KR20220143062A - 신규 ep4 길항제의 합성 및 암과 염증에서의 이의 용도 - Google Patents

신규 ep4 길항제의 합성 및 암과 염증에서의 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20220143062A
KR20220143062A KR1020227031652A KR20227031652A KR20220143062A KR 20220143062 A KR20220143062 A KR 20220143062A KR 1020227031652 A KR1020227031652 A KR 1020227031652A KR 20227031652 A KR20227031652 A KR 20227031652A KR 20220143062 A KR20220143062 A KR 20220143062A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
methyl
ethyl
mmol
pyrazole
Prior art date
Application number
KR1020227031652A
Other languages
English (en)
Inventor
쑤에준 장
양 장
리에 리
지에 션
저 리우
샤오후아 창
용강 왕
Original Assignee
우한 휴먼웰 이노베이티브 드러그 리서치 앤드 디벨롭먼트 센터 리미티드 컴퍼니
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 우한 휴먼웰 이노베이티브 드러그 리서치 앤드 디벨롭먼트 센터 리미티드 컴퍼니 filed Critical 우한 휴먼웰 이노베이티브 드러그 리서치 앤드 디벨롭먼트 센터 리미티드 컴퍼니
Publication of KR20220143062A publication Critical patent/KR20220143062A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

본 발명은 EP4를 효과적으로 길항하는 화합물에 관한 것으로, 이는 식 I로 표시되는 화합물, 또는 식 I로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 약학적으로 허용 가능한 염 또는 프로드러그이고,
Figure pct00281
,
여기서, R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되고; R2는 C2-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 할로겐으로 치환된 C2-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C3-C6 시클로알킬로부터 선택되며; R3은 수소, 할로겐, C1-C2 알킬, 불소로 치환된 C1-C2 알킬로부터 선택되고; R4는 수소, 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알콕시로부터 선택된다.

Description

신규 EP4 길항제의 합성 및 암과 염증에서의 이의 용도
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 출원번호가 202010144983.1이고 출원일자가 2020년 3월 4일인 중국 특허 출원을 기반으로 하고, 상기 중국 특허 출원의 우선권을 주장하는 바, 상기 중국 특허 출원의 모든 내용은 참조로서 본원 발명에 인용된다.
본 발명은 화학 및 의약 분야에 관한 것으로, 구체적으로, 본 발명은 피라졸 유도체 및 이의 용도에 관한 것이다.
프로스타글란딘 E2(Prostaglandin E2, PGE2)는 내인성 생물학적 활성 지질로, PGE2는 프로스타글란딘 수용체를 활성화시켜 광범위한 업스트림 및 다운스트림 의존성 생물학적 반응을 유도하며(Legler, D. F. et al, hit. J Biochem. Cell Biol. 2010, 42, p. 198-201), 염증, 통증, 신장 기능, 심혈관계, 폐 기능 및 암을 비롯한 많은 생리학적 및 병리학적 과정의 조절에 관여한다. PGE2는 다양한 암의 암성 조직에서 높게 발현되는 것으로 보고되고 있으며, PGE2는 환자의 암 및 질환 상태의 발생, 성장 및 진행과 관련이 있음이 입증되었다. PGE2는 세포 증식 및 세포 사멸(아폽토시스)의 활성화와 관련이 있으며 암세포 증식, 질환 진행 및 암 전이 과정에서 중요한 역할을 한다고 널리 알려져 있다.
PGE2의 수용체에는 EP1, EP2, EP3 및 EP4인 4가지 아형이 존재하고, 이들은 다양한 조직에 널리 분포되어 있다. 이러한 아형에서, PGE2는 EP4 수용체를 통해 염증 반응(면역 염증 반응을 포함), 평활근 이완, 통증 유발, 림프구 분화, 혈관간막세포 비대 또는 증식, 위장 점액 분비에 개입한다. 따라서, EP4 수용체 길항제는 염증성 질환, 다양한 통증을 동반하는 질환 등과 같은 PGE2-EP4 경로와 관련된 질환의 치료를 위한 소염제 및/또는 진통제로 유망하다고 볼 수 있다.
EP4는 류마티스 관절염 및 골관절염의 설치류 동물 모델에서 관절염 통증에 관여하는 주요 수용체이고(예를 들어, J.Pharmacol.Exp.Ther.,325,425(2008)을 참조), 이는 활성화된 후 세포내 신호전달 분자 cAMP의 축적을 야기한다. 통각 수용기의 말초신경 말단, 대식세포 및 호중구에서 EP4 수용체의 발현이 검출되었는데, 이러한 유형의 세포는 자궁내막증에 매우 중요한 것으로 입증되었다. 연구에 따르면, EP4 길항제를 경구 투여하면 제2형 당뇨병 마우스에서 단백뇨를 완화하고 당뇨병성 신병증의 진행을 억제할 수 있다고 보고되었다. 또 다른 연구에 따르면, 방광 점막에서 EP4의 활성화와 PGE2의 생성 증가가 전립선염으로 인한 과민성 방광의 중요한 원인일 수 있고, EP4 길항제를 방광 내 주사하면 전립선염 후 과민성 방광을 효과적으로 개선할 수 있다고 보고되었다. 따라서 선택적 EP4 길항제는 관절염 통증을 비롯한 관절염, 자궁내막증, 당뇨병성 신병증 및 과민성 방광의 치료에 사용될 수 있다. 기존의 관절염의 치료제는 심혈관 및/또는 위장 부작용을 일으킬 수 있는 전통적인 NSAID(비스테로이드성 항염증제) 또는 선택적 COX-2 억제제가 주를 이루고 있다. 선택적 EP4 길항제는 심혈관 부작용을 일으킬 가능성이 적다.
PGE2는 종양 미세 환경에서 종양 미세 환경에서의 EP 수용체(종양 세포에 의해 대량으로 생성됨)를 지속적으로 활성화함으로써(Ochs et al, J Neurochem. 2016, 136, p. 1142-1154; Zelenay, S. et al, Cell 2015, 162, p. 1257-1270), 2형 종양 관련 대식세포(TAMS), Treg 세포 및 골수 유래 억제 세포(MDSC)를 비롯한 다양한 면역 억제 세포의 축적을 촉진하고 활성을 향상시킨다. 면역 억제 종양 미세 환경의 주요 특징 중 하나는 대량의 MDSCs 및 TAM이 존재하는 것이고, 이들은 오히려 위암, 난소암, 유방암, 방광암, 간세포암(HCC), 두경부암 및 다른 유형의 암 환자의 낮은 전체 생존율과 밀접한 관련이 있다.
또한, PGE2는 종양에서 항원 제시 수지상 세포(DC)의 축적을 억제하고 종양 침윤성 DC의 활성화를 억제함으로써 면역 관용을 유도하는 것으로 보고되었다(Wang et al, Trends in Molecular Medicine 2016, 22, p. 1-3). 이러한 모든 PGE2 매개 작용은 공동으로 종양 세포가 면역 감시를 회피하는데 도움이 된다. PGE2는 종양 발생 및 발달을 촉진하는데 매우 중요한 역할을 한다. PGE2 및 관련 수용체 EP2 및 EP4의 발현 수준은 결장암, 폐암, 유방암 및 두경부암을 포함한 다양한 악성 종양에서 상승하는 것으로 밝혀졌으며 종종 불량한 예후와 밀접한 관련이 있다(Bhooshan, N .et al. Lung Cancer 101 ,88-91). 따라서, EP2 및 EP4 신호전달 경로를 선택적으로 차단하면 종양 미세 환경을 변경하고 종양 면역 세포를 조절하여 종양 발생 및 발달을 억제할 수 있다.
기존의 전임상 연구 데이터는 EP2 및 EP4 특이적 길항제가 결장암, 식도암, 폐암 및 유방암 등과 같은 동물 모델에서 다양한 정도로 종양 성장을 예방하거나 억제할 수 있음을 보여준다. 임상에 진입한 PGE2 수용체 약물 중 화이자（Pfizer）사에서 개발한 EP4 길항제인 그라피프란트(Grapiprant)가 개 관절염 치료에서의 사용으로 FDA 승인을 받았고, 동시에 전립선암, 비소세포폐암, 유방암 등 다양한 유형의 고형종양 치료를 위해 2015년에 항종양 임상 2상 연구에 진입하였다(De Vito, V .et al .J Pharm Biomed Anal 118 ,251-258). 에자이(Eisai)사에서 개발한 EP4 길항제인 E7046도 2015년에 임상 1상 연구를 시작하였으며, 2017년에 직장암에 대한 방사선 요법 또는 화학방사선 요법과 결합한 1b상 임상 시험을 시작하였다. Ono Pharmaceutical에서 개발한 ONO-4578은 2017년에 진행성 또는 전이성 고형종양에 대한 1상 임상 시험이 시작되었으며, 2018년에는 진행성 고형종양 치료를 위한 단일 제제 요법 또는 니볼루맙(nivolumab) 병용 용법의 1/2상 임상 시험이 시작되었다.
현재 EP4 길항제는 염증성 질환, 통증, 암 등 분야의 치료에서 어느 정도 진전을 보였지만 현재의 약물을 개선하거나 대체할 수 있는 신규 약물이 여전히 더 개발되어야 한다.
본 발명은 현재의 약물 또는 EP4 길항제를 개선 또는 대체할 수 있는 EP4를 효과적으로 길항할 수 있는 화합물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
이에, 본 발명의 제1 양태에서, 본 발명은 화합물을 제공하되, 상기 화합물은 식 V로 표시되는 화합물 또는 식 V로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 염 또는 프로드러그이고,
Figure pct00001
,
여기서, 고리 A는
Figure pct00002
,
Figure pct00003
,
Figure pct00004
,
Figure pct00005
로부터 선택되며;
고리 B는
Figure pct00006
,
Figure pct00007
로부터 선택되고;
R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며;
R2는 C2-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 페닐, 트리플루오로메틸, 할로겐으로 치환된 C2-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 히드록실로 치환된 C2-C6 알킬, 시아노로 치환된 C2-C6 알킬, -SF5, -X-R2a로부터 선택되되, X는 산소, 황, -CO-, -SO2-, -SO-로부터 선택되고; R2a는 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 선택되며;
R3은 수소, 할로겐, C1-C2 알킬, 불소로 치환된 C1-C2 알킬, 페닐로부터 선택되고;
R4는 수소, 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알콕시로부터 선택되며;
R5는 수소, 할로겐으로부터 선택되고;
R6a 및 R6b 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이거나; 또는 R6a 및 R6b는 함께 시클로부틸 고리를 형성하며;
R7은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되고;
M은 산소, 황, 메틸렌으로부터 선택되며;
조건은, R2가 트리플루오로메틸이고, M이 산소이며, R6a 및 R6b 중 하나가 수소이고 다른 하나가 메틸일 경우, 고리 A는
Figure pct00008
,
Figure pct00009
로부터 선택되고; R2가 트리플루오로메틸이고, M이 산소이며, 고리 A가
Figure pct00010
일 경우, R6a 및 R6b는 함께 시클로부틸 고리를 형성하는 것이다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 화합물은 또한 하기와 같은 부가적인 기술특징 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 화합물은 식 III로 표시되는 화합물 또는 식 III로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 염 또는 프로드러그이고,
Figure pct00011
,
여기서, R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며; R7은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되고; M은 산소, 황, 메틸렌으로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 화합물은 식 II로 표시되는 화합물 또는 식 II로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 염 또는 프로드러그이고,
Figure pct00012
,
여기서, R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며; 바람직하게는, R1은 -CHF2이고; R2는 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, tert-부틸, 플루오로에틸, 플루오로프로필, 플루오로이소프로필, 플루오로부틸, 플루오로이소부틸, 히드록시에틸, 히드록시이소프로필, 시아노메틸, 시아노에틸, 페닐, -SF5, -X-R2a로부터 선택되되, X는 산소, 황, -CO-로부터 선택되며; R2a는 메틸, 에틸, 플루오로메틸, 플루오로에틸로부터 선택되며; R3은 수소, 불소, 염소, 메틸, 에틸, 플루오로메틸, 플루오로에틸, 페닐로부터 선택되고; R4는 수소, 불소, 염소, 메틸, 에틸, 플루오로메틸, 플루오로에틸로부터 선택되며; R5는 수소, 불소, 염소로부터 선택되고; M은 산소, 황, 메틸렌으로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 화합물은 식 I로 표시되는 화합물(식 I로 표시되는 화합물은 화합물 I라고도 함), 이의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 약학적으로 허용 가능한 염 또는 프로드러그이고,
Figure pct00013
,
여기서,
R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며; R2는 C2-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 할로겐으로 치환된 C2-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C3-C6 시클로알킬로부터 선택되며; R3은 수소, 할로겐, C1-C2 알킬, 불소로 치환된 C1-C2 알킬로부터 선택되고; R4는 수소, 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알콕시로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 화합물은 또한 하기와 같은 부가적인 기술특징 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 실시예에 따르면, R2는 C2-C3 알킬, C3-C6 시클로알킬, 불소로 치환된 C2-C3 알킬, 불소로 치환된 C3-C6 시클로알킬로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, 바람직하게는, R2는 -CH2CH3, -CH(CH3)2, 시클로프로필, -CF2CH3 및 -CH2CF3으로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, R3은 수소, 불소 및 염소로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, R4는 수소, 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알콕시로부터 선택된다.
본 발명의 일부 실시예에 따르면, R4는 수소, 불소, 염소, C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, 불소 또는 염소로 치환된 C1-C4 알킬, 불소 또는 염소로 치환된 C1-C4 알콕시로부터 선택되며; 바람직하게는, R4는 수소, 불소, 염소로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 화합물은 하기와 같은 화합물 중 하나 또는 하기와 같은 화합물 중 하나의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 약학적으로 허용 가능한 염 또는 프로드러그이다.
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 염은 황산, 인산, 질산, 브롬화수소산, 염산, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 벤젠술폰산, 벤조산, 페닐아세트산, 살리실산, 알긴산, 안트라닐산, 장뇌산, 구연산, 비닐술폰산, 개미산, 푸마르산, 푸로산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글리콜산, 이세티온산, 젖산, 말레산, 말산, 만델산, 점액산, 파모산, 판토텐산, 스테아르산, 숙신산, 술파닐산, 주석산, p-톨루엔술폰산, 말론산, 2-히드록시프로피온산, 옥살산, 히드록시아세트산, 글루쿠론산, 갈락투론산, 구연산, 라이신, 아르기닌, 아스파르트산, 신남산, p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 트리플루오로메탄술폰산으로부터 선택된 적어도 하나의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함한다. 당업자는 약학적으로 허용 가능한 염 이외에, 본 발명은 또한 화합물의 정제 또는 다른 약학적으로 허용 가능한 염의 제조에서 중간체로서 사용될 수 있거나 본 발명에 따른 화합물의 동정, 특성화 또는 정제에 사용될 수 있는 다른 염 유형을 사용할 수 있음을 이해할 수 있다.
본 발명의 제2 양태에서, 본 발명은 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 실시예에 따르면, 상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 부형제 및 전술한 화합물을 포함한다.
본 발명의 제3 양태에서, 본 발명은 EP4 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 약물의 제조에서 전술한 화합물 또는 전술한 약학적 조성물의 용도를 제공한다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 용도는 또한 하기와 같은 부가적인 기술특징 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 EP4 관련 질환은 염증성 질환, 통증, 암, 대사성 질환, 비뇨기계 질환으로부터 선택된 적어도 하나를 포함한다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 염증성 질환은 관절염, 류마티스 관절염으로부터 선택된 적어도 하나를 포함한다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 통증은 골관절염 통증, 자궁내막증으로 인한 통증을 포함한다.
본 발명의 실시예에 따르면, 화합물 또는 전술한 약학적 조성물은 방사선 요법 및/또는 항체 요법과 조합하여 투여될 수 있고, 여기서 상기 항체 요법은 CTLA4 항체 요법, PDL1 항체 요법 및 PD1 항체 요법 중 하나 또는 이들의 조합으로부터 선택된다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 암은 고형암종을 포함한다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 암은 유방암, 자궁경부암, 결장직장암, 자궁내막암, 교모세포종, 두경부암, 신장암, 간암, 폐암, 수모세포종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 피부암 및 요로암을 포함한다.
본 발명의 실시예에 따르면, 상기 대사성 질환은 당뇨병을 포함하고, 상기 비뇨기계 질환은 과민성 방광을 포함한다.
본 발명의 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 화합물 또는 약학적 조성물을 이용하여 필요한 환자에게 더 우수하고 더 효과적인 임상 치료 약물 또는 요법을 제공할 수 있다. 본 발명의 실시예에 따르면, 본 발명은 EP4 관련 질환 또는 병증을 효과적으로 치료할 수 있는 신규한 구조, 더 나은 약동학적 성질, 더 우수한 약효 및 우수한 약물성을 갖는 일련의 EP4 길항제를 제공한다.
본 발명은 또한 EP4 관련 질환의 치료 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 환자에게 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 치료 유효 용량의 약물 제제를 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 염증성 질환, 통증, 암, 대사성 질환, 비뇨기계 질환의 치료 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 환자에게 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 치료 유효 용량의 약물 제제를 투여하는 단계를 포함한다. 본 발명은 또한 상기 화합물 또는 약학적 조성물을 방사선 요법 및/또는 항체 요법과 조합하여 투여하여 질환을 치료하는 방법에 관한 것으로, 여기서 항체 요법은 CTLA4 항체 요법, PDL1 항체 요법 및 PD1 항체 요법 중 하나 또는 이들의 조합으로부터 선택된다.
용어 정의 및 설명
달리 설명되지 않는 한, 본 발명의 명세서 및 특허청구범위에 기재된 그룹 및 용어의 정의는 구현예로서의 정의, 예시적인 정의, 바람직한 정의, 표에 기재된 정의, 실시예에서의 구체적인 화합물의 정의 등을 포함하고, 이들은 임의로 서로 조합 및 결합될 수 있다. 이렇게 조합 및 결합된 그룹의 정의 및 화합물의 구조는 본 발명의 명세서에 기재된 범위 내에 속해야 한다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 과학 용어는 청구범위 주제가 속하는 기술 분야의 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 달리 설명되지 않는 한, 본 명세서 전체에 인용된 모든 특허, 특허 출원, 공개 자료는 그 전체가 인용 방식을 통해 본 명세서에 통합된다. 본 명세서에 용어에 대한 정의가 여러 개 있는 경우 이 장의 정의를 기준으로 한다.
달리 설명되지 않는 한, 질량 분석법, NMR, IR 및 UV/Vis 분광법 및 약리학적 방법과 같은 당업계 기술 범위 내의 통상적인 방법을 사용한다. 달리 구체적으로 정의되지 않는 한, 분석 화학, 유기 합성 화학 및 약물과 의약 화학 관련 설명에서 본 명세서에 사용된 용어는 당업계에 공지된 것이다. 화학 합성, 화학 분석, 약물 제조, 제제 및 전달, 및 환자에 대한 치료에서 표준 기술을 사용할 수 있다. 예를 들어, 키트의 사용에 대한 제조업체의 설명을 사용하거나 당업계에 공지된 방식 또는 본 발명의 설명에 따라 반응 및 정제를 수행할 수 있다. 일반적으로 본 명세서에서 인용 및 논의된 다양한 요약성 및 비교적 구체적인 문헌에서의 설명에 따라, 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 상기 기술 및 방법을 수행할 수 있다. 본 명세서에서, 그룹 및 이들의 치환기는 안정적인 구조 부분 및 화합물을 제공하기 위해 당업자에 의해 선택될 수 있다. 왼쪽에서 오른쪽으로 기재된 통상적인 화학식을 통해 치환기를 설명할 경우, 상기 치환기는 오른쪽에서 왼쪽으로 구조식을 기재할 경우 얻어지는 화학적으로 동등한 치환기도 포함한다. 예를 들어, CH2O는 OCH2와 동등하다.
본 발명의 명세서 및 특허청구범위에 기재된 수치 범위에 있어서, 해당 수치 범위가 "정수"로 이해될 경우, 해당 범위의 두 끝점 및 해당 범위 내의 각 정수가 기재된 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, "1 ~ 6의 정수"는 0, 1, 2, 3, 4, 5 및 6의 각 정수가 기재된 것으로 이해되어야 한다. 해당 수치 범위가 "수"로 이해될 경우, 해당 범위의 두 끝점 및 해당 범위 내의 각 정수 및 해당 범위 내의 각 소수가 기재된 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, "1 ~ 10의 수"는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10의 각 정수가 기재되었을 뿐만 아니라 그 중 각 정수와 각각 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9의 합이 기재된 것으로 이해되어야 한다.
용어 "약학적으로 허용 가능한"은 화합물, 재료, 조성물 및/또는 제형들이 신뢰되는 의학 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극성, 알레르기 반응 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하며 합리적인 이익/위험 비율에 상응한 것을 의미한다.
용어 “약학적으로 허용 가능한 염” 또는 “이의 약학적으로 허용 가능한 염”은 무기산 및 무기염기, 유기산 및 유기염기의 염을 비롯한 약학적으로 허용 가능한 무독성 산 또는 염기의 염을 의미한다.
약학적으로 허용 가능한 염 이외에, 본 발명은 다른 염도 고려한다. 이들은 화합물의 정제 또는 다른 약학적으로 허용 가능한 염의 제조에서 중간체로서 사용될 수 있거나 본 발명에 따른 화합물의 동정, 특성화 또는 정제에 사용될 수 있다.
용어 “입체 이성질체”는 공간에서 분자의 원자 배열 방식이 상이하여 발생되는 이성질체를 의미한다. 본 발명에서 사용된 입체 화학적 정의 및 관례는 대체적으로 S.P.Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company, New York; and Eliel, E.and Wilen, S., “Stereochemistry of Organic Compounds”, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994에 의해 정의된다. 본 발명에 따른 화합물은 비대칭 중심 또는 키랄 중심을 함유할 수 있으므로, 상이한 입체 이성질체 형태로 존재할 수 있다. 부분입체 이성질체, 거울상 이성질체, 회전장애 이성질체(atropisomer) 및 기하(또는 형태) 이성질체 및 이들의 혼합물(예를 들어 라세미 혼합물)을 포함하지만 이에 한정되지 않는 본 발명에 따른 화합물의 모든 입체 이성질체 형태는 모두 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 예상된다.
많은 유기 화합물은 광학 활성 형태로 존재하는데, 즉, 이들은 평면 편광의 평면을 회전시키는 능력을 갖고 있다. 광학 활성을 갖는 화합물을 설명할 때 접두사 D 및 L 또는 R 및 S는 분자의 키랄 중심(또는 다수의 키랄 중심)에 대한 분자의 절대 배열을 나타내는데 사용된다. 접두사 D 및 L 또는 (+) 및 (-)는 화합물에 의한 평면 편광의 회전을 지정하는데 사용되는 부호이고, 여기서 (-) 또는 L은 화합물이 좌선성을 나타낸다. 접두사가 (+) 또는 D인 화합물은 우선성이다. 주어진 화학 구조에 대해 이러한 입체 이성질체가 서로 거울상이라는 점을 제외하고는 이러한 입체 이성질체는 동일하다. 구체적인 입체 이성질체는 또한 거울상 이성질체로 지칭될 수 있고, 상기 이성질체의 혼합물은 일반적으로 거울상 이성질체의 혼합물로 지칭된다. 거울상 이성질체의 50:50 혼합물은 라세미 혼합물 또는 라세미체라고 하며, 상기 라세미 혼합물 또는 라세미체는 화학 반응 또는 방법에 입체선택성 또는 입체특이성이 없을 때 발생할 수 있다.
원료 및 방법의 선택에 따라, 본 발명에 따른 화합물은 가능한 이성질체 중 하나 또는 이들의 혼합물의 형태로 존재할 수 있으며, 예를 들어 순수한 광학 이성질체의 형태, 또는 이성질체 혼합물의 형태, 예컨대 라세미 및 부분입체 이성질체 혼합물의 형태로 존재할 수 있는데, 이는 비대칭 탄소 원자의 개수에 의해 결정된다. 광학 활성 (R)- 또는 (S)-이성질체는 키랄 신톤 또는 키랄 제제를 사용하여 제조하거나 통상적인 기술을 사용하여 분할할 수 있다. 해당 화합물이 하나의 이중 결합을 포함하는 경우 치환기는 E 또는 Z 배열일 수 있고; 해당 화합물이 이치환된 시클로알킬을 포함하는 경우 시클로알킬의 치환기는 시스 또는 트랜스(cis- 또는 trans-) 배열일 수 있다.
본 발명의 식에서 키랄 탄소에 대한 결합이 직선으로 도시될 때, 키랄 탄소의 (R) 및 (S) 배열 및 이에 의해 생성된 이의 거울상 이성질체적으로 순수한 화합물 및 혼합물 모두가 해당 일반식 범위 내에 포함되는 것으로 이해해야 한다. 본 명세서에서 라세미체 또는 거울상 이성질체적으로 순수한 화합물의 도시법은 Maehr, J.Chem.Ed.1985, 62:114-120에서 가져온 것이다. 달리 설명되지 않는 한 쐐기형 결합 및 점선 결합은 하나의 입체 중심의 절대 배열을 나타내는데 사용된다. 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하는 본 발명에 따른 화합물은 광학 활성 형태 또는 라세미 형태로 분리될 수 있다. 화합물의 라세미 혼합물의 분할는 당업계에 공지된 많은 방법 중 임의의 하나에 의해 수행될 수 있다. 예시적인 방법은 광학 활성 염 형성 유기산인 키랄 분할 산을 사용한 분별 재결정화를 포함한다. 분별 재결정화 방법에 사용되는 적합한 분할제는 예를 들어 타르타르산, 디아세틸타르타르산, 디벤조일타르타르산, 만델산, 말산, 젖산과 같은 광학 활성 산 또는 β-캄포설폰산의 D 및 L 형태와 같은 다양한 광학 활성 캄포설폰산이다. 분별 결정화 방법에 적합한 다른 분할제는 입체 이성질체적으로 순수한 형태의 α-메틸-벤질아민(예를 들어, S 및 R 형태 또는 부분입체 이성질체적으로 순수한 형태), 2-페닐글리시놀, 노르에페드린, 에페드린, N-메틸에페드린, 시클로헥실에틸아민, 1,2-디아미노시클로헥산 등을 포함한다. 라세미 혼합물의 분할은 광학 활성 분할제(예를 들어, 디니트로벤조일페닐글리신)로 채워진 컬럼에서 용출하여 수행될 수도 있다. 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 또는 초임계 유체 크로마토그래피(SFC)로 수행될 수 있다. 구체적인 방법의 선택, 용출 조건 및 크로마토그래피 컬럼의 선택은 화합물의 구조 및 시험 결과에 따라 당업자에 의해 선택될 수 있다. 또한, 공지된 배열의 광학적으로 순수한 출발 원료 또는 시약을 사용하여 입체 유기 합성을 통해 본 발명에 따른 화합물의 임의의 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체를 얻을 수 있다.
올레핀, C＝N 이중 결합 등의 많은 기하 이성질체가 또한 본 명세서에 따른 화합물에 존재할 수 있고, 이러한 모든 안정한 이성질체가 본 발명에서 고려된다. 본 명세서에 따른 화합물이 올레핀 이중 결합을 함유하는 경우, 달리 설명되지 않는 한, 이러한 이중 결합은 E 및 Z 기하 이성질체를 포함한다.
용어 "호변 이성질체"는 분자의 두 위치에서 특정 원자의 급속한 이동으로 인한 작용기 이성질체를 의미한다. 본 발명에 따른 화합물은 호변 이성질체를 나타낼 수 있다. 호변 이성질체 화합물은 둘 이상의 상호 전환 가능한 유형으로 존재할 수 있다. 양성자 이동 호변 이성질체는 두 원자 사이의 공유 결합된 수소 원자의 이동에서 발생된다. 호변 이성질체는 일반적으로 평형 형태로 존재하며 단일 호변 이성질체를 분리하려는 시도는 일반적으로 물리화학적 성질이 화합물의 혼합물과 일치하는 혼합물을 생성한다. 평형 위치는 분자 내의 화학적 특성에 의해 결정된다. 예를 들어, 아세트알데히드와 같은 많은 지방족 알데히드 및 케톤에서는 케톤 형태가 우세하고; 페놀에서는 에놀 형태가 우세하다. 본 발명은 화합물의 모든 호변 이성질체 형태를 포함한다.
용어 "약학적 조성물"은 하나 이상의 본 명세서에 따른 화합물, 또는 이의 생리학적/약학적으로 허용 가능한 염 또는 전구약물, 및 생리학적/약학적으로 허용 가능한 담체 및 부형제와 같은 다른 화학 성분의 혼합물을 의미한다. 약학적 조성물의 목적은 생물체에 대한 화합물의 투여를 촉진하는 것이다.
용어 "용매화물"은 비공유 분자간 힘에 의해 결합된 화학량론적 또는 비화학량론적 양의 용매를 포함하는 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 염을 의미하고, 용매가 물인 경우에는 수화물이다.
용어 "프로드러그"는 생리학적 조건 하에 또는 가용매분해에 의해 생물학적 활성을 갖는 본 발명에 따른 화합물로 전환될 수 있는 것을 의미한다. 본 발명에 따른 프로드러그는 해당 화합물의 작용기를 변형함으로써 제조되고, 이러한 변형은 통상적인 조작에 의해 또는 체내에서 제거되어 모 화합물을 얻을 수 있다. 프로드러그는 본 발명에 따른 화합물의 히드록실기 또는 아미노기를 임의의 그룹에 연결하여 형성된 화합물을 포함하고, 본 발명에 따른 화합물의 프로드러그가 포유동물 개체에게 투여될 때, 프로드러그는 절단되어 각각 유리 히드록실기, 유리 아미노기를 형성한다.
본 발명에 따른 화합물은 해당 화합물을 구성하는 하나 이상의 원자에 비천연 비율의 원자 동위원소를 함유할 수 있다. 예를 들어, 화합물은 삼중수소(3H), 요오드-125(125I) 또는 C-14(14C)와 같은 방사성 동위원소로 표지될 수 있다. 방사성이든 아니든, 본 발명에 따른 화합물의 동위원소 조성의 모든 변형은 본 발명의 범위 내에 포함된다.
용어 "보조제"는 약학적으로 허용 가능한 불활성 성분을 의미한다. 용어 "부형제"의 종류 구현예에는 결합제, 붕해제, 윤활제, 활택제, 안정제, 충전제 및 희석제 등이 포함되지만 이에 제한되지 않는다.
용어 “C1-C6 알킬”은 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 포화 1가 탄화수소기를 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 상기 알킬은 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 이소프로필, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 이소펜틸, 2-메틸부틸, 1-메틸부틸, 1-에틸프로필, 1,2-디메틸프로필, 네오펜틸, 1,1-디메틸프로필, 4-메틸펜틸, 3-메틸펜틸, 2-메틸펜틸, 1-메틸펜틸, 2-에틸부틸, 1-에틸부틸, 3,3-디메틸부틸, 2,2-디메틸부틸, 1,1-디메틸부틸, 2,3-디메틸부틸, 1,3-디메틸부틸 또는 1,2-디메틸부틸 등 또는 이들의 이성질체이다. 특히, 상기 그룹은 메틸, 에틸, n-프로필 또는 이소프로필과 같이 1, 2 또는 3개의 탄소 원자를 갖는다(“C1-C3 알킬”).
용어 “C3-C6 시클로알킬”은 융합되거나 가교된 다중 고리 시스템을 포함하는 3 ~ 6개의 탄소 원자를 갖는 포화 1가 단일 고리 또는 이중 고리 탄화수소 고리를 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실이다.
용어 “C1-C6 알콕시”는 -O-(C1-6 알킬)로 이해되어야 하고, 여기서 “C1-6 알킬”은 상기 정의를 갖는다.
용어 “할로” 또는 “할로겐”은 불소, 염소, 브롬 및 요오드이다.
“할로알킬”은 특정 개수의 탄소 원자를 갖고 하나 이상의 할로겐으로 치환된 분지쇄 및 직쇄 포화 지방족 탄화수소기(예를 들어, -CvFw, 여기서 v＝1~3, w＝1~(2v+1))를 포함하는 것을 의미한다. 할로알킬의 구현예는 트리플루오로메틸, 트리클로로메틸, 펜타플루오로에틸, 펜타클로로에틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 헵타플루오로프로필 및 헵타클로로프로필을 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
유익한 효과
본 발명의 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 화합물 및/또는 이의 조성물은 EP4 수용체의 활성을 효과적으로 길항할 수 있고, 더 나은 간 대사 안정성 및 심장 안전성 이점을 가지며, 더 나은 약동학적 성질, 더 높은 체내 노출량, 더 낮은 투여량과 더 나은 순응도를 갖는다. EP4 관련 질환의 치료를 위한 약물의 제조 측면에서 광범위한 응용 전망을 가지고 있다.
본 발명의 부가적 양태 및 이점은 부분적으로 다음 설명에서 설명될 것이며 부분적으로는 다음 설명에서 명백하거나 본 발명의 실천에 의해 이해될 것이다.
도 1은 종양에 대한 본 발명의 실시예에 따른 화합물의 억제 결과를 나타낸다.
아래 실시예와 결부하여 본 발명의 해결수단을 해석한다. 당업자는 하기 실시예가 본 발명을 설명하기 위해 사용된 것일 뿐, 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 해석되어서는 아니되는 것으로 이해해야 한다. 실시예에 구체적인 기술이나 조건이 명시되지 않은 경우 당업계의 문헌에 설명된 기술 또는 조건을 따르거나 또는 제품 설명서에 따라 수행된다. 사용하는 시약이나 기기는 제조사가 명시되어 있지 않으며, 모두 시중에서 구매할 수 있는 통상적인 제품이다.
달리 설명되지 않는 한, 본 발명에 따른 화합물은 모두 핵자기 공명(NMR) 및/또는 질량 분석(MS)에 의해 결정된다. NMR 이동의 단위는 10-6(ppm)이다. NMR 측정용 용매는 중수소화 디메틸술폭시드, 중수소화 클로로포름, 중수소화 메탄올 등이며, 내부 표준 물질은 테트라메틸실란(TMS)이다.
본 발명의 약어는 다음과 같이 정의된다.
BAST: 비스(2-메톡시에틸)아미노설퍼 트리플루오라이트
m-CPBA: m-클로로퍼옥시벤조산
L-selectride: 리튬 트리-sec-부틸 보로하이드라이드
Pd(dppf)Cl2: 1,1-비스(디페닐포스피노)페로센 팔라듐 클로라이드
DCM: 디클로로메탄
HATU: O-(7-아자벤조트리아졸)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
DIPEA: 디이소프로필에틸아민, 즉, N,N-디이소프로필에틸아민
DMF: N,N-디메틸포름아미드
N: 당량 농도로, 예를 들어 1 N의 염산은 1 mol/L의 염산 용액을 나타낸다.
THF: 테트라히드로푸란
DMA: N,N-디메틸아세트아미드
DMSO: 디메틸술폭시드
EA: 아세트산에틸
IC50: 반수 억제 농도(median inhibition concentration)로, 최대 억제 효과의 절반에 도달할 때 농도를 의미한다.
CHO: 중국 햄스터 난소 세포(Chinese hamster ovary cells)
HBSS: Hank's 밸런스드 솔트 용액(Hank's Balanced Salt Solution)
BSA: 소 혈청 알부민(Albumin from bovine serum)
HEPES: N-2-히드록시에틸피페라진-N-에탄-설폰산
IBMX: 3-이소부틸-1-메틸-7H-크산틴(3-isobutyl-1-methyl-7H-xanthine)
FLIPR: 형광 이미징 플레이트 리더(Fluorescence Imaging Plate Reader)
EC80: 80 %의 최대 효과를 일으킬 수 있는 농도(concentration for 80 % of maximal effect)
달리 명시되지 않는 한, 본 명세서에 예시된 화합물은 ChemBioDraw Ultra 13.0을 사용하여 명명 및 넘버링된다.
대조예 1: 대조 화합물의 제조
Figure pct00020
대조 화합물은 특허 출원 WO2012039972A1을 참조하여 합성하였다.
아래에서 시험예의 대조 화합물은 모두 대조예 1에 따른 화합물을 의미한다.
제조예 1: 중간체 A의 제조
메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)
Figure pct00021
중간체 A의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00022
실온에서 원료 5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(5 g, 23.8 mmol)(특허 출원 WO2011151369A1을 참조하여 합성)을 DCM(200 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(5.1 g, 28.6 mmol), HATU(10.9 g, 28.6 mmol), DIPEA(4.6 g, 35.7 mmol)를 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(200 mL)을 첨가하며, DCM(50 mLХ3)으로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(5.6 g, 수율: 63.3 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 372.5 [M+H]+
제조예 2: 산성 제조 방법 A
이 실시예는 제품 정제 실시예이고, 이 정제 과정에서, 고성능 액체크로마토그래피법을 사용하여 정제하되, 정제 조건은 하기와 같다.
Welch, Ultimate C18 칼럼, 10 μm, 21.2 mm×250 mm.
이동상 A는 1 ‰의 트리플루오로아세트산 순수 용액이고, 이동상 B는 아세토니트릴 용액이다. 구배 조건: 0 ~ 3분, 이동상 A는 90 %로 유지하고, 3 ~ 18분 동안 구배 용출하며, 이동상 A는 90 %에서 5 %로 변경하고, 18 ~ 22분 동안 이동상 A를 5 %로 유지한다.
아래 실시예에서 “산성 제조 방법 A”는 모두 상기 제조예 2의 산성 제조 방법 A를 의미한다.
실시예 1: 화합물 I-1의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-1)
Figure pct00023
화합물 I-1의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00024
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-1B)
Figure pct00025
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(370 mg, 1.0 mmol)를 DMF(10 mL)에 첨가하고, 3-에틸페놀 (I-1A)(183 mg, 1.5 mmol), KOH(168 mg, 3.0 mmol)를 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 6시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(40 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=7로 조절하고, 아세트산에틸(20 mLХ3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-1B)(220 mg, 수율: 48.1 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 458.1 [M+H]+
두 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-1)
Figure pct00026
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-1B)(220 mg, 0.48 mmol)를 THF(4 mL)에 첨가하고, 물(2 mL), 수산화리튬 일수화물(42 mg, 1.0 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-1)(80 mg, 수율: 37.5 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.12 (d, 2H), 7.07 (d, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.76 (dd, 1H), 4.90 (t, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.61 (q, 2H), 1.22 (d, 3H), 1.14 (t, 3H).
LCMS (ESI) m/z: 444.1 [M+H]+
실시예 2: 화합물 I-2의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-2)
Figure pct00027
화합물 I-2의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00028
첫 번째 단계: 1-플루오로-4-메톡시-2-비닐벤젠(화합물 I-2B)
Figure pct00029
실온에서 2-브로모-1-플루오로-4-메톡시벤젠(화합물 I-2A)(1.02 g, 5.0 mmol)을 1,4-디옥산(20 mL)에 첨가하고, 칼륨 비닐 플루오로보레이트(740 mg, 5.52 mmol), [1,1-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐 디클로라이드(430 mg, 0.50 mmol), 탄산칼륨(1.52 g, 11.0 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 가열하고, 14시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, DCM(80mLХ3)으로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(순수 석유에테르)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 조 생성물 1-플루오로-4-메톡시-2-비닐벤젠(화합물 I-2B)(680 mg, 수율: 89.9 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 2-에틸-1-플루오로-4-메톡시벤젠(화합물 I-2C)
Figure pct00030
실온에서 1-플루오로-4-메톡시-2-비닐벤젠(3.60 g, 23.7 mmol)을 메탄올(50 mL)에 첨가하고, 10 %의 Pd/C(200 mg)를 첨가하며, H2를 통과시키고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 여과하고 메탄올(30 mL×3)로 세척하며, 유기상을 합하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 2-에틸-1-플루오로-4-메톡시벤젠(화합물 I-2C)(2.90 g, 수율: 79.5 %)을 얻었다.
세 번째 단계: 3-에틸-4-플루오로페놀(화합물 I-2D)
Figure pct00031
실온에서 2-에틸-1-플루오로-4-메톡시벤젠(100 mg, 0.65 mmol)을 DCM(3 mL)에 첨가하고, -60 ℃까지 냉각시키며, 1 mol/L의 BBr3의 DCM 용액(2 mL)을 첨가하고, 실온까지 자연스럽게 승온시키며, 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 물(3 mL)을 첨가하여 ?칭하고, DCM(5 mLХ3)으로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 3-에틸-4-플루오로페놀(화합물 I-2D)(60 mg, 수율: 89.9 %)을 얻었다.
네 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-2E)
Figure pct00032
실온에서 화합물 5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(350 mg, 1.18 mmol)를 DMF(5 mL)에 첨가하고, 3-에틸-4-플루오로페놀(379 mg, 2.70 mmol), 탄산칼륨(546 mg, 3.95 mmol)을 첨가하며, 100 ℃까지 가열하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(15 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 조 생성물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-2E)(600 mg, 수율: 100 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 299.1 [M+H]+
다섯 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-2F)
Figure pct00033
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(350 mg, 1.80 mmol)를 tert-부탄올(10 mL) 및 물(2 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(246 mg, 3.52 mmol), 아염소산나트륨(316 mg, 3.52 mmol), 인산이수소나트륨(281 mg, 2.34 mmol)을 첨가하며, 실온에서 4시간 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(10 mLХ3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-2F)(350 mg, 수율: 94.9 %)을 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 315.1 [M+H]+
여섯 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-2G)
Figure pct00034
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(350 mg, 1.11 mmol)을 DMF(5 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(220 mg, 1.23 mmol), HATU(467 mg, 1.23 mmol), DIPEA(301 mg, 2.33 mmol)를 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(10 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-2G)(400 mg, 수율: 75.5 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 476.2 [M+H]+
일곱 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-2)
Figure pct00035
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(400 mg, 0.84 mmol)를 THF(5 mL) 및 물(5 mL) 및 메탄올(5 mL)에 첨가하고, 수산화리튬 일수화물(141 mg, 3.36 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(300 mg, 수율: 77.2 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ 12.8 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 7.14-7.10 (m, 3H), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.82-6.79 (m, 1H), 4.92 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.59 (q, 2H), 1.25 (d, 3H), 1.11 (t, 3H).
LCMS (ESI) m/z: 462.2 [M+H]+
실시예 3: 화합물 I-3의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-시클로프로필페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-3)
Figure pct00036
화합물 I-3의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00037
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-시클로프로필페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-3B)
Figure pct00038
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(145 mg, 0.39 mmol)를 DMA(2 mL)에 첨가하고, 3-시클로프로필페놀(80 mg, 0.59 mmol), KOH(34 mg, 0.61 mmol)를 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(100 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(10 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-시클로프로필페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-3B)(20 mg, 수율: 10.9 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 470.6 [M+H]+
두 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-시클로프로필페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-3)
Figure pct00039
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-시클로프로필페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-3B)(20 mg, 0.04 mmol)를 THF(1 mL)에 첨가하고, 물(1 mL), 수산화리튬 일수화물(2 mg, 0.048 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-시클로프로필페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-3)(1.5 mg, 수율: 7.7 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ 12.8 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.11 (t, 1H), 7.10 (d, 2H), 6.90 (d, 1H), 6.80 (t, 1H), 6.70 (dd, 1H), 4.90 (t, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.92-1.98 (m, 1H), 1.23 (d, 3H), 0.96-0.92 (m, 2H), 0.66-0.27 (m, 2H).
LCMS (ESI) m/z: 456.6 [M+H]+
실시예 4: 화합물 I-4의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-4)
Figure pct00040
화합물 I-4의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00041
첫 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-4B)
Figure pct00042
실온에서 화합물 5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(500 mg, 2.57 mmol)를 DMF(5 mL)에 첨가하고, 3-이소프로필페놀(386 mg, 2.80 mmol), KOH(216 mg, 3.85 mmol)를 첨가하며, 150 ℃까지 가열하고, 4시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(15 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 조 생성물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-4B)(750 mg, 수율: 98.9 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 295.1 [M+H]+
두 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-4C)
Figure pct00043
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(750 mg, 2.55 mmol)를 tert-부탄올(6 mL) 및 물(7 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(355 mg, 5.07 mmol), 아염소산나트륨(456 mg, 5.07 mmol), 인산이수소나트륨(669 mg, 5.57 mmol)을 첨가하며, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(30 mLХ3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-4C)(800 mg, 수율: 100 %)을 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 311.1 [M+H]+
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-4D)
Figure pct00044
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(800 mg, 2.58 mmol)을 DCM(20 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(459 mg, 2.56 mmol), HATU(1.40 g, 3.68 mmol), DIPEA(991 mg, 7.68 mmol)를 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, DCM(40 mL)을 첨가하여 희석하며, 물(20 mLХ3)로 세척하고, 분액하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-4D)(720 mg, 수율: 59.2 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 472.2 [M+H]+
네 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-4)
Figure pct00045
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-4D)(440 mg, 0.93 mmol)를 메탄올(10 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화나트륨(93 mg, 2.32 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(93 mg, 수율: 21.7 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ 12.7 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.12 (t, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.06 (d, 2H), 6.99 (s, 1H), 6.72-6.70 (m, 1H), 4.91 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.91-2.85 (m, 1H), 1.21 (d, 3H), 1.17 (d, 6H).
LCMS (ESI) m/z: 458.3 [M+H]+
실시예 5: 화합물 I-5의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-5)
Figure pct00046
화합물 I-5의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00047
첫 번째 단계: 2-(3-(1,1-디플루오로에틸)페닐)디옥사보롤란(화합물 I-5B)
Figure pct00048
실온에서 1-브로모-3-(1,1-디플루오로에틸)벤젠(800 mg, 3.62 mmol)을 1,4-디옥산(30 mL)에 첨가하고, 비스(피나콜라토)디보론(17.0 g, 156.3 mmol), 요오드화 제일구리(2.5 g, 13.0 mmol), L-프롤린(2.76 g, 10.86 mmol), 아세트산칼륨(710 mg, 7.24 mmol), [1,1-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐 디클로라이드(295 mg, 0.36 mmol)를 첨가하며, 질소 보호 하에 90 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, 디클로로메탄(80 mLХ3)으로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(순수 석유에테르)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 조 생성물 2-(3-(1,1-디플루오로에틸)페닐)디옥사보롤란(화합물 I-5B)(900 mg, 수율: 92.7 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 3-(1,1-디플루오로에틸)페놀(화합물 I-5C)
Figure pct00049
실온에서 2-(3-(1,1-디플루오로에틸)페닐)디옥사보롤란(화합물 I-5B)(900 mg, 3.36 mmol)을 THF (15 mL) 및 물(15 mL)에 첨가하고, 과붕산나트륨 일수화물(1.01 g, 10.07 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 물(200 mL)을 첨가하여 희석하고, DCM(50 mLХ3)으로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=8:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 3-(1,1-디플루오로에틸)페놀(화합물 I-5C)(280 mg, 수율: 52.7 %)을 얻었다.
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-5D)
Figure pct00050
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(650 mg, 1.75 mmol)를 DMF(12 mL)에 첨가하고, 3-(1,1-디플루오로에틸)페놀(360 mg, 2.27 mmol), 수산화칼륨(147 mg, 2.62 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(80 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-5D)(1.2 g, 조 생성물)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 494.6 [M+H]+.
네 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-5)
Figure pct00051
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-5D)(1.0 g, 2.03 mmol)를 THF(5 mL)에 첨가하고, 물(4 mL), 수산화리튬 일수화물(340 mg, 8.11 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-5)(88 mg, 수율: 7.9 %)을 제조하였다.
LCMS (ESI) m/z: 480.5 [M+H]+
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.53 (t, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.11 (t, 1H), 7.11 (d, 2H), 7.07 (dd, 1H), 4.88 (t, 1H), 3.74 (s, 3H), 1.96 (t, 3H), 1.96 (d, 3H).
실시예 6: 화합물 I-6의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-6)
Figure pct00052
화합물 I-6의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00053
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-포르밀페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-6B)
Figure pct00054
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(371 mg, 1.0 mmol)를 DMSO(5 mL)에 첨가하고, 3-히드록시벤즈알데히드(122 mg, 1.0 mmol), K2CO3(270 mg, 2.0 mmol), 요오드화 제일구리(76 mg, 0.4 mmol), 페난트롤린(72 mg, 0.4 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20ml)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(10mlХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=8:1)으로 분리 및 정제하여 표제 화합물인 무색 액체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-포르밀페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-6B)(180 mg, 수율: 39.3 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 458.1 [M+H]+
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-6C)
Figure pct00055
실온에서 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-포르밀페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-6B)(41.4 mg, 0.09 mmol)를 DMF(2 mL)에 첨가하고, 트리페닐포스포니오 디플루오로아세테이트(64 mg, 0.18 mmol)를 첨가하며, 60 ℃까지 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 테트라부틸암모늄 플루오라이드의 테트라히드로푸란 용액(0.3 mL, 0.30 mmol)을 첨가하고, 계속하여 4시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 반응액을 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=8:1)으로 분리 및 정제하여 무색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-6C)(40 mg, 수율: 91.2 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 512.1 [M+H]+
세 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-6)
Figure pct00056
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-6C)(40 mg, 0.082 mmol)를 메탄올(2 mL)에 첨가하고, 물(2 mL), 수산화리튬 일수화물(12 mg, 0.3 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-6)(4.8 mg, 수율: 12.3 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ 12.7 (s, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.43 (t, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.13 (t, 1H), 7.12 (d, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.97 (dd, 1H), 4.89 (t, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.72-3.63 (m, 2H), 1.24 (d, 3H).
LCMS (ESI) m/z: 498.5 [M+H]+
실시예 7: 화합물 I-7의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(트리플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-7)
Figure pct00057
화합물 I-7의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00058
첫 번째 단계: 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-7B)
Figure pct00059
실온에서 화합물 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(700 mg, 3.30 mmol)를 tert-부탄올(20 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(1.80 g, 25.7 mmol), 아염소산나트륨(1.48 g, 16.4 mmol), 인산이수소나트륨(3.10 g, 25.8 mmol)을 첨가하며, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(30 mLХ3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 무색 액체의 조 잔류물을 얻고, 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 무색 고체의 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-7B)(680 mg, 수율: 90.3 %)을 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 229.6 [M+H]+
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-7C)
Figure pct00060
실온에서 화합물 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-7B)(680 mg, 2.98 mmol)을 DMF(20 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(537 mg, 3.00 mmol), HATU(1.70 g, 4.47 mmol), DIPEA(1.90 g, 14.7 mmol)를 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(30 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 무색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-7C)(700 mg, 수율: 60.3 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 390.5 [M+H]+
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-7D)
Figure pct00061
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-7C)(700 mg, 1.00 mmol)를 DMF(10 mL)에 첨가하고, 3-(1,1-디플루오로에틸)페놀(284 mg, 1.00 mmol), KOH(264 mg, 4.63 mmol)를 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(20 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-7D)(100 mg, 수율: 10.8 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 512.3 [M+H]+
네 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(트리플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-7)
Figure pct00062
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-7D)(100 mg, 0.19 mmol)를 THF(5 mL)에 첨가하고, 물(4 mL), 수산화리튬 일수화물(10 mg, 0.24 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(트리플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-7)(47.2 mg, 수율: 48.5 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ 12.8 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.53 (t, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.15 (d, 2H), 7.11 (d, 1H), 4.85 (t, 1H), 3.29 (s, 3H), 1.96 (t, 3H), 1.17 (d, 3H).
LCMS (ESI) m/z: 498.3 [M+H]+
실시예 8: 화합물 I-8의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-8)
Figure pct00063
화합물 I-8의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00064
첫 번째 단계: 5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-8B)
Figure pct00065
실온에서 1,3-디메틸-5-히드록시피라졸(5.5 g, 49.1 mmol)을 DMF(10.9 g)에 첨가하고, 0 ℃까지 냉각시키며, POCl3(53.0 g, 346.4 mmol)을 첨가하고, 실온까지 자연스럽게 승온시키며, 120 ℃까지 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, EA(200 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-8B)(4.3 g, 수율: 55.4 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 159.6 [M+H]+
두 번째 단계: 5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-8C)
Figure pct00066
실온에서 화합물 5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-8B)(3.20 g, 20.2 mmol)를 tert-부탄올(50 mL) 및 물(15 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(11.3 g, 161.4 mmol), 아염소산나트륨(9.10 g, 101.1 mmol), 인산이수소나트륨(19.4 g, 161.6 mmol)을 첨가하며, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(100 mLХ3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 표제 화합물인 무색 액체의 조 잔류물을 얻고, 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 무색 고체의 5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-8C)(3.10 g, 수율: 87.9 %)을 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 175.6 [M+H]+
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-8D)
Figure pct00067
실온에서 화합물 5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-8C)(1.20 g, 6.89 mmol)을 DMF(30 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(1.23 g, 6.87 mmol), HATU(3.90 g, 10.1 mmol), DIPEA(4.50 g, 34.8 mmol)를 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(100 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 무색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-8D)(1.90 g, 수율: 82.2 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 336.6 [M+H]+
네 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-8E)
Figure pct00068
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-8D)(335 mg, 1.00 mmol)를 DMF(10 mL)에 첨가하고, 3-(1,1-디플루오로에틸)페놀(158 mg, 1.00 mmol), KOH(150 mg, 2.67 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(20 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 표제 화합물인 무색 액체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-8E)(170 mg, 수율: 37.1 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 458.5 [M+H]+
다섯 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-8)
Figure pct00069
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-8E)(500 mg, 1.09 mmol)를 THF(5 mL)에 첨가하고, 물(4 mL), 수산화리튬 일수화물(340 mg, 8.11 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-8)(53 mg, 수율: 10.9 %)을 얻었다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ 12.8 (s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.71 (d, 1H), 7.52 (t, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.14 (d, 2H), 7.01 (dd, 1H), 4.91 (t, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.96 (t, 3H), 1.22 (d, 3H).
LCMS (ESI) m/z: 444.5 [M+H]+
실시예 9: 화합물 I-9의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-에틸페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-9)
화합물 I-9의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00070
화합물 I-9의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00071
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-에틸페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-9B)
Figure pct00072
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-8D)(100 mg, 0.30 mmol)를 DMF(3 mL)에 첨가하고, 3-에틸페놀 (36 mg, 0.30 mmol), KOH(49 mg, 0.86 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(20 mLХ3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-에틸페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-9B)(60 mg, 수율: 47.7 %)를 얻었다.
LCMS (ESI) m/z: 422.6 [M+H]+
두 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-에틸페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-9)
Figure pct00073
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-에틸페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-9B)(60 mg, 0.14 mmol)를 THF(2 mL)에 첨가하고, 물(2 mL), 수산화리튬 일수화물(6 mg, 0.14 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-에틸페녹시)-1,3-디메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-9)(10 mg, 수율: 17.2 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ 12.6 (s, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.12 (d, 2H), 7.04 (d, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.71 (dd, 1H), 4.92 (t, 1H), 3.56 (s, 3H), 2.67 (q, 2H), 2.27 (s, 3H), 1.24 (d, 3H), 1.14 (t, 3H).
LCMS (ESI) m/z: 408.6 [M+H]+
실시예 10: 화합물 I-10의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-10)
Figure pct00074
화합물 I-10의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00075
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-10B)
Figure pct00076
실온에서 화합물 1-(2-플루오로-5-히드록시페닐)에탄-1-온(1.58 g, 10.8 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(30 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(2.0 g, 5.4 mmol), 수산화칼륨(450 mg, 8.1 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-10B)(346 mg, 수율: 13 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 490.2[M+H]+
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-10C)
Figure pct00077
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-10B)(346 mg, 0.71 mmol)를 (디에틸아미노)설퍼 트리플루오라이트 (10 mL)에 첨가하고, 50 ℃까지 가열시키며, 16시간 동안 교반하였다. 0 ℃까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, EA(100 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 백색의 메틸 조 생성물 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-10C)(390 mg, 수율: 100 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 512.2[M+H]+
세 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-10)
Figure pct00078
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-10C)(390 mg, 0.76 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL), 메탄올(10 mL) 및 물(3 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(64 mg, 1.52 mmol)을 첨가하며, 실온에서 36시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=7로 조절하고, 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-10)(116 mg, 수율: 31 %)을 제조하였다.
LC-MS, M/Z (ESI):498.1[M+H]+
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.10 (s, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.75 (d, 2H), 7.39 (t, 1H), 7.26 (t, 1H), 7.15 (d, 2H), 7.13 (d, 1H), 7.12 (t, 1H), 4.90 (t, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.01 (t, 3H), 1.22 (d, 3H).
실시예 11: 화합물 I-11의 제조
(S)-4-(1-(5-(4-클로로-3-에틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-11)
Figure pct00079
화합물 I-11의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00080
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-클로로-3-에틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-11B)
Figure pct00081
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(371 mg, 1.00 mmol)를 디메틸술폭시드(3 mL)에 첨가하고, 4-클로로-3-에틸페놀 (156 mg, 1.00 mmol), 수산화칼륨(112 mg, 2.00 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(10 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(10 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-클로로-3-에틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-11B)(80 mg, 수율: 16 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 492.3 (M+1).
두 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(4-클로로-3-에틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-11)
Figure pct00082
실온에서 원료 (S)-4-(1-(5-(4-클로로-3-에틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-11B)(80 mg, 0.16 mmol)을 테트라히드로푸란(1 mL)에 첨가하고, 물(1 mL), 수산화리튬 일수화물(21 mg, 0.48 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(4-클로로-3-에틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-11)(13.3 mg, 수율: 17 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.41 (d, 1H), 7.11 (t, 1H), 7.10 (d, 2H), 7.08 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.91 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.67 (q, 2H), 1.24 (d, 3H),1.11 (t, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 478.3(M+1)
실시예 12: 화합물 I-12의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-5-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-12)
Figure pct00083
화합물 I-12의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00084
첫 번째 단계: 1-플루오로-3-메톡시-5-비닐벤젠(화합물 I-12B)
Figure pct00085
실온에서 1-브로모-3-플루오로-5-메톡시벤젠(2.0 g, 9.7 mmol)을 1,4-디옥산(50 mL)에 첨가하고, 칼륨 비닐 플루오로보레이트(1.6 g, 11.7 mmol), [1,1-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐 디클로라이드(1.4 g, 1.96 mmol), 탄산칼륨(2.7 g, 19.6 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, 디클로로메탄(80 mL×3)으로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(순수 석유에테르)으로 분리 및 정제하여 무색 액체1-플루오로-3-메톡시-5-비닐벤젠(화합물 I-12B)(600 mg, 수율: 40 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 1-에틸-3-플루오로-5-메톡시벤젠(화합물 I-12C)
Figure pct00086
실온에서 1-플루오로-3-메톡시-5-비닐벤젠(300 mg, 1.97 mmol)을 메탄올(20 mL)에 첨가하고, 10 %의 Pd/C(200 mg)를 첨가하며, H2를 통과시키고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 여과하고 메탄올(30 mL×3)로 세척하며, 유기상을 합하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 1-에틸-3-플루오로-5-메톡시벤젠(화합물 I-12C)(200 mg, 수율: 66 %)을 얻었다.
세 번째 단계: 3-에틸-5-플루오로페놀(화합물 I-12D)
Figure pct00087
실온에서 1-에틸-3-플루오로-5-메톡시벤젠(200 mg, 1.3 mmol)을 디클로로메탄 (2 mL)에 첨가하고, 0 ℃까지 냉각시키며, BBr3(1 mol/L의 디클로로메탄 용액, 2 mL)을 첨가하고, 실온까지 자연스럽게 승온시키며, 실온에서 4시간 교반하였다. 물(3 mL)을 첨가하여 ?칭하고, 디클로로메탄(5 mL×3)으로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 3-에틸-5-플루오로페놀(화합물 I-12D)(180 mg, 수율: 99 %)을 얻었다.
네 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-5-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-12E)
Figure pct00088
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(250 mg, 0.67 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 첨가하고, 3-에틸-5-플루오로페놀(180 mg, 1.28 mmol), 탄산칼륨(270 mg, 1.96 mmol), 요오드화 제일구리(50 mg, 0.26 mmol), 1,10-페난트롤린(90 mg, 0.50 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-5-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-12E)(200 mg, 수율: 62 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 476.2(M+1).
다섯 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-5-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-12)
Figure pct00089
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-5-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(200 mg, 0.42 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 수산화리튬 일수화물(53 mg, 1.26 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하여 표제 화합물인 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-5-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(130 mg, 수율: 67 %)를 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.16 (d, 2H), 7.11 (t, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.69 (d, 1H), 4.92 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.58-2.54 (m, 2H), 1.25 (d, 3H), 1.13 (t, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 462.1(M+1)
실시예 13: 화합물 I-13의 제조
4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-13)
Figure pct00090
화합물 I-13의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00091
첫 번째 단계: 3-비닐페놀(화합물 I-13B)
Figure pct00092
0 ℃에서 화합물 메틸트리페닐포스포늄 브로마이드(7.30 g, 20.5 mmol)를 무수 테트라히드로푸란(40 mL)에 첨가하고, 칼륨 tert-부톡시드(2.3 g, 20.5 mmol)를 첨가하며, 저온에서 2시간 동안 교반하였다. 3-히드록시벤즈알데히드(1.0 g, 8.20 mmol) 및 테트라히드로푸란(15 mL)의 용액을 적가하고, 적가 완료 후, 실온까지 자연스럽게 승온시키고, 16시간 동안 교반하였다. 물(100 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(100 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)으로 분리 및 정제하여 황색 액체의 3-비닐페놀(화합물 I-13B)(500 mg, 수율: 49 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-비닐페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-13C)
Figure pct00093
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(600 mg, 1.62 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(18 mL)에 첨가하고, 3-비닐페놀(화합물 I-13B)(388 mg, 3.23 mmol), 수산화칼륨(181 mg, 3.23 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(60 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(60 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-비닐페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-13C)(200 mg, 수율: 27 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 456.2 (M+1).
세 번째 단계: 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-13D)
Figure pct00094
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-비닐페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-13C)(100 mg, 0.22 mmol)를 아세토니트릴(25 mL)에 첨가하고, 선택적 불소화 시약(233 mg, 0.66 mmol), 테트라키스 트리페닐포스핀 팔라듐(25 mg, 0.02 mmol), 트리에틸실란(40.0 mg, 0.33 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하실온에서 16시간 동안 교반하였다. 물(60 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(60 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=5:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-13D)(65.0 mg, 수율: 62 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 476.3(M+1)
네 번째 단계: 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-13)
Figure pct00095
실온에서 원료 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-13D)(150 mg, 0.19 mmol)를 테트라히드로푸란(24 mL)에 첨가하고, 물(12 mL) 및 메탄올(12 mL)을 첨가하며, 수산화리튬(15.0 mg, 0.36 mmol)을 첨가하고, 실온에서 4시간 교반하였다. 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-13)(50.0 mg, 수율: 32 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.45 (t, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.11 (d, 2H), 6.98 (t, 1H), 6.94 (t, 1H), 5.78 (dd, 1H),4.89 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.60 (s, 1H), 1.55 (dd, 3H), 1.24 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 462.3(M+1)
실시예 14: 화합물 I-14의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-(2,2-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-14)
Figure pct00096
화합물 I-14의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00097
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-(5-(3-카르브알데히드페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14B)
Figure pct00098
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(574 mg, 1.54 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 첨가하고, 3-히드록시벤즈알데히드(378 mg, 3.09 mmol), 요오드화 제일구리(60 mg, 0.31 mmol), 1,10-페난트롤린(114 mg, 0.62 mmol), 탄산세슘(1.50 g, 4.62 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-(5-(3-카르브알데히드페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14B)(280 mg, 수율: 40 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 458.3[M+H]+.
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(2,2-디플루오로비닐)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14C)
Figure pct00099
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-(5-(3-카르브알데히드페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14B)(280 mg, 0.61 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 첨가하고, 트리페닐포스핀(200 mg, 0.76 mmol), 디플루오로클로로아세트산나트륨(140 mg, 0.92 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 마이크로파 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(2,2-디플루오로비닐)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14C)(120 mg, 수율: 40 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 492.4[M+H]+.
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(2,2-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14D)
Figure pct00100
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(2,2-디플루오로비닐)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14C)(120 mg, 0.24 mmol)를 메탄올(20 mL)에 첨가하고, 10 %의 Pd/C(20 mg)를 첨가하며, 수소를 통과시키고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 여과하고, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(2,2-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14D)(120 mg, 수율: 99 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 494.4[M+H]+.
네 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-(2,2-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-14)
Figure pct00101
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-(2,2-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-14D)(120 mg, 0.24 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(31 mg, 0.72 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-(2,2-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-14)(90 mg, 수율: 77 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.39 (t, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.16 (d, 2H), 7.13 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.34 (dt, 1H), 4.91 (t, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.22 (q, 2H), 1.22 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 480.4[M+H]+
실시예 15: 화합물 I-15의 제조
4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-15)
Figure pct00102
화합물 I-15의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00103
첫 번째 단계: 3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페놀(화합물 I-15B)
3-(1,1,1-trifluoropropan-2-yl)phenol(화합물 I-15B)
Figure pct00104
실온에서 화합물 1-메톡시-3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)벤젠 (800 mg, 0.72 mmol)을 디클로로메탄(1 mL)에 첨가하고, -78 ℃까지 냉각시키며, 삼브롬화붕소(1.50 g, 5.88 mmol)를 첨가하며, 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 디클로로메탄(50 mL×3)으로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=5:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페놀(화합물 I-15B)(640 mg, 수율: 86 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-15C)
Figure pct00105
실온에서 화합물 5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(660 mg, 3.37 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(6 mL)에 첨가하고, 3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페놀(640 mg, 3.37 mmol), 탄산칼륨(930 mg, 6.72 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 가열하고, 8시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=5:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-15C)(1.0 g, 수율: 18 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 349.2[M+H]+.
세 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-15D)
Figure pct00106
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(800 mg, 2.30 mmol)을 tert-부탄올(8 mL) 및 물(8 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(322 mg, 4.60 mmol), 아염소산나트륨(414 mg, 4.60 mmol), 인산이수소나트륨(617 mg, 5.06 mmol)을 첨가하며, 실온8시간 동안 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하여 희석하고, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-15D)(850 mg, 수율: 100 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 365.1[M+H]+.
네 번째 단계: 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-15E)
Figure pct00107
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(850 mg, 2.34 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(10 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(418 mg, 2.34 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(1.3 g, 3.50 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(900 mg, 7.0 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(40 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(40 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-15E)(1.0 g, 수율: 81 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 526.3[M+H]+.
다섯 번째 단계: 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-15)
Figure pct00108
실온에서 원료 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-15E)(1.0 g, 1.90 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL) 및 물(2 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(200 mg, 4.76 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-15)(356 mg, 수율: 37 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 7.97 (dd, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.43 (dd, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.13 (d, 2H), 7.11 (d, 1H), 6.99 (t, 1H), 4.90 (t, 1H), 3.89-3.85 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 1.41 (d, 3H), 1.21 (t, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 512.3[M+H]+
실시예 16: 화합물 I-16의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4,5-디플루오로에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-16)
Figure pct00109
화합물 I-16의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00110
첫 번째 단계: 1-(벤질옥시)-2,3-디플루오로-5-메톡시벤젠(화합물 I-16B)
Figure pct00111
실온에서 화합물 1,2,3-트리플루오로-5-메톡시벤젠(8.5 g, 52.4 mmol)을 톨루엔(100 mL)에 첨가하고, 벤질 알코올(11.3 g, 104 mmol), 수산화칼륨(5.86 g, 104 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(500 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=7-8로 조절하고, 디클로로메탄(100 mL×3)으로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V), 20:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의1-(벤질옥시)-2,3-디플루오로-5-메톡시벤젠(화합물 I-16B)(5.2 g, 수율: 40 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 2,3-디플루오로-5-메톡시페놀(화합물 I-16C)
Figure pct00112
실온에서 화합물 1-(벤질옥시)-2,3-디플루오로-5-메톡시벤젠(5.2 g, 20.8 mmol)을 테트라히드로푸란(100 mL)에 첨가하고, 10 %의 Pd/C(520 mg)를 첨가하며, 수소를 통과시키고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=5:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 조 생성물 2,3-디플루오로-5-메톡시페놀(화합물 I-16C)(3.8 g, 수율: 100 %)를 얻었다.
세 번째 단계: 2,3-디플루오로-5-메톡시페닐 트리플루오로메탄술포네이트(화합물 I-16D)
Figure pct00113
실온에서 화합물 2,3-디플루오로-5-메톡시페놀(500 mg, 3.12 mmol)을 디클로로메탄(20 mL)에 첨가하고, 트리플루오로메탄술폰산 무수물(881 mg, 3.12 mmol), 피리딘(493 mg, 6.25 mmol)을 첨가하며, 실온에서 4시간 교반하였다. 포화 탄산수소나트륨(20 mL)을 첨가하고, 분액하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 2,3-디플루오로-5-메톡시페닐 트리플루오로메탄술포네이트(화합물 I-16D)(600 mg, 수율: 66 %)를 얻었다.
네 번째 단계: 1,2-디플루오로-5-메톡시-3-비닐벤젠(화합물 I-16E)
Figure pct00114
실온에서 화합물 2,3-디플루오로-5-메톡시페닐 트리플루오로메탄술포네이트(600 mg, 2.05 mmol)를 1,4-디옥산(50 mL)에 첨가하고, 칼륨 비닐 트리플루오로보레이트(1.25 g, 9.37 mmol), 탄산칼륨(1.30 g, 9.37 mmol), 디클로로[1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐(254 mg, 0.31 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 90 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, 디클로로메탄(50 mL×3)으로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=100:1)으로 분리 및 정제하여 표제 화합물인 담황색 고체의 1,2-디플루오로-5-메톡시-3-비닐벤젠(화합물 I-16E)(200 mg, 수율: 57 %)을 얻었다.
다섯 번째 단계: 1-에틸-2,3-디플루오로-5-메톡시벤젠(화합물 I-16F)
Figure pct00115
실온에서 화합물 1,2-디플루오로-5-메톡시-3-비닐벤젠(130 mg, 0.82 mmol)을 메탄올(15 mL)에 첨가하고, 10 %의 Pd/C(20 mg)를 첨가하며, 수소를 통과시키고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 여과하고, 농축하여 담황색 고체의1-에틸-2,3-디플루오로-5-메톡시벤젠(화합물 I-16F)(100 mg, 수율: 76 %)을 얻었다.
여섯 번째 단계: 3-에틸-4,5-디플루오로페놀(화합물 I-16G)
Figure pct00116
실온에서 화합물 1-에틸-2,3-디플루오로-5-메톡시벤젠(100 mg, 0.58 mmol)을 디클로로메탄(10 mL)에 첨가하고, 0 ℃에서 삼브롬화붕소(726 mg, 2.90 mmol)를 첨가하며, 3시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 희석하고, 디클로로메탄(30 mL×3)으로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 3-에틸-4,5-디플루오로페놀(화합물 I-16G)(60 mg, 수율: 66 %)을 얻었다.
일곱 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4,5-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-16H)
Figure pct00117
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(600 mg, 1.61 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 첨가하고, 3-에틸-4,5-디플루오로페놀(450 mg, 3.0 mmol), 수산화칼륨(210 mg, 3.9 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(60 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4,5-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-16H)(350 mg, 수율: 44 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 494.4[M+H]+.
여덟 번째 단계: (S)-4-(1-3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4,5-디플루오로에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-16)
Figure pct00118
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4,5-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(325 mg, 0.66 mmol)를 테트라히드로푸란(15 mL), 메탄올(3 mL) 및 물(3 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(32 mg, 1.32 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4,5-디플루오로에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(170 mg, 수율: 54 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.76 (d, 2H), 7.24 (t, 1H), 7.18 (d, 2H), 7.01 (t, 1H), 6.80 (d, 1H), 4.94 (t, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.62 (q, 2H), 1.27 (d, 3H), 1.11 (t, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 480.4[M+H]+
실시예 17: 화합물 I-17의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-메틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-17)
Figure pct00119
화합물 I-17의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00120
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-브로모-4-메틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17B)
Figure pct00121
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(500 mg, 1.35 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(10 mL)에 첨가하고, 3-브로모-4-메틸페놀(380 mg, 2.02 mmol), 요오드화 제일구리(100 mg, 0.52 mmol), 1,10-페난트롤린(180 mg, 1.0 mmol), 탄산세슘(1.30 g, 4.05 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-브로모-4-메틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17B)(270 mg, 수율: 38 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 522.3[M+H]+.
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-메틸-3-비닐페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17C)
Figure pct00122
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-브로모-4-메틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17B)(260 mg, 0.50 mmol)를 1,4-디옥산(5 mL)에 첨가하고, 디클로로[1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐(73 mg, 0.10 mmol), 칼륨 비닐 트리플루오로보레이트(100 mg, 0.75 mmol), 탄산칼륨(140 mg, 1.0 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-메틸-3-비닐페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17C)(160 mg, 수율: 68 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 470.3[M+H]+.
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-메틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17D)
Figure pct00123
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-메틸-3-비닐페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(160 mg, 0.34 mmol)를 메탄올(10 mL)에 첨가하고, 10 %의 Pd/C(20 mg)를 첨가하며, 수소를 통과시키고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 여과하고, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-메틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17D)(150 mg, 수율: 93 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 472.3[M+H]+.
네 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-메틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-17)
Figure pct00124
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-메틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-17D)(150 mg, 0.32 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(24 mg, 1.0 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-메틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(85 mg, 수율: 58 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.7 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.69 (d, 2H), 7.25 (t, 1H), 7.13 (d, 1H), 7.11 (d, 2H), 6.85 (d, 1H), 6.64 (dd, 1H), 4.93 (t, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.55 (q, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.24 (d, 3H), 1.07 (t, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 458.3[M+H]+
실시예 18: 화합물 I-18의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-18)
Figure pct00125
화합물 I-18의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00126
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-18B)
Figure pct00127
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(371 mg, 1.0 mmol)를 디메틸술폭시드(3 mL)에 첨가하고, 4-에틸페놀 (122 mg, 1.0 mmol), 수산화칼륨(114 mg, 2.0 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 20분 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(20 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-18B)(175 mg, 수율: 38 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 458.3[M+H]+.
두 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-18)
Figure pct00128
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-18B)(175 mg, 0.38 mmol)를 테트라히드로푸란(2 mL), 메탄올(2 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(3 mg, 0.16 mmol)을 첨가하며, 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-에틸페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-18)(40 mg, 수율: 24 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.7 (s, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.24 (d, 2H), 7.21 (t, 1H), 7.11 (d, 2H), 6.92 (d, 2H), 4.91 (t, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.62 (q, 2H), 1.24 (d, 3H), 1.19 (t, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 444.3[M+H]+
실시예 19: 화합물 I-19의 제조
(S)-4-(1-(5-(4-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-19)
Figure pct00129
화합물 I-19의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00130
첫 번째 단계: 5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-19B)
Figure pct00131
실온에서 화합물 5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(1.0 g, 5.15 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 첨가하고, 4-아세틸페놀(1.05 g, 7.73 mmol), 요오드화 제일구리(918 mg, 5.15 mmol), 1,10-페난트롤린(1.05 g, 7.73 mmol), 탄산칼륨(1.42 g, 10.3 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 조 생성물 5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-19B)(270 mg, 수율: 18 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 295.1[M+H]+.
두 번째 단계: 5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-19C)
Figure pct00132
실온에서 화합물 5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-19B)(400 mg, 1.36 mmol)를 tert-부탄올(9 mL) 및 물(3 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(476 mg, 6.80 mmol), 아염소산나트륨(369 mg, 4.08 mmol), 인산이수소나트륨(408 mg, 3.40 mmol)을 첨가하며, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하여 희석하고, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-19C)(350 mg, 수율: 100 %)을 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 311.1[M+H]+.
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-19D)
Figure pct00133
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-이소프로필페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(350 mg, 1.13 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(7 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(242 mg, 1.36 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(650 mg, 1.71 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(437 mg, 3.67 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(40 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(40 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-19D)(500 mg, 수율: 94 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 472.2[M+H]+.
네 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-19E)
Figure pct00134
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-19D)(50 mg, 0.53 mmol)를 비스(2-메톡시에틸)아미노설퍼 트리플루오라이트(5 mL)에 첨가하고, 50 ℃까지 가열시키며, 48시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 반응액을 포화 탄산수소나트륨(50 mL) 용액에 적가하며, 아세트산에틸(40 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-19E)(250 mg, 수율: 96 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 494.5[M+H]+.
다섯 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(4-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-19)
Figure pct00135
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(4-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-19E)(250 mg, 0.51 mmol)를 테트라히드로푸란(4 mL), 메탄올(2 mL) 및 물(2 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(61 mg, 2.55 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(4-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-19)(19 mg, 수율: 8 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.60 (d, 2H), 7.25 (t, 1H), 7.12 (d, 2H), 7.08 (d, 2H), 4.90 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.01 (t, 3H), 1.23 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 480.5[M+H]+
실시예 20: 화합물 I-20의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3,4,5-트리플루오로페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-20)
Figure pct00136
화합물 I-20의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00137
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3,4,5-트리플루오로페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-20B)
Figure pct00138
실온에서 화합물 메틸(S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(370 mg, 1.0 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(10 mL)에 첨가하고, 3,4,5-트리플루오로페놀(222 mg, 1.5 mmol), 수산화칼륨(168 mg, 3.0 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 6시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(60 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3,4,5-트리플루오로페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-20B)(80 mg, 수율: 17 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 484.1[M+H]+.
두 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3,4,5-트리플루오로페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-20)
Figure pct00139
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3,4,5-트리플루오로페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(80 mg, 0.16 mmol)를 테트라히드로푸란(2 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(17 mg, 0.40 mmol)를 첨가하며, 50 ℃까지 가열시키고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하며, 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3,4,5-트리플루오로페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-20)(7 mg, 수율: 9.0 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 7.78 (d, 2H), 7.24 (d, 2H), 7.22 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.96 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 1.30 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 470.1[M+H]+
실시예 21: 화합물 I-21의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-21)
Figure pct00140
화합물 I-21의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00141
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-21B)
Figure pct00142
실온에서 화합물 1-(2-플루오로-5-히드록시페닐)에탄-1-온(1.58 g, 10.8 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(30 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(2.0 g, 5.4 mmol), 수산화칼륨(450 mg, 8.1 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-21B)(346 mg, 수율: 13 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 490.2[M+H]+
두 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-21)
Figure pct00143
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-21B)(65 mg, 0.13 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL), 메탄올(5 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(20 mg, 0.47 mmol)을 첨가하며, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-21)(30 mg, 수율: 66 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.29-7.24 (m, 1H), 7.26 (t, 1H), 7.16 (d, 2H), 4.91 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.54 (d,3H), 1.24 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 476.1[M+H]+
실시예 22: 화합물 I-22의 제조
4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-22)
Figure pct00144
화합물 I-22의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00145
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-22B)
Figure pct00146
실온에서 화합물 1-(3-히드록시페닐)에탄-1-온(275 mg, 2.02 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(6 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(500 mg, 1.35 mmol), 요오드화 제일구리(100 mg, 0.52 mmol), 1,10-페난트롤린(180 mg, 1.0 mmol), 탄산세슘(1.30 g, 4.05 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-22B)(300 mg, 수율: 47 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 472.3[M+H]+
두 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-22C)
Figure pct00147
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-22B)(290 mg, 0.62 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(45 mg, 1.87 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-22C)(180 mg, 수율: 64 %)을 제조하였다.
LC-MS,M/Z (ESI): 458.3[M+H]+.
세 번째 단계: 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-22)
Figure pct00148
실온에서 화합물 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-22C)(170 mg, 0.37 mmol)을 메탄올(15 mL) 및 물(15 mL)에 첨가하고, 수소화붕소나트륨(15 mg, 0.39 mmol)을 첨가하며, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-22)(168 mg, 수율: 98 %)을 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 460.3[M+H]+.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.7 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.36 (t, 1H), 7.26 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.13 (d, 2H), 7.11 (t, 1H), 6.83 (dd, 1H), 5.26 (d, 1H), 4.92 (t, 1H), 4.71 (s, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.28 (dd, 3H), 1.22 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 478.1[M+H]+
실시예 23: 화합물 I-23의 제조
4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-23)
Figure pct00149
화합물 I-23의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00150
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-23B)
Figure pct00151
실온에서 화합물 1-(2-플루오로-5-히드록시페닐)에탄-1-온(1.58 g, 10.8 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(30 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(2.0 g, 5.4 mmol), 수산화칼륨(450 mg, 8.1 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-23B)(346 mg, 수율: 13 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 490.2[M+H]+
두 번째 단계: 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-23C)
Figure pct00152
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-(3-아세틸-4-플루오로페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-23B)(100 mg, 0.20 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL)에 첨가하고, 0 ℃까지 냉각시키며, 수소화붕소나트륨(23 mg, 0.60 mmol)을 첨가하고, 실온3시간 동안 교반하였다. 물(100 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(80 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-23C)(75 mg, 수율: 75 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 492.1[M+H]+.
세 번째 단계: 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-23)
Figure pct00153
실온에서 원료 메틸 4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-23C)(75 mg, 0.15 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL), 메탄올(5mL) 및 물(1mL)에 첨가하고, 수산화리튬 일수화물(20 mg, 0.47 mmol)을 첨가하며, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체4-((1S)-1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(1-히드록시에틸)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-23)(48 mg, 수율: 66 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.25 (t, 1H), 7.21-7.10 (m, 4H), 6.90-6.81 (m, 1H), 4.96-4.86 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.67 (s,1H), 1.28 (d, 3H), 1.24 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 478.1[M+H]+
실시예 24: 화합물 I-24의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-24)
Figure pct00154
화합물 I-24의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00155
첫 번째 단계: 4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페놀(화합물 I-24B)
Figure pct00156
실온에서 화합물 메틸 2-플루오로-5-히드록시벤조에이트(340 mg, 2.0 mmol)를 1 mol/L의 메틸마그네슘 브로마이드의 테트라히드로푸란 용액(5 mL)에 첨가하고, 16시간 동안 교반하였다. 포화 염화암모늄 용액(10 mL)을 첨가하고, 디클로로메탄(30 mL×3)으로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페놀(화합물 I-24B)(340 mg, 수율: 100 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-24C)
Figure pct00157
실온에서 화합물 4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페놀(화합물 I-24B)(340 mg, 2.0 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(9 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(495 mg, 1.34 mmol), 요오드화 제일구리(100 mg, 0.52 mmol), 1,10-페난트롤린(180 mg, 1.0 mmol), 탄산세슘(1.30 g, 4.05 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-24C)(120 mg, 수율: 32 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 506.3[M+1]+.
세 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-24)
Figure pct00158
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-24C)(120 mg, 0.24 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL), 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(20 mg, 0.47 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(4-플루오로-3-(2-히드록시프로판-2-일)페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-24)(22 mg, 수율: 19 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.33 (t, 1H), 7.26 (t, 1H), 7.17 (d, 2H), 7.14 (t, 1H), 6.85 (t, 1H), 4.92 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.72 (s, 1H), 1.44 (s, 6H), 1.25 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 492.3[M+1]+
실시예 25: 화합물 I-25의 제조
(S)-4-(1-(5-(3-(시아노메틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-25)
Figure pct00159
화합물 I-25의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00160
첫 번째 단계: (S)-4-(1-(5-(3-(시아노메틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-25)
Figure pct00161
실온에서 화합물 2-(3-히드록시페닐)아세토니트릴(72 mg, 0.40 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(2 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(100 mg, 0.27 mmol), 수산화칼륨(30 mg, 0.53 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 170 ℃까지 마이크로파 가열하고, 5분 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(5 mL)을 첨가하며, 0.5시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-(3-(시아노메틸)페녹시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(10 mg, 수율: 8 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, CDCl3) δ12.7 (s, 1H), 7.93 (d, 2H), 7.38 (t, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.16 (d, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.82 (t, 1H), 6.35 (d, 1H), 5.18 (t, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 1.41 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 455.5[M+H]+
실시예 26: 화합물 I-26의 제조
(S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-4-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-26)
Figure pct00162
화합물 I-26의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00163
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-4-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-26B)
Figure pct00164
실온에서 화합물 [1,1'-디페닐]-4-페놀(458 mg, 2.70 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(10 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(500 mg, 1.35 mmol), 수산화칼륨(227 mg, 4.05 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-4-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-26B)(500 mg, 수율: 73 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 506.4[M+H]+
두 번째 단계: (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-4-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-26)
Figure pct00165
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-4-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-26B)(450 mg, 0.89 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL), 메탄올(5 mL) 및 물(4 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(108 mg, 4.5 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-4-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-26)(70 mg, 수율: 16 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.69 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.48 (t, 2H), 7.38 (t, 1H), 7.26 (t, 1H), 7.15 (d, 2H), 7.12 (d, 2H), 4.92 (t, 1H), 3.76 (s, 3H), 1.25 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 492.4[M+H]+
실시예 27: 화합물 I-27의 제조
(S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-3-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-27)
Figure pct00166
화합물 I-27의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00167
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-3-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-27B)
Figure pct00168
실온에서 화합물 [1,1'-디페닐]-3-올(458 mg, 2.70 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(10 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(500 mg, 1.35 mmol), 수산화칼륨(227 mg, 4.05 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-3-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-27B)(450 mg, 수율: 66 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 506.4[M+H]+
두 번째 단계: (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-3-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-27)
Figure pct00169
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-4-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-27B)(400 mg, 0.79 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL), 메탄올(5 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(96 mg, 4.0 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(5-([1,1'-디페닐]-3-일옥시)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-27)(115 mg, 수율: 30 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.50-7.44 (m, 4H), 7.41 (d, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.25-6.96 (m, 4H), 4.89 (t, 1H), 3.77 (s, 3H), 1.19 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 492.4[M+H]+
실시예 28: 화합물 I-28의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-28)
Figure pct00170
화합물 I-28의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00171
첫 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-28B)
Figure pct00172
실온에서 화합물 5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(500 mg, 2.57 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 첨가하고, 3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페놀(386 mg, 2.80 mmol), 수산화칼륨(216 mg, 3.85 mmol)을 첨가하며, 150 ℃까지 가열하고, 4시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(15 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 조 생성물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-28B)(750 mg, 수율: 98 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 379.1[M+H]+.
두 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-28C)
Figure pct00173
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(화합물 I-28B)(750 mg, 2.55 mmol)를 tert-부탄올(6 mL) 및 물(7 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(355 mg, 5.07 mmol), 아염소산나트륨(456 mg, 5.07 mmol), 인산이수소나트륨(669 mg, 5.57 mmol)을 첨가하며, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하여 희석하고, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 담황색 고체의 조 생성물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-28C)(800 mg, 수율: 100 %)을 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 395.1[M+H]+.
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-28D)
Figure pct00174
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-28C)(800 mg, 2.58 mmol)을 디클로로메탄(20 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(459 mg, 2.56 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(1.40 g, 3.68 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(991 mg, 7.68 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 디클로로메탄(40 mL)을 첨가하여 희석하며, 물(20 mL×3)로 세척하고, 분액하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-28D)(720 mg, 수율: 59 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 556.1[M+H]+.
네 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-28)
Figure pct00175
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-28D)(440 mg, 0.93 mmol)를 메탄올(10 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화나트륨(93 mg, 2.32 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(펜타플루오로-λ6-설파닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-28)(93 mg, 수율: 22 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.7 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.73 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.65 (t, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.21 (d, 2H), 4.89 (t, 1H), 3.78 (s, 3H), 1.11 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 542.1[M+H]+
실시예 29: 화합물 I-29의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-((트리플루오로메틸)티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-29)
Figure pct00176
화합물 I-29의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00177
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-((트리플루오로메틸)티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-29B)
Figure pct00178
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(186 mg, 0.50 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 첨가하고, 3-((트리플루오로메틸)티오)페놀(120 mg, 0.60 mmol), 수산화칼륨(45 mg, 0.80 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 12시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(15 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-((트리플루오로메틸)티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-29B)(20 mg, 수율: 7.5 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 530.2[M+H]+.
두 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-((트리플루오로메틸)티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-29)
Figure pct00179
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-((트리플루오로메틸)티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-29B)(20 mg, 0.04 mmol)를 테트라히드로푸란(2 mL), 메탄올(2 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(3 mg, 0.16 mmol)을 첨가하며, 50 ℃까지 가열시키고, 4시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하며, 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-((트리플루오로메틸)티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-29)(14 mg, 수율: 72 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400 mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.57 (t, 2H), 7.39 (s, 1H), 7.22-6.69 (m, 4H), 4.91-4.84 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 1.21 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 516.2[M+H]+
실시예 30: 화합물 I-30의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-30)
Figure pct00180
화합물 I-30의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00181
첫 번째 단계: 3-(메틸티오)페놀(화합물 I-30B)
Figure pct00182
실온에서 화합물 (3-메톡시페닐)(메틸)설파이드(4.0 g, 26 mmol)를 30 %의 아세트산 히드로브로마이드 용액(12 mL) 및 48 %의 브롬화수소산 수용액(3 mL)에 첨가하고, N2 보호 하에 가열 및 환류하며, 6시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(100 mL)을 첨가하여 희석하며, 에틸에테르(100 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 3-(메틸티오)페놀(화합물 I-30B)(3.8 g, 수율: 100 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-30C)
Figure pct00183
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(700 mg, 1.89 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 첨가하고, 3-(메틸티오)페놀(528 mg, 3.77 mmol), 수산화칼륨(318 mg, 5.67 mmol)을 첨가하며, 150 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-30C)(800 mg, 수율: 89 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 476.5[M+H]+.
세 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-30)
Figure pct00184
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-30C)(800 mg, 1.68 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL), 메탄올(10 mL) 및 물(2 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(121 mg, 5.0 mmol)을 첨가하며, 50 ℃까지 가열시키고, 4시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하며, 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-30)(165 mg, 수율: 21 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.34 (t, 2H), 7.14 (d, 2H), 7.11 (t, 1H), 6.97 (t, 1H), 6.70 (d, 1H), 4.91 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.24 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 462.5[M+H]+
실시예 31: 화합물 I-31의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸술포닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-31)
Figure pct00185
화합물 I-31의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00186
실온에서 원료 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-30)(80 mg, 0.17 mmol)을 디클로로메탄(5 mL)에 첨가하고, m-클로로퍼옥시벤조산(83 mg, 0.48 mmol)을 첨가하며, 실온3시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸술포닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-31)(64 mg, 수율: 75 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.70 (t, 1H), 7.59 (t, 1H),7.37 (d, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.15 (d, 2H), 4.87 (t, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 1.19 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 494.1[M+H]+
실시예 32: 화합물 I-32의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸술피닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-32)
Figure pct00187
화합물 I-32의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00188
실온에서 원료 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸티오)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-30)(60 mg, 0.13 mmol)을 테트라히드로푸란(5 mL)에 첨가하고, 30 %의 과산화수소(1 mL)를 첨가하며, 60 ℃까지 가열하고, 7시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(메틸술피닐)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-32)(35 mg, 수율: 75 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.61 (d, 1H), 7.50 (t, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.13 (d, 2H), 4.87 (t, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.69 (s, 3H), 1.20 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 478.2[M+H]+
실시예 33: 화합물 I-33의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-33)
Figure pct00189
화합물 I-33의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00190
첫 번째 단계: 1-(벤질옥시)-3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤젠(화합물 I-33B)
Figure pct00191
실온에서 화합물 3-(벤질옥시)페놀(600 mg, 3.0 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(10 mL)에 첨가하고, 2,2,2-트리플루오로에탄-1-술폰산 트리플루오로에스테르(840 mg, 3.6 mmol), 탄산칼륨(1.24 g, 9.0 mmol)을 첨가하며, 60 ℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)로 분리 및 정제하여 무색 액체의 1-(벤질옥시)-3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤젠(화합물 I-33B)(380 mg, 수율: 45 %)을 얻었다.
두 번째 단계: 3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페놀(화합물 I-33C)
Figure pct00192
실온에서 화합물 1-(벤질옥시)-3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤젠(화합물 I-33B)(520 mg, 1.84 mmol)을 에탄올(10 mL)에 첨가하고, 10 %의 Pd/C(50 mg)를 첨가하며, 한 방울의 포름산을 첨가하고, 수소를 통과시키며, 12시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 표제 화합물인 백색 고체의 3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페놀(화합물 I-33C)(210 mg, 수율: 59 %)을 얻었다.
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-33D)
Figure pct00193
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(371 mg, 1.0 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 첨가하고, 3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페놀(화합물 I-33C)(210 mg, 1.1 mmol), 요오드화 제일구리(191 mg, 1.0 mmol), 탄산세슘(1.0 g, 3.1 mmol), 1,10-페난트롤린(72 mg, 0.40 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-33D)(120 mg, 수율: 8 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 528.2[M+H]+.
네 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-33)
Figure pct00194
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-33D)(120 mg, 0.23 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL), 메탄올(5 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(20 mg, 0.83 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-33)(45 mg, 수율: 72 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.38 (t, 1H), 7.16 (t, 1H), 7.14 (d, 2H), 6.93 (d, 1H), 6.76 (t, 1H), 6.65 (d, 1H), 4.92 (t, 1H), 4.78 (dd, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.25 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 514.2[M+H]+
실시예 34: 화합물 I-34의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(2,4-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-34)
Figure pct00195
화합물 I-34의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00196
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(2,4-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-34B)
Figure pct00197
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(370 mg, 1.0 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(10 mL)에 첨가하고, 2,4-디플루오로페놀(195 mg, 1.5 mmol), 수산화칼륨(168 mg, 3.0 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 가열하고, 6시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 아세트산에틸(60 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(2,4-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-34B)(160 mg, 수율: 34 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 466.1[M+H]+.
두 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(2,4-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-34)
Figure pct00198
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(2,4-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-34B)(160 mg, 0.34 mmol)를 테트라히드로푸란(4 mL) 및 물(2 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(32 mg, 0.76 mmol)을 첨가하며, 50 ℃까지 가열시키고, 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하며, 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(2,4-二플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-34)(11 mg, 수율: 7.0 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.7 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.78 (d, 2H), 7.45 (t, 1H), 7.21 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 7.04 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.88 (t, 1H), 3.76 (s, 3H), 1.26 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 452.1[M+H]+
실시예 35: 화합물 I-35의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)페닐)티오)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-35)
Figure pct00199
화합물 I-35의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00200
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)페닐)티오)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-35B)
Figure pct00201
실온에서 화합물 3-(트리플루오로메틸)티오페놀(215 mg, 1.20 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(20 mL)에 첨가하고, 수소화나트륨(80 mg, 2.00 mmol)을 첨가하며, 0.5시간 동안 교반하였다. 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(375 mg, 1.00 mmol)를 첨가하고, 120 ℃까지 가열하며, 8시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(100 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(100 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)페닐)티오)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-35B)(350 mg, 수율: 67 %)를 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 514.2 (M+1).
두 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)페닐)티오)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-35)
Figure pct00202
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)페닐)티오)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-35B)(220 mg, 0.43 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL)에 첨가하고, 물(5 mL) 및 메탄올(5 mL), 수산화리튬(30 mg, 1.25 mmol)을 첨가하며, 50 ℃까지 가열시키고, 18시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)페닐)티오)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-35)(105 mg, 수율: 49 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.68 (d, 1H), 7.79 (d, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.58 (t, 2H), 7.39 (d, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.14 (t, 1H), 5.10-5.03 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 1.38 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 500.2(M+1)
실시예 36: 화합물 I-36의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-36)
Figure pct00203
화합물 I-36의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00204
첫 번째 단계: (4-(트리플루오로메틸)벤질)아연 브로마이드(화합물 I-36B)
Figure pct00205
실온에서 아연 분말(2.60 g, 40.0 mmol)을 무수 테트라히드로푸란(15 mL)에 첨가하고, 질소 보호 하에 1,2-디브로모에탄(0.02 mL)을 첨가하며, 60 ℃까지 가열하고, 트리메틸클로로실란(0.02 mL)을 첨가하며, 계속하여 15분 동안 교반하고, 0 ℃까지 냉각시키며, 화합물 4-(트리플루오로메틸)벤질 브로마이드(4.80 g, 20.0 mmol)의 테트라히드로푸란(5 mL) 용액을 적가하고, 적가 완료 후 60 ℃까지 가열하며, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시켜 1 mol/L(20 mL)의 (4-(트리플루오로메틸)벤질)아연 브로마이드의 테트라히드로푸란 용액(화합물 I-36B)을 얻었다.
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-36C)
Figure pct00206
실온에서 화합물 (4-(트리플루오로메틸)벤질)아연 브로마이드의 테트라히드로푸란 용액(화합물 I-36B)(2.70 mL, 2.70 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(500 mg, 1.35 mmol), 4,4'-디-tert-부틸-2,2'-비피리딘(35 mg, 0.13 mmol), 염화니켈 글리콜 디메틸 에테르 착화합물(30 mg, 0.13 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 마이크로파 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하며, 아세트산에틸(100 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-36C)(180 mg, 수율: 27 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 496.3[M+1]+.
세 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-36)
Figure pct00207
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-36C)(150 mg, 0.30 mmol)를 48 %의 브롬화수소아세트산 용액(3 mL)에 첨가하고, 65 ℃까지 가열하며, 16시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-36)(90 mg, 수율: 62 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.47 (d, 1H), 7.86 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.41 (d, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.23 (t, 1H), 5.12 (t, 1H),4.37 (dd, 2H), 3.77 (s, 3H), 1.41 (s, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 482.3[M+1]+
실시예 37: 화합물 I-37의 제조
(S)-5-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)티오펜-2-카르복실산(화합물 I-37)
Figure pct00208
화합물 I-37의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00209
첫 번째 단계: (R,E)-N-(1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-37B)
Figure pct00210
실온에서 화합물 1-(5-브로모티오펜-2-일)에탄-1-온(2.05 g, 10.0 mmol)을 디클로로메탄(50 mL)에 첨가하고, (R)-tert-부틸술핀아미드(1.8 g, 15.0 mmol), 테트라에틸티타네이트(5.70 g, 25.0 mmol)를 첨가하며, 50 ℃까지 가열시키고, 20시간 동안 교반하였다. 물(80 mL)을 첨가하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 (R,E)-N-(1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-37B)(500 mg, 수율: 16 %)를 얻었다.
두 번째 단계: (R)-N-((S)-1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-37C)
Figure pct00211
실온에서 화합물 (R,E)-N-(1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-37B)(500 mg, 1.62 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL)에 첨가하고, -78 ℃까지 냉각시키며, 1mol/L의 리튬 트리-sec-부틸 보로하이드라이드의 테트라히드로푸란 용액(2.4 mL, 2.4 mmol)을 첨가하고, 실온까지 자연스럽게 승온시키며, 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 (R)-N-((S)-1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-37C)(320 mg, 수율: 64 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 310.2[M+H]+.
세 번째 단계: (S)-1-(5-브로모티오펜-2-일)에탄-1-아민 염산염(화합물 I-37D)
Figure pct00212
실온에서 원료 (R)-N-((S)-1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-37C)(310 mg, 1.0 mmol)를 메탄올(10 mL)에 첨가하고, 4mol/L의 디옥산 염산염 용액(0.5 mL, 2.0 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하고, 에틸에테르(10 mL)를 첨가하며, 여과하여 백색 고체의 (S)-1-(5-브로모티오펜-2-일)에탄-1-아민 염산염(60097D) (190 mg, 수율: 78 %)을 얻었다.
네 번째 단계: (S)-N-(1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미드(화합물 I-37E)
Figure pct00213
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(140 mg, 0.41 mmol)을 디클로로메탄(5 mL) 및 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 첨가하고, (S)-1-(5-브로모티오펜-2-일)에탄-1-아민 염산염(화합물 I-37D)(118 mg, 0.49 mmol)을 첨가하며, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (239 mg, 0.63 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(135 mg, 1.05 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=4:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 조 생성물 (S)-N-(1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미드(화합물 I-37E)(170 mg, 수율: 78 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 524.2[M+H]+.
다섯 번째 단계: 메틸 (S)-5-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-37F)
Figure pct00214
실온에서 화합물 (S)-N-(1-(5-브로모티오펜-2-일)에틸)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미드(화합물 I-37E)(170 mg, 0.32 mmol)를 메탄올(5 mL)에 첨가하고, 트리에틸아민(320 mg, 3.20 mmol), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐 디클로라이드(53 mg, 0.06 mmol)를 첨가하며, 일산화탄소를 통과시키고, 120 ℃까지 가열하며, 48시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-5-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-37F)(140 mg, 수율: 86 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 504.5[M+H]+.
여섯 번째 단계: (S)-5-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)티오펜-2-카르복실산(화합물 I-37)
Figure pct00215
실온에서 원료 메틸 (S)-5-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-37F)(140 mg, 0.28 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(20 mg, 0.47 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-5-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)티오펜-2-카르복실산(화합물 I-37)(110 mg, 수율: 81 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.7 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 7.62 (t, 1H), 7.54 (t, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.28 (t, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.75 (d, 1H), 5.51-5.04 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 1.27 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 490.5[M+H]+
실시예 38: 화합물 I-38의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2,6-디플루오로벤조산(화합물 I-38)
Figure pct00216
화합물 I-38의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00217
첫 번째 단계: tert-부틸 (S)-(1-(3,5-디플루오로페닐)에틸)카르바메이트(화합물 I-38B)
Figure pct00218
실온에서 화합물 (S)-1-(3,5-디플루오로페닐)에탄-1-아민 염산염(2.0 g, 10.3 mmol)을 디클로로메탄(50 mL)에 첨가하고, 디-tert-부틸 디카보네이트(4.5 g, 20.7 mmol), 트리에틸아민(3.1 g, 31.0 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=10:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 tert-부틸 (S)-(1-(3,5-디플루오로페닐)에틸)카르바메이트(화합물 I-38B)(2.2 g, 수율: 72 %)를 얻었다.
두 번째 단계: (S)-4-(1-(tert-부톡시카르보닐)아미노)에틸)-2,6-디플루오로벤조산(화합물 I-38C)
Figure pct00219
실온에서 화합물 tert-부틸 (S)-(1-(3,5-디플루오로페닐)에틸)카르바메이트(500 mg, 2.50 mmol)를 테트라히드로푸란(10 mL)에 첨가하고, -78 ℃까지 냉각시키며, 2.5mol/L의 부틸리튬의 THF 용액(2.0 mL, 5.0 mmol)을 첨가하고, 2시간 동안 교반하였다. 저온에서 이산화탄소를 통과시키고, 실온까지 자연스럽게 승온시키며, 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=2로 조절하고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 백색 고체의 조 생성물 (S)-4-(1-(tert-부톡시카르보닐)아미노)에틸)-2,6-디플루오로벤조산(화합물 I-38C)(550 mg, 수율: 90 %)을 얻었다.
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)-2,6-디플루오로벤조에이트(화합물 I-38D)
Figure pct00220
실온에서 원료 (S)-4-(1-(tert-부톡시카르보닐)아미노)에틸)-2,6-디플루오로벤조산(화합물 I-38C)(500 mg, 2.0 mmol)을 메탄올(100 mL)에 첨가하고, 진한 황산(20 mL)를 첨가하며, 80 ℃까지 가열하고, 6시간 동안 교반하였다. 물(100 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(100 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 백색 고체의 조 생성물 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)-2,6-디플루오로벤조에이트(화합물 I-38D)(1.2 g, 수율: 100 %)를 얻었다.
네 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2,6-디플루오로벤조에이트(화합물 I-38E)
Figure pct00221
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(100 mg, 0.30 mmol)을 디클로로메탄(8 mL) 및 N,N-디메틸포름아미드(2 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)-2,6-디플루오로벤조에이트(화합물 I-38D)(78 mg, 0.36 mmol)를 첨가하며, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(171 mg, 0.45 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(58 mg, 0.45 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(50mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2,6-디플루오로벤조에이트(화합물 I-38E)(82 mg, 수율: 52 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 534.3[M+H]+.
다섯 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2,6-디플루오로벤조산(화합물 I-38)
Figure pct00222
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2,6-디플루오로벤조에이트(82 mg, 0.15 mmol)를 테트라히드로푸란(2 mL) 및 물(4 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(18.9 mg, 0.45 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=4로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2,6-디플루오로벤조산(화합물 I-38)(16 mg, 수율: 20 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.61 (t, 1H), 7.56 (t, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (t, 1H), 7.25 (t, 1H), 6.62 (d, 2H),4.76 (t, 1H), 3.76 (s, 3H), 1.13 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 520.3[M+H]+
실시예 39: 화합물 I-39의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2-메틸벤조산(화합물 I-39)
Figure pct00223
화합물 I-39의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00224
첫 번째 단계: 메틸 4-포르밀-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39B)의 합성
Figure pct00225
4-브로모-3-메틸벤즈알데히드(화합물 I-39A)(10.0 g, 50.2 mmol) 및 트리에틸아민(15.3 g, 151 mmol)을 메탄올(200 mL)에 첨가하고, 실온 조건 하에 1,1-비스(디페닐포스피노)페로센 팔라듐 클로라이드(2.94 g, 4.02 mmol)를 첨가하였다. 다음 일산화탄소로 3회 교체하고, 그 다음 50 Psi의 압력 하에 65 ℃에서 15시간 동안 반응시켰다. 실온까지 냉각시키고, 규조토로 여과하며, 필터 케이크를 아세트산에틸로 3회 세척하고, 여과액을 농축하며 조 생성물을 얻되, 조 생성물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=100:1-5:1)으로 분리 및 정제하여 화합물 메틸 4-포르밀-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39B)(8.0 g, 수율: 89 %)를 얻었다.
두 번째 단계: 메틸 (S,E)-4-(((tert-부틸술피닐)이미노)메틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39C)의 합성
Figure pct00226
메틸 4-포르밀-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39B)(8.0 g, 44.9 mmol) 및 R-(+)-tert-부틸술핀아미드(6.53 g, 53.9 mmol) 및 탄산세슘(17.6 g, 53.9 mmol)을 디클로로메탄(200 mL)에 첨가하고, 반응액을 50 ℃에서 15시간 동안 반응시켰다. 반응액에 물(200 mL) 및 디클로로메탄(200 mL)을 첨가하고, 수상을 디클로로메탄(200 mL×3)으로 추출하였다. 추출액을 합하고 포화 식염수(100 mL)로 세척하며, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 회전 건조시켜 조 생성물을 얻되, 조 생성물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=100:1-1:1)으로 분리 및 정제하여 화합물 메틸 (S,E)-4-(((tert-부틸술피닐)이미노)메틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39C)(10.0 g, 수율: 79 %)를 얻었다.
세 번째 단계: 메틸 4-((S)-1-(((S)-tert-부틸술피닐)아미노)에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39D)의 합성
Figure pct00227
메틸 (S,E)-4-(((tert-부틸술피닐)이미노)메틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39C)(1.0 g, 3.55 mmol)를 테트라히드로푸란(20 mL)에 첨가하고, 반응액을 -10 ℃까지 냉각시킨 다음, 메틸마그네슘 클로라이드(7.1 mL, 21.3 mmol, 3 mol/L)를 천천히 적가하며, 반응액을 실온에서 15시간 동안 반응시켰다. 반응액에 물(50 mL) 및 아세트산에틸(100 mL)을 첨가하고, 수상을 아세트산에틸(100 mL×3)로 추출하였다. 추출액을 합하고 포화 식염수(100 mL)로 세척하며, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 회전 건조시켜 조 생성물을 얻되, 조 생성물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=20:1-1:1)으로 분리 및 정제하여 화합물 메틸 4-((S)-1-(((S)-tert-부틸술피닐)아미노)에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39D)(0.7 g, 수율: 66 %)를 얻었다.
네 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39E)의 합성
Figure pct00228
메틸 4-((S)-1-(((S)-tert-부틸술피닐)아미노)에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39D)(0.7 g, 2.35 mmol)를 아세트산에틸(10 mL)에 첨가하고, 실온에서 아세트산에틸/염화수소 용액(10 mL)을 첨가하며, 반응액을 실온에서 2시간 동안 반응시키고, 반응액을 회전 건조시켜 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39E)(0.4 g, 수율: 88 %)를 얻었다.
다섯 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39F)의 합성
Figure pct00229
메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39E)(0.1 g, 0.52 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.24 g, 0.62 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.20 g, 1.55 mmol), 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(0.20 g, 0.62 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 첨가하고, 실온에서 12시간 동안 반응시켰다. 반응액에 물(50 mL) 및 아세트산에틸(100 mL)을 첨가하고, 아세트산에틸(100 mL×4)로 추출하였다. 추출액을 합하고 포화 식염수(50 mL)로 세척하며, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 회전 건조시켜 조 생성물을 얻되, 조 생성물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=20:1-1:1)으로 분리 및 정제하여 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39F)(0.15 g, 수율: 59 %)를 얻었다.
여섯 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2-메틸벤조산(화합물 I-39)의 합성
Figure pct00230
메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2-메틸벤조에이트(화합물 I-39F)(0.15 g, 0.31 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL), 메탄올(5 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 실온에서 수산화리튬(0.03 g, 1.23 mmol)을 첨가하며, 반응액을 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 반응액을 회전 건조시키고, 조 생성물에 물(50 mL) 및 아세트산에틸(100 mL)을 첨가한 다음, 1 N의 염산으로 pH=7로 조절하고, 아세트산에틸(100 mLХ2)로 추출하며, 유기층을 합하고, 포화 식염수(50 mL)로 유기상을 세척하며, 황산나트륨으로 건조시키고, 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)= 1:1)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)-2-메틸벤조산(화합물 I-39)(83 mg, 수율: 57 %)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 7.6, 6.4 Hz, 2H), 6.99 - 6.94 (m, 2H), 6.89 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.80 - 6.75 (m, 1H), 4.84 - 4.79 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.53 (dd, J = 14.8, 7.4 Hz, 2H) 1.19 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.06 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 476.3 [M+H]+.
실시예 40: 화합물 I-40의 제조
4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)시클로부틸)벤조산(화합물 I-40)
Figure pct00231
화합물 I-40의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00232
첫 번째 단계: N-시클로부틸리덴-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-40B)
Figure pct00233
실온에서 화합물 시클로부타논(5.0 g, 71.4 mmol)을 디클로로메탄(100 mL)에 첨가하고, tert-부틸술핀아미드(10.3 g, 85.6 mmol), 테트라에틸티타네이트(32.6 g, 143 mmol)를 첨가하며, 40 ℃까지 가열하고, 24시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(150 mL)을 첨가하며, 아세트산에틸(100 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르: 아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 담황색 고체의N-시클로부틸리덴-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-40B)(6.5 g, 수율: 53 %)를 얻었다.
두 번째 단계: N-(1-(4-브로모페닐)시클로부틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-40C)
Figure pct00234
실온에서 화합물 1,4-디브로모벤젠(14.0 g, 59.8 mmol)을 테트라히드로푸란(150 mL)에 첨가하고, -78 ℃까지 냉각시키며, 2.5mol/L의 부틸리튬의 테트라히드로푸란 용액(24.0 mL, 60.0 mmol)을 첨가하고, 40분 동안 교반하며, 질소 보호 하 N-시클로부틸리덴-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-40B)(7.0 g, 40.4 mmol)의 테트라히드로푸란(150 mL) 용액을 적가하고, 실온까지 자연스럽게 승온시키며, 2.5시간 동안 교반하였다. 포화 염화암모늄 수용액(200 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(200 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 황색 고체의 N-(1-(4-브로모페닐)시클로부틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-40C)(1.8 g, 수율: 64 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 330.0[M+H]+.
세 번째 단계: 메틸 4-(1-((tert-부틸술피닐)아미노)시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40D)
Figure pct00235
실온에서 원료 N-(1-(4-브로모페닐)시클로부틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드(화합물 I-40C)(1.80 g, 5.47 mmol)를 메탄올(30 mL)에 첨가하고, 트리에틸아민(2.76 g, 27.4 mmol), 1,1'-비스디페닐 포스피노 페로센 팔라듐 디클로라이드(450 mg, 0.55 mmol)를 첨가하며, 일산화탄소를 통과시키고, 85 ℃까지 가열하며, 24시간 동안 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(50 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(디클로로메탄:메탄올(V/V)=10:1)로 분리 및 정제하여 황색 액체의 메틸 4-(1-((tert-부틸술피닐)아미노)시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40D)(1.30 g, 수율: 77 %)를 얻었다.
네 번째 단계: 메틸 4-(1-아미노시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40E)
Figure pct00236
실온에서 화합물 메틸 4-(1-((tert-부틸술피닐)아미노)시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40D)(600 mg, 1.94 mmol)를 디클로로메탄(10 mL)에 첨가하고, 4 mol/L의 디옥산 염산염 용액(2.0 mL, 8.0 mmol)을 첨가하며, 실온에서 4시간 동안 교반하고, 포화 탄산수소나트륨 용액(30 mL)을 첨가하며, 디클로로메탄(30 mL×3)으로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하여 무색 액체의 조 생성물 메틸 4-(1-아미노시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40E)(350 mg, 수율: 88 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 206.5[M+H]+.
다섯 번째 단계: 메틸 4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40F)
Figure pct00237
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복실산(100 mg, 0.30 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(3 mL)에 첨가하고, 메틸 4-(1-아미노시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40E)(74 mg, 0.36 mmol)를 첨가하며, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (125 mg, 0.33 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(85 mg, 0.66 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(10 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하고, 잔류물을 박막 크로마토그래피 실리카겔 플레이트(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40F)(60 mg, 수율: 39 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 524.5[M+H]+.
여섯 번째 단계: 4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)시클로부틸)벤조산(화합물 I-40)
Figure pct00238
실온에서 원료 메틸 4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)시클로부틸)벤조에이트(화합물 I-40F)(60 mg, 0.12 mmol)를 테트라히드로푸란(1 mL), 메탄올(1 mL) 및 물(1 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(20 mg, 0.47 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=2로 조절하고, 반응액을 농축하며, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페녹시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)시클로부틸)벤조산(화합물 I-40)(16 mg, 수율: 27 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.7 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.68 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.25 (d, 2H), 7.18 (t, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.33-2.28 (m, 2H), 2.16-2.13 (m, 2H), 1.70-1.65 (m, 1H), 1.59-1.54 (m, 1H).
LC-MS, M/Z (ESI): 510.5[M+H]+
실시예 41: 화합물 I-41의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((5-메틸티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-41)
Figure pct00239
화합물 I-41의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00240
첫 번째 단계: 메틸 3-((3-(디플루오로메틸)-4-포르밀-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-41B)
Figure pct00241
실온에서 화합물 5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(120 mg, 0.62 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 첨가하고, 메틸 3-히드록시-5-메틸티오펜-2-카르복실레이트(143 mg, 0.74 mmol), 탄산세슘(403 mg, 1.24 mmol), 요오드화 제일구리(24.0 mg, 0.12 mmol), 1,10-페난트롤린(45.0 mg, 0.25 mmol)을 첨가하며, 130 ℃까지 마이크로파 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(15 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 메틸 3-((3-(디플루오로메틸)-4-포르밀-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-41B)(32.0 mg, 수율: 16 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 331.4(M+1).
두 번째 단계: 3-(디플루오로메틸)-5-((2-(메톡시카르보닐)-5-메틸티오펜-3-일)옥시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-41C)
Figure pct00242
실온에서 화합물 메틸 3-((3-(디플루오로메틸)-4-포르밀-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-41B)(30.0 mg, 0.09 mmol)를 tert-부탄올(6 mL) 및 물(3 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(18.9 mg, 0.27 mmol), 아염소산나트륨(24.0 mg, 0.27 mmol), 인산이수소나트륨(27.0 mg, 2.34 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(10 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 백색 고체의 3-(디플루오로메틸)-5-((2-(메톡시카르보닐)-5-메틸티오펜-3-일)옥시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-41C)(32.0 mg, 수율: 100 %)을 제조하였다.
LC-MS,M/Z (ESI): 347.4(M+1).
세 번째 단계: 메틸 (S)-3-((3-(디플루오로메틸)-4-((1-(4-(메톡시카르보닐)페닐)에틸)카르복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-41D)
Figure pct00243
실온에서 화합물 3-(디플루오로메틸)-5-(3-에틸-4-플루오로페녹시)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복실산(24.0 mg, 0.07 mmol)을 디클로로메탄(5 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(15.0 mg, 0.08 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(40.0 mg, 0.10 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(14.0 mg, 0.10 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(10 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=3:1)으로 분리 및 정제하여 무색 액체의 메틸 (S)-3-((3-(디플루오로메틸)-4-((1-(4-(메톡시카르보닐)페닐)에틸)카르복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실레이트(화합물 I-41D)(25.0 mg, 수율: 71.0 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 508.6(M+1).
네 번째 단계: (S)-3-((4-((1-(4-카르복시페닐)에틸)카르복사미도)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실산(화합물 I-41E)
Figure pct00244
실온에서 원료 메틸 (S)-3-((3-(디플루오로메틸)-4-((1-(4-(메톡시카르보닐)페닐)에틸)카르복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실레이트(38.0 mg, 0.08 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL) 및 물(3 mL)에 첨가하고, 수산화리튬(10.0 mg, 0.22 mmol)을 첨가하며, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 1 N의 염산으로 pH=6으로 조절하고, 아세트산에틸(10 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 조 생성물 백색 고체의 (S)-3-((4-((1-(4-카르복시페닐)에틸)카르복사미도)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실산(화합물 I-41E)(33.0 mg, 수율: 92 %)을 얻었다.
LC-MS, M/Z (ESI): 480.3(M+1)
다섯 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((5-메틸티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-41)
Figure pct00245
실온에서 원료 (S)-3-((4-((1-(4-카르복시페닐)에틸)카르복사미도)-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)옥시)-5-메틸티오펜-2-카르복실산(30.0 mg, 0.06 mmol)을 N-메틸피롤리돈(6 mL)에 첨가하고, 아세트산은(10.2 mg, 0.06 mmol)을 첨가하며, 질소 보호 하에 100 ℃까지 가열하고, 0.5시간 동안 교반하였다. 반응액을 여과하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체의 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((5-메틸티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-41)(6.7 mg, 수율: 25 %)을 제조하였다.
1 H NMR (400m Hz, CDCl3) δ12.8 (s, 1H), 7.99 (d, 2H), 7.20 (t, 1H), 7.20 (d, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.20 (s, 1H), 5.22 (t, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.43 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 436.1(M+1)
실시예 42: 화합물 I-42의 제조
(S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-42)
Figure pct00246
화합물 I-42의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00247
첫 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-42B)
Figure pct00248
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-3-(디플루오로메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(중간체 A)(1.0 g, 2.69 mmol)를 디메틸술폭시드(5 mL)에 첨가하고, 5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-올(908 mg, 5.40 mmol), 탄산칼륨(1.13 g, 8.18 mmol), 요오드화 제일구리(206 mg, 1.08 mmol), 1,10-페난트롤린(388 mg, 2.16 mmol)을 첨가하며, 120 ℃까지 마이크로파 가열하고, 4시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:3)으로 분리 및 정제하여 백색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-42B)(980 mg, 수율: 72 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 504.2 (M+1).
두 번째 단계: (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-42)
Figure pct00249
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-42B)(980 mg, 1.89 mmol)를 테트라히드로푸란(5 mL)에 첨가하고, 물(3 mL), 수산화리튬(238 mg, 5.67 mmol)을 첨가하며, 실온3시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 백색 고체 (S)-4-(1-(3-(디플루오로메틸)-1-메틸-5-((3-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-42)(345 mg, 수율: 36 %)을 제조하였다.
1H NMR (400m Hz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 7.79 (d, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.25 (d, 2H), 7.23 (d, 1H), 7.09 (t, 1H), 4.99-4.92 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 1.29 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 490.2(M+1)
실시예 43: 화합물 I-43의 제조
(S)-4-(1-(1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-5-((5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-43)
Figure pct00250
화합물 I-43의 합성 경로는 다음과 같다.
Figure pct00251
첫 번째 단계: 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-43B)
Figure pct00252
실온에서 화합물 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르브알데히드(700 mg, 3.30 mmol)를 tert-부탄올(20 mL) 및 물(5 mL)에 첨가하고, 2-메틸-2-부텐(1.80 g, 25.7 mmol), 아염소산나트륨(1.48 g, 16.4 mmol), 인산이수소나트륨(3.10 g, 25.8 mmol)을 첨가하며, 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여 표제 화합물인 무색 액체의 조 잔류물을 얻어 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 무색 고체의 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-43B)(680 mg, 수율: 90 %)을 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 229.6(M+1).
두 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-43C)
Figure pct00253
실온에서 화합물 5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복실산(화합물 I-43B)(680 mg, 2.98 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(20 mL)에 첨가하고, 메틸 (S)-4-(1-아미노에틸)벤조에이트(537 mg, 3.00 mmol), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (1.70 g, 4.47 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(1.90 g, 14.7 mmol)을 첨가하며, 실온에서 16시간 동안 교반하고, 물(200 mL)을 첨가하여 희석하며, 아세트산에틸(30 mL×3)로 추출하고, 분액하며, 유기상을 합하고, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과하고, 농축하며, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 무색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-43C)(700 mg, 수율: 60 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 390.5(M+1).
세 번째 단계: 메틸 (S)-4-(1-(1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-5-((5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-43D)
Figure pct00254
실온에서 화합물 메틸 (S)-4-(1-(5-클로로-1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(500 mg, 1.3 mmol)를 디메틸술폭시드(10mL)에 첨가하고, 5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-올(216 mg, 1.3 mmol), 탄산칼륨(360 mg, 2.6 mmol), 요오드화 제일구리(100 mg, 0.5 mmol), 1,10-페난트롤린(100 mg, 0.5 mmol)을 첨가하며, 95 ℃까지 마이크로파 가열하고, 5시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)을 첨가하여 희석하고, 아세트산에틸(20 mL×3)로 추출하며, 분액하고, 유기상을 합하며, 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하며, 농축하여, 잔류물을 실리카겔 컬럼(석유에테르:아세트산에틸(V/V)=1:1)으로 분리 및 정제하여 황색 고체의 메틸 (S)-4-(1-(1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-5-((5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-43D)(200 mg, 수율: 30 %)를 얻었다.
LC-MS,M/Z (ESI): 522.1 (M+1).
네 번째 단계: (S)-4-(1-(1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-5-((5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-43)
Figure pct00255
실온에서 원료 메틸 (S)-4-(1-(1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-5-((5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조에이트(화합물 I-43D)(100 mg, 0.19 mmol)을 테트라히드로푸란(30 mL)에 첨가하고, 물(10 mL), 수산화리튬(24 mg, 0.57 mmol)을 첨가하며, 50 ℃까지 가열시키고, 2시간 동안 교반하였다. 반응액을 농축하고, 산성 제조 방법 A를 통해 황색 고체의 (S)-4-(1-(1-메틸-3-(트리플루오로메틸)-5-((5-(트리플루오로메틸)티오펜-3-일)옥시)-1H-피라졸-4-카르복사미도)에틸)벤조산(화합물 I-43)(54 mg, 수율: 56 %)을 제조하였다.
1H NMR (400mHz, DMSO-d6) δ12.8 (s, 1H), 8.64 (d, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.24 (d, 2H), 4.92 (t, 1H), 3.80 (s, 3H), 1.26 (d, 3H).
LC-MS, M/Z (ESI): 508.1(M+1)
생물학적 활성 및 관련 성질 시험예
시험예 1: EP4 길항 작용 측정 실험
EP4에 대한 대조 화합물 및 실시예 1-43에서 제조된 화합물의 길항 작용을 각각 시험하였고, 인간 EP4 수용체를 고발현하는 안정적으로 형질감염된 CHO 세포주에서 측정하였다.
세포를 트립신으로 소화시킨 후, 완충액(1ХHBSS, 0.1 % BSA, 20 mM HEPES 및 500 μM IBMX)에 재현탁하고, 웰당 8000개 세포를 15 μL의 접종 부피로 384웰 플레이트에 접종하였다. 실험 완충액을 사용하여 8Х 농도의 화합물의 작업 용액을 제조한 다음 상기 384웰 플레이트에 웰당 2.5 μL의 8Х 화합물의 작업 용액을 첨가하고, 37 ℃에서 30분 동안 배양하였다. 실험 완충액을 사용하여 8Х 농도의 작용제 PGE2 작업 용액(4 nM)을 제조하고, 상기 384웰 플레이트에 웰당 2.5 μL씩 첨가하며(PGE2 최종 농도는 0.5 nM임), 37 ℃에서 30분 동안 배양하였다. 반응 종료 후, cAMP 측정 키트(Perkin Elmer, Cat#TRF0263)의 설명서에 기재된 방법에 따라 세포 내 cAMP 함량을 정량하였다. 시험 화합물의 길항 작용(IC50 값)을 계산하였다.
EP4에 대한 시험 화합물의 길항 작용
시험 화합물 IC50(nM)
대조 화합물 44
화합물 I-1 3.7
화합물 I-2 1.9
화합물 I-3 2.8
화합물 I-5 2.2
화합물 I-6 8.2
화합물 I-9 29
화합물 I-28 5.7
화합물 I-29 14
화합물 I-30 12
화합물 I-35 6.6
화합물 I-42 8.6
실험 결과, 본 발명에 따른 화합물은 EP4에 대해 좋은 길항 작용을 나타내며, 대조 화합물과 비교하여 대부분의 화합물의 길항 작용은 대조 화합물의 5배 이상이므로, 본 발명에 따른 화합물은 보다 우수한 EP4 수용체의 길항 작용을 나타낸다.
시험예 2: EP4 수용체 칼슘 플럭스에 대한 억제 효과 측정
EP4 칼슘 플럭스에 대한 대조 화합물 및 실시예 1-43에서 제조된 화합물의 억제 효과를 각각 시험하였고, 인간 EP4 수용체를 과발현하는 293 세포에서 측정하였다.
세포를 37 ℃의 워터배스에서 신속하게 해동하고 원심분리하며 재현탁하고 계수하였다. 세포 현탁액을 20 μL/웰로 2개의 384웰 플레이트(20,000개 세포/웰)에 접종하고, 37 ℃, 5 % CO2 인큐베이터에 밤새 두었다. 2× Fluo-4 DirectTM(Invitrogen, Cat# F10471) 로딩 완충액을 다음과 같이 준비하였다. 1 mL의 FLIPR 완충액에 77 mg의 프로베네시드를 250 mM의 농도로 첨가하였다. 각 튜브의 Fluo-4 DirectTM crystals에 10 mL의 FLIPR 완충액, 및 0.2 mL의 250 mM의 프로베네시드를 첨가하였다.
인큐베이터에서 하나의 세포 플레이트를 꺼내 배지를 제거하고, 20 μL의 분석 완충액 및 2Х Fluo-4 DirectTM No-Wash 로딩 완충액을 40 μL의 최종 부피로 384웰 세포 배양 플레이트에 첨가하였다. 37 ℃, 5 % CO2 인큐베이터에서 50분 동안 배양하고, 실온에서 10분 동안 배양한 후, FLIPR을 넣었다. 10 μL의 완충액을 세포 플레이트에 옮기고, 형광 신호를 읽었다. 작용제 PGE2를 DMSO 용매에서 10 mM의 저장 용액으로 조제하고, 완충액을 사용하여 10개 농도 포인트의 6× 작업 용액을 구배 희석하였다. 10 μL의 작용제 PGE2를 세포 플레이트에 옮기고, 형광 신호를 읽었으며, EC80 값을 계산하였다.
6× EC80 농도의 작용제 PGE2를 준비하고, 시험할 화합물을 DMSO 용매에서 10 mM의 저장 용액으로 조제하며, 완충액을 사용하여 10개 농도 포인트의 6× 화합물 작업 용액을 구배 희석하였다.
다른 하나의 세포 플레이트를 꺼내 배지를 제거하고, 20 μL의 분석 완충액 및 2Х Fluo-4 DirectTM No-Wash 로딩 완충액을 첨가하였다. 37 ℃, 5 % CO2 인큐베이터에서 50분 동안 배양하고, 실온에서 10분 동안 배양한 후, FLIPR을 넣었다. 10 μL의 화합물 작업 용액, DMSO, EP4 완전 길항제를 세포 플레이트에 옮기고, 형광 신호를 읽었다. 6× EC80 농도의 작용제 PGE2를 세포 플레이트에 옮기고, 형광 신호를 읽었으며, 억제율을 계산하였다.
억제율(%)=100-(시험군-EP4 완전 길항제군)/(DMSO군- EP4 완전 길항제군)×100
화합물의 상이한 농도의 억제율에 따라, EP4 칼슘 플럭스 억제에 대한 화합물의 IC50 값을 계산하였다.
EP4 칼슘 플럭스에 대한 시험 화합물의 억제 작용
시험 화합물 IC50(nM)
대조 화합물 21
화합물 I-1 15
화합물 I-2 7.4
화합물 I-3 3
화합물 I-4 4.0
화합물 I-5 12
화합물 I-6 8.0
화합물 I-8 16.5
화합물 I-10 14
화합물 I-11 8.0
화합물 I-12 19
화합물 I-13 10
화합물 I-15 18
화합물 I-17 18
화합물 I-26 8.5
화합물 I-28 8
화합물 I-30 15
화합물 I-33 12
화합물 I-35 6
화합물 I-41 16
화합물 I-42 15
실험 결과, 본 발명에 따른 화합물은 EP4 칼슘 플럭스에 대해 좋은 억제 작용을 나타내며, 대조 화합물보다 우수한데, 특히 화합물 I-4은 대조 화합물과 비교하여 EP4 칼슘 플럭스에 대한 억제 작용이 5배 이상 향상되었으므로, 본 발명에 따른 화합물은 보다 우수한 EP4 칼슘 플럭스 억제 작용을 나타낸다.
시험예 3: 방사성 리간드 EP4 수용체 결합 측정
재조합 인간 EP4 수용체 막 단백질(인간 EP4 수용체를 과발현하는 293 세포로부터 제조)을 사용하여 방사성 리간드 EP4에 대한 대조 화합물 및 실시예 1-43에서 제조된 화합물의 결합 작용을 시험하였다. 시험할 화합물 및 PGE2를 DMSO 용매에서 10 mM의 저장 용액으로 조제한 다음, 완충액(50 mM HBSS, 0.1 % BSA, 500 mM NaCl)을 사용하여 8개 농도 포인트의 4× 작업 용액을 구배 희석하였다. 1 μL의 화합물 작업 용액, DMSO, PGE2 작업 용액을 시험 플레이트에 각각 첨가하고, 100 μL의 EP4 수용체 막 단백질(20 μg/웰) 및 100 μL의 방사성 리간드 [3H]-PGE2(PerkinElmer, Cat: NET428250UC, Lot: 2469552)(최종 농도: 1.5 nM)를 첨가하며, 밀폐된 실온에서 1시간 동안 배양하였다. 실온에서, 0.5 %의 BSA를 사용하여 50 μL/웰에 Unifilter-96 GF/C 필터 플레이트(Perkin Elmer)를 적어도 30분 동안 담그었다.
결합이 완료된 후, Perkin Elmer Filtermate Harvester를 사용하여 GF/C 플레이트를 통해 여과하고 혼합물을 반응시킨 다음, 필터 플레이트를 세척하고, 50 ℃에서 필터 플레이트를 1시간 동안 건조시켰다. 건조 후, Perkin Elmer Unifilter-96 밀봉 테이프를 사용하여 필터 플레이트 웰의 바닥을 밀봉하고, 50 μL의 MicroScint™-20 cocktail(Perkin Elmer)를 첨가하며, 필터 플레이트의 상부를 밀봉하였다. Perkin Elmer MicroBeta2 Reader를 사용하여 필터에 포획된 3H 수를 읽었다.
GraphPad Prism 5를 사용하여 데이터를 분석하고, 아래 공식에 따라 억제율을 계산하였다.
억제율(%)=100-(시험군-PGE2군)/(DMSO군-PGE2군)×100
화합물의 상이한 농도의 억제율에 따라, 방사성 리간드 EP4 결합을 통해 측정된 화합물의 IC50 및 Ki 값을 계산하였다.
방사성 리간드 EP4 결합을 통해 측정된 시험 화합물의 IC50 및 Ki 값
시험 화합물 IC50(nM) Ki(nM)
대조 화합물 30 16
화합물 I-1 16 8.9
화합물 I-2 5.5 3.0
화합물 I-3 9.0 4.9
화합물 I-4 7.4 4.0
화합물 I-5 5.3 2.9
화합물 I-6 11 5.8
화합물 I-10 4.0 2.2
화합물 I-11 6.8 3.7
화합물 I-15 12 6.6
화합물 I-23 13 7.0
화합물 I-30 12 6.6
화합물 I-33 31 17
화합물 I-35 28 15
화합물 I-42 13 7.3
실험 결과, 대조 화합물과 비교하여 본 발명에 따른 화합물이 EP4 수용체에 대한 친화도가 더 좋고, 대조 화합물보다 우수한데, 특히 화합물 I-2 및 I-5는 대조 화합물과 비교하여 EP4 수용체에 대한 친화도는 5배 이상 향상되었으므로, 본 발명에 따른 화합물은 EP4 수용체에 대해 보다 우수한 친화 작용을 나타낸다.
시험예 4: 약동학 시험
본 실험에서는 대조 화합물 및 실시예 1-43에서 제조된 화합물의 약동학적 파라미터를 각각 마우스, 래트 및 개의 개체에서 시험하였다.
마우스 약동학 시험에서 20 ~ 25 g의 수컷 ICR 마우스를 사용하였고, 밤새 금식시켰다. 3마리의 마우스를 취하여 5 mg/kg을 위내 경구 투여하였다. 투여 전 및 투여 후 15, 30분 및 1, 2, 4, 8 및 24시간에 혈액을 수집하고, 또 다른 3마리의 마우스를 취하여 1 mg/kg을 정맥 주사하고, 투여 전 및 투여 후 15, 30분 및 1, 2, 4, 8 및 24시간에 혈액을 수집하였다. 6800 g의 혈액 샘플을 2 ~ 8 ℃에서 6분 동안 원심분리하여 혈장을 수집하고, -80 ℃에서 보관하였다. 각 시간대의 혈장을 취하고, 내부 표준 물질이 함유된 3 ~ 5배 양의 아세토니트릴 용액을 첨가하여 1분 동안 볼텍싱하여 혼합하며, 13,000 rpm으로 4 ℃에서 10분 동안 원심분리한 후 상층액을 취하여 3배 양의 물을 첨가하여 혼합하고, 적당량의 혼합액을 취하여 LC-MS/MS 분석을 수행하였다. 주요 약동학적 파라미터는 WinNonlin 7.0 소프트웨어를 사용하여 비구획 모델에 의해 분석되었다.
래트 약동학 시험에서 180 ~ 240 g의 수컷 SD 래트를 사용하였고, 밤새 금식시켰다. 3마리의 래트를 취하여 5 mg/kg을 위내 경구 투여하였다. 또 다른 3마리의 래트를 취하여 1 mg/kg을 정맥 주사하였다. 나머지 조작은 마우스 약동학 시험과 동일하다.
개 약동학 시험에서 8 ~ 10 kg의 수컷 Beagle 개를 사용하였고, 밤새 금식시켰다. 3마리의 Beagle 개를 취하여 3 mg/kg을 위내 경구 투여하였다. 또 다른 3마리의 Beagle 개를 취하여 1 mg/kg을 정맥 주사하였다. 나머지 조작은 마우스 약동학 시험과 동일하다.
표 4-1. 마우스 정맥 주사의 약동학 시험 결과
Figure pct00256
표 4-2. 마우스 위내 경구 투여의 약동학 시험 결과
Figure pct00257
표 5-1. 래트 정맥 주사의 약동학 시험 결과
Figure pct00258
표 5-2. 래트 위내 경구 투여의 약동학 시험 결과
Figure pct00259
표 6-1. 개 정맥 주사의 약동학 시험 결과
Figure pct00260
표 6-2. 개 위내 경구 투여의 약동학 시험 결과
Figure pct00261
실험 결과, 대조 화합물과 비교하여 본 발명에 따른 화합물은 정맥 투여에 의한 제거율이 더 낮고, 경구 투여에 의한 노출량이 더 높은데, 특히, 화합물 I-5는 래트 및 개에 경구 투여한 후 대조 화합물의 약 2배의 노출량을 나타내었으므로, 본 발명에 따른 화합물은 보다 우수한 약동학적 성질 및 우수한 약물성을 나타낸다.
시험예 5: CT-26 뮤린 결장암 종양 모델에서 시험 화합물과 방사선 요법 병용의 항종양 작용
본 실험에서, CT-26 뮤린 결장암 종양 모델에서 대조 화합물 및 실시예 1-43에서 제조된 화합물과 방사선 요법 병용의 항종양 작용을 시험하였다.
마우스 적응성 사육 1주 후, 대수기의 CT-26 세포를 PBS에 재현탁하고, 5×105 CT-26 세포를 마우스 오른쪽 후면에 100 mL/마우스로 피하 접종하며, 종양 성장 상황을 정기적으로 관찰하였고, 종양이 평균 60 ~ 80 mm3의 부피로 성장했을 때, 종양 보유 마우스를 종양의 부피 크기에 따라 각 군에 10마리씩 무작위로 5개 군으로 나누었다. 시험은 대조 화합물(150 mg/kg)과 방사선 요법(3Gry) 병용 투여군, 화합물 I-2(150 mg/kg)와 방사선 요법(3Gry) 병용 투여군, 화합물 I-5(150 mg/kg)와 방사선 요법(3Gry) 병용 투여군, 방사선 요법(3Gry) 단독 치료군 및 용매 대조군으로 나누어 23일 동안 1일 1회 위내 경구 투여하였다. 방사선 요법은 투여 첫날 1회 사용하였다.
종양 부피와 마우스 체중을 주 2회 측정하고 실험 종료 시 종양 무게를 쟀다. 상대 종양 억제율(TGI)에 따라 치료 효과를 평가하고, 동물의 체중 및 사망 상황에 따라 안전성을 평가하였다. 종양 부피 및 상대 종양 억제율은 아래 공식에 따라 계산하였다.
종양 부피(tumor volume, TV)=1/2 Х a Х b2, 여기서 a, b는 각각 측정된 종양의 길이와 너비이다.
상대 종양 억제율 TGI(%)=(TWc-TWt/TWc)Х 100 %, 여기서 TWc는 용매 대조군의 평균 종양 무게이고, TWt는 치료군의 평균 종양 무게이다.
실험 결과는 도 1에 도시된 바와 같이, 대조 화합물, 시험 화합물 I-2, I-5 각각과 방사선 요법의 병용은 투여 시작 후 23일째에 유의한 종양 억제 작용을 보였고, 상대 종양 억제율 TGI(%)는 각각 54 %, 63 % 및 79 %로 용매 대조군에 비해 모두 통계적으로 유의한 차이(p의 평균값이 0.05 미만)를 보였고, 화합물 I-5와 방사선 요법 병용 투여군은 방사선 요법 단독 치료군에 비해 통계적으로 유의한 차이(p는 0.05 미만)를 보였으며, 대조군 화합물과 방사선 요법 병용 투여군보다 우수하다. 방사선 요법 병용 투여군에서 모두 동물 사망은 없었고, 약물 독성도 뚜렷하지 않아 치료 기간 동안 내약성이 좋았다.

Claims (21)

  1. 화합물로서,
    상기 화합물은 식 V로 표시되는 화합물 또는 식 V로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 염 또는 프로드러그이고,
    Figure pct00262
    ,
    상기 식 V에서,
    고리 A는
    Figure pct00263
    ,
    Figure pct00264
    ,
    Figure pct00265
    ,
    Figure pct00266
    로부터 선택되며;
    고리 B는
    Figure pct00267
    ,
    Figure pct00268
    로부터 선택되고;
    R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며;
    R2는 C2-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 페닐, 트리플루오로메틸, 할로겐으로 치환된 C2-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C3-C6 시클로알킬, 히드록실로 치환된 C2-C6 알킬, 시아노로 치환된 C2-C6 알킬, -SF5, -X-R2a로부터 선택되되, X는 산소, 황, -CO-, -SO2-, -SO-로부터 선택되고; R2a는 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬로부터 선택되며;
    R3은 수소, 할로겐, C1-C2 알킬, 불소로 치환된 C1-C2 알킬, 페닐로부터 선택되고;
    R4는 수소, 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알콕시로부터 선택되며;
    R5는 수소, 할로겐으로부터 선택되고;
    R6a 및 R6b 중 하나는 수소이고 다른 하나는 메틸이거나; 또는 R6a 및 R6b는 함께 시클로부틸 고리를 형성하며;
    R7은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되고;
    M은 산소, 황, 메틸렌으로부터 선택되며;
    조건은, R2가 트리플루오로메틸이고, M이 산소이며, R6a 및 R6b 중 하나가 수소이고 다른 하나가 메틸일 경우, 고리 A는
    Figure pct00269
    ,
    Figure pct00270
    로부터 선택되고; R2가 트리플루오로메틸이고, M이 산소이며, 고리 A가
    Figure pct00271
    일 경우, R6a 및 R6b는 함께 시클로부틸 고리를 형성하는 것인, 화합물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 화합물은 식 III로 표시되는 화합물 또는 식 III로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 염 또는 프로드러그이고,
    Figure pct00272
    ,
    상기 식 III에서,
    R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며;
    R7은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되고;
    M은 산소, 황, 메틸렌으로부터 선택되는, 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 화합물은 식 II로 표시되는 화합물 또는 식 II로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 염 또는 프로드러그이고,
    Figure pct00273
    ,
    상기 식 II에서,
    R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며; 바람직하게는, R1은 -CHF2이고;
    R2는 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, tert-부틸, 플루오로에틸, 플루오로프로필, 플루오로이소프로필, 플루오로부틸, 플루오로이소부틸, 히드록시에틸, 히드록시이소프로필, 시아노메틸, 시아노에틸, 페닐, -SF5, -X-R2a로부터 선택되되, X는 산소, 황, -CO-로부터 선택되며; R2a는 메틸, 에틸, 플루오로메틸, 플루오로에틸로부터 선택되고;
    R3은 수소, 불소, 염소, 메틸, 에틸, 플루오로메틸, 플루오로에틸, 페닐로부터 선택되고;
    R4는 수소, 불소, 염소, 메틸, 에틸, 플루오로메틸, 플루오로에틸로부터 선택되며;
    R5는 수소, 불소, 염소로부터 선택되고;
    M은 산소, 황, 메틸렌으로부터 선택되는, 화합물.
  4. 화합물로서,
    상기 화합물은 식 I로 표시되는 화합물 또는 식 I로 표시되는 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 염 또는 프로드러그이고,
    Figure pct00274
    ,
    상기 식 I에서,
    R1은 -CH3, -CHF2 및 -CF3으로부터 선택되며;
    R2는 C2-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, 할로겐으로 치환된 C2-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C3-C6 시클로알킬로부터 선택되고;
    R3은 수소, 할로겐, C1-C2 알킬, 불소로 치환된 C1-C2 알킬로부터 선택되며;
    R4는 수소, 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알킬, 할로겐으로 치환된 C1-C6 알콕시로부터 선택되는, 화합물.
  5. 제4항에 있어서,
    R2는 C2-C3 알킬, C3-C6 시클로알킬, 불소로 치환된 C2-C3 알킬, 불소로 치환된 C3-C6 시클로알킬로부터 선택되고, 바람직하게는, R2는 -CH2CH3, -CH(CH3)2, 시클로프로필, -CF2CH3 및 -CH2CF3으로부터 선택되며;
    R3은 수소, 불소 및 염소로부터 선택되고;
    R4는 수소, 불소, 염소, C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, 불소 또는 염소로 치환된 C1-C4 알킬, 불소 또는 염소로 치환된 C1-C4 알콕시로부터 선택되며; 바람직하게는, R4는 수소, 불소, 염소로부터 선택되는, 화합물.
  6. 화합물로서,
    상기 화합물은 하기와 같은 화합물 또는 하기와 같은 화합물의 호변 이성질체, 입체 이성질체, 수화물, 용매화물, 약학적으로 허용 가능한 염 또는 프로드러그인, 화합물:
    Figure pct00275

    Figure pct00276

    Figure pct00277

    Figure pct00278

    Figure pct00279

    Figure pct00280
  7. 약학적으로 허용 가능한 부형제 및 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  8. EP4 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 약물의 제조에서 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제7항에 따른 약학적 조성물의 용도.
  9. 염증성 질환, 통증, 암, 대사성 질환, 비뇨기계 질환으로부터 선택된 적어도 하나를 치료 또는 예방하기 위한 약물의 제조에서 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제7항에 따른 약학적 조성물의 용도.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 염증성 질환은 관절염, 류마티스 관절염으로부터 선택되는 용도.
  11. 제9항에 있어서,
    상기 통증은 골관절염 통증, 자궁내막증으로 인한 통증으로부터 선택되는 용도.
  12. 제9항에 있어서,
    상기 약물은 방사선 요법 및/또는 항체 요법과 조합하여 투여되고, 상기 항체 요법은 CTLA4 항체 요법, PDL1 항체 요법 및 PD1 항체 요법 중 하나 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 용도.
  13. 제9항에 있어서,
    상기 암은 고형암종으로부터 선택되고, 바람직하게는, 유방암, 자궁경부암, 결장직장암, 자궁내막암, 교모세포종, 두경부암, 신장암, 간암, 폐암, 수모세포종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 피부암 및 요로암으로부터 선택되는 용도.
  14. 제9항에 있어서,
    상기 대사성 질환은 당뇨병이고, 상기 비뇨기계 질환은 과민성 방광으로부터 선택되는 용도.
  15. EP4 관련 질환의 치료 또는 예방 방법으로서,
    환자에게 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제7항에 따른 약학적 조성물을 투여하는 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 질환의 치료 방법으로서,
    환자에게 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제7항에 따른 약학적 조성물을 투여하고, 상기 질환은 염증성 질환, 통증, 암, 대사성 질환, 비뇨기계 질환으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 제16항에 있어서,
    상기 염증성 질환은 관절염, 류마티스 관절염으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 제16항에 있어서,
    상기 통증은 골관절염 통증, 자궁내막증으로 인한 통증으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  19. 제16항에 있어서,
    상기 암은 고형암종으로부터 선택되고, 바람직하게는, 유방암, 자궁경부암, 결장직장암, 자궁내막암, 교모세포종, 두경부암, 신장암, 간암, 폐암, 수모세포종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 피부암 및 요로암으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  20. 제16항에 있어서,
    상기 화합물 또는 약학적 조성물을 방사선 요법 및/또는 항체 요법과 조합하여 사용하고, 상기 항체 요법은 CTLA4 항체 요법, PDL1 항체 요법 및 PD1 항체 요법 중 하나 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  21. 제16항에 있어서,
    상기 대사성 질환은 당뇨병이고, 상기 비뇨기계 질환은 과민성 방광으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
KR1020227031652A 2020-03-04 2021-03-04 신규 ep4 길항제의 합성 및 암과 염증에서의 이의 용도 KR20220143062A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010144983.1 2020-03-04
CN202010144983 2020-03-04
PCT/CN2021/079073 WO2021175283A1 (zh) 2020-03-04 2021-03-04 新型ep4拮抗剂的合成及其在癌症和炎症中的用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220143062A true KR20220143062A (ko) 2022-10-24

Family

ID=77524867

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227031652A KR20220143062A (ko) 2020-03-04 2021-03-04 신규 ep4 길항제의 합성 및 암과 염증에서의 이의 용도

Country Status (10)

Country Link
US (1) US20230125494A1 (ko)
EP (1) EP4116291A4 (ko)
JP (1) JP7446460B2 (ko)
KR (1) KR20220143062A (ko)
CN (1) CN113354585A (ko)
AU (1) AU2021229414B2 (ko)
BR (1) BR112022017382A2 (ko)
CA (1) CA3170288A1 (ko)
IL (1) IL296007A (ko)
WO (1) WO2021175283A1 (ko)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4286371A1 (en) * 2021-01-28 2023-12-06 Shenzhen Zhongge Biological Technology Co., Ltd. Pyrazolamide derivative, preparation method therefor, and application thereof
CN115745892A (zh) * 2021-09-03 2023-03-07 武汉人福创新药物研发中心有限公司 一种ep4拮抗剂化合物及其盐、多晶型和用途
CN114380682A (zh) * 2021-10-27 2022-04-22 上海毕得医药科技股份有限公司 一种2,3-二氟-4-甲氧基苯乙酸合成方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5730992B2 (ja) 2010-06-03 2015-06-10 バイエル・クロップサイエンス・アーゲーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ａｇ Ｎ−［（ヘタ）アリールエチル）］ピラゾール（チオ）カルボキサミド類及びそれらのヘテロ置換された類似体
ES2610185T3 (es) * 2010-09-21 2017-04-26 Eisai R&D Management Co., Ltd. Composición farmacéutica
JP6787792B2 (ja) * 2014-05-23 2020-11-18 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 がんの処置のための併用治療

Also Published As

Publication number Publication date
EP4116291A1 (en) 2023-01-11
IL296007A (en) 2022-10-01
AU2021229414B2 (en) 2023-07-06
US20230125494A1 (en) 2023-04-27
AU2021229414A1 (en) 2022-10-20
CN113354585A (zh) 2021-09-07
JP7446460B2 (ja) 2024-03-08
CA3170288A1 (en) 2021-09-10
EP4116291A4 (en) 2024-03-06
WO2021175283A1 (zh) 2021-09-10
JP2023516714A (ja) 2023-04-20
BR112022017382A2 (pt) 2022-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7026196B2 (ja) Ｒｅｔの阻害剤
JP7446460B2 (ja) 新規ｅｐ４拮抗薬の合成及びその癌及び炎症における使用
KR20210089195A (ko) 비페닐계 화합물, 이의 중간체, 제조 방법, 약학 조성물 및 용도
KR101396606B1 (ko) 신규 갑상선 호르몬 β 수용체 작동약
WO2018006795A1 (zh) 芳香乙炔或芳香乙烯类化合物、其中间体、制备方法、药物组合物及应用
KR102212981B1 (ko) 4-알키닐이미다졸 유도체 및 그것을 유효 성분으로서 함유하는 의약
JP2020502111A (ja) 新規フェニルプロピオン酸誘導体及びその用途
CA2953472C (en) Halogen-substituted heterocyclic compound salt
WO2022100623A1 (zh) 氮取代杂环噻吩类化合物及其用途
JP7125882B2 (ja) 含窒素ヘテロアリール化合物およびその医薬用途
WO2022194066A1 (zh) Kras g12d抑制剂及其在医药上的应用
US20220098178A1 (en) Preparation Method for Amide Compound and Application Thereof in Field of Medicine
CN108299420B (zh) 作为选择性雌激素受体下调剂的五环类化合物及其应用
TW202225152A (zh) ２－吡啶酮類衍生物及其製備方法和在醫藥上的應用
WO2023134751A1 (zh) 微管蛋白-Src双靶点抑制剂和用途
WO2023134753A1 (zh) 微管蛋白-src双靶点抑制剂
WO2007004733A1 (ja) ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体δの活性化剤
RU2804153C1 (ru) Синтез нового антагониста ep4 и применение при раке и воспалении
WO2023016530A1 (zh) 一类3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪类化合物及其制备方法
JP7389238B2 (ja) ピリミジン化合物及びその調製方法
CN114790176A (zh) 咪唑类化合物及其制备方法和用途
WO2022068815A1 (zh) Fxr小分子激动剂及其制备方法和用途
JP2022513942A (ja) エストロゲン受容体拮抗剤
KR102406246B1 (ko) Hsp90 억제제로서의 1,2,3-트리아졸 유도체 화합물 및 이의 용도
CA3223869A1 (en) Compositions for the treatment of hypertension and/or fibrosis

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination