KR20190014764A - 오스문다락톤 및/또는 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤을 포함하는 항염증용 조성물 - Google Patents
오스문다락톤 및/또는 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤을 포함하는 항염증용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20190014764A KR20190014764A KR1020170098641A KR20170098641A KR20190014764A KR 20190014764 A KR20190014764 A KR 20190014764A KR 1020170098641 A KR1020170098641 A KR 1020170098641A KR 20170098641 A KR20170098641 A KR 20170098641A KR 20190014764 A KR20190014764 A KR 20190014764A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- compound
- present
- compounds
- dihydroxy
- caprolactone
- Prior art date
Links
- QNAMQKGNYCQHCI-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-5-(1-hydroxyethyl)oxolan-2-one Chemical compound CC(O)C1OC(=O)CC1O QNAMQKGNYCQHCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- TVDPVFPVOHCHQM-UHFFFAOYSA-N osmundalactone Natural products CC1OC(=O)C=CC1O TVDPVFPVOHCHQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title abstract description 51
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title abstract description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 38
- TVDPVFPVOHCHQM-UHNVWZDZSA-N (2r,3s)-3-hydroxy-2-methyl-2,3-dihydropyran-6-one Chemical compound C[C@H]1OC(=O)C=C[C@@H]1O TVDPVFPVOHCHQM-UHNVWZDZSA-N 0.000 claims abstract description 35
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims abstract description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 11
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 75
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 abstract 1
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 46
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 45
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 45
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 30
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 29
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 24
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 18
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 17
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 17
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 14
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 13
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 description 13
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 description 13
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 13
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- -1 alkali metal salt Chemical class 0.000 description 12
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 11
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 11
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 10
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 9
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 8
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 7
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 7
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 5
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 5
- 108010052419 NF-KappaB Inhibitor alpha Proteins 0.000 description 5
- 102000018745 NF-KappaB Inhibitor alpha Human genes 0.000 description 5
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 5
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 5
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000019189 interleukin-1 beta production Effects 0.000 description 5
- 230000017306 interleukin-6 production Effects 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- YQUVCSBJEUQKSH-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 YQUVCSBJEUQKSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000294180 Osmunda japonica Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical group C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 3
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 3
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 3
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- XPCTZQVDEJYUGT-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-2-methyl-4-pyrone Chemical compound CC=1OC=CC(=O)C=1O XPCTZQVDEJYUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZOPXYPPFZYEHT-UHFFFAOYSA-N Osmundalin Chemical compound CC1OC(=O)C=CC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 KZOPXYPPFZYEHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CUFLZUDASVUNOE-UHFFFAOYSA-N Protocatechuic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 CUFLZUDASVUNOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000012223 aqueous fraction Substances 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 239000000305 astragalus gummifer gum Substances 0.000 description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 2
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 2
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CNBGNNVCVSKAQZ-UHFFFAOYSA-N benzydamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(OCCCN(C)C)=NN1CC1=CC=CC=C1 CNBGNNVCVSKAQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N benzyl benzoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 239000002044 hexane fraction Substances 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229910052751 metal Chemical class 0.000 description 2
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- BYSRPHRKESMCPO-UHFFFAOYSA-N (2R,2'S,2R,3R,3'S,3S,4R,4'R)-3,3',4',5,7-Pentahydroxyflavan(2‘Â∆7,4‘Â∆8)-3,3',4',5,7-pentahydroxyflavan(4‘Â∆8)-3,3',4',5,7-pentahydroxyflavan Natural products C=12OC(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)CC2=C(O)C=C(O)C=1C1C(O)C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC(C=2C(C3O)C4=C(O)C=C(O)C=C4O4)=C1C(O)=CC=2OC34C1=CC=C(O)C(O)=C1 BYSRPHRKESMCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M (E)-Ferulic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C([O-])=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229940058015 1,3-butylene glycol Drugs 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNWHHMBRJJOGFJ-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecan-1-ol Chemical class CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCO WNWHHMBRJJOGFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000972 4,5-dimethylthiazol-2-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C1=C(N=C(*)S1)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- XYTYGFDMAMIXOO-UHFFFAOYSA-N 4-(tetrazol-2-yl)benzenesulfonic acid Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C1N1N=NC=N1 XYTYGFDMAMIXOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRQAODSINXAOBF-UHFFFAOYSA-N 6-O-(2-methylbutyryl-beta-D-glucopyranoside)-1-O-E-p-coumarate Natural products OC1Cc2c(O)cc(O)c(C3C(O)C(Oc4c3c(O)cc5OC6(Oc7c(C8C(O)C(Oc9cc(O)cc(O)c89)c%10ccc(O)c(O)c%10)c(O)cc(O)c7C(C6O)c45)c%11ccc(O)c(O)c%11)c%12ccc(O)c(O)c%12)c2OC1c%13ccc(O)c(O)c%13 QRQAODSINXAOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 101150071146 COX2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100114534 Caenorhabditis elegans ctc-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 238000011891 EIA kit Methods 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 231100000070 MTS assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000719 MTS assay Methods 0.000 description 1
- HYMLWHLQFGRFIY-UHFFFAOYSA-N Maltol Natural products CC1OC=CC(=O)C1=O HYMLWHLQFGRFIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- MZNYWPRCVDMOJG-UHFFFAOYSA-N N-(1-naphthyl)ethylenediamine dihydrochloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].C1=CC=C2C([NH2+]CC[NH3+])=CC=CC2=C1 MZNYWPRCVDMOJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150000187 PTGS2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N Sulfobutanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC(C(O)=O)S(O)(=O)=O ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 101150042711 adc2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 229960000333 benzydamine Drugs 0.000 description 1
- 229960002903 benzyl benzoate Drugs 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229960002537 betamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N betamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N bromic acid Chemical compound OBr(=O)=O SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 1
- 235000019437 butane-1,3-diol Nutrition 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000005827 chlorofluoro hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- BYSRPHRKESMCPO-LQNPQWRQSA-N cinnamtannin B-1 Chemical compound C1([C@]23OC=4C=C(O)C5=C(C=4[C@H]([C@H]2O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O3)O[C@@H]([C@H](O)[C@H]5C=2C(O)=CC(O)=C3C[C@H]([C@H](OC3=2)C=2C=C(O)C(O)=CC=2)O)C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=CC=C(O)C(O)=C1 BYSRPHRKESMCPO-LQNPQWRQSA-N 0.000 description 1
- SMAJFDDDFPFRSE-UHFFFAOYSA-N cinnamtannin B-1 Natural products OC1Cc2c(O)cc(O)c(C3C(O)C(Oc4c3c(O)cc5OC6(OC7C=C(O)C=C(O)C7C(C6O)c45)c8ccc(O)c(O)c8)c9ccc(O)c(O)c9)c2OC1c%10ccc(O)c(O)c%10 SMAJFDDDFPFRSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N ferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001785 ferulic acid Nutrition 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 description 1
- 229940114124 ferulic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960004369 flufenamic acid Drugs 0.000 description 1
- LPEPZBJOKDYZAD-UHFFFAOYSA-N flufenamic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 LPEPZBJOKDYZAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000000451 gelidium spp. gum Substances 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010842 high-capacity cDNA reverse transcription kit Methods 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- MTNDZQHUAFNZQY-UHFFFAOYSA-N imidazoline Chemical class C1CN=CN1 MTNDZQHUAFNZQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N isethionic acid Chemical compound OCCS(O)(=O)=O SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940043353 maltol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N monoethyl carbonate Chemical compound CCOC(O)=O CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N n-butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N n-pentane Natural products CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 1
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229940071089 sarcosinate Drugs 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- ZUFONQSOSYEWCN-UHFFFAOYSA-M sodium;2-(methylamino)acetate Chemical compound [Na+].CNCC([O-])=O ZUFONQSOSYEWCN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical compound NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N trans-isoferulic acid Natural products COC1=CC=C(C=CC(O)=O)C=C1O QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
- A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Birds (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
본 발명은 오스문다락톤(osmundalactone), 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-dihydroxy-γ-caprolactone), 또는 이들 화합물의 염을 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물에 관한 것으로, 상기 화합물은 세포 독성이 없고 염증을 예방, 치료 또는 개선하는 효과가 우수하므로 항염증용 의약품, 화장품, 또는 식품에 유용하게 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 또는 이들의 염을 포함하는 항염증용 조성물에 관한 것이다.
최근 경제 발전에 따른 의료기술의 발달 및 평균수명의 연장으로 고령자 비율이 계속하여 증가하고 있으며, 환경오염 및 스트레스 증가에 따른 면역계 이상으로 염증반응의 만성화가 진행되어 아토피, 천식 등의 만성 염증성 질환이 증가하고 있는 추세이다(Chang et al., 1994, Korean J. Gastroentrol., 26:907-918.; Heinzemann and Daser, 2002, Int. Arch. Allergy Immunol. 127:170-180.; Song et al., 1998, Korean J. Intern. Med., 55:158-168.; Sung et al., 2012, J. Ethnopharmacol. 144:94-100.).
일반적으로 염증반응은 세균감염과 같은 외부자극이나 생체 내 대사산물과 같은 내부자극에 대한 생체조직의 방어기전으로 세포 내 다양한 염증조절인자들인 종양괴사인자-α(TNF-α), 인터루킨-1β(IL-1β), 인터루킨-6(IL-6) 등과 같은 여러 사이토카인(cytokine) 및 산화질소(nitric oxide, NO)가 생성된다. 또한, 내독소로 알려진 지질다당체(LPS, lipopolysaccharide)는 그람 음성균의 세포 외막에 존재하여, 대식세포 또는 단핵세포에서 세포내 전사요소인 핵 인자-κB(NF-κB, nuclear facter-κB)의 활성화를 유도하여 염증성 사이토카인, 유동성 산화질소 신타아제(iNOS, inducible nitric oxide synthase), 사이클로옥시게나아제-2(COX-2, cyclooxygenase-2)의 유전자 발현을 유도하며, 염증 매개물질을 생성한다. 따라서, 염증반응의 조절을 위하여 iNOS, COX-2, 또는 NF-κB의 발현, 및 사이토카인과 산화질소의 분비 조절은 염증반응의 핵심요소로 인식되고 있으며, 이와 같은 인자들의 활성을 조절하는 물질이 염증질환의 예방 및 치료제로서 주목받고 있다(Kim et al., 2013b, J. Korean Med. Ophthalmol. Otolaryngol. Dermatol., 26:54-64.)
한편, 염증을 소실시키기 위해 염증원의 제거, 생체 반응 및 증상을 감소시키는 작용을 하는 것을 항염제라 한다. 현재까지 항염의 목적으로 이용되고 있는 물질로는 비스테로이드 계통인 플루페나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin) 등; 스테로이드 계통으로 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손(dexamethasone), 하이드로코티손(hydrocortisone), 베타메타손(betamethasone) 등이 있으나, 이들 물질은 간 손상, 암, 뇌졸중과 같은 여러 심각한 부작용을 초래하여 사용 시 제한되고 있다.
이에 본 발명자는 생체에 안전하고, 유효성분이 안정하며, 종래 의약품에 비해 장기간 섭취가 용이한 장점을 가지고 있는 천연물로부터 유래한 염증성 질환의 치료제를 개발하고자 예의 노력한 결과, 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 하나의 목적은 오스문다락톤(osmundalactone), 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone), 또는 이들의 염을 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 상기 조성물을 포함하는 염증의 예방, 치료 또는 개선용 약학적, 화장료, 또는 식품 조성물을 제공하는데 있다.
하나의 양태로서, 본 발명은 오스문다락톤(osmundalactone), 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone), 또는 이들의 염을 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "항염증"은 염증을 예방 또는 치료하는 것을 의미한다. 여기서, 상기 염증은 외부 감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발 물질 등)의 침입에 의하여 유발되는 질환을 말하며, 상기 질환으로는 아토피성 피부염, 알러지성 피부염, 염증성 장질환, 위궤양, 또는 천식 등이 있으나, 이에 특별히 제한되지는 않는다.
본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은 질환 또는 질병을 보유하고 있다고 진단된 적은 없으나, 이러한 질환 또는 질병에 걸리기 쉬운 경향이 있는 개체에서 질환 또는 질병의 발생을 억제하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "치료"는 개체에서 (a) 질환 또는 질병의 발전의 억제 (b) 질환 또는 질병의 경감 및 (c) 질환 또는 질환의 제거를 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "개선"은 개체에서 질환 또는 질병의 증세가 호전되는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "개체"는 본 발명의 상기 조성물을 투여하여 증상이 호전될 수 있는 질환을 가진 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 돼지, 양, 개, 고양이, 래트, 마우스, 침팬지 등의 포유동물을 의미한다.
본 발명의 조성물의 유효성분인 오스문다락톤(osmundalactone)은 하기 화학식 1의 구조를 갖고, 분자식(molecular formula)은 C6H8O3이며, 분자량(molecular weight)은 128.126인 화합물이다. 이에 대한 1H-NMR과 13C-NMR spectrum은 도 4 및 5에 나타내었다. 이하에서는, 화학식 1의 오스문다락톤(osmundalactone)을 화합물 1이라 편의상 칭한다.
[화학식 1]
본 발명의 조성물의 유효성분인 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone)은 하기 화학식 2의 구조를 갖는 화합물이며, 이에 대한 1H-NMR과 13C-NMR spectrum은 도 6 및 7에 나타내었다. 이하에서는, 화학식 2의 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone)을 화합물 2라 편의상 칭한다.
[화학식 2]
상기 오스문다락톤(osmundalactone) 및 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone)은 지금까지 항염증 효능에 대하여 알려진 바가 없다.
본 발명에 있어서, 상기 오스문다락톤(osmundalactone)의 염 및 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone)의 염은 약학적, 화장학적, 또는 식품학적으로 허용되는 염의 형태일 수 있다. 그와 같은 염으로는 약학적, 화장학적, 또는 식품학적으로 허용되는 유리산(free acid)에 의해 형성되는 산부가염 또는 염기에 의해 형성되는 금속염이 유용하다. 예를 들어, 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있다. 무기산으로는 염산, 황산, 브롬산, 아황산 또는 인산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 말레인산, 후마산, 글루콘산, 메탄술폰 산 등을 사용할 수 있다. 또한, 금속염으로는 알칼리 금속염, 알칼리 토금속염, 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 사용할 수 있다. 그러나 특별히 이로 제한되지는 않는다.
본 발명에 있어서, 상기 오스문다락톤(osmundalactone), 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone), 및 이들 화합물의 염은 화학적으로 합성된 것이거나 식물 추출물로부터 분리된 것일 수 있다. 상기 식물은 반드시 이로 제한되는 것은 아니지만 고비(Osmunda japonica) 일 수 있다.
상기 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염을 고비(Osmunda japonica)로부터 분리하는 경우, 당업계에 공지된 통상의 방법을 이용하여 고비의 전초, 잎, 뿌리, 줄기, 및 꽃으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 부위, 바람직하게는 줄기 및 뿌리, 보다 바람직하게는 뿌리로부터 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염을 을 추출 및 분리할 수 있다.
구체적으로, 상기 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염은 당업계에서 통상적으로 사용되는 추출용매를 사용하여 추출 및 분리할 수 있는데, 추출용매는 예를 들어, (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름 또는 (g) 1,3-부틸렌글리콜을 사용할 수 있다. 바람직하게는 물 또는 저급 알코올, 보다 바람직하게는 물 또는 에탄올을 사용하는 것이 좋다. 한편, 본 발명의 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.
또한, 상기 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염은 상기 추출용매에 의하여 추출하는 방법 이외에 통상적인 분리 및 정제과정을 거쳐서도 수득할 수 있다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제방법을 통해 얻어진 분획을 통하여서도 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염을 수득할 수 있다.
하나의 구체적 예로, 본 발명의 상기 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염은 당업계에 통상적으로 사용되는 추출용매를 이용하여 고비 추출물을 제조한 다음, 상기 고비 추출물을 물에 현탁하고, 헥산으로 분배하여 헥산 분획물 및 물 분획물을 용출하였다. 상기 물 분획물을 컬럼 크로마토그래피법을 이용 이동상으로 물(water): 아세토니트릴(acetonitril)의 용매조건으로 반복 진행하여 분리 한 후 최종적으로 prep-HPLC를 이용하여 순수한 화합물을 얻을 수 있다. (도 2 참조).
본 발명의 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염은 외부 감염원이 침입된 세포 내 일산화질소(NO), 프로스타글란딘 E2(PGE2), 및 TNF-α, IL-6, IL-1β 등의 사이토카인의 생성을 억제하며, COX-2 및 iNOS 등의 염증 관련 단백질의 발현을 저해하는 효과를 나타낸다.
따라서, 본 발명의 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염을 유효성분으로 포함하는 조성물은 염증을 예방 또는 치료하기 위한 용도로 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물에 유효성분으로 포함되는 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염은 전체 조성물의 총 중량을 기준으로 0.001 내지 50 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 30 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%의 함량으로 포함될 수 있다. 상기 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염의 함량이 0.001 중량% 미만일 경우 항염증 효과가 미약하고, 50 중량%를 초과하는 경우 함량 증가에 따른 효과 증가가 비례적이지 않아 비효율적일 수 있으며, 제형상의 안정성이 확보되지 않는 문제가 있다.
본 발명의 하나의 구체적 용도로서, 본 발명의 조성물은 염증을 예방 또는 치료하기 위한 약학적 조성물로 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물이 약학적 조성물로 사용되는 경우, 유효성분으로서 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 약학적으로 허용가능한 염 이외에 약학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 탄수화물류 화합물(예: 락토스, 아밀로스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 셀룰로스 등), 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 염 용액, 알코올, 아라비아 고무, 식물성 기름(예: 옥수수 기름, 목화 종자유, 두유, 올리브유, 코코넛유), 폴리에틸렌 글리콜, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시 벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
상기 약학적 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽제, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액 등의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 염증을 예방 또는 치료할 수 있는데, 치료방법은 상기 약학적 조성물을 약학적 유효량으로 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물 내에 다양한 경로로 투여하는 것을 포함한다. 상기 투여방법은 모든 방식으로 이루어질 수 있는데, 예를 들어, 경구, 직장 또는 정맥 내 주입, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여 또는 도포에 의한 국부 투여 등으로 투여될 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태 등의 요인에 따라 달라질 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 성인 기준으로 0.001-100 ㎎/kg 범위 내이다. 다만, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
본 발명의 다른 하나의 구체적 용도로서, 본 발명의 조성물은 염증을 예방 또는 개선하기 위한 화장료 조성물로 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 사용되는 경우, 유효성분으로서 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 화장학적으로 허용가능한 염 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 추가적으로 포함할 수 있다. 예컨대, 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 항료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림 등의 제형으로 제조될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트검, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 가용화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 검 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 다른 하나의 구체적 용도로서, 본 발명의 조성물은 염증을 예방 또는 개선하기 위한 식품 조성물로 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물이 식품 조성물로 사용되는 경우, 유효성분으로서 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 식품학적으로 허용가능한 염 이외에 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 추가로 포함할 수 있다.
상기 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)] 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한이 없다. 본 발명의 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 식품학적으로 허용가능한 염을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 식품학적으로 허용가능한 염 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 상술한 성분 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일쥬스, 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
한편, 본 발명의 구체적 실시예에서 오스문다락톤 및 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤에 대한 세포독성 실험을 실시한 결과, 세포독성이 없는 무해한 물질임이 확인되었다. 따라서, 본 발명의 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 식품학적으로 허용가능한 염은 독성이 거의 없어 장기간 사용시에도 안심하고 사용할 수 있으며, 특히 상기한 바와 같은 약학적, 화장료, 또는 식품 조성물에 안전하게 사용할 수 있다.
본 발명의 오스문다락톤, 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤, 및 이들 화합물의 염은 외부 감염원이 침입된 세포 내 일산화질소(NO), 프로스타글란딘 E2(PGE2), 및 TNF-α, IL-6, IL-1β 등의 사이토카인의 생성을 억제하며, COX-2 및 iNOS 등의 염증 관련 단백질의 발현을 저해하는 항염증 효과를 가지며 세포독성이 거의 없으므로, 염증을 예방 또는 치료하기 위한 약학적, 화장료, 또는 식품 조성물에 안전하게 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 물 추출물 및 고비 에탄올 추출물의 제조 공정을 나타낸 그림이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 화합물 1 내지 4를 분리하는 공정을 나타낸 그림이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 화합물 5 내지 11을 분리하는 공정을 나타낸 그림이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 1의 1H-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 1의 13C-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 2의 1H-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 2의 13C-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 물 추출물(OJT-W)의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 에탄올 추출물(OJT-E)의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 10은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 11은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 12는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 물 추출물(OJT-W)의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 13은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 에탄올 추출물(OJT-E)의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 14는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 15는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 16은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 PGE2 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 17은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 PGE2 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 18은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 COX-2 및 iNOS 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 19는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 COX-2 및 iNOS 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 20은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 TNF-α 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 21은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 TNF-α 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 22는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 TNF-α 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 23은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 TNF-α 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 24는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-6 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 25는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-6 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 26은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-6 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 27은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-6 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 28은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-1β 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 29는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-1β 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 30은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-1β 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 31은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-1β 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 32는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 Iκ-Bα 및 MAP Kinase 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 33은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 Iκ-Bα 및 MAP Kinase 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 화합물 1 내지 4를 분리하는 공정을 나타낸 그림이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 화합물 5 내지 11을 분리하는 공정을 나타낸 그림이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 1의 1H-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 1의 13C-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 2의 1H-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비로부터 분리된 화합물 2의 13C-NMR 스펙트럼을 나타낸 그림이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 물 추출물(OJT-W)의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 에탄올 추출물(OJT-E)의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 10은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 11은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별 세포독성을 관찰한 그림이다.
도 12는 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 물 추출물(OJT-W)의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 13은 본 발명의 일 실시예에 따른 고비 에탄올 추출물(OJT-E)의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 14는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 15는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 LPS로 유도된 세포의 NO 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 16은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 PGE2 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 17은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 PGE2 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 18은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 COX-2 및 iNOS 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 19는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 COX-2 및 iNOS 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 20은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 TNF-α 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 21은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 TNF-α 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 22는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 TNF-α 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 23은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 TNF-α 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 24는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-6 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 25는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-6 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 26은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-6 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 27은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-6 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 28은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-1β 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 29는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포의 IL-1β 생성 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 30은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-1β 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 31은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 IL-1β 생성 억제 효과를 유전자 분석한 그림이다.
도 32는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 1의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 Iκ-Bα 및 MAP Kinase 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
도 33은 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물 2의 농도별로 LPS로 유도된 세포에서 Iκ-Bα 및 MAP Kinase 발현 억제 효과를 관찰한 그림이다.
이하, 실시예 등을 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예 등은 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예 등에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
시약
및 기기와
통계처리
생리활성과 관련된 세포실험에서는 Dulbecco's modified eagle medium(DMEM), Minimum Essential medium (MEM), FBS, Streptomycin, penicillin은 Gipco (USA)와 Gibco/BRL (Eggenstein, Germany), Lipopolysaccaride (LPS), dimethyl sulfoxide (DMSO)는 Sigma Chemical Co. (St. Lousi, MO, USA), 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (MTS, CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay), Griess reagent system은 Promega (Madison, USA), PGE2 ELISA kit 는 Enzo Life Sciences Co. (Farmingdale, NY, USA), TNF-α, IL-1β, IL-6의 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) Kit는 R&D systems (DuoSet® ELISA Development Systems, MN, USA), iNOS와 COX-2, I-κB, ERK, p38, JNK, GAPDH antibodies는 Cell Signaling Technology, Inc. (MA, USA), Endothelial cell medium (ECM) suppliment kit 시약들은 ScienCell Research Laboratories (CA, USA)의 제품을 사용하였다.
추출 및 분획용 시약, TLC 및 column용 시약 등은 특급시약을 사용하였다. Thin layer chromatography용 plate는 precoated silica gel 60 F254 plate (layer thickness 0.25 mm, 20×20 cm. Art. 5715, Merck)와 precoated RP-18 F254S plate (layer thickness 0.25 mm, 20×20 cm. Art. 5423, Merck)를 사용하였으며, UV의 검색은 254와 365 nm에 측정하였다. Column chromatography의 충진제는 YMC gel ODS-A (50 μm)를 사용하였다. 단일 화합물의 구조를 규명하기 위해 이용한 NMR spectrum은 Varian 600 spectrometer (1H: 500 MHz, 13C: 125 MHz)를 사용하여 측정하였고, NMR 용매는 Sigma. Inc (USA)의 CD3OD를 사용하였다. 일반성분 분석을 위한 건조기 (VS-1202D3, Jeiotech, Korea), 회화로 (MF-21G, Daehan, Korea), 초음파추출기 (UC-20, Branson, USA)이며, 확인시험에는 반자동박층크로마토그래프 (ATS4&ADC2, Camag, Swiss)를 사용하였다. 함량 분석은 X-bridge C18 column (5 ∬㎛, 250mm x 4.6 mm, Waters, USA)을 사용하여 Shimadzu HPLC system (20-AD, Dongil, Korea)으로 측정하였다.
모든 데이터의 결과는 마이크로소프트 오피스 엑셀 2010 프로그램을 통하여 통계처리 하여 mean ± standard deviation(S.D.)로 기록하였다. 실험군간의 유의성 검정은 Student's t-test를 통해 분석하였으며, p<0.05의 경우에서 통계적 유의성이 있는 것으로 간주하였다.
제조예
1: 고비 추출물의 제조
고비의 원시료는 전남 완도(34°21'30"N, 126°39'13"E)에서 자생 중인 고비를 2015년 6월 24일에 채취하였다. 음건한 고비 뿌리줄기 100 g을 증류수 1L에 넣고 150 분 동안 전탕한 후, 여과지(Whatman No. 2, Whatman, Maidstone, UK)로 여과하였다. 얻어진 여과액은 감압농축기(N-1100 series, EYELA, Tokyo, Japan)에서 농축하여 고비 물 추출물(Osmunda japonica Thunb. water extract, OJT-W) 11.9g을 얻었다. 또한 고비 에탄올 추출물을 얻기 위해 음건한 고비 뿌리줄기 100g을 70% 에탄올 5L를 가하여 70에서 3시간 동안 3회 반복 추출한 후, 250 mesh sieve와 filter paper(Whatman No. 2, Whatman, Maidstone, UK)로 여과하였고, 얻어진 여과액은 감압농축기(N-1100 series, EYELA, Tokyo, Japan)를 통해 감압농축하여 에탄올을 증발시킨 후 9.8g의 고비 에탄올 추출물(Osmunda japonica Thunb. ethanol extract, OJT-E)을 얻었다(도 1 참조).
고비의 물 및 에탄올 추출물을 증류수에 현탁시킨 후, 현탁액과 헥산을 1:1 비율로 분획 깔때기에 넣고 헥산층과 물층으로 분획하였으며, 분획된 헥산층을 다시 감압 농축하여 시료를 얻었다. 이상의 동일한 과정을 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트, 부탄올로 순차적으로 가하여 각각 분획물을 얻었고, 농축이 완료된 추출물은 동결건조기(Ilsin, Incheon, Korea)를 이용하여 건조 시료로 제조하였다.
이상의 70% 에탄올 및 100% 물 추출물은 세포배양액으로 희석하여 10 mg/ml 농도로 만들었고, 고비로부터 분리한 화합물은 분자량을 확인하여 DMSO 적당량에 녹인 다음 세포배양액으로 희석하여 10 mM이 되도록 조제하였다.
제조예
2: 고비 추출물로부터 화합물의 분리
건조된 고비 뿌리줄기(2 kg)를 100% MeOH로 3회 환류 추출 한 후 감압 농축하여 MeOH 추출물 137 g을 얻었다. 이를 다시 10% 증류수 800 ml에 현탁시킨 후, n-hexane (2.4 L×3)을 사용하여 용매분획을 한 뒤, n-hexane fraction (20 g), 나머지 H2O fraction (100 g)을 얻었다.
2-1. 화합물 1 내지 4의 분리
H2O 분획물 (100 g)을 H2O: ACN (1: 0, 5: 5) 두 용매 조성으로 ODS open column chromatography 법을 이용하여 2개의 중분획 (GBW 1, 2)으로 나누었다. GBW 1 중분획을 H2O: ACN (1:0 ~ 4:1) 용매 조성으로 ODS open column chromatography 법을 이용하여 10개의 소분획 (GBW1-1 ~ 10)으로 나누었다. 그 중 GBW 1-5 (7 g)을 다시 H2O: ACN (1:0 ~ 5:1) 용매 조성으로 ODS open column chromatography 법을 이용하여 4개의 소분획 (GBW1-5-0 ~ 3)으로 나누었다. GBW1-5-0 (2.9 g)을 23mL/min, 0~5 % ACN, 40 min, 240 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 1 (8 mg)과 2 (14 mg)를 분리하였다. GBW 1-5-1 (1.3 g)을 다시 Ethyl acetate: MeOH: H2O (2: 1: 0 ~ 2: 1: 0.2) 용매 조성으로 silica open column chromatography 법을 이용하여 4개의 소분획 (GBW1-5-1 ~ 4)으로 나누었다. GBW1-5-1-3 (800 mg)을 25mL/min, 3 % ACN (Isocratic), 35 min, 254 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 3 (520 mg)을 분리하였다. GBW1-7과 GBW1-8을 합친 소분획(100 mg)을 20mL/min, 8~11 % ACN, 35 min, 220 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 4 (10 mg)을 분리하였다(도 2 참조).
2-2. 화합물 5 내지 11의 분리
GBW 2 중분획을 H2O: ACN (1:0 ~ 5:1) 용매 조성으로 ODS open column chromatography 법을 이용하여 11개의 소분획 (GBW1-1 ~ 11)으로 나누었다. GBW2-1과 GBW2-2을 합친 소분획을 25mL/min, 5 % ACN (Isocratic), 40 min, 254 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 5 (758 mg)을 분리하였다. GBW2-3을 22mL/min, 10 % ACN (Isocratic), 40 min, 289 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 6 (11 mg)을 분리하였다. GBW2-4와 GBW2-5를 합쳐 CHCl3: MeOH (20:1 ~ 1:1) 용매 조성으로 silica open column chromatography 법을 이용하여 7개의 소분획 (GBW2-4,5-1 ~ 7)으로 나누었다. 그 중 GBW2-4,5-3 (560 mg)을 25mL/min, 8 % ACN (Isocratic), 40 min, 290 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 7 (10 mg), 8 (265 mg)을 분리하였다. GBW2-4,5-4 (250 mg)을 MeOH rexrystallization을 이용하여 화합물 9 (10 mg)을 분리하였다. GBW2-7을 25mL/min, 14 % ACN (Isocratic), 40 min, 277 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 10 (675 mg)을 분리하였다. GBW2-10을 21mL/min, 12~20 % ACN, 35 min, 260 nm 용매조건으로 prep-HPLC를 이용하여 화합물 11 (8 mg)을 분리하였다(도 3 참조).
2-3. 분리된 화합물의 구조동정
고비에서 분리한 11종의 화합물에 대한 분자량 측정은 LC/MS IT-TOF (Shimadzu, Japan) 장비를 사용하였으며 ion source로는 ESI source를 사용하였다. System controller는 CBM-20A, solvent delivery units은 LC-20ADXR, online degasser는 DGU-20A3, auto sampler는 SIL-20ACXR, UV Detector는 SPD-20을 사용하였고 자세한 분석조건은 <표 1>과 같으며, 단일 peak를 확인하고 UVD의 UV흡수곡선과 함께, MSn의 data를 바탕으로 분자량과 분자식을 유추하고, 최종적으로 1H-NMR과 13C-NMR spectrum data를 이용하여 최종 구조 결정하였다. 특히, 화합물 1 및 2에 대한 1H-NMR과 13C-NMR spectrum을 도 4 내지 도 7에 나타내었다.
Osmundalactone (화합물 1) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 6.91 (1H, dd, J = 10.0, 2.5 Hz, H-3), 5.94 (1H, dd, J = 9.5, 1.5 Hz, H-2), 4.31 (1H, m, H-5), 4.16 (1H, m, H-4), 1.44 (1H, d, J = 6.5 Hz, H-6); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 164.7 (C-1), 150.3 (C-3), 119.0 (C-2), 77.3 (C-5), 66.7 (C-4), 16.9 (C-6); LC ESI IT-TOF MS: m/z 127 [M-H] -.
3,5- Dihydroxy - γ - caprolactone (화합물 2) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 7.75 (1H, dd, J = 5.0, 2.0 Hz, H-3), 6.20 (1H, dd, J = 5.5, 2.0 Hz, H-2), 5.50 (1H, dt, J = 5.0, 2.0 Hz, H-4), 3.93 (1H, m, H-5), 1.25 (1H, d, J = 6.5 Hz, H-6); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 174.1 (C-1), 155.0 (C-3), 121.5 (C-2), 87.6 (C-4), 67.0 (C-5), 17.7 (C-6); LC ESI IT-TOF MS: m/z 127 [M-H] -.
Osmundalin (화합물 3) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 7.09 (1H, dd, J = 10.0, 2.5 Hz, H-3), 6.02 (1H, dd, J = 9.5, 1.5 Hz, H-2), 4.59 (1H, m, H-5), 4.50 (1H, m, H-4), 4.49 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-1'), 3.90 (1H, dd, J = 12.0, 5.5 Hz, H-6b), 3.68 (1H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz, H-6a), 1.47 (1H, d, J = 6.5 Hz, H-6); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 163.7 (C-1), 146.3 (C-3), 120.2 (C-2), 101.5 (C-1'), 77.9 (C-5), 76.8 (C-5'), 76.6 (C-3'), 73.5 (C-2'), 72.0 (C-4'), 70.1 (C-4), 61.4 (C-6'), 17.2 (C-6); LC ESI IT-TOF MS: m/z 289 [M-H] -.
Protocatechuic acid (화합물 4) - White amorphous powder; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 7.43 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 7.40 (1H, dd, J = 8.0, 2.0 Hz, H-6), 6.79 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 169.1 (C-7), 150.3 (C-4), 144.9 (C-3), 122.7 (C-6), 122.1 (C-1), 116.6 (C-2), 114.6 (C-5); LC ESI IT-TOF MS: m/z 153 [M-H] -.
Maltol - β -D- glucopyranoside (화합물 5) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 8.01 (1H, d, J = 6.0 Hz, H-6), 6.45 (1H, d, J = 5.5 Hz, H-5), 4.81 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-1'), 3.83 (1H, dd, J = 12.0, 5.5 Hz, H-6b), 3.67 (1H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz, H-6a), 2.47 (3H, s, H-7); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 175.8 (C-4), 163.2 (C-2), 155.7 (C-6), 142.2 (C-3), 115.9 (C-5), 104.0 (C-1'), 77.1 (C-5'), 76.6 (C-2'), 74.0 (C-3'), 69.7 (C-4'), 62.1 (C-6'), 14.4 (C-7); LC ESI IT-TOF MS: m/z 287 [M-H] -.
Caffeic aicd 3- O - β -D- glucopyranoside (화합물 6) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 7.43 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7), 7.12 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 7.10 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 7.06 (1H, dd, J = 8.5 , 1.5Hz, H-6), 6.31 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-8), 4.77 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-1'), 3.45 (1H, dd, J = 12.0, 5.5 Hz, H-6b), 3.44 (1H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz, H-6a); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 168.3 (C-9), 147.6 (C-3), 147.2 (C-4), 144.0 (C-7), 129.3 (C-1), 121.0 (C-6), 118.0 (C-8), 116.5 (C-2), 115.2 (C-5), 102.0 (C-1'), 77.7 (C-5'), 76.2 (C-3'), 73.7 (C-2'), 70.2 (C-4'), 61.7 (C-6'); LC ESI IT-TOF MS: m/z 341 [M-H] -.
Coumaric acid 4- O - β -D- glucopyranoside (화합물 7) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 7.60 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-3, 5), 7.51 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-2), 7.04 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-2, 6), 6.39 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-8), 4.91 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-1'); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 176.0 (C-9), 159.7 (C-4), 141.2 (C-7), 131.5 (C-1), 130.1 (C-2, 6), 124.5 (C-8), 118.0 (C-3, 5), 102.0 (C-1'), 78.1 (C-5'), 77.8 (C-3'), 74.8 (C-2'), 71.3 (C-4'), 62.4 (C-6'); LC ESI IT-TOF MS: m/z 325 [M-H] -.
Protocatechuic acid 3- O - β -D- glucopyranoside (화합물 8) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 7.37 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 7.35 (1H, dd, J = 8.0, 2.0 Hz, H-6), 7.10 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 4.90 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-1'), 3.60 (1H, dd, J = 12.0, 5.5 Hz, H-6b), 3.42 (1H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz, H-6a); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 167.4 (C-7), 149.3 (C-4), 146.6 (C-3), 125.3 (C-6), 121.7 (C-1), 117.0 (C-2), 115.4 (C-5), 101.0 (C-1'), 76.2 (C-5'), 75.8 (C-3'), 73.5 (C-2'), 72.0 (C-4'), 59.9 (C-6'); LC ESI IT-TOF MS: m/z 315 [M-H] -.
Ferulic acid 4- O - β -D- glucopyranoside (화합물 9) - Colorless gum; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δH 7.52 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7), 7.33 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 7.17 (1H, dd, J = 8.5, 1.5Hz, H-6), 7.08 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 6.45 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-8), 4.97 (1H, d, J = 7.5 Hz, H-1'), 3.81 (3H, s, 3-OCH3), 3.65 (1H, dd, J = 12.0, 5.5 Hz, H-6b), 3.44 (1H, dd, J = 12.0, 2.0 Hz, H-6a); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 168.3 (C-9), 149.5 (C-3), 148.8 (C-4), 144.4 (C-7), 128.6 (C-1), 122.7 (C-6), 117.7 (C-8), 111.6 (C-2), 115.4 (C-5), 100.1 (C-1'), 77.5 (C-5'), 77.3 (C-3'), 73.6 (C-2'), 70.0 (C-4'), 61.1 (C-6'), 56.2 (3-OCH3); LC ESI IT-TOF MS: m/z 355 [M-H] -.
Cinnamtannin B-1 (화합물 10) - Brown powder; 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δH 7.31 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-12'), 7.19 (1H, dd, J = 8.5, 2.0 Hz, H-16'), 7.03 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-12), 6.85 (1H, d, J = 1.5 Hz, H-15''), 6.83 (3H, m, H-16, 15', 12''), 6.75 (2H, m, H-15, 16''), 6.10 (1H, s, H-6''), 6.01 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-6), 5.97 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-8), 5.80 (1H, s, H-6'), 5.70 (1H, s, H-2'), 4.56 (1H, t, J = 1.5 Hz, H-4'), 4.39 (1H, s, H-2''), 4.15 (1H, d, J = 3.5 Hz, H-4), 4.12 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-3'), 3.86 (1H, dd, J = 4.0, 3.0 Hz, H-3''), 3.29 (1H, d, J = 3.5 Hz, H-3), 2.83 (2H, t, J = 4.0 Hz, H-4''); 13C NMR (125 MHz, CD3OD) δC 156.4 (C-7), 155.4 (C-9), 154.6 (C-7''), 154.4 (C-5', 5''), 154.2 (C-9''), 152.7 (C-5), 150.4 (C-9'), 149.7 (C-7'), 145.3 (C-14), 144.9 (C-14'), 144.5 (C-13'), 144.3 (C-13''), 144.1 (C-13), 143.9 (C-14''), 131.8 (C-11''), 131.1 (C-11), 130.4 (C-11'), 119.9 (C-16'), 118.5 (C-16), 118.0 (C-16''), 115.3 (C-15), 114.7 (C-12'), 114.6 (C-12), 114.3 (C-15', 15''), 114.1 (C-12''), 107.4 (C-8''), 105.3 (C-10'), 105.0 (C-8'), 103.5 (C-10), 98.6 (C-10''), 98.5 (C-2), 96.9 (C-8), 95.1 (C-6''), 95.0 (C-6), 94.6 (C-6'), 78.9 (C-2''), 77.5 (C-2'), 71.2 (C-3'), 66.1 (C-3''), 65.8 (C-3), 36.9 (C-4'), 28.5 (C-4''), 27.5 (C-4); LC ESI IT-TOF MS: m/z 863 [M-H]-.
Protocatechuic acid methyl ester (화합물 11) - Colorless oil; 1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δH 7.43 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-6), 7.41 (1H, dd, J = 8.5, 2.0 Hz, H-2), 6.81 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-5), 3.84 (3H, s, 7-OCH3); 13C-NMR (125 MHz, CD3OD): δC 167.6 (C-7), 150.5 (C-3), 145.0 (C-4), 122.4 (C-1), 121.4 (C-6), 116.2 (C-2), 114.6 (C-5), 51.0 (7-OCH3); LC ESI IT-TOF MS: m/z 167 [M-H] -.
실시예
1: 세포배양 및
MTT
분석
고비 추출물 및 이로부터 분리된 화합물의 세포독성을 관찰하기 위하여 MTS 분석법을 이용하여 대식세포(RAW 264.7) 내에서 세포생존율을 측정하였다.
구체적으로, 한국세포주은행 (KCLB, Seoul, Korea)으로부터 분양 받은 마우스 대식세포(RAW 264.7)를 10% FBS, 1% antibiotic이 포함된 DMEM 배지를 사용하여 37와 5% CO2 조건에서 배양하였다. 이들 세포들을 96 well plate에 3 × 105 cells/well로 분주하였고 10% FBS DMEM 조건에서 고비 추출물은 1 ml 당 62.5, 125, 250, 500, 1,000 ㎍ 농도별로, 고비로부터 분리된 화합물은 6.25, 12.5, 25, 50, 100 μM 의 농도별 24시간 처리하였다. 그 후의 RAW 264.7 cell 배양액 용량의 10%의 MTS 용해액을 첨가한 다음 37에서 2 시간 배양한 후 ELISA microplate reader(Infinite 200 pro, TECAN, Grodig, Austria)를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이에 대한 결과를 도 8 내지 11에 나타내었다.
먼저, 고비 물 추출물(OJT-W)을 처리한 실험군에서는 62.5, 125, 250, 500, 1000 μg/ml의 농도에 따라 각각 102.3 ± 7.2%, 93.1 ± 1.4%, 86.4 ± 5.9%, 86.1 ± 5.1%, 68.4 ± 5.4%의 생존율을 보여(도 8 참조), 500 μg/ml 이상의 농도에서 세포 생존율이 유의미하게 감소하여 약한 독성이 확인되었다(p<0.05). 또한 고비 에탄올 추출물(OJT-E)을 처리한 실험군에서는 각각 103.4 ± 2.3%, 101.3 ± 2.1%, 103.6 ± 0.7%, 106.1 ± 3.8%, 107.8 ± 3.6%의 생존율을 보여 세포독성이 관찰되지 않았다(도 9 참조).
그리고, 화합물 1 (Osmundalactone)을 6.25, 12.5, 25, 50, 100 μM의 농도로 처리하였을 때, 각각 99.60 ± 1.95%, 98.85 ± 1.09%, 97.98 ± 1.60%, 96.74 ± 0.97%, 95.94 ± 0.96%의 생존율을 보여, 세포독성이 거의 관찰되지 않았다(도 10 참조).
마찬가지로 화합물 2 (3,5-Dihydroxy-γ-caprolactone)를 6.25, 12.5, 25, 50, 100 μM의 농도로 처리하였을 때, 각각 99.45 ± 1.94%, 98.45 ± 1.05%, 98.14 ± 1.23%, 98.04 ± 1.41%, 97.49 ± 0.47%의 생존율을 보여, 세포독성이 거의 관찰되지 않았다(도 11 참조).
실시예
2: Nitric Oxide (NO) 측정
고비 추출물 및 이로부터 분리된 화합물의 항염효과를 관찰하기 위하여 RAW 264.7 세포 내에서 LPS에 의해 유도된 NO 생성량을 측정하였다.
구체적으로, NO scavenging 법을 사용하여 NO값을 정량 하였다. RAW 264.7을 96 well plate에 1×105 cells/well로 분주하고, 고비 추출물은 62.5, 125, 250 μg/ml 농도로 처리 하였으며, 고비로부터 분리된 화합물들을 12.5, 25, 50, 100, 200 μM 농도로 처리 하였다. 이후 LPS 를 500 ng/ml 농도로 처리한 후 16시간 37와 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양이 끝나고 배지만 회수하여 50 μl씩 96 well plate에 분주하고, 50 μl의 Griess Reagent (50 μl Sulfonylamide + 50 μl Naphthyl-ethylenediamine dihydrochloride)를 ELISA microplate reader를 이용하여 540 nm 에서 흡광도를 측정하였다. NO의 정량 단위는 μM로 NaNO3의 표준곡선에 비교하여 NO를 정량화 하였다.
고비 물 추출물을 처리한 실험군에서 정상군은 0.3 ± 0.2 uM로 나타났으며, 대조군은 15.5 ± 1.9 uM로 나타났다. 62.5, 125, 250 μg/ml의 농도로 처리한 고비 물 추출물의 실험군에서는 각각 14.9 ± 2.2 uM, 14.1 ± 0.9 uM, 10.5 ± 0.5 uM로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 NO 생성이 감소하였음을 확인하였며(도 12 참조), 250 ug/ml에서 NO 생성이 유의미하게 억제되었다(p<0.05).
또한 고비 에탄올 추출물을 처리한 실험군에서 정상군은 10.9 ± 0.9 uM로 나타났으며, 대조군은 9.2 ± 1.3 uM로 나타났다. 62.5, 125, 250 μg/ml의 농도로 처리한 고비 에탄올 추출물의 실험군에서는 각각 9.1 ± 1.6 uM, 8.4 ± 1.0 uM, 6.8 ± 0.4 uM로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 NO 생성이 감소하였음을 확인하였으며(도 13 참조), 62.5 ug/ml에서부터 농도 의존적으로 NO 생성이 유의미하게 억제되었다(p<0.05).
그리고, 고비로부터 분리된 화합물 1 내지 11 중 화합물 1과 2만이 유의미적인 NO 생성 억제 효과를 나타내었으며, 나머지 화합물 3 내지 11은 NO 생성량의 감소가 거의 나타나지 않았다(표 2 참조).
구체적으로, 고비로부터 분리한 화합물 1을 12.5, 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군에서는 각각 7.5 ± 0.1 uM, 5.6 ± 0.1 uM, 4.6 ± 0.1 uM, 3.9 ± 0.1 uM, 3.3 ± 0.2 uM로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 12.5uM부터 농도 의존적으로 NO 생성이 감소하였음을 확인하였다(P< 0.05) (도 14 참조).
또한 고비로부터 분리한 화합물 2을 12.5, 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군에서는 각각 8.4 ± 0.1 uM, 8.0 ± 0.3 uM, 6.9 ± 0.2 uM, 5.0 ± 0.1 uM, 3.3 ± 0.2 uM로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 12.5uM부터 농도 의존적으로 NO 생성이 유의미적으로 감소하였음을 확인하였다(P< 0.05) (도 15 참조).
따라서, 이하 실험에서는 고비로부터 분리한 11개의 화합물 중 NO 생성의 억제효과를 나타낸 화합물 1과 2를 바탕으로 추가적인 항염효과 실험을 진행하였다.
Parameter | - | Compounds | ||||
Dose (uM) | - | 12.5 | 25 | 50 | 100 | 250 |
Control | 0.3 ± 0.1 | - | - | - | - | - |
LPS | 11.0 ± 0.2 | - | - | - | - | - |
1 | - | 7.5 ± 0.1* | 5.6 ± 0.1* | 4.6 ± 0.1* | 3.9 ± 0.1* | 3.3 ± 0.2* |
2 | - | 8.4 ± 0.1* | 8.0 ± 0.3* | 6.9 ± 0.2* | 5.0 ± 0.1* | 3.3 ± 0.2* |
3 | - | 11.5 ± 0.8 | 11.5 ± 0.6 | 11.3 ± 0.5 | 11.3 ± 0.4 | 11.2 ± 0.2 |
4 | - | 11.5 ± 0.7 | 11.2 ± 0.4 | 11.0 ± 0.1 | 10.9 ± 0.1 | 10.8 ± 0.1 |
5 | - | 11.6 ± 0.1 | 11.5 ± 0.2 | 11.4 ± 0.1 | 11.3 ± 0.1 | 11.3 ± 0.1 |
6 | - | 11.5 ± 0.6 | 11.5 ± 0.6 | 11.4 ± 0.5 | 11.3 ± 0.4 | 11.3 ± 0.4 |
7 | - | 11.5 ± 0.5 | 11.2 ± 0.5 | 10.9 ± 0.4 | 10.8 ± 0.1 | 10.8 ± 0.2 |
8 | - | 11.4 ± 0.6 | 11.3 ± 0.5 | 11.3 ± 0.3 | 11.2 ± 0.3 | 11.1 ± 0.2 |
9 | - | 12.0 ± 0.7 | 11.9 ± 0.6 | 11.5 ± 0.6 | 11.3 ± 0.4 | 10.1 ± 0.2 |
10 | - | 12.5 ± 0.6 | 12.4 ± 0.4 | 12.3 ± 0.3 | 11.4 ± 0.2 | 11.1 ± 0.2 |
11 | - | 11.2 ± 0.7 | 11.0 ± 0.7 | 10.7 ± 0.6 | 10.6 ± 0.5 | 10.6 ± 0.5 |
* Significantly different from LPS at P < 0.05. |
실시예
3: 화합물 1 및 2의 Prostaglandin E
2
생성 억제 효과
RAW 264.7 cell을 6 well plate에 5×105 cells/ml로 분주하고, 24시간 후에 대조군을 제외한 실험군에 화합물 1과 2를 1시간 동안 각각 25, 50, 100, 200 μM의 농도로 처리한 후, LPS (500 ng/ml)와 함께 화합물을 농도별로 18시간 동안 처리해주었다. Prostaglandin E2 (PGE2)의 양은 Prostaglandin E2 EIA kit (R&D systems, MN, USA)를 이용하여 450 nm에서 측정하였으며(BioTek, ELx 808), 방법은 제품 회사에서 제시한 방법을 참고하였다.
그 결과, 화합물 1과 2를 처리한 실험군의 LPS만 처리한 군 모두 PGE2의 생성량이 모두 뚜렷하게 증가하였다(도 16 및 17 참조). 즉, 화합물 1을 처리한 실험군에서는 LPS만 처리한 군과 비교하여 50 uM 농도에서부터 PGE2의 생성량이 유의미적으로 감소하였으며 (P<0.05), 화합물 2를 처리한 실험군에서는 100 uM 농도에서부터 유의미적인 PGE2 생성 감소를 나타내었다(P<0.05). 따라서, 화합물 1 및 2 모두 농도의존적으로 PGE2의 생성을 억제하는 확인하였다(도 16 및 17 참조).
실시예
4: 화합물 1 및 2의 COX-2 및
iNOS
발현 억제 효과
화합물 1과 2의 항염효과와 관련하여 NO 생성 억제기작에 관한 관련성을 조사하기 위하여 RAW 264.7 세포에서 LPS에 의한 COX-2와 iNOS 단백질 발현에 미치는 영향을 조사하였다.
구체적으로, RAW 264.7 세포를 96 well plate에 1×105 cells/well씩 분주하여 배양하였다. 화합물 1과 2를 각각 농도별(25, 50, 100, 200 μM)로 세포에 전처리하고 30분 후에 LPS(500 ng/mL)를 처리한 뒤 24시간 동안 배양한 후 ELISA 방법을 통하여 iNOS와 COX-2 단백질의 발현을 측정하였다.
또한, Total RNA는 Tri-zol (15596018, invitrogen, USA) 시약을 이용하여 추출하였다. 먼저 RAW 264.7 세포에 화합물 1과 2를 각각 농도별로 전 처리한 뒤 LPS로 자극한 후 24시간 배양한 세포를 PBS로 2회 씻은 다음 PBS 1 ml 씩 가해 세포를 포집한 후, 원심분리를 하여 위에 PBS는 버리고 바닥에 남은 세포를 Tri-zol 용액을 1 ml 넣어서 세포를 용해시킨 후 100 μL의 chloroform 용액을 가하고 두 세 번 잘 섞어준 뒤 12,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 맨 위의 상층액을 취했다. 그 후 2-propanol과 1:1로 섞은 뒤 12,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상층액은 버리고 남은 침전물에 80% ethanol로 2회 씻고 침전물을 건조시켰다. 그리고 침전물에 DEPC 처리한 증류수를 15μL씩 넣어 RNA를 용해시키고 정량하였다.
그 결과, LPS 처리시 iNOS와 COX-2 단백질 발현이 강하게 유도되었으나, 화합물 1을 처리한 실험군에서는 LPS만 처리한 군과 비교하여 50 uM 농도에서부터 iNOS와 COX-2 단백질 발현이 유의미하게 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05, P<0.01) (도 18 참조).
또한 화합물 2를 처리한 실험군에서는 LPS만 처리한 군과 비교하였을 경우, COX-2 단백질 발현은 50 uM 농도에서부터, iNOS 단백질 발현은 100 uM 농도에서부터 유의미하게 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05, P<0.01) (도 19 참조).
실시예
5: 화합물 1 및 2의 사이토카인(
cytokine
) 억제 효과
화합물 1과 2의 항염효과와 관련하여 NO 생성 억제기작에 관한 관련성을 조사하기 위하여 RAW 264.7 세포에서 LPS에 의한 cytokine(TNF-α, IL-6, IL-1β) 발현에 미치는 영향을 조사하였다.
구체적으로, RAW 264.7 세포를 96 well plate에 1×105 cells/well씩 분주하여 배양하였다. 화합물 1과 2를 각각 농도별(25, 50, 100, 200 μM)로 세포에 전처리하고 30분 후에 LPS(500 ng/mL)를 처리한 뒤 24시간 동안 배양한 뒤 염증매개와 관련된 cytokine(TNF-α, IL-6, IL-1β)을 세포 상층액에서 상기 명시된 ELISA kit의 protocol 대로 ELISA법으로 정량하였다.
또한, 화합물 1과 2의 염증 관련 인자 mRNA 발현에 미치는 영향을 검증하기 위해 5 ㎍의 mRNA를 High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit(Appiled biosystem, Foster city, CA, USA)를 이용하여 cDNA로 합성을 하였다. 합성된 cDNA 1 μL, Master Mix 10 μL, 10 pmole의 sense primer와 antisense primer [GAPDH, sense 5'-GGC ATG GCC TTC CGT GT-3' anti-sense 5'-GGT TTC TCC AGG CGG CA-3'; TNF-α, sense 5'-TCC AGG CGG TGC CTA TGT-3' anti-sense 5'-CGA TCA CCC CGA AGT TCA GT-3'; IL-6, sense 5'-CCC AAT TTC CAA TGC TCT CC-3', anti-sense 5'-ACA GAT AAG CTG GAG TCA CAG AAG GAG TGG CT-3'; IL-1β, sense 5'-ACC TGT CCT GTG TAA ATG AAA GAC G-3', anti-sense 5'-TTG GTA TTG CTT GGG ATC C-3']를 각각 1 μL 씩 섞어 증류수와 함께 최종 부피 20 μl로 만들어, 92°C에서 30초, 58°C에서 45초, 그 후에 72°C에서 30초를 30 cycles 조건으로 PCR을 이용해 target 유전자를 증폭시켰다. GAPDH는 TNF-α, IL-6, IL-1β의 발현을 상대적으로 비교 평가하기 위한 housekeeping gene으로 사용되었다. PCR 반응이 끝난 후 1× sampling buffer를 섞은 뒤 1.5% agarose gel에 10 μL 씩을 넣고 전기영동 한 후 자외선을 이용하여 반응을 확인하였다.
5-1. 화합물 1 및 2의
TNF
- 생성 억제 효과
화합물 1의 실험군 중 정상군은 440.05 ± 49.49 pg/ml로 나타났으며, 대조군은 2182.88 ± 91.92 pg/ml로 나타났다. 화합물 1을 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군은 각각 1881.63 ± 28.28 pg/ml, 1860.05 ± 21.21 pg/ml, 1614.05 ± 70.71 pg/ml, 1380.80 ± 21.21 pg/ml로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 감소하였으며(도 20 참조), 100uM의 농도에서부터 유의미적으로 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05).
또한 화합물 2의 실험군 중 정상군은 480.05 ± 106.06 pg/ml로 나타났으며, 대조군은 2162.88 ± 63.64 pg/ml로 나타났다. 화합물 2를 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군은 각각 1906.38 ± 70.71 pg/ml, 1876.71 ± 57.98 pg/ml, 1706.54 ± 30.41 pg/ml, 1384.88 ± 101.82 pg/ml로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 감소하였으며(도 21 참조), 100uM의 농도에서부터 유의미적으로 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05).
RT-PCR을 사용하여 조사한 결과, 화합물 1과 2 모두 농도의존적으로 TNF- mRNA의 생성을 억제하였다(도 22 및 23 참조).
5-2. 화합물 1 및 2의 IL-6 생성 억제 효과
화합물 1의 실험군 중 정상군은 26.94 ± 11.31 pg/ml로 나타났으며, 대조군은 930.16 ± 21.21 pg/ml로 나타났다. 화합물 1을 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군은 각각 497.28 ± 14.14 pg/ml, 481.84 ± 28.28 pg/ml, 398.59 ± 21.21 pg/ml, 261.81 ± 21.22 pg/ml로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 감소하였으며(도 24 참조), 25uM의 농도부터 유의미적으로 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05, P<0.01).
또한 화합물 2의 실험군 중 정상군은 19.94 ± 1.41 pg/ml로 나타났으며, 대조군은 895.15 ± 70.71 pg/ml로 나타났다. 화합물 2를 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군은 각각 617.87 ± 96.17 pg/ml, 599.71 ± 91.92 pg/ml, 581.91 ± 77.78 pg/ml, 554.38 ± 42.43 pg/ml로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 감소하였으며(도 25 참조), 25uM의 농도부터 유의미적으로 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05).
RT-PCR을 사용하여 조사한 결과, 화합물 1과 2 모두 농도의존적으로 IL-6 mRNA의 생성을 억제하였다(도 26 및 27 참조).
5-3. 화합물 1 및 2의 IL-
1β
생성 억제효과
화합물 1의 실험군 중 정상군은 25.83 ± 4.24 pg/ml로 나타났으며, 대조군은 340.33 ± 7.07 pg/ml로 나타났다. 화합물 1을 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군은 각각 264.50 ± 21.21 pg/ml, 237.25 ± 8.45 pg/ml, 193.17 ± 12.02 pg/ml, 156.33 ± 11.31 pg/ml로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 감소하였으며(도 28 참조), 50uM의 농도에서부터 유의미적으로 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05).
또한 화합물 2의 실험군 중 정상군은 20.83 ± 2.83 pg/ml로 나타났으며, 대조군은 330.33 ± 21.21 pg/ml로 나타났다. 화합물 2를 25, 50, 100, 200 uM의 농도로 처리한 실험군은 각각 271.67 ± 7.07 pg/ml, 252.83 ± 7.78 pg/ml, 235.66 ± 14.14 pg/ml, 188.08 ± 3.53 pg/ml로 나타나 LPS만 처리한 군과 비교하여 농도 의존적으로 감소하였으며(도 29 참조), 25uM의 농도에서부터 유의미적으로 감소하는 것을 확인하였다(P<0.05).
RT-PCR을 사용하여 조사한 결과, 화합물 1과 2 모두 농도의존적으로 IL-1β mRNA의 생성을 억제하였다(도 30 및 31 참조).
실시예
6: 화합물 1 및 2의
LPS로
유도된
Iκ
-
Bα
및 MAP
Kinase
발현 억제 효과
화합물 1과 2가 TNF-α, IL-1β, IL-6 생성을 억제하는 기전을 알아보기 위하여, 화합물 1 및 2가 NF-κB와 ERK, p38, JNK 등 MAP kinase의 활성에 미치는 영향을 조사하였다.
구체적으로, RAW 264.7 세포를 60 mm culture dish에 1×106 cell/ml로 세포를 배양하고 serum free media(DMEM)로 12시간 starvation 시킨 후 고비 분리 화합물 1과 2를 각각 농도별로 전처리 하고 30분 뒤에 LPS(500 ng/ml)로 자극하였다. 그 후 cold PBS로 3회 세척한 후 harvest하여 세포를 얻은 뒤 원심분리(5,000 rpm, 5 min)하여 상층액을 버리고 cell pellet을 수거하였다. Pellet은 lysis buffer(lysis buffer 1ml + phosphatase inhibitor 10 μL + protase inhibitor 10 μL)를 넣어 세포를 lysis시키고, 원심분리 (15,000 rpm, 20 min)로 찌꺼기를 침전시킨 후 단백질을 정량하였다. 각각 동일한 양의 단백질에 sampling buffer (4×)를 같이 넣어 섞은 다음, 이 sample을 10% SDS-PAGE에 전기영동 한 후 membrane에 옮기고 나서 5% skim milk로 2시간동안 blocking 하였다.
Anti-phospo-ERK Ab, anti-phospo-p38 Ab, anti-phospo-JNK Ab, anti-Iκ-Bα Ab로 처리 후, ERK, p38, JNK의 phosphorylation과 inhibitory kappa-Bα(Iκ-Bα)를 ECL detection 용액 (Amersham)을 사용하여 단백질의 발현 정도를 확인하였다.
그 결과, 화합물 1과 2는 Iκ-Bα의 인산화를 억제하였다. 또한, MAP kinase에 속하는 p38과 ERK, JNK의 인산화를 모두 억제하였다(도 32 및 33 참조).
Claims (3)
- 화학식 1의 오스문다락톤(osmundalactone), 화학식 2의 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-dihydroxy-γ-caprolactone), 상기 오스문다락톤의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 상기 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군으로부터 1 이상 선택된 화합물을 유효성분으로 포함하는 염증을 예방 또는 개선하는 화장료 조성물.
- 화학식 1의 오스문다락톤(osmundalactone), 화학식 2의 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤(3,5-dihydroxy-γ-caprolactone), 상기 오스문다락톤의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 상기 3,5-디히드록시-감마-카프로락톤의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군으로부터 1 이상 선택된 화합물을 유효성분으로 포함하는 염증을 예방 또는 개선하는 식품 조성물.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020170098641A KR102026887B1 (ko) | 2017-08-03 | 2017-08-03 | 오스문다락톤 및/또는 (4r,5s)-5-하이드록시-2-헥센-4-올리드을 포함하는 항염증용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020170098641A KR102026887B1 (ko) | 2017-08-03 | 2017-08-03 | 오스문다락톤 및/또는 (4r,5s)-5-하이드록시-2-헥센-4-올리드을 포함하는 항염증용 조성물 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20190014764A true KR20190014764A (ko) | 2019-02-13 |
KR102026887B1 KR102026887B1 (ko) | 2019-09-30 |
Family
ID=65366812
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020170098641A KR102026887B1 (ko) | 2017-08-03 | 2017-08-03 | 오스문다락톤 및/또는 (4r,5s)-5-하이드록시-2-헥센-4-올리드을 포함하는 항염증용 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR102026887B1 (ko) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20100009927A1 (en) * | 2008-07-14 | 2010-01-14 | Herbalscience Group Llc | Anti-Inflammatory and Anti-Allergy Extracts from Nettle |
-
2017
- 2017-08-03 KR KR1020170098641A patent/KR102026887B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20100009927A1 (en) * | 2008-07-14 | 2010-01-14 | Herbalscience Group Llc | Anti-Inflammatory and Anti-Allergy Extracts from Nettle |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Chinese Chemical Letters. Vol. 17, No. 6, pp. 727-729 * |
Eur. J. Org. Chem. 2002, pp. 2649-2655 * |
Tetrahedron Letters. 2015, Vol. 56, No. 21, pp. 2783-2786 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR102026887B1 (ko) | 2019-09-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101181321B1 (ko) | 고장초 추출물을 함유하는 알러지 개선용 조성물 | |
KR102327601B1 (ko) | 병풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 항아토피, 항산화 또는 항염증 활성을 갖는 조성물 | |
KR101869353B1 (ko) | 눈개승마 추출물에서 분리된 신규 화합물 및 이를 이용한 항염증 조성물 | |
KR101959731B1 (ko) | 새싹보리 추출물을 포함하는 갱년기 장애의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR101982657B1 (ko) | 테트라세라 로우레이리 추출물을 이용한 항염증용 조성물 | |
KR101705354B1 (ko) | 고사리삼 알코올 추출물을 포함하는 피부 염증 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR20180024470A (ko) | 섬기린초 추출물을 포함하는 염증 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR101355483B1 (ko) | 수검초 추출물 또는 이로부터 분리된 알파-아사론을 유효성분으로 함유하는 퇴행성 신경질환 예방 및 치료용 조성물 | |
KR20110035127A (ko) | 곰피와 감태 추출물 유래의 플로로탄닌을 유효성분으로 하는 염증억제용 조성물 | |
KR102488562B1 (ko) | 갯끈풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증 또는 아토피 피부염의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR101193558B1 (ko) | 다시마의 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 약학조성물 | |
KR102050966B1 (ko) | 침향 추출물의 분획물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 신경질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR101977977B1 (ko) | 타임 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환의 치료 및 예방용 조성물 | |
KR102026887B1 (ko) | 오스문다락톤 및/또는 (4r,5s)-5-하이드록시-2-헥센-4-올리드을 포함하는 항염증용 조성물 | |
KR101620153B1 (ko) | 갯방풍 추출물을 유효성분으로 포함하는 관절염 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR101403999B1 (ko) | 독성물질을 제거한 삼백초 정제물 및 분획물의 제조방법 및 상기 정제물을 유효성분으로 함유하는 천식 및 알러지성 질환의 치료 및 예방을 위한 조성물 | |
KR101436213B1 (ko) | 긴잎모시풀 추출물을 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR101758228B1 (ko) | 항염증 활성을 나타내는 신규 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물 | |
KR20180024052A (ko) | 신규한 디노익산 화합물 및 이를 포함하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
KR101069179B1 (ko) | 허수테논을 유효성분으로 포함하는 아토피성 피부염 개선용 조성물 | |
KR20200069616A (ko) | 올벚나무를 포함하는 항염증용 조성물 | |
KR102502598B1 (ko) | 지충이 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 또는 알레르기성 피부염의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 | |
TWI794575B (zh) | 化合物用於預防及/或治療高血脂症之用途 | |
KR101972076B1 (ko) | 카레야 아르보레아 추출물에서 분리한 활성성분을 이용한 아토피 피부염 개선용 조성물 | |
KR20180050970A (ko) | 테트라세라 로우레이리 추출물을 이용한 항염증용 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |