KR20200006538A

KR20200006538A - 암 치료에서 화학요법제와 병용되는 항-fgfr2 항체

Info

Publication number: KR20200006538A
Application number: KR1020197033263A
Authority: KR
Inventors: 헬렌 엘. 콜린스; 제임스 나티진; 홍 샹; 샹 장
Original assignee: 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크.
Priority date: 2017-05-16
Filing date: 2018-05-15
Publication date: 2020-01-20
Also published as: US11091555B2; CN110621336B; SG10202112636SA; RU2019141070A3; JP2023093527A; MX2024000614A; BR112019023898A2; JP7299842B2; CN118416216A; US20220041737A1; JP2020520903A; CA3062177A1; CN110621336A; EP3624837A1; WO2018213304A1; RU2019141070A; US20200079856A1; AU2018269984A1

Abstract

본 출원은 특정 암의 치료에서 mFOLFOX6 화학요법과 병용하여, FGFR2 동소체 FGFR2-IIIb (FGFR2b로도 알려짐)에 대항하는 항체를 비롯한, 섬유모세포 성장 인자 수용체 2 (FGFR2)에 대한 항체의 용도에 관계한다.

Description

암 치료에서 화학요법제와 병용되는 항-FGFR2 항체

본 출원은 2017년 5월 16일자로 제출된 미국 가출원 번호 62/507,053 및 2017년 11월 6일자로 제출된 미국 가출원 번호 62/581,992를 우선권으로 주장하며, 이의 전문이 본 명세서의 참고자료에 편입된다.

분야

본 출원은 특정 암의 치료에서 mFOLFOX6 화학요법과 병용하여, FGFR2 동소체(isoform) FGFR2-IIIb (FGFR2b로도 알려짐)에 대항하는 항체를 비롯한, 섬유모세포 성장 인자 수용체 2 (FGFR2)에 대한 항체의 용도에 관계한다.

배경

섬유모세포 성장 인자 (FGF) 패밀리 구성요소들은 4개의 공지된 티로신 키나제 수용체들, 섬유모세포 성장 인자 수용체들 1-4 (FGFR1-4) 및 이들의 동소체들에 결합하는데, 이들 다양한 FGFs는 상이한 FGFRs들에 다양한 정도로 결합한다 (Zhang 외, J. Biol. Chem. 281:15694, 2006). 인간 FGFR2의 단백질 서열은 가령, GenBank Locus AF487553에서 제공된다. 각 FGFR은 3개 면역글로블린 (Ig)-유사 도메인들 (D1, D2 및 D3), 단일 막경유 헬릭스, 및 세포내 촉매성 키나제 도메인을 포함하는 세포외 도메인 (ECD)으로 구성된다(Mohammadi 외, Cytokine Growth Factor Revs, 16:107, 2005). FGFs는 상기 수용체들의 D2 및 D3에 영역들을 통하여 주로 상기 수용체들에 결합한다. D1과 D2 사이의 "산성 박스"(AB)라 불리는 링커에서 산성 아미노산들의 연속적 띠(stretch)가 존재한다. D1 및 AB를 함유하는 영역은 수용체의 자가억제(autoinhibition)에 관여하는 것으로 여겨지는데, 이는 리간드에 대한 결합에 의해 해제된다.

FGFR은 mRNA의 다수의 대안적 스플라이싱(splicing)을 특징으로 하여, 다양한 동소체들을 초래한다 (Ornitz 외, J. Biol. Chem. 271:15292, 1996; Swiss-Prot P21802 참고, 그리고 FGFR2 및 이의 동형들의 서열의 경우 동형들 P21802-1 내지 -20). 눈에 띄게는, 3개의 모든 Ig 도메인들 (α 동소체) 또는 D1 (β동소체) 없이, 오직 Ig 도메인들 D2 및 D3 도메인들만 함유하는 형태들이 있다. FGFR1, FGFR2, 및 FGFR3에서, 모든 형태는 IIIa로 표시된 D3의 제 1 절반부를 포함하지만, D3의 제 2 절반부에는 2 개의 대안적인 엑손이 이용되어, IIIb 및 IIIc 형태가 될 수 있다. FGFR2의 경우, 이들은 차례로 FGFR2-IIIb 및 FGFR2-IIIc (또는 그냥 FGFR2b 및 FGFR2c)로 표시되는데; 대응하는 베타 형태는 FGFR2(베타)IIIb 및 FGFR2(베타)IIIc로 표시된다. FGFR2의 FGFR2-IIIb 형(K-sam-II로도 표시됨)은 FGF1 및 KGF 모두의 패밀리 구성요소들 (FGF7, FGF10, 및 FGF22)에 대하여 높은 친화력 수용체인데 반하며, FGFR2-IIIc (K-sam-I로도 표시됨)는 FGF1 및 FGF2에 모두 잘 결합하지만, 그러나 KGF 패밀리 구성요소들에는 결합하지 않는다 (Miki 외, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:246, 1992). 또한, FGFR2-IIIb는 KGF 패밀리 구성요소들의 유일한 수용체이며 (Ornitz 외, 1996, op. cit.), 따라서 또한 KGFR로 지정된다.

FGFRs 및 이들의 동소체들은 다양한 조직에서 차등적으로 발현된다. FGFR2-IIIb (그리고 FGFR1 및 FGFR3의 IIIb 형태)는 상피 조직에서 발현되며, 한편 FGFR2-IIIc는 간엽성 조직에서 발현된다 (Duan 외, J. Biol. Chem. 267:16076, 1992; Ornitz 외, 1996, op. cit.). 이들 수용체의 FGF 특정 리간드들은 반대의 발현 패턴을 갖는다. 따라서, FGF7 (KGF), FGF10, 및 FGF22를 비롯한 KGF 하위패밀리 구성요소들은 오직 FGFR2-IIIb에만 결합하고 (Zhang 외, op. cit.), 간엽성 조직에서 발현되며, 그래서, 상피 세포의 파라크린(paracrine) 작동체(effectors)일 수 있다 (Ornitz 외, 1996, op. cit.). 대조적으로, FGF4 하위패밀리 구성요소 FGF4-6은 FGFR2-IIIc에 결합하고, 상피 및 간엽성 계통 모두에서 발현되며, 그래서 오토크린(autocrine) 또는 파라크린(paracrine) 기능을 보유할 수 있다. FGFR2의 동소체 및 이들의 리간드들의 발현 패턴으로 인하여, FGFR2는 상피-간엽 상호작용에 역할을 하고 (Finch 외, Dev. Dyn. 203:223, 1995), 따라서 마우스에서 FGFR2-IIIb의 녹-아웃(knock-out)이 심각한 배아 결함 및 치사로 이어진다는 것은 놀라운 사실이 아니다 (De Moerlooze 외, Development 127:483, 2000).

KGF (FGF7) 및 KGFR (FGFR2-IIIb)은 많은 췌장암에서 과다발현되고 (Ishiwata 외, Am. J. Pathol. 153: 213, 1998), 그리고 이들의 공동발현은 나쁜 예후와 관련된다 (Cho 외, Am. J. Pathol. 170:1964, 2007). FGFR2 유전자의 체세포 돌연변이는 내막 (자궁) 암종의 거대 패널중 12%에서 발견되었고, 몇몇 테스트된 경우에서는 종양 세포 생존에 요구되었다 (Dutt 외, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105:8713, 2008). 2개 종양에서 FGFR2 돌연변이는 아페르트(Apert) 증후군과 관련된 동일한 S252W 치환으로 밝혀졌다. FGFR2의 증폭 및 과다발현은 미분화된, 미만성 유형의 위암과 연합되고, 이는 특히 예후가 좋지 않으며, 그리고 소분자 화합물들에 의한 FGFR2 활성의 억제는 이러한 암 세포의 증식을 저해하였다 (Kunii 외, Cancer Res. 68:2340, 2008; Nakamura 외, Gastroenterol. 131:1530, 2006).

FGFR 신호전달(signaling)의 억제는 항-종양 면역성을 개선시키고, 유방암에서 전이를 손상시키는 것으로 보고되었다. (가령, T. Ye 외, Breast Cancer Res. Treat. 143: 435-446 (2014)참고.) 항-FGFR2 항체는 예를 들면, 위암 모델에서 또한 테스트되었다. 특정 항-FGFR2 항체들이 예를 들면, U.S. 특허 번호. 8,101,723 B2에서 기술되는데, 인간 FGFR2-IIIb에 결합하지만, FGFR2-IIIc에는 잘 결합되지 않거나, 또는 결합하지 않는, 그리고 이의 역도 마찬가지인, 단일클론 항체를 포함한다. U.S. 특허 공개 번호. 2015-0050273 A1은 FGFR2-IIIb에 결합하는 특정 탈퓨코실화된(afucosylated) 항체를 기술한다.

요약

본 명세서는 예를 들면, 대상의 위암과 같은 위장관 암을 치료하는 방법을 포함하는데, 이 방법은 상기 대상에게 치료요법적 유효량의 항-섬유모세포 성장 인자 수용체 2 (항-FGFR2) 및 변형된 FOLFOX6 (mFOLFOX6) 화학요법을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2 항체는 항-FGFR2-IIIb 항체이다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 하나 또는 그 이상의 다음 성질을 갖는다: FGFR2-IIIc에 대한 것보다 더 높은 친화력으로 FGFR2-IIIb에 결합하거나, 또는 FGFR2-IIIc에 탐지될 수준으로 결합하지 않거나; FGF2가 인간 FGFR2에 결합하는 것을 억제하거나; FGF7이 인간 FGFR2에 결합하는 것을 억제하거나; 마우스 종양 모델에서 인간 종양의 성장을 억제하고; ADCC 활성을 유도하거나; 강화된 ADCC 활성을 소유하거나; 탈퓨코실화되거나; 그리고 대조군과 비교하였을 때, 마우스 종양 모델의 종양 조직 안에서 하나 또는 그 이상의 PD-L1 양성 세포, NK 세포, CD3+ T 세포, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포, 그리고 대식세포의 수를 증가시킬 수 있다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 이때 상기 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 초가변 영역 H1 (HVR-H1); 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 초가변 영역 L1 (HVR-L1); 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄 가변 도메인은 서열 번호: 4의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 경쇄 가변 도메인은 서열 번호: 5의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄 가변 도메인은 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 경쇄 가변 도메인은 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄는 서열 번호: 2의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 3의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄는 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 경쇄는 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 키메라, 인간화된, 또는 인간이다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 Fab, Fv, scFv, Fab', 및 (Fab')₂로부터 선택된다.

본원의 방법의 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 하나 또는 그 이상의 다음 성질을 갖는다: 위치 Asn297에서 퓨코스가 결여되고; κ경쇄 불변 영역을 포함하고; IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하고; 위치 Asn297에서 탈퓨코실화된 동일한 아미노산 서열을 갖는 항체와 비교하였을 때, 시험관내(in vitro)에서 강화된 ADCC 활성을 갖고; 위치 Asn297에서 탈퓨코실화된 동일한 아미노산 서열을 갖는 항체와 비교하였을 때, Fc 감마 RIIIA에 대하여 강화된 친화력을 갖고 ; 그리고 대조군과 비교하였을 때, 마우스 종양 모델의 종양 조직 안에서 하나 또는 그 이상의 PD-L1 양성 세포, NK 세포, CD3+ T 세포, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포, 그리고 대식세포의 수를 증가시킬 수 있다.

본원의 방법의 일부 구체예들에서, 대상은 국소 진행성, 절제 불가능 또는 전이성 위암을 앓고 있다. 일부 구체예들에서, 상기 위암은 위식도 암이다.

본원의 방법의 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg, 10-15 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 또는 15 mg/kg의 용량으로 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 10-21 일 마다 한 번, 매 10-15 일 마다 한 번, 매 10 일 마다 한 번, 매 11 일 마다 한 번, 매 12 일 마다 한 번, 매 13 일 마다 한 번, 매 14 일 마다 한 번, 매 15 일 마다 한 번, 매 16 일 마다 한 번, 매 17 일 마다 한 번, 매 18 일 마다 한 번, 매 19 일 마다 한 번, 매 20 일 마다 한 번, 또는 매 21 일 마다 한 번 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6 mg/kg, 10 mg/kg 또는 15 mg/kg의 용량으로 투여되고, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 다음과 같은 투여 체제(dosage regime)로 투여된다: (a) 6-15 mg/kg의 용량, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다; (b) 6 mg/kg의 용량, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다; (c) 10 mg/kg의 용량, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다; 또는 (d) 15 mg/kg의 용량, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다. 일부 구체예들에서 (a) 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg, 10-15 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 또는 15 mg/kg의 용량으로 매 11-17 일, 매 12-16 일, 매 13-15 일, 또는 매 14 일에 한 번 투여되고, 그리고 (b) 3-8 mg/kg, 5-8 mg/kg, 7-8 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 또는 8 mg/kg의 최소한 한 번의 중개(intervening) 용량이 (a)의 2차례 투여 사이에 투여되며, 그리고 이때 (b)의 용량은 (a)의 용량보다 적다. 일부 구체예들에서, (i) (a)의 용량은 10-15 mg/kg, 매 13-15 일 마다; (ii) (a)의 용량은 15 mg/kg으로 매 13-15 일 마다; (iii) (b)의 용량은 5-8 mg/kg이며, 그리고 (a)의 최소한 1회 투여 후 6-8일 그리고 (a)의 후속 투여 전 6-8일에 투여되고; (iv) (a)의 용량은 10-15 mg/kg으로 매 13-15 일 마다, 그리고 (b)의 용량은 7-8 mg/kg이며, (a)의 최소한 1회 투여 후 6-8일 그리고 (a)의 후속 투여 전 6-8일; (v) (a)의 용량은 15 mg/kg으로 매 14 일 마다, 그리고 (b)의 용량은 7-8 mg/kg이며, 그리고 (a)의 최소한 1회 용량의 투여 후 7일과 (a)의 후속 투여전 7일에 투여되고; (vi) (a)의 용량은 15 mg/kg으로 매 14 일 마다, 그리고 (b)의 용량은 7.5 mg/kg이며, (a)의 최소한 1회 투여 후 7일과 (a)의 후속 투여 전 7일에 투여되고; 및/또는 (vii) (b)의 용량은 (i) 내지 (vi)중 임의의 것에서 (a)의 첫 투여 후에 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg의 용량이 매 14 일마다 한 번 투여되고, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 첫 투여 후 6-8일에, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 7.5 mg/kg의 용량으로 추가 투여된다. 이러한 구체예의 일부에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg의 용량이 매 14 일마다 한 번 투여되고, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 첫 투여 후 7일에, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 7.5 mg/kg의 용량으로 투여된다. 이러한 구체예의 일부에서, 7.5 mg/kg 용량은 단 한 번 제공되는데, 즉 제 1 및 제 2의 15 mg/kg 투여 사이에 제공된다.

본원의 방법의 일부 구체예들에서, mFOLFOX6은 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)을 정맥내 (IV) 주입 또는 IV 볼루스에 의해 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6은 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)를 정맥내 (IV) 주입 또는 IV 볼루스에 의해 투여하고, 이어서 2400 mg/m² 5-FU를 IV 주입에 의해 44-48 시간에 걸쳐 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6은 매 10-21 일 마다 한 번, 매 10-15 일 마다 한 번, 매 10 일 마다 한 번, 매 11 일 마다 한 번, 매 12 일 마다 한 번, 매 13 일 마다 한 번, 매 14 일 마다 한 번, 매 15 일 마다 한 번, 매 16 일 마다 한 번, 매 17 일 마다 한 번, 매 18 일 마다 한 번, 매 19 일 마다 한 번, 매 20 일 마다 한 번, 또는 매 21 일 마다 한 번 투여된다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6은 매 14 일 마다 한 번 투여된다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6은 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)을 정맥내 (IV) 주입 또는 IV 볼루스에 의해 투여하고, 이어서 2400 mg/m² 5-FU를 IV 주입에 의해 44-48 시간에 걸쳐 투여하는 것을 포함하고, 이때 mFOLFOX6은 매 14 일 마다 한 번 투여된다.

본원의 방법의 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6은 동시에 또는 순차적으로 투여된다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6의 1회 또는 그 이상의 투여는 항-FGFR2-IIIb 항체의 투여 전에 이루어진다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6의 2회 투여는 항-FGFR2-IIIb 항체의 투여 전에 이루어진다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIB 항체는 mFOLFOX6과 동일한 날에, 그리고 mFOLFOX6 투여 전에 투여된다.

일부 구체예들에서, 위암은 FGFR2-IIIb를 과다발현하는 것으로 이미 결정되었고, 및/또는 위암은 FGFR2 유전자 증폭을 갖는 것으로 이미 결정되었다. 일부 구체예들에서, 상기 방법은 위암이 FGFR2-IIIb를 과다발현시키는 지 및/또는 위암이 FGFR2 유전자 증폭을 갖는지를 결정하는 것을 더 포함한다. 일부 구체예들에서, 단백질 수준에서 면역조직화학 (IHC)에 의해 FGFR2-IIIb 과다발현이 결정된다. 일부 구체예들에서, 상기 과다발현은 이미 결정되었거나, 또는 종양 세포의 최소한 10%, 20%, 30%, 40%, 또는 50%에서 IHC 신호가 3+인 것으로 결정된다. 일부 구체예들에서, FGFR2 유전자 증폭 이미 결정되었거나 또는 염색체 10 동원체 (CEN10)에 대한 FGFR2의 비율을 형광 제자리(in situ) 혼성화 (FISH)를 이용하여 수득함으로써 결정되고, 이때 FISH에 의해 결정된 FGFR2/CEN10 비율이 2이거나 또는 이보다 클 경우, FGFR2 유전자는 증폭된 것으로 간주된다. 일부 구체예들에서, FGFR2 증폭이 탐지되었거나 또는 순환하는 종양 DNA (ctDNA)에서 탐지된다.

본 명세서의 일부 구체예들은 대상에서 국소적으로 진행된, 절제불가능한 또는 전이성 위암을 치료하는 방법을 포괄하는데, 이 방법은 상기 대상에게 치료요법적 유효량의 항-섬유모세포 성장 인자 수용체 2 IIIb (항-FGFR2-IIIb) 항체 및 변형된 FOLFOX6 (mFOLFOX6) 화학요법을 투여하는 것을 포함하며, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 이때 상기 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:

(i) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;

(ii) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고

(iii) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;

그리고, 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:

(iv) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;

(v) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고

(vi) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3;

이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 10-15 mg/kg의 용량으로 투여되고, 이어서 mFOLFOX6의 투여는 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)를 IV 주입 또는 IV 볼루스에 의한 투여, 이어서 2400 mg/m² 5-FU를 IV 주입에 의해 44-48 시간에 걸쳐 투여하는 것을 포함하고; 그리고 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6은 매 2 주 마다 투여된다. 본 명세서의 일부 구체예들은 대상에서 국소적으로 진행된, 절제불가능한 또는 전이성 위암을 치료하는 방법을 포괄하는데, 이 방법은 상기 대상에게 치료요법적 유효량의 항-섬유모세포 성장 인자 수용체 2 IIIb (항-FGFR2-IIIb) 항체 및 변형된 FOLFOX6 (mFOLFOX6) 화학요법을 투여하는 것을 포함하며, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 이때 상기 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:

(i) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;

(ii) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고그리고

(iii) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;

그리고, 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:

(iv) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;

(v) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고

(vi) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3;

이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6은 매 13-15 일 마다 투여되고, 그리고 임의선택적으로 이때 단일 용량 3-8 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체는 항-FGFR2-IIIb 항체의 제 1 용량 6-15 mg/kg 투여 후 그리고 항-FGFR2-IIIb 항체의 제 2 용량 6-15 mg/kg 투여 전, 6-8일에 투여된다. 이러한 구체예의 일부에서, (a) 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 15 mg/kg으로 정맥내로 투여되고, (b) 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6는 매 14 일 마다 동일한 날에 투여되고, 그리고 (c) 단일 용량 7.5 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체는 제 1 용량 15 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체가 투여된 후, 그리고 제 2 용량 15 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체가 투여되기 전 7일에 투여된다.

본원의 일부 구체예들에서, 위암은 종양 세포의 최소한 10%에서 IHC 신호가 3+으로 나타날 때 FGFR2-IIIb를 과다발현시키는 것으로 이미 결정되었거나 및/또는 위암은 ctDNA에서 FGFR2 유전자 증폭을 갖는 것으로 이미 결정되었다. 이러한 구체예의 일부에서, 상기 대상은 항-FGFR2-IIIb 항체의 제 1 투여 전, mFOLFOX6를 2차례 투여 받았다.

본 명세서는 상기 방법중 임의의 한 방법에 따라 환자의 위장관 암, 이를 테면 위암을 치료하는데 사용하기 위하여, 본 명세서에서 기술된 바와 같은 항-FGFR2-IIIb 항체와 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU 각각을 포함하는 조성물을 포괄한다. 일부 구체예들에서, 상기 조성물은 본원에서 기술된 바와 같은 항-FGFR2-IIIb 항체 그리고 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU중 최소한 하나의 조합을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체, 그리고 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU중 최소한 하나는 별도의 용기 또는 칸(compartments)에 있다. 이러한 구체예의 일부에서, 상기 조성물은 별도의 용기 또는 칸에 상기 항체, 그리고 각 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU의 조합을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 조성물은 위장관 암, 가령 위암, 치료에 이용하기 위한 지침을 더 포함한다.

본원의 상기 방법 또는 조성물의 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 U.S. 특허 번호. 8,101,723 B2에서 기술된 단일클론 항체 GAL-FR21, GAL-FR22, 또는 GAL-FR23의 중쇄 및 경쇄 초가변 영역 (HVR) H1, H2, H3, L1, L2, 및 L3 아미노산 서열을 갖는다. 일부 구체예들에서 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: (i) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (ii) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고 (iii) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: (iv) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (v) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (vi) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호:4의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일한, 또는 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호:5의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일한, 또는 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열 번호:4의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 도메인은 서열 번호:5의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 2의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 3의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 중쇄는 서열 번호:2의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하고, 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄는 서열 번호:3의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하고, 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구체예들에서 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: (i)서열 번호: 16의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1; (ii) 서열 번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2; 그리고 (iii) 서열 번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3; 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: (iv) 서열 번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1; (v) 서열 번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2; 그리고 (vi) 서열 번호: 22의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호:15의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일한, 또는 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호:19의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일한, 또는 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열 번호:15의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 15의 아미노산 서열을 포함하고, 그리고 상기 경쇄 가변 도메인은 서열 번호:19의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 19의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구체예들에서 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 탈퓨코실화된 항체는 Asn297에서 퓨코실화된 동일한 아미노산 서열을 갖는 항체와 비교하였을 때, 시험관내 및/또는 생체에서 강화된 ADCC (항체-의존성 세포 세포독성) 활성을 갖는다. 일부 구체예들에서, 탈퓨코실화된 항체는 위치 Asn297에서 퓨코실화된 동일한 아미노산 서열을 갖는 항체와 비교하였을 때, Fc 감마 RIIIA에 대하여 강화된 친화력을 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 탈퓨코실화된 항체는 대조군(가령, FGFR2를 표적으로 하지 않는 대조군 항체와 비교하였을 때)과 비교하였을 때, 마우스 이종이식(xenograft) 및/또는 유전적 동계(syngeneic) 종양 모델의 종양 조직내 PD-L1 양성 세포, NK 세포, CD3+ T 세포, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포, 및 대식세포중 하나 또는 그 이상의 수를 증가시킬 수 있다.

선행된 일반 설명 및 이어지는 상세한 설명은 모두 예시와 설명을 위한 것이며, 본 청구범위를 제한하지 않는다는 것이 이해되어야 한다. 본 명세서에서 사용된 섹션 제목은 오로지 구획을 분리하려는 목적을 위함이며 서술된 주제를 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다. 특허 출원 및 공보를 비롯한, 본원에 인용된 모든 참고 문헌은 임의의 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

도 1은 하기 실시예 1에서 기술된 임상 실험의 용량 증가 I부의 투여 일정을 보여준다. 최초 코호트(cohort)는 용량 수준 1이며, 추가 등록은 하기 표 2에 제공된 바와 같이, 용량-제한 독성 (DLTs)의 존재 분석에 따라 도면에 나타난 바와 같은, 용량 수준 1, 2, 또는 -1 일 것이다.
도 2는 하기 실시 예 1에 기술된 임상 시험의 I 부에 대해 수행될 환자 평가를 보여주는 흐름도를 제공한다.
도 3은 하기 실시예 2에서 기술된 임상 실험의 용량 증가 (단계 1)의 투여 일정을 보여준다. 최초 코호트는 코호트 1 및 2이며, 코호트 3은 필요할 경우 개방되며, 추가 코호트 4 (나타내지 않음) 또한 필요할 경우 개방된다. 하기 실시예 2에 더 상세한 설명이 있다.

특정 구체예들의 설명

정의

달리 정의되지 않는 한, 본 발명과 관련하여 사용된 과학 및 기술 용어는 당업자에게 일반적으로 이해되는 의미를 가질 것이다. 더욱이, 내용에 의해 요구되지 않는 한, 단수는 복수를 포함하며, 복사는 단수를 포함한다.

재조합 DNA, 올리고뉴클레오티드 합성, 조직 배양 및 형질 전환 (예를 들어, 전기 천공법, 리포펙션), 효소 반응 및 정제 기술과 관련하여 사용된 예시적인 기술은 당업계에 공지되어 있다. 많은 이러한 기술과 절차가 설명되어 있는데, 가령, 그 중에서도 Sambrook 외 Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989))가 있다. 또한, 환자의 화학적 합성, 화학적 분석, 약학 제제, 제형 및 전달 및 치료를 위한 예시적인 기술이 또한 당업계에 공지되어 있다.

본 출원에서, “또는”이란 명시적으로 다른 언급이 없는 한, “및/또는”을 말한다. 다수의 종속 청구항의 맥락에서, "또는"의 사용은 대안의 경우에만 하나 이상의 이전의 독립 또는 종속 청구항을 의미한다. 또한, "요소(element)" 또는 "성분(component)"과 같은 용어는, 달리 구체적으로 언급되지 않은 한 하나 초과의 소단위를 포함하는 하나의 단위 및 요소 및 성분을 포함하는 요소 및 성분 둘다를 포괄한다.

본 개시에 따라 이용되는 바와 같이, 다음의 용어는 달리 지시되지 않는 한, 다음의 의미를 갖는 것으로 이해될 것이다:

용어 “핵산 분자” 및 “폴리뉴클레오티드”는 호환될 수 있으며, 뉴클레오티드의 고분자를 지칭한다. 이러한 뉴클레오티드의 중합체는 천연 및/또는 비 -천연 뉴클레오티드를 함유할 수 있으며, DNA, RNA 및 PNA를 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다. “핵산 서열”이란 핵산 분자 또는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 뉴클레오티드의 선형 서열을 지칭한다.

용어 “폴리펩티드” 및 “단백질”은 최소 길이의 제한 없이, 아미노산 잔기들의 중합체를 포함하는 것으로. 본 명세서에서 호환된다. 이러한 아미노산 잔기의 중합체는 천연 또는 비-천연 아미노산 잔기를 함유할 수 있으며, 아미노산 잔기의 펩티드, 올리고펩티드, 이량체, 삼량체 및 다량체를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 전장 단백질 및 이의 단편은 모두 정의에 포함된다. 상기 용어는 또한 폴리펩티드의 발현-후 변형, 예를 들어 당화(glycosylation), 시알릴화(sialylation), 아세틸화(acetylation), 인산화(phosphorylation) 및 이와 유사한 것등을 포함한다. 더욱이, 본 발명의 목적을 위하여, "폴리펩티드"는 해당 단백질이 원하는 활성을 유지하는 한, 고유 서열에 있어서 변형, 이를 테면 결손, 추가, 및 치환 (자연계에서 일반적으로 보존적)이 포함된 단백질을 지칭한다. 부위-지향적인 돌연변이 생성을 통하여 이들 변형이 의도적이거나, 또는 이를 테면 상기 단백질을 만드는 숙주의 돌연변이를 통하여, 또는 이들 변형은 PCR 증폭으로 인한 오류에 의해 우연한 것일 수 있다.

“FGFR2”란 인간 섬유모세포 성장 인자 수용체 2, 그리고 이의 대안적 접합된 형태, 이를 테면 IIIa, IIIb 및 IIIc 접합 형태(splice forms)를 포함하여, 지칭된다. 상기 용어 FGFR2는 야생형 FGFR2 및 자연 발생적 돌연변이체 형태, 이를 테면 FGFR2 활성화 돌연변이체 형태 이를 테면,용어일부 암세포에서 발견되는 FGFR2-S252W를 포괄한다. “FGFR2-IIIb” 또는 “FGFR2b”는 호환되며, 인간 섬유모세포 성장 인자 수용체 2 IIIb 접합 형을 지칭한다. 예시적인 인간 FGFR2-IIIb 서열은 2013년 7월 7일자 GenBank 기탁 번호. NP_075259.4에 나타난다. 비-제한적 예시적인 성숙(mature) 인간 FGFR2-IIIb 아미노산 서열은 서열 번호: 1에 나타낸다. “FGFR2-IIIc” 또는 “FGFR2c”는 호환되며, 인간 섬유모세포 성장 인자 수용체 2 IIIc 접합 형을 지칭한다. 예시적인 인간 FGFR2-IIIc 서열은 2013년 7월 7일자 GenBank 기탁 번호. NP_000132.3에 나타난다. 비-제한적 예시적인 성숙 FGFR2-IIIc 아미노산 서열은 서열 번호: 12에 나타낸다.

“FGFR2 세포외 도메인” 또는 “FGFR2 ECD”란 인간 FGFR2의 세포외 도메인을 지칭하는데, 이때 천연 및 이의 조작된 변이체를 포함한다. FGFR2 ECD의 예는 서열 번호: 13에서 제공된다.

본원에서 이용된 용어 “항체”란 중쇄의 최소한 초가변 영역 (HVRs) H1, H2, 및 H3 그리고 경쇄의 L1, L2, 및 L3을 포함하는 분자를 지칭하며, 이때 상기 분자는 항원에 결합할 수 있다. 상기 용어 항체는 항원에 결합할 수 있는 단편, 이를 테면 Fv, 단일-쇄 Fv (scFv), Fab, Fab', 및 (Fab')₂을 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 상기 용어 항체는 또한 키메라 항체, 인간화된 항체, 인간 항체, 그리고 다양한 종, 이를 테면 마우스, 인간, 시노몰구스(cynomolgus) 원숭이, 등의 항체를 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 또한 소분자 약물, 이중특이적 항체 및 다중특이적 항체와 같은 다른 분자에 접합된 항체도 포함한다.

“항-FGFR2” 항체는 FGFR2에 특이적으로 결합하는 항체를 지칭한다. “항-FGFR2-IIIb” 항체 또는 “항-FGFR2b” 항체는 FGFR2-IIIb (FGFR2b로도 알려짐)특이적으로 결합하는 항체를 지칭한다. 이러한 항체는 FGFR2의 다른 동소체, 이를 테면 FGFR2-IIIc보다 FGFR2-IIIb에 대한 친화력이 더 높다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 FGFR2-IIIc에 탐지가능하도록 결합하지 않을 수 있다. 용어 “항-FGFR2 항체”, “항-FGFR2-IIIb 항체” 및 “항-FGFR2b 항체”는 이러한 항체의 탈퓨코실화된 형태를 특이적으로 포함한다.

상기 용어 “중쇄 가변 영역”은 중쇄 HVR1, 프레임워크 (FR) 2, HVR2, FR3, 및 HVR3을 포함하는 영역을 지칭한다. 일부 구체예들에서, 중쇄 가변 영역은 또한 FR1의 적어도 일부 및/또는 FR4의 적어도 일부를 포함한다.

상기 용어 “중쇄 불변 영역”이란 최소한 3개 중쇄 불변 도메인들, C_H1, C_H2, 및 C_H3을 포함하는 영역을 지칭한다. 비제한적 예시적인 중쇄 불변 영역은 γ,δ, 및 α을 포함한다. 비제한적 예시적인 중쇄 불변 영역은 또한 ε및 μ을 포함한다. 각 중쇄 불변 영역은 항체 동형(isotype)에 대응한다. 예를 들면, γ 불변 영역을 포함하는 항체는 IgG 항체이고, δ 불변 영역을 포함하는 항체는 IgD 항체이고, 그리고 α 불변 영역을 포함하는 항체는 IgA 항체이다. 더욱이, μ 불변 영역을 포함하는 항체는 IgM 항체, 그리고 ε 불변 영역을 포함하는 항체는 IgE 항체이다. 특정 동형은 하위부류로 더 세분될 수 있다. 예를 들면, IgG 항체는 IgG1 (γ₁ 불변 영역을 포함하는), IgG2 (γ₂ 불변 영역을 포함하는), IgG3 (γ₃ 불변 영역을 포함하는), 및 IgG4 (γ₄ 불변 영역을 포함하는) 항체를 포함하나, 이에 국한되지 않으며; IgA 항체는 IgA1 (α₁ 불변 영역을 포함하는) 및 IgA2 (α₂ 불변 영역을 포함하는) 항체를 포함하나, 이에 국한되지 않으며; 그리고 IgM 항체는 IgM1 및 IgM2를 포함하나, 이에 국한되지 않는다.

상기 용어 “중쇄”란 리더(leader) 서열과 함께, 또는 없이 최소한 중쇄 가변 영역을 포함하는 폴리펩티드를 지칭한다. 일부 구체예들에서, 중쇄는 중쇄 불변 영역의 최소한 일부분을 포함한다. 상기 용어 “전장(full-length)의 중쇄”란 리더(leader) 서열과 함께, 또는 없이, 중쇄 가변 영역 및 중쇄 불변 영역을 포함하는 폴리펩티드를 지칭한다.

상기 용어 “경쇄 가변 영역”이란 경쇄 HVR1, 프레임워크 (FR) 2, HVR2, FR3, 및 HVR3을 포함하는 영역을 지칭한다. 일부 구체예들에서, 경쇄 가변 영역은 FR1 및/또는 FR4을 또한 포함한다.

상기 용어 “경쇄 불변 영역”은 경쇄 불변 도메인, C_L을 포함하는 영역을 지칭한다. 비제한적 예시적인 경쇄 불변 영역은 λ및 κ을 포함한다.

상기 용어 “경쇄”란 리더 서열과 함께, 또는 없이 최소한 경쇄 가변 영역을 포함하는 폴리펩티드를 지칭한다. 일부 구체예들에서, 경쇄는 경쇄 불변 영역의 최소한 일부분을 포함한다. 상기 용어 “전장 경쇄”란 리더 서열과 함께, 또는 없이, 경쇄 가변 영역 및 경쇄 불변 영역포함하는 폴리펩티드를 지칭한다.

상기 용어 “초가변 영역” 또는 “HVR”란 서열에서 초가변적이고, 및/또는 구조적으로 특정된 루프(“초가변 루프”)를 형성하는 항체 가변 도메인의 영역을 지칭한다. 일반적으로, 고유한 4개-쇄로 된 항체는 6개의 HVRs; V_H에서 3개 (H1, H2, H3), 그리고 V_L에서 3개 (L1, L2, L3)를 포함한다. HVRs는 일반적으로 초가변 루프 및/또는 "상보성 결정 영역들" (CDRs)의 아미노산 잔기를 포함하는데, 후자는 최대 서열 가변성이며 및/또는 항원 인지에 관련된다. 예시적인 초가변 루프는 아미노산 잔기 26-32 (L1), 50-52 (L2), 91-96 (L3), 26-32 (H1), 53-55 (H2), 및 96-101 (H3)에서 발생된다. (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987).) 예시적인 CDRs (CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3, CDR-H1, CDR-H2, 및 CDR-H3)은 L1의 아미노산 잔기 24-34, L2의 50-56, L3의 89-97, H1의 31-35B, H2의 50-65, 그리고 H3의 95-102에서 발생된다. (Kabat 외, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)). 용어 초가변 영역 (HVRs) 및 상보성 결정영역 (CDRs)은 모두 항원 결합 영역을 형성하는 가변 영역의 일부분을 지칭한다.

“친화력” 또는 “결합 친화력”이란 분자의 단일 결합 부위 (예를 들면, 항체와 이의 결합 짝 (예를 들면, 항체) 사이에 비공유 상호작용의 총 강도를 말한다. 일부 구체예들에서, “결합 친화력”이란 결합 쌍의 구성요소들간 (예를 들면, 항체와 항원)에 1:1 상호작용을 반영한 고유한 결합 친화력을 지칭한다. 분자 X가 이의 짝 Y에 대한 친화력은 해리 상수 (K_d)로 나타낼 수 있다.

“항체-의존성 세포-매개된 세포독성” 또는 “ADCC”는 특정 세포 독성 세포 (가령, NK 세포, 호중구 및 대식세포)에 존재하는 Fc 수용체 (FcR)에 결합된 분비된 Ig는 이들 세포 독성 작동체가 항원-보유 표적 세포에 특이적으로 결합하도록 하고, 결국 세포독소로 이 표적 세포를 죽이게 하는, 세포독성 형태를 지칭한다. ADCC를 중개하는 일차 세포, NK 세포는 오직 FcγRIII 만을 발현시키고, 반면 단핵구는 FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII 를 발현시킨다. 조혈 세포들에서 FcR 발현은 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-92 (1991)의 페이지 464의 표 3에 요약되어 있다. 관심대상 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위해, U.S. 특허 번호. 5,500,362 또는 5,821,337, 또는 U.S. 특허 번호 6,737,056 (Presta)에서 기술된 바와 같은 시험관내 ADCC 검증을 수행할 수 있다. 이러한 분석에 유용한 작동체 세포들은 PBMC 및 NK 세포들을 포함한다. 대안으로, 또는 추가로, 관심 분자의 ADCC 활성은 예를 들면, 동물 모델에서 생체에서 평가될 수 있는데, 가령, Clynes 외. Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 95:652-656 (1998)에서 설명된다. 변경된 Fc 영역 아미노산 서열 그리고 증가된 또는 감소된 ADCC 활성을 갖는 추가 항체들은 가령, U.S. 특허 번호. 7,923,538, 및 U.S. 특허 번호. 7,994,290에서 기술된다.

“강화된 ADCC 활성”을 갖는 항체는 모(parent) 항체와 비교하여 시험관내 또는 생체 내 ADCC를 매개하는데 보다 효과적인 항체를 지칭하는데, 이때 분석에 사용된 이러한 항체 및 모 항체의 양이 본질적으로 동일한 경우, 상기 항체 및 모 항체는 최소한 하나의 구조적 측면에서 상이하다. 일부 구체예들에서, 상기 항체 및 모 항체는 동일한 아미노산 서열을 갖지만, 그러나 상기 항체는 탈퓨코실화된 반면, 모 항체는 퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, ADCC 활성은 시험관내 ADCC 분석 이를 테면 US 공개 번호. 2015-0050273-A1에서 기술된 분석을 이용하여 결정될 것이지만, 가령 동물 모델 등에서 ADCC 활성을 결정하는 다른 분석 또는 방법이 고려된다. 일부 구체예들에서, 강화된 ADCC 활성을 갖는 항체는 또한 Fc 감마 RIIIA에 대하여 강화된 친화력을 갖는다. 일부 구체예들에서, 강화된 ADCC 활성을 갖는 항체는 Fc 감마 RIIIA (V158)에 대하여 강화된 친화력을 갖는다. 일부 구체예들에서, 강화된 ADCC 활성을 갖는 항체는 Fc 감마 RIIIA(F158)에 대하여 강화된 친화력을 갖는다.

“Fc 감마 RIIIA에 대한 강화된 친화력”이란 Fc 감마 RIIIA (일부 경우에서 CD16a로 지칭됨)에 대한 친화력이 모 항체보다 큰 항체를 지칭하며, 이때 상기 항체와 모 항체는 최소한 하나의 구조적 측면에서 상이하다. 일부 구체예들에서, 상기 항체 및 모 항체는 동일한 아미노산 서열을 갖지만, 그러나 상기 항체는 탈퓨코실화된 반면, 모 항체는 퓨코실화된다. Fc 감마 RIIIA에 대한 친화도를 결정하기 위한 임의의 적합한 방법이 사용될 수 있다. 일부 구체예들에서, Fc 감마 RIIIA에 대한 친화력은 U.S. 공개 번호. 2015-0050273-A1에서 기술된 방법에 의해 결정된다. 일부 구체예들에서, Fc 감마 RIIIA에 대한 강화된 친화력을 갖는 항체는 또한 강화된 ADCC 활성을 갖는다. 일부 구체예들에서, Fc 감마 RIIIA에 대한 강화된 친화력을 갖는 항체는 Fc 감마 RIIIA(V158)에 대하여 강화된 친화력을 갖는다 . 일부 구체예들에서, Fc 감마 RIIIA에 대한 강화된 친화력을 갖는 항체는 Fc 감마 RIIIA(F158)에 대하여 강화된 친화력을 갖는다.

본원에서 사용된 “키메라 항체”는 제 1종 (이를 테면 마우스, 렛, 시노몰구스 원숭이, 등)의 최소한 하나의 가변 영역과 제 2종 (이를 테면 인간, 시노몰구스 원숭이, 등)의 최소한 하나의 불변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다. 일부 구체예들에서, 키메라 항체는 최소한 하나의 마우스 가변 영역과 최소한 하나의 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 키메라 항체는 최소한 하나의 시노몰구스 가변 영역과 최소한 하나의 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 키메라 항체는 최소한 하나의 렛의 가변 영역과 최소한 하나의 마우스 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 키메라 항체의 모든 가변 영역은 제 1 종으로부터 유래되고, 키메라 항체의 모든 불변 영역은 제 2 종으로부터 유래된다.

본원에서 사용된 “인간화된(humanized) 항체”란 비-인간 가변 영역의 프레임워크 영역에서 최소한 하나의 아미노산이 인간 가변 영역의 상응하는 아미노산으로 대체된 항체를 지칭한다. 일부 구체예들에서, 인간화된 항체는 최소한 하나의 인간 불변 영역 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 구체예들에서, 인간화된 항체는 Fab, scFv, (Fab')₂, 등이다.

본원에서 사용된 바와 같이, “인간 항체”란 인간에서 만들어진 항체, 인간 면역글로블린 유전자를 포함하는 비-인간 동물, 이를 테면 XenoMouse®에서 만들어진 항체, 시험관내 방법, 이를 테면 파아지 디스플레이를 이용하여 선별된 항체를 지칭하며, 이때 상기 항체 레퍼토리(repertoire)는 인간 면역글로블린 서열에 기초한다.

“탈퓨코실화된” 항체 또는 “퓨코스가 결여된 항체”란 항체의 불변 영역 당화에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 동형 항체를 지칭힌다. 인간 IgG1 또는 IgG3의 당화는 Asn297 (N297)에서 최대 2개 Gal 잔기로 종료되는, 코어 퓨코실화된 바이안테너리(biantennary) 복합 올리고사카라이드로 발생된다. 일부 구체예들에서, 탈퓨코실화된 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된다. 이들 구조는 말단 Gal 잔기의 양에 따라, G0, G1 (α1,6 또는 α1,3) 또는 G2 글리칸 잔기로 표시된다. 가령, Raju, T. S., BioProcess Int. 1: 44-53 (2003) 참고. 항체 Fc의 CHO 유형 당화는 가령, Routier, F. H., Glycoconjugate J. 14: 201-207 (1997)에서 기술된다. 항체 집단 내에서, 이 집단 항체의 <5%가 Asn297에서 퓨 코스를 포함하는 경우, 항체는 탈퓨코실화된 것으로 간주된다.

“작동체 기능(Effector functions)”이란 항체 동형에 의해 가변적인, 항체의 Fc 영역에 기인된 생물학적 활성을 지칭한다. 항체 작동체 기능의 실시예로는 다음을 포함한다: C1q 결합 및 보체 의존성 세포독성 (CDC); Fc 수용체 결합; 항체-의존성 세포-매개된 세포독성 (ADCC); 식작용; 세포 표면 수용체들 (예로써 B 세포 수용체)의 하향 조절; 그리고 B 세포 활성화.

항-FGFR2 항체 관련하며, 용어 리간드의 “결합을 차단” 또는 “결합을 저해”한다는 것은 FGFR2와 FGFR2 리간드 사이, 이를 테면 인간 섬유모세포 성장 인자 1 (FGF1) 또는 FGF2 사이의 상호작용을 저해하는 능력을 지칭한다. 이러한 저해는 가령, FGFR2에서 결합 부위의 중첩, 및/또는 리간드 친화력을 변경시키는 항체에 의해 유도된 FGFR2에서의 형태학적 변화, 또는, 가령, FGFR2 ECD 또는 FGFR2 ECD 융합 분자의 경우, FGFR2 리간드들에 대한 결합의 경쟁으로 인하여, 리간드 결합과의 직접적인 간섭을 포함하여 임의의 메커니즘을 통해 발생할 수 있다.

상기 용어 “단리된 (isolated)”이란 자연에서 통상적으로 발견되는 성분의 적어도 일부로부터 분리된 분자를 의미한다. 예를 들면, 폴리펩티드는 그것이 생산된 세포의 성분 중 적어도 일부로부터 분리될 때 "단리된"것으로 언급된다. 여기에서 폴리펩티드가 발현 후 세포에 의해 분비되는 경우, 폴리펩타이드를 생산하는 세포로부터 폴리펩티드를 함유하는 상등액을 물리적으로 분리하는 것은 폴리펩티드를 "단리하는"것으로 간주된다. 마찬가지로, 폴리뉴클레오티드는 더 큰 폴리뉴클레오티드 (예컨데, DNA 폴리뉴클레오티드의 경우 게놈 DNA 또는 미토콘드리아 DNA와 같은)의 일부가 아닌 경우, 이때 이는 일반적으로 자연에서 발견되거나, RNA 폴리뉴클레오티드의 경우와 같이 생성된 세포의 성분 중 적어도 일부로부터 분리된 경우, "단리된" 것으로 지칭된다. 따라서, 숙주 세포 내부의 벡터에 포함되는 DNA 폴리뉴클레오티드는 폴리뉴클레오티드가 자연상태에서 이 벡터에 발견되지 않는 한, "단리된"것이라고 할 수 있다.

상기 용어 “상승된 수준” 이란 대조군, 가령, 본원에서 기술된 암 또는 다른 상태로 고통받지 않는 개체 또는 개인의 특정 조직과 비교하여, 대상의 동일 조직에서 단백질의 더 높은 수준을 의미한다. 상승된 수준은 단백질의 증가된 발현, 증가된 안정성, 감소된 분해, 분비 증가, 제거율 등과 같은 임의의 메커니즘의 결과일 수 있다.

단백질 또는 세포 유형과 관련하여, 용어 “감소하다” 또는 “감소하다” 또는 "증가하다" 또는 "증가하다"란 용어는 대상체의 특정 조직, 예를 들어 종양에서 단백질 또는 세포 유형의 수준을 최소한 10% 이상 변화시키는 것을 의미한다. 일부 구체예들에서, 물질, 이를 테면 항-FGFR2 항체는 대상의 특정 조직, 이를 테면 종양에서 단백질 또는 세포 유형의 수준을 상기 항체와 접촉하기 전의 수준과 비교하여 최소한 15%, 최소한 20%, 최소한 25%, 최소한 30%, 최소한 35%, 최소한 40%, 최소한 45%, 최소한 50%, 최소한 55%, 최소한 60%, 최소한 65%, 최소한 70%, 최소한 75%, 최소한 80%, 최소한 85%, 또는 최소한 90% 증가 또는 감소시킨다.

용어 “대상” 및 “환자” 는 본 명세서에서 호환되며, 인간을 지칭한다. 일부 구체예들에서, 설치류, 원숭이, 고양이과, 갯과, 소, 돼지, 양, 염소, 포유류 실험실 동물, 포유류 농장 동물, 포유류 스포츠 동물, 그리고 포유류 애완 동물을 포함하나, 이에 국한되지 않은 다른 포유류를 치료하는 방법이 또한 제공된다.

본원에 사용된 용어 "샘플"은, 예를 들어 물리적, 생화학적, 화학적 및/또는 생리학적 특성에 기초하여 특성화, 정량화 및/또는 식별될 세포 및/또는 다른 분자 인터티를 함유하는 대상으로부터 수득 또는 유래된 조성물을 지칭한다. 예시적인 샘플은 조직 샘플이다.

용어 "암"은 제어되지 않은 세포 증식, 억제되지 않은 세포 성장 및 세포자멸사(apoptosis)를 통한 감소된 세포 사멸과 관련된 악성 증식성 장애를 지칭한다. 상기 용어 “위장관 암” 또는 “GI 암”이란 위장관의 암, 이를 테면 위암, 결장 암, 또는 췌장 선암종의 암을 지칭힌다. 일부 구체예들에서, 위장관 암은 “위암” 또는 “GC”로, 본원에서 위식도암도 포함한다.

일부 구체예들에서, 암은 FGFR2 유전자 증폭을 포함하고, 한편 일부 구체예들에서 상기 암은 FGFR2 증폭을 포함하지 않는다. 일부 구체예들에서, 증폭이 일어날 때, FGFR2 증폭은 FGFR2:CEN10 (염색체 10 동원체) 비율이 >3을 포함한다. 일부 구체예들에서, FGFR2 증폭은 FGFR2:CEN10 비율 ≥ 2를 포함한다. 그러나, 다른 구체예들에서, FGFR2 수준은 1 내지 2의 FGFR2 : CEN10 비를 포함하며, 이는 FGFR2가 증폭되지 않았음을 나타낸다. 일부 구체예들에서, 돌연변이 또는 전좌(translocations)는 FGFR2 유전자 증폭을 야기할 수 있다.

FGFR2 유전자 증폭은 예를 들면 형광 제자리(in situ) 혼성화 분석 (FISH)을 이용하여 결정될 수 있다. FGFR2 유전자 증폭은 혈액-기반 분석, 또는 “액체 생검(liquid biopsy)”에 의해 또한 탐지될 수 있다. 혈액-기반 분석의 일부 구체예들에서, FGFR2 유전자 증폭은 순환하는 종양 세포, 또는 “CTCs”으로부터 DNA에서 탐지될 수 있다. CTCs의 검출 및 분자 특성화 방법은 가령, Alix-Panabieres (2013) Clinical Chemistry 59:1 110-118에서 기술된다. 혈액 기반 분석의 일부 구체예들에서, FGFR2 유전자 증폭은 ctDNA에서 탐지된다. 상기 용어 “ctDNA”란 “순환하는 종양 DNA”를 지칭하는데, 세포와 관련되지 않은 혈류에서 종양-유래 단편화된 DNA 이다. ctDNA의 검출 및 분자 특성화 방법, 가령, Han 외 (2017) Genomics, Proteomics & Bioinformatics 15:2 59-72에 설명되어 있고, PCR-기반 방법 및 차세대 시퀀싱 (NGS)이 포함된다.

일부 구체예들에서, 상기 암은 FGFR2-IIIb를 과다발현시킨다. 일부 구체예들에서, 상기 암은 FGFR2-IIIc보다 FGFR2-IIIb를 더 큰 정도로 과다발현시킨다. 일부 구체예들에서, 상기 암은 FGFR2-IIIc 발현의 보통 수준보다 2-배, 3-배, 5-배, 또는 10-배 더 큰 수준의 보통 수준으로 FGFR2-IIIb를 발현시킨다. 일부 구체예들에서, 암은 FGFR2-IIIb를 과다발현시키지만, 그러나 FGFR2 유전자 증폭을 포함하지 않고, 한편 다른 구체예들에서, 상기 암은 FGFR2 유전자 증폭을 포함하고, 또한 FGFR2-IIIb를 과다발현시킨다. FGFR2-IIIb의 발현은 예를 들어, 정상 조직과 비교하여 환자로부터의 종양 샘플의 면역조직화학 (IHC)에 의해 단백질 수준에서 결정될 수 있다. 용어 “FGFR2-IIIb 단백질 과다발현”과 “FGFR2-IIIb 과다발현” 및 이와 유사한 것은 이러한 상승된 수준의 원인에 무관하게 (가령, 이러한 상승된 수준이 해독 증가 및/또는 단백질의 감소된 분해, 다른 메커니즘 또는 메커니즘의 조합의 결과인지), FGFR2-IIIb 단백질 수준의 상승을 의미한다. 일부 구체예들에서, FGFR2-IIIb 과다발현은 예를 들어, 비암성 조직과 비교하여, 역전사효소 폴리머라제 연쇄 반응 (RT-PCR) 분석과 같은 기술을 사용하여 mRNA 수준에서 검출될 수 있다.

FGFR2 또는 FGFR2-IIIb 발현의 수준은 IHC에 의한 종양 샘플에 0-3의 스케일로 IHC 점수를 부여함으로써 결정될 수 있다. 여기서, 반응성이 관찰되지 않거나 또는 종양 세포의 <10%에서만 막 반응성이 있는 경우 "0"의 점수가 주어지고; 종양 세포의 적어도 10%에서 희미하거나 또는 거의 인지할 수 없는 막 반응성이 있거나, 또는 세포가 막의 일부에서만 반응하는 경우 "1+"의 점수가 주어지고; 종양 세포의 적어도 10%에서 약하거나 중간 정도의 완전, 기저 측 또는 측면 막 반응성이 있는 경우 "2+"의 점수가 주어지고; 그리고 종양 세포의 적어도 10%에서 강한 완전한 기저 측 또는 측면 막 반응성이 있는 경우 "3+"의 점수가 주어진다. 일부 구체예들에서, IHC에 의한 종양 세포의 1+, 2+ 또는 3+ 착색은 FGFR2-IIIb 과다발현을 나타낸다. 일부 구체예들에서, IHC에 의한 종양 세포의 2+ 또는 3+ 착색은 FGFR2-IIIb 과다발현을 나타낸다. 일부 구체예들에서, IHC에 의한 종양 세포의 3+ 착색은 FGFR2-IIIb 과다발현을 나타낸다.

“변형된 FOLFOX6” 또는 “mFOLFOX6” 화학요법 체제는 옥살리플라틴 (가령: Eloxatin®), 류코보린 (가령: 류코보린 칼슘 또는 엽산) 및 5-플루오로 우라실 (5-FU)의 조합을 각각 IV 주입 또는 IV 볼루스에 의해 약 2-8 시간에 걸쳐 인간 환자에게 투여되는 요법을 지칭하는데, 이때 5-FU의 추가 주입은 본원에 기재된 다양한 구체예에서 제공되는 바와 같이 약 2 일 기간에 걸쳐 IV 주입에 의해 투여된다.

“치료”란 본원에 사용된 바와 같이, 예를 들어, 대상이 표적이되는 병리학적 상태 또는 장애의 심각성을 감소 시키거나 또는 느리게 진행하는 것 뿐만 아니라, 예를 들어, 대상이 상태 또는 장애의 재발을 억제하는 치료요법적 처리를 지칭한다. 특정 구체예들에서, 상기 용어 “치료”란 환자에서 질환용 치료제의 임의의 투여 또는 적용을 포함하며, 질환의 억제 또는 둔화 또는 질환의 진행을 포함하고; 예를 들어, 퇴행을 일으키거나, 상실, 누락 또는 결함 기능을 회복 또는 회복시킴으로써 질병을 부분적으로 또는 완전히 경감시키고; 비효율적인 프로세스를 자극하는 것; 또는 정체된 질병의 심각성을 감소시키는 것을 포함한다. 상기 용어 “치료”에는 또한 임의의 표현적 특성의 중증도 감소 및 / 또는 그 특성의 발생률, 정도 또는 가능성 감소도 포함한다. 치료가 필요한 환자는 이미 장애가 있는 환자 및 장애의 재발 위험이 있는 환자 또는 장애의 재발을 예방되거나 느려지게 해야 하는 환자를 포함한다.

상기 용어 “유효량” 또는 “치료요법적 유효량”이란 대상에서 질환 또는 장애를 치료하는데 효과적인 약물의 양을 지칭한다. 특정 구체예들에서, 유효량이란 필요한 치료 또는 예방 결과를 달성하는데 필요한 투여량 및 필요한 시간 동안 효과적인 양을 지칭한다. 본 발명의 치료요법적 유효량의 항-FGFR2 항체 및 화학요법 체제는 질환 상태, 개체의 나이, 성별 및 체중, 및 개체에서 원하는 반응을 유도하는 항체 또는 항체들의 능력에 따라 달라질 수 있다. 치료요법적으로 효과적인 양은 치료요법적으로 유익한 효과가 항체 또는 항체들의 임의의 독성 또는 해로운 효과를 능가하는 양을 또한 말한다. 일부 구체예들에서, "유효량"이라는 표현은 암 치료에 효과적인 항체의 양을 의미한다.

화학요법 체제와 같은 하나 또는 그 이상의 추가 치료제와 "조합하여 "~병용(in combination with)" 투여는 임의의 순서로 동시 (공존) 및 연속 (순차) 투여를 포함한다.

“약학적으로 수용가능한 담체”는 대상에게 투여를 위한 "약학 조성물"을 함께 포함하는 치료제와 함께 사용하기 위해 당업계에 통상적인 비-독성의 고체, 반고체 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질, 제형 보조제 또는 담체를 지칭한다 약학적으로 수용가능한 담체는 사용된 투여량 및 농도에서 수령자에게 무독성이며, 제제의 다른 성분과 양립 가능하다. 약학적으로 수용가능한 담체는 사용된 제형에 적합하다. 예를 들면, 치료제가 경구 투여되는 경우, 담체는 겔 캡슐일 수 있다. 치료제가 피하로 투여되는 경우, 담체는 이상적으로 피부에 자극적이지 않으며 주사 부위 반응을 유발하지 않는다.

다음 섹션에서 추가 정의가 제공될 수 있다.

예시적인 항-FGFR2 항체

예시적인 항-FGFR2 항체는 FGFR2-IIIb, 가령, 항-FGFR2-IIIb 항체에 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIb에 결합하는 것보다 더 낮은 친화력으로 FGFR2-IIIc에 결합한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 탐지가능하도록 결합하지 않을 수 있다.

본원의 구체예들에서 사용되는 예시적인 항-FGFR2-IIIb 항체는 2012년 1월 24일자로 등록된 U.S. 특허 번호. 8,101,723 B2에서 기술된 HuGAL-FR21 항체이며, 이 자료는 본원에 참고자료로써 첨부된다. U.S. 특허 번호. 8,101,723 B2의 도 13 및 14에서는 HuGAL-FR21의 가변 영역 및 전장의 성숙된 항체 쇄의 아미노산 서열을 나타내며, 이 특허 자료는 본원에 참고자료로써 첨부된다. 항체 HuGAL-FR21의 상기 중쇄 가변 영역 서열은 U.S. 특허 번호. 8,101,723 B2의 도 13에 밑줄로 표시되며, 이 특허 자료는 본원에 참고자료로써 첨부된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다. 본원의 구체예에서 사용될 수 있는 추가의 항체는 미국 특허 공개 번호. 2015-0050273-A1에 기술된 항체를 포함하며, 이는 특정 탈퓨코실화된 항-FGFR2-IIIb 항체를 기술하고, 본원에 참고자료로써 첨부된다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; (d) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (e) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (f) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3에서 선택된 최소한 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 초가변 영역 (HVRs; 가령, CDRs)을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 중쇄 가변 영역 및 중쇄 불변 영역의 최소한 일부분을 포함하는 최소한 하나의 중쇄, 그리고 경쇄 가변 영역 및 경쇄 불변 영역의 최소한 일부분을 포함하는 최소한 하나의 경쇄을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 2개의 중쇄와 2개의 경쇄를 포함하는데, 이때 각 중쇄는 중쇄 가변 영역과 중쇄 불변 영역의 최소한 일부분을 포함하고, 이때 각 경쇄는 경쇄 가변 영역 및 경쇄 불변 영역의 최소한 일부분을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 다음을 포함하는 6개의 HVRs을 포함한다: (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; (d) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (e) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (f) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 상기 기재된 바와 같은 6 개의 HVRs를 포함하고, FGFR2-IIIb에 결합한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 결합하지 않는다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

한 측면에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; (d) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (e) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (f) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 6개의 HVRs을 포함하는 항-FGFR2-IIIb 항체와 경쟁한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고 (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3으로부터 선택된 최소한 1개, 최소한 2개, 또는 3개 모두의 VH HVR 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 (a) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (b) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (c) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3으로부터 선택된 최소한 1개, 최소한 2개, 또는 3개 모두의 VL HVR 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 (a) (i) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, (ii) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 (iii) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3으로부터 선택된 최소한 1개, 최소한 2개, 또는 3개 모두 VH HVR 서열을 포함하는 VH 도메인, 그리고 (b) (i) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, (ii) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 그리고 (c) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3으로부터 선택된 최소한 1개, 최소한 2개, 또는 3개 모두 VL HVR 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 4의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변 도메인 (VH) 서열을 포함한다. 특정 구체예들에서, 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 VH 서열은 기준 서열에 대하여 치환 (가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 함유하지만, 이 서열을 포함하는 항-FGFR2-IIIb 항체는 여전히 FGFR2-IIIb에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 이러한 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 검출가능하도록 결합하지 않으면서, FGFR2-IIIb에 선택적으로 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 4에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 치환, 삽입, 또는 결손은 HVRs 밖의 영역 (즉, FRs에서)에서 발생한다. 임의선택적으로, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 5의 VH 서열 및 이 서열의 전사-후 변형을 포함한다. 특정 구체예에서, 상기 VH는 (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고 (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3으로부터 선택된 1개, 2개, 또는 3개의 HVRs를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 5의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변 도메인 (VL)을 포함한다. 특정 구체예들에서, 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 VL 서열은 기준 서열에 대하여 치환 (가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 함유하지만, 이 서열을 포함하는 항-FGFR2-IIIb 항체는 여전히 FGFR2-IIIb에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 결합하지 않으면서, FGFR2-IIIb에 선택적으로 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 5에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 치환, 삽입, 또는 결손은 HVRs 밖의 영역 (즉, FRs에서)에서 발생한다. 임의선택적으로, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 4의 VL 서열 및 이 서열의 전사-후 변형을 포함한다. 특정 구체예에서, 상기 VL은 (a) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (b) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (c) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3으로부터 선택된 1개, 2개, 또는 3개의 HVRs를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 4의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변 도메인 (VH) 서열 및 서열 번호: 5의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변 도메인 (VL)을 포함한다. 특정 구체예들에서, 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 VH 서열은 기준 서열과 비교하여 치환(가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 포함하고, 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 VL 서열은 기준 서열과 비교하여 치환(가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 포함하지만, 그러나 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIb에 결합하는 능력을 보유한 그 서열을 포함한다. 특정 구체예들에서, 이러한 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 결합하지 않으면서, FGFR2-IIIb에 선택적으로 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 4에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 5에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 치환, 삽입, 또는 결손은 HVRs 밖의 영역 (즉, FRs에서)에서 발생한다. 임의선택적으로, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 4의 VH 서열 및 서열 번호: 5의 VL 서열을 포함하며, 여기에는 이들 하나 또는 두 서열의 전사-후 변형이 포함된다. 특정 구체예에서, 상기 VH는 (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고 (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3으로 부터 선택된 1, 2, 또는 3개의 HVRs를 포함하고; 그리고 상기 VL은 (a) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (b) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (c) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3으로 부터 선택된 1, 2, 또는 3개의 HVRs를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 상기에서 제공되는 임의의 구체예에서의 VH, 그리고 상기에서 제공되는 임의의 구체예에서의 VL을 포함한다. 한 구체예에서, 상기 항체는 차례로 서열 번호:4 및 서열 번호:5의 VH와 VL 서열, 그리고 이들 서열의 전사-후 변형을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 2의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 중쇄 서열을 포함한다. 특정 구체예들에서, 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 중쇄 서열은 기준 서열에 대하여 치환 (가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 함유하지만, 이 서열을 포함하는 항-FGFR2-IIIb 항체는 여전히 FGFR2-IIIb에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 이러한 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 검출가능하도록 결합하지 않으면서, FGFR2-IIIb에 선택적으로 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 2에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 치환, 삽입, 또는 결손은 HVRs 밖의 영역 (즉, FRs에서)에서 발생한다. 임의선택적으로, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 중쇄는 서열 번호: 2의 VH 서열 및 이 서열의 전사-후 변형을 포함한다. 특정 구체예에서, 상기 중쇄는 (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고 (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3으로부터 선택된 1개, 2개, 또는 3개의 HVRs를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 3의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 경쇄를 포함한다. 특정 구체예들에서, 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 경쇄 서열은 기준 서열에 대하여 치환 (가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 함유하지만, 이 서열을 포함하는 항-FGFR2-IIIb 항체는 여전히 FGFR2-IIIb에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 이러한 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 검출가능하도록 결합하지 않으면서, FGFR2-IIIb에 선택적으로 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 3에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 치환, 삽입, 또는 결손은 HVRs 밖의 영역 (즉, FRs에서)에서 발생한다. 임의선택적으로, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 경쇄는 서열 번호: 3의 VL 서열 및 이 서열의 전사-후 변형을 포함한다. 특정 구체예에서, 상기 경쇄는 (a) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (b) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (c) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3으로부터 선택된 1개, 2개, 또는 3개의 HVRs를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 서열 번호: 2의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 중쇄 서열 및 서열 번호: 3의 아미노산 서열에 대하여 최소한 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 경쇄 서열을 포함한다. 특정 구체예들에서, 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 중쇄 서열은 기준 서열에 대하여 치환 (가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 함유하지만, 이 서열을 포함하는 항-FGFR2-IIIb 항체는 여전히 FGFR2-IIIb에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 이러한 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 검출가능하도록 결합하지 않으면서, FGFR2-IIIb에 선택적으로 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성을 갖는 경쇄 서열은 기준 서열에 대하여 치환 (가령, 보존적 치환), 삽입, 또는 결손을 함유하지만, 이 서열을 포함하는 항-FGFR2-IIIb 항체는 여전히 FGFR2-IIIb에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 이러한 FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 검출가능하도록 결합하지 않으면서, FGFR2-IIIb에 선택적으로 결합하는 능력을 보유한다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 2에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 서열 번호: 3에서 총 1 내지 10개의 아미노산이 치환되거나, 삽입되거나 및/또는 결손된다. 특정 구체예들에서, 치환, 삽입, 또는 결손은 HVRs 밖의 영역 (즉, FRs에서)에서 발생한다. 임의선택적으로, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 중쇄는 서열 번호: 2의 VH 서열, 및 이 서열의 전사-후 변형을 포함하고, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 경쇄는 서열 번호: 3의 VL 서열 및 이 서열의 전사-후 변형을 포함한다. 특정 구체예에서, 상기 중쇄는 (a) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고 (c) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3으로부터 선택된 1, 2, 또는 3개의 HVRs를 포함하고; 그리고 상기 경쇄는 (a) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (b) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고 (c) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3으로부터 선택된 1, 2, 또는 3개의 HVRs를 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

추가 예시적인 항-FGFR2 항체는 U.S. 특허 번호., 8,101,723 B2에서 기술된 GAL-FR22 및 GAL-FR23 항체이며, 이 자료는 본원에 참고자료로써 첨부된다. 예를 들면, GAL-FR22의 경쇄 및 중쇄 가변 영역은 특허 번호., 8,101,723 B2에서 서열 번호: 7 및 8로 제공되며, 한편 Kabat CDRs 및 경쇄 및 중쇄 가변 영역은 이 특허의 도 16에서 제공되고, 이 자료는 본원에 참고자료로써 첨부된다. 하이브리도마를 생산하는 GAL-FR21, GAL-FR22 및 GAL-FR23는 차례로 American Type Culture Collection, PO Box 1549, Manassas VA, USA, 20108에 11월6일, 11월6일자 그리고 2008년 8월12일자로 ATCC 번호 9586, 9587, 및 9408로 기탁되었다. 따라서, 일부 구체예들에서, FGFR2 항체는 이들 3개 하이브리도마 균주들중 하나로부터 수득된 항체의 아미노산 서열을 포함하는 항체다.

GAL-FR22의 중쇄 및 경쇄 가변 영역는 본원에서 서열 번호: 39 및 43으로 제시되며, 한편 Kabat CDRs은 본원에서 서열 번호: 40-42 및 44-46으로 제시된다. 따라서, 일부 구체예들에서 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: (i)서열 번호: 40의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1; (ii) 서열 번호: 41의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2; 그리고 (iii) 서열 번호: 42의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3; 그리고 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다: (iv) 서열 번호: 44의 아미노산 서열을 포함하는 CDR1; (v) 서열 번호: 45의 아미노산 서열을 포함하는 CDR2; 그리고 (vi) 서열 번호: 46의 아미노산 서열을 포함하는 CDR3.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2 항체는 항-FGFR2-IIIb 항체를 포함하며, 이때 중쇄 가변 도메인은 서열 번호:39의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 39의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2 항체는 항-FGFR2-IIIb 항체를 포함하며, 이때 경쇄 가변 도메인은 서열 번호:43의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 43의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 중쇄 가변 도메인은 중쇄 가변 도메인은 서열 번호:39의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 39의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열 번호:43의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95%, 이를 테면 최소한 97%, 최소한 98%, 또는 최소한 99% 동일하거나, 또는 서열 번호: 43의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

본원에서 기술된 방법중 임의의 것에서, 상기 항-FGFR2 항체는 인간화된 항체, 키메라 항체, 또는 인간 항체일 수 있다. 본원에서 기술된 방법 또는 조성물중 임의의 것에서, 상기 항-FGFR2 항체는 Fab, Fv, scFv, Fab', 및 (Fab')2로부터 선택될 수 있다. 본원에서 기술된 방법 또는 조성물중 임의의 것에서, 상기 항-FGFR2 항체는 IgA, IgG, 및 IgD로부터 선택될 수 있다. 본원에서 기술된 방법 또는 조성물중 임의의 것에서, 상기 항-FGFR2 항체는 IgG일 수 있다. 본원에서 기술된 방법중 임의의 것에서, 상기 항체는 IgG1 또는 IgG3일 수 있다.

항체의 예시적인 성질

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 FGFR2-IIIc에 대한 것보다 더 높은 친화력으로 FGFR2-IIIb에 결합하거나, 또는 FGFR2-IIIc에 탐지될 수준으로 결합하지 않거나; FGF2가 인간 FGFR2에 결합하는 것을 억제하거나; 및/또는 FGF7이 인간 FGFR2에 결합하는 것을 억제한다. 항체가 FGFR2에 결합 및 FGFR2와 FGFs 사이의 결합 억제는 US 특허. 번호. 8,101,723에서 기술된 바와 같이, ELISA 분석 또는, 예를 들면, WO 2015/-17600의 실시예 2에서 기술된 칩-기반 분석에 의해 평가될 수 있다. 일부 구체예들에서, 항체는 ADCC 활성을 유도하고, 일부 구체예에서, 예를 들어 WO 2015/-17600에 기재된 바와 같이 향상된 ADCC 활성을 보유한다. ADCC 활성은 예를 들어, WO 2015/-17600의 실시예 3에 기재된 바와 같이 결정될 수있 다. 일부 구체예들에서, 상기 항체는 예를 들어, 국제 출원 번호 PCT/US2016/063332의 실시예 1에 나타낸 바와 같이 마우스 모델에서 인간 종양의 성장을 억제할 수 있다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 국제 출원 번호. PCT/US2016/063332의 실시예 2에서 기술된 바와 같이, 대조군과 비교하였을 때, 마우스 종양 모델의 종양 조직 안에서 하나 또는 그 이상의 PD-L1 양성 세포, NK 세포, CD3+ T 세포, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포, 그리고 대식세포의 수를 증가시킬 수 있다.

탈퓨코실화된 항-FGFR2 항체

일부 구체예들에서, 항-FGFR2 항체, 예를 들면 상기에서 기술된 바와 같은 항-FGFR2-IIIb 항체는 Fc 영역에 (직접적으로 또는 간접적으로) 부착된 퓨코스가 결여된 탄수화물 구조를 갖고(가령, 탈퓨코실화된 항체), 가령, 상기 항체는 탈퓨코실화된다. 일부 구체예들에서, 상기 탈퓨코실화된 항체는 Asn297에서 퓨코스가 결여된 IgG1 또는 IgG3 항체이다.

본원에서, 복수의 이러한 항체가 95% 이상의 탈퓨코실화된 항체를 포함할 때 항체는 탈퓨코실화된 것으로 간주된다. 퓨코스의 양은 Asn 297에 부착된 모든 당구조(가령, 복합체, 하이브리드 및 높은 만노스 구조)의 합과 비교하여 Asn297에서 슈가 쇄 안에 평균 퓨코스 양을 산출함으로써, 결정된다. 항체에서 퓨코스를 검출하는 비제한적인 예시적인 방법은 MALDI-TOF 질량 분석법 (예를 들어, WO 2008/077546 참조), 방출된 형광 라벨된 올리고사카라이드의 HPLC 측정(가령, Schneider 외, “N-Glycan analysis of monoclonal antibodies and other glycoproteins using UHPLC with fluorescence detection”,Agilent Technologies, Inc. (2012); Lines, J. Pharm. Biomed. Analysis, 14: 601-608 (1996); Takahasi, J. Chrom., 720: 217-225 (1996) 참고); 방출된 형광 라벨된 올리고사카라이드의 모세관 전기 영동 측정 (가령, Ma 외, Anal. Chem., 71: 5185-5192 (1999) 참고), 그리고 모노사카라이드 조성을 측정하기 위한 펄스 전류 측정 기능이 있는 HPLC(가령, Hardy, 외, Analytical Biochem., 170: 54-62 (1988) 참고)을 포함한다.

Asn297은 Fc 영역에서 대략 위치 297 (Fc 영역 잔기의 EU 번호매김)에 위치한 아스파라긴 잔기를 지칭하며; 그러나, 주어진 항체 서열에서 Asn297은 항체에서 소수의 서열 변이로 인하여 위치 297의 상류 또는 하류 약 ± 3개의 아미노산, 가령, 위치 294와 300에 또한 위치할 수 있다. 본원에서 기술된 항-FGFR2-IIIb 항체에서, Asn297은 서열 번호: 2에서 서열 QY N ST (서열 번호: 2의 위치 292-296)에서 볼 수 있고, 이는 하기에 나타낸 서열 표에서는 굵게 밑줄 표시된다.

퓨코실화 변이체들은 개선된 ADCC 기능을 보유할 수 있다. 가령, US 특허 공개 번호. US 2003/0157108 (Presta, L.); US 2004/0093621 (Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd) 참고. "탈퓨코실화된(afucosylated)" 또는 "퓨코스-결핍성 (fucose-deficient)" 항체와 관련된 출판물의 예로는 다음을 포함한다: US 2003/0157108; WO 2000/61739; WO 2001/29246; US 2003/0115614; US 2002/0164328; US 2004/0093621; US 2004/0132140; US 2004/0110704; US 2004/0110282; US 2004/0109865; WO 2003/085119; WO 2003/084570; WO 2005/035586; WO 2005/035778; WO2005/053742; WO2002/031140; Okazaki 외 J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004); Yamane-Ohnuki 외 Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004). 탈퓨코실화된 항체를 생산할 수 있는 세포주의 예로는 단백질 퓨코실화 결핍 Lec13 CHO 세포들 (Ripka 외 Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986); US 특허 출원 번호 US 2003/0157108 A1, Presta, L; 그리고 WO 2004/056312 A1, Adams 외, especially at Example 11), 그리고 녹아웃 세포주, 이를 테면 기능성 알파-1,6-퓨코실전이효소 유전자가 결여된 세포 계통, FUT8, 녹아웃 CHO 세포들 (가령, Yamane-Ohnuki 외 Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004); Kanda, Y. 외, Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006); 그리고 WO2003/085107 참고)를 포함한다.

본원의 항-FGFR2 항체는 양분된(bisected) 올리고사카라이드를 또한 보유할 수 있는데, 가령, 항체의 Fc 영역의 바이안테너리 올리고사카라이드는 GlcNAc에 의해 양분된다. 이러한 항체들은 감소된 퓨코실화 및/또는 개선된 ADCC 기능을 보유할 수 있다. 이러한 항체들의 예들은 예로써, WO 2003/011878 (Jean-Mairet 외); US 특허번호. 6,602,684 (Umana 외.); 그리고 US 2005/0123546 (Umana 외.)에서 설명된다. 일부 구체예들에서, 항-FGFR2 항체는 Fc 영역에 부착된 올리고사카라이드에서 최소한 한 개의 갈락토스 잔기를 가진다. 이러한 항체들은 개선된 CDC 기능을 보유할 수 있다. 이러한 항체들은 예로써, WO 1997/30087 (Patel 외.); WO 1998/58964 (Raju, S.); 그리고 WO 1999/22764 (Raju, S.)에서 설명된다.

본 발명의 일부 구체예들에서, 탈퓨코실화된 항-FGFR2 항체는 인간 작동체 세포 존재하에서 퓨코스를 포함하는 동일한 아미노산 서열을 갖는 항체보다 더 효과적으로 ADCC를 매개한다. 일반적으로,일부 구체예들에서, ADCC 활성은 시험관내 ADCC 분석 이를 테면 U.S. 특허 공개 번호. 2015-0050273 A1에서 기술된 분석을 이용하여 결정될 것이지만, 가령 동물 모델 등에서 ADCC 활성을 결정하는 다른 분석 또는 방법이 고려된다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2 항체는 서열 번호: 2 및 3의 중쇄 및 경쇄 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 서열 번호: 2 및 3의 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하는 항체는 탈퓨코실화된다.

예시적인 항체 불변 영역

일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 항-FGFR2는 하나 또는 그 이상의 인간 불변 영역을 포함하다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 중쇄 불변 영역은 IgA, IgG, 그리고 IgD로부터 선택된 동형의 것이다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 경쇄 불변 영역은 κ및 λ로부터 선택된 동형의 것이다.

일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 항체는 인간 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 작동체 기능이 바람직한 경우, 인간 IgG1 중쇄 불변 영역 또는 인간 IgG3 중쇄 불변 영역을 포함하는 항체가 선택된다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 항체는 인간 IgG1 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 항체는 인간 IgG1 불변 영역을 포함하고, 이때 N297는 퓨코실화되지 않는다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 항체는 인간 IgG1 불변 영역 및 인간 κ경쇄를 포함한다.

당업자에게 명시적으로 언급되거나 공지되지 않는 한, 본 명세서 및 청구 범위를 통해, 면역글로블린 중쇄의 잔기 넘버링은 Kabat 외, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)(본 발명의 참고자료에 명시적으로 통합됨)와 같이 EU 색인에 따른다. “Kabat 에서와 같은 EU 색인”이란 상기 인간 IgG1 EU 항체의 잔기 번호매김을 지칭한다.

특정 구체예들에서, 본 발명의 항체는 야생형 IgG 또는 야생형 항체의 Fc 영역과 비교하였을 때, 최소한 하나의 아미노산 치환을 보유하는 변이체 Fc 영역을 포함한다. 특정 구체예들에서, 상기 변이체 Fc 영역은 야생형 항체의 Fc 영역에서 2개 또는 그 이상의 아미노산 치환을 보유한다. 특정 구체예들에서, 상기 변이체 Fc 영역은 야생형 항체의 Fc 영역에서 3개 또는 그 이상의 아미노산 치환을 보유한다. 특정 구체예들에서, 일부 구체예들에서, 상기 변이체 Fc 영역은 본원에서 기술한 최소한 1, 2 또는 3개 또는 그 이상의 Fc 영역 아미노산 치환을 보유한다. 특정 구체예들에서, 일부 구체예들에서, 본 명세서의 상기 변이체 Fc 영역은 고유의 서열 Fc 영역 및/또는 부모 항체의 Fc 영역과 최소한 약 80% 상동성을 보유할 것이다. 특정 구체예들에서, 일부 구체예들에서, 본 명세서의 상기 변이체 Fc 영역은 고유의 서열 Fc 영역 및/또는 부모 항체의 Fc 영역과 최소한 약 90% 상동성을 보유할 것이다. 특정 구체예들에서, 일부 구체예들에서, 본 명세서의 상기 변이체 Fc 영역은 고유의 서열 Fc 영역 및/또는 부모 항체의 Fc 영역과 최소한 약 95% 상동성을 보유할 것이다.

특정 구체예들에서, 본 명세서에서 제공된 항체는 이 항체가 당화되는 정도를 증가 또는 감소시키기 위하여 변경된다. 항체의 당화 부위의 추가 또는 결손은 하나 또는 그 이상의 당화 부위가 만들어지거나 또는 제거되도록 아미노산 서열을 변경시킴으로써 편의적으로 실행될 수 있다.

상기 항체가 Fc 영역을 포함할 때, 이에 부착된 탄수화물이 변경될 수 있다. 포유류 세포들에 의해 만들어지는 고유 항체는 Fc 영역의 CH2 도메인의 Asn297에 N-링키지에 의해 일반적으로 부착된 분기화된, 바이안테너리 올리고사카라이드를 전형적으로 포함한다. 예로써, Wright 외. TIBTECH 15:26-32 (1997) 참고. 상기 올리고사카라이드는 다양한 탄수화물, 예로써, 만노스, N-아세틸 글루코사민 (GlcNAc), 갈락토스, 및 시알산, 뿐만 아니라 상기 바이안테너리 올리고사카라이드 구조의 "줄기(stem)"에 GlcNAc에 부착된 퓨코스를 포함할 수 있다. 일부 구체예들에 있어서, 본 발명의 항체의 올리고사카라이드의 변형은 특정 개선된 성질들을 가진 항체들을 만들기 위하여 만들어질 수 있다.

항체는 또한 아미노-말단 리더 연장(extensions)을 가질 수 있다. 예를 들면, 아미노-말단 리더 서열의 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기는 항체의 임의의 하나 또는 그 이상의 중쇄 또는 경쇄의 아미노-말단에 존재한다. 예시적인 아미노-말단 리더 연장부는 항체의 하나의 경쇄 또는 두 경쇄에 모두 존재하는 3개의 아미노산 잔기, VHS를 포함하거나, 또는 이로 구성된다.

인간 FcRn 고 친화력 결합 폴리펩티드의 생체내 또는 혈청 반감기는 변이체 Fc 영역을 갖는 폴리펩티드를 투여한 예를 들면, 이식유전자를 가진(transgenic) 마우스, 인간, 또는 비-인간 영장류에서 검정될 수 있다. 또한 가령, Petkova 외 International Immunology 18(12):1759-1769 (2006) 참고.

예시적인 키메라 항체

특정 구체예들에서, 본원에서 제공되는 항-FGFR2 항체는 키메라 항체다. 특정 키메라 항체는 가령, U.S. 특허 번호. 4,816,567; 그리고 Morrison 외, (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81: 6851-6855 (1984))에서 기술된다. 한 실시예에서, 키메라 항체는 비-인간 가변적 영역 (예로써, 마우스, 렛(rat), 햄스터, 토끼, 또는 비-인간 영장류, 이를 테면 원숭이로부터 유도된 가변적 영역)과 인간 불변 영역을 포함한다. 추가 실시예에서, 키메라 항체는 “클래스 전환된(class switched)”항체로써, 부모 항체의 것과는 다른 클래스 또는 하위클래스로 변화된 것이다. 키메라 항체는 이의 항원-결합 단편들을 함유한다.

비제한적 예시적인 키메라 항체는 FGFR2에 대항하는 키메라 항체를 포함하며, 이는 본원에서 기술하고 있는 중쇄 HVR1, HVR2, 및 HVR3, 및/또는 경쇄 HVR1, HVR2, 및 HVR3 서열을 함유한다.

일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 키메라 항체는 하나 또는 그 이상의 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 중쇄 불변 영역은 IgA, IgG, 그리고 IgD로부터 선택된 동형의 것이다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 경쇄 불변 영역은 κ및 λ로부터 선택된 동형의 것이다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 키메라 항체는 인간 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 키메라 항체는 인간 IgG4 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 키메라 항체는 인간 IgG4 불변 영역 및 인간 κ경쇄를 포함한다.

상기 한 바와 같이, 작동체 기능이 바람직한 지의 여부는 항체를 위한 특정 치료 방법에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 일부 구체예들에서, 작동체 기능이 바람직한 경우, 인간 IgG1 중쇄 불변 영역 또는 인간 IgG3 중쇄 불변 영역을 포함하는 키메라 항체가 선택된다. 일부 구체예들에서, 작동체 기능이 바람직하지 않는 경우, 인간 IgG4 또는 IgG2 중쇄 불변 영역을 포함하는 키메라 항체가 선택된다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 키메라 항체는 인간 IgG1 불변 영역을 포함하고, 이때 N297는 퓨코실화되지 않는다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 키메라 항체는 인간 IgG1 불변 영역 및 인간 κ경쇄를 포함한다.

예시적인 인간화된 항체

일부 구체예들에서, FGFR2에 결합하는 인간화된 항체가 제시된다. 인간화된 항체는 비-인간 항체와 비교하였을 때, 인간 면역 반응을 제거하거나 또는 줄이는데(이를 테면, 상기 인간 항-마우스 항체 (HAMA) 반응), 이 반응은 항체 치료제에 대한 면역 반응을 초래할 수 있고, 그리고 이 치료제의 효과를 감소시킬 수 있기 때문에, 치료 분자로 유용하다.

특정 구체예들에서, 키메라 항체는 인간화된 항체다. 전형적으로, 비-인간 항체는 인간에 대한 면역원성이 감소되도록 인간화되지만, 부모계 비-인간 항체의 특이성 및 친화력은 유지된다. 일반적으로, 인간화된 항체는 하나 또는 그 이상의 가변적 도메인을 포함하는데, 이때 HVRs 또는 CDRs, (또는 이의 부분들)는 비-인간 항체로부터 유도되고, FRs (또는 이의 부분들)은 인간 항체 서열로부터 유도된다. 인간화된 항체는 임의선택적으로 인간 불변 영역의 최소한 일부분을 또한 포함할 것이다. 일부 구체예들에 있어서, 인간화된 항체에서 일부 FR 잔기는 비-인간 항체 (예로써, HVR 잔기가 유도된 항체)의 대응 잔기로 대체되어, 예로써, 항체 특이성 또는 친화력이 복원 또는 개선된다.

인간화된 항체 및 이를 만드는 방법은 예를 들면, Almagro and Fransson, (2008) Front. Biosci. 13: 1619-1633에서 검토되며, 그리고 예를 들면, Riechmann 외, (1988) Nature 332:323-329; Queen 외, (1989) Proc. Natl Acad. Sci. USA 86: 10029-10033; US Patent Nos. 5, 821,337, 7,527,791, 6,982,321, 그리고 7,087,409; Kashmiri 외, (2005) Methods 36:25-34(SDR (a-CDR) 접합을 기술); Padlan, (1991) Mol. Immunol. 28:489-498 (“재표면처리”를 기술); Dall'Acqua 외, (2005) Methods 36:43-60 (“FR 셔플링”을 기술); 그리고 Osbourn 외, (2005) Methods 36:61-68 및 Klimka 외, (2000) Br. J. Cancer, 83:252-260 (FR 셔플링에 대한 "유도된 선택"을 기술)에서 더 설명되고 있다.

인간화에 이용되는 인간 틀-구조 영역은 다음을 포함하나, 이에 국한되지 않는다: "베스트-핏(best-fit)" 방법을 이용하여 선택된 틀-구조 영역 (가령, Sims 외,. (1993) J. Immunol. 151: 2296); 경쇄 또는 중쇄 가변 영역의 특정 하위집단의 인간 항체의 콘센수스 서열로부터 유도된 틀-구조 영역 (가령, Carter 외,. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285; 그리고 Presta 외,. (1993) J. Immunol., 151:2623); 인간 성숙 (체세포적으로 성숙된) 틀-구조 영역 또는 인간 생식계 틀-구조 영역 (가령, Almagro and Fransson (2008) Front. Biosci. 13:1619-1633); 그리고 FR 라이브러리 스크리닝으로부터 유도된 틀-구조 영역(가령, Baca 외, (1997) J. Biol. Chem. 272: 10678-10684; 그리고 Rosok 외, (1996) J. Biol. Chem. 271: 22611-22618).

일부 구체예들에서, 인간화된 항체는 하나 또는 그 이상의 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 중쇄 불변 영역은 IgA, IgG, 그리고 IgD로부터 선택된 동형의 것이다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 경쇄 불변 영역은 κ및 λ로부터 선택된 동형의 것이다.

일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간화된 항체는 인간 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서,작동체 기능이 바람직한 경우, 상기 항체는 인간 IgG1 중쇄 불변 영역 또는 인간 IgG3 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간화된 항체는 인간 IgG1 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간화된 항체는 인간 IgG1 불변 영역을 포함하고, 이때 N297는 퓨코실화되지 않는다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간화된 항체는 인간 IgG1 불변 영역 및 인간 κ경쇄를 포함한다.

인간 항체

인간 항-FGFR2 항체는 임의의 적합한 방법에 의해 만들어질 수 있다. 비 제한적인 예시적인 방법은 인간 면역 글로불린 유전자 좌를 포함하는 이식유전자를 가진 마우스에서 인간 항체를 제조하는 것을 포함한다. 가령, Jakobovits 외, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 2551-55 (1993); Jakobovits 외, Nature 362: 255-8 (1993); Lonberg 외, Nature 368: 856-9 (1994); 그리고 U.S. 특허 번호. 5,545,807; 6,713,610; 6,673,986; 6,162,963; 5,545,807; 6,300,129; 6,255,458; 5,877,397; 5,874,299; 그리고 5,545,806 참고.

비제한적 예시적인 방법은 파아지 디스플레이 라이브러리를 이용하여 인간 항체를 만드는 것을 또한 포함한다. 가령, Hoogenboom 외, J. Mol. Biol. 227: 381-8 (1992); Marks 외, J. Mol. Biol. 222: 581-97 (1991); 그리고 PCT 공개 번호. WO 99/10494 참고.

일부 구체예들에서, 인간 항체는 하나 또는 그 이상의 인간 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 중쇄 불변 영역은 IgA, IgG, 그리고 IgD로부터 선택된 동형의 것이다. 일부 구체예들에서, 상기 인간 경쇄 불변 영역은 κ및 λ로부터 선택된 동형의 것이다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간 항체는 인간 IgG 불변 영역을 포함한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간 항체는 인간 IgG4 중쇄 불변 영역을 포함한다. 이러한 구체예의 일부에서, 본원에서 기술되는 인간 항체는 인간 IgG4 불변 영역에 S241P 돌연변이를 포함한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술된 인간 항체는 인간 IgG4 불변 영역 및 인간 κ경쇄를 포함한다.

일부 구체예들에서, 작동체 기능이 바람직한 경우, 인간 IgG1 중쇄 불변 영역 또는 인간 IgG3 중쇄 불변 영역을 포함하는 인간 항체가 선택된다. 일부 구체예들에서, 작동체 기능이 바람직하지 않는 경우, 인간 IgG4 또는 IgG2 중쇄 불변 영역을 포함하는 인간 항체가 선택된다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간화된 항체는 인간 IgG1 불변 영역을 포함하고, 이때 N297는 퓨코실화되지 않는다. 일부 구체예들에서, 본원에서 기술되는 인간화된 항체는 인간 IgG1 불변 영역 및 인간 κ 경쇄를 포함한다.

예시적인 항체 접합체

일부 구체예들에서, 항-FGFR2 항체는 라벨 및/또는 세포독성 물질에 접합된다. 본원에서 사용된 바와 같이, 라벨은 항체의 검출을 용이하게 하고 및/또는 항체가 결합하는 분자의 검출을 용이하게 하는 모이어티다. 비제한적 예시적인 라벨은 방사성 동위 원소, 형광기, 효소기, 화학 발광기, 바이오틴, 에피토프 태그, 금속-결합 태그 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 당업자는 의도된 용도에 따라 적합한 라벨을 선택할 수 있다..

본원에서 사용된 바와 같이, 세포독성 물질은 하나 이상의 세포의 증식능을 감소시키는 모이어티다. 예를 들어, 세포가 자가사멸을 겪거나 또는 그렇지 않으면 죽고, 세포가 세포주기를 진행하지 못하거나 분열하지 못하고, 세포가 분화되기 때문에, 세포가 증식할 수 없게 될 때, 세포는 감소된 증식 능력을 보유한다. 비제한적 예시적인 세포독성 물질에는 방사성 동위 원소, 독소 및 화학 치료제가 포함되나, 이에 국한되지는 않는다. 당업자는 의도된 용도에 따라 적합한 세포 독성을 선택할 수 있다.

일부 구체예들에서, 라벨 및/또는 세포독성 물질은 시험관내 화학적 방법을 사용하여 항체에 접합된다. 접합의 비제한적 예시적인 화학적 방법은 당 업계에 공지되어 있고, 그리고 예를 들면, Thermo Scientific Life Science Research Produces (formerly Pierce; Rockford, IL), Prozyme (Hayward, CA), SACRI Antibody Services (Calgary, Canada), AbD Serotec (Raleigh, NC), 등으로부터 시판되는 이용가능한 서비스, 방법 및/또는 시약들을 포함한다. 일일부 구체예들에서, 라벨 및/또는 세포독성 물질이 폴리펩티드인 경우, 상기 라벨 및/또는 세포독성 물질은 항체 쇄에 융합된 라벨 및/또는 세포독성 물질을 포함하는 폴리펩티드를 만들기 위하여, 최소한 하나의 항체 쇄를 갖는 동일한 발현 벡터로부터 발현될 수 있다. 당업자는 목적하는 용도에 따라 항체에 라벨 및/또는 세포독성 물질을 접합시키는 적합한 방법을 선택할 수 있다.

항체를 인코딩하는 핵산 분자

항체의 하나 또는 그 이상의 쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 핵산 분자가 제시된다. 일부 구체예들에서, 핵산 분자는 항체의 중쇄 또는 경쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 일부 구체예들에서, 핵산 분자는 항체의 중쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드와 이의 경쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드를 모두 포함한다. 일부 구체예들에서, 제 1 핵산 분자는 중쇄를 인코드하는 제 1 폴리뉴클레오티드를 포함하고, 제 2 핵산 분자는 경쇄를 인코드하는 제 2 폴리뉴클레오티드를 포함한다.

이러한 구체예의 일부에서, 상기 중쇄와 상기 경쇄는 하나의 핵산 분자, 또는 2개의 별도 핵산 분자로부터 2개의 별도 폴리펩티드로 발현된다. 일부 구체예들에서, 이를 테면 항체가 scFv인 경우, 단일 폴리뉴클레오티드는 중쇄와 경쇄가 함께 연계된 단일 폴리펩티드를 인코드한다.

일부 구체예들에서, 항체의 중쇄 또는 경쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드는 해독되었을 때, 상기 중쇄 또는 경쇄의 N 말단에 위치하는 리더 서열을 인코드하는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 상기에서 논의된 바와 같이, 상기 리더 서열은 고유의 중쇄 또는 경쇄 리더 서열일 수 있거나, 또는 또다른 이종성 리더 서열일 수 있다.

핵산 분자는 당업계에 통상적인 재조합 DNA 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 일부 구체예들에서, 핵산 분자는 선택된 숙주 세포에서의 발현에 적합한 발현 벡터다.

항체 발현 및 생산

벡터

항체 중쇄 및/또는 경쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 제시된다. 항체 중쇄 및/또는 경쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터가 또한 제시된다. 이러한 벡터들로는 DNA 벡터들, 파지 벡터들, 바이러스성 벡터들, 레트로바이러스성 벡터들, 등이 포함되나 이에 한정되지 않는다. 일부 구체예들에서, 벡터는 중쇄를 인코드하는 제 1 폴리뉴클레오티드 서열과 경쇄를 인코드하는 제 2 폴리뉴클레오티드 서열을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 중쇄와 경쇄는 2개의 별도 폴리펩티드로 벡터로부터 발현된다. 일부 구체예들에서, 이를 테면, 상기 항체가 scFv인 경우, 상기 중쇄와 경쇄는 예를 들면 단일 폴리펩티드의 일부분으로 발현된다.

일부 구체예들에서, 제 1 벡터는 중쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드를 포함하고, 제 2 벡터는 경쇄를 인코드하는 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 일부 구체예들에서, 제 1 벡터와 제 2 벡터는 유사한 양(이를 테면, 유사한 몰량 또는 유사한 질량)으로 숙주 세포 안으로 형질감염된다. 일부 구체예들에서, 제 1 벡터와 제 2 벡터의 5:1 내지 1:5의 몰-또는 질량 비가 숙주 세포 안으로 형질감염된다. 일부 구체예들에서, 상기 중쇄를 인코드하는 벡터와 경쇄를 인코드하는 벡터의 1:1 내지 1:5의 질량비가 이용된다. 일부 구체예들에서, 상기 중쇄를 인코드하는 벡터와 경쇄를 인코드하는 벡터의 1:2의 질량비가 이용된다.

일부 구체예들에서, CHO 또는 CHO-유도된 세포 또는 NSO 세포에서 폴리펩티드의 발현에 최적화되는 벡터가 선택된다. 예시적인 이러한 벡터들은 가령, Running Deer 외, Biotechnol. Prog. 20:880-889 (2004)에서 설명된다.

일부 구체예들에서, 인간을 포함한 동물에서 항체 중쇄 및/또는 항체 경쇄의 생체 내 발현을 위해 벡터가 선택된다. 일부 이러한 구체예들에 있어서, 폴리펩티드는 조직-특이적 방식으로 기능을 하는 프로모터의 조절하에서 발현된다. 예를 들면, 간-특이적 프로모터는 가령, PCT 공개 번호. WO 2006/076288에서 기술된다.

숙주 세포

다양한 구체예들에서, 항체 중쇄 및/또는 항체 경쇄는 원핵 세포, 이를 테면 박테리아 세포; 또는 진핵 세포, 이를 테면 곰팡이 세포 (이를 테면 효모), 식물 세포, 곤충 세포, 그리고 포유류 세포에서 발현될 수 있다. 이러한 발현은 예를 들어, 당업계에 공지된 절차에 따라 수행될 수 있다. 폴리펩티드를 발현시키는데 이용될 수 있는 예시적인 진핵 세포는 COS 7 세포를 포함하는 COS 세포; 293-6E 세포를 포함하는 293 세포; CHO-S, DG44 세포를 포함하는 CHO 세포; PER.C6®세포 (Crucell); 그리고 NSO 세포를 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 일부 구체예들에서, 항체 중쇄 및/또는 경쇄는 효모에서 발현될 수 있다. 가령, U.S. 공개 번호. US 2006/0270045 A1 참고. 일부 구체예들에서, 특정 진핵 숙주 세포는 상기 항체 중쇄 및/또는 항체 경쇄에 바람직한 해독-후 변형을 만들 수 있는 능력에 근거하여 선택된다. 예를 들면, 일부 구체예들에서, CHO 세포는 293 세포에서 생산된 동일한 폴리펩티드보다 더 높은 수준의 시알화를 보유하는 폴리펩티드를 만든다.

원하는 숙주 세포 안으로 하나 또는 그 이상의 핵산의 도입은 인산칼슘 형질감염, DEAE-덱스트란 매개 형질감염, 양이온성 지질 매개 형질감염, 전기천공, 형질도입, 감염 등을 포함하는 임의의 방법에 의해 달성될 수 있지만, 이에 국한되지 않는다. 예시적인 비제한적 방법은 가령, Sambrook 외,　Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 3^rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press (2001)에서 설명된다. 임의의 적합한 방법에 따라 핵산은 바람직한 숙주 세포에서 일시적으로 또는 안정적으로 형질감염될 수 있다.

일부 구체예들에서, 하나 또는 그 이상의 폴리펩티드는 임의의 적합한 방법에 따라 폴리펩티드를 인코딩하는 하나 또는 그 이상의 핵산 분자로 조작되거나 또는 형질 감염된 동물에서 생체 내에서 생성될 수 있다.

항체의 정제

항체는 임의의 적합한 방법에 의해 정제될 수 있다. 이러한 방법은 친화성 매트릭스 또는 소수성 상호 작용 크로마토그래피의 사용을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 적합한 친화력 리간드는 항체 불변 영역에 결합하는 항원 및 리간드를 포함한다. 예를 들면, 단백질 A, 단백질 G, 단백질 A/G, 또는 항체 친화력 컬럼을 이용하여 불변 영역에 결합하고, 항체를 정제할 수 있다. 소수성 상호 작용 크로마토그래피, 예를 들어 부틸 또는 페닐 컬럼은 일부 폴리펩티드를 정제하는 데에도 적합할 수 있다. 폴리펩티드를 정제하는 많은 방법이 당업계에 공지되어 있다.

항체의 무-세포(cell-free) 생산

일부 구체예들에서, 항체는 무-세포 시스템에서 생성된다. 비제한적 예시적인 무-세포 시스템은 예를 들면, Sitaraman 외, Methods Mol. Biol. 498: 229-44 (2009); Spirin, Trends Biotechnol. 22: 538-45 (2004); Endo 외, Biotechnol. Adv. 21: 695-713 (2003)에서 기술된다.

변형된 FOLFOX6

화학요법 체제 변형된 FOLFOX6 (mFOLFOX6)은 옥살리플라틴 (가령 Eloxatin®), 류코보린 (가령 류코보린 칼슘 또는 엽산), 및 5-플루오로우라실 (5-FU) 의 조합이 각각 약 총 2-일 기간에 걸쳐 정맥내로 연속 투여되는 방식을 포함한다. 변형된 FOLFOX6은 진행된 위암의 일선 치료로 이용되었다. 220 명의 위암 환자에서 mFOLFOX6와 5-FU/LV/시스플라틴 (FLP)을 비교하는 무작위 단계(phase) 3 시험에서 진행까지의 시간(time-to-progression)이 통계적으로 유의미하게 개선되었지만, 그러나, mFOLFOX6는 호중구감소증, 빈혈 및 말초 신경병증을 비롯한 등급 3/4의 부작용의 유의미한 감소와 관련이 있었다. (Al-Batran 외, J. Clin. Oncol. 26: 1435-42 (2008).) 후속 연구는 진행된 위암에서 mFOLFOX6의 안전성과 효능을 확인했다. (B. Keam, BMC Cancer, 8: 148 (2008).)

일부 구체예들에서, 옥살리플라틴 (가령: Eloxatin®류코보린 (가령: 류코보린 칼슘 또는 엽산) 및 5-플루오로 우라실 (5-FU)의 조합을 각각 IV 주입 또는 IV 볼루스에 의해 약 2-8 시간에 걸쳐 투여되고, 5-FU의 추가 주입은 약 44-48 시간 기간에 걸쳐 IV 주입에 의해 투여된다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6 체제는 다음을 포함하는 방식이다: 1일차에 IV로 50-100 mg/m² 의 옥살리플라틴은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 1일차에 IV로 100-400 mg/m² 의 류코보린은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 100-400 mg/m²의 5-FU가 IV 볼루스 또는 IV 주입에 의해 투여되고, 이들 모두는 1일차에 투여되고, 이어서 IV 주입에 의해 2000-2500 mg/m²의 5-FU가 44-48 시간, 이를 테면 46 시간에 걸쳐 추가 주입된다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6 체제는 다음을 포함하는 방식이다: 1일차에 IV로 75-100 mg/m² 의 옥살리플라틴은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 1일차에 IV로 200-400 mg/m² 의 류코보린은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 200-400 mg/m²의 5-FU가 IV 볼루스 또는 IV 주입에 의해 투여되고, 이들 모두는 1일차에 투여되고, 이어서 IV 주입에 의해 2200-2400 mg/m²의 5-FU가 44-48 시간, 이를 테면 46 시간에 걸쳐 추가 주입된다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6 체제는 다음을 포함하는 방식이다: 1일차에 IV로 75-90 mg/m² 의 옥살리플라틴은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 1일차에 IV로 300-400 mg/m² 의 류코보린은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 300-400 mg/m²의 5-FU가 IV 볼루스 또는 IV 주입에 의해 투여되고, 이들 모두는 1일차에 투여되고, 이어서 IV 주입에 의해 2200-2400 mg/m²의 5-FU가 44-48 시간, 이를 테면 46 시간에 걸쳐 추가 주입된다.

일부 구체예들에서, mFOLFOX6 체제는 다음을 포함하는 방식이다: 1일차에 IV로 85 mg/m² 의 옥살리플라틴은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 1일차에 IV로 400 mg/m² 의 류코보린은 예를 들면, 2 시간에 걸쳐 투여되고, 그 다음 400 mg/m²의 5-FU가 IV 볼루스 또는 IV 주입에 의해 투여되고, 이들 모두는 1일차에 투여되고, 이어서 IV 주입에 의해 2400 mg/m²의 5-FU가 44-48 시간, 이를 테면 46 시간에 걸쳐 추가 주입된다. 예를 들면, 일선(first line) 위암 치료로서 mFOLFOX6의 시작 용량은 85 mg/m²의 옥살리플라틴, 350 mg의 엽산 칼륨 (엽산),400-mg/m² 용량의 플루오로우라실,이어서 46 시간에 걸쳐 2400-mg/m² 용량의 플루오로 우라실을 포함할 수 있다.

일부 구체예들에서, mFOLFOX6 체제는 매 10-21 일 마다 한 번, 이를 테면, 매 10-15 일 마다 한 번, 매 10 일 마다 한 번, 매 11 일 마다 한 번, 매 12 일 마다 한 번, 매 13 일 마다 한 번, 매 14 일 마다 한 번, 매 15 일 마다 한 번, 매 16 일 마다 한 번, 매 17 일 마다 한 번, 매 18 일 마다 한 번, 매 19 일 마다 한 번, 매 20 일 마다 한 번, 또는 매 21 일 마다 한 번 투여된다.

일부 구체예들에서, mFOLFOX6은 "2 주마다" 한 번 투여될 수 있으며, 이는 본 명세서의 일반적인 투여 체제의 맥락에서 사용 된 바와 같이, 매 14 일±3 일 마다 한 번, 또는 매 11-17 일에 마다 한 번을 의미한다.

치료 조성물 및 방법

암을 치료하는 방법

일부 구체예들에서, 암을 치료하는 방법이 제공되는데, 이 방법은 변형된 FOLFOX6 화학요법 체제 (mFOLFOX6)와 병용하여, 항-FGFR2 항체, 이를 테면 본원에서 기술된 바와 같은 항-FGFR2-IIIb 항체의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 일부 구체예들에서, 상기 암은 위장관 (GI) 암, 이를 테면 위암, 결장 암, 및 췌장 선암종이다. 일부 구체예들에서, 상기 암은 절제불가능한, 국소적으로 진행된, 또는 전이성 위암이다.

상기 방법들의 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg, 10-15 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 또는 15 mg/kg의 용량으로 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 7-21 일 마다 한 번, 매 7-15 일 마다 한 번, 매 7-10 일 마다 한 번, 매 10-14 일 마다 한 번, 매 11-17 일 마다 한 번, 매 12-16 일 마다 한 번, 매 13-15 일 마다 한 번, 매 7 일 마다 한 번, 매 8 일 마다 한 번, 매 9 일 마다 한 번, 매 10 일 마다 한 번, 매 11 일 마다 한 번, 매 12 일 마다 한 번, 매 13 일 마다 한 번, 매 14 일 마다 한 번, 매 15 일 마다 한 번, 매 16 일 마다 한 번, 매 17 일 마다 한 번, 매 18 일 마다 한 번, 매 19 일 마다 한 번, 매 20 일 마다 한 번, 또는 매 21 일 마다 한 번 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 2 주 마다 한 번 투여될 수 있는데, 이는 매 14 일 ±3 일 마다 한 번, 또는 매 11-17 일 마다 한 번을 의미한다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg 용량 체제를 매 2 주 마다 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg 용량 체제를 매 13-15 일 마다 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg 용량 체제를 매 14 일 마다 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6, 10, 또는 15 mg/kg 용량 체제를 매 2 주 마다 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6, 10, 또는 15 mg/kg 용량 체제를 매 13-15 일 마다 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6, 10, 또는 15 mg/kg 용량 체제를 매 14 일 마다 투여된다.

일부 구체예들에서, 2 회 용량을 2 주 간격으로 투여하고, 2 회 용량 사이에 한 번에 중간 부스터(booster) 용량을 투여하는 투여 체제가 사용되며, 여기서 중간 부스터 용량은 2 회 용량보다 낮다. 이러한 방식으로 투여 체제는 항체가 순환하는 동안 시간이 지남에 따라 합리적이거나 비교적 일정한 농도로 유지되도록 도울 수 있다. 예를 들면, 투여 후 순환계에서 항체의 농도가 투여 후 약 일주일에 최저점으로 떨어지는 경우, 그 최저점에서 또는 그 근처에 더 낮은 부스터 용량을 제공한 후, 부스터 투여 후 약 1 주일 후에 또 다른 정규 용량(regular dose)이 투여되면, 시간의 경과에 따라 순환계에서 항체의 전체 농도를 일정하게 유지하고, 투여 사이에서 농도가 너무 낮아지는 것을 방지할 수 있다.

따라서, 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg의 용량 체제로 매 2 주 마다 투여 방식으로 투여되고, 중간 부터스 용량[이 용량은 6-15 mg/kg 용량보다 더 낮음]은 2회 6-15 mg/kg 용량의 첫 투여후 1주(7 ± 2 일 또는 5-9 일을 의미함) 그리고 2회 6-15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 1주(가령 5-9일)에 투여된다. 이러한 구체예의 일부에서, 상기 부스터 용량은 3-8 mg/kg이다. 일부 구체예들에서, 상기 부스터 용량은 직전 및 직후 용량의 절반 용량이다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg으로 매 2 주 마다 투여 체제로 투여되고, 중간 부스터 용량 3-8 mg/kg은 2회 6-15 mg/kg 용량의 첫 투여후 6-8 일과 2회 6-15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 6-8 일에 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 10-15 mg/kg으로 매 2 주 마다 투여 체제로 투여되고, 중간 부스터 용량 5-8 mg/kg은 2회 10-15 mg/kg 용량의 첫 투여후 6-8 일과 2회 10-15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 6-8 일에 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg으로 매 2 주 마다 투여 체제로 투여되고, 중간 부스터 용량 7-8 mg/kg은 2회 15 mg/kg 용량의 첫 투여후 6-8 일과 2회 15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 6-8 일에 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg으로 매 13-15일 마다 투여 체제로 투여되고, 중간 부스터 용량 7-8 mg/kg은 2회 15 mg/kg 용량의 첫 투여후 6-8 일과 2회 15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 6-8 일에 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg으로 매 14일 마다 투여 체제로 투여되고, 중간 부스터 용량 7-8 mg/kg은 2회 15 mg/kg 용량의 첫 투여후 6-8 일과 2회 15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 6-8 일에 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg으로 매 14일 마다 투여 체제로 투여되고, 중간 부스터 용량 7-8 mg/kg은 2회 15 mg/kg 용량의 첫 투여후 7 일과 2회 15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 7 일에 투여된다. 상기 구체예들의 일부에서, 상기 부스터 용량은 오직 한 번, 가령, 상기 항체를 이 환자에게 투여하는 제 1 투여와 제 2 투여 사이에 오직 한 번 제공된다. 다른 구체예들에서, 부스터는 오직 2차례, 가령 상기 항체의 제 1 투여와 제 2 투여 사이, 그리고 제 2 투여와 제3 투여 사이에 제공된다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg으로 매 14일 마다 투여 체제으로 투여되고, 중간 부스터 용량 7.5 mg/kg은 2회 15 mg/kg 용량의 첫 투여후 7 일과 2회 15 mg/kg 용량의 제 2 투여 전 7 일에 투여된다. 이러한 구체예의 일부에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 15 mg/kg의 용량이 1일차에 시작 하여 매 14 일마다 한 번 투여되고, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 첫 투여 후 7일째(가령, 8일차)에, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 7.5 mg/kg의 부스터 용량으로 투여된다. 이러한 구체예의 일부에서, 상기 부스터 용량 7.5 mg/kg은 오직 한 번, 가령 항체의 제 1 및 제 2 15 mg/kg 투여 사이에 오직 한 번만 제공된다.

상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6 체제는 동시에, 이를 테면 같은 날 투여되고, 예를 들면 mFOLFOX6 방식 시작 전 IV에 의해 주입되고, 또는 이들은 이를 테면 상이한 날짜에 연속적으로 투여될 수 있다. 일부 구체예들에서, mFOLFOX6은 항-FGFR2-IIIb 항체로 치료를 시작하기 전, 적어도 한 번 또는 적어도 두 번 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항체 및 mFOLFOX6은 모두 매 7-21 일 마다 한 번, 매 7-15 일 마다 한 번, 매 7-10 일 마다 한 번, 매 10-14 일 마다 한 번, 매 11-17 일 마다 한 번, 매 12-16 일 마다 한 번, 매 13-15 일 마다 한 번, 매 7 일 마다 한 번, 매 8 일 마다 한 번, 매 9 일 마다 한 번, 매 10 일 마다 한 번, 매 11 일 마다 한 번, 매 12 일 마다 한 번, 매 13 일 마다 한 번, 매 14 일 마다 한 번, 매 15 일 마다 한 번, 매 16 일 마다 한 번, 매 17 일 마다 한 번, 매 18 일 마다 한 번, 매 19 일 마다 한 번, 매 20 일 마다 한 번, 또는 매 21 일 마다 한 번 투여된다. 일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6은 매 2 주 마다 한 번 투여될 수 있는데, 이는 매 14 일 ±3 일 마다 한 번, 또는 매 11-17 일 마다 한 번을 의미한다.

일부 구체예들에서, 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 이때 상기 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:

(i) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;

(iii) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;

그리고, 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:

(iv) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;

(v) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고

(vi) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3;

그리고 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 10-15 mg/kg의 용량으로 투여되고, 이어서 mFOLFOX6의 투여는 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)를 IV 주입 또는 IV 볼루스에 의한 투여, 이어서 2400 mg/m² 5-FU를 IV 주입에 의해 44-48 시간에 걸쳐 투여하는 것을 포함하고; 그리고 상기 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6은 매 2 주 마다 투여된다,

일부 구체예들에서, 상기 대상은 FGFR2 유전자 증폭을 포함하는 위암을 가지고 있으며고, 한편 일부 구체예들에서 상기 암은 FGFR2 증폭을 포함하지 않는다. 일부 구체예들에서, 이를 테면 FGFR2 유전자 좌 및 염색체 10 동원체에 대한 프로브와 함께, 형광 제자리(in situ) 혼성화 (FISH)를 이용하여 유전자 증폭을 평가한다. 일부 구체예들에서, 증폭이 일어날 때, FGFR2 증폭은 FGFR2:CEN10 (염색체 10 동원체) 비율이 >3을 포함한다. 일부 구체예들에서, FGFR2 증폭은 FGFR2:CEN10 비율 ≥ 2를 포함한다. 그러나, 다른 구체예들에서, FGFR2 수준은 1 내지 2의 FGFR2 : CEN10 비를 포함하며, 이는 FGFR2가 증폭되지 않았음을 나타낸다.

일부 구체예들에서, 상기 대상은 FGFR2를 과다발현시키는 암, 또는 FGFR2-IIIb를 과다발현시키는 위암을 가지고 있다. 일부 구체예들에서, 상기 암은 FGFR2-IIIc보다 FGFR2-IIIb를 더 큰 정도로 과다발현시킨다. 일부 구체예들에서, 상기 암은 유전자 증폭을 포함하지 않지만, 여전히 FGFR2-IIIb는 과다발현되고, 한편 다른 구체예들에서 상기 암은 FGFR2 유전자 증폭 및 FGFR2-IIIb의 과다발현을 모두 포함한다. 일부 구체예들에서, FGFR2 증폭을 포함하는 암은 FGFR2-IIIc 발현의 보통 수준보다 2-배, 3-배, 5-배, 또는 10-배 더 큰 수준의 보통 수준으로 FGFR2-IIIb를 발현시킨다. 일부 구체예들에서, 상기 발현 수준은 GUSB으로 표준화된다. 일부 구체예들에서, 과다발현은 mRNA 과다발현이다. 일부 구체예들에서, 과다발현은 단백질 과다발현이다. 일부 구체예들에서, 점 돌연변이 또는 전좌(translocations)는 FGFR2의 과다발현을 야기할 수 있다.

일부 구체예들에서, FGFR2 또는 FGFR2-IIIb 과다발현은 면역조직화학 (IHC)에 의해 결정된다. 예를 들면, 상기 과다발현은 종양 세포의 최소한 10%, 이를 테면 종양 세포의 최소한 20%, 30%, 40%, 또는 50%에서 IHC 신호가 1+, 2+, 또는 3+인 것으로 결정된다. 예를 들면, 이러한 구체예의 일부에서, 치료될 환자는 종양 세포의 최소한 10% (가령 세포 막)에서 FGFR2-IIIb에 대한 IHC 신호가 2+ 또는 3+을 가질 수 있다. 일부 구체예들에서, 환자는 종양 세포의 최소한 10%에서 3+ 신호를 가질 수 있다. 일부 구체예들에서, 환자는 종양 세포의 최소한 10%에서 최소한 1+ 신호를 가질 수 있다.

일부 구체예들에서, FGFR2 또는 FGFR2-IIIb 과다발현은 “스코어(score)”로 보고될 수 있다. H 스코어를 결정하기 위해, 제 1 막 착색 강도는 IHC와 같은 고정된 필드에서 세포에 대하여 0, 1+, 2+ 또는 3+의 점수를 얻기 위해 결정될 수 있고, H 스코어는 다음 식을 사용하여 계산 될 수 있다: 1x(1+의 IHC 강도로 시각화된 세포의%) + 2x(2+의 IHC 강도로 시각화된 세포의%) + 3x(3+의 IHC 강도로 시각화된 세포의%). 이론적으로, 시야 내의 모든 세포가 3+의 IHC 착색을 갖는 경우 H 점수는 0 내지 300의 범위이고, 300과 동일할 수 있다. 일부 구체예들에서, 치료될 환자는 FGFR2, 이를 테면 FGFR2-IIIb의 경우 출발 H 스코어 > 20, 이를 테면 > 30, > 40, > 50, 또는 > 100, 또는 20-300, 20-100, 20-50, 20-40, 또는 20-30 범위를 갖는다. 일부 구체예들에서, 상기 환자는 > 10 또는 10-20 또는 15-20 범위의 H 스코어를 갖는다. 다른 구체예들에서, 상기 환자는 0-10의 H 스코어를 갖고, 이는 과다발현의 결여를 나타낼 수 있다.

일부 구체예들에서, 상기 암, 가령 위암이 FGFR2-IIIb를 과다발현시키거나 및/또는 FGFR2 유전자 증폭을 휴대하는지가 이미 결정되었다. 다른 구체예들에서, 본원의 방법은 예를 들면, 항-FGFR2-IIIb 항체를 이용한 치료가 합당한지를 결정하기 위하여, 주어진 치료 전, FGFR2-IIIb 발현 및 FGFR2 유전자 증폭 상태중 하나 또는 이들 모두를 평가한다. 일부 구체예들에서, 본원에서 제공되는 방법들은 (a) 종양 세포의 최소한 10%에서 2+ 또는 3+의 IHC 신호로 나타나는 바와 같이 FGFR2-IIIb를 과다발현시키거나 및/또는 (b) ctDNA에서 FGFR2 유전자 증폭을 갖는 것으로 결정된 위암 치료에 이용된다. 일부 구체예들에서, 본원에서 제공되는 방법들은 (a) 종양 세포의 최소한 10%에서 3+의 IHC 신호로 나타나는 바와 같이 FGFR2-IIIb를 과다발현시키거나 및/또는 (b) ctDNA에서 FGFR2 유전자 증폭을 갖는 것으로 결정된 위암 치료에 이용된다.

투여 경로, 담체, 및 추가 약학 조성물

다양한 구체예들에서, 항체는 경구, 동맥내, 비경구, 비강내, 정맥내, 근육내, 심장내, 심실내, 기관내(intratracheal), 볼내(buccal), 직장내, 복강내, 피내(intradermal), 국소, 경피, 및 척추강내(intrathecal)를 포함하나, 이에 제한되지 않는 다양한 경로에 의해 생체내 투여될 수 있거나, 그렇지 않으면 이식 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 항체는 고체, 반-고체, 액체 또는 기체 형태의 제제로 제제화될 수 있으며; 정제, 캡슐, 분말, 과립, 연고, 용액, 좌제, 관장제, 주사제, 흡입제 및 에어로졸을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 항체를 코딩하는 핵산 분자는 문헌에 기재된 바와 같이, 금 미세입자 상에 코팅되고, 입자 투하 장치(particle bombardment device) 또는 "유전자 총(gene gun)"에 의해 피내로 전달될 수 있다(가령, Tang 외, Nature 356:152-154 (1992) 참고). 적절한 제형 및 투여 경로는 의도된 용도에 따라 선택될 수 있다.

다양한 구체예들에서, 항체를 포함하는 조성물은 다양한 약학적으로 허용 가능한 담체와 함께 제형으로 제공된다 (가령, Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy with Facts and Comparisons: Drugfacts Plus, 20^th ed. (2003); Ansel 외, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7^th ed.,　Lippencott Williams and Wilkins (2004); Kibbe 외, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3^rd ed.,　Pharmaceutical Press (2000))참고). 비이클, 어쥬번트 및 희석제를 포함하는 다양한 약학적으로 수용가능한 담체가 이용 가능하다. 또한, pH 조절 및 완충제, 등장성 조절제, 안정제, 습윤제 등과 같은 다양한 약학적으로 수용가능한 보조 물질도 이용 가능하다. 비-제한적 예시적인 담체는 식염수, 완충된 염수, 덱스트로스, 물, 글리세롤, 에탄올 및 이들의 조합 물을 포함한다.

본원에서 기술된 항-FGFR2 항체, 그리고 본원에서 기술된 mFOLFOX 6의 화학요법제, 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU중 하나 또는 그 이상을 포함하는 조성물이 또한 본원에서 제공된다. 일부 구체예들에서, FGFR2 억제제 및 화학요법 제는 각각 예를 들어 이들이 서로 혼합되지 않도록, 개별 용기 또는 단일 용기의 개별 구획 내에 포함된다. 일부 구체예들에서, 상기 조성물은 암 치료에 사용하기 위한 설명서와 같은 사용 설명서를 포함한다.

실시예

하기에서 논의되는 예들은 본 발명의 순전히 예시적인 것으로 의도된 것이며 어떤 식으로든 본 발명을 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다. 이 예들은 실험이 전부 또는 수행된 유일한 실험임을 나타내기 위한 것이 아니다.

실시예 1: 단계 1 용량-찾기, 안전성 실행 단계가 선행되었고, 기존 치료받지 않은 진행된 위암 또는 위식도암 환자에게서 변형된 FOLFOX6과 병용하여 항-FGFR2-IIIb 항체의 단계 3, 무작위화된, 이중-맹검, 위약-조절된 연구

프로토콜 개요

다음 프로토콜은 전 세계 최대 250 개의 서로 다른 연구센터에서 실행될 것이다. 이 연구는 2부로 진행될 것이다: 1 부: 단계 1 용량-찾기, 안전 실행 단계 그리고 2 부: 단계 3 연구.

1부의 주요 목적은 다음과 같다: (a) 진행성 위장관 (GI) 종양 환자에서 고정 용량의 5-플루오로우라실, 류코보린 및 옥살리플라틴 (mFOLFOX6) 주입과 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 권장 복용량 (RD) 결정, 그리고 (b) GI 종양 환자에서 mFOLFOX6와 병용 투여 시, 항-FGFR2-IIIb의 용량 증가의 안전성 프로파일 평가. 1부의 2차 목적은 다음과 같다: (a) GI 종양 환자에서 mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb에 대한 장기 노출의 안전성과 내약성을 평가, (b) GI 종양 환자에서 mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 약동학 (PK) 프로파일을 특성화, 그리고 (c) 항-FGFR2-IIIb의 면역원성 특징화. 1부는 항-FGFR2-IIIb가 mFOLFOX6와 병용 투여될 때, 또한 GI 종양 환자의 혈액 및 모낭 샘플에서 탐색 바이오마커의 평가를 통해, 상기 항체의 약력학 (PD) 프로파일을 특성화할 것이다.

I부의 1차 종점(end-point)은 조사자에 의해 항-FGFR2-IIIb와 관련하여 평가된 2 등급 또는 그 이상의 이상 반응 (adverse events: AEs)의 발생률 및 용량-제한 독성(DLTs)으로 정의된 임상 실험실 비정상일 것이다. 1부의 2차 종점은 (a) AEs 발생률, 임상 실험실 비정상, 각막 및 망막 소견 및 심전도 (ECG) 비정상, (b) 항-FGFR2-IIIb의 PK 매개변수들, 이를 테면, 혈청 농도-시간 곡선 (AUC) 하의 면적, 최대 혈청 농도(C_최대), 최저 혈청 농도 (C_최저), 제거 (CL), 최종 반감기 (t_1/2), 분배 용적 및 축적 비율은 적절하고 적용가능한 경우, 혈청 농도-시간 프로파일로부터 유도될 것이며, 그리고 (c) 면역원성 시험에 의해 결정된 항-FGFR2-IIIb에 대한 면역 반응. 이 부에서 또한 혈액 및 모낭 샘플에서 바이오마커를 탐색할 수도 있을 것이다.

2 부에서, 주요 목적은 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 FGFR2b-선별된 위 또는 위식도암 (이후, 위암 또는 GC로 지칭됨) 환자에서 무-진행 생존 (PFS)의 분석을 통하여 평가하는 것이다. 2차 목적은 (a) FGFR2b-선별된 GC 환자에서 전체 생존 (OS)의 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 평가, (b) FGFR2b-선별된 GC 환자에서 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 안전성과 내약성 평가, (c) FGFR2b-선별된 GC 환자에서 mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 PK 프로파일 특성화, (d) 항-FGFR2-IIIb의 면역원성 특성화, 그리고 (e) 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 치료-전 그리고 치료-동안 종양 생검에서 면역 세포 침윤 및 다른 조사 바이어마커의 분석을 통하여 항-FGFR2-IIIb의 PD 프로파일 특성화이다. 상기 연구는 또한 (a) 진행의 평가에서 블라인드 독립 검토 위원회(BIRC) 평가에 근거한 PFS 분석을 통하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상 이익의 평가 (b) FGFR2b 선택된 GC 환자에서 객관적 반응 속도 (ORR)의 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이익 평가, (c) BIRC 진행 평가에 근거한 ORR 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이익 평가 (d) FGFR2b-선별된 GC 환자에서 일년 OS 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이익 평가, (e) FGFR2b-선별된 GC 환자에서 반응 기간(DOR) 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이익 평가, (f) 임상 결과와 FGFR2 상태 (종양 조직 및/또는 혈액-기반 생검 [ctDNA] 분석에서)와의 연관성 조사, (g) 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석을 이용하여, 종양 조직에서 FGFR2 상태와 FGFR2 증폭 간의 일치성(concordance)을 조사, (h) FGFR2b-선별된 GC 환자의 혈액 샘플에서 탐색가능한 바이오마커의 평가를 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 PD 프로파일의 특성화, 그리고 (i) 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공된 항-FGFR2-IIIb를 제공받은 FGFR2b-선별된 GC 환자에서 환자가 보고한 결과(PROs)와 삶의 질(QOL) 평가를 또한 할 수 있다.

2부의 종점에는 무작위 시점에서 조사자 평가 (RECIST v.1.1에 따라) 또는 임의 원인에 따른 사망 (둘 중 먼저 발생하는 것)을 기반으로 하는 방사선학적 진행성 질환의 날짜까지로 정의된 1 차 종점 PFS 및 다양한 2 차 종점이 포함된다. 2차 종점은 다음을 포함한다: (a) 무작위 날짜부터 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간으로 정의된 OS, (b) RECIST v1.1에 따른 종양 병변의 조사자 평가에 기초한 객관적인 반응, (c) AEs 발생률, 임상 실험실 비정상, 각막 및 망막 소견 및 ECG 비정상, (d) mFOLFOX6와 병용 투여될 때, RD에서 항-FGFR2-IIIb의 PK 매개변수들, 이를 테면 AUC, C_최대, C_최저, CL, t_1/2, 분배 용적 및 축적 비율은 적절하고 적용가능한 경우, 혈청 농도-시간 프로파일로부터 유도될 것이며, (e) 면역원성 시험에 의해 결정된 면역 반응, 그리고 (f) 전-처리 및 치료 중 종양 생검 샘플에서 면역 세포 침윤 속도 및 다른 탐색적 바이오마커의 수준. 상기 연구는 또한 다음을 평가할 수 있다: (a) 항-FGFR2-IIIb의 최소한 1회 용량을 제공받고, 1년 후까지 생존한 환자의 비율로 정의된 1년 OS, (b) RECIST　v1.1에 따라 조사자에 의해 측정된 반응 환자에 제한된 DOR 및 진행 또는 사망(어느 것이든 먼저 발생된 것)에 대한 RECIST　v1.1에 따라 조사자에 의해 측정된 제 1 반응까지의 시간, (c) 종양 조직 및/또는 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석에서 확인된 FGFR2 상태와 RECIST　v1.1에 따른 객관적 반응간의 상관관계, (d) 종양 조직에서 확인된 FGFR2 상태와 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석에서 FGFR2 증폭 사이의 상관관계, (e) 탐색가능한 혈액-기반 바이오마커, 그리고 (f) EQ-5D-5L 및 EORTC QLQ-C30에 의해 측정된 QoL에서 기선으로부터의 변화.

이 연구 설계는 다음과 같다. 이 연구는 mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 안전성, 내약성, PK, PD 및 효능을 평가하기 위한 2-부, 다중심 연구(2-part, multicenter study)다. 이 연구에는 FGFR2b+ 위암 환자에서 공개-라벨, 1 부 용량 증가 및 무작위화된, 이중 맹검, 위약 대조, 2 부 연구가 포함된다. 1부는 진행된 GI 종양을 갖는 적격 환자에서 mFOLFOX6과 병용 투여될 항-FGFR2-IIIb의 RD를 결정하기 위해, mFOLFOX6과 조합된 항-FGFR2-IIIb의 최소 2 개의 계획된 투여량의 코호트로 구성된다. 2부는 FGFR2b-선별된 진행된 GC 환자에서 위약 및 mFOLFOX6과 비교하여, mFOLFOX6과 병용된 경우 RD에서 항-FGFR2-IIIb의 안전성 및 효능을 평가(FGFR2b 발현의 예상 면역조직화학 (IHC) 분석 및/또는 FGFR2 증폭을 나타내는 혈액-기반 분석에 의해 결정됨)하기 위한 2 개의 확장 부문(arm) (1:1 무작위화)으로 구성된다. 환자는 연구의 1부 또는 2부에 등록되지만, 둘 모두에 등록되지는 않는다. 최대 14 일 (2 주)의 초기 선별 기간 후에, 환자는 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6 (항-FGFR2-IIIb의 존재 또는 부재)로 치료될 것이다. 환자는 1부에 등록하기 전, mFOLFOX6 화학요법을 시작하거나 수령했을 수 있지만, 이 환자의 자격 요건은 최소 2 회의 추가 주기의 mFOLFOX6 화학요법을 받을 수 있는 후보이어야 한다(1 부 환자가 받았던 FOLFOX 주기 수에는 상한이 없으며, 또는 이들 환자는 어떠한 것도 받지 않았을 수도 있다). 1부에 등록된 각 환자는 안전성 평가 및 용량-제한 독성 발생 (DLT 기간)에 대해 28 일 동안 관찰된다. DLT 기간이 완료된 후, 환자는 조사자의 재량에 따라 mFOLFOX6와 함께 항-FGFR2-IIIb를 계속 받을 수 있다. 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 14-일 주기로 매 2 주마다 추가 치료를 시행할 수 있다. 항-FGFR2-IIIb 용량의 최대 횟수 제한은 없다. DLT 기간 이후의 mFOLFOX6 체제의 지속적인 투여는 지역 치료 표준에 따를 것이다. 2부에서, IHC (2+ 또는 3+의 점수) 또는 혈액에 의해 FGFR2b에 대해 종양이 양성이고, 진행성 위암에 대한 표준 1 차 요법으로서 2주기의 mFOLFOX6 화학요법을 완료하였고, 사전 동의서에 서명한 환자는 1 부에서 얻은 데이터의 평가 후, 선택된 RD에서 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb, 또는 위약 및 mFOLFOX6으로 치료되도록 1:1로 무작위화 될 것이다. 등록된 환자는 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 14-일 주기로 2 주마다 치료를 지속할 수 있다. 모든 치료 결정은 지역 평가를 사용하여, 조사자가 결정할 것이다. 진행 또는 동의서의 철회 이외의 이유로 연구 치료를 중단한 후, 환자가 추가 항암 요법을 시작할 때까지 종양 평가가 계속된다. 또한, 1 부 및 2부 모두의 환자는 최종 환자가 이 연구에 등록된 후 최대 24 개월까지, 또는 사망할 때까지, 추적-관찰 상실, 동의의 철회 또는 스폰서에 의한 연구 종료까지(어느 것이든 먼저 발생하는 것), EOT 방문 후 대략 3 개월 ± 28 일마다 병원 방문 또는 전화를 통하여 생존에 대하여 장기 추적- 관찰을 받을 것이다.

1부는 mFOLFOX6과 병용 제공된 항-FGFR2-IIIb의 공개-라벨 용량-증가 연구다. 1부에 자격이 있는 환자는 절제불가능한, 국소적으로 진행된 또는 전이성 질환을 가진 비선택된 GI 암 (FGFR2b 과다발현 종양을 가지거나, 또는 없는)을 갖고, 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6 화학요법 모두를 수용하는 후보이다. FGFR2 상태는 IHC 및 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석에 의해 소급적으로 결정될 것이다. 1부에 등록된 환자는 다음과 같이, 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6의 고정-용량 백본 화학요법 체제와 병용하여 항-FGFR2-IIIb의 용량을 증가시키면서 치료 될 것이다:

항-FGFR2-IIIb 투여: 항-FGFR2-IIIb IV는 mFOLFOX6 화학요법의 투여 전, 각 주기의 1일차에 매 2주 마다 투여된다. 항-FGFR2-IIIb는 인라인(in-line) 필터를 갖는 말초 정맥 또는 중심 정맥 카테터를 통해 대략 30 분 IV 주입으로 투여될 것이다.

백본(Backbone) 화학요법 체제: mFOLFOX6 화학요법의 투여는 각 치료 주기의 1 일차에 그리고 항-FGFR2-IIIb의 투여 후 시작될 것이다(30-분 휴식 후). mFOLFOX6 체제는 다음과 같이 매 2 주 마다 투여된다: 옥살리플라틴 85 mg/m²은 120 분에 걸쳐 IV 주입, 류코보린 400 mg/m²은 120 분에 걸쳐 IV 주입, 이어서 플루오로우라실 (5 FU) 400 mg/m²은 IV 볼루스, 이어서 5-FU 2400 mg/m²를 46 시간에 걸쳐 연속 IV 주입. 옥살리플라틴의 투여는 사전-수화(pre-hydration)를 필요로 하지 않는다. 덱사메타손과 함께, 또는 없이, 세로토닌 길항제와 같은 항-구토제를 이용한 예비 의약은 임상의가 표준 치료법에 따라 조사자의 재량에 따라 사용될 수 있다. 용량 수준 (1부) 1부에서, 항-FGFR2-IIIb의 2 회 용량 코호트는 표준 3 + 3 용량 증가 설계(dose escalation design)에서 예상되며, 최소 3 명의 환자가 각 코호트에 등록된다. 예상되는 용량 수준은 다음과 같다: 용량 수준 1: 10 mg/kg 항-FGFR2-IIIb, 용량 수준 2: 15 mg/kg 항-FGFR2-IIIb 용량 수준 -1: 6 mg/kg 항-FGFR2-IIIb (용량 수준 1에서 용량 감소가 필요한 경우에만).

모든 용량 증가 결정은 DLTs, 전반적인 안전성 및 내약성 평가를 기반으로 하며, 각 코호트에 등록한 마지막 환자가 28-일 DLT 기간을 완료 한 후에 결정된다(2 회 치료주기 완료). 용량 증가 결정은 스폰서 및 조사자로 구성된 코호트 검토 위원회 (CRC)에 의해 비준될 것이다. 안전성 및 PK 매개변수의 검토는 최적의 표적 노출에 도달하기 위해 대안적 용량 수준의 코호트 추가 결정에 영향을 줄 수 있다. 용량 수준-1은 복용량 수준 1에서 ≥ 2 DLTs가 관찰되는 경우에만 등록된다. DLTs는 하기와 같이 정의된다.

용량 증가 결정은 다음 알고리즘을 기반으로 한다: 코호트에 있는 3 명의 환자 중 누구도 DLTs를 갖지 않으면, 다음 코호트가 열릴 수 있고; 코호트의 1/3 환자가 DLTs를 보이는 경우, 동일한 동질 집단에 3 명의 환자를 더 등록하고; 코호트의 2/3 또는 3/3 환자가 DLTs를 보이는 경우, 등록을 중지하고 기존 코호트에 3명 밖에 없었던 코호트 아래(가령, 더 낮은 용량 수준에서) 3 명의 환자를 추가로 넣고, 코호트의 1/6 환자가 DLTs를 보이는 경우, 다음 코호트를 개방하고, 그리고 2/6 또는 그 이상이 DLTs를 보이면, 등록을 중단하고, 그 코호트에 오직 3 명의 환자만 등록된 경우 아래 용량 수준에서 3 명의 환자를 더 넣는다.

2부의 경우 항-FGFR2-IIIb의 RD는 전반적인 안전성, 내약성 및 PK의 평가에 기초하여 CRC에 의해 식별될 것이다. 따라서, RD는 식별된 최대 허용 용량 (MTD)과 동일하거나 동일하지 않을 수 있다. 예를 들면, MTD에 도달하지 못했거나, 또는 1부의 후속 치료주기에서 얻은 데이터가 안전성 프로파일에 대한 추가 통찰력을 제공하는 경우, 그 다음 RD는 비록 MTD보다는 더 높지는 않지만, 용량이 다를 수 있다. MTD는 DLT 기간 동안 환자의 <33%가 DLT를 경험하는 최대 용량으로 정의된다. 주어진 용량 수준에서 3 명의 환자 중 1 명에서 DLT가 관찰되면, 3 명의 추가 환자가 동일한 용량 수준으로 등록될 것이다. 용량 수준으로 치료된 3-6 명의 환자 중 2 명은 DLT (용량은 15mg/kg을 초과하지 않음)를 경험할 때까지, 용량 증가가 계속 될 수 있다. 그다음 더 낮은 용량은 MTD로 간주될 것이다. 일단 MTD 또는 RD에 도달하면, 최대 6 명의 환자가 추가되고, 이 용량 수준에서 안전성과 PK를 추가로 탐색될 것이다. 따라서 1부의 총 등록 수는 대략 9-12 명 환자일 것이다. DLT 기간 동안 mFOLFOX6와 병용하여 2 회 용량의 항-FGFR2-IIIb를 투여받지 않은 환자는 평가할 수 없는 것으로 간주되어 환자는 교체될 것이다. 교체된 환자는 스폰서와 상의한 후 계속 연구할 수 있다. 28-일 DLT 기간 동안, 2 회 이하의 항-FGFR2-IIIb 또는 2주기의 mFOLFOX6을 투여해야 한다. DLT 기간 종료시, 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 환자는 mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb를 매 14-일 주기로 2 주마다 치료를 지속할 수 있다. 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6에 대한 용량 변경 기준은 하기에 기재되어 있다. 질병 진행 전의 어떤 이유로든 mFOLFOX6 화학요법 투여 중단 (가령, 지역적 관행에 따라 mFOLFOX6 화학요법의 누적 독성 또는 완료)된 경우에,조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 항-FGFR2-IIIb는 단독요법으로 메 2 주마다 지속적으로 투여될 수 있다. 화학요법 관련-독성으로 인해, mFOLFOX6의 주기가 14 일 이상 지연되는 경우, 항-FGFR2-IIIb 투여는 지연되지 않아야 하며, 매 2 주마다 계속 투여될 수 있다. 투여지연 후, mFOLFOX6의 새로운 주기의 개시는 가능한 경우 항-FGFR2-IIIb 주입의 투여와 동기화되어야 한다(그러나, 연구 요건은 아님).

질병 진행 전, 어떤 이유(가령, 누적 독성)로든 항-FGFR2-IIIb 중단되는 경우, mFOLFOX6 화학요법은 지역적 관행에 따라, 또는 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 지속적으로 투여될 수 있다.

환자는 FGFR2b-선별된 위암 환자 집단에서 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용된 항-FGFR2-IIIb의 안전성 및 효능을 특성화하기 위한 목적으로 2부에 환자들이 등록될 것이다. 2부에 등록하는 것은 항-FGFR2-IIIb에 대하여 1부의 CRC에 의해 확인된 RD에서만 한 번 시작되며, 이는 15mg/kg을 초과하지 않을 것이다. 2부는 이중-맹검(double-blind)이며, 대략적으로 최대 360명의 FGFR2b-선별된 위암 환자는 1:1로 무작위 배정되어, 다음 두 치료 부문(arm) 중 하나를 받게 된다. 부문 1: RD의 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6, 매 2 주 마다 투여, 또는 부문 2: 위약 및 mFOLFOX6 매 2 주 마다 투여. 등록을 위한 2 부 개설은 스폰서의 재량에 따른다. 절제불가능한, 국소적으로 진행된, 또는 전이성 질환을 가지고, 일선 mFOLFOX6 화학요법을 받을 수 있으며, 2주기의 mFOLFOX6를 제공받은 환자는 연구의 2부에 등록될 것이다. 검증된 IHC 또는 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석에 의해 각각 결정된 바와 같이, 환자는 FGFR2b 과다발현 및/또는 FGFR2 증폭에 기초하여, 등록을 위해 선택될 것이다. IHC를 사용한 FGFR2b 과다발현, 또는 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석에서 증폭을 나타내지 않는 환자는 등록 자격이 없지만; 분석법 중 하나 또는 둘 모두에 기초한 양성 (가령, 혈액-기반 생검 [ctDNA] 분석에서는 양성이지만, 그러나, IHC에서는 음성)은 자격 요건을 충족시키기에 충분하다. 등록된 환자는 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 14-일 주기로 2 주마다 치료를 지속할 수 있다. 모든 치료 결정은 지역을 사용하여, 조사자가 결정할 것이다.

포함 기준은 다음과 같다. 연구의 1부 또는 2부에 등록되는 환자의 연령은 ≥ 18세이며; 절제불가능한, 국소적으로 진행된, 또는 전이성 질환을 가지고 있어야 하며; Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 실행 상태는 0 내지 1이어야 하고; FGFR2 상태의 결정을 위하여 종양 조직을 제공해야 하며; 사전 동의서를 제공해야 하고; 그리고 아래에 설명된 다른 모든 자격 기준을 충족해야만 한다. 연구의 1부 (용량-증가 안전성 실행)에 등록되는 환자는 다음의 기준을 또한 충족해야만 한다: mFOLFOX6가 적절한 치료법으로 간주되는 조직학적 또는 세포 학적으로 확인된 위장 악성 종양 (가령, 위암, 결장 암종, 췌장 선암종). 전이성 질환에 대한 2 가지 이하의 기존 화학요법 체제 (5-FU 및/또는 옥살리플라틴을 사용한 기존 보조 화학요법을 포함하지 않음). 환자는 최소한 2 주기의 mFOLFOX6 화학요법에 후보이어야 한다.

연구의 2부 (용량-확장)에 등록되는 환자는 다음의 기준을 또한 충족해야만 한다: 조직학적으로 기록된 위암 또는 위식도 접점 선암종. IHC에 의해 결정된 FGFR2b 과다발현 및/또는 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석에 의해 결정된 FGFR2 증폭. 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대한 기존 화학요법은 없음 (mFOLFOX6의 경우 포함 기준 #20에 기재된 것은 제외). 기존의 백금-기반 화학요법은 없음(mFOLFOX6의 경우 포함 기준 #20에 기재된 것은 제외). 만일 기존 보조요법 또는 신-보조요법 (화학요법 및/또는 화학 방사선 요법)을 받은 경우, 보조요법 종료와 등록 사이에 6 개월 이상 경과해야 한다.

환자는 mFOLFOX6 화학요법의 후보이어야 하며, 연구 등록 전에 2주기의 mFOLFOX6 화학요법을 받아야 한다(그러나 2 주기를 초과해서는 안된다). 치료받지 않거나 증상이있는 중추 신경계 (CNS) 전이; 심장 기능 장애 또는 임상적으로 유의한 심장 질환; 상승된 QTcF; 말초 감각 신경병증이 부작용에 대한 공통 용어 기준 (CTCAE) 등급 ≥ 2인 경우; 양성 HER2 상태; 연구 참여와 관련된 위험을 증가시킬 수 있는 다른 상태가 있는 경우, 1부 또는 2부에 등록된 환자는 제외될 것이다. 이러한 포함 또는 제외 기준에 대한 면제는 허용되지 않는다.

1부에서, 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 용인할 수 없는 독성, 또는 프로토콜-명시된 연구 철회의 다른 원인이 있을 때 까지, 항-FGFR2-IIIb는 멸균된 바이알에 공급되어 매 14 일마다 (+/- 3 일) 대략적으로 30 분에 걸쳐 연구 현장에서 투여될 수 있도록 정맥용 주머니에 희석될 것이다.

2부에서, 맹검 IP (항-FGFR2-IIIb/위약)은 1부에서 개방-라벨 항-FGFR2-IIIb에 대한 유사한 방식으로 공급 및 투여될 것이다.

옥살리플라틴, 5-FU, 및 류코보린은 통상적인 기관 관행에 따라 각 사이트에 제공될 것이다. 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 용인할 수 없는 독성, 또는 프로토콜-명시된 연구 철회의 다른 원인이 있을 때 까지, mFOLFOX6 체제는 매 14 일 (+/- 3 일)마다 투여될 것이다. 준비 및 완전한 처방 정보는 최신 지역 패키지 삽입물을 참조한다.

혈액 샘플을 수거하여 항-FGFR2-IIIb의 PK 매개변수들, 이를 테면 AUC, C_최대, C_최저, CL, t_1/2, 분배 용적, 및 축적 비율을 평가할 것이다. 1부에서, 모든 등록된 환자에서 항-FGFR2-IIIb의 혈청 수준을 측정하기 위해 하기에 요약된 시점에 혈액 샘플을 수집할 것이다. 2부에서, 아래에 요약된 시점에 2부로 무작위 배정된 첫 60 명의 환자에 대해 혈액 샘플을 수집할 것이다. 1부 및 2부의 경우, 항-FGFR2-IIIb 항체에 대한 혈액 샘플은 명시된 시점에 수집될 것이다.

종양 반응 평가는 RECIST v.1.1 지침에 따라 조사자 및 맹검 중앙 방사선과 검토에 의해 수행될 것이다. BIRC에 의한 독립적인 검토에 대한 자세한 내용은 Independent Imaging Review Charter에 나와 있다.

효능 측정에는 임상 검사 및 적절한 영상화 기술, 바람직하게 RECIST 지침에 따라 적절한 슬라이스 두께로 흉부, 복부 및 골반의 컴퓨터 단층 촬영 (CT) 스캔으로 구성된 종양 평가가 포함되고; 필요한 경우, 다른 평가 (자기 공명 영상 (MRI), X 선, 양전자 방출 단층 촬영 (PET) 및 초음파)가 수행될 수 있다. 종양 평가는 스크리닝시 (1 부 및 2 부에서 주기 1의 1일차 2주 이내) 실행될 수 있고, 그 다음 첫 투여일로부터 매 6 주마다, 24 주 동안, 그 이후 대략 매 12 주마다 수행될 것이다. 최초 완전 반응 (CR) 또는 부분 반응 (PR)이 나타나면, 4-6 주 후에 확인 스캔을 수행해야 한다.

안전성 측정에는 AEs, 혈액학, 임상 화학, 소변 검사, 바이탈 신호, 체중, 병용 약물/절차, ECOG 수행 상태, 표적화된 신체검사, ECGs 및 안과 검사가 포함된다. 독립적인 데이터 모니터링 위원회 (DMC)는 2부의 전체 처리 단계에서 정기적으로 안전 연구 데이터 (AE 및 SAEs)를 평가한다.

1부에서: FGFR2 상태의 평가를 위해 제출된 종양 조직은 IHC를 사용하여 FGFR2b 과다발현에 대해 소급적으로 분석될 것이다. 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석을 위한 샘플은 연구 약물의 첫 번째 용량 (주기 1, 1 일차) 전에 수집되고, FGFR2 증폭에 대해 소급하여 분석된다. 탐색용 바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플은 주기 1 및 2의 1일차 투여전, 주기 1, 1일차와 주기 2, 1일차에 투여 (3일차) 후 48시간에, 28-일 DLT 기간을 넘겨 치료를 지속한 환자의 경우 주기 3, 1일차 투여전, 그리고 EOT 방문시에 수집될 것이다. 모낭 샘플은 주기 1, 1 일차, 주기 3, 1 일차, 그리고 주기 5, 1 일차 투여 전, 샘플링이 가능한 모든 환자로부터 EOT 방문시에 수집될 것이다.

2부에서: FGFR2 상태의 평가를 위해, 종양 조직을 제출하고, 그리고 IHC를 사용하여 FGFR2b 과다발현에 대해 소급적으로 분석할 것이다. ctDNA 평가를 위한 혈액 샘플은 FGFR2 증폭에 대해 소급적적으로 분석될 것이다. 또한, 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석은 24 주 동안 첫 번째 투여로부터 매 6 주마다, 그 후 대략 매 12 주마다 종방향으로(longitudinally) 수집되고, FGFR2 증폭에 대해 소급적으로(retrospectively) 분석될 것이다. EOT 방문시 2부 모든 환자에 대한 샘플도 수집된다. EOT 방문시 2부 모든 환자에 대한 샘플도 수집된다. 탐색용 바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플은 주기 1, 1일차 및 주기 2, 1일차에 용량 (3일차) 후, 주기 3, 1일차 전, 48시간에서 주기 1 및 2의 1일차에 투여 전, EOT 방문에서 수집될 것이다.

가능한 한, 의무적으로 새로운 종양 생검은 2부로 무작위 배정된 최대 30 명의 환자에 대해 주기 3, 1 일차 전, 7 일 이내에 (및 투여 전, 적어도 24 시간) 치료전, 그리고 치료-시 수행될 것이다. 각 시점에서의 실행가능성(feasibility)은 조사자가 평가하며, 환자 안전을 고려해야 한다. 만일 조사자가 생검이 가능하지 않다고 평가하는 경우, 이 결정은 원본 문서에 기록되어야 한다. 등록 전 12 주 이내에 생검을 받은 환자의 경우, PD 분석을 위해 적절한 샘플을 사용할 수 있는 경우 (가령, 단일 파라핀-매립된 블록 또는 대략적으로 10 개의 슬라이드), 이 샘플은 신선한 전-처리 생검 요건을 충족시킬 수 있다. 2부의 환자는 또한 스폰서와의 협의 후, 기록된 종양 반응에 따라 선택적인 치료-시 생검 및/또는 기록된 종양 진행에 따라 선택적인 후-치료 생검을 가질 수 있다.

이 연구에 계획된 총 등록 환자 수는 대략적으로 최대 372 명이다. 표준 3+3 설계에 따라, 임의의 용량 제한 독성에 대해 평가할 수 있는 대략적으로 최대 12 명의 환자가 1부에 등록된다. 2부의 경우, FGFR2b-선별된 위암을 가진 대략적으로 최대 360 명의 환자를 등록하고, 위약 및 mFOLFOX6, 또는mFOLFOX6과 함께 항-FGFR2-IIIb를 제공받기 위해 1:1로 무작위화함으로써, 효능 및 내약성을 검사할 것이다. 적격 환자는 지역 (미국과 EU 대(vs) 아시아 대(vs) 나머지 세계), 치료이전 상태 (처음(de novo) 대(vs) 어쥬번트/네오-어쥬번트) 그리고 측정가능한 질병 상태 (측정가능 대(vs) 측정불 가능)에 따라 계층화될 것이다.

1 부에서, 모든 분석은 기술될 것이며, 적절히 투여량 그룹별로 그리고 전체적으로 제시될 것이다. 기술 통계량(descriptive statistics)에는 관측 수, 평균, 표준 편차, 중앙값, 범위 및 연속 변수에 대한 사분위수 범위, 그리고 범주 변수의 수 및 백분율이 포함될 것이고; 적절한 경우 95% 신뢰 구간이 제시될 것이다. 2부에서, 1 차 효능 분석은 mFOLFOX6 또는 위약 및 mFOLFOX6과 병용된 항-FGFR2-IIIb로 치료된 환자에서 PFS의 비교이다. 1 차 종점(endpoint) PFS는 무작위화 시점부터 조사자 평가 (RECIST v.1.1에 따라)에 근거하여 방사선적 진행성 질환의 날짜, 또는 임의의 원인에 의한 사망 날짜(어느 쪽이건 먼저 발생하는 날짜)까지로 정의된다. 이차 효능 종점은 OS 및 ORR을 포함한다. PFS에 대한 중간 분석 및 1 차 분석이 있으며, 둘 다 사건(event)-기반 분석이다. 위약 및 mFOLFOX6과 비교하여, mFOLFOX6과 병용된 항-FGFR2-IIIb의 조합 경우, HR> 0.806을 배제하기 위해, 등록된 환자에서 관찰된 48 건 (PFS의 1 차 분석을 위한 표적 96 PFS 사건의 50%) 후, 중간 분석에서 PFS의 무용성(futility) 시험 만이 수행될 것이다. 중간 분석(interim analysis)은 등록한 첫 번째 환자로부터 대략적으로 20 개월이 걸릴 것으로 추정된다. PFS의 1 차 분석은 첫 156 명의 등록된 환자에서 적어도 96건의 PFS 사건이 관찰될 때 수행될 것이고, 치료-의향 (intent-to-treat: ITT) 집단을 사용하여 수행될 것이다. 1 차 분석에는 RECIST v.1.1에 따라 조사자가 결정한 방사선 진행 사건 및 사망만 포함될 것이다. PFS의 1 차 분석은 0.05의 유의성 수준으로 계층화된 로그-랭크 2-면 테스트(log-rank 2-sided test)를 사용하여 수행될 것이다. 계층화 요소는 대화식 음성 및 웹 응답 시스템 (IXRS)에 설명 된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다. 계층화된 로그-랭크 테스트의 p-값이 통계적으로 유의하고 (<0.05 양면), HR이 <1 인 경우, PFS에 차이가 없다는 귀무 가설(null hypothesis)은 기각될 것이고, PFS는 위약 및 mFOLFOX6을 받는 그룹과 비교하여, mFOLFOX6과 병용하여 항-FGFR2-IIIb를 받는 그룹에서 통계적으로 연장되는 것으로 추론될 것이다. 각 치료 부문에서 중간 PFS 및 관련 95% 신뢰 구간은 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 추정될 것이다. 유해율 (HR=　λ_{항-FGFR2-IIIb+ mFOLFOX6}/ λ_mFOLFOX6)은 유일한 주요 효과로써 처리 그룹을 갖는 Cox 회귀 모델을 사용하여, 로그-랭크 테스트에 사용된 것과 동일한 계층화 계수(stratification factors)로 계층화되어 추정될 것이다. 계층화되지 않은(unstratified) HR도 또한 제공될 것이다.

OS 및 ORR을 포함한 2 차 종점 분석은 1 차 종점, PFS가 통계적으로 유의할 때 수행되며, OS 및 ORR의 공식 가설이 0.05 레벨에서 계층적으로 테스트될 것이다. OS가 먼저 테스트되고, 유의적인 경우 ORR이 다음에 테스트될 것이다. 1 차 및 2 차 종점 테스트의 유형 I 오류율은 0.05 레벨에서 이 고정된-시퀀스 테스트 절차를 사용하여 제어될 것이다. PFS 테스트가 통계적으로 유의하면, 계획된 OS에 대한 중간 및 최종 분석이 있을 것이다. OS의 중간 분석은 PFS의 1 차 분석 시 수행될 것이다. OS를 분석해야 하는 경우, 중간 (즉, 최소한 96건 이상의 PFS 사건이 관찰된 경우) 및 종료 시점 (즉, 249명의 사망이 관찰될 때)에서의 OS 분석은 ITT 집단에 대해 수행될 것이다. OS의 가설 테스트는 0.05 수준의 유의성을 가진 계층화된 로그-랭크 양면 테스트를 사용하여 수행될 것이다. 그룹 순차(sequential) 방법은 OS의 중간 및 최종 분석에서, 매개변수가 -4 인 감마 패밀리를 기반으로, O'Brien-Fleming 경계를 기반으로 하는 유형 I 오류율과 매개변수가 -4 인 감마 패밀리를 기반으로 하는 유형 II 오류율을 할당하는 데 사용될 것이다. 계층화 요소는 IXRS에 설명된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다. 각 치료 부문에 대한 중간 OS 및 관련 95% 신뢰 구간은 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 추정될 것이다. HR은 유일한 주요 효과로써 처리 그룹을 갖는 Cox 회귀 모델을 사용하여, 로그-랭크 테스트에 사용된 것과 동일한 계층화 계수로 계층화되어 추정될 것이다. 계층화되지 않은 HR도 또한 제공될 것이다.　 ORR은 RECIST v.1.1에 따라 조사자가 정의한 바와 같이, 부분 반응 또는 완전 반응을 보이는 환자의 비율로 정의된다. ORR의 1 차 분석은 기준 측정 가능한 질환을 가진 환자들 사이에서 수행될 것이다. ORR 분석에서, 기선 이후 적절한 종양 평가가 없는 환자는 비-응답자로 계수될 것이다. 계층화된 Cochran-Mantel-Haenszel 테스트를 사용하여, ORR의 공식 가설 테스트가 수행될 것이다. 계층화 요소는 IXRS에 설명된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다.

파워(Power) 및 샘플 크기: 이 연구는 PFS의 1 차 분석에 적절한 파워를 제공하도록 설계된다. 6 개월의 위약 및 mFOLFOX6를 받는 환자의 중앙값 PFS (mPFS)에 기초하여, 위약 및 mFOLFOX6과 비교하였을 때, 항-FGFR2-IIIb와 mFOLFOX6의 조합의 경우 24 개월의 누적 및 6 개월의 추적 후, 90%의 파워(2-면 α =0.05)로 mPFS에 대해 0.5의 유해율 (HR)을 실증하기 위하여 96건의 PFS 사건 표적으로, 대략적으로 156명의 환자 (1:1로 무작위화된)가 요구된다. PFS의 지수 분포를 가정하면, 이는 mPFS가 6 개월에서 12 개월로의 증가에 해당한다. 현재 설계에서, PFS에 대한 통계적 유의성을 초래할 수 있는 최저 관찰된 효과는 6 개월에서 9 개월 사이에 50% 개선 (HR = 0.67)이다. 이 연구는 또한 OS의 1 차 분석에 또한 충분하다. 10개월 동안 위약 및 mFOLFOX6을 제공받은 환자의 중앙값 OS (mOS)에 기초하여, 위약 및 mFOLFOX6과 비교하였을 때, 항-FGFR2-IIIb와 mFOLFOX6의 조합의 경우 36 개월의 누적 및 최종 환자의 등록 후 10 개월의 추적-후, 80%의 파워로, 전반적인 유형 I 오류 수준 0.05에서 mOS에 대해 0.7의 HR을 실증하기 위하여 249건의 사망 사건을 표적으로, 대략적으로 최대 360명의 환자까지 연구 등록이 지속될 것이다. OS의 지수 분포를 추정하면, 이는 중앙값 OS가 10 개월에서 14.3 개월로의 43% 증가에 해당한다. 현재 설계에서, 최종 분석에서 OS에 대한 통계적 유의성을 초래할 수 있는 최저 관찰된 효과는 10 개월에서 12.8 개월 사이에 28% 개선 (HR = 0.78)이다.

안전성 분석: 안전성 분석에는 연구 기간 동안 임의의 연구 약물 (항-FGFR2-IIIb와 mFOLFOX6, 또는 위약 및 mFOLFOX6)을 받고 치료-후 안전성 정보를 제공하는 모든 환자가 포함될 것이다. 모든 AEs는 Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA)을 사용하여 코드화될 것이다. 조사자는 CTCAE v 4.03을 사용하여 AEs의 심각도를 분류할 것이다. 치료 응급 부작용 (TEAE)은 연구 약물의 개시일, 또는 첫 번째 투여 이후 제시된 임의의 사건, 또는 치료 후 악화를 치료하기 전 제시된 임의의 사건으로 정의된다. 마지막 투여 +30 일 이전에 개시일을 갖는 TEAEs만 요약 표에서 표로 나타낼 것이다. AEs를 경험하는 환자의 수 및 백분율은 시스템 장기 부류, 선호되는 기간, 연구 약물과의 관계 및 각 치료 그룹의 심각성으로 요약될 것이다. 사망을 포함하여 SAE를 경험하거나, 연구로부터 조기 철회 또는 연구 약물 중단과 관련하여 AE를 경험한 환자에 대한 환자-별 목록(by-patient listing)이 제공될 것이다. 임상 실험실 데이터는 실험실 테스트 유형으로 요약될 것이다. 연구 약물 투여 후, 비정상 (즉, 기준 범위를 벗어난) 및/또는 임상적으로 유의적인 이상을 경험한 환자의 수 및 백분율이 각 임상 실험실 측정에 대해 제시될 것이다. 각 임상 실험실 측정에 대해, 기선 및 치료-후 예정된 모든 방문에 대한 기술 통계(descriptive statistics)가 제공될 것이다. 기선에서 치료후 방문까지의 변화도 또한 제공될 것이다. 바이탈 사인(vital signs)에 대한 기술 통계도 비슷한 방식으로 또한 제공될 것이다. 또한, CTCAE 등급 (해당되는 경우) 및 고/저 플래그(high/low flags) (CTCAE 등급이 정의되지 않은 경우)의 기선에서 변이가 처리 그룹에 의해 제시될 것이다. 안전성 종점에 대한 공식적인 비교는 계획되어 있지 않다.

PK 분석: PK 매개변수는 비-구획 분석(non-compartmental analysis)을 사용하여 추정되지만, 구획(compartment) 분석이 적절한 경우, 사용될 수 있다.

자세한 프로토콜

1. 개요

항-FGFR2-IIIb 배경

암에서 섬유모세포 성장 인자 (FGF) 수용체 (FGFR) 경로의 역할은 잘 공지되어 있다. FGFs는 종양 세포의 형질 전환 및 증식을 자극하고, 혈관 신생을 자극할 수 있다. 특이적 조직, 세포 유형, 및/또는 발달 단계로 일반적으로 국한된 개별 FGFs의 발현을 갖는 22개의 공지된 인간 FGFs가 있다. FGF 신호전달은 FGFR1-4로 지칭되는 FGF 수용체 아형을 만드는 4개의 별개 유전자에 의해 인코드되는 막경유 티로신 키나제 수용체 패밀리에 의해 매개된다 (Turner and Grose 2010).

FGFR2는 2개의 스플라이싱 변이체, b 및 c를 갖는다. 일반적으로, FGFR2b는 상피 기원의 조직(가령, 위, 피부)에서 발현된다 (Miki 1992). FGFR2b를 통하여 신호전달하는 주요 리간드는 FGF7, FGF10 및 FGF22이다. FGF/FGFR2 경로에서 신호전달의 변경 (가령,　FGFR2b 단백질의 과다발현 또는 FGFR2 유전자의 증폭)은 위암, 유방암 및 기타 암과 연관되며, 더 나쁜 예후를 나타내는 것으로 보인다(Wu　2013, Turner　and Grose 2010). 실제로, 1990년 초에 위암 (~ 3 내지 9%)과 유방암 (1 내지 2%) 환자의 하위집단은 염색체 10q26에있는 FGFR2 유전자가 증폭 된 것으로 나타났다. 위암에서, FGFR2 증폭은 세포 표면 상에서 FGR2b 수용체의 고-수준 발현을 초래한다.

FGFR2b-특이적 항체

항-FGFR2-IIIb는 인간 FGFR2b 수용체에 특이적인 인간화된 단일클론 항체 (IgG1 동형) (NCBI 참조 서열 ID NP_001138385.1)로써, FGF 리간드가 상기 수용체에 결합하는 것을 차단한다. 항-FGFR2-IIIb는 대안적으로 스플라이싱되고, 리간드 특이성을 조절하는 영역인 FGFR2b 수용체 동소체의 3번째 Ig 영역을 지향한다. 이 항체는 당화되지만, 중국 헴스터 난소 (CHO) 세포 계통에서는 FUT8 유전자 (α1,6-퓨코실전이효소)가 결여되고, 따라서 상기 항체의 폴리사카라이드 부분에서 코어 퓨코스가 결여된 상태로 만들어진다. 코어 퓨코스의 부재는 상기 퓨코실화된 분자와 비교하여 Fc 수용체 FcγRIIIa 에 대하여 더 높은 친화력을 초래하고, 면역 세포-매개된 종양 세포 사멸을 잠재적으로 강화시키게 된다 (Shinkawa 2003). 상기 항체는 따라서 강화된 항체-의존성 세포-매개된 세포독성 (ADCC)을 위하여 당조작되었다(glycoengineered)(Gemo 2014). 항-FGFR2-IIIb는 FGFR2b 과다발현 위암 및 유방암 세포 계통의 세포 배양물에서 FGF 리간드-자극된 FGFR2b 인산화 및 세포 증식을 억제한다. 항-FGFR2-IIIb는 FGFR2b 과다발현 위암 및 유방 이종이식 모델에서 종양 성장을 또한 억제한다. 따라서, 항-FGFR2-IIIb의 3가지 잠재적 작용 기전은 리간드 결합 및 하류(downstream) 신호전달을 차단, FGFR2b 구동자(driver) 단백질의 발현 감소, 그리고 ADCC 강화를 포함한다.

항-FGFR2-IIIb는 FGFR2b가 종양 성장의 구동자로 간주되는 면역-절충된 마우스에서 FGFR2b-과다발현 및 FGFR2 유전자-증폭된 위암 이종이식에서 완전하고, 지속적인 종양 성장 억제를 할 수 있다 (Gemo 2014). 또한, 항-FGFR2-IIIb는 FGFR2b의 보통 수준(modest) 발현을 하는 4T1 유전적 동계 종양 모델에서 NK 세포 보충(recruitment) 및 수반되는 종양 성장 억제를 입증한다. 이들 데이터는 ADCC가 중간 정도의 FGFR2b 과다발현을 갖는, FGFR2 유전자 증폭이 없는 환자에서 효과적이고, 그리고 ADCC 활성은 이들 환자의 작용 메커니즘에 주요 원인제공자일 수 있음을 시사한다.

추가적으로, 항-FGFR2-IIIb는 FGFR2b 수용체에 특이적이기 때문에, FGFR2c를 포함한, 다른 FGFs/FGFRs의 신호 전달을 간섭하지 않는다. FGFR 티로신 키나제 억제제 (TKIs)와는 대조적으로, 항-FGFR2-IIIb는 FGF23 신호전달을 저해하지 않는다. FGF23은 칼슘/포스페이트 대사에 관여하는 리간드이다. 따라서, 항-FGFR2-IIIb로의 치료는 FGFR TKIs와 관련된 상당한 용량-제한 고인산혈증을 유발하지 않을 것으로 예상된다 (Andre 2013, Brown 2005, Dienstmann　2014, Sequist　2014).

mFOLFOX6

주입용 5-플루오로우라실, 류코보린, 및 옥살리플라틴 (mFOLFOX6)은 승인된 화학요법 물질이며, 전이성 위암의 일선 치료를 위한 표준 치료이다. 5-FU는 전 세계의 위암 치료에 사용되는 주요 화학요법제이며, 다른 요법과 복합하여 자주 이용되는데, 연구 결과 5-FU 복합 화학요법으로 개선된 임상 결과를 보여주었다(Keam 2008). 5-플루오로우라실 (5-FU)로 알려진 표준 치료, Adrucil^®는 현재 결장 암, 유방암, 위암, 및 췌장암을 치료하기 위하여 공통적으로 이용되는 흔히 사용되는 화학치료제다.

항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6 출발 용량 정당범주(Justification)

용량 증가 안전성 연구의 1 부를 위하여, 28-일 주기에서 매 2주마다 IV 주입으로 투여되는 항-FGFR2-IIIb의 10　mg/kg 출발 용량이 기획된다.

우선 단계(Phase) I 임상 연구에서, 고형 종양이 있는 환자 (n=19) 및 위암 환자 (n=8)에서 용량 증가가 실행되었다. 용량 증가 동안, 임의의 용량 수준에서 용량 제한 독성(DLTs)은 없었고, 따라서 항-FGFR2-IIIb의 최대 용인되는 용량(MTD)는 확인되지 않았다. 표적 약물 농도의 전임상(preclinical) 모델링 및 관찰된 효능의 증거 뿐만 아니라 관찰된 내약성에 기초하여, 15mg/kg을 확장(expansion) 용량으로 선택하였다. 15　mg/kg　의 매 2 주 투여에서, 대부분의 환자에서 60 μg/mL의 항정 상태 (C_최저　ss)에서 항-FGFR2-IIIb 최저 농도를 달성할 것으로 예상되며, 이는 OCUM2 FGFR2-증폭된 위암 이종이식 모델을 이용한 마우스 효능 연구로부터 도출되었다.

집단 PK 분석으로부터 공개된 데이터에 기초하여, 베바씨주마브 (Genentech Inc.), 트라스투주마브 (Genentech Inc.), 페르투주마브 (Genentech Inc. 2016), 및 라무시루마브 (Eli Lilly and Company)을 포함하여, 항체 치료제에 대한 레이스에 의해 PK에서 임상적으로 유의미한 차이가 관찰되지 않았다. 중요하게도, 진행중인 항-FGFR2-IIIb 연구의 임상 데이터는 인간에게 10mg/kg 용량이 견딜 수 있음을 뒷받침한다. 항-FGFR2-IIIb는 또한 인간 첫-연구에서 허용가능한 안전성 프로파일을 보여주었으며, 53명의 환자는 최대 15 mg/kg 용량으로 치료되었다.

mFOLFOX6의 출발 용량에는 85 mg/m²의 옥살리플라틴, 350 mg의 엽산 칼륨 (엽산), 400-mg/m² 용량의 플루오로우라실, 그리고 2400-mg/m² 용량의 플루오로우라실이 포함된다. 옥살리플라틴 및 엽산 칼륨은 3-원(way) 탭/Y-부위 연결기를 이용하여 IV로 동시 투여된다. 더 작은 용량의 플루오로우라실은 IV 볼루스를 통하여 투여되고, 더 큰 용량의 플루오로우라실은 46　시간에 걸쳐 IV 주입을 통하여 투여된다. mFOLFOX6은 매 14 일 마다 투여된다.

2부 사전-스크리닝(Pre-screening)을 위한 이론적 근거

항-FGFR2-IIIb는 위암 종양에서 발현될 때, FGFR2b 수용체를 인지하도록 설계된 항체이다. 현재의 가설은 FGFR2b의 존재가 FGFR2b-선별된 위암 또는 위 식도암 환자(2 부에서)가 어떻게 반응 할 것인지에 대한 중요한 예측자가 될 것이라는 것이다. 이것은 FGFR2b를 과다발현시킨 종양 만이 이종이식 연구에서 항-FGFR2-IIIb 치료에 반응한다는 전임상 관찰, 뿐만 아니라 FGFR2b-양성 환자에서 항-FGFR2-IIIb 활성의 정도가 더 높은 것을 나타내는 진행중인 인간의 첫-연구의 조기 결과에 근거한다.

2부의 등록용 환자는 검증된 IHC (2+ 또는 3+의 스코어)또는 혈액-기반 생검 분석에 의해 각각 결정된 바와 같이, FGFR2b 과다발현 및/또는 FGFR2 증폭에 기초하여, 선택될 것이다. IHC를 사용한 FGFR2b 과다발현, 또는 혈액-기반 생검 분석에서 증폭을 나타내지 않는 환자는 등록 자격이 없지만; 분석법 중 하나 또는 둘 모두에 기초한 양성 (가령, 혈액-기반 생검 분석에서는 양성이지만, IHC에서는 음성)은 자격 요건을 충족시키기에 충분하다.

2부의 환자는 전이성 또는 절제불가능한 질환을 위한 사전 화학요법에 대해 경험이 없을 것이고(

); 기존 보조요법 또는 신-보조요법 (화학요법 및/또는 화학 방사선 요법)을 받은 경우, 보조요법 종료와 등록 사이에 6 개월 이상 경과해야 한다. 이들 환자는 절제불가능한, 국소적으로 진행된, 또는 전이성 질환을 가지고 있을 것이며, 따라서 진단 직후 치료 (mFOLFOX6)를 시작할 것으로 예상된다.

IHC 결과가 완료되기까지 최대 몇 주가 소요될 수 있으므로, 혈액-기반 분석에 의해 음성인 환자는 IHC에 의해 자격이 확인되기를 기다리는 동안, 화학요법 치료의 시작이 지체됨에 직면할 수 있다. 이러한 이유로, 연구에 참여하는 모든 환자는 등록 시점에 2주기의 mFOLFOX6을 받아야 한다. 환자는 2주기 이상 또는 2주기 미만을 받을 수 없는데, 그 이유는 연구 참여자 간의 치료 불균형 및 잠재적으로 연구 결과의 혼란스러운 해석을 야기할 수 있기 때문이다. IHC 결과는 mFOLFOX6의 처음 2주기를 투여하는데 걸리는 시간 동안 얻을 수 있을 것으로 예상된다. 이 기간 동안, 환자는 아직 연구에 등록되지 않았으므로, mFOLFOX6은 지역 관행에 따라 투여될 것이며, 연구의 일부로 부작용이 기록되지 않는다. 환자는 혈액 및 IHC 분석에 대해 사전-스크리닝 사전 동의서를 제공할 것이다. 만일 IHC 결과가 양성이면, 환자는 mFOLFOX6의 두 번째 과정을 마치고 스크리닝 기간에 진입하게 되며, 사전 동의 제공을 포함한 다른 모든 자격 기준이 충족되면 연구에 등록된다. 만일 IHC 결과가 음성이고, 혈액-기반 생검도 음성이면, 환자는 연구에 참여할 자격이 없다.

종양 생검 및 혈액 평가를 위한 이론적 근거

본 시험의 2 부 환자의 조직 결과와 혈액 결과를 모두 요구한다. 따라서, 조직과 혈장을 모두 제공할 수 없는 환자는 자격이 없다. IHC를 사용한 FGFR2b 과다발현, 또는 혈액-기반 생검 분석에서 증폭을 나타내지 않는 환자는 등록 자격이 없지만; 분석법 중 하나 또는 둘 모두에 기초한 양성 (가령, 혈액-기반 생검 분석에서는 양성이지만, IHC에서는 음성)은 자격 요건을 충족시키기에 충분하다. 혈액 검사는 FGFR2의 DNA 증폭을 드러내는 반면, IHC 검사는 단백질 발현 정도를 보여준다. Five Prime은 비임상용 항-FGFR2b 항체를 개발했으며, IHC에 의해 FGFR2b를 검출하기 위한 이의 감도 및 특이성이 최적화되었다.

위암 샘플을 평가하는 연구에서, FGFR2 증폭은 IHC에 의해 검출된 바와 같이, 상당한 FGFR2b 표면 발현과 균일하게 연관되어있다(Gemo 2014). 전임상 시험에서 관찰된 항-FGFR2-IIIb의 항종양 효과는 종양 세포 계통에서 FGFR2b의 과다발현에 근거하였다. FGFR2b의 과다발현이 없는 환자는 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6으로 치료할 때 큰 이점을 볼 것 같지 않다. 항-FGFR2-IIIb로 치료하기 위한 FGFR2b-양성 종양을 갖는 환자의 선택은 항-FGFR2-IIIb에 대한 진행중인 인간 첫-연구, 단계 1의 데이터에 의해 뒷받침된다. 연구 목적 및 종점

1부: 1차 목적

진행된 위장관 (GI) 종양 환자에서 고정 용량의 5-플루오로우라실, 류코보린 및 옥살리플라틴 (mFOLFOX6) 주입과 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 권장 복용량 (RD) 결정을 위하여.

GI 종양 환자에서 mFOLFOX6와 병용 제공 시, 항-FGFR2-IIIb의 용량 증가의 안전성 프로파일 평가를 위하여.

1부: 2차 목적

GI 종양 환자에서 mFOLFOX6와 병용 제공 시, 항-FGFR2-IIIb에 더 오랜 기간 노출시 안전성 및 내약성 평가를 위하여.

GI 종양 환자에서 mFOLFOX6와 병용 제공 시, 항-FGFR2-IIIb의 약동학 (PK) 프로파일을 특징화하기 위하여.

항-FGFR2-IIIb의 면역원성(immunogenicity)을 특징화하기 위하여.

1부: 탐색 목적

항-FGFR2-IIIb가 mFOLFOX6와 병용 투여될 때, 또한 GI 종양 환자의 혈액 및 모낭 샘플에서 탐색 바이오마커의 평가를 통해, 상기 항체의 약력학 (PD) 프로파일을 특성화하기 위하여.

2부: 1차 목적

위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 FGFR2b-선별된 위 또는 위식도암 (이후, 위암 또는 GC로 지칭됨) 환자에서 무-진행 생존 (PFS)의 분석을 통하여 평가하기 위하여.

2부: 2차 목적

FGFR2b-선별된 GC 환자의 전반적인 생존(OS) 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 평가하기 위하여.

FGFR2b-선별된 GC 환자에서, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우, 항-FGFR2-IIIb의 안정성 및 내성을 평가하기 위하여.

FGFR2b-선별된 GC 환자에서, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 PK 프로파일을 특징화하기 위하여.

항-FGFR2-IIIb의 면역원성을 특징화하기 위하여.

사전-치료 및 치료 중 종양 생검에서, 면역 세포 침윤물 및 다른 탐색용 바이오마커의 분석을 통해, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 PD 프로파일을 특징화하기 위하여.

2부: 탐색 목적

블라인드 독립 검토 위원회 (BIRC)의 진행 평가에 근거한 PFS 평가를 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 평가하기 위하여.

FGFR2b-선별된 GC 환자의 객관적 반응 속도 (ORR) 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 평가하기 위하여.

BIRC 진행 평가에 근거한 ORR의 평가를 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 평가하기 위하여.

FGFR2b-선별된 GC 환자의 1년 OS 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 평가하기 위하여.

FGFR2b-선별된 GC 환자의 반응 기간 (DOR) 분석을 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 평가하기 위하여.

FGFR2 상태 (종양 조직 및/또는 혈액-기반 생검)와 임상 결과의 관련성을 탐색하기 위하여.

혈액-기반 생검을 이용하여 종양 조직에서 FGFR2 상태와 FGFR2 증폭 간에 합치(concordance)를 탐색하기 위하여.

FGFR2b-선별된 GC 환자의 혈액 샘플에 있는 탐색용 바이오마커의 평가를 통하여, 위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용 제공될 경우 항-FGFR2-IIIb의 PD 프로파일을 특징화하기 위하여.

위약 및 mFOLFOX6와 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb를 병용 제공받은 FGFR2b-선별된 GC 환자에게서 환자가 보고한 결과(PROs)와 삶의 질(QOL) 결과를 평가하기 위하여.

1부: 1차 연구 종점

조사자에 의해 항-FGFR2-IIIb와 관련하여 평가된 2 등급 또는 그 이상의 이상 반응 (adverse events: AEs)의 발생률 및 용량-제한 독성(DLTs)으로 정의된 임상 실험실 비정상.

1부: 2차 종점

AEs 발생률, 임상 실험실 이상, 각막 및 망막 소견 및 심전도 (ECG) 이상.

항-FGFR2-IIIb의 PK 매개변수들, 이를 테면, 혈청 농도-시간 곡선 (AUC) 하의 면적, 최대 혈청 농도(C최대), 최저 혈청 농도 (C최저), 제거 (CL), 말단-반감기 (t1/2), 분배량 및 축적 비율은 적절하고 적용가능한 경우, 혈청 농도-시간 프로파일로부터 유도될 것이다.

면역원성 시험에 의해 결정된 면역 반응을 평가하기 위해.

1부: 탐색 종점

혈액 및 모낭 샘플에서 바이오마커들.

2부: 1차 종점

PFS, 무작위화 시점부터 조사자 평가 (RECIST v.1.1에 따라)에 근거하여 방사선적 진행성 질환의 날짜, 또는 임의의 원인에 의한 사망 날짜(어느 쪽이건 먼저 발생하는 날짜)까지로 정의됨.

2부: 2차 종점

OS, 무작위화 날짜부터 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간으로 정의됨.

RECIST v1.1에 따른 종양 병변의 조사자 평가에 기초한 객관적 반응률(ORR).

mFOLFOX6와 병용 투여될 때, RD에서 항-FGFR2-IIIb의 PK 매개변수들, 이를 테면 AUC, C최대, C최저, CL, t1/2, 분배 용적, 및 축적 비율은 적절하고 적용가능한 경우, 혈청 농도-시간 프로파일로부터 유도될 것이다.

면역원성 시험에 의해 결정된 면역 반응.

사전-치료 및 치료-중 종양 생검에서, 면역 세포 침윤물 및 다른 탐색용 바이오마커의 수준.

2부: 탐색 종점

1 년 OS, 최소한 1 회의 항-FGFR2-IIIb 용량을 받고, 1 년 후 생존한 환자의 비율로 정의됨.

RECIST　v1.1에 따라 조사자에 의해 측정된 반응 환자에 제한된 DOR 및 진행 또는 사망(어느 것이든 먼저 발생된 것)에 대한 RECIST　v1.1에 따라 조사자에 의해 측정된 제 1 반응까지의 시간으로 정의됨.

종양 조직 및/또는 혈액-기반 생검에서 확인된 FGFR2 상태와 RECIST　v1.1에 따른 객관적인 반응 사이의 상관 관계.

종양 조직에서 확인된 FGFR2 상태와 혈액-기반 생검에서 FGFR2 증폭간의 상관관계.

혈액 샘플에서 바이오마커들 .

EQ-5D-5L 및 EORTC QLQ-C30에 의해 측정된 QoL의 기준으로부터의 변화.

연구의 전반적인 설계 및 계획

개요

이 연구는 mFOLFOX6와 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 안전성, 내약성, PK, PD 및 효능을 평가하기 위한 2-부, 다중심 연구다. 상기 연구는 개방-라벨, 1부 용량 증가 안전성 진행(run-in) 및 무작위화된, 이중-맹검, 위약-조절된, 2부 용량 확장을 포함한다.

1부는 진행된 GI 종양을 갖는 적격 환자에서 mFOLFOX6과 병용 투여될 항-FGFR2-IIIb의 RD를 결정하기 위해, mFOLFOX6과 조합된 항-FGFR2-IIIb의 최소 2 개의 계획된 투여량의 코호트로 구성된다. 2부는 FGFR2b-선별된 진행된 GC 환자에서 위약 및 mFOLFOX6과 비교하여, mFOLFOX6과 병용된 경우 RD에서 항-FGFR2-IIIb의 안전성 및 효능을 평가(FGFR2b 발현의 예상 면역조직화학 (IHC) 분석 및/또는 FGFR2 증폭을 나타내는 혈액-기반 분석에 의해 결정됨)하기 위한 2 개의 확장 부문(1:1 무작위화)으로 구성된다. 환자는 연구의 1부 또는 2부에 등록되지만, 둘 모두에 등록되지는 않는다.

최대 14 일 (2 주)의 초기 선별 기간 후에, 환자는 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6 (항-FGFR2-IIIb의 존재 또는 부재)로 치료될 것이다. 환자는 1부에 등록하기 전, mFOLFOX6 화학요법을 시작하거나 수령했을 수 있지만, 이 환자의 자격 요건은 최소 2 회의 추가 주기의 mFOLFOX6 화학요법을 받을 수 있는 후보이어야 한다(1 부 환자가 받았던 FOLFOX 주기 수에는 상한이 없으며, 또는 이들 환자는 어떠한 것도 받지 않았을 수도 있다).

1부에 등록된 각 환자는 안전성 평가 및 용량-제한 독성 발생 (DLT 기간)에 대해 28 일 동안 관찰된다. DLT 기간이 끝나면, 환자는 조사자의 재량에 따라 치료를 계속 받을 수도 있다. 임상 적으로 지시된 바와 같이, 이후 14-일 주기로 매 2 주마다 추가 치료가 투여될 수 있다.

2부에서, IHC 또는 혈액에 의해 FGFR2b에 대해 종양이 양성이고, 진행성 위암에 대한 표준 일선 요법으로서 2주기의 mFOLFOX 화학요법을 완료하였고, 사전 동의서에 서명한 환자는 1 부에서 얻은 데이터의 평가 후, 선택된 RD에서 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb, 또는 mFOLFOX6과 병용한 위약으로 치료되도록 1:1로 무작위화 될 것이다.

초기 스크리닝 기간

1부

상기 스크리닝 기간은 환자가 사전 동의서(ICF)에 서명할 때 시작된다. 모든 환자는 항-FGFR2-IIIb의 첫 번째 투여 전, 14 일 (2 주) 이내에 스크리닝 평가를 받을 것이다. 사전 동의서에 서명한 후 그리고 첫 항-FGFR2-IIIb 투여 전에 발생하는 연구 절차와 관련이 없는 임의의 AEs는 이 기간 동안 수집되지 않는다. 환자는 1부에 등록하기 전, mFOLFOX6 화학요법을 시작하거나 수령했을 수 있지만, 이 환자의 자격 요건은 최소 2 회의 추가 주기의 mFOLFOX6 화학요법을 받을 수 있는 후보이어야 한다(1 부 환자가 받았던 FOLFOX 주기 수에는 상한이 없으며, 또는 이들 환자는 어떠한 것도 받지 않았을 수도 있다).

2부

2부에는 IHC 또는 혈액에 의해 FGFR2b에 대해 종양이 양성이고, 진행성 위암에 대한 표준 1 차 요법으로서 2주기의 mFOLFOX 화학요법을 완료하였고, 그리고 사전 동의서에 서명하고, 다른 적격 기준에 부합되는 환자들이 등록될 것이다.

2부에 대한 자격은 2 단계로 평가될 것이다 : IHC 및 혈액에 의한 FGFR2b 양성에 대한 테스트만을 포함하는 사전-스크리닝 기간; 및 나머지 모든 자격 기준이 확인되는 스크리닝 기간.

무작위화(Randomization)

1부

1부은 개방-라벨 연구다. 자격이 있다고 판단된 환자는 순차적으로 등록될 것이다.

2부

상기 사전-스크리닝 기간 동안, 환자들은 FGFR2b 양성에 대하여 테스트될 것이다. 하나 또는 두 가지 방법 (IHC 및/또는 혈액)에 의해 양성으로 검사된 환자가 상기 스크리닝 기간에 진입될 것이다. (참고 : 만일 혈액 검사가 양성인 경우, 환자가 해당 시점에 자격이 있고, 상기 스크리닝 기간을 시작해야 하므로 IHC 결과를 기다릴 필요는 없다).

자격을 충족하는 환자는 mFOLFOX6와 병용되는 위약, 또는 mFOLFOX6와 병용되는 항-FGFR2-IIIb에 1:1로 무작위 배정될 것이다.

1부 (용량 증가 안전성 진행)

1부는 mFOLFOX6과 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 공개-라벨 용량-증가 연구다. 1부에 자격이 있는 환자는 절제불가능한, 국소적으로 진행된 또는 전이성 질환을 가진 비선택된 GI 암 (FGFR2b 과다발현 종양을 가지거나, 또는 없는)을 갖고, 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6 화학요법 모두를 수용하는 후보이다. FGFR2 상태는 IHC 및 혈액-기반 생검에 의해 소급적으로 결정될 것이다.

1부에 등록된 환자는 다음과 같이, 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6의 고정-용량 백본 화학요법 체제와 병용하여 항-FGFR2-IIIb의 용량을 증가시키면서 치료 될 것이다:

항-FGFR2-IIIb 투여:

항-FGFR2-IIIb IV는 mFOLFOX6 화학요법의 투여 전, 각 주기의 1일차에 매 2주 마다 투여된다. 항-FGFR2-IIIb는 인라인(in-line) 필터를 갖는 말초 정맥 또는 중심 정맥 카테터를 통해 대략 30-분 IV 주입으로 투여될 것이다.

백본 화학요법 체재:

mFOLFOX6 화학요법의 투여는 각 치료 주기의 1 일차에 그리고 항-FGFR2-IIIb의 투여 후 시작될 것이다(30-분 휴식 후). mFOLFOX6 체제는 다음과 같이 매 2 주 마다 투여된다:

옥살리플라틴 85 mg/m²은 120 분에 걸쳐 IV 주입, 류코보린 400 mg/m²은 120 분에 걸쳐 IV 주입, 이어서 플루오로우라실 (5-FU) 400 mg/m²은 IV 볼루스, 이어서 5-FU 2400 mg/m²를 46 시간에 걸쳐 연속 IV 주입.

옥살리플라틴의 투여는 사전-수화(pre-hydration)를 필요로 하지 않는다. 덱사메타손과 함께, 또는 없이, 세로토닌 길항제와 같은 항-구토제를 이용한 예비 의약은 임상의가 표준 치료법에 따라 조사자의 재량에 따라 사용될 수 있다.

용량 수준 (1부)

1부에서, 항-FGFR2-IIIb의 2 회 용량 코호트는 표준 3+3 용량 증가 설계에서 예상되며, 최소 3 명의 환자가 각 코호트에 등록된다. 예상되는 용량 수준은 다음과 같다:

모든 용량 증가 결정은 DLTs, 전반적인 안전성 및 내약성 평가를 기반으로 하며, 각 코호트에 등록한 마지막 환자가 28-일 DLT 기간을 완료한 후에 결정된다(2 회 치료주기 완료). 용량 증가 결정은 스폰서 및 조사자로 구성된 코호트 검토 위원회 (CRC)에 의해 비준될 것이다. 안전성 및 PK 매개변수의 검토는 최적의 표적 노출에 도달하기 위해 대안적 용량 수준의 코호트 추가 결정에 영향을 줄 수 있다. 용량 수준-1은 복용량 수준 1에서 ≥ 2 DLTs가 관찰되는 경우에만 등록된다.

표 2에 나와 있는 알고리즘은 1부 용량 증가 결정에 사용된다:

2부의 경우 항-FGFR2-IIIb의 RD는 전반적인 안전성, 내약성 및 PK의 평가에 기초하여 CRC에 의해 식별될 것이다. 따라서, RD는 식별된 최대 허용 용량 (MTD)과 동일하거나 동일하지 않을 수 있다. 예를 들면, MTD에 도달하지 못했거나, 또는 1부의 후속 치료주기에서 얻은 데이터가 안전성 프로파일에 대한 추가 통찰력을 제공하는 경우, 그 다음 RD는 비록 MTD보다는 더 높지는 않지만, 용량이 다를 수 있다.

MTD는 DLT 기간 동안 환자의 <33%가 DLT를 경험하는 최대 용량으로 정의된다. 주어진 용량 수준에서 3 명의 환자 중 1 명에서 DLT가 관찰되면, 3 명의 추가 환자가 동일한 용량 수준으로 등록될 것이다. 용량 수준으로 치료된 3-6 명의 환자 중 2 명은 DLT (용량은 15mg/kg을 초과하지 않음)를 경험할 때까지, 용량 증가가 계속 될 수 있다. 그다음 더 낮은 용량은 MTD로 간주될 것이다.

일단 MTD 또는 RD에 도달하면, 3 명의 추가 환자가 더해지고, 이 용량 수준에서 안전성과 PK를 추가로 탐색될 것이다. 따라서 1부의 총 등록 수는 대략 9-12 명 환자일 것이다.

DLT 기간 동안 mFOLFOX6와 병용하여 정확하게 2 회 용량의 항-FGFR2-IIIb를 투여받지 않은 환자는 평가할 수 없는 것으로 간주되어 환자는 교체될 것이다. 교체된 환자는 스폰서와 상의한 후 계속 연구할 수 있다. 28-일 DLT 기간 동안, 2 회 이하의 항-FGFR2-IIIb 또는 2주기의 mFOLFOX6을 투여해야 한다.

DLT 기간 종료시, 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 환자는 mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb를 매 14-일 주기로 2 주마다 치료를 지속할 수 있다. 항-FGFR2-IIIb 용량의 최대 횟수 제한은 없다. DLT 기간 이후의 mFOLFOX6 체제의 지속적인 투여는 지역 치료 표준에 따를 것이다.

질병 진행 전의 어떤 이유로든 mFOLFOX6 화학요법 투여 중단 (가령, 지역적 관행에 따라 mFOLFOX6 화학요법의 누적 독성 또는 완료)된 경우에, 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 항-FGFR2-IIIb는 단독요법으로 매 2 주마다 지속적으로 투여될 수 있다. 화학요법 관련-독성으로 인해, mFOLFOX6의 주기가 14 일 이상 지연되는 경우, 항-FGFR2-IIIb 투여는 지연되지 않아야 하며, 매 2 주마다 계속 투여될 수 있다. 투여지연 후, mFOLFOX6의 새로운 주기의 개시는 가능한 경우 항-FGFR2-IIIb 주입의 투여와 동기화되어야 한다(그러나, 연구 요건은 아님).

2부: 무작위화된, 이중-맹검 용량 확장

환자는 FGFR2b-선별된 위암 환자 집단에서 위약 및 mFOLFOX6와 비교하여, mFOLFOX6와 병용된 항-FGFR2-IIIb의 안전성 및 효능을 특성화하기 위한 목적으로 2부에 환자들이 등록될 것이다. 2부에 등록하는 것은 항-FGFR2-IIIb에 대하여 1부의 CRC에 의해 확인된 RD에서만 한 번 시작되며, 이는 15mg/kg을 초과하지 않을 것이다.

2부는 이중-맹검이며, 대략적으로 최대 360명의 FGFR2b-선별된 위암 환자는 1:1로 무작위 배정되어, 다음 두 치료 부문 중 하나를 받게 된다.

부문 1: RD의 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6, 매 2 주 마다 투여; 또는

부문 2: 위약 및 mFOLFOX6 매 2 주 마다 투여

등록을 위한 2 부 개설은 스폰서의 재량에 따른다.

절제불가능한, 국소적으로 진행된, 또는 전이성 질환을 가지고, 일선(first-line) mFOLFOX6 화학요법을 받을 수 있으며, 2주기의 mFOLFOX6를 제공받은 환자는 연구의 2부에 등록될 것이다. 검증된 IHC 또는 혈액-기반 생검 분석에 의해 각각 결정된 바와 같이, 환자는 FGFR2b 과다발현 및/또는 FGFR2 증폭에 기초하여, 등록을 위해 선택될 것이다.

등록된 환자는 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 14-일 주기로 2 주마다 치료를 지속할 수 있다. 모든 치료 결정은 지역 평가를 사용하여, 조사자가 결정할 것이다. 진행 또는 동의서의 철회 이외의 이유로 연구 치료를 중단한 후, 환자가 추가 항암 요법을 시작할 때까지 종양 평가가 계속된다. 또한, 1 부 및 2부 모두의 환자는 최종 환자가 이 연구에 등록된 후 최대 24 개월까지, 또는 사망할 때까지, 추적-관찰 상실, 동의의 철회 또는 스폰서에 의한 연구 종료까지(어느 것이든 먼저 발생하는 것), EOT 방문 후 대략 3 개월 ± 28 일마다 병원 방문 또는 전화를 통하여 생존에 대하여 장기 추적-관찰을 받을 것이다.

질병 진행 전의 어떤 이유로든 mFOLFOX6 화학요법 투여 중단 (가령, 지역적 관행에 따라 mFOLFOX6 화학요법의 누적 독성 또는 완료)된 경우에,조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, IP는 단독요법으로 매 2 주마다 지속적으로 투여될 수 있다. 화학요법 관련-독성으로 인해, mFOLFOX6의 주기가 14 일 이상 지연되는 경우, IP 투여는 지연되지 않아야 하며, 매 2 주마다 계속 투여될 수 있다. 투여지연 후, mFOLFOX6의 새로운 주기의 개시는 가능한 경우 IP 주입의 투여와 동기화되어야 한다(그러나, 연구 요건은 아님).

질병 진행 전, 어떤 이유(가령, 누적 독성)로든 IP가 중단되는 경우, mFOLFOX6 화학요법은 지역적 관행에 따라, 또는 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 지속적으로 투여될 수 있다.

연구 개요

연구 개요는 도 1 (1부) 및 도 2 (2부)에 나타낸다.

연구 설계의 이론적 근거

1부는 mFOLFOX6과 병용 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 용량-증가 안전성 진행 연구다. 표준 3+3 설계가 사용된다. 1부에 등록된 환자는 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6의 고정-용량 백본 화학요법 체제와 병용하여 항-FGFR2-IIIb의 용량을 증가시키면서 치료될 것이다: 1부에 등록된 각 환자는 안전성 평가 및 용량-제한 독성 발생 (DLT 기간)에 대해 28 일 동안 관찰되고, 이 데이터 평가후 2부를 위한 RD가 선택될 것이다.

1부에 자격이 있는 환자는 절제불가능한, 국소적으로 진행된 또는 전이성 질환을 가진 비선택된 GI 암 (FGFR2b 과다발현 종양을 가지거나, 또는 없는)을 갖고, 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6 화학요법 모두를 수용하는 후보이다. FGFR2 상태는 IHC 및 혈액-기반 생검에 의해 소급적으로 결정될 것이다.

2부에서, 선택된 환자는 14-일 주기로 매 2 주마다 항-FGFR2-IIIb와 mFOLFOX6, 또는 위약과 mFOLFOX6으로 치료되도록 1:1로 무작위화될 것이다. 2부의 환자는 정확히(더 이상도 그리고 더 이하도 아님) 2주기의 mFOLFOX6을 완료해야 한다.

무작위화된 환자에서 FGFR2b-선별된 위암 환자의 PFS, ORR 및 OS를 측정하면, 위약과 mFOLFOX6을 비교하였을 때, mFOLFOX6와 병용으로 제공될 때, 항-FGFR2-IIIb의 임상적 이점을 강조할 수 있다.

연구 자격 및 철회 기준

계획된 환자 및 연구 센터 수

1부에서, 항-FGFR2-IIIb의 2 회 용량 코호트는 표준 3+3 용량 증가 설계에서 예상되며, 최소 3 명의 환자가 각 코호트에 등록된다. 일단 MTD 또는 RD에 도달하면, 3 명의 추가 환자가 더해지고, 이 용량 수준에서 안전성과 PK를 추가로 탐색될 것이다. 따라서 1부의 총 등록 수는 대략 9-12 명 환자일 것이다.

2 부에서, 대략적으로 최대 360 명의 FGFR2b-선별된 위암 환자는 1부에서 획득된 평가후 선별된 RD에서 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6과 병용된 위약, 또는 mFOLFOX6과 병용된 항-FGFR2-IIIb로 치료되도록 1:1로 무작위화될 것이다 등록을 위한 2 부 개설은 스폰서의 재량에 따른다.

이 연구에 계획된 총 등록 환자 수는 대략적으로 372 명이다.

이 연구는 최대 250 개의 글로벌 연구 센터에서 수행될 것이다.

모든 코호트에 적용되는 포함 기준

연구의 1부 또는 2부에 등록한 환자는 다음 포함 기준을 모두 충족해야 한다.

1) 절제불가능한, 국소적으로 진행된, 또는 전이성 질환

2) 임의의 연구-특이적 평가 전, 기관 검토 위원회 (IRB)/독립 윤리 위원회 (IEC)-승인된 사전 동의서 (ICF)를 이해하고 서명

3) 최소 3 개월의 기대 수명

4) 0 ~ 1의 Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 수행 상태

5) ICF 서명 당시 ≥ 18 세

6) 등록 전 ≤ 72 시간, 음성 혈청 β-인간 융모 성생식선 자극 호르몬 (β-hCG) 임신 테스트(오직 가임기 여성에 해당)

7) 성적으로 활동적인 환자 (가임기 여성 및 남성)에서, 2 가지 효과적인 피임법을 사용할 의사가 있는지, 그 중 하나는 항-FGFR2-IIIb의 마지막 투여 후 6 개월까지 물리적 장벽 방법 (콘돔, 격막(diaphragm) 또는 자궁 경부/뚜껑 캡)이어야 한다. 다른 효과적인 피임법은 다음을 포함한다:

· 스크리닝 전 최소 6 개월 전에 영구 불임 (자궁 내 절제술 및/또는 양측 난소 절제술 또는 수술로 양측 튜브 결찰 또는 정관 절제술)

· 연구 전 최소한 90 일 동안, 안정된 경구 피임 요법 또는 자궁 내 또는 임플란트 장치를 하거나, 또는 삶에서 성행위를 삼가는 가임기 여성

8) 다음과 같은 실험실 값으로 확인된 적절한 혈액학적 및 생물학적 기능:

· 골수 기능

· 절대적 호중구 수(ANC) ≥　1.5 × 10⁹/L

· 혈소판 >　100　×　10⁹/L

· 헤모글로빈 ≥　9　g/dL

· 간 기능

· 아스파르테이트 아미노전달효소 (AST) 및 알라닌 아미노전달효소 (ALT) ≤　3　× 정상적인 상한선 (ULN); 　간 전이라면, 그다음 ≤　5　×　ULN

· 빌리루빈 ≤　1.5 × ULN

· 신장 기능

· 산출된 크레아티닌 청소율 ≥　50 mL/분

9) 항응고제의 온전-복용(full-dose) 환자는 안정된 용량의 와파린을 복용해야 하며, 환자의 상태에 따라 치료 범위 내에서 범위-내 국제 표준화 비율 (INR)을 가지거나, 또는 저분자량의 헤파린의 안정 용량에 있어야 한다.

10) 측정 가능 또는 측정불가능한 질병

11) FGFR2 상태 결정을 위한 종양 조직

연구의 1부 (용량-증가 안전성 실행) 에 등록되는 환자는 다음의 기준을 또한 충족해야만 한다:

mFOLFOX6가 적절한 치료법으로 간주되는 조직학적 또는 세포 학적으로 확인된 위장 악성 종양 (가령, 위암, 결장 암종, 췌장 선암종).

전이성 질환에 대한 2 가지 이하의 기존 화학요법 체제 (5-FU 및/또는 옥살리플라틴을 사용한 기존 보조 화학요법을 포함하지 않음).

환자는 최소한 2 주기의 mFOLFOX6 화학요법에 후보이어야 한다.

연구의 2부 (용량-확장) 에 등록되는 환자는 다음의 기준을 또한 충족해야만 한다:

1) 조직학적으로 기록된 위암 또는 위식도 접점 선암종.

2) IHC에 의해 결정된 FGFR2b 과다발현 및/또는 혈액-기반 생검에 의해 결정된 FGFR2 증폭.

3) 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대한 기존 화학요법은 없음 (mFOLFOX6의 경우 포함 기준 #20에 기재된 것은 제외) .

4) 기존의 백금-기반 화학요법은 없음(mFOLFOX6의 경우 포함 기준 #20에 기재된 것은 제외).

5) 기존 보조요법 또는 신-보조요법 (화학요법 및/또는 화학 방사선 요법)을 받은 경우, 보조요법 종료와 등록 사이에 6 개월 이상 경과해야 한다.

6) 환자는 mFOLFOX6 화학요법의 후보이어야 하며, 연구 등록 전에 2주기의 mFOLFOX6 화학요법을 받아야 한다(그러나 2 주기 이상은 안됨).

모든 코호트에 적용되는 배제 기준

다음 기준 중 임의의 것에 해당하는 경우 1부 또는 2부에 등록한 환자는 제외된다:

치료받지 않거나 또는 증상이 있는 중추 신경계 (CNS) 전이. 무증상 CNS 전이가 있는 환자는 최소한 4 주 동안 임상적으로 안정한 경우, 그리고 CNS 질환과 관련된 증상 관리를 위해 수술, 방사선 또는 코르티코스테로이드 요법과 같은 중재가 필요하지 않는 경우 자격이 있다.

다음 중 임의의 것을 포함하여, 손상된 심장 기능 또는 임상 적으로 유의한 심장 질환:

· 등록 ≤ 6 개월 불안정 협심증

· 등록 ≤ 6 개월 급성 심근 경색

· New York Heart Association 클래스 II-IV 울혈성 심부전

· 통제되지 않은 고혈압 (최상의 의료 관리에도 불구하고 > 160/90으로 정의됨)

· 베타 차단제 또는 디곡신(digoxin) 이외의 항-부정맥 치료가 필요한 심장 부정맥

· 활성 관상 동맥 질환

7) QTcF> 450msec (남성) 또는 470msec (여성)

8) 부작용에 대한 공통 용어 기준 (CTCAE)에 따른 말초 감각 신경 병증 ≥ 등급 2

9) 등록 전 ≤ 14 일에, 전신 치료 또는 통제되지 않은 감염이 필요한 활성 감염

10) 알려진 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 또는 후천성 면역 결핍 증후군 (AIDS)-관련 질병, 또는 만성 B 또는 C형 간염의 병력

11) 간질 성 폐 질환의 병력 (가령, 폐렴 또는 폐 섬유증)

12) 출혈 체질 또는 응고병증의 증거 또는 병력

13) 등록 전 ≤28 일에 임의의 조사제 또는 치료

14) 방사선 치료 등록 ≤ 28 일. 환자는 모든 방사선 치료 관련 독성으로부터 회복되어야 한다. 등록 후 8 주 이내에 방사성 의약품 (스트론튬, 사마륨) 없음

15) FGF-FGFR 경로의 임의의 선택적 억제제 (예를 들어, AZD4547, BGJ398, JNJ-42756493, BAY1179470)로의 사전 치료

16) 기존 치료로 인한 지속적인 부작용> NCI CTCAE 1 등급 (2 등급 탈모증 제외)

17) 등록 후 28 일 이내, 또는 이 임상 연구 중에 다른 치료 임상 연구에 참여

18) 안과 의사의 견해로, 각막 결함, 각막 궤양, 각막염, 원뿔각막, 각막이식, 각막 이식 이력 또는 기타 알려진 각막 이상이 항-FGFR2-IIIb 치료에 위험을 초래할 수 있음.

19) 양성 HER2 상태 (양성 IHC 테스트에서 3+, 또는 양성 FISH와 함께, IHC 2+로 정의됨). HER2 상태는 위암에 대한 채점 지침을 기반으로 한다(HercepTest).　

20) 주요 수술 절차는 등록 전 ≤28 일에 허용되지 않는다. 국소/경막외 마취가 필요한 수술은 등록하기 최소한 72 시간에 완료해야 한다. 모든 경우에 환자는 치료 투여 전에 충분히 회복되고 안정되어야 한다.

21) 임신 중이거나 모유 수유중인 여성 (환자가 약물을 투여하는 동안 모유 수유를 중단한 다음, 그리고 연구 중단 후 6 개월 후에 재개하지 않는 한); 가임기 여성은 연구 중에 임신을 고려해서는 안된다.

22) 임상 연구와 양립할 수 없는 심각하거나 불안정한 수반되는 전신 장애의 존재 (가령, 약물 남용, 정신과적 장애 또는 활동성 감염을 비롯한 통제불능의 병간 질환, 동맥 혈전증 및 증상성 폐색전증)

23) 연구 참여와 관련된 위험을 증가시킬 수 있는 다른 상태 (예 : 디하이드로피리미딘 결핍 또는 흉막 삼출)가 있거나, 또는 연구 결과의 해석을 방해할 수 있고, 그리고, 조사자의 의견에 따라 환자가 연구에 참여하기에 부적절할 수 있는 것의 존재.

24) 폴리소르베이트를 포함한 항-FGFR2-IIIb 제제의 성분, 또는 백금-함유 약물, 플루오로우라실 또는 류코보린에 대한 공지의 알레르기 또는 과민성

25) 조사자의 의견으로는 연구 치료 효과의 결정에 영향을 미치지 않을 다른 악성 종양을 제외한 기존의 악성 종양의 병력

이러한 포함 또는 제외 기준에 대한 면제는 허용되지 않는다.

환자 철회 및 교체

다음 중 임의의 것에 해당되는 경우, 환자는 프로토콜-처방 요법을 중단해야 한다.

· 환자 또는 법적으로 승인된 대리인의 요청에 따른 동의 철회

· 조사자가 평가한 환자의 질병 진행.

· 환자에게 허용될 수 없는 안전성 위험을 초래할 수 있는 모든 사건

· 임상 상태의 평가에 상당한 정도로 영향을 미치는 동시 질병

· 연구 중 임의 시점에 임신 검사 양성

· 스폰서 또는 승인된 대리인의 특정 요청에 따라 (가령, 환자 안전상의 이유로 연구가 종료된 경우)

환자 확인 및 등록

환자는 사전 동의서를 제공할 수 있어야 하며, 모든 포함 기준을 충족해야 하며, 배제 기준중 어느 것에도 속하지 않아야 한다. 연구에 등록된 환자에 대해 조사자 및 후원자 또는 그의 피지명인에 의해 포함 또는 배제 기준의 예외는 인정하지 않는다. 환자를 등록하기 전에 모든 자격 기준을 충족해야 한다. 연구의 1 부에 자격이 있는 환자는 사용가능한 첫 번째 코호트에 등록된다. 환자는 연구의 1부 또는 2부에 등록되지만, 둘 모두에 등록되지는 않는다.

2부에서, 환자는 먼저 혈액-기반 생검 분석과 조직 검사가 모두 필요한 사전-스크리닝 검사를 받는다. FGFR2 양성으로 판단된 환자는 스크리닝 기간에 바로 들어갈 수 있다 (즉, 양성 혈액 검사 결과를 가진 환자는 IHC 결과를 기다릴 필요가 없다 (표 3 참조). 2부의 환자는 또한 mFOLFOX6의 2 사이클을 완료해야 하나, 단, 2회 이상은 안된다.

1 부와 2 부 모두에서, 만일 자격이 없는 결과가 오류로 간주되거나 또는 급성 결과가 반복 테스트의 자격 기준을 충족 할 가능성이 있는 경우, 조사자는 등록 전에 자격 있는 실험실 테스트와 바이탈 사인/ECGs의 정량화를 반복할 수 있다. 혈액학적 및 혈액 화학 검사 결과는 적격성을 확인하기 위해 투여 후 72 시간 이내에 얻어야 한다.

연구 약물

정체성(Identity)

1부에서, 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 용인할 수 없는 독성, 또는 프로토콜-명시된 연구 철회의 다른 원인이 있을 때 까지, 항-FGFR2-IIIb는 멸균된 바이알에 공급되어 매 14 일마다 (+/- 3 일) 대략적으로 30 분에 걸쳐 연구 현장에서 투여될 수 있도록 정맥용 주머니에서 희석될 것이다.

2부에서, 위약은 자각(unblinded) 사이트 약사에 의해 제공된다. 맹검 IP(항-FGFR2-IIIb/위약)를 받기 위해 참가자는 무작위로 [1:1] 비율로 배정될 것이다. 조사자는 연구 과정 내내 각 참가자의 지정된 연구 치료에 대해 모르는 상태에 있을 것이다. 이러한 무인지상태(blind)를 유지하기 위해, 자각 약사는 모든 연구 치료의 재구성 및 배포(dispensation)대한 책임이 있다. 품질 보증 감사의 경우, 감사인(들)은 무작위화/배정이 정확하게 이루어졌음을 확인하기 위해, 현장(들)에서 자각 연구 치료 기록에 접근이 허용될 것이다.

투여

1. mFOLFOX6

옥살리플라틴, 5-FU, 및 류코보린은 통상적인 기관 관행에 따라 각 사이트에 제공될 것이다. 조사자가 질환 진행, 용인할 수 없는 독성, 또는 프로토콜-명시된 연구 철회의 다른 원인이 있을 때 까지, mFOLFOX6 체제는 매 14 일 (+/- 3 일)마다 투여될 것이다.

mFOLFOX6의 출발 용량에는 85 mg/m²의 옥살리플라틴, 350 mg의 엽산 칼륨 (엽산), 400 mg/m² 용량의 플루오로우라실, 그리고 2400 mg/m² 용량의 플루오로우라실이 포함된다. 옥살리플라틴 및 엽산 칼륨은 3-원(way) 탭/Y-부위 연결기를 이용하여 IV로 동시 투여된다. 더 작은 용량의 플루오로우라실은 IV 볼루스를 통하여 투여되고, 더 큰 용량의 플루오로우라실은 46　시간에 걸쳐 IV 주입을 통하여 투여된다. mFOLFOX6은 매 14 일 마다 투여될 수 있다.

준비 및 완전한 처방 정보는 최신 패키지 삽입물을 참조한다.

2. 개방-라벨 항-FGFR2-IIIb (1부) 및 맹검 IP (2부)

항-FGFR2-IIIb는 이 프로토콜에 설명된 절차를 사용하여 오직 이 연구의 환자에게만 투여된다. 항-FGFR2-IIIb의 용량은 주기 1, 1 일차의 체중을 기준으로 하고, 환자의 체중이 주기 1, 1일차에 > 10%로 변한다면, 조정된다.

약사 (또는 다른 책임자)가 관리 솔루션을 준비할 것이다. 환자의 체중을 기준으로 바이알 수를 산출한 후, 연구 약물 제품을 0.9% 염화나트륨 용액으로 희석할 것이다. 준비된 항-FGFR2-IIIb는 준비 후, 약 ≤8 시간 (주위 온도)에 투여해야 한다. 항-FGFR2-IIIb는 의료 감독하에, 인라인(in-line) 필터를 갖는 말초 정맥 또는 중심 정맥 카테터를 통해 대략 30-분 IV 주입으로 투여될 것이다. 2부의 경우, 치료 과제에 대해 알게 되는 약사가 위약을 공급할 것이다.

항-FGFR2-IIIb의 주입은 더 일찍 중지, 감소, 중단 또는 중단되어야 한다. 만일 환자가 주입 반응을 경험하는 경우, 주입 중 그리고 주입 후 30 분마다 최소 2 시간 동안 그리고 주입 반응이 해결될 때까지 환자의 바이탈 신호 (온도, 혈압, 맥박 및 호흡률)를 모니터링해야 한다.

환자는 연구 참여 기간 동안 2 주 간격으로 2 용량의 항-FGFR2-IIIb를 제공받을 것이다. 1부에서, 질병 진행없이 치료가 용인되는 경우, DLT 기간 완료시, 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 환자는 mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb를 매 14-일 주기로 2 주마다 치료를 지속할 수 있다.

출발 용량 및 용량 변형

3. 1부: 용량-증가 안전성 진행

전술한 바와 같이, 1부에 등록된 환자는 14-일 주기로 매 2 주마다 mFOLFOX6의 고정-용량 백본 화학요법 체제와 병용하여 항-FGFR2-IIIb의 용량을 증가시키면서 치료될 것이다.

용량 변형 기준

4. 개방-라벨 항-FGFR2-IIIb (1부) 및 맹검 IP (2부)

1부 및 2부: 항-FGFR2-IIIb의 용량 감소는 표 4에 요약된 지침에 따라 1 부에서 DLT 기간을 넘겨 치료를 받는 환자, 또는 2 부의 임의의 환자에게 허용될 수 있다. 이 지침에 해당되지 않는 용량 감량 또는 중단이 조사자에 의해 고려되는 경우, 스폰서 또는 피지명인과 논의하고 승인받아야 한다.

사건이 표 4에 요약된 지침에 따라 기선 또는 ≤ 1 등급으로 회복되면, 환자는 연구 약물을 재개할 수 있다.

예정된 투여 방문에 대해 ± 3-일의 창(window)이 있다. 환자는 7 일 이내에 2 연속으로 항-FGFR2-IIIb 용량을 투여받아서는 안된다. 각주기의 첫 번째 용량은 각 주기의 1일차로 간주된다. 치료 지연이 없는 한, 주기는 매 14 일마다 반복된다.

각 환자의 시작 용량을 초과하는 환자-내(Intra-patient) 용량 증가는 허용되지 않는다. 더 이상 관련이 없는 이유로 환자의 복용량을 줄이면, 스폰서와 논의하고 승인받은 후, 원래 할당된 용량으로 용량을 증가시킬 수 있다.

5. mFOLFOX6

1부 및 2부: mFOLFOX6 독성에 대하여 환자를 면밀히 모니터링해야 한다. 치료중인 환자의 경우, 5-FU 및 옥살리플라틴의 용량 조정이 허용될 수 있지만, 그러나 DLT 기간 동안 용량 조절 또는 mFOLFOX 성분의 지연이 필요한 환자는 용량 조절 또는 지연이 항-FGFR2-IIIb와 관련된 AE로 인한 경우가 아니면 평가할 수 없는 것으로 간주되며, 이 경우 AE는 DLT로 간주된다 (DLT 정의는 아래 참조). 1부의 DLT 기간 또는 2부의 임의의 환자를 벗어난, mFOLFOX의 모든 성분에 대한 용량 조정은 프로토콜에 요약된 지침에 따라 허용된다.

질환 진행 전, 어떤 이유로 옥살리플라틴 투여가 중단된 경우, 5-FU/류코보린 요법은 질병 진행, 수용할 수 없는 독성, 또는 연구 철회의 다른 원인이 있을 때까지, 매 2-주 간격으로 계속 될 수 있다.

mFOLFOX6 독성에 대한 용량 조정이 표 5에 제시되어 있다.

Loupakis F, Cremolini C, Masi G, 외 Initial therapy with FOLFOXIRI and bevacizumab for metastatic colorectal cancer. N Engl J Med 2014;371:1609-18. DOI: 10.1056/NEJMoa1403108 프로토콜 채택

용량-제한 독성

DLTs는 치료의 처음 28 일 동안 발생하는 다음 사건 중 임의의 것으로 정의되며, 항-FGFR2-IIIb와 관련하여 조사자에 의해 평가된다. 해당되는 경우, 사건은 NCI CTCAE (버전 4.03)에 따라 분류된다.

· <0.5 x 10⁹/L의 ANC가 >5 일 지속 또는 열성 호중구감소 (가령, 단일 열이 >38.3℃이거나, 또는 1 시간 이상 동안 열이 >38 ℃이며, ANC <1.0 x 10⁹/L). 기관 표준에 따라 G-CSF 사용이 허용.

· 의학적 개입이 필요한 출혈과 함께, 혈소판 <25 x 10⁹/L 또는 혈소판 <50 x 10⁹/L

· 장기적 (>7 일) 등급 3 혈소판감소

· 등급 4 빈혈 (즉, 생명을 위협하는 결과; 긴급한 중재가 지시됨)

· 7 일 이내에 해결되지 않는 등급 2 또는 그 이상의 안과적 AE

· AST/ALT >3 x ULN 이고, 동시적으로 암 관련된 간과는 무관하게 총 빌리루빈이 >2　x　ULN임

· 등급 3 또는 그 이상의 임의의 비-혈액학적 AE (전신 약물에 의해 잘 통제되는 경우 욕지기, 구토 및 설사 제외). 조사자 및 스폰서 동의에 따라 임상적으로 중요하지 않은 등급 3 등급 또는 4 실험실 값은 DLTs로 간주되지 않음.

· mFOLFOX6의 임의의 성분의 최소한 4 일의 용량 감소 또는 지연을 초래하는 임의의 항-FGFR2-IIIb 관련 부작용

추천 용량 (RD) 및 최대 용인되는 용량 (MTD)

최저 용량 수준에서 독성

항-FGFR2-IIIb의 첫 번째 용량(10 mg/kg Q2W) 수준에서 MTD가 예기치 않게 초과되는 경우, 그런 다음 진행 방법에 대한 결정은 안전, 내약성 및 PK 데이터를 기반으로 하며; 조사자와 스폰서 사이에 협의된다.

용량 수준 -1 (항-FGFR2-IIIb 6　mg/kg Q2W; 3 내지 6　명의 대상)은 용량 수준 1에서 ≥ 2 DLTs가 관찰되는 경우에만 등록된다.

코호트 내에서 용량 증가

1부에서, 환자-내 용량 증가가 허용되지 않는다.

2부에서는 1부에서 결정한 대로 RD에서 환자를 치료하며, 용량 증가는 허용되지 않는다.

연구 약물 주입 중 용량 중단

주입 중 ≥ 등급 3의 임의의 AE가 발생하면, 항-FGFR2-IIIb 주입을 중단해야 한다. 주입 중 환자에서 기관지 경련 또는 호흡 곤란이 발생하면 주입을 중단해야 한다. 주입 반응의 증상에는 열, 냉기(chills), 오한(rigors), 두드러기, 저혈압 및 두통이 수반되는 고혈압, 쌕쌕거럼(wheeze), 호흡 곤란, 저산소증 및 폐 침윤이 포함될 수 있다.

또한, 조사자의 재량에 따라, 주입 중 심각성이 덜한 AE (등급 1 또는 2)가 발생하면, 주입 속도가 줄이거나 중단시킬 수 있다. 등급 3 또는 그 이하의 심각한 AE가 4 시간 이내에 해결되면, 주입은 이전 속도의 절반에서 재개될 수 있다. 다시 주입된 동안 언제라도 동일한 AE가 동일한 심각도로 다시 나타나는 경우, 주입을 중단해야 하며, 그리고 스폰서 또는 스폰서의 피지명자와 상의 없이는 더 이상 연구용 약물을 투여하지 않는다.

만일 주입이 완료되기 전, 환자가 주입 반응을 경험하면, 주입을 중단해야 하고, 이 사건이 완전히 해결될 때까지 징후 및 증상에 따른 지역 임상 프로토콜에 따라 신속하게 관리 및 모니터링해야 한다. 주입-관련 사건이 등급 1 또는 2이고, 주입 당일에 완전히 해결된 환자의 경우, 조사자의 재량에 따라 주입은 예비 약물로, 느린 속도로 재개될 수 있다. 그 환자에 대한 모든 후속 주입은 감소된 주입 속도로 예비-약물(pre-medications) 주입이 투여되어야 한다. 예비-약물(pre-medications) 치료는 지시된 바와 같이, 코르티코 스테로이드, 디펜히드라민, 아세트아미노펜 및 / 또는 기관지 확장제와 같은 약물을 포함할 수 있다. 등급 3 또는 그 이상의 주입-관련 이상 반응을 경험한 환자, 그리고 예비-약물 및 느린 주입에도 불구하고 주입을 다시 시작한 후 주입-관련 반응이 반복되는 환자에 대해 항-FGFR2-IIIb는 영구적으로 중단될 것이다.

만일 환자가 주입 반응을 경험하는 경우, 주입 중 그리고 주입 후 30 분마다 최소 2 시간 동안 그리고 주입 반응이 해결될 때까지 환자의 바이탈 신호 (온도, 혈압, 맥박 및 호흡률)를 모니터링해야 한다.

mFOLFOX6 독성으로 인한 용량 중단 및 지연은 표 5에 설명되어 있다 (류코보린, 5-FU, 및 옥살리플라틴의 경우 제품 라벨 참고).

매개변수 및 평가 방법

안전성 매개변수

안전성 측정에는 AEs, 혈액학, 임상 화학, 소변 검사, 바이탈 신호, 체중, 병용 약물/절차, ECOG 수행 상태, 표적화된 신체검사, ECGs 및 안과 검사가 포함된다.

1.1 환자 선별을 위한 종양 분석

1.1.1 1부

1.1.2 2부

이 연구의 2 부 환자는 종양 조직 분석 및 혈액 샘플 분석에 동의해야 한다. 검증된 IHC 또는 혈액-기반 생검 분석에 의해 각각 결정된 바와 같이, 환자는 FGFR2b 과다발현 및/또는 FGFR2 증폭에 기초하여, 등록을 위해 선택될 것이다. IHC를 사용한 FGFR2b 과다발현, 또는 혈액-기반 생검 분석에서 증폭을 나타내지 않는 환자는 등록 자격이 없지만; 그러나, 분석법 중 하나 또는 둘 모두에 기초한 양성 (가령, 혈액-기반 생검 분석에서는 양성이지만, 그러나, IHC에서는 음성)은 자격 요건을 충족시키기에 충분하다. 등록을 위한 FGFR2b 과다발현의 분석을 위해 적절한 종양 표본을 얻는 것은 각 조사자의 책임이다. 종양 슬라이드 또는 종양 블록 표본 처리, 라벨링 및 배송 지침은 표본 수집 키트와 함께 제공되는 실험실 설명서에 자세히 설명되어 있다.

타사(Third-party) 실험실은 각각 검증된 IHC 및 혈액-기반 분석을 사용하여 FGFR2b 발현 및 FGFR2 증폭 분석을 수행할 것이다.

2부의 경우, 일단 종양 및 혈액 표본이 접수되면, 가능한 한 효율적으로 분석이 수행되고, 그리고 결과는 조사자 또는 피지명인에게 다시 전달된다.

1.2 약력학 분석을 위한 종양의 새로운 생검

1.2.1 오직 2부에서만

종양 미세환경에 대한 항-FGFR2-IIIb의 약력학 효과를 평가하기 위해, 종양 생검 샘플을 또한 수집하고 있다. 이들 생검 샘플은 면역 침윤 및 선택된 종양 마커의 발현을 검사하기 위해, 치료-시 그리고 치료 전, 수득될 것이다. 선택적인 생검은 또한 저항 기전을 이해하기 위해, 치료-중 또는 치료-후 반응한 및/또는 진행된 종양에 대해 수득될 수 있다. IHC, qRT-PCR, 유전자 돌연변이 검출 및 형광 제자리(in situ) 혼성화(FISH)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는 다양한 방법론을 사용하여, 면역 또는 질병-관련 유전자 및/또는 단백질의 발현 뿐만 아니라, 면역 세포 집단의 존재에 대해 종양 생검 샘플을 평가할 수 있다. 이들 샘플은 또한 유전자 발현 경로 상에서 항-FGFR2-IIIb의 효과를 결정하기 위하여, 뿐만 아니라 반응 또는 반응에 대한 저항과 관련된 확인된 유전자 발현 특징을 결정하기 위해, RNA 시퀀싱을 거칠 수 있다. 이러한 분석은 향후 치료에 대한 반응을 예측하는 데 도움이 될 수 있다. 다른 종양 바이오마커 발현 방법도 또한 평가되고 있다.

원발성 종양 또는 전이성 종양 부위에서 새로운 생검은 가능한 경우, 스크리닝시 (투여 전 최소한 24 시간) 그리고 주기 3, 1일차 전 7 일 이내(그리고 투여 전 최소한 24시간)에 치료에서 2부로 무작위로 진입하는 최대 30명의 환자에 대해 필수적이다 . 등록 전 12 주 이내에 생검을 받은 환자의 경우, PD 분석을 위해 적절한 샘플을 사용할 수 있는 경우 (가령, 단일 파라핀-매립된 블록 또는 대략적으로 10 개의 슬라이드), 이 샘플은 신선한 전-처리 생검 요건을 충족시킬 수 있다.

2부의 환자는 종양 평가 후 28 일 (± 7 일) 내에 기록된 종양 반응에서 선택적인 치료-중(on-treatment) 생검을 또한 가질 수 있다. 2부의 환자는 또한 기록된 종양 진행시 EOT 방문에서 선택적인 치료-후(post-treatment) 생검을 가질 수 있다. 각각의 경우, 생검이 일어나기 전에, 스폰서와 상의해야 한다. 두 생검은 모두 선택 사항이다.

각 시점에서 새로운 종양 샘플을 획득할 수 있는 가능성은 조사자에 의해 평가될 것이며, 환자의 안전을 고려해야 한다. 만일 조사자가 생검이 가능하지 않다고 평가하는 경우, 이 결정은 원본 문서에 기록되어야 한다.

생검된 병변에 염증이 생기거나, 출혈이 생기거나 또는 크기가 변할 수 있고, 이는 부정확한 종양 측정 결과를 초래할 수 있다. 따라서, RECIST v 1.1 기준으로 반응을 평가할 때, 생검된 병변을 표적 병변으로 사용하지 않는 것이 좋다. 이 생검 샘플은 절제, 절개 또는 코어 바늘이어야 한다. 미세한 바늘 흡인물 또는 다른 세포 표본은 하류 바이오마커 분석에 충분하지 않다. 파라핀 매립된 블록 또는 착색안된 슬라이드 형태의 종양 조직 표본을 중앙 IHC 평가를 위해 제출한다.

1.3 종양 평가

종양 평가는 임상 검사와 적절한 영상화 기술로 구성되어야 하고 (RECIST v1.1에 따라 적절한 슬라이스 두께의 CT 스캔이 바람직함); 필요한 경우 다른 평가 (MRI, 방사선 사진, PET 및 초음파)를 수행할 수 있다. 기선에서 병변을 검출하는데 사용된 동일한 방법이 임상 연구 전반에 걸쳐 동일한 병변을 따르기 위해 사용되어야 한다. 스크리닝 종양 스캔은 주기 1, 1 일차에 치료 시작 후 2 주 이내에 이루어져야 한다.

종양 반응 평가는 RECIST 1.1 지침에 따라 조사자 및 맹검 중앙 방사선과 검토에 의해 수행될 것이다.

종양 스캔은 스크리닝에서 (1부 및 2부에서 주기 1, 1일차의 2주 이내) 그리고 주기 4, 1일차에, 주기 7, 1일차에, 주기 10, 1일차에, 주기 13, 1일차에 시작 전 7일 이내, 그리고 그 다음 대략적으로 매 12 주 마다 실행될 것이다. 초기 CR 또는 PR이 기록되면, 4-6 주 후에 확인 스캔을 수행해야 한다.

진행 또는 동의서의 철회 이외의 이유로 연구 치료를 중단한 후, 환자가 추가 항-암 요법 또는 진행을 시작할 때까지 종양 평가가 계속될 것이다.

1.3.1 혈액-기반 생검 (ctDNA)

1부에서, 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석을 위한 샘플은 연구 약물의 첫 번째 용량 (주기 1, 1 일차) 전에 수집되고, FGFR2 증폭에 대해 소급하여 분석된다.

2부에서, 사전-스크리닝 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석이 실시될 것이다. 이 샘플은 FGFR2 증폭에 대해 소급적으로 분석될 것이다. 또한, 혈액-기반 생검 (ctDNA) 분석은 24 주 동안 첫 번째 투여로부터 매 6 주마다, 그 후 대략 매 12 주마다 종방향으로(longitudinally) 수집되고, FGFR2 증폭에 대해 소급적으로(retrospectively) 분석될 것이다. EOT 방문시 2부 모든 환자에 대한 샘플도 수집된다.

1.4 모낭을 이용한 약력학 바이오마커 분석

오직 1부에서만, 눈썹 또는 두피의 모낭 (사용가능한 경우, 대략 10 개)이 샘플링이 가능한 모든 환자로부터 수집된다. 모낭은 FGFR2b 수용체를 발현하는 것으로 공지되어 있으며, FGFR2b 수준의 변화 및 하류 신호전달은 FGFR2b 수용체 및 하류 신호전달을 효과적으로 차단하는데 필요한 항-FGFR2-IIIb의 용량과 관련시키는데 사용될 수 있고, 그리고 연구의 2부에 대한 RD를 선택하는데 지침을 제공하는데 도움이 될 수 있다.

1.5 혈액을 이용한 약력학 바이오마커 분석

FGFR 경로의 탐색적 바이오마커 분석을 위한 혈청 샘플 (예 : FGF7, FGF10)은 부록 3에 명시된 시점에 투여-전, 모든 환자로부터 수집된다.

1.6 ctDNA용 혈액 샘플

1.7 종양 생검을 이용한 약력학 바이오마커 분석

면역 세포 침윤 속도 및 다른 탐색적 바이오마커의 수준은 모든 환자의 전-처리 및 치료-중 종양 생검 샘플에서 분석될 것이다.

1.8 FCGR 다형성(Polymorphisms)

Fc-감마 수용체들, 이를 테면 FCGR2A 및 FCGR3A에서 빈번히 발생되는 다형성에 대하여 혈액 샘플이 또한 수집된다. 이들 유전자는 백혈구 세포에서 ADCC 경로의 필수 부분인 Fc 감마 수용체를 발현하며, 이는 항-FGFR2-IIIb의 작용 기전으로 예상된다. 항-FGFR2-IIIb에 대한 환자의 반응을 연관시키기 위해, 연구 완료시 소급적 분석을 위해 데이터가 수집될 것이다. 이러한 바이오마커 테스트는 탐색적인 것으로 간주된다.

1.9 삶의 질 척도

EQ-5D-5L 삶의 질 (QoL) 설문지와 EORTC QLQ-C30은 투여-전 여러 차례에 걸쳐 부여된다(시점에 관하여 부록 1 참고).

EQ-5D-5L 설문지는 EuroQol Group에 의해 개발되었으며, 이는 임상 및 경제 평가를 위한 유용성을 제공하기 위한 표준화된 측정이다. 설명 시스템과 시각적 아날로그 등급(VAS)을 사용한다. 서술적 시스템은 이동성, 자기-관리, 일상 활동, 통증/불쾌감 및 불안/우울증의 5 가지 차원을 가지며, 각 차원은 5 가지 수준:문제 없음, 약간의 문제, 보통의 문제, 심각한 문제 및 극단적 인 문제로 구성된다.

응답자는 상기 5 차원 각각에서 건강 상태를 표시하기 위하여 가장 적절한 진술 상자를 체크해야 한다. 상기 5 차원에 대한 숫자는 응답자의 건강 상태를 나타내는 5-자리 숫자로 결합될 수 있다. EQ-5D-5L 서술 시스템에 의해 정의된 건강 상태는 유용성을 계산하기 위해 단일 인덱스 값으로 변환된다. VAS는 20-cm 수직 VAS에서 응답자의 자가-등급화된 건강을 묘사하며, 끝점에는 "상상 가능한 최고의 건강"과 "상상 가능한 최악의 건강"이라는 레이블이 붙어 있다.

암 연구 및 치료용 유럽 기구(EORTC)의 삶의 질 설문지 (QLQ)는 국제 임상 시험에 참여하는 암 환자의 건강-관련 삶의 질을 평가하기 위한 통합 시스템이다. EORTC는 필요한 경우, 종양 부위, 치료 양식 또는 QoL 차원에 특정한 모듈과 함께 관리할 핵심 설문지 (EORTC QLQ-C30)로 구성된 QoL 평가에 모듈식 접근 방식을 사용한다 (가령, 위암-특이적 모듈은 QLQ-STO22임).

환자는 5 가지 기능적 척도 (물리적, 역할, 정서적, 사회적, 인지 적), 3 가지 증상 척도 (피로, 메스꺼움 및 구토, 통증) 및 전반적 건강 상태/QOL 척도 및 6 개의 단일 항목 (호흡 곤란, 불면증, 식욕 상실, 변비, 설사 및 재정적 어려움)에 대한 답변을 제공한다.

1.10 ECOG 수행 상태

ECOG 수행 상태는 부록 1에 요약된 시점에 모든 환자에서 평가될 것이다. ECOG 수행 상태는 환자의 질병 진행 상태를 평가하고, 질병이 환자의 일상 생활 능력에 미치는 영향을 평가하고, 적절한 치료 및 예후를 결정하는 데 사용되는 척도이다. ECOG 척도는 부록 4에 나와 있다.

1.11 약동학 매개변수

약동학, 면역원성 및 약력학 혈액 샘플 수집에 대한 연구 흐름도에 요약된 바와 같이, 혈청의 항-FGFR2-IIIb 농도를 결정하기 위한 혈액 샘플은 각 환자로부터 획득될 것이다(부록 3).

2. 연구 수행

2.1 환자 평가의 개요

자세한 환자 평가 일정은 부록 1에 나와 있다. 안전 실험실 평가 목록은 부록 2에 나와 있다. PK, PD 및 면역원성 데이터의 샘플링 및 처리에 대한 지침은 부록 3의 순서도에 나와 있다.

2.2 방문 별 연구 평가 및 절차

2.2.1 사전-스크리닝 기간 (오직 2부만 - 사전-연구)

임의의 연구-특이적 절차에 앞서 사전 동의서 (사전-스크리닝 ICF)를 수집해야 한다.

· FGFR2b 발현의 유망한 IHC 분석 및 FGFR2 증폭을 나타내는 혈액-기반 분석법 (상기 참조).

2.2.2 스크리닝 기간 (-14일차에서 0일차 까지)

임의의 연구-특이적 절차에 앞서 사전 동의서를 수집해야 한다. 이 연구에 참여하는 것을 전적으로 동의한 환자는 항-FGFR2-IIIb의 첫 주입 전, 14일(2주) 이내에 스크리닝 평가를 받을 것이다. 다음 과정이 수행될 것이다:

· 자격 기준 검토/확인

· 약물 이력을 포함한 의료 및 질병 이력

· 기록보관소 또는 새로 얻은 재료에서 종양 조직 수집 (1 부 및 2 부 등록에 필요)

· 인구 통계 및 기선 특징화

· 체중과 키를 포함한 완전한 신체 검사

· ECOG 수행 상태 평가

· 바이탈 사인 (혈압, 맥박, 호흡 및 체온 [℃])

· 기록 전, 5 분 휴식 후 12-리드(lead) ECG

· 종합 안과 검사

· 안전성 혈액 테스트 (부록 2 참고.)

· 가임기 여성의 경우 ≤ 72 시간 전, 혈청 임신 검사 (베타-인간 융모 성생식선 자극 호르몬 [β-HCG]),

· 소변 검사 (단백질, 포도당, 혈액, pH 및 케톤을 위한 딥스틱 포함)

· 종양 평가는 치료 시작 전 14 일 이내에 수행되고, 필요한 경우 다른 평가 (MRI, 방사선 사진, PET 및 초음파)와 함께, 임상 검사 및 적절한 영상화 기술을 포함

· 오직 2부 환자에만 무작위화

· 2부로 무작위화된 최대 30명 환자의 경우: 투여 전 적어도 24 시간에 원발성 또는 전이성 종양 부위에서 새로운 조직 생검. 등록 전 12 주 이내에 생검을 받은 환자의 경우, PD 분석을 위해 적절한 샘플을 사용할 수 있는 경우 (가령, 단일 파라핀-매립된 블록 또는 대략적으로 10 개의 슬라이드), 이 샘플은 신선한 전-처리 생검 요건을 충족시킬 수 있다.

· 부록 3에서 제시된 바와 같이, 혈액-기반 생검 (ctDNA) 샘플 수집 .

· FOLFOX 투여 (1 부의 경우, 환자는 연구 등록 전, mFOLFOX6 화학요법을 시작했을 수 있고, 최소한 2 주기의 mFOLFOX6 화학요법에 후보이어야 한다. 2부에서, 환자는 무작위화 전, 2주기의 mFOLFOX6 화학요법을 완료할 것을 요구받는다).

· 해당되는 경우, AE 보고

2.2.3 치료 기간

2.2.3.1 주기 1, 1일차

다음 과정이 수행될 것이다:

· 자격 기준 검토/확인

· 의료, 질병 및 약물 이력을 업데이트하여, 스크리닝 검사의 변경 사항을 포착한다

· 체중 및 구강 검사를 포함한 제한된 신체 검사

· 환자가 보고한 결과 (EQ-5D-5L 및 EORTC QLQ-C30)

· 사전-투여시 그리고 항-FGFR2-IIIb 주입 시작 후 0.5, 1, 2, 및 4　시간에 바이탈 사인 (혈압, 맥박, 호흡 및 체온 [℃])

· 적격성을 확인하기 위해, 연구 약물 투여 전 72 시간 이내에 얻은 결과를 통한 안전성 혈액 검사(부록 2 참고.)

· 가임기 여성의 경우, 투여전 ≤72 시간에 혈청 임신 검사 (β-HCG),

· 부록 3에 요약된 PK, 면역원성 테스트, FCGR, ctDNA 및 탐색적 바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플링.

· 혈액-기반 생검 (ctDNA) 샘플 수집: 1부에서는 소급 분석을 위해, 주기 1, 1 일차에 투여하기 전에 혈액-기반 생검 (ctDNA) 샘플을 수집한다. 이 시점에서 2부 환자의 샘플은 필요하지 않다.

· 오직 1부에서만, 샘플링이 가능한 모든 환자로부터 주기 1, 1일차에 투여하기 전, 두피 또는 눈썹 모낭 샘플 (사용 가능한 경우 대략 10개)이 수집된다.

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

연구 약물 투여:

· 30 분에 걸쳐 IV 주입에 의해 투여되는 항-FGFR2-IIIb

· 30분 휴식 후 투여되는 mFOLFOX6 화학요법

2.2.3.2 주기 1, 2일차

다음 과정이 수행될 것이다:

· 사전-투여시 그리고 항-FGFR2-IIIb 주입 시작 후 0.5, 1, 및 2　시간에 측정된 바이탈 사인 (혈압, 맥박, 호흡 및 체온 [℃])

· PK 및 탐색적 바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플은 부록 3에 요약된 바와 같이, 수집된다.

· mFOLFOX6 투여 지속

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

2.2.3.3 주기 1, 3일차

다음 과정이 수행될 것이다:

· 부록 3에 제시된 바와 같이, PK 분석을 위한 혈액 샘플링.

· mFOLFOX6 투여 지속

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

2.2.3.4 주기 1, 8일차

다음 과정이 수행될 것이다:

· 체중 및 구강 검사를 포함한 제한된 신체 검사

· 연구 약물 투여 전 72 시간 이내에 얻은 결과를 통한 안전성 혈액 검사(부록 2 참고)

· 부록 3에 제시된 바와 같이, PK 분석을 위한 혈액 샘플링.

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

2.2.3.5 주기 2, 1일차

다음 과정이 수행될 것이다:

· 체중 및 구강 검사를 포함한 제한된 신체 검사

· 연구 약물 투여 전 72 시간 이내에 얻은 결과를 통한 안전성 혈액 검사(부록 2 참고.)

· 부록 3에 요약된 PK, 면역원성 테스트, 및 탐색적 바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플링.

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

연구 약물 투여:

· 30 분에 걸쳐 IV 주입에 의해 투여되는 항-FGFR2-IIIb

· 30분 휴식 후 투여되는 mFOLFOX6 화학요법

2.2.3.6 주기 3, 1일차 그리고 후속 홀수 주기의 1일차

다음 과정이 수행될 것이다:

· 체중 및 구강 검사를 포함한 제한된 신체 검사

· ECOG 수행 상태 평가

· 환자가 보고한 결과 (EQ-5D-5L 및 EORTC QLQ-C30)

· 사전-투여시 그리고 항-FGFR2-IIIb 주입 시작 후 0.5, 1, 및 2　시간에 수행된 바이탈 사인 (혈압, 맥박, 호흡 및 체온 [℃])

· 종합 안과 검사

· 항-FGFR2-IIIb 및 FOLFOX 6을 받기 위해 무작위 배정된 1부 환자와 2부 환자에 대한 OCT가 없는 슬릿 램프 검사(slit lamp examinations); 주기 2, 1일차에 후 매 6주 (주기 3, 15일차에, 주기 5, 1일차, 그리고 주기 6, 15일차에 전), 그 다음 주기 6, 15일차에 후 매 12주. 환자에게 지속적인 각막 발견이 있는 경우, 6-8 주마다 계속한다.　

· 연구 약물 투여 전 72 시간 이내에 얻은 결과를 통한 안전성 혈액 검사( 부록 2 참고.)

· 가임기 여성의 경우, 투여전 ≤72 시간에 소변 임신 검사

· 종양 평가는 주기 3, 1일차의 7 일 이내에 수행되고, 필요한 경우 다른 평가 (MRI, 방사선 사진, PET 및 초음파)와 함께, 임상 검사 및 적절한 영상화 기술을 포함

· 2부로 무작위화된 오직 최대 30명의 환자에 대해, 원발성 종양 또는 전이성 종양 부위에서 새로운 생검은 가능한 경우, 주기 3, 1일차 전 7 일 이내(그리고 투여 전 최소한 24시간)에 필수적이다 .

· 부록 3에 요약된 PK, 면역원성 테스트, 혈액-기반 생검 (ctDNA), 및 탐색적 바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플링.

· 오직 2부에서만, 혈액-기반 생검 (ctDNA) 샘플은 치료 전에 수집한다.

· 두피 또는 눈썹 모낭 샘플 (사용 가능한 경우, ~ 10개)

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

연구 약물 투여:

· 각 주기 1일차에 30 분에 걸쳐 IV 주입에 의해 투여되는 항-FGFR2-IIIb

· 30분 휴식 후, 각 주기의 1일차에 항-FGFR2-IIIb와 함께 투여되는 mFOLFOX6 화학요법.

2.2.3.7 주기 4, 1일차 및 후속 짝수 주기의 1일차

다음 과정이 수행될 것이다:

· 체중 및 구강 검사를 포함한 제한된 신체 검사

· 환자가 보고한 결과 (EQ-5D-5L 및 EORTC QLQ-C30)

· 항-FGFR2-IIIb 및 FOLFOX 6을 받기 위해 무작위 배정된 1부 환자와 2부 환자에 대한 OCT가 없는 슬릿 램프 검사; 주기 2, 1일차에 후 매 6주 (주기 3, 15일차에, 주기 5, 1일차, 그리고 주기 6, 15일차에 전), 그 다음 주기 6, 15일차에 후 매 12주. 환자에게 지속적인 각막 발견이 있는 경우, 6-8 주마다 계속한다.　

· 종양 평가는 주기 4, 1일차 시작 전 7 일 이내에 수행되고, 필요한 경우 다른 평가 (MRI, 방사선 사진, PET 및 초음파)와 함께 임상 검사 및 적절한 영상화 기술을 포함

· 1부의 경우, 항-FGFR2-IIIb를 투여하기 전, ≤　4　시간 그리고 후속 주기를 위하여 항-FGFR2-IIIb 주입 종료 후 15　분 (±　10　분)에 PK를 위한 혈액 샘플 2부의 경우, 항-FGFR2-IIIb 투여 ≤ 4 시간 전, 그리고 항-FGFR2-IIIb 주입 AE 보고 후 15 분 (±　10 분)에 PK 샘플 수집(오직 항-FGFR2-IIIb 및 mFOLFOX6 부문에 대하여 무작위화된 환자의 경우에만)

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

연구 약물 투여:

2.2.4 치료 방문-종료 또는 조기 종료

환자는 마지막 연구 치료 투여 후, 대략적으로 28 (± 3)에 연구 센터로 돌아가거나, 또는 사건의 경우 환자는 연구를 조기에 중단한다. 연구-종료 방문에서 다음과 같은 평가가 수행된다:

· 구강 검사를 포함한 체한된 신체 검사

· ECOG 수행 상태 평가

· 바이탈 사인 (5분 휴식 후, 앉은 자세 맥박, 혈압, 호흡 및 체온 [℃])

· 5분 휴식 후 12-리드 ECG

· 종합 안과 검사

· 안전성 혈액 테스트 (부록 2 참고)

· 가임기 여성의 경우, 소변 임신 검사

· 종양 스캔, EOT 방문 <6 주 전 마지막 스캔을 수행했거나, 또는 종양 진행이 이전에 결정된 경우, 생략할 수 있다

· 면역원성 테스트를 위한 혈액 샘플

· 오직 2부에서만, 혈액-기반 생검 (ctDNA) 샘플을 수집한다

· 두피 또는 눈썹 모낭 샘플 (사용 가능한 경우, ~ 10개)

· 1부의 모든 환자 및 2부의 항-FGFR2-IIIb를 받는 모든 환자의 PK용 혈액 샘플

· 바이오마커 평가를 위한 혈액 샘플

· AE 보고

· 수반되는 병용 약물의 검토

주석: 진행 또는 동의서의 철회 이외의 이유로 연구 치료를 중단한 후, 환자가 추가 항-암 요법 또는 진행을 시작할 때까지 종양 평가가 계속될 것이다.

2.2.5 장기 추적-관찰(Long-term Follow-Up)

· 1 부 및 2부 모두의 환자는 최종 환자가 이 연구에 등록된 후 최대 24 개월까지, 또는 사망할 때까지, 추적-관찰 상실, 동의의 철회 또는 스폰서에 의한 연구 종료까지(어느 것이든 먼저 발생하는 것), EOT 방문 후 대략 3 개월 ± 28 일마다 병원 방문 또는 전화를 통하여 생존에 대하여 장기 추적 관찰을 받을 것이다.

· 추적-관찰 기간 동안 환자가 항암-요법을 받는 경우 이를 기록해야 한다.

· 추적-관찰 기간의 첫 6 개월 동안 발생한 임신은 모두 스폰서에게 보고해야 한다.

· 환자는 사망, 추적-관찰 상실, 동의 철회 또는 스폰서의 연구 종료까지 따라야 한다.

· EOT 방문 후 발생하는 심각한 AEs는 조사자가 시험 약물과의 인과관계가 있다고 생각되면, 조사자에 의해 스폰서에게 보고 되어야 한다.

3. 통계 방법

데이터베이스 잠금 전, 별도의 통계 분석 계획 (SAP)이 마무리되어, 아래에 설명된 분석에 대한 자세한 방법을 제공한다. 계획된 분석으로부터의 편차는 최종 통합 연구 보고서에 설명되고, 타당화된다.

3.1 연구 환자

3.1.1 환자의 성향(Disposition)

연구의 각 단계 (예를 들어, 스크리닝, 주기 1 그리고 제공되는 경우, 후속 주기)에 진입가고, 완료한 환자의 수 및 백분율이 제시될 것이다. 철회 사유도 요약될 것이다.

3.1.2 프로토콜 편차

편차 유형별로 주요 프로토콜 편차가 있는 환자의 수와 백분율에 대한 요약이 제공된다. 편차는 데이터베이스 잠금 전, SAP에 정의된다.

3.1.3 분석 집단

연구를 위하여 다음 분석 집단이 정의된다:

· 안전성 집단 ― 최소한 하나의 용량의 항-FGFR2-IIIb의 임의의 부분을 받은 모든 환자.

· DLT-평가가능한 집단 ― 최소한 2 회 용량의 항-FGFR2-IIIb를 받고, 치료의 주기 1을 완료했거나, 또는 주기 1에서 DLT를 경험 한 모든 환자는 연구의 1부에 등록되었다.

· PK-평가가능한 집단 ― 최소한 하나의 용량의 항-FGFR2-IIIb를 받았으며, PK 프로파일의 결정을 위해 적절한 PK 평가를 받은 모든 환자. 적절성은 사례별로 결정되며, 혈액 샘플 분석 전에 평가된다.

· 치료-의향 (ITT) 집단 - 모든 등록된 환자

· 효능-평가가능한 집단 ― 적격성 기준을 충족하고, 항-FGFR2-IIIb를 최소한 1 회 용량을 투여받았으며, 최소한 1회의 기선-후(post-baseline) 질환 평가를 받은 모든 환자

3.2 전반적 고려사항

이 연구에 계획된 총 등록 환자 수는 대략적으로 최대 372 명이다. 표준 3+3 설계에 따라, 임의의 DLT에 대해 평가할 수 있는 대략적으로 최대 12 명의 환자가 1부에 등록될 것이다.

2부의 경우, FGFR2b-선별된 위암을 가진 대략적으로 최대 360 명의 환자를 등록하고, mFOLFOX6와 병용하여 위약, 또는 mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb를 제공받기 위해 1:1로 무작위화함으로써, 효능 및 내약성을 검사할 것이다. 적격 환자는 지역 (미국과 EU 대(vs) 아시아 대(vs) 나머지 세계), 치료이전 상태 (처음(de novo) 대(vs) 어쥬번트/네오-어쥬번트) 그리고 측정가능한 질병 상태 (측정가능 대(vs) 측정불 가능)에 따라 계층화될 것이다.

파워(Power) 및 샘플 크기:

이 연구는 PFS의 1 차 분석에 적절한 파워를 제공하도록 설계된다.

6 개월의 위약 및 mFOLFOX6를 받는 환자의 mPFS에 기초하여, 위약 및 mFOLFOX6과 비교하였을 때, 항-FGFR2-IIIb와 mFOLFOX6의 조합의 경우 24 개월의 누적 및 6 개월의 추적 후, 90%의 파워(2-면 α =0.05) 로 mPFS에 대해 0.5의 유해율 (HR)을 실증하기 위하여 96건의 PFS 사건 표적을 가진, 대략적으로 156명의 환자 (1:1로 무작위화된)가 요구된다.

PFS의 지수 분포를 가정하면, 이는 중앙값 PFS가 6 개월에서 12 개월로의 증가에 해당한다. 현재 설계에서, PFS에 대한 통계적 유의성을 초래할 수 있는 최저 관찰된 효과는 6 개월에서 9 개월로 50% 개선 (HR = 0.67)이다.

이 연구는 또한 OS의 1 차 분석에 또한 충분하다.

10개월 동안 위약 및 mFOLFOX6를 제공받은 환자의 mOS에 기초하여, 위약 및 mFOLFOX6과 비교하였을 때, 항-FGFR2-IIIb와 mFOLFOX6의 조합의 경우 36 개월의 누적 및 최종 환자의 등록 후 10 개월의 추적-관찰 후, 80%의 파워로, 전반적인 유형 I 오류 수준 0.05에서 mOS에 대해 0.7의 HR을 실증하기 위하여 249건의 사망 사건을 표적으로, 대략적으로 최대 360명의 환자까지 연구 등록이 지속될 것이다. 그룹 순차(sequential) 방법은 OS의 중간 및 최종 분석에서, 매개변수가 -4 인 감마 패밀리를 기반으로, O'Brien-Fleming 경계를 기반으로 하는 유형 I 오류율과 매개변수 -4인 감마 패밀리를 기반으로 하는 유형 II 오류율을 할당하는 데 사용될 것이다.

OS의 지수 분포를 추정하면, 이는 중앙값 OS가 10 개월에서 14.3 개월로의 43% 증가에 해당한다. 현재 설계에서, 최종 분석에서 OS에 대한 통계적 유의성을 초래할 수 있는 최저 관찰된 효과는 10 개월에서 12.8 개월로 28% 개선 (HR = 0.78)이다.

파워 및 샘플 크기 예상치는 EAST^®(V6.4)를 이용하여 예측하였다.

3.3 인구 통계, 기준 특성 및 수반되는 약물

인구 통계 데이터, 병력, 수반되는 질병 및 수반되는 약물은 코호트 및 전체적으로 요약된다. 연구 수행 기준이 충족되는지 확인하기 위해, 해당 표와 목록이 제공된다. 여기에는 자격 기준을 충족하지 못한 환자에 대한 설명, 프로토콜 위반 평가, 연구 약물 책임 및 연구의 일반 행동에 영향을 줄 수 있는 기타 데이터가 포함된다.

안전 집단에 대한 기선 특성이 요약된다. 치료를 시작하기 전, 사망하거나 또는 철회한 환자, 또는 필요한 안전 관찰을 완료하지 않은 환자는 별도로 설명되고 평가된다.

3.4 치료 순응도(Compliance)

치료 투여는 용량 투여, 용량 변경 또는 지연, 누적 용량, 평균 용량, 주입 횟수 및 치료 기간을 포함하는 코호트로 요약될 것이다.

3.5 효능 분석

1 부에서, 모든 분석은 기술될 것이며, 적절히 투여량 그룹별로 그리고 전체적으로 제시될 것이다. 기술 통계량(descriptive statistics)에는 관측 수, 평균, 표준 편차, 중앙값, 범위 및 연속 변수에 대한 사분위수 범위, 그리고 범주 변수의 수 및 백분율이 포함될 것이고; 적절한 경우 95% 신뢰 구간이 제시될 것이다.

3.5.1 1차 효능 분석

2부에서, 1 차 효능 분석은 위약 및 mFOLFOX6 그리고 mFOLFOX6과 병용된 항-FGFR2-IIIb로 치료된 환자에서 PFS의 비교이다.

1 차 종점(endpoint) PFS는 무작위화 시점부터 조사자 평가 (RECIST v.1.1에 따라)에 근거하여 방사선적으로 확인된 진행성 질환의 날짜, 또는 임의의 원인에 의한 사망 날짜(어느 쪽이건 먼저 발생하는 날짜)까지로 정의된다. 이차 효능 종점은 OS 및 ORR을 포함한다.

PFS에 대한 중간 분석 및 1 차 분석이 있으며, 둘 다 사건(event)-기반 분석이다. 위약 및 mFOLFOX6과 비교하여, mFOLFOX6과 병용된 항-FGFR2-IIIb의 조합 경우, HR> 0.806을 배제하기 위해, 등록된 환자에서 관찰된 48 건 (PFS의 1 차 분석을 위한 표적 96 PFS 사건의 50%) 후, 중간 분석에서 PFS의 무용성(futility) 시험 만이 수행될 것이다. 중간 분석(interim analysis)은 등록한 첫 번째 환자로부터 대략적으로 20 개월에서 일어날 것으로 추정된다.

PFS의 1 차 분석은 첫 156 명의 등록된 환자에서 적어도 96건의 PFS 사건이 관찰될 때 수행될 것이고, 치료-의향 (intent-to-treat: ITT) 집단을 사용하여 수행될 것이다.

1 차 분석에는 RECIST v.1.1에 따라 조사자가 결정한 방사선 진행 사건 및 사망을 포함될 것이다.

PFS의 1 차 분석은 0.05의 유의성 수준으로 계층화된 로그-랭크 2-면 테스트(log-rank 2-sided test)를 사용하여 수행될 것이다. 계층화 요소는 대화식 음성 및 웹 응답 시스템 (IXRS)에 설명 된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다.

계층화된 로그-랭크 테스트의 p-값이 통계적으로 유의하고 (<0.05 양면), HR은 <1 인 경우, PFS에 차이가 없다는 귀무 가설(null hypothesis)은 기각될 것이고, PFS는 위약 및 mFOLFOX6을 받는 그룹과 비교하여, mFOLFOX6과 병용하여 항-FGFR2-IIIb를 받는 그룹에서 통계적으로 연장되는 것으로 추론될 것이다.

각 치료 부문에서 중간 PFS 및 관련 95% 신뢰 구간은 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 추정될 것이다. 유해율 (HR=λ항-FGFR2-IIIb+ mFOLFOX6/λmFOLFOX6)은 유일한 주요 효과로써 처리 그룹을 갖는 Cox 회귀 모델을 사용하여, 로그-랭크 테스트에 사용된 것과 동일한 계층화 계수(stratification factors)로 계층화되어 추정될 것이다. 계층화되지 않은 HR도 또한 제공될 것이다. 2 차 종점 OS 분석은 1 차 종점, PFS가 통계적으로 유의할 때 수행되며, OS 공식 가설이 0.05 레벨에서 계층적으로 테스트될 것이다. 1 차 및 2 차 종점 테스트의 유형 I 오류율은 0.05 레벨에서 이 고정된-시퀀스 테스트 절차를 사용하여 강력하게 제어될 것이다.

3.5.2 2차 효능 분석

OS 및 ORR을 포함한 2 차 종점 분석은 1 차 종점, PFS가 통계적으로 유의할 때 수행되며, OS 및 ORR의 공식 가설이 0.05 레벨에서 계층적으로 테스트될 것이다. OS가 먼저 테스트되고, 유의적인 경우 ORR이 다음에 테스트될 것이다. 1 차 및 2 차 종점 테스트의 유형 I 오류율은 0.05 레벨에서 이 고정된-시퀀스 테스트 절차를 사용하여 제어될 것이다.

PFS 테스트가 통계적으로 유의하면, 계획된 OS에 대한 중간 및 최종 분석이 있을 것이다. OS의 중간 분석은 PFS의 1 차 분석 시 수행될 것이다. OS를 분석해야 하는 경우, 중간 (즉, 최소한 96건의 PFS 사건이 관찰된 경우) 및 종료 시점 (즉, 249명의 사망이 관찰될 때)에서의 OS 분석은 ITT 집단에 대해 수행될 것이다.

OS의 가설 테스트는 0.05 수준의 유의성을 가진 계층화된 로그-랭크 2-면-테스트를 사용하여 수행될 것이다. 그룹 순차(sequential) 방법은 OS의 중간 및 최종 분석에서, 매개변수 -4 인 감마 패밀리를 기반으로, O'Brien-Fleming 경계를 기반으로 하는 유형 I 오류율과 매개변수 -4인 감마 패밀리를 기반으로 하는 유형 II 오류율을 할당하는 데 사용될 것이다. 계층화 요소는 IXRS에 설명된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다.

각 치료 부문에 대한 중간 OS 및 관련 95% 신뢰 구간은 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 추정될 것이다. HR은 유일한 주요 효과로써 처리 그룹을 갖는 Cox 회귀 모델을 사용하여, 로그-랭크 테스트에 사용된 것과 동일한 계층화 계수로 계층화되어 추정될 것이다. 계층화되지 않은 HR도 또한 제공될 것이다.　

ORR은 RECIST v.1.1에 따라 조사자가 정의한 바와 같이, 부분 반응 또는 완전 반응을 보이는 환자의 비율로 정의된다. ORR의 1 차 분석은 기준 측정 가능한 질환을 가진 환자들 사이에서 수행될 것이다. ORR 분석에서, 기선 이후 적절한 종양 평가가 없는 환자는 비-응답자로 계수될 것이다. 계층화된 Cochran-Mantel-Haenszel 테스트를 사용하여, ORR의 공식 가설 테스트가 수행될 것이다. 계층화 요소는 IXRS에 설명된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다.

3.5.3 탐색적(Exploratory) 효능 분석

탐색적 효능 종점은 모든 등록된 환자에 대해 EQ-5D-5L 및 EORTC QLQ-C30에 의해 측정된 바와 같이, 반응 환자에서의 반응 기간, 1-년 OS 비율 및 QoL의 기선으로부터의 변화를 포함한다.

반응 기간은 객관적인 반응이 있는 환자의 경우, RECIST 1.1에 의한 질병 진행에 대한 객관적인 반응에 대한 최초 방사선 사진 기록부터 임의의 원인으로 인한 사망까지로 정의된다. 치료 집단에서 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 중간 반응 기간 및 관련 95% CI를 추정하게 된다. 처리 집단 간의 차이는 무작위화에 사용된 것과 동일한 계층화를 사용하여, 계층화된 로그-랭크 테스트를 사용하여 분석된다.

1 년 시점에서 생존 환자 비율로 정의된 1-년 OS 비율은 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 전체 생존율을 분석하는 동안 추정된다. 비율의 편차는 Greenwood의 공식을 사용하여 추정된다. 두 치료 집단 간의 1-년 생존율 차이에 대한 전체 비교는 z-통계를 사용하여 산출되며, 이때 t = 1 년이다.

EQ-5D-5L 및 EORTC QLQ-C30으로 측정된 QoL의 기선에서 변경되는 경우, 기선 변경에 대한 요약 통계는 각 기선 평가 후 그리고 치료 종료 시 제공된다. 적용가능 한 경우, 반복 측정 분석 방법을 사용하여, 처리 집단 간의 차이를 분석할 것이다.

블라인드 독립 검토 위원회 (BIRC)

BIRC는 조사자의 평가와 BIRC의 평가 사이의 일치성을 평가하기 위해, 설립될 것이다. 사전-특정된 감사 계획이 가상 헌장(imagine charter)에 포함되는 반면, 환자 비율, 이미징 하위집합 식별, 모든 이미지 감사시 기준 및 지역-검토 및 감사 PFS 결과 간의 비교에 대해 자세히 설명된다.

3.6 안전성 분석

안전성 분석에는 연구를 통하여 임의의 연구 약물 (mFOLFOX6와 병용되는 항-FGFR2-IIIb, 또는 위약 및 mFOLFOX6)을 받고 치료-후 안전성 정보를 제공하는 모든 환자가 포함될 것이다. 모든 AEs는 Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA)을 사용하여 코드화될 것이다. 조사자는 CTCAE v 4.03을 사용하여 AEs의 심각도를 분류할 것이다.

치료 응급 부작용 (TEAE)은 연구 약물의 개시일, 또는 첫 번째 투여 이후 제시된 임의의 사건, 또는 치료 후 악화를 치료하기 전 제시된 임의의 사건으로 정의된다. 마지막 투여 +30 일 이전에 개시일을 갖는 TEAEs만 요약 표에서 표로 나타낼 것이다. AEs를 경험하는 환자의 수 및 백분율은 시스템 장기 부류, 선호되는 기간, 연구 약물과의 관계 및 각 치료 그룹의 심각성으로 요약될 것이다. 사망을 포함하여 SAE를 경험하거나, 연구로부터 조기 철회 또는 연구 약물 중단과 관련하여 AE를 경험한 환자에 대한 환자-별 목록(by-patient listing)이 제공될 것이다. 임상 실험실 데이터는 실험실 테스트 유형으로 요약될 것이다. 연구 약물 투여 후, 비정상 (즉, 기준 범위를 벗어난) 및/또는 임상적으로 유의적인 이상을 경험한 환자의 수 및 백분율이 각 임상 실험실 측정에 대해 제시될 것이다. 각 임상 실험실 측정에 대해, 기선 및 치료-후 예정된 모든 방문에 대한 기술 통계(descriptive statistics)가 제공될 것이다. 기선에서 치료후 방문까지의 변화도 또한 제공될 것이다. 바이탈 사인(vital signs)에 대한 기술 통계도 비슷한 방식으로 또한 제공될 것이다. 또한, CTCAE 등급 (해당되는 경우) 및 고/저 플래그(high/low flags) (CTCAE 등급이 정의되지 않은 경우)의 기선에서 변이가 처리 그룹에 의해 제시될 것이다. 안전성 종점에 대한 공식적인 비교는 계획되어 있지 않다.

3.7 약동학 분석(Pharmacokinetic Analyses)

PK 매개변수는 비-구획 분석(non-compartmental analysis)을 사용하여 추정되지만, 구획(compartment) 분석이 적절한 경우, 사용될 수 있다. 개별 및 평균 (± SD) 혈청 항-FGFR2-IIIb 농도-시간 데이터는 용량 수준에 의해 도표화되고, 플롯팅될 것이다. 항-FGFR2-IIIb PK 매개변수는 정맥내 주입 입력(input)을 갖는 비-구획 분석 (NCA) 방법을 사용하여, 혈청의 연구 약물 농도-시간 데이터로부터 추정될 것이다. 대안적인 방법이 고려될 수 있다. 추정된 개인 및 평균 (± SD) PK 매개변수들은 용량 수준에 따라 표로 작성되고 요약된다. 혈청 항-FGFR2-IIIb 농도-시간 데이터 및 추정된 PK 매개변수에 대한 다른 기술 통계가 보고될 수 있다. 용량 비례성(proportionality), 연구 약물 축적 및 정상 상태 달성은 데이터가 허용하는 대로 평가될 것이다.

항-FGFR2-IIIb 노출에 대한 면역원성의 영향을 평가할 것이다.

3.8 중간(Interim) 분석

위약 및 mFOLFOX6과 비교하여, mFOLFOX6과 병용된 항-FGFR2-IIIb의 조합 경우, PFS에서 HR> 0.806을 배제하기 위해, PFS의 무용성 테스트만 시행될 때, 첫 156명의 등록된 환자에서 48 건 (PFS의 1 차 분석을 위한 96 PFS 표적 사건의 50%)이 관찰된 후, PFS에 대한 중간 분석이 있을 것이다. 또한, PFS 테스트가 통계적으로 유의하면, 계획된 OS에 대한 중간 분석이 있을 것이다. OS의 중간 분석은 PFS의 1 차 분석 시 수행될 것이다. OS가 분석되어야 한다면, 중간에 OS 분석은 ITT 집단에서 수행되며, 중간 분석에서 유형 I 오류율은 분석 당시, 정보의 분획 (사망 사건)에 따라, Lan-DeMets O'Brien-Fleming 알파 스펜딩(spending) 기능을 구현하여 결정된다.

또한, 안전성 데이터는 스폰서 및 CRO의 의료 모니터가 정기적으로 검토한다. 용량 증가 단계 동안, 의료 모니터 및 조사자는 용량 증가(escalation) 또는 탈-증가(de-escalation) 전, 각 용량 코호트로부터 안전성 데이터를 검토할 것이다. 모든 주기의 AE 데이터는 가능한 경우 의료 모니터에 제공된다.

3.9 계획된 분석의 변화

프로토콜에서 계획된 통계 분석 텍스트와 최종 SAP간에 불일치가 존재하면, 프로토콜 수정이 발행되지 않고 SAP가 우선한다.

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약어 및 정의 목록

실시예 2: 기존 치료받지 않은 진행된 위암 및 위식도암 환자에서 변형된 FOLFOX6와 비교하여, 변형된 FOLFOX6와 병용된 항-FGFR2-IIIb 항체의 단계(phase) 1/3 연구

프로토콜 개요

이 연구는 본원의 실시 예 1에 기재된 연구의 변형이며, mFOLFOX6와 병용하여 항-FGFR2-IIIb 항체의 안전성, 내약성, 효능, PK 및 PD를 평가하기 위한 다중심 연구이다. 이 연구는 GI 종양 (FGFR2 선별되지 않음) 환자에서 개방-라벨, 단계(phase) 1 안전성 진행, 이어서 FGFR2-선별된 GC 환자에서 무작위화된, 개방-라벨 단계 3을 포함한다 (FGFR2b 과다발현의 예상 IHC 분석 및/또는 FGFR2 유전자 증폭을 설명하는 ctDNA 혈액 분석에 의해 결정됨). 초기 스크리닝 기간 이후, 2 주의 주기에서 환자는 항-FGFR2-IIIb 항체와 병용된 mFOLFOX6 또는 오직 mFOLFOX6 단독으로 치료될 것이다.

단계(phase) 1: 용량-증가 안전성 진행

단계 1은 mFOLFOX6과 병용하여 항-FGFR2-IIIb 항체의 공개-라벨 용량-증가 연구다. 적격 환자는 임의의 유형의 절제불가능한 국소적으로 진행된 또는 전이성 GI 암을 가지고 있으며, 최소한 2　용량의 mFOLFOX6 화학요법을 수령하는 후보이다. FGFR2 상태는 등록을 요하지 않는다. FGFR2 상태는 IHC에 의해 소급적으로 시험될 것이고 (조직이 이용 가능한 경우) ctDNA 혈액 분석을 위해 샘플이 수득될 것이다.

단계 1은 단계 3에서 mFOLFOX6과 병용 투여될 항-FGFR2-IIIb의 RD를 결정하기 위해, mFOLFOX6과 조합된 항-FGFR2-IIIb 항체의 최소 2 투여량의 코호트로 구성된다. 환자는 기존 mFOLFOX6 화학요법을 시작했거나 또는 받지 않았을 수 있다. 환자가 받을 수 있는 기존 mFOLFOX6 용량의 수에는 상한이 없다.

등록된 각 환자는 안전성 평가, PK 및 용량-제한 독성 발생에 대하여 항-FGFR2-IIIb 항체를 이용한 치료의 첫날(주기 1, 1일차에 [연구 1일차에])에 시작되는 28일(DLT 기간) 동안 관찰된다. 환자 코호트는 2 주의 주기에서 mFOLFOX6의 화학요법 체제의 표준 용량과 조합하여, 항-FGFR2-IIIb의 용량을 증가시키면서, 치료될 수 있다.

항-FGFR2-IIIb 항체 투여

항-FGFR2-IIIb 항체 IV는 각 주기 (2　주 = 1 주기)의 1일차에, 그리고 mFOLFOX6 화학요법 투여 전, 매 2 주 마다 투여된다. 오직 코호트 2에서만 치료된 환자는 주기 1의 8일차에 한 번의 추가 용량의 항-FGFR2-IIIb 항체(mFOLFOX6는 이날 투여되지 않을 것이다)를 제공받을 것이다. 항-FGFR2-IIIb 항체는 말초 정맥 또는 중심 정맥 카테터를 통해 대략 30 분 IV 주입으로 투여될 것이다. 항-FGFR2-IIIb 항체 주입을 위한 IV 투여 세트에는 0.22-μm 인-라인 필터 또는 0.22-μm 주사기 필터를 함유해야만 한다.

mFOLFOX6 투여

mFOLFOX6 화학요법의 투여는 각 치료 주기의 주기 1, 1일차에 (연구 1일차에) 항-FGFR2-IIIb 항체의 주입 종료 후 30분에 또한 시작될 것이다. mFOLFOX6은 다음과 같이 매 2　주에 투여될 것이다:

- 1일차: 120분에 걸쳐 옥살리플라틴 85 mg/m2 IV 주입,

- 1일차: 120분에 걸쳐 류코보린 400　mg/m2 IV 주입, 만일 Y 커넥터를 사용하는 경우, 옥살리플라틴과 동시에 투여 될 수 있으며, 만일 Y 커넥터를 사용하지 않으면 순차적으로 투여된다,

- 1일차: 옥살리플라틴 및 류코보린 직후, 대략적으로 5 분에 걸쳐 5 FU 400 mg/m2 볼루스,

- 1일차: 5-FU 볼루스 직후, 46시간에 걸쳐 5-FU 2400 mg/m2 연속 IV 주입.

28 일 DLT 기간 후, 환자는 독성 분석에 근거하여 유지된 용량의 또는 감소된 용량의 mFOLFOX6 또는 항-FGFR2-IIIb 항체를 가질 수 있다. 지역 의료 표준에 따라, 조사자의 재량에 따라 사전약물 치료를 사용할 수 있다.

단계 1 코호트

단계 1에서, 테스트되는 항-FGFR2-IIIb 항체 코호트의 제 1　용량은 6 mg/kg이다. 예상되는 용량 수준은 다음과 같다:

- 코호트 1: 6 mg/kg 항-FGFR2-IIIb 항체 매 2 주;

- 코호트 2: 15 mg/kg 항-FGFR2-IIIb 항체 매 2 주; 8일차 (오직 주기 1에서만)에 7.5 mg/kg의 1 용량;

- 코호트 3 (필요하다면): 15 mg/kg 항-FGFR2-IIIb 항체 매 2 주;

- 코호트 4 (필요하다면): 최적의 표적 노출로 내약성을 달성하기 위해, 코호트 3보다 더 낮지만 코호트 1보다 더 높은 용량 수준.

제 1 코호트가 6 mg/kg에서 28-일 DLT 기간을 마친 경우, 매 2 주마다 15 mg/kg의 제 2 용량 코호트는 8일차 (오직 주기 1에서만)에서 7.5 mg/kg의 용량과 함께 롤링(rolling)-6 설계에서 테스트되며, 6명의 환자를 등록할 것이다. 용량 증가 결정은 DLTs, 전반적인 안전성 및 내약성 평가에 근거할 것이다. 용량 증가 결정은 각 코호트에 등록된 최종 환자가 28-일 DLT 기간을 완료한 후 (항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6의 2 치료 주기의 완료) 이루어진다. 용량 증가 결정은 스폰서 및 조사자로 구성된 코호트 검토 위원회 (CRC)에 의해 비준될 것이다. 코호트 2에서 ≥ 2 DLTs가 관찰되는 경우, 코호트 1과 2 사이의 용량 수준을 롤링 6 (2 주마다 15 mg/kg) 설계로 평가할 수 있다 (코호트 3). 코호트 3에서 ≥ 2 DLTs가 관찰되는 경우, 롤링 6 설계에서 코호트 3보다 더 낮지만 코호트 1보다 더 높은 용량 수준이 평가될 수 있다 (코호트 4). DLTs는 항-FGFR2-IIIb 항체와 관련하여 조사자에 의해 간주되는 다음 중 임의의 것으로 정의된다.

· < 0.5 x 10⁹/L의 ANC가 > 5 일' 기간 또는 열성 호중구감소 (가령, 1시간 이상 ANC < 1.0 x 10⁹/L, >　38.3℃의 단일 열, 또는 열 >　38 ℃). 기관 표준에 따라 G-CSF 사용이 허용.

· 의학적 개입이 필요한 출혈과 함께, 혈소판 <　25 x 10⁹/L 또는 혈소판 <　50 x 10⁹/L

· 장기적 (>　3 일) < 50 x 10⁹/L 혈소판

· 7 일 이내에 해결되지 않는 등급 2-3의 안과적 AE

· 등급 4 안과적 AE

· AST/ALT >3x ULN 및 동시적으로 암과 관련되지 않은 간의 총 빌리루빈 >2　x　ULN임

· 등급 3 또는 그 이상의 임의의 비-혈액학적 AE (욕지기, 구토 및 설사 제외).

· 72 시간 동안 지지 요법으로 해결되지 않는 3 등급 메스꺼움, 구토 또는 설사

· 72 시간 안에 해결되지 않는다면, 조사자 및 스폰서 동의에 따라 임상적으로 중요하지 않은 등급 3 등급 값.

· 등급 4 메스꺼움, 구토 또는 설사

· 임의의 등급 4 실험실 값

아래 표 7의 다음 알고리즘은 용량 증가 결정에 사용된다.

단계 3의 경우, 항-FGFR2-IIIb의 RD는 전반적인 안전성, 내약성 및 PK의 평가에 기초하여 CRC에 의해 식별될 것이고, 매 2 주마다 IV를 투여되는 15mg/kg을 초과하지 않을 것이며, 단, 주기 1의 8 일차에만 7.5mg/kg의 1 회 용량으로. RD를 결정할 때, CRC는 DLT 평가 기간 동안 관찰된 독성, DLT 평가 기간 이후에 관찰된 독성, 뿐만 아니라 DLT 기준에 부합되지 않는 동성으로 인한 mFOLFOX6 또는 항-FGFR2-IIIb 항체의 용량 감소 및 중단을 고려할 것이다. 데이터의 전체성에 기초하여, 항-FGFR2-IIIb 항체의 선택된 RD는 투여될 mFOLFOX6의 용량 강도의 감소를 초래하지 않을 것으로 예상되는 용량일 것이다. 따라서, RD는 식별된 최대 허용 용량 (MTD)과 동일하거나 동일하지 않을 수 있다. 예를 들면, MTD에 도달하지 못했거나, 또는 단계 1의 후속 치료주기에서 얻은 데이터가 안전성 프로파일에 대한 추가 통찰력을 제공하는 경우, 그 다음 RD는 비록 MTD보다는 더 높지는 않지만, 용량이 다를 수 있다.

MTD는 DLT 기간 동안 환자의 <33%가 DLT(용량 제한 독성)를 경험하는 최대 용량으로 정의된다. 코호트 1에서 3 명의 환자 중 1 명에서 DLT가 관찰되면, 3 명의 추가 환자가 이 용량 수준으로 등록될 것이다. 용량 수준으로 치료된 3-6 명의 환자 중 2 명은 DLT를 경험할 때까지, 용량 증가가 계속 될 수 있다.(용량 수준은 단계 1에서 용인되는 최대 용량 수준을 초과하지 않는다). 그다음 더 낮은 용량은 MTD로 간주될 것이다.

연구 기획

코호트 2에 등록을 시작하면 (8 일차에 7.5mg/kg의 1 회 용량으로 2 주마다 15mg/kg 코호트 [사이클 1에만 해당]), 6 명의 환자가 안전성과 효능을 탐색하기 위해 등록될 것이다. 단계 1의 총 등록 수는 대략적으로 9 ~ 21 명일 것이다.

항-FGFR2-IIIb 항체와 관련된 DLT 또는 AE가 아닌 이유로 인해, DLT 기간 동안 코호트에 의해 정의된 바와 같은 항-FGFR2-IIIb 항체의 총 수의 용량 및 2 개의 전체 용량의 mFOLFOX6을 받지 않는 환자는 가치가 없는 것으로 간주되고, 이 환자는 대체될 것이다. 대체된 환자는 조사자의 재량에 따라 그리고 스폰서와 상의한 후, 계속 연구에 남아 있을 수 있다. 28-일 DLT 기간 동안, 추가 용량의 항-FGFR2-IIIb 항체 또는 2 용량 이상의 mFOLFOX6이 투여되어서는 안된다. 주기 2의 1일차에 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6 용량을 동기화시킬 필요가 없다. 예를 들면, 항-FGFR2-IIIb 항체가 아닌 mFOLFOX6에만 관련된 것으로 간주되는 AE로 인하여 mFOLFOX6가 지연되는 경우, 항-FGFR2-IIIb 항체는 mFOLFOX6 투여 스케줄의 지연에 관계없이, 주기 1 및 2에 대해 예정된 것과 같이 투여되어야 한다.

DLT 기간이 완료된 후, 환자는 조사자의 재량에 따라 mFOLFOX6와 함께 항-FGFR2-IIIb 항체를 계속 받을 수 있다. 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 1 일 주기로 2 주(1 주기)마다 추가 치료를 시행할 수 있다.

치료의 첫 3주기 (42 일) 동안 화학요법-관련 독성으로 인해 mFOLFOX6주기가 2 주 이상 지연되는 경우, 항-FGFR2-IIIb 항체 는 일정 (±3 일)에 투여되어야 한다. 첫 3 주기 후, 항-FGFR2-IIIb 항체는 투여되는 mFOLFOX6과 동기화되도록 ± 7 일까지 지연될 수 있다. 항-FGFR2-IIIb 항체 또는 mFOLFOX6의 강제되는 최대 허용 수의 용량은 없다. mFOLFOX6 요법의 진행중인 투여는 DLT 기간 이후 다음 일정에 따를 것이다:

· mFOLFOX6의 출발 용량에는 46 시간에 걸쳐 85 mg/m²의 옥살리플라틴, 400 mg/m²의 엽산 칼륨 (엽산), 400 mg/m² 볼루스 용량의 5-FU, 그리고 2400 mg/m² 연속 주입 용량의 5-FU이 포함된다.

· 조사자-평가한 방사선 질환 진행 (오직 단계 3에서 만), 임상 질환 진행 (오직 단계 1에서 만), 허용되지 않는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜 지정 철회 기준을 충족할 때까지, mFOLFOX6 체제는 매 2 주 마다 투여 (± 3 일)될 것이다.

· 1일차: 120분에 걸쳐 옥살리플라틴 85 mg/m² IV 주입

· 1일차: 120분에 걸쳐 류코보린 400　mg/m² IV 주입, 만일 Y 커넥터를 사용하는 경우, 옥살리플라틴과 동시에 투여 될 수 있으며, 만일 Y 커넥터를 사용하지 않으면 순차적으로 투여된다,

· 1일차: 옥살리플라틴 및 류코보린 직후, 대략적으로 5 분에 걸쳐 5 FU 400 mg/m² 볼루스,

· 1일차: 5-FU 볼루스 직후, 46시간에 걸쳐 5-FU 2400 mg/m² 연속 IV 주입.

mFOLFOX6의 진행중인 투여에 대한 모든 수정은 다음 지침에 따라 발생할 수 있다:

· 체중이 최소한 10% 변화하면, 복용량을 다시 계산해야 한다.

· 환자에게 각 주입 동안 그리고 주입 후, 대략적으로 72 시간 동안 추운 날씨에 노출되지 않도록 조언한다.

· 옥살리플라틴을 시작하기 전, 저칼륨혈증 및 저마그네슘 혈증을 교정한다.

· 5-FU 후 심한 설사, 점막염 및 골수 억제는 디하이드로피리미딘 탈수소효소 결핍에 대한 즉각적인 평가를 해야 한다.　

· 류코보린 용량은 d,l-라셈체 혼합물에 대해 제공된다. LEVO-류코보린 (l-류코보린)의 경우 용량의 절반을 이용

· 질환 진행 전, 어떤 이유로 옥살리플라틴 투여가 중단된 경우, 5-FU/류코보린 요법은 질병 진행, 수용할 수 없는 독성 또는 연구 철회의 다른 원인이 있을 때까지, 매-2 주 간격으로 계속 될 수 있다. 5-FU/류코보린 요법이 중단되는 경우, 옥살리플라틴은 중단되어야 한다.

mFOLFOX6 독성에 대한 특정 용량 조정이 하기 표 8에 제시되어 있다.

연구의 단계　1 부분에서, 항-FGFR2-IIIb 항체가 어떤 이유로든 영구적으로 중단된 경우, 상기 환자는 항-FGFR2-IIIb 항체의 마지막 투여 후 대략 28 일에 치료 종료 (EOT) 추적-관찰 방문을 할 것이다. 이들 환자에 대한 추가적인 추적-관찰은 수행되지 않으며, 항-FGFR2-IIIb 항체 치료의 추적-관찰 방문의 종료는 연구의 끝이다. 조사자-평가한 진행 이외의 다른 이유로 인해 또는 다른 프로토콜-명시된 철회 기준 이외의 이유로 mFOLFOX6가 중단된 경우, 항-FGFR2-IIIb 항체는 조사자의 재량에 따라 단일 물질 요법으로서 계속될 수 있다.

단계 3 무작위화된 개방 부분

항-FGFR2-IIIb 항체에 대한 RD가 CRC에 의해 확인될 때, 단계 3으로의 등록이 시작되고, 단계 1에서 평가되고 허용되는 최고 용량 수준을 초과하지 않는다. 환자는 1 단계 또는 3 단계에 등록할 수 있지만, 이 연구의 두 단계에 모두 등록할 수는 없다. 등록을 위한 이 연구의 단계 3 부분 개설은 스폰서의 재량에 따른다.

환자 등록 자격은 절제불가능한 국소적으로 진행된 또는 전이성 GC를 가져야 하며, 표준 일선 요법으로서 mFOLFOX6 화학요법의 후보가 되며, 중심에서 수행되는 IHC 조직 시험 및 /또는 ctDNA 혈액 분석에 의해 FGFR2 양성인 종양을 가져야 한다. FGFR2 검사를 위해 조직 (보관된 또는 새로운) 및 혈액 시료를 제출하기 전에 환자가 사전-스크리닝 사전 동의서 (ICF)에 서명해야 한다. 중앙집중식(centralized) FGFR2 테스트 결과를 받는데 대략적으로 2 주가 소요될 수 있기 때문에, 환자는 조사자의 재량에 따라 이 중간 시간 기간 (사전-스크리닝 기간) 동안 최대 1 용량의 mFOLFOX6을 받을 수 있다. 이 1 용량의 화학요법은 연구의 요구 사항이 아니며. 이 임상 연구의 일부로 간주되지 않는다.

IHC에 의해 FGFR2b에 대해 양성 및/또는 ctDNA 혈액 분석에 의해 FGFR2 유전자 증폭에 양성인 종양을 갖는 환자는 완전한 연구 참여에 동의하고 (전체 연구 ICF에 서명), 스크리닝 기간에 들어갈 수 있다. 전체 연구 ICF에 서명하고, 연구에 등록하는 데 걸리는 시간은 심사 기간 (최대 21 일)으로 간주된다. 상기 스크리닝 기간 동안, 환자는 모든 자격 기준이 충족되도록 프로토콜 명시된 스크리닝 절차를 거치게 될 것이다.

본 연구의 단계 3 부분을 무작위화되고, 공개-라벨되며, 조합의 효능을 평가하기 위하여 mFOLFOX6에 대비하여 mFOLFOX6과 병용되는 항-FGFR2-IIIb 항체의 RD를 제공받기 위하여, 1:1로 무작위화된 548명의 FGFR2-선별된 GC 환자에 등록하게 될 것이다. 환자는 무작위화 후 3 일 이내에 연구 치료제를 먼저 투여 받아야 한다. 치료 부문(arms)은 다음으로 구성된다:

- 부문 1: mFOLFOX6과 병용하여 항-FGFR2-IIIb 항체를 매 2 주 마다 투여, 또는

- 부문 2: mFOLFOX6를 매 2 주 마다 투여.

질병 진행 이외의 다른 이유로 인해, 연구 치료의 임의의 성분 (mFOLFOX6, mFOLFOX6의 성분 또는 항-FGFR2-IIIb 항체)의 중단이 다른 성분의 중단을 요구하지는 않는다. 예외적으로 어떤 이유로든 5-FU이 중단되면 옥살리플라틴 및 류코 보린의 중단을 필요로 한다. 상기 논의된 바와 같이, mFOLFOX6 체제의 지속적인 투여가 제공될 수 있다.

치료의 처음 3주기 동안, 항-FGFR2-IIIb 항체는 mFOLFOX6 치료의 지연에 관계없이, 일정 (± 3 일)에 투여되어야 한다. 만일 mFOLFOX6이 지연된다면, 항-FGFR2-IIIb 항체의 첫 3주기 후, 항-FGFR2-IIIb 항체는 mFOLFOX6 투여와 동기화되도록, 최대 7일까지 지연될 수 있다. 그러나, 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6의 투여 동기화는 프로토콜 요건이 아니다. 만일 7 일 후에도 환자가 여전히 mFOLFOX6을 수용할 수 없는 경우, IMP는 매 2 주 (±　3　일)마다 단일 요법으로 계속해야 한다.

동의 철회 이외의 이유로 인해 모든 연구 치료제 (항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6의 모든 성분)를 중단한 환자는 마지막으로 투여된 치료 성분(옥살리플라틴, 류코보린, 5-FU, 또는 항-FGFR2-IIIb 항체)의 최종 투여 후 대략 28 일 후에 EOT 안전성 추적-관찰 방문을 하게 된다.

그러나, 질병 진행 또는 동의 철회 이외의 이유로 연구 치료 (항-FGFR2-IIIb 항체 및/또는 mFOLFOX6)를 중단한 환자는 생존에 대하여 장기 추적-관찰을 받게 되는 시점에서, 방사선 치료가 진행 또는 추가 항암 요법이 시작될 때까지는 프로토콜 일정에 따라 종양 평가를 계속 받게 된다.

EOT 방문 후 대략적으로 매 3 개월 (± 1 달)마다 최종 환자가 이 연구에 등록된 후 최대 24 개월까지, 또는 사망, 추적-관찰의 상실, 동의 철회 또는 스폰서의 연구 종료(어느 것이든 먼저 발생되는 것)까지, 생존에 대한 장기 추적-관찰은 클리닉 방문, 전화 통화, 또는 환자 등록소(국가 법률에 따라, 그리고 일반적인 데이터 보호법에 따라)를 이용하여 완료해야 할 것이다.

단계 1 및 단계 3의 포함 기준

단계 1 또는 단계 3에 등록한 환자는 다음 포함 기준을 모두 충족해야 한다.

· 절제불가능한, 국소적으로 진행된, 또는 전이성 질환

· 임의의 연구-특이적 평가 전, 기관 검토 위원회 (IRB)/독립 윤리 위원회 (IEC)-승인된 사전 동의서 (ICF)를 이해하고 서명

· 조사자의 의견으로 최소한 3 개월의 기대 수명

· 0 내지 1의 Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 수행 상태

· ICF 서명 당시 ≥18 세

· 주기 1, 1일차에 치료 전 ≤ 96 시간, 음성 혈청 β-인간 융모 성생식선 자극 호르몬 (β-hCG) 임신 테스트(오직 가임기 여성에 해당)

· 성적으로 활동적인 환자 (가임기 여성 및 남성)에서, 2 가지 효과적인 피임법을 사용할 의사가 있는지, 그 중 하나(1)는 항-FGFR2-IIIb 항체의 마지막 투여 후 6 개월까지 물리적 장벽 방법 (콘돔, 격막 또는 자궁 경부/뚜껑 캡)이어야 한다. 다른 효과적인 피임법은 다음을 포함한다:

· 스크리닝 전 최소 6 개월에 영구 불임 (자궁 내 절제술 및/또는 양측 난소 절제술 또는 수술로 양측 튜브 결찰 또는 정관 절제술)

· 연구 전 최소 90 일 동안 안정된 경구 피임 요법 또는 자궁 내 또는 임플란트 장치를 하거나, 또는 삶의 방식에서 성행위를 삼가는 가임기 여성

· 주기 1, 1일차에의 96시간 이내에 다음과 같은 실험실 값으로 확인된, 적절한 혈액학적 및 생물학적 기능.

골수 기능

· 절대적 호중구 수(ANC) ≥　1.5 × 10⁹/L

· 혈소판 ≥　100　×　10⁹/L

· 헤모글로빈 ≥　9　g/dL

간 기능

· 아스파르테이트 아미노전달효소 (AST) 및 알라닌 아미노전달효소 (ALT) <　3　× 정상적인 상한선 (ULN); 　간 전이라면, 그때 <　5　×　 ULN

· 빌리루빈 <　1.5 × ULN

신장 기능

· Cockroft Gault 공식을 이용하여 산출된 산출된 크레아티닌 청소율 ≥　50 mL/분.

· 온전-복용(full-dose) 항응고제 환자는 등록 전 6주 동안 안정된 용량의 와파린을 복용해야 하며, 환자의 상태에 따라 치료 범위 내에서 국제 표준화된 비율 (INR)을 가지거나, 또는 저분자량의 헤파린의 안정 용량에 있어야 한다.

· 측정 가능 또는 측정불가능한 질병

· 연구의 단계 1에 등록되는 환자는 다음의 기준을 또한 충족해야만 한다:

· mFOLFOX6가 적절한 치료법으로 간주되는 조직학적 또는 세포 학적으로 확인된 GI 악성 종양 (가령, GC, 결장 암종, 췌장 선암종).

· IHC에 의한 소급적으로 FGFR2b 과다발현의 결정을 위한 종양 조직 (가능한 경우)

· 환자는 최소한 2 용량의 mFOLFOX6 화학요법을 받을 수 있는 후보이어야 하며, 이때 용량은 다음과 같이 제공되며, 위에 제공된 독성 지침에 따라야 한다:

· mFOLFOX6 화학요법의 투여는 각 치료 주기의 주기 1, 1일차에 (연구 1일차에) 항-FGFR2-IIIb 항체/mFOLFOX6의 주입 종료 후 30분에 또한 시작되고, 다음과 같이 매 2　주에 투여된다:

· 1일차: 120분에 걸쳐 옥살리플라틴 85 mg/m² IV 주입.

· 1일차: 120분에 걸쳐 류코보린 400　mg/m² IV 주입, 만일 Y 커넥터를 사용하는 경우, 옥살리플라틴과 동시에 투여될 수 있다. 만일 Y 커넥터를 사용할 수 없다면, 순차적으로 투여.

· 1일차: 5-FU 볼루스 직후, 46시간에 걸쳐 5-FU 2400 mg/m² 연속 IV 주입. 첫 번째 투여 후, 환자는 지침에 따라 독성에 기초하여 용량 감소, 지연 또는 중단을 받을 수 있다.

연구의 단계 3에 등록되는 환자는 다음의 기준을 또한 충족해야만 한다:

· 조직학적으로 기록된 위암 또는 위식도 접점(GEJ의 근위 및 원위 5cm로 정의) 선암종

· C1D1의 28 일 이내에 흉부, 복부 및 골반의 방사선 영상 (컴퓨터 단층 촬영 (CT)이 바람직함, 자기 공명 영상 (MRI) 허용) 실행

· 중앙 집중식 수행된 IHC 테스트 및/또는 중앙집중식 수행된 ctDNA 혈액 기반 분석에 의해 결정된 FGFR2 유전자 증폭에 의해 결정된 바와 같이, FGFR2b 과다발현에 대한 종양 조직

· 환자mFOLFOX6 화학요법에 대하여 후보이어야 한다

· 전이성 또는 절제불가능한 질병에 대한 사전 화학요법 없음 (사전-스크리닝 기간 동안 FGFR2 시험 결과를 기다리는 동안 투여된 최대 1 회 용량의 mFOLFOX6을 제외)

· 기존의 백금-기반 화학요법은 없음 (포함 기준 #18에 기재된 것은 제외)

· 기존 보조요법 또는 신-보조요법 (화학요법 및/또는 화학 방사선 요법)을 받은 경우, 보조요법 종료와 등록 사이에 6 개월 이상 경과해야 한다

단계 1 및 단계 3의 배제 기준

다음 기준 중 임의의 것에 해당하는 경우 단계 1 또는 단계 3에 등록한 환자는 제외된다:

· 치료받지 않거나 또는 증상이 있는 중추 신경계 (CNS) 전이(CNS 이미징은 필요하지 않음). 무증상 CNS 전이가 있는 환자는 최소한 4 주 동안 임상적으로 안정한 경우, 그리고 CNS 질환과 관련된 증상 관리를 위해 수술, 방사선 또는 코르티코 스테로이드 요법과 같은 중재가 필요하지 않는 경우 자격이 있다.

· 다음 중 임의의 것을 포함하여, 손상된 심장 기능 또는 임상 적으로 유의한 심장 질환:

· 등록 ≤ 6 개월 불안정 협심증

· 등록 ≤ 6 개월 급성 심근 경색

· New York Heart Association 클래스 II-IV 울혈성 심부전

· 통제되지 않은 고혈압 (최상의 의료 관리에도 불구하고 ≥ 160/90으로 정의됨)

· 베타 차단제 또는 디곡신(digoxin) 이외의 조정불능 항-부정맥 치료가 필요한 심장 부정맥

· 활성 관상 동맥 질환

· QTcF ≥ 480

· 부작용에 대한 공통 용어 기준 (CTCAE)에 따른 말초 감각 신경 병증 ≥ 등급 2

· 등록 전 ≤ 14 일에, 전신 치료 또는 통제되지 않은 감염이 필요한 활성 감염

· 알려진 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 또는 후천성 면역 결핍 증후군 (AIDS)-관련 질병, 또는 공지의 활성 또는 만성 B 또는 C형 간염

· 간질 성 폐 질환의 병력 (가령, 폐렴 또는 폐 섬유증)

· 출혈 체질 또는 응고병증의 증거 또는 병력

· 방사선 치료 등록 ≤ 28 일. 환자는 모든 급성 방사선 치료 관련 독성으로부터 회복되어야 한다. 등록 후 8 주 이내에 방사성 의약품 (스트론튬, 사마륨) 없음

· FGF-FGFR 경로의 임의의 선택적 억제제 (예를 들어, AZD4547, BGJ398, JNJ-42756493, BAY1179470)로의 사전 치료

· 기존 전신 치료로 인한 지속적인 부작용> NCI CTCAE 1 등급 (2 등급 탈모증 제외)

· 등록 후 28 일 이내 또는 이 임상 연구 중에 또다른 치료 임상 연구에 참여하거나 또는 임상 시험 물질을 받는 경우

· 각막 결손, 각막 궤양, 각막염, 각막 이식, 각막 이식 이력 또는 각막 궤양 발병 위험이 높아질 수 있는 다른 공지의 각막 이상

· HER2에 대하여 공지된 양성 (양성 IHC 테스트에서 3+ 또는 양성 FISH와 함께, IHC 2+로 정의됨).

· 주요 수술 절차는 등록 ≤　28 일 이내에 허용되지 않는다. 국소/경막외 마취가 필요한 수술은 등록하기 최소한 72 시간에 완료해야 한다. 모든 경우에 환자는 치료 투여 전에 충분히 회복되고 안정되어야 한다

· 임신 중이거나 모유 수유중인 여성 (환자가 약물을 투여하는 동안 모유 수유를 중단한 다음, 그리고 연구 중단 후 6 개월 후에 재개하지 않는 한); 가임기 여성은 연구 치료 투여 중에 임신을 고려해서는 안된다.

· 임상 연구와 양립할 수 없는 심각하거나 불안정한 수반되는 전신 장애의 존재 (가령, 약물 남용, 정신과적 장애 또는 동맥 혈전증 및 증상성 폐색전증을 비롯한 통제불능의 병간 질환)

· 연구 참여와 관련된 위험을 증가시킬 수 있는 다른 상태가 있거나, 또는 연구 결과의 해석을 방해할 수 있고, 그리고, 조사자의 의견에 따라 환자가 연구에 참여하기에 부적절할 수 있는 것의 존재.

· 폴리소르베이트를 포함한 항-FGFR2-IIIb 항체 제제의 성분, 또는 백금-함유 약물, 5-FU, 또는 류코보린에 대한 공지의 알레르기 또는 과민성

· 다음을 제외한, 이전 악성 종양의 이력:

· 치유적으로 치료된 비-흑색 종 피부 악성 종양

· 제자리(in　situ) 자궁경부암

· 치유적으로 치료된 제자리(in　situ) 관 또는 소엽 유방 암종 그리고 임의의 전신 요법을 현재 받고 있지 않음

· 재발의 증거없이, 5 년 이상의 치유적으로 치료된 고형 종양.

연구 치료

단계 1에서, 항-FGFR2-IIIb 항체는 mFOLFOX6 화학요법 투여 전, 매 2 주 (±　3 일)마다 대략적으로 30　분 (± 10 분)에 걸쳐 연구 부위에 투여용 정맥내(IV) 주머니 안으로 희석을 위한 멸균 바이알에 공급될 것이다. 오직 코호트 2에서 치료되는 환자들만 주기 1의 8일차에 1 추가 용량의 항-FGFR2-IIIb 항체를 제공받을 것이다. 주기 2에서 출발하는 모든 환자는 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 각 주기의 1일차에 항-FGFR2-IIIb 항체를 매 2　주 마다 제공받게 된다. FP144 주입을 위한 IV 투여에는 0.22 μm 인-라인 필터 또는 0.22μm 주사기 필터를 함유해야만 한다.

단계 3에서, 항-FGFR2-IIIb 항체는 단계 1에서 항-FGFR2-IIIb 항체와 유사한 방식으로 제조 및 투여될 것이다. 항-FGFR2-IIIb 항체의 투여는 조사자-평가한 방사선 또는 임상 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 환자가 다른 프로토콜-명시된 철회 기준을 충족할 때까지, 지속될 것이다.

옥살리플라틴, 5-FU, 및 류코보린 (mFOLFOX6)은 각 부위(상기에서 기술된 바의)에서 매 2 주 (± 7 일)마다 투여될 것이다.

약동학 평가

혈액 샘플은 단계 1 및 단계 3에 각각 등록된 모든 환자에서 항-FGFR2-IIIb 항체의 혈청 수준을 특정하기 위하여 특정 시점에서 수집될 것이다.

PK 매개변수는 비-구획 분석을 사용하여 추정되지만, 구획 분석이 적절한 경우, 사용될 수 있다. 이 임상 시험의 혈청 농도-시간 데이터는 통합 집단 PK 분석 및 노출-반응 관계 평가에 대한 다른 연구의 데이터와 함께 모아질 것이다.

면역원성 평가

단계 1 및 단계 3에 등록된 모든 환자의 경우, 항-(항-FGFR2-IIIb 항체)-항체에 대한 혈액 샘플이 수집될 것이다. 면역원성은 항-FGFR2-IIIb 항체에 대한 면역 반응으로 정의되며, 모든 환자로부터 항-FGFR2-IIIb 항체에 대한 총 항체의 측정에 의해 평가될 것이다. 면역원성 시험은 스크리닝, 확인 및 적정으로 구성된다. 항-FGFR2-IIIb 항체에 대한 확인된 항체 반응의 추가 특성 분석이 고려될 수 있다.

효능 평가

단계 3 동안, 종양 반응 평가는 RECIST v.1.1 지침에 따라 조사자가 수행할 것이다. 효능 측정에는 임상 검사 및 적절한 영상화 기술, RECIST v.1.1 지침에 따라 적절한 슬라이스 두께로 바람직하게는 흉부, 복부 및 골반의 CT 스캔으로 구성된 종양 평가가 포함되지만; MRI는 수용가능하다. 스크리닝 기간 동안 (주기 1, 1 일차의 21일 이내) 스캔이 수행된다. 등록 전 28 일을 넘지 않는 날에, 치료 표준의 일부로 선별 전에 수행된 스캔은 허용가능하다. 스캔은 주기 1, 1일차부터 매 8　주 (+ 7 일)시행된다.

안전성 평가

단계 1 및 단계 3 모두에서 안전성 측정에는 AEs, 혈액학, 임상 화학, 소변 검사, 바이탈 신호, 체중, 병용 약물/절차, ECOG 수행 상태, 표적화된 신체검사, ECGs 및 안과 검사가 포함된다.

약력학 평가

단계 I

PD 평가는 특정 시점에 수집된다. FGFR2 상태의 평가를 위해 제출된 종양 조직(이용가능한 경우)은 IHC를 사용하여 FGFR2b 과다발현에 대해 소급적으로 분석될 것이다. FGFR2 상태의 평가를 위해 제출된 혈액 샘플은 연구 치료의 제 1 용량 이전에 수집되고, ctDNA 혈액 분석을 사용하여 FGFR2 유전자 증폭에 대해 소급적으로 분석될 것이다. FGFR 경로의 탐색적 바이오마커 분석을 위한 혈액 샘플이 종으로(longitudinally) 수집될 것이다.

단계 3

FGFR2 상태의 평가를 위해, 종양 조직을 제출하고, 그리고 IHC를 사용하여 FGFR2b 과다발현에 대해 소급적으로 분석할 것이다. 혈액 샘플은 FGFR2 상태를 위하여 제출될 것이며, ctDNA 혈액 분석을 이용한 FGFR2 유전자 증폭에 대하여 예비적으로 분석될 것이다. 등록 전, 조직 또는 혈액 중 하나 또는 둘로부터의 양성 결과가 이용 가능해야 한다.

이 연구에 계획된 총 등록 수는 대략적으로 569명의 환자다. 임의의 용량 제한 독성에 대한 평가가능한 대략적으로 9-21명의 환자가 단계 1에 등록될 것이다. 단계 3의 경우, FGFR2-선별된 GC를 가진 대략 548 명의 환자를 등록하고, 오직 mFOLFOX6만, 또는 mFOLFOX6과 함께 항-FGFR2-IIIb 항체를 제공받기 위해 1:1로 무작위화함으로써, 효능 및 내약성을 검사할 것이다. 적격 환자는 지리적 영역 (US과 EU 대(vs) 일본 대(vs) 나머지 아시아[중국 포함] 대(vs) 나머지 세계), 기존 치료 상태 (처음(de novo) 대(vs) 어쥬번트/네오-어쥬번트), 그리고 등록 전 단일 용량의 mFOLFOX6 투여 (예 또는 아니오)에 의해 계층화될 것이다.

단계 1에서, 모든 분석은 기술될 것이며, 적절히 투여량 그룹별로 그리고 전체적으로 제시될 것이다. 기술 통계량에는 관측 수, 평균, 표준 편차, 중앙값, 범위 및 연속 변수에 대한 사분위수 범위, 그리고 범주 변수의 수 및 백분율이 포함될 것이고; 적절한 경우 95% 신뢰 구간이 제시될 것이다. 추가적으로, 용량 감량 또는 용량 중단으로 이어지는 TEAEs 발생률을 표로 작성하고 요약한다. 단계 3에서, 1 차 효능 분석은 mFOLFOX6 또는 위약 및 mFOLFOX6과 병용된 항-FGFR2-IIIb로 치료된 환자에서 OS의 비교이다.

1차 종점, OS는 무작위화 날짜부터 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간으로 정의된다. 2차 효능 종점은 PFS 및 ORR을 포함하고, 한편 PFS는 조사자-평가한 (RECIST v.1.1에 따라)에 근거하여 방사선적으로 또는 임상 질환 질행의 날짜, 또는 임의의 원인에 의한 사망 날짜(어느 쪽이건 먼저 발생하는 날짜)까지로 정의되고, ORR은 기선 측정 가능한 질환을 가진 환자의 비율 및 RECIST v.1.1에 따라 조사자가 결정한 부분적 또는 완전한 반응으로 정의된다.

이 단계 3 연구는 mFOLFOX6 단독과 비교하여 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6의 조합에 대한 전체 생존 (OS)에 대한 유해율 (HR)을 평가하도록 설계되었다. 374건의 일차 사망 사건은 2.5%의 (1-면) 가양성(false positive) 오류율을 갖는 Cox 회귀 분석을 사용하여, OS에 대해 0.75의 HR을 탐지하는 80% 파워를 제공할 수 있다. OS의 지수 분포를 가정하면, 이는 중앙값 생존에서 10 개월에서 13.3 개월로의 대략적으로 33% 증가에 해당한다. OS에 대한 통계적 유의성은 HR = 0.815의 추정치로 발생되는데, 이는 10 개월에서 12.26 개월로 중앙값 생존이 대략적으로 22.6% 증가에 해당한다.

대략적으로 548명의 환자가 44 개월의 누적 기간 동안 무작위화되고 (1:1), 목표로 하는 1 차 사건 수를 달성하기 위해 대략적으로 24 개월의 추가 추적-관찰이 수행된다.

OS의 가설이 먼저 테스트된다. OS에 대한 두 가지 중간 분석(interim analyses)과 일차 분석(primary analysis)이 있으며, 모두 사건- 기반 분석(event-based analyses)이다.

OS에 대한 두 가지 중간 분석이 계획되어 있다; 첫 번째는 OS 사건의 50% 이후 (대략적으로 187 개 사건)과 두 번째는 OS 사건의 75% 후 (대략적으로 281개 사전)이다. O'Brien-Fleming 모니터링 경계(boundary)는 Lan-DeMets 구현으로 2.5% 가-양성 오류율을 유지하기 위해 사용되며, 이러한 중간 분석의 수와 타이밍에 유연성을 제공한다.

OS의 1 차 분석은 치료-의향(ITT) 집단을 사용하여 수행되며, 계층화된 로그-랭크 테스트를 사용하여 수행된다. 계층화 요소는 대화식 음성 및 웹 응답 시스템 (IXRS)에 설명된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다.

각 치료 부문에 대한 중간 OS 및 관련 95% 신뢰 구간은 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 추정될 것이다. 유해율 (HR=λ_{항-FGFR2-IIIB 항체+ mFOLFOX6}/λ_mFOLFOX6)은 유일한 주요 효과로써 처리 그룹을 갖는 Cox 회귀 모델을 사용하여, 계층화된 로그-랭크 테스트에 사용된 것과 동일한 계층화 계수로 계층화되어 추정될 것이다. 계층화되지 않은 HR도 또한 제공될 것이다.

2 차 종점 PFS 및 ORR의 분석은 1 차 종점, OS의 분석이 통계적으로 유의하면, 계층적으로 수행된다. PFS 및 ORR에 미치는 영향에 관한 공식 가설은 0.05 수준에서 계층적으로 테스트된다. PFS가 먼저 테스트되고, 유의적인 경우 ORR이 다음에 테스트될 것이다. 1 차 및 2 차 종점 테스트의 패밀리-방식(family-wise) 유형 I 오류율은 0.05 레벨에서 이 게이트-키핑(gate-keeping) 테스트 절차를 사용하여 제어될 것이다.

OS에 대한 테스트가 중요한 경우, OS 분석을 수행 할 때 관찰 된 모든 PFS 시건를 기반으로 0.05 수준의 계층화된 로그-랭크 테스트를 사용하여 무-진행 생존 (PFS)을 테스트한다. PFS의 1 차 분석은 계층화된 로그-랭크 테스트 (2-면)를 사용하여 수행된다. 계층화 요소는 대화식 음성 및 웹 응답 시스템 (IXRS)에 설명 된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다.

각 치료 부문에서 중간 PFS 및 관련 95% 신뢰 구간은 Kaplan-Meier 방법을 사용하여 추정될 것이다. HR은 유일한 주요 효과로써 처리 그룹을 갖는 Cox 회귀 모델을 사용하여, 계층화된 로그-랭크 테스트에 사용된 것과 동일한 계층화 계수로 계층화되어 추정될 것이다. 계층화되지 않은 HR도 또한 제공될 것이다. PFS 분석은 ITT 집단에 대해 수행될 것이다.　

만일 PFS의 테스트가 유의적이라면, 그 다음 ORR의 분석은 기준 측정 가능한 질환을 가진 환자들 사이에서 수행될 것이다. ORR 분석에서, 기선 이후 적절한 종양 평가가 없는 환자는 비-응답자로 계수될 것이다. 0.05 수준에서 계층화된 Cochran-Mantel-Haenszel 테스트(2-면)를 사용하여, ORR의 공식 가설 테스트가 수행될 것이다. 계층화 요소는 IXRS에 설명된 대로, 무작위화 일정을 계층화하는데 사용되는 것과 동일할 것이다.

안전성 분석: 모든 AEs는 Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA)을 사용하여 코드화될 것이다. 조사자는 CTCAE v 4.03을 사용하여 AEs의 심각도를 분류할 것이다. 치료 응급 부작용 (TEAE)은 연구 치료의 개시일, 또는 첫 번째 투여 이후 제시된 임의의 사건, 또는 치료 후 악화를 치료하기 전 제시된 임의의 사건으로 정의된다. 마지막 투여 +28 일 이전에 개시일을 갖는 TEAEs만 요약 표에서 표로 나타낼 것이다.

임상 실험실 데이터는 실험실 테스트 유형으로 요약될 것이다. 연구 치료 투여 후, 비정상 (즉, 기준 범위를 벗어난) 및/또는 임상적으로 유의적인 이상을 경험한 환자의 수 및 백분율이 각 임상 실험실 측정에 대해 제시될 것이다. 각 임상 실험실 측정에 대해, 기선 및 치료-후 예정된 모든 방문에 대한 기술 통계(descriptive statistics)가 제공될 것이다. 기선에서 치료-후 방문까지의 변화도 또한 제공될 것이다. 바이탈 사인에 대한 기술 통계도 비슷한 방식으로 또한 제공될 것이다. 또한, CTCAE 등급 (해당되는 경우) 및 고/저 플래그(high/low flags) (CTCAE 등급이 정의되지 않은 경우)의 기선에서 변이가 유사한 방식에 의해 제시될 것이다.

안전성 집단에 포함된 환자에 대해 단계 I의 안전성 분석이 수행된다. DLTs의 발생, TEAEs의 발생, 임상 실험실 비정상 (예 : 이동표), 바이탈 신호, 각막 및 망막 소견, 그리고 ECGs가 용량 수준에 의해 표로 작성되고, 요약될 것이다. 추가적으로, 용량 감량 또는 용량 중단으로 이어지는 TEAEs 발생을 표로 작성하고 요약한다.

단계 3의 안전성 분석에는 연구를 통하여 임의의 연구 치료 (mFOLFOX6와 병용되는 항-FGFR2-IIIb, 또는 mFOLFOX6)을 받고 치료-후 안전성 정보를 제공하는 모든 환자가 포함될 것이다. TEAEs의 발생, 임상 실험실 비정상 (예 : 이동표), 바이탈 신호, 각막 및 망막 소견, 그리고 ECGs가 치료 집단에 의해 표로 작성되고, 요약될 것이다.

개별 및 평균 (± SD) 혈청 항-FGFR2-IIIb 항체 농도-시간 데이터는 용량 수준에 의해 도표화되고, 플롯팅될 것이다. PK 매개변수는 적절하고, 이용가능한 경우, 용량 수준에 따라 표로 작성되고 요약된다. 항-FGFR2-IIIb 항체 노출에 대한 면역원성의 영향은 데이터가 허용하는 용량 수준으로 평가되고, 표로 작성되어, 요약될 것이다. 통합 집단 PK 분석 및 노출-반응 관계 평가는 별도의 보고서로 제공될 것이다.

연구 코호트의 개략도가 도 3에 제공되어 있다.

SEQUENCE LISTING <110> Five Prime Therapeutics, Inc. <120> ANTI-FGFR2 ANTIBODIES IN COMBINATION WITH CHEMOTHERAPY AGENTS IN CANCER TREATMENT <130> 01134-0054-00PCT <150> US 62/507,053 <151> 2017-05-16 <150> US 62/581,992 <151> 2017-11-06 <160> 22 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 801 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Arg Pro Ser Phe Ser Leu Val Glu Asp Thr Thr Leu Glu Pro Glu Glu 1 5 10 15 Pro Pro Thr Lys Tyr Gln Ile Ser Gln Pro Glu Val Tyr Val Ala Ala 20 25 30 Pro Gly Glu Ser Leu Glu Val Arg Cys Leu Leu Lys Asp Ala Ala Val 35 40 45 Ile Ser Trp Thr Lys Asp Gly Val His Leu Gly Pro Asn Asn Arg Thr 50 55 60 Val Leu Ile Gly Glu Tyr Leu Gln Ile Lys Gly Ala Thr Pro Arg Asp 65 70 75 80 Ser Gly Leu Tyr Ala Cys Thr Ala Ser Arg Thr Val Asp Ser Glu Thr 85 90 95 Trp Tyr Phe Met Val Asn Val Thr Asp Ala Ile Ser Ser Gly Asp Asp 100 105 110 Glu Asp Asp Thr Asp Gly Ala Glu Asp Phe Val Ser Glu Asn Ser Asn 115 120 125 Asn Lys Arg Ala Pro Tyr Trp Thr Asn Thr Glu Lys Met Glu Lys Arg 130 135 140 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Ser Ile Tyr Pro Asp Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Ala Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Asp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser 115 120 125 Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys 130 135 140 Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu 145 150 155 160 Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr 180 185 190 Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 225 230 235 240 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 245 250 255 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 260 265 270 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 275 280 285 Arg Glu Glu Gln Tyr Gln Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 290 295 300 Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 305 310 315 320 Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala 325 330 335 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 340 345 350 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 355 360 365 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 370 375 380 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 385 390 395 400 Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln 405 410 415 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 420 425 430 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 <210> 13 <211> 800 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Arg Pro Ser Phe Ser Leu Val Glu Asp Thr Thr Leu Glu Pro 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Leu Asp Val Val Glu Arg Ser Pro His Arg Pro Ile Leu Gln Ala Gly 225 230 235 240 Leu Pro Ala Asn Ala Ser Thr Val Val Gly Gly Asp Val Glu Phe Val 245 250 255 Cys Lys Val Tyr Ser Asp Ala Gln Pro His Ile Gln Trp Ile Lys His 260 265 270 Val Glu Lys Asn Gly Ser Lys Tyr Gly Pro Asp Gly Leu Pro Tyr Leu 275 280 285 Lys Val Leu Lys Ala Ala Gly Val Asn Thr Thr Asp Lys Glu Ile Glu 290 295 300 Val Leu Tyr Ile Arg Asn Val Thr Phe Glu Asp Ala Gly Glu Tyr Thr 305 310 315 320 Cys Leu Ala Gly Asn Ser Ile Gly Ile Ser Phe His Ser Ala Trp Leu 325 330 335 Thr Val Leu Pro Ala Pro Gly Arg Glu Lys Glu Ile Thr Ala Ser Pro 340 345 350 Asp Tyr Leu Glu Ile Ala Ile Tyr Cys Ile Gly Val Phe Leu Ile Ala 355 360 365 Cys Met Val Val Thr Val Ile Leu Cys Arg Met Lys Asn Thr Thr Lys 370 375 380 Lys Pro Asp Phe Ser Ser Gln Pro Ala Val His Lys Leu Thr Lys Arg 385 390 395 400 Ile Pro Leu Arg Arg Gln Val Thr Val Ser Ala Glu Ser Ser Ser Ser 405 410 415 Met Asn Ser Asn Thr Pro Leu Val Arg Ile Thr Thr Arg Leu Ser Ser 420 425 430 Thr Ala Asp Thr Pro Met Leu Ala Gly Val Ser Glu Tyr Glu Leu Pro 435 440 445 Glu Asp Pro Lys Trp Glu Phe Pro Arg Asp Lys Leu Thr Leu Gly Lys 450 455 460 Pro Leu Gly Glu Gly Cys Phe Gly Gln Val Val Met Ala Glu Ala Val 465 470 475 480 Gly Ile Asp Lys Asp Lys Pro Lys Glu Ala Val Thr Val Ala Val Lys 485 490 495 Met Leu Lys Asp Asp Ala Thr Glu Lys Asp Leu Ser Asp Leu Val Ser 500 505 510 Glu Met Glu Met Met Lys Met Ile Gly Lys His Lys Asn Ile Ile Asn 515 520 525 Leu Leu Gly Ala Cys Thr Gln Asp Gly Pro Leu Tyr Val Ile Val Glu 530 535 540 Tyr Ala Ser Lys Gly Asn Leu Arg Glu Tyr Leu Arg Ala Arg Arg Pro 545 550 555 560 Pro Gly Met Glu Tyr Ser Tyr Asp Ile Asn Arg Val Pro Glu Glu Gln 565 570 575 Met Thr Phe Lys Asp Leu Val Ser Cys Thr Tyr Gln Leu Ala Arg Gly 580 585 590 Met Glu Tyr Leu Ala Ser Gln Lys Cys Ile His Arg Asp Leu Ala Ala 595 600 605 Arg Asn Val Leu Val Thr Glu Asn Asn Val Met Lys Ile Ala Asp Phe 610 615 620 Gly Leu Ala Arg Asp Ile Asn Asn Ile Asp Tyr Tyr Lys Lys Thr Thr 625 630 635 640 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Arg Cys Leu Leu Lys Asp Ala Ala Val 35 40 45 Ile Ser Trp Thr Lys Asp Gly Val His Leu Gly Pro Asn Asn Arg Thr 50 55 60 Val Leu Ile Gly Glu Tyr Leu Gln Ile Lys Gly Ala Thr Pro Arg Asp 65 70 75 80 Ser Gly Leu Tyr Ala Cys Thr Ala Ser Arg Thr Val Asp Ser Glu Thr 85 90 95 Trp Tyr Phe Met Val Asn Val Thr Asp Ala Ile Ser Ser Gly Asp Asp 100 105 110 Glu Asp Asp Thr Asp Gly Ala Glu Asp Phe Val Ser Glu Asn Ser Asn 115 120 125 Asn Lys Arg Ala Pro Tyr Trp Thr Asn Thr Glu Lys Met Glu Lys Arg 130 135 140 Leu His Ala Val Pro Ala Ala Asn Thr Val Lys Phe Arg Cys Pro Ala 145 150 155 160 Gly Gly Asn Pro Met Pro Thr Met Arg Trp Leu Lys Asn Gly Lys Glu 165 170 175 Phe Lys Gln Glu His Arg Ile Gly Gly Tyr Lys Val Arg Asn Gln His 180 185 190 Trp Ser Leu Ile Met Glu Ser Val Val Pro Ser Asp Lys Gly Asn Tyr 195 200 205 Thr Cys Val Val Glu Asn Glu Tyr Gly Ser Ile Asn His Thr Tyr His 210 215 220 Leu Asp Val Val Glu Arg Ser Pro His Arg Pro Ile Leu Gln Ala Gly 225 230 235 240 Leu Pro Ala Asn Ala Ser Thr Val Val Gly Gly Asp Val Glu Phe Val 245 250 255 Cys Lys Val Tyr Ser Asp Ala Gln Pro His Ile Gln Trp Ile Lys His 260 265 270 Val Glu Lys Asn Gly Ser Lys Tyr Gly Pro Asp Gly Leu Pro Tyr Leu 275 280 285 Lys Val Leu Lys Ala Ala Gly Val Asn Thr Thr Asp Lys Glu Ile Glu 290 295 300 Val Leu Tyr Ile Arg Asn Val Thr Phe Glu Asp Ala Gly Glu Tyr Thr 305 310 315 320 Cys Leu Ala Gly Asn Ser Ile Gly Ile Ser Phe His Ser Ala Trp Leu 325 330 335 Thr Val Leu Pro Ala Pro Gly Arg Glu Lys Glu Ile Thr Ala Ser Pro 340 345 350 Asp Tyr Leu Glu 355 <210> 15 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-FGFR2 Gal-FR22 heavy chain variable region <400> 15 Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Phe 20 25 30 Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Asp Phe Arg 50 55 60 Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Ile Phe Phe 65 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Leu Leu Ile 35 40 45 His Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Ser Phe Ser Ile Ser Asn Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asp Asp Leu Tyr 85 90 95 Met Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Asp Ile Lys 100 105 <210> 20 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-FGFR2 Gal-FR22 light chain CDR1 <400> 20 Lys Ala Ser Gln Asp Ile Lys Asn Tyr Ile Ala 1 5 10 <210> 21 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-FGFR2 Gal-FR22 light chain CDR2 <400> 21 Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Pro 1 5 <210> 22 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Anti-FGFR2 Gal-FR22 light chain CDR3 <400> 22 Leu Gln Tyr Asp Asp Leu Tyr Met 1 5

Claims

대상에게서 위암을 치료하는 방법에 있어서, 이 방법은 상기 대상에게 치료요법적 유효량의 항-섬유모세포 성장 인자 수용체 2 IIIb (항-FGFR2-IIIb) 항체 및 변형된 FOLFOX6 (mFOLFOX6) 화학요법을 투여하는 것을 포함하는, 방법.
청구항 1에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 하나 또는 그 이상의 다음 성질을 갖는, 방법:
a. FGFR2-IIIc에 대한 것보다 더 높은 친화력으로 FGFR2-IIIb에 결합하거나, 또는 FGFR2-IIIc에 탐지될 수준으로 결합하지 않고;
b. FGF2가 인간 FGFR2에 결합하는 것을 억제시키고;
c. FGF7이 인간 FGFR2에 결합하는 것을 억제시키고;
d. 마우스 종양 모델에서 인간 종양의 성장을 억제시키고;
e. ADCC 활성을 유도하고;
f. 강화된 ADCC 활성을 보유하고;
g. 탈퓨코실화되거나(afucosylated); 그리고
h. 대조군과 비교하였을 때, 마우스 종양 모델의 종양 조직 안에서 하나 또는 그 이상의 PD-L1 양성 세포, NK 세포, CD3+ T 세포, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포, 그리고 대식세포의 수를 증가시킬 수 있다.
청구항 1 또는 2에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 이때 상기 중쇄 가변 영역은 다음을 포함하는, 방법:
(i) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
(ii) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고
(iii) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
그리고, 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:
(iv) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
(v) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고
(vi) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.
청구항 3에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄 가변 도메인은 서열 번호: 4의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
청구항 3 또는 4에 있어서, 이때 항-FGFR2-IIIb 항체의 경쇄 가변 도메인은 서열 번호: 5의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
청구항 3 내지 5중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄 가변 도메인은 서열 번호: 4의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
청구항 3 내지 6중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의경쇄 가변 도메인은 서열 번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
청구항 3에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄는 서열 번호: 2의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
청구항 3 또는 8에 있어서, 이때 상기 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 경쇄는 서열 번호: 3의 아미노산 서열에 대하여 최소한 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
청구항 3, 8, 또는 9중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 중쇄는 서열 번호: 2의 서열을 포함하는, 방법.
청구항 3, 또는 8-10중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 경쇄는 서열 번호: 3의 아미노산 서열을 포함하는, 방법.
청구항 1-11중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 키메라, 인간화된, 또는 인간인, 방법.
청구항 1-7중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 Fab, Fv, scFv, Fab', 및 (Fab')₂로부터 선택되는, 방법.
청구항 3-13중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 탈퓨코실화되는, 방법.
청구항 3-14중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 하나 또는 그 이상의 다음 성질을 보유하는, 방법:
a. 위치 Asn297에서 퓨코스가 결여되고;
b. κ 경쇄 불변 영역을 포함하고;
c. IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하고;
d. 위치 Asn297에서 퓨코실화된 동일한 아미노산 서열을 갖는 항체와 비교하였을 때, 시험관내 강화된 ADCC 활성을 보유하고;
e. 위치 Asn297에서 퓨코실화된 동일한 아미노산 서열을 갖는 항체와 비교하였을 때, Fc 감마 RIIIA에 대하여 강화된 친화력을 갖고; 그리고
f. 대조군과 비교하였을 때, 마우스 종양 모델의 종양 조직 안에서 하나 또는 그 이상의 PD-L1 양성 세포, NK 세포, CD3+ T 세포, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포, 그리고 대식세포의 수를 증가시킬 수 있다.
청구항 1-15중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 위암은 국소적으로 진행된, 절제불가능한 또는 전이성인, 방법.
청구항 1-16중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 6-15 mg/kg, 10-15 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 또는 15 mg/kg으로 투여되는, 방법.
청구항 1-17중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 7-21 일 마다 한 번, 매 7-15 일 마다 한 번, 매 7-10 일 마다 한 번, 매 10-14 일 마다 한 번, 매 11-17 일 마다 한 번, 매 12-16 일 마다 한 번, 매 13-15 일 마다 한 번, 매 7 일 마다 한 번, 매 8 일 마다 한 번, 매 9 일 마다 한 번, 매 10 일 마다 한 번, 매 11 일 마다 한 번, 매 12 일 마다 한 번, 매 13 일 마다 한 번, 매 14 일 마다 한 번, 매 15 일 마다 한 번, 매 16 일 마다 한 번, 매 17 일 마다 한 번, 매 18 일 마다 한 번, 매 19 일 마다 한 번, 매 20 일 마다 한 번, 또는 매 21 일 마다 한 번 투여되는, 방법.
청구항 18에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 다음과 같은 투여 체제로 투여되는, 방법:
(a) 용량 6-15 mg/kg, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다;
(b) 용량 6 mg/kg, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다;
(c) 용량 10 mg/kg, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다; 또는
(d) 용량 15 mg/kg, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 매 14 일 마다 한 번 투여된다.
청구항 18에 있어서, 이때 (a) 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 6-15 mg/kg, 10-15 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 또는 15 mg/kg의 용량으로 매 11-17 일, 매 12-16 일, 매 13-15 일, 또는 매 14 일에 마다 한 번 투여되고, 그리고 이때 (b) 3-8 mg/kg, 5-8 mg/kg, 7-8 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 또는 8 mg/kg의 최소한 한 번의 중개(intervening) 용량이 (a)의 2차례 투여 사이에 투여되며, 그리고 이때 (b)의 용량은 (a)의 용량보다 적은, 방법.
청구항 20에 있어서, 이때:
(i) (a)의 용량은 10-15 mg/kg, 매 13-15 일이고;
(ii) (a)의 용량은 15 mg/kg, 매 13-15 일이고;
(iii) (b)의 용량은 5-8 mg/kg이며, 그리고 (a)의 최소한 1회 투여 후 6-8일 그리고 (a)의 후속 투여 전 6-8일이며;
(iv) (a)의 용량은 10-15 mg/kg, 매 13-15 일이고, (b)의 용량은 7-8 mg/kg이며, 그리고 (a)의 최소한 1회 투여 후 6-8일과 (a)의 후속 투여 전 6-8일이며;
(v) (a)의 용량은 15 mg/kg, 매 14 일이고, (b)의 용량은 7-8 mg/kg이며, (a)의 최소한 1회 투여 후 7일과 (a)의 후속 투여 전 7일에 투여되고;
(vi) (a)의 용량은 15 mg/kg 매 14 일이고, (b)의 용량은 7.5 mg/kg이며, (a)의 최소한 1회 투여 후 7일과 (a)의 후속 투여 전 7일에 투여되고; 및/또는
(vii) (b)의 용량은 (i) 내지 (vi) 중 임의의 것에서 (a) 용량의 제 1 투여 후에 투여된다.
청구항 19에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 15 mg/kg으로 매 14 일 마다 한 번 투여되며, 그리고 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 첫 투여 후 6-8일에 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 7.5 mg/kg으로 더 투여되는, 방법.
청구항 22에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 15 mg/kg으로 매 14 일 마다 한 번 투여되고, 그리고 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체의 첫 투여 후 7일에 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 7.5 mg/kg으로 투여되는, 방법.
청구항 1-23중 임의의 한 항에 있어서, 이때 mFOLFOX6은 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)을 정맥내 (IV) 주입 또는 IV 볼루스에 의해 투여하는 것을 포함하는, 방법.
청구항 24에 있어서, 이때 mFOLFOX6은 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)를 정맥내 (IV) 주입 또는 IV 볼루스에 의해 투여하고, 이어서2400 mg/m² 5-FU를 IV 주입에 의해 44-48 시간에 걸쳐 투여하는 것을 포함하는, 방법.
청구항 24 또는 25에 있어서, 이때 mFOLFOX6은 매 10-21 일 마다 한 번, 매 10-15 일 마다 한 번, 매 10 일 마다 한 번, 매 11 일 마다 한 번, 매 12 일 마다 한 번, 매 13 일 마다 한 번, 매 14 일 마다 한 번, 매 15 일 마다 한 번, 매 16 일 마다 한 번, 매 17 일 마다 한 번, 매 18 일 마다 한 번, 매 19 일 마다 한 번, 매 20 일 마다 한 번, 또는 매 21 일 마다 한 번 투여되는, 방법.
청구항 26에 있어서, 이때 mFOLFOX6은 매 14 일 마다 번 투여되는, 방법.
청구항 24에 있어서, 이때 mFOLFOX6은 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)를 정맥내 (IV) 주입 또는 IV 볼루스에 의해 투여하고, 이어서 2400 mg/m² 5-FU를 IV 주입에 의해 44-48 시간에 걸쳐 투여되고, 이때 mFOLFOX6은 매 14일 마다 한 번 투여되는 것을 포함하는, 방법.
청구항 1 내지 28중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6은 동시에 또는 순차적으로 투여되는, 방법.
청구항 29에 있어서, 이때 mFOLFOX6의 1회 또는 그 이상의 투여는 항-FGFR2-IIIb 항체의 투여 전에 이루어지는, 방법.
청구항 30에 있어서, 이때 mFOLFOX6의 2회 투여는 항-FGFR2-IIIb 항체의 투여 전에 이루어지는, 방법.
청구항 29에 있어서, 이때 mFOLFOX6의 2회 투여는 항-FGFR2-IIIb 항체의 투여 전에 이루어지는, 방법.
청구항 28에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 mFOLFOX6과 동일한 날에, 그리고 mFOLFOX6 투여 전에 투여되는, 방법.
청구항 1-33중 임의의 한 항에 있어서, 이때 위암은 FGFR2-IIIb를 과다발현하는 것으로 이미 결정되었고, 및/또는 위암은 FGFR2 유전자 증폭을 갖는 것으로 이미 결정된, 방법.
청구항 1-33중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 방법은 위암이 FGFR2-IIIb를 과다발현시키는 지 및/또는 위암이 FGFR2 유전자 증폭을 갖는지를 결정하는 것을 더 포함하는, 방법.
청구항 34 또는 35에 있어서, 이때 FGFR2-IIIb 과다발현은 면역조직화학 (IHC)에 의해 결정되는, 방법.
청구항 36에 있어서, 이때 상기 과다발현은 이미 결정되었거나, 또는 종양 세포의 최소한 10%, 20%, 30%, 40%, 또는 50%에서 IHC 신호가 +2 또는 3+인 것으로 결정되는, 방법.
청구항 34 또는 35에 있어서, 이때 FGFR2 유전자 증폭 이미 결정되었거나 또는 염색체 10 동원체 (CEN10)에 대한 FGFR2의 비율을 형광 제자리(in situ) 혼성화 (FISH)를 이용하여 수득함으로써 결정되고, 이때 FISH에 의해 결정된 FGFR2/CEN10 비율이 2이거나 또는 이보다 클 경우, FGFR2 유전자는 증폭된 것으로 간주되는, 방법.
청구항 34, 35, 또는 38에 있어서, 이때 FGFR2 증폭 탐지되었거나 또는 순환하는 종양 DNA (ctDNA)에서 탐지되는, 방법.
대상에서 FGFR2-IIIb를 과다발현시키는 국소적으로 진행된, 절제불가능한 또는 전이성 위암을 치료하는 방법에 있어서, 이 방법은 상기 대상에게 치료요법적 유효량의 항-FGFR2-IIIb 항체 및 변형된 FOLFOX6 (mFOLFOX6) 화학요법을 투여하는 것을 포함하고,
이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 탈퓨코실화되며, 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하는데, 이때 상기 중쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:
(i) 서열 번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1;
(ii) 서열 번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 그리고
(iii) 서열 번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3;
그리고, 상기 경쇄 가변 영역은 다음을 포함한다:
(iv) 서열 번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
(v) 서열 번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 그리고
(vi) 서열 번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3;
이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 6-15 mg/kg의 용량으로 투여되고, 이어서 mFOLFOX6의 투여는 85 mg/m² 옥살리플라틴, 400 mg/m² 류코보린, 및 400 mg/m² 5-플루오로우라실 (5-FU)를 IV 주입 또는 IV 볼루스에 의한 투여, 이어서 2400 mg/m² 5-FU를 IV 주입에 의해 44-48 시간에 걸쳐 투여하는 것을 포함하고; 그리고
이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6은 매 13-15 일 마다 투여되고, 그리고 임의선택적으로 이때 단일 용량 3-8 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체는 항-FGFR2-IIIb 항체의 제 1 용량 6-15 mg/kg 투여 후 그리고 항-FGFR2-IIIb 항체의 제 2 용량 6-15 mg/kg 투여 전, 6-8일에 투여된다.
청구항 40에 있어서, 이때 (a) 상기 항-FGFR2-IIIb 항체는 용량 15 mg/kg으로 정맥내로 투여되고, (b) 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 mFOLFOX6는 매 14 일 마다 동일한 날에 투여되고, 그리고 (c) 단일 용량 7.5 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체는 제 1 용량 15 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체가 투여된 후 7일, 그리고 제 2 용량 15 mg/kg의 항-FGFR2-IIIb 항체가 투여되기 전에 투여되는, 방법.
청구항 40 또는 41에 있어서, 이때 상기 위암은 종양 세포의 최소한 10%에서 IHC 신호가 2+ 또는 3+으로 나타날 때 FGFR2-IIIb를 과다발현시키는 것으로 이미 결정되었거나 및/또는 이때 상기 위암은 ctDNA에서 FGFR2 유전자 증폭을 갖는 것으로 이미 결정되었된, 방법.
청구항 40-42중 임의의 한 항에 있어서, 이때 상기 대상은 항-FGFR2-IIIb 항체의 제 1 투여 전, mFOLFOX6를 2회 투여받았던, 방법.
청구항 1-43중 임의의 한 항의 방법에 따라 환자의 위암 치료 약물 제조용으로 청구항 1-15중 임의의 한 항에서 기술된 항-FGFR2-IIIb 항체, 그리고 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU 각각의 용도.
청구항 1-403중 임의의 한 항의 방법에 따라 환자의 위암 치료 용도에서 청구항 1-15중 임의의 한 항에서 기술된 항-FGFR2-IIIb 항체, 그리고 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU 각각을 포함하는 조성물.
청구항 1-15중 임의의 한 항에서 기술된 항-FGFR2-IIIb 항체, 그리고 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU중 최소한 하나의 조합을 포함하는, 조성물.
청구항 46에 있어서, 이때 상기 항-FGFR2-IIIb 항체 및 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU의 최소한 하나는 별도의 용기 또는 칸에 있는, 조성물.
청구항 47에 있어서, 별도의 용기 또는 칸에 옥살리플라틴, 류코보린, 및 5-FU 각각이 있는 것을 포함하는, 조성물.
청구항 46-48중 임의의 한 항에 있어서, 위암 치료에 사용되는 지침을 더 포함하는, 조성물.
청구항 46-48중 임의의 한 항에 있어서 암 치료용 조성물.