KR20210045352A - 화합물의 염 및 이의 결정 - Google Patents
화합물의 염 및 이의 결정 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20210045352A KR20210045352A KR1020207030563A KR20207030563A KR20210045352A KR 20210045352 A KR20210045352 A KR 20210045352A KR 1020207030563 A KR1020207030563 A KR 1020207030563A KR 20207030563 A KR20207030563 A KR 20207030563A KR 20210045352 A KR20210045352 A KR 20210045352A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- diffraction
- compound
- powder
- crystal
- vol
- Prior art date
Links
- 239000013078 crystal Chemical class 0.000 title claims abstract description 249
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 226
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims description 115
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- 238000000634 powder X-ray diffraction Methods 0.000 claims description 142
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 abstract description 4
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 abstract description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 109
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 108
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 92
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 79
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 78
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 74
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 63
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 61
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 60
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 54
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 49
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 47
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 32
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- GVOISEJVFFIGQE-YCZSINBZSA-N n-[(1r,2s,5r)-5-[methyl(propan-2-yl)amino]-2-[(3s)-2-oxo-3-[[6-(trifluoromethyl)quinazolin-4-yl]amino]pyrrolidin-1-yl]cyclohexyl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](N(C)C(C)C)CC[C@@H]1N1C(=O)[C@@H](NC=2C3=CC(=CC=C3N=CN=2)C(F)(F)F)CC1 GVOISEJVFFIGQE-YCZSINBZSA-N 0.000 description 27
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 23
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 19
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 19
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 18
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 18
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 16
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 16
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 15
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 15
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 13
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 12
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 12
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 101000643024 Homo sapiens Stimulator of interferon genes protein Proteins 0.000 description 11
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 11
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 11
- 102000050022 human STING1 Human genes 0.000 description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 11
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 10
- 230000008859 change Effects 0.000 description 10
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 9
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 7
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 7
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N isopropanol acetate Natural products CC(C)OC(C)=O JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229940011051 isopropyl acetate Drugs 0.000 description 7
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 7
- 238000001144 powder X-ray diffraction data Methods 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 229940044665 STING agonist Drugs 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 6
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 6
- RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N thiophenol Chemical compound SC1=CC=CC=C1 RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 5
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- VVWRJUBEIPHGQF-MDZDMXLPSA-N propan-2-yl (ne)-n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)\N=N\C(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 5
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- BQDFHACIOUBBDF-UHFFFAOYSA-N 3-(8-chloro-2,3-dimethoxy-10-phenothiazinyl)-N,N-dimethyl-1-propanamine Chemical compound S1C2=CC=C(Cl)C=C2N(CCCN(C)C)C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 BQDFHACIOUBBDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 4
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 4
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 4
- JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N dichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)Cl JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 4
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyldimethylsilyl chloride Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)Cl BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001757 thermogravimetry curve Methods 0.000 description 4
- FIQMHBFVRAXMOP-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphane oxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)(=O)C1=CC=CC=C1 FIQMHBFVRAXMOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- GVZJRBAUSGYWJI-UHFFFAOYSA-N 2,5-bis(3-dodecylthiophen-2-yl)thiophene Chemical compound C1=CSC(C=2SC(=CC=2)C2=C(C=CS2)CCCCCCCCCCCC)=C1CCCCCCCCCCCC GVZJRBAUSGYWJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002103 4,4'-dimethoxytriphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)(C1=C([H])C([H])=C(OC([H])([H])[H])C([H])=C1[H])C1=C([H])C([H])=C(OC([H])([H])[H])C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- 239000005456 alcohol based solvent Substances 0.000 description 3
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 3
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 3
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 3
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 3
- KUMNEOGIHFCNQW-UHFFFAOYSA-N diphenyl phosphite Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP([O-])OC1=CC=CC=C1 KUMNEOGIHFCNQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 239000003759 ester based solvent Substances 0.000 description 3
- 239000004210 ether based solvent Substances 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 239000005453 ketone based solvent Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 230000010399 physical interaction Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- NRTYMEPCRDJMPZ-UHFFFAOYSA-N pyridine;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound C1=CC=NC=C1.OC(=O)C(F)(F)F NRTYMEPCRDJMPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001028 reflection method Methods 0.000 description 3
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 3
- GZTYTTPPCAXUHB-UHFFFAOYSA-N 1,2-benzodithiol-3-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)SSC2=C1 GZTYTTPPCAXUHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRPFJAPZDXQHSM-UHFFFAOYSA-L 1,3-bis(2,4,6-trimethylphenyl)-4,5-dihydroimidazole;dichloro-[(2-propan-2-yloxyphenyl)methylidene]ruthenium Chemical compound CC(C)OC1=CC=CC=C1C=[Ru](Cl)(Cl)=C1N(C=2C(=CC(C)=CC=2C)C)CCN1C1=C(C)C=C(C)C=C1C ZRPFJAPZDXQHSM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HXBMIQJOSHZCFX-UHFFFAOYSA-N 1-(bromomethyl)-2-nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1CBr HXBMIQJOSHZCFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JBWYRBLDOOOJEU-UHFFFAOYSA-N 1-[chloro-(4-methoxyphenyl)-phenylmethyl]-4-methoxybenzene Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(Cl)(C=1C=CC(OC)=CC=1)C1=CC=CC=C1 JBWYRBLDOOOJEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- JVKRKMWZYMKVTQ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]pyrazol-1-yl]-N-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)acetamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)NC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 JVKRKMWZYMKVTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZMUCIBBVMLEKC-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-5,5-dimethyl-1,3,2$l^{5}-dioxaphosphinane 2-oxide Chemical compound CC1(C)COP(Cl)(=O)OC1 VZMUCIBBVMLEKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001731 2-cyanoethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])([H])C#N 0.000 description 2
- RKVHNYJPIXOHRW-UHFFFAOYSA-N 3-bis[di(propan-2-yl)amino]phosphanyloxypropanenitrile Chemical compound CC(C)N(C(C)C)P(N(C(C)C)C(C)C)OCCC#N RKVHNYJPIXOHRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N Dimethoxyethane Chemical compound COCCOC XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001054334 Homo sapiens Interferon beta Proteins 0.000 description 2
- 108091054729 IRF family Proteins 0.000 description 2
- 102000016854 Interferon Regulatory Factors Human genes 0.000 description 2
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 101100043703 Mus musculus Sting1 gene Proteins 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 2
- XXROGKLTLUQVRX-UHFFFAOYSA-N allyl alcohol Chemical compound OCC=C XXROGKLTLUQVRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- JHIVVAPYMSGYDF-UHFFFAOYSA-N cyclohexanone Chemical compound O=C1CCCCC1 JHIVVAPYMSGYDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 2
- 229960005215 dichloroacetic acid Drugs 0.000 description 2
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 210000003194 forelimb Anatomy 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- POPACFLNWGUDSR-UHFFFAOYSA-N methoxy(trimethyl)silane Chemical compound CO[Si](C)(C)C POPACFLNWGUDSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000008259 solid foam Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000005987 sulfurization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N triethylsilane Chemical compound CC[SiH](CC)CC AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- ORTVZLZNOYNASJ-OWOJBTEDSA-N (e)-but-2-ene-1,4-diol Chemical compound OC\C=C\CO ORTVZLZNOYNASJ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FINYOTLDIHYWPR-UHFFFAOYSA-N 2-cyanoethoxy-n,n-di(propan-2-yl)phosphonamidous acid Chemical compound CC(C)N(C(C)C)P(O)OCCC#N FINYOTLDIHYWPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 238000011718 B6 albino mouse Methods 0.000 description 1
- 206010055113 Breast cancer metastatic Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241001391944 Commicarpus scandens Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000007224 Myeloproliferative neoplasm Diseases 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- -1 Polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 102000004495 STAT3 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017324 STAT3 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 101150060741 Sting1 gene Proteins 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQVISGXICTVSDQ-UHFFFAOYSA-O [c-]1nn[nH]n1.CC(C)[NH2+]C(C)C Chemical compound [c-]1nn[nH]n1.CC(C)[NH2+]C(C)C YQVISGXICTVSDQ-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001348 anti-glioma Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N c-di-GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](N4C5=C(C(NC(N)=N5)=O)N=C4)O[C@@H]3COP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229910052681 coesite Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052906 cristobalite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 1
- 239000011549 crystallization solution Substances 0.000 description 1
- 238000002447 crystallographic data Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000003831 deregulation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- HVJJUDAMOHYMRL-UHFFFAOYSA-L dichloro-[(2-propan-2-yloxyphenyl)methylidene]ruthenium Chemical compound CC(C)OC1=CC=CC=C1C=[Ru](Cl)Cl HVJJUDAMOHYMRL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004455 differential thermal analysis Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000008995 epigenetic change Effects 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000012224 gene deletion Methods 0.000 description 1
- 238000011331 genomic analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 1
- IKGLACJFEHSFNN-UHFFFAOYSA-N hydron;triethylazanium;trifluoride Chemical compound F.F.F.CCN(CC)CC IKGLACJFEHSFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008073 immune recognition Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000005710 macrocyclization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- YRDSDHFBUHFDPG-ZZXKWVIFSA-N n,n-dimethyl-n'-(5-sulfanylidene-1,2,4-dithiazol-3-yl)methanimidamide Chemical compound CN(C)\C=N\C1=NC(=S)SS1 YRDSDHFBUHFDPG-ZZXKWVIFSA-N 0.000 description 1
- IHCHOVVAJBADAH-UHFFFAOYSA-N n-[2-hydroxy-4-(1h-pyrazol-4-yl)phenyl]-6-methoxy-3,4-dihydro-2h-chromene-3-carboxamide Chemical compound C1C2=CC(OC)=CC=C2OCC1C(=O)NC(C(=C1)O)=CC=C1C=1C=NNC=1 IHCHOVVAJBADAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005868 ontogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000001048 orange dye Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920003223 poly(pyromellitimide-1,4-diphenyl ether) Polymers 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 1
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 1
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical class [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)N=NC(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000028617 response to DNA damage stimulus Effects 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 229910052682 stishovite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N tert-butyl(dimethyl)silicon Chemical group C[Si](C)C(C)(C)C ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N tert-butylamine Chemical compound CC(C)(C)N YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002411 thermogravimetry Methods 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 229910052905 tridymite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7084—Compounds having two nucleosides or nucleotides, e.g. nicotinamide-adenine dinucleotide, flavine-adenine dinucleotide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6564—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms
- C07F9/6581—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms having phosphorus and nitrogen atoms with or without oxygen or sulfur atoms, as ring hetero atoms
- C07F9/6587—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms having phosphorus and nitrogen atoms with or without oxygen or sulfur atoms, as ring hetero atoms having two phosphorus atoms as ring hetero atoms in the same ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
본 발명은 의약품에서 약물 물질로서 사용될 가능성을 지닌 (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 암모늄염, 화합물 I 나트륨염 또는 화합물 I의 결정을 제공한다:
Description
본 발명은 화합물의 염 및 이의 결정에 관한 것이다.
STING(stimulator of interferon gene: 인터페론 유전자의 자극제)는 세포기질에서 dsDNA에 대한 선천성 반응에서 신호전달 분자이다. STING 결실은 다수의 인간 암에서 보고되었다. 또한, 인간 암에서의 STING 신호전달의 하향조절은 또한 흑색종(Xia T, et al., "Recurrent Loss of STING Signaling in Melanoma Correlates with Susceptibility to Viral Oncolysis" Cancer Res. 2016) 및 결장암에서 보고되었다. (Xia T, et al., "Deregulation of STING Signaling in Colorectal Carcinoma Constrains DNA Damage Responses and Correlates With Tumorigenesis" Cell Rep. 2016;14:282-97). 흥미롭게도, 그러한 연구들에서, 게놈 분석 결과는 손실된 STING 발현이 유전자 결실 또는 돌연변이로 인한 것이 아니라 후성적 변화를 통해 일어난다는 것을 보여주었다. (Xia, Cancer Res. 2016; Xia, Cell Rep. 2016). STING의 암 보호 활성은 또한 마우스 모델 연구로부터 얻은 증거에 의해 뒷받침된다. STING 넉아웃 마우스는 결함 있는 종양 조절을 보여주었다. (Woo SR, et al. "STING-dependent cytosolic DNA sensing mediates innate immune recognition of immunogenic tumors" Immunity 2014;41:830-42).
또한, 개체발생(ontogenesis)을 보호하는 데 있어서의 STING의 역할은 신경교종(Ohkuri T, et al., "Protective role of STING against gliomagenesis: Rational use of STING agonist in anti-glioma immunotherapy" Oncoimmunology. 2015;4:e999523) 및 결장암(Zhu Q, et al., "Cutting edge: STING mediates protection against colorectal tumorigenesis by governing the magnitude of intestinal inflammation" J. Immunol. 2014;193:4779-82)을 포함하는 여러 마우스 자연발증 모델(mouse spontaneous model)에서 입증되었다. 이 항종양 효과는 NF-kB 및 STAT3의 과활성화에 대항하는 이의 능력에 기인할 수 있다. (Ohkuri 2015). STING 경로의 활성화는 또한 전임상 마우스 종양 모델에서 강력한 활성을 보여주었다. (Woo 2014; Chandra D, et al. "STING ligand c-di-GMP improves cancer vaccination against metastatic breast cancer" Cancer Immunol Res. 2014;2:901-10; Corrales L, et al., "Direct Activation of STING in the Tumor Microenvironment Leads to Potent and Systemic Tumor Regression and Immunity" Cell Rep. 2015;11:1018-30; Curran E, et al. "STING Pathway Activation Stimulates Potent Immunity against Acute Myeloid Leukemia" Cell Rep. 2016;15:2357-66; Tang CH, et al. "Agonist-Mediated Activation of STING Induces Apoptosis in Malignant B Cells" Cancer Res. 2016;76:2137-52). 이 항종양 활성은 아마도 종양 맥관구조의 파괴에 기인한 것이며, 그에 뒤이어 적응 면역 반응이 유도된다. (Corrales L, et al., "The host STING pathway at the interface of cancer and immunity" J. Clin. Invest. 2016;126:2404-11). 따라서, 종양 미세환경에서 작용제에 의한 STING의 직접 자극은 다수의 암 유형을 치료하기 위한 신규한 접근법을 나타낼 수 있다.
화학식 I로 표시된 화합물, 즉 (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(이하 화합물 I라 칭함)은 종양의 성장을 억제한다:
일반적으로, 약학적 생성물로서 사용되는 화합물, 이의 염 및 이의 결정의 물성은 주로 약물의 생체이용률, 활성 약학 성분의 순도, 제제의 처방 등에 영향을 미친다. 따라서 본 발명의 목적은 의약품에서 약물 물질로서 사용될 가능성을 갖는 화합물 I의 염 또는 이의 결정을 제공하는 것이다.
본 발명자는 의약품에서 약물 물질로서 사용될 가능성을 갖는 화합물 I의 염 또는 이의 결정을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다.
구체적으로, 본 발명은 하기 <1> 내지 <50>를 제공한다.
<1>
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 암모늄염, 화합물 I 나트륨염 또는 화합물 I의 결정:
<2>
<1>에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 암모늄염의 결정인 결정.
<3>
<2>에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정인 결정.
<4>
<3>에 있어서, 분말 X선 회절에서 8.3°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 1).
<5>
<4>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 1).
<6>
<4>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3°, 12.7°, 16.6° 및 25.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 1).
<7>
<4>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3°, 12.7°, 14.6°, 16.6°, 18,1°, 22.1°, 22.8°, 24.4° 및 25.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 1).
<8>
<7>에 있어서, 도 3에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정(형태 1).
<9>
<4> 내지 <8> 중 어느 하나에 있어서, 수화물인 결정(형태 1).
<10>
<3>에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 2).
<11>
<10>에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.0°, 15.4° 및 20.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 2).
<12>
<10>에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.0°, 15.4°, 20.8°, 24.0° 및 30.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 2).
<13>
<10>에 있어서, 분말 X선 회절에서 7.0°, 9.0°, 11.8°, 13.2°, 15.4°, 19.7°, 20.8°, 24.0°, 30.0° 및 31.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 2).
<14>
<13>에 있어서, 도 4에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정(형태 2).
<15>
<10> 내지 <14> 중 어느 하나에 있어서, 수화물인 결정(형태 2).
<16>
<3>에 있어서, 분말 X선 회절에서 7.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 3).
<17>
<16>에 있어서, 분말 X선 회절에서 7.4°, 16.0° 및 21.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 3).
<18>
<16>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.0°, 7.4°, 9.3°, 16.0° 및 21.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 3).
<19>
<16>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.0°, 7.4°, 9.3°, 12.6°, 16.0°, 16.6°, 18.1°, 21.4°, 22.0° 및 22.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 3).
<20>
<19>에 있어서, 도 5에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정(형태 3).
<21>
<16> 내지 <20> 중 어느 하나에 있어서, 수화물인 결정(형태 3).
<22>
<3>에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.7°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 4).
<23>
<22>에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.7°, 14.0° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 4).
<24>
<22>에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.7°, 14.0°, 17.4°, 22.3° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 4).
<25>
<22>에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.9°, 7.6°, 9.7°, 11.6°, 14.0°, 16.0°, 17.4°, 22.3°, 24.6° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 4).
<26>
<25>에 있어서, 도 6에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정(형태 4).
<27>
<3>에 있어서, 분말 X선 회절에서 20.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 5).
<28>
<27>에 있어서, 분말 X선 회절에서 10.9°, 20.0° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 5).
<29>
<27>에 있어서, 분말 X선 회절에서 10.9°, 17.7°, 18.9°, 20.0° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 5).
<30>
<27>에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.0°, 9.6°, 10.9°, 13.0°, 15.3°, 17.7°, 18.9°, 20.0°, 21.5° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 5).
<31>
<30>에 있어서, 도 7에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정(형태 5).
<32>
<2>에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 모노암모늄염의 결정인 결정.
<33>
<32>에 있어서, 분말 X선 회절에서 17.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 6).
<34>
<33>에 있어서, 분말 X선 회절에서 17.0°, 21.6° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 6).
<35>
<33>에 있어서, 분말 X선 회절에서 15.1°, 16.4°, 17.0°, 21.6° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 6).
<36>
<33>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.9°, 8.5°, 12.0°, 15.1°, 16.4°, 17.0°, 21.0°, 21.6°, 22.8° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 6).
<37>
<36>에 있어서, 도 8에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정(형태 6).
<38>
<1>에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 나트륨염의 결정인 결정.
<39>
<38>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<40>
<39>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<41>
<39>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3°, 15.9°, 16.6° 및 22.3°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<42>
<39>에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3°, 13.4°, 14.8°, 15.9°, 16.6°, 20.6°, 22.3°, 23.5° 및 24.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<43>
<42>에 있어서, 도 9에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정.
<44>
<1>에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I)의 결정인 결정.
<45>
<44>에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<46>
<45>에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.6°, 13.9° 및 16.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<47>
<45>에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.6°, 8.9°, 11.4°, 13.9° 및 16.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<48>
<45>에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.6°, 7.9°, 8.9°, 11.4°, 13.9°, 16.8°, 22.1° 및 23.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
<49>
<48>에 있어서, 도 10에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 결정.
<50>
<1> 내지 <49> 중 어느 하나에 따른 결정을 포함하는 약학적 조성물.
본 발명에 의해 제공된 화합물 I의 염 및 이의 결정은 하기 기재된 실시예에 나타난 흡습성, 및 의약품에서 약물 물질로서 사용될 가능성과 같은 특성을 지닌다.
[도 1] 도 1은 화합물 I 암모늄염에 대한 1H NMR 분광사진을 보여준다.
[도 2a] 도 2a는 화합물 I 암모늄염의 결정에 대한 X선 결정학 결과(ORTEP 도면)를 보여주고, 여기서 2개의 분자는 비대칭 결정 단위에 존재한다.
[도 2b] 도 2b는 비대칭 결정 단위에서 제1 분자에 대한 X선 결정학 결과(ORTEP 도면)를 보여준다.
[도 2c] 도 2c는 비대칭 결정 단위에서 제2 분자에 대한 X선 결정학 결과(ORTEP 도면)를 보여준다.
[도 3] 도 3은 실시예 1에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 4] 도 4는 실시예 2에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 5] 도 5는 실시예 3에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 6] 도 6은 실시예 4에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 7] 도 7은 실시예 5에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 8] 도 8은 실시예 6에서 얻은 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 9] 도 9는 실시예 7에서 얻은 화합물 I 나트륨염의 결정의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 10] 도 10은 실시예 8에서 얻은 화합물 I의 결정의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 11] 도 11은 실시예 1에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 12] 도 12는 실시예 2에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 13] 도 13은 실시예 5에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 14] 도 14는 실시예 6에서 얻은 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 15] 도 15는 실시예 7에서 얻은 화합물 I 나트륨염의 결정의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 16] 도 16은 WY STING(pLenti-WT 인간 STING-Puro)에 대한 발현 벡터 지도를 보여준다.
[도 17] 도 17은 약리학적 시험 실시예 6을 수반하고, CT26 이중 종양 모델에서 화합물 I 디암모늄염의 치유 활성을 보여준다.
[도 18] 도 18은 약리학적 시험 실시예 6을 수반하고, CT26 이중 종양 모델에서 화합물 I 디암모늄염의 치유 활성을 보여준다.
[도 19] 도 19는 약리학적 시험 실시예 7을 수반하고, 치료된 종양에 대한 종양 부피 선도 및 생존율 곡선을 보여준다.
[도 20] 도 20은 약리학적 시험 실시예 8을 수반하고, 치료된 종양에 대한 종양 부피 선도 및 생존율 곡선을 보여준다.
[도 21] 도 21은 결정(형태 1)의 TG-DTA 온도기록도를 보여준다.
[도 22] 도 22는 실온(하부 패턴) 및 60℃ 초과(상부 패턴)에서의 결정(형태 1)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다.
[도 23] 도 23은 분말 X선 회절 패턴의 비교를 보여준다: 1) 투과 방법에 의해 분석된 결정(형태 1) 패턴(하부), 2) 반사 방법에 의해 분석된, 60℃ 초과로 가열된 결정(형태 1) 샘플의 패턴(중간), 3) 투과 방법에 의해 분석된 결정(형태 2) 패턴(상부).
[도 24] 도 24는 다양한 온도에서의 결정(형태 1)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다: 1) 실온(하부 패턴), 2) 61 내지 71℃(중간 패턴), 3) 125 내지 134℃(상부 패턴).
[도 25] 도 25는 25℃에서의 형태 1의 흡착 및 탈착 등온선을 보여준다.
[도 26] 도 26은 4일 동안 25℃ 및 94% RH에서의 저장 전(하부 패턴)과 저장 후(상부 패턴) 사이의 형태 1의 PXRD 패턴의 비교를 보여준다.
[도 2a] 도 2a는 화합물 I 암모늄염의 결정에 대한 X선 결정학 결과(ORTEP 도면)를 보여주고, 여기서 2개의 분자는 비대칭 결정 단위에 존재한다.
[도 2b] 도 2b는 비대칭 결정 단위에서 제1 분자에 대한 X선 결정학 결과(ORTEP 도면)를 보여준다.
[도 2c] 도 2c는 비대칭 결정 단위에서 제2 분자에 대한 X선 결정학 결과(ORTEP 도면)를 보여준다.
[도 3] 도 3은 실시예 1에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 4] 도 4는 실시예 2에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 5] 도 5는 실시예 3에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 6] 도 6은 실시예 4에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 7] 도 7은 실시예 5에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 8] 도 8은 실시예 6에서 얻은 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 9] 도 9는 실시예 7에서 얻은 화합물 I 나트륨염의 결정의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 10] 도 10은 실시예 8에서 얻은 화합물 I의 결정의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다. 가로좌표는 회절각(2θ)을 보여주고, 세로좌표는 피크 강도를 보여준다.
[도 11] 도 11은 실시예 1에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 12] 도 12는 실시예 2에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 13] 도 13은 실시예 5에서 얻은 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 14] 도 14는 실시예 6에서 얻은 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6)의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 15] 도 15는 실시예 7에서 얻은 화합물 I 나트륨염의 결정의 흡습성을 보여주는 그래프이다. 가로좌표는 상대 습도를 보여주고, 세로좌표는 중량 변화를 보여준다.
[도 16] 도 16은 WY STING(pLenti-WT 인간 STING-Puro)에 대한 발현 벡터 지도를 보여준다.
[도 17] 도 17은 약리학적 시험 실시예 6을 수반하고, CT26 이중 종양 모델에서 화합물 I 디암모늄염의 치유 활성을 보여준다.
[도 18] 도 18은 약리학적 시험 실시예 6을 수반하고, CT26 이중 종양 모델에서 화합물 I 디암모늄염의 치유 활성을 보여준다.
[도 19] 도 19는 약리학적 시험 실시예 7을 수반하고, 치료된 종양에 대한 종양 부피 선도 및 생존율 곡선을 보여준다.
[도 20] 도 20은 약리학적 시험 실시예 8을 수반하고, 치료된 종양에 대한 종양 부피 선도 및 생존율 곡선을 보여준다.
[도 21] 도 21은 결정(형태 1)의 TG-DTA 온도기록도를 보여준다.
[도 22] 도 22는 실온(하부 패턴) 및 60℃ 초과(상부 패턴)에서의 결정(형태 1)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다.
[도 23] 도 23은 분말 X선 회절 패턴의 비교를 보여준다: 1) 투과 방법에 의해 분석된 결정(형태 1) 패턴(하부), 2) 반사 방법에 의해 분석된, 60℃ 초과로 가열된 결정(형태 1) 샘플의 패턴(중간), 3) 투과 방법에 의해 분석된 결정(형태 2) 패턴(상부).
[도 24] 도 24는 다양한 온도에서의 결정(형태 1)의 분말 X선 회절 패턴을 보여준다: 1) 실온(하부 패턴), 2) 61 내지 71℃(중간 패턴), 3) 125 내지 134℃(상부 패턴).
[도 25] 도 25는 25℃에서의 형태 1의 흡착 및 탈착 등온선을 보여준다.
[도 26] 도 26은 4일 동안 25℃ 및 94% RH에서의 저장 전(하부 패턴)과 저장 후(상부 패턴) 사이의 형태 1의 PXRD 패턴의 비교를 보여준다.
구현예의 설명
본 발명의 화합물 I의 염, 이의 결정, 및 이의 제조 방법은 하기 기재될 것이다.
본원에 사용된 바와 같은, "염"은 산성 성분으로서의 화합물 I 및 화합물 I에 대한 특정 수의 당량의 염기로 구성된 화학적 엔티티(chemical entity)를 지칭한다. 여기서, 용어 "화학식 I로 표시된 (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 및 수산화나트륨, 탄산나트륨, 에탄올 중 암모니아 및 수산화암모늄 등으로 이루어진 군으로부터 선택된 염기의 염"은 "수산화나트륨, 탄산나트륨, 에탄올 중 암모니아 및 수산화암모늄 등으로 이루어진 군으로부터 선택된 염기로 형성된 화학식 I로 표시된 (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I)의 염"과 동일한 의미로 사용된다.
본원에 사용된 "염"의 예는 무기 염기를 갖는 염을 포함하며, 특히 약학적으로 허용 가능한 염이 바람직하다.
화합물 I의 염은 또한 용매화물 또는 수화물일 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 화합물 I의 염의 용매화물 또는 수화물은 용매 분자 또는 물 분자와 함께 화합물 I의 염으로부터 형성된 고체를 의미한다. 용매화물 중의 용매의 예는 케톤 용매, 예컨대 아세톤, 메틸 에틸 케톤 또는 사이클로헥사논; 에스테르 용매, 예컨대 에틸 아세테이트 또는 메틸 아세테이트; 에테르 용매, 예컨대 1,2-디메톡시에탄 또는 메틸-tert-부틸 에테르; 알코올 용매, 예컨대 메탄올, 에탄올, 1-프로판올 또는 이소프로판올; 극성 용매, 예컨대 N-메틸-2-피롤리돈, N,N-디메틸포름아미드 또는 디메틸 설폭사이드를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, "결정"은 화합물 I의 염의 결정 또는 화합물 I의 결정을 지칭한다. 따라서, 화합물 I 암모늄염의 결정은 예를 들어 화합물 I과 암모니아(또는 수산화암모늄) 사이에 형성된 염의 결정을 의미한다. 또한, 화합물 I 디암모늄염의 결정은, 예를 들어 화합물 I의 하나의 분자와 암모니아(또는 수산화암모늄)의 2개의 분자 사이에 형성된 염의 결정을 의미한다.
본원에서 바람직한 결정의 예는 하기를 포함한다:
(a1) 분말 X선 회절에서 8.3°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1);
(a2) 분말 X선 회절에서 8.3° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1);
(a3) 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1);
(a4) 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3°, 12.7°, 16.6° 및 25.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1);
(a5) 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3°, 12.7°, 16.6°, 22.1°, 22.8° 및 25.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1);
(a6) 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3°, 12.7°, 14.6°, 16.6°, 18.1°, 22.1°, 22.8°, 24.4° 및 25.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1);
(b1) 분말 X선 회절에서 9.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2);
(b2) 분말 X선 회절에서 9.0° 및 15.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2);
(b3) 분말 X선 회절에서 9.0°, 15.4° 및 20.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2);
(b4) 분말 X선 회절에서 9.0°, 15.4°, 20.8°, 24.0° 및 30.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2);
(b5) 분말 X선 회절에서 9.0°, 11.8°, 15.4°, 20.8°, 24.0°, 30.0° 및 31.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2);
(b6) 분말 X선 회절에서 7.0°, 9.0°, 11.8°, 13.2°, 15.4°, 19.7°, 20.8°, 24.0°, 30.0° 및 31.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2);
(c1) 분말 X선 회절에서 7.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3);
(c2) 분말 X선 회절에서 7.4° 및 16.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3);
(c3) 분말 X선 회절에서 7.4°, 16.0° 및 21.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3);
(c4) 분말 X선 회절에서 6.0°, 7.4°, 9.3°, 16.0° 및 21.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3);
(c5) 분말 X선 회절에서 6.0°, 7.4°, 9.3°, 12.6°, 16.0°, 16.6° 및 21.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3);
(c6) 분말 X선 회절에서 6.0°, 7.4°, 9.3°, 12.6°, 16.0°, 16.6°, 18.1°, 21.4°, 22.0° 및 22.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3);
(d1) 분말 X선 회절에서 9.7°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4);
(d2) 분말 X선 회절에서 9.7° 및 14.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4);
(d3) 분말 X선 회절에서 9.7°, 14.0° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4);
(d4) 분말 X선 회절에서 9.7°, 14.0°, 17.4°, 22.3° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4);
(d5) 분말 X선 회절에서 7.6°, 9.7°, 14.0°, 17.4°, 22.3°, 24.6° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4);
(d6) 분말 X선 회절에서 5.9°, 7.6°, 9.7°, 11.6°, 14.0°, 16.0°, 17.4°, 22.3°, 24.6° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4);
(e1) 분말 X선 회절에서 20.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5);
(e2) 분말 X선 회절에서 20.0° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5);
(e3) 분말 X선 회절에서 10.9°, 20.0° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5);
(e4) 분말 X선 회절에서 10.9°, 17.7°, 18.9°, 20.0° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5);
(e5) 분말 X선 회절에서 10.9°, 13.0°, 17.7°, 18.9°, 20.0°, 21.5° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5);
(e6) 분말 X선 회절에서 9.0°, 9.6°, 10.9°, 13.0°, 15.3°, 17.7°, 18.9°, 20.0°, 21.5° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5);
(f1) 분말 X선 회절에서 17.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6);
(f2) 분말 X선 회절에서 17.0° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6);
(f3) 분말 X선 회절에서 17.0°, 21.6° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6);
(f4) 분말 X선 회절에서 15.1°, 16.4°, 17.0°, 21.6° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6);
(f5) 분말 X선 회절에서 12.0°, 15.1°, 16.4°, 17.0°, 21.6°, 22.8° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6);
(f6) 분말 X선 회절에서 6.9°, 8.5°, 12.0°, 15.1°, 16.4°, 17.0°, 21.0°, 21.6°, 22.8° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6);
(g1) 분말 X선 회절에서 6.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 나트륨염의 결정;
(g2) 분말 X선 회절에서 6.1° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 나트륨염의 결정;
(g3) 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 나트륨염의 결정;
(g4) 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3°, 15.9°, 16.6° 및 22.3°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 나트륨염의 결정;
(g5) 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3°, 13.4°, 15.9°, 16.6°, 20.6° 및 22.3°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 나트륨염의 결정;
(g6) 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3°, 13.4°, 14.8°, 15.9°, 16.6°, 20.6°, 22.3°, 23.5° 및 24.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 나트륨염의 결정;
(h1) 분말 X선 회절에서 5.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 결정;
(h2) 분말 X선 회절에서 5.6° 및 13.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 결정;
(h3) 분말 X선 회절에서 5.6°, 13.9° 및 16.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 결정;
(h4) 분말 X선 회절에서 5.6°, 8.9°, 11.4°, 13.9° 및 16.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 결정; 및
(h5) 분말 X선 회절에서 5.6°, 7.9°, 8.9°, 11.4°, 13.9°, 16.8°, 22.1° 및 23.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는, 화합물 I의 결정.
상기 기재된 분말 X선 회절의 피크는 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 1), 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 2), 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 3), 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 4), 화합물 I 디암모늄염의 결정(형태 5), 화합물 I 모노암모늄염의 결정(형태 6), 화합물 I 나트륨염의 결정 및 화합물 I의 결정 각각에 특징적이다.
일반적으로, 분말 X선 회절에서 ± 0.2°의 범위 내의 회절각(2θ)의 오차가 생길 수 있고, 이에 따라 회절각의 상기 기재된 값은 대략 ± 0.2° 범위 내의 값을 포함하는 것으로 고려될 필요가 있다. 따라서, 분말 X선 회절에서 정확히 동일한 회절각에서의 피크를 갖는 결정뿐만 아니라 회절각의 대략 ± 0.2°의 오차 범위 내의 피크를 갖는 결정이 본 발명에 포함된다. 그러므로, 본원에 사용된 바와 같은 "8.3°의 회절각 (2θ ± 0.2°)에서 회절 피크를 갖는은 예를 들어 "8.1° 내지 8.5°의 회절각(2θ)에서 회절 피크를 갖는을 의미한다. 또한 동일사항이 다른 회절각에도 적용된다.
일반적으로, 분말 X선 회절에서의 회절각(2θ)의 피크 강도 및 반값 폭은 측정 조건의 차이, 및 분말 결정의 각 입자의 크기 및 형상의 분산 때문에 각각의 측정에 있어 상이하고, 결정의 형태가 동일하더라도 항상 안정하지는 않다. 따라서, 분말 X선 회절 패턴을 비교하는 경우에, 회절각(2θ)이 동일하지만, 피크 강도, 상대 피크 강도 및 반값 폭이 상이할 때, 그 차이는 측정된 결정의 형태가 서로 다르다는 것을 암시하지 않는다. 따라서, 본 발명에 따라 특정 염의 결정의 특징적인 회절 피크와 관련하여 상기 언급된 차이를 갖는, 분말 X선 회절 패턴을 갖는 염의 결정은 그 결정이 본 발명에 따라 염의 결정의 동일한 결정 형태를 갖는다는 것을 의미한다.
본원에 사용된 바와 같은 "도 3에 도시된 분말 X선 회절 패턴과 실질적으로 동일한 분말 X선 회절 패턴을 가진"은 이것이 도 3에 도시된 바와 같은 정확히 동일한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 경우뿐만 아니라 피크 강도, 상대 피크 강도 및 반값 폭이 상이한 경우, 또는 회절각의 대략 ± 0.2°의 오차 범위 내의 특징적인 피크를 갖는 경우를 포함한다는 것을 의미한다. 따라서, 이러한 분말 X선 회절 패턴을 갖는 모든 결정은 그 결정이 본 발명에 따른 결정과 동일하다는 것을 의미한다.
화합물 I의 염 및 이의 결정을 제조하는 방법이 자세히 기재될 것이다.
(화합물 I의 제조)
화합물 I은 하기 제조 실시예 1 또는 제조 실시예 2에 구체적으로 기재된 바와 같이 합성될 수 있다.
(화합물 I의 염을 제조하는 방법)
화합물 I의 염은 염을 제조하기 위한 종래의 방법에 의해 얻어질 수 있다. 구체적으로, 이것은 예를 들어 화합물 I를 필요한 경우 가열하면서 용매에 현탁하거나 용해시킴으로써, 이후 얻은 현탁액 또는 용액에 염기(예를 들어, 나트륨염의 경우 수산화나트륨, 탄산나트륨; 모노암모늄염 또는 디암모늄염의 경우 에탄올 중의 암모니아 및 수산화암모늄)를 첨가함으로써, 그리고 생성된 현탁액 또는 용액을 실온에서 또는 얼음 욕 냉각으로 수분 내지 수일 동안 교반하거나 정치시킴으로써 제조될 수 있다. 화합물 I의 염은 제조 방법에 따라 결정 또는 무정형 물질로서 얻어질 수 있다. 이들 방법에 사용될 용매의 예는 알코올 용매, 예컨대 에탄올, 1-프로판올 및 이소프로판올; 아세토니트릴; 케톤 용매, 예컨대 아세톤 및 2-부타논; 에스테르 용매, 예컨대 에틸 아세테이트; 포화 탄화수소 용매, 예컨대 헥산 및 헵탄; 에테르 용매, 예컨대 t-부틸 메틸 에테르 또는 물을 포함한다. 이들 용매 각각은 단독으로 사용될 수 있거나, 2종 이상이 혼합되어 사용될 수 있다.
(화합물 I의 염의 결정을 제조하는 방법)
화합물 I의 염의 결정은 화합물 I의 염을 제조하기 위한 상기 언급된 방법에 의해 제조되거나, 화합물 I의 염을 용매 중에 열 용해하고 이를 교반하면서 냉각을 통해 결정화함으로써 제조될 수 있다.
결정화에 사용될 화합물 I의 염은 임의의 형태일 수 있다: 이는 용매화물, 수화물, 무수물, 무정형 물질, 결정질 물질(복수의 결정질 다형체로 이루어진 것을 포함) 또는 이들의 조합일 수 있다.
결정화에 사용될 용매의 예는 알코올 용매, 예컨대 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 및 1-프로판올; 아세토니트릴; 아미드 용매, 예컨대 N,N-디메틸포름아미드; 에스테르 용매, 예컨대 에틸 아세테이트; 포화 탄화수소 용매, 예컨대 헥산 및 헵탄; 케톤 용매, 예컨대 아세톤 및 2-부타논; 에테르 용매, 예컨대 t-부틸 메틸 에테르 또는 물을 포함한다. 추가로, 이들 용매 각각은 단독으로 사용될 수 있거나, 2종 이상이 혼합되어 사용될 수 있다.
사용될 용매의 양은 적절하게 선택될 수 있지만, 단 하한은 화합물 I의 유리 형태 또는 이의 염이 가열에 의해 용해되거나 현탁액이 교반될 수 있는 양이고, 상한은 그 결정의 수율이 상당히 감소하지 않는 양이다.
시드 결정(예를 들어, 화합물 I의 원하는 염의 결정)은 결정화 동안 첨가될 수 있거나 첨가되지 않을 수 있다. 시드 결정이 첨가되는 온도는 특별히 제한되지는 않지만, 바람직하게는 0 내지 80℃이다.
화합물 I의 염이 가열에 의해 용해될 때 사용될, 화합물 I이 용해되는 온도가 용매에 따라 적절하게 선택될 수 있지만, 이는 바람직하게는 재결정화 용매가 환류하기 시작하는 온도 내지 50℃, 그리고 보다 바람직하게는 65 내지 55℃의 범위 내이다.
결정화 동안의 냉각은, 신속한 냉각의 경우에 결정의 상이한 형태(다형성)를 함유하는 물질을 생성시킬 수 있다. 따라서, 결정의 품질, 입도 등에 대한 효과의 고려사항에 기초하여 적절히 냉각 속도를 조절하면서 냉각을 수행하는 것이 바람직하다. 예를 들어, 40 내지 5℃/시간의 냉각 속도에서의 냉각이 바람직하다. 예를 들어, 25 내지 5℃/시간의 냉각 속도에서의 냉각이 더욱 바람직하다.
추가로, 최종 결정화 온도는 결정의 수율, 품질 등에 적절하게 선택될 수 있지만, 바람직하게는 30 내지 -25℃이다.
형성된 결정을 종래의 여과 절차를 통해 단리시키고, 필요한 경우 여과된 결정을 용매로 세척하고, 추가로 건조함으로써 목표 결정을 얻을 수 있다. 결정화에서와 동일한 용매를 결정을 세척하기 위해 사용될 용매로서 사용할 수 있다. 추가로, 이들 용매 각각은 단독으로 사용될 수 있거나, 2종 이상이 혼합되어 사용될 수 있다. 바람직하게는, 이것은 예를 들어 아세톤, 2-부타논, 에틸 아세테이트, t-부틸 메틸 에테르, 헥산 또는 헥산/2-부타논의 혼합 용매이다.
여과 절차를 통해 단리된 결정은 공기 중에 또는 질소 흐름 하에 이것을 정치시킴으로써 또는 가열함으로써 적절하게 건조될 수 있다.
건조 시간으로서, 잔류 용매의 양이 소정량보다 적게 될 때까지의 시간은 제조량, 건조 장치, 건조 온도 등에 따라 적절히 선택될 수 있다. 추가로, 건조는 기류 하에 또는 감압 하에 수행될 수 있다. 압력 감소의 정도는 제조량, 건조 장치, 건조 온도 등에 따라 적절히 선택될 수 있다. 얻은 결정은 건조 후 필요에 따라 공기 중에 정치될 수 있다.
(화합물 I의 결정을 제조하는 방법)
화합물 I의 결정은 상기 기재된 바와 같은 결정을 제조하기 위한 종래의 방법에 의해 얻어질 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 첨가제를 화합물 I의 염 또는 이의 결정과 혼합함으로써 제조될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 일본 약전 17판의 제조에 대한 일반 규칙에 기재된 방법과 같은 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 투여형에 따라 환자에게 적절하게 투여될 수 있다.
화합물 I의 염 또는 이의 결정이 STING 경로를 강력하게 활성화할 수 있고 강력한 항종양 활성을 보여주므로, 본 발명의 약학적 조성물은 암을 치료하기 위한 치료제로서 이용가능성을 갖는다. 암의 예는 신경교종, 흑색종 및 결장암을 포함한다.
화합물 I의 염 또는 이의 결정의 투약량은 증상의 정도, 연령, 성별, 체중, 투여형, 염의 유형, 특정 질병의 유형 등에 따라 변한다. 성인의 경우에, 전형적으로, 매일 약 30 ㎍ 내지 10 g, 바람직하게는 100 ㎍ 내지 5 g, 그리고 보다 바람직하게는 100 ㎍ 내지 1 g이 경구로 투여될 수 있거나, 매일 약 30 ㎍ 내지 1 g, 바람직하게는 100 ㎍ 내지 500 ㎎, 그리고 보다 바람직하게는 100 ㎍ 내지 300 ㎎이 각각의 경우에 단회 용량으로 또는 분할 용량으로 주사에 의해 투여된다.
실시예
이하, 본 발명은 제조 실시예 및 실시예와 함께 자세히 기재될 것이다. 그러나, 본 발명을 이들 실시예에 의해 제한하려는 것은 아니다.
하기 약어가 실시예에 걸쳐 사용될 수 있다.
DMT: 4,4'-디메톡시트리틸
(DMTO-:
Bz: 벤조일
CE: 시아노에틸
(
)
DEAD: 디에틸 아조디카복실레이트
DIAD: 디이소프로필 아조디카복실레이트
DCM: 디클로로메탄
DDTT: N,N-디메틸-N'-(3-티옥소-3H-1,2,4-디티아졸-5-일)포름이미드아미드
DMOCP: 2-클로로-5,5-디메틸-1,3,2-디옥사포스피난 2-옥사이드
TBS: t-부틸디메틸실릴
3H-벤조[c][1,2]디티올-3-온:
MTBE: 메틸 t-부틸 에테르
분말 X선 회절
각각의 결정질 샘플을 분말 X선 회절계의 샘플대에 배치하고, 하기 조건 중 하나 하에 분석을 수행하였다.
투과 방법 조건
설비: X'Pert Pro MPD 또는 Empyrean(Spectris)
X선 소스: CuKα(45 kV, 40 mA)
광학 시스템: 초점 거울
솔러 슬릿: 0.02 또는 0.04 라디안
검출기: X'Celerator 또는 PIXcel1D 검출기(반도체 검출 시스템)
모드: 투과
스캔 범위: 3° 또는 5° 내지 35° 또는 40°
단계 크기: 0.013, 0.017° 또는 0.033°
스캔 단계 시간: 9초, 19초, 305초, 1976초 또는 2000초
샘플 홀더: Kapton(등록 상표) 필름
반사 방법 조건
기기: RINT TTR-III(Rigaku)
X선 소스: CuKα(50 kV, 300 mA)
검출기: 섬광 계수기
모드: 반사
슬릿: 0.5 ㎜(발산 슬릿), 개방(산란 슬릿), 개방(수광 슬릿)
스캔 속도: 5° 또는 10°/분
샘플링 간격: 0.02°
스캔 범위: 3° 또는 5° 내지 35°
샘플 홀더: 알루미늄 홀더
1
H NMR: 양성자 핵 자기 공명
커플링 상수는 헤르츠(Hz)로 기록된다. 분할 패턴의 약어는 하기와 같다:
s: 일중항, d: 이중항, t: 삼중항, q: 사중항, m: 다중항, bs: 넓은 일중항, br s: 넓은 일중항, dd: 이중항의 이중항, dt: 삼중항의 이중항, br d: 넓은 이중항, br t: 넓은 삼중항
달리 표시되지 않는 한, 1H NMR 스펙트럼을 Bruker 300 MHz 또는 400 MHz NMR에서 취했다.
흡습성
얻은 고체를 샘플링 컵에 칭량하고, 샘플링 컵을 25℃에서 등온 챔버 내부에 배치하였다. 상대 습도(RH)를 중량측정 증기 수착 시스템을 사용하여 0% 내지 95% 조정하고, 각각의 RH 단계에서의 샘플 중량을 예비결정된 시간 간격 내에(예를 들어, 2분마다) 측정하였다. 각각의 RH 단계에서의 중량 변화를 단계별 방식으로 평가하고, 이후 하기 기준 하에 마지막으로 결정하였다. 각각의 측정에 대한 최대 중량 변화는 5분에 0.01%(w/w) 미만 또는 1분에 0.002%(w/w)이다.
제조 실시예 1: 화합물 I의 합성
단계 A
THF(1.1 ℓ) 중의 (2R,3R,4R,5R)-5-(6-벤즈아미도-9H-퓨린-9-일)-2-((비스(4-메톡시페닐) (페닐)메톡시)메틸)-4-플루오로테트라하이드로퓨란-3-일 (2-시아노에틸) 디이소프로필포스포르아미다이트(화합물 1)(인 부분입체이성질체의 혼합물; 80.0 g, 91.332 mmol, 1 당량, ChemGenes Corporation 카탈로그# ANP-9151), 알릴 알코올(9.63 ㎖, 142 mmol, 1.55 당량) 및 트리페닐포스핀(38.3 g, 146 mmol, 1.60 당량)의 혼합물에 주위 온도에서 DEAD(톨루엔 중 40 wt% 용액; 54.2 ㎖, 137 mmol, 1.5 당량)를 첨가하였다. 주위 온도에서 계속해서 교반하고, 반응물을 LC/MS에 의해 모니터링하였다. 완료 시(19시간), 혼합물을 진공에서 농축시키고(35℃), 생성된 혼합물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(800 g x 2 칼럼, 0.5% 트리에틸아민으로 완충된 n-헵탄 중의 40 내지 60% EtOAc)에 의해 정제하여 화합물 2를 백색 폼(84.2 g, 정량적 수율, 인 부분입체이성질체의 혼합물)으로서 생성하였다.
1H NMR (인 부분입체이성질체의 3:2 혼합물, 400 MHz, CDCl3) δ1.14-1.21 (m, 12 H), 2.40 (t, J=6.2 Hz, 1.2 H), 2.59 (t, J=6.2 Hz, 0.8 H), 3.27 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 3.52-3.66 (m, 5 H), 3.78 (s 2.4 H), 3.79 (s 3.6 H), 4.28 - 4.34 (m, 1 H), 4.84 - 4.96 (m, 0.4 H), 4.99 (d, J=5.5 Hz, 2 H), 4.95-5.10 (m, 0.6 H), 5.05 (d, J=10.9 Hz, 1 H), 5.22 (br d, J=17.6 Hz, 1 H), 5.64 (br d, J=53.2 Hz, 0.6 H), 5.70 (br d, J=51.6 Hz, 0.4 H), 5.96 - 6.75 (m, 1 H), 6.20 (d, J=16.0 Hz, 0.6 H), 6.24 (d, J=17.2Hz, 0.4 H), 6.74 - 6.79 (m, 4 H), 7.02 - 7.06 (m, 2H), 7.17 - 7.24 (m, 8 H), 7.32 - 7.34 (m, 2 H), 7.41 - 7.44 (m, 2 H), 8.11 (s, 1H), 8.52 (s, 0.4 H), 8.54 (s, 0.6 H).
단계 B
아세토니트릴(30 ㎖) 중의 화합물 2(3.00 g, 3.28 mmol, 1 당량)의 용액에 물(0.118 ㎖, 6.55 mmol, 2.0 당량) 및 피리딘 트리플루오로아세테이트 염(0.759 g, 3.93 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 주위 온도에서 1분 동안 교반한 후, tert-부틸아민(14.5 g, 21.0 ㎖, 0.20 mol, 60 당량)을 첨가하였다. 시아노에틸기의 완전한 절단 시(LC/MS에 의해 모니터링됨), 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 아세토니트릴과 2회 공비시켰다. 미정제 혼합물을 DCM(45.0 ㎖)에 용해시키고, 주위 온도에서 물(0.118 ㎖, 6.55 mmol, 2.0 당량) 및 NaHSO4-SiO2(1.18 g, 6.55 mmol, 2 당량)로 처리하였다. DMT 기의 완전한 절단 시(LC/MS에 의해 모니터링됨, 대략 1시간), 반응 혼합물을 여과시키고, DCM/MeOH(9/1, 20 ㎖)로 2회 세정하였다. 합한 여과액을 진공에서 농축시키고, n-헵탄/톨루엔의 1:1 혼합물(약 30 ㎖)로 처리하였다. 상층을 경사여과에 의해 제거하였다. 동일한 조작을 n-헵탄/톨루엔(1/1, 30 ㎖)으로 1회 더 반복하고, 바닥층을 아세토니트릴과 2회 공비시켜 화합물 3(100% 이론적 수율 추정)을 생성하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 C
아세토니트릴(30 ㎖) 중의 화합물 3(1.56 g, 3.27 mmol, 1 당량)과 화합물 1(3.00 g, 3.28 mmol, 1 당량)의 혼합물에 피리딘 트리플루오로아세테이트 염(피리딘과 공비 건조됨; 0.760 g, 3.94 mmol, 1.25 당량)을 첨가하였다. 5분 후, DDTT(0.840 g, 4.09 mmol, 1.30 당량, ChemGenes Corporation 카탈로그# RN-1588)를 첨가하고, 완전한 황화 시(LC/MS에 의해 모니터링됨), 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM(30 ㎖)에 용해시키고, DCM(30 ㎖) 중의 물(0.57 ㎖, 32 mmol, 10 당량) 및 6% 디클로로아세트산(1.56 ㎖, 18.9 mmol, 6.0 당량)으로 처리하였다. 20분 후, 반응물을 피리딘(20 ㎖)으로 켄칭하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 피리딘과 공비시켜 화합물 4(3.22 g, 100% 이론적 수율 추정)를 생성하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 D
피리딘(100 ㎖) 중의 화합물 4(3.22 g, 3.15 mmol, 1 당량)의 용액에 주위 온도에서 DMOCP(1.45 g, 7.88 mmol, 2.50 당량)를 첨가하였다. 완전한 거대고리화 시(LC/MS에 의해 모니터링됨), 물(1.7 ㎖, 94.5 mmol, DMOCP에 대해 x10배), 이어서 3H-벤조[c][1,2]디티올-3-온(0.795 g, 4.73 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 완전한 황화 시(대략 40분), 반응 혼합물을 부분적으로 대략 15 ㎖로 진공에서 농축시키고, 포화 수성 NaHCO3(50 ㎖)과 물(30 ㎖)의 혼합물에 부었다. 주위 온도에서 10분 교반한 후, 혼합물을 EtOAc/MTBE의 1:1 혼합물(60 ㎖ x 3회)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수(25 ㎖)로 세척하고, MgSO4 위에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(DCM 중의 0 내지 20% MeOH)에 의해 정제하여 화합물 5(3.31 g, 3.20 mmol, 100% 이론적 수율 추정)를 갈색 오일로서 생성하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 E
아세토니트릴(66.2 ㎖) 중의 화합물 5(3.31 g, 3.20 mmol, 1 당량)의 용액에 2-니트로벤질 브로마이드(2.42 g, 11.2 mmol, 3.50 당량) 및 트리에틸아민(1.78 ㎖, 12.8 mmol, 4.00 당량)을 첨가하였다. 완전한 반응 시(LC/MS에 의해 모니터링됨, 주위 온도에서 대략 20시간), 반응 혼합물을 진공에서 농축시키고, 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(60% 에틸 아세테이트/n-헵탄 내지 100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 0.568 g의 생성물을 인 부분입체이성질체의 혼합물로서 생성하였다. 부분입체이성질체의 분취용 HPLC 분리는 화합물 6(SR 이성질체; 0.225 g, 0.180 mmol, 화합물 2로부터의 5.6% 전체 수율) 및 화합물 7(RR 이성질체; 0.187 g, 0.149 mmol, 화합물 2로부터의 4.7% 전체 수율)을 생성하였다.
화합물 6 (SpRp) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ(ppm): 8.63 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.04 - 8.00 (m, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.65 - 7.44 (m, 8H), 7.40 - 7.31 (m, 4H), 7.25 - 7.21 (m, 4H), 6.15 - 5.89 (m, 5H), 5.61 (dd, J = 52.0, 5.1 Hz, 1H), 5.55 (ddd, J = 51.2, 4.7, 2.7 Hz, 1H), 5.51 - 5.42 (m, 1H), 5.31 - 5.22 (m, 2H), 5.11 (dd, J = 3.9, 9.8 Hz, 2H), 5.04 - 4.95 (m, 4H), 4.55 - 4.37 (m, 7H), 4.29 - 4.12 (m, 3H).
화합물 7 (RpRp) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ(ppm): 8.65 (s, 2H), 8.06 (dd, J = 1.4, 8.0 Hz, 2H), 7.98 (s, 2H), 7.57 - 7.52 (m, 6H), 7.47 - 7.32 (m, 6H), 7.25 - 7.21 (m, 4H), 6.15 (d, J = 18.7 Hz, 2H), 6.09 - 5.99 (m, 2H), 5.82-5.76 (m, 2H), 5.60 (dd, J = 51.8, 4.9 Hz, 2H), 5.27 (dd, J = 1.2, 17.2 Hz, 2H), 5.12 (dd, J = 1.0, 10.4 Hz, 2H), 5.06 - 4.96 (m, 4H), 4.55 - 4.40 (m, 4H), 4.36 - 4.24 (m, 4H), 4.21 - 4.02 (m, 2H).
분취용 HPLC 조건:
단계 F
톨루엔(519 ㎖) 중의 화합물 6(519 ㎎, 0.414 mmol, 1 당량)의 가열(90℃)된 용액에 Hoveyda-Grubbs Catalyst™ 2세대((1,3-비스-(2,4,6-트리메틸페닐)-2-이미다졸리디닐리덴)디클로로 (o-이소프로폭시페닐메틸렌)루테늄; SIGMA-ALDRITCH(등록 상표) 카탈로그 569755호에서 입수 가능; CAS 301224-40-8; 91 ㎎, 0.15 mmol, 0.35 당량) 및 퀴논(0.102 ㎖, 1.243 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 환류로 가열하고, 반응 진행을 LC/MS에 의해 모니터링하였다. 3시간 후, 추가 촉매(91 ㎎, 0.15 mmol, 0.35 당량)를 첨가하고, 추가 3시간 동안 계속해서 반응시켰다. 냉각 후, 혼합물을 15시간 동안 주위 온도에서 DMSO(0.59 ㎖, 8.3 mmol, 20 당량)로 처리하고, 진공에서 농축시키고, 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(SiO2 25 g, n-헵탄 중의 66% 에틸 아세테이트 내지 100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 화합물 8(200 ㎎, 0.163 mmol, 39% 수율)을 갈색 건조 폼으로서 생성하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ (ppm): 8.19 (s, 1H), 8.12 (dd, J = 7.8 Hz, 1.9 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.63 (br d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.53 - 7.41 (m, 10H), 7.35 - 7.30 (m, 2H), 7.25 - 7.20 (m, 4H), 6.23 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.86 - 5.75 (m, 1H), 5.75 (dt, J = 15.3, 5.0 Hz, 1H), 5.67 (dt, J = 15.3, 4.7 Hz, 1H), 5.60 (dd, J = 52.0, 3.9 Hz. 1H), 5.48 (dd, J = 50.4, 3.9 Hz. 1H), 5.50 - 5.39 (m, 1H), 4.91 - 4.64 (m, 4H), 4.57 - 4.25 (m, 9H), 4.15 (d, J = 7.03 Hz, 1H), 4.11 (d, J = 7.03 Hz, 1H).
단계 G
1,4-디옥산(1.76 ㎖) 중의 화합물 8(88 ㎎, 0.072 mmol, 1 당량)의 용액에 티오페놀(0.88 ㎖, 8.55 mmol, 119 당량) 및 트리에틸아민(0.88 ㎖, 6.31 mmol, 88 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 교반하였다. 완전한 반응 시(LC/MS에 의해 모니터링됨, 13시간), 메탄올(5.28 ㎖) 및 28% 수산화암모늄(3.52 ㎖)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 50℃까지 가열하였다. 완전한 반응 시(LC/MS에 의해 모니터링됨, 5시간), 혼합물을 주위 온도까지 냉각시키고, 생성된 갈색 슬러리를 여과시키고, 물(15 ㎖)로 세정하였다. 여과액을 다시 여과시켜 추가 고체를 제거하였다. 최종 여과액을 톨루엔과 n-헵탄의 1:1 혼합물(30 ㎖)로 2회 추출하였다. 수성 층을 진공에서 농축시키고, 이후 물(6 ㎖)에 재현탁시켰다. 생성된 고체를 여과시키고, 여과액을 분취용 HPLC로 처리하여 화합물 I의 디암모늄염(또한 화합물 1a라 칭함)(39 ㎎, 0.050 mmol, 70% 수율)을 백색 고체로서 생성하였다.
화합물 1a (SpRp, 트랜스) 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ (ppm): 9.05 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 6.34 (br s, 2H), 5.88 (br s, 2H), 5.66 (br d, J = 51.6 Hz, 1H), 5.59 (br d, J = 52.2 Hz, 1H), 5.01 (br s, 2H), 4.68-4.34 (m, 6H), 4.07 - 3.82 (m, 2H), 3.79 - 3.55 (m, 2H);
31P NMR (162 MHz, CD3OD) δ(ppm): 55.48 (s, 1P), 55.16 (s, 1P).
화합물 1a 분취용 HPLC 조건:
제조 실시예 2: (화합물 1a에 대한 대안적인 합성)
단계 1
화합물 201(570 g, 1.53 mol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)을 피리딘(2.85 ℓ, 35.2 mol, 4.89 wt, 5.0 vol, 23 당량)에 용해시켰다. 혼합물을 2.6℃까지 냉각시키고, 4,4'-디메톡시트리틸 클로라이드(DMTCl; 543 g, 1.60 mol, 0.953 wt, 1.05 당량)로 처리하였다. 혼합물을 0 내지 5℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 주위 온도까지 가온되게 하였다. 반응물을 LC/MS에 의해 모니터링하고, 완전한 전환은 밤샘 교반 후 확인되었다. 반응 혼합물을 5℃ 미만까지 냉각시키고, 15분 동안 MeOH(124 ㎖, 3.05 mol, 0.172 wt, 0.217 vol, 2.0 당량)으로 처리함으로써 켄칭하였다. 혼합물을 진공 하에 톨루엔(2.00 ℓ, 3.04 wt, 3.51 vol)과 동시증발시키고, 이후 EtOAc(2.850 ℓ, 4.5 wt, 5.0 vol)와 n-헵탄(2.85 ℓ, 3.42 wt, 5.0 vol)의 혼합물로 희석하였다. 유기 층을 포화 NaHCO3(물 중 9 wt% 용액; 2.0 ℓ, 3.5 vol)으로 세척하였다. 추가 EtOAc(2.85 ℓ, 4.5 wt, 5.0 vol)를 첨가하여 미정제 생성물을 완전히 용해시켰다. 5분 동안 교반한 후, 2개의 층을 분리하였다. 유기 층을 물(2.0 ℓ, 3.5 wt, 3.5 vol)로 세척하였다. 고체는 유기 층으로부터 천천히 침전되기 시작하였다. 물 층을 분리하였다. 이후, 유기 층을 대략 1 vol로 농축시켰다. 미정제 생성물을 n-헵탄(2.00 ℓ, 2.40 wt, 3.51 vol)과 톨루엔(0.50 ℓ, 0.76 wt, 0.88 vol)의 혼합물로 슬러리화하였다. 15분 동안 교반한 후, 담황색 고체를 진공 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 (1) n-헵탄(0.60 ℓ, 0.72 wt, 1.05 vol)과 톨루엔(0.30 ℓ, 0.46 wt, 0.53 vol)의 혼합물, 및 이후 (2) n-헵탄(3.00 ℓ, 3.6 wt, 5.26 vol)으로 순차적으로 세정하였다. 고체를 열 없이 30분 동안 건조시키고, 이후 밤새 진공 오븐에서 50℃에서 건조하기 위해 트레이로 옮겨 화합물 202를 담황색 고체(996.7 g, 1.47 mol, 1.75 wt, 97% 수율)로서 생성하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ(ppm): 8.99 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.04 - 8.00 (m, 2H), 7.64 - 7.59 (m, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.32 - 7.15 (m, 7H), 6.83 - 6.76 (m, 4H), 6.31 (dd, J = 2.5, 17.0 Hz, 1H), 5.68 (ddd, J = 2.3, 4.7, 52.7 Hz, 1H), 4.88 - 4.77 (m, 1H), 4.26 - 4.21 (m, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.57 (dd, J = 3.1, 10.9 Hz, 1H), 3.43 (dd, J = 4.1, 10.7 Hz, 1H), 2.60 (br s, 1H).
단계 1'
화합물 201(430 g, 1.15 mol, 1 wt, 1 vol, 1 당량) 및 이미다졸(118 g, 1.73 mol, 0.274 wt, 1.50 당량)을 DMF(1.72 ℓ, 3.78 wt, 4.0 vol)에 용해시키고, 생성된 혼합물을 5℃까지 냉각시켰다. TBS-Cl(191 g, 1.27 mol, 0.444 wt, 1.10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 0 내지 11℃에서 2시간 동안 교반하고, 주위 온도까지 천천히 가온되게 하였다(진행은 LCMS에 의해 모니터링됨). 반응은 TBS-Cl 첨가 6시간 후에 완료되었지만, 추가 20시간 동안 주위 온도에서 교반되게 하였다. 혼합물을 2℃까지 냉각시키고, 10분 동안 메탄올(93 ㎖, 74 g, 2.3 mol, 0.17 wt, 0.22 wt, 2.0 당량)로 처리하였다. 반응 혼합물을 MTBE(1.72 ℓ, 1.23 ㎏, 2.96 wt, 4.0 vol)와 EtOAc(1.72 ℓ, 1.55 ㎏, 3.60 wt, 4.0 vol)의 혼합물, 이어서 포화 NH4Cl(물 중 28 wt% 용액; 2.15 ℓ, 5.0 vol)로 희석하였다. 고체는 용액으로부터 천천히 떨어지기 시작하였다. 혼합물을 24℃까지 가온되게 하고, 물(1.08 ℓ, 1.08 ㎏, 2.5 wt, 2.5 vol)을 (T-내부 = 22℃)까지 첨가하였다. 더 많은 고체가 혼합물로부터 침전되기 시작하였다. 추가 물(1.08 ℓ, 1.08 ㎏, 2.5 wt, 2.5 vol) 및 MTBE(1.40 ℓ, 1.04 ㎏, 2.4 wt, 3.3 vol)를 혼합물에 첨가하였다. 미백색 고체를 진공 여과에 의해 수집하였다. 반응기를 물(320 ㎖, 0.74 vol) 및 이후 MTBE(1.80 ℓ, 1.33 ㎏, 3.10 wt, 4.19 vol)로 세정하여 임의의 남은 고체를 필터로 옮겼다. 필터 케이크를 (1) 물(1.80 ℓ, 1.80 ㎏, 4.2 wt, 4.2 vol), (2) 물(1.80 ℓ, 1.80 ㎏, 4.2 wt, 4.2 vol), (3) MTBE(0.90 ℓ, 0.67 ㎏, 1.5 wt, 2.1 vol)와 n-헵탄(0.90 ℓ, 0.62 ㎏, 1.4 wt, 2.1 vol)의 혼합물, (4) MTBE(0.90 ℓ, 0.67 ㎏, 1.5 wt, 2.1 vol)와 n-헵탄(0.90 ℓ, 0.62 ㎏, 1.4 wt, 2.1 vol)의 혼합물로 순차적으로 세정하였다. 회수된 고체를 진공 하에 40℃에서 2일에 걸쳐 건조시켜 화합물 203을 백색 고체(483 g, 0.991 mol, 1.12 wt, 86% 수율)로서 생성하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ (ppm): 8.97 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.04 - 8.00 (m, 2H), 7.64 - 7.58 (m, 1H), 7.56 - 7.51 (m, 2H), 6.40 (dd, J = 2.3, 16.0 Hz, 1H), 5.45 (ddd, J = 2.7, 4.3, 53.1 Hz, 1H), 4.75 - 4.66 (m, 1H), 4.22 - 4.17 (m, 1H), 4.07 (dd, J = 2.3, 11.7 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 2.7, 11.7 Hz, 1H), 2.38 (dd, J = 2.7, 7.0 Hz, 1H), 0.92 (s, 9H), 0.11 (s, 3H), 0.11 (s, 3H).
단계 2
화합물 202(993 g, 1.47 mol, 1 wt, 1 vol, 1 당량) 및 이미다졸(150 g, 2.20 mol, 0.151 wt, 1.5 당량)을 DMF(3.48 ℓ, 3.28 ㎏, 3.3 wt, 3.5 vol)에 용해시키고, 혼합물을 5℃까지 냉각시켰다. TBS-Cl(244 g, 1.62 mol, 0.245 wt, 1.10 당량)을 첨가하였다. 반응물을 0 내지 5℃에서 2시간 동안 교반하고, 주위 온도까지 천천히 가온되게 하고, LCMS에 의해 모니터링하였다. 17시간 후, 추가 이미다졸(100 g, 1.47 mol, 0.10 wt, 1.0 당량) 및 TBS-Cl(111 g, 735 mmol, 0.112 wt, 0.50 당량)을 첨가하고, 주위 온도에서 2시간 동안 및 35℃에서 2시간 동안 계속해서 교반하였다. 생성된 혼합물을 13.6℃까지 냉각시키고, 10분 동안 MeOH(119 ㎖, 2.94 mol, 2 당량)로 처리하였다. 별개의 반응기에 얼음(5 ㎏, 5 wt) 및 포화 NH4Cl(물 중 28 wt% 용액; 5.0 ℓ, 5 vol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 얼음/NH4Cl 혼합물에 첨가하였다. 미백색 고체는 용액으로부터 즉시 침전되기 시작하였다. 추가 2 ㎏의 얼음(2 ㎏, 2 wt) 및 물(3.0 ℓ, 3 vol)을 혼합물에 첨가하였다. 반응 플라스크를 물(0.50 ℓ, 0.5 vol)로 세정하고, 세정액을 혼합물에 첨가하였다. n-헵탄(2.00 ℓ, 2 vol)을 혼합물에 첨가하고, 10분 동안 계속해서 교반하였다. 미백색 고체를 진공 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 (1) 물(4.0 ℓ, 4.0 vol), (2) 물(4.0 ℓ, 4.0 vol), (3) n-헵탄(4.0 ℓ, 4.0 vol), (4) n-헵탄(4.0 ℓ, 4.0 vol)으로 세정하였다. 회수된 고체를 진공 하에 45℃에서 4일 동안 건조시켜 화합물 204를 미백색 고체(1.095 ㎏, 1.39 mol, 1.10 wt, 94% 수율)로서 생성하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ (ppm): 9.09 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.02 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.63 - 7.59 (m, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 2H), 7.37 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.29 - 7.17 (m, 7H), 6.79 (d, J = 7.9 Hz, 4H), 6.29 (dd, J = 2.9, 16.2 Hz, 1H), 5.60 (ddd, J = 2.7, 3.9, 53.1 Hz, 1H), 4.78 (ddd, J = 4. 7, 6.4, 15.8 Hz, 1H), 4.26 - 4.22 (m, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.58 (dd, J = 3.1, 10.9 Hz, 1H), 3.26 (dd, J = 3.7, 10.7 Hz, 1H), 0.85 (s, 9H), 0.10 (s, 3H), 0.02 (s, 3H).
단계 3
화합물 204(1000 g, 1.27 mol, 1 wt, 1 vol, 1 당량) 및 트랜스-2-부텐-1,4-디올(1H-NMR에 의해 확인된 올레핀 기하구조; 335 g, 3.80mol, 0.335 wt, 3.0 당량)을 THF(3.0 ℓ, 3.0 vol)와 2회 공비시켰다. 잔류물을 THF(10 ℓ, 10 vol)와 톨루엔(15 ℓ, 15 vol)의 혼합물에 용해시켰다. 트리페닐포스핀(432 g, 1.65 mol, 0.432 wt, 1.3 당량)을 첨가하고, 이후 반응 혼합물을 -5℃까지 냉각시켰다. DIAD(0.320 ℓ, 1.65 mol, 333 g, 0.333 wt, 0.320 vol, 1.3 당량)를 5℃ 미만의 T-내부를 유지시키면서 20분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 반응물을 0 내지 5℃에서 1시간 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터링하였다. 얼음 욕을 제거하고, 혼합물을 실온까지 가온되게 하였다. 밤새 교반한 후(17시간), 트리페닐포스핀(83 g, 0.32 mol, 0.083 wt, 0.25 당량) 및 DIAD(62 ㎖, 0.32 mol, 64 g, 0.064 wt, 0.062 vol, 0.25 당량)를 첨가하였다. 실온에서 추가 1시간 후, 반응 혼합물을 MTBE(10 ℓ, 10 vol)로 희석하고, 반-포화 NaCl(물 중 18 wt% 용액; 2 x 4 ℓ)로 2회 세척하고, 진공에서 걸쭉한 오일로 농축시켰다. 혼합물을 MTBE(4.00 ℓ, 4 vol)와 n-헵탄(0.50 ℓ, 0.5 vol)의 혼합물에 재용해시키고, 이후 0℃까지 냉각시켰다. 트리페닐포스핀 옥사이드의 시드 결정을 용액에 첨가하였다. 고체는 용액으로부터 천천히 침전되기 시작하였고, 이것을 밤새 교반하였다. 백색 고체를 진공 여과에 의해 수집하고, MTBE(2 ℓ, 2 vol)로 세정하여 540 g의 트리페닐포스핀 옥사이드를 단리시켰다. 여과액을 농축시키고, Biotage 150L KP-Sil(SiO2 5 ㎏; 헵탄 중의 1% TEA/EtOAc로 전처리됨; 용리제: n-헵탄/EtOAc(48 ℓ의 33% EtOAc와 1% TEA, 24 ℓ의 50% EtOAc와 1% TEA, 24 ℓ의 66% EtOAc와 1% TEA) → 100% EtOAc와 1% TEA)를 통해 정제하였다. 칼럼을 TLC(2:1 EtOAc/n-헵탄)에 의해 모니터링하였다. 깨끗한 생성물 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 화합물 205를 옅은 백색 폼 고체(634 g, 14 wt%의 DIAD 유래 동시생성물을 함유하였음, 순 545 g, 0.63 mol, 50% 조정된 수율)로서 생성하였다. 혼합물 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 담황색 폼 고체(750 g)을 생성하고, 이것을 Biotage 150M HP-Sphere(2.5 ㎏ SiO2; n-헵탄 중의 1% TEA/EtOAc로 전처리됨; 샘플과 톨루엔 용리제를 로딩: n-헵탄/EtOAc/1% TEA(12 ℓ의 50% EtOAc와 1% TEA, 16 ℓ의 66% EtOAc와 1% TEA) → EtOAc와 1% TEA)를 통해 재정제 처리하였다. 칼럼을 TLC(2/1/0.03 EtOAc/n-헵탄/TEA)에 의해 모니터링하였다. 깨끗한 생성물 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 추가 화합물 205를 옅은 백색 폼 고체(206 g, 0.24 mol, 18% 수율)로서 생성하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ (ppm): 8.58 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 2H), 7.24 - 7.15 (m, 8H), 7.03 - 6.98 (m, 2H), 6.78 - 6.73 (m, 4H), 6.18 (dd, J = 2.7, 17.2 Hz, 1H), 5.88 (td, J = 5.5, 15.6 Hz, 1H), 5.77 (td, J = 5.1, 15.6 Hz, 1H), 5.60 (ddd, J = 2.7, 4.3, 53.1 Hz, 1H), 5.03 - 4.96 (m, 2H), 4.91 (ddd, J = 4.5, 6.6, 16.6 Hz, 1H), 4.18 - 4.14 (m, 1H), 3.88 - 3.82 (m, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.52 (dd, J = 2.7, 10.9 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 3.5, 10.9 Hz, 1H), 0.85 (s, 9H), 0.10 (s, 3H), 0.01 (s, 3H).
단계 4
화합물 205(800 g, 0.930 mol, 1 wt, 1 vol, 1 당량) 및 화합물 203(522 g, 1.07 mol, 0.652 wt, 1.15 당량)을 THF(2 x 3 ℓ, 2 x 3.8 vol)와 공비 건조시키고, 실온에서 THF(9.60 ℓ, 8.45 ㎏, 12.0 vol)에 재용해시켰다. 트리페닐포스핀(317 g, 1.21 mol, 0.396 wt, 1.30 당량)을 첨가하고, 혼합물을 -5℃ 미만까지 냉각시켰다. DIAD(226 ㎖, 1.16 mol, 235 g, 0.294 wt, 0.283 vol, 1.25 당량)를 7℃ 미만의 T-내부에서 첨가하였다. 반응물을 천천히 실온까지 가온되게 하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였다. 21시간 후, 반응 혼합물을 진공에서 걸쭉한 오일로 농축시키고, n-헵탄(2.00, 1.37 ㎏, 1.71 wt, 2.50 vol)과 공비시키고, 이후 MTBE(2.40 ℓ, 1.78 ㎏, 2.2 wt, 3.0 vol)와 n-헵탄(800 ㎖, 547 g, 0.68 wt, 1.0 vol)의 혼합물에 재용해시켰다. 용액을 트리페닐포스핀 옥사이드로 시딩하고, 5℃까지 냉각시키고, n-헵탄(400 ㎖, 274 g, 0.34 wt, 0.50 vol)으로 희석하고, 5℃에서 30분 동안 교반하였다. 백색 고체 침전물을 진공 여과에 의해 수집하고, MTBE와 n-헵탄의 2:1(v/v) 혼합물(1.8 ℓ)로 세정하여 트리페닐포스핀 옥사이드(455 g)를 생성하였다. 여과액을 진공 하에 농축시키고, Biotage 150L KP-Sil(SiO2 5 ㎏; 1% TEA로 전처리됨; 톨루엔 용리제 중에 용해시킴으로써 샘플을 로딩: 9:1 n-헵탄/EtOAc(16 ℓ) 및 15 TEA, 3.6:1(46 ℓ), 2:1(20 ℓ) 및 1% TEA, 1:1(30 ℓ) 및 1% TEA, 및 100% EtOAc(16 ℓ) 및 1% TEA)을 통해 정제하였다. 합한 깨끗한 생성물 분획을 진공 하에 농축시켜 화합물 206을 미백색 고체 폼(662.2 g)으로서 생성하였다. 혼합물 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켰다(480 g). Biotage 150L에 로딩하기 전에 톨루엔(300 ㎖)으로 희석함으로써 형성된 백색 불용성 고체를 진공 여과에 의해 제거하였다. 톨루엔에 가용성인 재료를 Biotage 150M HP-Sphere(SiO2 2.5 ㎏(1% TEA로 전처리됨); 톨루엔과 샘플 로딩; 용리제: 2:1 n-헵탄/EtOAc(26 ℓ)와 1% TEA, 1:1(25 ℓ)과 1% TEA, 1:4(34 ℓ)와 1% TEA)를 통해 정제하였다. 칼럼을 TLC(1:1 n-헵탄/EtOAc)에 의해 모니터링하였다. 합한 깨끗한 생성물 분획을 진공 하에 농축시켜 추가 화합물 206을 미백색 고체 폼(165.5 g. 총 662.2 + 165.5 g = 827.7 g, 930 mmol, 1.03 wt, 67% 수율)으로서 생성하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ (ppm): 8.47 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.38 - 7.31 (m, 5H), 7.27 - 7.19 (m, 6H), 7.14 - 7.06 (m, 3H), 6.93 - 6.87 (m, 2H), 6.76 (d, J = 8.6 Hz, 4H), 6.26 (dd, J = 2.0, 16.0 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.7, 17.2 Hz, 1H), 5.86 (dd, J = 4.7, 15.2 Hz, 1H), 5.80 (dd, J = 4.7, 15.2 Hz, 1H), 5.51 (ddd, J = 2.7, 4.3, 52.8 Hz, 1H), 5.31 (ddd, J = 2.0, 4.3, 52.8 Hz, 1H), 4.87 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 4.85 - 4.81 (m, 1H), 4.79 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 4.71 - 4.59 (m, 1H), 4.20 - 4.13 (m, 2H), 4.06 (dd, J = 2.7, 11.3 Hz, 1H), 3.90 (dd, J = 2.7, 11.7 Hz, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.52 (dd, J = 3.1, 10.9 Hz, 1H), 3.18 (dd, J = 3.9, 10.9 Hz, 1H), 0.92 (s, 9H), 0.84 (s, 9H), 0.10 (s, 3H), 0.09 (s, 6H), 0.07 (s, 3H).
단계 5 및 6
피리딘(1.23 ℓ, 1.21 ㎏, 15.2 mol, 2.9 wt, 3.0 vol, 49 당량) 중의 화합물 206(410.7 g, 309 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)의 용액에 디페닐 포스파이트(90 ㎖, 109 g, 0.46 mol, 0.26 wt, 0.22 vol, 1.5 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 교반하고, LCMS에 의해 모니터링하였다. 2시간 후(80% 전환율), 추가 디페닐 포스파이트(29.9 ㎖, 36.2 g, 155 mmol, 0.088 wt, 0.073 vol, 0.50 당량)를 첨가하였다. 추가 1시간 후, 추가의 디페닐 포스파이트(6.0 ㎖, 7.2 g, 31 mmol, 0.018 wt, 0.015 vol, 0.10 당량)를 첨가하고, 추가 0.5시간 동안(98% 전환율) 계속해서 반응시켰다. 반응 혼합물을 T-내부 4.7 내지 12℃를 유지시키면서 포화 NaHCO3(물 중 9 wt% 용액; 2.1 ℓ, 5 vol)과 물(1.0 ㎖, 2.5 vol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응기를 적은 부피의 EtOAc로 세정하였다. 실온에서 30분 동안 계속해서 교반하고, 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였다(100% 전환율). 반응 혼합물을 EtOAc와 MTBE의 1:1 혼합물(2 x 8.2 ℓ, 2 x 20 vol)로 2회 추출하였다. 합한 유기 층을 물(4.1 ℓ, 10 vol)로 세척하고, 진공에서 농축시키고, 피리딘의 제거를 위해 톨루엔(3 x 4.1 ℓ, 3 x 10 vol; 연속 공급)과 공비시켜 화합물 207(0.55 당량의 피리딘이 남음)을 생성하였다.
단계 6
미정제 화합물 207을 주위 온도에서 디클로로메탄(3.08 ℓ, 4.07 ㎏, 9.9 wt, 7.5 vol)에 용해시켰다. 물(55.7 ㎖, 0.136 vol, 10 당량), 이어서 DCM(3.08 ℓ, 7.5 vol) 중의 디클로로아세트산(77 ㎖, 120 g, 0.93 mol, 0.29 wt, 0.19 vol, 3.0 당량)의 용액을 25℃ 미만의 내부 T를 유지시키면서 첨가하였다. (오렌지색 용액으로 변했다). 30분 후, 트리에틸실란(Et3SiH; 494 ㎖, 359 g, 3.09 mol, 0.875 wt, 1.20 vol, 10.0 당량)(T-내부는 18.2℃로부터 17℃가 되었음)을 첨가하고, 20분 동안 계속해서 교반하였다. 트리에틸아민(431 ㎖, 313 g, 3.09 mol, 0.762 wt, 1.05 vol, 10.0 당량)을 첨가하였다(T-내부는 17.8℃로부터 22℃가 되었음). 혼합물을 1.55 ㎏(3.8 wt)으로 농축시키고, EtOAc(6.2 ℓ, 5.5 ㎏, 14 wt, 15 vol)에 재용해시키고, (1) 물(1.0 ℓ, 2.5 vol) 및 포화 NaHCO3(물 중 9 wt% 용액, 0.82 ℓ, 2.0 vol)으로 순차적으로 세척하였다. 미정제 생성물 EtOAc 용액을 밤새 -20℃에서 저장했다.; 0.82 ℓ, 2.0 vol), 다음 날에 진공에서 용액을 25℃에서 농축시켰다. 이렇게 얻은 미정제 혼합물(654 g)을 (1) n-헵탄(3.01 ℓ, 7.5 vol), (2) n-헵탄(2.46 ℓ, 6.0 vol)과 톨루엔(0.82 ℓ, 2.0 vol)의 혼합물로 분쇄하였다. 용액 부분(상청액)을 경사여과시키고, 바닥에 남은 고체를 아세토니트릴(4.1 ℓ, 10 vol)에 용해시켰다. 진공에서 혼합물을 25℃에서 농축시키고, 아세토니트릴과 2회 공비시켜 화합물 208을 생성하였다. 생성물을 후속하는 단계에 정제 없이 사용하였다(이론적 100% 수율 추정).
단계 7
단계 7a
화합물 208(337 g, 309 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)을 실온에서 무수 피리딘(13.5 ℓ, 13.2 ㎏, 39 wt, 40 vol)에 용해시켰다. 트리에틸아민(129 ㎖, 927 mmol, 94 g, 0.28 wt, 0.38 vol, 3.0 당량), 이어서 2-클로로-5,5-디메틸-1,3,2-디옥사포스피난 2-옥사이드(DMOCP; 103 g, 556 mmol, 0.31 wt, 1.80 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반하고, LCMS에 의해 모니터링(100% 전환율)하여 화합물 209를 생성하였다.
단계 7b
TEA(129 ㎖, 927 mmol, 94 g, 0.28 wt, 0.38 vol, 3.0 당량), 물(100 ㎖, 5.56 mol, 0.30 wt, 0.30 wt, 18 당량) 및 황(34.7 g, 1.08 mol, 0.10 wt, 3.5 당량)을 화합물 209의 상기 혼합물에 첨가하였다. 90분 후(100% 전환율), NaHCO3(물 중 9 wt% 용액; 3.37 ℓ, 10 vol)을 30℃ 미만(16.6℃ 내지 27℃)의 T-내부를 유지시키면서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 염의 제거를 위해 여과시켰다. 여과액을 진공에서 혼합물 농축시키고, MTBE(5.1 ℓ, 15 vol)로 희석하고, NaCl(물 중 30 wt% 용액; 2 x 1.35 ℓ, 2 x 4 vol)로 2회 세척하였다. 불용성 고체를 여과시키고, 여과액을 진공에서 농축시키고, 톨루엔(4.0 ℓ, 12 vol)과 공비시켰다. 생성된 고체를 여과에 의해 제거하고, 미정제 혼합물을 톨루엔에 용해시키고, Biotage 150L KP-Sil(SiO2 5 ㎏; n-헵탄/EtOAc/TEA(1.5/1.5/0.03 CV)로 전처리됨; EtOAc/TEA(3/0.03 CV), EtOAc/MeOH/TEA(4/0.2/0.04 CV), EtOAC/MeOH/TEA(2/0.2/0.02CV)로 용리됨)을 통해 정제하였다. 칼럼을 TLC(EtOAC/MeOH/TEA = 9/1/0.1)에 의해 모니터링하였다. Sp 이성질체를 함유하는 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 화합물 210을 밝은 분홍색 폼 고체(Sp 이성질체; 154 g, 128 mmol, 0.46 wt, 41.3% 수율)로서 생성하였다. Rp 이성질체를 함유하는 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켜 화합물 212를 밝은 분홍색 폼 고체(Rp 이성질체; 64 g, 53 mmol, 0.19 wt, 17% 수율)로서 생성하였다.
화합물 210(Sp 이성질체):
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ (ppm): 8.51 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.38 - 7.27 (m, 4H), 7.25 - 7.21 (m, 2H), 7.14 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 6.44 (dd, J = 2.5, 13.9 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 5.78 (td, J = 6.3, 15.6 Hz, 1H), 5.69 (td, J = 4.7, 15.6 Hz, 1H), 5.56 (dd, J = 3.9, 50.8 Hz, 1H), 5.20 - 5.06 (m, 1H), 4.95 - 4.79 (m, 4H), 4.69 (dd, J = 4.3, 16.0 Hz, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 3H), 4.35 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.32 - 4.29 (m, 1H), 4.05 (dd, J = 1.6, 11.7 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 3.1, 11.7 Hz, 1H), 3.14 - 3.06 (m, 6H), 1.30 (t, J = 7.4 Hz, 9H), 0.91 (s, 9H), 0.90 (s, 9H), 0.12 (s, 3H), 0.08 (s, 3H), 0.06 (s, 3H), 0.05 (s, 3H)
화합물 212(Rp 이성질체):
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ(ppm): 8.54 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.39 - 7.09 (m, 10H), 6.39 (dd, J = 2.3, 14.1 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 3.1 Hz, 2H), 5.68 (dd, J = 4.3, 51.2 Hz, 1H), 5.43 - 5.29 (m, 1H), 5.10 - 4.96 (m, 3H), 4.90 - 4.83 (m, 2H), 4.78 - 4.72 (m, 1H), 4.52 (ddd, J = 3.9, 6.6, 17.2 Hz, 1H), 4.44 - 4.35 (m, 2H), 4.31 - 4.26 (m, 1H), 4.20 - 4.12 (m, 2H), 3.87 (dd, J = 3.5, 11.7 Hz, 1H), 3.79 - 3.77 (m, 1H), 3.15 - 3.09 (m, 6H), 1.33 (t, J = 7.4 Hz, 9H), 0.94 (s, 9H), 0.89 (s, 9H), 0.13 (s, 3H), 0.12 (s, 3H), 0.10 (s, 3H), 0.09 (s, 3H).
단계 8
화합물 210(221 g, 183 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)을 피리딘(530 ㎖, 6.56 mol, 519 g, 2.3 wt, 2.4 vol)과 TEA(2.65 ℓ, 19.0 mol, 1.93 ㎏, 8.7 wt, 12 vol, 104 당량)의 혼합물에 용해시켰다. 트리에틸아민 트리하이드로플루오라이드(264 ㎖, 1.62 mol, 262 g, 1.2 wt, 1.2 vol, 복합체로서 8.9 당량, 27 당량의 HF)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반하는 한편, 전환을 LCMS에 의해 모니터링하였다. 3시간 후(97% 전환율), 메톡시트리메틸실란(TMSOMe; 1.40 ℓ, 10.2 mol, 1.06 ㎏, 4.8 wt, 6.3 vol, 55 당량)을 첨가하고, 30분 동안 계속해서 교반하였다. 반응기가 점착성 고체에 의해 코팅되었다. 용액 부분(상청액)을 경사여과시켰다. 고체를 톨루엔(2 x 2.2 ℓ, 2 x 10 vol; 상청액을 경사여과시킴)으로 2회 분쇄하였다. 반응기에 남은 미정제 고체를 디클로로메탄(2.2 ℓ, 10 vol)에 용해시키고, NH4Cl(물 중 28 wt% 용액; 2.2 ℓ, 10 vol)로 세척하였다. 수성 층을 디클로로메탄(2.2 ℓ, 10 vol)으로 역추출하였다. 합한 유기 층을 NaCl(물 중 36 wt% 용액; 1.1 ℓ, 5 vol)과 물(1.1 ℓ, 5 vol)의 혼합물로 세척하고, 이후 진공 하에 농축시켜 화합물 211을 황갈색 건조 폼(152 g, 155 mmol, 0.70 wt, 85% 수율)으로서 생성하였다. 미정제 생성물을 정제 없이 다음 단계로 넘겼다.
단계 9
화합물 211(150 g, 153 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)을 아세토니트릴(4 ℓ, 27 vol)과 공비시키고, 이후 실온에서 아세토니트릴(1.05 ℓ, 0.83 ㎏, 5.5 wt, 7.0 vol)에 재용해시켰다. 2-니트로벤질 브로마이드(44.4 g, 205 mmol, 0.30 wt, 1.34 당량)를 실온에서 첨가하고, 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였다. 23시간 후(100% 전환율), EtOAc(1.50 ℓ, 10 vol), NH4Cl(물 중 28 wt% 용액; 300 ㎖, 2 vol) 및 물(300 ㎖, 2 vol)을 첨가하고(pH = 6), 생성된 혼합물을 부분적으로 진공 하에 25℃에서 1.11 ㎏의 중량으로 농축시켰다. EtOAc(2.25 ℓ, 15 vol)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 2개의 층을 분리하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트(750 ㎖, 5 vol)로 추출하였다. 합한 유기 층을 (1) NaCl(물 중 36 wt% 용액; 300 ㎖, 2 vol)과 물(300 ㎖, 2 vol)의 혼합물 및 (2) 물(600 ㎖, 4 vol)로 순차적으로 세척하였다. 이후, 유기 층을 진공 하에 농축시키고, n-헵탄(1.50 ℓ, 10 vol)과 공비시켰다. MTBE(0.95 ℓ, 6.3 vol)를 미정제 고체에 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(300 ㎖, 2 vol)로 희석하고, 0℃까지 천천히 냉각시켰다. 짙은 고체를 침강되게 하고, 상청액을 필터 프릿 관을 통해 펌프질하였다. 고체를 MTBE(2 x 300 ㎖, 2 x 2 vol; 상청액을 매번 필터 프릿 관을 통해 펌프질함)로 2회 세정하고, 진공 하에 40℃에서 밤새 건조시켜 화합물 212를 담황색 고체 (156 g)로서 생성하였다. 여과액을 진공 하에 농축시켜 갈색 오일(17.8 g)을 생성하고, 이것을 Biotage Snap-Ultra 340g(용리제: EtOAc 중의 0 내지 5% MeOH)를 통해 정제 처리하여 추가 화합물 212를 담황색 고체(5.8 g)로서 생성하였다. 총 156 g + 5.8 g = 161.8 g (순 152 mmol, 95% 순수, 99% 수율)
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ (ppm); 8.46 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.09 - 8.06 (m, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 1H), 7.49 - 7.45 (m, 4H), 7.37 - 7.28 (m, 3H), 7.24 - 7.19 (m, 3H), 7.16 - 7.11 (m, 2H), 6.22 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 2.7, 17.2 Hz, 1H), 5.83 - 5.61 (m, 3H), 5.60 - 5.48 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 3.5, 51.6 Hz, 1H), 5.06 - 4.96 (m, 1H), 4.79 (dd, J = 4.9, 15.8 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.67 - 4.56 (m, 1H), 4.48 - 4.40 (m, 3H), 4.37 - 4.30 (m, 1H), 4.27 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.19 - 4.13 (m, 1H), 3.93 - 3.85 (m, 1H), 3.85 - 3.78 (m, 1H)
단계 10 및 11
단계 10
화합물 212(95% 순수, 순 73.2 g, 72.3 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량) 및 2-시아노에틸 N,N,N',N'-테트라이소프로필포스포로디아미다이트(25.3 ㎖, 79.5 mmol, 0.33 wt, 0.35 vol, 1.10 당량)를 무수 아세토니트릴과 3회(3 x 2 ℓ) 공비시키고, 디클로로메탄(0.73 ℓ, 10 vol)에 재용해시키고, 0 내지 5℃까지 냉각시켰다. 디이소프로필암모늄 테트라졸라이드(6.19 g, 36.1 mmol, 0.085 wt, 0.50 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 0℃에서 10시간 동안 교반하고, 2시간에 걸쳐 10℃까지 가온시키고, 10℃에서 10시간 동안 유지시키고, 2시간에 걸쳐 실온까지 가온시켰다. 반응물을 LCMS 및 TLC(EtOAc와 0.5% TEA)에 의해 모니터링하였다. 18시간 후, 무수 아세토니트릴(0.73 ℓ, 10 vol)을 첨가하고, 혼합물을 3일에 걸쳐 -20℃에서 저장하였다.
단계 11a
단계 10으로부터의 혼합물을 주위 온도까지 가온시키고, 일부분씩 적하 깔때기(30분마다 100 ㎖, 9시간에 걸쳐)를 통해 피리딘 트리플루오로아세테이트 염(미리 피리딘과 2회 공비됨; 41.9 g, 217 mmol, 0.57 wt, 3.0 당량)과 아세토니트릴(5.85 ℓ, 80 vol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였다. 13시간 후, 아세토니트릴(24 ㎖) 중의 2-시아노에틸 N,N,N',N'-테트라이소프로필포스포로디아미다이트(5.8 ㎖, 18 mmol, 0.25 당량)의 용액을 4시간에 걸쳐 첨가하였다. 추가 시약의 양은 남은 화합물 212(LCMS에 기초한 약 30%)에 기초하여 결정되었다. 6시간 후 디올의 더 많은 전환이 관찰되었다.
단계 11b
((디메틸아미노메틸리덴)아미노)-3H-1,2,4-디티아졸린-3-티온(DDTT; 20.8 g, 101 mmol, 0.28 wt, 1.4 당량)을 첨가하고, 1시간 동안 계속해서 교반하였다. 반응 혼합물을 부분적으로 약 800 ㎖로 농축시키고, MTBE(1.46 ℓ, 20 vol), NaHCO3(물 중 9 wt% 용액; 1.1 ℓ, 15 vol) 및 물(0.37 ℓ, 5 vol)로 희석하였다. pH = 8. 층을 분리하고, 수성 층을 MTBE(1.46 ℓ, 20 vol)와 EtOAc(1.10 ℓ, 15 vol)의 혼합물로 추출하였다. 합한 유기 층을 30% 수성 NaCl(2 x 0.73 ℓ, 2 x 10 vol)로 2회 세척하고, 진공 하에 35℃에서 농축시키고, 톨루엔(1.46 ℓ, 20 vol)과 공비시켰다. LCMS 및 TLC(EtOAc)는 화합물 215(SpRp, 요구에 따라): 화합물 217(SpSp) = 5:1을 나타냈다.
미정제 생성물을 Biotage 150M KP-Sil(SiO2 2.5 ㎏; 용리제: EtOAc/n-헵탄: 2:1(4 CV), 3:1(2.5 CV), 4:1(2.5 CV), 100% EA(3 CV), EA 4 CV 중의 5 내지 10% MeOH)을 통해 정제하여 화합물 215(36 g, 31.5 mmol, 44% 수율)을 생성하였다.
화합물 215 (SpRp): 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ(ppm): 8.59 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.03 - 7.99 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.56 - 7.53 (m, 2H), 7.49 - 7.40 (m, 5H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.24 - 7.16 (m, 4H), 6.92 (s, 1H), 6.29 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 20.7 Hz, 1H), 5.97 - 5.83 (m, 1H), 5.76 (td, J = 4.7, 15.6 Hz, 1H), 5.61 - 5.51 (m, 2H), 5.40 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 5.29 - 5.17 (m, 1H), 4.91 (dd, J = 7.4, 14.9 Hz, 1H), 4.86 - 4.75 (m, 3H), 4.63 (dd, J = 3.7, 9.2 Hz, 1H), 4.58 - 4.43 (m, 5H), 4.34 - 4.19 (m, 4H), 2.79 (td, J = 5.9, 16.8 Hz, 1H), 2.66 (td, J = 6.3, 16.8 Hz, 1H).
화합물 217 (SpSp) 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ (ppm): 8.11 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.56 - 7.40 (m, 7H), 7.33 - 7.28 (m, 2H), 7.23 - 7.17 (m, 4H), 6.22 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 5.85 (dd, J = 3.5, 51.2 Hz, 1H), 5.75 - 5.45 (m, 5H), 4.95 - 4.23 (m, 14H), 2.82 (t, J = 6.1 Hz, 2H).
단계 12
화합물 215(71.6 g, 62.6 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)를 1,4-디옥산(0.43 ℓ, 6 vol)에 용해시켰다. 티오페놀(215 ㎖, 2.09 mol, 230 g, 3.2 wt, 3 vol, 30 당량 초과), 이어서 트리에틸아민(215 ㎖, 1.54 mol, 156 g, 2.2 wt, 3 vol)을 첨가하였다. 약간의 발열이 관찰되었고(T-내부는 약 7℃ 증가함), 따라서 물/얼음 욕을 사용하여 냉각시키고, T-내부를 27℃ 미만으로 제어하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였다. 2시간 후, MeOH(0.57 ℓ, 8 vol) 및 NH4OH(28 wt%; 15 mol, 0.57 ℓ, 8 vol, 200 당량 초과)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 가열하고, 실온까지 냉각시키고, 밤새 교반하였다. 14시간 후, 물(0.72 ℓ, 10 vol)을 첨가하고(고체가 관찰되지 않음), 혼합물을 n-헵탄과 톨루엔의 1:1(v/v) 혼합물로 3회 추출하고(3 x 0.86 ℓ, 3 x 12 vol), 이어서 톨루엔(0.57 ℓ, 8 vol)으로 추출하였다. 진공에서 수성 층을 40 내지 50℃에서 농축시키고, 물(1.07 ℓ, 15 vol)로 희석하였다. 생성된 슬러리를 실온에서 밤새 유지시켰다. 생성된 고체를 물(0.36 ℓ, 5 vol)로 세정하면서 여과시켰다. 여과액은 여전히 혼탁하였고, 이것을 셀라이트 및 Kuno 필터를 통해 여과시켰다. 여전히 혼탁함이 존재하였다. HCl(물 중 1.0 M 용액; 132 ㎖, 132 mmol, 2.1 당량)을 1시간에 걸쳐 첨가하고, pH를 확인하였다(pH < 2). 실온에서 1시간 동안 계속해서 교반하고, 혼합물을 여과시켰다. 필터 케이크를 물(8 x 0.20 ℓ)로 세정하고, 진공 오븐에서 35℃에서 2일 동안, 및 열 없이 1일 동안 건조시켜 화합물 I을 옅은 오렌지색 고체(44.88 g, 60.1 mmol, 0.63 wt, 96% 수율)로서 생성하였다.
단계 13
유리 산 화합물 I(22.42 g, 30.03 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)에 암모니아(MeOH 중 2.0M 용액; 220 ㎖, 440 mmol, 10 vol, 15 당량)를 첨가하였다. EtOH(55 ㎖, 2.5 vol)를 첨가하고, 생성된 용액을 MeOH와 EtOH의 1:1(v/v) 혼합물(90 ㎖, 4 vol)로 세정하면서 Kuno 필터(0.45 미크론; PTFE)를 통해 여과시켰다. 진공에서 여과액을 30℃에서 농축시켜 미백색 고체를 생성시키고, 이것을 실온에서 밤새 건조시키고, (파괴가 용이한) 스패츌러로 분쇄하고, 진공에서 실온에서 더 건조시켰다. 이후, 단리된 고체를 톨루엔(250 ㎖)에 현탁시키고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이후, 고체를 진공 여과에 의해 수집하고, 톨루엔으로 2회(2 x 50 ㎖) 세정하였다. 이후, 고체를 진공 하에 진공 오븐에서 건조시켜 22.4 g의 화합물 1a(화합물 I 디암모늄염)를 생성하였다.
재결정화:
화합물 1a(화합물 I 디암모늄염)(22.14 g, 28.36 mmol, 1 wt, 1 vol, 1 당량)를 물(664 ㎖, 30 vol)과 수산화암모늄(28 wt%; 2.5 ㎖, 18 mmol, 0.63 당량)의 혼합물(pH = 9 내지 10)에 용해시키고, 톨루엔으로 3회(3 x 300 ㎖, 3 x 14 vol) 추출하고, EtOAc로 3회(3 x 200 ㎖, 3 x 9 vol) 추출하고, 톨루엔으로 3회(3 x 300 ㎖, 3 x 14 vol) 추출하였다. 생성된 수성 층을 3.5시간의 기간에 걸쳐 HCl(물 중 1.0M 용액; 90 ㎖, 90 mmol, 3.2 당량)로 처리하였다(pH 2 이하). 혼합물을 30분 동안 교반하고, 이후 고체 침전물을 진공 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 물로 3회(3 x 200 ㎖, 3 x 9 vol) 세척하고, 진공에서 밤새 건조시켰다. 암모니아(MeOH 중 2.0M 용액; 250 ㎖, 500 mmol, 17.6 당량) 및 에탄올(100 ㎖)을 고체에 첨가하고, 생성된 혼합물을 결정이 나타날 때까지 진공에서 농축시키고(약 100 ㎖), 이때 농축을 중단시키고, 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 에탄올(45 ㎖)을 첨가하고, 혼합물을 부분적으로 농축시켰다(45 ㎖ 제거됨). 동일한 조작을 2회 더 반복하고, 이후 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 3.5시간 동안 교반하였다. 백색 고체를 진공 여과에 의해 수집하고, 차가운 에탄올(20 ㎖)로 세척하고, 이어서 에틸 아세테이트(2 x 50 ㎖)에 의해 세척하였다. 백색 고체를 진공 하에 실온에서 3일 동안 건조시켜 화합물 1a(화합물 I 디암모늄염)를 백색 고체(16.6 g, 21.3 mmol, 0.75 wt, 75% 수율)로서 생성하였다. 여과액을 진공 하에 농축시키고, 진공 하에 실온에서 3일 동안 건조시켜 화합물 1a(화합물 I 디암모늄염)를 미백색 고체(4.16 g, 5.3 mmol, 18% 수율)로서 생성하였다.
분석 실시예 1.2 - 화합물 I 암모늄염의 1H NMR 분석
화합물 I 암모늄염의 1H NMR 분광사진은 도 1에 도시된다. 생성된 스펙트럼은 하기와 같았다:
1H-NMR 스펙트럼(400MHz, DMSO-d6, δH 2.49 ppm, 80℃)
δ(ppm): 8.59 (1H, br s), 8.36 (1H, br s), 8.14 (1H, s), 8.13 (1H, s), 6.29 (1H, m), 6.26 (1H, m), 5.78 (1H, m), 5.76 (2H, s), 5.22 (1H, m), 4.53 - 4.68 (2H, m), 4.38 (1H, m), 4.28 (1H, m), 4.21 - 4.24 (2H, m), 3.78 (1H, dd, J=12, 4Hz), 3.70 (1H, dd, J=13, 5 Hz), 3.05 - 3.13 (4H, m).
분석 실시예 1.3 - 화합물 I 암모늄염의 X선 분석
약 2 ㎎의 화합물 I 암모늄염을 600 ㎕의 물에 용해시켰다. 120 ㎕의 이 용액을 다른 유리 바이알에 넣고, 이후 이 바이알을 실온에서 1주 동안 3 ㎖의 MeCN을 갖는 고정된 용기에 저장하였다. 이것은 샘플 제조의 H2O/MeCN 증기 확산 방법이다.
결정화 용액에서 발견된 무색 블록 단일 결정(0.1 × 0.1 × 0.1 ㎜)을 액체 Parabar 10312에 분산시키고, Dual - Thickness MicroMounts™(MiTeGen)에 탑재하였다. 회절 데이터를 다층 거울 단색화 Cu-Kα 방사선을 사용하여 ω 축 진동 방법으로 XtaLAB PRO P200 MM007HF(Rigaku)에서 -160℃에서 수집하였다.
도 2a는 화합물 I 암모늄염의 결정의 ORTEP 도면을 보여주고, 여기서 2개의 분자는 다수의 비정렬된 물 분자와 함께 비대칭 단위로 존재하였다. 도 2b는 도 2a로부터 비대칭 단위에서 2개의 분자 중 하나의 ORTEP 도면을 보여준다. 도 2c는 도 2a로부터 비대칭 단위에서 다른 분자의 ORTEP 도면을 보여준다.
화합물 I 암모늄염의 결정 구조는 0.1354의 최종 R-인자로 해석하였다. 플랙 매개변수는 거의 0이어서(0.083(17)), 화합물 I 암모늄염의 절대 구성이 (R, S)라는 것을 나타낸다. 결정 구조 분석은 또한 여러 물 분자가 화합물 I 암모늄염의 큰 채널에 존재한다는 것을 나타내고, 이는 물 분자가 채널로부터 쉽게 이탈할 수 있음을 나타낸다. 분석은 또한 비대칭 단위에서 결정학적으로 독립적인 분자 둘 모두의 입체형태가 거의 동일하다는 것을 확인시켜 주었다.
X선 분석의 추가의 매개변수가 하기에 기재된다:
실시예 1
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정(형태 1)의 제조
이소프로필 아세테이트(2.769 ㎖) 중의 화합물 I(138.5 ㎎)의 현탁액에 28% 암모니아 수성 용액(62 ㎕), 이소프로필 아세테이트(0.693 ㎖)와 2-프로판올(0.138 ㎖)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 슬러리를 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 모으고, 이소프로필 아세테이트(0.8 ㎖)로 세정하고, 얻은 고체를 감압 하에 실온에서 2시간 동안 건조시켜 표제 결정(126.8 ㎎)을 생성하였다. 표제 결정은 수화물로 확인되었다.
실시예 1-2
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정(형태 1)의 제조
이소프로필 아세테이트(18.0 ㎖) 중의 화합물 I(900 ㎎)의 현탁액에 28% 암모니아 수성 용액(400 ㎕), 이소프로필 아세테이트(4.5 ㎖)와 2-프로판올(0.90 ㎖)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 슬러리를 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 모으고, 이소프로필 아세테이트(4.5 ㎖)로 세정하고, 얻은 고체를 감압 하에 실온에서 5시간 동안 건조시키고, 실온에서 밤새 50% 상대 습도 하에 유지시킴으로써 수분을 연속하여 흡수시켜 표제 결정(942 ㎎)을 생성하였다. 표제 결정은 수화물로 확인되었다.
실시예 2
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정(형태 2)의 제조
화합물 I(143.6 ㎎)에 28% 암모니아 수성 용액(1.724 ㎖) 및 에탄올(1.718 ㎖)을 첨가하고, 생성된 용액을 감압 하에 40℃에서 약 0.86 ㎖까지 농축시켰다. 잔류물에 에탄올(1 ㎖)을 첨가하고, 용액을 감압 하에 40℃에서 약 0.86 ㎖까지 농축시켰다. 잔류물에 에탄올(1 ㎖)을 첨가하고, 생성된 용액을 감압 하에 40℃에서 0.89 g까지 농축시켰다. 잔류물 용액을 실온에서 0.5시간 동안 교반하였고, 침전물은 용액으로부터 떨어졌다. 슬러리에 10분 동안 이소프로필 아세테이트(1.2 ㎖)를 점차 적가하고, 생성된 슬러리를 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 모으고, 얻은 고체를 감압 하에 실온에서 3.3시간 동안 건조시켜 표제 결정(144 ㎎)을 생성하였다. 표제 결정은 수화물로 확인되었다.
실시예 3
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정(형태 3)의 제조
대략 10 ㎎의 화합물 I 디암모늄염 결정(형태 1)을 25℃ 인큐베이터 내의 데시케이터에 배치하고, 여기서 습도 조건은 포화 질산칼륨 용액을 사용하여 94% RH에서 제어되었다. 고체 샘플을 4일 동안 저장하여 표제 결정(대략 10 ㎎)을 생성하였다. 표제 결정은 수화물로 확인되었다.
실시예 4
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정(형태 4)의 제조
메탄올 중의 2 mol/ℓ의 암모니아(2.152 ㎖) 중의 화합물 I(217.22 ㎎)의 용액에 에탄올(0.869 ㎖)을 첨가하고, 용액을 감압 하에 50℃에서 약 1.1 g까지 농축시켰다. 잔류물을 실온에서 0.8시간 동안 교반하였고, 침전물은 용액으로부터 떨어졌다. 슬러리에 에탄올(0.434 ㎖)을 첨가하고, 혼합물을 감압 하에 50℃에서 약 0.8 g까지 농축시켰다. 잔류물에 에탄올(0.434 ㎖)을 첨가하고, 혼합물을 감압 하에 50℃에서 약 1.2 g까지 농축시켰다. 생성된 슬러리에 물(40 ㎕)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안, 및 얼음 냉각에 의해 1.8시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 모으고, 에탄올(0.2 ㎖) 및 에틸 아세테이트(0.2 ㎖)로 연속하여 세정하고, 얻은 고체를 감압 하에 실온에서 1시간 동안 건조시켜 표제 결정(21.22 ㎎)을 생성하였다.
실시예 5
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정(형태 5)의 제조
2-프로판올(5 ㎖) 중의 화합물 I(201.62 ㎎)의 현탁액에 28% 암모니아 수성 용액(36 ㎕)을 첨가하고, 생성된 용액을 60℃에서 교반하였다. 용액에 28% 암모니아 수성 용액(108 ㎕)을 첨가하였고, 침전물은 용액으로부터 떨어졌다. 온도가 실온까지 저절로 감소한 후, 침전물을 여과에 의해 모아 표제 결정(160 ㎎)을 생성하였다.
실시예 6
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 모노암모늄염의 결정(형태 6)의 제조
실시예 5에서 얻은 화합물 I 디암모늄염(85.24 ㎎)에 에탄올(4 ㎖)을 첨가하고, 생성된 슬러리를 실온에서 밤새 교반하였다. 이후, 침전물을 여과에 의해 모아 표제 결정(40.93 ㎎)을 생성하였다.
실시예 7
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온의 나트륨염의 결정의 제조
화합물 I(201.58 ㎎)에 메탄올(5 ㎖)을 첨가하고, 생성된 슬러리를 실온에서 교반하였다. 슬러리에 1 mol/ℓ의 수성 수산화나트륨 용액(0.54 ㎖)을 첨가하고, 생성된 용액을 60℃에서 대략 1시간 동안 교반하였다. 온도가 실온까지 저절로 감소한 후, 용액을 교반하면서 질소 가스 흐름 하에 농축시켰다. 용매가 점차 제거되면서, 결정화가 개시되었다. 얻은 고체를 감압 하에 실온에서 건조시켜 표제 결정(227 ㎎)을 생성하였다.
실시예 8
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온의 결정의 제조
에탄올(2.5 ㎖), 에탄올 중의 2 mol/ℓ의 암모니아(2.5 ㎖) 및 물(2.5 ㎖)의 혼합물 중의 화합물 I(500 ㎎)의 용액에 아세트산(0.572 ㎖)을 적가하고, 용액을 실온에서 교반하였다. 용액에 하기 실시예 8-2와 유사한 방식으로 얻은 화합물 I의 시드 결정을 첨가하였다. 이후, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였고, 침전물은 용액으로부터 떨어졌다. 슬러리에 45분 동안 아세트산(1.144 ㎖)을 점차 적가하고, 생성된 슬러리를 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 모으고, 차가운 67% 수성 에탄올(3.0 ㎖) 및 tert-부틸 메틸 에테르(2.0 ㎖)로 연속하여 세정하였다. 얻은 고체를 감압 하에 실온에서 5시간 동안 건조시켜 표제 결정(417 ㎎)을 83.4% 수율로 생성하였다.
실시예 8-2
(1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ
5
,39λ
5
-디포스파옥타사이클로[28.6.4.1
3,36
.1
28,31
.0
4,8
.0
7,12
.0
19,24
.0
23,27
]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온의 결정의 제조
화합물 I(497.5 ㎎)에 에탄올(1.0 ㎖) 및 에탄올 중의 2 mol/ℓ의 암모니아(2.0 ㎖)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 교반하고 용해시켰다. 생성된 용액을 면 패드를 통해 여과시키고, 패드를 에탄올 중의 2 mol/ℓ의 암모니아(0.5 ㎖) 및 에탄올(1.5 ㎖)로 세정하고, 용액에 물(2.5 ㎖)을 첨가하였다. 생성된 용액에 아세트산(0.57 ㎖)을 실온에서 30분 동안 점차 적가하였으며, 침전물은 용액으로부터 떨어졌고, 슬러리를 실온에서 37분 동안 교반하였다. 슬러리에 32분 동안 아세트산(0.85 ㎖)을 점차 적가하고, 생성된 슬러리를 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 모으고, 차가운 67% 수성 에탄올(4.0 ㎖) 및 물(4.0 ㎖)로 연속하여 세정하였다. 얻은 고체를 감압 하에 실온에서 밤새 및 30℃에서 3시간 동안 건조시켜 표제 결정(432.4 ㎎)을 86.9% 수율로 생성하였다.
실시예 9
결정(형태 1)에 대한 열중량분석 및 시차 열 분석(TG-DTA)
대략 5 ㎎의 결정(형태 1) 샘플을 알루미늄 팬에 정확히 칭량하고, 이후 하기 조건 하에 분석을 수행하였다. TG 온도기록도에서, 탈수로 인한 중량 손실은 실온 내지 130℃의 범위에서 관찰되었다.
측정 조건
분위기: 100 ㎖/분의 질소 가스 흐름
기준 팬: 빈 알루미늄 팬
가열 속도: 10℃/분
샘플링 간격: 1초
온도 범위: 실온 내지 300℃
실시예 10
다양한 온도에서의 분말 X선 회절
결정(형태 1) 샘플을 분말 X선 회절계의 샘플대에 배치하고, 실온 및 60℃ 초과에서 분석을 수행하고, 여기서 탈수로 인한 상당한 중량 손실은 결정(형태 1)의 TG-DTA 온도기록도에서 관찰되었다. 측정 조건은 하기와 같다.
반사 방법 조건
기기: RINT TTR-III(Rigaku)
X선 소스: CuKα(50 kV, 300 mA)
검출기: 섬광 계수기
모드: 반사
슬릿: 0.5 ㎜(발산 슬릿), 개방(산란 슬릿), 개방(수광 슬릿)
스캔 속도: 10°/분
샘플링 간격: 0.02°
스캔 범위: 5° 내지 35°
샘플 홀더: 알루미늄 홀더
결정(형태 1)의 TG-DTA 온도기록도(도 21)에서, 탈수로 인한 상당한 중량 손실은 흡열 피크가 관여되는 130℃까지의 온도 범위에서 관찰되었다. 결정(형태 1)을 가열할 때, 상당한 변화가 60℃ 초과의 분말 X선 회절(PXRD) 패턴에서 발견되었다(도 22). 도 23에 도시된 바와 같이, 변화한 PXRD 패턴은 결정(형태 2)의 패턴에 필적하였다. 이후, 결정(형태 2)의 PXRD 패턴은 125℃ 이상에서 다른 패턴으로 추가로 변했다(도 24). 이들 발견은 결정(형태 1) 및 결정(형태 2)이 수화물임을 나타냈다.
실시예 11
25℃에서 30% 내지 95%의 RH 범위에서 결정(형태 1)의 흡습성 측정에서, 흡착 공정과 탈착 공정 사이의 히스테리시스 루프는 도 25에 도시된 바와 같이 관찰되었다. 흡착 공정에서, 중량 변화 수준은 점차 1.7% 내지 80% RH까지 증가하였고, 이후 마지막으로 95% RH에서 대략 19%에 도달하였다. 흡습성 측정 전 및 후에 PXRD 패턴의 변화는 관찰되지 않았다. 그에 반해서, 4일 동안 25℃ 및 94% RH에서 저장된 결정(형태 1) 샘플의 PXRD 패턴은 도 26에 기재된 바와 같은 초기 패턴과는 상이하였다. 변화한 PXRD 패턴의 결정 형태는 형태 3으로 정의되었다. 이들 발견은 결정(형태 3)이 수화물임을 입증한다.
약리학적 시험 실시예
하기 시험 실시예는 화합물 1a의 약리학적 효과를 조사하기 위해 수행되었다.
약리학적 시험 실시예 1: HAQ STING 작용제 활성 리포터 검정
THP1-Dual™ 세포(InvivoGen, 카탈로그# thpd-nfis)를 EC50 결정에 적용하였다. THP1-Dual™ 세포는 판매회사 Invivogen(Insight 201402-1)에 의해 HAQ STING 유전자형을 보유한다는 것이 특성 규명되었다. 세포를 성장시키고 제조사에 의해 추천된 바와 같은 조건 하에 유지시켰다. EC50 결정을 위해, 제조사의 매뉴얼에 기재된 인터페론 조절 인자(IRF) 경로 유도를 따랐다. 간단히 말하면, 세포를 시딩하고 20시간 동안 상이한 농도의 화합물로 처리하는 한편, 37℃, 5% CO2에서 인큐베이션하였다. 세포를 재현탁시키고 QUANTI-Luc™ 용액(카탈로그#: rep-qlc1)을 첨가하였다. 생성된 광 방출을 루미노미터(Envision, Perkin Elmer)에 의해 측정하였다. 얻은 신호가 작도되고, EC50은 GraphPad Prism7 소프트웨어로 계산되었다. EC50 값은 하기 표 1에 기록되어 있다.
[표 1]
화합물 1a의 인간 STING EC50(μM)은 표 1에서 측정되었다.
약리학적 시험 실시예 2: STING 변이체 특이적 리포터 검정
인간 STING은 WT, HAQ, REF 및 AQ 변이체를 포함하는 4개의 주요 변이체를 갖는다. R232H라고도 지칭되는 REF-STING은 예를 들어 인간 집단의 약 14%에서 발생하였다. 야생형 대립유전자와 비교하여, R232H는 박테리아 및 후생동물 사이클릭 디뉴클레오타이드에 대한 감소된 반응을 가졌다. 이들 4개의 주요 변이체, 및 다른 희귀 변이체의 상세내용은 문헌[Yi G, et al., "Single nucleotide polymorphisms of human STING can affect innate immune response to cyclic dinucleotides" PLoS One 2013; 8:e77846]에 의해 보고되어 있다. STING 변이체 특이적 리포터 세포주는 THP1-Dual™ KO-STING 세포(InvivoGen, 카탈로그# thpd-kostg) 및 3개의 STING 변이체 단백질 발현 벡터를 사용하여 확립되었다. WT STING에 대한 발현 벡터 지도는 도 16에 도시되어 있다. 다른 2개의 발현 벡터에 대해, 상이한 STING 변이체 서열을 그 벡터에 사용하고, WT STING은 적절한 뉴클레오타이드 서열에 의해 대체되었다.
WT-STING, REF-STING 및 AQ-STING에 대한 STING 변이체 발현 벡터가 제조되고 각각 WT-STING, REF-STING 및 AQ-STING에 대한 STING 변이체 특이적 리포터 검정을 준비하기 위해 THP1-Dual™ KO-STING 세포로 안정하게 형질주입되었다. EC50 값은 HAQ STING 작용제 활성 리포터 검정에 대해 약리학적 시험 실시예 1에 상기 기재된 바와 같이 결정되었다. 결과는 하기 표 2에 기재되어 있다. 이들 STING 변이체에 사용된 DNA 서열은 SEQ ID NO: 1(WT 인간 STING의 뉴클레오타이드 서열), SEQ ID NO: 2(REF 인간 STING의 뉴클레오타이드 서열) 및 SEQ ID NO: 3(AQ 인간 Sting의 뉴클레오타이드 서열)에 나타나 있다.
WT 인간 STING:
REF 인간 STING:
AQ 인간 STING:
약리학적 시험 실시예 3: 마우스 STING 작용제 활성 리포터 검정
RAW-Lucia™ ISG 세포(InvivoGen, 카탈로그# rawl-isg)는 마우스 STING 작용제 리포터 검정에 사용되었다. EC50 값은 HAQ STING 작용제 활성 리포터 검정에서 약리학적 시험 실시예 1에 상기 기재된 바와 같이 결정되었다. 결과는 하기 표 2에 기재되어 있다.
[표 2] 화합물 1a 시험관내 특성 규명
약리학적 시험 실시예 4: 시차 주사 형광측정법(DSF) 검정
DSF 검정은 화합물과 재조합 STING 단백질 사이의 물리적 상호작용을 측정하도록 사용되었다. 절두된 재조합 STING 단백질(a.a.155-341)(SEQ ID NO: 4)은 E. 콜라이(E. coli)에서 발현되고, 하기 기재된 바와 같이 검정을 위해 단리되었다. 검정 매트릭스는 100 mM KCl, 5X SYPRO 오렌지 염료 및 50 μM 화합물(최종 DMSO 농도 0 내지 1%)이 보충된, 1 μM 재조합 STING 단백질(a.a. 155-341)(SEQ ID NO: 4), 100mM PBS pH 7.4로 이루어진 웰당 10 ㎕의 최종 부피로 384웰 플레이트에서 제조되었다. 검정은 각각 470 및 586 nm에서 여기 및 방출 필터 및 0.05℃/분의 속도로 25℃ 내지 95℃의 온도 구배를 사용하는 QuantStudio 12K Flex Real-Time PCR 시스템에서 수행되었다. Applied Biosystems(등록 상표) Protein Thermal Shift 소프트웨어(알고리즘 버전 1.3.)에 의해 배정된 형광 도함수 곡선에 따르면, 비결합된 및 리간드 결합된 재조합 STING 단백질의 열 용융(Tm) 및 열 용융 차이(dTm D)가 계산되었다.
일반적으로, ΔTm 값이 0보다 높은 화합물은 시험된 단백질과의 물리적 상호작용을 갖는 것으로 고려되고, ΔTm의 값은 화합물 결합 친화도와 양으로 연관된다. 여기서, 화합물 1a는 17.6의 ΔTm을 보여주고(상기 기재된 표 2), 이는 STING 단백질과의 물리적 상호작용을 나타낸다.
약리학적 시험 실시예 5: 생체외 인간 PBMC 자극 검정
5명의 건강한 공여자로부터의 인간 혈액을 10.0 ㎖의 BD Vacutainer 나트륨 헤파린 관(카탈로그# 367874)을 사용하여 수집하였다. 말초 혈액 단핵 세포(PBMC: peripheral blood mononuclear cell) 단리는 제조사에 의해 제공된 프로토콜을 사용하여 SIGMA ACCUSPIN 50 ml Tube(카탈로그# A2055) 및 시그마 ACCUSPIN System-HISTOPAQUE-1077(카탈로그# A7054)을 사용하여 수행되었다. PBMC 층을 수확하고, Sigma에 의해 제안된 바와 같이 1x 인산염 완충 식염수(PBS)로 세척하였다. PBMC를 계수하고, 마지막으로 10% 소 태아 혈청(FBS)(Gibco 카탈로그# 20140.79)이 보충된 RPMI 중의 1x10e6/㎖(corning 카탈로그# 10-041-CV)로 현탁시켰다. 1 ㎖의 세포(1x10e6)를 Falcon 5 mL Round Bottom Polypropylene Test Tube(카탈로그# 352063)로 옮기고, 5% CO2 인큐베이터에서 37℃에서 24시간 동안 상이한 농도(0, 0.1, 1, 10 μM)로 자극하였다.
인큐베이션 24시간 후에 그 관을 5분 동안 1400 rpm에서 원심분리하고, 상청액을 수확하였다. 상청액을 후속하는 IFNβ 측정을 위해 -80℃에서 저장하였다. IFNβ 측정을 인간 IFN-β Base Kit(Meso Scale Diagnostics 카탈로그# K151ADA)를 사용하여 수행하고, 제조사에 의해 제공된 프로토콜을 사용하였다. IFN-베타 추산은 MESO SECTOR Imager 2400에서 검정 플레이트를 판독하고 MSD Discovery Workbench 4.0 프로그램을 사용하여 수행되었다. 24시간 후에 IFNβ 단백질을 분석하였다. 결과는 화합물 1a가 용량 의존적 방식으로 1차 인간 PBMC IFNβ 단백질 생산을 유도할 수 있다는 것을 보여주었다. 표 3에 기재된 결과는 5명의 상이한 공여자를 사용하여 수행된 측정의 평균을 반영한다.
[표 3] 생체외 인간 PBMC 자극 검정
IFNβ mRNA 정량화를 위해, 전체 RNA를 제조사의 프로토콜에 따라 RNeasy Mini Kit(Qiagen, 독일)를 사용하여 단리하였다. IFNβ mRNA를 qPCR 검정에 의해 정량화하였다. 간단히 말하면, 전체 RNA(400 ng 내지 1000 ng)를 SuperScript VILO MasterMix(Life Technologies, 미국)를 사용하여 60 ㎕의 반응 부피에서 cDNA로 전환시켰다. 얻은 cDNA(10 ng)를 후속하여 IFNB1(Hs01077958_s1) 및 GAPDH(Hs99999905_m1)에 대한 RNA 특이적 프라이머를 사용하여 Applied Biosystems TaqMan 발현 검정을 사용하여 증폭시켰다. qPCR 분석은 50℃에서의 초기 2분 단계, 이어서 2초 동안 95℃, 및 1초 동안 95℃ 및 20초 동안 60℃의 40회 사이클로 Applied Biosystems Quantstudio 12K Flex Real-Time PCR 시스템에서 TaqMan Fast Advanced Master Mix(Life Technologies, 미국)로 수행되었다. 상대 유전자 발현을 2-ΔΔCT 방법을 사용하여 기준 유전자 GAPDH에 대해 정규화한 후 계산하였다. 계산은 Applied Biosystems Quantstudio 12K Flex 소프트웨어 v1.2.2를 사용하여 수행되었다. 비히클 치료된 샘플에 대한 IFNβ mRNA 배수 변화는 표 4에 요약되어 있다. 결과는 화합물 1a가 용량 및 시간 의존적 방식으로 1차 PBMC에서 IFNβ mRNA를 유도할 수 있다는 것을 보여주었다. 표 4는 5명의 상이한 공여자로부터 계산된 평균을 보여준다.
[표 4] 생체외 인간 PBMC 3시간 및 24시간 자극 검정 (mRNA)
약리학적 시험 실시예 6: CT26 이중 종양 모델에 대한, 화합물 1a의 항암 효과
화합물 1a를 마우스 결장암 모델인 CT26 이중 종양 모델에서 이의 항암 활성에 대해 시험하였다. 5 내지 6주령 Balb/cJ 마우스의 암컷(Jackson Labs, 메인주 바 하버)에, 각 측부마다 105개의 세포씩 각 동물의 양측부 모두에 CT26 종양 세포를 피하로 이식하였다. 연구 A의 경우, 치료는 평균 종양이 대략 100 ㎣에 도달한 종양 이식 5일 후에 시작하였다(1.25 ㎎/㎏, 2.5 ㎎/㎏ 및 5 ㎎/㎏). 연구 B의 경우, 치료는 평균 종양이 대략 120 ㎣에 도달한 종양 이식 8일 후에 시작하였다(0.6 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏). 치료 계획은 표 5 및 표 6에 기재되어 있다.
[표 5] 연구 A를 위한 투약 계획
*I.T.는 종양내이다.
[표 6] 연구 B를 위한 투약 계획
*I.T.는 종양내이다.
연구에서의 모든 마우스는 2개의 피하 CT26 종양을 갖는다. "치료된 종양"은 화합물이 직접 투여된 종양을 나타내는 한편, "비치료된 종양"은 화합물이 직접 투여되지 않은 종양을 나타낸다. 실험에 걸쳐 종양 부피가 추적되었다. 치료 시작 후 매주 2회 종양 부피를 측정하였다. 종양 부담은 장축 타원체의 부피에 대한 식 (LxW2)/2에 의해 캘리퍼 측정으로부터 계산되고, 여기서 L 및 W는 각각의 직각 길이 및 폭 측정치(㎜)이다.
화합물 1a는 CT26 이중 종양 모델에서 강력하고 치유적인 활성을 보여주었다(도 17 및 도 18). 치료된 종양의 경우, 20%의 치유 속도는 연구에서 시험된 최저 용량에서도 검출되었다(도 18, 0.6 ㎎/㎏ 용량). 동시에, 최고 용량(10 ㎎/㎏)은 연구의 종료 시 그 종양의 동물의 100%를 치유하였다. 비치료된 종양에 대해, 용량 의존적 항종양 효과 또한 입증되었다. 상부 용량 그룹(10 ㎎/㎏)은 80% 치유 효과를 보여주고; 모든 최저 용량은 또한 종양 성장 저해 활성을 보여주었다. 그리하여, 화합물 1a에 대한 0.6 ㎎/㎏ 내지 10 ㎎/㎏의 치료 범위가 관찰되었고, 항종양 활성은 비주사된 원위 종양 부위에서의 효과에 기초하여 국소적으로 나타났을 뿐만 아니라 전신적으로도 나타났다. 마지막으로, 이들 결과는 화합물 1a의 국소 투여가 국소 및 전신(압스코팔) 항암 활성 둘 모두를 유도할 수 있다는 것을 나타낸다.
약리학적 시험 실시예 7: CT26 간 전이 모델에 대한, 화합물 1a의 항암 효과
화합물 1a를 CT26 간 전이 모델에서 이의 항암 활성에 대해 시험하였다. 마취된 암컷 5 내지 6주령 BALB/cJ 마우스(Jackson Labs, 메인주 바 하버)에 루시퍼라제 발현 CT26 종양 세포(마우스마다 5 x 105개의 세포)를 비장내로 이식하였다. 후속하는 10분 대기 기간을 통해 종양 세포가 동물의 간으로 순환되게 하였다. 이후, 비장을 제거하고, 동물을 봉합하고 회복되게 하였다. 3일 후, 이번에는 CT26 종양 세포(마우스마다 105개의 세포)를 오른쪽 앞다리 부분 아래에 피하로(sc) 다시 이식하여, 화합물 투여를 위한 종양 덩어리가 발생할 수 있도록 하였다. 비장내 주사 9일 후에, 화합물(10 ㎎/㎏)을 sc 종양으로 단회 종양내 투여하였다.
화합물의 국소 항암 효과는 sc 종양에 대한 이의 효과를 통해 측정되는 한편, 화합물의 압스코팔 효과는 각각의 마우스 간에서 성장하는 종양 덩어리의 해로운 효과에 기초하여, 비히클 치료된 대조군 마우스에 비한 치료된 마우스의 전체 생존율에 의해 평가되었다. 화합물 1a는 국소 sc 종양에 대한 강력한 활성, 및 또한 10마리 중 9마리의 치료된 동물에서의 치유성 전신 활성 둘 모두를 보여주었다(도 19). 이들 결과는 화합물 1a의 국소 투여가 예컨대 간에서의 깊은 병변을 포함하여 국소 항암 활성 및 전신(압스코팔) 항암 활성 둘 모두를 유도할 수 있다는 것을 나타낸다.
약리학적 시험 실시예 8: GL261 뇌 동소 모델에 대한, 화합물 1a의 항암 효과
화합물 1a를 GL261 뇌 동소 모델에서 이의 항암 활성에 대해 시험하였다. GL261은 쥣과 신경교종 세포주이다. 루시퍼라제 발현 GL261 마우스 신경교종 세포(2x104개의 세포/마우스)를 암컷 5 내지 6 주령 B6 알비노 마우스(Jackson Labs, 메인주 바 하버)에 두개내로 이식되었다. 3일 내지 4일 후에, GL261 세포를 오른쪽 앞다리 부분 아래에 피하로 이식하여(106개의 세포/마우스), 화합물 투여를 위한 종양 덩어리가 발생하도록 하였다. 두개내 종양 세포 이식 10일 후에, 화합물(10 ㎎/㎏)을 sc 종양으로 단회 종양내 투여하였다.
화합물의 국소 항암 효과는 sc 종양에 대한 이의 효과를 통해 측정되는 한편, 화합물의 압스코팔 효과는 각각의 마우스 뇌에서 성장하는 종양 덩어리의 해로운 효과에 기초하여, 비히클 치료된 대조군 마우스에 비한 치료된 마우스의 전체 생존율에 의해 평가되었다. 화합물 1a는 국소 sc 종양에서의 강력한 활성, 및 8마리 중 5마리의 치료된 동물에서의 치유성 전신 활성 둘 모두를 보여주었다(도 20). 이들 결과는 화합물 1a의 국소 투여가 예컨대 뇌에서의 깊은 병변을 포함하여 국소 항암 활성 및 전신(압스코팔) 항암 활성 둘 모두를 유도할 수 있다는 것을 나타낸다.
서열 목록
SEQ ID NO: 1(WT 인간 STING):
SEQ ID NO: 2(REF 인간 STING):
SEQ ID NO: 3(AQ 인간 STING):
SEQ ID NO: 4(WT STING 잔기 155 내지 341):
Claims (34)
- (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 암모늄염, 화합물 I 나트륨염 또는 화합물 I의 결정:
.
- 제1항에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 암모늄염의 결정인 결정.
- 제2항에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 디암모늄염의 결정인 결정.
- 제3항에 있어서, 분말 X선 회절에서 8.3°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 1).
- 제4항에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 1).
- 제4항에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.4°, 8.3°, 12.7°, 16.6° 및 25.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 1).
- 제4항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 수화물인 결정(형태 1).
- 제3항에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 2).
- 제8항에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.0°, 15.4° 및 20.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 2).
- 제8항에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.0°, 15.4°, 20.8°, 24.0° 및 30.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 2).
- 제8항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 수화물인 결정(형태 2).
- 제3항에 있어서, 분말 X선 회절에서 7.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 3).
- 제12항에 있어서, 분말 X선 회절에서 7.4°, 16.0° 및 21.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 3).
- 제12항에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.0°, 7.4°, 9.3°, 16.0° 및 21.4°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 3).
- 제12항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 수화물인 결정(형태 3).
- 제3항에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.7°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 4).
- 제16항에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.7°, 14.0° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 4).
- 제16항에 있어서, 분말 X선 회절에서 9.7°, 14.0°, 17.4°, 22.3° 및 26.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 4).
- 제3항에 있어서, 분말 X선 회절에서 20.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 5).
- 제19항에 있어서, 분말 X선 회절에서 10.9°, 20.0° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 5).
- 제19항에 있어서, 분말 X선 회절에서 10.9°, 17.7°, 18.9°, 20.0° 및 23.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 5).
- 제2항에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 모노암모늄염의 결정인 결정.
- 제22항에 있어서, 분말 X선 회절에서 17.0°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 6).
- 제23항에 있어서, 분말 X선 회절에서 17.0°, 21.6° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 6).
- 제23항에 있어서, 분말 X선 회절에서 15.1°, 16.4°, 17.0°, 21.6° 및 25.9°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정(형태 6).
- 제1항에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I) 나트륨염의 결정인 결정.
- 제26항에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.1°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
- 제27항에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3° 및 16.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
- 제27항에 있어서, 분말 X선 회절에서 6.1°, 9.3°, 15.9°, 16.6° 및 22.3°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
- 제1항에 있어서, (1R,3R,15E,28R,29R,30R,31R,34R,36R,39S,41R)-29,41-디플루오로-34,39-비스(설파닐)-2,33,35,38,40,42-헥사옥사-4,6,9,11,13,18,20,22,25,27-데카아자-34λ5,39λ5-디포스파옥타사이클로[28.6.4.13,36.128,31.04,8.07,12.019,24.023,27]도테트라콘타-5,7,9,11,15,19,21,23,25-노나엔-34,39-디온(화합물 I)의 결정인 결정.
- 제30항에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.6°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
- 제31항에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.6°, 13.9° 및 16.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
- 제31항에 있어서, 분말 X선 회절에서 5.6°, 8.9°, 11.4°, 13.9° 및 16.8°의 회절각(2θ ± 0.2°)에서의 회절 피크를 갖는 결정.
- 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 따른 결정을 포함하는 약학적 조성물.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201862764774P | 2018-08-16 | 2018-08-16 | |
| US62/764,774 | 2018-08-16 | ||
| PCT/JP2019/031951 WO2020036199A1 (en) | 2018-08-16 | 2019-08-14 | Salts of compounds and crystals thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210045352A true KR20210045352A (ko) | 2021-04-26 |
Family
ID=69525441
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020207030563A KR20210045352A (ko) | 2018-08-16 | 2019-08-14 | 화합물의 염 및 이의 결정 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11691990B2 (ko) |
| EP (1) | EP3837268A4 (ko) |
| JP (1) | JP6767589B1 (ko) |
| KR (1) | KR20210045352A (ko) |
| CN (1) | CN112041325B (ko) |
| AU (1) | AU2019322722A1 (ko) |
| BR (1) | BR112021001349A2 (ko) |
| CA (1) | CA3099904A1 (ko) |
| MX (1) | MX2020013322A (ko) |
| SG (1) | SG11202009262VA (ko) |
| TW (1) | TWI717804B (ko) |
| WO (1) | WO2020036199A1 (ko) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20220111028A1 (en) | 2020-10-14 | 2022-04-14 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Combination Of A STING Agonist And A Complex Comprising A Cell Penetrating Peptide, A Cargo And A TLR Peptide Agonist |
Family Cites Families (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2257704B (en) | 1991-07-18 | 1995-03-01 | Erba Carlo Spa | Cyclic oligonucleotides phosphorothioates |
| US7592326B2 (en) | 2004-03-15 | 2009-09-22 | Karaolis David K R | Method for stimulating the immune, inflammatory or neuroprotective response |
| WO2005089777A1 (en) | 2004-03-15 | 2005-09-29 | Karaolis David K R | A method for inhibiting cancer cell proliferation or increasing cancer cell apoptosis |
| US8076303B2 (en) | 2005-12-13 | 2011-12-13 | Spring Bank Pharmaceuticals, Inc. | Nucleotide and oligonucleotide prodrugs |
| WO2009133560A1 (en) | 2008-04-29 | 2009-11-05 | Smart Assays | Non-hydrolyzable and permeable cyclic bis-[nucleotide monophosphate] derivatives and uses thereof |
| CN102199183B (zh) | 2010-03-26 | 2013-12-18 | 北京大学 | 环二鸟苷酸及其类似物和制备方法 |
| IN2014MN02492A (ko) | 2012-06-08 | 2015-07-17 | Aduro Biotech | |
| JP6333843B2 (ja) | 2012-12-13 | 2018-05-30 | アデュロ バイオテック，インコーポレイテッド | 明確な立体化学を有する環状プリンジヌクレオチドを含む組成物ならびにそれらの調製および使用方法 |
| ES2678194T3 (es) | 2012-12-19 | 2018-08-09 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Determinación farmacéutica de una vía de señalización de dinucleótido cíclico de mamífero |
| WO2014179335A1 (en) | 2013-04-29 | 2014-11-06 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Compositions and methods for altering second messenger signaling |
| EP2992000B1 (en) | 2013-05-03 | 2020-07-08 | The Regents of The University of California | Cyclic di-nucleotide induction of type i interferon |
| US9549944B2 (en) | 2013-05-18 | 2017-01-24 | Aduro Biotech, Inc. | Compositions and methods for inhibiting “stimulator of interferon gene”—dependent signalling |
| PT2996473T (pt) | 2013-05-18 | 2019-11-18 | Univ California | Composições e métodos para a ativação da sinalização dependente do ''estimulador de genes de interferão'' |
| US20160287623A1 (en) | 2013-11-19 | 2016-10-06 | The University Of Chicago | Use of sting agonist as cancer treatment |
| EP3071229A4 (en) | 2013-11-22 | 2017-05-10 | Brock University | Use of fluorinated cyclic dinucleotides as oral vaccine adjuvants |
| MX2016015928A (es) * | 2014-06-04 | 2017-03-20 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | Dinucleotidos ciclicos como moduladores de sting. |
| WO2016079899A1 (ja) | 2014-11-20 | 2016-05-26 | 国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所 | 異なる核酸アジュバントの組み合わせによる、新規Ｔｈ１誘導性アジュバントおよびその用途 |
| WO2016096577A1 (en) | 2014-12-16 | 2016-06-23 | Invivogen | Combined use of a chemotherapeutic agent and a cyclic dinucleotide for cancer treatment |
| US10011630B2 (en) | 2014-12-16 | 2018-07-03 | Invivogen | Cyclic dinucleotides for cytokine induction |
| CN112626153A (zh) | 2014-12-17 | 2021-04-09 | 立博美华基因科技有限责任公司 | 用cGAMP或cGAsMP治疗癌症的方法 |
| GB201501462D0 (en) | 2015-01-29 | 2015-03-18 | Glaxosmithkline Ip Dev Ltd | Novel compounds |
| AR103894A1 (es) | 2015-03-10 | 2017-06-14 | Aduro Biotech Inc | Composiciones y métodos para activar la señalización dependiente del estimulador del gen interferón |
| WO2017011622A1 (en) | 2015-07-14 | 2017-01-19 | Spring Bank Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and compositions that induce rig-i-and other pattern recongnition receptors |
| US10844051B2 (en) | 2015-07-22 | 2020-11-24 | The Royal Institution For The Advancement Of Learning/Mcgill University | Substituted oxazoles for the treatment of cancer |
| GEP20207182B (en) | 2015-08-13 | 2020-11-25 | Merck Sharp & Dohme | Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists |
| US9809597B2 (en) | 2015-08-20 | 2017-11-07 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Ganciclovir derivatives for modulating innate and adaptive immunity and for use in immunotherapy |
| US20170056448A1 (en) | 2015-09-01 | 2017-03-02 | Ifm Therapeutics, Inc | Immune cells having increased immunity or resistance to an immunosuppressive cytokine and use of the same |
| WO2017075477A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Aduro Biotech, Inc. | Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene"-dependent signalling |
| RU2020113165A (ru) | 2015-12-03 | 2020-06-09 | Глэксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед | Циклические пуриновые динуклеотиды в качестве модуляторов sting |
| US10723756B2 (en) | 2016-01-11 | 2020-07-28 | Innate Tumor Immunity Inc. | Cyclic dinucleotides for treating conditions associated with STING activity such as cancer |
| MY194058A (en) | 2016-01-11 | 2022-11-10 | Innate Tumor Immunity Inc | Cyclic dinucleotides for treating conditions associated with sting activity such as cancer |
| NZ746112A (en) | 2016-03-18 | 2023-01-27 | Immune Sensor Llc | Cyclic di-nucleotide compounds and methods of use |
| JP2019510802A (ja) | 2016-04-07 | 2019-04-18 | グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッドＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｌｉｍｉｔｅｄ | タンパク質調節物質として有用な複素環アミド |
| US10537590B2 (en) | 2016-09-30 | 2020-01-21 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Cyclic dinucleotide compounds |
| JOP20170188A1 (ar) | 2016-11-25 | 2019-01-30 | Janssen Biotech Inc | ثنائي النوكليوتيدات الحلقية كمنبهات ستينغ (sting) |
| EP3574018A4 (en) | 2017-01-27 | 2020-10-07 | Silverback Therapeutics, Inc. | CONJUGATES TARGETING TUMORS AND THEIR METHODS OF USE |
| US20200055883A1 (en) * | 2017-02-17 | 2020-02-20 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Cyclic di-nucleotides derivative for the treatment of cancer |
| WO2018198084A1 (en) | 2017-04-27 | 2018-11-01 | Lupin Limited | Cyclic di-nucleotide compounds with tricyclic nucleobases |
| UY37695A (es) | 2017-04-28 | 2018-11-30 | Novartis Ag | Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo |
| JP6909061B2 (ja) | 2017-06-13 | 2021-07-28 | 株式会社三共 | 遊技機 |
-
2019
- 2019-08-14 JP JP2019565031A patent/JP6767589B1/ja active Active
- 2019-08-14 KR KR1020207030563A patent/KR20210045352A/ko not_active Application Discontinuation
- 2019-08-14 TW TW108128873A patent/TWI717804B/zh not_active IP Right Cessation
- 2019-08-14 CA CA3099904A patent/CA3099904A1/en active Pending
- 2019-08-14 AU AU2019322722A patent/AU2019322722A1/en not_active Abandoned
- 2019-08-14 MX MX2020013322A patent/MX2020013322A/es unknown
- 2019-08-14 SG SG11202009262VA patent/SG11202009262VA/en unknown
- 2019-08-14 EP EP19850709.7A patent/EP3837268A4/en active Pending
- 2019-08-14 CN CN201980025277.0A patent/CN112041325B/zh active Active
- 2019-08-14 US US17/058,406 patent/US11691990B2/en active Active
- 2019-08-14 BR BR112021001349-0A patent/BR112021001349A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2019-08-14 WO PCT/JP2019/031951 patent/WO2020036199A1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112041325A (zh) | 2020-12-04 |
| US20210198282A1 (en) | 2021-07-01 |
| BR112021001349A2 (pt) | 2021-04-20 |
| EP3837268A1 (en) | 2021-06-23 |
| CA3099904A1 (en) | 2020-02-20 |
| MX2020013322A (es) | 2021-02-22 |
| US11691990B2 (en) | 2023-07-04 |
| TWI717804B (zh) | 2021-02-01 |
| EP3837268A4 (en) | 2022-04-20 |
| JP2020529967A (ja) | 2020-10-15 |
| CN112041325B (zh) | 2023-10-24 |
| WO2020036199A1 (en) | 2020-02-20 |
| JP6767589B1 (ja) | 2020-10-14 |
| AU2019322722A1 (en) | 2020-10-15 |
| SG11202009262VA (en) | 2020-10-29 |
| TW202015701A (zh) | 2020-05-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102645790B1 (ko) | 암의 치료를 위한 시클릭 디뉴클레오티드 화합물 | |
| AU2022201061B2 (en) | Novel Jak1 selective inhibitors and uses thereof | |
| EP4198037A1 (en) | Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof and their use in the treatment of cycstic fibrosis | |
| EP3068785A1 (en) | Substituted 4,5,6,7-tetrahydropyrazolo[1,5-a]pyrazine derivatives as casein kinase 1 d/e inhibitors | |
| EP2727920B1 (en) | 1,5-naphthyridine derivative or salt thereof | |
| EP4364804A2 (en) | Inhibitors of keap1-nrf2 protein-protein interaction | |
| CN108137638A (zh) | 桥连型核酸GuNA、其制造方法及中间体化合物 | |
| JP2022527298A (ja) | Ｓｔａｔ３の低分子分解誘導剤 | |
| EP4137484A1 (en) | Tricyclic compounds as egfr inhibitors | |
| KR20200043407A (ko) | 안드로겐 수용체 길항제로서 다이아릴티오하이단토인 화합물 | |
| EP2960241A1 (en) | Method for producing tricyclic compound, and tricyclic compound capable of being produced by said production method | |
| EP3943496A1 (en) | Wee1 inhibitor and preparation and use thereof | |
| TWI717804B (zh) | 化合物之鹽及其晶體 | |
| KR20210015937A (ko) | 방광암을 치료하기 위한 방법 | |
| CN113336774A (zh) | 作为trk抑制剂的取代的手性二芳基大环化合物 | |
| KR20210113652A (ko) | 시클릭 디뉴클레오티드 프로드러그 분자 및 이의 제조 방법과 응용 | |
| RU2790175C2 (ru) | Циклические ди-нуклеотидные соединения для лечения рака | |
| EP4212511A1 (en) | Aromatic ethylene compound and preparation method therefor, and intermediate, pharmaceutical composition, and application thereof | |
| CN102766165A (zh) | 合成钼蝶呤前体z衍生物的方法 | |
| EA040675B1 (ru) | Ингибиторы активин-подобной рецепторной киназы |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal |