KR20190074104A - 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방, 개선 또는 치료, 또는 정자 활동 개선용 조성물 - Google Patents
복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방, 개선 또는 치료, 또는 정자 활동 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방, 개선 또는 치료, 또는 정자 활동 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및/또는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 개선, 또는 정자 활동 개선용 건강기능식품을 제공한다.
Description
본 발명은 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방, 개선 또는 치료, 또는 정자 활동 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및/또는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 개선, 또는 정자 활동 개선용 건강기능식품을 제공한다.
일반적으로 여성호르몬의 분비는 매월 조금씩 변화를 나타내다가 50대 초반에 들어서면서 폐경 과정을 거치며 호르몬 분비량이 급격히 저하되나, 남성의 경우에는 여성과 달리 나이가 들어가며 서서히 감소하는 관계로 노년기에 들어서도 일정 수준의 남성 호르몬은 지속적으로 분비가 일어난다. 따라서, 여성의 경우에서처럼 갱년기 증상이 뚜렷하거나 또한 모든 사람에게서 나타나는 현상은 아니며, 이와 같은 이유로 남성갱년기를 Male Climacteric 혹은 Andropause라 부르고, 이외에도 PADAM (Partial Androgen Deficiency in Aging Male)으로도 부르고 있다. 남성갱년기와 밀접하게 관련된 호르몬으로는 남성호르몬이라 불리는 테스토스테론(Testosterone)이 있으며 테스토스테론의 감소에 의한 임상적 특징으로는 근육량 감소와 같은 생리학적 특징뿐만 아니라 인지능력의 손상과 성기능 장애 등과 같은 남성 갱년기 증상으로 구분할 수 있다.
세계남성 생식기학회 (ISA), 세계 남성노화 관련 학회 (ISSAM) 및 유럽 비뇨기과 학회(EAU)에서는 남성의 노화 관련 남성호르몬 생성이 감소함으로써 혈청 테스토스테론 수치가 점진적으로 감소되는 것을 테스토스테론 결핍 증후군 (TSD)으로 지칭하였다. 테스토스테론 감소에 의해 나타나는 신체 근육량 감소, 근력저하, 골밀도 감소 등을 남성 갱년기의 임상적 특징이라고 할 수 있다. 남성에서 혈청 내 테스토스테론을 유지하게 되면 근육량, 및 근육 감소증이 완화될 수 있으며, 또한 성기능 장애, 에너지 결핍, 인지기능 손상 및 전반적인 건강상태의 감소로 특징지어질 수 있는 갱년기의 증상을 완화하는데 중요한 역할을 할 수 있다.
한편, 장미과의 낙엽관목인 복분자 (Rubus occidentalis)는 국내에서 널리 재배되는 식물로, 타닌과 플라보노이드를 포함하는 페놀 계열의 성분과 함께 천연의 항산화 색소인 안토시아닌 등의 식물 화학물질(phytochemical)을 대량으로 함유하고 있다고 알려져 있다. 전라북도 고창군을 중심으로 전국적으로 재배되고 있는 복분자는 다양한 폴리페놀과 안토시아닌 그리고 미네랄 함유로 인하여 아주 오래전인 조선시대의 동의보감과 동시대보다 앞선 본초강목에서는 혈액순환과 함께 남성의 성기능저하와 발기불능 개선에 효과 있음이 기록되어 있다.
종래에는 복분자 미숙과를 이용한 대사증후군 질환의 예방 또는 치료용 조성물 (대한민국 공개특허 제 10-2016-0025549 호), 복분자를 이용한 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 조성물 (대한민국 등록특허 제 10-1595889 호) 및 복분자를 이용한 위장관 운동 장애 질환 치료용 조성물 (대한민국 공개특허 제 10-2015-0115086 호) 등이 개시된 바 있으나, 복분자 미숙과를 이용한 남성 갱년기 증후군 치료효과에 대해서는 알려진 바가 없다.
이러한 배경하에, 본 발명자들은 복분자 미숙과 추출물이 갱년기 남성의 건강 및 정자 활동성에 미치는 영향을 조사하고자 6개월령의 래트(rat)에 복분자 미숙과 추출물을 약 12주에 걸쳐 경구 투여한 뒤, 남성호르몬, 정자 활동성 및 정자 수에 미치는 영향을 조사함으로써 복분자 미숙과가 남성갱년기 증후에 유효한 식·의약 소재임을 과학적인 방법으로 입증하고자 하였다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로, 본 발명은 남성 갱년기 증후군을 예방, 개선 또는 치료하거나 정자 활동을 개선하기 위한 조성물을 제공하는데 목적이 있다.
상술한 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한, 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 개선, 또는 정자 활동 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 복분자 미숙과 추출물은 주정 추출물 또는 열수 추출물일 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 상기 남성 갱년기 증후군의 증상은 관절 또는 근육의 통증, 골다공증, 다한증, 수면장애, 흥분, 신경과민, 정서불안, 무기력증, 피로, 근력 저하, 우울증, 정력 저하, 성욕 저하, 발기력 저하, 노화 또는 비뇨생식기 기능 저하로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상일 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 상기 조성물은 혈청 내 테스토스테론 증가, 정자 수 증가 및 정자 활동성 증가로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 활성을 나타낼 수 있다.
본 발명의 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 및 건강기능식품은 노령 수컷의 래트 동물모델에서 혈청 내 테스토스테론 증가 및 정자 활동성 증가 효과를 나타내고, 특히 300 mg/kg 투여군에서는 정자 수 증가 효과 또한 나타내어 남성 갱년기 증후군을 예방, 개선 및 치료와 정자 활동 개선에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 상기 약학적 조성물 및 건강기능식품은 천연물 소재의 추출물을 이용하여 인체에 안전하고 부작용이 적으며, 복분자 성숙과 추출물보다 활성이 우수하여 남성 갱년기 증후군을 보다 효과적으로 치료할 수 있다.
도 1은 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 처리 농도에 따른 레이디 세포(leydig cell)의 세포독성을 나타낸 그래프이다.
도 2는 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 투여 농도에 따른 혈청 내 테스토스테론 농도 변화를 그래프로 나타낸 것이다 (**p<0.05 vs Old.).
도 3은 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 투여 농도에 따른 부정소의 정자 활동성 변화를 그래프로 나타낸 것이다 (**p<0.05 vs Old.).
도 4는 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 투여 농도에 따른 정자 수 변화를 그래프로 나타낸 것이다.
도 2는 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 투여 농도에 따른 혈청 내 테스토스테론 농도 변화를 그래프로 나타낸 것이다 (**p<0.05 vs Old.).
도 3은 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 투여 농도에 따른 부정소의 정자 활동성 변화를 그래프로 나타낸 것이다 (**p<0.05 vs Old.).
도 4는 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 투여 농도에 따른 정자 수 변화를 그래프로 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
상술한 바와 같이, 종래에는 복분자 미숙과를 이용한 남성 갱년기 증후군 치료효과에 대해서는 알려진 바가 없다. 이러한 배경 하에, 본 발명자들은 복분자 미숙과의 주정 추출물이 남성의 갱년기 및 정자 활동성에 미치는 영향을 연구하던 중, 복분자 미숙과 추출물이 노령 수컷의 래트 동물모델에서 혈청 내 테스토스테론 함량을 증가시키고, 부정소의 정자 활동성 (운동성)을 증가시키며, 특정 농도의 투여군에서는 정자 수 또한 증가시킨다는 것을 확인하고, 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방, 개선 또는 치료용, 또는 정자 활동 개선용 조성물을 제공함으로써 상술한 문제의 해결방안을 모색하였다.
본 발명의 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 및 건강기능식품은 노령 수컷의 래트 동물모델에서 혈청 내 테스토스테론 증가 및 정자 활동성 증가 효과를 나타내고, 특정 농도에서 정자 수 증가 효과를 나타내어 남성 갱년기 증후군을 예방, 개선 또는 치료하거나, 정자 활동을 개선함으로써 치료효과를 나타낼 수 있는 질환에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 상기 약학적 조성물 및 건강기능식품은 천연물 소재의 추출물을 이용하여 인체에 안전하고 부작용이 적으며, 복분자 성숙과 추출물보다 활성이 우수하여 남성 갱년기 증후군을 보다 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있고, 정자 활동을 효과적으로 개선시킬 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어는 다음과 같이 정의된다.
용어 “치료”는 이롭거나 바람직한 임상적 결과를 수득하기 위한 접근을 의미한다. 본 발명의 목적을 위해서, 이롭거나 바람직한 임상적 결과는 비제한적으로, 증상의 완화, 질병 범위의 감소, 질병 상태의 안정화(즉, 악화되지 않음), 질병 진행의 지연 또는 속도의 감소, 질병 상태의 개선 또는 일시적 완화 및 경감 (부분적이거나 전체적으로), 검출가능하거나 또는 검출되지 않거나의 여부를 포함한다. 또한, “치료”는 치료를 받지 않았을 때 예상되는 생존율과 비교하여 생존율을 늘이는 것을 의미할 수도 있다. “치료”는 치료학적 치료 및 예방적 또는 예방조치 방법 모두를 가리킨다. 상기 치료들은 예방되는 장애뿐만 아니라 이미 발생한 장애에 있어서 요구되는 치료를 포함한다. 질병을 “완화(palliating)”하는 것은 치료를 하지 않은 경우와 비교하여, 질병상태의 범위 및/또는 바람직하지 않은 임상적 징후가 감소되거나 및/또는 진행의 시간적 추이(time course)가 늦춰지거나 길어지는 것을 의미한다.
용어 “약학적 조성물(pharmaceutical composition)”은 본 발명의 복분자 미숙과 추출물에 희석제 또는 담체와 같은 다른 화학 성분들을 혼합한 혼합물을 의미한다.
용어 “유효성분으로 포함하는”이란 복분자 미숙과 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 조성물에 포함된 복분자 미숙과 추출물의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.
용어 “담체(carrier)”는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다. 예를 들어, 디메틸술폭사이드(DMSO)는 생물체의 세포 또는 조직 내로의 많은 유기 화합물들의 투입을 용이하게 하는 통상 사용되는 담체이다.
용어 “희석제(diluent)”는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게 되는 물에서 희석되는 화합물로 정의된다. 버퍼 용액에 용해되어 있는 염은 당해 분야에서 희석제로 사용된다. 통상 사용되는 버퍼 용액은 포스페이트 버퍼 식염수이며, 버퍼 염은 낮은 농도에서 용액의 pH를 제어할 수 있기 때문에, 버퍼 희석제가 화합물의 생물학적 활성을 변형하는 일은 드물다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.
본 발명은 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한, 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 개선, 또는 정자 활동 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 조성물의 원료로 사용된 복분자는 전라북도 고창군에서 재배된(Rubus occidentalis) 열매 부분을 사용하였으며, 성숙과가 되기 전 6월에 수확한 것을 건조하여 사용하였다.
상기 복분자 추출물은 통상적으로 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다:
1) 복분자 미숙과에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 상기 1) 단계의 추출물을 여과하는 단계; 및
3) 상기 2) 단계의 여과된 추출물을 감압농축한 후 건조하여 복분자 미숙과 추출물을 제조하는 단계.
상기 추출용매는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 상기 알코올로는 C1내지 C4의 저급 알코올, 바람직하게는 C1내지 C2의 저급 알코올을 사용할 수 있으나, 이로 한정되는 것은 아니다. 상기 C1내지 C2의 저급 알코올로는 30% 내지 100% 메탄올 또는 에탄올 (주정)을 사용할 수 있다. 추출방법으로는 교반추출, 감압고온추출, 열탕추출, 환류추출, 열수추출, 냉침추출, 상온추출, 초음파 추출 또는 증기추출을 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 추출용매는 복분자 미숙과 중량의 1 내지 10배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하다. 추출온도는 20℃ 내지 120℃인 것이 바람직하고, 추출방법에 따라 온도를 적절하게 변경할 수 있다. 추출시간은 2시간 내지 48시간인 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 아울러, 추출 회수는 2 내지 5회인 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 방법에 있어서, 3) 단계의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않고, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 구체적인 실시예에서는 복분자 미숙과를 70% 주정으로 추출한 뒤 여과하고 감압농축 및 동결건조함으로써 분말 형태로 복분자 미숙과 추출물을 수득하였다.
본 발명에서 "남성 갱년기 증후군"은 중년이나 노년 남성에게 테스토스테론과 같은 남성 호르몬이 부족해서 발생하는 것으로, 테스토스테론 결핍 증후군 (Testosterone Deficiency Syndrome, TDS)으로도 지칭된다.
상기 남성 갱년기 증후군의 증상은 관절 또는 근육의 통증, 골다공증, 다한증, 수면장애, 흥분, 신경과민, 정서불안, 무기력증, 피로, 근력 저하, 우울증, 정력 저하, 성욕 저하, 발기력 저하, 노화 또는 비뇨생식기 기능 저하로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상일 수 있으나, 테스토스테론 감소로 인해 야기되는 증상이라면 제한 없이 포함될 수 있다.
본 발명의 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 노령 수컷의 래트 동물모델에서 혈청 내 테스토스테론의 농도를 증가시키고(도 2), 부정소의 정자 활동성을 증가시키며(도 3), 일부 특정 투여군에서는 정자 수 또한 증가시키므로, 남성 갱년기 증후군을 예방, 개선 또는 치료하는데 사용할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있고, 예를 들어, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의하여 투여될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 치료용 약학적 조성물의 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의하여 적절하게 선택될 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 본 발명에 따른 약학적 조성물의 1회 복용량 당 복분자 미숙과 추출물의 중량은 100 mg 내지 5000 mg인 것이 바람직하다. 본 발명에 따른 약학적 조성물의 1회 복용량 당 복분자 미숙과 추출물의 중량이 100 mg 내지 500 mg으로서, 정제로 제조되는 경우, 1 내지 20정/회로 하여 아침, 낮, 저녁의 1일 3회, 식전에 복용하는 것이 바람직하다. 1포당 복분자 미숙과 추출물의 중량이 500 mg 내지 5000 mg인 과립으로서 제조되는 경우, 1 내지 4포/회로 하여 아침, 낮, 저녁의 1일 3회, 식전에 복용하는 것이 바람직하다. 1 ml 제제 당 복분자 미숙과 추출물의 중량이 0.3 mg 내지 300 mg인 액제로서 제조되는 경우, 20 내지 500 ml/회로 하여 아침, 낮, 저녁의 1일 3회, 식전에 복용하는 것이 바람직하다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 유효량은 바람직한 효과를 주기 위해 요구되는 추출물의 양이다. 유효량은 당업자에게 인식되어 있듯이 투여의 경로, 부형제의 사용 및 다른 약제와 함께 사용할 수 있는 가능성에 따라 변할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 약학적 투여 형태는 이들의 약제학적으로 허용되는 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 다른 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은, 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 잘 알려진 방법을 사용하여 약학적 제형으로 제조될 수 있다. 제형의 제조에 있어서, 활성 성분을 담체와 함께 혼합 또는 희석하거나, 용기 형태의 담체 내에 봉입시키는 것이 바람직하다.
따라서, 본 발명의 약학적 조성물은, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있고, 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
예를 들어, 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들어, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.
경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되고, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들어 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성 용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐, 드링크제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물에 포함될 수 있는 필수 성분으로서 상기 복분자 미숙과 추출물 또는 이의 식품학적으로 허용 가능한 염을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약 추출물, 식품 보조 첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물은 매실, 천마, 오미자, 감초, 결명자, 석창포, 오적골, 원지, 황기, 산조인, 시호, 창출, 당귀, 지자, 안육, 복령 등으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 생약 추출물을 추가로 포함할 수 있다.
또한, 상기 언급한 바와 같이 식품보조첨가제를 추가로 첨가할 수도 있는바 식품보조첨가제는 당업계에 통상적인 식품보조첨가제, 예를 들어 향미제, 풍미제, 착색제, 충진제, 안정화제 등을 포함한다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
복분자 미숙과 추출물의 제조
본 발명에서 사용한 복분자 (Rubus occidentalis) 미숙과는 2016년 전라북도 고창군에서 재배된 것으로, 6월 완숙되기 전 수확하여 사용하였다. 이후 복분자 미숙과를 건조한 뒤 복분자 미숙과 중량의 10배수의 주정을 가하여 80 ℃의 가열 맨틀상에서 2시간씩 2회 추출한 후 여과지(filter paper)로 여과하였다. 여과된 여액을 감압농축한 다음 동결건조한 뒤 분말형태로 만들어 이하 실시예에 사용하였다.
세포독성 (3-[4,5-
dimethylthiazol
-2-
yl
]-2,5-
diphenyltetrazolium
bromide,
MTT
) 평가
복분자 미숙과 추출물의 독성을 측정하기 위해 TM3 세포 (마우스 레이디 세포; ATCC, CRL-1714)를 96 웰 배양 플레이트에 2×104 cells/웰로 분주한 뒤 실시예 1에서 제조한 복분자 미숙과 70% 주정추출물(PMBRE : pre-matured black raspberry extract 70%)을 24시간동안 처리하여 세포생존율을 확인 하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이 복분자 미숙과 70% 주정추출물은 400 ug/mL 농도까지 80%의 세포 생존율을 나타내었다. 400 ug/mL 이하의 농도에서는 레이디 세포에 대한 세포 독성이 없는 것으로 판단된다.
혈청 내 남성호르몬인 테스토스테론 함량 측정
3-1. 실험동물의 사육환경 및 식이
본 연구에서는 Sprague-Dawley계 6개월령의 래트(rat)를 사용하여 실험 시작 전 1주 동안 적응시킨 뒤 그룹당 12마리씩 분류하였다. 실험쥐들은 온도 22℃, 상대습도 50±10%와 조명 시간 12시간(점등 08:00-소등 20:00)으로 설정된 환경에서 케이지당 1마리씩 배치하며 관리하였다. 실험쥐에게 급이하는 사료는 실험동물용 고형사료와 함께 필터와 자외선 살균기로 여과 살균된 정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다.
3-2.
실험군의
구성 및 투여
실험군은 노화된 그룹 (Old group, 구입시 6개월령)과 복분자 미숙과 70% 주정 추출물(PMBRE 70%)을 각각 100, 200, 300 및 400 mg/kg으로 투여한 처리군으로 구분하여 실험하였다. 총 12주간 매일 복분자 미숙과 70% 주정 추출물을 해당 투여량으로 경구 투여하며 급이 하였다.
3-3. 혈청 내 테스토스테론 측정
약 12주에 걸쳐 복분자 미숙과를 섭취시킨 후, 복대정맥에서 혈액을 채취하고 13,000rpm, 4℃에서 10분간 원심분리를 진행한 뒤 상층액인 혈청만을 분리하여 테스토스테론 ELISA 키트(abcam, MA, USA)를 사용하여 분석하였다.
혈청 테스토스테론 수치를 측정해본 결과, 하기 표 1 및 도 2에 나타난 바와 같이 복분자 미숙과 추출물을 투여하지 않은 대조군의 테스토스테론 수준은 1.22±0.29 ng/mL이었으며 복분자 미숙과 추출물을 100, 200 및 300 mg/kg씩 경구 투여한 실험쥐의 테스토스테론 수준은 각각 1.80±0.32, 2.13±0.47 및 3.26±0.50 ng/mL로, 복분자 미숙과 추출물의 농도가 증가함에 따라 혈액 내 테스토스테론의 함량이 증가하였다. 특히, 복분자 미숙과 추출물을 300 mg/kg 경구 투여하였을 때 통계적으로도 유의한 테스토스테론 수치를 나타내었다 (**p < 0.05 vs Old CTL).
Old | 복분자 미숙과 70% 주정추출물 (mg/kg) | ||||
100 | 200 | 300 | 400 | ||
남성호르몬 (ng/mL) | 1.22±0.29 | 1.80±0.32 | 2.13±0.47 | 3.26±0.50 | 1.44±0.37 |
그러나, 복분자 미숙과 추출물을 400 mg/kg으로 투여한 군에서는 혈청 내 테스토스테론의 함량이 오히려 감소하여 대조군과 유사한 수준을 나타냄을 확인하였다.
부고환 조직에서의 정자 수 및 활동성 측정
상기 실시예 2-2에 기재된 각 그룹의 래트로부터 오른쪽 부고환을 적출한 뒤 정소상부를 절단하여 1 mL의 37 ℃ 링거 용액 (ringer solution)에 안정화시켰다. 이후 1 mL의 링거 용액 중 10 μL를 채취하여 37 ℃를 유지하는 슬라이드 가열기(Thermostat / LabX)를 이용하여 정자 수 및 활동성을 확인하였다. 정자 수 및 활동성 확인에는 fertilization sperm analyzer (Nikon eclipse 80i)를 사용하였다.
표 2 및 도 3에 나타난 바와 같이, 복분자 미숙과 70% 주정 추출물을 투여한 모든 그룹에서 정자 활동성이 증가하는 것을 확인하였다. 특히, 200 mg/mL 및 300 mg/mL의 농도로 투여한 그룹에서 유의적인 증가를 나타내었다.
Old | 복분자 미숙과 70% 주정 추출물 (mg/kg) | ||||
100 | 200 | 300 | 400 | ||
정자 활동성 (%) |
45.19±3.98 |
52.95±3.04 |
64.71±3.54 |
67.26±5.61 |
55.40±4.76 |
정자 수의 경우, 표 3 및 도 4에 나타난 바와 같이 300 mg/mL의 경구 투여군에 증가하는 것을 확인하였다.
Old | 복분자 미숙과 70% 주정추출물 (mg/kg) | ||||
100 | 200 | 300 | 400 | ||
정자수/mL (×106) |
26.82±2.93 | 26.87±2.17 | 23.97±1.54 | 29.87±2.74 | 25.73±2.95 |
이상의 결과를 종합해 볼 때, 복분자 미숙과 70% 주정 추출물은 노화된 래트에서 혈청 내 남성호르몬인 테스토스테론의 수치와 정자의 활동성을 유의적으로 증가시키고, 특히 300 mg/kg으로 경구투여한 군에서는 정자의 수도 증가시키므로, 남성 갱년기 증후군을 예방, 개선 또는 치료하거나, 정자 활동을 개선함으로써 치료효과를 나타낼 수 있는 질환에 유용하게 사용할 수 있고, 이를 의약품 및/또는 건강기능성식품 소재로서 활용할 수 있음을 확인하였다.
제조예 1. 주사제
상기 실시예 1에서 제조한 복분자 미숙과 주정 추출물: 300 mg
소듐 메타비설파이트: 3.0 mg
메틸파라벤: 0.8 mg
프로필파라벤: 0.1 mg
주사용 멸균 증류수: 적량
상기 성분을 혼합하고 통상의 방법으로 최종 부피가 2 ㎖이 되도록 제조하여, 앰플에 충전하고 멸균하여 주사제를 제조하였다.
제조예 2. 정제
상기 실시예 1에서 제조한 복분자 미숙과 주정 추출물: 500 mg
감자 전분: 100 mg
락토오스: 100 mg
콜로이드성 규산: 16 mg
스테아린산 마그네슘: 적량
통상의 정제 제조방법에 따라 상기 성분을 혼합하고 타정하고 정제를 제조하였다.
제조예
3.
캡슐제
상기 실시예 1에서 제조한 복분자 미숙과 주정 추출물: 300 mg
유당: 50 mg
전분: 50 mg
탈크: 2 mg
스테아린산 마그네슘: 적량
통상의 캡슐 제조방법에 따라 상기 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제조예 4. 환제
상기 실시예 1에서 제조한 복분자 미숙과 주정 추출물: 350 mg
옥수수 전분: 100 mg
멸균 증류수: 적량
상기 성분을 혼합하고, 통상의 환제 제조방법에 따라 적절한 크기를 갖는 구형으로 제환하여 환제를 제조하였다.
제조예 5. 건강 기능 식품
1) 건강 음료
올리고당(2%), 액상과당(0.5%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%) 등의 음료 재료에 상기 실시예 1에서 제조한 복분자 미숙과 주정 추출물을 적량 혼합하여, 살균함으로써 음료를 제조하였다.
2) 기능성 식품
상기 실시예 1에서 제조한 복분자 미숙과 주정 추출물을 각종 비타민 및 미네랄 함유 기능성 식품에 적량 혼합하여 복분자 미숙과 추출물이 함유된 기능성 식품을 제조하였다.
Claims (8)
- 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 복분자 미숙과 추출물은 주정 추출물 또는 열수 추출물인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 남성 갱년기 증후군의 증상은 관절 또는 근육의 통증, 골다공증, 다한증, 수면장애, 흥분, 신경과민, 정서불안, 무기력증, 피로, 근력 저하, 우울증, 정력 저하, 성욕 저하, 발기력 저하, 노화 또는 비뇨생식기 기능 저하로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 혈청 내 테스토스테론 증가, 정자 수 증가, 및 정자 활동성 증가로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 또는 개선용, 또는 정자 활동 개선용 건강기능식품.
- 제5항에 있어서, 상기 복분자 미숙과 추출물은 주정 추출물 또는 열수 추출물인 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
- 제5항에 있어서, 상기 남성 갱년기 증후군의 증상은 관절 또는 근육의 통증, 골다공증, 다한증, 수면장애, 흥분, 신경과민, 정서불안, 무기력증, 피로, 근력 저하, 우울증, 정력 저하, 성욕 저하, 발기력 저하, 노화 또는 비뇨생식기 기능 저하로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 혈청 내 테스토스테론 증가, 정자 수 증가, 및 정자 활동성 증가로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
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KR1020170175492A KR20190074104A (ko) | 2017-12-19 | 2017-12-19 | 복분자 미숙과 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방, 개선 또는 치료, 또는 정자 활동 개선용 조성물 |
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