KR20190048202A - N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유하는 나노 리포좀 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 - Google Patents

N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유하는 나노 리포좀 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유하는 나노리포좀의 제조방법 및 그 나노리포좀을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는 유효성분인 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유한 조성물을 나노리포좀화함으로써 피부 흡수력을 높이고, 두 물질의 시너지효과로 피부 보습, 피부 주름 개선 및 피부 염증 완화효과가 우수한 화장료 조성물을 제조하는 기술에 관한 것이다.

Description

N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유하는 나노 리포좀 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부개선용 화장료 조성물{Methods for preparing nanoliposome encapsulating of N-Acetyl glucosamine and Sodium chondroitin sulfate and cosmetic composition containing the same}
본 발명은 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유하는 나노리포좀 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 유효성분인 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트의 시너지효과로 피부 보습 및 주름개선 효과가 증대되고, 나노리포좀화를 통해 피부 친화력을 높인 화장료 조성물에 관한 것이다.
노화란 세월이 지나감에 따라 신체의 구조와 기능이 점진적으로 저하되고 질병과 사망에 대한 감수성이 급격히 증가하면서 쇠약해지는 과정으로 신체에 생리적 변화가 발생하여 신체 전반적으로 현저한 퇴화현상이 나타나게 되는 것을 말한다. 이 중에서 우리가 가장 쉽게 느낄 수 있는 것이 피부 노화로 이는 당뇨병, 심장병, 동맥경화, 치매, 암 등에 못지않게 중요한 것으로 인식이 되고 있으며, 개인차가 있지만 피부노화는 대개 20대 초반을 전후해서 시작되어 나이가 많아지면서 증가하는 것으로 나타난다.
피부노화는 유전적, 환경적 등의 다양한 요인에 의해 영향을 받는데 크게 두 종류로 나눌 수 있다. 하나는 내인성 노화(intrinsic aging)로 이는 자연노화로써 유전정보에 따라 시간이 지나면서 일어나는 노화현상이며, 다른 하나는 외인성 노화(extrinsic aging)로 광노화(photoaging)라고도 하며, 외부환경 요인, 그 중에서도 햇빛에 존재하는 자외선에 의해 일어나는 노화 현상을 말한다.
자외선에 의해 활성산소가 발생하고 광노화가 일어나게 되는 것이다. 이들 활성산소 중 O2- 및 ㆍOH는 피부 광 손상에 있어서 중요하게 작용하여 피부 항산화제 파괴, 지질 과산화반응의 개시, 단백질 및 DNA 산화, 결합 조직 성분의 사슬절단 및 비정산적인 교차결합에 의한 주름생성, 멜라닌 생성 과정 등에 참여하여 피부 노화를 가속화시킨다. 따라서 자외선으로부터 피부의 노화를 억제하고 지연시키는 것이 중요하다.
한편 피부는 유해물질 또는 유해 작용에 대한 보호막으로서의 기능도 하지만 한편으로는 효능물질에 대한 장벽으로서 작용하기도 한다. 그러므로 효능 물질을 선택적으로 피부에 침투시키기 위해서는 특수한 피부 흡수 전달시스템이 필요하며 이를 위하여 가장 많이 연구되고 있는 것 중 하나가 리포좀(liposome)이다.
리포좀은 인지질을 수용액에 현탁할 때 생기는 소포로서 지질 이중충으로 구성된 막에 의해 외막과 격리되어 있으며 막 내에 콜레스테롤 당지질 등의 지질이나 막 단백질을 이입시킬 수 있다.
리포좀은 수용액 또는 유용성 물질을 포집할 수 있어 이들 원료의 운반을 도와주는 역할을 한다. 예를 들면 민감하고 피부에 흡수되기 어려운 원료들을 리포좀에 포집시켜 운반하면 이들 원료성분이 깨지지 않고 그대로 피부에 흡수될 수 있도록 도와주는 역할을 한다.
기존의 여러 경피전달 시스템(transdermal delivery system)들 중에서 리포좀(liposome)은 생체막의 주요성분인 인지질로 구성되어 생체 친화적이며 수용성 또는 지용성 성분 모두를 리포좀의 지질 이중층으로 구성된 내부로 포집할 수 있다는 장점이 있다.
한편, 본 발명의 유효성분으로 함유되는 N-아세틸글루코사민은 게, 새우와 같은 갑각류의 껍질, 버섯과 같은 세균류의 세포벽, 곤충과 같은 절지동물의 껍질, 연체동물 골격에 주로 존재하는 천연 물질로 키틴을 가수분해하여 생성한다. N-아세틸글루코사민은 히알루론산의 전구체가 되며, 기저층에서 세포의 유착, 증식 및 활성을 촉진하고 히알루론산의 생성을 촉진하는 기능이 있다. N-아세틸글루코사민은 피부 보습 및 주름에 중요한 역할을 하고 있다.
또한, 소듐 콘드로이틴 설페이트는 글리코스아미노글리칸황산염의 나트륨염인 점액성 다당체로 N-아세틸콘드로사민(2-아세트아미노-2-데옥시-β-D-갈락토피라노스)와 D-글루쿠론산 공중합체의 황산에스텔의 나트륨염으로 이루어져 있으며, 이들 육탄당은 중합체내에서 반복적으로 β-1,4 및 β-1,3 결합을 이루고 있다. 소듐 콘드로이틴 설페이트는 동물, 어류 또는 조류의 연골조직, 기관, 후골, 비골에 광범위하게 존재하며 신체의 결합조직 특히 관절부위 연골의 주성분으로서 연골 외에도 골건, 인대, 점액, 섬유, 혈관, 피부, 각막 등에 분포되어 있다. 소듐 콘드로이틴 설페이트는 관절 연골의 재생을 촉진하고 관절세포를 보호 및 활성화와 세포 보호, 피부 보습 등의 역할을 하는 생체활성물질이다.
상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트는 수용성 성분으로, 이를 화장료로 이용하기 위해서는 피부내로의 흡수가 용이한 형태로 전환하는 것이 중요하다. 피부의 주요 구성 성분은 지질로, 콜레스테롤, 지방산, 세라마이드 등의 피부 성분들이 피부 장벽을 구성하고 있어, 피부 형태 유지 및 외부로부터의 피부 방어 역할을 수행한다. 이러한 지질성분 및 지용성 구성성분들로 이루어진 피부 장벽으로 인해 수용성 성분이 피부내로 침투되는 것이 용이하지 않다고 알려져 있다.
이에 본 발명자들은 수용성 성분인 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 피부내로의 침투력을 증대하기 위해 나노리포좀에 포접을 시행하였다. 또한, 이를 화장료 조성물의 유효성분으로 사용하는 경우, 피부 보습효과와 주름개선효과, 염증완화 효과가 우수함을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
대한민국공개특허 제2005-0078283호 (2005.08.05) 대한민국공개특허 제2017-0099656호 (2017.09.01)
본 발명은 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 유효성분으로 함유하는 나노리포좀의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 상기 방법에 의하여 제조되어 유효성분의 피부 흡수력을 높이고, 피부 보습효과와 주름개선효과, 항염 효과가 우수한 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유하는 나노리포좀을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, A)N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 혼합하여 물에 용해시키는 단계; B)상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액, 레시틴 및 계면활성제를 혼합하여 용해시키는 단계; 및 C)고압 유화기에 투입하여 압력 15,000~20,000 psi에서 유화시키는 단계를 포함하는 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 함유된 나노 리포좀의 제조방법이 제공된다.
상기 A)단계에서 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트는 1~50:50~1의 중량비율로 혼합하는 것임을 특징으로 한다.
상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트는 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.01~50 중량% 포함된다.
상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 함유된 나노 리포좀을 화장료 조성물 전체 중량에 대해 0.01~20 중량% 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 화장료 조성물은 피부보습용, 피부주름 개선용, 피부 염증 완화용임을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 제조방법에 의하여 제조되는 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 포접된 나노리포좀은 피부 흡수력을 증가시켜 우수한 피부보습효과, 주름개선효과 및 염증완화효과를 나타내므로, 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 나노리포좀의 Hyaluronic acid 생성 효과를 나타내는 그래프이고,
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 나노리포좀의 HAS mRNA 발현효과를 나타내는 그래프이다.
이하, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명에 따르면, A)N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 혼합하여 물에 용해시키는 단계; B)상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액, 레시틴 및 계면활성제를 혼합하여 용해시키는 단계; 및 C)고압 유화기에 투입하여 압력 15,000~20,000 psi에서 유화시키는 단계를 포함하는 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 함유된 나노 리포좀의 제조방법이 제공된다.
각 단계를 보다 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 상기 A)단계에서는 유효성분인 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 혼합하여 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 제조한다. 이때, N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트는 1~50:50~1의 중량비로 혼합하는 것이 바람직하다. 더욱 바람직하게는 50:1로 혼합하는 경우에 그 상승작용에 의하여 가장 우수한 피부 개선 활성을 나타내었다.
이어, 상기 제조된 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 포접하는 나노리포좀을 제조한다. 나노리포좀의 제조 방법은 제한되지 않으며, 통상의 방법으로 제조될 수 있다. 상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트의 혼합액, 레시틴 및 유화보조제로서의 계면활성제를 혼합하여 용해시킨다. 용해물을 고압 유화기에 투입하여 압력 15,000 psi 이상, 바람직하게는 15,000~20,000 psi에서 유화시켜 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 포접된 나노 리포좀을 제조한다. 나노 입자로 리포좀 제조 시 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트는 0.01 ~ 50 중량%를 포함할 수 있다. 이때 0.01% 미만으로 포함하는 경우 그 효과가 미비하게 되고, 50% 초과하여 포함하는 경우 피부 자극을 유발할 수 있다.
상기 제조방법으로 제조된 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 포접하는 나노리포좀은 화장료조성물 총 중량에 대하여 0.005~50 중량%, 바람직하게는 0.01~20 중량% 함유된다. 활성성분으로서의 상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 포접하는 나노리포좀을 포함하는 화장료 조성물은 안정성이 우수하고, 피부 흡수율이 증가되므로, 보다 우수한 피부 보습, 주름개선 및 염증완화효과를 나타내었다.
본 발명의 화장료를 함유하는 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 화장품 이외에도 피부 과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.
또한, 본 발명에서 상기 화장료 조성물의 제형은 제한되지는 않으나 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 구성된 그룹에서 선택된 어느 하나의 제형으로 적용되어질 수 있다.
[실시예]
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 시험예에 의거하여 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명은 하기 실시예에 의해 한정되는 것이 아니다.
실시예 1 ~ 5: N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트의 혼합액을 함유하는 나노리포좀 제조
N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 함유하는 나노리포좀을 하기 표 1의 함량비로 조합한 실시예, N-아세틸글루코사민만을 함유하는 비교예 1, 소듐 콘드로이틴 설페이트 만을 함유하는 비교예 2의 나노리포좀을 제조하였다. 고압균질기(microfluidizer)를 통과시켜 나노화함으로써 이중층 구조의 나노리포좀을 제조하였다.
성분(중량%) 실시예 1 실시예2 실시예3 비교예1 실시예4 실시예5 비교예2
N-아세틸글루코사민 5.00 5.00 5.00 5.00 0.20 0.50 0
소듐 콘드로이틴 설페이트 0.10 0.20 0.50 0 5.00 5.00 5.00
정제수 44.90 44.80 44.50 45.00 44.80 44.50 45.00
부틸렌글라이콜 42.00 42.00 42.00 42.00 42.00 40.00 42.00
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50
레시틴 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00
콜레스테롤 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50
상기 표 1의 순서대로 70℃까지 가열하여 균일하게 혼합 및 용해시킨 후, 15,000 psi의 압력조건에서 고압균질기에 3회 반복 통과시켜 나노리포좀을 수득하였다.
시험예 1: Hyaluronic acid 생성량 측정
상기 실시예 및 비교예에서 제조된 나노리포좀을 사용하여 Hyaluronic acid 생성량을 측정하였다. HaCaT 세포를 6 well plate에 1×106cells/well의 농도로 분주하여 배양한 후, FBS가 첨가되지 않은 배지로 교체하여 18시간 starvation 시키고, 24시간 동안 배양하였다. HaCaT 세포에 각 시료 50ug/ml씩 처리하고, 24시간 배양 한 후 회수한 배양액은 ELISA kit를 이용하여 hyaluronic acid(HA)의 생성량을 측정하였다. 그 결과를 도 1에 나타내었다. 상기 실시예의 나노리포좀 조성물은 N-아세틸글루코사민만이 함유된 비교예 1 및 소듐 콘드로이틴 설페이트만이 함유된 비교예 2에 비하여 그 상승작용에 의하여 더 높은 hyaluronic acid(HA)의 생성량을 나타내었으며, 특히 50:1의 중량비로 혼합된 실시예 1에서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
시험예 2: HAS mRNA 발현에 미치는 효과
상기 실시예 및 비교예에서 제조된 나노리포좀의 HAS mRNA 발현효과를 측정하였다. HaCaT 세포를 6 well plate에 1×106cells/well의 농도로 분주하여 배양한 후, FBS가 첨가되지 않은 배지로 교체하여 18시간 starvation 시키고, 24시간 동안 배양하였다. HaCaT 세포에 각 시료 50ug/ml씩 처리하고, 24시간 배양 한 후 세포는 RT-PCR을 이용하여 hyaluronic acid synthase(HAS) mRNA 발현량을 조사하였다.
그 결과를 도 2에 나타내었다. HAS mRNA 발현을 조사한 결과, HAS-1, HAS-2 모두 모든 시료 처리군에서 mRNA 발현이 증가하였으며, HAS-1의 경우 실시예 1, 2, 3 에서, HAS-2의 경우 실시예 1, 2에서 발현이 현저하게 증가하였다.
시험예 3: MMP-1 생성 억제 효과 시험
사람의 정상 섬유아세포(CCD-986sk cell)를 48-well plate에 1×105cells/well되게 접종하고 24시간 배양하였다. 상기 실시예 및 비교예의 시료를 serum이 없는 DMEM 배지에 농도 별로 첨가하여 교체한 후 24시간 동안 더 배양한 다음 UVB 200 mJ/cmㅂ을 조사한 후 세포 배양액을 취하였다. 세포 배양액 내 MMP-1 양은 배양액을 취하여 MMP-1 assay kit(Amersham, USA)를 사용하여 측정하고, 하기식에 따라 MMP-1 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 이때, MMP-1 생성 억제율의 양성 대조군으로 adenosine을 사용하였다.
Figure pat00001
시료 농도
㎍/㎖		 MMP-1 생성 억제율(%)
비교예 실시예 adenosine
1 2 1 2 3 4 5
50 12.2 10.1 28.1 25.7 25.3 24.9 24.4 24.5
100 20.0 13.0 48.2 46.3 45.7 45.2 44.9 47.3
500 39.5 25.1 68.8 64.1 62.2 61.8 61.1 65.8
1000 45.1 39.2 85.5 82.5 81.4 81.0 80.5 83.1
MMP-1 생성 억제 효과를 살펴본 결과, N-아세틸글루코사민 혹은 소듐 콘드로이틴 설페이트 만을 단독 사용한 비교예 1, 2 보다 혼합하여 적용한 실시예 1~5 에서 MMP-1 생성 억제 효과가 더 우수하였다. 그 중에서도 실시예 1에서 가장 높은 억제율을 나타내었으며 대조군인 adenosine 보다도 우수한 경향의 효과를 보여주었다.
시험예 4: 콜라겐 생합성 촉진 효과 시험
사람의 정상 섬유아세포(CCD-986sk cell)를 48-well plate에 1×105cells/well되게 접종하고 24시간 배양하였다. 상기 실시예 및 비교예의 시료를 serum이 없는 DMEM 배지에 농도별로 첨가하여 교체한 후 24시간 동안 더 배양하여 세포 배양액을 취하였다. 세포 배양액 내 콜라겐 양은 procollagen type I C-peptide(PIP) EIA kit(Takara Bio, Japan)을 사용하여 정량하였다. 측정된 콜라겐 양은 Lowry assay로 구한 총 단백질 양으로 보정하였다. 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
시료 농도
㎍/㎖		 procollagen 발현율(%)
비교예 실시예 adenosine
1 2 1 2 3 4 5
0 2.61 2.61 2.61 2.61 2.61 2.61 2.61 2.61
100 30.71 25.27 42.97 41.54 41.29 41.25 41.21 44.00
500 50.95 46.59 58.80 57.50 57.45 57.40 57.34 59.98
1000 85.49 81.28 98.49 96.88 96.84 96.10 96.01 98.97
실시예 1~5에서 우수한 효과를 나타내었으며, 특히 실시예 1에서 가장 우수한 콜라겐 생합성 촉진효과를 나타내었다.
시험예 5: TNF-α 생성량
염증매개인자 발현억제 효과를 확인해 보기 위해 초기 염증성 분자 중 하나인 종양괴사인자(TNF-α) 생성에 대한 효과를 알아보았다. 실험에 사용된 세포는 HaCaT(Human Skin Keratinocytes cell line)이며 37℃, 5%의 CO2, 10%의 Fetal bovine serum(FBS, Lonza), 50μg/mL의 streptomycin(Sigma)을 첨가한 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM, Invitrogen)에서 배양하였다. 배양 후 1시간 동안 UV를 조사시켜 세포에 스트레스를 주었다. 대조구로는 시료를 처리하지 않고 UV를 조사한 세포를 사용하였다.
TNF-α는 macrophage와 fibroblast에 의해 분비되어 endothelial cell, neutrophil 및 B cell 등을 자극함으로써 chemokines, prostaglandins, proteases 및 growth factors 등의 분비를 촉진하는데, UV에 의해서 유의하게 증가된 HaCaT cell의 TNF-α를 하기 표 4에서 보는 바와 같이 실시예 1에서 가장 효과적으로 감소시킴을 확인하였다.
시료 농도
㎍/㎖		 TNF-α 발현율(%)
비교예 실시예 UV 조사
1 2 1 2 3 4 5
100 70.18 61.30 51.42 55.14 55.08 54.54 54.18 200
500 40.72 38.01 29.93 31.97 31.78 31.48 31.23
1000 20.33 15.67 9.65 13.85 13.79 13.17 13.07
실시예 6: 나노리포좀을 함유하는 크림 제조
상기 실시예 1, 비교예 1과 비교예 2를 포함한 크림을 하기 표 5의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성 분 함량(중량%)
대조예 비교예 3 비교예 4 실시예 6
비교예 1 - 3.0 - -
비교예 2 - - 3.0 -
실시예 1 - - - 3.0
친유형 모노스테아린산글리세린 2.0 2.0 2.0 2.0
스테아릴알콜 2.2 2.2 2.2 2.2
스테아린산 1.5 1.5 1.5 1.5
밀납 1.0 1.0 1.0 1.0
폴리솔베이트 60 1.5 1.5 1.5 1.5
솔비탄스테아레이트 0.6 0.6 0.6 0.6
정화식물유 1.0 1.0 1.0 1.0
스쿠알란 3.0 3.0 3.0 3.0
광물유 5.0 5.0 5.0 5.0
트리옥타노인 5.0 5.0 5.0 5.0
디메치콘 1.0 1.0 1.0 1.0
소듐마그네슘실리케이트 0.1 0.1 0.1 0.1
글리세린 5.0 5.0 5.0 5.0
베타인 3.0 3.0 3.0 3.0
트리에탄올아민 1.0 1.0 1.0 1.0
소듐히아루로네이트 4.0 4.0 4.0 4.0
방부제, 향, 색소 미량 미량 미량 미량
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
합계 100 100 100 100
시험예 6: 피부 보습 개선 효과 확인
N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 함유하는 나노리포좀을 포함하는 화장료 조성물의 보습효과를 확인하기 위하여 건강한 30세에서 50세의 여성 40명을 대상으로 시험하였다.
피부 보습 개선 효과를 확인하기 위해, 각 10명씩 나누어 상기 대조예, 비교예 및 실시예의 제형을 안면부에 하루 2회씩(아침 및 저녁) 2주간 도포하였다. 실험이 시작되기 전, 측정하고자 하는 2부위를 정하고 피부의 수분량을 각각 3회에 걸쳐 측정한 후 2주간 도포(2회/일) 한 후, 피부 수분함량 측정 장치를 이용하여 각질층 바로 아래의 표피층의 수분을 측정하였다. 상기 측정결과를 표 6에 정리하였다.
구분 초기(D0) 평균 2주(D14) 평균 수분 증가량(%)
대조예 33 38 10
비교예 3 34 45 30
비교예 4 35 47 32
실시예 6 36 54 46
상기 표 6으로부터, 본 발명의 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 나노리포좀화한 실시예 1을 함유한 실시예 6에서 가장 높은 보습효과를 나타내었다.
시험예 7: 피부 주름 개선 효과 확인
N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 함유하는 나노리포좀을 포함하는 화장료 조성물의 피부주름 개선효과를 확인하기 위하여 건강한 30세에서 50세의 여성 40명을 대상으로 시험하였다.
피부 주름 개선 효과를 확인하기 위해, 각 10명씩 나누어 상기 대조예, 비교예 및 실시예의 제형을 안면부에 하루 2회씩(아침 및 저녁) 4주간 도포하였다. 4주 후 주름의 개선 정도를 주름의 영상 분석을 통해 평가하였다.
주름의 영상분석에 의한 평가는 실험이 시작되기 전 눈 밑의 레플리카를 채취하고 실험이 종료된 직후의 레플리카를 눈 밑의 동일 부위에서 채취하여 영상분석을 통해 주름의 2차원적 분석으로 주름의 밀도를 측정하였다. 영상분석에 의한 주름 밀도의 측정 결과는 사용 전과 비교한 주름 밀도에 대한 감소율로 하기의 표 7에 나타내었다.
구분 주름 밀도 감소율(%)
대조예 9
비교예 3 36
비교예 4 32
실시예 6 49
상기 표 7로부터 확인되는 바와 같이, N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 나노리포좀화한 실시예 1을 함유한 실시예 6에서 가장 높은 주름 개선 효과를 나타내었다
실시예 7: 유연 화장수
본 발명의 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 포접하는 나노리포좀(실시예 1)을 포함한 유연 화장수를 하기의 표 8의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분(중량%) 실시예 7
실시예 1 2.0
1,3-부틸렌 글리콜 5.2
올레일알코올 1.5
에탄올 3.2
폴리솔베이트 20 3.2
벤조페논-9 2.0
카르복실비닐폴리머 1.0
글리세린 3.5
향 미량
방부제 미량
정제수 잔량
계 100
실시예 8: 영양 화장수(밀크로션)
본 발명의 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액을 함유하는 나노리포좀(실시예 1)을 포함한 영양 화장수를 하기의 표 9의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분(중량%) 실시예 8
실시예 1 2.0
글리세린 5.1
프로필렌글리콜 4.2
토코페릴아세테이트 3.0
유동파라핀 4.6
트리에탄올아민 1.0
스쿠알란 3.1
마카다미아너트오일 2.5
폴리솔베이트 20 1.6
솔비탄세스퀴롤레이트 1.6
프로필파라벤 0.6
카르복실비닐폴리머 1.5
향 미량
방부제 미량
정제수 잔량
계 100

Claims (7)

  1. A)N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트를 혼합하여 물에 용해시키는 단계;
    B)상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트 혼합액, 레시틴 및 계면활성제를 혼합하여 용해시키는 단계; 및
    C)고압 유화기에 투입하여 압력 15,000~20,000 psi에서 유화시키는 단계를 포함하는 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 함유된 나노 리포좀의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 A)단계에서 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트는 1~50:50~1의 중량비율로 혼합하는 것임을 특징으로 하는 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 함유된 나노 리포좀의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트는 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.01~50 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 함유된 나노 리포좀의 제조방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 의하여 제조되는 N-아세틸글루코사민과 소듐 콘드로이틴 설페이트가 함유된 나노 리포좀을 화장료 조성물 전체 중량에 대해 0.01~20 중량% 포함하는 화장료 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부보습용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부주름 개선용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 염증 완화용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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