KR20210118828A - 치환된 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 화합물, 이의 조성물, 및 이를 사용한 치료 방법 - Google Patents

Abstract

여기서 제공된 것은 다음 구조를 가지는 피페리딘 디온 화합물:

(I)
여기서 R^N, R¹, R², R³, R⁴, X, L,V, m, 및 n는 여기서 정의된 바와 같음, 유효량의 피페리딘 디온 화합물을 포함하는 조성물, 및 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 또는 예방 방법이다.

Description

치환된 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 화합물, 이의 조성물, 및 이를 사용한 치료 방법

관련 출원

본 출원은 2019년 12월 19일에 출원된 미국 가출원 제62/782,281호 및 2019년 7월 29일에 출원된 제62/879,927호를 우선권으로 주장하며, 이는 그 전문이 여기서 참조로 포함된다.

분야

여기서 제공된 것은 특정의 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 화합물, 유효량의 그러한 화합물을 포함하는 조성물, 및 유효량의 그러한 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 또는 예방 방법이다. 또한 여기서 제공된 것은 이들 방법에서의 사용을 위한 화합물 및 조성물이다.

배경

안드로겐 수용체 신호 전달은 전립선 암의 발병 기전에 결정적인 역할을 하는 것으로 알려져 있으며 다른 안드로겐 수용체 양성 암의 발생에 관여한다 (Chen Y et al., Lancet Oncol, 2009, 10:981-91; Mills I G, Nat Rev Cancer, 2014, 14:187-98; Taplin M E, Nat Clin Pract Oncol, 2007, 4:236-44; Wirth M P et al., Eur Urol, 2007, 51(2):306-13). 안드로겐 수용체를 길항하는 항-안드로겐으로 안드로겐 수용체 신호 전달을 억제하는 것은 전립선 암 치료를 위해 사용되거나 제안되었다.

안드로겐 수용체는 일반적으로 HSP90과 같은 샤페론에 결합된 세포질에 존재한다 (Brinkmann A O et al., J Steroid Biochem Mol Biol, 1999, 69:307-13). 디히드로테스토스테론 (DHT)의 결합시 안드로겐 수용체는 형태를 변경하고 핵으로 이동하여 안드로겐 반응 요소 (ARE)에 결합하여 KLK3 (전립선 특이 항원 PSA라고도 함), TMPRSS2 및 KLK2와 같은 표준 표적의 전사를 유도한다. ((Tran C et al., Science, 2009, 324:787-90; Murtha P et al., Biochemistry (Mosc.), 1993, 32:6459-64).

전립선 암 (PCa)은 미국 남성들 사이에서 가장 빈번하게 진단되는 비-피부암 중 하나이며, 미국에서 매년 200,000 건 이상의 신규 사례와 30,000 건 이상의 사망으로 암 사망의 두 번째로 흔한 원인이다.

안드로겐-박탈 요법 (ADT)은 중증 PCa 치료의 표준이다. 중증 PCa 환자는 황체 형성 호르몬 방출 호르몬 (LHRH) 작용제, LHRH 길항제 또는 양측 고환 절제술을 통해 ADT를 겪다. ADT에 대한 초기 반응에도 불구하고 질병의 진행은 불가피하며 암은 거세-저항성 전립선 암 (CRPC)으로 나타난다. 방사선이나 수술로 1 차 치료를 받는 전립선 암 환자의 최대 30 %는 1 차 치료 후 10 년 이내에 전이성 질환에 걸리게 된다. 연간 약 50,000 명의 환자가 전이성 CRPC (mCRPC)라고 하는 전이성 질환을 앓게 된다.

기존 요법과 관련된 독성 및/또는 부작용을 피하면서, AR 매개 질환, 특히 수술, 방사선 요법, 화학 요법 및 호르몬 요법과 같은 표준 치료에 불응성인 AR 매개 질환을 치료, 예방 및 관리하는 안전하고 효과적인 방법에 대한 상당한 필요성이 남아 있다.

본 출원의 이 섹션에서 참고문헌 인용 또는 식별은 참고문헌이 본 출원에 대한 선행 기술임을 인정하는 것으로 해석되어서는 안된다.

요약

여기서 제공된 것은 다음 식 (I)를 가지는 화합물:

(I)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고, 여기서 R^N, R¹, R², R³, R⁴, X, L, V, m 및 n는 여기서 정의된 바와 같다.

식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체 (각각 여기서 “피페리딘 디온 화합물”로서 언급된)는 대상체 내에서 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 또는 예방을 위해 유용하다.

한 양상에서, 여기서 제공된 것은 본개시물, 가령, 예를 들어, 표 1에서 기술된 피페리딘 디온 화합물이다.

한 양상에서, 여기서 제공된 것은 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 비히클을 포함하는 약제학적 조성물이다. 한 양상에서, 여기서 제공된 것은 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 비히클을 포함하는 약제학적 조성물이다. 일부 구체예에서 약제학적 조성물은 경구, 비경구, 점막, 경피 또는 외용 투여를 위해 적합하다.

한 양상에서, 여기서 제공된 것은, 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 화합물; 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 비히클을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 또는 예방 방법이다. 한 양상에서, 여기서 제공된 것은, 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물; 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 비히클을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 또는 예방 방법이다. 또다른 양상에서, 여기서 제공된 것은 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 방법에서의 사용을 위한 화합물이다. 또다른 양상에서, 여기서 제공된 것은 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 방법에서의 사용을 위한 피페리딘 디온 화합물이다.

또다른 양상에서 여기서 제공된 것은 여기서 기술된 바와 같은 화합물을 제공하기 위한 방법이다. 또다른 양상에서 여기서 제공된 것은 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물을 제공하기 위한 방법이다.

본구체예는 비-제한적인 구체예를 예시하기 위한 상세한 설명 및 실시예를 참조하여 보다 완전히 이해될 수 있다.

상세한 설명

정의

여기서 사용된, 용어 “포함하는" 및 “포함하는"는 상호교환가능하게 사용될 수 있다. 용어 "포함하는" 및 "포함하는"은 언급된 바와 같이 언급된 특징 또는 구성 요소의 존재를 지정하는 것으로 해석되어야 하지만, 하나 이상의 특징, 구성 요소 또는 그 그룹의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다. 부가적으로, 용어 "포함하는" 및 "포함하는"은 용어 "이루어진"에 포함된 예를 포함하도록 의도된다. 결과적으로, 용어 "이루어지는"은 용어 "포함하는" 및 "포함하는" 대신에 사용되어 본 발명의 보다 구체적인 구체예를 제공할 수 있다.

용어 "이루어지는"은 주제물이 이를 구성하는 언급된 특징 또는 구성 요소의 적어도 90 %, 95 %, 97 %, 98 % 또는 99 %를 갖는 것을 의미한다. 또다른 구체예에서, "이루어지는"이라는 용어는 달성될 기술적 효과에 필수적이지 않은 것을 제외하고는 임의의 다른 특징 또는 구성 요소를 연속적으로 언급하는 범위에서 제외한다.

여기서 사용된, 용어 "또는"은 임의의 하나 또는 임의의 조합을 의미하는 포괄적인 "또는"으로 해석되어야 한다. 따라서 "A, B 또는 C"는 다음 중 하나를 의미한다: "A; B; C; A 및 B; A 및 C; B 및 C; A, B 및 C". 이 정의에 대한 예외는 요소, 기능, 단계 또는 행위의 조합이 어떤 방식으로든 본질적으로 상호 배타적인 경우에만 발생한다.

“알킬” 기는 1 내지 10 탄소 원자, 대표적으로 1 내지 8로 탄소 또는, 일부 구체예에서, 1 내지 6, 1 내지 4로, 또는 2 내지 6 또는 탄소 원자를 가지는 포화, 부분적으로 포화, 또는 불포화 직쇄 또는 분지쇄 비-시클릭 탄화수소이다. 일부 구체예에서, 알킬 기는 포화 알킬 기이다. 대표적인 포화 알킬 기는 -메틸, -에틸, -n-프로필, -n-부틸, -n-펜틸 및 -n-헥실을 포함한다; 포화 분지쇄 알킬은 -이소프로필, -sec-부틸, -이소부틸, -tert-부틸, -이소펜틸, -네오펜틸, tert-펜틸,

-2-메틸펜틸, -3-메틸펜틸, -4-메틸펜틸, -2,3-디메틸부틸 등을 포함한다. 일부 구체예에서, 알킬 기는, 또한 알케닐 또는 알키닐 기로 불리는 불포화 알킬 기이다. “알케닐” 기는 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 알킬 기이다. “알키닐” 기는 하나 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하는 알킬 기이다. 불포화 알킬 기의 예시는, 비제한적으로, 특히 비닐, 알릴, -CH=CH(CH₃), -CH=C(CH₃)₂, -C(CH₃)=CH₂, -C(CH₃)=CH(CH₃), -C(CH₂CH₃)=CH₂,

-C≡CH, -C≡C(CH₃), -C≡C(CH₂CH₃), -CH₂C≡CH, -CH₂C≡C(CH₃) 및 -CH₂C≡C(CH₂CH₃)을 포함한다. 알킬 기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 여기서 기술된 알킬 기가 “치환된”으로 지칭될 때, 여기서 개시된 예시적 화합물 및 구체예에서 발견되는 임의의 치환기 또는 치환기들, 또한 할로겐; 히드록시; 알콕시; 시클로알킬옥시, 아릴옥시, 헤테로시클릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로시클로알킬옥시, 시클로알킬알킬옥시, 아르알킬옥시, 헤테로시클릴알킬옥시, 헤테로아릴알킬옥시, 헤테로시클로알킬알킬옥시; 옥소 (=O); 아미노, 알킬아미노, 시클로알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로시클릴아미노, 헤테로아릴아미노, 헤테로시클로알킬아미노, 시클로알킬알킬아미노, 아르알킬아미노, 헤테로시클릴알킬아미노, 헤테로아르알킬아미노, 헤테로시클로알킬알킬아미노; 이미노; 이미도; 아미디노; 구아니디노; 엔아미노; 아실아미노; 설포닐아미노; 우레아, 니트로우레아; 옥심; 히드록실아미노; 알콕시아미노; 아르알콕시아미노; 히드라지노; 히드라지도; 히드라조노; 아지도; 니트로; 티오 (-SH), 알킬티오; =S; 설피닐; 설포닐; 아미노설포닐; 포스포네이트; 포스피닐; 아실; 포르밀; 카르복시; 에스테르; 카바메이트; 아미도; 시아노; 이소시아네이토; 이소티오시아네이토; 시아네이토; 티오시아네이토; 또는 -B(OH)₂로 치환될 수 있다. 특정의 구체예에서, 여기서 기술된 알킬 기가 “치환된”으로 지칭될 때, 여기서 개시된 예시적 화합물 및 구체예에서 발견되는 임의의 치환기 또는 치환기들, 또한 할로겐 (클로로, 아이오도, 브로모, 또는 플루오로); 알킬; 히드록실; 알콕시; 알콕시알킬; 아미노; 알킬아미노; 카르복시; 니트로; 시아노; 티올; 티오에테르; 이민; 이미드; 이미딘; 구아니딘; 엔아민; 아미노카르보닐; 아실아미노; 포스포네이트; 포스핀; 티오카르보닐; 설피닐; 설폰; 설폰아미드; 케톤; 알데히드; 에스테르; 우레아; 우레탄; 옥심; 히드록실 아민; 알콕시아민; 아르알콕시아민; N-옥사이드; 히드라진; 히드라지드; 히드라존; 아지드; 이소시아네이트; 이소티오시아네이트; 시아네이트; 티오시아네이트; B(OH)₂, 또는 O(알킬)아미노카르보닐로 치환될 수 있다.

“시클로알킬” 기는 임의로 치환될 수 있는 단일 시클릭 링 또는 다중 축합 또는 가교 링을 가지는 3 내지 10 탄소 원자의 포화, 또는 부분적으로 포화 시클릭 알킬 기이다. 일부 구체예에서, 시클로알킬 기는 3 내지 8 개의 고리 구성원을 갖는 반면, 다른 구체예에서 고리 탄소 원자의 수는 3 내지 5, 3 내지 6, 또는 3 내지 7의 범위이다. 일부 구체예에서, 시클로알킬 기는 포화 시클로알킬 기이다. 그러한 포화 시클로알킬 기는, 예시로서, 단일 링 구조 가령 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 1-메틸시클로프로필, 2-메틸시클로펜틸, 2-메틸시클로옥틸, 등, 또는 다중 또는 가교 링 구조 가령 1-시클로[1.1.1]펜틸, 시클로[2.1.1]헥실, 시클로[2.2.1]헵틸, 시클로[2.2.2]옥틸, 아다만틸 등을 포함한다. 다른 구체예에서, 시클로알킬 기는 불포화 시클로알킬 기이다. 불포화 시클로알킬 기의 예시는 특히 시클로헥세닐, 시클로펜테닐, 시클로헥사디에닐, 부타디에닐, 펜타디에닐, 헥사디에닐을 포함한다. 시클로알킬 기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 그러한 치환된 시클로알킬 기는, 예시로서, 시클로헥산올 등을 포함한다.

“아릴” 기는 단일 링 (예를 들어, 페닐) 또는 다중 축합 링 (예를 들어, 나프틸 또는 안트릴)를 가지는 6 내지 14 탄소 원자의 방향족 카보시클릭 기이다. 일부 구체예에서, 아릴 기는 기 내 링 부분에서 6-14 탄소, 및 다른 예에서 6 내지 12 또는 심지어 6 내지 10　탄소 원자를 함유한다. 특정 아릴은 페닐, 비페닐, 나프틸 등을 포함한다. 아릴 기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 구조 “아릴 기”는 또한 융합된 링을 함유하는 기, 가령 융합된 방향족-지방족 링 시스템 (예를 들어, 인다닐, 테트라히드로나프틸, 등)을 포함한다.

“헤테로아릴” 기는 헤테로방향족 링 시스템 내 링 원자로서 1 내지 4 헤테로원자를 가지는 방향족 링 시스템이고, 여기서 원자의 나머지는 탄소 원자이다. 일부 구체예에서, 헤테로아릴 기는 기 내 링 부분에서 3 내지 6 링 원자, 및 다른 예에서 6　내지 9 또는 심지어 6 내지 10 원자를 함유한다. 적합한 헤테로원자는 산소, 황 및 질소를 포함한다. 특정의 구체예에서, 헤테로아릴 링 시스템은 모노시클릭 또는 비시클릭이다. 비-제한적 실시예는 비제한적으로, 기 가령 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 벤즈이속사졸릴 (예를 들어,　벤조[d]이속사졸릴), 티아졸릴, 피롤릴, 피리다지닐, 피리미딜, 피라지닐, 티오페닐, 벤조티오페닐, 푸란일, 벤조푸란일, 인돌릴 (예를 들어,　인돌릴-2-오닐 또는 이소인돌린-1-오닐), 아자인돌릴 (피롤로피리딜 또는 1H-피롤로[2,3-b]피리딜), 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴 (예를 들어,　1H-벤조[d]이미다졸릴), 이미다조피리딜 (예를 들어,　아자벤즈이미다졸릴 또는 1H-이미다조[4,5-b]피리딜), 피라졸로피리딜, 트리아졸로피리딜, 벤조트리아졸릴 (예를 들어, 1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸릴), 벤족사졸릴 (예를 들어,　벤조[d]옥사졸릴), 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 이속사졸로피리딜, 티아나프탈레닐, 푸리닐, 잔티닐, 아데니닐, 구아니닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐 (예를 들어,　3,4-디히드로이소퀴놀린-1(2H)-오닐), 테트라히드로퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 및 퀴나졸리닐 기를 포함한다. 헤테로아릴 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.

“헤테로시클릴”은 링 탄소 원자의 1 내지 4가 O, S 및 N로 이루어진 그룹으로부터의 헤테로원자로 독립적으로 대체된 방향족 (또한 헤테로아릴로서 언급된) 또는 비-방향족 시클로알킬이다. 일부 구체예에서, 헤테로시클릴 기는 3 내지10 링 원을 포함하고, 다른 그러한 기는 3 내지 5, 3 내지 6, 또는 3 내지 8로 링 원을 가진다. 헤테로시클릴은 또한 임의의 링 원자 (즉, 헤테로시클릭 링의 임의의 탄소 원자 또는 헤테로원자)에서 다른 기에 결합될 수 있다. 헤테로시클로알킬 기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 헤테로시클릴 기는 불포화, 부분적으로 포화 및 포화 링 시스템, 가령, 예를 들어, 이미다졸릴, 이미다졸리닐 및 이미다졸리디닐 (예를 들어, 이미다졸리딘-4-온 또는 이미다졸리딘-2,4-디오닐) 기를 포함한다. 구조 헤테로시클릴은, 융합된 방향족 및 비-방향족 기를 포함하는 것들, 가령, 예를 들어, 1- 및 2-아미노테트랄린, 벤조트리아졸릴 (예를 들어, 1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸릴), 벤즈이미다졸릴 (예를 들어,　1H-벤조[d]이미다졸릴), 2,3-디히드로벤조[l,4]디옥시닐, 및 벤조[l,3]디옥솔릴을 포함하는 융합된 링 종을 포함한다. 구조는 또한 가교된 폴리시클릭 링 시스템을 함유하는 헤테로원자 가령, 비제한적으로, 퀴누클리딜을 포함한다. 헤테로시클릴 기의 대표적인 예시는, 비제한적으로, 아지리디닐, 아제티디닐, 아제파닐, 옥세티닐, 피롤리딜, 이미다졸리디닐 (예를 들어,　이미다졸리딘-4-오닐 또는 이미다졸리딘-2,4-디오닐), 피라졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라히드로티오페닐, 테트라히드로푸란일, 디옥솔릴, 푸란일, 티오페닐, 피롤릴, 피롤리닐, 이미다졸릴, 이미다졸리닐, 피라졸릴, 피라졸리닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 벤즈이속사졸릴 (예를 들어,　벤조[d]이속사졸릴), 티아졸릴, 티아졸리닐, 이소티아졸릴, 티아디아졸릴, 옥사디아졸릴, 피페리딜, 피페라지닐 (예를 들어, 피페라진-2-오닐), 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 테트라히드로피란일 (예를 들어, 테트라히드로-2H-피란일), 테트라히드로티오피란일, 옥사티아닐, 디옥실, 디티아닐, 피란일, 피리딜, 피리미딜, 피리다지닐, 피라지닐, 트리아지닐, 디히드로피리딜, 디히드로디티이닐, 디히드로디티오닐, 1,4-디옥사스피로[4.5]데카닐, 호모피페라지닐, 퀴누클리딜, 인돌릴 (예를 들어,　인돌릴-2-오닐 또는 이소인돌린-1-오닐), 인돌리닐, 이소인돌릴, 이소인돌리닐, 아자인돌릴 (피롤로피리딜 또는 1H-피롤로[2,3-b]피리딜), 인다졸릴, 인돌리지닐, 벤조트리아졸릴 (예를 들어　1H-벤조[d][1,2,3]트리아졸릴), 벤즈이미다졸릴 (예를 들어,　1H-벤조[d]이미다졸릴 또는 1H-벤조[d]이미다조l-2(3H)-오닐), 벤조푸란일, 벤조티오페닐, 벤조티아졸릴, 벤족사디아졸릴, 벤족사지닐, 벤조디티이닐, 벤족사티이닐, 벤조티아지닐, 벤족사졸릴 (즉, 벤조[d]옥사졸릴), 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조[l,3]디옥솔릴, 피라졸로피리딜 (예를 들어, 1H-피라졸로[3,4-b]피리딜, 1H-피라졸로[4,3-b]피리딜), 이미다조피리딜 (예를 들어,　아자벤즈이미다졸릴 또는 1H-이미다조[4,5-b]피리딜), 트리아졸로피리딜, 이속사졸로피리딜, 푸리닐, 잔티닐, 아데니닐, 구아니닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐 (예를 들어, 3,4-디히드로이소퀴놀린-1(2H)-오닐), 퀴놀리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 신놀리닐, 프탈라지닐, 나프티리디닐, 프테리디닐, 티아나프탈레닐, 디히드로벤조티아지닐, 디히드로벤조푸란일, 디히드로인돌릴, 디히드로벤조디옥시닐, 테트라히드로인돌릴, 테트라히드로인다졸릴, 테트라히드로벤즈이미다졸릴, 테트라히드로벤조트리아졸릴, 테트라히드로피롤로피리딜, 테트라히드로피라졸로피리딜, 테트라히드로이미다조피리딜, 테트라히드로트리아졸로피리딜, 테트라히드로피리미딘-2(1H)-온 및 테트라히드로퀴놀리닐 기를 포함한다. 대표적인 비-방향족 헤테로시클릴 기는 융합된 방향족 기를 포함하는 융합된 링 종을 포함하지 않는다. 비-방향족 헤테로시클릴 기의 예시는 아지리디닐, 아제티디닐, 아제파닐, 피롤리딜, 이미다졸리디닐 (예를 들어,　이미다졸리딘-4-오닐 또는 이미다졸리딘-2,4-디오닐), 피라졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라히드로티오페닐, 테트라히드로푸란일, 피페리딜, 피페라지닐 (예를 들어,　피페라진-2-오닐), 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 테트라히드로피란일 (예를 들어, 테트라히드로-2H-피란일), 테트라히드로티오피란일, 옥사티아닐, 디티아닐, 1,4-디옥사스피로[4.5]데카닐, 호모피페라지닐, 퀴누클리딜, 또는 테트라히드로피리미딘-2(1H)-온을 포함한다. 대표적인 치환된 헤테로시클릴 기는 모노-치환 또는 한 번 초과로 치환될 수 있고, 가령, 비제한적으로, 2-, 3-, 4-, 5-, 또는 6-치환된, 또는 다양한 치환기 가령 아래에 나열된 것들로 2치환된 피리딜 또는 모르폴리닐 기일 수 있다.

여기서 사용된 및 달리 특정되지 않는 한, “시클로알킬알킬” 기는 다음 식의 라디칼이고: -알킬-시클로알킬, 여기서 알킬 및 시클로알킬은 위에서 정의된 바와 같다. 치환된 시클로알킬알킬 기는 기의 알킬, 시클로알킬, 또는 알킬 및 시클로알킬 부분 둘 다에서 치환될 수 있다. 대표적인 시클로알킬알킬 기는 비제한적으로 시클로프로필메틸, 시클로부틸메틸, 시클로펜틸메틸, 시클로헥실메틸, 시클로프로필에틸, 시클로부틸에틸, 시클로펜틸에틸, 시클로헥실에틸, 시클로펜틸프로필, 시클로헥실프로필 등을 포함한다.

여기서 사용된 및 달리 특정되지 않는 한, “아르알킬” 기는 다음 식의 라디칼이고: -알킬-아릴, 여기서 알킬 및 아릴은 위에서 정의된 바와 같다. 치환된 아르알킬 기는 기의 알킬, 아릴, 또는 알킬 및 아릴 부분 둘 다에서 치환될 수 있다. 대표적인 아르알킬 기는 비제한적으로 벤질 및 펜에틸 기 및 아르알킬 기를 포함하고 여기서 아릴 기는 시클로알킬 기 가령 인단-4-일 에틸에 융합된다.

여기서 사용된 및 달리 특정되지 않는 한, “헤테로시클릴알킬” 기는 다음 식의 라디칼이고: -알킬-헤테로시클릴, 여기서 알킬 및 헤테로시클릴은 위에서 정의된 바와 같다. “헤테로아릴알킬” 기는 다음 식의 라디칼이고: -알킬-헤테로아릴, 여기서 알킬 및 헤테로아릴은 위에서 정의된 바와 같다. “헤테로시클로알킬알킬” 기는 다음 식의 라디칼이고:

-알킬-헤테로시클로알킬, 여기서 알킬 및 헤테로시클로알킬은 위에서 정의된 바와 같다. 치환된 헤테로시클릴알킬 기는 기의 알킬, 헤테로시클릴, 또는 알킬 및 헤테로시클릴 부분 둘 다에서 치환될 수 있다. 대표적인 헤테로시클릴알킬 기는 비제한적으로 모르폴린-4-일 에틸, 모르폴린-4-일 프로필, 푸란-2-일 메틸, 푸란-3-일 메틸, 피리딘-3-일 메틸, 테트라히드로푸란-2-일 에틸, 및 인돌-2-일 프로필을 포함한다.

“할로겐”은 불소, 염소, 브롬 또는 요오드이다.

“히드록시알킬” 기는 하나 이상의 히드록시 기로 치환된 상기한 바와 같은 알킬 기이다.

“알콕시” 기는 -O-(알킬)이고, 여기서 알킬은 위에서 정의되어 있다.

“알콕시알킬” 기는 -(알킬)-O-(알킬)이고, 여기서 알킬은 위에서 정의되어 있다.

“아미노” 기는 다음 식의 라디칼이고: -NH₂, -NH(R^#), 또는 -N(R^#)₂, 여기서 각각의 R^#는 독립적으로 위에서 정의된 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬알킬, 아릴, 아르알킬, 헤테로시클릴 (예를 들어, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬), 또는 헤테로시클릴알킬 (예를 들어, 헤테로아릴알킬 또는 헤테로시클로알킬알킬) 기이고, 이들은 각각 독립적으로 치환 또는 비치환된다.

한 구체예에서, “아미노” 기는 “알킬아미노” 기이고, 이는 다음 식의 라디칼이고: -NH-알킬 또는 -N(알킬)₂, 여기서 각각의 알킬은 독립적으로 위에서 정의되어 있다. 용어 “시클로알킬아미노”, “아릴아미노”, “헤테로시클릴아미노”, “헤테로아릴아미노”, “헤테로시클로알킬아미노”, 등, 은 “알킬아미노”에 대한 상기 기술을 따르고 여기서 용어 “알킬”은 “시클로알킬”, “아릴”, “헤테로시클릴”, “헤테로아릴”, “헤테로시클로알킬”, 등, 각각으로 대체된다.

“카르복시” 기는 다음 식의 라디칼이다: -C(O)OH.

여기서 사용된 및 달리 특정되지 않는 한, “아실” 기는 다음 식의 라디칼이고: -C(O)(R^#) 또는 -C(O)H, 여기서 R^#는 위에서 정의되어 있다. “포르밀” 기는 다음 식의 라디칼이다: -C(O)H.

여기서 사용된 및 달리 특정되지 않는 한, “아미도” 기는 다음 식의 라디칼이고: -C(O)-NH₂, -C(O)-NH(R^#), -C(O)-N(R^#)₂, -NH-C(O)H, -NH-C(O)-(R^#),

-N(R^#)-C(O)H, 또는 -N(R^#)-C(O)-(R^#), 여기서 각각의 R^#는 독립적으로 위에서 정의되어 있다.

한 구체예에서, “아미도” 기는 “아미노카르보닐” 기이고, 이는 다음 식의 라디칼이고: -C(O)-NH₂, -C(O)-NH(R^#), -C(O)-N(R^#)₂, 여기서 각각의 R^#는 독립적으로 위에서 정의되어 있다.

한 구체예에서, “아미도” 기는 “아실아미노” 기이고, 이는 다음 식의 라디칼이고: -NH-C(O)H, -NH-C(O)-(R^#), -N(R^#)-C(O)H, 또는 -N(R^#)-C(O)-(R^#), 여기서 각각의 R^#는 독립적으로 위에서 정의되어 있다.

“설포닐아미노” 기는 다음 식의 라디칼이고: -NHSO₂(R^#) 또는

-N(알킬)SO₂(R^#), 여기서 각각의 알킬 및 R^#은 위에서 정의된 바와 같다.

여기서 사용된 및 달리 특정되지 않는 한, “에스테르” 기는 다음 식의 라디칼이고: -C(O)-O-(R^#) 또는 -O-C(O)-(R^#), 여기서 R^#는 위에서 정의되어 있다.

한 구체예에서, “에스테르” 기는 “알콕시카르보닐” 기이고, 이는 다음 식의 라디칼이고: -C(O)-O-(알킬), 여기서 알킬은 위에서 정의되어 있다. 용어 “시클로알킬옥시카르보닐”, “아릴옥시카르보닐”, “헤테로시클릴옥시카르보닐”, “헤테로아릴옥시카르보닐”, “헤테로시클로알킬옥시카르보닐”, 등은 “알콕시카르보닐”에 대한 상기 기술을 따르고 여기서 용어 “알콕시”는 “시클로알킬옥시”, “아릴옥시”, “헤테로시클릴옥시”, “헤테로아릴옥시”, “헤테로시클로알킬옥시”, 등, 각각으로 대체된다.

여기서 사용된 및 달리 특정되지 않는 한, “카바메이트” 기는 다음 식의 라디칼이고: -O-C(O)-NH₂, -O-C(O)-NH(R^#), -O-C(O)-N(R^#)₂, -NH-C(O)-O-(R^#), 또는

-N(R^#)-C(O)-O-(R^#), 여기서 각각의 R^#는 독립적으로 위에서 정의되어 있다.

“우레아” 기는 다음 식의 라디칼이고: -N(알킬)C(O)N(R^#)₂,

-N(알킬)C(O)NH(R^#), -N(알킬)C(O)NH₂, -NHC(O)N(R^#)₂, -NHC(O)NH(R^#), 또는 -NH(CO)NH₂, 여기서 각각의 알킬 및 R^#는 독립적으로 위에서 정의된 바와 같다.

알킬 기를 제외하고 본원에 기재된 기가 "치환된" 것으로 언급될 때, 이들은 임의의 적절한 치환기 또는 치환기들로 치환될 수 있다. 치환기의 예시적 예시는 여기서 개시된 예시적 화합물 및 구체예에서 발견되는 것들, 또한 할로겐 (클로로, 아이오도, 브로모, 또는 플루오로); 알킬; 히드록실; 알콕시; 알콕시알킬; 아미노; 알킬아미노; 카르복시; 니트로; 시아노; 티올; 티오에테르; 이민; 이미드; 이미딘; 구아니딘; 엔아민; 아미노카르보닐; 아실아미노; 포스포네이트; 포스핀; 티오카르보닐; 설피닐; 설폰; 설폰아미드; 케톤; 알데히드; 에스테르; 우레아; 우레탄; 옥심; 히드록실 아민; 알콕시아민; 아르알콕시아민; N-옥사이드; 히드라진; 히드라지드; 히드라존; 아지드; 이소시아네이트; 이소티오시아네이트; 시아네이트; 티오시아네이트; 산소 (=O); B(OH)₂, O(알킬)아미노카르보닐; 시클로알킬, 이는 모노시클릭 또는 융합된 또는 비-융합된 폴리시클릭 (예를 들어, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 또는 시클로헥실)일 수 있음, 또는 헤테로시클릴, 이는 모노시클릭 또는 융합된 또는 비-융합된 폴리시클릭 (예를 들어,　피롤리딜, 피페리딜, 피페라지닐, 모르폴리닐, 또는 티아지닐)일 수 있음; 모노시클릭 또는 융합된 또는 비-융합된 폴리시클릭 아릴 또는 헤테로아릴 (예를 들어,　페닐, 나프틸, 피롤릴, 인돌릴, 푸란일, 티오페닐, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피라졸릴, 피리딜, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 아크리디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 피리미딜, 벤즈이미다졸릴, 벤조티오페닐, 또는 벤조푸란일) 아릴옥시; 아르알킬옥시; 헤테로시클릴옥시; 및 헤테로시클릴 알콕시이다.

여기서 사용된, 용어 “피페리딘 디온 화합물”은 식 (I)의 화합물, 또한 여기서 제공된 추가 구체예를 지칭한다. 한 구체예에서, “피페리딘 디온 화합물”은 표 1에서 기술된 화합물이다. 용어 “피페리딘 디온 화합물”은 여기서 제공된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 및 입체 이성질체를 포함한다.

여기서 사용된, 용어 “약제학적으로 허용가능한 염(들)”은 무기 산 및 염기 및 유기 산 및 염기를 포함하는 약제학적으로 허용가능한 비-독성 산 또는 염기로부터 제조된 염을 지칭한다. 식 (I)의 화합물의 적합한 약제학적으로 허용가능한 염기 부가 염은 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 나트륨 및 아연으로 제조된 금속염 또는 라이신, N, N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민 (N-메틸-글루카민) 및 프로카인으로 제조된 유기 염을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 적합한 비-독성 산은, 비제한적으로, 무기 및 유기 산 가령 아세트산, 알긴산, 안트라닐산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포설폰산, 시트르산, 에텐설폰산, 포름산, 푸마르산, 푸로산, 갈락투론산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글리콜산, 브롬화 수소산, 염산, 이세티온산, 젖산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 점액산, 질산, 파모산, 판토텐산, 페닐아세트산, 인산, 프로피온산, 살리실산, 스테아르산, 숙신산, 설파닐산, 황산, 타르타르산 및 p-톨루엔설폰산을 포함한다. 특정 무독성 산은 염산, 브롬화 수소산, 말레산, 인산, 황산 및 메탄설폰산을 포함한다. 따라서 특정 염의 예는 염산염, 포름 및 메실레이트 염을 포함한다. 다른 것들은 당업계에 잘 알려져있다, 예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1990) or Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1995) 참조).

여기서 사용된 바와 같이 달리 지시되지 않는 한, 용어 "입체 이성질체" 또는 "입체 이성질체적으로 순수한"은 그 화합물의 다른 입체 이성질체가 실질적으로 없는 피페리딘 디온 화합물의 하나의 입체 이성질체를 의미한다. 예를 들어, 하나의 키랄 중심을 갖는 입체 이성질체적으로 순수한 화합물은 화합물의 반대 거울상 이성질체가 실질적으로 없을 것이다. 두 개의 키랄 중심을 갖는 입체 이성질체적으로 순수한 화합물은 화합물의 다른 부분 입체 이성질체가 실질적으로 없을 것이다. 전형적인 입체 이성질체적으로 순수한 화합물은 약 80 중량 % 초과의 화합물의 한 입체 이성질체 및 약 20 중량 % 미만의 화합물의 다른 입체 이성질체, 약 90 중량 % 초과의 화합물의 하나의 입체 이성질체 및 약 10 중량 %의 화합물의 다른 입체 이성질체, 약 95 중량 %의 화합물의 한 입체 이성질체 및 약 5 중량 % 미만의 화합물의 다른 입체 이성질체, 또는 약 97 중량 % 초과 화합물의 한 입체 이성질체 및 약 3 중량 % 미만의 화합물의 다른 입체 이성질체를 포함한다. 피페리딘 디온 화합물은 키랄 중심을 가질 수 있으며 라세미체, 개별 거울상 이성질체 또는 부분 입체이성질체 및 이들의 혼합물로 발생할 수 있다. 이러한 모든 이성질체 형태는 이들의 혼합물을 포함하여 본원에 개시된 구체예 내에 포함된다.

이러한 피페리딘 디온 화합물의 입체 이성질체적으로 순수한 형태의 사용 및 이러한 형태의 혼합물의 사용은 본원에 개시된 구체예에 포함된다. 예를 들어, 특정 피페리딘 디온 화합물의 거울상 이성질체를 동일하거나 동일하지 않은 양으로 포함하는 혼합물이 본원에 개시된 방법 및 조성물에 사용될 수 있다. 이러한 이성질체는 키랄 컬럼 또는 키랄 분해제와 같은 표준 기술을 사용하여 비대칭적으로 합성되거나 분해될 수 있다. 예를 들어, Jacques, J., et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley-Interscience, New York, 1981); Wilen, S. H., et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); Wilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972); Todd, M., Separation Of Enantiomers: Synthetic Methods (Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim, Germany, 2014); Toda, F., Enantiomer Separation: Fundamentals and Practical Methods (Springer Science & Business Media, 2007); Subramanian, G. Chiral Separation Techniques: A Practical Approach (John Wiley & Sons, 2008); Ahuja, S., Chiral Separation Methods for Pharmaceutical and Biotechnological Products (John Wiley & Sons, 2011) 참조.

또한 피페리딘 디온 화합물은 E 및 Z 이성질체, 또는 이들의 혼합물, 및 시스 및 트랜스 이성질체 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있음을 주목해야 한다. 특정의 구체예에서, 피페리딘 디온 화합물은 E 또는 Z 이성질체로서 분리된다. 다른 구체예에서, 피페리딘 디온 화합물은 E 및 Z 이성질체의 혼합물이다.

"호변 이성질체"는 서로 평형을 이루는 화합물의 이성질체 형태를 지칭한다. 이성질체 형태의 농도는 화합물이 발견되는 환경에 따라 달라지며, 예를 들어 화합물이 고체인지 유기 또는 수용액에 있는지에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 수용액에서 피라졸은 서로 호변 이성질체라고 하는 다음과 같은 이성질체 형태를 나타낼 수 있다:

.

당업자에 의해 쉽게 이해되는 바와 같이, 다양한 작용기 및 기타 구조는 호변이성을 나타낼 수 있으며 식　(I)의 화합물의 모든 호변 이성질체는 본 발명의 범위 내에 있다.

또한 피페리딘 디온 화합물은 하나 이상의 원자에서 비정상적인 비율의 원자 동위 원소를 함유할 수 있다는 점에 주목해야 한다. 예를 들어, 화합물은 삼중 수소 (³H), 요오드-125 (¹²⁵I), 황-35 (³⁵S), 또는 탄소-14 (¹⁴C)로 방사성 표지될 수 있거나, 또는 예를 들어, 중수소 (²H), 탄소-13 (¹³C), 또는 질소-15 (¹⁵N)와 같이 동위 원소 농축될 수 있다. 여기서 사용된, “동위원소 (isotopologue)"는 동위 원소가 농축된 화합물이다. 용어 "동위 원소 농축"은 그 원자의 천연 동위 원소 조성 이외의 동위 원소 조성을 갖는 원자를 지칭한다. "동위 원소 농축"은 또한 그 원자의 천연 동위 원소 조성 이외의 동위 원소 조성을 갖는 적어도 하나의 원자를 함유하는 화합물을 지칭할 수 있다. 용어 "동위 원소 조성"은 주어진 원자에 대해 존재하는 각 동위 원소의 양을 의미한다. 방사성 표지 및 동위 원소 농축 화합물은 치료제, 예를 들어 암 치료제, 연구 시약, 예를 들어 결합 분석 시약 및 진단제, 예를 들어 생체 내 조영제로서 유용하다. 본원에 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물의 모든 동위 원소 변이체는 방사성 여부에 관계없이 본원에 제공된 실시 양태의 범위 내에 포함되도록 의도된다. 일부 구체예에서, 피페리딘 디온 화합물의 동위 원소가 제공되며, 예를 들어 동위 원소는 중수소, 탄소-13 및/또는 질소-15 농축 피페리딘 디온 화합물이다. 여기서 사용된, "중수소화"는 하나 이상의 수소 (H)가 중수소 (D 또는 ²H로 표시됨)로 대체된 화합물, 즉, 화합물이 하나 이상의 위치에서 중수소가 농축된 화합물을 의미한다.

입체 이성질체 또는 동위 원소 조성물과는 독립적으로, 본원에 언급된 각각의 피페리딘 디온 화합물은 본원에서 논의된 임의의 약제학적으로 허용가능한 염의 형태로 제공될 수 있음이 이해된다. 동등하게, 동위 원소 조성은 본원에 언급된 각 피페리딘 디온 화합물의 입체 이성질체 조성과 독립적으로 변할 수 있음이 이해된다. 또한, 동위 원소 조성은 각각의 피페리딘 디온 화합물 또는 이의 염에 존재하는 요소로 제한되지만, 그렇지 않으면 각각의 피페리딘 디온 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염 염의 선택과는 독립적으로 달라질 수 있다.

묘사된 구조와 그 구조에 대한 이름 사이에 불일치가있는 경우, 묘사된 구조에 더 많은 가중치가 부여된다는 점에 주목해야 한다.

본원에 사용된 "치료하는"은 장애, 질병 또는 병태, 또는 장애, 질병 또는 병태와 관련된 하나 이상의 증상의 전체 또는 일부의 완화, 또는 이러한 증상의 추가 진행 또는 악화, 또는 장애, 질병 또는 병태 자체의 원인 (들)을 완화 또는 근절을 의미한다. 한 구체예에서, 장애는 본원에 기재된 바와 같은 안드로겐 수용체 매개 질환 또는 이의 증상이다.

본원에 사용된 "예방"은 장애, 질병 또는 상태의 전체 또는 일부의 발병, 재발 또는 확산을 지연 및/또는 방지; 대상체가 장애, 질병 또는 병태를 얻지 못하도록 금지; 또는 장애, 질병 또는 병태에 걸릴 위험을 줄이는 방법을 의미한다. 한 구체예에서, 장애는 본원에 기재된 바와 같은 안드로겐 수용체 매개 질환 또는 이의 증상이다.

피페리딘 디온 화합물과 관련된 용어 "유효량"은 본원에 개시된 장애, 질환 또는 상태 또는 이의 증상을 치료 또는 예방할 수 있는 양을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "대상체" 또는 "환자"는 소, 원숭이, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 래트, 토끼 또는 기니피그, 한 실시 양태에서 포유 동물, 다른 실시 양태에서 인간과 같은 동물을 포함하나 이에 제한되지 않는 동물을 포함한다. 한 구체예에서, 대상체는 안드로겐 수용체 매개 질환 또는 이의 증상을 갖거나 가질 위험이 있는 인간이다.

본원에 사용된 용어 "안드로겐 수용체" 또는 "AR" 또는 "NR3C4"는 테스토스테론 또는 디히드로테스토스테론을 포함하는 안드로겐 호르몬의 결합에 의해 활성화된 핵 호르몬 수용체를 지칭한다. 용어 "안드로겐 수용체"는 인간 안드로겐 수용체의 뉴클레오타이드 서열 또는 단백질 서열을 지칭할 수 있다 (예를 들어, Entrez 367, Uniprot P10275, RefSeq NM_000044 또는 RefSeq NP_000035).

본원에 사용된 용어 "AR- 전장" (AR-FL)은 N-말단 트랜스활성화 도메인 (NTD, 엑손 1), DNA- 결합 도메인 (DBD, 엑손 2-3), 힌지 도메인 (엑손 4) 및 C 말단 리간드 결합 도메인 (LBD, 엑손 4-8)을 함유하는 AR 단백질을 지칭한다.

용어 "거세 저항성 전립선 암"(CRPC)은 환자가 안드로겐 박탈 요법 또는 테스토스테론을 감소시키기 위해 다른 요법을 계속받는 동안 악화되거나 진행되는 진행성 전립선 암, 또는 호르몬 난치성, 호르몬-반응성, 안드로겐 독립적이거나 화학적 또는 외과적 거세 저항성으로 간주되는 전립선 암을 지칭한다. 거세 저항성 전립선 암 (CRPC)는 진행중인 ADT 및/또는 외과적 거세에도 불구하고 발생하는 진행성 전립선 암이다. 거세 저항성 전립선 암은 전립선 특이 항원 (PSA)의 증가 또는 더 높은 혈청 수준, 전이, 골 전이, 통증, 림프절 침범, 종양 성장에 대한 크기 또는 혈청 마커의 증가, 예후 또는 환자 상태의 진단 마커의 악화에 의해 입증되는 바와 같이, 이전의 외과 적거세, 성선 자극 호르몬 방출 호르몬 작용제 (예를 들어 류프롤리드) 또는 길항제 (예를 들어 데가렐릭스 또는 아바렐릭스), 항 안드로겐 (예를 들어 비칼루타마이드, 플루타마이드, 엔잘루타마이드, 케토코나졸, 아미노글루테타마이드), 화학요법제 (예를 들어 도세탁셀, 파클리탁셀, 카바지탁셀, 아드리아마이신, 미톡산트론, 에스트라무스틴, 사이클로포스파미드), 키나제 억제제 (이마티닙 (Gleevec.RTM.) 또는 제피티닙 (Iressaib. RTM.), 카보잔티닙(Cometriq.TM., XL184라고도 함)) 또는 기타 전립선 암 요법 (예를 들어 백신 (sipuleucel-T (Provenge.RTM.), GVAX 등), 허브 (PC-SPES) 및 분해효소 억제제 (아비라테론))를 사용한 지속적인 치료에도 불구하고 계속 진행되거나 악화되거나 환자의 건강에 악영향을 미치는 전립선 암으로 정의된다.

피페리딘 디온 화합물

여기서 제공된 것은 다음 식 (I)를 가지는 화합물:

(I)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고,

여기서

R^N는 H;

각각의 R¹는 할로겐, CN, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R² 및 R³는 각각 H, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고;

각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고;

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

n은 0-4;

m은 0-8;

p는 1-3;

V는

여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH 또는 CR^B;

각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 및 치환된 및 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-5 시클로알킬 또는 3-5 원 헤테로시클릴을 형성하고;

a는 0-3; 및

b는 0-2이다.

식 (I)의 화합물의 한 구체예에서, 화합물은 다음이다:

(IIa).

식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, 화합물은 다음이다:

(IIb).

식 (I), (IIa) 및 (IIb)의 화합물의 일부 구체예에서, 각각의 R¹는 할로겐, CN, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되다. 식 (I), (IIa) 및 (IIb)의 화합물의 일부 구체예에서, 각각의 R¹는 Cl, F, Br, CN, -CH₃, 및 -CH₂CH₃로부터 독립적으로 선택되다. 다른 구체예에서, 각각의 R¹는 Cl, F, 및 CN로부터 독립적으로 선택되다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, n은 0이다. 다른 구체예에서, n은 1이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다:

(III).

식 (I)의 화합물의 다른 구체예에서, 화합물은 다음이다:

(IV).

식 (I)의 화합물의 역시 다른 구체예에서, 화합물은 다음이다:

(V).

일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 식 (III), (IV) 또는 (V)의 화합물, 여기서 각각의 R¹는 Cl, F, 및 CN로부터 독립적으로 선택되다. 일부 그러한 구체예에서, R¹는 F 또는 Cl이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, R² 및 R³는 각각 H, 치환된 또는 비치환된 메틸, 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 시클로부틸 또는 시클로펜틸을 형성한다. 일부 그러한 구체예에서, R² 및 R³는 각각 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 비치환된 시클로프로필을 형성한다. 일부 다른 구체예에서, R² 및 R³는 둘 다 H 또는 메틸, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 비치환된 시클로프로필을 형성한다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, 각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 메틸 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필 또는 시클로부틸을 형성한다. 일부 구체예에서, 각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 메틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 비치환된 시클로프로필을 형성한다. 다른 구체예에서, 각각의 R⁴는 메틸 및 CH₂OH로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 비치환된 시클로프로필을 형성한다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, m은 0, 1, 2, 3 또는 4이다. 일부 구체예에서 m은 0, 1, 또는 2.이다

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성한다. 일부 그러한 구체예에서, 화합물은 다음이다:

(VI).

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, R^x는 H이다. 다른 구체예에서, R^x는 CH₃이다. 역시 다른 구체예에서, R^x는 F이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, L은 -O-, -O(CH₂)-, 또는 -O(CH₂)(CH₂)-이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, A는 CH이다. 식 (I)의 화합물의 일부 다른 구체예에서, B는 CH이다. 역시 다른 구체예에서, B는 N이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, a는 0, 1 또는 2이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, 각각의 R^A는 Cl, Br, F, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, CH₂CH₂CH(CH₃)₂, CH(CH₃)CH(CH₃)₂, CH₂C(CH₃)₃, CF₃, CF₂CH₃, CH₂CH₂F, CH₂CHF₂, CH₂CF₃, CH₂OH, CH(CH₃)OH, CH₂CH₂OH, CH(CH₃)CH₂OH, CH₂CH(CH₃)OH, 시클로프로필, 시클로부틸, 및 시클로펜틸로부터 독립적으로 선택되다. 일부 그러한 구체예에서, 각각의 R^A는 Cl, F, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃, 및 CH₂CH₂F로부터 독립적으로 선택되다. 다른 구체예에서, 각각의 R^A는 Cl, F, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃, 및 CH₂CH₂F로부터 독립적으로 선택되다. 역시 다른 구체예에서, 각각의 R^A는 Cl, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃ 및 CH₂CH₂F로부터 독립적으로 선택되다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, b는 0이다. 식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, R^C는 CF₃이다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, R⁵ 및 R⁶는 메틸, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 시클로프로필, 시클로부틸, 테트라히드로푸란일, 또는 테트라히드로피란일을 형성한다. 다른 구체예에서, R⁵ 및 R⁶는 메틸, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 시클로부틸을 형성한다.

식 (III), (IV) 또는 (V)의 화합물의 일부 구체예에서, 각각의 R¹는 Cl, F, 및 CN로부터 독립적으로 선택되고, R² 및 R³는 H 또는 메틸이다. 일부 그러한 구체예에서, 각각의 R⁴는 메틸 및 CH₂OH로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 비치환된 시클로프로필을 형성한다. 일부 그러한 구체예에서, R⁴는 메틸이다. 일부 다른 그러한 구체예에서, L　은 -O-, -O(CH₂)-, 또는 -O(CH₂)(CH₂)-이다. 역시 다른 그러한 구체예에서, A는 CH이다. 역시 다른 그러한 구체예에서, B는 CH이고, 각각의 R^A는 Cl, F, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃, 및 CH₂CH₂F로부터 독립적으로 선택되다. 다른 그러한 구체예에서, B는 N이고, 각각의 R^A는 Cl, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃ 및 CH₂CH₂F.로부터 독립적으로 선택되고 일부 다른 그러한 구체예에서, 각각의 R^A는 Cl, F, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃, 및 CH₂CH₂F이다. 역시 다른 그러한 구체예에서, R⁵ 및 R⁶는 메틸, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 시클로부틸을 형성한다.

식 (I), (IIa), 및 (IIb)의 화합물의 일부 구체예에서,

R^N는 H;

각각의 R¹는 Cl, F, Br, CN, -CH₃, 및 -CH₂CH₃로부터 독립적으로 선택되고;

R² 및 R³는 각각 H, 치환된 또는 비치환된 메틸, 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 시클로부틸 또는 시클로펜틸을 형성하고;

각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 메틸 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필 또는 시클로부틸을 형성하고;

X는 CR^x;

R^x는 H, F, 또는 CH₃;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

n은 0-4;

m은 0-8;

p는 1-3;

V는

,

여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH 또는 CR^B;

각각의 R^A는 Cl, Br, F, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, CH₂CH₂CH(CH₃)₂, CH(CH₃)CH(CH₃)₂, CH₂C(CH₃)₃, CF₃, CF₂CH₃, CH₂CH₂F, CH₂CHF₂, CH₂CF₃, CH₂OH, CH(CH₃)OH, CH₂CH₂OH, CH(CH₃)CH₂OH, CH₂CH(CH₃)OH, 시클로프로필, 시클로부틸, 및 시클로펜틸로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 메틸로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 메틸, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 시클로프로필, 시클로부틸, 테트라히드로푸란일, 또는 테트라히드로피란일을 형성하고;

a는 0-3; 및

b는 0-2이다.

식 (III), (IV) 및 (V)의 화합물의 일부 구체예에서,

R^N는 H;

각각의 R¹는 Cl, F, Br, CN, -CH₃, 및 -CH₂CH₃로부터 독립적으로 선택되고;

R² 및 R³는 각각 H, 치환된 또는 비치환된 메틸, 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 시클로부틸 또는 시클로펜틸을 형성하고;

각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 메틸 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필 또는 시클로부틸을 형성하고;

X는 CR^x;

R^x는 H, F, 또는 CH₃;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

n은 0-4;

m은 0-8;

p는 1-3;

V는

,

여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH 또는 CR^B;

각각의 R^A는 Cl, Br, F, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, CH₂CH₂CH(CH₃)₂, CH(CH₃)CH(CH₃)₂, CH₂C(CH₃)₃, CF₃, CF₂CH₃, CH₂CH₂F, CH₂CHF₂, CH₂CF₃, CH₂OH, CH(CH₃)OH, CH₂CH₂OH, CH(CH₃)CH₂OH, CH₂CH(CH₃)OH, 시클로프로필, 시클로부틸, 및 시클로펜틸로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 메틸로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 메틸, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 시클로프로필, 시클로부틸, 테트라히드로푸란일, 또는 테트라히드로피란일을 형성하고;

a는 0-3; 및

b는 0-2이다.

여기서 제공된 추가 구체예는 상기한 특정 구체예의 하나 이상의 임의의 조합을 포함한다.

식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 표 1로부터의 화합물.

대표적인 식 (I)의 화합물, (II), (III), (IV), (V), 및 (VI),는 표 1에서 기술되어 있다.

표 1에서 기술된 피페리딘 디온 화합물을 여기서 기술된 AR 매개 분석에서 시험했고 거기에 활성을 가진다고 발견되었다. 한 구체예에서, 피페리딘 디온 화합물은 여기서 기술된 바와 같은 화합물이고, 여기서 1 μM의 농도에서 화합물은 적어도 약 50% 이상으로 AR 단백질의 분해를 유도한다.

피페리딘 디온 화합물의 제조 방법

여기서 기술된 피페리딘 디온 화합물은 종래의 유기 합성 및 시판 중인 출발 물질, 또는 여기서 제공된 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 예시로서 및 비제한적으로, 피페리딘 디온 식 (I)의 화합물, 여기서 R^N, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R^A, R^B, R^c, L,V, X, n, m, p, a 및 b는 여기서 정의된 바와 같음, 은 아래에 나타낸 반응식 1 및 6, 또한 여기서 기술된 실시예에 나타낸 바와 같이 제조될 수 있다. 당업자는 소정의 생성물에 도달하기 위해 예시적 반응식 및 실시예에서 기술된 절차를 변형하는 방법을 알 것임을 주목해야 한다.

반응식 1

반응식 1에 나타낸 바와 같이, 피페리딘 디온 식 (I)의 화합물, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-임, 은 페놀 유도체 (A는 CH 또는 CR^A) 또는 피리딘온 (A는 N) V-OH을, 적절히 유도체화된 및 N-보호된 피페리딜 (예를 들어, 여기서 P^N는 Boc이고 이탈 기 LG¹는 Br, Cl, OTs, 또는 OMs)와, 용매 내에서 염기의 존재 하에서 (예를 들어, DMF 내 CsCO₃, 또는 K₂CO₃ 아세토니트릴 내), 고온에서 (예를 들어, 약 40 °C 및 약 70　°C 사이에서) 반응시킴에 의해 출발하여 제조되어 중간체 a를 얻을 수 있다. 대안적으로, LG¹는 -OH일 때, V-OH를 미츠노부 조건 하에서 처리하여 (예를 들어, 용매 가령 THF 내에서, 실온에서 PPh₃ 및 DIAD 또는 DEAD로) 중간체 a를 얻는다. 중간체 a로부터의 N-보호 기 P^N의 제거 (예를 들어, P^N는 Boc일 때, 실온에서 용매 내 산으로 처리에 의해, 예를 들어, 디옥산 또는 EtOAc 내 HCl, 또는 실온에서 DCM 내 TFA로)는 중간체　b를 제공한다. 중간체 b 를 Br-C(R²)(R³)COOR (여기서 R는 C_1-4 알킬, 예를 들어, 메틸, 에틸, 또는 t-부틸)와, 염기의 존재 하에서, 가령 TEA, DBU, 또는 DIEA, 용매 내에서, 가령 THF, NMP, 또는 DMF, 임의로 고온에서 (예를 들어, 사이의 온도 약 20　°C 및 약 80　°C), 임의로 NaI의 존재 하에서 반응시켜 중간체 c를 제공한다. 염기, 가령 LiOH 또는 NaOH로, 용매, 가령 THF/H₂O 혼합물 또는 디옥산/H₂O 혼합물 내에서 처리에 의해; 또는 R는 t-부틸일 때,용매 내 산 , 가령 디옥산 내/DCM 혼합물 내 HCl 또는 DCM 내 TFA로 처리에 의해, 중간체 c, 여기서 R는 메틸 또는 에틸임, 내 카르복실레이트의 탈보호는 중간체　d를 제공한다.

적절히 유도체화된 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 h는 아민 보호 기　P^N로 보호된 R¹-유도체화된 3-니트로아닐린로부터 제조되어 (여기서 P^N는, 예를 들어 Boc일 때, 염기, 가령 TEA, DIEA, 또는 DBU의 존재 하에서, 용매, 가령 THF, NMP 또는 DMF 내에서 Boc₂O로 처리에 의해) 중간체 e를 형성한다. 중간체 e 내 니트로 기는 환원되어 (촉매, 가령 Pd/C의 존재 하에서, 용매, 가령 EtOH 또는 MeOH 내에서 환원제, 예를 들어 H₂로 처리에 의해; 또는 용매 가령 EtOH 및 H₂O 내에서 Fe 및 NH₄Cl) 모노-보호된 유도체화된 디아닐린 중간체 f를 얻었다. 염기의 존재 하에서 용매 내에서(DMF 또는 NMP 내, 고온, 예를 들어 약 50 °C 및 약 80 °C 사이에서; 또는 DIEA DMF 또는 NMP 내, 고온, 예를 들어, 약 150 °C에서 예를 들어, NaHCO₃, CsCO₃, 또는 K₂CO₃) 3-브로모피페리딘-2,6-디온과 중간체 f의 커플링, 이후 보호 기 P^N의 제거 (예를 들어, P^N는 Boc일 때, 용매 내 산, 가령 DCM 내 TFA로 처리; 또는 디옥산 또는 EtOAc 내 HCl로 처리)는 중간체 h를 제공한다. 대안적으로, 중간체 h는 중간체 e 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온의 철-촉매화된 환원적 커플링 (예를 들어, Zn, TMSCl, FeCl₂*4H₂O의 존재 하에서, 용매, 가령 NMP 내에서, 고온, 예를 들어 약 80　°C 내지 약 100 °C 사이에서 반응에 의해), 이후 보호 기 P^N의 제거 (예를 들어, P^N는 Boc일 때, 용매 내 산, 가령 DCM 내 TFA로 처리; 또는 디옥산 또는 EtOAc 내 HCl로 처리)를 통해 얻는다.

중간체 d을, 예를 들어, 임의로 HOBt와 조합하여, 염기, 가령 DIEA, NMM, 또는 TEA의 존재 하에서, 용매, 가령 DCM, DMF, 또는 NMP, 또는 이의 혼합물 내에서 커플링제, 가령 HATU, HBTU, EDC, 또는 DCC의 존재 하에서 중간체　h와 커플링시켜, 식 (I)의 화합물, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-임, 를 제공한다.

반응식 2

식 (I)의 화합물의 합성에 대한 대안적 접근법은 반응식 2에 나타낸다. 한 접근법에서, 공통 중간체 h을, Y는 OH일 때, 커플링제 (예를 들어 임의로 HOBt와 조합하여 HATU, HBTU, 또는 EDC 또는 DCC), 및 염기 (예를 들어 DIEA, TEA, 또는 NMM)의 존재 하에서 , 용매, 예를 들어, DCM, DMF, NMP 또는 이의 혼합물 내에서 ; 또는, Y는 Cl일 때, 염기, 가령 TEA 또는 DIEA의 존재 하에서, 용매, 가령 DMF 또는 NMP 내에서, 약 0 °C 및 약 25 °C 사이의 온도에서, Hal²-C(R²)(R³)COY (여기서 Hal²는 Cl 또는 Br)와 반응시켜, 중간체 i를 얻는다. 염기, 가령 DIEA의 존재 하에서, 용매, 가령 DMF 내에서, 고온, 예를 들어, 약 40 °C 및 약 60 °C 사이에서, 임의로 NaI의 존재 하에서, 중간체 i의 중간체 b로 처리는 표적인 식 (I)의 화합물을 제공한다.

반응식 3

중간체 a, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-임, 의 대안적 합성은 반응식 3에 나타낸다. 적절히 유도체화된 4-니트로페놀 또는 5-니트로피리딘-2-올을, 중간체 l (여기서 LG²는 Br, Cl 또는 OH)와, LG²는 Br 또는 Cl일 때, 용매 내에서 염기의 존재 하에서, 고온에서 (예를 들어, 염기는 CsCO₃ 또는 K₂CO₃, 용매는 아세토니트릴, DMF 또는 NMP이고, 온도는 약 50　°C 및 약 80 °C 사이임) 반응시켜 중간체　n를 얻는다. LG²는 OH일 때, 미츠노부 반응을 수행하여 (용매, 가령 THF 내에서, 실온에서 PPh₃ 및 DIAD 또는 DEAD를 사용하여) 중간체 n를 얻는다. 대안적으로, A는 N일 때, 적절히 유도체화된 2-할로-5-니트로피리딘을 중간체 m와, 염기, 가령 CsCO₃ 또는 K₂CO₃의 존재 하에서, 용매, 가령 아세토니트릴, DMF, THF, 또는 NMP 내에서, 고온, 예를 들어 약 50　°C 및 약 70 °C 사이에서 반응시켜, 중간체 n를 얻는다. 용매 내에서, (예를 들어, H₂ EtOH 내, 촉매, 예를 들어, Pd/C; 또는 Fe 및 NH₄Cl의 존재 하에서, EtOH 및 H₂O 내, 고온, 예를 들어 약 80 °C에서) 환원제로 중간체 n 내 니트로 기의 환원으로 중간체 o를 제공한다. 중간체 o 과 R’OOC-C(R⁵)(R⁶)Hal (여기서 Hal는 Br 또는 Cl 및 R’는 C_1-3 알킬)를 염기의 존재 하에서 (예를 들어 DIEA 또는 TEA) 고온에서 (예를 들어, 110 °C 및 약 130 °C 사이에서) 반응시켜 중간체 p를 제공한다. 중간체 p 를, 염기, 가령 TEA의 존재 하에서, 용매 , 가령 EtOAc 내에서, 고온에서, 예를 들어, 약 70　°C 및 약 90　°C 사이에서 적절히 유도체화된 4-이소티오시아네이토벤조니트릴 또는 5-이소티오시아네이토피콜리노니트릴와 반응시켜 중간체 a를 제공하고, 이를 추가 반응시켜 상기 반응식에서 기술된 바와 같은 식　(I)의 화합물, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-임, 를 얻을 수 있다.

대안적으로, MgSO₄의 존재 하에서, 고온, 예를 들어 약 50 °C 내지 약 70 °C 사이에서, 중간체 o 와 CN-C(R⁵)(R⁶)OH의 반응은 중간체 q를 제공한다. 용매, 가령 DCM 내에서 C(=O)(R⁵)(R⁶) 와 TMSCN 및 TMSOTf의 반응에 의해 시약 CN-C(R⁵)(R⁶)OH가 형성될 수 있다. 용매, 가령 DMF 또는 DMA 내에서 중간체 q와 적절히 유도체화된 4-이소티오시아네이토벤조니트릴 또는 5-이소티오시아네이토피콜리노니트릴의 반응, 이후, 용매, 가령 MeOH 또는 EtOH 내에서, 고온, 예를 들어 약 70 °C 및 약 80 °C 사이에서 산, 예를 들어, HCl로 처리는 상기한 바와 같이 사용되는 중간체 a를 제공하고, 식 (I)의 화합물, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-임, 를 얻는다.

중간체 V-OH, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬임, 의 합성은 반응식 4, 5, 및 6에 나타낸다.

반응식 4

중간체 r, 여기서 P^O는 페놀 보호 기, 예를 들어 아세틸 또는 벤질임, 은, 촉매 및 리간드, 예를 들어, CPhos PdG3 및 CPhos의 존재 하에서 용매, 예를 들어, 톨루엔 내에서, 저온에서 예를 들어, 약 0　°C 및 약 25 °C 사이에서 R^A-Zn-Br로 처리시켜 중간체 s를 형성할 수 있다. 보호 기 P^O의 제거 (P^O는 아세틸일 때, 용매, 가령 MeOH 또는 EtOH 내에서 염기, 가령 K₂CO₃로 처리에 의해; 또는 P^O는 벤질일 때, 촉매 가령 Pd/C의 존재 하에서, 용매, 가령 EtOH 또는 MeOH 내에서 환원제 가령 H₂로 처리에 의해)로, 중간체 V-OH, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬임, 를 제공하고 이는 상기 반응식에서 사용될 수 있다.

반응식 5

대안적으로, 반응식 5에 나타낸 바와 같이, R^A는, 촉매 및 리간드, 예를 들어, CPhos　PdG3 및 CPhos의 존재 하에서 용매, 예를 들어, 톨루엔 내에서, 저온에서 예를 들어, 약 0　°C 및 약 25 °C 사이에서 중간체 t 와 R^A-Zn-Br의 반응에 의해 함입되어 중간체 u, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성할 수 있고, 이는 상기 반응식에서 중간체 a와 유사하게 사용될 수 있다.

반응식 6

상기 반응식에서의 사용을 위한 중간체 x, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-이고 R^A는 아래에 정의됨,는 반응식 6에 나타낸 바와 같이 제조될 수 있다. 제 1 단계에서, 2-브로모-4-니트로페놀 또는 3-브로모-5-니트로피리딘-2-올을, 염기의 존재 하에서 용매 내에서 (예를 들어, CsCO₃ 또는 K₂CO₃, DMF 내, NMP, 또는 아세토니트릴), 고온에서 (예를 들어, 약 40 °C 및 약 70　°C 사이에서) 적절히 유도체화된 및 N-보호된 피페리딜 (예를 들어, 여기서 P^N는 Boc이고 이탈 기 LG³는 Br, Cl, OTs, 또는 OMs)와 반응시켜 중간체 v를 얻는다. 대안적으로, LG³는 -OH일 때, 2-브로모-4-니트로페놀 또는 3-브로모-5-니트로피리딘-2-올을 미츠노부 조건 하에서 처리하여 (예를 들어, 용매 가령 THF 내에서, 실온에서 PPh₃ 및 DIAD 또는 DEAD로) 중간체 v를 얻는다. R^A의 도입은 용매 (가령 1,4-디옥산/물 혼합물) 내 팔라듐 촉매 (예를 들어 Pd(dppf)Cl₂) 및 염기 (가령 K₃PO₄)의 존재 하에서 중간체 v 와 보로네이트 R^A'[B(OR⁺)₂]₂(여기서 R^A'는 치환된 또는 비치환된 C_2-6 알케닐, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 또는 치환된 또는 비치환된 C_5-6 시클로알케닐이고, R⁺는 보론 원자 및 자신들이 부착된 원자와 함께 시클릭 보로네이트, 예를 들어, 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란을 형성한다), 의 반응에 의해 달성되어, 중간체　w를 제공하고, 여기서 R^A'는치환된 또는 비치환된 C_2-6 알케닐, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 또는 치환된 또는 비치환된 C_5-6 시클로알케닐이다. 촉매, 가령 Pd/C의 존재 하에서, 용매, 가령 MeOH 또는 EtOH 내에서, 약 20 °C 및 약 30 °C 사이의 온도에서 환원제, 가령 H₂를 사용하여, 중간체 w 내 니트로 기 및 R^A' 알케닐 기 또는 시클로알케닐의 환원은 중간체 x를 제공하고, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_2-6 알킬, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 또는 치환된 또는 비치환된 C_5-6 시클로알킬이고, 이는 상기 반응식에서 사용되어 식 (I)의 화합물을 얻을 수 있고, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-이고 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_2-6 알킬, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 또는 치환된 또는 비치환된 C_5-6 시클로알킬이다. 대안적으로, 중간체 v는 촉매 및 리간드 (예를 들어 cataCXium® A Palladacycle Gen. 3 및 부틸디-1-아다만틸포스핀)의 존재 하에서, 염기, 가령 Cs₂CO₃ 또는 K₂CO₃의 존재 하에서, 용매, 가령 톨루엔/물 혼합물 내에서, 고온에서, 예를 들어, 약 90　°C 및 약 110 °C 사이에서, R^ABF₃ ^-K⁺, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬임, 로 처리하여 중간체 y를 얻고, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬이다. 이전과 같이, 촉매, 가령 Pd/C의 존재 하에서, 용매, 가령 MeOH 또는 EtOH 내에서, 약 20 °C 및 약 30 °C 사이의 온도에서, 환원제, 가령 H₂를 사용하여, 중간체 y 내 니트로 기의 환원은 중간체 x를 제공하고, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬이고, 이는 상기 반응식에서 사용되어 식　(I)의 화합물을 얻을 수 있고, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-이고 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬이다.

일부 구체예에서, 식 (I)의 화합물의 거울상체의 키랄 분리 (표준 방법으로 및 여기서 기술된 바와 같이)는 식 (IIa) 및 식 (IIb)의 화합물을 제공한다

(IIa).

(IIb).

대안적으로, 상기 반응식에서 기술된 바와 같이 사용된 중간체 h 또는 i 의 표준 방법에 의한 키랄 분리는 식 (IIa) 또는 (IIb)의 화합물을 제공한다.

아민 및 히드록실기와 관련하여 용어 "보호된"은 가령 Protective Groups in Organic Synthesis, Greene, T. W.; Wuts, P. G. M., John Wiley & Sons, New York, N.Y., (5^th　Edition, 2014)에 기술된 것과 같이, 당업계의 숙련자에게 공지된 보호기와의 바람직하지 않은 반응으로부터 보호되는 이러한 작용기의 형태를 지칭하며, 이는 여기에 명시된 절차를 사용하여 추가하거나 제거할 수 있다.

아민 및 히드록실기와 관련하여 용어 "보호된"은 가령 Protective Groups in Organic Synthesis, Greene, T. W.; Wuts, P. G. M., John Wiley & Sons, New York, N.Y., (5^th　Edition, 2014)에 기술된 것과 같이, 당업계의 숙련자에게 공지된 보호기와의 바람직하지 않은 반응으로부터 보호되는 이러한 작용기의 형태를 지칭하며, 이는 여기에 명시된 절차를 사용하여 추가하거나 제거할 수 있다.

한 양상에서, 여기서 제공된 것은 식　(I)의 화합물을 제공하기 위한 방법이고:

(I)

상기 방법은 식 (h)의 화합물

(h), 을 식 (d)의 화합물과

(d),

커플링제, 및 염기의 존재 하에서, 용매 내에서, 식 (I)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함하고; 여기서

R^N는 H;

각각의 R¹는 할로겐, CN, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R² 및 R³는 각각 H, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고;

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 및 할로겐, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고;

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

n은 0-4;

m은 0-8;

p는 1-3;

V는

여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH 또는 CR^B;

각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 또는 치환된 및 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-5 시클로알킬 또는 3-5 원 헤테로시클릴을 형성하고;

a는 0-3; 및

b는 0-2이다.

한 구체예에서, 커플링제는 임의로 HOBt와 조합하여 HATU, HBTU, EDC 또는 DCC이다. 한 구체예에서, 커플링제는 HATU이다. 또다른 구체예에서, 염기는 DIEA, NMM 또는 TEA이다. 한 구체예에서, 염기는 DIEA이다. 또다른 구체예에서, 용매는 DCM, DMF, NMP, 또는 이의 혼합물이다. 한 구체예에서 용매는 DMF이다.

다음 구체예에서, 달리 특정되지 않는 한 변수 R^N, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R^A, R^B, R^C, L, V, A, B, n, m, p, a, 및 b는 여기서 정의된 바와 같다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (h)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(h),

상기 방법은 식 (g)의 화합물을

(g)

적합한 조건 하에서 탈보호시켜 식 (h)의 화합물을 얻는 것을 포함하고, 여기서 P^N는 아민 보호 기이다.

일부 구체예에서, P^N는 Boc 기이다. 일부 그러한 구체예에서, 탈보호는 용매 내 산으로 처리에 의해 수행된다. 일부 구체예에서, 산은 TFA이고 용매는 DCM이다. 다른 구체예에서, 산은 HCl이고 용매는 디옥산 또는 EtOAc이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (g)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(g)

상기 방법은 식 (f)의 화합물을

(f)

, 용매 내에서 염기의 존재 하에서, 고온에서, 식 (g)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 3-브로모피페리딘-2,6-디온과 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 그러한 구체예에서, 염기는 NaHCO₃, CsCO₃ 또는 K₂CO₃이고 용매는 DMF 또는 NMP이다. 한 구체예에서, 염기는 NaHCO₃이고, 용매는 DMF이다. 일부 그러한 구체예에서, 접촉은 약 50 °C 및 약 80　°C 사이의 온도에서 수행된다. 다른 구체예에서, 염기는 DIEA이다. 일부 그러한 구체예에서 용매는 DMF 또는 NMP이다. 일부 그러한 구체예에서, 접촉은 약 150 °C의 온도에서 수행된다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (f)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(f)

상기 방법은, 임의로 촉매의 존재 하에서, 용매 내에서, 식 (f)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 환원제를 사용하여 식　(e)의 화합물

(e)

내 니트로 기의 환원을 포함한다.

일부 그러한 구체예에서, 환원제는 H₂이고 촉매는 Pd/C이다. 일부 그러한 구체예에서, 용매는 EtOH 또는 MeOH이다. 다른 구체예에서, 환원제는 Fe 및 NH₄Cl이다. 일부 그러한 구체예에서, 용매는 EtOH 및 H₂O이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (e)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(e)

상기 방법은 용매 내에서 염기의 존재 하에서, 식 (e)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 보호제와의 반응에 의해 다음 식의 니트로아닐린

을 아민 보호 기 P^N로 보호를 포함한다.

일부 그러한 구체예에서, 아민 보호 기 P^N는 Boc이고 보호제는 Boc₂O이다. 일부 구체예에서, 염기는 TEA, DIEA 또는 DBU이다. 일부 구체예에서, 염기는 TEA이다. 일부 그러한 구체예에서, 용매는 THF, NMP 또는 DMF이다. 일부 구체예에서, 용매는 THF이다.

일부 다른 구체예에서, 상기 방법은 식 (g)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(g)

상기 방법은 식 (e)의 화합물

(e)

을 3-브로모피페리딘-2,6-디온과, Zn, TMSCl, 및 FeCl₂*4H₂O의 존재 하에서, 용매 내에서, 고온에서, 식 (g)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 용매는 NMP이다. 일부 구체예에서, 온도는 약 80　°C 내지 약 100 °C 사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (d)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(d)

상기 방법은 식 (c)의 화합물

(c)

여기서 R는 C_1-4 알킬임, 을 식 (d)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 탈보호시키는 것을 포함한다.

R는 메틸 또는 에틸인 일부 구체예에서, 탈보호는 염기로 처리에 의해, 용매 내에서 수행된다. 일부 구체예에서, 염기는 LiOH 또는 NaOH이다. 다른 구체예에서, 용매는 THF/H₂O 혼합물 또는 디옥산/H₂O 혼합물이다. R는 t-부틸인 다른 구체예에서, -탈보호는 용매 내 산으로 처리에 의해 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 산은 HCl이고 용매는 디옥산/DCM 혼합물이다. 다른 구체예에서, 산은 TFA이고 용매는 DCM이다.

일부 다른 구체예에서, 상기 방법은 식 (c)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(c)

상기 방법은 식 (b)의 화합물

(b)

을 Br-C(R²)(R³)COOR과, 용매 내에서 염기의 존재 하에서 식 (c)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 염기는 TEA, DBU, 또는 DIEA이다. 일부 구체예에서, 염기는 TEA이다. 다른 구체예에서, 용매는 THF, NMP, 또는 DMF이다. 일부 그러한 구체예에서, 용매는 THF이다. 일부 구체예에서, 접촉은 고온에서, 예를 들어, 약 20 °C 및 약 80　°C사이의 온도에서 행한다. 일부 구체예에서, 접촉은 NaI의 존재 하에서 행한다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (b)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(b)

상기 방법은 식 (b)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 식 (a)의 화합물

(a)

여기서 P^N는 아민 보호 기임, 을 탈보호시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, p^N는 Boc이다. 일부 그러한 구체예에서, 탈보호는 용매 내 산으로 처리에 의해 수행된다. 일부 구체예에서, 산은 HCl이고 용매는 디옥산 또는 EtOAc이다. 다른 구체예에서, 산은 TFA이고 용매는 DCM이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (a)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(a)

상기 방법은 화합물을 식 (a)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 V-OH, 여기서 LG¹는 OH, Br, Cl, OTs, 및 OMs로부터 선택되는 이탈 기임, 와 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, LG¹는 Br, Cl, OTs, 또는 OMs이고 접촉은 용매 내에서 염기의 존재 하에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 염기는 CsCO₃이고 용매는 DMF이다. 다른 구체예에서, 염기는 K₂CO₃이고 용매는 아세토니트릴이다. 일부 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 40 °C 및 약 70　°C 사이이다. 일부 구체예에서, 여기서 LG¹는 -OH이고 접촉은 PPh₃ 및 DIAD 또는 DEAD의 존재 하에서, 용매 내에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 용매는 THF이다. 일부 구체예에서, 접촉은 실온에서 수행된다.

또한 식 (I)의 화합물의 제조 방법이 제공되고

(I)

상기 방법은 식 (i) 의 화합물

(i)

을 식 (b)의 화합물

(b)

여기서 Hal²는 Br 또는 Cl임, 과 용매 내에서 염기의 존재 하에서, 식 (I)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서접촉시키는 것을 포함하고; 여기서

R^N는 H;

각각의 R¹는 할로겐, CN, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R² 및 R³는 각각 H, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고;

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 및 할로겐, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고;

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

n은 0-4;

m은 0-8;

p는 1-3;

V는

여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH 또는 CR^B;

각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 또는 치환된 및 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-5 시클로알킬 또는 3-5 원 헤테로시클릴을 형성하고;

a는 0-3; 및

b는 0-2이다.

한 구체예에서, 염기는 DIEA, TEA 또는 NMM이다. 한 구체예에서, 염기는 DIEA이다. 또다른 구체예에서, 용매는 DMF 또는 NMP이다. 한 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 한 그러한 구체예에서, 온도는 약 40 °C 및 약 60 °C 사이이다. 한 구체예에서, 접촉은 NaI의 존재 하에서 수행된다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (i) 의 화합물

(i),

을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고 상기 방법은 식 (h)의 화합물

(h)

을 식 (i )의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서, Hal²-C(R²)(R³)COY, 여기서 Y는 OH 또는 Cl임, 와 접촉시키는 것을 포함한다.

Y는 OH인 일부 구체예에서, 접촉은 커플링제, 및 염기의 존재 하에서, 용매 내에서 수행된다. 한 구체예에서, 커플링제는 임의로 HOBt와 조합하여 HATU, HBTU, EDC 또는 DCC이다. 한 구체예에서, 커플링제는 HATU이다. 일부 구체예에서, 염기는 DIEA, TEA, 또는 NMM이다. 한 구체예에서, 염기는 DIEA이다. 한 구체예에서, 용매는 DCM, DMF, NMP 또는 이의 혼합물이다. 한 구체예에서, 용매는 DMF이다. 다른 구체예에서, 여기서 Y는 Cl이고, 접촉은 용매 내에서 염기의 존재 하에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 염기는 TEA 또는 DIEA이다. 다른 구체예에서, 용매는 DMF 또는 NMP이다. 일부 구체예에서, 접촉은 약 0 °C 및 약 25 °C 사이의 온도에서 수행된다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (a)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(a),

상기 방법은 식 (q)의 화합물

(q)

을 화합물

과, 제 1 용매 내에서 접촉시키고, 이후 제 2 용매 내에서 식 (a)의 화합물, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-임, 을 얻기에 적합한 조건 하에서 산으로 처리하는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 제 1 용매는 DMF이고 또는 DMA이다. 일부 구체예에서, 산은 HCl이다. 일부 그러한 구체예에서, 제 2 용매는 MeOH 또는 EtOH이다. 일부 구체예에서, 산과의 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 70 °C 및 약 80　°C 사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (q)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(q),

상기 방법은 식 (o)의 화합물

(o),

을 건조제의 존재 하에서 식 (q)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 CN-C(R⁵)(R⁶)OH과 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 건조제는 MgSO₄이다. 일부 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 50 °C 및 약 70 °C 사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (a)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(a),

상기 방법은 식 (p)의 화합물

(p)

, 을 화합물

여기서 R'는 C_1-3 알킬임, 과 용매 내에서 염기의 존재 하에서, 식 (a)의 화합물, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-임, 를 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 염기는 TEA이다. 다른 구체예에서, 용매는 EtOAc이다. 일부 구체예에서 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 70　°C 및 약 90　°C사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (p)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(p),

상기 방법은 식 (o)의 화합물

(o)

, 을 R'OOC-C(R⁵)(R⁶)Hal, 여기서 Hal는 Br 또는 Cl임, 과 염기의 존재 하에서, 식 (p)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, Hal는 Br이다.

일부 구체예에서, 염기는 DIEA 또는 TEA이다. 일부 구체예에서 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 110　°C 및 약 130　°C사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (o)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(o),

상기 방법은 식 (n)의 화합물

(n)

을 환원제로, 용매 내에서, 식 (o)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 환원시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 환원제는 H₂이다. 일부 그러한 구체예에서, 접촉은 촉매의 존재 하에서 수행된다. 일부 구체예에서 촉매는 Pd/C이다. 일부 그러한 구체예에서, 용매는 EtOH이다. 다른 구체예에서, 환원제는 Fe 및 NH₄Cl이다. 일부 그러한 구체예에서, 용매는 EtOH 및 H₂O이다. 일부 그러한 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 구체예에서, 온도는 약 80 °C이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (n)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(n),

상기 방법은 식 (m)의 화합물

(m)

, 을 화합물

여기서 A는 N임, 과 용매 내에서 염기의 존재 하에서, 식 (n)의 화합물, 여기서 A는 N임, 를 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 염기는 CsCO₃ 또는 K₂CO₃이다. 일부 구체예에서, 염기는 K₂CO₃이다. 일부 구체예에서, 용매는 아세토니트릴, DMF, THF, 또는 NMP이다. 일부 구체예에서, 용매는 아세토니트릴이다. 일부 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 50　°C 및 약 70 °C 사이이다.

일부 다른 구체예에서, 상기 방법은 식 (n)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(n),

상기 방법은 식 (l)의 화합물

(l)

을 화합물

여기서 LG²는 Br, Cl 또는 OH임, 과 식 (n)의 화합물, 여기서 A는 N임, 를 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, LG²는 Br 또는 Cl이고, 접촉은 용매 내에서 염기의 존재 하에서 수행된다. 일부 구체예에서, 염기는 CsCO₃ 또는 K₂CO₃이다. 일부 구체예에서, 염기는 CsCO₃이다. 일부 구체예에서, 용매는 아세토니트릴, DMF 또는 NMP이다. 일부 구체예에서, 용매는 아세토니트릴이다. 일부 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 구체예에서 온도는 약 50　°C 및 80 °C사이이다. 일부 구체예에서, Hal는 Br이고, 염기는 CsCO₃이고, 용매는 DMF이고 온도는 약 70 °C이다. 다른 구체예에서, Hal는 Cl이고 염기는 K₂CO₃이고, 용매는 아세토니트릴이고, 온도는 약 60　°C이다. 일부 구체예에서, LG²는 OH이고 , 접촉은 PPh₃ 및 DIAD 또는 DEAD의 존재 하에서, 용매 내에서 수행된다. 일부 구체예에서, 용매는 THF이다. 일부 구체예에서 접촉은 실온에서 수행된다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 V-OH의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

V-OH

상기 방법은 식 (s)의 화합물

(s)

여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬이고 P^O는 임 페놀 보호 기임, 을 식 V-OH의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 탈보호시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, P^O는 아세틸이고, 탈보호는 염기로 처리에 의해, 용매 내에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 염기는 가령 K₂CO₃이다. 일부 구체예에서, 용매는 MeOH 또는 EtOH이다. 다른 구체예에서, P^O는 벤질이고, 탈보호는 환원제로 처리에 의해 용매 내에서 수행된다. 일부 구체예에서, 환원제는 H₂이고, 접촉은 촉매의 존재 하에서 수행된다. 한 구체예에서, 촉매는 Pd/C이다. 일부 구체예에서, 용매는 EtOH 또는 MeOH이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (s)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(s)

상기 방법은 식 (r)의 화합물

(r)

을 R^A-Zn-Br, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬임, 와 촉매 및 리간드의 존재 하에서, 용매 내에서, 식 (s)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 촉매 및 리간드는 CPhosPdG3 및 CPhos이다. 일부 구체예에서, 용매는 톨루엔이다. 일부 구체예에서, 접촉은 저온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 0　°C 및 약 25　°C사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (u)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(u)

상기 방법은 식 (t)의 화합물

(t)

을 R^A-Zn-Br, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬임, 과 촉매 및 리간드의 존재 하에서, 용매 내에서, 식 (u)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 촉매 및 리간드는 CPhosPdG3 및 CPhos이다. 일부 구체예에서, 용매는 톨루엔이다. 일부 구체예에서, 접촉은 저온에서 수행된다. 일부 그러한 구체예에서, 온도는 약 0　°C 및 약 25　°C사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법 은 식 (x)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(x)

상기 방법은 식 (y)의 화합물

(y)

을 환원제로, 여기서 L은 -O(CH₂)_p-, 및 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬임, 용매 내에서, 식 (x)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 환원시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 환원제는 촉매의 존재 하에서 H₂이다. 일부 구체예에서 촉매는 Pd/C이다. 일부 구체예에서, 용매는 MeOH 또는 EtOH이다. 일부 구체예에서, 접촉은 약 20 °C 및 약 30　°C 사이의 온도에서 수행된다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (y)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(y)

상기 방법은 식 (v)의 화합물

(v)

을 R^ABF₃ ^-K⁺, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬임, 과 촉매 및 리간드의 존재 하에서, 용매 내에서 염기의 존재 하에서, 식 (y)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서 촉매 및 리간드는 cataCXium® A Palladacycle Gen. 3 및 부틸디-1-아다만틸포스핀이다. 일부 구체예에서, 염기는 Cs₂CO₃ 또는 K₂CO₃이다. 일부 구체예에서 염기는 Cs₂CO₃이다. 일부 구체예에서, 용매는 톨루엔/물 혼합물이다. 일부 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 구체예에서, 온도는 약 90 °C 및 약 110　°C사이이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (x)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(x)

상기 방법은 식 (w)의 화합물

(w)

여기서 L은 -O(CH₂)_p-이고, R^A'은 치환된 또는 비치환된 C_2-6 알케닐, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 또는 치환된 또는 비치환된 C_5-6 시클로알케닐임, 을 환원제로, 용매 내에서, 식 (x)의 화합물, 여기서 R^A는 치환된 또는 비치환된 C_2-6 알킬, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필 또는 치환된 또는 비치환된 C_5-6 시클로알킬임, 를 얻기에 적합한 조건 하에서 환원시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 환원제는 촉매의 존재 하에서 H₂이다. 일부 구체예에서 촉매는 Pd/C이다. 일부 구체예에서, 용매는 MeOH 또는 EtOH이다. 일부 구체예에서, 접촉은 약 20　°C 및 약 30　°C사이의 온도에서 수행된다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (w)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(w)

상기 방법은 식 (v)의 화합물

(v)

을 R^A'[B(OR⁺)₂]₂, 여기서 R^A'는 치환된 또는 비치환된 C_2-6 알케닐, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 또는 치환된 또는 비치환된 C_5-6 시클로알케닐이고, R⁺는 보론 원자 및 자신들이 부착된 원자와 함께, 시클릭 보로네이트, 예를 들어, 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란을 형성함, 과 촉매의 존재 하에서 및 염기, 용매 내에서, 식　(w)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, 촉매는 Pd(dppf)Cl₂이다. 일부 구체예에서, 염기는 K₃PO₄이다. 일부 구체예에서, 용매는 1,4-디옥산/물 혼합물이다.

일부 구체예에서, 상기 방법은 식 (v)의 화합물을 제조하는 것을 부가적으로 포함하고

(v)

상기 방법은 화합물

을 화합물

여기서 LG³는 OH, Br, Cl, OTs, 또는 Oms임, 과 식　(v)의 화합물을 얻기에 적합한 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함한다.

일부 구체예에서, LG³는 Br, Cl, OTs, 또는 OMs이고, 접촉은 용매 내에서 염기의 존재 하에서 수행된다. 일부 구체예에서, 염기 CsCO₃ 또는 K₂CO₃이다. 일부 구체예에서, 용매는 DMF이고, NMP, 또는 아세토니트릴이다. 일부 구체예에서, 접촉은 고온에서 수행된다. 일부 구체예에서, 온도는 약 40 °C 및 약 70　°C 사이이다. 다른 구체예에서, LG³는

-OH이고, 접촉은 PPh₃ 및 DIAD 또는 DEAD의 존재 하에서, 용매 내에서 수행된다. 일부 구체예에서, 용매는 THF이다. 일부 구체예에서, 접촉은 실온에서 수행된다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 다음 식 (a)를 가지는 화합물:

(a)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고, 여기서 변수는 본명세서의 다른 곳에서 기술된 바와 같다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 식 (a)의 화합물이고, 여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH, 또는 CR^B;

각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬, 및 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬 또는 3-6 원 헤테로시클릴을 형성하고;

a는 0-3;

b는 0-2

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

m은 0-8;

p는 1-3;

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고; 그리고

P^N는 아민 보호 기이다.

한 구체예에서, P^N는 tert-부틸옥시카르보닐 또는 카르복시벤질이다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 다음 식 (b)를 가지는 화합물:

(b)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고, 여기서 변수는 본명세서의 다른 곳에서 기술된 바와 같다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 식 (b)의 화합물이고, 여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH, 또는 CR^B;

각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬, 및 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬 또는 3-6 원 헤테로시클릴을 형성하고;

a는 0-3;

b는 0-2

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

m은 0-8;

p는 1-3; 및

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성한다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 다음 식 (c)를 가지는 화합물:

(c)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고, 여기서 변수는 본명세서의 다른 곳에서 기술된 바와 같다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 식 (c)의 화합물이고, 여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH, 또는 CR^B;

각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬, 및 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬 또는 3-6 원 헤테로시클릴을 형성하고;

a는 0-3;

b는 0-2

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

m은 0-8;

p는 1-3;

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고;

R² 및 R³는 각각 H, 및 C_1-3알킬로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 C_3-6시클로알킬을 형성하고; 그리고

R는 C_1-4 알킬이다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 다음 식 (d)를 가지는 화합물:

(d)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고, 여기서 변수는 본명세서의 다른 곳에서 기술된 바와 같다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 식 (d)의 화합물이고, 여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH, 또는 CR^B;

각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬, 및 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬 또는 3-6 원 헤테로시클릴을 형성하고;

a는 0-3;

b는 0-2

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

m은 0-8;

p는 1-3;

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고; 그리고

R² 및 R³는 각각 H, 및 C_1-3알킬로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 C_3-6시클로알킬을 형성한다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 다음 식 (t)를 가지는 화합물:

(t)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고, 여기서 변수는 본명세서의 다른 곳에서 기술된 바와 같다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 식 (t)의 화합물이고, 여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH, 또는 CR^B;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬 또는 3-6 원 헤테로시클릴을 형성하고;

b는 0-2

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

m은 0-8;

p는 1-3;

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고; 그리고

P^N는 아민 보호 기이다.

한 구체예에서, P^N는 tert-부틸옥시카르보닐 또는 카르복시벤질이다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 다음 식 (u)를 가지는 화합물:

(u)

또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체이고, 여기서 변수는 본명세서의 다른 곳에서 기술된 바와 같다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 식 (u)의 화합물이고, 여기서

A는 N, CH, 또는 CR^A;

B는 N, CH, 또는 CR^B;

각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;

R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6　알킬, 또는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬;

R^C는 할로겐 또는 CF₃;

R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬 또는 3-6 원 헤테로시클릴을 형성하고;

b는 0-2

X는 CR^x;

R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;

L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;

m은 0-8;

p는 1-3;

각각의 R⁴는 독립적으로 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고; 그리고

P^N는 아민 보호 기이다.

한 구체예에서, P^N는 tert-부틸옥시카르보닐 또는 카르복시벤질이다.

사용방법

한 구체예에서, 여기서 기술된 화합물은 동물 또는 사람에서 병태를 치료 예방 또는 개선시키는 약제로서 유용성을 가진다. 여기서 기술된 피페리딘 디온 화합물은 동물 또는 사람에서 병태를 치료 예방 또는 개선시키는 약제로서 유용성을 가진다. 따라서, 여기서 제공된 것은 아래에서 기술된 질환의 치료 또는 예방을 포함하는, 피페리딘 디온 화합물의 많은 용도이다. 한 구체예에서, 여기서 제공된 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화합물의 투여를 포함한다.

여기서 제공된 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 하나 이상의 피페리딘 디온 화합물의 투여를 포함한다.

여기서 제공된 것은 대상체에서 안드로겐 수용체 (AR) 매개 질환의 치료 또는 예방 방법이고, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 화합물을 투여하는 것을 포함한다.

여기서 제공된 것은 대상체에서 AR 매개 질환의 치료 또는 예방 방법이고, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 피페리딘 디온 화합물은 표 1로부터의 화합물이다.

또다른 양상에서, 여기서 제공된 것은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 AR 매개 질환의 치료 또는 예방에서의 사용을 위한 화합물이다. 일부 구체예에서, 여기서 제공된 것은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 AR 매개 질환의 치료에서의 사용을 위한 화합물이다. 일부 구체예에서, 여기서 제공된 것은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 AR 매개 질환의 예방에서의 사용을 위한 화합물이다.

일부 구체예에서, 여기서의 방법에서 사용된 화합물은 여기서 기술된 바와 같은 피페리딘 디온 화합물이다. 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 식 (I)의 화합물. 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 식 (II)의 화합물. 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 식 (III)의 화합물. 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 식 (IV)의 화합물. 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 식 (v)의 화합물. 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 식 (VI)의 화합물. 일부 구체예에서, 화합물은 다음이다: 표 1로부터의 화합물.

일부 구체예에서, AR 매개 질환은 AR 야생형 매개 질환이다. 다른 구체예에서, AR 매개 질환은 AR 증폭결과이다.

특정의 구체예에서, AR 매개 질환은 전립선 암이다. 일부 그러한 구체예에서, 전립선 암은 거세 저항성 전립선 암 (CRPC)이다. 일부 그러한 구체예에서, 전립선 암은 전이성 거세 저항성 전립선 암 (mCRPC)이다. 역시 또다른 구체예에서, 전립선 암은 비-전이성 CRPC (nmCRPC)이다. 일부 구체예에서, 전립선 암은 호르몬 난치성이다. 일부 구체예에서, 전립선 암은 AR 길항제로 치료에 대해 내성이다. 예를 들어, 전립선 암은 엔잘루타마이드, 비칼루타마이드, 아비라테론, ARN-509, ODM-201, EPI-001, EPI-506, AZD-3514, 갈레테론, ASC-J9, 플루타마이드, 히드록시플루타마이드, 닐루타마이드, 시프로테론 아세테이트, 케토코나졸 또는 스피로노락톤으로 치료에 대해 내성이다.

여기서 제공된 것은 AR 수준을 감소시키는 방법이고, 상기 방법은 유효량의 피페리딘 디온 화합물을 대상체에 투여하는 것을 포함한다. 또한 여기서 제공된 것은 생체내, 생체외 또는 시험관내 세포를 유효량의 피페리딘 디온 화합물과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포내에서 AR 수준을 감소시키는 방법에서의 사용을 위한 피페리딘 디온 화합물이다. 한 구체예에서, 세포는 환자 내에 있다. 한 구체예에서, 세포는 환자 내에 있지 않는다. 한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 종양 내 야생형 AR의 수준을 감소시키는 방법이고, 상기 방법은, 종양 내 야생형 AR의 수준을 감소시키기 위해 치료적 유효량의 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 종양 내 AR-전장 (AR-FL)의 수준을 감소시키는 방법이고, 상기 방법은, 종양 내 AR-전장 (AR-FL)의 수준을 감소시키기 위해 치료적 유효량의 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, AR 수준은 피페리딘 디온 화합물 투여 이후 AR 수준과 비교하여 감소된다. 일부 구체예에서, AR 수준은 피페리딘 디온 화합물 투여 이후 AR 수준과 비교하여 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 805, 90%, 95%, 또는 99% 만큼 감소된다.

또한 여기서 제공된 것은 이를 필요로 하는 환자 내 AR의 단백질 활성을 조절하는 방법이고, 상기 환자에게 특정 양의 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 또한 여기서 제공된 것은 이를 필요로 하는 환자 내 AR의 단백질 활성을 감소시키는 방법이고, 상기 환자에게 특정 양의 피페리딘 디온 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예에서, AR의 단백질 활성은 피페리딘 디온 화합물 투여 이후AR의 단백질 활성과 비교하여 감소된다. 일부 구체예에서, AR의 단백질 활성은 피페리딘 디온 화합물 투여 이후AR의 단백질 활성과 비교하여 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 805, 90%, 95%, 또는 99% 만큼 감소된다.

여기서 기술된 방법의 일부 구체예에서, 상기 방법은 AR 길항제 (가령 시프로테론 아세테이트, 스피로노락톤, 비칼루타마이드, 엔잘루타마이드), 5α- 환원 효소 억제제 (가령 피나스테리드 및 두타스테리드), CYP17A1 억제제 (가령 아비라테론 아세테이트), 성선 자극 호르몬 방출 호르몬 (GnRH) 유사체 (가령 류프로렐린 및 세트로렐릭스) 및 항-성선 자극 호르몬 (가령 메게스트롤 아세테이트 및 메드록시 프로게스테론 아세테이트) 로부터 선택된 하나 이상의 제 2 약물을 투여하는 것을 부가적으로 포함한다.

일부 구체예에서, 여기서 제공된 화합물은 상기 방법 중 어느 것에서 사용될 수 있다.

일부 구체예에서, 여기서 제공된 피페리딘 디온 화합물은 상기 방법 중 어느 것에서 사용될 수 있다.

약제학적 조성물 및 투여 경로

본원에 제공된 화합물은 캡슐, 마이크로 캡슐, 정제, 과립, 분말, 트로키, 환약, 좌약, 주사제, 현탁액, 시럽, 패치, 크림, 로션, 연고, 젤, 스프레이, 용액 및 에멀젼과 같은 통상적인 제제 형태로 대상체에게 경구, 국소 또는 비경구로 투여될 수 있다.

본원에 제공된 피페리딘 디온 화합물은 캡슐, 마이크로 캡슐, 정제, 과립, 분말, 트로키, 환약, 좌약, 주사제, 현탁액, 시럽, 패치, 크림, 로션, 연고, 젤, 스프레이, 용액 및 에멀젼과 같은 통상적인 제제 형태로 대상체에게 경구, 국소 또는 비경구로 투여될 수 있다. 적합한 제형은 유기 또는 무기 첨가제, 가령 부형제 (예를 들어 수크로스, 전분, 만니톨, 소르비톨, 락토스, 글루코스, 셀룰로스, 탈크, 인산 칼슘 또는 탄산 칼슘), 결합제 (예를 들어, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 히드록시 메틸 셀룰로스, 폴리프로필피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 아라비아 고무, 폴리에틸렌 글리콜, 수크로스 또는 전분), 붕해제 (예를 들어 전분, 카르복시메틸셀룰로스, 히드록시프로필 전분, 저치환 히드록시프로필셀룰로스, 소듐 비카보네이트, 칼슘 포스페이트 또는 칼슘 시트레이트), 윤활제 (예를 들어 마그네슘 스테아레이트, 경질 무수 규산, 활석 또는 소듐 라우릴 설페이트), 향료 (예를 들어 시트르산, 멘톨, 글리신 또는 오렌지 분말), 방부제 (예를 들어 소듐 벤조에이트, 소듐 비설파이트, 메틸 파라벤 또는 프로필 파라벤)), 안정제 (예를 들어 구연산, 소듐 시트레이트 또는 아세트산), 현탁제 (예를 들어 메틸 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리클론 또는 알루미늄 스테아레이트), 분산제 (예를 들어 하이드록시프로필메틸셀룰로스), 희석제 (예를 들어 물) 및 베이스 왁스 (예를 들어 코코아 버터, 백색 바셀린 또는 폴리에틸렌 글리콜)를 사용하여 통상적으로 사용되는 방법에 의해 제조될 수 있다. 약제학적 조성물에서 피페리딘 디온 화합물의 유효량은 원하는 효과를 발휘할 수준일 수 있으며; 예를 들어, 경구 및 비경구 투여 모두를 위한 단위 투여으로 약 0.005 mg/kg의 대상체 체중 내지 약 10 mg/kg의 대상체 체중이다.

대상체에게 투여되는 피페리딘 디온 화합물의 투여량은 상당히 다양하며 보건 의료인의 판단에 따라 달라질 수 있다. 일반적으로 피페리딘 디온 화합물은 1 일 1 ~ 4 회 약 0.001　mg/kg의 대상체 체중 내지 약 10　mg/kg의 대상체 체중의 용량으로 투여할 수 있지만, 상기 투여량은 피험자의 연령, 체중 및 의학적 상태 및 투여 유형에 따라 적절하게 다양할 수 있다. 한 구체예에서, 투여량은 약 0.001 mg/kg의 대상체 체중 내지 약 5　mg/kg의 대상체 체중, 약 0.01 mg/kg의 대상체 체중 내지 약 5　mg/kg의 대상체 체중, 약 0.05 mg/kg의 대상체 체중 내지 약 1 mg/kg의 대상체 체중, 약 0.1　mg/kg의 대상체 체중 내지 약 0.75 mg/kg의 대상체 체중 또는 약 0.25 mg/kg의 대상체 체중 내지 약 0.5　mg/kg의 대상체 체중이다. 한 구체예에서, 1 일 1 회 투여가 제공된다. 임의의 주어진 경우에, 투여되는 피페리딘 디온 화합물의 양은 활성 성분의 용해도, 사용된 제형 및 투여 경로와 같은 인자에 따라 달라질 것이다.

또다른 구체예에서, 여기서 제공된 것은 이를 필요로 하는 대상체에게 약 0.01 mg/일 내지 약 750 mg/일, 약 0.1 mg/일 내지 약 375 mg/일, 약 0.1 mg/일 내지 약 150　mg/일, 약 0.1 mg/일 내지 약 75 mg/일, 약 0.1 mg/일 내지 약 50　mg/일, 약 0.1 mg/일 내지 약 25　mg/일, 또는 약 0.1 mg/일 내지 약 10　mg/일의 피페리딘 디온 화합물의 투여를 포함하는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법이다.

또다른 구체예에서, 여기서 제공된 것은 약 0.1 mg 및 500 mg, 약 1 mg 및 250 mg, 약 1 mg 및 약 100 mg, 약 1 mg 및 약 50 mg, 약 1 mg 및 약 25 mg 사이, 또는 사이에서 약 1 mg 및 약 10 mg의 피페리딘 디온 화합물을 포함하는 단위 투여 제제이다.

특정 구체예에서, 여기서 제공된 것은 약 0.1 mg 또는 100 mg의 피페리딘 디온 화합물을 포함하는 단위 투여 제제이다.

또다른 구체예에서, 여기서 제공된 것은 0.5 mg, 1 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 30 mg, 35 mg, 50 mg, 70 mg, 100　mg, 125　mg, 140 mg, 175 mg, 200 mg, 250 mg, 280 mg, 350 mg, 500 mg, 560 mg, 700 mg, 750 mg, 1000　mg 또는 1400 mg의 피페리딘 디온 화합물을 포함하는 단위 투여 제제이다.

피페리딘 디온 화합물은 1 일 1 회, 2 회, 3 회, 4 회 이상 투여될 수 있다. 특정 구체예에서, 100mg 이하의 용량은 1 일 1 회 용량으로 투여되고 100mg 초과 용량은 총 1 일 용량의 절반과 동일한 양으로 1 일 2 회 투여된다.

피페리딘 디온 화합물은 편의상 경구 투여될 수 있다. 한 구체예에서, 경구 투여될 때, 피페리딘 디온 화합물은 식사 및 물과 함께 투여된다. 또다른 구체예에서, 피페리딘 디온 화합물은 물 또는 주스 (예를 들어, 사과 주스 또는 오렌지 주스) 또는 임의의 다른 액체에 분산되고 용액 또는 현탁액으로서 경구 투여된다.

피페리딘 디온 화합물은 또한 피내, 근육 내, 복강 내, 경피, 정맥 내, 피하, 비강 내, 경 막내, 설하, 뇌내, 질내, 경피, 직장, 점막, 흡입에 의해, 또는 귀, 코, 눈 또는 피부에 국소적으로 투여될 수 있다. 투여 방식은 의료 종사자의 재량에 맡겨지며 부분적으로 의학적 상태에 따라 달라질 수 있다.

한 구체예에서, 여기서 제공된 것은 부가적 담체, 부형제 또는 비히클없이 피페리딘 디온 화합물을 함유하는 캡슐이다.

또다른 구체예에서, 여기서 제공된 것은 유효량의 피페리딘 디온 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 비히클을 포함하는 조성물이고, 여기서 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 비히클은 부형제, 희석제, 또는 이의 혼합물을 포함할 수 있다. 한 구체예에서, 조성물은 약제학적 조성물이다.

조성물은 정제, 씹을 수 있는 정제, 캡슐, 용액, 비경구 용액, 트로키, 좌약 및 현탁액 등의 형태일 수 있다. 조성물은 단일 정제 또는 캡슐 또는 편리한 부피의 액체일 수 있는 투여 단위로 일일 투여량 또는 일일 투여량의 편리한 분획을 함유하도록 제형화될 수 있다. 한 구체예에서, 용액은 하이드로 클로라이드 염과 같은 수용성 염으로부터 제조된다. 일반적으로, 모든 조성물은 약제학적 화학에서 공지된 방법에 따라 제조된다. 캡슐은 피페리딘 디온 화합물을 적절한 담체 또는 희석제와 혼합하고 적절한 양의 혼합물을 캡슐에 채워서 제조할 수 있다. 통상적인 담체 및 희석제는 비제한적으로, 다양한 종류의 전분과 같은 불활성 분말 물질, 분말 셀룰로스, 특히 결정질 및 미세 결정질 셀룰로스, 과당, 만니톨 및 수크로스와 같은 당, 곡물 가루 및 유사한 식용 분말을 포함한다.

정제는 직접 압축, 습식 과립화 또는 건식 과립화에 의해 제조할 수 있다. 그들의 제형은 일반적으로 화합물뿐만 아니라 희석제, 결합제, 윤활제 및 붕해제를 포함한다. 전형적인 희석제는 예를 들어 다양한 유형의 전분, 락토스, 만니톨, 카올린, 칼슘 포스페이트 또는 설페이트, 무기 염 가령 소듐 클로라이드 및 분말 설탕을 포함한다. 분말 셀룰로스 유도체도 유용한다. 전형적인 정제 결합제는 전분, 젤라틴과 같은 물질과 락토스, 과당, 포도당 등과 같은 당이다. 아카시아, 알기네이트, 메틸셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리딘 등을 포함하는 천연 및 합성 검도 편리하다. 폴리에틸렌 글리콜, 에틸 셀룰로오스 및 왁스도 결합제 역할을 할 수 있다.

정제 및 펀치가 다이에 달라붙는 것을 방지하기 위해 정제 제제에 윤활제가 필요할 수 있다. 윤활제는 활석, 마그네슘 및 칼슘 스테아레이트, 스테아르산 및 수소 첨가된 식물성 오일과 같은 미끄러운 고체로부터 선택될 수 있다. 정제 붕해제는 젖었을 때 팽창하여 정제를 분해하고 화합물을 방출하는 물질이다. 정제 붕해제는 전분, 점토, 셀룰로오스, 알긴 및 검을 포함한다. 보다 구체적으로, 예를 들어 옥수수 및 감자 전분, 메틸 셀룰로오스, 한천, 벤토나이트, 목재 셀룰로오스, 분말 천연 스펀지, 양이온 교환 수지, 알긴산, 구아 검, 시트러스 펄프 및 카복시메틸 셀룰로오스, 예를 들어 나트륨 라우릴 설페이트를 사용할 수 있다. 정제는 향료 및 실란트로서 설탕으로 코팅되거나 정제의 용해 특성을 변형하기 위해 필름 형성 보호제로 코팅될 수 있다. 조성물은 또한 예를 들어 제제에서 만니톨과 같은 물질을 사용하여 씹을 수 있는 정제로 제제화될 수 있다.

좌약으로서 피페리딘 디온 화합물을 투여하고자 하는 경우, 전형적인 베이스를 사용할 수 있다. 코코아 버터는 녹는 점을 약간 높이기 위해 왁스를 첨가하여 변형할 수 있는 전통적인 좌약 베이스이다. 특히 다양한 분자량의 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 수혼화성 좌약 베이스가 널리 사용되고 있다.

피페리딘 디온 화합물의 효과는 적절한 제형에 의해 지연되거나 연장될 수 있다. 예를 들어, 피페리딘 디온 화합물의 서서히 용해되는 펠릿을 제조하여 정제 또는 캡슐에 통합하거나 서방형 이식 장치로 통합할 수 있다. 이 기술은 또한 여러 다른 용해 속도의 펠릿을 만들고 펠릿의 혼합물로 캡슐을 채우는 것을 포함한다. 정제 또는 캡슐은 예측 가능한 기간 동안 용해에 저항하는 필름으로 코팅될 수 있다. 비경구 제제조차도 피페리딘 디온 화합물을 유성 또는 유화 비히클에 용해하거나 현탁하여 혈청에서 천천히 분산되도록 함으로써 장기-작용성으로 만들 수 있다.

실시예

다음 실시예는 제한이 아니라 예시로서 제시된다. 화합물의 이름은 화학 구조에 대한 체계적인 이름을 생성하고 입체 화학에 대한 Cahn-Ingold-Prelog 규칙을 지원하는 ChemBiodraw Ultra (Cambridgesoft)에서 제공하는 자동 이름 생성 도구를 사용하여 명명된다. 당업자는 원하는 제품에 도달하기 위해 예시적인 실시예에 기재된 절차를 수정할 수 있다.

본원에 기재된 화합물의 염은 크로마토그래피 정제 동안 이동상에 산 (예를 들어 TFA, 포름산 또는 HCl)을 포함시키거나 크로마토그래피 정제 후 산 용액 (예를 들어 수성 HCl)과 함께 생성물을 교반하는 것과 같은 표준 방법에 의해 제조될 수 있다.

사용된 약어:

화합물 합성

실시예 1: 2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 포르메이트

4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. 물 (1 L) 내 티오카르보닐 디클로라이드 (82.9 g, 0.72 mol)의 용액에 4-아미노-2-(디플루오로메틸-플루오라닐)벤조니트릴 (90 g, 0.48 mol)을 15 °C에서 부가했다. 부가 후, 반응을 28 °C에서 6 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (300 mL X 3). 조합시킨 유기 추출물을 농축하고 실리카겔 크로마토그래피 칼럼에 의해 정제하여 (0-5% 석유 에테르 내 EtOAc) 4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (110 g, 99.7% 수율)을 갈색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) ppm 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 1.6　Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 1.6 Hz, 8.0 Hz, 1H).

2-(3-플루오로-4-히드록시-아닐리노)-2-메틸-프로판니트릴. 아세톤 (400 mL) 및 DCM (800 mL) 내 4-아미노-2-플루오로-페놀 (80 g, 0.63 mol)의 용액에 트리메틸실릴포르모니트릴 (87.4 g,0.88 mol) 및 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트 (7.0 g, 0.03 mol)을 부가했다. 반응을 25 °C에서 16 h 동안 교반하고, 여과하고, 여액을 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (10-25% 석유 에테르 내 EtOAc) 2-(3-플루오로-4-히드록시-아닐리노)-2-메틸-프로판니트릴 (76 g, 62.2% 수율)을 갈색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 9.18 (s, 1H), 6.82 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 2.4 Hz, 13.2 Hz, 1H), 6.57-6.55 (m, 1H), 1.55 (s, 6H).

4-[3-(3-플루오로-4-히드록시-페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. 디메틸아세트아미드 (1.2 L) 내 2-(3-플루오로-4-히드록시-아닐리노)-2-메틸-프로판니트릴 (80 g, 0.41 mol)의 용액에 4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (113 g, 0.49 mol,)을 부가하고 반응을 25 °C에서 3 h 동안 교반했다. MeOH (800 mL) 및 MeOH (800 mL) 내 HCl의 2.0 M 용액을 0-10 °C 사이에서 부가했다. 부가 후, 반응을 70 °C에서 2 h 동안 교반하고, 이후 얼음-물 (200 mL) 내로 붓고 EtOAc로 추출했다 (100 mL X 3). 조합시킨 유기 층을 농축하고 실리카겔 크로마토그래피 칼럼에 의해 정제하여 (10-15% 석유 에테르 내 EtOAc) 4-[3-(3-플루오로-4-히드록시-페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (52.2 g, 29.9% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.38 (s, 1H), 8.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.07-8.05 (m, 1H), 7.22 (dd, J = 2.4 Hz, 11.6 Hz, 1H), 7.09 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.03-7.02 (m, 1H), 1.50 (s, 6H).

tert-부틸 4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-카르복실레이트. 4-(3-(3-플루오로-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.5 g, 1.181 mmol), tert-부틸 4-((메틸설포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.660 g, 2.362　mmol) 및 세슘 카보네이트 (1.154 g, 3.54 mmol)을 DMF (8 mL) 내에서 조합시키고 혼합물을 나사 캡 바이알 내에서 80 °C까지 가열했다. 16 h 후, 용액을 물 및 EtOAc (75%) 및 헥산 (25%)의 혼합물 사이에서 분배했다. 조합시킨 유기 추출물을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 황색 오일을 얻었다. 오일을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-45% 헥산 내 EtOAc) 건조 후 표제 화합물을 고체로서 얻었다 (0.558 g, 0.920 mmol, 78% 수율). MS (ESI) m/z 629 [M+Na]⁺.

4-(3-(3-플루오로-4-(피페리딘-4-일옥시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드. DCM (3 mL) 내 tert-부틸 4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.568 g, 0.936 mmol)의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (2.34 mL, 9.36 mmol)을 부가했다. 혼합물을 주변 온도에서 교반했다. 30 min 후, 용액을 감압 하에서 농축하고 표제 화합물을 얻었다 (0.569 g, 1.05 mmol, 정량적 수율). MS (ESI) m/z 543 [M+1]⁺.

메틸 2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-일)아세테이트. 4-(3-(3-플루오로-4-(피페리딘-4-일옥시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.250 g, 0.460 mmol)을 THF (2.5 mL) 내 TEA (0.193 mL, 1.38 mmol)와 조합시켰다. 2 min 동안 교반 후, 메틸 2-브로모아세테이트 (0.047　mL, 0.460 mmol)을 부가하고 혼합물을 주변 온도에서 나사 캡 플라스크 내에서 교반했다. 2 h 후, 용액을 감압 하에서 농축하고 백색 잔사를 얻었고 이를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피를 통해 정제하여 (0-100% 헥산 내 EtOAc 이후 0-5% MeOH 내 EtOAc) 표제 화합물을 얻었다 (0.231 g, 0.399 mmol, 87% 수율). MS　(ESI) m/z 579 [M+1]⁺.

2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-일)아세트산. 메틸 2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-일)아세테이트 (0.243 g, 0.420 mmol)을 THF (2 mL) 내에 용해시키고 물 (2.000 mL) 내에 용해시킨 리튬 히드록사이드 수화물 (0.176 g, 4.20 mmol)의 용액으로 처리했다. 혼합물을 주변 온도에서 교반했다. 1 h 후, 용액을 pH 5로 HCl의 2 M 수성 용액을 사용하여 산성화했다. 혼합물을 이후 물 및 10% DCM 내 MeOH 사이에서 분배했다. 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 표제 화합물을 백색 고체로서 얻었다 (0.163 g, 0.289 mmol, 69% 수율). MS (ESI) m/z 565 [M+1]⁺.

2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 포르메이트. DMF (1 mL) 내 2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-일)아세트산 (0.060 g, 0.106 mmol), 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 트리플루오로아세테이트 (0.034 g, 0.106 mmol) 및 DIEA (0.056 mL, 0.319 mmol)의 혼합물에 HATU (0.040 g, 0.106 mmol)을 주변 온도에서 부가했다. 1 h 후, 용액을 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 포르메이트 (0.033 g, 0.043 mmol, 40.5% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 766 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.78 (s, 1 H), 9.44 (s, 1 H), 8.39 (d, J = 8.19 Hz, 1 H), 8.28 (d, J = 1.71 Hz, 1　H), 8.20 (s, 1 H), 8.06 (dd, J = 8.13, 1.77 Hz, 1 H), 7.41 (t, J = 9.17 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J = 11.74, 2.45 Hz, 1 H), 7.11 - 7.17 (m, 1 H), 6.97 - 7.03 (m, 2 H), 6.86 (d, J = 8.07 Hz, 1 H), 6.54 (s, 1 H), 6.40 (dd, J = 7.82, 1.59 Hz, 1 H), 5.87 (d, J = 7.82 Hz, 1 H), 4.51 - 4.59 (m, 1 H), 4.26 (br d, J = 7.82 Hz, 1 H), 3.13 (s, 2 H), 2.80 (td, J = 5.23, 1.77 Hz, 2 H), 2.68 - 2.76 (m, 1 H), 2.53 - 2.66 (m, 3 H), 2.37 - 2.45 (m, 1 H), 1.99 - 2.14 (m, 3 H), 1.74 - 1.91 (m, 3 H), 1.51 (s, 6　H), 0.85 (br d, J = 10.76 Hz, 1 H), 0.01 - 0.02 (m, 2 H), -0.03 - -0.01 (m, 3 H), -0.15 (s, 1 H).

실시예 2: 2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 포르메이트

tert -부틸 4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 4-(3-(3-플루오로-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.500 g, 1.18 mmol), tert-부틸 4-(((메틸설포닐)옥시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.693 g, 2.36 mmol) 및 세슘 카보네이트 (1.154 g, 3.54 mmol)을 DMF (8 mL) 내에서 조합시키고 혼합물을 70　°C까지 나사 캡 바이알 내에서 가열했다. 16 h 후, 용액을 물 및 EtOAc (75%) 및 헥산 (25%)의 혼합물 사이에서 분배했다. 수상을 EtOAc (75%) 및 헥산 (25%)의 동일 혼합물로 추출했다. 조합시킨 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 황색 오일을 얻었다. 오일을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-45% 헥산 내 EtOAc) 표제 화합물을 발포물로서 얻었고 이는 건조 후 고체화되었다 (0.558 g, 0.899 mmol, 76% 수율). MS (ESI) m/z 643 [M+Na]⁺.

4-(3-(3-플루오로-4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드. tert-부틸 4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.558 g, 0.899 mmol)을 DCM (3　mL) 내에 용해시키고 4.0 M 디옥산 내 HCl의 용액 (2.248 mL, 8.99 mmol)로 처리했다. 혼합물을 주변 온도에서 교반했다. 30 min 후, 용액을 감압 하에서 농축하고 표제 생성물을 고체로서 얻었다 (0.528 g, 0.948 mmol, 정량적 수율). MS (ESI) m/z 521 [M+1]⁺.

메틸 2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-일)아세테이트. 4-(3-(3-플루오로-4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.250g, 0.449 mmol)을 THF (2.5 mL) 내 TEA (0.188 mL, 1.346 mmol)와 조합시켰다. 메틸 2-브로모아세테이트 (0.045 mL, 0.449 mmol)을 이후 부가하고 혼합물을 주변 온도에서 나사 캡 바이알 내에서 교반했다. 2 h 후, 용액을 감압 하에서 농축하고 백색 잔사를 얻었다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-100% 헥산 내 EtOAc) 표제 화합물을 얻었다 (0.166 g, 0.280 mmol, 62.4% 수율). MS (ESI) m/z 593 [M+1]⁺.

2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-일)아세트산. 메틸 2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-일)아세테이트 (0.166 g, 0.280 mmol)을 THF (2　mL) 내에 용해시키고 물 (2.00 mL) 내 리튬 히드록사이드 수화물 (0.118 g, 2.80 mmol)의 용액으로 처리했다. 혼합물을 주변 온도에서 교반했다. 1 h 후, 용액을 2.0 M HCl 수성 용액을 사용하여 pH=5로 산성화하고 물 및 10% MeOH 내 DCM의 용액 사이에서 분배했다. 유기 층을 조합시키고, 식염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 표제 화합물을 백색 고체로서 얻었다 (0.122 g, 0.211 mmol, 75% 수율). MS (ESI) m/z 579 [M+1]⁺.

2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 포르메이트. 섬광 바이알 내에서, 2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-일)아세트산 (0.060 g, 0.104 mmol), 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (0.033 g, 0.104 mmol) 및 DIEA (0.054 mL, 0.311　mmol)을 DMF (1 mL) 내에서 조합시켰다. HATU (0.039 g, 0.104 mmol)을 부가했다. 주변 온도에서 1　h 후, 용액을 DMSO로 희석하고 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-플루오로페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 포르메이트 (0.037 g, 0.047 mmol, 46% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 780 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.77 (s, 1 H), 9.41 (br d, J = 2.45 Hz, 1 H), 8.39 (d, J = 8.31 Hz, 1 H), 8.27 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 8.06 (dd, J = 8.38, 1.77 Hz, 1 H), 7.28 - 7.38 (m, 2 H), 7.16 (d, J = 8.68 Hz, 1 H), 6.97 - 7.02 (m, 2 H), 6.81 (d, J = 8.20 Hz, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 6.38 - 6.41 (m, 1 H), 5.88 (d, J = 7.34 Hz, 1 H), 4.22 - 4.30 (m, 1 H), 4.00 (br d, J = 5.87 Hz, 2 H), 3.27 - 3.30 (m, 3 H), 3.03 - 3.15 (m, 2 H), 2.87 - 2.98 (m, 2 H), 2.68 - 2.79 (m, 1　H), 2.52 - 2.63 (m, 3 H), 2.16 - 2.28 (m, 2 H), 2.05 - 2.14 (m, 2 H), 1.76 - 1.94 (m, 4 H), 1.42 - 1.53 (m, 8 H), 1.22 - 1.30 (m, 1 H), 0.95 (d, J = 6.60 Hz, 1 H), 0.82 - 0.88 (m, 1 H), 0.01 - 0.02 (m, 2 H), -0.03 - -0.01 (m, 4 H), -0.15 (s, 1 H).

실시예 3: 2-[(2R,4S)-4-[2-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-2-메틸-1-피페리딜]-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 히드로클로라이드

tert-부틸 (R,E)-4-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. 소듐 히드라이드 (0.281 g, 7.03 mmol, 1.50 eq)를 함유하는 바이알에 THF (4.69 mL, 1 M)을 부가했다. 바이알을 얼음 배쓰 내에 배치하고 트리에틸 포스포노아세테이트 (1.40 mL, 7.03　mmol, 1.50 equiv)을 한방울씩 부가했다. 10 min 동안 교반 후 플라스크를 얼음 배쓰로부터 제거하고 실온까지 데웠다. tert-부틸 rac-(2R)-2-메틸-4-옥소-피페리딘-1-카르복실레이트 (1.00 g, 4.69 mmol, 1.00 eq)을 THF (2.0 mL) 내 용액으로서 부가했다. 반응 용액을 실온에서 3 h 동안 교반하고, 이후 디에틸 에테르 (75 mL)로 희석하고 포화 수성 소듐 비카보네이트 (2 x 100 mL) 및 식염수 (100　mL)로 세척했다. 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고 오렌지색 오일로 농축하고 이를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (15-30% 헥산 내 디에틸에테르) tert-부틸 (R,E)-4-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (1.01 g, 3.56　mmol, 76.0 % 수율)를 무색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 306.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, CDCl₃) δ ppm 5.53 (br s, 1H), 5.49 - 5.44 (m, 1H), 4.57 - 4.35 (m, 2H), 4.24 - 4.19 (m, 1H), 4.18 - 4.09 (m, 4H), 3.54 (td, J = 1.8, 18.6 Hz, 1H), 3.03 - 2.98 (m, 3H), 2.93 - 2.77 (m, 1H), 2.53 - 2.40 (m, 1H), 2.32 - 2.19 (m, 1H), 1.93 (br dd, J = 3.2, 16.8 Hz, 1H), 1.85 (br d, J = 16.8 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.46 (s, 6H), 1.26 (dt, J = 0.8, 7.1 Hz, 5H), 1.16 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.10 (d, J　= 6.7 Hz, 2H).

tert-부틸 (2R)-4-(2-에톡시-2-옥소-에틸)-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트. EtOH (18.1 mL, 0.25 M) 내 tert-부틸 (R,E)-4-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (1.280 g, 4.52 mmol)의 용액에 이후 ~1 g의 탄소상 습윤 팔라듐. 플라스크를 하우스 진공 하에서 배출하고 수소 풍선으로 3회 퍼징했다. 반응을 수소 분위기 하에서 밤새 교반했다. 16 h 후, 반응 용액을 셀라이트를 통해 여과하고 여액을 농축하고 황색 오일을 얻었다. 미정제 물질을 클로로포름 내에 취하고, 시린지 필터를 통해 여과하고 농축하고 tert-부틸 (2R)-4-(2-에톡시-2-옥소-에틸)-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (1.183 g, 4.145 mmol, 91.7% 수율)를 부분입체이성질체의 2:3 혼합물로서 얻었다. MS (ESI) m/z 308.2 [M+Na]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.21 - 4.05 (m, 4H), 4.02 - 3.84 (m, 1H), 3.77 - 3.62 (m, 1H), 3.06 (ddd, J = 5.7, 10.3, 13.9 Hz, 1H), 2.94 - 2.79 (m, 1H), 2.21 - 2.13 (m, 3H), 2.10 - 2.02 (m, 1H), 1.99 - 1.86 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.73 - 1.53 (m, 3H), 1.45 (s, 6H), 1.45 (s, 8H), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 6H), 1.17 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 1.15 (s, 3H).

에틸 2-[(2R)-2-메틸-4-피페리딜]아세테이트 히드로클로라이드. tert-부틸 (2R)-4-(2-에톡시-2-옥소-에틸)-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.452 g, 1.58 mmol)를 함유하는 바이알에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (7.92 mL, 31.68 mmol, 20 equiv)를 부가했다. 반응 용액을 실온에서 45 min 동안 교반하고, 이후 감압하에서 농축하고 에틸 2-[(2R)-2-메틸-4-피페리딜]아세테이트 히드로클로라이드 (0.342 g, 1.542 mmol, 97.4% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. 상기 물질을 추가 정제 없이 사용했다. MS (ESI) 186.2 [M+1]⁺

에틸 2-[(2R)-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-메틸-4-피페리딜]아세테이트. 에틸 2-[(2R)-2-메틸-4-피페리딜]아세테이트 히드로클로라이드 (1.00 g, 4.51　mmol)를 함유하는 40　ml 바이알에 DMF (15.034 mL) 및 DIEA (4.71 mL, 27.1 mmol) 이후 4-메톡시벤질 클로라이드 (0.67 mL, 4.96 mmol)을 부가했다. 반응을 50 °C까지 가열했다. 반응 용액을 EtOAc (125 mL)로 희석하고 포화 수성 소듐 비카보네이트 (2 x 125 mL) 및 식염수 (125 mL)로 세척했다. 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고 농축하고 호박색 오일을 얻었고, 이를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0.5-10% 0.2% TEA를 함유한 DCM 내 MeOH) 에틸 2-[(2R)-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-메틸-4-피페리딜]아세테이트 (1.09 g, 3.57 mmol, 79.1% 수율)를 투명한 무색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 306.2 [M+1]⁺.

2-[(2R,4S)-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-메틸-4-피페리딜]에탄올. THF (19.5 mL, 0.1 M) 내 에틸 2-[(2R)-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-메틸-4-피페리딜]아세테이트 (1.19 g, 3.9 mmol, 1.00 eq)의 용액을 EtOH/물 냉각 배쓰 내에 -20　°C에서 배치했다. THF (5　mL) 내 디이소부틸알루미늄 히드라이드 (1.39 mL, 7.79 mmol, 2.00 eq)의 용액을 한방울씩 부가했다. 20 min 후, 반응을 Fieser 워크업을 통해 급냉했다. 용액에 물 (0.31 mL)을 한방울씩 조심스럽게, 이후 15% 수성 NaOH 용액 (0.31　mL) 및 물 (1.1 mL)을 부가했다. 용액을 2 min 동안 교반하고 이후 디에틸에테르 (50 mL)로 희석하고 실온까지 데워지도록 방치했다. 15 min 후 실온에서, 무수 소듐 설페이트를 부가하고 슬러리를 30 min 동안 교반했다. 슬러리를 셀라이트를 통해 여과하고 고체를 철저히 디에틸 에테르, 이후 EtOAc로 세척했다. 용액을 투명한, 무색 오일로 농축했다. 미정제 물질을 SFC에 의해 정제하여 (iridis BEH 칼럼, 10 mM 암모늄　아세테이트 개질제를 함유한 10% MeOH) 2-[(2R,4S)-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-메틸-4-피페리딜]에탄올 (0.380 g, 1.44 mmol, 37.0% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 264.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.37 - 7.29 (m, 2H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.93 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.71 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.67 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.34 - 3.22 (m, 1H), 2.94 - 2.83 (m, 1H), 2.72 - 2.60 (m, 1H), 1.92 - 1.79 (m, 1H), 1.79 - 1.65 (m, 2H), 1.64 - 1.55 (m, 1H), 1.54 - 1.40 (m, 3H), 1.22 - 1.16 (m, 3H).

tert -부틸 (2R,4S)-4-(2-히드록시에틸)-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트. 2-[(2R,4S)-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-2-메틸-4-피페리딜]에탄올 (0.545　g, 2.07 mmol), Boc₂O (0.903 g, 4.14 mmol, 2.00 eq), 및 탄소 분말 상 10% 팔라듐 히드록사이드 (0.145　g, 0.210 mmol, 0.10 eq)을 MeOH (20.7 mL, 0.1 M) 내에서 조합시키고 Parr Shaker 상에서 60 psi에서 배치했다. 16 h 후, 반응 용액을 셀라이트를 통해 여과하고 셀라이트를 MeOH 및 EtOAc로 세척했다. 여액을 농축하고 겔-상 물질을 얻었고, 이를 MeOH 내에 용해시키고 (10 mL) 및 초음파처리했다. 실리카겔을 EtOAc (30 mL)와 함께 부가하고, 슬러리를 서서히 미세 분말로 농축하고 이를 정제용 실리카겔 칼럼 (30-100% 헥산 내 디에틸에테르) 상으로 로딩하여 tert-부틸 (2R,4S)-4-(2-히드록시에틸)-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.442 g, 1.82 mmol, 87.8% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 266.2 [M+Na]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 4.50 - 4.27 (m, 1H), 4.07 - 3.85 (m, 1H), 3.70 (t, J　= 6.7 Hz, 2H), 2.91 - 2.76 (m, 1H), 1.88 - 1.75 (m, 1H), 1.74 - 1.63 (m, 1H), 1.59 - 1.50 (m, 2H), 1.49 - 1.46 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.31 (dt, J = 5.6, 12.8 Hz, 1H), 1.13 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.05 (dq, J = 4.6, 12.7 Hz, 1H).

(2R,4S)-4-[2-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트.. 얼음 배쓰 내 트리페닐포스핀 (0.106 g, 0.400 mmol, 1.50 eq) 및 THF (1 mL)를 함유하는 바이알에 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.070 mL, 0.370 mmol, 1.40 eq)을 부가했다. 반응 용액을 0 °C에서 10 min 동안 교반하고, 이 때 균질　용액은 백색 슬러리로 변했다. THF (1 mL) 내　tert-부틸 (2R,4S)-4-(2-히드록시에틸)-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.070 g, 0.270　mmol)의 용액을 즉시 부가하고, 반응 용액을 0 °C에서 5 min 동안 교반했다. THF (0.7 mL) 내 4-[3-(3-에틸-4-히드록시-페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.139 g, 0.320 mmol, 1.20 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된)의 용액을 부가했다. 반응 용액을 0　°C에서 교반했다. 2 h 후, 반응을 서서히 실온까지 데워지도록 밤새 방치했다. 총 16 h 후, 반응 용액을 농축하고 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (10-50% 헥산 내 EtOAc) tert-부틸 (2R,4S)-4-[2-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.145 g, 0.145 mmol, 54.4% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 559.0 [M - Boc + H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ　ppm 8.00 - 7.93 (m, 2H), 7.87 - 7.81 (m, 1H), 7.10 - 7.02 (m, 2H), 6.95 - 6.89 (m, 1H), 4.57 - 4.33 (m, 1H), 4.06 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.94 - 2.75 (m, 1H), 2.68 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.02 - 1.86 (m, 1H), 1.80 - 1.70 (m, 3H), 1.59 - 1.55 (m, 6H), 1.46 (s, 9H), 1.44 - 1.32 (m, 2H), 1.23 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 1.17 - 1.09 (m, 4H).

4-(3-(3-에틸-4-(2-((2R,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. tert-부틸 (2R,4S)-4-[2-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.142 g, 0.210 mmol)를 함유하는 바이알에 DCM (0.850 mL, 0.10 M) 이후 TFA (0.5 mL, 6.53　mmol, 30 eq)을 부가했다. 반응 용액을 실온에서 90 min 동안 교반하고, 이후 EtOAc (75 mL)로 희석하고 포화 수성 소듐 비카보네이트 용액 (2　x 75 mL), 물 (75 mL), 및 식염수로 세척했다. 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고 농축하고 4-(3-(3-에틸-4-(2-((2R,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴을 호박색 오일로서 얻었고 이를 추가 정제 없이 사용했다. MS (ESI) m/z = 559.2 [M+1]⁺.

2-[(2R,4S)-4-[2-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-2-메틸-1-피페리딜]-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 히드로클로라이드. 4-[3-[3-에틸-4-[2-[(2R,4S)-2-메틸-4-피페리딜]에톡시]페닐]-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.078 g, 0.140 mmol) 및 2-클로로-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 (0.041 g, 0.140 mmol, 1.00 eq)를 함유하는 2-모금 바이알에 DMF (0.347 mL, 0.4 M) 이후 DIEA (0.15 mL, 0.830 mmol, 6.00 eq)을 부가했다. 반응 용액을 45 °C까지 가열했다. 14 h 후, 반응 용액을 2　mL의 총 부피로 DMSO로 희석하고, 여과하고, 표준 방법에 의해 정제하여 2-[(2R,4S)-4-[2-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-2-메틸-1-피페리딜]-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 히드로클로라이드 (0.078 g, 0.090 mmol, 65% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 818.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, CDCl₃) δ ppm 10.55 - 10.47 (m, 1H), 8.01 - 7.95 (m, 3H), 7.84 (dd, J = 2.1, 8.3 Hz, 1H), 7.18 - 7.04 (m, 4H), 6.96 - 6.88 (m, 2H), 6.48 (br d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.13 - 4.04 (m, 3H), 3.96 - 3.82 (m, 2H), 3.81 - 3.68 (m, 1H), 3.48 - 3.33 (m, 1H), 3.14 - 3.02 (m, 1H), 2.88 - 2.78 (m, 2H), 2.65 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 2.06 - 1.99 (m, 3H), 1.95 - 1.77 (m, 5H), 1.59 - 1.55 (m, 6H), 1.52 - 1.37 (m, 3H), 1.22 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

실시예 4: 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

1-(벤질옥시)-2-브로모-4-니트로벤젠. 아세토니트릴 (300 mL) 내 2-브로모-4-니트로페놀 (30.00 g, 137.61 mmol, 1 eq) 및 포타슘 카보네이트 (57.06 g, 412.8 mmol, 3.00 eq)의 혼합물에 (브로모메틸)벤젠 (25.89 g, 151.4 mmol, 17.98 mL, 1.1　eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 80 °C에서 2 h 동안 교반하고, 여과하고, 여액을 진공하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (5-20% 석유 에테르 내 EtOAc) 생성물, 1-(벤질옥시)-2-브로모-4-니트로벤젠 (35.80 g, 116.2 mmol, 84.4% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 332.0 [M+Na] ⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 8.44 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.27 (dd, J = 2.8, 9.2 Hz, 1H), 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.45 - 7.40 (m, 3H), 7.38 - 7.34 (m, 1H), 5.37 (s, 2H).

1-(벤질옥시)-4-니트로-2-비닐벤젠. 디옥산 (300 mL) 및 물 (150 mL) 내 1-(벤질옥시)-2-브로모-4-니트로벤젠 (20.00 g, 64.91 mmol, 1.00 eq), 4,4,5,5-테트라메틸-2-비닐-1,3,2-디옥사보롤란 (19.99 g, 129.8 mmol, 22.02 mL, 2.00 eq) 및 포타슘 포스페이트 (41.33 g, 194.7 mmol, 3.00　eq)의 혼합물에 [1,1'-비스(디페닐포스피노)-페로센]디클로로팔라듐(II) (4.75 g, 6.49 mmol, 0.10 eq)을 실온에서 (25 °C) 부가했다. 반응 혼합물을 탈기하고 이후 100 °C까지 12 h 동안 질소 하에서 가열하고, 여과하고 여액을 진공하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-1% 석유 에테르 내 EtOAc) 생성물, 1-(벤질옥시)-4-니트로-2-비닐벤젠 (12.5 g, 48.9 mmol, 75.4% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 278.1 [M+Na]⁺.

4-아미노-2-에틸페놀. MeOH (50 mL) 및 THF (50 mL) 내 1-(벤질옥시)-4-니트로-2-비닐벤젠 (12.50 g, 48.9 mmol, 1.00 eq)의 용액에 탄소상 팔라듐 (2.00 g, 10% 순도)을 질소 하에서 부가했다. 현탁액을 진공하에서 탈기하고 수소로 퍼징했다. 혼합물을 수소 하에서 (50 psi) 50 °C에서 12 h 동안 교반하고, 여과하고, 여액을 진공하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-2% 석유 에테르 내 EtOAc) 생성물, 4-아미노-2-에틸페놀 (6.40 g, 46.6 mmol, 95.3% 수율)을 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 170.2 [M+Na]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 8.13 (s, 1H), 6.46 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.23 (dd, J = 2.8, 8.3 Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 2.41 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.07 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴. 톨루엔 (200 mL) 내 5-아미노-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (20.00 g, 106.9 mmol, 1.00 eq)의 용액에 티오카르보닐 디클로라이드 (24.58 g, 213.8 mmol, 16.39 mL, 2.00 eq)을 부가했다. 반응 혼합물을 110 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-5% 석유 에테르 내 EtOAc) 생성물, 5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (18.90 g, 82.47 mmol, 77.2% 수율)를 황색 액체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 230.1 [M+1]⁺.

2-((3-에틸-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴. 4-아미노-2-에틸페놀 (6.40 g, 46.6 mmol, 1.00 eq) 내 2-히드록시-2-메틸프로판니트릴 (18.64 g, 219.0 mmol, 20 mL, 4.69 eq)의 용액에 마그네슘 설페이트 (14.04 g, 116.6 mmol, 2.50 eq)을 부가했다. 반응 혼합물을 60 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 EtOAc-물 (v/v　=　1/1, 100 mL) 내로 붓고 15 min 동안 교반했다. 유기 상을 분리하고 수성 상을 EtOAc로 추출했다 (100 mL Х 2). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (200 mL Х 5), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축했다. 2-((3-에틸-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴 (12.00 g, 미정제)을 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 205.1 [M+1]⁺.

5-(3-(3-에틸-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴. DMF (100 mL) 내 2-((3-에틸-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴 (9.50 g, 46.5 mmol, 1.00 eq) 및 5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (8.53 g, 37.2 mmol, 0.80 eq)의 용액을 20　°C에서 1 h 동안 교반했다. 이후, 4.0 M MeOH 내 HCl 용액 (100 mL, 2.15 eq)을 부가했다. 결과로서 얻어진 혼합물을 70 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축하여 MeOH를 제거했다. 결과로서 얻어진 혼합물을 물 (200 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (200 mL × 2). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (50 mL × 2), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (5-30% 석유 에테르 내 EtOAc) 생성물, 5-(3-(3-에틸-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (13.30 g, 30.61 mmol, 65.8% 수율)을 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 457.2 [M+Na] ⁺.

tert-부틸 4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 5-(3-(3-에틸-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (3.95 g, 9.09 mmol), tert-부틸 4-(2-브로모에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.99 g, 13.6 mmol), 및 세슘 카보네이트 (4.44 g, 13.6 mmol)을 DMF (64.9 mL) 내에서 조합시켰다. 이 혼합물을 60 °C까지 2 h 동안 가열하고, 이후 EtOAc (300 mL), 물 (75 mL), 및 식염수 (75 mL)로 희석했다. 층을 분리하고, 유기 층을 식염수로 세척하고 (2 x 100 mL), 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 오일로 농축했다. 오일을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제했다 (0-45% 헥산 내 EtOAc). 분획을 함유하는 생성물을 조합시키고 오일로 농축하고 이를 분쇄하고 디에틸 에테르 및 헥산의 혼합물로부터 침전시켰다. tert-부틸 4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.67 g, 7.23 mmol, 80% 수율)을 여과에 의해 수집하고 진공 오븐 내에서 4 h 동안 건조시켰다. MS (ESI) m/z 546 [M-Boc+1]⁺.

5-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드. DCM (75 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.57 g, 7.08 mmol)의 용액을 부가했다. 이 혼합물에 4 N 디옥산 내 HCl 용액 (20 mL)을 부가했다. 주변 온도에서 1.5 h 동안 교반 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 오일로 농축하고, 이를 이후 디에틸 에테르 내에서 분쇄하고 5-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (1.5 g, 2.58 mmol, 36.4 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 546.2 [M+1]⁺.

2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산 히드로클로라이드. THF (15 mL) 내 5-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (1.50 g, 2.58 mmol)의 용액에 DIEA (1.800 mL, 10.31 mmol), 이후 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (0.400 mL, 2.71 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물을 밤새 주변 온도에서 교반했다. 또다른 0.25 당량의 시약을 부가하고 교반을 밤새 계속했다. 반응 혼합물을 EtOAc (125 mL), 물 (20 mL), 및 식염수 (20 mL)로 희석했다. 층을 분리하고, 유기 상을 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 오일로 농축했다. 오일을 DCM (50 mL) 내에 용해시키고 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액으로 처리하고 주변 온도에서 밤새 교반하고, 이후 오일로 농축했다. 잔사를 디에틸 에테르로 한 시간 동안 분쇄하고 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산 히드로클로라이드 (1.545 g, 2.414 mmol, 94% 수율)을 고체로서 얻었고, 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 진공 오븐 내에서 밤새 45 °C에서 건조시켰다. MS (ESI) m/z 604.2 [M+1]⁺.

2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 히드로클로라이드. 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산 히드로클로라이드 (0.100 g, 0.156 mmol), 3-((3-아미노-4-플루오로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.050 g, 0.183 mmol), HATU (0.089 g, 0.234 mmol), 및 DIEA (0.109 mL, 0.625 mmol)을 DMF (1　mL) 내에서 조합시키고 실온에서 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 DMSO (1 mL)로 희석하고, 여과하고, 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.028 g, 0.033 mmol, 20.9% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 823.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.79 (s, 1 H) 10.27 (s, 1 H) 9.25 (d, J=1.96 Hz, 1 H) 8.83 (d, J=1.83 Hz, 1 H) 7.09 - 7.22 (m, 4 H) 6.98 - 7.08 (m, 1 H) 6.51 (dt, J=8.65, 3.44 Hz, 1 H) 4.14 - 4.31 (m, 4 H) 4.06 - 4.13 (m, 2 H) 3.65 - 3.75 (m, 1 H) 3.05 - 3.20 (m, 2 H) 2.58 - 2.80 (m, 4 H) 2.06 - 2.15 (m, 1 H) 1.71 - 2.02 (m, 7 H) 1.57 - 1.70 (m, 2 H) 1.52 (s, 6 H) 1.11 - 1.20 (m, 3 H).

실시예 5: 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-5-플루오로페닐)아세트아미드 포르메이트

3-((3-아미노-5-플루오로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드. 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (4.57 g, 23.78 mmol), 5-플루오로벤젠-1,3-디아민 (1.50 g, 11.89　mmol) 및 DIEA (6.23 mL, 35.7 mmol)을 DMF (18 mL) 내에서 조합시키고 혼합물을 나사 캡 바이알 내에서 150 °C까지 가열했다. 24 h 후, 용액을 감압 하에서 농축하고 부분적으로 및 잔사를 역상 분취용 HPLC를 통해 정제했다 (5-25　% 물 내 아세토니트릴, 0.1% 포름산 25 min에 걸쳐). 적절한 분획을 몇 방울의 2.0 M 수성 HCl로 희석하고 분획 감압 하에서 농축하고 표제 화합물을 히드로클로라이드 염 (1.15 g, 3.71 mmol, 31% 수율)로서 얻었다. MS (ESI) m/z 238 [M+1]⁺.

2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-5-플루오로페닐)아세트아미드 포르메이트. 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산 디히드로클로라이드 (0.100 g, 0.148 mmol) (여기서 기술된 바와 같이 제조된), 3-((3-아미노-5-플루오로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.054　g, 0.163 mmol), 및 DIEA (0.129 mL, 0.739 mmol)을 DMF (0.75 mL) 내에서 조합시키고 용액을 2 min 동안 교반했다. HATU (0.062 g, 0.163 mmol)을 이후 부가하고 얻어진 혼합물을 주변 온도에서 교반했다. 90 min 후, 용액을 DMSO (1 mL)로 희석하고 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-5-플루오로페닐)아세트아미드 포르메이트 (0.018 g, 0.020 mmol, 13% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 823 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.80 (s, 1 H), 9.53 (s, 1 H), 9.24 (d, J = 1.83 Hz, 1 H), 8.82 (d, J = 1.83 Hz, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.07 - 7.17 (m, 3 H), 6.73 - 6.80 (m, 2 H), 6.18 - 6.25 (m, 2 H), 4.30 (s, 1 H), 4.09 (br t, J = 6.24 Hz, 2 H), 3.06 (s, 2 H), 2.82 - 2.89 (m, 2 H), 2.73 (s, 1　H), 2.58 - 2.70 (m, 3 H), 2.25 - 2.45 (m, 3 H), 2.00 - 2.24 (m, 4 H), 1.88 (br d, J = 12.35 Hz, 2　H), 1.63 - 1.79 (m, 5 H), 1.44 - 1.58 (m, 8 H), 1.29 - 1.42 (m, 3 H), 1.24 (br s, 2 H), 1.16 (t, J　= 7.52 Hz, 4 H), 0.95 (d, J = 6.60 Hz, 1 H), 0.79 - 0.90 (m, 2 H), 0.01 - 0.01 (m, 1 H), -0.03 - -0.01 (m, 2 H), -0.15 (s, 1 H).

실시예 6: (2R)-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드

2-((3-브로모-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴. DCM (177 mL) 내 아세톤 (89 mL) 내 4-아미노-2-브로모페놀 (5.00 g, 26.6 mmol)의 용액에 트리메틸실릴 시아나이드 (4.66 mL, 37.2 mmol) 및 트리메틸실릴 트리플루오로메틸설포네이트 (0.241　mL, 1.330 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반하고, 이후 농축하여 용매를 제거했다. 미정제 물질을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-100% 헥산 내 EtOAc 2-((3-브로모-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴 (4.56 g, 17.87 mmol, 67.2% 수율))을 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 256.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 9.55 - 9.66 (m, 1 H), 7.05 (d, J=2.69 Hz, 1 H), 6.83 - 6.87 (m, 1 H), 6.77 - 6.81(m, 1 H), 5.51 (s, 1 H), 1.55 (s, 6 H).

4-(3-(3-브로모-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. 2-((3-브로모-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴 (1.00 g, 3.92 mmol) 및 4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.894 g, 3.92 mmol)을 DMA (13.07 mL) 내에서 조합시키고 실온에서 밤새 교반했다. MeOH (5 mL) 및 3.0 N HCl 수성 용액 (5 mL)을 부가하고 반응을 70 °C에서 가열했다. 2 h 후, 반응 혼합물을 EtOAc 및 물 사이에서 분배했다. 수성 층을 EtOAc로 추출하고 이후 조합시킨 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 미정제 물질을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-100% 헥산 내 EtOAc) 4-(3-(3-브로모-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (1.23 g, 2.42 mmol, 62.0% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 484.0 [M+1]⁺.

2-브로모-4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페닐 아세테이트. DCM (7.74 mL) 내 4-(3-(3-브로모-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.75 g, 1.55　mmol)의 용액에 DIEA (0.541 mL, 3.10 mmol) 이후 아세틸 클로라이드 (0.132 mL, 1.858 mmol)을 부가했다. 실온에서 12 h 동안 교반 후, 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석하고 유기 층을 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액 (2 x 100 mL) 및 식염수 (100 mL)로 세척했다. 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고 농축하고 무색 오일을 얻었고 이를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (20-50% 헥산 내 EtOAc) 2-브로모-4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페닐 아세테이트 (0.766 g, 1.455 mmol, 94% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 526.0 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.97 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.82 (dd, J = 2.1, 8.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 1.61 (s, 6H).

4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페닐 아세테이트. 슈랭크 플라스크 내에서 조합시키고 아르곤으로 퍼징한 2-브로모-4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페닐 아세테이트 (2.00 g, 3.80　mmol), [(2-디시클로헥실포스피노-2',6'-비스(N,N-디메틸아미노) -1,1'-비페닐)-2-(2'-아미노-1,1'-비페닐)] 팔라듐(II) 메탄설포네이트 (0.311 g, 0.380 mmol) 및 2-(2-디시클로헥실포스파닐페닐)-N1,N1,N3,N3-테트라메틸-벤젠-1,3-디아민 (0.166 g, 0.380 mmol)의 혼합물에, 톨루엔 (15.20 mL)을 부가했다. 반응 혼합물을 5 min 동안 얼음 배쓰 내에 배치하고, 이후 THF 내 0.5 메틸아연(II) 브로미드의 용액 (6.08 mL, 3.04 mmol, 0.80 equiv)으로 처리했다. 30 min 후, 부가적 0.5　당량의 에틸아연(II) 브로미드 용액을 (3.80 mL, 1.90 mmol) 0 °C에서 30　min 동안 사용하고, 반응을 2.0 M HCl 수성 용액 (2.470　mL, 4.94 mmol)의 부가로 급냉하고 혼합물을 EtOAc로 희석했다 (350 mL). 유기 층을 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액으로 2회 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 갈색 고체를 얻었다. 미정제 물질을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-45% 헥산 내 EtOAc) 4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페닐 아세테이트 (0.986 g, 2.07 mmol, 55% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 476 [M+1]⁺.

4-(3-(3-에틸-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. MeOH (20 mL) 내 4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페닐 아세테이트 (0.876 g, 1.842 mmol) 및 포타슘 카보네이트 (0.255 g, 1.84 mmol)의 현탁액을 주변 온도에서 교반했다. 40 min 후, 용액을 EtOAc (200 mL)로 희석하고 물 (50 mL)로 분배했다. 조합시킨 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 표제 화합물을 얻었다 (0.766 g, 1.76 mmol, 96% 수율). MS (ESI) m/z 434 [M+1]⁺.

tert-부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 4-(3-(3-에틸-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.500 g, 1.154 mmol), tert-부틸 4-(2-브로모에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.506 g, 1.730 mmol), 세슘 카보네이트 (0.564 g, 1.730 mmol), 및 DMF (5.0 mL)의 혼합물을 60 °C까지 18 h 동안 가열했다. 반응을 EtOAc 및 물 사이에서 분배했다. 유기 층을 분리하고 수성 층을 EtOAc로 추출했다. 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 짙은 적색 오일을 얻었다. 오일을 EtOAc 내 취하고 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제했다 (0-60% 헥산 내 EtOAc). 소정의 생성물을 함유하는 분획을 조합시키고 감압 하에서 농축하고 tert-부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.680 g, 1.05 mmol, 91% 수율)를 옅은 분홍색 발포성 반-고체 물질로서 얻었다. MS (ESI) m/z 645.2 [M+1]⁺.

4-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. DCM (5.0 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.680 g, 1.05 mmol)의 용액을 TFA (2.0 mL, 26.0 mmol)로 처리했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 18 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축하고 짙은 보라색 발포성 고체를 얻었다. 고체를 MeOH 내에 용해시키고 강한 양이온 수지 교환 칼럼 상으로 로딩했다. 칼럼을 물, MeOH, 및 이후 MeOH 내 암모늄 히드록사이드의 5% 용액으로 연속적으로 세척하고 이는 생성물을 용리시켰다. 4-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.530 g, 0.973 mmol, 92% 수율)을 옅은 녹색 발포성 고체로서 감압 하에서 용매제거 후에 단리했다. MS (ESI) m/z 545.2 [M+1]⁺.

(R)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 트리플루오로아세테이트. 4-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.265 g, 0.487 mmol), (S)-메틸 2-클로로프로파노에이트 (0.089 g, 0.73 mmol), TEA (0.203 mL, 1.46 mmol), 및 THF (2.5 mL)의 혼합물을 85 °C까지 48 h 동안 가열하고, 이후 감압 하에서 농축하고 짙은 황색 오일을 얻었다. 오일을 DMSO 내에 용해시키고 역-상 반-분취용 HPLC (5-95% 아세토니트릴 + 0.1% TFA 물 내 + 0.1% TFA, 30 min에 걸쳐)에 의해 정제했다. 소정의 생성물을 함유하는 분획을 조합시키고 유기 용매 성분으로 농축했다. 남은 액체를 동결 및 냉동건조시켜 (R)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트, 트리플루오로아세테이트 (0.172 g, 0.231 mmol, 47.5% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 631.2 [M+1]⁺.

(R)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산. THF (1.0 mL) 및 물 (0.333 mL) 내 (R)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.172 g, 0.273 mmol)의 용액을 리튬 히드록사이드 (0.065 g, 2.73 mmol)로 처리하고 25 °C에서 18 h 동안 교반했다. 유기 용매를 감압 하에서 제거했다. 수상을 물로 희석하고 1.0 N HCl 수성 용액으로 처리하여 pH를 4로 조정했다. 생성물을 황갈색 점성 고체로서 침전시켰고 이를 상청액 수성 층으로부터 분리하고 오븐 내에서 밤새 건조시키고 (R)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.123 g, 0.199 mmol, 73.1% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 617.0 [M+1]⁺.

3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드. DMF (12.0 mL) 내 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (2.69 g, 14.0 mmol), 5-클로로벤젠-1,3-디아민 (1.00　g, 7.01 mmol), DIEA (3.67 mL, 21.04 mmol)의 혼합물을 150 °C까지 24 h 동안 가열했다. 미정제 반응 혼합물을 역상 반 분취용 HPLC에 의해 정제했다 (5-25% 아세토니트릴 + 0.1% 물 내 포름산 + 0.1% 포름산, 25 min에 걸쳐). 소정의 생성물을 함유하는 분획을 조합시키고 1.0 N HCl 수성 용액으로 처리했다 (5.0 mL). 유기 용매를 감압 하에서 제거하고 이후 동결건조하여 3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.472 g, 1.63 mmol, 23.2% 수율)를 짙은 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 254.0 [M+1]⁺.

(2R)-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드. (R)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.123 g, 0.199 mmol), 3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.069 g, 0.24 mmol), DIEA (0.139　mL, 0.798 mmol), HATU (0.083 g, 0.219 mmol), 및 DMF (1.0 mL)의 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반했다. 반응을 DMSO 내에 용해시키고 표준 방법에 의해 정제하여 (2R)-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드 (0.079 g, 0.089 mmol, 44.6% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 853.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.75-10.86 (m, 1H), 10.59-10.69 (m, 1H), 8.35-8.42 (m, 1H), 8.25-8.31 (m, 1H), 8.04-8.10 (m, 1H), 7.07-7.20 (m, 3H), 6.96-7.02 (m, 1H), 6.79-6.87 (m, 1H), 6.53 (t, J=1.90 Hz, 1H), 4.34 (br dd, J=4.22, 11.55 Hz, 1H), 3.99-4.13 (m, 6H), 3.56-3.66 (m, 1H), 3.43 (br d, J=11.00 Hz, 1H), 3.06-3.19 (m, 1H), 2.92-3.05 (m, 1H), 2.69-2.79 (m, 1H), 2.55-2.66 (m, 3H), 1.62-2.12 (m, 8H), 1.52-1.58 (m, 3H), 1.49 (s, 5H), 1.13-1.19 (m, 3H).

실시예 7: N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드

2-(1,1-디플루오로에틸)-4-니트로페놀. DCM (18 mL) 내 1-(2-히드록시-5-니트로페닐)에타논 (1.27 g, 7.00 mmol)의 용액을 0 °C까지 냉각하고 비스(2-메톡시에틸)아미노황 트리플루오리드 (Deoxo-Fluor®, 2.58 mL, 14.0 mmol)을 한방울씩 2 min에 걸쳐 부가했다. 혼합물을 2.5 h 동안 교반했고 그 동안 온도는 서서히 20 °C까지 올랐다. 혼합물을 얼음 물 (30 mL) 내로 붓고 5 min 동안혼합했다. 유기 층을 제거하고, 수성 층을 DCM로 추출하고, 조합시킨 유기 추출물을 소듐 설페이트 및 활성 탄소 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축하고, 잔여 고체 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (10-40% 헥산 내 EtOAc) 표제 화합물을 옅은 베이지색 고체로서 얻었다 (1.23 g, 86% 수율). ¹H　NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.33 (d, J=2.57 Hz, 1 H), 8.24 (dd, J=8.99, 2.63 Hz, 1 H), 7.06 (d, J=9.05 Hz, 1　H), 6.51 - 6.92 (br s, 1 H), 2.08 (t, J=18.9 Hz, 3 H).

tert -부틸 4-(2-(2-(1,1-디플루오로에틸)-4-니트로페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 건조 DMF (20 mL) 내 2-(1,1-디플루오로에틸)-4-니트로페놀 (4.00 g, 19.69 mmol) 및 tert-부틸 4-(2-브로모에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.75 g, 19.69 mmol))의 용액에 세슘 카보네이트 (12.83 g, 39.4 mmol)을 부가하고 혼합물을 질소의 분위기 하에서 65 °C에서 4 h 동안 교반했다. 혼합물을 실온까지 냉각하고, 얼음-물 (60 mL) 내로 붓고 혼합하고, 이후 EtOAc로 추출했다 (100 mL x 2). 조합시킨 추출물을 물 (100 mL), 식염수 (100 mL)로 세척하고 소듐 설페이트 상에서 건조시켰다. 조합시킨 유기 층을 실리카겔 플러그를 통해 여과하고 농축하고 tert-부틸 4-(2-(2-(1,1-디플루오로에틸)-4-니트로페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (7.10 g, 17.1　mmol, 87% 수율)를 옅은 황금색 점성 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.15 - 1.24 (m, 2 H) 1.69 - 1.78 (m, 3 H) 1.80 - 1.90 (m, 2 H) 1.95 - 2.08 (m, 4 H) 2.63 - 2.80 (m, 2 H) 4.18 - 4.34 (m, 2 H) 6.91 - 7.16 (m, 1 H) 8.17 - 8.34 (m, 1 H) 8.35 - 8.46 (m, 1 H).

tert -부틸 4-(2-(4-아미노-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. EtOH (200 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(2-(1,1-디플루오로에틸)-4-니트로페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (7.00 g, 16.89 mmol)의 용액에 팔라듐/탄소 (0.750 g, 10% 순도)을 부가했다. 혼합물을 수소로 탈기하고 이후 수소의 분위기 하에서 교반하고 풍선에 의해 25 °C에서 12 h 동안 유지시켰다. 혼합물을 여과하고 농축하고 tert-부틸 4-(2-(4-아미노-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (6.50 g, 16.9 mmol, 100% 수율)를 보라색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 384.2 [M]⁺.

tert -부틸 4-(2-(4-((2-시아노프로판-2-일)아미노)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 아세톤 (60 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-아미노-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (6.50 g, 16.91 mmol)의 용액을 0 °C까지 냉각하고 트리메틸실란카보니트릴 (2.52 g, 25.4 mmol) 이후 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트 (0.153 mL, 0.845 mmol)을 부가했다. 혼합물을 7 h 동안 교반했고 그 동안 온도는 주변 온도에 도달했다. 감압 하에서 용매제거 후, 잔사를 EtOAc (100　mL) 내 용해시키고 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액 (100 mL)로 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 농축했다. 상기 물질을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-70% 헥산 내 EtOAc) tert-부틸 4-(2-(4-((2-시아노프로판-2-일)아미노)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.00 g, 8.86 mmol, 52.4% 수율)를 시럽으로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 1.10 - 1.22 (m, 2 H) 1.43 - 1.47 (m, 9 H) 1.63 (s, 7 H) 1.68 - 1.77 (m, 5 H) 1.92 - 1.95 (m, 1 H) 2.02 - 2.05 (m, 1 H) 2.65 - 2.77 (m, 2 H) 3.99 - 4.05 (m, 2 H) 4.06 - 4.16 (m, 2 H) 6.85 - 6.91 (m, 1 H) 7.06 - 7.14 (m, 2 H).

5-(3-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴. DMF (20 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-((2-시아노프로판-2-일)아미노)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (4 g, 8.84 mmol) 및 5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (2.03 g, 8.84 mmol)의 용액을 60 °C에서 2 h 동안 교반했다. 혼합물을 실온까지 냉각하고 MeOH (30 mL), 물 (8 mL), 및 히드로클로라이드 산의 6.0 M 수성 용액 (6.48 mL, 39.12 mmol)로 처리했다. 결과로서 얻어진 용액을 60 °C에서 16 h 동안 교반하고, 농축하여 MeOH 성분을 제거하고, 0 °C까지 냉각하고, 서서히 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액 (20 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 처리했다. 상기 물질을 수상으로부터 EtOAc로 추가 추출했다 (100 mL x 2). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (100 mL), 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 건조까지 농축했다. 잔여 오렌지색 발포물을 DCM (10 mL) 내에 용해시키고, TFA (30 mL)로 처리하고, 2 h 동안 교반했다. 용액을 여과하고, 농축하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제했다 (0-10% DCM 내 MeOH). 수집된 분획을 농축하고 5-(3-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 2,2,2-트리플루오로아세테이트 (5.10 g, 7.33　mmol, 83% 수율)를 오렌지색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 582.1 [M+1]⁺.

2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산. THF (15 mL) 내 5-(3-(3-(1,1-디플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 2,2,2-트리플루오로아세테이트 (2.00 g, 2.88　mmol)의 용액에 DIEA (3.01 mL, 17.25 mmol), 이후 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (0.518 mL, 3.45 mmol)을 부가하고 얻어진 혼합물을 주변 온도에서 16 h 동안 교반했다. 혼합물을 EtOAc (125 mL), 물 (20 mL), 및 식염수 (20 mL)로 희석했다. 층을 분리하고 유기 층을 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 오일로 농축했다. DCM (50 mL) 내에 용해시킨 오일에 디옥산 내 4.0 M 용액으로서 염산 (12.88 mL, 51.5 mmol)을 부가하고 반응을 주변 온도에서 16 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 오일로 농축하고 이를 디에틸 에테르로 1 h 동안 분쇄했다. 결과로서 얻어진 고체를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 진공 오븐 내에서 밤새 45 °C에서 건조시키고 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산 히드로클로라이드 (1.90 g, 2.81 mmol, 98% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 640.2 [M+1]⁺.

N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드. DMF (2 mL) 내 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산 히드로클로라이드 (0.200 g, 0.296 mmol), 3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.086 g, 0.296 mmol), 및 DIEA (0.310 mL, 1.775 mmol)의 혼합물을 5 min 동안 교반했다. HATU (0.169 g, 0.444 mmol)을 부가하고 얻어진 혼합물을 주변 온도에서 16 h 동안 교반하고, 이후 EtOAc (100 mL), 물 (100 mL), 및 식염수 (20 mL)로 희석했다. 유기 층을 분리하고 층, 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 오일로 농축했다. 오일을 표준 방법에 의해 정제하여 N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(1,1-디플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.021 g, 0.024 mmol, 8.1% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 875.0 [M]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 0.71 - 0.92 (m, 1 H) 1.15 - 1.32 (m, 4 H) 1.48 - 1.61 (m, 7 H) 1.72 - 2.15 (m, 10 H) 2.64 - 2.84 (m, 2 H) 3.99 - 4.40 (m, 4 H) 6.26 - 6.43 (m, 1 H) 6.45 - 6.57 (m, 1 H) 6.77 - 6.91 (m, 1 H) 6.93 - 7.04 (m, 1 H) 7.26 - 7.57 (m, 3 H) 8.72 - 8.90 (m, 1 H) 9.18 - 9.32 (m, 1 H) 9.73 - 10.02 (m, 1 H) 10.75 - 10.89 (m, 1 H).

실시예 8: N -(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카복사미드 히드로클로라이드

1,1-디메틸-4-옥소피페리딘-1-이움 아이오다이드. 아세톤 (75 mL) 내 1-메틸피페리딘-4-온 (15.00 g, 132.56 mmol, 1.00 eq)의 용액에 아이오도메탄 (20.70 g, 145.81　mmol, 1.1 eq)을 한방울씩 0 °C에서 부가했다. 반응을 20 °C에서 1 h 동안 교반하고, 결과로서 얻어진 백색 현탁액을 여과에 의해 수집하고, EtOAc (100 mL)로 세척하고, 감압 하에서 건조시키고 1,1-디메틸-4-옥소피페리딘-1-이움 아이오다이드 (32.80 g, 128.6 mmol, 97.0% 수율)을 회색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 3.76 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 3.28 (s, 6H), 2.71 (br s, 4h).

메틸 1-(4-옥소피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트. 1,1-디메틸-4-옥소피페리딘-1-이움 아이오다이드 (25.24 g, 98.95 mmol, 1.50 eq), 포타슘 카보네이트 (10.03 g, 72.56 mmol,1.10 eq) 및 EtOH (200 mL)의 환류 혼합물에 물 (50 mL) 내 메틸 1-아미노시클로프로판카르복실레이트 히드로클로라이드 (10.00 g, 65.97 mmol, 1.00 eq)의 용액을 한방울씩 부가했다. 반응을 85 °C에서 1 h 동안 교반했다. 휘발성 용매를 감압 하에서 제거하고 잔사를 얻었고 이를 EtOAc (50 mL) 및 물 (50 mL)로 희석했다. 층 분리 후, 수성 층을 EtOAc로 추출했다 (30 mL). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (50 mL), 건조시키고, 여과하고, 농축했다. 미정제 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-8% 석유 에테르 내 EtOAc) 메틸 1-(4-옥소피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (2.10 g, 10.65　mmol, 16.1% 수율)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.65 (s, 3H), 3.23 (br s, 4H), 2.34 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.36 (q, J = 4.0 Hz, 2H), 1.07 (q, J = 3.6 Hz, 2H).

메틸 1-(4-(2-( tert -부톡시)-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트. 0°C에서 한방울씩 부가한 tert-부틸 2-(디에톡시포스포릴)아세테이트 (3.49 g, 13.84　mmol, 1.30 eq)로 처리한 THF (20 mL) 내 소듐 히드라이드 (0.639 g, 16.0 mmol, 60% 순도, 1.50 eq)의 용액을 0 °C에서 10 min 동안 교반했다. 이 혼합물에 THF (10 mL) 내 메틸 1-(4-옥소피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (2.10 g, 10.65　mmol, 1.00 eq)의 용액을 한방울씩 부가하고 반응을 20 °C에서 1 h 동안 교반하고, 이후 암모늄 클로라이드의 포화 수성 용액 (50 mL)의 부가로 급냉했다. 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (30 mL Х 2). 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (50 mL), 건조시키고, 여과하고, 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0 - 2% 석유 에테르 내 EtOAc) 메틸 1-(4-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (2.95 g, 9.99 mmol, 93.8% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 5.56 (s, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.03 - 2.84 (m, 6H), 2.17 (T, J = 5.6 Hz, 2H), 1.30 (q, J = 4.0 Hz, 2H), 0.98 (q, J = 3.6 Hz, 2H).

메틸 1-(4-(2-( tert -부톡시)-2-옥소에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트. 메틸 1-(4-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (2.95 g, 9.99 mmol, 1.00 eq), 활성 탄소 상 팔라듐 (0.600 g, 10% 순도) 및 THF (60 mL)의 혼합물을 20 °C에서 수소의 분위기 (15 psi) 하에서 10 h 동안 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 농축하고 메틸 1-(4-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (2.69 g, 9.05 mmol, 90.6% 수율)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400　MHz, CDCl₃) δ ppm 3.64 (s, 3H), 3.01 (td, J = 11.6, 2.4 Hz, 2H), 2.83 - 2.80 (m, 2H), 2.10 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.85 - 1.73 (m, 1H), 1.65 - 1.62 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.26 (q, J = 4.0 Hz, 2H), 1.08 (td, J = 12.0, 4.4 Hz, 2H), 0.91 (q, J = 3.6 Hz, 2H).

2-(1-(1-(메톡시카르보닐)시클로프로필)피페리딘-4-일)아세트산. DCM (10 mL) 내 메틸 1-(4-(2-(tert-부톡시)-2-옥소에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (2.49 g, 8.37 mmol, 1.00 eq)의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (10　mL, 4.78 eq)을 부가했다. 반응을 20 °C에서 12 h 동안 교반하고 감압 하에서 농축했다. 2-(1-(1-(메톡시카르보닐)시클로프로필)피페리딘-4-일)아세트산 히드로클로라이드 (2.12　g, 7.63 mmol, 91.2% 수율)을 백색 고체로서 단리하고 다음 단계에서 부가적 정제 없이 사용했다. ¹H NMR (400 MHz, CH₃OD) δ ppm 3.86 - 3.78 (m, 5H), 3.55 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 2.32 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.10 - 2.03 (m, 3H), 1.76 - 1.63 (m, 6H).

메틸 1-(4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트. THF (11 mL) 내 2-(1-(1-(메톡시카르보닐)시클로프로필)피페리딘-4-일)아세트산 히드로클로라이드 (2.12　g, 7.63 mmol, 1.00 eq)의 용액에 4-메틸모르폴린 (1.54 g, 15.27　mmol, 2.00 eq), 이후 이소부틸 카르보노클로리데이트 (1.04 g, 7.63 mmol, 1.00 eq)을 부가했고 둘 다 한방울씩 -15 °C에서 부가했다. 혼합물을 이 온도에서 10 min 동안 교반했다. 결과로서 얻어진 현탁액을 여과로 분리하고 THF (2 mL)로 세척했다. 여액을 -15 °C에서 배치된 플라스크 내에서 조합시켰다. 물 (5 mL) 내 소듐 보로히드라이드 (0.433 g, 11.45 mmol, 1.50 eq)의 용액을 한번에 부가했다. 반응을 20 °C에서 20 min 동안 교반했다. 혼합물에 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액 (50 mL)을 부가하고 얻어진 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (30 mL × 2). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (30 mL), 건조시키고, 여과하고, 농축하고 메틸 1-(4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (1.59 g, 7.00 mmol, 91.6% 수율)를 무색 오일로서 얻었고 이를 다음 단계에서 정제 없이 사용했다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ　ppm 3.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.00 (td, J = 11.6, 2.0 Hz, 2H), 2.84 - 2.81 (m, 2H), 1.64 - 1.61 (m, 2H), 1.52 - 1.44 (m, 3H), 1.28 - 1.24 (m, 2H), 1.06 (qd, J = 12.4, 4.0 Hz, 2H), 0.92 - 0.90 (m, 2H).

메틸 1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트. 톨루엔 (10 mL) 내 메틸 1-(4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (0.525 g, 2.31 mmol, 1.00 eq), 5-(3-(3-에틸-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (1.00 g, 2.31　mmol, 1.00 eq) 및 트리페닐포스핀 (0.909 g, 3.46 mmol, 1.5 eq)의 혼합물에 (E)-디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (0.701 g, 3.460 mmol, 1.50 eq)을 부가했다. 반응을 110 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 잔사를 반-분취용 역상 HPLC에 의해 정제하여 (33-63% 물 내 아세토니트릴 + 0.1% TFA, 27 min) 메틸 1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (0.854 g, 1.33 mmol, 57.4% 수율)를 회색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 9.10 (d, J　= 2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 - 7.04 (m, 2H), 6.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.05 (t, J　= 6.4 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.04 (t, J = 10.0 Hz, 2H), 2.87 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.69 (q, J = 7.2　Hz, 2H), 1.79 - 1.69 (m, 5H), 1.60 (s, 6H), 1.29 - 1.27 (m, 2H), 1.23 (t, J = 11.6 Hz, 3H), 1.19 - 1.09 (m, 2H), 0.93 (q, J = 3.6 Hz, 2H).

1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실산 히드로클로라이드. 6.0 N HCl 수성 용액 (40 mL,180.9 eq) 내에서 용해시킨 메틸 1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실레이트 (0.854 g, 1.33 mmol, 1.00 eq)의 용액을 100 °C에서 36 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하고 2상 혼합물을 관찰되었다. 상청액 용액을 따라내고 플라스크 표면 상에 침착된 고체를 아세토니트릴 (20 mL) 내에 용해시키고 용액을 감압 하에서 농축하고 1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실산 히드로클로라이드 (0.850 g, 미정제,)을 백색 고체로서 얻었고 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다. MS (ESI) m/z 630.2 [M+1]⁺.

N -(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카복사미드 히드로클로라이드. 1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카르복실산 히드로클로라이드 (0.850 g, 1.280 mmol, 1 eq), 3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.370 g, 1.28 mmol, 1.00 eq), HATU (0.582 g, 1.53 mmol, 1.20 eq), DIEA (0.660 g,5.10 mmol, 4.00 eq) 및 DMF (6 mL)의 혼합물을 25 °C에서 36 h 동안 교반하고, 여과하고, 여액을 표준 방법에 의해 정제하여 N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-1-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)시클로프로판카복사미드 히드로클로라이드 (0.302 g, 0.332 mmol, 26.0% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 865.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.80 (s, 1H), 10.54 (s, 1H), 9.53 (s, 1H), 9.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.16 - 7.09 (m, 3H), 6.90 (d, J = 18.0 Hz, 2H), 6.50 (s, 1H), 4.32 - 4.30 (m, 1H), 4.09 (br s, 1H), 3.61 - 3.56 (m, 4H), 2.78 - 2.56 (m, 4H), 2.08 - 2.04 (m, 1H), 1.93 - 1.75 (m, 9H), 1.61 - 1.50 (m, 8H), 1.17 - 1.13 (m, 4H).

실시예 9 및 10: ( 2S )-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드 및 (2 R )-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드

및

1-((3-에틸-4-히드록시페닐)아미노)시클로부탄카보니트릴. THF (70 mL) 내 4-아미노-2-에틸-페놀 (3.500 g, 25.51 mmol, 1 eq) 및 시클로부탄온 (1.970 g, 28.07 mmol, 2.10 mL, 1.10 eq)의 용액에 트리메틸실릴 시아나이드 (3.040 g, 30.62 mmol, 3.83　mL, 1.20 eq) 및 스칸듐 트리플레이트 (1.260 g, 2.550 mmol, 0.10 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 16 h 동안 교반하고, 농축하고, 이후 물 (50 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (50 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (30 mL × 2), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (100% DCM) 1-((3-에틸-4-히드록시페닐)아미노)시클로부탄카보니트릴 (2.650 g, 11.96 mmol, 46.9% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 217.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 6.68 (d, J　=　8.4 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.42 (dd, J = 2.8, 8.4 Hz, 1H), 4.61 (br s, 1H), 3.75 (br　s, 1H), 2.83 - 2.68 (m, 2H), 2.64 - 2.53 (m, 2H), 2.43 - 2.30 (m, 2H), 2.27 - 2.09 (m, 2H), 1.22 (t, J　= 7.6 Hz, 3H).

4-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. DMF (10　mL) 내 1-((3-에틸-4-히드록시페닐)아미노)시클로부탄카보니트릴 (1.450 g, 6.70 mmol, 1.00 eq) 및 4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (1.840 g, 8.050 mmol, 1.20 eq)의 용액을 25 °C에서 1 h 동안 교반했다. 이후 4.0 M MeOH 내 HCl 용액 (15 mL, 8.95 eq) 및 MeOH (5 mL)을 부가했다. 반응 혼합물 70 °C에서 12 h 동안 교반하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 물 (50 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (100　mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수　60　mL (30 mL × 2)로 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-35 % 석유 에테르 내 EtOAc) 4-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (3.00 g, 6.35 mmol, 94.7% 수율)을 회색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 446.1 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 8.03 - 7.94 (m, 2H), 7.90 - 7.83 (m, 1H), 7.08 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.05 - 6.99 (m, 1H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.44 (br s, 1H), 2.75 - 2.68 (m, 2H), 2.68 - 2.52 (m, 4H), 2.31 - 2.15 (m, 1H), 1.74 - 1.68 (m, 1H), 1.29 (t, J = 7.6 Hz, 3H).

tert -부틸 4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 . DMF (30　mL) 내 tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.00 g, 13.08 mmol, 1.00 eq)의 용액에 소듐 히드라이드 (1.050 g, 26.16 mmol, 60% 순도, 2.00 eq)을 0 °C에서 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반하고, 이후 벤질 브로미드 (3.360 g, 19.62 mmol, 2.33 mL, 1.5 eq)로 처리하고, 25 °C에서 2 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 암모늄 클로라이드 (40 mL)의 포화 용액으로 0 °C에서 급냉하고, 물 (50 mL)로 희석하고, EtOAc로 추출했다 (100 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (30 mL × 2), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0~4% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.70 g, 11.58 mmol, 88.5% 수율)을 단리된 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400MHz, CDCl₃) δ ppm 7.39 - 7.28 (m, 5H), 4.50 (s, 2H), 4.19 - 3.91 (m, 2H), 3.52 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.80 - 2.56 (m, 2H), 1.69 - 1.62 (m, 2H), 1.60 - 1.52 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.17 - 1.01 (m, 2H).

4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘. 디옥산 (25 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.70 g, 11.58 mmol, 1.00 eq)의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (25 mL, 8.60 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 2 h 동안 교반하고, 감압 하에서 농축하고, EtOAc (50 mL)로 희석하고, pH을 9로 소듐 비카보네이트의 포화 용액으로 조정했다. 미정제 물질을 EtOAc (50 mL × 3)로 추출하고 유기 층을 식염수로 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하고 4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘 (3.00 g, 미정제)를 백색 고체로서 얻었다. 상기 물질을 다음 단계에서 부가적 정제 없이 사용했다. MS (ESI) m/z 220.2 [M+1]⁺.

tert -부틸 2-(4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트. 아세토니트릴 (30 mL) 내 4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘 (3.00 g, 13.7 mmol, 1.00 eq) 및 tert-부틸 2-브로모프로파노에이트 (5.72 g, 27.4 mmol, 2.00 eq)의 용액에 DIEA (8.84　g, 68.4 mmol, 11.91 mL, 5.00 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 25　°C에서 12　h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 잔사를 물 (30 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (100 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (50 mL × 2), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-8% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 2-(4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (3.68 g, 10.4 mmol, 75.9% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 348.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.39 - 7.25 (m, 4H), 4.50 (s, 2H), 3.50 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.17 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 2.95 - 2.84 (m, 2H), 2.34 (dt, J = 2.4, 11.6 Hz, 1H), 2.22 (dt, J = 2.1, 11.6 Hz, 1H), 1.72 - 1.63 (m, 2H), 1.56 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.46 - 1.38 (m, 1H), 1.35 - 1.27 (m, 1H), 1.25 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.23 - 1.13 (m, 1H).

( S )- tert -부틸 2-(4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 및 ( R )- tert -부틸 2-(4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트의 키랄 분리. tert-부틸 2-(4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (3.68 g, 10.6　mmol)의 두 개의 거울상체를 다음 방법을 사용하여 키랄 SFC로 분리하고 (칼럼: DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 mm x 30 mm, 5 μm); 이동상 B: 0.1% 수성 암모니아 MeOH 내 ; 구배 B = 15%; 2.5 min) 거울상체 1 (0.550 g, 1.45 mmol, 91.6% 순도)를 무색 오일로서 얻었고, 거울상체 2 (0.960 g, 2.73 mmol, 98.9% 순도)을 무색 오일로서 얻었다.

(R) 및 (S)의 할당을 수행하지 않았다. 각각의 거울상체를 별도로 아래 단계에서 사용했다.

tert -부틸 2-(4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트의 거울상체 1. MeOH (10 mL) 내 tert-부틸 2-(4-(2-(벤질옥시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.550 g, 1.580 mmol, 1.00 eq)의 거울상체 1의 용액에 탄소상 Pd (0.050　g, 10% 순도)을 질소 하에서 부가했다. 현탁액을 진공하에서 탈기하고 수소로 몇 번 퍼징했다. 혼합물을 수소 하에서 (50　psi) 25 °C에서 16 h 동안 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 감압 하에서 농축했다. MeOH (10　mL) 내 잔사 (0.550 g, 미정제)의 용액에 탄소상 Pd (0.050　g, 10% 순도)을 질소 하에서 부가했다. 현탁액을 진공하에서 탈기하고 수소로 몇 번 퍼징했다. 혼합물을 수소 하에서 (50 Psi) 25 °C에서 또다른 16 h 동안 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 감압 하에서 농축하고 tert-부틸 2-(4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.420 g, 미정제)의 거울상체 1을 황색 오일로서 얻었고 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다.

tert -부틸 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트의 거울상체 1. 톨루엔 (2 mL) 내 5-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.300 g, 0.672 mmol, 1.00 eq)의 용액에, tert-부틸 2-(4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.208 g, 0.806 mmol, 1.2 eq) 및 트리페닐포스핀 (0.212 g, 0.806 mmol, 1.20　eq) 디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (0.163 g, 0.806　mmol, 0.157 mL, 1.20 eq)의 거울상체 1을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 110 °C에서 12　h 동안 교반하고, 이후 물 (30 mL)로 희석하고, 미정제 생성물을 EtOAc로 추출했다 (50　mL Х 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고, 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (100% EtOAc, 0-10% DCM 내 MeOH) 이후 분취용 실리카겔 TLC (50% 석유 에테르 내 EtOAc)에 의해 정제했다. tert-부틸 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.240 g, 0.345 mmol, 51.4% 수율)의 거울상체 1을 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 686.1 [M+1]⁺.

2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산의 거울상체 1. DCM (2 mL) 내 tert-부틸 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.240 g, 0.350 mmol, 1.00 eq)의 거울상체 1의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (10 mL)을 부가했다. 반응 혼합물을 25　°C에서 16 h 동안 교반하고 이후 감압 하에서 농축하고 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.220 g, 미정제)의 거울상체 1를 황색 오일로서 얻었고 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다. MS (ESI) m/z 630.1 [M+1]⁺.

N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 1. DMF (3 mL) 내 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.220 g, 0.349 mmol, 1.00 eq) 및 3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.152 g, 0.524 mmol, 1.50　eq,)의 거울상체 1의 용액에 DIEA (0.226 g, 1.75 mmol, 0.304 mL, 5.00 eq) 및 HATU (0.133 g, 0.349 mmol, 1.00 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 12　h 동안 교반하고 여과했다. 여액을 반-분취용 역상 HPLC (40-70% 아세토니트릴 + 0.225% 물 내 포름산, 9 min에 걸쳐)에 의해 정제했다. 수집된 분획을 농축하여 대부분의 아세토니트릴을 제거하고 1.0 M HCl 수성 용액 (5 mL)로 처리하고, 냉동건조시켰다. 고체를 EtOAc (50 mL)로 희석하고 pH을 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액으로 9로 조정했다. 혼합물을 EtOAc (50　mL Х 3)로 추출하고 유기 층을 식염수로 세척하고, 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 표준 방법에 의해 정제하여 N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드 (0.047 g, 0.052 mmol, 14.8% 수율)의 부분입체이성질체 1을 얻었다. MS (ESI) m/z 865.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.90 - 10.68 (m, 2H), 9.90 (br s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.25 - 7.12 (m, 3H), 7.00 (s, 1H), 6.91 - 6.83 (m, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.40 - 4.30 (m, 1H), 4.18 - 4.00 (m, 3H), 3.62 (br d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.16 (br s, 1H), 3.00 (br d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.81 - 2.70 (m, 1H), 2.69 - 2.56 (m, 6H), 2.44 (br s, 2H), 2.12 - 1.89 (m, 6H), 1.87 - 1.73 (m, 3H), 1.72 - 1.62 (m, 1H), 1.56 (br d, J = 6.6 Hz, 5H), 1.22 - 1.15 (m, 3H).

tert -부틸 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트의 거울상체 2. 톨루엔 (2 mL) 내 5-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.300 g, 0.672 mmol, 1.00 eq), tert-부틸 2-(4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트의 거울상체 2 (0.208 g, 0.806 mmol, 1.20 eq) (상기한 바와 같이 제조된) 및 트리페닐포스핀 (0.264 g, 1.01 mmol, 1.50　eq)의 용액에 디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (0.204 g, 1.01 mmol, 0.196　mL, 1.5 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 110 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 잔사를 트리페닐포스핀 (0.264 g) 및 디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (0.196 mL)에 부가했다. 반응 혼합물을 110 °C에서 또다른 16 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (21% 석유 에테르 내 EtOAc) 이후 실리카겔 분취용 TLC (50% 석유 에테르 내 EtOAc)에 의해 정제하여 tert-부틸 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트의 거울상체 2 (0.120 g, 0.162 mmol, 24.2% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 686.3 [M+1]⁺

2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산의 거울상체 2. DCM (2 mL) 내 tert-부틸 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.120 g, 0.175 mmol, 1.00 eq)의 거울상체 2의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (10 mL, 229 eq)을 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.120 g, 미정제)의 거울상체 2을 황색 오일로서 얻었고 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다. MS (ESI) m/z 630.2 [M+1]⁺.

N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 2. DMF (2 mL) 내 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.120 g, 0.190　mmol, 1.00 eq) 및 3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 히드로클로라이드 (0.100 g, 0.343 mmol, 1.80 eq)의 거울상체 2의 용액에 HATU (0.072 g, 0.190　mmol, 1.00 eq) 및 DIEA (0.123 g, 0.953 mmol, 0.166 mL, 5.00 eq)을 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 16 h 동안 교반하고, 여과했다. 여액을 표준 방법에 의해 정제하여 N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판아미드 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 2 (0.030 g, 0.033 mmol, 17.5% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 865.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 1.15 - 1.21 (m, 3 H), 1.53 (br s, 1 H), 1.56 (br d, J = 6.85 Hz, 3 H), 1.68 (br d, J = 12.72 Hz, 1 H), 1.74 - 2.14 (m, 9　H), 2.37 - 2.45 (m, 2 H), 2.57 - 2.68 (m, 6 H), 2.70 - 2.81 (m, 1 H), 3.00 (br d, J = 11.86 Hz, 1　H), 3.10 - 3.23 (m, 1 H), 3.61 (br d, J = 12.23 Hz, 1 H), 4.12 (br s, 3 H), 4.34 (br d, J = 6.97　Hz, 1 H), 6.36 (br s, 1 H), 6.53 (s, 1 H), 6.85 - 6.94 (m, 1 H), 7.01 (s, 1 H), 7.15 (br d, J = 3.55 Hz, 2 H), 7.18 - 7.24 (m, 1 H), 8.76 (d, J = 1.59 Hz, 1 H), 9.22 (s, 1 H), 10.08 (br s, 1 H), 10.80 (s, 1 H), 10.85 (br s, 1 H).

실시예 11: N-(3-시아노-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 트리플루오로아세테이트

tert -부틸 N -(3-브로모-5-니트로페닐)- N - tert -부톡시카르보닐-카바메이트. 피리딘 (50 mL) 내 3-브로모-5-니트로-아닐린 (5.500 g, 25.34 mmol, 1.00 eq)의 용액에 Boc₂O (27.66 g, 126.7 mmol, 5.00 eq)을 부가했다. 혼합물을 25 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 물 (30 mL) 및 EtOAc (60 mL × 3)로 희석했다. 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (20 mL × 2), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (3% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 N-(3-브로모-5-니트로-페닐)-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트 (8.00　g, 19.2 mmol, 76.0% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 8.37 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 8.20 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 8.12 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 1.40 (s, 18H).

tert -부틸 (3-시아노-5-니트로페닐)카바메이트 . DMF (5 mL) 내 tert-부틸 N-(3-브로모-5-니트로-페닐)-N-tert-부톡시카르보닐-카바메이트 (4.300 g, 10.31 mmol, 1.00 eq)의 혼합물을 아연 시아나이드 (2.420 g, 20.61 mmol, 2.00 eq), 및 테트라키스[트리페닐포스핀]팔라듐(0) (2.380 g, 2.060 mmol, 0.20 eq)에 부가하고, 혼합물을 100 °C에서 10 h 동안 질소 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 물 (25 mL)로 희석하고 생성물을 EtOAc (30 mL × 3)로 추출했다. 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (15 mL × 2), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공에서농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (4% 석유 에테르 내 EtOAc) tert -부틸 (3-시아노-5-니트로페닐)카바메이트 (1.10 g, 4.09 mmol, 30.0% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ ppm 10.24 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 1.50 (s, 9H).

tert -부틸 (3-아미노-5-시아노페닐)카바메이트. EtOH (30 mL) 및 물 (10 mL) 내 tert-부틸 N-(3-시아노-5-니트로-페닐)카바메이트 (1.100 g, 4.180 mmol, 1.00 eq)의 혼합물에 페릭 니트레이트 (1.400 g, 25.07 mmol, 6.00 eq) 및 암모늄 클로라이드 (2.240 g, 41.79 mmol, 10.00 eq)을 25 °C에서 부가했다. 혼합물을 80 °C까지 가열하고, 10 h 동안 질소 하에서 교반하고, 여과했다. 여액을 감압 하에서 농축하고 tert-부틸 (3-아미노-5-시아노페닐)카바메이트 (0.950 g, 4.07 mmol, 97.0% 수율)을 흑색 갈색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 178.1 [M-55]⁺.

3,5-디아미노벤조니트릴. EtOAc (2 mL) 내 tert-부틸 (3-아미노-5-시아노페닐)카바메이트 (0.200 g, 0.857 mmol, 1.00 eq)의 용액에 4.0 M 1,4-디옥산 내 HCl 용액 (4 M, 10.00 eq)을 부가했다. 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반하고, 이후 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액 (50 mL) 내로 붓고 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (50 mL Х 3). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (50　mL Х 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축했다. 화합물 3,5-디아미노벤조니트릴 (0.100 g, 0.751 mmol, 88.0% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.

3-아미노-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)벤조니트릴. DMF (1 mL) 내 3,5-디아미노벤조니트릴 (0.100 g, 0.751 mmol, 1.00 eq) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (0.288　g, 1.50 mmol, 2.00 eq)의 용액에 소듐 수소 카보네이트 (0.094 g, 1.13 mmol, 1.50 eq)을 부가했다. 혼합물을 50 °C에서 12 h 동안 교반했다. 혼합물을 얼음-물 (20 mL) 내로 붓고, 수성 상을 EtOAc로 추출했다 (20 mL × 3). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (20 mL), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축했다. 혼합물을 분취용 TLC (50% EtOAc 석유 에테르)에 의해 정제했다. 화합물 3-아미노-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)벤조니트릴 (0.050 g, 0.20 mmol, 27% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 245.2 [M+1]⁺.

N-(3-시아노-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 트리플루오로아세테이트. 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트산 디히드로클로라이드 (0.100 g, 0.148 mmol), 3-아미노-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)벤조니트릴 (0.047 g, 0.192 mmol), HATU (0.062 g, 0.163　mmol) 및 DIEA (0.103 mL, 0.591 mmol)을 DMF (1 mL) 내에서 조합시키고 혼합물을 주변 온도에서 나사 캡 바이알 내에서 교반했다. 2 h 후, 용액을 DMSO (1 mL)로 희석하고 표준 방법에 의해 정제하여 표제 화합물을 얻었다 (0.041, 0.049 mmol, 33.4% 수율). MS(ESI) m/z 830 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ　ppm 10.84 (s, 1 H), 9.24 (d, J = 1.96 Hz, 1 H), 8.82 (d, J = 1.96 Hz, 1 H), 7.25 (s, 1 H), 7.08 - 7.19 (m, 4 H), 6.82 (br s, 1 H), 6.53 (s, 2 H), 4.40 (br s, 1 H), 3.99 - 4.22 (m, 3 H), 2.74 (s, 1 H), 2.52 - 2.69 (m, 4 H), 2.07 (br s, 2 H), 1.93 (br dd, J = 12.23, 4.28 Hz, 3 H), 1.65 - 1.84 (m, 4 H), 1.51 (s, 9 H), 1.16 (t, J = 7.52 Hz, 4 H), 0.83 (s, 1 H), -0.04 - -0.01 (m, 1 H).

실시예 12: (S)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-(((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)프로판아미드 히드로클로라이드

tert -부틸 N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]카바메이트. DMF (50 mL) 내 tert-부틸 N-(3-아미노페닐)카바메이트 (10.90 g, 52.1 mmol) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (10.00 g, 52.1 mmol)의 용액에 소듐 비카보네이트 (4.38 g, 52.1　mmol)을 부가했다. 반응 혼합물을 80 °C에서 16 h 동안 교반하고, 이후 실온까지 냉각하고, 얼음 물 (800 mL) 내로 부었다. 결과로서 얻어진 고체를 여과에 의해 수집하고, 이후 EtOAc 및 석유 에테르 (100 mL)의 1:1 혼합물로 세척하고 진공하에서 건조시키고 tert-부틸 N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]카바메이트 (14.00 g, 84.2% 수율)를 청색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.77 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 6.93 (t, J = 8.0　Hz, 1H), 6.85 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.31-6.29 (m, 1H), 5.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.24-4.18 (m, 1H), 2.74-2.60 (m, 2H), 2.30-2.19 (m, 1H), 1.95-1.80 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).

3-(3-아미노아닐리노)피페리딘-2,6-디온. DCM (60 mL) 내 tert-부틸 N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]카바메이트 (12.00 g, 37.6 mmol)의 용액에 TFA (61.6 g, 540 mmol, 40 mL)을 0°C에서 부가했다. 반응 혼합물을 20 °C에서 3 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 잔사를 MTBE (60　mL)로 희석하고 20 °C에서 30 min 동안 교반했다. 고체를 여과에 의해 수집하고 물 (400 mL) 내에 용해시키고 소듐 비카보네이로 포화 수성 용액의 부가로 pH를 7로 조정했다. 상기 물질을 EtOAc로 추출했다 (500 mL x 3). 조합시킨 유기 층을 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하고 감압 하에서 3-(3-아미노아닐리노)피페리딘-2,6-디온 (8.00 g, 97.1% 수율)를 오렌지색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400　MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.83 (s, 1H), 6.81-6.77 (m, 1H), 5.97-5.83 (m, 3H), 5.47 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.26-4.22 (m, 1H), 2.78-2.61 (m, 2H), 2.15-2.14 (m, 1H), 1.91-1.85 (m, 1H).

(R)-3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 및 (S)-3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온. 3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (8 g)의 두 개의 거울상체를 키랄 SFC로 분리하고 분획을 35 ^oC 아래 온도에서 농축하고 두 개의 피크를 얻었다. 절대 배열을 진동 원편광 이색성 분광법 (VCD)로 결정했다. (R)-3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (2.80 g, 35.0% 수율, 97.7% ee) 및 (S)-3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (2.90 g, 36.3% 수율, 97.1% ee)을 갈색 고체로서 단리했다. SFC 정제 조건 (칼럼: Chiralpak IC-H, 250 x 30 mm i.d. 5 μm; 이동상: CO₂에 대한 A 및 EtOH에 대한 B:아세토니트릴= 2:1; 구배: B% = 40%; 유속: 75 g/min).

(R)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트. (R)-메틸 2-클로로프로파노에이트 (0.179 mL, 1.65 mmol, 2.40 eq)을 THF (5.87 mL, 0.117 몰) 내 5-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.400 g, 0.687 mmol, 1.00 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된) 및 TEA (0.383　mL, 2.75 mmol, 4.00 eq)의 교반 혼합물에 부가했다. 반응 혼합물을 2 d 동안 85 °C에서 교반하고, 이후 농축하고 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-100% EtOAc/헥산) (S)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.331 g, 0.524 mmol, 76% 수율, 94.3% ee)를 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 632.2 [M+1]⁺.

(S)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산. THF (3.52 mL) 및 물 (1. 2 mL) (0.078 몰)의 3:1 혼합물 내 (S)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.231 g, 0.366 mmol, 1.00 eq)의 현탁액을 리튬 히드록사이드 (0.091 g, 3.81 mmol, 10.4 eq)의 부가로 처리하고, 실온에서 18 h 동안 교반했다. 반응을 EtOAc 및 물로 희석하고 이후 pH을 6.0 N HCl 수성 용액의 부가로 3로 조정했다. 유기 층을 EtOAc로 추출하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하고 (S)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 히드로클로라이드 (0.222 g, 0.359 mmol, 98% 수율)을 베이지색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 618.2 [M+1]⁺.

(S)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-(((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)프로판아미드 히드로클로라이드. (S)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 히드로클로라이드 (0.111 g, 0.180 mmol, 1.00 eq)을 DMF (0.899　mL, 0.2 M) 내 (S)-3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (0.039 g, 0.180 mmol, 1.00　eq), HATU (0.075 g, 0.2 mmol, 1.10 eq), DIEA (0.094 mL, 0.54 mmol, 300. eq)와 조합시켰다. 반응을 25 °C에서 2 h 동안 교반하고, 이후 물로 급냉하고 EtOAc로 희석하고, 수성 층을 EtOAc로 추출했다. 조합시킨 유기 층을 농축하고, 잔사를 표준 방법에 의해 정제하여 (2S)-2-[4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-1-피페리딜]-N-[3-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]프로판아미드 히드로클로라이드 (0.056 g, 0.063 mmol, 35% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 819.4 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 10.79 (s, 1H), 10.52 (s, 1H), 9.88 (q, 1H, J =7.6 Hz), 9.24 (d, 1H, J =1.8 Hz), 8.82 (d, 1H, J =2.0 Hz), 7.1-7.2 (m, 3H), 7.05 (t, 1H, J =8.1 Hz), 6.97 (t, 1H, J =1.7 Hz), 6.85 (br d, 1H, J =7.9 Hz), 6.47 (dd, 1H, J =1.8, 8.0 Hz), 4.27 (br dd, 1H, J =4.9, 11.5 Hz), 4.10 (br t, 2H, J =5.7 Hz), 4.05 (quin, 1H, J =6.8 Hz), 3.43 (br d, 1H, J =11.0 Hz), 3.27 (br s, 1H), 3.1-3.2 (m, 1H), 2.9-3.0 (m, 1H), 2.7-2.8 (m, 1H), 2.63 (q, 2H, J =7.6 Hz), 2.6-2.6 (m, 1H), 2.1-2.1 (m, 1H), 1.98 (br d, 2H, J =13.3 Hz), 1.91 (br dq, 1H, J =4.5, 12.1 Hz), 1.82 (br s, 1H), 1.76 (q, 2H, J =5.6 Hz), 1.6-1.7 (m, 1H), 1.55 (br d, 3H, J =6.8 Hz), 1.53 (br s, 1H), 1.51 (s, 6H), 1.16 (t, 3H, J =7.5 Hz).

실시예 13: (2R)-2-[4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-1-피페리딜]-N-[3-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]프로판아미드 히드로클로라이드

(R)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트. (S)-메틸 2-클로로프로파노에이트 (0.101 g, 0.825 mmol, 1.20 eq)을 THF (5.87 mL, 0.117 몰) 내 5-(3-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.400 g, 0.687 mmol, 1.00 eq) 및 TEA (0.383　mL, 2.75 mmol, 4.00 eq)의 교반 혼합물에 부가했다. 반응 혼합물을 5 d 동안 85 °C에서 교반하고, 이후 농축하고 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-100% 헥산 내 EtOAc) (R)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.296 g, 0.469 mmol, 68.2% 수율, 94% ee)를 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 632.2 [M+1]⁺.

(R)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산. THF (2.95 mL) 및 물 (0.984 mL) (0.078 몰)의 3:1 혼합물 내 (R)-메틸 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로파노에이트 (0.194 g, 0.307 mmol, 1.00 eq)의 현탁액을 리튬 히드록사이드 (0.077 g, 3.2 mmol, 10.4 eq)로 처리했다. 반응 혼합물을 실온에서 18 h 동안 교반하고, EtOAc 및 물로 희석하고, pH을 6.0 N 수성 HCl의 부가로 3로 조정했다. 유기 층을 EtOAc로 추출하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하고 (R)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.195 g, 0.259 mmol, 84% 수율)을 베이지색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 618.2 [M+1]⁺.

(R)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-(((S)-2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)프로판아미드 히드로클로라이드. (R)-2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)프로판산 (0.097 g, 0.158 mmol, 1.00 eq)을 DMF (0.789 mL, 0.200 몰) 내 (S)-3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (여기서 기술된 바와 같이 제조된) (0.035 g, 0.158 mmol, 1.00 eq), HATU (0.066 g, 0.174 mmol, 1.10 eq), 및 DIEA (0.083 mL, 0.474　mmol, 4.00　eq) 와 조합시키고, 반응을 25 °C에서 2 h 동안 교반했다. 부가적 (S)-3-((3-아미노페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (0.035 g, 0.158 mmol, 1.00　eq), HATU (0.066　g, 0.174 mmol, 1.10 eq) 및 DIEA (0.083 mL, 0.474 mmol, 4.00 eq)을 사용하고, 반응을 부가적 18 h 교반하고, 이후 물로 급냉하고 EtOAc로 희석하고, 수성 층을 EtOAc로 추출했다. 조합시킨 유기 층을 농축하고, 잔사를 표준 방법에 의해 정제하여 (2R)-2-[4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-1-피페리딜]-N-[3-[[(3S)-2,6-디옥소-3-피페리딜]아미노]페닐]프로판아미드 히드로클로라이드 (0.027 g, 0.031 mmol, 19.7% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 819.4 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.80 (s, 1H), 10.52 (s, 1H), 9.87 (q, 1H, J =7.0 Hz), 9.24 (d, 1H, J =1.8 Hz), 8.82 (d, 1H, J =2.1 Hz), 7.1-7.2 (m, 3H), 7.05 (t, 1H, J =7.9 Hz), 6.97 (t, 1H, J =1.8 Hz), 6.85 (dd, 1H, J =0.8, 7.8 Hz), 6.47 (dd, 1H, J =1.9, 8.0 Hz), 4.27 (br dd, 1H, J =4.8, 11.3 Hz), 4.10 (br t, 2H, J =5.9 Hz), 4.05 (quin, 1H, J =6.8 Hz), 3.43 (br d, 2H, J =8.4 Hz), 3.07 (qd, 2H, J =12.7, 59.9 Hz), 2.7-2.8 (m, 1H), 2.63 (q, 2H, J =7.6 Hz), 2.6-2.6 (m, 1H), 2.0-2.1 (m, 1H), 1.99 (br d, 2H, J =12.6 Hz), 1.91 (br dq, 1H, J =4.2, 12.3 Hz), 1.82 (br s, 1H), 1.76 (q, 2H, J =5.6 Hz), 1.6-1.7 (m, 1H), 1.55 (d, 3H, J =6.8 Hz), 1.53 (br s, 1H), 1.51 (s, 6H), 1.16 (t, 3H, J =7.6 Hz).

실시예 14: 2-(4-((4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴. 톨루엔 (15 mL) 내 5-아미노-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (1.00 g, 5.34 mmol, 1.00 eq)의 용액에 티오포스겐 (0.922 g, 8.020 mmol, 1.50 eq)을 한번에 질소 하에서 부가했다. 혼합물을 110 °C에서 2 h 동안 교반하고, 이후 25 °C까지 냉각하고, 감압 하에서 40 °C에서농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-1% 석유 에테르 내 EtOAc) 5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.870 g, 3.80 mmol, 71.0% 수율)를 옅은 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 230.1 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 9.11 (d, J=2.2 Hz, 1H), 8.66 (d, J=2.1 Hz, 1H).

tert -부틸 4-((4-니트로페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트. THF (8 mL) 내 4-니트로페놀 (1.290 g, 9.29 mmol, 1.00 eq) 및 tert-부틸 4-(히드록시메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.000 g, 9.29 mmol, 1.00 eq)의 용액에 트리페닐포스핀 (6.090　g, 23.22 mmol, 2.50 eq) 및 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (3.76 g, 18.6 mmol, 3.61　mL, 2.00 eq)을 1 h에 걸쳐 0 °C에서 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 9 h 동안 교반하고, 이후 EtOAc (10 mL)로 희석하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (0-15% 석유 에테르 내 EtOAc)에 의해 정제했다. 분획을 농축하고 물질을 분쇄하고 (2% 석유 에테르 내 EtOAc (50 mL × 2) tert-부틸 4-((4-니트로페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.070 g, 3.15 mmol, 33.9% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 281.0 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ　ppm 8.25 - 8.15 (m, 2H), 7.24 - 7.08 (m, 2H), 4.10 - 3.90 (m, 4H), 2.92 - 2.58 (m, 2H), 2.04 - 1.92 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.21 - 1.14 (m, 2H).

tert -부틸 4-((4-아미노페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트. MeOH (80 mL) 내 tert-부틸 4-((4-니트로페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (6.50 g, 19.3 mmol, 1.00 eq)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (1.00 g, 10% 순도)을 부가하고, 혼합물을 수소로 3회 탈기하고 25 °C에서 수소 하에서 (15 psi) 10 h 동안 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 감압 하에서 농축하여 tert-부틸 4-((4-아미노페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.50 g, 17.9 mmol, 93% 수율)를 흑색 고체로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 6.63 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.48 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.58 (s, 2H), 4.02 - 3.90 (m, 2H), 3.66 (d, J=6.4 Hz, 2H), 2.82 - 2.61 (m, 2H), 1.89 - 1.78 (m, 1H), 1.70 (br s, 2H), 1.40 - 1.38 (m, 9H), 1.17 - 1.04 (m, 2H).

tert -부틸 4-((4-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노)페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트. DIEA (55　mL) 및 1-메틸-2-피롤리딘온 (5 mL) 내 tert-부틸 4-((4-아미노페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.50 g, 17.9 mmol, 1.00 eq)의 용액에 메틸 2-브로모-2-메틸-프로파노에이트 (9.75 g, 53.8 mmol, 6.96 mL, 3.00 eq)을 부가했다. 140 °C에서 12 h 후, 반응 혼합물을 EtOAc 및 물 (100 mL)의 1:1 혼합물 내로 붓고 15 min 동안 교반했다. 유기 상을 분리하고 수성 상을 EtOAc로 추출했다 (80 mL × 3). 조합시킨 유기 상을 식염수로 세척하고 (80 mL × 2), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 tert-부틸 4-((4-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노)페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.60 g, 10.2 mmol, 56.7% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 407.1 [M+1]⁺; ¹H　NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 6.67 (d, J=8.9　Hz, 2H), 6.40 (d, J=9.0 Hz, 2H), 5.40 (s, 1H), 3.99 - 3.86 (m, 2H), 3.68 (d, J=6.4 Hz, 2H), 3.58 (s, 3H), 2.81 - 2.62 (m, 2H), 1.90 - 1.78 (m, 1H), 1.69 (br s, 2H), 1.41 - 1.36 (m, 15H), 1.13 - 1.04 (m, 2H).

tert -부틸 4-((4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트. EtOAc (50 mL) 내 tert-부틸 4-((4-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노)페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.00 g, 12.3 mmol, 1.00 eq) 및 5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (5.64 g, 24.6 mmol, 2.00 eq)의 용액에 TEA (2.49 g, 24.6 mmol, 3.42 mL, 2.00 eq)을 한번에 질소 하에서 부가했다. 혼합물을 60 °C에서 10 h 동안 교반하고, 이후 진공하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-50% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 4-((4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.900 g)를 황색 발포물로서 및 tert-부틸 4-((4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.54 g)를 미정제 적색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 504.1 [M-Boc+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 9.25 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.82 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.26 (s, 2H), 7.11 (s, 2H), 4.01 (br s, 2H), 3.93 - 3.88 (m, 2H), 2.90 - 2.69 (m, 2H), 1.99 (s, 1H), 1.82 - 1.73 (m, 2H), 1.51 (s, 6H), 1.41 (s, 9H), 1.18 (s, 2H)

5-(4,4-디메틸-5-옥소-3-(4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드. THF (10 mL) 내 tert-부틸 4-((4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.80 g, 4.64 mmol, 1.00 eq)의 용액을 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (10 mL)로 처리하고 25　°C에서 2 h 동안 교반했다. 감압 하에서 농축 후, 5-(4,4-디메틸-5-옥소-3-(4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (2.80 g, 미정제)을 황색 발포물로서 단리했다. MS (ESI) m/z 504.0 [M+1]⁺

2-(4-((4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드. DMF (2 mL) 내 5-(4,4-디메틸-5-옥소-3-(4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.130 g, 0.241 mmol, 1.00 eq) 및 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.072 g, 0.241 mmol, 1.00 eq)의 혼합물에 DIEA (0.156　g, 1.20 mmol, 5.00 eq)을 부가하고, 혼합물을 50 °C에서 10 h 동안 교반하고, 감압 하에서 농축하고 잔사를 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-((4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.114 g, 0.138 mmol, 57.3% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 763.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.80 (s, 1H), 10.53 (br s, 1H), 10.02 - 9.78 (m, 1H), 9.24 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.82 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.28 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.11 (d, J=8.9 Hz, 2H), 7.04 (s, 1H), 6.96 (br s, 1H), 6.85 (br d, J=7.8 Hz, 1H), 6.45 (br d, J=8.6 Hz, 1H), 4.25 (br dd, J=4.9, 11.5 Hz, 1H), 4.11 (br d, J=4.3 Hz, 2H), 3.93 (br d, J=6.0 Hz, 2H), 3.66 - 3.07 (m, 4H), 2.81 - 2.68 (m, 1H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.15 - 1.87 (m, 5H), 1.72 (br s, 2H), 1.50 (s, 6H).

실시예 15: 2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

tert -부틸 4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 4-(3-(3-에틸-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.100 g, 0.23 mmol) (여기서 기술된 바와 같이 제조된), tert-부틸 4-(브로모메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.064 g, 0.23 mmol) 및 세슘 카보네이트 (0.113 g, 0.35 mmol)을 DMF (1.54 mL) 내에서 조합시키고 용액을 40 °C에서 밤새 교반했다. 반응을 EtOAc (100 mL), 물 (20 mL), 및 식염수 (20 mL)로 희석했다. 층을 분리하고 유기 층을 식염수로 세척하고 (2 x 50 mL), 무수 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 오일로 농축하고 이를 실리카겔 크로마토그래피 (0-20% MeOH 내 DCM)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.146 g, 0.230 mmol, 정량적 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 631.2 [M+1]⁺.

4-(3-(3-에틸-4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드. DCM (10 mL) 내 tert-부틸 4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.146 g, 0.23 mmol)의 용액에 TFA (2.0 mL, 26.0 mmol)을 부가하고 혼합물을 주변 온도에서 교반하고, 감압 하에서 3 h 후 오일로 농축하고, 디옥산 내 4 N HCl 용액 (5 mL) 및 DCM (5 mL)로 처리했다. 현탁액을 초음파처리하고 감압 하에서 오일로 농축하고 이를 디에틸 에테르 및 헥산으로 분쇄했다. 4-(3-(3-에틸-4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드를 감압 하에서 용매제거 후에 단리했다 (0.103 g, 0.18 mmol, 78% 수율). MS (ESI) m/z 531.2 [M+1]⁺.

2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드. 4-(3-(3-에틸-4-(피페리딘-4-일메톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.083 g, 0.15 mmol), 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.043 g, 0.15 mmol), 및 DIEA (0.103 mL, 0.59　mmol)을 DMF (1.0 mL) 내에서 조합시키고 혼합물을 주변 온도에서 밤새 교반했다. 혼합물을 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-((4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)메틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.028 g, 0.034 mmol, 23% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 790.4 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, DMSO-d ₆ ) ppm 10.77 - 10.84 (m, 1 H), 10.40 - 10.46 (m, 1 H), 9.77 - 9.90 (m, 1　H), 8.36 - 8.42 (m, 1 H), 8.26 - 8.32 (m, 1 H), 8.05 - 8.10 (m, 1 H), 7.02 - 7.21 (m, 4 H), 6.93 - 6.97 (m, 1 H), 6.81 - 6.87 (m, 1 H), 6.43 - 6.51 (m, 1 H), 4.22 - 4.29 (m, 1 H), 4.07 - 4.16 (m, 2　H), 3.92 - 3.98 (m, 2 H), 3.54 - 3.63 (m, 2 H), 3.10 - 3.23 (m, 2 H), 2.61 - 2.75 (m, 3 H), 1.74 - 2.19 (m, 8 H), 1.49 (s, 6 H), 1.13 - 1.22 (m, 3 H).

실시예 16: 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

tert -부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 톨루엔 (7 mL) 내 5-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.700 g, 1.57 mmol, 1.00 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된) tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.431 g, 1.88 mmol, 1.20 eq) 및 트리페닐포스핀 (0.494 g, 1.88 mmol, 1.20 eq)의 용액에 디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (0.380 g, 1.88 mmol, 0.366 mL, 1.20 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 110 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 물 (50 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (100 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (30 mL × 2), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 잔사를 얻었다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-9.4% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.61 g, 1.50 mmol, 95.4% 수율)을 적색 고체로서 및 tert-부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.290 g, 0.638 mmol, 40.9% 수율)을 회색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 680.3 [M+23]⁺.

5-(5-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴. DCM (3 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.61 g, 1.50 mmol, 1.00 eq)의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (15 mL, 40.12 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 2 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 잔사를 반-분취용 역상 HPLC (30-60% 아세토니트릴 + 0.225% 물 내 포름산, 22 min에 걸쳐)에 의해 정제했다. 이후 수집된 분획을 농축하여 대부분의 아세토니트릴을 제거하고 1.0 M 염산의 수성 용액 (5 mL)으로 처리했다. 생성물을 냉동건조시켰다. 5-(5-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.515 g, 0.858 mmol, 57.4% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 558.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ9.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.97 (br s, 1H), 8.81 - 8.62 (m, 2H), 7.22 - 7.09 (m, 3H), 4.10 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.25 (br d, J = 12.5 Hz, 2H), 2.93 - 2.75 (m, 2H), 2.70 - 2.57 (m, 4H), 2.47 - 2.37 (m, 2H), 2.02 - 1.92 (m, 1H), 1.89 (br d, J = 13.8 Hz, 2H), 1.85 - 1.70 (m, 3H), 1.61 - 1.50 (m, 1H), 1.49 - 1.36 (m, 2H), 1.17 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드. DMF (2　mL) 내 5-(5-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.150 g, 0.252 mmol, 1.00 eq) 및 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.101 g, 0.303 mmol, 1.20 eq)의 용액에 DIEA (0.163 g, 1.26 mmol, 0.220 mL, 5.00 eq)을 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 50 °C에서 16 h 동안 교반하고, 여과하고, 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.172 g, 0.200 mmol, 79.2% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 817.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.82 (s, 1H), 10.70 - 10.50 (m, 1H), 10.06 - 9.81 (m, 1H), 9.22 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.77 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.28 - 7.11 (m, 3H), 7.09 - 7.02 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.86 (br d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.47 (br d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.27 (br dd, J = 4.7, 11.3 Hz, 1H), 4.12 (br d, J = 4.5 Hz, 4H), 3.56 (br s, 2H), 3.32 (br s, 1H), 3.23 - 3.04 (m, 2H), 2.81 - 2.69 (m, 1H), 2.69 - 2.55 (m, 5H), 2.49 - 2.39 (m, 2H), 2.15 - 2.06 (m, 1H), 2.05 - 1.83 (m, 5H), 1.78 (br d, J = 5.7 Hz, 2H), 1.72 - 1.58 (m, 2H), 1.58 - 1.46 (m, 1H), 1.24 - 1.15 (m, 2H), 1.24 - 1.15 (m, 1H).

실시예 17: N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드

A. 1-(벤질옥시)-4-니트로-2-비닐벤젠. 디옥산 (200 mL) 및 물 (20　mL) 내 1-(벤질옥시)-2-브로모-4-니트로벤젠 (20.00 g, 64.91 mmol, 1.00 eq) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-비닐-1,3,2-디옥사보롤란 (12.00 g, 77.89 mmol, 13.21 mL, 1.20 eq)의 용액에 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 DCM 복합체 (5.300　g, 6.490 mmol, 0.1 eq) 및 포타슘 카보네이트 (17.94 g, 129.82 mmol, 2 eq)을 부가했다. 혼합물을 85 °C에서 26 h 동안 질소 분위기 하에서 교반하고, 이후 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 물 (300 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (100 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (50 mL × 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 잔사를 얻었다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-3% 석유 에테르 내 EtOAc) 1-(벤질옥시)-4-니트로-2-비닐벤젠 (10.00 g, 39.17 mmol, 60.3% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 256.1 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CH₃OD) δ ppm 8.27 (d, J=2.8 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=2.8, 9.0 Hz, 1H), 7.43 - 7.31 (m, 5H), 7.10 (d, J=9.2 Hz, 1H), 6.99 (dd, J=11.2, 17.8　Hz, 1H), 5.84 (dd, J=0.9, 17.7 Hz, 1H), 5.35 (dd, J=0.9, 11.2 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H).

2-(2-(벤질옥시)-5-니트로페닐)에탄올. THF (200 mL) 내 1-(벤질옥시)-4-니트로-2-비닐벤젠 (8.35 g, 32.7 mmol, 1.00 eq)의 용액에 보란 디메틸 설파이드 복합체 (10 M, 8.18 mL, 2.5 eq)을 한방울씩 0 °C에서 부가했다. 혼합물을 20 °C에서 2　h 동안 질소 분위기 하에서 교반했다. 반응 혼합물에 소듐 퍼보레이트 4수화물 (15.10 g, 98.13 mmol, 3 eq)을 0 °C에서 부가하고 이후 물 (60 mL)을 0 °C에서 한방울씩 부가했다. 결과로서 얻어진 혼합물을 20 °C에서 12 h 동안 교반했다. 반응을 포화 소듐 티오설페이트 용액 (400 mL) 부가로 급냉하고 미정제 생성물을 EtOAc로 추출했다 (100 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (50 mL × 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 잔사를 얻었다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (3-20% 석유 에테르 내 EtOAc) 2-(2-(벤질옥시)-5-니트로페닐)에탄올 (4.50 g, 16.5 mmol, 50.3% 수율)을 황색 검으로서 얻었다. MS (ESI) m/z 274.0 [M+1]⁺.

1-(벤질옥시)-2-(2-플루오로에틸)-4-니트로벤젠. DCM (50 mL) 내 2-(2-(벤질옥시)-5-니트로페닐)에탄올 (4.50 g, 16.5 mmol, 1.00 eq)의 용액에 디에틸아미노황 트리플루오리드 (7.96 g, 49.4 mmol, 6.53 mL, 3.00 eq)을 0 °C에서 부가했다. 혼합물을 20 °C에서 12 h 동안 질소 분위기 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 얼음-물 (200 mL) 내로 붓고 pH을 소듐 비카보네이트의 포화 용액의 부가로 7-8로 조정하고, 이후 EtOAc로 추출했다 (50 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (20 mL × 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (0-5% 석유 에테르 내 EtOAc에 의해 정제하여 1-(벤질옥시)-2-(2-플루오로에틸)-4-니트로벤젠 (3.150 g, 11.44 mmol, 69.5% 수율)을 옅은 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 276.0 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, CH₃OD) δ ppm 8.19 - 8.13 (m, 2H), 7.49 - 7.45 (m, 2H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 7.21 (d, J=8.7 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.70 (t, J=6.2 Hz, 1H), 4.58 (t, J=6.2 Hz, 1H), 3.15 (t, J=6.2 Hz, 1H), 3.09 (t, J=6.2 Hz, 1H).

4-아미노-2-(2-플루오로에틸)페놀. EtOAc (50 mL) 내 1-(벤질옥시)-2-(2-플루오로에틸)-4-니트로벤젠 (3.78 g, 13.7 mmol, 1.00 eq)의 용액에 팔라듐/탄소 (1.460 g, 1.370 mmol, 10% 순도, 0.1 eq)을 부가했다. 혼합물을 30 °C에서 16 h 동안 수소 (50 psi) 분위기 하에서 교반하고 이후 30 °C에서 또다른 16 h 동안 수소 (50 psi) 분위기 하에서 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 팔라듐/탄소 (1.460 g, 1.370 mmol, 10% 순도, 0.1 eq)로 처리했다. 결과로서 얻어진 혼합물을 40 °C에서 또다른 16 h 동안 수소 (50 psi) 분위기 하에서 교반하고, 이후 여과하고 감압 하에서 농축했다. 잔사를 MTBE (20 mL) 내에서 현탁하고 20 °C에서 1 h 동안 교반했다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 4-아미노-2-(2-플루오로에틸)페놀 (1.73 g, 미정제)를 갈색 고체로서 얻었다. (ESI) m/z 156.1 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CH₃OD) δ ppm 6.66 - 6.56 (m, 2H), 6.56 - 6.48 (m, 1H), 4.60 (t, J=6.9 Hz, 1H), 4.48 (t, J=6.9 Hz, 1H), 2.97 - 2.86 (m, 2H).

2-((3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴. 2-히드록시-2-메틸프로판니트릴 (13.98 g, 164.27 mmol, 15 mL, 23.20 eq) 내 4-아미노-2-(2-플루오로에틸)페놀 (1.100 g, 7.090 mmol, 1.00 eq)의 용액에 마그네슘 설페이트 (2.130 g, 17.72 mmol, 2.50 eq)을 부가했다. 혼합물을 60 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 물 (50 mL)로 희석하고 EtOAc (30 mL × 3)로 추출했다. 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (20 mL × 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 갈색 검으로서 얻어진 미정제 생성물, 2-((3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴 (1.500 g, 미정제)을 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다. MS (ESI) m/z 196.1 [M-26]⁺.

4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. DMF (15 mL) 내 2-((3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)아미노)-2-메틸프로판니트릴 (1.500 g, 6.750 mmol, 1.00 eq)의 용액에 4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (1.080 g, 4.720 mmol, 0.70 eq)을 부가했다. 혼합물을 20 °C에서 1 h 동안 교반하고 이후 4.0 M MeOH 내 HCl 용액 (8.44 mL, 5 eq)로 처리하고 70 °C에서 12 h 동안 질소 분위기 하에서 교반했다. 감압 하에서 농축 이후, 잔사를 물 (50 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (30 mL Х 5). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (20 mL Х 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (5-20% 석유 에테르 내 EtOAc)에 의해 정제하여 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (1.47 g, 3.26 mmol, 48.2% 수율)을 황색 검으로서 얻었다. MS (ESI) m/z 452.1 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CH₃OD) δ ppm 8.16 - 8.12 (m, 2H), 7.98 (br d, J=2.0　Hz, 1H), 7.14 (d, J=2.6 Hz, 1H), 7.07 (dd, J=2.6, 8.4 Hz, 1H), 6.91 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.68 (t, J=6.5 Hz, 1H), 4.56 (t, J=6.5 Hz, 1H), 3.09 - 3.00 (m, 2H), 1.53 (s, 6H), 1.56 - 1.50 (m, 1H).

tert -부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. DMF (4 mL) 내 tert-부틸 4-(2-브로모에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.777 g, 2.66 mmol, 3.00 eq)의 용액에 소듐 아이오다이드 (0.398 g, 2.660 mmol, 3.00 eq)을 부가했다. 90 °C에서 0.5 h 동안 교반 후, 포타슘 카보네이트 (0.367 g, 2.66 mmol, 3.00 eq), 18-크라운-6 (0.703 g, 2.660 mmol, 3.00 eq), 및 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.400 g, 0.886 mmol, 1.00 eq)을 부가하고 얻어진 혼합물을 90 °C에서 16 h 동안 교반하고, 여과하고, 여액을 반-분취용 역상 HPLC (78-98% 물 내 아세토니트릴 + 0.225% 포름산, 7.8 min에 걸쳐)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.140 g, 0.211 mmol, 23.8% 수율)을 황색 검으로서 얻었다. MS (ESI) m/z 563.2 [M-99]⁺.

4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드. tert-부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.140 g, 0.211 mmol, 1.00 eq)에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (5.0 mL, 95 eq)을 부가했다. 혼합물을 20 °C에서 2　h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축하고 잔사를 얻었다 (0.126 g). 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.063 g)의 일부를 반-분취용 역상 HPLC (25-45% 물 내 아세토니트릴 + 0.05% 염산, 10 min에 걸쳐)에 의해 정제했다. 이후 0.063 g의 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴을 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다. 정제된 용액을 냉동건조시켜 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.025 g, 0.042 mmol, 19.9% 수율)를 단리된 황색 고체로서 얻었다. 화합물 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.063　g, 미정제)을 황색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 563.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400　MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 8.84 (br s, 1H), 8.57 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 8.39 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.29 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.07 (dd, J=1.7, 8.1 Hz, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 7.17 - 7.12 (m, 1H), 4.69 (t, J=6.3 Hz, 1H), 4.58 (t, J=6.3 Hz, 1H), 4.10 (br t, J=5.9 Hz, 2H), 3.25 (br d, J=12.7 Hz, 2H), 3.03 (t, J=6.2 Hz, 1H), 2.97 (t, J=6.2 Hz, 1H), 2.90 - 2.80 (m, 2H), 1.88 (br d, J=14.3 Hz, 2H), 1.82 - 1.70 (m, 3H), 1.48 (s, 6H), 1.45 - 1.35 (m, 2H).

N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드. DMF (2 mL) 내 미정제 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.063 g, 0.105 mmol, 1.00　eq) 및 2-클로로-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.042　g, 0.126 mmol, 1.20 eq)의 용액에 DIEA (0.054 g, 0.421 mmol, 0.073　mL, 4.00 eq)을 부가했다. 혼합물을 60 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 여과했다. 여액을 표준 방법에 의해 정제하여 N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.055 g, 0.061　mmol, 57.7% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 856.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.82 - 10.77 (m, 1H), 10.73 (s, 1H), 10.00 - 9.75 (m, 1H), 8.39 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.29 (d, J=1.5　Hz, 1H), 8.07 (dd, J=1.5, 8.3 Hz, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 2H), 7.19 - 7.12 (m, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.71 (t, J=6.3 Hz, 1H), 4.59 (t, J=6.3 Hz, 1H), 4.33 (br dd, J=4.8, 11.6 Hz, 1H), 4.25 - 4.08 (m, 4H), 3.53 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 3.32 (br s, 1H), 3.18 - 2.95 (m, 4H), 2.79 - 2.68 (m, 1H), 2.62 - 2.57 (m, 1H), 2.11 - 2.03 (m, 1H), 1.98 - 1.73 (m, 6H), 1.68 - 1.55 (m, 2H), 1.49 (s, 6H).

실시예 18: 2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

1-((3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)아미노)시클로부탄카보니트릴. THF (20 mL) 내 4-아미노-2-(2-플루오로에틸)페놀 (1.00 g, 6.44 mmol, 1.00 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된) 및 시클로부탄온 (0.542 g, 7.73 mmol, 0.578 mL, 1.20 eq)의 용액에 트리메틸실릴 시아나이드 (0.767 g, 7.73 mmol, 0.968 mL, 1.20 eq) 및 스칸듐 트리플레이트 (0.634 g, 1.29 mmol, 0.20 eq)을 부가했다. 혼합물을 20 °C에서 16 h 동안 질소 분위기 하에서 교반하고, 이후 물 (50 mL)로 희석하고 EtOAc (30 mL × 3)로 추출했다. 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (20 mL × 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (6-20% 석유 에테르 내 EtOAc) 1-((3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)아미노)시클로부탄카보니트릴 (0.950 g, 4.06 mmol, 62.9% 수율)를 황색 검으로서 얻었다. MS (ESI) m/z 235.1 [M+1]⁺.

5-(5-(3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 . DMF (5 mL) 내 1-((3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)아미노)시클로부탄카보니트릴 (0.400 g, 1.71 mmol, 1.00 eq)의 용액에 5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.391 g, 1.71　mmol, 1.00 eq)을 부가했다. 혼합물을 20 °C에서 1 h 동안 교반하고, 이후 4.0 M MeOH 내 HCl 용액 (2.13 mL, 5 eq)로 처리하고 70 °C에서 12 h 동안 질소 분위기 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하고, 잔사를 물 (40 mL) 내에 용해시키고, pH을 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액으로 7~8로 조정했다. 상기 물질을 EtOAc (30 mL × 3)로 추출하고 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (20 mL × 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (10-20% 석유 에테르 내 EtOAc) 5-(5-(3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.720 g, 1.55 mmol, 90.8% 수율)를 황색 검으로서 얻었다. MS (ESI) m/z 465.1 [M+1]⁺.

tert -부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. THF (3 mL) 내 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-히드록시페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.300 g, 0.664 mmol, 1.00 eq), tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.198 g, 0.863 mmol, 1.30 eq) 및 트리페닐포스핀 (0.261 g, 0.996 mmol, 1.50 eq)의 혼합물을 감압 하에서 농축하고, 이후 THF (3 mL) 내에 질소 하에서 용해시키고 0 °C까지 냉각했다. 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.201g, 0.996 mmol, 0.193 mL, 1.5 eq)을 부가했다. 용액을 50 °C에서 12 h 동안 질소 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, EtOAc (100 mL Х 3)로 추출하고,조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (50 mL × 3), 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-60% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.320 g, 0.448 mmol, 67.4% 수율)을 갈색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 563.2 [M-100+1]⁺.

4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. 4.0 M EtOAc 내 HCl 용액 (3.4 mL, 30 eq) 내 tert-부틸 4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.300 g, 0.452 mmol, 1.00 eq)의 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축하고 EtOAc로 희석했다 (100 mL). 용액의 pH을 8로 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액으로 조정했다. 용액을 식염수로 세척하고 (30 mL Х 3), 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 박층 크로마토그래피에 의해 정제하여 (9% DCM 내 MeOH) 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.100 g, 0.177 mmol, 39.1% 수율)을 옅은 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 563.1 [M+1]⁺.

2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드. DMF (1 mL) 내 4-(3-(3-(2-플루오로에틸)-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.080 g, 0.142 mmol, 1.00 eq) 및 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.041 g, 0.140 mmol, 0.98 eq)의 혼합물에 DIEA (0.051 g, 0.400 mmol, 0.069 mL, 2.82 eq)을 부가하고 용액을 50 °C에서 10 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 여과하고 여액을 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(2-플루오로에틸)페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.064 g, 0.073 mmol, 52.0% 수율,)을 얻었다. MS (ESI) m/z 822.1 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) ppm 10.80 (s, 1H), 10.70 - 10.50 (m, 1H), 9.91 (s, 1H), 8.39 (d, J = 8.4Hz, 1H), 8.29 (d, J =1.6 Hz, 1H), 8.08 (dd, J =1.6, 8.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 2H), 7.19 - 7.13 (m, 1H), 7.08 - 7.02 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.86 (d, J　= 7.2 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.71 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.59 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 4.8, 11.6 Hz, 1H), 3.54 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 3.31 (s, 1H), 3.20 - 3.08 (m, 2H), 3.05 (t, J　= 6.4 Hz, 1H), 2.99 (bt, J = 6.4 Hz,1H), 2.80 - 2.66 (m, 1H), 2.65 - 2.54 (m, 1H), 2.16 - 2.05 (m, 1H), 2.01 - 1.85 (m, 4H), 1.77 (s, 3H), 1.70 - 1.55 (m, 2H), 1.49 (s, 6H).

실시예 19: N -(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드

tert -부틸 4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)피페리딘-1-카르복실레이트. DMF (13.5 mL, 0.141 몰) 내 4-[3-(3-에틸-4-히드록시-페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.832 g, 1.92 mmol, 1.00 eq), tert-부틸 4-(메틸설포닐옥시)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.29 g, 4.61 mmol, 2.40 eq), 및 세슘 카보네이트 (0.943 g, 2.88 mmol, 1.50 eq)의 혼합물을 60 °C까지 가열하고 밤새 교반했다. 반응을 물로 급냉하고 EtOAc로 희석하고, 수성 상을 EtOAc로 추출했다. 조합시킨 유기 상을 식염수로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축했다. 미정제 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (0-100% EtOAc/헥산)에 의해 정제했다. 분획을 농축하고, 잔사를 DCM 및 헥산으로 분쇄하고 tert-부틸 4-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.19　g, 1.930 mmol, 100% 수율) 및 상응하는 히단토인 부산물의 혼합물을 베이지색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 637.7 [M+Na]⁺.

4-(3-(3-에틸-4-(피페리딘-4-일옥시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 디히드로클로라이드. DCM (8.53 mL, 0.226 몰) 내 tert-부틸 4-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]피페리딘-1-카르복실레이트 (1.19 g, 1.93 mmol, 1.00 eq)의 현탁액을 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (7.23 mL, 28.92　mmol, 15 eq)로 처리하고, 실온에서 2 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 이후 농축하고 4-[3-[3-에틸-4-(4-피페리딜옥시)페닐]-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 디히드로클로라이드 (1.15 g, 1.95 mmol, 101% 수율)을 크림색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 516.0 [M+H]⁺.

2-클로로-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드. 3-((3-아미노-5-클로로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (3.74 g, 14.74 mmol, 1.00 eq), 2-클로로아세트산 (1.06 mL, 17.7 mmol, 1.20 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된), HATU (8.41　g, 22.11 mmol, 1.5 eq), 및 DIEA (7.72 mL, 44.2 mmol, 3.00 eq)을 DMF (42.1　mL, 0.350 몰) 내에서 조합시키고 실온에서 교반했다. 10 min 후, 반응 혼합물을 EtOAc 및 식염수 사이에서 분배했다. 유기 추출물을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축했다. 미정제 물질을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (50-100% 헥산 내 EtOAc) 녹색 오일을 얻었고, 이를 DCM 및 헥산 내에서 분쇄했다. 감압 하에서 용매제거 및 고진공하에서 추가 건조 이후, 2-클로로-N-(3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (3.25 g, 9.84 mmol, 66.7% 수율)을 옅은 녹색 고체로서 단리했다. MS (ESI) m/z 330.0 [M]⁺; ¹H NMR (DMSO-d ₆ , 400 MHz) δ ppm 10.80 (s, 1H), 10.19 (s, 1H), 6.92 (t, 1H, J=1.7 Hz), 6.82 (t, 1H, J=1.8 Hz), 6.47 (t, 1H, J=1.9 Hz), 6.32 (d, 1H, J=8.1 Hz), 4.3-4.4 (m, 1H), 4.22 (s, 2H), 2.7-2.8 (m, 1H), 2.5-2.6 (m, 1H), 2.0-2.1 (m, 1H), 1.90 (dq, 1H, J=4.7, 12.4 Hz).

N- (3-클로로-5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)-2-(4-(4-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-에틸페녹시)피페리딘-1-일)아세트아미드 히드로클로라이드. 2-클로로-N-[3-클로로-5-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 (0.126 g, 0.38 mmol, 1.50 eq)을 4-[3-[3-에틸-4-(4-피페리딜옥시)페닐]-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 디히드로클로라이드 (0.150 g, 0.25 mmol, 1.00 eq), 소듐 아이오다이드 (0.058　g, 0.38 mmol, 1.50 eq), DMF (2.12 mL, 0.120 몰) 및 DIEA (0.22 mL, 1.27 mmol, 5　eq)의 교반 혼합물에 부가했다. 반응 혼합물을 1 h 동안 60 °C에서 교반하고, 이후 용액을 여과하고 표준 방법에 의해 정제하여 N-[3-클로로-5-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]-2-[4-[4-[3-[4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]-1-피페리딜]아세트아미드 히드로클로라이드 (0.067 g, 0.08 mmol, 30% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 810.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.82 (s, 1H), 10.6-10.7 (m, 1H), 10.1-10.3 (m, 1H), 8.39 (d, 1H, J=8.2 Hz), 8.29 (d, 1H, J=1.7 Hz), 8.07 (dd, 1H, J=1.6, 8.2 Hz), 7.16 (s, 3H), 7.00 (s, 1H), 6.82 (br s, 1H), 6.52 (t, 1H, J=1.8 Hz), 4.6-4.9 (m, 1H), 4.33 (dd, 1H, J=4.9, 11.5 Hz), 4.21 (br d, 2H, J=14.4 Hz), 3.63 (br d, 1H, J=12.1 Hz), 3.3-3.4 (m, 4H), 2.6-2.8 (m, 4H), 1.9-2.3 (m, 6H), 1.49 (s, 6H), 1.19 (td, 3H, J=7.4, 14.4 Hz).

실시예 20: 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

tert -부틸 4-(2-(2-브로모-4-니트로페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. 2-브로모-4-니트로페놀 (10.00 g, 45.87 mmol, 1.00 eq), tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (10.52 g, 45.87 mmol, 1.00 eq), 트리페닐포스핀 (14.44 g, 55.04 mmol, 1.20 eq) 및 THF (50 mL)의 혼합물에 (E)-디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (11.13 g, 55.04 mmol, 10.70 mL, 1.20 eq)을 한방울씩 질소 하에서 0 °C에서 부가했다. 반응을 60 °C에서 10 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축했다. 미정제 생성물을 반-분취용 역상 HPLC에 의해 정제하여 (50-80% 물 내 아세토니트릴 + 0.1% TFA) tert-부틸 4-(2-(2-브로모-4-니트로페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (14.6　g, 33.9 mmol, 73.9% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.46 (d, J = 2.4　Hz, 1 H), 8.19 (dd, J = 9.2, 2.8 Hz, 1 H), 6.93 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 4.18 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.12 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.73 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 1.85 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 1.79 - 1.73 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.24 - 1.16 (m, 2H).

tert- 부틸 4-(2-(4-니트로-2-(프로프-1-엔-2-일)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. tert-부틸 4-(2-(2-브로모-4-니트로페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.00 g, 6.99 mmol, 1.00 eq), 2-이소프로페닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (2.350 g, 13.98 mmol, 2.00 eq), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II) (0.256 g, 0.349 mmol, 0.05 eq), 포타슘 포스페이트 (4.45 g, 20.96 mmol, 3.00 eq), 디옥산 (30　mL) 및 물 (15 mL)의 혼합물을 90 °C에서 질소 하에서 12 h 동안 교반하고, 이후 식염수 (50 mL)로 희석하고, 층을 분리했다. 수성 층을 EtOAc로 추출했다 (30 mL). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (20 mL), 건조시키고, 여과하고, 농축했다. 미정제 생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-20% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 4-(2-(4-니트로-2-(프로프-1-엔-2-일)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.39 g, 6.12 mmol, 87.6% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ　ppm 8.15 (dd, J = 8.80, 2.80 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 5.23 (t, J = 1.20 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 0.80 Hz, 1H), 4.15 - 4.10 (m, 4H), 2.70 (t, J = 12.00 Hz, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.81 (q, J = 6.40 Hz, 2H), 1.73 - 1.68 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.30 - 1.23 (m, 1H), 1.21 - 1.15 (m, 2H).

tert -부틸 4-(2-(4-아미노-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. tert-부틸 4-(2-(4-니트로-2-(프로프-1-엔-2-일)페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.39 g, 6.12 mmol, 1.00 eq), 활성 탄소 상 팔라듐 (0.500 g, 10 % 순도) 및 MeOH (30 mL)의 혼합물을 30 °C에서 수소의 분위기 (50 psi) 하에서 24 h 동안 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 농축하여 tert-부틸 4-(2-(4-아미노-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.05 g, 5.66 mmol, 92.4% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 6.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.49 (dd, J = 8.4, 2.8 Hz, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.93 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.48 - 3.08 (m, 3H), 2.70 (t, J = 12.0 Hz, 2H), 1.73 - 1.68 (m, 5H), 1.46 (s, 9H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 8H).

tert- 부틸 4-(2-(4-((2-시아노프로판-2-일)아미노)-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. tert-부틸 4-(2-(4-아미노-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.39 g, 6.12 mmol, 1.00 eq), 2-히드록시-2-메틸-프로판니트릴 (1.860 g, 21.90 mmol, 2 mL, 7.94 eq) 및 마그네슘 설페이트 (0.830 g, 6.90 mmol, 2.50 eq)의 혼합물을 60 °C에서 12 h 동안 교반했다. 혼합물에 물 (10 mL) 및 EtOAc (10 mL)을 부가하고 층을 분리했다. 수성 층을 EtOAc로 추출했다 (10　mL). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (10 mL × 4), 건조시키고, 여과하고, 농축하여 tert-부틸 4-(2-(4-((2-시아노프로판-2-일)아미노)-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.30 g, 미정제)를 갈색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 403.2 [M+1-27]⁺.

5-(3-(3-이소프로필-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드. DMF (5 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-((2-시아노프로판-2-일)아미노)-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.500 g, 1.16 mmol, 1.00 eq) 및 5-이소티오시아네이토-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카보니트릴 (0.266 g, 1.16 mmol, 1.00 eq)의 용액에 25 °C에서 1 h 동안 교반하고 4.0　M MeOH 내 HCl의 용액 (1.45 mL, 5 eq)을 부가하고 반응을 80 °C에서 1 h 동안 교반했다. 감압 하에서 농축 후, 잔사를 반-분취용 역상 HPLC에 의해 정제하여 (30-60% 물 내 아세토니트릴 + 0.05% HCl, 25 min) 5-(3-(3-이소프로필-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.342 g, 0.574 mmol, 49.5% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 560.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz,CDCl₃) δ ppm 9.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 - 7.04(m, 2H), 6.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.39 - 3.29(m, 1H), 3.22 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 2.73 - 2.67(m, 2H), 1.88 - 1.73(m, 5H), 1.59 (s, 6H), 1.42 - 1.32(m, 2H), 1.24 - 1.22(m, 6H).

2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드. 5-(3-(3-이소프로필-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.245 g, 0.411 mmol, 1.00 eq), 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.129 g, 0.390 mmol, 0.95 eq), DIEA (0.170　g, 1.310 mmol, 3.2 eq) 및 DMF (1.5 mL)의 혼합물을 50 °C에서 10 h 동안 교반하고, 이후 여과했다. 여액을 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(3-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-이소프로필페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.177 g, 0.199 mmol, 48.6% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 819.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.82 (s, 1H), 10.51 - 10.47 (m, 1H), 9.81 - 9.76 (m, 1H), 9.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.83 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.17 - 7.10 (m, 3H), 7.05 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.86 - 6.82 (m, 1H), 6.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 11.2, 4.8 Hz, 1H), 4.22 - 4.09 (m, 4H), 3.32 - 3.24 (m, 2H), 3.18 - 3.06 (m, 2H), 2.78 - 2.69 (m, 1H), 2.63 - 2.56 (m, 1H), 2.13 - 2.07 (m, 1H), 1.98 - 1.74 (m, 6H), 1.70 - 1.56 (m, 2H), 1.51 (s, 6H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 6H).

실시예 21 및 22: 2-(( R)- 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-일)- N -(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 및 2-(( S)- 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-일)- N -(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

및

에틸 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트. THF (40 mL) 내 소듐 히드라이드 (0.885 g, 22.130 mmol, 60% 순도, 1.30 eq)의 용액에 에틸 2-(디에톡시포스포릴)아세테이트 (4.20 g, 18.73 mmol, 1.01 eq)을 한방울씩 0 °C에서 부가했다. 10 min 후, THF (20 mL) 내 1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-온 (3.70 g, 17.0 mmol, 1.00 eq)의 용액을 한방울씩 부가하고 교반을 20 °C에서 1 h 동안 계속했다. 반응을 암모늄 클로라이드의 포화 수성 용액 (50 mL)의 부가로 급냉하고 생성물을 EtOAc로 추출했다 (30 mL × 2). 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (50 mL), 건조시키고, 여과하고, 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-1% 석유 에테르 내 EtOAc) 에틸 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (3.99 g, 13.9 mmol, 81.5% 수율)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.37 (d, J　= 7.2 Hz, 2H), 7.31 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.23 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.70 - 5.60 (m, 1H), 4.18 - 4.10 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 2.90 - 2.84 (m, 2H), 2.55 - 2.49 (m, 2H), 2.22 - 2.18 (m, 2H), 1.31 - 1.26 (m, 3H), 1.16 - 1.13 (m, 6H).

메틸 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)아세테이트. MeOH (70　mL) 내 에틸 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (2.00 g, 6.96 mmol, 1.99 eq)의 용액에 마그네슘 조각 (6.77 g, 278.36 mmol, 40 eq)을 조금씩 부가했다. 반응을 25 °C에서 4 h 동안 교반했다. 온도를 0 °C까지 냉각하고 이후 농축 HCl를 부가하여 투명한 용액을 형성시켰다. 용액에 소듐 비카보네이트를 부가하여 pH를 8로 조정했다. 알칼리 용액을 EtOAc로 추출했다 (50 mL × 2). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (30 mL), 건조시키고, 여과하고, 농축했다. 미정제 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-3% 석유 에테르 내 EtOAc) 메틸 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)아세테이트 (1.40 g, 5.08 mmol, 73.0% 수율)를 옅은-황색 오일로서 얻었다. ¹H　NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.35 - 7.27 (m, 4H), 7.21 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 2.96 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.56 - 2.51 (m, 1H), 2.26 (td, J = 12.4, 2.8　Hz, 1H), 2.19 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.09 - 2.03 (m, 1H), 1.61 - 1.55 (m, 1H), 1.53 - 1.48 (m, 1H), 1.29 - 1.26 (m, 1H), 1.23 (s, 3H), 1.11 (qd, J = 12.8, 4.8 Hz, 1H), 1.05 (s, 3H).

2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)에탄올. THF (25 mL) 내 메틸 2-(1-벤질-2,2-디메틸-4-피페리딜)아세테이트 (1.120 g, 4.070 mmol, 100 eq)의 용액에 리튬 알루미늄 히드라이드 (0.232 g, 6.10 mmol, 1.50 eq)을 조금씩 0 °C에서 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반하고 이후 THF (20 mL)로 희석하고 소듐 설페이트 (15 g)로 처리하고 0 °C까지 냉각했다. 교반 혼합물에 물 (3 mL)을 한방울씩 부가하고 혼합물을 30 °C에서 0.5 h 동안 교반했다. 현탁액을 여과하고 여액을 감압 하에서 농축하고 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)에탄올 (0.990 g, 미정제)을 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.36 - 7.27 (m, 4H), 7.21 (t, J = 7.2　Hz, 1H), 4.06 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 2.96 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 1H), 2.23 (td, J = 12.4, 2.8 Hz, 1H), 1.70 - 1.65 (m, 1H), 1.61 - 1.56 (m, 1H), 1.51 - 1.43 (m, 3H), 1.28 - 1.20 (m, 4H), 1.12 - 1.03 (m, 4H).

거울상체 ( S )-2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)에탄올 및 ( R )-2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)에탄올의 키랄 분리 . 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)EtOH (0.980 g, 3.960 mmol, 1.00 eq)의 거울상체를 키랄 SFC로 분리하고 (칼럼: DAICEL Chiralpak AD-H (250 mm Х 30 mm, 5 μm); 이동상: A:CO₂, B:2-프로판올 내 0.1% 수성 암모니아 ; B= 30%, 2.5 min) 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)EtOH의 거울상체 1 (0.421 g, 1.62 mmol, 40.8% 수율, t_R1 = 1.192　min, ee = 99.3%) 및 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)EtOH의 거울상체 2 (0.463 g, 1.76　mmol, 44.3% 수율, t_R2 = 1.338 min, ee = 99.0%, 93.8% 순도) 를 황색 오일로서 얻었다.

거울상체 1: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.36 - 7.27 (m, 4H), 7.21 (t, J　= 7.2 Hz, 1H), 4.06 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 2.96 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 1H), 2.23 (td, J = 12.4, 2.8 Hz, 1H), 1.70 - 1.65 (m, 1H), 1.61 - 1.56 (m, 1H), 1.51 - 1.43 (m, 3H), 1.28 - 1.20 (m, 4H), 1.12 - 1.03 (m, 4H).

거울상체 2: ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.36 - 7.27 (m, 4H), 7.21 (t, J　= 7.2 Hz, 1H), 4.06 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 2.96 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 1H), 2.23 (td, J = 12.4, 2.8 Hz, 1H), 1.70 - 1.65 (m, 1H), 1.61 - 1.56 (m, 1H), 1.51 - 1.43 (m, 3H), 1.28 - 1.20 (m, 4H), 1.12 - 1.03 (m, 4H).

(R) 및 (S)의 할당을 수행하지 않았다. 각각의 거울상체를 별도로 아래 기술된 단계에서 사용했다.

tert -부틸 4-(2-히드록시에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 거울상체 1. 2-(1-벤질-2,2-디메틸-4-피페리딜]에탄올의 거울상체 1 (0.420　g, 1.70 mmol, 1.00 eq), Boc₂O (0.741 g, 3.40 mmol, 2.00 eq), 활성 탄소 상 팔라듐 히드록사이드 (0.150 g, 10% 순도) 및 MeOH (10 mL)의 혼합물을 25 °C에서 수소 하에서 (50 psi) 12 h 동안 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 농축했다. 미정제 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-10% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.202 g, 0.785 mmol, 46.2% 수율)의 거울상체 1를 옅은 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 3.78 - 3.68 (m, 3H), 3.14 - 3.08 (m, 1H), 1.82 - 1.74 (m, 2H), 1.49 - 1.46 (m, 15H), 1.34 - 1.24 (m, 5H), 1.17 - 1.08 (m, 1H).

tert -부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 거울상체 1. THF (1 mL) 내 tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.170 g, 0.661 mmol, 1.00 eq), 5-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.324 g, 0.726 mmol, 1.10 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된)의 거울상체 1의 용액에 트리페닐포스핀 (0.260 g, 0.991 mmol, 1.50 eq)을 부가하고 이후 (E)-디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (0.200 g, 0.991 mmol, 1.50 eq)을 한방울씩 0 °C에서 부가했다. 반응을 60 °C에서 10 h 동안 교반했다. 휘발성 용매를 감압 하에서 제거했다. 미정제 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0 - 8% 석유 에테르 내 에틸 아세테이트) tert-부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.180 g, 0.262 mmol, 39.7% 수율)의 거울상체 1를 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ　9.11 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.11 - 7.07 (m, 2H), 6.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.08 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.81 (dt, J = 13.6, 5.2 Hz, 1H), 3.17 - 3.10 (m, 1H), 2.74 - 2.56 (m, 6H), 2.30 - 2.16 (m, 1H), 1.97 - 1.84 (m, 2H), 1.78 (q, J　= 6.0 Hz, 2H), 1.72 - 1.62 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.30 (s, 1H), 1.26 - 1.22 (m, 5H).

5-(5-(4-(2-(2,2-디메틸피페리딘-4-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드의 거울상체 1. DCM (1 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.180 g, 0.262 mmol, 1.00 eq)의 거울상체 1의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (0.33 mL, 5.00 eq)을 부가했다. 반응을 25 °C에서 3 h 동안 교반하고, 감압 하에서 농축했다. 미정제 생성물을 반-분취용 역상 HPLC에 의해 정제했다 (37-57% 물 내 아세토니트릴 + 0.05% HCl). 수집된 분획을 감압 하에서 현탁액으로 농축했다. 현탁액을 동결-건조시켜 5-(5-(4-(2-(2,2-디메틸피페리딘-4-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.067 g, 0.108 mmol, 41.1% 수율)의 거울상체 1를 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 586.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 9.21 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.89 - 8.48 (m, 3H), 7.21 - 7.19 (m, 1H), 7.15 - 7.13 (m, 2H), 4.11 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.11 - 3.07 (m, 2H), 2.67 - 2.62 (m, 4H), 2.43 - 2.40 (m, 2H), 2.01 - 1.88 (m, 3H), 1.81 - 1.66 (m, 3H), 1.55 - 1.53 (m, 1H), 1.33 - 1.29 (m, 8H), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H).

2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-일)- N -(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 1. 5-(5-(4-(2-(2,2-디메틸피페리딘-4-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드의 거울상체 1 (0.254 g, 0.434　mmol, 1.00 eq), 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.144 g, 0.434 mmol, 1.00 eq), DIEA (0.196 g, 1.52 mmol, 0.264 mL, 3.50 eq) 및 DMF (3.5 mL)의 혼합물을 70 °C에서 48 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하여 용매를 제거했다. 잔사를 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 1 (0.191 g, 0.216 mmol, 49.8% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 845.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 10.80 (s, 1H), 10.54 (s, 1H), 9.37 - 9.35 (m, 1H), 9.21 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.75 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.21 - 7.14 (m, 3H), 7.13 - 7.04 (m, 1H), 6.95 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.46 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 6.06 - 5.98 (m, 1H), 4.37 - 4.33 (m, 1H), 4.26 - 4.23 (m, 1H), 4.11 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.79 (dd, J = 14.8, 7.6 Hz, 1H), 3.49 - 3.45 (m, 1H), 3.25 - 3.20 (m, 1H), 2.71 - 2.64 (m, 6H), 2.45 - 2.42 (m, 3H), 2.08 - 2.06 (m, 1H), 2.04 - 1.93 (m, 4H), 1.83 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 1.81 - 1.57 (m, 5H), 1.44 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H).

tert -부틸 4-(2-히드록시에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 거울상체 2. 2-(1-벤질-2,2-디메틸피페리딘-4-일)EtOH의 거울상체 2 (0.460　g, 1.860 mmol, 1 eq), Boc₂O (0.812 g, 3.720 mmol, 2 eq), 팔라듐 히드록사이드 (0.150 g, 10% 순도) 및 MeOH (10 mL)의 혼합물을 25 °C에서 수소 하에서 (50 psi) 12 h 동안 교반했다. 촉매를 여과로 제거하고 여액을 농축했다. 미정제 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-10% 석유 에테르 내 EtOAc) tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 거울상체 2 (0.295 g, 1.15 mmol, 61.6% 수율)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 3.78 - 3.68 (m, 3H), 3.14 - 3.08 (m, 1H), 1.81 - 1.78 (m, 2H), 1.52 - 1.44 (m, 15H), 1.34 - 1.26 (m, 5H), 1.17 - 1.08 (m, 1H).

tert -부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 거울상체 2. THF (3 mL) 내 tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 거울상체 2 (0.288 g, 1.12 mmol, 1.00 eq), 5-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 (0.500 g, 1.12 mmol, 1.00 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된)의 용액에 트리페닐포스핀 (0.440 g, 1.68 mmol, 1.50 eq)을 부가하고, 이후 (E)-디이소프로필 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (0.339 g, 1.680 mmol, 1.50 eq)을 한방울씩 0 °C에서 부가했다. 반응을 60 °C에서 10 h 동안 교반하고 이후 농축했다. 미정제 생성물을 분취용 역상 HPLC에 의해 정제하여 (60-90% 물 내 아세토니트릴 + 0.05% HCl, 40 min) tert-부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 거울상체 2 (0.504 g, 0.735 mmol, 65.6% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ　ppm 9.11 (d, J = 2.0　Hz, 1H), 8.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.12 - 7.07 (m, 2H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.08 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.81 (dt, J = 13.6, 5.2 Hz, 1H), 3.17 - 3.10 (m, 1H), 2.74 - 2.56 (m, 6H), 2.29 - 2.17 (m, 1H), 1.95 - 1.85 (m, 2H), 1.78 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 1.74 - 1.65 (m, 1H), 1.58 - 1.53 (m, 4H), 1.47 - 1.36 (m, 10H), 1.31 (s, 1H), 1.27 - 1.25 (m, 3H).

5-(5-(4-(2-(2,2-디메틸피페리딘-4-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드의 거울상체 2. DCM (3 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.500 g, 0.729 mmol, 1.00 eq)의 거울상체 2의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (0.91 mL, 5.00 eq)을 부가했다. 반응을 25 °C에서 1 h 동안 교반하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 EtOAc (5 mL)로 분쇄하여 백색 현탁액을 형성시켰다. 현탁액을 여과에 의해 수집하고 (EtOAc (5 mL × 2)로 세척했다. 수집된 고체를 아세토니트릴 (10 mL) 내에서 현탁하고, 현탁액을 농축하고 감압 하에서 건조시켜 5-(5-(4-(2-(2,2-디메틸피페리딘-4-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드 (0.402 g, 0.637 mmol, 87.4% 수율)의 거울상체 2를 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 586.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 9.21 (d, J = 2.4　Hz, 1H), 8.95 - 8.75 (m, 3H), 7.21 - 7.18 (m, 1H), 7.15 - 7.13 (m, 2H), 4.10 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.12 - 3.00 (m, 2H), 2.67 - 2.59 (m, 4H), 2.45 - 2.40 (m, 2H), 2.02 - 1.93 (m, 2H), 1.90 - 1.86 (m, 1H), 1.80 - 1.65 (m, 3H), 1.58 - 1.50 (m, 1H), 1.39 - 1.29 (m, 8H), 1.17 (t, J = 7.6 Hz, 3H).

2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-일)- N -(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 2. 5-(5-(4-(2-(2,2-디메틸피페리딘-4-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드의 거울상체 2 (0.200 g, 0.321　mmol, 1.00 eq), 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.107 g, 0.321 mmol, 1 eq), DIEA (0.145 g, 1.130 mmol, 3.50 eq) 및 DMF (2　mL)의 혼합물을 50 °C에서 72 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 여과했다. 여액을 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-2,2-디메틸피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 2 (0.093 g, 0.105 mmol, 32.5% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 845.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.80 (s, 1H), 10.60 (s, 1H), 9.37 (br, 1H), 9.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.76 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.21 - 7.13 (m, 3H), 7.05 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.96 - 6.95 (m, 1H), 6.86 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.46 (dd, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.26 - 4.23 (m, 1H), 4.10 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 15.2, 8.0 Hz, 1H), 3.22 - 3.17 (m, 2H), 2.77 - 2.62 (m, 6H), 2.45 - 2.39 (m, 2H), 2.11 - 1.90 (m, 5H), 1.83 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 1.78 - 1.69 (m, 2H), 1.61 - 1.52 (m, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H).

실시예 23: 2-(4-(2-(4-(7-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)- N -(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 히드로클로라이드

2-에틸-4-((1-이소시아노시클로부틸)아미노)페놀. THF (100 mL) 내 4-아미노-2-에틸페놀 (8.600 g, 62.69 mmol, 1 eq) 및 시클로부탄온 (6.590 g, 94.04 mmol, 7.03 mL, 1.50　eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된)의 용액에, 트리메틸실릴 시아나이드 (15.55　g, 156.7 mmol, 19.61 mL, 2.50 eq) 및 스칸듐(III) 트리플루오로메탄설포네이트 (3.09 g, 6.27 mmol, 0.1 eq)을 부가했다. 반응 혼합물을 25 °C에서 12 h 동안 교반하고, 이후 물 (100 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (100mL × 2). 조합시킨 유기 상을 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고, 진공하에서 농축했다. 잔사를 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (3-25% 석유 에테르 내 EtOAc), 이후 반-분취용 역상 HPLC (20-50% 아세토니트릴 + 0.225% 물 내 포름산, 32　min)에 의해 정제했다. 선택된 분획을 농축하여 대부분의 아세토니트릴을 제거하고 얻어진 현탁액을 희석 HCl로 처리하고 냉동건조시켜 2-에틸-4-((1-이소시아노시클로부틸)아미노)페놀 (2.050 g, 9.480 mmol, 15.1% 수율)을 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI+) m/z 217.1 [M+1] ⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ ppm 6.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 2.8, 8.4 Hz, 1H), 2.81 - 2.68 (m, 2H), 2.60 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.41 - 2.33 (m, 2H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 1.23 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

4-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. DMF (10 mL) 내 4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.850 g, 3.730 mmol, 1.30 eq) 및 2-에틸-4-((1-이소시아노시클로부틸)아미노)페놀 (0.620 g, 2.87 mmol, 1.00 eq)의 용액을 25　°C에서 1 h 동안 교반하고, 이후 4.0 M MeOH 내 HCl 용액 (10 mL, 13.95 eq)로 처리하고, 70 °C에서 12 h 동안 교반했다. 혼합물을 진공하에서 농축하여 MeOH를 제거하고, 이후 물 (200 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (200mL × 2). 조합시킨 유기 상을 식염수로 세척하고 (50 mL × 2), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (5-15% 석유 에테르 내 EtOAc) 4-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.200 g, 0.449　mmol, 15.7% 수율)를 갈색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 468.0 [M+Na]⁺.

tert -부틸 4-(2-(4-(7-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트. THF (2 mL) 내 4-(5-(3-에틸-4-히드록시페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.200 g, 0.449 mmol, 1.00 eq), tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.103 g, 0.449 mmol, 0 eq) 및 트리페닐포스핀 (0.236 g, 0.898 mmol, 2.0 eq)의 혼합물을 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.182　g, 0.898 mmol, 0.17 mL, 2.00 eq)로 0 °C에서 처리하고, 반응 혼합물을 25 °C에서 2　h 동안 교반하고, 이후 진공하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (3-25% 석유 에테르 내 EtOAc) 생성물, tert-부틸 4-(2-(4-(7-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.230 g, 0.413 mmol, 92.0% 수율)를 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 679.3 [M+1]⁺.

4-(5-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. 디옥산 (5 mL) 내 tert-부틸 4-(2-(4-(7-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.230 g, 0.350 mmol, 1.00 eq)의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (5 mL, 57.11 eq)을 부가하고 얻어진 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축하여 4-(5-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 히드로클로라이드 (0.205 g, 0.346 mmol, 98.7% 수율)를 황색 오일로서 얻었고 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다. MS (ESI) m/z 557.3 [M+1]⁺.

2-클로로- N -(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드. DMF (10 mL)내 2-클로로아세트산 (0.478 g, 5.060 mmol, 1.20 eq)의 용액에 HATU (1.920 g, 5.060 mmol, 1.20 eq)을 한번에 25°C에서 질소 하에서 부가하고 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반했다. 이 용액에, 3-((3-아미노-4-플루오로페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온 (1.00 g, 4.22 mmol, 1.00 eq) (여기서 기술된 바와 같이 제조된), 및 DIEA (1.63 g, 12.6 mmol, 2.2 mL, 3.00 eq)을 부가하고 교반을 25 °C에서 1　h 동안 계속했다. 소정의 질량을 갖는 한 주요 피크가 LCMS 상에 나타났다. 반응 혼합물을 물 (150 mL)로 희석하고 EtOAc로 추출했다 (50 mL Х 4). 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (100 mL Х 3), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (30-45% 석유 에테르 내 EtOAc) 2-클로로-N-(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 (0.510 g, 1.53 mmol, 36.3% 수율)을 갈색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 314.1 [M+1]⁺.

2-(4-(2-(4-(7-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)- N -(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 히드로클로라이드. DMF (3 mL) 내 4-(5-(3-에틸-4-(2-(피페리딘-4-일)에톡시)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 염산 (0.200 g, 0.337 mmol, 1.00 eq)의 용액에 2-클로로-N-(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 (0.106 mg, 0.337 mmol, 1 eq) 및 DIEA (0.131 g, 1.01 mmol, 0.18 mL, 3.00 eq)을 부가했다. 반응 혼합물을 50 °C에서 12 h 동안 교반하고, 실온까지 냉각하고 pH을 6로 포름산으로 조정했다. 혼합물을 표준 방법에 의해 정제하여 2-(4-(2-(4-(7-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)피페리딘-1-일)-N-(5-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아세트아미드 히드로클로라이드 (0.159 g, 0.181 mmol, 53.6% 수율)을 얻었다. MS (ESI+) m/z 834.4 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.78 (s, 1H), 10.52 - 10.28 (m, 1H), 10.22 - 9.97 (m, 1H), 8.37 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.05 (dd, J = 1.7, 8.3 Hz, 1H), 7.23 - 7.10 (m, 4H), 7.06 - 6.98 (m, 1H), 6.60 - 6.43 (m, 1H), 4.25 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 4.18 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 4.11 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.54 (br d, J = 10.9 Hz, 2H), 3.30 - 3.03 (m, 2H), 2.78 - 2.65 (m, 2H), 2.64 - 2.52 (m, 4H), 2.49 - 2.42 (m, 2H), 2.42 - 2.37 (m, 1H), 2.13 - 2.05 (m, 1H), 2.00 - 1.88 (m, 4H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.73 - 1.60 (m, 2H), 1.57 - 1.48 (m, 1H), 1.18 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

실시예 24: 2-[4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-4-메틸-1-피페리딜]-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 히드로클로라이드

tert-부틸 4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트. THF (2.5 mL) 내 5-[3-(3-에틸-4-히드록시-페닐)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카보니트릴 (0.230 g, 0.530 mmol) (여기서 기술된 바와 같이 제조된), tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.142 g, 0.580 mmol), 트리페닐포스핀 (0.208 g, 0.790 mmol)의 혼합물을 0 °C에서 15 min 동안 교반하고 이후 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.160 g, 0.790 mmol)를 한방울씩 부가했다. 반응 혼합물을 부가적 45 min 동안 0 °C에서 이후 18 h 동안 실온에서 교반했다. 용매를 감압 하에서 제거했다. 고체 잔사를 EtOAc 내 용해시키고 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제했다 (0-50% 헥산 내 EtOAc). 소정의 생성물을 함유하는 분획을 조합시키고 감압 하에서 농축하여 tert-부틸 4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.295 g, 0.447 mmol, 84.5% 수율)를 발포성 오렌지색 반-고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 560.2 [M-Boc]⁺.

5-[3-[3-에틸-4-[2-(4-메틸-4-피페리딜)에톡시]페닐]-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드. Tert-부틸 4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-4-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (0.295 g, 0.450　mmol)을 4.0 M의 디옥산 내 HCl 용액 (2.00 mL, 8.00 mmol) 내에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 25 °C에서 18 h 동안 교반하고, 이후 감압 하에서 농축하여 5-[3-[3-에틸-4-[2-(4-메틸-4-피페리딜)에톡시]페닐]-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카보니트릴;히드로클로라이드 (0.286 g, 0.480　mmol, 107% 수율)를 발포성 백색 반-고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 560.0 [M+1]⁺.

2-[4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-4-메틸-1-피페리딜]-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 히드로클로라이드. DMF (1 mL) 내 5-[3-[3-에틸-4-[2-(4-메틸-4-피페리딜)에톡시]페닐]-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드 (0.143 g, 0.240 mmol), 2-클로로-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 (0.071 g, 0.240 mmol), DIEA (0.13 mL, 0.720　mmol)의 혼합물을 60 °C까지 18 h 동안 가열하고, 이후 DMSO로 희석하고, 표준 방법에 의해 정제하여 2-[4-[2-[4-[3-[6-시아노-5-(트리플루오로메틸)-3-피리딜]-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소-이미다졸리딘-1-일]-2-에틸-페녹시]에틸]-4-메틸-1-피페리딜]-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 히드로클로라이드 (0.077 g, 0.086 mmol, 36% 수율)를 얻었다. MS (ESI) m/z 819.2 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ ppm 10.80 (s, 1H), 10.47-10.57 (m, 1H), 9.66-9.97 (m, 1H), 9.25 (d, J =2.08 Hz, 1H), 8.82 (d, J =2.08 Hz, 1H), 7.09-7.20 (m, 3H), 7.01-7.08 (m, 1H), 6.97 (br s, 1H), 6.85 (br d, J =7.58 Hz, 1H), 6.46 (dd, J =1.59, 8.19　Hz, 1H), 4.22-4.29 (m, 1H), 4.09-4.21 (m, 4H), 3.20-3.48 (m, 4H), 2.69-2.80 (m, 1H), 2.56-2.66 (m, 3H), 2.06-2.15 (m, 1H), 1.85-2.05 (m, 3H), 1.74-1.83 (m, 3H), 1.64 (br d, J =13.69 Hz, 1H), 1.51 (s, 6H), 1.11-1.20 (m, 5H), 1.07 (s, 1H).

실시예 25 및 26: 2-((1R,3r,5S)-3-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 및 2-((1R,3s,5S)-3-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드

및

tert -부틸 (1R,5S)-3-(2-히드록시에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트. DCM (20 mL) 내 2-(8-아자시클로[3.2.1]옥탄-3-일)EtOH (1.00 g, 6.44　mmol)를 함유하는 용액에 Boc₂O (1.54 g, 7.08 mmol) 및 DIEA (2.47 mL, 14.1　mmol)을 부가했다. 용액을 실온에서 나사 캡 바이알 내에서 교반했다. 30 min 후, 용액을 EtOAc 및 물 사이에서 분배했다 (3X). 수성 층을 EtOAc로 추출하고 조합시킨 유기 추출물을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축하고 무색 오일을 얻었다. 오일을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-60% 헥산 내 EtOAc) 표제 화합물을 약간 황색 오일로서 얻었다 (1.14 g, 4.46 mmol, 69.3% 수율). MS (ESI) m/z 256 [M+1]⁺.

tert -부틸 (1R,3r,5S)-3-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트. 5-[5-(3-에틸-4-히드록시-페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일]-3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-카보니트릴 (0.550 g, 1.23 mmol), tert-부틸 rac-(1R,5S)-3-(2-히드록시에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트 (0.377 g, 1.47 mmol) 및 트리페닐포스핀 (0.355, 1.35 mmol) (여기서 기술된 바와 같이 제조된), 을 THF (6.2 mL) 내에서 조합시켰다. 용액에 디이소프로필아조디카르복실레이트 (0.26 mL, 1.35 mmol)을 한방울씩 부가하고 혼합물을 주변 온도에서 나사 캡 바이알 내에서 교반했다. 2 d에 걸쳐 교반 후, 용액을 감압 하에서 농축했다. 결과로서 얻어진 적색 오일을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-35% 헥산 내 EtOAc) 부분입체이성질체의 혼합물을 얻었다 (0.950 g). 고체를 키랄 역상 분취용 HPLC를 통해 분해시켜 (95% 물 내 MeOH 등용매, 0.1% TFA, Cosmosil 5PYE, 20x150mm) 부분입체이성질체 1 (0.132 g, 0.193 mmol, 15.7% 수율) 및 부분입체이성질체 2 (0.428 g, 0.626 mmol, 50.8% 수율)을 얻었다. MS (ESI) m/z 628 [M-(t-부틸) ]⁺.

키랄 중심의 할당을 수행하지 않았다. 각각의 부분입체이성질체를 별도로 아래 기술된 단계에서 사용했다.

5-(5-(4-(2-(8-아자시클로[3.2.1]옥탄-3-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 1. DCM (1 mL) 내 tert-부틸 3-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트 (0.127 g, 0.185 mmol)의 부분입체이성질체 1의 용액에 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (1.16 mL, 4.64 mmol)을 부가했다. 혼합물을 주변 온도에서 교반하고, 2 h 후, 감압 하에서 농축하고 표제 화합물을 얻었다 (0.126 g, 0.191 mmol, 정량적 수율). MS (ESI) m/z 584 [M+1]⁺.

2-(3-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드의 부분입체이성질체 1. DMF (1　mL) 내 5 5-(5-(4-(2-(8-아자시클로[3.2.1]옥탄-3-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 1 (0.063 g, 0.108　mmol), 2-클로로-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 (0.033 g, 0.110　mmol), 소듐 아이오다이드 (0.016 g, 0.108　mmol) 및 DIEA (0.055 g, 0.431 mmol)의 혼합물을 50 °C에서 교반했다. 3 h 후, 용액을 DMSO로 희석하고 표준 방법에 의해 정제하여 표제 화합물을 얻었다 (0.034 g, 0.040 mmol, 37% 수율). MS (ESI) m/z 843 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.79 (s, 1 H), 9.63 (s, 1 H), 9.24 (d, J = 1.83　Hz, 1 H), 8.82 (d, J = 2.20 Hz, 1 H), 7.09 - 7.15 (m, 3 H), 6.98 (t, J = 1.71 Hz, 1 H), 6.92 (s, 1 H), 6.45 (t, J = 1.90 Hz, 1 H), 6.25 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 4.26 - 4.40 (m, 1 H), 4.08 (br t, J　= 5.81 Hz, 2 H), 3.25 - 3.30 (m, 2 H), 3.17 (br s, 2 H), 3.04 (s, 2 H), 2.67 (t, J = 1.90 Hz, 2 H), 2.61 (d, J = 7.34 Hz, 2 H), 2.52 - 2.52 (m, 1 H), 2.44 (br d, J = 2.93 Hz, 2 H), 2.33 (dt, J = 3.67, 1.83 Hz, 2 H), 2.12 - 2.21 (m, 3 H), 1.91 - 2.00 (m, 5 H), 1.70 (br d, J = 7.83 Hz, 3 H), 1.51 (s, 7　H), 1.22 - 1.28 (m, 4 H), 1.15 (t, J = 7.46 Hz, 4 H), 0.95 (d, J = 6.60 Hz, 1 H), 0.81 - 0.88 (m, 4 H), 0.01 - 0.01 (m, 3 H), -0.03 - -0.01 (m, 6 H), -0.15 (s, 1 H).

5-(5-(4-(2-(8-아자시클로[3.2.1]옥탄-3-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴 히드로클로라이드의 부분입체이성질체 2. DCM (2.7 mL) 내 tert-부틸 3-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트의 부분입체이성질체 2 (0.365 g, 0.533 mmol)의 용액을 4.0 M 디옥산 내 HCl 용액 (3.33 mL, 13.3 mmol)로 처리했다. 혼합물을 주변 온도에서2 h 동안 교반하고, 감압 하에서 농축하고 표제 화합물을 HCl 염로서 얻었다 (0.361 g, 0.549 mmol, quant.수율). MS (ESI) m/z 584 [M+1]⁺.

2-(3-(2-(4-(7-(6-시아노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-5-일)-2-에틸페녹시)에틸)-8-아자시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드의 부분입체이성질체 2. DMF (1.7　mL) 내 5-(5-(4-(2-(8-아자시클로[3.2.1]옥탄-3-일)에톡시)-3-에틸페닐)-8-옥소-6-티옥소-5,7-디아자스피로[3.4]옥탄-7-일)-3-(트리플루오로메틸)피콜리노니트릴의 부분입체이성질체 2 (0.100 g, 0.171 mmol), 2-클로로-N-[3-[(2,6-디옥소-3-피페리딜)아미노]페닐]아세트아미드 히드로클로라이드 (0.053 g, 0.179　mmol), 소듐 아이오다이드 (0.026　g, 0.171 mmol) 및 DIEA (0.119 mL, 0.685 mmol)의 혼합물을 50 °C에서 4 h 동안 교반했다. 용액을 DMSO로 희석하고 표준 방법에 의해 정제하여 표제 화합물을 얻었다 (0.059　g, 0.070 mmol, 41% 수율). MS (ESI) m/z 843 [M+1]⁺; ¹H　NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 10.77 (s, 1 H), 9.52 (s, 1 H), 9.22 (d, J = 1.96 Hz, 1 H), 8.76 (d, J = 1.83 Hz, 1 H), 7.12 - 7.21 (m, 3 H), 6.98 - 7.04 (m, 2 H), 6.79 (dd, J = 7.95, 0.98 Hz, 1 H), 5.90 (d, J = 7.83 Hz, 1 H), 4.21 - 4.35 (m, 1 H), 4.10 (br t, J = 5.87 Hz, 2 H), 3.25 - 3.30 (m, 1 H), 3.19 (br s, 2 H), 3.02 (s, 2 H), 2.57 - 2.68 (m, 6 H), 2.39 - 2.47 (m, 3 H), 2.33 (s, 1　H), 2.14 - 2.25 (m, 2 H), 1.97 (br d, J = 6.85 Hz, 7　H), 1.85 - 1.91 (m, 1 H), 1.71 (br d, J = 7.95 Hz, 3 H), 1.47 (br d, J = 13.57 Hz, 3 H), 1.21 - 1.31 (m, 5 H), 1.17 (t, J = 7.46 Hz, 4 H), 0.95 (d, J = 6.72 Hz, 1 H), 0.81 - 0.89 (m, 3 H), 0.80 - 0.91 (m, 1 H), 0.01 - 0.01 (m, 1 H), -0.03 - -0.01 (m, 2 H).

실시예 27: 2-((2 S ,4 S )-4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 및 2-((2S,4R)-4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드

( S )- tert -부틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. THF (50 mL) 내 소듐 히드라이드 (1.13 g, 28.1 mmol, 60% wt)의 용액에 에틸 2-(디에톡시포스포릴)아세테이트 (5.78 g, 25.7 mmol)을 한방울씩 0 °C에서 부가했다. 차가운 혼합물을 0 °C에서 10 min 동안 교반하고 이후 THF (15 mL) 내 (S)-tert-부틸 2-메틸-4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (5.00 g, 23.4 mmol)의 용액을 한방울씩 부가하고 반응을 20 °C에서 1 h 동안 교반했다. 반응을 암모늄 클로라이드의 수성 용액 (50 mL)의 부가로 급냉하고, 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (30 mL Х 2). 유기 층을 식염수로 세척하고 (50 mL), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 농축했다. 잔사를 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-1% EtOAc/석유 에테르) (S)-tert-부틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (5.60 g, 19.7 mmol, 84.3% 수율)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ　5.52 - 5.46 (m, 1H), 4.50 (br s, 1H), 4.21 - 4.00 (m, 3H), 3.67 - 3.51 (m, 1H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.57 - 2.44 (m, 1H), 2.32 - 2.22 (m, 1H), 1.95 - 1.82 (m, 1H), 1.47 - 1.46 (m, 9H), 1.30 - 1.24 (m, 3H), 1.16 - 1.06 (m, 3H).

(2 S )- tert -부틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. (S)-tert-부틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸리덴)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (5.19　g, 18.3 mmol), Pd/C (1.00 g, 10% wt) 및 MeOH (80 mL)의 혼합물을 25 °C에서 수소 분위기 하에서 (15 psi) 12 h 동안 교반했다. 현탁액을 여과하고, 여액을 농축하여 (2S)-tert-부틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (5.50 g, 미정제)를 무색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 4.15 - 4.09 (m, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 1H), 3.73 - 3.67 (m, 1H), 3.10 - 3.02 (m, 1H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.18 - 2.04 (m, 2H), 1.97 - 1.87 (m, 1H), 1.81 - 1.76 (m, 1H), 1.70 - 1.68 (m, 1H), 1.60 - 1.53 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.37 - 1.31 (m, 1H), 1.25 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 1.18 - 1.13 (m, 3H), 1.09 - 1.03 (m, 1H).

(2 S )- tert -부틸 4-(2-히드록시에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. THF (80 mL) 내 (2S)-tert-부틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (5.50 g, 19.2 mmol)의 용액에 리튬 알루미늄 히드라이드 (0.87 g, 23.1 mmol)를 조금씩 0 °C에서 부가했다. 반응을 25 °C에서 1 h 동안 교반했다. 반응에 THF (50 mL) 및 소듐 설페이트 (20 g)을 부가하고, 이후 플라스크를 얼음-배쓰 내에 배치했다. 교반 혼합물에 물 (2.5 mL)을 한방울씩 부가하고, 혼합물을 30 °C에서 0.5 h 동안 교반했다. 현탁액을 여과하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트 (50 mL)로 세척했다. 여액을 감압 하에서 농축하여 (2S)-tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (4.61 g, 18.9 mmol, 98.3% 수율)를 미정제 무색 오일로서 얻었다. ¹H　NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 3.91 - 3.86 (m, 1H), 3.75 - 3.67 (m, 7H), 3.08 - 3.01 (m, 1H), 1.60 - 1.49 (m, 6H), 1.42 - 1.40 (m, 9H), 1.31 - 1.27 (m, 1H), 1.17 - 1.15 (m, 3H).

(2 S )- tert -부틸 4-(2-((3-브로모-5-니트로피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. THF (40 mL) 내 (2S)-tert-부틸 4-(2-히드록시에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (4.60 g, 18.9 mmol, 1 eq)의 용액에 소듐 히드라이드 (1.13 g, 28.4　mmol, 60% 순도, 1.5 eq)을 0 °C에서 부가했다. 혼합물을 서서히 25 °C까지 데웠고 1 h 동안 교반했다. 혼합물에 THF (10 mL) 내 3-브로모-2-클로로-5-니트로-피리딘 (6.73 g, 28.4mmol, 1.5 eq)의 용액을 한방울씩 25 °C에서 부가하고, 이후 반응을 25 °C에서 1 h 동안 교반했다. 반응을 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액 (100 mL)의 부가로 급냉했다. 혼합물을 EtOAc (50 mL Х 2)로 추출하고, 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (100 mL), 건조시키고, 여과하고 농축했다. 미정제 생성물을 플래시 실리카겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-7% EtOAc/석유 에테르) (2S)-tert-부틸 4-(2-((3-브로모-5-니트로피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (6.01 g, 12.9 mmol, 68.7% 수율, 96% 순도)를 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 344.1 [M-100+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.95-9.01 (m, 1H), 8.59-8.64 (m, 1H), 4.30-4.59(m, 3H), 3.86-4.07 (m, 1H), 3.66-3.78 (m, 1H), 3.01-3.16 (m, 1H), 1.68-1.93 (m, 4H), 1.58-1.67 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.33-1.43 (m, 1H), 1.17-1.21 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 1.11-1.16(d, J = 7.2　Hz, 1H).

(2 S ,4 S )- tert -부틸 4-(2-((3-브로모-5-니트로피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 및 (2 S ,4 R )- tert -부틸 4-(2-((3-브로모-5-니트로피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. (2S)-tert-부틸 4-(2-((3-브로모-5-니트로피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트의 부분 입체이성질체 (7.29 g, 16.4 mmol, 1 eq)을 SFC로 분리하고, 이후 키랄 SFC로 추가 분리하여 (DAICEL Chiralpak AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); 이동상: 35% MeOH + 0.1% 암모니아; 3 min) tert-부틸 (2S,4S)-4-[2-[(3-브로모-5-니트로-2-피리딜)옥시]에틸]-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (2.50 g, 5.61 mmol, 34.2% 수율, 99.7% 순도)를 황색 오일로서 얻었다. ¹H　NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.96-9.01 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.59-8.64 (m, J = 2.4 Hz, 1H), 4.50-4.59 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.88-3.98 (m, 1H), 3.70-3.78 (m, 1H), 3.04-3.14 (m, 1H), 1.92-2.03 (m, 1H), 1.76-1.91 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.24-1.33 (m, 2H), 1.17-1.21 (d, J = 6.4 Hz, 1H). tert-부틸 (2S,4R)-4-[2-[(3-브로모-5-니트로-2-피리딜)옥시]에틸]-2-메틸-피페리딘-1-카르복실레이트 (3.600 g, 8.040 mmol, 48.99% 수율, 99.2% 순도)을 황색 오일로서 단리했다. ¹H　NMR (400　MHz, CDCl₃) δ 8.96-9.03 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.59-8.65 (m, J = 2.4 Hz, 1H), 4.35-4.65 (m, 3H), 3.99 (br s, 1H), 2.74-2.95 (t, J = 11.2Hz, 1H), 1.84-1.98 (m, 1H), 1.60-1.84 (m, 4H), 1.33-1.50 (m, 11H), 1.13-1.16 (d, J = 7.2 Hz, 1H).

(2 S ,4 S )- tert -부틸 2-메틸-4-(2-((5-니트로-3-비닐피리딘-2-일)옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 및 (2 S ,4 R )-tert-부틸 2-메틸-4-(2-((5-니트로-3-비닐피리딘-2-일)옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트.. 디옥산 (20 mL) 및 물 (10 mL) 내 4,4,5,5-테트라메틸-2-비닐-1,3,2-디옥사보롤란 (0.19 g, 1.28　mmol, 0.37 eq)의 혼합물에 (2S,4S)-tert-부틸 4-(2-((3-브로모-5-니트로피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (1.50 g, 3.37 mmol, 1 eq), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0.19 g, 0.17 mmol, 0.05 eq) 및 소듐 카보네이트 (1.07 g, 10.1 mmol, 3 eq)을 한번에 25 °C에서 질소 하에서 부가했다. 혼합물을 100　°C까지 가열하고 12 h 동안 교반했다. 부가적 4,4,5,5-테트라메틸-2-비닐-1,3,2-디옥사보롤란 (0.52 g, 3.37 mmol, 1 eq)을 부가하고, 반응을 12 h 동안 교반했다. 잔사를 물 내로 붓고 (50 mL), 수상을 EtOAc (30 mL Х 3)로 추출하고, 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (30 mL), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축했다. 잔사를 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-20% EtOAc/석유 에테르) (2S,4S)-tert-부틸 2-메틸-4-(2-((5-니트로-3-비닐피리딘-2-일)옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.62 g, 1.58 mmol, 47.0% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.88-9.01 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.39-8.53 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.77-6.92 (dd, J = 17.6 Hz, J = 10.8 Hz, 1H), 5.89-6.05 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.48-5.62 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 4.45-4.60 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.85-4.00 (m, 1H), 3.65-3.82 (m, 1H), 3.00-3.19 (m, 1H), 1.90-2.03 (m, 1H), 1.73-1.90 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.23-1.32 (m, 2H), 1.16-1.21 (d, J = 2.4 Hz, 3H).

동일 방법을 사용하여 (2S,4S)-tert-부틸 2-메틸-4-(2-((5-니트로-3-비닐피리딘-2-일)옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.640 g, 1.630 mmol, 78.7% 수율)를 옅은 황색 고체로서 합성했다. MS (ESI) m/z 336.5 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.96 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 8.46 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 6.85 (dd, J = 17.6, 11.2 Hz, 1 H), 5.98 (d, J = 17.6 Hz, 1 H), 5.54 (d, J = 11.6 Hz, 1 H), 4.53 (t, J = 6.8 Hz, 2 H), 4.30 - 4.48 (m, 1 H), 3.85 - 4.10 (m, 1 H), 2.77 - 2.94 (m, 1 H), 1.81 - 1.95 (m, 1 H), 1.68 - 1.80 (m, 3 H), 1.59 - 1.66 (m, 1 H), 1.47 (s, 9 H), 1.34 - 1.43 (m, 1 H), 1.09 - 1.17 (m, 4 H).

(2 S ,4 S )- tert -부틸 4-(2-((5-아미노-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 및 (2 S ,4 R )- tert -부틸 4-(2-((5-아미노-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. THF (10 mL) 내 (2S,4S)-tert-부틸 2-메틸-4-(2-((5-니트로-3-비닐피리딘-2-일)옥시)에틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.62 g, 1.58 mmol, 1 eq)의 용액에 Pd/C (0.15 g, 10% wt)을 질소 하에서 부가했다. 현탁액을 진공하에서 탈기하고 수소로 몇 번 퍼징하고, 혼합물을 수소 분위기 하에서 (50 psi) 25 °C에서 12 h 동안 교반했다. 반응을 여과하고 진공에서 농축하고 미정제 (2S,4S)-tert-부틸 4-(2-((5-아미노-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.42 g, 1.16 mmol, 72.9% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 364.6 [M+1]⁺; ¹H　NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46-7.50 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.87-6.90 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.23-4.28 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.85-3.95 (m, 1H), 3.67-3.75 (m, 1H), 3.30 (s, 2H), 3.03-3.13 (m, 1H), 2.49-2.57 (m, 2H), 1.88-2.00 (m, 1H), 1.73-1.87 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.07-1.25 (m, 8H).

부가적으로 0.96 eq의 28% 순수한 암모늄 히드록사이드 및 45 °C의 고온을 포함하는 동일 방법을 사용하여 (2S,4R)-tert-부틸 4-(2-((5-아미노-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.500 g, 1.380 mmol, 91.3% 수율)를 옅은 황색 오일로서 형성시켰다. MS (ESI) m/z 364.5 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.48 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 6.89 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 4.35 - 4.55 (m, 1 H), 4.20 - 4.31 (m, 2 H), 3.85 - 4.05 (m, 1 H), 3.05 - 3.60 (m, 2 H), 2.75 - 2.95 (m, 1 H), 2.53 (q, J = 7.6 Hz, 2 H), 1.82 - 1.96 (m, 1 H), 1.63 - 1.76 (m, 4 H), 1.46 (s, 9 H), 1.30 - 1.40 (m, 1 H), 1.15 - 1.20 (m, 3 H), 1.00 - 1.14 (m, 4 H).

(2 S ,4 S )- tert -부틸 4-(2-((3-에틸-5-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노) 피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 및 (2 S ,4 R )- tert -부틸 4-(2-((3-에틸-5-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노)피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. (2S,4S)-tert-부틸 4-(2-((5-아미노-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.42　g, 1.16 mmol, 1 eq), 메틸 2-브로모-2-메틸-프로파노에이트 (1.05 g, 5.78 mmol, 5 eq) 및 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (0.75 g, 5.78 mmol, 5 eq)의 혼합물을 100 °C에서 24 h 동안 교반했다. 암모늄 클로라이드의 포화 수성 용액 (30 mL) 및 EtOAc (30 mL)을 부가하고, 층을 분리했다. 수성 층을 EtOAc (30 mL)로 추출하고, 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (20 mL), 건조시키고, 여과하고 농축했다. 미정제 생성물을 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 (0-50% EtOAc/석유 에테르) (2S,4S)-tert-부틸 4-(2-((3-에틸-5-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노)피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.42 mg, 0.91 mmol, 78.4% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 464.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46-7.49 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.92-6.95 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.22-4.29 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.86-3.96 (m, 1H), 3.66-3.76 (m, 5H), 3.02-3.12 (m, 1H), 2.48-2.56 (m, 2H), 1.89-1.99 (m, 1H), 1.74-1.87 (m, 4H), 1.45-1.49 (m, 14H), 1.24-1.31 (m, 2H), 1.14-1.19 (m, 6H).

동일 절차에 따라서 (2S,4R)-tert-부틸 4-(2-((3-에틸-5-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노)피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.141 g, 0.295 mmol, 44.68% 수율, 97% 순도)을 제조하여 갈색 오일을 얻었다. MS (ESI) m/z 464.1 [M+1]⁺.

(2 S ,4 S )- tert -부틸 4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4- 옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 및 (2 S ,4 R )- tert -부틸 4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트. (2S,4S)-tert-부틸 4-(2-((3-에틸-5-((1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)아미노)피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.42 g, 0.91 mmol, 1 eq), 4-이소티오시아네이토-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.31 g, 1.36 mmol, 1.5 eq), TEA (0.27 g, 2.72 mmol, 378 μL, 3 eq) 및 EtOAc (5 mL)의 혼합물을 60 °C에서 10 h 동안 교반했다. LCMS는 40% 소정의 생성물이 검출되었음을 나타냈고, 잔사를 물 내로 붓고 (50 mL), 수성 상을 EtOAc (30 mL × 3)로 추출했다. 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (50 mL), 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축했다. 잔사를 반-분취용, 역-상 HPLC에 의해 정제하여 (78-100% 물 내 아세토니트릴 + 0.225% 포름산, 11 min) (2S,4S)-tert-부틸 4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.19 g, 0.29 mmol, 32.6% 수율)를 무색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 560.4 [M-100+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.89-8.03 (m, 3H), 7.81-7.87 (dd, J = 8.4 Hz, J = 1.6 Hz, 1H), 7.30-7.35 (m, 1H), 4.34-4.44 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.85-3.97 (m, 1H), 3.67-3.78 (m, 2H), 3.04-3.14 (m, 1H), 2.59-2.68 (m, 2H), 1.91-2.03 (m, 1H), 1.69-1.89 (m, 5H), 1.51-1.59 (m, 2H), 1.46 (s, 10H), 1.18-1.30 (m, 9H).

동일 절차에 의해 (2S,4R)-tert-부틸 4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.080 g, 0.112 mmol, 37.12% 수율, 98.9% 순도, 포름산)를 황색 오일로서제공했다. MS (ESI) m/z 682.3 [M+Na]⁺.

4-(3-(5-에틸-6-(2-((2 S ,4 S )-2-메틸피페리딘-4-일)에톡시)피리딘-3-일)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 및 4-(3-(5-에틸-6-(2-((2 S ,4 R )-2-메틸피페리딘-4-일)에톡시)피리딘-3-일)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴. DCM (2 mL) 내 (2S,4S)-tert-부틸 4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-카르복실레이트 (0.19　g, 0.29 mmol, 1 eq)의 혼합물에 수소 클로라이드/MeOH (4 M, 0.3 mL, 4.17 eq)을 한번에 부가했다. 혼합물을 25 °C에서 1 h 동안 교반했다. 반응을 진공에서 농축하고, 잔사를 소듐 비카보네이트의 포화 수성 용액 (20　mL) 내로 붓고 10 min 동안 교반했다. 수상을 EtOAc로 추출하고 (10 mL Х 3), 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (20 mL Х 1), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축했다. 화합물 4-(3-(5-에틸-6-(2-((2S,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)에톡시)피리딘-3-일)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.13 g, 미정제)을 황색 오일로서 얻었다. MS (ESI) m/z 560.4 [M+1]⁺.

동일 절차에 의한 황색 고체로서의 4-(3-(5-에틸-6-(2-((2S,4R)-2-메틸피페리딘-4-일)에톡시)피리딘-3-일)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.067 g, 0.112 mmol, 99.16% 수율, 수소 클로라이드)의 합성에 10 °C의 더 낮은 온도 및 8 h의 교반이 필요했다. MS (ESI) m/z 560.3 [M+1]⁺.

2-((2 S ,4 S )-4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-일)- N -(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 및 2-((2 S ,4 R )-4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-일)- N -(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드. DMF (3 mL) 내 4-(3-(5-에틸-6-(2-((2S,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)에톡시)피리딘-3-일)-4,4-디메틸-5-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-2-(트리플루오로메틸)벤조니트릴 (0.13 g, 0.23 mmol, 1 eq) 및 2-클로로-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.10 g, 0.34 mmol, 1.5 eq)의 혼합물에 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (0.09 g, 0.68 mmol, 3 eq)을 부가했다. 혼합물을 70 °C까지 가열하고 12 h 동안 교반했다. 혼합물을 물 (30 mL) 내로 붓고 10 min 동안 교반했다. 수상을 EtOAc (30 mL Х 3)로 추출하고, 조합시킨 유기 층을 식염수로 세척하고 (50 mL Х 5), 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축했다. 잔사를 표준 방법에 의해 정제하여 2-((2S,4S)-4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.06 g, 0.07 mmol, 31.1% 수율, 98% 순도)를 얻었다. MS (ESI) m/z 819.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.77 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.36-8.43 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.27-8.32 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.05-8.10 (dd, J = 8.0 Hz, J = 1.6 Hz, 1H), 7.95-8.05 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.50-7.60 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.93-7.08(m, 2H), 6.75-6.85(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.32-6.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.80-5.96 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.36-4.44 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.21-4.33 (m, 1H), 3.35-3.38 (m, 1H), 2.93-3.01 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 2.85-2.93 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.68-2.77 (m, 1H), 2.56-2.64 (m, 4H), 2.35-2.41 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.07-2.12 (m, 1H), 1.58-1.93 (m, 1H), 1.64-1.77 (m, 4H), 1.58 (br s, 1H), 1.51 (s, 6H), 1.27-1.38 (m, 1H), 1.13-1.21 (t, J = 7.6　Hz, 3H), 0.96-1.12 (m, 4H). 48 h 반응 시간을 제외하고, 동일 합성을 사용하여 2-((2S,4R)-4-(2-((5-(3-(4-시아노-3-(트리플루오로메틸)페닐)-5,5-디메틸-4-옥소-2-티옥소이미다졸리딘-1-일)-3-에틸피리딘-2-일)옥시)에틸)-2-메틸피페리딘-1-일)-N-(3-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)페닐)아세트아미드 (0.045 g, 0.054 mmol, 48.13% 수율, 98.18% 순도)를 백색 고체로서 얻었다. MS (ESI) m/z 819.3 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.76 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.39 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 8.29 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 8.08 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.55 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.02 - 6.98 (m, 2H), 6.81 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 6.40 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 5.88 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 4.40 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.30 - 4.24 (m, 1H), 3.18 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 3.05- 3.01 (m, 2H), 2.77 - 2.69 (m, 1H), 2.62 - 2.57 (m, 5H), 2.12 - 2.07 (m, 1H), 1.93 - 1.70 (m, 5H), 1.58 - 1.51 (m, 8H), 1.39 - 1.34 (m, 1H), 1.17 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 1.00 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

분석

세포 기초 분석

VCAP AR 분해 분석. 시험 화합물을 전자 장치를 쓰지 않는 디스펜서를 사용하여 Corning CellBind 96-웰 투명 바닥 판 (Cat # 3300)에 미리 분배하여 각 화합물에 대해 1: 3 희석으로 10 점 농도 시리즈를 만들었다. 각 화합물의 최종 최고 농도는 5μM이다. 최종 농도 0.1 %의 DMSO를 대조군으로 사용했다. 8 % 소 태아 혈청 (FBS)을 함유한 DMEM에서 배양된 VCaP 세포를 200 μL 부피의 웰당 50K 세포로 화합물 플레이트에 파종하고 24 시간 동안 CO₂ 인큐베이터에서 37 ° C에서 인큐베이션했다. 배지를 조심스럽게 세포로부터 제거하고 플레이트를 얼음 위에 놓았다. Cell Signaling Technologies (Cat # 9803)의 빙냉 1x 세포 용해 완충액 100 μL를 세포의 각 웰에 첨가하고 플레이트를 쉐이커에서 1 시간 동안 4 ° C에서 배양했다. PathScan Total Sandwich AR ELISA 키트 (Cell Signaling Technology, Cat # 12580)를 사용하여 AR ELISA 검출을 위해 15 μL의 세포 용해물을 사용했다. 화합물 처리된 웰의 AR 수준을 DMSO 대조군의 AR 수준으로 정규화하고 대조군의 백분율 (PoC) (y)로 표시했다. 4 개 매개 변수 로지스틱 모델 (Sigmoidal Dose-Response Model)을 사용하여 다음 방정식을 사용하여 화합물의 DC₅₀, 및 EC₅₀을 결정했다:

y = (A+ ((B-A)/ (1+ ((C/x)^D))))

A = Y_Min (곡선 맞춤에 의해 결정된 화합물 처리에 대한 반응으로 DMSO 대조군에 대해 정규화된 최저 AR 수준)

B = Y_Max (곡선 맞춤에 의해 결정된 최대 AR 수준)

C = EC₅₀

D = 기울기

x = 화합물 농도

EC₅₀ = y = (Y_Max-Y_Min)/2일 때 화합물의 농도

DC₅₀ = y = DMSO 대조군의 50% (50% AR 분해)일 때 화합물의 농도

y = DMSO 대조군에 대해 정규화된 AR 단백질 수준

화합물 처리에 대한 반응으로 DMSO 대조군에 대해 정규화된 최저 측정 AR 수준 (Y 값이라고 함)을 사용하여 화합물-매개 AR 분해 효율을 특성화했다.

표 1의 각 피페리딘 디온 화합물은 VCAP AR 분해 분석에서 테스트되었으며 그 안에서 활성이 있는 것으로 확인되었다. 표 1의 모든 화합물은 DMSO 대조군의 DC₅₀ <1 μM 및 Y <50 %를 갖는 것으로 나타났다.

전립선 암 세포 증식 분석. VCAP 또는 ENZR 세포를 DMEM + 8 % FBS 배지를 사용하여 96-웰 CellBind (Costar) 플레이트에서 웰당 10K 세포로 플레이팅했다. 세포를 37 ° C에서 밤새 배양하고 시험 화합물을 연속 희석하여 웰에 첨가했다. 7 일 배양 후, 분석 배지를 반전에 의해 제거하고 플레이트를 -80 ° C에서 밤새 냉동시켰다. 플레이트를 실온에서 해동하고 100 μL 탈이온수 (ddH₂O)를 각 웰에 첨가했다. 플레이트를 비-CO₂ 인큐베이터에서 1 시간 동안 37 ° C에서 인큐베이션한 다음 -80 ° C에서 밤새 냉동시켰다. 플레이트를 실온으로 해동하고 100 μL TNE 완충액 (NaCl, 트리스, EDTA) + Hoescht 염료 (1.0 mg/ml, 1: 400)를 각 웰에 첨가했다. 형광 신호는 460 nm에서 측정되었다. 모든 데이터는 DMSO 대조군의 백분율로 정규화되었다. 4 개 매개 변수 로지스틱 모델 (Sigmoidal Dose-Response Model)을 사용하여 다음 방정식을 사용하여 화합물의 GI₅₀ 값을 결정했다:

y = (A+ ((B-A)/ (1+ ((C/x)^D))))

A = Y_Min (곡선 맞춤에 의해 결정된 화합물 처리에 대한 반응으로 DMSO 대조군에 대해 정규화된 발광 단위에서의 최저 세포 생존율)

B = Y_Max (곡선 맞춤에 의해 결정된 DMSO 대조군에 대해 정규화된 발광 단위로서 측정된 최대 세포 생존율)

C = EC₅₀

D = 기울기

GI₅₀ = Y = (Y_Max+Yt ₀ )/2일 때 화합물의 농도

EC₅₀ = y = (Y_Max-Y_Min)/2일 때 화합물의 농도

IC₅₀ = Y = of DMSO 대조군의 50% 일 때 화합물의 농도

y = 발광 단위로서 측정되고 DMSO 대조군의 퍼센트로서 정규화된 세포 생존율

t₀ = 화합물 부가시의 시간

피페리딘 디온 화합물은 전립선 암 세포 증식 분석에서 시험되었거나 시험될 것이며, 그 안에서 활성을 갖는 것으로 나타났거나 나타날 것이다.

생체내 분석

AR 분해 분석. 생체 내 AR 분해 분석은 VCAP 전립선 암 이종 이식 종양을 갖는 NSG 마우스에서 수행되었다. 수컷 NSG 마우스에 오른쪽 다리 위의 옆구리 영역에 VCAP 세포를 접종했다. 동물 접종 후, 종양은 무작위화 전에 약 500 mm³까지 성장하도록 허용되었다. 무작위 배정된 동물은 20 % Labrasol, 80 % 25mM 구연산염 완충액 pH 3으로 조제된 시험 화합물을 투여 받았다. 화합물은 3 일 동안 매일 1 회 경구 투여되었다. 화합물 투여의 마지막 투여 후, 혈장 및 종양을 수집하여 AR 분해 분석을 위해 처리했다. 종양 내 AR 수준은 웨스턴 블롯 분석을 사용하여 측정되었다. 일원 분산 분석 (ANOVA)을 사용하여 통계 분석을 수행했다.

피페리딘 디온 화합물은 생체 내 AR 분해 분석에서 시험되었거나 시험될 것이며, 그 안에서 활성을 갖는 것으로 나타났거나 나타날 것이다.

VCAP 전립선 암 이종 이식 모델. 이종 이식 연구는 VCAP 전립선 암 이종 이식 종양이 있는 수컷 NSG 마우스를 대상으로 수행되었다. 수컷 NSG 마우스에 오른쪽 뒷다리 위의 옆구리 영역에 VCAP 세포를 피하로 접종했다. 동물 접종 후, 종양은 무작위화 전에 약 200 mm³까지 성장하도록 허용되었다. 무작위화 동안, 75 내지 250 mm³ 범위의 VCAP 종양을 갖는 마우스를 함께 모으고 다양한 치료 그룹으로 무작위화했다. 20 % Labrasol, 80 % 25mM 구연산염 완충액 pH 3으로 제형화된 시험 화합물은 5 mL/kg의 용량 부피로 투여되었다. 화합물은 연구 기간 동안 매일 1 회 경구 투여되었다. 캘리퍼를 사용하여 종양을 일주일에 두 번 측정하고 W² x L/2 공식을 사용하여 종양 부피를 계산했다. 일원 또는 이원 분산 분석 (ANOVA)을 사용하여 통계 분석을 수행했다.

피페리딘 디온 화합물은 VCAP 전립선 암 이종 이식 모델에서 시험되었거나 시험될 것이며, 이 모델에서 전립선 암의 치료로서 효과적인 것으로 나타났거나 나타날 것이다.

활성 표

표 1의 각각의 피페리딘 디온 화합물은 위에 제시된 하나 이상의 AR 분해 분석, 예를 들어 VCAP AR 분해 분석 분석에서 테스트되었고, 그 안에서 활성을 갖는 것으로 밝혀졌다.

표 1의 모든 화합물은 DMSO 대조군의 DC₅₀ < 1 μM 및 Y　<　50%을 갖는 것으로 나타났으며, 일부 화합물은 DC₅₀ 값 C: DC₅₀ ≤ 0.10 μM, 일부는 DC₅₀ 값 B: 0.10　μM　<　DC₅₀　≤ 0.50 μM, 및 나머지는 DC₅₀ 값 A: 0.50　μM　<　DC₅₀　≤　1.0　μM였다.

추가로 화합물은 DMSO 대조군의 50 % 미만의 AR 분해 효율 Y 값을 갖는 것으로 나타났으며, 일부 화합물은 0 <Y <= 25 % (*로 표시), 일부 화합물은 25 % <Y <= 35% (**로 표시), 및 나머지는 35 % <Y <50 % (***로 표시)였다.

다수의 참고 문헌이 인용되었으며, 그 개시 내용은 그 전체가 본원에 참고로 포함된다.

Claims (40)

1. 식 (I)의 화합물
   

   

   
   또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체,
   여기서
   R^N는 H;
   각각의 R¹는 할로겐, CN, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
   R² 및 R³는 각각 H, 및 C_1-3 알킬로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고;
   각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬, 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 동일 또는 인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-6 시클로알킬을 형성하고, 또는 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하고;
   X는 CR^x;
   R^x는 H, 할로겐, 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-3 알킬;
   L은 -O-, -O(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-;
   n은 0-4;
   m은 0-8;
   p는 1-3;
   V는
   

   

   
   여기서
   A는 N, CH, 또는 CR^A;
   B는 N, CH 또는 CR^B;
   각각의 R^A는 할로겐, 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬, 및 치환된 및 비치환된 C_3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고;
   각각의 R^B는 할로겐, 및 치환된 또는 비치환된 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택되고;
   R^C는 할로겐 또는 CF₃;
   R⁵ 및 R⁶는 C_1-3 알킬, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 C_3-5 시클로알킬 또는 3-5 원 헤테로시클릴을 형성하고;
   a는 0-3; 및
   b는 0-2임.
2. 제 1항에 있어서, 각각의 R¹는 Cl, F, Br, CN, -CH₃, 및 -CH₂CH₃로부터 독립적으로 선택되는 화합물.
3. 제 1항에 있어서, 각각의 R¹는 Cl, F, 및 CN로부터 독립적으로 선택되는 화합물.
4. 제 1항에 있어서, n은 0인 화합물.
5. 제 1항에 있어서, n은 1인 화합물.
6. 제 1항에 있어서, R² 및 R³는 각각 H, 치환된 또는 비치환된 메틸, 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 치환된 또는 비치환된 시클로프로필, 시클로부틸 또는 시클로펜틸을 형성하는 화합물.
7. 제 1항에 있어서, R² 및 R³는 각각 H 및 메틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 여기서 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 비치환된 시클로프로필을 형성하는 화합물.
8. 제 1항에 있어서, R² 및 R³는 둘 다 H 또는 메틸, 또는 여기서 R² 및 R³ 및 자신들이 부착된 탄소는 비치환된 시클로프로필을 형성하는 화합물.
9. 제 1항에 있어서, 각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 메틸 및 에틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 여기서 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 치환된 또는 비치환된 시클로프로필 또는 시클로부틸을 형성하는 화합물.
10. 제 1항에 있어서, 각각의 R⁴는 치환된 또는 비치환된 메틸로부터 독립적으로 선택되고, 또는 여기서 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 비치환된 시클로프로필을 형성하는 화합물.
11. 제 1항에 있어서, 각각의 R⁴는 메틸 및 CH₂OH로부터 독립적으로 선택되고, 또는 여기서 두 개의 R⁴ 기는, 자신들이 부착된 동일 탄소 원자와 함께, 비치환된 시클로프로필을 형성하는 화합물.
12. 제 1항에 있어서, m은 0, 1, 2, 3 또는 4인 화합물.
13. 제 1항에 있어서, m은 0, 1, 또는 2인 화합물.
14. 제 1항에 있어서, 두 개의 R⁴ 기는 자신들이 부착된 탄소 원자와 비-인접한 탄소 원자와 함께 비치환된 4-7-원 헤테로시클릴을 형성하는 화합물.
15. 제 1항에 있어서, R^x는 H인 화합물.
16. 제 1항에 있어서, R^x는 CH₃인 화합물.
17. 제 1항에 있어서, R^x는 F인 화합물.
18. 제 1항에 있어서, L은 -O-, -O(CH₂)-, 또는 -O(CH₂)(CH₂)-인 화합물.
19. 제 1항에 있어서, A는 CH인 화합물.
20. 제 1항에 있어서, B는 CH인 화합물.
21. 제 1항에 있어서, B는 N인 화합물.
22. 제 1항에 있어서, A는 0, 1 또는 2인 화합물.
23. 제 19항에 있어서, 각각의 R^A는 Cl, Br, F, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, CH₂CH₂CH(CH₃)₂, CH(CH₃)CH(CH₃)₂, CH₂C(CH₃)₃, CF₃, CF₂CH₃, CH₂CH₂F, CH₂CHF₂, CH₂CF₃, CH₂OH, CH(CH₃)OH, CH₂CH₂OH, CH(CH₃)CH₂OH, CH₂CH(CH₃)OH, 시클로프로필, 시클로부틸, 및 시클로펜틸로부터 독립적으로 선택되는 화합물.
24. 제 1항에 있어서, 각각의 R^A는 Cl, F, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃, 및 CH₂CH₂F로부터 독립적으로 선택되는 화합물.
25. 제 20항에 있어서, 각각의 R^A는 Cl, F, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃, 및 CH₂CH₂F로부터 독립적으로 선택되는 화합물.
26. 제 21항에 있어서, 각각의 R^A는 Cl, 에틸, 이소프로필, CF₂CH₃ 및 CH₂CH₂F로부터 독립적으로 선택되는 화합물.
27. 제 1항에 있어서, b는 0인 화합물.
28. 제 1항에 있어서, R^C는 CF₃인 화합물.
29. 제 1항에 있어서, R⁵ 및 R⁶는 메틸, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 시클로프로필, 시클로부틸, 테트라히드로푸란일, 또는 테트라히드로피란일을 형성하는 화합물.
30. 제 1항에 있어서, R⁵ 및 R⁶는 메틸, 또는 R⁵ 및 R⁶는, 자신들이 부착된 탄소 원자와 함께, 시클로부틸을 형성하는 화합물.
31. 표 1로부터의 화합물.
32. 유효량의 제 1 내지 31항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변 이성질체, 동위원소, 또는 입체 이성질체, 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 비히클을 포함하는 약제학적 조성물.
33. 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 방법, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 이의 유효량의 제 1 내지 31항 중 어느 한 항의 화합물을 투여하는 것을 포함함.
34. 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료 방법, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 이의 유효량의 제 32항의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함함.
35. 제 33 또는 34항에 있어서 , 여기서 안드로겐 매개 질환은 전립선 암인 방법.
36. 제 35항에 있어서, 전립선 암은 거세 저항성 전립선 암 (CRPC)인 방법.
37. 제 1 내지 31항 중 어느 한 항에 있어서 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료를 위한 방법에서의 사용을 위한 화합물.
38. 제 32 항에 있어서 안드로겐 수용체 매개 질환의 치료를 위한 방법에서의 사용을 위한 약제학적 조성물.
39. 안드로겐 매개 질환은 전립선 암인 제 37항의 사용을 위한 화합물 또는 제 38항의 사용을 위한 약제학적 조성물.
40. 제 39항에 있어서 , 여기서 전립선 암은 거세 저항성 전립선 암 (CRPC)인 사용을 위한 화합물 또는 약제학적 조성물.