KR20200085782A - 비스테로이드성 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (ｓｅｇｒａｍ) 및 이의 용도 - Google Patents

비스테로이드성 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (ｓｅｇｒａｍ) 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20200085782A
KR20200085782A KR1020207014598A KR20207014598A KR20200085782A KR 20200085782 A KR20200085782 A KR 20200085782A KR 1020207014598 A KR1020207014598 A KR 1020207014598A KR 20207014598 A KR20207014598 A KR 20207014598A KR 20200085782 A KR20200085782 A KR 20200085782A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cpdx
segram
formula
derivative
enantiomer
Prior art date
Application number
KR1020207014598A
Other languages
English (en)
Inventor
피에르 샹봉
구오치앙 후아
Original Assignee
아쏘시아시옹 뿌르 라 르셰르셰 아 르 아이지비엠씨 (에이알아이)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 아쏘시아시옹 뿌르 라 르셰르셰 아 르 아이지비엠씨 (에이알아이) filed Critical 아쏘시아시옹 뿌르 라 르셰르셰 아 르 아이지비엠씨 (에이알아이)
Priority claimed from PCT/EP2018/079049 external-priority patent/WO2019081517A2/en
Publication of KR20200085782A publication Critical patent/KR20200085782A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/87—Benzo [c] furans; Hydrogenated benzo [c] furans
    • C07D307/88—Benzo [c] furans; Hydrogenated benzo [c] furans with one oxygen atom directly attached in position 1 or 3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/14—Decongestants or antiallergics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

본 발명은 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM) 또는 이의 유도체의 두 개의 에난티오머; 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 중수소화된 형태; 및 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 두 개의 중수소화된 에난티오머, 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이다:
Figure pct00020

(화학식 1).
본 발명은 또한 염증성 장애의 예방 또는 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체, 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이다.

Description

비스테로이드성 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (ＳＥＧＲＡＭ) 및 이의 용도
본 발명은 염증성 장애의 예방 또는 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM)에 관한 것이다. 특히, 본 발명의 SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체의 직접 전사촉진 (transactivation) 또는 직접 전사억제 (transrepression) 기능 중 어느 것도 유도하지 않으며, 합성 글루코코르티코이드 (GC)의 쇠약 효과를 발휘하지 않는다.
글루코코르티코이드 (GC)는 항상성을 유지하기 위한 노력으로 수많은 생리적 과정을 조절하는 삶에 필요한 일차 스트레스 호르몬이다. 이들은 코르티코스테로이드 계열에 속하며, 이들의 동족 수용체인 글루코코르티코이드 수용체 (GR)에 결합한다.
NR3C1 (핵 수용체 서브패밀리 3, 그룹 C, 구성원 1)로도 알려진 GR은 거의 모든 척추동물 사이에서 거의 모든 세포에 어디에나 존재한다. 이것은 발달, 대사 및 면역 반응과 같은 다양한 중요한 생리적 과정을 제어하는 유전자의 발현을 조절한다.
구조적으로, GR은 수 개의 도메인으로 구성된 모듈식 단백질이다:
- N-말단 전사촉진 도메인 (NTD, 또는 "A/B 도메인");
- 중심 DNA-결합 도메인 (DBD, 또는 "C 도메인"). 이 도메인은 핵 수용체 수퍼패밀리에 걸쳐 가장 보존된 도메인이며 글루코코르티코이드-반응 요소 (GRE)라고 불리는 표적 DNA 서열을 인식하고 결합하는 두 개의 징크 핑거 모티프를 함유한다;
- 가요성 힌지 영역 (또는 "D 도메인");
- C-말단 리간드 결합 도메인 (LBD, 또는 "E 도메인"). 이 도메인은 GC를 결합하기 위한 소수성 포켓을 형성한다;
- 및 C-말단 도메인 (CTD 또는 "F 도메인").
GR LBD에 GC의 결합시, GR은 입체구조 변화를 겪어 각각 DBD/힌지 영역 접합부에 및 LBD 내에 위치한 두 개의 핵 국재화 신호를 노출시킨다. 그후 GR은 핵 기공을 통해 핵으로 빠르게 전위하며, 여기에서 이것은 이하에 및 도 1에 상세히 설명된 세 가지 전사 조절 기능 중 하나를 발휘할 수 있다.
"직접 전사촉진"이라고 불리는 첫 번째 기능은 GC-관련 GR을 시스-작용 양성 GRE ((+)GRE)에 직접 결합시켜 표적 유전자의 발현을 활성화시킨 결과이다. 컨센서스 (+)GRE 서열, GGAACANNNTGTTCT (여기서 N은 A, T, C 또는 G 중의 어느 것이다) (서열 번호 1)는 3개의 염기 쌍에 의해 분리된 2개의 6-염기 쌍 반 부위를 포함하는 불완전한 회문이며, 따라서 "IR3" ("역위 반복 3")으로 지칭된다.
두 번째 기능은 "간접 테더링된(tethered) 전사억제"이며, 이것은 GC-결합된 GR와 전염증성 전사 인자 AP-1 및 NF-κB와의 물리적 상호작용으로부터 야기된다. GR은 AP-1의 Jun 서브유닛 및 NF-κB의 p65 서브유닛에의 결합을 통해 이들의 활성을 길항시키고 이들 두 가지 단백질의 전사 활성화 기능을 방해한다 (Nissen and Yamamoto, 2000. Genes Dev. 14(18):2314-29; Yang-Yen et al., 1990. Cell. 62(6):1205-15).
"직접 전사억제"라고 불리는 세 번째 기능은 GC-관련 GR을 특정 유전자의 직접적인 억제를 매개하는 최근에 (2011) 기술된 음성 GRE (nGRE)에 직접 결합시킨 결과이다 (Surjit et al., 2011. Cell. 145(2):224-41). 컨센서스 nGRE 서열, CTCC(N)0-2GGAGA (여기서 N은 A, T, C 또는 G 중의 어느 것이다) (서열 번호 2)도 회문식이지만, 서열 및 스페이서 길이에 있어서 고전적인 (+)GRE와 다르다 (따라서 경우에 따라 IR0, IR1 또는 IR2로 명명된다).
천연 GC의 항염증 특성은 60년 이상 전에 입증되었다 (Carryer et al., 1950. J Allergy. 21(4):282-7). 그 이후로, 합성 GC 유도체가 다양한 질환에서 급성 및 만성 염증성 및 알레르기성 장애를 억제 또는 완화시키기 위한 목적으로 치료에 널리 사용되어 왔다. 그러나, GC 치료는 2형 당뇨병 (type 2 diabetes), 이상지질혈증 (dyslipidemia), 체중 증가, 인지 장애 (cognitive impairment), 위염 (gastritis), 간 지방증 (hepatic steatosis), 골다공증 (osteoporosis), 고혈압 (hypertension), 허혈성 심장 질환 (ischemic heart disease), 피부다공증 (dermatoporosis), 피부 위축 (skin atrophy), 백내장 (cataract), 녹내장 (glaucoma), 동공확대 (mydriasis) 또는 세포-매개 면역의 억제와 같은 다양한 심각한 쇠약 부작용과 관련이 있다 (Oray et al., 2016. Expert Opin Drug Saf. 15(4):457-65). 투여량 및 투여 경로에 관계없이 60일 이상 GC를 복용한 환자의 최대 90%에서 다른 부작용이 발생할 수 있다. 이러한 부작용 중 일부는 저 용량 (≤ 7.5mg/일)을 복용하는 환자에서도 발생할 수 있다 (Curtis et al., 2006. Arthritis Rheum. 55(3):420-6; Pereira et al., 2010. Clinics (Sao Paulo). 65(11):1197-1205).
2011년에 직접 전사억제 경로의 발견 전에는, GC의 유익한 항염증 효과가 간접 테더링된 전사억제 경로에 기인한 반면, GC 치료로부터 야기된 바람직하지 않은 부작용의 다수는 단지 직접 전사촉진 경로와 관련이 있는 것으로 생각되었다 (Clark and Belvisi, 2012. Pharmacol Ther. 134(1):54-67) (도 1).
따라서 전사촉진 특성을 부분적으로 또는, 가장 이상적으로는, 전체적으로 상실하면서 전사억제 프로파일은 보유하는 "해리된" 또는 "선택적" GR 효능작용 조절제 (SEGRAM)로 불리는 새로운 GR 리간드를 개발하기 위해 지난 수십 년에 걸쳐 치열한 노력들이 이루어져 왔다 (Schacke et al., 2004. Proc Natl Acad Sci U S A. 101(1):227-32).
이와 관련하여, 다수의 추정 SEGRAM이 개발되었지만, 임상 시험이 이루어진 것은 거의 없다. 이러한 리간드, RU24858은 시험관내에서 이러한 예상되는 해리된 프로파일을 나타내는 것으로 밝혀졌다 (Vayssiere et al., 1997. Mol Endocrinol. 11(9):1245-55). 그러나, 생체내 투여시, 병리생리학적 연구는 이러한 해리를 확인하지 못했다 (Belvisi et al., 2001. J Immunol. 166(3):1975-82).
이후에, 또 다른 합성 비스테로이드성 리간드, 즉 Mapracorat (ZK245186 또는 BOL-303242-X라고도 함)가 시험관내에서 삼투성 스트레스로 장애가 있는 각막 상피 세포에서 (Cavet et al., 2010. Mol Vis. 16:1791-1800) 및 생체내에서 안구 건조증 및 수술후 염증의 실험 모델에서 (Shafiee et al., 2011. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52(3):1422-30) 항염증제로서 작용하며 합성 "종래의" 스테로이드 덱사메타손의 활성에 필적하는 활성을 갖지만 안내압 및 체중에 있어 감소된 부작용을 갖는 것으로 나타났다. Mapracorat는 또한 2009년 6월과 2013년 7월 사이에 여러 임상 시험의 연구 산물이었다: 아토피성 피부염을 위한 연고로서의 용량 발견 II상 임상 시험 (임상 시험 번호 NCT00944632, NCT01228513, NCT01359787, NCT01407510, NCT01408511 및 NCT01736462); 알레르기성 결막염 (임상 시험 번호 NCT01289431) 및 백내장 수술 후 염증 및 통증 (임상 시험 번호 NCT00905450, NCT01230125, NCT01298752, NCT01591161, NCT01591655 및 NCT01736462)을 위한 안과용 현탁액으로서의 I, II 및 III상 임상 시험. 그러나, 2018년 10월 현재, 이들 시험의 연구 결과는 이용 가능하지 않고 마케팅 권한부여가 승인되지 않았으며, 이것은 Mapracorat가 효능 및/또는 부작용의 문제를 나타낼 수 있음을 시사한다.
2011년에서와 같이, GC-결합된 GR-매개된 직접 전사억제 기능은 또한 바람직하지 않은 부작용에 관여하는 것으로 나타났으며 (Surjit et al., 2011. Cell. 145(2):224-41), 오로지 간접 테더링된 전사억제 경로를 표적으로 하는 것이 부작용을 예방하는데 효과적인 것으로 보였다.
따라서, 간접 테더링된 전사억제 활성 및 항염증 특성을 생체내에서 여전히 유도하면서, GR의 직접 전사촉진 및 직접 전사억제 기능 중 어느 것도 효율적으로 유도할 수 없는 선의의 SEGRAM의 개발에 대한 필요성이 남아있다.
흥미롭게도, 1990년대 후반에, 현재 Bayer HealthCare Pharmaceuticals인 Schering AG가 대사 효과와 관련이 없는 항염증제 활성을 주장하는 신규한 비스테로이드성 화합물 (예를 들어 미국 특허 제6,245,804호 참조)을 개발하였다 (예를 들어 미국 특허 제6,323,199호 참조). 2016년까지, 출원인은 이들 화합물 중에서, 이들 중 하나, 즉 이하 "CpdX"로 명명된 5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온이 GR의 간접 테더링된 전사억제 활성을 여전히 유도하면서 GR의 전사촉진 및 직접 전사억제 기능을 유도하지 않는다는 것을 발견하였다 (Hua et al., 2016. Proc Natl Acad Sci U S A. 113(5):E635-43).
본원에서, 본 발명자들은, 당업계에 이전에 기술된 추정 SEGRAM (예를 들어, Mapracorat)과는 달리, CpdX가 GR "간접 테더링된 전사억제 활성"을 선택적으로 유도하며, 따라서 선의의 SEGRAM은 GR 간접 전사억제 기능을 선택적으로 나타내는 반면 Mapracorat은 모든 세 가지 GR 기능을 나타냄을 보여준다. 가장 중요하게는, 본 발명자들은, 마우스에 장기간 투여시, CpdX 및 이의 신규한 유도체가 합성 글루코코르티코이드 덱사메타손 (Dex)만큼 치료학적으로 효과적이며, 합성 글루코코르티코이드의 잘 확립된 쇠약 부작용이 없음을 입증한다.
본 발명은 염증성 장애의 예방 또는 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM) (CpdX) 또는 이의 유도체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이다:
Figure pct00001
(화학식 1 - CpdX)
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체는 중수소화된 형태이며, 바람직하게는 SEGRAM은 화학식 2의 화합물 (CpdX-D3)이다:
Figure pct00002
(화학식 2 - CpdX-D3)
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 라세미 형태(racemic form)이거나 이의 두 가지 에난티오머 형태 중 하나이다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 SEGRAM의 유도체는 화학식 3의 화합물이다:
Figure pct00003
(화학식 3)
여기서:
- W는 O, S 또는 CH2로부터 선택되고,
- R2는 H 또는 CH3으로부터 선택되고,
- Z2, Z3, Z4, Z5 및 Z6은 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, CH3, OCH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH3)2, C(CH3)3, COCH3, NO2, CN, CH=CH2 또는 CONH2로부터 선택된다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체는 글루코코르티코이드 수용체의 직접 전사촉진 기능 또는 직접 전사억제 기능 중 어느 것도 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체는 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, SAID-관련 부작용은 피부 위축 (skin atrophy); 골다공증 (osteoporosis); 성장 억제; 체중 손실; 지방량 증가; 제지방 손실; 흉선, 비장, 신장 및/또는 부신 아폽토시스(apoptosis); 코르티코스테론 합성 억제; 부신 억제; 고혈당증; 인슐린 내성; 고인슐린혈증; 및 지방간을 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
하나의 실시양태에서, 염증성 장애는 IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 및 IgG2a를 포함하는 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 선택된 사이토카인 및/또는 항체의 증가된 수준을 특징으로 한다.
하나의 실시양태에서, 염증성 장애는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병(Horton disease)), 건초열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation), 아나필락시스 (anaphylaxis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염 포함), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory disease), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편 대 숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
하나의 실시양태에서, 염증성 장애는 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
하나의 실시양태에서, 염증성 장애는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM은 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이며, 상기 에난티오머는 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 첫 번째 용출 피크 [CpdX (eA)]에 상응한다.
하나의 실시양태에서, 염증성 장애는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM은 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이며, 상기 에난티오머는 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 두 번째 용출 피크 [CpdX (eB)]에 상응한다.
하나의 실시양태에서, 염증성 장애는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM은 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이며, 상기 에난티오머는 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 첫 번째 용출 피크 [CpdX-D3(eA)]에 상응한다.
하나의 실시양태에서, 염증성 장애는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM은 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이며, 상기 에난티오머는 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 두 번째 용출 피크 [CpdX-D3(eB)]에 상응한다.
본 발명은 또한 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM)의 에난티오머, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이며, 바람직하게는 상기 에난티오머는 CpdX(eA) 또는 CpdX(eB)이다.
하나의 실시양태에서, 에난티오머는 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의한 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 분리에 의해 수득되며, 여기서 CpdX(eA)는 첫 번째 용출 피크에 상응하고 CpdX(eB)는 두 번째 용출 피크에 상응한다.
본 발명은 또한 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM)의 중수소화된 형태, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이다.
하나의 실시양태에서, 상기 중수소화된 형태는 화학식 2의 화합물이다:
Figure pct00004
(화학식 2).
하나의 실시양태에서, 상기 중수소화된 형태는 라세미 형태이다.
하나의 실시양태에서, 상기 중수소화된 형태는 화학식 2의 화합물의 두 개의 에난티오머 중 하나이며, 바람직하게는 상기 에난티오머는 CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)이다.
하나의 실시양태에서, 상기 중수소화된 형태는 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의한 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 분리에 의해 수득되며, 여기서 CpdX-D3(eA)은 첫 번째 용출 피크에 상응하고 CpdX-D3(eB)은 두 번째 용출 피크에 상응한다.
정의
본원에 사용된 "부신 억제" 또는 "부신 기능부전"은 부신이 적절한 양의 코르티솔을 생성하지 못하는 상태를 지칭한다. 외인성 글루코코르티코이드는 시상하부 코르티코트로핀-방출 호르몬 (CRH) 및 뇌하수체 부신피질자극 호르몬 (ACTH)을 억제할 뿐만 아니라 부신 코르티코스테론 합성 효소의 합성을 억제하기 때문에 일주일 이상 고용량 스테로이드의 사용은 대상체의 부신의 억제를 야기하기 시작한다. 장기간 억제하면 부신이 위축되고 외인성 글루코코르티코이드의 중단 후 전체 기능을 회복하는데 최대 9개월이 걸릴 수 있다. 이러한 회복 시간 동안, 대상체는 부신 위축 및 CRH와 ACTH 방출의 억제 둘 다로 인해, 질병과 같은 스트레스 시간 동안 부신 기능부전에 취약하다.
본원에서 사용되는 "CpdX"는 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물을 지칭한다:
Figure pct00005
(화학식 1)
"CpdX"는 5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온에 상응한다 (실시예 1, 도 2a 참조).
본원에서 사용되는 "CpdX ( eA )"는 화학식 1의 SEGRAM의 두 개의 에난티오머 중 하나 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 전구약물을 지칭한다. "CpdX(eA)"는 분취용 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리된 5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온의 첫 번째 용출 피크에 상응한다 (실시예 1, 도 2b 참조).
본원에서 사용되는 "CpdX ( eB )"는 화학식 1의 SEGRAM의 두 개의 에난티오머 중 하나 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 전구약물을 지칭한다. "CpdX(eB)"는 분취용 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리된 5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온의 두 번째 용출 피크에 상응한다 (실시예 1, 도 2b 참조).
본원에서 사용되는 "CpdX -D3"은 화학식 1의 SEGRAM의 중수소화된 라세미 형태 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 전구약물을 지칭한다. "CpdX-D3"은 화학식 2의 5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로-메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온에 상응한다 (실시예 1, 도 2c 참조):
Figure pct00006
(화학식 2)
본원에서 사용되는 "CpdX -D3( eA )"는 화학식 2의 SEGRAM의 두 개의 에난티오머 중 하나 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 전구약물을 지칭한다. "CpdX-D3(eA)"은 분취용 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리된 5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온의 첫 번째 용출 피크에 상응한다 (실시예 1, 도 2d 참조).
본원에서 사용되는 "CpdX -D3( eB )"는 화학식 2의 SEGRAM의 두 개의 에난티오머 중 하나 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 전구약물을 지칭한다. "CpdX-D3(eB)"는 분취용 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리된 5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온의 두 번째 용출 피크에 상응한다 (실시예 1, 도 2d 참조).
"글루코코르티코이드 수용체 ( GR )의 직접 전사촉진 기능"은 이들의 프로모터 영역에서 글루코코르티코이드 (GC)-관련 GR에 의해 결합된 (서열 번호 1을 갖는) 양성 글루코코르티코이드 반응 요소 ((+)GRE)를 포함하는 유전자의 전사 활성화를 지칭한다.
"글루코코르티코이드 수용체 ( GR )의 직접 전사억제 기능"은 이들의 프로모터 영역에서 글루코코르티코이드 (GC)-관련 GR에 의해 결합된 (서열 번호 2를 갖는) 음성 글루코코르티코이드 반응 요소 (nGRE)를 포함하는 유전자의 전사 억제를 지칭한다.
"향상된 T h 2 활성"은 병에 걸린 대상체가 건강한 대상체와 비교하여 이의 Th2 활성의 증가 (예를 들어, 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 8배, 10배 또는 그 이상)를 갖는 것을 의미한다. 향상된 Th2 활성은 당업계에 공지된 방법에 따라 분비된 사이토카인 및 항체 (예를 들어, IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, TSLP, IgE 및 IgG1)의 수준의 증가에 의해 측정될 수 있다.
"향상된 T h 17 활성"은 병에 걸린 대상체가 건강한 대상체와 비교하여 이의 Th17 활성의 증가 (예를 들어, 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 8배, 10배 또는 그 이상)를 갖는 것을 의미한다. 향상된 Th17 활성은 당업계에 공지된 방법에 따라 분비된 사이토카인 (예를 들어, IL-1β, IL-6, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-21, IL-22, IL-23 및 TGFβ)의 수준의 증가에 의해 측정될 수 있다.
"향상된 T h 1 활성"은 병에 걸린 대상체가 건강한 대상체와 비교하여 이의 Th1 활성의 증가 (예를 들어, 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 8배, 10배 또는 그 이상)를 갖는 것을 의미한다. 향상된 Th1 활성은 당업계에 공지된 방법에 따라 분비된 사이토카인 및 항체 (예를 들어, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-6, IL-12, IL-18, IL-23, IFN-γ, TNFα 및 IgG2a)의 수준의 증가에 의해 측정될 수 있다.
본원에서 사용되는, "간 지방증"이라고도 하는 "지방간"은 지방증의 과정 (즉, 세포 내의 지질의 비정상적인 보유)을 통해 트리글리세리드 지방의 큰 액포가 간 세포에 축적되는 상태를 지칭한다. 이러한 지방 축적은 또한 지방간염 (steatohepatitis)이라고 하는 간의 점진적인 염증 (간염)을 동반할 수 있다.
"성장 억제"는 특히 어린이에서 스테로이드성 항염증 약물 (SAID) 요법의 중요하고 잘 알려진 부작용이다. 성장 억제의 메커니즘은 골 대사, 질소 보유, 및 콜라겐 형성에 대한 효과를 포함한 동화작용 및 성장의 필수 성분에 대한 SAID의 효과를 제한없이 포함한다. SAID 요법은 또한 성장 호르몬 방출 및 인슐린-유사 성장 인자-1 (IGF-1) 생체이용률의 억제를 초래한다. 하나의 실시양태에서, SAID 요법에 의한 성장 억제는 신체 성장을 둔화시키고 몸 전체에 영향을 미친다. 하나의 실시양태에서, SAID 요법에 의한 성장 억제는 내부 장기에 영향을 미치며, 흉선, 비장, 신장, 간 및 부신을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
"고혈당증"은 혈액 L 당 글루코스 11.1 mmol (혈액 dL 당 글루코스 200 mg) 이상과 같이 과량의 글루코스가 혈장에서 순환하는 상태이다. 미국 당뇨병 협회 (American Diabetes Association) 가이드라인은 경미한 고혈당 (약 5.6 내지 약 7mmol/L 혈액, 즉 약 100 내지 약 126 mg/dL 혈액 범위의 혈당 수준을 가짐) 내지 당뇨병 (7 mmol/L 혈액 초과, 즉 126 mg/dL 혈액 초과의 글루코스 수준을 가짐)에 이르는 몇 가지 하위그룹으로 대상체를 분류한다. 글루코스 대사에 대한 SAID의 효과는 용량-의존적이며, 기존 당뇨병이 없는 환자에서 공복 혈당 수준은 약간 증가시키고 식후 혈당은 크게 증가시킨다. SAID-유도된 고혈당증은 기원이 다원적이고, 간 글루코스 신생합성의 증대, 지방 조직에서 글루코스 흡수의 억제 및/또는 SAID에 의해 유도된 수용체 및 수용체-후 기능의 변경에 의해 설명될 수 있다. SAID 요법시 또는 본 발명의 SEGRAM을 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 고혈당증의 발생을 평가하는 기술은 숙련가들로부터 널리 공지되어 있으며, 생화학적 분석 및 글루코스 검사를 사용한 혈액 검사 (공복 혈당 (FBS) 검사, 공복 혈장 글루코스 (FPG) 검사, 글루코스 부하 검사, 식후 글루코스 (PG) 검사 및 무작위 글루코스 검사를 포함함)를 제한없이 포함한다.
본원에 사용되는 "고인슐린혈증" 또는 "고인슐린증"은 과량의 인슐린이 혈장에서 순환하는 상태를 지칭한다. 고인슐린혈증은 고혈압, 비만, 이상지질혈증 및 글루코스 불내성 (모두 통틀어 "대사 증후군"으로 알려짐)과 관련이 있다.
"글루코코르티코이드 수용체 ( GR )의 간접 테더링된 전사억제 기능"은 글루코코르티코이드 (GC)-관련 GR에 의해 자체 결합된, 각각 AP-1의 Jun 서브유닛 및/또는 NF-κB의 p65 서브유닛에 의해 결합된, 이들의 프로모터 영역에서 AP-1 결합 부위 (핵산 서열 ATGAGTCAT를 가짐) 및/또는 NF-κB-결합 부위 (핵산 서열 서열 번호 3 - GGGRNNYYCC을 가짐, 여기서 R은 G 또는 A 중의 어느 하나이고, Y는 T 또는 C 중의 어느 하나이며, N은 A, T, C 또는 G 중의 어느 하나이다)를 포함하는 유전자의 전사 억제를 지칭한다.
"염증성 장애"는 예를 들어 백혈구의 유입 및/또는 호중구 화학주성에 의해 유발되는 염증을 야기하는 병리학적 상태를 지칭한다. 염증은 병원성 유기체 및 바이러스에 의한 감염, 또는 예를 들어, 외래 항원에 대한 면역 반응, 자가면역 반응, 외상 또는 심근경색이나 뇌졸중 후 재관류와 같은 비감염성 수단으로부터 야기될 수 있다. Th1, Th2 및 Th17 세포는 여러 염증성 장애에 관여하는 것으로 알려진 T 도움 세포의 세 가지 서브세트이다. 이들은 이들의 사이토카인 환경에 따라 천연 CD4 T 세포 (또는 Th0 세포)와 구별된다: IFN-γ는 Th1 세포 생산을 유도하는 반면 IL-10 및 IL-4는 Th1 세포 생산을 억제하고; 반대로, IL-4는 Th2 세포 생산을 유도하고 IFN-γ는 Th2 세포를 억제한다. Th17 세포에 대해, 이들의 생산은 TGF-β, IL-6, IL-21, IL-23 및 IL-33에 의해 유도된다.
"골다공증"은 낮은 골 질량, 골 조직의 미세구조 열화, 골 취약성, 및 그에 따른 골절 위험 증가를 특징으로 하는 진행성 질환이다. 이차 골다공증은, SAID와 같은 전신 약물 사용의 결과로서, 1940년부터 인식된 글루코코르티코이드 요법의 가장 쇠약한 합병증 중 하나이다. SAID 노출 지속시간과 누적 용량은 골다공증 발병의 주요 결정요인이다. 골아세포 기능의 억제가 골 형성의 감소를 야기하는 골대사에 미치는 SAID의 주요 효과이다. 골 손실은 SAID 요법의 개시 직후 시작되며 주로 치료의 처음 6개월에 일어난다. SAID 요법은 골 손실 외에도 또한 골의 구조적 무결성의 변화를 초래할 수 있다. SAID 요법시 또는 본 발명의 SEGRAM을 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 골다공증의 발달을 평가하는 기술은 숙련가에게 잘 알려져 있으며, 기준선에서 골 미네랄 밀도를 측정하고 기준선 결과를 치료 중 및 치료 후에 후속 측정과 비교함을 제한없이 포함한다. 골다공증을 예방하는 기술 또한 숙련가로부터 잘 알려져 있으며, 이를 필요로 하는 환자에게 칼슘 및/또는 비타민 D 보충제를 투여하는 것 및 적절한 신체 활동을 제한없이 포함한다.
본원에서 사용되는 "전구약물"은 이의 생체내 생물변환 산물이 활성 약물인 에스테르와 같은 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 약리학적으로 허용되는 유도체를 지칭한다. 전구약물은 증가된 생체이용률을 특징으로 하며 생체내에서 활성 화합물로 쉽게 대사된다. 본 발명의 목적에 적합한 전구약물은 카복실산 에스테르 (특히 알킬 에스테르, 아릴 에스테르, 아실옥시알킬 에스테르 및 디옥솔렌 카복실산 에스테르) 및 아스코르브산 에스테르를 포함한다.
"감소된 T h 2 활성"은 병에 걸린 대상체가 건강한 대상체와 비교하여 이의 Th2 반응의 감소 (예를 들어, 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 8배, 10배 또는 그 이하)를 갖는 것을 의미한다. 감소된 Th2 활성은 당업계에 공지된 방법에 따라 분비된 사이토카인 및 항체 (예를 들어, IL-1β, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, TSLP, IgE 및 IgG1)의 수준의 감소에 의해 측정될 수 있다.
"감소된 T h 17 활성"은 병에 걸린 대상체가 건강한 대상체와 비교하여 이의 Th17 반응의 감소 (예를 들어, 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 8배, 10배 또는 그 이하)를 갖는 것을 의미한다. 감소된 Th17 활성은 당업계에 공지된 방법에 따라 분비된 사이토카인 (예를 들어, IL-1β, IL-6, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-21, IL-22, IL-23 및 TGFβ)의 수준의 감소에 의해 측정될 수 있다.
"감소된 T h 1 활성"은 병에 걸린 대상체가 건강한 대상체와 비교하여 이의 Th1 반응의 감소 (예를 들어, 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 8배, 10배 또는 그 이하)를 갖는 것을 의미한다. 감소된 Th1 활성은 당업계에 공지된 방법에 따라 분비된 사이토카인 및 항체 (예를 들어, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-6, IL-12, IL-18, IL-23, IFN-γ, TNFα 및 IgG2a)의 수준의 감소에 의해 측정될 수 있다.
"스테로이드 위축" 또는 "코르티코스테로이드-유도된 진피 위축"으로도 지칭되는 "피부 위축"은 표피 및/또는 진피 두께의 감소, 피지선의 퇴행, 피하 지방 손실 및/또는 근육층 위축으로 구성된다. 이것은 섬유아세포 및/또는 콜라게나제의 유사분열 활성의 SAID-유도된 억제로부터 초래되며, 이는 콜라겐 및 글리코사미노글리칸 합성의 감소 및 피브릴의 직경의 감소를 초래한다. SAID 요법시 또는 본 발명의 SEGRAM을 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 피부 위축의 발생을 평가하는 기술은 당업자로부터 널리 공지되어 있으며, 피부 얇아짐 및 혈관 돌출성의 시각적 제어, 캘리퍼스 (Harpenden skinfold 캘리퍼스 포함) 사용, 중량측정, 초음파, 연조직 X-선, 조직학적, 전기 저항 및 Kindlin-1 (Ussar et al., 2008. PLoS Genet. 4(12):e1000289) 및 REDD1 (Britto et al., 2014. Am J Physiol Endocrinol Metab. 307(11):E983-93; Baida et al., 2015. EMBO Mol Med. 7(1):42-58) 유전자의 전사 분석을 제한없이 포함한다.
본원에서 사용되는 "용매화물"은 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체 및 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 용매 분자, 예를 들어 에탄올을 포함하는 분자 복합체를 지칭한다. 용어 "수화물"은 상기 용매가 물일 때 사용된다.
본원에 사용되는 "스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용"은 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)로 단기, 중기 또는 장기 치료를 받는 대상체에서 일반적으로 관찰되는 부작용 ("쇠약 효과"라고도 함)을 지칭한다.
"T h 2 -관련 염증성 장애"는 Th2 세포가 질환, 장애 또는 병태 과정을 지지, 유발 또는 매개하거나 Th2 세포가 질환, 장애 또는 병태의 증상을 치료 또는 완화시키는데 관여하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 지칭하며, 이것은 향상된 또는 감소된 Th2 활성으로 나타내어질 수 있다.
"T h 17 -관련 염증성 장애"는 Th17 세포가 질환, 장애 또는 병태 과정을 지지, 유발 또는 매개하거나 Th17 세포가 질환, 장애 또는 병태의 증상을 치료 또는 완화시키는데 관여하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 지칭하며, 이것은 향상된 또는 감소된 Th17 활성으로 나타내어질 수 있다.
"T h 1 -관련 염증성 장애"는 Th1 세포가 질환, 장애 또는 병태 과정을 지지, 유발 또는 매개하거나 Th1 세포가 질환, 장애 또는 병태의 증상을 치료 또는 완화시키는데 관여하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 지칭하며, 이것은 향상된 또는 감소된 Th1 활성으로 나타내어질 수 있다.
상세한 설명
본 발명은 치료적 유효량의 선택적 GR 효능작용 조절제 (SEGRAM)를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여함을 포함하는 염증성 장애의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 T 헬퍼 2 세포 (Th2)-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 T 헬퍼 17 세포 (Th17)-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 T 헬퍼 1 세포 (Th1)-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th2- 및 Th17-관련 염증성 장애 ("혼합 Th2/Th17 염증성 장애"라고도 함)를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th1- 및 Th17-관련 염증성 장애 ("혼합 Th1/Th17 염증성 장애"라고도 함)를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th1- 및 Th2-관련 염증성 장애 ("혼합 Th1/Th2 염증성 장애"라고도 함)를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th1-, Th2- 및 Th17-관련 염증성 장애 ("혼합 Th1/Th2/Th17 염증성 장애"라고도 함")를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다.
염증성 장애
염증성 장애의 예는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma)을 포함한 천식, 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병), 염증성 장 질환 (IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만 이에 제한되지 않음), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 치주염 (periodontitis), 파제트병 (Pagets disease), 골다공증 (osteoporosis), 다발성 골수종 (multiple myeloma), 포도막염 (uveitis), 급성 골수성 백혈병 (acute myelogenous leukemia), 만성 골수성 백혈병 (chronic myelogenous leukemia), 췌장 β 세포 파괴 (pancreatic β cell destruction), 류마티스 척추염 (rheumatoid spondylitis), 골관절염 (osteoarthritis), 통풍성 관절염 (gouty arthritis) 및 기타 관절염 상태, 통풍 (gout), 성인 호흡 곤란 증후군 (adult respiratory distress syndrome; ARDS), 만성 폐 염증성 질환 (chronic pulmonary inflammatory disease), 규폐증 (silicosis), 폐 유육종증 (sarcoidosis), 비염 (rhinitis), 아나필락시스 (anaphylaxis), 췌장염 (pancreatitis), 근육 변성 (muscle degeneration), 감염, 악성 종양 또는 후천성 면역 결핍 증후군 (acquired immune deficiency syndrome)에 부차적인 악액질을 포함한 악액질 (cachexia), 라이터 증후군 (Reiter's syndrome), I형 당뇨병 (type I diabete), 골 흡수 질환 (bone resorption disease), 이식편-대-숙주 질환 (graft-versus-host disease) (GVHD), 허혈성 재관류 손상 (ischemia reperfusion injury), 뇌 외상 (brain trauma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 뇌 말라리아 (cerebral malaria), 패혈증 (sepsis), 패혈성 쇼크 (septic shock), 독성 쇼크 증후군 (toxic shock syndrome), 내독성 쇼크 (endotoxic shock), 그램 음성 패혈증 (gram negative sepsis), 인플루엔자(influenza)와 같은 감염으로 인한 열 및 근육통 및 가슴앓이 (pyrosis)를 제한없이 포함한다.
T h 2 -관련 염증성 장애
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th2-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, Th2-관련 염증성 장애는 Th2 세포가 질환, 장애 또는 병태 과정을 지지, 유발 또는 매개하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 포함한다. 하나의 실시양태에서, Th2-관련 염증성 장애는 Th2 세포가 질환, 장애 또는 병태의 증상을 치료 또는 완화시키는데 관여하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 포함한다.
하나의 실시양태에서, Th2-관련 염증성 장애는 향상된 Th2 활성에 의해 나타내어진다. 하나의 실시양태에서, Th2-관련 염증성 장애는 감소된 Th2 활성에 의해 나타내어진다.
Th2-관련 염증성 장애는 알레르기성 질환 및 감염성 질환 (특히 세포외 감염)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명 내에 포함되는 Th2-관련 알레르기성 질환은 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 건조열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation) 및 아나필락시스 (anaphylaxis)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 아토피성 피부염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다 (실시예 5 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 알레르기성 천식을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다 (실시예 6 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 알레르기성 결막염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다 (실시예 10 참조).
T h 17-관련 염증성 장애
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th17-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, Th17-관련 염증성 장애는 Th17 세포가 질환, 장애 또는 병태 과정을 지지, 유발 또는 매개하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 포함한다. 하나의 실시양태에서, Th17-관련 염증성 장애는 Th17 세포가 질환, 장애 또는 병태의 증상을 치료 또는 완화시키는데 관여하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 포함한다.
하나의 실시양태에서, Th17-관련 염증성 장애는 향상된 Th17 활성에 의해 나타내어진다. 하나의 실시양태에서, a Th17-관련 염증성 장애는 감소된 Th17 활성에 의해 나타내어진다.
Th17-관련 염증성 장애는 자가면역 질환 및 증식성 장애 (예를 들어, 암)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명 내에 포함되는 Th17-관련 자가면역 질환은 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만, 이에 제한되지 않음), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory diseases), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편-대-숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 접촉성 피부염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다 (실시예 3 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 건선을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다 (실시예 7 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 류마티스 관절염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다 (실시예 8 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 대장염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다 (실시예 9 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 치주염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다.
T h 1-관련 염증성 장애
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th1-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, Th1-관련 염증성 장애는 Th1 세포가 질환, 장애 또는 병태 과정을 지지, 유발 또는 매개하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 포함한다. 하나의 실시양태에서, Th1-관련 염증성 장애는 Th1 세포가 질환, 장애 또는 병태의 증상을 치료 또는 완화시키는데 관여하는 임의의 질환, 장애 또는 병태를 포함한다.
하나의 실시양태에서, Th1-관련 염증성 장애는 향상된 Th1 활성에 의해 나타내어진다. 하나의 실시양태에서, Th1-관련 염증성 장애는 감소된 Th1 활성에 의해 나타내어진다.
Th1-관련 염증성 장애는 감염성 질환 (특히 세포내 감염, 예를 들어 바이러스 감염) 및 증식성 장애 (예를 들어, 암)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
사이토카인/Ig 수준을 측정하는 방법
분비된 사이토카인 및 항체의 수준의 증가 또는 감소를 측정하는 방법은 숙련가로부터 널리 공지되어 있으며, 조직학적 분석 및 사이토카인 및/또는 면역글로불린 프로파일의 분석을 제한없이 포함한다.
사이토카인 및/또는 면역글로불린 프로파일은 유세포 분석 검정, ELISA 검정, 샌드위치 ELISA 검정, ELISPOT 검정 등에서 항-사이토카인 (예를 들어, 항-IL-1β, 항-IL-2, 항-IL-3, 항-IL-4, 항-IL-5, 항-IL-6, 항-IL-10, 항-IL-12, 항-IL-13, 항-IL-17a, 항-IL-17c, 항-IL-17f, 항-IL-18, 항-IL-21, 항-IL-22, 항-IL-23, 항-IL-33, 항-IFN-γ, 항-TNFα, 항-TGFβ 또는 항-TSLP) 및/또는 항-이소타입 항체 (예를 들어, 항-IgA, 항-IgE, 항-IgG1, 항-IgG2a, 항-IgG2b, 항-IgG3 또는 항-IgM 항체)를 사용하여 통상의 방법에 의해 측정될 수 있다. 사이토카인 프로파일을 측정하는 또 다른 방법은 실시간 폴리머라제 연쇄 반응 (RT-PCR), 정량적 역전사 폴리머라제 연쇄 반응 (q-RT- PCR) 등을 포함한 역전사 폴리머라제 연쇄 반응 (RT-PCR)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 SEGRAM의 특성
GR에 대한 기능
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 직접 전사촉진 기능을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
"글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 직접 전사촉진 기능을 유도하지 않는다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 양성 글루코코르티코이드 반응 요소 ((+)GRE)를 포함한 유전자의 전사 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 전사 수준보다 높지 않음을 의미한다. 즉, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 양성 글루코코르티코이드 반응 요소 ((+)GRE)를 포함한 유전자의 전사는 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전과 비교하여 증가되지 않는다.
"글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 직접 전사촉진 기능을 실질적으로 유도하지 않는다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 양성 글루코코르티코이드 반응 요소 ((+)GRE)를 포함한 유전자의 전사 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 전사 수준의 3배, 2개, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 높지 않음을 의미한다. 즉, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 양성 글루코코르티코이드 반응 요소 ((+)GRE)를 포함한 유전자의 전사가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전과 비교하여 3배, 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 이상 또는 그 미만까지 증가되지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 GR의 직접 전사억제 기능을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
"GR의 직접 전사억제 기능을 유도하지 않는다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 음성 글루코코르티코이드 반응 요소 (nGRE)를 포함한 유전자의 전사 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 전사 수준보다 낮지 않음을 의미한다. 즉, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 음성 글루코코르티코이드 반응 요소 (nGRE)를 포함한 유전자의 전사가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전과 비교하여 감소되지 않는다.
"GR의 직접 전사억제 기능을 실질적으로 유도하지 않는다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 음성 글루코코르티코이드 반응 요소 (nGRE)를 포함한 유전자의 전사 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 전사 수준의 3배, 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 낮지 않음을 의미한다. 즉, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 음성 글루코코르티코이드 반응 요소 (nGRE)를 포함한 유전자의 전사가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전과 비교하여 3배, 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 이상 또는 그 미만까지 감소되지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 GR의 직접 전사촉진 또는 직접 전사억제 기능 중 어느 것도 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 GR의 간접 테더링된 전사억제 기능을 선택적으로 유도한다.
T h 세포에 대한 기능
T h 2 세포에 대한 기능
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 Th0 세포로부터의 Th2 세포 분화를 억제하거나 실질적으로 억제한다.
"Th0 세포로부터의 Th2 세포 분화를 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, Th2 세포의 수가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 높지 않음을 의미한다. 하나의 실시양태에서, Th2 세포의 수는 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 낮다. 하나의 실시양태에서, Th2 세포의 수는 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 1.1배, 1.2배, 1.5배, 2배, 3배, 5배, 10배, 25배, 50배, 100배 또는 그 이상 더 낮다.
"Th0 세포로부터의 Th2 세포 분화를 실질적으로 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, Th2 세포의 수가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수의 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 높지 않음을 의미한다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 IL-4, IL-5, IL-10, IL-13 및 TSLP를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제하거나 실질적으로 억제한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 IgE 및 IgG1을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 면역글로불린 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제하거나 실질적으로 억제한다.
"사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제한다" 및 "면역글로불린 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 높지 않음을 의미한다. 하나의 실시양태에서, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준은 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 낮다. 하나의 실시양태에서, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준은 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 1.1배, 1.2배, 1.5배, 2배, 3배, 5배, 10배, 25배, 50배, 100배 또는 그 이상 더 낮다.
"사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 실질적으로 억제한다" 및 "면역글로불린 중의 임의의 하나 이상의 생산을 실질적으로 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준의 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 높지 않음을 의미한다.
T h 17 세포에 대한 기능
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 Th0 세포로부터의 Th17 세포 분화를 억제하거나 실질적으로 억제한다.
"Th0 세포로부터의 Th17 세포 분화를 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, Th17 세포의 수가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 높지 않음을 의미한다. 하나의 실시양태에서, Th17 세포의 수는 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 낮다. 하나의 실시양태에서, Th17 세포의 수는 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 1.1배, 1.2배, 1.5배, 2배, 3배, 5배, 10배, 25배, 50배, 100배 또는 그 이상 더 낮다.
"Th0 세포로부터의 Th17 세포 분화를 실질적으로 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, Th17 세포의 수가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수의 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 높지 않음을 의미한다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-21, IL-22, IL-23 및 TGFβ를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제하거나 실질적으로 억제한다.
"사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 상기 사이토카인의 발현 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 높지 않음을 의미한다. 하나의 실시양태에서, 상기 사이토카인의 발현 수준은 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 낮다. 하나의 실시양태에서, 상기 사이토카인의 발현 수준은 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 1.1배, 1.2배, 1.5배, 2배, 3배, 5배, 10배, 25배, 50배, 100배 또는 그 이상 더 낮다.
"사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 실질적으로 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 상기 사이토카인의 발현 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준의 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 높지 않음을 의미한다.
T h 1 세포에 대한 기능
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 Th0 세포로부터의 Th1 세포 분화를 억제하거나 실질적으로 억제한다.
"Th0 세포로부터의 Th1 세포 분화를 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, Th1 세포의 수가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 높지 않음을 의미한다. 하나의 실시양태에서, Th1 세포의 수는 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 낮다. 하나의 실시양태에서, Th1 세포의 수는 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수보다 1.1배, 1.2배, 1.5배, 2배, 3배, 5배, 10배, 25배, 50배, 100배 또는 그 이상 더 낮다.
"Th0 세포로부터의 Th1 세포 분화를 실질적으로 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, Th1 세포의 수가 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 수의 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 높지 않음을 의미한다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 IL-2, IL-12, IL-18, IFN-γ 및 TNFα를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제하거나 실질적으로 억제한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 IgG2a를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 면역글로불린 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제하거나 실질적으로 억제한다.
"사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제한다" 및 "면역글로불린 중의 임의의 하나 이상의 생산을 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 높지 않음을 의미한다. 하나의 실시양태에서, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준은 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 낮다. 하나의 실시양태에서, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준은 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준보다 1.1배, 1.2배, 1.5배, 2배, 3배, 5배, 10배, 25배, 50배, 100배 또는 그 이상 더 낮다.
"사이토카인 중의 임의의 하나 이상의 생산을 실질적으로 억제한다" 및 "면역글로불린 중의 임의의 하나 이상의 생산을 실질적으로 억제한다"란, GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합시, 상기 사이토카인 또는 면역글로불린의 발현 수준이 GR에 본 발명의 SEGRAM의 결합 전 이들의 발현 수준의 2배, 1.8배, 1.6배, 1.5배, 1.4배, 1.3배, 1.2배, 1.1배 또는 그 미만보다 높지 않음을 의미한다.
부작용
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
SAID의 예는 천연 글루코코르티코이드 및 합성 글루코코르티코이드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 천연 글루코코르티코이드의 예는 코르티손, 코르토독손, 데속시코르톤, 하이드로코르티손, 프레베디올론 아세테이트 및 프레그네놀론을 제한없이 포함한다. 합성 글루코코르티코이드는 알클로메타손, 암시노니드, 베클로메타손, 베타메타손, 부데소니드, 클로로프레드니손, 클로로프레드니손, 시클레소니드, 클로베타졸, 클로베타손, 클로코르톨론, 클로프레드놀, 코르티바졸, 데플라자코르트, 데소니드, 데속시메타손, 덱사메타손, 디플로라손, 디플루코르톨론, 디플루프레드네이트, 플루클로롤론, 플루클로롤론, 플루드로코르티손, 플루드록시코르티드, 플루게스톤아세테이트, 플루메타손, 플루니솔리드, 플루오시놀론, 플루오시노니드, 플루오코르틴, 플루오코르톨론, 플루오로메톨론, 플루페롤론, 플루프레드니덴, 플루프레드니솔론, 플루티카손, 포르모코르탈, 할시노니드, 할로메타손, 로테프레드놀, 메드리손, 메프레드니손, 메틸프레드니솔론, 모메타손, 파라메타손, 프레드니카베이트, 프레드니솔론, 프레드니손앤드틱소코르톨, 프레드닐리덴, 리멕솔론, 트리암시놀론, 트리암시놀론 및 울로베타솔을 제한없이 포함한다.
SAID-관련 부작용의 예는 근골격 부작용, 내분비 및 대사 부작용, 위장관 부작용, 심혈관 부작용, 피부과 부작용, 신경정신과 부작용, 안과 부작용 및 면역학적 부작용을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 근골격 부작용은 골다공증, 뼈의 무혈관 괴사 및 근병증을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 내분비 및 대사 부작용은 대사 증후군; 성장 억제; 체중 손실; 지방량 증가; 제지방 손실; 흉선, 비장, 신장 및/또는 부신 아폽토시스; 코르티코스테론 합성 억제; 부신 억제; 고혈당증; 인슐린 내성; 고인슐린혈증; 2형 당뇨병; 이상지질혈증; 지방간; 및 쿠싱양 특징 (cushingoid feature)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 위장관 부작용은 위염 (gastritis), 소화성 궤양 (peptic ulcer), 위장관 출혈 (gastrointestinal bleeding), 내장 천공 (visceral perforation) 및 췌장염 (pancreatitis)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 심혈관 부작용은 고혈압, 관상 동맥 심장 질환, 허혈성 심장 질환 및 심부전을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 피부과 부작용은 피부 위축 (skin atrophy), 피부다공증 (dermatoporosis), 반상출혈 (ecchymose), 자반 (purpura), 짓무름 (erosion), 선 (striae), 상처 치유 지연 (delayed wound healing), 쉽게 멍듬 (easy bruising), 여드름 (acne), 다모증 (hirsutism) 및 탈모 (hair loss)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 신경정신과 부작용은 기분 변화 (mood change), 우울증 (depression), 행복감 (euphoria), 기분 가변성 (mood lability), 과민성 (irritability), 정좌불능 (akathisia), 불안 (anxiety), 인지 장애 (cognitive impairment), 정신병 (psychosis), 치매 (dementia) 및 섬망증 (delirium)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 안과 부작용은 백내장 (cataract), 녹내장 (glaucoma), 안검하수증 (ptosis), 공동확대 (mydriasis), 기회감염성 안구 감염 (opportunistic ocular infection) 및 중심성 장액 맥락망막병증 (central serous chorioretinopathy)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
SAID-관련 면역학적 부작용은 세포-매개 면역의 억제, 감염의 소인 및 잠복 감염의 재활성화를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 골다공증; 뼈의 무혈관 괴사; 근병증; 대사 증후군; 성장 억제; 체중 손실; 지방량 증가; 제지방 손실; 흉선, 비장, 신장 및/또는 부신 아폽토시스; 코르티코스테론 합성 억제; 부신 억제; 고혈당증; 인슐린 내성; 고인슐린혈증; 2형 당뇨병; 이상지질혈증; 지방간; 위염; 소화성 궤양; 위장관 출혈; 내장 천공; 간 지방증; 췌장염; 고혈압; 관상 동맥 심장 질환; 허혈성 심장 질환; 심부전; 피부 위축; 피부다공증; 반상출혈; 자반; 짓무름; 선; 상처 치유 지연; 쉽게 멍듬; 여드름; 다모증; 탈모; 기분 변화; 우울증; 행복감; 기분 가변성; 과민성; 정좌불능; 불안; 인지 장애; 정신병; 치매; 섬망증; 백내장; 녹내장; 안검하수증; 공동확대; 기회감염성 안구 감염; 중심성 장액 맥락망막병증; 세포-매개 면역의 억제; 감염의 소인; 및 잠복 감염의 재활성화를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택되는 SAID-관련 부작용 중의 임의의 하나 이상을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 피부 위축; 골다공증; 성장 억제; 체중 손실; 지방량 증가; 제지방 손실; 흉선, 비장, 신장 및/또는 부신 아폽토시스; 코르티코스테론 합성 억제; 부신 억제; 고혈당증; 인슐린 내성; 고인슐린혈증; 및 지방간을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 SAID-관련 부작용 중의 임의의 하나 이상을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 피부 위축을 유도하지 않는다 (실시예 11 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 골다공증을 유도하지 않는다 (실시예 12 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 성장 억제를 유도하지 않는다 (실시예 13 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 체중 손실을 유도하지 않는다 (실시예 13 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 지방량 증가 및/또는 제지방 손실을 유도하지 않는다 (실시예 13 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 흉선, 비장, 신장 및/또는 부신 아폽토시스를 유도하지 않는다 (실시예 14 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 코르티코스테론 합성 억제를 유도하지 않는다 (실시예 15 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 부신 억제를 유도하지 않는다 (실시예 15 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 고혈당증을 유도하지 않는다 (실시예 16 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 인슐린 내성을 유도하지 않는다 (실시예 17 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 고인슐린혈증을 유도하지 않는다 (실시예 17 참조).
하나의 실시양태에서, 본 발명의 SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 지방간을 유도하지 않는다 (실시예 18 참조).
구조
하나의 실시양태에서, 본 발명에 따르는 SEGRAM은 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 하나 또는 두 개의 에난티오머 또는 이의 약제학적으로 허용되는 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물이다:
Figure pct00007
(화학식 1)
본원에서 사용되는 바와 같이, 화학식 1의 화합물은 5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온이며 "CpdX"라고 한다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물은 라세미 (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온이다. 하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 두 개의 에난티오머 각각은 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의한 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 분리에 의해 수득되며, 상기 두 개의 에난티오머는 각각 첫 번째 용출 피크 [CpdX(eA)] 및 두 번째 용출 피크 [CpdX(eB)]에 상응한다.
SFC는 당업계의 숙련가로부터 널리 알려진 기술이다. 하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 각각의 에난티오머는 아밀로스 트리스-(3,5-디메틸페닐카바메이트) 컬럼을 사용한 SFC에 의해 효율적으로 정제될 수 있다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물은 중수소화된다. 하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 적어도 하나의 수소원자가 중수소화된다. 하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 또는 21개 수소원자가 중수소화된다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 세 개의 수소원자가 중수소화된다. 따라서, 하나의 실시양태에서, 화학식 1의 중수소화된 형태는 화학식 2의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 염, 용매화물 및/또는 전구약물이고, "CpdX-D3"이라고 한다:
Figure pct00008
(화학식 2)
하나의 실시양태에서, 화학식 2의 화합물은 라세미 (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로-메틸)-펜틸아미노}-이소벤조푸란-1(3H)-온이다. 하나의 실시양태에서, 화학식 2의 화합물의 두 개의 에난티오머는 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의한 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 분리에 의해 수득되며, 상기 두 개의 에난티오머는 각각 첫 번째 용출 피크 [CpdX-D3(eA)] 및 두 번째 용출 피크 [CpdX-D3(eB)]에 상응한다.
SFC는 당업계의 숙련가에게 잘 알려진 기술이다. 하나의 실시양태에서, 화학식 2의 화합물의 각각의 에난티오머는 아밀로스 트리스-(3,5-디메틸페닐카바메이트) 컬럼을 사용한 SFC에 의해 효율적으로 정제될 수 있다.
하기에서, 화학식 1의 화합물에 대한 임의의 언급은 또한, 달리 명시되지 않는 한, 상기 정의된 바와 같은 화학식 2의 화합물을 포함한다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 유도체는 미국 특허 제6,245,804호에 개시된 화합물을 포함한다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물은 화학식 3으로부터 유도된 가능한 화합물에 포함된다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 유도체는 화학식 3의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물이다:
Figure pct00009
(화학식 3)
여기서:
- W는 O, S 또는 CH2로부터 선택되고;
- R2는 H 또는 CH3으로부터 선택되고;
- Z2, Z3, Z4, Z5 및 Z6은 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, CH3, OCH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH3)2, C(CH3)3, COCH3, NO2, CN, CH=CH2 또는 CONH2로부터 선택된다.
하나의 실시양태에서, 화학식 3의 화합물은 중수소화된다. 하나의 실시양태에서, 화학식 3의 화합물의 적어도 하나의 수소원자가 중수소화된다. 하나의 실시양태에서, 화학식 3의 화합물의 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20개 또는 그 이상의 수소원자가 중수소화된다.
특정 실시양태에서, 화학식 3의 화합물이 중수소화되는 경우, Z2는 D, CD3, OCD3, CH2CD3, CH2CH2CD3, CH(CD3)2, C(CD3)3, COCD3 또는 CH=CD2로부터 선택된다.
특정의 바람직한 실시양태에서, 화학식 3의 화합물이 중수소화되는 경우, Z2는 OCD3이다.
본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 약제학적으로 허용되는 염은 이의 산 부가염 및 염기 염을 포함한다.
적합한 산 부가염은 비독성 염을 형성하는 산으로부터 형성된다. 예는 아세테이트, 아디페이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 비카보네이트/카보네이트, 비설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 시클라메이트, 에디실레이트, 에실레이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 히벤제이트, 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이드로브로마이드/브로마이드, 하이드로요오다이드/요오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프틸레이트, 2-납실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/하이드로겐 포스페이트/디하이드로겐 포스페이트, 피로글루타메이트, 사카레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 탄네이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트리플루오로아세테이트 및 크시노포에이트 염을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
적합한 염기 염은 비독성 염을 형성하는 염기로부터 형성된다. 예는 알루미늄, 아르기닌, 벤자틴, 칼슘, 콜린, 디에틸아민, 디올아민, 글리신, 리신, 마그네슘, 메글루민, 올라민, 칼륨, 나트륨, 트로메타민, 2-(디에틸아미노)에탄올, 에탄올아민, 모르폴린, 4-(2-하이드록시에틸)모르폴린 및 아연 염을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
산 및 염기의 헤미염 (hemisalt), 예를 들면, 헤미설페이트 및 헤미칼슘 염이 또한 형성될 수 있다.
바람직하게는, 약제학적으로 허용되는 염은 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이드로브로마이드/브로마이드, 비설페이트/설페이트, 니트레이트, 시트레이트 및 아세테이트를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 약제학적으로 허용되는 염은 하기 방법들 중의 하나 이상에 의해 제조될 수 있다:
(i) 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 목적하는 산과 반응시킴으로써;
(ii) 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 목적하는 염기와 반응시킴으로써;
(iii) 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 적합한 전구체로부터 산- 또는 염기-불안정 보호 그룹을 제거함으로써; 또는 목적하는 산을 사용하여 적합한 사이클릭 전구체, 예를 들면, 락톤 또는 락탐을 개환시킴으로써; 또는
(iv) 적합한 산과의 반응에 의해 또는 적합한 이온 교환 컬럼에 의해 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 하나의 염을 다른 염으로 전환시킴으로써.
이러한 모든 반응은 전형적으로 용액에서 수행된다. 염은 용액으로부터 침전될 수 있고 여과에 의해 수집될 수 있거나 용매의 증발에 의해 회수될 수 있다. 염의 이온화 정도는 완전 이온화에서 거의 비이온화까지 다양할 수 있다.
본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체에 대한 모든 언급은 이의 에난티오머, 중수소화된 형태, 염, 용매화물, 다성분 복합체 및 액정 뿐만 아니라 이들의 조합에 대한 언급을 포함한다.
본 발명의 화합물은 이의 모든 다형체 및 결정 습성, 이의 전구약물 및 이성체 (광학, 기하 및 호변 이성체 포함) 및 동위원소-표지된 화합물을 포함한, 본원에 정의된 바와 같은 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함한다.
또한, 일반적으로, 염과 관련하여, 약제학적으로 허용되는 염이 바람직하지만, 본 발명은 이의 가장 넓은 의미에서 또한 예를 들면 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 단리 및/또는 정제에 사용될 수 있는 비-약제학적으로 허용되는 염을 포함함을 주지해야 한다. 예를 들면, 광학 활성 산 또는 염기로 형성된 염은 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 광학 활성 이성체의 분리를 촉진할 수 있는 부분입체이성체 염을 형성하는데 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 일반적으로 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 모든 약제학적으로 허용되는 프리드럭 (predrug) 및 프로드럭 (prodrug)을 포함한다.
에난티오머
본 발명은 또한 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 하나 또는 두 개의 에난티오머 또는 이의 약제학적으로 허용되는 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이다:
Figure pct00010
(화학식 1)
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 에난티오머는 데노보 합성된다 (실시예 1, 도 2a).
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 에난티오머는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체에 존재하는 두 개의 라세미 성분의 분리에 의해 수득된다 (실시예 1, 도 2b).
하나의 실시양태에서, 두 개의 라세미 성분의 분리는 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의해 수행된다. SFC는 당업계의 숙련가에게 잘 알려진 기술이다. 이러한 실시양태에서, 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 각각의 에난티오머는 아밀로스 트리스-(3,5-디메틸페닐카바메이트) 컬럼을 사용한 SFC에 의해 효율적으로 분리될 수 있다.
화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물이 SFC에 의해 분리되는 하나의 실시양태에서, 첫 번째 용출 피크는 "CpdX(eA)"라고 하는 반면 두 번째 용출 피크는 "CpdX(eB)"라고 한다.
중수소화된 SEGRAM
본 발명은 또한 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 중수소화된 형태 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이다:
Figure pct00011
(화학식 1)
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 중수소화된 형태는 적어도 하나의 중수소화된 수소원자를 포함한다. 하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 중수소화된 형태는 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 또는 21개의 중수소화된 수소원자를 포함한다.
하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 중수소화된 형태는 세 개의 중수소화된 수소원자를 포함한다. 따라서, 하나의 실시양태에서, 화학식 1의 화합물의 중수소화된 형태는 화학식 2의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 염, 용매화물 및/또는 전구약물이고, "CpdX-D3"이라고 한다:
Figure pct00012
(화학식 2).
중수소화된 에난티오머
본 발명은 또한 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 하나 또는 두 개의 에난티오머 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물에 관한 것이다:
Figure pct00013
(화학식 2).
하나의 실시양태에서, 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 에난티오머는 데노보 합성된다 (실시예 1, 도 2c).
하나의 실시양태에서, 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 에난티오머는 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체에 존재하는 두 개의 라세미 성분의 분리에 의해 수득된다 (실시예 1, 도 2d).
일부 실시양태에서, 두 개의 라세미 성분의 분리는 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의해 수행된다. SFC는 당업계의 숙련가에게 잘 알려진 기술이다. 하나의 실시양태에서, 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 각각의 에난티오머는 아밀로스 트리스-(3,5-디메틸페닐카바메이트) 컬럼을 사용한 SFC에 의해 효율적으로 분리될 수 있다.
화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물이 SFC에 의해 분리되는 하나의 실시양태에서, 첫 번째 용출 피크는 "CpdX-D3(eA)"라고 하는 반면 두 번째 용출 피크는 "CpdX-D3(eB)"라고 한다.
조성물
조성물
본 발명은 또한 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 또는 치료하거나, 또는 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된, 이를 필요로 하는 대상체에서 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 또는 치료하거나, 또는 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 조성물에 관한 것이다.
약제학적 조성물
본 발명은 또한 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제와 조합된 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체, 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 또는 치료하거나, 또는 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체, 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된, 이를 필요로 하는 대상체에서 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 또는 치료하거나, 또는 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다.
약제학적으로 허용되는 부형제는 물, 염수, 링거액, 덱스트로스 용액, 및 에탄올, 글루코스, 수크로스, 덱스트란, 만노스, 만니톨, 소르비톨, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 포스페이트, 아세테이트, 젤라틴, 콜라겐, 카보폴®, 식물성 오일의 용액 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 적합한 방부제, 안정화제, 항산화제, 항균제 및 완충제, 예를 들어 BHA, BHT, 시트르산, 아스코르브산, 테트라사이클린 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물에서 사용될 수 있는 약제학적으로 허용되는 부형제의 또 다른 예는 이온 교환체, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예를 들어 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예를 들어 포스페이트, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산, 물, 염 또는 전해질의 부분 글리세라이드 혼합물, 예를 들어 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연 염, 콜로이드성 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스-기반 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블럭 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모지를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
또한, 몇몇 약제학적으로 허용되는 부형제는 계면활성제 (예를 들어 하이드록시프로필셀룰로스); 적합한 담체, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이의 적합한 혼합물, 및 식물성 오일, 예를 들어, 땅콩유 및 호마유를 함유하는 용매 및 분산 매질; 등장화제, 예를 들어, 당 또는 염화나트륨; 코팅제, 예를 들어, 레시틴; 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴; 방부제, 예를 들어, 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 클로로부탄올, 티메로살 등; 완충제, 예를 들어, 붕산, 중탄산나트륨 및 중탄산칼륨, 붕산나트륨 및 붕산칼륨, 탄산나트륨 및 탄산칼륨, 아세트산나트륨, 중인산나트륨 등; 장성화제, 예를 들어, 덱스트란 40, 덱스트란 70, 덱스트로스, 글리세린, 염화칼륨, 프로필렌 글리콜, 염화나트륨; 항산화제 및 안정화제, 예를 들어, 중아황산나트륨, 메타중아황산나트륨, 티오아황산나트륨, 티오우레아 등; 비이온성 습윤제 또는 정화제, 예를 들어, 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머 282 및 틸록사폴; 점도 개질제, 예를 들어, 덱스트란 40, 덱스트란 70, 젤라틴, 글리세린, 하이드록시에틸셀룰로스, 하이드록시메틸프로필셀룰로스, 라놀린, 메틸셀룰로스, 바셀린, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐피롤리돈, 카복시메틸셀룰로스; 등을 포함할 수 있다.
약제
본 발명은 또한 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된 약제에 관한 것이다.
본 발명은 또한 염증성 장애의 예방 및 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 또는 치료하거나, 또는 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 약제에 관한 것이며, 여기서 상기 약제는 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된다.
본 발명은 또한 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애의 예방 및 치료를 필요로 하는 대상체에서 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 또는 치료하거나, 또는 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 약제에 관한 것이며, 여기서 상기 약제는 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된다.
약용화장품 조성물
본 발명은 또한 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된 약용화장품 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 염증성 장애의 예방 및 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 또는 치료하거나, 또는 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 약용화장품 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 약제는 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물을 포함하거나 이들로 구성되거나 이들로 본질적으로 구성된다.
투여 방식
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 전신 또는 국소로 투여하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 경구, 주사, 국소, 경피, 피하, 경점막, 경피, 비강 (예를 들어, 비강내 스프레이 또는 점적에 의해), 협측, 설하, 안구, 비내, 기관내, 내시경, 관절내, 동맥내, 수질내, 척수내, 심실내, 복강내, 장내, 직장 또는 질 투여하기 위한 것이다.
주사
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 주사, 바람직하게는 전신 주사된다. 전신 주사에 적합한 제형의 예는 액체 용액 또는 현탁액, 주사 전 액체에 용해 또는 현탁시키기에 적합한 고체 형태를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 전신 주사의 예는 정맥내, 피하, 근육내, 피내 및 복강내 주사, 및 관류를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 또 다른 양태에서, 주사되는 경우, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물 또는 약제는 멸균성이다. 멸균 약제학적 조성물을 수득하기 위한 방법은 GMP 합성 (GMP는 "양호한 제조 관행"을 나타낸다)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
경구 투여
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 경구 투여된다.
경구 투여에 적합한 제형의 예는 고체 형태, 액체 형태 및 겔을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
경구 투여에 적합한 고체 형태의 예는 환제, 정제, 캡슐, 연질 젤라틴 캡슐, 경질 젤라틴 캡슐, 당의정, 압축 정제, 카세제, 웨이퍼, 당-코팅 환제, 당 코팅 정제, 또는 분산/또는 붕해 정제, 분말, 경구 투여 전 액체에 용해 또는 현탁시키기에 적합한 고체 형태 및 발포성 정제를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
경구 투여에 적합한 액체 형태의 예는 용액, 현탁액, 마실 수 있는 용액, 엘릭서제, 밀봉된 작은 유리병 (phial), 물약, 드렌치 (drench), 시럽 및 리큐어 (liquor)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
국소 투여
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 국소 투여된다.
국소 투여는, 예를 들어, 손, 손가락 또는 다양한 어플리케이터 (롤업, 롤온 또는 기타 스틱 용기, 튜브 용기, 면봉, 파우더 퍼프, Q-팁, 펌프, 브러시, 매트, 천 및/또는 이와 유사한 것)를 사용한, 국소 효과를 위한 관심 부위에의 (일반적으로 노출되고 시각적으로 관찰 가능한 표피의 최외층과 같은 하나 이상의 노출된 표면 또는 이의 외부 표면에의) 직접적인 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 전달, 투여 또는 적용을 특징으로 한다. 적용은, 예를 들어 피부 내에 또는 피부 상에 놓고, 배치하고, 문지르고, 쓸어내고, 붓고, 퍼지고/퍼지거나 마사지함으로써 또는 임의의 다른 편리한 또는 적합한 방법에 의해 이루어질 수 있다. 바람직하게는, 국소 투여는 (전신 효과를 피하기 위해) 조성물의 성분을 대상체의 혈류에 상당히 흡수시키지 않으면서 수행된다.
국소 투여에 적합한 제형의 예는 스틱, 립스틱, 왁스, 크림, 로션, 연고, 밤(balm), 겔, 광택제, 자외선 차단제, 화장품, 마스크, 리브-온(leave-on) 세척제 또는 클렌저, 제모제 및/또는 이와 유사한 것을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 예를 들어, 방부제로서의 벤질 알콜 1% 또는 2% (w/w), 유화 왁스, 글리세린, 이소프로필 팔미테이트, 락트산, 정제수 및 소르비톨 용액과 함께 흰색의 부드럽고 균질한 불투명 크림 또는 로션을 형성하도록 혼합될 수 있다. 또한, 조성물은 폴리에틸렌 글리콜 400 (PEG 400)을 함유할 수 있다. 이들은, 예를 들어, 방부제로서의 벤질 알콜 2% (w/w), 백색 바셀린, 유화 왁스 및 테녹스 II (부틸화 하이드록시아니솔, 프로필 갈레이트, 시트르산, 프로필렌 글리콜)과 함께 연고를 형성하도록 혼합될 수 있다. 붕대 재료, 예를 들어 거즈의 짜여진 패드 또는 롤은 용액, 로션, 크림, 연고의 조성물로 함침될 수 있거나 다른 이러한 형태가 또한 국소 적용에 사용될 수 있다.
하나의 실시양태에서, 국소 투여에 적합한 제형은 약 0.001%　w/w, 바람직하게는 약 0.005%　w/w, 0.01%　w/w, 0.02%　w/w, 0.03%　w/w, 0.04%　w/w, 0.05%　w/w, 0.06%　w/w, 0.07%　w/w, 0.08%　w/w, 0.09%　w/w, 0.1%　w/w, 0.2%　w/w, 0.3%　w/w, 0.4%　w/w, 0.5%　w/w, 0.6%　w/w, 0.7%　w/w, 0.8%　w/w, 0.9%　w/w, 1.0%　w/w 또는 그 이상의 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체를 포함한다.
경피 투여
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 또한 조성물로 함침된 수지성 가교결합제를 갖는 아크릴-기반 중합체 접착제 중 하나와 같은 경피 시스템을 사용하여 국소적으로 적용되고 불침투성 배킹 (impermeable backing)에 적층될 수 있다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 경피 패치로서, 보다 특히 서방성 경피 패치로서 투여될 수 있다. 경피 패치는, 예를 들어, 접착제 매트릭스, 중합체 매트릭스, 저장소 패치, 매트릭스 또는 일체식 적층 구조와 같은 임의의 통상적인 형태를 포함할 수 있고, 일반적으로 하나 이상의 배킹 층, 접착제, 침투 증강제, 임의의 속도 제어 막 및 적용 전에 접착제를 노출시키기 위해 제거되는 박리 라이너 (release liner)로 구성된다. 중합체 매트릭스 패치는 또한 중합체-매트릭스 형성 물질을 포함한다. 적합한 경피 패치는, 예를 들어, 미국 특허 제5,262,165호, 제5,948,433호, 제6,010,715호 및 제6,071,531호에 보다 상세하게 기술되어 있으며, 이들 각각의 개시내용은 전문이 본원에 포함된다.
경피 투여에 적합한 제형의 예는 연고, 페이스트, 크림, 필름, 밤, 패치, 예를 들어 경피 패치, 겔, 리포좀 형태 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 연고, 페이스트, 크림; 필름, 밤, 패치, 예를 들어, 경피 패치, 겔, 리포좀 형태 등이다.
본 발명의 하나의 실시양태에서, 연고는 유성 연고; 예를 들어 수중유 또는 유중수 연고와 같은 유화 연고; 또는 수용성 연고이고, 바람직하게는 유성 연고이다.
본 발명의 하나의 실시양태에서, 유성 연고는 염기, 예를 들어, 식물 및 동물 오일; 식물 및 동물 지방; 왁스; 바셀린, 예를 들어 백색 바셀린 또는 바셀린 오일; 및 파라핀, 예를 들어, 액체 파라핀 또는 파라핀 오일을 사용한다.
본 발명의 하나의 실시양태에서, 경피 조성물은 하나 이상의 부형제를 추가로 포함한다. 적합한 약제학적으로 허용되는 부형제는 숙련가로부터 잘 알려져 있다. 적합한 부형제의 예는 담체, 유화제, 경화제, 레올리지 개질제 또는 증점제, 계면활성제, 연화제, 방부제, 습윤제, 완충제, 용매, 보습제 및 안정화제를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
안구 투여
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 또한 안내로 적용될 수 있다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 투여는 국소 안구 투여, 예를 들어, 점안제의 투여 또는 본 발명의 억제제를 포함하는 안과 용액에 눈을 씻는 것일 수 있다.
안과 용액은 안구 및/또는 결막에 투여하거나 결막낭에 삽입하거나 후안부에 투여하기 위한 멸균 액체, 반고체 또는 고체 제제를 지칭한다. 본원에서 사용되는 용어 "후안부 (posterior segment of eye)"는 전방 유리체 막과 그 뒤의 구조 (유리체액, 망막, 맥락막, 시신경)를 포함한, 눈의 뒤쪽 2/3를 지칭한다. 특히, 안과용 조성물은 유리체 내로, 예를 들어 유리체내 주사에 의해 투여될 수 있다. 안과용 조성물의 예는 점안제, 눈 로션, 점안제용 분말 및 눈 로션용 분말, 및 결막낭 또는 유리체에 주사하기 위한 조성물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
담체의 예는 물; 완충 염수; 바셀린 (petroleum jelly) (백색 연질 파라핀으로도 알려진 바셀린); 바셀린 (petrolatum); 오일, 예를 들어, 광유, 식물유, 동물유, 파라핀유, 피마자유 또는 바셀린유; 유기 및 무기 왁스, 예를 들어, 미세결정질, 파라핀, 밀랍 및 지랍 왁스; 천연 중합체, 예를 들어, 크산탄, 젤라틴, 셀룰로스, 콜라겐, 전분, 또는 아라비아 고무; 합성 중합체; 알콜; 폴리올; 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 하나의 실시양태에서, 담체는 유화제, 유상 성분 및 수상 성분을 포함하는 기재 크림이다.
연고- 또는 로션-기재 부형제의 예는 바셀린, Plastibase™ (폴리에틸렌 (약 21000 Da의 평균 분자량) 및 액체 파라핀으로 제조된 기재임) 및 ESMA-P™ (미세결정질 왁스로 만들어짐)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
유화제의 예는 세틸 알콜, 세토스테아릴 알콜, 스테아릴 알콜, 카복시폴리메틸렌, 폴리카보필, 폴리에틸렌 글리콜 및 이의 유도체, 폴리옥시에틸렌 및 이의 유도체, 예를 들어, 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80, 단독 또는 지방 알콜, 예를 들어, 세틸 알콜, 스테아릴 알콜 및 세토스테아릴 알콜과 조합, 및 소르비탄 에스테르, 예를 들어, 소르비탄 지방산 에스테르를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
유상 성분의 예는 바셀린, 예를 들어, 백색 바셀린, 황색 바셀린 또는 바셀린 오일, 파라핀, 예를 들어, 액체 파라핀 또는 파라핀 오일, 디메티콘 및 이의 혼합물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
수상 성분의 예는 물, 글리세롤 및 프로필렌글리콜을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
경화제의 예는 스테아릴 알콜, 세토스테아릴 알콜, 및 세틸 알콜을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
레올로지 개질제 또는 증점제의 예는 카보머, 예를 들어, Carbopol®, 및 폴리옥시에틸렌 수지 아민, 예를 들어, Ethomeen®을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
계면활성제의 예는 음이온성, 양이온성, 양쪽성, 및 비이온성 계면활성제, 예를 들어, 나트륨 라우릴 설페이트, 세토스테아릴 알콜, 세틸 알콜, 마그네슘 라우릴 설페이트, 왁스, 또는 이들의 조합을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
연화제의 예는 백색 또는 황색 바셀린 (백색 또는 황색 바셀린), 액체 바셀린 (액체 바셀린), 파라핀, 또는 아쿠아포어 (aquaphor)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
방부제의 예는 항균성 방부제, 예를 들어, 니파긴 (메틸 하이드록시벤조에이트), 니파솔 (하이드록시벤조에이트), 부틸파라벤, 에틸파라벤, 메틸파라벤, 프로필 파라벤 칼륨, 프로필 파라벤 나트륨, 파라하이드록시벤조에이트 에스테르, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 벤조산, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 티메로살, 나트륨 벤조에이트 및 벤질 알콜을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
습윤제의 예는 프로필렌 글리콜 및 프로필렌 글리콜 알기네이트를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
완충제의 예는 수산화나트륨, 시트르산 및 수산화칼륨을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
용매의 예는 물, 이소프로판올, 벤질 알콜, 및 프로필렌 글리콜을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
보습제의 예는 글리세린, 광유, 폴리옥시에틸렌 경화된 피마자유 및 바세린, 프로필렌 글리콜, 파라핀, 왁스, 예를 들어, 밀랍, 폴리에틸렌 글리콜 또는 이들의 혼합물, 예를 들어, 마크로골 (마크로골은 상이한 분자량의 폴리에틸렌 글리콜의 혼합물이다), 스테아릴 알콜, 벤질 알콜, 파라하이드로벤조에이트 에스테르 (파라벤), 겔화 탄화수소, 시트르산, 스쿠알렌, 라놀린, 글리세린, 폴리옥시에틸렌 경화된 피마자유, 소르비탄 지방산 에스테르, 글리세린 지방 에스테르, 동물 및 식물 지방, 오일, 전분, 트라가칸트, 셀룰로스 유도체, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 활석, 산화아연 및 이들의 혼합물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
안정화제의 예는 탄수화물, 예를 들어, 수크로스, 락토스 및 트레할로스, 당 알콜, 예를 들어, 만니톨 및 소르비톨, 아미노산, 예를 들어, 히스티딘, 글리신, 페닐알라닌 및 아르기닌을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
호흡기 투여
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 비강 (예를 들어, 스프레이에 의한) 및 협측을 포함하는 호흡기 투여에 의해 투여되기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 흡입에 의한 치료제의 투여를 위해 당업계에 공지된 임의의 다양한 흡입 장치에 의해 전달될 수 있다. 이들 장치는 계량 흡입기, 네뷸라이저 (nebulizer), 건조 분말 흡입기, 분무기 (sprayer) 등을 포함한다.
본 발명의 실행에 적합한 상업적으로 이용 가능한 흡입 장치의 몇 가지 구체적인 예는 Cyclohaler, Turbohaler™ (Astra), Rotahaler® (Glaxo), Diskus® (Glaxo), Spiros™ 흡입기 (Dura), Inhale Therapeutics에 의해 판매되는 장치, AERx™ (Aradigm), Ultravent® 네뷸라이저 (Mallinckrodt), Acorn II® 네뷸라이저 (Marquest Medical Products), Ventolin® 계량 흡입기 (Glaxo), Spinhaler® 분말 흡입기 (Fisons), Respimat® 연질 미스트 흡입기 (Boehringer Ingelheim) 등이다.
당업계의 숙련가들이 인지하는 바와 같이, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 제형, 전달된 제형의 양 및 단일 용량의 투여 지속기간은 사용된 흡입 장치의 유형에 따라 좌우된다.
네뷸라이저와 같은 일부 에어로졸 전달 시스템의 경우, 투여 빈도 및 시스템이 활성화되는 시간의 길이는 주로 에어로졸 중의 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 농도에 따라 좌우될 것이다. 예를 들면, 네뷸라이저 용액 중의 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 더 높은 농도에서 더 짧은 투여 기간이 사용될 수 있다.
계량 흡입기와 같은 장치는 더 높은 에어로졸 농도를 생성할 수 있으며, 원하는 양의 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 전달하기 위해 더 짧은 기간 동안 작동될 수 있다.
분말 흡입기와 같은 장치는 주어진 충전량의 제제가 장치에서 방출될 때까지 활성제를 전달한다. 이러한 유형의 흡입기에서, 주어진 양의 분말 중의 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 양이 단일 투여로 전달되는 용량을 결정한다.
하나의 실시양태에서, 흡입에 의해 전달되는 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 입자는 바람직하게는 약 10 μm 미만, 보다 바람직하게는 약 1 μm 내지 약 5 μm 범위의 입자 크기를 갖는다.
유리하게는, 건조 분말로서 투여하기 위해, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 약 10 μm 미만, 바람직하게는 약 1 내지 약 5 μm의 입자를 갖는 미립자 형태로 제조된다. 이러한 제형은 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 분무 건조, 분쇄, 미분화 또는 임계점 응축에 의해 달성될 수 있다.
건조 분말 흡힙기로부터의 투여를 위한 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 제형은 전형적으로 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 함유하는 미분된 건조 분말을 포함하지만, 분말은 또한 벌킹제, 담체, 부형제, 다른 첨가제 등을 포함할 수 있다. 첨가제의 예는 단당류, 이당류 및 다당류; 당 알콜 및 기타 폴리올, 예를 들어, 락토스, 글루코스, 라피노스, 멜레지토스, 락티톨, 말티톨, 트레할로스, 수크로스, 만니톨, 전분, 이눌린, 또는 이들의 조합; 계면활성제, 예를 들어, 소르비톨, 디팔미토일포스파티딜 콜린, 또는 레시틴; 등을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 포함하는 스프레이는 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 압력하에 노즐에 통과시킴으로써 생산할 수 있다. 노즐 크기 및 구성, 인가된 압력, 및 액체 공급 속도는 원하는 출력 및 입자 크기를 달성하도록 선택될 수 있다. 전기분무는 예를 들어 모세관 또는 노즐 공급과 관련된 전기장에 의해 생성될 수 있다. 분무기에 사용하기에 적합한 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 제형은 전형적으로 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 수용액으로 포함할 것이다.
관절내 투여
또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 관절내 투여하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 이를 필요로 하는 대상체의 관절 내에 전달될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 요통이 있는 염증성 장애를 갖는 대상체에게 디스크-내 (intra-disc) 또는 디스크-주변 (peri-disc) 투여에 의해 투여될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 무릎 통증이 있는 염증성 장애를 갖는 대상체에게 무릎-간 (inter-knee) 또는 무릎-주변 (peri-knee) 주사에 의해 투여될 수 있다.
서방성 투여
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 서방출 형태로 투여하기 위한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 조성물, 약제학적 조성물 또는 약제는 조절제의 방출을 제어하는 전달 시스템을 포함한다.
대상체
하나의 실시양태에서, 대상체는 동물이다. 하나의 실시양태에서, 대상체는 포유동물이다.
포유동물의 예는 영장류 (인간 및 비인간 포함), 소 (암소 포함), 말, 돼지, 양, 염소, 개 및 고양이를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
바람직한 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
하나의 실시양태에서, 대상체는 성인 (예를 들어, 사람 연령으로 18세 이상의 대상체 또는 생식 능력에 도달한 후의 대상체)이다. 또 다른 실시양태에서, 대상체는 아동 (예를 들면, 사람 연령으로 18세 미만의 대상체 또는 생식 능력에 도달하기 전의 대상체)이다.
하나의 실시양태에서, 대상체는 남성이다. 하나의 실시양태에서, 대상체는 여성이다.
하나의 실시양태에서, 대상체는 염증성 장애, 바람직하게는 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애로 진단되고/되었다. 하나의 실시양태에서, 대상체는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병), 건초열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation), 아나필락시스 (anaphylaxis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염 포함), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory disease), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편 대 숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애 중의 어느 하나로 진단되고/되었다.
하나의 실시양태에서, 대상체는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 염증성 장 질환 (IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염 포함)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애 중의 어느 하나로 진단되고/되었다.
하나의 실시양태에서, 대상체는 염증성 장애, 바람직하게는 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 발병할 위험이 있다. 하나의 실시양태에서, 대상체는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병), 건초열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation), 아나필락시스 (anaphylaxis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염 포함), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory disease), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편 대 숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애 중의 어느 하나를 발병할 위험이 있다.
하나의 실시양태에서, 대상체는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 염증성 장 질환 (IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염 포함)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애 중의 어느 하나를 발병할 위험이 있다.
섭생
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 숙련가에 의해 결정된 용량으로 투여하고 각각의 대상체에 개별적으로 적응하기 위한 것이다.
본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 총 일일 사용량은 건전한 의학적 판단 범위 내에서 주치의에 의해 결정될 것으로 이해될 것이다. 임의의 특정 대상체에 대한 구체적인 치료적 유효량은 치료되는 질환 및 질환의 중증도; 사용되는 특정 조성물, 대상체의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별 및 식이; 투여 시간, 투여 경로, 치료 지속기간; 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물과 병용하여 또는 동시에 사용되는 약물; 등의 의학 분야에 널리 알려진 인자를 포함한 다양한 인자들에 따라 좌우될 것이다. 예를 들면, 원하는 치료 효과를 달성하는데 필요한 것보다 낮은 수준에서 치료 화합물의 용량을 시작하고 원하는 효과가 달성될 때까지 용량을 점진적으로 증가시키는 것은 당업계의 기술 내에 있다; 그러나 반대로, 부하 용량, 정상 상태 혈장 농도에 더 빨리 도달하는 방식으로 시작한 다음 제거 과정의 효과를 정확하게 보상하도록 계산된 유지 용량을 따르는 것이 똑같이 유용할 수 있다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 적어도 1일 1회, 적어도 1일 2회, 적어도 1일 3회 투여하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 2, 3, 4, 5, 6일마다 투여하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 일주일에 두 번, 매주, 2주마다, 한 달에 한 번 투여하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 매월, 2개월마다, 3개월마다, 4개월마다, 5개월마다, 6개월마다, 1년에 1회 투여하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 약 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 1주일, 2주일, 3주일, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 1년, 또는 보다 긴 기간에 걸쳐, 예를 들어, 몇 년 동안 또는 대상체의 남은 생애 동안의 기간 동안 투여하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 염증성 장애, 바람직하게는 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애의 치료 또는 완화시까지 투여하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 만성 치료를 위해 투여하기 위한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 치료적 유효량은 급성 치료를 위해 투여하기 위한 것이다.
질량/체중/일의 섭생
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 0.5 μg/kg 내지 약 50 mg/kg, 바람직하게는 약 5 μg/kg 내지 약 25 mg/kg, 바람직하게는 약 50 μg/kg 내지 약 5 mg/kg, 바람직하게는 약 250 μg/kg 내지 약 2.5 mg/kg, 바람직하게는 약 300 μg/kg 내지 약 1 mg/kg, 바람직하게는 약 350 μg/kg 내지 약 800 μg/kg, 바람직하게는 약 400 μg/kg 내지 약 600 μg/kg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 500 μg/kg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 1 μg/kg 내지 약 100 mg/kg, 바람직하게는 약 10 μg/kg 내지 약 50 mg/kg, 바람직하게는 약 100　μg/kg 내지 약 10 mg/kg, 바람직하게는 약 500 μg/kg 내지 약 5 mg/kg, 바람직하게는 약 750 μg/kg 내지 약 2.5 mg/kg, 바람직하게는 약 800 μg/kg 내지 약 2 mg/kg, 바람직하게는 약 900 μg/kg 내지 약 1.5 mg/kg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 1 mg/kg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 5 μg/kg 내지 약 500 mg/kg, 바람직하게는 약 50 μg/kg 내지 약 250 mg/kg, 바람직하게는 약 500 μg/kg 내지 약 50 mg/kg, 바람직하게는 약 1 mg/kg 내지 약 25 mg/kg, 바람직하게는 약 1.5 mg/kg 내지 약 12.5 mg/kg, 바람직하게는 약 2 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 바람직하게는 약 2.5 mg/kg 내지 약 7.5 mg/kg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 5 mg/kg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 0.5 μg/kg 내지 약 250 μg/kg, 바람직하게는 약 1 μg/kg 내지 약 200 μg/kg, 바람직하게는 약 5 μg/kg 내지 약 150 μg/kg, 바람직하게는 약 10 μg/kg 내지 약 100 μg/kg, 바람직하게는 약 25 μg/kg 내지 약 75 μg/kg, 바람직하게는 약 30 μg/kg 내지 약 50 μg/kg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 40 μg/kg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 0.1 μg/kg 내지 약 10 mg/kg, 바람직하게는 약 1 μg/kg 내지 약 1 mg/kg, 바람직하게는 약 10 μg/kg 내지 약 500 μg/kg, 바람직하게는 약 20 μg/kg 내지 약 450　μg/kg, 바람직하게는 약 30 μg/kg 내지 약 400 μg/kg, 바람직하게는 약 40　μg/kg 내지 약 350 μg/kg, 바람직하게는 약 45 μg/kg 내지 약 300 μg/kg, 바람직하게는 약 50 μg/kg 내지 약 250 μg/kg, 바람직하게는 약 55 μg/kg 내지 약 200 μg/kg, 바람직하게는 약 60 μg/kg 내지 약 150 μg/kg, 바람직하게는 약 65 μg/kg 내지 약 100 μg/kg, 바람직하게는 약 70 μg/kg 내지 약 90 μg/kg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 80 μg/kg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 1 μg/kg 내지 약 5 mg/kg, 바람직하게는 약 10 μg/kg 내지 약 2.5 mg/kg, 바람직하게는 약 25 μg/kg 내지 약 2 mg/kg, 바람직하게는 약 50 μg/kg 내지 약 1 mg/kg, 바람직하게는 약 100 μg/kg 내지 약 750 μg/kg, 바람직하게는 약 150 μg/kg 내지 약 600 μg/kg, 바람직하게는 약 200 μg/kg 내지 약 600 μg/kg, 바람직하게는 약 250 μg/kg 내지 약 550 μg/kg, 바람직하게는 약 300 μg/kg 내지 약 500 μg/kg, 바람직하게는 약 350 μg/kg 내지 약 450 μg/kg, 바람직하게는 약 380 μg/kg 내지 약 420 μg/kg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 400 μg/kg이다.
질량/일의 섭생
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 0.05 μg 내지 약 250 μg, 약 0.1 μg 내지 약 150 μg, 약 0.2 μg 내지 약 100 μg, 약 0.3 μg 내지 약 50 μg, 약 0.4 μg 내지 약 35 μg, 약 0.5 μg 내지 약 25 μg, 약 2.5 μg 내지 약 20 μg, 바람직하게는 약 5 μg 내지 약 15 μg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 10 μg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 0.1 μg 내지 약 500 μg, 약 0.2 μg 내지 약 300 μg, 약 0.4 μg 내지 약 200 μg, 약 0.6 μg 내지 약 100 μg, 약 0.8 μg 내지 약 75 μg, 약 1 μg 내지 약 50 μg, 약 5 μg 내지 약 40 μg, 바람직하게는 약 10 μg 내지 약 30 μg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 20 μg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 0.5 μg 내지 약 500 μg, 바람직하게는 약 1 μg 내지 약 250 μg, 바람직하게는 약 10 μg 내지 약 200 μg, 바람직하게는 약 25 μg 내지 약 180 μg, 바람직하게는 약 50 μg 내지 약 160 μg, 바람직하게는 약 60 μg 내지 약 140 μg, 바람직하게는 약 80 μg 내지 약 120 μg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 1일량은 약 100 μg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 50 μg 내지 약 25 mg, 바람직하게는 약 50 μg 내지 약 15 mg, 바람직하게는 약 100 μg 내지 약 12.5 mg, 바람직하게는 약 200 μg 내지 약 10 mg, 바람직하게는 약 300 μg 내지 약 7.5 mg, 바람직하게는 약 400 μg 내지 약 5 mg, 바람직하게는 약 500 μg 내지 약 4.5 mg, 바람직하게는 약 1 mg 내지 약 4 mg, 바람직하게는 약 1.5 mg 내지 약 3.5 mg, 바람직하게는 약 2 mg 내지 약 3 mg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 2.5 mg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 0.1 mg 내지 약 50 mg, 바람직하게는 약 0.1 mg 내지 약 30 mg, 바람직하게는 약 0.2 mg 내지 약 25 mg, 바람직하게는 약 0.4 mg 내지 약 20 mg, 바람직하게는 약 0.6 mg 내지 약 15 mg, 바람직하게는 약 0.8 mg 내지 약 10 mg, 바람직하게는 약 1 mg 내지 약 9 mg, 바람직하게는 약 2 mg 내지 약 8 mg, 바람직하게는 약 3 mg 내지 약 7 mg, 바람직하게는 약 4 mg 내지 약 6 mg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 5 mg이다.
하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 0.5 mg 내지 약 100 mg, 바람직하게는 약 0.6 mg 내지 약 75 mg, 바람직하게는 약 0.8 mg 내지 약 60　mg, 바람직하게는 약 1 mg 내지 약 55 mg, 바람직하게는 약 2.5 mg 내지 약 50 mg, 바람직하게는 약 5 mg 내지 약 45 mg, 바람직하게는 약 10 mg 내지 약 40 mg, 바람직하게는 약 15 mg 내지 약 35 mg, 바람직하게는 약 20 mg 내지 약 30 mg, 바람직하게는 약 23 mg 내지 약 27 mg에 이른다. 하나의 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 일일 인간-등가량은 약 25 mg이다.
병용 요법
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 병용 요법의 일부로서 투여될 수 있다. 따라서, 공동투여 및 본 발명의 SEGRAM, 바람직하게는 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체 이외에, 추가의 치료제 및/또는 활성 성분을 포함하는 조성물 및 약제를 포함하는 양태들이 본 발명의 범위내에 포함된다.
종종 병용 요법으로 지칭되는 이러한 다중 약물 섭생은 염증성 장애를 예방 또는 치료하기 위해, 바람직하게는 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 또는 치료하기 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 SEGRAM 이외에 활성제의 사용을 필요로 할 수 있는 치료 효능의 요건에 더하여, 부가 요법을 나타내는 활성 성분을 포함하는 약물의 조합의 사용을 강요하거나 강력하게 권고하는, 즉 본 발명의 SEGRAM에 의해 수행되는 기능을 보완하고 보충하는 추가의 근거가 있을 수 있다.
보조 치료의 목적을 위해 사용되는 적합한 보충 치료제는 염증성 장애를 직접적으로 예방 또는 치료, 바람직하게는 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 또는 치료하는 대신에, 기본적인 또는 근본적인 염증성 장애, 바람직하게는 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애로부터 직접적으로 야기되거나 간접적으로 동반되는 질환 또는 병태를 치료하는 약물을 포함한다.
따라서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 단일요법의 형태로 투여될 수 있지만, 본 발명에 따르는 SEGRAM이 하나 이상의 다른 치료제와 조합하여 공동-투여되는 다중 요법의 형태로 사용될 수도 있다.
본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물과 조합하여 투여될 수 있는 다른 활성제의 예는 다음을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다:
(i) 다음을 포함하는 스테로이드성 항염증 약물 (SAID):
a. 천연 글루코코르티코이드, 예를 들어, 코르티손, 코르토독손, 데속시코르톤, 하이드로코르티손, 프레베디올론 아세테이트 및 프레그네놀론;
b. 합성 글루코코르티코이드, 예를 들어, 알클로메타손, 암시노니드, 베클로메타손, 베타메타손, 부데소니드, 클로로프레드니손, 클로로프레드니손, 시클레소니드, 클로베타졸, 클로베타손, 클로코르톨론, 클로프레드놀, 코르티바졸, 데플라자코르트, 데소니드, 데속시메타손, 덱사메타손, 디플로라손, 디플루코르톨론, 디플루프레드네이트, 플루클로롤론, 플루클로롤론, 플루드로코르티손, 플루드록시코르티드, 플루게스톤아세테이트, 플루메타손, 플루니솔리드, 플루오시놀론, 플루오시노니드, 플루오코르틴, 플루오코르톨론, 플루오로메톨론, 플루페롤론, 플루프레드니덴, 플루프레드니솔론, 플루티카손, 포르모코르탈, 할시노니드, 할로메타손, 로테프레드놀, 메드리손, 메프레드니손, 메틸프레드니솔론, 모메타손, 파라메타손, 프레드니카베이트, 프레드니솔론, 프레드니손앤드틱소코르톨, 프레드닐리덴, 리멕솔론, 트리암시놀론, 트리암시놀론 및 울로베타솔;
(ii) 다음을 포함하는 비-스테로이드성 항염증 약물 (NSAID):
a. TNFα 억제제, 예를 들어, 인플릭시맙, 아달리무맙, 세르톨리주맙 페골, 골리무맙, 에타너셉트, 탈리도미드, 레날리도미드 및 포말리도미드;
b. 살리실레이트, 예를 들어, 아목시프린, 아스피린, 베노릴레이트, 디플루니살, 파이살라민, 메살라민 및 메틸 살리실레이트;
c. 기관지확장제, 예를 들어,
i. β2-아드레날린 효능제, 예를 들어, 아베다테롤, 아르포모테롤, 밤부테롤, 클렌부테롤, 포모테롤, 인다카테롤, 올로다테롤, 프로토킬롤, 살메파몰, 살메테롤 및 빌란테롤;
ii. 항콜린제, 예를 들어, 아트로핀, 벤즈트로핀, 비페리덴, 클로르페니라민, 디사이클로민, 디멘하이드리네이트, 디펜하이드아민, 독세핀, 독실라민, 글리코피롤레이트, 이프라트로피움, 오르페나드린, 옥시트로피움, 옥시부티닌, 프로판텔린 브로마이드, 톨테로딘, 티오트로피움, 트리사이클릭 항우울제, 트리헥실페니딜, 스코폴라민, 솔리페나신, 트로피카미드, 부프로피온, 덱스트로메토르판, 독사쿠리움, 헥사메토늄, 메카밀라민 및 튜보쿠라린; 및
iii. 류코트리엔 개질제, 예를 들어 2-TEDC, 바이칼레인, BW-A4C, BW-B70C, 카페인산, 신나밀-3,4-디하이드록시-α-시아노신나메이트 (CDC), CJ-13610, 커큐민, 펜류톤, 하이퍼포린, 하이페리쿰 퍼포라툼, 메클로페나메이트, 미노사이클린, N-스테아로일도파민, 타임가딘, 질류톤, AM-103, AM-679, BAYx1005, MK-591, MK-886, 3-메톡시트로폴론, 루테올린, PD-146176, 아세빌루스타트, 캅토프릴, DG-051, 포시노프릴라트, JNJ-26993135, SA-6541, SC-57461A, 우베니멕스, 17-옥타데신산, 아젤라스틴, 아시비신, 세린-보레이트 착물, 및 실라스타틴;
d. 아릴알칸산, 예를 들어, 2-아릴프로피온산, 디클로페낙, 인도메타신 및 설린닥;
e. 프로펜, 예를 들어, 카프로펜, 페노프로펜, 플루르비프로펜, 이부프로펜, 케토프로펜, 케토롤락, 록소프로펜, 나프록센 및 티아프로펜산;
f. N-아릴안트라닐산, 예를 들어, 페남산, 메페남산 및 메클로페남산;
g. 피라졸리딘 유도체, 예를 들어, 페닐부타존 및 옥시페닐부타존;
h. 옥시캄, 예를 들어, 멜록시캄 및 피록시캄;
i. 콕시브, 예를 들어, 셀레콕시브, 에토리콕시브, 파레콕시브, 로페콕시브 및 발데콕시브;
j. 설폰아닐리드, 예를 들어, 이메설리드;
k. 리폭시게나제 억제제, 예를 들어, 바이칼레인, 카페인산, 에이코사테트라이노산, 에이코사트리이노산, 에스쿨레틴, 플루비프로펜, 고시폴, 5-하이드록시에에코사테트라엔산 (HETE) 락톤, 5(S)-HETE 및 노르디하이드로구아이아레트산;
l. 매크롤라이드 유도체, 예를 들어, 9-(S)-디하이드로에리트로마이신 유도체;
m. 항염증 펩티드 (안티플라민이라고도 함), 예를 들어, 정낭 단백질로부터 유래된 펩티드, 셀렉틴-결합 펩티드, 살균성/투과성-증가 단백질 BPI에 기초한 양이온성 펩티드 및 IL-2 유래 펩티드;
n. 항염증 사이토카인, 예를 들어, IL-1Ra, IL-4, IL-6, IL-10, IL-11 및 IL-13;
o. 전염증성 사이토카인 억제제, 예를 들어, TNFα 억제제 및 IL-18 억제제);
p. 갈렉틴, 예를 들어, 갈렉틴-1;
q. 전염증성 신호전달 분자/사이토카인을 중화시키는 항체, 예를 들어, TNFα, IL-1, IL-18에 대한 항체; 및
r. 스타틴.
상기 조합물은 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물과 하나의 다른 활성제 뿐만 아니라 둘 이상의 활성제의 조합물을 포함한다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물 및 다른 치료 활성제는 다음과 같이 투여될 수 있다:
- 투여형의 측점에서 별도로 또는 서로와 함께 및
- 이들의 투여 시간 측면에서, 연속적으로 또는 동시에.
따라서, 본 발명의 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 투여는 다른 활성제의 투여 전, 투여와 동시에, 또는 투여에 후속적으로 이루어질 수 있다.
방법 및 사용
치료 방법
본 발명은 추가로, 대상체에게 치료적 유효량의 선택적 GR 효능작용 조절제 (SEGRAM)를 투여함을 포함하여, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 대상체에게 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 투여함을 포함하여, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 추가로, 대상체에게 치료적 유효량의 SEGRAM을 투여함을 포함하여, 이를 필요로 하는 대상체에서 향상된 Th1, Th2 및/또는 Th17 활성을 예방 및/또는 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 대상체에게 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 투여함을 포함하여, 이를 필요로 하는 대상체에서 향상된 Th1, Th2 및/또는 Th17 활성을 예방 및/또는 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 추가로, 대상체에게 치료적 유효량의 SEGRAM을 투여함을 포함하여, 이를 필요로 하는 대상체에서 증가된 수준의 분비된 사이토카인 및 항체를 예방 및/또는 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 대상체에게 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물을 투여함을 포함하여, 이를 필요로 하는 대상체에서 증가된 수준의 분비된 사이토카인 및 항체를 예방 및/또는 치료하는 방법에 관한 것이다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물이다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 직접 전사촉진 또는 직접 전사억제 기능 중 어느 것도 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 간접 테더링된 전사억제 기능을 유도한다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다. 하나의 실시양태에서, 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병), 건초열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation), 아나필락시스 (anaphylaxis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만 이에 제한되지 않음), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory disease), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편 대 숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 염증성 장 질환 (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만, 이에 제한되지 않음)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 아토피성 피부염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 접촉성 피부염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 알레르기성 천식을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 건선을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 류마티스 관절염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 궤양성 대장염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 알레르기성 결막염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법은 폐경기-유도된 대사 증후군 및 지방증을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 분비된 사이토카인 및 항체는 IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 및 IgG2a를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된다.
드러난 용도
본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 유효량의 선택적 GR 효능작용 조절제 (SEGRAM)의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 향상된 Th1, Th2 및/또는 Th17 활성을 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 유효량의 SEGRAM의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 향상된 Th1, Th2 및/또는 Th17 활성을 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 증가된 수준의 분비된 사이토카인 및 항체를 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 유효량의 SEGRAM의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 증가된 수준의 분비된 사이토카인 및 항체를 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물의 용도에 관한 것이다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물이다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 직접 전사촉진 또는 직접 전사억제 기능 중 어느 것도 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 간접 테더링된 전사억제 기능을 유도한다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다. 하나의 실시양태에서, 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병), 건초열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation), 아나필락시스 (anaphylaxis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만 이에 제한되지 않음), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory disease), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편 대 숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 염증성 장 질환 (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만, 이에 제한되지 않음)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 아토피성 피부염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 접촉성 피부염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 알레르기성 천식을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 건선을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 류마티스 관절염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 궤양성 대장염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 알레르기성 결막염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 폐경기-유도된 대사 증후군 및 지방증을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 분비된 사이토카인 및 항체는 IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 및 IgG2a를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된다.
목적-제한된 생성물
본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 선택적 GR 효능작용 조절제 (SEGRAM)에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 향상된 Th1, Th2 및/또는 Th17 활성을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 SEGRAM에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 향상된 Th1, Th2 및/또는 Th17 활성을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 증가된 수준의 분비된 사이토카인 및 항체를 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 SEGRAM에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 이를 필요로 하는 대상체에서 증가된 수준의 분비된 사이토카인 및 항체를 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물에 관한 것이다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 에난티오머, 중수소화된 형태, 염, 용매화물 및/또는 전구약물이다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 직접 전사촉진 또는 직접 전사억제 기능 중 어느 것도 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM은 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 간접 테더링된 전사억제 기능을 유도한다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다. 하나의 실시양태에서, 치료적 유효량의 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는다.
하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 Th1-, Th2- 및/또는 Th17-관련 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병), 건초열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation), 아나필락시스 (anaphylaxis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만 이에 제한되지 않음), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory disease), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편 대 숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 염증성 장 질환 (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염을 포함하지만, 이에 제한되지 않음)을 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된 염증성 장애를 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 아토피성 피부염을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 접촉성 피부염을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 알레르기성 천식을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 건선을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 류마티스 관절염을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 궤양성 대장염을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 용도는 알레르기성 결막염을 예방 및/또는 치료하기 위한 것이다. 하나의 실시양태에서, SEGRAM, 본 발명에 따르는 조성물, 약제학적 조성물, 약제 또는 약용화장품 조성물은 폐경기-유도된 대사 증후군 및 지방증을 예방 및/또는 치료하는데 사용하기 위한 것이다.
하나의 실시양태에서, 분비된 사이토카인 및 항체는 IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 and IgG2a를 포함하거나 이들로 구성된 그룹으로부터 선택된다.
도 1은 글루코코르티코이드 (GC)의 결합시 글루코코르티코이드 수용체 (GR)의 세 가지 전사 조절 기능을 보여주는 개략도이고: 좌측에서, 직접 전사촉진은 GC-관련 GR을 시스-작용 양성 GRE ((+)GRE)에 직접 결합시켜 표적 유전자의 발현을 활성화시킨 결과이다. 중간에서, 직접 전사억제는 GC-관련 GR을 특정 유전자의 직접적인 억제를 매개하는 시스-작용 음성 GRE (IR nGRE)에 직접 결합시킨 결과이다. 우측에서, 간접 테더링된 전사억제는 GC-결합된 GR와 전염증성 전사 인자 AP-1 및/또는 NF-κB와의 물리적 상호작용으로부터 야기되어, 이들의 활성을 길항시킨다.
도 2는 (A) [(R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온] [CpdX], 또는 (C) [(R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온] [CpdX-D3]의 합성에 대한 두 개의 개략도; 및 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) 방법을 통한 (B) [(R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소-벤조푸란-1(3H)-온] [CpdX], 또는 (D) [(R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온] [CpdX-D3]의 두 개의 에난티오머의 분리를 보여주는 두 개의 크로마토그램을 포함한다.
도 3은 (A) mTOR 억제제를 암호화하는 GR-전사촉진된 REDD1 유전자로부터; (B) GR 직접-전사억제된 케라틴 5 (K5) 유전자로부터; (C) GR 간접-전사억제된 인터류킨-1β (IL-1β) 유전자로부터; 및 (D) GR 간접-전사억제된 인터류킨-6 (IL-6) 유전자로부터 qRT-PCR 분석에 의해 측정된 (HPRT 하우스키핑 유전자와 비교하여) 나타낸 바와 같은 RNA 전사체의 발현을 보여주는 4개의 히스토그램의 세트이다. RNA 전사체는 (A 및 B의 경우) 에탄올 [비히클], 1 nmole/cm2의 덱사메타손 [Dex], Mapracorat, (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX], CpdX(eA), CpdX(eB), (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3], CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB); (C 및 D의 경우) (A 및 B)에서와 같지만 추가의 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트 [TPA] 처리 (1 nmole/cm2)를 사용한 국소 18-시간-처리 후 마우스 귀로부터 추출하였다. 데이터는 처리당 적어도 3마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 4는 대식세포 염증성 단백질-1β [CCL4], 사이클로옥시게나제-2 [COX2], 콜라게나제 3 [MMP13], 인터류킨-1β [IL1β], 인터류킨-6 [IL6], 종양 괴사 인자 알파 [TNFα], 흉선 기질상 림포포이에틴 [TSLP], 인터류킨-22 [IL22] 및 인터류킨-23 [IL23]을 암호화하는 유전자의 RNA 전사체의 q-RT-PCR 분석에 의해 측정된 상대 RNA 발현을 보여주는 히스토그램이다. Th1-, Th2- 및 Th17-특이 전염증성 인터류킨이 강조된다. RNA 전사체는 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트 단독 [TPA], TPA와 덱사메타손 [TPA+Dex], TPA와 (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [TPA+CpdX], 또는 TPA와 (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [TPA+CpdX-D3]으로의 처리 (1 nmole/cm2)에 의한 접촉성 피부염-유사 염증의 유도 후 마우스 귀 피부 샘플로부터 추출하였다. 데이터는 처리당 적어도 3마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 5는 인터류킨-1β [IL1β], 인터류킨-6 [IL6], 사이클로옥시게나제-2 [COX2] 및 종양 괴사 인자 알파 [TNFα]를 암호화하는 유전자의 RNA 전사체의 q-RT-PCR 분석에 의해 측정된 상대 RNA 발현의 히스토그램이다. RNA 전사체는 도 4에 기술된 바와 같이 마우스 귀 피부 샘플로부터 추출하였다. 덱사메타손 [Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)-펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX], 뿐만 아니라 (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}-이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3]을 에탄올 (EtOH)(1 nmole/cm2) 또는 크림 (0.05%)으로 투여하였다. 데이터는 처리당 적어도 3마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 6은 도 5에서 처리된 바와 같은 마우스의 피부 절편을 보여주는 8개의 현미경 사진의 세트이다. 마우스 귀 피부 절편을 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 기준자는 20 μm를 나타낸다.
도 7은 콜라게나제 3 [MMP13], 사이클로옥시게나제-2 [COX2], 인터류킨-1β [IL1β], 인터류킨-6 [IL6], 인터류킨-10 [IL10], 인터류킨-13 [IL13] 및 흉선 기질상 림포포이에틴 [TSLP]을 암호화하는 유전자의 RNA 전사체의 q-RT-PCR 분석에 의해 측정된 상대 RNA 발현을 보여주는 히스토그램이다. Th2-특이 전염증성 인터류킨이 강조된다. RNA 전사체는 아토피성 피부염-유사 염증의 유도 및 칼시포트리올 단독 [MC903], 칼시포트리올과 덱사메타손 [MC903+Dex], 칼시포트리올과 (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [MC903+CpdX], 칼시포트리올과 CpdX(eA) [MC903+CpdX(eA)], 칼시포트리올 및 CpdX(eB) [MC903+CpdX(eB)], 칼시포트리올과 (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [MC903+CpdX-D3], 칼시포트리올과 CpdX-D3(eA) [MC903+CpdX-D3(eA)] 또는 칼시포트리올과 CpdX-D3(eB) [MC903+CpdX-D3(eB)]으로의 처리 (1 nmole/cm2) 후 마우스 귀 피부 샘플로부터 추출하였다. 데이터는 처리당 적어도 3마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 8은 도 7에서와 같이 처리된 마우스의 피부 절편을 보여주는 8개의 현미경 사진의 세트이다. 마우스 귀 피부 절편을 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 기준자는 20 μm를 나타낸다.
도 9는 (A) 기관지폐포 세척액 [BAL]에서의 세포 수 및 (B) 난백알부민 (OVA)에 의한 18일의 감작에 이은 OVA를 단독으로 [OVA] 또는 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [OVA+Dex] 또는 (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [OVA+CpdX]과 함께 사용한 3일간의 챌린지를 포함하는 천식-유사 폐 염증의 22일 유도 후 마우스 폐 샘플로부터 추출된 RNA 전사체의 q-RT-PCR 분석에 의해 측정된 상대 RNA 발현을 보여주는 두 개의 히스토그램의 세트이다. (A): 총 세포, 호산구, 호중구, 대식세포 및 림프구의 수 (x105)가 보고된다. (B): 인터류킨-1β [IL1β], 인터류킨-6 [IL6], 인터류킨-4 [IL4], 인터류킨-5 [IL5], 인터류킨-10 [IL10], 인터류킨-13 [IL13], 에오탁신 [Eotaxin], 대식세포 염증성 단백질-1β [CCL4] 및 종양 괴사 인자 알파 [TNFα]를 암호화하는 유전자의 상대 RNA 발현이 보고된다. Th2- 및 Th1-특이 전염증성 인터류킨이 강조된다. 데이터는 처리당 적어도 6마리의 마우스의 평균 ± SEM로 표시된다. OVA 처리와 비교한 통계적 유의도는 스튜던트 t 검정에 의해 계산하였다; (*) p<0,05; (**) p<0,01; (***) p<0,001.
도 10은 도 9에 기술된 바와 같이 난백알부민 (OVA)에 의한 18일의 감작에 이은 3일간의 챌린지 후 난백알부민-유도된 천식-유사 폐 염증을 보여주는 3개의 현미경 사진의 세트이다. 폐 절편을 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 기관지주위 (B) 및 혈관주위 (V) 영역이 표시된다. 기준자는 40 μm를 나타낸다.
도 11은 (A-B) 기관지폐포 세척액 [BAL]에서의 세포 수 및 (C-D) 집먼지 진드기 (HDM)로의 28일 감작에 이은 3일간의 HDM 챌린지를 단독으로 [HDM] 또는 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [HDM+Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [HDM+CpdX], CpdX(eA) [HDM+CpdX(eA)], CpdX(eB) [HDM+CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [HDM+CpdX-D3], CpdX-D3(eA) [HDM+CpdX-D3(eA)] 또는 CpdX-D3(eB) [HDM+CpdX-D3(eB)]과 함께 사용한 천식-유사 폐 염증의 유도 후 D32에서 마우스 폐 샘플로부터 추출된 RNA 전사체의 q-RT-PCR 분석에 의해 측정된 상대 RNA 발현을 보여주는 4개의 히스토그램의 세트이다. (A-B): 총 세포, 호산구, 호중구, 대식세포 및 림프구의 수 (x105)가 보고된다. (C-D): 인터류킨-1β [IL1β], 인터류킨-6 [IL6], 인터류킨-4 [IL4], 인터류킨-5 [IL5], 인터류킨-13 [IL13], 에오탁신 [Eotaxin] 및 대식세포 염증성 단백질-1β [CCL4]를 암호화하는 유전자의 상대 RNA 발현이 보고된다. Th2-특이 전염증성 인터류킨이 강조된다. 데이터는 처리당 적어도 4마리의 마우스로 적어도 3회 독립적인 실험의 평균 ± SEM로 표시된다. HDM 처리와 비교한 통계적 유의도는 스튜던트 t 검정에 의해 계산하였다; (*) p<0,05; (**) p<0,01; (***) p<0,001; (ns) 유의하지 않음.
도 12는 HDM에 의한 28일의 감작에 이은 도 11에 기술된 바와 같은 3일간의 챌린지 후 집먼지 진드기 (HDM)-유도된 천식-유사 폐 염증을 보여주는 8개의 현미경 사진의 세트이다. 폐 절편을 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 기관지주위 (B) 및 혈관주위 (V) 영역이 표시된다. 기준자는 40 μm를 나타낸다.
도 13은 집먼지 진드기 (HDM)-유도된 천식-유사 폐 염증이 HDM으로의 28일의 감작에 이은 도 11에 기술된 바와 같은 3일간의 챌린지에 의해 유도된 마우스의 메타콜린 (MCh, 50 mg/mL)에 대한 기도 과민반응성을 보여주는 두 개의 히스토그램의 세트이다. (A) 기도 저항성, (B) 기도 탄력성. 데이터는 처리당 적어도 8마리의 마우스를 사용한 평균 ± SEM로 표시된다. HDM 처리 자체와 비교한 통계적 유의도는 이원 ANOVA에 이은 본페로니 다중 비교를 통해 계산하였다; (**) p<0,01; (***) p<0,001; (****) p<0,0001; (ns) 유의하지 않음.
도 14는 인터류킨-17a [IL17a], 인터류킨-17c [IL17c], 인터류킨-17f [IL17f] 및 인터류킨-22 [IL22]를 암호화하는 유전자의 RNA 전사체의 q-RT-PCR 분석에 의해 측정된 상대 RNA 발현을 보여주는 히스토그램이다. RNA 전사체는 에탄올 [Aldara+비히클], 1 nmole/cm2 덱사메타손 [Aldara+Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [Aldara+CpdX], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [Aldara+ CpdX-D3]으로의 마지막 5일간의 국소 처리를 포함한 Aldara®-유도된 건선-유사 염증의 9일 유도 후 마우스 귀 피부 샘플로부터 추출하였다. Th17-특이 전염증성 인터류킨이 강조된다. 데이터는 처리당 적어도 3마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 15는 도 14에 기술된 바와 같은 5일 국소 처리 후 Aldara®-생성된 건선-유사 피부 염증을 보여주는 5개의 현미경 사진의 세트이다. 마우스 귀 피부 샘플을 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 기준자는 20 μm를 나타낸다.
도 16은 콜라겐-유도된 관절염-유사 염증이 유발되고 (T0, 좌측 패널), NaCl 0,9% [비히클], 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)-펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3]으로의 10일 (T10) 복강내 투여 (오른쪽 패널)로 처리된 마우스의 뒷발을 보여주는 8개의 현미경 사진의 세트이다.
도 17은 관절염-유사 염증의 유도 (T0에서) 및 (A) NaCl 0,9% [비히클], 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX] 또는 (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)-펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3]; 및 (B) [CpdX-(eA)], [CpdX(eB)], [CpdX-D3(eA)] 또는 [CpdX-D3(eB)]로의 10일간의 복강내 투여 (T10) 후 마우스의 뒷발 (발목 수준에서)의 두께 (mm 단위)를 보여주는 2개의 그래프의 세트이다. 데이터는 처리당 적어도 6마리의 마우스를 사용한 평균 ± SEM으로 표시된다. Dex 처리와 비교한 통계적 유의도는 스튜던트 t 검정에 의해 계산하였다. (*) p<0,05; (ns)는 Dex-처리된, CpdX-처리된 및 CpdX-D3-처리된 마우스 사이에 관찰된 차이가 유의하지 않음을 나타낸다.
도 18은 인터류킨-1β [IL1β], 인터류킨-6 [IL6], 인터류킨-17a [IL17a], 인터류킨-17f [IL17f] 및 종양 괴사 인자 알파 [TNFα]의 RNA 전사체의 q-RT-PCR 분석에 의해 측정된 상대 RNA 발현을 보여주는 히스토그램이다. 총 RNA 전사체는 도 17에 기술된 바와 같은 10일 처리 전 (T0) 또는 10일 처리 후 (T10) 마우스 전체 뒷발로부터 추출하였다. Th17- 및 Th1-특이 전염증성 인터류킨이 강조된다. 데이터는 처리당 적어도 6마리의 마우스를 사용한 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 19는 정상 결장 절편 [DSS 처리 없음] 및 NaCl 0,9% [DSS+비히클], 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [DSS+Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시-페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온 [DSS+CpdX] 또는 (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로-페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)-펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [DSS+CpdX-D3]의 복강내 투여로 D11, D12 및 D13에 처리된 마우스로부터의 절편과 비교하여 13일 DSS (3% 덱스트란 나트륨 설페이트) 처리에 의해 유도된 궤양성 대장염을 보여주는 결장 절편 (각각 50 μm 또는 20 μm을 나타내는 기준자로 2배 확대)의 10개의 현미경 사진의 세트이다. 결장 절편은 초기에 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 실선 화살표: 점막 염증 세포 침윤; 점선 화살표: 점막하 염증성 세포 침윤; 화살촉 : 궤양화.
도 20은 인터류킨-1β [IL1β], 인터류킨-6 [IL6], 인터류킨-17a [IL17a], 인터류킨-17f [IL17f], 흉선 기질상 림포포이에틴 [TSLP] 및 콜라게나제 3 [MMP13]을 암호화하는 유전자의 RNA 전사체의 비교 q-RT-PCR 분석을 보여주는 히스토그램이다. Th17- 및 Th2-특이 전염증성 인터류킨이 강조된다. RNA 전사체는 D11, D12 및 D13에 NaCl 0,9% [DSS+비히클], 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [DSS+Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온 [DSS+CpdX], CpdX(eA) [DSS+CpdX(eA)], CpdX(eB) [DSS+CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [DSS+CpdX-D3], CpdX-D3(eA) [DSS+CpdX-D3(eA)] 또는 CpdX-D3(eB) [DSS+CpdX-D3(eB)]의 복강내 투여와 함께 13일 동안의 (식수 중의) 3% DSS로 경구-처리된 마우스의 결장 샘플로부터 추출하였다. 데이터는 처리당 적어도 4마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 21은 (A) 14일의 OVA 감작에 이은 NaCl 0,9% (비히클) 또는 OVA로의 10일 챌린지를 포함하는 난백알부민 (OVA)-유도된 알레르기성 결막염의 유도시, 24일째 마지막 처리한지 20분 후 마우스 눈의 임상적 외관을 보여주는 9개의 현미경 사진의 세트이다. 22, 23 및 24일째에, OVA-챌린지된 마우스 눈을 NaCl 0,9% [OVA], 0.1%의 덱사메타손 [OVA+Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [OVA+CpdX], CpdX-(eA) [OVA+CpdX(eA)], CpdX(eB) [OVA+CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [OVA+CpdX-D3], CpdX-D3(eA) [OVA+CpdX-D3(eA)] 또는 CpdX-D3(eB) [OVA+CpdX-D3(eB)]로 공동-처리하였다; 및 (B) (A) 하에 기술된 바와 같이 처리된 마우스 눈의 임상 스코어 (결막성 충혈, 눈꺼풀 부종 및 눈물)를 보여주는 그래프이다. 스코어링을 수행하였으며, 각 파라미터는 0 내지 3의 범위로 등급을 매겼다 (0 = 부재, 1 = 경미, 2 = 중등도 및 3 = 중증 증상). 따라서, 각각의 동물은 0 내지 9 범위의 총 임상 스코어를 받았으며, 데이터는 처리당 적어도 4마리의 마우스를 사용한 평균 ± SEM으로 표현되었다.
도 22는 (A) Kindlin-1 (nGRE-함유 유전자) 및 (B) REDD1 (+GRE-함유 유전자) 유전자의 RNA 전사체의 (q-RT-PCR 분석에 의해 측정된) 상대 발현을 보여주는 두 개의 히스토그램의 세트이다. 마우스를 등 피부를 면도한 다음 에탄올 [비히클], 1 nmole/cm2의 덱사메타손 [Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]-이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX], [CpdX(eA)], [CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}-이소벤조푸란-1-(3H)-온 [CpdX-D3], [CpdX-D3(eA)] 또는 [CpdX-D3(eB)]로 8일간 국소 처리하였다. 데이터는 처리당 적어도 3마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 23은 등 피부를 면도한 다음 도 22에 기술된 바와 같이 8일 동안 국소 처리한 마우스에서 표피 두께 (μm 단위)의 형태적 분석을 보여주는 히스토그램이다. 데이터는 처리당 적어도 3마리의 마우스로 적어도 3회의 독립적인 실험의 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 24는 등 피부를 면도한 다음 도 22에 기술된 바와 같이 국소 처리한 마우스에서 피부 위축을 보여주는 16개의 현미경 사진의 세트이다. 좌측 패널: 피부 샘플을 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다. 우측 패널: 핵을 DAPI로 염색하였다. 기준자는 20 μm를 나타낸다.
도 25는 마이크로CT에 의해 측정된 5개의 피질 골 파라미터에 대한 10개의 그래프의 세트이다 : (A) 골 용적/총 용적 (%); (B) 피질 두께 (mm); (C) 총 면적 (mm2); (D) 골 면적 (mm2) 및 (E) 골수 면적 (mm2). 8주령 마우스를 NaCl 0,9% [비히클], 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX], [CpdX(eA)], [CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3], [CpdX-D3(eA)] 또는 [CpdX-D3(eB)]의 매일 피하 주사로 3개월 동안 처리하였다. FX 양자 마이크로-CT 스캐너 (Perkin Elmer)를 사용하여 경골 중간축에서 측정을 수행하였다. 데이터는 처리당 적어도 6마리의 마우스에 대한 평균 (화살촉에 의해 표시됨) ± SEM에 해당한다. 비히클 처리와 비교한 통계적 유의도는 일원 ANOVA 검정에 이은 Dunnett의 다중 비교 검정을 통해 계산하였다; (*) p<0,05; (**) p<0,01 (***) p<0,001; (****) p<0,0001; (ns): 유의하지 않음.
도 26은 마우스 경골에서 Wnt16 유전자의 RNA 전사체의 (q-RT-PCR 분석에 의해 측정된) 상대 발현을 보여주는 히스토그램이다. 8주령 마우스를 도 25에 나타낸 바와 같이 처리하였다. 데이터는 처리당 적어도 6마리의 마우스를 사용한 평균 ± SEM으로 표시된다.
도 27은 NaCl 0,9% [비히클], 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [Dex], (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX] 또는 (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3]의 매일 피하 주사로 추가 3개월 동안 제시된 바와 같이 처리된 8주령 마우스의 (A) 체중, (B) 지방 퍼센트 및 (C) 제지방 퍼센트의 (처리 전) 기준선으로부터의 변화를 보여주는 3개의 그래프의 세트이다. 데이터는 처리당 적어도 9마리의 마우스에 대한 (화살촉이 가리키는 바와 같은) 평균 ± SEM에 해당한다. 통계적 유의도는 Krustal-Walis 검정에 이은 Dunn의 다중 비교 검정를 통해 계산하였다; (*) p<0,05; (**) p<0,01 (***) p<0,001.
도 28은 NaCl 0,9% [비히클], 1 mg/kg 체중의 덱사메타손 [Dex] 또는 (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX], [CpdX(eA)], [CpdX-(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로-메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3], [CpdX-D3(eA)] 또는 [CpdX-D3(eB)]의 매일 피하 주사로 추가 3개월 동안 처리된 8주령 마우스의 (A) 흉선, (B) 비장, (C) 부신 및 (D) 신장의 중량 (그램 단위)을 보여주는 4개의 히스토그램의 세트이다. 데이터는 처리당 적어도 9마리의 마우스에 대한 평균 ± SEM로 표시된다. 통계적 유의도는 스튜던트 t 검정에 의해 계산하였다; (*) p<0,05.
도 29는 도 27에 나타낸 바와 같이 처리된 8주령 마우스의 부신의 절편을 보여주는 (기준자가 각각 50 μm 또는 25 μm을 나타내는 두 개의 상이한 배율에서) 8개의 현미경 사진의 세트이다. 부신의 피질 층은 양방향 화살표로 왼쪽 패널에 표시되는 반면 피질의 속상대 및 구상대는 각각 오른쪽 패널에 긴 굵은 양방향 화살표 및 작은 빈 양방향 화살표로 표시된다.
도 30은 도 28에 나타낸 바와 같이 처리된 8주령 마우스에서의 코르티코스테론 합성을 보여준다. (A): 스테로이드 11α-하이드록실라제 (Cyp11a), 스테로이드 11β-하이드록실라제 (Cyp11b1), 3β-하이드록시스테로이드 데하이드로게나제 (HSD3β) 및 알도스테론 신타제 (Cyp11b2) 유전자의 (q-RT-PCR 분석에 의해 결정된 바와 같은) RNA 전사체의 마우스 부신에서의 상대 발현; (B): 제시된 바와 같이 처리된 마우스에서 10 a.m. 및 6 p.m.의 혈장 코르티코스테론 수준. 데이터는 처리당 적어도 9마리의 마우스에 대한 평균 ± SEM로 표시된다.
도 31은 도 28에 나타낸 바와 같이 처리된 8주령 마우스에서의 혈중 글루코스 수준 (mg/dL)을 보여주는 두 개의 히스토그램의 세트이다. (A) : 밤새 14시간 금식 후 혈장 글루코스 수준; (B): 글루코스 i.p. 주사 (2 mg/kg 체중) 후 2시간 복강내 글루코스 내성 검사 (IPGTT). 데이터는 처리당 적어도 6마리의 마우스에 대한 평균 ± SEM로 표시된다. 비히클 처리와 비교한 통계적 유의도는 스튜던트 t 검정에 의해 계산하였다; (*) p<0,05; (**) p<0,01.
도 32(A)는 도 28에 나타낸 바와 같이 처리된 8주령 마우스에서의 혈중 인슐린 수준 (μg/L)을 보여주는 히스토그램이다. 데이터는 처리당 적어도 9마리의 마우스에 대한 평균 ± SEM로 표시된다. (B): 0,75 U 인슐린/kg 체중의 복강내 주사 후 1시간 복강내 인슐린 내성 검사 (IPITT). 데이터는 처리당 적어도 6마리의 마우스에 대한 평균 ± SEM로 표시된다. 비히클 처리와 비교한 통계적 유의도는 스튜던트 t 검정에 의해 계산하였다, * p<0,01. (C): 세린 318에서 인산화된 포스 포-인슐린 수용체 기질-1 (p-IRS1 S318), pan-인슐린 수용체 기질-1 (IRS 총), 세린 473에서 인산화된 포스포-단백질 키나제 B (p-AKT S473) 및 pan-단백질 키나제 B (AKT 총) 단백질에 대한 마우스 간 샘플의 웨스턴 블롯 분석.
도 33은 도 28에 나타낸 바와 같이 처리된 8주령 마우스의 간에서 (동결된 간 절편의 5% 레드 오일 염색에 의해 밝혀진) 선택적 지질 침착을 보여주는 (2배율에서의) 16개의 현미경 사진의 세트이다.
도 34는 마우스 간에서 지방산 신타제 (FASN) 및 스테아로일-CoA 탈포화효소-1 (SCD1)의 전사체의 상대 RNA 발현 (q-RT-PCR 분석)을 보여주는 두 개의 히스토그램의 세트이다. 8주령 마우스를 도 28에 나타낸 바와 같이 처리하였다. 데이터는 처리당 적어도 9마리의 마우스에 대한 평균 ± SEM에 해당한다. 통계적 유의도는 스튜던트 t 검정에 의해 계산하였다; (**) p<0,01; (***) p<0,001.
도 35는 도 28에 나타낸 바와 같이 처리된 8주령 마우스로부터의 혈액에서 총 콜레스테롤 수준 (mmol/L) 및 담즙산 수준 (μmol/L)을 보여주는 두 개의 히스토그램의 세트이다. 데이터는 처리당 적어도 9마리의 마우스에 대한 평균 ± SEM으로 표시된다.
실시예
본 발명은 하기 실시예에 의해 추가로 예시된다.
실시예 1: CpdX 및 CpdX -D3의 합성 및 이들의 에난티오머의 분리
" 라세미 " CpdX 합성 및 이의 에난티오머 CpdX ( eA ) 및 CpdX(eB)의 분리
소위 화합물 CpdX {(R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온}의 라세미 혼합물을 99.5% 순도로 도 2a에 요약된 바와 같이 합성하였으며, 이의 정체는 LCMS (MS+1=442.1), HPLC, HNMR 및 FNMR에 의해 확인하였다.
그후, CpdX의 라세미 혼합물 300mg을 분취용 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) AD 컬럼 (250 mm * 30 mm * 5 μm; 이동상: Neu-MeOH; B%: 20%-20%, 2.3분)를 통해 통과시켰다.
그후 첫 번째 용출 피크 (CpdX 피크1, 도 2b)에 해당하는 수집된 분획을 30℃에서 감압하에 농축시키고, 동결건조시키고 Phenomenex Synergi C18 컬럼 크로마토그래피 [150 mm * 25mm * 10 μm; 이동상: 물 (0.1% TFA)-ACN; B%: 50%-80%, 10분]를 통해 추가로 정제하였다. 수집된 분획을 30℃에서 감압하에 농축시키고 백색 고체 (97.77 mg)로서 동결건조시켰으며, 이의 정제는 LCMS (MS+1=442.1) 및 SFC (체류 시간 (RT) = 1.084 mins)에 의해 확인하였고, "CpdX(eA)" 에난티오머 (97.6% 순도)로서 명명하였다 (표 1).
두 번째 용출 피크 (CpdX 피크2, 도 2b)에 해당하는 수집된 분획을 유사하게 30℃에서 감압하에 농축시키고, 동결건조시키고 Phenomenex Synergi C18 컬럼 크로마토그래피 [150 mm * 25 mm * 10 μm); 이동상: 물 (0.1% TFA)-ACN; B%: 51%-81%, 12분]에 의해 추가로 정제하였다. 수집된 분획을 30℃에서 감압하에 농축시키고 백색 고체 (101.72 mg)로서 동결건조시켰으며, 이의 정제는 LCMS (MS+1=442.1) 및 SFC (RT = 1.147분)에 의해 확인하였고, 98% 순도를 갖는 "CpdX(eB)" 에난티오머로서 명명하였다 (표 1).
추가 분석은 두 개의 에난티오머 CpdX(eA) 및 CpdX(eB) 중 어느 것이 각각 R 및 S 형태에 해당하는지를 결정할 것이다.
Figure pct00014
" 라세미 " CpdX -D3 합성 및 이의 에난티오머 CpdX -D3( eA ) 및 CpdX -D3( eB )의 분리
중수소화된 화합물 {(R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온}에 해당하는 소위 중수소화된 화합물 CpdX-D3의 라세미 혼합물을 99.3% 순도 및 98.83% 중수소 함량으로 도 2c에 요약된 바와 같이 합성하였으며, 이의 정체는 LCMS (MS+1=445), HPLC, HNMR 및 FNMR에 의해 확인하였다.
그후 84.4 mg의 CpdX-D3을 분취용 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC) DAICEL CHIRALPAK AD-H 컬럼 (250 mm * 30 mm * 5 μm; 이동상: 0.1% NH3H2O-MEOH; B%: 20%-20%, 2.3분)을 통해 통과시켰다.
첫 번째 용출 피크 (CpdX-D3 피크1)에 해당하는 수집된 분획을 30℃에서 감압하에 농축시키고 백색 고체 (32.41 mg)로서 동결건조시켰으며, 이의 정체를 LCMS (MS+1=445) 및 SFC (RT = 1.082분)에 의해 확인하였고, 98.7% 순도를 갖는 에난티오머 "CpdX-D3(eA)"로서 명명하였다.
두 번째 용출 피크 (CpdX-D3 피크2)에 해당하는 수집된 분획을 30℃에서 감압하에 농축시키고 백색 고체 (31.06 mg)로서 동결건조시켰으며, 이의 정체를 LCMS (MS+1=445) 및 SFC (RT = 1.149분)에 의해 확인하였고, 99.1% 순도를 갖는 "CpdX-D3(eB)" 에난티오머로서 명명하였다 (도 2d).
추가 분석은 두 개의 에난티오머 CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB) 중 어느 것이 각각 R 및 S 형태에 해당하는지를 결정할 것이다.
실시예 2: Mapracorat /ZK245186과 달리, CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 및 CpdX -D3( eB )는 진짜의(bona fide) 비스테로이드성 선택적 GR 효능작용 조절제 ( SEGRAM )이다 (도 3 참조)
재료 및 방법
Balb/C 마우스의 귀를 1 nmole/cm2의 다음 물질로 18시간 동안 밤새 처리하였다:
- 에탄올 [비히클],
- 덱사메타손 [Dex],
- Mapracorat,
- (R/S)-5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX],
- 5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)-펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 에난티오머 A [CpdX(eA)],
- 5-[4-(5-플루오로-2-메톡시페닐)-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)-펜틸아미노]이소벤조푸란-1(3H)-온 에난티오머 B [CpdX(eB)],
- (R/S)-5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 [CpdX-D3],
- 5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 에난티오머 A [CpdX-D3(eA)], 또는
- 5-{4-[2-(메톡시-D3)-5-플루오로페닐]-2-하이드록시-4-메틸-2-(트리플루오로메틸)펜틸아미노}이소벤조푸란-1(3H)-온 에난티오머 B [CpdX-D3(eB)].
그후, 마우스 귀로부터 RNA 전사체를 추출하고 4개의 유전자의 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다:
(i) mTOR 억제제 REDD1의 직접적으로 GR-전사촉진된 유전자,
(ii) 케라틴 5 (K5)의 GR-직접적으로 전사억제된 유전자 및
(iii) 둘 다 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트 (TPA)의 존재하에서 활성화되는 인터류킨-1β (IL-1β) 및 인터류킨-6 (IL-6)의 GR-간접적으로 "테더링된" 전사억제된 유전자.
결과
Dex 또는 Mapracorat로 처리시, 생체내 전사 분석에서는 Mapracorat는 Dex와 마찬가지로 REDD1 유전자의 유사한 전사촉진 (도 3a), K5 유전자의 유사한 직접 전사억제 (도 3b), 및 IL-1β (도 3c) 및 IL-6 (도 3d) 유전자의 유사한 간접 전사억제와 함께, 세 가지 모든 GR 기능 (직접 전사촉진, 직접 전사억제 및 간접 테더링된 전사억제, 도 1에 요약됨)을 유도하는 것으로 나타났다.
반대로, GR은 대조군 (비히클)과 비교하여, CpdX의 생체내 투여시 간접 테더링된 전사억제 활성과 REDD1 및 K5 유전자에 대한 변하지 않은 상대 RNA 발현 수준을 선택적으로 나타낸다. 유사한 결과는 또한 CpdX(eA) 또는 CpdX(eB), 또는 이들의 중수소화된 대응물 CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)의 투여시에도 수득되었다.
결론
Mapracorat는 비스테로이드성 선택적 GR 효능작용 조절제 (SEGRAM)가 아니며, 이것은 Mapracorat가 - 비록 더 적은 정도일 수 있지만 - Dex 치료시 현재 발생하는 부작용과 유사한 부작용을 보일 수 있음을 나타낸다.
뚜렷이 대조적으로, CpdX 및 이의 두 개의 에난티오머 CpdX(eA) 및 CpdX(eB)는, 선의의 SEGRAM에 대해 예상되는 바와 같이, GR의 간접 테더링된 전사억제 활성을 선택적으로 나타낸다. 가장 흥미롭게도, 중수소화된 CpdX (CpdX-D3) 및 이의 두 개의 에난티오머 [CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)]는 이들의 CpdX 대응물과 동일한 선택성 및 항염증 특성을 나타낸다.
실시예 3: CpdX 및 CpdX -D3은 TPA-유도된 자극성 접촉 피부염-유사 T h 1/T h 2/T h 17 염증을 감소시키는데 덱사메타손 ( Dex )만큼 효율적이다 (도 4 참조)
재료 및 방법
Balb/C 마우스 귀를 TPA로 국소 처리하여 "자극성 접촉 피부염-유사 염증"을 유도하였다.
마우스를 TPA로 4일 동안 처리한 다음 비히클, TPA 단독, TPA와 Dex, TPA와 CpdX 또는 TPA와 CpdX-D3으로 (D9까지) 추가로 5일 동안 처리하였다.
D10에, 마우스 귀 피부 샘플로부터 RNA 전사체를 추출하고 CCL4, COX2, MMP13, IL-1β, IL-6, TNF-α, TSLP, IL-22 및 IL-23의 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 귀 피부를 수확하고, (H&E 염색으로) 조직학적 및 (항-TSLP 항체로) 면역조직화학적 분석을 수행하였다.
결과
TPA-유도된 피부 염증은 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3으로의 처리에 의해 유의적으로 감소하였다.
이들 마우스로부터의 귀 추출물을 사용한 전사체 분석에서는 CpdX 및 CpdX-D3이 전염증성 유전자의 TPA-유도된 전사를 Dex만큼 효율적으로 억제하는 것으로 나타났다 (도 4).
마우스 귀 피부의 조직학적 분석은 TPA-유도된 귀 피부 염증이 대조군과 비교하여 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3으로의 처리에 의해 유의적으로 감소되었음을 보여 주었다 (데이터는 나타내지 않음).
TSLP-특이 항체를 사용한 면역화학 분석은 TPA-처리된 마우스 표피에서의 TSLP의 발현이 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3 처리에 의해 유사하게 강하게 감소되었음을 보여 주었다 (데이터는 나타내지 않음).
결론
종합하면, 이러한 결과는 CpdX 및 CpdX-D3이 유도된 피부 염증을 Dex만큼 효율적으로 억제한다는 것을 입증하며, 이것은 이들 둘 다가 피부 염증의 치료, 특히 접촉성 피부염과 같은 Th1/Th2/Th17-관련 염증성 장애의 치료에 사용될 수 있음을 나타낸다.
실시예 4: 크림 제형 또는 에탄올 ( EtOH )로의 Dex , CpdX 또는 CpdX -D3의 국소 투여는 유사한 항염증 활성을 야기한다 (도 5 및 6 참조)
재료 및 방법
Balb/C 마우스 귀를 먼저 3일 동안 TPA로 국소 처리한 다음 에탄올 (1　nmole/cm2)로 또는 바셀린, 액체 파라핀, Emulgade® 1000 NI (BASF), 프로필 갈레이트, 나트륨 에데테이트, 소르브산 및 정제수로 구성된 크림 (0,05% w/w)으로 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3의 부재 또는 존재하에 3일간 공동-처리하였다.
마우스 귀 피부 샘플로부터 RNA 전사체를 추출하고 IL-1β, IL-6, COX2 및 TNF-α의 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 귀 피부를 수확하고 (H&E 염색으로) 조직학적 분석을 수행하였다.
결과
귀 추출물의 전사체 분석은 에탄올로 또는 크림 제형으로 투여된 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3에 의한 전염증성 유전자의 유사한 억제를 나타냈다 (도 5). 마우스 귀 피부의 조직학적 분석은 유사한 항염증 효과를 확인시켜 주었다 (도 6).
결론
에탄올로 또는 크림 제형으로 투여된 CpdX 및 CpdX-D3은 피부 염증의 치료에서 동일한 항염증 효과를 갖는다.
실시예 5: CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 및 CpdX -D3( eB )은 칼시포트리올 (MC 903)-유도된 아토피성 피부염-유사 T h 2 염증을 감소시키는데 덱사메타손 ( Dex )만큼 효율적이다 (도 7 및 8 참조)
재료 및 방법
생체내 CpdX 항염증 활성을 조사하기 위해, 아토피성 피부염 (AD)-유사 염증을 유발하기 위해 Balb/C 마우스 귀를 칼시포트리올 (MC 903, 비타민 D3 유사체)로 국소 처리하였다 (Li et al., 2006. Proc Natl Acad Sci U S A. 103(31):11736-41).
마우스를 MC 903으로 14일 동안 처리한 다음 (D22까지) 추가로 8일 동안 MC 903 단독 (대조군), MC 903과 Dex, MC 903과 CpdX, MC 903과 CpdX(eA), MC 903과 CpdX(eB), MC 903과 CpdX-D3, MC 903과 CpdX-D3(eA) 및 MC 903과 CpdX-D3(eB)으로 처리하였다.
D23에, 마우스 귀 피부 샘플로부터 RNA 전사체를 추출하고 7개의 사이토카인 (MMP13, COX2, IL-1β, IL-6, IL-10, IL-13 및 TSLP)의 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 귀 피부를 수확하고 (H&E 염색으로) 조직학적 및 (항-TSLP 항체로) 면역조직화학적 분석을 수행하였다.
결과
MC 903-유도된 피부 염증은 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3으로의 처리에 의해 유의적으로 감소하였다.
이들 마우스로부터의 귀 추출물의 RNA 전사체 분석에서는 CpdX 및 CpdX-D3이 Th2 염증의 전염증성 유전자 (IL-10, IL-13 및 TSLP)를 포함한 각종 전염증성 유전자 (MMP13, COX2, IL-1β, IL-6, IL-10, IL-13 및 TSLP)의 MC 903-유도된 전사를 Dex만큼 효율적으로 억제하는 것으로 나타났다 (도 7).
마우스 귀 피부의 조직학적 분석은 MC 903-유도된 귀 피부 염증이 대조군과 비교하여 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3으로의 처리에 의해 감소되었음을 보여 주었다 (도 8).
TSLP-특이 항체를 사용한 면역조직화학 분석은 MC 903-처리된 마우스 표피에서의 TSLP 림포카인의 발현이 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3에 의해 유사하게 강하게 감소됨을 보여 주었다 (데이터는 나타내지 않음).
유사한 결과는 또한 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)로의 처리에 대해서도 관찰되었다 (도 7 및 8).
결론
종합하면, 이러한 결과는 CpdX, 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3 또는 임의의 이들의 에난티오머 [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)]의 국소 투여가 피부 염증을 Dex만큼 효율적으로 감소시킨다는 것을 입증하며, 이것은 이들 모두가 피부 염증의 치료, 특히 아토피성 피부염과 같은 Th2-관련 염증성 장애의 치료에 유용함을 나타낸다.
실시예 6: CpdX ( eB ) 또는 CpdX -D3( eB )은 그렇지 않지만, CpdX , CpdX ( eA ), CpdX-D3 및 CpdX -D3( eA )는 천식-유사 폐 알레르기성 T h 2 염증을 감소시키는데 덱사메타손 ( Dex )만큼 효율적이다 (도 9 내지 13 참조)
재료 및 방법
글루코코르티코이드 (Pearlman et al., 1997. Ann Allergy Asthma Immunol. 78(4):356-62)는 여전히 천식 치료법에 널리 사용된다. 생체내에서 가능한 CpdX 항염증 활성을 조사하기 위해, 마우스를 감작시키고 난백알부민 (OVA) 또는 집먼지 진드기 (HDM)로 챌린지시켜 천식-유사 알레르기성 폐 염증을 유도하였다.
백알부민 감작 및 챌린지
마우스를 D0, D7 및 D14에서 명반과 함께 50 μg OVA로 또는 명반 단독으로 복강내 감작시켰다. 그후 마우스를 3개의 그룹으로 세분화하고, D19, D20 및 D21에, 이들을 10 μg OVA로 비강내 (i.n.) 챌린지시켰다. 제1 및 제2 그룹은 각각 0.5 mg/kg 체중의 Dex 또는 CpdX를 비강내로 제공받은 반면 제3 그룹은 대조군으로 제공되었다.
D22에, 기관지폐포 세척액 (BAL)의 검사에 의해 각 마우스에 대해 폐 알레르기성 염증을 평가하였다. 총 BAL 세포, 호산구, 호중구, 대식세포 및 림프구를 계수하였다. 폐 샘플로부터 RNA 전사체를 추출하고 IL-1β, IL-6, IL-4, IL-5, IL-10, IL-13, 에오탁신, CCL4 및 TNFα의 RNA 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 폐 조직의 (H&E 염색으로) 조직학적 분석 및 (호산구-특이 및 호중구-특이 항체로) 면역조직화학 분석을 또한 수행하였다.
집먼지 진드기 (HDM) 감작 및 챌린지
마우스를 D0 내지 D4에 1 μg HDM으로 비강내 감작시키고, 추가로 D14 및 D21에 10 μg HDM으로 비강내 감작시켰다. 그후 마우스를 8개의 그룹으로 세분화하고, D29, D30 및 D31에, 각각의 마우스를 다시 1 μg HDM으로 비강내 챌린지시켰다. 처음 7개 그룹은 각각 0.5 mg/kg 체중의 Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)을 제공받은 반면 8번째 그룹은 대조군으로서 제공되었다.
D32에, 기도 반응성을 컴퓨터-제어된 작은 동물 인공호흡기 (FlexVent® system, SCIREQ Technologies)를 사용하여 침습적으로 결정하였다. 마우스를 크실라진 (15 mg/kg, i.p.)으로 마취시킨 다음 15분 후 펜토바르비탈 나트륨 (54 mg/kg)을 i.p. 주사하였다. 그후 18-게이지 금속 바늘을 기관에 삽입하고, 각 마우스를 FlexVent® 인공호흡기에 연결하고, 자발적 호흡에 가까운 평균 폐 용량을 달성하기 위해 150회 호흡/분의 빈도 및 2 cm H2O의 호기말 양압에서 10mL/kg의 일호흡량으로 준-유동적으로 (quasi-sinusoidally) 인공호흡시켰다. 기준선 측정 후, 마우스를 10초 동안 염수 에어로졸로 챌린지시키고, 4.5분 간격으로, 50 mg/mL 메타콜린으로 챌린지시켰다. 기도 저항성 및 탄력성은 각각 cmH20.s/mL 및 cmH2O/mL로 표현하였다.
폐 알레르기성 염증은 이들 HDM-챌린지된 마우스 각각으로부터의 기관지폐포 세척액 (BAL) 유체의 검사에 의해 평가하였다. 총 BAL 세포, 호산구, 호중구, 대식세포 및 림프구를 계수하였다. RNA 전사체를 폐 샘플로부터 추출하였다. IL-1β, IL-6, IL-4, IL-5, IL-13, 에오탁신, CCL4, IL-10 및 TNFα의 RNA 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 폐 조직을 수확하고 (H&E 염색으로) 조직학적 분석 및 (호산구-특이 및 호중구-특이 항체로) 면역조직화학 분석을 수행하였다.
결과
난백알부민 감작 및 챌린지
Dex 또는 CpdX로 처리시, BAL 세포, 호산구, 호중구 및 림프구의 총 수는 대조군과 비교하여 모두 유의적으로 감소하였다. 대식세포의 수는 변하지 않았다 (도 9a).
이러한 결과와 일치하게, 폐 샘플의 전사 분석은 IL-1β, IL-6 및 Th2 전염증성 유전자 IL-4, IL-5, IL-10 및 IL-13의 발현 뿐만 아니라 호산구 화학주성 케모카인 에오탁신, CCL4 및 TNFα의 발현이 Dex 또는 CpdX 처리시 유의적으로 및 유사하게 감소하였음을 보여 주었다 (도　9b).
폐 파라핀 절편의 조직학적 분석은 기관지주위 (B) 및 혈관주위 (V) 염증 세포 침윤이 Dex 또는 CpdX 처리에 의해 강하게 감소되었음을 입증하였다 (도 10).
호산구-특이 및 호중구-특이 항체를 사용한 면역조직화학 염색은 호산구 및 호중구 둘 다가 Dex 또는 CpdX 처리에 의해 유사하게 감소되었음을 확인시켜 주었다 (데이터는 나타내지 않음).
집먼지 진드기 (HDM) 감작 및 챌린지
Dex, CpdX 또는 CpdX-D3으로 처리시, BAL 세포, 호산구 및 림프구의 총 수는 대조군과 비교하여 유의적으로 감소하였다. 호중구 및 대식세포의 수에서는 유의적인 변화가 관찰되지 않았다 (도 11a 및 b).
폐 샘플의 RNA 전사 분석은 IL-1β, IL-6 및 Th2 전염증성 유전자 (IL-4, IL-5, IL-13)의 발현 뿐만 아니라 호산구 화학주성 케모카인 에오탁신 및 CCL4의 발현은 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3에 의해 유의적으로 및 유사하게 감소한 반면 (도 11c 및 d) IL-10 및 TNFα의 발현은 영향을 받지 않았음을 보여 주었다 (데이터는 나타내지 않음).
폐 파라핀 절편의 조직학적 분석은 기관지주위 및 혈관주위 염증 세포 침윤이 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3 처리에 의해 강하게 감소되었음을 입증하였다 (도 12).
호산구-특이 항체를 사용한 면역조직화학 염색은 호산구가 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3 처리에 의해 감소되었음을 확인시켜 주었다 (데이터는 나타내지 않음). 그러나, 호중구-특이 항체를 사용하여 유의적인 변화는 관찰되지 않았다 (데이터는 나타내지 않음).
폐 기능 검사 (기도 저항성 및 탄력성의 침습적 측정에 의해 분석된 메타콜린에 대한 반응)는 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3 투여가 HDM-유도된 기도 과민반응성 (AHR)을 유사하게 감소시켰음을 입증하였다 (도 13).
놀랍게도, CpdX(eB) 또는 CpdX-D3(eB)로의 처리는 그렇지 않지만, CpdX(eA) 또는 CpdX-D3(eA)로의 처리는 총 BAL 세포, 호산구 및 림프구의 수 (도 11a 및 b) 뿐만 아니라 전염증성 유전자의 발현 (도 11c 및 d)을 효율적으로 감소시켰다. 폐 파라핀 절편의 조직학적 분석에서는 기관지주위 및 혈관주위 염증 세포 침윤이 CpdX(eA) 또는 CpdX-D3(eA) 처리에 의해 감소되었지만 CpdX(eB) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해서는 감소되지 않은 것으로 밝혀졌다 (도 12). 따라서, 폐 기능 검사는 CpdX(eB)는 그렇지 않지만, CpdX(eA)의 투여는 HDM-유도된 기도 과민반응성 (AHR)을 감소시켰음을 보여 주었다 (도 13).
결론
종합하면, 이러한 결과는 CpdX 및 CpdX-D3이 알레르겐-유도된 폐 염증을 Dex만큼 효율적으로 억제하였음을 입증하며, 이것은 천식과 같은 Th2-관련 염증성 장애의 치료에 대한 이들의 잠재적 유용성을 나타낸다. 흥미롭게도, CpdX(eB) 또는 CpdX-D3(eB)은 그렇지 않지만, CpdX(eA) 및 CpdX-D3(eA)는 HDM-유도된 폐 염증을 효율적으로 억제하였으며, 이것은 천식의 치료에서 CpdX(eA) 또는 CpdX-D3(eA) 만이 활성 에난티오머임을 나타낸다.
실시예 7: Aldara -유도된 건선 -유사 T h 17 염증은 덱사메타손 ( Dex ), CpdX 또는 CpdX-D3으로의 국소 처리에 의해 감소된다 (도 14 및 15 참조)
재료 및 방법
Balb/C 마우스 귀를 Aldara®로 국소 처리하여 건선-유사 피부 염증을 유도하였다 (Vinter et al., 2015. Br J Dermatol. 172(2):345-53). 마우스를 에탄올 (비히클), Dex, CpdX 또는 CpdX-D3로의 마지막 5일간의 공동-국소 처리를 포함하여 Aldara®로 9일 동안 처리하였다.
D10에, 마우스 귀로부터 RNA 전사체를 추출하고 IL-17a, IL-17c, IL-17f 및 IL-22 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 귀 피부 샘플을 또한 (H&E 염색을 사용한) 조직학적 분석을 위해 수확하였다.
결과
Aldara®-유도된 건선-유사 피부 염증은 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3으로의 처리에 의해 유의적으로 감소되었다. 흥미롭게도, 귀 추출물의 RNA 전사체 분석은 IL-23은 그렇지 않지만, Th17 사이토카인 IL-17a, IL-17c, IL-17f 및 IL-22의 유도된 발현이 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3 처리에 의해 유사하게 감소되었음을 나타내었다 (도 14 및 데이터는 나타내지 않음).
H&E 염색에 의한 조직학적 분석이 이러한 결과를 확인시켜 주었으며 Dex, CpdX 또는 CpdX-D3이 Aldara®-유도된 건선-유사 피부 염증을 감소시킬 수 있음을 보여 주었다 (도 15).
결론
이러한 결과는 마우스에서, CpdX 또는 CpdX-D3이 Aldara-유도된 건선-유사 피부 염증을 Dex만큼 효율적으로 억제하였음을 입증하며, 이것은 CpdX 및 CpdX-D3 둘 다가 이러한 Th17-관련 염증성 피부 장애의 치료에서 Dex만큼 효과적임을 나타낸다.
실시예 8: CpdX(eB) 또는 CpdX-D3(eB)는 그렇지 않지만, CpdX , CpdX ( eA ), CpdX -D3 및 CpdX -D3(eA)은 콜라겐-유도된 관절염 (CIA) T h 17 염증을 감소시키는데 덱사메타손 ( Dex )만큼 효과적이다 (도 16 내지 18 참조)
재료 및 방법
Inglis 등 (2007. Arthritis Res Ther. 9(5):R113) 및 Geboes 등 (2009. Arthritis Rheum. 60(2):390-5)에 의해 기술된 바와 같이 마우스를 콜라겐으로 처리하여 Th17 류마티스 관절염-유사 염증을 유도하였다.
수컷 마우스 (DBA-1 품종)에게 D0에 마우스당 100 μg 콜라겐을 피하 주사하였다. 발목 수준에서의 뒷발 두께를 캘리퍼스로 정기적으로 측정하였다. 발목 두께가 약 4 mm에 도달했을 때 (T0, 즉 D0에 콜라겐을 주사한지 30 내지 50일 후), 마우스에게 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (NaCl 0,9%에 희석된 1 mg/kg 체중)로 10일 동안 (T0 내지 T10) 매일 복강내 주사하고, 발목 수준에서의 뒷발 두께를 캘리퍼스로 매일 측정하였다. 부기 (swelling) 과정을 평가하기 위해 뒷발 사진을 T0 및 T10 (비히클, Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)로 처리하기 전 및 후) 일자에 촬영하였다.
T0 및 T10에 콜라겐-비처리 및 콜라겐-처리 마우스의 전체 뒷발로부터 RNA 전사체를 추출하였다. IL-1β, IL-6, IL-17a, IL-17f 및 TNFα 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다.
결과
뒷발 두께는 콜라겐 주사시 증가를 보인 반면 Dex, CpdX 및 CpdX-D3 처리가 10일 내에 이 두께의 급속한 감소를 야기하였다 (도 16 및 17a). CpdX(eA) 또는 CpdX-D3(eA)로 처리된 마우스에서는 뒷발 두께의 유사한 감소가 관찰된 반면 이와 현저하게 대조적으로 CpdX(eB) 또는 CpdX-D3(eB) 처리시에는 이러한 감소가 관찰되지 않았다 (도 17b 및 데이터는 나타내지 않음).
가장 특히, CIA를 발병한 마우스의 뒷발에서 발현된 전염증성 유전자의 RNA 전사체는 덱사메타손, CpdX, CpdX(eA), CpdX-D3 또는 CpdX-D3(eA) 처리에 의해 유사하게 억제되었지만, CpdX(eB) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해서는 그렇지 않았다 (도 18).
결론
이러한 결과는 CpdX 및 CpdX-D3 둘 다 뿐만 아니라 이들의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX-D3(eA)가, 이들의 CpdX(eB) 또는 CpdX-D3(eB) 에난티오머는 그렇지 않지만, 류마티스 관절염-유사 Th17 염증을 감소시키는데 Dex만큼 효과적임을 입증한다.
실시예 9: CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 및 CpdX -D3( eB )은 덱스트란 나트륨 설페이트 (DSS)-유도된 T h 17 궤양성 대장염을 치료하는데 덱사메타손 (Dex)만큼 효율적이다 (도 19 및 20 참조)
재료 및 방법
Th17 궤양성 대장염에 대한 CpdX 및 CpdX-D3의 항염증 활성을 조사하기 위해, Balb/C 마우스를 D11, D12 및 D13에 Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (1 mg/kg 체중)의 복강내 투여의 존재 또는 부재하에 식수 중 3% DSS로 13일 동안 처리하였다.
D14에, 마우스 결장으로부터 RNA 전사체를 추출하였다. IL-1β, IL-6, IL-17a, IL-17f, TSLP 및 MMP13 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 결장 샘플을 또한 (H&E 염색을 사용한) 조직학적 분석을 위해 수확하였다.
결과
조직학적 분석 (H&E 염색된 파라핀 절편) (도 19 및 데이터는 나타내지 않음)은 대조군 마우스 (DSS 처리 없음)와 비교하여 DSS-처리된 마우스 결장에서 극적인 손상을 보였다: 규칙적인 결장 융모/돌기 구조는 DSS-처리된 마우스에서 고도로 와해되거나 부재하였다. 또한, 결장 점막 (실선 화살표) 및 점막하 (점선 화살표) 층으로의 세포 침윤 뿐만 아니라 궤양화 (화살촉)가 또한 관찰되었다. 가장 특히, Dex, CpdX, CpdX-D3 또는 이들의 두 개의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)로 3일간 처리된 마우스에서, 결장 융모/돌기 구조는 거의 재건되었으며, 점막 및 점막하 세포 침윤 둘 다가 유의적으로 감소되었다.
전사 분석은 DSS-유도된 궤양성 대장염에서 과발현된 전염증 유전자가 Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)에 의해 유사하게 억제되었음을 보여주었다 (도 20).
결론
종합하면, 우리의 결과는 CpdX, CpdX-D3 및 이들의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)가 궤양성 대장염과 같은 Th17-관련 염증성 장애의 치료에 Dex만큼 효율적임을 입증한다.
실시예 10: CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 또는 CpdX -D3(eB)은 난백알부민 (OVA)-유도된 알레르기성 결막염을 덱사메타손 ( Dex )만큼 효율적으로 완화시킨다 (도 21 참조)
재료 및 방법
알레르기성 결막염에 대한 CpdX 또는 CpdX-D3의 항염증 효과를 조사하기 위해, Balb/C 마우스를 D1 및 D8 일자 둘 다에 명반을 갖는 50 μg OVA로 복강내 감작시킨 다음 D15 내지 D21에 결막낭에 주입된 직접 5 μL의 멸균된 비히클 (0.9% NaCl) 중의 250 μg OVA로 챌린지시켰다. D22 내지 D24에, 마우스를 여러 그룹으로 나누고, OVA 단독, OVA를 0.1%의 Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)과 함께 주입하였다.
마우스 눈의 임상적 외관을 D24에 마지막 주입한지 20분 후에 평가하였다. 임상 징후 (결막성 충혈, 눈꺼풀 부종 및 눈물)를 스코어링하여 Gimenes 등 (2015. Experimental Eye Research 134:24-32)에 의해 기술된 바와 같이 결막염의 발생 및 중증도를 평가하였다. 파라미터는 0 내지 3 범위 (0 = 부재, 1 = 경미, 2 = 중등도 및 3 = 중증 증상)로 등급을 매겼으며, 각각의 동물은 0 내지 9 범위의 총 임상 스코어를 받았다. 데이터는 처리당 적어도 4마리 마우스를 사용한 평균 ± SEM으로 표현되었다.
결과
마지막 OVA 챌린지 20분 후, 모든 OVA-처리된 마우스로부터의 눈은 대조군 마우스 (비히클)와 비교하여 알레르기성 결막염의 명백한 임상 징후를 나타내었다 (도 21). 이러한 징후는 Dex 처리 뿐만 아니라 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해 상당히 감소되었다 (도 21).
결론
이러한 결과는 CpdX, CpdX-D3 및 이들의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)가 난백알부민 (OVA)-유도된 알레르기성 결막염을 Dex만큼 효율적으로 감소시킴을 입증한다.
실시예 11: 덱사메타손 ( Dex )과는 현저하게 대조적으로, CpdX , CpdX ( eA ), CpdX(eB), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 또는 CpdX -D3( eB ) 으로의 국소 치료는 피부 표피 위축을 유도하지 않는다 (도 22 내지 24 참조)
재료 및 방법
피부 위축은 글루코코르티코이드로의 국소 치료에 대한 심각한 한계이다 (Schoepe et al., 2006. Exp Dermatol. 15(6):406-20).
Dex와 유사하게, CpdX의 국소 투여가 피부 위축을 야기할 수 있는지를 조사하기 위해, Balb/C 마우스의 등 피부를 면도하였다. 에탄올 (비히클), Dex, CpdX 또는 이의 두 개의 에난티오머 CpdX(eA) 또는 CpdX(eB) 중의 어느 하나 뿐만 아니라 중수소화된 형태 CpdX-D3 또는 이의 두 개의 에난티오머 CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 중의 어느 하나를 8일 동안 등 피부에 국소 적용하였다.
처리 완료시, 등 피부 샘플로부터 RNA 전사체를 추출하고, Kindlin-1 및 REDD1 유전자의 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 등 피부의 조직학적 및 형태학적 분석을 또한 수행하였다.
결과
Kindlin-1 단백질의 소실은 표피 피부 위축을 유발하는 반면 (Ussar et al., 2008. PLoS Genet. 4(12):e1000289), 현저하게 대조적으로, Redd1 단백질의 소실은 GC-유도된 피부 위축을 방지하는 것으로 보고되었다 (Britto et al., 2014. Am J Physiol Endocrinol Metab. 307(11):E983-93; Baida et al., 2015. EMBO Mol Med. 7(1):42-58).
가장 흥미롭게도, 등 피부 샘플로부터의 전사 분석은 (nGRE를 함유하는) Kindlin-1 유전자의 전사가 Dex 국소 처리에 의해서는 크게 감소하지만 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해서는 그렇지 않음을 명백히 나타내었다 (도 22a). 반대로, (+GRE를 함유하는) REDD1 유전자의 전사는 Dex에 의해서는 유의적으로 증가하지만 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리 중 어느 것에 의해서도 증가하지 않는다 (도 22b).
RNA 전사체 분석과 일관되게, 형태학적 분석은 8일간의 Dex 처리시 표피 두께가
Figure pct00015
65%까지 감소함을 보여 주었다. 반대로, 표피 두께는 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해 유의적으로 감소하지 않는다 (도 23). 이러한 데이터는 Dex의 적용이, CpdX 또는 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3 또는 이들의 에난티오머 중의 어느 것과는 현저하게 대조적으로, 피부 위축을 심하게 유도함을 입증하는 조직학적 분석과 완전히 일치한다 (도 24).
결론
우리의 결과는, Dex 국소 처리와는 현저히 대조적으로, CpdX, 또는 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3, 또는 이들의 에난티오머 [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)] 중의 어느 것으로의 국소 투여가 표피 피부 위축을 야기하지 않음을 명백히 입증하며, 이것은 CpdX 및 CpdX-D3이 피부 치료에 안전하게 사용될 수 있음을 나타낸다.
실시예 12: CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 또는 CpdX -D3(eB)로의 3개월 치료는, 덱사메타손 ( Dex ) 치료와는 반대로, 피질 또는 섬유주 골 형성에 영향을 미치지 않는다 (도 25 및 26)
재료 및 방법
B6 수컷 마우스 (8주령)에게 3개월 동안 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (1 mg/kg 체중, NaCl 0,9%에 희석됨)의 피하 주사를 매일 적용하였다.
실험에 포함된 각 동물로부터, 하나의 대퇴골 및 동측 경골을 절개하고 마이크로-CT에 의한 추가의 골 미세구조 분석을 위해 70% 에탄올에 보존시켰다. FX Quantum micro-CT 스캐너 (Perkin Elmer)를 사용하여 원위 대퇴부 및 중간축 경골에서 측정을 수행하였다. 모든 스캔은 10 μm의 등방성 복셀 크기, 160 μA 튜브 전류 및 90 kV 튜브 전압으로 수행하였다.
형태학적 3D 측정은 CTAn 소프트웨어 (Bruker)를 사용하여 수행하였다. 경골 중간축에서 측정된 피질 골 파라미터는 총 용적, 피질 두께, 총 면적, 골 면적 및 골수 면적과 비교하여 골 용적율의 측정치를 포함하였다. 관심 영역은 원위 경골 돌기 아래로부터 선택하고 경골의 근위 말단을 향해 20 슬라이스 동안 계속하였다. 섬유주 골 파라미터를 대퇴골의 원위 골간단 (distal metaphysis)에서 측정하였으며 골 용적율, 섬유주 두께, 섬유주 수 및 섬유주 간격을 포함하였다. 관심 영역은 골단 캡 (epiphyseal cap) 구조가 완전히 사라진 원위 성장판 아래에서 선택하였으며 대퇴골의 근위 단부를 향해 100 슬라이스 동안 계속하였다.
비히클 처리와 비교한 통계적 유의도는 일원 ANOVA 검정에 이은 Dunn의 다중 비교 검정을 통해 계산하였다, * p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001; **** p<0,0001.
결과
골다공증은 장기 글루코코르티코이드 임상 치료의 일반적인 바람직하지 않은 부작용이다 (Canalis, 2003. Curr Opin Rheumatol. 15(4):454-7). 예상한 바와 같이, 3개월 Dex 처리 후, 마우스 경골 피질골에서 골다공증-유사 표현형이 관찰되었다: 골 용적은 총 용적에 비해 유의적으로 감소하고 (도 25a), 피질 두께가 극적으로 감소하며 (도 25b), 골수 면적은 그렇지 않지만 골 면적 또한 감소하였다 (도 25d 및 e). 놀랍게도, 그러나 이전 보고서와 일치하게 (Grahnemo et al., 2015. J Endocrinol. 224(1):97-108), Dex-처리는 섬유주의 수의 증가 및 섬유주 간격의 감소로 인해 마우스 섬유주 골 용적을 증가시켰으며, 섬유주 두께는 변하지 않았다 (데이터는 나타내지 않음).
중요하게도, Dex 처리와는 현저하게 대조적으로, CpdX 또는 CpdX-D3, 뿐만 아니라 이들의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 중의 어느 하나의 이러한 3개월 투여는 피질 및 섬유주 골의 골 형성에 영향을 미치지 않았다 (도 25 및 데이터는 나타내지 않음).
WNT16 유전자의 발현은 골 미네랄 밀도, 피질 골 두께, 골 강도 및 골다공증 골절의 위험에 영향을 미치는 것으로 보고되었다 (Zheng et al., 2012. PLoS Genet. Jul; 8(7): e1002745). 마우스 경골 샘플로부터의 전사 분석은 WNT16 유전자의 전사가 Dex 처리로 50% 감소하였지만 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리로는 그렇지 않았음을 입증하였다 (도 26).
결론
이러한 결과는 CpdX, CpdX-D3 및 이들의 에난티오머 [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)] 중의 어느 것이 염증성 질환의 임상 치료에 안전하게 사용될 수 있으며, Dex와는 달리, 이들은 골 형성에 영향을 미치지 않음을 나타낸다.
실시예 13: 덱사메타손 ( Dex )과는 반대로, CpdX 또는 CpdX -D3으로의 장기간 치료는 체중 손실이나 체성분 변화를 유도하지 않는다 (도 27 참조)
재료 및 방법
B6 수컷 마우스 (8주령)에게 3개월 동안 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX 또는 CpdX-D3 (1 mg/kg 체중, 비히클에 희석됨)의 피하 주사를 매일 적용하였다. pDEXA 기기를 사용하여 제지방량 및 지방량을 결정하였다. 통계적 유의도는 Krustal-Walis 검정에 이은 Dunn의 다중 비교 검정을 통해 계산하였다, * p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001.
결과
8주령 마우스는 비히클, CpdX 또는 CpdX-D3으로 3개월 동안 처리할 경우 체중의 유사한 증가 (도 27a) 뿐만 아니라 지방량 (도 27b) 및 제지방 퍼센트 (도 27c)의 상응하는 증가를 나타내었다. 이와 달리, Dex로 처리된 마우스는 지방의 불균형한 증가 (도 27b) 및 제지방량의 감소 (도 27c)와 함께 총 체중의 순 손실 (도 27a)을 나타내었다.
결론
이러한 결과는 CpdX 또는 CpdX-D3의 장기 투여가, Dex와 달리, 체중 감소 또는 지방량 증가 및 제지방량 감소를 초래하지 않음을 나타낸다.
실시예 14: 3개월 생체내 투여시, CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX -D3( eB )로 처리된 마우스는 덱사메타손 ( Dex ) 으로 처리된 마우스에서 관찰되는 바람직하지 않은 조직-특이 "독성" 부작용을 나타내지 않는다 (도 28 참조)
재료 및 방법
B6 수컷 마우스 (8주령)에게 3개월 동안 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (1 mg/kg 체중, 비히클에 희석됨)의 피하 주사를 매일 적용하였다. 이러한 처리 후, 네 개의 장기 (흉선, 비장, 부신 및 신장)를 수확하고 칭량하였다.
결과
글루코코르티코이드는 급격한 흉선 아폽토시스를 유도하는 것으로 잘 알려져 있다 (Cohen, 1992. Semin Immunol. 4(6):363-9). 따라서, 3개월 처리 후, Dex로 처리한 19마리의 마우스 중 16마리에서 흉선이 발견되지 않았다. 현저하게 대조적으로, CpdX, 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3, 또는 이들의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)로의 처리는 상당한 흉선 아폽토시스를 초래하지 않았다 (도 28a).
비장 중량은 Dex-처리된 마우스에서 50% 이상 감소한 반면 CpdX-, CpdX(eA)-, CpdX(eB)-, CpdX-D3-, CpdX-D3(eA)- 또는 CpdX-D3(eB)-처리된 마우스에서는 감소하지 않았다 (도 28b). 신장 중량의 약하지만 유의적인 손실이 또한 Dex로 처리된 마우스에서 선택적으로 관찰되었다 (도 28d).
흥미롭게도, 코르티코스테론 합성이 일어나는 부신의 중량은 Dex 처리에 의해 감소한 반면 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)로의 처리에 의해 증가하였다 (도 28c).
결론
생체내 장기 치료시, 합성 글루코코르티코이드 덱사메타손의 투여와는 현저하게 대조적으로, CpdX 또는 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3 또는 이들의 에난티오머 [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB)] 중의 어느 것의 투여는 독성이 없으며, 가장 특히 흉선, 비장 및 부신에 대해 독성이 없다.
실시예 15: 덱사메타손 ( Dex )의 장기간의 매일 피하 주사는, 현저하게 대조적으로 CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 또는 CpdX -D3( eB ) 으로의 유사한 치료에 의해 증가되는 코르티코스테론 합성을 억제한다 (도 29 및 30 참조)
재료 및 방법
B6 수컷 마우스 (8주령)에게 3개월 동안 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (1 mg/kg 체중, 비히클에 희석됨)의 피하 주사를 매일 적용하였다.
이러한 장기 처리 후, 리튬-헤파린 코팅된 바이알에서 안구뒤 천공에 의해 오전 10시와 오후 6시에 혈액을 채취하고, 코르티코스테론의 혈장 수준을 결정하였다. 부신을 수확하고 칭량하였다. RNA 전사체를 추출하고, Cyp11a, Cyp11b1, Cyp11b2 및 HSD3β 유전자의 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다. 부신의 조직학적 분석을 또한 수행하였다.
결과
코르티코스테론은 부신의 피질 층의 속상대에서 합성된다. Dex로의 3개월 처리시, 부신의 피질 층 (왼쪽 패널의 양방향 화살표 참조), 가장 특히 속상대 (오른쪽 패널의 굵은 양방향 화살표 참조)는 대폭 감소한 반면 (도 29) CpdX 또는 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3, 또는 이들의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)의 투여에 의해서는 현저하게 증가하였다 (도 29 및 데이터는 나타내지 않음).
마우스 부신 샘플로부터의 전사 분석은 코르티코스테론 합성 경로에 관여하는 Cyp11a, Cyp11b1 및 HSD3β 유전자의 전사체가 Dex 처리에 의해서는 억제되는 반면 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해서는 증가되었다음을 입증하였다 (도 30a).
대조군 마우스 (비히클)와 비교하여, Dex-처리된 마우스는 오전 10시 및 오후 6시 둘 다에서 훨씬 낮은 코르티코스테론 수준을 나타낸 반면 현저하게 대조적으로, CpdX-, CpdX(eA)-, CpdX(eB)-, CpdX-D3-, CpdX-D3(eA)- 및 CpdX-D3(eB)-처리된 마우스는 오전 10시에 훨씬 더 높은 코르티코스테론 수준을 나타내었다 (도 30b).
흥미롭게도, 마우스 부신 샘플로부터의 전사 분석은 또한 알도스테론 합성 경로에 관여하는 Cyp11b2 유전자의 전사체가 Dex 처리에 의해서는 억제되지만 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해서는 억제되지 않음을 보여 주었다 (도 30a). 이러한 결과와 일치하게, 조직학적 분석에서는 알도스테론을 생성하는 구상대 (피질 층의 최외각 영역, 도 29의 오른쪽 패널의 작은 빈 양방향 화살표 참조)가 Dex 처리에 의해서는 대폭 감소하지만 CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) 처리에 의해서는 감소하지 않은 것으로 드러났다 (도 29 및 데이터는 나타내지 않음).
결론
가장 흥미롭게도, 이러한 데이터는 전염증성 유전자의 억제를 통해 일어나는 CpdX 및 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3 [뿐만 아니라 이들의 에난티오머 CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 및 CpdX-D3(eB) 중의 어느 것]의 유리한 항염증 효과는 (i) 테더링된 간접 전사억제 기능을 활성화시키는, GR에의 CpdX 또는 CpdX-D3의 직접 결합, 및 (ii) 가장 특히 휴식 기간 동안 혈중 코르티코스테론 수준의 CpdX- 또는 CpdX-D3-유도된 증가로 인한 이러한 간접 전사억제 기능의 추가 활성화 둘 다로부터 초래됨을 나타낸다.
실시예 16: 덱사메타손 ( Dex )의 3개월 투여와는 현저하게 대조적으로, CpdX , CpdX(eA), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 또는 CpdX -D3( eB )의 3개월 생체내 투여는 고혈당증을 유도하지 않는다 (도 31 참조)
재료 및 방법
장기간 글루코코르티코이드 투여시, 고혈당증은 일반적인 바람직하지 않은 부작용이다 (Clore & Thurby-Hay, 2009. Endocr Pract. 15(5):469-74).
B6 수컷 마우스 (8주령)에게 3개월 동안 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (1 mg/kg 체중, 비히클에 희석됨)의 피하 주사를 매일 적용하였다. 마우스를 밤새 금식시켰다. 마우스 혈중 글루코스 농도를 글루코스 i.p. 주사 (2 mg/kg 체중) 전 (T0) 및 주사 후 2시간 동안 (T120) 측정하였다.
결과
3개월 처리 후, Dex-처리된 마우스의 혈중 글루코스 수준은 염수 (비히클), CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)로 처리된 마우스에서보다 유의적으로 더 높았다 (도 31a).
복강내 글루코스 내성 검사 (IPGTT)는 글루코스 주사시 Dex-처리된 마우스에서는 2시간 동안 유의하게 더 높은 혈중 글루코스 수준이 관찰된 반면 대조군, CpdX-, CpdX(eA)-, CpdX(eB)-, CpdX-D3-, CpdX-D3(eA)- 또는 CpdX-D3(eB)-처리된 마우스에서는 이들 수준 사이에 유의적인 차이가 없었음을 보여 주었다 (도 31b).
결론
이러한 상기 결과는, Dex와는 반대로, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)로의 처리가 혈중 글루코스 수준의 조절에 유의적인 영향을 미치지 않음을 나타낸다.
실시예 17: CpdX , CpdX ( eA ), CpdX ( eB ), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 또는 CpdX -D3(eB)의 3개월 생체내 투여는, 덱사메타손 ( Dex )과는 달리, 인슐린-내성을 유도하지 않는다 (도 31 및 32 참조)
재료 및 방법
글루코코르티코이드 (GC)에의 인간의 만성적인 노출이 전신 인슐린-내성을 야기하는 것으로 잘 알려져 있다 (Geer et al., 2014. Endocrinol Metab Clin North Am. 43(1):75-102).
B6 수컷 마우스 (8주령)에게 3개월 동안 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (1 mg/kg 체중, 비히클에 희석됨)의 피하 주사를 매일 적용하였다. 3개월 후, 리튬-헤파린 코팅된 바이알에서 안구뒤 천공에 의해 오전 10시에 혈액을 수집하고, 인슐린의 혈장 수준을 결정하였다.
복강내 인슐린 내성 검사 (IPITT)를 위해, 마우스를 검사 전에 6시간 동안 금식시켰다. 혈중 글루코스 농도는 인슐린 i.p. 주사 (0,75 U/kg 체중) 전 (T0) 및 주사 후 1시간 동안 측정하였다.
이러한 3개월 처리 후, 간 샘플을 수확하고 RIPA 완충액 (20 mM Tris pH 8, 150 mM NaCl, 10% 글리세롤, 1% NP-40 및 2 mM EDTA)에 용해시켰다. 세포 신호전달로부터의 항체를 사용하여 웨스턴 블롯팅에 의해 p-IRS1 (S318), IRS-1, p-AKT (S473) 및 AKT의 상대 수준을 평가하였다.
결과
3개월 처리 후, 혈중 인슐린 수준은 Dex-처리된 마우스에서는 고인슐린혈증을 나타냈지만, 염수 (비히클), CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)로 처리된 마우스에서는 그렇지 않았다 (도 32a). 고혈당증이 Dex-처리된 마우스에서 관찰되었고 (도 31a) IPITT 검사가 이들 마우스에서 인슐린에 대한 유의적인 반응 손상 (도 32b)을 나타내었으므로, 이들은 인슐린 내성을 나타낼 수 있다. 이러한 제안과 일치하게, 간 추출물로부터의 웨스턴-블롯 분석은 비히클-, CpdX- 또는 CpdX-D3-처리된 마우스에서는 그렇지 않지만, Dex-처리된 마우스에서는 인산화된 인슐린 수용체 기질 1 (p-IRS1 S318)의 감소를 보여 주었다 (도 32c). 예상된 바와 같이, 인슐린-자극된 단백질 키나제 B (p-AKT S473)의 인산화는 또한 Dex-처리된 마우스에서 감소하였다 (도 32c).
결론
이러한 결과는, 덱사메타손과는 반대로, CpdX, 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3, 또는 이들의 에난티오머 [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)] 중의 어느 것으로의 처리가 인슐린 내성을 유도하지 않음을 나타낸다.
실시예 18: 덱사메타손 ( Dex )과는 현저하게 대조적으로, CpdX , CpdX ( eA ), CpdX(eB), CpdX -D3, CpdX -D3( eA ) 또는 CpdX -D3( eB )의 3개월 생체내 투여는 지방간을 유도하지 않는다 (도 33 내지 35 참조)
재료 및 방법
B6 수컷 마우스 (8주령)에게 3개월 동안 비히클 (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB) (1 mg/kg 체중, 비히클에 희석됨)의 피하 주사를 매일 적용하였다. 이러한 처리 후, 리튬-헤파린 코팅된 바이알에서 안구뒤 천공에 의해 오전 10시에 혈액을 수집하였다. 총 콜레스테롤 및 담즙산의 혈장 수준을 결정하였다.
간 샘플을 수확하였다. 간에서의 지질 침착은 냉동된 절편의 5% 레드 오일 염색에 의해 밝혀졌다. 간 샘플로부터 RNA 전사체를 추출하고 지방산 신타제 (FASN) 및 스테아로일-CoA 탈포화효소 1 (SCD1) 유전자의 전사체를 q-RT-PCR에 의해 분석하였다.
결과
3개월 처리시, Dex의 매일 피하 투여에 적용된 마우스의 간에서는 현저한 지질 침착이 있었으며, 이것은 CpdX 또는 CpdX-D3, 이들의 에난티오머 또는 비히클로 처리된 마우스에서는 관찰되지 않았다 (도 33). 따라서, 간 지방형성에 결정적으로 관여하는 지방산 신타제 (FASN) 및 스테아로일-CoA 탈포화효소 1 (SCD1)의 전사체의 증가는 Dex-처리된 마우스의 간에서는 관찰되었지만 비히클-, CpdX-, CpdX(eA)-, CpdX(eB)-, CpdX-D3-, CpdX-D3(eA)- 또는 CpdX-D3(eB)-처리된 마우스의 간에서는 관찰되지 않았다 (도 34).
고콜레스테롤혈증은 비-알콜성 지방간 질환 (NAFLD)의 주 원인이다 (Kim et al., 2014. PLoS One.　9(6):e97841). 콜레스테롤은 간에서 담즙산으로 전환된다. 따라서, 지방간 질환을 나타내는 환자에서 높은 수준의 담즙산이 또한 관찰되었다 (Aranha et al., 2008. Eur J Gastroenterol Hepatol. 20(6):519-25). 예상된 바와 같이, CpdX-, CpdX(eA)-, CpdX(eB)-, CpdX-D3-, CpdX-D3(eA)- 또는 CpdX-D3(eB)-처리된 마우스는 그렇지 않지만, Dex-처리된 마우스는 혈중 콜레스테롤 및 담즙산 수준의 뚜렷한 증가를 나타내었다 (도 35).
결론
CpdX 또는 이의 중수소화된 형태 CpdX-D3, 또는 이들의 에난티오머 [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)] 중의 어느 것으로의 3개월 생체내 처리는, Dex로의 유사한 처리와 현저하게 대조적으로, 지방간 질환을 유도하지 않는다.
SEQUENCE LISTING <110> ASSOCIATION POUR LA RECHERCHE A L`IGBMC (ARI) <120> NON-STEROIDAL SELECTIVE GLUCOCORTICOID RECEPTOR AGONISTIC MODULATORS (SEGRAMs) AND USES THEREOF <130> IPA200502-FR <150> US 62/578,036 <151> 2017-10-27 <150> EP 18305612.6 <151> 2018-05-17 <160> 3 <170> BiSSAP 1.3.6 <210> 1 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Consensus positive glucocorticoid-responsive element ((+)GRE) <220> <221> misc_feature <222> 7 <223> /note="n can be any of A, T, C or G" <220> <221> misc_feature <222> 8 <223> /note="n can be any of A, T, C or G" <220> <221> misc_feature <222> 9 <223> /note="n can be any of A, T, C or G" <400> 1 ggaacannnt gttct 15 <210> 2 <211> 10 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Consensus negative glucocorticoid-responsive element (nGRE) <220> <221> misc_feature <222> 5 <223> /note="n can be any of A, T, C or G" /note="n can be 0, 1 or 2 nucleic acids" <400> 2 ctccnggaga 10 <210> 3 <211> 10 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> NF-觀B-binding site <220> <221> misc_feature <222> 4 <223> /note="r can be any of G or A" <220> <221> misc_feature <222> 5 <223> /note="n can be any of A, T, C, or G" <220> <221> misc_feature <222> 6 <223> /note="n can be any of A, T, C, or G" <220> <221> misc_feature <222> 7 <223> /note="Y can be any of T or C" <220> <221> misc_feature <222> 8 <223> /note="Y can be any of T or C" <400> 3 gggrnnyycc 10

Claims (21)

  1. 염증성 장애의 예방 또는 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM) 또는 이의 유도체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물:
    Figure pct00016

    (화학식 1 - CpdX).
  2. 제1항에 있어서, SEGRAM이 중수소화된 형태이고, 바람직하게는 SEGRAM이 화학식 2의 화합물인, SEGRAM 또는 이의 유도체:
    Figure pct00017

    (화학식 2 - CpdX-D3).
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, SEGRAM이 라세미 형태(racemic form)이거나, 이의 두 개의 에난티오머 형태 중의 하나인, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  4. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 화학식 1의 SEGRAM의 유도체가 화학식 3의 화합물인, SEGRAM 또는 이의 유도체:
    Figure pct00018

    (화학식 3)
    여기서:
    - W는 O, S 또는 CH2로부터 선택되고,
    - R2는 H 또는 CH3으로부터 선택되고,
    - Z2, Z3, Z4, Z5 및 Z6은 각각 독립적으로 H, F, Cl, Br, CH3, OCH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH3)2, C(CH3)3, COCH3, NO2, CN, CH=CH2 또는 CONH2로부터 선택된다.
  5. 제1항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 있어서, SEGRAM이 글루코코르티코이드 수용체의 직접 전사촉진 (transactivation) 기능 또는 직접 전사억제 (transrepression) 기능 중 어느 것도 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  6. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, SEGRAM이 이를 필요로 하는 대상체에 투여시 스테로이드성 항염증 약물 (SAID)-관련 부작용을 유도하지 않거나 실질적으로 유도하지 않는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  7. 제6항에 있어서, SAID-관련 부작용이 피부 위축 (skin atrophy); 골다공증 (osteoporosis); 성장 억제; 체중 손실; 지방량 증가; 제지방 손실; 흉선, 비장, 신장 및/또는 부신 아폽토시스(apoptosis); 코르티코스테론 합성 억제; 부신 억제; 고혈당증; 인슐린 내성; 고인슐린혈증 및 지방간을 포함하는 그룹으로부터 선택되는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  8. 제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 염증성 장애가 IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, MMP13, IgE, IgG1 및 IgG2a를 포함하는 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 분비된 사이토카인 및/또는 항체의 증가된 수준을 특징으로 하는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  9. 제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 있어서, 염증성 장애가 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 알레르기성 부비동염 (allergic sinusitis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 비결막염 (rhinoconjunctivitis), 거대-세포 동맥염 (giant-cell arteritis) (호턴병(Horton disease)), 건초열 (hay fever), 일광성 피부염 (solar dermatitis), 습진 (eczema), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedema), 결절성 홍반 (erythema nodosum), 다형 홍반 (erythema multiforme), 피부 괴사성 세정맥염 (cutaneous necrotizing venulitis), 곤충 물린 피부 염증 (insect bite skin inflammation), 아나필락시스 (anaphylaxis), 건선 (psoriasis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD) (크론병, 궤양성 대장염 및 대장염 포함), 치주염 (periodontitis), 만성 염증성 질환 (chronic inflammatory disease), 홍반성 낭창 (lupus erythematosus), 피부근염 (dermatomyositis), 혈관염 (vasculitis), 쇼그렌 증후군 (Sjogren's syndrome), 경피증 (scleroderma), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 백반증 (vitiligo), 편평 태선 (lichen planus), 2형 당뇨병 (type 2 diabete), 관상 동맥 심장 질환 (coronary heart disease), 고지혈증 (hyperlipidemia), 폐경기-유도된 대사 증후군 (postmenopausal-induced metabolic syndrome) 및 지방증 (steatosis), 및 이식편 대 숙주 질환 (graft-versus-host disease)을 포함하는 그룹으로부터 선택되는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  10. 제1항 내지 제9항 중의 어느 한 항에 있어서, 염증성 장애가 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  11. 제1항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 염증성 장애가 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM이 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이고, 상기 에난티오머가 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 첫 번째 용출 피크 [CpdX(eA)]에 해당하는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  12. 제1항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 염증성 장애가 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM이 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이고, 상기 에난티오머가 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 두 번째 용출 피크 [CpdX(eB)]에 해당하는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  13. 제2항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 염증성 장애가 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 알레르기성 천식 (allergic asthma), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis) 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM이 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이고, 상기 에난티오머가 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 첫 번째 용출 피크 [CpdX-D3(eA)]에 해당하는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  14. 제2항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 염증성 장애가 아토피성 피부염 (atopic dermatitis), 접촉성 피부염 (contact dermatitis), 건선 (psoriasis), 알레르기성 결막염 (allergic conjunctivitis), 및 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)을 포함하는 그룹으로부터 선택되고; SEGRAM이 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머이고, 상기 에난티오머가 화학식 2의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)의 두 번째 용출 피크 [CpdX-D3(eB)]에 해당하는, SEGRAM 또는 이의 유도체.
  15. 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM) 또는 이의 유도체의 에난티오머 (바람직하게는 상기 에난티오머는 CpdX(eA) 또는 CpdX(eB)이다), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물.
  16. 제15항에 있어서, 상기 에난티오머가 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의한 화학식 1의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 분리에 의해 수득되고, CpdX(eA)가 첫 번째 용출 피크에 해당하고 CpdX(eB)가 두 번째 용출 피크에 해당하는, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 에난티오머.
  17. 화학식 1의 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (SEGRAM) 또는 이의 유도체의 중수소화된 형태, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 및/또는 전구약물.
  18. 제17항에 있어서, 상기 중수소화된 형태가 화학식 2의 화합물인, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 중수소화된 형태:
    Figure pct00019

    (화학식 2).
  19. 제17항 또는 제18항에 있어서, 상기 중수소화된 형태가 라세미 형태인, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 중수소화된 형태.
  20. 제17항 또는 제18항에 있어서, 상기 중수소화된 형태가 화학식 2의 화합물의 두 개의 에난티오머 중 하나이고, 바람직하게는 상기 에난티오머가 CpdX-D3(eA) 또는 CpdX-D3(eB)인, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 중수소화된 형태.
  21. 제20항에 있어서, 상기 에난티오머가 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC)에 의한 화학식 2의 화합물 또는 이의 유도체의 라세미 혼합물의 분리에 의해 수득되고, CpdX-D3(eA)가 첫 번째 용출 피크에 해당하고 CpdX-D3(eB)이 두 번째 용출 피크에 해당하는, 화학식 1의 SEGRAM 또는 이의 유도체의 중수소화된 형태.
KR1020207014598A 2017-10-27 2018-10-23 비스테로이드성 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (ｓｅｇｒａｍ) 및 이의 용도 KR20200085782A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762578036P 2017-10-27 2017-10-27
US62/578,036 2017-10-27
EP18305612.6A EP3569228A1 (en) 2018-05-17 2018-05-17 Non-steroidal selective glucocorticoid receptor agonistic modulators (segrams) and uses thereof
EP18305612.6 2018-05-17
PCT/EP2018/079049 WO2019081517A2 (en) 2017-10-27 2018-10-23 NON-STEROIDIC GLUCOCORTICOIC RECEPTOR (SEGRAM) RECEPTOR AGONIST MODULATORS AND USES THEREOF

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20200085782A true KR20200085782A (ko) 2020-07-15

Family

ID=62386318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207014598A KR20200085782A (ko) 2017-10-27 2018-10-23 비스테로이드성 선택적 글루코코르티코이드 수용체 효능작용 조절제 (ｓｅｇｒａｍ) 및 이의 용도

Country Status (9)

Country Link
US (1) US11179363B2 (ko)
EP (2) EP3569228A1 (ko)
JP (1) JP2021509411A (ko)
KR (1) KR20200085782A (ko)
CN (1) CN111511359A (ko)
AU (1) AU2018355698A1 (ko)
BR (1) BR112020008350A2 (ko)
MA (1) MA50443A (ko)
PT (1) PT3700513T (ko)

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5262165A (en) 1992-02-04 1993-11-16 Schering Corporation Transdermal nitroglycerin patch with penetration enhancers
US6010715A (en) 1992-04-01 2000-01-04 Bertek, Inc. Transdermal patch incorporating a polymer film incorporated with an active agent
HU228434B1 (en) 1995-06-07 2013-03-28 Ortho Mcneil Pharm Inc Transdermal medicament for administering 17-deacetyl norgestimate alone or in combination with an estrogen
US6245804B1 (en) 1997-05-30 2001-06-12 Schering Aktiengesellschaft Nonsteroidal gestagens
DE19723722A1 (de) * 1997-05-30 1998-12-10 Schering Ag Nichtsteroidale Gestagene
US5948433A (en) 1997-08-21 1999-09-07 Bertek, Inc. Transdermal patch
DE19856475A1 (de) * 1998-11-27 2000-05-31 Schering Ag Nichtsteroidale Entzündungshemmer
DE10038639A1 (de) * 2000-07-28 2002-02-21 Schering Ag Nichtsteroidale Entzündungshemmer
US20190151283A1 (en) * 2017-10-27 2019-05-23 Association Pour La Recherche À L'igbmc (Ari) NON-STEROIDAL SELECTIVE GLUCOCORTICOID RECEPTOR AGONISTIC MODULATORS (SEGRAMs) AND USES THEREOF

Also Published As

Publication number Publication date
MA50443A (fr) 2020-09-02
JP2021509411A (ja) 2021-03-25
US11179363B2 (en) 2021-11-23
US20210177798A1 (en) 2021-06-17
PT3700513T (pt) 2022-11-30
EP3700513B1 (en) 2022-08-24
CN111511359A (zh) 2020-08-07
BR112020008350A2 (pt) 2020-11-03
AU2018355698A1 (en) 2020-05-14
EP3569228A1 (en) 2019-11-20
EP3700513A2 (en) 2020-09-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7169693B2 (ja) 呼吸器疾患の治療
JP2017512757A (ja) 経口投与するためのペントサンポリ硫酸塩の組成物および使用の方法
RU2502519C2 (ru) Терапевтическое средство для лечения ринита
JP6837486B2 (ja) 加齢に関連する認知障害及び神経炎症を予防及び／又は治療する方法
EP2300425A2 (en) Cycloalkaneýb¨indole angtagonists of prostaglandin d2 receptors
CN118453559A (zh) 炎症性疾病或骨病的预防或治疗剂及医药组合物
US11628154B2 (en) CCL5 inhibitors
JP5425229B2 (ja) Ｎｋ受容体アンタゴニストの使用
ES2932076T3 (es) Moduladores agonistas de los receptores de glucocorticoides selectivos (SEGRAM) no esteroideos y usos de los mismos
AU2018262108A1 (en) Compounds for the treatment of respiratory diseases
US11179363B2 (en) Non-steroidal selective glucocorticoid receptor agonistic modulators (SEGRAMs) and uses thereof
JP7502242B2 (ja) 状態を予防及び治療するための組成物及び方法
KR101656324B1 (ko) 키닌 ｂ２ 수용체 길항제 및 코르티코스테로이드에 기반한 약학적 조성물 및 그의 용도
DE102017215154A1 (de) Zusammensetzung zur topischen Behandlung von nicht-Mikroorganismus-verursachten entzündlichen Haut- und Schleimhauterkrankungen
Zein “CpdX”, a non-steroidal Selective Glucocorticoid Receptor Agonistic Modulator (SEGRAM) selectively triggers the beneficial anti-inflammatory activity of glucocorticoids, but not their long-term debilitating effects
JP2006188496A (ja) ｐ３８ＭＡＰキナーゼ阻害剤を有効成分とする掻痒治療剤
KR20150100902A (ko) 옥시부티닌의 투여를 위한 방법 및 조성물
JP2022067848A (ja) 経鼻投与用医薬組成物
WO2022251824A1 (en) Mmp13 as a therapeutic target for allergic inflammatory diseases
JP2024511019A (ja) メラノサイト増殖促進剤および生存促進因子としての特異的炎症収束性メディエーター（ｓｐｍ）およびその使用
EA043839B1 (ru) Применение производного глутаримида для преодоления резистентности к стероидам и терапии заболеваний, ассоциированных с аберрантным сигналингом интерферона гамма
US20130123365A1 (en) Use of fts and analogs to treat non-autoimmune-allergic and non-allergic inflammatory conditions
JPWO2021046448A5 (ko)

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
A302 Request for accelerated examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application