Asp Gly Tyr Ile Val Tyr Pro Asn Asn Cys
1 5 10 15
Val Tyr His Cys Gly Leu Asp Pro Tyr Cys Asn Asp Leu Cys Thr Gly
20 25 30
Ala
<210> 156
<211> 33
<212> PRT
<213> Scorpio maurus palmatus
<400> 156
Gly Asp Cys Leu Pro His Leu Lys Leu Cys Lys Glu Asn Lys Asp Cys
1 5 10 15
Cys Ser Lys Lys Cys Lys Arg Arg Gly Thr Asn Ile Glu Lys Arg Cys
20 25 30
Arg
<210> 157
<211> 36
<212> PRT
<213> Buthus sindicus
<400> 157
Cys Gly Pro Cys Phe Thr Lys Asp Pro Glu Thr Glu Lys Lys Cys Ala
1 5 10 15
Thr Cys Cys Gly Gly Ile Gly Arg Cys Phe Gly Pro Gln Cys Leu Cys
20 25 30
Asn Arg Gly Tyr
35
<210> 158
<211> 36
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus quinquestriatus
<400> 158
Met Cys Met Pro Cys Phe Thr Thr Asp His Gln Met Ala Arg Lys Cys
1 5 10 15
Asp Asp Cys Cys Gly Gly Lys Gly Arg Gly Lys Cys Tyr Gly Pro Gln
20 25 30
Cys Leu Cys Arg
35
<210> 159
<211> 35
<212> PRT
<213> Androctonus mauretanicus mauretanicus
<400> 159
Cys Gly Pro Cys Phe Thr Thr Asp Pro Tyr Thr Glu Ser Lys Cys Ala
1 5 10 15
Thr Cys Cys Gly Gly Arg Gly Lys Cys Val Gly Pro Gln Cys Leu Cys
20 25 30
Asn Arg Ile
35
<210> 160
<211> 35
<212> PRT
<213> Buthus eupeus
<400> 160
Met Cys Met Pro Cys Phe Thr Thr Asp Pro Asn Met Ala Asn Lys Cys
1 5 10 15
Arg Asp Cys Cys Gly Gly Gly Lys Lys Cys Phe Gly Pro Gln Cys Leu
20 25 30
Cys Asn Arg
35
<210> 161
<211> 35
<212> PRT
<213> Hemiscorpius lepturus
<400> 161
Ile Lys Cys Thr Leu Ser Lys Asp Cys Tyr Ser Pro Cys Lys Lys Glu
1 5 10 15
Thr Gly Cys Pro Arg Ala Lys Cys Ile Asn Arg Asn Cys Lys Cys Tyr
20 25 30
Gly Cys Ser
35
<210> 162
<211> 34
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 162
Cys Gly Pro Cys Phe Thr Thr Asp His Gln Met Glu Gln Lys Cys Ala
1 5 10 15
Glu Cys Cys Gly Gly Ile Gly Lys Cys Tyr Gly Pro Gln Cys Leu Cys
20 25 30
Asn Arg
<210> 163
<211> 70
<212> PRT
<213> Androctonus australis
<400> 163
Lys Lys Asn Gly Tyr Ala Val Asp Ser Ser Gly Lys Ala Pro Glu Cys
1 5 10 15
Leu Leu Ser Asn Tyr Cys Asn Asn Glu Cys Thr Lys Val His Tyr Ala
20 25 30
Asp Lys Gly Tyr Cys Cys Leu Leu Ser Cys Tyr Cys Phe Gly Leu Asn
35 40 45
Asp Asp Lys Lys Val Leu Glu Ile Ser Asp Thr Arg Lys Ser Tyr Cys
50 55 60
Asp Thr Thr Ile Ile Asn
65 70
<210> 164
<211> 72
<212> PRT
<213> Anuroctonus phaiodactylus
<400> 164
Lys Phe Ile Arg His Lys Asp Glu Ser Phe Tyr Glu Cys Gly Gln Leu
1 5 10 15
Ile Gly Tyr Gln Gln Tyr Cys Val Asn Ala Cys Gln Ala His Gly Ser
20 25 30
Lys Glu Lys Gly Tyr Cys Lys Gly Met Ala Pro Phe Gly Leu Pro Gly
35 40 45
Gly Cys Tyr Cys Pro Lys Leu Pro Ser Asn Arg Val Lys Met Cys Phe
50 55 60
Gly Ala Leu Glu Ser Lys Cys Ala
65 70
<210> 165
<211> 61
<212> PRT
<213> Buthacus arenicola
<400> 165
Asp Gly Tyr Ile Arg Arg Arg Asp Gly Cys Lys Val Ser Cys Leu Phe
1 5 10 15
Gly Asn Glu Gly Cys Asp Lys Glu Cys Lys Ala Tyr Gly Gly Ser Tyr
20 25 30
Gly Tyr Cys Trp Thr Trp Gly Leu Ala Cys Trp Cys Glu Gly Leu Pro
35 40 45
Asp Asp Lys Thr Trp Lys Ser Glu Thr Asn Thr Cys Gly
50 55 60
<210> 166
<211> 65
<212> PRT
<213> Bothus occitanus tunetanus
<400> 166
Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Gln Asn Tyr Asn Cys Val Tyr Phe Cys
1 5 10 15
Met Lys Asp Asp Tyr Cys Asn Asp Leu Cys Thr Lys Asn Gly Ala Ser
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Ala Gly Lys Tyr Gly Asn Ala Cys Trp Cys
35 40 45
Tyr Ala Leu Pro Asp Asn Val Pro Ile Arg Ile Pro Gly Lys Cys His
50 55 60
Ser
65
<210> 167
<211> 60
<212> PRT
<213> Bothus occitanus tunetanus
<400> 167
Asp Gly Tyr Ile Lys Gly Tyr Lys Gly Cys Lys Ile Thr Cys Val Ile
1 5 10 15
Asn Asp Asp Tyr Cys Asp Thr Glu Cys Lys Ala Glu Gly Gly Thr Tyr
20 25 30
Gly Tyr Cys Trp Lys Trp Gly Leu Ala Cys Trp Cys Glu Asp Leu Pro
35 40 45
Asp Glu Lys Arg Trp Lys Ser Glu Thr Asn Thr Cys
50 55 60
<210> 168
<211> 64
<212> PRT
<213> Buthus martensii
<400> 168
Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Lys Pro His Asn Cys Val Tyr Glu Cys
1 5 10 15
Ala Arg Asn Glu Tyr Cys Asn Asp Leu Cys Thr Lys Asn Gly Ala Lys
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Val Gly Lys Tyr Gly Asn Gly Cys Trp Cys
35 40 45
Ile Glu Leu Pro Asp Asn Val Pro Ile Arg Val Pro Gly Lys Cys His
50 55 60
<210> 169
<211> 64
<212> PRT
<213> Buthus martensii
<400> 169
Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Lys Pro His Asn Cys Val Tyr Ser Cys
1 5 10 15
Ala Arg Asn Glu Trp Cys Asn Asp Leu Cys Thr Lys Asn Gly Ala Lys
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Val Gly Lys Tyr Gly Asn Gly Cys Trp Cys
35 40 45
Ile Glu Leu Pro Asp Asn Val Pro Ile Arg Val Pro Gly Lys Cys His
50 55 60
<210> 170
<211> 64
<212> PRT
<213> Buthus martensii
<400> 170
Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Lys Pro Glu Asn Cys Val Tyr His Cys
1 5 10 15
Ala Gly Asn Glu Gly Cys Asn Lys Leu Cys Thr Asp Asn Gly Ala Glu
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Gly Gly Arg Tyr Gly Asn Ala Cys Trp Cys
35 40 45
Ile Lys Leu Pro Asp Asp Val Pro Ile Arg Val Pro Gly Lys Cys His
50 55 60
<210> 171
<211> 66
<212> PRT
<213> Buthus martensii
<400> 171
Val Arg Asp Gly Tyr Ile Ala Leu Pro His Asn Cys Ala Tyr Gly Cys
1 5 10 15
Leu Asn Asn Glu Tyr Cys Asn Asn Leu Cys Thr Lys Asp Gly Ala Lys
20 25 30
Ile Gly Tyr Cys Asn Ile Val Gly Lys Tyr Gly Asn Ala Cys Trp Cys
35 40 45
Ile Gln Leu Pro Asp Asn Val Pro Ile Arg Val Pro Gly Arg Cys His
50 55 60
Pro Ala
65
<210> 172
<211> 72
<212> PRT
<213> Buthus martensii
<400> 172
Lys Lys Asn Gly Tyr Ala Val Asp Ser Ser Gly Lys Val Ala Glu Cys
1 5 10 15
Leu Phe Asn Asn Tyr Cys Asn Asn Glu Cys Thr Lys Val Tyr Tyr Ala
20 25 30
Asp Lys Gly Tyr Cys Cys Leu Leu Lys Cys Tyr Cys Phe Gly Leu Ala
35 40 45
Asp Asp Lys Pro Val Leu Asp Ile Trp Asp Ser Thr Lys Asn Tyr Cys
50 55 60
Asp Val Gln Ile Ile Asp Leu Ser
65 70
<210> 173
<211> 66
<212> PRT
<213> buthus occitanus mardochei
<400> 173
Gly Arg Asp Gly Tyr Ile Ala Gln Pro Glu Asn Cys Val Tyr His Cys
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ser Ser Gly Cys Asp Thr Leu Cys Lys Glu Lys Gly Ala
20 25 30
Thr Ser Gly His Cys Gly Phe Leu Pro Gly Ser Gly Val Ala Cys Trp
35 40 45
Cys Asp Asn Leu Pro Asn Lys Val Pro Ile Val Val Gly Gly Glu Lys
50 55 60
Cys His
65
<210> 174
<211> 65
<212> PRT
<213> buthus occitanus mardochei
<400> 174
Gly Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Gln Pro Glu Asn Cys Val Tyr Glu Cys
1 5 10 15
Ala Lys Asn Ser Tyr Cys Asn Asp Leu Cys Thr Lys Asn Gly Ala Lys
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Leu Gly Lys Tyr Gly Asn Ala Cys Trp Cys
35 40 45
Glu Asp Leu Pro Asp Asn Val Pro Ile Arg Ile Pro Gly Lys Cys His
50 55 60
Phe
65
<210> 175
<211> 64
<212> PRT
<213> Hottentotta judaica
<400> 175
Gly Arg Asp Ala Tyr Ala Leu Asp Asn Leu Asn Cys Ala Tyr Thr Cys
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Tyr Cys Asn Thr Glu Cys Thr Lys Asn Gly Ala Val
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Leu Gly Lys Tyr Gly Asn Ala Cys Trp Cys
35 40 45
Ile Asn Leu Pro Asp Lys Val Pro Ile Arg Ile Pro Gly Ala Cys Arg
50 55 60
<210> 176
<211> 76
<212> PRT
<213> Hottentotta judaicus
<400> 176
Lys Lys Asn Gly Tyr Pro Leu Asp Arg Asn Gly Lys Thr Thr Glu Cys
1 5 10 15
Ser Gly Val Asn Ala Ile Ala Pro His Tyr Cys Asn Ser Glu Cys Thr
20 25 30
Lys Val Tyr Tyr Ala Glu Ser Gly Tyr Cys Cys Trp Gly Ala Cys Tyr
35 40 45
Cys Phe Gly Leu Glu Asp Asp Lys Pro Ile Gly Pro Met Lys Asp Ile
50 55 60
Thr Lys Lys Tyr Cys Asp Val Gln Ile Ile Pro Ser
65 70 75
<210> 177
<211> 61
<212> PRT
<213> Hottentotta judaicus
<400> 177
Asp Gly Tyr Ile Arg Lys Lys Asp Gly Cys Lys Val Ser Cys Ile Ile
1 5 10 15
Gly Asn Glu Gly Cys Arg Lys Glu Cys Val Ala His Gly Gly Ser Phe
20 25 30
Gly Tyr Cys Trp Thr Trp Gly Leu Ala Cys Trp Cys Glu Asn Leu Pro
35 40 45
Asp Ala Val Thr Trp Lys Ser Ser Thr Asn Thr Cys Gly
50 55 60
<210> 178
<211> 64
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 178
Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Lys Asn Tyr Asn Cys Val Tyr Glu Cys
1 5 10 15
Phe Arg Asp Ala Tyr Cys Asn Glu Leu Cys Thr Lys Asn Gly Ala Ser
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Ala Gly Lys Tyr Gly Asn Ala Cys Trp Cys
35 40 45
Tyr Ala Leu Pro Asp Asn Val Pro Ile Arg Val Pro Gly Lys Cys Arg
50 55 60
<210> 179
<211> 63
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 179
Asp Asn Gly Tyr Leu Leu Asn Lys Ala Thr Gly Cys Lys Val Trp Cys
1 5 10 15
Val Ile Asn Asn Ala Ser Cys Asn Ser Glu Cys Lys Leu Arg Arg Gly
20 25 30
Asn Tyr Gly Tyr Cys Tyr Phe Trp Lys Leu Ala Cys Tyr Cys Glu Gly
35 40 45
Ala Pro Lys Ser Glu Leu Trp Ala Tyr Ala Thr Asn Lys Cys Asn
50 55 60
<210> 180
<211> 61
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 180
Asp Gly Tyr Ile Lys Arg Arg Asp Gly Cys Lys Val Ala Cys Leu Ile
1 5 10 15
Gly Asn Glu Gly Cys Asp Lys Glu Cys Lys Ala Tyr Gly Gly Ser Tyr
20 25 30
Gly Tyr Cys Trp Thr Trp Gly Leu Ala Cys Trp Cys Glu Gly Leu Pro
35 40 45
Asp Asp Lys Thr Trp Lys Ser Glu Thr Asn Thr Cys Gly
50 55 60
<210> 181
<211> 60
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 181
Asp Gly Tyr Ile Arg Gly Asp Gly Cys Lys Val Ser Cys Val Ile Asn
1 5 10 15
His Val Phe Cys Asp Asn Glu Cys Lys Ala Ala Gly Gly Ser Tyr Gly
20 25 30
Tyr Cys Trp Ala Trp Gly Leu Ala Cys Trp Cys Glu Gly Leu Pro Ala
35 40 45
Glu Arg Glu Trp Lys Tyr Glu Thr Asn Thr Cys Gly
50 55 60
<210> 182
<211> 70
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 182
Lys Lys Asn Gly Phe Ala Val Asp Ser Asn Gly Lys Ala Pro Glu Cys
1 5 10 15
Phe Phe Asp His Tyr Cys Asn Ser Glu Cys Thr Lys Val Tyr Tyr Ala
20 25 30
Glu Lys Gly Tyr Cys Cys Leu Leu Ser Cys Tyr Cys Phe Gly Leu Asn
35 40 45
Asp Asp Lys Lys Val Leu Glu Ile Ser Asp Thr Thr Lys Lys Tyr Cys
50 55 60
Asp Phe Thr Ile Ile Asn
65 70
<210> 183
<211> 67
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 183
Val Arg Asp Gly Tyr Ile Ala Gln Pro Glu Asn Cys Val Tyr His Cys
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ser Ser Gly Cys Asp Thr Leu Cys Lys Glu Lys Gly Gly
20 25 30
Thr Ser Gly His Cys Gly Phe Lys Val Gly His Gly Leu Ala Cys Trp
35 40 45
Cys Asn Ala Leu Pro Asp Asn Val Gly Ile Ile Val Glu Gly Glu Lys
50 55 60
Cys His Ser
65
<210> 184
<211> 64
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 184
Val Arg Asp Gly Tyr Ile Ala Gln Pro Glu Asn Cys Val Tyr His Cys
1 5 10 15
Ile Pro Asp Cys Asp Thr Leu Cys Lys Asp Asn Gly Gly Thr Gly Gly
20 25 30
His Cys Gly Phe Lys Leu Gly His Gly Ile Ala Cys Trp Cys Asn Ala
35 40 45
Leu Pro Asp Asn Val Gly Ile Ile Val Asp Gly Val Lys Cys His Lys
50 55 60
<210> 185
<211> 66
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus hebraeus
<400> 185
Val Arg Asp Gly Tyr Ile Ala Lys Pro Glu Asn Cys Ala His His Cys
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ser Ser Gly Cys Asp Thr Leu Cys Lys Glu Asn Gly Gly
20 25 30
Thr Gly Gly His Cys Gly Phe Lys Val Gly His Gly Thr Ala Cys Trp
35 40 45
Cys Asn Ala Leu Pro Asp Lys Val Gly Ile Ile Val Asp Gly Val Lys
50 55 60
Cys His
65
<210> 186
<211> 70
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus quinquestriatus
<400> 186
Lys Lys Asn Gly Tyr Ala Val Asp Ser Ser Gly Lys Ala Pro Glu Cys
1 5 10 15
Leu Leu Ser Asn Tyr Cys Tyr Asn Glu Cys Thr Lys Val His Tyr Ala
20 25 30
Asp Lys Gly Tyr Cys Cys Leu Leu Ser Cys Tyr Cys Val Gly Leu Ser
35 40 45
Asp Asp Lys Lys Val Leu Glu Ile Ser Asp Ala Arg Lys Lys Tyr Cys
50 55 60
Asp Phe Val Thr Ile Asn
65 70
<210> 187
<211> 61
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus quinquestriatus
<400> 187
Asp Gly Tyr Ile Arg Lys Arg Asp Gly Cys Lys Leu Ser Cys Leu Phe
1 5 10 15
Gly Asn Glu Gly Cys Asn Lys Glu Cys Lys Ser Tyr Gly Gly Ser Tyr
20 25 30
Gly Tyr Cys Trp Thr Trp Gly Leu Ala Cys Trp Cys Glu Gly Leu Pro
35 40 45
Asp Glu Lys Thr Trp Lys Ser Glu Thr Asn Thr Cys Gly
50 55 60
<210> 188
<211> 64
<212> PRT
<213> Leiurus quinquestriatus quinquestriatus
<400> 188
Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Lys Asn Tyr Asn Cys Val Tyr Glu Cys
1 5 10 15
Phe Arg Asp Ser Tyr Cys Asn Asp Leu Cys Thr Lys Asn Gly Ala Ser
20 25 30
Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Ala Gly Lys Tyr Gly Asn Ala Cys Trp Cys
35 40 45
Tyr Ala Leu Pro Asp Asn Val Pro Ile Arg Val Pro Gly Lys Cys His
50 55 60
<210> 189
<211> 65
<212> PRT
<213> Odonthobuthus doriae
<400> 189
Gly Val Arg Asp Ala Tyr Ile Ala Asp Asp Lys Asn Cys Val Tyr Thr
1 5 10 15
Cys Ala Ser Asn Gly Tyr Cys Asn Thr Glu Cys Thr Lys Asn Gly Ala
20 25 30
Glu Ser Gly Tyr Cys Gln Trp Ile Gly Arg Tyr Gly Asn Ala Cys Trp
35 40 45
Cys Ile Lys Leu Pro Asp Glu Val Pro Ile Arg Ile Pro Gly Lys Cys
50 55 60
Arg
65
<210> 190
<211> 61
<212> PRT
<213> Tityus serrulatus
<400> 190
Lys Glu Gly Tyr Leu Met Asp His Glu Gly Cys Lys Leu Ser Cys Phe
1 5 10 15
Ile Arg Pro Ser Gly Tyr Cys Gly Arg Glu Cys Gly Ile Lys Lys Gly
20 25 30
Ser Ser Gly Tyr Cys Ala Trp Pro Ala Cys Tyr Cys Tyr Gly Leu Pro
35 40 45
Asn Trp Val Lys Val Trp Asp Arg Ala Thr Asn Lys Cys
50 55 60
<210> 191
<211> 64
<212> PRT
<213> Tityus zulianus
<400> 191
Lys Asp Gly Tyr Leu Val Gly Asn Asp Gly Cys Lys Tyr Ser Cys Phe
1 5 10 15
Thr Arg Pro Gly Thr Tyr Cys Ala Asn Glu Cys Ser Arg Val Lys Gly
20 25 30
Lys Asp Gly Tyr Cys Tyr Ala Trp Met Ala Cys Tyr Cys Tyr Ser Met
35 40 45
Pro Asn Trp Val Lys Thr Trp Asp Arg Ala Thr Asn Arg Cys Gly Arg
50 55 60
<210> 192
<211> 32
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 192
Val Phe Cys Arg Ser Asn Gly Gln Gln Cys Thr Ser Asp Gly Gln Cys
1 5 10 15
Cys Tyr Gly Lys Cys Met Thr Ala Phe Met Gly Lys Ile Cys Met Arg
20 25 30
<210> 193
<211> 31
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 193
Val Phe Cys Arg Phe Asn Gly Gln Gln Cys Thr Ser Asp Gly Gln Cys
1 5 10 15
Cys Tyr Gly Lys Cys Arg Thr Ala Phe Met Gly Lys Ile Cys Met
20 25 30
<210> 194
<211> 33
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 194
Val Phe Cys Arg Phe Asn Gly Gln Gln Cys Thr Ser Asp Gly Gln Cys
1 5 10 15
Cys Tyr Gly Lys Cys Arg Thr Ala Phe Leu Arg Met Ile Cys Met Gly
20 25 30
Gly
<210> 195
<211> 35
<212> PRT
<213> Allagelena opulenta
<400> 195
Gly Gly Cys Leu Pro His Asn Arg Phe Cys Asn Ala Leu Ser Gly Pro
1 5 10 15
Arg Cys Cys Ser Gly Leu Lys Cys Lys Glu Leu Ser Ile Trp Asp Ser
20 25 30
Arg Cys Leu
35
<210> 196
<211> 68
<212> PRT
<213> Cupiennius salei
<400> 196
Lys Asp Asp Lys Asn Cys Ile Pro Lys His His Glu Cys Thr Asn Asp
1 5 10 15
Lys Lys Asn Cys Cys Lys Lys Gly Leu Thr Lys Met Lys Cys Lys Cys
20 25 30
Phe Thr Val Ala Asp Ala Lys Gly Ala Thr Ser Glu Arg Cys Ala Cys
35 40 45
Asp Ser Ser Leu Leu Gln Lys Phe Gly Phe Thr Gly Leu His Ile Ile
50 55 60
Lys Gly Leu Phe
65
<210> 197
<211> 80
<212> PRT
<213> Calisoga sp.
<400> 197
Met Lys Tyr Phe Val Val Phe Cys Val Leu Ile Ile Ala Val Ala Ala
1 5 10 15
Phe Thr Ser Ala Ala Glu Asp Gly Glu Val Phe Glu Glu Asn Pro Leu
20 25 30
Glu Phe Pro Lys Thr Ile Gln Lys Arg Cys Ile Ser Ala Arg Tyr Pro
35 40 45
Cys Ser Asn Ser Lys Asp Cys Cys Ser Gly Asn Cys Gly Thr Phe Trp
50 55 60
Thr Cys Tyr Ile Arg Lys Asp Pro Cys Ser Lys Glu Cys Leu Ala Pro
65 70 75 80
<210> 198
<211> 39
<212> PRT
<213> Calisoga sp.
<400> 198
Cys Ile Ser Ala Arg Tyr Pro Cys Ser Asn Ser Lys Asp Cys Cys Ser
1 5 10 15
Gly Asn Cys Gly Thr Phe Trp Thr Cys Phe Ile Arg Lys Asp Pro Cys
20 25 30
Ser Lys Glu Cys Leu Ala Pro
35
<210> 199
<211> 39
<212> PRT
<213> Calisoga sp.
<400> 199
Cys Ile Ser Ala Arg Tyr Pro Cys Ser Asn Ser Lys Asp Cys Cys Ser
1 5 10 15
Gly Ser Cys Gly Ile Phe Trp Thr Cys Tyr Leu Arg Lys Asp Pro Cys
20 25 30
Ser Lys Glu Cys Leu Ala Pro
35
<210> 200
<211> 82
<212> PRT
<213> Plectreurys tristis
<400> 200
Met Lys His Leu Ile Phe Ser Ser Ala Leu Val Cys Ala Leu Val Val
1 5 10 15
Cys Thr Phe Ala Glu Glu Gln Val Asn Val Pro Phe Leu Pro Asp Glu
20 25 30
Arg Ala Val Lys Cys Ile Gly Trp Gln Glu Thr Cys Asn Gly Asn Leu
35 40 45
Pro Cys Cys Asn Glu Cys Val Met Cys Glu Cys Asn Ile Met Gly Gln
50 55 60
Asn Cys Arg Cys Asn His Pro Lys Ala Thr Asn Glu Cys Glu Ser Arg
65 70 75 80
Arg Arg
<210> 201
<211> 61
<212> PRT
<213> Plectreurys tristis
<400> 201
Glu Glu Gln Val Asn Val Pro Phe Leu Pro Asp Glu Arg Ala Val Lys
1 5 10 15
Cys Ile Gly Trp Gln Glu Thr Cys Asn Gly Gln Leu Pro Cys Cys Asp
20 25 30
Gly Cys Val Met Cys Glu Cys Asn Ile Met Gly Gln Asn Cys Arg Cys
35 40 45
Asn His Pro Lys Met Thr Ser Glu Cys Gly Ser Arg Arg
50 55 60
<210> 202
<211> 79
<212> PRT
<213> Plectreurys tristis
<400> 202
His Leu Ile Leu Ala Ser Ala Leu Ile Cys Ala Leu Val Val Cys Thr
1 5 10 15
Phe Ala Glu Glu Gln Val Asn Val Pro Phe Leu Pro Asp Glu Arg Glu
20 25 30
Val Lys Cys Ile Gly Trp Gln Glu Tyr Cys Arg Gly Asn Leu Pro Cys
35 40 45
Cys Asp Asp Cys Val Met Cys Glu Cys Asn Ile Met Gly Gln Asn Cys
50 55 60
Arg Cys Asn His Pro Arg Ile Thr Ser Glu Cys Gly Ser Arg Arg
65 70 75
<210> 203
<211> 45
<212> PRT
<213> Plectreurys tristis
<400> 203
Ala Val Lys Cys Ile Gly Trp Gln Glu Thr Cys Asn Gly Asn Leu Pro
1 5 10 15
Cys Cys Asn Glu Cys Val Met Cys Glu Cys Asn Ile Met Gly Gln Asn
20 25 30
Cys Arg Cys Asn His Pro Lys Ala Thr Asn Glu Cys Glu
35 40 45
<210> 204
<211> 46
<212> PRT
<213> Plectreurys tristis
<400> 204
Ala Val Lys Cys Ile Gly Trp Gln Glu Thr Cys Asn Gly Lys Leu Pro
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Cys Val Met Cys Glu Cys Asn Ile Met Gly Gln Asn
20 25 30
Cys Arg Cys Asn His Pro Lys Ala Thr Ser Glu Cys Glu Ser
35 40 45
<210> 205
<211> 31
<212> PRT
<213> Coremiocnemis valida
<400> 205
Ala Cys Ser Arg Ala Gly Glu Asn Cys Tyr Lys Ser Gly Arg Cys Cys
1 5 10 15
Asp Gly Leu Tyr Cys Lys Ala Tyr Val Val Thr Cys Tyr Lys Pro
20 25 30
<210> 206
<211> 85
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 206
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Leu Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Ile Glu Lys Glu Gly Asp Lys
50 55 60
Pro Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn
65 70 75 80
Met Cys Val Lys Val
85
<210> 207
<211> 84
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 207
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Glu Ser Gln Leu Met Glu
20 25 30
Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg Leu
35 40 45
Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Ile Glu Lys Glu Gly Asp Lys Pro
50 55 60
Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn Met
65 70 75 80
Cys Val Lys Val
<210> 208
<211> 85
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 208
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Ser Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Leu Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Ile Glu Lys Glu Gly Asp Lys
50 55 60
Pro Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn
65 70 75 80
Met Cys Val Lys Val
85
<210> 209
<211> 37
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 209
Leu Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Gln Glu Lys Glu Gly Asp Lys
1 5 10 15
Pro Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn
20 25 30
Met Cys Val Lys Val
35
<210> 210
<211> 85
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 210
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Pro Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Ile Glu Lys Glu Gly Asp Lys
50 55 60
Pro Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn
65 70 75 80
Met Cys Val Lys Val
85
<210> 211
<211> 84
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 211
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Glu Ser Gln Leu Met Glu
20 25 30
Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg Pro
35 40 45
Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Ile Glu Lys Glu Gly Asp Lys Pro
50 55 60
Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn Met
65 70 75 80
Cys Val Lys Val
<210> 212
<211> 85
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 212
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Leu Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Ile Glu Lys Glu Gly Asp Lys
50 55 60
Pro Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn
65 70 75 80
Met Cys Val Lys Phe
85
<210> 213
<211> 85
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 213
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Leu Phe Glu Cys Ser Phe Ser Cys Glu Ile Glu Lys Glu Gly Asp Lys
50 55 60
Leu Cys Lys Lys Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn
65 70 75 80
Met Cys Val Lys Val
85
<210> 214
<211> 83
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 214
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Glu Ser Gln Leu Met Glu
20 25 30
Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg Leu
35 40 45
Phe Glu Cys Ser Ile Ser Cys Glu Ile Glu Lys Lys Gly Glu Ser Cys
50 55 60
Lys Pro Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn Met Cys
65 70 75 80
Val Lys Val
<210> 215
<211> 84
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 215
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Phe Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Leu Phe Glu Cys Ser Ile Ser Cys Glu Ile Glu Lys Lys Gly Glu Ser
50 55 60
Cys Lys Pro Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn Met
65 70 75 80
Cys Val Lys Val
<210> 216
<211> 84
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 216
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Leu Phe Glu Cys Ser Ile Ser Cys Glu Ile Glu Lys Lys Gly Glu Ser
50 55 60
Cys Lys Pro Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn Met
65 70 75 80
Cys Val Lys Val
<210> 217
<211> 83
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 217
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Glu Ser Gln Leu Met Glu
20 25 30
Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg Leu
35 40 45
Phe Glu Cys Ser Ile Ser Cys Glu Ile Glu Lys Lys Gly Glu Ser Cys
50 55 60
Lys Pro Lys Lys Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn Met Cys
65 70 75 80
Val Lys Val
<210> 218
<211> 84
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 218
Met Lys Val Thr Leu Ile Ala Ile Leu Thr Cys Ala Ala Val Leu Val
1 5 10 15
Leu His Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Glu Ala Glu Ser Gln Leu Met
20 25 30
Glu Val Gly Met Pro Asp Thr Glu Leu Ala Ala Val Asp Glu Glu Arg
35 40 45
Leu Phe Glu Cys Ser Ile Ser Cys Glu Ile Glu Lys Lys Gly Glu Ser
50 55 60
Cys Lys Pro Lys Glu Cys Lys Gly Gly Trp Lys Cys Lys Phe Asn Met
65 70 75 80
Cys Val Lys Val
<210> 219
<211> 70
<212> PRT
<213> Agelena orientalis
<400> 219
Met Arg Ala Ile Ile Ser Leu Phe Leu Ile Ser Ala Met Val Phe Ser
1 5 10 15
Met Ile Gln Ala Val Pro Glu Glu Glu Gly Leu Gln Leu Ser Glu Asp
20 25 30
Glu Arg Gly Gly Cys Leu Pro His Asn Arg Phe Cys Asn Ala Leu Ser
35 40 45
Gly Pro Arg Cys Cys Ser Gly Leu Lys Cys Lys Glu Leu Ser Ile Trp
50 55 60
Asp Ser Arg Cys Leu Gly
65 70
<210> 220
<211> 35
<212> PRT
<213> Agelena opulenta
<400> 220
Gly Gly Cys Leu Pro His Asn Arg Phe Cys Asn Ala Leu Ser Gly Pro
1 5 10 15
Arg Cys Cys Ser Gly Leu Lys Cys Lys Glu Leu Ser Ile Trp Asp Ser
20 25 30
Arg Cys Leu
35
<210> 221
<211> 63
<212> PRT
<213> Cupiennius salei
<400> 221
Ser Asp Cys Thr Leu Arg Asn His Asp Cys Thr Asp Asp Arg His Ser
1 5 10 15
Cys Cys Arg Ser Lys Met Phe Lys Asp Val Cys Thr Cys Phe Tyr Pro
20 25 30
Ser Gln Ala Lys Lys Glu Leu Cys Thr Cys Gln Gln Pro Lys His Leu
35 40 45
Lys Tyr Ile Glu Lys Gly Leu Gln Lys Ala Lys Asp Tyr Ala Thr
50 55 60
<210> 222
<211> 88
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 222
Met Lys Val Ala Ile Leu Ile Leu Ser Ile Leu Val Leu Ala Val Ala
1 5 10 15
Ser Glu Thr Ile Glu Glu Tyr Arg Asp Asp Phe Ala Val Glu Glu Leu
20 25 30
Glu Arg Ala Thr Cys Ala Gly Gln Asp Lys Pro Cys Lys Glu Thr Cys
35 40 45
Asp Cys Cys Gly Glu Arg Gly Glu Cys Val Cys Ala Leu Ser Tyr Glu
50 55 60
Gly Lys Tyr Arg Cys Ile Cys Arg Gln Gly Asn Phe Leu Ile Ala Trp
65 70 75 80
His Lys Leu Ala Ser Cys Lys Lys
85
<210> 223
<211> 37
<212> PRT
<213> Apomastus schlingeri
<400> 223
Cys Asn Ser Lys Gly Thr Pro Cys Thr Asn Ala Asp Glu Cys Cys Gly
1 5 10 15
Gly Lys Cys Ala Tyr Asn Val Trp Asn Cys Ile Gly Gly Gly Cys Ser
20 25 30
Lys Thr Cys Gly Tyr
35
<210> 224
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 224
Lys Glu Cys Met Thr Asp Gly Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asp Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Ser Asn Gly Pro Ile Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Glu Met Met Val Gly Asn Cys Met Cys Gly Pro Lys Ala
35 40 45
<210> 225
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 225
Lys Glu Cys Met Ala Asp Glu Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asn Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Leu Asn Gly Pro Tyr Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Glu Met Leu Val Gly Asn Cys Lys Cys Gly Pro Lys Glu
35 40 45
<210> 226
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 226
Lys Glu Cys Met Val Asp Gly Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asp Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Leu Asn Gly Pro Ile Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Glu Met Met Val Gly Asn Cys Lys Cys Gly Pro Lys Ala
35 40 45
<210> 227
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 227
Lys Glu Cys Met Val Asp Gly Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asp Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Leu Asn Gly Pro Ile Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Lys Met Met Val Gly Asn Cys Lys Cys Gly Pro Lys Ala
35 40 45
<210> 228
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 228
Lys Glu Cys Met Val Asp Gly Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asp Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Pro Asn Gly Pro Leu Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Glu Met Leu Val Gly Asn Cys Lys Cys Gly Pro Lys Ala
35 40 45
<210> 229
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 229
Lys Glu Cys Met Thr Asp Glu Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asp Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Leu Asn Gly Pro Ile Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Glu Met Met Val Gly Asn Cys Lys Cys Gly Pro Lys Ala
35 40 45
<210> 230
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 230
Lys Glu Cys Met Ala Asp Gly Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asp Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Pro Asn Gly Pro Leu Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Glu Val Leu Val Gly Asn Cys Lys Cys Gly Pro Lys Ala
35 40 45
<210> 231
<211> 46
<212> PRT
<213> Segestria florentina
<400> 231
Lys Glu Cys Met Ala Asp Gly Thr Val Cys Tyr Ile His Asn His Asn
1 5 10 15
Asp Cys Cys Gly Ser Cys Leu Cys Pro Asn Gly Pro Leu Ala Arg Pro
20 25 30
Trp Glu Met Leu Val Gly Asn Cys Lys Cys Gly Pro Lys Ala
35 40 45
<210> 232
<211> 87
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 232
Met Val Asn Met Lys Ala Ser Met Phe Leu Thr Phe Ala Gly Leu Val
1 5 10 15
Leu Leu Phe Val Val Cys Tyr Ala Ser Glu Ser Glu Glu Lys Glu Phe
20 25 30
Pro Lys Glu Met Leu Ser Ser Ile Phe Ala Val Asp Asn Asp Phe Lys
35 40 45
Gln Glu Glu Arg Asp Cys Ala Gly Tyr Met Arg Glu Cys Lys Glu Lys
50 55 60
Leu Cys Cys Ser Gly Tyr Val Cys Ser Ser Arg Trp Lys Trp Cys Val
65 70 75 80
Leu Pro Ala Pro Trp Arg Arg
85
<210> 233
<211> 32
<212> PRT
<213> Apomastus schlingeri
<400> 233
Trp Leu Gly Cys Ala Arg Val Lys Glu Ala Cys Gly Pro Trp Glu Trp
1 5 10 15
Pro Cys Cys Ser Gly Leu Lys Cys Asp Gly Ser Glu Cys His Pro Gln
20 25 30
<210> 234
<211> 49
<212> PRT
<213> Plectreurys tristis
<400> 234
Gly Cys Lys Gly Phe Leu Val Lys Cys Asp Ser Asn Ser Glu Cys Cys
1 5 10 15
Lys Thr Ala Ile Val Lys Gly Lys Lys Lys Gln Leu Ser Cys Leu Cys
20 25 30
Gly Ala Trp Gly Ala Gly Cys Ser Cys Ser Phe Arg Cys Gly Asn Arg
35 40 45
Cys
<210> 235
<211> 32
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 235
Ser Phe Cys Ile Pro Phe Lys Pro Cys Lys Ser Asp Glu Asn Cys Cys
1 5 10 15
Lys Lys Phe Lys Cys Lys Thr Thr Gly Ile Val Lys Leu Cys Arg Trp
20 25 30
<210> 236
<211> 54
<212> PRT
<213> Phoneutria keyserlingi
<400> 236
Ala Thr Cys Ala Gly Gln Asp Lys Pro Cys Lys Glu Thr Cys Asp Cys
1 5 10 15
Cys Gly Glu Arg Gly Glu Cys Val Cys Gly Leu Ser Tyr Glu Gly Lys
20 25 30
Tyr Arg Cys Ile Cys Arg Gln Gly Thr Phe Leu Ile Ala Trp Tyr Lys
35 40 45
Leu Ala Ser Cys Lys Lys
50
<210> 237
<211> 79
<212> PRT
<213> Macrothele gigas
<400> 237
Met Lys Ala Pro Ala Thr Thr Leu Ile Leu Val Met Ser Leu Ile Ser
1 5 10 15
Val Leu Trp Ala Thr Pro Asp Leu Glu Glu Gly Asp Leu Leu Ala Glu
20 25 30
Leu Gly Asp Leu Ile Ala Thr Asp Asp Glu Tyr Pro Met Lys Pro Glu
35 40 45
Glu Arg Gly Cys Lys Leu Thr Phe Trp Lys Cys Lys Asn Lys Lys Glu
50 55 60
Cys Cys Gly Trp Asn Ala Cys Ala Leu Gly Ile Cys Met Pro Arg
65 70 75
<210> 238
<211> 29
<212> PRT
<213> Macrothele raveni
<400> 238
Gly Cys Lys Leu Thr Phe Trp Lys Cys Lys Asn Lys Lys Glu Cys Cys
1 5 10 15
Gly Trp Asn Ala Cys Ala Leu Gly Ile Cys Met Pro Arg
20 25
<210> 239
<211> 81
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 239
Met Lys Val Ala Ile Val Phe Leu Ser Leu Leu Val Leu Ala Phe Ala
1 5 10 15
Ser Glu Ser Ile Glu Glu Asn Arg Glu Glu Phe Pro Val Glu Glu Ser
20 25 30
Ala Arg Cys Ala Asp Ile Asn Gly Ala Cys Lys Ser Asp Cys Asp Cys
35 40 45
Cys Gly Asp Ser Val Thr Cys Asp Cys Tyr Trp Ser Asp Ser Cys Lys
50 55 60
Cys Arg Glu Ser Asn Phe Lys Ile Gly Met Ala Ile Arg Lys Lys Phe
65 70 75 80
Cys
<210> 240
<211> 42
<212> PRT
<213> Missulena bradleyi
<400> 240
Cys Ala Lys Lys Arg Glu Trp Cys Ala Lys Thr Glu Asp Cys Cys Cys
1 5 10 15
Pro Met Lys Cys Ile Tyr Ala Trp Tyr Asn Glu Gln Ser Ser Cys Gln
20 25 30
Thr Thr Phe Ser Gly Met Phe Lys Lys Cys
35 40
<210> 241
<211> 37
<212> PRT
<213> Pireneitega luctuosa
<400> 241
Gly Cys Leu Gly Glu Gly Glu Lys Cys Ala Asp Trp Ser Gly Pro Ser
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Phe Tyr Cys Ser Cys Arg Ser Met Pro Tyr Cys Arg
20 25 30
Cys Arg Asn Asn Ser
35
<210> 242
<211> 37
<212> PRT
<213> Pireneitega luctuosa
<400> 242
Ala Cys Val Gly Asp Gly Gln Arg Cys Ala Ser Trp Ser Gly Pro Tyr
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Tyr Tyr Cys Ser Cys Arg Ser Met Pro Tyr Cys Arg
20 25 30
Cys Arg Asn Asn Ser
35
<210> 243
<211> 36
<212> PRT
<213> Pireneitega luctuosa
<400> 243
Ala Asp Cys Leu Asn Glu Gly Asp Trp Cys Ala Asp Trp Ser Gly Pro
1 5 10 15
Ser Cys Cys Gly Glu Met Trp Cys Ser Cys Pro Gly Phe Gly Lys Cys
20 25 30
Arg Cys Lys Lys
35
<210> 244
<211> 37
<212> PRT
<213> Pireneitega luctuosa
<400> 244
Ala Cys Ala Thr Lys Asn Gln Arg Cys Ala Ser Trp Ala Gly Pro Tyr
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Phe Tyr Cys Ser Cys Arg Ser Tyr Pro Gly Cys Met
20 25 30
Cys Arg Pro Asn Ser
35
<210> 245
<211> 47
<212> PRT
<213> Ancylometes sp.
<400> 245
Ala Thr Cys Ala Gly Gln Asp Lys Pro Cys Lys Val Asn Cys Asp Cys
1 5 10 15
Cys Gly Glu Arg Gly Glu Cys Val Cys Gly Gly Pro Cys Ile Cys Arg
20 25 30
Gln Gly Asn Val Phe Ile Ala Trp Ser Lys Leu Met Thr Cys Lys
35 40 45
<210> 246
<211> 48
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 246
Cys Gly Asp Ile Asn Ala Ala Cys Lys Glu Asp Cys Asp Cys Cys Gly
1 5 10 15
Tyr Thr Thr Ala Cys Asp Cys Tyr Trp Ser Lys Ser Cys Lys Cys Arg
20 25 30
Glu Ala Ala Ile Val Ile Tyr Thr Ala Pro Lys Lys Lys Leu Thr Cys
35 40 45
<210> 247
<211> 82
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 247
Met Lys Val Ala Ile Val Phe Leu Ser Leu Leu Val Leu Ala Phe Ala
1 5 10 15
Ser Glu Ser Ile Glu Glu Asn Arg Glu Glu Phe Pro Val Glu Glu Ser
20 25 30
Ala Arg Cys Gly Asp Ile Asn Ala Ala Cys Lys Glu Asp Cys Asp Cys
35 40 45
Cys Gly Tyr Thr Thr Ala Cys Asp Cys Tyr Trp Ser Lys Ser Cys Lys
50 55 60
Cys Arg Glu Ala Ala Ile Val Ile Tyr Thr Ala Pro Lys Lys Lys Leu
65 70 75 80
Thr Cys
<210> 248
<211> 48
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 248
Cys Gly Asp Ile Asn Ala Ala Cys Lys Glu Asp Cys Asp Cys Cys Gly
1 5 10 15
Tyr Thr Thr Ala Cys Asp Cys Tyr Trp Ser Ser Ser Cys Lys Cys Arg
20 25 30
Glu Ala Ala Ile Val Ile Tyr Thr Ala Pro Lys Lys Lys Leu Thr Cys
35 40 45
<210> 249
<211> 82
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 249
Met Lys Val Ala Ile Leu Phe Leu Ser Ile Leu Val Leu Ala Val Ala
1 5 10 15
Ser Glu Ser Ile Glu Glu Ser Arg Asp Asp Phe Ala Val Glu Glu Leu
20 25 30
Gly Arg Ala Thr Cys Ala Gly Gln Asp Gln Pro Cys Lys Glu Thr Cys
35 40 45
Asp Cys Cys Gly Glu Arg Gly Glu Cys Val Cys Gly Gly Pro Cys Ile
50 55 60
Cys Arg Gln Gly Tyr Phe Trp Ile Ala Trp Tyr Lys Leu Ala Asn Cys
65 70 75 80
Lys Lys
<210> 250
<211> 49
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 250
Ala Thr Cys Ala Gly Gln Asp Gln Thr Cys Lys Val Thr Cys Asp Cys
1 5 10 15
Cys Gly Glu Arg Gly Glu Cys Val Cys Gly Gly Pro Cys Ile Cys Arg
20 25 30
Gln Gly Asn Phe Leu Ile Ala Ala Tyr Lys Leu Ala Ser Cys Lys Cys
35 40 45
Lys
<210> 251
<211> 82
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 251
Met Lys Val Ala Ile Leu Phe Leu Ser Ile Leu Val Leu Ala Val Ala
1 5 10 15
Ser Glu Ser Ile Glu Glu Ser Arg Asp Asp Phe Ala Val Glu Glu Leu
20 25 30
Gly Arg Ala Thr Cys Ala Gly Gln Asp Gln Thr Cys Lys Val Thr Cys
35 40 45
Asp Cys Cys Gly Glu Arg Gly Glu Cys Val Cys Gly Gly Pro Cys Ile
50 55 60
Cys Arg Gln Gly Asn Phe Leu Ile Ala Trp Tyr Lys Leu Ala Ser Cys
65 70 75 80
Lys Lys
<210> 252
<211> 47
<212> PRT
<213> Phoneutria reidyi
<400> 252
Gly Thr Cys Ala Gly Gln Asp Lys Pro Cys Lys Glu Thr Cys Asp Cys
1 5 10 15
Cys Gly Glu Arg Gly Gln Cys Val Cys Glu Gly Pro Cys Ile Cys Arg
20 25 30
Gln Gly Tyr Phe Trp Ile Ala Ala Tyr Lys Leu Gly Asn Cys Lys
35 40 45
<210> 253
<211> 42
<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 253
Cys Ala Lys Lys Arg Asn Trp Cys Gly Lys Asn Glu Asp Cys Cys Cys
1 5 10 15
Pro Met Lys Cys Ile Tyr Ala Trp Tyr Asn Gln Gln Gly Ser Cys Gln
20 25 30
Thr Thr Ile Thr Gly Leu Phe Lys Lys Cys
35 40
<210> 254
<211> 42
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 254
Cys Ala Lys Lys Arg Asn Trp Cys Gly Lys Thr Glu Asp Cys Cys Cys
1 5 10 15
Pro Met Lys Cys Val Tyr Ala Trp Tyr Asn Glu Gln Gly Ser Cys Gln
20 25 30
Ser Thr Ile Ser Ala Leu Trp Lys Lys Cys
35 40
<210> 255
<211> 42
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 255
Cys Ser Arg Ser Asp Gly Trp Cys Gly Lys Thr Glu Asp Cys Cys Cys
1 5 10 15
Pro Met Lys Cys Ile Lys Ala Trp Tyr Lys Gln Asn Gly Asn Cys Gln
20 25 30
Asn Thr Ile Ser Ala Ile Trp Lys Asn Cys
35 40
<210> 256
<211> 42
<212> PRT
<213> Illawara wisharti
<400> 256
Cys Ala Lys Lys Arg Asn Trp Cys Gly Lys Asn Glu Asp Cys Cys Cys
1 5 10 15
Pro Met Lys Cys Ile Tyr Ala Trp Tyr Asn Gln Gln Gly Ser Cys Gln
20 25 30
Ser Thr Ile Thr Gly Leu Phe Lys Lys Cys
35 40
<210> 257
<211> 105
<212> PRT
<213> Macrothele gigas
<400> 257
Met Lys Thr Leu Val Ile Ala Cys Val Ala Leu Val Leu Val Val Val
1 5 10 15
His Gly Glu Val Ile Glu Glu Val Asn Glu Lys Gln Leu Gln Glu Ser
20 25 30
Val Glu Glu Lys Tyr Ser Leu Leu Gln Arg Leu Glu Lys Leu Asp Glu
35 40 45
Ala Ile Thr Ala Glu Glu Asn Arg Asn Ser Arg Val Arg Arg Cys Gly
50 55 60
Ser Lys Arg Ala Trp Cys Lys Glu Lys Lys Asp Cys Cys Cys Gly Tyr
65 70 75 80
Asn Cys Val Tyr Ala Trp Tyr Asn Gln Gln Ser Ser Cys Glu Arg Lys
85 90 95
Trp Lys Tyr Leu Phe Thr Gly Glu Cys
100 105
<210> 258
<211> 70
<212> PRT
<213> Macrothele gigas
<400> 258
Met Lys Ile Leu Glu Lys Ala Leu Leu Glu Asn Asp Ser Ala Ala Glu
1 5 10 15
Glu Glu Ser Arg Asn Leu Arg Thr Lys Arg Cys Ala Arg Lys Arg Ala
20 25 30
Trp Cys Glu Lys Thr Glu Asn Cys Cys Cys Pro Met Lys Cys Ile Tyr
35 40 45
Ala Trp Tyr Asn Gly Gln Ser Ser Cys Asp His Thr Ile Ser Thr Ile
50 55 60
Trp Thr Ser Cys Pro Lys
65 70
<210> 259
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche formidabilis
<400> 259
Ser Pro Thr Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala Ala Cys Cys Pro
1 5 10 15
Cys Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Gly Pro Glu Pro Asn Gly Val Ser
20 25 30
Tyr Cys Arg Asn Asp
35
<210> 260
<211> 36
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 260
Thr Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala Ala Cys Cys Pro Cys
1 5 10 15
Cys Pro Gly Thr Ser Cys Gln Gly Pro Glu Ser Asn Gly Val Val Tyr
20 25 30
Cys Arg Asn Phe
35
<210> 261
<211> 36
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 261
Thr Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala Ala Cys Cys Pro Cys
1 5 10 15
Cys Pro Gly Thr Ser Cys Gln Gly Pro Glu Pro Asn Gly Val Ser Tyr
20 25 30
Cys Arg Asn Asp
35
<210> 262
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 262
Ala Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala Ala Cys Cys Pro Cys
1 5 10 15
Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn Gly Val Ser Tyr Cys
20 25 30
Arg Lys Asp Glu Pro
35
<210> 263
<211> 74
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 263
Met Asn Thr Ala Thr Cys Phe Ile Val Leu Leu Asp Val Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Ser Asp Met Arg Lys Asp Val Met
20 25 30
Gly Leu Phe Arg Arg Ala Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala
35 40 45
Ala Cys Cys Pro Cys Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn
50 55 60
Gly Val Ser Tyr Cys Arg Lys Asp Glu Pro
65 70
<210> 264
<211> 74
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 264
Met Asn Thr Ala Thr Cys Phe Ile Val Leu Leu Val Val Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Phe Asp Met Arg Lys Asp Val Met
20 25 30
Gly Leu Phe Arg Arg Ala Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala
35 40 45
Ala Cys Cys Pro Cys Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn
50 55 60
Gly Val Ser Tyr Cys Arg Lys Asp Glu Pro
65 70
<210> 265
<211> 74
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 265
Met Asn Thr Ala Thr Cys Phe Ile Val Phe Leu Val Val Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Ser Asp Met Arg Lys Asp Val Met
20 25 30
Gly Leu Phe Arg Arg Ala Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala
35 40 45
Ala Cys Cys Pro Cys Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn
50 55 60
Gly Val Ser Tyr Cys Arg Lys Asp Glu Pro
65 70
<210> 266
<211> 74
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 266
Met Asn Thr Ala Thr Cys Phe Ile Val Leu Leu Val Val Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Ser Asp Met Arg Lys Asp Val Met
20 25 30
Gly Leu Phe Arg Arg Val Ile Cys Thr Gly Ala Asp Ser Pro Cys Ala
35 40 45
Ala Cys Cys Pro Cys Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn
50 55 60
Gly Val Ser Tyr Cys Arg Lys Asp Glu Pro
65 70
<210> 267
<211> 74
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 267
Met Asn Thr Ala Thr Cys Phe Ile Val Leu Leu Val Val Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Phe Asp Met Arg Lys Asp Val Met
20 25 30
Gly Leu Phe Arg Arg Ala Ile Cys Pro Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala
35 40 45
Ala Cys Cys Pro Cys Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn
50 55 60
Gly Val Phe Tyr Cys Arg Lys Asp Glu Pro
65 70
<210> 268
<211> 29
<212> PRT
<213> Eucratoscelus constrictus
<400> 268
Tyr Cys Gln Lys Phe Leu Trp Thr Cys Asp Thr Glu Arg Lys Cys Cys
1 5 10 15
Glu Asp Met Val Cys Glu Leu Trp Cys Lys Leu Glu Lys
20 25
<210> 269
<211> 29
<212> PRT
<213> Eucratoscelus constrictus
<400> 269
Tyr Cys Gln Lys Phe Leu Trp Thr Cys Asp Thr Glu Arg Lys Cys Cys
1 5 10 15
Glu Asp Met Val Cys Glu Leu Trp Cys Lys Tyr Lys Glu
20 25
<210> 270
<211> 36
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 270
Glu Cys Val Pro Glu Asn Gly His Cys Arg Asp Trp Tyr Asp Glu Cys
1 5 10 15
Cys Glu Gly Phe Tyr Cys Ser Cys Arg Gln Pro Pro Lys Cys Ile Cys
20 25 30
Arg Asn Asn Asn
35
<210> 271
<211> 37
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 271
Glu Cys Ala Thr Lys Asn Lys Arg Cys Ala Asp Trp Ala Gly Pro Trp
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Leu Tyr Cys Ser Cys Arg Ser Tyr Pro Gly Cys Met
20 25 30
Cys Arg Pro Ser Ser
35
<210> 272
<211> 38
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 272
Ala Asp Cys Val Gly Asp Gly Gln Arg Cys Ala Asp Trp Ala Gly Pro
1 5 10 15
Tyr Cys Cys Ser Gly Tyr Tyr Cys Ser Cys Arg Ser Met Pro Tyr Cys
20 25 30
Arg Cys Arg Ser Asp Ser
35
<210> 273
<211> 37
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 273
Ala Cys Val Gly Glu Asn Gln Gln Cys Ala Asp Trp Ala Gly Pro His
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Tyr Tyr Cys Thr Cys Arg Tyr Phe Pro Lys Cys Ile
20 25 30
Cys Arg Asn Asn Asn
35
<210> 274
<211> 37
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 274
Ala Cys Val Gly Glu Asn Lys Gln Cys Ala Asp Trp Ala Gly Pro His
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Tyr Tyr Cys Thr Cys Arg Tyr Phe Pro Lys Cys Ile
20 25 30
Cys Arg Asn Asn Asn
35
<210> 275
<211> 37
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 275
Asp Cys Val Gly Glu Ser Gln Gln Cys Ala Asp Trp Ala Gly Pro His
1 5 10 15
Cys Cys Asp Gly Tyr Tyr Cys Thr Cys Arg Tyr Phe Pro Lys Cys Ile
20 25 30
Cys Val Asn Asn Asn
35
<210> 276
<211> 36
<212> PRT
<213> Hololena curta
<400> 276
Ser Cys Val Gly Glu Tyr Gly Arg Cys Arg Ser Ala Tyr Glu Asp Cys
1 5 10 15
Cys Asp Gly Tyr Tyr Cys Asn Cys Ser Gln Pro Pro Tyr Cys Leu Cys
20 25 30
Arg Asn Asn Asn
35
<210> 277
<211> 38
<212> PRT
<213> Hololena curta
<400> 277
Ala Asp Cys Val Gly Asp Gly Gln Arg Cys Ala Asp Trp Ala Gly Pro
1 5 10 15
Tyr Cys Cys Ser Gly Tyr Tyr Cys Ser Cys Arg Ser Met Pro Tyr Cys
20 25 30
Arg Cys Arg Ser Asp Ser
35
<210> 278
<211> 38
<212> PRT
<213> Hololena curta
<400> 278
Ala Asp Cys Val Gly Asp Gly Gln Lys Cys Ala Asp Trp Phe Gly Pro
1 5 10 15
Tyr Cys Cys Ser Gly Tyr Tyr Cys Ser Cys Arg Ser Met Pro Tyr Cys
20 25 30
Arg Cys Arg Ser Asp Ser
35
<210> 279
<211> 94
<212> PRT
<213> Diguetia canities
<400> 279
Met Lys Val Phe Val Val Leu Leu Cys Leu Ser Leu Ala Ala Val Tyr
1 5 10 15
Ala Leu Glu Glu Arg Leu Asp Lys Asp Ala Asp Ile Met Leu Asp Ser
20 25 30
Pro Ala Asp Met Glu Arg Ala Lys Asp Gly Asp Val Glu Gly Pro Ala
35 40 45
Gly Cys Lys Lys Tyr Asp Val Glu Cys Asp Ser Gly Glu Cys Cys Gln
50 55 60
Lys Gln Tyr Leu Trp Tyr Lys Trp Arg Pro Leu Asp Cys Arg Cys Leu
65 70 75 80
Lys Ser Gly Phe Phe Ser Ser Lys Cys Val Cys Arg Asp Val
85 90
<210> 280
<211> 58
<212> PRT
<213> Diguetia canities
<400> 280
Ala Lys Asp Gly Asp Val Lys Gly Pro Ala Gly Cys Met Lys Tyr Lys
1 5 10 15
Ser Gly Asp Cys Arg Gly Lys Thr Cys Cys Asp Gln Gln Tyr Leu Trp
20 25 30
Tyr Lys Trp Arg Asn Leu Ala Cys Arg Cys Phe Thr Val Glu Val Phe
35 40 45
Lys Lys Asp Cys Trp Cys Asn Asp Ile Ser
50 55
<210> 281
<211> 121
<212> PRT
<213> Macrothele gigas
<400> 281
Met Met Thr Leu Ser Pro Phe Leu Leu Leu Leu Ile Ala Ala Val Val
1 5 10 15
Ile Gly Asn Ala Ser Glu Gly Glu Val Lys Asn Glu Phe Glu Glu Arg
20 25 30
Leu Lys Asp Glu Phe Lys Asp Pro Ser Arg Ser Glu Val Ala Glu Val
35 40 45
Ile Leu Leu Arg Glu Leu Glu Val Leu Glu Glu Thr Leu Phe Gly Lys
50 55 60
Glu Met Thr Ser Asp Thr Glu Glu Asn Arg Asn Ser Arg Glu Lys Arg
65 70 75 80
Cys Met Gly Tyr Asp Ile Glu Cys Asn Glu Asn Leu Pro Cys Cys Lys
85 90 95
His Arg Lys Leu Glu Cys Val Glu Thr Ser Gly Tyr Trp Trp Tyr Lys
100 105 110
Arg Lys Tyr Cys Arg Pro Ile Lys Gly
115 120
<210> 282
<211> 38
<212> PRT
<213> Macrothele gigas
<400> 282
Cys Met Gly Tyr Asp Ile His Cys Thr Asp Arg Leu Pro Cys Cys Phe
1 5 10 15
Gly Leu Glu Cys Val Lys Thr Ser Gly Tyr Trp Trp Tyr Lys Lys Thr
20 25 30
Tyr Cys Arg Arg Lys Ser
35
<210> 283
<211> 99
<212> PRT
<213> Macrothele gigas
<400> 283
Thr Ser Gln Gly Thr Thr Pro Asp Lys Val Gln Leu Glu Val Asn Cys
1 5 10 15
Ile Ser Asn Leu Pro Asn Asn Glu Val Glu Glu Thr Asp Leu Leu Arg
20 25 30
Glu Leu Glu Met Ile Glu Glu Asn Leu Phe Gly Lys Glu Leu Ser Phe
35 40 45
Val Pro Glu Glu Asn Arg Asn Ser Arg His Lys Arg Cys Met Gly Tyr
50 55 60
Asp Ile Glu Cys Asn Glu Arg Leu His Cys Cys Ala Asp Leu Glu Cys
65 70 75 80
Val Lys Thr Ser Gly Arg Trp Trp Tyr Lys Lys Thr Tyr Cys Arg Arg
85 90 95
Lys Ser Gly
<210> 284
<211> 46
<212> PRT
<213> Macrothele gigas
<400> 284
Gly Gly Cys Ile Lys Trp Asn His Ser Cys Gln Thr Thr Thr Leu Lys
1 5 10 15
Cys Cys Gly Lys Cys Val Val Cys Tyr Cys His Thr Pro Trp Gly Thr
20 25 30
Asn Cys Arg Cys Asp Arg Thr Arg Leu Phe Cys Thr Glu Asp
35 40 45
<210> 285
<211> 87
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 285
Met Val Asn Met Lys Ala Ser Met Phe Leu Thr Phe Ala Gly Leu Val
1 5 10 15
Leu Leu Phe Val Val Cys Tyr Ala Ser Glu Ser Glu Glu Lys Glu Phe
20 25 30
Pro Lys Glu Met Leu Ser Ser Ile Phe Ala Val Asp Asn Asp Phe Lys
35 40 45
Gln Glu Glu Arg Asp Cys Ala Gly Tyr Met Arg Glu Cys Lys Glu Lys
50 55 60
Leu Cys Cys Ser Gly Tyr Val Cys Ser Ser Arg Trp Lys Trp Cys Val
65 70 75 80
Leu Pro Ala Pro Trp Arg Arg
85
<210> 286
<211> 39
<212> PRT
<213> Missulena bradleyi
<400> 286
Ser Pro Val Cys Thr Pro Ser Gly Gln Pro Cys Gln Pro Asn Thr Gln
1 5 10 15
Pro Cys Cys Asn Asn Ala Glu Glu Glu Gln Thr Ile Asn Cys Asn Gly
20 25 30
Asn Thr Val Tyr Arg Cys Ala
35
<210> 287
<211> 48
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 287
Lys Lys Lys Cys Ile Ala Lys Asp Tyr Gly Arg Cys Lys Trp Gly Gly
1 5 10 15
Thr Pro Cys Cys Arg Gly Arg Gly Cys Ile Cys Ser Ile Met Gly Thr
20 25 30
Asn Cys Glu Cys Lys Pro Arg Leu Ile Met Glu Gly Leu Gly Leu Ala
35 40 45
<210> 288
<211> 83
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 288
Met Lys Leu Cys Met Thr Leu Leu Ile Thr Ala Ile Ala Val Val Thr
1 5 10 15
Phe Val Val Ala Thr Gln Glu Glu Ser Ala Glu Phe Asn Glu Val Glu
20 25 30
Glu Ser Arg Glu Asp Asn Cys Ile Ala Glu Asp Tyr Gly Lys Cys Thr
35 40 45
Trp Gly Gly Thr Lys Cys Cys Arg Gly Arg Pro Cys Arg Cys Ser Met
50 55 60
Ile Gly Thr Asn Cys Glu Cys Thr Pro Arg Leu Ile Met Glu Gly Leu
65 70 75 80
Ser Phe Ala
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<211> 83
<212> PRT
<213> Agelenopsis aperta
<400> 289
Met Lys Leu Cys Met Thr Leu Leu Ile Thr Ala Ile Ala Val Val Thr
1 5 10 15
Phe Val Val Ala Thr Gln Glu Glu Ser Ala Glu Phe Asn Glu Val Glu
20 25 30
Glu Ser Arg Glu Asp Asn Cys Ile Ala Glu Asp Tyr Gly Lys Cys Thr
35 40 45
Trp Gly Gly Thr Lys Cys Cys Arg Gly Arg Pro Cys Arg Cys Ser Met
50 55 60
Ile Gly Thr Asn Cys Glu Cys Thr Pro Arg Leu Ile Met Glu Gly Leu
65 70 75 80
Ser Phe Ala
<210> 290
<211> 85
<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 290
Met Asn Thr Ala Thr Gly Phe Ile Val Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Leu Gly Ala Ile Glu Ala Glu Asp Ala Val Pro Asp Phe Glu Gly Gly
20 25 30
Phe Ala Ser His Ala Arg Glu Asp Thr Val Gly Gly Lys Ile Arg Arg
35 40 45
Ser Ser Val Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn Glu His
50 55 60
Cys Cys Ser Gly Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Val Gln Arg Cys Asp
85
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<211> 37
<212> PRT
<213> Atrax robustus
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1 5 10 15
Cys Cys Ser Gly Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr
20 25 30
Val Gln Arg Cys Asp
35
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<211> 73
<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 292
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1 5 10 15
Leu Gly Cys Ile Glu Ala Gly Glu Ser His Val Arg Glu Asp Ala Met
20 25 30
Gly Arg Ala Arg Arg Gly Ala Cys Thr Pro Thr Gly Gln Pro Cys Pro
35 40 45
Tyr Asn Glu Ser Cys Cys Ser Gly Ser Cys Gln Glu Gln Leu Asn Glu
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Asn Gly His Thr Val Lys Arg Cys Val
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<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 293
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1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Glu Ala Glu Asp Thr Arg Ala Asp Leu Gln Gly Gly
20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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<213> Atrax robustus
<400> 294
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1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Glu Ala Glu Asp Thr Arg Ala Asp Leu Gln Gly Gly
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Glu Ala Ala Glu Lys Val Phe Arg Arg Ser Pro Thr Cys Ile Pro Ser
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<213> Atrax robustus
<400> 295
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1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Glu Ala Glu Asp Thr Arg Ala Asp Leu Gln Gly Gly
20 25 30
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<211> 78
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<213> Atrax robustus
<400> 296
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<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 298
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20 25 30
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<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 299
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Leu Gly
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<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 300
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
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85 90 95
Leu Gly
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<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 301
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<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 302
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Ile Thr Leu Ala Val Ile Leu Thr Gln
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<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 303
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Ile Thr Leu Ala Val Ile Leu Thr Gln
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Ser
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<211> 97
<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 304
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Ile Thr Leu Val Val Ile Leu Thr Gln
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Ser
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<211> 100
<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 305
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Ile Thr Leu Ala Val Ile Leu Thr Gln
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Gly Gly Ile Leu
100
<210> 306
<211> 100
<212> PRT
<213> Atrax robustus
<400> 306
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Ile Thr Leu Ala Val Ile Leu Thr Gln
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Gly Leu Glu Ser Asn Glu Leu His Asp Ala Ile Lys Lys Pro Val Asn
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Gly Gly Ile Leu
100
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<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche formidabilis
<400> 307
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35
<210> 308
<211> 36
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 308
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Cys Ser Gly Ser Cys Thr Tyr Lys Ala Asn Glu Asn Gly Asn Gln Val
20 25 30
Lys Arg Cys Asp
35
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<211> 78
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 309
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Ile Gly Cys Ile Ser Ala Asp Phe Gln Gly Ser Phe Glu Pro Tyr Glu
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Tyr Lys Ala Asn Glu Asn Gly Asn Gln Val Lys Arg Cys Asp
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<210> 310
<211> 78
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 310
Met Asn Thr Ala Thr Gly Phe Ile Val Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Ser Ala Asp Phe Gln Gly Gly Phe Glu Pro Tyr Glu
20 25 30
Glu Glu Asp Ala Glu Arg Ile Phe Arg Arg Ser Thr Cys Thr Pro Thr
35 40 45
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50 55 60
Tyr Lys Ala Asn Glu Asn Gly Asn Gln Val Lys Arg Cys Asp
65 70 75
<210> 311
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 311
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1 5 10 15
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<213> Hadronyche infensa
<400> 312
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<211> 79
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 313
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50 55 60
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65 70 75
<210> 314
<211> 79
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 314
Met Asn Thr Ala Thr Gly Phe Ile Val Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Ser Val Asp Phe Gln Gly Gly Phe Glu Ser Tyr Glu
20 25 30
Glu Glu Asp Ala Glu Arg Ile Phe Arg Arg Ser Pro Thr Cys Ile Pro
35 40 45
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50 55 60
Thr Tyr Lys Ala Asn Glu Asn Gly Asn Gln Val Lys Arg Cys Asp
65 70 75
<210> 315
<211> 79
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 315
Met Asn Thr Ala Thr Gly Phe Ile Val Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
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Ile Gly Cys Ile Ser Thr Asp Phe Gln Gly Gly Phe Glu Pro Tyr Glu
20 25 30
Glu Glu Asp Ala Glu Arg Ile Phe Arg Arg Ser Pro Thr Cys Ile Pro
35 40 45
Thr Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn Glu Asn Cys Cys Ser Gln Ser Cys
50 55 60
Thr Tyr Lys Ala Asn Glu Asn Gly Asn Gln Val Lys Arg Cys Asp
65 70 75
<210> 316
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 316
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1 5 10 15
Cys Cys Ser Gly Ser Cys Thr Tyr Lys Ala Asn Glu Asn Gly Asn Gln
20 25 30
Val Lys Arg Cys Asp
35
<210> 317
<211> 78
<212> PRT
<213> Hadronyche infensa
<400> 317
Met Asn Thr Ala Thr Gly Phe Ile Val Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Ser Ala Asp Phe Gln Gly Gly Phe Glu Ser Ser Val
20 25 30
Glu Asp Ala Glu Arg Leu Phe Arg Arg Ser Ser Thr Cys Ile Arg Thr
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<210> 318
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 318
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1 5 10 15
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20 25 30
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35
<210> 319
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 319
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1 5 10 15
Cys Cys Ser Gln Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr
20 25 30
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35
<210> 320
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 320
Ser Ser Thr Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn Glu Asn
1 5 10 15
Cys Cys Ser Gln Ser Cys Thr Phe Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr
20 25 30
Val Lys Arg Cys Asp
35
<210> 321
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 321
Ser Pro Thr Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn Glu Asn
1 5 10 15
Cys Cys Ser Lys Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr
20 25 30
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35
<210> 322
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 322
Ser Pro Thr Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn Glu Asn
1 5 10 15
Cys Cys Ser Gln Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr
20 25 30
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35
<210> 323
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 323
Ser Ala Val Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Ser Lys Tyr
1 5 10 15
Cys Cys Ser Gly Ser Cys Thr Tyr Lys Thr Asn Glu Asn Gly Asn Ser
20 25 30
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35
<210> 324
<211> 76
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 324
Met Asn Thr Ala Thr Gly Phe Ile Val Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Leu Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Ser His Met Arg Lys Asp Ala Met
20 25 30
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65 70 75
<210> 325
<211> 76
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 325
Met Asn Thr Thr Thr Gly Phe Ile Val Leu Leu Val Leu Ala Thr Ile
1 5 10 15
Leu Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Ser His Met Arg Lys Asp Ala Met
20 25 30
Gly Arg Val Arg Arg Gln Tyr Cys Val Pro Val Asp Gln Pro Cys Ser
35 40 45
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50 55 60
Asn Glu Asn Asp Asn Thr Val Tyr Tyr Cys Arg Ala
65 70 75
<210> 326
<211> 76
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 326
Met Asn Thr Ala Thr Gly Phe Ile Val Phe Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Leu Gly Gly Ile Glu Ala Gly Glu Ser His Met Arg Lys Asp Ala Met
20 25 30
Gly Arg Val Arg Arg Gln Tyr Cys Val Pro Val Asp Gln Pro Cys Ser
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50 55 60
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65 70 75
<210> 327
<211> 45
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 327
Leu Leu Ala Cys Leu Phe Gly Asn Gly Arg Cys Ser Ser Asn Arg Asp
1 5 10 15
Cys Cys Glu Leu Thr Pro Val Cys Lys Arg Gly Ser Cys Val Ser Ser
20 25 30
Gly Pro Gly Leu Val Gly Gly Ile Leu Gly Gly Ile Leu
35 40 45
<210> 328
<211> 98
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 328
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Ile Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Lys Asn
20 25 30
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35 40 45
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Leu Gly
<210> 329
<211> 98
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 329
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Ile Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Lys Asn
20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Leu Gly
<210> 330
<211> 98
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 330
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Ile Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Lys Asn
20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
Thr Met Gly Leu Cys Val Pro Ser Val Gly Gly Leu Val Gly Gly Ile
85 90 95
Leu Gly
<210> 331
<211> 98
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 331
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Leu Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Lys Asn
20 25 30
Gly Leu Glu Ser Gln Ala Leu His Asp Glu Ile Arg Lys Pro Ile Asp
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65 70 75 80
Thr Met Gly Leu Cys Val Pro Ser Val Gly Gly Leu Val Gly Gly Ile
85 90 95
Leu Gly
<210> 332
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<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 332
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Val Ile Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Lys Asn
20 25 30
Gly Leu Glu Ser Gln Ala Leu His Asp Glu Ile Arg Lys Pro Ile Asp
35 40 45
Ser Glu Asn Pro Asp Thr Glu Arg Leu Leu Asp Cys Leu Leu Asp Asn
50 55 60
Arg Val Cys Ser Ser Asp Lys Asp Cys Cys Gly Met Thr Pro Ser Cys
65 70 75 80
Thr Met Gly Leu Cys Val Pro Ser Val Gly Gly Leu Val Gly Gly Ile
85 90 95
Leu Gly
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<211> 93
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 333
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Leu Phe Val Leu Cys Asp Phe Met Lys Asn Gly Leu Glu Ser Gln
20 25 30
Ala Leu His Asp Glu Ile Arg Lys Ser Ile Asp Ser Glu Asn Pro Asp
35 40 45
Thr Glu Arg Leu Leu Asp Cys Leu Leu Asp Asn Arg Val Cys Ser Ser
50 55 60
Asp Lys Asp Cys Cys Gly Met Thr Pro Ser Cys Thr Met Gly Leu Cys
65 70 75 80
Val Pro Ser Val Gly Gly Leu Val Gly Gly Ile Leu Gly
85 90
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<211> 98
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 334
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Ile Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Lys Asn
20 25 30
Asp Leu Glu Ser Gln Ala Leu His Asp Glu Ile Arg Lys Pro Ile Asn
35 40 45
Ser Glu Asn Pro Asp Thr Glu Arg Leu Leu Asp Cys Leu Leu Asp Asn
50 55 60
Arg Val Cys Ser Ser Asp Lys Asp Cys Cys Gly Met Thr Pro Ser Cys
65 70 75 80
Thr Met Gly Leu Cys Val Pro Ser Val Gly Gly Leu Val Gly Gly Ile
85 90 95
Leu Gly
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<213> Hadronyche versuta
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Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
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Ala Leu Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Lys Asn
20 25 30
Gly Leu Glu Ser Gln Ala Leu His Asp Glu Ile Arg Lys Pro Ile Asp
35 40 45
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50 55 60
Arg Val Cys Ser Ser Asp Arg Asp Cys Cys Gly Met Thr Pro Ser Cys
65 70 75 80
Thr Met Gly Leu Cys Val Pro Asn Val Gly Gly Leu Val Gly Asp Ile
85 90 95
Leu Gly
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Gly Leu Glu Ser Gln Ala Leu His Asp Glu Ile Arg Lys Pro Ile Asp
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Thr Met Gly Leu Cys Val Pro Asn Val Gly Gly Leu Val Gly Gly Ile
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Leu Gly
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Val Leu Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Glu Asp Phe Met Lys Asn Gly
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Gly
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Leu Gly
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Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
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35 40 45
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Thr Met Gly Leu Cys Val Pro Asn Val Gly Gly Leu Val Gly Gly Ile
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Leu Gly
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<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 341
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Leu Thr Leu Ala Leu Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Leu Phe Val Leu Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Glu His
20 25 30
Gly Leu Glu Ser His Ala Leu His Asp Glu Ile Arg Lys Pro Ile Asp
35 40 45
Thr Glu Lys Ala Asp Ala Glu Arg Leu Val Asp Cys Val Val Asn Thr
50 55 60
Leu Gly Cys Ser Ser Asp Lys Asp Cys Cys Gly Met Thr Pro Ser Cys
65 70 75 80
Thr Leu Gly Ile Cys Ala Pro Ser Val Arg Gly Leu Val Gly Gly Leu
85 90 95
Leu Gly Arg Ala Leu
100
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<211> 101
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
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100
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<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
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<213> Hadronyche versuta
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<213> Hadronyche versuta
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100
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<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 346
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85 90 95
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<211> 100
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
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100
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<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
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<213> Hadronyche versuta
<400> 349
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<213> Hadronyche versuta
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<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
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Ala Leu Leu Val Val Cys Gly Lys Ile Asn Glu Asp Phe Met Glu Asn
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<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
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100
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<211> 101
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 353
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<211> 83
<212> PRT
<213> Hadronyche venenata
<400> 354
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<211> 84
<212> PRT
<213> Hadronyche venenata
<400> 355
Met Asn Thr Ala Thr Gly Val Ile Ala Leu Val Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Glu Ala Glu Glu Thr Arg Ala Asp Leu Gln Gly Ala
20 25 30
Phe Glu Ser Tyr Glu Gly Glu Ala Ala Asp Lys Ile Phe Arg Arg Ser
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50 55 60
Cys Ser Lys Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr Val
65 70 75 80
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<211> 84
<212> PRT
<213> Hadronyche venenata
<400> 356
Met Asn Thr Ala Thr Gly Val Ile Ala Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Glu Ala Glu Glu Thr Arg Ala Asp Leu Gln Gly Ala
20 25 30
Phe Glu Ser Tyr Glu Gly Glu Gly Ala Asp Lys Ile Phe Arg Arg Ser
35 40 45
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50 55 60
Cys Ser Lys Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr Val
65 70 75 80
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<210> 357
<211> 84
<212> PRT
<213> Hadronyche venenata
<400> 357
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1 5 10 15
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20 25 30
Phe Glu Ser Tyr Glu Gly Glu Ala Ala Glu Lys Ile Phe Arg Arg Ser
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50 55 60
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65 70 75 80
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<210> 358
<211> 84
<212> PRT
<213> Hadronyche venenata
<400> 358
Met Asn Thr Ala Thr Gly Val Ile Ala Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Glu Ala Glu Glu Thr Arg Ala Asp Leu Gln Gly Ala
20 25 30
Phe Glu Ser Tyr Glu Gly Glu Ala Ala Asp Lys Ile Phe Arg Arg Ser
35 40 45
Pro Thr Cys Ile Pro Ser Gly Gln Pro Cys Pro Tyr Asn Glu Asn Cys
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Cys Ser Lys Ser Cys Thr Tyr Lys Glu Asn Glu Asn Gly Asn Thr Val
65 70 75 80
Gln Arg Cys Asp
<210> 359
<211> 84
<212> PRT
<213> Hadronyche venenata
<400> 359
Met Asn Thr Ala Thr Gly Val Ile Ala Leu Leu Val Leu Ala Thr Val
1 5 10 15
Ile Gly Cys Ile Glu Ala Glu Asp Thr Arg Ala Asp Leu Gln Gly Gly
20 25 30
Leu Glu Ser Tyr Glu Gly Glu Ala Ala Asp Lys Ile Phe Arg Arg Ser
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Gln Arg Cys Asp
<210> 360
<211> 100
<212> PRT
<213> Illawara wisharti
<400> 360
Met Lys Phe Ser Lys Leu Ser Ile Thr Leu Ala Val Ile Leu Thr Gln
1 5 10 15
Ala Val Phe Val Leu Cys Gly Met Lys Asn Glu Asp Phe Met Glu Lys
20 25 30
Gly Leu Glu Ser Asn Glu Leu His Asp Ala Ile Lys Lys Pro Val Asn
35 40 45
Ser Gly Lys Pro Asp Thr Glu Arg Leu Leu Asp Cys Val Leu Ser Arg
50 55 60
Val Cys Ser Pro Asp Ala Asn Cys Cys Gly Leu Thr Pro Ile Cys Lys
65 70 75 80
Met Gly Leu Cys Val Pro Lys Val Gly Gly Leu Leu Gly Gly Leu Leu
85 90 95
Gly Gly Ile Leu
100
<210> 361
<211> 55
<212> PRT
<213> Oxyopes lineatus
<400> 361
Ala Trp Lys Cys Leu Pro Lys Asp Ser Thr Cys Gly Asp Asp Cys Asp
1 5 10 15
Cys Cys Glu Gly Leu His Cys His Cys Pro Leu Arg Asn Met Leu Pro
20 25 30
Ala Ile Leu Arg Cys Ser Cys Gln Ser Lys Asp Asp His Ile Asn Thr
35 40 45
Cys Pro Lys Tyr Lys Lys Ser
50 55
<210> 362
<211> 44
<212> PRT
<213> Plectreurys tristis
<400> 362
Ala Asp Cys Ser Ala Thr Gly Asp Thr Cys Asp His Thr Lys Lys Cys
1 5 10 15
Cys Asp Asp Cys Tyr Thr Cys Arg Cys Gly Thr Pro Trp Gly Ala Asn
20 25 30
Cys Arg Cys Asp Tyr Tyr Lys Ala Arg Cys Asp Thr
35 40
<210> 363
<211> 39
<212> PRT
<213> Aphonopelma sp.
<400> 363
Leu Phe Glu Cys Val Leu Ser Cys Asp Ile Lys Lys Asn Gly Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Pro Lys Gly Glu Lys Lys Cys Ser Gly Gly Trp Arg Cys Lys
20 25 30
Ile Asn Phe Cys Leu Lys Val
35
<210> 364
<211> 39
<212> PRT
<213> Aphonopelma sp.
<400> 364
Ile Phe Glu Cys Val Phe Ser Cys Asp Ile Glu Lys Glu Gly Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Pro Lys Gly Glu Lys Lys Cys Thr Gly Gly Trp Lys Cys Lys
20 25 30
Ile Lys Leu Cys Leu Lys Ile
35
<210> 365
<211> 39
<212> PRT
<213> Aphonopelma sp.
<400> 365
Ile Phe Glu Cys Val Phe Ser Cys Asp Ile Glu Lys Glu Gly Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Pro Lys Gly Glu Lys Lys Cys Ser Gly Gly Trp Lys Cys Lys
20 25 30
Ile Lys Leu Cys Leu Lys Ile
35
<210> 366
<211> 39
<212> PRT
<213> Brachypelma albiceps
<400> 366
Ile Leu Glu Cys Val Phe Ser Cys Asp Ile Lys Lys Glu Gly Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Pro Lys Gly Glu Lys Lys Cys Thr Gly Gly Trp Arg Cys Lys
20 25 30
Ile Lys Leu Cys Leu Lys Ile
35
<210> 367
<211> 39
<212> PRT
<213> Brachypelma albiceps
<400> 367
Ile Phe Glu Cys Val Phe Ser Cys Asp Ile Lys Lys Glu Gly Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Pro Lys Gly Glu Lys Lys Cys Thr Gly Gly Trp Arg Cys Lys
20 25 30
Ile Lys Leu Cys Leu Lys Ile
35
<210> 368
<211> 39
<212> PRT
<213> Brachypelma smithi
<400> 368
Ile Phe Glu Cys Val Phe Ser Cys Asp Ile Glu Lys Glu Gly Lys Pro
1 5 10 15
Cys Lys Pro Lys Gly Glu Lys Lys Cys Ser Gly Gly Trp Lys Cys Lys
20 25 30
Ile Lys Leu Cys Leu Lys Ile
35
<210> 369
<211> 99
<212> PRT
<213> Brachypelma smithi
<400> 369
Met Asn Thr Ile Gln Val Ile Ile Phe Ala Val Val Leu Val Leu Thr
1 5 10 15
Val Thr Val Gly Gln Ala Asp Glu Asp Ser Ala Glu Thr Ser Leu Leu
20 25 30
Arg Lys Leu Glu Glu Ala Glu Ala Ala Met Phe Gly Gln Tyr Leu Glu
35 40 45
Glu Ser Lys Asn Ser Arg Glu Lys Arg Cys Ile Gly Glu Ser Val Pro
50 55 60
Cys Asp Lys Asp Asp Pro Arg Cys Cys Arg Glu Tyr Glu Cys Leu Lys
65 70 75 80
Pro Thr Gly Tyr Gly Trp Trp Tyr Ala Ser Tyr Tyr Cys Tyr Arg Lys
85 90 95
Lys Ser Gly
<210> 370
<211> 86
<212> PRT
<213> Haplopelma huwenum
<400> 370
Met Lys Ser Ile Val Phe Val Ala Leu Phe Gly Leu Ala Leu Leu Ala
1 5 10 15
Val Val Cys Ser Ala Ser Glu Asp Ala His Lys Glu Leu Leu Lys Glu
20 25 30
Val Val Arg Ala Met Val Val Asp Lys Thr Asp Ala Val Gln Ala Glu
35 40 45
Glu Arg Glu Cys Arg Trp Tyr Leu Gly Gly Cys Ser Gln Asp Gly Asp
50 55 60
Cys Cys Lys His Leu Gln Cys His Ser Asn Tyr Glu Trp Cys Val Trp
65 70 75 80
Asp Gly Thr Phe Ser Lys
85
<210> 371
<211> 47
<212> PRT
<213> Anemonia erythraea
<400> 371
Gly Ala Pro Cys Leu Cys Ala Asn Ser Gly Pro Asn Thr Arg Gly Asn
1 5 10 15
Asp Leu Asn Gly Ile Val Trp Val Phe Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asp Cys His Gly Arg Ala Met Val Gly Tyr Cys Cys Gln Glu Asp
35 40 45
<210> 372
<211> 42
<212> PRT
<213> Anthopleura elegantissima
<400> 372
Gly Thr Thr Cys Tyr Cys Gly Lys Thr Ile Gly Ile Tyr Trp Phe Gly
1 5 10 15
Thr Lys Thr Cys Pro Ser Asn Arg Gly Tyr Thr Gly Ser Cys Gly Tyr
20 25 30
Phe Leu Gly Ile Cys Cys Tyr Pro Val Asp
35 40
<210> 373
<211> 42
<212> PRT
<213> Anthopleura elegantissima
<400> 373
Gly Thr Ala Cys Ser Cys Gly Asn Ser Lys Gly Ile Tyr Trp Phe Tyr
1 5 10 15
Arg Pro Ser Cys Pro Thr Asp Arg Gly Tyr Thr Gly Ser Cys Arg Tyr
20 25 30
Phe Leu Gly Thr Cys Cys Thr Pro Ala Asp
35 40
<210> 374
<211> 43
<212> PRT
<213> Anemonia sulcata
<400> 374
Ala Ala Pro Cys Phe Cys Ser Gly Lys Pro Gly Arg Gly Asp Leu Trp
1 5 10 15
Ile Leu Arg Gly Thr Cys Pro Gly Gly Tyr Gly Tyr Thr Ser Asn Cys
20 25 30
Tyr Lys Trp Pro Asn Ile Cys Cys Tyr Pro His
35 40
<210> 375
<211> 43
<212> PRT
<213> Anemonia sulcata
<400> 375
Ala Ala Pro Cys Phe Cys Pro Gly Lys Pro Asp Arg Gly Asp Leu Trp
1 5 10 15
Ile Leu Arg Gly Thr Cys Pro Gly Gly Tyr Gly Tyr Thr Ser Asn Cys
20 25 30
Tyr Lys Trp Pro Asn Ile Cys Cys Tyr Pro His
35 40
<210> 376
<211> 48
<212> PRT
<213> Bunodosoma granulifera
<400> 376
Gly Ala Ser Cys Arg Cys Asp Ser Asp Gly Pro Thr Ser Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Thr Gly Thr Leu Trp Leu Ile Gly Arg Cys Pro Ser Gly Trp
20 25 30
His Asn Cys Arg Gly Ser Gly Pro Phe Ile Gly Tyr Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 377
<211> 48
<212> PRT
<213> Bunodosoma granulifera
<400> 377
Gly Ala Ser Cys Arg Cys Asp Ser Asp Gly Pro Thr Ser Arg Gly Asp
1 5 10 15
Thr Leu Thr Gly Thr Leu Trp Leu Ile Gly Arg Cys Pro Ser Gly Trp
20 25 30
His Asn Cys Arg Gly Ser Gly Pro Phe Ile Gly Tyr Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 378
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura elegantissima
<400> 378
Gly Ile Ala Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Thr Tyr Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ser Ser Gly Gln Leu Ile Gly Ala Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 379
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura elegantissima
<400> 379
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Asn Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Thr Tyr Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ser Ser Gly Pro Leu Ile Gly Ala Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 380
<211> 46
<212> PRT
<213> Anemonia sulcata
<400> 380
Gly Ala Ala Cys Leu Cys Lys Ser Asp Gly Pro Asn Thr Arg Gly Asn
1 5 10 15
Ser Met Ser Gly Thr Ile Trp Val Phe Gly Cys Pro Ser Gly Trp Asn
20 25 30
Asn Cys Glu Gly Arg Ala Ile Ile Gly Tyr Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 381
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura fuscoviridis
<400> 381
Gly Val Ala Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Asn Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Thr Ile Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 382
<211> 48
<212> PRT
<213> Heteractis crispa
<400> 382
Ala Ser Cys Lys Cys Asp Asp Asp Gly Pro Asp Val Arg Ser Ala Thr
1 5 10 15
Phe Thr Gly Thr Val Asp Phe Ala Tyr Cys Asn Ala Gly Trp Glu Lys
20 25 30
Cys Leu Ala Val Tyr Thr Pro Val Ala Ser Cys Cys Arg Lys Lys Lys
35 40 45
<210> 383
<211> 48
<212> PRT
<213> Stoichactis helianthus
<400> 383
Ala Ala Cys Lys Cys Asp Asp Glu Gly Pro Asp Ile Arg Thr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Thr Gly Thr Val Asp Leu Gly Ser Cys Asn Ala Gly Trp Glu Lys
20 25 30
Cys Ala Ser Tyr Tyr Thr Ile Ile Ala Asp Cys Cys Arg Lys Lys Lys
35 40 45
<210> 384
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura elegantissima
<400> 384
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 385
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura elegantissima
<400> 385
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Asn Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 386
<211> 47
<212> PRT
<213> Anemonia sulcata
<400> 386
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Ile Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Lys His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 387
<211> 48
<212> PRT
<213> Anthopleura fuscoviridis
<400> 387
Gly Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly
1 5 10 15
Asn Thr Leu Ser Gly Ile Ile Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp
20 25 30
His Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 388
<211> 48
<212> PRT
<213> Heteractis crispa
<400> 388
Gly Thr Cys Lys Cys Asp Asp Asp Gly Pro Asp Val Arg Thr Ala Thr
1 5 10 15
Phe Thr Gly Ser Thr Glu Phe Ala Asn Cys Asn Glu Ser Trp Glu Lys
20 25 30
Cys Leu Ala Val Tyr Thr Pro Val Ala Ser Cys Cys Arg Lys Lys Lys
35 40 45
<210> 389
<211> 48
<212> PRT
<213> Radianthus paumotensis
<400> 389
Ala Ser Cys Lys Cys Asp Asp Asp Gly Pro Asp Val Arg Ser Ala Thr
1 5 10 15
Phe Thr Gly Thr Val Asp Phe Trp Asn Cys Asn Glu Gly Trp Glu Lys
20 25 30
Cys Thr Ala Val Tyr Thr Pro Val Ala Ser Cys Cys Arg Lys Lys Lys
35 40 45
<210> 390
<211> 31
<212> PRT
<213> Parasicyonis actinostoloides
<400> 390
Ala Gly Gly Lys Ser Thr Cys Cys Pro Cys Ala Met Cys Lys Tyr Thr
1 5 10 15
Ala Gly Cys Pro Trp Gly Gln Cys Ala His His Cys Gly Cys Ser
20 25 30
<210> 391
<211> 48
<212> PRT
<213> Heteractis crispa
<400> 391
Gly Asn Cys Lys Cys Asp Asp Glu Gly Pro Tyr Val Arg Thr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Thr Gly Tyr Val Asp Leu Gly Tyr Cys Asn Glu Gly Trp Glu Lys
20 25 30
Cys Ala Ser Tyr Tyr Ser Pro Ile Ala Glu Cys Cys Arg Lys Lys Lys
35 40 45
<210> 392
<211> 48
<212> PRT
<213> Radianthus paumotensis
<400> 392
Gly Asn Cys Lys Cys Asp Asp Glu Gly Pro Asn Val Arg Thr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Thr Gly Tyr Val Asp Leu Gly Tyr Cys Asn Glu Gly Trp Glu Lys
20 25 30
Cys Ala Ser Tyr Tyr Ser Pro Ile Ala Glu Cys Cys Arg Lys Lys Lys
35 40 45
<210> 393
<211> 48
<212> PRT
<213> Heteractis crispa
<400> 393
Gly Asn Cys Lys Cys Asp Asp Glu Gly Pro Asn Val Arg Thr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Thr Gly Tyr Val Asp Leu Gly Tyr Cys Asn Glu Gly Trp Asp Lys
20 25 30
Cys Ala Ser Tyr Tyr Ser Pro Ile Ala Glu Cys Cys Arg Lys Lys Lys
35 40 45
<210> 394
<211> 46
<212> PRT
<213> Anemonia sulcata
<400> 394
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Lys His Lys Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys
35 40 45
<210> 395
<211> 47
<212> PRT
<213> Heteractis crispa
<400> 395
Gly Asn Cys Lys Cys Asp Asp Glu Gly Pro Asn Val Arg Thr Ala Pro
1 5 10 15
Leu Thr Gly Tyr Val Asp Leu Gly Tyr Cys Asn Glu Gly Trp Glu Lys
20 25 30
Cys Ala Ser Tyr Tyr Ser Pro Ile Ala Glu Cys Cys Arg Lys Lys
35 40 45
<210> 396
<211> 49
<212> PRT
<213> Anthopleura xanthogrammica
<400> 396
Gly Val Ser Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Thr Leu Trp Leu Tyr Pro Ser Gly Cys Pro Ser Gly
20 25 30
Trp His Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys
35 40 45
Gln
<210> 397
<211> 49
<212> PRT
<213> Anthopleura xanthogrammica
<400> 397
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Arg Pro Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Phe Tyr Pro Ser Gly Cys Pro Ser Gly
20 25 30
Trp His Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Asn Ile Gly Trp Cys Cys Lys
35 40 45
Lys
<210> 398
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura elegantissima
<400> 398
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 399
<211> 36
<212> PRT
<213> Actinia equina
<400> 399
Gly Cys Lys Asp Asn Phe Ser Ala Asn Thr Cys Lys His Val Lys Ala
1 5 10 15
Asn Asn Asn Cys Gly Ser Gln Lys Tyr Ala Thr Asn Cys Ala Lys Thr
20 25 30
Cys Gly Lys Cys
35
<210> 400
<211> 37
<212> PRT
<213> Bunodosoma granulifera
<400> 400
Val Cys Arg Asp Trp Phe Lys Glu Thr Ala Cys Arg His Ala Lys Ser
1 5 10 15
Leu Gly Asn Cys Arg Thr Ser Gln Lys Tyr Arg Ala Asn Cys Ala Lys
20 25 30
Thr Cys Glu Leu Cys
35
<210> 401
<211> 48
<212> PRT
<213> Bunodosoma caissarum
<400> 401
Gly Val Ala Cys Arg Cys Asp Ser Asp Gly Pro Thr Ser Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Thr Gly Thr Leu Trp Leu Thr Gly Gly Cys Pro Ser Gly Trp
20 25 30
His Asn Cys Arg Gly Ser Gly Pro Phe Ile Gly Tyr Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 402
<211> 41
<212> PRT
<213> Bunodosoma caissarum
<400> 402
Gly Leu Pro Cys Asp Cys His Gly His Thr Gly Thr Tyr Trp Leu Asn
1 5 10 15
Tyr Tyr Ser Lys Cys Pro Lys Gly Tyr Gly Tyr Thr Gly Arg Cys Arg
20 25 30
Tyr Leu Val Gly Ser Cys Cys Tyr Lys
35 40
<210> 403
<211> 48
<212> PRT
<213> Bunodosoma cangicum
<400> 403
Gly Val Ala Cys Arg Cys Asp Ser Asp Gly Pro Thr Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Ser Leu Ser Gly Thr Leu Trp Leu Thr Gly Gly Cys Pro Ser Gly Trp
20 25 30
His Asn Cys Arg Gly Ser Gly Pro Phe Ile Gly Tyr Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 404
<211> 35
<212> PRT
<213> Stoichactis helianthus
<400> 404
Arg Ser Cys Ile Asp Thr Ile Pro Lys Ser Arg Cys Thr Ala Phe Gln
1 5 10 15
Cys Lys His Ser Met Lys Tyr Arg Leu Ser Phe Cys Arg Lys Thr Cys
20 25 30
Gly Thr Cys
35
<210> 405
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura xanthogrammica
<400> 405
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Asn Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Thr Tyr Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ser Ser Gly Pro Asn Ile Gly Trp Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 406
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura xanthogrammica
<400> 406
Gly Val Ala Cys Leu Cys Asp Ala Asp Gly Pro Ser Val Ser Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 407
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura xanthogrammica
<400> 407
Gly Ala Ala Cys Phe Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Ser Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Asn Ile Gly Trp Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 408
<211> 47
<212> PRT
<213> Anthopleura xanthogrammica
<400> 408
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Ser Leu Ser Gly Ile Ile Trp Leu Phe Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Arg Asp His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 409
<211> 49
<212> PRT
<213> Anthopleura xanthogrammica
<400> 409
Gly Val Ser Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Leu Trp Phe Tyr Pro Ser Gly Cys Pro Ser Gly
20 25 30
Trp His Asn Cys Lys Ala His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys
35 40 45
Gln
<210> 410
<211> 48
<212> PRT
<213> Bunodosoma cangicum
<400> 410
Gly Val Ala Cys Arg Cys Asp Ser Asp Gly Pro Thr Val Arg Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Ser Gly Thr Leu Trp Leu Thr Gly Gly Cys Pro Ser Gly Trp
20 25 30
His Asn Cys Arg Gly Ser Gly Pro Phe Ile Gly Tyr Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 411
<211> 48
<212> PRT
<213> Bunodosoma cangicum
<400> 411
Gly Val Ala Cys Arg Cys Asp Ser Asp Gly Pro Thr Val His Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Ser Gly Thr Leu Trp Leu Thr Gly Gly Cys Pro Ser Gly Trp
20 25 30
His Asn Cys Arg Gly Ser Gly Pro Phe Ile Gly Tyr Cys Cys Lys Lys
35 40 45
<210> 412
<211> 681
<212> PRT
<213> Bacillus thuringiensis
<400> 412
Met Gly Gly Ile Asp Met Asn Pro Tyr Gln Asn Lys Asn Glu Tyr Glu
1 5 10 15
Ile Phe Asn Ala Pro Ser Asn Gly Phe Ser Lys Ser Asn Asn Tyr Ser
20 25 30
Arg Tyr Pro Leu Ala Asn Lys Pro Asn Gln Pro Leu Lys Asn Thr Asn
35 40 45
Tyr Lys Asp Trp Leu Asn Val Cys Gln Asp Asn Gln Gln Tyr Gly Asn
50 55 60
Asn Ala Gly Asn Phe Ala Ser Ser Glu Thr Ile Val Gly Val Ser Ala
65 70 75 80
Gly Ile Ile Val Val Gly Thr Met Leu Gly Ala Phe Ala Ala Pro Val
85 90 95
Leu Ala Ala Gly Ile Ile Ser Phe Gly Thr Leu Leu Pro Ile Phe Trp
100 105 110
Gln Gly Ser Asp Pro Ala Asn Val Trp Gln Asp Leu Leu Asn Ile Gly
115 120 125
Gly Arg Pro Ile Gln Glu Ile Asp Lys Asn Ile Ile Asn Val Leu Thr
130 135 140
Ser Ile Val Thr Pro Ile Lys Asn Gln Leu Asp Lys Tyr Gln Glu Phe
145 150 155 160
Phe Asp Lys Trp Glu Pro Ala Arg Thr His Ala Asn Ala Lys Ala Val
165 170 175
His Asp Leu Phe Thr Thr Leu Glu Pro Ile Ile Asp Lys Asp Leu Asp
180 185 190
Met Leu Lys Asn Asn Ala Ser Tyr Arg Ile Pro Thr Leu Pro Ala Tyr
195 200 205
Ala Gln Ile Ala Thr Trp His Leu Asn Leu Leu Lys His Ala Ala Thr
210 215 220
Tyr Tyr Asn Ile Trp Leu Gln Asn Gln Gly Ile Asn Pro Ser Thr Phe
225 230 235 240
Asn Ser Ser Asn Tyr Tyr Gln Gly Tyr Leu Lys Arg Lys Ile Gln Glu
245 250 255
Tyr Thr Asp Tyr Cys Ile Gln Thr Tyr Asn Ala Gly Leu Thr Met Ile
260 265 270
Arg Thr Asn Thr Asn Ala Thr Trp Asn Met Tyr Asn Thr Tyr Arg Leu
275 280 285
Glu Met Thr Leu Thr Val Leu Asp Leu Ile Ala Ile Phe Pro Asn Tyr
290 295 300
Asp Pro Glu Lys Tyr Pro Ile Gly Val Lys Ser Glu Leu Ile Arg Glu
305 310 315 320
Val Tyr Thr Asn Val Asn Ser Asp Thr Phe Arg Thr Ile Thr Glu Leu
325 330 335
Glu Asn Gly Leu Thr Arg Asn Pro Thr Leu Phe Thr Trp Ile Asn Gln
340 345 350
Gly Arg Phe Tyr Thr Arg Asn Ser Arg Asp Ile Leu Asp Pro Tyr Asp
355 360 365
Ile Phe Ser Phe Thr Gly Asn Gln Met Ala Phe Thr His Thr Asn Asp
370 375 380
Asp Arg Asn Ile Ile Trp Arg Ala Val His Gly Asn Ile Ile Ser Gln
385 390 395 400
Asp Thr Ser Lys Val Phe Pro Phe Tyr Arg Asn Lys Pro Ile Asp Lys
405 410 415
Val Glu Ile Val Arg His Arg Glu Tyr Ser Asp Ile Ile Tyr Glu Met
420 425 430
Ile Phe Phe Ser Asn Ser Ser Glu Val Phe Arg Tyr Ser Ser Asn Ser
435 440 445
Thr Ile Glu Asn Asn Tyr Lys Arg Thr Asp Ser Tyr Met Ile Pro Lys
450 455 460
Gln Thr Trp Lys Asn Glu Glu Tyr Gly His Thr Leu Ser Tyr Ile Lys
465 470 475 480
Thr Asp Asn Tyr Ile Phe Ser Val Val Arg Glu Arg Arg Arg Val Ala
485 490 495
Phe Ser Trp Thr His Thr Ser Val Asp Phe Gln Asn Thr Ile Asp Leu
500 505 510
Asp Asn Ile Thr Gln Ile His Ala Leu Lys Thr Leu Lys Val Ser Ser
515 520 525
Asn Ser Lys Ile Val Lys Gly Leu Gly His Thr Ser Glu Asn Leu Val
530 535 540
Ile Leu Lys Asp Ser Met Asn Phe Arg Val Arg Phe Leu Lys Asn Val
545 550 555 560
Ser Gln Gln Tyr Gln Val Arg Ile Arg Tyr Ala Thr Asn Ala Pro Lys
565 570 575
Thr Thr Val Phe Leu Thr Gly Ile Asp Thr Ile Ser Val Glu Leu Pro
580 585 590
Ser Thr Thr Ser Arg Gln Asn Pro Asn Ala Thr Asp Leu Thr Tyr Ala
595 600 605
Asp Phe Gly Tyr Val Thr Phe Ser Arg Thr Val Ser Asn Lys Thr Phe
610 615 620
Glu Gly Glu Asp Thr Phe Ile Asn Asp Leu Tyr Tyr Gly Thr Pro Asn
625 630 635 640
His Ser Tyr Asn Ile Tyr Ile Asp Lys Ile Glu Phe Ile Pro Ile Thr
645 650 655
Gln Ser Val Leu Asp Tyr Thr Glu Lys Gln Asn Ile Glu Lys Thr Gln
660 665 670
Lys Ile Val Asn Asp Leu Phe Val Asn
675 680
<210> 413
<211> 109
<212> PRT
<213> Bacillus thuringiensis
<400> 413
Phe Ala Val Tyr Thr Ile Leu Asp Ile His Tyr Ala Asn Lys Pro Asn
1 5 10 15
Gln Pro Leu Lys Asn Thr Asn Tyr Lys Asp Trp Leu Asn Val Cys Gln
20 25 30
Asp Asn Gln Gln Tyr Gly Asn Asn Ala Gly Asn Phe Ala Ser Ser Glu
35 40 45
Thr Ile Val Gly Val Ser Ala Gly Ile Ile Val Val Gly Thr Met Leu
50 55 60
Gly Ala Phe Ala Ala Pro Val Leu Ala Ala Gly Ile Ile Ser Phe Gly
65 70 75 80
Thr Leu Leu Pro Ile Phe Trp Gln Gly Ser Asp Pro Ala Asn Val Trp
85 90 95
Gln Asp Leu Leu Asn Ile Gly Gly Arg Pro Ile Gln Glu
100 105
<210> 414
<211> 69
<212> PRT
<213> Bacillus thuringiensis
<400> 414
Met Glu Val Arg Thr Gln Thr Phe Tyr Gln Asn Pro Asn Asn Glu Pro
1 5 10 15
Ile Ala Pro Arg Asp Ile Ile Asn Gln Ile Leu Thr Ala Pro Ala Pro
20 25 30
Ala Asp Leu Phe Phe Lys Asn Ala Asp Ile Asn Val Lys Phe Thr Gln
35 40 45
Trp Phe Gln Ser Thr Leu Tyr Gly Trp Asn Ile Lys Leu Gly Thr Gln
50 55 60
Thr Val Leu Ser Met
65
<210> 415
<211> 1176
<212> PRT
<213> Bacillus thuringiensis
<400> 415
Met Asp Asn Asn Pro Asn Ile Asn Glu Cys Ile Pro Tyr Asn Cys Leu
1 5 10 15
Ser Asn Pro Glu Val Glu Val Leu Gly Gly Glu Arg Ile Glu Thr Gly
20 25 30
Tyr Thr Pro Ile Asp Ile Ser Leu Ser Leu Thr Gln Phe Leu Leu Ser
35 40 45
Glu Phe Val Pro Gly Ala Gly Phe Val Leu Gly Leu Val Asp Ile Ile
50 55 60
Trp Gly Ile Phe Gly Pro Ser Gln Trp Asp Ala Phe Leu Val Gln Ile
65 70 75 80
Glu Gln Leu Ile Asn Gln Arg Ile Glu Glu Phe Ala Arg Asn Gln Ala
85 90 95
Ile Ser Arg Leu Glu Gly Leu Ser Asn Leu Tyr Gln Ile Tyr Ala Glu
100 105 110
Ser Phe Arg Glu Trp Glu Ala Asp Pro Thr Asn Pro Ala Leu Arg Glu
115 120 125
Glu Met Arg Ile Gln Phe Asn Asp Met Asn Ser Ala Leu Thr Thr Ala
130 135 140
Ile Pro Leu Phe Ala Val Gln Asn Tyr Gln Val Pro Leu Leu Ser Val
145 150 155 160
Tyr Val Gln Ala Ala Asn Leu His Leu Ser Val Leu Arg Asp Val Ser
165 170 175
Val Phe Gly Gln Arg Trp Gly Phe Asp Ala Ala Thr Ile Asn Ser Arg
180 185 190
Tyr Asn Asp Leu Thr Arg Leu Ile Gly Asn Tyr Thr Asp Tyr Ala Val
195 200 205
Arg Trp Tyr Asn Thr Gly Leu Glu Arg Val Trp Gly Pro Asp Ser Arg
210 215 220
Asp Trp Val Arg Tyr Asn Gln Phe Arg Arg Glu Leu Thr Leu Thr Val
225 230 235 240
Leu Asp Ile Val Ala Leu Phe Ser Asn Tyr Asp Ser Arg Arg Tyr Pro
245 250 255
Ile Arg Thr Val Ser Gln Leu Thr Arg Glu Ile Tyr Thr Asn Pro Val
260 265 270
Leu Glu Asn Phe Asp Gly Ser Phe Arg Gly Met Ala Gln Arg Ile Glu
275 280 285
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<212> PRT
<213> Bacillus thuringiensis
<400> 437
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1 5 10 15
Asn Pro Glu Glu Val Leu Leu Asp Gly Glu Arg Ile Leu Pro Asp Ile
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Asp Pro Leu Glu Val Ser Leu Ser Leu Leu Gln Phe Leu Leu Asn Asn
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Phe Val Pro Gly Gly Gly Phe Ile Ser Gly Leu Val Asp Lys Ile Trp
50 55 60
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Val Ile Asp Arg Phe Arg Ile Leu Asp Gly Leu Ile Glu Ala Asn Ile
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<213> Bacillus thuringiensis
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<400> 439
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<213> Bacillus thuringiensis
<220>
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (477)..(477)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (600)..(600)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (604)..(604)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (624)..(624)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (637)..(637)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (712)..(712)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 440
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<213> Bacillus thuringiensis
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<213> Bacillus thuringiensis
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<221> misc_feature
<222> (58)..(58)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
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Ala Ser Glu Leu Ile Thr Lys Asp Glu Ile Lys Thr Ser Gly Ser Glu
260 265 270
Ile Gly Lys Val Tyr Ser Phe Leu Ile Val Leu Thr Ser Leu Gln Ala
275 280 285
Lys Ala Phe Leu Thr Leu Thr Thr Cys Arg Lys Leu Leu Gly Leu Ser
290 295 300
Asp Ile Asp Tyr Thr Ser Ile Met Asn Glu His Leu Asn Asn Glu Lys
305 310 315 320
Asn Glu Phe Arg Asp Asn Ile Leu Pro Ala Leu Ser Asn Lys Phe Ser
325 330 335
Asn Pro Ser Tyr Ala Lys Thr Ile Gly Ser Asp Asn Tyr Ala Lys Val
340 345 350
Ile Leu Glu Ser Glu Pro Gly Tyr Ala Leu Val Gly Phe Glu Ile Ile
355 360 365
Asn Asp Pro Ile Pro Val Leu Lys Ala Tyr Lys Ala Lys Leu Lys Gln
370 375 380
Asn Tyr Gln Val Asp Asn Gln Ser Leu Ser Glu Ile Val Tyr Leu Asp
385 390 395 400
Ile Asp Lys Leu Phe Cys Pro Glu Asn Ser Glu Gln Lys Tyr Tyr Thr
405 410 415
Lys Asn Leu Thr Phe Pro Asp Gly Tyr Val Ile Thr Lys Ile Thr Phe
420 425 430
Glu Lys Lys Leu Asn Asn Leu Ile Tyr Glu Ala Thr Ala Asn Phe Tyr
435 440 445
Asp Pro Ser Thr Gly Asp Ile Asp Leu Asn Lys Lys Gln Val Glu Ser
450 455 460
Thr Phe Pro Gln Thr Asp Tyr Ile Thr Met Asp Ile Gly Asp Asp Asp
465 470 475 480
Gly Ile Tyr Met Pro Leu Gly Val Ile Ser Glu Thr Phe Leu Thr Pro
485 490 495
Ile Asn Ser Phe Gly Leu Glu Val Asp Ala Lys Ser Lys Thr Leu Thr
500 505 510
Leu Lys Cys Lys Ser Tyr Leu Arg Glu Tyr Leu Leu Glu Ser Asp Leu
515 520 525
Lys Asn Lys Glu Thr Gly Leu Ile Ala Pro Pro Asn Val Phe Ile Ser
530 535 540
Asn Val Val Lys Asn Trp Asp Ile Glu Glu Asp Ser Leu Glu Pro Trp
545 550 555 560
Val Ala Asn Asn Lys Asn Ala Tyr Val Asp Asn Thr Gly Gly Ile Glu
565 570 575
Arg Ser Lys Ala Leu Phe Thr Gln Gly Asp Gly Glu Phe Ser Gln Phe
580 585 590
Ile Gly Asp Lys Leu Lys Pro Asn Thr Asp Tyr Ile Ile Gln Tyr Thr
595 600 605
Val Lys Gly Lys Pro Ala Ile Tyr Leu Lys Asn Lys Ser Thr Gly Tyr
610 615 620
Ile Thr Tyr Glu Asp Thr Asn Gly Asn Ser Glu Glu Phe Gln Thr Ile
625 630 635 640
Ala Val Lys Phe Thr Ser Glu Thr Asp Leu Ser Gln Thr His Leu Val
645 650 655
Phe Lys Ser Gln Asn Gly Tyr Glu Ala Trp Gly Asp Asn Phe Ile Ile
660 665 670
Leu Glu Ala Lys Leu Phe Glu Thr Pro Glu Ser Pro Glu Leu Ile Lys
675 680 685
Phe Asn Asp Trp Glu Arg Phe Gly Thr Thr Tyr Ile Thr Gly Asn Glu
690 695 700
Leu Arg Ile Asp His Ser Arg Gly Gly Tyr Phe Arg Gln Ser Leu Asn
705 710 715 720
Ile Asp Ser Tyr Ser Thr Tyr Asp Leu Ser Phe Ser Phe Ser Gly Leu
725 730 735
Trp Ala Lys Val Ile Val Lys Asn Ser Arg Gly Val Val Leu Phe Glu
740 745 750
Lys Val Lys Asn Asn Gly Ser Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Glu Ser Phe
755 760 765
Thr Thr Ala Ser Asn Lys Asp Gly Phe Phe Ile Glu Leu Thr Ala Glu
770 775 780
Arg Thr Ser Ser Thr Phe His Ser Phe Arg Asp Ile Ser Ile Lys Glu
785 790 795 800
Lys Ile Glu
<210> 588
<211> 47
<212> PRT
<213> Anemonia viridis
<400> 588
Gly Val Pro Cys Leu Cys Asp Ser Asp Gly Pro Ser Val Arg Gly Asn
1 5 10 15
Thr Leu Ser Gly Ile Ile Trp Leu Ala Gly Cys Pro Ser Gly Trp His
20 25 30
Asn Cys Lys Lys His Gly Pro Thr Ile Gly Trp Cys Cys Lys Gln
35 40 45
<210> 589
<211> 75
<212> PRT
<213> Zea mays
<400> 589
Gln Ile Phe Val Lys Thr Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val
1 5 10 15
Glu Ser Ser Asp Thr Ile Asp Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys
20 25 30
Glu Gly Ile Pro Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln
35 40 45
Leu Glu Asp Gly Arg Thr Leu Ala Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser
50 55 60
Thr Leu His Leu Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly
65 70 75
<210> 590
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ALKFLV
<400> 590
Ala Leu Lys Phe Leu Val
1 5
<210> 591
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Histidine tag
<400> 591
His His His His His His
1 5
<210> 592
<211> 50
<212> PRT
<213> Eratigena agrestis
<400> 592
Glu Pro Asp Glu Ile Cys Arg Ala Arg Met Thr Asn Lys Glu Phe Thr
1 5 10 15
Tyr Lys Ser Asn Val Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala Cys
20 25 30
Glu Ala Glu Cys Phe Arg Asn Asp Val Tyr Thr Ala Cys His Glu Ala
35 40 45
Gln Lys
50
<210> 593
<211> 163
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Non-naturally occurring U1-agatoxin-Ta1b insecticidal protein
<400> 593
Met Gly Lys Met Ala Ser Leu Phe Ala Thr Phe Leu Val Val Leu Val
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ala Ser Glu Ser Ser Ala Gln Ile Phe Val Lys Thr
20 25 30
Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val Glu Ser Ser Asp Thr Ile
35 40 45
Asp Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile Pro Pro Asp
50 55 60
Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp Gly Arg Thr
65 70 75 80
Leu Ala Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser Thr Leu His Leu Val Leu
85 90 95
Arg Leu Arg Gly Gly Ala Leu Lys Phe Leu Val Glu Pro Asp Glu Ile
100 105 110
Cys Arg Ala Arg Met Thr Asn Lys Glu Phe Thr Tyr Lys Ser Asn Val
115 120 125
Cys Asn Asn Cys Gly Asp Gln Val Ala Ala Cys Glu Ala Glu Cys Phe
130 135 140
Arg Asn Asp Val Tyr Thr Ala Cys His Glu Ala Gln Lys His His His
145 150 155 160
His His His
<210> 594
<211> 37
<212> PRT
<213> Hadronyche versuta
<400> 594
Ala Ile Cys Thr Gly Ala Asp Arg Pro Cys Ala Ala Cys Cys Pro Cys
1 5 10 15
Cys Pro Gly Thr Ser Cys Lys Ala Glu Ser Asn Gly Val Ser Tyr Cys
20 25 30
Arg Lys Asp Glu Pro
35
<210> 595
<211> 157
<212> PRT
<213> Galanthus nivalis
<400> 595
Met Ala Lys Ala Ser Leu Leu Ile Leu Ala Ala Ile Phe Leu Gly Val
1 5 10 15
Ile Thr Pro Ser Cys Leu Ser Asp Asn Ile Leu Tyr Ser Gly Glu Thr
20 25 30
Leu Ser Thr Gly Glu Phe Leu Asn Tyr Gly Ser Phe Val Phe Ile Met
35 40 45
Gln Glu Asp Cys Asn Leu Val Leu Tyr Asp Val Asp Lys Pro Ile Trp
50 55 60
Ala Thr Asn Thr Gly Gly Leu Ser Arg Ser Cys Phe Leu Ser Met Gln
65 70 75 80
Thr Asp Gly Asn Leu Val Val Tyr Asn Pro Ser Asn Lys Pro Ile Trp
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
Tyr Pro Thr Ala Gly Lys Ile Lys Leu Val Thr Ala Lys
145 150 155
<210> 596
<211> 316
<212> PRT
<213> Sambucus nigra
<400> 596
Met Arg Val Ile Ala Ala Ala Met Leu Tyr Leu Tyr Ile Val Val Leu
1 5 10 15
Ala Ile Cys Ser Val Gly Ile Glu Gly Ile Glu Tyr Pro Ser Val Ser
20 25 30
Phe Asn Leu Ala Gly Ala Lys Ser Ala Thr Trp Asp Phe Leu Arg Met
35 40 45
Pro Thr Ser Arg Asn Gly Tyr Asp Asp Gly Glu Pro Ile Thr Gly Asn
50 55 60
Ile Val Gly Arg Asp Gly Leu Cys Val Asp Val Arg Asn Gly Tyr Asp
65 70 75 80
Thr Asp Gly Thr Pro Ile Gln Leu Trp Pro Cys Gly Thr Gln Arg Asn
85 90 95
Gln Gln Trp Thr Phe His Thr Asp Asp Thr Ile Arg Ser Met Gly Lys
100 105 110
Cys Met Thr Ala Asn Gly Leu Asn Asn Gly Gly Asn Ile Met Ile Phe
115 120 125
Asn Cys Ser Thr Ala Val Glu Asn Ala Ile Lys Trp Glu Val Thr Ile
130 135 140
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145 150 155 160
Ser Ala Ala Ser Arg Thr Ile Leu Leu Leu Gln Asn Asn Ile Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Gln Gly Trp Thr Val Ser Asn Asn Val Gln Pro Ile Val Ala
180 185 190
Ser Ile Val Gly Phe Arg Glu Met Cys Leu Gln Ala Asn Gly Glu Asn
195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
Leu Cys Val Thr Thr Asn Gly Tyr Asn Ser Arg Asp Leu Ile Ile Ile
245 250 255
Leu Lys Cys Gln Gly Leu Pro Ser Gln Arg Trp Phe Phe Asn Ser Asp
260 265 270
Gly Ala Ile Val Asn Pro Lys Ser Lys Leu Val Met Asp Val Lys Ser
275 280 285
Ser Asn Val Ser Leu Arg Glu Ile Ile Ile Tyr Pro Ala Thr Gly Arg
290 295 300
Pro Asn Gln Gln Trp Val Thr Gln Val Leu Pro Ser
305 310 315
<210> 597
<211> 287
<212> PRT
<213> Maackia amurensis
<400> 597
Met Ala Thr Ser Asn Ser Lys Pro Thr Gln Val Leu Leu Ala Thr Phe
1 5 10 15
Leu Thr Phe Phe Phe Leu Leu Leu Asn Asn Val Asn Ser Ser Asp Glu
20 25 30
Leu Ser Phe Thr Ile Asn Asn Phe Val Pro Asn Glu Ala Asp Leu Leu
35 40 45
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50 55 60
Arg Val Glu Asn Gly Gln Pro Gln Lys Tyr Ser Val Gly Arg Ala Leu
65 70 75 80
Tyr Ala Ala Pro Val Arg Ile Trp Asp Asn Thr Thr Gly Ser Val Ala
85 90 95
Ser Phe Ser Thr Ser Phe Thr Phe Val Val Lys Ala Pro Asn Pro Asp
100 105 110
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115 120 125
Ile Pro Ser Gly Ser Val Ser Lys Tyr Leu Gly Leu Phe Asn Asn Ser
130 135 140
Asn Ser Asp Ser Ser Asn Gln Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr
145 150 155 160
Phe Ala His Ser Tyr Asp Pro Trp Asp Pro Asn Tyr Arg His Ile Gly
165 170 175
Ile Asp Val Asn Gly Ile Glu Ser Ile Lys Thr Val Gln Trp Asp Trp
180 185 190
Ile Asn Gly Gly Val Ala Phe Ala Thr Ile Thr Tyr Leu Ala Pro Asn
195 200 205
Lys Thr Leu Ile Ala Ser Leu Val Tyr Pro Ser Asn Gln Thr Thr Phe
210 215 220
Ser Val Ala Ala Ser Val Asp Leu Lys Glu Ile Leu Pro Glu Trp Val
225 230 235 240
Arg Val Gly Phe Ser Ala Ala Thr Gly Tyr Pro Thr Glu Val Glu Thr
245 250 255
His Asp Val Leu Ser Trp Ser Phe Thr Ser Thr Leu Glu Ala Asn Cys
260 265 270
Asp Ala Ala Thr Glu Asn Asn Val His Ile Ala Arg Tyr Thr Ala
275 280 285
<210> 598
<211> 239
<212> PRT
<213> Erythrina cristagalli
<400> 598
Val Glu Thr Ile Ser Phe Ser Phe Ser Glu Phe Glu Pro Gly Asn Asp
1 5 10 15
Asn Leu Thr Leu Gln Gly Ala Ala Leu Ile Thr Gln Ser Gly Val Leu
20 25 30
Gln Leu Thr Lys Ile Asn Gln Asn Gly Met Pro Ala Trp Asp Ser Thr
35 40 45
Gly Arg Thr Leu Tyr Thr Lys Pro Val His Met Trp Asp Ser Thr Thr
50 55 60
Gly Thr Val Ala Ser Phe Glu Thr Arg Phe Ser Phe Ser Ile Glu Gln
65 70 75 80
Pro Tyr Thr Arg Pro Leu Pro Ala Asp Gly Leu Val Phe Phe Met Gly
85 90 95
Pro Thr Lys Ser Lys Pro Ala Gln Gly Tyr Gly Tyr Leu Gly Val Phe
100 105 110
Asn Asn Ser Lys Gln Asp Asn Ser Tyr Gln Thr Leu Ala Val Glu Phe
115 120 125
Asp Thr Phe Ser Asn Pro Trp Asp Pro Pro Gln Val Pro His Ile Gly
130 135 140
Ile Asp Val Asn Ser Ile Arg Ser Ile Lys Thr Gln Pro Phe Gln Leu
145 150 155 160
Asp Asn Gly Gln Val Ala Asn Val Val Ile Lys Tyr Asp Ala Pro Ser
165 170 175
Lys Ile Leu His Val Val Leu Val Tyr Pro Ser Ser Gly Ala Ile Tyr
180 185 190
Thr Ile Ala Glu Ile Val Asp Val Lys Gln Val Leu Pro Asp Trp Val
195 200 205
Asp Val Gly Leu Ser Gly Ala Thr Gly Ala Gln Arg Asp Ala Ala Glu
210 215 220
Thr His Asp Val Tyr Ser Trp Ser Phe Gln Ala Ser Leu Pro Glu
225 230 235
<210> 599
<211> 540
<212> PRT
<213> Ricinus communis
<400> 599
Ile Phe Pro Lys Gln Tyr Pro Ile Ile Asn Phe Thr Thr Ala Asp Ala
1 5 10 15
Thr Val Glu Ser Tyr Thr Asn Phe Ile Arg Ala Val Arg Ser His Leu
20 25 30
Thr Thr Gly Ala Asp Val Arg His Glu Ile Pro Val Leu Pro Asn Arg
35 40 45
Val Gly Leu Pro Ile Ser Gln Arg Phe Ile Leu Val Glu Leu Ser Asn
50 55 60
His Ala Glu Leu Ser Val Thr Leu Ala Leu Asp Val Thr Asn Ala Tyr
65 70 75 80
Val Val Gly Cys Arg Ala Gly Asn Ser Ala Tyr Phe Phe His Pro Asp
85 90 95
Asn Gln Glu Asp Ala Glu Ala Ile Thr His Leu Phe Thr Asp Val Gln
100 105 110
Asn Ser Phe Thr Phe Ala Phe Gly Gly Asn Tyr Asp Arg Leu Glu Gln
115 120 125
Leu Gly Gly Leu Arg Glu Asn Ile Glu Leu Gly Thr Gly Pro Leu Glu
130 135 140
Asp Ala Ile Ser Ala Leu Tyr Tyr Tyr Ser Thr Cys Gly Thr Gln Ile
145 150 155 160
Pro Thr Leu Ala Arg Ser Phe Met Val Cys Ile Gln Met Ile Ser Glu
165 170 175
Ala Ala Arg Phe Gln Tyr Ile Glu Gly Glu Met Arg Thr Arg Ile Arg
180 185 190
Tyr Asn Arg Arg Ser Ala Pro Asp Pro Ser Val Ile Thr Leu Glu Asn
195 200 205
Ser Trp Gly Arg Leu Ser Thr Ala Ile Gln Glu Ser Asn Gln Gly Ala
210 215 220
Phe Ala Ser Pro Ile Gln Leu Gln Arg Arg Asn Gly Ser Lys Phe Asn
225 230 235 240
Val Tyr Asp Val Ser Ile Leu Ile Pro Ile Ile Ala Leu Met Val Tyr
245 250 255
Arg Cys Ala Pro Pro Pro Ser Ser Gln Phe Ser Leu Leu Ile Arg Pro
260 265 270
Val Val Pro Asn Phe Asn Ala Asp Val Cys Met Asp Pro Glu Pro Ile
275 280 285
Val Arg Ile Val Gly Arg Asn Gly Leu Cys Val Asp Val Thr Gly Glu
290 295 300
Glu Phe Phe Asp Gly Asn Pro Ile Gln Leu Trp Pro Cys Lys Ser Asn
305 310 315 320
Thr Asp Trp Asn Gln Leu Trp Thr Leu Arg Lys Asp Ser Thr Ile Arg
325 330 335
Ser Asn Gly Lys Cys Leu Thr Ile Ser Lys Ser Ser Pro Arg Gln Gln
340 345 350
Val Val Ile Tyr Asn Cys Ser Thr Ala Thr Val Gly Ala Thr Arg Trp
355 360 365
Gln Ile Trp Asp Asn Arg Thr Ile Ile Asn Pro Arg Ser Gly Leu Val
370 375 380
Leu Ala Ala Thr Ser Gly Asn Ser Gly Thr Lys Leu Thr Val Gln Thr
385 390 395 400
Asn Ile Tyr Ala Val Ser Gln Gly Trp Leu Pro Thr Asn Asn Thr Gln
405 410 415
Pro Phe Val Thr Thr Ile Val Gly Leu Tyr Gly Met Cys Leu Gln Ala
420 425 430
Asn Ser Gly Lys Val Trp Leu Glu Asp Cys Thr Ser Glu Lys Ala Glu
435 440 445
Gln Gln Trp Ala Leu Tyr Ala Asp Gly Ser Ile Arg Pro Gln Gln Asn
450 455 460
Arg Asp Asn Cys Leu Thr Thr Asp Ala Asn Ile Lys Gly Thr Val Val
465 470 475 480
Lys Ile Leu Ser Cys Gly Pro Ala Ser Ser Gly Gln Arg Trp Met Phe
485 490 495
Lys Asn Asp Gly Thr Ile Leu Asn Leu Tyr Asn Gly Leu Val Leu Asp
500 505 510
Val Arg Arg Ser Asp Pro Ser Leu Lys Gln Ile Ile Val His Pro Phe
515 520 525
His Gly Asn Leu Asn Gln Ile Trp Leu Pro Leu Phe
530 535 540
<210> 600
<211> 273
<212> PRT
<213> Arachis hypogaea
<400> 600
Met Lys Pro Phe Cys Val Phe Leu Thr Phe Phe Leu Leu Leu Ala Ala
1 5 10 15
Ser Ser Lys Lys Val Asp Ser Ala Glu Thr Val Ser Phe Asn Phe Asn
20 25 30
Ser Phe Ser Glu Gly Asn Pro Ala Ile Asn Phe Gln Gly Asp Val Thr
35 40 45
Val Leu Ser Asn Gly Asn Ile Gln Leu Thr Asn Leu Asn Lys Val Asn
50 55 60
Ser Val Gly Arg Val Leu Tyr Ala Met Pro Val Arg Ile Trp Ser Ser
65 70 75 80
Ala Thr Gly Asn Val Ala Ser Phe Leu Thr Ser Phe Ser Phe Glu Met
85 90 95
Lys Asp Ile Lys Asp Tyr Asp Pro Ala Asp Gly Ile Ile Phe Phe Ile
100 105 110
Ala Pro Glu Asp Thr Gln Ile Pro Ala Gly Ser Ile Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Leu Gly Val Ser Asp Thr Lys Gly Ala Gly His Phe Val Gly Val Glu
130 135 140
Phe Asp Thr Tyr Ser Asn Ser Glu Tyr Asn Asp Pro Pro Thr Asp His
145 150 155 160
Val Gly Ile Asp Val Asn Ser Val Asp Ser Val Lys Thr Val Pro Trp
165 170 175
Asn Ser Val Ser Gly Ala Val Val Lys Val Thr Val Ile Tyr Asp Ser
180 185 190
Ser Thr Lys Thr Leu Ser Val Ala Val Thr Asn Asp Asn Gly Asp Ile
195 200 205
Thr Thr Ile Ala Gln Val Val Asp Leu Lys Ala Lys Leu Pro Glu Arg
210 215 220
Val Lys Phe Gly Phe Ser Ala Ser Gly Ser Leu Gly Gly Arg Gln Ile
225 230 235 240
His Leu Ile Arg Ser Trp Ser Phe Thr Ser Thr Leu Ile Thr Thr Thr
245 250 255
Arg Arg Ser Ile Asp Asn Asn Glu Lys Lys Ile Met Asn Met Ala Ser
260 265 270
Ala
<210> 601
<211> 212
<212> PRT
<213> Triticum aestivum
<400> 601
Met Lys Met Met Ser Thr Arg Ala Leu Ala Leu Gly Ala Ala Ala Val
1 5 10 15
Leu Ala Phe Ala Ala Ala Thr Ala Gln Ala Gln Arg Cys Gly Glu Gln
20 25 30
Gly Ser Asn Met Glu Cys Pro Asn Asn Leu Cys Cys Ser Gln Tyr Gly
35 40 45
Tyr Cys Gly Met Gly Gly Asp Tyr Cys Gly Lys Gly Cys Gln Asn Gly
50 55 60
Ala Cys Trp Thr Ser Lys Arg Cys Gly Ser Gln Ala Gly Gly Ala Thr
65 70 75 80
Cys Thr Asn Asn Gln Cys Cys Ser Gln Tyr Gly Tyr Cys Gly Phe Gly
85 90 95
Ala Glu Tyr Cys Gly Ala Gly Cys Gln Gly Gly Pro Cys Arg Ala Asp
100 105 110
Ile Lys Cys Gly Ser Gln Ala Gly Gly Lys Leu Cys Pro Asn Asn Leu
115 120 125
Cys Cys Ser Gln Trp Gly Phe Cys Gly Leu Gly Ser Glu Phe Cys Gly
130 135 140
Gly Gly Cys Gln Ser Gly Ala Cys Ser Thr Asp Lys Pro Cys Gly Lys
145 150 155 160
Asp Ala Gly Gly Arg Val Cys Thr Asn Asn Tyr Cys Cys Ser Lys Trp
165 170 175
Gly Ser Cys Gly Ile Gly Pro Gly Tyr Cys Gly Ala Gly Cys Gln Ser
180 185 190
Gly Gly Cys Asp Gly Val Phe Ala Glu Ala Ile Thr Ala Asn Ser Thr
195 200 205
Leu Leu Gln Glu
210
<210> 602
<211> 290
<212> PRT
<213> Canavalia ensiformis
<400> 602
Met Ala Ile Ser Lys Lys Ser Ser Leu Phe Leu Pro Ile Phe Thr Phe
1 5 10 15
Ile Thr Met Phe Leu Met Val Val Asn Lys Val Ser Ser Ser Thr His
20 25 30
Glu Thr Asn Ala Leu His Phe Met Phe Asn Gln Phe Ser Lys Asp Gln
35 40 45
Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly Asp Ala Thr Thr Gly Thr Asp Gly Asn
50 55 60
Leu Glu Leu Thr Arg Val Ser Ser Asn Gly Ser Pro Gln Gly Ser Ser
65 70 75 80
Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser
85 90 95
Ala Val Val Ala Ser Phe Glu Ala Thr Phe Thr Phe Leu Ile Lys Ser
100 105 110
Pro Asp Ser His Pro Ala Asp Gly Ile Ala Phe Phe Ile Ser Asn Ile
115 120 125
Asp Ser Ser Ile Pro Ser Gly Ser Thr Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe
130 135 140
Pro Asp Ala Asn Val Ile Arg Asn Ser Thr Thr Ile Asp Phe Asn Ala
145 150 155 160
Ala Tyr Asn Ala Asp Thr Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr Pro
165 170 175
Asn Thr Asp Ile Gly Asp Pro Ser Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile
180 185 190
Lys Ser Val Arg Ser Lys Lys Thr Ala Lys Trp Asn Met Gln Asn Gly
195 200 205
Lys Val Gly Thr Ala His Ile Ile Tyr Asn Ser Val Asp Lys Arg Leu
210 215 220
Ser Ala Val Val Ser Tyr Pro Asn Ala Asp Ser Ala Thr Val Ser Tyr
225 230 235 240
Asp Val Asp Leu Asp Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu
245 250 255
Ser Ala Ser Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp
260 265 270
Ser Phe Thr Ser Lys Leu Lys Ser Asn Glu Ile Pro Asp Ile Ala Thr
275 280 285
Val Val
290
<210> 603
<211> 144
<212> PRT
<213> Ananas comosus
<400> 603
Ser Gly Leu Val Lys Leu Gly Leu Trp Gly Gly Asn Glu Gly Thr Leu
1 5 10 15
Gln Asp Ile Asp Gly His Pro Thr Arg Leu Thr Lys Ile Val Ile Arg
20 25 30
Ser Ala His Ala Ile Asp Ala Leu Gln Phe Asp Tyr Val Glu Asp Gly
35 40 45
Lys Thr Phe Ala Ala Gly Gln Trp Gly Gly Asn Gly Gly Lys Ser Asp
50 55 60
Thr Ile Glu Phe Gln Pro Gly Glu Tyr Leu Ile Ala Ile Lys Gly Thr
65 70 75 80
Thr Gly Ala Leu Gly Ala Val Thr Asn Leu Val Arg Ser Leu Thr Phe
85 90 95
Ile Ser Asn Met Arg Thr Tyr Gly Pro Phe Gly Leu Glu His Gly Thr
100 105 110
Pro Phe Ser Val Pro Val Ala Ser Gly Arg Ile Val Ala Phe Tyr Gly
115 120 125
Arg Phe Gly Ser Leu Val Asp Ala Phe Gly Ile Tyr Leu Met Pro Tyr
130 135 140
<210> 604
<211> 54
<212> PRT
<213> Lathyrus hirsutus
<400> 604
Val Thr Ser Tyr Thr Leu Asn Glu Val Val Pro Leu Lys Asp Val Val
1 5 10 15
Pro Glu Trp Val Arg Ile Gly Phe Ser Ala Thr Thr Gly Ala Glu Phe
20 25 30
Ala Ala His Glu Val Leu Ser Trp Ser Phe His Ser Glu Leu Gly Gly
35 40 45
Thr Ser Ala Ser Lys Gln
50
<210> 605
<211> 281
<212> PRT
<213> Canavalia bonariensis
<400> 605
Met Ala Ile Ser Lys Lys Ser Ser Leu Tyr Leu Pro Ile Phe Thr Phe
1 5 10 15
Ile Thr Met Leu Leu Met Val Val Asn Lys Val Ser Ser Ser Thr Ala
20 25 30
Asp Ala Asn Ala Leu His Phe Thr Phe Asn Gln Phe Ser Lys Asp Gln
35 40 45
Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly Asp Ala Thr Thr Gly Thr Asp Gly Asn
50 55 60
Leu Glu Leu Thr Arg Val Ser Ser Asn Gly Ser Pro Gln Gly Asn Ser
65 70 75 80
Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser
85 90 95
Ala Val Val Ala Ser Phe Asp Ala Thr Phe Lys Phe Leu Ile Lys Ser
100 105 110
Pro Asp Ser Glu Pro Ala Asp Gly Ile Thr Phe Phe Ile Ala Asn Ile
115 120 125
Asp Ser Ser Ile Pro Ser Gly Ser Gly Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe
130 135 140
Pro Asp Ala Asn Ile Ile Lys Asn Ser Thr Thr Ile Asp Phe Asn Ala
145 150 155 160
Ala Tyr Asn Ala Asp Thr Ile Val Ala Val Glu Leu Asp Thr Tyr Pro
165 170 175
Asn Thr Asp Ile Gly Asp Pro Asn Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile
180 185 190
Lys Ser Ile Arg Ser Lys Lys Thr Thr Arg Trp Asn Ile Gln Asn Gly
195 200 205
Lys Val Gly Thr Ala His Ile Asn Tyr Asn Ser Val Gly Lys Arg Leu
210 215 220
Ser Ala Ile Val Ser Tyr Pro Asn Ser Asp Ser Ala Thr Val Ser Tyr
225 230 235 240
Asp Val Asp Leu Asp Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu
245 250 255
Ser Ala Thr Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp
260 265 270
Ser Phe Thr Ser Lys Leu Lys Ser Asn
275 280
<210> 606
<211> 237
<212> PRT
<213> Canavalia grandiflora
<400> 606
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1 5 10 15
Ile Gly Asp Pro Asn Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile Lys Ser Ile
20 25 30
Arg Ser Lys Lys Ile Ala Lys Trp Asn Met Gln Asp Gly Lys Val Ala
35 40 45
Thr Ala His Ile Ile Tyr Asn Ser Val Gly Lys Arg Leu Ser Ala Val
50 55 60
Val Ser Tyr Pro Asn Ala Asp Ser Ala Thr Val Ser Tyr Asp Val Asp
65 70 75 80
Leu Asp Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu Ser Ala Thr
85 90 95
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100 105 110
Ser Lys Leu Lys Ser Asn Ser Thr Ala Glu Thr Asn Ala Leu His Phe
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Thr Phe Asn Gln Phe Thr Lys Asp Gln Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly
130 135 140
Asp Ala Thr Thr Asp Ser Asp Gly Asn Leu Gln Leu Thr Arg Val Ser
145 150 155 160
Ser Asp Gly Thr Pro Gln Gly Asn Ser Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr
165 170 175
Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser Ala Val Val Ala Ser Phe Asp
180 185 190
Ala Thr Phe Thr Phe Leu Ile Lys Ser Pro Asp Ser Asp Pro Ala Asp
195 200 205
Gly Ile Thr Phe Phe Ile Ser Asn Met Asp Ser Thr Ile Pro Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe Pro Asp Ala Asn
225 230 235
<210> 607
<211> 237
<212> PRT
<213> Cymbosema roseum
<400> 607
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1 5 10 15
Ile Gly Asp Pro Ser Tyr Pro His Ile Gly Ile Asp Ile Lys Ser Ile
20 25 30
Arg Ser Lys Ser Thr Ala Arg Trp Asn Met Gln Thr Gly Lys Val Gly
35 40 45
Thr Ala His Ile Ser Tyr Asn Ser Val Ala Lys Arg Leu Thr Ala Val
50 55 60
Val Ser Tyr Ser Gly Ser Ser Ser Thr Thr Val Ser Tyr Asp Val Asp
65 70 75 80
Leu Asn Asn Val Leu Pro Glu Trp Val Arg Val Gly Leu Ser Ala Thr
85 90 95
Thr Gly Leu Tyr Lys Glu Thr Asn Thr Ile Leu Ser Trp Ser Phe Thr
100 105 110
Ser Lys Leu Lys Thr Asn Ser Ile Ala Asp Ala Asn Ala Leu His Phe
115 120 125
Ser Phe His Gln Phe Thr Gln Asn Pro Lys Asp Leu Ile Leu Gln Gly
130 135 140
Asp Ala Thr Thr Asp Ser Asp Gly Asn Leu Glu Leu Thr Lys Val Ser
145 150 155 160
Ser Ser Gly Ser Pro Gln Gly Ser Ser Val Gly Arg Ala Leu Phe Tyr
165 170 175
Ala Pro Val His Ile Trp Glu Ser Ser Ala Val Val Ala Ser Phe Asp
180 185 190
Ala Thr Phe Thr Phe Leu Ile Lys Ser Pro Asp Ser Glu Pro Ala Asp
195 200 205
Gly Ile Thr Phe Phe Ile Ala Asn Thr Asp Thr Ser Ile Pro Ser Gly
210 215 220
Ser Ser Gly Arg Leu Leu Gly Leu Phe Pro Asp Ala Asn
225 230 235
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<212> PRT
<213> Viscum album
<400> 608
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1 5 10 15
Met Leu Gly Gln Val Phe Gly Ala Thr Val Lys Ala Glu Thr Lys Phe
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Ser Tyr Glu Arg Leu Arg Leu Arg Val Thr His Gln Thr Thr Gly Glu
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50 55 60
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Ser Asp Ala Gln Arg Phe Val Leu Val Glu Leu Thr Asn Glu Gly Gly
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100 105 110
Tyr Gln Ala Gly Asp Gln Ser Tyr Phe Leu Arg Asp Ala Pro Arg Gly
115 120 125
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260 265 270
Leu Ala Ile Met Leu Phe Val Cys Gly Glu Arg Pro Ser Ser Ser Asp
275 280 285
Val Arg Tyr Trp Pro Leu Val Ile Arg Pro Val Ile Ala Asp Asp Val
290 295 300
Thr Cys Ser Ala Ser Glu Pro Thr Val Arg Ile Val Gly Arg Asn Gly
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Met Cys Val Asp Val Arg Asp Asp Asp Phe His Asp Gly Asn Gln Ile
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340 345 350
Ile Lys Arg Asp Gly Thr Ile Arg Ser Asn Gly Ser Cys Leu Thr Thr
355 360 365
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370 375 380
Ala Val Arg Glu Ala Thr Leu Trp Glu Ile Trp Gly Asn Gly Thr Ile
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Ile Asn Pro Arg Ser Asn Leu Val Leu Ala Ala Ser Ser Gly Ile Lys
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<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 609
Met Ala Asp Asn Phe Ser Leu His Asp Ala Leu Ser Gly Ser Gly Asn
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Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro Gly Gln Ala Pro Pro Gly Ala Tyr Pro
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Gly Pro Pro Ser Gly Pro Gly Ala Tyr Pro Ser Ser Gly Gln Pro Ser
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Asp Leu Thr Ser Ala Ser Tyr Thr Met Ile
245 250
<210> 610
<211> 234
<212> PRT
<213> Cratylia mollis
<400> 610
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<211> 569
<212> PRT
<213> Viscum album
<400> 611
Met Asn Ala Val Met Asp Ser Arg Gly Ala Trp Val Ser Cys Phe Leu
1 5 10 15
Ile Leu Gly Leu Val Phe Gly Ala Thr Val Lys Ala Glu Thr Lys Phe
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Ser Tyr Glu Arg Leu Arg Leu Arg Val Thr His Gln Thr Thr Gly Asp
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Leu Ala Ile Met Leu Phe Val Cys Arg Asp Arg Pro Ser Ser Ser Glu
275 280 285
Val Arg Tyr Trp Pro Leu Val Ile Arg Pro Val Leu Glu Asn Ser Gly
290 295 300
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Val Gly Arg Asp Gly Leu Cys Val Asp Val Arg Asp Gly Lys Phe His
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340 345 350
Asn Gln Leu Trp Thr Ile Arg Arg Asp Gly Thr Ile Arg Ser Asn Gly
355 360 365
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Ser Leu Gly Gln Gly Trp Leu Ala Gly Asn Asp Thr Ala Pro Arg Glu
435 440 445
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450 455 460
Ser Val Trp Val Glu Thr Cys Gly Ser Ser Thr Glu Asn Gln Asn Trp
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Ala Leu Tyr Gly Asp Gly Ser Ile Arg Pro Lys Gln Asn Gln Asp Gln
485 490 495
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Ser Cys Ser Ala Gly Ser Ser Gly Gln Arg Trp Val Phe Thr Asn Glu
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530 535 540
Ser Asn Pro Ser Leu Arg Arg Ile Ile Ile Tyr Pro Ala Thr Gly Asn
545 550 555 560
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565
<210> 612
<211> 239
<212> PRT
<213> Cymbosema roseum
<400> 612
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1 5 10 15
Asp Leu Thr Leu Gln Gly Ser Ala Leu Val Ser Ser Lys Gly Ser Leu
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35 40 45
Arg Ala Leu Tyr Arg Ser Pro Ile His Ile Trp Asp Glu Thr Thr Gly
50 55 60
Lys Val Ala Ser Phe Asp Ala Thr Phe Ser Phe Val Ser Glu Ala Pro
65 70 75 80
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Asp Asp Thr Arg Ile Gly Gly Gln Leu Gly Val Val Asn Asp Ser Tyr
100 105 110
Asn Val Ile Arg Val Thr Val Ala Val Glu Asn Asp Gly Tyr Arg Asn
115 120 125
Arg Val Asp Pro Ser Ala Arg Pro His Ile Ser Leu Pro Ile Lys Ser
130 135 140
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Gly Thr Ala His Ile Ser Tyr Asn Ser Val Ala Lys Arg Leu Ser Ala
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180 185 190
Val Leu Leu Asn Leu Ala Val Leu Pro Ser Lys Val Leu Val Gly Lys
195 200 205
Thr Ala Thr Gly Leu Tyr Lys Asp His Val Glu Thr Asn Thr Ile Leu
210 215 220
Ser Trp Ser Phe Thr Ser Lys Leu Lys Thr Asn Ser Ile Ala Asp
225 230 235
<210> 613
<211> 135
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 613
Met Ala Cys Gly Leu Val Ala Ser Asn Leu Asn Leu Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Cys Leu Arg Val Arg Gly Glu Val Ala Pro Asp Ala Lys Ser Phe Val
20 25 30
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50 55 60
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65 70 75 80
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Leu Asn Leu Glu Ala Ile Asn Tyr Met Ala Ala Asp Gly Asp Phe Lys
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Ile Lys Cys Val Ala Phe Asp
130 135
<210> 614
<211> 168
<212> PRT
<213> Patiria pectinifera
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65 70 75 80
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Val Cys Lys Met Ser Thr Thr Asn
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<210> 615
<211> 233
<212> PRT
<213> Vicia faba
<400> 615
Thr Asp Glu Ile Thr Ser Phe Ser Ile Pro Lys Phe Arg Pro Asp Gln
1 5 10 15
Pro Asn Leu Ile Phe Gln Gly Gly Gly Tyr Thr Thr Lys Glu Lys Leu
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Thr Leu Thr Lys Ala Val Lys Asn Thr Val Gly Arg Ala Leu Tyr Ser
35 40 45
Leu Pro Ile His Ile Trp Asp Ser Glu Thr Gly Asn Val Ala Asp Phe
50 55 60
Thr Thr Thr Phe Ile Phe Val Ile Asp Ala Pro Asn Gly Tyr Asn Val
65 70 75 80
Ala Asp Gly Phe Thr Phe Phe Ile Ala Pro Val Asp Thr Lys Pro Gln
85 90 95
Thr Gly Gly Gly Tyr Leu Gly Val Phe Asn Gly Lys Asp Tyr Asp Lys
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Ile Lys Ser Ile Ser Thr Lys Ser Trp Asn Leu Gln Asn Gly Glu Glu
145 150 155 160
Ala His Val Ala Ile Ser Phe Asn Ala Thr Thr Asn Val Leu Ser Val
165 170 175
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Pro Leu Lys Asp Val Val Pro Glu Trp Val Arg Ile Gly Phe Ser Ala
195 200 205
Thr Thr Gly Ala Glu Tyr Ala Thr His Glu Val Leu Ser Trp Thr Phe
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Leu Ser Glu Leu Thr Gly Pro Ser Asn
225 230
<210> 616
<211> 1095
<212> PRT
<213> Photorhabdus luminescens
<400> 616
Met Val Thr Val Met Gln Asn Lys Ile Ser Phe Leu Ser Val Thr Ser
1 5 10 15
Glu Gln Pro Leu Leu Asp Ala Gly Tyr Gln Asn Val Phe Asn Ile Val
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Ser Ile Ser Arg Ala Ala Phe Val Gln Ser Val Pro Thr Leu Pro Val
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Gln Glu Ala His Ala Val Tyr Arg Gln Ala Arg Gln Arg Ala Glu Asn
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Leu Lys Ser Leu Tyr Arg Ala Trp Gln Leu Arg Gln Glu Pro Val Ile
65 70 75 80
Lys Gly Leu Thr Lys Leu Asn Ala Gln Ala Asn Val Ser Val Leu Gln
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Asp Thr Leu Val Glu Asn Ile Gly Gly Asp Gly Asp Phe Ser Asp Leu
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Met Asn Arg Ala Ser Gln Tyr Ala Asp Ala Ala Ser Ile Gln Ser Leu
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Phe Ser Pro Gly Arg Tyr Ala Thr Ala Leu Tyr Lys Val Ala Lys Asp
130 135 140
Leu His Lys Ser Asp Ser Ser Leu His Ile Asp Asn Arg Arg Ala Asp
145 150 155 160
Leu Lys Asp Leu Ile Leu Ser Glu Thr Thr Met Asn Lys Glu Val Thr
165 170 175
Ser Leu Asp Ile Leu Leu Asp Val Leu Gln Lys Gly Ser Lys Asp Ile
180 185 190
Thr Glu Leu Ser Ser Ala Phe Phe Pro Met Thr Leu Pro Tyr Asp Asp
195 200 205
His Leu Ser Gln Ile Asp Ser Ala Leu Ser Ala Gln Ala Arg Thr Leu
210 215 220
Asn Gly Val Trp Asn Thr Leu Thr Asp Thr Thr Ala Gln Ala Val Ser
225 230 235 240
Glu Gln Ala Asp Lys Thr Asn Thr Leu Lys Phe Phe Ala Ala Gln Asp
245 250 255
Asp Asn Gln Asp Thr Phe Phe Ala Gly Asn Thr Phe Tyr Phe Lys Ala
260 265 270
Val Gly Phe Ser Gly Gln Pro Met Val Tyr Leu Ser Gln Tyr Thr Ser
275 280 285
Gly Ser Gly Ile Val Gly Ala Gln Leu Ile Ala Gly Asn Pro Asp Gln
290 295 300
Ala Ala Ala Ala Ile Val Ala Pro Leu Gln Leu Thr Trp Ser Met Ala
305 310 315 320
Lys Gln Cys Tyr Tyr Leu Gly Ala Pro Asp Gly Thr Lys Met Gly Asp
325 330 335
Gly Asn Val Leu Thr Gly Cys Phe Leu Arg Gly Asn Ser Pro Thr Asn
340 345 350
Pro Asp Gln Asn Gly Ile Phe Ala Gln Val Ala Asn Lys Ser Gly Ser
355 360 365
Thr Gln Pro Leu Pro Ser Phe His Leu Pro Val Thr Leu Glu Arg Ser
370 375 380
Glu Asp Lys Asp Lys Tyr Tyr Leu Lys Thr Glu Gln Gly Tyr Ile Ala
385 390 395 400
Val Asp Ser Ser Gly Gln Ser Asn Trp Lys Asn Ala Leu Val Ile Asn
405 410 415
Gly Thr Lys Asp Asn Gly Leu Leu Leu Thr Phe Cys Ser Asp Ser Ser
420 425 430
Gly Thr Pro Thr Asn Pro Asp Asp Val Ile Pro Pro Ala Ile Asn Asp
435 440 445
Ile Pro Ser Pro Pro Ala Arg Glu Thr Leu Ser Leu Thr Pro Val Ser
450 455 460
Tyr Gln Leu Ile Thr Asn Pro Ala Pro Thr Thr Asp Asp Ile Thr Asn
465 470 475 480
His Tyr Gly Leu Gly Ser Ser Gly Leu Gln Glu Thr Ala Ser Ser Ala
485 490 495
Ser Ala Leu Thr Thr Ala Leu Asn Ser Ile Glu Thr Phe Cys Glu Lys
500 505 510
Thr Arg Ile Asn Phe Asn Gln Leu Met Asp Leu Thr Ala Gln Gln Ser
515 520 525
Tyr Ser Gln Ser Ser Val Asp Ala Lys Ala Ala Ser Arg Tyr Val Arg
530 535 540
Phe Gly Glu Thr Ala Ala Thr Arg Val Asn Val Tyr Gly Ala Ala Tyr
545 550 555 560
Leu Asn Ser Thr Leu Ala Ala Ala Ala Asp Gly Gln Tyr Leu Trp Ile
565 570 575
Gln Thr Asp Gly Lys Ser Leu Asn Phe Thr Asp Asp Thr Val Val Ala
580 585 590
Leu Ala Gly Arg Ala Glu Lys Leu Val Arg Leu Ser Ser Gln Thr Gly
595 600 605
Leu Ser Phe Glu Glu Leu Asp Trp Leu Ile Val Asn Ala Ser Arg Ser
610 615 620
Val Pro Asp His His Asp Lys Ile Val Leu Asp Lys Pro Val Leu Glu
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Ala Leu Ala Glu Tyr Val Ser Leu Lys Gln Arg Tyr Gly Leu Asp Ala
645 650 655
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675 680 685
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Asp Glu Leu Ser Thr Ile Cys Cys Lys Ala Leu Gly Val Thr Ser Asp
705 710 715 720
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<212> PRT
<213> Trichoderma viride
<400> 620
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<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-T43F
<400> 669
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttactttg cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 670
<211> 153
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-T43P
<400> 670
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttaccctg cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 671
<211> 153
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
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<400> 671
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
gtatgcaata attgtggcga ccaggtggca gcctgcgagg cagagtgctt tcgtaatgac 120
gtttactatg cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 672
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<212> DNA
<213> Artificial sequence
<220>
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<400> 672
gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
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gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
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gtttactggg cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
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<220>
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gtttaccatg cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
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<220>
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<220>
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gaaccagacg agatatgcag agcaaggatg accaacaaag aatttaccta taagtccaac 60
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gtttacttag cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
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<220>
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<223> TVP-T43V
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<220>
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<223> TVP-T43S
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<213> Artificial sequence
<220>
<223> TVP-T43R
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gtttacagag cttgtcacga ggctcagaaa ggt 153
<210> 689
<211> 81
<212> PRT
<213> Phoneutria nigriventer
<400> 689
Met Lys Val Ala Ile Val Phe Leu Ser Leu Leu Val Leu Ala Phe Ala
1 5 10 15
Ser Glu Ser Ile Glu Glu Asn Arg Glu Glu Phe Pro Val Glu Glu Ser
20 25 30
Ala Arg Cys Ala Asp Ile Asn Gly Ala Cys Lys Ser Asp Cys Asp Cys
35 40 45
Cys Gly Asp Ser Val Thr Cys Asp Cys Tyr Trp Ser Asp Ser Cys Lys
50 55 60
Cys Arg Glu Ser Asn Phe Lys Ile Gly Met Ala Ile Arg Lys Lys Phe
65 70 75 80
Cys
Claims (106)
- 시스테인 풍부 살충 펩타이드(CRIP: Cysteine Rich Insecticidal Peptide)와 살충 작용제(IA: Insecticidal Agent)를 포함하는 조합물.
- 제1항에 있어서, IA가 박테리아 독소; 진균 독소; 렉틴; 아자디라크타 인디카(Azadirachta indica) 화합물; 붕소 화합물; 바이러스; 또는 이들의 조합인, 조합물.
- 제2항에 있어서, 박테리아 독소가 바실러스 투린기엔시스(Bacillus thuringiensis)(Bt) 독소 또는 포토랍두스(Photorhabdus) 독소인, 조합물.
- 제3항에 있어서, Bt 독소가 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Bacillus thuringiensis var. kurstaki)(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Bacillus thuringiensis var. tenebrionis)(Btt); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bacillus thuringiensis var. israelensis)(Bti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이(Bacillus thuringiensis var. aizawai); 바실러스 투린기엔시스 변종 아이자와이/파시피쿠스(Bacillus thuringiensis var. aizawai/pacificus); 바실러스 투린기엔시스 변종 알레스티(Bacillus thuringiensis var. alesti); 바실러스 투린기엔시스 변종 아마기엔시스(Bacillus thuringiensis var. amagiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 안달로우시엔시스(Bacillus thuringiensis var. andalousiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 아르겐티넨시스(Bacillus thuringiensis var. argentinensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 아스투리엔시스(Bacillus thuringiensis var. asturiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 아조렌시스(Bacillus thuringiensis var. azorensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 발레아리카(Bacillus thuringiensis var. balearica); 바실러스 투린기엔시스 변종 베를리네르(Bacillus thuringiensis var. berliner); 바실러스 투린기엔시스 변종 볼리비아(Bacillus thuringiensis var. bolivia); 바실러스 투린기엔시스 변종 브라실렌시스(Bacillus thuringiensis var. brasilensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 카메로운(Bacillus thuringiensis var. cameroun); 바실러스 투린기엔시스 변종 카나덴시스(Bacillus thuringiensis var. canadensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 찬파이시스(Bacillus thuringiensis var. chanpaisis); 바실러스 투린기엔시스 변종 키넨시스(Bacillus thuringiensis var. chinensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 콜메리(Bacillus thuringiensis var. colmeri); 바실러스 투린기엔시스 변종 코레아넨시스(Bacillus thuringiensis var. coreanensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 다코타(Bacillus thuringiensis var. dakota); 바실러스 투린기엔시스 변종 다름스타디엔시스(Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 덴드롤리무스(Bacillus thuringiensis var. dendrolimus); 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스(Bacillus thuringiensis var. entomocidus); 바실러스 투린기엔시스 변종 엔토모시두스/서브톡시쿠스(Bacillus thuringiensis var. entomocidus/subtoxicus); 바실러스 투린기엔시스 변종 피니티무스(Bacillus thuringiensis var. finitimus); 바실러스 투린기엔시스 변종 푸쿠오카엔시스(Bacillus thuringiensis var. fukuokaensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레키아에(Bacillus thuringiensis var. galechiae); 바실러스 투린기엔시스 변종 갈레리아에(Bacillus thuringiensis var. galleriae); 바실러스 투린기엔시스 변종 그라시오센시스(Bacillus thuringiensis var. graciosensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 구이얀기엔시스(Bacillus thuringiensis var. guiyangiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 히고(Bacillus thuringiensis var. higo); 바실러스 투린기엔시스 변종 후아존겐시스(Bacillus thuringiensis var. huazhongensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 이베리카(Bacillus thuringiensis var. iberica); 바실러스 투린기엔시스 변종 인디아나(Bacillus thuringiensis var. indiana); 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스/토키기엔시스(Bacillus thuringiensis var. israelensis/tochigiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 자포넨시스(Bacillus thuringiensis var. japonensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 제가테산(Bacillus thuringiensis var. jegathesan); 바실러스 투린기엔시스 변종 진곤기엔시스(Bacillus thuringiensis var. jinghongiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 케니아에(Bacillus thuringiensis var. kenyae); 바실러스 투린기엔시스 변종 킴(Bacillus thuringiensis var. kim); 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠맘토엔시스(Bacillus thuringiensis var. kumamtoensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 nags3(Bacillus thuringiensis var. kunthalanags3); 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX24(Bacillus thuringiensis var. kunthalaRX24); 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX27(Bacillus thuringiensis var. kunthalaRX27); 바실러스 투린기엔시스 변종 쿤탈라 RX28(Bacillus thuringiensis var. kunthalaRX28); 바실러스 투린기엔시스 변종 큐슈엔시스(Bacillus thuringiensis var. kyushuensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 리시스(Bacillus thuringiensis var. leesis); 바실러스 투린기엔시스 변종 론드리나(Bacillus thuringiensis var. londrina); 바실러스 투린기엔시스 변종 말라옌시스(Bacillus thuringiensis var. malayensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 메델린(Bacillus thuringiensis var. medellin); 바실러스 투린기엔시스 변종 멕시카넨시스(Bacillus thuringiensis var. mexicanensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 모기(Bacillus thuringiensis var. mogi); 바실러스 투린기엔시스 변종 몬테레이(Bacillus thuringiensis var. monterrey); 바실러스 투린기엔시스 변종 모리소니(Bacillus thuringiensis var. morrisoni); 바실러스 투린기엔시스 변종 무주(Bacillus thuringiensis var. muju); 바실러스 투린기엔시스 변종 나바렌시스(Bacillus thuringiensis var. navarrensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 네오레오넨시스(Bacillus thuringiensis var. neoleonensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 니게리엔시스(Bacillus thuringiensis var. nigeriensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 노보시비르스크(Bacillus thuringiensis var. novosibirsk); 바실러스 투린기엔시스 변종 오스트리니아에(Bacillus thuringiensis var. ostriniae); 바실러스 투린기엔시스 변종 오스왈도크루지(Bacillus thuringiensis var. oswaldocruzi); 바실러스 투린기엔시스 변종 파한기(Bacillus thuringiensis var. pahangi); 바실러스 투린기엔시스 변종 파키스타니(Bacillus thuringiensis var. pakistani); 바실러스 투린기엔시스 변종 팔마니올렌시스(Bacillus thuringiensis var. palmanyolensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 핀글루온시스(Bacillus thuringiensis var. pingluonsis); 바실러스 투린기엔시스 변종 피레나이카(Bacillus thuringiensis var. pirenaica); 바실러스 투린기엔시스 변종 폴로니엔시스(Bacillus thuringiensis var. poloniensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 폰디케리엔시스(Bacillus thuringiensis var. pondicheriensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 풀시엔시스(Bacillus thuringiensis var. pulsiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 롱세니(Bacillus thuringiensis var. rongseni); 바실러스 투린기엔시스 변종 로스킬디엔시스(Bacillus thuringiensis var. roskildiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 샌디에고(Bacillus thuringiensis var. san diego); 바실러스 투린기엔시스 변종 세오울렌시스(Bacillus thuringiensis var. seoulensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 샨돈기엔시스(Bacillus thuringiensis var. shandongiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 실로(Bacillus thuringiensis var. silo); 바실러스 투린기엔시스 변종 시넨시스(Bacillus thuringiensis var. sinensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 순케온(Bacillus thuringiensis var. sooncheon); 바실러스 투린기엔시스 변종 소토(Bacillus thuringiensis var. sotto); 바실러스 투린기엔시스 변종 소토/덴드롤리무스(Bacillus thuringiensis var. sotto/dendrolimus); 바실러스 투린기엔시스 변종 서브톡시쿠스(Bacillus thuringiensis var. subtoxicus); 바실러스 투린기엔시스 변종 수미요시엔시스(Bacillus thuringiensis var. sumiyoshiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 실베스트리엔시스(Bacillus thuringiensis var. sylvestriensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 타일란덴시스(Bacillus thuringiensis var. thailandensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 톰프소니(Bacillus thuringiensis var. thompsoni); 바실러스 투린기엔시스 변종 투린기엔시스(Bacillus thuringiensis var. thuringiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 토키기엔시스(Bacillus thuringiensis var. tochigiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 토구치니(Bacillus thuringiensis var. toguchini); 바실러스 투린기엔시스 변종 토호쿠엔시스(Bacillus thuringiensis var. tohokuensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 톨워르티(Bacillus thuringiensis var. tolworthi); 바실러스 투린기엔시스 변종 토우마노피(Bacillus thuringiensis var. toumanoffi); 바실러스 투린기엔시스 변종 바젠시스(Bacillus thuringiensis var. vazensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 라티슬라비엔시스(Bacillus thuringiensis var. wratislaviensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 우하넨시스(Bacillus thuringiensis var. wuhanensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 지아구안기엔시스(Bacillus thuringiensis var. xiaguangiensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 요수(Bacillus thuringiensis var. yosoo); 바실러스 투린기엔시스 변종 윤나넨시스(Bacillus thuringiensis var. yunnanensis); 바실러스 투린기엔시스 변종 자오돈겐시스(Bacillus thuringiensis var. zhaodongensis); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 콘쿠키안(Bacillus thuringiensis var. konkukian) 독소.
- 제4항에 있어서, Bt 독소가 하기로 이루어지는 군에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물: 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk); 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt); 및 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti).
- 제5항에 있어서, Bt 독소가 부포자(parasporal) 결정 독소, 분비된 단백질, β-외독소, 41.9-kDa 살충 독소, 스파에리콜리신(sphaericolysin), 알베올리신(alveolysin) 또는 인한신(enhancin) 유사 단백질인, 조합물.
- 제6항에 있어서, 부포자 결정 독소가 δ-내독소인, 조합물.
- 제7항에 있어서, δ-내독소가 3-도메인(3D) Cry 패밀리 단백질, 이원 Bin 유사 패밀리 독소, ETX_MTX2 유사 패밀리 독소, 독소-10 패밀리 독소, 아에롤리신(aerolysin) 패밀리 독소 또는 시톨리신(cytolysin)인, 조합물.
- 제8항에 있어서, δ-내독소가 3-도메인(3D) Cry 독소, 모기 살충성 Cry 독소(Mtx), 이원 유사(Bin) 독소 또는 Cyt 독소인, 조합물.
- 제9항에 있어서, δ-내독소가 3-도메인(3D) Cry 독소 또는 Cyt 독소인, 조합물.
- 제10항에 있어서, δ-내독소가 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 조합물: Cry1Aa1, Cry1Aa2, Cry1Aa3, Cry1Aa4, Cry1Aa5, Cry1Aa6, Cry1Aa7, Cry1Aa8, Cry1Aa9, Cry1Aa10, Cry1Aa11, Cry1Aa12, Cry1Aa13, Cry1Aa14, Cry1Aa15, Cry1Aa16, Cry1Aa17, Cry1Aa18, Cry1Aa19, Cry1Aa20, Cry1Aa21, Cry1Aa22, Cry1Aa23, Cry1Aa24, Cry1Aa25, Cry1Ab1, Cry1Ab2, Cry1Ab3, Cry1Ab4, Cry1Ab5, Cry1Ab6, Cry1Ab7, Cry1Ab8, Cry1Ab9, Cry1Ab10, Cry1Ab11, Cry1Ab12, Cry1Ab13, Cry1Ab14, Cry1Ab15, Cry1Ab16, Cry1Ab17, Cry1Ab18, Cry1Ab19, Cry1Ab20, Cry1Ab21, Cry1Ab22, Cry1Ab23, Cry1Ab24, Cry1Ab25, Cry1Ab26, Cry1Ab27, Cry1Ab28, Cry1Ab29, Cry1Ab30, Cry1Ab31, Cry1Ab32, Cry1Ab33, Cry1Ab34, Cry1Ab35, Cry1Ab36, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ab 유사, Cry1Ac1, Cry1Ac2, Cry1Ac3, Cry1Ac4, Cry1Ac5, Cry1Ac6, Cry1Ac7, Cry1Ac8, Cry1Ac9, Cry1Ac10, Cry1Ac11, Cry1Ac12, Cry1Ac13, Cry1Ac14, Cry1Ac15, Cry1Ac16, Cry1Ac17, Cry1Ac18, Cry1Ac19, Cry1Ac20, Cry1Ac21, Cry1Ac22, Cry1Ac23, Cry1Ac24, Cry1Ac25, Cry1Ac26, Cry1Ac27, Cry1Ac28, Cry1Ac29, Cry1Ac30, Cry1Ac31, Cry1Ac32, Cry1Ac33, Cry1Ac34, Cry1Ac35, Cry1Ac36, Cry1Ac37, Cry1Ac38, Cry1Ac39, Cry1Ad1, Cry1Ad2, Cry1Ae1, Cry1Af1, Cry1Ag1, Cry1Ah1, Cry1Ah2, Cry1Ah3, Cry1Ai1, Cry1Ai2, Cry1Aj1, Cry1A 유사, Cry1Ba1, Cry1Ba2, Cry1Ba3, Cry1Ba4, Cry1Ba5, Cry1Ba6, Cry1Ba7, Cry1Ba8, Cry1Bb1, Cry1Bb2, Cry1Bb3, Cry1Bc1, Cry1Bd1, Cry1Bd2, Cry1Bd3, Cry1Be1, Cry1Be2, Cry1Be3, Cry1Be4, Cry1Be5, Cry1Bf1, Cry1Bf2, Cry1Bg1, Cry1Bh1, Cry1Bi1, Cry1Bj1, Cry1Ca1, Cry1Ca2, Cry1Ca3, Cry1Ca4, Cry1Ca5, Cry1Ca6, Cry1Ca7, Cry1Ca8, Cry1Ca9, Cry1Ca10, Cry1Ca11, Cry1Ca12, Cry1Ca13, Cry1Ca14, Cry1Ca15, Cry1Cb1, Cry1Cb2, Cry1Cb3, Cry1Cb 유사, Cry1Da1, Cry1Da2, Cry1Da3, Cry1Da4, Cry1Da5, Cry1Db1, Cry1Db2, Cry1Dc1, Cry1Dd1, Cry1Ea1, Cry1Ea2, Cry1Ea3, Cry1Ea4, Cry1Ea5, Cry1Ea6, Cry1Ea7, Cry1Ea8, Cry1Ea9, Cry1Ea10, Cry1Ea11, Cry1Ea12, Cry1Eb1, Cry1Fa1, Cry1Fa2, Cry1Fa3, Cry1Fa4, Cry1Fb1, Cry1Fb2, Cry1Fb3, Cry1Fb4, Cry1Fb5, Cry1Fb6, Cry1Fb7, Cry1Ga1, Cry1Ga2, Cry1Gb1, Cry1Gb2, Cry1Gc1, Cry1Ha1, Cry1Hb1, Cry1Hb2, Cry1Hc1, Cry1H 유사, Cry1Ia1, Cry1Ia2, Cry1Ia3, Cry1Ia4, Cry1Ia5, Cry1Ia6, Cry1Ia7, Cry1Ia8, Cry1Ia9, Cry1Ia10, Cry1Ia11, Cry1Ia12, Cry1Ia13, Cry1Ia14, Cry1Ia15, Cry1Ia16, Cry1Ia17, Cry1Ia18, Cry1Ia19, Cry1Ia20, Cry1Ia21, Cry1Ia22, Cry1Ia23, Cry1Ia24, Cry1Ia25, Cry1Ia26, Cry1Ia27, Cry1Ia28, Cry1Ia29, Cry1Ia30, Cry1Ia31, Cry1Ia32, Cry1Ia33, Cry1Ia34, Cry1Ia35, Cry1Ia36, Cry1Ia37, Cry1Ia38, Cry1Ia39, Cry1Ia40, Cry1Ib1, Cry1Ib2, Cry1Ib3, Cry1Ib4, Cry1Ib5, Cry1Ib6, Cry1Ib7, Cry1Ib8, Cry1Ib9, Cry1Ib10, Cry1Ib11, Cry1Ic1, Cry1Ic2, Cry1Id1, Cry1Id2, Cry1Id3, Cry1Ie1, Cry1Ie2, Cry1Ie3, Cry1Ie4, Cry1Ie5, Cry1If1, Cry1Ig1, Cry1I 유사, Cry1I 유사, Cry1Ja1, Cry1Ja2, Cry1Ja3, Cry1Jb1, Cry1Jc1, Cry1Jc2, Cry1Jd1, Cry1Ka1, Cry1Ka2, Cry1La1, Cry1La2, Cry1La3, Cry1Ma1, Cry1Ma2, Cry1Na1, Cry1Na2, Cry1Na3, Cry1Nb1, Cry1 유사, Cry2Aa1, Cry2Aa2, Cry2Aa3, Cry2Aa4, Cry2Aa5, Cry2Aa6, Cry2Aa7, Cry2Aa8, Cry2Aa9, Cry2Aa10, Cry2Aa11, Cry2Aa12, Cry2Aa13, Cry2Aa14, Cry2Aa15, Cry2Aa16, Cry2Aa17, Cry2Aa18, Cry2Aa19, Cry2Aa20, Cry2Aa21, Cry2Aa22, Cry2Aa23, Cry2Aa23, Cry2Aa25, Cry2Ab1, Cry2Ab2, Cry2Ab3, Cry2Ab4, Cry2Ab5, Cry2Ab6, Cry2Ab7, Cry2Ab8, Cry2Ab9, Cry2Ab10, Cry2Ab11, Cry2Ab12, Cry2Ab13, Cry2Ab14, Cry2Ab15, Cry2Ab16, Cry2Ab17, Cry2Ab18, Cry2Ab19, Cry2Ab20, Cry2Ab21, Cry2Ab22, Cry2Ab23, Cry2Ab24, Cry2Ab25, Cry2Ab26, Cry2Ab27, Cry2Ab28, Cry2Ab29, Cry2Ab30, Cry2Ab31, Cry2Ab32, Cry2Ab33, Cry2Ab34, Cry2Ab35, Cry2Ab36, Cry2Ac1, Cry2Ac2, Cry2Ac3, Cry2Ac4, Cry2Ac5, Cry2Ac6, Cry2Ac7, Cry2Ac8, Cry2Ac9, Cry2Ac10, Cry2Ac11, Cry2Ac12, Cry2Ad1, Cry2Ad2, Cry2Ad3, Cry2Ad4, Cry2Ad5, Cry2Ae1, Cry2Af1, Cry2Af2, Cry2Ag1, Cry2Ah1, Cry2Ah2, Cry2Ah3, Cry2Ah4, Cry2Ah5, Cry2Ah6, Cry2Ai1, Cry2Aj1, Cry2Ak1, Cry2Al1, Cry2Ba1, Cry2Ba2, Cry3Aa1, Cry3Aa2, Cry3Aa3, Cry3Aa4, Cry3Aa5, Cry3Aa6, Cry3Aa7, Cry3Aa8, Cry3Aa9, Cry3Aa10, Cry3Aa11, Cry3Aa12, Cry3Ba1, Cry3Ba2, Cry3Ba3, Cry3Bb1, Cry3Bb2, Cry3Bb3, Cry3Ca1, Cry4Aa1, Cry4Aa2, Cry4Aa3, Cry4Aa4, Cry4A 유사, Cry4Ba1, Cry4Ba2, Cry4Ba3, Cry4Ba4, Cry4Ba5, Cry4Ba 유사, Cry4Ca1, Cry4Ca2, Cry4Cb1, Cry4Cb2, Cry4Cb3, Cry4Cc1, Cry5Aa1, Cry5Ab1, Cry5Ac1, Cry5Ad1, Cry5Ba1, Cry5Ba2, Cry5Ba3, Cry5Ca1, Cry5Ca2, Cry5Da1, Cry5Da2, Cry5Ea1, Cry5Ea2, Cry6Aa1, Cry6Aa2, Cry6Aa3, Cry6Ba1, Cry7Aa1, Cry7Aa2, Cry7Ab1, Cry7Ab2, Cry7Ab3, Cry7Ab4, Cry7Ab5, Cry7Ab6, Cry7Ab7, Cry7Ab8, Cry7Ab9, Cry7Ac1, Cry7Ba1, Cry7Bb1, Cry7Ca1, Cry7Cb1, Cry7Da1, Cry7Da2, Cry7Da3, Cry7Ea1, Cry7Ea2, Cry7Ea3, Cry7Fa1, Cry7Fa2, Cry7Fb1, Cry7Fb2, Cry7Fb3, Cry7Ga1, Cry7Ga2, Cry7Gb1, Cry7Gc1, Cry7Gd1, Cry7Ha1, Cry7Ia1, Cry7Ja1, Cry7Ka1, Cry7Kb1, Cry7La1, Cry8Aa1, Cry8Ab1, Cry8Ac1, Cry8Ad1, Cry8Ba1, Cry8Bb1, Cry8Bc1, Cry8Ca1, Cry8Ca2, Cry8Ca3, Cry8Ca4, Cry8Ca5, Cry8Da1, Cry8Da2, Cry8Da3, Cry8Db1, Cry8Ea1, Cry8Ea2, Cry8Ea3, Cry8Ea4, Cry8Ea5, Cry8Ea6, Cry8Fa1, Cry8Fa2, Cry8Fa3, Cry8Fa4, Cry8Ga1, Cry8Ga2, Cry8Ga3, Cry8Ha1, Cry8Hb1, Cry8Ia1, Cry8Ia2, Cry8Ia3, Cry8Ia4, Cry8Ib1, Cry8Ib2, Cry8Ib3, Cry8Ja1, Cry8Ka1, Cry8Ka2, Cry8Ka3, Cry8Kb1, Cry8Kb2, Cry8Kb3, Cry8La1, Cry8Ma1, Cry8Ma2, Cry8Ma3, Cry8Na1, Cry8Pa1, Cry8Pa2, Cry8Pa3, Cry8Qa1, Cry8Qa2, Cry8Ra1, Cry8Sa1, Cry8Ta1, Cry8 유사, Cry8 유사, Cry9Aa1, Cry9Aa2, Cry9Aa3, Cry9Aa4, Cry9Aa5, Cry9Aa 유사, Cry9Ba1, Cry9Ba2, Cry9Bb1, Cry9Ca1, Cry9Ca2, Cry9Cb1, Cry9Da1, Cry9Da2, Cry9Da3, Cry9Da4, Cry9Db1, Cry9Dc1, Cry9Ea1, Cry9Ea2, Cry9Ea3, Cry9Ea4, Cry9Ea5, Cry9Ea6, Cry9Ea7, Cry9Ea8, Cry9Ea9, Cry9Ea10, Cry9Ea11, Cry9Eb1, Cry9Eb2, Cry9Eb3, Cry9Ec1, Cry9Ed1, Cry9Ee1, Cry9Ee2, Cry9Fa1, Cry9Ga1, Cry9 유사, Cry10Aa1, Cry10Aa2, Cry10Aa3, Cry10Aa4, Cry10A 유사, Cry11Aa1, Cry11Aa2, Cry11Aa3, Cry11Aa4, Cry11Aa5, Cry11Aa 유사, Cry11Ba1, Cry11Bb1, Cry11Bb2, Cry12Aa1, Cry13Aa1, Cry13Aa2, Cry14Aa1, Cry14Ab1, Cry15Aa1, Cry16Aa1, Cry17Aa1, Cry18Aa1, Cry18Ba1, Cry18Ca1, Cry19Aa1, Cry19Ba1, Cry19Ca1, Cry20Aa1, Cry20Ba1, Cry20Ba2, Cry20 유사, Cry21Aa1, Cry21Aa2, Cry21Aa3, Cry21Ba1, Cry21Ca1, Cry21Ca2, Cry21Da1, Cry21Ea1, Cry21Fa1, Cry21Ga1, Cry21Ha1, Cry22Aa1, Cry22Aa2, Cry22Aa3, Cry22Ab1, Cry22Ab2, Cry22Ba1, Cry22Bb1, Cry23Aa1, Cry24Aa1, Cry24Ba1, Cry24Ca1, Cry24Da1, Cry25Aa1, Cry26Aa1, Cry27Aa1, Cry28Aa1, Cry28Aa2, Cry29Aa1, Cry29Ba1, Cry30Aa1, Cry30Ba1, Cry30Ca1, Cry30Ca2, Cry30Da1, Cry30Db1, Cry30Ea1, Cry30Ea2, Cry30Ea3, Cry30Ea4, Cry30Fa1, Cry30Ga1, Cry30Ga2, Cry31Aa1, Cry31Aa2, Cry31Aa3, Cry31Aa4, Cry31Aa5, Cry31Aa6, Cry31Ab1, Cry31Ab2, Cry31Ac1, Cry31Ac2, Cry31Ad1, Cry31Ad2, Cry32Aa1, Cry32Aa2, Cry32Ab1, Cry32Ba1, Cry32Ca1, Cry32Cb1, Cry32Da1, Cry32Ea1, Cry32Ea2, Cry32Eb1, Cry32Fa1, Cry32Ga1, Cry32Ha1, Cry32Hb1, Cry32Ia1, Cry32Ja1, Cry32Ka1, Cry32La1, Cry32Ma1, Cry32Mb1, Cry32Na1, Cry32Oa1, Cry32Pa1, Cry32Qa1, Cry32Ra1, Cry32Sa1, Cry32Ta1, Cry32Ua1, Cry32Va1, Cry32Wa1, Cry32Wa2, Cry32Xa1, Cry32Ya1, Cry33Aa1, Cry34Aa1, Cry34Aa2, Cry34Aa3, Cry34Aa4, Cry34Ab1, Cry34Ac1, Cry34Ac2, Cry34Ac3, Cry34Ba1, Cry34Ba2, Cry34Ba3, Cry35Aa1, Cry35Aa2, Cry35Aa3, Cry35Aa4, Cry35Ab1, Cry35Ab2, Cry35Ab3, Cry35Ac1, Cry35Ba1, Cry35Ba2, Cry35Ba3, Cry36Aa1, Cry37Aa1, Cry38Aa1, Cry39Aa1, Cry40Aa1, Cry40Ba1, Cry40Ca1, Cry40Da1, Cry41Aa1, Cry41Ab1, Cry41Ba1, Cry41Ba2, Cry41Ca1, Cry42Aa1, Cry43Aa1, Cry43Aa2, Cry43Ba1, Cry43Ca1, Cry43Cb1, Cry43Cc1, Cry43 유사, Cry44Aa1, Cry45Aa1, Cry45Ba1, Cry46Aa1, Cry46Aa2, Cry46Ab1, Cry47Aa1, Cry48Aa1, Cry48Aa2, Cry48Aa3, Cry48Ab1, Cry48Ab2, Cry49Aa1, Cry49Aa2, Cry49Aa3, Cry49Aa4, Cry49Ab1, Cry50Aa1, Cry50Ba1, Cry50Ba2, Cry51Aa1, Cry51Aa2, Cry52Aa1, Cry52Ba1, Cry52Ca1, Cry53Aa1, Cry53Ab1, Cry54Aa1, Cry54Aa2, Cry54Ab1, Cry54Ba1, Cry54Ba2, Cry55Aa1, Cry55Aa2, Cry55Aa3, Cry56Aa1, Cry56Aa2, Cry56Aa3, Cry56Aa4, Cry57Aa1, Cry57Ab1, Cry58Aa1, Cry59Ba1, Cry59Aa1, Cry60Aa1, Cry60Aa2, Cry60Aa3, Cry60Ba1, Cry60Ba2, Cry60Ba3, Cry61Aa1, Cry61Aa2, Cry61Aa3, Cry62Aa1, Cry63Aa1, Cry64Aa1, Cry64Ba1, Cry64Ca1, Cry65Aa1, Cry65Aa2, Cry66Aa1, Cry66Aa2, Cry67Aa1, Cry67Aa2, Cry68Aa1, Cry69Aa1, Cry69Aa2, Cry69Ab1, Cry70Aa1, Cry70Ba1, Cry70Bb1, Cry71Aa1, Cry72Aa1, Cry72Aa2, Cry73Aa1, Cry74Aa, Cry75Aa1, Cry75Aa2, Cry75Aa3, Cry76Aa1, Cry77Aa1 또는 Cry78Aa1, Cyt1Aa1, Cyt1Aa2, Cyt1Aa3, Cyt1Aa4, Cyt1Aa5, Cyt1Aa6, Cyt1Aa7, Cyt1Aa8, Cyt1Aa 유사, Cyt1Ab1, Cyt1Ba1, Cyt1Ca1, Cyt1Da1, Cyt1Da2, Cyt2Aa1, Cyt2Aa2, Cyt2Aa3, Cyt2Aa4, Cyt2Ba1, Cyt2Ba2, Cyt2Ba3, Cyt2Ba4, Cyt2Ba5, Cyt2Ba6, Cyt2Ba7, Cyt2Ba8, Cyt2Ba9, Cyt2Ba10, Cyt2Ba11, Cyt2Ba12, Cyt2Ba13, Cyt2Ba14, Cyt2Ba15, Cyt2Ba16, Cyt2Ba 유사, Cyt2Bb1, Cyt2Bc1, Cyt2B 유사, Cyt2Ca1 및 Cyt3Aa1.
- 제11항에 있어서, Cry 독소 또는 Cyt 독소가 서열번호 412 내지 481에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제6항에 있어서, Bt 독소가 분비된 단백질인, 조합물.
- 제13항에 있어서, 분비된 단백질이 식물생장 살충 단백질(Vip), 분비된 살충 단백질(Sip), Bin 유사 패밀리 단백질 또는 ETX_MTX2-패밀리 단백질인, 조합물.
- 제14항에 있어서, 분비된 단백질이 Vip인, 조합물.
- 제15항에 있어서, Vip가 Vip 1 패밀리 단백질, Vip 2 패밀리 단백질, Vip 3 패밀리 단백질 또는 Vip 4 패밀리 단백질인, 조합물.
- 제16항에 있어서, Vip가 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 조합물: Vip1Aa1, Vip1Aa2, Vip1Aa3, Vip1Ab1, Vip1Ac1, Vip1Ad1, Vip1Ba1, Vip1Ba2, Vip1Bb1, Vip1Bb2, Vip1Bb3, Vip1Bc1, Vip1Ca1, Vip1Ca2, Vip1Da1, Vip2Aa1, Vip2Aa2, Vip2Aa3, Vip2Ab1, Vip2Ac1, Vip2Ac2, Vip2Ad1, Vip2Ae1, Vip2Ae2, Vip2Ae3, Vip2Af1, Vip2Af2, Vip2Ag1, Vip2Ag2, Vip2Ba1, Vip2Ba2, Vip2Bb1, Vip2Bb2, Vip2Bb3, Vip2Bb4, Vip3Aa1, Vip3Aa2, Vip3Aa3, Vip3Aa4, Vip3Aa5, Vip3Aa6, Vip3Aa7, Vip3Aa8, Vip3Aa9, Vip3Aa10, Vip3Aa11, Vip3Aa12, Vip3Aa13, Vip3Aa14, Vip3Aa15, Vip3Aa16, Vip3Aa17, Vip3Aa18, Vip3Aa19.0, Vip3Aa19, Vip3Aa20, Vip3Aa21, Vip3Aa22, Vip3Aa23, Vip3Aa24, Vip3Aa25, Vip3Aa26, Vip3Aa27, Vip3Aa28, Vip3Aa29, Vip3Aa30, Vip3Aa31, Vip3Aa32, Vip3Aa33, Vip3Aa34, Vip3Aa35, Vip3Aa36, Vip3Aa37, Vip3Aa38, Vip3Aa39, Vip3Aa40, Vip3Aa41, Vip3Aa42, Vip3Aa43, Vip3Aa44, Vip3Aa45, Vip3Aa46, Vip3Aa47, Vip3Aa48, Vip3Aa49, Vip3Aa50, Vip3Aa51, Vip3Aa52, Vip3Aa53, Vip3Aa54, Vip3Aa55, Vip3Aa56, Vip3Aa57, Vip3Aa58, Vip3Aa59, Vip3Aa60, Vip3Aa61, Vip3Aa62, Vip3Aa63, Vip3Aa64, Vip3Aa65, Vip3Aa66, Vip3Ab1, Vip3Ab2, Vip3Ac1, Vip3Ad1, Vip3Ad2, Vip3Ad3, Vip3Ad4, Vip3Ad5, Vip3Ad6, Vip3Ae1, Vip3Af1, Vip3Af2, Vip3Af3, Vip3Af4, Vip3Ag1, Vip3Ag2, Vip3Ag3, Vip3Ag4, Vip3Ag5, Vip3Ag6, Vip3Ag7, Vip3Ag8, Vip3Ag9, Vip3Ag10, Vip3Ag11, Vip3Ag12, Vip3Ag13, Vip3Ag14, Vip3Ag15, Vip3Ah1, Vip3Ah2, Vip3Ai1, Vip3Aj1, Vip3Aj2, Vip3Ba1, Vip3Ba2, Vip3Bb1, Vip3Bb2, Vip3Bb3, Vip3Bc, Vip3Ca1, Vip3Ca2, Vip3Ca3, Vip3Ca4 및 Vip4Aa1.
- 제17항에 있어서, Vip 단백질이 서열번호 482 내지 587에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제3항에 있어서, 박테리아 독소가 포토랍두스 독소인, 조합물.
- 제19항에 있어서, 포토랍두스 독소가 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 조합물: 포토랍두스 아쿠르스티(Photorhabdus akhurstii) 독소; 포토랍두스 아심비오티카(Photorhabdus asymbiotica) 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카(Photorhabdus asymbiotica subsp. asymbiotica) 독소; 포토랍두스 아심비오티카 아종 아심비오티카 ATCC 43949 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스(Photorhabdus australis) 독소; 포토랍두스 아우스트랄리스 DSM 17609 독소; 포토랍두스 보데이(Photorhabdus bodei) 독소; 포토랍두스 카리베아넨시스(Photorhabdus caribbeanensis) 독소; 포토랍두스 시네레아(Photorhabdus cinerea) 독소; 포토랍두스 하이나넨시스(Photorhabdus hainanensis) 독소; 포토랍두스 헤테로랍디티스(Photorhabdus heterorhabditis) 독소; 포토랍두스 카야이(Photorhabdus kayaii) 독소; 포토랍두스 카니(Photorhabdus khanii) 독소; 포토랍두스 카니 NC19 독소; 포토랍두스 카니 아종 구아나주아텐시스(Photorhabdus khanii subsp. guanajuatensis) 독소; 포토랍두스 클레이니(Photorhabdus kleinii) 독소; 포토랍두스 라우몬디(Photorhabdus laumondii) 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 클라르케이(Photorhabdus laumondii subsp. clarkei) 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디(Photorhabdus laumondii subsp. laumondii) 독소; 포토랍두스 라우몬디 아종 라우몬디 TTO1 독소; 포토랍두스 루미네센스(Photorhabdus luminescens) 독소; 포토랍두스 루미네센스 BA1 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII H75HRPL105 독소; 포토랍두스 루미네센스 NBAII HiPL101 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스(Photorhabdus luminescens subsp. luminescens) 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 루미네센스 ATCC 29999 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 멕시카나(Photorhabdus luminescens subsp. mexicana) 독소; 포토랍두스 루미네센스 아종 소노렌시스(Photorhabdus luminescens subsp. sonorensis) 독소; 포토랍두스 남나오넨시스(Photorhabdus namnaonensis) 독소; 포토랍두스 노에니에푸텐시스(Photorhabdus noenieputensis) 독소; 포토랍두스 스타케브란드티(Photorhabdus stackebrandtii) 독소; 포토랍두스 타스마니엔시스(Photorhabdus tasmaniensis) 독소; 포토랍두스 템페라타(Photorhabdus temperata) 독소; 포토랍두스 템페라타 J3 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 포라메(Photorhabdus temperata subsp. phorame) 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타(Photorhabdus temperata subsp. temperata) 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 M1021 독소; 포토랍두스 템페라타 아종 템페라타 Meg1 독소; 포토랍두스 트라센시스(Photorhabdus thracensis) 독소; 미분류 포토랍두스 독소; 포토랍두스 종 독소; 포토랍두스 종 3014 독소; 포토랍두스 종 3240 독소; 포토랍두스 종 Az29 독소; 포토랍두스 종 BS21 독소; 포토랍두스 종 CbKj163 독소; 포토랍두스 종 CRCIA-P01 독소; 포토랍두스 종 ENY 독소; 포토랍두스 종 FL2122 독소; 포토랍두스 종 FL480 독소; 포토랍두스 종 FsIw96 독소; 포토랍두스 종 GDd233 독소; 포토랍두스 종 H3086 독소; 포토랍두스 종 H3107 독소; 포토랍두스 종 H3240 독소; 포토랍두스 종 HB301 독소; 포토랍두스 종 HB78 독소; 포토랍두스 종 HB89 독소; 포토랍두스 종 HIT 독소; 포토랍두스 종 HO1 독소; 포토랍두스 종 HUG-39 독소; 포토랍두스 종 IT 독소; 포토랍두스 종 JUN 독소; 포토랍두스 종 KcTs129 독소; 포토랍두스 종 KJ13.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ14.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ24.5 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ29.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ37.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ7.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ8.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.1 TH 독소; 포토랍두스 종 KJ9.2 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.3 TH 독소; 포토랍두스 종 KK1.4 TH 독소; 포토랍두스 종 KMD74 독소; 포토랍두스 종 KOH 독소; 포토랍두스 종 MID10 독소; 포토랍두스 종 MOL 독소; 포토랍두스 종 MSW_058 독소; 포토랍두스 종 MSW_079 독소; 포토랍두스 종 NK2.1 TH 독소; 포토랍두스 종 NK2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 NnMt2h 독소; 포토랍두스 종 NP1 독소; 포토랍두스 종 OH10 독소; 포토랍두스 종 OnIr40 독소; 포토랍두스 종 OnKn2 독소; 포토랍두스 종 PB10.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB16.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB17.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB2.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB22.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB32.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB33.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB37.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB39.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB41.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB45.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB47.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB5.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB50.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB51.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB52.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB54.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB58.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB59.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB6.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB67.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB68.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB7.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.1 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.4 TH 독소; 포토랍두스 종 PB76.5 TH 독소; 포토랍두스 종 PB78.2 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.3 TH 독소; 포토랍두스 종 PB80.4 TH 독소; 포토랍두스 종 Pjun 독소; 포토랍두스 종 RW14-46 독소; 포토랍두스 종 S10-54 독소; 포토랍두스 종 S12-55 독소; 포토랍두스 종 S14-60 독소; 포토랍두스 종 S15-56 독소; 포토랍두스 종 S5P8-50 독소; 포토랍두스 종 S7-51 독소; 포토랍두스 종 S8-52 독소; 포토랍두스 종 S9-53 독소; 포토랍두스 종 SJ2 독소; 포토랍두스 종 SN259 독소; 포토랍두스 종 SP1.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP16.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP21.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP3.4 TH 독소; 포토랍두스 종 SP4.5 TH 독소; 포토랍두스 종 SP7.3 TH 독소; 포토랍두스 종 TyKb140 독소; 포토랍두스 종 UK76 독소; 포토랍두스 종 VMG 독소; 포토랍두스 종 WA21C 독소; 포토랍두스 종 WkSs43 독소; 포토랍두스 종 Wx13 독소; 포토랍두스 종 X4 독소; 포토랍두스 종 YNb90 독소; 및 포토랍두스 종 ZM 독소.
- 제20항에 있어서, 포토랍두스 독소가 포토랍두스 루미네센스 독소인, 조합물.
- 제2항에 있어서, 진균 독소가 아스코마이세테(Ascomycete) 진균 독소인, 조합물.
- 제22항에 있어서, 아스코마이세테 진균 독소가 코르디시피타세아에(Cordycipitaceae)과 진균 독소인, 조합물.
- 제23항에 있어서, 코르디시피타세아에 진균 독소가 아칸토마이세스(Akanthomyces) 독소; 아스코폴리포러스(Ascopolyporus) 독소; 뷰베리아(Beauveria) 독소; 비자사무하(Beejasamuha) 독소; 코르디셉스(Cordyceps) 독소; 코레미옵시스(Coremiopsis) 독소; 엔교돈티움(Engyodontium) 독소; 기벨룰라(Gibellula) 독소; 히페르데르미움(Hyperdermium) 독소; 인섹티콜라(Insecticola) 독소; 이사리아(Isaria) 독소; 레카니실리움(Lecanicillium) 독소; 미크로힐룸(Microhilum) 독소; 피토코르디셉스(Phytocordyceps) 독소; 슈도기벨룰라(Pseudogibellula) 독소; 로티페로프토라(Rotiferophthora) 독소; 심플리실리움(Simplicillium) 독소; 또는 토루비엘라(Torrubiella) 독소인, 조합물.
- 제24항에 있어서, 코르디시피타세아에 진균 독소가 뷰베리아 독소인, 조합물.
- 제25항에 있어서, 뷰베리아 독소가 뷰베리아 알바(Beauveria alba) 독소; 뷰베리아 아모르파(Beauveria amorpha) 독소; 뷰베리아 아레나리아(Beauveria arenaria) 독소; 뷰베리아 아시아티카(Beauveria asiatica) 독소; 뷰베리아 아우스트랄리스(Beauveria australis) 독소; 뷰베리아 바시아나 독소; 코르디셉스 바시아나 독소; 뷰베리아 브롱니아르티(Beauveria brongniartii) 독소; 뷰베리아 브룸프티(Beauveria brumptii) 독소; 뷰베리아 칼레도니카(Beauveria caledonica) 독소; 뷰베리아 키로멘시스(Beauveria chiromensis) 독소; 뷰베리아 코코룸(Beauveria coccorum) 독소; 뷰베리아 크레타세아(Beauveria cretacea) 독소; 뷰베리아 실린드로스포라(Beauveria cylindrospora) 독소; 뷰베리아 델라크로이시(Beauveria delacroixii) 독소; 뷰베리아 덴사(Beauveria densa) 독소; 뷰베리아 데펜덴스(Beauveria dependens) 독소; 뷰베리아 도리포라에(Beauveria doryphorae) 독소; 뷰베리아 에푸사(Beauveria effusa) 독소; 뷰베리아 에피가에아(Beauveria epigaea) 독소; 뷰베리아 펠리나(Beauveria felina) 독소; 뷰베리아 게오데스(Beauveria geodes) 독소; 뷰베리아 글로불리페라(Beauveria globulifera) 독소; 뷰베리아 헤이미(Beauveria heimii) 독소; 뷰베리아 호플로켈리(Beauveria hoplocheli) 독소; 뷰베리아 키푸카에(Beauveria kipukae) 독소; 뷰베리아 락사(Beauveria laxa) 독소; 뷰베리아 말라위엔시스(Beauveria malawiensis) 독소; 뷰베리아 메도겐시스(Beauveria medogensis) 독소; 뷰베리아 멜로론타에(Beauveria melolonthae) 독소; 뷰베리아 누비콜라(Beauveria nubicola) 독소; 뷰베리아 오리자에(Beauveria oryzae) 독소; 뷰베리아 파라독사(Beauveria paradoxa) 독소; 뷰베리아 파라넨시스(Beauveria paranensis) 독소; 뷰베리아 파라시티카(Beauveria parasitica) 독소; 뷰베리아 페텔로티(Beauveria petelotii) 독소; 뷰베리아 슈도바시아나(Beauveria pseudobassiana) 독소; 뷰베리아 릴레이(Beauveria rileyi) 독소; 뷰베리아 루브라(Beauveria rubra) 독소; 뷰베리아 시오타에(Beauveria shiotae) 독소; 뷰베리아 소볼리페라(Beauveria sobolifera) 독소; 뷰베리아 스피카타(Beauveria spicata) 독소; 뷰베리아 스테파노데리스(Beauveria stephanoderis) 독소; 뷰베리아 설푸레센스(Beauveria sulfurescens) 독소; 뷰베리아 순기(Beauveria sungii) 독소; 뷰베리아 테넬라(Beauveria tenella) 독소; 뷰베리아 툰드렌시스(Beauveria tundrensis) 독소; 뷰베리아 벨라타(Beauveria velata) 독소; 뷰베리아 바로아에(Beauveria varroae) 독소; 뷰베리아 베르미코니아(Beauveria vermiconia) 독소; 뷰베리아 벡산스(Beauveria vexans) 독소; 뷰베리아 비안나이(Beauveria viannai) 독소; 또는 뷰베리아 비렐라(Beauveria virella) 독소인, 조합물.
- 제2항에 있어서, 렉틴이 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 조합물: 갈란투스 니발리스(Galanthus nivalis) 응집소(GNA); 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra) 렉틴(SNA); 마악키아 아무렌시스(Maackia amurensis)-II(MAL-II); 에리트리나 크리스타갈리(Erythrina cristagalli) 렉틴(ECL); 리시누스 코무니스(Ricinus communis) 응집소-I(RCA); 땅콩 응집소(PNA); 밀배아 응집소(WGA); 그리포니아 심플리시폴리아(Griffonia simplicifolia)-II(GSL-II); Con A; 렌스 쿨리나리스(Lens culinaris) 응집소(LCA); 만노오스 결합 렉틴(MBL); BanLec; 갈렉틴; 파세올루스 불가리스(Phaseolus vulgaris) 백혈구응집소(PHA-L); 파세올루스 불가리스 적혈구응집소(PHA-E); 및 다투라 스트라모니움(Datura stramonium) 렉틴(DSL).
- 제27항에 있어서, 렉틴이 GNA인, 조합물.
- 제2항에 있어서, 아자디라크타 인디카 화합물이 아자디라크틴(azadirachtin); 아자디라디온(azadiradione); 아자디라디오놀리드(azadiradionolide); 데아세틸게두닌(deacetylgedunin); 데아세틸아자디라크티놀(deacetylazadirachtinol); 데스푸라노아자디라디온(desfuranoazadiradione); 에폭시아자디라디온; 게두닌(gedunin); 마흐무딘(mahmoodin); 님프루이틴(neemfruitin) A; 님프루이틴 B; 님볼리드(nimbolide); 님빈(nimbin); 니몰리시놀(nimolicinol); 오키닌 아세테이트(ohchinin acetate); 살라닌(salannin); 살라놀(salannol); 알파-니모락톤(nimolactone); 베타-니모락톤; 2',3'-디히드로살라닌; 3-데아세틸살라닌; 6-데아세틸님빈; 7-아세틸-16,17-데히드로-16-히드록시네오트리킬레논; 7-벤조일님보시놀; 7-데아세틸-7-벤조일에폭시아자디라디온; 7-데아세틸-7-벤조일게두닌; 7-데아세틸-17-에피니몰리시놀; 15-히드록시아자디라디온; 17-에피-17-히드록시아자디라디온; 17-에피아자디라디온; 20,21,22,23-테트라히드로-23-옥소아자디론; 22,23-디히드로니모시놀; 또는 28-데옥소님볼리드인, 조합물.
- 제2항에 있어서, 붕소 화합물이 보락스, 붕산, 디소듐 옥타보레이트, 소듐 보레이트, 소듐 메타보레이트, 소듐 테트라보레이트 10수화물, 산화붕소, 탄화붕소, 질화붕소, 삼브롬화붕소, 삼염화붕소 및 삼플루오린화붕소로 이루어지는 군에서 선택되는, 조합물.
- 제2항에 있어서, 바이러스가 바큘로바이러스과(Baculoviridae) 바이러스인, 조합물.
- 제31항에 있어서, 바큘로바이러스과 바이러스가 베타바큘로바이러스(Betabaculovirus)인, 조합물.
- 제32항에 있어서, 베타바큘로바이러스가 아독소피에스 오라나(Adoxophyes orana) 과립병바이러스(granulovirus); 아그로티스 세게툼(Agrotis segetum) 과립병바이러스; 아르토게이아 라파에(Artogeia rapae) 과립병바이러스; 피에리스 브라시카에(Pieris brassicae) 과립병바이러스; 코리스토네우라 푸미페라나(Choristoneura fumiferana) 과립병바이러스; 코리스토네우라 오시덴탈리스(Choristoneura occidentalis) 과립병바이러스; 클로스테라 아나코레타(Clostera anachoreta) 과립병바이러스; 클로스테라 아나스토모시스(Clostera anastomosis) 과립병바이러스 A; 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 헤난(Henan); 클로스테라 아나스토모시스 과립병바이러스 B; 크나팔로크로시스 메디날리스(Cnaphalocrocis medinalis) 과립병바이러스; 크립토플레비아 류코트레타(Cryptophlebia leucotreta) 과립병바이러스; 시디아 포모넬라(Cydia pomonella) 과립병바이러스; 시디아 포모넬라 과립병바이러스(멕시코 단리물); 디아트라에아 사카랄리스(Diatraea saccharalis) 과립병바이러스; 에피노티아 아포레마(Epinotia aporema) 과립병바이러스; 에리니스 엘로(Erinnyis ello) 과립병바이러스; 하리시나 브릴리안스(Harrisina brillians) 과립병바이러스; 헬리코베르파 아르미게라(Helicoverpa armigera) 과립병바이러스; 라카노비아 올레라세아에(Lacanobia oleracea) 과립병바이러스; 모시스 라티페스(Mocis latipes) 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 A(Mythimna unipuncta granulovirus A); 슈달라티아 우니푼크타(Pseudalatia unipuncta) 과립병바이러스; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스 B; 미팀나 우니푼크타 과립병바이러스; 프토리마에아 오페르쿨렐라(Phthorimaea operculella) 과립병바이러스; 플로디아 인테르푼크텔라(Plodia interpunctella) 과립병바이러스; 플루텔라 자일로스텔라(Plutella xylostella) 과립병바이러스; 스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda) 과립병바이러스; 스포도프테라 리투라(Spodoptera litura) 과립병바이러스; 트리코플루시아 니(Trichoplusia ni) 과립병바이러스; 트리코플루시아 니 과립병바이러스 LBIV-12; 제스티아 c-니그룸(Xestia c-nigrum) 과립병바이러스; 미분류 베타바큘로바이러스; 아카에아 자나타(Achaea janata) 과립병바이러스; 아독소피에스 혼마이(Adoxophyes honmai) 과립병바이러스; 아그로티스 엑스클라마티오니스(Agrotis exclamationis) 과립병바이러스; 아멜리아 팔로라나(Amelia pallorana) 과립병바이러스; 안드라카 비푼크타타(Andraca bipunctata) 과립병바이러스; 아우토그라파 감마(Autographa gamma) 과립병바이러스; 칼롭틸리아 테이보라(Caloptilia theivora) 과립병바이러스; 코리스토네우라 무리나나(Choristoneura murinana) 과립병바이러스; 코리스토네우라 비리디스 베타바큘로바이러스(Choristoneura viridis betabaculovirus); 클로스테라 아나스토모시스(Clostera anastomosis) 과립병바이러스; 크네파시아 론가나(Cnephasia longana) 과립병바이러스; 에스티그메네 아크레아(Estigmene acrea) 과립병바이러스; 육소아 오크로가스테르(Euxoa ochrogaster) 과립병바이러스; 헬리오티스 아르미게라(Heliothis armigera) 과립병바이러스; 호플로드리나 암비구아(Hoplodrina ambigua) 과립병바이러스; 히판트리아 쿠네아(Hyphantria cunea) 과립병바이러스; 나타다 나라리아(Natada nararia) 과립병바이러스; 네펠로데스 에메도니아(Nephelodes emmedonia) 과립병바이러스; 판데미스 리미타타(Pandemis limitata) 과립병바이러스; 페리도르마 모르폰토라(Peridorma morpontora) 과립병바이러스; 피에리스 라파에(Pieris rapae) 과립병바이러스; 플라티페나 스카브라(Plathypena scabra) 과립병바이러스; 슈달레티아 베타바큘로바이러스(Pseudaletia betabaculovirus); 스코토그라마 트리폴리(Scotogramma trifolii) 과립병바이러스; 스포도프테라 안드로게아(Spodoptera androgea) 과립병바이러스; 스포도프테라 리토랄리스(Spodoptera littoralis) 과립병바이러스; 테시아 솔라니보라(Tecia solanivora) 과립병바이러스; 또는 모시스 종(Mocis sp.) 과립병바이러스인, 조합물.
- 제1항에 있어서, IA가 포토랍두스 루미네센스 독소; 뷰베리아 바시아나 독소; 갈란투스 니발리스 응집소(GNA); 아자디라크틴 화합물; 붕산; 및 시디아 포모넬라 과립병바이러스(CpGV)로 이루어지는 군에서 선택되는, 조합물.
- 제34항에 있어서, 포토랍두스 루미네센스 독소가 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체(Tca)를 포함하는, 조합물.
- 제35항에 있어서, Tca가 TcaA 단백질(서열번호 616), TcaB 단백질(서열번호 617), TcaC 단백질(서열번호 618) 및 TcaZ 단백질(서열번호 619)을 포함하는, 조합물.
- 제34항에 있어서, 뷰베리아 바시아나 독소가 뷰베리신(beauvericin) 독소인, 조합물.
- 제37항에 있어서, 뷰베리신 독소가 화학식 C45H57N3O9을 갖는 뷰베리신 독소; 화학식 C46H59N3O9을 갖는 뷰베리신 A 독소; 또는 화학식 C47H61N3O9을 갖는 뷰베리신 B 독소인, 조합물.
- 제38항에 있어서, 뷰베리아 바시아나 독소가 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자에서 단리된 뷰베리신 독소인, 조합물.
- 제34항에 있어서, GNA가 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제34항에 있어서, CpGV가 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스인, 조합물.
- 제1항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물.
- 제42항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물.
- 제1항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물.
- 제44항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물.
- 제1항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물.
- 제46항에 있어서, Btt 독소가 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소인, 조합물.
- 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, CRIP가 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP); 말미잘 독소; Av3 변이체 폴리펩타이드(AVP); 포네우트리아(Phoneutria) 독소; 또는 아트라코톡신(ACTX)인, 조합물.
- 제48항에 있어서, U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드가 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제49항에 있어서, U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드가 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제48항에 있어서, TVP가 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 및 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제51항에 있어서, TVP가 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 및 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제48항에 있어서, 말미잘 독소가 Av2 독소 또는 Av3 독소인, 조합물.
- 제53항에 있어서, Av2 독소가 서열번호 588에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제54항에 있어서, Av2 독소가 서열번호 588에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제53항에 있어서, Av3 독소가 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제56항에 있어서, Av3 독소가 서열번호 44에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제48항에 있어서, AVP가 AVP펩타이드, AVPa-C1 펩타이드 또는 AVPb 펩타이드인, 조합물.
- 제58항에 있어서, AVPa 독소가 서열번호 45에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제59항에 있어서, AVPa 독소가 서열번호 45에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제58항에 있어서, AVPa-C1 독소가 서열번호 46에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제61항에 있어서, AVPa-C1 독소가 서열번호 46에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제58항에 있어서, AVPb 독소가 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제63항에 있어서, AVPb 독소가 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제48항에 있어서, CRIP가 크테니톡신(CNTX: ctenitoxin)인, 조합물.
- 제65항에 있어서, CNTX가 Γ-CNTX-Pn1a인, 조합물.
- 제66항에 있어서, Γ-CNTX-Pn1a가 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제67항에 있어서, Γ-CNTX-Pn1a가 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제48항에 있어서, CRIP가 ACTX인, 조합물.
- 제69항에 있어서, ACTX가 U-ACTX 펩타이드, 오메가-ACTX 펩타이드 또는 카파-ACTX 펩타이드인, 조합물.
- 제69항에 있어서, ACTX가 U-ACTX-Hv1a, U+2-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1a, rU-ACTX-Hv1b, κ-ACTX-Hv1a, κ+2-ACTX-Hv1a, ω-ACTX-Hv1a 또는 ω+2-ACTX-Hv1a인, 조합물.
- 제71항에 있어서, ACTX가 서열번호 60 내지 64 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제72항에 있어서, ACTX가 서열번호 60 내지 64 및 594 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제69항에 있어서, ACTX가 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열과 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제74항에 있어서, ACTX가 서열번호61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는, 조합물.
- 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, CRIP가 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 조합물: 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드; 서열번호 2 내지 15, 49 내지 53, 2 내지 15, 49 내지 53, 621 내지 622, 624 내지 628, 631 내지 640, 642 내지 651, 및 653 내지 654 중 어느 하나에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 TVP; 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP); 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a; 또는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a.
- 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, IA 대 CRIP의 비가 약 10,000:1, 5,000:1, 1,000:1, 500:1, 250:1, 200:1, 100:1, 99:1, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25, 70:30, 65:35, 60:40, 55:45, 1:1, 45:55, 40:60, 35:65, 30:70, 25:75, 20:80, 15:85, 10:90, 5:95, 1:99, 1:100, 1:200, 1:250, 1:500, 1:1,000, 1:5,000 또는 1:10,000인, 조합물.
- 제77항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP가 ACTX이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 및 독소 대 ACTX의 비가 약 1:1 내지 약 1:5000인, 조합물.
- 제78항에 있어서, 바실러스 투린기엔시스 변종 이스라엘렌시스(Bti)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비가 약 1:4000인, 조합물.
- 제77항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP가 ACTX이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비가 약 1:1 내지 약 1:10인, 조합물.
- 제80항에 있어서, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비가 약 1:9.2인, 조합물.
- 제77항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP가 AVP이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 AVP의 비가 약 1:1 내지 약 1:1.5인, 조합물.
- 제82항에 있어서, 바실러스 투린기엔시스 변종 쿠르스타키(Btk)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 AVP의 비가 약 1:1.375인, 조합물.
- 제77항에 있어서, IA가 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소이고; CRIP가 ACTX이며; 여기서 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비가 약 1:1 내지 약 1:10인, 조합물.
- 제84항에 있어서, 바실러스 투린기엔시스 변종 테네브리오니스(Btt)에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소 대 ACTX의 비가 약 1:8.75인, 조합물.
- 제1항 내지 제82항 중 어느 한 항에 따른 조합물을 포함하고, 부형제를 추가로 포함하는 조성물.
- 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 1에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 펩타이드를 포함하는 조합물.
- 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 2에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U1-아가톡신-Ta1b 변이체 폴리펩타이드(TVP)를 포함하는 조합물.
- 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 67에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Av3-변이체 폴리펩타이드(AVP)를 포함하는 조합물.
- 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 Γ-CNTX-Pn1a 독소를 포함하는 조합물.
- 뷰베리아 바시아나 균주 ANT-03 포자와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물.
- 바실러스 투린기엔시스 아종 테네브리오니스 균주 NB-176에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물.
- 바실러스 투린기엔시스 아종 쿠르스타키 균주 EVB-113-19에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물.
- 바실러스 투린기엔시스 아종 이스라엘렌시스 균주 BMP 144에서 단리된 하나 이상의 발효 고형물, 포자 또는 독소와, 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소를 포함하는 조합물.
- 포토랍두스 루미네센스 독소와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 포토랍두스 루미네센스 독소는 TcaA(서열번호 616), TcaB(서열번호 617), TcaC(서열번호 618) 및 TcaZ(서열번호 619)를 포함하는 포토랍두스 루미네센스 독소 복합체(Tca)이고; ACTX 펩타이드는 U+2-ACTX-Hv1a 독소(서열번호 61)인 조합물.
- 갈란투스 니발리스 응집소(GNA)와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 GNA는 서열번호 35에 제시된 아미노산 서열을 갖고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물.
- 아자디라크틴과 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 아자디라크틴은 화학식 C35H44O16을 갖는 아자디라크틴이고; ACTX는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물.
- 붕산 화합물과 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 붕산 화합물은 화학식 H3BO3을 갖고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물.
- 시디아 포모넬라 과립병바이러스(CpGV)와 ACTX를 포함하는 조합물로서; 여기서 CpGV는 시디아 포모넬라 과립병바이러스 단리물 V22 바이러스이고; ACTX 펩타이드는 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열에 따른 아미노산 서열을 갖는 U+2-ACTX-Hv1a 독소인 조합물.
- 곤충을 방제하기 위해 제1항 내지 제99항 중 어느 한 항의 조합물을 사용하는 방법으로서, 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 IA의 조합물을 제공하는 단계와, 제1항 내지 제105항 중 어느 한 항의 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법.
- 제100항에 있어서, 곤충이 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 방법: 아케마 스핑크스 나방(Achema Sphinx Moth)(박각시벌레)(유모르파 아케몬(Eumorpha achemon)); 알파파 모충(Alfalfa Caterpillar)(콜리아스 유리테메(Colias eurytheme)); 아몬드 나방(Almond Moth)(카우드라 카우텔라(Caudra cautella)); 아모르비아 나방(Amorbia Moth)(아모르비아 후메로사나(Amorbia humerosana)); 거염벌레(Armyworm)(스포도프테라 종, 예를 들어 엑시구아(exigua), 프루기페르다(frugiperda), 리토랄리스(littoralis), 슈달레티아 우니푼크타(Pseudaletia unipuncta)); 아티초크 플럼 나방(Artichoke Plume Moth)(플라티프틸리아 카르두이닥틸라(Platyptilia carduidactyla)); 아잘레아 모충(Azalea Caterpillar)(다타나 마조르(Datana major)); 도롱이벌레(Bagworm)(티리도프테릭스 에페메라에포르미스(Thyridopteryx ephemeraeformis)); 바나나 나방(Banana Moth)(히페르콤페 스크리보니아(Hypercompe scribonia)); 바나나 팔랑나비(Banana Skipper)(에리오노타 트락스(Erionota thrax)); 블랙헤드 싹벌레(Blackheaded Budworm)(아클레리스 글로베라나(Acleris gloverana)); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(Spring Cankerworm)(팔레아크리타 메리카타(Paleacrita merriccata)); 체리 과일벌레(Cherry Fruitworm)(그라폴리타 파카르디(Grapholita packardi)); 중국 표식 나방(China Mark Moth)(님풀라 스타그나타(Nymphula stagnata)); 감귤류 야도충(Citrus Cutworm)(자일로미게스 쿠리알리스(Xylomyges curialis)); 코들링나방(Codling Moth)(시디아 포모넬라(Cydia pomonella)); 크랜베리 과일벌레(Cranberry Fruitworm)(아크로바시스 바시니(Acrobasis vaccinii)); 십자줄무늬 양배추벌레(Cross-striped Cabbageworm)(에베르게스티스 리모살리스(Evergestis rimosalis)); 야도충(Cutworm)(녹투이드(Noctuid) 종, 아그로티스 입실론(Agrotis ipsilon)); 더글라스 전나무 독나방(Douglas Fir Tussock Moth)(오르기아 슈도츄가타(Orgyia pseudotsugata)); 엘로 나방(Ello Moth)(박각시벌레(Hornworm))(에리니스 엘로(Erinnyis ello)); 느릅나무 자벌레(Elm Spanworm)(에노모스 서브시그나리아(Ennomos subsignaria)); 유럽 포도덩굴 나방(European Grapevine Moth)(로베시아 보트라나(Lobesia botrana)); 유럽 팔랑나비(European Skipper)(티멜리쿠스 리네올라(Thymelicus lineola)(에섹스 팔랑나비(Essex Skipper)); 가을 웹웜(Fall Webworm)(멜리소푸스 라티페레아누스(Melissopus latiferreanus)); 필버트 잎말이나방(Filbert Leafroller)(아르킵스 로사누스(Archips rosanus)); 과일나무 잎말이나방(Fruittree Leafroller)(아르킵스 아르기로스필리아Archips argyrospilia)); 포도열매 나방(Grape Berry Moth)(파랄로베시아 비테아나(Paralobesia viteana)); 포도 잎말이나방(Grape Leafroller)(플라티노타 스툴타나(Platynota stultana)); 포도잎 스켈레토나이저(Grapeleaf Skeletonizer)(하리시나 아메리카나(Harrisina americana))(땅에서만); 녹색 클로버벌레(Green Cloverworm)(플라티페나 스카브라(Dryocampa rubicunda)); 녹색줄무늬 메이플벌레(Greenstriped Mapleworm)(드리오캄파 루비쿤다(Dryocampa rubicunda)); 군모소스-바트라케드라(Gummosos-Batrachedra); 코모사에(Comosae)(호드게스(Hodges)); 집시 나방(Gypsy Moth)(리만트리아 디스파르(Lymantria dispar)); 독미나리 자벌레(Hemlock Looper)(람브디나 피셀라리아(Lambdina fiscellaria)); 박각시벌레(만두카(Manduca) 종); 배추흰나비 유충(Imported Cabbageworm)(피에리스 라파에(Pieris rapae)); 이오 나방(Io Moth)(아우토메리스 이오(Automeris io)); 잭 파인 싹벌레(Jack Pine Budworm)(코리스토네우라 피누스(Choristoneura pinus)); 밝은갈색 사과 나방(Light Brown Apple Moth)(에피피아스 포스트비타나(Epiphyas postvittana)); 멜론벌레(Melonworm)(디아파니아 히알리나타(Diaphania hyalinata)); 미모사 웹웜(Mimosa Webworm)(호마다울라 아니소센트라(Homadaula anisocentra)); 부등변줄무늬 잎말이나방(Obliquebanded Leafroller)(코리스토네우라 로사세아나(Choristoneura rosaceana)); 협죽도 나방(Oleander Moth)(신토메이다 에필라이스(Syntomeida epilais)); 잡식성 잎말이나방(Omnivorous Leafroller)(플라이노타 스툴타나(Playnota stultana)); 잡식성 자벌레(Omnivorous Looper)(사불로데스 아에그로타타(Sabulodes aegrotata)); 오렌지독(Orangedog)(파필리오 크레스폰테스(Papilio cresphontes)); 오렌지 토르트릭스(Orange Tortrix)(아르기로타에니아 시트라나(Argyrotaenia citrana)); 동양 과일 나방(Oriental Fruit Moth)(그라폴리타 몰레스타(Grapholita molesta)); 복숭아 가지 천공충(Peach Twig Borer)(아나르시아 리네아텔라(Anarsia lineatella)); 소나무 나비(Pine Butterfly)(네오파시아 메나피아(Neophasia menapia)); 꼬투리벌레(Podworm)(헬리오베르파 제아(Heliocoverpa zea)); 붉은줄무늬 잎말이나방(Redbanded Leafroller)(아르기로타에니아 벨루티나나(Argyrotaenia velutinana)); 붉은혹 모충(Redhumped Caterpillar)(스키주라 콘시나(Schizura concinna)); 린드웜 복합체(Rindworm Complex)(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(Saddleback Caterpillar)(시비네 스티물레아(Sibine stimulea)); 안장 돌출형 모충(Saddle Prominent Caterpillar)(헤테로캄파 구티비타(Heterocampa guttivitta)); 염습지 모충(Saltmarsh Caterpillar)(에스티그메네 아크레아(Estigmene acrea)); 소드 웹웜(Sod Webworm)(크람부스(Crambus) 종); 자벌레(Spanworm)(에노모스 서브시그나리아(Ennomos subsignaria)); 가을 황충(Fall Cankerworm)(알소필라 포메타리아(Alsophila pometaria)); 가문비나무 싹벌레(Spruce Budworm)(코리스토네우라 푸미페라나(Choristoneura fumiferana)); 텐트 모충(Tent Caterpillar)(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(Thecla-Thecla Basilides)(게이르(Geyr))(테클라 바실리데스(Thecla basilides)); 담배 박각시벌레(Tobacco Hornworm)(만두카 섹스타(Manduca sexta)); 담배 나방(Tobacco Moth)(에페스티아 엘루텔라(Ephestia elutella)); 술이달린 사과 싹나방(Tufted Apple Budmoth)(플라티노타 이다에우살리스(Platynota idaeusalis)); 가지 천공충(Twig Borer)(아나르시아 리네아텔라(Anarsia lineatella)); 무늬 야도충(Variegated Cutworm)(페리드로마 사우시아(Peridroma saucia)); 무늬 잎말이나방(Variegated Leafroller)(플라티노타 플라베다나(Platynota flavedana)); 벨벳콩 모충(Velvetbean Caterpillar)(안티카르시아 겜마탈리스(Anticarsia gemmatalis)); 호두 모충(Walnut Caterpillar)(다타나 인테게리마(Datana integerrima)); 웹웜(히판트리아 쿠네아(Hyphantria cunea)); 서양 독나방(Western Tussock Moth)(오르기아 베투스타(Orgyia vetusta)); 남부 옥수수대 천공충(Southern Cornstalk Borer)(디아트라에아 크람비도이데스(Diatraea crambidoides)); 옥수수 귀벌레(Corn Earworm); 고구마 바구미(Sweet potato weevil); 고추 바구미(Pepper weevil); 감귤류 뿌리 바구미(Citrus root weevil); 딸기 뿌리 바구미(Strawberry root weevil); 피칸 바구미(Pecan weevil); 필버트 바구미(Filbert weevil); 벼물 바구미(Ricewater weevil); 알팔파 바구미(Alfalfa weevil); 클로버 바구미(Clover weevil); 차나무좀(Tea shot-hole borer); 뿌리 바구미(Root weevil); 사탕수수 딱정벌레(Sugarcane beetle); 커피열매 천공충(Coffee berry borer); 새포아풀 바구미(Annual blue grass weevil)(리스트로노투스 마쿨리콜리스(Listronotus maculicollis)); 아시아 정원 딱정벌레(Asiatic garden beetle)(말라데라 카스타네아(Maladera castanea)); 유럽 풍뎅이(European chafer)(리조트로쿠스 마잘리스(Rhizotroqus majalis)); 녹색 풍뎅이(Green June beetle)(코티니스 니티다(Cotinis nitida)); 일본 딱정벌레(Japanese beetle)(포필리아 자포니카(Popillia japonica)); 5월 또는 6월 딱정벌레(May or June beetle)(필로파가(Phyllophaga) 종); 북부 마스크 풍뎅이(Northern masked chafer)(시클로세팔라 보레알리스(Cyclocephala borealis)); 동양 딱정벌레(Oriental beetle)(아노말라 오리엔탈리스(Anomala orientalis)); 남부 마스크 풍뎅이(Southern masked chafer)(시클로세팔라 루리다(Cyclocephala lurida)); 바구미(Billbug)(쿠르쿨리오노이데아(Curculionoidea)); 아에데스 아에깁티(Aedes aegypti); 부세올라 푸스카(Busseola fusca); 킬로 수프레살리스(Chilo suppressalis); 쿨렉스 피피엔스(Culex pipiens); 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스(Culex quinquefasciatus); 디아브로티카 비르기페라(Diabrotica virgifera); 디아트라에아 사카랄리스(Diatraea saccharalis); 헬리코베르파 아르미게라(Helicoverpa armigera); 헬리코베르파 제아(Helicoverpa zea); 헬리오티스 비레센스(Heliothis virescens); 렙티노타르사 데셈리네아타(Leptinotarsa decemlineata); 오스트리니아 푸르나칼리스(Ostrinia furnacalis); 오스트리니아 누빌라리스(Ostrinia nubilalis); 펙티노포라 고시피엘라(Pectinophora gossypiella); 플로디아 인테르푼크텔라(Plodia interpunctella); 플루텔라 자일로스텔라(Plutella xylostella); 슈도플루시아 인클루덴스(Pseudoplusia includens); 스포도프테라 엑시구아(Spodoptera exigua); 스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda); 스포도프테라 리토랄리스(Spodoptera littoralis); 트리코플루시아 니(Trichoplusia ni); 및 잔토갈레루카 루테올라(Xanthogaleruca luteola).
- 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충을 방제하기 위해 제1항 내지 제99항 중 어느 한 항의 조합물을 사용하는 방법으로서, 적어도 하나의 CRIP와 적어도 하나의 IA의 조합물을 제공하는 단계, 이어서 상기 조합물을 곤충의 서식지에 적용하는 단계를 포함하는 방법.
- 제102항에 있어서, 바실러스 투린기엔시스 독소 내성 곤충이 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 방법: 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
- 해충을 퇴치, 방제 또는 저해하는 방법으로서, 제1항 내지 제99항 중 어느 한 항의 조합물의 살충 유효량을 해충의 서식지, 또는 해충의 공격을 받기 쉬운 식물 또는 동물에 적용하는 단계를 포함하는 방법.
- 제104항에 있어서, 해충이 하기로 이루어지는 군에서 선택되는, 방법: 아케마 스핑크스 나방(박각시벌레)(유모르파 아케몬); 알파파 모충(콜리아스 유리테메); 아몬드 나방(카우드라 카우텔라); 아모르비아 나방(아모르비아 후메로사나); 거염벌레(스포토프테라 종, 예를 들어 엑시구아, 프루기페르다, 리토랄리스, 슈달레티아 우니푼크타); 아티초크 플럼 나방(플라티프틸리아 카르두이닥틸라); 아잘레아 모충(다타나 마조르); 도롱이벌레(티리도프테릭스 에페메라에포르미스); 바나나 나방(히페르콤페 스크리보니아); 바나나 팔랑나비(에리오노타 트락스); 블랙헤드 싹벌레(아클레리스 글로베라나); 캘리포니아 오크나무벌레(프리가니디아 칼리포르니카); 봄 자벌레(팔레아크리타 메리카타); 체리 과일벌레(그라폴리타 파카르디); 중국 표식 나방(님풀라 스타그나타); 감귤류 야도충(자일로미게스 쿠리알리스); 코들링나방(시디아 포모넬라); 크랜베리 과일벌레(아크로바시스 바시니); 십자줄무늬 양배추벌레(에베르게스티스 리모살리스); 야도충(녹투이드 종, 아그로티스 입실론); 더글라스 전나무 독나방(오르기아 슈도츄가타); 엘로 나방(박각시벌레)(에리니스 엘로); 느릅나무 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 유럽 포도덩굴 나방(로베시아 보트라나); 유럽 팔랑나비(티멜리쿠스 리네올라)(에섹스 팔랑나비); 가을 웹웜(멜리소푸스 라티페레아누스); 필버트 잎말이나방(아르킵스 로사누스); 과일나무 잎말이나방(아르킵스 아르기로스필리아); 포도열매 나방(파랄로베시아 비테아나); 포도 잎말이나방(플라티노타 스툴타나); 포도잎 스켈레토나이저(하리시나 아메리카나)(땅에서만); 녹색 클로버벌레(플라티페나 스카브라); 녹색줄무늬 메이플벌레(드리오캄파 루비쿤다); 군모소스-바트라케드라; 코모사에(호드게스); 집시 나방(리만트리아 디스파르); 독미나리 자벌레(람브디나 피셀라리아); 박각시벌레(만두카 종); 배추흰나비 유충(피에리스 라파에); 이오 나방(아우토메리스 이오); 잭 파인 싹벌레(코리스토네우라 피누스); 밝은갈색 사과 나방(에피피아스 포스트비타나); 멜론벌레(디아파니아 히알리나타); 미모사 웹웜(호마다울라 아니소센트라); 부등변줄무늬 잎말이나방(코리스토네우라 로사세아나); 협죽도 나방(신토메이다 에필라이스); 잡식성 잎말이나방(플라이노타 스툴타나); 잡식성 자벌레(사불로데스 아에그로타타); 오렌지독(파필리오 크레스폰테스); 오렌지 토르트릭스(아르기로타에니아 시트라나); 동양 과일 나방(그라폴리타 몰레스타); 복숭아 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 소나무 나비(네오파시아 메나피아); 꼬투리벌레(헬리오베르파 제아); 붉은줄무늬 잎말이나방(아르기로타에니아 벨루티나나); 붉은혹 모충(스키주라 콘시나); 린드웜 복합체(각종 레피도프테라); 안장모양 모충(시비네 스티물레아); 안장 돌출형 모충(헤테로캄파 구티비타); 염습지 모충(에스티그메네 아크레아); 소드 웹웜(크람부스 종); 자벌레(에노모스 서브시그나리아); 가을 황충(알소필라 포메타리아); 가문비나무 싹벌레(코리스토네우라 푸미페라나); 텐트 모충(각종 라시오캄프과); 테클라-테클라 바실리데스(게이르)(테클라 바실리데스); 담배 박각시벌레(만두카 섹스타); 담배 나방(에페스티아 엘루텔라); 술이달린 사과 싹나방(플라티노타 이다에우살리스); 가지 천공충(아나르시아 리네아텔라); 무늬 야도충(페리드로마 사우시아); 무늬 잎말이나방(플라티노타 플라베다나); 벨벳콩 모충(안티카르시아 겜마탈리스); 호두 모충(다타나 인테게리마); 웹웜(히판트리아 쿠네아); 서양 독나방(오르기아 베투스타); 남부 옥수수대 천공충(디아트라에아 크람비도이데스); 옥수수 귀벌레; 고구마 바구미; 고추 바구미; 감귤류 뿌리 바구미; 딸기 뿌리 바구미; 피칸 바구미; 필버트 바구미; 벼물 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 알팔파 바구미; 클로버 바구미; 차나무좀; 뿌리 바구미; 사탕수수 딱정벌레; 커피열매 천공충; 새포아풀 바구미(리스트로노투스 마쿨리콜리스); 아시아 정원 딱정벌레(말라데라 카스타네아); 유럽 풍뎅이(리조트로쿠스 마잘리스); 녹색 풍뎅이(코티니스 니티다); 일본 딱정벌레(포필리아 자포니카); 5월 또는 6월 딱정벌레(필로파가 종); 북부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 보레알리스); 동양 딱정벌레(아노말라 오리엔탈리스); 남부 마스크 풍뎅이(시클로세팔라 루리다); 바구미(쿠르쿨리오노이데아); 아에데스 아에깁티; 부세올라 푸스카; 킬로 수프레살리스; 쿨렉스 피피엔스; 쿨렉스 퀸쿠에파시아투스; 디아브로티카 비르기페라; 디아트라에아 사카랄리스; 헬리코베르파 아르미게라; 헬리코베르파 제아; 헬리오티스 비레센스; 렙티노타르사 데셈리네아타; 오스트리니아 푸르나칼리스; 오스트리니아 누빌라리스; 펙티노포라 고시피엘라; 플로디아 인테르푼크텔라; 플루텔라 자일로스텔라; 슈도플루시아 인클루덴스; 스포도프테라 엑시구아; 스포도프테라 프루기페르다; 스포도프테라 리토랄리스; 트리코플루시아 니; 및 잔토갈레루카 루테올라.
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