KR20180030469A

KR20180030469A - 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물

Info

Publication number: KR20180030469A
Application number: KR1020177034662A
Authority: KR
Inventors: 바오안 왕; 펭 마오
Original assignee: 산시 모멘텀 파마슈티컬 컴퍼니 리미티드
Priority date: 2015-05-13
Filing date: 2016-05-12
Publication date: 2018-03-23
Also published as: WO2016180347A1; EP3295948A4; US11160841B2; JP2020023526A; CN115068551A; CN104825782A; EP3295948A1; US20180133279A1; JP2018515609A

Abstract

본 발명은 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물을 제공한다. 본 발명에서 제기한 한약 조성물은 각 한약원료가 아래 중량부에 따라 배합하여 제조된다: 황련 250~450, 반하 150~350, 복령 150~450, 탱자 65~265, 상산 150~350, 연자심 10~70, 고삼 150~350, 개사철쑥 150~350, 인삼 65~265, 맥문동 150~350, 감초 65~265.
본 발명의 한약 조성물은 심근세포 활동전위간격을 연장하여 심근 전기활동의 불응기간을 연장할 수 있는데 이러한 작용 메커니즘은 흥분이 재진입하여 유발한 부정맥을 억제하는 작용을 가지나 부작용은 없다. 본 발명은 임상에서 심실성, 심방성 또는 심실위 부정맥 등 질병을 치료하는 새로운 약물을 제공하고 비교적 우수한 응용 전망을 가지는데, 본 발명의 방법은 작업이 간편하고 규모화 생산에 유리하다.

Description

칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물{USE OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE COMPOSITION IN PREPARATION OF POTASSIUM ION CHANNEL MODULATOR MEDICINE}

본 발명은 한약에 관한 것으로서 구체적으로 한약 조성물에 관한 것으로서, 특히 한약 조성물이 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물에 관한 것이다.

심장질병과 관련된 연구에서 칼륨 이온 채널의 연구가 이미 증가하고 있는데, 칼륨 이온 채널은 발견된 하위 유형이 제일 많으며 작용이 제일 복잡한 채널이며, 일반적으로 지연 정류 칼륨 채널, 일시적 외향 칼륨 채널, 내향 정류 칼륨 채널, 아데노신 트리포스페이트 민감 칼륨 채널 및 아세틸 콜린 민감성 칼륨 채널 등 5가지 유형으로 분류되며 이것들은 모두 부정맥을 발생, 발전과 밀접한 관련이 있다.

지연 정류 칼륨 채널은 빠른 활성화 지연 정류 칼륨 전류(Ikr), 완만 활성화 지연 정류 칼륨 전류(Iks), 초속 활성화 지연 정류 칼륨 전류(Ikur) 등 3가지로 분류된다. 빠른 활성화 지연 정류 칼륨 전류, 완만 활성화 지연 정류 칼륨 전류는 심근세포활동전위 2기 안정기의 중지 및 3기 재분극에 중요한 의미가 있다. Ikr , Iks 채널 이상 또는 수량의 인상, 인하는 모두 부정맥의 발생을 초래할 수 있으므로 Ikr , Iks 채널은 부정맥의 발생 및 항부정맥약물 작용의 중요한 타겟이다.

내향 정류 칼륨 채널(Kir)의 주요기능은 세포막 휴지 전위를 유지하는 것인데 이 또한 재분극 3기의 주요 전류이다. 내향 정류 칼륨 채널(Kir)은 두번의 막관통 하부 단위의 4분자체로 조성되고 정전위인 경우 세포내 Mg2와 폴리아민에 의해 차단된다. 일시적 외향 칼륨 채널은 심장활동전위 재분극에 참여하는 주요한 막전류인 바, 채널개방은 순간적인 순 외향 전류로 나타났다가 뒤따라 닫혀 활동전위의 1기를 형성함으로써 활동전위시간과 형태에 비교적 큰 영향을 주게 된다. KATP 채널심근 KATP는 세포 내의 생리학적 수준의 ATP에 의해 억제되고 세포대사와 막전위를 커플링시킨다. 내향 정류 메커니즘은 세포 내 Mg와 Na가 개방채널에 대한 차단을 포함한다.

아세틸 콜린 활성화 K칼륨 채널(IKAch)은 동결절의 심박 조율기 세포와 심방근 세포에 존재하고 심장 박동율을 조절한다. 심방 IKAch의 밀도는 약 심실의 6배이고 IKAch활성화는 막전위의 과분극을 초래하며 동결절과 방실 결절 심박 조율기 세포의 자발성을 저하시켜 방실 결절의 전도성을 지연시킨다.

부정맥은 동결절 활성화 이상 또는 활성화가 동결절 이외에 발생하여 활성화의 전달이 느리고 차단되거나 또는 이상 채널을 통해 전달, 즉 심장활동의 시작 및/또는 전달 장애로 인하여 심작박동의 빈도 및/또는 율동이 이상한 것을 말한다. 부정맥은 심혈관 질병에서의 중요한 질병이다. 이는 단독으로 발병할 수도 있고 심혈관 질병과 함께 발병할 수도 있다. 갑자기 발병하여 갑 작스런 사망에 도달할 수도 있고 지속적으로 심장에 누적되어 쇠약하게 만들수도 있다. 부정맥은 각종 기질성 심장병에서 나타날 수 있는데 여기서 관상동맥 죽상 경화성 심장병(약칭: 관상동맥경화증), 심근병, 심근염과 류마티스성 심장병(약칭: 류마티스 심장병)이 제일 보편적이며 특히 심장 쇠약 또는 급성 심근경색이 발생할 경우 기본적인 건강한 사람 또는 식물신경기능손실 환자에서 발생하는 부정맥도 적지 않다. 그러나 부정맥이 발생하는 주요한 원인은 충동에 의해 형성된 이상(이소성 율동점 자율성이 향상되고 후탈분극되며 활동을 유발) 또는 임펄스 전도 이상(재진입)이며, 또는 둘 다이다. 따라서 부정맥에 대한 치료는 응당 자율성을 저하시키고 후탈분극을 감소하며 재진입을 해소하여야 한다.

현재, 약물의 주요작용채널과 전기 생리학 특성에 근거하여 여러가지 화학구조가 상이한 약물을 4가지 분류로 나뉘는데, Ⅰ류는 나트륨 채널 차단약이고; Ⅱ류는 베타 아드레날린 수용체 길항제이며; Ⅲ류는 활동전위시간을 늘이는 약(칼륨 이온 채널 차단제)이고; Ⅳ류는 칼슘 채널 차단제다. 임상에서 부정맥을 치료하는 주요한 약물로는 퀴니딘, 리도카인, 시틸, 아미오다론, 베라파밀 등이 있고 일정한 효과가 있으나 이와 동시에 이상반응과 부작용도 나타내고 있다. 화학약품 외에 또 한약도 발명하였다. 특허번호 200310122205.9에서는 심계항진을 치료하는 심속저(Xinsuning) 캡슐을 공개하였는데 이는 심실성 기외 수축(심계항진)을 치료하는데 사용되는 한약 및 그의 제조방법에 관한 것이지만 응용범위에 한계가 있어 이 약물조성물이 칼륨 이온 채널에 대한 조절작용(활동전위시간 연장)을 공개하지 않았다. 본 발명특허는 기존의 특허기술의 기초상에 보다 깊은 연구를 통해 이 조성물이 칼륨 이온 채널에 대한 조절작용(활동전위시간 연장)을 증명하고 심실성, 심방성, 심실위 등 방면의 부정맥을 치료할 수 있고 혈당을 낮추고 혈압을 낮추는 약물에서의 응용을 증명하였다.

특허번호 200310122205.9

본 발명이 해결하고자 하는 기술적 과제는 상기 결함을 극복하는 동시에 칼륨 이온 채널에 대한 조절 작용(활동전위시간 연장)이 있고 심실성, 심방성, 심실위 등 방면을 치료하는데 사용될 수 있는 한약 조성물을 연구 설계하는 것이다.

본 발명은 칼륨 채널 조절 약물을 제조하기 위한 한약 조성물을 제공한다.

본 발명에서 제기한 한약 조성물은 활성성분인 한약과 부형재로 조성된다.

본 발명에서 제기한 한약 조성물은 각 한약원료가 아래 중량부에 따라 배합하여 제조된다:

황련250~450 반하 150~350 복령 150~450

탱자 65~265 상산 150~350 연자심 10~70

고삼 150~350 개사철쑥 150~350 인삼 65~265

맥문동 150~350 감초 65~265.

바람직하게, 본 발명에서 제기한 한약 조성물은 각 한약원료가 아래 중량부에 따라 배합하여 제조된다:

황련 334g 반하 250g 복령 250g

탱자 167g 상산 250g 연자심 42g

고삼 250g 개사철쑥 250g 인삼 167g

맥문동 250g 감초 167g.

본 발명의 한약 조성물의 작용 메커니즘은 활동전위시간을 연장하고 칼륨 이온 채널을 조절하며 여러가지 칼륨 전류를 억제하는 것이다. 본 발명의 한약 조성물은 심근세포 활동전위간격을 연장하여 심근 전기활동의 불응기를 연장할 수 있는데 이러한 작용 메커니즘은 흥분이 재진입하여 유발한 부정맥을 억제하는 작용을 갖지만 부작용은 없다.

본 발명의 한약 조성물은 심근세포 전기 생리학 실험을 진행하였는데 실험결과에 나타낸 바에 의하면 본 발명의 한약 조성물은 심근세포 활동전위간격을 연장하여 칼륨 이온 채널을 조절하는 작용을 가진다. 실험결과에 나타낸 바에 의하면 본 발명의 이 약품은 심근세포 활동전위간격을 연장하여 칼륨 이온 채널을 조절하는 작용을 가지고 약물 효과와 약물 사용량 농도는 관련성이 있다. 약물농도가 1mg/ml 일 경우 본 발명의 약물은 칼륨 이온 채널을 조절하는 것을 통하여 심근세포활동 전위간격을 지연시키는 약물작용효과가 뚜렷하지 않고 실험과 대조는 4번을 반복하였는데 대조군과 비교하였을 경우 통계학적인 의미가 존재하지 않는다. 약물농도가 2mg/ml 일 경우 본 발명의 약물은 칼륨 이온 채널을 조절하는 것을 통하여 심근세포활동전위간격을 지연시키는 약물작용효과가 뚜렷하고 실험과 대조는 7번을 반복하였는데 대조군과 비교하였을 경우 현저한 차이점(P<0.05)을 가진다. 약물농도가 4mg/ml 일 경우 본 발명의 약물은 칼륨 이온 채널을 조절하는 것을 통하여 심근세포활동전위간격을 지연시키는 약물작용효과가 뚜렷하고 실험과 대조는 7번을 반복하였는데 대조군과 비교하였을 경우 현저한 차이점을 가진다.

따라서 본 발명의 한약 조성물은 칼륨 이온 채널 조절제 약물을 제조하는데 사용될 수 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 한약 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.

이 방법은 아래 단계를 포함한다:

단계(1), 개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하, 맥문동, 연자심약재에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라낸 후 준비하는 단계;

단계(2), 개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라내고 유동 식수를 이용하여 세척한 후 편 또는 토막으로 절단하되 맥문동은 유동 식수를 이용하여 완전히 젖힌 후 얇게 뚜드려 펴서 준비하는 단계;

단계(3),단계(1)과 단계(2)의 약재를 70-80℃에서 건조시켜 준비하는 단계;

단계(4), 황련, 탱자, 상산, 연자심, 고삼을 취하여 60%의 에탄올을 추가한 후 2번 환류 추출하는데 첫 번째에는 8배량을 추가하고 두 번째에는 6배량을 추가하며 매번 각각 1.5시간을 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 여과액을 감압(0.04Kpa, 70℃)하고 에탄올을 회수하며 상대밀도가 1.38(60℃에서 측정)인 될때까지 계속하여 농축하고 80℃에서 드라이 페이스트로 건조하여 준비하는 단계;

단계(5), 인삼, 복령, 반하를 취하여 70%의 에탄올을 추가한 후 2번 환류 추출하는데 첫 번째에는 8배량을 추가하고 두 번째에는 6배량을 추가하며 매번 각각 2시간을 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 여과액을 다른 용기에 수집하여 준비하는 단계;

단계(6), 단계(4)의 약찌꺼기와 맥문동, 개사철쑥, 감초를 병합하고 물을 추가하여 2번 달이는데 첫 번째에는 10배량을 추가하고 두 번째에는 8배량을 추가하며 매번 각각 1시간을 진행한 다음 달인 물을 병합하고 여과하며 여과액을 상대밀도가 1.05~1.06(80℃에서 측정)인 클리어 페이스트까지 농축하고 95% 에탄올을 추가하여 알콜 함량이 70%가 되도록 한 후 균일하게 교반하고 24시간 정치시켜 상등액을 취한 다음 여과하여 여과액을 수집하여 준비하는 단계;

단계(7), 단계(5)의 여과액과 단계(6)의 여과액을 병합하고 0.04KPa로 감압하며 70℃에서 에탄올을 회수하고 상대밀도가 1.38(60℃에서 측정)인 될때까지 계속하여 농축하며 80℃에서 드라이 페이스트로 건조하여 준비하는 단계;

단계(8), 단계(4)와 단계(7)의 드라이 페이스트를 병합하고 100메쉬의 고운 가루로 분쇄한 후 적당한 양의 덱스트린을 추가하여 균일하게 혼합한 다음 캡슐에 담거나 또는 약용 보조재료와 함께 제제로 제작하여 획득하는 단계.

본 발명의 한약 조성물은 약물의 통상적인 방법에 따라 제조되는데 정제, 캡슐, 과립제, 드링크제, 환약 등 경구제제를 포함하며 제조과정에 약제학적으로 사용되는 충전제, 접합제, 붕괴제, 윤활제, 방취제 등과 같은 보조재료를 첨가한다.

본 발명이 제공하는 한약 조성물이 칼륨 이온 채널 조절제 약물을 제조의 응용에서 상기 응용은 항부정맥약물을 제조에서 응용이다.

본 발명이 제공하는 한약 조성물이 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조의 응용에서 상기 응용은 심실성, 심방성 또는 심실위 부정맥을 치료하는 약물 제조의 응용이다.

본 발명이 제공하는 한약 조성물이 칼륨 이온 채널 조절제 약물을 제조의 응용에서 상기 응용은 활동전위시간을 연장하고 칼륨 이온 채널을 조절하며 각종 칼륨 전류를 억제하는 약물 제조의 응용이다.

본 발명의 한약 조성물은 심근세포 활동전위간격을 연장하여 심근 전기활동의 불응 기간을 연장할 수 있는데 이러한 작용 메커니즘은 흥분이 재진입하여 유발한 부정맥을 억제하는 작용을 가지나 부작용은 없다. 본 발명은 새로운 칼륨 이온 채널 조절 제한약을 제공하여 임상에서 심실성, 심방성 또는 심실위 부정맥 등 질병을 치료하는 새로운 약물을 제공하고 비교적 우수한 응용전망을 가지는 바, 본 발명의 방법은 작업이 간편하고 규모화 생산에 유리하다.

도 1은 본 발명의 약물 2mg/ml의 활동전위 연장효과와 시간에 관한 도면이다.
가로 좌표는 투약시간(단위: 분)을 나타내고 세로 좌표는 활동전위 감쇠시간(단위: 밀리초)을 나타낸다. 1은 본 발명의 약물 2mg/ml의 투약시간이 0.65분---10.16분임을 나타낸다.
도 2는 본 발명의 한약 조성물 2mg/ml, 4mg/ml의 활동전위 도면이다.
가로 좌표는 투약시간(단위: 밀리초)을 나타내고 세로 좌표는 활동전위 (단위: 밀리볼트)를 나타낸다. 라인1은 대조군 활동전위와 시간의 관계를 나타내고, 라인2는 본 발명의 약물 투약군(2mg/ml) 활동전위와 시간의 관계를 나타내며, 라인3은 세포를 씻어내고 회복한 후 활동전위와 시간의 관계를 나타낸다.
도 3은 본 발명의 한약 조성물이 상이한 농도(1mg/ml, 2mg/ml, 4mg/ml)에서의 활동전위 감쇠관계 도면인데, 가로 좌표는 상이한 농도의 투약군을 나타내고 세로 좌표는 활동전위 감쇠량을 나타내며, 막대 그래프 1은 대조군 활동전위 감쇠량인 바 대조군 활동전위 감쇠량을 1이라고 설정하고 막대그래프 2는 본 발명의 약물 1mg/ml의 활동전위 감쇠량이며, 막대 그래프 3은 본 발명의 약물 2mg/ml의 활동전위 감쇠량이고, 막대 그래프 4는 본 발명의 약물 1mg/ml의 활동전위 감쇠량이다.

본 발명의 약물 조성물을 쉽게 심근세포 전기 생리학 실험연구에 응용되도록 하기 위하여 본 발명의 약물 조성물은 처방비율에 따라 동결건조된 분말 또는 추출물로 제조된다.

실시예에 사용되는 한약원료는 시판되는 원료에서 얻는다.

실시예1

[처방]

황련 334g 반하 250g 복령 250g

탱자 167g 상산 250g 연자심 42g

고삼 250g 개사철쑥 250g 인삼 167g

맥문동 250g 감초 167g

1) 이상 11가지 생약재, 개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하, 맥문동, 연자심 약재에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라낸다.

개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라내고 유동 식수를 이용하여 세척(또는 스프레이)한 후 완전히 젖도록(또는 어느 정도 젖도록) 하여 편 또는 토막으로 각각 절단한다. 맥문동은 완전히 젖힌 다음 얇게 두드려 편다. 70-80℃에서 건조시킨다.

2), 황련, 탱자, 상산, 연자심, 고삼약재는 20kg의 수돗물로 두 번 세척한 다음 10kg의 정제수로 두 번 세척한 후 60%의 에탄올을 추가하여 2번 환류 추출하는데 첫 번째에는 8.4L를 추가하고 두 번째에는 6.3L를 추가하며 매번 각각 1.5h를 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 알콜 맛이 없을 때까지 여과액에서 에탄올을 회수(0.04Kpa, 70℃)하고 된풀에 6.3L의 사출용수를 추가한 다음 가열하여 온도가 50℃~60℃에 도달하도록 한 후 교반하여 충분히 용해되도록 하며 뜨거울 때 여과한 후 여과액을 하룻밤 정치시켜 상등액을 여과해낸 후 준비한다;

3), B그룹의 인삼, 복령, 반하 약재를 13kg의 수돗물로 두 번 세척한 다음 6.5kg의 정제수로 두 번 세척하고 그 후 70%의 에탄올을 이용하여 2번 환류 추출하는데 첫 번째에는 5.3L를 추가하고 두 번째에는 4L를 추가하며 매번 각각 2h을 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 여과액과 약 찌꺼기를 각각 준비한다;

4), C그룹의 맥문동, 개사철쑥, 감초약재를 13kg의 수돗물로 두 번 세척한 다음 6.5kg의 정제수로 두 번 세척하고 상기 B그룹에서 준비한 약 찌꺼기와 병합한 다음 사출용수를 추가하여 두 번 달이는데 첫 번째에는 6.7L의 물을 추가하여 1h 달이고 두 번째에는 5.3L의 물을 추가하여 1h 달이며 두 번의 여과액을 병합한 후 약 찌꺼기를 제거하는데 여과액은 상대밀도가 1.05~1.06(80℃)인 페이스트가 될 때까지 농축하고, 95%의 에탄올을 추가하여 알콜 함량이 70%가 되도록 한 후 균일하게 교반하고 24시간 정치시켜 상등액을 취한 다음 상기 B그룹에서 준비한 여과액과 병합하고 알콜 맛이 없을 때까지 여과액을 에탄올을 회수(0.04Kpa, 70℃)하며 페이스트에 6배량의 4L 사출용수를 추가한 후 가열하여 온도가 50℃~60℃에 도달하도록 한 다음 교반하여 충분히 용해되도록 하며 뜨거울 때 여과한 후 여과액을 하룻밤 정치시켜 상등액을 여과해낸 후 준비한다;

5), 상기 A그룹과 C그룹에서 준비한 상등액을 취하여 병합한 후 회전박막 증발기로 60℃에서 감압 농축하여 상대밀도가 1.10(60℃)인 페이스트가 되도록 한다;

6), 상기 상대밀도가 1.10(60℃)인 준비된 페이스트를 취하여 고정 트레이에 놓은 후 냉동 건조하되 동결건조조건은 냉동온도가 -40℃이하, 진공도가 15pa이하, 가열온도가 -20℃~80℃이며 20시간 냉동건조한 후 꺼내어 동결건조 고형물을 수집한 다음 분쇄하고 균일하게 혼합하여 동결건조분말 590g을 얻는다.

실시예2

[처방]

황련 334g 반하 250g 복령 250g

탱자 167g 상산 250g 연자심 42g

고삼 250g 개사철쑥 250g 인삼 167g

맥문동 250g 감초 167g

개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라내고 유동 식수를 이용하여 세척(또는 스프레이)한 후 완전히 젖도록(또는 어느 정도 젖도록) 하여 편 또는 토막으로 각각 절단한다. 맥문동은 완전히 젖힌 다음 얇게 뚜드려 편다. 70-80℃에서 건조시킨다.

2), 황련, 탱자, 상산, 연자심, 고삼약재는 20kg의 수돗물로 두 번 세척한 다음 10kg의 정제수로 두 번 세척한 후 60%의 에탄올을 추가하여 2번 환류 추출하는데 첫 번째에는 8.4L를 추가하고 두 번째에는 6.3L를 추가하며 매번 각각 1.5h를 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 알콜 맛이 없을 때까지 여과액에서 에탄올을 회수(0.04Kpa, 70℃)하고 페이스트에 6.3L의 사출용수를 추가한 다음 가열하여 온도가 50℃~60℃에 도달하도록 한 후 교반하여 충분히 용해되도록 하며 뜨거울 때 여과한 후 여과액을 하룻밤 정치시켜 상등액을 여과해낸 후 준비한다;

4), C그룹의 맥문동, 개사철쑥, 감초약재를 13kg의 수돗물로 두 번 세척한 다음 6.5kg의 정제수로 두 번 세척하고 상기 B그룹에서 준비한 약 찌꺼기와 병합한 다음 사출용수를 추가하여 두 번 달이는데 첫번째에는 6.7L의 물을 추가하여 1h 달이고 두 번째에는 5.3L의 물을 추가하여 1h 달이며 두 번의 여과액을 병합한 후 약 찌꺼기를 제거하는데, 여과액은 상대밀도가 1.05~1.06(80℃)인 페이스트가 될 때까지 농축하고 95%의 에탄올을 추가하여 알콜 함량이 70%가 되도록 한 후 균일하게 교반하고 24시간 정치시켜 상등액을 취한 다음 상기 B그룹에서 준비한 여과액과 병합하고 알콜 맛이 없을 때까지 여과액을 에탄올을 회수(0.04Kpa, 70℃)하며 페이스트에 6배량의 4L 사출용수를 추가한 후 가열하여 온도가 50℃~60℃에 도달하도록 한 다음 교반하여 충분히 용해되도록 하며 뜨거울 때 여과한 후 여과액을 하룻밤 정치시켜 상등액을 여과해낸 후 준비한다;

6), 상기 상대밀도가 1.10(60℃)인 준비된 페이스트를 취하여 65℃의 중탕 냄비에서 중탕하여 유동성 페이스트가 없을 때까지 가열한 다음 균일하게 혼합하여 얻는다.

실시예3

황련 334g 반하 250g 복령 250g

탱자 167g 상산 250g 연자심 42g

고삼 250g 개사철쑥 250g 인삼 167g

맥문동 250g 감초 167g

1) 이상 11가지 생약재, 개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하, 맥문동, 연자심약재에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라낸다.

2), 황련, 탱자, 상산, 연자심, 고삼약재는 20kg의 수돗물로 두 번 세척한 다음 10kg의 정제수로 두 번 세척한 후 60%의 에탄올을 추가하여 2번 환류 추출하는데 첫번째에는 8.4L를 추가하고 두 번째에는 6.3L를 추가하며 매번 각각 1.5h를 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 알콜 맛이 없을 때까지 여과액에서 에탄올을 회수(0.04Kpa, 70℃)하고 페이스트에 6.3L의 사출용수를 추가한 다음 가열하여 온도가 50℃~60℃에 도달하도록 한 후 교반하여 충분히 용해되도록 하며 뜨거울 때 여과한 후 여과액을 하룻밤 정치시켜 상등액을 여과해낸 후 준비한다;

4), C그룹의 맥문동, 개사철쑥, 감초약재를 13kg의 수돗물로 두 번 세척한 다음 6.5kg의 정제수로 두 번 세척하고 상기 B그룹에서 준비한 약 찌꺼기와 병합한 다음 사출용수를 추가하여 두 번 달이는데 첫 번째에는 6.7L의 물을 추가하여 1h 달이고 두 번째에는 5.3L의 물을 추가하여 1h 달이며 두 번의 여과액을 병합한 후 약 찌꺼기를 제거하는데 여과액은 상대밀도가 1.05~1.06(80℃)인 페이스트가 될 때까지 농축하고 95%의 에탄올을 추가하여 알콜 함량이 70%가 되도록 한 후 균일하게 교반하고 24시간 정치시켜 상등액을 취한 다음 상기 B그룹에서 준비한 여과액과 병합하고 알콜 맛이 없을 때까지 여과액을 에탄올을 회수(0.04Kpa, 70℃)하며 페이스트에 6배량의 4L 사출용수를 추가한 후 가열하여 온도가 50℃~60℃에 도달하도록 한 다음 교반하여 충분히 용해되도록 하며 뜨거울 때 여과한 후 여과액을 하룻밤 정치시켜 상등액을 여과해낸 후 준비한다;

6), 상기 상대밀도가 1.10(60℃)인 준비된 페이스트를 취하여 65℃의 중탕 냄비에서 중탕하여 유동성 페이스트가 없을 때까지 가열한 다음 80℃에서 드라이 페이스트가 되도록 건조하여 준비한다; 100메쉬의 분말로 분쇄하여 균일하게 혼합한 다음 200g의 덱스트린을 추가하여 균일하게 혼합하며 캡슐에 넣어 획득한다.

실시예4

본 발명의 한약 조성물(실시예1에서 제조하여 얻은 동결건조 분말)을 이용하여 심근세포 전기 생리학실험을 진행한다.

1. 실험재료:

실험동물:

수컷 래트, 체중 250~500g, 영국 옥스퍼드 대학 실험동물센터에서 제공.

(2). 약품과 시약

본 발명의 실험투약 분말(실시예1에서 제조).

정밀하게 본 발명의 실험투약 분말의 무게를 측량한 후 세포외액에 용해하여 최종농도가 각각 1mg/ml 및 2mg/ml, 4mg/ml가 되도록 한다. 시약은 시그마(Sigma) 회사에서 구입한다.

(2) 용액:

1) 세포외액(mmol/L):

NaCl 112.0, KCl 10, KH₂PO₄ 1.2, HEPES 10, MgSO₄ 5, NaHCO₃ 15, 타우린(Taurine) 30, 글루코스(Glucose) 20, NaHCO₃ 24.0 (pH 7.4). 연속적으로 5%의 CO₂와 95%의 O₂를 통과시킨다.

2) 전극액(mmol/L): KCl 140; MgCl2 1; EGTA 5.0; Hepes 10.0; Na₂ATP 2.0 (pH 7.2)

2. 연구방법: 전 세포 전압 클램프 테크닉을 응용하여 하나의 심실근세포 활동전위를 기록하고 지속적인 관류방법을 통하여 본 발명의 약물실험용 용액이 세포 또는 세척세포에 작용하도록 한다.

1) 래트의 단일 심실근세포의 분리

하나의 심실근 세포는 성년 흰 쥐의 심장에서 분리된 것이고 효소 가수분해 방법을 사용하는데 흰 쥐의 머리를 가격하여 혼미상태로 만든 후 경독맥에서 피를 받고 반듯이 눕혀 고정하여 신속하게 심장을 적출한 다음 심장을 랑도퍼(Langdonffer) 관류 시스템에 장착하고 심장을 통해 효소액을 관류하여 36℃의 칼슘 유리 용액에 방치하며 칼슘 유리 용액을 연속적으로 약 5min 관류시키는데 칼슘 유리 용액 성분은 염화나트륨 120, 5.4; 염화칼륨; 황산 마그네슘5; 피루브산5 포도당20; 20; 타우린; HEPES 10(pH 6.96)이다. 관류액에 4U/ml의 프로테아제를 추가하여 상기 칼슘 유리 관류액을 치환한다(Sigma type XXIV). 2분간 관류하는데 2 분후 관류액을 콜라게나아제 (워딩턴2급, 0.3밀리그램/밀리리터)와 히알루로니다아제(Sigma회사, 0.6밀리그램/밀리리터)를 함유하도록 절환한다. 5-10min 동안 지속적으로 관류한 후 심장을 케이싱 파이프에서 꺼내며 그 다음 심방에서 심실을 제거하여 잘게 잘라 고 칼륨 용액에 넣는데 성분은 KOH 5; 염화칼륨 30; KH₂PO₄ 30; MgSO₄ 3; 글루탐산 50, 타우린20 ; EGTA 0.5; HEPES 10, 포도당10(pH 7.4)이며 조직은 응당 4층의 거즈를 통해 여과하고 1500rpm 조건하에서 원심분리하며 2분 동안 원심분리한다. 세포가 침전된 후 상등액을 버리고 고 칼륨 용액을 추가하여 다시 한번 원심분리한 다음 세포를 고 칼륨 용액에 추가하고 4℃에서 유지시킨다.

2) 전기 생리학 기술 및 통계

분리된 세포는 세포 배스에 넣고 연속적으로 관류(22-24℃)하는데 세포막전위는 전 세포 전압 클램프 테크닉으로 기록하고 하나의 축삭200B 패치 클램프 전극 증폭기, 붕규산 유리 전극을 사용하며 전극에 도전액체를 추가한 후 저항이 1.5~3Ω 사이에 있게 된다. 전류는 제9대 PCLAMPEX 소프트웨어(미국 Axon회사)를 사용하여 기록하고 데이터분석은 PCLAMPFIt 소프트웨어(미국 Axon회사)를 사용하여 분석하며 origin 소프트웨어(미국 OriginLab회사)를 사용하여 제도하는데 약을 관류액에 용해시키고 적어도 3분 동안 관류한 후 투약을 시작하며 데이터 분석은 평균치와 표준차를 사용하고 약물의 효과는 대조하고 투약한 후의 두 그룹의 데이터의 평균수치차이를 이용하여 t검사를 이용하여 통계를 진행한다.

3. 연구결과:

(1) 실험결과가 나타낸 바에 의하면 본 발명의 상기 약품은 심근세포 활동전위간격을 뚜렷이 연장하여 칼륨 이온 채널을 조절하는 작용을 가지는데 대조는 45.4ms±4.9이고 본 발명의 약물조성물(2mg/ml)은 52.2ms±4.5(P<0.01, n=7)이다. 약물로 세포를 세탁한 후 활동전위는 투약 전의 상태로 돌아간다. 결과는 도1에 도시된 바와 같은데 실험결과가 나타낸 바에 의하면 본 발명의 상기 약품은 심근세포 활동전위간격을 뚜렷이 연장하여 칼륨 이온 채널을 조절하는 작용을 가지는데 약물효과와 약물사용량 농도는 관련성이 있고 약물농도가 1mg/ml일 경우 본 발명의 약물은 칼륨 이온 채널을 조절함으로써 심근세포활동전위간격을 연장하는 약물작용효과가 명확하지 않고 실험과 대조는 4번 중복하는 바, 대조군과 비교하여 통계학적 의미가 없다. 약물농도가 2mg/ml일 경우 본 발명의 약물은 칼륨 이온 채널을 조절함으로써 심근세포활동 전위간격을 연장하는 약물작용효과가 명확하고 실험과 대조는 7번 중복하는 바, 대조군과 비교하여 현저한 차이점(P<0.05)을 가진다. 약물농도가 4mg/ml일 경우 본 발명의 약물은 칼륨 이온 채널을 조절함으로써 심근세포활동 전위간격을 연장하는 약물작용효과가 명확하고 실험과 대조는 7번 중복하는 바, 대조군과 비교하여 현저한 차이점(P<0.05)을 가진다. 결과는 도2, 도3을 참조하기 바란다.

Claims

칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물로서,
각 한약원료가 아래 중량부에 따라 배합하여 제조되는 것을 특징으로 하는 한약 조성물;
황련 250~450 반하 150~350 복령 150~450
탱자 65~265 상산 150~350 연자심 10~70
고삼 150~350 개사철쑥 150~350 인삼 65~265
맥문동 150~350 감초 65~265.
칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물로서,
각 한약원료가 아래 중량부에 따라 배합하여 제조되는 것을 특징으로 하는 한약 조성물,
황련 334g 반하 250g 복령 250g
탱자 167g 상산 250g 연자심 42g
고삼 250g 개사철쑥 250g 인삼 167g
맥문동 250g 감초 167g.
제1항에 있어서,
상기 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물은,
아래 단계를 포함하는 아래 방법에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 한약 조성물;
단계(1), 개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하, 맥문동, 연자심 약재에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라낸 후 준비하는 단계;
단계(2), 개사철쑥, 고삼, 감초, 복령, 황련, 탱자, 상산, 인삼, 반하에서 각각 이물질, 비약용부위 불순물을 골라내고 유동 식수를 이용하여 세척한 후 편 또는 토막으로 절단하되 맥문동은 유동 식수를 이용하여 완전히 젖힌 후 얇게 두드려 펴서 준비하는 단계;
단계(3), 단계(1)과 단계(2)의 약재를 70-80℃에서 건조시켜 준비하는 단계;
단계(4), 황련, 탱자, 상산, 연자심, 고삼을 취하여 60%의 에탄올을 추가한 후 2번 환류 추출하는데 첫 번째에는 8배량을 추가하고 두 번째에는 6배량을 추가하며 매번 각각 1.5시간을 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 여과액을 0.04Kpa로 감압하고 70℃에서 에탄올을 회수하며 상대밀도가 1.38(60℃에서 측정)인 페이스트까지 계속하여 농축하고 80℃에서 드라이 페이스트로 건조하여 준비하는 단계;
단계(5), 인삼, 복령, 반하를 취하여 70%의 에탄올을 추가한 후 2번 환류 추출하는데 첫번째에는 8배량을 추가하고 두번째에는 6배량을 추가하며 매번 각각 2시간을 진행한 다음 추출액을 병합하고 여과하며 여과액을 다른 용기에 수집하여 준비;
단계(6), 단계(4)의 약 찌꺼기와 맥문동, 개사철쑥, 감초를 병합하고 물을 추가하여 2번 달이는데 첫 번째에는 10배량을 추가하고 두 번째에는 8배량을 추가하며 매번 각각 1시간을 진행한 다음 달임물을 병합하고 여과하며 여과액을 상대밀도가 1.05~1.06(80℃에서 측정)인 클리어 페이스트까지 농축하고 95% 에탄올을 추가하여 알콜 함량이 70%가 되도록 한 후 균일하게 교반하고 24시간 정치시켜 상등액을 취한 다음 여과하여 여과액을 수집하여 준비하는 단계;
단계(7), 단계(5)의 여과액과 단계(6)의 여과액을 병합하고 0.04KPa로 감압하며 70℃에서 에탄올을 회수하고 상대밀도가 1.38(60℃에서 측정)인 페이스트까지 계속하여 농축하며 80℃에서 드라이 페이스트로 건조하여 준비하는 단계;
단계(8), 단계(4)와 단계(7)의 드라이 페이스트를 병합하고 100메쉬의 분말로 분쇄한 후 적당한 양의 덱스트린을 추가하여 균일하게 혼합한 다음 캡슐에 담거나 또는 약용 보조재료와 함께 제제로 제작하여 획득하는 단계.
제1항에 있어서,
상기 이용은 항부정맥 약물을 제조에 이용하는 것을 특징으로 하는 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물.
제1항에 있어서,
상기 이용은 심실성, 심방성 또는 심실위 부정맥을 치료하는 약물 제조에 이용인 것을 특징으로 하는 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물.
제1항에 있어서,
상기 이용은 활동전위시간을 연장하고 칼륨 이온 채널을 조절하며 각종 칼륨 전류를 억제하는 약물 제조에 이용인 것을 특징으로 하는 칼륨 이온 채널 조절제 약물 제조에 이용되는 한약 조성물.
제1항에 있어서,
상기 한약 조성물은 정제, 캡슐, 과립제, 드링크제 또는 환약인 것을 특징으로 하는 칼륨 이온 채널 조절제 약물을 제조에 이용되는 한약 조성물.