KR20150031372A - 비타민나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 식품 조성물 - Google Patents

비타민나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 식품 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 비타민나무(Hoppophea rhamnoids) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물 및 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 비타민나무 열매 추출물은 글루코오스 내당능, 인슐린 및 공복 혈당 조절 등의 당뇨 개선 효과가 뛰어나므로, 이를 당뇨병 예방 또는 개선을 위한 기능성 천연 소재로 유용하게 사용할 수 있다. 또한 여러 차례에 걸친 수확이 가능한 비타민나무 열매 부위를 이용하므로 비교적 공급이 용이하여, 식품 산업에 널리 활용될 수 있다.

Description

비타민나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 식품 조성물{Phamaceutical and food composition for preventing or treating diabetes comprising extract of fruit from Hoppophea rhamnoids as effective component}
본 발명은 비타민나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 식품 조성물에 관한 것이다.
최근 현대인들의 생활수준의 향상과 인간수명의 증가로 인하여 건강에 대한 인식도가 증가함에 따라 급속도로 증가하고 있는 당뇨병은 전 세계적으로 주목받고 있는 만성질환이다. 당뇨병은 췌장의 베타세포에서 생성되는 인슐린 호르몬 부족 또는 인슐린 저항성의 이상과 나아가 이러한 두 가지 모두의 결함으로 발생하는 고혈당을 특징으로 하는 대사장애증후군이다. 이러한 당뇨병은 인슐린 의존형 당뇨병 (IDDM; Type I)과 인슐린 저항 및 인슐린 분비 손상에 의해 발생하는 인슐린 비의존형 당뇨병(NIDDM; Type Ⅱ)으로 나눌 수 있다. 제I형과 제Ⅱ형 당뇨병 모두에서 심장 질환, 장 질환, 안과 질환, 신경 질환 및 뇌졸증 등과 같은 다양한 합병증이 발생하게 되는데 이는 장시간 동안 혈당과 인슐린 수준이 상승하여 만성신경질환과 심혈관질환이 발생하게 되고 단시간의 저혈당과 고혈당반응으로 급성 합병증을 야기시키게 되는 것이다.
당뇨의 치료법은 약물요법, 운동요법 및 식이요법이 있으며 환자의 증상에 따라 인슐린 약재와 각종 혈당제가 사용되고 있다. 그러나 당뇨병은 간에서의 당 생성 과다, 인슐린 저항성, 근육과 지방 세포 등에서 당 처리 능력 감소 등의 특징을 나타내는 복합적인 질병이므로 특정 치료법만으로는 여러 가지 부작용의 유발을 막을 수 없다. 이 중 약물요법은 인슐린 및 화학물질을 사용하고 있어 약물 복용에 따른 부작용과 환자의 내성에 끊임없는 문제가 되고 있기 때문에, 최근에는 당뇨병 치료에 있어 식이가 가능하며 부작용이 적은 천연물을 이용하여 당뇨병을 치료하고, 더 나아가 당뇨병 합병증을 예방 및 치료하기 위한 연구가 필요한 실정이다.
비타민나무(Hippophae rhamnoides L.; 산자나무)는 보리수과에 속하는 관목으로서 100 여종 이상의 성분을 포함하고 있으며, 특히 비타민(A, B, C, E, F, K)등 유효한 성분을 많이 함유하고 있다. 겨울철 추위 및 여름철 고온에서도 잘 자라며, 척박한 지대에서도 잘 자라는 강한 적응성을 지녔다. 이미 비타민나무의 항산화 활성 측정 및 비타민나무의 지방산 함량 및 암 예방, 면역 체계 분야 등 다양한 연구 분야가 이루어지고 있으며 비타민나무 열매에 베타 카로틴 성분이 함유하고 있다고 보고된 바 있다. 또한 비타민나무 잎의 기기분석을 통해 유효성분을 측정하고 있으며, 비타민나무로 다양한 식품을 만들어 사용하고 있으나, 국내에서는 아직 그 연구가 활발하게 이루어지지 않고 있다.
한편, 한국등록특허 제1224196호에는 '비타민나무 추출물과 생약제가 함유된 오메가-3 제조방법'이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1229748호에는 '비타민나무 발효 추출물을 함유하는 화장료 조성물'이 개시되어 있으나, 본 발명의 비타민나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 식품 조성물에 대해서는 밝혀진 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 천연소재의 항당뇨 물질을 개발하고자 비타민나무 열매의 70% 에탄올 추출물을 대상으로 항비만 효과를 분석한 결과, 췌장의 베타세포를 파괴하는 당뇨유발물질인 알록산(alloxan) 처리에 의한 손상으로부터 세포를 보호하고, 비만 쥐에서의 글루코스 내당능, 인슐린 및 공복 혈당을 조절하는 등의 현저한 항당뇨 효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 비타민나무(Hoppophea rhamnoids) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 비타민나무(Hoppophea rhamnoids) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 비타민나무 열매 추출물은 글루코오스 내당능, 인슐린 및 공복 혈당 조절 등의 당뇨 개선 효과가 뛰어나므로, 이를 당뇨병 예방 또는 개선을 위한 기능성 천연 소재로 유용하게 사용할 수 있다. 또한 여러 차례에 걸친 수확이 가능한 비타민나무 열매 부위를 이용하므로 비교적 공급이 용이하여, 식품 산업에 널리 활용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 비타민나무 추출물의 세포 독성 여부를 조사하기 위하여 농도별로 RIN 세포주에 처리한 결과를 나타낸 결과이다. (A) 잎 열수 추출물, (B) 잎 에탄올 추출물, (C) 열매 에탄올 추출물, (D) 잎 및 열매 추출물, E-나뭇잎: 잎 에탄올 추출물, E-열매: 열매 에탄올 추출물, W-나뭇잎: 잎 열수 추출물.
도 2는 당뇨 유발 물질인 알록산(alloxan)의 최적농도를 알아보기 위하여, 농도별로 RIN 세포주에 처리한 결과 및 본 발명의 비타민나무 추출물 처리에 의한 세포 보호 효과(항당뇨 활성)를 나타낸 결과이다. (A) 알록산 농도별 처리, (B) 알록산 10mM을 처리한 세포에서 비타민나무 추출물 처리에 의한 세포보호 효과, E-나뭇잎: 잎 에탄올 추출물, E-열매: 열매 에탄올 추출물, W-나뭇잎: 잎 열수 추출물.
도 3은 본 발명의 비타민나무 추출물의 항당뇨 효과를 검증하기 위한 정상식이 및 고지방식이 쥐의 식이조건을 나타낸 그림이다.
도 4는 본 발명의 비타민나무 추출물이 글루코스 내당능(AUC; area under the curve)에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다. ND: 정상 쥐(양성 대조군), HD: 고지방 식이 쥐(음성 대조군), HD-WSL1: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 열수 추출물 500mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-WSL2: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 열수 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESL1: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 에탄올 추출물 500mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESL2: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 에탄올 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESF1: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 열매 에탄올 추출물 500mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESF2: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 열매 에탄올 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-Xeni: 고지방 식이 쥐에 지방흡수 억제제인 제니칼(xenical) 5.54mg/kg을 경구투여한 실험구(양성 대조군).
도 5는 본 발명의 비타민나무 추출물이 혈중 인슐린 함량의 변화에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다. ND: 정상 쥐(양성 대조군), HD: 고지방 식이 쥐(음성 대조군), HD-WSL1: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 열수 추출물 500mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-WSL2: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 열수 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESL1: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 에탄올 추출물 500mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESL2: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 잎 에탄올 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESF1: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 열매 에탄올 추출물 500mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-ESF2: 고지방 식이 쥐에 비타민나무 열매 에탄올 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구, HD-Xeni: 고지방 식이 쥐에 지방흡수 억제제인 제니칼(xenical) 5.54mg/kg을 경구투여한 실험구(양성 대조군).
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 비타민나무(Hoppophea rhamnoids) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 상기 비타민나무 열매 추출물은 비타민나무 열매를 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 추출한 것일 수 있고, 바람직하게는 상온에서 3~6일 동안 65~75% 에탄올에 추출한 것일 수 있고, 더욱 바람직하게는 상온에서 4~5일 동안 70% 에탄올에 추출한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 당뇨병 예방 또는 개선용 비타민나무 열매 추출물을 식품 조성물로 사용하는 경우, 상기 비타민나무 열매 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
또한, 본 발명의 당뇨병 예방 또는 개선용 비타민나무 열매 추출물을 식품 또는 음료에 첨가할 수 있다. 이때, 식품 또는 음료 중의 당뇨병 예방 또는 개선용 비타민나무 열매 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100㎖를 기준으로 0.02 내지 5g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 비타민나무 열매 추출물을 함유하는 것 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당; 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물, 예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 비타민나무 열매 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 비타민나무 열매 추출물을 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육에 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 비타민나무 열매 추출물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 비타민나무(Hoppophea rhamnoids) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 상기 비타민나무 열매 추출물은 비타민나무 열매를 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 추출한 것일 수 있고, 바람직하게는 상온에서 3~6일 동안 65~75% 에탄올에 추출한 것일 수 있고, 더욱 바람직하게는 상온에서 4~5일 동안 70% 에탄올에 추출한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 사용된 용어 "예방용 조성물"은 요법제(예를 들면, 예방제 또는 치료제) 또는 요법제의 조합물(예를 들면, 예방제 또는 치료제의 조합물)을 투여하여 대상체에서 장애의 1종 이상의 징후가 재발, 발병 또는 발전되는 것을 예방하는 것을 나타낸다. 예방 유효량은 장애와 관련된 1종 이상의 징후의 발전, 재발 또는발병을 예방하거나, 또는 또다른 요법제(예를 들면, 또다른 예방제)의 예방 효과를 증대 또는 개선시키기에 충분한 요법제(예를 들면, 예방제)의 양을 나타낸다.
본 발명에 사용된 "치료용 조성물"은, 한 실시 양태에서 임의의 질환 또는 장애를 대상체에 존재하는 질환 또는 장애를 개선시키는 것을 나타낸다. 또 다른 실시양태에서는, 하나 이상의 신체 파라미터를 개선시키는 것을 나타내며, 대상체는 이를 인식하지 못할 수도 있다. 또 다른 실시양태에서, "치료"는 질환 또는 장애를 체계적으로 조절하는 것(예를 들면, 인식가능한 징후의 안정화) 및 생리학적으로 조절하는 것(예를 들면, 신체 파라미터의 안정화)을 나타낸다. 또 다른 실시양태에서는, 질환 또는 장애의 발병을 지연시키는 것을 나타낸다.
본 발명의 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한 다양한 화합물 혹은 혼합물을 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 활택제, 결합제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 1종 이상 사용하여 조제된다. 붕해제로는 한천, 전분, 알긴산 또는 이의 나트륨염, 무수인산일수소 칼슘염 등이 사용될 수 있고, 활택제로는 실리카, 탈크, 스테아르산 또는 이의 마그네슘염 또는 칼슘염, 폴리에틸렌 글리콜 등이 사용될 수 있으며, 결합제로는 마그네슘, 알루미늄, 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨카복시메틸셀룰로오스, 폴리비닐피롤리딘, 저치환도 하이드록시프로필셀룰로오스 등이 사용될 수 있다. 이외에도 락토즈, 덱스트로오스, 수크로오스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로오스, 글리신 등을 희석제로 사용할 수 있으며, 경우에 따라서는 일반적으로 알려진 비등 혼합물, 흡수제, 착색제, 향미제, 감미제 등을 함께 사용할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되거나 또는 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염, 완충제 등의 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다.
본 발명의 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물은 하기의 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물의 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 또는 경/연질 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 또는 보존제 등이 포함될 수 있다.
또한 상기 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물은 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사제, 정맥주사제, 근육 내 주사제 또는 흉부 내 주사제를 주입하는 방법에 의한다. 이때, 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 본 발명의 비타민나무 열매 추출물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제조할 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 또는 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름 또는 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지 또는 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 비타민나무 열매 추출물은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물은 1일 0.0001 내지 500mg/㎏으로, 바람직하게는 0.001 내지 100mg/㎏으로 1회 내지 수회 나누어 투여하는 것이 좋다. 또한 그 추출물의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 약물 형태, 투여기간 및 환자의 상태, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 비타민나무 잎 또는 열매 추출물 제조
비타민나무의 항당뇨 효과를 확인하기 위하여 비타민나무 잎 및 열매를 각각 추출하여 실험에 사용하였다. 비타민나무 잎은 채취하여 세척한 것을, 비타민나무 열매는 채취하여 깨끗이 세척하고 열매 자체나 과피와 씨를 제거한 것을 40~50℃에서 24~48시간 동안 열풍 건조하고 세절기를 이용하여 60메쉬의 분말을 만들어 이를 추출에 사용하였다.
비타민나무 잎 열수 추출물은 상기 분말에 5배의 물을 가하여 80~90℃에서 1시간 동안 추출하고 여과하고, 다시 수거된 분말은 상기와 같은 방법으로 열수 추출하는 과정을 2번 더 반복하여 추출을 마치고, 추출물을 감압농축하여 사용하였다.
상기 비타민나무 잎 또는 열매 에탄올 추출물은 각각의 분말에 5배 정도의 70% 에탄올을 가하여 상온에서 4~5일 동안 추출하고 여과한 것을 감압농축하여 사용하였다.
실시예 2: 비타민나무 추출물의 항당뇨 효과
비타민나무의 항당뇨 효과를 알아보기 위하여, 먼저 상기 실시예 1의 비타민나무 잎 열수 및 에탄올 추출물과 비타민나무 열매 추출물을 농도별(0, 0.2, 0.4, 1, 2, 10, 20㎍/㎕)로 RIN 세포주에 처리하였다. 그 결과, 무처리구에 비해 비타민나무 잎 열수 추출물의 경우 10㎍/㎕를 처리하였을 때, 비타민나무 잎 에탄올 추출물 및 열매 에탄올 추출물은 10 및 20㎍/㎕을 처리하였을 때 세포 증식이 활성화되는 것을 확인할 수 있었다(도 1). 한편, 췌장의 베타세포를 파괴하는 당뇨유발물질인 알록산(alloxan)이 RIN 세포주의 증식에 미치는 영향을 평가하기 위하여 농도별(0, 5, 10, 15, 20mM)로 처리한 결과, 10mM 이상의 알록산을 처리할 때 유의적으로 세포의 증식이 감소하므로, 알록산의 적정 처리 농도는 10mM인 것을 확인할 수 있었다(도 2A).
상기와 같이 도출된 결과로, RIN 세포주의 활성을 저해시키기 위하여 10mM의 알록산을 처리하고 여기에 10㎍/㎕ 농도의 비타민나무 추출물을 각각 처리하여 비타민나무 추출물의 세포보호 효과를 확인하였다. 그 결과, 알록산에 의해 활성이 떨어졌던 세포에서 비타민나무 잎 열수 및 에탄올 추출물과 비타민나무 열매 추출물을 각각 처리함으로써 세포가 보호되는 것을 관찰할 수 있었다. 따라서, 비타민나무 추출물이 당뇨유발물질로 인한 세포의 파괴에 대한 보호 효과를 가진 것을 확인할 수 있었다(도 2B).
비만 쥐를 유도하여 비타민나무의 항당뇨 활성을 측정하기 위하여, 4주령의 C57BL/6J 쥐를 중앙실험동물(한국)에서 구입하여 1주일 동안 고형식이(Research diets, New Brunswick, NJ, USA)를 급여하고 환경에 적응시킨 후 도 3과 같이 9개의 식이군을 나누어 처리하였다. 실험 식이는 Research Diet(New Brunswick, NJ, USA)의 AIN-93 diet를 변형한 정상식이(10% fat kcal)와 고지방식이(60% fat kcal)를 구입하여 섭취하도록 하였다(표 1). 13주 동안 정상 대조군(ND)와 고지방 대조군(HD)은 증류수를, 나머지 군은 각 처리구에 해당하는 추출 시료를 하루에 1회 경구투여하였고 14주에 희생시켜 분석에 사용하였다(도 3).
정상식이와 고지방식이의 사료 조성
Ingredient(g) Normal Diet(ND1) High-fat Diet(HD2)
Casein, lactic 200 200
L-Cystine 3 3
Corn Starch 315 -
Maltodextrin 35 125
Sucrose 350 68.8
Cellulose 50 50
Soybean Oil 25 25
Lard 20 245
Mineral Mix 10 10
Dicalcium Phosphate 13 13
Calcium Carbonate 5.5 5.5
Potassium Citrate 16.5 16.5
Vitamin Mix 10 10
Choline Bitarate 2 2
FD&C Yellow Dye #5 0.05 -
FD&C Blue Dye #1 - 0.05
Total 1055.05 773.85
Kcal 4057 4057
Kcal/g 3.9 5.2
1Normal diet; AIN-93 diet with 4% fat (10% fat calories) content,
2High-fat diet; AIN-93 diet with 35% fat (60% fat calories) content
실험동물의 하루 평균 섭취량을 측정하였고, 이를 바탕으로 에너지섭취량을 비교한 결과, 고지방식이 섭취군에서 모두 정상식이군에 비해 높은 에너지를 섭취한 것을 확인할 수 있었다(표 2).
정상식이 섭취군 및 비타민나무 추출물을 경구투여한 고지방식이 섭취군의 사료섭취량 및 에너지섭취량
Intake Groups Feed intake(g/day) Energy intake(Kcal/day)
ND 2.06±0.07 8.04±0.25b
HD 2.11±0.11 10.95±0.60a
HD-WSL1 1.97±0.18 10.23±0.92a
HD-WSL2 1.91±0.03 9.95±0.14a
HD-ESL1 1.92±0.03 9.97±0.16a
HD-ESL2 1.86±0.03 9.67±0.13a
HD-ESF1 2.07±0.06 10.76±0.33a
HD-ESF2 2.08±0.23 10.84±1.17a
HD-Xeni 2.07±0.10 10.78±0.53a
항당뇨 효과를 확인하기 위하여 실험동물의 공복시 혈당 변화를 조사한 결과, 지방흡수 억제제인 제니칼(xenical)를 처리한 실험구(HD-Xeni)에서는 혈당 조절 효과가 나타나지 않은 반면, 비타민나무 잎 열수 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구(HD-WSL2)와 비타민나무 열매 에탄올 추출물 1,000mg/kg을 경구투여한 실험구(HD-ESF2)에서 5~11주차 모두에서 공복시 혈당을 감소시키는 효과를 확인할 수 있었다(표 3).
정상식이 섭취군 및 비타민나무 추출물을 경구투여한 고지방식이 섭취군의 공복시 혈당 측정
Weeks Groups 5weeks 7weeks 9weeks 11weeks
ND 86.88±9.26d 104.50±21.08d 81.75±8.28b 89.38±13.03d
HD 129.00±17.61ab 122.78±17.14abcd 130.00±17.14a 139.00±34.87ab
HD-WSL1 138.78±16.07a 133.56±15.07ab 118.56±15.07a 119.67±15.40abc
HD-WSL2 101.78±11.24cd 117.22±20.22bcd 118.11±20.22a 110.89±20.46cd
HD-ESL1 123.67±18.08ab 135.78±21.79ab 121.56±21.79a 136.44±18.69ab
HD-ESL2 130.22±22.29ab 145.67±36.66a 120.44±36.66a 129.78±16.43abc
HD-ESF1 127.11±20.75ab 132.00±14.17ab 130.44±14.17a 131.67±26.44abc
HD-ESF2 114.00±13.42bc 108.22±16.69cd 116.33±16.69a 115.89±19.73bc
HD-Xeni 120.78±30.38ab 129.78±23.02abc 121.67±23.02a 141.67±30.10a
또한, 12주차의 실험동물의 내당능을 측정한 결과, 비타민나무 추출물을 섭이시킨 모든 실험구에서 내당능(AUC; area under the curve)이 유의적으로 낮아지는 효과를 확인할 수 있었다(도 4).
비타민나무 추출물이 혈중 인슐린 수치에 영향을 분석한 결과, 본 발명의 비타민나무 잎 및 열매의 에탄올 추출물 섭취에 의해 낮아지는 것을 확인할 수 있었으며, 특히 비타민나무 열매 에탄올 추출물을 경구투여한 섭취군(HD-ESF1 및 HD-ESF2)의 경우 지방흡수 억제제인 제니칼을 경구투여시킨 고지방식이 섭취군(HD-Xeni)과 유의한 수준으로 낮아지는 것을 확인할 수 있었다(도 5).

Claims (6)

  1. 비타민나무(Hoppophea rhamnoids) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 비타민나무 열매 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 추출하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 비타민나무 열매 추출물은 65~75% 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  4. 비타민나무(Hoppophea rhamnoids) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 비타민나무 열매 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 추출하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 비타민나무 열매 추출물은 65~75% 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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