KR20190038829A

KR20190038829A - Mek 억제제, pd-1 축 억제제, 및 vegf 억제제를 사용한 조합 요법

Info

Publication number: KR20190038829A
Application number: KR1020197003739A
Authority: KR
Inventors: 니콜라스 충
Original assignee: 제넨테크, 인크.
Priority date: 2016-08-12
Filing date: 2017-08-11
Publication date: 2019-04-09
Also published as: AU2017311585A1; WO2018031865A1; JP2019524820A; US20220298247A1; EP3496752A1; TW201811369A; US20190161549A1; EP3496752B1; BR112019002036A2; CA3032542A1; MX2019001635A; CN109689102A

Abstract

MEK 억제제, PD-1 축 억제제, 및 VEGF 억제제를 포함하는 조합 요법이 결장직장암 및 전이성 결장직장암의 치료를 위해 제공된다.

Description

MEK 억제제, PD-1 축 억제제, 및 VEGF 억제제를 사용한 조합 요법

관련 출원에 대한 상호-참조

본 출원은 2016년 8월 12일에 출원된 미국 가출원 일련 번호 62/374437의 우선권 이익을 주장하며, 이는 그 전문이 본원에 포함된다.

발명의 분야

본 발명의 분야는 일반적으로 MEK 억제제, PD-1 축 억제제, 및 VEGF 억제제의 조합을 사용한 암 요법에 관한 것이다.

위장 종양은 전세계적으로 암-관련 사망의 흔한 원인이다. 결장직장암 (CRC)은 각각 남성 및 여성에서 세 번째 및 두 번째로 가장 흔하게 진단되는 암이고, 각각 남성 및 여성에서의 암 사망의 네 번째 및 세 번째로 주요한 원인이다 (Torre LA, Bray F, Siegel RL, et al., Global cancer statistics, 2012, CA Cancer J Clin. 2015;65:87-108). 매년 CRC로 진단되는 미국의 환자들 중에서, 약 40%는 초기 단계 질환으로 진단되고, 약 40%는 국한성 질환으로 진단되고, 약 20%는 원위 전이로 진단되며, 각각 5년 생존율이 90%, 70%, 및 13%이고, 여기서 대부분의 환자는 전이성 질환으로 사망한다 (Alberts SR and Wagman LD., Chemotherapy for colorectal cancer liver metastases, Oncologist 2008;13:1063-73; Kennecke H, Yu J, Gill S, et al., Effect of M1a and M1b Category in Metastatic Colorectal Cancer, Oncologist 2014;19:720-6; 및 American Cancer Society, Estimated Number* of New Cancer Cases and Deaths by Sex, US, 2013 [Resource on the Internet; accessed 12 November 2015]).

전신 세포독성 화학요법은 대다수의 전이성 CRC (mCRC) 환자를 위한 치료의 주축이며 중앙 전체 생존기간은 단지 약 30개월이다. 항-혈관 내피 성장 인자 (VEGF) 요법 예컨대 베바시주맙, 라무시루맙 및 지브-아플리베르셉트, 및 항-표피 성장 인자 수용체 모노클로날 항체 (mAb) 예컨대 세툭시맙 및 파니투무맙은, 치료 조합이 영역에 따라 달라지더라도, 1차, 2차 및 3차 요법에서 화학요법과 조합하여 사용될 수 있다 (Petrelli F, Coinu A, Ghilardi M, et al. Efficacy of Oxaliplatin-based Chemotherapy + Bevacizumab as First-line Treatment for Advanced Colorectal Cancer. Am J Clin Oncol 2015; 38:227-233).

최근의 진전에도 불구하고, mCRC는 치유불가능한 질환으로 남아있다. mCRC를 갖는 환자는 질환이 불응성이 될 때까지 각각의 추가 차수 요법에서 질환 제어 기간의 연속적인 감소를 가지며, 환자는 암으로 사망한다. 골수억제, 위장 독성, 무력증/피로, 말초 신경독성 및 피부 독성 (손 및 발 증후군 포함)은 치료를 받고 있는 mCRC를 갖는 환자에서 흔하게 관찰되는 유해 사건이다. 이들 유해 사건은 환자의 삶의 질에 유의하게 영향을 미칠 수 있다.

따라서 CRC 및 전이성 CRC를 위한 개선된 요법에 대한 필요가 존재한다.

본 개시내용은 결장직장암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 방법은 상기 대상체에게 (i) 치료 유효량의 MEK 억제제, (ii) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제, 및 (iii) 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하는 요법을 투여하는 것을 포함한다.

본 개시내용은 인간 대상체에서 결장직장암을 치료하기 위한 키트를 추가로 제공한다. 키트는 MEK 억제제, PD-1 축 억제제, VEGF 억제제, 및 치료 유효량의 MEK 억제제, 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 대상체를 치료하는데 사용하는 것에 대한 지침서를 포함하는 패키지 삽입물을 포함한다.

MEK 억제제, PD-1 축 억제제, 및 VEGF 억제제의 투여 순서는 달라질 수 있다. 일부 측면에서, PD-1 축 억제제 및 VEGF 억제제가 동일한 날에 투여되는 경우에, PD-1 축 억제제는 VEGF 억제제 전 적어도 30분에 투여된다.

본 발명의 일부 측면에서, MEK 억제제는 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염이고/거나; PD-1 축 억제제는 PD-L1 억제제, 및 보다 특히 아테졸리주맙이고/거나; VEGF 억제제는 베바시주맙이다.

본 개시내용은 (i) 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 80 mg, 또는 약 80 mg의 용량의 MEK 억제제; (ii) 약 400 mg 내지 약 1200 mg, 약 600 mg 내지 약 1000 mg, 약 700 mg 내지 약 900 mg, 또는 약 840 mg의 용량의 PD-1 축 억제제; 및 (iii) 약 5 mg/kg 내지 약 15 mg/kg, 약 5 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg 또는 약 15 mg/kg의 용량의 VEGF 억제제를 포함하는 암 요법 약물 조합물을 추가로 제공한다. 본 발명의 일부 특정한 측면에서, MEK 억제제는 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염이고/거나; PD-1 축 억제제는 PD-L1 억제제, 및 보다 특히 아테졸리주맙이고/거나; VEGF 억제제는 베바시주맙이다.

도 1은 임상 시험의 준비 및 확장 코호트에 대한 연구 개략도를 보여준다.
도 2는 임상 시험의 생검 코호트에 대한 연구 개략도를 보여준다.

본 발명은 MEK 억제제, PD-1 축 억제제 및 VEGF 억제제의 조합, 보다 특히 MEK 억제제, PD-L1 억제제 및 VEGF 억제제의 조합, 및 보다 더 특히 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염, 아테졸리주맙 및 베바시주맙의 조합을 사용한 암의 치료에 관한 것이다. 일부 측면에서, 암은 CRC, 및 보다 특히 전이성 CRC (mCRC)이다. MEK, VEGF 신호전달, 및 PD-1 축, 예컨대 PD-L1의 동시 억제, 그에 따른 다인성 방식으로의 종양의 표적화는 CRC를 갖는 환자에서 면역요법 성분의 효능을 증진시킬 것으로 여겨진다. 일부 측면에서, 조합 요법은 플루오로피리미딘 및 옥살리플라틴 또는 이리노테칸을 함유하는 적어도 1종의 선행 차수 요법을 받은 CRC를 갖는 환자에서 면역요법 성분의 효능을 증진시킬 것으로 여겨진다.

코비메티닙 및 아테졸리주맙에 베바시주맙을 추가하는 것은 CRC를 갖는 환자에게 화학치료 기반 요법과 비교하여 감소된 독성을 갖는 적극 치료를 제공할 것으로 추가로 여겨진다.

본 발명의 조합 요법의 작용 메카니즘이 전통적인 화학치료 요법과 상이하기 때문에, 추가의 표준 요법의 활성은 유의하게 영향을 받지 않을 것으로 추가로 여겨진다. 이는 진행성 질환을 갖는 환자가 치료를 계속하는 것을 가능하게 할 것이다.

정의

본원에 사용된 "결장직장암" (CRC)은 결장암, 직장암, 및 결장직장암 (즉, 결장 및 직장 구역 둘 다의 암)을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "암"은 전형적으로 비조절된 세포 성장을 특징으로 하는 포유동물에서의 생리학적 상태를 지칭하거나 기재한다. "종양"은 1종 이상의 암성 세포를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "환자" 및 "대상체"는 동물, 예컨대 영장류 (예를 들어, 인간), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 포유동물을 지칭한다. 특정 측면에서, 환자 또는 대상체는 인간이다.

본원에 사용된 용어 "치료"는 임상 병리상태의 과정 동안 치료될 개체 또는 세포의 자연 과정을 변경하도록 설계된 임상 개입을 지칭한다. 치료의 바람직한 효과는 질환 진행 속도의 감소, 질환 상태의 호전 또는 완화, 및 경감 또는 개선된 예후를 포함한다. 예를 들어, 개체는 암성 세포의 증식의 감소 (또는 파괴), 질환으로부터 발생하는 증상의 감소, 질환을 앓고 있는 개체의 삶의 질의 증가, 질환을 치료하는데 필요한 다른 의약의 용량의 감소, 및/또는 개체의 생존 연장을 포함하나 이에 제한되지는 않는, 암과 연관된 1종 이상의 증상이 완화되거나 제거되는 경우에 성공적으로 "치료된다".

본원에 사용된 어구 "치료 유효량"은 (i) 특정한 질환, 상태, 또는 장애를 치료 또는 예방하거나, (ii) 특정한 질환, 상태, 또는 장애의 1종 이상의 증상을 약화, 호전, 또는 제거하거나, 또는 (iii) 본원에 기재된 특정한 질환, 상태, 또는 장애의 1종 이상의 증상의 발병을 예방 또는 지연시키는 1종 이상의 약물 화합물의 양을 지칭한다. 암의 경우에, 치료 유효량의 약물은 암 세포의 수를 감소시키고/거나; 종양 크기를 감소시키고/거나; 말초 기관으로의 암 세포 침윤을 억제하고/거나 (즉, 어느 정도까지 늦추거나 바람직하게는 정지시키는 것); 종양 전이를 억제하고/거나 (즉, 어느 정도까지 늦추거나 바람직하게는 정지시키는 것); 종양 성장을 어느 정도까지 억제하고/거나; 암과 연관된 증상 중 1종 이상을 어느 정도까지 완화시킬 수 있다. 약물은, 존재하는 암 세포의 성장을 방지하고/거나 존재하는 암 세포를 사멸시킬 수 있는 정도까지 세포증식억제성 및/또는 세포독성일 수 있다. 암 요법에 대해, 효능은 예를 들어 전체 반응률 (ORR)을 평가함으로써 측정될 수 있다. 본원에서 치료 유효량은 환자의 질환 상태, 연령, 성별 및 체중, 및 개체에서 목적하는 반응을 도출하는 작용제의 능력과 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 치료 유효량은 또한 치료상 유익한 효과가 치료의 독성 또는 유해한 효과를 능가하는 것이다. 예방적 사용의 경우에, 유익한 또는 목적하는 결과는 질환의 생화학적, 조직학적 및/또는 거동적 증상, 질환의 발달 동안 나타나는 그의 합병증 및 중간 병리학적 표현형을 포함한 질환의 위험을 제거 또는 감소시키거나, 상기 질환의 중증도를 경감시키거나, 또는 상기 질환의 개시를 지연시키는 것과 같은 결과를 포함한다. 치료적 사용의 경우에, 유익하거나 목적하는 결과는 질환으로부터 발생한 1종 이상의 증상을 감소시키는 것, 질환을 앓고 있는 자의 삶의 질을 증가시키는 것, 질환을 치료하는데 필요한 다른 의약의 용량을 감소시키는 것, 표적화를 통해서와 같이 또 다른 의약의 효과를 증진시키는 것, 질환의 진행을 지연시키는 것, 및/또는 생존을 연장시키는 것과 같은 임상 결과를 포함한다. 암 또는 종양의 경우에, 치료 유효량의 약물은 암 세포의 수를 감소시키고/거나; 종양 크기를 감소시키고/거나; 말초 기관으로의 암 세포 침윤을 억제하고/거나 (즉, 어느 정도 늦추거나 바람직하게는 정지시키는 것); 종양 전이를 억제하고/거나 (즉, 어느 정도 늦추거나 바람직하게는 정지시키는 것); 종양 성장을 어느 정도까지 억제하고/거나; 장애와 연관된 증상 중 1종 이상을 어느 정도까지 완화시킬 수 있다. 치료 유효량은 1회 이상의 투여로 투여될 수 있다. 본 발명의 목적상, 약물, 화합물 또는 제약 조성물의 치료 유효량은 예방적 또는 치유적 치료를 직접적으로 또는 간접적으로 달성하기에 충분한 양이다. 임상 상황에서 이해되는 바와 같이, 약물, 화합물 또는 제약 조성물의 치료 유효량은 또 다른 약물, 화합물 또는 제약 조성물과 조합하여 달성될 수 있거나 그렇지 않을 수 있다. 따라서, 1종 이상의 치료제를 투여하는 맥락에서 치료 유효량이 고려될 수 있고, 1종 이상의 다른 작용제와 조합하여 목적하는 결과가 달성될 수 있거나 달성되는 경우에 단일 작용제가 치료 유효량으로 제공된 것으로 간주될 수 있다.

본원에 사용된 "조합하여"는 하나의 치료 양식을 또 다른 치료 양식에 더하여 투여하는 것을 지칭한다. 따라서, "조합하여"는 개체에게 다른 치료 양식을 투여하기 전에, 그 동안에 또는 그 후에 하나의 치료 양식을 투여하는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "제약 제제"는 활성 성분의 생물학적 활성이 효과적이도록 하는 형태로 존재하며 제제를 투여할 대상체에게 허용되는 않는 독성인 추가의 성분을 함유하지 않는 제제를 지칭한다. 이러한 제제는 멸균된다. "제약상 허용되는" 부형제 (비히클, 첨가제)는 사용되는 활성 성분의 유효 용량을 제공하도록 대상 포유동물에 합리적으로 투여될 수 있는 것이다.

본원에 사용된 "면역조직화학" (IHC)은 생물학적 조직에서 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 원리를 이용함으로써 조직 절편의 세포에서 항원 (예를 들어, 단백질)을 검출하는 과정을 지칭한다. 면역조직화학적 염색은 예컨대 암성 종양에서 발견되는 것과 같은 비정상 세포의 진단에 사용될 수 있다. 특이적인 분자 마커는 특정한 세포성 사건 예컨대 증식 또는 세포 사멸 (아폽토시스)의 특징이다. IHC는 또한 바이오마커의 분포 및 국재화 및 생물학적 조직의 상이한 부분에서 차등 발현된 단백질을 이해하는데 사용될 수 있다. 항체 또는 항혈청, 예컨대 각각의 마커에 특이적인 폴리클로날 항혈청 및 모노클로날 항체가 발현을 검출하는데 사용된다. 항체는 예를 들어 방사성 표지, 형광 표지, 합텐 표지, 예컨대 비오틴, 또는 효소, 예컨대 양고추냉이 퍼옥시다제 또는 알칼리성 포스파타제에 의한 항체 자체의 직접적인 표지에 의해 검출될 수 있다. 하나의 시각화 방법에서, 항체는 색-생산 반응을 촉매할 수 있는 효소, 예컨대 퍼옥시다제에 접합된다 (면역퍼옥시다제 염색 참조). 또 다른 시각화 방법에서, 항체는 또한 형광단, 예컨대 플루오레세인 또는 로다민에 태그부착될 수 있다 (면역형광 참조). 대안적으로, 비표지된 1차 항체가 1차 항체에 특이적인 항혈청, 폴리클로날 항혈청 또는 모노클로날 항체를 포함하는 표지된 2차 항체와 함께 사용된다. 면역조직화학 프로토콜 및 키트는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고 상업적으로 입수가능하다.

본원에 사용된 "항-치료 항체 평가" (ATA)는 문헌 [Rosenberg AS, Worobec AS., A risk-based approach to immunogenicity concerns of therapeutic protein products, BioPharm Intl 2004;17:34-42; 및 Koren E, Smith HW, Shores E, et al., Recommendations on risk-based strategies for detection and characterization of antibodies against biotechnology products, J Immuno Methods 2008; 333:1-9]에 상술된 바와 같은, ATA 반응을 특징화하기 위한 위험-기반 면역원성 전략을 사용하는 면역원성 평가를 지칭한다. 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본원에 사용된 C_max는 최대 혈장 농도를 지칭한다.

본원에 사용된 C_min은 최소 혈장 농도를 지칭한다.

본원에 사용된 "농도 곡선 하 면적" (AUC)은 피팅된 혈장 농도 대 시간 곡선 하의 면적을 지칭한다. AUC₀ _-∞는 기준선 - 무한대의 곡선 하 면적을 지칭한다. AUC₀ _-T는 전체 노출이다.

본원에 사용된 "고형 종양의 반응 평가 기준" (RECIST) v1.1은 문헌 [Eisenhauer, EA, et al., New response evaluation criteria in solid tumours: Revised RECIST guideline (version 1.1), Eur J Cancer 2009:45:228-247; Topalian SL, et al., Safety, activity, and immune correlates of anti-PD-L1 antibody in cancer, N Engl J Med 2012:366:2443-54; 및 Wolchok JD, et al., Guidelines for the evaluation of immunetherapy activity in solid tumors: immune-related response criteria, Clin Can Res 2009;15:7412-20]에 의해 상술된 바와 같은 종양 반응 기준 규정을 지칭한다. 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본원에 사용된 "면역-변형된 RECIST" (irRC)는 RECIST v1.1 규정 (Eisenhauer, EA, et al., (2009))에서 유래된 기준 및 문헌 [Nishino M, et al., Optimizing immune-related tumor response assessment: does reducing the number of lesions impact response assessment in melanoma patients treated with ipilimumab, J Immunother Can 2014;2:17; 및 Nishino M, Giobbie-Hurder A, Gargano M et al., Developing a common language for tumor response to immunotherapy: immune-related response criteria using unidimensional measurements, Clin Can Res 2013;19:3936-43]에 의해 상술된 바와 같은 면역 반응 기준을 지칭한다. 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 달리 명시되지 않는 한, RECIST v1.1 규정이 적용된다.

본원에 사용된 "억제하다"는 표적 효소의 활성을, 억제제가 없는 경우에서의 그 효소의 활성과 비교하여 감소시키는 것을 지칭한다. 일부 측면에서, 용어 "억제하다"는 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 95%의 활성의 감소를 의미한다. 다른 측면에서, "억제하다"는 약 5% 내지 약 25%, 약 25% 내지 약 50%, 약 50% 내지 약 75%, 또는 약 75% 내지 100%의 활성의 감소를 의미한다. 일부 측면에서, "억제하다"는 약 95% 내지 100%의 활성의 감소, 예를 들어, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 활성의 감소를 의미한다. 이러한 감소는 관련 기술분야의 통상의 기술자가 인식할 수 있을 다양한 기술을 사용하여 측정될 수 있다.

본원에 사용된 "무진행 생존" (PFS)은 RECIST v1.1을 사용하여 조사자에 의해 결정된 바와 같은, 질환의 치료로부터 질환 진행 또는 재발의 최초 발생까지의 시간을 지칭한다.

본원에 사용된 "전체 생존" (OS)은 무작위화에서부터 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간을 지칭한다.

본원에 사용된 "부분 반응" (PR)은 기준선 합계 직경을 참조로 하여, 표적 병변의 합계 직경에서의 적어도 30%의 감소를 지칭한다.

본원에 사용된 질환의 "진행의 지연"은 질환 (예컨대 암)의 발생이 연기, 저지, 지체, 저해, 안정화 및/또는 연장되는 것을 의미한다. 이러한 지연은 치료될 질환 및/또는 개체의 병력에 따라 달라지는 시간 길이를 가질 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백한 바와 같이, 충분한 또는 상당한 지연은 사실상 개체에서 질환이 발생하지 않는다는 점에서의 방지를 포괄할 수 있다. 예를 들어, 후기 단계 암, 예컨대 전이의 발생이 지연될 수 있다.

본원에 사용된 "지속된 반응"은 치료 중단 후에 종양 성장 감소에 대한 지속된 효과를 지칭한다. 예를 들어, 종양 크기는 투여 단계 초기의 크기와 비교하여 동일하거나 보다 작게 남아 있을 수 있다. 일부 측면에서, 지속된 반응은 적어도 치료 지속기간과 동일한 지속기간, 적어도 1.5x, 2x, 2.5x 또는 3x 길이의 지속기간을 갖는다.

본원에 사용된 "암 재발을 감소시키거나 억제하는"은 종양 또는 암 재발 또는 종양 또는 암 진행을 감소시키거나 억제하는 것을 의미한다. 본원에 개시된 바와 같이, 암 재발 및/또는 암 진행은 비제한적으로 암 전이를 포함한다.

본원에 사용된 "완전 반응" (CR)은 모든 표적 병변의 소멸을 지칭한다. 임의의 병리학적 림프절 (표적이든 비-표적이든)은 10 mm 미만으로의 짧은 축의 감소를 갖는다.

본원에 사용된 "진행성 질환" (PD)은 기준선 및 적어도 5 mm의 절대적 증가를 포함한 연구 중의 가장 작은 합계 (최저점)를 참조로 하여, 표적 병변의 합계 직경에서의 적어도 20%의 증가를 지칭한다. 하나 이상의 새로운 병변의 출현 또한 진행인 것으로 간주된다.

본원에 사용된 "안정 질환" (SD)은 연구 중의 가장 작은 합계를 참조로 하여, PR의 자격을 얻기에 충분한 수축도 아니고 PD의 자격을 얻기에 충분한 증가도 아닌 것을 지칭한다.

본원에 사용된 "전체 반응률" (ORR)은 RECIST v1.1을 사용하여 조사자에 의해 결정된 바와 같은, 무작위화 후에 발생하고 ≥ 28일 후에 확인된, PR 또는 CR의 비율을 지칭한다.

본원에 사용된 "비확인된 전체 반응률" (ORR_uc)은 확인이 필요하지 않은, RECIST v1.1을 사용하여 조사자에 의해 결정된 바와 같은 무작위화 후에 발생하는 PR 또는 CR의 비율을 지칭한다.

본원에 사용된 "반응 지속기간" (DOR)은 RECIST v1.1을 사용하여 조사자에 의해 결정된 바와 같은, 기록된 객관적 반응의 최초 발생으로부터 재발의 시간 또는 연구 동안 임의의 원인으로 인한 사망 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때까지의 시간을 지칭한다.

본원에 사용된 "국립 암 연구소 유해 사건에 대한 통상 용어 기준" (NCI CTCAE)은 문헌 [Common Terminology Criteria for Adverse Effect, Version 4.0, published May 28, 2009 (v4.03: June 14, 2010) by the U.S. Department of Health and Human Services, National Institutes of Health, National Cancer Institute] (그 전문이 참조로 포함됨)을 지칭한다.

본원에 사용된 "암 요법 기능성 평가 일반" (FACT-G)은 신체적 (7개 항목), 사회적/가족 (7개 항목), 감정적 (6개 항목) 및 기능적 웰빙 (7개 항목)을 측정하는 4가지 하위척도로 구성된 검증되고 신뢰가능한 27-항목 설문지를 지칭하며, 임의의 형태의 암을 갖는 환자에게 사용하기에 적절한 것으로 간주된다 (문헌 [Cella DF, Tulsky DS, Gray G, Sarafian B, Linn E, Bonomi AE et al., The Functional Assessment of Cancer Therapy scale: development and validation of the general measure, Journal of Clinical Oncology 1993; 11(3 Suppl.2):570-9; 및 Webster, K., Odom, L., Peterman, A., Lent, L., Cella, D., The Functional Assessment of Chronic Illness Therapy (FACIT) measurement system: Validation of version 4 of the core questionnaire, Quality of Life Research 1999, 8(7):604]. 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 포함된다). 환자는 각각의 진술이 이전 7일 동안 그들에게 얼마나 맞는지를 5-점 척도로 평가한다 (0, 전혀 그러하지 않음; 1, 약간 그러함; 2, 다소 그러함; 3, 상당히 그러함; 4 아주 많이 그러함).

본원에 사용된 용어 "MEK 억제제(들)"는 MEK, 예컨대 미토겐-활성화 단백질 키나제 효소 MEK1 (또한 MAP2K1로 알려짐) 또는 MEK2 (또한 MAP2K2로 알려짐)를 억제하는 분자를 지칭한다. MEK 억제제는 일부 암, 예컨대 CRC에서 과다활성일 수 있는 MAPK/ERK 경로에 영향을 미치기 위해 사용될 수 있다. MEK 억제제는 광범위하게 보고되었다 (S. Price, Putative Allosteric MEK1 and MEK 2 inhibitors, Expert Opin. Ther. Patents, 2008 18(6):603; J. I. Trujillo, MEK Inhibitors: a patent review 2008-2010,Expert Opin. Ther. Patents 2011 21(7):1045).

본원에 사용된 용어 "PD-1 축 억제제" 또는 "결합 길항제"는 PD-1 신호전달 축 상의 신호전달로부터 생성된 T-세포 기능이상을 제거하여 T-세포 기능 (예를 들어, 증식, 시토카인 생산, 표적 세포 사멸)을 회복 또는 증진시키는 결과를 나타내도록, PD-1 축 결합 파트너와 그의 결합 파트너 중 1종 이상과의 상호작용을 억제하는 분자를 지칭한다. 본원에 사용된 PD-1 축 억제제는 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, 및 PD-L2 억제제를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "PD-1 억제제" 또는 "결합 길항제"는 PD-1과 그의 결합 파트너 중 1종 이상, 예컨대 PD-L1 및 PD-L2와의 상호작용으로부터 생성된 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 제거 또는 방해하는 분자를 지칭한다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 PD-1의 그의 결합 파트너 중 1종 이상에 대한 결합을 억제하는 분자이다. 구체적 측면에서, PD-1 억제제는 PD-1의 PD-L1 및/또는 PD-L2에 대한 결합을 억제한다. 예를 들어, PD-1 억제제는 항-PD-1 항체, 그의 항원 결합 단편, 이뮤노어드헤신, 융합 단백질, 올리고펩티드, 및 PD-1과 PD-L1 및/또는 PD-L2와의 상호작용으로부터 생성된 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 제거 또는 방해하는 다른 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 기능이상적 T-세포가 보다 덜 기능이상적이 되도록 (예를 들어, 항원 인식에 대한 이펙터 반응을 증진시킴) PD-1을 통한 T 림프구 매개된 신호전달 시에 발현된 세포 표면 단백질에 의해 또는 이를 통해 매개되는 음성 공동-자극 신호를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 항-PD-1 항체이다.

본원에 사용된 용어 "PD-L1 억제제" 또는 "결합 길항제"는 PD-L1과 그의 결합 파트너 중 1종 이상, 예컨대 PD-1, B7-1과의 상호작용으로부터 생성된 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 제거 또는 방해하는 분자를 지칭한다. 일부 실시양태에서, PD-L1 억제제는 PD-L1의 그의 결합 파트너에 대한 결합을 억제하는 분자이다. 구체적 측면에서, PD-L1 억제제는 PD-L1의 PD-1 및/또는 B7-1에 대한 결합을 억제한다. 일부 실시양태에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체, 그의 항원 결합 단편, 이뮤노어드헤신, 융합 단백질, 올리고펩티드, 및 PD-L1과 그의 결합 파트너 중 1종 이상, 예컨대 PD-1, B7-1과의 상호작용으로부터 생성된 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 제거 또는 방해하는 다른 분자를 포함한다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 기능이상적 T-세포가 보다 덜 기능이상적이 되도록 (예를 들어, 항원 인식에 대한 이펙터 반응을 증진시킴) PD-L1을 통한 T 림프구 매개된 신호전달 시에 발현된 세포 표면 단백질에 의해 또는 이를 통해 매개되는 음성 공동-자극 신호를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체이다.

본원에 사용된 용어 "PD-L2 억제제" 또는 "결합 길항제"는 PD-L2와 그의 결합 파트너 중 1종 이상, 예컨대 PD-1과의 상호작용으로부터 생성된 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 제거 또는 방해하는 분자를 지칭한다. 일부 실시양태에서, PD-L2 억제제는 PD-L2의 그의 결합 파트너 중 1종 이상에 대한 결합을 억제하는 분자이다. 구체적 측면에서, PD-L2 억제제는 PD-L2의 PD-1에 대한 결합을 억제한다. 일부 실시양태에서, PD-L2 억제제는 항-PD-L2 항체, 그의 항원 결합 단편, 이뮤노어드헤신, 융합 단백질, 올리고펩티드, 및 PD-L2와 그의 결합 파트너 중 1종 이상, 예컨대 PD-1과의 상호작용으로부터 생성된 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 제거 또는 방해하는 다른 분자를 포함한다. 한 실시앙태에서, PD-L2 억제제는 기능이상적 T-세포가 보다 덜 기능이상적이 되도록 (예를 들어, 항원 인식에 대한 이펙터 반응을 증진시킴) PD-L2를 통한 T 림프구 매개된 신호전달 시에 발현된 세포 표면 단백질에 의해 또는 이를 통해 매개되는 음성 공동-자극 신호를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, PD-L2 억제제는 이뮤노어드헤신이다.

본원에 사용된 면역 기능이상과 관련된 용어 "기능이상"은 항원 자극에 대한 감소된 면역 반응성의 상태를 지칭한다. 상기 용어는 항원 인식이 일어날 수 있지만 그로 인한 면역 반응이 감염 또는 종양 성장을 제어하는데 효과적이지 않은 소진 및/또는 무반응 둘 다의 공통 요소를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "기능이상적"은 또한 항원 인식에 대한 불응성 또는 비반응성, 구체적으로 항원 인식을 하류 T-세포 이펙터 기능, 예컨대 증식, 시토카인 생산 (예를 들어, IL-2) 및/또는 표적 세포 사멸로 번역하는 능력의 손상을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "무반응"은 T-세포 수용체를 통해 전달된 불완전한 또는 불충분한 신호로부터 발생한 항원 자극에 대한 비반응성의 상태 (예를 들어, ras-활성화의 부재 하에 세포내 Ca+2를 증가시킴)를 지칭한다. T 세포 무반응은 또한 공동-자극의 부재 하에 항원으로의 자극 시에 발생할 수 있으며, 이는 세포가 심지어 공동-자극과 관련하여 항원에 의한 후속 활성화에 불응성이 되도록 한다. 비반응성 상태는 종종 인터류킨-2의 존재에 의해 무효화될 수 있다. 무반응성 T-세포는 클론 확장을 겪고/거나 이펙터 기능을 획득하지 않는다.

본원에 사용된 용어 "소진"은 다수의 만성 감염 및 암 동안 일어나는 지속된 TCR 신호전달로부터 발생한 T 세포 기능이상의 상태로서 T 세포 소진을 지칭한다. 이는 불완전하거나 결함이 있는 신호전달을 통해서가 아니라 지속된 신호전달로부터 발생한다는 점에서 무반응과 구별된다. 이는 불량한 이펙터 기능, 억제 수용체의 지속된 발현 및 기능적 이펙터 또는 기억 T 세포의 것과 구별되는 전사 상태에 의해 정의된다. 소진은 감염 및 종양의 최적의 제어를 방해한다. 소진은 외인성 음성 조절 경로 (예를 들어, 면역조절 시토카인), 뿐만 아니라 세포 내인성 음성 조절 (공동자극) 경로 (PD-1, B7-H3, B7-H4 등) 둘 다로부터 발생할 수 있다.

"T 세포 기능을 증진시키는 것"은 T-세포가 지속된 또는 증폭된 생물학적 기능을 갖도록 유도, 유발 또는 자극하는 것, 또는 소진된 또는 불활성 T-세포를 재생 또는 재활성화시키는 것을 의미한다. T-세포 기능을 증진시키는 것의 예는 개입 전의 수준에 비해 CD8+ T-세포로부터의 감마-인터페론의 증가된 분비, 증가된 증식, 증가된 항원 반응성 (예를 들어, 바이러스, 병원체 또는 종양 클리어런스)을 포함한다. 한 실시양태에서, 증진 수준은 적어도 50%, 대안적으로 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 120%, 150%, 200%이다. 이러한 증진을 측정하는 방식은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있다.

"T 세포 기능이상적 장애"는 항원 자극에 대한 감소된 반응성을 특징으로 하는 T-세포의 장애 또는 상태이다. 특정한 실시양태에서, T-세포 기능이상적 장애는 PD-1을 통한 부적절한 증가된 신호전달과 특이적으로 연관된 장애이다. 또 다른 실시양태에서, T-세포 기능이상적 장애는 T-세포가 무반응이거나 또는 시토카인 분비, 증식 또는 세포용해 활성을 수행하는 능력이 감소된 것이다. 구체적 측면에서, 감소된 반응성은 면역원을 발현하는 병원체 또는 종양을 비효과적으로 제어하도록 한다. T-세포 기능이상을 특징으로 하는 T 세포 기능이상적 장애의 예는 미해결 급성 감염, 만성 감염 및 종양 면역을 포함한다.

본원에 사용된 "VEGF"는 문헌 [Leung et al. (1989) Science 246:1306, 및 Houck et al. (1991) Mol. Endocrin, 5:1806]에 기재된 바와 같은, 165-아미노산 인간 혈관 내피 세포 성장 인자 및 관련된 121-, 189-, 및 206-아미노산 인간 혈관 내피 세포 성장 인자, 및 그의 자연 발생 대립 유전자 및 프로세싱된 형태를 지칭한다. 용어 "VEGF"는 또한 비-인간 종, 예컨대 마우스, 래트 또는 영장류로부터의 VEGF를 지칭한다. 때로는, 특정 종으로부터의 VEGF가, 인간 VEGF에 대해서는 hVEGF, 뮤린 VEGF에 대해서는 mVEGF 등과 같은 용어로 나타내어 진다. 용어 "VEGF"는 또한 165-아미노산 인간 혈관 내피 세포 성장 인자의 아미노산 8 내지 109 또는 아미노산 1 내지 109를 포함하는 폴리펩티드의 말단절단된 형태를 지칭하는데 사용된다. 임의의 이러한 형태의 VEGF에 대한 언급은, 본원에서 예를 들어 "VEGF (8-109)", "VEGF (1-109)" 또는 "VEGF.sub.165"에 의해 확인될 수 있다. "말단절단된" 천연 VEGF에 대한 아미노산 위치는 천연 VEGF 서열에 나타내어진 바와 같이 넘버링된다. 예를 들어, 말단절단된 천연 VEGF에서의 아미노산 위치 17 (메티오닌)은 또한 천연 VEGF에서의 위치 17 (메티오닌)이다. 말단절단된 천연 VEGF는 KDR 및 Flt-1 수용체에 대해 천연 VEGF와 대등한 결합 친화도를 갖는다.

본원에 사용된 "VEGF 억제제"는 하나 이상의 VEGF 수용체에 대한 그의 결합을 포함하는 VEGF 활성을 중화, 차단, 억제, 제거, 감소 또는 방해할 수 있는 분자를 지칭한다. VEGF 길항제는 항-VEGF 항체 및 그의 항원-결합 단편, VEGF에 특이적으로 결합하여 그의 하나 이상의 수용체에의 결합을 격리시키는 수용체 분자 및 유도체, 항-VEGF 수용체 항체 및 VEGF 수용체 길항제, 예컨대, VEGFR 티로신 키나제의 소분자 억제제, 및 융합 단백질, 예를 들어, VEGF-트랩(Trap) (리제네론(Regeneron)), VEGF.sub.121-겔로닌 (페레그린(Peregrine))을 포함한다. VEGF 길항제는 또한 VEGF의 길항제 변이체, VEGF에 대해 지시된 안티센스 분자, VEGF에 특이적인 RNA 압타머, 및 VEGF 또는 VEGF 수용체에 대한 리보자임을 포함한다. VEGF의 길항제는 VEGF가 세포 수용체에 결합하는 것을 방해하거나, VEGF에 의해 활성화된 세포를 무력화하거나 사멸시키거나, 또는 VEGF가 세포 수용체에 결합한 후의 혈관 내피 세포 활성화를 방해함으로써 작용한다. VEGF 길항제에 의한 모든 이러한 개입 점들은 본 발명의 목적을 위해 동등한 것으로 간주되어야 한다. 바람직한 VEGF 길항제는 VEGF의 생물학적 활성 중 하나 이상 (예를 들어 유사분열촉진 활성, 혈관신생 활성 또는 혈관 투과성 활성)을 억제할 수 있는 항-VEGF 길항작용 항체이다. 항-VEGF 길항작용 항체는 항체 A4.6.1, rhuMab VEGF (베바시주맙), Y0317 (라니비주맙), G6, B20, 2C3, 및 예를 들어 WO98/45331, US2003/0190317, 미국 특허 번호 6,582,959 및 6,703,020; WO98/45332; WO 96/30046; WO94/10202; WO2005/044853; EP 0666868B1; 및 문헌 [Popkov et al., Journal of Immunological Methods 288:149-164 (2004)]에 기재된 바와 같은 다른 것들을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 항-VEGF 길항작용 항체는 WO98/45331 및 문헌 [Chen et al. J Mol Biol 293:865-881 (1999)] (이들 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은 Y0317의 경쇄 및 중쇄 가변 도메인 서열을 갖는 인간화, 친화도 성숙 항-인간 VEGF 항체 Fab 단편인 라니비주맙이다.

본원에 사용된 용어 "패키지 삽입물"은 치료 제조품의 상업용 패키지 내에 통상적으로 포함된 지침서를 지칭하며, 이는 이러한 치료 제조품의 사용에 관한 적응증, 용법, 투여량, 투여, 금기 및/또는 경고에 대한 정보를 함유한다.

용어 "제약상 허용되는 염"은 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌 염을 나타낸다. 제약상 허용되는 염은 산 부가염 및 염기 부가염 둘 다를 포함한다. 어구 "제약상 허용되는"은 해당 물질 또는 조성물이 제제를 구성하는 다른 성분들 및/또는 이것으로 치료할 포유동물과 화학적 및/또는 독성학적으로 상용가능하다는 것을 나타낸다. 산 부가염은 무기 산, 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 탄산, 인산; 및 지방족, 시클로지방족, 방향족, 아르지방족, 헤테로시클릭, 카르복실산, 및 술폰 부류의 유기 산으로부터 선택되는 유기 산, 예컨대 포름산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 글루콘산, 락트산, 피루브산, 옥살산, 말산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 아스파르트산, 아스코르브산, 글루탐산, 안트라닐산, 벤조산, 신남산, 만델산, 엠본산, 페닐아세트산, 메탄술폰산 "메실레이트", 에탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 및 살리실산과 형성된 것이다. 염기 부가염은 유기 또는 무기 염기와 형성된 것이다. 허용가능한 무기 염기의 예는 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망가니즈, 및 알루미늄 염을 포함한다. 제약상 허용되는 유기 비독성 염기로부터 유래된 염은 1차, 2차, 및 3차 아민, 자연 발생적으로 치환된 아민을 포함한 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 에탄올아민, 2-디에틸아미노에탄올, 트리메타민, 디시클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 테오브로민, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘, 및 폴리아민 수지의 염을 포함한다.

본원에서 용어 "항체"는 가장 광범위한 의미로 사용되고, 구체적으로 모노클로날 항체 (예를 들어, 전장 모노클로날 항체), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 및 목적하는 생물학적 활성을 나타내는 한 항체 단편을 포함한다.

"단리된" 항체는 그의 자연 환경의 성분으로부터 확인되고 분리 및/또는 회수된 것이다. 그의 자연 환경의 오염 성분은 항체에 대한 연구, 진단 또는 치료 용도를 방해하는 물질이며, 효소, 호르몬 및 다른 단백질성 또는 비단백질성 용질을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 항체는 (1) 예를 들어 로우리(Lowry) 방법으로 측정 시에 95 중량% 초과의 항체로, 및 일부 실시양태에서는 99 중량% 초과의 항체로; (2) 예를 들어 스피닝 컵 서열분석기를 사용하여 N-말단 또는 내부 아미노산 서열의 적어도 15개의 잔기를 수득하기에 충분한 정도로, 또는 (3) 예를 들어 쿠마시(Coomassie) 블루 또는 은 염색을 사용하여 환원 또는 비환원 조건 하에 SDS-PAGE에 의해 균질한 정도로 정제된다. 단리된 항체는 항체의 자연 환경의 적어도 1종의 성분이 존재하지 않을 것이기 때문에 재조합 세포 내의 계내 항체를 포함한다. 그러나, 통상적으로, 단리된 항체는 적어도 1회의 정제 단계에 의해 제조될 것이다.

"천연 항체"는 통상적으로 2개의 동일한 경쇄 (L) 및 2개의 동일한 중쇄 (H)로 구성된 약 150,000 달톤의 이종사량체 당단백질이다. 각각의 경쇄는 1개의 공유 디술피드 결합에 의해 중쇄에 연결되지만, 디술피드 연결의 수는 상이한 이뮤노글로불린 이소형의 중쇄 사이에서 달라진다. 각각의 중쇄 및 경쇄는 또한 규칙적으로 이격된 쇄내 디술피드 가교를 갖는다. 각각의 중쇄는 한 말단에 가변 도메인 (VH)에 이어서 다수의 불변 도메인을 갖는다. 각각의 경쇄는 한 말단에 가변 도메인 (VL) 및 그의 다른 말단에 불변 도메인을 갖고; 경쇄의 불변 도메인은 중쇄의 제1 불변 도메인과 정렬되고, 경쇄 가변 도메인은 중쇄의 가변 도메인과 정렬된다. 특정한 아미노산 잔기는 경쇄 가변 도메인과 중쇄 가변 도메인 사이에 계면을 형성하는 것으로 여겨진다.

용어 "불변 도메인"은 항원 결합 부위를 함유하는 이뮤노글로불린의 다른 부분인 가변 도메인에 비해 보다 보존된 아미노산 서열을 갖는 이뮤노글로불린 분자의 부분을 지칭한다. 불변 도메인은 중쇄의 CH1, CH2 및 CH3 도메인 (집합적으로, CH) 및 경쇄의 CHL (또는 CL) 도메인을 함유한다.

항체의 "가변 영역" 또는 "가변 도메인"은 항체의 중쇄 또는 경쇄의 아미노-말단 도메인을 지칭한다. 중쇄의 가변 도메인은 "VH"로 지칭될 수 있다. 경쇄의 가변 도메인은 "VL"로 지칭될 수 있다. 이들 도메인은 일반적으로 항체의 가장 가변적인 부분이고, 항원-결합 부위를 함유한다.

용어 "가변"은 가변 도메인의 특정 부분이 항체마다 서열에 있어서 광범위하게 상이하고, 각각의 특정한 항체의 그의 특정한 항원에 대한 결합 및 특이성에 사용된다는 사실을 지칭한다. 그러나, 가변성은 항체의 가변 도메인 전반에 걸쳐 고르게 분포되지 않는다. 이것은 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인 둘 다에서 초가변 영역 (HVR)이라 불리는 3개의 절편에 집중되어 있다. 가변 도메인의 보다 고도로 보존된 부분은 프레임워크 영역 (FR)으로 불린다. 천연 중쇄 및 경쇄 각각의 가변 도메인은, 주로 베타-시트 형상을 채택하여 3개의 HVR에 의해 연결되어 있는 4개의 FR 영역을 포함하며, 이는 베타-시트 구조를 연결하고 일부 경우에는 그의 일부를 형성하는 루프를 형성한다. 각각의 쇄에서의 HVR은 FR 영역에 의해 함께 근접하게 위치되어 있고, 다른 쇄로부터의 HVR과 함께 항체의 항원-결합 부위의 형성에 기여한다 (문헌 [Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md. (1991)] 참조). 불변 도메인은 항원에 대한 항체의 결합에 직접적으로 수반되지는 않지만, 다양한 이펙터 기능, 예컨대 항체-의존성 세포 독성에의 항체의 참여를 나타낸다.

임의의 포유동물 종으로부터의 항체 (이뮤노글로불린)의 "경쇄"는 그의 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여, 카파 ("κ") 및 람다 ("λ")로 불리는 2종의 명백하게 별개의 유형 중 1종으로 지정될 수 있다.

본원에 사용된 용어 IgG "이소형" 또는 "하위부류"는 그의 불변 영역의 화학적 특징 및 항원 특징에 의해 정의된 이뮤노글로불린의 임의의 하위부류를 의미한다.

중쇄 불변 도메인의 아미노산 서열에 따라, 항체 (이뮤노글로불린)는 상이한 부류로 지정될 수 있다. 5가지 주요 부류의 이뮤노글로불린: IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM이 존재하고, 이들 중 몇 가지는 하위부류 (이소형), 예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2로 추가로 분류될 수 있다. 상이한 부류의 이뮤노글로불린에 상응하는 중쇄 불변 도메인은 각각 α, γ, ε, γ 및 μ로 불린다. 이뮤노글로불린의 상이한 부류의 서브유닛 구조 및 3차원적 형상은 널리 공지되어 있고 일반적으로 예를 들어 문헌 [Abbas et al. Cellular and Mol. Immunology, 4th ed. (W.B. Saunders, Co., 2000)]에 기재되어 있다. 항체는 항체와 1종 이상의 다른 단백질 또는 펩티드의 공유 또는 비-공유 회합에 의해 형성되는, 보다 큰 융합 분자의 일부일 수 있다.

용어 "전장 항체", "무손상 항체" 및 "전체 항체"는 하기 정의된 바와 같은 항체 단편이 아닌, 그의 실질적으로 무손상 형태의 항체를 지칭하기 위해 본원에서 상호교환가능하게 사용된다. 용어는 특히 Fc 영역을 함유하는 중쇄를 갖는 항체를 지칭한다.

본원의 목적상 "네이키드 항체"는 세포독성 모이어티 또는 방사성표지에 접합되지 않은 항체이다.

"항체 단편"은 바람직하게는 항원 결합 영역을 포함하는 무손상 항체의 일부를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체 단편은 항원-결합 단편이다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 단편; 디아바디; 선형 항체; 단일-쇄 항체 분자; 및 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 항체를 포함한다.

항체의 파파인 소화는 "Fab" 단편으로 불리는, 각각 단일 항원-결합 부위를 갖는 2개의 동일한 항원-결합 단편, 및 명칭이 용이하게 결정화되는 그의 능력을 반영한 것인 잔류 "Fc" 단편을 생성한다. 펩신 처리는 2개의 항원-결합 부위를 갖고 여전히 항원에 가교될 수 있는 F(ab')2 단편을 생성한다.

"Fv"는 완전한 항원-결합 부위를 함유하는 최소 항체 단편이다. 한 실시양태에서, 2-쇄 Fv 종은 단단히 비-공유 회합된 1개의 중쇄 및 1개의 경쇄 가변 도메인의 이량체로 이루어진다. 단일-쇄 Fv (scFv) 종에서는, 1개의 중쇄 및 1개의 경쇄 가변 도메인이 유연한 펩티드 링커에 의해 공유 연결되어 경쇄 및 중쇄가 2-쇄 Fv 종에서의 구조와 유사한 "이량체" 구조로 회합할 수 있다. 이러한 형상에서, 각각의 가변 도메인의 3개의 HVR은 상호작용하여 VH-VL 이량체의 표면 상의 항원-결합 부위를 규정한다. 집합적으로, 6개의 HVR이 항체에 항원-결합 특이성을 부여한다. 그러나, 심지어 단일 가변 도메인 (또는 항원에 특이적인 3개의 HVR만을 포함하는 Fv의 절반)은 전체 결합 부위보다 친화도가 더 낮긴 하지만 항원을 인식하고 그에 결합하는 능력을 갖는다.

Fab 단편은 중쇄 및 경쇄 가변 도메인을 함유하고, 또한 경쇄의 불변 도메인 및 중쇄의 제1 불변 도메인 (CH1)을 함유한다. Fab' 단편은 항체 힌지 영역으로부터의 1개 이상의 시스테인을 포함하는 중쇄 CH1 도메인의 카르복시 말단에 수개의 잔기가 부가되었다는 점에서 Fab 단편과 상이하다. Fab'-SH는 불변 도메인의 시스테인 잔기(들)가 유리 티올 기를 보유하고 있는 Fab'에 대한 본원의 명칭이다. F(ab')2 항체 단편은 원래 이들 사이에 힌지 시스테인을 갖는 Fab' 단편의 쌍으로서 생성되었다. 항체 단편의 다른 화학적 커플링이 또한 알려져 있다.

"단일-쇄 Fv" 또는 "scFv" 항체 단편은 단일 폴리펩티드 쇄에 존재하는 항체의 VH 및 VL 도메인을 포함한다. 일반적으로, scFv 폴리펩티드는 scFv가 항원 결합을 위한 목적하는 구조를 형성할 수 있게 하는, VH 도메인과 VL 도메인 사이의 폴리펩티드 링커를 추가로 포함한다. scFv의 검토를 위해, 예를 들어 문헌 [Pluckthuen, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., (Springer-Verlag, New York, 1994), pp. 269-315]을 참조한다.

용어 "디아바디"는 2개의 항원-결합 부위를 갖는 항체 단편을 지칭하며, 단편은 동일한 폴리펩티드 쇄 (VH-VL) 내에서 경쇄 가변 도메인 (VL)에 연결된 중쇄 가변 도메인 (VH)을 포함한다. 동일한 쇄 상의 2개의 도메인 사이의 쌍형성을 허용하기에 너무 짧은 링커를 사용함으로써, 도메인은 또 다른 쇄의 상보적 도메인과 쌍형성하도록 강제되고 2개의 항원-결합 부위를 생성한다. 디아바디는 2가 또는 이중특이적일 수 있다. 디아바디는, 예를 들어 EP 404,097; WO 1993/01161; 문헌 [Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003); 및 Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993)]에 보다 완전히 기재되어 있다. 트리아바디 및 테트라바디는 또한 문헌 [Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003)]에 기재되어 있다.

본원에 사용된 용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 동종인 항체의 집단으로부터 수득된 항체를 지칭하며, 예를 들어 집단을 구성하는 개별 항체는 미량으로 존재할 수 있는 가능한 돌연변이, 예를 들어 자연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하다. 따라서, 수식어 "모노클로날"은 개별 항체의 혼합물이 아닌 것으로서의 항체의 특징을 나타낸다. 특정 실시양태에서, 이러한 모노클로날 항체는 전형적으로 표적에 결합하는 폴리펩티드 서열을 포함하는 항체를 포함하고, 여기서 표적-결합 폴리펩티드 서열은 복수의 폴리펩티드 서열로부터 단일 표적 결합 폴리펩티드 서열을 선택하는 것을 포함하는 과정에 의해 수득되었다. 예를 들어, 선택 방법은 복수의 클론, 예컨대 하이브리도마 클론, 파지 클론 또는 재조합 DNA 클론의 풀로부터의 고유한 클론의 선택일 수 있다. 선택된 표적 결합 서열은, 예를 들어 표적에 대한 친화도 개선, 표적 결합 서열의 인간화, 세포 배양물에서의 그의 생산 개선, 생체내에서의 그의 면역원성 감소, 다중특이적 항체의 생성 등을 위해 추가로 변경될 수 있고, 변경된 표적 결합 서열을 포함하는 항체는 또한 본 발명의 모노클로날 항체인 것으로 이해되어야 한다. 전형적으로 상이한 결정기 (에피토프)에 대해 지시되는 상이한 항체를 포함하는 폴리클로날 항체 제제와 대조적으로, 모노클로날 항체 제제의 각각의 모노클로날 항체는 항원 상의 단일 결정기에 대해 지시된다. 모노클로날 항체 제제는, 그의 특이성에 더하여, 전형적으로 다른 이뮤노글로불린에 의해 오염되지 않는다는 점에서 유리하다.

수식어 "모노클로날"은 실질적으로 동종인 항체의 집단으로부터 수득되는 것으로서 항체의 특징을 나타내고, 임의의 특정한 방법에 의한 항체의 생산을 필요로 하는 것으로 해석되어서는 안된다. 예를 들어, 본 발명에 따라 사용될 모노클로날 항체는 예를 들어, 하이브리도마 방법 (예를 들어, 문헌 [Kohler and Milstein, Nature, 256:495-97 (1975); Hongo et al., Hybridoma, 14 (3): 253-260 (1995), Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2nd ed. 1988); Hammerling et al., in: Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563-681 (Elsevier, N.Y., 1981)]); 재조합 DNA 방법 (예를 들어, 미국 특허 번호 4,816,567 참조), 파지-디스플레이 기술 (예를 들어, 문헌 [Clackson et al., Nature, 352: 624-628 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992); Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004); Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004); Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004); 및 Lee et al., J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132 (2004)] 참조), 및 인간 이뮤노글로불린 서열을 코딩하는 인간 이뮤노글로불린 유전자좌 또는 유전자의 일부 또는 전부를 갖는 동물에서 인간 또는 인간-유사 항체를 생산하는 기술 (예를 들어, WO 1998/24893; WO 1996/34096; WO 1996/33735; WO 1991/10741; 문헌 [Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 2551 (1993); Jakobovits et al., Nature 362: 255-258 (1993); Bruggemann et al., Year in Immunol. 7:33 (1993)]; 미국 특허 번호 5,545,807; 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; 및 5,661,016; 문헌 [Marks et al., Bio/Technology 10: 779-783 (1992); Lonberg et al., Nature 368: 856-859 (1994); Morrison, Nature 368: 812-813 (1994); Fishwild et al., Nature Biotechnol. 14: 845-851 (1996); Neuberger, Nature Biotechnol. 14: 826 (1996); 및 Lonberg and Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93 (1995)] 참조)을 포함한 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다.

본원에서 모노클로날 항체는 구체적으로 중쇄 및/또는 경쇄의 일부가 특정한 종으로부터 유래되거나 특정한 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 항체에서의 상응하는 서열과 동일하거나 그에 상동이고, 쇄(들)의 나머지는 또 다른 종으로부터 유래되거나 또 다른 항체 부류 또는 하위부류에 속하는 항체에서의 상응하는 서열과 동일하거나 그에 상동인 "키메라" 항체, 뿐만 아니라 목적하는 생물학적 활성을 나타내는 한 이러한 항체의 단편을 포함한다 (예를 들어, 미국 특허 번호 4,816,567; 및 문헌 [Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855 (1984)] 참조). 키메라 항체는, 항체의 항원-결합 영역이 예를 들어 마카크 원숭이를 관심 항원으로 면역화시켜 생산된 항체로부터 유래된 것인 프리마티즈드(PRIMATIZED)® 항체를 포함한다.

비-인간 (예를 들어, 뮤린) 항체의 "인간화" 형태는 비-인간 이뮤노글로불린으로부터 유래된 최소 서열을 함유하는 키메라 항체이다. 한 실시양태에서, 인간화 항체는 수용자의 HVR로부터의 잔기가 목적하는 특이성, 친화도 및/또는 능력을 갖는 비-인간 종 (공여자 항체), 예컨대 마우스, 래트, 토끼 또는 비인간 영장류의 HVR로부터의 잔기에 의해 대체된 인간 이뮤노글로불린 (수용자 항체)이다. 일부 경우에, 인간 이뮤노글로불린의 FR 잔기는 상응하는 비-인간 잔기로 대체된다. 또한, 인간화 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 항체 성능이 추가로 개선되도록 이루어질 수 있다. 일반적으로, 인간화 항체는 적어도 1개 및 전형적으로 2개의 가변 도메인을 실질적으로 모두 포함할 것이며, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 초가변 루프는 비-인간 이뮤노글로불린의 것에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR은 인간 이뮤노글로불린 서열의 것이다. 또한, 인간화 항체는 임의로 이뮤노글로불린 불변 영역 (Fc) 중 적어도 일부, 전형적으로 인간 이뮤노글로불린의 것을 포함할 것이다. 추가의 세부사항에 대해서는, 문헌 [Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); 및 Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992)]을 참조한다. 또한, 예를 들어 문헌 [Vaswani and Hamilton, Ann. Allergy, Asthma & Immunol. 1:105-115 (1998); Harris, Biochem. Soc. Transactions 23:1035-1038 (1995); Hurle and Gross, Curr. Op. Biotech. 5:428-433 (1994)]; 및 미국 특허 번호 6,982,321 및 7,087,409를 참조한다.

"인간 항체"는 인간에 의해 생산된 항체의 것에 상응하는 아미노산 서열을 보유하고/거나 본원에 개시된 바와 같은 인간 항체의 임의의 제조 기술을 사용하여 제조된 것이다. 인간 항체의 이러한 정의는 구체적으로 비-인간 항원-결합 잔기를 포함하는 인간화 항체를 배제시킨다. 인간 항체는 파지-디스플레이 라이브러리를 포함한 관련 기술분야에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생산될 수 있다. 문헌 [Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227:381 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581 (1991)]. 또한, 문헌 [Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner et al., J. Immunol., 147(1):86-95 (1991)]에 기재된 방법도 인간 모노클로날 항체의 제조에 이용가능하다. 또한 문헌 [van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol., 5: 368-74 (2001)]을 참조한다. 인간 항체는, 항원 챌린지에 반응하여 이러한 항체를 생산하도록 변형되었으나 내인성 유전자좌는 무력화시킨 트랜스제닉 동물, 예를 들어 면역화된 제노마우스에게 항원을 투여함으로써 제조될 수 있다 (예를 들어, 제노마우스(XENOMOUSE)™ 기술에 관한 미국 특허 번호 6,075,181 및 6,150,584 참조). 또한, 예를 들어 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체에 관한 문헌 [Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006)]을 참조한다.

"종-의존성 항체"는 제2 포유동물 종으로부터의 항원의 상동체에 대한 것보다, 제1 포유동물 종으로부터의 항원에 대한 결합 친화도가 더 강한 항체이다. 통상적으로, 종-의존성 항체는 인간 항원에 "특이적으로 결합"하지만 (예를 들어, 결합 친화도 (Kd) 값이 약 1x10^-7M 이하, 바람직하게는 약 1x10^-8M 이하, 바람직하게는 약 1x10^-9M 이하), 제2의 비인간 포유동물 종으로부터의 항원의 상동체에 대한 결합 친화도는 인간 항원에 대한 그의 결합 친화도보다 적어도 약 50배 또는 적어도 약 500배 또는 적어도 약 1000배 더 약하다. 종-의존성 항체는 상기 정의된 바와 같은 임의의 다양한 유형의 항체일 수 있으나, 바람직하게는 인간화 또는 인간 항체이다.

본원에 사용된 경우에 용어 "초가변 영역", "HVR" 또는 "HV"는 서열 내에서 초가변적이고/거나 구조적으로 한정된 루프를 형성하는 항체 가변 도메인의 영역을 지칭한다. 일반적으로, 항체는 6개의 HVR; VH 내에 3개 (H1, H2, H3), 및 VL 내에 3개 (L1, L2, L3)를 포함한다. 천연 항체에서, H3 및 L3은 6개의 HVR 중 가장 높은 다양성을 나타내고, H3은 특히 항체에 대한 정밀한 특이성을 부여하는데 고유한 역할을 수행하는 것으로 여겨진다. 예를 들어, 문헌 [Xu et al., Immunity 13:37-45 (2000); Johnson and Wu, in Methods in Molecular Biology 248:1-25 (Lo, ed., Human Press, Totowa, N.J., 2003)]을 참조한다. 실제로, 중쇄만으로 이루어진 자연 발생 낙타류 항체는 경쇄의 부재 하에 기능적이고 안정하다. 예를 들어, 문헌 [Hamers-Casterman et al., Nature 363:446-448 (1993); Sheriff et al., Nature Struct. Biol. 3:733-736 (1996)]을 참조한다.

다수의 HVR 설명이 사용되고 있으며 본원에 포괄된다. 카바트(Kabat) 상보성 결정 영역 (CDR)은 서열 가변성에 기초하며, 가장 통상적으로 사용된다 (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)). 대신, 코티아(Chothia)는 구조적 루프의 위치를 지칭한다 (Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). AbM HVR은 카바트 HVR과 코티아 구조적 루프 사이의 절충안을 나타내고, 옥스포드 몰레큘라(Oxford Molecular)의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 사용된다. "접촉" HVR은 이용가능한 복합체 결정 구조의 분석에 기초한다. 각각의 이들 HVR로부터의 잔기가 하기 기재된다.

루프 카바트 AbM 코티아 접촉

L1 L24-L34 L24-L34 L26-L32 L30-L36

L2 L50-L56 L50-L56 L50-L52 L46-L55

L3 L89-L97 L89-L97 L91-L96 L89-L96

H1 H31-H35B H26-H35B H26-H32 H30-H35B (카바트 넘버링)

H1 H31-H35 H26-H35 H26-H32 H30-H35 (코티아 넘버링)

H2 H50-H65 H50-H58 H53-H55 H47-H58

H3 H95-H102 H95-H102 H96-H101 H93-H101

HVR은 하기와 같이 "확장된 HVR"을 포함할 수 있다: VL에서 24-36 또는 24-34 (L1), 46-56 또는 50-56 (L2) 및 89-97 또는 89-96 (L3), 및 VH에서 26-35 (H1), 50-65 또는 49-65 (H2) 및 93-102, 94-102 또는 95-102 (H3). 가변 도메인 잔기는 각각의 이들 정의에 대해 상기 문헌 [Kabat et al.]에 따라 넘버링된다.

"프레임워크" 또는 "FR" 잔기는 본원에 정의된 바와 같은 HVR 잔기 이외의 가변 도메인 잔기이다.

용어 "카바트에서와 같은 가변 도메인 잔기 넘버링" 또는 "카바트에서와 같은 아미노산 위치 넘버링" 및 그의 변형은 상기 문헌 [Kabat et al.]에서 항체 편집의 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인에 사용된 넘버링 시스템을 지칭한다. 이러한 넘버링 시스템을 사용하여, 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 FR 또는 HVR의 단축, 또는 그 내로의 삽입에 상응하게 보다 적은 또는 추가의 아미노산을 함유할 수 있다. 예를 들어, 중쇄 가변 도메인은 H2의 잔기 52 다음의 단일 아미노산 삽입체 (카바트에 따라 잔기 52a), 및 중쇄 FR 잔기 82 다음에 삽입된 잔기 (예를 들어, 카바트에 따라 잔기 82a, 82b, 및 82c 등)를 포함할 수 있다. 잔기의 카바트 넘버링은 항체 서열을 "표준" 카바트 넘버링된 서열과 상동성 영역에서 정렬함으로써 주어진 항체에 대해 결정될 수 있다.

카바트 넘버링 시스템은 일반적으로 가변 도메인 내의 잔기 (대략 경쇄의 잔기 1-107 및 중쇄의 잔기 1-113)를 지칭하는 경우에 사용된다 (예를 들어, 문헌 [Kabat et al., Sequences of Immunological Interest. 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)]). "EU 넘버링 시스템" 또는 "EU 인덱스"는 일반적으로 이뮤노글로불린 중쇄 불변 영역의 잔기를 지칭하는 경우에 사용된다 (예를 들어, 상기 문헌 [Kabat et al.]에 보고된 EU 인덱스). "카바트에서와 같은 EU 인덱스"는 인간 IgG1 EU 항체의 잔기 넘버링을 지칭한다.

표현 "선형 항체"는 문헌 [Zapata et al. (1995 Protein Eng, 8(10):1057-1062)]에 기재된 항체를 지칭한다. 간략하게, 이들 항체는 상보적 경쇄 폴리펩티드와 함께 한 쌍의 항원 결합 영역을 형성하는 한 쌍의 탠덤 Fd 절편 (VH-CH1-VH-CH1)을 포함한다. 선형 항체는 이중특이적 또는 단일특이적일 수 있다.

본원에 사용된 용어 "결합한다", "에 특이적으로 결합한다" 또는 "에 특이적인"은 생물학적 분자를 포함하는 이종 분자 집단의 존재 하에 표적의 존재를 결정할 수 있는 것으로, 측정가능하고 재현가능한 상호작용, 예컨대 표적과 항체 사이의 결합을 지칭한다. 예를 들어, 표적 (에피토프일 수 있음)에 결합하거나 특이적으로 결합하는 항체는 다른 표적에 결합하는 경우보다 더 큰 친화도, 결합력으로, 더 용이하게, 및/또는 더 긴 기간 동안 이러한 표적에 결합하는 항체이다. 한 실시양태에서, 비관련 표적에 항체가 결합하는 정도는, 예를 들어 방사성면역검정 (RIA)에 의한 측정 시에 표적에 대한 항체의 결합의 약 10% 미만이다. 특정 실시양태에서, 표적에 특이적으로 결합하는 항체의 해리 상수 (Kd)는 ≤ 1μM, ≤ 100 nM, ≤ 10 nM, ≤ 1 nM 또는 ≤ 0.1 nM이다. 특정 실시양태에서, 항체는 상이한 종으로부터의 단백질 사이에 보존되는, 단백질 상의 에피토프에 특이적으로 결합한다. 또 다른 실시양태에서, 특이적 결합은 배타적 결합을 포함할 수 있으나 이를 필요로 하지는 않는다.

용어 "검출"은 직접 및 간접 검출을 포함한 임의의 검출 수단을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "바이오마커"는 샘플에서 검출될 수 있는, 예를 들어 예측, 진단 및/또는 예후 지시자를 지칭한다. 바이오마커는 특정한 분자적, 병리학적, 조직학적 및/또는 임상적 특색을 특징으로 하는 특정한 하위유형의 질환 또는 장애 (예를 들어, 암)의 지시자로서의 역할을 할 수 있다. 일부 실시양태에서, 바이오마커는 유전자이다. 바이오마커는 폴리뉴클레오티드 (예를 들어, DNA 및/또는 RNA), 폴리뉴클레오티드 카피수 변경 (예를 들어, DNA 카피수), 폴리펩티드, 폴리펩티드 및 폴리뉴클레오티드 변형 (예를 들어, 번역후 변형), 탄수화물 및/또는 당지질-기재 분자 마커를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

치료제

본 개시내용은 대상체에서 CRC를 치료하기 위한 MEK 억제제, PD-1 축 억제제, 및 VEGF 억제제의 조합을 사용한다. 일부 측면에서, MEK 억제제는 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염이고/거나; PD-1 축 억제제는 PD-L1 억제제이고, 보다 특히 PD-L1 억제제는 아테졸리주맙이고/거나; VEGF 억제제는 베바시주맙이다. 일부 다른 측면에서, 코비메티닙은 코텔릭(Cotellic)®이고/거나, 아테졸리주맙은 테센트릭(Tecentriq)®이고/거나, 베바시주맙은 아바스틴(Avastin)®이다.

본원에 개시된 화합물은 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방식으로 투여될 수 있다. 일부 측면에서, 화합물은 정맥내로, 근육내로, 피하로, 국소로, 경구로, 경피로, 복강내로, 안와내로, 이식에 의해, 흡입에 의해, 척수강내로, 뇌실내로, 종양내로 또는 비강내로 투여될 수 있다.

활성 화합물의 적절한 용량은 통상의 숙련된 의사의 지식 내의 수많은 인자에 좌우된다는 것이 이해된다. 활성 화합물의 용량(들)은, 예를 들어, 대상체의 연령, 체중, 전반적 건강, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로, 배출 속도, 및 임의의 약물 조합물에 따라 달라질 것이다.

또한 치료를 위해 사용되는 본 개시내용의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, 대사물 또는 유도체의 유효 투여량은 특정한 치료 과정에 걸쳐 증가 또는 감소될 수 있다는 것이 인지될 것이다. 투여량의 변화는 진단 검정의 결과로부터 이루어질 수 있고 분명해질 수 있다.

MEK 억제제

본 개시내용의 범주 내의 MEK 억제제의 예는 코비메티닙, 트라메티닙, 비니메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, PD-0325901 및 BI-847325, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.

본 개시내용의 일부 특정한 측면에서, MEK 억제제는 화학 명칭 (S)[3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)페닐][3-히드록시-3-(피페리딘-2-일]아제티딘-1-일) 메타논을 갖고 하기 구조를 갖는 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염 (예를 들어, 코텔릭®)이다:

코텔릭®은 코비메티닙의 푸마레이트 염이다. 코비메티닙은 미국 특허 번호 7,803,839 및 8,362,002에 기재되어 있고, 그의 각각은 그 전문이 참조로 포함된다. 코비메티닙은 MEK1 및 MEK2 (RAS/RAF/MEK/ERK (MAPK)의 중심 성분) 경로의 가역적이고, 강력하고, 고도로 선택적인 억제제이고, 다수의 인간 암 모델에서 단일 작용제 항종양 활성을 갖는다.

코비메티닙은 MEK1 및 MEK2의 억제를 통해 다양한 인간 종양 세포주의 증식을 억제한다. 또한, 코비메티닙은 이종이식 종양 모델에서 ERK 인산화를 억제하고, 아폽토시스를 자극한다. 코비메티닙은 종양 이종이식편 내에 축적되고, 혈장 농도가 저하된 후 종양에서 고농도로 유지된다. ERK1 인산화를 억제하기 위한 코비메티닙의 활성은 혈장에서보다 종양 조직에서의 그의 농도와 보다 밀접하게 상관되고; 일반적으로, 종양 이종이식편 모델에서 감소된 ERK1 인산화와 효능 사이에는 양호한 상관관계가 존재한다. 여러 인간 종양 이종이식편 모델에서 종양 퇴행이 관찰되었다. 이러한 퇴행은 용량 의존성이었고, 시험된 최고 용량에서 최대 100% 퇴행되었다. 연구된 모델은 CRC, 악성 흑색종, 유방 암종, 및 폐 암종을 포함한다.

단일 작용제로서 투여되는 코비메티닙의 약동학 (PK)은 BRAF, NRAS, 또는 KRAS 돌연변이를 보유하는 환자에서 1일 60 mg의 코비메티닙 용량의 평가를 포함하는 Ia상 용량-증량 연구 MEK4592g에서 경구 투여에 따라 단일 및 다중 투약 후 암 환자에서 특징화되었다. 전체 6명의 환자 (모두 흑색종을 가짐; 6.2%)는 확인된 부분 반응 (PR)을 가졌고, 28명의 환자 (28.9%)는 안정 질환 (SD)을 가졌고, 40명의 환자 (41.2%)는 진행성 질환을 가졌다. 14명의 결장직장암 (CRC) 환자에서, 모든 환자는 진행성 질환 (PD)을 경험하였다. 연구 MEK4592g의 단계 III에 18명의 환자가 들어가고, 18명의 환자 중 14명에 대해 최상의 전체 반응을 평가하였다. 4명의 환자 (22.2%)는 그의 최상의 전체 반응으로서 SD를 가졌고, 2명의 환자 (11.1%)는 확인되지 않은 종양 반응을 가졌다.

코비메티닙은 중간 정도의 흡수 속도 (최대 농도까지의 중앙 시간 [t_max], 1 내지 3시간) 및 48.8시간의 평균 말기 반감기 (t_1/2) (23.1 내지 80시간의 범위)를 갖는다. 코비메티닙은 농도-비의존성 방식으로 혈장 단백질에 결합한다 (95%). 코비메티닙은 0.05 mg/kg (70 kg 성인의 경우 대략 3.5 mg/kg) 내지 80 mg 용량 범위에서 선형 약동학을 나타내고, 절대 생체이용률은 건강한 대상체에서의 연구 MEK4952g에서 45.9% (90% CI: 39.74%, 53.06%)인 것으로 결정되었다. 코비메티닙 약동학은 건강한 대상체에서 공복 상태에서의 투여와 비교하여 섭식 상태에서의 투여 시 변경되지 않는다. 식품은 코비메티닙 약동학을 변경시키지 않기 때문에, 코비메티닙은 식품과 함께 또는 식품 없이 투여될 수 있다. 공복 상태에서 단독으로의 코비메티닙 투여와 비교하여, 고-지방식의 존재 또는 부재 하에 투여되는지에 관계없이, 양성자 펌프 억제제 라베프라졸은 코비메티닙 약동학에 대해 최소 효과를 갖는 것으로 보인다. 따라서, 위의 pH의 증가는 코비메티닙 약동학에 영향을 미치지 않고, 이는 위의 pH의 변경에 민감하지 않다는 것을 나타낸다.

코비메티닙 염, 결정질 형태 및 전구약물은 본 개시내용의 범주 내에 포함된다. 코비메티닙, 제조 방법 및 치료 용도는 국제 공개 번호 WO 2007/044515, WO 2007/044615, WO 2014/027056 및 WO 2014/059422에 개시되어 있고, 그의 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 예를 들어, 본 개시내용의 일부 측면에서, MEK 억제제는 결정질 헤미푸마레이트 코비메티닙 다형체 형태 A이다.

본 개시내용의 범주 내의 MEK 억제제 (예를 들어, 코비메티닙) 용량은 1일에 MEK 억제제 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 80 mg, 또는 약 60 mg이다. 특정한 실시양태에서, MEK 억제제는 코비메티닙이고, 약 60 mg, 약 40 mg 또는 약 20 mg으로 투여된다.

MEK 억제제는 1일 1회 적합하게 투여된다. 일부 측면에서, MEK 억제제는 28일 치료 사이클의 연속 21일 동안 1일 1회 투여된다. 일부 측면에서, MEK 억제제는 28일 치료 주기의 제1일 내지 제21일에 1일 1회 투여된다. 일부 측면에서, MEK 억제제는 28일 치료 주기의 제3일 내지 제23일에 1일 1회 투여된다.

PD-1 축 억제제

본 개시내용에 따라, PD-1 축 억제제는 보다 특히 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, 또는 PD-L2 억제제를 지칭할 수 있다. "PD-1"에 대한 대체 명칭은 CD279 및 SLEB2를 포함한다. "PD-L1"에 대한 대체 명칭은 B7-H1, B7-4, CD274, 및 B7-H를 포함한다. "PD-L2"에 대한 대체 명칭은 B7-DC, Btdc, 및 CD273을 포함한다. 일부 실시양태에서, PD-1, PD-L1 및 PD-L2는 인간 PD-1, PD-L1 및 PD-L2이다.

일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 PD-1의 그의 리간드 결합 파트너에 대한 결합을 억제하는 분자이다. 구체적 측면에서, PD-1 리간드 결합 파트너는 PD-L1 및/또는 PD-L2이다. 또 다른 실시양태에서, PD-L1 억제제는 PD-L1의 그의 결합 파트너에 대한 결합을 억제하는 분자이다. 구체적 측면에서, PD-L1 결합 파트너는 PD-1 및/또는 B7-1이다. 또 다른 실시양태에서, PD-L2 억제제는 PD-L2의 그의 결합 파트너에 대한 결합을 억제하는 분자이다. 구체적 측면에서, PD-L2 결합 파트너는 PD-1이다. 억제제는 항체, 그의 항원 결합 단편, 이뮤노어드헤신, 융합 단백질, 또는 올리고펩티드일 수 있다.

일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 항-PD-1 항체 (예를 들어, 인간 항체, 인간화 항체, 또는 키메라 항체)이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 람브롤리주맙 및 CT-011로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 이뮤노어드헤신 (예를 들어, 불변 영역 (예를 들어, 이뮤노글로불린 서열의 Fc 영역)에 융합된 PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 또는 PD-1 결합 부분을 포함하는 이뮤노어드헤신)이다. 일부 실시양태에서, PD-1 억제제는 AMP-224이다. MDX-1106-04, MDX-1106, ONO-4538, BMS-936558, 및 옵디보(OPDIVO)®로도 알려져 있는 니볼루맙은 WO2006/121168에 기재된 항-PD-1 항체이다. MK-3475, 머크 3475, 람브롤리주맙, 키트루다(KEYTRUDA)®, 및 SCH-900475로도 알려져 있는 펨브롤리주맙은 WO2009/114335에 기재된 항-PD-1 항체이다. hBAT 또는 hBAT-1로도 알려져 있는 CT-011은 WO2009/101611에 기재된 항-PD-1 항체이다. B7-DCIg로도 알려져 있는 AMP-224는 WO2010/027827 및 WO2011/066342에 기재된 PD-L2-Fc 융합 가용성 수용체이다.

일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙 (CAS 등록 번호: 946414-94-4)이다. 추가 실시양태에서, 서열식별번호: 1로부터의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 서열식별번호: 2로부터의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 단리된 항-PD-1 항체가 제공된다. 추가 실시양태에서, 중쇄 및/또는 경쇄 서열을 포함하는 단리된 항-PD-1 항체가 제공되며, 여기서:

(a) 중쇄 서열은 중쇄 서열:

에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖거나,

(b) 경쇄 서열은 경쇄 서열:

에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖는다.

일부 실시양태에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙 (CAS 등록 번호: 1374853-91-4)이다. 추가 실시양태에서, 서열식별번호: 3으로부터의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 서열식별번호: 4로부터의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 단리된 항-PD-1 항체가 제공된다. 추가 실시양태에서, 중쇄 및/또는 경쇄 서열을 포함하는 단리된 항-PD-1 항체가 제공되며, 여기서:

(a) 중쇄 서열은 중쇄 서열:

(b) 경쇄 서열은 경쇄 서열:

일부 실시양태에서, PD-L1 억제제는 항-PD-L1 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 억제제는 YW243.55.S70, MPDL3280A (아테졸리주맙), MDX-1105, 및 MEDI4736으로 이루어진 군으로부터 선택된다. BMS-936559로도 알려져 있는 MDX-1105는 WO2007/005874에 기재된 항-PD-L1 항체이다. 항체 YW243.55.S70 (중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열이 각각 서열식별번호: 5 및 6에 제시됨)은 WO 2010/077634 A1에 기재된 항-PD-L1이다. MEDI4736은 WO2011/066389 및 US2013/034559에 기재된 항-PD-L1 항체이다.

본 발명의 방법에 유용한 항-PD-L1 항체, 및 그의 제조 방법의 예는 PCT 특허 출원 WO 2010/077634 A1 및 미국 특허 번호 8,217,149에 기재되어 있고, 이는 본원에 참조로 포함된다.

일부 실시양태에서, PD-1 축 억제제는 항-PD-L1 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 PD-L1과 PD-1 사이 및/또는 PD-L1과 B7-1 사이의 결합을 억제할 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 모노클로날 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 Fab, Fab'-SH, Fv, scFv, 및 (Fab')₂ 단편으로 이루어진 군으로부터 선택되는 항체 단편이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 인간화 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 인간 항체이다.

본 발명에 유용한 항-PD-L1 항체 (이러한 항체를 함유하는 조성물 포함)는 예컨대 WO 2010/077634 A1에 기재되어 있다. 일부 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 서열식별번호: 7 또는 8 (하기)의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열식별번호: 9 (하기)의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

한 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 폴리펩티드를 함유하며, 여기서

(a) HVR-H1 서열은 GFTFSX₁SWIH (서열식별번호: 10)이고;

(b) HVR-H2 서열은 AWIX₂PYGGSX₃YYADSVKG (서열식별번호: 11)이고;

(c) HVR-H3 서열은 RHWPGGFDY (서열식별번호: 12)이고;

추가로 여기서 X₁은 D 또는 G이고; X₂는 S 또는 L이고; X₃은 T 또는 S이다.

하나의 구체적 측면에서, X₁은 D이고; X₂는 S이고 X₃은 T이다. 또 다른 측면에서, 폴리펩티드는 식: (HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)에 따른 HVR 사이에 병치된 가변 영역 중쇄 프레임워크 서열을 추가로 포함한다. 또 다른 측면에서, 프레임워크 서열은 인간 컨센서스 프레임워크 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 프레임워크 서열은 VH 하위군 III 컨센서스 프레임워크이다. 추가 측면에서, 프레임워크 서열 중 적어도 1개는 하기이다:

HC-FR1은 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS (서열식별번호: 13)이고

HC-FR2는 WVRQAPGKGLEWV (서열식별번호: 14)이고

HC-FR3은 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (서열식별번호: 15)이고

HC-FR4는 WGQGTLVTVSA (서열식별번호: 16)이다.

추가 측면에서, 중쇄 폴리펩티드는 HVR-L1, HVR-L2 및 HVR-L3을 포함하는 가변 영역 경쇄와 추가로 조합되며, 여기서

(a) HVR-L1 서열은 RASQX₄X₅X₆TX₇X₈A (서열식별번호: 17)이고;

(b) HVR-L2 서열은 SASX₉LX₁₀S (서열식별번호: 18)이고;

(c) HVR-L3 서열은 QQX₁₁X₁₂X₁₃X₁₄PX₁₅T (서열식별번호: 19)이고;

추가로 여기서 X₄는 D 또는 V이고; X₅는 V 또는 I이고; X₆은 S 또는 N이고; X₇은 A 또는 F이고; X₈은 V 또는 L이고; X₉는 F 또는 T이고; X₁₀은 Y 또는 A이고; X₁₁은 Y, G, F, 또는 S이고; X₁₂는 L, Y, F 또는 W이고; X₁₃은 Y, N, A, T, G, F 또는 I이고; X₁₄는 H, V, P, T 또는 I이고; X₁₅는 A, W, R, P 또는 T이다.

추가 측면에서, X₄는 D이고; X₅는 V이고; X₆은 S이고; X₇은 A이고; X₈은 V이고; X₉는 F이고; X₁₀은 Y이고; X₁₁은 Y이고; X₁₂는 L이고; X₁₃은 Y이고; X₁₄는 H이고; X₁₅는 A이다. 추가 측면에서, 경쇄는 식: (LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)에 따른 HVR 사이에 병치된 가변 영역 경쇄 프레임워크 서열을 추가로 포함한다. 추가 측면에서, 프레임워크 서열은 인간 컨센서스 프레임워크 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 프레임워크 서열은 VL 카파 I 컨센서스 프레임워크이다. 추가 측면에서, 프레임워크 서열 중 적어도 1개는 하기이다:

LC-FR1은 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC (서열식별번호: 20)이고

LC-FR2는 WYQQKPGKAPKLLIY (서열식별번호: 21)이고

LC-FR3은 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC (서열식별번호: 22)이고

LC-FR4는 FGQGTKVEIKR (서열식별번호: 23)이다.

또 다른 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하는 단리된 항-PD-L1 항체 또는 항원 결합 단편이 제공되며, 여기서

중쇄는 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3을 포함하고, 여기서 추가로

(i) HVR-H1 서열은 GFTFSX₁SWIH (서열식별번호: 10)이고;

(ii) HVR-H2 서열은 AWIX₂PYGGSX₃YYADSVKG (서열식별번호: 11)이고

(iii) HVR-H3 서열은 RHWPGGFDY (서열식별번호: 12)이고,

경쇄는 HVR-L1, HVR-L2 및 HVR-L3을 포함하고, 여기서 추가로

(i) HVR-L1 서열은 RASQX₄X₅X₆TX₇X₈A (서열식별번호: 17)이고

(ii) HVR-L2 서열은 SASX₉LX₁₀S (서열식별번호: 18)이고;

(iii) HVR-L3 서열은 QQX₁₁X₁₂X₁₃X₁₄PX₁₅T (서열식별번호: 19)이다.

추가로 여기서 X₁은 D 또는 G이고; X₂는 S 또는 L이고; X₃은 T 또는 S이고; X₄는 D 또는 V이고; X₅는 V 또는 I이고; X₆은 S 또는 N이고; X₇은 A 또는 F이고; X₈은 V 또는 L이고; X₉는 F 또는 T이고; X₁₀은 Y 또는 A이고; X₁₁은 Y, G, F, 또는 S이고; X₁₂는 L, Y, F 또는 W이고; X₁₃은 Y, N, A, T, G, F 또는 I이고; X₁₄는 H, V, P, T 또는 I이고; X₁₅는 A, W, R, P 또는 T이다.

구체적 측면에서, X₁은 D이고; X₂는 S이고 X₃은 T이다. 또 다른 측면에서, X₄는 D이고; X₅는 V이고; X₆은 S이고; X₇은 A이고; X₈은 V이고; X₉는 F이고; X₁₀은 Y이고; X₁₁은 Y이고; X₁₂는 L이고; X₁₃은 Y이고; X₁₄는 H이고; X₁₅는 A이다. 또 다른 측면에서, X₁은 D이고; X₂는 S이고 X₃은 T이고, X₄는 D이고; X₅는 V이고; X₆은 S이고; X₇은 A이고; X₈은 V이고; X₉는 F이고; X₁₀은 Y이고; X₁₁은 Y이고; X₁₂는 L이고; X₁₃은 Y이고; X₁₄는 H이고 X₁₅는 A이다.

추가 측면에서, 중쇄 가변 영역은 (HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)로서 HVR 사이에 병치된 1개 이상의 프레임워크 서열을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 (LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)로서 HVR 사이에 병치된 1개 이상의 프레임워크 서열을 포함한다. 추가 측면에서, 프레임워크 서열은 인간 컨센서스 프레임워크 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열은 카바트 하위군 I, II, 또는 III 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열은 VH 하위군 III 컨센서스 프레임워크이다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열 중 1개 이상은 하기이다:

HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS (서열식별번호: 13)

HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV (서열식별번호: 14)

HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (서열식별번호: 15)

HC-FR4 WGQGTLVTVSA (서열식별번호: 16).

추가 측면에서, 경쇄 프레임워크 서열은 카바트 카파 I, II, II 또는 IV 하위군 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 경쇄 프레임워크 서열은 VL 카파 I 컨센서스 프레임워크이다. 추가 측면에서, 경쇄 프레임워크 서열 중 1개 이상은 하기이다:

LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC (서열식별번호: 20)

LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY (서열식별번호: 21)

LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC (서열식별번호: 22)

LC-FR4 FGQGTKVEIKR (서열식별번호: 23).

추가의 구체적 측면에서, 항체는 인간 또는 뮤린 불변 영역을 추가로 포함한다. 추가 측면에서, 인간 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG2, IgG3, IgG4로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 구체적 측면에서, 인간 불변 영역은 IgG1이다. 추가 측면에서, 뮤린 불변 영역은 IgG1, IgG2A, IgG2B, IgG3으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가 측면에서, 뮤린 불변 영역은 IgG2A이다. 추가의 구체적 측면에서, 항체는 감소된 또는 최소 이펙터 기능을 갖는다. 추가의 구체적 측면에서 최소 이펙터 기능은 "무이펙터 Fc 돌연변이" 또는 비-글리코실화로부터 발생한다. 추가 실시양태에서, 무이펙터 Fc 돌연변이는 불변 영역에서의 N297A 또는 D265A/N297A 치환이다.

또 다른 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하는 항-PD-L1 항체가 제공되며, 여기서

(a) 중쇄는 각각 GFTFSDSWIH (서열식별번호: 24), AWISPYGGSTYYADSVKG (서열식별번호: 25) 및 RHWPGGFDY (서열식별번호: 12)에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3 서열을 추가로 포함하거나,

(b) 경쇄는 각각 RASQDVSTAVA (서열식별번호: 26), SASFLYS (서열식별번호: 27) 및 QQYLYHPAT (서열식별번호: 28)에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는 HVR-L1, HVR-L2 및 HVR-L3 서열을 추가로 포함한다.

구체적 측면에서, 서열 동일성은 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%이다. 또 다른 측면에서, 중쇄 가변 영역은 (HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)로서 HVR 사이에 병치된 1개 이상의 프레임워크 서열을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 (LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)로서 HVR 사이에 병치된 1개 이상의 프레임워크 서열을 포함한다. 또 다른 측면에서, 프레임워크 서열은 인간 컨센서스 프레임워크 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열은 카바트 하위군 I, II, 또는 III 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열은 VH 하위군 III 컨센서스 프레임워크이다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열 중 1개 이상은 하기이다:

HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS (서열식별번호: 13)

HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV (서열식별번호: 14)

HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (서열식별번호: 15)

HC-FR4 WGQGTLVTVSA (서열식별번호: 16).

LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC (서열식별번호: 20)

LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY (서열식별번호: 21)

LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC (서열식별번호: 22)

LC-FR4 FGQGTKVEIKR (서열식별번호: 23).

추가 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하는 단리된 항-PD-L1 항체가 제공되며, 여기서

(a) 중쇄 서열은 중쇄 서열:

에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖거나,

(b) 경쇄 서열은 경쇄 서열:

에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는다.

HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS (서열식별번호: 13)

HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV (서열식별번호: 14)

HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (서열식별번호: 15)

HC-FR4 WGQGTLVTVSA (서열식별번호: 16).

LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC (서열식별번호: 20)

LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY (서열식별번호: 21)

LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC (서열식별번호: 22)

LC-FR4 FGQGTKVEIKR (서열식별번호: 23).

추가의 구체적 측면에서, 항체는 인간 또는 뮤린 불변 영역을 추가로 포함한다. 추가 측면에서, 인간 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG2, IgG3, IgG4로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 구체적 측면에서, 인간 불변 영역은 IgG1이다. 추가 측면에서, 뮤린 불변 영역은 IgG1, IgG2A, IgG2B, IgG3으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가 측면에서, 뮤린 불변 영역은 IgG2A이다. 추가의 구체적 측면에서, 항체는 감소된 또는 최소 이펙터 기능을 갖는다. 추가의 구체적 측면에서, 최소 이펙터 기능은 원핵 세포에서의 생산으로부터 발생한다. 추가의 구체적 측면에서 최소 이펙터 기능은 "무이펙터 Fc 돌연변이" 또는 비-글리코실화로부터 발생한다. 추가 실시양태에서, 무이펙터 Fc 돌연변이는 불변 영역에서의 N297A 또는 D265A/N297A 치환이다.

또 다른 추가 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하는 단리된 항-PD-L1 항체가 제공되며, 여기서

(a) 중쇄 서열은 중쇄 서열:

에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖거나,

(b) 경쇄 서열은 경쇄 서열:

에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는다.

(a) 중쇄 서열은 중쇄 서열:

에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖거나,

(b) 경쇄 서열은 경쇄 서열:

에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는다.

HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS (서열식별번호: 13)

HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV (서열식별번호: 14)

HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (서열식별번호: 15)

HC-FR4 WGQGTLVTVSS (서열식별번호: 30).

LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC (서열식별번호: 20)

LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY (서열식별번호: 21)

LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC (서열식별번호: 22)

LC-FR4 FGQGTKVEIKR (서열식별번호: 23).

또 다른 실시양태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙 또는 MPDL3280A (CAS 등록 번호: 1422185-06-5)이다. 추가 실시양태에서,

로부터의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및

의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 단리된 항-PD-L1 항체가 제공된다. 추가 실시양태에서, 중쇄 및/또는 경쇄 서열을 포함하는 단리된 항-PD-L1 항체가 제공되며, 여기서

(a) 중쇄 서열은 중쇄 서열:

에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖고/거나,

(b) 경쇄 서열은 경쇄 서열:

추가 실시양태에서, 항-PD-L1 항체의 경쇄 또는 중쇄 가변 영역 서열을 코딩하는 단리된 핵산이 제공되며, 여기서

(a) 중쇄는 각각 GFTFSDSWIH (서열식별번호: 24), AWISPYGGSTYYADSVKG (서열식별번호: 25) 및 RHWPGGFDY (서열식별번호: 12)에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3 서열을 추가로 포함하고,

구체적 측면에서, 서열 동일성은 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%이다. 한 측면에서, 중쇄 가변 영역은 (HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)로서 HVR 사이에 병치된 1개 이상의 프레임워크 서열을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 (LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)로서 HVR 사이에 병치된 1개 이상의 프레임워크 서열을 포함한다. 또 다른 측면에서, 프레임워크 서열은 인간 컨센서스 프레임워크 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열은 카바트 하위군 I, II, 또는 III 서열로부터 유래된다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열은 VH 하위군 III 컨센서스 프레임워크이다. 추가 측면에서, 중쇄 프레임워크 서열 중 1개 이상은 하기이다:

HC-FR1 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS (서열식별번호: 13)

HC-FR2 WVRQAPGKGLEWV (서열식별번호: 14)

HC-FR3 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (서열식별번호: 15)

HC-FR4 WGQGTLVTVSA (서열식별번호: 16).

LC-FR1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC (서열식별번호: 20)

LC-FR2 WYQQKPGKAPKLLIY (서열식별번호: 21)

LC-FR3 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC (서열식별번호: 22)

LC-FR4 FGQGTKVEIKR (서열식별번호: 23).

추가의 구체적 측면에서, 본원에 기재된 항체 (예컨대, 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 또는 항-PD-L2 항체)는 인간 또는 뮤린 불변 영역을 추가로 포함한다. 추가 측면에서, 인간 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG2, IgG3, IgG4로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 구체적 측면에서, 인간 불변 영역은 IgG1이다. 추가 측면에서, 뮤린 불변 영역은 IgG1, IgG2A, IgG2B, IgG3으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가 측면에서, 뮤린 불변 영역은 IgG2A이다. 추가의 구체적 측면에서, 항체는 감소된 또는 최소 이펙터 기능을 갖는다. 추가의 구체적 측면에서, 최소 이펙터 기능은 원핵 세포에서의 생산으로부터 발생한다. 추가의 구체적 측면에서 최소 이펙터 기능은 "무이펙터 Fc 돌연변이" 또는 비-글리코실화로부터 발생한다. 추가 측면에서, 무이펙터 Fc 돌연변이는 불변 영역에서의 N297A 또는 D265A/N297A 치환이다.

추가 측면에서, 본원에 기재된 임의의 항체를 코딩하는 핵산이 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 핵산은 임의의 이전에 기재된 항-PD-L1, 항-PD-1 또는 항-PD-L2 항체를 코딩하는 핵산의 발현에 적합한 벡터를 추가로 포함한다. 추가의 구체적 측면에서, 벡터는 핵산의 발현에 적합한 숙주 세포를 추가로 포함한다. 추가의 구체적 측면에서, 숙주 세포는 진핵 세포 또는 원핵 세포이다. 추가의 구체적 측면에서, 진핵 세포는 포유동물 세포, 예컨대 차이니즈 햄스터 난소 (CHO)이다.

항체 또는 그의 항원 결합 단편은 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여, 예를 들어 발현에 적합한 형태의 임의의 이전에 기재된 항-PD-L1, 항-PD-1 또는 항-PD-L2 항체 또는 항원-결합 단편을 코딩하는 핵산을 함유하는 숙주 세포를 이러한 항체 또는 단편을 생산하는데 적합한 조건 하에 배양하고, 상기 항체 또는 단편을 회수하는 것을 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다.

일부 실시양태에서, 단리된 항-PD-L1 항체는 비-글리코실화 항체이다. 항체의 글리코실화는 전형적으로 N-연결 또는 O-연결된다. N-연결은 아스파라긴 잔기의 측쇄에의 탄수화물 모이어티의 부착을 지칭한다. 트리펩티드 서열 아스파라긴-X-세린 및 아스파라긴-X-트레오닌 (여기서 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산임)은 아스파라긴 측쇄에의 탄수화물 모이어티의 효소적 부착을 위한 인식 서열이다. 따라서, 폴리펩티드에서 이들 트리펩티드 서열 중 어느 하나의 존재는 잠재적인 글리코실화 부위를 생성한다. O-연결 글리코실화는 히드록시아미노산, 가장 통상적으로는 세린 또는 트레오닌에의 당 N-아세틸갈락토사민, 갈락토스 또는 크실로스 중 1개의 부착을 지칭하지만, 5-히드록시프롤린 또는 5-히드록시리신이 또한 사용될 수 있다. 항체로부터 글리코실화 부위를 제거하는 것은 상기 기재된 트리펩티드 서열 중 1개 (N-연결 글리코실화 부위의 경우)가 제거되도록 아미노산 서열을 변경시킴으로써 편리하게 달성된다. 변경은 글리코실화 부위 내 아스파라긴, 세린 또는 트레오닌 잔기를 또 다른 아미노산 잔기 (예를 들어, 글리신, 알라닌 또는 보존적 치환)로 치환하는 것에 의해 이루어질 수 있다.

이와 관련하여 단일 작용제로서 투여된 아테졸리주맙의 약동학은 연구 PCD4989g로부터의 임상 데이터에 기초하여 특징화되었고 이는 TNBC의 1차 치료에서 현재 진행 중인 제III상 연구 WO29522와 일치한다는 것에 주목한다. 아테졸리주맙 항종양 활성은 1 내지 20 mg/kg 용량에 걸쳐 관찰되었다. 전체적으로, 아테졸리주맙은 선형이면서 3주마다 (q3w) ≥ 1 mg/kg의 용량의 경우의 전형적 IgG1 항체와 일치하는 약동학을 나타낸다. 약동학적 데이터 (Bai S, Jorga K, Xin Y, et al., A guide to rational dosing of monoclonal antibodies, Clin Pharmacokinet 2012;51:119-35, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)는 고정 용량 또는 체중에 대해 조정된 용량에 따른 노출에서 어떠한 임상적으로 의미있는 차이도 시사하지 않는다. q3w 및 q2w의 아테졸리주맙 투여 스케줄을 시험하였다. 2주마다 (q2w)의 아테졸리주맙 800 mg의 고정 용량 (q2w 체중 기반 용량 10 mg/kg과 등가임)은 3주마다 (q3w) 투여된 1200 mg의 제III상 용량과 등가의 노출을 발생시킨다. q3w 스케줄은 다수의 종양 유형에 걸친 아테졸리주맙 단독요법의 다수의 제III상 연구에서 사용되고 있고, q2w는 화학치료 요법과 조합되어 우세하게 사용된다. 연구 PCD4989g에서, 카플란-마이어는 전체 24주 무진행 생존 (PFS) 비율이 33% (95% CI: 12%, 53%)인 것으로 추정하였다.

본 개시내용의 PD-1 축 억제제 용량은 적합하게는 약 400 mg 내지 약 1200 mg, 약 600 mg 내지 약 1000 mg, 약 700 mg 내지 약 900 mg, 또는 약 840 mg이다. 일부 측면에서, PD-1 축 억제제는 PD-L1 억제제이고, 보다 특히 아테졸리주맙이며, 이는 약 840 mg의 용량으로 투여된다.

특정한 실시양태에서, PD-1 축 억제제, 또는 보다 특히 PD-L1 억제제는 28일 치료 주기의 14일마다 정맥내로 투여된다. 일부 측면에서, 대상체는 28일 치료 주기의 제1일 및 제15일에 PD-1 축 억제제, 및 보다 특히 PD-L1 억제제로 치료받는다.

VEGF 억제제

본 개시내용의 범주 내의 VEGF 억제제는 파조파닙 (보트리엔트(Votrient)®), 베바시주맙 (아바스틴(Avastin)®), 소라페닙 (넥사바르(Nexavar)®), 수니티닙 (수텐트(Sutent)®), 악시티닙 (인리타(Inlyta)®), 포나티닙 (이클루식(Iclusig)®), 레고라페닙 (스티바르가(Stivarga)®), 카보잔티닙 (카보메틱스(Cabometyx)®), 반데타닙 (카프렐사(Caprelsa)®), 라무시루맙 (시람자(Cyramza)®), 렌바티닙 (렌비마(Lenvima)®) 및 지브-아플리베르셉트 (잘트랩(Zaltrap)®)를 포함한다.

일부 측면에서, VEGF 억제제 약물은 베바시주맙이다. 베바시주맙은 전이성 결장직장암 (CRC) 및 비소세포 폐암 (NSCLC)을 치료하기 위한 화학치료 요법과 조합된 용도로 FDA에 의해 승인받았다. 베바시주맙은 그의 내용이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 6,054,297 및 6,884,879에 기재되어 있고, 이는 VEGF에 결합하고 VEGF와 그의 수용체의 상호작용을 막음으로써 VEGF의 생물학적 활성을 중화시키는 재조합 인간화 IgG1 mAb이다.

본 개시내용의 이러한 또는 또 다른 측면에서, VEGF 억제제는 서열식별번호: 33으로부터의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 서열식별번호: 34로부터의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체이다. 본 개시내용의 추가 측면에서 중쇄 및/또는 경쇄 서열을 포함하는 단리된 VEGF 억제제 항체가 제공되며, 여기서:

(a) 중쇄 서열은 중쇄 서열:

에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖거나;

(b) 경쇄 서열은 경쇄 서열:

에 대해 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는다.

본 개시내용의 이러한 또는 또 다른 측면에서, VEGF 억제제는 중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역 서열을 포함하는 항체이고, 여기서:

(a) 중쇄는 각각 GYTFTNYGMN (서열식별번호: 35), WINTYTGEPTYAADFKR (서열식별번호: 36), 및 YPHYYGSSHWYFDV (서열식별번호: 37)에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3 서열을 추가로 포함하거나;

(b) 경쇄는 각각 SASQDISNYLN (서열식별번호: 38), FTSSLHS (서열식별번호: 39), 및 QQYSTVPWT (서열식별번호: 40)에 대해 적어도 85% 서열 동일성을 갖는 HVR-L1, 및 HVR-L2 및 HVR-L3 서열을 추가로 포함한다.

본 개시내용에 따르면, VEGF 억제제 용량은 약 0.1 내지 약 15 mg/kg/주, 약 0.5 내지 약 15 mg/kg/주, 약 1 내지 약 15 mg/kg/주, 약 5 내지 약 15 mg/kg/주, 약 5 내지 약 10 mg/kg/주, 예컨대 약 5 mg/kg/주, 약 10 mg/kg/주 또는 약 15 mg/kg/주이다. 일부 측면에서, VEGF 억제제는 베바시주맙이다. 일부 측면에서, 베바시주맙은 매주 투여되고, 및 보다 특히 약 5 mg/kg/주의 용량으로 투여된다.

결장직장암

한 측면에서, 결장직장암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 MEK 억제제, PD-1 축 억제제, 및 VEGF 억제제의 조합을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 결장직장암을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. mCRC는 특히 본원에 기재된 조합 요법에 적용될 수 있다.

본 개시내용의 일부 측면에서, 치료는 대상체에서 CRC의 진행의 지연을 발생시킨다. 일부 다른 측면에서, 치료는 대상체에서 완전 반응을 발생시킨다. 일부 다른 측면에서, 반응은 치료의 중지 후에 지속된다. 다른 측면에서, 치료는 (i) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 MEK 억제제를 포함하고 VEGF 억제제의 투여는 부재하는 요법, (ii) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하고 MEK 억제제의 투여는 부재하는 요법, 및/또는 (iii) 치료 유효량의 MEK 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하고 PD-1 축 억제제의 투여는 부재하는 요법을 제공받은 CRC 대상체와 비교하여 중앙 무진행 생존 시간을 연장한다.

조합 요법

MEK 억제제, PD-1 축 억제제, 및 VEGF 억제제의 삼중 조합은 (i) 암의 특징 (즉, 증식성 신호전달, 면역 회피 및 혈관신생)을 표적화하고/거나, (ii) 이들 작용제가 나타내는 복합 상호작용 및 활성에 기초하여 상승작용적 항종양 활성으로 이어질 것이고/거나, (iii) CRC를 갖는 환자에서 실질적 임상 이익의 잠재력을 제공할 것으로 여겨진다.

추가로, 본 개시내용의 삼중 조합 치료는 (i) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 MEK 억제제를 포함하고 VEGF 억제제의 투여는 부재하는 요법, (ii) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하고 MEK 억제제의 투여는 부재하는 요법, 및/또는 (iii) 치료 유효량의 MEK 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하고 PD-1 축 억제제의 투여는 부재하는 요법을 제공받은 CRC 대상체와 비교하여 CRC를 갖는 대상체에 대해 중앙 무진행 생존 시간을 연장할 수 있을 것으로 여겨진다.

약물 조합물

본 개시내용의 일부 측면에서, (i) 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 80 mg, 또는 약 80 mg의 용량의 MEK 억제제; (ii) 약 400 mg 내지 약 1200 mg, 약 600 mg 내지 약 1000 mg, 약 700 mg 내지 약 900 mg, 또는 약 840 mg의 용량의 PD-1 축 억제제; 및 (iii) 약 5 mg/kg 내지 약 15 mg/kg, 약 5 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg 또는 약 15 mg/kg의 용량의 VEGF 억제제를 포함하는 암 요법 약물 조합물이 제공된다. 하나의 특정한 측면에서, MEK 억제제는 코비메티닙이고, PD-L1 억제제는 아테졸리주맙이고, VEGF 억제제는 베바시주맙이다. 일부 측면에서, 조합물은 2주마다 투여될 수 있다. 예를 들어, 조합물은 28일 치료 주기의 제1일 및 제15일에 투여될 수 있다.

이와 관련하여, 본 개시내용의 의도되는 범주에서 벗어나지 않으면서, 조합물의 언급된 성분에 대한 언급된 투여량 범위의 임의의 조합이 사용될 수 있다는 것에 주목한다. 대상체에게 동일한 날에 약물 조합물 (즉, MEK 억제제, PD-1 축 억제제 및 VEGF 억제제)을 투여하는 경우에, 약물은 임의의 순서로 투여될 수 있다. 예를 들어, (i) 약물은 임의의 순서로 개별적으로 투여될 수 있거나 또는 (ii) 제1 약물 및 제2 약물이 동시에 또는 시간상 근접하여 투여될 수 있고, 제3 약물이 제1 및 제2 약물의 투여 전 또는 후에 투여될 수 있다. 약물 조합물의 각각의 약물의 투여는 일부 시간 기간, 예컨대 0.5시간, 1시간, 2시간, 3시간 또는 4시간만큼 분리될 수 있다. 일부 특정한 측면에서, 코비메티닙은 경구로 투여될 수 있고, 아테졸리주맙은 정맥내로 투여될 수 있고, 베바시주맙은 아테졸리주맙 투여의 적어도 0.5시간 후에 비경구로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 이러한 측면에서, 코비메티닙은 아테졸리주맙 전 또는 후에 투여될 수 있다. 일부 측면에서, MEK 억제제 및 PD-1 축 억제제는 각각 28일 치료 주기의 제1일 및 제15일에 투여되고, 코비메티닙은 28일 치료 주기의 제1일 내지 제21일에 투여된다.

키트

본 개시내용의 일부 측면에서, 인간 대상체에서 CRC를 치료하기 위한 키트가 제공된다. 키트는 MEK 억제제, PD-1 축 억제제, VEGF 억제제, 및 치료 유효량의 MEK 억제제, 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 대상체를 치료하는데 사용하는 것에 대한 지침서를 포함하는 패키지 삽입물을 포함한다. 일부 측면에서, MEK 억제제는 코비메티닙이고, PD-1 축 억제제는 아테졸리주맙이고, VEGF 억제제는 베바시주맙이다.

본 개시내용의 키트는 (i) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 MEK 억제제를 포함하고 VEGF 억제제의 투여는 부재하는 요법, (ii) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하고 MEK 억제제의 투여는 부재하는 요법, 및/또는 (iii) 치료 유효량의 MEK 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하고 PD-1 축 억제제의 투여는 부재하는 요법을 제공받은 CRC 대상체와 비교하여 중앙 무진행 생존 시간을 연장한다.

실시예

실시예는 진행성 질환에 대해 플루오로피리미딘 및 옥살리플라틴 또는 이리노테칸을 함유하는 적어도 1종의 선행 차수 요법을 받았고 진행된 mCRC를 갖는 환자에서 코비메티닙, 아테졸리주맙 및 베바시주맙의 조합의 안전성, 내약성 및 약동학을 평가하기 위해 설계된 2 단계, 개방-표지, 다기관, 단일-부문, Ib상 연구에 관한 것이다.

단계 1은 안전성 준비 단계일 것이다. 단계 2는 확장 코호트 및 생검 코호트가 존재하는 용량 확장 단계일 것이다. 환자는 먼저 안전성 준비기에 들어갈 것이다. 치료 요법의 안전성 및 내약성이 결정되면, 연구는 확장 단계로 진행될 것이다. 안전성 준비 단계로부터의 결과가 코비메티닙의 용량 감소를 요구한다면, 추가의 단계 1 코호트가 개방될 것이다. 확장 단계 내에서 환자는 환자가 연속 종양 생검을 받기에 적합한지 및 그러할 의향이 있는지에 따라 치료 또는 생검 코호트 내로 등록될 수 있다. 등록된 모든 환자가 사망, 동의 철회, 추적 소실, 또는 의뢰자의 시험 종료 결정 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때까지 추적되었을 때 연구는 종료될 것이다.

연구의 1차 목적은 코비메티닙 플러스 베바시주맙 플러스 아테졸리주맙의 안전성 및 내약성을 가늠하는 평가 및 추가의 임상 개발을 위한 제안된 투여 요법의 확인을 포함한다. 평가 기준 및 종점은 하기를 포함한다: (i) 국립 암 연구소 유해 사건에 대한 통상 용어 기준 (NCI CTCAE) v4에 따라 등급화된 유해 사건의 발생률, 성질 및 중증도; (ii) 실험실 데이터; 및 (iii) 특별 관심 유해 사건 및 치료 중단으로 이어지는 유해 사건을 포함한 등급 ≥ 3 유해 사건.

탐색적 효능 목적은 코비메티닙 플러스 베바시주맙 플러스 아테졸리주맙의 효능의 평가를 포함한다. 평가 기준 및 종점은 하기를 포함한다: (i) 조사자에 의해 평가되고 확인된, 고형 종양의 반응 평가 기준 (RECIST) v1.1에 의해 정의된 전체 반응률; (ii) RECIST v1.1을 사용하여 조사자에 의해 결정된 바와 같은, 제1주기 제1일부터 질환 진행의 최초 발생 또는 연구 동안 임의의 원인으로 인한 사망 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때까지의 시간으로 정의되는 무진행 생존; 및 (iii) RECIST v1.1을 사용하여 조사자에 의해 결정된 바와 같은, 기록된 객관적 반응의 최초 발생으로부터 질환 진행의 시점 또는 연구 동안 임의의 원인으로 인한 사망 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때까지의 시간으로 정의되는 반응 지속기간.

연구 치료는 21/7 스케줄로 60 mg의 용량의 코비메티닙, 840 mg 2주마다 (q2w) 스케줄로의 아테졸리주맙 및 5 mg/kg q2w 스케줄로의 베바시주맙을 포함할 것이다. 안전성 준비 및 확장 코호트 내의 환자는 제1일부터 코비메티닙, 아테졸리주맙 및 베바시주맙을 받을 것이다. 확장 단계에서 생검 코호트 내의 환자는 베바시주맙을 제1일에 시작하고, 이어서 종양 생검을 제14일 (±2일 범위)에 수행하고, 코비메티닙을 제15일에 시작하고, 이어서 종양 생검을 제28일 (±2일 범위)에 수행하고, 아테졸리주맙을 제29일 (즉, 제2주기 제1일)에 시작하고, 이어서 임의적인 종양 생검을 제56일 (±2일 범위)에 수행할 것이다. 각각 코비메티닙 및 아테졸리주맙의 개시 전에 생검이 수행될 것이다. 이 시점으로부터 앞으로, 생검 코호트 내의 환자는 안전성 준비 및 치료 확장 코호트에서의 것과 동일한 치료 요법을 따를 것이다.

치료전 생검은 모든 환자에게 요구될 것이고, 포르말린-고정된, 파라핀 포매된 조직일 것이다. 보관 생검은 이들이 스크리닝 전 3개월 이내에 수집되는 한 치료전 생검에 사용될 수 있다. 신선 샘플이 생검 코호트 내의 환자에 대해 바람직하다. 남아있는 생검은 상기 기재된 바와 같이 단지 생검 코호트 내의 환자에 대해서만 스케줄링될 것이다.

모든 환자는 요법의 모든 주기 동안, 연구 종료 치료 방문에서 및 추적 기간 동안 안전성 및 내약성에 대해 면밀히 모니터링될 것이다. NCI CTCAE v4.0은 모든 환자에 대한 연구 치료의 독성 프로파일을 특징화하기 위해 사용될 것이다.

두 단계에서의 환자는 RECISTv1.1에 따른 질환 진행, 허용되지 않는 독성, 사망, 환자 또는 의사의 철회 결정, 또는 임신 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때까지 연구 요법을 계속해서 받을 것이다. 임의의 평가가능한 및 측정가능한 질환은 스크리닝시 기록될 것이고, 각각의 후속 종양 평가시 재평가될 것이다. 조사자는 임의의 용량 지연에 관계없이, 8주 간격으로 종양 반응을 평가할 것이다.

치료는 환자가 RECIST v1.1에 따른 질환 진행, 허용되지 않는 독성, 사망, 환자 또는 의사의 철회 결정, 또는 임신 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때까지 계속될 것이다. 상승하는 암배아성 항원 수준 단독은 질환 진행으로 간주되지 않을 것이다. 환자는 특정 조건이 충족되는 경우에 질환 진행 이후에 연구 치료를 받도록 허용될 것이다.

연구 참가에 대한 환자 포함 기준은 하기를 포함한다. 적어도 18세. 0 또는 1의 동부 협동 종양학 그룹 수행 상태. 조직학적으로 확인된 절제불가능한 전이성 결장직장 선암종. 절제불가능한 전이성 결장직장 선암종에 대한 플루오로피리미딘 및 옥살리플라틴 또는 이리노테칸을 함유하는 선행 차수 요법을 진행함. 아주반트 또는 신보조 화학요법이 연구 치료의 시작으로부터 적어도 12개월 전에 완료되는 경우에 허용됨. RECIST v1.1에 따른 측정가능한 질환. 생검이 수행되도록 의도된 병변은 표적 병변이 아니어야 한다는 것에 주목함. 연구 약물 치료의 제1 투여 전 14일 이내에 수득된 하기 실험실 결과에 의해 정의되는, 적절한 혈액 및 종말 기관 기능: (i) WBC ≥ 2.5 및 ≤ 15.0x10⁹개/L; (ii) ANC ≥ 1.5x10⁹개/L; (iii) 혈소판 수 ≥ 100x10⁹개/L; (iv) 헤모글로빈 ≥ 9 g/dL; (v) 알부민 ≥ 9 g/dL; 혈청 빌리루빈 ≤ 1.5 x 정상 상한치 (ULN) (알려진 길버트병을 갖는 환자는 빌리루빈 ≤ 3.0 x ULN을 가질 수 있음); (vi) INR 및 PTT ≤ 1.5 x ULN; (vii) 아밀라제 및 리파제 ≤ 1.5 x ULN; (viii) AST, ALT 및 알칼리성 포스파타제 (ALP) ≤ 3 x ULN, 단 하기를 예외로 함: 기록된 간 전이를 갖는 환자 (AST 및/또는 ALT ≤ 5 x ULN) 및 기록된 간 또는 골 전이를 갖는 환자 (ALP ≤ 5 x ULN); (ix) 크레아틴 클리어런스 ≥ 30 mL/분.

연구 참가에 대한 환자 배제 기준은 하기를 포함한다. 등록 전 60일 이내에 외과적 절차 (개방 생검, 외과적 절제, 상처 교정 또는 임의의 다른 대수술 포함) 또는 유의한 외상성 손상, 또는 연구의 과정 동안 주요 외과적 절차에 대한 필요의 예상. 연구 제1주기 제1일의 15일 이내에 부차 외과적 절차 (혈관 접근 장치의 배치 포함). 비치료된 CNS 전이. 외과적 또는 방사선 기술에 의한 뇌 전이의 치료가 연구 치료의 개시로부터 적어도 4주 전에 완료되었을 것임. 이 연구에의 등록 (제1주기 제1일) 전 28일 또는 2회의 임상시험용 작용제 반감기 (이 중 어느 것이든 더 긴 기간) 이내에 임의의 임상시험용 작용제 또는 승인된 요법에 의한 치료. 제1주기 제1일 전 5년 이내에 결장직장암 이외의 악성종양, 단 예상되는 치유 결과 (예컨대 적절하게 치료된 자궁경부의 상피내 암종, 기저 또는 편평 세포 피부암, 치유 의도 하에 외과적으로 치료된 국재화된 전립선암, 치유 의도 하에 외과적으로 치료된 관 상피내 암종)로 치료된 무시할만한 위험의 전이 또는 사멸 (예를 들어, 예상되는 5년 전체 생존 > 90%)을 갖는 것은 예외로 함. 연구 제1주기 제1일 전 30일 이내에 선행 방사선 요법 및/또는 방사선-관련 유해 효과의 지속성. 선행 동종 골수 이식 또는 과거에 또 다른 악성종양에 대한 실질 기관 이식. 수술 및/또는 방사선에 의해 명확하게 치료되지 않은 척수 압박. 비제어된 흉막 삼출, 심막 삼출, 또는 반복적 배액 절차가 요구되는 복수.

연구 의약과 관련된 연구 참가에 대한 환자 배제 기준은 하기를 포함한다. 현재 또는 최근 (연구 등록 10일 이내에) 아세틸살리실산 (> 325 mg/일), 클로피도그렐 (> 75 mg/일)의 사용, 또는 현재 또는 최근 (베바시주맙의 제1 투여 10일 이내에) 치료 목적을 위한 치료적 경구 또는 비경구 항응고제 또는 혈전용해제의 사용. 키메라 또는 인간화 항체 또는 융합 단백질에 대한 중증 알레르기성, 아나필락시스성 또는 다른 과민 반응의 병력. 차이니즈 햄스터 난소 세포에서 생산된 생물약제 또는 코비메티닙, 아테졸리주맙 또는 베바시주맙 제제의 임의의 성분에 대한 알려진 과민성 또는 알레르기. CD137 효능제 또는 면역 체크포인트 차단 요법, 항-프로그램화된 사멸-1, 항-프로그램 사멸-리간드 1, MEK 억제제에 의한 선행 치료.

기관 기능 및 의료 병력과 관련된 연구 참가에 대한 환자 배제 기준은 하기를 포함한다. 임상적으로 유의한 심장 또는 폐 기능장애의 병력. 심각한 비-치유 상처, 활성 궤양 또는 비치료된 골절. 제1주기 제1일 전 6개월 이내에 복부 누공 또는 위장 천공의 병력. 객혈 (에피소드당 ≥ ½ 티스푼의 밝은 적색 혈액) 또는 임의의 다른 심각한 출혈 또는 출혈의 위험 (위장 출혈 병력, 위장 궤양 등)의 병력. 제1주기 제1일 전 7일 이내에 INR > 1.5 및 aPTT > 1.5 x ULN. 유전성 출혈 소질 또는 출혈의 위험이 있는 유의한 응고병증의 병력 또는 증거. 기대 수명 < 12주. 임의의 이전 정맥 혈전색전증 ≥ 등급 3. 스크리닝시 소변 계량봉 ≥ 2 +에 의해 입증된 바와 같은 단백뇨 또는 24시간 단백뇨 > 1.0 g. 임상 정상 하한치 미만의 좌심실 박출 수. 비제어된 심각한 의학적 또는 정신 질병. 비제어된 종양 통증; 스크리닝 동안 마약성 진통 의약이 요구되는 환자는 제1주기 제1일 전에 안정한 용량 요법을 받아야 함. 임신 또는 수유중, 또는 연구 동안 임신될 예정. 폐경후 (폐경기 이외의 원인이 확인되지 않은 ≥ 12개월 연속 무월경) 또는 외과적 불임이 아닌 여성은 제1주기 제1일 전 14일 이내에 음성 혈청 임신 검사를 가져야 함. 특발성 폐 섬유증, 기질화 폐렴 (예를 들어, 폐쇄성 세기관지염), 약물-유도된 폐장염, 특발성 폐장염의 병력, 또는 스크리닝 흉부 CT 스캔 상의 활성 폐장염의 증거. 감각신경 망막 박리/중심 장액성 맥락망막병증, 망막 정맥 폐쇄 또는 신생혈관성 황반 변성에 대한 위험 인자로 간주되는 안과 검사 상의 망막 병리상태의 병력 또는 증거. 감염성 질환에 기초한 배제 기준은 하기를 포함한다: 스크리닝시 IV 항생제가 요구되는 활성 감염; 활성 B형 간염 (만성 또는 급성)을 갖는 환자; 과거 B형 간염 바이러스 (HBV) 감염 또는 해소된 HBV 감염을 갖는 환자; 활성 C형 간염을 갖는 환자; 및 알려진 HIV 감염. 자가면역 상태에 기초한 배제 기준은 하기를 포함한다: 중증 근무력증, 근염, 자가면역 간염, 전신 홍반성 루푸스, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 항인지질 증후군과 연관된 혈관 혈전증, 베게너 육아종증, 쇼그렌 증후군, 길랑-바레 증후군, 다발성 경화증, 혈관염 또는 사구체신염을 포함하나 이에 제한되지는 않는 자가면역 질환의 병력.

생검 코호트 내 포함에 대한 환자 포함 기준은 하기를 포함한다: 연구 참가에 대한 포함 기준 모두를 충족함; 및 베바시주맙 나이브 또는 제1주기 제1일부터 적어도 12개월 전에 마지막 베바시주맙 치료를 받았음.

코비메티닙은 28일 주기의 제1일-제21일 동안 매일 1회 경구로 60 mg 코비메티닙 (각각 20 mg의 3개의 정제)의 용량으로 투여될 것이다.

아테졸리주맙은 각각의 28일 주기의 제1일 및 제15일에 IV 주입에 의해 840 mg의 용량으로 투여될 것이다. 아테졸리주맙이 먼저 투여되고, 이어서 투여 사이에 최소 30분으로 베바시주맙이 투여될 것이다.

베바시주맙은 각각의 28일 주기의 제1일 및 제15일에 IV 주입에 의해 5 mg/kg의 용량으로 투여될 것이다.

보관 및/또는 신선 종양 시편의 수집, 및 바이오마커 평가

확장된 RAS 상태는 mCRC의 치료 및 예후에 있어서 연관성을 갖는다 (문헌 [Karapetis CS, Khambata-Ford S, Jonker DJ, et al., K-ras Mutations and Benefit from Cetuximab in Advanced Colorectal Cancer, N Engl J Med 2008;359:1757-65; De Roock W, Claes B, Bernasoni D, et al., Effects of KRAS, BRAF, NRAS, and PIK3CA mutations on the efficacy of cetuximab plus chemotherapy in chemotherapy refractory metastatic colorectal cancer: a restrospective consortium analysis, The Lancet 2010;11:753-62; Sorich MJ, Wise MD, Rowland A, et al., Extended RAS mutations and anti-EGFR monocloncal antibody survival benefit in metastatic colorectal cancer: a meta analysis of randomized controlled trials, Ann Oncol 2015;26:13-21; 및 Allegra CJ, Rumble RB, Hamilton SR, et al., Extended RAS Gene Mutation Testing in Metastatic Colorectal Carcinoma to Predict Response to Anti-Epidermal Growth Factor Receptor Monoclonal Antibody Therapy: American Society of Clinical Oncology Provisional Clinical Opinion Update 2015, J Clin Oncol 2016;34:179-85]. 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.). 여러 연구는 RAS 돌연변이가 RAS 야생형 코호트와 비교하여 PFS 및 전체 생존에 대해 악화된 예후를 나타낸다는 것을 입증한다 (Sorbye H, Dragomir A, Sundstroem M, et al., High BRAF Mutation Frequency and Marked Survival Differences in Subgroups According to KRAS/BRAF Mutation Status and Tumor Tissue Availability in a Prospective Population-Based Metastatic Colorectal Cancer Cohort, PLoS One 2015;10:e0131046; Sorich et al. 2015; 및 Vincenzi B, Cremolini C, Sartore-Bianchi A, et al., Prognostic significance of K-Ras mutation rate in metastatic colorectal cancer patients, Oncotarget 2015;6:31604-12). Ib상 연구 GP28363 (국부 진행성 또는 전이성 종양을 갖는 환자에서 아테졸리주맙과 함께 투여되는 코비메티닙)은 KRAS 돌연변이 mCRC에서 뿐만 아니라 다양한 고형 종양을 포함한 생검 코호트에서 안전성 및 효능을 평가하였다. 본 개시내용과 관련하여, 모든 mCRC 환자에서의 이 요법의 효능 및 안전성은 작용 메카니즘이 차등 효과를 예측해주지 않을 것이기 때문에 확장된 RAS 상태와 관계없이 평가된다. 그러나, RAS 상태에 기초한 차등 예후를 고려하여, 확장된 RAS 상태에 대한 보관/기준선 종양 조직의 시험이 수행될 것이다.

CRC에서의 MSI 상태는 또한 mCRC의 치료 및 예후 둘 다에 있어서 연관성을 갖는다 (문헌 [Goldstein J, Tran B, Ensor J, et al., Multicenter retrospective analysis of metastatic colorectal cancer (CRC) with high-level microsatellite instability (MSI-H), Annals of Oncology 2014;25:1032-8], 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 그것은 체크포인트 억제제, 예컨대 PD L1 및 PD 1 길항제와 상이한 ORR 및 반응 지속기간 (DOR) 비율을 갖는다 (Li J, Qin S, Xu R, et al., Regorafenib plus best supportive care versus placebo plus best supportive care in Asian patients with previously treated metastatic colorectal cancer (CONCUR): a randomised, double-blind, placebo-controlled, phase 3 trial, Lancet Oncol 2015;16:619-29; 및 Oh DY, Venook AP, Fong L., On the Verge: Immunotherapy for Colorectal Carcinoma, J Natl Comp Canc Netw 2015;13:970-8). PD L1 항체인 아테졸리주맙이 MSI 높은 CRC 환자에서 다른 체크포인트 억제제와 유사하게 효과적일 수 있지만, MSI 상태에 따라 차등 효과가 존재할 수 있는 것으로 여겨진다. 따라서, MSI 상태는 이들 상이한 집단에서 이 요법의 효능을 구별하기 위해 보관/기준선 조직으로부터 평가될 것이다.

종양 조직 샘플은 차세대 서열분석 (NGS)으로 체세포 돌연변이를 확인할 수 있도록 하여 연구원의 질환 병리생물학의 이해를 돕기 위한 DNA 및/또는 RNA 추출을 위해 기준선에서 수집될 것이다. 유전자-기반 CRC 분류는 CRC의 다양한 하위유형을 구별하는 방식으로 점점 더 제안되어 왔고, 치료 및 예후 둘 다에 대한 심오한 효과를 가질 수 있다. 이들 하위유형은 상이한 면역조정 영향을 갖는 것으로 제시되었고, 이 요법의 효능에 영향을 미칠 수 있다 (Guinney J, Dienstmann R, Wang X, et al., The consensus molecular subtypes of colorectal cancer, Nat Med 2015;21:1350-6; Kocarnik JM, Shiovitz S, Phipps AI, Molecular phenotypes of colorectal cancer and potential clinical applications, Gastroenterol Rep (Oxf) 2015;3:269-76; 및 Lal N, Beggs AD, Willcox BE, Middleton GW, An immunogenomic stratification of colorectal cancer: Implications for development of targeted immunotherapy, Oncoimmunology 2015;4:e976052). 이들 바이오마커는 또한 예후 값을 가질 수 있으므로, 질환 진행과의 그의 잠재적 연관성이 또한 탐구될 것이다. 이러한 가능한 관계를 추가로 평가하기 위해 상이한 CRC 하위유형의 보관/기준선 종양 분석 및 분류가 수행될 것이다.

치료전, 베바시주맙과 코비메티닙과의 조합에 의한 치료, 및 아테졸리주맙과의 삼중 조합에 의한 치료에서의 종양 생검이 스케줄링된 독립적 코호트. 시차를 둔 치료에서의 생검 사이의 바이오마커의 비교는 이러한 조합의 가능한 작용 메카니즘을 추가로 설명해줄 것이다. 바이오마커 분석은 CD8-양성 T 세포 침윤물, PD L1 발현, 및 증진된 면역 반응, MAPK 억제의 바이오마커 및 아폽토시스 또는 염증에 수반되는 다른 바이오마커의 평가에 초점을 맞출 것이다.

단계 1: 안전성 준비 코호트

I상 연구 GP28363은 아테졸리주맙과 함께 투여되는 코비메티닙의 증가하는 용량을 탐구하였다. 아테졸리주맙과 함께 투여되는 코비메티닙은 안전하고 내약성이 있는 것으로 제시되었다. 이 연구에서 베바시주맙이 아테졸리주맙과 코비메티닙의 요법에 추가된다. 베바시주맙은 전에 아테졸리주맙과 함께 투여되었지만, 베바시주맙이 이전에 코비메티닙 및 아테졸리주맙과 함께 환자에게 투여되지는 않았기 때문에, 이 연구는 안전성 준비 코호트와 함께 시작할 것이다. 베바시주맙은 코비메티닙 및 아테졸리주맙과 일부 중첩된 독성을 갖는다.

안전성 준비 코호트 내의 환자는 제1일부터 코비메티닙, 아테졸리주맙 및 베바시주맙을 받을 것이다. 연구 계획이 안전성 준비에 대해 제공되고, 확장 코호트는 도 1에 도시된다.

안전성 준비 코호트에서, 28일 투여 주기가 평가될 것이며, 여기서 환자에게 하기가 투여될 것이다: (i) 제1 21일 동안 60 mg 코비메티닙, 이어서 코비메티닙 요법 없이 7일 휴약 기간; (ii) 28일 주기의 제1일 및 제15일에 840 mg 아테졸리주맙 주입; 및 (iii) 28일 주기의 제1일 및 제15일에 5 mg/kg 베바시주맙 주입.

안전성 준비 단계에서의 환자가 적어도 1회의 28일 치료 주기를 완료한 후에, 임상 데이터는 시험된 용량의 안전성 및 내약성을 결정하기 위해 검토될 것이다. 이 군의 등록을 완료하는데 수개월이 소요될 것으로 여겨지고; 따라서, 안전성 검토는 안전성 평가 시에 여러 주기 동안 요법을 받고 있는 환자에 대한 데이터를 함유하여야 한다. 60 mg 코비메티닙 용량이 안전성 준비 단계에서 내약성이 없는 것으로 결정되는 경우에, 연구 팀은 40 mg QD (21/7)의 감소된 코비메티닙 용량의 환자의 추가의 코호트를 등록시킬 수 있다. 이러한 감소된 코비메티닙 투여량 평가에서, 추가의 코호트가 1회의 치료 주기를 완료한 후에, 확장 단계가 코비메티닙의 이러한 더 낮은 용량으로 개시될 수 있는지를 결정하기 위해 임상 데이터의 검토가 수행될 것이다.

하기 상황 중 어느 것이 발생하고 그와 관련된 것으로 조사자에 의해 평가된 경우에, 연구 치료는 개별 환자에 대해 즉시 정지될 것이고, 철저한 조사 및 안전성 분석이 수행될 것이다: (i) 등급 ≥ 3 고혈압 (≥ 180 mmHg 수축기 또는 ≥ 110 mmHg 확장기); (ii) 등급 ≥ 3 출혈 (증상 및 ≤ 2 유닛의 농축 RBC의 수혈이 나타남); (iii) 등급 ≥ 3 폐장염 (증후성, ADL 방해; 산소가 나타남); (iv) 등급 ≥ 3 좌심실 기능장애 (개입에 반응하는 증후성 CHF); (v) 등급 ≥ 3 설사, 항설사제에 반응하지 않음 (기준선에 비해 1일에 ≥7회 대변의 증가; 실금; IV 유체 ≥24시간; 입원); 또는 (vi) ALT 또는 AST > 5 x ULN과 총 빌리루빈 > 2 x ULN의 조합. 하기 상황 중 어느 것이 발생한다면, 추가의 등록 및 연구 치료는 즉시 철저한 조사 및 안전성 분석이 수행될 때까지 정지될 것이다: (i) 임의의 대상체가 (조사자 및/또는 의뢰자에 의해) 연구 치료와 관련된 것으로 평가된 AE로 인해 사망을 경험하는 경우에 연구 팀에 의한 검토가 있을 때까지 연구가 일시적으로 보류될 것임; 또는 (ii) 환자의 30% 초과가 상기 정의된 개별 정지 규칙을 충족함.

단계 2: 확장 및 생검 코호트

확장 코호트 내의 환자는 제1일부터 코비메티닙, 아테졸리주맙 및 베바시주맙을 받을 것이다.

확장 단계에서 생검 코호트 내의 환자는 베바시주맙을 제1일에 시작하고, 이어서 종양 생검을 제14일 (±2일 범위)에 수행하고, 코비메티닙을 제15일에 시작하고, 이어서 종양 생검을 제28일 (±2일 범위)에 수행하고, 아테졸리주맙을 제29일 (즉, 제2주기 제1일)에 시작하고, 이어서 임의적인 종양 생검을 제56일 (±2일 범위)에 수행할 것이다. 각각 코비메티닙 및 아테졸리주맙의 개시 전에 생검이 수집될 것이다. 이 시점으로부터 앞으로, 생검 코호트 내의 환자는 안전성 준비 및 치료 확장 코호트에서의 것과 동일한 치료 요법을 따를 것이다.

생검 코호트에 대한 연구 계획은 도 2에 도시된다.

종양 반응은 RECIST v1.1에 따라 평가될 것이다. 임의의 평가가능한 및 측정가능한 질환은 스크리닝시 기록되고, 각각의 후속 종양 평가시 재평가될 것이다. 기준선 종양 평가는 제1주기 제1일부터 ≤ 28일 전에 수행되고, 하기 약술된 바와 같이 RECIST v 1.1에 따라 평가될 것이다. 기준선에서 질환 부위를 평가하는데 사용된 동일한 절차가 연구 전반에 걸쳐 사용될 것이다 (예를 들어, CT 스캔 또는 MRI 스캔에 대한 동일한 조영 프로토콜).

RECIST v1.1에 따른 종양 반응의 평가는 기록, 조사자-결정, 진행성 질환, 임상 이익의 상실, 동의 철회, 사망 또는 의뢰자에 의한 연구 종결 중 어느 것이든 먼저 발생하는 때까지 8주 ± 1주마다 (환자가 치료 주기 중 어디에 있든지) 기록될 것이다. 종양 평가의 스케줄은 연구 치료 투여 스케줄에 대한 임의의 변화 (예를 들어, 용량 지연)에 비의존성이고, 주기의 길이에 따라 중간-주기에 발생할 수 있다. 종양 평가가 조만간 수행되어야 하는 경우에, 후속 평가는 제1 연구 약물 투여의 날 (제1주기, 제1일)에 기초한 원래 스케줄에 따라 수행되어야 한다. 반응 (PR 또는 완전 반응 [CR])의 확인은 연구 참가로부터 28일 이내에 수행될 것이다. SD의 경우에, 측정은 최소 6주 이상의 간격으로 연구 참가 후 적어도 1회 SD 기준을 충족하였어야 한다. 질환 진행 이외의 임의의 이유로 연구 치료를 중단하는 환자는 진행성 질환까지 (대략 8주마다) 계속해서 종양 반응 평가를 받을 것이다. 진행의 방사선학적 증거의 부재 하에 증가하는 종양 마커 (예를 들어, CEA)는 진행성 질환으로 간주되지 않는다.

고형 종양의 반응 평가

기준선에서, 종양 병변/림프절은 하기와 같이 측정가능한 것 또는 비-측정가능한 것으로 카테고리화될 것이다. 종양 병변은 적어도 1차원으로 측정될 것이며 (측정 면에서 가장 긴 직경이 기록되어야 함) 하기 최소 크기를 가짐: (i) 컴퓨터 단층촬영 (CT) 또는 자기 공명 영상화 (MRI) 스캔에 의한 10 mm (CT/MRI 스캔 절편 두께/간격 5 mm 이하); (ii) 임상 검사에 의한 10 mm 캘리퍼 측정 (캘리퍼로 정확하게 측정될 수 없는 병변은 비-측정가능한 것으로 기록되어야 함); 또는 (iii) 흉부 X선에 의한 20 mm. 악성 림프절은 림프절이 CT 스캔에 의해 평가될 경우 짧은 축에서 ≥ 15 mm이면 (CT 스캔 절편 두께는 5 mm 이하인 것이 권장됨) 병리학상 확대되고 측정가능한 것으로 간주될 것이다. 기준선 및 추적에서, 단지 짧은 축만이 측정되고 추적될 것이다. 비-측정가능한 종양 병변은 소형 병변 (가장 긴 직경 < 10 mm 또는 ≥ 10 내지 ≤ 15 mm 짧은 축을 갖는 병리학적 림프절), 뿐만 아니라 실제 비-측정가능한 병변을 포괄한다. 실제 비-측정가능한 것으로 간주되는 병변은 재현가능한 영상화 기술에 의해 측정가능하지 않은 신체 검사에 의해 확인된 연수막 질환, 복수, 흉막 또는 심막 삼출액, 염증성 유방 질환, 피부 또는 폐의 림프관성 침범, 복막 확산, 및 복부 종괴/복부 기관비대를 포함한다.

골 병변과 관련하여, 골 스캔, 양전자 방출 단층촬영 (PET) 스캔 또는 단순 필름은 골 병변을 측정하기에 적절한 영상화 기술로 간주되지 않는다. 그러나, 이들 기술은 골 병변의 존재 또는 소멸을 확인하는데 사용될 수 있다. 횡단면 영상화 기술, 예컨대 CT 또는 MRI에 의해 평가될 수 있는 용해 골 병변 또는 혼합 용해-모구성 병변, 이와 함께 확인가능한 연부 조직 성분은, 연부 조직 성분이 상기 기재된 가측성의 정의를 충족하는 경우에 측정가능한 병변으로 간주될 수 있다. 모구성 골 병변은 비-측정가능한 것이다. 낭성 병변과 관련하여, 방사선촬영으로 정의되는 단순한 낭에 대한 기준을 충족하는 병변은, 이들이 정의에 의해 단순한 낭이기 때문에, 악성 병변으로 간주되지 않아야 한다 (측정가능한 것도 아니고 비-측정가능한 것도 아니다). 낭성 전이를 나타내는 것으로 생각되는 낭성 병변은 이들이 상기 기재된 가측성의 정의를 충족하는 경우에 측정가능한 병변으로 간주될 수 있다. 그러나, 비낭성 병변이 동일한 환자에 존재하는 경우에, 이들은 표적 병변으로서 선택되기에 적합하다. 이전에 조사된 영역 또는 다른 국소-영역 요법에 적용된 영역에 위치하는 종양 병변은 병변에서 진행이 나타나지 않는 한 통상적으로 측정가능한 것으로 간주되지 않는다. 연구 프로토콜은 이러한 병변이 측정가능한 것으로 간주될 조건을 상세화하여야 한다.

병변 측정은 임상적으로 평가되는 경우에 캘리퍼를 사용하여 계량 표기법으로 기록될 것이다. 모든 기준선 평가는 가능한 치료 시작에 가깝게 및 치료 시작 전 4주 이내에 수행될 것이다. 기준선에서 및 연구 동안 각각 확인 및 보고된 병변을 특징화는데 동일한 평가 방법 및 동일한 기술이 사용될 것이다. 영상화 기반 평가가 바람직하다.

임상 병변은 단지 이들이 표재성이고 캘리퍼를 사용하여 평가되었을 때 ≥ 10 mm 직경인 경우에만 측정가능한 것으로 간주될 것이다 (예를 들어, 피부 결절). 피부 병변의 경우에, 병변의 크기를 추정하기 위한 룰러를 포함하여, 컬러 사진에 의한 기록이 바람직하다.

흉부 CT는, 특히 진행이 중요한 종점인 경우에 흉부 X선보다 바람직한데, 이는 CT가, 특히 새로운 병변을 확인하는데 있어서 X선보다 더 감도가 우수하기 때문이다. 그러나, 흉부 X선 상의 병변은 이들이 명확히 정의되고 공기든 폐에 둘러싸인 경우에 측정가능한 것으로 간주될 수 있다. CT는 반응 평가를 위해 선택된 병변을 측정하기에 현재 이용가능하고 재현가능한 최상의 방법이다. 이 가이드라인은 CT 절편 두께가 5 mm 이하라는 가정에 기초하여 CT 스캔 상의 병변의 가측성을 정의하였다. CT 스캔이 5 mm 초과의 절편 두께를 갖는 경우에, 측정가능한 병변에 대한 최소 크기는 절편 두께의 2배이어야 한다. MRI가 또한 허용가능하다. 등록 전에, 환자가 알레르기 또는 신기능부전으로 인해 정맥내 (IV) 조영제에 의한 CT 스캔을 받을 수 없는 것으로 알려진 경우에, 비조영 CT 또는 MRI (IV 조영제 부재)가 기준선에서 및 연구 동안 환자를 평가하는데 사용될지 여부에 관한 결정은 조사 하에 있는 종양 유형 및 질환의 해부학적 위치에 의해 안내되어야 한다. 기준선 조영 CT가 수행된 후 조영제에 대한 금기가 발생한 환자의 경우, 비-조영 CT 또는 MRI (증강 또는 비-증강)가 수행될지 여부에 관한 결정도 또한 종양 유형 및 질환의 해부학적 위치에 기초하여야 하고, 가능한 경우 선행 연구와 비교할 수 있도록 최적화되어야 한다.

종양 반응의 평가는 기준선에서의 전체 종양 부담의 추정치 및 이것을 후속 측정에 대한 비교자로서 사용하는 것을 수반한다. 측정가능한 질환은 상기 상세화된 바와 같이 적어도 1개의 측정가능한 병변의 존재에 의해 정의된다. 1개 초과의 측정가능한 병변이 기준선에서 존재하는 경우에, 모든 침범된 기관을 대표하는 총 최대 5개까지의 병변 (및 기관당 최대 2개의 병변)의 모든 병변이 표적 병변으로서 확인되어야 하고, 기준선에서 기록 및 측정될 것이다. 이것은 환자가 단지 1 또는 2개의 침범된 기관 부위를 갖는 경우에, 각각 최대 2개의 병변 (1개의 부위) 및 4개의 병변 (2개의 부위)이 기록될 것임을 의미한다. 그러한 기관 내의 다른 병변은 (측정가능할지라도) 비-측정가능한 병변으로서 기록될 것이다 (CT 스캔에 의해 크기가 > 10 mm일지라도). 표적 병변은 그의 크기에 기초하여 선택되어야 하고 (가장 긴 직경을 갖는 병변), 모든 침범된 기관을 대표하여야 하지만, 추가적으로 재현가능한 반복 측정에 적합한 것이어야 한다. 짧은 축 < 10 mm를 갖는 림프절은 비병리학적인 것으로 간주되고, 기록 또는 추적되지 않아야 한다. 모든 표적 병변에 대한 직경의 합계 (비-결절 병변에 대해 가장 긴 축, 결절 병변에 대해 짧은 축)가 계산되고, 기준선 직경 합계로서 보고될 것이다. 림프절이 합계에 포함된다면, 상기 기재된 바와 같이, 단지 짧은 축만이 합계에 추가된다. 기준선 직경 합계는 질환의 측정가능한 차원에서 임의의 객관적 종양 퇴행을 추가로 특징화하기 위해 참조로서 사용될 것이다.

기준선에서 측정가능한 질환을 갖는 환자에 대한 각각의 시점에서의 전체 반응 상태 계산의 요약이 하기 표 1에 제공된다. 반응의 확인이 요구되는 전체 반응 계산의 요약이 하기 표 2에 제공된다.

표 1: 시점 반응 - 표적 병변 (비표적 병변 존재 또는 부재)을 갖는 환자

표 2: 확인이 요구되는 최상의 전체 반응

^a CR이 최초 시점에서 실제 충족되는 경우에, 후속 시점에서 보이는 임의의 질환, 심지어 기준선에 비해 PR 기준을 충족하는 질환은, 그 시점에서 PD의 자격을 갖는다 (질환이 CR 후에 재출현한 것이 틀림없기 때문에). 최상의 반응은 SD에 대한 최소 지속기간이 충족되었는지 여부에 좌우될 것이다. 그러나, 때때로 CR은 후속 스캔에 의해 소형 병변이 여전히 존재할 가능성이 있었고 실제로 환자가 최초 시점에서 CR이 아니라 PR을 가지고 있었다는 것이 시사될 때 주장될 수 있다. 이들 상황 하에서, 원래 CR은 PR로 변화되어야 하고, 최상의 반응은 PR이다.

실험실, 바이오마커, 및 다른 생물학적 샘플 및 평가

하기 실험실 시험을 위한 샘플은 분석을 위해 1곳 또는 여러곳의 중앙 실험실로 보내질 것이다. 면역 매개 독성의 증거를 나타내는 환자의 경우, 하기를 포함한 추가의 샘플이 수집 및 분석될 수 있다: (i) 항-핵 항체; (ii) 항-이중-가닥 DNA; (iii) 순환 항-호중구 세포질 항체; 및 (iv) 핵주위 항-호중구 세포질 항체. 약동학 검정은 하기를 포함할 것이다: (i) 하기 표 3에서의 스케줄에 따른 검증된 면역검정의 사용으로 아테졸리주맙 및 베바시주맙 농도에 대해 검정되는 혈청 샘플; 및 (ii) 하기 표 3에서의 스케줄에 따른 탠덤 질량 분광측정법 방법과 조합된 검증된 액체 크로마토그래피를 사용하여 측정되는 코비메티닙 농도에 대한 혈장 샘플. 표 3에서의 스케줄에 따라 모든 적격 환자로부터의 CRC 또는 종양 면역 생물학과 관련된 바이오마커를 포함하나 이에 제한되지는 않는 바이오마커에 대한 혈액 샘플이 수집 및 분석될 것이다. 샘플은 표 4에 열거된 혈액-기반 제안 바이오마커의 결정을 위한 혈장을 수득하기 위해 가공될 것이다.

표 3: 약동학의 스케줄, 면역원성, 및 바이오마커 샘플

^a 연구 약물을 중단하는 환자는 연구 약물의 마지막 투여로부터 30 (±7)일 후에 치료 중단 방문을 위해 클리닉으로 돌아갈 것이다. 반응 평가가 진행성 질환을 나타내는 방문은 치료 중단 방문으로서 사용될 수 있다.

표 4: 탐색적 연구를 위한 제안된 바이오마커

종양 조직 샘플

파라핀 블록 (바람직함) 또는 적어도 20개의 연속 절단된 비염색 슬라이드 내의 대표적인 종양 시편은 연관된 병리학 보고서와 함께 RAS 상태 및 MSI 상태의 결정을 위해 제출될 것이다.

확장된 RAS 돌연변이는 KRAS 및 NRAS 유전자 코돈, 엑손 2의 12 및 13; 엑손 3의 59 및 61; 및 엑손 4의 117 및 146에서 발생하는 돌연변이로 정의된다 (Allegra et al. 2016). 지역 RAS 시험 결과는 중앙 확인을 위한 요건 하에 스크리닝 과정의 일부로서 결과 및 해석의 사본과 함께 받아들여질 것이다.

MSI 상태는 상이하게 사이징된 반복물을 나타내는 MSI 유전자좌의 분획에 의해 여러 방법, 예컨대 hMLH1 및 hMSH2 유전자 산물의 IHC 검출, NGS 시험 또는 PCR 시험에 의해 정의될 수 있다 (문헌 [Lindor NM, Burgart LJ, Leontovich O, et al., Immunohistochemistry versus microsatellite instability testing in phenotyping colorectal tumors, J Clin Oncol 2002;20:1043-8; Salipante SJ, Scroggins SM, Hampel HL, et al., Microsatellite instability detection by next generation sequencing., Clin Chem 2014;60:1192-9]. 각각의 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.). 지역 MSI 시험 결과는 중앙 확인을 위한 요건 하에 스크리닝 과정의 일부로서 결과 및 해석의 사본과 함께 받아들여질 것이다.

또한, 비-유전성 (또는 종양 특이적) 바이오마커 (암-관련 유전자 및 공통 분자 경로와 연관된 바이오마커를 포함하나 이에 제한되지는 않음) 및 탐색적 바이오마커 (면역, MAP 키나제 경로, 또는 CRC 생물학, 예컨대 T-세포 마커 또는 종양 돌연변이 상태와 관련된 마커를 포함하나 이에 제한되지는 않음)에 대한 탐색적 연구를 위한 NGS가 평가될 수 있다.

이러한 기재된 설명은 본 발명을 개시하기 위해 예를 사용한다. 본 발명의 특허가능한 범주는 청구범위에 의해 정의되고, 관련 기술분야의 통상의 기술자가 고안하는 다른 예를 포함할 수 있다. 이러한 다른 예는, 이들이 청구범위의 문자 그대로의 표현과 상이하지 않은 구조적 요소를 갖거나 또는 이들이 청구범위의 문자 그대로의 표현과 비실질적 차이를 갖는 동등한 구조적 요소를 포함하는 경우에 청구범위의 범주 내에 있는 것으로 의도된다.

SEQUENCE LISTING <110> Genentech, Inc. <120> COMBINATION THERAPY WITH A MEK INHIBITOR, A PD-1 AXIS INHIBITOR, AND A VEGF INHIBITOR <130> P33774 (33988-58) <150> US 62/374437 <151> 2016-08-12 <160> 40 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 440 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 1 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser 115 120 125 Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp 130 135 140 Tyr Phe Pro 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Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> Tyr, Gly, Phe, or Ser <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> Leu, Tyr, Phe or Trp <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(5) <223> Tyr, Asn, Ala, Thr, Gly, Phe, or Ile <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> His, Val, Pro, Thr, or Ile <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> Ala, Trp, Arg, Pro, or Thr <400> 19 Gln Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Thr 1 5 <210> 20 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 20 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 20 <210> 21 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 21 Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 1 5 10 15 <210> 22 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 22 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 1 5 10 15 Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 23 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 23 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 1 5 10 <210> 24 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 24 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser Trp Ile His 1 5 10 <210> 25 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 25 Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 1 5 10 15 Lys Gly <210> 26 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 26 Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala Val Ala 1 5 10 <210> 27 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 27 Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser 1 5 <210> 28 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 28 Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala Thr 1 5 <210> 29 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 29 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 20 25 30 Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 30 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 30 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 31 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 31 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 20 25 30 Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg His Trp Pro Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 <210> 32 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 32 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Leu Tyr His Pro Ala 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 33 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 33 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Ala Asp Phe 50 55 60 Lys Arg Arg Phe Thr Phe Ser Leu Asp Thr Ser Lys Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Tyr Pro His Tyr Tyr Gly Ser Ser His Trp Tyr Phe Asp Val 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 34 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 34 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile 35 40 45 Tyr Phe Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Thr Val Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 35 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 35 Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met Asn 1 5 10 <210> 36 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 36 Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Ala Asp Phe Lys 1 5 10 15 Arg <210> 37 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 37 Tyr Pro His Tyr Tyr Gly Ser Ser His Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 38 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 38 Ser Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn 1 5 10 <210> 39 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 39 Phe Thr Ser Ser Leu His Ser 1 5 <210> 40 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Peptide <400> 40 Gln Gln Tyr Ser Thr Val Pro Trp Thr 1 5

Claims

결장직장암을 갖는 대상체에게 (i) 치료 유효량의 MEK 억제제, (ii) 치료 유효량의 PD-1 축 억제제, 및 (iii) 치료 유효량의 VEGF 억제제를 포함하는 요법을 투여하는 것을 포함하는, 결장직장암을 갖는 대상체를 치료하는 방법.
제1항에 있어서, 대상체가 전이성 결장직장암을 갖는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, MEK 억제제가 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 축 억제제가 PD-L1 억제제인 방법.
제4항에 있어서, PD-L1 억제제가 GFTFSDSWIH (서열식별번호: 24)의 HVR-H1 서열, AWISPYGGSTYYADSVKG (서열식별번호: 25)의 HVR-H2 서열, 및 RHWPGGFDY (서열식별번호: 12)의 HVR-H3 서열을 포함하는 중쇄; 및 RASQDVSTAVA (서열식별번호: 26)의 HVR-L1 서열, SASFLYS (서열식별번호: 27)의 HVR-L2 서열, 및 QQYLYHPAT (서열식별번호: 28)의 HVR-L3 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체인 방법.
제4항에 있어서, PD-L1 억제제가
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS (서열식별번호: 7)의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR (서열식별번호: 9)의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역
을 포함하는 항체인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, PD-L1 억제제가 아테졸리주맙인 방법.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF 억제제가 GYTFTNYGMN (서열식별번호: 35)의 HVR-H1 서열, WINTYTGEPTYAADFKR (서열식별번호: 36)의 HVR-H2 서열, 및 YPHYYGSSHWYFDV (서열식별번호: 37)의 HVR-H3 서열을 포함하는 중쇄; 및 SASQDISNYLN (서열식별번호: 38)의 HVR-L1 서열, FTSSLHS (서열식별번호: 39)의 HVR-L2 서열, 및 QQYSTVPWT (서열식별번호: 40)의 HVR-L3 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체인 방법.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF 억제제가
EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTY AADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS (서열식별번호: 33)의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및
DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR (서열식별번호: 34)의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역
을 포함하는 항체인 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF 억제제가 베바시주맙인 방법.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 1일에 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 80 mg, 또는 약 60 mg의 MEK 억제제로 치료받는 것인 방법.
제11항에 있어서, MEK 억제제가 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염이고, 추가로 대상체가 약 60 mg, 약 40 mg 또는 약 20 mg으로 치료받는 것인 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, MEK 억제제가 28일 치료 주기의 연속 21일 동안 1일 1회 투여되는 것인 방법.
제13항에 있어서, MEK 억제제가 28일 치료 주기의 제3일 내지 제23일에 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 약 400 mg 내지 약 1200 mg, 약 600 mg 내지 약 1000 mg, 약 700 mg 내지 약 900 mg, 또는 약 840 mg의 PD-1 축 억제제로 28일 치료 주기의 14일마다 정맥내로 치료받는 것인 방법.
제15항에 있어서, PD-1 축 억제제가 아테졸리주맙이고, 추가로 대상체가 약 840 mg으로 치료받는 것인 방법.
제15항 또는 제16항에 있어서, 대상체가 28일 치료 주기의 제1일 및 제15일에 PD-1 축 억제제로 치료받는 것인 방법.
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 kg 체중당 약 3 mg 내지 kg 체중당 약 7 mg, kg 체중당 약 4 mg 내지 kg 체중당 약 6 mg, 또는 kg 체중당 약 5 mg의 VEGF 억제제로 28일 치료 주기의 14일마다 치료받는 것인 방법.
제18항에 있어서, VEGF 억제제가 베바시주맙이고, 추가로 대상체가 kg 체중당 약 5 mg으로 치료받는 것인 방법.
제18항 또는 제19항에 있어서, 대상체가 VEGF 억제제로 28일 치료 주기의 제1일 및 제15일에 치료받는 것인 방법.
제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, MEK 억제제, PD-1 축 억제제 및 VEGF 억제제가 각각 28일 치료 주기의 제1일 및 제15일에 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 결장직장암이 미소위성체 안정한 결장직장암인 방법.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 축 억제제 및 VEGF 억제제가 각각 28일 치료 주기의 제1일 및 제15일에 투여되고, PD-1 축 억제제가 대상체에의 VEGF 억제제의 투여 전에 대상체에게 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, MEK 억제제가 28일 치료 주기의 제1일 내지 제21일에 투여되는 것인 방법.
결장직장암을 갖는 대상체에게
(i) 치료 유효량의 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염;
(ii) 치료 유효량의
(a) GFTFSDSWIH (서열식별번호: 24)의 HVR-H1 서열, AWISPYGGSTYYADSVKG (서열식별번호: 25)의 HVR-H2 서열, 및 RHWPGGFDY (서열식별번호: 12)의 HVR-H3 서열을 포함하는 중쇄; 및 RASQDVSTAVA (서열식별번호: 26)의 HVR-L1 서열, SASFLYS (서열식별번호: 27)의 HVR-L2 서열, 및 QQYLYHPAT (서열식별번호: 28)의 HVR-L3 서열을 포함하는 경쇄, 또는
(b) EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS (서열식별번호: 7)의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR (서열식별번호: 9)의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역
을 포함하는 항체인 PD-L1 억제제; 및
(iii) 치료 유효량의
(a) GYTFTNYGMN (서열식별번호: 35)의 HVR-H1 서열, WINTYTGEPTYAADFKR (서열식별번호: 36)의 HVR-H2 서열, 및 YPHYYGSSHWYFDV (서열식별번호: 37)의 HVR-H3 서열을 포함하는 중쇄; 및 SASQDISNYLN (서열식별번호: 38)의 HVR-L1 서열, FTSSLHS (서열식별번호: 39)의 HVR-L2 서열, 및 QQYSTVPWT (서열식별번호: 40)의 HVR-L3 서열을 포함하는 경쇄, 또는
(b) EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTY AADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS (서열식별번호: 33)의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR. (서열식별번호: 34)의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역
을 포함하는 항체인 VEGF 억제제
를 포함하는 요법을 투여하는 것을 포함하는, 결장직장암을 갖는 대상체를 치료하는 방법.
제25항에 있어서, 대상체가 약 60 mg의 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염; 약 840 mg의 PD-L1 억제제; 및 kg 체중당 약 5 mg의 VEGF 억제제로 치료받는 것인 방법.
MEK 억제제, PD-1 축 억제제, VEGF 억제제, 및 치료 유효량의 MEK 억제제, 치료 유효량의 PD-1 축 억제제 및 치료 유효량의 VEGF 억제제를 인간 대상체를 치료하는데 사용하는 것에 대한 지침서를 포함하는 패키지 삽입물을 포함하는, 인간 대상체에서 결장직장암을 치료하기 위한 키트.
제27항에 있어서, MEK 억제제가 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염이고, PD-1 축 억제제가 PD-L1 억제제 아테졸리주맙이고, VEGF 억제제가 베바시주맙인 키트.
(i) 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 80 mg, 또는 약 80 mg의 용량의 MEK 억제제;
(ii) 약 400 mg 내지 약 1200 mg, 약 600 mg 내지 약 1000 mg, 약 700 mg 내지 약 900 mg, 또는 약 840 mg의 용량의 PD-1 축 억제제; 및
(iii) 약 5 mg/kg 내지 약 15 mg/kg, 약 5 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 5 mg/kg, 약 10 mg/kg 또는 약 15 mg/kg의 용량의 VEGF 억제제
를 포함하는 결장직장암 요법 약물 조합물.
제29항에 있어서, MEK 억제제가 약 60 mg의 용량의 코비메티닙 또는 그의 제약상 허용되는 염이고, PD-1 축 억제제가 약 840 mg의 용량의 PD-L1 억제제 아테졸리주맙이고, VEGF 억제제가 kg 체중당 약 5 mg의 용량의 베바시주맙인 결장직장암 요법 약물 조합물.