KR20190030621A

KR20190030621A - 누룩을 이용한 쪽 발효방법 및 이에 얻은 쪽 발효추출물을 이용한 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20190030621A
Application number: KR1020180109510A
Authority: KR
Inventors: 강춘일
Original assignee: 농업회사법인 주식회사 제주인디
Priority date: 2017-09-14
Filing date: 2018-09-13
Publication date: 2019-03-22
Also published as: KR102111085B1

Abstract

본 발명은 누룩을 이용한 쪽 발효방법 및 이에 의해 얻은 쪽 발효추출물을 이용한 화장료 조성물에 대한 것으로, 더욱 상세하게는 누룩 등을 이용하여 쪽을 발효시켜 쪽 발효추출물을 얻으므로 쪽의 유용 성분의 추출 효율을 향상시킬 수 있으며, 쪽 발효추출물을 화장료 조성물에 이용하여 항산화, 주름 개선, 피부 미백 효과를 향상시킬 수 있는 누룩을 이용한 쪽 발효방법 및 이에 의해 얻은 쪽 발효추출물을 이용한 화장료 조성물에 대한 것이다.

Description

누룩을 이용한 쪽 발효방법 및 이에 얻은 쪽 발효추출물을 이용한 화장료 조성물{Method for fermenting polygonum indigo using nuruk and Cosmetic composition using fermented polygonum indigo extract obtained by the same}

쪽(Polygonum indigo)은 쌍떡잎식물 마디풀목 마디풀과의 한해살이풀로 중국이 원산지이며, 과거에는 염료 자원으로 재배하였다. 줄기는 곧게 서고 높이가 50∼60cm이며 붉은빛이 강한 자주색이다. 열매는 수과이고 꽃받침에 싸여 있으며 세모난 달걀 모양이고 길이가 2mm 정도이며 검은빛이 도는 갈색이다. 잎은 남색의 염료로 사용한다. 또한, 쪽은 쪽염색용 염료의 조제에 사용하는 인디고를 생성하는 인디칸을 포함하고, 요람(蓼藍), 산쪽풀(쥐꼬리망초과), 에조 대청(십자화과), 산쪽풀(대극과), 인도남(콩과) 등이 있고, 일본 등에서는 요람은 염료의 조제에 사용될 뿐만 아니라, 그 잎 및 과실에는 유용한 생리활성 성분을 함유하고 있다고 생각되어, 그 잎 및 과실을 햇볕에 말려 얻어지는 쪽잎 및 쪽 열매는 생약으로서 사용되고 있다. 나아가, 최근에는 쪽풀 추출물 을 함유하는 항종양 활성, 항바이러스 활성, 항균 활성 등의 연구가 이루어지고 있으며, 하기의 특허문헌처럼 화장품 조성물에 이용되고 있다.

<특허문헌>

특허 제0-1550422호(2015. 08. 31. 등록) "쪽추출물을 함유한 화장료 조성물"

하지만, 종래의 화장료 조성물에 사용되는 쪽추출물은 열수 또는 에탄올 등에 의해 추출되어 유용성분의 추출 효율이 낮은 문제가 있다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 것으로,

본 발명은 누룩 등을 이용하여 쪽을 발효시켜 쪽 발효추출물을 얻으므로, 쪽의 유용 성분의 추출 효율을 향상시킬 수 있는 누룩을 이용한 쪽 발효방법 및 이에 의해 얻은 쪽 발효추출물을 이용한 화장료 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

또한, 본 발명은 쪽 발효추출물을 화장료 조성물에 이용하여 항산화, 피부 미백 및 주름 개선 효과를 향상시킬 수 있는 누룩을 이용한 쪽 발효방법 및 이에 의해 얻은 쪽 발효추출물을 이용한 화장료 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

본 발명은 앞서 본 목적을 달성하기 위하여 다음과 같은 구성을 가진 실시예에 의해 구현된다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 쪽을 누룩으로 발효시켜 얻은 쪽 발효추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서 상기 쪽 발효추출물은, 쪽꽃 80 내지 120중량부, 누룩 80 내지 120 중량부, 설탕 80 내지 120중량부 및 물 800 내지 1000중량부를 혼합하고 35 내지 39℃의 온도에서 4 내지 6일간 정치하여 발효물을 얻고, 상기 발효물 100중량부당 95% 에탄올 150 내지 200중량부를 가하고 상온에서 20 내지 28시간 동안 교반하여 추출물을 얻고, 상기 추출물을 여과 후 농축하여 얻어지는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 항산화, 미백 및 주름 개선 효과를 가지는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 항염증 효과를 제공하는 항염증추출물을 추가로 포함하며, 상기 항염증추출물은 감탕나무 추출물, 말발도리 추출물 및 백출 추출물이 1:1:1의 중량비로 혼합되어 사용되는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 누룩을 이용한 쪽 발효방법은 쪽꽃 80 내지 120중량부, 누룩 80 내지 120 중량부, 설탕 80 내지 120중량부 및 물 800 내지 1000중량부를 혼합하고 35 내지 39℃의 온도에서 4 내지 6일간 정치하여 발효물을 얻는 발효단계와, 상기 발효물 100중량부당 95% 에탄올 150 내지 200중량부를 가하고 상온에서 20 내지 28시간 동안 교반하여 추출물을 얻는 추출단계와, 상기 추출물을 여과 후 농축하여 쪽 발효추출물을 얻는 여과농축단계를 포함하며, 상기 쪽 발효추출물은 화장료 조성물에 이용되게 되며, 향상된 항산화, 주름 개선 및 미백 효과를 제공하는 것을 특징으로 한다.

본 발명은 앞서 본 실시예에 의해 다음과 같은 효과를 얻을 수 있다.

본 발명은 누룩 등을 이용하여 쪽을 발효시켜 쪽 발효추출물을 얻으므로, 쪽의 유용 성분의 추출 효율을 향상시킬 수 있는 효과가 있다.

또한, 본 발명은 쪽 발효추출물을 화장료 조성물에 이용하여 항산화, 피부 미백 및 주름 개선 효과를 향상시킬 수 있는 효과가 있다.

도 1 내지 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 사용되는 추출물의 항산화 효과를 나타내는 그래프.
도 7 내지 9은 본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 사용되는 추출물의 주름 개선 효과를 나타내는 그래프.
도 10 및 11은 본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에 사용되는 추출물의 피부 미백 효과를 나타내는 그래프.
도 12 및 13은 본 발명의 일 실시예에 따른 화ㅈ아료 조성물에 사용되는 추출물의 HPLC 분석 결과를 나타내는 그래프.

이하에서는 본 발명에 따른 누룩을 이용한 쪽 발효방법 및 이에 의해 얻은 쪽 발효추출물을 이용한 화장료 조성물을 상세히 설명한다. 특별한 정의가 없는 한 본 명세서의 모든 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 기술자가 이해하는 당해 용어의 일반적 의미와 동일하고 만약 본 명세서에 사용된 용어의 의미와 충돌하는 경우에는 본 명세서에 사용된 정의에 따른다. 또한, 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있는 공지 기능 및 구성에 대해 상세한 설명은 생략한다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 누룩을 이용한 쪽 발효방법은 쪽, 누룩, 설탕 및 물을 혼합한 후 일정 온도에서 일정 시간 정치하여 발효물을 얻는 발효단계와, 상기 발효단계 후 상기 발효물에 에탄올을 가하고 일정 온도에 일정 시간 교반하여 추출물을 얻는 추출단계와, 상기 추출단계 후 상기 추출물을 여과 후 농축하여 쪽 발효추출물을 얻는 여과농축단계 등을 포함한다.

상기 발효단계는 쪽, 누룩, 설탕 및 물을 혼합한 후 일정 온도에서 일정 시간 정치하여 발효물을 얻는 단계로, 예컨대 쪽 80 내지 120중량부, 누룩 80 내지 120 중량부, 설탕 80 내지 120중량부 및 물 800 내지 1000중량부를 혼합하고 35 내지 39℃의 온도에서 4 내지 6일간 정치하여 발효물을 얻을 수 있다.

상기 쪽(Polygonum indigo)은 쌍떡잎식물 마디풀목 마디풀과의 한해살이풀로 중국이 원산지이며, 줄기는 곧게 서고 높이가 50∼60cm이며 붉은빛이 강한 자주색이고, 열매는 수과이고 꽃받침에 싸여 있으며 세모난 달걀 모양이고 길이가 2mm 정도이며 검은빛이 도는 갈색이다. 본 발명에서는 쪽의 꽃 또는 잎이 사용될 수 있으나, 바람직하게는 쪽의 꽃이 사용되게 된다.

상기 누룩은 우리나라 전통의 술 발효제로서, 술의 발효와 숙성 중에 주원료로 사용되는 호화된 곡물(찹쌀, 멥쌀, 보리, 밀, 옥수수, 수수, 조 등)의 전분질을 분해, 당화시켜 포도당으로 만들어주는 효소원이자 발효원으로, 알코올 발효의 중요한 원료가 된다. 예컨대, 상기 누룩은 보리를 이용한 붉은 누룩이 사용될 수 있으며, 상기 누룩은 공지의 제조방법에 의해 제조된 것이 이용될 수도 있고, 시판 중인 제품이 이용될 수 있다.

상기 추출단계는 상기 발효단계 후 상기 발효물에 에탄올을 가하고 일정 온도에 일정 시간 교반하여 추출물을 얻는 단계로, 예컨대 상기 발효물 100중량부당 95% 에탄올 150 내지 200중량부를 가하고 상온에서 20 내지 28시간 동안 교반하여 추출물을 얻을 수 있다.

상기 여과농축단계는 상기 추출물을 여과 후 농축하여 쪽 발효추출물을 얻는 단계로, 여과 및 농축 과정은 공지의 방법이 이용될 수 있다. 상기 누룩을 이용한 쪽 발효방법을 통해 얻은 쪽 발효추출물은 화장료 조성물에 이용되게 되며, 향상된 항산화, 주름 개선, 미백 효과를 제공하게 된다.

본 발명의 다른 실시예에 따른 화장료 조성물은 누룩으로 발효시켜 얻은 쪽 발효추출물을 유효성분으로 함유한다. 상기 쪽 발효추출물은 앞서 설명한 누룩을 이용한 쪽 발효방법에 의해 얻어지게 되므로, 이하 자세한 설명은 생략하기로 한다. 본 발명에서 상기 쪽 발효추출물은 화장료 조성물 총중량에 대하여 0.001 ~ 10중량%로 함유되게 된다.

상기 화장료 조성물은 항염증 효과를 제공하는 항염증추출물을 추가로 포함할 수 있으며, 상기 항염증추출물은 여우구슬 추출물, 수선화 추출물, 백출 추출물, 감탕나무 추출물 및 말발도리 추출물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상이 사용될 수 있으며, 백출 추출물, 감탕나무 추출물 및 말발도리 추출물이 1:1:1의 중량비로 혼합되어 사용되는 것이 더욱 바람직하다. 상기 여우구슬 추출물, 수선화 추출물, 백출 추출물, 감탕나무 추출물 및 말발도리 추출물은 여우구슬잎, 수선화잎, 백출(뿌리줄기), 감탕나무잎, 말발도리잎 각각을 에탄올에 혼합한 후 일정 시간 지난 후 여과하여 얻은 추출액을 감압농축하여 얻어지게 된다. 상기 여우구술은 쌍떡잎식물 대극목 대극과의 한해살이풀이며, 상기 수선화는 외떡잎식물 백합목 수선화과의 여러해살이풀이고, 상기 백출은 국화과의 삽주의 뿌리줄기이며, 상기 감탕나무는 감탕나무과에 속하는 상록소교목이고, 상기 말발도리는 쌍떡잎식물 장미목 범의귀과의 낙엽관목이다. 상기 화장료 조성물에 추가로 첨가되는 항염증추출물은 누룩을 이용하여 발효하지 않고 에탄올을 바로 이용하여 추출하게 되는데, 누룩을 이용한 발효 후 추출 시 유용성분 추출효율이 떨어지기 때문이다. 쪽에 있어서도 꽃이 잎보다 누룩을 이용한 발효 후 추출 시 유용 성분 추출 효율이 현저히 크다는 점에서, 본 발명은 화장료 조성물에서 특정 기능을 수행할 수 있는 식물 및 그 부위에 맞추어 추출방법을 선택하고, 추출된 추출물을 혼합함으로써 시너지 효과를 발휘할 수 있도록 완성되었다.

본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 추가로 포함할 수 있다.

상기 수용성 비타민으로서는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 상기 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

상기 유용성 비타민으로서는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E(d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 상기 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

상기 고분자 펩티드로서는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 상기 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

상기 고분자 다당으로서는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

상기 스핑고 지질로서는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 상기 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

상기 해초 엑기스로는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 상기 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 통상 화장료 조성물에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다. 예를 들면, 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

상기 유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다. 상기 에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다. 상기 탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다. 상기 실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다. 상기 불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다. 상기 동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

상기 보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다. 상기 수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다. 상기 지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다. 상기 수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다. 상기 지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

상기 에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

상기 계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다. 상기 비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌), 솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEPOP (폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다. 상기 음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다. 상기 양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다. 상기 양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면활성제 등을 들 수 있다.

상기 유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트,마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

상기 유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

상기 자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

상기 살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

상기 산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

상기 pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

상기 알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5% 중량 백분율, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 3% 중량 백분율로 배합된다.

본 발명의 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 화합물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 핸드크림, 모이스처크림, 에센스, 팩, 비누, 화장수, 밀크로션, 젤, 연고, 패취, 클렌징폼, 바디클린저, 아스트린젠트, 분무제의 제형을 포함한다. 본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다. 본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 또 다른 실시예에 따른 화장료 조성물의 제조방법은 쪽을 누룩으로 발효시켜 쪽 발효추출물을 얻는 추출물수득단계와, 상기 추출물수득단계에서 얻은 쪽 발효추출물을 용매에 혼합하는 혼합단계 등을 포함한다.

상기 추출물수득단계는 쪽, 누룩, 설탕 및 물을 혼합한 후 일정 온도에서 일정 시간 정치하여 발효물을 얻는 발효단계와, 상기 발효단계 후 상기 발효물에 에탄올을 가하고 일정 온도에 일정 시간 교반하여 추출물을 얻는 추출단계와, 상기 추출단계 후 상기 추출물을 여과 후 농축하여 쪽 발효추출물을 얻는 여과농축단계 등을 포함한다. 상기 발효단계, 추출단계 및 여과농축단계는 앞서 설명한 누룩을 이용한 쪽 발효방법의 발효단계, 추출단계 및 여과농축단계와 동일하므로 자세한 설명은 생략하기로 한다.

이하, 실시예를 통해서 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 하지만, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 시료의 준비

1. 쪽꽃 20g, 누룩(시판 중인 붉은 누룩 제품 사용) 20g, 설탕 20g 및 증류수 180ml를 혼합하고 37℃에서 5일간 정치배양한 후, 95% 에탄올 420ml를 추가로 가하여 24시간 동안 실온에서 교반하고, 필터를 이용하여 여과 후 농축하여 쪽 발효추출물(시료 1)을 얻었다.

2. 쪽꽃이 아니라 쪽잎을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하게 하여 쪽 발효추출물(시료 2)을 얻었다.

3. 누룩 20g 대신에 10g을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하게 하여 쪽 발효추출물(시료 3)을 얻었다.

4. 누룩 20g 대신에 30g을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하게 하여 쪽 발효추출물(시료 4)을 얻었다.

5. 설탕 20g 대신에 10g을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하게 하여 쪽 발효추출물(시료 5)을 얻었다.

6. 설탕 20g 대신에 30g을 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 1과 동일하게 하여 쪽 발효추출물(시료 6)을 얻었다.

7. 쪽꽃 20g을 95% 에탄올 420ml에 침지 교반하고, 필터를 이용하여 여과 후 농축하여 쪽 발효추출물(시료 7)을 얻었다.

8. 여우구슬잎, 수선화잎, 백출(뿌리줄기), 감탕나무잎, 말발도리잎 각각 20g을 95% 에탄올 420ml에 24시간 침지 교반하여 추출하고 여과 후 농축하여, 여우구슬 추출물(시료 8), 수선화 추출물(시료 9), 백출 추출물(시료 10), 감탕나무 추출물(시료 11), 말발도리 추출물(시료 12), 시료 10과 11을 1:1의 중량비로 혼합하여 시료 13을 준비하고, 시료 8, 10 및 11을 1:1:1의 중량비로 혼합하여 시료 14을 준비하고, 시료 10, 11, 12를 1:1:1의 중량비로 혼합하여 시료 15를 준비하였다.

<실시예 2> 항산화 효과 평가

1. DPPH radical 소거 활성

농도별 시료 용액(20μL)에 0.2mM DPPH(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 용액(180μL)을 넣고 10분간 암소에서 반응시킨 후 Microplate readers(모델명: Tecan AT/sunrise TW)를 통해 잔존하는 DPPH free radical을 517nm에서 측정하였다. DPPH radical 소거활성은 시료 용액의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도 차이를 백분율로 나타내었다(DPPH radical 소거활성(%) = (1-OD of sample/OD of control)×100). 시료 용액은 시료 1, 2 및 7을 각각 용매에 혼합하여 형성하였으며, 각 시료 용액의 농도별로 DPPH radical 소거 활성을 측정하여 도 1 내지 3에 나타내었고, 도 1은 시료 1을 사용한 용액의 결과, 도 2는 시료 2를 사용한 용액의 결과, 도 3은 시료 7을 사용한 용액의 결과를 나타낸다.

2. ABTS radical 소거 활성

7.4mM ABTS와 2.6mM potassium persulfate를 혼합 후 실온 암소에서 15시간 동안 방치하여 radical을 형성시킨 후 이 용액을 734nm에서 흡광도 값이 0.70±0.02가 되도록 희석하였다. 희석된 ABTS 용액(180μL)에 농도별 시료 용액(20μL)을 가하여 실온에서 15분 동안 방치한 후 700nm에서 흡광도를 측정하였다. ABTS radical 소거활성은 시료 용액의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도 차이를 백분율로 나타내었다(ABTS radical 소거활성(%) = (1-OD of sample/OD of control)×100). 시료 용액은 시료 1, 2 및 7을 각각 용매에 혼합하여 형성하였으며, 각 시료 용액의 농도별로 ABTS radical 소거 활성을 측정하여 도 4 내지 6에 나타내었고, 도 4은 시료 1을 사용한 용액의 결과, 도 5는 시료 2를 사용한 용액의 결과, 도 6은 시료 7을 사용한 용액의 결과를 나타낸다.

3. 도 1 내지 6을 참조하면, 쪽꽃 발효추출물(시료 1), 쪽잎 발효추출물(시료 2) 및 쪽꽃 추출물(시료 7)이 농도가 증가함에 따라 DPPH(및 ATBS) radical 소거 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있어 시료 1, 2 및 7은 항산화 효과를 제공할 수 있음을 알 수 있고, 쪽꽃 발효추출물(시료 1)이 쪽잎 발효추출물(시료 2) 및 쪽꽃 추출물(시료 7)보다 향상된 항산화 효과를 제공할 수 있음을 알 수 있다.

<실시예 3> 피부 주름 개선 효과 평가

1. Elastase 저해 활성 평가

(1) 0.2M Tris-HCl(pH 8.0), 0.1mg/mL elastase, 기질로 12.5mM N-succ(Ala)3-p-nitroanilide(SANA), 농도별 시료 용액을 준비하고, 96 well plate에 buffer 165μL, SANA 5μL, elastase 10μL, 시료 용액 20μL를 넣고 25℃에서 15분간 반응시킨 후 microplate reader(모델명: Tecan AT/sunrise TW)를 통해 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료 용액은 시료 1 내지 7을 각각 용매에 혼합하여 형성하였으며, 각 시료 용액의 농도별로 억제 정도(Elastase inhibition activity(%) = [1-(샘플의 흡광도-효소 넣기 전 샘플의 흡광도)/(컨트롤 흡광도-효소 넣기 컨트롤 흡광도)]×100)를 측정하였으며, 시료 1, 2 및 7을 사용한 시료 용액의 결과는 도 7 내지 9에 나타내었고, 시료 1 내지 7을 사용한 시료 용액의 특정 농도(312.50μg/ml)에서 억제 정도값을 표 1에 나타내었다. 도 7은 시료 1을 사용한 용액의 결과, 도 8은 시료 2를 사용한 용액의 결과, 도 9는 시료 7을 사용한 용액의 결과를 나타낸다.

	시료 1	시료 2	시료 3	시료 4	시료 5	시료 6	시료 7
Elastase inhibition activity(%)	24	5	8	15	15	23	13

(2) 도 7 내지 9를 및 표 1을 참조하면, 쪽꽃 발효추출물(시료 1, 3 내지 6), 쪽잎 발효추출물(시료 2) 및 쪽꽃 추출물(시료 7)이 엘라스타제 제거 활성을 가져 주름 개선 효과를 가짐을 알 수 있으며, 쪽꽃 발효추출물(시료 1)이 쪽잎 발효추출물(시료 2) 및 쪽꽃 추출물(시료 7)보다 향상된 주름 개선 효과를 제공함을 알 수 있다. 또한, 표 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 누룩과 설탕이 적당량이 사용되지 않는 경우 유용 성분 추출 효율이 떨어짐을 알 수 있다.

2. 콜라겐 합성 능력 평가

(1) 배양된 HDFn을 2x10⁵cells/ml이 되도록 96 well plate에 접종한 후, 37℃, 5% CO₂조건하에 24시간 동안 유지한 후 FBS가 포함되지 않은 DMEM/F12(3:1) 배지로 교체 후, 시료 1 내지 7(농도 500μg/ml)을 첨가하고 48시간 동안 배양하였다. 이후, 배지 상층액을 모아서 Procollagen type 1 C-peptide(PIP) EIA kit를 이용하여 procollagen 양을 측정하였고, 그 결과를 표 2에 나타내었다.

	무첨가	시료 1	시료 2	시료 3	시료 4	시료 5	시료 6	시료 7
collagen 1(%)	100	160	115	120	130	130	158	125

(2) 표 2를 참조하면, 시료 1이 시료 2 내지 7에 비해 콜라겐 1의 생성량이 많음을 알 수 있다. 이를 통해, 적정한 조건에서 누룩을 이용하여 쪽꽃을 발효하여 얻은 쪽꽃 발효추출물이 향상된 주름 개선 효과를 제공함을 알 수 있다.

<실시예 4> 피부 미백 개선 효과 평가

1. 멜라닌 생합성 저해 평가

(1) DMEM 배지로 배양된 B16F10 세포를 96 well plate에 2×10⁵ cell/mL이 되도록 분주하고 24시간 동안 5% CO₂, 37℃로 배양하고 α-MSH 200nM을 첨가하여 생성하고, 농도별 시료 용액(PTFFE, 시료 1을 포함)을 첨가하고 3일 동안 배양하였다. 배양 완료 후, 배지를 제거시키고, 인산완충용액(pH 74)으로 세척하고, melanin에 1N NaOH를 가하여 80℃에서 1시간 반응시킨 후 분광광도계 405nm에서 흡광도를 측정한 후, 상대적 비교를 통해 멜라닌 양(Melanine content(%))을 구해 도 10에 나타내었다. 대조군으로 Arbutin을 사용하였다.

(2) 도 10을 보면, 시료 1을 이용한 쪽꽃 발효 추출물(250μg/ml)은 α-MSH 200nM을 처리한 경우에 비해 멜라닌 생성량을 43% 감소시키며, 미처리 경우에 비해 멜라닌 생성량을 16% 감소시킴을 확인할 수 있다.

2. 티로시나제 발현 능력 평가

(1) DMEM 배지로 배양된 B16F10 세포를 96 well plate에 2×10⁵ cell/mL이 되도록 분주하고 24시간 동안 5% CO₂, 37℃로 배양하고 α-MSH 200nM을 첨가하고, 농도별 시료 용액(PTFFE, 시료 1을 포함)을 첨가하고 3일 동안 배양하였다. 배양 완료 후, tyrosinase activity를 측정하여 도 11에 나타내었다. 대조군으로 Arbutin을 사용하였다.

(2) 도 11을 보면, 시료 1을 이용한 쪽꽃 발효 추출물(250μg/ml)은 α-MSH 200nM을 처리한 경우에 비해 티로시나제의 발현을 290% 감소시키며, 미처리 경우에 비해 티로시나제의 발현을 32% 감소시킴을 확인할 수 있다.

<실시예 5> 누룩을 이용한 발효를 통한 성분 변화의 확인

1. 시료 1 및 7에 대하여 HPLC 분석(2695 seperation module(Waters, USA)을 사용하고, 데이터 분석은 Waters Empower software를 사용하고, 분석 샘플은 시료 1 및 7 각각을 70% 에탄올에 10mg/ml의 농도로 용해하여 사용함)을 실시하여 그 결과를 도 12 및 13에 나타내었다. 도 12는 시료 1에 대한 HPLC 분석 결과를 나타내며, 도 13은 시료 7에 대한 HPLC 분석 결과를 나타낸다.

2. 도 12 및 13을 비교하면, 누룩을 통한 발효를 통해 구성 화합물이 양이 현저하게 변함을 확인할 수 있다. 이를 통해, 누룩을 이용하여 쪽꽃을 발효하는 경우 항산화, 주름 개선, 피부 미백 효과를 제공하는 화합물의 양이 현저하게 증가함을 알 수 있다.

<실시예 6> 항염증 효과의 평가

1. Pro-inflammatory cytokines(TNF-α, IL-6) 생성 억제 평가

(1) 배양된 RAW 264.7 세포를 DMEM 배지를 이용하여 2×10⁵cells/ml로 조절한 후, 96 well plate에 접종 배양한 후, 시료 용액 각각과 자극물질 LPS(1㎍/ml)를 함유한 새로운 배지를 동시에 처리하여 배양하였다. 시료 용액은 시료 8 내지 15를 각각 용매에 혼합하여 형성하였으며, 각 시료 용액의 최종농도 250㎍/ml로 하였다. 배양 후 배양 배지를 원심분리하여 얻어진 상층액의 pro-inflammatory cytokines 생성 함량을 측정하여 그 결과를 표 3에 나타내었다. pro-inflammatory cytokines 정량은 ELISA kit(R&D Systems Inc., Minneapolis, MN, USA)를 이용하여 정량하였으며 standard에 대한 표준곡선의 r2 값은 0.99 이상이었다.

	무처리	시료 8	시료 9	시료 10	시료 11	시료 12	시료 13	시료 14	시료 15
TNF-α 생성률(%)	100	85	92	86	87	86	80	82	75
IL-6 생성률(%)	100	83	91	85	88	84	77	80	74

(2) 표 3을 보면, 시료 8 내지 15가 Pro-inflammatory cytokines의 생성을 억제하여 항염증 효과를 제공함을 확인할 수 있으며, 시료 9가 다른 추출물에 비해 약간 항염증 효과가 떨어짐을 확인할 수 있고, 시료 10 내지 12가 혼합된 시료 15가 현저히 향상된 함염증 효과를 제공함을 알 수 있다. 이는, 추출물별로 포함된 항염증 효과를 제공하는 화합물이 다른데 시료 15의 경우 각 화합물이 서로 시너지 효과를 발휘한 것으로 보인다.

2. NO 생성 억제 효능 평가

(1) 배양된 RAW 264.7 세포를 DMEM 배지를 이용하여 2x10⁵cells/ml로 조절한 후, 96 well plate에 접종 배양하고, 시료 용액 각각과 자극물질 LPS(1㎍/ml)를 함유한 새로운 배지를 동시에 처리하여 배양하였다. 시료 용액은 시료 8 내지 15를 각각 용매에 혼합하여 형성하였으며, 각 시료 용액의 최종농도 250㎍/ml로 하였다. 생성된 NO의 양은 그리즈(Griess) 시약을 이용하여 세포배양액 중에 존재하는 NO₂ ^-의 형태로 측정하였다. 세포배양 상등액 100μL와 그리즈 시약 100μL를 혼합하여 반응시킨 후, ELISA 리더를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 생성된 NO의 양은 sodium nitrite(NaNO₂)를 standard로 비교하여, 그 결과를 표 4에 나타내었다.

	무처리	시료 8	시료 9	시료 10	시료 11	시료 12	시료 13	시료 14	시료 15
NO 생산 (%)	100	76	81	75	77	75	71	73	65

(2) 표 4를 보면, 시료 8 내지 15가 NO의 생성을 억제하여 항염증 효과를 제공함을 확인할 수 있으며, 시료 10 내지 12가 혼합된 시료 15가 현저히 향상된 함염증 효과를 제공함을 알 수 있다.

<실시예 7> 피부 자극 여부 평가

1. 시험 참가자(나이는 평균 40.2세임(20대 13%, 30대 20%, 40대 57%, 50대 10%로 이루어짐)) 총 30명을 대상으로 하여, 테스트 부위(등)을 세척하고 건조한 후 22℃, 습도 50%에서 30분 동안 유지한 후, 70% 에탄올로 세척하고 건조하고 시료 용액 50μL(시료 1과 15를 1:1의 중량비로 혼합하여 최종농도가 500μg/mL가 되도록 함)를 바르고 패치를 고정하였다. 24시간이 지난 후 패치를 제거하고 24hr, 48hr이 지난 후 피부 반응을 관찰하여 그 결과를 표 5에 나타내었다. 피부 반응은 International Contact Dermatitis Research Groupm의 기준에 따라 평가하였다.

2. 표 2에서 확인할 수 있는 바와 같이, 시료 용액이 도포된 피부에서 erythema, burning, pruritus 등과 같은 부작용이 발생하지 않았다. 따라서, 상기 시료들은 피부 자극을 발생시키지 않아 화장료를 구성하는 물질로 사용될 수 있음을 알 수 있다.

	48h				72h
	1+	2+	3+	4+	1+	2+	3+	4+
control	-	-	-	-	-	-	-	-
시료 용액	-	-	-	-	-	-	-	-
- No reaction

이상에서, 출원인은 본 발명의 다양한 실시예들을 설명하였지만, 이와 같은 실시예들은 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 일 실시예일 뿐이며, 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 한 어떠한 변경예 또는 수정예도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

쪽을 누룩으로 발효시켜 얻은 쪽 발효추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 쪽 발효추출물은
쪽꽃 80 내지 120중량부, 누룩 80 내지 120 중량부, 설탕 80 내지 120중량부 및 물 800 내지 1000중량부를 혼합하고 35 내지 39℃의 온도에서 4 내지 6일간 정치하여 발효물을 얻고, 상기 발효물 100중량부당 95% 에탄올 150 내지 200중량부를 가하고 상온에서 20 내지 28시간 동안 교반하여 추출물을 얻고, 상기 추출물을 여과 후 농축하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 화장료 조성물은
항산화, 미백 및 주름 개선 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제3항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 항염증 효과를 제공하는 항염증추출물을 추가로 포함하며, 상기 항염증추출물은 감탕나무 추출물, 말발도리 추출물 및 백출 추출물이 1:1:1의 중량비로 혼합되어 사용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
쪽꽃 80 내지 120중량부, 누룩 80 내지 120 중량부, 설탕 80 내지 120중량부 및 물 800 내지 1000중량부를 혼합하고 35 내지 39℃의 온도에서 4 내지 6일간 정치하여 발효물을 얻는 발효단계와, 상기 발효물 100중량부당 95% 에탄올 150 내지 200중량부를 가하고 상온에서 20 내지 28시간 동안 교반하여 추출물을 얻는 추출단계와, 상기 추출물을 여과 후 농축하여 쪽 발효추출물을 얻는 여과농축단계를 포함하며,
상기 쪽 발효추출물은 화장료 조성물에 이용되게 되며, 향상된 항산화, 주름 개선 및 미백 효과를 제공하는 것을 특징으로 하는 누룩을 이용한 쪽 발효방법.