KR20220054289A - 다방향 생물수송을 위한 재료 및 방법 - Google Patents

다방향 생물수송을 위한 재료 및 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20220054289A
KR20220054289A KR1020227003585A KR20227003585A KR20220054289A KR 20220054289 A KR20220054289 A KR 20220054289A KR 1020227003585 A KR1020227003585 A KR 1020227003585A KR 20227003585 A KR20227003585 A KR 20227003585A KR 20220054289 A KR20220054289 A KR 20220054289A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
seq
sequence
cdr1
cdr2
single domain
Prior art date
Application number
KR1020227003585A
Other languages
English (en)
Inventor
라즈쿠마르 가네산
바라티쿠마르 벨랄로어 마루타찰람
아담 지월락
브라이언 게이스트
시에판 린-슈미트
사티아데비 벤카타라마니
산자야 싱
Original Assignee
얀센 바이오테크 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=74502941&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR20220054289(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 얀센 바이오테크 인코포레이티드 filed Critical 얀센 바이오테크 인코포레이티드
Publication of KR20220054289A publication Critical patent/KR20220054289A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against Fc-receptors, e.g. CD16, CD32, CD64
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6847—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a hormone or a hormone-releasing or -inhibiting factor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A61K2039/544—Mucosal route to the airways
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/22—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from camelids, e.g. camel, llama or dromedary
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 단일 도메인 항체 또는 치료 분자를 전달하기 위한 방법으로서, pIgR-발현 세포를 단일 도메인 항체 또는 치료 분자와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합하고 치료 분자는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 방법이 기재된다. 그러한 치료 분자를 대상의 전신 순환 또는 고유층 또는 위장관으로 수송하기 위한 방법으로서, 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 치료 분자를 투여하는 단계를 포함하는 방법이 또한 기재된다.

Description

다방향 생물수송을 위한 재료 및 방법
관련 출원과의 상호 참조
본 출원은 2019년 11월 25일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/940,232호, 2019년 11월 25일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/940,228호, 2019년 11월 25일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/940,220호, 2019년 11월 25일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/940,208호, 2019년 11월 25일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/940,206호, 2019년 11월 25일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/940,200호, 2019년 11월 25일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/940,196호, 2019년 8월 2일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/882,387호, 2019년 8월 2일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/882,361호, 2019년 8월 2일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/882,346호, 및 2019년 8월 2일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/882,291호의 이익을 주장하며, 이들 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
서열 목록
본 출원은 크기가 169,502 바이트인, 2020년 7월 28일자로 생성된, 명칭이 "14620-204-228_SL.txt"인 텍스트 형식으로서 본 출원과 함께 제출된 서열 목록을 참고로 포함한다.
기술분야
본 명세서에는, 중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)-발현 세포의 정점 표면(apical surface)으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면(basolateral surface)으로 제제를 수송하는 단계에 의한 것을 포함하여, 제제(예를 들어, 치료제)를 전달하기 위한 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인) 및 이의 용도가 제공된다.
생물학적 제제는 만성 질환을 포함하는 다수의 질환, 장애, 및 병태, 및 다양한 충족되지 않은 의학적 요구를 해결하기 위한 가능성이 증가함에 따라 약제학 분야에서 구동력이 되어 왔다. 실제로, 개발 중인 생물학적 제제의 수는, 특히 암 및 암 관련 병태, 희귀 질환, 신경학적 장애, 및 자가면역 장애를 포함하는 면역학적 또는 염증성 질환, 장애, 및 병태의 치료 분야에서 지수적으로 계속 증가한다.
그러나, 생물학적 제제의 전달은 부분적으로 이들의 분자량 및 복잡성으로 인해 난제이다. 합성된 소분자 약물의 분자량은 수백 내지 아마도 수천 달톤(Da)의 범위이지만, 생물학적 제제의 분자량은 150,000 Da 이상에 달할 수 있다. 이들의 비교적 큰 크기는 점막 상피 장벽을 통한 수송을 포함하여 상피를 가로지르는 이들의 수송을 제한하며, 생물학적 제제가 점막에 도달하고 이를 통과함에 있어서 수송 난제가 존재한다. 결과적으로, 가장 보편적인 투여 방식은 비용이 많이 드는 진료 환경에서 보건 전문가의 서비스를 빈번하게 필요로 하는 침습적 투여이다. 따라서, 특히 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달과 같은 덜 침습적이거나 비-침습적인 경로를 통한 생물학적 제제를 위한 효과적인 약물 투여 방법에 대한 필요성이 당업계에 존재한다.
일 태양에서 본 명세서에는, 중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 전달하기 위한 방법으로서, pIgR-발현 세포를 (i) pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체, 또는 (ii) 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자와 접촉시키는 단계를 포함하는 방법이 제공된다.
다른 태양에서 본 명세서에는, 대상의 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 치료 분자를 수송하는 방법으로서, 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다. 일부 실시 형태에서, 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 일부 실시 형태에서, 치료제는 대상에서 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 수송된다.
다른 태양에서 본 명세서에는, 치료 분자를 대상의 전신 순환으로 수송하는 방법으로서, 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는 방법이 제공된다. 일부 실시 형태에서, 치료제는 대상에서 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 수송된다.
또 다른 태양에서 본 명세서에는, 치료 분자를 대상의 고유층(lamina propria) 또는 위장관으로 수송하는 방법으로서, 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는 방법이 제공된다. 일부 실시 형태에서, 치료제는 대상에서 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 수송된다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체 또는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자는 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로 수송될 수 있다.
일부 실시 형태에서, pIgR-발현 세포는 상피 세포이다. 일부 실시 형태에서, 상피 세포는 장 내강 세포 또는 기도 상피 세포이다.
일부 실시 형태에서, 제제는 당뇨병 약제이다. 일부 실시 형태에서, 당뇨병 약제는 인슐린, 글루카곤-유사-펩티드-1, 인슐린-모방 펩티드, 및 글루카곤-유사-펩티드-1-모방 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시 형태에서, 제제는 펩티드 또는 항체 또는 이의 단편이다. 일부 실시 형태에서, 항체 또는 이의 단편은 항-TNF-알파 항체 또는 이의 단편, 항-IL23 항체 또는 이의 단편, 및 IL23의 수용체에 결합하는 항체 또는 이의 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시 형태에서, 제제는 백신이다. 일부 실시 형태에서, 백신은 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이로 이루어진 군으로부터 선택된 감염을 예방하기 위한 것이다.
다른 태양에서 본 명세서에는, 분자를 대상에게 제공하기 위한 공정으로서, 제제 및 중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는 공정이 제공된다.
일부 실시 형태에서, 분자는 대상에서 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 제공될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 분자는 대상에서 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로 제공될 수 있다.
일부 실시 형태에서, pIgR-발현 세포는 상피 세포이다. 일부 실시 형태에서, 상피 세포는 장 내강 세포 또는 기도 상피 세포이다.
일부 실시 형태에서, 제제는 당뇨병 약제이다. 일부 실시 형태에서, 당뇨병 약제는 인슐린, 글루카곤-유사-펩티드-1, 인슐린-모방 펩티드, 및 글루카곤-유사-펩티드-1-모방 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시 형태에서, 제제는 펩티드 또는 항체 또는 이의 단편이다. 일부 실시 형태에서, 항체 또는 이의 단편은 항-TNF-알파 항체 또는 이의 단편, 항-IL23 항체 또는 이의 단편, 및 IL23의 수용체에 결합하는 항체 또는 이의 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시 형태에서, 제제는 백신이다. 일부 실시 형태에서, 백신은 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이로 이루어진 군으로부터 선택된 감염을 예방하기 위한 것이다.
다른 태양에서 본 명세서에는, 대상에게 분자를 제공하기 위한 단계를 포함하는 공정이 제공된다.
일부 실시 형태에서, 분자는 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 제제는 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 백신, 소분자, 폴리뉴클레오티드, 방사성 동위원소, 독소, 효소, 항응고제, 호르몬, 사이토카인, 항-염증성 분자, RNAi, 항생제, 또는 항체-항생제 접합체이다.
일부 실시 형태에서, 제제는 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 또는 백신이다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합된다.
일 태양에서 본 명세서에는, 분자를 대상의 고유층 또는 위장관에 제공하기 위한 시스템으로서, 대상에게 투여하기에 적합한 분자를 포함하며, 분자는 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하고, 여기서 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달 또는 흡입 전달, 또는 이들의 조합을 통해 대상에게 투여되는 시스템이 제공된다.
일부 실시 형태에서, 제제는 당뇨병 약제이다. 일부 실시 형태에서, 당뇨병 약제는 인슐린, 글루카곤-유사-펩티드-1, 인슐린-모방 펩티드, 및 글루카곤-유사-펩티드-1-모방 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시 형태에서, 제제는 펩티드 또는 항체 또는 이의 단편이다. 일부 실시 형태에서, 항체 또는 이의 단편은 항-TNF-알파 항체 또는 이의 단편, 항-IL23 항체 또는 이의 단편, 및 IL23의 수용체에 결합하는 항체 또는 이의 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 실시 형태에서, 제제는 백신이다. 일부 실시 형태에서, 백신은 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이로 이루어진 군으로부터 선택된 감염을 예방하기 위한 것이다.
다른 태양에서 본 명세서에는, 대상의 고유층 또는 위장관에 분자를 제공하기 위한 수단을 포함하는 시스템이 제공된다.
일부 실시 형태에서, 분자는 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 제제는 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 백신, 소분자, 폴리뉴클레오티드, 방사성 동위원소, 독소, 효소, 항응고제, 호르몬, 사이토카인, 항-염증성 분자, RNAi, 항생제, 또는 항체-항생제 접합체이다.
일부 실시 형태에서, 제제는 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 또는 백신이다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합된다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 1, 세포외 도메인 2, 세포외 도메인 1-2, 세포외 도메인 3, 세포외 도메인 2-3, 세포외 도메인 4-5, 또는 세포외 도메인 5에 결합한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 1에 결합한다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 2에 결합한다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 1-2에 결합한다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 3에 결합한다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 2-3에 결합한다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 4-5에 결합한다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR의 세포외 도메인 5에 결합한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR에 대한 IgA 결합과 경쟁한다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 pIgR에 대한 IgA 결합을 촉진한다.
일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD는 약 4 내지 약 525 nM이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD는 약 50 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD는 약 4 내지 약 34 nM이다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체의 Tm은 약 53 내지 약 77℃이다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체의 Tm은 53.9 내지 76.4℃이다.
일부 실시 형태에서, pIgR은 인간 pIgR이다. 다른 실시 형태에서, pIgR은 마우스 pIgR이다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 인간 pIgR의 줄기 서열(stalk sequence)(예를 들어, 서열 번호 143) 및/또는 마우스 pIgR의 줄기 서열(예를 들어, 서열 번호 144 또는 서열 번호 145)에 결합하지 않는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61), DVFGSSGYVETY(서열 번호 62), PLTAR(서열 번호 63), DPFNQGY(서열 번호 64), PLTSR(서열 번호 65), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71), SIDLNWYGGMD(서열 번호 272), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72), TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273), DVFGSSGYVETY(서열 번호 73), VFGSSGYVET(서열 번호 274), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), DPFNQGY(서열 번호 75), PFNQG(서열 번호 276), PLTSR(서열 번호 76), LTS(서열 번호 277), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82), AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283), CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83), AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284), KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84), NHPLTAR(서열 번호 85), AADPFNQGY(서열 번호 86), NHPLTSR(서열 번호 87), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215), DVFGSSGYVETY(서열 번호 216), PLTAR(서열 번호 217), DPFNQGY(서열 번호 218), PLTSR(서열 번호 219), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225), AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226), KADVFGSSGYVET(서열 번호 227), NHPLTA(서열 번호 228), AADPFNQG(서열 번호 229), NHPLTS(서열 번호 230), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237), DVFGSSGYVETY(서열 번호 238), PLTAR(서열 번호 239), DPFNQGY(서열 번호 240), PLTSR(서열 번호 241), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DWNGRGTYY(서열 번호 40), WNGRGTY(서열 번호 260), NGGGI(서열 번호 41), GGG(서열 번호 261), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TWNGGT(서열 번호 43), WNGG(서열 번호 263), SGGGT(서열 번호 44), GGG(서열 번호 264), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDWNGRGTYY(서열 번호 50), IDWNGRGTYYR(서열 번호 270), INGGGIT(서열 번호 51), IDRIATT(서열 번호 52), ITWNGGTT(서열 번호 53), ISGGGTT(서열 번호 54), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194), LVARINGGGITH(서열 번호 195), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197), WVAFISGGGTTT(서열 번호 198), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204), RINGGGITH(서열 번호 205), FIDRIATTT(서열 번호 206), AITWNGGTTY(서열 번호 207), FISGGGTTT(서열 번호 208), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), 또는 SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 SYRMG(서열 번호 1), INVMG(서열 번호 2), SNAMG(서열 번호 3), SYAMG(서열 번호 4), SDAMG(서열 번호 5), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GLTFSSY(서열 번호 10), GSIFSIN(서열 번호 11), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), GSSVSSD(서열 번호 14), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GLTFSSYR(서열 번호 20), GSIFSINV(서열 번호 21), GTSVSSNA(서열 번호 22), GRTFSSYA(서열 번호 23), GSSVSSDA(서열 번호 24), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GLTFSSYRMG(서열 번호 154), GSIFSINVMG(서열 번호 155), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), GRTFSSYAMG(서열 번호 157), GSSVSSDAMG(서열 번호 158), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSYRMG(서열 번호 164), SINVMG(서열 번호 165), SSNAMG(서열 번호 166), SSYAMG(서열 번호 167), SSDAMG(서열 번호 168), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GLTFSSYRMG(서열 번호 174), GSIFSINVMG(서열 번호 175), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), GRTFSSYAMG(서열 번호 177), GSSVSSDAMG(서열 번호 178), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다:
a) VHH1:
i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60)의 CDR3 서열;
ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71) 또는 SIDLNWYGGMD(서열 번호 272)의 CDR3 서열;
iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82) 또는 AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283)의 CDR3 서열;
iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR 2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214)의 CDR3 서열;
v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225)의 CDR3 서열; 또는
vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236)의 CDR3 서열;
b) VHH2:
i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열;
ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열;
iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열;
iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열;
v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열; 또는
vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열;
c) VHH3:
i) INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열;
ii) GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열;
iii) GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열;
iv) GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열;
v) SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열; 또는
vi) GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열;
d) VHH4:
i) SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열;
ii) GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열;
iii) GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열, 및 NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열;
iv) GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열;
v) SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열, 및 NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열; 또는
vi) GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열;
e) VHH5:
i) SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열;
ii) GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열;
iii) GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열;
iv) GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열;
v) SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열;
f) VHH6:
i) SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열;
ii) GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열;
iii) GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열, 및 NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열;
iv) GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열;
v) SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열, 및 NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열; 또는
vi) GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열;
g) VHH7:
i) INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열;
ii) RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열;
iii) RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열;
iv) RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열;
v) SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열; 또는
vi) RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열;
h) VHH9:
i) TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열;
ii) GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열;
iii) GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열, 및 NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열;
iv) GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열;
v) STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열, 및 NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열;
i) VHH10:
i) RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열;
ii) GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열, SWSGSS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열;
iii) GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열;
iv) GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열;
v) TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열; 또는
vi) GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열;
j) VHH11:
i) FTTYRMG(서열 번호 258) 또는 TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열;
ii) GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열;
iii) GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열;
iv) GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열;
v) TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열; 및
k) VHH12:
i) FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열;
ii) GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열;
iii) GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열;
iv) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열;
v) SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열을 포함하는 단일 도메인 항체 중 임의의 것의 프레임워크로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열을 포함하는 프레임워크를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열로 구성된다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합된다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 단일 도메인 항체와 제제 사이에 링커를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 링커는 폴리펩티드이다. 일부 실시 형태에서, 링커는 EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130), (EAAAK)n(서열 번호 147), (GGGGS)n(서열 번호 148), 및 (GGGS)n(서열 번호 149)으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 가요성 링커이며, 여기서 n은 1 내지 20의 정수이다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 제제에 화학적으로 접합된다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 제제에 비공유 결합된다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 방법은 IgA의 pIgR-매개 세포통과(transcytosis)를 억제하지 않는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 SNAMG(서열 번호 3), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GTSVSSNA(서열 번호 22), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSNAMG(서열 번호 166), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDRIATT(서열 번호 52), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), FIDRIATTT(서열 번호 206), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), 또는 SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 PLTAR(서열 번호 63), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), NHPLTAR(서열 번호 85), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), PLTAR(서열 번호 217), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), NHPLTA(서열 번호 228), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), PLTAR(서열 번호 239), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함한다.
본 특허 또는 출원 파일은 컬러로 작성된 적어도 하나의 도면을 포함한다. 컬러 도면(들)을 가진 본 특허 또는 특허 출원 공개의 사본은 신청 및 필요한 수수료의 지불 시에 관청에 의해 제공될 것이다.
도 1a 및 도 1b는 pIgR-매개 양방향 세포통과의 경로를 나타내는 개략도이다. 도 1a는 pIgR 엑토도메인의 분비 성분(도메인 1 내지 5)에 결합하는 분자, 예컨대 이량체성 IgA(천연 리간드) 또는 VHH(인공 pIgR 리간드)가 상피 세포를 기저측으로부터 정점 방향으로 세포통과하고 혈액으로부터 점막 내강에 도달할 수 있음을 나타낸다. 이러한 분비 성분-매개 정방향 수송은 전신 순환으로부터 점막 내강으로 분자를 전달하기 위해 사용될 수 있다. 본 명세서에는 분비 성분에 결합하고 및 상피의 기저측으로부터 정점 측면으로 세포통과하는 VHH 분자가 기재되어 있다. 도 1b는 pIgR 엑토도메인의 줄기 영역에 결합하는 분자(임의의 인공 리간드)가 상피 세포를 정점으로부터 기저측 방향으로 세포통과하고 점막 내강으로부터 혈액에 도달할 수 있음을 나타낸다. 이러한 줄기-매개 역방향 수송은 경구 섭취 후에 전신 순환으로 분자를 전달하기 위해 사용될 수 있다.
도 2는 pIgR 결합제의 에피토프 맵핑에 대한 데이터를 예시한다. 9개의 HIS-태깅된 pIgR 작제물(D1, D2, D3, D4, D5, D1-D2, D2-D3, D3-D4, 및 D4-D5)을 발현시키고 고정된 금속 이온 친화성 크로마토그래피를 사용하여 HEK293 세포로부터 정제하였다. 2개의 작제물(D4 및 D3-D4)의 경우에 발현 및 정제 수율이 매우 낮았기 때문에, 이들은 결합 연구에 사용되지 않았다. 도 2의 열 지도는 고정된 pIgR 작제물에 대한 VHH-모노-Fc 분자의 결합을 전기화학발광 단위로 나타낸다. 모든 양성 상호작용에 대한 KD 값은 생물층 간섭계에 의해 측정되었다. 도 2의 열 지도는 VHH2 및 VHH3의 에피토프가 주로 hpIgR 도메인-1 내에 함유되고, VHH4 및 VHH6의 에피토프가 주로 hpIgR 도메인-2 내에 함유되고, 다른 6개의 VHH의 에피토프가 주로 hpIgR 도메인 4-5에 함유됨을 나타낸다.
도 3a 및 도 3b는 hpIgR-ECD에 대한 IgA 결합에 대한 VHH의 효과에 대한 데이터를 예시한다. 도 3a는 dIgA2의 부재(청색) 및 존재(적색) 하에 고정된 VHH-모노-Fc에 대한 전장 hpIgR ECD 결합에 대한 KD 값을 나타낸다. 도 3b는 VHH-모노-Fc 분자의 존재 또는 부재 하에 hpIgR 엑토도메인에 대한 고정된 dIgA2 결합에 대한 KD 값을 나타낸다. 아민-반응성 바이오센서를 사용하여 dIgA2를 고정시키고, pIgR 및 pIgR-VHH 복합체의 결합을 생물층 간섭계에 의해 측정하였다. 3개의 분자(VHH2, VHH3, 및 VHH5)가 pIgR에 대한 IgA 결합에 대해 음성 효과를 가졌다. 다른 VHH 분자는 pIgR에 대한 IgA 결합에 대해 작은 양성 효과를 나타낸다.
도 4는 VHH-모노-Fc 분자의 세포통과 활성에 대한 검정의 결과를 도시한다. 상단 패널은 VHH 세포통과를 검정하기 위해 사용되는 EpiAirway 1차 인간 폐 조직 모델의 개략도이다. meso-scale discovery(MSD) 검정은 세포통과 전 및 후에 기저측 및 정점 챔버 내에 존재하는 VHH의 양을 정량화하기 위해 개발되었다. 비오티닐화된 항-VHH 항체를 사용하여 스트렙타비딘 플레이트 상의 VHH-모노-Fc 분자를 포획하고 루테닐화된 항-인간-Fc 항체를 검출 항체로서 사용하였다. 하단 패널은 VHH 처리 후 24 시간에 정점 점액 중에 존재하는 VHH의 양을 나타내는 그래프이다. 5개의 VHH 분자(VHH2, VHH6, VHH9, VHH11, 및 VHH12)가 대조군 VHH 분자(VHH1, VHH13, 및 VHH14)에 비해 이들의 점막 양의 20-배 초과의 증가를 나타냈다.
도 5는 1차 인간 폐 조직 모델에 걸쳐 pIgR 및 VHH를 추적하는 단계를 나타내는 데이터를 예시한다. 도 5의 좌측 패널은 세포통과 후에 EpiAirway 1차 인간 폐 조직 모델 상에 유지된 pIgR의 양을 나타내는 열지도이다. 도 5의 우측 패널은 세포통과 후에 EpiAirway 1차 인간 폐 조직 모델 상에 유지된 VHH의 양을 나타내는 열지도이다. 처리 후 48시간에, 조직 샘플을 고정시키고, 투과화하고, hpIgR 및 VHH에 대해 염색하였다. 조직 모델에 걸쳐 유지된 pIgR 및 VHH의 양을 Opera Phenix 공초점 레이저 현미경법을 사용하여 간접 면역형광에 의해 정량화하였다. 도 5는 VHH가 조직 깊이 치수에 걸쳐 pIgR 및 VHH 분포의 별개의 프로파일을 나타냈음을 나타낸다. 도 5는 또한 강력한 세포통과를 나타낸 5개의 VHH 중에서, VHH2, VHH9, 및 VHH12-처리된 조직 모델이 정점 표면 부근에서 다른 VHH보다 더 높은 VHH 염색을 나타냈음을 나타낸다. VHH6-처리된 모델은 조직 두께에 걸쳐 VHH 및 pIgR 둘 모두에 대한 최저 염색을 나타냈다. 이미징 연구는 세포통과 결과를 입증했으며, 특히 정점 상피에 더 가까운 hpIgR 및 VHH의 공동국소화를 나타냈다.
도 6a는 pIgR의 구조를 나타내는 개략도이다.
도 6b는 pIgR-매개 수송의 메커니즘을 나타내는 개략도이다. 도면의 출처는 문헌[Kaetzel, Curr. Biol., 2001, 11(1):R35-38]이다.
도 7은 다양한 장기에서 pIgR의 발현을 나타낸다.
도 8은 mpIgR 항원으로부터 생성된 VHH 분자를 평가하기 위해 사용되는 선택 기준을 나타낸다.
도 9는 hpIgR 항원으로부터 생성된 VHH 분자를 평가하기 위해 사용되는 선택 기준을 나타낸다.
도 10은 pIgR을 발현하는 MDCK 세포에 결합하는 VHH 분자의 능력에 대한 검정의 결과를 나타낸다.
도 11은 MDCK 세포 상의 hpIgR의 발현을 나타낸다. 염색은 MDCK 세포의 단층의 표면 및 내부에 위치하는 hpIgR을 나타낸다. 단층 내에서 hpIgR 염색의 분포는 균일하지 않다. 초기 실험은 세포당 표면 상의 약 6000개의 hpIgR 수용체 밀도를 나타낸다. 청색은 핵에 대한 Hoechst 염색을 나타내고, 녹색은 항체 염색을 나타내고, 적색은 항-Rab5 염색을 나타낸다.
도 12a 및 도 12b는 실시예 3에 기재된 바와 같이 MDCK-hpIgR 세포를 사용하는 VHH 세포통과 검정의 결과를 나타낸다. 0, 24, 및 48 시간에서의 정점 VHH 양을 도 12b, 좌측 패널에 나타낸다. 대조군 VHH에 비한 24 시간에서의 정점 VHH 양의 배수 증가를 도 12b, 우측 패널에 나타낸다.
도 12c는 기저측으로부터 정점 챔버로 MDCK-hpIgR 단층을 가로지르는 VHH-모노-Fc 분자의 세포통과 활성을 나타낸다. 대조군 VHH에 비한 24 시간에서의 정점 VHH 양의 배수 증가를 나타낸다.
도 13은 고도로 보존된 서열 유사성을 나타내는 영역(서열 번호 93 내지 95, 97 내지 103, 및 247 내지 249)을 갖는 VHH 분자의 세트의 서열 특징을 나타낸다.
도 14는 VHH 분자의 정제를 요약하는 차트이다.
도 15는 VHH 분자의 A-SEC 정제에 대한 결과를 나타낸다.
도 16은 VHH 분자의 SEC-MALS 분석에 대한 결과를 나타낸다.
도 17은 시차 주사 형광측정법(DSF)에 의한 VHH 분자의 열 안정성 검정의 결과를 나타낸다.
도 18은 EpiAirway 인간 조직 모델을 도시한다.
도 19는 EpiAirway 모델을 사용하는 VHH 세포통과 검정의 결과를 나타낸다. 좌측 패널은 0, 24, 및 48 시간에서의 정점 점액 중의 각각의 시험 VHH의 양의 열 지도를 나타낸다. MSD 검정으로부터 얻어진 전기화학발광(ECLU) 단위를 열 지도로서 플롯팅하였다. 상단 우측 패널은 24 시간에서의 정점 점액 중의 VHH의 양을 나타내고, 하단 우측 패널은 대조군에 비한 정점 점액 중의 VHH의 배수 증가를 나타낸다. 상단 우측 패널은 5개의 VHH(VHH2, VHH6, VHH9, VHH11, 및 VHH12)가 대조군 VHH 분자에 비해 이들의 점막 양의 20-배 초과의 증가를 나타냈고, 또한 VHH12는 대조군 VHH에 비해 점액 중의 38-배 증가를 나타냈고 가장 높은 세포통과 활성을 나타냈음을 나타낸다.
도 20은 EpiAirway 모델을 사용하는 IgA 세포통과 검정의 결과를 나타낸다. 도 20은 VHH2 및 VHH12-처리된 조직 샘플이 VHH3 및 VHH14(음성 대조군)에 비해 VHH에 대해 강하게 염색되었고 pIgR과 함께 공동국소화되었음을 나타낸다.
도 21은 hpIgR 및 VHH의 공동국소화를 나타낸다.
도 22는 EpiAirway 모델의 정점 표면으로의 hpIgR 및 VHH의 국소화를 나타내는 3D 재구성을 나타낸다.
도 23은 EpiAirway 조직 모델이 경사진 막 상에 있음을 나타낸다.
도 24는 EpiAirway 조직 모델에 의한 경사진 조직 문제를 극복하기 위한 Opera Phenix 이미징 및 분석을 위한 전략을 예시한다.
도 25는 불활성 입체형태의 리간드 미결합 hpIgR의 결정 구조를 나타낸다. 도면의 출처는 문헌[Stadtmueller et al., Elife, March 4, 2016, e10640]이다.
도 26은 제약 산란 모델링(constrained scattering modeling)에 의한 pIgR:IgA 복합체의 구조를 나타낸다. 도면의 출처는 문헌[Bonner et al., J. Biol. Chem., 2009, 284(8):5077-87]이다.
도 27a는 IgA 세포통과에 대한 구조 모델을 나타낸다. 도면의 출처는 문헌[Stadtmueller et al., Elife, March 4, 2016, e10640]이다.
도 27b는 점막 상피 장벽을 가로지르는 pIgR-매개 이량체성 IgA 수송의 개략도를 나타낸다. (1) 형질 세포 및 IgA 이량체화에 의한 IgA 생성; (2) 상피의 기저측 측면 상의 pIgR ECD에 대한 이량체성 IgA(dIgA)의 결합(pIgR-dIgA 상호작용은 pIgR의 도메인 1 및 5 및 dIgA의 Fc 및 J 사슬에 의해 매개됨); (3) 이량체성 IgA의 pIgR-매개 세포통과(클라트린-매개 세포내이입은 기저측으로부터 정점으로의 수송으로 구동하며, 정점 측면에 도달시에, pIgR ECD는 단백질분해에 의해 절단되고 IgA와 함께 점액 내로 방출됨. 분비된 pIgR ECD(분비 성분) 와 복합체를 형성한 점막 IgA는 분비 IgA(sIgA)로 지칭됨); 및 (4) sIgA에 의한 점막 항원의 중화.
도 28a 내지 도 28d는 hpIgR에 대한 VHH 결합에 대한 IgA의 효과를 나타낸다.
도 29는 pIgR 결합제 VHH1, VHH2, VHH3, VHH4, VHH5, VHH6, VHH7, VHH9, VHH10, VHH11, 및 VHH12의 도메인-수준 에피토프 맵핑의 결과를 나타낸다. 상단 패널 카툰의 출처는 문헌[Stadtmueller et al., Elife, March 4, 2016, e10640]이다.
도 30a는 hpIgR D2 결합제에 대한 결합 동역학을 나타낸다.
도 30b는 hpIgR D4-D5 결합제에 대한 결합 동역학을 나타낸다.
도 31은 VHH2 및 VHH3(서열번호 93 내지 95)의 특성을 나타낸다.
도 32a는 hpIgR의 도메인 및 서열의 구조를 예시하며, hpIgR에 대한 IgA 결합에 D1이 필요함을 나타낸다. 도면의 출처는 문헌[Stadtmueller et al., Elife, March 4, 2016, e10640](서열 번호 250 내지 252)이다.
도 32b는 용액 산란의 제약 모델링 및 AUC 정보(PDB ID 3CHN으로부터 생성됨)에 의해 얻어진, 분비 IgA1(sIgA1), 이량체성 IgA와 분비 성분 사이의 복합체의 구조를 나타낸다. 중쇄는 주황색으로 나타내고, 경쇄는 녹색으로 나타내고, J 사슬은 분홍색으로 나타내고, 분비 성분은 청록색으로 나타낸다. 도면의 출처는 문헌[Bonner et al., Mucosal Immunol., 2:74-84 (2009)]이다.
도 33a 내지 도 33d는 실시예 6의 VHH/IgA 경쟁 연구의 결과를 나타낸다. 도 33a의 결정 구조의 출처는 문헌[Stadtmueller et al., Elife, March 4, 2016, e10640](서열 번호 250 및 253 내지 257)이다. 도 33b는 PDB ID 5D4K로부터 생성된 hpIgR 도메인-1의 카툰 표현을 나타낸다. hpIgR 도메인-1의 CDR1, CDR2, 및 CDR3은 각각 주황색, 분홍색, 및 밝은 적색으로 나타내며, 여기서 hpIgR 도메인-1 CDR을 상응하는 경골 어류 CDR로 교체하여 VHH 결합에 대한 hpIgR 도메인-1 CDR의 영향을 시험하였다. 도 33c는, KD 값(KD, Kon, 또는 Koff)을 포함하여, 고정된 pIgR 작제에 대한 IgA 결합을 나타낸다. 도 33d는 센서 고정된 HIS-태깅된 pIgR 단백질 작제물에 대한 VHH2 및 VHH3 결합에 대한 동역학 파라미터를 나타낸다. KD, Kon, 또는 Koff는 각각 하부 좌측, 상부 좌측, 및 상부 우측 패널에 나타낸다. 도 33d는 hD1_tCDR2 작제물이 VHH2 및 VHH3 둘 모두에 대해 결합을 나타내지 않았음을 나타낸다. 결합 동역학 파라미터는 생물층 간섭계에 의해 얻었으며, 전장 hpIgR ECD에 비한 pIgR 도메인 작제물에 대한 VHH2 및 VHH3 결합에 대한 KD 값의 배수 변화를 하부 우측 패널에 나타낸다.
도 34는 VHH2 및 VHH3이 pIgR에 대한 결합에 대해 서로 경쟁하는 방법을 설명하는 데이터를 나타낸다.
도 35는 4개의 분자(VHH3, VHH4, VHH5, 및 VHH6)가 pIgR 상의 매립된 에피토프를 인식함을 예시한다.
도 36a 및 도 36b는 VHH3이 hpIgR 도메인-1 계면 상의 복합 에피토프를 인식함을 나타낸다.
도 37a 및 도 37b는 실시예 7에 기재된 바와 같이 MDCK-hpIgR 단층을 사용하는 정방향 및 역방향 세포통과 검정에서의 VHH-모노-Fc 분자의 결과를 나타낸다. 이들 결과는 양방향 수송을 입증한다. 도 37a는 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자가 기저측 챔버에 첨가된 정방향 세포통과(기저측으로부터 정점으로의 방향)에 대한 결과를 나타내며, 처리 후 24 시간(밝은 회색) 및 48 시간(어두운 회색)에서의 대조군에 비한 정점 [VHH]의 배수 증가를 나타낸다. 정방향 세포통과의 경우, VHH2, VHH6, VHH9, VHH11, 또는 VHH12 도메인을 포함하는 5개의 VHH-모노-Fc 분자는 48 시간에 대조군 VHH-모노-Fc 분자에 비해 이들의 정점 농도의 20-배 초과의 증가를 나타낸 반면에, VHH4 도메인을 포함하는 VHH-모노-Fc 분자는 그의 정점 농도의 15-배 증가를 나타냈다. 도 37b는 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자가 정점 챔버에 첨가된 역방향 세포통과(정점으로부터 기저측으로의 방향)에 대한 결과를 나타내며, 처리 후 24 시간(밝은 회색) 및 48 시간(어두운 회색)에서의 대조군에 비한 기저측 [VHH]의 배수 증가를 나타낸다. VHH6, VHH11, 또는 VHH12 도메인을 포함하는 VHH-모노-Fc 분자는 48 시간에 대조군 VHH-모노-Fc 분자에 비해 이들의 기저측 농도의 10-배 초과의 증가를 나타냈다. 역방향 세포통과의 경우, VHH2, VHH4, 또는 VHH9 도메인을 포함하는 VHH-모노-Fc 분자는 48 시간에 대조군 VHH-모노-Fc 분자에 비해 이들의 기저측 농도의 5-배 초과의 증가를 나타냈다. 도 37a 및 도 37b에 대한 결과는 2회의 기술적 반복실험을 각각 포함하는 3회의 독립적인 실험으로부터 얻었다.
도 38a 및 도 38b는 실시예 7에 기재된 바와 같이 MDCK-hpIgR 단층을 사용하는 정방향 및 역방향 세포통과 검정에서의 VHH-모노-Fc 분자의 결과를 나타낸다. 이들 결과는 양방향 수송을 입증한다. 정방향 세포통과 활성을 시험하기 위해, 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자를 기저측 챔버에 첨가하고, 처리 후 24 및 48 시간에 정점 VHH-모노-Fc의 양을 정량화하였다(B로부터 A로의 검정). 역방향 세포통과 활성을 시험하기 위해, 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자를 정점 챔버에 첨가하고, 처리 후 24 및 48 시간에 기저측 VHH의 양을 정량화하였다(A로부터 B로의 검정). B로부터 A로의 검정에서 정점 VHH(㎍)는 밝은 회색으로 나타내고 A로부터 B로의 검정에서 기저측 VHH(㎍)는 어두운 회색으로 나타낸다. 도 38a는 VHH 처리 후 24 시간에 VHH-모노-Fc 분자의 정방향 및 역방향 수송의 비교를 나타낸다. 도 38b는 VHH 처리 후 48 시간에 VHH-모노-Fc 분자의 정방향 및 역방향 수송의 비교를 나타낸다.
도 39a 및 도 39b는 실시예 7에 기재된 바와 같이 MDCK-hpIgR 단층을 가로지르는 VHH-모노-Fc 분자의 정방향 및 역방향 세포통과 동역학에 대한 결과를 나타낸다. 도 39a는 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자가 기저측 챔버에 첨가된 정방향 세포통과 동역학(기저측으로부터 정점으로의 방향)의 결과를 나타낸다. VHH 처리 후 상이한 시점(0, 4, 8, 12, 24, 36, 및 48시간)에 정점 챔버 내에 존재하는 VHH의 양(㎍)을 정량화하고 나타냈다. 시간 경과에 따라 정점 챔버 내의 VHH-모노-Fc 분자의 농도가 증가하였다. 8개의 VHH-모노-Fc 분자의 경우, 기저측 VHH 투입(2 ㎍)의 10% 초과가 정점 챔버로 수송되었다(VHH3 또는 VHH7 도메인을 포함하는 VHH-모노-Fc 분자를 제외함). 도 39b는 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자가 정점 챔버에 첨가된 역방향 세포통과 동역학(정점으로부터 기저측으로의 방향)의 결과를 나타낸다. VHH 처리 후 상이한 시점(0, 4, 8, 12, 24, 36, 및 48시간)에 기저측 챔버 내에 존재하는 VHH의 양(㎍)을 정량화하고 나타냈다. 시간 경과에 따라 기저측 챔버 내의 VHH-모노-Fc 분자의 농도가 증가하였다. 6개의 VHH-모노-Fc 분자의 경우, 정점 VHH 투입(2 ㎍)의 10% 초과가 기저측 챔버로 수송되었다(VHH2, VHH4, VHH6, VHH9, VHH11, 또는 VHH12 도메인을 포함하는 VHH-모노-Fc 분자).
본 개시내용은 본 명세서에 제공된 바와 같은 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)가 중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 제제를 수송하거나 수송을 촉진할 수 있다는 의외의 발견에 부분적으로 기초하며, 따라서, 예를 들어, 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해, 예를 들어 대상의 전신 순환 또는 고유층 또는 위장관에 치료 분자(진단 분자를 포함함)를 투여하기 위한 효과적인 방법을 제공한다.
5.1. 정의
본 명세서에 기재되거나 언급된 기술 및 절차는, 예를 들어, 문헌[Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3d ed. 2001)]; 문헌[Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel et al. eds., 2003)]; 문헌[Therapeutic Monoclonal Antibodies: From Bench to Clinic (An ed. 2009)]; 문헌[Monoclonal Antibodies: Methods and Protocols (Albitar ed. 2010)]; 및 문헌[Antibody Engineering Vols 1 and 2 (Kontermann and Dㆌbel eds., 2d ed. 2010)]에 기재된 광범위하게 이용되는 방법론과 같은, 일반적으로 당업자에 의해 잘 이해되고/되거나 관용적인 방법론을 사용하여 통상적으로 사용되는 것들을 포함한다.
본 명세서에 달리 한정되지 않는 한, 본 상세한 설명에 사용된 기술 및 과학 용어는 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 의미를 갖는다. 본 명세서를 해석하는 목적으로, 하기 용어의 설명이 적용될 것이며, 적절할 때마다, 단수로 사용되는 용어는 또한 복수형을 포함할 것이고, 그 역 또한 성립한다. 제시된 용어의 임의의 설명이 본 명세서에 참고로 포함된 임의의 문서와 상충되는 경우, 하기 제시된 용어의 설명이 우선할 것이다.
용어 "항체", "면역글로불린", 또는 "Ig"는 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용되며, 가장 넓은 의미로 사용되고, 하기 기재된 바와 같이 2개 이상의 온전한 항체, 단일 사슬 항체, 및 이들의 단편으로부터 형성된, 예를 들어, 단일클론 항체(작용제, 길항제, 중화 항체, 전장 또는 온전한 단일클론 항체를 포함함), 폴리에피토프 또는 모노에피토프 특이성을 갖는 항체 조성물, 다클론 또는 1가 항체, 다가 항체, 다중특이적 항체(예를 들어, 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 이중특이적 항체)를 구체적으로 망라한다. 항체는 인간, 인간화, 키메라, 및/또는 친화성 성숙될 수 있을 뿐만 아니라 다른 종, 예를 들어 마우스 및 토끼 등으로부터의 항체일 수 있다. 용어 "항체"는 특이적 분자 항원에 결합할 수 있고 2개의 동일한 폴리펩티드 사슬의 쌍으로 구성된 폴리펩티드의 면역글로불린 클래스 내의 B 세포의 폴리펩티드 생성물을 포함하도록 의도되며, 여기서 각각의 쌍은 하나의 중쇄(약 50 내지 70 kDa) 및 하나의 경쇄(약 25 kDa)를 갖고, 각각의 사슬의 각각의 아미노-말단 부분은 약 100 내지 약 130개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하며, 각각의 사슬의 각각의 카르복시-말단 부분은 불변 영역을 포함한다. 예를 들어, 문헌[Antibody Engineering (Borrebaeck ed., 2d ed. 1995)]; 및 문헌[Kuby, Immunology (3d ed. 1997)]을 참조한다. 특이적 실시 형태에서, 특이적 분자 항원은 폴리펩티드 또는 에피토프를 포함하는 본 명세서에 제공된 항체에 의해 결합될 수 있다. 항체는 또한 합성 항체, 재조합적으로 생성된 항체, 낙타과 종(예를 들어, 라마 또는 알파카)으로부터의 것 또는 이들의 인간화 변이체를 포함하는 단일 도메인 항체, 인트라바디, 항-이디오타입(항-Id) 항체, 및 상기 중 임의의 것의 기능성 단편(예를 들어, 항원-결합 단편)(이는 그 단편이 유래된 항체의 결합 활성의 일부 또는 전부를 유지하는 항체 중쇄 또는 경쇄 폴리펩티드의 일부를 지칭함)을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 기능성 단편(예를 들어, 항원-결합 단편)의 비제한적인 예는 단일-사슬 Fv (scFv)(예를 들어, 단일특이적, 이중특이적 등을 포함함), Fab 단편, F(ab') 단편, F(ab)2 단편, F(ab')2 단편, 다이설파이드-연결된 Fv(dsFv), Fd 단편, Fv 단편, 다이아바디, 트라이아바디, 테트라바디, 및 미니바디를 포함한다. 특히, 본 명세서에 제공된 항체는 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적으로 활성인 부분, 예를 들어, 항원에 결합하는 항원-결합 부위를 함유하는 항원-결합 도메인 또는 분자(예를 들어, 항체의 하나 이상의 CDR)를 포함한다. 그러한 항체 단편은, 예를 들어, 문헌[Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual (1989)]; 문헌[Mol. Biology and Biotechnology: A Comprehensive Desk Reference (Myers ed., 1995)]; 문헌[Huston et al., 1993, Cell Biophysics 22:189-224]; 문헌[
Figure pct00001
and Skerra, 1989, Meth. Enzymol. 178:497-515]; 및 문헌[Day, Advanced Immunochemistry (2d ed. 1990)]에서 확인할 수 있다. 본 명세서에 제공된 항체는 임의의 클래스(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, 및 IgA), 또는 임의의 서브클래스(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, 및 IgA2)의 면역글로불린 분자일 수 있다. 항체는 작용성 항체 또는 길항성 항체일 수 있다. 항체는 작용성도 아니고 길항성도 아닐 수 있다.
"항원"은 항체가 선택적으로 결합할 수 있는 구조이다. 표적 항원은 폴리펩티드, 탄수화물, 핵산, 지질, 합텐, 또는 다른 천연 발생 또는 합성 화합물일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 표적 항원은 폴리펩티드이다. 특정 실시 형태에서, 항원은 세포와 결합되며, 예를 들어, 세포 상에 또는 세포 내에 존재한다.
"온전한" 항체는 항원-결합 부위뿐만 아니라 CL 및 적어도 중쇄 불변 영역, CH1, CH2, 및 CH3을 포함하는 것이다. 불변 영역은 인간 불변 영역 또는 이의 아미노산 서열 변이체를 포함할 수 있다. 특정 실시 형태에서, 온전한 항체는 하나 이상의 이펙터 기능을 갖는다.
용어 "항원-결합 단편", "항원-결합 도메인", "항원-결합 영역", 및 유사한 용어는 항원과 상호작용하는 아미노산 잔기를 포함하고 결합제에 항원에 대한 그의 특이성 및 친화성을 부여하는 결합 분자의 부분(예를 들어, CDR)을 지칭한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이 "항원-결합 단편"은
온전한 항체의 항원-결합 또는 가변 영역과 같은 온전한 항체의 일부를 포함하는 "항체 단편"을 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편; 다이아바디 및 다이-다이아바디(예를 들어, 문헌[Holliger et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. 90:6444-48]; 문헌[Lu et al., 2005, J. Biol. Chem. 280:19665-72]; 문헌[Hudson et al., 2003, Nat. Med. 9:129-34]; 제WO 93/11161호; 및 미국 특허 제5,837,242호 및 제6,492,123호 참조); 단일-사슬 항체 분자(예를 들어, 미국 특허 제4,946,778호; 제5,260,203호; 제5,482,858호; 및 제5,476,786호 참조); 이중 가변 도메인 항체(예를 들어, 미국 특허 제7,612,181호 참조); 단일 가변 도메인 항체(sdAb)(예를 들어, 문헌[Woolven et al., 1999, Immunogenetics 50: 98-101]; 및 문헌[Streltsov et al., 2004, Proc Natl Acad Sci USA. 101:12444-49] 참조); 및 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 항체를 제한 없이 포함한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이 "단일 도메인 항체" 또는 "sdAb"는 단일 단량체성 가변 항체 도메인을 지칭하며, 이는 항원 결합이 가능하다(예를 들어, pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체). 단일 도메인 항체는 본 명세서에 기재된 바와 같은 VHH 도메인을 포함한다. 단일 도메인 항체의 예는 천연적으로 경쇄가 없는 항체, 예컨대 낙타과 종(예를 들어, 라마)으로부터의 것들, 관용적인 4-사슬 항체로부터 유래된 단일 도메인 항체, 조작된 항체, 및 항체로부터 유래된 것들 이외의 단일 도메인 스캐폴드를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 단일 도메인 항체는 마우스, 인간, 낙타, 라마, 염소, 토끼, 및 소를 포함하지만 이로 제한되지 않는 임의의 종으로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같이, 단일 도메인 항체는 낙타과 종, 예를 들어 낙타, 라마, 단봉 낙타, 알파카, 및 구아나코에서 형성된 항체로부터 유래될 수 있다. 낙타과 이외의 다른 종이 천연적으로 경쇄가 없는 중쇄 항체를 생성할 수 있으며; 그러한 다른 종으로부터 유래된 VHH는 본 개시내용의 범주 내에 있다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH)는 FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4의 구조를 갖는다. 본 명세서에 기재된 바와 같이 단일 도메인 항체는 다른 분자(예를 들어, 제제)에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합될 수 있다.
용어 "결합하다" 또는 "결합"은, 예를 들어, 복합체를 형성하는 것을 포함하는 분자 사이의 상호작용을 지칭한다. 상호작용은, 예를 들어, 수소 결합, 이온 결합, 소수성 상호작용, 및/또는 반 데르 발스 상호작용을 포함하는 비공유 상호작용일 수 있다. 복합체는 또한 공유 또는 비공유 결합, 상호작용, 또는 힘에 의해 함께 유지된 2개 이상의 분자의 결합을 포함할 수 있다. 항체 상의 단일 항원-결합 부위와 항원과 같은 표적 분자의 단일 에피토프 사이의 총 비공유 상호작용의 강도는 그 에피토프에 대한 항체 또는 기능성 단편의 친화성이다. 1가 항원에 대한 결합 분자(예를 들어, 항체)의 해리 속도(koff) 대 결합 속도(kon)의 비(koff/kon)는 해리 상수 KD이며, 이는 친화성에 역으로 관련된다. KD 값이 낮을수록, 항체의 친화성이 높다. KD의 값은 항체와 항원의 상이한 복합체에 대해 변동되며, kon 및 koff 둘 모두에 의존한다. 본 명세서에 제공된 항체에 대한 해리 상수 KD는 본 명세서에 제공된 임의의 방법 또는 당업자에게 잘 알려진 임의의 다른 방법을 사용하여 결정할 수 있다. 하나의 결합 부위에서의 친화성이 항체와 항원 사이의 상호작용의 진정한 강도를 항상 반영하는 것은 아니다. 다중의 반복되는 항원 결정기를 함유하는 복합 항원, 예컨대 다가 항원이 다중 결합 부위를 함유하는 항체와 접촉되는 경우, 하나의 부위에서의 항원과 항체의 상호작용은 제2 부위에서의 반응의 확률을 증가시킬 것이다. 다가 항체와 항원 사이의 그러한 다중 상호작용의 강도를 결합력이라 칭한다.
본 명세서에 기재된 결합 분자와 관련하여, "~에 결합하다", "~에 특이적으로 결합하는"과 같은 용어, 및 유사한 용어는 또한 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용되며, 항원에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인의 결합 분자, 예컨대 폴리펩티드를 지칭한다. 항원에 결합하거나 특이적으로 결합하는 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 관련 항원과 교차-반응성일 수 있다. 특정 실시 형태에서, 항원에 결합하거나 특이적으로 결합하는 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 다른 항원과 교차 반응하지 않는다. 항원에 결합하거나 특이적으로 결합하는 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은, 예를 들어, 면역검정, Octet®, Biacore®, 또는 당업자에게 알려진 다른 기술에 의해 식별될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 방사면역검정(RIA) 및 효소 결합 면역흡착 검정(ELISA)과 같은 실험 기술을 사용하여 결정되는 바와 같이 임의의 교차-반응성 항원보다 더 높은 친화성으로 항원에 결합할 경우에, 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 항원에 결합하거나 특이적으로 결합한다. 전형적으로 특이적이거나 선택적인 반응은 배경 신호 또는 노이즈의 2배 이상일 것이며 배경의 10배 초과일 수 있다. 결합 특이성에 관한 논의에 대해서는, 예를 들어, 문헌[Fundamental Immunology 332-36 (Paul ed., 2d ed. 1989)]을 참조한다. 특정 실시 형태에서, 예를 들어, 형광 활성화 세포 분류(FACS) 분석 또는 RIA에 의해 결정되는 바와 같이, "비표적" 단백질에 대한 결합 분자 또는 항원 결합 도메인의 결합의 정도는 그의 특정 표적 항원에 대한 결합 분자 또는 항원 결합 도메인의 결합의 약 10% 미만이다. "특이적 결합", "~에 특이적으로 결합하다", 또는 "~에 특이적인"과 같은 용어에 관해서는, 비특이적 상호작용과는 측정가능하게 상이한 결합을 의미한다. 예를 들어, 일반적으로 결합 활성을 갖지 않는 유사한 구조의 분자인 대조군 분자의 결합에 비교하여 분자의 결합을 결정함으로써, 특이적 결합을 측정할 수 있다. 예를 들어, 특이적 결합은 표적과 유사한 대조군 분자, 예를 들어, 과량의 비-표지된 표적과의 경쟁에 의해 결정될 수 있다. 이 경우에, 표지된 표적의 프로브에 대한 결합이 과량의 표지되지 않은 표적에 의해 경쟁적으로 억제된다면 특이적 결합을 나타낸다. 예를 들어, 항원을 표적화하는 진단제로서 결합 분자가 유용하도록, 항원에 결합하는 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 충분한 친화성으로 항원에 결합할 수 있는 것을 포함한다. 특정 실시 형태에서, 항원에 결합하는 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 800 nM, 600 nM, 550 nM, 500 nM, 300 nM, 250 nM, 100 nM, 50 nM, 10 nM, 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2 nM, 1 nM, 0.9 nM, 0.8 nM, 0.7 nM, 0.6 nM, 0.5 nM, 0.4 nM, 0.3 nM, 0.2 nM, 또는 0.1 nM 이하의 해리 상수(KD)를 갖는다. 특정 실시 형태에서, 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 상이한 종으로부터의 항원 사이에 보존된 항원(예를 들어, 인간 및 사이노 종 사이)의 에피토프에 결합한다.
"결합 친화성"은 일반적으로 분자(예를 들어, 항체와 같은 결합 단백질)의 단일 결합 부위와 그의 결합 파트너(예를 들어, 항원) 사이의 비공유 상호작용의 총합의 강도를 지칭한다. 달리 지시되지 않는 한, 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "결합 친화성"은 결합 쌍(예를 들어, 항체 및 항원)의 구성원들 사이의 1:1 상호작용을 반영하는 고유 결합 친화성을 지칭한다. 결합 분자 X의 그의 결합 파트너 Y에 대한 친화성은 일반적으로 해리 상수(KD)로 나타낼 수 있다. 본 명세서에 기재된 것들을 포함하는, 당업계에 알려진 통상의 방법에 의해 친화성이 측정될 수 있다. 저친화성 항체는 일반적으로 항원에 천천히 결합하고 쉽게 해리되는 경향이 있는 반면에, 고친화성 항체는 일반적으로 항원에 더 빠르게 결합하고 더 길게 결합이 유지되는 경향이 있다. 결합 친화성을 측정하는 다양한 방법이 당업계에 알려져 있으며, 이들 중 임의의 것이 본 개시내용의 목적에 사용될 수 있다. 예시적인 특이적 실시 형태는 하기를 포함한다. 일 실시 형태에서, "KD" 또는 "KD 값"은 당업계에 알려진 검정에 의해, 예를 들어 결합 검정에 의해 측정될 수 있다. 예를 들어, 관심 항체의 Fab 버전 및 그의 항원으로 수행하는 RIA에서 KD를 측정할 수 있다(문헌[Chen et al., 1999, J. Mol Biol 293:865-81]). KD 또는 KD 값은 또한, 예를 들어, Octet®Red96 시스템을 사용하는 Octet®에 의해, 또는, 예를 들어, Biacore®TM-2000 또는 Biacore®TM-3000을 사용하는 Biacore®에 의해, 생물층 간섭계(BLI) 또는 표면 플라즈몬 공명(SPR) 검정을 사용함으로써 측정할 수 있다. "on-속도" 또는 "결합의 속도" 또는 "결합 속도" 또는 "kon"은 또한, 예를 들어, Octet®Red96, Biacore®TM-2000, 또는 Biacore®TM-3000 시스템을 사용하는 상기 기재된 동일한 생물층 간섭계(BLI) 또는 표면 플라즈몬 공명(SPR) 기술로 결정될 수 있다.
특정 실시 형태에서, 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은, 중쇄 및/또는 경쇄의 일부가 특정 종으로부터 유래되거나 특정 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체뿐만 아니라 그러한 항체의 단편 내의 상응하는 서열과 동일하거나 상동성인 "키메라"서열을 포함할 수 있는 반면에, 사슬(들)들의 나머지는, 이들이 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한, 다른 종으로부터 유래되거나 다른 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체 내의 상응하는 서열과 동일하거나 상동성이다(미국 특허 제4,816,567호; 및 문헌[Morrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-55] 참조). 키메라 서열은 인간화 서열을 포함할 수 있다.
특정 실시 형태에서, 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 비인간(예를 들어, 낙타, 뮤린, 비-인간 영장류) 항체의 "인간화" 형태의 부분을 포함할 수 있으며, 이는 원하는 특이성, 친화성, 및 수용력(capacity)을 갖는 낙타, 마우스, 래트, 토끼, 또는 비인간 영장류와 같은 비인간 종의 상응하는 CDR(예를 들어, 공여자 항체)로부터의 잔기에 의해 천연 CDR 잔기가 대체된 인간 면역글로불린(예를 들어, 수용자 항체)로부터의 서열을 포함한다. 일부 경우에는, 인간 면역글로불린 서열의 하나 이상의 FR 영역 잔기가 상응하는 비인간 잔기에 의해 대체된다. 또한, 인간화 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 항체 성능을 추가로 개선하도록 이루어진다. 인간화 항체 중쇄 또는 경쇄는 적어도 하나 이상의 가변 영역의 실질적으로 전부를 포함할 수 있으며, 여기에서 CDR의 전부 또는 실질적으로 전부는 비인간 면역글로불린의 것들에 상응하고 FR의 전부 또는 실질적으로 전부는 인간 면역글로불린 서열의 것들이다. 특정 실시 형태에서, 인간화 항체는 면역글로불린 불변 영역(Fc), 전형적으로는 인간 면역글로불린의 것의 적어도 일부를 포함할 것이다. 추가의 세부 사항에 대해서는, 문헌[Jones et al., 1986, Nature 321:522-25]; 문헌[Riechmann et al., 1988, Nature 332:323-29]; 문헌[Presta, 1992, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-96]; 문헌[Carter et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4285-89]; 미국 특허 제6,800,738호; 제6,719,971호; 제6,639,055호; 제6,407,213호; 및 제6,054,297호를 참조한다.
특정 실시 형태에서, 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 "완전 인간 항체" 또는 "인간 항체"의 일부를 포함할 수 있으며, 여기서 이 용어들은 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용되고 인간 가변 영역 및, 예를 들어, 인간 불변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다. 결합 분자는 단일 도메인 항체 서열을 포함할 수 있다. 특이적 실시 형태에서, 이 용어는 인간 기원의 가변 영역 및 불변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다. 특정 실시 형태에서, "완전 인간" 항체는 또한, 폴리펩티드에 결합하고 인간 생식계열 면역글로불린 핵산 서열의 천연 발생 체세포 변이체인 핵산 서열에 의해 인코딩되는 항체를 포함할 수 있다. 용어 "완전 인간 항체"는 카밧(Kabat) 등에 의해 기재된 바와 같은 인간 생식계열 면역글로불린 서열에 상응하는 가변 영역 및 불변 영역을 갖는 항체를 포함한다(문헌[Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242] 참조). "인간 항체"는 인간에 의해 생성된 항체의 것에 상응하고/하거나 인간 항체를 제조하기 위한 기술 중 임의의 것을 사용하여 제조된 것에 상응하는 아미노산 서열을 보유하는 것이다. 인간 항체의 이러한 정의는 비-인간 항원-결합 잔기를 포함하는 인간화 항체를 특이적으로 배제한다. 인간 항체는 파지-디스플레이 라이브러리(문헌[Hoogenboom and Winter, 1991, J. Mol. Biol. 227:381]; 문헌[Marks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222:581]) 및 효모 디스플레이 라이브러리(문헌[Chao et al., 2006, Nature Protocols 1: 755-68])를 포함하는 당업계에 알려진 다양한 기술을 사용하여 생성될 수 있다. 또한, 인간 단일클론 항체의 제조를 위해, 문헌[Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy 77 (1985)]; 문헌[Boerner et al., 1991, J. Immunol. 147(1):86-95]; 및 문헌[van Dijk and van de Winkel, 2001, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74]에 기재된 방법이 이용가능하다. 인간 항체는, 항원 시험접종(antigenic challenge)에 반응하여 그러한 항체를 생성하도록 변형되었지만 그의 내인성 유전자좌가 불능화된 유전자이식 동물, 예를 들어, 마우스에 항원을 투여함으로써 제조될 수 있다(예를 들어, 문헌[Jakobovits, 1995, Curr. Opin. Biotechnol. 6(5):561-66]; 문헌[
Figure pct00002
and Taussing, 1997, Curr. Opin. Biotechnol. 8(4):455-58]; 및 XENOMOUSETM 기술에 관한 미국 특허 제6,075,181호 및 제6,150,584호 참조). 또한, 예를 들어, 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체에 관한 문헌[Li et al., 2006, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103:3557-62]을 참조한다.
특정 실시 형태에서, 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 "재조합 인간 항체"의 일부를 포함할 수 있으며, 여기서 이 구문은 재조합 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나, 단리된 인간 항체, 예컨대 숙주 세포 내로 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체, 재조합, 조합 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체, 인간 면역글로불린 유전자에 대해 유전자이식되고/되거나 염색체이식된 동물(예를 들어, 마우스 또는 소)로부터 단리된 항체(예를 들어, 문헌[Taylor, L. D. et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295] 참조) 또는 인간 면역글로불린 유전자 서열을 다른 DNA 서열에 스플라이싱하는 단계를 포함하는 임의의 다른 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나, 단리된 항체를 포함한다. 그러한 재조합 인간 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 영역 및 불변 영역을 가질 수 있다(문헌[Kabat, E. A. et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242] 참조). 그러나, 특정 실시 형태에서는, 그러한 재조합 인간 항체에 시험관내 돌연변이유발(또는 인간 Ig 서열에 대해 유전자이식된 동물이 사용되는 경우, 생체내 체세포 돌연변이유발)을 적용하며, 따라서 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은, 인간 생식계열 VH 및 VL 서열로부터 유래되고 이에 관련되지만 생체내에서 인간 항체 생식계열 레퍼토리 내에 천연적으로 존재하지 않을 수 있는 서열이다.
특정 실시 형태에서, 결합 분자 또는 항원 결합 도메인은 "단일클론 항체"의 일부를 포함할 수 있으며, 여기서 이 용어는 본 명세서에 사용되는 바와 같이 실질적으로 균질한 항체의 집단으로부터 얻어진 항체를 지칭하고, 예를 들어, 집단을 포함하는 개별 항체는 미량으로 존재하거나 잘 알려진 번역후 변형일 수 있는 가능한 천연 발생 돌연변이, 예컨대 아미노산 이성체화 또는 탈아미드화, 메티오닌 산화 또는 아스파라긴 또는 글루타민 탈아미드화를 제외하고는 동일하며, 각각의 단일클론 항체는 전형적으로 항원 상의 단일 에피토프를 인식할 것이다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 사용되는 바와 같이 "단일클론 항체"는 단일 하이브리도마 또는 다른 세포에 의해 생성된 항체이다. 용어 "단일클론"은 항체를 제조하기 위한 임의의 특정 방법으로 제한되지 않는다. 예를 들어, 본 개시내용에 유용한 단일클론 항체는 문헌[Kohler et al., 1975, Nature 256:495]에 의해 최초로 기재된 하이브리도마 방법론에 의해 제조될 수 있거나, 박테리아 또는 진핵 동물 또는 식물 세포에서 재조합 DNA 방법을 사용하여 제조될 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 제4,816,567호 참조). "단일클론 항체"는 또한, 예를 들어, 문헌[Clackson et al., 1991, Nature 352:624-28] 및 문헌[Marks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222:581-97]에 기재된 기술을 사용하여 파지 항체 라이브러리로부터 단리될 수 있다. 클론 세포주의 제조 및 이에 의해 발현되는 단일클론 항체의 제조를 위한 다른 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 문헌[Short Protocols in Molecular Biology (Ausubel et al. eds., 5th ed. 2002)]을 참조한다.
전형적인 4-사슬 항체 단위는 2개의 동일한 경쇄(L) 및 2개의 동일한 중쇄 (H)로 구성된 이종사량체 당단백질이다. IgG의 경우에, 4-사슬 단위는 일반적으로 약 150,000 달톤이다. 각각의 L 사슬은 하나의 공유 다이설파이드 결합에 의해 H 사슬에 연결되는 반면에, 2개의 H 사슬은 H 사슬 동형에 따라 하나 이상의 다이설파이드 결합에 의해 서로 연결된다. 각각의 H 및 L 사슬은 또한 규칙적으로 이격된 사슬간 다이설파이드 가교를 갖는다. 각각의 H 사슬은 N-말단에 가변 도메인(VH)에 이어서 α 및 γ 사슬 각각에 대한 3개의 불변 도메인(CH) 및 μ 및 ε 동형에 대한 4개의 CH 도메인을 갖는다. 각각의 L 사슬은 N-말단에 가변 도메인(VL)에 이어서 불변 도메인(CL)을 그의 다른 단부에 갖는다. VL은 VH와 정렬되고, CL은 중쇄(CH1)의 제1 불변 도메인과 정렬된다. 특정 아미노산 잔기는 경쇄와 중쇄 가변 도메인 사이에 계면을 형성하는 것으로 생각된다. VH 및 VL의 대합은 함께 단일 항원-결합 부위를 형성한다. 상이한 클래스의 항체의 구조 및 특성에 대해서는, 예를 들어, 문헌[Basic and Clinical Immunology 71 (Stites et al. eds., 8th ed. 1994)]; 및 문헌[Immunobiology (Janeway et al. eds., 5th ed. 2001)]을 참조한다.
용어 "Fab" 또는 "Fab 영역"은 항원에 결합하는 항체 영역을 지칭한다. 관용적인 IgG는 일반적으로 2개의 Fab 영역을 포함하며, 각각은 Y-형 IgG 구조의 2개의 아암 중 하나 상에 존재한다. 각각의 Fab 영역은 전형적으로 중쇄 및 경쇄 각각의 하나의 가변 영역 및 하나의 불변 영역으로 구성된다. 더욱 구체적으로, Fab 영역 내의 중쇄의 가변 영역 및 불변 영역은 VH 및 CH1 영역이고, Fab 영역 내의 경쇄의 가변 영역 및 불변 영역은 VL 및 CL 영역이다. 본 개시내용에 따른 항원 결합 능력을 부여하기 위해 Fab 영역 내의 VH, CH1, VL, 및 CL을 다양한 방식으로 배열할 수 있다. 예를 들어, 관용적인 IgG의 Fab 영역과 유사하게, VH 및 CH1 영역은 하나의 폴리펩티드 상에 존재할 수 있고, VL 및 CL 영역은 별도의 폴리펩티드 상에 존재할 수 있다. 대안적으로, VH, CH1, VL, 및 CL 영역은 모두 동일한 폴리펩티드 상에 존재할 수 있고, 하기 섹션에 더욱 상세하게 기재된 바와 같이 상이한 순서로 배향될 수 있다.
용어 "가변 영역", "가변 도메인", "V 영역", 또는 "V 도메인"은, 경쇄 또는 중쇄의 아미노-말단에 일반적으로 위치하며 길이가 중쇄에서는 약 120 내지 130개의 아미노산이고 경쇄에서는 약 100 내지 110개의 아미노산이고, 그의 특정 항원에 대한 각각의 특정 항체의 결합 및 특이성에 사용되는, 항체의 경쇄 또는 중쇄의 일부를 지칭한다. 중쇄의 가변 영역은 "VH"로 지칭될 수 있다 경쇄의 가변 영역은 "VL"로 지칭될 수 있다 용어 "가변"은 가변 영역의 특정 세그먼트가 항체들 사이에서 서열이 광범위하게 상이하다는 사실을 지칭한다. V 영역은 항원 결합을 매개하고 특정 항체의 그의 특정 항원에 대한 특이성을 한정한다. 그러나, 가변성은 가변 영역의 110-아미노산 스팬에 걸쳐 균일하게 분포되지 않는다. 그 대신에, V 영역은 길이가 각각 약 9 내지 12개의 아미노산인 "초가변 영역"이라고 칭하는 더 큰 가변성(예를 들어, 극단적 가변성)의 더 짧은 영역에 의해 분리된 약 15 내지 30개의 아미노산의 프레임워크 영역(FR)이라고 칭하는 덜 가변성인(예를 들어, 비교적 불변성) 구간으로 이루어진다. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역은, β 시트 구조를 연결하고 일부 경우에는 그의 일부를 형성하는 루프를 형성하는, 3개의 초가변 영역에 의해 연결된, β 시트 구성을 주로 채택하는 4개의 FR을 각각 포함한다. 각각의 사슬 내의 초가변 영역은 FR에 의해 매우 근접하여 함께 유지되며, 다른 사슬로부터의 초가변 영역은 항체의 항원-결합 부위의 형성에 기여한다(예를 들어, 문헌[Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (5th ed. 1991)] 참조). 불변 영역은 항원에 대한 항체의 결합에 직접적으로 관여하지 않지만, 항체 의존성 세포독성(ADCC) 및 보체 의존성 세포독성(CDC)에서의 항체의 참여와 같은 다양한 이펙터 기능을 나타낸다. 가변 영역은 상이한 항체들 사이에서 서열이 광범위하게 상이하다. 특이적 실시 형태에서, 가변 영역은 인간 가변 영역이다.
용어 "카밧에 따른 가변 영역 잔기 넘버링" 또는 "카밧에서와 같은 아미노산 위치 넘버링", 및 이의 변형은, 문헌[Kabat et al., 상기 문헌]에서 항체 편집의 중쇄 가변 영역 또는 경쇄 가변 영역에 사용되는 넘버링 시스템을 지칭한다. 이러한 넘버링 시스템을 사용하여, 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 FR 또는 CDR의 단축, 또는 이들 내로의 삽입에 상응하는 더 적거나 추가의 아미노산을 함유할 수 있다. 예를 들어, 중쇄 가변 도메인은 잔기 52 뒤에 단일 아미노산 삽입(카밧에 따른 잔기 52a) 및 잔기 82 뒤에 삽입된 3개의 잔기(예를 들어, 카밧에 따른 잔기 82a, 82b, 및 82c 등)를 포함할 수 있다. 잔기의 카밧 넘버링은, 항체의 서열의 상동성 영역에서 "표준" 카밧 넘버링된 서열과의 정렬에 의해 주어진 항체에 대해 결정될 수 있다. 카밧 넘버링 시스템은 일반적으로 가변 도메인 내의 잔기(대략 경쇄의 잔기 1 내지 107 및 중쇄의 잔기 1 내지 113)를 지칭할 경우에 사용된다(예를 들어, 문헌[Kabat et al., 상기 문헌]). "EU 넘버링 시스템" 또는 "EU 인덱스"는 일반적으로 면역글로불린 중쇄 불변 영역 내의 잔기를 지칭할 경우에 사용된다(예를 들어, 문헌[Kabat et al., 상기 문헌]에 보고된 EU 인덱스). "카밧에서와 같은 EU 인덱스"는 인간 IgG 1 EU 항체의 잔기 넘버링을 지칭한다. 다른 넘버링 시스템은, 예를 들어, AbM, 초티아(Chothia), Contact, IMGT, 및 AHon에 의해 기재되어 있다.
항체에 관련하여 사용될 경우에, 용어 "중쇄"는 약 50 내지 70 kDa의 폴리펩티드 사슬을 지칭하며, 여기서 아미노-말단 부분은 약 120 내지 130개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하고, 카르복시-말단 부분은 불변 영역을 포함한다. 불변 영역은 중쇄 불변 영역의 아미노산 서열에 기초하여 알파(α), 델타(δ), 엡실론(ε), 감마(γ), 및 뮤(μ)로 지칭되는 5개의 별개의 유형(예를 들어, 동형) 중 하나일 수 있다. 별개의 중쇄는 크기가 상이하다: α, δ, 및 γ는 대략 450개의 아미노산을 함유하는 반면에, μ 및 ε은 대략 550개의 아미노산을 함유한다. 경쇄와 조합되는 경우에, 이러한 별개의 유형의 중쇄는, IgG의 4개의 서브클래스, 즉, IgG1, IgG2, IgG3, 및 IgG4를 포함하는 5개의 잘 알려진 클래스(예를 들어, 동형)의 항체, IgA, IgD, IgE, IgG, 및 IgM을 각각 생성한다.
항체에 관련하여 사용될 경우에, 용어 "경쇄"는 약 25 kDa의 폴리펩티드 사슬을 지칭하며, 여기서 아미노-말단 부분은 약 100 내지 약 110개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하고, 카르복시-말단 부분은 불변 영역을 포함한다. 경쇄의 대략적인 길이는 211 내지 217개의 아미노산이다. 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여 카파(κ) 또는 람다(λ)로 지칭되는 2개의 별개의 유형이 존재한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "초가변 영역", "HVR", "상보성 결정 영역", 및 "CDR"은 상호교환가능하게 사용된다. "CDR"은 면역글로불린(Ig 또는 항체) VH β-시트 프레임워크의 비-프레임워크 영역 내의 3개의 초가변 영역(H1, H2, 또는 H3) 중 하나, 또는 항체 VL β-시트 프레임워크의 비-프레임워크 영역 내의 3개의 초가변 영역(L1, L2, 또는 L3) 중 하나를 지칭한다. 따라서, CDR은 프레임워크 영역 서열 내에 산재된 가변 영역 서열이다.
CDR 영역은 당업자에게 잘 알려져 있고, 잘 알려진 넘버링 시스템에 의해 한정되었다. 예를 들어, 카밧 상보성 결정 영역(CDR)은 서열 가변성에 기초하며 가장 통상적으로 사용된다(예를 들어, 문헌[Kabat et al., 상기 문헌] 참조). 그 대신에 초티아는 구조적 루프의 위치를 지칭한다(예를 들어, 문헌[Chothia and Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-17] 참조). 카밧 넘버링 규칙을 사용하여 넘버링될 경우에 초티아 CDR-H1 루프의 단부는 루프의 길이에 따라 H32와 H34 사이에서 변동된다(이는 카밧 넘버링 체계가 H35A 및 H35B에 삽입을 배치하기 때문이고; 35A 및 35B 중 어느 것도 존재하지 않는 경우에, 루프는 32에서 종결되며; 35A만 존재하는 경우에, 루프는 33에서 종결되고; 35A 및 35B 둘 모두가 존재하는 경우에, 루프는 34에서 종결된다. "AbM" 초가변 영역은 카밧 CDR과 초티아 구조적 루프 사이의 절충을 나타내며, Oxford Molecular의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 사용된다(예를 들어, 문헌[Antibody Engineering Vol. 2 (Kontermann and
Figure pct00003
eds., 2d ed. 2010)] 참조). "Contact" 초가변 영역은 이용가능한 복합체 결정 구조의 분석에 기초한다. 개발되고 광범위하게 채택된 다른 보편적 넘버링 시스템은 ImMunoGeneTics(IMGT) Information System®이다(문헌[Lafranc et al., 2003, Dev. Comp. Immunol. 27(1):55-77]). IMGT는 인간 및 다른 척추동물의 면역글로불린(IG), T-세포 수용체(TCR), 및 주조직적합성 복합체(MHC)에 특화된 통합 정보 시스템이다. 여기서, CDR은 아미노산 서열 및 경쇄 또는 중쇄 내의 위치 둘 모두의 관점에서 나타낸다. 면역글로불린 가변 도메인의 구조 내의 CDR의 "위치"는 종들 사이에서 보존되고 루프라고 칭하는 구조 내에 존재하므로, 구조적 특징에 따라 가변 도메인 서열들을 정렬하는 넘버링 시스템을 사용함으로써, CDR 및 프레임워크 잔기가 용이하게 식별된다. 이러한 정보는 하나의 종의 면역글로불린으로부터의 CDR 잔기를, 전형적으로 인간 항체로부터의 수용체 프레임워크 내로 그래프팅 및 대체하는 데 사용될 수 있다. 추가의 넘버링 시스템(AHon)이 문헌[Honegger and
Figure pct00004
, 2001, J. Mol. Biol. 309: 657-70]에 의해 개발되었다. 예를 들어, 카밧 넘버링 및 IMGT 고유 넘버링 시스템을 포함하는 넘버링 시스템 사이의 상응성은 당업자에게 잘 알려져 있다(예를 들어, 문헌[Kabat, 상기 문헌]; 문헌[Chothia and Lesk, 상기 문헌]; 문헌[Martin, 상기 문헌]; 문헌[Lefranc et al., 상기 문헌] 참조). 이들 초가변 영역 또는 CDR 각각으로부터의 잔기는 하기 언급된다.
Figure pct00005
주어진 CDR의 경계는 식별에 사용되는 체계에 따라 변동될 수 있다. 따라서, 달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 이의 영역, 예컨대 가변 영역의 용어 "CDR" 및 "상보성 결정 영역"뿐만 아니라 항체 또는 이의 영역의 개별 CDR(예를 들어, "CDR-H1, CDR-H2)은 상기 본 명세서에 기재된 알려진 체계 중 임의의 것에 의해 한정된 바와 같은 상보성 결정 영역을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 일부 경우에는, 카밧, 초티아, 또는 Contact 방법에 의해 한정되는 바와 같은 CDR과 같이, 특정 CDR 또는 CDR들의 식별을 위한 체계가 명시된다. 다른 경우에는, CDR의 특정 아미노산 서열이 주어진다.
초가변 영역은 하기와 같은 "연장된 초가변 영역"을 포함할 수 있다: VL 내의 24 내지 36 또는 24 내지 34(L1), 46 내지 56 또는 50 내지 56(L2), 및 89 내지 97 또는 89 내지 96(L3), 및 VH 내의 26 내지 35 또는 26 내지 35A(H1), 50 내지 65 또는 49 내지 65(H2), 및 93 내지 102, 94 내지 102, 또는 95 내지 102(H3).
용어 "불변 영역" 또는 "불변 도메인"은, 항원에 대한 항체의 결합에 직접적으로 관여하지는 않지만 Fc 수용체와의 상호작용과 같은 다양한 이펙터 기능을 나타내는 경쇄 및 중쇄의 카르복시 말단부를 지칭한다. 이 용어는 항원 결합 부위를 함유하는 면역글로불린의 다른 부분, 가변 영역에 비해 더 보존된 아미노산 서열을 갖는 면역글로불린 분자의 일부를 지칭한다. 불변 영역은 중쇄의 CH1, CH2, 및 CH3 영역 및 경쇄의 CL 영역을 함유할 수 있다.
용어 "프레임워크" 또는 "FR"은 CDR을 플랭킹하는 가변 영역 잔기를 지칭한다. FR 잔기는, 예를 들어, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 도메인 항체(예를 들어, 단일 도메인 항체), 다이아바디, 선형 항체, 및 이중특이적 항체 내에 존재한다. FR 잔기는 초가변 영역 잔기 또는 CDR 잔기 이외의 가변 도메인 잔기이다.
본 명세서에서 용어 "Fc 영역"은, 예를 들어, 천연 서열 Fc 영역, 재조합 Fc 영역, 및 변이체 Fc 영역을 포함하는 면역글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 한정하기 위해 사용된다. 면역글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 변동될 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 종종 위치 Cys226에서의 아미노산 잔기로부터, 또는 Pro230으로부터 이의 카르복실-말단까지 신장되도록 한정된다. 예를 들어, 항체의 생성 또는 정제 중에, 또는 항체의 중쇄를 인코딩하는 핵산을 재조합적으로 조작함으로써, Fc 영역의 C-말단 라이신(EU 넘버링 시스템에 따른 잔기 447)을 제거할 수 있다. 따라서, 온전한 항체의 조성물은 모든 K447 잔기가 제거된 항체 집단, K447 잔기가 제거되지 않은 항체 집단, 및 K447 잔기가 있거나 없는 항체의 혼합물을 갖는 항체 집단을 포함할 수 있다. "기능성 Fc 영역"은 천연 서열 Fc 영역의 "이펙터 기능"을 보유한다. 예시적인 "이펙터 기능"은 C1q 결합; CDC; Fc 수용체 결합; ADCC; 식작용; 세포 표면 수용체(예를 들어, B 세포 수용체)의 하향조절 등을 포함한다. 그러한 이펙터 기능은 일반적으로 Fc 영역이 결합 영역 또는 결합 도메인(예를 들어, 항체 가변 영역 또는 도메인)과 조합되는 것을 필요로 하며, 당업자에게 알려진 다양한 검정을 사용하여 평가할 수 있다. "변이체 Fc 영역"은 하나 이상의 아미노산 변형(예를 들어, 치환, 부가, 또는 결실)에 의해 천연 서열 Fc 영역의 것과는 상이한 아미노산 서열을 포함한다. 특정 실시 형태에서, 변이체 Fc 영역은 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역에 비교하여 하나 이상의 아미노산 치환, 예를 들어, 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역 내에 약 1 내지 약 10개의 아미노산 치환, 또는 약 1 내지 약 5개의 아미노산 치환을 갖는다. 본 명세서의 변이체 Fc 영역은 천연 서열 Fc 영역 및/또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역과 약 80% 이상의 상동성, 또는 이들과 약 90% 이상의 상동성, 예를 들어, 이들과 약 95% 이상의 상동성을 보유할 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, "에피토프"는 당업계의 용어이며, 결합 분자(예를 들어, 단일 도메인 항체 서열을 포함하는 항체)가 특이적으로 결합할 수 있는 항원의 국소화된 영역을 지칭한다. 에피토프는 선형 에피토프 또는 입체형태, 비선형, 또는 불연속 에피토프일 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드 항원의 경우에, 에피토프는 폴리펩티드의 인접한 아미노산("선형" 에피토프)일 수 있거나, 에피토프는 폴리펩티드의 2개 이상의 비-인접 영역으로부터의 아미노산을 포함할 수 있다("입체형태", "비-선형", 또는 "불연속" 에피토프). 일반적으로, 선형 에피토프는 2차, 3차, 또는 4차 구조에 의존하거나 의존하지 않을 수 있음을 당업자는 인정할 것이다. 예를 들어, 일부 실시 형태에서, 결합 분자는 아미노산의 군이 천연 3차원 단백질 구조로 폴딩되어 있는지 여부에 무관하게 아미노산의 군에 결합한다. 다른 실시 형태에서, 에피토프를 인식하고 결합하기 위해 결합 분자는 에피토프를 이루는 아미노산 잔기가 특정 입체형태를 나타낼 것(예를 들어, 구부러지거나, 비틀리거나, 방향전환되거나, 폴딩됨)을 필요로 한다.
"향상시키다" 또는 "촉진하다", 또는 "증가시키다" 또는 "확장하다" 또는 "개선하다"는 일반적으로 비히클 또는 대조군 분자/조성물에 의해 유발되는 반응에 비교하여 더 큰 생리학적 반응(즉, 하류 효과)을 생성, 유도, 또는 유발하는 본 명세서에서 고려되는 조성물의 능력을 지칭한다. 측정가능한 생리학적 반응은, 당업계의 이해 및 본 명세서의 설명으로부터 자명한 다른 것들 중에서, 정방향 또는 역방향 세포통과의 증가를 포함할 수 있지만 이로 제한되지 않는다. 특정 실시 형태에서, "증가된" 또는 "향상된" 양은 "통계적으로 유의한" 양일 수 있으며, 비히클 또는 대조군 조성물에 의해 생성되는 반응의 1.1, 1.2, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30배 이상(예를 들어, 500, 1000배)(1을 초과하는 모든 정수 및 그 사이의 소수점, 예를 들어 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 등을 포함함)인 증가를 포함할 수 있다.
용어 "폴리펩티드" 및 "펩티드" 및 "단백질"은 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용되며, 임의의 길이의 아미노산의 중합체를 지칭한다. 중합체는 선형 또는 분지형일 수 있으며, 그것은 변형된 아미노산을 포함할 수 있고, 그것에는 비-아미노산이 개재될 수 있다. 그 용어는 또한 천연적으로 또는 개입; 예를 들어, 다이설파이드 결합 형성, 글리코실화, 지질화, 아세틸화, 인산화, 또는 임의의 다른 조작 또는 변형에 의해 변형된 아미노산 중합체를 포함한다. 예를 들어, 비천연 아미노산뿐만 아니라 당업계에 알려진 다른 변형을 포함하지만 이로 제한되지 않는 아미노산의 하나 이상의 유사체를 함유하는 폴리펩티드가 또한 이 정의 내에 포함된다. 본 개시내용의 폴리펩티드는 면역글로불린 수퍼패밀리의 항체 또는 다른 구성원에 기초할 수 있으므로, 특정 실시 형태에서, "폴리펩티드"는 단일 사슬 또는 2개 이상의 결합된 사슬로서 발생할 수 있음이 이해된다.
용어 "벡터"는 핵산 서열을 숙주 세포 내로 도입하기 위해, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 결합 분자(예를 들어, 항체)를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 핵산 서열을 담지하거나 포함하기 위해 사용되는 물질을 지칭한다. 사용에 적용가능한 벡터는, 예를 들어, 발현 벡터, 플라스미드, 파지 벡터, 바이러스 벡터, 에피솜, 및 인공 염색체를 포함하며, 이들은 숙주 세포의 염색체 내로의 안정한 통합을 위해 작동가능한 선택 서열 또는 마커를 포함할 수 있다. 또한, 벡터는 하나 이상의 선택가능한 마커 유전자 및 적절한 발현 제어 서열을 포함할 수 있다. 포함될 수 있는 선택가능한 마커 유전자는, 예를 들어, 항생제 또는 독소에 대한 저항성을 제공하거나, 영양요구성 결핍을 보충하거나, 배양 배지 내에 없는 중요한 영양소를 공급한다. 발현 제어 서열은 당업계에 잘 알려진 구성적 및 유도성 프로모터, 전사 인핸서, 전사 종결자 등을 포함할 수 있다. 2개 이상의 핵산 분자가 공동-발현되어야 하는 경우에(예를 들어, 항체 중쇄 및 경쇄 또는 항체 VH 및 VL 둘 모두), 예를 들어, 단일 발현 벡터 내로, 또는 별도의 발현 벡터 내에 둘 모두의 핵산 분자가 삽입될 수 있다. 단일 벡터 발현의 경우에, 인코딩 핵산은 하나의 공통 발현 제어 서열에 작동가능하게 연결되거나, 상이한 발현 제어 서열, 예컨대 하나의 유도성 프로모터 및 하나의 구성적 프로모터에 연결될 수 있다. 숙주 세포 내로의 핵산 분자의 도입은 당업계에 잘 알려진 방법을 사용하여 확인할 수 있다. 그러한 방법은, 예를 들어, mRNA의 노던 블롯 또는 중합효소 연쇄 반응(PCR) 증폭과 같은 핵산 분석, 유전자 생성물의 발현에 대한 면역블로팅, 또는 도입된 핵산 서열의 발현 또는 그의 상응하는 유전자 생성물을 시험하기 위한 다른 적합한 분석 방법을 포함한다. 당업자는 핵산 분자가 원하는 생성물을 생성하기에 충분한 양으로 발현됨을 이해하며, 당업계에 잘 알려진 방법을 사용하여 충분한 발현을 얻기 위해 발현 수준을 최적화할 수 있음을 추가로 이해한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "숙주"는 포유류(예를 들어, 인간)와 같은 동물을 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "숙주 세포"는 핵산 분자로 형질감염될 수 있는 특정 대상 세포 및 그러한 세포의 자손 또는 잠재적 자손을 지칭한다. 후속 세대에서 발생할 수 있는 돌연변이 또는 환경적 영향 또는 숙주 세포 게놈 내로의 핵산 분자의 통합으로 인해, 그러한 세포의 자손은 핵산 분자로 형질감염된 모세포와 동일하지 않을 수 있다.
"단리된 핵산"은 다른 게놈 DNA 서열로부터 실질적으로 분리된 핵산, 예를 들어, RNA, DNA, 또는 혼합 핵산뿐만 아니라, 천연 서열을 천연적으로 수반하는 리보솜 및 중합효소와 같은 단백질 또는 복합체이다. "단리된" 핵산 분자는 핵산 분자의 천연 공급원 내에 존재하는 다른 핵산 분자로부터 분리된 것이다. 또한, "단리된" 핵산 분자, 예컨대 cDNA 분자는 재조합 기술에 의해 생성될 경우에 다른 세포 재료, 또는 배양 배지가 실질적으로 없거나, 화학적으로 합성될 경우에 화학 전구체 또는 다른 화학물질이 실질적으로 없을 수 있다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 단일 도메인 항체 또는 항체를 인코딩하는 하나 이상의 핵산 분자는 단리되거나 정제된다. 이 용어는 천연 발생 환경으로부터 제거된 핵산 서열을 포함하며, 재조합 또는 클로닝된 DNA 단리물 및 화학적으로 합성된 유사체 또는 이종성 시스템에 의해 생물학적으로 합성된 유사체를 포함한다. 실질적으로 순수한 분자는 단리된 형태의 분자를 포함할 수 있다.
본 명세서에서 상호교환적으로 사용되는 바와 같이, "폴리뉴클레오티드" 또는 "핵산"은 임의의 길이의 뉴클레오티드의 중합체를 지칭하며, DNA 및 RNA를 포함한다. 뉴클레오티드는 데옥시리보뉴클레오티드, 리보뉴클레오티드, 변형된 뉴클레오티드 또는 염기, 및/또는 이들의 유사체, 또는 DNA 또는 RNA 중합효소에 의해, 또는 합성 반응에 의해 중합체 내로 혼입될 수 있는 임의의 기질일 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 변형된 뉴클레오티드, 예컨대 메틸화된 뉴클레오티드 및 이들의 유사체를 포함할 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "올리고뉴클레오티드"는 일반적으로 길이가 약 200개 미만의 뉴클레오티드이지만 반드시 그러하지는 않은, 일반적으로 단일-가닥인 짧은 합성 폴리뉴클레오티드를 지칭한다. 용어 "올리고뉴클레오티드" 및 "폴리뉴클레오티드"는 상호 배타적이지 않다. 폴리뉴클레오티드에 대한 상기 설명은 올리고뉴클레오티드에 동일하고 완전하게 적용가능하다. 본 개시내용의 결합 분자를 생성하는 세포는 모 하이브리도마 세포뿐만 아니라, 항체를 인코딩하는 핵산이 도입된 박테리아 및 진핵 숙주 세포를 포함할 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 본 명세서에 개시된 임의의 단일-가닥 폴리뉴클레오티드 서열의 좌측 단부는 5' 단부이고; 이중-가닥 폴리뉴클레오티드 서열의 좌측 방향은 5' 방향으로 지칭된다. 초기 RNA 전사체의 5'으로부터 3'으로의 부가의 방향은 전사 방향으로 지칭되고; RNA 전사체의 5' 단부에 대해 5'인 RNA 전사체와 동일한 서열을 갖는 DNA 가닥 상의 서열 영역은 "상류 서열"로 지칭되며; RNA 전사체의 3' 단부에 대해 3'인 RNA 전사체와 동일한 서열을 갖는 DNA 가닥 상의 서열 영역은 "하류 서열"로 지칭된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "작동적으로 연결된" 및 유사한 구문(예를 들어, 유전자 융합된)은, 핵산 또는 아미노산에 관련하여 사용될 경우에, 서로 기능적 관계로 배치된 핵산 서열 또는 아미노산 서열의 작동성 연결을 각각 지칭한다. 예를 들어, 작동적으로 연결된 프로모터, 인핸서 요소, 개방 판독 프레임, 5' 및 3' UTR, 및 종결자 서열은 핵산 분자(예를 들어, RNA)의 정확한 생성을 유발한다. 일부 실시 형태에서, 작동적으로 연결된 핵산 요소는 개방 판독 프레임의 전사 및 궁극적으로 폴리펩티드의 생성(즉, 개방 판독 프레임의 발현)을 유발한다. 다른 예로서, 작동적으로 연결된 펩티드는 기능성 도메인이 각각의 도메인의 의도된 기능을 부여하기 위해 서로 적절한 거리로 배치되는 것이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용가능한"은 동물, 및 더욱 특히 인간에서의 사용에 대해 연방 또는 주 정부의 규제 기관에 의해 승인되거나 미국 약전, 유럽 약전, 또는 다른 일반적으로 인정되는 약전에 열거되어 있음을 의미한다.
"부형제"는 약제학적으로 허용가능한 재료, 조성물, 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 용매, 또는 캡슐화 재료를 의미한다. 부형제는, 예를 들어, 캡슐화 재료 또는 첨가제, 예컨대 흡수 촉진제, 산화방지제, 결합제, 완충제, 담체, 코팅제, 착색제, 희석제, 붕해제, 유화제, 증량제, 충전제, 향미제, 보습제, 윤활제, 향료, 보존제, 추진제, 이형제, 살균제, 감미료, 가용화제, 습윤제, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 용어 "부형제"는 또한 희석제, 아쥬반트(예를 들어, 프로인트 아쥬반트(완전 또는 불완전)), 또는 비히클을 지칭할 수 있다.
일부 실시 형태에서, 부형제는 약제학적으로 허용가능한 부형제이다. 약제학적으로 허용가능한 부형제의 예는 완충제, 예컨대 포스페이트, 시트레이트, 및 다른 유기산; 아스코르브산을 포함하는 산화방지제; 저분자량(예를 들어, 약 10개 미만의 아미노산 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌, 또는 라이신; 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린을 포함하는 단당류, 이당류, 및 다른 탄수화물; 킬레이팅제, 예컨대 EDTA; 당 알코올, 예컨대 만니톨 또는 소르비톨; 염-형성 반대 이온, 예컨대 소듐; 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대 TWEEN™, 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 및 PLURONICS™를 포함한다. 약제학적으로 허용가능한 부형제의 다른 예는 문헌[Remington and Gennaro, Remington's Pharmaceutical Sciences (18th ed. 1990)]에 기재되어 있다.
일 실시 형태에서, 약제학적 제형의 다른 성분과 상용성이고, 과도한 독성, 자극, 알레르기성 반응, 면역원성, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직 또는 장기와 접촉되어 사용하기에 적합하며, 합리적인 이익/위험 비에 상응한다는 의미에서, 각각의 성분은 "약제학적으로 허용가능"하다. 예를 들어, 문헌[Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2005; Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th ed.; Rowe et al., Eds.]; 문헌[The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association: 2009; Handbook of Pharmaceutical Additives, 3rd ed.; Ash and Ash Eds.]; 문헌[Gower Publishing Company: 2007]; 문헌[Pharmaceutical Preformulation and Formulation, 2nd ed.; Gibson Ed.; CRC Press LLC: Boca Raton, FL, 2009]을 참조한다. 일부 실시 형태에서, 약제학적으로 허용가능한 부형제는 사용된 투여량 및 농도에서 이에 노출되는 세포 또는 포유류에 대해 비독성이다. 일부 실시 형태에서, 약제학적으로 허용가능한 부형제는 수성 pH 완충 용액이다.
일부 실시 형태에서, 부형제는 석유, 동물, 식물, 또는 합성 기원의 것들, 예컨대 낙화생유, 대두유, 광유, 참기름 등을 포함하는, 물 및 오일과 같은 멸균 액체이다. 조성물(예를 들어, 약제학적 조성물)이 정맥내 투여되는 경우에 물은 예시적인 부형제이다. 특히 주사 용액의 경우에, 식염 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액이 또한 액체 부형제로서 사용될 수 있다. 부형제는 또한 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 백악, 실리카 겔, 소듐 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 소듐 클로라이드, 건조 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함할 수 있다. 조성물은, 원하는 경우에, 소량의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제를 또한 함유할 수 있다. 조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼, 정제, 환제, 캡슐, 분말, 지속-방출 제형 등의 형태를 취할 수 있다. 제형을 포함하는 경구 조성물은 제약 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 사카린, 셀룰로스, 마그네슘 카르보네이트 등과 같은 표준 부형제를 포함할 수 있다.
약제학적 화합물을 포함하는 조성물은, 적합한 양의 부형제와 함께, 예를 들어, 단리되거나 정제된 형태로, 결합 분자(예를 들어, 항체)를 함유할 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "유효량" 또는 "치료적 유효량"은 원하는 결과를 유발하기에 충분한 본 명세서에 제공된 제제 및 단일 도메인 항체 또는 약제학적 조성물을 포함하는 단일 도메인 항체 또는 치료 분자의 양을 지칭한다.
용어 "대상체" 및 "환자"는 상호교환가능하게 사용될 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 특정 실시 형태에서, 대상은 포유류, 예컨대 비-영장류(예를 들어, 소, 돼지, 말, 고양이, 개, 래트 등) 또는 영장류(예를 들어, 원숭이 및 인간)이다. 특이적 실시 형태에서, 대상은 인간이다. 일 실시 형태에서, 대상은 병태 또는 장애로 진단된 포유류, 예를 들어, 인간이다. 다른 실시 형태에서, 대상은 병태 또는 장애가 발생할 위험이 있는 포유류, 예를 들어, 인간이다.
"투여하다" 또는 "투여"는, 예컨대 점막, 피내, 정맥내, 근육내 전달, 및/또는 본 명세서에 기재되거나 당업계에 알려진 임의의 다른 물리적 전달 방법에 의해, 신체 외부에 존재하는 물질을 환자에게 주사하거나 달리 물리적으로 전달하는 작용을 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "치료하다", "치료", 및 "치료하는"은, 하나 이상의 요법의 투여로부터 유발되는, 질환 또는 병태의 진행, 중증도, 및/또는 지속기간의 감소 또는 개선을 지칭한다. 환자가 여전히 기저 장애를 앓고 있을 수 있음에도 불구하고, 환자에게 개선이 관찰되도록 기저 장애와 관련된 하나 이상의 증상의 감소, 완화, 및/또는 경감이 있었는지 여부를 평가함으로써 치료를 결정할 수 있다. 용어 "치료"는 질환을 관리 및 개선하는 것 둘 모두를 포함한다. 용어 "관리하다", "관리하는", 및 "관리"는 대상이 요법으로부터 얻는 유익한 효과를 지칭하며, 이는 반드시 질환의 치유를 유발하지는 않는다.
용어 "예방하다", "예방하는", 및 "예방"은 질환, 장애, 병태, 또는 관련 증상(들)(예를 들어, 당뇨병 또는 암)의 발병(또는 재발)의 가능성을 감소시키는 것을 지칭한다.
용어 "약" 및 "대략"은 주어진 값 또는 범위의 20% 이내, 15% 이내, 10% 이내, 9% 이내, 8% 이내, 7% 이내, 6% 이내, 5% 이내, 4% 이내, 3% 이내, 2% 이내, 1% 이내, 또는 그 미만을 의미한다.
본 개시내용 및 청구범위에 사용되는 바와 같이, 단수 형태("a", "an", 및 "the")는, 문맥이 명확하게 달리 지시하지 않는 한, 복수 형태를 포함한다.
실시 형태가 용어 "포함하는"으로 본 명세서에 기재되는 경우에는 언제나, "~로 이루어진" 및/또는 "~로 본질적으로 이루어진"의 용어로 기재된 그 밖에는 유사한 실시 형태가 또한 제공됨이 이해된다. 실시 형태가 구문 "~로 본질적으로 이루어진"으로 본 명세서에 기재되는 경우에는 언제나, "~로 이루어진"의 용어로 기재된 그 밖에는 유사한 실시 형태가 또한 제공됨이 또한 이해된다.
"A와 B 사이의" 또는 "A-B 사이의"와 같은 구문에 사용되는 바와 같이, 용어 "사이의"는 A 및 B 둘 모두를 포함하는 범위를 지칭한다.
본 명세서에서 "A 및/또는 B"와 같은 구문에 사용되는 바와 같이, 용어 "및/또는"은 A 및 B 둘 모두; A 또는 B; A(단독); 및 B(단독)를 포함하도록 의도된다. 마찬가지로, "A, B, 및/또는 C"와 같은 구문에 사용되는 바와 같이, 용어 "및/또는"은 하기 실시 형태 각각을 포함하도록 의도된다: A, B, 및 C; A, B, 또는 C; A 또는 C; A 또는 B; B 또는 C; A 및 C; A 및 B; B 및 C; A(단독); B(단독); 및 C(단독).
5.2. 단일 도메인 항체
5.2.1 pIgR을 표적화하는 단일 도메인 항체
본 명세서에는, 치료제를 위한 전달 도메인으로서 작용할 수 있는, 중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)에 결합할 수 있는 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)가 제공된다.
다양한 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)는 인간 pIgR(Genbank ID: CR749533)에 결합한다(문헌[Turula, H. & Wobus, C.E. The Role of the Polymeric Immunoglobulin Receptor and Secretory Immunoglobulins during Mucosal Infection and Immunity. Viruses 10 (2018)] 참조). 다른 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)는 마우스 pIgR에 결합한다.
인간 pIgR(hpIgR)은 620-잔기 세포외 도메인(ECD), 23-잔기 막관통 도메인, 및 103-잔기 세포내 도메인을 함유하는 82 kDa의 단일-통과 막관통 수용체이다.
pIgR은 가용성 중합체 형태의 IgA 및 IgM을 상피의 기저측 측면으로부터 정점 점막 조직으로 수송한다. 기저측으로부터 정점 측면으로 중합체성 면역글로불린을 수송하는 공정은 세포통과이다. 세포통과 후에, 5개의 도메인(분비 성분)을 함유하는 pIgR ECD는 단백질분해에 의해 절단되고 IgA와 함께, 또는 IgA 없이, 점액 내로 방출된다. 세포통과에 더하여, pIgR은 IgA에 대한 안정성의 부여, 면역 배제, 항염증 특성, 및 점막 면역계에서의 공생균(commensal)의 항상성을 포함하지만 이로 제한되지 않는 몇몇 상이한 기능을 갖는다.
총 일일 항체 생성의 대략 75%는 IgA 분자에 관한 것이다. 인간에는 IgA 서브클래스를 인코딩하는 2개의 Cα 유전자가 존재한다: IgA1 및 IgA2(IgA2m(1) 및 (2) 동종이형). IgA1은, 몇몇 O-글리칸 부위를 함유하고 단백질분해 절단에 취약한, IgA2에 결여된 신장된 힌지 영역을 갖는다. 내인성 IgA는 구획-의존적 방식으로 다양한 형태로 존재한다. 단량체성 IgA(mIgA)는, 주로 골수에서 생성되는 IgA1(약 90%)으로서, 혈청에서 (1 내지 3 mg/mL의 농도로) 우세한 형태이다. 이량체성 IgA(dIgA)는 J 사슬과 C-말단 Fc 꼬리조각의 S-S 가교화를 통해 형성된다. dIgA는 표적 작용 부위에서 국소적으로 생성되고, 점막 표면을 가로질러 호흡기, GI, 및 비뇨생식관의 분비물 내로 수송된다. 분비 IgA(S-IgA)는 중합체성 Ig 수용체(pIgR)의 세포외 도메인을 갖는 dIgA 복합체를 통해 형성된다. 상피 세포의 점막 표면에서의 분비 성분(SC)의 절단은 S-IgA를 방출한다.
중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)는 Fc 및 J-사슬 매개 상호작용을 통해 가용성 이량체성 IgA에 결합한다. pIgR은 IgG 분자에 결합하거나 점막 상피를 가로질러 이를 수송하지 않는다. IgG 분자는 내강-표적화된 활성 수송 메커니즘이 결여되어 있지만, IgG에 pIgR-결합 능력을 부여하는 것은 점막 내강 내로의 IgG 항체의 선택적 수송을 매개할 수 있다.
pIgR의 구조는 도 6a에 요약되어 있다. pIgR-매개 수송의 메커니즘은 도 6b에 요약되어 있다. 다양한 장기에서의 pIgR의 발현을 도 7에 나타낸다.
본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 정점 표면으로부터 기저측 표면으로(역방향 세포통과) 뿐만 아니라 기저측으로부터 정점 측면으로도(세포통과) 수송된다는 것이 본 개시내용에 의한 의외의 발견이다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)는 pIgR에 대한 IgA 결합과 경쟁한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)는 pIgR에 대한 IgA 결합을 촉진한다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 4 내지 525 nM이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 525 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 400 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 350 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 300 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 250 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 200 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 150 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 100 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 50 nM 미만이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 4 내지 525 nm이다. 일부 실시 형태에서, pIgR에 대한 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 결합의 KD는 4 내지 34 nm이다. 본 명세서에 기재된 생물층 간섭계 실험은 인간 pIgR 엑토도메인에 대한 결합에 대해 50 nM 미만의 KD 값을 갖는 8개의 VHH 도메인 결합제를 나타낸다(표 1 참조).
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 Tm은 53 내지 77℃이다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 Tm은 53.9 내지 76.4℃이다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 Tm은 61 내지 77℃이다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)의 Tm은 61 내지 71℃이다.
일부 실시 형태에서, MDCK-hpIgR 세포에 대한 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인) 결합에 대한 EC50 값은 10 nM 미만이다. VHH 도메인을 포함하는 6개의 그러한 결합제가 표 1에 기재되어 있다.
일 태양에서, pIgR의 도메인 1에 결합하는 VHH 도메인이 본 명세서에 제공되며, 여기서 VHH 도메인은 본 명세서에 기재된 VHH2 또는 VHH3의 CDR1, CDR2, 및/또는 CDR3 서열을 포함한다. 따라서, 일부 실시 형태에서, pIgR의 도메인 1에 결합하는 VHH 도메인은 하기 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열을 포함한다:
VHH2:
i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열;
ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열;
iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열;
iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열;
v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열; 또는
vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열; 또는
VHH3:
i) INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열;
ii) GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열;
iii) GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열;
iv) GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열;
v) SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열; 또는
vi) GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열.
일 태양에서, pIgR의 도메인 2에 결합하는 VHH 도메인이 본 명세서에 제공되며, 여기서 VHH 도메인은 본 명세서에 기재된 VHH4 또는 VHH6의 CDR1, CDR2, 및/또는 CDR3 서열을 포함한다. 따라서, 일부 실시 형태에서, pIgR의 도메인 2에 결합하는 VHH 도메인은 하기 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열을 포함한다:
VHH4:
i) SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열;
ii) GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열;
iii) GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열, 및 NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열;
iv) GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열;
v) SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열, 및 NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열; 또는
vi) GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열; 또는
VHH6:
i) SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열;
ii) GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열; 또는
iii) GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열, 및 NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열;
iv) GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열;
v) SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열, 및 NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열; 또는
vi) GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열.
일 태양에서, pIgR의 도메인 4-5에 결합하는 VHH 도메인이 본 명세서에 제공되며, 여기서 VHH 도메인은 본 명세서에 기재된 VHH5, VHH7, VHH9, VHH10, 또는 VHH11의 CDR1, CDR2, 및/또는 CDR3 서열을 포함한다. 따라서, 일부 실시 형태에서, pIgR의 도메인 4-5에 결합하는 VHH 도메인은 하기 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열을 포함한다:
VHH5:
i) SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열;
ii) GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열;
iii) GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열;
iv) GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열;
v) SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열;
VHH7:
i) INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열;
ii) RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열;
iii) RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열;
iv) RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열;
v) SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열; 또는
vi) RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열;
VHH9:
i) TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열;
ii) GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열;
iii) GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열, 및 NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열;
iv) GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열;
v) STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열, 및 NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열;
VHH10:
i) RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열;
ii) GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열, SWSGSS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열;
iii) GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열;
iv) GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열;
v) TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열; 또는
vi) GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열; 또는
VHH11:
i) FTTYRMG(서열 번호 258) 또는 TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열;
ii) GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열;
iii) GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열;
iv) GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열;
v) TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열.
일 태양에서, pIgR의 도메인 5에 결합하는 VHH 도메인이 본 명세서에 제공되며, 여기서 VHH 도메인은 본 명세서에 기재된 VHH12의 CDR1, CDR2, 및/또는 CDR3 서열을 포함한다. 따라서, 일부 실시 형태에서, pIgR의 도메인 5에 결합하는 VHH 도메인은 하기 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열을 포함한다:
VHH12:
i) FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열;
ii) GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열;
iii) GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열;
iv) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열;
v) SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH 도메인이다. 예시적인 VHH 도메인은 하기 기재된 바와 같이 생성되며, 이들 VHH 도메인(mpIgR_011, hpIgR_021, hpIgR_073, hpIgR_175, hpIgR_181, hpIgR_198, hpIgR_201, hpIgR_221, hpIgR_225, hpIgR_250, hpIgR_266, mpIgR_338, 및 hpIgR_349로 지칭됨)은 도 13에 나타낸 바와 같이 일부 서열 특징을 공유한다. 고도로 보존된 서열 유사성의 영역은 황색으로 나타낸다. 도 14에 나타낸 바와 같이, mpIgR_011은 VHH1이고, hpIgR_021은 VHH3이고, hpIgR_073은 VHH4이고, hpIgR_175는 VHH5이고, hpIgR_181은 VHH6이고, hpIgR_198은 VHH7이고, hpIgR_201은 VHH8이고, hpIgR_221은 VHH9이고, hpIgR_225는 VHH10이고, hpIgR_250은 VHH11이고, hpIgR_266은 VHH12이고, mpIgR_338은 VHH2이다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH1, VHH2, VHH3, VHH4, VHH5, VHH6, VHH7, VHH9, VHH10, VHH11, 및 VHH12 중 어느 하나의 하나 이상의 CDR 서열을 포함한다.
따라서, 일부 실시 형태에서, 본 명세서에는 하기 구조를 포함하는 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체가 제공된다: FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4, 여기서 CDR 서열은 VHH1, VHH2, VHH3, VHH4, VHH5, VHH6, VHH7, VHH9, VHH10, VHH11, 및 VHH12 내의 것들에 대해 선택된다.
더욱 구체적으로, 본 명세서에는 하기 구조를 포함하는 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체가 제공된다: FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4, 여기서
(i) CDR1은 SYRMG(서열 번호 1), INVMG(서열 번호 2), SNAMG(서열 번호 3), SYAMG(서열 번호 4), SDAMG(서열 번호 5), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GLTFSSY(서열 번호 10), GSIFSIN(서열 번호 11), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), GSSVSSD(서열 번호 14), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GLTFSSYR(서열 번호 20), GSIFSINV(서열 번호 21), GTSVSSNA(서열 번호 22), GRTFSSYA(서열 번호 23), GSSVSSDA(서열 번호 24), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GLTFSSYRMG(서열 번호 154), GSIFSINVMG(서열 번호 155), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), GRTFSSYAMG(서열 번호 157), GSSVSSDAMG(서열 번호 158), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSYRMG(서열 번호 164), SINVMG(서열 번호 165), SSNAMG(서열 번호 166), SSYAMG(서열 번호 167), SSDAMG(서열 번호 168), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GLTFSSYRMG(서열 번호 174), GSIFSINVMG(서열 번호 175), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), GRTFSSYAMG(서열 번호 177), GSSVSSDAMG(서열 번호 178), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 및 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖고;
(ii) CDR2는 AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DWNGRGTYY(서열 번호 40), WNGRGTY(서열 번호 260), NGGGI(서열 번호 41), GGG(서열 번호 261), DRIAT(서열 번호 42), TWNGGT(서열 번호 43), WNGG(서열 번호 263), SGGGT(서열 번호 44), GGG(서열 번호 264), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDWNGRGTYY(서열 번호 50), IDWNGRGTYYR(서열 번호 270), INGGGIT(서열 번호 51), IDRIATT(서열 번호 52), ITWNGGTT(서열 번호 53), ISGGGTT(서열 번호 54), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194), LVARINGGGITH(서열 번호 195), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197), WVAFISGGGTTT(서열 번호 198), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204), RINGGGITH(서열 번호 205), FIDRIATTT(서열 번호 206), AITWNGGTTY(서열 번호 207), FISGGGTTT(서열 번호 208), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), 및 SITWNGGSTS(서열 번호 213)로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖고;
(iii) CDR3은 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61), DVFGSSGYVETY(서열 번호 62), PLTAR(서열 번호 63), DPFNQGY(서열 번호 64), PLTSR(서열 번호 65), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71), SIDLNWYGGMD(서열 번호 272), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72), TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273), DVFGSSGYVETY(서열 번호 73), VFGSSGYVET(서열 번호 274), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), DPFNQGY(서열 번호 75), PFNQG(서열 번호 276), PLTSR(서열 번호 76), LTS(서열 번호 277), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82), AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283), CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83), AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284), KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84), NHPLTAR(서열 번호 85), AADPFNQGY(서열 번호 86), NHPLTSR(서열 번호 87), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215), DVFGSSGYVETY(서열 번호 216), PLTAR(서열 번호 217), DPFNQGY(서열 번호 218), PLTSR(서열 번호 219), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225), AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226), KADVFGSSGYVET(서열 번호 227), NHPLTA(서열 번호 228), AADPFNQG(서열 번호 229), NHPLTS(서열 번호 230), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237), DVFGSSGYVETY(서열 번호 238), PLTAR(서열 번호 239), DPFNQGY(서열 번호 240), PLTSR(서열 번호 241), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에는 표 1에 제시된 항체 중 어느 하나의 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 포함하는 가변 영역(예를 들어, VH)을 포함하는 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체가 제공된다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, RYAMG GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSY SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR1 서열, 예를 들어, GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, SWSGGS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR2 서열, 예를 들어, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71) 또는 SIDLNWYGGMD(서열 번호 272)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82) 또는 AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열을 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열을 포함한다. 본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 내에 존재하는 CDR3 서열, 예를 들어, ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다:
a) VHH2:
i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열;
ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열;
iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열;
iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열;
v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열; 또는
vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열;
b) VHH3:
i) INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열;
ii) GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열;
iii) GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열;
iv) GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열;
v) SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열; 또는
vi) GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열;
c) VHH4:
i) SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열;
ii) GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열;
iii) GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열, 및 NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열;
iv) GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열;
v) SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열, 및 NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열; 또는
vi) GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열;
d) VHH5:
i) SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열;
ii) GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열;
iii) GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열;
iv) GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열;
v) SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열;
e) VHH6:
i) SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열;
ii) GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열;
iii) GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열, 및 NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열;
iv) GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열;
v) SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열, 및 NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열; 또는
vi) GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열;
f) VHH7:
i) INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열;
ii) RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열;
iii) RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열;
iv) RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열;
v) SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열; 또는
vi) RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열;
g) VHH9:
i) TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열;
ii) GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열;
iii) GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열, 및 NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열;
iv) GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열;
v) STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열, 및 NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열;
h) VHH10:
i) RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열;
ii) GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열, SWSGSS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열;
iii) GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열;
iv) GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열;
v) TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열; 또는
vi) GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열;
i) VHH11:
i) FTTYRMG(서열 번호 258) 또는 TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열;
ii) GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열;
iii) GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열;
iv) GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열;
v) TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열; 및
j) VHH12:
i) FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열;
ii) GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열;
iii) GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열;
iv) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열;
v) SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열; 또는
vi) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60)의 CDR3 서열; ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71) 또는 SIDLNWYGGMD(서열 번호 272)의 CDR3 서열; iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82) 또는 AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283)의 CDR3 서열; iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR 2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214)의 CDR3 서열; v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225)의 CDR3 서열; 및 vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열; ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열; iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열; iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열; v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열; 및 vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열; ii) GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열; iii) GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열; iv) GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열; v) SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열; 및 vi) GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열; ii) GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열; iii) GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열, 및 NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열; iv) GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열; v) SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열, 및 NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열; 및 vi) GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열; ii) GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열; iii) GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열; iv) GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열; v) SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열; 및 vi) GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열; ii) GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열; iii) GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열, 및 NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열; iv) GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열; v) SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열, 및 NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열; 및 vi) GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열; ii) RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열; iii) RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열; iv) RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열; v) SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열; 및 vi) RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열; ii) GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열; iii) GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열, 및 NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열; iv) GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열; v) STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열, 및 NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열; 및 vi) GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열; ii) GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열, SWSGSS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열; iii) GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열; iv) GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열; v) TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열; 및 vi) GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) FTTYRMG(서열 번호 258) 또는 TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열; ii) GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열; iii) GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열; iv) GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열; v) TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열; 및 vi) GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함한다: i) FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열; ii) GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열; iii) GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열; iv) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열; v) SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열; 및 vi) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH1로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 상기 기재된 바와 같이, CDR 영역은 당업자에게 잘 알려져 있고, 잘 알려진 넘버링 시스템에 의해 한정되었다. 이들 초가변 영역 또는 CDR 각각으로부터의 잔기는 상기 표 1에 언급된다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH2로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH3으로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH4로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH5로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH6으로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH7로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH9로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 VHH10으로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체는 VHH11로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체는 VHH12로부터의 하나 이상의 CDR 영역을 갖는다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 CDR1의 아미노산 서열을 갖는 CDR1을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR2를 갖는다. 다른 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR2의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR2를 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 CDR1 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR2 및 CDR3을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 CDR1, CDR2, 및 CDR3의 아미노산 서열을 갖는 CDR1, CDR2, 및 CDR3을 갖는다. CDR 서열은 잘 알려진 넘버링 시스템에 따라 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDR은 카밧 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 AbM 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 초티아 넘버링에 따른다. 다른 실시 형태에서, CDR은 Contact 넘버링에 따른다. 일부 실시 형태에서, CDR은 IMGT 넘버링에 따른다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1, VHH2, VHH3, VHH4, VHH5, VHH6, VHH7, VHH9, VHH10, VHH11, 및 VHH12의 하나 이상의 프레임워크 영역을 추가로 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
본 명세서에 기재된 태양의 다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열을 포함하는 VHH 도메인으로부터 유래된 프레임워크를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1의 아미노산 서열을 갖는 FR1을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR2의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR2를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR2 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR3 및 FR24의 아미노산 서열을 갖는 FR3 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR3의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR3을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR3, 및 FR4를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103에 제시된 바와 같은 FR1, FR2, FR3, 및 FR4의 아미노산 서열을 갖는 FR1, FR2, FR3, 및 FR4를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 인간화 단일 도메인 항체이다.
본 명세서에 기재된 프레임워크 영역은 CDR 넘버링 시스템의 경계에 기초하여 결정된다. 다시 말해서, 예를 들어, 카밧, IMGT, 또는 초티아에 의해 CDR이 결정된다면, 프레임워크 영역은 N-말단으로부터 C-말단으로 FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4의 형식으로 가변 영역 내의 CDR을 둘러싸는 아미노산 잔기이다. 예를 들어, FR1은, 예를 들어, 카밧 넘버링 시스템, IMGT 넘버링 시스템, 또는 초티아 넘버링 시스템에 의해 한정되는 바와 같이 CDR1 아미노산 잔기에 대해 N-말단인 아미노산 잔기로서 한정되고, FR2는, 예를 들어, 카밧 넘버링 시스템, IMGT 넘버링 시스템, 또는 초티아 넘버링 시스템에 의해 한정되는 바와 같이 CDR1 및 CDR2 아미노산 잔기 사이의 아미노산 잔기로서 한정되고, FR3은, 예를 들어, 카밧 넘버링 시스템, IMGT 넘버링 시스템, 또는 초티아 넘버링 시스템에 의해 한정되는 바와 같이 CDR2 및 CDR3 아미노산 잔기 사이의 아미노산 잔기로서 한정되고, FR4는, 예를 들어, 카밧 넘버링 시스템, IMGT 넘버링 시스템, 또는 초티아 넘버링 시스템에 의해 한정되는 바와 같이 CDR3 아미노산 잔기에 대해 C-말단인 아미노산 잔기로서 한정된다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102)의 서열을 포함한다.
일부 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는
QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열을 포함한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 항체 VHH1, VHH2, VHH3, VHH4, VHH5, VHH6, VHH7, VHH9, VHH10, VHH11, 및 VHH12 중 어느 하나에 비해 특정 % 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
2개의 서열(예를 들어, 아미노산 서열 또는 핵산 서열) 사이의 % 동일성의 결정은 수학적 알고리즘을 사용하여 달성할 수 있다. 2개의 서열의 비교에 이용되는 수학적 알고리즘의 바람직한 비제한적인 예는 문헌[Karlin and Altschul, 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:5873 5877]에서와 같이 변형된 문헌[Karlin and Altschul, 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87:2264 2268]의 알고리즘이다. 그러한 알고리즘은 문헌[Altschul et al., 1990, J. Mol. Biol. 215:403]의 NBLAST 및 XBLAST 프로그램에 포함된다. 예를 들어, 점수=100, 단어 길이=12에 대해 설정된 NBLAST 뉴클레오티드 프로그램 파라미터로 BLAST 뉴클레오티드 검색을 수행하여 본 명세서에 기재된 핵산 분자와 상동성인 뉴클레오티드 서열을 얻을 수 있다. 예를 들어, 점수 50, 단어 길이=3으로 설정된 XBLAST 프로그램 파라미터로 BLAST 단백질 검색을 수행하여 본 명세서에 기재된 단백질 분자와 상동성인 아미노산 서열을 얻을 수 있다. 비교 목적을 위한 갭 정렬을 얻기 위해, 문헌[Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res. 25:3389 3402]에 기재된 바와 같이 갭 BLAST가 이용될 수 있다. 대안적으로, PSI BLAST를 사용하여 분자 사이의 원거리 관계(Id.)를 검출하는 반복된 검색을 수행할 수 있다. BLAST, 갭 BLAST, 및 PSI Blast 프로그램을 이용할 경우, 각각의 프로그램(예를 들어, XBLAST 및 NBLAST)의 디폴트 파라미터가 사용될 수 있다(예를 들어, 월드와이드 웹, ncbi.nlm.nih.gov 상의 미국 국립 생물 정보 센터(NCBI) 참조). 서열의 비교에 이용되는 수학적 알고리즘의 다른 바람직한 비제한적인 예는 문헌[Myers and Miller, 1988, CABIOS 4:11 17]의 알고리즘이다. 그러한 알고리즘은 ALIGN 프로그램(버전 2.0)에 포함되며, 이는 GCG 서열 정렬 소프트웨어 패키지의 일부이다. 아미노산 서열을 비교하기 위한 ALIGN 프로그램을 이용할 경우, PAM120 가중치 잔기 표, 12의 갭 길이 페널티, 및 4의 갭 페널티가 사용될 수 있다.
갭을 허용하거나 허용하지 않으면서 상기 기재된 것들과 유사한 기술을 사용하여 2개의 서열 사이의 % 동일성을 결정할 수 있다. % 동일성의 계산에서는, 전형적으로 정확한 일치만이 계수된다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VHH 도메인을 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 93의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 94의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 95의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 96의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 면역특이적으로 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 97의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 98의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 99의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 100의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 101의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 102의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 서열 번호 103의 아미노산 서열에 대해 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 프레임워크를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합한다.
5.2.2. 인간화 단일 도메인 항체
본 명세서에 기재된 단일 도메인 항체는 인간화 단일 도메인 항체를 포함한다. 낙타과 종으로부터의 단일 도메인 항체를 인간화하는 일반적인 전략이 기재되어 있으며(예를 들어, 문헌[Vincke et al., J. Biol. Chem., 2009, 284(5):3273-3284]), 본 명세서에 개시된 바와 같은 인간화 VHH 도메인을 생성하기에 유용하다. 낙타과 종으로부터의 인간화 단일 도메인 항체의 설계는 VHH 내의 홀마크 잔기, 예컨대 잔기 11, 37, 44, 45, 및 47(카밧에 따른 잔기 넘버링)을 포함할 수 있다(문헌[Muyldermans, Reviews Mol Biotech 74:277-302 (2001)]).
인간화 항체, 예컨대 본 명세서에 개시된 인간화 단일 도메인 항체는 또한, CDR-그래프팅(유럽 특허 제EP 239,400호; 국제 출원 공개 제WO 91/09967호; 및 미국 특허 제5,225,539호, 제5,530,101호, 및 제5,585,089호), 베니어링(veneering) 또는 재표면화(resurfacing)(유럽 특허 제EP 592,106호 및 제EP 519,596호; 문헌[Padlan, 1991, Molecular Immunology 28(4/5):489-498]; 문헌[Studnicka et al., 1994, Protein Engineering 7(6):805-814]; 및 문헌[Roguska et al., 1994, PNAS 91:969-973]), 사슬 셔플링(chain shuffling)(미국 특허 제5,565,332호), 및 예를 들어, 미국 특허 제6,407,213호, 미국 특허 제5,766,886호, 제WO 9317105호, 문헌[Tan et al., J. Immunol. 169:1119 25 (2002)], 문헌[Caldas et al., Protein Eng. 13(5):353-60 (2000)], 문헌[Morea et al., Methods 20(3):267 79 (2000)], 문헌[Baca et al., J. Biol. Chem. 272(16):10678-84 (1997)], 문헌[Roguska et al., Protein Eng. 9(10):895 904 (1996)], 문헌[Couto et al., Cancer Res. 55 (23 Supp):5973s- 5977s (1995)], 문헌[Couto et al., Cancer Res. 55(8):1717-22 (1995)], 문헌[Sandhu JS, Gene 150(2):409-10 (1994)], 및 문헌[Pedersen et al., J. Mol. Biol. 235(3):959-73 (1994)]에 개시된 기술을 포함하지만 이로 제한되지 않는 당업계에 알려진 다양한 기술을 사용하여 생성할 수 있다. 미국 특허 출원 공개 제US 2005/0042664 A1호(Feb. 24, 2005)를 또한 참조하며, 이들 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 인간 pIgR을 포함하는 pIgR에 결합하는 인간화 단일 도메인 항체일 수 있다. 예를 들어, 본 개시내용의 인간화 단일 사슬 항체는 VHH1, VHH2, VHH3, VHH4, VHH5, VHH6, VHH7, VHH9, VHH10, VHH11, 및/또는 VHH12의 하나 이상의 CDR을 포함할 수 있다. 비-인간 항체를 인간화하기 위한 다양한 방법이 당업계에 알려져 있다. 예를 들어, 인간화 항체는 비-인간인 공급원으로부터 그것에 도입된 하나 이상의 아미노산 잔기를 가질 수 있다. 이러한 비-인간 아미노산 잔기는 종종 "도입(import)" 잔기로 지칭되며, 이는 전형적으로 "도입" 가변 도메인으로부터 취해진다. 예를 들어, 문헌[Jones et al., 1986, Nature 321:522-25]; 문헌[Riechmann et al., 1988, Nature 332:323-27]; 및 문헌[Verhoeyen et al., 1988, Science 239:1534-36]의 방법에 따라, 초가변 영역 서열로 인간 항체의 상응하는 서열을 치환함으로써 인간화를 수행할 수 있다.
일부 경우에, 인간화 항체는 CDR 그래프팅에 의해 작제되며, 여기서 모 비-인간 항체의 CDR의 아미노산 서열이 인간 항체 프레임워크 상에 그래프팅된다. 예를 들어, 파들란(Padlan) 등은 CDR 내의 잔기 중 약 1/3만이 항원과 실제로 접촉됨을 밝혀내고, 이들을 "특이성 결정 잔기" 또는 SDR로 명명하였다(문헌[Padlan et al., 1995, FASEB J. 9:133-39]). SDR 그래프팅 기술에서는, SDR 잔기만이 인간 항체 프레임워크 상에 그래프팅된다(예를 들어, 문헌[Kashmiri et al., 2005, Methods 36:25-34] 참조).
인간화 항체의 제조에 사용될 인간 가변 도메인의 선택은 항원성을 감소시키기 위해 중요할 수 있다. 예를 들어, 소위 "최적합(best-fit)" 방법에 따라, 비-인간 항체의 가변 도메인의 서열을 알려진 인간 가변-도메인 서열의 전체 라이브러리에 대해 스크리닝한다. 비-인간 항체의 것에 가장 가까운 인간 서열은 인간화 항체에 대한 인간 프레임워크로서 선택될 수 있다(문헌[Sims et al., 1993, J. Immunol. 151:2296-308]; 및 문헌[Chothia et al., 1987, J. Mol. Biol. 196:901-17]). 다른 방법은 경쇄 또는 중쇄의 특정 하위군의 모든 인간 항체의 공통 서열로부터 유래된 특정 프레임워크를 사용한다. 동일한 프레임워크가 몇몇 상이한 인간화 항체에 사용될 수 있다(문헌[Carter et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4285-89]; 및 문헌[Presta et al., 1993, J. Immunol. 151:2623-32]). 일부 경우에, 프레임워크는 가장 풍부한 인간 서브클래스, VL6 하위군 I(VL6I) 및 VH 하위군 III(VHIII)의 공통 서열로부터 유래된다. 다른 방법에서는, 인간 생식계열 유전자가 프레임워크 영역의 공급원으로서 사용된다.
초인간화라고 칭하는 CDR의 비교에 기초하는 대안적인 패러다임에서, FR 상동성은 무관하다. 그 방법은 비-인간 서열과 기능성 인간 생식계열 유전자 레퍼토리의 비교로 이루어진다. 이어서, 뮤린 서열과 동일하거나 밀접하게 관련된 표준 구조를 인코딩하는 유전자가 선택된다. 그 다음에, 비-인간 항체와 표준 구조를 공유하는 유전자 내에서, CDR 내에서 가장 높은 상동성을 갖는 것들이 FR 공여자로서 선택된다. 최종적으로, 비-인간 CDR은 이들 FR 상에 그래프팅된다(예를 들어, 문헌[Tan et al., 2002, J. Immunol. 169:1119-25] 참조).
항체가 항원에 대한 이들의 친화성 및 다른 유리한 생물학적 특성을 유지하면서 인간화되는 것이 일반적으로 추가로 바람직하다. 이러한 목표를 달성하기 위해, 일 방법에 따라, 모 서열 및 인간화 서열의 3차원 모델을 사용하여 모 서열 및 다양한 개념적(conceptual) 인간화 생성물의 분석 공정에 의해 인간화 항체가 제조된다. 3차원 면역글로불린 모델이 흔히 이용 가능하고, 당업자에게 익숙하다. 선택된 후보 면역글로불린 서열의 가능한 3차원 입체형태 구조를 예시하고 디스플레이하는 컴퓨터 프로그램이 이용 가능하다. 이들은, 예를 들어, WAM(문헌[Whitelegg and Rees, 2000, Protein Eng. 13:819-24]), Modeller(문헌[Sali and Blundell, 1993, J. Mol. Biol. 234:779-815]), 및 Swiss PDB Viewer(문헌[Guex and Peitsch, 1997, Electrophoresis 18:2714-23])를 포함한다. 이들 디스플레이에 대한 조사는 후보 면역글로불린 서열의 기능에 있어서의 잔기의 가능성 있는 역할의 분석, 예를 들어, 후보 면역글로불린이 그의 항원에 결합하는 능력에 영향을 주는 잔기의 분석을 가능하게 한다. 이러한 방식으로, 원하는 항체 특징, 예컨대 표적 항원(들)에 대한 증가된 친화성이 달성되도록 수용자 서열 및 도입 서열로부터 FR 잔기가 선택되고 조합될 수 있다. 일반적으로, 초가변 영역은 항원 결합에 영향을 미침에 있어서 직접적이고 가장 실질적으로 관여한다.
항체 인간화를 위한 다른 방법은 인간 스트링 함량(HSC: Human String Content)으로 명명되는 항체 인간도(antibody humanness)의 계량에 기초한다. 이 방법은 마우스 서열을 인간 생식계열 유전자의 레퍼토리와 비교하고, 차이를 HSC로서 채점한다. 이어서, 다중의 다양한 인간화 변이체를 생성하기 위해 전반적 동일성 측정(global identity measure)을 사용하기보다는 그의 HSC를 최대화함으로써 표적 서열을 인간화한다(문헌[Lazar et al., 2007, Mol. Immunol. 44:1986-98]).
상기 기재된 방법에 더하여, 경험적 방법을 사용하여 인간화 항체를 생성하고 선택할 수 있다. 이들 방법은 인간화 변이체의 큰 라이브러리의 생성 및 풍부화 기술(enrichment technology) 또는 고처리량 스크리닝 기술을 사용하는 최상의 클론의 선택에 기초하는 것들을 포함한다. 항체 변이체는 파지, 리보솜, 및 효모 디스플레이 라이브러리로부터 뿐만 아니라 박테리아 콜로니 스크리닝에 의해 단리될 수 있다(예를 들어, 문헌[Hoogenboom, 2005, Nat. Biotechnol. 23:1105-16]; 문헌[Dufner et al., 2006, Trends Biotechnol. 24:523-29]; 문헌[Feldhaus et al., 2003, Nat. Biotechnol. 21:163-70]; 및 문헌[Schlapschy et al., 2004, Protein Eng. Des. Sel. 17:847-60] 참조).
FR 라이브러리 접근법에서는, 잔류 변이체의 집합이 FR 내의 특이적 위치에 도입된 후에 라이브러리를 스크리닝하여 그래프팅된 CDR을 가장 잘 지원하는 FR을 선택한다. 치환될 잔기는 CDR 구조에 잠재적으로 기여하는 것으로 식별된 "베르니어(Vernier)" 잔기의 일부 또는 전부를 포함할 수 있거나(예를 들어, 문헌[Foote and Winter, 1992, J. Mol. Biol. 224:487-99] 참조), 바카(Baca) 등에 의해 식별된 표적 잔기의 더 제한된 세트로부터의 것일 수 있다(문헌[1997, J. Biol. Chem. 272:10678-84]).
FR 셔플링에서는, 선택된 잔기 변이체의 조합 라이브러리를 생성하는 대신에 비-인간 CDR과 전체 FR이 조합된다(예를 들어, 문헌[Dall'Acqua et al., 2005, Methods 36:43-60] 참조). 1-단계 FR 셔플링 공정이 사용될 수 있다. 생성된 항체가 향상된 발현, 증가된 친화성, 및 열 안정성을 포함하는 개선된 생화학적 및 물리화학적 특성을 나타냈으므로, 그러한 공정은 효율적인 것으로 나타났다(예를 들어, 문헌[Damschroder et al., 2007, Mol. Immunol. 44:3049-60] 참조).
"인간화조작(humaneering)" 방법은 필수 최소 특이성 결정인자(MSD: minimum specificity determinant)의 실험적 식별에 기초하며, 비-인간 단편의 인간 FR의 라이브러리 내로의 순차적 대체 및 결합의 평가에 기초한다. 이 방법론은 전형적으로 에피토프 유지 및 별개의 인간 V-세그먼트 CDR을 갖는 다중 서브클래스로부터의 항체의 식별을 유발한다.
"인간 조작" 방법은 인간에서 감소된 면역원성을 갖는 변형된 항체를 생성하도록 항체의 아미노산 서열에 특이적인 변화를 일으킴으로써 비-인간 항체 또는 항체 단편을 변경하는 것을 포함하며, 이는 그럼에도 불구하고 원래의 비-인간 항체의 바람직한 결합 특성을 유지한다. 일반적으로, 그 기술은 비-인간 항체의 아미노산 잔기를 "저위험", "중간 위험", 또는 "고위험" 잔기로서 분류하는 단계를 포함한다. 특정 치환을 실행하는 것의 예측된 이익(예를 들어, 인간에서의 면역원성)을 생성되는 항체의 폴딩에 치환이 영향을 줄 위험에 대해 평가하는 전반적 위험/보상 계산을 사용하여 분류가 수행된다. 비-인간 항체의 가변 영역으로부터의 아미노산 서열을 특이적 또는 공통 인간 항체 서열의 상응하는 영역과 정렬함으로써, 비-인간 항체 서열의 주어진 위치에서 치환될 특정 인간 아미노산 잔기(예를 들어, 저위험 또는 중간 위험)를 선택할 수 있다. 정렬에 따라 비-인간 서열 내의 저위험 또는 중간 위험 위치에서의 아미노산 잔기로 인간 항체 서열 내의 상응하는 잔기를 치환할 수 있다. 인간 조작된 단백질을 제조하기 위한 기술은 문헌[Studnicka et al., 1994, Protein Engineering 7:805-14]; 미국 특허 제5,766,886호; 제5,770,196호; 제5,821,123호; 및 제5,869,619호; 및 PCT 출원 공개 제WO 93/11794호에 더욱 상세하게 기재되어 있다.
복합 인간 항체는, 예를 들어, Composite Human Antibody™ 기술(영국 캠브리지 소재의 Antitope Ltd.)을 사용하여 생성할 수 있다. 복합 인간 항체를 생성하기 위해, T 세포 에피토프를 회피함으로써 생성되는 항체의 면역원성을 최소화하는 방식으로 다중의 인간 항체 가변 영역 서열의 단편으로부터 가변 영역 서열이 설계된다.
탈면역화된 항체는 T-세포 에피토프가 제거된 항체이다. 탈면역화된 항체를 제조하는 방법이 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌[Jones et al., Methods Mol Biol. 2009;525:405-23, xiv], 및 문헌[De Groot et al., Cell. Immunol. 244:148-153(2006)]을 참조한다. 탈면역화된 항체는 T-세포 에피토프-고갈 가변 영역 및 인간 불변 영역을 포함한다. 약술하면, 항체의 가변 영역이 클로닝되고, T 세포 증식 검정에서 항체의 가변 영역으로부터 유래된 중첩 펩티드를 시험함으로써 T-세포 에피토프가 후속적으로 식별된다. 컴퓨터내(in silico) 방법을 통해 T 세포 에피토프를 식별하여 인간 MHC 클래스 II에 대한 펩티드 결합을 식별한다. 가변 영역에 돌연변이를 도입하여 인간 MHC 클래스 II에 대한 결합을 제거한다. 이어서, 돌연변이된 가변 영역을 이용하여 탈면역화된 항체를 생성한다.
5.2.3. 단일 도메인 항체 변이체
일부 실시 형태에서는, 본 명세서에 기재된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체의 아미노산 서열 변형(들)이 고려된다. 예를 들어, 특이성, 열안정성, 발현 수준, 이펙터 기능, 글리코실화, 감소된 면역원성, 또는 용해도를 포함하지만 이로 제한되지 않는 항체의 결합 친화성 및/또는 다른 생물학적 특성을 최적화하는 것이 바람직할 수 있다. 따라서, 본 명세서에 기재된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체에 더하여, 본 명세서에 기재된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체의 변이체가 제조될 수 있음이 고려된다. 예를 들어, 적절한 뉴클레오티드 변화를 인코딩 DNA 내로 도입하는 단계 및/또는 원하는 항체 또는 폴리펩티드의 합성에 의해 단일 도메인 항체 변이체가 제조될 수 있다. 아미노산 변화가 단일 도메인 항체의 번역후 공정을 변경할 수 있음을 당업자는 인정한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는, 예를 들어, 단일 도메인 항체에 대한 임의의 유형의 분자의 공유적 부착에 의해 화학적으로 변형된다. 항체 유도체는, 예를 들어, 글리코실화, 아세틸화, 페길화, 인산화, 아미드화, 알려진 보호기/차단기에 의한 유도체화, 단백질분해 절단, 세포 리간드 또는 다른 단백질에 대한 연결, 또는 하나 이상의 면역글로불린 도메인(예를 들어, Fc 또는 Fc의 일부)에 대한 접합에 의해 화학적으로 변형된 항체를 포함할 수 있다. 특이적 화학적 절단, 아세틸화, 제형화, 튜니카마이신의 대사 합성 등을 포함하지만 이로 제한되지 않는 알려진 기술에 의해 다수의 화학적 변형 중 임의의 것이 실행될 수 있다. 또한, 항체는 하나 이상의 비-고전적 아미노산을 함유할 수 있다.
변이는 원래의 항체 또는 폴리펩티드와 비교하여 아미노산 서열의 변화를 유발하는 단일 도메인 항체 또는 폴리펩티드를 인코딩하는 하나 이상의 코돈의 치환, 결실, 또는 삽입일 수 있다. 아미노산 치환은, 세린에 의한 류신의 대체, 예를 들어, 보존적 아미노산 대체와 같이, 하나의 아미노산을 유사한 구조적 및/또는 화학적 특성을 갖는 다른 아미노산으로 대체한 결과일 수 있다. 예를 들어, 아미노산 치환을 유발하는 부위-지정 돌연변이유발 및 PCR-매개 돌연변이유발을 포함하는, 당업자에게 알려진 표준 기술을 사용하여, 본 명세서에 제공된 분자를 인코딩하는 뉴클레오티드 서열에 돌연변이를 도입할 수 있다. 삽입 또는 결실은 임의로 약 1 내지 5개의 아미노산의 범위일 수 있다. 특정 실시 형태에서, 치환, 결실, 또는 삽입은 원래의 분자에 비해 25개 미만의 아미노산 치환, 20개 미만의 아미노산 치환, 15개 미만의 아미노산 치환, 10개 미만의 아미노산 치환, 5개 미만의 아미노산 치환, 4개 미만의 아미노산 치환, 3개 미만의 아미노산 치환, 또는 2개 미만의 아미노산 치환을 포함한다. 특이적 실시 형태에서, 치환은 하나 이상의 예측된 비-필수 아미노산 잔기에서 실행된 보존적 아미노산 치환이다. 허용되는 변이는 서열 내에 아미노산의 삽입, 결실, 또는 치환을 체계적으로 실행하고, 생성된 변이체를 모 항체에 의해 나타나는 활성에 대해 시험함으로써 결정될 수 있다.
아미노산 서열 삽입은 길이가 1개의 잔기 내지 다중 잔기를 함유하는 폴리펩티드의 범위인 아미노- 및/또는 카르복실-말단 융합뿐만 아니라 단일 또는 다중 아미노산 잔기의 서열내 삽입을 포함한다. 말단 삽입의 예는 N-말단 메티오닐 잔기를 갖는 항체를 포함한다.
보존적 아미노산 치환에 의해 생성된 단일 도메인 항체가 본 개시내용에 포함된다. 보존적 아미노산 치환에서, 아미노산 잔기는 유사한 전하를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체된다. 상기 기재된 바와 같이, 유사한 전하를 갖는 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 패밀리는 당업계에 한정되어 있다. 이들 패밀리는 염기성 측쇄(예를 들어, 라이신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예를 들어, 아스파르트산, 글루탐산), 비하전된 극성 측쇄(예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인), 비극성 측쇄(예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 아이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지형 측쇄(예를 들어, 트레오닌, 발린, 아이소류신), 및 방향족 측쇄(예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 갖는 아미노산을 포함한다. 대안적으로, 예컨대 포화 돌연변이유발에 의해 코딩 서열의 전부 또는 일부를 따라 돌연변이가 무작위로 도입될 수 있고, 생성된 돌연변이체를 생물학적 활성에 대해 스크리닝하여 활성을 유지하는 돌연변이체를 식별할 수 있다. 돌연변이유발 후에, 인코딩된 단백질이 발현될 수 있고, 단백질의 활성이 결정될 수 있다. 특성을 유지하거나 유의하게 변화시키지 않도록, 보존적(예를 들어, 유사한 특성 및/또는 측쇄를 갖는 아미노산 군 내에서) 치환이 실행될 수 있다.
아미노산은 이들의 측쇄의 특성의 유사성에 따라 분류될 수 있다(예를 들어, 문헌[Lehninger, Biochemistry 73-75 (2d ed. 1975)] 참조): (1) 비극성: Ala(A), Val(V), Leu(L), Ile(I), Pro(P), Phe(F), Trp(W), Met(M); (2) 비하전된 극성: Gly(G), Ser(S), Thr(T), Cys(C), Tyr(Y), Asn(N), Gln(Q); (3) 산성: Asp(D), Glu(E); 및 (4) 염기성: Lys(K), Arg(R), His(H). 대안적으로, 천연 발생 잔기를 통상의 측쇄 특성에 기초하여 군으로 분할할 수 있다: (1) 소수성: 노르류신, Met, Ala, Val, Leu, Ile; (2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln; (3) 산성: Asp, Glu; (4) 염기성: His, Lys, Arg; (5) 사슬 배향에 영향을 주는 잔기: Gly, Pro; 및 (6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.
예를 들어, 단일 도메인 항체의 적절한 입체형태를 유지하는 것에 관여하지 않는 임의의 시스테인 잔기는 또한, 분자의 산화 안정성을 개선하고 비정상적인 가교화를 방지하기 위해, 예를 들어, 알라닌 또는 세린과 같은 다른 아미노산으로 치환될 수 있다.
올리고뉴클레오티드-매개(부위-지정) 돌연변이유발, 알라닌 스캐닝, 및 PCR 돌연변이유발과 같은 당업계에 알려진 방법을 사용하여 변이를 실행할 수 있다. 부위-지정 돌연변이유발(예를 들어, 문헌[Carter, 1986, Biochem J. 237:1-7]; 및 문헌[Zoller et al., 1982, Nucl. Acids Res. 10:6487-500] 참조), 카세트 돌연변이유발(예를 들어, 문헌[Wells et al., 1985, Gene 34:315-23] 참조), 또는 다른 알려진 기술을 클로닝된 DNA 상에서 수행하여 단일 도메인 항체 변이체 DNA를 생성할 수 있다.
5.2.4. 시험관내 친화성 성숙
일부 실시 형태에서, 모 항체에 비교하여 친화성, 안정성, 또는 발현 수준과 같은 개선된 특성을 갖는 항체 변이체는 시험관내 친화성 성숙에 의해 제조될 수 있다. 천연 프로토타입과 마찬가지로, 시험관내 친화성 성숙은 돌연변이 및 선택의 원리에 기초한다. 항체의 라이브러리는 유기체(예를 들어, 파지, 박테리아, 효모, 또는 포유류 세포)의 표면 상에 또는 이들의 인코딩 mRNA 또는 DNA와 결합되어(예를 들어, 공유적으로 또는 비공유적으로) 디스플레이된다. 디스플레이된 항체의 친화성 선택은 항체를 인코딩하는 유전자 정보를 담지하는 유기체 또는 복합체의 단리를 가능하게 한다. 파지 디스플레이와 같은 디스플레이 방법을 사용하는 2 또는 3 라운드의 돌연변이 및 선택은 일반적으로 낮은 나노몰 범위의 친화성을 갖는 항체 단편을 유발한다. 친화성 성숙된 항체는 표적 항원에 대해 나노몰 또는 심지어 피코몰의 친화성을 가질 수 있다.
파지 디스플레이는 항체의 디스플레이 및 선택을 위한 광범위한 방법이다. 항체는 박테리오파지 코트 단백질에 대한 융합으로서 Fd 또는 M13 박테리오파지의 표면 상에 디스플레이된다. 선택은, "패닝(panning)"으로 지칭되는 공정인, 파지-디스플레이된 항체가 이들의 표적에 결합하는 것이 가능하도록 항원에 노출시키는 것을 포함한다. 항원에 결합된 파지를 회수하고, 세균을 감염시켜 추가의 선택 라운드를 위해 파지를 생성하기 위해 사용한다. 검토를 위해, 예를 들어, 문헌[Hoogenboom, 2002, Methods. Mol. Biol. 178:1-37]; 및 문헌[Bradbury and Marks, 2004, J. Immunol. Methods 290:29-49]을 참조한다.
효모 디스플레이 시스템(예를 들어, 문헌[Boder et al., 1997, Nat. Biotech. 15:553-57]; 및 문헌[Chao et al., 2006, Nat. Protocols 1:755-68] 참조)에서, 항체는 효모 응집소 단백질 Aga2p의 접착 서브유닛에 융합될 수 있으며, 이는 Aga1p에 대한 다이설파이드 결합을 통해 효모 세포벽에 부착된다. Aga2p를 통한 단백질의 디스플레이는 단백질을 세포 표면으로부터 멀리 돌출시켜, 효모 세포벽 상의 다른 분자와의 잠재적인 상호작용을 최소화한다. 개선된 친화성 또는 안정성을 갖는 항체에 대해 선택하기 위해, 자기 분리 및 유세포 분석법을 사용하여 라이브러리를 스크리닝한다. 비오티닐화된 항원 및 2차 시약, 예컨대 형광단에 접합된 스트렙타비딘을 이용한 효모의 표지화에 의해 관심 가용성 항원에 대한 결합이 결정된다. 항체의 표면 발현에서의 변이는 단일 사슬 항체(예를 들어, scFv)를 플랭킹하는 헤마글루티닌 또는 c-Myc 에피토프 태그의 면역형광 표지를 통해 측정될 수 있다. 발현은 디스플레이된 단백질의 안정성과 상관관계가 있는 것으로 나타났으며, 따라서 항체는 개선된 안정성뿐만 아니라 친화성에 대해 선택될 수 있다(예를 들어, 문헌[Shusta et al., 1999, J. Mol. Biol. 292:949-56] 참조). 효모 디스플레이의 추가의 이점은 디스플레이된 단백질이 진핵 효모 세포의 소포체 내에서 폴딩되어, 소포체 샤프롱 및 품질-제어 기구를 이용한다는 점이다. 일단 성숙이 완료되면, 항체 친화성은 효모의 표면 상에 디스플레이되는 동안 편리하게 "적정"될 수 있어서, 각각의 클론의 발현 및 정제에 대한 필요성을 제거한다. 효모 표면 디스플레이의 이론적 제한은 다른 디스플레이 방법의 것보다 잠재적으로 더 작은 기능성 라이브러리 크기이지만; 최근의 접근법은 효모 세포의 교배 양식(mating system)을 사용하여 크기가 1014으로 추정되는 조합 다양성을 생성한다(예를 들어, 미국 특허 출원 공개 제2003/0186374호; 및 문헌[Blaise et al., 2004, Gene 342:211-18] 참조).
리보솜 디스플레이에서는, 무세포 시스템에서의 선택을 위해 항체-리보솜-mRNA(ARM) 복합체가 생성된다. 항체의 특정 라이브러리를 코딩하는 DNA 라이브러리는 정지 코돈이 결여된 스페이서 서열에 유전자 융합된다. 이러한 스페이서 서열은, 번역될 경우에, 펩티딜 tRNA에 여전히 부착되고 리보솜 터널을 점유하며, 따라서 관심 단백질이 리보솜으로부터 돌출되고 폴딩되는 것을 가능하게 한다. mRNA, 리보솜, 및 단백질의 생성되는 복합체는 표면-결합 리간드에 결합하여, 리간드를 이용한 친화성 포획을 통한 항체 및 그의 인코딩 mRNA의 동시 단리를 가능하게 할 수 있다. 이어서, 리보솜-결합된 mRNA는 다시 cDNA로 역전사되며, 이는 이어서 돌연변이유발을 겪고 다음 선택 라운드에 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[Fukuda et al., 2006, Nucleic Acids Res. 34:e127] 참조). mRNA 디스플레이에서는, 어댑터 분자로서 퓨로마이신을 사용하여 항체와 mRNA 사이의 공유 결합을 확립한다(문헌[Wilson et al., 2001, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98:3750-55]).
이들 방법들은 완전히 시험관내에서 수행되므로, 이들은 다른 선택 기술에 비해 2가지 주요 이점을 제공한다. 첫째로, 라이브러리의 다양성은 박테리아 세포의 형질전환 효율에 의해 제한되는 것이 아니라, 시험관 내에 존재하는 상이한 mRNA 분자 및 리보솜의 개수에 의해서만 제한된다. 둘째로, 임의의 다양화 단계 후에 라이브러리가 형질전환되어야 하는 것이 아니므로, 각각의 선택 라운드 후에, 예를 들어, 비-교정 중합효소에 의해 무작위 돌연변이가 용이하게 도입될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 포유류 디스플레이 시스템이 사용될 수 있다.
다양성은 또한, 표적화된 방식으로 또는 무작위 도입을 통해 항체 라이브러리의 CDR 내로 도입될 수 있다. 전자의 접근법은 고수준 또는 저수준의 돌연변이유발을 통해 항체의 모든 CDR을 순차적으로 표적화하는 단계 또는 체세포 과돌연변이의 단리된 핫 스폿(예를 들어, 문헌[Ho et al., 2005, J. Biol. Chem. 280:607-17]) 또는 실험적 기반 또는 구조적 이유로 친화성에 영향을 주는 것으로 의심되는 잔기를 표적화하는 단계를 포함한다. 다양성은 또한, DNA 셔플링 또는 유사한 기술을 통한 천연적으로 다양한 영역의 대체에 의해 도입될 수 있다(예를 들어, 문헌[Lu et al., 2003, J. Biol. Chem. 278:43496-507]; 미국 특허 제5,565,332호 및 제6,989,250호). 프레임워크-영역 잔기 내로 연장되는 초가변 루프를 표적으로 하는 대안적인 기술(예를 들어, 문헌[Bond et al., 2005, J. Mol. Biol. 348:699-709] 참조)은 CDR 내의 루프 결실 및 삽입을 사용하거나 혼성화-기반 다양화를 사용한다(예를 들어, 미국 특허 출원 공개 제2004/0005709호 참조). CDR에서 다양성을 생성하는 추가의 방법은, 예를 들어, 미국 특허 제7,985,840호에 개시되어 있다. 항체 라이브러리 및/또는 항체 친화성 성숙을 생성하기 위해 사용될 수 있는 추가의 방법은, 예를 들어, 미국 특허 제8,685,897호 및 제8,603,930호, 및 미국 출원 공개 제2014/0170705호, 제2014/0094392호, 제2012/0028301호, 제2011/0183855호, 및 제2009/0075378호에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본 명세서에 참고로 포함된다.
라이브러리의 스크리닝은 당업계에 알려진 다양한 기술에 의해 달성될 수 있다. 예를 들어, 단일 도메인 항체는 고체 지지체, 컬럼, 핀, 또는 셀룰로스/폴리 (비닐리덴 플루오라이드) 막/다른 필터 상에 고정되거나, 흡착 플레이트에 부착된 숙주 세포 상에서 발현되거나, 세포 분류에 사용되거나, 스트렙타비딘-코팅된 비드를 이용한 포획을 위해 비오틴에 접합되거나, 디스플레이 라이브러리를 패닝하기 위한 임의의 다른 방법에 사용될 수 있다.
시험관내 친화성 성숙 방법의 검토를 위해, 예를 들어, 문헌[Hoogenboom, 2005, Nature Biotechnology 23:1105-16]; 문헌[Quiroz and Sinclair, 2010, Revista Ingeneria Biomedia 4:39-51]; 및 그 안의 참고문헌을 참조한다.
5.2.5. 단일 도메인 항체의 변형
단일 도메인 항체의 공유적 변형은 본 개시내용의 범주 내에 포함된다. 공유적 변형은 단일 도메인 항체의 표적화된 아미노산 잔기를 단일 도메인 항체의 선택된 측쇄 또는 N- 또는 C- 말단 잔기와 반응할 수 있는 유기 유도체화제와 반응시키는 단계를 포함한다. 다른 변형은, 글루타미닐 및 아스파라기닐 잔기의 각각 상응하는 글루타밀 및 아스파르틸 잔기로의 탈아미드화, 프롤린 및 라이신의 하이드록실화, 세릴 또는 트레오닐 잔기의 하이드록실기의 인산화, 라이신, 아르기닌, 및 히스티딘 측쇄의 α-아미노기의 메틸화(예를 들어, 문헌[Creighton, Proteins: Structure and Molecular Properties 79-86 (1983)] 참조), N-말단 아민의 아세틸화, 및 임의의 C-말단 카르복실기의 아미드화를 포함한다.
본 개시내용의 범주 내에 포함된 단일 도메인 항체의 공유적 변형의 다른 유형은 항체 또는 폴리펩티드의 천연 글리코실화 패턴을 변경하는 단계(예를 들어, 문헌[Beck et al., 2008, Curr. Pharm. Biotechnol. 9:482-501]; 및 문헌[Walsh, 2010, Drug Discov. Today 15:773-80] 참조), 및 예를 들어, 미국 특허 제4,640,835호; 제4,496,689호; 제4,301,144호; 제4,670,417호; 제4,791,192호; 또는 제4,179,337호에 제시된 방식으로 다양한 비단백질성 중합체, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 또는 폴리옥시알킬렌 중 하나에 항체를 연결하는 단계를 포함한다. 본 개시내용의 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체는 또한, 반감기를 연장하고/하거나 알려진 Fc-매개 이펙터 기능을 부여하기 위해 하나 이상의 면역글로불린 불변 영역 또는 이의 부분(예를 들어, Fc)에 유전자 융합되거나 접합될 수 있다.
본 개시내용의 pIgR에 결합하는 단일 사슬 항체는 또한, 다른 이종성 폴리펩티드 또는 아미노산 서열, 예를 들어, 에피토프 태그(예를 들어, 문헌[Terpe, 2003, Appl. Microbiol. Biotechnol. 60:523-33] 참조) 또는 IgG 분자의 Fc 영역(예를 들어, 문헌[Aruffo, Antibody Fusion Proteins 221-42 (Chamow and Ashkenazi eds., 1999)] 참조)에 융합된 pIgR에 결합하는 단일 사슬 항체를 포함하는 키메라 분자를 형성하도록 변형될 수 있다. pIgR에 결합하는 단일 사슬 항체는 또한, pIgR 결합 키메라 항원 수용체(CAR)를 생성하기 위해 사용될 수 있다.
본 개시내용의 pIgR 및 이종성 폴리펩티드에 결합하는 단일 사슬 항체를 포함하는 융합 단백질이 또한 본 명세서에 제공된다. 일부 실시 형태에서, 항체가 유전자 융합되거나 화학적으로 접합되는 이종성 폴리펩티드는 세포 표면-발현된 pIgR을 갖는 세포에 항체를 표적화하기에 유용하다.
또한 pIgR 항원에 결합하는 항체의 패널이 본 명세서에 제공된다. 특이적 실시 형태에서, 항체의 패널은 상이한 결합 속도, 상이한 해리 속도, pIgR 항원에 대한 상이한 친화성, 및/또는 pIgR 항원에 대한 상이한 특이성을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 패널은 약 10, 약 25, 약 50, 약 75, 약 100, 약 125, 약 150, 약 175, 약 200, 약 250, 약 300, 약 350, 약 400, 약 450, 약 500, 약 550, 약 600, 약 650, 약 700, 약 750, 약 800, 약 850, 약 900, 약 950, 또는 약 1000개 이상의 항체를 포함하거나 이들로 이루어진다. 예를 들어, ELISA와 같은 검정을 위해, 96-웰 또는 384-웰 플레이트 내에서 항체의 패널이 사용될 수 있다.
5.2.6. 단일 도메인 항체의 제조
본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 단일 도메인 항체-인코딩 핵산을 함유하는 벡터로 형질전환되거나 형질감염된 세포를 배양함으로써 생성될 수 있다. 본 개시내용의 항체의 폴리펩티드 성분을 인코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열은 표준 재조합 기술을 사용하여 얻을 수 있다. 하이브리도마 세포 또는 B 세포와 같은 항체 생성 세포로부터 원하는 폴리뉴클레오티드 서열이 단리되고 서열분석될 수 있다. 대안적으로, 뉴클레오티드 합성기 또는 PCR 기술을 사용하여 폴리뉴클레오티드를 합성할 수 있다. 일단 얻어지면, 숙주 세포에서 이종성 폴리뉴클레오티드를 복제하고 발현할 수 있는 재조합 벡터 내로 폴리펩티드를 인코딩하는 서열을 삽입한다. 이용가능하고 당업계에 알려진 다수의 벡터가 본 개시내용의 목적을 위해 사용될 수 있다. 적절한 벡터의 선택은 주로 벡터 내로 삽입될 핵산의 크기 및 벡터로 형질전환될 특정 숙주 세포에 의존할 것이다. 본 개시내용의 항체를 발현하기에 적합한 숙주 세포는 그람-음성 또는 그람 양성 유기체를 포함하는 고세균 및 진정세균과 같은 원핵생물, 사상 진균 또는 효모와 같은 진핵 미생물, 곤충 또는 식물 세포와 같은 무척추동물 세포, 및 포유류 숙주 세포주와 같은 척추동물 세포를 포함한다. 숙주 세포는 상기-기재된 발현 벡터로 형질전환되고, 프로모터를 유도하거나, 형질전환체를 선택하거나, 원하는 서열을 인코딩하는 유전자를 증폭하기 위해 적절한 바와 같이 변형된 관용적인 영양 배지 중에 배양된다. 숙주 세포에 의해 생성된 항체는 당업계에 알려진 바와 같이 표준 단백질 정제 방법을 사용하여 정제된다.
벡터 작제, 발현, 및 정제를 포함하는 항체 생성을 위한 방법은, 문헌[
Figure pct00006
et al., Antibody Engineering: Producing antibodies in Escherichia coli: From PCR to fermentation 203-52 (McCafferty et al. eds., 1996)]; 문헌[Kwong and Rader, E. coli Expression and Purification of Fab Antibody Fragments, in Current Protocols in Protein Science (2009)]; 문헌[Tachibana and Takekoshi, Production of Antibody Fab Fragments in Escherichia coli, in Antibody Expression and Production (Al-Rubeai ed., 2011)]; 및 문헌[Therapeutic Monoclonal Antibodies: From Bench to Clinic (An ed., 2009)]에 추가로 기재되어 있다.
물론, 당업계에 잘 알려진 대안적인 방법이 항-pIgR 항체를 제조하기 위해 사용될 수 있음이 고려된다. 예를 들어, 적절한 아미노산 서열 또는 이의 일부는 고체상 기술을 사용하는 직접 펩티드 합성에 의해 생성될 수 있다 (예를 들어, 문헌[Stewart et al., Solid-Phase Peptide Synthesis (1969)]; 및 문헌[Merrifield, 1963, J. Am. Chem. Soc. 85:2149-54] 참조). 시험관내 단백질 합성은 수동 기술을 사용하거나 자동화에 의해 수행될 수 있다. 항-pIgR 항체의 다양한 부분을 별도로 화학적으로 합성하고 화학적 또는 효소적 방법을 사용하여 조합하여 원하는 항-pIgR 항체를 생성할 수 있다. 대안적으로, 항체는 예를 들어, 미국 특허 제5,545,807호 및 제5,827,690호에 개시된 바와 같이, 항체를 발현하도록 조작된 유전자이식 동물의 세포 또는 체액, 예컨대 유즙으로부터 정제될 수 있다.
구체적으로, 단일 도메인 항체 또는 다른 pIgR 결합제는 mpIgR 및 hpIgR 세포외 도메인(ECD)을 사용하여 라마를 면역화하는 단계, 단일 B-세포 분류를 수행하는 단계, V-유전자 추출을 수행하는 단계, pIgR 결합제, 예컨대 VHH -Fc 융합을 클로닝하는 단계, 및 이어서 소규모 발현 및 정제를 수행하는 단계에 의해 생성될 수 있다. ELISA-양성, BLI-양성, 및 100 nM 미만의 KD에 대한 선택 중 하나 이상을 포함하는, pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체 및 다른 분자의 추가의 스크리닝이 수행될 수 있다. 이들 선택 기준은 도 8(mpIgR 항원으로부터 생성된 VHH) 및 도 9(hpIgR 항원으로부터 생성된 VHH)에 나타낸 바와 같이 조합될 수 있다. 추가로, 개별 VHH 결합제(및 pIgR에 결합하는 다른 분자)는 pIgR, 예를 들어 hpIgR을 발현하는 MDCK 세포에 결합하는 이들의 능력에 대해 검정될 수 있다. hpIgR을 발현하는 MDCK 세포를 이용한 FACS 분석을 사용하고 형광-표지된 VHH 분자의 평균 형광 강도(MFI)를 측정하여 그러한 검정을 수행할 수 있다. 그러한 실험의 결과는 도 10에 나타낸다. MDCK 세포의 단층 상에서의 hpIgR의 염색을 도 11에 나타낸다.
5.3. 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자
일 태양에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인) 및 치료제를 포함하는 치료 분자가 본 명세서에 제공된다.
다양한 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 이들 제제의 전달을 위한 임의의 제제, 예를 들어, 단백질-기반 물질에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합될 수 있다. 단일 도메인 항체는 제제에 화학적으로 접합될 수 있거나, 제제에 달리 비공유적으로 접합될 수 있다.
본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체는 대상을 치료하기 위해 사용될 수 있는 제제, 예컨대 생물학적 제제(펩티드 및 항체와 같은 단백질 기반 치료제, 및 바이러스 유전자 치료제 또는 RNA 치료제와 같은 뉴클레오티드 기반 치료제를 포함함)를 전달하기에 유용하다. 예를 들어, 제제는 인슐린, 글루카곤-유사-펩티드-1, 인슐린-모방 펩티드, 및 글루카곤-유사-펩티드-1-모방 펩티드로 이루어진 군으로부터 임의로 선택된 당뇨병 약제일 수 있다. 제제는 항-TNF-알파 항체 또는 이의 단편, 항-IL23 항체 또는 이의 단편, IL23의 수용체에 결합하는 항체 또는 이의 단편, IL23 수용체 억제제, 및 면역 체크포인트 항체, 예컨대 항-PD-1 항체로 이루어진 군으로부터 임의로 선택된 펩티드 또는 항체(또는 이의 단편)일 수 있다. 제제는 또한 백신, 예컨대 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이로 이루어진 군으로부터 선택된 감염을 예방하기 위한 백신일 수 있다.
따라서, 이종성 단백질 또는 폴리펩티드에(또는 이의 단편, 예를 들어, 약 10, 약 20, 약 30, 약 40, 약 50, 약 60, 약 70, 약 80, 약 90, 약 100, 약 150, 약 200, 약 250, 약 300, 약 350, 약 400, 약 450, 또는 약 500개의 아미노산, 또는 500 개 초과의 아미노산의 폴리펩티드에) 재조합적으로 융합되거나 화학적으로 접합(공유 또는 비공유 접합)되어 융합 단백질을 생성하는 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)뿐만 아니라, 이들의 용도가 본 명세서에 제공된다. 특히, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체의 항원-결합 단편(예를 들어, CDR1, CDR2, 및/또는 CDR3)을 포함하는 융합 단백질 및 이종성 단백질, 폴리펩티드, 또는 펩티드가 본 명세서에 제공된다. 예를 들어, 특정 세포 유형에 의해 발현되는 세포 표면 수용체에 결합하는 항체는 본 명세서에 제공된 변형된 항체에 융합되거나 접합될 수 있다.
또한, 본 명세서에 제공된 항체는 정제를 용이하게 하기 위해 펩티드와 같은 마커 또는 "태그"서열에 융합될 수 있다. 특이적 실시 형태에서, 마커 또는 태그 아미노산 서열은 특히 pQE 벡터(예를 들어, QIAGEN, inc. 참조)에 제공된 태그와 같은 헥사-히스티딘 펩티드이며, 이들 중 다수는 구매가능하다. 예를 들어, 문헌[Gentz et al., 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:821-24]에 기재된 바와 같이, 헥사-히스티딘은 융합 단백질의 편리한 정제를 제공한다. 정제에 유용한 다른 펩티드 태그는 인플루엔자 헤마글루티닌 단백질로부터 유래된 에피토프에 상응하는 헤마글루티닌("HA") 태그(문헌[Wilson et al., 1984, Cell 37:767-78]) 및 "FLAG" 태그를 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
항체에 모이어티(폴리펩티드를 포함함)를 융합시키거나 접합시키는 방법이 알려져 있다(예를 들어, 문헌[Arnon et al., Monoclonal Antibodies for Immunotargeting of Drugs in Cancer Therapy, in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy 243-56 (Reisfeld et al. eds., 1985)]; 문헌[Hellstrom et al., Antibodies for Drug Delivery, in Controlled Drug Delivery 623-53 (Robinson et al. eds., 2d ed. 1987)]; 문헌[Thorpe, Antibody Carriers of Cytotoxic Agents in Cancer Therapy: A Review, in Monoclonal Antibodies: Biological and Clinical Applications 475-506 (Pinchera et al. eds., 1985)]; 문헌[Analysis, Results, and Future Prospective of the Therapeutic Use of Radiolabeled Antibody in Cancer Therapy, in Monoclonal Antibodies for Cancer Detection and Therapy 303-16 (Baldwin et al. eds., 1985)]; 문헌[Thorpe et al., 1982, Immunol. Rev. 62:119-58]; 미국 특허 제5,336,603호; 제5,622,929호; 제5,359,046호; 제5,349,053호; 제5,447,851호; 제5,723,125호; 제5,783,181호; 제5,908,626호; 제5,844,095호; 및 제5,112,946호; 제EP 307,434호; 제EP 367,166호; 제EP 394,827호; PCT 출원 공개 제WO 91/06570호, 제WO 96/04388호, 제WO 96/22024호, 제WO 97/34631호, 및 제WO 99/04813호; 문헌[Ashkenazi et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88: 10535-39]; 문헌[Traunecker et al., 1988, Nature, 331:84-86]; 문헌[Zheng et al., 1995, J. Immunol. 154:5590-600]; 및 문헌[Vil et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:11337-41] 참조).
예를 들어, 유전자-셔플링, 모티프-셔플링, 엑손-셔플링, 및/또는 코돈-셔플링(총칭하여 "DNA 셔플링"으로 지칭됨)의 기술을 통해 융합 단백질이 생성될 수 있다. 예를 들어, 더 높은 친화성과 더 낮은 해리 속도를 갖는 항체를 포함하는, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체의 활성을 변경하기 위해 DNA 셔플링이 사용될 수 있다(예를 들어, 미국 특허 제5,605,793호; 제5,811,238호; 제5,830,721호; 제5,834,252호; 및 제5,837,458호; 문헌[Patten et al., 1997, Curr. Opinion Biotechnol. 8:724-33]; 문헌[Harayama, 1998, Trends Biotechnol. 16(2):76-82]; 문헌[Hansson et al., 1999, J. Mol. Biol. 287:265-76]; 및 문헌[Lorenzo and Blasco, 1998, Biotechniques 24(2):308-13] 참조). 재조합 전에 오류-발생 PCR, 무작위 뉴클레오티드 삽입, 또는 다른 방법에 의한 무작위 돌연변이유발을 적용함으로써 항체 또는 인코딩된 항체를 변경할 수 있다. 본 명세서에 제공된 항체를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드는 하나 이상의 이종성 분자의 하나 이상의 성분, 모티프, 섹션, 부분, 도메인, 단편 등과 재조합될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)는 제2 항체에 접합되어, 예를 들어, 미국 특허 제4,676,980호에 기재된 바와 같은 항체 이종접합체를 형성한다.
본 명세서에 제공된 pIgR에 결합하는 항체는 또한 고체 지지체에 부착될 수 있으며, 이는 표적 항원의 면역검정 또는 정제에 특히 유용하다. 그러한 고체 지지체는 유리, 셀룰로스, 폴리아크릴아미드, 나일론, 폴리스티렌, 폴리비닐 클로라이드, 또는 폴리프로필렌을 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
다른 예시적인 제제는 소분자, 폴리뉴클레오티드, 방사성 동위원소, 독소, 효소, 항응고제, 호르몬, 사이토카인, 항-염증 분자, RNAi, mRNA, 자가-복제 RNA, 항생제, 또는 항체-항생제 접합체를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 일 실시 형태에서, 제제는 항생제이다. 예시적인 항생제는, 마크롤라이드 항생제, 플루오로퀴놀론, 테트라사이클린, 아목시실린, 세프트리악손, 페니실린 G, 리네졸리드, 목시플록사신, 및 아지트로마이신을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 예시적인 방사성 동위원소는 18F, 99Tc, 111In, 123I, 201Tl, 133Xe, 11C, 13N, 15O, 18F, 62Cu, 64Cu, 124I, 76Br, 82Rb, 89Zr, 및 68Ga을 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
다른 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체는, 예를 들어, 진단 분자에 접합되거나 재조합적으로 융합된다.
그러한 진단 및 검출은, 예를 들어, 호스래디쉬 퍼옥시다제, 알칼리성 포스파타제, 베타-갈락토시다제, 또는 아세틸콜린에스테라제와 같으나 이로 제한되지 않는 다양한 효소; 스트렙타비딘/비오틴 또는 아비딘/비오틴과 같으나 이로 제한되지 않는 보결 분자단; 움벨리페론, 플루오레세인, 플루오레세인 아이소티오시네이트, 로다민, 다이클로로트라이아지닐아민 플루오레세인, 단실 클로라이드, 또는 피코에리트린과 같으나 이로 제한되지 않는 형광 재료; 루미놀과 같으나 이로 제한되지 않는 발광 재료; 루시페라제, 루시페린, 또는 에쿼린과 같으나 이로 제한되지 않는 생물발광 재료; 225Acγ-방출, 오거(Auger)-방출, β-방출, 알파-방출, 또는 양전자-방출 방사성 동위원소와 같은 화학발광 재료를 포함하지만 이로 제한되지 않는 검출가능한 물질에 항체를 커플링함으로써 달성될 수 있다 예시적인 방사성 동위원소는 3H, 11C, 13C, 15N, 18F, 19F, 55Co, 57Co, 60Co, 61Cu, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 68Ga, 72As, 75Br, 86Y, 89Zr, 90Sr, 94mTc, 99mTc, 115In, 1231, 1241, 125I, 1311, 211At, 212Bi, 213Bi, 223Ra, 226Ra, 225Ac, 및 227Ac를 포함한다.
링커는 세포에서 접합된 제제의 방출을 용이하게 하는 "절단가능한 링커"일 수 있지만, 비-절단가능한 링커도 본 명세서에서 고려된다. 본 개시내용의 접합체에 사용하기 위한 링커는 산 불안정성 링커(예를 들어, 하이드라존 링커), 다이설파이드-함유 링커, 펩티다제-민감성 링커(예를 들어, 아미노산, 예를 들어, 발린 및/또는 시트룰린을 포함하는 펩티드 링커, 예컨대 시트룰린-발린 또는 페닐알라닌-라이신), 광불안정성 링커, 다이메틸 링커(예를 들어, 문헌[Chari et al., 1992, Cancer Res. 52:127-31]; 및 미국 특허 제5,208,020호), 티오에테르 링커, 또는 다중약물 수송체-매개 저항성을 회피하도록 설계된 친수성 링커(예를 들어, 문헌[Kovtun et al., 2010, Cancer Res. 70:2528-37])를 제한 없이 포함한다.
항체와 제제의 접합체는 다양한 이기능성 단백질 커플링제, 예컨대 BMPS, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, MPBH, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, 설포-EMCS, 설포-GMBS, 설포-KMUS, 설포-MBS, 설포-SIAB, 설포-SMCC, 설포-SMPB, 및 SVSB(석신이미딜-(4-비닐설폰)벤조에이트)를 사용하여 제조할 수 있다. 본 개시내용은 항체와 제제의 접합체가 당업계에 개시된 바와 같은 임의의 적합한 방법(예를 들어, 문헌[Bioconjugate Techniques (Hermanson ed., 2d ed. 2008)] 참조)을 사용하여 제조될 수 있음을 추가로 고려한다.
항체 및 제제에 대한 관용적인 접합 전략은 Lys 잔기의 ε-아미노기 또는 Cys 잔기의 티올기를 포함하는 무작위 접합 화학에 기초하였으며, 이는 이종성 접합체를 유발한다. 최근에 개발된 기술은 항체에 대한 부위-특이적 접합을 가능하게 하여, 균질한 로딩을 유발하고 변경된 항원-결합 또는 약동학을 갖는 접합체 하위집단을 회피한다. 이들은 반응성 티올기를 제공하고 면역글로불린 폴딩 및 조립을 방해하거나 항원 결합을 변경하지 않는 중쇄 및 경쇄 상의 위치에 시스테인 치환을 포함하는 "thiomab"의 조작을 포함한다(예를 들어, 문헌[Junutula et al., 2008, J. Immunol. Meth. 332: 41-52]; 및 문헌[Junutula et al., 2008, Nature Biotechnol. 26:925-32] 참조). 다른 방법에서는, 정지 코돈 UGA를 종결로부터 셀레노시스테인 삽입으로 리코딩(recoding)함으로써 셀레노시스테인을 항체 서열에 동시번역 삽입하여, 다른 천연 아미노산의 존재 하에 셀레노시스테인의 친핵성 셀레놀기에서의 부위 특이적 공유 접합을 가능하게 한다(예를 들어, 문헌[Hofer et al., 2008, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105:12451-56]; 및 문헌[Hofer et al., 2009, Biochemistry 48(50):12047-57] 참조).
5.3.1. 유전자 융합된 단백질의 제조 방법
다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 제제에 유전자 융합된다. 유전자 융합은 단일 도메인 항체와 제제 사이에 링커(예를 들어, 폴리펩티드)를 배치함으로써 달성될 수 있다. 링커는 EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130), (EAAAK)n(서열 번호 147), (GGGGS)n(서열 번호 148), 및 (GGGS)n(서열 번호 149)으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 가요성 링커일 수 있으며, 여기서 n은 1 내지 20의 정수이다.
다양한 실시 형태에서, 단일 도메인 항체를 치료 분자에 연결하는 힌지 영역을 이용하여 단일 도메인 항체를 치료 분자에 유전자 접합시킨다. 힌지 영역은 EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130), (EAAAK)n(서열 번호 147), (GGGGS)n(서열 번호 148), 및 (GGGS)n(서열 번호 149)으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 가요성 링커일 수 있으며, 여기서 n은 1 내지 20의 정수이다. 일부 실시 형태에서, 힌지 영역은 서열 EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130)를 포함하거나, EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130)와 50 이상, 55 이상, 60 이상, 65 이상, 70 이상, 75 이상, 80 이상, 85 이상, 90 이상, 95 이상, 98 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 힌지 영역은 서열 EPKSCDKTHTCPPCP(서열 번호 150)를 포함하거나, EPKSCDKTHTCPPCP(서열 번호 150)와 50 이상, 55 이상, 60 이상, 65 이상, 70 이상, 75 이상, 80 이상, 85 이상, 90 이상, 95 이상, 98 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 힌지 영역은 서열 ERKCCVECPPCP(서열 번호 151)를 포함하거나, ERKCCVECPPCP(서열 번호 151)와 50 이상, 55 이상, 60 이상, 65 이상, 70 이상, 75 이상, 80 이상, 85 이상, 90 이상, 95 이상, 98 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 힌지 영역은 서열 ELKTPLGDTTHTCPRCP(EPKSCDTPPPCPRCP)3(서열 번호 152)을 포함하거나, ELKTPLGDTTHTCPRCP(EPKSCDTPPPCPRCP)3(서열 번호 152)과 50 이상, 55 이상, 60 이상, 65 이상, 70 이상, 75 이상, 80 이상, 85 이상, 90 이상, 95 이상, 98 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 힌지 영역은 서열 ESKYGPPCPSCP(서열 번호 153)를 포함하거나, ESKYGPPCPSCP(서열 번호 153)와 50 이상, 55 이상, 60 이상, 65 이상, 70 이상, 75 이상, 80 이상, 85 이상, 90 이상, 95 이상, 98 이상, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
본 명세서에 제공된 다양한 융합 단백질의 제조 방법이 또한 본 명세서에 제공된다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 융합 단백질은 재조합적으로 발현된다.
본 명세서에 제공된 융합 단백질의 재조합 발현은 단백질 또는 이의 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 발현 벡터의 작제를 필요로 할 수 있다. 일단 본 명세서에 제공된 단백질 또는 이의 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오티드가 얻어졌으면, 분자의 생성을 위한 벡터가 당업계에 잘 알려진 기술을 사용하는 재조합 DNA 기술에 의해 생성될 수 있다. 따라서, 인코딩 뉴클레오티드 서열을 함유하는 폴리뉴클레오티드를 발현시킴으로써 단백질을 제조하는 방법이 본 명세서에 기재되어 있다. 당업자에게 잘 알려진 방법을 사용하여 코딩 서열 및 적절한 전사 및 번역 제어 신호를 함유하는 발현 벡터를 작제할 수 있다. 이들 방법은, 예를 들어, 시험관내 재조합 DNA 기술, 합성 기술, 및 생체내 유전자 재조합을 포함한다. 프로모터에 작동가능하게 연결된, 본 명세서에 제공된 융합 단백질 또는 이의 단편 또는 CDR을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 복제가능한 벡터가 또한 제공된다.
발현 벡터는 관용적인 기술에 의해 숙주 세포로 전달될 수 있고, 이어서 형질감염된 세포는 관용적인 기술에 의해 배양되어 본 명세서에 제공된 융합 단백질을 생성한다. 따라서, 이종성 프로모터에 작동가능하게 연결된 본 명세서에 제공된 융합 단백질 또는 이의 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 숙주 세포가 또한 본 명세서에 제공된다.
본 명세서에 제공된 융합 단백질을 발현시키기 위해 다양한 숙주-발현 벡터 시스템이 이용될 수 있다(예를 들어, 미국 특허 제5,807,715호 참조). 그러한 숙주-발현 시스템은 관심 코딩 서열이 생산되고 후속적으로 정제될 수 있는 비히클을 나타내지만, 또한 적절한 뉴클레오티드 코딩 서열로 형질전환되거나 형질감염될 경우에 본 명세서에 제공된 융합 단백질을 원위치에서 발현할 수 있는 세포를 나타낸다. 이들은 코딩 서열을 함유하는 재조합 박테리오파지 DNA, 플라스미드 DNA, 또는 코스미드 DNA 발현 벡터로 형질전환된 박테리아(예를 들어, E. 콜라이(E. coli) 및 B. 서브틸리스(B. subtilis))와 같은 미생물; 코딩 서열을 함유하는 재조합 효모 발현 벡터로 형질전환된 효모(예를 들어, 사카로마이세스 피키아(Saccharomyces Pichia)); 코딩 서열을 함유하는 재조합 바이러스 발현 벡터(예를 들어, 바큘로바이러스)로 감염된 곤충 세포 시스템; 재조합 바이러스 발현 벡터(예를 들어, 콜리플라워 모자이크 바이러스, CaMV, 담배 모자이크 바이러스, TMV)로 감염되거나 코딩 서열을 함유하는 재조합 플라스미드 발현 벡터(예를 들어, Ti 플라스미드)로 형질전환된 식물 세포 시스템; 포유류 세포의 게놈으로부터 유래된 프로모터(예를 들어, 메탈로티오네인 프로모터) 또는 포유류 바이러스로부터 유래된 프로모터(예를 들어, 아데노바이러스 후기 프로모터; 백시니아 바이러스 7.5K 프로모터)를 함유하는 재조합 발현 작제물을 보유하는 포유류 세포 시스템(예를 들어, COS, CHO, BHK, 293, NS0, 및 3T3 세포)을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 특히 전체 재조합 항체 분자의 발현을 위한, 진핵 세포, 또는, 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli)와 같은 박테리아 세포가 재조합 융합 단백질의 발현에 사용될 수 있다. 예를 들어, 인간 사이토메갈로바이러스로부터의 주요 중간 초기 유전자 프로모터 요소와 같은 벡터와 함께, 중국 햄스터 난소 세포(CHO)와 같은 포유류 세포는 항체 또는 이의 변이체를 위한 효과적인 발현 시스템이다(문헌[Foecking et al., 1986, Gene 45:101]; 및 문헌[Cockett et al., 1990, Bio/Technology 8:2]). 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 융합 단백질은 CHO 세포에서 생성된다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 융합 단백질을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현은 구성적 프로모터, 유도성 프로모터, 또는 조직 특이적 프로모터에 의해 조절된다.
박테리아 시스템에서, 발현되는 융합 단백질에 대해 의도된 용도에 따라 다수의 발현 벡터가 유리하게 선택될 수 있다. 예를 들어, 융합 단백질의 약제학적 조성물의 생성을 위해, 다량의 그러한 융합 단백질이 생성되어야 하는 경우, 용이하게 정제되는 융합 단백질 생성물의 고수준의 발현을 유도하는 벡터가 바람직할 수 있다. 그러한 벡터는, 융합 단백질이 생성되도록 코딩 서열이 lac Z 코딩 영역과 인 프레임(in frame)으로 벡터 내에 개별적으로 라이게이션될 수 있는 E. 콜라이 발현 벡터 pUR278(문헌[Ruther et al., 1983, EMBO 12:1791]); pIN 벡터(문헌[Inouye & Inouye, 1985, Nucleic Acids Res. 13:3101-3109]; 문헌[Van Heeke & Schuster, 1989, J. Biol. Chem. 24:5503-5509]) 등을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 글루타티온 5-트랜스퍼라제(GST)와의 융합 단백질로서 외래 폴리펩티드를 발현시키기 위해 pGEX 벡터가 또한 사용될 수 있다. 일반적으로, 그러한 융합 단백질은 가용성이고, 용해된 세포로부터 매트릭스 글루타티온 아가로스 비드에 대한 흡착 및 결합에 이어서 유리 글루타티온의 존재 하의 용출에 의해 용이하게 정제될 수 있다. pGEX 벡터는 클로닝된 표적 유전자 생성물이 GST 모이어티로부터 방출될 수 있도록 트롬빈 또는 인자 Xa 프로테아제 절단 부위를 포함하도록 설계된다.
곤충 시스템에서는, 아우토그라파 칼리포르니카(Autographa californica) 핵 다각체병 바이러스(AcNPV)가 외래 유전자를 발현시키기 위한 벡터로서 사용된다. 바이러스는 스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda)에서 성장한다. 코딩 서열은 바이러스의 비필수 영역(예를 들어, 다각체 유전자) 내로 개별적으로 클로닝되고, AcNPV 프로모터(예를 들어, 다각체 프로모터)의 제어 하에 배치될 수 있다.
포유류 숙주 세포에서는, 다수의 바이러스-기반 발현 시스템이 이용될 수 있다. 아데노바이러스가 발현 벡터로서 사용되는 경우, 관심 코딩 서열은 아데노바이러스 전사/번역 제어 복합체, 예를 들어, 후기 프로모터 및 삼부 리더 서열에 라이게이션될 수 있다. 이어서, 이러한 키메라 유전자는 시험관내 또는 생체내 재조합에 의해 아데노바이러스 게놈에 삽입될 수 있다. 바이러스 게놈의 비필수 영역(예를 들어, 영역 El 또는 E3)에서의 삽입은 생존가능하고 감염된 숙주에서 융합 단백질을 발현할 수 있는 재조합 바이러스를 유발할 것이다(예를 들어, 문헌[Logan & Shenk, 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 8 1:355-359] 참조). 삽입된 코딩 서열의 효율적인 번역을 위해 특이적 개시 신호가 또한 필요할 수 있다. 이들 신호는 ATG 개시 코돈 및 인접한 서열을 포함한다. 또한, 개시 코돈은 전체 삽입물의 번역을 보장하기 위해 원하는 코딩 서열의 판독 프레임과 일치해야 한다. 이들 외인성 번역 제어 신호 및 개시 코돈은 천연 및 합성 둘 모두의 다양한 기원의 것일 수 있다. 적절한 전사 인핸서 요소, 전사 종결자 등의 포함에 의해 발현 효율이 향상될 수 있다 (예를 들어, 문헌[Bittner et al., 1987, Methods in Enzymol. 153:51-544] 참조).
또한, 삽입된 서열의 발현을 조절하거나, 원하는 특이적 방식으로 유전자 생성물을 변형시키고 가공하는 숙주 세포 균주가 선택될 수 있다. 단백질 생성물의 그러한 변형(예를 들어, 글리코실화) 및 가공(예를 들어, 절단)은 단백질의 기능에 중요할 수 있다. 상이한 숙주 세포는 단백질 및 유전자 생성물의 번역후 가공 및 변형을 위한 특징적이고 특이적인 메커니즘을 갖는다. 발현된 외래 단백질의 정확한 변형 및 가공을 보장하도록 적절한 세포주 또는 숙주 시스템이 선택될 수 있다. 이 목적을 위해, 유전자 생성물의 1차 전사체, 글리코실화, 및 인산화의 적절한 가공을 위한 세포성 기구를 보유하는 진핵 숙주 세포가 사용될 수 있다. 그러한 포유류 숙주 세포는 CHO, VERY, BHK, Hela, COS, MDCK, 293, 3T3, W138, BT483, Hs578T, HTB2, BT2O 및 T47D, NS0(내인성으로 임의의 면역글로불린 사슬을 생성하지 않는 뮤린 골수종 세포주), CRL7O3O 및 HsS78Bst 세포를 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
재조합 단백질의 장기 고수율 생성을 위해, 안정한 발현이 이용될 수 있다. 예를 들어, 융합 단백질을 안정적으로 발현하는 세포주가 조작될 수 있다. 바이러스 복제 기원을 함유하는 발현 벡터를 사용하기보다는, 적절한 발현 조절 요소(예를 들어, 프로모터, 인핸서, 서열, 전사 종결자, 폴리아데닐화 부위 등)에 의해 제어되는 DNA 및 선택가능한 마커로 숙주 세포를 형질전환할 수 있다. 외래 DNA의 도입 후에, 조작된 세포를 강화 배지(enriched media) 중에 1 내지 2 일 동안 성장시키고, 이어서 선택 배지로 전환할 수 있다. 재조합 플라스미드 내의 선택가능한 마커는 선택에 대한 저항성을 부여하고, 세포가 플라스미드를 이들의 염색체 내로 안정적으로 통합하고 성장하여 증식소(foci)를 형성하는 것을 가능하게 하며, 이는 결국 클로닝되고 세포주로 확장될 수 있다. 이러한 방법은 융합 단백질을 발현하는 세포주를 조작하기 위해 유리하게 사용될 수 있다. 그러한 조작된 세포주는 결합 분자와 직접적으로 또는 간접적으로 상호작용하는 조성물의 스크리닝 및 평가에 특히 유용할 수 있다.
단순 포진 바이러스 티미딘 키나제(문헌[Wigler et al., 1977, Cell 11:223]), 하이포잔틴구아닌 포스포리보실트랜스퍼라제(문헌[Szybalska & Szybalski, 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48:202]), 및 아데닌 포스포리보실트랜스퍼라제(문헌[Lowy et al., 1980, Cell 22:8-17]) 유전자를 포함하지만 이로 제한되지 않는 다수의 선택 시스템이 각각 tk-, hgprt-, 또는 aprt-세포에 사용될 수 있다. 또한, 하기 유전자에 대한 선택의 기반으로서 대사길항물질 저항성이 사용될 수 있다: 메토트렉세이트에 대한 저항성을 부여하는 dhfr(문헌[Wigler et al., 1980, Natl. Acad. Sci. USA 77:357]; 문헌[O'Hare et al., 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:1527]); 마이코페놀산에 대한 저항성을 부여하는 gpt(문헌[Mulligan & Berg, 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2072]); 아미노글리코시드 G-418에 대한 저항성을 부여하는 neo(문헌[Wu and Wu, 1991, Biotherapy 3:87-95]; 문헌[Tolstoshev, 1993, Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32:573-596]; 문헌[Mulligan, 1993, Science 260:926-932]; 및 문헌[Morgan and Anderson, 1993, Ann. Rev. Biochem. 62:191-217]; 문헌[May, 1993, TIB TECH 11(5):l55-2 15]); 및 하이그로마이신에 대한 저항성을 부여하는 hygro(문헌[Santerre et al., 1984, Gene 30:147]). 원하는 재조합 클론을 선택하기 위해 재조합 DNA 기술의 당업계에 통상적으로 알려진 방법이 일상적으로 적용될 수 있으며, 그러한 방법은, 예를 들어, 문헌[Ausubel et al. (eds.), Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (1993)]; 문헌[Kriegler, Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, Stockton Press, NY (1990)]; 및 문헌[Chapters 12 and 13, Dracopoli et al. (eds.), Current Protocols in Human Genetics, John Wiley & Sons, NY (1994)]; 문헌[Colberre-Garapin et al., 1981, J. Mol. Biol. 150:1]에 기재되어 있고, 이들은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
융합 단백질의 발현 수준은 벡터 증폭에 의해 증가될 수 있다(검토를 위해, 문헌[Bebbington and Hentschel, The use of vectors based on gene amplification for the expression of cloned genes in mammalian cells in DNA cloning, Vol. 3 (Academic Press, New York, 1987)] 참조). 융합 단백질을 발현하는 벡터 시스템에서 마커가 증폭가능한 경우, 숙주 세포의 배양물 내에 존재하는 억제제의 수준의 증가는 마커 유전자의 카피 수를 증가시킬 것이다. 증폭되는 영역은 융합 단백질 유전자와 관련되므로, 융합 단백질의 생성이 또한 증가할 것이다(문헌[Crouse et al., 1983, Mol. Cell. Biol. 3:257]).
숙주 세포는 본 명세서에 제공된 다중 발현 벡터로 공동-형질감염될 수 있다. 벡터는 각각의 인코딩 폴리펩티드의 동일한 발현을 가능하게 하는 동일한 선택가능한 마커를 함유할 수 있다. 대안적으로, 다중 폴리펩티드를 인코딩하고 발현시킬 수 있는 단일 벡터가 사용될 수 있다. 코딩 서열은 cDNA 또는 게놈 DNA를 포함할 수 있다.
일단 본 명세서에 제공된 융합 단백질이 재조합 발현에 의해 생성되었으면, 그것은 폴리펩티드(예를 들어, 면역글로불린 분자)의 정제에 대해 당업계에 알려진 임의의 방법에 의해, 예를 들어, 크로마토그래피(예를 들어, 이온 교환, 친화성(특히 단백질 A 후에 특이적 항원에 대한 친화성에 의함), 크기결정 컬럼 크로마토그래피, 및 카파 선택 친화성 크로마토그래피), 원심분리, 차등 용해도에 의해, 또는 단백질의 정제에 대한 임의의 다른 표준 기술에 의해 정제될 수 있다. 또한, 정제를 용이하게 하기 위해 본 명세서에 제공된 융합 단백질 분자는 본 명세서에 기재되거나 당업계에 달리 알려진 이종성 폴리펩티드 서열에 융합될 수 있다.
5.4. 폴리뉴클레오티드
특정 실시 형태에서, 본 개시내용은 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 본 명세서에 기재된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는 융합 단백질을 제공한다. 본 개시내용의 폴리뉴클레오티드는 RNA의 형태 또는 DNA의 형태일 수 있다. DNA는 cDNA, 게놈 DNA, 및 합성 DNA를 포함하고; 이중-가닥 또는 단일-가닥일 수 있으며, 단일 가닥인 경우에는 코딩 가닥 또는 비-코딩(안티-센스) 가닥일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드는 cDNA의 형태이다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드는 합성 폴리뉴클레오티드이다.
예시적인 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 핵산 분자는 하기의 서열을 갖는 단일 도메인 항체를 인코딩하는 서열을 포함한다:
QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103).
예시적인 실시 형태에서, 핵산 분자는 하기의 서열을 포함한다:
Caggtgcagctggtggagtctgggggaggattggtgcaggctgggggctctctgaaactcgcctgtgcagcacctggacttaccttcagttcgtatcgcatgggctggttccgccaggctccagggcaggagcgtgagtttgtagcagctattgattggaatggtcgtggcacatattatcgatactatgcagactccgtgaagggccgatccaccatttccagagacaacgccaagaacacgatgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcaggttcgatcgaccttaactggtacggcggcatggactactggggcnangggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 133), gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggattggtgcaggctgggggctctctgaaactcgcctgtgcagcacctggacttaccttcagttcgtatcgcatgggctggttccgccaggctccagggcaggagcgtgagtttgtagcagctattgattggaatggtcgtggcacatattatcgatactatgcagactccgtgaagggccgatccaccatttccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagctactacggtattaactgaccctagggttcttaatgagtatgccacatggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 134), cagttgcagctcgtggagtctgggggaggcttggtgcagcctggggggtctctgagactctcctgtgcagcctctggaagcatcttcagtatcaatgttatgggctggtaccgccaggctccagggaagcagcgcgagttggtcgcacgtattaatggaggtggcattacacactatgcagagtccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacagccgcatattactgtaaggcagatgtgttcggtagtagcgggtacgtagaaacctactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 135), Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggcttggtgcaggctgggggctctctgagactctcctgtgcagtctctggaacctccgtcagtagcaatgccatgggttggtaccgccaggctccagggaagcagcgcgagtgggtcggatttattgatcgtattgctaccacgacgattgcaacctccgtgaagggccgattcgccatcaccagagacaacgccaagaacacggtgtatctccaaatgagcggcctgaaacctgaggacacagccgtctattactgtaatcatccattgaccgctcggtggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 136), Caggtgcagctggtggagtctgggggaggcttggtgcaggctgggggctctctgagactctcctgtgcagcctctggacgcaccttcagtagctatgccatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgtgagtttgtagcagctattacctggaatggtggtaccacatactatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcagacccattcaaccaaggctactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 137), Gaggtgcagctcgtggagtctggaggaggcttggtgcaggctggggggtctctgagactctcctgtgcagtctctggaagctccgtcagtagcgatgccatgggttggtaccgccaggctccagggaatcagcgcgcgtgggtcgcatttatttctggtggtggtaccacaacctatgcagactccgttaagggccgattcaccatctccagagacaacaccaagaacacggtgtatctccacatgaacagcctgaaacctgaagacacagccgtctattactgtaatcatccattgacgtctcggtggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 138), Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggattggtgcaggctggggggtctctgagactcgcctgtgtagcctctagaagcatcggcagtatcaatgttatgggctggtaccgccaggctccagggaagcagcgcgacttggtcgcacgtattactggaggtggcagtacacactacgcagagtccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctggaacctgaggacacggccgtttattactgtgcgtcaatggtaaaccctatcattacggcttggggtacgattggtgtgcgcgagattcccgactatgactactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 139), Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggcttggtgcaggctggggggtctctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcacccgctatgccatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgatcgtttgtagcagctattagctggagtggtagtagcgcaggctatggagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagtctaaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcagacccattcaaccaaggctactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 140), Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggattggtgcaggctgggggctctctgagactctcctgtgcagcctctggacgcaccttcactacctatcgcatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgagagtttgtagcagctattcgctggagtggtggtcgcacattgtatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacagcgtatctgcaaatgaacaacctgagacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcagatctagccgagtatagtggtacttactccagccctgcggactcccccgctgggtatgactactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 141), 또는 caggtgcagctggtcgaaactgggggaggattggtgcaggctggggactctctgagactctcctgtgcagcctctggacgcaccctcagcttcaacacctatgccatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgtgaatttgtagcctctattacctggaatggtggaagcacaagctacgcagactccgtgaagggccgattcaccatcaccagagacaacgccaagaacacggctactctgcgaatgaatagcctgcagcccgacgacacggccgtgtattactgtgcagcagcccgatactatgtgagtggtacttacttccccgcgaattactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca(서열 번호 142).
본 명세서에 기재된 핵산 분자를 포함하는 벡터가 또한 제공된다. 일 실시 형태에서, 핵산 분자는 재조합 발현 벡터 내로 포함될 수 있다. 본 개시내용은 본 개시내용의 핵산 중 임의의 것을 포함하는 재조합 발현 벡터를 제공한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "재조합 발현 벡터"는 유전자 변형된 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드 작제물을 의미하는 것으로서, 이러한 작제물이 mRNA, 단백질, 폴리펩티드, 또는 펩티드를 인코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하고, 이러한 벡터가 숙주 세포 내에서 발현되는 mRNA, 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드를 갖기에 충분한 조건 하에서 숙주 세포와 접촉될 때, 숙주 세포에 의한 mRNA, 단백질, 폴리펩티드, 또는 펩티드의 발현을 가능하게 한다. 본 명세서에 기재된 벡터는 전체로서 천연 발생하지 않지만; 벡터의 부분은 천연 발생할 수 있다. 기재된 재조합 발현 벡터는 DNA 및 RNA를 포함하지만 이로 한정되지 않는 임의의 유형의 뉴클레오티드를 포함할 수 있으며, 이는 단일 가닥 또는 이중 가닥이거나, 합성되거나, 천연 공급원으로부터 부분적으로 획득될 수 있고, 천연, 비천연 또는 변경된 뉴클레오티드를 함유할 수 있다. 재조합 발현 벡터는 천연 발생 또는 천연 비발생 뉴클레오티드간 결합, 또는 두 결합 유형 모두를 포함할 수 있다. 천연 비발생 또는 변경된 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드간 결합은 벡터의 전사 또는 복제를 방해하지 않는다.
일 실시 형태에서, 본 개시내용의 재조합 발현 벡터는 임의의 적합한 재조합 발현 벡터일 수 있으며, 임의의 적합한 숙주를 형질전환시키거나 형질감염시키기 위해 사용될 수 있다. 적합한 벡터는 전파 및 증폭을 위해 또는 발현을 위해 또는 둘 모두를 위해 설계된 것들, 예컨대 플라스미드 및 바이러스를 포함한다. 벡터는 pUC 시리즈(미국 메릴랜드주 글렌 버니 소재의 Fermentas Life Sciences), pBluescript 시리즈(미국 캘리포니아주 라졸라 소재의 Stratagene), pET 시리즈(미국 위스콘신주 매디슨 소재의 Novagen), pGEX 시리즈(스웨덴 웁살라 소재의 Pharmacia Biotech), 및 pEX 시리즈(미국 캘리포니아주 팔로 알토 소재의 Clontech)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 박테리오파지 벡터, 예컨대 λGT10, λGT11, λEMBL4, 및 λNM1149, λZapII(Stratagene)가 사용될 수 있다. 식물 발현 벡터의 예에는 pBI01, pBI01.2, pBI121, pBI101.3, 및 pBIN19(Clontech)가 포함된다. 동물 발현 벡터의 예에는 pEUK-Cl, pMAM, 및 pMAMneo(Clontech)가 포함된다. 재조합 발현 벡터는 바이러스 벡터, 예를 들어 레트로바이러스 벡터, 예를 들어 감마 레트로바이러스 벡터일 수 있다.
일 실시 형태에서, 재조합 발현 벡터는, 예를 들어, 문헌[Sambrook et al., 상기 문헌], 및 문헌[Ausubel et al., 상기 문헌]에 기재된 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 제조된다. 원형 또는 선형인 발현 벡터의 작제물은 원핵생물 또는 진핵생물 숙주 세포에서 기능적인 복제 시스템을 함유하도록 제조될 수 있다. 복제계는 예를 들어, ColE1, SV40, 2μ 플라스미드, λ, 소 유두종 바이러스 등으로부터 유래될 수 있다.
재조합 발현 벡터는 적절한 경우에 그리고 벡터가 DNA- 또는 RNA-기반인지의 여부를 고려하여, 벡터가 도입될 숙주(예를 들어, 세균, 식물, 진균, 또는 동물)의 유형에 특이적인 조절성 서열, 예컨대 전사 및 번역 개시 및 종결 코돈을 포함할 수 있다.
재조합 발현 벡터는 형질전환된 또는 형질감염된 숙주의 선택을 가능하게 하는 하나 이상의 마커 유전자를 포함할 수 있다. 마커 유전자는 살생제 저항성, 예를 들어 항생제, 중금속 등에 대한 저항성, 영양요구성 숙주에서 원생영양을 제공하기 위한 상보성 등을 포함한다. 기재된 발현 벡터에 적합한 마커 유전자는, 예를 들어 네오마이신/G418 저항성 유전자, 히스티딘올 x 저항성 유전자, 히스티딘올 저항성 유전자, 테트라사이클린 저항성 유전자, 및 암피실린 저항성 유전자를 포함한다.
재조합 발현 벡터는 본 개시내용의 뉴클레오티드 서열에 작동가능하게 연결된 천연 또는 정규 프로모터를 포함할 수 있다. 프로모터의 선택, 예를 들어 강한, 약한, 조직-특이적, 유도성 및 발생-특이적 프로모터의 선택은 당업자의 기술 내에 있다. 유사하게, 뉴클레오티드 서열을 프로모터와 조합하는 것이 또한 당업자의 기술 내에 있다. 프로모터는 비-바이러스성 프로모터 또는 바이러스성 프로모터, 예를 들어 거대세포바이러스(CMV) 프로모터, RSV 프로모터, SV40 프로모터, 또는 뮤린 줄기 세포 바이러스의 긴 말단 반복부에서 발견되는 프로모터일 수 있다.
재조합 발현 벡터는 일시적 발현을 위해, 안정한 발현을 위해, 또는 둘 모두를 위해 설계될 수 있다. 또한, 재조합 발현 벡터는 구성적 발현을 위해 또는 유도성 발현을 위해 제조될 수 있다.
또한, 재조합 발현 벡터는 자살 유전자를 포함하도록 제조될 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "자살 유전자"는 자살 유전자를 발현하는 세포가 죽게 하는 유전자를 지칭한다. 자살 유전자는, 유전자가 발현되는 세포 상에서 작용제, 예를 들어 약물에 대한 감수성을 부여하고, 세포가 작용제와 접촉되거나 그에 노출될 때 세포가 죽게 하는 유전자일 수 있다. 자살 유전자는 당업계에 공지되어 있으며, 예를 들어 단순 헤르페스 바이러스(HSV), 티미딘 키나제(TK) 유전자, 시토신 데아미나제, 푸린 뉴클레오시드 포스포릴라제 및 니트로환원효소를 포함한다.
본 개시내용은 추가로 본 명세서에 기재된 폴리뉴클레오티드의 변이체에 관한 것이며, 여기서 변이체는, 예를 들어, 본 개시내용의 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체의 단편, 유사체, 및/또는 유도체를 인코딩한다. 특정 실시 형태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드와 약 80% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열, 약 85% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열, 약 90% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열, 약 95% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열, 그리고 일부 실시 형태에서는, 약 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열을 갖는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 구문 "예를 들어, 참조 뉴클레오티드 서열과 95% 이상 "동일한" 뉴클레오티드 서열을 갖는 폴리뉴클레오티드"는 폴리뉴클레오티드 서열이 참조 뉴클레오티드 서열의 각각의 100개 뉴클레오티드당 최대 5개의 점 돌연변이를 포함할 수 있다는 점을 제외하고는, 폴리뉴클레오티드의 뉴클레오티드 서열이 참조 서열과 동일함을 의미하도록 의도된다. 다시 말해서, 참조 뉴클레오티드 서열과 95% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열을 갖는 폴리뉴클레오티드를 얻기 위해, 참조 서열 내의 뉴클레오티드의 최대 5%가 결실되거나 다른 뉴클레오티드로 치환될 수 있거나, 참조 서열 내의 총 뉴클레오티드의 최대 5%의 개수의 뉴클레오티드가 참조 서열 내로 삽입될 수 있다. 참조 서열의 이들 돌연변이는 참조 뉴클레오티드 서열의 5' 또는 3' 말단 위치 또는 그러한 말단 위치들 사이의 임의의 곳에서 발생할 수 있으며, 참조 서열 내의 뉴클레오티드 사이에 개별적으로, 또는 참조 서열 내에 하나 이상의 인접한 군으로 산재된다.
폴리뉴클레오티드 변이체는 코딩 영역, 비-코딩 영역, 또는 둘 모두의 변경을 함유할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 침묵 치환, 부가, 또는 결실을 생성하지만, 인코딩된 폴리펩티드의 특성 또는 활성을 변경하지 않는 변경을 함유한다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 (유전자 코드의 축퇴로 인해) 폴리펩티드의 아미노산 서열에 변화를 유발하지 않는 침묵 치환을 포함한다. 폴리뉴클레오티드 변이체는 다양한 이유로, 예를 들어, 특정 숙주에 대한 코돈 발현을 최적화하기 위해 생성될 수 있다(즉, 인간 mRNA에서의 코돈을 E. 콜라이와 같은 박테리아 숙주에 의해 선호되는 것들로 변화시킴). 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 서열의 비-코딩 또는 코딩 영역 내에 하나 이상의 침묵 돌연변이를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 인코딩된 폴리펩티드의 발현(또는 발현 수준)을 조절하거나 변경하기 위해 생성된다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 인코딩된 폴리펩티드의 발현을 증가시키기 위해 생성된다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 인코딩된 폴리펩티드의 발현을 감소시키기 위해 생성된다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 모 폴리뉴클레오티드 서열에 비교하여 인코딩된 폴리펩티드의 발현을 증가시켰다. 일부 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드 변이체는 모 폴리뉴클레오티드 서열에 비교하여 인코딩된 폴리펩티드의 발현을 감소시켰다.
특정 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드는 단리된다. 특정 실시 형태에서, 폴리뉴클레오티드는 실질적으로 순수하다.
본 명세서에 기재된 핵산 분자를 포함하는 숙주 세포가 또한 제공된다. 숙주 세포는 이종성 핵산을 함유하는 임의의 세포일 수 있다. 이종성 핵산은 벡터(예를 들어, 발현 벡터)일 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포는 세포에 의한 물질의 생성, 예를 들어 세포에 의한 유전자, DNA 또는 RNA 서열, 단백질 또는 효소의 발현을 위해 임의의 방식으로 선택되거나, 변형되거나, 형질전환되거나, 성장시키거나, 사용되거나, 조작되는 임의의 유기체로부터의 세포일 수 있다. 적절한 숙주가 결정될 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포는 벡터 골격 및 원하는 결과에 기초하여 선택될 수 있다. 예로서, 몇몇 유형의 벡터의 복제를 위해 플라스미드 또는 코스미드가 원핵생물 숙주 세포 내로 도입될 수 있다. 벡터 복제 및/또는 발현을 위한 숙주 세포로서 DH5α, JM109, 및 KCB, SURE® Competent Cell, 및 SOLOPACK Gold Cell과 같으나 이로 제한되지 않는 박테리아 세포가 사용될 수 있다. 또한, 파지 바이러스를 위한 숙주 세포로서 E. 콜라이 LE392와 같은 박테리아 세포가 사용될 수 있다. 숙주 세포로서 사용될 수 있는 진핵 세포는 효모(예를 들어, YPH499, YPH500, 및 YPH501), 곤충, 및 포유류를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 벡터의 복제 및/또는 발현을 위한 포유류 진핵 숙주 세포의 예는 HeLa, NIH3T3, Jurkat, 293, COS, Saos, PC12, SP2/0(미국 버지니아주 머내서스 소재의 미국 세포주 은행(ATCC: American Type Culture Collection), CRL-1581), NS0(영국 윌트셔주 솔즈베리 소재의 유럽 세포주 은행(ECACC: European Collection of Cell Cultures), ECACC 번호 85110503), FO(ATCC CRL-1646), 및 Ag653(ATCC CRL-1580) 뮤린 세포주를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 예시적인 인간 골수종 세포주는 U266(ATCC CRL-TIB-196)이다. 다른 유용한 세포주는 중국 햄스터 난소 (CHO) 세포, 예를 들어 CHO-K1SV (미국 메릴랜드주 워커스빌 소재의 론자 바이올로직스(Lonza Biologics)), CHO-K1 (ATCC CRL-61) 또는 DG44로부터 유래된 것을 포함한다.
5.5. 약제학적 조성물
일 태양에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 단일 도메인 항체 또는 치료 분자를 포함하는 약제학적 조성물을 추가로 제공한다. 일부 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 치료적 유효량의 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함한다.
특이적 실시 형태에서, 용어 "부형제"는 또한 희석제, 아쥬반트(예를 들어, 프로인트 아쥬반트(완전 또는 불완전)), 또는 비히클을 지칭할 수 있다. 약제학적 부형제는 석유, 동물, 식물, 또는 합성 기원의 것들, 예컨대 낙화생유, 대두유, 광유, 참기름 등을 포함하는, 물 및 오일과 같은 멸균 액체일 수 있다. 물은 예시적인 부형제이다. 식염 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액이 또한 액체 부형제로서 사용될 수 있다. 적합한 약제학적 부형제는 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 백악, 실리카 겔, 소듐 스테아레이트, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 소듐 클로라이드, 건조 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함한다. 조성물은, 원하는 경우에, 소량의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제를 또한 함유할 수 있다. 이들 조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼, 정제, 환제, 캡슐, 분말, 지속-방출 제형 등의 형태를 취할 수 있다. 적합한 약제학적 부형제의 예는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA]에 기재되어 있다. 그러한 조성물은 환자에 대한 적절한 투여를 위한 형태를 제공하도록 적합한 양의 부형제와 함께, 예방적 유효량 또는 치료적 유효량의 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자를, 예컨대 정제된 형태로 함유할 것이다. 제형은 투여 방식에 적합해야 한다.
본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체 또는 치료 분자는 표적 세포/조직으로의 전달을 위한 임의의 적합한 형태로, 예를 들어, 마이크로 캡슐 또는 마크로에멀젼으로서(문헌[Remington, 상기 문헌]; 문헌[Park et al., 2005, Molecules 10:146-61]; 문헌[Malik et al., 2007, Curr. Drug. Deliv. 4:141-51]), 지속 방출 제형으로서(문헌[Putney and Burke, 1998, Nature Biotechnol. 16:153-57]), 또는 리포좀으로(문헌[Maclean et al., 1997, Int. J. Oncol. 11:325-32]; 문헌[Kontermann, 2006, Curr. Opin. Mol. Ther. 8:39-45]) 제형화될 수 있다.
본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체 또는 치료 분자는 또한, 예를 들어, 코아세르베이션 기술에 의하거나 계면 중합에 의해 제조된 마이크로캡슐, 예를 들어, 각각 하이드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐 내에, 콜로이드성 약물 전달 시스템(예를 들어, 리포좀, 알부민 마이크로스피어, 마이크로에멀젼, 나노-입자, 및 나노캡슐) 내에, 또는 마크로에멀젼 내에 포획될 수 있다. 그러한 기술은, 예를 들어, 문헌[Remington, 상기 문헌]에 개시되어 있다.
리포좀, 미세입자, 마이크로캡슐 내의 캡슐화, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체 또는 치료 분자를 발현할 수 있는 재조합 세포, 레트로바이러스 벡터 또는 다른 벡터의 일부로서의 핵산의 작제 등을 포함하지만 이로 제한되지 않는, 다양한 조성물 및 전달 시스템이 알려져 있으며, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체 또는 치료 분자와 함께 사용될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자는 덜 침습성이거나 비-침습성인 투여에 적합한 약제학적 조성물로 제형화된다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자는 경구 투여에 적합한 약제학적 조성물로 제형화된다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자는 협측 투여에 적합한 약제학적 조성물로 제형화된다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자는 흡입 투여에 적합한 약제학적 조성물로 제형화된다. 특이적 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자는 비강 투여에 적합한 약제학적 조성물로 제형화된다. 비제한적인 예시적인 투여 형태는 하기 섹션에 더욱 상세하게 기재되어 있다.
5.5.1. 경구 투여 형태
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자는 경구 투여에 적합한 약제학적 조성물로 제형화된다. 경구 투여는, 정제(예를 들어, 저작성 정제), 당의정, 캡슐, 및 액체(예를 들어, 향미 시럽)와 같으나 이로 제한되지 않는 별개의 투여 형태로서 제공될 수 있다. 그러한 투여 형태는 사전결정된 양의 활성 성분을 함유하며, 당업자에게 잘 알려진 약학 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton PA (1990)]을 참조한다.
전형적인 경구 투여 형태는 관용적인 약제학적 컴파운딩 기술에 따라 활성 성분을 하나 이상의 부형제와 함께 긴밀한 혼합물 내에 조합함으로써 제조된다. 부형제는 투여를 위해 원하는 제조 형태에 따라 매우 다양한 형태를 취할 수 있다. 예를 들어, 경구 액체 또는 에어로졸 투여 형태로 사용하기에 적합한 부형제는 물, 글리콜, 오일, 알코올, 향미제, 보존제, 및 착색제를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 고형 경구 투여 형태(예를 들어, 분말, 정제, 캡슐, 및 당의정)에 사용하기에 적합한 부형제의 예는 전분, 당, 미세-결정질 셀룰로스, 희석제, 과립화제, 윤활제, 결합제, 및 붕해제를 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
정제 및 캡슐은 이들의 투여 용이성으로 인해 유리한 경구 투여 단위 형태를 대표하며, 이 경우에는 고형 부형제가 사용된다. 원하는 경우, 정제는 표준 수성 또는 비수성 기술에 의해 코팅될 수 있다. 그러한 투여 형태는 임의의 약학 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 약제학적 조성물 및 투여 형태는 활성 성분을 액체 담체, 미분된 고체 담체, 또는 둘 모두와 균일하고 긴밀하게 혼합한 후, 필요한 경우에 생성물을 원하는 외형으로 성형함으로써 제조된다.
예를 들어, 정제는 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축된 정제는, 임의로 부형제와 혼합된, 분말 또는 과립과 같은 자유-유동 형태의 활성 성분을 적합한 기계에서 압축함으로써 제조될 수 있다. 성형된 정제는, 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말화된 화합물의 혼합물을 적합한 기계에서 성형함으로써 제조될 수 있다.
본 명세서에 제공된 경구 투여 형태에 사용될 수 있는 부형제의 예는 결합제, 충전제, 붕해제, 및 윤활제를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 약제학적 조성물 및 투여 형태에 사용하기에 적합한 결합제는 옥수수 전분, 감자 전분, 또는 다른 전분, 젤라틴, 천연 및 합성 검, 예컨대 아카시아, 소듐 알기네이트, 알긴산, 다른 알기네이트, 분말화된 트래거캔스, 구아 검, 셀룰로스 및 그의 유도체(예를 들어, 에틸 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트, 카르복시메틸 셀룰로스 칼슘, 소듐 카르복시메틸 셀룰로스), 폴리비닐 피롤리돈, 메틸 셀룰로스, 전호화 전분, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, (예를 들어, 번호 2208, 2906, 2910), 미세결정질 셀룰로스, 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
미세결정질 셀룰로스의 적합한 형태는 AVICEL-PH-101, AVICEL-PH-103 AVICEL RC-581, AVICEL-PH-105(미국 펜실베이니아주 마르쿠스 훅 소재의 FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales로부터 입수가능함)로서 판매되는 재료 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 특이적 결합제는 AVICEL RC-581로서 판매되는 미세결정질 셀룰로스 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로스의 혼합물이다. 적합한 무수 또는 저수분 부형제 또는 첨가제는 AVICEL-PH-103™ 및 전분 1500 LM을 포함한다.
본 명세서에 개시된 약제학적 조성물 및 투여 형태에 사용하기에 적합한 충전제의 예는 활석, 칼슘 카르보네이트(예를 들어, 과립 또는 분말), 미세결정질 셀룰로스, 분말화된 셀룰로스, 덱스트레이트, 카올린, 만니톨, 규산, 소르비톨, 전분, 전호화 전분, 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 본 명세서에 제공된 약제학적 조성물 내의 결합제 또는 충전제는 전형적으로 약제학적 조성물 또는 투여 형태의 약 50 내지 약 99 중량%로 존재한다.
붕해제는 수성 환경에 노출될 경우에 붕해되는 정제를 제공하기 위해 조성물에 사용된다. 너무 많은 붕해제를 함유하는 정제는 보관 시에 붕해될 수 있는 반면, 너무 적은 붕해제를 함유하는 정제는 요망되는 속도로 또는 요망되는 조건 하에서 붕해되지 않을 수 있다. 따라서, 너무 많거나 너무 적어서 활성 성분의 방출을 불리하게 변경시키지 않는 충분한 양의 붕해제가 고형 경구 투여 형태를 형성하는 데 사용되어야 한다. 사용되는 붕해제의 양은 제형의 유형에 기초하여 변동되며, 당업자에게 용이하게 인식될 수 있다. 전형적인 약제학적 조성물은 약 0.5 내지 약 15 중량%의 붕해제, 바람직하게는 약 1 내지 약 5 중량%의 붕해제를 포함한다.
약제학적 조성물 및 투여 형태에 사용될 수 있는 붕해제는 한천-한천, 알긴산, 칼슘 카르보네이트, 미세결정질 셀룰로스, 크로스카멜로스 소듐, 크로스포비돈, 폴라크릴린 포타슘, 소듐 전분 글리콜레이트, 감자 또는 타피오카 전분, 다른 전분, 전호화 전분, 다른 전분, 점토, 다른 알긴, 다른 셀룰로스, 검, 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이로 제한되지 않는다.
약제학적 조성물 및 투여 형태에 사용될 수 있는 윤활제는 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 광유, 경질 광유, 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 다른 글리콜, 스테아르산, 소듐 라우릴 설페이트, 활석, 수소화 식물성 오일(예를 들어, 낙화생유, 면실유, 해바라기유, 참기름, 올리브유, 옥수수유, 및 대두유), 아연 스테아레이트, 에틸 올레에이트, 에틸 라우레이트, 한천, 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 추가의 윤활제는, 예를 들어, 실로이드 실리카 겔(AEROSIL200, 미국 메릴랜드주 볼티모어 소재의 W.R. Grace Co.에 의해 제조됨), 합성 실리카의 응집된 에어로졸(미국 텍사스주 플라노 소재의 Degussa Co.에 의해 시판됨), CAB-O-SIL(미국 매사추세츠주 보스톤 소재의 Cabot Co.에 의해 판매되는 발열성 이산화규소 생성물), 및 이들의 혼합물을 포함한다. 윤활제는, 사용된다고 하더라도, 전형적으로 이들이 포함되는 약제학적 조성물 또는 투여 형태의 약 1 중량% 미만의 양으로 사용된다.
5.5.2. 국소 및 점막 투여 형태
본 명세서에 제공된 국소 및 점막 투여 형태는 스프레이, 에어로졸, 용액, 에멀젼, 현탁액, 점안액, 또는 다른 안과용 제제, 또는 당업자에게 알려진 다른 형태를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 예를 들어, 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th and 18th eds., Mack Publishing, Easton PA (1980 & 1990)]; 및 문헌[Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4th ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985)]을 참조한다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 점막 투여 형태는 대상의 구강 점막 표면(협측) 또는 비강 점막 표면에 투여하기에 적합하다.
국소 및 점막 투여 형태를 제공하기 위해 사용될 수 있는 적합한 부형제(예를 들어, 담체 및 희석제) 및 다른 재료는 약제학 기술의 당업자에게 잘 알려져 있고, 주어진 약제학적 조성물 또는 투여 형태가 적용될 특정 조직에 의존한다. 이러한 사실을 고려하여, 전형적인 부형제는 비독성이고 약제학적으로 허용가능한 용액, 에멀젼, 또는 겔을 형성하기 위한 물, 아세톤, 에탄올, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 부탄-1,3-다이올, 아이소프로필 미리스테이트, 아이소프로필 팔미테이트, 광유, 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 원하는 경우에 수분공급제 또는 보습제가 또한 약제학적 조성물 및 투여 형태에 첨가될 수 있다. 그러한 추가의 성분의 예는 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th and 18th eds., Mack Publishing, Easton PA (1980 & 1990)]을 참조한다.
하나 이상의 활성 성분의 전달을 개선하기 위해 약제학적 조성물 또는 투여 형태의 pH가 또한 조정될 수 있다. 유사하게, 전달을 개선하기 위해 용매 담체의 극성, 그의 이온 강도, 또는 장성이 조정될 수 있다. 전달을 개선하도록 하나 이상의 활성 성분의 친수성 또는 친유성을 유리하게 변경하기 위해 스테아레이트와 같은 화합물이 또한 약제학적 조성물 또는 투여 형태에 첨가될 수 있다. 이와 관련하여, 스테아레이트는 제형을 위한 지질 비히클로서, 유화제 또는 계면활성제로서, 그리고 전달-향상제 또는 침투-향상제로서 작용할 수 있다. 활성 성분의 상이한 염, 수화물, 또는 용매화물을 사용하여 생성되는 조성물의 특성을 추가로 조정할 수 있다.
5.5.3. 지연 방출 투여 형태
다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 제어 방출 또는 지속 방출 시스템으로서 제공될 수 있다. 일 실시 형태에서는, 제어 방출 또는 지속 방출을 달성하기 위해 펌프가 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[Langer, 상기 문헌]; 문헌[Sefton, 1987, Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201-40]; 문헌[Buchwald et al., 1980, Surgery 88:507-16]; 및 문헌[Saudek et al., 1989, N. Engl. J. Med. 321:569-74] 참조). 다른 실시 형태에서는, 본 명세서에 제공된 예방제 또는 치료제(예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 융합 단백질) 또는 조성물의 제어 방출 또는 지속 방출을 달성하기 위해 중합체성 재료를 사용할 수 있다(예를 들어, 문헌[Medical Applications of Controlled Release (Langer and Wise eds., 1974)]; 문헌[Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance (Smolen and Ball eds., 1984)]; 문헌[Ranger and Peppas, 1983, J. Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61-126]; 문헌[Levy et al., 1985, Science 228:190-92]; 문헌[During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351-56]; 문헌[Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105-12]; 미국 특허 제5,679,377호; 제5,916,597호; 제5,912,015호; 제5,989,463호; 및 제5,128,326호; PCT 출원 공개 제WO 99/15154호 및 제WO 99/20253호 참조). 지속 방출 제형에 사용되는 중합체의 예는 폴리(2-하이드록시 에틸 메타크릴레이트), 폴리(메틸 메타크릴레이트), 폴리(아크릴산), 폴리(에틸렌-코-비닐 아세테이트), 폴리(메타크릴산), 폴리글리콜리드(PLG), 폴리언하이드라이드, 폴리(N-비닐 피롤리돈), 폴리(비닐 알코올), 폴리아크릴아미드, 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리락티드(PLA), 폴리(락티드-코-글리콜리드)(PLGA), 및 폴리오르토에스테르를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 일 실시 형태에서, 지속 방출 제형에 사용되는 중합체는 불활성이고, 침출가능한 불순물이 없고, 저장시에 안정하고, 멸균되고, 생분해성이다.
또 다른 실시 형태에서, 제어 방출 또는 지속 방출 시스템은 특정 표적 조직, 예를 들어, 비강 또는 폐에 근접하여 배치될 수 있으며, 따라서 전신 용량의 소정 분획만을 필요로 한다(예를 들어, 문헌[Goodson, Medical Applications of Controlled Release Vol. 2, 115-38 (1984)] 참조). 제어 방출 시스템은, 예를 들어, 문헌[Langer, 1990, Science 249:1527-33]에 의해 논의되어 있다. 당업자에게 알려진 임의의 기술을 사용하여 본 명세서에 기재된 바와 같은 하나 이상의 제제를 포함하는 지속 방출 제형을 생성할 수 있다(예를 들어, 미국 특허 제4,526,938호, PCT 출원 공개 제WO 91/05548호 및 제WO 96/20698호, 문헌[Ning et al., 1996, Radiotherapy & Oncology 39:179-89]; 문헌[Song et al., 1995, PDA J. of Pharma. Sci. & Tech. 50:372-97]; 문헌[Cleek et al., 1997, Pro. Int'l. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 24:853-54]; 및 문헌[Lam et al., 1997, Proc. Int'l. Symp. Control Rel. Bioact. Mater. 24:759-60] 참조).
5.6. 방법 및 용도
본 개시내용에 의해 입증된 바와 같이, 본 명세서에 제공된 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH 도메인)는 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 제제를 수송하기에 유용하며, 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달과 같은 방법을 통해, 예를 들어, 대상의 전신 순환 또는 고유층 또는 위장관에 제제를 전달할 수 있다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
따라서, 일부 실시 형태에서 본 명세서에는, pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 전달하기 위한 방법으로서, pIgR-발현 세포를 (i) 본 명세서에 제공된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체, 또는 (ii) 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자와 접촉시키는 단계를 포함하는 방법이 제공된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
일부 실시 형태에서 본 명세서에는, pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 제제를 전달하는 용도를 위한, 본 명세서에 제공된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체가 제공되며, 여기서 제제는 단일 도메인 항체에 접합된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
일부 실시 형태에서 본 명세서에는, pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 제제를 전달하기 위한, 본 명세서에 제공된 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체의 용도가 제공되며, 여기서 제제는 단일 도메인 항체에 접합된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 치료 분자를 수송하는 방법으로서, 제제 및 VHH 도메인을 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다. 일부 실시 형태에서, 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 치료 분자를 수송하는 용도를 위한 단일 도메인 항체가 제공되며, 여기서 치료 분자는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 치료 분자를 수송하기 위한 단일 도메인 항체의 용도가 제공되며, 여기서 치료 분자는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 전신 순환으로 치료 분자를 수송하는 방법으로서, 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는 방법이 제공된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 전신 순환으로 치료 분자를 수송하는 용도를 위한 단일 도메인 항체가 제공되며, 여기서 치료 분자는 단일 도메인 항체 및 제제를 포함하고, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 전신 순환으로 치료 분자를 수송하기 위한 VHH의 용도가 제공되며, 여기서 치료 분자는 단일 도메인 항체 및 제제를 포함하고, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 고유층 또는 위장관으로 치료 분자를 수송하는 방법으로서, 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는 방법이 제공된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 고유층 또는 위장관으로 치료 분자를 수송하는 용도를 위한 단일 도메인 항체가 제공되며, 여기서 치료 분자는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하고, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상의 고유층 또는 위장관으로 치료 분자를 수송하기 위한 단일 도메인 항체의 용도가 제공되며, 여기서 치료 분자는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하고, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
본 명세서에 제공된 다양한 방법 및 용도의 일부 실시 형태에서, 치료제는 대상에서 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 수송된다.
일부 실시 형태에서, 단일 도메인 항체 또는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자는 또한 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로 수송될 수 있다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 질환 또는 장애를 치료하는 방법으로서, 본 명세서에 제공된 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 임의로 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는 방법이 제공된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상에서 질환 또는 장애를 치료하는 용도를 위한, 본 명세서에 제공된 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자가 제공되며, 여기서 임의로 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
또 다른 실시 형태에서 본 명세서에는, 대상에서 질환 또는 장애를 치료하기 위한, 본 명세서에 제공된 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자의 용도가 제공되며, 여기서 임의로 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여된다. 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH1 또는 VHH1과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH2 또는 VHH2와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH3 또는 VHH3과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH4 또는 VHH4와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH5 또는 VHH5와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH6 또는 VHH6과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH7 또는 VHH7과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH9 또는 VHH9와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH10 또는 VHH10과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH11 또는 VHH11과 동일한 CDR을 갖는 VHH이다. 또 다른 특이적 실시 형태에서, 단일 도메인 항체는 VHH12 또는 VHH12와 동일한 CDR을 갖는 VHH이다.
일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 대사 질환 또는 장애이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 당뇨병이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 암이다. 다른 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 면역 질환 또는 장애이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 위장관 질환이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 위장관 염증이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 염증성 장 질환(IBD)이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 크론병(CD)이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 궤양성 대장염(UC)이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 강직성 척추염(AS)이다. 일부 실시 형태에서, 질환 또는 장애는 대장염이다.
예를 들어, 본 개시내용의 단일 도메인 항체는, 전염증성 사이토카인의 억제제, Th17 세포 활성화 및/또는 분화의 억제제, 림프구 이동 또는 접착을 억제하는 분자, 선천성 면역계의 조절제, 대식세포, 수지상 세포, 조절 T 세포(Treg), 또는 이펙터 CD8+ 또는 CD4+ T 세포의 조절제를 포함하는, 장 염증, IBD, UC, 또는 AS의 증상을 치료하거나 개선하기 위해 사용될 수 있는 임의의 제제에 접합될 수 있다. 그러한 예시적인 제제는 TNF-α IL-12, IL-6, IL-13, IL-17A, IL17A/F, IL-18, IL-21의 억제제, TLR3 또는 TLR4 경로의 조절제, TNF-α 억제제 인플릭시맙, 아달리무맙, 세르톨리주맙, 골리무맙, 에타네르셉트, 및 이들의 바이오시밀러, IL-23 억제제 우스테키누맙, 리산키주맙, 브라지쿠맙, 및 미리키주맙, IL-23 수용체 억제제, IL-17 억제제 세쿠키누맙, IL-6 억제제 토실리주맙 및 PF-04236921, PDE4 억제제 아페르밀라스트, JAK 억제제 토카시피닙, 필고티닙, 우파다시티닙, 또는 페피시팅, 세포 접착의 억제제, 예컨대 나탈리주맙, 베돌리주맙, 에트롤리주맙, 아브릴루맙, PF-00547659, 인테그린 길항제 또는 스핑고신 1 포스페이트 수용체 조절제, 또는 IL-10의 생성을 향상시키는 제제를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 제제는 IL-23 수용체의 억제제이다. 본 명세서에서 장 염증에서의 병원성 경로를 표적화하는 제제는 알려진 분자, 알려진 분자의 변이체 또는 단편이거나, 신생경로로(de novo) 생성되고 알려진 방법 및 본 명세서에 기재된 것들을 사용하여 본 개시내용의 단일 도메인 항체에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 방법 또는 용도는 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이와 같은 감염을 예방하기 위한 백신을 전달하기 위한 것이다.
본 명세서에 제공된 다양한 방법 및 용도의 일부 실시 형태에서, 치료 분자 내의 제제는 펩티드를 포함한다. 본 명세서에 제공된 다양한 방법 및 용도의 일부 실시 형태에서, 치료 분자 내의 제제는 항체 또는 이의 단편을 포함한다. 본 명세서에 제공된 다양한 방법 및 용도의 일부 실시 형태에서, 치료 분자 내의 제제는 소분자 화합물에 접합된 펩티드(예를 들어, 항체 약물 접합체)를 포함한다. 본 명세서에 제공된 다양한 방법 및 용도의 일부 실시 형태에서, 치료 분자 내의 제제는 핵산을 포함한다. 본 명세서에 제공된 다양한 방법 및 용도의 일부 실시 형태에서, 치료 분자 내의 제제는 백신을 포함한다.
질환 또는 병태의 예방 및/또는 치료에 효과적인 예방제 또는 치료제(예를 들어, 항체 또는 치료 분자), 또는 본 명세서에 제공된 조성물의 양은 표준 임상 기술에 의해 결정될 수 있다. 또한, 최적의 투여량 범위를 식별하는 것을 보조하기 위해 시험관내 검정이 임의로 사용될 수 있다. 제형에 사용될 정확한 용량은 또한 투여 경로, 및 질환 또는 병태의 심각도에 의존할 것이며, 전문의의 판단 및 각각의 환자의 상황에 따라 결정되어야 한다.
유효 용량은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 용량-반응 곡선으로부터 외삽될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 환자에 대한 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자의 용량에 대한 투여 경로는, 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 흡입 전달, 또는 이들의 조합이지만, 다른 경로가 또한 허용가능할 수 있다. 각각의 용량은 동일한 투여 경로에 의해 투여될 수 있거나 그러하지 않을 수 있다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 제공된 항체 또는 치료 분자는 다중의 투여 경로를 통해 본 명세서에 제공된 동일하거나 상이한 제제의 다른 용량과 동시에 또는 후속적으로 투여될 수 있다.
간결성을 위해, 특정 약어가 본 명세서에 사용된다. 일례는 아미노산 잔기를 나타내는 1 문자 약어이다. 아미노산 및 이들의 상응하는 3 문자 및 1 문자 약어는 하기와 같다:
Figure pct00007
본 개시내용은 일반적으로 다수의 실시 형태를 기재하기 위해 긍정 언어를 사용하여 본 명세서에 개시된다. 본 개시내용은 또한 물질 또는 재료, 방법 단계 및 조건, 프로토콜, 절차, 검정 또는 분석과 같은 특정 주제가 전체적으로 또는 부분적으로 배제되는 실시 형태를 구체적으로 포함한다. 따라서, 본 개시내용이 포함하지 않는 것의 관점에서 본 개시내용이 본 명세서에 일반적으로 표현되지 않았지만, 그럼에도 불구하고 본 개시내용에 명시적으로 포함되지 않은 태양들이 본 명세서에 개시된다.
본 개시내용의 다수의 실시 형태가 기재되었다. 그럼에도 불구하고, 본 개시내용의 사상 및 범주로부터 이탈함이 없이 다양한 변형들이 실행될 수 있음이 이해될 것이다. 따라서, 하기 실시예는 청구범위에 기재된 본 개시내용의 범주를 제한하는 것이 아니라 예시하도록 의도된다.
6. 실시예
하기는 연구에 사용된 다양한 방법 및 재료의 설명이며, 당업자에게 본 개시내용을 실행하고 사용하는 방법에 대한 완전한 개시내용 및 설명을 제공하도록 제시되고, 본 발명자들이 이들의 개시내용으로 간주하는 것의 범주를 제한하도록 의도되는 것도 아니고 하기 실험이 수행되었고 수행될 수 있는 실험의 전부임을 이들이 나타내도록 의도되는 것도 아니다. 현재 시제로 작성된 예시적인 설명은 반드시 수행된 것은 아니지만 본 개시내용의 교시와 관련된 데이터 등을 생성하기 위해 설명이 수행될 수 있음이 이해되어야 한다. 사용된 숫자(예를 들어, 양, 백분율 등)에 관련하여 정확도를 보장하기 위한 노력이 실행되었지만, 일부 실험 오차 및 편차가 고려되어야 한다.
6.1. 실시예 1: pIgR 결합제의 면역화, 회수, 및 스크리닝
pIgR에 결합하는 단일-도메인 항체의 패널을 생성하기 위해, 약 90 일 동안 재조합 인간 pIgR(hpIgR) 및/또는 마우스 pIgR(mpIgR)로 라마를 면역화하였다. 라마로부터 전혈 및 PBMC를 단리하고, RNA를 제조하였다. 제1-가닥 cDNA 합성 후에, (i) VH(중쇄 가변 영역), (ii) VHH 리더 서열 유전자, 및 (iii) CH2 유전자에 어닐링되는 라마-특이적 프라이머를 사용하여 VH 및 VHH 유전자 레퍼토리를 PCR 증폭시켰다.
겔 상에서 PCR 단편을 주행시키고 더 작은 밴드를 절단함으로써 VHH 레퍼토리를 VH 레퍼토리로부터 분리하였다. VHH 유전자 레퍼토리를 재증폭시키고 CMV-기반 포유류 벡터 내로 클로닝하였다. VHH-유전자는 Ig-융합으로서 구성되었다. 라이브러리를 E. 콜라이에 형질전환시켰다. 생거 서열분석을 위해 단일 콜로니를 96-웰 형식으로 선택하였다. 대략 300개의 고유한 서열로부터, 선택된 개수의 VHH 서열을 미니프렙 DNA를 위해 선택한 후, 향후 재조합 발현 및 스크리닝을 위해 규모-확대하였다. 미니프렙 DNA를 위해 mo_pIgR_llama_Sort1 캠페인으로부터 39개의 클론을 선택하고 hu_pIgR_llama_Sort1 캠페인으로부터 35개를 선택하였다. 클론 선택은 서열 고유성(CDR3에 크게 가중됨) 및 VHH 또는 중쇄 단독 유래 서열을 나타내는 프레임워크 2 시그니처에 기초하였다.
VHH 및 항원 결합에 대해 양성인 B-세포를 단리하고, 회수하고, 클로닝하고, 확립된 프로토콜을 사용하여 VHH 가변 도메인을 서열분석하였다. VHH-영역 서열분석 후에, 73개의 VHH 분자의 패널을 인간 IgG1 모노-Fc 단백질에 대한 융합으로서 발현시키고 정제하였다. 인간 IgG1 모노-Fc 단백질의 서열은 하기와 같다:
SPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQYN STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTKPPSREE MTKNQVSLSC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTVPV LDSDGSFRLA SYLTVDKSRW QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK(서열 번호 146)
효소-결합 면역흡착 검정(ELISA)에 의해 hpIgR 및 mpIgR 엑토도메인에 대한 결합에 대해 이 VHH 패널을 스크리닝하여 40개의 양성 히트가 생성되었다.
생물층 간섭계를 하기와 같이 수행하였다. ForteBioOctet RED384 시스템(Pall Corporation)을 사용하여 VHH-모노-Fc 분자와 pIgR 단백질 사이, 및 IgA와 pIgR 단백질 사이의 결합 동역학을 측정하였다(VHH-모노-Fc 분자의 부재 및 존재 하에). Octet Data Acquisition 버전 7.1.0.87(ForteBio)로 데이터를 수집하고, Octet Data Analysis 버전 7.1(ForteBio)을 사용하여 분석하였다. VHH-모노-Fc 분자와 HIS-태깅된 pIgR 단백질 사이의 결합 동역학을 측정하기 위해, VHH-모노-Fc를 아민-반응성 2-세대(ARG2) 바이오센서 상에 제조사의 설명서에 따라 고정시키고 증가하는 농도의 pIgR 단백질을 센서-고정된 VHH에 노출시켰다. 일부 경우에는, HIS-태깅된 pIgR 단백질을 항-HIS 바이오센서 상에 고정시키고 증가하는 농도의 VHH-모노-Fc 분자에 노출시켰다. 파장(nm)의 이동에 의해 결합 및 해리 속도가 측정되었다. 각각의 센서-고정된 단백질에 대해, 3개 이상의 상이한 리간드 농도가 사용되었고, 1:1 결합 모델에 데이터를 피팅함으로써 K D(평형 해리 상수)를 얻었다. 모든 반응은 25℃에서 PBS 중에 수행하였다. 결과는 도 30a 및 도 30b에 나타낸다.
IgA와 pIgR 단백질 사이의 결합 동역학을 측정하기 위해, IgA를 ARG2 바이오센서 상에 제조사의 설명서에 따라 고정시키고, 고정된 IgA를 증가하는 농도의 pIgR ECD에 노출시켰다. pIgR-IgA 결합에 대한 VHH의 효과를 시험하기 위해, VHH의 존재 하에 IgA에 결합하는 pIgR ECD에 대해 K D 값을 측정하였다. ARG2 바이오센서 상에 고정된 IgA를 증가하는 농도의 pIgR-VHH 복합체에 노출시키고, 파장(nm)의 이동에 의해 결합 및 해리 속도를 측정하였다. 각각의 센서-고정된 IgA에 대해, 3개 이상의 상이한 pIgR 또는 pIgR-VHH 농도가 사용되었고, 2:1 결합 모델에 데이터를 피팅함으로써 K D(평형 해리 상수)를 얻었다. 모든 반응은 25 C에서 PBS 중에 수행하였다.
생물층 간섭계는 이 패널로부터의 14개의 결합제가 마우스 또는 인간 pIgR 엑토도메인에 대한 결합에 대해 100 nM 미만의 KD 값을 가졌음을 나타냈다(5개의 항-mpIgR, 6개의 항-hpIgR, 및 3개의 교차-반응성).
CHO 세포에서 VHH의 발현 및 정제를 하기와 같이 수행하였다. In-Fusion® HD 클로닝 키트를 사용하여 VHH에 대한 DNA 작제물을 포유류 발현 벡터 내로 서브클로닝하였다. ExpiCHOTM 세포를 적절한 발현 벡터로 형질감염시켰다. 6 내지 7일 후에 원심분리(4,000 g, 15 분)에 의해 상청액을 수확하고, 0.45-um 필터에 통과시키고, DPBS(Sigma)를 주행 완충액으로서 사용하고 0.1 M 소듐 아세테이트, pH 3.5를 용출 완충액으로서 사용하는 ㅔKTA express 시스템 상의 MabSelectTM SuReTM 크로마토그래피에 의해(둘 모두 GE Healthcare) 4 oC에서 정제하였다. 25%(v/v) 2 M 트리스-HCl pH 7.0을 사용하여 용출액을 즉시 중화시키고, DPBS에 투석하고, 0.22-um 여과에 의해 멸균하고, 4 oC에서 저장하였다. Nanodrop ND-1000 분광광도계(ThermoFisher Scientific) 상에서 280 nm에서의 흡광도에 의해 농도를 결정하였다. 결과는 도 14에 나타낸다.
HEK293 세포에서 pIgR 작제물의 클로닝, 발현, 및 정제를 하기와 같이 수행하였다. 원하는 hpIgR 도메인 서열을 인코딩하는 유전자 블록을 IDT로부터 얻고, In-Fusion® HD 클로닝 키트를 사용하여 포유류 발현 벡터 내로 서브-클로닝하였다. ExpiFectamineTM 293 형질감염 키트를 사용하여 HEK Expi293TM 세포를 pIgR-도메인 발현 벡터로 형질감염시켰다. 6 내지 7일 후에 원심분리(4,000 g, 15 분)에 의해 상청액을 수확하고, 0.45-um 필터에 통과시키고, HisPurTM 코발트 수지(Thermo scientific)를 사용하는 고정된 금속 이온 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 완충액 NPI-20(Teknova)을 주행 완충액으로서 사용하고, 300 mM 이미다졸을 함유하는 완충액 NPI-300(Teknova)을 용출 완충액으로서 사용하였다. 제조사의 설명서에 따라 PD10탈염 컬럼(GE health care)을 사용하여 용출액을 DPBS로 완충액 교환하고, 정제된 pIgR 도메인을 4 oC에서 저장하였다. Nanodrop ND-1000 분광광도계(ThermoFisher Scientific) 상에서 280 nm에서의 흡광도에 의해 농도를 결정하였다.
분석용-SEC를 하기와 같이 수행하였다. 모든 정제된 VHH-모노-Fc 분자를 Agilent AdvanceBio 크기 배제 컬럼(300 Å, 2.7 um, 4.6 x 150 mm)을 사용하는 Agilent 1200 infinity 시스템 상에서 분석용 고압 액체 크로마토그래피에 의해 분석하였다. 컬럼을 0.2 M 소듐 포스페이트 pH 6.8로 평형화하고, 20 ul의 샘플을 0.5 mg/ml의 농도 및 0.35 ml/분의 유량에서 주입하였다. 이들 설정에서 약 4 분의 예상된 체류 시간에 단량체성 VHH-모노-Fc 용출이 검출되었다. OpenLab Chemstation에서 데이터 분석을 수행하여 % 단량체 함량을 계산하였다.
SEC-MALS는 하기와 같이 수행되었다. 정제된 VHH-모노-Fc 분자에 대한 분자량을 다각 광 산란과 조합된 크기-배제 크로마토그래피에 의해 측정하였다. 실험은 Wyatt uDAWN 광 산란/uTrEX 기기에 직렬로 연결된 Waters 고압 액체 크로마토그래피 기기 상에서 수행하였다. Acquity UPLC Protein BEH 크기-배제 컬럼(200 Å, 1.7 μm, 4.6 x 150 mm)을 1 x DPBS pH 7.4로 평형화하고, 10 ul의 샘플을 0.5 mg/ml의 농도 및 0.3 ml/분의 유량에서 주입하였다. Astra 소프트웨어 패키지(Wyatt)를 사용하여 주요 종(단량체성 VHH-Fc)의 분자량을 계산하였다.
6.2. 실시예 2: hpIgR-특이적 결합제의 생물물리학적 특성화
추가의 생물물리학적 검정 및 기능적 검정을 위해 실시예 1로부터의 10개의 pIgR 결합제(8개의 hpIgR 특이적 및 2개의 인간/마우스 교차-반응성)를 선택하였다. 10개의 pIgR 결합제를 CHO 세포로부터 발현시키고 단백질-A 친화성 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 다각 광 산란과 조합된 크기-배제 크로마토그래피는 10개의 VHH-모노-Fc 결합제(VHH2, VHH3, VHH4, VHH5, VHH6, VHH7, VHH9, VHH10, VHH11, 및 VHH12)의 분자량이 41.3 kDa 내지 48.7 kDa의 범위임을 나타냈다.
자동화된 Prometheus 기기를 사용하여, 시차 주사 형광측정법, 구체적으로 NanoDSF 방법에 의해 샘플의 열 안정성을 결정하였다. 384-웰 샘플 플레이트로부터 24-웰 모세관 내로 샘플을 로딩함으로써 측정을 실행하였다. 각각의 샘플에 대해 이중실험 주행을 수행하였다. Prometheus NanoDSF 사용자 인터페이스(Melting Scan 탭)를 사용하여 주행을 위한 실험 파라미터를 설정하였다. 전형적인 IgG 샘플에 대한 열 스캔은 1.0℃/분의 속도로 20℃부터 95℃까지 이어졌다. 330 nm 및 350 nm의 방출 파장에서 고유 트립토판 및 티로신 형광의 이중-UV 기술 모니터링을 수행하였다. F350 nm/F330 nm 비를 온도에 대해 플롯팅하여 언폴딩 곡선을 생성하였다.
샘플 응집의 검출을 위해 기기의 후방 반사 광학계(back reflection optics)가 또한 사용되었다. 그러한 광학계는 단백질에 의해 흡수되지 않는 파장에서 근-UV 광을 방출한다. 이러한 광은 샘플을 통과하고 검출기로 반사되었다. 단백질 응집체는 이러한 광을 산란시키므로, 산란되지 않은 광만이 검출기에 도달한다. 후방 반사된 광의 감소는 샘플 내의 응집에 대한 직접적인 척도였으며, 온도에 대해 mAU(감쇠 단위)로서 플롯팅된다. 포스페이트 완충 식염수, pH 7.4 중의 0.5 mg/mL 농도에서 VHH 결합제의 열 언폴딩 파라미터(Tm 및 Tagg)를 측정하기 위해 Nano DSF가 사용되었다.
VHH-모노-Fc 분자를 CHO 세포에서 발현시키고 단백질-A 친화성 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 정제된 단백질의 균질성 및 분자량을 분석용 크기-배제 크로마토그래피(A-SEC) 및 다중-각 광 산란과 조합된 크기-배제 크로마토그래피(SEC-MALS)에 의해 각각 검증하였다. A-SEC에 대한 결과는 도 15에 나타낸다. SEC-MALS에 대한 결과는 도 16에 나타낸다.
열 안정성은 시차 주사 형광측정법(DSF)에 의해 평가되었으며, 결과는 도 17에 나타낸다. VHH 분자에 대한 Tm은 하기 보고되어 있다. VHH-hpIgR 엑토도메인 상호작용에 대한 KD 값은 생물층 간섭계에 의해 측정되었다. MDCK-hpIgR 세포에 대한 VHH 분자 결합에 대한 EC50 값은 유세포 분석법에 의해 측정하였다.
유세포 분석법은 하기와 같이 수행하였다. VHH-모노-Fc 분자가 세포-표면 hpIgR을 인식하는지 여부를 시험하기 위해, 전장 hpIgR을 발현하도록 조작된 마딘-다비 개 신장(MDCK: Madin-Darby canine kidney) 세포를 사용하였다. 5% CO2 중에 37℃에서 10% 우태아 혈청을 함유하는 둘베코 변형된 이글 배지 중에 세포를 배양하였다. 세포를 동일한 분획(약 70,000개의 세포)으로 분할하고, 증가하는 농도의 VHH-모노-Fc 분자와 함께 4℃에서 30 분 동안 인큐베이션하였다. 세포를 저온 PBS(pH 7.4)로 2회 세척하고 4℃에서 염색 완충액(2 ㎍/ml Ab) 중에 30 분 동안 형광-표지된 항-Fc 항체(Alexa Fluor® 647 AffiniPure F(ab')₂ 단편 염소 항-인간 IgG Fcγ 단편 특이적)와 함께 인큐베이션하였다. 세포를 저온 염색 완충액으로 2회 세척하고, 주행 완충액에 재현탁시키고, iQue Screener(IntelliCyt Corporation)로 분석하였다. 생존 세포 집단으로부터의 RL1(A647) 기하평균에 의해 결합을 평가하였고, Prism(Graphpad)에서 log VHH 농도 대 MFI를 피팅함으로써 EC50을 계산하였다. 데이터는 하기 표 1에 나타낸다.
[표 1]
Figure pct00008
표 1에서, 시차 주사 형광측정법은 10개의 VHH 분자의 Tm 값이 53.9℃ 내지 76.4℃의 범위임을 나타냈다. 시차 주사 형광측정법은 5개의 강력한 VHH 결합제의 Tm 값이 61℃ 내지 70℃의 범위임을 나타냈다. 표 1에 나타낸 바와 같이, 생물층 간섭계는 이 패널로부터의 8개의 결합제가 인간 pIgR 엑토도메인에 대한 결합에 대해 50 nM 미만의 KD 값을 가졌음을 나타냈다. 또한, 유세포 분석법은 6개의 결합제가 MDCK-hpIgR 세포에 대한 결합에 대해 10 nM 미만의 EC50 값을 가졌음을 나타냈다.
6.3. 실시예 3: 세포 결합 및 세포통과 검정
세포통과 분석은 하기와 같이 수행하였다. 통상적으로 사용되는 상피 모델 시스템인 마딘-다비 개 신장(MDCK) 세포를 사용하여 VHH 결합제가 pIgR 매개 세포통과에 의해 상피를 가로질러 수송될 수 있는지를 조사하였다. 인간 pIgR로 형질감염되지 않았거나 안정적으로 형질감염된 MDCK 세포를 사용하여 세포통과를 연구하였다(문헌[Natvig, I.B., Johansen, F.E., Nordeng, T.W., Haraldsen, G. & Brandtzaeg, P. Mechanism for enhanced external transfer of dimeric IgA over pentameric IgM: studies of diffusion, binding to the human polymeric Ig receptor, and epithelial transcytosis. J. Immunol. 159, 4330-4340 (1997)] 참조). MDCK 세포에서의 hpIgR의 발현 및 단층 형성을 공초점 레이저 현미경법에 의해 확인하였다. 대략 5.0 × 105개의 세포를 1-㎠, 3.0-μm 콜라겐-코팅된 PTFE 필터(Transwell-COL 3494; Costar) 상에 접종하였다. 5% CO2 중에 3 일 동안 37℃에서 10% 우태아 혈청, 50 ㎍/ml 겐타마이신, 및 1 mM L-글루타민을 함유하는 둘베코 변형된 이글 배지 중에 세포를 인큐베이션하였다. 20 ㎍의 시험 VHH-모노-Fc 분자를 기저측 챔버에 첨가하고, 37℃에서 24 또는 48 시간 동안 새로운 배지 중에 필터를 인큐베이션하였다. pIgR에 결합하지 않은 VHH-모노-Fc(무관한 VHH)를 100 nM(15 ㎍/mL) 인간 IgG와 함께 대조군으로서 사용하였다(비특이적 수송 및 누출에 대해 제어하기 위해). 정점 배지를 수확하고, pIgR에 의해 수송된 VHH모노-Fc의 양을 표준 적정 연구에 의해 계산하였다. 정점 배지로의 IgG 누출을 MSD에 의해 검출하였다. 세포통과 검정의 결과를 도 12a 및 도 12b에 나타낸다.
또한, 비오티닐화된 항-VHH 항체를 사용하여 스트렙타비딘 플레이트 상에 VHH-모노-Fc를 포획하고 루테닐화된 항-Fc 항체를 사용하여 MSD 플랫폼에 의해 VHH-모노-Fc를 검출하였다. 이러한 검정의 결과를 도 12c에 나타낸다. 6개의 VHH(2, 4, 6, 9, 11, 및 12)가 대조군 VHH에 비해 이들의 정점 농도의 10-배 초과의 증가를 나타냈다.
6.4. 실시예 4: 1차 인간 폐 조직 모델을 사용하는 세포통과 검정
EpiAirway 인간 폐 조직 모델을 또한 사용하여 기저측으로부터 정점 상피로의 10개의 VHH 분자의 세포통과 활성 및 점막 내강으로의 이들의 전달을 시험하였다. EpiAirway 모델은 도 18에 도시되어 있다. EpiAirway 모델은 1차 인간 기도 기관지 세포로부터 조작된 확립된 폐 조직 모델이다. 조직 모델은 Mattek Corporation으로부터 입수되었으며, 제조사의 설명서에 따라 유지하였다. 20 ㎍의 시험 및 대조군 VHH-모노-Fc 분자를 기저측 챔버 내에서 1 ml의 EpiAirway 배지에 첨가하고, 0, 24, 및 48 시간에 기저측 및 정점 챔버로부터 100 ul의 샘플을 수집하였다. EpiAirway TEER 완충액을 사용하여 정점 챔버로부터 점액을 수집하였다. 기저측 배지 및 정점 점액 중에 존재하는 VHH-모노-Fc의 양을 전기화학발광 방법에 의해 정량화하였다. 이 방법에서는, 스트렙타비딘 MSD 플레이트를 RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 비오티닐화된 항-VHH 항체(PBS 중의 2 ㎍/ml)로 코팅하고, PBT로 3X 세척하고, RT에서 1 시간 동안 차단 완충액과 함께 인큐베이션하고, RT에서 2 시간 동안 1000 rpm으로 VHH-모노-Fc 함유 배지/점액(상이한 희석으로)과 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 루테닐화된-항-인간-Fc 항체(PBS 중의 2 ㎍/ml)와 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, MSD 이미저를 사용하여 40 ul 판독 완충액 중에 플레이트를 판독하였다. Prism(Graphpad)에서 VHH-모노-Fc 표준 곡선에 대해 ECLU 값을 플롯팅함으로써 기저측 및 정점 챔버 내의 VHH-모노-Fc의 양을 계산하였다. 데이터는 도 19에 나타낸다. IgG 및 IgA가 세포통과된 유사한 실험을 도 20에 나타낸다. 도 20의 각각의 현미경 사진은 도 5의 열 지도에서의 정사각형 중 하나의 대표적인 이미지이다.
도 22는 EpiAirway 모델의 정점 표면으로의 hpIgR 및 VHH의 국소화를 나타내는 3D 재구성을 나타낸다.
처리 후 0, 24, 및 48 시간에 정점 점액 중에 존재하는 VHH의 양을 전기화학발광에 의해 정량화하였다.
전기화학발광 검정은 하기와 같이 수행하였다. 에피토프 맵핑 및 에피토프 매립 연구를 수행하기 위해 meso-scale discovery(MSD) 플랫폼을 사용하였다. 정제된 pIgR 단백질 작제물에 대한 VHH-모노-Fc 분자의 결합을 시험하기 위해, 스트렙타비딘 MSD 플레이트를 RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 비오티닐화된 항-HIS 항체(PBS 중의 2 ㎍/ml)로 코팅하고, PBT(PBS + 0.1% Tween-20)로 3X 세척하고, RT에서 1 시간 동안 차단 완충액과 함께 인큐베이션하고, RT에서 2 시간 동안 1000 rpm으로 His-태깅된 pIgR 단백질(PBS 중의 10 ㎍/ml)과 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, RT에서 2 시간 동안 1000 rpm으로 VHH-모노-Fc 분자(PBS 중의 100 ㎍/ml)와 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 루테닐화된-항-인간-Fc 항체(PBS 중의 2 ㎍/ml)와 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, MSD 이미저를 사용하여 40 ul 판독 완충액 중에 플레이트를 판독하였다. ECLU 값을 열지도로서 플롯팅하였다.
VHH가 pIgR 상의 매립된 에피토프를 인식하는지 여부를 확인하기 위해, 2개의 상이한 검출 항체, 항-Fc 항체 및 항-VHH 항체를 사용하는 전기화학발광에 의해, hpIgR-ECD 단백질에 대한 VHH-모노-Fc 분자 결합에 대해 EC50 값을 측정하였다. RT에서 2 시간 동안 1000 rpm으로 pIgR ECD(PBS 중의 10 ㎍/ml)를 고-결합 MSD 플레이트 상에 코팅하고, RT에서 1 시간 동안 차단 완충액과 함께 인큐베이션하고, RT에서 2 시간 동안 1000 rpm으로 VHH-모노-Fc 분자(PBS 중의 증가하는 농도)와 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 루테닐화된 2차 항체(PBS 중의 2 ㎍/ml)와 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, MSD 이미저를 사용하여 40 ul 판독 완충액 중에 플레이트를 판독하였다. Prism(Graphpad)에서 log VHH 농도 대 log ECLU를 피팅함으로써 EC50을 계산하였다. 항-VHH 검출로 인한 EC50의 증가(50-배 초과)는 VHH가 pIgR 상의 매립된 에피토프를 인식하는지 여부를 결정하기 위한 척도로서 사용되었다.
처리 후 48 시간에, 조직 샘플을 고정시키고, 투과화하고, EpiAirway 모델에 걸쳐 hpIgR 및 VHH를 추적하기 위해 염색하였다. 데이터는 도 4에 나타낸다. 5개의 VHH 분자(VHH2, VHH6, VHH9, VHH11, 및 VHH12)가 대조군 VHH 분자에 비해 이들의 점막 양의 20-배 초과의 증가를 나타냈다. 최상의 pIgR 작용제(VHH12)의 경우, 24 시간마다 기저측 VHH 투입의 17.5%가 점액 내로 분비되었다. 도 23은 EpiAirway 조직 모델이 경사진 막 상에 있음을 나타내며, 이는 이미지 분석에 이상적이지 않다. 도 24는 EpiAirway 조직 모델에 의한 경사진 조직 문제를 극복하기 위한 Opera Phenix 이미징 및 분석을 위한 전략을 예시한다.
세포통과 후에, Opera Phenix 공초점 레이저 현미경법에 의해 EpiAirway 조직 모델에 걸쳐 hpIgR 및 VHH의 위치 및 양을 추적하기 위해 간접 면역형광을 사용하였다. 간접 면역형광을 사용하여, 처리 후 2 일에 EpiAirway 모델에 걸쳐 유지된 pIgR 및 VHH-모노-Fc의 양을 추적하였다. 조직 샘플을 PBS에 헹구고, 2 ml의 10% 포르말린으로 RT에서 20 분 동안 조직을 고정시키고, 2 ml PBST(PBS 중의 1% Triton-X100)로 RT에서 각각 10 분 동안 3회 세척하고(온화한 교반과 함께), RT에서 2 시간 동안 PBTG(10% 염소 혈청을 갖는 PBST)에 희석된 1차 항체(500 ul 정점, 500 ul 기저측)와 함께 인큐베이션하고(온화한 교반과 함께), 2 ml PBTG로 RT에서 각각 10 분 동안 2회 세척하고(온화한 교반과 함께), RT에서 1 시간 동안 PBTG에 희석된 2차 항체(100 ul 정점, 100 ul 기저측)와 함께 인큐베이션하고(온화한 교반과 함께), 2 ml PBTG로 RT에서 각각 10 분 동안 2회 세척하였다(온화한 교반과 함께). 1차 항체 혼합물은 마우스 항체 및 비오티닐화된 항 IgA 항체를 둘 모두 5 ㎍/ml로 함유하였다. 2차 항체 혼합물은 Alexa-Flour 488-표지된 항-마우스 항체(1:100 희석), Alexa-Flour 647-표지된 스트렙타비딘(1:100 희석), 및 Hoechst(1: 1000 희석)를 함유하였다. 고정되고, 투과화되고, 염색된 조직을 Opera Phenix 공초점 레이저 현미경법을 사용하여 20X 해상도(30 내지 40개의 평면, 2 um 거리)에서 이미징하였다. Harmony 세트를 사용하여 이미지 분석을 수행하고, 막 자가 형광에 대해 형광 판독을 보정하고, 세포의 개수에 대해 정규화하고, Prism(Graphpad)에서 열 지도로서 플롯팅하였다.
데이터는 도 5에 나타낸다. 이미징 연구는 세포통과 결과를 입증하며, 특히 정점 상피에 더 가까운 hpIgR 및 VHH의 공동국소화를 나타냈다. pIgR은 단백질분해에 의해 절단되고 세포통과시에 점액 내로 방출되므로, 조직-유지된 pIgR의 양은 VHH 기능과 역상관관계가 있다.
EpiAirway 모델에서, IgA의 존재는 VHH9의 세포통과에 영향을 미치지 않았지만, IgA의 존재는 4개의 다른 VHH 결합제 VHH2, VHH6, VHH11, 및 VHH12에 대해 음성 효과를 가졌다.
6.5. 실시예 5: 도메인-수준 에피토프 맵핑
VHH의 도메인-수준 에피토프 맵핑을 수행하기 위해, HEK293 세포로부터의 hpIgR ECD의 1 또는 2개의 도메인을 각각 인코딩하는 7개의 HIS-태깅된 hpIgR 작제물(D1, D2, D3, D5, D1-D2, D2-D3, 및 D4-D5)을 발현시키고 고정된 금속 이온 친화성 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 2개의 작제물, D4 및 D3-D4는 불량한 발현 및 정제를 나타냈고, 에피토프 맵핑 검정에 사용되지 않았다. 고정된 pIgR 작제물에 대해 VHH-mFc 분자의 결합을 전기화학발광 방법에 의해 시험하였다. 결합 검정으로부터의 결과는 도 2에 열 지도로서 나타낸다.
pIgR 결합제에 의한 매립된 에피토프의 인식은 하기와 같이 수행하였다. 2개의 상이한 검출 항체, 항-Fc 항체 및 항-VHH 항체를 사용하는 전기화학발광에 의해, hpIgR-ECD 단백질에 대한 VHH-모노-Fc 분자 결합에 대한 EC50을 측정하였다. 항-VHH 검출로 인한 EC50의 증가(50-배 초과)는 VHH가 pIgR 상의 매립된 에피토프를 인식하는지 여부를 결정하기 위한 척도로서 사용되었다. 도 35에 나타낸 바와 같이, 4개의 분자(VHH3, VHH4, VHH5, 및 VHH6)가 pIgR 상의 매립된 에피토프를 인식하였다. 도 36a 및 도 36b에 나타낸 바와 같이, VHH3은 hpIgR 도메인-1 계면 상의 복합 에피토프를 인식하며, 특히 VHH2에 대해 EC50의 차이가 관찰되지 않았지만(둘 모두의 검출 항체에 대해 4 nM), VHH3은 항-VHH 검출로 인해 EC50의 54-배 증가를 나타냈다. 이들 실험은 함께, VHH2 및 VHH3이 상이한 방식으로 도메인-1을 인식함을 나타냈으며, 이는 이들의 기능 차이에 기여했을 수 있다.
에피토프 맵핑은 VHH2, VHH6, 및 VHH12가 hpIgR 도메인 1, 2, 및 5에 각각 결합하는 반면에, VHH9 및 VHH11은 hpIgR 도메인 4-5에 결합함을 나타냈다. VHH 결합 영역이 hpIgR 상의 매립된 에피토프를 인식하는지 여부를 시험하기 위해, 2개의 상이한 검출 항체, 항-Fc 항체 및 항-VHH 항체를 사용하는 전기화학발광 방법을 사용하여, hpIgR-ECD 단백질에 대한 VHH-모노-Fc 분자 결합을 반영하는 EC50 값을 생성하였다. 항-VHH 검출로 인한 EC50의 증가(50-배 초과)는 VHH가 pIgR 상의 매립된 에피토프를 인식하는지 여부를 결정하기 위한 척도로서 사용되었다. 결과는 표 2 및 도 29에 나타낸다.
[표 2]
Figure pct00009
표 2의 결과는 4개의 분자(VHH3, VHH4, VHH5, 및 VHH6)가 pIgR 상의 매립된 에피토프를 인식하였음을 나타낸다. 도메인-수준 에피토프 맵핑을 수행하기 위해, 7개의 HIS-태깅된 pIgR 엑토도메인 작제물(D1, D2, D3, D5, D1-D2, D2-D3, 및 D4-D5)을 HEK293 세포로부터 성공적으로 발현시키고 고정된 금속 이온 친화성 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. D1, D2, D3, D5, D1-D2, D2-D3, 및 D4-D5의 서열은 서열 번호 216 내지 222의 것들을 포함한다.
고정된 pIgR 작제물에 대한 VHH-모노-Fc 분자의 결합은 도 2에 열 지도로서 요약되어 있다. 약술하면, VHH2 및 VHH3의 에피토프는 주로 hpIgR 도메인 1(D1) 내에 함유되고, VHH4 및 VHH6의 에피토프는 주로 hpIgR 도메인 2(D2) 내에 함유된다. 도 32a에 나타낸 바와 같이, D1은 hpIgR에 결합하는 IgA에 필요하다. 다른 6개의 VHH 분자의 에피토프는 주로 hpIgR 도메인 4-5(D4-D5) 내에 함유된다. 또한, 문헌[Bonner et al., Mucosal Immunol., 2:74-84 (2009)]에 의해 수행된 용액 x-선 산란 연구는, dIgA와의 상호작용시에 pIgR은 연장된 입체형태를 취하며, 도메인-1은 하나의 Fcα 서브유닛의 Cα2 도메인과 상호작용하고 도메인-5는 대향하는 Fcα 서브유닛의 동일한 측면 상의 Cα2 서브유닛에 결합함을 시사한다(도 32b).
그 다음에, hpIgR에 대한 결합에 대해 100 nM 미만의 KD 값을 나타내는 8개의 VHH-모노-Fc 분자에 대해 경쟁 결합 검정을 수행하였다. 첫째로, hpIgR-VHH 결합에 대한 IgA의 영향을 시험하기 위해, 생물층 간섭계에 의해 dIgA2의 부재 및 존재 하에 고정된 VHH-모노-Fc 분자에 대한 전장 hpIgR ECD 결합에 대해 KD 값을 측정하였다(도 3a). 전체적으로, VHH는 dIgA의 존재로 인해 hpIgR ECD에 대한 결합에 대한 친화성의 1.3 내지 3.3-배 감소를 나타냈다. 가능하게는, 결합된 dIgA 또는 hpIgR ECD의 입체형태 재배열로부터 발생하는 입체 장애로 인해, 사전-결합된 IgA는 pIgR에 대한 VHH의 결합에 대해 작은 음성 효과를 가졌다. 둘째로, hpIgR에 대한 dIgA2 결합에 대한 VHH의 효과를 시험하기 위해, hpIgR 엑토도메인에 대한 재조합 이량체성 IgA2 작제물 결합에 대한 KD 값을 VHH-모노-Fc 분자의 존재 및 부재 하에 측정하였다. 3개의 분자(VHH2, VHH3, 및 VHH5)는 pIgR에 대한 IgA 결합에 대해 음성 효과를 가진 반면에, 다른 VHH 분자는 도 3b에 나타낸 바와 같이 pIgR에 대한 IgA 결합에 대해 작은 양성 효과를 나타냈다.
6.6. 실시예 6: VHH/IgA 경쟁 연구(결합 및 세포통과)
상기 기재된 세포통과-양성 도메인-1 결합제인 VHH2와 세포통과-음성 도메인-1 결합제인 VHH3 사이의 결합의 차이를 비교하였다. VHH3은 VHH2보다 더 강하게 결합한다. VHH2 및 VHH3 결합에 대한 hpIgR 도메인-1 CDR의 중요성을 시험하기 위해, 인간 pIgR의 각각의 도메인-1 CDR을 경골 어류 pIgR의 각각의 도메인-1 CDR로 교체하여, 결합 연구에 사용하기 위한 3개의 새로운 CDR-교체된 hpIgR 도메인-1 작제물을 제조하였다. (전장 hpIgR ECD는 R&D Systems로부터 구매하였다.) 5개의 작제물(D1-D2, D1, D1_tCDR1, D1_tCDR2, D1_tCDR3)을 HEK293 세포로부터 발현시키고 고정된 금속 이온 친화성 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 3개의 hpIgR 도메인-1 CDR 돌연변이체(D1_tCDR1, D1_tCDR2, D1_tCDR3)가 hpIgR 도메인-1 프레임워크 상에 각각의 경골 어류 CDR을 함유한다. His-태깅된 pIgR 작제물을 항-HIS 바이오센서 상에 고정시키고, pIgR 작제물에 대한 VHH-모노-Fc 분자의 결합을 생물층 간섭계에 의해 측정하였다. 데이터는 표 3 및 도 33a 내지 도 33d에 나타낸다.
[표 3]
Figure pct00010
표 3에서, 6개의 HIS-태깅된 pIgR 작제물에 대한 2개의 VHH-모노-Fc 분자(VHH2 및 VHH3) 결합에 대한 KD 값. VHH2 및 VHH3은 hpIgR 도메인-1의 CDR1에 대해서는 상이한 결합 프로파일을 가진 반면에, hpIgR 도메인-1의 CDR2 및 CDR3에 대해서는 유사한 결합 프로파일을 나타냈다. VHH2 및 VHH3의 특성은 도 31에 요약되어 있다. 도 34의 데이터는 VHH2 및 VHH3이 hpIgR에 대한 결합에 대해 서로 경쟁함을 나타낸다.
가능하게는 이량체성 IgA와 VHH 사이의 크기 차이로부터 발생하는 입체 장애로 인해, 경쟁 결합 검정은 IgA가 pIgR에 대한 VHH 분자의 결합에 대해 음성 효과를 가졌음을 나타냈다. 데이터는 도 28a 내지 도 28d에 나타낸다. hpIgR 도메인-1이 IgA 결합에 필요하다는 점을 고려하면, VHH2(도메인-1 결합제)만이 hpIgR에 대한 IgA 결합에 대해 음성 효과를 가졌고 IgA와의 직접 경쟁을 나타냈다.
VHH2 및 VHH3은 hpIgR 도메인-1의 CDR1에 대해서는 상이한 결합 프로파일을 나타낸 반면에, hpIgR 도메인-1의 CDR2 및 CDR3에 대해서는 유사한 결합 프로파일을 나타냈다. 이는 VHH2 및 VHH3이 도메인-1 상의 부분 에피토프와 중첩되며, 따라서 hpIgR에 대한 결합에 대해 서로 경쟁함을 나타냈다. 또한, 결합 검정은 VHH3이 VHH2에 비해 도메인-1 상의 더 숨겨진 에피토프에 결합함을 시사하였다(표 2). 흥미롭게도, VHH3-처리된 EpiAirway 조직 모델은 VHH2 또는 VHH 없음에 비해 기저측 상피 내에 더 많은 pIgR을 유지했다(도 5). 도메인-1이 불활성으로부터 활성으로의 hpIgR의 전환에서 중요한 계면 및 역할을 담당하는 것을 고려하면, 이들 결과는 VHH3 결합이 pIgR 평형을 불활성 입체형태 쪽으로 이동시킬 수 있음을 시사한다. 도 25에 나타낸 바와 같이, 5개의 Ig-유사 세포외 도메인은 리간드-결합 도메인 D1과 D5 사이의 계면을 갖는 삼각형으로 배열된다. D1-D5 계면은 리간드 결합시에 해체된다. 도 26은 제약 산란 모델링에 의한 pIgR:IgA 복합체의 구조를 나타낸다.
시험된 VHH 분자의 특성의 요약을 하기 표 4에 나타낸다.
[표 4]
Figure pct00011
상기 실시예는 생물물리학적 검정 및 기능적 검정에 의한 hpIgR-결합 VHH 분자의 생성, 스크리닝, 및 특성화를 나타낸다. VHH 분자는 다양한 정도의 친화성, 종 교차-반응성, 생물물리학적 특성, 에피토프 다양성, IgA 경쟁 프로파일, 및 인간 폐 조직 모델에서의 세포통과 활성을 나타냈다.
6.7. 실시예 7: 추가의 세포통과 검정
실시예 3에 기재된 바와 같은 hpIgR을 발현하는 MDCK 세포는 적절한 상피 모델 시스템이며, VHH-모노-Fc 분자의 정방향 및 역방향 세포통과 활성을 검정하기 위해 사용되었다.
hpIgR을 발현하는 MDCK 세포는 5% CO2 중에 37℃에서 10% FBS를 함유하는 DMEM 중에 배양하였다. 그러한 세포의 단층(MDCK-hpIgR 단층)을 제조하기 위해, 0.4 μm 폴리에스테르 막 필터를 함유하는 피브로넥틴- 및 콜라겐-처리된 TranswellTM 투과성 지지체(Costar) 상에 5 × 105개의 세포를 접종하였다. 이어서, 세포를 3 일 동안 인큐베이션하고, 2 시간 동안 혈청 기아 처리하고, 1% FBS를 함유하는 DMEM(검정 배지)으로 보충하였다. 기저측 및 정점 챔버는 각각 1.5 ml 및 0.5 ml의 검정 배지를 함유하였다.
MDCK-hpIgR 단층을 가로지르는 VHH-모노-Fc 분자의 정방향 세포통과 활성을 시험하기 위해, 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자를 기저측 챔버에 첨가하고, VHH-모노-Fc 분자의 첨가 후 상이한 시점에(0, 4, 8, 12, 24, 36, 및 48 시간) 기저측 및 정점 챔버로부터 100 μl의 배지를 수집하였다.
MDCK-hpIgR 단층을 가로지르는 VHH-모노-Fc 분자의 역방향 세포통과 활성을 시험하기 위해, 20 ㎍의 시험 또는 대조군 VHH-모노-Fc 분자를 정점 챔버에 첨가하고, VHH-모노-Fc의 첨가 후 상이한 시점에(0, 4, 8, 12, 24, 36, 및 48 시간) 기저측 및 정점 챔버로부터 100 μl의 배지를 수집하였다.
기저측 및 정점 배지에 존재하는 VHH-모노-Fc의 양을 전기화학발광 방법에 의해 정량화하였다. 스트렙타비딘 MSD 플레이트를 RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 비오티닐화된 항-VHH 항체(PBS 중의 2 ㎍/ml)로 코팅하고, PBT로 3X 세척하고, RT에서 1 시간 동안 차단 완충액과 함께 인큐베이션하고, RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 VHH-모노-Fc 함유 배지/점액(상이한 희석으로)과 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, RT에서 1 시간 동안 1000 rpm으로 루테닐화된-항-인간-Fc 항체(PBS 중의 2 ㎍/ml)와 함께 인큐베이션하고, PBT로 3X 세척하고, MSD 이미저를 사용하여 40 μl 판독 완충액 중에 플레이트를 판독하였다. Prism(Graphpad)에서 VHH-모노-Fc 표준 곡선에 대해 ECLU 값을 플롯팅함으로써 기저측 및 정점 챔버 내의 VHH의 양을 계산하였다.
정방향 및 역방향 세포통과 검정의 결과는 도 37a, 도 37b, 도 38a, 도 38b, 도 39a, 및 도 39b에 나타낸다.
시험된 VHH 분자의 특성의 요약을 하기 표 5에 나타낸다.
[표 5]
Figure pct00012
본 명세서에 인용된 모든 특허, 공개된 출원, 및 참고문헌의 교시는 전체적으로 참고로 포함된다.
예시적인 실시 형태가 구체적으로 제시되어 있고 기재되어 있지만, 첨부된 청구범위에 의해 포함되는 실시 형태의 범주로부터 벗어남이 없이 형태 및 세부 사항에 있어서의 다양한 변화들이 예시적인 실시 형태 내에서 이루어질 수 있음이 당업자에 의해 이해될 것이다.
전술한 것으로부터, 특이적 실시 형태가 예시의 목적을 위해 본 명세서에 기재되었지만, 본 명세서에 제공된 것의 사상 및 범주를 벗어나지 않으면서 다양한 변형이 실행될 수 있음이 인정될 것이다. 상기 언급된 모든 참고문헌은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
서열 목록
서열 번호 1 - VHH1 및 VHH2 CDR1(카밧)
SYRMG
서열 번호 2 - VHH3 CDR1(카밧)
INVMG
서열 번호 3 - VHH4 CDR1(카밧)
SNAMG
서열 번호 4 - VHH5 CDR1(카밧)
SYAMG
서열 번호 5 - VHH6 CDR1(카밧)
SDAMG
서열 번호 6 - VHH7 CDR1(카밧)
INVMG
서열 번호 7 - VHH9 CDR1(카밧)
TYRMG
서열 번호 8 - VHH10 CDR1(카밧)
RYAMG
서열 번호 9 -VHH12 CDR1(카밧)
FNTYAMG
서열 번호 10 - VHH1 및 VHH2 CDR1(초티아)
GLTFSSY
서열 번호 11 - VHH3 CDR1(초티아)
GSIFSIN
서열 번호 12 - VHH4 CDR1(초티아)
GTSVSSN
서열 번호 13 - VHH5 CDR1(초티아)
GRTFSSY
서열 번호 14 - VHH6 CDR1(초티아)
GSSVSSD
서열 번호 15 - VHH7 CDR1(초티아)
RSIGSIN
서열 번호 16 - VHH9 CDR1(초티아)
GRTFSTY
서열 번호 17 - VHH10 CDR1(초티아)
GFTFTRY
서열 번호 18 - VHH11 CDR1(초티아)
GRTFTTY
서열 번호 19 - VHH12 CDR1(초티아)
GRTLSFNTY
서열 번호 20 - VHH1 및 VHH2 CDR1(IMGT)
GLTFSSYR
서열 번호 21 - VHH3 CDR1(IMGT)
GSIFSINV
서열 번호 22 - VHH4 CDR1(IMGT)
GTSVSSNA
서열 번호 23 - VHH5 CDR1(IMGT)
GRTFSSYA
서열 번호 24 - VHH6 CDR1(IMGT)
GSSVSSDA
서열 번호 25 - VHH7 CDR1(IMGT)
RSIGSINV
서열 번호 26 - VHH9 CDR1(IMGT)
GRTFSTYR
서열 번호 27 - VHH10 CDR1(IMGT)
GFTFTRYA
서열 번호 28 - VHH11 CDR1(IMGT)
GRTFTTYR
서열 번호 29 - VHH12 CDR1(IMGT)
GRTLSFNTYA
서열 번호 30 - VHH1 및 VHH2 CDR2(카밧)
AIDWNGRGTYYRYYADSVKG
서열 번호 31 - VHH3 CDR2(카밧)
RINGGGITHYAESVKG
서열 번호 32 - VHH4 CDR2(카밧)
FIDRIATTTIATSVKG
서열 번호 33 - VHH5 CDR2(카밧)
AITWNGGTTYYADSVKG
서열 번호 34 - VHH6 CDR2(카밧)
FISGGGTTTYADSVKG
서열 번호 35 - VHH7 CDR2(카밧)
RITGGGSTHYAESVKG
서열 번호 36 - VHH9 CDR2(카밧)
AISWSGGSTTYADPVKG
서열 번호 37 - VHH10 CDR2(카밧)
AISWSGSSAGYGDSVKG
서열 번호 38 - VHH11 CDR2(카밧)
AIRWSGGRTLYADSVKG
서열 번호 39 - VHH12 CDR2(카밧)
SITWNGGSTSYADSVKG
서열 번호 40 - VHH1 및 VHH2 CDR2(초티아)
DWNGRGTYY
서열 번호 41 - VHH3 CDR2(초티아)
NGGGI
서열 번호 42 - VHH4 CDR2(초티아)
DRIAT
서열 번호 43 - VHH5 CDR2(초티아)
TWNGGT
서열 번호 44 - VHH6 CDR2(초티아)
SGGGT
서열 번호 45 - VHH7 CDR2(초티아)
TGGGS
서열 번호 46 - VHH9 CDR2(초티아)
SWSGGS
서열 번호 47 - VHH10 CDR2(초티아)
SWSGSS
서열 번호 48 - VHH11 CDR2(초티아)
RWSGGR
서열 번호 49 - VHH12 CDR2(초티아)
TWNGGS
서열 번호 50 - VHH1 및 VHH2 CDR2(IMGT)
IDWNGRGTYY
서열 번호 51 - VHH3 CDR2(IMGT)
INGGGIT
서열 번호 52 - VHH4 CDR2(IMGT)
IDRIATT
서열 번호 53 - VHH5 CDR2(IMGT)
ITWNGGTT
서열 번호 54 - VHH6 CDR2(IMGT)
ISGGGTT
서열 번호 55 - VHH7 CDR2(IMGT)
ITGGGST
서열 번호 56 - VHH9 CDR2(IMGT)
ISWSGGST
서열 번호 57 - VHH10 CDR2(IMGT)
ISWSGSSA
서열 번호 58 - VHH11 CDR2(IMGT)
IRWSGGRT
서열 번호 59 - VHH12 CDR2(IMGT)
ITWNGGST
서열 번호 60 - VHH1 CDR3(카밧)
GSIDLNWYGGMDY
서열 번호 61 -VHH2 CDR3(카밧)
TTVLTDPRVLNEYAT
서열 번호 62 - VHH3 CDR3(카밧)
DVFGSSGYVETY
서열 번호 63 - VHH4 CDR3(카밧)
PLTAR
서열 번호 64 - VHH5 CDR3(카밧)
DPFNQGY
서열 번호 65 - VHH6 CDR3(카밧)
PLTSR
서열 번호 66 - VHH7 CDR3(카밧)
MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY
서열 번호 67 - VHH9 CDR3(카밧)
DQRGY
서열 번호 68 - VHH10 CDR3(카밧)
DPFNQGY
서열 번호 69 - VHH11 CDR3(카밧)
DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY
서열 번호 70 - VHH12 CDR3(카밧)
ARYYVSGTYFPANY
서열 번호 71 - VHH1 CDR3(초티아)
GSIDLNWYGGMDY
서열 번호 72 - VHH2 CDR3(초티아)
TTVLTDPRVLNEYAT
서열 번호 73 - VHH3 CDR3(초티아)
DVFGSSGYVETY
서열 번호 74 - VHH4 CDR3(초티아)
PLTAR
서열 번호 75 - VHH5 CDR3(초티아)
DPFNQGY
서열 번호 76 - VHH6 CDR3(초티아)
PLTSR
서열 번호 77 - VHH7 CDR3(초티아)
MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY
서열 번호 78 - VHH9 CDR3(초티아)
DQRGY
서열 번호 79 - VHH10 CDR3(초티아)
DPFNQGY
서열 번호 80 - VHH11 CDR3(초티아)
DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY
서열 번호 81 - VHH12 CDR3(초티아)
ARYYVSGTYFPANY
서열 번호 82 - VHH1 CDR3(IMGT)
CAAGSIDLNWYGGMDY
서열 번호 83 - VHH2 CDR3(IMGT)
CAATTVLTDPRVLNEYAT
서열 번호 84 - VHH3 CDR3(IMGT)
KADVFGSSGYVETY
서열 번호 85 - VHH4 CDR3(IMGT)
NHPLTAR
서열 번호 86 - VHH5 CDR3(IMGT)
AADPFNQGY
서열 번호 87 - VHH6 CDR3(IMGT)
NHPLTSR
서열 번호 88 - VHH7 CDR3(IMGT)
ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY
서열 번호 89 - VHH9 CDR3(IMGT)
NDQRGY
서열 번호 90 - VHH10 CDR3(IMGT)
AADPFNQGY
서열 번호 91 - VHH11 CDR3(IMGT)
AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY
서열 번호 92 - VHH12 CDR3(IMGT)
AAARYYVSGTYFPANY
서열 번호 93 - VHH1 - VH 아미노산 서열
QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS
서열 번호 94 - VHH2 - VH 아미노산 서열
EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS
서열 번호 95 - VHH3 - VH 아미노산 서열
QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS
서열 번호 96 - VHH4 - VH 아미노산 서열
E VQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS
서열 번호 97 - VHH5 - VH 아미노산 서열
QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS
서열 번호 98 - VHH6 - VH 아미노산 서열
EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS
서열 번호 99 - VHH7 - VH 아미노산 서열
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS
서열 번호 100 - VHH9 - VH 아미노산 서열
QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS
서열 번호 101 - VHH10 - VH 아미노산 서열
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS
서열 번호 102 - VHH11 - VH 아미노산 서열
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS
서열 번호 103 - VHH12 - VH 아미노산 서열
QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS
서열 번호 104 - VHH1-링커- 모노-Fc 단백질
QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 105 - VHH2-링커- 모노-Fc 단백질
EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 106 - VHH3-링커- 모노-Fc 단백질
QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 107 - VHH4-링커- 모노-Fc 단백질
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCXHPXTARWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 108 - VHH5-링커- 모노-Fc 단백질
QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 109 - VHH6-링커- 모노-Fc 단백질
EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 110 - VHH7-링커- 모노-Fc 단백질
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 111 - VHH9-링커- 모노-Fc 단백질
QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 112 - VHH10-링커- 모노-Fc 단백질
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 113 - VHH11-링커- 모노-Fc 단백질
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 114 - VHH12-링커- 모노-Fc 단백질
QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSSEPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPKSPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 115 - IgA 중쇄
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKSSGGTSNNYAISWVRQAPGQGLDWMGGISPIFGSTAYAQKFQGRVTISADIFSNTAYMELNSLTSEDTAVYFCARHGNYYYYSGMDVWGQGTTVTVSSASPTSPKVFPLSLDSTPQDGNVVVACLVQGFFPQEPLSVTWSESGQNVTARNFPPSQDASGDLYTTSSQLTLPATQCPDGKSVTCHVKHYTNPSQDVTVPCPVPPPPPCCHPRLSLHRPALEDLLLGSEANLTCTLTGLRDASGATFTWTPSSGKSAVQGPPERDLCGCYSVSSVLPGCAQPWNHGETFTCTAAHPELKTPLTANITKSGNTFRPEVHLLPPPSEELALNELVTLTCLARGFSPKDVLVRWLQGSQELPREKYLTWASRQEPSQGTTTFAVTSILRVAAEDWKKGDTFSCMVGHEALPLAFTQKTIDRLAGKPTHVNVSVVMAEVDGTCY
서열 번호 116 - IgA 경쇄
QSALTQPPAVSGTPGQRVTISCSGSDSNIGRRSVNWYQQFPGTAPKLLIYSNDQRPSVVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEAEYYCAAWDDSLKGAVFGGGTQLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS
서열 번호 117 - IgA J 사슬
SRDSSASASRVAGITAQEDERIVLVDNKCKCARITSRIIRSSEDPNEDIVERNIRIIVPLNNRENISDPTSPLRTRFVYHLSDLCKKCDPTEVELDNQIVTATQSNICDEDSATETCYTYDRNKCYTAVVPLVYGGETKMVETALTPDACYPD
서열 번호 118 - 인간 pIgR 세포외 도메인(ECD)
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEVSQGPGLLNDTKVYTVDLGRTVTINCPFKTENAQKRKSLYKQIGLYPVLVIDSSGYVNPNYTGRIRLDIQGTGQLLFSVVINQLRLSDAGQYLCQAGDDSNSNKKNADLQVLKPEPELVYEDLRGSVTFHCALGPEVANVAKFLCRQSSGENCDVVVNTLGKRAPAFEGRILLNPQDKDGSFSVVITGLRKEDAGRYLCGAHSDGQLQEGSPIQAWQLFVNEESTIPRSPTVVKGVAGSSVAVLCPYNRKESKSIKYWCLWEGAQNGRCPLLVDSEGWVKAQYEGRLSLLEEPGNGTFTVILNQLTSRDAGFYWCLTNGDTLWRTTVEIKIIEGEPNLKVPGNVTAVLGETLKVPCHFPCKFSSYEKYWCKWNNTGCQALPSQDEGPSKAFVNCDENSRLVSLTLNLVTRADEGWYWCGVKQGHFYGETAAVYVAVEERKAAGSRDVSLAKADAAPDEKVLDSGFREIENKAIQDPRLFAEEKAVADTRDQADGSRASVDSGSSEEQGGSSRHHHHHH
서열 번호 119 - 인간 pIgR 세포외 도메인 1(D1)
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEVGSHHHHHH
서열 번호 120 - 인간 pIgR 세포외 도메인 2(D2)
SQGPGLLNDTKVYTVDLGRTVTINCPFKTENAQKRKSLYKQIGLYPVLVIDSSGYVNPNYTGRIRLDIQGTGQLLFSVVINQLRLSDAGQYLCQAGDDSNSNKKNADLQVLKPEPGSHHHHHH
서열 번호 121 - 인간 pIgR 세포외 도메인 3(D3)
KPEPELVYEDLRGSVTFHCALGPEVANVAKFLCRQSSGENCDVVVNTLGKRAPAFEGRILLNPQDKDGSFSVVITGLRKEDAGRYLCGAHSDGQLQEGSPIQAWQLFVNEESTGSHHHHHH
서열 번호 122 - 인간 pIgR 세포외 도메인 5(D5)
GEPNLKVPGNVTAVLGETLKVPCHFPCKFSSYEKYWCKWNNTGCQALPSQDEGPSKAFVNCDENSRLVSLTLNLVTRADEGWYWCGVKQGHFYGETAAVYVAVEERGSHHHHHH
서열 번호 123 - 인간 pIgR 세포외 도메인 1-도메인 2(D1-D2)
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEVSQGPGLLNDTKVYTVDLGRTVTINCPFKTENAQKRKSLYKQIGLYPVLVIDSSGYVNPNYTGRIRLDIQGTGQLLFSVVINQLRLSDAGQYLCQAGDDSNSNKKNADLQVLKPGSHHHHHH
서열 번호 124 - 인간 pIgR 세포외 도메인 2-도메인 3(D2-D3)
SQGPGLLNDTKVYTVDLGRTVTINCPFKTENAQKRKSLYKQIGLYPVLVIDSSGYVNPNYTGRIRLDIQGTGQLLFSVVINQLRLSDAGQYLCQAGDDSNSNKKNADLQVLKPEPELVYEDLRGSVTFHCALGPEVANVAKFLCRQSSGENCDVVVNTLGKRAPAFEGRILLNPQDKDGSFSVVITGLRKEDAGRYLCGAHSDGQLQEGSPIQAWQLFVNGSHHHHHH
서열 번호 125 - 인간 pIgR 세포외 도메인 4-도메인 5(D4-D5)
STIPRSPTVVKGVAGSSVAVLCPYNRKESKSIKYWCLWEGAQNGRCPLLVDSEGWVKAQYEGRLSLLEEPGNGTFTVILNQLTSRDAGFYWCLTNGDTLWRTTVEIKIIEGEPNLKVPGNVTAVLGETLKVPCHFPCKFSSYEKYWCKWNNTGCQALPSQDEGPSKAFVNCDENSRLVSLTLNLVTRADEGWYWCGVKQGHFYGETAAVYVAVEERGSHHHHHH
서열 번호 126 - D1의 pIgR CDR1
GPQYASY
서열 번호 127 - D1의 pIgR CDR2
DAP
서열 번호 128 - D1의 pIgR CDR3
VGGVWSAD
서열 번호 129 - 마우스 pIgR 세포외 도메인(ECD)
KSPIFGPQEVSSIEGDSVSITCYYPDTSVNRHTRKYWCRQGASGMCTTLISSNGYLSKEYSGRANLINFPENNTFVINIEQLTQDDTGSYKCGLGTSNRGLSFDVSLEVSQVPELPSDTHVYTKDIGRNVTIECPFKRENAPSKKSLCKKTNQSCELVIDSTEKVNPSYIGRAKLFMKGTDLTVFYVNISHLTHNDAGLYICQAGEGPSADKKNVDLQVLAPEPELLYKDLRSSVTFECDLGREVANEAKYLCRMNKETCDVIINTLGKRDPDFEGRILITPKDDNGRFSVLITGLRKEDAGHYQCGAHSSGLPQEGWPIQTWQLFVNEESTIPNRRSVVKGVTGGSVAIACPYNPKESSSLKYWCRWEGDGNGHCPVLVGTQAQVQEEYEGRLALFDQPGNGTYTVILNQLTTEDAGFYWCLTNGDSRWRTTIELQVAEATREPNLEVTPQNATAVLGETFTVSCHYPCKFYSQEKYWCKWSNKGCHILPSHDEGARQSSVSCDQSSQLVSMTLNPVSKEDEGWYWCGVKQGQTYGETTAIYIAVEERTRGSSHVNPTDANARAKVALEEEVVDSSISEKENKAIPNPGPFANEREIQNVGDQAQENRASGDAGSADGQSRSSSSKHHHHHH
서열 번호 130 - 힌지 영역(AA)
EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK
서열 번호 131 - 힌지 영역(DNA)
Gaacccaagacaccaaaaccacaaccacaaccacaactacaaccacaacccaatcctacaacagaatccaagagccccaaaa
서열 번호 132 - 인간 IgG1 모노-Fc DNA 서열
Agcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccaagcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgagctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacggtgcccgtgctggactccgacggctccttcagactcgcaagctatctcaccgtggacaagagcagatggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa
서열 번호 146 - 인간 IgG1 모노-Fc AA 서열
SPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTKPPSREEMTKNQVSLSCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTVPVLDSDGSFRLASYLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
서열 번호 133 - VHH1을 코딩하는 DNA 서열
Caggtgcagctggtggagtctgggggaggattggtgcaggctgggggctctctgaaactcgcctgtgcagcacctggacttaccttcagttcgtatcgcatgggctggttccgccaggctccagggcaggagcgtgagtttgtagcagctattgattggaatggtcgtggcacatattatcgatactatgcagactccgtgaagggccgatccaccatttccagagacaacgccaagaacacgatgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcaggttcgatcgaccttaactggtacggcggcatggactactggggcnangggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 134 - VHH2를 코딩하는 DNA 서열
gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggattggtgcaggctgggggctctctgaaactcgcctgtgcagcacctggacttaccttcagttcgtatcgcatgggctggttccgccaggctccagggcaggagcgtgagtttgtagcagctattgattggaatggtcgtggcacatattatcgatactatgcagactccgtgaagggccgatccaccatttccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagctactacggtattaactgaccctagggttcttaatgagtatgccacatggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 135 - VHH3을 코딩하는 DNA 서열
cagttgcagctcgtggagtctgggggaggcttggtgcagcctggggggtctctgagactctcctgtgcagcctctggaagcatcttcagtatcaatgttatgggctggtaccgccaggctccagggaagcagcgcgagttggtcgcacgtattaatggaggtggcattacacactatgcagagtccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacagccgcatattactgtaaggcagatgtgttcggtagtagcgggtacgtagaaacctactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 136 - VHH4를 코딩하는 DNA 서열
Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggcttggtgcaggctgggggctctctgagactctcctgtgcagtctctggaacctccgtcagtagcaatgccatgggttggtaccgccaggctccagggaagcagcgcgagtgggtcggatttattgatcgtattgctaccacgacgattgcaacctccgtgaagggccgattcgccatcaccagagacaacgccaagaacacggtgtatctccaaatgagcggcctgaaacctgaggacacagccgtctattactgtaatcatccattgaccgctcggtggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 137 - VHH5를 코딩하는 DNA 서열
Caggtgcagctggtggagtctgggggaggcttggtgcaggctgggggctctctgagactctcctgtgcagcctctggacgcaccttcagtagctatgccatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgtgagtttgtagcagctattacctggaatggtggtaccacatactatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctgaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcagacccattcaaccaaggctactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 138 - VHH6을 코딩하는 DNA 서열
Gaggtgcagctcgtggagtctggaggaggcttggtgcaggctggggggtctctgagactctcctgtgcagtctctggaagctccgtcagtagcgatgccatgggttggtaccgccaggctccagggaatcagcgcgcgtgggtcgcatttatttctggtggtggtaccacaacctatgcagactccgttaagggccgattcaccatctccagagacaacaccaagaacacggtgtatctccacatgaacagcctgaaacctgaagacacagccgtctattactgtaatcatccattgacgtctcggtggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 139 - VHH7을 코딩하는 DNA 서열
Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggattggtgcaggctggggggtctctgagactcgcctgtgtagcctctagaagcatcggcagtatcaatgttatgggctggtaccgccaggctccagggaagcagcgcgacttggtcgcacgtattactggaggtggcagtacacactacgcagagtccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacggtgtatctgcaaatgaacagcctggaacctgaggacacggccgtttattactgtgcgtcaatggtaaaccctatcattacggcttggggtacgattggtgtgcgcgagattcccgactatgactactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 140 - VHH10을 코딩하는 DNA 서열
Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggcttggtgcaggctggggggtctctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcacccgctatgccatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgatcgtttgtagcagctattagctggagtggtagtagcgcaggctatggagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagtctaaaacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcagacccattcaaccaaggctactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 141 - VHH11을 코딩하는 DNA 서열
Gaggtgcaggtggtggagtctgggggaggattggtgcaggctgggggctctctgagactctcctgtgcagcctctggacgcaccttcactacctatcgcatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgagagtttgtagcagctattcgctggagtggtggtcgcacattgtatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaacacagcgtatctgcaaatgaacaacctgagacctgaggacacggccgtttattactgtgcagcagatctagccgagtatagtggtacttactccagccctgcggactcccccgctgggtatgactactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 142 - VHH12를 코딩하는 DNA 서열
caggtgcagctggtcgaaactgggggaggattggtgcaggctggggactctctgagactctcctgtgcagcctctggacgcaccctcagcttcaacacctatgccatgggctggttccgccaggctccagggaaggagcgtgaatttgtagcctctattacctggaatggtggaagcacaagctacgcagactccgtgaagggccgattcaccatcaccagagacaacgccaagaacacggctactctgcgaatgaatagcctgcagcccgacgacacggccgtgtattactgtgcagcagcccgatactatgtgagtggtacttacttccccgcgaattactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctca
서열 번호 143 - 인간 pIgR의 예시적인 줄기 서열
EKAVADTRDQADGSRASVDSGSSEEQGGSSR
서열 번호 144 - 마우스 pIgR의 예시적인 줄기 서열
EREIQNVGDQAQENRASGDAGSADGQSRSSSSK
서열 번호 145 - 마우스 pIgR의 예시적인 줄기 서열
EREIQNVRDQAQENRASGDAGSADGQSRSSSSK
서열 번호 147 - 예시적인 가요성 링커 1
(EAAAK)n, 여기서 n은 1 내지 20의 정수임
서열 번호 148 - 예시적인 가요성 링커 2
(GGGGS)n, 여기서 n은 1 내지 20의 정수임
서열 번호 149 - 예시적인 가요성 링커 3
(GGGS)n, 여기서 n은 1 내지 20의 정수임
서열 번호 150 - 예시적인 힌지 영역 1
EPKSCDKTHTCPPCP
서열 번호 151 - 예시적인 힌지 영역 2
ERKCCVECPPCP
서열 번호 152 - 예시적인 힌지 영역 3
ELKTPLGDTTHTCPRCP(EPKSCDTPPPCPRCP)3
서열 번호 153 - 예시적인 힌지 영역 4
ESKYGPPCPSCP
서열 번호 154 - VHH1 및 VHH2 CDR1(예시적)
GLTFSSYRMG
서열 번호 155 - VHH3 CDR1(예시적)
GSIFSINVMG
서열 번호 156 - VHH4 CDR1(예시적)
GTSVSSNAMG
서열 번호 157 - VHH5 CDR1(예시적)
GRTFSSYAMG
서열 번호 158 - VHH6 CDR1(예시적)
GSSVSSDAMG
서열 번호 159 - VHH7 CDR1(예시적)
RSIGSINVMG
서열 번호 160 - VHH9 CDR1(예시적)
GRTFSTYRMG
서열 번호 161 - VHH10 CDR1(예시적)
GFTFTRYAMG
서열 번호 162 - VHH11 CDR1(예시적)
GRTFTTYRMG
서열 번호 163 - VHH12 CDR1(예시적)
GRTLSFNTYAMG
서열 번호 164 - VHH1 및 VHH2 CDR1(Contact)
SSYRMG
서열 번호 165 - VHH3 CDR1(Contact)
SINVMG
서열 번호 166 - VHH4 CDR1(Contact)
SSNAMG
서열 번호 167 - VHH5 CDR1(Contact)
SSYAMG
서열 번호 168 - VHH6 CDR1(Contact)
SSDAMG
서열 번호 169 - VHH7 CDR1(Contact)
SINVMG
서열 번호 170 - VHH9 CDR1(Contact)
STYRMG
서열 번호 171 - VHH10 CDR1(Contact)
TRYAMG
서열 번호 172 - VHH11 CDR1(Contact)
TTYRMG
서열 번호 173 - VHH12 CDR1(Contact)
SFNTYAMG
서열 번호 174 - VHH1 및 VHH2 CDR1(AbM)
GLTFSSYRMG
서열 번호 175 - VHH3 CDR1(AbM)
GSIFSINVMG
서열 번호 176 - VHH4 CDR1(AbM)
GTSVSSNAMG
서열 번호 177 - VHH5 CDR1(AbM)
GRTFSSYAMG
서열 번호 178 - VHH6 CDR1(AbM)
GSSVSSDAMG
서열 번호 179 - VHH7 CDR1(AbM)
RSIGSINVMG
서열 번호 180 - VHH9 CDR1(AbM)
GRTFSTYRMG
서열 번호 181 - VHH10 CDR1(AbM)
GFTFTRYAMG
서열 번호 182 - VHH11 CDR1(AbM)
GRTFTTYRMG
서열 번호 183 - VHH12 CDR1(AbM)
GRTLSFNTYAMG
서열 번호 184 - VHH1 및 VHH2 CDR2(예시적)
AIDWNGRGTYYRYYADSVKG
서열 번호 185 - VHH3 CDR2(예시적)
RINGGGITHYAESVKG
서열 번호 186 - VHH4 CDR2(예시적)
FIDRIATTTIATSVKG
서열 번호 187 - VHH5 CDR2(예시적)
AITWNGGTTYYADSVKG
서열 번호 188 - VHH6 CDR2(예시적)
FISGGGTTTYADSVKG
서열 번호 189 - VHH7 CDR2(예시적)
RITGGGSTHYAESVKG
서열 번호 190 - VHH9 CDR2(예시적)
AISWSGGSTTYADPVKG
서열 번호 191 - VHH10 CDR2(예시적)
AISWSGSSAGYGDSVKG
서열 번호 192 - VHH11 CDR2(예시적)
AIRWSGGRTLYADSVKG
서열 번호 193 - VHH12 CDR2(예시적)
SITWNGGSTSYADSVKG
서열 번호 194 - VHH1 및 VHH2 CDR2(Contact)
FVAAIDWNGRGTYYRY
서열 번호 195 - VHH3 CDR2(Contact)
LVARINGGGITH
서열 번호 196 - VHH4 CDR2(Contact)
WVGFIDRIATTT
서열 번호 197 - VHH5 CDR2(Contact)
FVAAITWNGGTTY
서열 번호 198 - VHH6 CDR2(Contact)
WVAFISGGGTTT
서열 번호 199 - VHH7 CDR2(Contact)
LVARITGGGSTH
서열 번호 200 - VHH9 CDR2(Contact)
FVAAISWSGGSTT
서열 번호 201 - VHH10 CDR2(Contact)
FVAAISWSGSSAG
서열 번호 202 - VHH11 CDR2(Contact)
FVAAIRWSGGRTL
서열 번호 203 - VHH12 CDR2(Contact)
FVASITWNGGSTS
서열 번호 204 - VHH1 및 VHH2 CDR2(AbM)
AIDWNGRGTYYRY
서열 번호 205 - VHH3 CDR2(AbM)
RINGGGITH
서열 번호 206 - VHH4 CDR2(AbM)
FIDRIATTT
서열 번호 207 - VHH5 CDR2(AbM)
AITWNGGTTY
서열 번호 208 - VHH6 CDR2(AbM)
FISGGGTTT
서열 번호 209 - VHH7 CDR2(AbM)
RITGGGSTH
서열 번호 210 - VHH9 CDR2(AbM)
AISWSGGSTT
서열 번호 211 - VHH10 CDR2(AbM)
AISWSGSSAG
서열 번호 212 - VHH11 CDR2(AbM)
AIRWSGGRTL
서열 번호 213 - VHH12 CDR2(AbM)
SITWNGGSTS
서열 번호 214 - VHH1 CDR3(예시적)
GSIDLNWYGGMDY
서열 번호 215 - VHH2 CDR3(예시적)
TTVLTDPRVLNEYAT
서열 번호 216 - VHH3 CDR3(예시적)
DVFGSSGYVETY
서열 번호 217 - VHH4 CDR3(예시적)
PLTAR
서열 번호 218 - VHH5 CDR3(예시적)
DPFNQGY
서열 번호 219 - VHH6 CDR3(예시적)
PLTSR
서열 번호 220 - VHH7 CDR3(예시적)
MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY
서열 번호 221 - VHH9 CDR3(예시적)
QRGY
서열 번호 222 - VHH10 CDR3(예시적)
DPFNQGY
서열 번호 223 - VHH11 CDR3(예시적)
DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY
서열 번호 224 - VHH12 CDR3(예시적)
ARYYVSGTYFPANY
서열 번호 225 - VHH1 CDR3(Contact)
AAGSIDLNWYGGMD
서열 번호 226 - VHH2 CDR3(Contact)
AATTVLTDPRVLNEYA
서열 번호 227 - VHH3 CDR3(Contact)
KADVFGSSGYVET
서열 번호 228 - VHH4 CDR3(Contact)
NHPLTA
서열 번호 229 - VHH5 CDR3(Contact)
AADPFNQG
서열 번호 230 - VHH6 CDR3(Contact)
NHPLTS
서열 번호 231 - VHH7 CDR3(Contact)
ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD
서열 번호 232 - VHH9 CDR3(Contact)
NDQRG
서열 번호 233 - VHH10 CDR3(Contact)
AADPFNQG
서열 번호 234 - VHH11 CDR3(Contact)
AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD
서열 번호 235 - VHH12 CDR3(Contact)
AAARYYVSGTYFPAN
서열 번호 236 - VHH1 CDR3(AbM)
GSIDLNWYGGMDY
서열 번호 237 - VHH2 CDR3(AbM)
TTVLTDPRVLNEYAT
서열 번호 238 - VHH3 CDR3(AbM)
DVFGSSGYVETY
서열 번호 239 - VHH4 CDR3(AbM)
PLTAR
서열 번호 240 - VHH5 CDR3(AbM)
DPFNQGY
서열 번호 241 - VHH6 CDR3(AbM)
PLTSR
서열 번호 242 - VHH7 CDR3(AbM)
MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY
서열 번호 243 - VHH9 CDR3(AbM)
QRGY
서열 번호 244 - VHH10 CDR3(AbM)
DPFNQGY
서열 번호 245 - VHH11 CDR3(AbM)
DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY
서열 번호 246 - VHH12 CDR3(AbM)
ARYYVSGTYFPANY
서열 번호 247 - hpIgR_073
EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCXHPXTARWGQGTQVTVSS
서열 번호 248 - hpIgR_201
QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGRPNSKYAMAWFRRAPGKEREFQAAINWSGANTYYGDSVKGRFTISRDNAKNTVTLQMNNLNPEDTAVYYCAADNRAYTYHTFDYYQTDASYVYWGQGTQVTVSS
서열 번호 249 - mpIgR_349
QLQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSTSTMGWFRQAPGKEREFVAAIQWSSASASTYYYYADSVKGRFTISRDNARNTVSLQMNSLKPEDTAVYYCANLVFRVGALKERDDYWGQGTQVTVSS
서열 번호 250 - hpIgR_D1
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEVS
서열 번호 251 - mpIgR_D1
KSPIFGPQEVSSIEGDSVSITCYYPDTSVNRHTRKYWCRQGASGMCTTLISSNGYLSKEYSGRANLINFPENNTFVINIEQLTQDDTGSYKCGLGTSNRGLSFDVSLEVS
서열 번호 252 - 공통
KSPIFGPX1EVX2SIEGX3SVSITCYYPX4TSVNRHTRKYWCRQGAX5GX6CX7TLISSX8GYLSX9X10YAGRANLX11NFPENX12TFVINIX13QLSQDDSGX14YKCGLGX15X16X17RGLSFDVSLEVS
X1은 E 또는 Q이고, X2는 N 또는 S이고, X3은 N 또는 D이고, X4는 P 또는 D이고, X5는 R 또는 S이고, X6은 G 또는 M이고, X7은 I 또는 T이고, X8은 E 또는 N이고, X9는 S 또는 K이고, X10은 K 또는 E이고, X11은 T 또는 I이고, X12는 G 또는 N이고, X13은 A 또는 E이고, X14는 R 또는 S이고, X15는 I 또는 T이고, X16은 N 또는 S이고, X17은 S 또는 N임
서열 번호 253 - tpIgR_D1
RVTTVGDLAVLEGRSVMIPCHYGPQYASYVKYWCRGSVKDLCTSLVRSDAPRGPAAAGEDKVVMFDDPVQQVFTVTMTELQKEDSGWYWCGVEVGGVWSADVTASLHINVIQG
서열 번호 254 - hpIgR_D1
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEV
서열 번호 255 - hD1_tCDR1
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYGPQYASYRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEV
서열 번호 256 - hD1_tCDR2
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSDAPVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEV
서열 번호 257 - hD1_tCDR3
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGVGGVWSADLSFDVSLEV
서열 번호 258 - VHH9 CDR1(카밧)
FTTYRMG
서열 번호 259 - VHH10 CDR1(카밧) - 대안적
TYRMG
서열 번호 260 - VHH1 및 VHH2 CDR2(초티아) - 대안적
WNGRGTY
서열 번호 261 - VHH3 CDR2(초티아) - 대안적
GGG
서열 번호 262 - VHH4 CDR2(초티아) - 대안적
RIA
서열 번호 263 - VHH5 CDR2(초티아) - 대안적
WNGG
서열 번호 264 - VHH6 CDR2(초티아) - 대안적
GGG
서열 번호 265 - VHH7 CDR2(초티아) - 대안적
GGG
서열 번호 266 - VHH9 CDR2(초티아) - 대안적
WSGG
서열 번호 267 - VHH10 CDR2(초티아) - 대안적
WSGS
서열 번호 268 - VHH11 CDR2(초티아) - 대안적
WSGG
서열 번호 269 - VHH12 CDR2(초티아) - 대안적
WNGG
서열 번호 270 - VHH1 및 VHH2 CDR2(IMGT) - 대안적
IDWNGRGTYYR
서열 번호 271 - VHH9 CDR3(카밧) - 대안적
QRGY
서열 번호 272 - VHH1 CDR3(초티아) - 대안적
SIDLNWYGGMD
서열 번호 273 - VHH2 CDR3(초티아) - 대안적
TVLTDPRVLNEYA
서열 번호 274 - VHH3 CDR3(초티아) - 대안적
VFGSSGYVET
서열 번호 275 - VHH4 CDR3(초티아) - 대안적
LTA
서열 번호 276 - VHH5 CDR3(초티아) - 대안적
PFNQG
서열 번호 277 - VHH6 CDR3(초티아) - 대안적
LTS
서열 번호 278 - VHH7 CDR3(초티아) - 대안적
VNPIITAWGTIGVREIPDYD
서열 번호 279 - VHH9 CDR3(초티아) - 대안적
RG
서열 번호 280 - VHH10 CDR3(초티아) - 대안적
PFNQG
서열 번호 281 - VHH11 CDR3(초티아) - 대안적
LAEYSGTYSSPADSPAGYD
서열 번호 282 - VHH12 CDR3(초티아) - 대안적
RYYVSGTYFPAN
서열 번호 283 - VHH1 CDR3(IMGT) - 대안적
AAGSIDLNWYGGMDY
서열 번호 284 - VHH2 CDR3(IMGT) - 대안적
AATTVLTDPRVLNEYAT
SEQUENCE LISTING <110> JANSSEN BIOTECH, INC. <120> MATERIALS AND METHODS FOR MULTIDIRECTIONAL BIOTRANSPORTATION <130> 14620-204-228 <140> <141> <150> 62/940,232 <151> 2019-11-25 <150> 62/940,228 <151> 2019-11-25 <150> 62/940,220 <151> 2019-11-25 <150> 62/940,208 <151> 2019-11-25 <150> 62/940,206 <151> 2019-11-25 <150> 62/940,200 <151> 2019-11-25 <150> 62/940,196 <151> 2019-11-25 <150> 62/882,387 <151> 2019-08-02 <150> 62/882,361 <151> 2019-08-02 <150> 62/882,346 <151> 2019-08-02 <150> 62/882,291 <151> 2019-08-02 <160> 284 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR1 (Kabat) <400> 1 Ser Tyr Arg Met Gly 1 5 <210> 2 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR1 (Kabat) <400> 2 Ile Asn Val Met Gly 1 5 <210> 3 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR1 (Kabat) <400> 3 Ser Asn Ala Met Gly 1 5 <210> 4 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR1 (Kabat) <400> 4 Ser Tyr Ala Met Gly 1 5 <210> 5 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR1 (Kabat) <400> 5 Ser Asp Ala Met Gly 1 5 <210> 6 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR1 (Kabat) <400> 6 Ile Asn Val Met Gly 1 5 <210> 7 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR1 (Kabat) <400> 7 Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 <210> 8 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR1 (Kabat) <400> 8 Arg Tyr Ala Met Gly 1 5 <210> 9 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR1 (Kabat) <400> 9 Phe Asn Thr Tyr Ala Met Gly 1 5 <210> 10 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR1 (Chothia) <400> 10 Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr 1 5 <210> 11 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR1 (Chothia) <400> 11 Gly Ser Ile Phe Ser Ile Asn 1 5 <210> 12 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR1 (Chothia) <400> 12 Gly Thr Ser Val Ser Ser Asn 1 5 <210> 13 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR1 (Chothia) <400> 13 Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr 1 5 <210> 14 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR1 (Chothia) <400> 14 Gly Ser Ser Val Ser Ser Asp 1 5 <210> 15 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR1 (Chothia) <400> 15 Arg Ser Ile Gly Ser Ile Asn 1 5 <210> 16 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR1 (Chothia) <400> 16 Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr 1 5 <210> 17 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR1 (Chothia) <400> 17 Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr 1 5 <210> 18 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR1 (Chothia) <400> 18 Gly Arg Thr Phe Thr Thr Tyr 1 5 <210> 19 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR1 (Chothia) <400> 19 Gly Arg Thr Leu Ser Phe Asn Thr Tyr 1 5 <210> 20 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR1 (IMGT) <400> 20 Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr Arg 1 5 <210> 21 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR1 (IMGT) <400> 21 Gly Ser Ile Phe Ser Ile Asn Val 1 5 <210> 22 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR1 (IMGT) <400> 22 Gly Thr Ser Val Ser Ser Asn Ala 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR1 (IMGT) <400> 23 Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr Ala 1 5 <210> 24 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR1 (IMGT) <400> 24 Gly Ser Ser Val Ser Ser Asp Ala 1 5 <210> 25 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR1 (IMGT) <400> 25 Arg Ser Ile Gly Ser Ile Asn Val 1 5 <210> 26 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR1 (IMGT) <400> 26 Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr Arg 1 5 <210> 27 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR1 (IMGT) <400> 27 Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr Ala 1 5 <210> 28 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR1 (IMGT) <400> 28 Gly Arg Thr Phe Thr Thr Tyr Arg 1 5 <210> 29 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR1 (IMGT) <400> 29 Gly Arg Thr Leu Ser Phe Asn Thr Tyr Ala 1 5 10 <210> 30 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR2 (Kabat) <400> 30 Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr Tyr Ala Asp 1 5 10 15 Ser Val Lys Gly 20 <210> 31 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR2 (Kabat) <400> 31 Arg Ile Asn Gly Gly Gly Ile Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 32 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR2 (Kabat) <400> 32 Phe Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr Thr Ile Ala Thr Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 33 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR2 (Kabat) <400> 33 Ala Ile Thr Trp Asn Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 34 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR2 (Kabat) <400> 34 Phe Ile Ser Gly Gly Gly Thr Thr Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 35 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR2 (Kabat) <400> 35 Arg Ile Thr Gly Gly Gly Ser Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 36 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR2 (Kabat) <400> 36 Ala Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr Thr Tyr Ala Asp Pro Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 37 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR2 (Kabat) <400> 37 Ala Ile Ser Trp Ser Gly Ser Ser Ala Gly Tyr Gly Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 38 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR2 (Kabat) <400> 38 Ala Ile Arg Trp Ser Gly Gly Arg Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 39 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR2 (Kabat) <400> 39 Ser Ile Thr Trp Asn Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 40 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR2 (Chothia) <400> 40 Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr 1 5 <210> 41 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR2 (Chothia) <400> 41 Asn Gly Gly Gly Ile 1 5 <210> 42 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR2 (Chothia) <400> 42 Asp Arg Ile Ala Thr 1 5 <210> 43 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR2 (Chothia) <400> 43 Thr Trp Asn Gly Gly Thr 1 5 <210> 44 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR2 (Chothia) <400> 44 Ser Gly Gly Gly Thr 1 5 <210> 45 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR2 (Chothia) <400> 45 Thr Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 46 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR2 (Chothia) <400> 46 Ser Trp Ser Gly Gly Ser 1 5 <210> 47 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR2 (Chothia) <400> 47 Ser Trp Ser Gly Ser Ser 1 5 <210> 48 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR2 (Chothia) <400> 48 Arg Trp Ser Gly Gly Arg 1 5 <210> 49 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR2 (Chothia) <400> 49 Thr Trp Asn Gly Gly Ser 1 5 <210> 50 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR2 (IMGT) <400> 50 Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr 1 5 10 <210> 51 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR2 (IMGT) <400> 51 Ile Asn Gly Gly Gly Ile Thr 1 5 <210> 52 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR2 (IMGT) <400> 52 Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr 1 5 <210> 53 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR2 (IMGT) <400> 53 Ile Thr Trp Asn Gly Gly Thr Thr 1 5 <210> 54 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR2 (IMGT) <400> 54 Ile Ser Gly Gly Gly Thr Thr 1 5 <210> 55 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR2 (IMGT) <400> 55 Ile Thr Gly Gly Gly Ser Thr 1 5 <210> 56 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR2 (IMGT) <400> 56 Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr 1 5 <210> 57 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR2 (IMGT) <400> 57 Ile Ser Trp Ser Gly Ser Ser Ala 1 5 <210> 58 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR2 (IMGT) <400> 58 Ile Arg Trp Ser Gly Gly Arg Thr 1 5 <210> 59 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR2 (IMGT) <400> 59 Ile Thr Trp Asn Gly Gly Ser Thr 1 5 <210> 60 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (Kabat) <400> 60 Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 61 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (Kabat) <400> 61 Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr Ala Thr 1 5 10 15 <210> 62 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR3 (Kabat) <400> 62 Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr Tyr 1 5 10 <210> 63 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR3 (Kabat) <400> 63 Pro Leu Thr Ala Arg 1 5 <210> 64 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR3 (Kabat) <400> 64 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 65 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR3 (Kabat) <400> 65 Pro Leu Thr Ser Arg 1 5 <210> 66 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR3 (Kabat) <400> 66 Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val Arg Glu 1 5 10 15 Ile Pro Asp Tyr Asp Tyr 20 <210> 67 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (Kabat) <400> 67 Asp Gln Arg Gly Tyr 1 5 <210> 68 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR3 (Kabat) <400> 68 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 69 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR3 (Kabat) <400> 69 Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp Ser Pro 1 5 10 15 Ala Gly Tyr Asp Tyr 20 <210> 70 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR3 (Kabat) <400> 70 Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala Asn Tyr 1 5 10 <210> 71 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (Chothia) <400> 71 Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 72 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (Chothia) <400> 72 Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr Ala Thr 1 5 10 15 <210> 73 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR3 (Chothia) <400> 73 Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr Tyr 1 5 10 <210> 74 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR3 (Chothia) <400> 74 Pro Leu Thr Ala Arg 1 5 <210> 75 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR3 (Chothia) <400> 75 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 76 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR3 (Chothia) <400> 76 Pro Leu Thr Ser Arg 1 5 <210> 77 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR3 (Chothia) <400> 77 Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val Arg Glu 1 5 10 15 Ile Pro Asp Tyr Asp Tyr 20 <210> 78 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (Chothia) <400> 78 Asp Gln Arg Gly Tyr 1 5 <210> 79 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR3 (Chothia) <400> 79 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 80 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR3 (Chothia) <400> 80 Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp Ser Pro 1 5 10 15 Ala Gly Tyr Asp Tyr 20 <210> 81 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR3 (Chothia) <400> 81 Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala Asn Tyr 1 5 10 <210> 82 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (IMGT) <400> 82 Cys Ala Ala Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 83 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (IMGT) <400> 83 Cys Ala Ala Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr 1 5 10 15 Ala Thr <210> 84 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR3 (IMGT) <400> 84 Lys Ala Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr Tyr 1 5 10 <210> 85 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR3 (IMGT) <400> 85 Asn His Pro Leu Thr Ala Arg 1 5 <210> 86 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR3 (IMGT) <400> 86 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 87 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR3 (IMGT) <400> 87 Asn His Pro Leu Thr Ser Arg 1 5 <210> 88 <211> 24 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR3 (IMGT) <400> 88 Ala Ser Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val 1 5 10 15 Arg Glu Ile Pro Asp Tyr Asp Tyr 20 <210> 89 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (IMGT) <400> 89 Asn Asp Gln Arg Gly Tyr 1 5 <210> 90 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR3 (IMGT) <400> 90 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 91 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR3 (IMGT) <400> 91 Ala Ala Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp 1 5 10 15 Ser Pro Ala Gly Tyr Asp Tyr 20 <210> 92 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR3 (IMGT) <400> 92 Ala Ala Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala Asn Tyr 1 5 10 15 <210> 93 <211> 125 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH1 - VH amino acid sequence <400> 93 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ala Cys Ala Ala Pro Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr Tyr Ala 50 55 60 Asp Ser Val Lys Gly Arg Ser Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 65 70 75 80 Thr Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val 85 90 95 Tyr Tyr Cys Ala Ala Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met 100 105 110 Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 94 <211> 127 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH2 - VH amino acid sequence <400> 94 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ala Cys Ala Ala Pro Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr Tyr Ala 50 55 60 Asp Ser Val Lys Gly Arg Ser Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 65 70 75 80 Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val 85 90 95 Tyr Tyr Cys Ala Ala Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn 100 105 110 Glu Tyr Ala Thr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 95 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH3 - VH amino acid sequence <400> 95 Gln Leu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Phe Ser Ile Asn 20 25 30 Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val 35 40 45 Ala Arg Ile Asn Gly Gly Gly Ile Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ala Tyr Tyr Cys Lys 85 90 95 Ala Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 96 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH4 - VH amino acid sequence <400> 96 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Thr Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Trp Val 35 40 45 Gly Phe Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr Thr Ile Ala Thr Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Ala Ile Thr Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Gly Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn 85 90 95 His Pro Leu Thr Ala Arg Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 97 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH5 - VH amino acid sequence <400> 97 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Thr Trp Asn Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 98 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH6 - VH amino acid sequence <400> 98 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Ser Ser Val Ser Ser Asp 20 25 30 Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Asn Gln Arg Ala Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Ser Gly Gly Gly Thr Thr Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 His Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn 85 90 95 His Pro Leu Thr Ser Arg Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 99 <211> 130 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH7 - VH amino acid sequence <400> 99 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ala Cys Val Ala Ser Arg Ser Ile Gly Ser Ile Asn 20 25 30 Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val 35 40 45 Ala Arg Ile Thr Gly Gly Gly Ser Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Ser Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val Arg 100 105 110 Glu Ile Pro Asp Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val 115 120 125 Ser Ser 130 <210> 100 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH9 - VH amino acid sequence <400> 100 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Ser Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr Thr Tyr Ala Asp Pro Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Arg Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Asn Asp Gln Arg Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 101 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH10 - VH amino acid sequence <400> 101 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr 20 25 30 Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Ser Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Ser Ser Ala Gly Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 102 <211> 130 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH11 - VH amino acid sequence <400> 102 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Arg Trp Ser Gly Gly Arg Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp 100 105 110 Ser Pro Ala Gly Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val 115 120 125 Ser Ser 130 <210> 103 <211> 125 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH12 - VH amino acid sequence <400> 103 Gln Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Leu Ser Phe Asn 20 25 30 Thr Tyr Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu 35 40 45 Phe Val Ala Ser Ile Thr Trp Asn Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr 65 70 75 80 Ala Thr Leu Arg Met Asn Ser Leu Gln Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Ala Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala 100 105 110 Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 104 <211> 371 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH1-linker- mono-Fc protein <400> 104 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ala Cys Ala Ala Pro Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr Tyr Ala 50 55 60 Asp Ser Val Lys Gly Arg Ser Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 65 70 75 80 Thr Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val 85 90 95 Tyr Tyr Cys Ala Ala Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met 100 105 110 Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Glu Pro Lys 115 120 125 Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro Gln Pro Asn Pro 130 135 140 Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 145 150 155 160 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 165 170 175 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 180 185 190 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 195 200 205 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 210 215 220 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 225 230 235 240 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 245 250 255 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 260 265 270 Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 275 280 285 Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 290 295 300 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Val Pro 305 310 315 320 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala Ser Tyr Leu Thr Val 325 330 335 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 340 345 350 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 355 360 365 Pro Gly Lys 370 <210> 105 <211> 373 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH2-linker- mono-Fc protein <400> 105 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ala Cys Ala Ala Pro Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr Tyr Ala 50 55 60 Asp Ser Val Lys Gly Arg Ser Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 65 70 75 80 Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val 85 90 95 Tyr Tyr Cys Ala Ala Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn 100 105 110 Glu Tyr Ala Thr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Glu 115 120 125 Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro Gln Pro 130 135 140 Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala Pro Glu Leu 145 150 155 160 Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 165 170 175 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 180 185 190 Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 195 200 205 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser 210 215 220 Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 225 230 235 240 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 245 250 255 Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 260 265 270 Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln 275 280 285 Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 290 295 300 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 305 310 315 320 Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala Ser Tyr Leu 325 330 335 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 340 345 350 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 355 360 365 Leu Ser Pro Gly Lys 370 <210> 106 <211> 366 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH3-linker- mono-Fc protein <400> 106 Gln Leu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Phe Ser Ile Asn 20 25 30 Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val 35 40 45 Ala Arg Ile Asn Gly Gly Gly Ile Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ala Tyr Tyr Cys Lys 85 90 95 Ala Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln 115 120 125 Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys 130 135 140 Ser Pro Lys Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 145 150 155 160 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 165 170 175 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 180 185 190 Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 195 200 205 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 210 215 220 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 225 230 235 240 Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 245 250 255 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro 260 265 270 Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val 275 280 285 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 290 295 300 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp 305 310 315 320 Gly Ser Phe Arg Leu Ala Ser Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 325 330 335 Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 340 345 350 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 355 360 365 <210> 107 <211> 359 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH4-linker- mono-Fc protein <220> <221> MOD_RES <222> (96)..(96) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (99)..(99) <223> Any amino acid <400> 107 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Thr Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Trp Val 35 40 45 Gly Phe Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr Thr Ile Ala Thr Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Ala Ile Thr Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Gly Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Xaa 85 90 95 His Pro Xaa Thr Ala Arg Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro 115 120 125 Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala Pro 130 135 140 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 145 150 155 160 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 165 170 175 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 180 185 190 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 195 200 205 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 210 215 220 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 225 230 235 240 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 245 250 255 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys 260 265 270 Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 275 280 285 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 290 295 300 Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala Ser 305 310 315 320 Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 325 330 335 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 340 345 350 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 355 <210> 108 <211> 362 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH5-linker- mono-Fc protein <400> 108 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Thr Trp Asn Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln 115 120 125 Leu Gln Pro Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser 130 135 140 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 145 150 155 160 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 165 170 175 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 180 185 190 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 195 200 205 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 210 215 220 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 225 230 235 240 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 245 250 255 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu 260 265 270 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 275 280 285 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 290 295 300 Asn Tyr Lys Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg 305 310 315 320 Leu Ala Ser Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 325 330 335 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 340 345 350 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 355 360 <210> 109 <211> 359 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH6-linker- mono-Fc protein <400> 109 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Ser Ser Val Ser Ser Asp 20 25 30 Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Asn Gln Arg Ala Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Ser Gly Gly Gly Thr Thr Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 His Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn 85 90 95 His Pro Leu Thr Ser Arg Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro 115 120 125 Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala Pro 130 135 140 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 145 150 155 160 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 165 170 175 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 180 185 190 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 195 200 205 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 210 215 220 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 225 230 235 240 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 245 250 255 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys 260 265 270 Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 275 280 285 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 290 295 300 Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala Ser 305 310 315 320 Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 325 330 335 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 340 345 350 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 355 <210> 110 <211> 376 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH7-linker- mono-Fc protein <400> 110 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ala Cys Val Ala Ser Arg Ser Ile Gly Ser Ile Asn 20 25 30 Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val 35 40 45 Ala Arg Ile Thr Gly Gly Gly Ser Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Ser Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val Arg 100 105 110 Glu Ile Pro Asp Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val 115 120 125 Ser Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln 130 135 140 Pro Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala 145 150 155 160 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 165 170 175 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 180 185 190 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 195 200 205 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 210 215 220 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 225 230 235 240 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 245 250 255 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 260 265 270 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 275 280 285 Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 290 295 300 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 305 310 315 320 Lys Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala 325 330 335 Ser Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 340 345 350 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 355 360 365 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 370 375 <210> 111 <211> 359 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH9-linker- mono-Fc protein <400> 111 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Ser Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr Thr Tyr Ala Asp Pro Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Arg Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Asn Asp Gln Arg Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro 115 120 125 Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala Pro 130 135 140 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 145 150 155 160 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 165 170 175 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 180 185 190 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 195 200 205 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 210 215 220 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 225 230 235 240 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 245 250 255 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys 260 265 270 Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 275 280 285 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 290 295 300 Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala Ser 305 310 315 320 Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 325 330 335 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 340 345 350 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 355 <210> 112 <211> 362 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH10-linker- mono-Fc protein <400> 112 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr 20 25 30 Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Ser Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Ser Ser Ala Gly Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln 115 120 125 Leu Gln Pro Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser 130 135 140 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 145 150 155 160 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 165 170 175 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 180 185 190 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 195 200 205 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 210 215 220 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 225 230 235 240 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 245 250 255 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu 260 265 270 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 275 280 285 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 290 295 300 Asn Tyr Lys Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg 305 310 315 320 Leu Ala Ser Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 325 330 335 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 340 345 350 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 355 360 <210> 113 <211> 376 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH11-linker- mono-Fc protein <400> 113 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Arg Trp Ser Gly Gly Arg Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp 100 105 110 Ser Pro Ala Gly Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val 115 120 125 Ser Ser Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln 130 135 140 Pro Gln Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala 145 150 155 160 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 165 170 175 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 180 185 190 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 195 200 205 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 210 215 220 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 225 230 235 240 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 245 250 255 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 260 265 270 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 275 280 285 Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 290 295 300 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 305 310 315 320 Lys Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala 325 330 335 Ser Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 340 345 350 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 355 360 365 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 370 375 <210> 114 <211> 371 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> VHH12-linker- mono-Fc protein <400> 114 Gln Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Leu Ser Phe Asn 20 25 30 Thr Tyr Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu 35 40 45 Phe Val Ala Ser Ile Thr Trp Asn Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr 65 70 75 80 Ala Thr Leu Arg Met Asn Ser Leu Gln Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Ala Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala 100 105 110 Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Glu Pro Lys 115 120 125 Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro Gln Pro Asn Pro 130 135 140 Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 145 150 155 160 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 165 170 175 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 180 185 190 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 195 200 205 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 210 215 220 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 225 230 235 240 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 245 250 255 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 260 265 270 Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 275 280 285 Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 290 295 300 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Val Pro 305 310 315 320 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Arg Leu Ala Ser Tyr Leu Thr Val 325 330 335 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 340 345 350 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 355 360 365 Pro Gly Lys 370 <210> 115 <211> 461 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> IgA Heavy Chain <400> 115 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ser Ser Gly Gly Thr Ser Asn Asn Tyr 20 25 30 Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Asp Trp Met 35 40 45 Gly Gly Ile Ser Pro Ile Phe Gly Ser Thr Ala Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Ile Phe Ser Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg His Gly Asn Tyr Tyr Tyr Tyr Ser Gly Met Asp Val Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ser Leu Asp Ser Thr Pro Gln Asp Gly Asn Val Val 130 135 140 Val Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val 145 150 155 160 Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Asn Val Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro 165 170 175 Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr 180 185 190 Leu Pro Ala Thr Gln Cys Pro Asp Gly Lys Ser Val Thr Cys His Val 195 200 205 Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp Val Thr Val Pro Cys Pro Val 210 215 220 Pro Pro Pro Pro Pro Cys Cys His Pro Arg Leu Ser Leu His Arg Pro 225 230 235 240 Ala Leu Glu Asp Leu Leu Leu Gly Ser Glu Ala Asn Leu Thr Cys Thr 245 250 255 Leu Thr Gly Leu Arg Asp Ala Ser Gly Ala Thr Phe Thr Trp Thr Pro 260 265 270 Ser Ser Gly Lys Ser Ala Val Gln Gly Pro Pro Glu Arg Asp Leu Cys 275 280 285 Gly Cys Tyr Ser Val Ser Ser Val Leu Pro Gly Cys Ala Gln Pro Trp 290 295 300 Asn His Gly Glu Thr Phe Thr Cys Thr Ala Ala His Pro Glu Leu Lys 305 310 315 320 Thr Pro Leu Thr Ala Asn Ile Thr Lys Ser Gly Asn Thr Phe Arg Pro 325 330 335 Glu Val His Leu Leu Pro Pro Pro Ser Glu Glu Leu Ala Leu Asn Glu 340 345 350 Leu Val Thr Leu Thr Cys Leu Ala Arg Gly Phe Ser Pro Lys Asp Val 355 360 365 Leu Val Arg Trp Leu Gln Gly Ser Gln Glu Leu Pro Arg Glu Lys Tyr 370 375 380 Leu Thr Trp Ala Ser Arg Gln Glu Pro Ser Gln Gly Thr Thr Thr Phe 385 390 395 400 Ala Val Thr Ser Ile Leu Arg Val Ala Ala Glu Asp Trp Lys Lys Gly 405 410 415 Asp Thr Phe Ser Cys Met Val Gly His Glu Ala Leu Pro Leu Ala Phe 420 425 430 Thr Gln Lys Thr Ile Asp Arg Leu Ala Gly Lys Pro Thr His Val Asn 435 440 445 Val Ser Val Val Met Ala Glu Val Asp Gly Thr Cys Tyr 450 455 460 <210> 116 <211> 216 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> IgA Light Chain <400> 116 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ala Val Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Asp Ser Asn Ile Gly Arg Arg 20 25 30 Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Phe Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Asn Asp Gln Arg Pro Ser Val Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 85 90 95 Lys Gly Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly Gln 100 105 110 Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu 115 120 125 Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr 130 135 140 Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys 145 150 155 160 Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr 165 170 175 Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His 180 185 190 Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys 195 200 205 Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 117 <211> 153 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> IgA J Chain <400> 117 Ser Arg Asp Ser Ser Ala Ser Ala Ser Arg Val Ala Gly Ile Thr Ala 1 5 10 15 Gln Glu Asp Glu Arg Ile Val Leu Val Asp Asn Lys Cys Lys Cys Ala 20 25 30 Arg Ile Thr Ser Arg Ile Ile Arg Ser Ser Glu Asp Pro Asn Glu Asp 35 40 45 Ile Val Glu Arg Asn Ile Arg Ile Ile Val Pro Leu Asn Asn Arg Glu 50 55 60 Asn Ile Ser Asp Pro Thr Ser Pro Leu Arg Thr Arg Phe Val Tyr His 65 70 75 80 Leu Ser Asp Leu Cys Lys Lys Cys Asp Pro Thr Glu Val Glu Leu Asp 85 90 95 Asn Gln Ile Val Thr Ala Thr Gln Ser Asn Ile Cys Asp Glu Asp Ser 100 105 110 Ala Thr Glu Thr Cys Tyr Thr Tyr Asp Arg Asn Lys Cys Tyr Thr Ala 115 120 125 Val Val Pro Leu Val Tyr Gly Gly Glu Thr Lys Met Val Glu Thr Ala 130 135 140 Leu Thr Pro Asp Ala Cys Tyr Pro Asp 145 150 <210> 118 <211> 626 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain (ECD) <400> 118 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile 85 90 95 Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser Gln Gly 100 105 110 Pro Gly Leu Leu Asn Asp Thr Lys Val Tyr Thr Val Asp Leu Gly Arg 115 120 125 Thr Val Thr Ile Asn Cys Pro Phe Lys Thr Glu Asn Ala Gln Lys Arg 130 135 140 Lys Ser Leu Tyr Lys Gln Ile Gly Leu Tyr Pro Val Leu Val Ile Asp 145 150 155 160 Ser Ser Gly Tyr Val Asn Pro Asn Tyr Thr Gly Arg Ile Arg Leu Asp 165 170 175 Ile Gln Gly Thr Gly Gln Leu Leu Phe Ser Val Val Ile Asn Gln Leu 180 185 190 Arg Leu Ser Asp Ala Gly Gln Tyr Leu Cys Gln Ala Gly Asp Asp Ser 195 200 205 Asn Ser Asn Lys Lys Asn Ala Asp Leu Gln Val Leu Lys Pro Glu Pro 210 215 220 Glu Leu Val Tyr Glu Asp Leu Arg Gly Ser Val Thr Phe His Cys Ala 225 230 235 240 Leu Gly Pro Glu Val Ala Asn Val Ala Lys Phe Leu Cys Arg Gln Ser 245 250 255 Ser Gly Glu Asn Cys Asp Val Val Val Asn Thr Leu Gly Lys Arg Ala 260 265 270 Pro Ala Phe Glu Gly Arg Ile Leu Leu Asn Pro Gln Asp Lys Asp Gly 275 280 285 Ser Phe Ser Val Val Ile Thr Gly Leu Arg Lys Glu Asp Ala Gly Arg 290 295 300 Tyr Leu Cys Gly Ala His Ser Asp Gly Gln Leu Gln Glu Gly Ser Pro 305 310 315 320 Ile Gln Ala Trp Gln Leu Phe Val Asn Glu Glu Ser Thr Ile Pro Arg 325 330 335 Ser Pro Thr Val Val Lys Gly Val Ala Gly Ser Ser Val Ala Val Leu 340 345 350 Cys Pro Tyr Asn Arg Lys Glu Ser Lys Ser Ile Lys Tyr Trp Cys Leu 355 360 365 Trp Glu Gly Ala Gln Asn Gly Arg Cys Pro Leu Leu Val Asp Ser Glu 370 375 380 Gly Trp Val Lys Ala Gln Tyr Glu Gly Arg Leu Ser Leu Leu Glu Glu 385 390 395 400 Pro Gly Asn Gly Thr Phe Thr Val Ile Leu Asn Gln Leu Thr Ser Arg 405 410 415 Asp Ala Gly Phe Tyr Trp Cys Leu Thr Asn Gly Asp Thr Leu Trp Arg 420 425 430 Thr Thr Val Glu Ile Lys Ile Ile Glu Gly Glu Pro Asn Leu Lys Val 435 440 445 Pro Gly Asn Val Thr Ala Val Leu Gly Glu Thr Leu Lys Val Pro Cys 450 455 460 His Phe Pro Cys Lys Phe Ser Ser Tyr Glu Lys Tyr Trp Cys Lys Trp 465 470 475 480 Asn Asn Thr Gly Cys Gln Ala Leu Pro Ser Gln Asp Glu Gly Pro Ser 485 490 495 Lys Ala Phe Val Asn Cys Asp Glu Asn Ser Arg Leu Val Ser Leu Thr 500 505 510 Leu Asn Leu Val Thr Arg Ala Asp Glu Gly Trp Tyr Trp Cys Gly Val 515 520 525 Lys Gln Gly His Phe Tyr Gly Glu Thr Ala Ala Val Tyr Val Ala Val 530 535 540 Glu Glu Arg Lys Ala Ala Gly Ser Arg Asp Val Ser Leu Ala Lys Ala 545 550 555 560 Asp Ala Ala Pro Asp Glu Lys Val Leu Asp Ser Gly Phe Arg Glu Ile 565 570 575 Glu Asn Lys Ala Ile Gln Asp Pro Arg Leu Phe Ala Glu Glu Lys Ala 580 585 590 Val Ala Asp Thr Arg Asp Gln Ala Asp Gly Ser Arg Ala Ser Val Asp 595 600 605 Ser Gly Ser Ser Glu Glu Gln Gly Gly Ser Ser Arg His His His His 610 615 620 His His 625 <210> 119 <211> 117 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain 1 (D1) <400> 119 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile 85 90 95 Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Gly Ser His 100 105 110 His His His His His 115 <210> 120 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain 2 (D2) <400> 120 Ser Gln Gly Pro Gly Leu Leu Asn Asp Thr Lys Val Tyr Thr Val Asp 1 5 10 15 Leu Gly Arg Thr Val Thr Ile Asn Cys Pro Phe Lys Thr Glu Asn Ala 20 25 30 Gln Lys Arg Lys Ser Leu Tyr Lys Gln Ile Gly Leu Tyr Pro Val Leu 35 40 45 Val Ile Asp Ser Ser Gly Tyr Val Asn Pro Asn Tyr Thr Gly Arg Ile 50 55 60 Arg Leu Asp Ile Gln Gly Thr Gly Gln Leu Leu Phe Ser Val Val Ile 65 70 75 80 Asn Gln Leu Arg Leu Ser Asp Ala Gly Gln Tyr Leu Cys Gln Ala Gly 85 90 95 Asp Asp Ser Asn Ser Asn Lys Lys Asn Ala Asp Leu Gln Val Leu Lys 100 105 110 Pro Glu Pro Gly Ser His His His His His His 115 120 <210> 121 <211> 121 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain 3 (D3) <400> 121 Lys Pro Glu Pro Glu Leu Val Tyr Glu Asp Leu Arg Gly Ser Val Thr 1 5 10 15 Phe His Cys Ala Leu Gly Pro Glu Val Ala Asn Val Ala Lys Phe Leu 20 25 30 Cys Arg Gln Ser Ser Gly Glu Asn Cys Asp Val Val Val Asn Thr Leu 35 40 45 Gly Lys Arg Ala Pro Ala Phe Glu Gly Arg Ile Leu Leu Asn Pro Gln 50 55 60 Asp Lys Asp Gly Ser Phe Ser Val Val Ile Thr Gly Leu Arg Lys Glu 65 70 75 80 Asp Ala Gly Arg Tyr Leu Cys Gly Ala His Ser Asp Gly Gln Leu Gln 85 90 95 Glu Gly Ser Pro Ile Gln Ala Trp Gln Leu Phe Val Asn Glu Glu Ser 100 105 110 Thr Gly Ser His His His His His His 115 120 <210> 122 <211> 114 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain 5 (D5) <400> 122 Gly Glu Pro Asn Leu Lys Val Pro Gly Asn Val Thr Ala Val Leu Gly 1 5 10 15 Glu Thr Leu Lys Val Pro Cys His Phe Pro Cys Lys Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Glu Lys Tyr Trp Cys Lys Trp Asn Asn Thr Gly Cys Gln Ala Leu Pro 35 40 45 Ser Gln Asp Glu Gly Pro Ser Lys Ala Phe Val Asn Cys Asp Glu Asn 50 55 60 Ser Arg Leu Val Ser Leu Thr Leu Asn Leu Val Thr Arg Ala Asp Glu 65 70 75 80 Gly Trp Tyr Trp Cys Gly Val Lys Gln Gly His Phe Tyr Gly Glu Thr 85 90 95 Ala Ala Val Tyr Val Ala Val Glu Glu Arg Gly Ser His His His His 100 105 110 His His <210> 123 <211> 230 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain 1-domain 2 (D1-D2) <400> 123 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile 85 90 95 Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser Gln Gly 100 105 110 Pro Gly Leu Leu Asn Asp Thr Lys Val Tyr Thr Val Asp Leu Gly Arg 115 120 125 Thr Val Thr Ile Asn Cys Pro Phe Lys Thr Glu Asn Ala Gln Lys Arg 130 135 140 Lys Ser Leu Tyr Lys Gln Ile Gly Leu Tyr Pro Val Leu Val Ile Asp 145 150 155 160 Ser Ser Gly Tyr Val Asn Pro Asn Tyr Thr Gly Arg Ile Arg Leu Asp 165 170 175 Ile Gln Gly Thr Gly Gln Leu Leu Phe Ser Val Val Ile Asn Gln Leu 180 185 190 Arg Leu Ser Asp Ala Gly Gln Tyr Leu Cys Gln Ala Gly Asp Asp Ser 195 200 205 Asn Ser Asn Lys Lys Asn Ala Asp Leu Gln Val Leu Lys Pro Gly Ser 210 215 220 His His His His His His 225 230 <210> 124 <211> 228 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain 2-domain 3 (D2-D3) <400> 124 Ser Gln Gly Pro Gly Leu Leu Asn Asp Thr Lys Val Tyr Thr Val Asp 1 5 10 15 Leu Gly Arg Thr Val Thr Ile Asn Cys Pro Phe Lys Thr Glu Asn Ala 20 25 30 Gln Lys Arg Lys Ser Leu Tyr Lys Gln Ile Gly Leu Tyr Pro Val Leu 35 40 45 Val Ile Asp Ser Ser Gly Tyr Val Asn Pro Asn Tyr Thr Gly Arg Ile 50 55 60 Arg Leu Asp Ile Gln Gly Thr Gly Gln Leu Leu Phe Ser Val Val Ile 65 70 75 80 Asn Gln Leu Arg Leu Ser Asp Ala Gly Gln Tyr Leu Cys Gln Ala Gly 85 90 95 Asp Asp Ser Asn Ser Asn Lys Lys Asn Ala Asp Leu Gln Val Leu Lys 100 105 110 Pro Glu Pro Glu Leu Val Tyr Glu Asp Leu Arg Gly Ser Val Thr Phe 115 120 125 His Cys Ala Leu Gly Pro Glu Val Ala Asn Val Ala Lys Phe Leu Cys 130 135 140 Arg Gln Ser Ser Gly Glu Asn Cys Asp Val Val Val Asn Thr Leu Gly 145 150 155 160 Lys Arg Ala Pro Ala Phe Glu Gly Arg Ile Leu Leu Asn Pro Gln Asp 165 170 175 Lys Asp Gly Ser Phe Ser Val Val Ile Thr Gly Leu Arg Lys Glu Asp 180 185 190 Ala Gly Arg Tyr Leu Cys Gly Ala His Ser Asp Gly Gln Leu Gln Glu 195 200 205 Gly Ser Pro Ile Gln Ala Trp Gln Leu Phe Val Asn Gly Ser His His 210 215 220 His His His His 225 <210> 125 <211> 224 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> human pIgR extracellular domain 4-domain 5 (D4-D5) <400> 125 Ser Thr Ile Pro Arg Ser Pro Thr Val Val Lys Gly Val Ala Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Ala Val Leu Cys Pro Tyr Asn Arg Lys Glu Ser Lys Ser Ile 20 25 30 Lys Tyr Trp Cys Leu Trp Glu Gly Ala Gln Asn Gly Arg Cys Pro Leu 35 40 45 Leu Val Asp Ser Glu Gly Trp Val Lys Ala Gln Tyr Glu Gly Arg Leu 50 55 60 Ser Leu Leu Glu Glu Pro Gly Asn Gly Thr Phe Thr Val Ile Leu Asn 65 70 75 80 Gln Leu Thr Ser Arg Asp Ala Gly Phe Tyr Trp Cys Leu Thr Asn Gly 85 90 95 Asp Thr Leu Trp Arg Thr Thr Val Glu Ile Lys Ile Ile Glu Gly Glu 100 105 110 Pro Asn Leu Lys Val Pro Gly Asn Val Thr Ala Val Leu Gly Glu Thr 115 120 125 Leu Lys Val Pro Cys His Phe Pro Cys Lys Phe Ser Ser Tyr Glu Lys 130 135 140 Tyr Trp Cys Lys Trp Asn Asn Thr Gly Cys Gln Ala Leu Pro Ser Gln 145 150 155 160 Asp Glu Gly Pro Ser Lys Ala Phe Val Asn Cys Asp Glu Asn Ser Arg 165 170 175 Leu Val Ser Leu Thr Leu Asn Leu Val Thr Arg Ala Asp Glu Gly Trp 180 185 190 Tyr Trp Cys Gly Val Lys Gln Gly His Phe Tyr Gly Glu Thr Ala Ala 195 200 205 Val Tyr Val Ala Val Glu Glu Arg Gly Ser His His His His His His 210 215 220 <210> 126 <211> 7 <212> PRT <213> Oncorhynchus mykiss <220> <223> teleost fish pIgR CDR1 of D1 <400> 126 Gly Pro Gln Tyr Ala Ser Tyr 1 5 <210> 127 <211> 3 <212> PRT <213> Oncorhynchus mykiss <220> <223> teleost fish pIgR CDR2 of D1 <400> 127 Asp Ala Pro 1 <210> 128 <211> 8 <212> PRT <213> Oncorhynchus mykiss <220> <223> teleost fish pIgR CDR3 of D1 <400> 128 Val Gly Gly Val Trp Ser Ala Asp 1 5 <210> 129 <211> 633 <212> PRT <213> Mus sp. <220> <223> mouse pIgR extracellular domain (ECD) <400> 129 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Gln Glu Val Ser Ser Ile Glu Gly Asp 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Asp Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Ser Gly Met Cys Thr Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Asn Gly Tyr Leu Ser Lys Glu Tyr Ser Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Ile Asn Phe Pro Glu Asn Asn Thr Phe Val Ile Asn Ile Glu 65 70 75 80 Gln Leu Thr Gln Asp Asp Thr Gly Ser Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Thr 85 90 95 Ser Asn Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser Gln Val 100 105 110 Pro Glu Leu Pro Ser Asp Thr His Val Tyr Thr Lys Asp Ile Gly Arg 115 120 125 Asn Val Thr Ile Glu Cys Pro Phe Lys Arg Glu Asn Ala Pro Ser Lys 130 135 140 Lys Ser Leu Cys Lys Lys Thr Asn Gln Ser Cys Glu Leu Val Ile Asp 145 150 155 160 Ser Thr Glu Lys Val Asn Pro Ser Tyr Ile Gly Arg Ala Lys Leu Phe 165 170 175 Met Lys Gly Thr Asp Leu Thr Val Phe Tyr Val Asn Ile Ser His Leu 180 185 190 Thr His Asn Asp Ala Gly Leu Tyr Ile Cys Gln Ala Gly Glu Gly Pro 195 200 205 Ser Ala Asp Lys Lys Asn Val Asp Leu Gln Val Leu Ala Pro Glu Pro 210 215 220 Glu Leu Leu Tyr Lys Asp Leu Arg Ser Ser Val Thr Phe Glu Cys Asp 225 230 235 240 Leu Gly Arg Glu Val Ala Asn Glu Ala Lys Tyr Leu Cys Arg Met Asn 245 250 255 Lys Glu Thr Cys Asp Val Ile Ile Asn Thr Leu Gly Lys Arg Asp Pro 260 265 270 Asp Phe Glu Gly Arg Ile Leu Ile Thr Pro Lys Asp Asp Asn Gly Arg 275 280 285 Phe Ser Val Leu Ile Thr Gly Leu Arg Lys Glu Asp Ala Gly His Tyr 290 295 300 Gln Cys Gly Ala His Ser Ser Gly Leu Pro Gln Glu Gly Trp Pro Ile 305 310 315 320 Gln Thr Trp Gln Leu Phe Val Asn Glu Glu Ser Thr Ile Pro Asn Arg 325 330 335 Arg Ser Val Val Lys Gly Val Thr Gly Gly Ser Val Ala Ile Ala Cys 340 345 350 Pro Tyr Asn Pro Lys Glu Ser Ser Ser Leu Lys Tyr Trp Cys Arg Trp 355 360 365 Glu Gly Asp Gly Asn Gly His Cys Pro Val Leu Val Gly Thr Gln Ala 370 375 380 Gln Val Gln Glu Glu Tyr Glu Gly Arg Leu Ala Leu Phe Asp Gln Pro 385 390 395 400 Gly Asn Gly Thr Tyr Thr Val Ile Leu Asn Gln Leu Thr Thr Glu Asp 405 410 415 Ala Gly Phe Tyr Trp Cys Leu Thr Asn Gly Asp Ser Arg Trp Arg Thr 420 425 430 Thr Ile Glu Leu Gln Val Ala Glu Ala Thr Arg Glu Pro Asn Leu Glu 435 440 445 Val Thr Pro Gln Asn Ala Thr Ala Val Leu Gly Glu Thr Phe Thr Val 450 455 460 Ser Cys His Tyr Pro Cys Lys Phe Tyr Ser Gln Glu Lys Tyr Trp Cys 465 470 475 480 Lys Trp Ser Asn Lys Gly Cys His Ile Leu Pro Ser His Asp Glu Gly 485 490 495 Ala Arg Gln Ser Ser Val Ser Cys Asp Gln Ser Ser Gln Leu Val Ser 500 505 510 Met Thr Leu Asn Pro Val Ser Lys Glu Asp Glu Gly Trp Tyr Trp Cys 515 520 525 Gly Val Lys Gln Gly Gln Thr Tyr Gly Glu Thr Thr Ala Ile Tyr Ile 530 535 540 Ala Val Glu Glu Arg Thr Arg Gly Ser Ser His Val Asn Pro Thr Asp 545 550 555 560 Ala Asn Ala Arg Ala Lys Val Ala Leu Glu Glu Glu Val Val Asp Ser 565 570 575 Ser Ile Ser Glu Lys Glu Asn Lys Ala Ile Pro Asn Pro Gly Pro Phe 580 585 590 Ala Asn Glu Arg Glu Ile Gln Asn Val Gly Asp Gln Ala Gln Glu Asn 595 600 605 Arg Ala Ser Gly Asp Ala Gly Ser Ala Asp Gly Gln Ser Arg Ser Ser 610 615 620 Ser Ser Lys His His His His His His 625 630 <210> 130 <211> 27 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> hinge region (AA) <400> 130 Glu Pro Lys Thr Pro Lys Pro Gln Pro Gln Pro Gln Leu Gln Pro Gln 1 5 10 15 Pro Asn Pro Thr Thr Glu Ser Lys Ser Pro Lys 20 25 <210> 131 <211> 82 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide <220> <223> hinge region (DNA) <400> 131 gaacccaaga caccaaaacc acaaccacaa ccacaactac aaccacaacc caatcctaca 60 acagaatcca agagccccaa aa 82 <210> 132 <211> 657 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <223> Human IgG1 Mono-Fc DNA sequence <400> 132 agcccagcac ctgaactcct ggggggaccg tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag 60 gacaccctca tgatctcccg gacccctgag gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac 120 gaagaccctg aggtcaagtt caactggtac gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag 180 acaaagccgc gggaggagca gtacaacagc acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc 240 ctgcaccagg actggctgaa tggcaaggag tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc 300 ccagccccca tcgagaaaac catctccaaa gccaaagggc agccccgaga accacaggtg 360 tacaccaagc ccccatcccg ggaggagatg accaagaacc aggtcagcct gagctgcctg 420 gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag 480 aacaactaca agaccacggt gcccgtgctg gactccgacg gctccttcag actcgcaagc 540 tatctcaccg tggacaagag cagatggcag caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg 600 catgaggctc tgcacaacca ctacacgcag aagagcctct ccctgtctcc gggtaaa 657 <210> 133 <211> 375 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH1 <220> <221> modified_base <222> (349)..(349) <223> a, c, t, g, unknown or other <220> <221> modified_base <222> (351)..(351) <223> a, c, t, g, unknown or other <400> 133 caggtgcagc tggtggagtc tgggggagga ttggtgcagg ctgggggctc tctgaaactc 60 gcctgtgcag cacctggact taccttcagt tcgtatcgca tgggctggtt ccgccaggct 120 ccagggcagg agcgtgagtt tgtagcagct attgattgga atggtcgtgg cacatattat 180 cgatactatg cagactccgt gaagggccga tccaccattt ccagagacaa cgccaagaac 240 acgatgtatc tgcaaatgaa cagcctgaaa cctgaggaca cggccgttta ttactgtgca 300 gcaggttcga tcgaccttaa ctggtacggc ggcatggact actggggcna ngggacccag 360 gtcaccgtct cctca 375 <210> 134 <211> 381 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH2 <400> 134 gaggtgcagg tggtggagtc tgggggagga ttggtgcagg ctgggggctc tctgaaactc 60 gcctgtgcag cacctggact taccttcagt tcgtatcgca tgggctggtt ccgccaggct 120 ccagggcagg agcgtgagtt tgtagcagct attgattgga atggtcgtgg cacatattat 180 cgatactatg cagactccgt gaagggccga tccaccattt ccagagacaa cgccaagaac 240 acggtgtatc tgcaaatgaa cagcctgaaa cctgaggaca cggccgttta ttactgtgca 300 gctactacgg tattaactga ccctagggtt cttaatgagt atgccacatg gggccagggg 360 acccaggtca ccgtctcctc a 381 <210> 135 <211> 360 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH3 <400> 135 cagttgcagc tcgtggagtc tgggggaggc ttggtgcagc ctggggggtc tctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggaag catcttcagt atcaatgtta tgggctggta ccgccaggct 120 ccagggaagc agcgcgagtt ggtcgcacgt attaatggag gtggcattac acactatgca 180 gagtccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaacg ccaagaacac ggtgtatctg 240 caaatgaaca gcctgaaacc tgaggacaca gccgcatatt actgtaaggc agatgtgttc 300 ggtagtagcg ggtacgtaga aacctactgg ggccagggga cccaggtcac cgtctcctca 360 <210> 136 <211> 339 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH4 <400> 136 gaggtgcagg tggtggagtc tgggggaggc ttggtgcagg ctgggggctc tctgagactc 60 tcctgtgcag tctctggaac ctccgtcagt agcaatgcca tgggttggta ccgccaggct 120 ccagggaagc agcgcgagtg ggtcggattt attgatcgta ttgctaccac gacgattgca 180 acctccgtga agggccgatt cgccatcacc agagacaacg ccaagaacac ggtgtatctc 240 caaatgagcg gcctgaaacc tgaggacaca gccgtctatt actgtaatca tccattgacc 300 gctcggtggg gccaggggac ccaggtcacc gtctcctca 339 <210> 137 <211> 348 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH5 <400> 137 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtgcagg ctgggggctc tctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggacg caccttcagt agctatgcca tgggctggtt ccgccaggct 120 ccagggaagg agcgtgagtt tgtagcagct attacctgga atggtggtac cacatactat 180 gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa cacggtgtat 240 ctgcaaatga acagcctgaa acctgaggac acggccgttt attactgtgc agcagaccca 300 ttcaaccaag gctactgggg ccaggggacc caggtcaccg tctcctca 348 <210> 138 <211> 339 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH6 <400> 138 gaggtgcagc tcgtggagtc tggaggaggc ttggtgcagg ctggggggtc tctgagactc 60 tcctgtgcag tctctggaag ctccgtcagt agcgatgcca tgggttggta ccgccaggct 120 ccagggaatc agcgcgcgtg ggtcgcattt atttctggtg gtggtaccac aacctatgca 180 gactccgtta agggccgatt caccatctcc agagacaaca ccaagaacac ggtgtatctc 240 cacatgaaca gcctgaaacc tgaagacaca gccgtctatt actgtaatca tccattgacg 300 tctcggtggg gccaggggac ccaggtcacc gtctcctca 339 <210> 139 <211> 390 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH7 <400> 139 gaggtgcagg tggtggagtc tgggggagga ttggtgcagg ctggggggtc tctgagactc 60 gcctgtgtag cctctagaag catcggcagt atcaatgtta tgggctggta ccgccaggct 120 ccagggaagc agcgcgactt ggtcgcacgt attactggag gtggcagtac acactacgca 180 gagtccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaacg ccaagaacac ggtgtatctg 240 caaatgaaca gcctggaacc tgaggacacg gccgtttatt actgtgcgtc aatggtaaac 300 cctatcatta cggcttgggg tacgattggt gtgcgcgaga ttcccgacta tgactactgg 360 ggccagggga cccaggtcac cgtctcctca 390 <210> 140 <211> 348 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH10 <400> 140 gaggtgcagg tggtggagtc tgggggaggc ttggtgcagg ctggggggtc tctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcacc cgctatgcca tgggctggtt ccgccaggct 120 ccagggaagg agcgatcgtt tgtagcagct attagctgga gtggtagtag cgcaggctat 180 ggagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagtctaaa acctgaggac acggccgttt attactgtgc agcagaccca 300 ttcaaccaag gctactgggg ccaggggacc caggtcaccg tctcctca 348 <210> 141 <211> 390 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH11 <400> 141 gaggtgcagg tggtggagtc tgggggagga ttggtgcagg ctgggggctc tctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggacg caccttcact acctatcgca tgggctggtt ccgccaggct 120 ccagggaagg agcgagagtt tgtagcagct attcgctgga gtggtggtcg cacattgtat 180 gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa cacagcgtat 240 ctgcaaatga acaacctgag acctgaggac acggccgttt attactgtgc agcagatcta 300 gccgagtata gtggtactta ctccagccct gcggactccc ccgctgggta tgactactgg 360 ggccagggga cccaggtcac cgtctcctca 390 <210> 142 <211> 375 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide <220> <223> DNA sequence coding for VHH12 <400> 142 caggtgcagc tggtcgaaac tgggggagga ttggtgcagg ctggggactc tctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggacg caccctcagc ttcaacacct atgccatggg ctggttccgc 120 caggctccag ggaaggagcg tgaatttgta gcctctatta cctggaatgg tggaagcaca 180 agctacgcag actccgtgaa gggccgattc accatcacca gagacaacgc caagaacacg 240 gctactctgc gaatgaatag cctgcagccc gacgacacgg ccgtgtatta ctgtgcagca 300 gcccgatact atgtgagtgg tacttacttc cccgcgaatt actggggcca ggggacccag 360 gtcaccgtct cctca 375 <210> 143 <211> 31 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Exemplary stalk sequence of human pIgR <400> 143 Glu Lys Ala Val Ala Asp Thr Arg Asp Gln Ala Asp Gly Ser Arg Ala 1 5 10 15 Ser Val Asp Ser Gly Ser Ser Glu Glu Gln Gly Gly Ser Ser Arg 20 25 30 <210> 144 <211> 33 <212> PRT <213> Mus sp. <220> <223> Exemplary stalk sequence of mouse pIgR <400> 144 Glu Arg Glu Ile Gln Asn Val Gly Asp Gln Ala Gln Glu Asn Arg Ala 1 5 10 15 Ser Gly Asp Ala Gly Ser Ala Asp Gly Gln Ser Arg Ser Ser Ser Ser 20 25 30 Lys <210> 145 <211> 33 <212> PRT <213> Mus sp. <220> <223> Exemplary stalk sequence of mouse pIgR <400> 145 Glu Arg Glu Ile Gln Asn Val Arg Asp Gln Ala Gln Glu Asn Arg Ala 1 5 10 15 Ser Gly Asp Ala Gly Ser Ala Asp Gly Gln Ser Arg Ser Ser Ser Ser 20 25 30 Lys <210> 146 <211> 219 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Human IgG1 Mono-Fc AA sequence <400> 146 Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 1 5 10 15 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 20 25 30 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 35 40 45 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 50 55 60 Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 65 70 75 80 Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 85 90 95 Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 100 105 110 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Lys Pro Pro Ser Arg Glu 115 120 125 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Leu Val Lys Gly Phe 130 135 140 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 145 150 155 160 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Val Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 165 170 175 Arg Leu Ala Ser Tyr Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 180 185 190 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 195 200 205 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 210 215 <210> 147 <211> 100 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> Exemplary flexible linker 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(100) <223> This sequence may encompass 1-20 "Glu Ala Ala Ala Lys" repeating units <400> 147 Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu 1 5 10 15 Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala 20 25 30 Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala 35 40 45 Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala 50 55 60 Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 65 70 75 80 Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu 85 90 95 Ala Ala Ala Lys 100 <210> 148 <211> 100 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> Exemplary flexible linker 2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(100) <223> This sequence may encompass 1-20 "Gly Gly Gly Gly Ser" repeating units <400> 148 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 20 25 30 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 35 40 45 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 50 55 60 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 65 70 75 80 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 85 90 95 Gly Gly Gly Ser 100 <210> 149 <211> 80 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> Exemplary flexible linker 3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(80) <223> This sequence may encompass 1-20 "Gly Gly Gly Ser" repeating units <400> 149 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 20 25 30 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 35 40 45 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 50 55 60 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 65 70 75 80 <210> 150 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> Exemplary hinge region 1 <400> 150 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 10 15 <210> 151 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> Exemplary hinge region 2 <400> 151 Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 10 <210> 152 <211> 62 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> Exemplary hinge region 3 <400> 152 Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro Arg Cys 1 5 10 15 Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro 20 25 30 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro Glu 35 40 45 Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro 50 55 60 <210> 153 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> Exemplary hinge region 4 <400> 153 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro 1 5 10 <210> 154 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH 2 CDR1 (Exemplary) <400> 154 Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr Arg Met Gly 1 5 10 <210> 155 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR1 (Exemplary) <400> 155 Gly Ser Ile Phe Ser Ile Asn Val Met Gly 1 5 10 <210> 156 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR1 (Exemplary) <400> 156 Gly Thr Ser Val Ser Ser Asn Ala Met Gly 1 5 10 <210> 157 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR1 (Exemplary) <400> 157 Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Gly 1 5 10 <210> 158 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR1 (Exemplary) <400> 158 Gly Ser Ser Val Ser Ser Asp Ala Met Gly 1 5 10 <210> 159 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR1 (Exemplary) <400> 159 Arg Ser Ile Gly Ser Ile Asn Val Met Gly 1 5 10 <210> 160 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR1 (Exemplary) <400> 160 Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 10 <210> 161 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR1 (Exemplary) <400> 161 Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr Ala Met Gly 1 5 10 <210> 162 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR1 (Exemplary) <400> 162 Gly Arg Thr Phe Thr Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 10 <210> 163 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR1 (Exemplary) <400> 163 Gly Arg Thr Leu Ser Phe Asn Thr Tyr Ala Met Gly 1 5 10 <210> 164 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH 2 CDR1 (Contact) <400> 164 Ser Ser Tyr Arg Met Gly 1 5 <210> 165 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR1 (Contact) <400> 165 Ser Ile Asn Val Met Gly 1 5 <210> 166 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR1 (Contact) <400> 166 Ser Ser Asn Ala Met Gly 1 5 <210> 167 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR1 (Contact) <400> 167 Ser Ser Tyr Ala Met Gly 1 5 <210> 168 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR1 (Contact) <400> 168 Ser Ser Asp Ala Met Gly 1 5 <210> 169 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR1 (Contact) <400> 169 Ser Ile Asn Val Met Gly 1 5 <210> 170 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR1 (Contact) <400> 170 Ser Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 <210> 171 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR1 (Contact) <400> 171 Thr Arg Tyr Ala Met Gly 1 5 <210> 172 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR1 (Contact) <400> 172 Thr Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 <210> 173 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR1 (Contact) <400> 173 Ser Phe Asn Thr Tyr Ala Met Gly 1 5 <210> 174 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH 2 CDR1 (AbM) <400> 174 Gly Leu Thr Phe Ser Ser Tyr Arg Met Gly 1 5 10 <210> 175 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR1 (AbM) <400> 175 Gly Ser Ile Phe Ser Ile Asn Val Met Gly 1 5 10 <210> 176 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR1 (AbM) <400> 176 Gly Thr Ser Val Ser Ser Asn Ala Met Gly 1 5 10 <210> 177 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR1 (AbM) <400> 177 Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Gly 1 5 10 <210> 178 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR1 (AbM) <400> 178 Gly Ser Ser Val Ser Ser Asp Ala Met Gly 1 5 10 <210> 179 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR1 (AbM) <400> 179 Arg Ser Ile Gly Ser Ile Asn Val Met Gly 1 5 10 <210> 180 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR1 (AbM) <400> 180 Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 10 <210> 181 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR1 (AbM) <400> 181 Gly Phe Thr Phe Thr Arg Tyr Ala Met Gly 1 5 10 <210> 182 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR1 (AbM) <400> 182 Gly Arg Thr Phe Thr Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 10 <210> 183 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR1 (AbM) <400> 183 Gly Arg Thr Leu Ser Phe Asn Thr Tyr Ala Met Gly 1 5 10 <210> 184 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH 2 CDR2 (Exemplary) <400> 184 Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr Tyr Ala Asp 1 5 10 15 Ser Val Lys Gly 20 <210> 185 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR2 (Exemplary) <400> 185 Arg Ile Asn Gly Gly Gly Ile Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 186 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR2 (Exemplary) <400> 186 Phe Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr Thr Ile Ala Thr Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 187 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR2 (Exemplary) <400> 187 Ala Ile Thr Trp Asn Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 188 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR2 (Exemplary) <400> 188 Phe Ile Ser Gly Gly Gly Thr Thr Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 189 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR2 (Exemplary) <400> 189 Arg Ile Thr Gly Gly Gly Ser Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 190 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR2 (Exemplary) <400> 190 Ala Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr Thr Tyr Ala Asp Pro Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 191 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR2 (Exemplary) <400> 191 Ala Ile Ser Trp Ser Gly Ser Ser Ala Gly Tyr Gly Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 192 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR2 (Exemplary) <400> 192 Ala Ile Arg Trp Ser Gly Gly Arg Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 193 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR2 (Exemplary) <400> 193 Ser Ile Thr Trp Asn Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 194 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR2 (Contact) <400> 194 Phe Val Ala Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr 1 5 10 15 <210> 195 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR2 (Contact) <400> 195 Leu Val Ala Arg Ile Asn Gly Gly Gly Ile Thr His 1 5 10 <210> 196 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR2 (Contact) <400> 196 Trp Val Gly Phe Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr Thr 1 5 10 <210> 197 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR2 (Contact) <400> 197 Phe Val Ala Ala Ile Thr Trp Asn Gly Gly Thr Thr Tyr 1 5 10 <210> 198 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR2 (Contact) <400> 198 Trp Val Ala Phe Ile Ser Gly Gly Gly Thr Thr Thr 1 5 10 <210> 199 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR2 (Contact) <400> 199 Leu Val Ala Arg Ile Thr Gly Gly Gly Ser Thr His 1 5 10 <210> 200 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR2 (Contact) <400> 200 Phe Val Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr Thr 1 5 10 <210> 201 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR2 (Contact) <400> 201 Phe Val Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Ser Ser Ala Gly 1 5 10 <210> 202 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR2 (Contact) <400> 202 Phe Val Ala Ala Ile Arg Trp Ser Gly Gly Arg Thr Leu 1 5 10 <210> 203 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR2 (Contact) <400> 203 Phe Val Ala Ser Ile Thr Trp Asn Gly Gly Ser Thr Ser 1 5 10 <210> 204 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH 2CDR2 (AbM) <400> 204 Ala Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg Tyr 1 5 10 <210> 205 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR2 (AbM) <400> 205 Arg Ile Asn Gly Gly Gly Ile Thr His 1 5 <210> 206 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR2 (AbM) <400> 206 Phe Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr Thr 1 5 <210> 207 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR2 (AbM) <400> 207 Ala Ile Thr Trp Asn Gly Gly Thr Thr Tyr 1 5 10 <210> 208 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR2 (AbM) <400> 208 Phe Ile Ser Gly Gly Gly Thr Thr Thr 1 5 <210> 209 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR2 (AbM) <400> 209 Arg Ile Thr Gly Gly Gly Ser Thr His 1 5 <210> 210 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR2 (AbM) <400> 210 Ala Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ser Thr Thr 1 5 10 <210> 211 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR2 (AbM) <400> 211 Ala Ile Ser Trp Ser Gly Ser Ser Ala Gly 1 5 10 <210> 212 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR2 (AbM) <400> 212 Ala Ile Arg Trp Ser Gly Gly Arg Thr Leu 1 5 10 <210> 213 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR2 (AbM) <400> 213 Ser Ile Thr Trp Asn Gly Gly Ser Thr Ser 1 5 10 <210> 214 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (Exemplary) <400> 214 Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 215 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (Exemplary) <400> 215 Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr Ala Thr 1 5 10 15 <210> 216 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR3 (Exemplary) <400> 216 Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr Tyr 1 5 10 <210> 217 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR3 (Exemplary) <400> 217 Pro Leu Thr Ala Arg 1 5 <210> 218 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR3 (Exemplary) <400> 218 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 219 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR3 (Exemplary) <400> 219 Pro Leu Thr Ser Arg 1 5 <210> 220 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR3 (Exemplary) <400> 220 Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val Arg Glu 1 5 10 15 Ile Pro Asp Tyr Asp Tyr 20 <210> 221 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (Exemplary) <400> 221 Gln Arg Gly Tyr 1 <210> 222 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR3 (Exemplary) <400> 222 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 223 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR3 (Exemplary) <400> 223 Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp Ser Pro 1 5 10 15 Ala Gly Tyr Asp Tyr 20 <210> 224 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR3 (Exemplary) <400> 224 Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala Asn Tyr 1 5 10 <210> 225 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (Contact) <400> 225 Ala Ala Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp 1 5 10 <210> 226 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (Contact) <400> 226 Ala Ala Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr Ala 1 5 10 15 <210> 227 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR3 (Contact) <400> 227 Lys Ala Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr 1 5 10 <210> 228 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR3 (Contact) <400> 228 Asn His Pro Leu Thr Ala 1 5 <210> 229 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR3 (Contact) <400> 229 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly 1 5 <210> 230 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR3 (Contact) <400> 230 Asn His Pro Leu Thr Ser 1 5 <210> 231 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR3 (Contact) <400> 231 Ala Ser Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val 1 5 10 15 Arg Glu Ile Pro Asp Tyr Asp 20 <210> 232 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (Contact) <400> 232 Asn Asp Gln Arg Gly 1 5 <210> 233 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR3 (Contact) <400> 233 Ala Ala Asp Pro Phe Asn Gln Gly 1 5 <210> 234 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR3 (Contact) <400> 234 Ala Ala Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp 1 5 10 15 Ser Pro Ala Gly Tyr Asp 20 <210> 235 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR3 (Contact) <400> 235 Ala Ala Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala Asn 1 5 10 15 <210> 236 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (AbM) <400> 236 Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 237 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (AbM) <400> 237 Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr Ala Thr 1 5 10 15 <210> 238 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR3 (AbM) <400> 238 Asp Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr Tyr 1 5 10 <210> 239 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR3 (AbM) <400> 239 Pro Leu Thr Ala Arg 1 5 <210> 240 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR3 (AbM) <400> 240 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 241 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR3 (AbM) <400> 241 Pro Leu Thr Ser Arg 1 5 <210> 242 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR3 (AbM) <400> 242 Met Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val Arg Glu 1 5 10 15 Ile Pro Asp Tyr Asp Tyr 20 <210> 243 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (AbM) <400> 243 Gln Arg Gly Tyr 1 <210> 244 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR3 (AbM) <400> 244 Asp Pro Phe Asn Gln Gly Tyr 1 5 <210> 245 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR3 (AbM) <400> 245 Asp Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp Ser Pro 1 5 10 15 Ala Gly Tyr Asp Tyr 20 <210> 246 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR3 (AbM) <400> 246 Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala Asn Tyr 1 5 10 <210> 247 <211> 113 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> hpIgR_073 <220> <221> MOD_RES <222> (96)..(96) <223> Any amino acid <220> <221> MOD_RES <222> (99)..(99) <223> Any amino acid <400> 247 Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Thr Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Trp Val 35 40 45 Gly Phe Ile Asp Arg Ile Ala Thr Thr Thr Ile Ala Thr Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Ala Ile Thr Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Gly Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Xaa 85 90 95 His Pro Xaa Thr Ala Arg Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 248 <211> 130 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> hpIgR_201 <400> 248 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Asn Ser Lys Tyr 20 25 30 Ala Met Ala Trp Phe Arg Arg Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Gln 35 40 45 Ala Ala Ile Asn Trp Ser Gly Ala Asn Thr Tyr Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Thr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asn Leu Asn Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ala Asp Asn Arg Ala Tyr Thr Tyr His Thr Phe Asp Tyr Tyr Gln 100 105 110 Thr Asp Ala Ser Tyr Val Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val 115 120 125 Ser Ser 130 <210> 249 <211> 127 <212> PRT <213> Mus sp. <220> <223> mpIgR_349 <400> 249 Gln Leu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Thr Ser 20 25 30 Thr Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val 35 40 45 Ala Ala Ile Gln Trp Ser Ser Ala Ser Ala Ser Thr Tyr Tyr Tyr Tyr 50 55 60 Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg 65 70 75 80 Asn Thr Val Ser Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala 85 90 95 Val Tyr Tyr Cys Ala Asn Leu Val Phe Arg Val Gly Ala Leu Lys Glu 100 105 110 Arg Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 250 <211> 110 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> hpIgR_D1 <400> 250 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile 85 90 95 Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser 100 105 110 <210> 251 <211> 110 <212> PRT <213> Mus sp. <220> <223> mpIgR_D1 <400> 251 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Gln Glu Val Ser Ser Ile Glu Gly Asp 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Asp Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Ser Gly Met Cys Thr Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Asn Gly Tyr Leu Ser Lys Glu Tyr Ser Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Ile Asn Phe Pro Glu Asn Asn Thr Phe Val Ile Asn Ile Glu 65 70 75 80 Gln Leu Thr Gln Asp Asp Thr Gly Ser Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Thr 85 90 95 Ser Asn Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser 100 105 110 <210> 252 <211> 110 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> Consensus <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> Glu or Gln <220> <221> MOD_RES <222> (11)..(11) <223> Asn or Ser <220> <221> MOD_RES <222> (16)..(16) <223> Asn or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (26)..(26) <223> Pro or Asp <220> <221> MOD_RES <222> (43)..(43) <223> Arg or Ser <220> <221> MOD_RES <222> (45)..(45) <223> Gly or Met <220> <221> MOD_RES <222> (47)..(47) <223> Ile or Thr <220> <221> MOD_RES <222> (53)..(53) <223> Glu or Asn <220> <221> MOD_RES <222> (58)..(58) <223> Ser or Lys <220> <221> MOD_RES <222> (59)..(59) <223> Lys or Glu <220> <221> MOD_RES <222> (67)..(67) <223> Thr or Ile <220> <221> MOD_RES <222> (73)..(73) <223> Gly or Asn <220> <221> MOD_RES <222> (80)..(80) <223> Ala or Glu <220> <221> MOD_RES <222> (89)..(89) <223> Arg or Ser <220> <221> MOD_RES <222> (96)..(96) <223> Ile or Thr <220> <221> MOD_RES <222> (97)..(97) <223> Asn or Ser <220> <221> MOD_RES <222> (98)..(98) <223> Ser or Asn <400> 252 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Xaa Glu Val Xaa Ser Ile Glu Gly Xaa 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Xaa Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Xaa Gly Xaa Cys Xaa Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Xaa Gly Tyr Leu Ser Xaa Xaa Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Xaa Asn Phe Pro Glu Asn Xaa Thr Phe Val Ile Asn Ile Xaa 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Xaa Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Xaa 85 90 95 Xaa Xaa Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser 100 105 110 <210> 253 <211> 113 <212> PRT <213> Oncorhynchus mykiss <220> <223> tpIgR_D1 <400> 253 Arg Val Thr Thr Val Gly Asp Leu Ala Val Leu Glu Gly Arg Ser Val 1 5 10 15 Met Ile Pro Cys His Tyr Gly Pro Gln Tyr Ala Ser Tyr Val Lys Tyr 20 25 30 Trp Cys Arg Gly Ser Val Lys Asp Leu Cys Thr Ser Leu Val Arg Ser 35 40 45 Asp Ala Pro Arg Gly Pro Ala Ala Ala Gly Glu Asp Lys Val Val Met 50 55 60 Phe Asp Asp Pro Val Gln Gln Val Phe Thr Val Thr Met Thr Glu Leu 65 70 75 80 Gln Lys Glu Asp Ser Gly Trp Tyr Trp Cys Gly Val Glu Val Gly Gly 85 90 95 Val Trp Ser Ala Asp Val Thr Ala Ser Leu His Ile Asn Val Ile Gln 100 105 110 Gly <210> 254 <211> 109 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> hpIgR_D1 <400> 254 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile 85 90 95 Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val 100 105 <210> 255 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> hD1_tCDR1 <400> 255 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Gly Pro Gln Tyr Ala Ser Tyr Arg 20 25 30 Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr Leu Ile 35 40 45 Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala Asn Leu 50 55 60 Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala Gln Leu 65 70 75 80 Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile Asn Ser 85 90 95 Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val 100 105 <210> 256 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> hD1_tCDR2 <400> 256 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Asp Ala Pro Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile 85 90 95 Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val 100 105 <210> 257 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <220> <223> hD1_tCDR3 <400> 257 Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn 1 5 10 15 Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His 20 25 30 Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr 35 40 45 Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala 65 70 75 80 Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Val 85 90 95 Gly Gly Val Trp Ser Ala Asp Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val 100 105 110 <210> 258 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR1 (Kabat) <400> 258 Phe Thr Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 <210> 259 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR1 (Kabat) - alternative <400> 259 Thr Tyr Arg Met Gly 1 5 <210> 260 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 260 Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr 1 5 <210> 261 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 261 Gly Gly Gly 1 <210> 262 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 262 Arg Ile Ala 1 <210> 263 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 263 Trp Asn Gly Gly 1 <210> 264 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 264 Gly Gly Gly 1 <210> 265 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 265 Gly Gly Gly 1 <210> 266 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 266 Trp Ser Gly Gly 1 <210> 267 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 267 Trp Ser Gly Ser 1 <210> 268 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 268 Trp Ser Gly Gly 1 <210> 269 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR2 (Chothia) - alternative <400> 269 Trp Asn Gly Gly 1 <210> 270 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 and VHH2 CDR2 (IMGT) - alternative <400> 270 Ile Asp Trp Asn Gly Arg Gly Thr Tyr Tyr Arg 1 5 10 <210> 271 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (Kabat) - alternative <400> 271 Gln Arg Gly Tyr 1 <210> 272 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 272 Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp 1 5 10 <210> 273 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 273 Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr Ala 1 5 10 <210> 274 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH3 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 274 Val Phe Gly Ser Ser Gly Tyr Val Glu Thr 1 5 10 <210> 275 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH4 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 275 Leu Thr Ala 1 <210> 276 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH5 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 276 Pro Phe Asn Gln Gly 1 5 <210> 277 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH6 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 277 Leu Thr Ser 1 <210> 278 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH7 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 278 Val Asn Pro Ile Ile Thr Ala Trp Gly Thr Ile Gly Val Arg Glu Ile 1 5 10 15 Pro Asp Tyr Asp 20 <210> 279 <211> 2 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH9 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 279 Arg Gly 1 <210> 280 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH10 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 280 Pro Phe Asn Gln Gly 1 5 <210> 281 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH11 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 281 Leu Ala Glu Tyr Ser Gly Thr Tyr Ser Ser Pro Ala Asp Ser Pro Ala 1 5 10 15 Gly Tyr Asp <210> 282 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH12 CDR3 (Chothia) - alternative <400> 282 Arg Tyr Tyr Val Ser Gly Thr Tyr Phe Pro Ala Asn 1 5 10 <210> 283 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH1 CDR3 (IMGT) - alternative <400> 283 Ala Ala Gly Ser Ile Asp Leu Asn Trp Tyr Gly Gly Met Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 284 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> VHH2 CDR3 (IMGT) - alternative <400> 284 Ala Ala Thr Thr Val Leu Thr Asp Pro Arg Val Leu Asn Glu Tyr Ala 1 5 10 15 Thr

Claims (148)

  1. 중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)-발현 세포의 정점 표면(apical surface)으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면(basolateral surface)으로 단일 도메인 항체 또는 치료 분자를 전달하기 위한 방법으로서, pIgR-발현 세포를 단일 도메인 항체 또는 치료 분자와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 단일 도메인 항체는 pIgR에 결합하고 치료 분자는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는, 방법.
  2. 대상의 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 치료 분자를 수송하는 방법으로서, 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  3. 제2항에 있어서, 치료 분자가 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는, 방법.
  4. 치료 분자를 대상의 전신 순환으로 수송하는 방법으로서, 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는, 방법.
  5. 치료 분자를 대상의 고유층(lamina propria) 또는 위장관으로 수송하는 방법으로서, 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 치료 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는, 방법.
  6. 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 치료제가 대상에서 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 수송되는, 방법.
  7. 제1항 또는 제6항에 있어서, 단일 도메인 항체 또는 제제 및 단일 도메인 항체를 포함하는 치료 분자가 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로 수송될 수 있는, 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR-발현 세포가 상피 세포인, 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상피 세포가 장 내강 세포 또는 기도 상피 세포인, 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 당뇨병 약제인, 방법.
  11. 제10항에 있어서, 당뇨병 약제가 인슐린, 글루카곤-유사-펩티드-1, 인슐린-모방 펩티드, 및 글루카곤-유사-펩티드-1-모방 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  12. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 펩티드 또는 항체 또는 이의 단편인, 방법.
  13. 제12항에 있어서, 항체 또는 이의 단편이 항-TNF-알파 항체 또는 이의 단편, 항-IL23 항체 또는 이의 단편, IL23의 수용체에 결합하는 항체 또는 이의 단편, 또는 IL23의 수용체의 억제제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  14. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 백신인, 방법.
  15. 제14항에 있어서, 백신이 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이로 이루어진 군으로부터 선택된 감염을 예방하기 위한 것인, 방법.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1, 세포외 도메인 2, 세포외 도메인 1-2, 세포외 도메인 3, 세포외 도메인 2-3, 세포외 도메인 4-5, 또는 세포외 도메인 5에 결합하는, 방법.
  17. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1에 결합하는, 방법.
  18. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 2에 결합하는, 방법.
  19. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1-2에 결합하는, 방법.
  20. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 3에 결합하는, 방법.
  21. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 2-3에 결합하는, 방법.
  22. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 4-5에 결합하는, 방법.
  23. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 5에 결합하는, 방법.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR에 대한 IgA 결합과 경쟁하는, 방법.
  25. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR에 대한 IgA 결합을 촉진하는, 방법.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 4 내지 약 525 nM인, 방법.
  27. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 50 nM 미만인, 방법.
  28. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 4 내지 약 34 nM인, 방법.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체의 Tm이 약 53 내지 약 77℃인, 방법.
  30. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체의 Tm이 53.9 내지 76.4℃인, 방법.
  31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR이 인간 pIgR인, 방법.
  32. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR이 마우스 pIgR인, 방법.
  33. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 인간 pIgR의 줄기 서열(stalk sequence) 및/또는 마우스 pIgR의 줄기 서열에 결합하지 않는, 방법.
  34. 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61), DVFGSSGYVETY(서열 번호 62), PLTAR(서열 번호 63), DPFNQGY(서열 번호 64), PLTSR(서열 번호 65), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71), SIDLNWYGGMD(서열 번호 272), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72), TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273), DVFGSSGYVETY(서열 번호 73), VFGSSGYVET(서열 번호 274), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), DPFNQGY(서열 번호 75), PFNQG(서열 번호 276), PLTSR(서열 번호 76), LTS(서열 번호 277), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82), AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283), CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83), AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284), KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84), NHPLTAR(서열 번호 85), AADPFNQGY(서열 번호 86), NHPLTSR(서열 번호 87), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215), DVFGSSGYVETY(서열 번호 216), PLTAR(서열 번호 217), DPFNQGY(서열 번호 218), PLTSR(서열 번호 219), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225), AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226), KADVFGSSGYVET(서열 번호 227), NHPLTA(서열 번호 228), AADPFNQG(서열 번호 229), NHPLTS(서열 번호 230), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237), DVFGSSGYVETY(서열 번호 238), PLTAR(서열 번호 239), DPFNQGY(서열 번호 240), PLTSR(서열 번호 241), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함하는, 방법.
  35. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DWNGRGTYY(서열 번호 40), WNGRGTY(서열 번호 260), NGGGI(서열 번호 41), GGG(서열 번호 261), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TWNGGT(서열 번호 43), WNGG(서열 번호 263), SGGGT(서열 번호 44), GGG(서열 번호 264), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDWNGRGTYY(서열 번호 50), IDWNGRGTYYR(서열 번호 270), INGGGIT(서열 번호 51), IDRIATT(서열 번호 52), ITWNGGTT(서열 번호 53), ISGGGTT(서열 번호 54), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194), LVARINGGGITH(서열 번호 195), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197), WVAFISGGGTTT(서열 번호 198), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204), RINGGGITH(서열 번호 205), FIDRIATTT(서열 번호 206), AITWNGGTTY(서열 번호 207), FISGGGTTT(서열 번호 208), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), 또는 SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함하는, 방법.
  36. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 SYRMG(서열 번호 1), INVMG(서열 번호 2), SNAMG(서열 번호 3), SYAMG(서열 번호 4), SDAMG(서열 번호 5), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GLTFSSY(서열 번호 10), GSIFSIN(서열 번호 11), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), GSSVSSD(서열 번호 14), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GLTFSSYR(서열 번호 20), GSIFSINV(서열 번호 21), GTSVSSNA(서열 번호 22), GRTFSSYA(서열 번호 23), GSSVSSDA(서열 번호 24), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GLTFSSYRMG(서열 번호 154), GSIFSINVMG(서열 번호 155), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), GRTFSSYAMG(서열 번호 157), GSSVSSDAMG(서열 번호 158), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSYRMG(서열 번호 164), SINVMG(서열 번호 165), SSNAMG(서열 번호 166), SSYAMG(서열 번호 167), SSDAMG(서열 번호 168), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GLTFSSYRMG(서열 번호 174), GSIFSINVMG(서열 번호 175), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), GRTFSSYAMG(서열 번호 177), GSSVSSDAMG(서열 번호 178), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함하는, 방법.
  37. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함하는, 방법:
    a) VHH1:
    i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60)의 CDR3 서열;
    ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71) 또는 SIDLNWYGGMD(서열 번호 272)의 CDR3 서열;
    iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82) 또는 AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283)의 CDR3 서열;
    iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR 2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214)의 CDR3 서열;
    v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236)의 CDR3 서열;
    b) VHH2:
    i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열;
    ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열;
    iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열;
    iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열;
    v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열;
    c) VHH3:
    i) INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열;
    ii) GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열;
    iii) GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열;
    iv) GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열;
    v) SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열;
    d) VHH4:
    i) SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열;
    ii) GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열;
    iii) GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열, 및 NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열;
    iv) GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열;
    v) SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열, 및 NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열;
    e) VHH5:
    i) SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열;
    v) SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열;
    f) VHH6:
    i) SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열;
    ii) GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열;
    iii) GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열, 및 NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열;
    iv) GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열;
    v) SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열, 및 NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열;
    g) VHH7:
    i) INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열;
    ii) RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열;
    iii) RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열;
    iv) RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열;
    v) SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열; 또는
    vi) RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열;
    h) VHH9:
    i) TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열, 및 NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열;
    v) STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열, 및 NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열;
    i) VHH10:
    i) RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열;
    ii) GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열, SWSGSS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열;
    iii) GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열;
    iv) GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열;
    v) TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열;
    j) VHH11:
    i) FTTYRMG(서열 번호 258) 또는 TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열;
    v) TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열; 및
    k) VHH12:
    i) FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열;
    ii) GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열;
    iii) GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열;
    iv) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열;
    v) SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열.
  38. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열을 포함하는 단일 도메인 항체 중 임의의 것의 프레임워크로부터 유래된 프레임워크를 포함하는, 방법.
  39. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열을 포함하는 프레임워크를 포함하는, 방법.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열로 구성되는, 방법.
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합되는, 방법.
  42. 제41항에 있어서, 단일 도메인 항체와 제제 사이에 링커를 추가로 포함하는, 방법.
  43. 제42항에 있어서, 링커가 폴리펩티드인, 방법.
  44. 제43항에 있어서, 링커가 EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130), (EAAAK)n(서열 번호 147), (GGGGS)n(서열 번호 148), 및 (GGGS)n(서열 번호 149)으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 가요성 링커이며, 여기서 n은 1 내지 20의 정수인, 방법.
  45. 제41항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 화학적으로 접합되는, 방법.
  46. 제41항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 비공유 결합되는, 방법.
  47. 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, IgA의 pIgR-매개 세포통과(transcytosis)를 억제하지 않는, 방법.
  48. 제47항에 있어서, 단일 도메인 항체가 SNAMG(서열 번호 3), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GTSVSSNA(서열 번호 22), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSNAMG(서열 번호 166), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함하는, 방법.
  49. 제47항 또는 제48항에 있어서, 단일 도메인 항체가 FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDRIATT(서열 번호 52), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), FIDRIATTT(서열 번호 206), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), 또는 SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함하는, 방법.
  50. 제47항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 PLTAR(서열 번호 63), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), NHPLTAR(서열 번호 85), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), PLTAR(서열 번호 217), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), NHPLTA(서열 번호 228), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), PLTAR(서열 번호 239), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함하는, 방법.
  51. 분자를 대상에게 제공하기 위한 공정으로서, 제제 및 중합체성 면역글로불린 수용체(pIgR)에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는 분자를 대상에게 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달, 또는 흡입 전달을 통해 대상에게 투여되는, 공정.
  52. 제51항에 있어서, 분자가 대상에서 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로 제공될 수 있는, 공정.
  53. 제51항 또는 제52항에 있어서, 분자가 대상에서 pIgR-발현 세포의 기저측 표면으로부터 pIgR-발현 세포의 정점 표면으로 제공될 수 있는, 공정.
  54. 제51항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR-발현 세포가 상피 세포인, 공정.
  55. 제54항에 있어서, 상피 세포가 장 내강 세포 또는 기도 상피 세포인, 공정.
  56. 제51항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 당뇨병 약제인, 공정.
  57. 제56항에 있어서, 당뇨병 약제가 인슐린, 글루카곤-유사-펩티드-1, 인슐린-모방 펩티드, 및 글루카곤-유사-펩티드-1-모방 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택되는, 공정.
  58. 제51항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 펩티드 또는 항체 또는 이의 단편인, 공정.
  59. 제58항에 있어서, 항체 또는 이의 단편이 항-TNF-알파 항체 또는 이의 단편, 항-IL23 항체 또는 이의 단편, 및 IL23의 수용체에 결합하는 항체 또는 이의 단편으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 공정.
  60. 제51항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 백신인, 공정.
  61. 제60항에 있어서, 백신이 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이로 이루어진 군으로부터 선택된 감염을 예방하기 위한 것인, 공정.
  62. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1, 세포외 도메인 2, 세포외 도메인 1-2, 세포외 도메인 3, 세포외 도메인 2-3, 세포외 도메인 4-5, 또는 세포외 도메인 5에 결합하는, 공정.
  63. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1에 결합하는, 공정.
  64. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 2에 결합하는, 공정.
  65. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1-2에 결합하는, 공정.
  66. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 3에 결합하는, 공정.
  67. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 2-3에 결합하는, 공정.
  68. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 4-5에 결합하는, 공정.
  69. 제51항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 5에 결합하는, 공정.
  70. 제51항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR에 대한 IgA 결합과 경쟁하는, 공정.
  71. 제51항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR에 대한 IgA 결합을 촉진하는, 공정.
  72. 제51항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 4 내지 약 525 nM인, 공정.
  73. 제51항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 50 nM 미만인, 공정.
  74. 제51항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 4 내지 약 34 nM인, 공정.
  75. 제51항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체의 Tm이 약 53 내지 약 77℃인, 공정.
  76. 제51항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체의 Tm이 53.9 내지 76.4℃인, 공정.
  77. 제51항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR이 인간 pIgR인, 공정.
  78. 제51항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR이 마우스 pIgR인, 공정.
  79. 제51항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 인간 pIgR의 줄기 서열 및/또는 마우스 pIgR의 줄기 서열에 결합하지 않는, 공정.
  80. 제51항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61), DVFGSSGYVETY(서열 번호 62), PLTAR(서열 번호 63), DPFNQGY(서열 번호 64), PLTSR(서열 번호 65), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71), SIDLNWYGGMD(서열 번호 272), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72), TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273), DVFGSSGYVETY(서열 번호 73), VFGSSGYVET(서열 번호 274), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), DPFNQGY(서열 번호 75), PFNQG(서열 번호 276), PLTSR(서열 번호 76), LTS(서열 번호 277), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82), AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283), CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83), AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284), KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84), NHPLTAR(서열 번호 85), AADPFNQGY(서열 번호 86), NHPLTSR(서열 번호 87), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215), DVFGSSGYVETY(서열 번호 216), PLTAR(서열 번호 217), DPFNQGY(서열 번호 218), PLTSR(서열 번호 219), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225), AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226), KADVFGSSGYVET(서열 번호 227), NHPLTA(서열 번호 228), AADPFNQG(서열 번호 229), NHPLTS(서열 번호 230), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237), DVFGSSGYVETY(서열 번호 238), PLTAR(서열 번호 239), DPFNQGY(서열 번호 240), PLTSR(서열 번호 241), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함하는, 공정.
  81. 제51항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DWNGRGTYY(서열 번호 40), WNGRGTY(서열 번호 260), NGGGI(서열 번호 41), GGG(서열 번호 261), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TWNGGT(서열 번호 43), WNGG(서열 번호 263), SGGGT(서열 번호 44), GGG(서열 번호 264), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDWNGRGTYY(서열 번호 50), IDWNGRGTYYR(서열 번호 270), INGGGIT(서열 번호 51), IDRIATT(서열 번호 52), ITWNGGTT(서열 번호 53), ISGGGTT(서열 번호 54), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194), LVARINGGGITH(서열 번호 195), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197), WVAFISGGGTTT(서열 번호 198), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204), RINGGGITH(서열 번호 205), FIDRIATTT(서열 번호 206), AITWNGGTTY(서열 번호 207), FISGGGTTT(서열 번호 208), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), 또는 SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함하는, 공정.
  82. 제51항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 SYRMG(서열 번호 1), INVMG(서열 번호 2), SNAMG(서열 번호 3), SYAMG(서열 번호 4), SDAMG(서열 번호 5), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GLTFSSY(서열 번호 10), GSIFSIN(서열 번호 11), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), GSSVSSD(서열 번호 14), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GLTFSSYR(서열 번호 20), GSIFSINV(서열 번호 21), GTSVSSNA(서열 번호 22), GRTFSSYA(서열 번호 23), GSSVSSDA(서열 번호 24), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GLTFSSYRMG(서열 번호 154), GSIFSINVMG(서열 번호 155), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), GRTFSSYAMG(서열 번호 157), GSSVSSDAMG(서열 번호 158), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSYRMG(서열 번호 164), SINVMG(서열 번호 165), SSNAMG(서열 번호 166), SSYAMG(서열 번호 167), SSDAMG(서열 번호 168), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GLTFSSYRMG(서열 번호 174), GSIFSINVMG(서열 번호 175), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), GRTFSSYAMG(서열 번호 177), GSSVSSDAMG(서열 번호 178), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함하는, 공정.
  83. 제51항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함하는, 공정:
    a) VHH1:
    i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60)의 CDR3 서열;
    ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71) 또는 SIDLNWYGGMD(서열 번호 272)의 CDR3 서열;
    iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82) 또는 AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283)의 CDR3 서열;
    iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR 2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214)의 CDR3 서열;
    v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236)의 CDR3 서열;
    b) VHH2:
    i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열;
    ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열;
    iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열;
    iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열;
    v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열;
    c) VHH3:
    i) INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열;
    ii) GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열;
    iii) GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열;
    iv) GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열;
    v) SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열;
    d) VHH4:
    i) SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열;
    ii) GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열;
    iii) GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열, 및 NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열;
    iv) GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열;
    v) SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열, 및 NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열;
    e) VHH5:
    i) SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열;
    v) SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열;
    f) VHH6:
    i) SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열;
    ii) GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열;
    iii) GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열, 및 NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열;
    iv) GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열;
    v) SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열, 및 NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열;
    g) VHH7:
    i) INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열;
    ii) RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열;
    iii) RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열;
    iv) RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열;
    v) SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열; 또는
    vi) RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열;
    h) VHH9:
    i) TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열, 및 NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열;
    v) STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열, 및 NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열;
    i) VHH10:
    i) RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열;
    ii) GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열, SWSGSS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열;
    iii) GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열;
    iv) GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열;
    v) TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열;
    j) VHH11:
    i) FTTYRMG(서열 번호 258) 또는 TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열;
    v) TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열; 및
    k) VHH12:
    i) FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열;
    ii) GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열;
    iii) GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열;
    iv) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열;
    v) SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열.
  84. 제51항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열을 포함하는 단일 도메인 항체 중 임의의 것의 프레임워크로부터 유래된 프레임워크를 포함하는, 공정.
  85. 제51항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열을 포함하는 프레임워크를 포함하는, 공정.
  86. 제51항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열로 구성되는, 공정.
  87. 제51항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합되는, 공정.
  88. 제87항에 있어서, 단일 도메인 항체와 제제 사이에 링커를 추가로 포함하는, 공정.
  89. 제88항에 있어서, 링커가 폴리펩티드인, 공정.
  90. 제89항에 있어서, 링커가 EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130), (EAAAK)n(서열 번호 147), (GGGGS)n(서열 번호 148), 및 (GGGS)n(서열 번호 149)으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 가요성 링커이며, 여기서 n은 1 내지 20의 정수인, 공정.
  91. 제87항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 화학적으로 접합되는, 공정.
  92. 제87항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 비공유 결합되는, 공정.
  93. 제51항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, IgA의 pIgR-매개 세포통과를 억제하지 않는, 공정.
  94. 제93항에 있어서, 단일 도메인 항체가 SNAMG(서열 번호 3), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GTSVSSNA(서열 번호 22), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSNAMG(서열 번호 166), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함하는, 공정.
  95. 제93항 또는 제94항에 있어서, 단일 도메인 항체가 FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDRIATT(서열 번호 52), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), FIDRIATTT(서열 번호 206), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함하는, 공정.
  96. 제93항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 PLTAR(서열 번호 63), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), NHPLTAR(서열 번호 85), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), PLTAR(서열 번호 217), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), NHPLTA(서열 번호 228), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), PLTAR(서열 번호 239), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함하는, 공정.
  97. 대상에게 분자를 제공하기 위한 단계를 포함하는, 공정.
  98. 제97항에 있어서, 분자가 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는, 공정.
  99. 제98항에 있어서, 제제가 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 백신, 소분자, 폴리뉴클레오티드, 방사성 동위원소, 독소, 효소, 항응고제, 호르몬, 사이토카인, 항-염증성 분자, RNAi, 항생제, 또는 항체-항생제 접합체인, 공정.
  100. 제97항 내지 제99항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 또는 백신인, 공정.
  101. 제98항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합되는, 공정.
  102. 분자를 대상의 고유층에 제공하기 위한 시스템으로서, 대상에게 투여하기에 적합한 분자를 포함하며, 분자는 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하고, 여기서 분자는 경구 전달, 협측 전달, 비강 전달 또는 흡입 전달, 또는 이들의 조합을 통해 대상에게 투여되는, 시스템.
  103. 제102항에 있어서, 제제가 당뇨병 약제인, 시스템.
  104. 제103항에 있어서, 당뇨병 약제가 인슐린, 글루카곤-유사-펩티드-1, 인슐린-모방 펩티드, 및 글루카곤-유사-펩티드-1-모방 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택되는, 시스템.
  105. 제102항에 있어서, 제제가 펩티드 또는 항체 또는 이의 단편인, 시스템.
  106. 제105항에 있어서, 항체 또는 이의 단편이 항-TNF-알파 항체 또는 이의 단편, 항-IL23 항체 또는 이의 단편, 및 IL23의 수용체에 결합하는 항체 또는 이의 단편으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 시스템.
  107. 제102항에 있어서, 제제가 백신인, 시스템.
  108. 제107항에 있어서, 백신이 비브리오, 콜레라, 티포이드, 로타바이러스, 투베르쿨로시스, HIV, 인플루엔자, 에볼라, 및 센다이로 이루어진 군으로부터 선택된 감염을 예방하기 위한 것인, 시스템.
  109. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1, 세포외 도메인 2, 세포외 도메인 1-2, 세포외 도메인 3, 세포외 도메인 2-3, 세포외 도메인 4-5, 또는 세포외 도메인 5에 결합하는, 시스템.
  110. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1에 결합하는, 시스템.
  111. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 2에 결합하는, 시스템.
  112. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 1-2에 결합하는, 시스템.
  113. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 3에 결합하는, 시스템.
  114. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 2-3에 결합하는, 시스템.
  115. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 4-5에 결합하는, 시스템.
  116. 제102항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR의 세포외 도메인 5에 결합하는, 시스템.
  117. 제102항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR에 대한 IgA 결합과 경쟁하는, 시스템.
  118. 제102항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 pIgR에 대한 IgA 결합을 촉진하는, 시스템.
  119. 제102항 내지 제118항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 4 내지 약 525 nM인, 시스템.
  120. 제102항 내지 제118항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 50 nM 미만인, 시스템.
  121. 제102항 내지 제118항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR에 대한 단일 도메인 항체의 결합의 KD가 약 4 내지 약 34 nM인, 시스템.
  122. 제102항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체의 Tm이 약 53 내지 약 77℃인, 시스템.
  123. 제102항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체의 Tm이 53.9 내지 76.4℃인, 시스템.
  124. 제102항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR이 인간 pIgR인, 시스템.
  125. 제102항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, pIgR이 마우스 pIgR인, 시스템.
  126. 제102항 내지 제123항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 인간 pIgR의 줄기 서열 및/또는 마우스 pIgR의 줄기 서열에 결합하지 않는, 시스템.
  127. 제102항 내지 제126항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61), DVFGSSGYVETY(서열 번호 62), PLTAR(서열 번호 63), DPFNQGY(서열 번호 64), PLTSR(서열 번호 65), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71), SIDLNWYGGMD(서열 번호 272), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72), TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273), DVFGSSGYVETY(서열 번호 73), VFGSSGYVET(서열 번호 274), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), DPFNQGY(서열 번호 75), PFNQG(서열 번호 276), PLTSR(서열 번호 76), LTS(서열 번호 277), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82), AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283), CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83), AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284), KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84), NHPLTAR(서열 번호 85), AADPFNQGY(서열 번호 86), NHPLTSR(서열 번호 87), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215), DVFGSSGYVETY(서열 번호 216), PLTAR(서열 번호 217), DPFNQGY(서열 번호 218), PLTSR(서열 번호 219), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225), AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226), KADVFGSSGYVET(서열 번호 227), NHPLTA(서열 번호 228), AADPFNQG(서열 번호 229), NHPLTS(서열 번호 230), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236), TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237), DVFGSSGYVETY(서열 번호 238), PLTAR(서열 번호 239), DPFNQGY(서열 번호 240), PLTSR(서열 번호 241), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함하는, 시스템.
  128. 제102항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DWNGRGTYY(서열 번호 40), WNGRGTY(서열 번호 260), NGGGI(서열 번호 41), GGG(서열 번호 261), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TWNGGT(서열 번호 43), WNGG(서열 번호 263), SGGGT(서열 번호 44), GGG(서열 번호 264), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDWNGRGTYY(서열 번호 50), IDWNGRGTYYR(서열 번호 270), INGGGIT(서열 번호 51), IDRIATT(서열 번호 52), ITWNGGTT(서열 번호 53), ISGGGTT(서열 번호 54), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184), RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187), FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194), LVARINGGGITH(서열 번호 195), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197), WVAFISGGGTTT(서열 번호 198), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204), RINGGGITH(서열 번호 205), FIDRIATTT(서열 번호 206), AITWNGGTTY(서열 번호 207), FISGGGTTT(서열 번호 208), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), 또는 SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함하는, 시스템.
  129. 제102항 내지 제128항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 SYRMG(서열 번호 1), INVMG(서열 번호 2), SNAMG(서열 번호 3), SYAMG(서열 번호 4), SDAMG(서열 번호 5), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GLTFSSY(서열 번호 10), GSIFSIN(서열 번호 11), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), GSSVSSD(서열 번호 14), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GLTFSSYR(서열 번호 20), GSIFSINV(서열 번호 21), GTSVSSNA(서열 번호 22), GRTFSSYA(서열 번호 23), GSSVSSDA(서열 번호 24), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GLTFSSYRMG(서열 번호 154), GSIFSINVMG(서열 번호 155), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), GRTFSSYAMG(서열 번호 157), GSSVSSDAMG(서열 번호 158), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSYRMG(서열 번호 164), SINVMG(서열 번호 165), SSNAMG(서열 번호 166), SSYAMG(서열 번호 167), SSDAMG(서열 번호 168), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GLTFSSYRMG(서열 번호 174), GSIFSINVMG(서열 번호 175), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), GRTFSSYAMG(서열 번호 177), GSSVSSDAMG(서열 번호 178), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함하는, 시스템.
  130. 제102항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 도메인 항체의 CDR1 서열, CDR2 서열, 및 CDR3 서열을 포함하는, 시스템:
    a) VHH1:
    i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 60)의 CDR3 서열;
    ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 71) 또는 SIDLNWYGGMD(서열 번호 272)의 CDR3 서열;
    iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 82) 또는 AAGSIDLNWYGGMDY(서열 번호 283)의 CDR3 서열;
    iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR 2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 214)의 CDR3 서열;
    v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AAGSIDLNWYGGMD(서열 번호 225)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 GSIDLNWYGGMDY(서열 번호 236)의 CDR3 서열;
    b) VHH2:
    i) SYRMG(서열 번호 1)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 30)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 61)의 CDR3 서열;
    ii) GLTFSSY(서열 번호 10)의 CDR1 서열, DWNGRGTYY(서열 번호 40) 또는 WNGRGTY(서열 번호 260)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 72) 또는 TVLTDPRVLNEYA(서열 번호 273)의 CDR3 서열;
    iii) GLTFSSYR(서열 번호 20)의 CDR1 서열, IDWNGRGTYY(서열 번호 50) 또는 IDWNGRGTYYR(서열 번호 270)의 CDR2 서열, 및 CAATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 83) 또는 AATTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 284)의 CDR3 서열;
    iv) GLTFSSYRMG(서열 번호 154)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRYYADSVKG(서열 번호 184)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 215)의 CDR3 서열;
    v) SSYRMG(서열 번호 164)의 CDR1 서열, FVAAIDWNGRGTYYRY(서열 번호 194)의 CDR2 서열, 및 AATTVLTDPRVLNEYA(서열 번호 226)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GLTFSSYRMG(서열 번호 174)의 CDR1 서열, AIDWNGRGTYYRY(서열 번호 204)의 CDR2 서열, 및 TTVLTDPRVLNEYAT(서열 번호 237)의 CDR3 서열;
    c) VHH3:
    i) INVMG(서열 번호 2)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 31)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 62)의 CDR3 서열;
    ii) GSIFSIN(서열 번호 11)의 CDR1 서열, NGGGI(서열 번호 41) 또는 GGG(서열 번호 261)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 73) 또는 VFGSSGYVET(서열 번호 274)의 CDR3 서열;
    iii) GSIFSINV(서열 번호 21)의 CDR1 서열, INGGGIT(서열 번호 51)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVETY(서열 번호 84)의 CDR3 서열;
    iv) GSIFSINVMG(서열 번호 155)의 CDR1 서열, RINGGGITHYAESVKG(서열 번호 185)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 216)의 CDR3 서열;
    v) SINVMG(서열 번호 165)의 CDR1 서열, LVARINGGGITH(서열 번호 195)의 CDR2 서열, 및 KADVFGSSGYVET(서열 번호 227)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GSIFSINVMG(서열 번호 175)의 CDR1 서열, RINGGGITH(서열 번호 205)의 CDR2 서열, 및 DVFGSSGYVETY(서열 번호 238)의 CDR3 서열;
    d) VHH4:
    i) SNAMG(서열 번호 3)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 63)의 CDR3 서열;
    ii) GTSVSSN(서열 번호 12)의 CDR1 서열, DRIAT(서열 번호 42) 또는 RIA(서열 번호 262)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 74) 또는 LTA(서열 번호 275)의 CDR3 서열;
    iii) GTSVSSNA(서열 번호 22)의 CDR1 서열, IDRIATT(서열 번호 52)의 CDR2 서열, 및 NHPLTAR(서열 번호 85)의 CDR3 서열;
    iv) GTSVSSNAMG(서열 번호 156)의 CDR1 서열, FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 217)의 CDR3 서열;
    v) SSNAMG(서열 번호 166)의 CDR1 서열, WVGFIDRIATTT(서열 번호 196)의 CDR2 서열, 및 NHPLTA(서열 번호 228)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GTSVSSNAMG(서열 번호 176)의 CDR1 서열, FIDRIATTT(서열 번호 206)의 CDR2 서열, 및 PLTAR(서열 번호 239)의 CDR3 서열;
    e) VHH5:
    i) SYAMG(서열 번호 4)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 33)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 64)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFSSY(서열 번호 13)의 CDR1 서열, TWNGGT(서열 번호 43) 또는 WNGG(서열 번호 263)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 75) 또는 PFNQG(서열 번호 276)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFSSYA(서열 번호 23)의 CDR1 서열, ITWNGGTT(서열 번호 53)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 86)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFSSYAMG(서열 번호 157)의 CDR1 서열, AITWNGGTTYYADSVKG(서열 번호 187)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 218)의 CDR3 서열;
    v) SSYAMG(서열 번호 167)의 CDR1 서열, FVAAITWNGGTTY(서열 번호 197)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 229)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFSSYAMG(서열 번호 177)의 CDR1 서열, AITWNGGTTY(서열 번호 207)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 240)의 CDR3 서열;
    f) VHH6:
    i) SDAMG(서열 번호 5)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 34)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 65)의 CDR3 서열;
    ii) GSSVSSD(서열 번호 14)의 CDR1 서열, SGGGT(서열 번호 44) 또는 GGG(서열 번호 264)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 76) 또는 LTS(서열 번호 277)의 CDR3 서열;
    iii) GSSVSSDA(서열 번호 24)의 CDR1 서열, ISGGGTT(서열 번호 54)의 CDR2 서열, 및 NHPLTSR(서열 번호 87)의 CDR3 서열;
    iv) GSSVSSDAMG(서열 번호 158)의 CDR1 서열, FISGGGTTTYADSVKG(서열 번호 188)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 219)의 CDR3 서열;
    v) SSDAMG(서열 번호 168)의 CDR1 서열, WVAFISGGGTTT(서열 번호 198)의 CDR2 서열, 및 NHPLTS(서열 번호 230)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GSSVSSDAMG(서열 번호 178)의 CDR1 서열, FISGGGTTT(서열 번호 208)의 CDR2 서열, 및 PLTSR(서열 번호 241)의 CDR3 서열;
    g) VHH7:
    i) INVMG(서열 번호 6)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66)의 CDR3 서열;
    ii) RSIGSIN(서열 번호 15)의 CDR1 서열, TGGGS(서열 번호 45) 또는 GGG(서열 번호 265)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77) 또는 VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278)의 CDR3 서열;
    iii) RSIGSINV(서열 번호 25)의 CDR1 서열, ITGGGST(서열 번호 55)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88)의 CDR3 서열;
    iv) RSIGSINVMG(서열 번호 159)의 CDR1 서열, RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220)의 CDR3 서열;
    v) SINVMG(서열 번호 169)의 CDR1 서열, LVARITGGGSTH(서열 번호 199)의 CDR2 서열, 및 ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231)의 CDR3 서열; 또는
    vi) RSIGSINVMG(서열 번호 179)의 CDR1 서열, RITGGGSTH(서열 번호 209)의 CDR2 서열, 및 MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242)의 CDR3 서열;
    h) VHH9:
    i) TYRMG(서열 번호 7)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 67) 또는 QRGY(서열 번호 271)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFSTY(서열 번호 16)의 CDR1 서열, SWSGGS(서열 번호 46) 또는 WSGG(서열 번호 266)의 CDR2 서열, 및 DQRGY(서열 번호 78) 또는 RG(서열 번호 279)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFSTYR(서열 번호 26)의 CDR1 서열, ISWSGGST(서열 번호 56)의 CDR2 서열, 및 NDQRGY(서열 번호 89)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFSTYRMG(서열 번호 160)의 CDR1 서열, AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 221)의 CDR3 서열;
    v) STYRMG(서열 번호 170)의 CDR1 서열, FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200)의 CDR2 서열, 및 NDQRG(서열 번호 232)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFSTYRMG(서열 번호 180)의 CDR1 서열, AISWSGGSTT(서열 번호 210)의 CDR2 서열, 및 QRGY(서열 번호 243)의 CDR3 서열;
    i) VHH10:
    i) RYAMG(서열 번호 8)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 68)의 CDR3 서열;
    ii) GFTFTRY(서열 번호 17)의 CDR1 서열, SWSGSS(서열 번호 47) 또는 WSGS(서열 번호 267)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 79) 또는 PFNQG(서열 번호 280)의 CDR3 서열;
    iii) GFTFTRYA(서열 번호 27)의 CDR1 서열, ISWSGSSA(서열 번호 57)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQGY(서열 번호 90)의 CDR3 서열;
    iv) GFTFTRYAMG(서열 번호 161)의 CDR1 서열, AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 222)의 CDR3 서열;
    v) TRYAMG(서열 번호 171)의 CDR1 서열, FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201)의 CDR2 서열, 및 AADPFNQG(서열 번호 233)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GFTFTRYAMG(서열 번호 181)의 CDR1 서열, AISWSGSSAG(서열 번호 211)의 CDR2 서열, 및 DPFNQGY(서열 번호 244)의 CDR3 서열;
    j) VHH11:
    i) FTTYRMG(서열 번호 258) 또는 TYRMG(서열 번호 259)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69)의 CDR3 서열;
    ii) GRTFTTY(서열 번호 18)의 CDR1 서열, RWSGGR(서열 번호 48) 또는 WSGG(서열 번호 268)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80) 또는 LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281)의 CDR3 서열;
    iii) GRTFTTYR(서열 번호 28)의 CDR1 서열, IRWSGGRT(서열 번호 58)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91)의 CDR3 서열;
    iv) GRTFTTYRMG(서열 번호 162)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223)의 CDR3 서열;
    v) TTYRMG(서열 번호 172)의 CDR1 서열, FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202)의 CDR2 서열, 및 AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTFTTYRMG(서열 번호 182)의 CDR1 서열, AIRWSGGRTL(서열 번호 212)의 CDR2 서열, 및 DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245)의 CDR3 서열; 및
    k) VHH12:
    i) FNTYAMG(서열 번호 9)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70)의 CDR3 서열;
    ii) GRTLSFNTY(서열 번호 19)의 CDR1 서열, TWNGGS(서열 번호 49) 또는 WNGG(서열 번호 269)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81) 또는 RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282)의 CDR3 서열;
    iii) GRTLSFNTYA(서열 번호 29)의 CDR1 서열, ITWNGGST(서열 번호 59)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92)의 CDR3 서열;
    iv) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163)의 CDR1 서열, SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224)의 CDR3 서열;
    v) SFNTYAMG(서열 번호 173)의 CDR1 서열, FVASITWNGGSTS(서열 번호 203)의 CDR2 서열, 및 AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235)의 CDR3 서열; 또는
    vi) GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열, SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열, 및 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열.
  131. 제102항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열을 포함하는 단일 도메인 항체 중 임의의 것의 프레임워크로부터 유래된 프레임워크를 포함하는, 시스템.
  132. 제102항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열을 포함하는 프레임워크를 포함하는, 시스템.
  133. 제102항 내지 제132항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 QVQLVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTMYLQMNSLKPEDTAVYYCAAGSIDLNWYGGMDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 93), EVQVVESGGGLVQAGGSLKLACAAPGLTFSSYRMGWFRQAPGQEREFVAAIDWNGRGTYYRYYADSVKGRSTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAATTVLTDPRVLNEYATWGQGTQVTVSS(서열 번호 94), QLQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGSIFSINVMGWYRQAPGKQRELVARINGGGITHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAAYYCKADVFGSSGYVETYWGQGTQVTVSS(서열 번호 95), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGTSVSSNAMGWYRQAPGKQREWVGFIDRIATTTIATSVKGRFAITRDNAKNTVYLQMSGLKPEDTAVYYCNHPLTARWGQGTQVTVSS(서열 번호 96), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFSSYAMGWFRQAPGKEREFVAAITWNGGTTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 97), EVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGSSVSSDAMGWYRQAPGNQRAWVAFISGGGTTTYADSVKGRFTISRDNTKNTVYLHMNSLKPEDTAVYYCNHPLTSRWGQGTQVTVSS(서열 번호 98), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLACVASRSIGSINVMGWYRQAPGKQRDLVARITGGGSTHYAESVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLEPEDTAVYYCASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 99), QVQLVESGGGLVQAGGSLRLSCAVSGRTFSTYRMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGGSTTYADPVKGRFTISRDNAKNTVYLRMNSLKPEDTAVYYCNDQRGYWGQGTLVTVSS(서열 번호 100), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGFTFTRYAMGWFRQAPGKERSFVAAISWSGSSAGYGDSVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLKPEDTAVYYCAADPFNQGYWGQGTQVTVSS(서열 번호 101), EVQVVESGGGLVQAGGSLRLSCAASGRTFTTYRMGWFRQAPGKEREFVAAIRWSGGRTLYADSVKGRFTISRDNAKNTAYLQMNNLRPEDTAVYYCAADLAEYSGTYSSPADSPAGYDYWGQGTQVTVSS(서열 번호 102), 또는 QVQLVETGGGLVQAGDSLRLSCAASGRTLSFNTYAMGWFRQAPGKEREFVASITWNGGSTSYADSVKGRFTITRDNAKNTATLRMNSLQPDDTAVYYCAAARYYVSGTYFPANYWGQGTQVTVSS(서열 번호 103)의 서열과 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열로 구성되는, 시스템.
  134. 제102항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합되는, 시스템.
  135. 제134항에 있어서, 단일 도메인 항체와 제제 사이에 링커를 추가로 포함하는, 시스템.
  136. 제135항에 있어서, 링커가 폴리펩티드인, 시스템.
  137. 제136항에 있어서, 링커가 EPKTPKPQPQPQLQPQPNPTTESKSPK(서열 번호 130), (EAAAK)n(서열 번호 147), (GGGGS)n(서열 번호 147), 및 (GGGS)n(서열 번호 149)으로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 가요성 링커이며, 여기서 n은 1 내지 20의 정수인, 시스템.
  138. 제134항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 화학적으로 접합되는, 시스템.
  139. 제134항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 비공유 결합되는, 시스템.
  140. 제102항 내지 제139항 중 어느 한 항에 있어서, IgA의 pIgR-매개 세포통과를 억제하지 않는, 시스템.
  141. 제140항에 있어서, 단일 도메인 항체가 SNAMG(서열 번호 3), INVMG(서열 번호 6), TYRMG(서열 번호 7), RYAMG(서열 번호 8), FTTYRMG(서열 번호 258), TYRMG(서열 번호 259), FNTYAMG(서열 번호 9), GTSVSSN(서열 번호 12), GRTFSSY(서열 번호 13), RSIGSIN(서열 번호 15), GRTFSTY(서열 번호 16), GFTFTRY(서열 번호 17), GRTFTTY(서열 번호 18), GRTLSFNTY(서열 번호 19), GTSVSSNA(서열 번호 22), RSIGSINV(서열 번호 25), GRTFSTYR(서열 번호 26), GFTFTRYA(서열 번호 27), GRTFTTYR(서열 번호 28), GRTLSFNTYA(서열 번호 29), GTSVSSNAMG(서열 번호 156), RSIGSINVMG(서열 번호 159), GRTFSTYRMG(서열 번호 160), GFTFTRYAMG(서열 번호 161), GRTFTTYRMG(서열 번호 162), GRTLSFNTYAMG(서열 번호 163), SSNAMG(서열 번호 166), SINVMG(서열 번호 169), STYRMG(서열 번호 170), TRYAMG(서열 번호 171), TTYRMG(서열 번호 172), SFNTYAMG(서열 번호 173), GTSVSSNAMG(서열 번호 176), RSIGSINVMG(서열 번호 179), GRTFSTYRMG(서열 번호 180), GFTFTRYAMG(서열 번호 181), GRTFTTYRMG(서열 번호 182), 또는 GRTLSFNTYAMG(서열 번호 183)의 CDR1 서열을 포함하는, 시스템.
  142. 제140항 또는 제141항에 있어서, 단일 도메인 항체가 FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 32), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 35), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 36), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 37), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 38), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 39), DRIAT(서열 번호 42), RIA(서열 번호 262), TGGGS(서열 번호 45), GGG(서열 번호 265), SWSGGS(서열 번호 46), WSGG(서열 번호 266), SWSGSS(서열 번호 47), WSGS(서열 번호 267), RWSGGR(서열 번호 48), WSGG(서열 번호 268), TWNGGS(서열 번호 49), WNGG(서열 번호 269), IDRIATT(서열 번호 52), ITGGGST(서열 번호 55), ISWSGGST(서열 번호 56), ISWSGSSA(서열 번호 57), IRWSGGRT(서열 번호 58), ITWNGGST(서열 번호 59), FIDRIATTTIATSVKG(서열 번호 186), RITGGGSTHYAESVKG(서열 번호 189), AISWSGGSTTYADPVKG(서열 번호 190), AISWSGSSAGYGDSVKG(서열 번호 191), AIRWSGGRTLYADSVKG(서열 번호 192), SITWNGGSTSYADSVKG(서열 번호 193), WVGFIDRIATTT(서열 번호 196), LVARITGGGSTH(서열 번호 199), FVAAISWSGGSTT(서열 번호 200), FVAAISWSGSSAG(서열 번호 201), FVAAIRWSGGRTL(서열 번호 202), FVASITWNGGSTS(서열 번호 203), FIDRIATTT(서열 번호 206), RITGGGSTH(서열 번호 209), AISWSGGSTT(서열 번호 210), AISWSGSSAG(서열 번호 211), AIRWSGGRTL(서열 번호 212), SITWNGGSTS(서열 번호 213)의 CDR2 서열을 포함하는, 시스템.
  143. 제140항 내지 제142항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 PLTAR(서열 번호 63), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 66), DQRGY(서열 번호 67), QRGY(서열 번호 271), DPFNQGY(서열 번호 68), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 69), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 70), PLTAR(서열 번호 74), LTA(서열 번호 275), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 77), VNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 278), DQRGY(서열 번호 78), RG(서열 번호 279), DPFNQGY(서열 번호 79), PFNQG(서열 번호 280), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 80), LAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 281), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 81), RYYVSGTYFPAN(서열 번호 282), NHPLTAR(서열 번호 85), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 88), NDQRGY(서열 번호 89), AADPFNQGY(서열 번호 90), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 91), AAARYYVSGTYFPANY(서열 번호 92), PLTAR(서열 번호 217), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 220), QRGY(서열 번호 221), DPFNQGY(서열 번호 222), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 223), ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 224), NHPLTA(서열 번호 228), ASMVNPIITAWGTIGVREIPDYD(서열 번호 231), NDQRG(서열 번호 232), AADPFNQG(서열 번호 233), AADLAEYSGTYSSPADSPAGYD(서열 번호 234), AAARYYVSGTYFPAN(서열 번호 235), PLTAR(서열 번호 239), MVNPIITAWGTIGVREIPDYDY(서열 번호 242), QRGY(서열 번호 243), DPFNQGY(서열 번호 244), DLAEYSGTYSSPADSPAGYDY(서열 번호 245), 또는 ARYYVSGTYFPANY(서열 번호 246)의 CDR3 서열을 포함하는, 시스템.
  144. 대상의 고유층에 분자를 제공하기 위한 수단을 포함하는, 시스템.
  145. 제144항에 있어서, 분자가 제제 및 pIgR에 결합하는 단일 도메인 항체를 포함하는, 시스템.
  146. 제145항에 있어서, 제제가 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 백신, 소분자, 폴리뉴클레오티드, 방사성 동위원소, 독소, 효소, 항응고제, 호르몬, 사이토카인, 항-염증성 분자, RNAi, 항생제, 또는 항체-항생제 접합체인, 시스템.
  147. 제144항 내지 제146항 중 어느 한 항에 있어서, 제제가 항체 또는 이의 단편, 펩티드, 또는 백신인, 시스템.
  148. 제145항 내지 제147항 중 어느 한 항에 있어서, 단일 도메인 항체가 제제에 유전자 융합되거나 화학적으로 접합되는, 시스템.
KR1020227003585A 2019-08-02 2020-07-31 다방향 생물수송을 위한 재료 및 방법 KR20220054289A (ko)

Applications Claiming Priority (23)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962882346P 2019-08-02 2019-08-02
US201962882361P 2019-08-02 2019-08-02
US201962882291P 2019-08-02 2019-08-02
US201962882387P 2019-08-02 2019-08-02
US62/882,387 2019-08-02
US62/882,346 2019-08-02
US62/882,361 2019-08-02
US62/882,291 2019-08-02
US201962940206P 2019-11-25 2019-11-25
US201962940196P 2019-11-25 2019-11-25
US201962940228P 2019-11-25 2019-11-25
US201962940208P 2019-11-25 2019-11-25
US201962940200P 2019-11-25 2019-11-25
US201962940232P 2019-11-25 2019-11-25
US201962940220P 2019-11-25 2019-11-25
US62/940,232 2019-11-25
US62/940,228 2019-11-25
US62/940,206 2019-11-25
US62/940,196 2019-11-25
US62/940,200 2019-11-25
US62/940,220 2019-11-25
US62/940,208 2019-11-25
PCT/US2020/044497 WO2021025997A1 (en) 2019-08-02 2020-07-31 Materials and methods for multidirectional biotransportation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220054289A true KR20220054289A (ko) 2022-05-02

Family

ID=74502941

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227003638A KR20220054585A (ko) 2019-08-02 2020-07-31 고분자 항체 수용체 표적화를 위한 재료 및 방법
KR1020227003585A KR20220054289A (ko) 2019-08-02 2020-07-31 다방향 생물수송을 위한 재료 및 방법

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227003638A KR20220054585A (ko) 2019-08-02 2020-07-31 고분자 항체 수용체 표적화를 위한 재료 및 방법

Country Status (18)

Country Link
US (2) US20230019640A1 (ko)
EP (2) EP4007607A4 (ko)
JP (2) JP2022542391A (ko)
KR (2) KR20220054585A (ko)
CN (2) CN114173801A (ko)
AU (2) AU2020326589A1 (ko)
BR (2) BR112022001352A2 (ko)
CA (2) CA3147916A1 (ko)
CO (2) CO2022000817A2 (ko)
CR (2) CR20220042A (ko)
DO (2) DOP2022000022A (ko)
EC (2) ECSP22007690A (ko)
IL (2) IL289955A (ko)
JO (1) JOP20220025A1 (ko)
MX (2) MX2022001278A (ko)
PE (2) PE20220298A1 (ko)
TW (2) TW202122108A (ko)
WO (2) WO2021026000A1 (ko)

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU728587B2 (en) * 1996-06-04 2001-01-11 Regents Of The University Of California, The Cellular internalization of pIgR stalk and associated ligands
US6060082A (en) * 1997-04-18 2000-05-09 Massachusetts Institute Of Technology Polymerized liposomes targeted to M cells and useful for oral or mucosal drug delivery
WO2000047611A2 (en) * 1999-02-12 2000-08-17 Oklahoma Medical Research Foundation Polymeric immunoglobulin receptor (pigr)-binding domains and methods of use therefor
EP1268555A2 (en) * 2000-03-27 2003-01-02 The Regents of The University of California Ligands directed to the non-secretory component, non-stalk region of pigr and methods of use thereof
MXPA03002918A (es) * 2000-10-02 2004-04-20 Arizeke Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodos para el transporte de agentes biologicamente activos a traves de barreras celulares.
US20030166160A1 (en) * 2001-09-06 2003-09-04 Hawley Stephen B. Compounds and molecular complexes comprising multiple binding regions directed to transcytotic ligands
AU2002305140A1 (en) * 2001-04-03 2002-10-28 Arizeke Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for transepithelial transport of membrane-bounded vesicles and virions
AU2004204763A1 (en) * 2003-01-09 2004-07-29 Arizeke Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for targeted biological delivery of molecular carriers
EP2101801A1 (en) * 2006-12-20 2009-09-23 Ablynx N.V. Oral delivery of polypeptides
US20100166734A1 (en) * 2006-12-20 2010-07-01 Edward Dolk Oral delivery of polypeptides
EP1975178A1 (en) * 2007-03-30 2008-10-01 f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. Transcytotic modular antibody
WO2009080764A2 (en) * 2007-12-20 2009-07-02 Abylnx N.V. Oral or nasal administration of compounds comprising amino acid sequences
EP2753644A1 (en) * 2011-09-09 2014-07-16 Universiteit Utrecht Holding B.V. Broadly neutralizing vhh against hiv-1
AU2013201422B2 (en) * 2012-01-23 2015-04-09 Ablynx Nv Sequences directed against hepatocyte growth factor (HFG) and polypeptides comprising the same for the treatment of cancers and/or tumors
EP2917731B1 (en) * 2012-11-08 2019-12-25 The Macfarlane Burnet Institute For Medical Research And Public Health Ltd Diagnostic, prognostic, therapeutic and screening protocols
WO2017172517A1 (en) * 2016-03-29 2017-10-05 Stcube & Co., Inc. Methods for selecting antibodies that specifically bind glycosylated immune checkpoint proteins
WO2018222506A1 (en) * 2017-05-27 2018-12-06 Immune-Onc Therapeutics, Inc. Modulation of immunoglobulin-a-positive cells

Also Published As

Publication number Publication date
US20230019640A1 (en) 2023-01-19
EP4007607A1 (en) 2022-06-08
KR20220054585A (ko) 2022-05-03
EP4007591A1 (en) 2022-06-08
WO2021026000A1 (en) 2021-02-11
PE20220344A1 (es) 2022-03-14
PE20220298A1 (es) 2022-03-07
CA3147916A1 (en) 2021-02-11
AU2020326589A1 (en) 2022-02-17
MX2022001379A (es) 2022-03-17
US20220324970A1 (en) 2022-10-13
CR20220043A (es) 2022-06-06
ECSP22014913A (es) 2022-03-31
IL289955A (en) 2022-03-01
EP4007591A4 (en) 2023-11-29
ECSP22007690A (es) 2022-02-25
CN114173801A (zh) 2022-03-11
JP2022542391A (ja) 2022-10-03
DOP2022000021A (es) 2022-08-15
WO2021026000A8 (en) 2022-02-17
IL289956A (en) 2022-03-01
BR112022001352A2 (pt) 2022-06-07
WO2021025997A1 (en) 2021-02-11
CR20220042A (es) 2022-03-22
CO2022000817A2 (es) 2022-02-07
BR112022001080A2 (pt) 2022-07-19
JOP20220025A1 (ar) 2023-01-30
DOP2022000022A (es) 2022-07-31
CO2022001579A2 (es) 2022-03-18
MX2022001278A (es) 2022-05-03
TW202116813A (zh) 2021-05-01
JP2022542418A (ja) 2022-10-03
EP4007607A4 (en) 2024-01-10
TW202122108A (zh) 2021-06-16
AU2020326590A1 (en) 2022-02-17
CN114423451A (zh) 2022-04-29
CA3147905A1 (en) 2021-02-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210340272A1 (en) Anti-mesothelin constructs and uses thereof
US20170233481A1 (en) Anti-cd25 antibodies and their uses
US20150010538A1 (en) Anti-cd25 antibodies and their uses
KR20210076918A (ko) 4-1bb 및 종양-관련 항원에 결합하는 항체 작제물 및 이의 용도
US10836833B2 (en) Cell engaging binding molecules
TW202229335A (zh) 用於多方向性生物輸送之生物合成材料及方法
JP2024512135A (ja) 免疫エフェクター細胞再指向のための材料及び方法
KR20220054289A (ko) 다방향 생물수송을 위한 재료 및 방법
US20220267456A1 (en) Materials and methods for targeting regulatory t cells for enhancing immune surveillance
WO2022161472A1 (en) Sars-cov-2 binding molecules and uses thereof
TW202337904A (zh) ＩＬ－１β結合蛋白之材料及方法
CN117500836A (zh) 用于免疫效应细胞重定向的材料和方法