BR112020008350A2 - moduladores agonísticos de receptor de glicocorticóide seletivos (segrams) não esteroidais e usos dos mesmos - Google Patents

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Abstract

A presente invenção se refere a dois enantiômeros de um modulador agonístico de receptor de glicocorticóide seletivos (SEGRAM) de fórmula 1 ou um derivado do mesmo; a uma forma deuterada de um SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo; e a dois enantiômeros deuterados de um SEGRAM de fórmula 1 ou derivado do mesmo: (Formula 1) ou um sal, solvato e /ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo. A presente invenção também se refere a um SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, ou um enantiômero, forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um indivíduo em necessidade do mesmo.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para: “MODULADORES AGONÍSTICOS SELETIVOS DE RECEPTOR DE GLICOCORTICÓIDE (SEGRAMs) NÃO ESTEROIDAIS E USOS DOS MESMOS”
CAMPO DE INVENÇÃO
[001] A presente invenção se refere aos Moduladores Agonísticos Seletivos de Receptor de Glicocorticoide (SEGRAMs) para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo. Em particular, os SEGRAMs da presente invenção não induzem nem a transativação direta nem as funções de transrepressão direta do receptor glicocorticoide, e não exercem os efeitos debilitantes dos glicocorticoides sintéticos (GC).
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO
[002] Os glicocorticoides (GCs) são hormônios primários do estresse necessários para a vida que regulam numerosos processos fisiológicos, em um esforço para manter a homeostase. Eles pertencem à classe dos corticosteroides, que se ligam ao seu receptor cognato, o receptor glicocorticoide (GR).
[003] O GR, também conhecido como NR3C1 (subfamília de receptores nucleares 3, grupo C, membro 1), é onipresente entre quase todos os vertebrados, em quase todas as células.
Regula a expressão de genes que controlam vários processos fisiológicos importantes, como desenvolvimento, metabolismo e resposta imunológica.
[004] Estruturalmente, o GR é uma proteína modular composta por vários domínios: - um domínio de transativação do terminal N (NTD ou “domínio A/B”); - um domínio de ligação ao DNA central (DBD ou “domínio C”). Esse domínio é o domínio mais conservado da superfamília de receptores nucleares e contém dois motivos de dedos de zinco que reconhecem e ligam as sequências de DNA alvo, chamadas elementos responsivos aos glicocorticoides (GREs); - uma região de dobradiça flexível (ou “domínio D”); - um domínio de ligação ao ligante do terminal C (LBD, ou “domínio E”). Este domínio forma uma bolsa hidrofóbica para ligar GCs; - e um domínio C-terminal (CTD ou “domínio F”).
[005] Após a ligação de um GC ao GR LBD, o GR sofre uma alteração conformacional, resultando na exposição de dois sinais de localização nuclear localizados na junção DBD/região da dobradiça e dentro do LBD, respectivamente. O GR é então translocado rapidamente para o núcleo através dos poros nucleares, onde pode exercer uma das três funções reguladoras da transcrição detalhadas a seguir e na Figura
1.
[006] O primeiro, chamado “transativação direta”, é uma consequência da ligação de GR associados a GC diretamente a GREs positivos em ação de cis (GREs) ((+)GREs), ativando a expressão dos genes alvos. A sequência de consenso(+)GRE, GGAACANNNTGTTCT (com N sendo qualquer um de A, T, C ou G) (SEQ ID NO: 1), é um palíndromo imperfeito, compreendendo dois meios sítios de 6 pares de bases separados por 3 pares de bases, portanto denominados “IR3” (para “repetição invertida 3”).
[007] A segunda função é a “transrepressão de ligação indireta”, que surge da interação física dos GRs ligados ao GC com os fatores de transcrição pró-inflamatória AP-1 e NF-κB. Através da ligação à subunidade Jun de AP-1 e subunidade p65 de NF-κB, a GR antagoniza sua atividade e interfere na função de ativação transcricional dessas duas proteínas (Nissen e Yamamoto, 2000. Genes Dev. 14(18):2314- 29; Yang-Yen et al., 1990. Cell. 62(6):1205-15).
[008] A terceira função, chamada “transrepressão direta”, é uma consequência da ligação de GR associada a GC diretamente ao GRE (nGRE) recentemente descrito (2011) (Surjit et al., 2011). Cell. 145(2):224-41), que medeia a repressão direta de genes específicos. A sequência de consenso nGRE, CTCC(N)0-2GGAGA (com N sendo qualquer um de A, T, C ou G) (SEQ ID NO: 2), também é palindrômico, mas difere do clássico (+)GRE na sequência e no comprimento do espaçador (e, portanto, é denominado IR0, IR1 ou IR2 , conforme o caso).
[009] As propriedades anti-inflamatórias dos GCs naturais foram demonstradas há mais de 60 anos (Carryer et al., 1950. J Allergy. 21(4):282-7). Desde então, os derivados sintéticos de GCs têm sido amplamente utilizados em tratamentos destinados a suprimir ou aliviar desordens inflamatórias e alérgicas agudas e crônicas em várias doenças. No entanto, os tratamentos com GCs estão associados a uma variedade de efeitos colaterais debilitantes graves (Oray et al., 2016. Expert Opin Drug Saf. 15(4):457-65), como diabetes tipo 2, dislipidemia, ganho de peso, comprometimento cognitivo, gastrite, esteatose hepática, osteoporose, hipertensão, cardiopatia isquêmica, dermatoporose, atrofia da pele, catarata, glaucoma, midríase ou supressão de imunidade mediada por células. Diferentes efeitos colaterais podem ocorrer em até 90% dos pacientes que tomam GC por mais de 60 dias, independentemente da dose e via de administração. Alguns desses efeitos colaterais podem até ocorrer em pacientes que tomam doses baixas (≤ 7,5 mg/dia) (Curtis et al., 2006. Arthritis Rheum. 55(3):420-6; Pereira et al., 2010. Clinics (Sao Paulo). 65(11):1197- 1205).
[010] Antes da descoberta da via direta de transrepressão em 2011, efeitos benéficos anti-inflamatórios dos GCs haviam sido atribuídos à via indireta de transrepressão de ligação, enquanto muitos dos efeitos colaterais indesejáveis decorrentes dos tratamentos com GC eram relacionados apenas à via direta de transativação.
(Clark e Belvisi, 2012. Pharmacol Ther. 134(1):54-67) (Figura 1).
[011] Intensos esforços têm, portanto, sido feitos ao longo das últimas décadas para desenvolver novos ligantes de GR, denominados Moduladores Agonísticos de GR “dissociados” ou “Seletivos” (SEGRAMs), que iria manter um perfil transrepressão, enquanto tendo perdido parcial ou, mais idealmente, inteiramente, suas propriedades de transativação (Schäcke et al., 2004. Proc Natl Acad Sci U S A. 101(1):227-32).
[012] Nesse sentido, vários SEGRAMs putativos foram desenvolvidos, mas poucos chegaram a ensaios clínicos.
Verificou-se que esse ligante, RU24858, exibia um perfil dissociado esperado in vitro (Vayssière et al., 1997. Mol Endocrinol. 11(9):1245-55). No entanto, após a administração in vivo, os estudos fisiopatológicos falharam em confirmar esta dissociação (Belvisi et al., 2001. J Immunol.
166(3):1975-82).
[013] Posteriormente, outro ligante sintético não esteroide, chamado Mapracorat (também chamado ZK245186 ou BOL-303242-X), demonstrou in vitro atuar como um agente anti- inflamatório nas células epiteliais da córnea, desafiadas pelo estresse osmótico (Cavet et al., 2010. Mol Vis. 16:1791- 1800), e in vivo em modelos experimentais de olho seco e inflamação pós-operatória (Shafiee et al., 2011. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52(3):1422-30), com atividade comparável à da dexametasona esteroide “tradicional” sintética, mas com efeitos colaterais reduzidos na pressão intraocular e no peso corporal. O Mapracorat também foi o produto do estudo de vários ensaios clínicos entre junho de 2009 e julho de 2013: um ensaio clínico de fase II para determinação de dose como uma pomada para dermatite atópica (números de ensaios clínicos NCT00944632, NCT01228513, NCT01359787, NCT01407510, NCT01408511 e NCT01736462); e ensaios clínicos de fase I, II e III como uma suspensão oftálmica para conjuntivite alérgica (número do ensaio clínico NCT01289431) e inflamação e dor após cirurgia de catarata (números do ensaio clínico NCT00905450, NCT01230125, NCT01298752, NCT01591161, NCT01591655 e NCT01736462). No entanto, em outubro de 2018, nenhum resultado de estudo desses ensaios está disponível e nenhuma autorização de comercialização foi concedida, sugerindo que o Mapracorat pode ter revelado problemas de eficácia e/ou efeitos colaterais.
[014] Como em 2011, a função de transrepressão direta mediada por GR ligada ao GC também mostrou estar envolvida em efeitos colaterais indesejáveis (Surjit et al., 2011). Cell. 145(2):224-41), parecia que o direcionamento exclusivamente à via indireta de transrepressão de ligação seria eficiente na prevenção de efeitos colaterais.
[015] Permaneceu assim a necessidade do desenvolvimento de SEGRAMs bona fide que não possam induzir eficientemente nem a função de transativação direta nem a transrepressão direta de GR, enquanto ainda induzem sua atividade de transrepressão de ligação indireta e propriedades anti-inflamatórias in vivo.
[016] Curiosamente, no final dos anos 90, a Schering AG, agora Bayer HealthCare Pharmaceuticals, desenvolveu novos compostos não esteroides (veja, por exemplo, a patente US 6.245.804), alegando uma atividade anti-inflamatória dissociada de seus efeitos metabólicos (veja, por exemplo, a patente US 6.323.199). Em 2016, o Requerente descobriu que, dentre esses compostos, um deles denominado 5-[4-(5- fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino] isobenzofuran-1 (3H)-ona, doravante denominado “CpdX”, não induz as funções de transativação e transrepressão direta do GR, enquanto ainda induz sua atividade de transrepressão de ligação indireta (Hua et al.,
2016. Proc Natl Acad Sci U S A. 113(5):E635-43).
[017] Aqui, os inventores mostram que, ao contrário dos supostos SEGRAMs descritos anteriormente na técnica (como Mapracorat), o CpdX induz seletivamente a “atividade de transrepressão de ligação indireta” de GR, sendo assim um
SEGRAM bona fide exibindo seletivamente a função de transrepressão indireta GR, enquanto o Mapracorat exibe todas as três funções GR. Mais importante ainda, os inventores demonstram que, após administração a longo prazo a camundongos, o CpdX e seus novos derivados são terapeuticamente tão eficazes quanto o glicocorticoide sintético Dexametasona (Dex), embora desprovidos dos efeitos colaterais debilitantes bem estabelecidos dos glicocorticoides sintéticos.
SUMÁRIO
[018] A presente invenção refere-se a um Modulador Agonístico Seletivo de Receptor de Glicocorticoide(SEGRAM) de Fórmula 1 (CpdX) ou um derivado do mesmo: (Fórmula 1 - CpdX) ou um sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo.
[019] Em uma modalidade, o SEGRAM de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo está em uma forma deuterada, de preferência o SEGRAM é um composto de Fórmula 2 (CpdX-D3): (Fórmula 2 – CpdX-D3)
[020] Em uma modalidade, o SEGRAM está em uma forma racêmica ou é uma de suas duas formas de enantiômero.
[021] Em uma modalidade, um derivado do SEGRAM da Fórmula 1 é um composto da Fórmula 3: (Fórmula 3) em que: - W é selecionado a partir de O, S ou CH2, - R2 é selecionado a partir de H ou CH3, e - Z2, Z3, Z4, Z5 e Z6 são, cada um, independentemente selecionados entre H, F, Cl, Br, CH3, OCH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH3)2, C(CH3)3, COCH3, NO2, CN, CH=CH2 ou CONH2.
[022] Em uma modalidade, o SEGRAM de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo não induz ou não induz substancialmente nem uma função de transativação direta nem uma função de transrepressão direta do receptor de glicocorticoide.
[023] Em uma modalidade, o SEGRAM de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo.
[024] Em uma modalidade, os efeitos colaterais associados a SAIDs são selecionados do grupo que compreende atrofia da pele; osteoporose; supressão de crescimento; perda de peso corporal; ganho de massa gorda; perda de massa magra; apoptose do timo, baço, rim e/ou glândula adrenal; inibição da síntese de corticosterona; supressão adrenal; hiperglicemia; resistência à insulina; hiperinsulinemia; e fígado gorduroso.
[025] Em uma modalidade, a desordem inflamatória é caracterizada por um nível aumentado de pelo menos uma citocina secretada e/ou anticorpo selecionado do grupo que compreende IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL- 6, IL-10, IL- 12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL- 23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 e IgG2a.
[026] Em uma modalidade, a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica,
dermatite de contato, asma alérgica, sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, rinoconjuntivite, arterite de células gigantes (doença de Horton), febre do feno, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por picada de inseto, anafilaxia, psoríase, artrite reumatoide, doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo doença de Crohn, colite ulcerativa e colite), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite, síndrome de Sjogren, esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença cardíaca coronária, hiperlipidemia, síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa e doença do enxerto contra o hospedeiro.
[027] Em uma modalidade, a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite de contato, dermatite atópica, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e colite ulcerativa.
[028] Em uma modalidade, a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e colite ulcerativa; e o SEGRAM é um enantiômero do SEGRAM de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, correspondendo o referido enantiômero ao primeiro pico de eluição [CpdX(eA)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica do SEGRAM de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[029] Em uma modalidade, a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, psoríase, conjuntivite alérgica e colite ulcerativa; e o SEGRAM é um enantiômero do SEGRAM de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, correspondendo o referido enantiômero ao segundo pico de eluição [CpdX(eB)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica do SEGRAM de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[030] Em uma modalidade, a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e colite ulcerativa; e o SEGRAM é um enantiômero do SEGRAM da Fórmula 2 ou um derivado do mesmo, correspondendo o referido enantiômero ao primeiro pico de eluição [CpdX-D3 (eA)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica do SEGRAM da Fórmula 2 ou um derivado do mesmo.
[031] Em uma modalidade, a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, psoríase, conjuntivite alérgica e colite ulcerativa; e o SEGRAM é um enantiômero do SEGRAM de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo, correspondendo o referido enantiômero ao segundo pico de eluição [CpdX-D3(eB)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica do SEGRAM de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo.
[032] A presente invenção também refere-se a um enantiômero de um Modulador Agonístico Seletivo de Receptor de Glicocorticoide (SEGRAM) de Fórmula 1, ou de um sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, preferencialmente o referido enantiômero é CpdX(eA) ou CpdX(eB).
[033] Em uma modalidade, o enantiômero é obtido pela separação de uma mistura racêmica do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo por cromatografia de fluido supercrítico (SFC), em que CpdX(eA) corresponde ao primeiro pico de eluição e CpdX(eB) corresponde a o segundo pico de eluição.
[034] A presente invenção também se relaciona com uma forma deuterada de um Modulador Agonístico Seletivo de Receptor de Glicocorticoide (SEGRAM) de Fórmula 1, ou de um sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[035] Em uma modalidade, a referida forma deuterada é um composto da Fórmula 2:
(Fórmula 2).
[036] Em uma modalidade, a referida forma deuterada está em uma forma racêmica.
[037] Em uma modalidade, a referida forma deuterada é um dos dois enantiômeros do composto de Fórmula 2, de preferência o referido enantiômero é CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB).
[038] Em uma modalidade, a referida forma deuterada é obtida pela separação de uma mistura racêmica do composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo por cromatografia de fluido supercrítico (SFC), e em que CpdX-D3(eA) corresponde ao primeiro pico de eluição e CpdX-D3(eB) corresponde ao segundo pico de eluição.
DEFINIÇÕES
[039] “Supressão adrenal”, ou “insuficiência adrenal”, conforme usado aqui, se refere a uma condição na qual as glândulas suprarrenais não produzem quantidades adequadas de cortisol. O uso de esteroides em altas doses por mais de uma semana começa a produzir supressão das glândulas suprarrenais do sujeito, porque os glicocorticoides exógenos suprimem o hormônio liberador de corticotropina hipotalâmica (CRH) e o hormônio adrenocorticotrópico hipofisário (ACTH), além de inibir a síntese de enzimas sintetizadoras de corticosterona adrenal.
Com a supressão prolongada, as glândulas suprarrenais se atrofiam e podem levar até 9 meses para recuperar a função completa após a descontinuação do glicocorticoide exógeno.
Durante esse tempo de recuperação, o sujeito fica vulnerável à insuficiência adrenal durante períodos de estresse, como doenças, devido à atrofia adrenal e à supressão da liberação de CRH e ACTH.
[040] “CpdX”, tal como aqui utilizado, se refere ao Modulador agonístico seletivo de receptor de glicocorticoide (SEGRAM) de Fórmula 1: (Fórmula 1) ou um enantiômero, forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo. “CpdX” corresponde a 5-[4-(5-fluor-2-metoxifenil)-2-hydroxi-4-metil-2-(trifluoro metil)pentilamino]-isobenzofuran-1(3H)-ona (Ver Exemplo 1, Figura 2A).
[041] “CpdX(eA)” como aqui utilizado, se refere a um dos dois enantiômeros do SEGRAM de Fórmula 1 ou a um sal, solvato ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
“CpdX(eA)” corresponde ao primeiro pico de eluição de 5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluor ometil)pentilamino]-isobenzofuran-1(3H)-ona separado por cromatografia de fluido supercrítico preparativa (ver Exemplo 1, Figura 2B).
[042] “CpdX(eB)”, como aqui utilizado, se refere a um dos dois enantiômeros do SEGRAM de Fórmula 1 ou a um sal, solvato ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
“CpdX(eB)” corresponde ao segundo pico de eluição de 5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluor ometil)pentilamino]-isobenzofuran-1(3H)-ona separada por cromatografia de fluido supercrítico preparativa (ver Exemplo 1, Figura 2B).
[043] “CpdX-D3”, como aqui utilizado, se refere a uma forma racêmica deuterada do SEGRAM de Fórmula 1 ou a um sal, solvato ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo. “CpdX-D3” corresponde um 5-{4-[2-(metoxi-D3)-5- fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluoro- metil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona de Fórmula 2 (ver Exemplo 1, Figura 2C):
(Fórmula 2)
[044] “CpdX-D3(eA)”, como aqui utilizado, se refere a um dos dois enantiômeros do SEGRAM de Fórmula 2 ou a um sal, solvato ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo. “CpdX-D3(eA)” corresponde ao primeiro pico de eluição de 5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona separada por cromatografia de fluido supercrítico preparativa (ver Exemplo 1, Figura 2D).
[045] “CpdX-D3(eB)”, como aqui utilizado, se refere a um dos dois enantiômeros do SEGRAM de Fórmula 2 ou a um sal, solvato ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo. “CpdX-D3(eB)” corresponde ao segundo pico de eluição de 5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona separada por cromatografia de fluido supercrítico preparativa (ver Exemplo 1, Figura 2D).
[046] “Função de transativação direta do receptor glicocorticoide (GR)” se refere à ativação transcricional de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide positivo ((+) GRE) (com SEQ ID NO: 1) ligado por um GR associado a glicocorticoide (GC) na sua região promotora.
[047] “Função de transrepressão direta do receptor de glicocorticoide (GR)” se refere à repressão transcricional de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide negativo (nGRE) (com SEQ ID NO: 2) ligado por um GR associado a glicocorticoide (GC) na sua região promotora.
[048] “Atividade melhorada de Th2” significa que um sujeito doente tem um aumento (por exemplo, pelo menos 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 8 vezes, 10 vezes ou mais) em sua atividade de Th2, em comparação com um sujeito saudável. Uma atividade melhorada de Th2 pode ser medida por um aumento no nível de citocinas e anticorpos secretados (por exemplo, IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, TSLP, IgE e IgG1) de acordo com métodos conhecidos na técnica.
[049] “Atividade melhorada de Th17” significa que um sujeito doente tem um aumento (por exemplo, pelo menos 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 8 vezes, 10 vezes ou mais) em sua atividade Th17, em comparação com um sujeito saudável. Uma atividade melhorada de Th17 pode ser medida por um aumento no nível de citocinas secretadas (por exemplo, IL-1β, IL-6, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-21, IL-22, IL -23 e TGFβ) de acordo com métodos conhecidos na técnica.
[050] “Atividade melhorada de Th1” significa que um sujeito doente tem um aumento (por exemplo, pelo menos 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 8 vezes, 10 vezes ou mais) em sua atividade T h 1, em comparação com um sujeito saudável. Uma atividade aumentada Th1 pode ser medida por um aumento do nível de citocinas e anticorpos secretados (por exemplo, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-6, IL-12, IL-18, IL-23, IFN- γ, TNFα e IgG2a) de acordo com métodos conhecidos na técnica.
[051] “Fígado gorduroso”, também conhecido como “esteatose hepática”, como usado aqui, se refere a uma condição em que grandes vacúolos de gordura triglicerídica se acumulam nas células hepáticas através do processo de esteatose (isto é, retenção anormal de lipídeos dentro de uma célula). Esse acúmulo de gordura também pode ser acompanhado por uma inflamação progressiva do fígado (hepatite), chamada esteato-hepatite.
[052] A “supressão do crescimento” é um efeito adverso importante e bem reconhecido da terapia com fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAID), principalmente em crianças. O mecanismo de supressão do crescimento inclui, sem limitação, o efeito dos SAIDs nos componentes essenciais do anabolismo e crescimento, incluindo o metabolismo ósseo, a retenção de nitrogênio e o efeito na formação de colágeno.
As terapias SAID também resultam na inibição da liberação do hormônio do crescimento e da biodisponibilidade do fator de crescimento semelhante à insulina 1 (IGF-1). Em uma modalidade, a supressão do crescimento com a terapia com SAID afeta todo o corpo, com um crescimento físico atrofiado.
Em uma modalidade, a supressão do crescimento após a terapia com SAID afeta os órgãos internos e inclui, mas não está limitado a, timo, baço, rim, fígado e glândula adrenal.
[053] “Hiperglicemia” é uma condição na qual circula uma quantidade excessiva de glicose no plasma sanguíneo, como, por exemplo, mais de 11,1 mmol de glicose por L de sangue (200 mg de glicose por dL de sangue). As diretrizes da Associação Americana de Diabetes classificam sujeitos em vários subgrupos, de levemente hiperglicêmicos (com um nível de glicose variando de cerca de 5,6 a 7 mmol/L de sangue, ou seja, de 100 a 126 mg/dL de sangue) e diabéticos (com um nível de glicose acima de 7 mmol/L de sangue, ou seja, acima de 126 mg/dL de sangue). O efeito dos SAIDs no metabolismo da glicose é dependente da dose e causa um leve aumento nos níveis de glicose no sangue em jejum e um aumento maior na glicemia pós-prandial em pacientes sem diabetes mellitus preexistente. A hiperglicemia induzida por SAID é de origem multifatorial e pode ser explicada pelo aumento da gliconeogênese hepática, inibição da captação de glicose no tecido adiposo e/ou alteração das funções de receptor e pós- receptor induzidas por SAIDs. As técnicas para avaliar o desenvolvimento de hiperglicemia por terapia com SAID ou por administração do SEGRAM da presente invenção a um sujeito em necessidade do mesmo são bem conhecidas do técnico no assunto, e incluem, sem limitação, exame de sangue com análise bioquímica e teste de glicose (incluindo teste de açúcar no sangue em jejum (FBS), teste de glicose no plasma em jejum (FPG), teste de tolerância à glicose, teste de glicemia pós-prandial (PG) e teste aleatório de glicose).
[054] “Hiperinsulinemia” ou “hiperinsulinismo”, conforme usado aqui, se refere a uma condição na qual uma quantidade excessiva de insulina circula no plasma sanguíneo. A hiperinsulinemia está associada à hipertensão, obesidade, dislipidemia e intolerância à glicose (todas conhecidas coletivamente como “síndrome metabólica”).
[055] “Função de transrepressão de ligação indireta do receptor de glicocorticoide (GR)” se refere à repressão transcricional de genes que compreendem um sítio de ligação a AP-1 (com uma sequência de ácidos nucleicos ATGAGTCAT) e/ou um sítio de ligação a NF-κB (com uma sequência de ácidos nucleicos SEQ ID NO: 3-GGGRNNYYCC, com R sendo qualquer um de G ou A, Y sendo qualquer um de T ou C e N sendo qualquer um de A, T, C ou G) em sua região promotora, limitada pela subunidade Jun de AP-1 e/ou a subunidade p65 de NF-kB, respectivamente, ligados por um GR associado ao glicocorticoide (GC).
[056] “Desordem inflamatória” se refere a um estado patológico que resulta em inflamação, por exemplo, causada pelo influxo de leucócitos e/ou quimiotaxia de neutrófilos.
A inflamação pode resultar da infecção por organismos e vírus patogênicos ou de meios não infecciosos, como, por exemplo, resposta imunológica a antígeno estranho, respostas autoimunes, trauma ou reperfusão após infarto do miocárdio ou acidente vascular cerebral. As células Th1, Th2 e Th17 são três subconjuntos de células T helper que se sabe estarem envolvidos em várias desordens inflamatórias. Elas se diferenciam das células T CD4 ingênuas (ou células Th0), dependendo do ambiente de citocinas: IFN-y aciona a produção de célula Th1 enquanto a IL-10 e IL-4 inibem a produção de célula Th1; por outro lado, a IL-4 aciona a produção de células Th2 e o IFN-γ inibe as células Th2. Quanto às células Th17, sua produção é dirigida por TGF-β, IL-6, IL-21, IL-23 e IL-33.
[057] “Osteoporose” é uma doença progressiva caracterizada por baixa massa óssea, deterioração da microarquitetura do tecido ósseo, fragilidade óssea e consequente aumento no risco de fratura. A osteoporose secundária, como consequência do uso sistêmico de fármacos, como os SAIDs, é uma das complicações mais debilitantes da terapia com glicocorticoides, reconhecida desde 1940. A dose cumulativa, bem como a duração da exposição do SAID, são os principais determinantes no desenvolvimento da osteoporose.
A inibição da função dos osteoblastos é o principal efeito dos SAIDs no metabolismo ósseo, levando a uma diminuição na formação óssea. A perda óssea começa imediatamente após o início da terapia com SAID e ocorre principalmente nos primeiros seis meses de tratamento. Além da perda óssea, a terapia com SAID também pode resultar em alterações na integridade arquitetônica do osso. As técnicas para avaliar o desenvolvimento da osteoporose por terapia com SAID ou por administração do SEGRAM da presente invenção a um sujeito em necessidade do mesmo são bem conhecidas do técnico no assunto, e incluem, sem limitação, medir a densidade mineral óssea na linha de base e comparar o resultado da linha de base para medições subsequentes durante e após o tratamento.
As técnicas para prevenir a osteoporose também são bem conhecidas do técnico no assunto e incluem, sem limitação, administração a um paciente em necessidade do mesmo, uma suplementação em cálcio e/ou vitamina D e atividade física apropriada.
[058] “Pró-fármaco”, como aqui utilizado, se refere aos derivados farmacologicamente aceitáveis do SEGRAM da invenção, preferencialmente do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, como ésteres cujo produto de biotransformação in vivo é o fármaco ativo. Os pró-fármacos são caracterizados pelo aumento da biodisponibilidade e são rapidamente metabolizados nos compostos ativos in vivo. Os pró-fármacos adequados para os fins da invenção incluem ésteres carboxílicos (em particular ésteres alquílicos, ésteres arílicos, ésteres aciloxialquílicos e ésteres carboxílicos de dioxoleno) e ésteres de ácido ascórbico.
[059] “Atividade de Th2 reduzida” significa que um sujeito doente tem uma diminuição (por exemplo, pelo menos 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 8 vezes, 10 vezes ou menos) na sua resposta ao Th2, em comparação com um sujeito saudável. Uma atividade reduzida de Th2 pode ser medida por uma diminuição no nível de citocinas e anticorpos secretados (por exemplo, IL-1β, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL- 10, IL-13, TSLP, IgE e IgG1) de acordo com métodos conhecidos na técnica.
[060] “Atividade de Th17 reduzida” significa que um sujeito doente tem uma diminuição (por exemplo, pelo menos 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 8 vezes, 10 vezes ou menos) na sua resposta Th17, em comparação com um sujeito saudável. Uma atividade reduzida de Th17 pode ser medida por uma diminuição no nível de citocinas secretadas (por exemplo, IL-1β, IL-6, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-21, IL-22, IL-23 e TGFβ) de acordo com métodos conhecidos na técnica.
[061] “Atividade de Th1 reduzida” significa que um sujeito doente tem uma diminuição (por exemplo, pelo menos 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 8 vezes, 10 vezes ou menos) na sua resposta Th1, em comparação com um sujeito saudável. Uma atividade reduzida de Th1 pode ser medida por uma diminuição no nível de citocinas e anticorpos secretados (por exemplo, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-6, IL-12, IL- 18, IL-23, IFN-γ, TNFα e IgG2a) de acordo com métodos conhecidos na técnica.
[062] “Atrofia da pele”, também chamada de “atrofia esteroide” ou “atrofia dérmica induzida por corticosteroide”, consiste em uma redução da espessura epidérmica e/ou dérmica, regressão das glândulas sebáceas, perda subcutânea de gordura e/ou atrofia da camada muscular.
É o resultado da inibição da atividade mitótica dos fibroblastos e/ou da colagenase, conduzida por SAID, levando a uma diminuição na síntese de colágeno e glicosaminoglicano e a uma redução no diâmetro das fibrilas. As técnicas para avaliar o desenvolvimento de atrofia da pele após terapia com SAID ou após a administração do SEGRAM da presente invenção a um sujeito em necessidade do mesmo são bem conhecidas do técnico no assunto, e incluem, sem limitação, controle visual do afinamento da pele e a proeminência vascular, uso de pinças (incluindo o paquímetro Harpenden), gravimetria, ultrassonografia, raio X de tecidos moles, histiometria, resistividade elétrica e análise transcricional dos genes Kindlin-1 (Ussar et al., 2008. PLoS Genet. 4(12):e1000289) and REDD1 (Britto et al., 2014. Am J
Physiol Endocrinol Metab. 307(11):E983-93; Baida et al.,
2015. EMBO Mol Med. 7(1):42-58).
[063] “Solvato”, como aqui utilizado, se refere a um complexo molecular compreendendo os SEGRAMs da invenção, preferencialmente os compostos de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo e uma ou mais moléculas de solvente farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, etanol. O termo “hidrato” é empregado quando o referido solvente é água.
[064] “Efeitos colaterais associados a medicamentos anti-inflamatórios esteroides (SAIDs)”, como aqui utilizados, se refere aos efeitos colaterais (também denominados “efeitos debilitantes”) comumente observados em sujeitos submetidos a um tratamento de curto, médio ou longo prazo com um anti-inflamatório esteroide (SAIDs).
[065] “Desordem inflamatória relacionada à Th2” se refere a qualquer doença, desordem ou condição, em que as células Th2 suportam, causam ou medeia a doença, desordem ou condição do processo ou em que as células Th 2 estão envolvidas na cura ou alívio dos sintomas, desordem ou condição da doença, que podem ser representados por uma atividade de Th2 aumentada ou reduzida.
[066] “Desordem inflamatória relacionada à Th17” se refere a qualquer doença, desordem ou condição, em que as células Th17 suportam, causam ou medeiam a doença, desordem ou condição do processo ou em que as células Th17 estão envolvidos na cura ou alívio dos sintomas, desordem ou condição da doença, que podem ser representados por uma atividade Th17 aumentada ou reduzida.
[067] “Desordem inflamatória relacionada à Th1” se refere a qualquer doença, desordem ou condição, em que as células Th1 suportam, causam ou medeiam a doença, desordem ou condição do processo ou em que as células Th1 estão envolvidos na cura ou alívio de sintomas, desordem ou condição da doença, a qual pode ser representada por uma atividade aumentada ou reduzida Th1.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[068] A presente invenção se refere a métodos para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória que compreende a administração a um sujeito em necessidade do mesmo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um Modulador agonístico seletivo de receptor de glicocorticoide (SEGRAM).
[069] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada às células Th2 helper (Th2). Em uma modalidade, os métodos da invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada às células Th17 helper (Th17). Em uma modalidade, os métodos da invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada às células Th1 helper (Th1).
[070] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th2 e Th17 o (também referido como “desordem inflamatória mista Th2/Th17”). Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar uma desordem inflamatória relacionada à Th1 e Th17 (também conhecido como “desordem inflamatória mista Th1/Th17”). Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar uma desordem inflamatória relacionada à Th 1 e Th 2 (também conhecido como “desordem inflamatória mista de Th1/Th2”). Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e Th17 (também conhecido como “desordem inflamatória mista de Th1/Th2/Th17”).
Desordens inflamatórias
[071] Exemplos de desordens inflamatórias incluem, sem limitação, dermatite atópica, dermatite de contato, asma incluindo asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide, arterite de células gigantes (doença de Horton), doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, mas não limitado a, Doença de Crohn, colite ulcerativa e colite), síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós- menopausa, periodontite, doença de Pagets, osteoporose, mieloma múltiplo, uveíte, leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crônica, destruição das células β pancreáticas,
espondilite reumatoide, osteoartrite, artrite gótica e outras condições de artrite, gota, síndrome do desconforto respiratório do adulto (SDRA), doenças inflamatórias pulmonares crônicas, silicose, sarcoidose pulmonar, rinite, anafilaxia, pancreatite, degeneração muscular, caquexia incluindo caquexia secundária a infecção, malignidade ou síndrome da imunodeficiência adquirida, Síndrome de Reiter, diabetes tipo I, doença de reabsorção óssea, doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH), lesão de isquemia- reperfusão, trauma cerebral, esclerose múltipla, malária cerebral, sepse, choque séptico, síndrome do choque tóxico, choque endotóxico, sepse por gram-negativos, febre e mialgias devido a infecções como influenza e pirose.
Desordens inflamatórias relacionadas à Th2
[072] Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th2. Em uma modalidade, desordens inflamatórias relacionadas à Th2 incluem qualquer doença, desordem ou condição em que as células Th2 suportam, causam ou medeiam o processo da doença, desordem ou condição. Em uma modalidade, desordens inflamatórias relacionadas à Th2 incluem qualquer doença, desordem ou condição, em que as células Th2 estão envolvidos na cura ou alívio dos sintomas da doença, desordem ou condição.
[073] Em uma modalidade, uma desordem inflamatória relacionada à Th 2 está representada por uma atividade aumentada de Th2. Em uma modalidade, uma desordem inflamatória relacionada à Th2 está representada por uma reduzida atividade de Th2.
[074] Doenças inflamatórias relacionadas com Th2 incluem, mas não estão limitadas a, doenças alérgicas e doenças infecciosas (particularmente infecções extracelulares).
[075] Doenças alérgicas relacionadas à Th 2 englobadas dentro da presente invenção incluem, mas não estão limitados a, dermatite atópica, asma alérgica, sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, rinoconjuntivite, febre dos fenos, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por picada de inseto e anafilaxia.
[076] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a dermatite atópica (ver Exemplo 5).
[077] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a asma alérgica (ver Exemplo 6).
[078] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a conjuntivite alérgica (ver Exemplo 10).
Desordens inflamatórias relacionados à Th17
[079] Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th17. Em uma modalidade, desordens inflamatórias relacionadas à Th17 incluem qualquer doença, desordem ou condição em que as células Th17 suportam, causam ou medeiam o processo da doença, desordem ou condição. Em uma modalidade, desordens inflamatórias relacionadas à Th17 incluem qualquer doença, desordem ou condição, em que as células Th17 estão envolvidas na cura ou alívio dos sintomas da doença, desordem ou condição.
[080] Em uma modalidade, uma desordem inflamatória relacionada à Th17 é representada por uma atividade aumentada de Th17. Em uma modalidade, uma desordem inflamatória relacionada à Th17 é representada por uma reduzida atividade de Th17.
[081] Doenças inflamatórias relacionadas à Th17 incluem, mas não estão limitados a, doenças autoimunes e distúrbios proliferativos (por exemplo, câncer).
[082] Doenças autoimunes relacionados à Th17 abrangidas pela presente invenção incluem, mas não estão limitados a, dermatite de contacto, psoríase, artrite reumatoide, doença inflamatória do intestino (DII) (incluindo, mas não se limitando a, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite,
síndrome de Sjogren, esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença coronariana, hiperlipidemia, síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa e doença do enxerto contra o hospedeiro.
[083] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a dermatite de contato (ver Exemplo 3).
[084] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a psoríase (ver Exemplo 7).
[085] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a artrite reumatoide (ver Exemplo 8).
[086] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a colite (ver Exemplo 9).
[087] Em uma modalidade, os métodos da invenção são para prevenir e/ou tratar a periodontite.
Desordens inflamatórias relacionadas à Th1
[088] Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th1. Em uma modalidade, desordens inflamatórias relacionadas à Th1 incluem qualquer doença, desordem ou condição em que as células Th1 suportam, causam ou medeiam o processo da doença, desordem ou condição. Em uma modalidade, desordens inflamatórias relacionadas à Th1 incluem qualquer doença, desordem ou condição, em que as células Th1 estão envolvidas na cura ou alívio dos sintomas da doença, desordem ou condição.
[089] Em uma modalidade, uma desordem inflamatória relacionada à Th1 é representada por uma atividade aumentada de Th1. Em uma modalidade, uma desordem inflamatória relacionada à Th1 é representado por uma atividade reduzida de Th1.
[090] Desordens inflamatórias relacionadas à Th1 incluem, mas não estão limitadas a, doenças infecciosas (particularmente infecções intracelulares, tais como, por exemplo, infecções virais e distúrbios proliferativas) (por exemplo, câncer).
Métodos para medir os níveis de citocinas/Ig
[091] Os métodos para medir um aumento ou diminuição no nível de citocinas e anticorpos secretados são bem conhecidos do técnico no assunto, e incluem, sem limitação,
análise histológica e análise de perfis de citocinas e/ou imunoglobulinas.
[092] Os perfis de citocinas e/ou imunoglobulinas podem ser medidos por métodos convencionais usando anti- citocinas (como, por exemplo, anticorpos anti-IL-1β, anti- IL-2, anti-IL-3, anti-IL-4, anti-IL-5, anti-IL-6, anti-IL- 10, anti-IL-12, anti-IL-13, anti-IL-17a, anti-IL-17c, anti- IL-17f, anti-IL-18, anti-IL-21, anti-IL-22, anti-IL-23, anti-IL-33, anti-IFN-γ, anti-TNFα, anti-TGFβ ou anti-TSLP) e/ou anticorpos anti-isotipo (tais como, por exemplo, anticorpos anti-IgA, anti-IgE, anti-IgG1, anti-IgG2a, anti- IgG2b, anti-IgG3 ou anti-IgM) em um teste de citometria de fluxo, ensaio ELISA, ensaio ELISA sanduíche, ensaio ELISPOT ou semelhantes. Outros métodos para medir um perfil de citocinas incluem, entre outros, reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa (RT-PCR), incluindo reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR), reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa quantitativa (q-RT-PCR) e semelhantes.
Propriedades dos SEGRAMs da invenção Função em GR
[093] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz ou não induz substancialmente a função de transativação direta do receptor de glicocorticoide (GR).
[094] Por “não induz a função de transativação direta do receptor de glicocorticoide (GR)”, entende-se que, após a ligação do SEGRAM da presente invenção a GR, o nível de transcrição de genes que compreende um elemento de resposta glicocorticoide positivo ((+)GRE) é não superior ao seu nível de transcrição antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em outras palavras, após a ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR, a transcrição de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide positivo ((+)GRE) não é aumentada em comparação com antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[095] Por “não induz substancialmente a função de transativação direta do receptor de glicocorticoide (GR)” significa que, após a ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR, o nível de transcrição de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide positivo ((+)GRE) não é superior a três vezes, duas vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu nível de transcrição antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em outras palavras, após a ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR, a transcrição de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide positivo ((+)GRE) não é aumentada em mais de três vezes, duas vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos em comparação com antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[096] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz ou não induz substancialmente a função de transrepressão direta do GR.
[097] Por “não induz a função direta de transrepressão do GR”, entende-se que, após a ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR, o nível de transcrição de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide negativo (nGRE) não é inferior ao seu nível de transcrição antes ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em outras palavras, após a ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR, a transcrição de genes compreendendo um elemento de resposta glicocorticoide negativo (nGRE) não diminui em comparação com antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[098] Por “não induz substancialmente a função de transrepressão direta do GR” significa que, após a ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR, o nível de transcrição de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide negativo (nGRE) não é inferior a três vezes, duas vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu nível de transcrição antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em outras palavras, após a ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR, a transcrição de genes que compreendem um elemento de resposta glicocorticoide negativo (nGRE) não diminui em mais do que três vezes, duas vezes, 1,8 vez e 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos em comparação com antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[099] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz ou não induz substancialmente nem a transativação direta, nem as funções de transrepressão direta do GR.
[0100] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção induz seletivamente a função de transrepressão de ligação indireta do GR.
Função nas células Th Função em células Th2
[0101] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a diferenciação das células Th2 das células Th0.
[0102] Por “inibe a diferenciação de células Th2 de células Th0” entende-se que após a ligação da SEGRAM da invenção ao GR, o número de células Th2 não é maior do que o seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o número de células Th2 é menor do que o seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o número de células Th2 é 1,1 vez, 1,2 vez, 1,5 vez, 2 vezes, 3 vezes, 5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes ou mais abaixo do seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao
GR.
[0103] Por “substancialmente inibe diferenciação de células Th2 de células Th0” entende-se que após a ligação da SEGRAM da invenção ao GR, o número de células Th2 não superior é de 2 vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0104] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais das citocinas selecionadas do grupo que compreende ou consiste em IL-4, IL-5, IL-10, IL-13 e TSLP. Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais imunoglobulinas selecionadas do grupo que compreende ou consiste em IgE e IgG1.
[0105] Por “inibe a produção de qualquer uma ou mais das citocinas” e “inibe a produção de qualquer uma ou mais das imunoglobulinas” significa que, após a ligação do SEGRAM da invenção ao GR, o nível de expressão das citocinas ou imunoglobulinas referidas não é superior ao seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o nível de expressão das referidas citocinas ou imunoglobulinas é inferior ao seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o nível de expressão das citocinas ou imunoglobulinas é de 1,1 vez, 1,2 vez, 1,5 vez, 2 vezes, 3 vezes, 5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes ou mais abaixo do seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0106] Por “inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais das citocinas” e “inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais das imunoglobulinas” significa que, após a ligação do SEGRAM da invenção ao GR, o nível de expressão das citocinas ou as imunoglobulinas não é superior a 2 vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
Função em células Th17
[0107] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a diferenciação de células Th17 das células Th0.
[0108] Por “inibe a diferenciação das células Th17 a partir de células Th0” entende-se que após a ligação da SEGRAM da invenção ao GR, o número de células Th17 não é maior do que o seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o número de células Th17 é inferior ao seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o número de células Th17 é 1,1 vez, 1,2 vez, 1,5 vez, 17 vezes, 3 vezes, 5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes ou mais abaixo do seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0109] Por “inibe substancialmente diferenciação de células Th17 a partir de células Th0” entende-se que após a ligação da SEGRAM da invenção ao GR, o número de células Th17 não é superior a 2 vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0110] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais das citocinas selecionadas do grupo que compreende ou consiste em IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-21, IL-22, IL-23 e TGFβ.
[0111] Por “inibe a produção de qualquer uma ou mais das citocinas”, entende-se que após a ligação do SEGRAM da invenção ao GR, o nível de expressão das citocinas não é maior que o seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o nível de expressão das referidas citocinas é inferior ao seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o nível de expressão das referidas citocinas é 1,1 vez, 1,2 vez, 1,5 vez, 2 vezes, 3 vezes, 5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes ou mais abaixo do seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0112] “Inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais citocinas” significa que, após a ligação do SEGRAM da invenção ao GR, o nível de expressão das citocinas não é maior que 2 vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
Função em células Th1
[0113] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a diferenciação de células Th1 a partir de células Th0.
[0114] Por “inibe a diferenciação de células Th1 a partir de células Th0” entende-se que após a ligação da SEGRAM da invenção ao GR, o número de células Th1 não é maior do que o seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o número de células Th1 é inferior ao seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o número de células Th1 é 1,1 vez, 1,2 vez, 1,5 vez, 1 vezes, 3 vezes, 5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes ou mais abaixo do seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0115] Por “inibe substancialmente diferenciação de células Th1 a partir de células Th0” entende-se que após a ligação da SEGRAM da invenção ao GR, o número de células Th1 não é superior a 2 vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu número antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0116] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais das citocinas selecionadas do grupo que compreende ou consiste em IL-2, IL-12, IL-18, IFN-γ e TNFα. Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção inibe ou inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais imunoglobulinas selecionadas do grupo que compreende ou consiste em IgG2a.
[0117] Por “inibe a produção de qualquer uma ou mais das citocinas” e “inibe a produção de qualquer uma ou mais das imunoglobulinas” significa que, após a ligação do SEGRAM da invenção ao GR, o nível de expressão das citocinas ou imunoglobulinas referidas não é superior ao seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o nível de expressão das referidas citocinas ou imunoglobulinas é inferior ao seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR. Em uma modalidade, o nível de expressão das citocinas ou imunoglobulinas é de 1,1 vez, 1,2 vez, 1,5 vez, 2 vezes, 3 vezes, 5 vezes, 10 vezes, 25 vezes, 50 vezes, 100 vezes ou mais abaixo do seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
[0118] Por “inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais das citocinas” e “inibe substancialmente a produção de qualquer uma ou mais das imunoglobulinas” significa que, após a ligação do SEGRAM da invenção ao GR, o nível de expressão das citocinas ou as imunoglobulinas não é superior a 2 vezes, 1,8 vez, 1,6 vez, 1,5 vez, 1,4 vez, 1,3 vez, 1,2 vez, 1,1 vez ou menos o seu nível de expressão antes da ligação do SEGRAM da presente invenção ao GR.
Efeitos colaterais
[0119] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais após a administração a um sujeito em necessidade do mesmo.
[0120] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo.
[0121] Exemplos de SAIDs incluem, mas não estão limitados a, glicocorticoides naturais e glicocorticoides sintéticos. Exemplos de glicocorticoides naturais incluem, sem limitação, cortisona, cortodoxona, desoxicortona, hidrocortisona, acetato de prebediolona e pregnenolona. Os glicocorticoides sintéticos incluem, sem limitação, alclometasona, amcinonida, beclometasona, betametasona, budesonida, cloroprednisona, cloroprednisona, ciclesonida, clobetasol, clobetasona, clocortolona, cloprednol,
cortivazol, deflacort, desonida, desoximetasona, dexametasona, diflorasona, diflucortolona, difluprednato, difluclorolona, fluclorolona, fludrocortisona, fludroxicortida, flugestoneacetato, flumetasona, flunisolida, fluocinolona, fluocinonida, fluocortina, fluocortolona, fluorometolona, fluperolona, fluprednideno, fluprednisolona, fluticasona, formocortal, halcinonida, halometasona, loteprednol, medrisona, meprednisone, metilprednisolone, mometasone, parametasona, prednicarbato, prednisolona, prednisona e tixocortol, prednilideno, rimexolona, triamcinolona, triamcinolona e ulobetasol.
[0122] Exemplos de efeitos colaterais associados a SAIDs incluem, entre outros, efeitos colaterais musculoesqueléticos, efeitos colaterais endócrinos e metabólicos, efeitos colaterais gastrointestinais, efeitos colaterais cardiovasculares, efeitos colaterais dermatológicos, efeitos colaterais neuropsiquiátricos, efeitos colaterais oftalmológicos e efeitos colaterais imunológicos.
[0123] Os efeitos colaterais osteomusculares associados a SAIDs incluem, entre outros, osteoporose, necrose avascular dos ossos e miopatia.
[0124] Os efeitos colaterais endócrinos e metabólicos associados a SAIDs incluem, mas não estão limitados a, síndrome metabólica; supressão de crescimento;
perda de peso corporal; ganho de massa gorda; perda de massa magra; apoptose do timo, baço, rim e/ou glândula adrenal; inibição da síntese de corticosterona; supressão adrenal; hiperglicemia; resistência à insulina; hiperinsulinemia; diabetes tipo 2; dislipidemia; fígado gordo; e características cushingoides.
[0125] Os efeitos colaterais gastrointestinais associados a SAIDs incluem, entre outros, gastrite, úlcera péptica, sangramento gastrointestinal, perfuração visceral e pancreatite.
[0126] Os efeitos colaterais cardiovasculares associados a SAIDs incluem, entre outros, hipertensão, doença cardíaca coronária, doença isquêmica do coração e insuficiência cardíaca.
[0127] Os efeitos colaterais dermatológicos associados a SAIDs incluem, entre outros, atrofia da pele, dermatoporose, equimoses, púrpura, erosões, estrias, cicatrização retardada de feridas, hematomas fáceis, acne, hirsutismo e perda de cabelo.
[0128] Os efeitos colaterais neuropsiquiátricos associados a SAIDs incluem, entre outros, alterações de humor, depressão, euforia, instabilidade de humor, irritabilidade, acatisia, ansiedade, comprometimento cognitivo, psicose, demência e delírio.
[0129] Os efeitos colaterais oftalmológicos associados a SAIDs incluem, entre outros, catarata, glaucoma, ptose, midríase, infecções oculares oportunistas e coriorretinopatia serosa central.
[0130] Os efeitos colaterais imunológicos associados aos SAIDs incluem, entre outros, supressão da imunidade mediada por células, predisposição a infecções e reativação de infecções latentes.
[0131] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção não induz ou não induz substancialmente qualquer um ou mais efeitos colaterais associados a SAIDs selecionados do grupo que compreende ou consiste em osteoporose; necrose avascular do osso; miopatia; síndrome metabólica; supressão de crescimento; perda de peso corporal; ganho de massa gorda; perda de massa magra; apoptose do timo, baço, rim e/ou glândula adrenal; inibição da síntese de corticosterona; supressão adrenal; hiperglicemia; resistência à insulina; hiperinsulinemia; diabetes tipo 2; dislipidemia; fígado gorduroso; gastrite; úlcera péptica; sangramento gastrointestinal; perfuração visceral; esteatose hepática; pancreatite; hipertensão; doença cardíaca coronária; cardiopatia isquêmica; insuficiência cardíaca; atrofia da pele; dermatoporose; equimoses; púrpura; erosões; estrias; atraso na cicatrização de feridas; contusões fáceis; acne; hirsutismo; perda de cabelo; mudança de humor; depressão; euforia; instabilidade de humor; irritabilidade; acatisia;
ansiedade; comprometimento cognitivo; psicose; demência; delírio; catarata; glaucoma; ptose; midríase; infecções oculares oportunistas; coriorretinopatia serosa central; supressão da imunidade mediada por células; predisposição a infecções e reativação de infecções latentes.
[0132] Em uma modalidade, o SEGRAM da invenção não induz ou não induz substancialmente qualquer um ou mais efeitos colaterais associados a SAIDs selecionados do grupo que compreende ou consiste em atrofia da pele; osteoporose; supressão de crescimento; perda de peso corporal; ganho de massa gorda; perda de massa magra; apoptose do timo, baço, rim e/ou glândula adrenal; inibição da síntese de corticosterona; supressão adrenal; hiperglicemia; resistência à insulina; hiperinsulinemia; e fígado gorduroso.
[0133] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz atrofia da pele após a administração a um sujeito em necessidade (ver Exemplo 11).
[0134] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz osteoporose por administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 12).
[0135] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz supressão do crescimento após a administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 13).
[0136] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz a perda de peso corporal após a administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 13).
[0137] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz ganho de massa gorda e/ou perda de massa magra mediante administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 13).
[0138] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz apoptose do timo, baço, rim e/ou glândula adrenal após administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 14).
[0139] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz a inibição da síntese de corticosterona após a administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 15).
[0140] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz a supressão adrenal após administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 15).
[0141] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz hiperglicemia por administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 16).
[0142] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz resistência à insulina após a administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver
Exemplo 17).
[0143] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz hiperinsulinemia, após administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 17).
[0144] Em uma modalidade, o SEGRAM da presente invenção não induz fígado gorduroso após administração a um sujeito em necessidade do mesmo (ver Exemplo 18).
Estrutura
[0145] Em uma modalidade, os SEGRAMs de acordo com a presente invenção são um ou os dois enantiômeros de um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo: (Fórmula 1) ou uma forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0146] Como aqui utilizado, o composto de Fórmula 1 é uma 5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino]-isobenzofuran-1(3H)-ona e é referido como “CpdX”.
[0147] Em uma modalidade, o composto de Fórmula 1 é o racêmico (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4- metil-2-(trifluorometil)pentilamino]-isobenzofuran-1(3H)- one. Em uma modalidade, cada um dos dois enantiômeros do composto de Fórmula 1 é obtido pela separação de uma mistura racêmica do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo por cromatografia de fluido supercrítico (SFC), os referidos dois enantiômeros correspondendo ao primeiro pico de eluição [CpdX(eA)] e ao segundo pico de eluição [CpdX(eB)], respectivamente.
[0148] SFC é uma técnica bem conhecida dos técnicos no assunto. Em uma modalidade, cada enantiômero do composto de Fórmula 1 pode ser eficientemente purificado por SFC usando uma coluna de tris-(3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilose.
[0149] Em uma modalidade, o composto de Fórmula 1 é deuterado. Em uma modalidade, pelo menos um átomo de hidrogênio no composto de Fórmula 1 é deuterado. Em uma modalidade, pelo menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 ou 21 átomos de hidrogênio no composto de Fórmula 1 são deuterados.
[0150] Em uma modalidade, três átomos de hidrogênio no composto de Fórmula 1 são deuterados. Por conseguinte, em uma modalidade, uma forma deuterada da Fórmula 1 é um composto da Fórmula 2 ou um enantiômero, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, e é referido como “CpdX-D3”: (Fórmula 2)
[0151] Em uma modalidade, o composto de Fórmula 2 é o racêmico (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2- hidroxi-4-metil-2-(trifluoro-metil)-pentilamino}- isobenzofuran-1(3H)-ona. Em uma modalidade, os dois enantiômeros do composto de Fórmula 2 são obtidos por separação de uma mistura racêmica do composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo por cromatografia de fluido supercrítico (SFC), os referidos dois enantiômeros correspondendo ao primeiro pico de eluição [CpdX-D3(eA)] e ao segundo pico de eluição [CpdX-D3(eB)], respectivamente.
[0152] SFC é uma técnica bem conhecida dos técnicos no assunto. Em uma modalidade, cada enantiômero do composto de Fórmula 2 pode ser eficientemente purificado por SFC usando uma coluna de tris-(3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilose.
[0153] A seguir, qualquer referência a um composto de Fórmula 1 também inclui compostos de Fórmula 2, como definido acima, a menos que explicitamente mencionado de outra forma.
[0154] Em uma modalidade, um derivado do composto de Fórmula 1 compreende compostos descritos na patente US
6.245.804.
[0155] Em uma modalidade, o composto da Fórmula 1 está compreendido nos possíveis compostos derivados da Fórmula 3.
[0156] Em uma modalidade, um derivado de um composto de Fórmula 1 é um composto de Fórmula 3: (Fórmula 3) em que: - W é selecionado a partir de O, S ou CH2; - R2 é selecionado a partir de H ou CH3; e - Z2, Z3, Z4, Z5 e Z6 são, cada um, independentemente selecionados a partir de H, F, Cl, Br, CH3, OCH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH3)2, C(CH3)3, COCH3, NO2, CN, CH=CH2 ou CONH2, ou um enantiômero, forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0157] Em uma modalidade, o composto de Fórmula 3 é deuterado. Em uma modalidade, pelo menos um átomo de hidrogênio no composto de Fórmula 3 é deuterado. Em uma modalidade, pelo menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 ou mais átomos de hidrogênio no composto de Fórmula 3 são deuterados.
[0158] Em uma modalidade específica, quando o composto de Fórmula 3 é deuterado, Z2 é selecionado a partir de D, CD3, OCD3, CH2CD3, CH2CH2CD3, CH(CD3)2, C(CD3)3, COCD3 ou CH=CD2.
[0159] Em uma modalidade preferencial específica e, quando o composto de Fórmula 3 é deuterado, Z2 é OCD3.
[0160] Os sais farmaceuticamente aceitáveis do SEGRAM da invenção, preferencialmente do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, incluem a adição de sais ácidos e básicos dos mesmos.
[0161] Sais de adição de ácido adequados são formados a partir de ácidos que formam sais não tóxicos. Os exemplos incluem, entre outros, sais de acetato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, ciclamato, edisilato, esilato, formato, fumarato, gluceptado, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato hibenzato, cloridrato/cloreto, brometo/brometo, iodeto/iodeto, isionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato,
orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/di-hidrogenofosfato, piroglutamato, sacarato, estearato, succinato, tanato, tartarato, tosilato, trifluoroacetato e xinofoato.
[0162] Os sais de base adequados são formados a partir de bases que formam sais não tóxicos. Os exemplos incluem, entre outros, sais de alumínio, arginina, benzatina, cálcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnésio, meglumina, olamina, potássio, sódio, trometamina, 2-(dietilamino) etanol, etanolamina, morfolina, 4-(2-hidroxietil)morfolina e zinco.
[0163] Hemissais de ácidos e bases também podem ser formados, por exemplo, sais de hemissulfato e hemicálcio.
[0164] De preferência, sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, cloridrato/cloreto, brometo/brometo, bissulfato/sulfato, nitrato, citrato e acetato.
[0165] Os sais farmaceuticamente aceitáveis do SEGRAM da invenção, preferencialmente do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, podem ser preparados por um ou mais destes métodos: (i) fazendo reagir o SEGRAM da invenção, preferencialmente o composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, com o ácido desejado; (ii) fazendo reagir o SEGRAM da invenção,
preferencialmente o composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, com a base desejada; (iii) removendo um grupo de proteção lábil a ácidos ou bases de um precursor adequado do SEGRAM da invenção, preferencialmente do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo; ou pela abertura do anel de um precursor cíclico adequado, por exemplo, uma lactona ou lactama, usando o ácido desejado; ou (iv) convertendo um sal do SEGRAM da invenção, preferencialmente do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, para outro por reação com um ácido apropriado ou por meio de uma coluna de troca iônica adequada.
[0166] Todas essas reações são normalmente realizadas em solução. O sal pode precipitar da solução e ser coletado por filtração ou pode ser recuperado por evaporação do solvente. O grau de ionização no sal pode variar de completamente ionizado a quase não ionizado.
[0167] Todas as referências ao SEGRAM da invenção, preferencialmente ao composto de Fórmula 1 ou a um derivado do mesmo, incluem referências a enantiômeros, formas deuteradas, sais, solvatos, complexos multicomponentes e cristais líquidos dos mesmos, bem como combinações dos mesmos.
[0168] Os compostos da invenção incluem o SEGRAM da invenção, de preferência o composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, como aqui definido, incluindo todos os polimorfos e hábitos de cristal dos mesmos, pró-fármacos e isômeros dos mesmos (incluindo isômeros ópticos, geométricos e tautoméricos) e compostos isotopicamente marcados.
[0169] Além disso, embora geralmente, em relação aos sais, sais farmaceuticamente aceitáveis são preferenciais, deve-se notar que a invenção, em seu sentido mais amplo, também inclui sais não farmaceuticamente aceitáveis, que podem, por exemplo, ser utilizados no isolamento e/ou purificação do SEGRAM da invenção, de preferência do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo. Por exemplo, sais formados com ácidos ou bases opticamente ativos podem ser utilizados para formar sais diastereoisoméricos que podem facilitar a separação de isômeros opticamente ativos do SEGRAM da invenção, preferencialmente do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[0170] A invenção também abrange geralmente todos os pré-fármacos e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis do SEGRAM da invenção, de preferência do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
Enantiômeros
[0171] A presente invenção também se refere a um ou dois enantiômeros de um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo:
(Fórmula 1) ou uma forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0172] Em uma modalidade, os enantiômeros de um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo são sintetizados de novo (Exemplo 1, Figura 2A).
[0173] Em uma modalidade, os enantiômeros de um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo são obtidos por separação dos dois componentes racêmicos presentes no composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo (Exemplo 1, Figura 2B).
[0174] Em uma modalidade, a separação dos dois componentes racêmicos é realizada por cromatografia de fluido supercrítico (SFC). SFC é uma técnica bem conhecida dos técnicos no assunto. Nesta modalidade, cada enantiômero do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo pode ser eficientemente separado por SFC usando uma coluna de tris- (3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilose.
[0175] Em uma modalidade na qual uma mistura racêmica de um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo é separada por SFC, o primeiro pico de eluição é referido como “CpdX(eA)”, enquanto o segundo pico de eluição é referido como “CpdX(eB)”.
SEGRAMs deuterados
[0176] A presente invenção também se refere a uma forma deuterada de um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo: (Fórmula 1) ou um enantiômero, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0177] Em uma modalidade, a forma deuterada de um composto de Fórmula 1 compreende pelo menos um átomo de hidrogênio deuterado. Em uma modalidade, a forma deuterada de um composto de Fórmula 1 compreende pelo menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 ou 21 átomos de hidrogênio deuterados.
[0178] Em uma modalidade, a forma deuterada de um composto de Fórmula 1 compreende três átomos de hidrogênio deuterados. Por conseguinte, em uma modalidade, a forma deuterada de um composto de Fórmula 1 é um composto de Fórmula 2 ou um enantiômero, sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, e é referido como “CpdX-D3”: (Fórmula 2).
Enantiômeros deuterados
[0179] A presente invenção também se refere a um ou aos dois enantiômeros de um composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo: (Fórmula 2) ou um sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0180] Em uma modalidade, os enantiômeros de um composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo são sintetizados de novo (Exemplo 1, Figura 2C).
[0181] Em uma modalidade, os enantiômeros de um composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo são obtidos por separação dos dois componentes racêmicos presentes no composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo (Exemplo 1, Figura 2D).
[0182] Em algumas modalidades, a separação dos dois componentes racêmicos é realizada por cromatografia de fluido supercrítico (SFC). SFC é uma técnica bem conhecida dos técnicos no assunto. Em uma modalidade, cada enantiômero do composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo pode ser eficientemente separado por SFC usando uma coluna de tris- (3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilose.
[0183] Em uma modalidade na qual uma mistura racêmica de um composto de Fórmula 2 ou um derivado do mesmo é separada por SFC, o primeiro pico de eluição é referido como “CpdX- D3(eA)”, enquanto o segundo pico de eluição é referido como “CpdX-D3(eB)”.
Composições Composição
[0184] A presente invenção também se refere a uma composição que compreende ou consiste essencialmente ou consiste no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[0185] A presente invenção também se refere a uma composição para prevenir ou tratar, ou para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo ou consistindo em ou consistindo essencialmente no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[0186] A presente invenção também se refere a uma composição para prevenir ou tratar, ou para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th 2 e/ou Th17 em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo ou consistindo em ou consistindo essencialmente no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
Composição farmacêutica
[0187] A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica que compreende ou consiste essencialmente ou consiste no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, em combinação com pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[0188] A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica para prevenir ou tratar, ou para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo ou consistindo em ou consistindo essencialmente no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo e pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[0189] A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica para prevenir ou tratar, ou para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e/ou Th17 em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo ou consistindo em ou consistindo essencialmente no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, e pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[0190] Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis incluem, entre outros, água, solução salina, solução de Ringer, solução de dextrose e soluções de etanol, glicose, sacarose, dextrano, manose, manitol, sorbitol, polietileno glicol (PEG), fosfato, acetato, gelatina, colágeno, Carbopol®, óleos vegetais e semelhantes. Pode-se incluir adicionalmente conservantes, estabilizadores, antioxidantes, antimicrobianos e agentes tamponantes adequados, tais como, por exemplo, BHA, BHT, ácido cítrico, ácido ascórbico, tetraciclina e semelhantes.
[0191] Outros exemplos de excipientes farmaceuticamente aceitáveis que podem ser utilizados na composição da invenção incluem, mas não estão limitados a trocadores de íons, alumina, estearato de alumínio,
lecitina, proteínas séricas, como albumina sérica humana, substâncias tampão como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas parciais de glicerídeos de ácidos graxos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, como sulfato de protamina, hidrogenofosfato dissódico, hidrogenofosfato de potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trissilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, substâncias à base de celulose, polietileno glicol, carboximetilcelulose de sódio, poliacrilatos, ceras, polímeros em bloco de polietileno-polioxipropileno, polietileno glicol e gordura de lã.
[0192] Além disso, alguns excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem incluir surfactantes (por exemplo, hidroxipropilcelulose); carreadores adequados, como, por exemplo, solventes e meios de dispersão que contêm, por exemplo, água, etanol, poliol (por exemplo, glicerol, propileno glicol e polietileno glicol líquido e semelhantes), as misturas adequadas dos mesmos e óleos vegetais, como, por exemplo, óleo de amendoim e óleo de gergelim; agentes isotônicos, tais como, por exemplo, açúcares ou cloreto de sódio; agentes de revestimento, tais como, por exemplo, lecitina; agentes que retardam a absorção, tais como, por exemplo, monoestearato de alumínio e gelatina; conservantes, tais como, por exemplo, cloreto de benzalcônio, cloreto de benzetônio, clorobutanol, timerosal e semelhantes; tampões, tais como, por exemplo, ácido bórico, bicarbonato de sódio e potássio, boratos de sódio e potássio, carbonato de sódio e potássio, acetato de sódio, bifosfato de sódio e semelhantes; agentes de tonicidade, tais como, por exemplo, dextrano 40, dextrano 70, dextrose, glicerina, cloreto de potássio, propileno glicol, cloreto de sódio; antioxidantes e estabilizadores, tais como, por exemplo, bissulfito de sódio, metabissulfito de sódio, tiossulfito de sódio, tioureia e semelhantes; agentes umectantes ou clarificantes não iônicos, tais como, por exemplo, polissorbato 80, polissorbato 20, poloxâmero 282 e tiloxapol; agentes modificadores da viscosidade, tais como, por exemplo, dextrano 40, dextrano 70, gelatina, glicerina, hidroxietilcelulose, hidroximetilpropilcelulose, lanolina, metilcelulose, petrolato, polietileno glicol, álcool polivinílico, polivinilpirrolidona, carboximetilcelulose; e semelhantes.
Medicamento
[0193] A presente invenção também se refere a um medicamento que compreende ou consiste essencialmente ou consiste no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[0194] A presente invenção também se refere a um medicamento para prevenção ou tratamento, ou para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo, em que o referido medicamento compreende ou consiste em ou consiste essencialmente ou consiste essencialmente no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[0195] A presente invenção também se refere a um medicamento para prevenção ou tratamento, ou para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e/ou Th17 em um sujeito com necessidade do mesmo, em que o referido medicamento compreende ou consiste em ou consiste essencialmente no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
Composição cosmecêutica
[0196] A presente invenção também se refere a uma composição cosmecêutica compreendendo ou consistindo essencialmente ou consistindo no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
[0197] A presente invenção também se refere a uma composição cosmecêutica para prevenir ou tratar, ou para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo, em que o referido medicamento compreende ou consiste em ou consiste essencialmente ou consiste essencialmente no SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1.
Modos de administração
[0198] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada sistemicamente ou localmente.
[0199] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada por via oral, por injeção, por via tópica, transdérmica, subcutânea, transmucosa, percutânea, nasal (como por exemplo, spray intranasal ou gotas), bucal, sublingual, ocular, intra-auricular, intratraqueal, endoscopicamente, intra-articular, intra- arterial, intra-medular, intratecal, intraventricular, intraperitoneal, enteral, retal ou vaginal.
Injeção
[0200] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção é injetada, de preferência injetada sistemicamente.
Exemplos de formulações adaptadas às injeções sistêmicas incluem, mas não estão limitados a, soluções ou suspensões líquidas, formas sólidas adequadas para solução ou suspensão em líquido antes da injeção. Exemplos de injeções sistêmicas incluem, entre outros, injeção intravenosa, injeção subcutânea, injeção intramuscular, injeção intradérmica, e injeção intraperitoneal e perfusão. Em outra modalidade,
quando injetada, a composição, a composição farmacêutica ou o medicamento da invenção é estéril. Os métodos para obter uma composição farmacêutica estéril incluem, entre outros, síntese de GMP (GMP significa “Boas práticas de fabricação”).
Administração oral
[0201] Em outra modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção é administrada por via oral.
[0202] Exemplos de formulações adaptadas à administração oral incluem, mas não estão limitados a, formas sólidas, formas líquidas e géis.
[0203] Exemplos de formas sólidas adaptadas à administração oral incluem, entre outros, pílula, comprimido, cápsula, cápsula de gelatina mole, cápsula de gelatina dura, drágea, comprimido, hóstia, bolacha, pílula revestida com açúcar, comprimido revestido com açúcar ou comprimido de dispersão / ou desintegrador, pó, formas sólidas adequadas para solução ou suspensão em líquido antes da administração oral e comprimido efervescente.
[0204] Exemplos de forma líquida adaptada à administração oral incluem, mas não estão limitados a, soluções, suspensões, soluções potáveis, elixires, frasco vedado, poção, banho, xarope e licor.
Administração tópica
[0205] Em outra modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção é administrada topicamente.
[0206] A administração tópica caracteriza a liberação, administração ou aplicação da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção diretamente no local de interesse para um efeito localizado (geralmente em uma ou mais superfícies expostas ou exteriores, como a camada mais externa da epiderme, que é exposta e visualmente observável), por exemplo, usando mãos, dedos ou uma grande variedade de aplicadores (roll-up, roll-on ou outro recipiente para palitos, recipiente para tubos, bola de algodão, pó de arroz, cotonete, bomba, escova, manta, pano e/ou semelhantes). A aplicação pode ser feita, por exemplo, aplicando, colocando, esfregando, varrendo, derramando, espalhando e/ou massageando a pele, ou sobre a pele, ou por qualquer outro método conveniente ou adequado. De preferência, a administração tópica é realizada sem qualquer absorção significativa dos componentes da composição na corrente sanguínea do sujeito (para evitar um efeito sistêmico).
[0207] Exemplos de formulações adaptadas à administração tópica incluem, mas não estão limitados a bastões, bastões labiais, cremes, loções, unguentos, bálsamos, géis, glosses, preparações de filtro solar, cosméticas, máscaras, lavagens sem enxague ou limpadores,
preparações depilatórias e /ou semelhantes.
[0208] A composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser misturada para formar creme ou loção branca, lisa, homogênea e opaca com, por exemplo, álcool benzílico 1% ou 2% (p/p) como conservante, cera emulsificante, glicerina, palmitato de isopropil, ácido lático, água purificada e solução de sorbitol. Além disso, as composições podem conter polietilenoglicol 400 (PEG 400). Eles podem ser misturados para formar pomadas com, por exemplo, álcool benzílico a 2% (p/p) como conservante, petrolato branco, cera emulsificante e tenox II (hidroxianisol butilado, galato de propila, ácido cítrico, propileno glicol). Almofadas de tecido ou rolos de material de bandagem, por exemplo, gaze, podem ser impregnados com as composições em solução, loção, creme, pomada ou outra forma semelhante também pode ser usada para aplicação tópica.
[0209] Em uma modalidade, as formulações adaptadas à administração tópica compreendem cerca de 0,001% p/p, de preferência cerca de 0,005% p/p, 0,01% p/p, 0,02% p/p, 0,03% p/p, 0,04% p/p, 0,05% p/p, 0,06% p/p, 0,07% p/p, 0,08% p/p, 0,09% p/p, 0,1% p/p, 0,2% p/p, 0,3% p/p, 0,3% p/p, 0,4% m p/p, 0,5% p/p, 0,6% p/p, 0,7% p/p, 0,8% p/p, 0,9% p/p, 1,0% p/p ou mais do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
Administração transdérmica
[0210] Em outra modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser aplicada por via tópica usando um sistema transdérmico, como um adesivo polimérico à base de acrílico com um agente reticulante resinoso impregnado com a composição e laminado para um suporte impermeável.
[0211] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser administrada como um adesivo transdérmico, mais particularmente como um adesivo transdérmico de liberação sustentada. Os adesivos transdérmicos podem incluir qualquer forma convencional, como, por exemplo, matriz adesiva, matriz polimérica, adesivo de reservatório, matriz ou estrutura laminada do tipo monolítico e geralmente são compostos de uma ou mais camadas de suporte, adesivos, intensificadores de penetração, uma membrana de controle de velocidade opcional e um revestimento de liberação que é removido para expor os adesivos antes da aplicação. Os adesivos de matriz polimérica também compreendem um material formador de matriz polimérica. Emplastros transdérmicos adequados são descritos em mais detalhes, por exemplo, nas patentes US 5.262.165, 5.948.433, 6.010.715 e 6.071.531, cuja descrição é incorporada aqui na sua totalidade.
[0212] Exemplos de formulações adaptadas à administração transdérmica incluem, mas não estão limitados a unguento, pasta, creme, filme, bálsamo, adesivo, como, por exemplo, adesivo transdérmico, gel, formas lipossômicas e semelhantes.
[0213] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção é uma pomada, pasta, creme; filme, bálsamo, adesivo, tal como, por exemplo, adesivo transdérmico, gel, formas lipossômicas ou semelhantes.
[0214] Em uma modalidade da invenção, a pomada é uma pomada oleaginosa; uma pomada emulsionada tal como, por exemplo, uma pomada óleo em água ou uma pomada água em óleo; ou uma pomada solúvel em água, de preferência é uma pomada oleaginosa.
[0215] Em uma modalidade da invenção, a pomada oleaginosa utiliza bases como, por exemplo, óleos vegetais e animais; gorduras vegetais e animais; ceras; vaselina, como, por exemplo, vaselina branca ou óleo de vaselina; e parafina como, por exemplo, parafina líquida ou óleo de parafina.
[0216] Em uma modalidade da invenção, a composição transdérmica compreende ainda um ou mais excipientes.
Excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados são bem conhecidos do técnico no assunto. Exemplos de excipientes adequados incluem, mas não estão limitados a, carreadores, agentes emulsificantes, agentes endurecedores, modificadores ou espessantes reológicos, surfactantes, emolientes, conservantes, umectantes, agentes tamponantes, solventes, agentes hidratantes e estabilizadores.
Administração ocular
[0217] Em outra modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção também pode ser aplicada intraocularmente. Em uma modalidade, a administração da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser uma administração ocular tópica, tal como, por exemplo, a administração de colírios ou banhando o olho em uma solução oftálmica compreendendo o inibidor da invenção.
[0218] Uma solução oftálmica se refere a preparações estéreis líquidas, semissólidas ou sólidas destinadas à administração no globo ocular e/ou à conjuntiva, ou à inserção no saco conjuntival ou à administração no segmento posterior do olho. Como usado aqui, o termo “segmento posterior do olho” se refere aos dois terços posteriores do olho, compreendendo a membrana hialoide anterior e as estruturas por trás dela (humor vítreo, retina, coroide, nervo óptico). Em particular, uma composição oftálmica pode ser administrada no vítreo, por exemplo, por injeção intravítrea. Exemplos de composições oftálmicas incluem, mas não estão limitados a, colírios, loções para os olhos, pós para colírios e pós para loções para os olhos e composições a serem injetadas no saco conjuntival ou no vítreo.
[0219] Exemplos de carreadores incluem, mas não estão limitados a, água; solução salina tamponada; vaselina (vaselina, também conhecida como parafina branca macia); petrolato; óleos como, por exemplo, óleo mineral, óleo vegetal, óleo animal, óleo de parafina, óleo de mamona ou óleo de vaselina; ceras orgânicas e inorgânicas, tais como, por exemplo, microcristalina, parafina, cera de abelha e cera de ozocerita; polímeros naturais, tais como, por exemplo, xantanos, gelatina, celulose, colágeno, amido ou goma arábica; polímeros sintéticos; álcoois; polióis; e semelhantes. Em uma modalidade da invenção, o carreador é um creme de base, compreendendo um agente emulsificante, um ingrediente em fase oleosa e um ingrediente em fase aquosa.
[0220] Exemplos de excipientes à base de pomada ou loção incluem, mas não estão limitados a Vaselina, Plastibase™ (que é uma base preparada com polietileno (peso molecular médio de cerca de 21000 Da) e parafina líquida) e ESMA-P™ (feito de cera microcristalina).
[0221] Exemplos de agentes emulsificantes incluem, mas não estão limitados a, álcool cetílico, álcool cetostearílico, álcool estearílico, carboxipolimetileno, policarbófilo, polietilenoglicol e seus derivados, polioxietileno e seus derivados, como, por exemplo,
polissorbato 20 ou polissorbato 80, isoladamente ou em combinação com álcoois graxos como, por exemplo, álcool cetílico, álcool estearílico e álcool cetostearílico e ésteres de sorbitano, como, por exemplo, éster de ácido graxo de sorbitano.
[0222] Exemplos de ingredientes na fase oleosa incluem, mas não estão limitados a vaselina, como por exemplo vaselina branca, vaselina amarela ou óleo de vaselina, parafina como, por exemplo, parafina líquida ou óleo de parafina, dimeticona e as misturas dos mesmos.
[0223] Exemplos de ingredientes da fase aquosa incluem, mas não estão limitados a, água, glicerol e propilenoglicol.
[0224] Exemplos de agentes endurecedores incluem, mas não estão limitados a, álcool estearílico, álcool cetostearílico e álcool cetílico.
[0225] Os exemplos de agentes modificadores da reologia ou espessantes incluem, mas não estão limitados a, carbômeros, tais como, por exemplo, Carbopol®, e aminas de sebo polioxietileno, tais como, por exemplo, Ethomeen®.
[0226] Exemplos de surfactantes incluem, mas não estão limitados a, surfactantes aniônicos, catiônicos, anfotéricos e não iônicos, como, por exemplo, lauril sulfato de sódio, álcool cetostearílico, álcool cetílico, lauril sulfato de magnésio, uma cera ou uma combinação dos mesmos.
[0227] Exemplos de emolientes incluem, mas não estão limitados a, vaselina branca ou amarela (vaselina branca ou amarela), petrolato líquido (líquido de vaselina), a parafina, ou Aquaphor.
[0228] Exemplos de conservantes incluem, mas não estão limitados a, conservantes antimicrobianos, como, por exemplo, nipagina (hidroxibenzoato de metila), nipasol (hidroxibenzoato), butilparabeno, etilparabeno, metilparabeno, propilparabeno potássio, propilparabeno sódico, ésteres de parahidroxibenzoato de potássio, ácido sórbico sorbato, ácido benzoico, parabenos, clorobutanol, fenol, timerosal, benzoato de sódio e álcool benzílico.
[0229] Exemplos de umectantes incluem, mas não estão limitados a, propileno glicol e alginato de propileno glicol.
[0230] Exemplos de agentes tamponantes incluem, mas não estão limitados a, hidróxido de sódio, ácido cítrico e hidróxido de potássio.
[0231] Exemplos de solventes incluem, mas não estão limitados a, água, isopropanol, álcool benzílico e propileno glicol.
[0232] Exemplos de agentes hidratantes incluem, entre outros, glicerina, óleo mineral, óleo de mamona endurecido com polioxietileno e vaselina, propilenoglicol, parafinas, ceras, como, por exemplo, cera de abelha, polietileno glicóis ou misturas dos mesmos, como, por exemplo, macrogol (macrogol é uma mistura de polietilenoglicóis de diferentes pesos moleculares), álcool estearílico, álcool benzílico, ésteres de para-hidrobenzoato (parabenos), hidrocarboneto gelificado, ácido cítrico, esqualeno, lanolinas, glicerina, óleo de mamona endurecido com polioxietileno, éster graxo de sorbitano, ésteres graxos de glicerina, gorduras animais e vegetais, óleos, amido, tragacanto, derivados de celulose, silicones, bentonitas, ácido silícico, talco, óxido de zinco e misturas dos mesmos.
[0233] Exemplos de estabilizadores incluem, mas não estão limitados a, carboidratos como, por exemplo, sacarose, lactose e trealose, álcoois de açúcar como, por exemplo, manitol e sorbitol, aminoácidos como, por exemplo, histidina, glicina, fenilalanina e arginina.
Administração respiratória
[0234] Em outra modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada por administração respiratória, incluindo nasalmente (como, por exemplo, por spray) e bucalmente.
[0235] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser liberada por qualquer um de uma variedade de dispositivos de inalação conhecidos na técnica para administração de um agente terapêutico por inalação. Estes dispositivos incluem inaladores de dose medida, nebulizadores, inaladores de pó seco, pulverizadores e semelhantes.
[0236] Alguns exemplos específicos de dispositivos de inalação comercialmente disponíveis, adequados para a prática desta invenção são Cyclohaler, Turbohaler™ (Astra), Rotahaler® (Glaxo), Diskus® (Glaxo), inalador Spiros™ (Dura), dispositivos comercializados por Inhale Therapeutics, AERx™ (Aradigm), nebulizador Ultravent® (Mallinckrodt), nebulizador Acorn II® (Marquest Medical Products), inalador de dose calibrada Ventolin® (Glaxo), inalador de pó Spinhaler® (Fisons), inalador de névoa suave Respimat® (Boehringer Ingelheim) ou semelhantes.
[0237] Como os técnicos no assunto reconhecerão, a formulação da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção, a quantidade da formulação liberada e a duração da administração de uma dose única dependem do tipo de dispositivo de inalação empregado.
[0238] Para alguns sistemas de administração de aerossóis, como nebulizadores, a frequência de administração e o período de tempo durante o qual o sistema é ativado dependerão principalmente da concentração da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção no aerossol. Por exemplo, períodos mais curtos de administração podem ser utilizados em concentrações mais altas da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção na solução de nebulizador.
[0239] Dispositivos como inaladores de dose medida podem produzir concentrações mais altas de aerossol e podem ser operados por períodos mais curtos para fornecer a quantidade desejada da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção.
[0240] Dispositivos como inaladores de pó fornecem agente ativo até que uma determinada carga de agente seja expelida do dispositivo. Neste tipo de inalador, a quantidade da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção em uma determinada quantidade de pó determina a dose administrada em uma única administração.
[0241] Em uma modalidade, as partículas da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção liberadas por inalação têm um tamanho de partícula preferencialmente inferior a cerca de 10 µm, mais preferencialmente na faixa de cerca de 1 µm a cerca de 5 µm.
[0242] Vantajosamente, para administração como pó seco, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção é preparada em uma forma de partículas com um tamanho de partícula inferior a cerca de 10 µm, preferencialmente cerca de 1 a cerca de 5 µm. Tais formulações podem ser alcançadas por secagem por pulverização, moagem, micronização ou condensação de ponto crítico da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção.
[0243] As formulações da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção para administração a partir de um inalador de pó seco incluem tipicamente um pó seco finamente dividido contendo a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção, mas o pó também pode incluir um agente de volume, transportador, excipiente, outro aditivo ou semelhante. Exemplos de aditivos incluem, mas não estão limitados a, mono, di e polissacarídeos; álcoois de açúcar e outros polióis, tais como, por exemplo, lactose, glicose, rafinose, melezitose, lactitol, maltitol, trealose, sacarose, manitol, amido, inulina ou combinações dos mesmos; surfactantes, tais como sorbitóis, dipalmitoilfosfatidil colina ou lecitina; ou semelhantes.
[0244] Um spray incluindo a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser produzido forçando a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção através de um bico sob pressão. O tamanho e a configuração do bico, a pressão aplicada e a taxa de alimentação de líquido podem ser escolhidos para atingir a saída e o tamanho de partícula desejados. Um eletropulverizador pode ser produzido, por exemplo, por um campo elétrico em conexão com uma alimentação capilar ou de bico. As formulações da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção adequada para uso com um pulverizador incluirão tipicamente a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção em uma solução aquosa.
Administração intra-articular
[0245] Em outra modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada intra-articularmente.
[0246] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser liberada dentro da articulação de um sujeito em necessidade do mesmo. Por exemplo, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser administrada por administração intra-disco ou peri-disco a um sujeito com uma desordem inflamatória com dor nas costas. Por exemplo, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser administrada por injeção inter-joelho ou peri-joelho a um sujeito com uma desordem inflamatória com dor no joelho.
Administração de liberação sustentada
[0247] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada em uma forma de liberação sustentada. Em outra modalidade, a composição, a composição farmacêutica ou o medicamento compreende um sistema de liberação que controla a liberação do modulador.
Sujeito
[0248] Em uma modalidade, o sujeito é um sujeito animal. Em uma modalidade, o sujeito é um sujeito mamífero.
[0249] Exemplos de mamíferos incluem, entre outros, primatas (incluindo humanos e não humanos), gado (incluindo vacas), cavalos, porcos, ovelhas, cabras, cães e gatos.
[0250] Em uma modalidade preferencial, o sujeito é um ser humano.
[0251] Em uma modalidade, o sujeito é um adulto (por exemplo, um sujeito com idade superior a 18 anos ou um sujeito após a capacidade reprodutiva ter sido atingida. Em outra modalidade, o sujeito é uma criança (por exemplo, um sujeito com menos de 18 anos de idade ou um sujeito antes que a capacidade reprodutiva tenha sido atingida).
[0252] Em uma modalidade, o sujeito é um sujeito masculino. Em algumas modalidades, o sujeito é um sujeito feminino.
[0253] Em uma modalidade, o sujeito é/foi diagnosticado com uma desordem inflamatória, de um modo preferencial com uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th 2 e/ou Th17. Em uma modalidade, o sujeito é/foi diagnosticado com qualquer um das desordens inflamatórias relacionadas à Th1, Th2 e/ou Th17 selecionados do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, rinoconjuntivite, arterite de células gigantes (doença de Horton), febre do feno, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por picada de inseto, inflamação da pele por picada de inseto, psoríase, artrite reumatoide, doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, entre outros, doença de Crohn, colite e colite ulcerativa), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite, síndrome de Sjogren, esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença coronariana, hiperlipidemia, síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa e doenças do enxerto contra o hospedeiro.
[0254] Em uma modalidade, o sujeito é/foi diagnosticado com qualquer um das desordens inflamatórias relacionadas à Th1, Th2 e/ou Th17 selecionados do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, artrite reumatoide e doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, entre outros, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite.
[0255] Em uma modalidade, o sujeito está em risco de desenvolver uma desordem inflamatória, de um modo preferencial com uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e/ou Th17. Em uma modalidade, o sujeito corre o risco de desenvolver qualquer um das desordens inflamatórias relacionadas à Th1, Th2 e/ou Th17 selecionados do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, rinoconjuntivite, arterite de células gigantes (doença de Horton), febre do feno, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por picada de inseto, inflamação da pele por picada de inseto, psoríase, artrite reumatoide, doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, entre outros, doença de Crohn, colite e colite ulcerativa), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite, síndrome de Sjogren, esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença cardíaca coronária, hiperlipidemia, síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa e doença do enxerto contra o hospedeiro.
[0256] Em uma modalidade, o sujeito corre o risco de desenvolver qualquer um das desordens inflamatórias relacionadas à Th1, Th2 e/ou Th17 selecionados do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, mas não limitado a, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite).
Esquema
[0257] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada em uma dose determinada pelo técnico no assunto e adaptada pessoalmente a cada sujeito.
[0258] Será entendido que o uso diário total da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da presente invenção será decidido pelo médico assistente dentro do escopo do julgamento médico correto. A quantidade terapeuticamente eficaz específica para qualquer sujeito em particular dependerá de uma variedade de fatores, incluindo a doença a ser tratada e a gravidade da doença; a composição específica empregada, a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do sujeito; o tempo de administração, via de administração, a duração do tratamento; medicamentos utilizados em combinação ou coincidentes com a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção; e fatores semelhantes bem conhecidos nas artes médicas. Por exemplo, está bem dentro da habilidade da técnica iniciar doses de um composto terapêutico em níveis inferiores aos necessários para alcançar o efeito terapêutico desejado e aumentar gradualmente a dosagem até que o efeito desejado seja alcançado; mas, pelo contrário, pode ser igualmente útil começar com uma dose de ataque, uma maneira de atingir a concentração plasmática em estado estacionário mais rapidamente e depois seguir com uma dose de manutenção calculada para compensar exatamente o efeito do processo de eliminação.
[0259] Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada pelo menos uma vez ao dia, duas vezes ao dia ou pelo menos três vezes ao dia.
[0260] Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada a cada dois, três, quatro, cinco, seis dias.
[0261] Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada duas vezes por semana, toda semana, a cada duas semanas ou uma vez por mês.
[0262] Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada todos os meses, a cada dois meses, a cada três meses, a cada quatro meses, a cada cinco meses, a cada seis meses, uma vez um ano.
[0263] Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada por um período de tempo de cerca de um dia, dois dias, três dias, quatro dias, cinco dias, seis dias, uma semana, duas semanas, três semanas, um mês, dois meses, três meses, seis meses, um ano ou por períodos mais longos, como, por exemplo, por vários anos ou pelo resto da vida do sujeito. Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada até o tratamento ou alívio da desordem inflamatória, de preferência das desordens inflamatórias relacionadas à Th1, Th2 e/ou Th17.
[0264] Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada para um tratamento crônico.
Em outra modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção deve ser administrada para um tratamento agudo.
Esquema em massa/peso corporal/dia
[0265] Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou de um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,5 µg/kg a cerca de 50 mg/kg, preferencialmente de cerca de 5 µg/kg a cerca de 25 mg/kg, preferencialmente de cerca de 50 µg/kg a cerca de 5 mg/kg, preferencialmente de cerca de 250 µg/kg a cerca de 2,5 mg/kg, preferencialmente de cerca de 300 µg/kg a cerca de 1 mg/kg, preferencialmente de cerca de 350 µg/kg a cerca de 800 µg/kg, de preferência de cerca de 400 µg/kg a cerca de 600 µg/kg. Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 500 µg/kg.
[0266] Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou de um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 1 µg/kg a cerca de 100 mg/kg, preferencialmente de cerca de 10 µg/kg a cerca de 50 mg/kg, preferencialmente de cerca de 100 µg/kg a cerca de 10 mg/kg, preferencialmente de cerca de 500 µg/kg a cerca de 5 mg/kg, preferencialmente de cerca de 750 µg/kg a cerca de 2,5 mg/kg, preferencialmente de cerca de 800 µg/kg a cerca de 2 mg/kg, de preferência de cerca de 900 µg/kg a cerca de 1,5 mg/kg. Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 1 mg/kg.
[0267] Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou de um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 5 µg/kg a cerca de 500 mg/kg, preferencialmente de cerca de 50 µg/kg a cerca de 250 mg/kg, preferencialmente de cerca de 500 µg/kg a cerca de 50 mg/kg, preferencialmente de cerca de 1 mg/kg a cerca de 25 mg/kg, preferencialmente de cerca de 1,5 mg/kg a cerca de 12,5 mg/kg, preferencialmente de cerca de 2 mg/kg a cerca de 10 mg/kg, de preferência de cerca de 2,5 mg/kg a cerca de 7,5 mg/kg. Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 5 mg/kg.
[0268] Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente a humano do composto de Fórmula 1 ou de um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,5 µg/kg a cerca de
250 µg/kg, preferencialmente de cerca de 1 µg/kg a cerca de 200 µg/kg, preferencialmente de cerca de 5 µg/kg a cerca de 150 µg/kg, preferencialmente de cerca de 10 µg/kg a cerca de 100 µg/kg, preferencialmente de cerca de 25 µg/kg a cerca de 75 µg/kg, preferencialmente de cerca de 30 µg/kg a cerca de 50 µg/kg. Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 40 µg/kg.
[0269] Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou de um derivado a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,1 µg/kg a cerca de 10 mg/kg, preferencialmente de cerca de 1 µg/kg a cerca de 1 mg/kg, preferencialmente de cerca de 10 µg/kg a cerca de 500 µg/kg, preferencialmente de cerca de 20 µg/kg a cerca de 450 µg/kg, preferencialmente de cerca de 30 µg/kg a cerca de 400 µg/kg, preferencialmente de cerca de 40 µg/kg a cerca de 350 µg/kg, preferencialmente de cerca de 45 µg/kg a cerca de 300 µg/kg, preferencialmente de cerca de 50 µg/kg a cerca de 250 µg/kg, preferencialmente de cerca de 55 µg/kg a cerca de 200 µg/kg, preferencialmente de cerca de 60 µg/kg a cerca de 150 µg/kg, preferencialmente de cerca de 65 µg/kg a cerca de 100 µg/kg, preferencialmente de cerca de 70 µg/kg a cerca de 90 µg/kg.
Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 80 µg/kg.
[0270] Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou de um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 1 µg/kg a cerca de 5 mg/kg, preferencialmente de cerca de 10 µg/kg a cerca de 2,5 mg/kg, preferencialmente de cerca de 25 µg/kg a cerca de 2 mg/kg, preferencialmente de cerca de 50 µg/kg a cerca de 1 mg/kg, preferencialmente de cerca de 100 µg/kg a cerca de 750 µg/kg, preferencialmente de cerca de 150 µg/kg a cerca de 600 µg/kg, preferencialmente de cerca de 200 µg/kg a cerca de 600 µg/kg, preferencialmente de cerca de 250 µg/kg a cerca de 550 µg/kg, preferencialmente de cerca de 300 µg/kg a cerca de 500 µg/kg, preferencialmente de cerca de 350 µg/kg a cerca de 450 µg/kg, preferencialmente de cerca de 380 µg/kg a cerca de 420 µg/kg. Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 400 µg/kg.
Esquema em massa/dia
[0271] Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou de um derivado a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,05 µg a cerca de 250 µg, de cerca de 0,1 µg a cerca de 150 µg, de cerca de 0,2 µg a cerca de 100 µg, de cerca de 0,3 µg a cerca de 50 µg, de cerca de 0,4 µg a cerca de 35 µg, de cerca de 0,5 µg a cerca de 25 µg, de cerca de 2,5 µg a cerca de 20 µg, preferencialmente de cerca de 5 µg a cerca de 15 µg. Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 10 µg.
[0272] Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou de um derivado a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,1 µg a cerca de 500 µg, de cerca de 0,2 µg a cerca de 300 µg, de cerca de 0,4 µg a cerca de 200 µg, de cerca de 0,6 µg a cerca de 100 µg, de cerca de 0,8 µg a cerca de 75 µg, de cerca de 1 µg a cerca de 50 µg, de cerca de 5 µg a cerca de 40 µg, preferencialmente de cerca de 10 µg a cerca de 30 µg.
Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 20 µg.
[0273] Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,5 µg a cerca de 500 µg, preferencialmente de cerca de 1 µg a cerca de 250 µg, preferencialmente de cerca de 10 µg a cerca de 200 µg, preferencialmente de cerca de 25 µg a cerca de 180 µg, preferencialmente de cerca de 50 µg a cerca de 160 µg, preferencialmente de cerca de 60 µg a cerca de 140 µg, preferencialmente de cerca de 80 µg a cerca de 120 µg. Em uma modalidade, a quantidade diária do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 100 µg.
[0274] Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou de um derivado do mesmo para ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 50 µg a cerca de 25 mg, preferencialmente de cerca de 50 µg a cerca de 15 mg, preferencialmente de cerca de 100 µg a cerca de 12,5 mg, preferencialmente de cerca de 200 µg a cerca de 10 mg, preferencialmente de cerca de 300 µg a cerca de 7,5 mg, preferencialmente de cerca de 400 µg a cerca de 5 mg, preferencialmente de cerca de 500 µg a cerca de 4,5 mg, preferencialmente de cerca de 1 mg a cerca de 4 mg, preferencialmente de cerca de 1,5 mg a cerca de 3,5 mg, preferencialmente de cerca de 2 mg a cerca de 3 mg. Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 2,5 mg.
[0275] Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou de um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,1 mg a cerca de 50 mg, preferencialmente de cerca de 0,1 mg a cerca de 30 mg, preferencialmente de cerca de 0,2 mg a cerca de 25 mg, preferencialmente de cerca de 0,4 mg a cerca de 20 mg, preferencialmente de cerca de 0,6 mg a cerca de 15 mg, preferencialmente de cerca de 0,8 mg a cerca de 10 mg, preferencialmente de cerca de 1 mg a cerca de 9 mg, preferencialmente de cerca de 2 mg a cerca de 8 mg, preferencialmente de cerca de 3 mg a cerca de 7 mg, preferencialmente de cerca de 4 mg a cerca de 6 mg. Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 5 mg.
[0276] Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 a ser administrada a um sujeito em necessidade do mesmo varia de cerca de 0,5 mg a cerca de 100 mg, preferencialmente de cerca de 0,6 mg a cerca de 75 mg, preferencialmente de cerca de 0,8 mg a cerca de 60 mg, preferencialmente de cerca de 1 mg a cerca de 55 mg, preferencialmente de cerca de 2,5 mg a cerca de 50 mg, preferencialmente de cerca de 5 mg a cerca de 45 mg, preferencialmente de cerca de 10 mg a cerca de 40 mg, preferencialmente de cerca de 15 mg a cerca de 35 mg, preferencialmente de cerca de 20 mg a cerca de 30 mg,
preferencialmente de cerca de 23 mg a cerca de 27 mg. Em uma modalidade, a quantidade diária equivalente à humana do composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo a ser administrado a um sujeito em necessidade é de cerca de 25 mg.
Terapia de combinação
[0277] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser administrada como parte de uma terapia de combinação. Assim, estão incluídos no escopo da presente invenção modalidades compreendendo a coadministração de e composições e medicamentos que compreendem, além do SEGRAM da invenção, preferencialmente um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, agentes terapêuticos adicionais e/ou ingredientes ativos.
[0278] Tais esquemas múltiplos de medicamentos, frequentemente referidos como terapia de combinação, podem ser utilizados para prevenir ou tratar uma desordem inflamatória, preferencialmente para prevenir ou tratar uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e/ou Th17.
[0279] Além do requisito de eficácia terapêutica, que pode exigir o uso de agentes ativos além do SEGRAM da invenção, pode haver justificativas adicionais que obrigam ou recomendam altamente o uso de combinações de medicamentos envolvendo ingredientes ativos que representam terapia adjuvante, isto é, que complementam e suplementam a função desempenhada pelo SEGRAM da presente invenção.
[0280] Os agentes terapêuticos suplementares adequados utilizados para o propósito de tratamento auxiliar incluem medicamentos que, em vez de prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória, de preferência a prevenção ou o tratamento diretamente de uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e/ou Th17, tratar doenças ou estados que resultam diretamente ou indiretamente acompanham a desordem inflamatória básica ou subjacente, preferencialmente desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e/ou Th17.
[0281] Portanto, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser administradas na forma de monoterapia, mas também podem ser usadas na forma de terapia múltipla na qual o SEGRAM de acordo com a presente invenção é co-administrado em combinação com um ou mais outros agentes terapêuticos.
[0282] Exemplos de outros agentes ativos que podem ser administrados em combinação com a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção incluem, mas não estão limitados a: (i) fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs), incluindo: a. glicocorticoides naturais, tais como, por exemplo,
cortisona, cortodoxona, desoxicortona, hidrocortisona,
acetato de prebediolona e pregnenolona;
b. glicocorticoides sintéticos, como, por exemplo,
alclometasona, amcinonida, beclometasona, betametasona,
budesonida, cloroprednisona, cloroprednisona, ciclesonida,
clobetasol, clobetasona, clocortolona, cloprednol,
cortivazol, deflazacona, desonida, desoxim, desoxida,
desoxida, desoxida fluclorolona, fludrocortisona,
fludroxicortida, flugestoneacetato, flumetasona,
flunisolida, fluocinolona, fluocinonida, fluocortina,
fluocortolona, fluorometolona, fluperolona, fluprednideno,
fluprednisolona, flutoneona, medona, prednisolona,
prednisona e tixocortol, prednilideno, rimexolona,
triamcinolona, triamcinolona e ulobetasol;
(ii) fármacos anti-inflamatórios não esteroidais
(AINEs), incluindo:
a.
Inibidores de TNFα, tais como, por exemplo,
infliximabe, adalimumabe, certolizumabe pegol, golimumabe,
etanercept, talidomida, lenalidomida e pomalidomida;
b. salicilatos, tais como, por exemplo, amoxiprina,
aspirina, benorilato, diflunisal, faislamina, mesalamina e salicilato de metila;
c. broncodilatadores, como, por exemplo,
i. agonistas β2-adrenérgicos, tais como, por exemplo,
abediterol, arformoterol, bambuterol, clenbuterol,
formoterol, indacaterol, olodaterol, protocilol, salmefamol,
salmeterol e vilanterol;
ii. anticolinérgicos, como, por exemplo, atropina,
benztropina, biperideno, clorfeniramina, diciclomina,
dimenidrinato, difenidramina, doxepina, doxilamina,
glicopirrolato, ipratrópio, orfenadrina, oxitrópio,
oxibutinina, antiotrodina, tricloridrato de sódio,
propiotrina, bromidrato de trifenidina, propiotrina,
tropicamida, bupropiona, dextrometorfano, doxacúrio,
hexametônio, mecamilamina e tubocurarina; e iii. modificadores de leucotrienos, como, por exemplo,
2-TEDC, baicaleína, BW-A4C, BW-B70C, ácido cafeico, cinamil-
3,4-di-hidroxi-α-cianocinamato (CDC), CJ-13610, curcumina,
fenleuton, hiperforina, Hypericum perforatum, meclofenamato,
minociclina, N-estearoildopamina, timegadina, zileuton, AM-
103, AM-679, BAYx1005, MK-591, MK-886, 3-metoxitropolona,
luteolina, PD-146176, acebilustato, captopril, DG-051,
fosinoprilat, JNJ-26993135, SA-6541, SC-57461A, ubenimex,
ácido 17-octadecinoico, azelastina, acivicina, complexo serina-borato e cilastatina;
d. ácidos arilalcanoicos, tais como, por exemplo,
ácidos 2-arilpropiônicos, diclofenaco, indometacina e sulindaco;
e. profenos, tais como, por exemplo, carprofeno,
fenoprofeno, flurbiprofeno, ibuprofeno, cetoprofeno,
cetorolaco, loxoprofeno, naproxeno e ácido tiaprofênico;
f. ácidos N-arilantranílicos, tais como, por exemplo,
ácidos fenâmicos, ácido mefenâmico e ácido meclofenâmico;
g. derivados de pirazolidina, tais como, por exemplo,
fenilbutazona e oxifenilbutazona;
h. oxicams, tais como, por exemplo, meloxicam e piroxicam;
i. coxibes, tais como, por exemplo, celecoxibe,
etoricoxibe, parecoxibe, rofecoxibe e valdecoxibe;
j. sulfonanilidas, tais como, por exemplo,
nimesulida;
k. inibidores de lipoxigenase, tais como, por exemplo, baicaleína, ácido cafeico, ácido eicosatetrainoico,
ácido eicosatri-inoico, esculetina, flubiprofeno, gossipol,
lactona 5-hidroxieicosatetraenoica (HETE), ácido 5 (S)-HETE e ácido nordi-hidroguaiarético;
l. derivados de macrolídeos, tais como, por exemplo,
derivados de 9-(S)-di-hidroeritromicina;
m. peptídeo anti-inflamatório (também denominado antiflaminas), como, por exemplo, peptídeos derivados de proteínas da vesícula seminal, peptídeos de ligação à selectina, peptídeos catiônicos baseados em peptídeos derivados de BPI e de proteína BIP e de aumento da permeabilidade bactericida/permeabilidade;
n. citocinas anti-inflamatórias, tais como, por exemplo, IL-1Ra, IL-4, IL-6, IL-10, IL-11 e IL-13; o. inibidores de citocinas pró-inflamatórias, tais como, por exemplo, inibidores de TNFα e inibidores de IL- 18); p. galectinas, tais como, por exemplo, galectina-1; q. anticorpos que neutralizam moléculas/citocinas sinalizadoras pró-inflamatórias, tais como, por exemplo, anticorpos contra TNFα, IL-1, IL-18; e r. estatinas.
As combinações acima incluem combinações da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção, não apenas com um outro agente ativo, mas também com dois ou mais agentes ativos.
[0283] Em uma modalidade, a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção e os outros agentes ativos terapêuticos podem ser administrados: - em termos de formas de dosagem, separadamente ou em conjunto, e - em termos de tempo de administração, em série ou simultaneamente.
[0284] Assim, a administração da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica da invenção pode ser anterior, concorrente ou subsequente à administração dos outros agentes ativos.
Métodos e usos Métodos de tratamento
[0285] A presente invenção se refere ainda a um método para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo a administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um Modulador agonístico seletivo de receptor de glicocorticoide (SEGRAM). A presente invenção se refere ainda a um método de prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo a administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção.
[0286] A presente invenção se refere ainda a um método de prevenção e/ou tratamento de uma atividade aumentada de Th1, Th2 e/Th17 em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo a administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um SEGRAM. A presente invenção se refere ainda a um método de prevenção e/ou tratamento de uma atividade aumentada de T1h, Th2 e/ou Th17 em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo a administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção.
[0287] A presente invenção se refere ainda a um método de prevenção e/ou tratamento um nível aumentado de citocinas e anticorpos secretados em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz de um SEGRAM. A presente invenção se refere ainda a um método de prevenção e/ou tratamento de um nível aumentado de citocinas e anticorpos secretados em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo a administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção.
[0288] Em uma modalidade, o SEGRAM é um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, ou um enantiômero farmaceuticamente aceitável, forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco do mesmo.
[0289] Em uma modalidade, o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente nem a transativação direta, nem as funções de transrepressão direta do receptor de glicocorticoide (GR). Em uma modalidade, o SEGRAM induz as funções indiretas de transrepressão amarradas do receptor glicocorticoide (GR).
[0290] Em uma modalidade, o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo. Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo.
[0291] Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th 2 e/ou Th17. Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória selecionada do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, rinoconjuntivite, arterite de células gigantes (doença de Horton), febre do feno, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por picada de inseto, anafilaxia, psoríase, artrite reumatoide, doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, mas não limitado a, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite, síndrome de Sjögren,
esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença coronariana, hiperlipidemia, síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa e doença do enxerto contra o hospedeiro. Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória selecionada do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e doença inflamatória intestinal (DII).) (incluindo, entre outros, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite). Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de dermatite atópica.
Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de dermatite de contato. Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de asma alérgica. Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de psoríase. Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de artrite reumatoide. Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de colite ulcerativa. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de conjuntivite alérgica. Em uma modalidade, os métodos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de síndrome metabólica e a esteatose induzidas pela pós- menopausa.
[0292] Em uma modalidade, as citocinas e anticorpos secretados são selecionados a partir do grupo que compreende ou consiste em IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 e IgG2a.
Usos descobertos
[0293] A presente invenção se refere ainda à utilização de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um Modulador agonístico seletivo de receptor de glicocorticoide (SEGRAM) para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo. A presente invenção se refere ainda ao uso de uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo.
[0294] A presente invenção se refere ainda à utilização de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um SEGRAM para a prevenção e/ou tratamento de uma atividade aumentada de Th1, Th2 e/ou Th17, em um sujeito com necessidade do mesmo. A presente invenção se refere ainda ao uso de uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção para a prevenção e/ou tratamento uma atividade aumentada de Th1, Th2 e/ou Th17 em um sujeito em necessidade.
[0295] A presente invenção se refere ainda ao uso de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um SEGRAM para a prevenção e/ou tratamento de um nível aumentado de citocinas e anticorpos secretados em um sujeito em necessidade do mesmo. A presente invenção se refere ainda ao uso de uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção para a prevenção e/ou tratamento de um nível aumentado de citocinas e anticorpos secretados em um sujeito em necessidade do mesmo.
[0296] Em uma modalidade, o SEGRAM é um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, ou um enantiômero farmaceuticamente aceitável, forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco do mesmo.
[0297] Em uma modalidade, o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente nem a transativação direta, nem as funções de transrepressão direta do receptor de glicocorticoide (GR). Em uma modalidade, o SEGRAM induz as funções indiretas de transrepressão amarradas do receptor glicocorticoide (GR).
[0298] Em uma modalidade, o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo. Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo.
[0299] Em uma modalidade, as utilizações da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th 2 e/ou Th17. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória selecionada do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, rinoconjuntivite, arterite de célula gigante (doença de Horton), febre do feno, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por picada de inseto, anafilaxia, psoríase, artrite reumatoide, doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, mas não limitado a, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite, síndrome de Sjögren, esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença coronariana, hiperlipidemia, síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa e doença do enxerto contra o hospedeiro.
Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória selecionada do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, entre outros, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite). Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de dermatite atópica. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de dermatite de contato. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de asma alérgica. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de psoríase. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de artrite reumatoide.
Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de colite ulcerativa. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de conjuntivite alérgica. Em uma modalidade,
os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa.
[0300] Em uma modalidade, as citocinas e anticorpos secretados são selecionados do grupo que compreende ou consiste em IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-5, IL-6, IL- 10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL- 22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 e IgG2a.
Produto com finalidade limitada
[0301] A presente invenção se refere ainda a um Modulador Agonístico Seletivo de GR (SEGRAM) para utilização na prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo. A presente invenção se refere ainda a composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção para a prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória em um sujeito em necessidade do mesmo.
[0302] A presente invenção se refere ainda a um SEGRAM para utilização na prevenção e/ou tratamento de uma atividade aumentada de Th1, Th2 e/ou Th17 ou em um sujeito em necessidade do mesmo. A presente invenção se refere ainda à composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção para uso na prevenção e/ou tratamento de uma atividade melhorada de Th1,
Th2 e/ou Th17 em um sujeito em necessidade do mesmo.
[0303] A presente invenção se refere ainda a um SEGRAM para uso na prevenção e/ou tratamento de um nível aumentado de citocinas e anticorpos secretados em um sujeito em necessidade do mesmo. A presente invenção se refere ainda à composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção para uso na prevenção e/ou tratamento de um nível aumentado de citocinas e anticorpos secretados em um sujeito em necessidade do mesmo.
[0304] Em uma modalidade, o SEGRAM é um composto de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo, ou um enantiômero farmaceuticamente aceitável, forma deuterada, sal, solvato e/ou pró-fármaco do mesmo.
[0305] Em uma modalidade, o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente nem a transativação direta, nem as funções de transrepressão direta do receptor de glicocorticoide (GR). Em uma modalidade, o SEGRAM induz as funções indiretas de transrepressão amarradas do receptor glicocorticoide (GR).
[0306] Em uma modalidade, o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo. Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção não induz ou não induz substancialmente efeitos colaterais associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um sujeito em necessidade do mesmo.
[0307] Em uma modalidade, o SEGRAM, a composição, a composição farmacêutica, o medicamento ou a composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória relacionada à Th1, Th2 e/ou Th17. Em uma modalidade, o SEGRAM, composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória selecionada do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, rinoconjuntivite, arterite de células gigantes (doença de Horton), febre do feno, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por mordida de inseto, anafilaxia artrite reumatoide, doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, entre outros, doença de Crohn, colite e colite ulcerativa), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite, síndrome de Sjögren, esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença coronariana, hiperlipidemia, síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa e doença do enxerto contra o hospedeiro.
Em uma modalidade, o SEGRAM, composição,
composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento de uma desordem inflamatória selecionado do grupo que compreende ou consiste em dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase,
conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo, mas não limitado a, doença de Crohn, colite ulcerativa e colite). Em uma modalidade, o SEGRAM, composição, composição farmacêutica,
medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento de dermatite atópica.
Em uma modalidade, o SEGRAM, composição,
composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento de dermatite de contato.
Em uma modalidade, o SEGRAM, composição, composição farmacêutica,
medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento de asma alérgica.
Em uma modalidade, o SEGRAM, composição,
composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento da psoríase. Em uma modalidade, o SEGRAM, composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento da artrite reumatoide. Em uma modalidade, o SEGRAM, composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento da colite ulcerativa. Em uma modalidade, os usos da presente invenção são para a prevenção e/ou tratamento de conjuntivite alérgica. Em uma modalidade, o SEGRAM, composição, composição farmacêutica, medicamento ou composição cosmecêutica de acordo com a invenção são para uso na prevenção e/ou tratamento da síndrome metabólica e esteatose induzidas pela pós-menopausa.
[0308] Em uma modalidade, as citocinas e anticorpos secretados são selecionados do grupo que compreende ou consiste em IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-5, IL-6, IL- 10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL- 22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, COX2, MMP13, IgE, IgG1 e IgG2a.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0309] A Figura 1 é um esquema que mostra as três funções reguladoras da transcrição do receptor glicocorticoide (GR) após a ligação de um glicocorticoide (GC): à esquerda, a transativação direta é a consequência da ligação do GR associado ao GC diretamente a um GRE positivo para a ação cis ((+)GRE), ativando assim a expressão dos genes alvos. No meio, a transrepressão direta é a consequência da ligação do GR associado ao GC diretamente a um GRE negativo de ação cis (IR nGRE) que medeia a repressão direta dos genes alvos. À direita, a transrepressão de ligação indireta surge da interação física de GRs ligados ao GC com os fatores de transcrição pró-inflamatório AP-1 e/ou NF-κB, antagonizando assim sua atividade.
[0310] A Figura 2 compreende dois esquemas para a síntese de (A) [(R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2- hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-one] [CpdX], ou (C) [(R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2- hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-one] [CpdX- D3]; e dois cromatogramas mostrando a separação dos dois enantiômeros de (B) [(R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2- hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil)pentilamino]-iso- benzofuran-1(3H)-one] [CpdX], ou (D) [(R/S)-5-{4-[2-(metoxi- D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-one] [CpdX- D3] através do método de cromatografia de fluido supercrítico (SFC).
[0311] A Figura 3 é um conjunto de quatro histogramas que mostram a expressão de transcritos de RNA conforme indicado (em relação ao gene de limpeza de HPRT) medido por análise de qRT-PCR (A) do gene REDD1 transativado por GR que codifica um inibidor de mTOR; (B) do gene da queratina 5 (K5) diretamente transreprimido GR; (C) do gene da interleucina-1β (IL-1β) GR indiretamente transreprimido; e (D) do gene da interleucina-6 (IL-6) GR indiretamente transreprimido. Transcritos de RNA foram extraídos a partir de orelhas de camundongo após um tratamento tópico de 18 horas com (A e B) etanol [Veículo], 1 nmol/cm2 de dexametasona [Dex], Mapracorat, (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2- metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX], CpdX(eA), CpdX(eB), (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5- fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX- D3], CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB); (C e D) como em (A e B), mas com um tratamento adicional com 12-O- tetradecanoilforbol-13-acetato [TPA] (1 nmol/cm2). Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos três camundongos por tratamento.
[0312] A Figura 4 é um histograma que mostra a expressão relativa de RNA medida por análise q-RT-PCR de transcritos de RNA de genes que codificam para proteína inflamatória 1β [CCL4], ciclo-oxigenase-2 [COX2], colagenase 3 [MMP13], interleucina-1β [IL1β], interleucina-6 [IL6], fator de necrose tumoral alfa [TNFα], linfopoietina estromal do timo [TSLP], interleucina-22 [IL22] e interleucina-23 [IL23]. São destacadas as interleucinas pró-inflamatórias específicas de Th1, Th2 e Th17. Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pele da orelha de camundongo após indução de uma inflamação do tipo dermatite de contato por tratamento (1 nmol/cm2) com 12-O-tetradecanoilforbol-13- acetato isolado [TPA], TPA and dexametasona [TPA+Dex], TPA and (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil- 2-(trifluorometil)pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona [TPA+CpdX], ou TPA e (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5- fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona [TPA+CpdX-D3]. Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos três camundongos por tratamento.
[0313] A Figura 5 é um histograma da expressão relativa de RNA medida por análise q-RT-PCR de transcritos de RNA de genes que codificam interleucina-1β [IL1β], interleucina-6 [IL6], ciclo-oxigenase-2 [COX2] e fator de necrose tumoral alfa [TNFa]. Os transcritos de RNA foram extraídos das amostras de pele da orelha de camundongo, conforme descrito na Figura 4. Dexametasona [Dex], (R/S)-5-
[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)- pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX], bem como (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]- 2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil)pentilamino}- isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX-D3], foram administrados em etanol (EtOH)(1 nmol/cm2) ou um creme (0,05%). Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos três camundongos por tratamento.
[0314] A Figura 6 é um conjunto de oito micrografias mostrando seções de pele de camundongos, conforme tratado na Figura 5. As seções da pele da orelha do camundongo foram coradas com hematoxilina e eosina. A barra de escala representa 20 µm.
[0315] A Figura 7 é um histograma que mostra a expressão relativa de RNA medida por análise q-RT-PCR de transcritos de RNA de genes que codificam colagenase 3 [MMP13], ciclo-oxigenase-2 [COX2], interleucina-1β [IL1β], interleucina-6 [IL6], interleucina-10 [IL10], interleucina- 13 [IL13] e linfopoietina estromal do timo [TSLP].
Interleucinas pró-inflamatórias especificas de Th 2 são destacadas. Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pele de orelha de camundongo após indução de uma inflamação e tratamento semelhante a dermatite atópica (1 nmol/cm2) com calcipotriol isolado [MC903], calcipotriol and dexametasona [MC903+Dex], calcipotriol e (R/S)-5-[4-(5- fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluo- rometil)pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona [MC903+CpdX], calcipotriol and CpdX(eA) [MC903+CpdX(eA)], calcipotriol e CpdX(eB) [MC903+CpdX(eB)], calcipotriol e (R/S)-5-{4-[2- (metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona [MC903+CpdX-D3], calcipotriol e CpdX-D3(eA) [MC903+CpdX- D3(eA)] ou calcipotriol e CpdX-D3(eB) [MC903+CpdX-D3(eB)].
Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos três camundongos por tratamento.
[0316] A Figura 8 é um conjunto de oito micrografias mostrando seções de pele de camundongos tratados como na Figura 7. As seções da pele das orelhas do camundongo foram coradas com hematoxilina e eosina. A barra de escala representa 20 µm.
[0317] A Figura 9 é um conjunto de dois histogramas mostrando (A) a contagem de células em um lavado broncoalveolar [BAL] e (B) a expressão relativa de RNA medida por análises q-RT-PCR de transcritos de RNA extraídos de amostras de pulmão de camundongo após um teste de indução de 22 dias de uma inflamação pulmonar semelhante à asma que inclui 18 dias de sensibilização com ovalbumina (OVA), seguida por um desafio de 3 dias com OVA, isoladamente [OVA]
ou juntamente com 1 mg/kg de peso corporal de dexametasona [OVA + Dex] ou (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2- hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona [OVA + CpdX]. (A): o número (x105) de células totais, eosinófilos, neutrófilos, macrófagos e linfócitos está relatado. (B): a expressão relativa de RNA dos genes que codificam a interleucina-1β [IL1β], interleucina-6 [IL6], interleucina-4 [IL4], interleucina-5 [IL5], interleucina-10 [IL10], interleucina- 13 [IL13], eotaxina [Eotaxina], proteína inflamatória-1β dos macrófagos [CCL4] e fator de necrose tumoral alfa [TNFα] é reportada. Interleucinas pró-inflamatórias específicas para Th2 e Th1 são destacadas. Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos seis camundongos por tratamento.
A significância estatística comparada ao tratamento OVA foi calculada pelo teste t de Student; (*) p <0,05; (**) p <0,01; (***) p <0,001.
[0318] A Figura 10 é um conjunto de três micrografias mostrando uma inflamação pulmonar do tipo asma induzida por ovalbumina, após 18 dias de sensibilização com ovalbumina (OVA), seguida de um desafio de 3 dias, conforme descrito na Figura 9. As seções pulmonares foram coradas com hematoxilina e eosina. As regiões peribronquiolar (B) e perivascular (V) são indicadas. A barra de escala representa 40 µm.
[0319] A Figura 11 é um conjunto de quatro histogramas que mostram (A-B) as contagens de células em uma lavagem broncoalveolar [BAL] e (CD) a expressão relativa de
RNA medida por análises q-RT-PCR de transcritos de RNA extraídos de amostras de pulmão de camundongo em D32, após indução de uma inflamação pulmonar semelhante à asma com uma sensibilização de 28 dias com ácaro da poeira doméstica
(HDM), seguida por um desafio de HDM de 3 dias, sozinho [HDM]
ou em conjunto com 1 mg/kg de peso corporal de dexametasona
[HDM + Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-
4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino] isobenzofuran-1
(3H)-ona [HDM + CpdX], CpdX(eA) [HDM + CpdX(eA)], CpdX(eB)
[HDM + CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-
2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino}
isobenzofurano-1 (3H)-ona [HDM + CpdX-D3], CpdX-D3(eA) [HDM
+ CpdX-D3(eA)] ou CpdX-D3(eB) [HDM + CpdX-D3(eB)]. (A-B): o número (x105) de células totais, eosinófilos, neutrófilos,
macrófagos e linfócitos é reportado. (C-D): a expressão relativa do RNA dos genes que codificam a interleucina-1β
[IL1β], interleucina-6 [IL6], interleucina-4 [IL4],
interleucina-5 [IL5], interleucina-13 [IL13], eotaxina
[Eotaxina] e proteína inflamatória-1β dos macrófagos [CCL4]
é reportada.
Interleucinas pró-inflamatórias especificas de
Th2 são destacadas.
Os dados são representados como média ±
SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos quatro camundongos por tratamento.
A significância estatística comparada ao tratamento HDM foi calculada pelo teste t de Student; (*) p <0,05; (**) p <0,01; (***) p <0,001; (ns) não significativo.
[0320] A Figura 12 é um conjunto de oito micrografias mostrando uma inflamação pulmonar do tipo asma induzida por ácaro da poeira doméstica (HDM), após 28 dias de sensibilização com HDM, seguida de um desafio de 3 dias, conforme descrito na Figura 11. As seções pulmonares foram coradas com hematoxilina e eosina. As regiões peribronquiolar (B) e perivascular (V) são indicadas. A barra de escala representa 40 µm.
[0321] A Figura 13 é um conjunto de dois histogramas mostrando a hiperresponsividade das vias aéreas à metacolina (MCh, 50 mg/mL) de camundongos nos quais uma inflamação pulmonar do tipo asma induzida por ácaro da poeira doméstica (HDM) foi induzida por uma sensibilização de 28 dias com HDM, seguido por um desafio de três dias, conforme descrito na Figura 11. (A) resistência das vias aéreas, (B) elastância das vias aéreas. Os dados são representados como média ± SEM com pelo menos oito camundongos por tratamento. A significância estatística em comparação com o tratamento com HDM foi calculada por ANOVA de duas vias seguida de comparações múltiplas de Bonferroni; (**) p <0,01; (***) p <0,001; (****) p <0,0001; (ns) não significativo.
[0322] A Figura 14 é um histograma mostrando a expressão relativa de RNA medida por análise q-RT-PCR de transcritos de RNA dos genes que codificam interleucina-17a [IL17a], interleucina-17c [IL17c], interleucina-17f [IL17f] e interleucina-22 [IL22]. Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pele de orelha de camundongo após uma indução de 9 dias de uma inflamação semelhante à psoríase induzida por Aldara®, incluindo um tratamento tópico nos últimos 5 dias com etanol [Aldara + Veículo], 1 nmol/cm 2 dexametasona [Aldara + Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2- metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino] isobenzofurano-1 (3H)-ona [Aldara + CpdX], (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil- 2-(trifluorometil) pentilamino} isobenzofurano-1 (3H)-ona [Aldara + CpdX-D3]. As interleucinas pró-inflamatórias específicas de Th17 são destacadas. Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos três camundongos por tratamento.
[0323] A Figura 15 é um conjunto de cinco micrografias mostrando uma inflamação da pele do ouvido semelhante à psoríase gerada por Aldara®, seguida por tratamentos tópicos de 5 dias, conforme descrito na Figura
14. As amostras de pele da orelha de camundongo foram coradas com hematoxilina e eosina. A barra de escala representa 20 µm.
[0324] A Figura 16 é um conjunto de oito micrografias mostrando as patas traseiras de camundongos nos quais uma inflamação do tipo artrite induzida por colágeno foi induzida (T0, painéis esquerdos) e tratada com uma administração intraperitoneal de 10 dias (T10) (painéis direitos), com NaCl 0,9% [Veículo], 1 mg/kg de peso corporal de dexametasona [Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4- metil-2-(trifluorometil) pentilamino] isobenzofurano-1 (3H)-ona [CpdX], (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]- 2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil)-pentilamino} isobenzofuran-1 (3H)-ona [CpdX-D3].
[0325] A Figura 17 é um conjunto de dois gráficos que mostram a espessura (em mm) das patas traseiras (no nível do tornozelo) de camundongos após a indução de uma inflamação do tipo artrite (em T0) e uma administração intraperitoneal por 10 dias (T10) (A) com NaCl 0,9% [Veículo], 1 mg/kg de peso corporal de dexametasona [Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro- 2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino] isobenzofuran-1 (3H)-ona [CpdX] ou (R/S)-5-{4- [2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)-pentilamino} isobenzofuran-1 (3H)-ona [CpdX-D3]; e (B) com [CpdX-(eA)], [CpdX(eB)], [CpdX-D3(eA)] ou [CpdX-D3(eB)]. Os dados são representados como média ± SEM com pelo menos seis camundongos por tratamento. A significância estatística comparada ao tratamento Dex foi calculada pelo teste t de Student. (*) p <0,05; (ns) indica que a diferença observada entre camundongos tratados com Dex, tratados com CpdX e tratados com CpdX-D3 não é significativa.
[0326] A Figura 18 é um histograma mostrando a expressão relativa de RNA medida por análise q-RT-PCR de transcritos de RNA de interleucina-1β [IL1β], interleucina- 6 [IL6], interleucina-17a [IL17a], interleucina-17f [IL17f] e fator de necrose tumoral alfa [TNFα]. Os transcritos de RNA total foram extraídos de patas traseiras inteiras de camundongo antes (T0) ou após um tratamento de 10 dias (T10), conforme descrito na Figura 17. Interleucinas pró- inflamatórias específicas de Th17 e Th1 são destacadas. Os dados são representados como média ± SEM com pelo menos seis camundongos por tratamento.
[0327] A Figura 19 é um conjunto de dez micrografias de seções do cólon (com duas ampliações com barra de escala representando 50 µm ou 20 µm respectivamente) mostrando uma colite ulcerativa induzida por um tratamento de 13 dias com DSS (sulfato de sódio a 3% de dextrano) em comparação com um seção normal do cólon [sem tratamento com DSS] e seções de camundongos tratados em D11, D12 e D13 com administração intraperitoneal de NaCl 0,9% [DSS + Veículo], 1 mg/kg de peso corporal dexametasona [DSS + Dex], (R/S)-5-[4-(5- fluoro-2-metoxi-fenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil)
pentilamino]-isobenzofuran-1 (3H)-ona [DSS + CpdX] ou (R/S)- 5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluoro-fenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)-pentilamino} isobenzofurano-1 (3H)-ona [DSS + CpdX-D3]. As seções de cólon foram inicialmente coradas com hematoxilina e eosina. Setas sólidas: infiltração de células inflamatórias da mucosa; setas pontilhadas: infiltração de células inflamatórias submucosas; ponta de flecha: ulceração.
[0328] A Figura 20 é um histograma mostrando as análises comparativas de q-RT-PCR de transcritos de RNA dos genes que codificam interleucina-1β [IL1β], interleucina-6 [IL6], interleucina-17a [IL17a], interleucina-17f [IL17f], linfopoietina estromal de timo [TSLP] e colagenase 3 [MMP13].
Interleucinas pró-inflamatórias específicas de Th17 e Th1 são destacadas. Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de cólon de camundongos tratados oralmente com DSS a 3% (em água potável) por 13 dias, juntamente com uma administração intraperitoneal em D11, D12 e D13, de NaCl 0,9% [DSS + veículo], 1 mg/kg de peso corporal de dexametasona [DSS + Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4- metil-2-(trifluorometil) pentilamino]-isobenzofurano-1 (3H)-ona [DSS + CpdX], CpdX(eA) [DSS + CpdX(eA)], CpdX(eB) [DSS + CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]- 2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino} isobenzo- furano-1 (3H)-ona [DSS + CpdX-D3], CpdX-D3(eA) [DSS + CpdX-
D3(eA)] ou CpdX-D3(eB) [DSS + CpdX-D3(eB)]. Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos quatro camundongos por tratamento.
[0329] A Figura 21 é (A) um conjunto de nove micrografias mostrando, 20 minutos após o último tratamento no dia 24, a aparência clínica dos olhos do camundongo após a indução de uma conjuntivite alérgica induzida por albumina (OVA) que inclui 14 dias de sensibilização por OVA, seguida por um desafio de 10 dias com NaCl 0,9% (veículo) ou OVA.
Nos dias 22, 23 e 24, os olhos de camundongos desafiados por OVA foram co-tratados com NaCl 0,9% [OVA], 0,1% de dexametasona [OVA + Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2- metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino] isobenzofuran-1 (3H)-ona [OVA + CpdX], CpdX- (eA) [OVA + CpdX(eA)], CpdX(eB) [OVA + CpdX(eB)], (R/S)-5- {4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil) pentilamino} isobenzofurano-1 (3H)-ona [OVA + CpdX-D3], CpdX-D3(eA) [OVA + CpdX-D3(eA)] ou CpdX-D3(eB) [OVA + CpdX-D3(eB)]; e (B) um gráfico mostrando a pontuação clínica (hiperemia conjuntival, edema da pálpebra e lacrimejamento) dos olhos de camundongo tratados como descrito em (A). A pontuação foi realizada e cada parâmetro foi avaliado em uma escala de 0 a 3 (0 = ausência, 1 = leve, 2 = moderado e 3 = sintomas graves). Assim, cada animal recebeu uma pontuação clínica total de 0 a 9, e os dados foram expressos como média ± SEM com pelo menos quatro camundongos por tratamento.
[0330] A Figura 22 é um conjunto de dois histogramas mostrando a expressão relativa (medida por análises q-RT- PCR) de transcritos de RNA de (A) Kindlin-1 (um gene contendo nGRE) e (B) REDD1 (um gene contendo +GRE). Os camundongos foram raspados na pele dorsal e tratados topicamente com etanol [Veículo], 1 nmol/cm2 de dexametasona [Dex], (R/S)-5- [4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino]-isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX], [CpdX(eA)], [CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)- 5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluorometil) pentilamino}-isobenzofuran-1-(3H)-ona [CpdX-D3], [CpdX- D3(eA)] ou [CpdX-D3(eB)] por 8 dias. Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos três camundongos por tratamento.
[0331] A Figura 23 é um histograma mostrando uma análise morfométrica da espessura epidérmica (em µm) em camundongos raspados na pele dorsal e depois tratados topicamente por 8 dias, conforme descrito na Figura 22. Os dados são representados como média ± SEM de pelo menos três experimentos independentes com pelo menos três camundongos por tratamento.
[0332] A Figura 24 é um conjunto de dezesseis micrografias mostrando a atrofia da pele em camundongos raspados na pele dorsal e depois tratados topicamente, conforme descrito na Figura 22. Painéis à esquerda: as amostras de pele foram coradas com hematoxilina e eosina.
Painéis à direita: o núcleo foi corado pelo DAPI. A barra de escala representa 20 µm.
[0333] A Figura 25 é um conjunto de dez gráficos para cinco parâmetros ósseos corticais medidos pelo microCT: (A) volume ósseo/volume total (%); (B) espessura cortical (mm); (C) área total (mm2); (D) área óssea (mm2) e (E) área medular (mm2). Camundongos com 8 semanas de idade foram tratados por três meses com uma injeção subcutânea diária de NaCl 0,9% [Veículo], 1 mg/kg de peso corporal dexametasona [Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino] isobenzofuran-1 (3H)-ona [CpdX], [CpdX(eA)], [CpdX(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)- 5-fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1 (3H)-ona [CpdX- D3], [CpdX-D3(eA)] ou [CpdX-D3(eB)]. O micro-CT FX Quantum (Perkin Elmer) foi utilizado para realizar medições na tíbia do eixo médio. Os dados correspondem à média (como apontadas por cabeças de seta) ± SEM para pelo menos seis camundongos por tratamento. A significância estatística comparada ao tratamento do veículo foi calculada através do teste ANOVA de uma via, seguido pelo teste de comparação múltipla de Dunnett (*) p <0,05; (**) p <0,01 (***) p <0,001; (****) p <0,0001; (ns): não significativo.
[0334] A Figura 26 é um histograma mostrando a expressão relativa (medida por análises de q-RT-PCR) de transcritos de RNA do gene Wnt16 na tíbia de camundongo.
Camundongos com 8 semanas de idade foram tratados como indicado na Figura 25. Os dados são representados como média ± SEM com pelo menos seis camundongos por tratamento.
[0335] A Figura 27 é um conjunto de três gráficos mostrando a alteração da linha de base (antes do tratamento) de (A) o peso corporal, (B) o percentual de gordura e (C) o percentual de massa magra de camundongos de 8 semanas tratados como indicado por três meses adicionais com uma injeção subcutânea diária de NaCl 0,9% [Veículo], 1 mg/kg de peso corporal dexametasona [Dex], (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2- metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino]isobenzofuran-1 (3H)-ona [CpdX] ou (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4- metil-2-(trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX-D3]. Os dados correspondem à média (como apontado por cabeças de seta) ± SEM para, pelo menos, nove camundongos por tratamento. A significância estatística foi calculada pelo teste de Krustal-Walis seguido pelo teste de comparação múltipla de Dunn; (*) p <0,05; (**) p <0,01 (***) p <0,001.
[0336] A Figura 28 é um conjunto de quatro histogramas mostrando o peso (em gramas) de (A) timo, (B) baço, (C) glândula adrenal e (D) rim de camundongos de 8 semanas tratados por três meses adicionais com um injeção subcutânea diária de NaCl 0,9% [Veículo], 1 mg/kg de peso corporal dexametasona [Dex] ou (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2- metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX], [CpdX(eA)], [CpdX-(eB)], (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5- fluorofenil]-2-hidroxi-4-metil-2-(trifluoro- metil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX-D3], [CpdX- D3(eA)] ou [CpdX-D3(eB)]. Os dados são representados como média ± SEM para pelo menos nove camundongos por tratamento.
A significância estatística foi calculada pelo teste t de Student; (*) p <0,05.
[0337] A Figura 29 é um conjunto de oito micrografias (com duas ampliações diferentes com barra de escala representando 50 µm ou 25 µm respectivamente) mostrando seções de glândulas suprarrenais de camundongos com 8 semanas de idade tratados como indicado na Figura 27. A camada do córtex da glândula adrenal é indicada nos painéis à esquerda por setas de duas cabeças, enquanto as zonas fasciculada e glomerulosa do córtex são indicadas por longas setas em negrito de duas cabeças e pequenas setas vazias de duas cabeças nos painéis à direita, respectivamente.
[0338] A Figura 30 mostra a síntese de corticosterona em camundongos com 8 semanas de idade tratados como indicado na Figura 28. (A): expressão relativa nas glândulas suprarrenais de camundongos dos transcritos de RNA (conforme determinado pelas análises q-RT-PCR) de esteroide 11α- hidroxilase (Cyp11a), esteroide 11β-hidroxilase (Cyp11b1), 3β-hidroxisteroide desidrogenase (HSD3β) e genes da aldosterona sintase (Cyp11b2); (B): níveis plasmáticos de corticosterona às 10h e 18h em camundongos tratados conforme indicado. Os dados são representados como média ± SEM para pelo menos nove camundongos por tratamento.
[0339] A Figura 31 é um conjunto de dois histogramas mostrando os níveis de glicose no sangue (mg/dL) em camundongos com 8 semanas de idade tratados como indicado na Figura 28. (A): níveis plasmáticos de glicose após jejum de 14 horas durante a noite; (B): Teste de tolerância à glicose intraperitoneal de 2 horas (IPGTT) após uma injeção i.p. de glicose (2 mg/kg de peso corporal). Os dados são representados como média ± SEM para pelo menos seis camundongos por tratamento. A significância estatística comparada ao tratamento do veículo foi calculada pelo teste t de Student; (*) p <0,05; (**) p <0,01.
[0340] A Figura 32 (A) é um histograma mostrando os níveis de insulina no sangue (µg/L) em camundongos com 8 semanas de idade tratados como indicado na Figura 28. Os dados são representados como média ± SEM para pelo menos nove camundongos por tratamento. (B): Teste de tolerância à insulina intraperitoneal de 1 hora (IPITT) após uma injeção intraperitoneal de 0,75 U de insulina/kg de peso corporal.
Os dados são representados como média ± SEM com pelo menos seis camundongos por tratamento. A significância estatística comparada ao tratamento do veículo foi calculada pelo teste t de Student, * p <0,01. (C): análises por western blot de amostras de fígado de camundongo para substrato-1 do receptor de fosfo-insulina fosforilado na serina 318 (p-IRS1 S318), substrato-1 do receptor de pan-insulina-1 (total de IRS), fosfo-proteína quinase B fosforilada na serina 473 (p-AKT S473) e proteínas de pan-proteína quinase B (total de AKT).
[0341] A Figura 33 é um conjunto de dezesseis micrografias (com duas ampliações) mostrando uma deposição lipídica seletiva (revelada por coloração com óleo vermelho a 5% das seções congeladas do fígado) no fígado de camundongos com 8 semanas de idade tratados como indicado na Figura 28.
[0342] A Figura 34 é um conjunto de dois histogramas mostrando a expressão relativa de RNA (análise de q-RT-PCR) de transcritos de ácidos graxos sintase (FASN) e estearoil- CoA dessaturase-1 (SCD1) no fígado de camundongos.
Camundongos com 8 semanas de idade foram tratados como indicado na Figura 28. Os dados correspondem à média ± SEM para pelo menos nove camundongos por tratamento. A significância estatística foi calculada pelo teste t de Student; (**) p <0,01; (***) p <0,001.
[0343] A Figura 35 é um conjunto de dois histogramas que mostram os níveis de colesterol total (mmol/L) e ácidos biliares (µmol/L) no sangue de camundongos com 8 semanas de idade tratados como indicado na Figura 28. Os dados são representados como média ± SEM para pelo menos nove camundongos por tratamento.
EXEMPLOS
[0344] A presente invenção é ainda ilustrada pelos seguintes exemplos: Exemplo 1: Síntese de CpdX e CpdX-D3 e separação de seus enantiômeros Síntese e separação “racêmica” de CpdX de seus enantiômeros CpdX(eA) e CpdX(eB)
[0345] A mistura racêmica do chamado composto CpdX {(R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona}, foi sintetizado como descrito na Figura 2A com 99,5% de pureza e sua identidade foi confirmada por LCMS (MS + 1 = 442,1), HPLC, HNMR e FNMR.
[0346] 300 mg de uma mistura racêmica de CpdX foram então corridos através de uma coluna AD de cromatografia de fluido supercrítico preparativo (SFC) (250 mm * 30 mm * 5 µm; fase móvel: Neu-MeOH; B%: 20% -20%, 2,3 minutos).
[0347] As frações coletadas correspondentes ao primeiro pico de eluição (CpdX Pico 1, Figura 2B) foram então concentradas sob pressão reduzida a 30ºC, liofilizadas e posteriormente purificadas através de uma cromatografia em coluna Phenomenex Synergi C18 [150 mm * 25 mm * 10 µm; fase móvel: água (0,1% TFA)-ACN; B%: 50%-80%, 10 minutos]. As frações coletadas foram concentradas sob pressão reduzida a 30ºC e liofilizadas como um sólido branco (97,77 mg), cuja identidade foi confirmada por LCMS (MS + 1 = 442,1) e SFC (tempo de retenção (TR) = 1,086 minutos) e nomeado como o enantiômero “CpdX(eA)” (97,6% de pureza) (Tabela 1).
[0348] As frações coletadas correspondentes ao segundo pico de eluição (CpdX Pico 2, Figura 2B) foram similarmente concentradas sob pressão reduzida a 30ºC, liofilizadas e posteriormente purificadas por cromatografia em coluna Phenomenex Synergi C18 [150 mm * 25 mm * 10 µm); fase móvel: água (0,1% TFA)-ACN; B%: 51%-81%, 12 minutos].
As frações coletadas foram concentradas sob pressão reduzida a 30ºC e liofilizadas como um sólido branco (101,72 mg), cuja identidade foi confirmada por LCMS (MS + 1 = 442,1) e SFC (RT = 1,147 minutos), e nomeado como o enantiômero “CpdX(eB)” com uma pureza de 98% (Tabela 1).
[0349] Análises adicionais determinarão qual dos dois enantiômeros CpdX(eA) e CpdX(eB) corresponde às formas
R e S, respectivamente.
Tempo de %De Altur Largur % de Pico retenção Altur Área a a USP Área (minutos) a 34002 50,43 61958 49,52 Pico 1 1,084 0,052 2 2 7 8 33419 49,56 63140 50,47 Pico 2 1,147 0,052 3 8 3 2 Tabela 1 Síntese e separação “racêmica” de CpdX-D3 de seus enantiômeros CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB)
[0350] A mistura racêmica do chamado composto deuterado CpdX-D3, correspondente ao composto deuterado {(R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4- metil-2-(trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)- ona}, foi sintetizado como na Figura 2C, com 99,3% de pureza e 98,83% de deutério, e sua identidade foi confirmada por LCMS (MS + 1 = 445), HPLC, HNMR e FNMR.
[0351] 84,4 mg de CpdX-D3 foram então executados através de uma cromatografia de fluido supercrítico preparativa (SFC) coluna DAICEL CHIRALPAK AD-H (250 milímetros * 30 mm * 5 µm; na fase móvel: 0,1% NH3H2O-MEOH; B%: 20%-20%, 2,3 minutes).
[0352] As frações coletadas correspondentes ao primeiro pico de eluição (CpdX-D3 Pico 1) foram concentradas sob pressão reduzida a 30ºC e liofilizadas como um sólido branco (32,41 mg), cuja identidade foi confirmada por LCMS (MS + 1 = 445) e SFC (RT = 1,082 minutos) e nomeado como o enantiômero “CpdX-D3(eA)” com uma pureza de 98,7%.
[0353] As frações coletadas correspondentes ao segundo pico de eluição (CpdX-D3 Pico 2) foram concentradas sob pressão reduzida a 30ºC e liofilizadas como um sólido branco (31,06 mg), cuja identidade foi confirmada por LCMS (MS + 1 = 445) e SFC (RT = 1,149 minutos) e nomeado como o enantiômero “CpdX-D3(eB)” com uma pureza de 99,1% (Figura 2D).
[0354] Análises posteriores determinarão qual dos dois enantiômeros CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB) corresponde às formas R e S, respectivamente.
Exemplo 2: Ao contrário de Mapracorat/ZK245186, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(EA) e CpdX-D3(EB) são Moduladores Agonísticos de GR Seletivos não esteroidais bona fide (SEGRAMs) (ver Figura 3) Materiais e métodos
[0355] Orelhas de camundongos Balb/C foram tratadas durante a noite por 18 horas com 1 nmol/cm2 de: - Etanol [veículo], - Dexametasona [Dex], - Mapracorat, - (R/S)-5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-
metil-2-(trifluorometil)pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX], - 5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil- 2-(trifluorometil)-pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona A enantiômero A [CpdX(eA)], - 5-[4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-hidroxi-4-metil- 2-(trifluorometil)-pentilamino]isobenzofuran-1(3H)-ona enantiômero B [CpdX(eB)], - (R/S)-5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2- hidroxi-4-metil-2- (trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona [CpdX- D3], - 5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4- metil-2-(trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona enantiômero A [CpdX-D3(eA)] ou - 5-{4-[2-(metoxi-D3)-5-fluorofenil]-2-hidroxi-4- metil-2-(trifluorometil)pentilamino}isobenzofuran-1(3H)-ona enantiômero B [CpdX-D3(eB)].
[0356] Os transcritos de RNA foram extraídos das orelhas dos camundongos e os transcritos de 4 genes foram analisados por q-RT-PCR: (i) o gene transativado por GR diretamente do inibidor de mTOR REDD1, (ii) o gene transreprimido por GR diretamente da queratina 5 (K5) e (iii) os genes transreprimidos por GR indiretamente “amarrados” da interleucina-1β (IL-1β) e interleucina-6 (IL- 6), sendo ambos ativados na presença de 12-O- tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA).
Resultados
[0357] Após o tratamento com Dex ou Mapracorat, análises transcricionais in vivo mostraram que o Mapracorat, assim como a Dex, induz todas as três funções GR (transativação direta, transrepressão direta e transrepressão de ligação indireta, resumidas na Figura 1), com uma transativação semelhante do gene REDD1 (Figura 3A), uma transrepressão direta semelhante do gene K5 (Figura 3B) e uma transrepressão indireta semelhante dos genes IL-1β (Figura 3C) e IL-6 (Figura 3D).
[0358] Pelo contrário, o GR exibe seletivamente uma atividade de transrepressão de ligação indireta à administração in vivo de CpdX, com níveis de expressão de RNA relativo inalterados para os genes REDD1 e K5, em comparação ao controle (Veículo). Resultados semelhantes também foram obtidos com a administração de CpdX(eA) ou CpdX(eB), ou de seus equivalentes deuterados CpdX-D3, CpdX- D3(eA) e CpdX-D3(eB).
Conclusão
[0359] Mapracorat não é um Modulador Agonístico de
GR Seletivo não esteroidal (SEGRAM), indicando que Mapracorat pode apresentar- ainda que poderia ser em menor grau - efeitos colaterais semelhantes aos atualmente encontrados em cima de um tratamento de Dex.
[0360] Em contraste marcante, o CpdX, bem como seus dois enantiômeros CpdX(eA) e CpdX(eB), exibem seletivamente a atividade de transrepressão de ligação indireta do GR, como esperado para SEGRAMs de bona fide. O mais interessante é que o CpdX deuterado (CpdX-D3) e seus dois enantiômeros [CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB)] exibem as mesmas propriedades seletivas e anti-inflamatórias dos seus homólogos CpdX.
Exemplo 3: CpdX e CpdX-D3 são tão eficientes quanto a Dexametasona (Dex) na redução de uma dermatite de contato irritativa induzida por DPA semelhante à inflamação por Th1/Th2/Th17 (ver Figura 4) Materiais e métodos
[0361] Orelhas de camundongo Balb/C foram tratadas topicamente com TPA para induzir uma “inflamação irritativa do tipo dermatite de contato”.
[0362] Os camundongos foram tratados por 4 dias com TPA, depois por 5 dias extras (até D9) com qualquer veículo, TPA sozinho, TPA e Dex, TPA e CpdX ou TPA e CpdX-D3.
[0363] No D10, os transcritos de RNA foram extraídos das amostras de pele da orelha de camundongo e os transcritos de CCL4, COX2, MMP13, IL-1β, IL-6, TNF-α, TSLP, IL-22 e IL-
23 foram analisados por q-RT-PCR. A pele da orelha foi coletada e análises histológicas (com coloração H&E) e imuno- histoquímicas (com anticorpos anti-TSLP) foram realizadas.
Resultados
[0364] A inflamação da pele induzida por TPA foi significativamente reduzida pelo tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3.
[0365] Análises de transcrição usando extratos de orelha desses camundongos indicaram que CpdX e CpdX-D3 reprimiram, com a mesma eficiência que Dex, a transcrição induzida por TPA de genes pró-inflamatórios (Figura 4).
[0366] A análise histológica da pele do ouvido de camundongo mostrou que uma inflamação da pele do ouvido induzida por TPA diminuiu significativamente pelo tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3, em comparação com o controle (dados não mostrados).
[0367] A análise imuno-histoquímica usando um anticorpo específico para TSLP mostrou que a expressão de TSLP na epiderme de camundongo tratada com TPA foi similarmente fortemente diminuída por um tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3 (dados não mostrados).
Conclusão
[0368] Analisados em conjunto, estes resultados demonstram que CpdX e CpdX-D3 reprimem as inflamações induzida de pele induzidas de forma tão eficiente como Dex,
indicando que ambos podem ser usados no tratamento de inflamações da pele, nomeadamente no tratamento de desordens inflamatórias relacionadas à Th1/Th2/Th17, como dermatite de contato.
Exemplo 4: A administração tópica de Dex, CpdX ou CpdX- D3, em uma formulação em creme ou em etanol (EtOH), resulta em uma atividade anti-inflamatória semelhante (ver Figuras 5 e 6) Materiais e métodos
[0369] Orelhas de camundongo Balb/C foram primeiro tratadas topicamente com TPA por 3 dias, seguidas de um co- tratamento de três dias sem ou com Dex, CpdX ou CpdX-D3 em etanol (1 nmol/cm2) ou em creme (0,05% p/p) composto de vaselina, parafina líquida, Emulgade® 1000 NI (BASF), propil galato, edetato de sódio, ácido sórbico e água purificada.
[0370] Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pele da orelha de camundongo e os transcritos de IL-1β, IL-6, COX2 e TNF-α foram analisados por q-RT-PCR. A pele da orelha foi coletada e análises histológicas (com coloração de H&E) foram realizadas.
Resultados
[0371] As análises de transcrição dos extratos de orelha revelaram uma repressão semelhante dos genes pró- inflamatórios por Dex, CpdX ou CpdX-D3 administrados em etanol ou em uma formulação de creme (Figura 5). A análise histológica da pele do ouvido de camundongo confirmou efeitos anti-inflamatórios semelhantes (Figura 6).
Conclusão
[0372] O CpdX, assim como o CpdX-D3, administrado em etanol ou em uma formulação em creme, têm a mesma eficiência anti-inflamatória no tratamento de uma inflamação da pele.
Exemplo 5: CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX- D3(eA) e CpdX-D3(eB) são tão eficientes quanto a Dexametasona (Dex) na redução de dermatites atópicas induzidas por calcipotriol (MC 903) como inflamação de Th2 (ver Figuras 7 e 8) Materiais e métodos
[0373] Para investigar a atividade anti-inflamatória da CpdX in vivo, as orelhas de camundongo Balb/C foram tratadas topicamente com calcipotriol (MC 903, um análogo da vitamina D 3), a fim de induzir uma inflamação semelhante à dermatite atópica (DA) (Li et al. 2006. Proc Natl Acad Sci U S A. 103(31):11736-41).
[0374] Os camundongos foram tratados por 14 dias com MC 903 e, em seguida, por 8 dias extras (até D22), com MC 903 sozinho (controle), MC 903 e Dex, MC 903 e CpdX, MC 903 e CpdX(eA), MC 903 e CpdX(eB), MC 903 e CpdX-D3, MC 903 e CpdX-D3(eA) e MC 903 e CpdX-D3(eB).
[0375] No D23, os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pele da orelha de camundongo e os transcritos de 7 citocinas (MMP13, COX2, IL-1β, IL-6, IL-6, IL-10, IL- 13 e TSLP) foram analisados por q-RT-PCR. A pele da orelha foi coletada e análises histológicas (com coloração H&E) e imuno-histoquímicas (com anticorpos anti-TSLP) foram realizadas.
Resultados
[0376] A inflamação da pele induzida por MC 903 foi significativamente reduzida pelo tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3.
[0377] As análises de transcrição de RNA dos extratos de orelha desses camundongos indicaram que CpdX e CpdX-D3 reprimiram, com a mesma eficiência que Dex, a transcrição induzida por MC 903 de uma variedade de genes pró- inflamatórios (MMP13, COX2, IL-1β, IL-6, IL-10, IL-13 e de TSLP), incluindo aqueles de uma inflamação por Th2 (IL-10, IL-13 e TSLP) (Figura 7).
[0378] A análise histológica da pele da orelha de camundongo mostrou que uma inflamação da pele da orelha induzida por MC 903 foi diminuída pelo tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3, em comparação com o controle (Figura 8).
[0379] A análise imuno-histoquímica usando um anticorpo específico para TSLP mostrou que a expressão da linfocina TSLP na epiderme de camundongo tratada com MC 903 foi similarmente fortemente diminuída por Dex, CpdX ou CpdX- D3 (dados não mostrados).
[0380] Resultados semelhantes também foram observados para um tratamento com CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX- D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figuras 7 e 8).
Conclusão
[0381] Tomados em conjunto, esses resultados demonstram que uma administração tópica de CpdX, sua forma deuterada CpdX-D3 ou qualquer um de seus enantiômeros [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB)] reduzem de forma tão eficiente como Dex uma inflamação da pele, indicando que todos eles são úteis no tratamento de inflamações da pele, nomeadamente no tratamento de desordens inflamatórias relacionadas à Th2, tais como a dermatite atópica.
Exemplo 6: CpdX, CpdX(eA), CpdX-D3 e CpdX-D3 (AE), mas não CpdX(eB) nem CpdX-D3(EB), são tão eficientes quanto Dexametasona (Dex) em diminuir uma inflamação alérgica por Th2 semelhante a asma (ver Figuras 9 a 13) Materiais e métodos
[0382] Os glicocorticoides foram (Pearlman et al.,
1997. Ann Allergy Asthma Immunol. 78(4):356-62), e ainda são amplamente utilizados na terapia da asma. A fim de investigar a possível atividade anti-inflamatória de CpdX in vivo, os camundongos foram sensibilizados e desafiados com ovalbumina (OVA) ou ácaro da poeira doméstica (HDM) para induzir uma inflamação pulmonar alérgica semelhante à asma.
Sensibilização e desafio à ovalbumina
[0383] Os camundongos foram sensibilizados intraperitonealmente com 50 µg de OVA juntamente com alúmen ou apenas alúmen em D0, D7 e D14. Os camundongos foram então subdivididos em três grupos e, em D19, D20 e D21, foram desafiados por via intranasal (i.n.) com 10 µg de OVA. O primeiro e o segundo grupo receberam, por via intranasal, 0,5 mg/kg de peso corporal de Dex ou CpdX, respectivamente, enquanto o terceiro grupo serviu como controle.
[0384] No D22, a inflamação alérgica pulmonar foi avaliada para cada camundongo através do exame do líquido de lavagem broncoalveolar (LBA). Foram contadas as células totais de BAL, eosinófilos, neutrófilos, macrófagos e linfócitos. Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pulmão e os transcritos de RNA de IL-1β, IL-6, IL-4, IL- 5, IL-10, IL-13, Eotaxina, CCL4 e TNFα foram analisados por q-RT-PCR. Também foram realizadas análises histológicas (com coloração H&E) e imuno-histoquímicas (com anticorpos específicos para eosinófilos e específicos para neutrófilos) dos tecidos pulmonares.
Sensibilização e desafio ao ácaro da poeira doméstica (HDM)
[0385] Os camundongos foram sensibilizados intranasalmente com 1 µg de HDM de D0 à D4, e posteriormente sensibilizados intranasalmente com 10 µg de HDM em D14 e
D21. Os camundongos foram então subdivididos em oito grupos e, em D29, D30 e D31, cada camundongo foi novamente desafiado intranasalmente com 1 µg de HDM. Os sete primeiros grupos receberam, respectivamente, 0,5 mg/kg de peso corporal de Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB), enquanto o oitavo grupo serviu como controle.
[0386] No D32, a capacidade de resposta das vias aéreas foi determinada de forma invasiva, utilizando um ventilador de pequenos animais controlado por computador (sistema FlexVent®, SCIREQ Technologies). Os camundongos foram anestesiados com xilazina (15 mg/kg, i.p.), seguida de 15 minutos depois por uma injeção i.p. de pentobarbital sódico (54 mg/kg). Uma agulha de metal de calibre 18 foi inserida na traqueia, cada camundongo foi conectado ao ventilador FlexVent® e quase sinusoidalmente ventilado com um volume corrente de 10 mL/kg a uma frequência de 150 respirações/minuto e uma pressão expiratória final positiva de 2 cm H2O, a fim de atingir um volume pulmonar médio próximo à respiração espontânea. Após a medição da linha de base, os camundongos foram desafiados por 10 segundos com um aerossol salino e, a intervalos de 4,5 minutos, com 50 mg/mL de metacolina. Resistência e elastância das vias aéreas foram expressas como cmH2O.s/mL e cmH2O/mL, respectivamente.
[0387] A inflamação alérgica do pulmão foi avaliada pelo exame do líquido de lavagem broncoalveolar (LBA) de cada um desses camundongos desafiados por HDM. Foram contadas as células totais de BAL, eosinófilos, neutrófilos, macrófagos e linfócitos. Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pulmão. Os transcritos de RNA de IL-1β, IL-6, IL-4, IL-5, IL-13, Eotaxina, CCL4, IL-10 e TNFα foram analisados por q-RT-PCR. Os tecidos pulmonares foram coletados e também foram realizadas análises histológicas (com coloração H&E) e imuno-histoquímica (com anticorpos específicos para eosinófilos e anticorpos para neutrófilos).
Resultados Sensibilização e desafio à ovalbumina
[0388] Após o tratamento com Dex ou CpdX, o número total de células BAL, eosinófilos, neutrófilos e linfócitos diminuiu significativamente em comparação ao grupo controle.
O número de macrófagos permaneceu inalterado (Figura 9A).
[0389] Consistente com estes resultados, a análise da transcrição de amostras de pulmão mostraram que as expressões de IL-1β, IL-6 e de genes pró-inflamatórios de Th2 de IL-4, IL-5, IL-10 e IL-13, bem como os da quimiocina quimiotática eosinófila Eotaxina, CCL4 e TNFα, foram significativamente e similarmente diminuídos com o tratamento com Dex ou CpdX (Figura 9B).
[0390] As análises histológicas das seções de parafina pulmonar demonstraram que a infiltração de células inflamatórias peribronquiolares (B) e perivasculares (V) foi fortemente diminuída pelo tratamento com Dex ou CpdX (Figura 10).
[0391] A coloração imuno-histoquímica usando anticorpos específicos para eosinófilos e específicos para neutrófilos confirmou que ambos eosinófilos e neutrófilos foram diminuídos de forma semelhante tanto por um tratamento com Dex quanto por CpdX (dados não mostrados).
Sensibilização e desafio ao ácaro da poeira doméstica (HDM)
[0392] Após o tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3, o número total de células BAL, eosinófilos e linfócitos diminuiu significativamente em comparação ao grupo controle.
Nenhuma mudança significativa foi observada no número de neutrófilos e macrófagos (Figura 11A e B).
[0393] As análises transcricionais de RNA de amostras de pulmão mostraram que as expressões dos genes pró-inflamatórios IL-1β, IL-6 e Th2 (IL-4, IL-5, IL-13), bem como as da quimiocina quimiotática eosinófila Eotaxina e o CCL4 foram significativamente e similarmente diminuídos por Dex, CpdX ou CpdX-D3 (Figura 11C e D), enquanto os de IL-10 e TNFα não foram afetados (dados não mostrados).
[0394] As análises histológicas das seções de parafina pulmonar demonstraram que a infiltração de células inflamatórias peribronquiolares e perivasculares foi fortemente diminuída pelo tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-
D3 (Figura 12).
[0395] A coloração imuno-histoquímica usando anticorpos específicos para eosinófilos confirmou que os eosinófilos foram diminuídos pelo tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3 (dados não mostrados). No entanto, nenhuma alteração significativa foi observada usando um anticorpo específico para neutrófilos (dados não mostrados).
[0396] Os testes funcionais pulmonares (respostas à metacolina analisadas por medidas invasivas da resistência e elastância das vias aéreas) demonstraram que a administração de Dex, CpdX ou CpdX-D3 reduziu de maneira semelhante a hiperresponsividade das vias aéreas induzida por HDM (AHR) (Figura 13).
[0397] Surpreendentemente, um tratamento com CpdX(eA) ou CpdX-D3(eA), mas não com CpdX(eB) nem CpdX- D3(eB), diminuiu com eficiência o número total de células BAL, eosinófilos e linfócitos (Figura 11A e B), bem como a expressão de genes pró-inflamatórios (Figura 11C e D). As análises histológicas das seções de parafina pulmonar revelaram que a infiltração de células inflamatórias peribronquiolares e perivasculares foi diminuída pelo tratamento com CpdX(eA) ou CpdX-D3(eA), mas não pelo tratamento com CpdX(eB) nem CpdX-D3(eB) (Figura 12).
Consequentemente, os testes funcionais pulmonares mostraram que a administração de CpdX(eA), mas não de CpdX(eB), reduziu a hiperresponsividade das vias aéreas induzida por HDM (AHR) (Figura 13).
Conclusão
[0398] Tomados em conjunto, esses resultados demonstram que CpdX e CpdX-D3 reprimiram, com a mesma eficiência que Dex, inflamações pulmonares induzidas por alérgenos, indicando sua potencial utilidade no tratamento de desordens inflamatórias relacionadas à Th2, como a asma.
Curiosamente, CpdX(eA) e CpdX-D3(eA), mas nenhum CpdX(eB) nem CpdX-D3(eB) reprimiram eficientemente a inflamação pulmonar induzida por HDM, indicando que apenas CpdX(eA) ou CpdX-D3(eA) é o enantiômero ativo no tratamento da asma.
Exemplo 7: Uma inflamação de Th17 tipo psoríase induzida por Aldara é reduzida por um tratamento tópico com Dexametasona (Dex), CpdX ou CpdX-D3 (ver Figuras 14 e 15) Materiais e métodos
[0399] As orelhas de camundongo Balb/C foram tratadas topicamente com Aldara® para induzir uma inflamação da pele semelhante à psoríase (Vinter et al., 2015. Br J Dermatol. 172(2):345-53). Os camundongos foram tratados por 9 dias com Aldara®, incluindo um tratamento co-tópico nos últimos 5 dias com etanol (Veículo), Dex, CpdX ou CpdX-D3.
[0400] No D10, os transcritos de RNA foram extraídos das orelhas dos camundongos e os transcritos de IL-17a, IL- 17c, IL-17f e IL-22 foram analisados por q-RT-PCR. Amostras de pele da orelha também foram coletadas para análises histológicas (com coloração H&E).
Resultados
[0401] A inflamação da pele tipo psoríase induzida por Aldara® foi significativamente reduzida pelo tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3. Curiosamente, RNA transcrito análises de extratos da orelha indicaram que as expressões induzidas da citocinas Th17 IL-17A, IL-17C, IL-17F e IL-22; mas não de IL-23, foram igualmente reduzidas por um tratamento com Dex, CpdX ou CpdX-D3 (Figura 14 e dados não mostrados).
[0402] As análises histológicas por coloração com H&E confirmaram esses resultados e mostraram que Dex, CpdX ou CpdX-D3 poderiam reduzir uma inflamação da pele do tipo psoríase induzida por Aldara® (Figura 15).
Conclusão
[0403] Esses resultados demonstram que, no camundongo, o CpdX ou o CpdX-D3 reprimiram, com a mesma eficiência que Dex, uma inflamação da pele tipo psoríase induzida por Aldara, indicando que tanto o CpdX quanto o CpdX-D3 são tão eficientes quanto a Dex no tratamento dessa desordem inflamatória da pele relacionado a Th17.
Exemplo 8: CpdX, CpdX(eA), CpdX-D3 e CpdX-D3(eA), mas não CpdX(eB), nem CpdX-D3(eB), são tão eficientes quanto a Dexametasona (Dex) na redução da inflamação por Th17 de artrite induzida por colágeno (CIA)) (ver Figuras 16 a 18) Materiais e métodos
[0404] Os camundongos foram tratados com colágeno para induzir uma inflamação tipo artrite reumatoide por Th17, conforme descrito por Inglis et al. (2007. Arthritis Res Ther. 9(5):R113) and Geboes et al. (2009. Arthritis Rheum.
60(2):390-5).
[0405] Camundongos machos (cepa DBA-1) foram injetados subcutaneamente com 100 µg de colágeno por camundongo em D0. A espessura da pata traseira no nível do tornozelo foi medida regularmente com um paquímetro. Quando a espessura do tornozelo atingiu cerca de 4 mm (T0, ou seja, 30 a 50 dias após a injeção de colágeno em D0), os camundongos foram injetados diariamente por via intraperitoneal por 10 dias (T0 a T10) com qualquer um dos veículos (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal diluído em NaCl 0,9%) e o a espessura da pata traseira no nível do tornozelo foi medida diariamente com um paquímetro. Foram tiradas fotos das patas traseiras nos dias T0 e T10 (antes e após o tratamento com Veículo, Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB)), a fim de avaliar o curso do inchaço.
[0406] Os transcritos de RNA foram extraídos de patas traseiras inteiras de camundongos não tratados e tratados com colágeno em T0 e T10. Os transcritos de IL-1β, IL-6, IL-
17a, IL-17f e TNFα foram analisados por q-RT-PCR.
Resultados
[0407] A espessura da pata traseira mostrou um aumento após a injeção de colágeno, enquanto os tratamentos com Dex, CpdX e CpdX-D3 resultaram em 10 dias em uma rápida diminuição dessa espessura (Figuras 16 e 17A). Uma diminuição semelhante da espessura da pata traseira foi observada em camundongos tratados com CpdX(eA) ou CpdX-D3(eA), enquanto em contraste marcado nenhuma diminuição foi observada em um tratamento com CpdX(eB) ou CpdX-D3(eB) (Figura 17B e dados não mostrados).
[0408] Mais notavelmente, os transcritos de RNA dos genes pró-inflamatórios que são expressos nas patas traseiras de camundongos que desenvolveram uma CIA foram igualmente reprimidos por um tratamento de dexametasona, CpdX, CpdX(eA), CpdX-D3 ou CpdX D3(eA), mas não por um tratamento de CpdX(eB), nem um tratamento de CpdX-D3(eB) (Figura 18).
Conclusão
[0409] Esses resultados demonstram que tanto o CpdX quanto o CpdX-D3, assim como seus enantiômeros CpdX(eA), CpdX-D3(eA), mas não seus enantiômeros CpdX(eB) e CpdX- D3(eB), são tão eficientes quanto a Dex em diminuição de uma inflamação Th17 tipo artrite reumatoide.
Exemplo 9: CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-
D3(EA) e CpdX-D3(EB) são tão eficazes como a dexametasona (Dex) na cura de colite ulcerativa por Th17 induzida por Dextrano Sulfato de Sódio (DSS) (ver Figuras 19 e 20) Materiais e métodos
[0410] Investigar a atividade anti-inflamatória de CpdX e CpdX-D3 em uma colite ulcerativa Th17, camundongos Balb/C foram tratados com DSS a 3% em água potável por 13 dias, com ou sem administração intraperitoneal de Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal) em D11, D12 e D13.
[0411] No D14, os transcritos de RNA foram extraídos dos cólons de camundongo. Os transcritos de IL-1β, IL-6, IL- 17a, IL-17f, TSLP e MMP13 foram analisados por q-RT-PCR.
Também foram coletadas amostras de cólon para análises histológicas (com coloração H&E).
Resultados
[0412] As análises histológicas (seções de parafina coradas com H&E) (Figura 19 e dados não mostrados) mostraram danos dramáticos no cólon de camundongo tratado com DSS em comparação com camundongos de controle (sem tratamento com DSS): a estrutura regular das vilosidades/criptas do cólon estava altamente desorganizada ou ausente em camundongos tratados com DSS. Além disso, também foram observadas ulcerações (ponta da seta), bem como infiltrações celulares nas camadas da mucosa colônica (setas sólidas) e submucosas
(setas pontilhadas). Mais notavelmente, em camundongos tratados por 3 dias com Dex, CpdX, CpdX-D3 ou seus dois enantiômeros CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB), a vilosidade colônica/a estrutura da cripta foi quase restabelecida e a infiltração de células da mucosa e da submucosa diminuiu significativamente.
[0413] As análises transcricionais mostraram (Figura 20) que os genes pró-inflamatórios sobre-expressos na colite ulcerativa induzida por DSS foram igualmente reprimidos por Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB).
Conclusão
[0414] Tomados em conjunto, nossos resultados demonstram que CpdX, CpdX-D3 e seus enantiômeros CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB) são tão eficientes quanto Dex para o tratamento de desordem inflamatória relacionada à Th17, como colite ulcerativa.
Exemplo 10: CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX- D3(eA) ou CpdX-D3(eB) aliviam tão eficientemente quanto Dexametasona em conjuntivite alérgica induzida por ovalbumina (OVA) (ver a Figura 21) Materiais e métodos
[0415] Para investigar o efeito anti-inflamatório de CpdX ou CpdX-D3 em uma conjuntivite alérgica, os camundongos Balb/C foram sensibilizados intraperitonealmente com 50 µg de OVA com alúmen nos dias D1 e D8, e depois desafiados de D15 a D21 com 250 µg de OVA em 5 µL de veículo esterilizado (NaCl a 0,9%), que foram instilados diretamente no saco conjuntival. De D22 a D24, os camundongos foram divididos em vários grupos e receberam instilação apenas com OVA, OVA e 0,1% de Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB).
[0416] A aparência clínica dos olhos do camundongo foi avaliada 20 minutos após a última instilação no D24. Os sinais clínicos (hiperemia conjuntival, edema da pálpebra e lacrimejamento) foram pontuados para avaliar a ocorrência e aa gravidade da conjuntivite, conforme descrito por Gimenes et al. (2015. Experimental Eye Research 134:24-32). Os parâmetros foram classificados em uma escala de 0 a 3 (0 = ausência, 1 = leve, 2 = moderado e 3 = sintomas graves), cada animal recebendo uma pontuação clínica total variando de 0 a 9. Os dados foram expressos como média ± SEM com pelo menos quatro camundongos por tratamento.
Resultados
[0417] Vinte minutos após o último desafio com OVA, os olhos de todos os camundongos tratados com OVA apresentaram sinais clínicos óbvios de conjuntivite alérgica em comparação com os camundongos de controle (Veículo) (Figura 21). Esses sinais foram consideravelmente reduzidos pelo tratamento com Dex, bem como pelo tratamento com CpdX,
CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 21).
Conclusão
[0418] Estes resultados demonstram que CpdX, CpdX- D3 e seus enantiômeros CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB) reduzem, tão eficientemente quanto Dex, uma conjuntivite alérgica induzida por ovalbumina (OVA).
Exemplo 11: Em contraste marcante com a dexametasona (Dex), um tratamento tópico com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) não induz atrofia da epiderme da pele (ver figuras 22 a 24) Materiais e métodos
[0419] A atrofia da pele é uma limitação grave aos tratamentos tópicos com glicocorticoides (Schoepe et al.,
2006. Exp Dermatol. 15(6):406-20).
[0420] Para investigar se, da mesma forma que Dex, uma administração tópica de CpdX poderia resultar em atrofia da pele, os camundongos Balb/C foram raspados na pele dorsal.
Etanol (veículo), Dex, CpdX ou um de seus dois enantiômeros CpdX(eA) ou CpdX(eB), bem como a forma deuterada CpdX-D3 ou um de seus dois enantiômeros CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB), foram aplicados topicamente na pele dorsal por 8 dias.
[0421] Após a conclusão dos tratamentos, os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de pele dorsal e os transcritos dos genes Kindlin-1 e REDD1 foram analisados por q-RT-PCR. Também foram realizadas análises histológicas e morfométricas da pele dorsal.
Resultados
[0422] Foi relatado que uma perda da proteína Kindlin-1 resulta em atrofia epidérmica da pele (Ussar et al., 2008. PLoS Genet. 4(12):e1000289), enquanto, em contraste marcado, a perda da proteína Redd1 impede uma atrofia cutânea induzida por GC (Britto et al., 2014). Am J Physiol Endocrinol Metab. 307(11):E983-93; Baida et al.,
2015. EMBO Mol Med. 7(1):42-58).
[0423] O mais interessante é que as análises transcricionais de amostras de pele dorsal indicaram claramente que a transcrição do gene Kindlin-1 (que contém um nGRE) é fortemente diminuída por um tratamento tópico com Dex, mas não por um dos CpdX, CpdX(eA), CpdX (Tratamento eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 22A). Por outro lado, a transcrição do gene REDD1 (que contém um +GRE) é significativamente aumentada por um tratamento com Dex, mas não com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3 (eA) nem CpdX-D3(eB) (Figura 22B).
[0424] Consistente com as análises dos transcritos de RNA, as análises morfométricas mostraram que a espessura epidérmica diminui em ≈ 65% após um tratamento com Dex por oito dias. Por outro lado, a espessura epidérmica não diminui significativamente com o tratamento CpdX, CpdX(eA),
CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 23).
Esses dados são totalmente consistentes com a análise histológica, demonstrando que uma aplicação de Dex, em acentuado contraste com a de CpdX ou sua forma deuterada CpdX-D3 ou qualquer um de seus enantiômeros, induz severamente uma atrofia da pele (Figura 24).
Conclusão
[0425] Nossos resultados demonstram claramente que, em contraste marcante com o tratamento tópico Dex, um tratamento tópico com CpdX ou sua forma deuterada CpdX-D3 ou com qualquer um de seus enantiômeros [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3 (eA) e CpdX-D3(eB)], não resulta em atrofia epidérmica da pele, indicando que CpdX e CpdX-D3 podem ser usados com segurança em tratamentos de pele.
Exemplo 12: Um tratamento de três meses com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) não afeta a formação óssea cortical nem trabecular, em contraste com tratamento com Dexametasona (Dex) (ver Figuras 25 e 26) Materiais e métodos
[0426] Camundongos machos B6 (8 semanas de idade) foram submetidos diariamente por três meses a uma injeção subcutânea de veículo (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal, diluído em NaCl 0,9%).
[0427] De cada animal incluído nos experimentos, um fêmur e a tíbia ipsilateral foram dissecados e preservados em etanol a 70% para posterior análise da microestrutura óssea por micro-CT. O micro-CT FX Quantum (Perkin Elmer) foi utilizado para realizar medições no fêmur distal e na tíbia do eixo médio. Todas as varreduras foram realizadas com um tamanho isotrópico de voxel de 10 µm, corrente de tubo de 160 µA e tensão de tubo de 90 kV.
[0428] As medidas morfológicas em 3D foram realizadas no software CTAn (Bruker). Os parâmetros corticais ósseos, medidos no eixo médio da tíbia, incluíram medidas da fração de volume ósseo em relação ao volume total, espessura cortical, área total, área óssea e área medular.
A região de interesse foi selecionada abaixo da crista tibial distal e continuou por 20 cortes em direção à extremidade proximal da tíbia. Os parâmetros ósseos trabeculares foram medidos na metáfise distal dos fêmures e incluíram fração de volume ósseo, espessura trabecular, número trabecular e espaçamento trabecular. A região de interesse foi selecionada abaixo da placa de crescimento distal, onde a estrutura da tampa epifisária desapareceu completamente e continuou por 100 cortes em direção à extremidade proximal do fêmur.
[0429] A significância estatística em relação ao tratamento do veículo foi calculada através do teste ANOVA de uma via, seguido pelo teste de comparação múltipla de
Dunn, * p <0,05; ** p <0,01; *** p <0,001; **** p <0,0001.
Resultados
[0430] A osteoporose é um efeito colateral indesejável comum de um tratamento clínico com glicocorticoides a longo prazo (Canalis, 2003. Curr Opin Rheumatol. 15(4):454-7). Como esperado, após um tratamento com Dex por três meses, foram observados fenótipos do tipo osteoporose no osso cortical da tíbia do camundongo: o volume ósseo diminuiu significativamente em comparação com o volume total (Figura 25A), a espessura cortical diminuiu drasticamente (Figura 25B) e a área óssea, mas não a medula, também foi reduzida (Figuras 25D e E). Surpreendentemente, mas de acordo com um relatório anterior (Grahnemo et al.,
2015. J Endocrinol. 224(1):97-108), um tratamento com Dex aumentou o volume ósseo trabecular do camundongo devido a um aumento no número de trabéculas e uma diminuição do espaçamento trabecular, sem alteração na espessura trabecular (dados não mostrados).
[0431] É importante ressaltar que, em contraste marcante com o tratamento Dex, essa administração de CpdX ou CpdX-D3 por três meses, bem como de qualquer um de seus enantiômeros CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB), não afetou a formação óssea nos ossos corticais e trabeculares (Figura 25 e dados não mostrados).
[0432] Foi relatado que a expressão do gene WNT16 afeta a densidade mineral óssea, a espessura óssea cortical, a força óssea e o risco de fratura osteoporótica (Zheng et al., 2012). PLoS Genet. Jul; 8(7): e1002745). Análises transcricionais de amostras de tíbia de camundongos demonstraram que a transcrição do gene WNT16 foi reduzida em 50% com um tratamento Dex, mas não com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou tratamento com CpdX-D3(eB) (Figura 26).
Conclusão
[0433] Esses resultados indicam que CpdX, CpdX-D3 e qualquer um de seus enantiômeros [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX- D3(eA) ou CpdX-D3(eB)] podem ser usados com segurança para tratamentos clínicos de doenças inflamatórias, ao contrário de Dex, eles não afetam a formação óssea.
Exemplo 13: Em contraste com a Dexametasona (Dex), um tratamento de longo prazo com CpdX ou CpdX-D3 não induz uma perda de peso corporal, nem uma alteração na composição corporal (ver Figura 27) Materiais e métodos
[0434] Camundongos machos B6 (8 semanas de idade) foram submetidos diariamente por três meses a uma injeção subcutânea de qualquer veículo (NaCl 0,9%), Dex, CpdX ou CpdX-D3 (1 mg/kg de peso corporal, diluído no veículo). Uma máquina pDEXA foi usada para determinar a massa magra e a massa gorda. A significância estatística foi calculada pelo teste de Krustal-Walis, seguido pelo teste de comparação múltipla de Dunn, * p <0,05; ** p <0,01; *** p <0,001.
Resultados
[0435] Camundongos com 8 semanas de idade que, quando tratados por 3 meses com qualquer veículo, CpdX ou CpdX-D3 exibiram um aumento semelhante do peso corporal (Figura 27A), bem como um aumento proporcional da massa gorda (Figura 27B) e percentual de gordura (Figura 27C). Por outro lado, os camundongos tratados com Dex exibiram uma perda líquida no peso corporal total (Figura 27A), juntamente com um aumento desproporcional na gordura (Figura 27B) e uma diminuição da massa magra (Figura 27C).
Conclusão
[0436] Esses resultados indicam que uma administração a longo prazo de CpdX ou CpdX-D3, em contraste com a de Dex, não resulta em perda de peso corporal, nem em aumento da massa gorda e diminuição da massa magra.
Exemplo 14: Após uma administração in vivo de três meses, os camundongos tratados com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) não exibem os efeitos colaterais” tóxicos” específicos de tecidos indesejáveis observados em camundongos tratados com Dexametasona (Dex) (ver Figura 28) Materiais e métodos
[0437] Camundongos machos B6 (8 semanas de idade)
foram diariamente submetidos a três meses a uma injeção subcutânea de qualquer veículo (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal, diluído em veículo). Após esses tratamentos, quatro órgãos (timo, baço, glândula adrenal e rim) foram coletados e pesados.
Resultados
[0438] Sabe-se que os glicocorticoides induzem uma apoptose drástica do timo (Cohen, 1992. Semin Immunol.
4(6):363-9). Consequentemente, após um tratamento de três meses, não foi encontrado timo em dezesseis dos dezenove camundongos tratados com Dex. Em contraste acentuado, um tratamento com CpdX, sua forma deuterada CpdX-D3, ou com seus enantiômeros CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB) não resultou em nenhuma apoptose significativa de timo (Figura 28A).
[0439] O peso do baço foi reduzido em mais de 50% em camundongos tratados com Dex, enquanto que não foi diminuído em camundongos tratados com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX- D3, CpdX-D3(eA) ou com CpdX-D3(eB) (Figura 28B). Uma perda fraca, mas significativa, do peso do rim também foi observada seletivamente em camundongos tratados com Dex (Figura 28D).
[0440] Curiosamente, o peso da glândula adrenal, na qual ocorre a síntese de corticosterona, foi diminuído por um tratamento com Dex, enquanto foi aumentado por um tratamento com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX- D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 28C).
Conclusão
[0441] Em um tratamento de longo prazo in vivo e em contraste marcante com a administração do glicocorticoide sintético Dexametasona, a administração de CpdX ou sua forma deuterada CpdX-D3 ou qualquer um de seus enantiômeros [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB)], não é tóxica, principalmente para o timo, o baço e a glândula adrenal.
Exemplo 15: Uma injeção subcutânea diária de longo prazo de Dexametasona (Dex) inibe a síntese de corticosterona que, em contraste acentuado, é aumentada por um tratamento semelhante com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX- D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Ver as Figuras 29 e 30) Materiais e métodos
[0442] Camundongos machos B6 (8 semanas de idade) foram submetidos diariamente por três meses a uma injeção subcutânea de veículo (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal, diluído em veículo).
[0443] Após este tratamento de longo prazo, o sangue foi coletado às 10h e 18h por punção retro-orbital em frascos revestidos com lítio-heparina, e o nível plasmático de corticosterona foi determinado. As glândulas drenais foram coletadas e pesadas. Os transcritos de RNA foram extraídos e os transcritos dos genes Cyp11a, Cyp11b1, Cyp11b2 e HSD3β foram analisados por q-RT-PCR. Análises histológicas das glândulas suprarrenais também foram realizadas.
Resultados
[0444] A corticosterona é sintetizada na zona fasciculada da camada do córtex da glândula adrenal. Após um tratamento de três meses com Dex, as camadas do córtex (ver seta de duas cabeças nos painéis à esquerda), mais notavelmente a zona fasciculada (ver seta de duas cabeças em negrito nos painéis à direita) das glândulas suprarrenais diminuíram drasticamente (Figura 29), enquanto eles foram marcadamente aumentados pela administração de CpdX ou sua forma deuterada CpdX-D3, ou um de seus enantiômeros CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 29 e dados não mostrados).
[0445] Análises transcricionais de amostras de glândulas adrenais de camundongos demonstraram que os transcritos dos genes Cyp11a, Cyp11b1 e HSD3β, envolvidos na via de síntese de corticosterona, foram inibidos pelo tratamento com Dex, enquanto aumentados por tratamentos com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB) (Figura 30A).
[0446] Em comparação aos camundongos controle (Veículo), os camundongos tratados com Dex exibiram níveis muito mais baixos de corticosterona às 10h e 18h, enquanto, em contraste acentuado, camundongos tratados com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3 CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB) exibiram um nível de corticosterona muito mais alto às 10 horas (Figura 30B).
[0447] Curiosamente, análises transcricionais de amostras de glândulas suprarrenais de camundongos também mostraram que a transcrição do gene Cyp11b2, que está envolvida na via de síntese da aldosterona, é inibida pelo tratamento com Dex, mas não por tratamento com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 30A). De acordo com este resultado, as análises histológicas revelaram que a zona glomerulosa (zona mais externa da camada do córtex, ver as pequenas setas vazias de duas cabeças nos painéis à direita da Figura 29), que produz aldosterona, foi drasticamente diminuída pelo tratamento com Dex, mas não pelos tratamentos com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 29 e dados não mostrados).
Conclusão
[0448] O mais interessante é que esses dados indicam que os efeitos anti-inflamatórios benéficos do CpdX e de sua forma deuterada CpdX-D3 [assim como qualquer um de seus enantiômeros CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) e CpdX-D3(eB)], que ocorre através da repressão de genes pró-
inflamatórios, resultam de (i) a ligação direta de CpdX ou CpdX-D3 ao GR, que ativa sua função de transrepressão de ligação indireta e (ii) uma ativação adicional dessa função indireta de transrepressão devido a um aumento induzido por CpdX ou CpdX-D3 no nível de corticosterona no sangue, principalmente durante o período de descanso.
Exemplo 16: Em contraste marcante com uma administração de três meses de Dexametasona (Dex), uma administração in vivo de três meses de CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) não induz hiperglicemia (veja a Figura 31) Materiais e métodos
[0449] Após uma administração prolongada de glicocorticoides, a hiperglicemia é um efeito colateral indesejável comum (Clore & Thurby-Hay, 2009. Endocr Pract.
15(5):469-74).
[0450] Camundongos machos B6 (8 semanas de idade) foram diariamente submetidos a três meses de injeção subcutânea de qualquer veículo (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal, diluído em veículo). Os camundongos estavam em jejum durante a noite. A concentração de glicose no sangue do camundongo foi medida antes (T0) e durante duas horas (T120) após a injeção i.p. de glicose (2 mg/kg de peso corporal).
Resultados
[0451] Após um tratamento de três meses, o nível de glicose no sangue nos camundongos tratados com Dex foi significativamente maior do que nos camundongos tratados com solução salina (veículo), CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3 (eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 31A).
[0452] Um teste de tolerância à glicose intraperitoneal (IPGTT) mostrou que, após a injeção de glicose, um nível significativamente mais alto de glicose no sangue foi observado durante um período de duas horas em camundongos tratados com Dex, enquanto não houve diferença significativa entre esses níveis no controle camundongos tratados com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 31B).
Conclusão
[0453] Os resultados acima indicam que, ao contrário de Dex, um tratamento com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) não afeta significativamente o controle do nível de glicose no sangue.
Exemplo 17: Uma administração in vivo de três meses de CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB), diferente da Dexametasona (Dex), não induz resistência à insulina (ver Figuras 31 e 32) Materiais e métodos
[0454] Sabe-se que uma exposição crônica de seres humanos a glicocorticoides (GC) resulta em resistência à insulina no corpo inteiro (Geer et al., 2014). Endocrinol Metab Clin North Am. 43(1):75-102).
[0455] Camundongos machos B6 (8 semanas de idade) foram submetidos diariamente por três meses a uma injeção subcutânea de qualquer veículo (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal, diluído em veículo). Depois de três meses, o sangue foi coletado às 10 horas por punção retro- orbital em frascos revestidos com heparina de lítio, e determinou-se o nível plasmático de insulina.
[0456] Para o teste de tolerância à insulina intraperitoneal (IPITT), os camundongos foram submetido a jejum por 6 horas antes do teste. A concentração de glicose no sangue foi medida antes (T0) e durante um período de uma hora após a injeção de insulina i.p. (0,75 U/kg de peso corporal).
[0457] Após este tratamento de três meses, as amostras de fígado foram coletadas e lisadas no tampão RIPA (Tris 20 mM pH 8, NaCl 150 mM, glicerol a 10%, NP-40 a 1% e NTA-40 a 2 mM e EDTA 2 mM). Os anticorpos da sinalização celular foram utilizados para avaliar por Western-Blotting o nível relativo de p-IRS1 (S318), IRS-1, p-AKT (S473) e AKT.
Resultados
[0458] Após um tratamento de três meses, o nível de insulina no sangue revelou uma hiperinsulinemia em camundongos tratados com Dex, mas não em camundongos tratados com solução salina (veículo), CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 32A). Como uma hiperglicemia foi observada em camundongos tratados com Dex (Figura 31A) e um teste IPITT revelou uma resposta prejudicada significativa à insulina nesses camundongos (Figura 32B), isto pode revelar uma resistência à insulina.
De acordo com essa sugestão, as análises de western blot dos extratos hepáticos mostraram em camundongos tratados com Dex, mas não em camundongos tratados com veículo, CpdX ou CpdX-D3, uma diminuição no substrato 1 do receptor de insulina fosforilado (p-IRS1 S318) (Figura 32C). Como esperado, a fosforilação da proteína quinase B estimulada por insulina (p-AKT S473) também foi diminuída em camundongos tratados com Dex (Figura 32C).
Conclusão
[0459] Esses resultados indicam que, ao contrário da dexametasona, um tratamento com CpdX, sua forma deuterada CpdX-D3 ou qualquer um de seus enantiômeros [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-eB (C), CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB)], não induz resistência à insulina.
Exemplo 18: Em contraste marcante com a dexametasona (Dex), uma administração in vivo de três meses de CpdX,
CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) não induz um fígado gorduroso (ver figuras 33 a 35) Materiais e métodos
[0460] Camundongos machos B6 (8 semanas de idade) foram diariamente submetidos a três meses de injeção subcutânea de qualquer veículo (NaCl 0,9%), Dex, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (1 mg/kg de peso corporal, diluído em veículo). Após este tratamento, o sangue foi coletado às 10 horas por punção retro-orbital em frascos revestidos com lítio-heparina. Os níveis plasmáticos de colesterol total e ácidos biliares foram determinados.
[0461] Amostras de fígado foram coletadas. A deposição de lipídeos no fígado foi revelada pela coloração com óleo vermelho a 5% das seções congeladas. Os transcritos de RNA foram extraídos de amostras de fígado e os transcritos de genes de ácido graxo sintase (FASN) e Estearoil-CoA desaturase 1 (SCD1) foram analisados por q-RT-PCR.
Resultados
[0462] Após um tratamento de três meses, houve uma deposição lipídica acentuada no fígado de camundongos submetidos a uma administração diária subcutânea de Dex, o que não foi observado em camundongos tratados com CpdX ou CpdX-D3, seus enantiômeros ou Veículo (Figura 33).
Consequentemente, um aumento nos transcritos de ácidos graxos sintase (FASN) e estearoil-CoA desaturase 1 (SCD1), que estão criticamente envolvidos na lipogênese hepática, foi observado no fígado de camundongos tratados com Dex, mas não nos camundongos tratados com veículo, CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) (Figura 34).
[0463] A hipercolesterolemia é a principal causa de doenças hepáticas gordurosas não alcoólicas (DHGNA) (Kim et al., 2014). PLoS One. 9(6):e97841). O colesterol é convertido no fígado em ácidos biliares. Consequentemente, também foi observado um alto nível de ácidos biliares em pacientes com doenças hepáticas gordurosas (Aranha et al.,
2008. Eur J Gastroenterol Hepatol. 20(6):519-25). Como esperado, os camundongos tratados com Dex, mas não com CpdX, CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3, CpdX-D3(eA) ou CpdX-D3(eB) apresentaram um claro aumento dos níveis de colesterol no sangue e ácidos biliares (Figura 35).
Conclusão
[0464] Um tratamento in vivo de três meses com CpdX ou sua forma deuterada CpdX-D3 ou com qualquer um de seus enantiômeros [CpdX(eA), CpdX(eB), CpdX-D3(eA) ou CpdX- D3(eB)] não induz uma doença hepática gordurosa, em acentuado contraste com um tratamento semelhante com Dex.

Claims (21)

REIVINDICAÇÕES
1. Modulador agonístico de receptor de glicocorticóide seletivo (SEGRAM) de Fórmula 1 ou um derivado do mesmo: (Formula 1 -CpdX) Ou um sal, solvato ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é para uso na prevenção ou tratamento de uma desordem inflamatória em um indivíduo em necessidade do mesmo.
2. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o SEGRAM está na forma deuterada, preferencialmente em que o SEGRAM é um composto de fórmula 2: (Fórmula 2 – CpdX-D3)
3. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o SEGRAM está na forma racêmica, ou é uma de suas formas enantioméricas.
4. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o SEGRAM de fórmula 1 é um composto de fórmila 3: (Fórmula 3) Em que: - W é selecionado de O, S ou CH2 - R2 é selecionado de H ou CH3, e - Z2 , Z3, Z4, Z5 e Z6 são independentemente selecionados de H, F, Cl, Br, CH3, OCH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH3)2, C(CH3)3, COCH3, NO2, CN, CH=CH2 or CONH2.
5. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente nem uma função de transativação direta nem uma função de transrepressão direta do receptor glicocorticóide.
6. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o SEGRAM não induz ou não induz substancialmente efeitos adversos associados a fármacos anti-inflamatórios esteroidais (SAIDs) após administração a um indivíduo em necessidade do mesmo.
7. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que efeitos adversos associados a SAIDs são selecionados do grupo que compreende atrofia da pele; osteoporose; supressão de crescimento; perda de peso corporal; ganho de massa gorda; perda de massa magra; apoptose do timo, baço, rim e / ou glândula adrenal; inibição da síntese de corticosterona; supressão adrenal; hiperglicemia; resistência a insulina; hiperinsulinemia e fígado gorduroso.
8. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que a desordem inflamatória é caracterizada por um aumento nos níveis de pelo menos uma citocina e/ou anticorpo secretados selecionados do grupo que compreende IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17a, IL-17c, IL-17f, IL-18, IL-21, IL-22, IL-23, IL-33, TSLP, TGFβ, CCL4, TNFα, MMP13, IgE, IgG1 e IgG2a.
9. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, sinusite alérgica, conjuntivite alérgica, rinoconjuntivite, arterite de células gigantes (doença de Horton), febre do feno, dermatite solar, eczema, urticária, angioedema, eritema nodoso, eritema multiforme, venulite necrosante cutânea, inflamação da pele por picada de inseto, anafilaxia, psoríase, artrite reumatóide, doença inflamatória intestinal (DII) (incluindo doença de Crohn, colite ulcerosa e colite), periodontite, doenças inflamatórias crônicas, lúpus eritematoso, dermatomiosite, vasculite, síndrome de Sjogren, esclerodermia, esclerose múltipla, vitiligo, líquen plano, diabetes tipo 2, doença coronariana, hiperlipidemia, esteatose e síndrome metabólica induzida pós-menopausa e doença do enxerto contra o hospedeiro.
10. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e colite ulcerativa.
11. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e colite ulcerativa; e em que o SEGRAM é um enantiômero do SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, tal enantiômero correspondente ao primeiro pico de eluição [CpdX(eA)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica do SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
12. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e colite ulcerativa; e em que o SEGRAM é um enantiômero do SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, tal enantiômero correspondendo ao segundo pico de eluição [CpdX(eB)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica de um SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo.
13. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica,
artrite reumatoide e colite ulcerativa; e em que o SEGRAM é um enantiômero de SEGRAM de fórmula 2 ou um derivado do mesmo, tal enantiômero correspondendo ao primeiro pico de eluição [CpdX-D3(eA)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica do SEGRAM de fórmula 2 ou um derivado do mesmo.
14. SEGRAM ou derivado do mesmo para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a desordem inflamatória é selecionada do grupo que compreende dermatite atópica, dermatite de contato, asma alérgica, psoríase, conjuntivite alérgica, artrite reumatoide e colite ulcerativa; e em que o SEGRAM é um enantiômero de SEGRAM de fórmula 2 ou um derivado do mesmo, tal enantiômero correspondendo ao segundo pico de eluição [CpdX-D3(eB)] de uma cromatografia de fluido supercrítico (SFC) de uma mistura racêmica do SEGRAM de fórmula 2 ou um derivado do mesmo.
15. Enantiômero de um Modulador agonístico de receptor de glicocorticóide seletivo (SEGRAM) de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, ou um solvato, sal e/ou pró-fármaco do mesmo, caracterizado pelo fato de que, preferencialmente, o referido enantiômero é CpdX(eA) or CpdX(eB).
16. Enantiômero de um SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o referido enantiômero é obtido por separação de uma mistura racêmica de um composto de fórmula 1 ou um derivado do mesmo por cromatografia de fluido supercrítico (SFC), e em que CpdX(eA) corresponde ao primeiro pico de eluição e CpdX(eB) corresponde ao segundo pico de eluição.
17. Forma deuterada de um Modulador agonístico de receptor de glicocorticóide seletivo (SEGRAM) caracterizado pelo fato de que é de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, ou um sal, solvato e/ou pró-fármaco farmaceutiamente aceitável do mesmo.
18. Forma deuterada de um SEGRAM de fórmula 1 ou derivado do mesmo, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que a forma deuterada é um composto de fórmula 2: (Fórmula 2)
19. Forma deuterada de um SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 ou 18, caracterizado pelo fato de que a forma deuterada está em uma forma racêmica.
20. Forma deuterada de um SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 ou 18, caracterizado pelo fato de que a forma deuterada é um dos dois enantiômeros do composto de Fórmula 2, de preferência o referido enantiômero é CpdX-D3 (eA) ou CpdX-D3 (eB).
21. Forma deuterada de um SEGRAM de fórmula 1 ou um derivado do mesmo, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que os referidos enantiômeros são obtidos por separação de uma mistura racêmica do composto de fórmula 2 ou um derivado do mesmo por cromatografia de fluido supercrítico (SFC), e em que CpdX-D3(eA) corresponde ao primeiro pico de eluição e CpdX-D3(eB) corresponde ao segundo pico de eluição.
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US5262165A (en) 1992-02-04 1993-11-16 Schering Corporation Transdermal nitroglycerin patch with penetration enhancers
US6010715A (en) 1992-04-01 2000-01-04 Bertek, Inc. Transdermal patch incorporating a polymer film incorporated with an active agent
HU228434B1 (en) 1995-06-07 2013-03-28 Ortho Mcneil Pharm Inc Transdermal medicament for administering 17-deacetyl norgestimate alone or in combination with an estrogen
US6245804B1 (en) 1997-05-30 2001-06-12 Schering Aktiengesellschaft Nonsteroidal gestagens
DE19723722A1 (de) * 1997-05-30 1998-12-10 Schering Ag Nichtsteroidale Gestagene
US5948433A (en) 1997-08-21 1999-09-07 Bertek, Inc. Transdermal patch
DE19856475A1 (de) * 1998-11-27 2000-05-31 Schering Ag Nichtsteroidale Entzündungshemmer
DE10038639A1 (de) * 2000-07-28 2002-02-21 Schering Ag Nichtsteroidale Entzündungshemmer
DK3700513T3 (da) * 2017-10-27 2022-11-28 Association Pour La Rech A Ligbmc Ari Ikke-steroide selektive glucocorticoidreceptor-agonistiske modulatorer (segram) og anvendelser deraf

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