KR20200058462A - 암을 치료하기 위한 btk 억제제 및 cdk9의 억제제의 조합 - Google Patents

암을 치료하기 위한 btk 억제제 및 cdk9의 억제제의 조합 Download PDF

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KR20200058462A
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cdk9
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acalabrutinib
azd4573
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KR1020207011340A
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스캇 보이코
저스틴 시다도
리사 드류
테레사 프로이아
메리앤 샌 마틴
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아스트라제네카 아베
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Abstract

본 발명은 대상체에서 암의 치료에 사용하기 위한 BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 조합에 관한 것이다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙, 이브루티닙, 또는 ONO/GS-4059일 수 있으며; CDK9의 억제제는 AZD4573, BAY-1251152, BAY-1143572, CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 또는 디나시클립일 수 있다.

Description

암을 치료하기 위한 BTK 억제제 및 CDK9의 억제제의 조합
사이클린-의존성 단백질 키나아제(CDK)는 사이클린 조절 파트너에의 결합시에 활성이 되는 세린/트레오닌 단백질 키나아제 패밀리를 나타낸다. CDK/사이클린 복합체는 처음에 세포 사이클 진행의 조절자로서 확인되었다. CDK/사이클린 복합체는 또한 전사 및 mRNA 프로세싱에 관련된 것으로 나타났다. CDK9/PTEFb(양성 전사 연장 인자 b)는 RNA 폴리머라아제 II(RNAP II)의 큰 서브유닛의 카르복실-말단 도메인(CTD)을 주로 Ser-2에서 인산화시켜, 전사의 연장을 조절한다. CDK9의 억제 및 전사 저해는 단명하는 mRNA 전사물 및 Mcl1 및 c-myc를 비롯한 관련 단백질의 신속한 고갈을 야기하여, 이들 생존 단백질에 과-의존성인 종양 세포에서 아폽토시스를 유도한다.
TEC 패밀리 키나아제의 구성원인 브루톤(Bruton) 티로신 키나아제(BTK)는 B-세포 수용체(BCR) 시그널링 경로에서 중요한 성분이며, 여기서 BTK는 BCR과 다운스트림 생존 시그널 사이에 위치한다. BTK는 T 세포를 제외하고, 조혈 계통 세포에서 발현되며, 정상 B 세포에 비하여 만성 림프구성 백혈병(CLL) 세포에서 상향조절된다. BTK는 또한 일부 B-세포 종양의 증식과 생존을 위해 필수적이다. 구체적으로, BTK의 넉다운은 BCR 시그널링에 의존하는 일차 CLL 세포 및 림프종 세포주에서 종양 세포 사멸을 유도한다. 또한, BTK의 유전적 제거는 CLL의 마우스 모델에서 질환 진행을 억제하여, B-세포 종양을 위해 그것의 계속적인 중요성을 나타낸다.
본 발명은 암과 같은 일부 질환의 치료에 사용하기 위한 조합 치료에 관한 것이다.
일 양태에서, 대상체에서 암의 치료에서 사용하기 위한 BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 조합. BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 대상체에게 투여되기 전에 대상체에게 투여될 수 있다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙(acalabrutinib)(ACP-196으로도 불림), 이브루티닙(ibrutinib), 또는 ONO/GS-4059일 수 있다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙일 수 있다. CDK9의 억제제는 AZD4573 또는 디나시클립(dinaciclib)일 수 있다. CDK9의 억제제는 AZD4573일 수 있다.
암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소(small) 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증(Waldentrom's macroglobulinemia), 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택될 수 있다.
다른 양태에서, 아칼라브루티닙과 AZD4573의 조합이 대상체에서 암의 치료에서 사용될 수 있으며, 여기서 아칼라브루티닙은 AZD4573이 대상체에게 투여되기 전에 대상체에게 투여될 것이며, 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택된다.
다른 양태에서, 대상체에서 암의 치료 방법은 대상체에게 유효량의 BTK 억제제를 투여하는 단계; 및 대상체에게 유효량의 CDK9의 억제제를 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 대상체에게 투여되기 전에 대상체에게 투여될 수 있다. CDK9의 억제제는 CDK9의 선택적 억제제일 수 있다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙, 이브루티닙, 또는 ONO/GS-4059일 수 있다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙일 수 있다. CDK9의 억제제는 AZD4573 또는 디나시클립일 수 있다. CDK9의 억제제는 AZD4573일 수 있다. 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택될 수 있다.
다른 양태에서, 대상체에서 암의 치료 방법은 대상체에게 유효량의 아칼라브루티닙을 투여하는 단계; 및 대상체에게 유효량의 AZD4573을 투여하는 단계를 포함할 수 있으며; 여기서 아칼라브루티닙은 대상체에게 AZD4573이 투여되기 전에 대상체에게 투여되며; 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택된다.
다른 양태에서, 키트는 BTK 억제제 및 약학적 허용 담체를 포함하는 제1 약학 조성물; 및 CDK9의 억제제 및 약학적 허용 담체를 포함하는 제2 약학 조성물을 포함할 수 있다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙, 이브루티닙, 또는 ONO/GS-4059일 수 있다. CDK9의 억제제는 AZD4573 또는 디나시클립일 수 있다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙일 수 있다. CDK9의 억제제는 AZD4573일 수 있다. BTK 억제제는 아칼라브루티닙일 수 있으며, CDK9의 억제제는 AZD4573일 수 있다.
본 발명의 다른 특징, 목적 및 효과는 상세한 설명과 도면으로부터, 그리고 청구범위로부터 명백할 것이다.
도 1은 세 가지 상이한 DLBCL 세포주에 대한 아칼라브루티닙 처리의 효과를 보여준다.
도 2는 BTK 억제제-민감성 세포주(OCILy10 및 TMD8) 및 BTKi-비민감성 세포주(Karpas422)에 대한 아칼라브루티닙 전처리와 AZD4573의 조합의 효과를 예시한다.
도 3은 세 가지 상이한 DLBCL 세포주에서의 아폽토시스에 대한, 아칼라브루티닙, AZD4573, 동시에 투약된 AZD4573과 아칼라브루티닙의 조합 및 순차적으로 투약된 AZD4573과 아칼라브루티닙의 조합의 효과를 예시한다.
도 4a, 4b, 및 4c는 DLBCL의 생체내 모델에 대한 아칼라브루티닙과 AZD4573의 조합 처리의 효과를 예시한다.
암과 같은 증식성 질환의 치료를 위해 유용한 조합 치료가 본 명세서에서 개시된다. 구체적으로 조합 치료는 미만성 거대 B-세포 림프종(DLBCL), 외투 세포 림프종(MCL), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 소 만성 림프구성 백혈병(SLL), 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병(ALL), 및 다른 BTK-민감성 암을 포함하지만 이에 한정되지 않는 암과 같은 증식성 질환의 치료에서 사용하는 것이다.
한 가지 보다 많은 에이전트를 이용하는 조합 치료는 어느 한 가지 에이전트를 단독으로 이용하는 치료에 비하여 개선된 효과를 제공할 수 있다. (본 명세서가 2-에이전트 조합을 자주 토의하지만, 세 가지 이상의 에이전트를 가진 조합이 가능함이 인식된다.)
용어 "조합"은 두 가지 이상의 에이전트의 동시, 별도, 또는 순차적 투여를 지칭할 수 있다. 일 양태에서, "조합"은 동시 투여(예를 들어, 단일 제형으로 두 제제의 투여)를 지칭할 수 있다. 다른 양태에서, "조합"은 별도 투여(예를 들어, 별도의 제형으로 그러나 실질적으로 동시에 두 에이전트의 투여)를 지칭한다. 본 발명의 추가 양태에서, "조합"은 순차적 투여(예를 들어, 제1 에이전트가 투여되고, 지연 후, 제2 또는 추가의 에이전트가 투여되는 경우)를 지칭한다. 투여가 순차적이거나 별도인 경우, 더 늦은 성분의 투여에서의 지연은 조합의 효과를 상실하지 않도록, 너무 길거나 너무 짧지 않아야 한다.
본 명세서에서 사용될 때, 용어 "CDK9의 억제제"는 CDK9를 억제할 수 있고, 선택적으로, 한 가지 이상의 다른 CDK를 억제할 수 있는 화합물을 지칭한다. CDK9에 더하여 한 가지 이상의 다른 CDK를 억제하는 화합물은, 이 화합물의 일차 표적이 CDK9가 아니지만, CDK9의 비-선택적 억제제이다. 예를 들어, 디나시클립은 CDK9를 비롯한 다수의 CDK를 억제한다. 따라서, 디나시클립은, 그 용어가 본 명세서에서 사용된 것처럼, CDK9의 비-선택적 억제제이다. CDK9의 선택적 억제제는 CDK9를 억제하며 다른 CDK에 대해서는 억제 활성을 거의 또는 전혀 가지지 않는 화합물이다. 따라서, 본 명세서에서 사용될 때 "CDK9의 억제제"는 CDK9의 비-선택적 및 선택적 억제제 둘 모두를 포함한다.
용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 암과 같은 병태, 장애 또는 질환을 적어도 부분적으로 완화, 억제, 방지 및/또는 개선하는 것을 말한다. 용어 "암의 치료" 또는 "암세포의 치료"는 인간과 같은 온혈 동물을 비롯하여, 시험관내 및 생체내 치료 둘 모두를 포함한다. 암세포의 치료의 효과는 암세포 증식 억제(암 성장의 역전 포함); 암세포 사멸 촉진(예를 들어, 아폽토시스 또는 다른 세포 사멸 기전의 촉진에 의해); 증상의 개선; 치료에 대한 반응의 지속; 질환의 진행의 지연; 및 생존 연장을 포함하지만 이에 한정되지 않는 다양한 방식으로 평가될 수 있다. 치료는 또한 치료와 관련된 부작용의 특성과 정도에 관하여 평가될 수 있다. 또한, 효과는 구체적인 생물학적 현상과 관련된 것으로 알려진 단백질의 발현 또는 인산화 수준과 같은 바이오마커에 관하여 평가될 수 있다. 효과의 다른 평가는 당업자에게 알려져 있다.
BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 조합은 암세포의 치료에서 단독보다 더 효과적일 수 있다(시험관내이건 생체내이건). 구체적으로, BTK-반응성 암세포의 치료는 CDK9의 억제제를 이용한 치료에 대해 이들 세포를 민감화시킬 수 있다. 이와 관련하여, 조합 치료의 효과는 상기에 개시된 방식 중 한 가지 이상으로 평가될 수 있다. 따라서, 일부 실시 형태에서, 암세포의 치료에서 사용될 경우, BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 조합은 어느 한 에이전트 단독보다 더 효과적일 수 있다. 조합 치료는 암세포 사멸 촉진; 암 성장 억제(예를 들어, 종양 부피의 증가를 억제); 및 반응의 지속 중 한 가지 이상에서 효과적일 수 있다.
BTK 억제제는 예를 들어, 아칼라브루티닙,이브루티닙, 및 ONO/GS-4059를 포함한다.
ACP-196 또는 (S)-4-(8-아미노-3-(1-부트-2-이노일피롤리딘-2-일)이미다조[1,5-a]피라진-1-일)-N-(피리딘-2-일)벤즈아미드로도 불리는 아칼라브루티닙은 하기 화학식을 가진다:
Figure pct00001
아칼라브루티닙의 제조 방법은 예를 들어, 그 전체가 참고로 포함되는 국제 공개 제2013/010868호에 개시된다.
CDK9의 억제제는 예를 들어, AZD4573, BAY-1251152, BAY-1143572, CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 및 디나시클립을 포함한다. CDK9의 선택적 억제제는 AZD4573, BAY-1251152, 및 BAY-1143572를 포함한다. CDK9의 비-선택적 억제제는 CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 및 디나시클립을 포함한다.
(1S,3R)-3-아세트아미도-N-(5-클로로-4-(5,5-다이메틸-5,6-다이하이드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)피리딘-2-일)시클로헥산카르복스아미드로도 불리는 선택적 CDK9 억제제인 AZD4573은 하기 화학식을 가진다:
Figure pct00002
AZD4573의 제조 방법은 예를 들어, 그 전체가 참고로 포함되는 국제 공개 제2017/001354호에 개시된다.
일부 실시 형태에서, 조합은 아칼라브루티닙,이브루티닙, 또는 ONO/GS-4059를 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 조합은 AZD4573, BAY-1251152, BAY-1143572, CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 및 디나시클립을 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 조합은 아칼라브루티닙을 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 조합은 AZD4573을 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 조합은 아칼라브루티닙 및 AZD4573을 포함할 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 순차적 투여는 동시 투여보다 더 큰 효과를 가질 수 있다. 일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 투약 주기 내에서 CDK9의 억제제가 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 투약 주기 내에서 CDK9의 억제제가 투여되기 전 적어도 2시간, 적어도 4시간, 적어도 6시간, 적어도 8시간, 적어도 12시간, 적어도 16시간, 적어도 24시간, 또는 적어도 48시간에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 투약 주기 내에서 CDK9의 억제제가 투여되기 전 2시간 이하, 4시간 이하, 6시간 이하, 8시간 이하, 12시간 이하, 16시간 이하, 24시간 이하, 또는 48시간 이하에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 투약 주기 내에서 CDK9의 억제제가 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 간헐적 투약 스케쥴로 BTK 억제제를 투여하는 것이 연속적 투약 스케쥴로 투약하는 것보다 더 큰 효과를 가질 수 있다. 일부 실시 형태에서, 간헐적 투약 스케쥴로 CDK9의 억제제를 투여하는 것이 연속적 투약 스케쥴로 투약하는 것보다 더 큰 효과를 가질 수 있다. 일부 실시 형태에서, 간헐적 투약 스케쥴로 BTK 억제제와 CDK9의 억제제 둘 모두를 투여하는 것이 연속적 투약 스케쥴로 투약하는 것보다 더 큰 효과를 가질 수 있다.
간헐적 투약 스케쥴은 투약 휴일을 포함할 수 있다. 예시의 목적으로, 7-일 투약 주기에서, 간헐적으로 투약되는 에이전트는 제1일과 제2일에 주어지지만 제3일, 제4일, 제5일, 제6일 또는 제7일에는 주어지지 않을 수 있다. 투약 주기가 그 후 반복될 것이다. 이 예시는 2 온/5 오프 스케쥴로 불릴 수 있으며, 에이전트가 2일 동안 주어지고 5일 휴일이 이어진다.
대조적으로, 연속 투약 스케쥴은 투약 주기 동안 휴일을 포함하지 않는다. 따라서, 예시로, 7-일 투약 주기에서, 연속적으로 투약되는 에이전트는 제1일, 제2일, 제3일, 제4일, 제5일, 제6일 및 제7일에 주어질 것이다. 투약 주기가 그 후 반복될 것이다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기는 5 내지 30일, 7 내지 24일, 9 내지 16일, 또는 13 내지 15일일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 투약 주기는, 5일, 7일, 10일, 12일, 14일, 21일, 또는 28일일 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 투약 주기에서 연속적으로 투약될 수 있다.
일부 실시 형태에서, CDK9의 억제제는 투약 주기에서 간헐적으로 투약될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, BTK 억제제는 연속적으로 투약될 수 있으며, CDK9의 억제제는 간헐적으로 투약될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 6 내지 16일의 투약 주기에서, CDK9의 억제제는 2 내지 4일에 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있다.
일부 실시 형태에서, 13 내지 15일의 투약 주기에서, CDK9의 억제제는 2 내지 3 연속일에 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, CDK9의 억제제는 2 연속일에 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, BTK 억제제는 매일 투여되고, CDK9의 억제제는 2일만 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, BTK 억제제는 매일 투여되고, CDK9의 억제제는 2 연속일에만 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있다.
일부 실시 형태에서, 아칼라브루티닙은 투약 주기에서, 연속적으로 투약되고, AZD4573은 간헐적으로 투약될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 매일 투여되고, AZD4573은 2일만 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 매일 투여되고, AZD4573은 2 연속일에만 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, BTK 억제제는 연속적으로 투약될 수 있고, CDK9의 억제제는 간헐적으로 투약될 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 6 내지 16일의 투약 주기에서, CDK9의 억제제는 2 내지 4일에 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, CDK9의 억제제는 2 연속일에 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, BTK 억제제는 매일 투여될 수 있으며, CDK9의 억제제는 2일만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, BTK 억제제는 매일 투여될 수 있고, CDK9의 억제제는 2 연속일에만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 연속적으로 투약될 수 있고, AZD4573은 간헐적으로 투약될 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, 100 mg의 아칼라브루티닙이 매일 2회 투여될 수 있고, AZD4573이 간헐적으로 투약될 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 매일 투여될 수 있으며, AZD4573은 2일만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 매일 투여될 수 있으며, AZD4573은 2 연속일에만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, 100 mg의 아칼라브루티닙이 매일 2회 투여될 수 있고, AZD4573이 2 연속일에만 투여되고, 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, BTK 억제제는 연속적으로 투약될 수 있고, CDK9의 억제제는 간헐적으로 투약될 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 6 내지 16일의 투약 주기에서, CDK9의 억제제는 2 내지 4일에 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, CDK9의 억제제는 2 연속일에 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, BTK 억제제는 매일 투여될 수 있으며, CDK9의 억제제는 2일만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, BTK 억제제는 매일 투여될 수 있으며, CDK9의 억제제는 2 연속일만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, BTK 억제제는 CDK9의 억제제가 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 연속적으로 투약될 수 있으며 AZD4573은 간헐적으로 투약될 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, 100 mg의 아칼라브루티닙이 매일 2회 투여될 수 있고, AZD4573이 간헐적으로 투여될 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 매일 투여될 수 있고, AZD4573은 2일만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, 아칼라브루티닙은 매일 투여될 수 있고, AZD4573은 2 연속일만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 14일의 투약 주기에서, 100 mg의 아칼라브루티닙이 매일 2회 투여될 수 있고, AZD4573이 2 연속일만 투여되고 나머지 일에는 투여되지 않을 수 있으며, 아칼라브루티닙은 AZD4573이 투여되기 2 내지 4시간 전; 4 내지 6시간 전; 6 내지 8시간 전; 8 내지 12시간 전; 12 내지 16시간 전; 16 내지 24시간 전; 20 내지 28시간 전; 또는 24 내지 48시간 전에 투여될 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 대상체에서 암 치료에 사용될 수 있으며, 여기서 치료는 대상체에게의 BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 별도, 순차적 또는 동시 투여를 포함할 수 있다.
일부 실시 형태에서, 치료는 대상체에게의 CDK9의 억제제의 투여 전에 대상체에게의 BTK 억제제의 투여를 포함할 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙, 이브루티닙 또는 ONO/GS-4059일 수 있다. 일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙일 수 있다.
일부 실시 형태에서, CDK9의 억제제는 AZD4573, BAY-1251152, BAY-1143572, CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 및 디나시클립일 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDK9의 억제제는 AZD4573일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택될 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 대상체에서 암의 치료에 사용하기 위한 것이며, 여기서 치료는 대상체에게의 BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 별도, 순차적 또는 동시 투여를 포함할 수 있으며; BTK 억제제는 아칼라브루티닙이고; CDK9의 억제제는 AZD4573이며; 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택될 수 있다.
일부 실시 형태에서, CDK9의 억제제는 대상체에서 암 치료에 사용될 수 있으며, 여기서 치료는 대상체에게의 CDK9의 억제제와 BTK 억제제의 별도, 순차적 또는 동시 투여를 포함할 수 있다.
일부 실시 형태에서, 치료는 대상체에게의 CDK9의 억제제의 투여 전에 대상체에게의 BTK 억제제의 투여를 포함할 수 있다.
일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙, 이브루티닙 또는 ONO/GS-4059일 수 있다. 일부 실시 형태에서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙일 수 있다.
일부 실시 형태에서, CDK9의 억제제는 AZD4573, BAY-1251152, BAY-1143572, CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 및 디나시클립일 수 있다. 일부 실시 형태에서, CDK9의 억제제는 AZD4573일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택될 수 있다.
일부 실시 형태에서, CDK9의 억제제는 대상체에서 암의 치료에 사용될 수 있으며, 여기서 치료는 대상체에게의 CDK9의 억제제와 BTK 억제제의 별도, 순차적 또는 동시 투여를 포함할 수 있으며; BTK 억제제는 아칼라브루티닙이고; CDK9의 억제제는 AZD4573이며; 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택될 수 있다.
실시예
실시예 1: 아칼라브루티닙은 BTK 억제제-민감성 암 세포주가 프로-어팝토틱(pro-apoptotic) BH3-온리(only) 단백질의 증가된 단백질 수준을 통해 사멸하도록 프라이밍한다.
방법
셀타이터-글로(CellTiter-Glo) 생존능 판독을 이용하면서 두 가지 ABC-DLBCL(OCILy10 및 TMD8) 세포주 및 한 가지 GCB-DLBCL(Karpas422) 세포주를 비히클(DMSO) 또는 아칼라브루티닙의 10-포인트, ½ log 연속 희석물로 72 시간동안 처리하였다. 50% 성장이 억제되는 농도(GI50)를 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 또는 진데이터(GeneData)를 이용하여 계산하였다.
OCILy10, TMD8, 및 Karpas422를 2 내지 72시간 동안 비히클 또는 100 nM 아칼라브루티닙으로 처리하였다. 그 간격내의 다수의 시점에 단백질 용해물을 수집하고, BCA 단백질 분석 키트를 이용하여 단백질 농도를 결정하고, Bcl12 패밀리 단백질 수준에 대한 효과를 평가하기 위하여 표준 프로토콜에 따라 웨스턴 블롯을 수행하였다. 각 샘플을 로딩 대조군으로서의 빈큘린에 정규화시킨 후, 아칼라브루티닙-처리된 샘플의 단백질 수준을 비히클-처리된 샘플의 수준에 비교하여 계산하였다.
토의
DLBCL 세포주는 BTK 억제제 아칼라브루티닙에 대해 차등적인 민감성을 나타낸다. 세 가지 DLBCL 세포주에서 아칼라브루티닙의 용량-반응은 두 가지 ABC-DLBCL 세포주, OCILy10 및 TMD8이 BTK 억제에 민감한 한편, GCB-DLBCL 세포주, Karpas422는 그렇지 않음을 보여주었다. 세 가지 세포주 각각을 그 후 24시간 동안 100 nM 아칼라브루티닙으로 처리하고, BH3-온리 단백질 수준을 평가하였다. 프로-어팝토틱 BH3-온리 단백질은 주요 Bcl-2 패밀리 단백질의 항-어팝토틱 기능을 억제하기 위해 결합한다. 결과가 도 1에 도시된다. 프로-어팝토틱 BH3-온리 단백질 Bim 및 Bmf의 수준은 비민감성 세포주에 비하여 두 가지 아칼라브루티닙-민감성 DLBCL 세포주에서 증가하여, 세포를 아폽토시스를 위해 프라이밍시켰다.
실시예 2: 아칼라브루티닙과 AZD4573의 조합은 향상되고 신속한 세포 사멸 유도를 이끈다
방법
두 가지 BTK 억제제-민감성 ABC-DLBCL 세포주(OCILy10 및 TMD8) 및 한 가지 비민감성 GCB-DLBCL 세포주(Karpas422)를 100 nM AZD4573 단독으로 또는 100 nM 아칼라브루티닙으로 24-시간 전처리 후(24시간동안의 아칼라브루티닙에의 노출이 최대 BH3-온리 단백질 수준을 유도하기에 충분하였으므로) 100 nM AZD4573으로 8-시간 시간 과정동안 처리하였다. AZD4573 처리 후 다양한 시점에(0, 0.5, 1, 2, 4, 및 8시간) 단백질 용해물을 위해 세포를 수집하고, BCA 단백질 분석 키트를 이용하여 단백질 농도에 대해 정규화하고, 표준 프로토콜에 따라 웨스턴 블롯을 위해 러닝시켰다. 예상된 표적 결합이 이루어지게 하기 위하여, CDK9를 위한 근위 및 말단 바이오마커(각각 pSer2-RNAPolII 및 Mcl-1), 및 활성화된 BTK(pBTK)에 대한 바이오마커에 대해 블롯을 프로빙하였다. 아폽토시스 유도까지의 시간을 측정하기 위하여, 절단된 카스파아제-3을 또한 평가하였다. 로딩 대조군(빈큘린)을 또한 정규화를 위해 이용하였다.
토의
아칼라브루티닙이 BTK 억제제-민감성 세포주에서 Bim 및 Bmf의 단백질 수준을 증가시켜 세포를 아폽토시스에 대해 프라이밍하므로, Mcl1 수준을 신속하게 고갈시키는 AZD4573과의 조합은 세포 사멸에 대한 프로- 및 항-어팝토틱 Bcl2 패밀리 단백질의 균형을 기울어지게 할 것으로 예측되었다. 따라서, 두 가지 BTK 억제제-민감성 세포주 및 한 가지 비민감성 세포주를 AZD4573 단독으로, 또는 아칼라브루티닙으로 전처리 후 AZD4573으로 처리하였다.
두 가지 BTK 억제제-민감성 세포주(OCILy10 및 TMD8)에서, 조합은 4시간까지 절단된 카스파아제의 강한 유도를 야기한 반면, AZD4573 단독은 8 시간까지 약간의 카스파아제 활성화를 야기하였다. 아칼라브루티닙이 BH3-온리 단백질 수준을 증가시키지 않은 BTK 억제제-비민감성 세포주(Karpas422)에서는, 단일 에이전트 또는 조합 샘플 간에 카스파아제 활성화에서 차이가 없었다. 도 2를 참조한다.
실시예 3: 아칼라브루티닙 전처리는 AZD4573과의 조합 효과를 향상시킨다
방법
두 가지 BTK 억제제-민감성 ABC-DLBCL 세포주(OCILy10 및 TMD8) 및 한 가지 비민감성 GCB-DLBCL 세포주(Karpas422)를 비히클(DMSO), 100 nM 아칼라브루티닙, 또는 100 nM AZD4573으로 다양한 길이의 시간 동안 단독 에이전트로서 또는 조합하여 처리하였다. 24시간동안 아칼라브루티닙에의 BTKi-민감성 세포주의 노출이 비히클-처리된 세포에 비하여 최대 BH3-온리 단백질 수준을 유도하기에 충분하였으므로(도 1), 아칼라브루티닙의 24-시간 전처리를 조합 순서 중 하나를 위해 선택하였다. 따라서, 세포를 아칼라브루티닙 단독으로 32시간; AZD4573 단독으로 8시간; 동시에 투약된 AZD4573과 아칼라브루티닙으로 8시간; 또는 32시간 중 마지막 8시간동안 순차적으로 첨가된 AZD4573을 가진 아칼라브루티닙으로 32시간(즉, 아칼라브루티닙 전처리 24시간) 처리하였다.
샘플을 테트라메틸로다민, 에틸 에스테르(TMRE) 및 4',6-다이아미드이노-2-페닐인돌(DAPI)로 염색한 후 그들을 BD LSR 포르테사(Fortessa)를 이용하여 유세포분석을 거침으로써 어팝토틱 또는 사멸 세포의 비율을 결정하였다. TMRE는 활성 미토콘드리아에서 축적되는 양 전하를 띤 염료이며, 아폽토시스를 일으키는 세포는 미토콘드리아 외막 투과화(MOMP)를 겪게 되어 TMRE를 유지하지 못한다. 따라서, TMRE 염색의 감소는 아폽토시스의 지표이다. DAPI는 생존 세포에서 막 불투과성인 DNA-결합 형광 염료여서, 사멸되는 세포는 증가된 DAPI 염색을 나타낼 것이다. 적절한 처리 후, 세포를 직접 200 nM TMRE로 염색하고, 37℃에서 30분 동안 항온처리하고, DAPI를 함유한 유동 완충제에 재현탁시키고, 유세포분석하였다. 플로우조(Flowjo)를 이용하여 생존능(DAPI)과 MOMP(TMRE)에 따른 적절한 게이트를 확립하였으며, 생존 세포는 낮은 DAPI와 높은 TMRE 염색을 가진 세포로 정의되었다.
토의
BTK 억제제-민감성 세포의 아칼라브루티닙 처리는 시간에 걸쳐 BH3-온리 단백질 수준을 증가시켰으며 투약 후 24시간에 최대 수준이 이루어졌다(도 1). 하지만, 만일 있다면, 얼마나 긴 아칼라브루티닙 전처리가 AZD4573과의 조합 효과를 향상시킬지 명확하지 않았다. 본 실시예에서는, 아칼라브루티닙을 AZD4573과 동시에 또는 순차적으로 투약하고 AZD4573 처리의 마지막 8시간 후에 어팝토틱/사멸 세포에 대해 평가하였다.
OCI-LY-10 세포를 아칼라브루티닙 단독으로 32시간 또는 AZD4573 단독으로 8시간 처리한 결과, 각각 ~20% 및 ~40% 세포 사멸을 야기하였다(도 3). 억제제가 8시간 동안 동시에 투약되었을 때(도 3에서 공동-투약으로 표지됨), 아폽토시스 세포의 증가가 최소였다(~50%). 대조적으로, 아칼라브루티닙 32시간과 마지막 8시간 동안 AZD4573으로 순차적으로 투약된 경우, 거의 90%의 세포가 어팝토틱이었다. 따라서, 아칼라브루티닙으로 전처리하는 것은 동시 처리에 비하여 AZD4573과의 조합의 효과를 상당히 증가시켰다. TMD8 세포에 대해 유사한 결과가 관찰되었다. Karpas-422 세포에서는, 단독 또는 조합된 아칼라브루티닙은 BTK-비민감성 세포주에 대해 예상된 대로, 최소의 효과를 가졌다.
실시예 4: BTK 억제제-민감성 생체내 모델에서 아칼라브루티닙과 AZD4573의 조합은 향상된 항-종양 활성을 야기한다
방법
AZD4573을 다이메틸아세트아미드(DMA)/폴리에틸렌 글리콜 400(PEG 400)/1% w/v Tween 80 용액 2/30/68에서 제형화하고, 제1일과 제2일에 2시간 간격으로 하루 두번 복강내로(ip) 5 mL/kg으로 투약한 후 5일 투약 휴일을 가졌으며; 즉, 2 온/5 오프 스케쥴이었다.
아칼라브루티닙을 0.5% 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스/0.2% Tween 80에서 제형화하고, 12.5 mg/kg의 용량으로 10 ml/kg의 부피로 경구(po) 투여로서 하루 두번(bid) 투약하였다. OCILy10 모델의 경우, 8/16 hr 분할 하루 두번 투약 스케쥴을 이용하여 아칼라브루티닙을 투약하였다. TMD8 및 Karpas-422 연구를 위하여, 아칼라브루티닙은 12 hr 하루 두번 분할 투약 스케쥴을 이용하여 투약하였다. 모든 세 가지 세포주에 대해, 아칼라브루티닙의 첫번째 투여 후 24hr에 제1 용량의 AZD4573을 투여하였다.
5 x 106 OCILy10 종양 세포 또는 10 x 106 TMD8 종양 세포를 50% 마트리젤을 함유하는 0.1 mL의 부피로 C.B.-17 SCID 암컷 마우스의 우측 옆구리에 피하로 주사하였다. 10 x 106 Karpas-422 종양 세포를 50% 마트리젤을 함유하는 0.1 mL의 부피로 SCID 베이지 암컷 마우스의 우측 옆구리에 피하로 주사하였다. 연구 지속 동안 종양 부피(캘리퍼로 측정함), 동물 체중 및 종양 상태를 매주 2회 기록하였다. 식: 길이(mm) x 폭(mm)2 x 0.52를 이용하여 종양 부피를 계산하였다. 효능 연구를 위하여, 대조군과 처리된 그룹 사이의 종양 부피의 차이 비교에 의해 처리 시작으로부터 성장 억제를 평가하였다. 평균 종양 크기가 대략 150~180 mm3에 도달하였을 때 투약을 시작하였다. CR = 완전 반응.
토의
ABC-DLBCL 모델에서 AZD4573를 아칼라브루티닙과 조합하는 것은 반응의 지속을 개선하였으며(OCILy10, 도 4a) 완전 퇴행을 유도하였다(TMD8, 도 4b). 하지만, GBC-DLBCL 모델 Karpas-422에서 조합 효과는 관찰되지 않았다(도 4c). 놀랍게도, 아칼라브루티닙과 조합된 AZD4573을 매주 2회 투여하는 것은 단일 에이전트 AZD4573 처리에 비하여 OCILy10에서 종양 재성장을 60일 지연시켰다(도 4a, 하부 패널). TMD8에서, 아칼라브루티닙과 조합된 AZD4573을 매주 2회 투여하는 것은 처리된 동물 100%에서 완전 반응을 생산하였으며(도 4b, 라벨 19/19 CR), 이것은 처리 제거 후 53일동안 유지되었다. 18/19 동물이 투약 기간 종료 후 61일까지 종양없이 남아 있었다(데이터 나타나지 않음). 대조적으로, BTK-비민감성 세포주에 대해 예상된 대로, 3주기의 치료 후 GCB-DLBCL 모델 Karpas-422에서 조합 효과는 관찰되지 않았다. 모든 요법이 단독으로 투약되건 조합으로 투약되건 잘 용인되었다.
도 4a, 4b, 및 4c에서, 아칼라브루티닙이 ACP-196으로 표시됨을 주목한다.
실시예 5: 대안적인 BTK 억제제 이브루티닙은 시험관내 및 생체내 에서 AZD4573과 조합 효과를 나타낸다
방법
아칼라브루티닙과 유사하게, 24 시간동안의 노출이 최대 BH3-온리 단백질 수준을 유도하기에 충분하기 때문에(데이터 나타나지 않음), BTK 억제제-민감성 ABC-DLBCL 세포주 OCILy10을 100 nM AZD4573 단독으로 또는 30 nM 이브루티닙으로 24-시간 전처리 후 100 nM AZD4573으로 8-시간 시간 과정동안 시험관내 처리하였다. AZD4573 처리 후 다양한 시점에(0, 0.5, 1, 2, 4, 및 8 시간) 단백질 용해물을 위해 세포를 수집하고, BCA 단백질 분석 키트를 이용하여 단백질 농도에 대해 정규화하고, 표준 프로토콜에 따라 웨스턴 블롯을 위해 러닝시켰다. 예상된 표적 결합이 이루어지게 하기 위하여, CDK9를 위한 근위 및 말단 바이오마커(각각 pSer2-RNAPolII 및 Mcl-1), 및 활성화된 BTK(pBTK)에 대한 바이오마커에 대해 블롯을 프로빙하였다. BH3-온리 단백질 Bim 및 Bmf 또한 증가된 수준을 확인하기 위하여 프로빙하였다. 아폽토시스 유도까지의 시간을 측정하기 위하여, 절단된 카스파아제-3을 또한 평가하였다. 로딩 대조군(빈큘린)을 또한 정규화를 위해 이용하였다.
AZD4573을 다이메틸아세트아미드(DMA)/폴리에틸렌 글리콜 400(PEG 400)/1% w/v Tween 80 용액 2/30/68에서 제형화하고, 제1일과 제2일에 2시간 간격으로 하루 두번(BID) 복강내로(ip) 5 mL/kg으로 투약한 후, 5일 투약 휴일을 가졌다. 이브루티닙을 0.5% 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스에서 제형화하고, 12 mg/kg의 용량으로 10 ml/kg의 부피로 경구(po) 투여로서 하루 한번(QD) 투약하였다. 5 x 106 OCILy10 종양 세포를 50% 마트리젤을 함유하는 0.1 mL의 부피로 C.B.-17 SCID 암컷 마우스의 우측 옆구리에 피하로 주사하였다. 연구 지속 동안 종양 부피(캘리퍼로 측정함), 동물 체중 및 종양 상태를 매주 2회 기록하였다. 식: 길이(mm) x 폭(mm)2 x 0.52를 이용하여 종양 부피를 계산하였다. 효능 연구를 위하여, 대조군과 처리된 그룹 사이의 종양 부피의 차이 비교에 의해 처리 시작으로부터 성장 억제를 평가하였다. 평균 종양 크기가 대략 150~180 mm3에 도달하였을 때 투약을 시작하였다. CR = 완전 반응.
토의
아칼라브루티닙처럼, 이브루티닙은 BTK 억제와 일치하게, BTK 억제제-민감성 모델 OCILy10에서 BH3-온리 단백질 Bim 및 Bmf의 수준을 증가시켰다(도 5a). 이브루티닙으로 24시간 전처리 후 AZD4573의 첨가는 카스파아제의 향상되고 신속한 유도를 야기하였으며(도 5a), 이것은 생체내에서 반응 지속의 개선으로 바꼈다(도 5b). AZD4573의 매주 2회 투여는, 별로 효과적이지 않았던 이브루티닙 단일 에이전트에 비하여, 3주기의 투약 후 처리된 동물 100%에서 완전 반응을 생성하였다. 이브루티닙과 AZD4573의 조합은 또한 3주기의 처리 후 처리된 동물 100%에서 완전 반응을 생성하였다. 이브루티닙과 조합된 AZD4573은 단일 에이전트 AZD4573 처리에 비교할 때, OCILy10에서 종양 재성장까지 2주 지연을 생성하여, 조합에 대해 반응의 증가된 지속을 입증하였다. 모든 요법은 단독으로 투약되건 조합으로 투약되건 잘 용인되었다.
다른 실시 형태는 하기 청구범위의 범주 이내이다.

Claims (15)

  1. 대상체에서 암의 치료에 사용하기 위한 BTK 억제제와 CDK9의 억제제의 조합.
  2. 제1항에 있어서, CDK9의 억제제가 대상체에게 투여되기 전에 BTK 억제제가 대상체에게 투여되는 조합.
  3. 제1항 내지 제2항 중 어느 한 항에 있어서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙, 이브루티닙, 또는 ONO/GS-4059인 조합.
  4. 제3항에 있어서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙인 조합.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, CDK9의 억제제는 AZD4573, BAY-1251152, BAY-1143572, CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 또는 디나시클립인 조합.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, CDK9의 억제제는 AZD4573인 조합.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소(small) 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증(Waldentrom's macroglobulinemia), 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택되는 조합.
  8. 대상체에게 유효량의 BTK 억제제를 투여하는 단계; 및 대상체에게 유효량의 CDK9의 억제제를 투여하는 단계를 포함하는 대상체에서 암을 치료하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, CDK9의 억제제가 대상체에게 투여되기 전에 BTK 억제제가 대상체에게 투여되는 방법.
  10. 제8항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙, 이브루티닙, 또는 ONO/GS-4059인 방법.
  11. 제10항에 있어서, BTK 억제제는 아칼라브루티닙인 방법.
  12. 제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, CDK9의 억제제는 AZD4573, BAY-1251152, BAY-1143572, CYC065, 알보시딥, AT7519, 보루시클립, 로니시클립, 또는 디나시클립인 방법.
  13. 제12항에 있어서, CDK9의 억제제는 AZD4573인 방법.
  14. 제8항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 미만성 거대 B-세포 림프종, 외투 세포 림프종, 만성 림프구성 백혈병, 소 만성 림프구성 백혈병, 발덴트롬 마크로글로불린혈증, 변연부 림프종, 만성 이식편대숙주병, 소포성 림프종, 및 급성 림프모구 백혈병으로부터 선택되는 방법.
  15. BTK 억제제 및 약학적 허용 담체를 포함하는 제1 약학 조성물; 및 CDK9의 억제제 및 약학적 허용 담체를 포함하는 제2 약학 조성물을 포함하는 키트.
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