KR20220084208A - 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 - Google Patents
클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220084208A KR20220084208A KR1020227019981A KR20227019981A KR20220084208A KR 20220084208 A KR20220084208 A KR 20220084208A KR 1020227019981 A KR1020227019981 A KR 1020227019981A KR 20227019981 A KR20227019981 A KR 20227019981A KR 20220084208 A KR20220084208 A KR 20220084208A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- cells
- cell
- antigen
- leu
- ser
- Prior art date
Links
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 243
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 claims abstract description 50
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 528
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 240
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 149
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 149
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 138
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 101
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 99
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 99
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 75
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 24
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 20
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 20
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 claims description 10
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 abstract description 162
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 abstract description 157
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 abstract description 59
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 abstract description 22
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 254
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 254
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 253
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 243
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 119
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 115
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 106
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 96
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 89
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 88
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 87
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 85
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 84
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 83
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 81
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 81
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 70
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 66
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 64
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 56
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 52
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 50
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 44
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 42
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 38
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 38
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 33
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 33
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 32
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 30
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 28
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 28
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 28
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 27
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 27
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 24
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 24
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 24
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 23
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 23
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 23
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 23
- 230000004044 response Effects 0.000 description 23
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 23
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 22
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 22
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 21
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 21
- 230000006870 function Effects 0.000 description 21
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 21
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 19
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 19
- 241000894007 species Species 0.000 description 19
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 18
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 18
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 18
- 108010087408 alpha-beta T-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 18
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 18
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 17
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 17
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 17
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 17
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 17
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 17
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 16
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 16
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 15
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 15
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 15
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 15
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 14
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 14
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 14
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 13
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 13
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 13
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 13
- VDABVNMGKGUPEY-UHFFFAOYSA-N 6-carboxyfluorescein succinimidyl ester Chemical compound C=1C(O)=CC=C2C=1OC1=CC(O)=CC=C1C2(C1=C2)OC(=O)C1=CC=C2C(=O)ON1C(=O)CCC1=O VDABVNMGKGUPEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 102000002029 Claudin Human genes 0.000 description 12
- 108050009302 Claudin Proteins 0.000 description 12
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 12
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 12
- 102100026964 M1-specific T cell receptor beta chain Human genes 0.000 description 12
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 12
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 12
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 12
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 12
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 12
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 12
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 12
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 12
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 12
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 12
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 11
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 11
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 11
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 11
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 11
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 11
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 10
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 10
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 10
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 10
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 10
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 description 10
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 10
- 238000011161 development Methods 0.000 description 10
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 10
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 10
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 10
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 10
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 9
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 9
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 9
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 9
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 9
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 9
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 102100040835 Claudin-18 Human genes 0.000 description 8
- 102100038449 Claudin-6 Human genes 0.000 description 8
- 101000749329 Homo sapiens Claudin-18 Proteins 0.000 description 8
- 101000882898 Homo sapiens Claudin-6 Proteins 0.000 description 8
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 8
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 8
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 8
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 8
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 8
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 8
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 8
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 8
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 8
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 8
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 8
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 8
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 8
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 8
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 8
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 8
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 8
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 7
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 7
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 7
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 7
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 7
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 7
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 7
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 7
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 7
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 7
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010062878 Gastrooesophageal cancer Diseases 0.000 description 6
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 6
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 6
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 6
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 6
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 102000004503 Perforin Human genes 0.000 description 6
- 108010056995 Perforin Proteins 0.000 description 6
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- -1 RNA Chemical class 0.000 description 6
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 description 6
- 102000006707 alpha-beta T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 6
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 6
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 6
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 6
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 6
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 6
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 6
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 6
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 6
- 201000006974 gastroesophageal cancer Diseases 0.000 description 6
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 6
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 6
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 6
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 6
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 6
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 6
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 6
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 6
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 5
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 5
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 5
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 5
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 5
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 5
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 5
- 208000007433 Lymphatic Metastasis Diseases 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 5
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 238000013461 design Methods 0.000 description 5
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 5
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 5
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 5
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 5
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- 102000019260 B-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010012919 B-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 4
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 4
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 4
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 4
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 4
- YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- SHOMROOOQBDGRL-JHEQGTHGSA-N Thr-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O SHOMROOOQBDGRL-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 4
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 4
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 4
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 4
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 4
- UQMPYVLTQCGRSK-IFFSRLJSSA-N Val-Thr-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O UQMPYVLTQCGRSK-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 4
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 4
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 4
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 4
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 4
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- 210000001578 tight junction Anatomy 0.000 description 4
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 4
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GJLXVWOMRRWCIB-MERZOTPQSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-acetamido-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanoyl]amino]-6-aminohexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 GJLXVWOMRRWCIB-MERZOTPQSA-N 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 3
- XSTZMVAYYCJTNR-DCAQKATOSA-N Ala-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XSTZMVAYYCJTNR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- CPTXATAOUQJQRO-GUBZILKMSA-N Arg-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CPTXATAOUQJQRO-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 3
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 108050009324 Claudin-18 Proteins 0.000 description 3
- 102000002038 Claudin-18 Human genes 0.000 description 3
- 102100026097 Claudin-9 Human genes 0.000 description 3
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 3
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N Gln-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- LCNXZQROPKFGQK-WHFBIAKZSA-N Gly-Asp-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LCNXZQROPKFGQK-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- SWQALSGKVLYKDT-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ile-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SWQALSGKVLYKDT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 3
- SWQALSGKVLYKDT-UHFFFAOYSA-N Gly-Ile-Ala Natural products NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(C)C(O)=O SWQALSGKVLYKDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AAHSHTLISQUZJL-QSFUFRPTSA-N Gly-Ile-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O AAHSHTLISQUZJL-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 3
- UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N Gly-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical class C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 3
- 102100029966 HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain Human genes 0.000 description 3
- 101000912661 Homo sapiens Claudin-9 Proteins 0.000 description 3
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 3
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical group SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 3
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 3
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 3
- TZLYIHDABYBOCJ-FXQIFTODSA-N Met-Asp-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O TZLYIHDABYBOCJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N Ser-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- HEUVHBXOVZONPU-BJDJZHNGSA-N Ser-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HEUVHBXOVZONPU-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 3
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 3
- ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N Val-Ala-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 230000003190 augmentative effect Effects 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 3
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 3
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 3
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 3
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 3
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 3
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 3
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091006112 ATPases Proteins 0.000 description 2
- 102000057290 Adenosine Triphosphatases Human genes 0.000 description 2
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 2
- WQVYAWIMAWTGMW-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N WQVYAWIMAWTGMW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- PNALXAODQKTNLV-JBDRJPRFSA-N Ala-Ile-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PNALXAODQKTNLV-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 2
- CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N Ala-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N 0.000 description 2
- YFWTXMRJJDNTLM-LSJOCFKGSA-N Arg-Ala-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N YFWTXMRJJDNTLM-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 2
- OOIMKQRCPJBGPD-XUXIUFHCSA-N Arg-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OOIMKQRCPJBGPD-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 2
- OGSQONVYSTZIJB-WDSOQIARSA-N Arg-Leu-Trp Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O OGSQONVYSTZIJB-WDSOQIARSA-N 0.000 description 2
- LTCKTLYKRMCFOC-KKUMJFAQSA-N Asp-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LTCKTLYKRMCFOC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 2
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UUERSUCTHOZPMG-SRVKXCTJSA-N Cys-Asn-Tyr Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 UUERSUCTHOZPMG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 2
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 2
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 2
- KZKBJEUWNMQTLV-XDTLVQLUSA-N Gln-Ala-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KZKBJEUWNMQTLV-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 2
- JSYULGSPLTZDHM-NRPADANISA-N Gln-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JSYULGSPLTZDHM-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- PAOHIZNRJNIXQY-XQXXSGGOSA-N Gln-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PAOHIZNRJNIXQY-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- ZZLDMBMFKZFQMU-NRPADANISA-N Gln-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZZLDMBMFKZFQMU-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N Gln-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 2
- OCJRHJZKGGSPRW-IUCAKERBSA-N Glu-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O OCJRHJZKGGSPRW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- VDCRBJACQKOSMS-JSGCOSHPSA-N Gly-Phe-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VDCRBJACQKOSMS-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 2
- BAYQNCWLXIDLHX-ONGXEEELSA-N Gly-Val-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CN BAYQNCWLXIDLHX-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- SBVMXEZQJVUARN-XPUUQOCRSA-N Gly-Val-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SBVMXEZQJVUARN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102100036242 HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 2 chain Human genes 0.000 description 2
- 108010088729 HLA-A*02:01 antigen Proteins 0.000 description 2
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 2
- 102100021519 Hemoglobin subunit beta Human genes 0.000 description 2
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 101100113665 Homo sapiens CLDN18 gene Proteins 0.000 description 2
- 101000864089 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000930802 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 1 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000968032 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 3 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 2
- 101000899111 Homo sapiens Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 2
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 2
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N L-isoleucyl-L-alanine Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical group CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical group CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 2
- QLDHBYRUNQZIJQ-DKIMLUQUSA-N Leu-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QLDHBYRUNQZIJQ-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 2
- LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- AIRUUHAOKGVJAD-JYJNAYRXSA-N Leu-Phe-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIRUUHAOKGVJAD-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- MAXILRZVORNXBE-PMVMPFDFSA-N Leu-Phe-Trp Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MAXILRZVORNXBE-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 2
- TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N Leu-Val-Cys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- VKVDRTGWLVZJOM-DCAQKATOSA-N Leu-Val-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VKVDRTGWLVZJOM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Chemical group CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- KNKHAVVBVXKOGX-JXUBOQSCSA-N Lys-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KNKHAVVBVXKOGX-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 2
- MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C MYAPQOBHGWJZOM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- LRALLISKBZNSKN-BQBZGAKWSA-N Met-Gly-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LRALLISKBZNSKN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- LPNWWHBFXPNHJG-AVGNSLFASA-N Met-Val-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN LPNWWHBFXPNHJG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 101100342977 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-1 gene Proteins 0.000 description 2
- WURZLPSMYZLEGH-UNQGMJICSA-N Phe-Met-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O WURZLPSMYZLEGH-UNQGMJICSA-N 0.000 description 2
- MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N Phe-Pro-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CC=CC=C1 MMJJFXWMCMJMQA-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N Pro-Val-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- NMZXJDSKEGFDLJ-DCAQKATOSA-N Ser-Pro-Lys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O NMZXJDSKEGFDLJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N Ser-Thr-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 2
- JRAUIKJSEAKTGD-TUBUOCAGSA-N Thr-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N JRAUIKJSEAKTGD-TUBUOCAGSA-N 0.000 description 2
- MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N Thr-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N 0.000 description 2
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 2
- WKGAAMOJPMBBMC-IXOXFDKPSA-N Thr-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O WKGAAMOJPMBBMC-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- RPTAWXPQXXCUGL-OYDLWJJNSA-N Trp-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O RPTAWXPQXXCUGL-OYDLWJJNSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SZEIFUXUTBBQFQ-STQMWFEESA-N Tyr-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O SZEIFUXUTBBQFQ-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- MDXLPNRXCFOBTL-BZSNNMDCSA-N Tyr-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O MDXLPNRXCFOBTL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- KLOZTPOXVVRVAQ-DZKIICNBSA-N Tyr-Val-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 KLOZTPOXVVRVAQ-DZKIICNBSA-N 0.000 description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- RQOMPQGUGBILAG-AVGNSLFASA-N Val-Met-Leu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RQOMPQGUGBILAG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- VHIZXDZMTDVFGX-DCAQKATOSA-N Val-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VHIZXDZMTDVFGX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine group Chemical group [C@@H]1([C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)N1C=NC=2C(N)=NC=NC12 OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010053584 alpha-Globins Proteins 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 2
- 230000006229 amino acid addition Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 2
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 2
- ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J calcium;potassium;sodium;2-hydroxypropanoic acid;sodium;tetrachloride Chemical compound [Na].[Na+].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].CC(O)C(O)=O ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 201000007455 central nervous system cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000025997 central nervous system neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003145 cytotoxic factor Substances 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004041 dendritic cell maturation Effects 0.000 description 2
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 2
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 2
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000007487 gallbladder carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 2
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010057083 glutamyl-aspartyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 2
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010051673 leucyl-glycyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 2
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Chemical group 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 210000004986 primary T-cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000011311 validation assay Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- 102000010400 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical group C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 5-Methylcytidine Natural products O=C1N=C(N)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 5-methylcytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical group NC1=NC(N)=NC(Cl)=N1 FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 7-methylguanosine Chemical compound C1=2N=C(N)NC(=O)C=2[N+](C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 0.000 description 1
- OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 9-ethyl-3-carbazolamine Chemical compound NC1=CC=C2N(CC)C3=CC=CC=C3C2=C1 OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 206010000117 Abnormal behaviour Diseases 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 208000036832 Adenocarcinoma of ovary Diseases 0.000 description 1
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 description 1
- 206010001233 Adenoma benign Diseases 0.000 description 1
- JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N Ala-Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CCCN=C(N)N JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- XQGIRPGAVLFKBJ-CIUDSAMLSA-N Ala-Asn-Lys Chemical compound N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O XQGIRPGAVLFKBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- BLGHHPHXVJWCNK-GUBZILKMSA-N Ala-Gln-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BLGHHPHXVJWCNK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FUSPCLTUKXQREV-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FUSPCLTUKXQREV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N Ala-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- AWZKCUCQJNTBAD-SRVKXCTJSA-N Ala-Leu-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN AWZKCUCQJNTBAD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OPZJWMJPCNNZNT-DCAQKATOSA-N Ala-Leu-Met Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N OPZJWMJPCNNZNT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RGQCNKIDEQJEBT-CQDKDKBSSA-N Ala-Leu-Tyr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 RGQCNKIDEQJEBT-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- QUIGLPSHIFPEOV-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O QUIGLPSHIFPEOV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VCSABYLVNWQYQE-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Lys Natural products NCCCCC(NC(=O)C(N)C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JAQNUEWEJWBVAY-WBAXXEDZSA-N Ala-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 JAQNUEWEJWBVAY-WBAXXEDZSA-N 0.000 description 1
- VJVQKGYHIZPSNS-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N VJVQKGYHIZPSNS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N Ala-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N Ala-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C)N IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- JJHBEVZAZXZREW-LFSVMHDDSA-N Ala-Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](NC(=O)[C@H](C)N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(O)=O JJHBEVZAZXZREW-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 1
- LFFOJBOTZUWINF-ZANVPECISA-N Ala-Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 LFFOJBOTZUWINF-ZANVPECISA-N 0.000 description 1
- XAXMJQUMRJAFCH-CQDKDKBSSA-N Ala-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=C(O)C=C1 XAXMJQUMRJAFCH-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- BOKLLPVAQDSLHC-FXQIFTODSA-N Ala-Val-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N BOKLLPVAQDSLHC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OMSKGWFGWCQFBD-KZVJFYERSA-N Ala-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OMSKGWFGWCQFBD-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N Arg-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- NUBPTCMEOCKWDO-DCAQKATOSA-N Arg-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N NUBPTCMEOCKWDO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ITVINTQUZMQWJR-QXEWZRGKSA-N Arg-Asn-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ITVINTQUZMQWJR-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- SQKPKIJVWHAWNF-DCAQKATOSA-N Arg-Asp-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SQKPKIJVWHAWNF-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BEXGZLUHRXTZCC-CIUDSAMLSA-N Arg-Gln-Ser Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N)CN=C(N)N BEXGZLUHRXTZCC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- UFBURHXMKFQVLM-CIUDSAMLSA-N Arg-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UFBURHXMKFQVLM-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IIAXFBUTKIDDIP-ULQDDVLXSA-N Arg-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O IIAXFBUTKIDDIP-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- SSZGOKWBHLOCHK-DCAQKATOSA-N Arg-Lys-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N SSZGOKWBHLOCHK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AMIQZQAAYGYKOP-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AMIQZQAAYGYKOP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- ORXCYAFUCSTQGY-FXQIFTODSA-N Asn-Ala-Met Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N ORXCYAFUCSTQGY-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- IARGXWMWRFOQPG-GCJQMDKQSA-N Asn-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IARGXWMWRFOQPG-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- AYZAWXAPBAYCHO-CIUDSAMLSA-N Asn-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N AYZAWXAPBAYCHO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SEKBHZJLARBNPB-GHCJXIJMSA-N Asn-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SEKBHZJLARBNPB-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- GLWFAWNYGWBMOC-SRVKXCTJSA-N Asn-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O GLWFAWNYGWBMOC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ALHMNHZJBYBYHS-DCAQKATOSA-N Asn-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ALHMNHZJBYBYHS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LZLCLRQMUQWUHJ-GUBZILKMSA-N Asn-Lys-Gln Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LZLCLRQMUQWUHJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ZYPWIUFLYMQZBS-SRVKXCTJSA-N Asn-Lys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N ZYPWIUFLYMQZBS-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AEZCCDMZZJOGII-DCAQKATOSA-N Asn-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AEZCCDMZZJOGII-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VITDJIPIJZAVGC-VEVYYDQMSA-N Asn-Met-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VITDJIPIJZAVGC-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- KAZKWIKPEPABOO-IHRRRGAJSA-N Asn-Met-Tyr Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N KAZKWIKPEPABOO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ZVUMKOMKQCANOM-AVGNSLFASA-N Asn-Phe-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZVUMKOMKQCANOM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- YUOXLJYVSZYPBJ-CIUDSAMLSA-N Asn-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YUOXLJYVSZYPBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- KSZHWTRZPOTIGY-AVGNSLFASA-N Asn-Tyr-Gln Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O KSZHWTRZPOTIGY-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N Asn-Tyr-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O QNNBHTFDFFFHGC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GHWWTICYPDKPTE-NGZCFLSTSA-N Asn-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N GHWWTICYPDKPTE-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 1
- QXHVOUSPVAWEMX-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QXHVOUSPVAWEMX-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- YRBGRUOSJROZEI-NHCYSSNCSA-N Asp-His-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O YRBGRUOSJROZEI-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- QNFRBNZGVVKBNJ-PEFMBERDSA-N Asp-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N QNFRBNZGVVKBNJ-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N Asp-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- SPKCGKRUYKMDHP-GUDRVLHUSA-N Asp-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N SPKCGKRUYKMDHP-GUDRVLHUSA-N 0.000 description 1
- DONWIPDSZZJHHK-HJGDQZAQSA-N Asp-Lys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O DONWIPDSZZJHHK-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- ZXRQJQCXPSMNMR-XIRDDKMYSA-N Asp-Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N ZXRQJQCXPSMNMR-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- VMVUDJUXJKDGNR-FXQIFTODSA-N Asp-Met-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VMVUDJUXJKDGNR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WOPJVEMFXYHZEE-SRVKXCTJSA-N Asp-Phe-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WOPJVEMFXYHZEE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ZKAOJVJQGVUIIU-GUBZILKMSA-N Asp-Pro-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ZKAOJVJQGVUIIU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UAXIKORUDGGIGA-DCAQKATOSA-N Asp-Pro-Lys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O UAXIKORUDGGIGA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N Asp-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- PLNJUJGNLDSFOP-UWJYBYFXSA-N Asp-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PLNJUJGNLDSFOP-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- QPDUWAUSSWGJSB-NGZCFLSTSA-N Asp-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N QPDUWAUSSWGJSB-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 102100027314 Beta-2-microglobulin Human genes 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010006417 Bronchial carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 1
- 101100512078 Caenorhabditis elegans lys-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100148606 Caenorhabditis elegans pst-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100495352 Candida albicans CDR4 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 101150117674 Cd247 gene Proteins 0.000 description 1
- 231100000023 Cell-mediated cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 206010057250 Cell-mediated cytotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- NOCCABSVTRONIN-CIUDSAMLSA-N Cys-Ala-Leu Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N NOCCABSVTRONIN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PRXCTTWKGJAPMT-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ala-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PRXCTTWKGJAPMT-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- CEZSLNCYQUFOSL-BQBZGAKWSA-N Cys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O CEZSLNCYQUFOSL-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- VNLYIYOYUNGURO-ZLUOBGJFSA-N Cys-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VNLYIYOYUNGURO-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- DZIGZIIJIGGANI-FXQIFTODSA-N Cys-Glu-Gln Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O DZIGZIIJIGGANI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LYSHSHHDBVKJRN-JBDRJPRFSA-N Cys-Ile-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N LYSHSHHDBVKJRN-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- UVZFZTWNHOQWNK-NAKRPEOUSA-N Cys-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UVZFZTWNHOQWNK-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- KCPOQGRVVXYLAC-KKUMJFAQSA-N Cys-Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KCPOQGRVVXYLAC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- SRIRHERUAMYIOQ-CIUDSAMLSA-N Cys-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SRIRHERUAMYIOQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LWYKPOCGGTYAIH-FXQIFTODSA-N Cys-Met-Asp Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N LWYKPOCGGTYAIH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- DRXOWZZHCSBUOI-YJRXYDGGSA-N Cys-Thr-Tyr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O DRXOWZZHCSBUOI-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- 206010011831 Cytomegalovirus infection Diseases 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008286 DNA nucleotidylexotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100029764 DNA-directed DNA/RNA polymerase mu Human genes 0.000 description 1
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 1
- 208000005431 Endometrioid Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102100039328 Endoplasmin Human genes 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 241000700662 Fowlpox virus Species 0.000 description 1
- 241000126130 Ganymedes Species 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- WMOMPXKOKASNBK-PEFMBERDSA-N Gln-Asn-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WMOMPXKOKASNBK-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- CRRFJBGUGNNOCS-PEFMBERDSA-N Gln-Asp-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O CRRFJBGUGNNOCS-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- XEYMBRRKIFYQMF-GUBZILKMSA-N Gln-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XEYMBRRKIFYQMF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WLODHVXYKYHLJD-ACZMJKKPSA-N Gln-Asp-Ser Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N WLODHVXYKYHLJD-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- UICOTGULOUGGLC-NUMRIWBASA-N Gln-Asp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O UICOTGULOUGGLC-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- ZNZPKVQURDQFFS-FXQIFTODSA-N Gln-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZNZPKVQURDQFFS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KHGGWBRVRPHFMH-PEFMBERDSA-N Gln-Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N KHGGWBRVRPHFMH-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- IHSGESFHTMFHRB-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O IHSGESFHTMFHRB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FKXCBKCOSVIGCT-AVGNSLFASA-N Gln-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FKXCBKCOSVIGCT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- PBYFVIQRFLNQCO-GUBZILKMSA-N Gln-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PBYFVIQRFLNQCO-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SYZZMPFLOLSMHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O SYZZMPFLOLSMHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- ARYKRXHBIPLULY-XKBZYTNZSA-N Gln-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ARYKRXHBIPLULY-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- STHSGOZLFLFGSS-SUSMZKCASA-N Gln-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O STHSGOZLFLFGSS-SUSMZKCASA-N 0.000 description 1
- CVRUVYDNRPSKBM-QEJZJMRPSA-N Gln-Trp-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N CVRUVYDNRPSKBM-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- VEYGCDYMOXHJLS-GVXVVHGQSA-N Gln-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VEYGCDYMOXHJLS-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- SBYVDRJAXWSXQL-AVGNSLFASA-N Glu-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SBYVDRJAXWSXQL-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HJIFPJUEOGZWRI-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N HJIFPJUEOGZWRI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PHONAZGUEGIOEM-GLLZPBPUSA-N Glu-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PHONAZGUEGIOEM-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 1
- OPAINBJQDQTGJY-JGVFFNPUSA-N Glu-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O OPAINBJQDQTGJY-JGVFFNPUSA-N 0.000 description 1
- ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N Glu-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- HVYWQYLBVXMXSV-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HVYWQYLBVXMXSV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- RBXSZQRSEGYDFG-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RBXSZQRSEGYDFG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ALMBZBOCGSVSAI-ACZMJKKPSA-N Glu-Ser-Asn Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N ALMBZBOCGSVSAI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- RFTVTKBHDXCEEX-WDSKDSINSA-N Glu-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RFTVTKBHDXCEEX-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- JVYNYWXHZWVJEF-NUMRIWBASA-N Glu-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O JVYNYWXHZWVJEF-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- BDISFWMLMNBTGP-NUMRIWBASA-N Glu-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BDISFWMLMNBTGP-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- ZALGPUWUVHOGAE-GVXVVHGQSA-N Glu-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZALGPUWUVHOGAE-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- PUUYVMYCMIWHFE-BQBZGAKWSA-N Gly-Ala-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PUUYVMYCMIWHFE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- YMUFWNJHVPQNQD-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN YMUFWNJHVPQNQD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- ADZGCWWDPFDHCY-ZETCQYMHSA-N Gly-His-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CN=CN1 ADZGCWWDPFDHCY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- LPCKHUXOGVNZRS-YUMQZZPRSA-N Gly-His-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LPCKHUXOGVNZRS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- ZOTGXWMKUFSKEU-QXEWZRGKSA-N Gly-Ile-Met Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O ZOTGXWMKUFSKEU-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- SCWYHUQOOFRVHP-MBLNEYKQSA-N Gly-Ile-Thr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SCWYHUQOOFRVHP-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- YIFUFYZELCMPJP-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O YIFUFYZELCMPJP-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N Gly-Leu-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N Gly-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CN UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N Gly-Leu-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- DHNXGWVNLFPOMQ-KBPBESRZSA-N Gly-Phe-His Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)NC(=O)CN DHNXGWVNLFPOMQ-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N Gly-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- BMWFDYIYBAFROD-WPRPVWTQSA-N Gly-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN BMWFDYIYBAFROD-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ZKJZBRHRWKLVSJ-ZDLURKLDSA-N Gly-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)CN)O ZKJZBRHRWKLVSJ-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- PNUFMLXHOLFRLD-KBPBESRZSA-N Gly-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 PNUFMLXHOLFRLD-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- OCRQUYDOYKCOQG-IRXDYDNUSA-N Gly-Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 OCRQUYDOYKCOQG-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- MUGLKCQHTUFLGF-WPRPVWTQSA-N Gly-Val-Met Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)CN MUGLKCQHTUFLGF-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102100028976 HLA class I histocompatibility antigen, B alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100028971 HLA class I histocompatibility antigen, C alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100031618 HLA class II histocompatibility antigen, DP beta 1 chain Human genes 0.000 description 1
- 102100036241 HLA class II histocompatibility antigen, DQ beta 1 chain Human genes 0.000 description 1
- 102100040505 HLA class II histocompatibility antigen, DR alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100040485 HLA class II histocompatibility antigen, DRB1 beta chain Human genes 0.000 description 1
- 108010058607 HLA-B Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010052199 HLA-C Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010093061 HLA-DPA1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010045483 HLA-DPB1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010086786 HLA-DQA1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010065026 HLA-DQB1 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010067802 HLA-DR alpha-Chains Proteins 0.000 description 1
- 108010039343 HLA-DRB1 Chains Proteins 0.000 description 1
- DZMVESFTHXSSPZ-XVYDVKMFSA-N His-Ala-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DZMVESFTHXSSPZ-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- OBTMRGFRLJBSFI-GARJFASQSA-N His-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)C(=O)O OBTMRGFRLJBSFI-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- JWLWNCVBBSBCEM-NKIYYHGXSA-N His-Gln-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N)O JWLWNCVBBSBCEM-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- RGPWUJOMKFYFSR-QWRGUYRKSA-N His-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RGPWUJOMKFYFSR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- BDFCIKANUNMFGB-PMVVWTBXSA-N His-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 BDFCIKANUNMFGB-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 1
- SKYULSWNBYAQMG-IHRRRGAJSA-N His-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SKYULSWNBYAQMG-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UROVZOUMHNXPLZ-AVGNSLFASA-N His-Leu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 UROVZOUMHNXPLZ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CKRJBQJIGOEKMC-SRVKXCTJSA-N His-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CKRJBQJIGOEKMC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SLFSYFJKSIVSON-SRVKXCTJSA-N His-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N SLFSYFJKSIVSON-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AYUOWUNWZGTNKB-ULQDDVLXSA-N His-Phe-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AYUOWUNWZGTNKB-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- JATYGDHMDRAISQ-KKUMJFAQSA-N His-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JATYGDHMDRAISQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 1
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101100166600 Homo sapiens CD28 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 1
- 101000812663 Homo sapiens Endoplasmin Proteins 0.000 description 1
- 101000930801 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 2 chain Proteins 0.000 description 1
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 1
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 1
- 101000818543 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase ZAP-70 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 1
- WZPIKDWQVRTATP-SYWGBEHUSA-N Ile-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)CC)C(O)=O)=CNC2=C1 WZPIKDWQVRTATP-SYWGBEHUSA-N 0.000 description 1
- SCHZQZPYHBWYEQ-PEFMBERDSA-N Ile-Asn-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N SCHZQZPYHBWYEQ-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- KMBPQYKVZBMRMH-PEFMBERDSA-N Ile-Gln-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KMBPQYKVZBMRMH-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- LBRCLQMZAHRTLV-ZKWXMUAHSA-N Ile-Gly-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LBRCLQMZAHRTLV-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- RIVKTKFVWXRNSJ-GRLWGSQLSA-N Ile-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N RIVKTKFVWXRNSJ-GRLWGSQLSA-N 0.000 description 1
- GAZGFPOZOLEYAJ-YTFOTSKYSA-N Ile-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N GAZGFPOZOLEYAJ-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 1
- HPCFRQWLTRDGHT-AJNGGQMLSA-N Ile-Leu-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HPCFRQWLTRDGHT-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- GLYJPWIRLBAIJH-FQUUOJAGSA-N Ile-Lys-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GLYJPWIRLBAIJH-FQUUOJAGSA-N 0.000 description 1
- GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N Ile-Lys-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLXPYSDGMXTTNQ-DKIMLUQUSA-N Ile-Phe-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XLXPYSDGMXTTNQ-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- XLXPYSDGMXTTNQ-UHFFFAOYSA-N Ile-Phe-Leu Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XLXPYSDGMXTTNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CNMOKANDJMLAIF-CIQUZCHMSA-N Ile-Thr-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CNMOKANDJMLAIF-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- KXUKTDGKLAOCQK-LSJOCFKGSA-N Ile-Val-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O KXUKTDGKLAOCQK-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- UYODHPPSCXBNCS-XUXIUFHCSA-N Ile-Val-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C UYODHPPSCXBNCS-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 206010061252 Intraocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N Isophenergan Chemical compound C1=CC=C2N(CC(C)N(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N L-leucyl-L-arginine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 1
- LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N Leu-Ala-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N LJHGALIOHLRRQN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WSGXUIQTEZDVHJ-GARJFASQSA-N Leu-Ala-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O WSGXUIQTEZDVHJ-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- HBJZFCIVFIBNSV-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HBJZFCIVFIBNSV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KKXDHFKZWKLYGB-GUBZILKMSA-N Leu-Asn-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N KKXDHFKZWKLYGB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N Leu-Asn-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- DLCOFDAHNMMQPP-SRVKXCTJSA-N Leu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DLCOFDAHNMMQPP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- XVSJMWYYLHPDKY-DCAQKATOSA-N Leu-Asp-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O XVSJMWYYLHPDKY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- HFBCHNRFRYLZNV-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HFBCHNRFRYLZNV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N Leu-Gly-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- QJXHMYMRGDOHRU-NHCYSSNCSA-N Leu-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O QJXHMYMRGDOHRU-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- TVEOVCYCYGKVPP-HSCHXYMDSA-N Leu-Ile-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N TVEOVCYCYGKVPP-HSCHXYMDSA-N 0.000 description 1
- IFMPDNRWZZEZSL-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O IFMPDNRWZZEZSL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N Leu-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- PPQRKXHCLYCBSP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N PPQRKXHCLYCBSP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N Leu-Lys-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- CPONGMJGVIAWEH-DCAQKATOSA-N Leu-Met-Ala Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CPONGMJGVIAWEH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JVTYXRRFZCEPPK-RHYQMDGZSA-N Leu-Met-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O JVTYXRRFZCEPPK-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- YWKNKRAKOCLOLH-OEAJRASXSA-N Leu-Phe-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YWKNKRAKOCLOLH-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- JDBQSGMJBMPNFT-AVGNSLFASA-N Leu-Pro-Val Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JDBQSGMJBMPNFT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JIHDFWWRYHSAQB-GUBZILKMSA-N Leu-Ser-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O JIHDFWWRYHSAQB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SVBJIZVVYJYGLA-DCAQKATOSA-N Leu-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SVBJIZVVYJYGLA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LFSQWRSVPNKJGP-WDCWCFNPSA-N Leu-Thr-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LFSQWRSVPNKJGP-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N Leu-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- IDGRADDMTTWOQC-WDSOQIARSA-N Leu-Trp-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IDGRADDMTTWOQC-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- RIHIGSWBLHSGLV-CQDKDKBSSA-N Leu-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RIHIGSWBLHSGLV-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- VJGQRELPQWNURN-JYJNAYRXSA-N Leu-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VJGQRELPQWNURN-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100026238 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- WQWZXKWOEVSGQM-DCAQKATOSA-N Lys-Ala-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN WQWZXKWOEVSGQM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MKBIVWXCFINCLE-SRVKXCTJSA-N Lys-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N MKBIVWXCFINCLE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VEGLGAOVLFODGC-GUBZILKMSA-N Lys-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VEGLGAOVLFODGC-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N Lys-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- CANPXOLVTMKURR-WEDXCCLWSA-N Lys-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN CANPXOLVTMKURR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- DAOSYIZXRCOKII-SRVKXCTJSA-N Lys-His-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DAOSYIZXRCOKII-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NJNRBRKHOWSGMN-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NJNRBRKHOWSGMN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WRODMZBHNNPRLN-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WRODMZBHNNPRLN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N Lys-Lys-Asn Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- HYSVGEAWTGPMOA-IHRRRGAJSA-N Lys-Pro-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HYSVGEAWTGPMOA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N Lys-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LUTDBHBIHHREDC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- GHKXHCMRAUYLBS-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GHKXHCMRAUYLBS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SQXZLVXQXWILKW-KKUMJFAQSA-N Lys-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SQXZLVXQXWILKW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- DIBZLYZXTSVGLN-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DIBZLYZXTSVGLN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N Lys-Thr-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- VHTOGMKQXXJOHG-RHYQMDGZSA-N Lys-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VHTOGMKQXXJOHG-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- GILLQRYAWOMHED-DCAQKATOSA-N Lys-Val-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN GILLQRYAWOMHED-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RIPJMCFGQHGHNP-RHYQMDGZSA-N Lys-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O RIPJMCFGQHGHNP-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 108010066345 MHC binding peptide Proteins 0.000 description 1
- 101710175243 Major antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- 235000006679 Mentha X verticillata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002899 Mentha suaveolens Nutrition 0.000 description 1
- 235000001636 Mentha x rotundifolia Nutrition 0.000 description 1
- DTICLBJHRYSJLH-GUBZILKMSA-N Met-Ala-Val Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DTICLBJHRYSJLH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ZAJNRWKGHWGPDQ-SDDRHHMPSA-N Met-Arg-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N ZAJNRWKGHWGPDQ-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- YNOVBMBQSQTLFM-DCAQKATOSA-N Met-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YNOVBMBQSQTLFM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N Met-Asn-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZMYHJISLFYTQGK-FXQIFTODSA-N Met-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ZMYHJISLFYTQGK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MTBVQFFQMXHCPC-CIUDSAMLSA-N Met-Glu-Asp Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MTBVQFFQMXHCPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- UNPGTBHYKJOCCZ-DCAQKATOSA-N Met-Lys-Ala Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UNPGTBHYKJOCCZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JQHYVIKEFYETEW-IHRRRGAJSA-N Met-Phe-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JQHYVIKEFYETEW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- QQPMHUCGDRJFQK-RHYQMDGZSA-N Met-Thr-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QQPMHUCGDRJFQK-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- CNFMPVYIVQUJOO-NHCYSSNCSA-N Met-Val-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O CNFMPVYIVQUJOO-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 101100096028 Mus musculus Smok1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N N-L-methionyl-L-tyrosine Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010084333 N-palmitoyl-S-(2,3-bis(palmitoyloxy)propyl)cysteinyl-seryl-lysyl-lysyl-lysyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 241000221960 Neurospora Species 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 206010061328 Ovarian epithelial cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000000821 Parathyroid Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010061336 Pelvic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- YMORXCKTSSGYIG-IHRRRGAJSA-N Phe-Arg-Cys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N YMORXCKTSSGYIG-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MECSIDWUTYRHRJ-KKUMJFAQSA-N Phe-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MECSIDWUTYRHRJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- UEHNWRNADDPYNK-DLOVCJGASA-N Phe-Cys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N UEHNWRNADDPYNK-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- MGBRZXXGQBAULP-DRZSPHRISA-N Phe-Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 MGBRZXXGQBAULP-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- BFYHIHGIHGROAT-HTUGSXCWSA-N Phe-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O BFYHIHGIHGROAT-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- BIYWZVCPZIFGPY-QWRGUYRKSA-N Phe-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BIYWZVCPZIFGPY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- SFKOEHXABNPLRT-KBPBESRZSA-N Phe-His-Gly Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)NCC(O)=O SFKOEHXABNPLRT-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- BYAIIACBWBOJCU-URLPEUOOSA-N Phe-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O BYAIIACBWBOJCU-URLPEUOOSA-N 0.000 description 1
- RORUIHAWOLADSH-HJWJTTGWSA-N Phe-Ile-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 RORUIHAWOLADSH-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- MSHZERMPZKCODG-ACRUOGEOSA-N Phe-Leu-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MSHZERMPZKCODG-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- DNAXXTQSTKOHFO-QEJZJMRPSA-N Phe-Lys-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 DNAXXTQSTKOHFO-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- IWZRODDWOSIXPZ-IRXDYDNUSA-N Phe-Phe-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CC=CC=C1 IWZRODDWOSIXPZ-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- WKLMCMXFMQEKCX-SLFFLAALSA-N Phe-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CC3=CC=CC=C3)N)C(=O)O WKLMCMXFMQEKCX-SLFFLAALSA-N 0.000 description 1
- ODGNUUUDJONJSC-UFYCRDLUSA-N Phe-Pro-Tyr Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)N[C@@H](CC3=CC=C(C=C3)O)C(=O)O ODGNUUUDJONJSC-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- YDUGVDGFKNXFPL-IXOXFDKPSA-N Phe-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O YDUGVDGFKNXFPL-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- WSAPMHXTQAOAQQ-BVSLBCMMSA-N Phe-Trp-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC3=CC=CC=C3)N WSAPMHXTQAOAQQ-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- APECKGGXAXNFLL-RNXOBYDBSA-N Phe-Trp-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 APECKGGXAXNFLL-RNXOBYDBSA-N 0.000 description 1
- APZNYJFGVAGFCF-JYJNAYRXSA-N Phe-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccccc1)C(C)C)C(O)=O APZNYJFGVAGFCF-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000254064 Photinus pyralis Species 0.000 description 1
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N Pro-Ala-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OCSACVPBMIYNJE-GUBZILKMSA-N Pro-Arg-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OCSACVPBMIYNJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CYQQWUPHIZVCNY-GUBZILKMSA-N Pro-Arg-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CYQQWUPHIZVCNY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KIGGUSRFHJCIEJ-DCAQKATOSA-N Pro-Asp-His Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O KIGGUSRFHJCIEJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NMELOOXSGDRBRU-YUMQZZPRSA-N Pro-Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 NMELOOXSGDRBRU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LGSANCBHSMDFDY-GARJFASQSA-N Pro-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O LGSANCBHSMDFDY-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N Pro-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- AFXCXDQNRXTSBD-FJXKBIBVSA-N Pro-Gly-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O AFXCXDQNRXTSBD-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- WOIFYRZPIORBRY-AVGNSLFASA-N Pro-Lys-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WOIFYRZPIORBRY-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- SEZGGSHLMROBFX-CIUDSAMLSA-N Pro-Ser-Gln Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O SEZGGSHLMROBFX-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O SXJOPONICMGFCR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 229930185560 Pseudouridine Natural products 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N Pseudouridine C Natural products OC1C(O)C(CO)OC1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005161 RNA Caps Proteins 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 241000235346 Schizosaccharomyces Species 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 101100225046 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) ecl2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000710961 Semliki Forest virus Species 0.000 description 1
- SRTCFKGBYBZRHA-ACZMJKKPSA-N Ser-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SRTCFKGBYBZRHA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- JPIDMRXXNMIVKY-VZFHVOOUSA-N Ser-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JPIDMRXXNMIVKY-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QGMLKFGTGXWAHF-IHRRRGAJSA-N Ser-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QGMLKFGTGXWAHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- BCKYYTVFBXHPOG-ACZMJKKPSA-N Ser-Asn-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N BCKYYTVFBXHPOG-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VAUMZJHYZQXZBQ-WHFBIAKZSA-N Ser-Asn-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O VAUMZJHYZQXZBQ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asp-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- SWSRFJZZMNLMLY-ZKWXMUAHSA-N Ser-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SWSRFJZZMNLMLY-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- DSSOYPJWSWFOLK-CIUDSAMLSA-N Ser-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DSSOYPJWSWFOLK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SWIQQMYVHIXPEK-FXQIFTODSA-N Ser-Cys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SWIQQMYVHIXPEK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N Ser-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZOHGLPQGEHSLPD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- YPUSXTWURJANKF-KBIXCLLPSA-N Ser-Gln-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O YPUSXTWURJANKF-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- QKQDTEYDEIJPNK-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO QKQDTEYDEIJPNK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N Ser-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N Ser-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N Ser-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- LWMQRHDTXHQQOV-MXAVVETBSA-N Ser-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LWMQRHDTXHQQOV-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CO OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ILZAUMFXKSIUEF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- XJDMUQCLVSCRSJ-VZFHVOOUSA-N Ser-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XJDMUQCLVSCRSJ-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N Ser-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- YEDSOSIKVUMIJE-DCAQKATOSA-N Ser-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YEDSOSIKVUMIJE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 208000032023 Signs and Symptoms Diseases 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 230000037453 T cell priming Effects 0.000 description 1
- 108010083312 T-Cell Antigen Receptor-CD3 Complex Proteins 0.000 description 1
- 108700042075 T-Cell Receptor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 1
- 102100037906 T-cell surface glycoprotein CD3 zeta chain Human genes 0.000 description 1
- 101710156660 T-cell surface glycoprotein CD3 zeta chain Proteins 0.000 description 1
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 1
- YRNBANYVJJBGDI-VZFHVOOUSA-N Thr-Ala-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O YRNBANYVJJBGDI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N Thr-Arg-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- KRPKYGOFYUNIGM-XVSYOHENSA-N Thr-Asp-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N)O KRPKYGOFYUNIGM-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- JXKMXEBNZCKSDY-JIOCBJNQSA-N Thr-Asp-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O JXKMXEBNZCKSDY-JIOCBJNQSA-N 0.000 description 1
- UTCFSBBXPWKLTG-XKBZYTNZSA-N Thr-Cys-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O UTCFSBBXPWKLTG-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- LGNBRHZANHMZHK-NUMRIWBASA-N Thr-Glu-Asp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O LGNBRHZANHMZHK-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- VOHWDZNIESHTFW-XKBZYTNZSA-N Thr-Glu-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O VOHWDZNIESHTFW-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- WDFPMSHYMRBLKM-NKIYYHGXSA-N Thr-Glu-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N)O WDFPMSHYMRBLKM-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- XPNSAQMEAVSQRD-FBCQKBJTSA-N Thr-Gly-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XPNSAQMEAVSQRD-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- UBDDORVPVLEECX-FJXKBIBVSA-N Thr-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O UBDDORVPVLEECX-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- ODXKUIGEPAGKKV-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ODXKUIGEPAGKKV-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N Thr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N Thr-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- SPVHQURZJCUDQC-VOAKCMCISA-N Thr-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SPVHQURZJCUDQC-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- MCDVZTRGHNXTGK-HJGDQZAQSA-N Thr-Met-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MCDVZTRGHNXTGK-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- HSQXHRIRJSFDOH-URLPEUOOSA-N Thr-Phe-Ile Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HSQXHRIRJSFDOH-URLPEUOOSA-N 0.000 description 1
- XIHGJKFSIDTDKV-LYARXQMPSA-N Thr-Phe-Trp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O XIHGJKFSIDTDKV-LYARXQMPSA-N 0.000 description 1
- MROIJTGJGIDEEJ-RCWTZXSCSA-N Thr-Pro-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 MROIJTGJGIDEEJ-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- BZTSQFWJNJYZSX-JRQIVUDYSA-N Thr-Tyr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BZTSQFWJNJYZSX-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- QGVBFDIREUUSHX-IFFSRLJSSA-N Thr-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QGVBFDIREUUSHX-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000000591 Tight Junction Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010002321 Tight Junction Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- HQJOVVWAPQPYDS-ZFWWWQNUSA-N Trp-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HQJOVVWAPQPYDS-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- JVTHMUDOKPQBOT-NSHDSACASA-N Trp-Gly-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH3+])C(=O)NCC(=O)NCC([O-])=O)=CNC2=C1 JVTHMUDOKPQBOT-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- AWEGFIJXYWGBCA-XIRDDKMYSA-N Trp-His-Asn Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CN=CN3)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N AWEGFIJXYWGBCA-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- IVBJBFSWJDNQFW-XIRDDKMYSA-N Trp-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IVBJBFSWJDNQFW-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- KBKTUNYBNJWFRL-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Asn Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 KBKTUNYBNJWFRL-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- UIDJDMVRDUANDL-BVSLBCMMSA-N Trp-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UIDJDMVRDUANDL-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N Tyr-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- JWHOIHCOHMZSAR-QWRGUYRKSA-N Tyr-Asp-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 JWHOIHCOHMZSAR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N Tyr-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- YLRLHDFMMWDYTK-KKUMJFAQSA-N Tyr-Cys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 YLRLHDFMMWDYTK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N Tyr-Gln-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- TWAVEIJGFCBWCG-JYJNAYRXSA-N Tyr-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N TWAVEIJGFCBWCG-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- WAPFQMXRSDEGOE-IHRRRGAJSA-N Tyr-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O WAPFQMXRSDEGOE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- IMXAAEFAIBRCQF-SIUGBPQLSA-N Tyr-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N IMXAAEFAIBRCQF-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 1
- YYZPVPJCOGGQPC-JYJNAYRXSA-N Tyr-His-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYZPVPJCOGGQPC-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- DWAMXBFJNZIHMC-KBPBESRZSA-N Tyr-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O DWAMXBFJNZIHMC-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- CDKZJGMPZHPAJC-ULQDDVLXSA-N Tyr-Leu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CDKZJGMPZHPAJC-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- KZOZXAYPVKKDIO-UFYCRDLUSA-N Tyr-Met-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 KZOZXAYPVKKDIO-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- OKDNSNWJEXAMSU-IRXDYDNUSA-N Tyr-Phe-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 OKDNSNWJEXAMSU-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- CDBXVDXSLPLFMD-BPNCWPANSA-N Tyr-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CDBXVDXSLPLFMD-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- YYLHVUCSTXXKBS-IHRRRGAJSA-N Tyr-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYLHVUCSTXXKBS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- XGZBEGGGAUQBMB-KJEVXHAQSA-N Tyr-Pro-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)O XGZBEGGGAUQBMB-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- RZAGEHHVNYESNR-RNXOBYDBSA-N Tyr-Trp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RZAGEHHVNYESNR-RNXOBYDBSA-N 0.000 description 1
- RGJZPXFZIUUQDN-BPNCWPANSA-N Tyr-Val-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RGJZPXFZIUUQDN-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- 102100021125 Tyrosine-protein kinase ZAP-70 Human genes 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000005969 Uveal melanoma Diseases 0.000 description 1
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 1
- AAOPYWQQBXHINJ-DZKIICNBSA-N Val-Gln-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N AAOPYWQQBXHINJ-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- ROLGIBMFNMZANA-GVXVVHGQSA-N Val-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ROLGIBMFNMZANA-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- JVYIGCARISMLMV-HOCLYGCPSA-N Val-Gly-Trp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N JVYIGCARISMLMV-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 1
- HQYVQDRYODWONX-DCAQKATOSA-N Val-His-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N HQYVQDRYODWONX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AGXGCFSECFQMKB-NHCYSSNCSA-N Val-Leu-Asp Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N AGXGCFSECFQMKB-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- DAVNYIUELQBTAP-XUXIUFHCSA-N Val-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N DAVNYIUELQBTAP-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- MBGFDZDWMDLXHQ-GUBZILKMSA-N Val-Met-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](C(C)C)N MBGFDZDWMDLXHQ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LJSZPMSUYKKKCP-UBHSHLNASA-N Val-Phe-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LJSZPMSUYKKKCP-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- NZGOVKLVQNOEKP-YDHLFZDLSA-N Val-Phe-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N NZGOVKLVQNOEKP-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- BGXVHVMJZCSOCA-AVGNSLFASA-N Val-Pro-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BGXVHVMJZCSOCA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- HWNYVQMOLCYHEA-IHRRRGAJSA-N Val-Ser-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N HWNYVQMOLCYHEA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N Val-Thr-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N 0.000 description 1
- DVLWZWNAQUBZBC-ZNSHCXBVSA-N Val-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O DVLWZWNAQUBZBC-ZNSHCXBVSA-N 0.000 description 1
- DOBHJKVVACOQTN-DZKIICNBSA-N Val-Tyr-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)CC1=CC=C(O)C=C1 DOBHJKVVACOQTN-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- PGBMPFKFKXYROZ-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)O)N PGBMPFKFKXYROZ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 201000005188 adrenal gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024447 adrenal gland neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000008484 agonism Effects 0.000 description 1
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N beta-D-ribose Chemical group OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N beta-Pseudouridine Natural products OC1OC(CN2C=CC(=O)NC2=O)C(O)C1O WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000003362 bronchogenic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003185 calcium uptake Effects 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000009172 cell transfer therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 230000005890 cell-mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000006364 cellular survival Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000009060 clear cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011198 co-culture assay Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000011970 concomitant therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000013601 cosmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 208000030381 cutaneous melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005220 cytoplasmic tail Anatomy 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- MWEQTWJABOLLOS-UHFFFAOYSA-L disodium;[[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-oxidophosphoryl] hydrogen phosphate;trihydrate Chemical compound O.O.O.[Na+].[Na+].C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP([O-])(=O)OP(O)([O-])=O)C(O)C1O MWEQTWJABOLLOS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 230000009429 distress Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 101150058725 ecl1 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000003981 ectoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000005014 ectopic expression Effects 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 210000001900 endoderm Anatomy 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005619 esophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 238000011124 ex vivo culture Methods 0.000 description 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- LIYGYAHYXQDGEP-UHFFFAOYSA-N firefly oxyluciferin Natural products Oc1csc(n1)-c1nc2ccc(O)cc2s1 LIYGYAHYXQDGEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 108700014844 flt3 ligand Proteins 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003953 foreskin Anatomy 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000037433 frameshift Effects 0.000 description 1
- 210000004475 gamma-delta t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000006585 gastric adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000003633 gene expression assay Methods 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 108010010096 glycyl-glycyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010078326 glycyl-glycyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 108010028188 glycyl-histidyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010059898 glycyl-tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000011134 hematopoietic stem cell transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 210000003297 immature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002861 immature t-cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011502 immune monitoring Methods 0.000 description 1
- 230000037189 immune system physiology Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002743 insertional mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010027338 isoleucylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 230000006122 isoprenylation Effects 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010000761 leucylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010091871 leucylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 208000026045 malignant tumor of parathyroid gland Diseases 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- MIKKOBKEXMRYFQ-WZTVWXICSA-N meglumine amidotrizoate Chemical compound C[NH2+]C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CC(=O)NC1=C(I)C(NC(C)=O)=C(I)C(C([O-])=O)=C1I MIKKOBKEXMRYFQ-WZTVWXICSA-N 0.000 description 1
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108010056582 methionylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010085203 methionylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002500 microbody Anatomy 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000009126 molecular therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 201000010879 mucinous adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007498 myristoylation Effects 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 201000002575 ocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 230000006548 oncogenic transformation Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 208000013371 ovarian adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006588 ovary adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- JJVOROULKOMTKG-UHFFFAOYSA-N oxidized Photinus luciferin Chemical compound S1C2=CC(O)=CC=C2N=C1C1=NC(=O)CS1 JJVOROULKOMTKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000026792 palmitoylation Effects 0.000 description 1
- 210000000277 pancreatic duct Anatomy 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000009521 phase II clinical trial Methods 0.000 description 1
- 108010084525 phenylalanyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010018625 phenylalanylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N pseudouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000007388 punch biopsy Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008943 replicative senescence Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 238000010242 retro-orbital bleeding Methods 0.000 description 1
- 102220289632 rs33941849 Human genes 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 208000019694 serous adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000004548 serous cystadenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 108010007375 seryl-seryl-seryl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000003708 skin melanoma Diseases 0.000 description 1
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 231100000617 superantigen Toxicity 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 description 1
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 description 1
- 210000003411 telomere Anatomy 0.000 description 1
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000012085 transcriptional profiling Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000014723 transformation of host cell by virus Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 1
- 108010084932 tryptophyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000005909 tumor killing Effects 0.000 description 1
- 230000037455 tumor specific immune response Effects 0.000 description 1
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- IBIDRSSEHFLGSD-UHFFFAOYSA-N valinyl-arginine Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N IBIDRSSEHFLGSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 230000006648 viral gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/70539—MHC-molecules, e.g. HLA-molecules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4632—T-cell receptors [TCR]; antibody T-cell receptor constructs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/70521—CD28, CD152
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/572—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 cytotoxic response
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/575—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 humoral response
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/035—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal for targeting to the external surface of a cell, e.g. to the outer membrane of Gram negative bacteria, GPI- anchored eukaryote proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
Abstract
본 발명은 면역요법에 유용한 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체(T 세포 수용체 및 인공 T 세포 수용체(키메라 항원 수용체; CAR)) 및 T 세포 에피토프를 제공한다.
Description
본 발명은 면역요법에 유용한 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체(T 세포 수용체 및 인공 T 세포 수용체(키메라 항원 수용체; CAR)) 및 T 세포 에피토프의 제공에 관한 것이다.
면역계의 진화는 척추 동물에서 2종류의 방어: 선천적 면역과 양자면역(adoptive immunity)에 기초한 매우 효과적인 네트워크를 야기하였다.
병원체와 관련된 공통적인 분자 패턴을 인식하는 변이 수용체에 의존하는 진화론적 선천적 면역계와는 달리, 양자면역은 B 세포(B 림프구)와 T 세포(T 림프구) 상에 있고 클론 선택에 의한 고도로 특이적인 항원 수용체를 기반으로 한다.
B 세포는 항체들의 분비에 의해 체액성 면역반응을 일으키지만, T 세포는 인식된 세포의 파괴를 유도하는 세포성 면역반응을 매개한다.
T 세포는 사람과 동물에서 세포 매개 면역에 중심적인 역할을 한다. 특정 항원의 인식 및 결합은 T 세포의 표면 상에 발현되는 T 세포 수용체(TCR)에 의해 매개된다.
T 세포의 T 세포 수용체(TCR)는 주조직적합성 복합체(MHC) 분자에 결합하고 표적세포의 표면 상에 제시되는 면역원성 펩티드(에피토프)와 상호작용할 수 있다. TCR의 특이적 결합은 T 세포 내에서의 신호 캐스케이드를 유발하여 성숙한 효과기 T 세포로의 증식 및 분화를 유도한다. 광대하게 다양한 항원을 표적으로 할 수 있으려면, T 세포 수용체가 매우 다양해야만 한다.
이 다양성은 TCR의 상이한 구조적 영역을 암호화하는 유전자의 다른 불연속적인 세그먼트의 유전자 재배치에 의해 얻어진다. TCR은 하나의 α-사슬과 하나의 β-사슬 또는 하나의 γ 사슬과 하나의 δ 사슬로 구성된다. TCR α/β-사슬은 항원 인식에 관여하는 N 말단의 고도의 다형성 가변부 및 불변의 불변부로 구성된다. 유전자 수준에서 이들 사슬은 가변(V) 영역, 다양성(D) 영역(오직 β-사슬 및 δ 사슬), 연결(J) 영역 및 불변(C) 영역으로 나누어진다. 인간 β-사슬 유전자는 60개 이상의 가변(V) 세그먼트, 2개의 다양성(D) 세그먼트, 10개 이상의 연결(J) 세그먼트, 및 2개의 불변부 세그먼트(C)를 포함한다. 인간 α-사슬 유전자는 50개 이상의 V 세그먼트, 및 60개 이상의 J 세그먼트뿐만 아니라, 1개의 C 세그먼트를 포함하지만, D 세그먼트는 포함하지 않는다. 뮤린 β-사슬 유전자는 30개 이상의 가변(V) 세그먼트, 2개의 다양성(D) 세그먼트, 10개 이상의 연결(J) 세그먼트, 및 2개의 불변부 세그먼트(C)를 포함한다. 뮤린 α-사슬 유전자는 거의 100개의 V 세그먼트, 60개의 J 세그먼트를 포함하고, D 세그먼트는 포함하지 않지만 1개의 C 세그먼트를 포함한다. T 세포의 분화 중에, 특이적 T 세포 수용체 유전자는 하나의 V, 하나의 D(오직 β-사슬 및 δ-사슬), 하나의 J 및 하나의 C 영역 유전자를 재배치하여 생성된다. TCR의 다양성은 재조합 위치에서 무작위적으로 뉴클레오티드가 도입 및/또는 결실되는 부정확한 V-(D)-J 재배열에 의해 추가적으로 증폭된다. TCR 유전자좌의 재배열은 T 세포의 성숙 동안에 게놈 내에서 발생하므로, 각 성숙 T 세포는 하나의 특이적 α/β TCR 또는 γ/δ TCR만을 발현한다.
MHC 및 항원 결합은 TCR의 상보성 결정 영역 1, 2 및 3(CDR1, CDR2, CDR3)에 의해 매개된다. 항원 인식 및 결합에 가장 중요한 β-사슬의 CDR3는 재배열된 TCR β-사슬 유전자의 V-D-J 접합에 의해 암호화된다.
TCR은 TCR α-사슬 및 β-사슬, 공-수용체 CD4 또는 CD8 및 CD3 신호전달 모듈의 이종이량체 복합체를 포함하는 복잡한 신호전달 기구의 일부이다(도 1). CD3 사슬은 세포 내에 활성화 신호를 전달하지만, TCR α/β 이종이량체는 단독으로 항원 인식만을 담당한다. 따라서, TCR α/β-사슬의 전달은 T 세포를 관심있는 임의의 항원으로 재지향시킬 가능성을 제공한다.
면역요법
항원-특이적 면역요법은 전염성 또는 악성 질병을 통제하기 위해 환자에서 특이적 면역반응을 향상시키거나 유도하는 것을 목표로 한다. 점차 많아지는 병원체-관련 항원 및 종양-관련 항원(TAA)의 동정은 면역요법을 위한 적절한 표적의 광범위한 컬렉션을 이끌었다. 이들 항원으로부터 유래된 면역원성 펩티드(에피토프)를 제시하는 세포는 능동 또는 수동 면역화 전략에 의해 특이적으로 표적화될 수 있다.
능동 면역화는 병든 세포를 특이적으로 인지하고 사멸시킬 수 있는 항원-특이적 T 세포를 환자에서 유도하고 증대시키려는 경향이 있다. 대조적으로, 수동 면역화는 시험관내에서 증대되고 선택적으로 유전적으로 조작된 T 세포의 양자 전이(양자 T 세포 요법)에 의존한다.
백신접종
종양 백신은 능동 면역에 의해 내인성 종양-특이적 면역반응을 유도하는 것을 목표로 한다. 종양 백신접종에는 환자에게 전달한 후 DC를 펄싱함으로써 생체내 또는 시험관내에서 직접 적용될 수 있는 전체 암세포, 단백질, 펩티드 또는 면역화 벡터 예컨대 RNA, DNA 또는 바이러스 벡터를 포함하고, 상기 종양 백신접종에 대해 상이한 항원 형식을 사용할 수 있다.
치료-유도된 면역반응을 확인할 수 있는 임상 연구의 수는 면역 전략과 항원-특이적 면역반응의 검출 방법의 향상으로 꾸준히 증가하고 있다(Connerotte, T. et al. (2008). Cancer Res. 68, 3931-3940; Schmitt, M. et al. (2008) Blood 111, 1357-1365; Speiser, D.E. et al. (2008) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 105, 3849-3854; Adams, S. et al. (2008) J. Immunol. 181, 776-784).
그러나 대부분의 경우에는 검출된 면역반응이 임상 결과와 체계적으로 연관될 수는 없다(Curigliano, G. et al. (2006) Ann. Oncol. 17, 750-762; Rosenberg, S.A. et al. (2004) Nat. Med. 10, 909-915).
따라서, 종양 항원으로부터 유래된 펩티드 에피토프를 정확히 규정하는 것은 백신접종 전략의 특이성 및 효율성뿐만 아니라 면역 모니터링 방법을 개선하는데 기여할 수 있다.
양자 세포 전달(ACT)
ACT 기반 면역요법은 이전에 감작된 T 세포를 비-면역 수용자에게 전달하는 수동 면역화의 형태로, 또는 전구체가 낮은 빈도에서 임상적으로 관련된 세포 수로부터 생체외 확장 후 자가 숙주에게 전달되는 수동 면역화의 형태로 광범위하게 정의할 수 있다. ACT 실험에 사용되고 있는 세포 유형은 림포카인-활성화 킬러(LAK) 세포(Mule, J.J. et al. (1984) Science 225, 1487-1489; Rosenberg, S.A. et al. (1985) N. Engl. J. Med. 313, 1485-1492), 종양-침윤 림프구(TIL)(Rosenberg, S.A. et al. (1994) J. Natl. Cancer Inst. 86, 1159-1166), 조혈 줄기세포 이식(HSCT) 후의 공여자 림프구뿐만 아니라, 종양-특이적 T 세포주 또는 클론을 들 수 있다(Dudley, M.E. et al. (2001) J. Immunother. 24, 363-373; Yee, C. et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 99, 16168-16173).
양자 T 세포 전달은 CMV와 같은 인간 바이러스 감염에 대한 치료 활성을 갖는 것으로 나타났다. 내인성 잠복 바이러스의 CMV 감염 및 재활성화는 건강한 개체의 면역계에 의해 제어되지만, 면역 무방비 상태의 개체 예컨대 이식 수용자 또는 AIDS 환자에서는 심각한 이환율과 사망률을 초래한다.
Riddell 및 동료들은 HLA-필적된 CMV-혈청 반응 양성의 이식 공여자로부터 유래된 CD8+ CMV-특이적 T 세포 클론을 옮긴 후 면역 억제 환자에서 양자 T 세포 요법으로 바이러스성 면역을 재구성하는 것을 입증하였다(Riddell, S.R. (1992) Science 257, 238-241).
다른 접근법으로서 폴리클로날 공여체-유래된 CMV- 또는 EBV-특이적 T 세포 집단을 이식 수용자에게 전달하여 전달된 T 세포의 지속성을 증가시켰다(Rooney, C.M. et al. (1998) Blood 92, 1549-1555; Peggs, K.S. et al. (2003) Lancet 362, 1375-1377).
흑색종의 양자 면역요법을 위해 Rosenberg와 동료들은 비-파괴적 림프구 고갈 화학요법 및 고용량 IL2와 병용하여 절제된 종양으로부터 분리하여 시험관내 증식시킨 자가 종양 침윤 림프구(TIL)의 주입에 의거하는 ACT 접근법을 확립하였다. 최근 발표된 임상 연구는 전이성 흑색종을 앓아 치료받은 환자의 ~50%의 객관적 반응률을 나타냈다(Dudley, M.E. et al. (2005) J. Clin. Oncol. 23: 2346-2357).
그러나 환자는 ACT 면역요법에 적격일 수 있는 몇 가지 전제를 충족시켜야 한다. 이들은 절제 가능한 종양이 있어야 한다. 종양은 세포 배양 조건 하에서 생존 가능한 TIL을 생성해야 한다. TIL은 종양 항원과 반응해야 하며 시험관내에서 충분한 수로 증대되어야 한다. 특히 흑색종 이외의 암에서는 이러한 종양-반응성 TIL을 얻는 것이 어렵다. 또한, 정상적인 인간 T 림프구의 시험관내 자극과 클론확장을 반복하면, 텔로머라아제 활성이 점진적으로 감소하고 텔로미어의 길이가 짧아지고 복제성 노화를 일으키고 전달된 T 세포의 지속성이 감소할 가능성이 있다(Shen, X. et al. (2007) J. Immunother. 30: 123-129).
유전자-조작된 T 세포를 이용한 ACT
ACT의 한계를 극복하는 접근법은 단시간의 생체외 배양 중에 정해진 특이성을 갖는 종양 반응성 면역수용체를 발현하도록 재프로그램하고 환자에게 재주입하는 자가 T 세포의 양자전이이다(Kershaw M.H. et al. (2013) Nature Reviews Cancer 13 (8):525-41). 이 전략은 종양 반응성 T 세포가 환자에게 없는 경우에도 ACT를 다양한 일반 악성종양에 적용할 수 있게 한다. T 세포의 항원 특이성이 전적으로 TCR α- 및 β-사슬의 이종이량체 복합체에 의거하기 때문에, T 세포로 복제 된 TCR 유전자의 전달은 대상으로 하는 임의의 항원으로 이들을 재지향시키는 잠재적 가능성을 제공한다. 따라서, TCR 유전자 요법은 치료 옵션으로서 자가 림프구에 의한 항원-특이적 면역요법을 개발하는 매력적인 전략을 제공한다. TCR 유전자 전달의 주요 이점은 항원-특이적 T 세포의 치료량을 며칠 내에 생성하고 환자의 내인성 TCR 레파토리에는 존재하지 않는 특이성을 도입할 수 있다는 것이다.
몇몇의 그룹은 TCR 유전자 전달이 일차 T 세포의 항원-특이성을 재지향하는 매력적인 전략임을 보여주었다(Morgan, R.A. et al. (2003) J. Immunol. 171, 3287-3295; Cooper, L.J. et al. (2000) J. Virol. 74, 8207-8212; Fujio, K. et al. (2000) J. Immunol. 165, 528-532; Kessels, H.W. et al. (2001) Nat. Immunol. 2, 957-961; Dembic, Z. et al. (1986) Nature 320, 232-238).
인간에서의 TCR 유전자 요법의 실현가능성은 최근 Rosenberg와 그의 그룹에 의해 악성 흑색종의 치료에 관한 임상시험에서 입증되었다. 흑색종/멜라닌세포 항원-특이적 TCR로 레트로바이러스성 형질도입된 자가 림프구의 양자전이는 처치된 흑색종 환자의 30%까지 암 퇴행을 초래하였다(Morgan, R.A. et al. (2006) Science 314, 126-129; Johnson, L.A. et al. (2009) Blood 114, 535-546).
키메라 항원 수용체
키메라 항원 수용체(CAR)는 T 세포 활성화를 위한 하나 이상의 신호전달 도메인으로 이루어진 세포내 일부분과 단일 클론 항체의 단일 사슬 가변 단편(scFv)을 조합하여 조작된 수용체이다. CAR은 비-MHC-제한적 방식으로 천연 항원을 인식하므로 어떠한 HLA 유형이라도 모든 개체에서 사용할 수 있으며 CD8+ T 세포뿐만 아니라 CD4+에서도 기능한다.
지난 10년간 다양한 세포 표면 종양 항원의 패널을 표적으로 하는 다수의 CAR이 보고되고 있다. 이들의 생물학적 기능은 제2세대 CAR이라고 하는 3부분으로 된 수용체(scFv, CD28, CD3ζ)를 유발하는 공자극 도메인의 통합에 의해 극적으로 개선되었다. 제3세대 CAR은 변형된 T 세포의 급증 능력과 지속성을 향상시키기 위해 OX40과 4-1BB와 같은 공자극 분자의 추가적인 도메인을 포함한다(도 2).
항원-특이적 면역요법을 위한 표적 구조
다양한 종양-관련 항원(TAA)의 발견은 항원-특이적 면역요법 개념의 기초를 제공하였다(Novellino, L. et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54, 187-207). TAA는 유전적 불안정성으로 인해 종양 세포에서 발현되는 비정상적인 단백질이고, 이는 정상 세포에서 발현하지 않거나 발현이 한정되어 있다. 이들 TAA는 면역계에 의해 악성 세포를 특이적 인식을 가져올 수 있다.
자가 종양-특이적 T 세포(van der Bruggen, P. et al. (1991) Science 254, 1643-1647) 또는 순환 항체(Sahin, U. et al. (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 92, 11810-11813)를 사용한 종양-유도된 cDNA 발현 라이브러리의 스크리닝, 역면역학적 접근법, 생화학적 방법(Hunt, D.F. et al. (1992) Science 256, 1817-1820), 유전자 발현 분석법 또는 인 실리코 클로닝 전략(Helftenbein, G. et al. (2008) Gene 414, 76-84)은 면역요법 전략의 표적 후보자를 상당수 유도하였다. TAA는 분화 항원, 과발현된 항원, 종양-특이적 스플라이스 변이체, 돌연변이된 유전자 산물, 바이러스성 항원 및 암 정소 항원(CTA)을 포함한 수개의 카테고리에 분류된다. 암 정소 패밀리는 이들의 발현은 정소와 다양한 종양 실체로 한정되기 때문에 TAA의 매우 유망한 카테고리이다(Scanlan, M.J. et al. (2002) Immunol. Rev. 188, 22-32). 현재까지 50개를 초과하는 CT 유전자가 기술되어 있고(Scanlan, M.J. et al. (2004) Cancer Immun. 4, 1) 그 중 일부는 임상 연구에서 다루어지고 있다(Adams, S. et al. (2008) J. Immunol. 181, 776-784; Atanackovic, D. et al. (2004) J. Immunol. 172, 3289-3296; Chen, Q. et al. (2004) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 101, 9363-9368; Connerotte, T. et al. (2008). Cancer Res. 68, 3931-3940; Davis, I.D. et al. (2004) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 101, 10697-10702; Jager, E. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 97, 12198-12203; Marchand, M. et al. (1999) Int. J. Cancer 80, 219-230; Schuler-Thurner, B. et al. (2000) J. Immunol. 165, 3492-3496).
면역치료적 접근을 위한 매력적인 표적 구조가 증가하고 있음에도 불구하고, 특이적 T 세포 클론 또는 정해진 HLA 한정 세포주는 그들 중 극히 일부에 대해서만 존재한다(Chaux, P. et al. (1999) J. Immunol. 163, 2928-2936; Zhang, Y. et al. (2002) Tissue Antigens 60, 365-371; Zhao, Y. et al. (2005) J. Immunol. 174, 4415-4423).
클라우딘은 상피와 내피의 밀착연접 내에 위치한 내재성 막 단백질이다. 클라우딘은 2개의 세포밖 루프와 세포질에 위치한 N- 및 C-말단을 가지고 4개의 막관통 세그먼트를 가질 것으로 예측된다. 막관통 단백질의 클라우딘(CLDN) 패밀리는 상피와 내피의 밀착연접의 유지에 중요한 역할을 하며, 또한 세포 골격과 세포 신호전달의 유지에 중요한 역할도 할 수 있다.
CLDN18은 클라우딘 패밀리에 속하며, 이는 밀착연접의 형성에 관여하는 4개의 막을 가로지르는 도메인을 갖는 세포 표면 분자이다(Tsukita S, Nat Rev Mol Cell Biol 2001; 2:285-93). 인간 CLDN18 유전자는 2개의 대체적인 제 1 엑손을 가지고 있고, N-말단 69개 아미노산에 대해 다른 2개의 단백질 이소형체(CLDN18.1 및 CLDN18.2)를 생성하고 있고(Niimi T, MolCellBiol 2001;21:7380-90), 세포밖 루프를 포함한다(도 4A). 제한된 조직 세트의 전사 프로파일링은 이들 이소형체가 상이한 계열 관여를 가지고, CLDN18.1이 폐 조직에서 주로 발현되는 반면 CLDN18.2는 위 특이성을 나타내는 것을 보여주었다. CLDN18.2 발현은 위점막의 수명이 짧은 분화된 상피에 국한되며 위 줄기 세포 구역 및 임의의 다른 건강한 조직에는 존재하지 않는다. CLDN18.2의 발현은 위식도암, 췌장암 및 다른 암과 관련이 있다(도 4B, C; Sahin U et al., Clin Cancer Res 2008;14:7624-34; Karanjawala ZE et al., Am J Surg Pathol 2008;32:188-96;). 이 표적에 대한 재조합 mAb는 현재 II상 임상 시험 중이지만, T 세포 기반된 요법에 대한 표적으로서 CLDN18.2의 평가는 아직 다루어지지 않고 있다.
종양에서의 CLDN18.2의 빈번한 과발현은 백신 치료제 및 치료용 항체와 같은 CLDN18.2에 대한 치료제의 개발을 위한 매우 매력적인 표적으로 이 분자를 인정한다. 그러나, 지금까지는 HLA-A*2-제한된 CLDN18.2 T 세포 에피토프 및 T 세포 수용체 또는 CLDN18.2를 표적으로 하는 CAR은 설명되지 않고 있으며 CLDN18.2 발현 암세포가 능동 또는 수동 면역화 접근법을 사용하는, T 세포를 포함하는 면역요법에 의해 생체내에서 표적화될 수 있는지 여부는 알려져 있지 않다.
본 발명은 종양-관련 항원 CLDN18.2에 특이적인 T 세포 수용체 및 인공 T 세포 수용체에 관한 것으로, 특히 병든 세포와 같은 세포의 표면 상에 존재하거나 또는 병든 세포 또는 항원-제시 세포와 같은 세포 표면 상에 제시하는 경우에 해당하고, 뿐만 아니라 이들 T 세포 수용체에 의해 인식되는 에피토프, 즉 CLDN18.2-T 세포 에피토프를 포함하는 펩티드에 관한 것이다.
이러한 T 세포 수용체 또는 인공 T 세포 수용체를 발현하도록 조작된 T 세포의 양자전이에 의해 CLDN18.2 발현 암세포는 암세포의 선택적 파괴를 초래함으로써 특이적으로 표적화될 수 있다. 또한, 본 발명에 따라 제공되는 T 세포 에피토프는 CLDN18.2-발현 암에 대한 백신 설계에 유용하다.
하나의 양상에서, 본 발명은 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드에 관한 것이다. 일 실시형태에서, 펩티드는 100개 이하, 50개 이하, 20개 이하 또는 10개 이하의 아미노산 길이이다. 일 실시형태에서, 펩티드는 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체로 이루어진 펩티드를 생산하도록 가공될 수 있다. 일 실시형태에서, 펩티드는 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체로 구성된다.
일 실시형태에서, 펩티드는 MHC 클래스 I 또는 클래스 II 제시된 펩티드이고, 바람직하게는 MHC 클래스 I 제시된 펩티드이고, 또는 세포 내에 존재하면 MHC 클래스 I 또는 클래스 II 제시된 펩티드인 이의 가공 생성물을 생산하도록 가공될 수 있고, 바람직하게는 MHC 클래스 I 제시된 펩티드인 이의 가공 생성물을 생산하도록 가공될 수 있다. 바람직하게는, 상기 MHC 클래스 I 또는 클래스 II 제시된 펩티드는 주어진 아미노산 서열, 즉 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체에 실질적으로 상응하는 서열을 갖는다. 바람직하게는, 본 발명에 따른 펩티드는 CLDN18.2를 클래스 I MHC로 제시하는 것을 특징으로 하는 세포에 관련된 질병에 대한 세포성 반응을 자극할 수 있다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 본 발명의 펩티드를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산 및 상기 핵산을 포함하는 세포에 관한 것이다. 상기 핵산은 재조합 핵산일 수 있다. 상기 핵산은 플라스미드 또는 발현 벡터에 존재할 수 있고 프로모터에 기능적으로 연결될 수 있다. 일 실시형태에서, 상기 핵산은 RNA이다. 바람직하게는, 상기 세포는 펩티드를 발현한다. 상기 세포는 재조합 세포일 수 있고 암호화된 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 분비할 수 있으며, 이를 표면 상에 발현시킬 수 있고, 바람직하게는 상기 펩티드 또는 이의 가공 생성물에 결합하는 MHC 분자를 추가적으로 발현할 수 있고 바람직하게는 세포 표면 상에 상기 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 제시한다. 일 실시형태에서, 상기 세포는 내인성으로 MHC 분자를 발현한다. 추가적인 실시형태에서, 상기 세포는 재조합 방식으로 MHC 분자 및/또는 펩티드를 발현한다. 상기 세포는 바람직하게는 비증식성이다. 바람직한 실시형태에서, 상기 세포는 항원-제시 세포, 특히 수지상세포, 단핵구 또는 대식세포이다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 본 발명의 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 제시하는 세포에 관한 것이며, 여기서 상기 가공 생성물은 바람직하게는 주어진 아미노산 서열, 즉 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 갖는 펩티드이다. 일 실시형태에서, 상기 세포는 본 발명의 펩티드를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산을 포함하는 세포이다. 바람직하게는 상기 세포는 상기 펩티드를 생산하도록 상기 핵산을 발현한다. 선택적으로, 상기 세포는 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드를 생산하도록 상기 펩티드를 가공한다. 상기 세포는 이의 표면 상에 MHC 분자에 의해 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 제시할 수 있다. 일 실시형태에서, 상기 세포는 MHC 분자를 내인성으로 발현한다. 추가적인 실시형태에서, 상기 세포는 MHC 분자를 재조합적으로 발현한다. 일 실시형태에서, 상기 세포의 MHC 분자는 펩티드를 세포에 첨가함으로써 펩티드로 로딩(펄스화)된다. 상기 세포는 펩티드를 재조합적으로 발현하고 상기 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 세포 표면 상에 제시할 수 있다. 상기 세포는 바람직하게는 비증식성이다. 바람직한 실시형태에서, 상기 세포는 항원-제시 세포 예컨대 수지상세포, 단핵구 또는 대식세포이다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 특히 병든 세포와 같은 세포의 표면 상에 제시되는 경우, 본 발명의 펩티드와 반응하는 면역반응성 세포에 관한 것이다. 상기 면역반응성 세포는 펩티드를 인식하기 위해 시험관내에서 감작된 세포일 수 있다. 상기 면역반응성 세포는 T 세포일 수 있고, 바람직하게는 세포독성 T 세포일 수 있다. 바람직하게는, 상기 면역반응성 세포는 특히 MHC 예컨대 병든 세포와 같은 세포의 표면상의 MHC에 결합하는 경우, 주어진 아미노산 서열에 실질적으로 상응하는 서열, 즉 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노의 변이체에 결합한다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 선택적으로 MHC 분자와의 복합체에서, 본 발명의 펩티드에 결합하는 결합제에 관한 것이다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 선택적으로 MHC 분자와의 복합체에서, 본 발명의 펩티드에 결합하고, 바람직하게는 상기 펩티드와 반응하는, T 세포 수용체 또는 상기 T 세포 수용체의 폴리펩티드 사슬에 관한 것이다. 일 실시형태에서, 상기 T 세포 수용체의 폴리펩티드 사슬은 T 세포 수용체 α-사슬 또는 T 세포 수용체 β-사슬이다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 T 세포 수용체 α-사슬 또는 상기 T 세포 수용체 α-사슬을 포함하는 T 세포 수용체에 관한 것이고,
여기서 상기 T 세포 수용체 α-사슬은
(i) 서열번호 8, 10, 12, 14, 16 및 18로 이루어진 군으로부터 선택된 T 세포 수용체 α-사슬 또는 이의 변이체의 CDR 서열 중 적어도 1개, 바람직하게는 2개, 보다 바람직하게는 3개 모두를 포함하는 T 세포 수용체 α-사슬 및
(ii) 서열번호 8, 10, 12, 14, 16 및 18로 이루어진 군으로부터 선택된 T 세포 수용체 α-사슬 서열이나 이의 단편, 또는 상기 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 T 세포 수용체 α-사슬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일 실시형태에서, 상기 서열번호는 서열번호 8, 10, 14 및 18로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 T 세포 수용체는 서열번호 6의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드와 반응한다.
일 실시형태에서, 상기 서열번호는 서열번호 10, 12 및 14로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 T 세포 수용체는 서열번호 7의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드와 반응한다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 T 세포 수용체 β-사슬 또는 상기 T 세포 수용체 β-사슬을 포함하는 T 세포 수용체에 관한 것이고,
여기서 상기 T 세포 수용체 β-사슬은
(i) 서열번호 9, 11, 13, 15, 17 및 19로 이루어진 군으로부터 선택된 T 세포 수용체 β-사슬 또는 이의 변이체의 CDR 서열 중 적어도 1개, 바람직하게는 2개, 보다 바람직하게는 3개 모두를 포함하는 T 세포 수용체 β-사슬 및
(ii) 서열번호 9, 11, 13, 15, 17 및 19로 이루어진 군으로부터 선택된 T 세포 수용체 β-사슬 서열이나 이의 단편, 또는 상기 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 T 세포 수용체 β-사슬로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일 실시형태에서, 상기 서열번호는 서열번호 9, 11, 15 및 19로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 T 세포 수용체는 서열번호 6의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드와 반응한다.
일 실시형태에서, 상기 서열번호는 서열번호 11, 13 및 15로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 T 세포 수용체는 서열번호 7의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드와 반응한다.
추가적인 양상에서, 본 발명은:
(I) T 세포 수용체는:
(i) 서열번호 x인 T 세포 수용체 α-사슬 또는 이의 변이체의 CDR 서열 중 적어도 하나, 바람직하게는 2개, 보다 바람직하게는 3개 모두를 포함하는 T 세포 수용체 α-사슬, 및
(ii) 서열번호 x+1인 T 세포 수용체 β-사슬 또는 이의 변이체의 CDR 서열 중 적어도 하나, 바람직하게는 2개, 보다 바람직하게는 3개 모두를 포함하는 T 세포 수용체 β-사슬을 포함하고;
여기서 x는 8, 10, 12, 14, 16 및 18로 이루어진 군으로부터 선택되며
(II) T 세포 수용체는:
(i) 서열번호 x인 T 세포 수용체 α-사슬 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 T 세포 수용체 α-사슬, 및
(ii) 서열번호 x+1인 T 세포 수용체 β-사슬 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 T 세포 수용체 β-사슬을 포함하고;
여기서 x는 8, 10, 12, 14, 16 및 18로 이루어진 군으로부터 선택되는 것으로 이루어진 군으로부터 선택되는 T 세포 수용체에 관한 것이다.
일 실시형태에서, 상기 x는 서열번호 8, 10, 14 및 18로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 T 세포 수용체는 서열번호 6의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드와 반응한다.
일 실시형태에서, 상기 x는 서열번호 10, 12 및 14로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 T 세포 수용체는 서열번호 7의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 펩티드와 반응한다.
일 실시형태에서, T 세포에 의해 발현되는 경우 및/또는 암세포와 같은 세포 상에 제시하는 상술한 바와 같은 CLDN18.2-펩티드 에피토프에 대해 T 세포 상에 제시되는 경우 상기 T 세포 수용체의 결합은 상기 T 세포의 증식 및/또는 활성화를 야기하고, 여기서 상기 활성화된 T 세포는 바람직하게는 세포독성 인자, 예를 들어 퍼포린 및 그랜자임을 방출하고, 암세포의 세포용해 및/또는 세포예정사를 개시한다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 클라우딘-18.2(CLDN18.2)에 결합하는 인공 T 세포 수용체에 관한 것이다. 일 실시형태에서, 결합은 특이적 결합이다.
일 실시형태에서, 상기 CLDN18.2는 암세포에서 발현된다. 일 실시형태에서, 상기 CLDN18.2는 암세포의 표면 상에 발현된다. 일 실시형태에서, 상기 인공 T 세포 수용체는 세포밖 도메인에 결합하거나 또는 CLDN18.2의 세포밖 도메인에서의 에피토프에 결합한다. 일 실시형태에서, 상기 인공 T 세포 수용체는 살아있는 세포의 표면 상에 제시하는 CLDN18.2의 천연 에피토프에 결합한다. 일 실시형태에서 상기 인공 T 세포 수용체는 CLDN18.2의 제 1 세포밖 루프에 결합한다. 일 실시형태에서, T 세포에 의해 발현되는 경우 및/또는 암세포와 같은 세포 상에 제시되는 CLDN18.2에 대해 T 세포상에 제시되는 경우 상기 인공 T 세포 수용체의 결합은 상기 T 세포의 증식 및/또는 활성화를 야기하며, 상기 활성화된 T 세포는 바람직하게는 세포독성 인자, 예를 들어 퍼포린 및 그랜자임을 방출하고, 암세포의 세포용해 및/또는 세포예정사를 개시한다.
일 실시형태에서, 본 발명의 인공 T 세포 수용체는 CLDN18.2에 대한 결합 도메인을 포함한다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 상기 인공 T 세포 수용체의 엑소도메인에 포함된다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 CLDN18.2 항체의 단일 사슬 가변 단편(scFv)을 포함한다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 CLDN18.2에 대한 특이성을 갖는 면역글로불린의 중쇄 가변부(VH)(VH(CLDN18.2)) 및 CLDN18.2에 대한 특이성을 갖는 면역글로불린의 경쇄 가변부(VL)(VL(CLDN18.2))를 포함한다. 일 실시형태에서, 상기 중쇄 가변부(VH) 및 상응하는 경쇄 가변부(VL)는 펩티드 링커를 통해 연결되고, 바람직하게는 아미노산 서열 (GGGGS)3을 포함하는 펩티드 링커를 통해 연결된다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 23으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 VH(CLDN18.2)를 포함한다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 30로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 VL(CLDN18.2)를 포함한다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 23으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 VH(CLDN18.2) 및 서열번호 30로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 VL(CLDN18.2)를 포함한다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 35로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함한다.
일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 CLDN18.2에 대한 결합 도메인과 동일한 또는 본질적으로 동일한 에피토프를 인식하거나 또는 서열번호 23으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 VH(CLDN18.2) 및 서열번호 30으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 VL(CLDN18.2)를 포함하는 CLDN18.2에 대한 항체를 인식하고 및/또는 CLDN18.2와의 결합에 대해 상기 CLDN18.2-결합 도메인 또는 CLDN18.2-항체와 경쟁한다. 일 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 35로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 CLDN18.2에 대한 결합 도메인과 동일한 또는 본질적으로 동일한 에피토프를 인식하고 및/또는 CLDN18.2와의 결합에 대해 상기 CLDN18.2-결합 도메인와 경쟁한다. 표적과의 결합에 대해 제 2 결합 도메인 또는 항체와 경쟁하는 결합 도메인은 바람직하게는 상기 제 2 결합 도메인 또는 항체에 대해 길항적이다.
일 실시형태에서, 본 발명의 인공 T 세포 수용체는 막관통 도메인을 포함한다. 일 실시형태에서, 막관통 도메인은 막을 횡단하는 소수성 알파 나선이다. 일 실시형태에서, 막관통 도메인은 CD28 막관통 도메인 또는 이의 단편을 포함한다.
일 실시형태에서, 본 발명의 인공 T 세포 수용체는 T 세포 신호전달 도메인을 포함한다. 일 실시형태에서, T 세포 신호전달 도메인은 세포 내 위치한다. 일 실시형태에서, T 세포 신호전달 도메인은 CD3-제타, 바람직하게는 CD3-제타의 엔도도메인을, 선택적으로 CD28과 조합하여 포함한다. 일 실시형태에서, T 세포 신호전달 도메인은 서열번호 40에 따른 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 서열이나 단편의 변이체를 포함한다.
일 실시형태에서, 본 발명의 인공 T 세포 수용체는 초기 단백질(nascent protein)을 소포체 내로 향하게 하는 신호 펩티드를 포함한다. 일 실시형태에서, 신호 펩티드는 CLDN18.2에 대한 결합 도메인에 선행한다. 일 실시형태에서, 신호 펩티드는 서열번호 37에 따른 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 서열이나 단편의 변이체를 포함한다.
일 실시형태에서, 본 발명의 인공 T 세포 수용체는 CLDN18.2에 대한 결합 도메인을 막관통 도메인에 연결시키는 스페이서 영역을 포함한다. 일 실시형태에서, 스페이서 영역은 CLDN18.2 인식을 용이하게 하기 위해 CLDN18.2에 대한 결합 도메인을 다른 방향으로 배향하는 것을 가능하게 한다. 일 실시형태에서, 스페이서 영역은 IgG1으로부터의 경첩 영역을 포함한다. 일 실시형태에서, 스페이서 영역은 서열번호 38에 따른 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 서열이나 단편의 변이체를 포함한다.
일 실시형태에서, 본 발명의 인공 T 세포 수용체는 하기 구조를 포함한다:
NH2 - 신호 펩티드 - CLDN18.2에 대한 결합 도메인 - 스페이서 영역 - 막관통 도메인 - T 세포 신호전달 도메인 - COOH
일 실시형태에서, 본 발명의 인공 T 세포 수용체는 서열번호 41에 따른 아미노산 서열 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함한다.
상기 T 세포 수용체 및 인공 T 세포 수용체는, 특히 병든 세포와 같은 세포의 표면 상에 존재하는 경우 또는 병든 세포 또는 항원-제시 세포와 같은 세포의 표면 상에 존재하는 경우, 종양-관련 항원 CLDN18.2에 특이적인 것이 바람직하다.
본 발명의 T 세포 수용체 및 인공 T 세포 수용체는 T 세포와 같은 세포에 의해 발현 및/또는 이의 표면 상에 존재할 수 있다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 본 발명의 T 세포 수용체 사슬 또는 T 세포 수용체를 암호화하거나 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산에 관한 것이다. 일 실시형태에서, 핵산은 재조합 핵산이다. 일 실시형태에서, 핵산은 벡터의 형태 또는 RNA의 형태이다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 본 발명의 T 세포 수용체 사슬 또는 T 세포 수용체 또는 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 포함하는 세포 및/또는 본 발명의 T 세포 수용체 사슬 또는 T 세포 수용체를 암호화하거나 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산을 포함하는 세포에 관한 것이다. 일 실시형태에서, 상기 핵산은 RNA이고, 바람직하게는 시험관내 전사된 RNA이다. 세포는 본 발명의 T 세포 수용체 사슬 또는 T 세포 수용체 또는 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 발현하는 세포일 수 있고 및/또는 본 발명의 T 세포 수용체 사슬 또는 T 세포 수용체 또는 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 이의 세포 표면 상에 가질 수 있다. 일 실시형태에서, 상기 세포는 양자 세포 전달에 유용한 세포이다. 세포는 효과기 또는 줄기 세포일 수 있고, 바람직하게는 면역반응성 세포일 수 있다. 면역반응성 세포는 T 세포이고, 바람직하게는 세포독성 T 세포일 수 있다. 일 실시형태에서, 면역반응성 세포는 종양-관련 항원 CLDN18.2와 반응한다. 일 실시형태에서, 상기 CLDN18.2는 병든 세포와 같은 세포의 표면 상에 제시한다. 일 실시형태에서, 상기 CLDN18.2는 병든 세포 또는 항원-제시 세포와 같은 세포의 표면 상에 제시하며, 면역반응성 세포는 특히 MHC와 관련하여 제시되는 경우 본 발명의 펩티드와 반응하고, 바람직하게는 주어진 아미노산 서열, 즉 서열번호 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체와 실질적으로 상응하는 서열에 결합한다. 일 실시형태에서, 상기 세포는 내인성 TCR의 표면 발현이 결핍되어 있거나 또는 CLDN18.2-비관련된 항원에 특이적이다.
일 실시형태에서, 본 발명의 세포는 양자 세포 전달에 사용하기 전에 항원-특이적 증식 및 재공격을 받고, 여기서 항원-특이적 증식 및 재공격은 바람직하게는 CLDN18.2 또는 이의 펩티드 단편을 제시하는 자가 항원 제시 세포에 세포를 노출시킴으로써 실시할 수 있다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 본 발명의 T 세포 수용체 사슬 또는 T 세포 수용체를 암호화하거나 또는 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산을 가지고 T 세포에 형질도입하는 단계를 포함하는 면역반응성 세포의 생산 방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 일반적으로 병든 세포 예컨대 암세포, 특히 CLDN18.2를 발현하는 암세포를 표적으로 함으로써 질병의 치료를 포함한다. 그 방법은 CLDN18.2를 발현하지 않고 및/또는 제시하지 않는 정상 세포에 대한 부작용을 최소화함으로써, 종양-관련 항원 CLDN18.2를 이들 표면 상에 발현 및/또는 제시하는 세포의 선택적 박멸을 제공한다. 따라서, 치료를 위한 바람직한 질병은 CLDN18.2가 발현되고 선택적으로 제시되는 것들, 예컨대 암질환, 특히 본원에 기재된 것들이다.
본 발명의 펩티드, 본 발명의 펩티드를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산 또는 상기 핵산을 포함하는 본 발명의 세포를 투여하는 경우, 치료는 바람직하게는 능동 면역화를 포함한다. 바람직하게는, CLDN18.2-특이적 T 세포는 환자에서 증대되고, 병든 세포를 인식하고 사멸시킬 수 있다. 본 발명의 면역반응성 세포, 본 발명의 T 세포 수용체, 본 발명의 인공 T 세포 수용체, 본 발명의 T 세포 수용체를 암호화하거나 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 본 발명의 핵산 또는 본 발명의 T 세포 수용체 또는 인공 T 세포 수용체를 포함하는 본 발명의 세포 및/또는 본 발명의 T 세포 수용체를 암호화하거나 본 발명의 인공 T 세포 수용체를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 본 발명의 핵산을 포함하는 본 발명의 세포를 투여하는 경우, 치료는 바람직하게는 수동 면역화를 포함한다. 바람직하게는, 병든 세포를 인식하고 죽일 수 있는 CLDN18.2-특이적 T 세포 및 선택적으로 시험관내에서 유전적으로 조작하고 및/또는 증대시킨 CLDN18.2-특이적 T 세포는 환자에게 양자적으로 전달된다.
하나의 양상에서, 본 발명은:
(i) 본 발명의 펩티드;
(ii) 본 발명의 핵산;
(iii) 본 발명의 세포;
(iv) 본 발명의 면역반응성 세포;
(v) 본 발명의 결합제;
(vi) 본 발명의 T 세포 수용체; 및
(vi) 본 발명의 인공 T 세포 수용체 중 하나 이상을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약학 조성물은 약제적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있고 선택적으로 하나 이상의 보조제, 안정화제 등을 포함할 수 있다. 약학 조성물은 치료적 또는 예방적 백신의 형태일 수 있다. 일 실시형태에서, 약학 조성물은 본원에 기재된 것과 같은 암질환을 치료하거나 예방하는데 사용된다.
상기 기술된 바와 같은 약학 조성물의 투여는 CLDN18.2에 대한 CD4+ 헬퍼 T 세포 반응 및/또는 CD8+ T 세포 반응을 유도할 수 있는 MHC 클래스 II-제시된 에피토프를 제공 할 수 있다(이의 표면 상에 CLDN18.2를 발현하는 세포 및/또는 MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2를 제시하는 세포를 포함한다). 대안으로 또는 부가적으로, 상술한 바와 같은 약학 조성물의 투여는 CLDN18.2에 대한 CD8+ T 세포성 반응을 유도할 수 있는 MHC 클래스 I-제시된 에피토프를 제공할 수 있다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 본 발명의 약학 조성물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 암질환의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다.
추가적인 양상에서, 본 발명은 치료에 사용하기 위한, 특히 암을 치료하거나 예방하는데 사용하기 위한 본 발명의 펩티드, 본 발명의 핵산, 본 발명의 세포, 본 발명의 면역반응성 세포, 본 발명의 결합제, 본 발명의 T 세포 수용체, 또는 본 발명의 인공 T 세포 수용체에 관한 것이다.
또 다른 양상은 본 발명의 약학 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 면역반응을 유도하는 방법에 관한 것이다.
또 다른 양상은 본 발명의 펩티드, 본 발명의 펩티드를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 본 발명의 핵산, 상기 핵산을 포함하는 본 발명의 세포 및/또는 본 발명의 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 제시하는 본 발명의 세포 중 하나 이상을 사용하여 T 세포를 자극, 초회항원자극(priming) 및/또는 증대시키는 방법에 관한 것이다. 일 실시형태에서, 본 발명의 펩티드는 MHC 분자 예컨대 세포, 예를 들어 항원-제시 세포 표면상의 MHC 분자와 관련하여 제시된다.
이러한 양상에서, 본 발명은 CLDN18.2-특이적 T 세포를 제조하는 방법에 관한 것이다. T 세포는 시험관내 또는 생체내에서 자극, 초회항원자극 및/또는 증대될 수 있다. 바람직하게는, T 세포는 대상체로부터 수득된 시료에 존재한다. 자극된, 초회항원자극된 및/또는 증대된 T 세포는 대상체에게 투여될 수 있고, 대상체에 대해 자가, 동종이계, 동계일 수 있다.
대상체에서 면역반응을 유도하는 방법 또는 T 세포를 자극, 초회항원자극 및/또는 증대시키는 방법의 상기 양상에서의 본 발명은 대상체에서 암질환을 치료하는 방법에 관한 것일 수 있다.
또 다른 양상은 본 발명의 펩티드, 본 발명의 핵산, 본 발명의 세포, 본 발명의 면역반응성 세포, 본 발명의 결합제, 본 발명의 T 세포 수용체, 또는 본 발명의 인공 T 세포 수용체의 치료적 유효량을 대상체에게 제공하는 단계를 포함하는, 대상체에서 암세포를 사멸시키는 방법에 관한 것이다.
본원에 기재된 조성물 및 제제는 클래스 I MHC와 함께 CLDN18.2의 발현 및/또는 제시하는 것을 특징으로 하는 질병, 예를 들어 암질환에 대해서 세포성 반응, 바람직하게는 세포독성 T 세포 활성을 유도하거나 촉진시킬 수 있는 것이 바람직하다.
하나의 양상에서, 본 발명은 본원에 기재된 치료 방법에 사용하기 위한 본원에 기재된 제제 및 조성물을 제공한다.
본원에 기재된 암질환의 치료는 외과적 절제 및/또는 방사선조사 및/또는 전통적인 화학요법과 조합될 수 있다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 대상체로부터 분리된 생물학적 시료에서 본 발명의 펩티드 또는 본 발명의 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 제시하는 본 발명의 세포와 반응하는 T 세포를 결정하는 것을 포함하는, 대상체에서의 면역반응을 결정하는 방법에 관한 것이다. 그 방법은:
(a) 하기 중 하나 이상을 가진 대상체로부터 분리된 T 세포를 포함하는 시료를 인큐베이팅하는 단계; 및
(i) 본 발명의 펩티드;
(ii) 본 발명의 펩티드를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 본 발명의 핵산; 및
(iii) 상기 핵산을 포함하는 본 발명의 세포 또는 본 발명의 펩티드 또는 이의 가공 생성물을 제시하는 본 발명의 세포;
(b) 상기 T 세포의 특이적 활성화를 검출하고, 이로부터 상기 대상체에서 면역반응의 존재 또는 부재를 결정하는 단계를 포함할 수 있다.
대상체에서 면역반응을 결정하는 방법의 상기 양상에서 본 발명은 대상체에서 암질환을 진단하는 방법에 관한 것이다.
진단 방법의 일 실시형태에서, 생물학적 시료는 조직 또는 기관에서 유래한 것이며, 여기서 조직 또는 기관이 무병일 경우 세포는 CLDN18.2를 실질적으로 발현하지 않는다.
전형적으로, 생물학적 시료에서 T 세포의 수준은 기준 수준과 비교되고, 여기서 상기 기준 수준으로부터의 편차는 대상체에서의 질병의 존재 및/또는 단계를 나타내는 것이다. 기준 수준은 대조군 시료(예를 들어, 건강한 조직 또는 대상체로부터의 것)에서 결정된 바와 같은 수준 또는 건강한 대상체로부터의 중간 수준일 수 있다. 상기 기준 수준으로부터의 "편차"는 적어도, 10%, 20%, 또는 30%, 바람직하게는 적어도 40% 또는 50%, 또는 그 이상의 증가와 같은 임의의 유의한 변화를 나타낸다. 바람직하게는, 상기 생물학적 시료에서의 T 세포의 존재 또는 기준 레벨과 비교하여 증가된 생물학적 시료에서의 T 세포의 양은 질병의 존재를 나타낸다.
T 세포는 환자 말초혈액, 림프절, 생검 및 절제로부터 유래된 것과 같은 조직 시료 또는 다른 공급원으로부터 분리될 수 있다. 반응성 검정은 일차 T 세포 또는 다른 적절한 유도체에서 수행될 수 있다. 예를 들어, T 세포는 융합되어 혼성세포를 생성할 수 있다. T 세포성 응답성을 측정하기 위한 검정은 본 기술분야에 공지되어 있는 것이며, 증식 검정 및 사이토카인 방출 검정을 포함한다.
반응성 T 세포를 검출하기 위한 검정 및 지표에는 IFNγ ELISPOT 및 IFNγ 세포내 사이토카인 염색의 사용이 포함되지만 이에 한정되지는 않는다. T 세포 클론이 특정 펩티드에 반응할지 여부를 결정하기 위한 다른 다양한 방법이 본 기술분야에 공지되어 있다. 전형적으로, 펩티드는 1~3일의 기간 동안 T 세포의 현탁액에 첨가된다. T 세포의 반응은 증식, 예를 들어 표지된 티미딘의 흡수 또는 사이토카인, 예를 들어 IL-2의 방출에 의해 측정될 수 있다. 다양한 검정법이 방출된 사이토카인의 존재를 검출하기 위해 이용 가능하다. T 세포 세포독성 검정은 항원에 대한 특이성을 갖는 세포독성 T 세포를 검출하는데 사용될 수 있다. 일 실시형태에서, 세포독성 T 세포는 MHC 클래스 I 분자로 항원을 제시하는 표적세포를 사멸시키는 이들의 능력에 대해 시험한다. 항원을 제시하는 표적세포를 표지하고 환자 시료으로부터의 T 세포의 현탁액에 첨가할 수 있다. 세포독성은 용균된 세포로부터 표지의 방출을 정량함으로써 측정될 수 있다. 자발적 방출 및 총 방출에 대한 대조군을 검정에 포함할 수 있다.
본 발명의 일 실시형태에서, 본원에 기재된 암은 MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2를 발현하는 암세포 및/또는 CLDN18.2를 제시하는 암세포를 포함한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 병든 세포는 암세포이다. 일 실시형태에서, 암세포와 같은 병든 세포는 MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2를 발현하는 세포 및/또는 CLDN18.2를 제시하는 세포이다. 일 실시형태에서, CLDN18.2의 발현은 병든 세포의 표면 상에 있다.
본 발명의 일 실시형태에서, 암은 아데노-암종, 특히 진행성 선암이다. 일 실시형태에서, 암은 위암, 식도암, 췌장암, 비소세포성 폐암(NSCLC)과 같은 폐암, 유방암, 난소암, 대장암, 간암, 두경부암, 담낭의 암 및 이의 전이, 크루켄버그(Krukenberg) 종양, 복막 전이 및/또는 림프절 전이로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일 실시형태에서, 암은 위암, 식도암, 특히 하부 식도암, 식도-위 접합부의 암 및 위식도암으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일 실시형태에서, 환자는 HER2/neu 음성 환자이거나 HER2/neu 양성 상태이지만 트라스투주맙 치료에 적합하지 않은 환자이다.
본 발명의 일 실시형태에서, 암세포는 위암, 식도암, 췌장암, 비소세포성 폐암(NSCLC)과 같은 폐암, 유방암, 난소암, 대장암, 간암, 두경부암, 담낭의 암 및 이의 전이, 크루켄버그 종양, 복막 전이 및/또는 림프절 전이로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 암세포이다. 일 실시형태에서, 암세포는 위암, 식도암, 특히 하부 식도암, 식도-위 접합부의 암 및 위식도암으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 암세포이다.
본 발명에 따르면, CLDN18.2는 바람직하게는 서열번호 1에 따른 아미노산 서열을 갖는다.
본 발명의 다른 특징 및 이점은 다음의 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백해질 것이다.
도 1은 TCR-CD3 복합체의 모식도를 나타낸다. 세포질내 CD3 면역수용체 티로신-기반 활성화 모티프(ITAM)는 원기둥 형상으로 나타내어진다(문헌["The T cell receptor facts book", MP Lefranc, G Lefranc, 2001]으로부터 개작하였다)
도 2는 CAR의 성공적인 생성을 디자인한 도면이다. CAR(1G, 제1세대, 2G, 제2세대, 3G, 제3세대)의 서로 다른 세대의 모식도를 개략적으로 나타낸다. 제1세대는 세포밖 scFv 및 세포독성을 매개하는 세포질 CD3ζ 사슬/ZAP70를 포함하고, 제2세대는 증식을 촉진하는 CD28/PI3K를 포함하고, 제3세대는 또한 세포 생존을 유지하는 4-1BB 또는 OX40/TRAF를 포함한다(Casucci, M. et al. (2011) 2: 378-382).
도 3은 CLDN18.2에 대한 T 세포의 재지향을 위한 다른 수용체 형태의 모식도를 개략적으로 나타낸다. 모식도의 좌측은 CLDN18.2-특이적 scFv 단편, IgG1-유래된 스페이서 도메인, CD28 공자극 및 CD3ζ 신호전달 도메인(CAR-28ζ)으로 구성된 제2세대를 나타내고, 모식도의 중앙은 뮤린 TCRβ-사슬의 불변 도메인의 연결 및 뮤린 TCRα-사슬의 불변 도메인의 공발현에 기반한 신규한 CAR 형태(CAR/Cα)를 나타내고, 모식도의 우측은 TCR α/β-사슬로 구성된 뮤린 TCR(mu, 뮤린 TCR)을 나타낸다.
도 4는 인간 조직 패널에서 CLDN18.1 및 CLDN18.2 전사체의 프로파일링을 나타내고 있다. 도 4의 A에서는 CLDN18 유전자좌(위쪽)의 게놈 구조를 나타낸다. 해치(Hatch)된 박스로 각각 CLDN18.1(E 1.1) 또는 CLDN18.2(E 1.2)에 대한 특위의 엑손을 나타내고; 하단에는 CLDN18 변이체의 엑손 조성을 나타내고; 아치형은 2개의 세포밖 도메인을 표시한 것이고; 화살표는 RT-PCR에 사용된 프라이머를 표시한 것이다. 도 4의 B에서는 종결점 RT-PCR(end-point RT-PCR)에 의해 정상 인간 조직(N), 원발성 종양 검체, 및 종양 세포주에서의 CLDN18 이소형체의 비교 분석을 나타낸다. 도 4의 C에서는 실시간 PCR에 의해 정상 인간 조직(N), 원발성 종양 검체 및 종양 세포주에서의 정량화를 나타낸다(Sahin U et al., Clin Cancer Res 2008;14:7624-34).
도 5는 IFNy-ELISPOT 검정에 의해 분석된 CLDN18.2-유래된 펩티드에 대한 면역화된 HLA-A*02-유전자이식 마우스로부터의 비장 세포의 생체외 반응성을 나타낸다. HLA-A*02 CLDN18.2-특이적 결합 펩티드는 특정 알고리즘을 적용한 CLDN18.2의 처음 80개 아미노산에 대해 예측되었다(Rammensee H. et al. (1999) Immunogenetics 50, 213-9). CLDN18.2-면역화된 HLA-A*02-유전자이식 마우스의 비장 세포를 CLDN18.2 펩티드 풀 및 예측된 HLA-A*02-결합 CLDN18.2-유래된 펩티드인 CLDN18.2-A2-1 내지 6에 대한 반응성에 대해 분석하였다. 양성 대조군은 PMA-처리 된 비장 세포이고; 음성 대조군은 무관한 펩티드 풀(HIV-gag), 무관한 9량체 펩티드이다(PLAC1-31-39).
도 6은 시험관내 재자극 후 HLA-A*02-유전자이식 마우스로부터의 CLDN18.2-특이적 뮤린 CD8+ T 세포의 유동 세포계측법 선별을 나타낸다. 단일 CD8+/ CD137+ T 세포는 CLDN18.2 중첩 펩티드 풀을 갖는 비장 세포의 재자극 후에 분리하였다. 대조군은 무관한 펩티드 풀(HIV-gag)로 재자극된 비장 세포이다.
도 7은 CLDN18.2-면역화된 마우스의 CD8+ T 세포로부터 분리된 TCR의 특이성 시험을 나타낸 것이다. HLA-A*02-양성 건강한 공여자의 CD8+ T 세포를 TCR-α/β-사슬 RNA로 형질주입시키고 IFNγ-ELISPOT에 의해 CLDN18.2 중첩 15량체 펩티드(= CLDN18.2 풀) 또는 CLDN18.2-유래된 HLA-A*02 결합 펩티드(CLDN18.2-A2-4, CLDN218.2-A2-5, CLDN18.2-A2-6)로 펄싱된 K562-A2 세포의 인식에 대해 시험하였다. 음성 대조군은 무관한 펩티드 풀(HIV-gag), 무관한 9량체 펩티드(PLAC1-31-39)이고; 양성 대조군은 SEB이다.
도 8은 인간 예비 활성화된 CD8+ T 세포 상의 CLDN18.2- 및 CLDN6-특이적 CAR의 표면 발현을 나타낸다. CD8+ T 세포를 OKT3로 사전 활성화시키고 20㎍ CAR-RNA로 형질주입시켰다. 전기천공 후 20시간에 세포를 각각 CLDN18.2-CAR 및 CLDN6-CAR에 특이적인 PE-접합된 항-CD8 항체 및 이디오타입-특이적 형광색소-접합된 항체로 염색하였다. 세포는 단일 CD8+ T 림프구에 대해 변환되었다.
도 9는 CLDN18.2-CAR에 의해 매개되는 CLDN18.2-발현 표적세포의 특이적 용균을 나타낸다. 사전 활성화된 CD8+ T 세포를 20㎍ CAR RNA로 형질주입시키고 20시간 후에 적정된 E:T 비율(30:1, 10:1, 3:1)을 사용하여 CLDN18.2-CAR로 암호화한 RNA로 형질주입된 자가 iDC와 함께 공배양하였다. 음성 대조군은 CLDN6-특이적 CAR로 형질주입된 세포 또는 CAR RNA(=mock) 없이 형질주입된 T 세포, CLDN6-RNA로 형질주입된 iDC이다. 특이적 용균은 4시간 공배양 후 루시페라아제-기반 세포독성 검정으로 분석하였다.
도 10은 이디오타입-특이적 항체의 첨가에 의해 CLDN18.2-발현 표적세포의 CLDN18.2-CAR 매개된 용균의 특이적 억제를 나타낸다. 사전 활성화된 CD8+ T 세포를 20㎍ CAR RNA로 형질주입하고 20시간 후에 CLDN18.2- 또는 CLDN6-RNA로 형질주입된 자가 iDCs와 함께 30:1의 E:T 비율을 사용하여 공배양하였다. 효과기 T 세포는 표적세포가 첨가되기 전에 1시간 동안 2㎍/ml의 이디오타입-특이적 항체로 예비 인큐베이팅하거나 없이 예비 인큐베이팅하였다. 특이적 용균은 4시간 공배양 후 루시페라아제-기반 세포독성 감정으로 분석하였다.
도 11은 CLDN18.2-CAR T 세포의 시험관내 항원-특이적 증식을 나타낸다. CD8+ T 세포를 CLDN18.2-CAR를 암호화하는 RNA와 함께 전기천공하거나 또는 RNA 없이(mlock) 전기천공하고, 카복시플루오레세인 숙신이미딜 에스터(CFSE; Carboxyfluorescein succinimidyl ester)로 표지하였다. CAR T 세포를 CLDN18.2 또는 대조군 항원 CLDN9 또는 CLDN6를 암호화하는 5㎍ IVT-RNA로 형질주입된 iDC와 함께 공배양하였다. 96시간 후 공배양 세포를 수거하고, CFSE 형광을 유동 세포계측법으로 분석하였다. 세포는 CD8+ 살아있는 단일 림프구에 대해 변환되었다.
도 12는 백신접종 후 마우스에서 CLDN18.2-CAR T 세포의 생체내 항원-특이적 활성화를 보여준다. BALB/c-마우스는 정맥주사로 5x106 CLDN18-2-CAR-effLuc-GFP 형질도입된 T 세포를 이식하였다. ACT 후 24시간에, 마우스에게 정맥주사로 25㎍ CLDN18.2 RNA 또는 Ctrl RNA를 포함하는 RNA(F12-Lip)로 백신접종하였다. 도 12의 A에서는 형광색소-결합된 항체를 사용하여 유동 세포계측법을 통해 T 세포의 형질도입 효율을 측정한 것을 나타낸다. 도 12의 B에서는 마우스의 생체내-발광 강도를 백신 접종 48시간 후에 측정한 것을 나타낸다. 오프-컬러 이미지는 회색톤의 기준 사진 상에 겹쳐진 빛 강도(흑색은 최소 인텐스이고, 백색 내지 어두운 회색은 최대 인텐스이다)를 나타낸다.
도 2는 CAR의 성공적인 생성을 디자인한 도면이다. CAR(1G, 제1세대, 2G, 제2세대, 3G, 제3세대)의 서로 다른 세대의 모식도를 개략적으로 나타낸다. 제1세대는 세포밖 scFv 및 세포독성을 매개하는 세포질 CD3ζ 사슬/ZAP70를 포함하고, 제2세대는 증식을 촉진하는 CD28/PI3K를 포함하고, 제3세대는 또한 세포 생존을 유지하는 4-1BB 또는 OX40/TRAF를 포함한다(Casucci, M. et al. (2011) 2: 378-382).
도 3은 CLDN18.2에 대한 T 세포의 재지향을 위한 다른 수용체 형태의 모식도를 개략적으로 나타낸다. 모식도의 좌측은 CLDN18.2-특이적 scFv 단편, IgG1-유래된 스페이서 도메인, CD28 공자극 및 CD3ζ 신호전달 도메인(CAR-28ζ)으로 구성된 제2세대를 나타내고, 모식도의 중앙은 뮤린 TCRβ-사슬의 불변 도메인의 연결 및 뮤린 TCRα-사슬의 불변 도메인의 공발현에 기반한 신규한 CAR 형태(CAR/Cα)를 나타내고, 모식도의 우측은 TCR α/β-사슬로 구성된 뮤린 TCR(mu, 뮤린 TCR)을 나타낸다.
도 4는 인간 조직 패널에서 CLDN18.1 및 CLDN18.2 전사체의 프로파일링을 나타내고 있다. 도 4의 A에서는 CLDN18 유전자좌(위쪽)의 게놈 구조를 나타낸다. 해치(Hatch)된 박스로 각각 CLDN18.1(E 1.1) 또는 CLDN18.2(E 1.2)에 대한 특위의 엑손을 나타내고; 하단에는 CLDN18 변이체의 엑손 조성을 나타내고; 아치형은 2개의 세포밖 도메인을 표시한 것이고; 화살표는 RT-PCR에 사용된 프라이머를 표시한 것이다. 도 4의 B에서는 종결점 RT-PCR(end-point RT-PCR)에 의해 정상 인간 조직(N), 원발성 종양 검체, 및 종양 세포주에서의 CLDN18 이소형체의 비교 분석을 나타낸다. 도 4의 C에서는 실시간 PCR에 의해 정상 인간 조직(N), 원발성 종양 검체 및 종양 세포주에서의 정량화를 나타낸다(Sahin U et al., Clin Cancer Res 2008;14:7624-34).
도 5는 IFNy-ELISPOT 검정에 의해 분석된 CLDN18.2-유래된 펩티드에 대한 면역화된 HLA-A*02-유전자이식 마우스로부터의 비장 세포의 생체외 반응성을 나타낸다. HLA-A*02 CLDN18.2-특이적 결합 펩티드는 특정 알고리즘을 적용한 CLDN18.2의 처음 80개 아미노산에 대해 예측되었다(Rammensee H. et al. (1999) Immunogenetics 50, 213-9). CLDN18.2-면역화된 HLA-A*02-유전자이식 마우스의 비장 세포를 CLDN18.2 펩티드 풀 및 예측된 HLA-A*02-결합 CLDN18.2-유래된 펩티드인 CLDN18.2-A2-1 내지 6에 대한 반응성에 대해 분석하였다. 양성 대조군은 PMA-처리 된 비장 세포이고; 음성 대조군은 무관한 펩티드 풀(HIV-gag), 무관한 9량체 펩티드이다(PLAC1-31-39).
도 6은 시험관내 재자극 후 HLA-A*02-유전자이식 마우스로부터의 CLDN18.2-특이적 뮤린 CD8+ T 세포의 유동 세포계측법 선별을 나타낸다. 단일 CD8+/ CD137+ T 세포는 CLDN18.2 중첩 펩티드 풀을 갖는 비장 세포의 재자극 후에 분리하였다. 대조군은 무관한 펩티드 풀(HIV-gag)로 재자극된 비장 세포이다.
도 7은 CLDN18.2-면역화된 마우스의 CD8+ T 세포로부터 분리된 TCR의 특이성 시험을 나타낸 것이다. HLA-A*02-양성 건강한 공여자의 CD8+ T 세포를 TCR-α/β-사슬 RNA로 형질주입시키고 IFNγ-ELISPOT에 의해 CLDN18.2 중첩 15량체 펩티드(= CLDN18.2 풀) 또는 CLDN18.2-유래된 HLA-A*02 결합 펩티드(CLDN18.2-A2-4, CLDN218.2-A2-5, CLDN18.2-A2-6)로 펄싱된 K562-A2 세포의 인식에 대해 시험하였다. 음성 대조군은 무관한 펩티드 풀(HIV-gag), 무관한 9량체 펩티드(PLAC1-31-39)이고; 양성 대조군은 SEB이다.
도 8은 인간 예비 활성화된 CD8+ T 세포 상의 CLDN18.2- 및 CLDN6-특이적 CAR의 표면 발현을 나타낸다. CD8+ T 세포를 OKT3로 사전 활성화시키고 20㎍ CAR-RNA로 형질주입시켰다. 전기천공 후 20시간에 세포를 각각 CLDN18.2-CAR 및 CLDN6-CAR에 특이적인 PE-접합된 항-CD8 항체 및 이디오타입-특이적 형광색소-접합된 항체로 염색하였다. 세포는 단일 CD8+ T 림프구에 대해 변환되었다.
도 9는 CLDN18.2-CAR에 의해 매개되는 CLDN18.2-발현 표적세포의 특이적 용균을 나타낸다. 사전 활성화된 CD8+ T 세포를 20㎍ CAR RNA로 형질주입시키고 20시간 후에 적정된 E:T 비율(30:1, 10:1, 3:1)을 사용하여 CLDN18.2-CAR로 암호화한 RNA로 형질주입된 자가 iDC와 함께 공배양하였다. 음성 대조군은 CLDN6-특이적 CAR로 형질주입된 세포 또는 CAR RNA(=mock) 없이 형질주입된 T 세포, CLDN6-RNA로 형질주입된 iDC이다. 특이적 용균은 4시간 공배양 후 루시페라아제-기반 세포독성 검정으로 분석하였다.
도 10은 이디오타입-특이적 항체의 첨가에 의해 CLDN18.2-발현 표적세포의 CLDN18.2-CAR 매개된 용균의 특이적 억제를 나타낸다. 사전 활성화된 CD8+ T 세포를 20㎍ CAR RNA로 형질주입하고 20시간 후에 CLDN18.2- 또는 CLDN6-RNA로 형질주입된 자가 iDCs와 함께 30:1의 E:T 비율을 사용하여 공배양하였다. 효과기 T 세포는 표적세포가 첨가되기 전에 1시간 동안 2㎍/ml의 이디오타입-특이적 항체로 예비 인큐베이팅하거나 없이 예비 인큐베이팅하였다. 특이적 용균은 4시간 공배양 후 루시페라아제-기반 세포독성 감정으로 분석하였다.
도 11은 CLDN18.2-CAR T 세포의 시험관내 항원-특이적 증식을 나타낸다. CD8+ T 세포를 CLDN18.2-CAR를 암호화하는 RNA와 함께 전기천공하거나 또는 RNA 없이(mlock) 전기천공하고, 카복시플루오레세인 숙신이미딜 에스터(CFSE; Carboxyfluorescein succinimidyl ester)로 표지하였다. CAR T 세포를 CLDN18.2 또는 대조군 항원 CLDN9 또는 CLDN6를 암호화하는 5㎍ IVT-RNA로 형질주입된 iDC와 함께 공배양하였다. 96시간 후 공배양 세포를 수거하고, CFSE 형광을 유동 세포계측법으로 분석하였다. 세포는 CD8+ 살아있는 단일 림프구에 대해 변환되었다.
도 12는 백신접종 후 마우스에서 CLDN18.2-CAR T 세포의 생체내 항원-특이적 활성화를 보여준다. BALB/c-마우스는 정맥주사로 5x106 CLDN18-2-CAR-effLuc-GFP 형질도입된 T 세포를 이식하였다. ACT 후 24시간에, 마우스에게 정맥주사로 25㎍ CLDN18.2 RNA 또는 Ctrl RNA를 포함하는 RNA(F12-Lip)로 백신접종하였다. 도 12의 A에서는 형광색소-결합된 항체를 사용하여 유동 세포계측법을 통해 T 세포의 형질도입 효율을 측정한 것을 나타낸다. 도 12의 B에서는 마우스의 생체내-발광 강도를 백신 접종 48시간 후에 측정한 것을 나타낸다. 오프-컬러 이미지는 회색톤의 기준 사진 상에 겹쳐진 빛 강도(흑색은 최소 인텐스이고, 백색 내지 어두운 회색은 최대 인텐스이다)를 나타낸다.
이하에 본 발명을 보다 상세히 설명하지만, 방법론, 프로토콜 및 시약들이 다양한 만큼 본 발명이 본원에 기재된 특정 방법론, 프로토콜 및 시약들로 한정되는 것이 아님을 이해하여야 한다. 또한, 본원에 사용된 용어들은 특정 구현예를 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 한정하려는 의도로 해석되어서는 아니되며 본 발명의 범위는 첨부된 청구범위에 의해서만 한정되는 것으로 이해되어야 한다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 기술분야의 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다.
이하에서, 본 발명의 구성 요소들을 설명한다. 이 구성 요소들은 특정 구현예와 함께 열거되지만, 이들은 여하한 방식 및 여하한 횟수로든 조합되어 부가적인 구현예를 구현할 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 다양하게 기재된 구현예 및 바람직한 구현예들은 다양하게 설명된 구체예와 바람직한 구현예들은 단지 명시적으로 설명된 구현예들만으로 본 발명을 한정짓는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 명세서는 명시적으로 기재된 구현예들과 개시된 및/또는 바람직한 여하한 수의 구성 요소들을 조합하는 구현예들을 뒷받침하고 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 이 출원의 모든 설명된 멤버들의 여하한 순열 및 조합들은 문맥상 달리 지시되지 않는 한, 본 출원의 설명에 의해 개시된 것으로 간주되어야 한다.
바람직하게, 본원에 사용되는 용어는 문헌 ["A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)", H.G.W. Leuenberger, B. Nagel, and H. Koelbl, Eds., Helvetica Chimica Acta, CH-4010 Basel, Switzerland, (1995)]에 기재되어 있는 바와 같이 정의된다.
본 발명의 실시는 달리 명시되지 않는 한, 본 분야의 문헌에서 설명되어 있는 종래의 화학적, 생화학적, 세포 생물학적, 면역학적 방법, 및 재조합 DNA 기술의 상법을 채용할 것이다(예컨대, 참고로, Molecular 클로닝: A Laboratory Manual, 2nd Edition, J. Sambrook et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989).
본 명세서 및 하기의 특허청구범위 전반에서, 문맥이 달리 요구하지 않는다면, 단어 "포함하다", 및 "포함한다"와 "포함하는"과 같이 변형어는 명시된 멤버, 정수 또는 단계, 또는 멤버, 정수 또는 단계들의 군을 포함하는 것을 의미하되, 비록 일부 구현예에서 이러한 다른 멤버, 정수 또는 단계, 또는 멤버, 정수 또는 단계들의 군을 배제할 수도 있지만, 임의의 다른 멤버, 정수 또는 단계, 멤버, 정수 또는 단계들의 군을 배제하는 것을 의미하지 않는 것으로 이해될 것이며, 즉 본 발명의 청구대상은 명시된 멤버, 정수 또는 단계, 또는 멤버, 정수 또는 단계들의 군을 포함하는 것이다. 본 발명을 설명하는 문맥에서(특히, 본 청구범위의 문맥상) 사용되는 용어 "하나"와 "한(부정관사)" 및 "정관사" 및 유사한 참조용어는 본원에서 달리 명시되지 않거나 문맥에 의해 분명하게 부정되지 않는 한, 단수와 복수 둘 모두를 포함하는 것으로 해석될 수 있다. 본 발명의 값들을 범위로 인용하는 것은 단지 해당 범위에 속하는 각각의 별개의 값들을 개별적으로 손쉽게 칭하기 위한 것이다. 본원에서 달리 명시되지 않으면, 각각의 개별 값은 본원에서 개별적으로 지칭되는 것처럼 본 명세서 내로 편입된 것으로 간주한다.
본원에서 설명되는 모든 방법은 본원에서 달리 명시되지 않거나 문맥에 의해 명백하게 부정되지 않으면, 적절한 임의의 순서로 수행될 수 있다. 본원에서 제공된, 임의 및 모든 실례, 또는 예시적 어법(가령, "예를 들면")의 이용은 단지 본 발명을 더욱 잘 조명하기 위해 의도된 것이고, 청구되는 본 발명의 범위에 한정을 달리 부가하는 것은 아니다. 본 명세서에서 어떠한 어법도 발명의 실시에 필수적인 임의의 청구되지 않은 구성 요소를 지칭하는 것으로 해석되어서는 안된다.
본 명세서의 본문 전반에 걸쳐 몇가지 문헌들이 인용된다. 본원에서 인용된 각각의 상기 또는 하기 문헌들(모든 특허, 특허출원, 과학간행물, 제조업체의 설명서, 지침서 등)은 그 내용 전체가 그 이상 또는 그 이하를 불문하고 본원에 참조 병합된다. 이들 문헌들이 선행발명임을 이유로, 본 발명이 이러한 개시내용에 선행한다고 하지 못함을 인정하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
본 발명의 문맥상 용어 "재조합"은 "유전공학을 통해 제조된" 것을 의미한다. 바람직하게는, 본 발명의 문맥상에서 재조합 세포와 같은 "재조합 대상"은 천연 발생적인 것이 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이 대상에 적용되는 것으로서 "천연 발생하는"이라는 용어는 대상이 천연에서 발견될 수 있다는 사실을 지칭한다. 예를 들어, 천연 공급원으로부터 분리될 수 있는 유기체(바이러스를 포함한다)에 존재하고 실험실에서 사람에 의해 의도적으로 변형되지 않은 폴리펩티드 또는 폴리뉴클레오티드 서열은 천연 발생적이다.
용어 "면역반응"은 항원에 대한 통합된 신체 반응을 지칭하며 바람직하게는 세포성 면역반응 또는 세포성뿐만 아니라 체액성 면역반응을 지칭한다. 면역반응은 방어적/방지적/예방적 및/또는 치료적일 수 있다.
"면역반응을 유도한다는 것"은 유도 전에 특정 항원에 대한 면역반응이 없다는 것을 의미할 수 있지만 유도 전에 특정 항원에 대한 일정 수준의 면역반응이 존재하고 유도 후에 상기 면역반응이 증강되는 것도 의미할 수 있다. 따라서, "면역반응을 유도한다는 것"에는 또한 "면역반응을 증강시키는 것"이 포함된다. 바람직하게는, 대상체에서 면역반응을 유도한 후, 상기 대상체는 암질환과 같은 질병을 발달시키는 것으로부터 보호되거나, 질병 상태가 면역반응을 유도함으로써 개선된다. 예를 들어, CLDN18.2와 같은 종양-관련 항원에 대한 면역반응은 암질환을 갖는 환자 또는 암질환을 발달시킬 위험이 있는 대상체에서 유도될 수 있다. 이 경우에 면역반응을 유도하는 것은 대상체의 질병 상태가 개선되고, 대상자가 전이를 발달시키지 않거나, 암질환을 발달시킬 위험이 있는 대상자가 암질환을 발달시키지 않을 수 있음을 의미할 수 있다.
"세포성 면역반응", "세포성 반응", "항원에 대한 세포성 반응" 또는 이와 유사한 용어는 클래스 I MHC 또는 클래스 II MHC로 항원을 제시함으로써 특징화 되는 세포에 대한 세포성 반응을 포함하도록 의미한다. 세포성 반응은 '헬퍼' 또는 '킬러'로서 작용하는 T 세포 또는 T-림프구라고 하는 세포에 관한 것이다. 헬퍼 T 세포(또한, CD4+ T 세포라고도 한다)는 면역반응을 조절함으로써 중추적 역할을 하고, 킬러 세포(또한, 세포독성 T 세포, 세포용해성 T 세포, CD8+ T 세포 또는 CTL이라고도 한다)는 암 세포와 같은 병든 세포를 죽여, 더 많은 병든 세포의 생산을 방지한다.
용어 "항원"은 면역반응이 생성되도록 하는 것 및/또는 유도되도록 하는 에피토프를 포함하는 제제에 관한 것이다. 바람직하게는, 본 발명의 문맥 상에서의 항원은 선택적으로 가공 후에, 바람직하게는 항원에 대해서 또는 항원을 발현하는 및/또는 제시하는 세포에 대해서 특이적인 면역반응을 유도하는 분자이다. 용어 "항원"은 특히 단백질 및 펩티드를 포함한다. 항원은 바람직하게는 천연 발생적인 항원에 상응하는 생성물 또는 이로부터 유래된 생성물이다. 이러한 천연 발생적인 항원은 종양-관련 항원을 포함하거나 이로부터 유도될 수 있다.
특히, 항원 또는 이의 펩티드 단편은 T 세포 수용체에 의해 인식될 수 있어야 한다. 바람직하게는, 항원 또는 펩티드가 T 세포 수용체에 의해 인식되는 경우 적절한 공-자극 신호의 존재 하에서 항원 또는 펩티드를 인식하는 T 세포 수용체를 보유한 T 세포의 클론확장(clonal expansion)을 유도할 수 있다. 본 발명의 실시형태에 관련하여, 항원은 바람직하게는 세포에 의해, 바람직하게는 항원 제시 세포 및/또는 병든 세포에 의해 MHC 분자와 관련하여 제시되고, 이는 항원(또는 항원을 제시하는 세포)에 대한 면역반응을 일으킬 수 있다.
바람직한 실시형태에서, 항원은 종양-관련 항원, 즉 세포질, 세포 표면 및 세포 핵으로부터 유래될 수 있는 암세포의 구성요소이며, 특히 세포 내에서 또는 암세포 상의 표면 항원으로서 바람직하게는 대량으로 생산되는 항원이다.
본 발명의 문맥상에서, 용어 "종양-관련 항원" 또는 "종양 항원"은 정상 조건하에서 한정된 수의 조직 및/또는 기관에서 또는 특정 발생 단계에서 특이적으로 발현되는 단백질에 관한 것으로, 예를 들어, 종양-관련 항원은 정상 조건하에서 위 조직, 바람직하게는 위 점막, 생식 기관, 예를 들어 정소에서, 영양막 조직에서, 예를 들어 태반에서, 또는 생식선 세포에서 특이적으로 발현될 수 있고, 하나 이상의 종양 또는 암 조직에서 발현되거나 비정상적으로 발현된다. 이러한 맥락에서, "한정된 수"는 바람직하게는 3개 이하, 보다 바람직하게는 2개 이하를 의미한다. 본 발명의 문맥에서의 종양-관련 항원은 예를 들어, 분화 항원, 바람직하게는 세포 유형 특이적 분화 항원, 즉, 정상 조건하에서 특정 분화 단계시 특정 세포 유형에서 특이적으로 발현되는 단백질, 암/정소 항원, 즉 정상 조건하에서 정소 및 때때로 태반에서 특이적으로 발현되는 단백질, 및 생식선 특이적 항원을 포함한다. 본 발명의 문맥상, 종양-관련 항원은 바람직하게는 암세포의 세포 표면과 회합하고, 바람직하게는 정상 조직에서는 전혀 발현되지 않거나 드물게밖에 발현되지 않는다. 바람직하게는, 종양-관련 항원 또는 종양-관련 항원의 이상 발현은 암세포를 동정한다. 본 발명의 문맥상, 대상체, 예를 들어, 암질환을 앓고 있는 환자에서 암세포에 의해 발현되는 종양-관련 항원은 바람직하게는 상기 대상체에서의 자가-단백질이다. 바람직한 양태에서, 본 발명의 문맥에서의 종양-관련 항원은 비-필수적인 조직 또는 기관, 즉 면역계에 의해 손상된 경우 대상체가 사망에 이르지 않는 조직 또는 기관에서, 또는 면역계에 의해 접근할 수 없거나 거의 접근할 수 없는 신체의 기관 또는 구조물에서 정상 조건하에서 특이적으로 발현된다. 바람직하게는, 종양-관련 항원의 아미노산 서열은 정상 조직에서 발현되는 종양-관련 항원과 암 조직에서 발현되는 종양-관련 항원 간에 동일하다. 바람직하게는, 종양-관련 항원은 이를 발현하는 암세포에 의해 제시된다.
본 발명의 다양한 양상은 종양-관련 항원 CLDN18.2를 포함하고, 본 발명은 상기 종양-관련 항원을 발현하는 암세포 및 바람직하게는 상기 종양-관련 항원을 클래스 I MHC와 함께 제시하는 암세포에 대한 항-종양 CTL 반응의 자극 또는 제공을 포함할 수 있다.
클라우딘은 밀착연접의 가장 중요한 성분인 단백질들의 패밀리인데, 상피의 세포들 간의 세포간 공간에서 분자 흐름을 제어하는 세포주위(paracellular) 장벽을 이룬다. 클라우딘은 N-말단 및 C-말단이 모두 세포질에 존재하면서, 막을 4회 가로지르는 막관통 단백질이다. EC1 또는 ECL1라고 하는, 제1 세포밖 루프 또는 도메인은 평균 53개의 아미노산으로 이루어지고, EC2 또는 ECL2라고 하는 제2 세포밖 루프 또는 도메인은 약 24개의 아미노산으로 이루어진다. 클라우딘 패밀리 중 세포 표면 단백질, 예를 들어 CLDN18.2는 다양한 기원의 종양에서 발현되며, 선택적 발현(독성 관련 정상 조직에서의 발현 없음) 및 원형질막으로의 국소화로 인해 항체-매개성 암 면역요법과 관련하여 표적 구조로서 특히 적합하다.
CLDN18.2는 정상 조직에서 위점막의 분화된 상피 세포에서 선택적으로 발현된다. CLDN18.2는 췌장 암종, 식도 암종, 위 암종, 기관지 암종, 유방 암종, 및 ENT 종양과 같은 다양한 기원의 암에서 발현된다. CLDN18.2는 위암, 식도암, 췌장암, 비소세포성 폐암(NSCLC)과 같은 폐암, 난소암, 대장암, 간암, 두경부암, 담낭암 및 이의 전이, 특히 위암 전이 예컨대 크루켄버그 종양, 복막 전이, 및 림프절 전이와 같은 원발성 종양의 예방 및/또는 치료를 위한 중요한 표적이다.
본원에서 사용된 바와 같이 용어 "CLDN"은 클라우딘을 의미하며 CLDN18.2를 포함한다. 바람직하게는, 클라우딘은 인간 클라우딘이다.
용어 "CLDN18"은 클라우딘18에 관한 것이고, 클라우딘18 스플라이스 변이체 1(클라우딘18.1(CLDN18.1)) 및 클라우딘18 스플라이스 변이체 2(클라우딘18.2 (CLDN18.2))를 포함하는 모든 변이체를 포함한다.
용어 "CLDN18.2"는 바람직하게는 인간 CLDN18.2에 관한 것이고, 특히 서열 목록의 서열번호 1에 따른 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체로 이루어진 것을 포함하는 단백질에 관한 것이다. CLDN18.2의 제1 세포밖 루프 또는 도메인은 바람직하게는 서열번호 1에 도시된 아미노산 서열의 아미노산 27 내지 81개, 보다 바람직하게는 아미노산 29 내지 78개를 포함한다. CLDN18.2의 제2 세포밖 루프 또는 도메인은 바람직하게는 서열번호 1에 도시된 아미노산 서열의 아미노산 140 내지 180개를 포함한다. 상기 제1 및 제2 세포밖 루프 또는 도메인은 바람직하게는 CLDN18.2의 세포밖 부분 또는 도메인을 형성한다.
본 발명에 따른 용어 "변이체"는 특히 돌연변이체, 스플라이스 변이체, 입체배좌체, 이소형체, 대립형질 변이체, 종 변이체 및 종 상동체, 특히 천연적으로 존재하는 것들을 지칭한다. 대립형질 변이체는 유전자의 정상 서열에서의 변경에 관한 것이고, 그 중요성은 종종 불분명하다. 완전한 유전자 시퀀싱은 종종 주어진 유전자에 대한 수많은 대립형질 변이체를 동정한다. 종 상동체는 주어진 핵산 또는 아미노산 서열과는 다른 종의 기원을 갖는 핵산 또는 아미노산 서열이다. 용어 "변이체"는 번역후 변형된 모든 변이체 및 입체배좌 변이체를 포함할 수 있다.
본 발명의 다양한 양상에 따라, 그 목적은 바람직하게는 CLDN18.2를 발현하는 암세포에 대한 면역반응을 유도하거나 결정하는 것이고, 바람직하게는 CLDN18.2의 제시를 특징으로 하는 암세포에 대한 면역반응을 유도하거나 결정하는 것이고, CLDN18.2를 발현하는 세포를 포함하는 암질환을 진단, 치료 또는 예방하는 것이다. 바람직하게는, 면역반응은 CLDN18.2를 발현하는 암세포에 대한 항-CLDN18.2 CTL 반응의 자극을 포함하고, 바람직하게는 CLDN18.2를 클래스 I MHC와 함께 제시하는 암세포에 대한 항-CLDN18.2 CTL 반응의 자극을 포함한다.
본 발명에 따르면, 용어 "CLDN18.2-발현 암" 또는 "CLDN18.2-양성 암"은 CLDN18.2를 발현하는 암세포, 바람직하게는 상기 암세포의 표면 상에 CLDN18.2를 발현하는 암세포를 포함하는 암을 의미한다. 대안으로 또는 부가적으로, CLDN18.2를 발현하는 상기 암세포는 MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2를 제시한다. MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2를 제시하는 암세포는 T 세포 수용체를 보유하는 면역반응성 세포에 의해 표적화될 수 있는 반면, 표면 상에 CLDN18.2를 발현하는 암세포는 인공 T 세포 수용체를 보유하는 면역반응성 세포에 의해 표적화 될 수 있다.
"세포 표면"은 본 기술분야에서 이의 통상적인 의미에 따라 사용되며, 따라서 단백질 및 다른 분자에 의한 결합이 허용 가능한 세포의 외부를 포함한다.
CLDN18.2는 상기 세포의 표면에 위치하고, 세포에 첨가된 CLDN18.2-특이적 항체에 의한 결합을 허용 가능하다면 세포 표면 상에 발현된다.
본 발명의 문맥 상에서 용어 "세포밖 부분" 또는 "엑소도메인"은 세포의 세포밖 공간을 향하고, 바람직하게는 예를 들어 세포 외부에 위치한 항체와 같은 항원-결합 분자에 의해 상기 세포의 외부로부터 접근 가능한 단백질과 같은 분자의 일부를 지칭한다. 바람직하게는, 이 용어는 하나 이상의 세포밖 루프 또는 도메인 또는 이의 단편을 지칭한다.
용어 "부분"은 분획을 지칭한다. 아미노산 서열 또는 단백질과 같은 특정 구조와 관련하여 이의 "부분"이라는 용어는 상기 구조의 연속 또는 불연속 분획을 나타낼 수 있다. 바람직하게는, 아미노산 서열의 부분은 상기 아미노산 서열의 아미노산 중 적어도 1%, 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 40%, 바람직하게는 적어도 50%, 보다 바람직하게는 적어도 60%, 더욱 바람직하게는 적어도 70%, 보다 더욱 바람직하게는 적어도 80%이고, 가장 바람직하게는 적어도 90%를 포함한다. 바람직하게는, 그 부분이 불연속 분획인 경우, 상기 불연속 분획은 구조의 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8개 또는 그 이상의 일부분으로 구성되며, 각 일부분은 구조의 연속적인 구성요소이다. 예를 들어, 아미노산 서열의 불연속 분획은 상기 아미노산 서열의 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8개 또는 그 이상, 바람직하게는 4개 이하로 이루어질 수 있으며, 여기서 각각의 일부분은 바람직하게는 아미노산 서열 중 적어도 5개의 연속적인 아미노산, 적어도 10개의 연속적인 아미노산, 바람직하게는 적어도 20개의 연속적인 아미노산, 바람직하게는 적어도 30개의 연속적인 아미노산을 포함한다.
용어 "일부분" 및 "단편"은 본원에서 상호교환적으로 사용되고 연속적인 구성요소를 지칭한다. 예를 들어, 아미노산 서열 또는 단백질과 같은 구조의 일부분은 상기 구조의 연속적인 구성요소를 지칭한다. 구조의 부분, 일부분 또는 단편은 바람직하게는 상기 구조의 기능적 특성을 하나 이상 포함한다. 예를 들어, 에피토프, 펩티드 또는 단백질의 부분, 일부분 또는 단편은 그것이 유도된 에피토프, 펩티드 또는 단백질과 면역학적으로 동등한 것이 바람직하다. 본 발명의 문맥상, 아미노산 서열과 같은 구조의 "일부분"은 전체 구조 또는 아미노산 서열의 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 92%, 적어도 94%, 적어도 96%, 적어도 98%, 적어도 99%를 포함하고 바람직하게는 이로 이루어진다. 단백질 서열의 일부분 또는 단편은 바람직하게는 단백질 서열의 적어도 6, 특히 적어도 8, 적어도 12, 적어도 15, 적어도 20, 적어도 30, 적어도 50, 또는 적어도 100개의 연이은 아미노산을 포함한다. 상기 논의된 바와 같이 부분, 일부분 또는 단편은 본원에서 사용된 용어 "변이체"에 의해 포함된다.
본 발명에 따르면, CLDN18.2는 발현 수준이 위 세포 또는 위 조직에서의 발현과 비교하여 더 낮으면 세포에서 실질적으로 발현되지 않는다. 바람직하게는, 발현 수준은 위 세포 또는 위 조직에서의 발현의 10% 미만, 바람직하게는 5%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1% 또는 0.05% 미만이거나 심지어 더 낮다. 바람직하게는, 발현 수준이 위 이외의 비-암성 조직에서의 발현 수준을 단지 2배, 바람직하게는 1.5배로 초과하고, 바람직하게는 상기 비-암성 조직에서의 발현 수준을 초과하지 않는 경우, CLDN18.2는 세포에서 실질적으로 발현되지 않는다. 바람직하게는, CLDN18.2는 발현 수준이 검출 한계 미만인 경우 및/또는 발현 수준이 너무 낮아 세포에 첨가된 CLDN18.2-특이적 항체에 의한 결합을 허용할 수 없는 경우, 세포에서 실질적으로 발현되지 않는다.
본 발명에 따르면, CLDN18.2는 발현 수준이 위 이외의 비-암성 조직에서의 발현 수준을 2배 초과, 바람직하게는 10배, 100배, 1000배, 또는 10000배 초과하는 경우 세포에서 발현된다. 바람직하게는, CLDN18.2는 발현 수준이 검출 한계를 초과하는 경우 및/또는 발현 수준이 세포에 첨가된 CLDN18.2-특이적 항체에 의한 결합을 허용하기에 충분히 높은 경우 세포에서 발현된다. 바람직하게는, 세포에서 발현된 CLDN18.2는 상기 세포 표면에 발현되거나 노출된다.
"표적세포"는 세포성 면역반응과 같은 면역반응의 표적이 되는 세포를 의미할 수 있다. 표적세포는 항원 또는 항원 에피토프, 즉 항원으로부터 유래된 펩티드 단편을 제시하는 세포를 포함하고, 암세포와 같은 바람직하지 않은 세포를 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 표적세포는 CLDN18.2를 발현하는 세포이며, 바람직하게는 세포 표면 상에 존재 및/또는 클래스 I MHC와 함께 존재하는 것이다.
용어 "에피토프"는 항원과 같은 분자 내의 항원 결정기, 즉 면역계에 의해 인식되는, 예를 들어 특히 MHC 분자와 관련하여 제기되는 경우 T 세포에 의해 인식되는 분자 내의 일부분 또는 단편을 지칭한다. 종양-관련 항원과 같은 단백질의 에피토프는 바람직하게는 상기 단백질의 연속적 또는 불연속적인 부분을 포함하고, 길이가 바람직하게는 5~100, 보다 바람직하게는 5~50, 더욱 바람직하게는 8~30, 가장 바람직하게는 10~25개의 아미노산이고, 예를 들어, 에피토프는 길이가 바람직하게는 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 또는 25개의 아미노산일 수 있다. 본 발명의 문맥상에서 에피토프가 T 세포 에피토프인 것이 특히 바람직하다.
"에피토프", "항원 단편", "항원 펩티드" 또는 "면역원성 펩티드"와 같은 용어는 본원에서 상호교환적으로 사용되고, 바람직하게는 항원 또는 항원을 발현하거나 항원을 포함 및 바람직하게는 제시하는 세포에 대한 면역반응을 유도할 수 있는 항원의 불완전한 제시에 관한 것이 바람직하다. 바람직하게는, 그 용어는 항원의 면역원성 부분에 관한 것이다. 바람직하게는, 이는 특히 MHC 분자와 관련하여 제시되면, T 세포 수용체에 의해 인식(즉, 특이적으로 결합된다)되는 항원의 부분이다. 특정 바람직한 면역원성 부분은 세포 표면과 같은 MHC 클래스 I 또는 클래스 II 분자에 결합하여, 따라서 MHC 결합 펩티드이다. 본원에서 사용된 바와 같이, 펩티드는 본 기술분야에 공지된 임의의 분석을 사용하여 이러한 결합이 검출 가능한 경우 MHC 클래스 I 또는 클래스 II 분자에 "결합"한다고 한다.
바람직하게는, 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 본원에 개시된 펩티드는 면역반응을 자극할 수 있으며, 바람직하게는 CLDN18.2 또는 CLDN18.2의 발현을 특징으로 하는 세포, 바람직하게는 CLDN18.2의 제시를 특징으로 하는 세포에 대한 세포성 반응을 자극할 수 있다. 바람직하게는, 이러한 펩티드는 CLDN18.2를 클래스 I MHC와 함께 제시함으로써 특징화된 세포에 대한 세포성 반응을 자극할 수 있으며, 바람직하게는 CLDN18.2-반응성 CTL을 자극할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명에 따른 펩티드는 MHC 클래스 I 및/또는 클래스 II 제시 펩티드이거나 MHC 클래스 I 및/또는 클래스 II 제시 펩티드를 생산하도록 가공될 수 있다. 바람직하게는, MHC 분자에 결합된 서열은 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로부터 선택된다.
항원 펩티드가 직접적으로, 즉 가공 없이, 특히 절단 없이 제시되면, MHC 분자, 특히 클래스 I MHC 분자와의 결합에 적합한 길이를 가지며, 바람직하게는 7-20개 아미노산 길이, 보다 바람직하게는 7-12개의 아미노산 길이, 더욱 바람직하게는 8-11개의 아미노산 길이, 특히 바람직하게는 9 또는 10개의 아미노산 길이인 것이다. 바람직하게는 직접 제시되는 항원 펩티드의 서열은 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로부터 선택된 서열에 실질적으로 상응하고 바람직하게는 완전히 동일하다.
항원 펩티드가 가공 후, 특히 절단 후 제시되어야 하는 경우, 가공에 의해 생성된 펩티드는 MHC 분자, 특히 클래스 I MHC 분자에 결합하기에 적합한 길이를 가지며, 바람직하게는 7-20개의 아미노산 길이, 보다 바람직하게는 7-12개의 아미노산 길이, 더욱 바람직하게는 8-11개의 아미노산 길이, 특히 바람직하게는 9 또는 10개의 아미노산 길이를 갖는다. 바람직하게는, 가공 후 제시되는 펩티드의 서열은 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로부터 선택되는 서열에 실질적으로 상응하고 바람직하게는 완전히 동일하다. 따라서, 일 실시형태에서 본 발명에 따른 항원 펩티드는 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로부터 선택된 서열을 포함하고, 항원 펩티드의 후속 공정은 서열번호 2, 3, 4, 5, 6 및 7로부터 선택된 서열을 형성한다.
MHC 분자에 의해 제시되는 펩티드의 서열에 실질적으로 상응하는 아미노산 서열을 갖는 펩티드는 MHC에 의해 제시되는 바와 같이 펩티드의 TCR 인식에 필수가 아니거나 MHC에 대한 펩티드 결합에 필수가 아닌 하나 이상의 잔기에 있어서 상이할 수 있다. 이러한 실질적으로 상응하는 펩티드는 바람직하게는 항원-특이적 세포성 반응 예컨대 항원-특이적 CTL를 자극할 수 있다. TCR 인식에 영향을 미치지 않지만 MHC에 대한 결합의 안정성을 개선시키는 잔기에 있어서 제시 펩티드와는 상이한 아미노산 서열을 갖는 펩티드는 항원 펩티드의 면역원성을 향상시킬 수 있으며, 본원에서 "최적화된 펩티드"로 지칭될 수 있다. 이들 잔기들 중 어느 것이 MHC 또는 TCR에 대한 결합에 보다 영향을 미칠 수 있는지에 대한 기존의 지식을 사용하여, 실질적으로 상응하는 펩티드의 설계에 대한 합리적인 접근법이 채용될 수 있다. 생성된 기능성 펩티드는 항원 펩티드로서 고려된다. 상기 논의된 바와 같은 서열은 본원에서 사용된 용어 "변이체"에 의해 포함된다.
"항원 가공"은 상기 항원의 단편인 가공 생성물로 항원의 분해(예를 들어, 단백질의 펩티드로의 분해) 및 세포, 바람직하게는 항원-제시 세포에 의해 특이적 T 세포에 제시하기 위한 MHC 분자와 이들 단편 중 하나 이상과의 회합(예를 들어, 결합을 통한)을 지칭한다.
항원-제시 세포(APC)는 이의 표면의 주조직적합성 복합체(MHC)와 관련하여 항원을 나타내는 세포이다. T 세포는 이의 T 세포 수용체(TCR)를 사용하여 이 복합체를 인식할 수 있다. 항원-제시 세포는 항원을 가공하여 T 세포에 이를 제시한다.
전문 항원-제시 세포는 식균작용이나 수용체 매개 내포작용에 의해, 항원을 내재화시킨 다음, 그 막 상에 클래스 II MHC 분자에 결합된 항원의 단편을 나타내는데 매우 효율적이다. T 세포는 항원-제시 세포의 막에 항원-클래스 II MHC 분자 복합체를 인식하고 이와 상호작용한다. 이어서, 추가적인 공-자극 신호가 항원-제시 세포에 의해 생성되어, T 세포의 활성화를 유도한다. 공-자극 분자의 발현은 전문 항원-제시 세포의 결정적인 특징이다. 항원-제시 세포에는 전문 항원-제시 세포 및 비전문 항원-제시 세포가 포함된다.
전문 항원-제시 세포의 주된 종류는 가장 광범위한 항원 제시를 가진 수지상세포이고, 가장 중요한 항원-제시 세포, 대식세포, B-세포, 단핵구 및 특정 활성화된 상피 세포일 수 있다.
비전문 항원-제시 세포는 나이브 T 세포와의 상호작용에 필요한 MHC 클래스 II 단백질을 구성적으로 발현하지 않고, 이들은 IFNγ와 같은 특정 사이토카인에 의한 비전문 항원-제시 세포의 자극시에만 발현된다.
수지상세포(DC)는 MHC 클래스 II 및 I 항원 제시 경로를 통해 말초 조직에서 T 세포에 포획된 항원을 제시하는 백혈구 집단이다. 수지상세포가 면역반응의 강력한 유도제이며 이들 세포의 활성화가 항종양 면역의 유도에 중요한 단계임은 잘 알려져 있다.
수지상세포 및 전구세포는 말초혈액, 골수, 종양-침윤 세포, 주변부 종양 조직-침윤 세포, 림프절, 비장, 피부, 제대혈 또는 다른 임의의 적합한 조직 또는 유체로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 수지상세포는 GM-CSF, IL-4, IL-13 및/또는 TNFα와 같은 사이토카인의 조합물을 말초혈액으로부터 수확된 단핵구의 배양물에 첨가함으로써 생체외 분화될 수 있다. 대안으로는, 말초혈액, 제대혈 또는 골수로부터 수확된 CD34 양성 세포는 GM-CSF, IL-3, TNFα, CD40 리간드, LPS, flt3 리간드 및/또는 수지상세포의 분화, 성숙 및 증식을 유도하는 다른 화합물(들)의 배양 배지 조합물을 첨가함으로써 수상 세포로 분화시킬 수 있다.
수지상세포는 "미성숙" 및 "성숙" 세포로 편리하게 분류되고, 이는 잘 특성화된 두가지 표현형 간에 구별하기 위한 간단한 방법으로 사용될 수 있다. 그러나, 이 명명법은 분화의 가능한 모든 중간 단계를 제외하는 것으로 해석되어서는 안된다.
미성숙 수지상세포는 Fcγ 수용체 및 만노오스 수용체의 높은 발현과 연관있는 항원 흡수 및 가공에 대한 높은 용량을 갖는 항원-제시 세포로서 특징화된다. 성숙 표현형은 전형적으로 이들 마커의 발현이 낮은 것을 특징으로 하지만 클래스 I 및 클래스 II MHC, 부착 분자(예를 들어, CD54 및 CD11) 및 공자극 분자(예를 들어, CD40, CD80, CD86 및 4-1 BB)의 T 세포 활성화를 담당하는 세포 표면 분자의 높은 발현을 특징으로 한다.
수지상세포 성숙은 이러한 항원-제시 수지상세포가 T 세포 초회항원자극을 유도하는 수지상세포 활성화 상태인 것을 지칭하는 반면, 미성숙 수지상세포에 의한 제시는 관용을 초래한다. 수지상세포 성숙은 주로 선천적 수용체에 의해 검출되는 미생물 특징을 갖는 생체분자(박테리아성 DNA, 바이러스성 RNA, 내독소 등), 전-염증성 사이토카인(TNF, IL-1, IFNs), CD40L에 의한 수지상세포 표면 상의 CD40의 연결 및 스트레스성 세포사를 받은 세포로부터 방출된 물질에 의해 야기된다. 수지상세포는 과립구-대식세포 콜로니-자극 인자(GM-CSF) 및 종양괴사 인자 알파와 같은 사이토카인과 함께 골수 세포를 시험관내 배양함으로써 유도할 수 있다.
항원 제시 세포 또는 표적세포 등의 세포는 펩티드를 가진 세포를 노출, 즉 펄스시키거나, 또는 펩티드 또는 제시될 펩티드를 포함하는 단백질을 암호화하는 핵산, 예를 들어 항원을 암호화하는 핵산, 바람직하게는 RNA를 가진 세포를 형질도입시킴으로써 제시된 펩티드를 MHC 클래스 I과 함께 로딩시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 약학 조성물은 항원 펩티드가 로딩된 항원 제시 세포를 포함한다. 이러한 측면에서, 프로토콜은 인위적으로 항원 펩티드를 제시하는 방식으로 조작된 수지상세포의 시험관내 배양/분화에 의존할 수 있다. 유전적으로 조작된 수지상세포의 생산은 항원 또는 항원 펩티드를 암호화하는 핵산을 수지상세포 내에 도입하는 것을 포함할 수 있다. mRNA로의 수지상세포의 형질주입은 강한 항종양 면역을 자극하는 유망한 항원-로딩 기술이다. 이러한 형질주입은 생체 외 발생할 수 있으며, 이후 이러한 형질주입된 세포를 포함하는 약학 조성물은 치료 목적으로 사용될 수 있다. 대안으로, 수지상 또는 다른 항원 제시 세포를 표적으로 하는 유전자 전달 운반체는 환자에게 투여하여 생체내 발생하는 형질주입을 초래할 수 있다. 예를 들어, 수지상세포의 생체내 및 생체외 형질주입은 WO 97/24447에 기재된 것과 같은 본 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하거나, 또는 문헌[Mahvi et al., Immunology and cell Biology 75: 456-460,1997]에 기재된 유전자총 접근법을 사용하여 유전적으로 수행할 수 있다. 수지상세포의 항원 로딩은 수지상세포 또는 전구세포를 항원, DNA(네이키드되거나 플라스미드 벡터 내에) 또는 RNA와 함께 인큐베이션하거나; 또는 항원-발현 재조합 박테리아 또는 바이러스(예를 들어, 벡시니아, 계두 바이러스, 아데노바이러스 또는 렌티바이러스 벡터)와 함께 인큐베이션함으로써 달성될 수 있다.
용어 "면역원성"은 면역반응을 유도하기 위한 항원의 상대적 효율에 관한 것이다.
본 발명의 문맥 상에서 용어 "면역 효과기 기능"은 예를 들어 종양 파종 및 전이의 억제를 포함하는, 종양 세포의 살상 또는 종양 성장의 억제 및/또는 종양 발달의 억제를 초래하는 면역계의 성분에 의해 매개되는 임의의 기능을 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 문맥에서의 면역 효과기 기능은 T 세포 매개된 효과기 기능이다. 이러한 기능은 헬퍼 T 세포(CD4+ T 세포)의 경우에 T 세포 수용체에 의한 MHC 클래스 II 분자와 관련하여 항원 또는 항원으로부터 유래된 항원 펩티드의 인식, 사이토카인의 방출 및/또는 CD8+ 림프구(CTL) 및/또는 B-세포의 활성화를 포함하고, CTL의 경우에는 T 세포 수용체에 의한 MHC 클래스 I 분자와 관련하여 항원 또는 항원으로부터 유래된 항원 펩티드의 인식, 예를 들어, 세포예정사 또는 퍼포린-매개 세포 용균을 통해, MHC 클래스 I 분자와 관련하여 제시된 세포, 즉 클래스 I MHC와 함께 항원의 제시를 특징으로 하는 세포의 제거, IFN-γ 및 TNF-α와 같은 사이토카인의 생산, 항원 발현 표적세포의 특이적 세포용해 사멸을 포함한다.
본 발명의 문맥에서 용어 "면역반응성 세포" 또는 "면역 효과기 세포"는 면역반응 동안 효과기 기능을 발휘하는 세포에 관한 것이다. "면역반응성 세포"는 바람직하게는 세포 표면에 발현되는 항원과 같은 항원, 또는 항원 또는 항원으로부터 유래된 항원 펩티드의 제시를 특징으로 하는 세포에 결합할 수 있고, 면역반응을 매개할 수 있다. 예를 들어, 이러한 세포는 사이토카인 및/또는 케모카인을 분비하고, 미생물을 사멸시키고, 항체를 분비하고, 감염된 세포 또는 암성 세포를 인식하고, 선택적으로 이러한 세포를 제거한다. 예를 들어, 면역반응성 세포는 T 세포(세포독성 T 세포, 헬퍼 T 세포, 종양 침윤 T 세포), B 세포, 자연살생세포, 호중구, 대식세포 및 수지상세포를 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 문맥상, "면역반응성 세포"는 T 세포이고, 바람직하게는 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포이다.
바람직하게는, "면역반응성 세포"는 특히 MHC 분자와 관련하여 항원-제시 세포 또는 암세포와 같은 병든 세포의 표면 상에 제시되면 어느 정도의 특이성을 가지고 항원 또는 항원으로부터 유도된 항원 펩티드를 인식한다. 바람직하게는, 상기 인식은 항원 또는 상기 항원으로부터 유도된 항원 펩티드를 인식하는 세포가 반응성이거나 반응하도록 할 수 있다. 세포가 MHC 클래스 II 분자와 관련하여 항원 또는 항원으로부터 유도된 항원 펩티드를 인식하는 수용체를 갖는 헬퍼 T 세포 (CD4+ T 세포)인 경우, 이러한 응답성 또는 반응성은 사이토카인의 방출 및/또는 CD8+ 림프구 (CTL) 및/또는 B- 세포의 활성화를 포함할 수 있다. 세포가 CTL인 경우, 이러한 응답성 또는 반응성은 MHC 클래스 I 분자와 관련하여 제시된 세포, 즉, 예를 들어 세포예정사 또는 퍼포린-매개 세포 용균을 통한 클래스 I MHC로 항원을 제시함으로써 특징화된 세포의 제거를 수반할 수 있다. 본 발명에 따르면, CTL 반응성은 지속적인 칼슘 유동, 세포 분열, IFN-γ 및 TNF-α와 같은 사이토카인의 생산, CD44 및 CD69와 같은 활성화 마커의 상향 조절 및 항원 발현 표적세포의 특이적 세포용해성 살상을 포함할 수 있다. CTL 응답성은 또한 CTL 반응성을 정확하게 나타내는 인공 리포터를 사용하여 결정할 수 있다. 또한, 항원 또는 항원 유래의 항원 펩티드를 인식하고, 응답성 또는 반응성인 이러한 CTL을 본원에서 "항원-응답성 CTL"이라고 칭한다. 세포가 B 세포이면 이러한 응답성은 면역글로불린의 방출을 포함할 수 있다.
본 발명에 따르면, 용어 "면역반응성 세포"는 적절한 자극으로 면역 세포 (예를 들어, T 세포, 특히 T 헬퍼 세포 또는 세포용해성 T 세포)로 성숙시킬 수 있는 세포를 또한 포함한다. 면역반응성 세포는 CD34+ 조혈 줄기 세포, 미성숙 및 성숙 T 세포, 및 미성숙 및 성숙 B 세포를 포함한다. 항원을 인식하는 T 헬퍼 세포 또는 세포용해성 세포의 생성이 요구되는 경우, 면역반응성 세포는 세포용해성 T 세포 및 T 헬퍼 세포의 생산, 분화 및/또는 선택을 유리하게 하는 조건하에 항원 또는 항원 펩티드를 제시하는 세포와 접촉된다. T 세포 전구체가 세포용해성 T 세포로 분화되는 것은 항원에 노출될 때 면역계의 클론 선택과 유사하다.
"림프계 세포"는 선택적으로 적합한 변형 후, 예를 들어, T 세포 수용체의 전달 후, 세포성 면역반응과 같은 면역반응, 또는 이러한 세포의 전구체 세포를 생산할 수 있고, 이는 림프구를 포함하고, 바람직하게는 T 림프구, 림프아구, 및 형질세포를 포함한다. 림프계 세포는 본원에 기재된 면역반응성 세포일 수 있다. 바람직한 림프계 세포는 T 세포 수용체의 내인성 발현이 결핍된 T 세포이며, 이러한 T 세포 수용체를 세포 표면에 발현하도록 변형될 수 있다.
용어 "T 세포" 및 "T 림프구"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 세포용해성 T 세포를 포함하는 세포독성 T 세포(CTL, CD8+ T 세포) 및 T 헬퍼 세포(CD4+ T 세포)를 포함한다.
T 세포는 림프구로 알려진 백혈구 세포 그룹에 속하며 세포 매개 면역에 중심적인 역할을 한다. 이들은 T 세포 수용체(TCR)라고 불리는 세포 표면의 특별한 수용체의 존재에 의해 다른 림프구 유형, 예컨대 B 세포 및 자연살생세포와 구별될 수 있다. 흉선은 T 세포의 T 세포 성숙을 담당하는 주요 기관이다. 몇몇 서로 다른 T 세포의 서브세트가 각기 다른 기능이 있는 것으로 발견되고 있다.
T 헬퍼 세포는 다른 기능들 중에서 B 세포의 형질세포로의 성숙 및 세포독성 T 세포 및 대식세포의 활성화를 비롯한 면역학적 과정에서 다른 백혈구 세포를 돕는다. 또한, 이들 세포들은 이들 표면에 CD4 단백질을 발현하기 때문에 CD4+ T 세포로도 알려져 있다. 헬퍼 T 세포는 항원-제시 세포(APC)의 표면 상에 발현되는 MHC 클래스 II 분자에 의해 펩티드 항원으로 제시될 때 활성화된다. 일단 활성화되면, 신속히 분열하여 활성 면역반응을 조절하거나 돕는 사이토카인이라는 작은 단백질을 분비한다.
세포독성 T 세포는 바이러스 감염 세포와 종양 세포를 파괴하며 이식 거부에도 영향을 미친다. 또한, 이들 세포는 이들의 표면에 CD8 당단백질을 발현하기 때문에 CD8+ T 세포로도 알려져 있다. 이들 세포는 신체의 거의 모든 세포 표면에 존재하는 MHC 클래스 I과 관련된 항원에 결합함으로써 표적을 인식한다.
대다수의 T 세포에는 여러 단백질의 복합체로 존재하는 T 세포 수용체(TCR)가 있다. 실제 T 세포 수용체는 독립적인 T 세포 수용체 알파 및 베타(TCRα 및 TCRβ) 유전자로부터 생산되며 α-TCR 및 β-TCR 사슬이라고 불리는 두개의 개별적인 펩티드 사슬로 이루어진다. γδ T 세포(감마 델타 T 세포)는 표면에 뚜렷한 T 세포 수용체(TCR)를 가지고 있는 T 세포의 작은 서브세트를 나타낸다. 그러나, γδ T 세포에서, TCR은 하나의 γ-사슬과 하나의 δ 사슬로 이루어진다. 이 T 세포 그룹은 αβ T 세포보다 덜 흔하다(전체 T 세포의 2%).
T 세포 수용체의 구조는 항체 팔의 조합된 경쇄 및 중쇄로 정의된 영역인, 면역글로불린 Fab 단편과 매우 유사하다. TCR의 각 사슬은 면역글로불린 슈퍼패밀리의 구성원이며 하나의 N-말단 가변 (V) 도메인, 하나의 불변 (C) 도메인, 막관통/세포막-가로지르는 영역, 및 C-말단의 짧은 세포질성 꼬리를 가진다.
본 발명에 따르면, 용어 "T 세포 수용체의 가변부"는 TCR 사슬의 가변 도메인에 관한 것이다.
TCR α-사슬 및 β-사슬 모두의 가변부는 3개의 초가변 또는 상보성 결정 영역(CDR)을 갖는 반면, β-사슬의 가변부는 항원을 정상적으로 접촉하지 않으므로 CDR로 간주되지 않는 초가변부의 추가 영역(HV4)을 가진다. α-사슬의 CDR1이 또한 항원성 펩티드의 N 말단 부분과 상호작용하는 것으로 나타났지만, β-사슬의 CDR1이 펩티드의 C-말단 부분과 상호작용하는 반면, CDR3은 가공된 항원을 인식하는 것을 담당하는 주요 CDR이다. 펩티드. CDR2는 MHC를 인식하는 것으로 여겨진다. β-사슬의 CDR4는 항원 인식에 관여하는 것으로 생각되지 않지만, 슈퍼항원과 상호작용하는 것으로 나타나고 있다.
본 발명에 따르면, 용어 "CDR 서열 중 적어도 하나"는 바람직하게는 적어도 CDR3 서열을 의미한다. 용어 "T 세포 수용체 사슬의 CDR 서열"은 바람직하게는 T 세포 수용체의 α-사슬 또는 β-사슬의 CDR1, CDR2 및 CDR3에 관한 것이다.
TCR 도메인의 불변 도메인은 시스테인 잔기가 이황화결합을 형성하는 짧은 연결 서열로 구성되며, 이는 두 사슬 간의 연결고리를 형성한다.
모든 T 세포는 골수에서 조혈 줄기 세포에서 유래한다. 조혈 줄기 세포로부터 유래된 조혈 전구세포는 흉선에 존재하고 세포 분열에 의해 증대하여 미성숙한 흉선세포의 큰 집단을 생성한다. 가장 초기의 흉선세포는 CD4 또는 CD8을 발현하지 않으므로 이중 음성(CD4-CD8-) 세포로 분류된다. 이들은 발달 단계를 거치면서 이중 양성 흉선세포(CD4+CD8+)가 되고, 결국 흉선으로부터 말초 조직으로 방출되는 단일 양성 (CD4+CD8- 또는 CD4-CD8+) 흉선세포로 성숙한다.
T 세포 활성화에서의 제 1 신호는 다른 세포 상의 주조직적합성 복합체(MHC)에 의해 제시되는 짧은 펩티드에 T 세포 수용체를 결합시킴으로써 제공된다. 이는 해당 펩티드에 특이적인 TCR을 가진 T 세포만을 활성화시킨다는 것을 보장한다. 파트너 세포는 일반적으로 전문 항원-제시 세포(APC)이며, 일반적으로 나이브 반응의 경우에는 수지상세포이지만, B 세포 및 대식세포가 중요한 APC일 수 있다. MHC 클래스 I 분자에 의해 CD8+ T 세포에 제시된 펩티드는 길이가 8-10개인 아미노산이고; MHC 클래스 II 분자에 의해 CD4+ T 세포에 제시된 펩티드는 MHC 클래스 II 분자의 결합 틈새의 말단이 열려 있기 때문에 더 길다.
T 세포는 일반적으로 표준 절차를 사용하여 시험관내 또는 생체외 제조될 수 있다. 예를 들어, T 세포는 시판되는 세포 분리 시스템을 사용하여, 포유류 예컨대 환자의 골수, 말초혈액 또는 골수 또는 말초혈액의 분획 내에 존재(또는 이로부터 분리)할 수 있다. 대안으로, T 세포는 관련되거나 관련없는 인간, 비인간 동물, 세포주 또는 배양물로부터 유래될 수 있다. "T 세포를 포함하는 시료"는 예를 들어 말초혈액 단핵성 세포(PBMC)일 수 있다.
T 세포는 항원, 펩티드, 핵산 및/또는 항원을 발현하는 항원-제시 세포(APC)로 자극될 수 있다. 이러한 자극은 항원, 펩티드 및/또는 항원 또는 펩티드를 제시하는 세포에 특이적인 T 세포의 생성을 허용하기에 충분한 시간 및 조건 하에서 수행된다.
CD4+ 또는 CD8+ T 세포의 특이적 활성화는 다양한 방법으로 검출될 수 있다. 특이적 T 세포 활성화를 검출하는 방법은 T 세포의 증식, 사이토카인(예를 들어, 림포카인)의 생산, 또는 세포용해 활성의 생성을 검출하는 것을 포함한다. CD4+ T 세포에 대해, 특이적 T 세포 활성화를 검출하는 바람직한 방법은 T 세포의 증식을 검출하는 것이다. CD8+ T 세포에 대해, 특이적 T 세포 활성화를 검출하는 바람직한 방법은 세포용해 활성의 생성을 검출하는 것이다.
CD8+ T 세포주를 생성하기 위해, 항원을 생산하는 핵산으로 형질주입된 항원-제시 세포, 바람직하게는 자가 항원-제시 세포는 자극기 세포로서 사용할 수 있다.
T 세포 수용체(TCR) 사슬을 암호화하는 RNA와 같은 핵산은 림프계 세포, 예컨대 T 세포 또는 용해 가능성이 있는 다른 세포 내로 도입될 수 있다. 적합한 실시형태에서, TCR α-사슬 및 β-사슬은 항원-특이적 T 세포주로부터 클로닝되고 양자(adoptive) T 세포 요법에 사용한다. 이러한 관점에서, 본 발명은 본원에 개시된 CLDN18.2 또는 CLDN18.2 펩티드에 특이적인 T 세포 수용체를 제공한다. 일반적으로, 본 발명의 이러한 양상은 MHC와 관련하여 제시된 CLDN18.2 펩티드를 인식하거나 결합하는 T 세포 수용체에 관한 것이다. T 세포 수용체의 α-사슬 및 β-사슬을 암호화하는 핵산, 예를 들면, 본 발명에 따라 제공되는 T 세포 수용체는 발현 벡터와 같은 개별적인 핵산 분자 상에 또는 대안으로 단일 핵산 분자 상에 포함될 수 있다. 따라서, 용어 "T 세포 수용체를 암호화하는 핵산" 또는 이와 유사한 용어는 동일한 핵산 분자 상 또는 바람직하게는 상이한 핵산 분자 상의 T 세포 수용체 사슬을 암호화하는 핵산 분자에 관한 것이다.
"펩티드와 반응하는 면역반응성 세포"라는 용어는 펩티드를 인식할 때, 특히 MHC 분자와 관련하여 예컨대 항원 제시 세포 또는 병든 세포 예컨대 암세포의 표면 상에서 인식하면, 상술한 바와 같이 면역반응성 세포의 효과기 기능을 발휘하는 면역반응성 세포에 관한 것이다.
"펩티드와 반응하는 T 세포 수용체"라는 용어는 면역반응성 세포 상에 존재할 때 MHC 분자와 관련하여 예컨대 항원 제시 세포 또는 병든 세포 예컨대 암세포의 표면 상에 제시하면, 면역반응성 세포가 상술한 바와 같이 면역반응성 세포의 효과기 기능을 발휘할 수 있도록 펩티드를 인식하는 T 세포 수용체에 관한 것이다.
용어 "항원-반응성 T 세포" 또는 이와 유사한 용어는 MHC 분자와 관련하여 예컨대 항원 제시 세포 또는 병든 세포 예컨대 암세포의 표면 상에 제시되면 항원을 인식하고 상술한 바와 같이 T 세포의 효과기 기능을 발휘하는 T 세포에 관한 것이다.
용어 "항원-특이적 림프계 세포"는 특히 항원 특이적 T 세포 수용체가 제공된 경우, MHC 분자와 관련하여 예컨대 항원 제시 세포 또는 병든 세포 예컨대 암세포의 표면 상에 제시되면 항원을 인식하고, 바람직하게는 상술한 바와 같이 T 세포의 효과기 기능을 발휘하는 림프계 세포에 관한 것이다. T 세포 및 다른 림프계 세포는 항원을 발현하는 표적세포 및/또는 항원 펩티드를 제시하는 표적세포를 사멸시키면 항원에 특이적인 것으로 간주된다. T 세포 특이성은 예를 들어 크롬 방출 분석 또는 증식 분석법에 있어서 임의의 다양한 표준 기술을 사용하여 평가할 수 있다. 대안으로, 림포카인(예컨대 인터페론-γ)의 합성을 측정할 수 있다.
용어 "주조직적합성 복합체" 및 약어 "MHC"는 MHC 클래스 I 및 MHC 클래스 II 분자를 포함하고 모든 척추동물에서 발생하는 유전자의 복합체에 관한 것이다. MHC 단백질 또는 분자는 면역반응에서 림프구와 항원-제시 세포 또는 병든 세포 사이의 신호전달에 중요하며, 여기서 MHC 단백질 또는 분자는 펩티드를 결합하고 T 세포 수용체에 의한 인식을 위해 이들을 제시한다. MHC에 의해 암호화된 단백질은 세포 표면에서 발현되며, T 세포에 자기 항원(세포 자체의 펩티드 단편)과 비자기 항원(예를 들어, 침입 미생물의 단편)을 모두 표시한다.
MHC 영역은 클래스 I, 클래스 II 및 클래스 III의 세 하위그룹으로 구분된다. MHC 클래스 I 단백질에는 α-사슬과 β2-마이크로글로불린이 포함되어 있다(15번 염색체에 의해 암호화된 MHC의 일부분은 아니다). 이들은 세포독성 T 세포에 항원 단편을 제시한다. 대부분의 면역계 세포 상에, 특히 항원-제시 세포 상에 MHC 클래스 II 단백질은 α-사슬 및 β-사슬을 포함하며 이들은 T-헬퍼 세포에 항원 단편을 제시한다. MHC 클래스 III 영역은 다른 면역 성분, 예컨대 보체 성분 및 사이토카인을 암호화하는 일부를 암호화한다.
인간에서, 세포 표면에 항원 제시 단백질을 암호화하는 MHC 영역에서의 유전자는 인간 백혈구 항원 (HLA) 유전자라고 한다. 그러나 약어 MHC는 종종 HLA 유전자 산물을 지칭하기 위해 사용된다. HLA 유전자는 9개의 소위 고전적 MHC 유전자를 포함한다: HLA-A, HLA-B, HLA-C, HLA-DPA1, HLA-DPB1, HLA-DQA1, HLA-DQB1, HLA-DRA 및 HLA-DRB1.
본 발명의 모든 양상의 바람직한 일 실시형태에서, MHC 분자는 HLA 분자이다.
"항원 제시를 특징으로 하는 세포", "항원을 제시하는 세포", "세포에 의해 제시된 항원", "제시된 항원" 또는 이와 유사한 표현이란 암세포와 같은 병든 세포, 또는 MHC 분자와 관련하여, 특히 MHC 클래스 I분자와 관련하여 스스로가 발현하는 항원 또는 상기 항원 유래의 단편을, 예를 들면 항원의 가공에 의해 제시하는 항원 제시 세포와 같은 세포를 의미한다. 유사하게, 용어 "항원 제시를 특징으로 하는 질병"은 항원 제시, 특히 I 형 MHC로의 항원의 제시를 특징으로 하는 세포를 포함하는 질병을 의미한다. 세포에 의한 항원의 제시는 항원을 암호화하는 RNA와 같은 핵산으로 세포를 형질주입시킴으로써 달성할 수 있다.
"제시된 항원의 단편" 또는 이와 유사한 표현이란 이의 단편이 예를 들어 항원-제시 세포에 직접 첨가될 때 MHC 클래스 I 또는 클래스 II, 바람직하게는 MHC 클래스 I에 의해 제시될 수 있음을 의미한다. 일 실시형태에서, 단편은 항원을 발현하는 세포에 의해 천연적으로 제시되는 단편이다.
일부 치료 방법은 클래스 I MHC로 항원을 제시하는 병든 세포의 용균을 초래하는 환자의 면역계의 반응을 기반으로 한다. 이와 관련하여, 예를 들어, 항원 펩티드 및 MHC 분자의 복합체에 특이적 자가 세포독성 T 림프구가 질환을 갖는 환자에게 투여될 수 있다. 시험관내 이러한 세포독성 T 림프구의 생산이 공지된 것이다. T 세포를 분화시키는 방법의 예로서는 WO-A-9633265에서 발견할 수 있다. 일반적으로, 혈액 세포와 같은 세포를 함유하는 시료를 환자로부터 취하고, 세포는 복합체를 제시하고 세포독성 T 림프구(예를 들어, 수지상세포)의 증식을 유발할 수 있는 세포와 접촉시킨다. 표적세포는 COS 세포와 같은 형질주입된 세포일 수 있다. 이들 형질주입된 세포들은 이들의 표면에 목적하는 복합체를 제시하고, 세포독성 T 림프구와 접촉하는 경우 후자의 증식을 자극한다. 이어서, 클론적으로 증대된 자가 세포독성 T 림프구를 환자에게 투여한다.
세포독성 T 림프구를 선택하는 또 다른 방법에서는, MHC 클래스 I 분자/펩티드 복합체의 형광성 4량체는 세포독성 T 림프구의 특이적인 클론을 얻기 위해 사용한다(Altman et al.(1996), Science 274:94-96; Dunbar et al. (1998), Curr. Biol. 8:413-416, 1998).
또한, 목적하는 복합체(예를 들어, 수지상세포)를 제시하는 세포는 건강한 개체 또는 다른 종(예를 들어, 마우스)의 세포독성 T 림프구와 조합시켜 높은 친화도를 갖는 특이적 세포독성 T 림프구의 증식을 야기할 수 있다. 이들 증식된 T 림프구의 고친화성 T 세포 수용체는 복제되고 선택적으로 상이한 정도로 인간화시킬 수 있고, 따라서 수득된 T 세포 수용체는 예를 들어 레트로바이러스 벡터를 사용하여 유전자 전달을 통해 환자의 T 세포로 형질도입된다. 이어서, 양자전이는 이들 유전적으로 변형된 T 림프구를 사용하여 실시할 수 있다(Stanislawski et al.(2001), Nat Immunol. 2:962-70; Kessels et al. (2001), Nat Immunol. 2:957-61).
세포독성 T 림프구는 또한 그 자체로 공지된 방식으로 생체내 생성될 수 있다. 하나의 방법은 MHC 클래스 I/펩티드 복합체를 발현하는 비증식성 세포를 사용한다. 여기에 사용된 세포는 통상적으로 복합체를 발현하는 것, 예컨대 조사된 종양 세포 또는 복합체의 제시에 필요한 하나 또는 두 유전자(즉, 항원성 펩티드 및 제시하는 MHC 분자)가 형질주입된 세포일 것이다. 또 다른 바람직한 형태는 예를 들어 리포좀 이동 또는 전기천공에 의해 세포 내로 도입될 수 있는 재조합 RNA 형태의 항원의 도입이다. 얻어진 세포는 목적하는 복합체를 제시하고 이어서 증식될 자가 세포독성 T 림프구에 의해 인지된다.
항원 또는 항원 펩티드를 생체내 항원-제시 세포로의 함입을 가능하게 하기 위해 보조제와 조합함으로써 유사한 효과를 달성할 수 있다. 항원 또는 항원 펩티드는 단백질, DNA (예를 들어, 벡터 내에서) 또는 RNA로 나타낼 수 있다. 항원은 MHC 분자에 대한 펩티드 파트너를 생산하도록 가공될 수 있지만, 이의 단편은 추가 가공을 필요로 하지 않고 제시될 수 있다. 후자는 MHC 분자에 결합할 수 있는 경우에 특히 그러하다. 효과적인 항원 반응에 필요한 T 헬퍼 세포성 반응을 생성 할 수 있기 때문에, 완전한 항원이 수지상세포에 의해 생체내 가공되는 투여 형태가 바람직하다는 것은 이것이 또한 효과적인 면역반응에 필요한 T 헬퍼 세포 반응을 생산할 수 있기 때문이다(Ossendorp et al., Immunol Lett. (2000), 74:75-9; Ossendorp et al. (1998), J. Exp. Med. 187:693-702). 일반적으로, 예를 들어 유효량의 종양-관련 항원을 피내 주사에 의해 환자에게 투여하는 것이 가능하다. 그러나, 주사는 또한 림프절 내로 절내(intranodally) 실시될 수 있다(Maloy et al. (2001), Proc Natl Acad Sci USA 98:3299-303).
본 발명에 따르면, 용어 "인공 T 세포 수용체"는 "키메라 T 세포 수용체" 및 "키메라 항원 수용체(CAR)"와 동의어이다.
이들 용어는 T 세포와 같은 면역 효과기 세포에 대한 단일 클론 항체의 특이성과 같은 자의적인 특이성을 부여하는 조작된 수용체에 관한 것이다. 이러한 방식으로, 다수의 암-특이적 T 세포가 양자 세포 전달을 위해 생성될 수 있다. 따라서, 인공 T 세포 수용체가 예를 들어 T 세포 자체의 T 세포 수용체 대신에 또는 이에 부가하여, T 세포 상에 존재할 수 있다. 이러한 T 세포는 표적세포의 인식을 위한 항원의 가공 및 제시를 필수적으로 필요로 하지 않고 오히려 바람직하게는 표적세포 상에 존재하는 임의의 항원을 특이적으로 인식할 수 있다. 바람직하게는, 상기 인공 T 세포 수용체는 세포 표면에서 발현된다. 본 발명의 목적상, 인공 T 세포 수용체를 포함하는 T 세포는 본원에서 사용된 바와 같이 "T 세포"라는 용어에 포함된다.
일 실시형태에서, 단일 클론 항체로부터 유래된 단일 사슬 가변 단편(scFv)은 CD3-제타 막관통 및 엔도도메인에 융합된다. 이러한 분자는 표적세포 상의 항원 표적의 scFv에 의한 인식에 반응하는 제타 신호의 전달 및 표적 항원을 발현하는 표적세포의 사멸을 초래한다. 또한, 사용될 수 있는 항원 인식 도메인은 그 중에서도 T 세포 수용체(TCR) 알파 및 베타 단일 사슬을 포함한다. 실제로, 높은 친화도로 주어진 표적에 결합하는 거의 모든 것이 항원 인식 영역으로 사용될 수 있다.
항원 인식 후, 수용체가 클러스터링하고 신호가 세포로 전달된다. 이 점에서, "T 세포 신호전달 도메인"은 항원이 결합된 후 활성화 신호를 T 세포로 전송하는 도메인이고, 바람직하게는 엔도도메인이다. 가장 보편적으로 사용되는 엔도도메인 성분은 CD3-제타이다.
키메라 항원 수용체를 발현하는 CAR-조작된 T 세포에서의 양자 세포 전이 요법은 CAR-변형된 T 세포가 사실상 임의의 종양 항원을 표적으로 하도록 조작될 수 있기 때문에 유망한 항암 치료제이다. 예를 들어, 환자의 T 세포는 환자의 종양 세포에서 항원에 대한 특이적으로 유도된 CAR을 발현하도록 유전 공학적으로 조작된 다음, 환자에게 다시 주입될 수 있다.
본 발명에 따르면, 인공 T 세포 수용체는 상술한 바와 같은 T 세포 수용체의 기능을 대체할 수 있으며, 특히 세포용해 활성과 같은 반응성을 상술한 바와 같은 T 세포와 같은 세포에 부여할 수 있다. 그러나, 상술한 바와 같은 항원 펩티드-MHC 복합체에 대한 T 세포 수용체의 결합과는 달리, 인공 T 세포 수용체는 항원, 특히 세포 표면에 발현되는 항원에 결합할 수 있다.
T 세포 표면 당단백질 CD3-제타 사슬은 인간에서 CD247 유전자에 의해 암호화되는 단백질이다. CD3-제타는 T 세포 수용체 알파/베타 및 감마/델타 이종이량체 및 CD3-감마, CD3-델타 및 CD3-엡실론과 함께, T 세포 수용체-CD3 복합체를 형성한다. 제타 사슬은 항원 인식을 여러 세포내의 신호전달-형질도입 경로에 연결시키는 데 중요한 역할을 한다. 용어 "CD3-제타"는 바람직하게는 인간 CD3-제타에 관한 것이며, 특히 서열 목록의 서열번호 40의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 단백질이고, 이로 이루어지는 단백질인 것이 바람직하다.
CD28(클러스터 분화 28)은 T 세포 활성화에 필요한 공-자극 신호를 제공하는, T 세포에서 발현되는 분자 중 하나이다. CD28은 CD80 (B7.1) 및 CD86 (B7.2)에 대한 수용체이다. T 세포 수용체(TCR)에 더하여 CD28을 통한 자극은 다양한 인터루킨(특히 IL-6)의 생산을 위해 T 세포에 강력한 공-자극 신호를 제공할 수 있다. 용어 "CD28"은 바람직하게는 인간 CD28에 관한 것이고, 특히 서열 목록의 서열번호 39의 아미노산 서열 또는 상기 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 단백질이고, 이로 이루어지는 단백질인 것이 바람직하다.
본 발명에 따르면, CAR은 일반적으로 3개의 도메인을 포함할 수 있다.
제 1 도메인은 CLDN18.2를 인식하고 결합하는 결합 도메인이다.
제 2 도메인은 공-자극 도메인이다. 공-자극 도메인은 CAR을 표적 부분에 결합시 세포독성 림프구의 증식 및 생존을 향상시키는 역할을 한다. 공-자극 도메인의 동일성은 CAR에 의한 표적 부분에 결합시 세포성 증식 및 생존을 향상시킬 수 있는 능력이 있다는 점에서만 한정된다. 적절한 공-자극 도메인은 CD28, CD137(4-1BB), 종양 괴사 인자(TNF) 수용체 패밀리의 구성원, CD134(OX40), 수용체의 TNFR-슈퍼패밀리의 구성원, 및 CD278(ICOS), 활성화된 T 세포 상에 발현되는 CD28-슈퍼패밀리 공-자극 분자를 포함한다. 당업자는 이들 언급된 공-자극 도메인의 서열 변이체가 본 발명에 악영향을 미치지 않고 사용될 수 있고, 변이체는 이들이 모델로 하는 도메인과 동일하거나 유사한 활성을 가지는 것을 이해할 것이다. 이러한 변이체는 이들이 유래된 도메인의 아미노산 서열과 적어도 약 80%의 서열 동일성을 가질 것이다. 본 발명의 일부 실시형태에서, CAR 구조물은 2개의 공-자극 도메인을 포함한다. 특정 조합이에는 언급된 4가지 도메인의 모든 가능한 변형을 포함하지만, 구체예는 CD28+CD137 (4-1BB) 및 CD28+CD134 (OX40)를 포함한다.
제 3 도메인은 활성화 신호전달 도메인(또는 T 세포 신호전달 도메인)이다. 활성화 신호전달 도메인은 CLDN18.2에 대한 CAR의 결합시 세포독성 림프구를 활성화시키는 역할을 한다. 활성화 신호전달 도메인의 동일성은 CLDN18.2에 대한 CAR의 결합시 선택된 세포독성 림프구의 활성화를 유도할 수 있는 능력을 갖는다는 점에서만 한정된다. 적절한 활성화 신호전달 도메인은 T 세포 CD3[제타] 사슬 및 Fc 수용체[감마]를 포함한다. 당업자는 이들 언급된 활성화 신호전달 도메인의 서열 변이체가 본 발명에 악영향을 미치지 않고 사용될 수 있고, 변이체는 이들이 모델로 하는 도메인과 동일하거나 유사한 활성을 가지는 것을 이해할 것이다. 이러한 변이체는 이들이 유래된 도메인의 아미노산 서열과 적어도 약 80%의 서열 동일성을 가질 것이다.
본 발명의 CAR은 3개의 도메인을 융합 단백질의 형태로 함께 포함할 수 있다. 이러한 융합 단백질은 일반적으로 N-말단에서 C-말단 방향으로 연결된 결합 도메인, 하나 이상의 공-자극 도메인 및 활성화 신호전달 도메인을 포함할 것이다. 그러나, 본 발명의 CAR은 이러한 배열에 한정되지 않고, 다른 배열도 허용 가능하며 결합 도메인, 활성화 신호전달 도메인 및 하나 이상의 공-자극 도메인을 포함한다. 결합 도메인은 CLDN18.2에 자유롭게 결합해야 하기 때문에, 융합 단백질에서의 결합 도메인의 배치는 일반적으로 세포 외부 상의 영역의 제시가 달성될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 동일한 방식으로, 공-자극 및 활성화 신호전달 도메인이 세포독성 림프구의 활성 및 증식을 유도하는 역할을 하기 때문에, 융합 단백질은 일반적으로 세포의 내부에 이들 2개의 도메인을 나타낼 것이다. CAR은 부가적인 구성요소, 예컨대 세포 표면으로 융합 단백질의 적절한 수송을 보장하기 위한 신호 펩티드, 융합 단백질이 내재성 막 단백질로서 유지되도록 하는 막관통 도메인, 및 결합 도메인에 유연성을 부여하고 CLDN18.2에 강력한 결합을 허용하는 경첩 도메인(또는 스페이서 영역)을 포함할 수 있다.
본 발명의 CAR 시스템과 관련하여 사용되는 세포는 바람직하게는 T 세포, 특히 세포독성 림프구이고, 바람직하게는 세포독성 T 세포, 자연살생세포(NK) 및 림포카인-활성화 킬러(LAK) 세포로부터 선택된다. 활성화시, 이들 각각의 세포독성 림프구는 표적세포의 파괴를 유발한다. 예를 들어, 세포독성 T 세포는 다음과 같은 방법 중 하나 또는 모두로 표적세포의 파괴를 유발한다. 첫째로, 활성화시 T 세포는 퍼포린, 그랜자임 및 그라눌리신(granulysin)과 같은 세포 독소를 방출한다. 퍼포린과 그라눌리신은 표적세포에서 세공을 만들고, 그랜자임은 세포로 들어가고 세포의 세포예정사(프로그램된 세포 사멸)를 유도하는 세포질에서 카스파제 캐스케이드를 유발한다. 둘째로, T 세포와 표적 종양 세포 간의 Fas-Fas 리간드 상호작용을 통해 세포예정사를 유도할 수 있다. 세포독성 림프구는 이종(heterologous) 세포 또는 동종이계(allogenic) 세포를 사용할 수 있지만, 바람직하게는 자가 세포이다.
본 발명에 따르면, 기준 시료 또는 기준 유기체와 같은 "기준"은 본 발명의 방법에서 수득된 결과를 시험 시료 또는 시험 유기체와 상관시켜 비교하기 위해 사용될 수 있다. 전형적으로 기준 유기체는 건강한 유기체, 특히 암질환과 같은 질병을 앓고 있지 않은 유기체이다. "기준값" 또는 "기준 레벨"은 충분히 많은 수의 기준을 측정함으로써 경험적으로 기준으로부터 결정될 수 있다. 바람직하게는 기준값은 적어도 2, 바람직하게는 적어도 3, 바람직하게는 적어도 5, 바람직하게는 적어도 8, 바람직하게는 적어도 12, 바람직하게는 적어도 20, 바람직하게는 적어도 30, 바람직하게는 적어도 50, 또는 바람직하게는 적어도 100인 기준값을 측정함으로써 결정된다.
본 발명에 따르면, 용어 "결합제"는 표적에 대한 결합능을 갖는 임의의 화합물을 포함한다. 바람직하게는, 이러한 결합제는 표적에 대한 적어도 하나의 결합 도메인을 포함한다. 이 용어는 예컨대, 표적에 대한 결합 능력을 갖는 항체, 항체 단편, 이중특이성 또는 다중특이성 분자, 키메라 항원 수용체(CAR) 및 모든 인공 결합 분자(scaffold) 뿐만 아니라, 나노바디(nanobodies), 애피바디(affibodies), 안티칼린(anticalins), DARPin, 모노바디(monobodies), 아비머(avimers), 및 미소체(microbodies)를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 일 실시형태에서, 상기 결합은 특이적 결합이다.
용어 "면역글로불린"은 면역글로불린 슈퍼패밀리의 단백질에 관한 것이고, 바람직하게는 항체 또는 B 세포 수용체(BCR)와 같은 항원 수용체에 관한 것이다. 면역글로불린은 특징적인 면역글로불린(Ig) 폴드를 갖는 구조 도메인, 즉 면역글로불린 도메인을 특징으로 한다. 이 용어는 가용성 면역글로불린뿐만 아니라 막결합 면역글로불린을 포함한다. 또한, 막결합 면역글로불린은 표면 면역글로불린 또는 막 면역글로불린이라고도 하며, 일반적으로 BCR의 일부분이다. 가용성 면역글로불린은 일반적으로 항체를 지칭한다. 면역글로불린은 일반적으로 수개의 사슬을 포함하고, 전형적으로 이황화결합을 통해 연결된 2개의 동일한 중쇄 및 2개의 동일한 경쇄를 포함한다. 이들 사슬은 주로 VL(가변 경쇄) 도메인, CL(불변 경쇄) 도메인 및 CH(불변 중쇄) 도메인인 CH1, CH2, CH3 및 CH4와 같은 면역글로불린 도메인으로 구성된다. 항체의 다른 클래스, 즉 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM을 설명하는 5가지 유형의 포유동물 면역글로불린 중쇄, 즉 α, δ, ε, γ, 및 μ가 있다. 가용성 면역글로불린의 중쇄와는 대조적으로, 막 또는 표면 면역글로불린의 중쇄는 이들의 카복시-말단에 짧은 세포질 도메인 및 막관통 도메인을 포함한다. 포유류에는 람다 및 카파의 2가지 유형의 경쇄가 있다. 면역글로불린 사슬은 가변부 및 불변부를 포함한다. 불변부는 면역글로불린의 상이한 동종형 내에 기본적으로 저장되어 있고, 여기서 가변 부분은 고도의 다양성이 있고 항원 인식을 담당한다.
용어 "항체"는 이황화결합에 의해 상호연결된 적어도 2개의 중쇄(H) 사슬 및 2개의 경쇄(L)를 포함하는 당단백질을 지칭한다. 용어 "항체"는 재조합 항체, 인간 항체, 인간화 항체, 및 키메라 항체를 포함한다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변부(본원에서는 VH로 약칭함) 및 중쇄 불변부로 구성된다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변부(본원에서는 VL로 약칭함) 및 경쇄 불변부로 구성된다. VH 및 VL 영역은 프레임워크영역(FR)으로 지칭되는, 더욱 보전된 영역으로 산재되어 있는, 상보성 결정 영역(CDR)으로 지칭되는 초가변적 영역으로 추가적으로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4의 순서로 아미노-말단으로부터 카복시-말단까지에 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다. 중쇄 및 경쇄의 가변부는 항원과 상호작용하는 결합 도메인을 함유한다. 항체의 불변부는 면역계의 다양한 세포(예를 들어, 효과기 세포) 및 고전 보체 시스템의 제1 성분(C1q)을 포함하는 숙주 조직 또는 인자에 대한 면역글로불린의 결합을 매개할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같은 용어 "단일 클론 항체"는 단일 분자 조성물의 항체 분자의 조제물질을 일컫는다. 단일 클론 항체는 단일 결합 특이성 및 친화도를 나타낸다. 일 실시형태에서, 단일 클론 항체는 불멸화된 세포에 융합된, 비인간 동물, 예를 들어, 마우스로부터 수득된 B 세포를 포함하는 혼성세포에 의해 생성된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "재조합 항체"는 재조합 수단에 의해 제조, 발현, 창출 또는 분리된 모든 항체, 예컨대 (a) 면역글로불린 유전자에 대하여 유전자이식(transgenic) 또는 염색체이식(transchromosomal)한 동물(예를 들어, 마우스) 또는 이로부터 제조된 혼성세포로부터 분리된 항체들, (b) 항체를 발현하도록 형질전환된 숙주세포, 예를 들어 형질주입종(transfectoma)로부터 분리된 항체, (c) 재조합의 조합 항체 라이브러리로부터 분리된 항체, 및 (d) 면역글로불린 유전자 서열을 다른 DNA 서열에 스플라이싱하는 것을 포함하는 임의의 다른 수단에 의해 제조, 발현, 창출 또는 분리된 항체를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "인간 항체"는 인간 생식계 면역글로불린 서열로부터 유래되는 가변부 및 불변부를 갖는 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 인간 항체는 인간 생식계 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기(예를 들어, 시험관내 무작위 또는 부위 특이적 돌연변이유발에 의해 도입된 돌연변이 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다.
용어 "인간화 항체"는 비-인간종의 면역글로불린으로부터 실질적으로 유래된 항원 결합 부위를 갖는 분자를 지칭하며, 여기서 분자의 나머지 면역글로불린 구조는 인간 면역글로불린의 구조 및/또는 서열에 기반한다. 항원 결합 부위는 불변 도메인 상에 융합된 완전한 가변 도메인 또는 가변 도메인 내의 적절한 프레임워크 영역에 이식된 상보성 결정 영역(CDR)만을 포함할 수 있다. 항원 결합 부위는 야생형일 수 있거나 하나 이상의 아미노산 치환에 의해 변형될 수 있고, 예를 들어 인간 면역글로불린과 더 유사하게 변형될 수 있다. 인간화 항체의 일부 형태는 모든 CDR 서열(예를 들어, 마우스 항체로부터 6개의 CDR 모두를 함유하는 인간화 마우스 항체)을 보존한다. 다른 형태는 원래의 항체와 관련하여 변형된 하나 이상의 CDR을 갖는다.
용어 "키메라 항체"는 중쇄 및 경쇄의 각각의 아미노산 서열의 한 부분이 특정 종으로부터 유래되거나 특정 부류에 속하는 항체에서 상응하는 서열들과 상동성인 반면, 사슬의 남아있는 세그먼트는 다른 사슬에서의 상응하는 서열과 상동성인 이들 항체를 지칭한다. 전형적으로, 경쇄 및 중쇄의 가변영역은 포유류의 한 종으로부터 유래된 항체의 가변영역을 모방하는 반면, 불변 부분은 또 다른 것으로부터 유래된 항체의 서열과 상동성이다. 이러한 키메라 형태에 대한 하나의 분명한 이점은 가변영역이 예를 들어 인간 세포 제제로부터 유래된 불변영역과 조합하여 비-인간 숙주 유기체로부터의 용이하게 이용가능한 B-세포 또는 혼성세포를 사용하여 현재 알려진 공급원으로부터 편리하게 유래될 수 있다는 것이다. 가변영역은 제조의 용이함이라는 이점을 가지고, 특이성은 공급원에 의해 영향을 받지 않지만, 인간의 것인 불변영역은 항체들이 비-인간 공급원으로부터의 불변영역인 것보다는 주입될 때 인간 대상체로부터의 면역반응을 이끌어 낼 확률이 낮다. 그러나, 정의는 이러한 특정 예에 제한되는 것은 아니다.
항체는 마우스, 랫, 토끼, 기니아 피그 및 인간을 포함하나, 이에 한정되지 않는 상이한 종으로부터 유래될 수 있다.
본원에 기재된 항체들은 IgA, 예컨대 IgA1 또는 IgA2, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgE, IgM 및 IgD 항체를 포함한다. 다양한 실시형태에서, 항체는 IgG1의 항체이고, 더욱 상세하게는 IgG1, 카파 또는 IgG1, 람다 동종형(예를 들어 IgG1, κ, λ), IgG2a 항체(예를 들어 IgG2a, κ, λ), IgG2b 항체(예를 들어 IgG2b, κ, λ) IgG3 항체(예를 들어 IgG3, κ, λ) 또는 IgG4 항체(예를 들어 IgG4, κ, λ)를 들 수 있다.
본원에 기재된 항체는 바람직하게는 분리된다. 본원에서 사용된 바와 같이, "분리된 항체"는, 상이한 항원적 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 없는 항체를 지칭하는 것으로 의도된다(예를 들어, CLDN18.2에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 CLDN18.2 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 없다). 그러나, 인간 CLDN18.2의 에피토프, 이소형체 또는 변이체에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 예를 들어 다른 종(예를 들어, CLDN18.2 종 상동체)으로부터의 다른 관련된 항원에 대해 교차-반응성을 가질 수 있다. 또한, 분리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학물질을 실질적으로 가지지 않을 수 있다. 본 발명의 일 실시형태에서, "분리된" 단일 클론 항체의 조합은 상이한 특이성을 가지며, 명확히 정의된 조성물 또는 혼합물로 조합되어 있는 항체에 관한 것이다.
항체의 "항원-결합 부분"(또는 간단히 "결합 부분") 또는 항체의 "항원-결합 단편"(또는 간단히 "결합 단편")이라는 용어 또는 유사한 용어는 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 항체의 항원-결합 기능은 전장 항체의 단편에 의해 실행될 수 있는 것을 나타내고 있다. 항체의 "항원-결합 부분"이라는 용어에 포함되는 결합 단편의 예로서는 (i) VL, VH, CL 및 CH 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 경첩 영역에서 디설파이드 가교에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 팔의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) VH 도메인으로 이루어진, dAb 단편(Ward et al., (1989) Nature 341: 544-546); (vi) 분리된 상보성 결정 영역(CDR); 및 (vii) 선택적으로 합성 링커에 의해 연결될 수 있는 2개 이상의 분리된 CDR의 조합을 들 수 있다. 또한, Fv 단편의 2개의 도메인, VL 및 VH는 별도의 유전자에 의해 암호화되지만, 재조합 방법을 이용하여, 이들은 VL 및 VH 영역이 1가 분자를 형성하도록 짝을 이루는 단일 단백질 사슬(단일사슬 Fv(scFv)로서 알려져 있다; 예를 들어, Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; 및 Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883을 참조)로서 제작하는 것을 가능하게 하는 합성 링커에 의해 연결될 수 있다. 또한, 이러한 단일사슬 항체들은 항체의 "항원-결합 단편"이라는 용어에 포함되는 것으로 의도된다. 또 다른 예로서는 (i) 면역글로불린 경첩 영역 폴리펩티드에 융합된 결합 도메인 폴리펩티드, (ii) 경첩 영역에 융합된 면역글로불린 중쇄 CH2 불변영역, 및 (iii) CH2 불변영역에 융합된 면역글로불린 중쇄 CH3 불변영역을 포함하는 결합-도메인 면역글로불린 융합 단백질이다. 결합 도메인 폴리펩티드는 중쇄 가변영역 또는 경쇄 가변영역일 수 있다. 결합-도메인 면역글로불린 융합 단백질은 미국 특허출원 제 2003/0118592호 및 미국 특허출원 제 2003/0133939호에 추가로 개시되어 있다. 이들 항체 단편은 본 기술분야에서 당업자에게 공지된 통상적인 기술을 사용하여 수득되며, 상기 단편은 무손상 항체와 동일한 방식으로 유용성을 위해 스크리닝한다.
본 발명에 따르면, 용어 "CLDN18.2에 대한 결합 도메인"은 CLDN18.2 항체의 항원-결합 부분, 즉 CLDN18.2에 대해 겨냥된 항체이고, 바람직하게는 CLDN18.2에 특이적인 항체의 항원-결합 부분을 포함하고 바람직하게는 이에 관한 것이다.
용어 "결합 도메인"은 본 발명과 관련하여, 주어진 표적 구조/항원/에피토프에 결합하거나/이에 상호작용하는 구조, 예를 들어 항체인 것을 특징으로 한다. 따라서, 본 발명에 따른 결합 도메인은 "항원-상호작용-부위"를 나타낸다.
본 발명의 목적을 위해 본원에 기재된 바와 같이 항체 단편과 같은 항체의 모든 항체 및 유도체는 용어 "항체"에 포함된다.
본원에 기재된 항체는 종래의 단일 클론 항체 방법론, 예를 들어 문헌[Kohler and Milstein, Nature 256: 495 (1975)]의 표준 체세포 혼성화 기술을 포함하는 다양한 기술에 의해 생성될 수 있다. 체세포 혼성화 절차가 원칙적으로 바람직하지만, 단일 클론 항체를 생산하기 위한 다른 기술, 예를 들어, B-림프구의 바이러스성 형질전환 또는 발암성 형질전환 또는 항체 유전자의 라이브러리를 이용한 파지 디스플레이 기술이 사용될 수 있다.
단일 클론 항체를 분비하는 혼성세포를 제조하기 위한 바람직한 동물 시스템은 뮤린 시스템이다. 마우스에서의 혼성세포 생성은 매우 잘 확립된 절차이다. 융합을 위한 면역화된 비장세포의 분리를 위한 면역화 프로토콜 및 기술은 당업계에 공지되어 있는 것이다. 융합 파트너(예를 들어, 뮤린의 골수종 세포) 및 융합 절차 또한 공지되어 있는 것이다.
단일 클론 항체를 분비하는 혼성세포를 제조하기 위한 다른 바람직한 동물 시스템은 랫 및 토끼 시스템이다 (예를 들어 Spieker-Polet et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92:9348 (1995)에 기재된 것이고, 또한 Rossi et al., Am. J. Clin. Pathol. 124: 295 (2005)을 참조).
항체를 생성하기 위해, 기재된 바와 같이, 항원 서열, 즉 항체에 대한 것일 수 있는 서열로부터 유래되는 담체-접합된 펩티드, 재조합적으로 발현된 항원 또는 이의 단편의 농축된 제조물 및/또는 항원을 발현하는 세포에 의해 마우스를 면역화할 수 있다. 또는, 마우스는 항원 또는 이의 단편을 암호화하는 DNA로 면역화시킬 수 있다. 또한, 정제되거나 농축된 항원 제조물을 사용하는 면역화가 항체를 야기하지 않는 경우에는, 마우스는 항원을 발현하는 세포, 예를 들어, 세포주로 면역화되어 면역반응을 촉진시킬 수 있다.
면역반응은 꼬리 정맥 또는 후안와(retroorbital) 출혈로 얻는 혈장 및 혈청 시료를 가지고 면역 프로토콜 과정을 통해 모니터링할 수 있다. 면역글로불린의 충분한 역가를 갖는 마우스는 융합에 사용할 수 있다. 특정 항체 분비 혼성세포의 비율을 증가시키기 위해 마우스를 희생시키고 비장을 제거하기 3일 전에 마우스에서는 항원 발현 세포로 복강 내 또는 정맥 내에서 증강시킬 수 있다.
단일 클론 항체를 생성하는 혼성세포를 생성하기 위해, 면역화된 마우스로부터의 비장 세포 및 림프절 세포를 분리하고, 마우스 골수종 세포주와 같은 적절한 불멸화 세포주에 융합시킬 수 있다. 이어서, 얻어진 혼성세포는 항원-특이적 항체의 생산을 위해 스크리닝할 수 있다. 그 후, 개별적인 웰은 ELISA에 의해 항체를 분비하는 혼성세포를 스크리닝할 수 있다. 항원 발현 세포를 이용한 면역형광법 및 FACS 분석을 통해, 항원 특이성을 가진 항체를 동정할 수 있다. 항체 분비 혼성세포는 옮겨질 수 있고, 다시 스크리닝 될 수 있으며, 여전히 단일 클론 항체에 대해서 양성이면 한계 희석에 의해 서브클로닝될 수 있다. 안정한 서브클론을 시험관내에서 배양하여 특성화를 위해 조직 배양 배지에서 항체를 생성시킬 수 있다.
항체가 항원에 결합하는 능력은 표준 결합 검정법(예를 들어, ELISA, 웨스턴 블롯, 면역형광법 및 유동 세포계측 분석)을 사용하여 결정할 수 있다.
항체 및 항체의 유도체는 특히 VL 및 VH 영역을 제공하기 위해, 항체 단편과 같은 결합 도메인을 제공하는데 유용한다.
인공 T 세포 수용체 내에 존재할 수 있는 CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 CLDN18.2에 결합하는 능력, 즉 CLDN18.2에 존재하는 에피토프, 바람직하게는 CLDN18.2의 세포밖 도메인 내에 위치한 에피토프, 특히 제 1 세포밖 루프, 바람직하게는 CLDN18.2의 아미노산 위치 29 내지 78에 결합하는 능력을 갖는다. 특정 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 CLDN18.1 상에 존재하지 않는 CLDN18.2 상의 에피토프에 결합한다. 가장 바람직하게는, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 CLDN18.2 외에 CLDN 단백질 상에 존재하지 않는 CLDN18.2 상의 에피토프에 결합한다.
CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 바람직하게는 CLDN18.2에 결합하지만 CLDN18.1에는 결합하지 않는다. 바람직하게, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 CLDN18.2에 특이적이다. 바람직하게는, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 세포 표면 상에 발현된 CLDN18.2에 결합한다. 특히 바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 생세포의 표면 상에 존재하는 CLDN18.2의 천연 에피토프에 결합한다.
바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 20, 21, 22, 23, 24 및 25로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 중쇄 가변부(VH)를 포함한다.
바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33 및 34로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 이의 단편, 또는 상기 아미노산 서열이나 단편의 변이체를 포함하는 경쇄 가변부(VL)를 포함한다.
특정의 바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 이하의 가능성 (i) 내지 (ix)로부터 선택되는 중쇄 가변부(VH) 및 경쇄 가변부(VL)의 조합을 포함한다:
(i) VH는 서열번호 20으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 27로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(ii) VH는 서열번호 21로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 26으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(iii) VH는 서열번호 22로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 28로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(iv) VH는 서열번호 24로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 31로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(v) VH는 서열번호 23으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 30으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(vi) VH는 서열번호 25로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 29로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(vii) VH는 서열번호 25로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 32로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(viii) VH는 서열번호 25로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 33으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고,
(ix) VH는 서열번호 25로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 34로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함한다.
특히 바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 중쇄 가변부(VH) 및 경쇄 가변부(VL)의 이하의 조합을 포함한다:
VH는 서열번호 23으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 30으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함한다.
추가적인 특히 바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 중쇄 가변부(VH) 및 경쇄 가변부(VL)의 이하의 조합을 포함한다:
VH는 서열번호 21로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함하고, VL은 서열번호 26으로 표시되는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 포함한다.
바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 (i) 이하의 서열을 포함하는 CDR3을 포함하는 VH: TRSWRGNSFDY 및/또는 (ii) 이하의 서열을 포함하는 CDR3을 포함하는 VL: QNDYSYPFT을 포함한다.
바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은
(i) 상보성 결정 영역 CDR1, CDR2 및 CDR3의 이하의 세트를 포함하는 VH:
CDR1: GYTFTSYW, CDR2: IYPSDSYT, CDR3: TRSWRGNSFDY
및/또는
(ii) 상보성 결정 영역 CDR1, CDR2 및 CDR3의 이하의 세트를 포함하는 VL:
CDR1: QSLLNSGNQKNY, CDR2: WAS, CDR3: QNDYSYPFT를 포함한다.
바람직한 실시형태에서, CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 각각은 상보성 결정 영역 CDR1, CDR2 및 CDR3의 이하의 세트를 각각 포함하는 VH 및 VL의 조합을 포함한다:
VH: CDR1: GYTFTSYW, CDR2: IYPSDSYT, CDR3: TRSWRGNSFDY,
VL: CDR1: QSLLNSGNQKNY, CDR2: WAS, CDR3: QNDYSYPFT
바람직하게는, 본 명세서에 기재된 중쇄 가변부(VH) 및 경쇄 가변부(VL)의 조합이 단일 사슬 Fv(scFv) 내에 배열된다.
용어 "단편"은 특히 중쇄 가변부(VH) 및/또는 경쇄 가변부(VL)의 하나 이상의 상보성 결정 영역(CDR), 바람직하게는 적어도 CDR3 가변부를 지칭한다. 일 실시형태에서 상기 하나 이상의 상보성 결정 영역(CDR)은 상보성 결정 영역 CDR1, CDR2 및 CDR3의 세트로부터 선택된다. 특히 바람직한 실시형태에서, 용어 "단편"은 중쇄 가변부(VH) 및/또는 경쇄 가변부(VL)의 상보성 결정 영역 CDR1, CDR2 및 CDR3을 지칭한다.
일 실시형태에서, 본원에 기재된 바와 같이, 하나 이상의 CDR, CDR 세트 또는 CDR 세트의 조합을 포함하는 CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 상기 CDR을 이들의 사이에 있는 프레임워크 영역과 함께 포함한다. 바람직하게는, 상기 부분은 또한 제 1 및 제 4 프레임워크 영역 중 어느 하나 또는 모두의 적어도 약 50%를 포함할 것이며, 50%는 제 1 프레임워크 영역의 C-말단의 50% 및 제 4 프레임워크 영역의 N-말단 50%인 것이다. 재조합 DNA 기술에 의해 제조된 결합제의 구축은 클로닝 또는 다른 조작 단계를 용이하게 하기 위해 도입된 링커에 의해 암호화되는 가변 영역에 잔기 N-말단 또는 C- 말단을 도입시킬 수 있으며, 면역글로불린 중쇄, 다른 가변 도메인(예를 들어, 디아바디(diabodies)의 생산에서) 또는 단백질 표지를 포함하는 추가적인 단백질 서열에 본 발명의 가변영역을 결합시키는 링커의 도입을 포함한다.
일 실시형태에서, 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 CDR, CDR 세트 또는 CDR 세트의 조합을 포함하는 CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 인간 항체 프레임워크에 상기 CDR을 포함한다.
일 실시형태에서, 본 발명에 따른 CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 본원에 기재된 CLDN18.2의 결합 도메인과 동일하거나 본질적으로 동일한 에피토프를 인식, 즉 결합하는 CLDN18.2의 결합 도메인(본원에 기재된 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 가변 영역(VL)의 조합을 포함하는 항체), 및/또는 CLDN18.2와의 결합에 대해 상기 CLDN18.2에 대한 결합 도메인과 경쟁하는 CLDN18.2의 결합 도메인에 관한 것이다.
본 발명에 따른 용어 "결합"은 바람직하게는 특이적 결합에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, T 세포 수용체 또는 항체와 같은 제제는 하기 소정의 표적에 대해 유의적인 친화도를 갖고 표준 검정법에서 상기 소정의 표적에 결합하는 경우 소정의 표적에 결합할 수 있다. "친화도" 또는 "결합 친화도"는 종종 평형 해리 상수(KD)로 측정된다. 바람직하게는, 용어 "유의적 친화도"는 10-5 M 이하, 10-6 M 이하, 10-7 M 이하, 10-8 M 이하, 10-9 M 이하, 10-10 M 이하, 10-11 M 이하, 또는 10-12 M 이하의 해리 상수(KD)를 갖는 소정의 표적에 대한 결합을 의미한다.
제제는 상기 표적에 대해 유의한 친화도를 나타내지 않으면 표적에 (실질적으로) 결합할 수 없고, 표준 검정에서 상기 표적에 유의적으로 결합하지 않고, 특히 검출 가능하게 결합하지 않는다. 바람직하게는, 제제는 2 이하, 바람직하게는 10, 보다 바람직하게는 20, 특히 50 또는 100㎍/ml 이상의 농도로 존재한다면 상기 표적에 검출 가능하게 결합하지 않는다. 바람직하게는, 제제가 결합 가능한 소정의 표적에 결합하는 것에 대한 KD보다 적어도 10-배, 100-배, 103-배, 104-배, 105-배, 또는 106-배 초과인 KD를 갖는 상기 표적에 결합하면, 제제는 표적에 대한 유의한 친화도를 갖지 않는다. 예를 들면, 제제가 결합 가능한 표적에 대한 제제의 결합에 대한 KD가 10-7M이면, 제제가 유의한 친화도를 갖지 않는 표적에의 결합에 대한 KD는 적어도 10-6M, 10-5M, 10-4M, 10-3M, 10-2M, 또는 10-1M일 수 있다.
제제는 하기 소정의 표적에 결합할 수 있으나 다른 표적에는 (실질적으로) 결합할 수 없으면 소정의 표적에 특이적이고, 즉 다른 표적에 대해서는 유의한 친화도를 갖지 않고 표준 검정에서 다른 표적에 유의적으로 결합하지 않는다. 본 발명에 따르면, 제제는 CLDN18.2에 결합할 수 있지만 다른 표적에 (실질적으로) 결합할 수 없으면 CLDN18.2에 특이적인 것이다. 바람직하게는, 제제는 이러한 다른 표적에 대한 친화력 및 결합이 CLDN18.2-비관련 단백질 예컨대 소 혈청 알부민(BSA), 카세인, 인간 혈청 알부민(HSA) 또는 비-클라우딘 막관통 단백질 예컨대 MHC 분자 또는 트랜스페린 수용체 또는 다른 임의의 특정 폴리펩티드에 대한 친화도 또는 결합도가 유의적으로 넘어서지 않으면 CLDN18.2에 특이적이다. 바람직하게는, 제제는 특이적이지 않은 표적에 결합하는 것에 대한 KD보다 적어도 10-배, 100-배, 103-배, 104-배, 105-배, 또는 106-배 미만인 KD를 갖는 표적에 결합하면 제제는 소정의 표적에 대해 특이적이다. 예를 들어, 특이적인 표적에 대한 제제의 결합에 대한 KD가 10-7M이면, 특이적이지 않은 표적에 결합하는 것에 대한 KD는 적어도 10-6M, 10-5M, 10-4M, 10-3M, 10-2M, 또는 10-1M일 수 있었다.
표적에 대한 제제의 결합은 임의의 적합한 방법을 사용하여 실험적으로 결정될 수 있다; 예를 들어, Berzofsky et al., "Antibody-Antigen Interactions" In Fundamental Immunology, Paul, W. E., Ed., Raven Press New York, N Y (1984), Kuby, Janis Immunology, W. H. Freeman and Company New York, N Y (1992), 및 본원에 기재된 방법을 참조한다. 친화도는 평형 투석법에 의하거나; 제조자가 설명한 일반 절차를 사용하는 BIAcore 2000 기기를 사용하거나; 방사성표지된 표적 항원을 사용하는 방사면역측정법에 의하거나; 또는 숙련된 당업자에게 공지된 다른 방법에 의해서와 같이 통상적인 기술을 사용하여 용이하게 결정될 수 있다. 친화도 데이터는, 예를 들어 Scatchard et al., Ann N.Y. Acad. ScL, 51:660 (1949)의 방법에 분석될 수 있다. 특정 항체-항원 상호작용의 측정된 친화도는 상이한 조건, 예를 들어, 염 농도, pH 하에서 측정되는 경우 다양해질 수 있다. 따라서, 친화도 및 다른 항원-결합 파라미터, 예를 들어 KD, IC50은 바람직하게는 항체 및 항원의 표준화된 용액 및 표준화된 완충액으로 측정된다.
본원에 기재된 펩티드 및 단백질 제제는 핵산 예컨대 제제를 암호화하는 RNA의 형태로 및/또는 핵산 예컨대 제제를 암호화하는 RNA를 포함하는 숙주 세포의 형태로 시험관내 또는 생체내 제공될 수 있다. 특히, 비-바이러스성-기반 DNA 형질 주입, 트랜스포존-기반 시스템 및 바이러스성-기반 시스템을 포함하는 T 세포 내에 CAR 구조물을 도입하기 위해 다양한 방법이 사용될 수 있다. 비-바이러스성-기반 DNA 형질주입은 삽입 돌연변이 유발의 위험이 낮다. 트랜스포존-기반 시스템은 통합 구성요소를 포함하지 않는 플라스미드보다 전이유전자를 효율적으로 통합할 수 있다. 바이러스성-시스템은 γ-레트로바이러스 및 렌티바이러스성 벡터의 사용을 포함한다. γ-레트로바이러스는 상대적으로 생산하기 쉽고, 효율적이고 영구적으로 T 세포를 전달하며, 일차 인간 T 세포의 통합 관점에서 예비적으로 안전하다고 증명되어 있다. 또한, 렌티바이러스성 벡터는 T 세포를 효율적이고 영구적으로 형질도입하지만 제조 비용이 더 비싸다. 이들은 또한 레트로바이러스 기반 시스템보다 잠재적으로 안전하다.
본원에 기재된 펩티드 및 단백질 제제는 핵산 예컨대 제제를 암호화하는 RNA를 투여함으로써 및/또는 핵산 예컨대 제제를 암호화하는 RNA를 포함하는 숙주 세포를 투여함으로써 환자에게 전달될 수 있다. 환자에게 투여될 때 핵산은 네이키드 형태 또는 적합한 전달 운반체, 예컨대 리포솜 또는 바이러스 입자 형태로 또는 숙주 세포 내에 존재할 수 있다. 제공된 핵산은 적어도 부분적으로 치료적 단백질에 대해 관찰된 불안정성을 완화시키는 지속된 방식으로 장시간 동안 제제를 생성할 수 있다. 핵산이 숙주 세포 내에 존재하지 않고 환자에게 투여되는 경우, 핵산에 의해 암호화되는 제제의 발현을 위해 바람직하게는 환자의 세포에 의해 흡수된다. 핵산이 숙주 세포 내에 존재하는 동안 환자에게 투여되는 경우, 핵산에 의해 암호화된 제제를 생산하도록 환자 내 숙주 세포에 의해 발현되는 것이 바람직하다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "핵산"은 DNA 및 RNA 예컨대 게놈 DNA, cDNA, mRNA, 재조합적으로 생산된 분자 및 화학적으로 합성된 분자를 포함하도록 의도된다. 핵산은 단일 가닥 또는 이중 가닥일 수 있다. RNA에는 시험관내 전사된 RNA(IVT RNA) 또는 합성 RNA가 포함된다. 본 발명에 따르면, 핵산은 바람직하게는 분리된 핵산이다.
핵산은 벡터에 포함될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "벡터"는 플라스미드 벡터, 코스미드 벡터, 파지 벡터, 예컨대 람다 파지, 바이러스 벡터, 예컨대 아데노 바이러스 벡터 또는 바큘로 바이러스 벡터, 또는 인공 염색체 벡터, 예컨대 박테리아 인공 염색체(BAC), 효모 인공 염색체(YAC) 또는 P1 인공 염색체(PAC)를 포함하는 당업자에게 공지된 임의의 벡터를 포함한다. 상기 벡터는 발현 벡터뿐만 아니라 클로닝 벡터(cloning vector)를 포함한다. 발현 벡터는 바이러스 벡터뿐만 아니라 플라스미드를 포함하고, 일반적으로 목적하는 코딩 서열 및 특정 숙주 유기체(예를 들어, 박테리아, 효모, 식물, 곤충 또는 포유류) 또는 시험관내 발현 시스템에서 작동 가능하게 연결된 코딩 서열의 발현에 필요한 적절한 DNA 서열을 함유한다. 클로닝 벡터는 일반적으로 소정의 목적하는 DNA 단편을 조작하고 증폭시키는데 사용되며, 목적하는 DNA 단편의 발현에 필요한 기능 서열이 결여될 수 있다.
본 발명의 문맥 상에서, 용어 "RNA"는 리보뉴클레오티드 잔기를 포함하는 분자에 관한 것이고, 바람직하게는 완전히 또는 대체로 리보뉴클레오티드 잔기로 이루어진 분자에 관한 것이다. "리보뉴클레오티드"는 β-D-리보푸라노실기의 2'-위치에 히드록실기를 갖는 뉴클레오티드에 관한 것이다. 이 용어는 이중가닥 RNA, 단일가닥 RNA, 분리된 RNA, 예컨대 부분적으로 정제된 RNA, 본질적으로 순수한 RNA, 합성 RNA, 재조합적으로 생산된 RNA뿐만 아니라 하나 이상의 뉴클레오티드의 부가, 결실, 치환 및/또는 변경에 의해 천연-발생 RNA와 상이한 변형된 RNA를 포함한다. 이러한 변경은 예를 들어, RNA의 하나 이상의 뉴클레오티드에서, RNA의 말단(들)에 또는 내부적으로, 비-뉴클레오티드 물질을 첨가하는 것을 포함할 수 있다. 또한, RNA 분자의 뉴클레오티드는 비-표준 뉴클레오티드, 예컨대 비-천연 발생 뉴클레오티드 또는 화학적으로 합성된 뉴클레오티드 또는 데옥시뉴클레오티드도 포함할 수 있다. 이들 변경된 RNA는 유사체 또는 천연 발생 RNA의 유사체로 지칭할 수 있다.
본 발명에 따르면, 용어 "RNA"는 "메신저 RNA"를 의미하는 "mRNA"를 포함하고 바람직하게는 이에 관한 것이며, DNA를 주형으로 사용하여 생산될 수 있는 "전사체"에 관한 것이고, 펩티드 또는 단백질을 암호화한다. mRNA는 전형적으로 5'비번역영역(5'-UTR), 단백질 또는 펩티드 코딩 영역 및 3'비번역영역(3'-UTR)을 포함한다. mRNA는 세포 내에 및 시험관내에서는 제한된 반감 시간을 갖는다. 바람직하게는, mRNA는 DNA 주형을 사용하여 시험관내 전사에 의해 생성된다. 본 발명의 일 실시형태에서, RNA는 시험관내 전사 또는 화학 합성에 의해 수득된다. 시험관내 전사 방법론은 당업자에게 공지되어 있는 것이다. 예를 들어, 시판되어 있는 다양한 시험관내 전사 키트가 존재한다.
본 발명의 일 실시형태에서, RNA는 자가-복제 RNA, 예컨대 단일 가닥 자가-복제 RNA이다. 일 실시형태에서, 자가-복제 RNA는 포지티브 센스의 단일 가닥 RNA이다. 일 실시형태에서, 자가-복제 RNA는 바이러스 RNA 또는 바이러스 RNA로부터 유래된 RNA이다. 일 실시형태에서, 자가-복제 RNA는 알파바이러스 게놈 RNA이거나 알파바이러스 게놈 RNA로부터 유래된 것이다. 일 실시형태에서, 자가-복제 RNA는 바이러스 유전자 발현 벡터이다. 일 실시형태에서, 바이러스는 셈리키삼림열바이러스(Semliki forest virus)이다. 일 실시형태에서, 자가-복제 RNA는 본원에 기재된 제제를 암호화하는 상기 전이유전자 중 하나 이상, 하나 이상의 전이유전자를 함유한다. 일 실시형태에서, RNA가 바이러스 RNA이거나 바이러스 RNA로부터 유래된 경우, 전이유전자는 바이러스 서열 예컨대 구조 단백질을 암호화하는 바이러스 서열을 부분적으로 또는 완전히 대체할 수 있다. 일 실시형태에서, 자가-복제 RNA는 시험관내 전사된 RNA이다.
본 발명에 따라 사용된 RNA의 발현 및/또는 안정성을 증가시키기 위해, 바람직하게는 발현된 펩티드 또는 단백질의 서열을 변경하지 않고 이를 변형시킬 수 있다.
본 발명에 따라 사용되는 바와 같이 RNA와 관련하여 "변형"이란 용어는 상기 RNA에 천연적으로 존재하지 않는 RNA의 임의의 변형을 포함한다.
본 발명의 일 실시형태에서, 발명에 따라 사용된 RNA는 캡핑되지 않은 5'-트리포스페이트를 갖지 않는다. 이러한 캡핑되지 않은 5'-트리포스페이트의 제거는 포스파타아제로 RNA를 처리함으로써 달성될 수 있다.
본 발명에 따른 RNA는 그 안정성을 증가시키기 위해 및/또는 세포독성을 감소시키기 위해 천연 발생적인 또는 합성 리보뉴클레오티드를 변형시킬 수 있다. 예를 들어, 일 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용된 RNA에서는 5-메틸시티딘은 부분적으로 또는 전적으로 시티딘으로 대신하고, 바람직하게는 전적으로 시티딘으로 대신한다. 대안으로 또는 부가적으로, 일 실시형태에서, 본 발명에 따라 사용된 RNA에서 슈도우리딘은 부분적으로 또는 전적으로 우리딘으로 대신하고, 바람직하게는 전적으로 우리딘으로 대신한다.
일 실시형태에서, 용어 "변형"은 5'-캡 또는 5'-캡 유사체를 RNA에 제공하는 것에 관한 것이다. 용어 "5'-캡"은 mRNA 분자의 5'-말단에서 발견되는 캡 구조를 지칭하며 일반적으로 흔치않은 5'에서 5'로의 트리포스페이트 결합을 통해 mRNA에 연결된 구아노신 뉴클레오티드로 구성된다. 일 실시형태에서, 이 구아노신은 7-위치에서 메틸화된다. 용어 "통상적인 5'-캡"은 천연 발생적인 RNA 5'-캡을 지칭하고, 바람직하게는 7-메틸구아노신 캡(m7G)을 지칭한다. 본 발명의 문맥 상에서, 용어 "5'-캡"은 RNA 캡 구조와 유사한 5'-캡 유사체를 포함하고, 바람직하게는 생체내 및/또는 세포내에서 RNA에 부착된 경우 RNA를 안정화시키는 능력을 갖도록 변형된다.
5'-캡 또는 5'-캡 유사체를 갖는 RNA를 제공하는 것은 상기 5'-캡 또는 5'-캡 유사체의 존재하에서 DNA 주형의 시험관내 전사에 의해 달성될 수 있으며, 여기서 상기 5'-캡은 공-전사적으로 생성된 RNA 가닥 내에 포함되거나, RNA가 예를 들어 시험관내 전사에 의해 생성될 수 있고, 5'-캡은 캡핑 효소, 예를 들어 벡시니아 바이러스의 캡핑 효소를 사용하여 전사후 RNA에 부착될 수 있다.
RNA는 추가적인 변형을 포함할 수 있다. 예를 들어, 본 발명에서 사용되는 RNA의 추가 변형은 천연 발생하는 폴리(A) 꼬리의 연장 또는 절단 또는 5'- 또는 3'-비번역영역(UTR)의 변경, 예컨대 상기 RNA의 코딩 영역과 관련없는 UTR의 도입, 예를 들어, 글로빈 유전자, 예컨대 알파2-글로빈, 알파1-글로빈, 베타-글로빈, 바람직하게는 베타-글로빈, 보다 바람직하게는 인간 베타-글로빈으로부터 유래된 3'-UTR의 하나 이상의 삽입, 바람직하게는 2 카피의 삽입일 수 있다.
따라서, 본 발명에 따라 사용된 RNA의 안정성 및/또는 발현을 증가시키기 위하여, 폴리-A 서열과 함께 존재하도록 변형될 수 있고, 바람직하게는 10 내지 500의 길이를 갖고, 보다 바람직하게는 30 내지 300의 길이를 갖고, 더욱 바람직하게는 65 내지 200의 길이를 갖고, 특히 바람직하게는 100 내지 150의 길이를 갖는 아데노신 잔기를 포함한다. 특히 바람직한 실시형태에서, 폴리-A 서열은 약 120 아데노신 잔기의 길이를 갖는다. 또한, 2개 이상의 3'-비번역영역(UTR)을 RNA 분자의 3'-비번역영역 내에 도입하면 번역 효율이 향상될 수 있다. 하나의 특정 실시형태에서, 3'-UTR은 인간 β-글로빈 유전자로부터 유래된다.
RNA의 "안정성"이라는 용어는 RNA의 "반감기"에 관한 것이다. "반감기"는 분자의 활성, 양, 또는 수의 절반을 제거하는 데 필요한 시간을 말한다. 본 발명의 문맥 상에서, RNA의 반감기는 상기 RNA의 안정성을 나타낸다. RNA의 반감기는 RNA의 "발현 지속 시간"에 영향을 줄 수 있다. 반감기가 긴 RNA는 장시간에 걸쳐 발현될 것으로 예상될 수 있다.
본 발명의 문맥 상에서, 용어 "전사"는 DNA 서열 내의 유전 암호가 RNA로 전사되는 과정에 관한 것이다. 이어서, 그 RNA는 단백질로 번역될 수 있다. 본 발명에 따르면, 용어 "전사"는 "시험관내 전사"를 포함하며, 여기서 용어 "시험관내 전사"는 RNA, 특히 mRNA가 무세포계에서, 바람직하게는 적절한 세포 추출물을 사용하여 시험관내 합성되는 공정에 관한 것이다. 바람직하게는, 클로닝 벡터가 전사체의 생성을 위해 적용된다. 이들 클로닝 벡터는 일반적으로 전사 벡터로 나타내고, 본 발명에 따르면 용어 "벡터"에 포함되는 것이다.
본 발명에 따르면 용어 "번역"은 메신저 RNA의 가닥이 펩티드 또는 단백질을 제작하기 위해 아미노산의 서열 조립을 유도하는 세포의 리보솜에서의 과정에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 핵산은 단독으로 또는 상동성 또는 이종성일 수 있는 다른 핵산과 함께 존재할 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 핵산은 상기 핵산에 대해 상동이거나 이종일 수 있는 발현 조절 서열에 기능적으로 연결되어 있다. 또한, 용어 "상동성(homologous)"은 핵산이 천연적으로 기능적으로 연결되어 있음을 의미하며, 용어 "이종성(heterologous)"은 핵산이 천연적으로 기능적으로 연결되어 있지 않다는 것을 의미한다.
핵산 및 발현 조절 서열은 상기 핵산의 발현 또는 전사가 상기 발현 조절 서열의 조절하에 있거나 상기 발현 조절 서열의 영향하에서 서로 공유결합되어 있는 경우 서로 "기능적으로" 연결되어 있다. 핵산이 기능성 단백질로 번역될 경우, 코딩 서열에 기능적으로 연결된 발현 조절 서열에 의해, 상기 발현 조절 서열의 유도는 코딩 서열에서 프레임시프트를 야기하지 않고 또는 상기 코딩 서열은 목적하는 단백질 또는 펩티드로 번역되는 것을 불가능하게 하지 않고 상기 핵산의 전사를 일으킨다.
용어 "발현 조절 서열" 또는 "발현 조절 요소"는 본 발명에 따라 유전자의 전사 또는 mRNA의 번역을 조절하는 프로모터, 리보솜 결합 부위, 인핸서 및 다른 제어 구성요소를 포함한다. 본 발명의 특정 실시형태에서, 발현 조절 서열을 조절할 수 있다. 발현 조절 서열의 정확한 구조는 종 또는 세포 유형의 기능에 따라 다양할 수 있지만, 일반적으로 전사 및 번역의 개시에 관여하는 5'-비전사서열 및 5'- 및 3'-비번역서열, 예컨대 TATA 박스, 캡핑 서열, 및 CAAT 서열 등을 각각 포함한다. 보다 구체적으로, 5'-비전사된 발현 조절 서열은 기능적으로 연결된 핵산의 전사 조절을 위한 프로모터 서열을 포함하는 프로모터 영역을 포함한다. 발현 조절 서열은 또한 인핸서 서열 또는 상류 활성자 서열을 포함할 수 있다.
용어 "발현"은 가장 일반적인 의미로 본 발명에 따라 사용되며, 예를 들어 전사 및/또는 번역에 의한 RNA 및/또는 펩티드 또는 단백질의 생성을 포함한다. RNA와 관련하여, 용어 "발현" 또는 "번역"은 특히 펩티드 또는 단백질의 생산에 관한 것이다. 또한, 이는 핵산의 부분적인 발현도 포함한다. 또한, 발현은 일시적이거나 안정적일 수 있다. 본 발명에 따르면, 용어 발현은 또한 "정상에서 벗어난(이상) 발현" 또는 "비정상적인 발현"도 포함한다.
"이상 발현" 또는 "비정상적 발현"은 본 발명에 따르면, 발현이 예를 들면 특정 단백질, 예를 들면 종양 항원의 이상 발현 또는 비정상적인 발현에 따른 질환을 갖지 않은 대상체에서의 상태를 기준과 비교하여 변경된 것, 바람직하게는 증가된 것을 의미한다. 발현에서의 증가는 적어도 10%, 특히 적어도 20%, 적어도 50% 또는 적어도 100% 이상 증가된 것을 의미한다. 일 실시형태에서, 그 발현은 병든 조직에서만 발견되는 반면, 건강한 조직에서의 발현은 억제된다.
"특이적으로 발현되는"이란 용어는 단백질이 본질적으로 특정 조직 또는 기관에서만 발현된다는 것을 의미한다. 예를 들어, 위점막에서 특이적으로 발현되는 종양 항원은 상기 단백질이 위점막에서 주로 발현되고 다른 조직에서는 발현되지 않거나 다른 조직 또는 기관 유형에서 유의한 정도로 발현되지 않는다는 것을 의미한다. 따라서, 위점막의 세포에서만 독점적으로 발현되고, 다른 어떤 조직, 예컨대 고환에서 유의적으로 낮은 정도로 발현되는 단백질은 위점막의 세포에서 특이적으로 발현된다. 일부 실시형태에서, 종양 항원은 또한 2가지 또는 3가지 조직 유형 또는 기관에서와 같이 하나 이상의 조직 유형 또는 기관에서 정상 조건 하에서 특이적으로 발현될 수 있지만, 바람직하게는 3가지를 초과하지 않는 다른 조직 또는 기관 유형에서 특이적으로 발현될 수 있다. 이 경우, 종양 항원은 이들 기관에서 특이적으로 발현된다. 예를 들어, 종양 항원이 바람직하게는 폐 및 위에서 대략 동등한 정도로 정상 조건 하에 발현되는 경우, 상기 종양 항원은 폐 및 위에서 특이적으로 발현된다.
본 발명에 따르면, 용어 "핵산 암호화"는 핵산이 적절한 환경, 바람직하게는 세포 내에 존재하는 경우, 암호화하여 단백질 또는 펩티드를 생산할 수 있음을 의미한다.
본 발명의 몇몇 양상들은 핵산 예컨대 본원에 기재된 제제를 암호화하는 RNA로 시험관내 형질주입시키고 바람직하게는 낮은 전구체 빈도로부터 임상적으로 타당한 세포 수까지 생체외 증폭된 후, 환자와 같은 수용자에게 전달되는 숙주세포의 양자전이에 의존한다. 본 발명에 따라 치료를 위해 사용되는 숙주세포는 처치된 수용자에 대해서 자가(autologous), 동종이계(allogeneic), 또는 동계(syngeneic)일 수 있다.
용어 "자가"는 어떠한 것이든 동일한 대상체로부터 유래된 것을 설명하는데 사용된다. 예를 들어, "자가 이식"은 동일한 대상체로부터 유래된 조직 또는 기관의 이식을 지칭한다. 이러한 절차는 그렇지 않다면 거부 반응을 일으키는 면역 장벽을 극복해주므로 유리하다.
용어 "동종이계"는 동일한 종의 다른 개체로부터 유래된 것을 설명하는데 사용된다. 하나 이상의 유전자좌에서의 유전자가 동일하지 않은 경우 둘 이상의 개체가 서로 동종이계에 있다고 한다.
용어 "동계"는 동일한 유전자형을 갖는 개체 또는 조직, 즉 일란성 쌍생아 또는 동일한 동계교배계의 동물 또는 이들의 조직으로부터 유래한 것을 설명하는데 사용된다.
용어 "이종"은 다양한 다른 요소로 구성된 것을 설명하기 위해 사용된다. 예를 들어, 한 개체의 골수를 다른 개체로 옮기는 것은 이종 이식을 구성한다. 이종 유전자는 대상체 이외의 공급원으로부터 유래된 유전자이다.
용어 "형질주입"은 세포 내로의 핵산, 특히 RNA의 도입에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 목적을 위해, 용어 "형질주입"은 세포 내로의 핵산의 도입 또는 이러한 세포에 의한 핵산의 흡수를 포함하며, 여기서 세포는 대상체, 예를 들어 환자에 존재하는 것일 수 있다. 따라서, 본 발명에 따르면, 본원에 기재된 핵산의 형질주입을 위한 세포는 시험관내 또는 생체내에서 존재할 수 있고, 예를 들어 상기 세포는 환자의 장기, 조직 및/또는 유기체의 일부를 형성할 수 있다. 본 발명에 따르면, 형질주입은 일시적 또는 안정적일 수 있다. 형질주입을 적용한 일부 경우에, 형질주입된 유전 물질이 일시적으로만 발현되는 것으로 충분하다. 형질주입 과정에서 도입된 핵산은 일반적으로 핵 게놈에는 결합되지 않기 때문에 외래 핵산은 유사분열을 통해 희석되거나 분해된다. 핵산의 에피솜 증폭을 허용하는 세포들은 희석율을 크게 감소시킨다. 형질주입된 핵산이 실제로 세포 및 이의 딸 세포의 게놈에 남아있는 것이 바람직하다면, 안정적인 형질주입이 발생해야만 한다. RNA는 이의 암호화된 단백질을 일시적으로 발현하기 위해 세포로 형질주입될 수 있다.
본 발명에 따르면, 세포 내로 핵산을 도입, 즉 전달 또는 형질주입시키는데 유용한 임의의 기술이 사용될 수 있다. 바람직하게는, RNA는 표준 기술에 의해 세포 내로 형질주입된다. 이러한 기술은 전기천공법, 리포펙션 및 미세주입법을 포함한다. 본 발명의 특히 바람직한 일 실시형태에서, RNA는 전기천공법에 의해 세포 내로 도입된다.
전기천공법 또는 전기투과화(electropermeabilization)는 외부에서 인가된 전기장에 의해 야기되는 세포 원형질막의 전기 전도도 및 투과성의 유의한 증가에 관한 것이다. 통상적으로 세포 내로 물질을 도입하는 방법으로서 분자 생물학에 사용되는 것이다.
본 발명에 따르면, 단백질 또는 펩티드를 암호화하는 핵산을 세포에 도입하여 상기 단백질 또는 펩티드의 발현을 야기하는 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 용어 "펩티드"는 올리고펩티드 및 폴리펩티드를 포함하고, 2개 이상, 바람직하게는 3개 이상, 바람직하게는 4개 이상, 바람직하게는 6개 이상, 바람직하게는 8개 이상, 바람직하게는 9개 이상, 바람직하게는 10개 이상, 바람직하게는 13개 이상, 바람직하게는 16개 이상, 바람직하게는 21개 이상이고, 보다 바람직하게는 8개, 10개, 20개, 30개, 40개 또는 50개 이하, 특히 100개 이하의 펩티드 결합에 의해 공유결합된 아미노산을 포함하는 물질을 지칭한다. 용어 "단백질"은 큰 펩티드를 지칭하고, 바람직하게는 100개 초과의 아미노산 잔기를 갖는 펩티드를 지칭하지만, 일반적으로 용어 "펩티드" 및 "단백질"은 동의어이며 본원에서 상호교환적으로 사용된다.
본 발명에 따르면, 펩티드는 천연 아미노산 및 비-천연 아미노산을 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 펩티드는 단지 천연 아미노산만을 포함한다.
본 발명에 따르면, "비-천연 아미노산"이란 용어는 20개의 천연 아미노산 종과는 상이한 구조를 갖는 아미노산을 지칭한다. 비-천연 아미노산은 천연 아미노산과 유사한 구조를 가지기 때문에 비-천연 아미노산은 특정 천연 아미노산의 유도체 또는 유사체로 분류될 수 있다.
바람직하게는, 본 발명에 따라 기재된 단백질 및 펩티드를 분리하고 있다. "분리된 단백질" 또는 "분리된 펩티드"라는 용어는 단백질 또는 펩티드가 이의 천연 환경으로부터 분리되었음을 의미한다. 분리된 단백질 또는 펩티드는 본질적으로 정제된 상태일 수 있다. "본질적으로 정제된"이란 용어는 단백질 또는 펩티드가 본질적으로 천연 또는 생체내 관련된 다른 물질을 함유하지 않음을 의미한다.
특이 아미노산 서열, 예컨대 서열목록에 나타난 아미노산 서열에 관한 본 발명의 교시 내용은 상기 특이 서열들과 기능적으로 동등한 서열들, 예컨대 상기 특이적인 아미노산 서열과 동일하거나 유사한 특성을 갖는 아미노산 서열들을 야기시키는 상기 특이 서열들의 변이체에 관한 것으로 이해되어야 한다. 한가지 중요한 특성은 MHC 분자 및/또는 T 세포 수용체에 대한 펩티드의 결합 또는 이의 표적에 대한 T 세포 수용체의 결합을 유지하는 것 또는 T 세포의 효과기 기능을 유지하는 것이다. 바람직하게는, 특이 서열에 대한 변형된 서열은 T 세포 수용체에서 특이 서열을 대체할 경우 상기 T 세포 수용체의 표적에 대한 결합을 유지하고, 바람직하게는 본원에 기재된 바와 같이, 상기 T 세포 수용체 또는 T 세포 수용체를 보유한 T 세포의 기능을 유지한다.
예를 들어, 서열 목록에 제시된 서열은 하나 이상을 제거하도록 변형되고, 바람직하게는 모든 유리 시스테인 잔기를 제거하도록 변형되고, 특히 시스테인 잔기를 시스테인 이외의 아미노산으로, 바람직하게는 세린, 알라닌, 트레오닌, 글리신, 티로신, 류신 또는 메티오닌, 가장 바람직하게는 알라닌 또는 세린으로 대체함으로써, 변형될 수 있다.
특히 CDR 서열, 초가변영역 및 가변영역의 서열이 표적에 결합하는 능력을 손실하지 않고 변형될 수 있다는 것은 당업자가 이해할 것이다. 예를 들어, CDR 영역은 본원에서 특정된 항체의 영역과 동일하거나 고도로 상동적일 수 있다. "고도의 상동성"이란 CDR 내에 1 내지 5개, 바람직하게는 1 내지 4개, 예컨대 1 내지 3개 또는 1개 또는 2개 치환이 있을 수 있는 것으로 의도된다. 또한, 초가변영역 및 가변영역은 본원에서 구체적으로 개시된 영역과 실질적인 상동성을 나타내도록 변형될 수도 있다.
펩티드 "변이체"는 주어진 펩티드의 면역원성을 보유할 수 있다(예를 들어, T 세포주 또는 클론과 반응하는 변이체의 능력은 주어진 펩티드와 비교하여 실질적으로 감소되지 않는다). 달리 말하면, T 세포주 또는 클론과 반응하는 변이체의 능력은 주어진 펩티드에 비해 증강되거나 변하지 않을 수 있거나 또는 주어진 펩티드에 비해 50% 미만, 바람직하게는 20% 미만으로 감소될 수 있다.
MHC 분자에 결합하는 능력을 평가함으로써 변이체를 동정할 수 있다. 바람직한 일 실시형태에서, 변이체 펩티드는 MHC 분자에 결합하는 변이체 펩티드의 능력이 주어진 펩티드에 비해 증가하도록 변형을 갖는다. MHC 분자에 결합하는 변이체 펩티드의 능력은 주어진 펩티드의 것에 비해 적어도 2배, 바람직하게는 적어도 3배, 4배 또는 5배 증가될 수 있다. 따라서, 특정 바람직한 실시형태에서, 펩티드는 T 세포주 또는 클론과 반응하는 능력이 비변형 펩티드에 대한 것보다 통계적으로 더 크도록 면역원성 부분 내에 1 내지 3개의 아미노산이 치환된 변이체를 포함한다. 이러한 치환은 바람직하게는 펩티드의 MHC 결합 부위 내에 위치한다. 바람직한 치환은 MHC 클래스 I 또는 클래스 II 분자에 대한 증가된 결합을 허용한다. 특정 변이체는 보존적 치환을 포함한다.
또한, 본 발명에 따른 용어 "변이체"는 특히 돌연변이체, 스플라이스 변이체, 입체배좌체, 이소형체, 대립형질 변이체, 종 변이체 및 종 상동체, 특히 천연적으로 존재하는 것들을 포함한다. 대립형질 변이체는 유전자의 정상 서열에서의 변경에 관한 것이고, 그 중요성은 종종 불분명하다. 완전한 유전자 시퀀싱은 종종 주어진 유전자에 대한 수많은 대립형질 변이체를 동정한다. 종 상동체는 주어진 핵산 또는 아미노산 서열과는 다른 종의 기원을 갖는 핵산 또는 아미노산 서열이다. 용어 "변이체"는 번역후 변형된 모든 변이체 및 입체배좌 변이체를 포함할 수 있다.
본 발명의 목적을 위해, 아미노산 서열의 "변이체"는 아미노산 삽입 변이체, 아미노산 첨가 변이체, 아미노산 결실 변이체 및/또는 아미노산 치환 변이체를 포함한다. 또한, 단백질의 N 말단 및/또는 C 말단에서 결실을 포함하는 아미노산 결실 변이체는 N 말단 및/또는 C 말단 절단 변이체라고도 불린다.
아미노산 삽입 변이체는 특정 아미노산 서열에서 단일 또는 둘 이상의 아미노산의 삽입을 포함한다. 삽입을 갖는 아미노산 서열 변이체의 경우, 하나 이상의 아미노산 잔기가 아미노산 서열의 특정 부위에 삽입되지만, 결과 생성물의 적절한 스크리닝을 통한 무작위 삽입이 또한 가능하다.
아미노산 첨가 변이체는 하나 이상의 아미노산, 예를 들어 1, 2, 3, 5, 10, 20, 30, 50개 이상의 아미노산의 아미노-말단 및/또는 카복시-말단 융합체를 포함한다.
아미노산 결실 변이체는 서열로부터 하나 이상의 아미노산을 제거하는 것, 예컨대 1, 2, 3, 5, 10, 20, 30, 50개 이상의 아미노산을 제거하는 것을 특징으로 한다. 결실은 단백질의 임의의 위치에 있을 수 있다.
아미노산 치환 변이체는 서열 중 적어도 1개의 잔기가 제거되고 또 다른 잔기가 그 자리에 삽입되는 것을 특징으로 한다. 상동성 단백질 또는 펩티드 간에 보존되지 않은 아미노산 서열에서의 위치에 있는 변형 및/또는 아미노산을 유사한 특성을 갖는 다른 아미노산으로 대체하는 변형이 바람직하다. 바람직하게는, 단백질 변이체의 아미노산 변화는 보존적 아미노산 변화, 즉 유사하게 하전되거나 비하전된 아미노산의 치환이다. 보존적 아미노산 변화는 이들의 측쇄와 관련된 아미노산 패밀리 중 하나로의 치환을 포함한다. 천연적으로 발생하는 아미노산은 일반적으로 4가지 패밀리로 나뉘는데, 산성 아미노산(아스파테이트, 글루타메이트), 염기성 아미노산(라이신, 아르기닌, 히스티딘), 비극성 아미노산(알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 및 비전하성 극성 아미노산(글리신, 아스파라긴, 글루타민, 시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신)으로 나뉜다. 페닐알라닌, 트립토판, 및 티로신은 때때로 방향족 아미노산으로도 분류된다.
바람직하게는 유사성의 정도, 바람직하게는 주어진 아미노산 서열과 상기 주어진 아미노산 서열의 변이체인 아미노산 서열 사이의 동일성은 적어도 약 60%, 65%, 70%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%일 것이다. 유사성 또는 동일성의 정도는 바람직하게는 기준 아미노산 서열의 전체 길이의 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90% 또는 약 100%인 아미노산 영역에 대해 부여된다. 예를 들어, 기준 아미노산 서열이 200개의 아미노산으로 구성되는 경우, 유사성 또는 동일성의 정도는 바람직하게는 약 20개, 적어도 약 40, 적어도 약 60, 적어도 약 80, 적어도 약 100, 적어도 약 120, 적어도 약 140, 적어도 약 160, 적어도 약 180, 또는 약 200개의 아미노산, 바람직하게는 연속적인 아미노산에 대해 부여된다. 바람직한 실시형태에서, 유사성 또는 동일성의 정도는 기준 아미노산 서열의 전체 길이에 대해 주어진다. 서열 유사성, 바람직하게는 서열 동일성을 결정하기 위한 정렬은 당업계에 공지된 도구를 사용하여, 바람직하게는 가장 양호한 서열 정렬을 사용하여, 예를 들어, Align을 사용하여, 표준 설정을 사용하여, 바람직하게는 EMBOSS::needle, Matrix: Blosum62, Gap Open 10.0, Gap Extend 0.5을 사용하여 행할 수 있다.
"서열 유사성"은 동일하거나 보존적 아미노산 치환을 나타내는 아미노산의 퍼센트를 나타낸다. 두 아미노산 서열 간의 "서열 동일성"은 서열들 간의 동일한 아미노산의 퍼센트를 나타낸다.
"퍼센트 동일성"이란 용어는 최상의 정렬 후에 수득된 비교될 두 서열 간에 동일한 아미노산 잔기의 백분율을 나타내고, 이 백분율은 오직 통계적이며, 두 서열 간의 차이가 무작위로 그리고 그 전체 길이에 걸쳐 분포된다. 2개의 아미노산 서열 간의 서열 비교는 통상적으로 이들을 최적으로 정렬시킨 후 이들 서열을 비교함으로써 실시하며, 상기 비교는 서열 유사성의 국부적 영역을 동정하고 비교하기 위해 세그먼트 또는 "비교 윈도우"에 의해 실시한다. 비교를 위한 서열의 최적 정렬은 수동 외에도 Smith and Waterman, 1981, Ads App. Math. 2, 482의 국부적 상동성 알고리즘에 의해, Neddleman and Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48, 443의 국부적 상동성 알고리즘에 의해, Pearson and Lipman, 1988, Proc. Natl Acad. Sci. USA 85, 2444의 유사성 검색방법 또는 이들 알고리즘(GAP, BESTFIT, FASTA, BLAST P, BLAST N and TFASTA in Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wis.)을 사용하는 컴퓨터 프로그램에 의해 생성될 수 있다.
퍼센트 동일성은 비교될 2개의 서열 간의 동일한 위치의 수를 결정하고, 이 수를 비교된 위치의 수로 나누고, 얻어진 결과에 100을 곱하여 이들 두 서열 간의 퍼센트 동일성을 수득함으로써 계산된다.
상동성 아미노산 서열은 본 발명에 따르면 아미노산 잔기의 40%, 특히 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 및 바람직하게는 적어도 95%, 적어도 98 또는 적어도 99% 동일성을 보여준다.
본원에 기재된 아미노산 서열 변이체는 예를 들어, 재조합 DNA 조작에 의해 당업자가 용이하게 제조할 수 있다. 치환, 부가, 삽입 또는 결실을 갖는 단백질 및 펩티드를 제조하기 위한 DNA 서열의 조작은 예를 들어 문헌[Sambrook et al. (1989)]에 상세하게 기재되어 있다. 또한, 본원에 기재된 펩티드 및 아미노산 변이체는 공지된 펩티드 합성 기술의 도움, 예컨대 고체상 합성 및 유사한 방법에 의해 용이하게 제조될 수 있다.
본 발명은 "펩티드" 및 "단백질"이라는 용어에 포함되는 본원에 기재된 펩티드 또는 단백질의 유도체를 포함한다. 본 발명에 따르면, 단백질 및 펩티드의 "유도체"는 단백질 및 펩티드의 변형된 형태이다. 이러한 변형은 임의의 화학적 변형을 포함하고 단백질 또는 펩티드와 관련된 임의의 분자, 예컨대 탄수화물, 지질 및/또는 단백질 또는 펩티드의 단일 또는 다중 치환, 결실 및/또는 첨가를 포함한다. 일 실시형태에서, 단백질 또는 펩티드의 "유도체"는 글리코실화, 아세틸화, 인산화, 아미드화, 팔미토일화, 미리스토일화, 이소프레닐화, 지질화, 알킬화, 유도체화, 보호기/차단기의 도입, 단백질분해성 절단 또는 항체 또는 다른 세포성 리간드에 결합으로부터 발생하는 이들 변형된 유사체를 포함한다. 또한, "유도체"라는 용어는 상기 단백질 및 펩티드의 모든 기능적 화학적 등가물까지도 포함한다. 바람직하게는, 변형된 펩티드는 증가된 안정성 및/또는 증가된 면역원성을 갖는다.
또한, 펩티드의 모방체가 포함된다. 이러한 모방체는 하나 이상의 아미노산 모방체에 연결된 아미노산을 포함할 수 있거나(즉, 펩티드 내의 하나 이상의 아미노산은 아미노산 모방체로 대체될 수 있다) 완전히 비펩티드 모방체일 수 있다. 아미노산 모방체는 예를 들어 T 세포주 또는 클론과 반응하는 능력을 실질적으로 감소시키지 않으면서 아미노산을 치환할 수 있도록, 아미노산과 입체배좌적으로 유사한 화합물이다. 비펩티드 모방체는 예를 들어 T 세포주 또는 클론과 반응하는 모방체의 능력이 주어진 펩티드의 능력에 비해 실질적으로 감소되지 않도록, 아미노산을 함유하지 않는 화합물이고, 펩티드와 유사한 전체적인 입체배좌를 갖는 화합물이다.
본 발명에 따르면, 아미노산 서열, 펩티드 또는 단백질의 변이체, 유도체, 변형된 형태, 단편, 일부분 또는 부분은 바람직하게는 각각 이것이 유래하는 아미노산 서열, 펩티드 또는 단백질의 기능적 특성을 가지며, 즉 기능적으로 동등하다. 일 실시형태에서, 아미노산 서열, 펩티드 또는 단백질의 변이체, 유도체, 변형된 형태, 단편, 일부분 또는 부분은 각각 이것이 유래하는 아미노산 서열, 펩티드 또는 단백질과 면역학적으로 동등하다. 일 실시형태에서, 기능적 특성은 면역학적 특성이다.
특정 특성은 MHC 분자와 복합체를 형성하는 능력이며, 적절한 경우 바람직하게는 세포독성 또는 T 헬퍼 세포를 자극함으로써 면역반응을 생성한다.
용어 "면역학적으로 동등한"은 면역학적으로 동등한 아미노산 서열과 같은 면역학적으로 동등한 분자가 동일하거나 본질적으로 동일한 면역학적 성질을 나타내는 것 및/또는 예를 들어, 체액성 및/또는 세포성 면역반응의 유도, 유도된 면역반응의 강도 및/또는 지속, 또는 유도된 면역반응의 특이성과 같은 면역학적 효과의 유형에 대해, 동일하거나 본질적으로 동일한 면역학적 효과를 발휘한다는 것을 의미한다. 본 발명의 문맥상, 용어 "면역학적으로 동등한"은 바람직하게는 면역화에 사용된 펩티드 또는 펩티드 변이체의 면역학적 효과 또는 특성에 대하여 사용된다. 예를 들어, 아미노산 서열이 대상체의 면역계에 노출될 때 상기 아미노산 서열이 기준 아미노산 서열과 반응하는 특이성을 갖는 면역반응을 유도한다면, 아미노산 서열은 기준 아미노산 서열과 면역학적으로 동등하다.
용어 "유래된"은 본 발명에 따르면 특정 독립체, 특히 특정 서열이 이의 유래된 대상, 특히 유기체 또는 분자에 존재한다는 것을 의미한다. 아미노산 서열, 특히 특정 서열 영역의 경우, "유래된"은 특히 관련된 아미노산 서열이 이 안에 존재하는 아미노산 서열로부터 유래되는 것을 의미한다.
"세포" 또는 "숙주세포"라는 용어는 바람직하게는 무손상 세포, 즉 효소, 세포 기관 또는 유전 물질과 같은 정상적인 세포내 성분을 방출하지 않은 무손상 막을 갖는 세포에 관한 것이다. 무손상 세포는 바람직하게는 생세포, 즉 정상적인 대사 기능을 수행 가능한 생세포이다. 바람직하게는 상기 용어는 본 발명에 따라 외인성 핵산으로 형질주입될 수 있는 임의의 세포에 관한 것이다. 바람직하게는, 외인성 핵산으로 형질주입된 세포는 핵산을 발현할 수 있다. 바람직하게는, 외인성 핵산으로 형질주입되어 수용자에게 전달될 때 세포는 수용자에서 핵산을 발현할 수 있다. 용어 "세포"는 박테리아 세포를 포함하고; 다른 유용한 세포는 효모 세포, 진균 세포 또는 포유류 세포이다. 적절한 박테리아 세포는 그람-음성 세균 균주 예컨대 Escherichia coli, Proteus, 및 Pseudomonas의 균주, 및 그람-양성 세균 균주 예컨대 Bacillus, Streptomyces, Staphylococcus, 및 Lactococcus의 균주로부터의 세포를 포함한다. 적합한 진균 세포는 Trichoderma, Neurospora, 및 Aspergillus의 종으로부터의 세포를 포함한다. 적합한 효모 세포는 Saccharomyces (예를 들어 Saccharomyces cerevisiae), Schizosaccharomyces (예를 들어 Schizo saccharomyces pombe), Pichia (예를 들어 Pichia pastoris 및 Pichia methanolicd), 및 Hansenula의 종으로부터의 세포를 포함한다. 적합한 포유류 세포는 예를 들어 CHO 세포, BHK 세포, HeLa 세포, COS 세포, 및 293 HEK 등을 포함한다. 그러나, 양서 세포, 곤충 세포, 식물 세포, 및 이종 단백질의 발현을 위해 본 기술분야에서 사용되는 임의의 다른 세포도 또한 사용할 수 있다. 포유류 세포, 예컨대 인간, 마우스, 햄스터, 돼지, 염소 및 영장류로부터의 세포들이 양자전이에 특히 바람직하다. 그 세포는 다양한 조직 유형으로부터 유래될 수 있고, 여기에는 일차 세포들 및 세포주들 예컨대 면역계 세포들, 특히 항원-제시 세포 예컨대 수지상세포 및 T 세포, 조혈 줄기세포 및 중간엽 줄기세포와 같은 줄기세포 및 그 밖의 세포 종류가 포함된다. 항원-제시 세포는 이의 표면에서 주요 조직적합성 복합체 관점에서 항원을 나타내는 세포이다. T 세포는 이들의 T세포 수용체(TCR)를 이용하여 이 복합체를 인식할 수 있다.
핵산 분자를 포함하는 세포는 바람직하게는 핵산에 의해 암호화되는 펩티드 또는 단백질을 발현한다.
상기 세포는 재조합 세포일 수 있고 암호화된 펩티드 또는 단백질을 분비할 수 있고, 이를 표면 상에 발현시킬 수 있으며, 바람직하게는 상기 펩티드 또는 단백질 또는 이의 가공 생성물에 결합하는 MHC 분자를 추가로 발현할 수 있다. 일 실시형태에서, 세포는 내인성으로 MHC 분자를 발현한다. 추가적인 실시형태에서, 세포는 재조합 방식으로 MHC 분자 및/또는 펩티드 또는 단백질 또는 이들의 가공 생성물을 발현한다. 세포는 바람직하게는 비증식성이다. 바람직한 실시형태에서, 세포는 항원-제시 세포, 특히 수지상세포, 단핵구 또는 대식세포이다.
용어 "클론확장"은 특정 독립체가 증식되는 과정을 지칭한다. 본 발명의 문맥상, 이 용어는 바람직하게는 림프구가 항원에 의해 자극되고 증식하며, 상기 항원을 인식하는 특이적 림프구가 증폭되는 면역반응과 관련하여 사용된다. 바람직하게는, 클론확장은 림프구의 분화를 가져온다.
항원 발현과 관련된 질병은 생물학적 시료에서 펩티드와 특이적으로 반응하는 T 세포의 존재에 기반하여 검출될 수 있다. 특정 방법으로는, 환자로부터 분리된 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포를 포함하는 생물학적 시료를 본 발명의 펩티드, 이러한 펩티드를 암호화하는 핵산 및/또는 적어도 이러한 펩티드의 면역원성 부분을 발현 및/또는 제시하는 항원-제시 세포와 함께 인큐베이팅하고, T 세포의 특이적 활성화의 존재 또는 부재를 검출한다. 적합한 생물학적 시료는 분리된 T 세포를 포함 하나 이에 한정되지 않는다. 예를 들어, T 세포는 통상의 기술에 의해(예를 들어, 말초혈액 림프구의 Ficoll/Hypaque 밀도 구배 원심분리에 의해) 환자로부터 분리될 수 있다. CD4+ T 세포에 대하여, 활성화는 바람직하게는 T 세포의 증식을 평가함으로써 검출한다. CD8+ T 세포에 대하여, 세포용해 활성을 평가함으로써 활성화를 검출하는 것이 바람직하다. 질환이 없는 대상체에서보다 적어도 2배 더 큰 증식 수준 및/또는 적어도 20% 큰 세포용해 활성 수준은 대상체에서 항원 발현과 관련된 질환의 존재를 나타낸다.
본원에서 사용된 바와 같이 "감소" 또는 "억제"는 전반적인 감소를 일으키는 능력을 의미하며, 그 수준에서 바람직하게는 5% 이상, 10% 이상, 20% 이상의 감소, 보다 바람직하게는 50% 이상의 감소, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소시키는 능력을 의미한다. 용어 "억제" 또는 유사한 문구는 완전하거나 본질적으로 완전한 억제, 즉 제로로의 감소 또는 본질적으로 제로로의 감소를 포함한다.
"증가" 또는 "증진"과 같은 용어는 바람직하게는 적어도 약 10%, 바람직하게는 적어도 20%, 바람직하게는 적어도 30%, 더욱 바람직하게는 적어도 40%, 더욱 바람직하게는 적어도 50%, 보다 더욱 바람직하게는 적어도 80%, 및 가장 바람직하게는 적어도 100%로의 증가 또는 증진에 관한 것이다.
본원에 기재된 제제, 조성물 및 방법은 질병, 예를 들어 MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2를 발현하는 병든 세포의 존재를 특징으로 하고, 바람직하게는 CLDN18.2를 제시하는 병든 세포의 존재를 특징으로 하는 질병을 가진 대상체를 치료하는데 사용될 수 있다. 치료 및/또는 예방될 수 있는 질병의 예로서는 CLDN18.2를 발현하는 모든 질병을 포함한다. 특히 바람직한 질병은 암질환이다.
본원에 기재된 작용제, 조성물 및 방법은 또한 본원에 기재된 질병을 예방하기 위한 면역화 또는 백신접종에 사용될 수 있다.
"정상 조직" 또는 "정상 상태"라는 용어는 건강한 대상체에서의 건강한 조직 또는 상태, 즉 비-병리학적 상태를 지칭하고, 여기서 "건강한"은 바람직하게는 비-암성을 의미한다.
"질병"이란 용어는 개체의 신체에 영향을 미치는 비정상적인 상태를 말한다. 질병은 종종 특정 증상 및 징후와 관련된 건강 상태로 해석된다. 질병은 전염병과 같은 외부 원인에 기인한 인자에 의해 야기될 수 있으며, 자가면역질환과 같은 내부 기능장애에 의해 야기될 수 있다. 인간의 경우, "질병"은 통증, 기능장애, 고통, 사회적 문제, 또는 고통을 당한 개체에게 죽음, 또는 개체와 접촉하는 사람들에게 유사한 문제를 초래하는 임의의 상태를 지칭하기 위해 더 광범위하게 사용된다. 보다 넓은 의미에서는, 때때로 상해, 장애, 장애증상, 증후군, 감염, 격리된 증상, 비정상적인 행동, 및 구조와 기능의 비정형 변형을 포함하지만 다른 맥락 또는 다른 목적을 위해 구별 가능한 범주로 간주될 수 있다. 질병은 대개 신체적으로뿐만 아니라 감정적으로도 개인에게 영향을 미치며, 많은 질병에 걸리고 질병과 삶을 사는 것은 삶에 대한 자신의 견해와 개인의 성격을 바꿀 수 있다. 본 발명에 따르면, 용어 "질병"은 암, 특히 본원에 기재된 암의 형태를 포함한다. 암 또는 암의 특정 형태에 대한 본원에서의 임의의 언급은 이의 암 전이를 또한 포함한다. 바람직한 실시형태에서, 본원에 따라 치료될 질병은 MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2를 발현하는 세포 및 선택적으로 CLDN18.2를 제시하는 세포를 포함한다.
"CLDN18.2를 발현하는 세포와 관련된 질병" 또는 이와 유사한 발현은 본 발명에 따르면 CLDN18.2가 병든 조직 또는 기관의 세포에서 발현된다는 것을 의미한다. 일 실시형태에서, 병든 조직 또는 기관의 세포에서의 CLDN18.2의 발현은 건강한 조직 또는 기관의 상태와 비교하여 증가한다. 증가는 적어도 10%, 특히 적어도 20%, 적어도 50%, 적어도 100%, 적어도 200%, 적어도 500%, 적어도 1000%, 적어도 10000% 또는 그 이상으로 증가하는 것을 지칭한다. 일 실시형태에서, 발현은 병든 조직에서만 발견되는 반면, 건강한 조직에서의 발현은 억제된다. 본 발명에 따르면, CLDN18.2를 발현하는 세포를 포함하는 질병은 암질환을 포함한다. 또한, 본 발명에 따르면, 암질환은 바람직하게는 암세포가 CLDN18.2를 발현하는 질환이다.
용어 "암질환" 또는 "암"은 전형적으로 조절되지 않은 세포 성장인 것을 특징으로 하는 개체의 생리 조건을 지칭하거나 설명한다. 암의 예로서는 암종, 림프종, 모세포종, 육종 및 백혈병을 포함하지만 이에 한정되는 것은 아니다. 더욱 상세하게는, 이러한 암의 예로서는 골암, 혈액암, 폐암, 간암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부(cutaneous) 또는 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 항문부암, 위암, 결장암, 유방암, 전립선암, 자궁암, 성기 및 생식 기관의 암종, 호지킨병, 식도암, 소장암, 내분비계 암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 방광암, 신장암, 신장세포암종, 신우암, 중추신경 종양(CNS), 신경외배엽 암, 척추 축 종양, 신경교종, 뇌수막종 및 뇌하수체 선종이다. 본 발명에 따른 용어 "암"은 또한 암 전이를 포함한다. 바람직하게는, "암 질환"은 CLDN18.2를 발현하는 세포 및 CLDN18.2를 발현하는 암세포를 특징으로 한다.
병든 세포는 바람직하게는 CLDN18.2를 발현하는 세포이며, 상기 CLDN18.2는 바람직하게는 막관통 단백질로서 상기 세포의 표면 상에 존재하고 및/또는 MHC 예컨대 MHC I과 관련하여 상기 세포에 의해 제시된다. CLDN18.2를 발현하는 세포는 바람직하게는 암세포이고, 바람직하게는 본원에 기재된 암의 암세포이다.
일 실시형태에서, 암질환은 퇴행성, 침윤성 및 전이의 특성을 특징으로 하는 악성 질병이다. 악성 종양은 악성도는 그 성장에 있어서 자기-한정성이 아니고 인접 조직에 침윤이 가능하고, 원위 조직으로 퍼지는(전이되는) 것이 가능할 수 있다는 점에서 비-암성 양성 종양과 대조되는데, 양성 종양은 이들 특성을 갖지 않는다.
일 실시형태에서, 본 발명에 따른 암은 CLDN18.2를 발현하는 암세포를 포함한다. 일 실시형태에서, 암은 CLDN18.2 양성이다. 일 실시형태에서, CLDN18.2의 발현은 세포 표면에서 일어난다. 일 실시형태에서, 암세포의 적어도 50%, 바람직하게는 60%, 70%, 80% 또는 90%는 CLDN18.2 양성이고/이거나, 암세포의 적어도 40%, 바람직하게는 적어도 50%는 CLDN18.2의 표면 발현에 대해 양성인 것이다. 일 실시형태에서, 암세포의 적어도 95% 또는 적어도 98%는 CLDN18.2 양성이다. 일 실시형태에서, 암세포의 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80% 또는 적어도 90%는 CLDN18.2의 표면 발현에 양성인 것이다.
일 실시형태에서, CLDN18.2-발현 암, CLDN18.2를 발현하는 암세포를 포함하는 암 또는 CLDN18.2 양성 암은 위암, 식도암, 췌장암, 비소세포성 폐암(NSCLC)과 같은 폐암, 난소암, 대장암, 간암, 두경부암, 및 담낭암과 이들의 전이, 특히 위암 전이, 예컨대 크루켄버그 종양, 복막 전이 및 림프절 전이로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일 실시형태에서, 암은 선암, 특히 진행성 선암이다. 특히 바람직한 암 질환은 위암, 식도, 췌관, 담관, 폐 및 난소의 선암이다. 일 실시형태에서, 암은 위암, 식도암, 특히 하부 식도암, 식도-위 접합부의 암 및 위식도암으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 특히 바람직한 실시형태에서, 암은 위식도암, 예컨대 전이성, 불응성 또는 재발성 진행성 위식도암이다.
본 발명에 따르면, 용어 "종양" 또는 "종양 질환"은 세포의 비정상적인 성장에 의해 형성되는 종창 또는 병변을 지칭한다(종양(neoplastic) 세포 또는 종양세포라고 한다). "종양 세포"란 급속하고 통제되지 않은 세포 증식에 의해 성장하고 새로운 성장을 시작한 자극이 중단된 후에도 계속해서 성장하는 비정상적인 세포를 의미한다. 종양은 정상 조직과의 구조적 조직체 및 기능적 협응이 부분적으로 또는 완전히 결여되어 있고, 일반적으로 양성, 전-악성 또는 악성일 수 있는 별개의 조직 덩어리를 형성한다.
본 발명에 따르면, "암종"은 상피 세포로부터 유래된 악성 종양이다. 이 그룹은 일반적인 형태의 유방암, 전립선암, 폐암 및 대장암의 흔한 형태를 포함하는, 가장 흔한 암을 나타낸다.
"선암"은 선 조직에서 발생하는 암이다. 이 조직은 또한 상피 조직으로 알려진 더 큰 조직 범주의 일부이다. 상피 조직에는 피부, 선 및 신체의 체강 및 기관을 정렬하는 다양한 조직이 포함된다. 상피는 발생학적으로 외배엽, 내배엽 및 중배엽으로부터 유래된다. 선암으로 분류되기 위해, 세포가 분비 성질을 가지는 한, 반드시 선의 일부일 필요는 없다. 선종의 이러한 형태는 인간을 포함한 일부 고등 포유류에서 발생할 수 있다. 잘 분화된 선암은 그들이 유래한 선 조직과 유사한 경향이 있는 반면에, 열악하게 분화된 것은 그러하지 않은 것이다. 생검으로부터 세포를 염색함으로써, 병리학자는 종양이 선암인지 또는 다른 유형의 암인지 여부를 결정할 것이다. 선암은 신체 내 어디에나 있는 선의 특성상 신체의 많은 조직에서 발생할 수 있다. 각각의 선은 동일한 물질을 분비하지 않을 수 있지만, 세포에 외분비 기능이 있는 한, 이는 선으로 간주되며, 따라서 악성 형태는 선암으로 명명된다. 악성 선암은 다른 조직을 침범하고 그렇게 하기에 충분한 시간이 주어지면 종종 전이된다. 난소 선암은 가장 흔한 유형의 난소 암종이다. 이는 장액성 및 점액성 선암, 투명세포 선암 및 자궁내막양 선암을 포함한다.
림프종 및 백혈병은 조혈(혈액 형성) 세포로부터 유래된 악성종양이다.
출아형 종양 또는 모세포종은 미성숙 또는 배아 조직과 유사한 종양(일반적으로 악성)이다. 이들 종양 중 상당수는 소아에게서 가장 일반적이다.
"전이"란 암세포가 원래 위치에서 다른 신체 부위로 전파되는 것을 의미한다. 전이의 형성은 매우 복잡한 과정이며 원발성 종양으로부터 악성 세포를 분리하고, 세포밖 기질로 침투하며, 내피 기저막으로 침투하여 체강과 혈관에 침투한 다음, 혈액에 의해 운반된 후, 표적 기관으로 침투한다. 마지막으로, 표적 부위에서 새로운 종양의 성장은 신생혈관에 달려있다. 종양 전이는 종종 종양세포 또는 성분이 전이 잠재성을 유지하고 발달시킬 수 있기 때문에 원발성 종양의 제거 후에도 발생한다. 일 실시형태에서, 본 발명에 따르면 용어 "전이"는 원발성 종양 및 국소 림프계로부터 떨어진 전이와 관련된 "원격 전이"에 관한 것이다. 일 실시형태에서, 본 발명에 따르면 용어 "전이"는 림프절 전이에 관한 것이다.
이차 또는 전이성 종양의 세포는 원래의 종양에서의 세포와 유사하다. 이는 예를 들어, 난소 암이 간으로 전이되면 이차 종양은 비정상적인 간세포가 아닌 비정상적인 난소 세포를 형성하는 것을 의미한다. 따라서, 간에서의 종양은 간암이 아니라 전이성 난소 암이라고 한다.
재발 또는 재발생은 사람이 과거에 영향을 받은 상태에 의해 재차 영향을 받을 때 발생한다. 예를 들어, 환자가 종양 질병을 앓고 있고, 상기 질병에 대한 성공적인 치료를 받고 있으며 재차 상기 질병이 발달한다면, 신규하게 발달된 상기 질병은 재발 또는 재발생으로 간주될 수 있다. 그러나, 본 발명에 따르면, 종양 질병의 재발 또는 재발생은 원래의 종양 질병 부위에서 일어날 수는 있지만 반드시 발생하는 것은 아니다. 따라서, 예를 들어, 환자가 난소 종양에 걸렸고 성공적인 치료를 받은 경우, 재발 또는 재발생은 난소 종양의 발생 또는 난소와는 다른 부위에서 종양의 발생일 수 있다. 종양의 재발 또는 재발생은 또한 원래의 종양의 부위에서뿐만 아니라 원래의 종양의 위치와는 다른 부위에서 종양이 발생하는 상황을 포함한다. 바람직하게는, 환자가 치료를 받은 원래의 종양은 원발성 종양이고 원래의 종양의 부위와는 다른 부위의 종양은 이차 또는 전이성 종양이다.
용어 "치료" 또는 "치료적 처치"는 건강 상태를 향상시키는 임의의 처치 및/또는 개체의 수명을 연장(증가)시키는 임의의 처치에 관한 것이다. 상기 치료는 개체에서의 질병을 제거하는 것, 개체에서의 질병의 발달을 막거나 저감시키는 것, 개체에서의 질병의 발달을 억제 또는 지연시키는 것, 개체에서의 증상의 빈도 또는 중증도를 감소시키는 것, 및/또는 현재 질병에 걸린 사람 또는 이전에 질병에 걸린 적이 있는 개체에서의 재발생을 감소시킬 수 있다.
용어 "예방적 치료" 또는 "방지적 치료"는 개체에서 발생하는 질병을 예방하려고 의도한 임의의 치료에 관한 것이다. 용어 "예방적 치료" 또는 "방지적 치료"는 본원에서 상호교환적으로 사용된다.
"개체" 및 "대상체"라는 용어는 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 이들은 질병이나 장애(예를 들어, 암)로 고통받거나 취약하지만, 질병이나 장애가 있을 수 있거나 없을 수 있는 인간, 비-인간 영장류 또는 기타 포유류(예를 들어 마우스, 랫, 토끼, 개, 고양이, 소, 돼지, 양, 말 또는 영장류)를 지칭한다. 많은 실시형태에서, 개체는 인간이다. 달리 명시되지 않는 한, "개체" 및 "대상체"라는 용어는 특정 연령을 나타내지 않으므로, 성인, 연장자, 어린이 및 신생아를 아우른다. 본 발명의 바람직한 실시형태에서, "개체" 또는 "대상체"는 "환자"이다. 용어 "환자"는 본 발명에 따라 치료 대상, 특히 질환이 있는 대상을 의미한다.
"위험이 있는"이란, 일반 집단과 비교하여, 질병, 특히 암을 발달시킬 확률이 정상보다 높은 것으로 확인된 대상체, 즉 환자를 의미한다. 또한, 질병, 특히 암을 앓았거나 현재 앓고 있는 대상체는 이러한 대상체에서는 계속 질병을 발달시킬 수 있기 때문에 질병을 발달할 위험이 증가된 대상체이다. 현재 암을 갖고 있거나 암에 걸린 적 있는 대상체는 암 전이 위험이 증가한다.
용어 "면역요법"은 특정 면역반응을 포함하는 치료에 관한 것이다.
본 발명의 문맥상, "보호하다", "예방하다", "예방적", "방지적", 또는 "방어적"과 같은 용어는 대상체에서 질병의 발생 및/또는 전파의 예방 또는 치료 또는 이들 둘 모두를 하는 것에 관한 것이고, 특히, 대상체는 질병을 발달시킬 수 있는 가능성을 최소화하거나 질병의 발달을 지연시키는 것에 관한 것이다. 예를 들어, 상술한 바와 같이, 종양에 대한 위험이 있는 사람은 종양을 예방하기 위한 요법의 후보자가 될 수 있다.
면역요법의 예방적 투여, 예를 들어, 본 발명의 제제 또는 조성물의 예방적 투여는 바람직하게는 수용자를 질병의 발달로부터 보호한다. 면역요법의 치료적 투여, 예를 들어, 본 발명의 제제 또는 조성물의 치료적 투여는 질병의 진행/성장의 억제를 초래할 수 있다. 이는 질병의 진행/성장의 감속, 특히 바람직하게는 질병의 제거로 이끄는 질병의 진행의 붕괴를 포함한다.
면역요법은 다양한 기술 중 임의의 것을 사용하여 수행될 수 있으며, 여기서 본원에서 제공되는 제제는 바람직하게는 환자로부터 CLDN18.2-발현 세포를 제거하는 기능을 한다. 이러한 제거는 MHC 분자와 관련하여 CLDN18.2 또는 CLDN18.2를 발현하는 세포 및/또는 CLDN18.2를 제시하는 세포에 특이적인 환자에서의 면역반응을 증진시키거나 유도시키는 결과로서 발생할 수 있다.
특정 실시형태에서의 면역요법은 치료가 내인성 숙주 면역계의 생체내 자극에 의존하여 면역반응-변형 제제(예를 들어, 본원에서 제공된 바와 같은 펩티드 및 핵산)의 투여로 병든 세포에 대해 반응하는 능동 면역요법일 수 있다.
다른 실시형태에서의 면역요법은 치료로서 직접적 또는 간접적으로 항종양 효과를 매개할 수 있고 무손상 숙주 면역계에 반드시 의존하지 않는 확립된 종양-면역 반응성(예컨대, 효과기 세포)을 갖는 제제의 전달을 포함하는, 수동 면역요법일 수 있다. 효과기 세포의 예로서는 T 림프구(예를 들어, CD8+ 세포독성 T 림프구 및 CD4+ T-헬퍼 림프구), 및 항원-제시 세포(예컨대 수지상세포 및 대식세포)를 들 수 있다. 본원에 인용된 CLDN18.2 펩티드에 특이적인 T 세포 수용체 및 CLDN18.2에 특이적인 인공 T 세포 수용체는 양자 면역요법을 위한 효과기 세포로 이동시킬 수 있다.
상술한 바와 같이, 본원에 제공된 면역반응성 펩티드는 면역요법을 위한 충분히 많은 수의 세포를 생성하기 위해 항원-특이적 T 세포 배양을 신속하게 증대시키는데 사용될 수 있다. 특히, 항원-제시 세포, 예컨대 수지상세포, 대식세포, 단핵구, 섬유아세포 및/또는 B 세포는 본 기술분야에서 공지된 표준 기술을 사용하여 면역반응성 펩티드로 펄스시키나 하나 이상의 핵산으로 형질주입시킬 수 있다. 요법에 사용하기 위해 배양된 효과기 세포는 성장하여 넓게 분포하고, 생체내 장기간 생존할 수 있어야 한다. 연구에 의하면, 배양된 효과기 세포는 IL-2가 보충된 항원을 반복적으로 자극함으로써 생체내 생장하고 장기간 생존하도록 유도될 수 있음이 밝혀졌다(예를 들어, 문헌[Cheever et al. (1997), Immunological Reviews 157, 177]을 참조).
대안으로, 본원에서 인용된 펩티드를 발현하는 핵산은 환자로부터 채취된 항원-제시 세포에 도입될 수 있고 동일한 환자에게 되돌려 이식하기 위해 클론에 의해 생체외 전파시킬 수 있다.
형질주입된 세포는 본 기술분야에서 공지된 임의의 수단을 사용하여, 바람직하게는 정맥내, 강내(intracavitary), 복강내 또는 종양내 투여에 의해 무균 상태로 환자에게 재도입될 수 있다.
본원에 개시된 방법은 펩티드 또는 펩티드-발현 항원 제시 세포에 반응하여 활성화되어 있는 자가 T 세포의 투여를 포함할 수 있다. 이러한 T 세포는 CD4+ 및/또는 CD8+일 수 있으며, 상술한 바와 같이 급증할 수 있다. T 세포는 질병의 발달을 억제하는데 효과적인 양으로 대상체에게 투여될 수 있다.
용어 "면역화" 또는 "백신접종"은 치료적 이유 또는 예방적 이유로 면역반응을 유발할 목적으로 환자를 치료하는 과정을 기술한다.
용어 "생체내"는 대상체의 상황에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, "시료"는 본 발명에 따라 유용한 임의의 시료, 특히 체액 및/또는 세포성 시료를 포함하는 조직 시료와 같은 생물학적 시료일 수 있으며, 종래 방식으로 펀치 생검을 포함하여 조직 생검, 그리고 혈액, 기관지 흡인물, 객담, 소변, 대변 또는 다른 체액을 채취함으로써 수득할 수 있다. 본 발명에 따르면, 용어 "시료"는 또한 생물학적 시료의 분획물 또는 분리물, 예를 들어 핵산 및 펩티드/단백질 분리물과 같은 가공된 시료를 포함한다.
본원에 기재된 화합물 및 제제는 임의의 적합한 약학 조성물의 형태로 투여될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 바람직하게는 멸균되고, 목적하는 반응 또는 목적하는 효과를 생성시키기 위해 본원에 기재된 제제의 유효량 및 선택적으로 본원에서 논의된 바와 같은 추가적인 제제의 유효량을 함유한다.
약학 조성물은 일반적으로 균일한 투여 형태로 제공되며, 공지된 방식으로 제조될 수 있다. 약학 조성물은 예를 들어, 용액이나 현탁액의 형태일 수 있다.
약학 조성물은 바람직하게는 약제적으로 허용 가능한 모든 것, 염, 완충 물질, 방부제, 담체, 희석제 및/또는 부형제를 포함할 수 있다. 용어 "약제적으로 허용 가능한"은 약학 조성물의 활성 성분의 작용과 상호작용하지 않는 물질의 무독성에 관한 것이다.
약제적으로 허용되지 않는 염은 약제적으로 허용 가능한 염을 제조하는데 사용될 수 있으며 본 발명에 포함된다. 이러한 종류의 약제적으로 허용 가능한 염은 염화수소, 브롬화수소, 황산, 질산, 인산, 말레산, 아세트산, 살리실산, 시트르산, 포름산, 말론산 및 숙신산 등의 산으로부터 제조된 것들을 비제한적으로 포함한다. 약제적으로 허용 가능한 염은 또한 나트륨염, 칼륨염 또는 칼슘염과 같은 알칼리 금속염 또는 알칼리 토금속염으로서 제조될 수 있다.
약학 조성물에 사용하기에 적합한 완충 물질은 염의 아세트산, 염의 시트르산, 염의 붕산 및 염의 인산을 포함한다.
약학 조성물에 사용하기에 적합한 방부제는 염화벤잘코늄, 클로로부탄올, 파라벤 및 티메로살을 포함한다.
주사 가능한 제형은 약제적으로 허용 가능한 부형제, 예컨대 링거 락테이트 (Ringer Lactate)를 포함할 수 있다.
용어 "담체"는 천연 또는 합성 성질의 유기 또는 무기 성분을 말하며, 활성 성분이 적용을 촉진, 증진 또는 적용 가능하게 하기 위해 조합되어 있다. 본 발명에 따르면, 용어 "담체"는 또한 환자에게 투여하기에 적합한 하나 이상의 혼용가능한 고체 또는 액체 충전제, 희석제 또는 캡슐화 물질을 포함한다.
가능한 비경구 투여용 담체 물질은 예를 들어, 멸균수, 링거(Ringer), 링거 락테이트, 멸균 염화나트륨 용액, 폴리알킬렌글리콜, 수소화 나프탈렌 및 특히 생체혼용가능한 락티드 중합체, 락티드/글리콜리드(glycolide) 공중합체 또는 폴리옥시에틸렌/폴리옥시프로필렌 공중합체를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "부형제"는 약학 조성물에 존재할 수 있고 예를 들어 담체, 바인더, 윤활제, 증점제, 표면활성제, 방부제, 유화제, 완충액, 향료 또는 착색제와 같은 활성 성분이 아닌 모든 물질을 가리키도록 한다.
본원에 기재된 제제 및 조성물은 임의의 통상적인 경로를 통해, 예컨대 주사 또는 주입에 의한 것을 포함하는 비경구 투여에 의해 투여될 수 있다. 투여는 바람직하게는 비경구적으로, 예를 들어. 정맥내, 동맥내, 피하, 피부층 사이에 또는 근육내로 투여될 수 있다.
비경구 투여에 적합한 조성물은 일반적으로 활성 화합물의 멸균수용액 또는 비수성 제조물을 포함하며, 이는 바람직하게는 수용자의 혈액과 등장성이다. 호환되는 담체 및 용매의 예로서는 링거 용액 및 등장성 염화나트륨 용액이다. 또한, 일반적으로 멸균된 고정유가 용액 또는 현탁 매질로 사용된다.
본원에 기재된 제제 및 조성물은 유효량으로 투여된다. "유효량"은 목적하는 반응 또는 목적하는 효과를 단독으로 또는 추가 투여량과 함께 달성하는 양을 지칭한다. 특정 질환 또는 특정 상태를 치료하는 경우에, 목적하는 반응은 바람직하게는 상기 질환의 경과의 억제에 관한 것이다. 이는 질병의 진행을 늦추고, 특히 질병의 진행을 방해하거나 역전시키는 것을 포함한다. 질병 또는 증상의 치료에서 목적하는 반응은 또한 상기 질병 또는 상기 증상의 발병의 지연 또는 발병의 예방일 수 있다.
본원에 기재된 제제 또는 조성물의 유효량은 치료될 상태, 질환의 중증도, 환자의 연령, 생리 상태, 사이즈 및 중량, 치료 기간, 동반 요법의 종류(있는 경우), 특정 투여 경로 및 이와 유사한 인자들을 포함하는 환자의 개체맞춤 변수에 따라 달라질 것이다. 따라서, 본원에 기재된 제제의 투여된 용량은 이러한 변수의 다양성에 좌우될 수 있다. 환자에서의 반응이 초기 용량으로 불충분한 경우에는, 보다 많은 용량(또는 보다 국소화된 상이한 투여 경로에 의해 달성되는 효과적으로 더 높은 용량)이 사용될 수 있다.
본원에 기재된 제제 및 조성물은 본원에 기재된 것과 같은 다양한 장애를 치료 또는 예방하기 위해 환자에게, 예를 들어, 생체내 투여될 수 있다. 바람직한 환자는 본원에 기재된 제제 및 조성물을 투여함으로써 교정되거나 개선될 수 있는 장애를 갖는 인간 환자를 포함한다. 여기에는 CLDN18.2의 발현을 특징으로 하는 세포 관련 장애도 포함된다.
예를 들어, 일 실시형태에서, 본원에 기재된 제제는 암질환, 예를 들어 CLDN18.2를 발현하는 암세포의 존재를 특징으로 하는 본원에 기재된 바와 같은 암질환을 가진 환자를 치료하는데 사용될 수 있다.
본 발명에 따라 기술된 약학 조성물 및 치료 방법은 또한 본원에 기재된 질병을 예방하기 위한 면역화 또는 백신접종에 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 하나 이상의 보조제와 같은 면역-증강 물질을 보충하면서 투여될 수 있으며, 그 효율성을 더욱 증가시키기 위해, 바람직하게는 면역자극의 상승 효과를 달성하기 위해 하나 이상의 면역-증강 물질을 포함할 수 있다. 용어 "보조제"는 면역반응을 연장하거나 향상시키나 촉진시키는 화합물에 관한 것이다. 다양한 보조제의 유형에 따라, 다양한 메커니즘이 이러한 점에서 가능하다. 예를 들어, DC의 성숙을 가능하게 하는 화합물, 예를 들어. 지질다당류 또는 CD40 리간드는 적절한 보조제의 제 1 클래스를 형성한다. 일반적으로, "위험 신호"(LPS, GP96, dsRNA 등) 또는 GM-CSF와 같은 사이토카인 같은 유형의 면역계에 영향을 미치는 임의의 제제는 제어된 방식으로 면역반응을 강화시키는 것 및/또는 영향 미치는 것을 가능하게 하는 보조제로서 사용될 수 있다. 또한, CpG 올리고디옥시뉴클레오티드는 선택적으로 이러한 맥락에서 사용될 수 있지만, 상기 설명한 바와 같이 특정 상황하에서 발생하는 부작용이 고려되어야 한다. 특히 바람직한 보조제는 모노카인, 림포카인, 인터류킨 또는 케모카인과 같은 사이토카인이고, 예를 들어 IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IFNα, IFNγ, GM-CSF, LT-α 또는 성장 인자, 예를 들어 hGH를 들 수 있다. 추가로 공지된 보조제는 수산화알루미늄, 프로인트(Freund) 보조제 또는 오일, 예컨대 Montanide®, 가장 바람직하게는 Montanide® ISA51이다. 지질펩티드, 예컨대 Pam3Cys는 또한 본 발명의 약학 조성물에서 보조제로서 사용하기에 적합하다.
약학 조성물은 국소적으로 또는 전신적으로 투여할 수 있고, 바람직하게는 전신적으로 투여할 수 있다.
용어 "전신 투여"는 제제가 유의한 양으로 개체의 신체 내에서 광범위하게 분포되어 목적하는 효과를 발현하도록 하는 제제의 투여를 지칭한다. 예를 들어, 제제는 혈액 내에서 목적하는 효과를 발현할 수 있고 및/또는 혈관계를 통해 목적하는 작용 부위에 도달할 수 있다. 전형적인 전신 투여 경로에는 제제를 혈관계에 직접 도입함으로써 투여하거나 구강, 폐 또는 근육내 투여를 포함하며, 여기서 제제는 흡수되어 혈관계로 들어가고, 혈액을 통해 하나 이상의 목적하는 작용 부위(들)로 운반된다.
본 발명에 따르면, 전신 투여가 비경구 투여에 의한 것이 바람직하다. 용어 "비경구 투여"는 제제가 장을 통과하지 못하게 하는 제제의 투여를 지칭한다. 용어 "비경구 투여"는 정맥내 투여, 피하 투여, 피내 투여 또는 동맥내 투여를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 투여는 예를 들어 경구, 복강내 또는 근육내 경로로 실시될 수 있다.
본원에서 제공되는 제제 및 조성물은 단독으로 또는 수술, 방사선조사, 화학요법 및/또는 골수 이식(자가, 동계, 동종이계 또는 비관련된 것)과 같은 통상적인 치료 요법과 조합하여 사용될 수 있다.
본 발명은 하기의 도면 및 실시예에 의해 상세히 설명되며, 이는 단지 설명의 목적으로 사용되며 한정하려는 것은 아니다. 상세한 설명 및 실시예들로 인해, 본 발명에 마찬가지로 포함되는 추가 실시형태들은 숙련된 기술자에게 이해하기 쉬운 것이다.
실시예
본원에서 사용된 기술 및 방법은 본원에 기술되어 있거나 또는 그 자체로 공지된 방식으로 실시하고 예를 들어 문헌[Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y]에 기재된 바와 같은 방법으로 실시한다. 키트 및 시약의 사용을 포함한 모든 방법은 특별히 명시하지 않는 한 제조업체의 정보에 따라 실시한다.
실시예 1: 재료 및 방법
세포주 및 시약
HLA-A*0201(Britten, C.M. et al. (2002), J. Immunol. Methods 259, 95-110)으로 안정적으로 형질주입하고 TCR 검증 분석에 사용되는 인간 만성 골수성 백혈병 세포주 K562((Lozzio, C.B. & Lozzio, B.B (1975), Blood 45, 321-334)(예를 들어 K562-A2라고도 한다)는 표준 조건 하에서 배양하였다. 일차 인간 신생 포피 섬유 아세포 세포주 CCD-1079Sk (ATCC No. CRL-2097)를 제조사의 지시에 따라 배양하였다.
말초혈액 단핵성 세포(PBMC), 단핵구 및 수지상세포(DC)
PBMC는 버피코트로부터 Ficoll-Hypaque (Amersham Biosciences, Uppsala, Sweden) 밀도 구배 원심분리법으로 분리하였다. HLA 대립유전자형은 PCR 표준 방법에 의해 결정되었다. 단핵구는 항-CD14 마이크로비드 (Miltenyi Biotech, Bergisch-Gladbach, Germany)로 농축하였다. 미성숙 DC(iDC)는 문헌[Kreiter et al. (2007), Cancer Immunol. Immunother., CII, 56, 1577-87]에 기재된 바와 같이 사이토카인-보충된 배양 배지에서 단핵구를 5일간 분화함으로써 수득하였다.
펩티드 및 자극기 세포의 펩티드 펄싱
클라우딘-18.2 또는 HIV-gag의 서열에 상응하는 11개의 아미노산 중첩을 갖는 N- 및 C-말단 유리 15량체 펩티드의 풀(항원 펩티드 풀이라고도 한다)을 표준 고체상 화학(JPT GmbH, Berlin, Germany)에 의해 합성하고 최종 농도가 0.5 mg/ml가 되도록 DMSO에 용해시켰다. 9량체 펩티드를 PBS 10% DMSO에서 재용해하였다. 자극기 세포를 펄싱하기 위해, 상이한 펩티드 농도를 사용하여 배양 배지에서 37℃에서 1시간 동안 인큐베이팅하였다.
RNA의
시험관내
전사(IVT)를 위한 벡터
모든 구축물은 이전에 기술된 pST1-sec-insert-2βgUTR-A(120)-Sap1 플라스미드의 변이체이다(Holtkamp, S. et al. (2006), Blood 108, 4009-4017). 뮤린 TCR 사슬을 암호화하는 플라스미드의 생성을 위해, 뮤린 TCR-α, -β1 및 -β2 불변부를 암호화하는 cDNA를 상업적 공급자로부터 조달하고 유사하게 클로닝하였다(각각 GenBank 수탁번호 M14506, M64239 및 X67127). 특정 V(D)J PCR 생성물을 이러한 카세트에 도입하여 전장 TCR 사슬을 생성하였다(pST1-murineTCRαβ-2βgUTR-A(120)이라고 한다).
전장 CLDN18.2, CLDN18.2 aa 1-80 및 CLDN6 항원은 이전에 기술된 pST1 플라스미드에서 MHC 클래스 I 수송 신호(MITD)와 연결되어 클로닝하였다(Kreiter, S. et al. (2008), J. Immunol. 180, 309-318).
시험관내
전사 (IVT) RNA의 생성 및 세포 내로의 이동
IVT RNA의 생성은 이전에 기술된 바와 같이 수행하고(Holtkamp, S. et al. (2006), Blood 108, 4009-4017), 예냉된 4-mm 갭의 멸균 전기천공 큐벳(Bio-Rad Laboratories GmbH, Munich, Germany)에서 X-VIVO 15 배지에 현탁된 세포에 첨가하였다(Lonza, Basel, Switzerland). Gene-Pulser-II 장치(Bio-Rad Laboratories GmbH, Munich, Germany)로 전기천공을 수행하였다(T 세포: 450V/250μF; K562-A2: 200V/300μF).
IVT RNA로 HLA A2.1/DR1 마우스의 결절내 면역화에 의한 T 세포의
생체내
초회항원자극
A2/DR1 마우스의 T 세포(Pajot A. et al. (2004), Eur. J. Immunol. 34, 3060-69)는 항원-암호화 IVT RNA를 사용하여 반복적인 결절내 면역화에 의해 목적하는 항원에 대해 생체내 초회항원자극하였다(Kreiter S. et al. (2010), Cancer Research 70, 9031-40). 결절내 면역화를 위해, 마우스를 자일라진/케타민으로 마취시켰다. 서혜부 림프절을 외과적으로 노출시키고, 링거 용액 및 RNase-불함유 멸균수에 희석시킨 10㎕ RNA(20㎍)은 초미세 니들(31G, BD Biosciences)이 장착된 일회용 0.3-ml 주사기를 사용하여 서서히 주입하고, 상처를 폐쇄하였다. 6회의 면역화 사이클 후, 마우스를 희생시키고 비장 세포를 분리하였다.
비장 세포의 채취
멸균 조건 하에서 이들의 해부 후, 비장을 PBS 함유한 팔콘튜브로 옮겼다. 비장을 겸자로 기계적으로 파쇄시키고 세포 스트레이너(40μm)로 세포 현탁액을 수득하였다. 비장 세포를 PBS로 세척하고 원심분리하고 적혈구를 용균시키기 위해 저장성 완충액에 재현탁하였다. 실온에서 5분 인큐베이션 후, 20-30ml 배지 또는 PBS를 첨가하여 반응을 중단시켰다. 비장 세포를 원심분리하고 PBS로 2회 세척하였다.
CD137 염색 후 항원-특이적 CD8+ T 세포의 단일-세포 선별
항원-특이적 재자극을 위해, 면역화된 A2/DR1 마우스의 2.5x10^6/웰 비장 세포를 24-웰 플레이트에 접종하고 목적하는 항원 또는 대조군 항원을 암호화하는 중첩 펩티드의 풀을 사용하여 펄스하였다. 24시간 인큐베이션 후, 세포를 수거하고, FITC-접합된 항-CD3 항체, PE-접합된 항-CD4 항체, PerCP-Cy5.5-접합된 항-CD8 항체 및 Dylight-649-접합된 항-CD137 항체로 염색하였다. 선별은 BD FACS Aria 유세포분석기(BD Biosciences) 상에서 수행하였다. CD137, CD3 및 CD8에 양성인 세포를 선별하고, 피더 세포로서 인간 CCD-1079Sk 세포를 포함하는 96-웰 V-바닥-플레이트(Greiner Bio-One)에서 웰당 하나의 세포를 수거하고, 4℃에서 원심분리하고 즉시 -80℃에 저장하였다 .
선별된 세포로부터 RNA 추출, SMART-기반 cDNA 합성 및 비특이적 증폭
선별된 T 세포로부터 RNA를 공급업체의 지시에 따라 RNeasy Micro 키트 (Qiagen, Hilden, Germany)로 추출하였다. 주형-스위치 프로토콜을 cDNA 합성에 사용하였다: Mint 역전사효소(Evrogen JSC)는 제1-가닥 합성 반응의 초회항원자극을 위해 올리고(dT)-T-프라이머 롱 및 역전사 효소의 말단 전이효소 활성에 의한 연장된 주형의 생성 및 주형 스위치를 가능하게 하는 올리고(리보G)를 도입하는 TS-숏(Eurofins Genomic)을 조합하였다(Matz, M. et al. (1999) Nucleic Acids Res. 27, 1558-1560). 제조사의 지침에 따라 합성된 제 1 가닥 cDNA는 200μM dNTP의 존재하에서 5 U PfuUltra Hotstart High-Fidelity DNA 중합효소 (Agilent Technologies) 및 0.48μM 프라이머 TS-PCR 프라이머로 21회 증폭시켰다(사이클링 조건: 95℃에서 2분, 94℃에서 30초, 65℃에서 30초, 72℃에서 1분, 72℃에서 6분간 최종 신장). TCR 유전자의 성공적인 증폭은 뮤린의 TCR-β 불변부 특이적 프라이머로 제어하고 연속적인 클론형-특이적 뮤린 Vα-/Vβ-PCR은 강한 밴드가 검출되는 경우에만 수행하였다.
TCR 증폭을 위한 PCR 프라이머의 설계
뮤린 TCR 컨센서스 프라이머의 설계를 위해, 이들의 대응하는 선도 서열과 함께 ImMunoGeneTics(IMGT) 데이터베이스(http://www.imgt.org)에 나열된 바와 같이 모든 기능적인 뮤린 TCR-Vβ 및 -Vα 유전자를 BioEdit 서열 정렬 에디터(예를 들어, http://www.bio-soft.net)로 정렬하였다. 최대 3개의 축퇴된 염기, 40-60%의 GC-함량 및 3'말단에 G 또는 C를 갖는 24 내지 27bp 길이의 포워드 프라이머는 가능한 한 많은 선도 서열로 어닐링하도록 설계하고 희소한 제한효소 부위 및 Kozak 서열을 특징으로 하는 15bp의 5'신장을 구비하였다. 리버스 프라이머는 Cα의 아미노산 24 내지 31개에 상응하는 서열에 결합하는 프라이머 mTRACex1_as 및 Cβ1과 Cβ2에서 아미노산 8 내지 15개에 상응하는 서열에 결합하는 프라이머 mTRBCex1_as를 가지고, 불변부 유전자의 제 1 엑손에 어닐링하도록 고안하였다. 두 올리고뉴클레오티드는 5'포스페이트로 합성하였다. 프라이머는 동일한 어닐링 온도로 2-6개의 포워드 올리고 풀에 정리하였다.
PCR 증폭 및 V(D)J 서열의 클로닝
분리된 T 세포로부터의 미리 증폭된 cDNA 6㎕를 0.6μM mVα-/mVβ-특이적 올리고 풀, 0.6μM mCα- 또는 mCβ-올리고, 200μM dNTP 및 5 U PfuUltra II Fusion HS DNA 중합효소의 존재하에 40회 PCR에 적용시켰다(Agilent사; 사이클링 조건: 95℃에서 1분, 94℃에서 30초, 어닐링 온도 30초, 72℃에서 30초, 72℃에서 3분간 최종 신장 시간). Qiagen의 모세관 전기영동 시스템을 사용하여 PCR 산물을 분석하였다. 470-550bp에서의 밴드를 갖는 시료를 아가로스겔 상에서 크기 분획화하고, 밴드를 절제하고, 겔 추출 키트 (Qiagen, Hilden, Germany)를 사용하여 정제 하였다. mTRBCex1_as 및 mTRBCex1_as 프라이머가 각각 마우스의 TCR 불변부 유전자 Cβ1 및 Cβ2와 모두 필적하므로, 서열 분석을 수행하여 V(D)J 도메인 및 β 불변부 모두의 서열을 밝혀냈다. DNA를 소화시키고 완전한 뮤린 TCR-α/β-사슬을 위해 적절한 골격을 함유하는 IVT 벡터에 클로닝하였다.
유동 세포계측 분석
형질주입된 TCR 유전자의 세포 표면 발현은 적절한 가변부 패밀리 또는 TCR β-사슬의 불변부(Beckman Coulter Inc., Fullerton, USA)에 대한 형광색소-접합된 항-TCR 항체를 CD3, CD8 또는 CD4에 대한 항체(BD Biosciences)와 조합하여 사용하여 유동 세포계측법으로 분석하였다. 형질주입된 CAR의 세포 표면 발현은 각 CAR 구조체에 함유된 scFv 단편을 인식하는 형광색소-접합된 이디오타입-특이적 항체(Ganymed Pharmaceuticals)를 사용하여 분석하였다. 유동 세포계측 분석은 FACS Diva 소프트웨어(BD Biosciences)를 사용하여 FACS CANTO II 유세포분석기 상에서 수행하였다.
루시페라아제 세포독성 검정
세포-매개 세포독성의 평가를 위해 생물발광-기반 검정법을 51Cr 방출의 대체법 및 최적화로 사용하였다. 표준 크롬 방출 검정법과는 달리, 이 검정법은 공인큐베이션(coincubation) 후에 생존가능한 루시페라아제 발현 표적세포의 수를 계산함으로써 효과기 세포의 용해 활성을 측정하는 것이다. 표적세포는 반딧불이 포티너스 피라리스(Photinus pyralis)(EC 1.13.12.7)로부터 반딧불이 루시페라아제를 암호화하는 루시페라아제 유전자로 안정적으로 또는 일시적으로 형질주입하였다. 루시페라아제는 루시페린의 산화를 촉매하는 효소이다. 반응은 ATP-의존적이며 두 단계로 진행된다:
루시페린 + ATP → 루시페릴아데닐산 + PP i
루시페릴아데닐산 + O 2 → 옥시루시페린 + AMP + 광
표적세포를 백색 96-웰 플레이트(Nunc, Wiesbaden, Germany)에 웰당 104개 세포의 농도로 도말하고 100㎕의 최종 부피에서 다양한 수의 TCR-형질주입된 T 세포와 함께 공배양하였다. 3시간 후 50㎕의 D-루시페린(BD Biosciences)을 함유한 반응 혼합물(루시페린(1㎍/㎕), HEPES-완충액(50mM, pH), 아데노신 5'-트리포스파타아제(ATPase, 0.4mU/㎕, Sigma-Aldrich, St. Louis, USA)를 세포에 첨가하였다. 반응 혼합물에 ATPase를 첨가함으로써 죽은 세포로부터 방출된 루시페라아제로 인한 발광을 약화시켰다.
4시간의 총 인큐베이션시간 후, Tecan Infinite 200 리더기(Tecan, Crailsheim, Germany)를 사용하여 생세포에 의해 방출된 생물발광을 측정하였다. 세포-사멸 활성은 2% Triton-X 100 첨가에 의해 유도된 완전한 세포 용균 후 수득된 발광값에 대하여 그리고 표적세포에 의해 단독으로 방출된 발광에 연결하여 계산하였다. 데이터 출력은 초당 계수율(CPS)이고 퍼센트 특정 용균은 다음과 같이 계산하였다:
(1-(CPSexp-CPSmin)/(CPSmax-CPSmin))) * 100.
완전한 용균을 위해 계면활성제 Triton-X-100으로 표적을 처리한 후 최대 발광(초당 최대 계수율, CPSmax)을 효과기 없이 표적세포를 인큐베이팅한 후 평가하고 최소 발광(CPSmin)을 평가하였다.
*ELISPOT (효소-연결 면역SPOT 검정법)
미량정량판 플레이트(Millipore, Bedford, MA, USA) Mabtech)는 실온에서 밤새 항-인간 IFNγ 항체 1-D1k(Mabtech, Stockholm, Sweden)로 도포하거나 4℃에서 밤새 항-뮤린 IFNy 항체 AN18(Mabtech)로 도포하고, 2% 인간 알부민(CSL Behring, Marburg, Germany)으로 차단하거나 뮤린 배양 배지로 차단하였다. 뮤린의 설정에서는 5x105 비장 세포를 웰마다 분배하는 반면, 인간의 설정에서는 2-5x104/웰 항원 제시하는 자극기 세포를 전기천공하고 24시간 후에 0.3-3x105/웰 TCR-형질주입된 CD4+ 또는 CD8+ 효과기 세포와 함께 3배로 도말하였다. 플레이트를 밤새(37℃, 5% CO2) 인큐베이팅하고, PBS 0.05% Tween 20으로 세척하고, 항-인간 IFNγ 비오티닐화된 mAB 7-B6-1(Mabtech) 또는 항-뮤린 IFNγ 비오티닐화된 mAb R4-6A2(Mabtech)로 37℃에서 1㎍/ml의 최종 농도로 2시간 동안 인큐베이팅하였다. 아비딘-결합된 호스래디시 페록시다아제 H(Vectastain Elite Kit; Vector Laboratories, Burlingame, USA)를 웰에 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 인큐베이팅하고 3-아미노-9-에틸 카바졸(Sigma, Deisenhofen, Germany)로 전개시켰다.
CFSE (카복시플루오레세인 숙신이미딜 에스터) 증식 검정법
CD8+ T 세포를 CAR RNA로 형질주입시키고 약 20시간 후에 0.8μM CFSE로 표지하였다. 표지된 T 세포를 세척하고 RNA-형질주입된 자가 iDC와 공배양하였다(E:T 비율=10:1). 공배양 4일 후 세포를 수거하고, 세포 분열 후 딸세포 내에서의 CFSE 형광의 점진적 반감기에 기반한 유동 세포계측법에 의해 증식을 분석하였다.
동물
BALB/c 마우스는 Javier Labs로부터 구입하였다. 실험 중에 연령(8주령) 및 성별(암컷)에 필적된 동물을 사용하였다. 유사유전자형(Congenic) BALB/c-Thy1.1 마우스를 BioNTech AG, Germany의 동물 시설에서 사육하였다.
레트로바이러스 유전자 조작 및 양자 T 세포 전달을 위한 CAR T 세포의 제조
BALB/c-Thy1.1 마우스의 비장 세포를 분리하고 5ng/mL rh IL-7 및 10ng/mL rh IL-15(둘 모두 Miltenyi)의 존재하에서 2㎍/mL 가용성 항-CD3(eBioscience) 및 1㎍/mL 가용성 항-CD28(Novus Biologicals)로 사전 활성화시켰다. 사전 활성화하고 24시간 및 48시간 후 RetroNectin-기술(Takara)을 이용하여 CLDN18.2-CAR-effLuc-GFP를 암호화하는 트리시스트론성 벡터로 T 세포를 레트로바이러스성(MLV-E) 형질도입시켰다. 5ng/mL rh IL-7 및 10ng/mL rh IL-15의 존재하에서 형질도입된 T 세포를 3일간 증대시킨 후, 이어서 마우스 내에 양자전이하기 전에 Ficoll-Paque PREMIUM(1.084)으로 피콜 세정하였다.
마우스 실험
5x106 CLDN18.2 CAR 형질도입된 BALB/c-Thy1.1+ T 세포를 BALB/c 마우스에 정맥내(i.v.) 주입하였다. 이어서, 마우스는 양자 T 세포 전이(ACT) 24시간 후에 RNA(Lip)의 F12:RNA 비율이 1.3:2가 되도록 정맥내 백신접종하였다. 전체 신체 생물발광 촬상을 수행하였다.
생체내 생물발광 촬상 (BLI)
CLDN18.2-CAR-effLuc-GFP 형질도입된 T 세포의 확장은 IVIS Lumina 촬상 시스템(Caliper Life Sciences)을 사용하여 생체내 생물발광 촬상에 의해 평가하였다. 간단히 말해, D-루시페린 수용액(80mg/kg 체중; Perkin Elmer)을 주사하고 5분 후에, 방출된 광자를 정량화하였다(1분의 적분시간). 동물 내에서 루시페라아제 발현 세포로부터 유래하는 투과광의 강도는 회색톤 이미지로 나타내어지고, 여기서 흑색은 최소 인텐스인 것이고, 백색 내지 어두운 회색은 최대 인텐스 생물발광 신호이다. LED 저조도 조명하에서 마우스의 회색톤 기준 이미지를 수득하였다. 이미지는 Living Image 4.0 소프트웨어를 사용하여 이중인화(superimpose)하였다.
실시예 2: 클라우딘-18.2에 특이적인 고도-친화도 HLA-A*02-제한된 뮤린 TCR의 분리
본원 발명자들은 CLDN18.2의 아미노산 1-80을 암호화하는 IVT-RNA를 사용하여 A2/DR1 마우스에서 반복적인 결절내 면역화에 의해 CLDN18.2의 면역원성을 검증하였다. 인간 CLDN18 유전자는 N-말단 69개 아미노산이 서로 다른 2개의 단백질 이소형체(CLDN18.1 및 CLDN18.2)를 생성하는 2개의 대체적인 제 1 엑손을 가지고 있다(도 4A). 또한, CLDN18.1도 정상 조직, 특히 폐에서 발현되기 때문에 CLDN18.2-특이적 T 세포 반응성을 독점적으로 유도하기 위해 CLDN18.2의 N 말단 일부분만을 사용하였다. CLDN18.2-특이적 T 세포의 분리 및 이후의 상응하는 TCR 유전자의 클로닝을 위해 이들 마우스의 비장 세포를 사용하였다. 면역화된 마우스의 비장 세포를 IFNγ-ELISPOT 검정법에 의해 생체외 예측된 HLA-A*02 결합 CLDN18.2 펩티드에 대한 CLDN18.2-특이적 T 세포의 유도 및 이들의 반응성에 대해 분석하였다(도 5).
CLDN18.2-특이적 T 세포의 유의한 빈도를 RNA 면역화에 의해 3마리 마우스 모두에서 유도할 수 있었지만, T 세포성 반응성은 HLA-A*0201(CLDN18.2-A2-5 및 -CLDN18.2-A2-6)에 결합할 것으로 예측된 2개의 CLDN18.2 펩티드에 집중되었다.
CLDN18.2-특이적 T 세포의 분리를 위해, 면역화된 마우스의 비장 세포를 시험관내 재자극하고 단일 세포를 CD137의 활성화-유도된 상향 조절에 기반하여 유동 세포계측법에 의해 분리하였다(도 6).
3마리의 면역화된 A2/DR1 마우스 모두로부터 CLDN18.2-특이적 CD8+ T 세포를 회수할 수 있고, 총 6개의 CLDN18.2-특이적 TCR을 단일-선별된 뮤린 T 세포로부터 클로닝하였다.
TCR은 면역학적 검증 검정을 실시하여, 6개의 CLDN18.2-TCR 모두는 이전에 생체외 ELISPOT 분석에 의해 동정된, 하나 또는 2개의 HLA-A*0201-제한된 에피토프인 CLDN18.2 아미노산 7-15(CLDN18.2-A2-5) 및 CLDN18.2 아미노산 8-16(CLDN18.2-A2-6) 모두를 인식하는 것으로 나타났다(도 7).
실시예 3: 클라우딘-18.2-특이적 CAR의 생성 및
시험관내
검증
본원 발명자들은 각각 CD3ζ 및 CD28의 신호전달 및 공자극 부분을 함유하는 CLDN18.2를 표적으로 하는 제2세대 CAR을 생성하였다. CD28 엔도도메인에서 lck 결합 부분의 결실은 조절 T 세포의 유도를 방지하기 위해 CAR 결합시 IL2 분비를 배제하였다(Kofler D.M. et al., (2011) Molecular Therapy 19 (4), 760-767). CAR의 세포밖 부분에서 IgG1 Fc '스페이서' 도메인의 변형은 '오프-타겟(off-target)' 활성화 및 선천적인 면역반응의 의도하지 않은 개시를 회피한다(Hombach A. et al., (2010) Gene Therapy 17, 1206-1213).
CLDN18.2-CAR T 세포에 의한 CLDN18.2-발현 표적세포의 특이적 용균을 분석하기 위해, 루시페라아제-기반 세포독성 검정을 수행하였다. CD8+ T 세포를 미리 활성화시키고, 대조군으로서 CLDN6-특이적 CAR 또는 CLDN18.2-CAR을 암호화하는 IVT-RNA로 형질주입시켰다. CAR 표면 발현은 유동 세포계측법에 의해 형광색소-접합된 항체로 염색한 후 확인하였다(도 8). 두가지 CAR 모두는 CD8+ T 세포의 표면에서 잘 발현시켰다. CAR-형질주입된 T 세포는 상이한 효과기-대-표적 비율을 사용하여 CLDN18.2-RNA 또는 CLDN6-RNA로 형질주입된 자가 iDC로 배양하고, 4시간의 공배양 후에 특이적 용균을 계산하였다(도 9). CLDN18.2-CAR 및 CLDN6-CAR 둘 모두는 CLDN18.2 및 CLDN6을 각각 발현하는 iDC의 특이적 용균을 매개하였다. iDC가 각각의 대조군 항원을 발현하는 경우, 용균은 관찰되지 않았다.
분석을 위해, CLDN18.2-발현 표적세포의 CLDN18.2-CAR-매개된 용균이 이디오타입-특이적 항체의 첨가에 의해 억제될 수 있다면, 표적세포와의 공배양을 시작하기 전에 CAR T 세포는 CLDN18.2-CAR에 포함된 scFv 단편에 특이적으로 결합하는 항체와 함께 또는 항체 없이 미리 인큐베이팅하고 루시페라아제-기반 세포독성 검정법을 사용하여 용균을 분석하였다(도 10).
CLDN18.2-발현 표적세포의 CLDN18.2-CAR-매개된 용균은 이의 표적 항원에 대한 CLDN18.2-CAR의 결합을 차단함으로써 30:1의 높은 E:T 비율로도 효과적으로 억제할 수 있었다. CLDN6-CAR 매개된 용균의 억제는 CLDN18.2-CAR에 대한 항체의 선택적 결합을 확인하는 것으로 관찰되지 않았다. 이 실험은 한편으로는 CLDN18.2-CAR-매개된 용균이 CAR의 CLDN18.2 특이성에만 독점적으로 의존하는 것을 확인하고 다른 한편으로는 CLDN18.2-CAR 검출에 사용되는 이디오타입-특이적 항체가 원칙적으로는 심각한 부작용 사례에서 생체내 CLDN18.2-CAR T 세포의 억제에도 적용될 수 있다는 것을 확인하였다.
CAR-조작된 T 세포의 항-종양 효능에 대한 필수 전제조건은 환자에서 증식하고 지속되는 능력이다. 분석을 위해, CLDN18.2-CAR T 세포가 iDC에서 이소성으로 발현된 CLDN18.2에 반응하여 효율적으로 급증하면, 카복시플루오레세인 숙신이미딜 에스터(CFSE) 기반한 시험관내 공배양 검정을 수행하였다. CLDN18.2-CAR을 암호화하는 IVT-RNA로 형질주입된 CD8+ T 세포를 CFSE로 표지하고, CLDN18.2 또는 대조군 항원 CLDN9나 CLDN6를 암호화하는 IVT-RNA로 형질주입된 자가 iDC와 공배양하였다. CAR 표면 발현은 형광색소-결합된 항-이디오타입-특이적 항체를 사용하여 유동 세포계측법으로 분석하였다(도 11A). 4일간의 공배양 후, CFSE-표지된 CAR-형질주입된 CD8+ T 세포의 항원-특이적 증식을 유동 세포계측법에 의해 분석하였다. 대조군 항원 형질주입된 iDC(CLDN9, CLDN6)에 반응하여 CAR T 세포의 백그라운드 증식만을 관찰할 수 있는 반면, CLDN18.2에 반응하여 CD8+ T 세포의 약 86 %의 CLDN18.2-CAR 매개된 증식을 관찰하였다(도 11B). 이들 데이터는 인간 iDC에서의 이소성 CLDN18.2 발현에 의해 CLDN18.2-CAR T 세포의 효율적인 항원-특이적 활성화 및 증대를 달성할 수 있음을 확인하였다.
항원 특이적 활성화 및 생체내 T 세포를 보유한 CAR의 증대를 매개하는 CLDN18.2-CAR의 효능을 동계(syngenic) 마우스 모델에서 검사하였다. 생체내 양자 이동된 CAR-T 세포의 운명을 추적하기 위해, 바이러스성 T2A 서열에 의해 분리된 CLDN18.2-CAR의 eGFP 리포터 유전자 하류 및 루시페라아제(effLuc)를 암호화하는 트리시스트론성 레트로바이러스 벡터를 사용하였다.
나이브 BALB/c 마우스는 CLDN18.2-CAR 형질도입된 뮤린 T 세포를 사용하여 이식시켰다. 옮기는 당일에, 형질도입된 T 세포 상의 CLDN18.2-CAR 발현은 형광색소-결합된 항-이디오타입-특이적 항체를 eGFP 리포터 발현과 함께 병용하여 유동 세포계측법에 의해 평가하였다. CLDN18.2-CAR은 약 36%의 CD8+ 및 약 45%의 CD4+ T 세포에서 고도로 발현하였다(도 12A). 이어서, 이식된 마우스를 CLDN18.2 또는 대조군(Ctrl) 항원을 암호화하는 IVT-RNA로 처리하였다. 동족 항원에 반응하여 CLDN18.2-CAR T 세포의 유의한 활성화 및 증식을 나타내는 mRNA 백신접종 2일 후에 대조군 RNA 처리된 마우스와 비교하여 CLDN18.2 RNA에서 광 방출의 강력한 증가를 관찰할 수 있었다(도 12B). 이들 데이터는 생체내 T 세포에서 CLDN18.2 CAR의 작용성 및 항원 특이성을 명확하게 보여주었다.
CLDN18.2-특이적 T 세포 에피토프
A2-1 (aa 68-76)
TLLGLPAML
A2-2 (aa 71-79)
GLPAMLQAV
A2-3 (14-22)
SLIGIAGII
A2-4 (17-25)
GIAGIIAAT
A2-5 (7-15)
QGLGFVVSL
A2-6 (8-16)
GLGFVVSLI
CLDN18.2-특이적 T 세포 수용체
SEQUENCE LISTING
<110> BioNTech Cell & Gene Therapies GmbH et al.
<120> CLAUDIN-18.2-SPECIFIC IMMUNORECEPTORS AND T CELL EPITOPES
<130> 674-152 PCT
<150> PCT/EP2015/060357
<151> 2015-05-11
<160> 47
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 261
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Met Ala Val Thr Ala Cys Gln Gly Leu Gly Phe Val Val Ser Leu Ile
1 5 10 15
Gly Ile Ala Gly Ile Ile Ala Ala Thr Cys Met Asp Gln Trp Ser Thr
20 25 30
Gln Asp Leu Tyr Asn Asn Pro Val Thr Ala Val Phe Asn Tyr Gln Gly
35 40 45
Leu Trp Arg Ser Cys Val Arg Glu Ser Ser Gly Phe Thr Glu Cys Arg
50 55 60
Gly Tyr Phe Thr Leu Leu Gly Leu Pro Ala Met Leu Gln Ala Val Arg
65 70 75 80
Ala Leu Met Ile Val Gly Ile Val Leu Gly Ala Ile Gly Leu Leu Val
85 90 95
Ser Ile Phe Ala Leu Lys Cys Ile Arg Ile Gly Ser Met Glu Asp Ser
100 105 110
Ala Lys Ala Asn Met Thr Leu Thr Ser Gly Ile Met Phe Ile Val Ser
115 120 125
Gly Leu Cys Ala Ile Ala Gly Val Ser Val Phe Ala Asn Met Leu Val
130 135 140
Thr Asn Phe Trp Met Ser Thr Ala Asn Met Tyr Thr Gly Met Gly Gly
145 150 155 160
Met Val Gln Thr Val Gln Thr Arg Tyr Thr Phe Gly Ala Ala Leu Phe
165 170 175
Val Gly Trp Val Ala Gly Gly Leu Thr Leu Ile Gly Gly Val Met Met
180 185 190
Cys Ile Ala Cys Arg Gly Leu Ala Pro Glu Glu Thr Asn Tyr Lys Ala
195 200 205
Val Ser Tyr His Ala Ser Gly His Ser Val Ala Tyr Lys Pro Gly Gly
210 215 220
Phe Lys Ala Ser Thr Gly Phe Gly Ser Asn Thr Lys Asn Lys Lys Ile
225 230 235 240
Tyr Asp Gly Gly Ala Arg Thr Glu Asp Glu Val Gln Ser Tyr Pro Ser
245 250 255
Lys His Asp Tyr Val
260
<210> 2
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T cell epitope
<400> 2
Thr Leu Leu Gly Leu Pro Ala Met Leu
1 5
<210> 3
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T cell epitope
<400> 3
Gly Leu Pro Ala Met Leu Gln Ala Val
1 5
<210> 4
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T cell epitope
<400> 4
Ser Leu Ile Gly Ile Ala Gly Ile Ile
1 5
<210> 5
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T cell epitope
<400> 5
Gly Ile Ala Gly Ile Ile Ala Ala Thr
1 5
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T cell epitope
<400> 6
Gln Gly Leu Gly Phe Val Val Ser Leu
1 5
<210> 7
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T cell epitope
<400> 7
Gly Leu Gly Phe Val Val Ser Leu Ile
1 5
<210> 8
<211> 268
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 8
Met Arg Pro Gly Thr Cys Ser Val Leu Val Leu Leu Leu Met Leu Arg
1 5 10 15
Arg Ser Asn Gly Asp Ser Val Thr Gln Thr Glu Gly Leu Val Thr Val
20 25 30
Thr Glu Gly Leu Pro Val Lys Leu Asn Cys Thr Tyr Gln Thr Thr Tyr
35 40 45
Leu Thr Ile Ala Phe Phe Trp Tyr Val Gln Tyr Leu Asn Glu Ala Pro
50 55 60
Gln Val Leu Leu Lys Ser Ser Thr Asp Asn Lys Arg Thr Glu His Gln
65 70 75 80
Gly Phe His Ala Thr Leu His Lys Ser Ser Ser Ser Phe His Leu Gln
85 90 95
Lys Ser Ser Ala Gln Leu Ser Asp Ser Ala Leu Tyr Tyr Cys Ala Leu
100 105 110
Met Asp Ser Asn Tyr Gln Leu Ile Trp Gly Ser Gly Thr Lys Leu Ile
115 120 125
Ile Lys Pro Asp Ile Gln Asn Pro Glu Pro Ala Val Tyr Gln Leu Lys
130 135 140
Asp Pro Arg Ser Gln Asp Ser Thr Leu Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp
145 150 155 160
Ser Gln Ile Asn Val Pro Lys Thr Met Glu Ser Gly Thr Phe Ile Thr
165 170 175
Asp Lys Thr Val Leu Asp Met Lys Ala Met Asp Ser Lys Ser Asn Gly
180 185 190
Ala Ile Ala Trp Ser Asn Gln Thr Ser Phe Thr Cys Gln Asp Ile Phe
195 200 205
Lys Glu Thr Asn Ala Thr Tyr Pro Ser Ser Asp Val Pro Cys Asp Ala
210 215 220
Thr Leu Thr Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Met Asn Leu Asn Phe Gln
225 230 235 240
Asn Leu Ser Val Met Gly Leu Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly
245 250 255
Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265
<210> 9
<211> 301
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 9
Met Gly Ser Arg Leu Phe Phe Val Val Leu Ile Leu Leu Cys Ala Lys
1 5 10 15
His Met Glu Ala Ala Val Thr Gln Ser Pro Arg Ser Lys Val Ala Val
20 25 30
Thr Gly Gly Lys Val Thr Leu Ser Cys His Gln Thr Asn Asn His Asp
35 40 45
Tyr Met Tyr Trp Tyr Arg Gln Asp Thr Gly His Gly Leu Arg Leu Ile
50 55 60
His Tyr Ser Tyr Val Ala Asp Ser Thr Glu Lys Gly Asp Ile Pro Asp
65 70 75 80
Gly Tyr Lys Ala Ser Arg Pro Ser Gln Glu Asn Phe Ser Leu Ile Leu
85 90 95
Glu Leu Ala Ser Leu Ser Gln Thr Ala Val Tyr Phe Cys Ala Ser Ser
100 105 110
Ile Asn Glu Arg Leu Phe Phe Gly His Gly Thr Lys Leu Ser Val Leu
115 120 125
Glu Asp Leu Arg Asn Val Thr Pro Pro Lys Val Ser Leu Phe Glu Pro
130 135 140
Ser Lys Ala Glu Ile Ala Asn Lys Gln Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu
145 150 155 160
Ala Arg Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu Leu Ser Trp Trp Val Asn
165 170 175
Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr Asp Pro Gln Ala Tyr Lys
180 185 190
Glu Ser Asn Tyr Ser Tyr Cys Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Ser Ala
195 200 205
Thr Phe Trp His Asn Pro Arg Asn His Phe Arg Cys Gln Val Gln Phe
210 215 220
His Gly Leu Ser Glu Glu Asp Lys Trp Pro Glu Gly Ser Pro Lys Pro
225 230 235 240
Val Thr Gln Asn Ile Ser Ala Glu Ala Trp Gly Arg Ala Asp Cys Gly
245 250 255
Ile Thr Ser Ala Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser Ala Thr Ile Leu
260 265 270
Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val Leu Val Ser
275 280 285
Thr Leu Val Val Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asn Ser
290 295 300
<210> 10
<211> 267
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 10
Met Asn Ser Phe Pro Gly Phe Met Thr Val Met Leu Leu Ile Phe Thr
1 5 10 15
Arg Ala His Gly Asp Ser Val Thr Gln Thr Glu Gly Gln Val Ala Leu
20 25 30
Ser Glu Glu Asp Phe Leu Thr Ile His Cys Asn Tyr Ser Ala Ser Gly
35 40 45
Tyr Pro Ala Leu Phe Trp Tyr Val Gln Tyr Pro Gly Glu Gly Pro Gln
50 55 60
Phe Leu Phe Arg Ala Ser Arg Asp Lys Glu Lys Gly Ser Ser Arg Gly
65 70 75 80
Phe Glu Ala Thr Tyr Asp Lys Gly Thr Thr Ser Phe His Leu Arg Lys
85 90 95
Ala Ser Val Gln Glu Ser Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Gly
100 105 110
Asp Tyr Ala Gln Gly Leu Thr Phe Gly Leu Gly Thr Arg Val Ser Val
115 120 125
Phe Pro Tyr Ile Gln Asn Pro Glu Pro Ala Val Tyr Gln Leu Lys Asp
130 135 140
Pro Arg Ser Gln Asp Ser Thr Leu Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp Ser
145 150 155 160
Gln Ile Asn Val Pro Lys Thr Met Glu Ser Gly Thr Phe Ile Thr Asp
165 170 175
Lys Thr Val Leu Asp Met Lys Ala Met Asp Ser Lys Ser Asn Gly Ala
180 185 190
Ile Ala Trp Ser Asn Gln Thr Ser Phe Thr Cys Gln Asp Ile Phe Lys
195 200 205
Glu Thr Asn Ala Thr Tyr Pro Ser Ser Asp Val Pro Cys Asp Ala Thr
210 215 220
Leu Thr Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Met Asn Leu Asn Phe Gln Asn
225 230 235 240
Leu Ser Val Met Gly Leu Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe
245 250 255
Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265
<210> 11
<211> 305
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 11
Met Gly Ser Ile Phe Leu Ser Cys Leu Ala Val Cys Leu Leu Val Ala
1 5 10 15
Gly Pro Val Asp Pro Lys Ile Ile Gln Lys Pro Lys Tyr Leu Val Ala
20 25 30
Val Thr Gly Ser Glu Lys Ile Leu Ile Cys Glu Gln Tyr Leu Gly His
35 40 45
Asn Ala Met Tyr Trp Tyr Arg Gln Ser Ala Lys Lys Pro Leu Glu Phe
50 55 60
Met Phe Ser Tyr Ser Tyr Gln Lys Leu Met Asp Asn Gln Thr Ala Ser
65 70 75 80
Ser Arg Phe Gln Pro Gln Ser Ser Lys Lys Asn His Leu Asp Leu Gln
85 90 95
Ile Thr Ala Leu Lys Pro Asp Asp Ser Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Ser
100 105 110
Ser Gln Glu Trp Gly Gly Tyr Glu Gln Tyr Phe Gly Pro Gly Thr Arg
115 120 125
Leu Thr Val Leu Glu Asp Leu Arg Asn Val Thr Pro Pro Lys Val Ser
130 135 140
Leu Phe Glu Pro Ser Lys Ala Glu Ile Ala Asn Lys Gln Lys Ala Thr
145 150 155 160
Leu Val Cys Leu Ala Arg Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu Leu Ser
165 170 175
Trp Trp Val Asn Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr Asp Pro
180 185 190
Gln Ala Tyr Lys Glu Ser Asn Tyr Ser Tyr Cys Leu Ser Ser Arg Leu
195 200 205
Arg Val Ser Ala Thr Phe Trp His Asn Pro Arg Asn His Phe Arg Cys
210 215 220
Gln Val Gln Phe His Gly Leu Ser Glu Glu Asp Lys Trp Pro Glu Gly
225 230 235 240
Ser Pro Lys Pro Val Thr Gln Asn Ile Ser Ala Glu Ala Trp Gly Arg
245 250 255
Ala Asp Cys Gly Ile Thr Ser Ala Ser Tyr His Gln Gly Val Leu Ser
260 265 270
Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala
275 280 285
Val Leu Val Ser Gly Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Lys Lys Asn
290 295 300
Ser
305
<210> 12
<211> 268
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 12
Met Asp Ser Phe Pro Gly Phe Met Thr Val Met Leu Leu Ile Phe Thr
1 5 10 15
Arg Ala His Gly Asp Ser Val Thr Gln Thr Glu Gly Gln Val Ala Leu
20 25 30
Ser Glu Glu Asp Phe Leu Thr Ile His Cys Asn Tyr Ser Ala Ser Gly
35 40 45
Tyr Pro Thr Leu Phe Trp Tyr Val Gln Tyr Pro Gly Glu Gly Pro Gln
50 55 60
Leu Leu Phe Arg Ala Ser Arg Asp Lys Glu Lys Gly Ser Ser Arg Gly
65 70 75 80
Phe Glu Ala Thr Tyr Asp Lys Gly Thr Thr Ser Phe His Leu Arg Lys
85 90 95
Ala Ser Val Gln Glu Ser Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Ser
100 105 110
Val Asp Tyr Ala Asn Lys Met Ile Phe Gly Leu Gly Thr Ile Leu Arg
115 120 125
Val Arg Pro His Ile Gln Asn Pro Glu Pro Ala Val Tyr Gln Leu Lys
130 135 140
Asp Pro Arg Ser Gln Asp Ser Thr Leu Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp
145 150 155 160
Ser Gln Ile Asn Val Pro Lys Thr Met Glu Ser Gly Thr Phe Ile Thr
165 170 175
Asp Lys Thr Val Leu Asp Met Lys Ala Met Asp Ser Lys Ser Asn Gly
180 185 190
Ala Ile Ala Trp Ser Asn Gln Thr Ser Phe Thr Cys Gln Asp Ile Phe
195 200 205
Lys Glu Thr Asn Ala Thr Tyr Pro Ser Ser Asp Val Pro Cys Asp Ala
210 215 220
Thr Leu Thr Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Met Asn Leu Asn Phe Gln
225 230 235 240
Asn Leu Ser Val Met Gly Leu Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly
245 250 255
Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265
<210> 13
<211> 307
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 13
Met Trp Gln Phe Cys Ile Leu Cys Leu Cys Val Leu Met Ala Ser Val
1 5 10 15
Ala Thr Asp Pro Thr Val Thr Leu Leu Glu Gln Asn Pro Arg Trp Arg
20 25 30
Leu Val Pro Arg Gly Gln Ala Val Asn Leu Arg Cys Ile Leu Lys Asn
35 40 45
Ser Gln Tyr Pro Trp Met Ser Trp Tyr Gln Gln Asp Leu Gln Lys Gln
50 55 60
Leu Gln Trp Leu Phe Thr Leu Arg Ser Pro Gly Asp Lys Glu Val Lys
65 70 75 80
Ser Leu Pro Gly Ala Asp Tyr Leu Ala Thr Arg Val Thr Asp Thr Glu
85 90 95
Leu Arg Leu Gln Val Ala Asn Met Ser Gln Gly Arg Thr Leu Tyr Cys
100 105 110
Thr Cys Ser Pro Leu Thr Gly Ser Tyr Glu Gln Tyr Phe Gly Pro Gly
115 120 125
Thr Arg Leu Thr Val Leu Glu Asp Leu Arg Asn Val Thr Pro Pro Lys
130 135 140
Val Ser Leu Phe Glu Pro Ser Lys Ala Glu Ile Ala Asn Lys Gln Lys
145 150 155 160
Ala Thr Leu Val Cys Leu Ala Arg Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu
165 170 175
Leu Ser Trp Trp Val Asn Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr
180 185 190
Asp Pro Gln Ala Tyr Lys Glu Ser Asn Tyr Ser Tyr Cys Leu Ser Ser
195 200 205
Arg Leu Arg Val Ser Ala Thr Phe Trp His Asn Pro Arg Asn His Phe
210 215 220
Arg Cys Gln Val Gln Phe His Gly Leu Ser Glu Glu Asp Lys Trp Pro
225 230 235 240
Glu Gly Ser Pro Lys Pro Val Thr Gln Asn Ile Ser Ala Glu Ala Trp
245 250 255
Gly Arg Ala Asp Cys Gly Ile Thr Ser Ala Ser Tyr His Gln Gly Val
260 265 270
Leu Ser Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu
275 280 285
Tyr Ala Val Leu Val Ser Gly Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Lys
290 295 300
Lys Asn Ser
305
<210> 14
<211> 264
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 14
Met Asn Arg Phe Leu Gly Ile Ser Leu Val Thr Leu Trp Phe Gln Val
1 5 10 15
Ala Trp Ala Lys Ser Gln Trp Gly Glu Glu Asn Leu Gln Ala Leu Ser
20 25 30
Ile Gln Glu Gly Glu Asp Val Thr Met Asn Cys Ser Tyr Lys Thr Tyr
35 40 45
Thr Thr Val Val Gln Trp Tyr Arg Gln Lys Ser Gly Lys Gly Pro Ala
50 55 60
Gln Leu Ile Leu Ile Arg Ser Asn Glu Arg Glu Lys Arg Ser Gly Arg
65 70 75 80
Leu Arg Ala Thr Leu Asp Thr Ser Ser Gln Ser Ser Ser Leu Ser Ile
85 90 95
Thr Gly Thr Leu Ala Thr Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys Ala Thr Asp
100 105 110
Asn Arg Ile Phe Phe Gly Asp Gly Thr Gln Leu Val Val Lys Pro Asn
115 120 125
Ile Gln Asn Pro Glu Pro Ala Val Tyr Gln Leu Lys Asp Pro Arg Ser
130 135 140
Gln Asp Ser Thr Leu Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp Ser Gln Ile Asn
145 150 155 160
Val Pro Lys Thr Met Glu Ser Gly Thr Phe Ile Thr Asp Lys Thr Val
165 170 175
Leu Asp Met Lys Ala Met Asp Ser Lys Ser Asn Gly Ala Ile Ala Trp
180 185 190
Ser Asn Gln Thr Ser Phe Thr Cys Gln Asp Ile Phe Lys Glu Thr Asn
195 200 205
Ala Thr Tyr Pro Ser Ser Asp Val Pro Cys Asp Ala Thr Leu Thr Glu
210 215 220
Lys Ser Phe Glu Thr Asp Met Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu Ser Val
225 230 235 240
Met Gly Leu Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn Leu Leu
245 250 255
Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260
<210> 15
<211> 305
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 15
Met Gly Ala Arg Leu Ile Cys Tyr Val Ala Leu Cys Leu Leu Gly Ala
1 5 10 15
Gly Ser Phe Asp Ala Ala Val Thr Gln Lys Pro Arg Tyr Leu Ile Lys
20 25 30
Met Lys Gly Gln Glu Ala Glu Met Lys Cys Ile Pro Glu Lys Gly His
35 40 45
Thr Ala Val Phe Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Ser Lys Glu Leu Lys Phe
50 55 60
Leu Ile Tyr Phe Gln Asn Gln Gln Pro Leu Asp Gln Ile Asp Met Val
65 70 75 80
Lys Glu Arg Phe Ser Ala Val Cys Pro Ser Ser Ser Leu Cys Ser Leu
85 90 95
Gly Ile Arg Thr Cys Glu Ala Glu Asp Ser Ala Leu Tyr Leu Cys Ser
100 105 110
Ser Ser Gln Ser Gly Gly Tyr Glu Gln Tyr Phe Gly Pro Gly Thr Arg
115 120 125
Leu Thr Val Leu Glu Asp Leu Arg Asn Val Thr Pro Pro Lys Val Ser
130 135 140
Leu Phe Glu Pro Ser Lys Ala Glu Ile Ala Asn Lys Gln Lys Ala Thr
145 150 155 160
Leu Val Cys Leu Ala Arg Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu Leu Ser
165 170 175
Trp Trp Val Asn Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr Asp Pro
180 185 190
Gln Ala Tyr Lys Glu Ser Asn Tyr Ser Tyr Cys Leu Ser Ser Arg Leu
195 200 205
Arg Val Ser Ala Thr Phe Trp His Asn Pro Arg Asn His Phe Arg Cys
210 215 220
Gln Val Gln Phe His Gly Leu Ser Glu Glu Asp Lys Trp Pro Glu Gly
225 230 235 240
Ser Pro Lys Pro Val Thr Gln Asn Ile Ser Ala Glu Ala Trp Gly Arg
245 250 255
Ala Asp Cys Gly Ile Thr Ser Ala Ser Tyr His Gln Gly Val Leu Ser
260 265 270
Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala
275 280 285
Val Leu Val Ser Gly Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Lys Lys Asn
290 295 300
Ser
305
<210> 16
<211> 268
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 16
Met Leu Leu Ala Leu Leu Ser Val Leu Gly Ile His Phe Leu Leu Arg
1 5 10 15
Asp Ala Gln Ala Gln Ser Val Thr Gln Pro Asp Ala Arg Val Thr Val
20 25 30
Ser Glu Gly Ala Ser Leu Gln Leu Arg Cys Lys Tyr Ser Tyr Phe Gly
35 40 45
Thr Pro Tyr Leu Phe Trp Tyr Val Gln Tyr Pro Arg Gln Gly Leu Gln
50 55 60
Leu Leu Leu Lys Tyr Tyr Pro Gly Asp Pro Val Val Gln Gly Val Asn
65 70 75 80
Gly Phe Glu Ala Glu Phe Ser Lys Ser Asn Ser Ser Phe His Leu Arg
85 90 95
Lys Ala Ser Val His Trp Ser Asp Trp Ala Val Tyr Phe Cys Ala Val
100 105 110
Ser Lys Tyr Tyr Asn Val Leu Tyr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Thr
115 120 125
Val Glu Pro Asn Ile Gln Asn Pro Glu Pro Ala Val Tyr Gln Leu Lys
130 135 140
Asp Pro Arg Ser Gln Asp Ser Thr Leu Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp
145 150 155 160
Ser Gln Ile Asn Val Pro Lys Thr Met Glu Ser Gly Thr Phe Ile Thr
165 170 175
Asp Lys Thr Val Leu Asp Met Lys Ala Met Asp Ser Lys Ser Asn Gly
180 185 190
Ala Ile Ala Trp Ser Asn Gln Thr Ser Phe Thr Cys Gln Asp Ile Phe
195 200 205
Lys Glu Thr Asn Ala Thr Tyr Pro Ser Ser Asp Val Pro Cys Asp Ala
210 215 220
Thr Leu Thr Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Met Asn Leu Asn Phe Gln
225 230 235 240
Asn Leu Ser Val Met Gly Leu Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly
245 250 255
Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265
<210> 17
<211> 305
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 17
Met Gly Ser Ile Phe Leu Ser Cys Leu Ala Val Cys Leu Leu Val Ala
1 5 10 15
Gly Pro Val Asp Pro Lys Ile Ile Gln Lys Pro Lys Tyr Leu Val Ala
20 25 30
Val Thr Gly Ser Glu Lys Ile Leu Ile Cys Glu Gln Tyr Leu Gly His
35 40 45
Asn Ala Met Tyr Trp Tyr Arg Gln Ser Ala Lys Lys Pro Leu Glu Phe
50 55 60
Met Phe Ser Tyr Ser Tyr Gln Lys Leu Met Asp Asn Gln Thr Ala Ser
65 70 75 80
Ser Arg Phe Gln Pro Gln Ser Ser Lys Lys Asn His Leu Asp Leu Gln
85 90 95
Ile Thr Ala Leu Lys Pro Asp Asp Ser Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Ser
100 105 110
Ser Gln Asp Gln Gly Gly Gln Gly Gln Tyr Phe Gly Pro Gly Thr Arg
115 120 125
Leu Thr Val Leu Glu Asp Leu Arg Asn Val Thr Pro Pro Lys Val Ser
130 135 140
Leu Phe Glu Pro Ser Lys Ala Glu Ile Ala Asn Lys Gln Lys Ala Thr
145 150 155 160
Leu Val Cys Leu Ala Arg Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu Leu Ser
165 170 175
Trp Trp Val Asn Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr Asp Pro
180 185 190
Gln Ala Tyr Lys Glu Ser Asn Tyr Ser Tyr Cys Leu Ser Ser Arg Leu
195 200 205
Arg Val Ser Ala Thr Phe Trp His Asn Pro Arg Asn His Phe Arg Cys
210 215 220
Gln Val Gln Phe His Gly Leu Ser Glu Glu Asp Lys Trp Pro Glu Gly
225 230 235 240
Ser Pro Lys Pro Val Thr Gln Asn Ile Ser Ala Glu Ala Trp Gly Arg
245 250 255
Ala Asp Cys Gly Ile Thr Ser Ala Ser Tyr His Gln Gly Val Leu Ser
260 265 270
Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala
275 280 285
Val Leu Val Ser Gly Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Lys Lys Asn
290 295 300
Ser
305
<210> 18
<211> 267
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 18
Met Asn Thr Ser Pro Ala Leu Val Thr Val Met Leu Phe Ile Leu Gly
1 5 10 15
Arg Thr His Gly Asp Ser Val Ile Gln Met Gln Gly Gln Val Thr Leu
20 25 30
Ser Glu Asn Asp Phe Leu Phe Ile Asn Cys Thr Tyr Ser Thr Thr Gly
35 40 45
Tyr Pro Thr Leu Phe Trp Tyr Val Gln Tyr Ser Gly Glu Gly Pro Gln
50 55 60
Leu Leu Leu Gln Val Thr Thr Ala Asn Asn Lys Gly Ser Ser Arg Gly
65 70 75 80
Phe Glu Ala Thr Tyr Asp Lys Gly Thr Thr Ser Phe His Leu Gln Lys
85 90 95
Thr Ser Val Gln Glu Ile Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ile Gly
100 105 110
Asn Tyr Ala Gln Gly Leu Thr Phe Gly Leu Gly Thr Arg Val Ser Val
115 120 125
Phe Pro Tyr Ile Gln Asn Pro Glu Pro Ala Val Tyr Gln Leu Lys Asp
130 135 140
Pro Arg Ser Gln Asp Ser Thr Leu Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp Ser
145 150 155 160
Gln Ile Asn Val Pro Lys Thr Met Glu Ser Gly Thr Phe Ile Thr Asp
165 170 175
Lys Thr Val Leu Asp Met Lys Ala Met Asp Ser Lys Ser Asn Gly Ala
180 185 190
Ile Ala Trp Ser Asn Gln Thr Ser Phe Thr Cys Gln Asp Ile Phe Lys
195 200 205
Glu Thr Asn Ala Thr Tyr Pro Ser Ser Asp Val Pro Cys Asp Ala Thr
210 215 220
Leu Thr Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Met Asn Leu Asn Phe Gln Asn
225 230 235 240
Leu Ser Val Met Gly Leu Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe
245 250 255
Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265
<210> 19
<211> 306
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 19
Met Gly Ser Ile Phe Leu Ser Cys Leu Ala Val Cys Leu Leu Val Ala
1 5 10 15
Gly Pro Val Asp Pro Lys Ile Ile Gln Lys Pro Lys Tyr Leu Val Ala
20 25 30
Val Thr Gly Ser Glu Lys Ile Leu Ile Cys Glu Gln Tyr Leu Gly His
35 40 45
Asn Ala Met Tyr Trp Tyr Arg Gln Ser Ala Lys Lys Pro Leu Glu Phe
50 55 60
Met Phe Ser Tyr Ser Tyr Gln Lys Leu Met Asp Asn Gln Thr Ala Ser
65 70 75 80
Ser Arg Phe Gln Pro Gln Ser Ser Lys Lys Asn His Leu Asp Leu Gln
85 90 95
Ile Thr Ala Leu Lys Pro Asp Asp Ser Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Ser
100 105 110
Ser Pro Asp Trp Gly Ala Glu Tyr Glu Gln Tyr Phe Gly Pro Gly Thr
115 120 125
Arg Leu Thr Val Leu Glu Asp Leu Arg Asn Val Thr Pro Pro Lys Val
130 135 140
Ser Leu Phe Glu Pro Ser Lys Ala Glu Ile Ala Asn Lys Gln Lys Ala
145 150 155 160
Thr Leu Val Cys Leu Ala Arg Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu Leu
165 170 175
Ser Trp Trp Val Asn Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr Asp
180 185 190
Pro Gln Ala Tyr Lys Glu Ser Asn Tyr Ser Tyr Cys Leu Ser Ser Arg
195 200 205
Leu Arg Val Ser Ala Thr Phe Trp His Asn Pro Arg Asn His Phe Arg
210 215 220
Cys Gln Val Gln Phe His Gly Leu Ser Glu Glu Asp Lys Trp Pro Glu
225 230 235 240
Gly Ser Pro Lys Pro Val Thr Gln Asn Ile Ser Ala Glu Ala Trp Gly
245 250 255
Arg Ala Asp Cys Gly Ile Thr Ser Ala Ser Tyr His Gln Gly Val Leu
260 265 270
Ser Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr
275 280 285
Ala Val Leu Val Ser Gly Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Lys Lys
290 295 300
Asn Ser
305
<210> 20
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 20
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Asp Tyr Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 21
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 21
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Asn Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Glu Glu Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Gly Phe Gly Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 22
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 22
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Tyr Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 23
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 23
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Pro Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser Trp Arg Gly Asn Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 24
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 24
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Val Ile Ser Trp Val Lys Gln Arg Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Val Leu Leu Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 25
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 25
Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly Ser Glu Leu Arg Ser Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Asp Phe Asp Ser Glu Val Phe Pro Phe
20 25 30
Ala Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Lys Pro Gly His Gly Phe Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Asp Ile Leu Pro Ser Ile Gly Arg Thr Ile Tyr Gly Glu Lys
50 55 60
Phe Glu Asp Lys Ala Thr Leu Asp Ala Asp Thr Val Ser Asn Thr Ala
65 70 75 80
Tyr Leu Glu Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Gly Glu Gly Tyr Gly Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 26
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 26
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu
100 105 110
Lys
<210> 27
<211> 106
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 27
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ser Pro Lys Leu Trp Ile Tyr
35 40 45
Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Met Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Tyr Pro Pro Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 28
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 28
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Arg Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile
35 40 45
Tyr Leu Ala Ser Asn Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Leu Gln His Trp Asn Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 29
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 29
Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Val Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Lys Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu
100 105 110
Lys
<210> 30
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 30
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn
85 90 95
Asp Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 31
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 31
Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
20 25 30
Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln
85 90 95
Ser Tyr Asn Leu Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 32
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 32
Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Val Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr His Cys Gly Gln
85 90 95
Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 33
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 33
Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Val Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Val Lys Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu
100 105 110
Lys
<210> 34
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Antibody fragment
<400> 34
Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Met Ser Met Ser Val Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Leu Thr Cys Lys Ala Ser Glu Asn Val Val Thr Tyr
20 25 30
Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Lys Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 35
<211> 251
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> mouse IgG Vh-Vl (kappa)
<400> 35
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Pro Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser Trp Arg Gly Asn Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Leu Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
130 135 140
Thr Val Thr Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln
145 150 155 160
Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln
165 170 175
Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr
180 185 190
Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr
195 200 205
Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val
210 215 220
Tyr Tyr Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly
225 230 235 240
Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ser Asp Pro Ala
245 250
<210> 36
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Linker
<400> 36
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 37
<211> 19
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Signal peptide
<400> 37
Met Asp Trp Ile Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Gly Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Ala His Ser
<210> 38
<211> 231
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human IgG1 Fc fragment
<400> 38
Glu Pro Lys Ser Pro Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
20 25 30
Asp Thr Leu Met Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
35 40 45
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
50 55 60
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
65 70 75 80
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
85 90 95
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
100 105 110
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
115 120 125
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
145 150 155 160
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
165 170 175
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
180 185 190
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
195 200 205
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
210 215 220
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225 230
<210> 39
<211> 68
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human CD28 (TM + ic)
<400> 39
Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu
1 5 10 15
Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser
20 25 30
Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly
35 40 45
Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Ala Tyr Ala Ala Ala Arg Asp Phe Ala
50 55 60
Ala Tyr Arg Ser
65
<210> 40
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> human CD3-zeta (ic)
<400> 40
Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln
1 5 10 15
Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu
20 25 30
Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly
35 40 45
Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln
50 55 60
Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu
65 70 75 80
Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr
85 90 95
Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro
100 105 110
Arg
<210> 41
<211> 686
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Artificial T cell receptor
<400> 41
Met Asp Trp Ile Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Gly Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Ala His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn
65 70 75 80
Gln Lys Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Pro Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Thr Arg Ser Trp Arg Gly Asn Ser Phe Asp Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro
145 150 155 160
Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys
165 170 175
Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr
180 185 190
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp
195 200 205
Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp
225 230 235 240
Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr Phe
245 250 255
Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ser Asp Pro Ala Glu Pro
260 265 270
Lys Ser Pro Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro
275 280 285
Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
290 295 300
Leu Met Ile Ala Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
305 310 315 320
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
325 330 335
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
340 345 350
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
355 360 365
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
370 375 380
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
385 390 395 400
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
405 410 415
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
420 425 430
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
435 440 445
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
450 455 460
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
465 470 475 480
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
485 490 495
Leu Ser Pro Gly Lys Lys Asp Pro Lys Phe Trp Val Leu Val Val Val
500 505 510
Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile
515 520 525
Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr
530 535 540
Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln
545 550 555 560
Ala Tyr Ala Ala Ala Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Leu Arg Val
565 570 575
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
580 585 590
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
595 600 605
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
610 615 620
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
625 630 635 640
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
645 650 655
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
660 665 670
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
675 680 685
<210> 42
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR sequence
<400> 42
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp
1 5
<210> 43
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR sequence
<400> 43
Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr
1 5
<210> 44
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR sequence
<400> 44
Thr Arg Ser Trp Arg Gly Asn Ser Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 45
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR sequence
<400> 45
Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 46
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR sequence
<400> 46
Trp Ala Ser
1
<210> 47
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR sequence
<400> 47
Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr
1 5
Claims (8)
- CLDN18.2에 대한 결합 도메인, 막관통 도메인, 공-자극 도메인 및 T 세포 신호전달 도메인을 포함하는, 인공 T 세포 수용체로서,
상기 CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 23으로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 VH(CLDN18.2) 및 서열번호 30으로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 VL(CLDN18.2)을 포함하고,
상기 VH 및 VL은 공유결합되어 있는, 인공 T 세포 수용체. - 제1항에 있어서,
상기 CLDN18.2에 대한 결합 도메인은 서열번호 35로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는, 인공 T 세포 수용체. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
NH2-신호 펩티드-CLDN18.2에 대한 결합 도메인-스페이서 영역-막관통 도메인-T 세포 신호전달 도메인-COOH 구조를 포함하는, 인공 T 세포 수용체. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
서열번호 41에 따른 아미노산 서열을 포함하는, 인공 T 세포 수용체. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 한의 인공 T 세포 수용체를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 핵산.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 한의 인공 T 세포 수용체를 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 조성물.
- 제4항의 인공 T 세포 수용체를 포함하고/하거나, 인공 T 세포를 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 분리된 세포.
- (i) 제5항의 핵산;
(ii) 제7항의 세포;
(iii) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 인공 T 세포 수용체; 또는
(iv) 제6항의 조성물;
을 포함하는, 암 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/EP2015/060357 WO2016180468A1 (en) | 2015-05-11 | 2015-05-11 | Claudin-18.2-specific immunoreceptors and t cell epitopes |
EPPCT/EP2015/060357 | 2015-05-11 | ||
KR1020177032586A KR102409948B1 (ko) | 2015-05-11 | 2016-05-09 | 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 |
PCT/EP2016/060337 WO2016180782A1 (en) | 2015-05-11 | 2016-05-09 | Claudin-18.2-specific immunoreceptors and t cell epitopes |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020177032586A Division KR102409948B1 (ko) | 2015-05-11 | 2016-05-09 | 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20220084208A true KR20220084208A (ko) | 2022-06-21 |
Family
ID=53181285
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020177032586A KR102409948B1 (ko) | 2015-05-11 | 2016-05-09 | 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 |
KR1020227019981A KR20220084208A (ko) | 2015-05-11 | 2016-05-09 | 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020177032586A KR102409948B1 (ko) | 2015-05-11 | 2016-05-09 | 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11713346B2 (ko) |
EP (3) | EP4082565A1 (ko) |
JP (3) | JP6942059B2 (ko) |
KR (2) | KR102409948B1 (ko) |
CN (2) | CN115109141A (ko) |
AU (2) | AU2016259730B2 (ko) |
BR (1) | BR112017020894A2 (ko) |
CA (1) | CA2982422C (ko) |
DK (2) | DK3795177T3 (ko) |
ES (2) | ES2921801T3 (ko) |
HK (2) | HK1247815A1 (ko) |
HR (1) | HRP20220799T1 (ko) |
HU (2) | HUE052961T2 (ko) |
LT (1) | LT3795177T (ko) |
MX (2) | MX2017014193A (ko) |
PL (2) | PL3294333T3 (ko) |
PT (2) | PT3294333T (ko) |
RS (1) | RS63380B1 (ko) |
SI (2) | SI3294333T1 (ko) |
WO (2) | WO2016180468A1 (ko) |
Families Citing this family (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105315375B (zh) | 2014-07-17 | 2021-04-23 | 恺兴生命科技(上海)有限公司 | 靶向cld18a2的t淋巴细胞及其制备方法和应用 |
WO2016180468A1 (en) | 2015-05-11 | 2016-11-17 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Claudin-18.2-specific immunoreceptors and t cell epitopes |
CN116874608A (zh) * | 2017-03-27 | 2023-10-13 | 诺伊尓免疫生物科技株式会社 | 嵌合抗原受体 |
MX2020008390A (es) * | 2018-02-11 | 2020-12-07 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Receptores de linfocitos t no restringidos a antígenos leucocitarios humanos (hla) y usos de los mismos. |
EP3762031A4 (en) * | 2018-03-08 | 2021-12-22 | Phanes Therapeutics, Inc. | ANTI-CLAUDINE ANTIBODIES 18.2 AND THEIR USES |
CN111989344A (zh) * | 2018-03-09 | 2020-11-24 | 科济生物医药(上海)有限公司 | 用于治疗肿瘤的方法和组合物 |
KR102340989B1 (ko) * | 2018-03-28 | 2021-12-20 | 에이비온 주식회사 | 클라우딘 3의 ecl-2에 특이적으로 결합하는 항체, 이의 단편 및 이들의 용도 |
WO2019242505A1 (zh) * | 2018-06-17 | 2019-12-26 | 上海健信生物医药科技有限公司 | 靶向cldn18.2的抗体、双特异性抗体、adc和car及其应用 |
WO2020038404A1 (zh) * | 2018-08-22 | 2020-02-27 | 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 | 抗人claudin 18.2单克隆抗体及其应用 |
CN110862454B (zh) * | 2018-08-27 | 2022-12-30 | 南京圣和药业股份有限公司 | 一种抗Claudin18_2抗体及其应用 |
EP3844499A1 (en) * | 2018-08-31 | 2021-07-07 | Invectys Sa | Method to assess car functionality |
MX2021004588A (es) * | 2018-10-22 | 2022-01-18 | Shanghai Genbase Biotechnology Co Ltd | Anticuerpo anti-cldn18.2 y sus usos. |
TW202029971A (zh) * | 2018-10-24 | 2020-08-16 | 美國衛生與公眾服務部 | 針對突變ras之hla-a3–限制性t細胞受體 |
JP2022515487A (ja) * | 2018-12-28 | 2022-02-18 | ナンジン、ジェンスクリプト、バイオテック、カンパニー、リミテッド | クローディン18.2結合部分およびその利用 |
EP3909590A4 (en) * | 2019-01-07 | 2022-11-16 | CRAGE medical Co., Limited | ASSOCIATION FOR CELLULAR IMMUNOTHERAPY |
CN114106183B (zh) | 2019-01-15 | 2023-06-23 | 浙江道尔生物科技有限公司 | 抗cld18a2纳米抗体及其应用 |
CN109762067B (zh) * | 2019-01-17 | 2020-02-28 | 北京天广实生物技术股份有限公司 | 结合人Claudin 18.2的抗体及其用途 |
WO2020205331A1 (en) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | Phanes Therapeutics, Inc. | Humanized anti-claudin 18.2 chimeric antigen receptors and uses thereof |
AU2020281380B2 (en) * | 2019-05-30 | 2024-04-11 | Shandong Boan Biotechnology Co., Ltd. | Antibody or chimeric antigen receptor which targets claudin 18.2 |
CN114026125B (zh) * | 2019-07-12 | 2022-09-20 | 明济生物制药(北京)有限公司 | Cldn18.2抗体及其用途 |
AU2020332585A1 (en) * | 2019-08-20 | 2022-02-17 | Suzhou Transcenta Therapeutics Co., Ltd. | Novel anti-CLDN18.2 antibodies |
CN114981303B (zh) * | 2019-09-13 | 2024-01-23 | 安徽俊义医疗管理咨询有限公司 | 人源化抗Claudin18.2(CLDN18.2)抗体 |
CA3184008A1 (en) * | 2020-05-25 | 2021-12-02 | Suzhou Transcenta Therapeutics Co., Ltd. | Anti-cldn18.2 antibodies and diagnostic uses thereof |
CN114222761B (zh) * | 2020-07-14 | 2024-02-20 | 浙江道尔生物科技有限公司 | 一种抗cld18a2的单域抗体 |
CN117229398A (zh) * | 2022-06-15 | 2023-12-15 | 中山康方生物医药有限公司 | 抗cldn18.2抗体、其药物组合物及用途 |
CN116751302B (zh) * | 2023-08-03 | 2023-11-10 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 靶向Claudin18.2的抗体、衍生产品及其在肿瘤治疗中的应用 |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5677139A (en) | 1995-04-21 | 1997-10-14 | President And Fellows Of Harvard College | In vitro differentiation of CD34+ progenitor cells into T lymphocytes |
EP0871747A1 (en) | 1996-01-02 | 1998-10-21 | Chiron Viagene, Inc. | Immunostimulation mediated by gene-modified dendritic cells |
US7754208B2 (en) | 2001-01-17 | 2010-07-13 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
US20030133939A1 (en) | 2001-01-17 | 2003-07-17 | Genecraft, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
DE102004024617A1 (de) * | 2004-05-18 | 2005-12-29 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Differentiell in Tumoren exprimierte Genprodukte und deren Verwendung |
BRPI0511782B8 (pt) * | 2004-06-03 | 2021-05-25 | Novimmune Sa | anticorpos anti-cd3, uso e método de produção dos mesmos, composição farmacêutica, molécula de ácido nucleico isolada e vetor |
EP1790664A1 (en) * | 2005-11-24 | 2007-05-30 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Monoclonal antibodies against claudin-18 for treatment of cancer |
JPWO2008146672A1 (ja) * | 2007-05-23 | 2010-08-19 | 三菱電機株式会社 | エスカレータ用照明兼搭乗者転倒検知システム、エスカレータ用照明兼省エネルギー向け搭乗者有無検知システム及びエスカレータ用照明兼搭乗者利用状況検知システム |
EP1997832A1 (en) * | 2007-05-29 | 2008-12-03 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Monoclonal antibodies against Claudin-18 for treatment of cancer |
EP2547695B1 (en) | 2010-03-16 | 2018-05-09 | Biontech Protein Therapeutics GmbH | Tumor vaccination involving a humoral immune response against self-protein cldn18.2 |
EP3590530B1 (en) * | 2010-09-20 | 2021-12-29 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Antigen-specific t cell receptors and t cell epitopes |
JP6053688B2 (ja) | 2011-10-07 | 2016-12-27 | 国立大学法人三重大学 | キメラ抗原受容体 |
WO2013167153A1 (en) * | 2012-05-09 | 2013-11-14 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Antibodies useful in cancer diagnosis |
WO2013174403A1 (en) * | 2012-05-23 | 2013-11-28 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 for treatment of cancer |
MX369276B (es) | 2012-11-13 | 2019-11-04 | Biontech Ag | Agentes para tratamiento de enfermedades cancerosas que expresan claudina. |
WO2014146672A1 (en) * | 2013-03-18 | 2014-09-25 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Therapy involving antibodies against claudin 18.2 for treatment of cancer |
US10808035B2 (en) * | 2013-08-26 | 2020-10-20 | Markus Chmielewski | Anti CD30 chimeric antigen receptor and its use |
WO2015113576A1 (en) | 2014-01-29 | 2015-08-06 | Biontech Ag | Peptide mimotopes of claudin 18.2 and uses thereof |
AU2015239683B2 (en) * | 2014-04-01 | 2019-08-22 | Astellas Pharma Inc. | Claudin-6-Specific immunoreceptors and T cell epitopes |
CN105315375B (zh) * | 2014-07-17 | 2021-04-23 | 恺兴生命科技(上海)有限公司 | 靶向cld18a2的t淋巴细胞及其制备方法和应用 |
WO2016123143A1 (en) * | 2015-01-26 | 2016-08-04 | The University Of Chicago | CAR T-CELLS RECOGNIZING CANCER-SPECIFIC IL 13Rα2 |
WO2016180468A1 (en) | 2015-05-11 | 2016-11-17 | Biontech Cell & Gene Therapies Gmbh | Claudin-18.2-specific immunoreceptors and t cell epitopes |
-
2015
- 2015-05-11 WO PCT/EP2015/060357 patent/WO2016180468A1/en active Application Filing
-
2016
- 2016-05-09 PT PT167211762T patent/PT3294333T/pt unknown
- 2016-05-09 SI SI201630989T patent/SI3294333T1/sl unknown
- 2016-05-09 US US15/572,919 patent/US11713346B2/en active Active
- 2016-05-09 PL PL16721176T patent/PL3294333T3/pl unknown
- 2016-05-09 CA CA2982422A patent/CA2982422C/en active Active
- 2016-05-09 ES ES20193185T patent/ES2921801T3/es active Active
- 2016-05-09 WO PCT/EP2016/060337 patent/WO2016180782A1/en active Application Filing
- 2016-05-09 KR KR1020177032586A patent/KR102409948B1/ko active IP Right Grant
- 2016-05-09 HR HRP20220799TT patent/HRP20220799T1/hr unknown
- 2016-05-09 DK DK20193185.4T patent/DK3795177T3/da active
- 2016-05-09 AU AU2016259730A patent/AU2016259730B2/en active Active
- 2016-05-09 ES ES16721176T patent/ES2835269T3/es active Active
- 2016-05-09 SI SI201631558T patent/SI3795177T1/sl unknown
- 2016-05-09 EP EP22166898.1A patent/EP4082565A1/en active Pending
- 2016-05-09 PL PL20193185.4T patent/PL3795177T3/pl unknown
- 2016-05-09 PT PT201931854T patent/PT3795177T/pt unknown
- 2016-05-09 EP EP20193185.4A patent/EP3795177B1/en active Active
- 2016-05-09 JP JP2017559059A patent/JP6942059B2/ja active Active
- 2016-05-09 EP EP16721176.2A patent/EP3294333B1/en active Active
- 2016-05-09 HU HUE16721176A patent/HUE052961T2/hu unknown
- 2016-05-09 HU HUE20193185A patent/HUE059282T2/hu unknown
- 2016-05-09 RS RS20220633A patent/RS63380B1/sr unknown
- 2016-05-09 KR KR1020227019981A patent/KR20220084208A/ko not_active Application Discontinuation
- 2016-05-09 CN CN202210717626.9A patent/CN115109141A/zh active Pending
- 2016-05-09 MX MX2017014193A patent/MX2017014193A/es unknown
- 2016-05-09 CN CN201680027048.9A patent/CN107960056B/zh active Active
- 2016-05-09 DK DK16721176.2T patent/DK3294333T3/da active
- 2016-05-09 LT LTEP20193185.4T patent/LT3795177T/lt unknown
- 2016-05-09 BR BR112017020894A patent/BR112017020894A2/pt active Search and Examination
-
2017
- 2017-11-06 MX MX2022000132A patent/MX2022000132A/es unknown
-
2018
- 2018-05-31 HK HK18107192.1A patent/HK1247815A1/zh unknown
- 2018-07-26 HK HK18109692.2A patent/HK1250331A1/zh unknown
-
2020
- 2020-10-22 AU AU2020257113A patent/AU2020257113B2/en active Active
-
2021
- 2021-06-01 JP JP2021092285A patent/JP7194230B2/ja active Active
-
2022
- 2022-12-09 JP JP2022196889A patent/JP2023039980A/ja active Pending
-
2023
- 2023-06-13 US US18/333,942 patent/US20230303656A1/en active Pending
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR102409948B1 (ko) | 클라우딘-18.2-특이적 면역수용체 및 t 세포 에피토프 | |
JP7451858B2 (ja) | クローディン6特異的免疫受容体およびt細胞エピトープ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A107 | Divisional application of patent | ||
E902 | Notification of reason for refusal |