KR20210049857A - 안과 질환 치료용 약물 조성물 및 치료 방법 - Google Patents

안과 질환 치료용 약물 조성물 및 치료 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20210049857A
KR20210049857A KR1020217008504A KR20217008504A KR20210049857A KR 20210049857 A KR20210049857 A KR 20210049857A KR 1020217008504 A KR1020217008504 A KR 1020217008504A KR 20217008504 A KR20217008504 A KR 20217008504A KR 20210049857 A KR20210049857 A KR 20210049857A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
subject
camkk2
administering
eye
Prior art date
Application number
KR1020217008504A
Other languages
English (en)
Inventor
스콧 더블유. 커진스
프리야담 에스. 메투
데이빗 엠. 구덴
Original Assignee
듀크 유니버시티
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 듀크 유니버시티 filed Critical 듀크 유니버시티
Publication of KR20210049857A publication Critical patent/KR20210049857A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/06—Peri-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/06—Peri-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

본 발명은 대상에서, 이에 한정되지는 않지만, 1) 이에 한정되지는 않지만, 안구 이식편대숙주병(ocular graft versus host disease), 안구 반흔성 유천포창(ocular cicatricial pemphigoid), 아토피 결막염(vernal keratoconjunctivitis), 알레르기 눈 질환, 마이봄샘 기능장애(meibomian gland dysfunction), 눈물층 부족증(aqueous tear deficiency) (흔한 안구건조증), 각막성 흉터, 및 결막 흉터결막성 흉터 및 섬유증을 포함하는 안구 표면 염증성 질환 (OSIDs); 2) 포도막염, 및 이에 한정되지는 않지만, 각막염, 공막염, 홍채염, 홍채모양체염 중간체 포도막염, 평면부염, 안구뒤쪽 포도막염, 맥락막염(choroiditis), 맥락망막염, 망막염, 또는 비감염성, 감염성, 또는 특발성 병인의 범포도막염을 포함하는 눈의 다른 염증성 질환; 및 3) 건조한 연령 관련 황반 변성(dry age-related macular degeneration), 신생혈관 연령관련 황반 변성(neovascular age-related macular degeration), 당뇨망막병증(diabetic retinopathy), 망막 혈관 질환 (e.g. 내경계막 제거술, 망막 동맥 폐쇄(retinal artery occlusion)), 및 망막 변성 및 이상증을 포함하는 "눈의 뒤쪽" 망막 질환을 포함하여, CaMKK2-중재 안과 질환 치료용 조성물 및 치료 방법에 관한 것이다.

Description

안과 질환 치료용 약물 조성물 및 치료 방법
관련된 출원에 대한 교차 참조
본 출원은 Cousins 등에 의해, 2018년 8월 20일에 출원된 US 임시 출원 62/719,938, 210-97-PROV의 이익을 주장하며, 여기 참조로서 전체적으로 통합되어 있다.
본 발명은 미국국립보건원(National Institutes of Health)에 의해 등록번호 EY029185-01로 정부 지원으로 만들어졌다. 정부는 본 발명에 특정 권리를 갖는다.
1. 분야
현재 개시된 본 발명은 수 많은 세포 타입, 특히 면역 세포에서 세포성 이펙터 기능을 조절하는 중간체 키나아제, 칼슘/칼모듈린-종속 키나아제 키나아제 2 (CaMKK2)의 활성화에 의해 중재된 안과 질환의 치료를 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본 주재의 주요 초점은 눈, 눈 부속기관, 및 외부 조직 (눈꺼풀, 안와)의 염증성 질환에 관한 것이다. 이들 질환은 안구앞 부분 (또는 "눈의 앞 부분") 염증성 질환뿐만 아니라 안구 뒤부분 (또는 "눈의 뒤") 질환을 포함하며, 여기서 면역 세포 내 CaMKK2의 활성화가 질병 활성화를 개시, 중재, 또는 조절하고; 표적 면역 세포 내 CaMKK2의 억제가 잠재적 치료 또는 질병-변형 전략을 대표할 수 있다. 이들은 CaMKK2가 보여지거나 또는 중요 역할을 할 것 같은 주요 3가지 부류의 질환을 포함한다: 1) 이에 한정되지는 않지만 안구 이식편대숙주병(ocular graft versus host diseas), 안구 반흔성 유천포창(ocular cicatricial pemphigoid), 아토피 결막염(vernal keratoconjunctivitis), 알레르기 눈 질환, 마이봄샘 기능장애(meibomian gland dysfunction), 눈물층 부족증(aqueous tear deficiency) (흔한 안구건조증), 각막성 흉터, 및 결막 흉터결막성 흉터 및 섬유증을 포함하는 안구 표면 염증성 질환(OSID); 2) 포도막염, 및 이에 한정되지는 않지만, 각막염, 공막염, 홍채염, 홍채모양체염, 중간체 포도막염, 평면부염, 안구뒤쪽 포도막염, 맥락막염(choroiditis), 맥락망막염, 망막염, 또는 비감염성, 감염성, 또는 특발성 병인의 범포도막염을 포함하는 눈의 다른 염증성 질환; 및 3) 이에 한정되지는 않지만, 건조한 연령 관련 황반 변성(dry age-related macular degeneration), 신생혈관 연령관련 황반 변성(neovascular age-related macular degeneration), 당뇨망막병증(diabetic retinopathy), 망막 혈관 질환 (e.g. 내경계막 제거술, 망막 동맥 폐쇄(retinal artery occlusion)), 및 망막 변성 및 이상증을 포함하는 "눈의 뒤쪽" 망막 질환.
2. 배경
2.1. 소개
여기 제공된 "배경기술" 설명은 본 개시 문맥을 일반적으로 제시하기 위한 목적이다. 본 배경기술에 설명된 정도의 본 발명자들의 작업은, 본 배경기술 단락에 설명된 정도까지로서 출원시 선행 기술로서 달리 증명하지 않은 상세한 설명의 양상은 본 개시에 대한 선행 기술로서 명시적으로 또는 함축적으로 인정하는 것은 아니다.
칼슘/칼모듈린-종속 단백질 키나아제 키나아제 2(CaMKK2)는, 많은 세포 타입에서 도처에 발현된 세포내 중간체 키나아제이다. 그러나, CaMKK2의 활성은 특히 면역계의 세포, 특히 활성화된 T 림프구 및 침윤 대식세포(infiltrating macrophages)(1-5)를 포함하는 특정 "활성화된" 세포 내에서 특히 증가된다. CaMKK2는 항상성 유지자 그 이상의 "활성화된" 세포를 위한 이펙터 기능의 증폭자로 나타난다. 따라서, 실험 연구에서, CaMKK2가 없는 마우스는 면역결핍성 증거가 없고, 주요 페노타입(phenotype)을 나타내지 않는다. CaMKK2는 가장 중요한 칼슘 반응적 키나아제 중 하나이고, 이의 활성은 세포질 칼슘 및 칼모듈린 준위에 의해 조절된다. 일단, 활성 CaMKK2는 몇 가지 기질을 인산화한다. 다른 CaMKK2 분자를 자가-인산화 및 활성화하는 것외에, CaMKK2는 칼슘/칼모듈린-종속 단백질 키나아제 I (CaMKI), 칼슘/칼모듈린-종속 단백질 키나아제 IV (CaMKIV), 및 아데노신 모노포스페이트-활성화된 단백질 키나아제(AMPK) (FIGS. 1 및 2)를 직접적으로 인산화한다. 이들 기질의 인산화는 다중 하류 신호전달 캐스케이드를 증폭시키고, 다중 세포성 이펙터 기능을 조절한다.
T 세포 내 CaMKK2 활성 : 이의 기질 CaMKI, CamKIV, 및 AMPK의 인산화를 통해, CaMKK2는 T 세포 내에서 수 많은 특이적 이펙터 기능을 조절한다(도 1). 활성화된 T 림프구에서, 칼슘은 T 세포 수용체를 통한 활성화 또는 공동-자극 신호 및/또는 IL-2(6)에 의한 증폭과 무관한 주요 2차 메신저 시스템이고, 그 결과 칼모듈린 및 CaMKK2를 활성화시킨다. 활성화된 T 세포에서, AMPK의 하류 활성화는 세포성 생체에너지기법(bioenergetics), 증식, 및 사이토카인 생산(1, 5)을 조절한다. CaMKI는 T 세포 이동 및 접착 (7)을 조절한다. CaMKIV는 T 세포 사이토카인 이펙터 반응에서 중요하다. CaMKK2는 또한 PTK2B(단백질 티로신 키나아제 베타)의 활성화를 증폭시키며, 이는 많은 이펙터 사이토카인(3)의 생산에 중요한 p38 MAPK 경로를 중재한다. 그러므로, CaMKK2의 넉아웃이 수 많은 염증성 질환, 예를 들어 실험적 이식편대숙주질환(graft versus host disease)(GVHD)(2, 8-11)를 줄인다는 것은 놀라운 것이 아니다.
매크로파아지 내 CaMKK2 활성 : 이의 기질, CaMKI, CamKIV, 및 AMPK의 인산화를 통해, CaMKK2는 또한 매크로파아지 기능의 주요 조절자이다(도 2). 예를 들어, AMPK의 활성화는 비고전적인 매크로파아지에서 수선적 기능에 중요한 유전자 전사의 전체 숙주를 활성화시키고, CaMKK2의 특이적 억제는 AMPK 활성화(12)의 방지를 통해 비고전적 매크로파아지에 대한 단핵구의 전이를 억제한다. T 세포 내에서처럼, CaMKK2는 또한 PTK2B(단백질 티로신 키나아제 베타)의 활성화를 증폭시키고, 많은 매크로파아지-유래 이펙터 사이토카인(3)의 생산에 또한 중요한, p38 MAPK 경로를 중재한다. 그러므로, CaMKK2 억제는 조직 상처 및 파괴에 연루되었던 염증 유도성 사이토카인의 생산을 줄인다. CaMKK2의 증가된 활성은 활성 자극(e.g., LPS)(리포폴리사카라이드)(4)에 사전에 노출된 매크로파아지에서 관찰된다. CaMKK2의 넉아웃은 막 공정을 부착 및 연장하는 매크로파아지의 능력을 수선하고, 그 결과 그러한 활성화 자극(4)에 대한 반응으로 매크로파아지 축적의 축소 및 사이토카인 방출의 감소를 나타낸다.
안과 질환에 대한 치료적 표적으로서의 이유: OSID 및 포도막염 질환은 심각한 망막 이환율(ocular morbidity) 및 시력 손실을 가져오는 질병으로서 잘 알려져 있으며, 염증성 세포(특히 매크로파아지)는 또한 안구 뒤부분 질환의 심각성 및 시각 이환율(visual morbidity)(13-17)에 기여하는 것으로 또한 알려져 있다. 이들 모든 질병들은 면역 세포, 특히 T 세포 및 매크로파아지가 질병의 1차적인 중재자(즉, 이들 세포는 안구 조직에 침윤하고 원발 질환(primary disease) 과정으로서 국소적 상처를 촉발시킴)인 질환, 및 면역세포가 원발성 안구 질환 과정에서 반응하는 2차 병리학적 중재자인 질환 모두를 포함할 수 있다. T 세포 및 매크로파아지 모두에서, CaMKK2는 증폭 회로로서 기능하며; 넉아웃은 염증을 줄이나 면역 억제(4)를 유도하지는 않는다. 그러므로, CaMKK2는 T 세포 및 매크로파아지 기능에서 CaMKK2의 성립된 역할과 함께 사용될 때 안구 염증성 질환에서 매력적인 치료적 표적을 나타낸다. 중요하게는, 안구 염증성 질환의 실험적 마우스 모델의 임상전 데이터는, CaMKK2의 표적화된 억제가 T 세포 및 매크로파아지의 침윤의 감소와 함께 질병 심각성을 개선한다는 것을 나타낸다(본 출원의 실시예 4 및 5 참조). 안구 질환의 이들 및 다른 모델의 데이터는, 안구 질환, 특히 염증성 또는 면역 세포에 의해 1차적으로 또는 2차적으로 중재된 안구 질환의 치료를 위하여 CaMKK2의 소분자 억제제의 개발 및 잠재적 효능에 대한 설득력있는 이유 및 기술 검증을 제공한다.
여기 개시된 본 발명은, 활성화된 T 세포 및 매크로파아지를 포함하여 면역 시스템의 세포 내에서 증가된 활성을 갖는 중간체 키나아제인, 칼슘/칼모듈린-종속 단백질 키나아제 2(CaMKK2)의 새로운 소분자(small molecule) 억제제를 위한 조성물 및 방법에 관한 것다. 새로운 소분자는 CaMKK2의 억제에 대한 높은 특이성 및 효능을 갖도록 디자인되고, 이들 분자들은 친수성과 높은 수용해도를 보유한다. 이들 CaMKK2의 소분자 억제제(SMIC)는 생물물리학적 성질로 인하여 수용액 또는 현탁액에서 용이하게 제형화될 수 있다. 그러므로, 이들 SMICs는 안구 투여의 국소적 또는 결막밑출혈(subconjunctival) 경로를 통해 안과 질환의 치료에 이상적으로 적당하다.
본 개시의 또 다른 양상은 여기 개시되고 설명된 것들 모두를 제공한다.
이전 요약 및 다음 상세한 설명은 도면을 참조로 설명되며, 이는 여기 개시된 실시예들 일부(전부는 아님)를 설명한다.
도 1은 T 세포 이펙터 반응의 CaMKK2 조절을 개략적으로 설명하며, 다중 하류 경로의 CaMKK2 증폭이 어떻게 많은 염증유도성 이펙터 메커니즘을 중재하는지를 나타낸다.
도 2는 매크로파아지 이펙터 반응의 CaMKK2 조절을 개략적으로 설명하고, 다중 하류 경로의 CaMKK2 증폭이 염증유도성 및 섬유증유도성 이펙터 메커니즘 모두를 어떻게 중재하는지를 나타낸다.
도 3a는 알레르기성 조혈줄기세포이식(HSCT)(즉, 골수이식) 후 안구 이식편대숙주병의 병리생물학을 개략적으로 설명한다.
도 3b는 OGVHD에서 결막의 면역 세포(T 세포 및 매크로파아지) 침윤의 조직학을 묘사하는 헤마톡실린 및 에오신(H & E) 마이크로그래프상이다.
도 3c는 심각한 OGVHD의 임상 프레젠테이션을 설명하는 임상 슬릿-램프 바이오마이크로 스코프 포토그래프이다.
도 4a 및 4b는 배양된 HEK293 세포 내에서 (A) CaMKK2 자가-인산화; 및 (B) 비이클, 소분자 화합물 EYE301-EYE305, 및 도구 화합물 STO-609에 의한 AMPK 인산화;에 의한 CaMKK2 효소 활성의 억제를 설명하는 웨스턴 블랏(Western blot)이다.
도 4c 및 4d는, 배양된 HEK293 세포 내에서, C) CaMKK2 자가-인산화; 및 D)비이클, 소분자 화합물 EYE 301-EYE305, 및 도구 화합물 STO-609에 의한 AMPK 인산화;의 CaMKK2의 억제 활성을 나타내는 웨스턴 블랏의 농도 분석을 설명하는 막대 그래프이다.
도 5는 혼합된 림프구 반응에서 염증전 사이토카인의 측정을 설명하는 막대 그래프이며, 이는 인비트로에서(즉, "접시 내 GVHD") CaMKK2(SMICs)의 소분자 억제제의 기능성 억제 능력을 스크린하는데 사용될 수 있다.
도 6은 C57B1/6 마우스를 BALB/c 마우스 내로 비장(splenic) T 세포를 동시에 양자 전이시키는 것과 함께, 골수 이식을 기초로 한 이식편대숙주병의 마우스 모델의 설명이다.
도 7a는 "안전한" 혈액 골수 이식(즉, 동시에 T 세포 양자 전이를 하지 않음)을 한 후 마우스의 외부 눈의 슬릿 램프 바이오마이크로 스코프 포토그래프이다.
도 7b는 비장 T 세포의 동시적 양자 전이와 함께 알레르기성 혈액 골수 전이 후 안구 이식편대숙주병(OGVHD)를 묘사하는 마우스의 외부 눈의 슬릿 램프 바이오마이크로스코프 포토그래프이다.
도 8은, "안전한" BMT 마우스에서 최소 OGVHD 심각성에 비교된, "OGVHD" BMT 마우스(비장 T 세포의 동시적 양자 전이와 함께)의 OGVHD 눈 병리학 스코어의 산포도이다.
도 9a 및 9b는 A) 대조군 "안전한" BMT 및 B) GVHD BMT(비장 T 세포의 동시적 양자 전이와 함께) 후 안구 표면 플루오레세인 착색을 설명한다.
도 9c는 대조군 안전한 BMT 마우스 및 GVHD BMT 마우스의 안구 표면 플루오레세인 착색 스코어의 플롯이다.
도 10a-10d는 각막 간질(corneal stroma), 숨뇌(bulbar) 결막, 및 안와 결막 내로 T 세포 (A 및 B) 및 매크로파아지 (C 및 D) 침윤의 조직병리학적 증거를 나타내는 이미지들이다.
도 11a는 OGVH로 대조군-처리된 마우스의 눈의 슬릿 바이오마이크로스코프 포토그래프이다.
도 11b는 치료 후 OGVHD의 최소 표시와 함께 STO-609 처리된 마우스의 슬릿 바이오마이크로 스코프 포토그래프이다.
도 11c는 비이클 대조군 또는 STO-609로 국소적 안과 치료 후 알레르기성 BMT + 비장 T 세포 전이의 눈 병리학 스코어의 산포도이다.
도 12: 후보자 SMICs는 인비트로에서 STO-609에 유사한 효능을 나타낸다. HEK-293 세포는, CaMKK2의 기존 활성자, 1mM 이노마이신으로 자극하기 전에 STO-609, 후보자 SMICs, 또는 비이클 대조군으로 처리되었다. 세포 용해물은 CaMKK2 및 AMPK에 대한 포스포-특이적 항체로 탐침되었다. B-액틴은 로딩 대조군으로 사용되었다. 그래프는 로딩 변화에 대해 정정하면서 농도계의 정량화를 나타낸다.
도 13: 마우스는 BMT 14일 후 시작해서 연속해서 2주 동안 CaMKK2, STO-609, 선도(lead) SMIC 화합물 EY 1006. A001. B001 및 EY1001.A002.B001, 프레드니솔론의 도구 화합물 억제제를 국소적 투여를 하였다. 선도 SMICs EY1006.A001.B001 및 EY1001.A002.B001 모두는 STO-609와 유사한 효능을 갖는 임상적 OGVHD 발견의 심각성을 줄였다. 대조적으로, 비이클 대조군-처리된 눈들은 속눈썹(lash) 및 눈주위 털 손실, 눈꺼풀 떨림(crusting), 결막부종, 비정상 눈물 필름, 및 각막병증을 가졌다. STO-609 및 선도 SMICs은, OGVHD (p<0.05, STO-609, EY1006.A001.B001, EY1001.A002.B001 vs 비이클 또는 프레드니솔론에 대해)의 사인들을 예방할 때 비이클 및 프레드니솔론보다 우수하였다. 경증 질병(스코어 0-5); 중도증 질병(스코어 6-10); 중증(스코어 >10).
5.1. 정의
다음 용어들은 당해 기술 분야의 통상의 기술자들에게 잘 이해되는 것으로 여겨지는 것으로, 다음 정의들은 본 개시의 주제를 설명하기에 용이하도록 설정되어 있다.
본 명세서 전체적으로, 수치의 범위는 특정 정량을 위하여 제공된다. 이들 범위는 그 안의 하부 범위들 모두를 포함하는 것으로 이해된다. 그러므로, "50 내지 80"의 범위는 이 안의 모든 가능한 범위를 포함한다(e.g., 51-79, 52-78, 53-77, 54-76, 55-76, 55-75, 60-70 등). 게다가, 주어진 범위이 모든 값들은 그로 인하여 포함되는 범위의 모든 말단 점들일 수 있다(e.g., 범위 50-80은 예를 들어 55-80, 50-75 등과 같은 말단 점들을 갖는 범위들을 포함한다).
여기 사용된 것처럼, 상세한 설명 및 청구범위 및 이들의 집합에서, 용어 "포함하다"는, 그 말 이후 용어들이 포함되는 것을 의미하는 것으로 비제한적으로 사용되나 구체적으로 언급되어 있지 않은 용어들을 배제하는 것은 아니다.
명세서 전체적으로, 단어 "포함하는", 또는 "포함하다", 또는 "포함하는"과 같은 변형은 언급된 소자, 정수 또는 단계, 또는 소자, 정수 또는 단계들의 집단을 함축하는 것으로 이해될 것이나, 임의 다른 소자, 정수 또는 단계, 또는 소자, 정수 또는 단계의 집단을 배제하는 것은 아니다. 본 발명은 적적하게 본 청구항에 설명된 단계, 소자 및/또는 시약들을 "포함하다", "이루어지다", 또는 "필수적으로 이루어지다"일 수 있다.
청구항은 임의 선택적인 소자를 배제하기 위하여 서술될 수도 있다는 것을 더 주목한다. 그러한 것으로는, 그러한 배제적 용어로는 "단독으로", "단지" 등과 같은 것이 청구항 소자들의 나열과 함께 사용되거나 또는 "부정적" 제한과 사용되어 선행 기초로 작용하게 된다.
본 발명은 보다 넓은 발명의 하나 이상의 특정 실시예의 이해를 위하여 충분한 설명과 함께 도입된다. 상세한 설명은 명백하게 설명된 실시예 및 특징들로 본 발명을 제한하지 않고 이들 실시예의 특징들을 상세히 설명하고 예시한 것이다. 이들 설명의 관점에서 개시된 본 발명의 범위를 벗어나는 것 없이 추가적이고 유사한 실시예 및 특징들을 고려할 수 있을 것이다.
달리 규정되지 않는 한, 여기 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 관련이 있는 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공통적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 여기 설명된 것과 동일 또는 유사한 임의 방법, 장치 및 물질이 본 발명의 연습 또는 시험에 사용되었지만, 대표적인 방법, 장치 및 물질이 지금 설명된다.
다음 오래 지속되는 특허법 조약에서, 용어 "하나", "하나의" 및 "상기"는, 청구범위를 포함하여 본 명세서에서 사용될 때 "하나 이상의"를 의미한다. 그러므로, 예를 들어 "하나 세포"는 그러한 세포 다수를 포함할 수 있다.
달리 지정되지 않는 한, 명세서 및 청구범위에 사용된 성분, 조건 등의 정량을 나타내는 모든 숫자들은 용어 "약"에 의해 모든 예시에서 수정되는 것으로 이해된다. 따라서, 반대적으로 지정되지 않는 한, 본 명세서 및 첨부된 청구항에 언급된 수치적 파라미터는 본 명세서에서 얻어지는 원하는 성질에 따라 달라질 수 있는 근사치이다.
여기 사용된 것으로서, "약"은 질량, 중량, 시간, 부피, 농도 및/또는 퍼센트를 의미할 때, 실시예에서 특정 함량으로부터 +/- 20%, 일부 실시예에서 +/-l0%, 일부 실시예에서 +/- 5%, 일부 실시예에서 +/- 1%, 일부 실시예에서 +/- 0.5%, 및 일부 실시예에서 +/-0.l%의 변화를 포함할 수 있으며, 그러한 변화는 개시된 패키지 및 방법에서 적당하다.
본 발명은 활성화된 T 세포 및 매크로파아지를 위한 표적으로서 칼슘/칼모듈린 키나아제 키나아제 2 (CaMKK2)의 발견을 기초로 한 것이다. CaMKK2는 CaMKK2 유전자(18)에 의해 암호화된 효소이고, 1차적으로 2008년에 중추신경계 식욕조절의 주요 중재자인 것으로 제안되었으며, 이는 뇌 조절 포만감(brain controlling satiety)(19)의 중심에 존재하는 것으로 나타났기 때문이다. 보다 최근에는, CaMKK2는 매크로파아지 및 T 세포에서 중요한 조절 키나아제인 것으로 나타났으며(도 1 및 2), 결과적으로 신체 내에서 다중 조직 사이트에서 특정 암, 식용 조절 및 포만감, 및 다양한 면역-중재 및 염증성 질환을 포함하여 다양한 질환에서, 매크로파아지-중재 및 T 세포-중재 생물학에서 중요한 효과를 갖는다(1-5, 19-21). 여기 사용된 용어 "질환"은 다양한 질환, 질병, 증후, 상태, 및/또는 조짐(indication)을 포함한다.
CaMKK2는 세린/트레오닌 단백질 키나아제 패밀리, 및 Ca+2/칼모듈린-종속 단백질 키나아제 하부패밀리 (18)에 속한다. 게다가, CaMKK2는 세포질 칼모듈린 준위 및 염증성 자극에 의해 조절된다. 활성 T 세포에서, 칼슘은 T 세포 수용체의 활성화 또는 공통-자극 신호 및/또는 IL-2(6)에 의한 증폭과 무관하게 주요 2차 메신저 시스템이다. 다른 CaMKK2 분자를 자가 인산화하고 활성화하는 것외에, CaMKK2는 칼슘/칼모듈린-종속 키나아제 I 및 IV (CaMKI 및 CaMKIV) 및 아데노신 모노포스페이트- 활성화된 단백질 키나아제 (AMPK)를 인산화하고, 이는 도 1에 보여진 것처럼 수 많은 T 세포 기능(1, 2, 5, 6, 8, 10)을 조절한다. 특히, CaMKI는 T 세포 이동 및 접착(6)를 조절하고, CaMKIV는 T 세포 사이토카인 이펙터 반응(2, 6, 8, 10)에서 중요하다. 게다가, AMPK는 T 세포 생체에너지기법, 증식, 및 사이토카인 생산 (1, 5, 6)을 조절한다. 이들 키나아제 및 하류 신호전달 경로의 활성화는 T 세포 활성화 및 연속되는 염증을 촉진한다. CaMKK2는 또한 단백질 티로신 키나아제 beta (PTK2B) (3, 4)의 활성화를 증폭시키고, 이는 많은 염증유발성 및 섬유형성 이펙터 시스템을 중재한다. 중요하게, CaMKK2는 넉아웃이 염증을 줄이나 면역억제(3, 4)를 유도하지 않도록 하는 증폭 회로로서 기능한다.
CaMKK2는 도 2에 도시된 것처럼 매크로파아지 기능의 주요 조절자이다. CaMKK2에 의한 AMPK의 활성화는 비고전적 매크로파아지(3, 4, 12)에서 수리적 기능에 중요한 유전자 전사의 전체 호스트를 활성화시키고, CaMKK2의 특이적 억제는 AMPK 활성화(12)의 방지를 통해 비고전적 매크로파아지에 대한 단핵구의 전이를 방지한다. CaMKK2는 또한 PTK2B(단백질 티로신 키나아제 베타)의 활성화를 증폭시키며, 이는 많은 매크로파아지-유래 이펙터 사이토카인의 생산에 중요한, p38 MAPK 경로를 중재한다. 그러므로, CaMKK2 억제는 조직 상처 및 파괴에 함축된 염증유도성 사이토카인의 생산을 줄인다. 증가된 활성은 활성화 자극(3, 4)에 사전에 노출된 매크로파아지 내에서 관찰되었다. 게다가, CaMKK2의 넛아웃은 매크로파아지의 막 공정을 접착하고 연장하는 능력을 악화시키고, 그 결과 특정 톡신(e.g., LPS)(4)에 반응하여 매크로파아지 축적을 줄이고 사이토카인 방출을 약화시킨다.
이 모든 것들은 함께, 이들 발견들은 T 세포 매크로파아지-중재 질환에서 치료적 전략으로서 CaMKK2의 억제에 강력한 이유를 제공한다. 중요하게, CaMKK2의 억제는, 2가지 세포 타입이 중요한 역할을 하는 임의 안과 질환에서 T 세포 및 매크로파아지의 이중 표적화가 가능하게 한다. 이들은 다음을 포함한다: 1) 이에 한정되지는 않지만, 안구 이식편대숙주병, 안구 반흔성 유천포창, 아토피 결막염, 알레르기 눈 질환, 마이봄샘 기능장애, 눈물층 부족증(흔한 안구건조증), 각막 흉터, 및 결막성 흉터 및 섬유증을 포함하는 안구 표면 염증성 질환(OSIDs); 2) 이에 한정되지는 않지만 각막염, 공막염, 홍채염, 홍채모양체염 중간체 포도막염, 평면부염, 안구뒤쪽 포도막염, 맥락막염, 맥락망막염, 망막염, 또는 비감염성, 감염성, 또는 특발성 병인을 포함하는 포도막염 및 눈의 다른 염증성 질환; 및 3)이에 한정되지는 않지만, 건조한 연령 관련 황반 변성, 신생혈관 연령관련 황반 변성, 당뇨망막병증, 망막 혈관 질환 (e.g. 내경계막 제거술, 망막 동맥 폐쇄), 및 망막 변성 및 이상증을 포함하는 "눈의 뒤쪽" 망막 질환.
이들 질병 중에서, 안구 이식편대숙주병 (OGVHD)는 CaMKK2(SMICs)의 새로운 소분자 억제제의 치료적 잠재능을 특성화하는 모델 안구 염증성 질환(도 3)을 나타내며, 이는 질병의 임상 및 병리학적 발견이 잘-정의된 환자 집단(즉, 골수 이식을 받은 환자들)(13, 15, 22)에서 특성화될 수 있으며; T 세포 및 매크로파아지 모두 OGVHD(14, 23)에서 병리학적 역할을 하는 것으로 알려져 있으며; 질병은 안구 약물 투여(23)에 의해 치료될 수 있다. OGVHD는 알레르기성 조혈모 줄기 세포 이식(HSCT)(즉, 골수 이식)(13, 15)을 받은 환자의 60% 이상에서 발생한다. OGVHD에서 공여자 T 세포는 안구 조직 내 수혜자 이식 항원을 만나 T 세포 활성화 및 사이토카인 생산을 유도한다(도 3a)(14, 23). 이는 호중구(neutrophil) 및 B 세포의 2차적 기여와 함께, 공여자 매크로파아지, 추가적인 "자가 면역" T 세포의 모집 및 침윤을 촉발한다(14, 23)(도 3b). 이들 침윤하는 염증성 세포는 조직 손상의 "이펙터"로서 작용한다. 임상적으로, OGVHD는 눈물층 부족증, 마이봄샘 기능장애, 각막병증의 발견으로서 나타나고, 심각한 경우에 막성 흉터, 안검연 흉터, 및 각막 궤양으로 나타난다(도 3c) (13, 24, 25). OGVHD는 보다 흔한 OSIDs(즉 흔한 안구건조증, 마이봄샘 기능장애, 다른 것들), 및 다른 안구 염증성 질환(즉, 다양한 형태의 포도막염)(26-29)와 임상적 및 병리학적 겹침을 공유하기 때문에, OGVHD의 실험 임상전 모델은 CaMKK2를 표적으로 하고 이를 억제하는 약물의 치료적 잠재력을 연구하는 이상적인 시스템을 나타낸다.
소분자 STO-609는 CaMKK2(20)의 잘 특성화되고 특이적인 억제제이다. STO-609의 생물리학적 성질이 치료제로서의 이의 잠재력을 제한하지만, STO-609와 CaMKK2와의 분자 상호작용은 CaMKK2 활성을 억제할 수 있게하는 특이적 특성으로 중요한 인사이트를 제공한다. 평면의 단단한 STO-609 분자는 ATP 결합과 경쟁하고 이를 방해하면서 카나아제 도메인 내 좁은 포켓 안에 맞춰진다. STO-609 및 CaMKK2 사이의 결합 포켓 상호작용은 자연에서 대부분 소수성이다(즉, 특히 잔기 Ile 171, Vall79, Alal92, Val249, Phe267, Gly273, Pro274, 및 Leu3l9와 상호작용하는 CaMMK2 펩티드에서). 소수성 상호작용에 추가로, 2개 주요 수소 결합 상호작용은 활성 사이트 내에 STO-609 결합 수용을 돕는다 - (i) STO-609 아미드 산소 및 Val 270 사이 상호작용; 및 (ii) 결합된 STO-609의 카르복실산과 Asp330 의 사이 상호작용. 게다가, 물의 활성 사이트 분자는 STO-609의 카르복실산과 Glu236 사이에서 수소 결합 다리를 형성한다. 집합적으로 이들 분자 상호작용은 CaMKK2의 STO-609 억제능을 가능하게 한다. STO-609는 HeLa 세포에서 CaMKK2 <30nM 및 IC50 < 40nM에 대해 Ki를, 매크로파아지 및 T 세포(31)에서 약 100nM의 IC50를 갖는다. 게다가, STO-609는 CaMKI, CaMKII, CaMKIV, MLCK, PKC, PKA, p42, MAPK, VEGFR1, 및 PDGFR (30) 보다 CaMKK1에 대해 6배 더 적은 활성을 나타내고 CaMKK2에 대해 >80-배 선택성을 나타낸다.
그러나, 그러한 전망있는 활성에도 불구하고, STO-609는 도구 화합물로만 사용하게 하는 몇가지 제한점이 있다. 예를 들어, 약 100mg 이상의 규모로 STO-609를 합성하려고 일반적으로 사용되는 현재 합성 루트는 다음 보여지는 것처럼 혼합물의 40~50%와 같이 많은 이성질체 브로마이드 쌍을 100mg 이상 생산한다.
Figure pct00001
추가로, STO-609는 화합물과 함께 하는 인비보 및 인비트로 작업이 침전을 유도하도록 낮은 용해도(즉, DMSO 내 STO-609의 최대 농도는 초음파처리하여 10mM이다)를 나타낸다. STO-609는 또한 낮은 경구 생체이용성을 나타내며, 이는 치료제로서 이의 개발을 제한하고 실험실 연구에서 도구 화합물로서의 이의 사용을 제한한다. 게다가, 아릴 탄화수소 수용체(32)의 활성화를 포함하여 다양한 불명확한 효과는 의심을 받아왔다. STO-609의 생화학적 구조의 지식을 사용하여, 본 발명자들은 STO-609의 국소적 안구(즉, 안구주위 및 국부적) 사용을 위하여 제형을 디자인할 수 있었다. 추가적으로, CaMKK2 결합 포켓에서 STO-609 배향 지식을 사용하여, 본 발명자들은 STO-609의 어느 영역이 수성 용해성을 증진시킬 수 있는 분자적 골격에 구조적 변형 및 기들을 추가하기에 가장 적당한지를 결정할 수 있었다.
Figure pct00002
본 발명은 화학식 (I) 및 (II)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 및/또는 유도체를 더 포함한다. 여기 사용된 용어 "약제학적으로 허용가능한" 은 일반적으로 동물, 예를 들어(이에 한정되지는 않지만), 인간에 사용되는 것으로 인식되는 것을 의미하며, 생물학적으로 또는 그렇지 않다고 대상에서 바람직하지 않다는 것은 아니다.
화학식 (I)의 화합물의 벤즈이미다졸 우레아 스캐폴드는 이하 보여진 것과 같이 STO-609와 유사한, 평편하고 단단한 아로마틱 구조를 유지한다.
Figure pct00003
STO-609 (I)
그러므로, CaMKK2의 얇고 좁은 결합 포켓은 개시된 시리즈의 억제제에 접근가능하게 남아있다. 게다가, 화학식(I)의 화합물을 갖는 AutoDock®(Scripps Research Institute, La Jolla, California)를 사용한 CaMKK2 활성 사이트 도킹 시뮬레이션은, Val270, Asp330, 및 Glu236과 수소 결합 상호작용 안정화가 우레아 산소 및 카르복실레이트기 각각과 함께 유지된다는 것을 확인하였다. 구조적으로, 화학식(I)의 벤즈이미다졸 우레아 스캐폴드 화합물로의 전이와 함께하는 주된 개선점은 아로마틱 링의 손실이다. 그 결과로서, clogD는 필수 스캐폴드의 용해도를 증가시키면서, (clogD(STO-609)7.4 = -0.75, clogD(I)7.4 = -1.75) 규모로 감소한다. 그러나, 코어 구조의 변형으로 상당한 다양성이 가능하게 되어 국소 투여를 위한 높은 수용해성을 갖는 새로운 유사체 화합물 제조가 가능하게 된다. Phe267 및 Vall79와의 상호작용을 통해 억제제의 활성 사이트 안정화가 사라지고, 백본 잔기 E269의 C=O의 우레아 NH 수소 결합을 통해 상기 안정화 손실에 대한 보상이 실현될 수 있다.
게다가, STO-609의 합성과 다르게, 화학식(I) 및 (II)의 조성물(및 여기 개시된 모든 현재 및 제시된 벤즈이미다졸 우레아 시리지 화합물들)은 단일 화합물을 생산한다. 결과로서, 비결합 아이소머의 생산은, 큰규모 합성에서 조차 예상된 합성 생산물의 효율 및 충실도 모두를 증가시키면서, 일어나지는 않는다.
본 발명은 화학식(I) 및 (II)의 합성적으로 접근가능한 구조적 유사체를 더 포함하며, 예를 들어 (그러나 이에 한정되지는 않음) 하부 시리즈 화학식 (III) 내지 (V)의 화합물, 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 또는 유도체를 더 포함하며, 여기서 R은 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴기를 포함한다.
Figure pct00004
용어 "알킬," 그 자체 또는 다른 치환이기의 일부로서, 알킬은, 다르게 언급되지 않는 한, 직쇄(즉, 비분지된) 또는 분지된 사슬, 또는 이들의 조합을 의미하며, 이는 완전히 포화된, 모노- 또는 폴리불포화된(즉, 알케닐)일 수 있고, 정해진 탄소 원자의 수를 갖는(즉, C1-C10은 1 내지 10 탄소를 의미한다), 디 및 다가 라디칼(e.g., 알킬렌)을 포함할 수 있다. 포화된 탄화수소 라디칼의 예는, 이에 한정되지는 않지만, 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, 이소부틸, sec -부틸, (시클로헥실)메틸, 예를 들어, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, 및 이와 유사한 것들의 호모로그 및 아이소머를 포함한다. 불포화된 알킬기는 하나 이상의 이중 결합 또는 삼중 결합을 갖는 것이다. 불포화된 알킬기(즉, 알케닐기)의 예는, 이에 한정되지는 않지만, 비닐, 2-프로페닐, 2-이소펜테닐, 2-(부타디에닐), 2,4-펜타디에닐, 3-(l,4-펜타디에닐), 에티닐, 1- 및 3-프로피닐, 3-부티닐, 및 보다 높은 호모로그 및 아이소머를 포함한다. 알킬기는 치환 또는 비치환; 예를 들어 하나 이상의 할로겐을 갖는, e.g., 트리플루오로메틸일 수 있다.
용어 "헤테로알킬"은, 그 자체 또는 다른 용어와 조합하여, 달리 언급되지 않는 한, 안정한 직쇄 또는 분지쇄, 또는 이들의 조합을 의미하며, 적어도 하나의 탄소 원자 및 적어도 하나의 헤테로 원자로 이루어진다. "헤테로 원자"는 산소 (O), 질소 (N), 황 (S), 인 (P), 셀레늄 (Se) 및 실리콘 (Si)을 포함하며, 여기서 N 및 S는 선택적으로 산화될 수 있고, N은 선택적으로 4차화될 수 있다. 헤테로원자는 내부 위치를 포함하여 임의의 화학적으로 허용가능한 위치에 놓여질 수 있으며, 알킬기가 분자의 나머지(중심부 말단), 또는 먼거리 말단(e.g., 헤테로알킬렌기 경우)에 부착되는 위치에 놓여질 수 있다. 예들은, 이에 한정되지는 않지만 다음을 포함한다: ― C(0)R',― C(0)NR',― NR'R",― 또는 ',― SR', 및/또는― S02R', 및― CN. 2개 이하의 헤테로원자는 연속적, 예를 들어― CH2― NH― OCH3일 수 있다.
용어 "시클로알킬" 및 "헤테로시클로알킬"는, 이들 자체 또는 다른 용어들과 조합하여, 다르게 언급되지 않는 한, 각각 "알킬" 및 "헤테로알킬"의 시클릭 버전이다. 시클로알킬의 예는, 이에 한정되지는 않지만, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 및 시클로헵틸를 포함한다. 헤테로시클로알킬의 예는 이에 한정되지는 않지만, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 테트라히드로푸라닐, 및 테트라히드로티에닐을 포함한다. 상기 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬 기는 치환 또는 비치환될 수 있다.
용어"아릴"은 그 자체 또는 다른 용어와 조합하여, 다르게 언급하지 않는 한, 폴리불포화된, 아로마틱, 탄화수소 기이고, 이는 함께 접합되거나 또는 공유적으로 연결된 단일 링 또는 다중 링(바람직하게는 1 내지 3 링)일 수 있다. 접합 링 아릴은 함께 접합된 다중링을 의미하며, 여기서 적어도 하나의 접합 링은 아릴링이다.
용어 "헤테로아릴"은, 그 자체 또는 다른 용어와 조합하여, 다르게 언급하지 않는 한, 1 내지 4 헤테로 원자(상기 정의된 것)를 포함하는 아릴기(상기 정의된 것)을 의미한다. 그러므로, 용어 "헤테로아릴"은 함께 접합된 다중 링(e.g., 5 및/또는 6-원자 링)이며, 적어도 하나의 접합 링은 헤테로아로마틱 링이다. 헤테로아릴 기는 탄소 또는 헤테로원자를 통해 분자의 나머지에 부착될 수 있다. 아릴 및 헤테로아릴기의 비제한적 실시예는 페닐, 나프틸, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 피라지닐, 옥사졸릴, 티아졸릴, 푸릴, 티에닐, 피리딜, 피리미딜, 퓨리닐, 벤조티아졸릴, 벤즈이미다졸릴, 인돌릴, 이소퀴놀릴, 퀴녹살리닐, 5-퀴녹살리닐, 및 퀴놀릴을 포함한다. 아릴 또는 헤테로아릴 기는 치환 또는 비치환, 예를 들어 할로겐으로 치환될 수 있다. 아릴 또는 헤테로아릴 기는 모노-, 디 또는 트리-치환될 수 있다.
게다가, 본 발명은 벤즈이미다졸 시클릭 (티오)우레아 하부시리즈 화합물, 예를 들어 (이에 한정되지는 않지만), 화학식 (VI) 및 (VII)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 또는 유도체를 포함하며, X는 산소 (O) 또는 황(S)이고, n은 1 또는 2이다.
Figure pct00005
본 발명은, 또한 벤즈이미다졸 티오(우레아) 에스테르 프로드러그 서브시리즈 화합물을 포함한다. 여기 사용된 용어"에스테르"는 히드록실 화합물, 예를 들어 알코올과 옥소산(산소를 포함하는 유기산)의 반응으로 유래한 임의 화합물을 의미한다. 에스테르는 통상, 적어도 하나의 히드록실(-OH)기가 -O-알킬(알콕시)기에 의해 교체된 유기산으로부터 유래한다. 가장 공통적으로, 에스테르는 카르복실산을 알코올로 응축하여 형성된다. 여기 사용된 용어 "프로드러그"는 약물학적으로 활성인 모 화합물로 전환되지 않는 한 약물학적으로 큰 활성을 나타내지 않는 화합물을 의미한다. 전형적으로, 약제학적으로 유용한 프로드러그는 개인에게 투여시 인비보에서 대응하는 약물학적으로 활성인 모 화합물로 전환되는 화합물이다. 그러나, 적당한 프로드러그는 또한 외부적으로 제공된 전환 활성, 예를 들어(이에 한정되지는 않지만) 전환 효소의 존재 내에서 인비트로에서 약물학적으로 활성 모 약물로 전환될 수 있다.
예를 들어 적당한 벤즈이미다졸 티오(우레아) 에스테르 프로드러그 화합물은 화학식(VIII)의 화합물, 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 또는 유도체를 포함할 수 있으며, X는 O 또는 S이고, R은 에스테르 프로드러그이다.
Figure pct00006
본 발명은 벤즈이미다졸 티오(우레아) 카르복사미드 서브시리즈 화합물을 더 포함한다. 여기 사용된, 용어 "카르복사미드"는 화학식 A에서 보여진 구조에서 결합된 탄소, 질소 및 산소 원자를 포함하는 모이어티를 의미한다. 구체적으로 상기 탄소원자는 카르복사미드 모이어티가 결합된 라디칼 내 탄소 원자에 결합된다. 게다가, 질소원자는 카보닐 탄소에 결합되고 또한 2개의 다른 원자에 결합되며, 이들 중 적어도 하나는 수소 원자 또는 카르복사미드 모이어티가 결합된 다른 라디칼의 탄소 원자로부터 선택된다.
Figure pct00007
예를 들어, 적당한 벤즈이미다졸 티오(우레아) 카르복사미드 화합물은, (이에 한정되지는 않지만) 화학식 (IX) 내지 (XI)의 화합물, 및 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 또는 유도체를 포함할 수 있으며, 여기서 X는 O 또는 S이고; R는 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기이고; 및 R1 및 R2 는 동일하거나 다른 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기이다.
Figure pct00008
일부 실시예에서, 본 발명은 벤즈이미다졸 앨리패틱 및 앨리시클릭 서브시리즈 화합물을 포함한다. 여기 사용된 용어 "앨리패틱"은 직쇄 또는 분지쇄 구조, 또는 포화된 탄소 결합 및 선택적으로 하나 이상의 비컨쥬게이트된 불포화된 결합, 예를 들어 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 폐쇄 링 구조에 의해 특징되는 유기 화합물을 의미한다. 여기 사용된 용어"앨리시클릭"은 포화된 탄소 결합 및 선택적으로 하나 이상의 비컨쥬게이트된 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 폐쇄된 링 구조를 포함하는 유기 화합물을 의미한다.
예를 들어, 적당한 벤즈이미다졸 앨리패틱 및 앨리클릭 서브시리즈 화합물은 화학식 (XII) 내지 (XV)의 화합물, 및 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 또는 유도체를 포함할 수 있으며, 여기서 n은 1, 2, 또는 3이고; R은 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기이고; 및 R1 및 R2 은 같거나 다른 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기이다.
Figure pct00009
(XII) (XIII) (XIV) (XV)
일부 실시예에서, 본 발명은 아릴 및 헤테로아릴 벤즈이미다졸 우레아 화합물, 예를 들어 화학식(XVI)의 화합물, 이들의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 또는 유도체을 포함한다.
Figure pct00010
일부 실시예에서, 본 발명은 sp3 혼성화된 탄소 원자를 포함하는 벤즈이미다졸 (티오)우레아 서브시리즈 화합물를 포함한다. sp3 혼성화된 탄소 원자는 탄소 원자 주위 테트라고널 형태로 놓여진 4 결합 대 4 치환을 형성하는 탄소원자를 의미한다. sp3 혼성화된 탄소 원자를 포함하는 적당한 벤즈이미다졸 (티오)우레아 서브시리즈 화합물은, (이에 한정되지는 않지만) 화학식 (XVII), 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 또는 유도체를 포함하며, 여기서 X는 O 또는 S이다.
Figure pct00011
본 발명은 화학식(I) 및 (II)의 합성적으로 접근가능한 구조적 유사체, 예를 들어(이에 한정되지는 않지만), 서브시리즈 화학식(XVIII) 및 (XIX)의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 프로드러그, 또는 유도체를 더 포함하며, 여기서 R1은 H 또는 COOCH3을 포함하고, R2은 CH2CN, CH2COOC2H5, 또는 CH2COPh이다.
Figure pct00012
일부 실시예에서, 상기 화합물은 다음 구조를 갖는다:
Figure pct00013
상기 화합물 및 표 1의 화합물 1-9은 이하 반응식을 사용하여 합성된다:
Figure pct00014
다른 실시예에서, 상기 화합물은 다음 구조를 갖는다:
Figure pct00015
중성 가용화기를 갖는 화합물은 다음 반응식에서 보여진 것처럼 합성될 수 있다:
Figure pct00016
대안적으로 상기 화합물은 다음 구조를 갖는 생리적 조건하에서 이온화되고 전하를 띠게 된다:
Figure pct00017
이온화할 기를 갖는 화합물을 제조하는 합성 반응식은 다음과 같이 제조될 수 있다:
Figure pct00018
일부 실시예에서, 본 발명은, 여기 설명된 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함, 이루어지거나, 필수적으로 이루어진 약제학적 조성물을 제공한다. 적당한 담체는 (이에 한정되지는 않지만) 물, 수용액, 폴리머(예를 들어, 히드록시프로필 메틸셀룰로오스), 페트로라텀, 미네랄오일, 피마자유, 카르복시메틸 셀룰로오스, 유기 액상 지질, 폴리비닐 알콜, 히드록시프로필 셀룰로오스, 히알루론산, 글리세린, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리소르베이트 80, 포비돈, 및/또는 덱스트란을 포함할 수 있다. 본 조성물은 담체 내에서 본 조성물의 총 중량을 기초로 약 0.5-20 중량%, 예를 들어 약 0.5-10%, 0.5-9%, 0.5-8%, 0.5-7%, 0.5-6%, 0.5-5%, 0.5-4%, 0.5-3%, 0.5-2%, 또는 0.5-1%의 함량으로 존재할 수 있다.
본 조성물은 선택적으로 하나 이상의 완충제, 등장화제, 방부제, 및/또는 킬레이트제를 포함할 수 있다. 적당한 완충제는, (이에 한정되지는 않지만) 아세테이트, 보레이트, 카보네이트, 시트레이트, 및/또는 포스페이트 완충제를 포함한다. 본 조성물을 원하는 등장 범위로 조절하는데 사용될 수 있는 적당한 등장화제는, (이에 한정되지는 않지만) 글리세린, 만니톨, 소르비톨, 소듐 클로라이드, 및/또는 다른 전해질을 포함할 수 있다. 박테리아 오염을 방지하게 위하여 사용될 수 있는 적당한 방부제는, (이에 한정되지는 않지만) 폴리헥사메틸렌비구아니딘 (PHMB), 벤즈알코늄 클로라이드(BAK), 안정화된 옥시클로로 복합체(Purite®), 페닐머큐릭 아세테이트, 클로로부탄올, 소르브산, 클로로헥시딘, 벤질 알콜, 파라벤, 및/또는 티머로살을 포함한다. 방부제 효과를 증진시키는데 사용될 수 있는 적당한 킬레이트제는, (이에 한정되지는 않지만) 에데테이트 염, 예를 들어 에데테이트 디소듐, 에데테이트 칼슘 디소듐, 에데테이트 트리소듐, 및/또는 에데테이트 디포타슘을 포함한다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물의 모든 적당한 동위원소 변화를 포함한다. 본 발명의 화합물의 동위원소 변화는 적어도 하나의 원자가 동일한 원자 수이나 자연에서 발견된 통상 또는 지배적인 원자량과 다른 원자량을 갖는 원자에 의해 교체된 것으로 정의된다. 본 발명의 화합물 내로 통합될 수 있는 동위원소의 예는 각각 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 불소, 염소, 브롬 및 요오드, 예를 들어 ¾ (중수소), 3H (삼중수소), 13C, 14C, 15N, 170, 180, 32P, 33P, 33S, 34S, 35S, 36S, 18F, 36Cl, 82Br, 123I, 124I, 129I 및 131I의 동위원소를 포함한다. 본 발명의 화합물의 특정 동위원소 변화는, 예를 들어 하나 이상의 방사선 동위원소, 예를 들어 3H 또는 14C가 통합되고, 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에서 유용하다. 삼중수소 및 탄소-14, 즉 14C, 동위원소는 특히 제조의 용이성 및 검출가능성 때문에 바람직하다. 동위원소, 예를 들어 UC, 18F, 150 및 13N를 방출하는 양전자(positron)으로 치환하면 Positron Emission Topography (PET) 연구에서 유용할 수 있다.
게다가, 동위원소, 예를 들어 중수소의 치환은 보다 우수한 대사적 안정성, 예를 들어 인비보 반감기의 증가 또는 약물 요구량의 감소의 결과 치료적으로 유리한 장점을 제공하므로 일부 환경에서 바람직할 수 있다. 본 발명의 화합물의 동위원소 변화는 일반적으로 당해 기술 분야의 통상의 기술자들에 의해 알려진 종래 절차에 의해, 적당한 시약의 적절한 동위원소 변화를 이용하여 이후 실시예에 설명된 예를 들어 설명된 방법 또는 이후 실시예에 설명된 제조법에 의해 제조될 수 있다. 또 다른 실시예에서, 동위원소-표지된 화합물은 중수소 (¾), 삼중수소 (3H) 또는 14C 동위원소를 포함한다. 본 발명의 동위원소-표지된 화합물은 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 잘 알려진 일반적인 방법으로 제조될 수 있다.
그러한 동위원소-표지된 화합물은, 비-표지된 시약을 용이하게 이용가능한 동위원소 표지된 시약을 치환하는 것으로 여기 개시된 실시예 및 반응식에 개시된 절차를 수행하는 것에 의해 제조될 수 있다. 일부 예에서, 화합물은 동위원소-표지 시약으로 처리하여 정상 원자를 이의 동위원소로 교환할 수 있으며, 예를 들어, 수소를 중수소로 하는 것은 듀터산(deuteric acid), 예를 들어 D2SO4/D2O의 작용에 의해 교환될 수 있다. 대안적으로, 중수소는, 여러 방법들을 사용하여, 예를 들어 환원, 적당한 중수소화제, 예를 들어 중수소화물, D2 및 D2O을 사용하여, 예를 들어 LiAID4 또는 NaBD3, 촉매적 수소화 또는 산성 또는 염기성 동위원소 교환을 하여, 화합물 내로 또한 통합될 수 있다. 상기 설명된 것 외에, PCT 공개공보, WO2014/169280; WO2015/058067; U.S. Pat. Nos. 8,354,557; 8,704,001 및 US 특허 출원 공개 제2010/0331540; 2014/0081019; 2014/0341994; 2015/0299166에 공개되어 있고, 상기 방법들은 참조로서 여기 통합되어 있다.
일부 실시예에서, 본 조성물의 pH는 약 4 내지 8, 예를 들어 약 4.5-7.5, 4.5-6.5, 또는 4.5-5.5일 수 있다.
일부 실시예에서, 본 발명은 세포 내에서 CaMKK2 활성을 조절하는 방법에 관한 것이다. 본 방법은, CaMKK2 활성이 조절되도록 여기 제공된 화합물을 효과적인 함량으로 세포에 투여하는 단계를 포함하거나, 이루어지거나, 또는 필수적으로 이루어진다. 여기 사용된 용어 "투여하는" 는 화합물 또는 조성물, 예를 들어 개시된 화합물의 단일 복용량 또는 다중 복용량을 의미한다. 투여하는데 사용되는 방법은 전달, 특히 눈에 국소적으로 전달(delivery)하는 다중 경로를 포함한다. 수 많은 질병 조짐에 대한 추가적인 전달 경로는, 이에 한정되지는 않지만 결막밑출혈 전달, sub-Tenon's 전달, 전안방내(intracameral) 전달, 유리체내(intravitreal) 전달, 맥락막위공간(suprachoroidal) 전달, 눈물점(punctal) 전달, 숨뇌뒤의(retrobulbar) 전달, 정맥 전달, 피하 전달, 근육내 전달, 경구 전달, 흡입 전달, 및 척추강내 전달을 포함한다.
여기 제공된 약제학적 조성물은 국소적으로 피부, 오리피스 또는 점막에 투여될 수 있다. 여기 사용된 국소 투여는 (내)피부, 결막, 각막내, 안구내, 안과, 및 피부투과 투여를 포함한다.
여기 제공된 약제학적 조성물은 국소적 또는 전체적 효과를 위해 국부적 투여에 적당한 임의 투여 형태로 제형화될 수 있으며, 에멀젼, 용액, 현탁액, 크림, 겔, 히드로겔, 연고, 더스팅 파우더, 드레싱, 엘릭시르, 로션, 현탁액, 팅크, 페이스트, 폼, 필름, 에어로졸, 관주제, 스프레이, 좌약, 붕대, 피부 패치를 포함한다.여기 제공된 약제학적 조성물의 국소적 제형은 또한 리포좀, 마이셀, 마이크로스페어, 나노시스템, 및 이들의 혼합물을 또한 포함할 수 있다.
여기 제공된 국소 제형에 사용되기에 적당한 약제학적으로 허용가능한 담체 및 부형제는, 이에 한정되지는 않지만, 수성 비이클, 물-혼화성 비이클, 비-수성 비이클, 미생물 성장에 대한 항균제 또는 방부제, 안정화제, 용해성 증가제, 등장화제, 완충화제, 항산화제, 국소마취제, 현탁화제 및 분산화제, 습윤제 또는 에멀화제, 착화제, 금속이온봉쇄제 또는 킬레이트제, 경피흡수 촉진제, 동결보호제, 동결건조보호제(lyoprotectant), 증점제, 및 불활성 기체를 포함한다. 여기 제공된 약제학적 조성물은 연고, 크림, 및 겔의 형태로 제공될 수 있다. 적당한 연고 비이클은 라드(lard), 또는 벤조화된 라드, 올리브유, 목화씨유 및 다른 오일, 백색 와셀린을 포함하는 유성 또는 탄화수소 비이클; 유화성 또는 흡수 비이클, 예를 들면 소수성 페트로라텀, 히드록시스테아린 설페이트, 및 무수 나놀린; 물-제거가능한 비이클, 예를 들어 소수성 연고; 분자량이 변화하는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는, 수-용해성 연고 비이클; 에멀젼 비이클, 유중수(W/O) 에멀젼 또는 수중유(O/W) 에멀젼이고, 여기에는 세틸 알콜, 글리세릴 모노스테아레이트, 라놀린, 및 스테아르산이 포함된다(참조, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, supra). 이들 비이클은 에몰리언트이나 일반적으로 항산화제 및 방부제 추가를 요구한다.
적당한 크림 베이스는 수중유 또는 유중수일 수 있다. 크림 비이클은 물-세척가능할 수 있으며, 오일상, 에멀젼화제, 및 수성상을 포함한다. 오일 상은 또한 "내부" 상이라 불리며, 이는 일반적으로 페트로라텀 및 지방알콜, 예를 들어, 세틸 또는 스테아릴 알코올로 구성된다. 수성상은, 통상, 필수적이지는 않지만, 부피로서 오일상을 초과하지 않으며, 일반적으로 보습제를 포함한다. 크림 제형 내 에멀화제는 비이온, 음이온, 양이온 또는 양쪽성 계면활성제일 수 있다.
겔은 반고체이며, 현탁액-타입 시스템이다. 단일-상 겔은 액체 담체를 통해 실질적으로 균일하게 분포된 유기 맥크로분자를 포함한다. 적당한 겔화제는 가교된 아크릴산 폴리머, 예를들어 카르보머, 카르복시폴리알킬렌, CARBOPOL®; 소수성 폴리머, 예를 들어 폴리에틸렌 산화물s, 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 코폴리머, 및 폴리비닐알콜; 셀룰로오스 폴리머s, 예를 들어 히드록시프로필 셀룰로오스, 히드록시에틸 셀룰로오스, 히드록시프로필 메틸셀룰로오스, 히드록시프로필 메틸셀룰로오스 프탈레이트, 및 메틸셀룰로오스; 검, 예를 들어 트래거캔스 및 크산탄 검; 소듐 알지네이트; 및 젤라틴을 포함한다. 균일한 겔을 제조하기 위하여, 분산제, 예를 들어 알콜 또는 글리세린이 첨가되거나, 또는 겔화제가 분쇄, 기계적 혼합, 및/또는 교반으로 분산될 수 있다,
일부 실시예에서, 본 발명은 표적 세포 내에서 CaMKK2 활성을 억제하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 CaMKK2 활성이 억제되도록 여기 설명된 화합물을 효과적인 함량으로 세포에 투여하는 단계를 포함, 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 대상에서 안구 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 안구 질환이 치료되도록 효과적인 함량의 화합물을 대상에 투여하는 단계를 포함, 이루어지거나 또는 필수적으로 이루어지는 방법이다. 전형적인 안구질환은, 이에 한정되지는 않지만 안구앞 부분 또는 눈의 앞 환 (i.e., 각막 및/또는 결막 질환, 예를 들어 눈물층 부족증, 마이봄샘 기능장애, 또는 OGVHD)을 포함한다. 질환은, 포도막염 및 눈의 다른 염증성 질환(i.e., 비감염성, 감염성, 또는 특발성 병인의 홍채염, 홍채모양체염 중간체 포도막염, 안구뒤쪽 포도막염, 또는 범포도막염)을 또한 포함할 수 있다. 질환은 또한, 안구 뒤부분 또는 눈의 뒤쪽 질환(즉, 망막 및/또는 맥락막 질환, 예를 들어 노화 관련 노인황반변성 (AMD), 당뇨망막병증, 또는 망막 변성/ 이상증)을 포함할 수 있다. 일부 실시예에서, 안구 조짐은 T 세포 및 /또는 매크로파아지-중재 염증에 의해 특징된 하나 이상의 안구 질환을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 질환은 증가된 CaMKK2 활성에 의해 특징된다.
일부 실시예에서, 조성물의 "효과적인 함량"(또는 "치료학적으로 효과적인 함량")은 유리하거나 또는 원하는 생물학적 및/또는 임상 결과 효과를 내기에 충분한 함량을 포함한다.
여기 사용된 용어 "대상"은 동물, 예를 들어 포유류를 포함한다. 적당한 대상은, (이에 한정되지는 않지만) 영장류, 소, 양, 염소, 개, 고양이, 말, 토끼, 래트, 마우스 등을 포함할 수 있다. 일부 실시예에서, 상기 대상은 인간이다.
여기 사용된 용어 "치료된" 또는 "치료"는 질병, 질병들, 또는 질병 또는 질병들의 적어도 하나의 임상적 증후를 잡거나 또는 개선하는 것; 질병, 질병들, 또는 질병 또는 질병들의 적어도 하나의 임상적 증후를 얻을 위험을 줄이는 것; 질병, 질병들, 또는 질병 또는 질병들의 적어도 하나의 임상적 증후의 발달을 줄이는 것; 및/또는 질병, 질병들, 또는 질병 또는 질병들의 적어도 하나의 임상적 증후의 발달 위험을 줄이는 것을 의미한다. "치료된" 또는 "치료"는 또한 질병 또는 질병들을 물리적(e.g., 인식할 수 있는 증상), 생리적으로(e.g., 물리적 파라미터의 안정화), 또는 둘 다로 억제하거나, 또는 대상이 인식할 수 없는 적어도 하나의 물리적 파라미터를 억제하는 것을 의미한다. 게다가 "치료된" 또는 "치료"는 대상이 질병 또는 질병들의 증상을 아직 경험하거나 또는 나타내지 않을 지라도 질병 또는 질병들에 노출 또는 이러한 질병을 갖게될 성향을 갖는 대상에게 질병 또는 질병 또는 적어도 이들의 증상의 시작을 지연시키는 것을 의미한다. 일부 실시예에서, 본 발명은 대상에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 암이 치료되도록 대상에게 여기 설명된 화합물을 효과적인 함량으로 투여하는 암 치료의 방법에 관한 것이다. 일부 실시예에서, 상기 암은 암 세포 내 또는 침윤 또는 보조 세포(i.e. 맥관 세포, 면역 세포 등) 내 또는 암세포와 관련된 증가된 CaMKK2 활성으로 특징된다.
일부 실시예에서, 본 발명은 식욕 조절 질병을 갖는 대상을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 식욕 조절 질병이 치료되도록 대상에게 여기 설명된 화합물을 효과적인 함량으로 투여하는 단계를 포함, 이루어지거나 필수적으로 이루어진다.
본 발명의 또 다른 양상은 여기 개시되고 설명된 모든 것을 제공한다.
다음 실시예들은 개시된 것들을 더 설명하고 본 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다. 특히, 본 개시 내용은 여기 설명된 특정 실시예로 제한되는 것은 아니며, 변화될 수 있다. 여기 사용된 용어는 특정 실시예를 설명하고자 하는 목적만이며, 제한하고자 하는 것은 아니며 본 개시의 범위는 첨부된 청구범위에 의해서만 제한될 것으로 이해된다.
6. 실시예
다음 실시예는 본 개시된 문제의 대표적인 실시예를 구현하기 위하여 통상의 기술자에게 지침서를 제공하기 위하여 포함되는 것이다. 본 개시 내용과 당해 기술 분야의 통상의 준위에서, 통상의 기술자는 다음 실시예들이 단지 예시적인 것이며 수 많은 변화와 변형이 가능하며, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않고서도 변경이 가능하다는 것을 평가할 수 있다.
실시예 1
새로운 소분자 억제제 화합물의 개발
STO-609/CaMKK2의 결정 구조의 컴퓨터 모델화를 사용하여 컴퓨터 화학을 기반으로 CaMMK2(SMICs)의 소분자 억제제의 라이브러리를 개발하였다. 특히, STO-609/CaMKK2의 결정 구조가 얻어졌으며, 수용체 결합을 방해하는 것으로 예측되는 것이 아니라 세포 관통에 해로운 효과(총 극성 표면적 < 140이 바람직한 것으로 판단됨)없이도 개선된 용해도(계산된 LogP ~3)를 갖도록 도구 화합물의 일부는 변경되었다. 다섯개(5) 초기 화합물은 MonomerChem (RTP, North Carolina)에 의해 합성되었고, 여기 데이터 생성을 위해 사용되었다.
이하 표 1은 합성된 초기 5 화합물을 설명하며, 각각은 새로운 하부류를 대표한다.
화합물 1-10
화합물 ID# 구조 cLogP TPSA*
STO-609
Figure pct00019
 3.74 71.7
1
(EY301)
(EY1001.A001.B001)
Figure pct00020
 2.74 87.5
2
(EY302)
(EY2001.A001.B001)
Figure pct00021
 3.08 70.5
3
(EY303)
(EY1002.A001.B001)
Figure pct00022
 2.81 76.6
4
(EY304)
(EY1003.A001.B001)
Figure pct00023
 3.18 76.6
5
(EY305)
(EY1004.A001.B001)
Figure pct00024
 3.93 76.6
6
(EY0001)
(EY1005.A001.B001)
Figure pct00025
 2.79 85.8
7
(EY0007)
(EY1006.A001.B001)
Figure pct00026
 3.10 76.6
8
(EY0002)
(EY1007.A001.B001)
Figure pct00027
 3.60 76.6
9
(EY0006)
(EY1008.A001.B001)
Figure pct00028
 2.73 83.1
10
(EY0009)
(EY1001.A002.B001)
Figure pct00029
 2.36 105.9
실시예 2
CaMKK2에 대한 생화학적 활성
화합물 EY301-EY305의 예비적 스크리닝을 HEK293 세포(모두 10μM로 시험함)에서 인비트로에서 수행하였다. 간단히, HEK293 세포를 배양하여, RPMI-40 완전한 배지 및 1% 소태아혈청 (FBS)에서 하부 융합하시키고, 5% CO2에서 37℃에서 배양하였다. 배양된 세포는 이후 실험 개시 전에 밤 사이 무혈청 배지로 전환되었다. 세포는 이후 5개 SMIC(EY301, EY302, EY303, EY304, 및 EY305, 모두 10μM 농도) 중 하나, STO-609 (10 μM), 또는 비이클 대조군으로 2 시간 동안 37°C에서 5% C02내에서 배양시켜 사전 처리되었다. 세포는 15분 동안 칼슘 이오노포어 이오노마이신 (0.5 ㎍/mL)으로 자극하고, 이후, 세포를 세척, 수확 및 용해시켜 표준 방법을 사용하여 총 단백질을 회수하였다. 표준 단백질 겔 전기영동 후, 웨스턴 블랏을 각 조건에 대해 포스포-CaMKK2 (도 4a) 또는 포스포-AMPK (도 4b)을 수행하였다. 연구는 3번 수행하였다. 농도 측정 분석은 EY301, EY303, EY304, 및 EY305(STO-609에 비하여 보다 효과적인 것으로 나타난 EY301 및 EY304와 함께)에 대해 CaMKK2 자가 인산화의 강력한 억제 및 EY303, EY304, 및 EY305에 대해 포스포-AMPK(도 4d)의 부분적 억제를 나타내었고, 이들 모두는 STO-609에 비견할만하였다.
예언적 실시예 3
화합물 1-5의 기능적 스크리닝
한 방향 혼합된 림프구 반응(MLR) (도 5)을 사용하여 EY301-EY305의 기능적 억제 능력을 스크리닝할 것이다. C57BL/6 마우스의 비장 세포(spleen cell)는 반응 세포로서 사용될 것이며, BALB/c 마우스의 비장 세포(Co60, 3000 rads로 방사선 조사됨)는 자극자 세포(simulator cell)로서 사용될 것이다. 2가지 타입의 세포는 이후 동등한 부피 및 농도로 혼합되고 다음의 존재하에서 24시간 동안 낮은 혈청 조건에서 37℃에서 5%CO2에서 배양되었다: 1) 비이클 대조군; 2-6) 5개 SMICs(EY301-EY305) 중 각각 한 개, 또는 7) STO-609(각 SMIC 또는 STO-609에 대해 농도 10 μM, 3 μM, 1μM, 0.3μM, 및 0.1μM 농도 변화). 각 농도/조건은 3번 수행될 것이다. 상층액은 이후 회수되고 농축되어, 면역 세포(e.g., TNF-a, IL-2, TGF-b, 및 IFN-g)를 침투하는 것으로 파괴적 손상을 중재하는 것으로 여겨지는 몇가지 주요 T 세포- 및 매크로파아지-유래 사이토카인 및 이펙터 분자 각각에 대하여 효소-결합 면역 흡착제 분석(ELISA)에 의한 분석을 하였다. EY301-EY305의 기능적 억제 활성은 이후 관심있는 각 사이토카인에 대한 각 화합물의 IC50을 계산하는 것으로 결정될 것이다. 화합물들은 이후 면역 세포 이펙터 기능의 상대적인 효능 및 능력을 평가하기 위하여 관심있는 각 사이토카인에 대하여 IC50 농도에 따라서 순위를 매길 것이다.
실시예 4
QGVHD의 마우스 모델
안구 이식편대숙주병(OGVHD), T 세포 및 매크로파아지가 주요 병원성 역할을 하는 것으로 알려진 질병으로서, 모델 안구 염증성 질환을 대표하며, 이는 A) 다른 보다 일반적인 안구 염증성 질환(즉, 눈물층 부족증, 마이봄샘 기능장애, 포도막염 질환 등)과 겹쳐지는 병리학적 및 임상적 특징을 공유하는 것으로 알려져 있고; 및 B) 이것이 혈액암, 자가면역 질환 및 다른 질환에 대해 동종골수이식(allogeneic bone marrow transplant)을 한 개인에게서 발생하기 때문에 위험한 환경 집단이 잘 정의되어 있기 때문이다. 그러한 것처럼, OGVHD의 실험 모델은, 안과 질환에 대해 CaMKK2를 표적화하고 억제하는 치료적 능력을 연구하는 매력적인 시스템을 대표한다. C57BL/6 마우스의 비장 T세포를 BALB/c 마우스에 보충한 골수 이식("BMT")을 기초로 한 마우스 모델은, 주된 조직적합성 부조화를 대표하며, 안구 이식편대숙주병 (OGVHD)의 주요 병리학적 특징을 개요하고 있다(도 6). 요약하면, 2-3 개월 마우스의 C57BL/6 및 BALB/c 염좌가 이 모델에서 사용된다. C57BL/6 마우스를 희생시키고, 이후 RPMI-1640 배지가 회복된 정강이뼈 및 대퇴골 모두의 골간(diaphyseal) 채널 내에 쏟아진다. 골수는 이후 균질화되고 여과되고, 정제되지 않은 적혈구가 없는 골수(BM) 세포가 공여자 마우스로부터 회수된다. 추가적으로, 공여자 비장은 무균적으로 수확되고, 작은 조각으로 절단되고, 스파출라로 으깨고, 여과시킨 후 분리하여 분리된 비장-유래 T 세포의 단일-세포 현탁액을 만들었다. 수혜자 BALB/c 마우스는 950cGy 양으로 방사능 조사(세슘 137 공급원)하여 총 신체 치명적인 방사선 조사를 하고, 이 후 공여자 C57BL/6 BM 세포 및 비장-유래 T 세포를 방사능 조사된 수혜자 마우스에 꼬리 혈관 인젝션을 통해 이식된다.
비장-유래 T 세포의 동시적 양자 전이가 부존재할 때, 임상 GVHD는 발달하지 않는다(도 7a)( "안전한 BMT"라 함). 임상 GVHD는 공여자 비장-유래 T 세포가 골수 이식편(GVHD BMT)에 첨가될 때 발달하고, GVHD의 상대적인 심각도는 이식된 비장-유래 T 세포의 용량 증가에 따라 증가한다. 눈물 흘리기, 눈꺼풀 떨림(lid crusting), 안검연 부종, 결막부종, 및 각막병증을 포함하는, 심각한 인간 OGVHD의 전통적인 발견은, 모두 이 모델에서 관찰된다(도 7b). OGVHD 표시는 시간에 따라 심각도가 진행하면서 BMT + T- 세포 양자 전이 후 14일 내 나타나기 시작한다(도 8, 안전한 BMT에 비교된, ~90일에서의 GVHD BMT 심각도 스코어). 각막병증은 각막 착색이 없는 대조군 안전한 BMT에 비하여, 안구 표면의 강력한 플루오레세인 착색에 의해 증명된 것으로, 심각한 것으로 관찰된다(도 9a)(33에 설명된, 임상 그래이드 시스템에 의한 정량화된 플루로세인 착색). 적합화된 임상 그래이딩(grading) 시스템(34)을 사용한 이들 파라미터의 정량적 스코어링은, OGVHD의 표시가 없는 대조군 안전한 BMT 수혜자 집단 내에서는 4 ± 2인데 비하여(도 9c), 실험 OGVHD을 갖는 BMT+T 세포 수혜자 집단은 24 ± 2의 평균 임상 스코어를 나타낸다(도 9c).
OGVHD의 이들 임상적 발견은 T 세포(도 10a) 및 매크로파아지(도 10b)가 각막 기질 내로 침윤하는 중요한 조직 병리학적 증거와 관련이 있을뿐만 아니라 영향받은 마우스의 숨뇌(bulbar) 및 안와 결막과 관련있다. 집합적으로, 이들 데이터는 이 모델이 인간 OGVHD의 필수적 임상 및 병리학적 특징을 개요하고 있으므로 OGVHD의 치료를 위한 새로운 약물, 특히 새로운 SMIC 약물의 시험을 위한 이상적인 실험 모델이다.
실시예 5
CaMKK2 억제제의 국소적 투여
실시예 4에 설명된 OGVHD 모델을 사용하여 도구 화합물 CaMKK2 억제제 STO-609(1.5mg/Ml)의 국소적 안구 투여가 실험 OGVHD의 심각성을 예방하거나 또는 완화시킬지 여부를 시험하였다. BMT+T 세포 전이 후, 수혜자 BALB/c 마우스를 14일 동안 회복기를 보낸 후 실험 절차를 시작하였다. BMT+T 세포 전이 후 14일에 시작하고, STO-609 또는 비이클을 2주 동안 매일 투여하고, 처리 기간 동안 규칙적인 실험을 하였다. 처리 기간의 결론은, 눈을 OGVHD의 표시에 따라 등급화(마스크 형태로)하고 수정된 임상 등급 시스템(33, 34)에 따라 점수를 매겼다. 이후 마우스를 희생시키고, OGVHD의 병리학적 평가(i.e. 면역 세포 침윤, 결막성 흉터, 술잔(goblet) 세포 손실, 마이봄샘(Meibomian gland) 흉터, 및 눈물샘 분열/침윤/흉터)와 함께 안구 부속 조직(눈꺼풀, 결막) 및 안구 앞부분(결막, 공막, 결막)의 조직 분석을 위해 눈을 회수하였다.
안와주위 털 손실, 눈꺼풀 떨림, 중도증 결막부종, 줄어든 눈물막 및 각막병증(도 11a)과 함께 안검염 종창 및 흉터를 갖는 비이클-처리된 마우스와 비교하여, STO-609 처리 마우스는 OGVHD의 표시가 적다(도 11b). STO-609 처리 마우스에서 OGVHD의 삼각도(중간 점수 5)는 비이클-처리된 마우스(중간 점수 17)에 비하여 크게 줄어들었다(도 11c). 중요하게는, 어떠한 약물 독성도 명백하게 관찰되지 않았다. 도구 화합물 억제제 STO-609를 가지고 한 결과는 OGVHD의 치료를 위한 성공가능한 표적으로서 CaMKK2를 뒷받침하며 전망있는 SMICs의 인비보 시험을 위하여 합리적인 기초를 제공하는, SMICs의 치료적 잠재력을 위한 기술증명을 성립한다.
예시적 실시예 6
인비트로에서 T 세포 및/또는 매크로파아지 활성을 억제하는 SMIC의 확인
우리는 인비트로에서 T 세포 및/또는 매크로파아지 활성을 억제하는 20 NCE SMICs의 라이브러리 중에서 적어도 하나(1)의 SMIC를 확인할 것이며, OGVHD의 마우스 모델에서 효과적이다. 이것은 인비트로에서 높은 농도에서 억제적 활성을 갖지 않는 화합물들을 초기 배제할 수 있을 것이다. 매크로파아지 및 T 세포주를 사용하여 CaMKK2 활성을 억제하는 후보자 분자의 능력은 웨스턴 블랏 농도 분석, CaMKK2 기질 CaMKIV 및 AMPK의 인산화뿐만 아니라 CaMKK2의 자가 인산화를 사용하여 평가될 것이다. 간단하게, 세포는 혈청 환원 조건에서 배양되고 비이클, STO-609, 후보자 SMICs, 또는 비이클 대조군의 존재하에서 0.5μg/mL 이오노마이신 및 10 ng/mL PMA으로 15분 동안 처리될 것이다. 이후 세포를 회수하고 총 단백질을 용해하고, STO-609 및 비이클에 비교하여 SMICs 억제 능력을 사용하여, 액틴으로 정상화한 농도 분석으로, pCaMKK2, pAMPK, pCaMKIV에 대해 웨스턴 블롯 분석을 하였다.
우리는 T 세포 및 매크로파아지 이펙터 기능의 억제(즉, IC50)의 효능에 의해 SMIC들의 순위를 매기기 위하여 혼합된 림프구 반응(MLR)(즉, "접시 내 GVHD")을 사용할 것이다. 가장 전망있는 SMICs(즉, 생화학적 억제 활성)은 3번 복제 분석을 사용하여 MLR 상청액의 ELISA에 의해 기능적 억제, 특히 염증성 사이토카인 IL-2, TNF-a, IL-6, TGF-b, 및 IFN-g의 생산에서 축소를 평가하기 위하여 MLR 분석에서 스크리닝될 것이다. MLR 데이터를 사용하여, SMICs는 사이토카인 각각에 대하여 IC50에 의해 순위 매겨질 것이다. 간단하게, 방사능 조사된 B ALB/c 비장세포는 각 조건마다 3가지로 C57BL/6 비장 세포에 첨가될 것이다: STO-609 및 후보자 SMICs (모두 다음 농도에서: 10 μM, 3 μM, 1μM, 0.3μM, 및 0.1μM)뿐만 아니라 비이클 대조군. ELISA는 이후 각 사이토카인에 대하여 약물 IC50의 계산과 함께 염증성 사이토카인 IL-2, TNF-α, IL-6, TGF-β 및 IFN-γ 에 대해 수행될 것이다. 생존력 및 아포토시스의 측정은 또한 약물 농도별로 수행되어 인비트로에서 잠재적 용량 제한 독성을 확인할 것이다.
eurofins / DiscoverX (Fremont, CA)를 통해 이용가능한 상업적으로 이용가능한 무료 서비스 기술를 사용하여 >450 공통 키나아제에 대하여 후보자 SMICs의 부정확한 활성에 대해 평가하기 위해 키노메 스캔을 수행할 것이다. 상위 5 SMICs는 최소 불명확한 활성에 따라 순위가 매겨질 것이다. 본 수집적 스크리닝 전략(웨스턴 블랏 분석, MLR 반응, 키노메 스캔)의 목적은 불명확한 활성의 효능 및 결핍에 의해 순위 매겨진 적어도 5개(5)_SMIC를 지명하여, 인비보 스크리닝 및 시험하게 될 것이다.
예시적 실시예 7
SMICs의 인비보 용인성
우리는 임상 평가 및 조직병리학에 의해 국소적 독성을 평가하여 비조작된 2-3개월 야생-타입 BALB/c 마우스에 상위 (5) SMIC를 국소적으로 투여한 nonGLP 독성 연구를 수행할 것이다. 간단하게, 수성 용매 내에서 15mM 스탁 농도를 각 후보자 SMIC에 대해 사용하고, 예비적 용량 범위 연구를 3배 희석액(3 용량, n=3/용량 군, 5 후보자 화합물)으로 국소적으로 14일 동안 매일 2번 수행하고, 비이클 대조군(n=5)와 비교할 것이다. 국소적 독성을 2개 매트릭스로 평가할 것이다: (1) 임상적 발견(결막 출혈, 각막 헤이즈, 염증성 세포, AC 내에서), 및 (2) 조직학(결막, 결막, 공막, 렌즈, 망막, 맥락막). 임상 생체현미경 눈 시험 후, 마우스를 희생시키고 조직학을 위하여 눈을 회수할 것이다. 안구 조직의 표준 H&E 섹션을 독성을 암시하는 염증 또는 조직 형태학 변화를 증명하기 위하여 마스크 형태로 시험할 것이다. 전체적인 독성에 대한 표면적 평가는, 번창의 실패 및 사망을 평가하여 수행될 것이다. "비정상 추적"보다 더 큰 발견은 화합물 농도를 실격시키는 것이다. 인비보 용인성 연구에서 이들의 목적은 국소 사용에서 안구 독성이 없는 적어도 2개(2) SMICs를 확인하는 것일 것이다.
예시적 실시예 8
OGVHD에서 기술 증명
우리는 상위 두 개(2) SMIC 후보자들의 국소적 사용의 임상 효능을 나타내기 위하여 OGVHD의 마우스 모델에서 임상전 기술증명을 수행할 것이다.
궁극적으로, 목적은 후보자 SMIC의 국소적 사용으로 OGVHD 심각성을 줄여 선택된 SMIC를 단지 OGVHD뿐만 아니라 OGVHD와 겹쳐지는 질병 메커니즘을 공유하는 다른 보다 일반적인 안구 염증성 질환에 대한 치료제로서 작용할 수 있다는 것을 증명하는 기술증명을 성립하는 것이다. 예비적인 데이터는 STO-609가 이 목적을 달성한다는 것을 나타내고, 이들 연구는 선택된 후보자 SMIC를 확인하고 이들 후보자까지 연장할 것이다. 실시예 7에서 확인된 뛰어난 2개 후보자 SMIC는 이 OGVHD 모델에서 스크리닝될 것이다. 간단하게, 2-3개월의 마우스 C57BL/6 및 BALB/c 염좌가 이 모델에 사용된다. C57BL/6 마우스를 희생시키고, 이후 RPMI-1640 매질은 회수된 정강이뼈 및 대퇴골 모두의 골간 채널 내로 쏟아져 나온다. 회수된 골수는 이후 균질화되고 여과되고, 적혈구 세포가 없는 정제되지 않은 골수(BM) 세포는 공여자 마우스로부터 회수된다. 추가적으로, 공여자 비장을 무균적으로 수확하고, 작은 조각들로 절단하고 스파출라로 으깨고 여과하여 T 세포를 포함하는 분리된 비장세포의 단일-세포 현탁액을 만든다. 수혜자 BALB/c 마우스는 세슘-137 공급원으로 950 cGy 용량의 총 신체 치명적인 방사능 조사를 하고, 이후 공여자 C57BL/6 BM 세포 및 비장 유래 T 세포는 꼬리 혈관 인젝션을 통해 방사능 조사된 수혜자 마우스로 이식된다. 수혜자 BALB/c 마우스는 대략 14일 동안 회복시키고 추가 시험 절차를 시작한다. 이때, 매일 2번, 선택한 약물을 가지고 양쪽에 국소적 처리르 시작하고, 4주 처리 기간 동안 규칙적인 실험을 하였다. 임상 스코어는 처리 2주 후 및 4주 후 수행할 것이다. OGVHD 임상적 발견은 안검연 부종, 눈꺼풀 떨림, 눈물 필름 붕괴, 결막 결막부종, 및 각막병증을 포함한다. 이들 발견은 이전 공개된 연구(33, 34)로부터 적용된 양적 스코어링을 사용하여 등급화될 것이다. 처리 기간(BMT 후 6주) 후, 마우스를 희생시키고, 눈을 회수하여, OGVHD의 병리학적 평가(i.e. 면역 세포 침윤, 결막성 흉터, 술잔 세포 손실, 마이봄샘 흉터, 및 눈물샘 붕괴/침윤/흉터)와 함께, 안구 부속 조직(눈꺼풀, 결막) 및 안구앞 부분 (결막, 공막, 결막)의 조직 분석을 하였다.
처리 집단은 다음과 같을 것이다:
a) 대조군 집단: BALB/c 수혜자에 이식된 공존하는 T 세포 (n=5) 없는 BL/6 공여자 BM, OGVHD를 개발하지 않는 대조군 집단, 약물 투여 없음.
b) Exp. 집단 1: BL/6 공여자 BM, 및 BALB/c 수혜자 (n=l5)에 이식된 T 세포(n=8), 비이클 대조군.
c) Exp. 집단 2: BL/6 공여자 BM, 및 BALB/c 수혜자(n=l5)에 이식된 T 세포(n=8), STO-609.
d) Exp. 집단 3: BL/6 공여자 BM, 및 BALB/c 수혜자 (n=l5)에 이식된T 세포(n=8). SMIC No. 1.
e) Exp. 집단 4: BL/6 공여자 BM, 및 BALB/c 수혜자(n=l5)에 이식된 T 세포(n=8) . SMIC No. 2.
임상 스코어링은 카테고리 등급을 반영하기 때문에 데이터 및 관찰된 발견들의 분석을 위하여, 비파라미터적 통계(e.g., Mann- Whitney test)가 사용되어 처리 집단들 중 중간 값들을 비교할 것이다. 파라미터 통계는 병리학적 평가에서 연속되는 변수들(e.g., 정량적 면역 세포 침윤)의 비교에 사용될 것이다.
STO-609에 대하여 나타나고 성립된 것이기 때문에, 이들 연구의 목적은 OGVHD 스코어에서 50% 축소가 되는 적어도 하나의 후보자 SMIC를 확인하는 것일 것이다.
실시예 9
인비트로에서 세포성 CaMKK2 활성을 억제하는 SMIC의 확인
합성된 SMIC의 초기 세트는 표 1에 참조되어 있다. 이 세트들 중에서, 6개 후보자 SMIC(EY1003.A001.B001, EY1005.A001.B001, EY1006.A001.B001, EY1007.A001.B001, EY1008.A001.B001, EY1001.A002.B001)를 선택하여 HEK293 세포에서 세포-기반 생화학적 스크리닝 분석하였다. HEK-293 세포를 다음들 중 하나로 처리하였다: STO-609, EY1003.A001.B001, EY1005.A001.B001, EY 1006. A001. B001, EY1007.A001.B001, Y1008.A001.B001, EY1001.A002.B001 (모두, 30μM), 또는 비이클 대조군, 이후 lmM 이오노마이신, CaMKK2의 공지된 활성자로 자극함. 이후 세포 용해물은 CaMKK2 및 AMPK에 대한 포스포-특이적 항체를 가지고 웨스턴 블랏 분석으로 탐침하여, CaMKK2 자가 인산화 활성 및 기질 인산화 활성 각각에 대하여 후보자 SMIC의 효과를 평가하였다(도 12). B-액틴은 로딩 대조군으로서 포함되었다. 그래프는 샘플에 대하여 단백질 로딩 변화에 따라 정정하기 위하여 B-액틴에 대하여 정상화된 신호를 가지고 상대적 농도를 정량화한 것을 나타낸다. 이 분석을 기초로, 후보자 SMICs EY1006.A001.B001 및 EY1001.A002.B001는 인비트로에서 CaMKK2 억제 활성에 대하여 유사한 효능을 나타내었다.
실시예 10
SMIC의 인비보 용인성
국소적으로 투여된 후보자 SMICs EY1006.A001.B001 및 EY1001.A002.B001의 비GLP 독성학 연구는 임상 평가 및 조직 병리학에 의해 국소 독성을 평가하여, 2-3 개월 야생 타입 BALB/c 마우스에서 평가되었다. 양 화합물들을 14일 동안 매일 2번 1.5mg/mL로 국소적으로 투여하였다. 임상 생체현미경 눈 실험 또는 사후 조직 평가에 의해 약물에 대해 국소적 독성 신호가 관찰되지 않았다. 추가적으로, 어떠한 화합물도 명백히 전체적 독성과 관련이 없었다(즉, 번성의 실패 또는 사망의 증거가 없음).
실시예 11
QGVHD에서 기술증명
OGVHD의 마우스 모델에서 임상전 기술증명 연구를 하여 실시예 6 및 7에서 확인된 2개의 가장 전망있는 후보자, EY1006.A001.B001 및 EY1001.A002.B001의 국소적 투여의 임상 효능을 평가하였다. 이전 실험들은, CaMKK2 STO-609의 도구 화합물 억제제가 이 목적을 달성하고, 이 연구의 목적이 선도 후보자 NCE SMIC가 비교할만할 효능을 얻는지 여부를 평가하는 것이라는 것을 나타내었다. 간단하게, OGVHD 마우스 모델은 2-3 개월 마우스 C57BL/6J 공여자 마우스로부터 골수 및 비장 T 세포의 분리로 시작하고, 수혜자 골수의 절제 후에 분리된 골수 및 T 세포를 수혜자 2-3 개월 BALB/c 마우스에 이식한다. 수혜자 BALB/c 마우스는 이후 대략 14일 동안 휴식기를 두고 추가 실험을 하였다. 마우스는 다음들 중 하나로 매일 국소 처리를 하였다(실험 집단, n=5): STO-609 아세테이트(1.5 mg/mL), 선도 SMIC 화합물 EY1006.A001.B001 및 EY1001.A002.B001 (둘 다 1.5 mg/mL), 및 1% 프레드니솔론 아세테이트, BMT 후 14일에 시작하고 2주간 계속됨.
OGVHD 임상 발견은 안검연 부종, 눈꺼풀 떨림, 눈물 필름 붕괴, 결막 결막부종, 및 각막병증을 포함한다. 이전에 공개된 연구를 적용하여 정량적인 스코어 시스템을 사용하여 처리 1주 및 2주 후에 이들 발견을 임상적으로 등급화하였다(33, 34). 선도 SMICs EY1006.A001.B001 및 EY1001.A002.B001는 STO-609와 유사한 효능을 갖는 임상적 OGVHD 발견의 심각성을 줄였다(도 13). 대조적으로, 비이클 대조군-처리된 눈은, 속눈썹 및 안구 주변 털 손실을 가져오는 안검연 종창 및 흉터, 눈꺼풀 떨림, 결막부종, 비정상 눈물 필름, 및 각막병증을 갖는다. STO-609 및 선도 SMICs는 OGVHD (p<0.05, STO-609, EY1006.A001.B001, EY1001.A002.B001 대 비이클 또는 프레드니솔론)의 방지 신호에서 비이클 및 프레드니솔론보다 우수하였다. 이 스코어 시스템 및 실험에 대하여, 경증 질병은 스코어 0-5, 중도증 질병은 스코어 6-10, 중증 질병은 스코어 >10이었다.
이 실험의 발견은 국소 투여를 위한 이상적인 물리화학적 성질을 갖는 선택된 SMIC가 OGVHD뿐만 아니라 OGVHD와 겹치는 질병 메커니즘을 공유하는 잠재적으로 보다 공통되는 안구 염증성 질환(즉, 염증성 안구 건조 질환)의 치료제로서 작용할 수 있다는 기술 증명을 성립한다.
본 명세서에서 언급된 임의 환자 또는 공보는 발명이 관련이 있는 당해 기술 분야의 통상의 기술자들의 지표를 나타낸다. 이들 특허 및 공보는 마치 각 개별 공보가 구체적으로 그리고 개별적으로 참조로서 통합되어 있는 것처럼 동일한 정도로 참조로서 여기 통합되어 있다. 이해 충돌의 경우에 정의를 포함하여 본 명세서가 제어할 것이다.
당해 기술 분야의 통상의 기술자들은 본 발명이 여기 기재된 것뿐만 아니라 언급된 목적을 수행하고 결과 및 장점을 얻기 위하여 잘 적용된다는 것을 용이하게 이해할 것이다. 여기 설명된 본 발명은, 바람직한 실시예의 대표적인 것이며, 예시적이며, 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다. 여기서 여기서 통상의 기술자에게서 일어날 수 있는 변화 및 사용은 통 청구항의 범위에서 정의된 본 발명의 범위 내에 함유되는 것이다.
본 명세서에서 임의의 비-특허 또는 특허 문헌을 포함하는 임의 참조 문헌은 선행 기술을 구성한다고 인정하는 것은 아니다. 특히 다르게 언급하지 않는 한 여기의 임의 문헌들은 미국 및 또는 임의 다른 나라에서 일반적인 지식의 일부를 형성하는 것이라고 인정하는 것은 아니다. 참조 문헌에서 논의한 것은 이들의 작가가 주장하는 것이 무엇이든, 출원인은 여기 인용된 문헌의 정확성 및 적절성에 이의를 제기할 권리를 갖는다. 여기 인용된 모든 문헌들은 다르게 명백하게 언급하지 않는 한 참조로서 완전하게 통합된다. 본 개시는 인용된 참조 문헌에서 발견된 임의 정의 및/또는 설명 들 사이에서 차이가 있는 경우에 완전히 통합된다.
화합물 6-9의 합성 경로
Figure pct00030
화합물s 6-9: 일반 절차 단계 1
EtOH(4mL) 중 대응하는 알데히드 및 페닐렌디아민(1mmol)의 등가몰 용액을, 모든 출발 물질이 이민 중간체(ca. 1.5h)로 전환될 때까지 환류하에서 가열하였다.
DDQ(395mg, 1.1mmol)의 첨가 후에, 상기 반응 혼합물을 이민 중간체가 벤즈이미다졸 생산물로 완전히 전환될 때(전형적으로 30-60분)까지 환류하에서 가열하였다. 반응 혼합물을 이후 실온까지 냉각시키고, 포화된 수성 NaHCO3으로 희석하고, 생성물을 에틸아세테이트로 2번 추출하였다. 조합된 유기 추출물을 무수 MgSO4로 건조시키고, 여과 및 감압하에서 농축하였다. 조 생성물을 실리카 상에서 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 대응하는 순수한 벤즈이미다졸을 얻었다.
일반 절차 단계 2
메탄올: 에틸아세테이트의 150mL에 니트로-치환된 벤즈이미다졸 중간체 (2 g, 7 mmol)의 용액을 활성탄 Pd 촉매(600 mg, 5 wt % Pd)의 존재하에서 대기 압력하에서 실온에서 수소화하였다. 반응(TLC)의 완결 후, 촉매를 셀라이트 패드를 통해 여과 제거시키고, 여액을 감압하에 농축시켜 노란색 고체의 원하는 생성물을 얻었다.
화합물 6-9, 일반 절차 단계 3
THF (100 mL) 중 출발 물질 아닐린(7.5mmol)의 용액에 트리포스젠(7.5mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 초음파처리하고, 얻어진 현탁액을 1h 동안 55-60℃에서 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시켰다. 잔사를 어름 물 및 포화된 소듐바이카보네이트에 첨가하였다. 형성된 고체를 여과하였다. 고체를 물로 세척하고 건조시킨 후 다음 반응에 사용하였다.
화합물 6-9, 일반 절차 단계 4
THF 5ml 중 출발 물질 우레아 (1.36 mmol), 트리페닐포스핀 (6 mmol) 및 알콜 (l50mL, 과량)의 현탁액을 5분 동안 초음파처리하고, 디이소프로필 아조디카르복실레이트(DIAD) 1.4mL(7 mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 초음파처리하였다. 혼합물을 실온에서 밤 사이 교반하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔사를 디에틸에테르로 희석하였다. 침전된 고체를 여과하고 고체를 건식 에테르(4 x 50mL)로 세척하였다. 고체를 건조시키고 플래쉬 크로마토그래피(헥산- EtOAc, 0-50%)로 정제하여 원하는 화합물을 얻었다.
화합물 10의 합성 경로
Figure pct00031
단계 1: 화합물 6-9 단계 1에서 보여진 것과 같다.
단계 2: 일반적인 절차:
에탄올 5mL 중 니트로 화합물(1mmol)의 용액에 Zn 파우더(5mmol) 및 포화된 NH4Cl 용액 2mL을 첨가하였다. 혼합물을 2h 동안 초음파 처리하였다. 혼합물을 에틸아세테이트(3x30mL)로 세척하였다. 유기층을 물로 세척하고, 건조(Na2SO4) 및 농축하여 갈색 고체를 얻었다. 조 고체를 컬럼 크로마토그래피(헥산-EtOAc, 0-100%)로 정제하여 원하는 생성물을 얻었다.
참조문헌
다음 문헌들은 전체로서 여기 통합되어 있다.
Figure pct00032
Figure pct00033
Figure pct00034
Figure pct00035
Figure pct00036
8. 본 개시의 일반적인 성명
성명 1: 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00037
화학식(I)
여기서 R1은 산소 (O) 또는 황 (S)로부터 선택되며; 및
여기서 R2 는 수소 (H), 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택된다.
성명 2. 화학식(I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00038
화학식 (I)
여기서 R은 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택된다.
성명 3. 화학식 (I) 또는 화학식 (II)을 포함하는 화합물 또는
이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00039
화학식(I) 화학식(II)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고, n은 1 또는 2이다.
성명 4. 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00040
화학식 (I)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고,
R은 에스테르, 또는 이에 한정되지는 않지만 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기가 포함된 에스테르 프로드러그이다 .
성명 5. 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00041
화학식 (I)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고;
여기서 R1은 수소 (H), 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택되며;
여기서 R2 는 수소 (H), 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택된다.
성명 6. 화학식(I), (II), (III), 또는 (IV)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00042
화학식(I) 화학식(II)
Figure pct00043
화학식(III) 화학식(IV)
여기서 R, R1, 및 R2 는 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택되며; 및 여기서 n은 1, 2, 또는 3이다.
성명 7. 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00044
(화학식 I)
여기서 A는 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아로마틱 링 내에 원자를 나타낸다.
성명 8. 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00045
화학식(I)
성명 9. 화학식(I) 또는 화학식(II)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00046
화학식 (I)
Figure pct00047
화학식 (II)
여기서 R1은 수소 (H) 또는 COOCH3이고, 여기서 R2 는 CH2CN, CH2COOC2H5, 또는 CH2COPh이다.
성명 10. 대상에 CaMKK2를 조절하는 방법으로서 상기 방법은 효과적인 함량의 화학식 (I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:의 조성물을 대상에 투여하는 단계를 포함한다.
Figure pct00048
화학식 (I)
여기서 R1은 산소 (O) 또는 황 (S)로부터 선택되고; 여기서 R2는 수소 (H), 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택된다.
성명 11. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 효과적인 함량의 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법:
Figure pct00049
화학식 (I)
여기서 R은 알킬, 헤테로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택된다.
성명 12. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 화학식(I), 화학식 (II), 또는 둘 다, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법:
Figure pct00050
화학식 (I)
Figure pct00051
화학식 (II)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고, n은 1 또는 2이다.
성명 13. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법이 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법:
Figure pct00052
화학식 (I)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고, R은 에스테르. 또는 이에 한정되지는 않지만 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로 구성된 에스테르 프로드러그이다.
성명 14. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법:
Figure pct00053
화학식 (I)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고; 여기서 R1은 수소 (H), 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택되며; 및 여기서 R2는 수소 (H), 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택된다.
성명 15. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 화학식(I), 화학식(II), 화학식(III), 화학식(IV), 또는 이들의 조합을 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법:
Figure pct00054
화학식 (I)
Figure pct00055
화학식 (II)
Figure pct00056
화학식 (III)
Figure pct00057
화학식 (IV)
여기서 R, R1, 및 R2 은 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴 기로부터 선택되며; 여기서 n은 1, 2, 또는 3이다.
성명 16. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는, 방법:
Figure pct00058
(화학식 I)
여기서 A는 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아로마틱 링을 나타낸다.
성명 17. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 화학식(I)를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는, 방법:
Figure pct00059
화학식 (I)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이다.
18. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 화학식(I), 화학식(II), 또는 둘 다를 포함하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체의 조성물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는, 방법:
Figure pct00060
여기서 R1은 수소 (H) 또는 COOCH3이고, 여기서 R2은 CH2CN, CH2COOC2H5, 또는 CH2COPh이다.
성명 19. 임의 안과 질환을 치료하는 방법으로서, 이에 한정되지는 않지만 다음을 포함하는 안과 질환의 치료 방법: 1)이에 한정되지는 않지만 안구 이식편대숙주병, 안구 반흔성 유천포창, 아토피 결막염, 알레르기 눈 질환, 마이봄샘 기능장애, 눈물층 부족증 (흔한 안구건조증), 각막 흉터, 및 결막성 흉터 및 섬유증을 포함하는, 안구 표면 염증성 질환 (OSIDs); 2) 포도막염, 및 이에 한정되지는 않지만 각막염, 공막염, 홍채염, 홍채모양체염 중간체 포도막염, 평면부염, 안구뒤쪽 포도막염, 맥락막염, 맥락망막염, 망막염, 또는 비감염성, 감염성, 또는 특발성 병인의 범포도막염을 포함하는 눈의 다른 염증성 질환; 및 3)"눈의 뒤쪽" 망막 질환으로, 건조한 연령 관련 황반 변성, 신생혈관 연령관련 황반 변성, 당뇨망막병증, 망막 혈관 질환 (e.g. 내경계막 제거술, 망막 동맥 폐쇄), 및 망막 변성 및 이상증을 포함하는 질환으로, 상기 방법은 상기 성명 1 내지 9중 어느 하나의 화합물을 안과 질환이 치료되도록 효과적인 함량으로 투여하는 단계를 포함한다.
성명 20. 대상에서 전두안(frontal eye) 또는 원위안(distal eye) 조짐(indication)을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 1 내지 9 중 어느 한 화합물을 효과적인 함량으로 상기 조짐이 치료되도록 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 21. 대상에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 성명 1-9 중 어느 한 화합물의 효과적인 함량을 암이 치료되도록 상기 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 22. 대상에서 식욕 질환(appetite disease)을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 성명 1-9 중 어느 하나의 화합물을 효과적인 함량으로 상기 식욕 질환이 치료되도록 투여하는 단계를 포함하는 방법.
성명 23. 대상에서 전체 염증성 또는 자가면역 질환, 예를 들어 이식편대숙주질환, 사르코이드증, 전체 홍반성 낭창, 다른 것들을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 성명 1-9 중 어느 하나의 화합물을 전체 염증성 질환이 치료되도록 상기 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 24. 화학식 (XX)을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물, 또는 유도체:
Figure pct00061
(XX)
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고; 여기서 Y는 NR4, 또는 CR5R6이고; 여기서 R1은 -CH2COOH, -COOH, -CH2COOCR7, -COOR7; -CH2CONH2, -CONH2, -CH2CONR5R6, 또는 -CONR5R6 이고; 여기서 각 R2 및 R3 는 독립적으로 수소 (H), C1-C10 알킬, -OR7, -OCH2CH2OR7, -OCH2CH2NR5R6, -OCH2CH2COR7 또는 -OCH2CH2PO3H이고;
여기서 R4는 수소 (H), C1-C10 알킬, -CH2CN, -CH2C(0)NH2, -CH2COOH, -CH2SO2CH3, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2티에닐, -CH2푸라닐, -CH2CH2헤테로사이클, -CH2CH2시클로알킬, -CH2CH2헤테로시클로알킬, -CH2CHOCH2OH 또는 -(CH2)nZ(CH2)mCH3이고, 여기서 n은 1 내지 5의 정수이고, m은 0 내지 5의 정수이고, Z는 산소(O) 또는 황(S)이고;
여기서 각 R5 및 R6는 독립적으로 수소 (H), C1-C5 알킬이거나, 또는 R5 및 R6 는 함께 3 내지 7-원자 시클로알킬 링를 형성할 수 있고; 및 여기서 R7 은 C1-C5 알킬이다.
성명 25. 성명 24에 있어서, 여기서 X는 산소인 화합물.
성명 26. 성명24 또는 성명 25에 있어서, 여기서 Y는 NH, NCH3,
Figure pct00062
인, 화합물.
성명 27. 성명 24 내지 성명 26 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R1은 COOH인, 화합물.
성명 28. 성명 24 내지 성명 27 중 어느 한 항에 있어서, 여기서 R2 또는 R3 는 -OCH3인 화합물.
성명 29. 성명 24 내지 성명 28 중 어느 한 항에 있어서, 여기서 R2 및 R3는 -OCH3인 화합물.
성명 30. 화학식 (XXI)를 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
Figure pct00063
여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고; 여기서 R1은 -CH2COOH, -COOH, -CH2COOCR7, -COOR7; -CH2CONH2, -CONH2, -CH2CONR5R6, 또는 -CONR5R6이고; 여기서 각 R2 및 R3은 독립적으로 수소(H), C1-C10 알킬, -OR7, -OCH2CH2OR7, -OCH2CH2NR5R6, -OCH2CH2COOR7 또는 -OCH2CH2PO3H이고;
여기서 각 R5 및 R6 는 독립적으로 수소 (H), C1-C5 알킬이거나, 또는 R5 및 R6 는 함께 3 내지 7-원자 시클로알킬 링을 형성하고; 여기서 R7는 C1-C5 알킬이고; 및 여기서 w는 1 또는 2이다.
성명 31. 성명 30에 있어서, 여기서 X는 산소인 화합물.
성명 32. 성명 30 내지 성명 31 중 어느 한 항에 있어서, 여기서 R1은 COOH인 화합물.
성명 33. 성명 30 내지 성명 32 중 어느 한 항에 있어서, 여기서 R2 또는 R3는 -OCH3인 화합물.
성명 34. 성명 30 내지 성명 33 중 어느 한 항에 있어서, 여기서 R2 및 R3은 -OCH3인 화합물.
성명 35. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서 상기 방법이 성명 24 내지 성명 29 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 36. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서 상기 방법이 성명 30 내지 성명 34 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 37. 대상에서 전두안 또는 원위안 조짐을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 24 내지 성명 29 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 38. 대상에서 전두안 또는 원위안 조짐을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 30 내지 성명 34 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 39. 대상에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 24 내지 성명 29 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 40. 대상에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 30 내지 성명 34 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 41. 대상에서 식욕 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 24 내지 성명 29 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 42. 대상에서 식욕 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 30 내지 성명 34 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 43. 대상에서 전체 염증성 또는 자가면역 질환, 예를 들어 이식편대숙주질환, 사르코이드증, 전체 홍반성 낭창, 다른 것들을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 24 내지 성명 29 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
성명 44. 대상에서 전체 염증성 또는 자가면역 질환, 예를 들어 이식편대숙주질환, 사르코이드증, 전체 홍반성 낭창, 다른 것들을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 성명 30 내지 성명 34 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
상기 설명은 설명적 실험 및 실시예를 나타낼뿐인 것으로 이해되어야 한다. 독자의 편의를 위해서 상기 설명은 본 발명의 원리를 가르치는 모든 가능한 실시예에서 대표적인 실시예로 제한된 것에 초점을 맞춘 것이다. 상세한 설명은 모든 가능한 변화 또는 이들 설명된 변화의 조합들을 소모적으로 열거하고자 한 것이 아니다. 대안적인 예들은 본 개시의 특정 범위를 위해 제시되지 않거나, 또는 추가 설명되지 않은 대안적인 실시예는 일부분이 이용가능할 수 있으며, 본 대안적인 실시예를 포기하는 것은 아니다. 통상의 기술자들은 이들 설명되지 않은 많은 예들이 본 발명의 원리에서의 차이 보다는 기술 및 재료의 차이와 관련이 있다는 것을 이해할 것이다. 따라서 본 개시 내용은 다음 청구항 및 이와 등가물에서 설정된 범위보다 제한적인 것을 의도한 것이 아니다.
참조 문헌의 통합
여기 인용된 모든 참조 문헌, 논문, 공개공보, 특허, 특허공보, 및 특허출원은 전체적으로 모든 목적에 대하여 여기 참조로서 통합되어 있다. 그러나, 여기 인용된 모든 참조 문헌, 논문, 공개공보, 특허, 특허공보, 및 특허출원의 언급은 이들이 선행기술을 구성하거나 또는 세계 임의 국가에서 일반 상식의 일부를 형성한다고 암시하는 것으로 해석되어서는 안된다. 개시 내용은 상세한 설명과 함께 설명되면서, 이전 설명들은 설명을 위한 것이며 범위를 제한하는 것이 아니라는 것으로 이해된다. 본 명세서에서 인용된 모든 문헌, 특허 및 특허 출원은 마치 각 공개문헌 또는 특허 출원이 구체적이고 개별적으로 참조로서 통합되어진 것처럼 참조로서 여기 통합되어 있다.

Claims (21)

  1. 화학식 (XX)을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
    Figure pct00064

    여기서 X는 산소(O)이고;
    여기서 Y는 NR4, 또는 CR5R6이고;
    여기서 R1은 -CH2COOH, -COOH, -CH2COOCR7, -COOR7; -CH2CONH2, -CONH2, -CH2CONR5R5, 또는 -CONR5R6이고;
    여기서 각 R2 및 R3 는 독립적으로 수소 (H), C1-C10 알킬, -OR7, -OCH2CH2OR7, -OCH2CH2NR5R6, -OCH2CH2COOR7 또는 -OCH2CH2PO3H이고;
    여기서 R4는 수소(H), C1-C10 알킬, -CH2CN, -CH2C(0)NH2, -CH2COOH, -CH2SO2CH3, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2티에닐, -CH2푸라닐, -CH2CH2헤테로사이클, -CFhCFh시클로알킬, -CH2CH2헤테로시클로알킬, -CH2CHOCH2OH 또는 -(CH2)nZ(CH2)mCH3이고, 여기서 n은 1 내지 5의 정수이고, m은 0 내지 5의 정수이고 Z는 산소 (O) 또는 황 (S)이고;
    여기서 각 R5 및 Re는 독립적으로 수소 (H), C1-C5 알킬이거나, 또는 R5 및 R6 는 함께 3 내지 7-원자 시클로알킬 링을 형성하고; 및
    여기서 R7은 C1-C5 알킬이다.
  2. 제1항에 있어서, 여기서 Y는 NR4인 화합물.
  3. 제2항에 있어서, 여기서 Y는 NH, NCH3, NCH2CH3, NCH2CH2F, NCH(CH3)2,
    Figure pct00065
    인, 화합물.
  4. 제1항에 있어서, 여기서 R1은 COOH인, 화합물.
  5. 제1항에 있어서, 여기서 R2 또는 R3 은 -OCH3인 화합물.
  6. 제1항에 있어서, 여기서 R2 및 R3 은 -OCH3인 화합물.
  7. 화학식(XXI)를 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 수화물 또는 유도체:
    Figure pct00066

    여기서 X는 산소 (O) 또는 황 (S)이고;
    여기서 Y는 NR4, 또는 CR5R6이고;
    여기서 R1은 -CH2COOH, -COOH, -CH2COOCR7, -COOR7; -CH2CONH2, -CONH2, -CH2CONR5R6, 또는 -CONR5R6이고;
    여기서 각 R2 및 R3 는 독립적으로 수소 (H), C1-C10 알킬, -OR7, -OCH2CH2OR7, -OCH2CH2NR5R6, -OCH2CH2COOR7 또는 -0CH2CH2P03H이고;
    여기서 각 R5 및 R6은 독립적으로 수소 (H), C1-C5 알킬이거나, 또는 R5 및 R6 는 함께 3 내지 7-원자 시클로알킬 링을 형성하고; 여기서 R6 는 C1-C5 알킬이고; 및 여기서 w는 1 또는 2이다.
  8. 제7항에 있어서, 여기서 X는 산소인, 화합물.
  9. 제7항에 있어서, 여기서 R1은 COOH인 화합물.
  10. 제7항에 있어서, 여기서 R2 또는 R3 는 -OCH3인 화합물.
  11. 제7항에 있어서, 여기서 R2 및 R3 는 -OCH3인 화합물.
  12. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  13. 대상에서 CaMKK2를 조절하는 방법으로서, 상기 방법은 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  14. 대상에서 전두안(frontal eye) 또는 원위안(distal eye) 조짐을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  15. 대상에서 전두안(frontal eye) 또는 원위안(distal eye) 조짐을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  16. 대상에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  17. 대상에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  18. 대상에서 식욕 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  19. 대상에서 식욕 질환을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  20. 대상에서 전체 염증성 또는 자가면역 질환, 예를 들어 이식편대숙주질환, 사르코이드증, 전체 홍반성 낭창, 다른 것들을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  21. 대상에서 전체 염증성 또는 자가면역 질환, 예를 들어 이식편대숙주질환, 사르코이드증, 전체 홍반성 낭창, 다른 것들을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화합물을 효과적인 함량으로 대상에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
KR1020217008504A 2018-08-20 2019-08-20 안과 질환 치료용 약물 조성물 및 치료 방법 KR20210049857A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862719938P 2018-08-20 2018-08-20
US62/719,938 2018-08-20
PCT/US2019/047309 WO2020041344A1 (en) 2018-08-20 2019-08-20 Methods and compositions for drugs to treat ophthalmic diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210049857A true KR20210049857A (ko) 2021-05-06

Family

ID=69591159

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217008504A KR20210049857A (ko) 2018-08-20 2019-08-20 안과 질환 치료용 약물 조성물 및 치료 방법

Country Status (14)

Country Link
US (1) US20210198266A1 (ko)
EP (1) EP3840745A4 (ko)
JP (1) JP2021534202A (ko)
KR (1) KR20210049857A (ko)
CN (1) CN112654353A (ko)
AU (1) AU2019326448A1 (ko)
BR (1) BR112021003189A2 (ko)
CA (1) CA3109809A1 (ko)
CO (1) CO2021003607A2 (ko)
IL (1) IL280952A (ko)
MX (1) MX2021002028A (ko)
SG (1) SG11202101522WA (ko)
TW (1) TW202021968A (ko)
WO (1) WO2020041344A1 (ko)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4153693B2 (ja) * 2001-04-25 2008-09-24 大日本住友製薬株式会社 新規なＣａＭＫＫ阻害剤
GB0600764D0 (en) * 2006-01-13 2006-02-22 Crysoptix Ltd Organic compound, optical crystal film and method of production thereof
WO2012064618A1 (en) * 2010-11-09 2012-05-18 Crysoptix Kk Negative dispersion retardation plate and achromatic circular polarizer

Also Published As

Publication number Publication date
CA3109809A1 (en) 2020-02-27
WO2020041344A1 (en) 2020-02-27
SG11202101522WA (en) 2021-03-30
CN112654353A (zh) 2021-04-13
WO2020041344A4 (en) 2020-03-26
EP3840745A4 (en) 2022-06-08
US20210198266A1 (en) 2021-07-01
AU2019326448A1 (en) 2021-03-11
TW202021968A (zh) 2020-06-16
MX2021002028A (es) 2021-07-21
JP2021534202A (ja) 2021-12-09
CO2021003607A2 (es) 2021-07-30
BR112021003189A2 (pt) 2021-05-11
EP3840745A1 (en) 2021-06-30
IL280952A (en) 2021-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2046775B1 (fr) Derives de n- (amino-heteroaryl) - 1h-indole-2 -carboxamides comme antagonistes des recepteurs de type trpv1 ou vr1
KR101740076B1 (ko) Ｊａｋ 경로의 억제를 위한 조성물 및 방법
US20070149548A1 (en) (indazol-5-yl)-pyrazines and (1,3-dihydro-indol-2-one)-pyrazines for treating rho kinase-mediated diseases and conditions
JP2022088642A (ja) 神経学的状態および心血管状態を処置するための化合物および方法
EA028026B1 (ru) Противовирусное соединение, содержащая его фармацевтическая композиция и способ лечения
AU2015326543A1 (en) 4-(4-(4-phenylureido-naphthalen-1-yl)oxy-pyridin-2-yl)amino-benzoic acid derivative as p38 kinase inhibitor
EA025393B1 (ru) Пиразолилмочевины в качестве ингибиторов киназы
JP2016525547A (ja) 神経保護性の二環式化合物ならびに自閉症スペクトラム障害および神経発達障害の治療におけるそれらの使用方法
Rogov et al. Mitochondrial dysfunctions may be one of the major causative factors underlying detrimental effects of benzalkonium chloride
WO2018053373A1 (en) Uses of satl-inducible kinase (sik) inhibitors for treating osteoporosis
JP2021185183A (ja) Ｃｆｔｒ制御因子及びこの使用方法
JP6351629B2 (ja) 点眼用組成物
KR20210049857A (ko) 안과 질환 치료용 약물 조성물 및 치료 방법
JP2023506118A (ja) 皮膚エリテマトーデス及び扁平苔癬（ｌｐ）の治療のためのｊａｋ１阻害剤の使用
US11992490B2 (en) Use of JAK1 inhibitors for the treatment of cutaneous lupus erythematosus and Lichen planus (LP)
Vishvakarma et al. Inhibition of protease of novel corona virus by designed noscapines: Molecular docking and ADMET studies
US7867999B1 (en) Hydroxyamino- and amino-substituted pyridine analogs for treating rho kinase-mediated diseases and conditions
Hunziker et al. Synthesis, characterization, and in vivo evaluation of a novel potent Autotaxin-inhibitor
KR20100021444A (ko) 플루오로퀴놀론을 사용하여 염증을 조절하기 위한 조성물 및 방법
WO2024036961A1 (zh) 一种抗衰老相关疾病的前药及其使用方法
US20230263767A1 (en) Composition for preventing, alleviating, or treating inflammatory disease containing isookanin or salt thereof as active ingredient
CA3037116A1 (en) Methods for treating ocular disease using inhibitors of csf-1r
WO2006062069A1 (ja) ｐ３８ＭＡＰキナーゼ阻害剤を有効成分とする掻痒治療剤
WO2007107384A2 (de) Inhibitoren der löslichen adenylatzyklase
Hunziker et al. Synthesis, Characterization, and in vivo Evaluation of a Novel Potent Autotaxin-Inhibitor. Front. Pharmacol. 12: 699535. doi: 10.3389/fphar. 2021.699535

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination