KR20200083972A

KR20200083972A - 켈로이드를 치료하기 위한 약제학적 조성물 및 그의 용도

Info

Publication number: KR20200083972A
Application number: KR1020207009328A
Authority: KR
Inventors: 린 엘.에이치. 황
Original assignee: 엑셀 메드, 엘엘씨; 내셔날 쳉쿵 유니버시티
Priority date: 2017-09-01
Filing date: 2018-08-31
Publication date: 2020-07-09
Also published as: CA3074440A1; JP7260087B2; EP3675874C0; EP3675874B1; US20210015905A1; TWI763917B; EP3675874A4; WO2019046678A1; EP3675874A1; TW201919658A; JP2020536849A; CN111163784A; ZA202001921B

Abstract

대상에서 켈로이드 또는 켈로이드를 형성할 위험이 있는 영역에 약제학적 조성물을 적용하는 단계를 포함하여, 대상에서 켈로이드를 치료하는 방법으로서, 여기에서 조성물은 유효량의 히알루로난 및 유효량의 콜라겐을 포함하고, 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비는 1을 초과하는 방법.

Description

켈로이드를 치료하기 위한 약제학적 조성물 및 그의 용도

관련 출원과의 상호 참조

본 출원은 2017년 9월 1일자로 출원된 미국 가출원 제62/553,267호에 대한 우선권을 주장하며, 그의 내용은 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.

켈로이드는 피부 섬유증의 비정상적인 과다형성으로부터 유발되는 반흔(scar)의 유형이다. 주원인은 세포외 매트릭스의 과도한 축적이며, 이는 대형 반흔의 형성을 유발한다. 반흔은 뚜렷한 외관을 가질 뿐 아니라, 과도한 염증 반응, 소양증, 및 통증을 야기하며, 심지어 말초 조직 기능의 손상을 유발한다.

켈로이드는 인체의 고장력 위치(high-tension position), 예컨대 전흉부, 치골상부위, 및 상박에 발생한다. 반흔의 형상은 주로 크랩 또는 덤벨 형상이다. 그의 구조, 가요성, 및 강도 또한 정상 조직과는 상이하다. 켈로이드 반흔은 임상 수술에 의해 제거될 수 있지만, 환자에서의 재발률은 여전히 60%를 초과한다.

연구에 의해, 켈로이드의 병인은 가족 유전성 인자에 부가하여 주로 켈로이드 섬유모세포에 관련되는 것으로 나타났다. 정상 상처 조직으로부터 단리된 섬유모세포에 비교하여, 켈로이드 섬유모세포는 세포외 매트릭스 구성요소, 특히 콜라겐, 피브로넥틴, 엘라스틴, 및 프로테오글리칸, 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 전환 성장 인자(TGF), 혈소판-유래 성장 인자(PDGF), 및 결합 조직 성장 인자(CTGF)를 포함하는 일부 성장 인자를 과도하게 분비한다. 켈로이드 환자의 상처에서의 섬유성 조직의 과다형성은 과립화 조직이 상처의 원래 영역을 넘어 너무 커지게 하여 켈로이드 반흔을 형성한다. 부가적으로, 켈로이드 섬유모세포 내의 코넥신 및 세포자멸 유전자의 발현은 정상보다 더 낮으므로, 세포자멸의 정도가 상대적으로 낮다. 또한, 켈로이드의 반흔 조직에서, 콜라겐 및 글리코사미노글리칸 구성요소의 증가는 콜라겐 번들이 두꺼워지고 나선형 배열을 형성하는 것을 야기한다. 추가로, 상처 조직의 대사 활성은 정상 조직보다 더 높으며, 상처 조직 내에 저산소증을 유발하므로, 이러한 높은 산소 소모 및 저산소증 확산 하에 켈로이드를 형성하기 쉽다.

현재의 켈로이드 치료는 주로 켈로이드 반흔을 표적화한다. 압박 드레싱, 스테로이드의 국소 주사, 레이저 회춘, 및 약물의 외부 적용을 포함하는 다수의 치료가 있다. 치료는 반흔의 정도에 따라 선택되므로, 켈로이드의 재발을 예방할 수 없고 높은 재발률을 유발한다. 부가적으로, 현재 모든 유형의 켈로이드 환자에 대한 단일 치료가 없으며, 일부 치료는 심지어 부작용을 야기할 수 있다. 그러므로, 대부분의 켈로이드 환자에 대해 적합하며, 안전하고 효과적이며, 재발률을 감소시킬 수 있는 약제학적 조성물 및 치료 방법을 개발하는 것이 중요하다.

일 태양에서 본 명세서에는, 대상에서 켈로이드를 치료하는 방법이 기재된다. 방법은 대상에서 켈로이드 또는 켈로이드를 형성할 위험이 있는 영역에 약제학적 조성물을 적용하는 단계를 포함하며, 여기에서 조성물은 유효량의 히알루로난 및 유효량의 콜라겐을 포함하고, 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비는 1을 초과한다(예를 들어, 1.5-1000, 1.5-3.5, 2-5, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 또는 1000). 일부 실시 형태에서, 켈로이드를 형성할 위험이 있는 영역은 켈로이드 반흔이 수술적으로 제거된 영역이다.

일부 실시 형태에서 약제학적 조성물은, 히알루로난, pH 7±2의 0.001 M - 0.1 M 포스페이트 완충 용액, 및 0.1% - 0.9% NaCl 용액을 혼합하여 히알루로난 용액을 형성하는 단계; 콜라겐 용액을 제공하는 단계; 혼합물 내의 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비가 1을 초과하도록 히알루로난 용액과 콜라겐 용액을 4 ℃ 미만에서 혼합하여 혼합물을 얻는 단계; 및 혼합물의 pH를 7±1로 조정하는 단계를 포함하는 과정에 의해 제조된다. 히알루로난 용액의 pH는 6 미만일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 콜라겐 용액의 pH는 6 미만이다.

일부 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 영양소, 생물학적 활성 제제, 항미생물제, 세포, 세포외 매트릭스 구성요소, 및 부형제로 구성된 그룹 중에서 선택된 첨가제를 추가로 포함한다.

일부 실시 형태에서, 히알루로난의 분자량은 4 내지 5000 kDa(예를 들어, 4 내지 20, 20 내지 100, 100 내지 500, 500 내지 1000, 1000 내지 2000, 2000 내지 2500, 2500 내지 5000, 5, 10, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 750, 1000, 1500, 1800, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 또는 5000 kDa)이다.

일부 실시 형태에서, 히알루로난 용액의 농도는 3 내지 1000 mg/ml(예를 들어, 3 내지 200 mg/ml)일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 콜라겐 용액의 농도는 0.03 내지 500 mg/ml(예를 들어, 1 내지 100 mg/ml)일 수 있다.

일부 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 켈로이드 섬유모세포에서 플라스미노겐 활성화제 저해제-1(PAI-1), 세르핀 펩티다제 저해제, 클레이드 B(오브알부민), 플라스미노겐 활성화제 저해제-2(PAI-2), 콜라겐 유형1, 피브로넥틴, 알파-평활근 액틴(α-SMA), 또는 결합 조직 성장 인자(CTGF)의 유전자 발현을 감소시킬 수 있다.

일부 실시 형태에서, 생물학적 활성 제제는 표피 성장 인자, 섬유모세포 성장 인자(FGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 결합 조직 성장 인자(CTGF), 혈소판-유래 성장 인자(PDGF), 인슐린-유사 성장 인자, 신경 성장 인자, 간세포 성장 인자, 콜로니-자극 인자, 줄기 세포 인자, 케라틴세포 성장 인자, 과립구 콜로니-자극 인자, 과립구 대식세포 콜로니-자극 인자, 신경아교세포-유래 신경영양 인자, 섬모 신경영양 인자, 내피-단핵구 활성화 폴리펩티드, 상피 호중구 활성화 펩티드, 에리트로포이에틴, 골 형성 단백질, 뇌-유래 신경영양 인자, BRAK, 전환 성장 인자 베타(TGF-β), 및 종양 괴사 인자로 구성된 그룹 중에서 선택된다.

일부 실시 형태에서, 세포외 매트릭스 구성요소는 콜라겐, 히알루로난, 젤라틴, 피브로넥틴, 엘라스틴, 테나신, 라미닌, 비트로넥틴, 헤파란 설페이트, 콘드로이틴, 콘드로이틴 설페이트, 케라틴, 케라탄 설페이트, 데르마탄 설페이트, 카라기난, 헤파린, 키틴, 키토산, 알기네이트, 아가로스, 아가(agar), 셀룰로스, 글리코겐, 피브린, 피브리노겐, 응고 효소, 폴리글루탐산, 및 합성 중합체 또는 그의 유도체로 구성된 그룹 중에서 선택된다.

일부 실시 형태에서, 항미생물제는 항생제, 항미생물 단백질, 또는 항미생물 펩티드이다. 일부 실시 형태에서, 세포는 줄기 세포, 위성 세포, 전구 세포(precursor cell), 또는 조직 세포이다. 일부 실시 형태에서, 부형제는 바셀린, 글리세린, 또는 레시틴이다. 일부 실시 형태에서, 영양소는 탄수화물, 아미노산, 펩티드, 단백질, 지방산, 지질, 비타민, 또는 미네랄이다.

다른 태양에서 본 명세서에는, 대상에서 켈로이드를 치료하거나 예방하기 위한 약제학적 조성물이 기재된다. 조성물은 유효량의 히알루로난 및 유효량의 콜라겐을 포함하며, 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비는 1을 초과한다.

하나 이상의 실시 형태의 상세사항이 하기 첨부 도면 및 상세한 설명에 기술되어 있다. 실시 형태의 다른 특징, 목적, 및 이점은 상세한 설명 및 도면으로부터, 그리고 청구범위로부터 자명할 것이다.

도 1은 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포의 형태학을 나타내는 영상의 세트이다.
도 2는 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포의 이동을 나타내는 막대 그래프이다. *P < 0.05.
도 3은 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포의 수축력의 백분율을 나타내는 막대 그래프이다. **P < 0.01; *P <　0.05.
도 4a는 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포 내의 플라스미노겐 활성화제 저해제-1(PAI-1)의 유전자 발현을 나타내는 막대 그래프이다. ***P < 0.001; **P < 0.01; *P < 0.1.
도 4b는 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포 내의 플라스미노겐 활성화제 저해제-2(PAI-2)의 유전자 발현을 나타내는 막대 그래프이다. ***P < 0.001; **P < 0.01; *P < 0.1.
도 4c는 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포 내의 콜라겐 유형 I의 유전자 발현을 나타내는 막대 그래프이다. ***P < 0.001; **P < 0.01; *P < 0.1.
도 4d는 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포 내의 피브로넥틴의 유전자 발현을 나타내는 막대 그래프이다. ***P < 0.001; **P < 0.01; *P < 0.1.
도 4e는 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포 내의 알파-평활근 액틴(α-SMA)의 유전자 발현을 나타내는 막대 그래프이다. ***P < 0.001; **P < 0.01; *P < 0.1.
도 4f는 다양한 약제학적 조성물에서 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포 내의 결합 조직 성장 인자(CTGF)의 유전자 발현을 나타내는 막대 그래프이다. ***P < 0.001; **P < 0.01; *P < 0.1.

히알루로난 및 콜라겐을 함유하는 다양한 조성물이 켈로이드 섬유모세포의 형태학, 이동, 수축성, 및 켈로이드-관련 유전자의 발현을 정상 수준으로, 또는 정상 수준에 근접하여 회복시켰음을 의외로 발견하였다. 그러므로, 조성물은 켈로이드를 치료하거나 켈로이드의 위험을 감소시키기 위해 사용할 수 있다.

약제학적 조성물

따라서, 본 명세서에는 켈로이드를 치료하기 위한 약제학적 조성물이 기재된다. 조성물은 유효량의 히알루로난 및 유효량의 콜라겐을 함유하며, 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비는 1을 초과한다(예를 들어, 1.5-1000, 1.5-3.5, 2-5, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 또는 1000).

조성물은 영양소, 생물활성 제제, 항미생물제, 세포, 세포외 매트릭스 구성요소, 및 부형제를 포함하는 하나 이상의 구성요소를 추가로 함유할 수 있다.

천연-발생 콜라겐 중 임의의 것 또는 그들의 기능성 변이체를 약제학적 조성물의 제조에 사용할 수 있다. 인간 또는 동물의 피부, 힘줄, 인대, 및 골과 같은 콜라겐이 풍부한 조직으로부터 콜라겐을 단리하고 정제할 수 있다. 콜라겐의 단리 및 정제 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 미국 특허 제5,512,291호; 미국 특허 공개 제20040138695호; 문헌[Methods in Enzymology, vol. 82, pp. 33-64, 1982]; 문헌[The Preparation of Highly Purified Insoluble Collagen, Oneson, I., et al., Am. Leather Chemists Assoc., Vol. LXV, pp. 440-450, 1970]; 미국 특허 제6,090,996호를 참조한다. 콜라겐은 또한, Advanced Tissue Sciences(캘리포니아주 라호이아 소재)에 의해 기재된 것들과 같은 재조합 기술에 의해 제조될 수 있거나 다양한 공급사(예를 들어, Fibrogen; 캘리포니아주 사우스 샌프란시스코 소재)로부터 구매할 수 있다. 용어 "콜라겐"은 상기 언급된 분자, 분해/수화된 분자(젤라틴으로도 명명함) 및 그들의 유도체를 지칭한다. 콜라겐 용액을 제조하기 위해, 콜라겐을 아세트산(예를 들어, 0.1 M 내지 0.5 M), HCl(예를 들어, 0.001 내지 0.05 N), 또는 물에 용해시킬 수 있다.

용어 "히알루로난"은 N-아세틸글루코사민 및 D-글루쿠론산의 반복되는 이당류 단위를 포함하는 천연-발생 음이온성 비-설페이트화 글리코사미노글리칸, 및 그의 유도체를 지칭한다. 천연-발생 히알루로난(히알루론산 또는 히알루로네이트로도 알려짐)은 그의 천연 공급원, 예를 들어, 스트렙토코키(Streptococci)의 캡슐, 닭 벼슬, 연골, 관절 활액, 제대, 피부 조직, 및 눈의 유리체로부터 관용적인 방법을 통해 단리할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Guillermo Lago et al. Carbohydrate Polymers 62(4): 321-326, 2005]; 및 문헌[Ichika　Amagai et al. Fisheries Science 75(3): 805-810, 2009]을 참조한다. 대안적으로, 그것은 상업적 공급사, 예를 들어, Genzyme Corporation, Lifecore Biomedical, LLC, 및 Hyaluron Contract Manufacturing으로부터 구매할 수 있다. 천연-발생 히알루로난의 유도체는 히알루로난 에스테르, 아디픽 디하이드라지드-변형 히알루로난, 히알루로난 아미드 산물, 가교결합된 히알루론산, 석신산의 헤미에스테르 또는 그의 중금속 염 히알루론산, 히알루론산의 부분 또는 전체 에스테르, 설페이트화 히알루론산, N-설페이트화 히알루론산, 및 아민 또는 디아민 변형 히알루론산을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 그의 기능기(예를 들어, 카르복실산 기, 하이드록실 기, 환원성 말단 기, N-아세틸 기) 중 하나 이상을 화학적으로 변형시킴으로써 그들을 얻을 수 있다. 카르복실 기는 에스테르화 또는 카르보디이미드 및 비스하이드라지드에 의해 매개되는 반응을 통해 변형될 수 있다. 하이드록실 기의 변형은 설페이트화, 에스테르화, 이소우레아 커플링, 시아노겐 브로마이드 활성화, 및 퍼요오데이트 산화를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 환원성 말단 기는 환원성 아민화에 의해 변형될 수 있다. 이는 또한 인지질, 염료(예를 들어, 형광단 또는 발색단), 또는 친화도 매트릭스의 제조에 적합한 제제에 연결될 수 있다. 천연-발생 히알루로난의 유도체는 또한 가교결합제(예를 들어, 비스에폭사이드, 디비닐설폰, 비스카르보디이미드, 작은 동종이기능성 링커, 포름알데히드, 사이클로헥실 이소시아나이드, 및 리신 에틸 에스테르, 금속 양이온, 하이드라자이드, 또는 그의 혼합물)를 사용하거나 내부 에스테르화, 광-가교결합, 또는 표면 플라스마 처리를 통한 가교결합에 의해 얻어질 수 있다. 히알루로난의 분자량은 4 kDa 내지 5000 kDa(예를 들어, 4 내지 20, 20 내지 100, 100 내지 500, 500 내지 1000, 1000 내지 2000, 2000 내지 2500, 2500 내지 5000, 5, 10, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 750, 1000, 1500, 1800, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 또는 5000 kDa)의 범위일 수 있다. 히알루로난 용액을 제조하기 위해, 히알루로난을 NaCl(예를 들어, 0.1~0.9%)이 있는 포스페이트 완충 용액(예를 들어, pH 7±2의 0.001~0.1 M)에 용해시킬 수 있다. 히알루로난의 농도는 3 내지 1000 mg/mL의 범위일 수 있다. 히알루로난의 바람직한 범위는 3 내지 200 mg/mL이다.

용어 "영양소"는 세포 성장에 필수적인 영양분의 공급원을 지칭한다. 그것은 아미노산, 비타민, 미네랄, 탄소 공급원(예를 들어, 글루코스), 지방산, 또는 그의 혼합물일 수 있다. 일례에서, 약제학적 조성물 내의 영양소는 세포 성장 배지, 예를 들어, 최소 필수 배지, 기본 배지 이글, 둘베코 변형 이글 배지, 햄 영양소 혼합물 F-10 또는 F-12, 배지 199, RPMI 배지, 에임스 배지, BGJb 배지(피톤-잭슨 변형), 클릭 배지, CMRL-1066 배지, 피셔 배지, 글라스카우 최소 필수 배지, 이스코브 변형 둘베코 배지, L-15 배지, 맥코이 5A 변형 배지, NCTC 배지, 스윔 S-77 배지, 웨이마우스 배지, 또는 윌리엄 배지 E이다.

생물활성 제제는 세포 생존율을 개선하거나, 세포 증식을 촉진하거나, 세포 분화를 유도하는 임의의 제제(예를 들어, 펩티드, 폴리펩티드, 올리고당류, 다당류, 또는 소분자)이다. 일례에서, 생물활성 제제는 성장 인자, 예컨대 표피 성장 인자, 섬유모세포 성장 인자, 혈관 내피 성장 인자, 결합 조직 성장 인자, 혈소판-유래 성장 인자, 인슐린-유사 성장 인자, 신경 성장 인자, 간세포 성장 인자, 콜로니-자극 인자, 줄기 세포 인자, 세로토닌, 및 폰 빌레브란트 인자, 전환 성장 인자, 케라틴세포 성장 인자, 과립구 콜로니-자극 인자, 과립구/대식세포 콜로니 자극 인자, 신경아교세포 유래 신경영양 인자, 섬모 신경영양 인자, 내피-단핵구 활성화 폴리펩티드, 상피 호중구 활성화 펩티드, 에리트로포이에틴, 골 형성 단백질, 뇌-유래 신경영양 인자이다. 다른 예에서, 생물활성 제제는 IL-2, 유방-발현 케모카인(예를 들어, BRAK), 신장-발현 케모카인(예를 들어, CXCL14)을 포함하지만 이로 제한되지 않는 사이토카인 또는 케모카인이다. 생물활성 제제는 또한 세포 분화 인자, 예컨대 덱사메타손, 소듐 피루베이트, 아스코르브산-2-포스페이트, 레티노산, 프롤린, 인슐린, 트랜스페린, 아셀렌산(selenous acid), 리놀레산, 및 소 혈청 알부민, 및 TGF-β3일 수 있다. 바람직한 예에서, 분화 인자는 중간엽 줄기 세포의 연골형성(미국 특허 제5,908,784호에 개시된 것들 참조), 골형성(예를 들어, 덱사메타손, 아스코르브산, β-글리세롤 포스페이트), 지방형성(예를 들어, 인슐린, 이소부틸-메틸 잔틴, 덱사메타손, 인도메타신), 심근 분화(예를 들어, 액티빈 A, BMP-4), 내피 세포 분화(예를 들어, EBM-2, 덱사메타손, 및 VEGF), 평활근 세포 분화(예를 들어, PDGF-BB), 신경 유도(예를 들어, bFGF, EGF, 및 B27 보충제, DMSO, 부틸화 하이드록시아니솔, 포르스콜린, 발프로산, KCl, K252a, 및 N2 보충제) 및 내배엽 계통 분화(예를 들어, 덱사메타손, HGF, 및 FGF-4)를 촉진하는 화합물이다. 생물활성 제제는 또한 중국 한약 또는 그의 활성 성분일 수 있다.

세포외 매트릭스 구성요소는 젤라틴, 콜라겐, 히알루로난, 피브로넥틴, 엘라스틴, 테나신, 라미닌, 비트로넥틴, 폴리펩티드, 헤파란 설페이트, 콘드로이틴, 콘드로이틴 설페이트, 케라탄, 케라탄 설페이트, 데르마탄 설페이트, 카라기난, 헤파린, 키틴, 키토산, 알기네이트, 아가로스, 아가, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 카르복실 메틸 셀룰로스, 글리코겐, 및 그의 유도체를 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 부가적으로, 세포외 매트릭스 구성요소는 피브린, 피브리노겐, 트롬빈, 폴리글루탐산, 합성 중합체(예를 들어, 아크릴레이트, 폴리락트산, 폴리글리콜산, 또는 폴리(락트-코-글리콜산), 또는 가교결합제(예를 들어, 제니핀, 글루타르알데히드, 포름알데히드, 또는 에폭사이드)일 수 있다.

윤활 및 방습을 제공하기 위해 하나 이상의 부형제가 약제학적 조성물에 포함될 수 있다. 부형제의 존재는 또한 상처의 치유를 위해 상피 층에 결합하고 이를 연화시키는 크림으로서 작용할 수 있다. 레시틴, 석유 젤리, 글리세롤, 글리세린, 및 글리세린은 세포 조직 겔에 포함될 수 있는 예시적인 부형제이다. 다른 부형제 또한 당업계에 알려져 있고 이용가능하다.

줄기 세포, 위성 세포, 전구 세포, 또는 임의의 조직 세포와 같은 세포가 약제학적 조성물에 포함될 수 있다.

약제학적 조성물은 또한 하나 이상의 항미생물제, 예를 들어, 항생제, 항미생물 단백질, 또는 항미생물 펩티드를 포함할 수 있다.

약제학적 조성물은 액체, 크림, 겔, 젤리, 페이스트, 연고, 스프레이, 콜로이드, 포말, 스펀지, 매트릭스, 드레싱, 패드, 과립, 현탁액, 또는 분말의 형태일 수 있다.

약제학적 조성물을 제조하기 위해, 히알루로난 용액 및 콜라겐 용액을 4 ℃ 미만에서 혼합하여 히알루로난 및 콜라겐을 목적하는 단위 부피당 중량비로 함유하는 혼합물을 제조할 수 있다. 콜라겐에 대한 히알루로난의 바람직한 중량비는 1.5 내지 1000의 범위이다. 하나 이상의 다른 구성요소(예를 들어, 영양소, 생물활성 제제, 항미생물제, 세포, 세포외 매트릭스 구성요소, 및 부형제)가 혼합물에 첨가될 수 있다. 이어서, 최종 혼합물의 pH를 중성 또는 중성 부근(예를 들어, 7±1)으로 조정하여 약제학적 조성물을 형성하며, 이는 젤라틴 굳기(gelatinous consistency)를 가진다. 히알루로난 용액의 농도는 3 내지 1000 mg/ml(예를 들어, 3 내지 100 mg/ml, 5　mg/ml 내지 10 mg/ml, 7 mg/ml 내지 15 mg/ml, 10 내지 25 mg/ml, 15 내지 35 mg/ml, 25 내지 50 mg/ml, 35 내지 65 mg/ml, 50 내지 75 mg/ml, 65 내지 85 mg/ml, 75 내지 95 mg/ml, 85 내지 105 mg/ml, 100 내지 400 mg/ml, 250 내지 550 mg/ml, 400 내지 700 mg/ml, 550 내지 850 mg/ml, 700 내지 1000 mg/ml, 0.5 mg/ml, 1 mg/ml, 1.5 mg/ml, 3 mg/ml, 5 mg/ml, 10 mg/ml, 15 mg/ml, 20 mg/ml, 25 mg/ml, 30 mg/ml, 35 mg/ml, 45 mg/ml, 50 mg/ml, 55 mg/ml, 60 mg/ml, 65 mg/ml, 70 mg/ml, 75 mg/ml, 80 mg/ml, 85 mg/ml, 90 mg/ml, 95 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml, 300 mg/ml, 400 mg/ml, 500 mg/ml, 600 mg/ml, 700 mg/ml, 800 mg/ml, 900 mg/ml, 또는 1000 mg/ml)일 수 있다. 히알루로난에 대한 바람직한 범위는 3 내지 200 mg/ml이다. 콜라겐 용액의 농도는 0.03 내지 500 mg/ml(예를 들어, 0.03 내지 1 mg/ml, 1 내지 2.5 mg/ml, 2.5 내지 5 mg/ml, 5 mg/ml 내지 10 mg/ml, 7 mg/ml 내지 15 mg/ml, 10 내지 25 mg/ml, 15 내지 35 mg/ml, 25 내지 50 mg/ml, 35 내지 65 mg/ml, 50 내지 75 mg/ml, 65 내지 85 mg/ml, 75 내지 95 mg/ml, 85 내지 105 mg/ml, 100 내지 200 mg/ml, 150 내지 250 mg/ml, 200 내지 300 mg/ml, 250 내지 350 mg/ml, 300 내지 400 mg/ml, 350 내지 450 mg/ml, 400 내지 500 mg/ml, 0.5 mg/ml, 1 mg/ml, 1.5 mg/ml, 3 mg/ml, 5 mg/ml, 10 mg/ml, 15 mg/ml, 20 mg/ml, 25 mg/ml, 30 mg/ml, 35 mg/ml, 45 mg/ml, 50 mg/ml, 55 mg/ml, 60 mg/ml, 65 mg/ml, 70 mg/ml, 75 mg/ml, 80 mg/ml, 85 mg/ml, 90 mg/ml, 95 mg/ml, 100 mg/ml, 200 mg/ml, 300 mg/ml, 400 mg/ml, 또는 500 mg/ml)일 수 있다. 콜라겐에 대한 바람직한 범위는 1 내지 100 mg/ml이다.

치료 방법

약제학적 조성물을 환자에게 투여하여 켈로이드의 재발을 치료하거나 예방하거나 그의 재발을 감소시킬 수 있다. 조성물은 켈로이드 또는 켈로이드가 발생할 위험이 있는 영역에 주사하거나 그 위에 국소적으로 적용할 수 있다. 특히, 켈로이드가 수술적으로 제거된 영역에 조성물을 투여하여 상처 치유를 보조하고 동일한 영역에 켈로이드가 형성될 위험을 감소시킬 수 있다.

조성물은 대상에게 필요한 만큼 자주, 예를 들어, 적합한 치료 기간, 예를 들어, 1 내지 4 주, 1 내지 12 개월, 또는 1 내지 3 년 동안, 매일 1 내지 5회, 주당 1 내지 5회, 월당 1 내지 5회 적용될 수 있다.

"치료"는 장애, 장애의 증상, 장애에 부차적인 질환 상태, 또는 장애에 대한 질병소질을 치료하거나, 경감시키거나, 완화하거나, 구제하거나, 그의 발병을 지연시키거나, 예방하거나, 개선하는 목적으로 장애를 앓고 있거나 장애가 발생할 위험이 있는 대상에게 조성물을 투여하는 것을 지칭한다. "유효량"은 치료하는 대상에서 의학적으로 바람직한 결과를 생성할 수 있는 조성물의 양을 지칭한다. 치료 방법은 단독으로, 또는 다른 약물 또는 요법과 함께 수행될 수 있다.

하기 특이적 실시예는 단지 예시적일 뿐이고, 어떠한 임의의 방식으로도 본 개시의 나머지를 제한하지 않는 것으로 해석되어야 한다. 추가의 상술 없이, 당업자는 본 명세서의 상세한 설명에 기초하여 본 개시를 충분히 이용할 수 있다고 생각된다. 본 명세서에 인용된 모든 간행물은 원용에 의해 전체적으로 본 명세서에 포함된다.

실시예 1: 약제학적 조성물의 제조

히알루로난, 포스페이트 완충 용액(0.001 내지 0.1 M 및 pH 7±2), 및 NaCl 용액(0.1 내지 0.9 %)을 혼합함으로써 히알루로난 용액을 제조하였다. 표 1, 2, 및 3에 나타낸 중량비로 각각의 원심분리 튜브 내에서 콜라겐 용액을 히알루로난 용액과 혼합하였다. 각각의 튜브 내의 최종 부피가 동일하도록 소 태아 혈청 및 세포 배양 배지를 함유하는 혼합물을 각각의 튜브에 첨가하였다. 이어서, pH 산-염기 시험지로 각각의 튜브의 pH를 측정하고, HCl 및 NaOH로 pH를 중성(pH 7.0)으로 조정하였다. 혼합 단계는 4 ℃ 미만에서 실행하였다.

단위 부피당 콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비 및 비

군	콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비	히알루로난 : 콜라겐 최종 농도(mg/mL)	히알루로난의 분자량
대조군 1	-	0：3
실험군 1	1	3：3	1~1.8 MDa
실험군 2	2	6：3	1~1.8 MDa
실험군 3	3	9：3	1~1.8 MDa

단위 부피당 콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비 및 비

군	콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비	히알루로난 : 콜라겐 최종 농도(mg/mL)	히알루로난의 분자량
대조군 2	-	0：10
실험군 4	1	10：10	1~1.8 MDa
실험군 5	1.5	15：10	1~1.8 MDa
실험군 6	2	20：10	1~1.8 MDa
실험군 7	2	20：10	4~20 KDa
실험군 8	2	20：10	21~99 KDa
실험군 9	2	20：10	0.1~1 MDa
실험군 10	2	20：10	1.8~5 MDa

단위 부피당 콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비 및 비

군	콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비	히알루로난 : 콜라겐 최종 농도(mg/mL)	히알루로난의 분자량
대조군 3	-	0：50
실험군 11	1	50：50	4~20 KDa
실험군 12	1.5	150：100*	0.1~1 MDa
실험군 13	2	1000：500*	4~20 KDa
실험군 14	5	25：5	1~1.8 MDa
실험군 15	10	200：20	21~99 KDa
실험군 16	50	50：1	0.1~1 MDa
실험군 17	100	3：0.03	1~1.8 MDa
실험군 18	1000	100：0.1	21~99 KDa

*: 수화된 콜라겐을 사용함.

실시예 2: 형태학

이전의 연구는 정상 배양 조건 하에 켈로이드 섬유모세포가 방추형 부착을 나타낸다는 것을 시사하였다. 히알루로난 및 콜라겐을 함유하는 다양한 조성물의 켈로이드 섬유모세포의 형태학에 대한 효과를 이해하기 위해, 정상 섬유모세포(NF) 및 켈로이드 섬유모세포(KF)를 표 1-3의 대조군 및 실험군에서, 그리고 배양 배지(10 mL DMEM, 10% FBS, 1% 페니실린/스트렙토마이신)에서 배양하였다. 섬유모세포를 0.5% 크리스탈 바이올렛으로 염색하고 전자 현미경 하에 관찰하였다.

도 1에 나타낸 바와 같이, 배양 배지(플레인 배양군(plane culture group))에서, 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포의 외관은 유의적으로 상이하지 않았고 양자 모두 방추형으로 부착되었다. 양자 모두 유사한 배열로 증식하였으나, 배양 후의 켈로이드 섬유모세포의 밀도는 정상 섬유모세포의 것보다 유의적으로 더 컸다. 콜라겐-단독 조성물(대조군)에서, 정상 섬유모세포는 플레인 배양군의 것보다 유의적으로 더 많은 사상위족을 나타냈으며 외향 성장하였다. 세포들 사이의 돌출부는 서로 연결되어 비월 네트워크를 형성하였다. 정상 섬유모세포와 유사하게, 켈로이드 섬유모세포 또한 사상위족을 나타냈고 비월 네트워크를 형성하였다. 반면에, 실험군 1에서, 켈로이드 섬유모세포는 핵 부근에서 더 비대성이었고, 정상 섬유모세포보다 더 돌출되었다. 그러나, 실험군 2 및 3에서, 정상 섬유모세포 및 켈로이드 섬유모세포 양자 모두의 돌기가 감소되었다. 그들의 전반적인 형태학 및 성장은 실험군 2, 3, 5 내지 10, 및 12 내지 18에서 유사하였다. 데이터는 히알루로난 및 콜라겐을 함유하는 조성물 중에 배양된 켈로이드 섬유모세포가 정상 형태학으로 복귀할 수 있었음을 나타냈다.

실시예 3: 이동 시험

이전의 연구는 켈로이드 섬유모세포가 정상 섬유모세포보다 더 높은 이동 잠재력을 가진다는 것을 나타냈다. 히알루로난 및 콜라겐을 함유하는 다양한 조성물의 켈로이드 섬유모세포의 이동에 대한 효과를 이해하기 위해 연구를 실행하였다. 각각의 군의 조성물 100　㎕를 배양 접시 상의 코팅에 적용하고 배양 접시의 중앙에 O-링(내경 4 mm, 외경 6 mm)을 놓았다. 정상 섬유모세포 또는 켈로이드 섬유모세포를 각각의 코팅된 접시 내의 O-링 내부에 각각 놓았다. 세포가 부착된 후에 O-링을 제거하고, 세포를 4 일 동안 계속 배양하였다. 이어서, 세포를 크리스탈 바이올렛으로 염색하고 관찰하였다. 세포 이동 면적을 계산하였다.

도 2에 나타낸 바와 같이, 콜라겐-단독군(대조군)에서, 켈로이드 섬유모세포의 이동 면적은 정상 섬유모세포의 것보다 유의적으로 더 컸다. 그러나, 실험군 2 및 3에서, 켈로이드 섬유모세포의 이동 면적은 정상 섬유모세포의 것과 유의적으로 상이하지 않았다. 실험군 5 내지 10 및 12 내지 18에서 유사한 결과가 관찰되었다. 결과는 히알루로난 및 콜라겐을 1 초과의 중량비로 함유하는 조성물이 켈로이드 섬유모세포의 이동 능력을 정상 수준으로 회복시키는 능력을 가진다는 것을 시사한다.

실시예 4: 수축 시험

이전의 연구는 켈로이드 섬유모세포가 정상 섬유모세포보다 더 강한 수축력을 가진다는 것을 나타냈다. 히알루로난 및 콜라겐을 함유하는 다양한 조성물의 켈로이드 섬유모세포의 수축력에 대한 효과를 이해하기 위해 연구를 실행하였다.

히알루로난 및 콜라겐을 함유하는 다양한 조성물에 정상 또는 켈로이드 섬유모세포를 각각 첨가하였다. 균일하게 혼합한 후에, 각각의 50 ㎕를 배양 접시의 중앙 상에 반구형으로 적하하고, 이를 37 ℃에서 2 시간 동안 인큐베이터에 넣어 두었다. 2 시간의 겔화 후에, 반구의 면적(A₀)을 기록하였다. 800 ㎕의 배양 배지를 첨가한 후에, 섬유모세포가 조성물을 수축시키기 시작했고 반구가 위축되었다. 48 시간 후에, 반구의 면적(A)을 기록하였다. 하기 수학식을 사용하여 세포 수축력의 백분율을 계산하였다: X = [(A₀-A)/A₀]×100%. 더 높은 위축의 백분율은 더 강한 수축력을 나타냈다.

도 3에 나타낸 바와 같이, 대조군 및 실험군 1에서 켈로이드 섬유모세포의 수축력의 백분율은 정상 섬유모세포의 것보다 유의적으로 더 높았다. 그러나, 실험군 2 및 3에서는 켈로이드 섬유모세포 및 정상 섬유모세포의 수축력의 백분율 사이에 유의적인 차이가 없었다. 실험군 5 내지 10 및 12 내지 18에서 유사한 결과가 관찰되었다. 결과는 히알루로난 및 콜라겐을 1 초과의 중량비로 함유하는 조성물이 켈로이드 섬유모세포의 수축 능력을 정상 수준으로 감소시키는 능력을 가진다는 것을 시사한다.

실시예 5: 유전자 발현 분석

이전의 연구는 장력 인자(예를 들어, PAI-1, PAI-2, 및 α-SMA), 성장 인자 CTGF, 및 세포외 매트릭스 구성요소(콜라겐 I 및 피브로넥틴)가 켈로이드의 형성과 관련된다는 것을 입증했다. 히알루로난 및 콜라겐을 함유하는 다양한 조성물의 켈로이드 섬유모세포에 대한 효과를 분자 수준에서 이해하기 위해 연구를 실행하였다.

표 1에 기재된 플레인 배양군, 대조군, 및 실험군에서 정상 및 켈로이드 섬유모세포를 별도로 배양하였다. 4 일의 배양 후에, 섬유모세포로부터 총 RNA를 추출하였다. 이어서, 총 RNA를 cDNA로 역전사하고 정량적 폴리머라제 연쇄 반응(PCR)에 의해 분석하였다. 플레인 배양군에서는, 표준 배양 접시의 표면 상에 세포를 배양하였다.

도 4a-4f에 나타낸 바와 같이, 플레인 배양군, 대조군, 및 실험군 1에서는, 켈로이드 섬유모세포에서의 PAI-1, PAI-2, 콜라겐 I, 피브로넥틴, α-SMA, 및 CTGF의 발현 수준이 정상 섬유모세포에서의 것들보다 더 높았다. 반면에, 실험군 2 및 3에서는, 켈로이드 섬유모세포에서의 이들 유전자의 발현 수준이 감소하였고 정상 섬유모세포에서의 것들과 유의적으로 상이하지 않았다. 결과는 히알루로난 및 콜라겐을 1 초과의 중량비로 함유하는 조성물이 켈로이드 형성과 관련된 유전자의 발현 수준을 감소시킬 수 있다는 것을 시사한다.

요약하면, 히알루로난 및 콜라겐을 1 초과의 중량비로 함유하는 조성물은 켈로이드 섬유모세포의 형태학, 이동, 및 수축성을 정상 수준으로 개선하는 것으로 나타났다. 켈로이드-관련 유전자의 발현 수준 또한 조성물에 의해 정상 섬유모세포에서의 것들에 근접하도록 조절되었다. 그러므로, 조성물은 피부가 비정상적인 돌출부 없이 정상 피부에 더 근접하도록 켈로이드 환자에서 상처 치유 조직의 과다형성을 감소시킬 수 있다. 추가로, 켈로이드 반흔의 수술적 제거 후에 환자를 치료하여 치유 조직의 과다형성을 예방하기 위해 조성물을 사용할 수 있다.

다른 실시 형태

본 명세서에 개시된 모든 특징은 임의의 조합으로 조합될 수 있다. 본 명세서에 개시된 각각의 특징은 동일하거나 등가이거나 유사한 목적을 제공하는 대안적인 특징에 의해 대체될 수 있다. 따라서, 명시적으로 달리 언급되지 않는 한, 각각의 개시된 특징은 등가이거나 유사한 특징의 포괄적인 시리즈의 예일 뿐이다.

상기 상세한 설명으로부터, 당업자는 기재된 실시 형태의 필수적 특징을 용이하게 확인할 수 있으며, 그의 사상 및 범위로부터 이탈하지 않으면서, 그것을 다양한 용법 및 조건에 대해 조정하기 위해 실시 형태의 다양한 변화 및 변형을 실행할 수 있다. 따라서, 다른 실시 형태 또한 청구범위 내에 있다.

Claims

대상(subject)에서 켈로이드(keloid) 또는 켈로이드를 형성할 위험이 있는 영역에 약제학적 조성물을 적용하는 단계를 포함하여, 대상에서 켈로이드를 치료하는 방법으로서, 여기에서 조성물은 유효량의 히알루로난 및 유효량의 콜라겐을 포함하고, 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비는 1을 초과하는 방법.
제1항에 있어서,
콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비가 2 이상인 방법.
제2항에 있어서,
콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비가 3 이상인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
약제학적 조성물이
히알루로난, pH 7±2의 0.001 M - 0.1 M 포스페이트 완충 용액, 및 0.1% - 0.9% NaCl 용액을 혼합하여 히알루로난 용액을 형성하는 단계;
콜라겐 용액을 제공하는 단계;
혼합물 내의 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비가 1을 초과하도록 히알루로난 용액과 콜라겐 용액을 4 ℃ 미만에서 혼합하여 혼합물을 얻는 단계; 및
혼합물의 pH를 7±1로 조정하는 단계를 포함하는 과정에 의해 제조되는 방법.
제4항에 있어서,
히알루로난 용액의 pH가 6 미만인 방법.
제4항에 있어서,
콜라겐 용액의 pH가 6 미만인 방법.
제1항에 있어서,
켈로이드를 형성할 위험이 있는 영역이 켈로이드 반흔(scar)이 수술적으로 제거된 영역인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
약제학적 조성물이 영양소, 생물학적 활성 제제, 항미생물제, 세포, 세포외 매트릭스 구성요소, 및 부형제로 구성된 그룹 중에서 선택된 첨가제를 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
히알루로난의 분자량이 4 내지 5000 kDa인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
약제학적 조성물이 켈로이드 섬유모세포에서 플라스미노겐 활성화제 저해제-1(PAI-1), 세르핀 펩티다제 저해제, 클레이드 B(오브알부민), 플라스미노겐 활성화제 저해제-2(PAI-2), 콜라겐 유형1, 피브로넥틴, 알파-평활근 액틴(α-SMA), 또는 결합 조직 성장 인자(CTGF)의 유전자 발현을 감소시킬 수 있는 방법.
제8항에 있어서,
생물학적 활성 제제가 표피 성장 인자, 섬유모세포 성장 인자(FGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 결합 조직 성장 인자(CTGF), 혈소판-유래 성장 인자(PDGF), 인슐린-유사 성장 인자, 신경 성장 인자, 간세포 성장 인자, 콜로니-자극 인자, 줄기 세포 인자, 케라틴세포 성장 인자, 과립구 콜로니-자극 인자, 과립구 대식세포 콜로니-자극 인자, 신경아교세포-유래 신경영양 인자, 섬모 신경영양 인자, 내피-단핵구 활성화 폴리펩티드, 상피 호중구 활성화 펩티드, 에리트로포이에틴, 골 형성 단백질, 뇌-유래 신경영양 인자, BRAK, 전환 성장 인자 베타(TGF-β), 및 종양 괴사 인자로 구성된 그룹 중에서 선택되는 방법.
제8항에 있어서,
세포외 매트릭스 구성요소가 콜라겐, 히알루로난, 젤라틴, 피브로넥틴, 엘라스틴, 테나신, 라미닌, 비트로넥틴, 헤파란 설페이트, 콘드로이틴, 콘드로이틴 설페이트, 케라틴, 케라탄 설페이트, 데르마탄 설페이트, 카라기난, 헤파린, 키틴, 키토산, 알기네이트, 아가로스, 아가(agar), 셀룰로스, 글리코겐, 피브린, 피브리노겐, 응고 효소, 폴리글루탐산, 및 합성 중합체 또는 그의 유도체로 구성된 그룹 중에서 선택되는 방법.
제8항에 있어서,
항미생물제가 항생제, 항미생물 단백질, 또는 항미생물 펩티드인 방법.
제8항에 있어서,
세포가 줄기 세포, 위성 세포, 전구 세포, 또는 조직 세포인 방법.
제8항에 있어서,
부형제가 바셀린, 글리세린, 또는 레시틴인 방법.
제8항에 있어서,
영양소가 탄수화물, 아미노산, 펩티드, 단백질, 지방산, 지질, 비타민, 또는 미네랄인 방법.
유효량의 히알루로난 및 유효량의 콜라겐을 포함하며, 콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비가 1을 초과하는, 대상에서 켈로이드를 치료하거나 예방하기 위한 약제학적 조성물.
제17항에 있어서,
콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비가 2 이상인 약제학적 조성물.
제18항에 있어서,
콜라겐에 대한 히알루로난의 중량비가 3 이상인 약제학적 조성물.
제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
히알루로난, pH 7±2의 0.001 M 내지 0.1 M 포스페이트 완충 용액, 및 0.1% 내지 0.9% NaCl 용액을 혼합하여 히알루로난 용액을 형성하는 단계;
콜라겐 용액을 제공하는 단계;
혼합물 내의 콜라겐에 대한 히알루로난의 단위 부피당 중량비가 1을 초과하도록 히알루로난 용액과 콜라겐 용액을 4 ℃ 미만에서 혼합하여 혼합물을 얻는 단계; 및
혼합물의 pH를 7±1로 조정하는 단계를 포함하는 과정에 의해 제조되는 약제학적 조성물.
제20항에 있어서,
히알루로난 용액의 pH가 6 미만인 약제학적 조성물.
제20항에 있어서,
콜라겐 용액의 pH가 6 미만인 약제학적 조성물.
제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
영양소, 생물학적 활성 제제, 항미생물제, 세포, 세포외 매트릭스 구성요소, 및 부형제로 구성된 그룹 중에서 선택된 첨가제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
히알루로난의 분자량이 4 내지 5000 kDa인 약제학적 조성물.
제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
켈로이드 섬유모세포에서 플라스미노겐 활성화제 저해제-1(PAI-1), 세르핀 펩티다제 저해제, 클레이드 B(오브알부민), 플라스미노겐 활성화제 저해제-2(PAI-2), 콜라겐 유형1, 피브로넥틴, 알파-평활근 액틴(α-SMA), 또는 결합 조직 성장 인자(CTGF)의 유전자 발현을 감소시킬 수 있는 약제학적 조성물.
제23항에 있어서,
생물학적 활성 제제가 표피 성장 인자, 섬유모세포 성장 인자(FGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 결합 조직 성장 인자(CTGF), 혈소판-유래 성장 인자(PDGF), 인슐린-유사 성장 인자, 신경 성장 인자, 간세포 성장 인자, 콜로니-자극 인자, 줄기 세포 인자, 케라틴세포 성장 인자, 과립구 콜로니-자극 인자, 과립구 대식세포 콜로니-자극 인자, 신경아교세포-유래 신경영양 인자, 섬모 신경영양 인자, 내피-단핵구 활성화 폴리펩티드, 상피 호중구 활성화 펩티드, 에리트로포이에틴, 골 형성 단백질, 뇌-유래 신경영양 인자, BRAK, 전환 성장 인자 베타(TGF-β), 및 종양 괴사 인자로 구성된 그룹 중에서 선택되는 약제학적 조성물.
제23항에 있어서,
세포외 매트릭스 구성요소가 콜라겐, 히알루로난, 젤라틴, 피브로넥틴, 엘라스틴, 테나신, 라미닌, 비트로넥틴, 헤파란 설페이트, 콘드로이틴, 콘드로이틴 설페이트, 케라틴, 케라탄 설페이트, 데르마탄 설페이트, 카라기난, 헤파린, 키틴, 키토산, 알기네이트, 아가로스, 아가, 셀룰로스, 글리코겐, 피브린, 피브리노겐, 응고 효소, 폴리글루탐산, 및 합성 중합체 또는 그의 유도체로 구성된 그룹 중에서 선택되는 약제학적 조성물.
제23항에 있어서,
항미생물제가 항생제, 항미생물 단백질, 또는 항미생물 펩티드인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서,
세포가 줄기 세포, 위성 세포, 전구 세포(precursor cell), 또는 조직 세포인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서,
부형제가 바셀린, 글리세린, 또는 레시틴인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서,
영양소가 탄수화물, 아미노산, 펩티드, 단백질, 지방산, 지질, 비타민, 또는 미네랄인 약제학적 조성물.