KR20200087439A

KR20200087439A - 피뿌리풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 그의 용도

Info

Publication number: KR20200087439A
Application number: KR1020190003701A
Authority: KR
Inventors: 이우정; 박세정; 강은수; 이미영; 조희원; 노주원; 김명석; 이희주; 손양주
Original assignee: 코오롱생명과학 주식회사; 한국과학기술연구원
Priority date: 2019-01-11
Filing date: 2019-01-11
Publication date: 2020-07-21

Abstract

본 발명은 피뿌리풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 그의 용도에 관한 것으로서, 상기 피뿌리풀 추출물은, 다프닌, 다프네틴-8-β-글루코시드, 다프네틴, 다프노레틴, 이소쿼르시트린, 루타렌신 및 차마에크로모네로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 상기 피부 미백용 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는 피부를 미백하는 화장 방법에 관한 것이다.

Description

피뿌리풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 그의 용도{COSMETIC COMPOSITION FOR SKIN WHITENING CONTAINING STELLERA CHAMAEJASME EXTRACT AND USE THEREOF}

본 발명은 피뿌리풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 그의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 멜라닌 생성 저해 효과 및 항산화 효과가 있는 피뿌리풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 그의 용도에 관한 것이다.

사람의 피부색은 피부 내 멜라닌(melanin)의 농도와 분포에 따라 유전적으로 결정되나, 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다.

피부의 색을 결정하는 멜라닌 생성에 대한 화학적 작용은 현재까지 여러 논문 등을 통해 많이 보고되고 있는데, 상기 멜라닌 생합성 과정에서 필요한 전구물질은 티로신(tyrosine)이라는 아미노산으로, 이러한 티로신은 디히드록시페닐알라닌(dihydroxyphenylalanine, DOPA)으로 전환되고, 그 후 도파퀴논(dopaquinone)이라는 물질 등을 거쳐 최종적으로 멜라닌으로 전환된다고 알려져 있다.

이와 같이 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 그러나 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨 및 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다.

이와 같은 요구에 부응하여 종전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔다. 그러나, 이들의 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합 시 나타나는 제형 및 안정성의 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.

따라서 효과적인 피부 미백 및 항산화 효과를 달성할 수 있는 새로운 성분에 관한 연구가 필요하다.

한편, 피뿌리풀은 전통적인 약용 식물로 피부 상처치유 효과가 있다고 알려져 있으나, 피부 미백 효과에 대해서는 아직까지 보고된 바 없다.

본 발명의 목적은 멜라닌 생성 저해 효과 및 항산화 효과가 있는 피뿌리풀 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 피부 미백용 화장료 조성물을 이용하여 피부를 미백하는 화장 방법을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명의 일 측면에 따른 피부 미백용 화장료 조성물은 피뿌리풀 추출물을 유효 성분으로 포함한다.

이때, 상기 피뿌리풀은, 피뿌리풀 전초, 지상부, 뿌리, 잎, 꽃 및 종자로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상인 것일 수 있다.

또한, 상기 피뿌리풀 추출물은, 물, 아세톤, C1-C6 알코올, 또는 이들 중 2 이상의 혼합용매로 추출된 것일 수 있다.

그리고, 상기 피뿌리풀 추출물은, 다프닌, 다프네틴-8-β-글루코시드, 다프네틴, 다프노레틴, 이소쿼르시트린, 루타렌신 및 차마에크로모네로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상의 화합물을 포함할 수 있다.

이때, 상기 화장료 조성물은, 상기 화합물, 그의 염 또는 용매화물을 유효 성분으로 포함할 수 있다.

그리고, 본 발명의 피부 미백용 화장료 조성물은, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 마스크 팩 또는 시트, 포말(foam) 또는 에어로졸 제형인 것일 수 있다.

나아가, 본 발명의 다른 측면에 따른 멜라닌 생성 저해용, 피부 색소 침착 개선용, 및/또는 항산화용 화장료 조성물은 피뿌리풀 추출물을 유효 성분으로 포함한다. 이때, 상기 항산화는 유해 활성산소 제거 용도일 수 있다.

한편, 본 발명의 또 다른 측면에 따른 피부를 미백하는 화장 방법은, 전술한 본 발명의 피부 미백용 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계를 포함한다.

본 발명에 따르면, 피뿌리풀 추출물에 의해 멜라닌 생성 저해효과 및 항산화 효과가 발생하여, 피부색 개선에 효과가 있다.

그리고, 인체피부 적용 시험을 통해 피부 과색소침착 부위의 피부색 개선, 멜라닌 지수 감소 및 피부톤 균일도의 증가 효과가 있음을 확인하였다.

또한, 본 발명의 피부를 미백하는 화장 방법에 의해, 효율적으로 피부 밝기를 개선시킬 수 있고, 피부 색소 침착을 예방 및 개선할 수 있다.

도 1은 본 발명의 시험군과 대조군의 시간 경과에 따른 피부색, 멜라닌 지수 및 피부톤 균일도를 보여준다.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 피부 미백용 화장료 조성물은, 피뿌리풀 추출물을 유효 성분으로 포함한다. 본 발명에 따른 피뿌리풀 추출물은 멜라닌 생성 저해효과 및 항산화 효과가 있어, 피부색 개선에 효과적이고, 피부톤의 균일도도 향상시키는 효과가 있다.

상기 피뿌리풀은 피뿌리풀 전초, 지상부, 뿌리, 잎, 꽃 및 종자로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상일 수 있고, 보다 구체적으로는 피뿌리풀 지상부의 전체, 그 일부분, 또는 이들로부터 유래된 재료일 수 있으며, 상기 피뿌리풀의 일부분은 피뿌리풀의 줄기, 잎, 꽃, 또는 꽃잎일 수 있다.

상기 피뿌리풀은 몽골의 산악 지역에서 생육된 것일 수 있다. 상기 지역은 움란바토르 근교일 수 있다. 상기 피뿌리풀은 약 30 내지 40 cm의 높이로 자랄 수 있다. 상기 피뿌리풀의 잎의 길이는 약 15 내지 27 mm이고, 잎은 피침형(lanceolate)일 수 있다. 상기 잎의 표면은 녹색이고, 그 뒷면은 푸른 빛이 도는 회색일 수 있다. 잎의 양면 모두 털이 없고 잎자루가 짧다. 가장 바람직하게는 상기 피뿌리풀 지상부의 전체, 그 일부분, 또는 이들로부터 유래된 재료를 분쇄 또는 세절하거나 적당하게 건조하여 추출에 사용할 수 있다.

상기 피뿌리풀 추출물은 물, 아세톤, 알코올, 예를 들면, C1-C6 알코올, 또는 이들 중 2 이상의 혼합용매로 추출된 것일 수 있다. 상기 C1-C6 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 펜탄올, 헥산올 등의 1가 알코올일 수 있고, 에틸렌글리콜, 1,3-프로판디올(트리메틸렌글리콜), 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜 등의 2가 알코올(다이올)일 수도 있다. 상기 용매는 예를 들면, 물과 알코올의 혼합물, 즉, 알코올 수용액일 수 있다. 알코올 수용액의 알코올 농도는 1 내지 100(v/v)%, 예를 들면, 1 내지 99.5(v/v)%, 10 내지 100(v/v)%, 20 내지 100(v/v)%, 30 내지 100(v/v)%, 40 내지 100(v/v)%, 50 내지 100(v/v)%, 60 내지 100(v/v)%, 70 내지 100(v/v)%, 또는 75 내지 100(v/v)%일 수 있고, 바람직하게는, 10 내지 90(v/v)%, 20 내지 80(v/v)%, 30 내지 70(v/v)%, 40 내지 60(v/v)%일 수 있으며, 가장 바람직하게는 50(v/v)%일 수 있다. 상기 (v/v)%는 부피%를 나타낸다. 상기 알코올 수용액은 메탄올, 에탄올, 또는 부탄올 수용액일 수 있다. 상기 아세톤은 100% 농도일 수 있다.

상기 추출은 상기 피뿌리풀 전초, 지상부, 뿌리, 잎, 꽃 및 종자로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상으로부터 유래된 재료에 대하여 상기 추출 용매를 1 내지 100(중량/중량)배, 예를 들면, 1 내지 50(중량/중량)배, 1 내지 40(중량/중량)배, 1 내지 30(중량/중량)배, 1 내지 20(중량/중량), 1 내지 10(중량/중량)배 또는 1 내지 5(중량/중량)배 첨가하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 피뿌리풀 지상부의 전체, 그 일부분, 또는 이들로부터 유래된 재료 1kg에 대하여 상기 추출 용매를 1 내지 40 kg, 바람직하게는 10 내지 30 kg, 가장 바람직하게는 20 kg을 첨가하는 것일 수 있다. 상기 (중량/중량)배는 중량비를 나타낸다.

상기 추출은 가온된 액체 추출, 가압된 액체 추출(pressurized liquid extraction: PLE), 초음파 도움을 받은 추출(microwave assisted extraction: MAE), 아임계 추출(subcritical extraction: SE), 또는 이들의 조합에 의하여 수행될 수 있다. 상기 아임계 추출은 아임계 수추출(subcritical water extraction: SWE)일 수 있다. 아임계 수추출은 초가열된 수추출(superheated water extraction) 또는 가압된 열수 추출(pressurized hot water extraction: PHWE)이라고도 한다. 상기 가온된 액체 추출은 환류 추출일 수 있다.

상기 추출은 4 ℃ 내지 70 ℃, 예를 들면, 4 ℃ 내지 50 ℃, 4 ℃ 내지 40 ℃, 4 ℃ 내지 30 ℃, 10 ℃ 내지 70 ℃, 15 ℃ 내지 70 ℃, 20 ℃ 내지 70 ℃, 4 ℃ 내지 50 ℃, 10 ℃ 내지 50 ℃, 4 ℃ 내지 40 ℃, 4 ℃ 내지 30 ℃, 10 ℃ 내지 40 ℃, 10 ℃ 내지 35 ℃, 또는 10 ℃ 내지 30 ℃에서 수행하는 것일 수 있다. 바람직하게는 30 내지 70 ℃ 또는 40 내지 60 ℃일 수 있고, 가장 바람직하게는 50 ℃ 정도일 수 있다. 상기 추출 시간은 선택된 온도에 따라 달라질 수 있는데 1 분 내지 2 개월, 예를 들면, 1 분 내지 1 개월, 1 분 내지 15 일, 1 분 내지 10 일, 1 분 내지 5 일, 1 분 내지 3 일, 1 분 내지 2 일, 1 분 내지 1 일, 1 시간 내지 2 개월, 1 시간 내지 1 개월, 1 시간 내지 15 일, 1 시간 내지 10 일, 1 시간 내지 5 일, 1 시간 내지 3 일, 1 시간 내지 2 일, 1 시간 내지 1 일, 5 시간 내지 1 개월, 5 시간 내지 15 일, 5 시간 내지 10 일, 5 시간 내지 5 일, 5 시간 내지 3 일, 5 시간 내지 2 일, 5 시간 내지 1 일, 10 시간 내지 1 개월, 10 시간 내지 15 일, 10 시간 내지 10 일, 10 시간 내지 5 일, 10 시간 내지 3 일, 또는 10 시간 내지 2 일일 수 있다. 특히, 초음파 도움을 받은 추출인 경우에는 짧게는 1 분 내지 10 분 정도 추출을 진행할 수도 있으나, 추출 시간이 상기에 기재된 내용으로 한정되는 것은 아니다. 상기 추출은 상기 용매 중에 피뿌리풀의 지상부의 전체, 그 일부분, 또는 이들로부터 유래된 재료를 혼합하고 일정 시간 동안 방치하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방치는 적당한 교반을 포함할 수 있다. 상기 추출은 1 회 이상, 예를 들면, 1 내지 5 회 반복될 수 있다.

상기 추출은 식물체 잔사 및 추출액을 여과 등의 알려진 방법에 의하여 분리할 수 있다. 상기 추출은 또한 얻어진 추출액으로부터 감압 농축과 같은 알려진 방법에 의하여 용매를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 상기 추출은 또한, 얻어진 추출물을 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등과 같은 건조에 의하여 건조 추출물을 제조하는 것을 포함할 수 있다.

한편, 본 발명의 피뿌리풀 추출물은, 피뿌리풀 추출물의 분획물일 수 있다. 이때, 상기 용어 “분획물(fraction)”은 상기 피뿌리풀 추출물이 그 일부의 성분으로 나누어진 물질, 즉, 분획된 물질을 나타낸다. 상기 분획물을 용매 분획화(fractionation)에 의하여 얻어진 것일 수 있다. 상기 용매 분획화는 피뿌리풀 추출물을 용매와 혼합하고 상기 용매에 존재하는 물질을 분리하는 것일 수 있다. 상기 분획물은 상기 피뿌리풀 추출물을 물에 현탁시킨 후 헥산, 에틸아세테이트, 및 부탄올로 순차적으로 분획화하여 얻어진 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물, 또는 최종적으로 남은 물 분획물일 수 있다.

구체적으로, 상기 헥산 분획물은 상기 피뿌리풀 추출물을 물과 혼합하고, 이 혼합물을 다시 헥산과 혼합한 후, 일정 시간 동안 방치한 다음, 헥산층을 분리하고, 분리된 헥산층으로부터 분획물을 분리하는 것에 의하여 얻어진 것일 수 있다. 분획물을 분리하는 것은 헥산층으로부터 헥산을 제거하는 것을 포함할 수 있다. 또한, 상기 에틸아세테이트 분획물은 상기 헥산 분획물을 분리하고 남은 물층을 에틸아세테이트와 혼합한 후, 일정 시간 동안 방치한 다음, 에틸아세테이트층을 분리하고, 분리된 에틸아세테이트층으로부터 분획물을 분리하는 것에 의하여 얻어진 것일 수 있다. 분획물을 분리하는 것은 에틸아세테이트층으로부터 에틸아세테이트를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 또한, 상기 부탄올 분획물은 상기 에틸아세테이트 분획물을 분리하고 남은 물층을 부탄올과 혼합한 후, 일정 시간 동안 방치한 다음, 부탄올층을 분리하고, 분리된 부탄올층으로부터 분획물을 분리하는 것에 의하여 얻어진 것일 수 있다. 분획물을 분리하는 것은 부탄올층으로부터 부탄올을 제거하는 것을 포함할 수 있다. 온도 조건, 압력 조건, 시간, 사용된 용매의 양 또는 농도, 교반 등과 같은 상기 분획화의 조건은 상기한 피뿌리풀 추출물을 제조하는데 사용된 추출에 대하여 설명한 바와 같을 수 있다. 상기 분획화는 1 회 이상, 예를 들면, 1 내지 5 회 반복될 수 있다. 상기 분획화의 순서는 예시적인 것이며, 헥산, 에틸아세이트, 및 부탄올을 사용한 분획화는 당업자가 임의의 순서로 실시할 수 있다.

상기 분획물을 분리하는 것은 여과 등의 알려진 방법에 의하여 이루어질 수 있다. 상기 분획화는 또한 얻어진 분획물로부터 감압 농축과 같은 알려진 방법에 의하여 용매를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 상기 분획화는 또한 얻어진 분획물을 농축 및/또는 건조하는 것을 포함할 수 있다. 상기 농축은 감압 농축일 수 있다. 상기 건조는 감압 건조, 비등 건조, 분무 건조, 상온 건조 또는 동결건조를 포함할 수 있다.

본 발명의 상기 피부 미백용 화장료 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량% 내지 80 중량%, 예를 들면, 0.01 중량% 내지 60 중량%, 0.01 중량% 내지 40 중량%, 0.01 중량% 내지 30 중량%, 0.01 중량% 내지 20 중량%, 0.01 중량% 내지 10 중량%, 0.01 중량% 내지 5 중량%, 0.05 중량% 내지 60 중량%, 0.05 중량% 내지 40 중량%, 0.05 중량% 내지 30 중량%, 0.05 중량% 내지 20 중량%, 0.05 중량% 내지 10 중량%, 0.05 중량% 내지 5 중량%, 0.1 중량% 내지 60 중량%, 0.1 중량% 내지 40 중량%, 0.1 중량% 내지 30 중량%, 0.1 중량% 내지 20 중량%, 0.1 중량% 내지 10 중량%, 또는 0.1 중량% 내지 5 중량%의 피뿌리풀 추출물을 포함할 수 있다.

한편, 본 발명의 상기 피뿌리풀 추출물은, 다프닌(Daphnin), 다프네틴-8-β-글루코시드(Daphnetin-8-beta-glucoside), 다프네틴(Daphnetin), 다프노레틴(Daphnoretin), 이소쿼르시트린(Isoquercitrin), 루타렌신(Rutarensin) 및 차마에크로모네(Chamaechromone)로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상의 화합물을 포함할 수 있다.

이때, 상기 화장료 조성물은 상기 화합물, 그의 염 또는 용매화물을 유효 성분으로 포함할 수 있다.

한편, 상기 다프닌은 8-히드록시-2-옥소-2H-크로멘-7-일-β-D-글루코피라노시드(8-hydroxy-2-oxo-2H-chromen-7-yl beta-D-glucopyranoside)일 수 있다. 상기 다프네틴은 7,8-디히드록시쿠마린(7,8-Dihydroxycoumarin)일 수 있다. 상기 다프노레틴은 7-히드록시-6-메톡시-3-(2-옥소크로멘-7-일) 옥시크로멘-2-오네(7-hydroxy-6-methoxy-3-(2-oxochromen-7-yl)oxychromen-2-one)일 수 있다. 상기 이소쿼르시트린은 2-(3,4-디히드록시페닐)-5,7-디히드록시-3-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-트리히드록시-6-(히드록시메틸)옥산-2-일] 옥시크로멘-4-오네(2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxychromen-4-one)일 수 있다. 상기 루타렌신은 3-히드록시-3-메틸-5-옥소-5-[[3,4,5-트리히드록시-6-[6-메톡시-2-옥소-3-(2-옥소크로멘-7-일) 옥시크로멘-7-일]옥시옥산-2-일]메톡시]펜탄산(3-hydroxy-3-methyl-5-oxo-5-[[3,4,5-trihydroxy-6-[6-methoxy-2-oxo-3-(2-oxochromen-7-yl)oxychromen-7-yl]oxyoxan-2-yl]methoxy]pentanoic acid)일 수 있다. 그리고, 상기 차마에크로모네는 (+)-3-[1-[비스(4-히드록시페닐)메틸]-2-옥소-2-(2,4,6-트리히드록시페닐)에틸]-5,7-디히드록시-4H-1-벤조피란-4-오네((+)-3-[1-[Bis(4-hydroxyphenyl)methyl]-2-oxo-2-(2,4,6-trihydroxyphenyl)ethyl]-5,7-dihydroxy-4H-1-benzopyran-4-one)일 수 있다.

그리고, 상기 화합물의 염은 피부 화장료 용도로 허용 가능한 한 특별히 제한되지는 않으나, 바람직하게는 무기산염, 유기산염 또는 금속염일 수 있다. 바람직한 무기산염의 예에는 염산염, 인산염, 황산염 또는 이황산염을 들 수 있으며, 바람직한 유기산염의 예에는 말산염, 말레인산염, 구연산염, 푸마르산염, 베실산염, 캄실산염 또는 에디실염을 들 수 있고, 금속염의 예에는 칼슘염, 나트륨염, 마그네슘염, 스트론튬염 또는 칼륨염을 들 수 있다.

상기 피부 미백용 화장료 조성물은 희석제 또는 담체를 포함할 수 있다. 상기 희석제는 유당, 옥수수 전분, 대두유, 미정질 셀룰로오스, 또는 만니톨, 활택제로는 스테아린산 마그네슘, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 담체는 부형제, 붕해제, 결합제, 활택제, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 부형제는 미결정 셀룰로오스, 유당, 저치환도 히드록시셀룰로오스, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 붕해제는 카르복시메틸셀룰로오스 칼슘, 전분 글리콜산 나트륨, 무수인산일수소 칼슘, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 결합제는 폴리비닐피롤리돈, 저치환도 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 활택제는 스테아린산 마그네슘, 이산화규소, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다.

한편, 상기 피부 미백용 화장료 조성물은 통상의 화장품의 피부 외용제에 사용되는 성분, 예를 들면 수성성분, 유성성분, 분말성분, 알코올류, 보습제, 증점제, 자외선흡수제, 미백제, 방부제, 산화방지제, 계면활성제, 향료, 색제, 각종 피부 영양제, 또는 이들의 조합과 필요에 따라서 적절하게 배합될 수 있다.

상기 피부외용제는, 에데트산이나트륨, 에데트산삼나트륨, 시트르산나트륨, 폴리인산나트륨, 메타인산나트륨, 글루콘산 등의 금속봉쇄제, 카페인, 탄닌, 벨라파밀, 감초추출물, 글라블리딘, 칼린의 과실의 열수추출물, 각종 생약, 아세트산토코페롤, 글리틸리틴산, 트라넥삼산 및 그 유도체 또는 그 염 등, 비타민 C, 아스코르브산인산마그네슘, 아스코르브산글루코시드, 알부틴, 코지산, 글루코스, 프룩토스, 트레할로스 등의 당류도 적절하게 배합할 수 있다.

한편, 상기 피부 미백용 화장료 조성물은, 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있다. 예를 들면, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 마스크 팩 또는 시트, 포말(foam) 또는 에어로졸 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

그리고, 상기 피부 미백용 화장료 조성물은, 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 보습제 등의 추가 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.01 내지 5 중량%, 구체적으로 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.

한편, 본 발명의 다른 실시예에 따른 피부를 미백하는 화장 방법은, 전술한 본 발명의 피부 미백용 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계를 포함한다.

이때, 상기 개체의 피부에 적용하는 단계는 피부에 상기 피부 미백용 화장료 조성물을 접촉시켜 상기 조성물의 성분이 피부 내로 침투되도록 하는 것을 포함한다. 피부에 적용하는 단계는 상기 조성물이 피부 내로 침투되도록 하는 것을 돕는 다른 수단, 예를 들면, 이온토포리스와 같은 전기적 또는 자기적 힘과 같은 수단과 조합될 수 있다.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.

<실시예>

1. 피뿌리풀 에탄올 추출물의 제조

피뿌리풀은 몽골 울란바토르 근교에서 생육한 것으로서 지상부를 채집하였다. 채집된 지상부를 물로 세척하고 건조하였다. 건조된 피뿌리풀 지상부는 작두를 이용하여 2 내지 3 cm로 세절하여 사용하였다. 유리 삼각플라스크에 상기 세절된 피뿌리풀 지상부 100 g과, 50(v/v)%의 에탄올 수용액 2 kg을 넣고 혼합하였다. 이 혼합물을 50 ℃의 온도에서 2 시간 동안 150 내지 350 rpm으로 교반하여 추출하였다.

다음으로, 혼합물을 여과지(Whatman, NO.2, 8 ㎛)에 통과시켜 얻어진 여과액을 얻었다. 얻어진 여과액을 회전식 감압농축기(EYELA, N-1100)를 사용하여 감압 농축하였으며, 남아있는 용매를 제거하기 위하여 48 시간 동안 동결 건조(Operon, FDCF-12003)를 실시하여 용매가 제거된 건조된 피뿌리풀 추출물 3 g을 얻었다.

상기 피뿌리풀 에탄올 추출물을 디메틸술폭시드(Dimethyl sulfoxide: DMSO)에 20 mg/ml의 농도로 녹인 후, 하기 실험에 이용했다.

2. 멜라닌 생성 저해 효과 확인 실험

미백 효능을 확인하기 위하여, human melanocyte인 SK-MEL-2 세포주를 사용하였다. 각 세포주는 세포 생장에 알맞은 배지를 선정하여 37 ℃, 5 % CO₂를 포함하는 배양기 내에서 배양하였다.

실험 전 사람의 멜라닌 세포에 대하여 독성을 평가하여 독성이 없는 농도를 선정하여 미백 평가를 수행하였다. 배양액의 최종농도가 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 50 ppm이 되도록 실험하였으며, 대조군인 루시놀(Rucinol)은 1.7 ppm이 되도록 배지에 첨가하여 진행하였다.

상기 SK-MEL-2 세포주를 멜라닌 유도 물질인 α-MSH를 처리하여 시료와 함께 3 일간 배양 후 세포를 수집하였다. 수집된 세포에 1N NaOH를 처리한 후 고온에서 세포를 완전히 녹인 뒤, 400 내지 500 nm에서 흡광도를 측정하였고, 합성 멜라닌(synthetic melanin)으로 standard curve를 구하여 멜라닌 양을 정량화하여 아래의 표 1에 나타내었다. 이러한 실험은 3번 반복된 것이다.

첨가 조성물	α-MSH	Concentration (ppm)	Melanin Contents(% of control)
없음(DMSO)	-	0	100.00±0.005
없음(DMSO)	+	0	214.88±0.005
피뿌리풀	+	5	129.51±0.018
	+	10	116.70±0.004
	+	20	90.35±0.013
	+	50	85.34±0.021
루시놀	+	1.7	122.64±0.012

피뿌리풀 추출물은 기존에 알려진 미백 물질인 루시놀과 비교할 때 배양된 사람의 멜라닌 세포에 대하여 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 알 수 있다.

3. 멜라닌 생성 저해 효과 확인 실험

미백 효능을 확인하기 위하여, human melanocyte인 SK-MEL-2 세포주를 사용하였다. 각 세포주는 세포 생장에 알맞은 배지를 선정하여 37 ℃, 5 % CO₂를 포함하는 배양기내에서 배양하였다.

실험 전 사람의 멜라닌 세포에 대하여 독성을 평가하여 독성이 없는 농도를 선정하여 미백 평가를 수행하였다. 다프닌, 다프네틴-8-ß-글루코시드, 다프네틴, 다프노레틴, 이소쿼르시트린, 루타렌신 및 차마에크로모네는 배양액의 최종농도가 1 μM, 5 μM, 10 μM, 20 μM이 되도록 실험하였으며, 대조군인 루시놀은 10 μM이 되도록 배지에 첨가하여 진행하였다.

상기 SK-MEL-2 세포주를 멜라닌 유도 물질인 α-MSH를 처리하여 시료와 함께 3 일간 배양 후 세포를 수집하였다. 수집된 세포에 1N NaOH를 처리한 후 고온에서 세포를 완전히 녹인 뒤 400 내지 500 nm에서 흡광도를 측정하였고, 합성 멜라닌으로 standard curve를 구하여 멜라닌 양을 정량화하여 아래의 표 2에 나타내었다. 이러한 실험은 3번 반복된 것이다.

첨가 조성물	α-MSH	Concentration (μM)	Melanin Contents(% of control)
없음(DMSO)	-	0	100
없음(DMSO)	+	0	210.59±7.99
다프닌	+	1	169.39±7.75
		5	116.25±8.16
		10	143.40±2.91
		20	116.25±3.07
다프네틴-8-β-글루코시드	+	1	119.85±3.86
		5	121.87±5.13
		10	119.51±4.83
		20	117.30±4.23
다프네틴	+	1	119.68±4.85
		5	106.00±3.37
		10	101.43±2.31
		20	99.76±2.84
다프노레틴	+	1	136.67±5.06
		5	123.55±4.98
		10	119.63±3.62
		20	103.17±6.14
이소쿼르시트린	+	1	127.08±8.61
		5	121.42±6.80
		10	122.63±8.17
		20	109.82±3.97
루타렌신	+	1	121.01±4.48
		5	119.49±4.42
		10	117.98±4.36
		20	117.47±4.35
차마에크로모네	+	1	122.52±4.53
		5	121.01±4.48
		10	118.48±4.38
		20	114.95±4.25
루시놀	+	10	107.38±2.73

상기 표 2를 참고하면, α-MSH를 처리한 경우, 무처리군에 비해 멜라닌 함량이 증가하는 것을 확인하였으며 조성물을 함께 처리하였을 시 멜라닌 함량이 감소하는 경향을 확인하였다. 상기 지표 성분 7종 모두 멜라닌 함량 감소에 효과적이었고, 특히 다프네틴에서 효과가 우수하였으며, 이는 양성 대조군으로 사용한 루시놀(Rucinol)과 유사한 효과가 나타났음을 확인하였다.

4. 항산화 효과 확인 실험

조성물의 hydroxyl radical 소거능을 확인하기 위해 조성물에 FeSO₄ 및 2-디옥시리보오스(2-deoxyribose)를 혼합하여 반응시킨 뒤, 타이오바르비투르산(thiobarbituric acid) 용액을 가하여 가열시킨 후 532 nm에서 흡광도를 측정하여 하기 표 3에 나타내었다.

조성물	Hydroxyl radical scavenging (%)
피뿌리풀 추출물 5 ppm	25.71±0.001
피뿌리풀 추출물 10 ppm	50.42±0.003
피뿌리풀 추출물 20 ppm	51.34±0.000
피뿌리풀 추출물 50 ppm	54.22±0.016

상기 표 3을 참고하면, 피뿌리풀 추출물 10 ppm 이상의 농도에서 50% 이상의 hydroxyl radical 소거능을 보여 항산화 효과가 있음을 알 수 있다.

5. 미백 효능 인체 적용 실험

피뿌리풀 추출물 1 % 함유 크림과 대조군으로 무함유 크림을 이용하여 인체적용 실험을 수행하였다.

(1) 평가 방법

본 실험 목적에 적합한 실험 대상자인 평균나이 50±3.92세 여성 20 명의 피험자들을 대상으로 안면을 반으로 나누어 시험제품과 대조제품을 이중맹검 및 무작위 배정에 따라 사용하도록 하였다. 평가는 제품 사용 전, 사용 4주, 8주 및 12주 후 시점에서 과색소침착 부위의 피부 색, 멜라닌 지수 및 피부 톤 균일도의 평가를 실시하였다. 시험군은 피뿌리풀 추출물 1.0 % 함유 크림이고, 대조군은 아무것도 첨가하지 않은 무함유 크림으로 진행하였다.

(2) 피부색 분석

피부색(ITA°value)은 Spectrophotometer^®CM-2500d(Minolta, Japan)를 이용하여 측정하였다. 이는 물체 색의 분광반사율을 측정하는 장비로서 3자극치(tristimulus values)를 측정하여 CIE표색계인 L*, a*, b*로 계산해준다. L*a*b* 표색계에서 명도는 L*로, 색상과 채도는 a*, b*로 표현된다. a*는 적색방향, -a*는 녹색방향, b*는 황색방향, -b*는 청색방향을 표시한다.

본 실험에서는 제품사용 전, 사용 4주, 8주 및 12주 후 시점에서 과색소침착 부위를 3회 측정한 후 아래의 식을 이용하여 피부색(Individual Typology Angle (ITA°value)을 분석하였다.

ITA˚= [Arc Tangent((L*-50)/b*)] × 180/π

(3) 멜라닌 지수 분석

멜라닌 지수(MI) 측정은 Mexameter^® MX18(C+K, Germany)를 이용하였다. 이는 피부색을 결정하는 주요 요인인 멜라닌과 헤모글로빈의 양을 흡광 원리를 이용하여 측정하는 장치로서, Probe 내에는 3개 영역의 파장을 방출하는 방출기와 물체에 반사된 빛을 수용하는 수용기가 있다. 방출기에서 일정량의 빛을 방출하고, 피부에서 반사된 빛의 양을 수용기에서 감지하여 피부에서 흡수된 빛의 양을 계산할 수 있다. 멜라닌지수는 2개의 다른 파장 영역에서의 흡수율로 측정된다.

본 실험에서는 제품 사용 전, 사용 4주, 8주 및 12주 후 시점에서 과색소침착 부위를 3회 측정한 후 멜라닌 지수의 평균값을 구하였다.

(4) 피부톤 균일도 측정

피부톤의 균일도는 편광 이미지를 통해 측정할 수 있는데, Image-pro^® plus (Media Cybernetics, USA)를 이용하여 value(V, 명도)의 표준 편차(SD) 값을 분석함으로써 측정하였다. 표준편차 값이 감소할수록 피부톤이 균일해짐을 의미한다.

(5) 결과 분석

도 1은 본 발명의 실험군과 대조군의 시간 경과에 따른 피부색, 멜라닌 지수 및 피부톤 균일도를 보여준다. 하기 항목에 대한 분석결과는 다음과 같다.

1) 분광반사율을 이용한 피부색 분석

제품 사용 전과 비교시, 시험군 과색소침착 부위의 피부색이 모든 시점에서 유의하게 개선되었으며, 개선율은 3.94 % 내지 11.39 %였다(p < 0.05).

군간 비교시, 시험군이 대조군에 비해 과색소침착 부위의 피부색이 모든 시점에서 유의하게 개선되었다(p < 0.05).

2) 흡광원리를 이용한 멜라닌 지수 분석

제품 사용 전과 비교시, 시험군 과색소침착 부위의 멜라닌 지수가 모든 시점에서 유의하게 감소하였으며, 감소율은 4.48 % 내지 6.56 %였다(p < 0.05).

군간 비교시, 시험군이 대조군에 비해 과색소침착 부위의 멜라닌 지수가 모든 시점에서 유의하게 개선되었다(p < 0.05).

3) 편광 이미지를 이용한 피부톤 균일도 분석

제품 사용 전과 비교시, 시험군의 피부톤 균일도가 모든 시점에서 유의하게 감소하였으며, 감소율은 2.32 % 내지 3.33 %였다(p < 0.05).

군간 비교시, 시험군이 대조군에 비해 피부톤 균일도가 모든 시점에서 유의하게 개선되었다(p < 0.05).

미백효과 평가 결과, 과색소침착 부위의 피부색, 멜라닌 지수 및 피부톤 균일도가 대조군에 비해 유의하게 개선되었다. 따라서 피뿌리풀 추출물은 피부 미백에 도움을 준다는 것을 확인하였다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

피뿌리풀 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 피뿌리풀은, 피뿌리풀 전초, 지상부, 뿌리, 잎, 꽃 및 종자로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 피뿌리풀 추출물은 물, 아세톤, C1-C6 알코올, 또는 이들 중 2 이상의 혼합용매로 추출된 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 피뿌리풀 추출물은,
다프닌, 다프네틴-8-β-글루코시드, 다프네틴, 다프노레틴, 이소쿼르시트린, 루타렌신 및 차마에크로모네로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 또는 이들 중 2 이상의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제4항에 있어서,
상기 화장료 조성물은, 상기 화합물, 그의 염 또는 용매화물을 유효 성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 마스크 팩 또는 시트, 포말(foam) 또는 에어로졸 제형인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항의 피부 미백용 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는, 피부를 미백하는 화장 방법.