KR20180023138A

KR20180023138A - 갈대 내생균으로부터 분리된 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 치료 및 예방용 조성물

Info

Publication number: KR20180023138A
Application number: KR1020160107652A
Authority: KR
Inventors: 김순옥; 방우영; 심상희; 김정아; 이현정; 박정은
Original assignee: 대한민국(환경부 국립생물자원관장)
Priority date: 2016-08-24
Filing date: 2016-08-24
Publication date: 2018-03-07
Also published as: KR101897644B1

Abstract

본 발명은 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주에서 분리된 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다.
본 발명에 따른 화합물은 우수한 항염증 활성을 보유하여 이를 이용한 약학적 조성물, 식품 조성물 등의 용도로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

갈대 내생균으로부터 분리된 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 치료 및 예방용 조성물{Novel Compounds Derived from Endophytic Fungal Strain Isolated from the Rhizome of Reed Plant and Composition for Treating and Preventing Inflammatory Disease Comprising the Same}

본 발명은 염증성 질환 치료 및 예방용 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 갈대 내생균으로부터 분리된 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 치료 및 예방용 조성물에 관한 것이다.

지질-폴리사카라이드 복합 화합물인 리포폴리사카라이드(LPS, Lipopolysaccharide)는 그람 음성 박테리아의 세포벽에서 발견되는 내독소 O-항원으로서, 박테리아 LPS는 전형적으로는 리피드 A(내독소), 비반복성 코어 올리고사카라이드, 및 폴리사카라이드(O-항원)로 구성되어 있다. 지질 부분(리피드 A)은 글리코사이드 결합을 통해 코어 폴리사카라이드 부분과 복합체를 형성한다. 코어 부분은 반복되는 올리고사카라이드 유닛으로 구성된 고도의 면역원성과 가변성을 갖는 O-사슬 폴리사카라이드, 즉 3번째의 외부 부위인 O-항원 부위와 연결된다.

산화질소(NO, Nitric oxide)는 면역시스템에서 다양한 생리학적 메카니즘을 조절하는데 관여하는 중요한 세포내 및 세포간 신호전달 분자이다. 산화질소는 수퍼옥사이드와 반응하여 퍼옥시나이트라이트(peroxynitrite) 이온을 생성하고, 생성된 이온은 과도한 염증 활성을 유도하며, 패혈증(sepsis), 궤양성 대장염(ulcerative colitis), 관절염(arthritis), 루푸스(systemic lupus erythematosus, SLE) 및 쇼그렌증후군(Sjogren's syndrome, SS) 등의 질환을 발생시키는 것으로 알려져 있다. 활성산소종(Reactive oxygen species, ROS) 및 산화질소(nitric oxide, NO)는 신호전달과정의 중간 매개자로서 매우 중요한 생리학적 역할을 담당한다.

그러나, 내인성 및/또는 외인성 ROS 및 NO의 과도한 생성은 염증성 질환 및 암의 발병에 관련되어 있다. 또한, 산화환원-민감성 전사인자인 NF-κB는 산화스트레스, 외인성 ROS와 산화질소(NO, Nitric oxide) 등과 같은 염증성 매개자에 의해 활성화된다. NF-κB가 활성화되면, IκB는 IκB 키나아제(IKK) 복합체에 의해 인산화되고, IκB는 유비퀴틴화(ubiquitinated)되어 분해된다. IκB로부터 분리된 자유 NF-κB는 핵속으로 이동하고, 핵내에서 세포 성장조절, 아폽토시스, 면역반응, 염증 및 암에 관련된 유전자를 전사시킨다. 또한, NF-κB는 만성염증성질환 및 다양한 인간 암의 발병기전에 중요한 역할을 한다고 보고되었다.

따라서, NF-κB 활성을 유발하는 NO 발생을 억제하는 물질을 탐색하면, 다양한 염증성 질환의 예방 및 치료에 효과적인 물질로 판명할 수 있다는 것을 의미한다.

또한, 세포내 다양한 염증 조절 인자들은 유도형 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase; iNOS)나 사이클로-옥시제나제 (cyclo-oxygenase-2; COX-2)에 의해 생체 내 대식세포와 같은 염증 세포들이 활성화 되면서 염증 매개인자인 일산화질소(Nitric oxide; NO), 프로스타글란딘(Prostaglandin; PG), 인터루킨-1 베타(Interleukin-1 beta; IL-1β), 종양괴사인자-알파 (Tumor necrosis factor-alpha; TNF-α), 사이토카인(cytokine) 등이 다량 생산 된다(Jun-Ho Son. et.al., Anti-Inflammatory Effect of Ligularia fischeri, Solidago virga-aurea and Aruncus dioicus Complex Extracts in Raw 264.7 Cells, Journal of Life Science, 2011, Vol. 21, No. 5, 678~683쪽). 또한, 염증성 사이토카인(cytokine)인 인터루킨-1(IL-1), 종양괴사인자-α(TNF-α) 등을 유도시키게 되는데 이로 인하여 근육, 건, 인대 등과 같은 조직에도 영향을 끼쳐 심한 통증을 일으킨다(Fernandes J. C. et al., The role of cytokines in osteoarthritis pathophysiology, 2002, 39, 237-246쪽).

대부분의 염증 질환의 치료제로서 널리 사용되고 있는 제제인 비스테로이드성 소염제(non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDS)는 시클로옥시게나제(cyclooxygenase, COX)라고 하는 아라키돈산(arachidonic acid)으로부터 프로스타글란딘(prostaglandin)의 생합성에 관여하는 효소 활성을 억제함으로써, 항염증 작용을 나타내는데, 주 치료작용 외에 위장관 장애, 간장애, 신장애 등의 심각한 부작용을 야기하므로 장기간의 사용에 있어서 제약이 따르는 실정이다. 따라서, 특허 등록 제10-0532633호, 특허등록 제10-1390084호, 특허등록 제10-1160488호 등 천연에서 유래한 식물추출물을 이용한 염증성 질환 치료용 조성물에 관한 연구가 진행된 바 있다. 상기 비스테로이드성 소염제를 대체하여 부작용이 없이 장기간 사용하는데 무리가 없으면서 항염증 효능에 탁월한 새로운 소염 진통제의 개발이 절실하게 요구되고 있으며, 이는 최근 천연 자원으로부터의 효능 검증을 통한 소재 개발 연구가 활성화되고 있는 이유이기도 하다.

한편, 식물 내생균은 생활사의 일부가 건강한 식물 조직에 외형적 변형을 일으키지 않고 공존하는 미생물이다. 내생균의 공생은 기주식물과의 상호관계, 즉 내생균과 기주식물 파트너의 특성이나 환경적 영향에 따라 공생, 편리 공생 및 기생 등의 형태(balanced symbiotic continuum)로 정의될 수 있다. 내생균은 기주식물의 생장 촉진, 병해충 저항성 증대, 냉해나 건조 등의 환경변화에 대한 적응력 증대, 대사물질 형성 촉진 등 식물에 이로운 영향을 주기도 하나, 일부 내생균의 경우 기주식물에 잠복하여 병원균으로 작용하는 등 해로운 영향을 주기도 하고, 죽은 식물 조직의 일차 분해자로 작용하여 생태계 물질 순환을 촉진하는 역할을 하기도 한다.

또한, 식물 내생균은 그 자체가 항암 또는 항균 등의 활성을 갖는 유용한 이차대사산물을 생산하는 것으로 알려져 있는데, 가장 대표적인 예로는 주목나무에서 분리된 탁소미세스 속 내생균(Taxomyces andreanae)으로 차세대 항암제로 주목받고 있는 택솔(paclitaxel)을 생산하는 내생균이다. 이러한 내생균의 상업적 성공으로 인해 다양한 약리적 효능을 가진 신규 생리활성 물질을 보유한 새로운 식물 내생균을 찾기 위한 연구개발 노력이 지속적으로 이루어지고 있다.

그러나, 이러한 연구결과에도 불구하고 아직까지 식물 내생균을 이용한 신규 약제 개발과 관련된 연구 성과는 미미한 상태이다.

이에, 본 발명자들은 염증반응에 관여하는 산화질소의 발생을 효과적으로 억제하는 천연유래 물질을 발굴하기 위해 예의 연구노력한 결과, 갈대 내생균으로부터 분리된 화합물들이 산화질소의 발생을 효과적으로 억제하여 다양한 염증성 질환의 예방 및 치료에 효과적으로 활용할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 주된 목적은 염증성 질환 치료 및 예방에 효과가 있는 갈대 내생균으로부터 분리된 화합물, 이의 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 갈대 내생균으로부터 분리된 화합물, 이의 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 조성물을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 목적 및 장점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구의 범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 하기 화학식 1 내지 화학식 6 중 어느 하나로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 5]

및

[화학식 6]

본 발명에서는 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주의 일종인 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) JS0464(NIBRFGC000146694) 균주(수탁번호: KACC83010P)를 동정하고, 상기 균주가 생산하는 항염증 활성을 갖는 화합물을 정제 및 동정하였다.

상기 화학식 1로 표시되는 신규한 화합물은 “resorcinol 2-butyl-5-pentyl-4-C-6-deoxy-β-D-gulopyranoside(stemphol C)” 이고,

상기 화학식 2로 표시되는 신규한 화합물은 “resorcinol 2-butyl-5-pentyl-4-C-α-L-rhamnoside(stemphol D)” 이고,

상기 화학식 3으로 표시되는 신규한 화합물은 “1-O-methyl-6-O-(α-D-ribofuranosyl)-emodin” 이고,

상기 화학식 4로 표시되는 화합물은 “1-O-methylemodin” 이고,

상기 화학식 5로 표시되는 화합물은 “5α,8α-epidioxyergosta-6,9(11),22-trien-3-ol” 이고,

상기 화학식 6으로 표시되는 화합물은 “5α,8α-epidioxy-(22E,24R)-23-methylergosta-6,22-dien-3β-ol”로 명명된다.

특히, 본 발명자들은 상기 화학식 1 내지 3으로 표시되는 신규한 화합물을 처음으로 규명하였고, 종래물질인 화학식 4 내지 6으로 표시되는 화합물의 신규한 항염증 효능을 처음으로 규명하였다.

또한, 상기 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주는 수탁번호 KACC 83010P로 부다페스트 조약 하의 국제기탁기관인 국립농업과학원 농업유전자원정보센터에 (KACC)에 국제기탁하여 수탁번호 KACC 83010P를 부여받았다. 상기 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주 JS0464(NIBRFGC000146694)는 상기 화학식 1 내지 화학식 6으로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 이의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 생산하여 항염증 활성을 갖는 물질을 생산한다.

본 발명의 일 실시예에서는 순천만 갈대 뿌리로부터 순수 분리된 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 JS0464(NIBRFGC000146694) 균주를 동정하기 위하여 생리적, 형태학적인 검사를 수행하였다(도 1 및 도 2 참조).

그 결과, 상기 균주는 PDA(potato dextrose agar), Czapek dox agar 배지 및 Czapek dox agar 배지를 기본으로 하고 서로 다른 9개의 탄소원으로 구성된 배지에서 균사생장의 차이가 없으며, V8 주스 아가(juice agar)와 오트밀 아가 배지나, 워터 아가(Water agar)에 멸균된 갈대 줄기 조각을 올린 갈대 배지 상에서 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 특유의 자실체를 형성하였다. 자낭과 내에는 8개의 자낭포자가 들어 있었다. PDA 배지 상에서는 후막포자를 형성하였다.

또한, ITS1 및 ITS4 프라이머를 이용한 ITS(internal transcribed spacer) 분석 결과, 상기 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 JS0464(NIBRFGC000146694) 균주는 유성기(sexual stage)에는 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속의 특징을, 무성기(asexual stage)에는 피알로포라 속(Phialophora sp.)의 특징을 보였다.

생리적, 형태학적 특성과 ITS 염기서열 분석을 기초로 JS0464(NIBRFGC000146694) 균주를 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주로 동정하였으며, 국립농업과학원 농업유전자원정보센터에 2016년 07월 25일자로 기탁하고, 수탁번호 KACC83010P를 부여받았다.

구체적으로 본 발명의 화합물은 상기 화학식 1 내지 화학식 6의 화합물과 동일한 활성을 갖는 이의 이성질체, 이의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 용어 "이성질체"란, 화학식은 같으나 동일하지는 않은 화합물의 관계를 의미하며, 이러한 이성질체의 종류에는 구조 이성질체, 기하 이성질체, 광학 이성질체 및 기하 이성질체가 있다. 입체 이성질체란, 동일한 화학적 구성을 갖지만, 공간 중에서 원자 또는 기의 배열의 측면에서 상이한 화합물 의미하고, 광학 이성질체(거울상 이성질체)는 서로 겹치지 않는 거울상을 갖는 한 화합물의 두 입체 이성질체를 의미하며, 부분입체 이성질체는 둘 이상의 비대칭 중심을 가지고 그것의 분자들이 서로 거울상이 아닌 입체이성질체를 의미한다.

본 발명의 용어 "유도체"는 화합물의 원자 혹은 원자단이 다른 원자 혹은 원자단에 의해서 치환된 화합물로서, 본 발명의 유도체는 상기 화학식 1 내지 6의 화합물의 원자 혹은 원자단이 다른 원자 혹은 원자단에 의해서 치환된 화합물로서, 항염증 활성을 갖는 화합물을 말한다. 구체적으로는 탄화수소 또는 복소 고리의 수소 원자를 다른 기로 치환한 유도체이거나, 작용기를 다른 작용기로 치환한 유도체일 수 있다.

본 발명의 용어 "약학적으로 허용가능한 염"은 환자에게 비교적 비독성이고 무해한 유효작용을 갖는 농도로서, 이 염에 기인한 부작용이 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화합물의 이로운 효능을 저하시키지 않는 상기 화합물의 임의의 모든 유기 또는 무기 부가염을 의미한다.

산부가염은 통상의 방법, 예를 들어 화합물을 과량의 산 수용액에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들어 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조한다. 동 몰량의 화합물에 산 또는 알코올(예, 글리콜 모노메틸에테르)을 가열하고, 이어서 상기 혼합물을 증발시켜 건조시키거나, 또는 석출된 염을 흡인 여과시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

이때, 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 인산, 황산, 질산, 주석산 등을 사용할 수 있고 유기산으로는 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 말레인산(maleic acid), 숙신산, 옥살산, 벤조산, 타르타르산, 푸마르산(fumaric acid), 만데르산, 프로피온산(propionic acid), 구연산(citric acid), 젖산(lactic acid), 글리콜산(glycollic acid), 글루콘산(gluconic acid), 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산(glutaric acid), 글루쿠론산(glucuronic acid), 아스파르트산, 아스코르브산, 카본산, 바닐릭산, 요오드화수소산(hydroiodic acid) 등을 사용할 수 있으며, 이들에 제한되지 않는다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속염 또는 알칼리 토금속염은, 예를 들어 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해시키고, 비용해 화합물 염을 여과한 후 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 특히 나트륨, 칼륨, 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하나 이들에 제한되는 것은 아니다. 또한 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 얻을 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 화학식 1 내지 6의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염은, 달리 지시되지 않는 한, 화학식 1 내지 6의 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 포함한다. 예를 들어, 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드록시기의 나트륨, 칼슘 및 칼륨염 등이 포함될 수 있고, 아미노기의 기타 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드로브롬화물, 황산염, 수소 황산염, 인산염, 수소 인산염, 이수소 인산염, 아세테이트, 숙시네이트, 시트레이트, 타르트레이트, 락테이트, 만델레이트, 메탄술포네이트(메실레이트) 및 p-톨루엔술포네이트(토실레이트) 염 등이 있으며, 당업계에 알려진 염의 제조방법을 통하여 제조될 수 있다.

본 발명의 상기 화학식 1 내지 6의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염으로는 약학적으로 허용가능한 염으로서, 상기 화학식 1 내지 6의 화합물과 동등한 항염증 활성을 나타내는 상기 화학식 1 내지 6의 화합물의 염이면 제한 없이 모두 사용 가능하다.

본 발명의 상기 화학식 1 내지 화학식 6 중 어느 하나로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 염증성 질환의 예방 또는 치료에 효과가 있는 것을 특징으로 한다.

본 발명에서 상기 염증성 질환은 부종, 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루프스, 섬유근통(fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrom), 다발성 경화증 등의 염증성 질환일 수 있다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 화학식 1 내지 화학식 6으로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 이의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 산화질소(NO)의 분비를 억제함으로써 항염증 활성을 갖는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 일 실시예에서는 상기 화학식 1 내지 화학식 6의 화합물의 세포 독성을 측정한 결과, 세포 독성이 없음을 확인하여 약학적 조성물로의 사용 가능성을 확인하였으며, 염증 유발 인자인 산화질소(NO)의 생산 및 분비를 억제하는 효과가 우수함을 확인함으로써, 염증성 질환의 치료 및 예방 효과가 우수함을 확인할 수 있었다(도 4 내지 7).

본 발명의 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 화학식 1의 화합물을 0.0001 내지 99.9 중량%로, 바람직하게는 0.001 내지 10 중량%로 포함할 수 있다.

본 발명에서 용어, "염증성 질환"은 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 의미로서, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게는 부종, 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통(fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome) 또는 다발성 경화증일 수 있다.

본 발명에서 용어, "치료"는 상기 조성물의 투여로 염증성 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 의미하며, "예방"은 상기 조성물의 투여로 염증성 질환의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있으며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

또한, 본 발명의 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수용성용제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 그 투여용량에 특별한 제약은 없고, 체내 흡수도, 체중, 환자의 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다. 일반적으로, 일일 투여량은 바람직하게는 화학식 1의 화합물의 양을 기준으로 0.0001 내지 100 mg/kg일 수 있으며, 보다 바람직하게는 0.001 내지 100 mg/kg일 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 유효량 범위를 고려하여 제조하도록 하며, 이렇게 제형화된 단위 투여형 제제는 필요에 따라 약제의 투여를 감시하거나 관찰하는 전문가의 판단과 개인의 요구에 따라 전문화된 투약법을 사용하거나 일정 시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.

또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 화학식 1 내지 화학식 6 중 어느 하나로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.

상기 화합물에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명의 조성물을 건강기능식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 건강기능식품 또는 건강기능식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 바람직하게는 15 중량부 이하, 보다 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 조절 및 위생을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안정성 면에서 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.

본 발명의 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 조성물을 첨가할 수 있는 건강기능식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물이 음료의 형태로 사용될 경우에는 통상의 음료와 같이 여러 가지 감미제, 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드, 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨과 같은 당알콜일 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 이에 제한되지는 않으나, 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 바람직하게는 약 0.01 내지 0.04g, 보다 바람직하게는 0.02 내지 0.03g일 수 있다. 상기 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제 및 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제일 수 있다.

상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 생산하기 위한 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) JS0464(NIBRFGC000146694)(수탁번호: KACC83010P) 균주를 제공한다. 상기 균주는 염증성 질환의 예방 또는 치료에 효과가 있는 상기 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 생산하는 것을 특징으로 한다.

상기 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) JS0464(NIBRFGC000146694)(수탁번호: KACC83010PP) 균주에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:

(i) 본 발명의 화학식 1 내지 화학식 6의 화합물은 대식세포에서 LPS 처리에 의해 유도되는 산화질소(NO)의 과생성을 억제하며, 인터페론β 및 IL1β를 효과적으로 억제한다.

(ⅱ) 본 발명의 화학식 1 내지 화학식 6의 화합물은 산화질소 과생성을 저해함으로써 다양한 염증성질환의 치료제로 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주 JS0464(NIBRFGC000146694)가 감자한천배지 상에서 생장하는 모습 및 형성된 후막포자에 대한 사진이다.
도 2는 본 발명의 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주 JS0464(NIBRFGC000146694)가 V8 juice agar 배지 상에서 생장하는 모습을 나타내는 사진이다.
도 3은 화학식 1 내지 화학식 6의 화합물의 세포독성 실험 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 화학식 1 내지 화학식 6의 화합물이 산화질소(NO) 생성 억제를 통해 항염증 활성을 나타냄을 보여주는 그래프이다.
도 5는 화학식 5의 화합물이 농도의존적으로 산화질소(NO) 생성 억제를 통해 항염증 활성을 나타냄을 보여주는 그래프이다.
도 6은 화학식 5의 화합물이 IFN-β 발현 억제를 통해 항염증 활성을 나타냄을 보여주는 그래프이다.
도 7은 화학식 6의 화합물이 IL-1β 발현 억제를 통해 항염증 활성을 나타냄을 보여주는 그래프이다.
도 8은 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주 JS0464의 계통도이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예

본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 “%“는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량) %, 고체/액체는 (중량/부피) %, 그리고 액체/액체는 (부피/부피) %이다.

실시예 1. 균주 분리

항염증 활성이 있는 식물 내생균을 수집하기 위해 먼저 식물 시료로 갈대 뿌리를 확보하였다.

[표 1] 기주식물

채집한 식물 시료는 흐르는 수돗물로 표면에 붙은 흙먼지를 씻고 물기를 닦은 후, 내생균 분리에 사용하였다. 먼저 뿌리 조직은 0.5×0.5cm 크기의 단편으로작게 조각낸 후, 2% 차아염소산나트륨 용액에 1분 동안 살균하고, 다시 70% 에탄올에 1분간 표면 살균한 후, 다시 멸균된 증류수에 1분간 세척하고, 균주 분리용 배지에 치상하였다. 균주분리용 배지는 MEA(malt extract agar, Difco)와 PDA에 50ppm 로즈 벵갈(Rose Bengal), 100ppm 카나마이신(Kanamycin), 100ppm 스트렙토마이신(Streptomycin)을 첨가하여 조제하였다. 표면살균한 갈대 조각을 균주분리용 배지에 치상한 후, 22℃ 암조건에서 7일간 배양 후, 자라나오는 균사조각을 다시 PDA(potato dextrose agar, Difco) 배지로 옮겨 순수 배양한 후, 분리된 균주를 넘버링 하고, 국립생물자원관(National Institute of Biological Resources)의 야생 유전자원 은행(Wildlife Genetic Resources Bank)의 액체질소탱크에 20% 글리콜 스탁(glycerol stocks)으로 보관하였다(도 1 및 도 2 참조).

실시예 2. 화합물 분리 및 동정

라이스 배지(rice media)에서 배양한 내생균 배양액을 에틸 아세테이트(EtOAc) 용매 하에서 울트라소닉 소노매틱 클리닝 배쓰(ultrasonic sonomatic cleaning bath, Branson 5510E-DTH, Danbury, USA) 장치를 이용하여 시간당 40kHz의 주파수 및 135W 조건에서 3회 추출하였다.

추출된 혼합 용액을 45℃ 감압조건 하에서 건조하여 에틸아세테이트 추출물 72.3g을 수득하였다. 이렇게 수득한 에틸아세테이트 추출물 70g을 실리카 겔 컬럼 크로마토그리피[n-Hexane-EtOAc-MeOH 농도 구배(v/v/v, 50:1:0 → 2:1:0.1 → 0:0:1) 용액]를 이용하여 크로마토그래피를 진행하고, A에서 F까지 6개의 분획물을 수득하였다.

상기 분획물 E를 HPLC를 이용하여 정제하였고, 다시 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피[n-Hexane-EtOAc-MeOH 농도구배(v/v/v, 8:1:0 → 2:1:0.1]를 이용하여 크로마토그래피를 진행하여, E1에서 E12까지의 분획물을 수득하였다.

상기 분획물 E11을 H₂O-MeOH 용매(v/v, 95:5 → 0:100) 농도구배 시스템을 적용한 C-18 컬럼 크로마토그래피를 이용한 HPLC를 수행하여, 본 발명의 상기 화학식 1의 화합물(38.4mg)을 수득하였다.

또한, 상기 분획물 E12를 MeOH-H₂O 용매(v/v, 1:1 → 4:1) 농도구배 시스템을 적용한 C-18 컬럼 크로마토그래피를 이용하여, 본 발명의 상기 화학식 2의 화합물(6.2mg)을 수득하였다.

상기 분획물 F를 세파덱스 LH-20(Sephadex LH-20)에 넣고, 메탄올 등용매용리(isocratic) 방식의 크로마토그래피를 진행하여, F1에서 F20까지의 분획물을 수득하였다.

상기 분획물 F14를 H₂O-MeOH 용매(v/v, 95:5 → 0:100) 농도구배 시스템을 적용한 C-18 컬럼 크로마토그래피를 이용한 HPLC를 수행하여, 본 발명의 상기 화학식 3의 화합물(1.8mg)을 수득하였다.

또한, 상기 E8 분획물을 결정화화여 본 발명의 상기 화학식 4의 화합물(2.8 mg)을 수득하였다.

분획물 C를 다시 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피[n-Hexane-EtOAc 농도구배(v/v, 100:1 → 7:1)]를 이용하여 크로마토그래피를 진행하여, 본 발명의 상기 화학식 5의 화합물(총량 4.0mg)을 수득하였다.

상기 E7 분획물을 아세톤, 메탄올, 및 물로 농도구배[Acetone-MeOH-Water (v/v/v, 0:1:1 → 7:7:1)]한 용매 시스템을 적용한 C-18 컬럼 크로마토그래피(C-18 column chromatography)를 이용하여, 본 발명의 상기 화학식 5의 화합물(7.0mg), 및 상기 화학식 6의 화합물(5.7 mg)을 각각 수득하였다.

신물질인 상기 화학식 1 및 화학식 2의 화합물의 CD₃OD 상에서 NMR 분석 결과는 하기 표 2와 같다.

[표 2] ¹H(600MHz) 및 ¹³C(150MHz) NMR 스펙트로스코프 데이터

또한, 신물질인 상기 화학식 3의 화합물의 pyridine-d₅ 상에서 NMR 분석 결과는 하기 표 3과 같다.

[표 3] ¹H(600MHz) 및 ¹³C(150MHz) NMR 스펙트로스코프 데이터

상기 화학식 1 내지 3의 신물질 화합물의 주요 특성은 다음과 같다.

- 화학식 1의 화합물: 연한 황색 바늘형(MeOH/H₂O); [α]D25 = -23.4°(c 0.1, MeOH); ¹H 및 ¹³C NMR 데이터(표 2); (+)HR-ESI-MSm/z, 405.2249 [M+Na]⁺, C₂₁H₃₄O₆Na, 405.2248.

- 화학식 2의 화합물: 연한 황색 무정형(MeOH/H₂O); [α]D25 = +11.4°(c 0.1, MeOH); ¹H 및 13C NMR 데이터(표 2); (+)HR-ESI-MSm/z, 405.2249 [M+Na]⁺, C₂₁H₃₄O₆Na, 405.2248.

- 화학식 3의 화합물: 연한 황색 무정형; [α]D25 = -42.3°(c0.1, MeOH); ¹H 및 ¹³C NMR 데이터(표 3); (+)HR-ESI-MS m/z 439.1001 [M+Na]⁺, C₂₁H₂₀O₉Na, 439.1000.

실시예 3. 세포 독성 검정

본 발명의 화합물들이 마우스 BV-2(murine microglial cells) 세포의 생장에 미치는 효과를 아래와 같은 방법으로 확인하였다.

우선, 경희대학교 오명숙 교수 연구실에서 제공받은 BV-2(murine microglial cells) 세포를 4g/L의 글루코오스, 3.7 g/L 소듐 바이카보네이트, 10% FBS(fetal bovine serum) 및 항생물질(100units/ml 페니실린 및 100μg/ml 스트렙토마이신)을 포함하는 낮은 글루코오스 농도의 DMEM(pH 7.2 - 7.4) 배지를 이용하여, 5% CO₂, 37℃, 습윤 조건 하에서 배양하였다.

배양된 BV-2(murine microglial cells) 세포를 5×10⁴(세포/웰) 농도로 96-웰 클리어 바텀 플레이트(Costar, Cambridge, MA)에서 하루 동안 세포를 배양한 후, DMEM 배지(0.5% DMSO 포함)에 용해된 상기 화학식 1 내지 6의 화합물(50μM)을 처리하여 시험군으로 사용하였다.

세포 생존율은 MTS 분석 키트(Promega, Madison, WI)를 사용하여 제조사 매뉴얼에 따라 분석하였다. 미토콘드리아 디하이드로게나아제의 활성에 직접적으로 비례하는 포마잔(formazan) 생성물의 양은 490nm에서 측정하였다.

R i386 3.3.0 소프트웨어를 사용하여 Student's t-test를 수행하였다. 모든 수치는 적어도 3회 이상의 독립적인 실험값에 대한 평균±표준오차로 표시하였다.

그 결과, 상기 화학식 1 내지 6의 화합물을 처리한 경우, 마우스 BV-2(murine microglial cells) 세포의 생존율에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었으며, 특히, 상기 화학식 2의 화합물을 처리한 군에서는 무처리 군에 비해 세포생존율이 17.2% 증가하는 현상을 관찰 할 수 있었다(도 3 참조). 이러한 결과를 통해 본 발명의 화합물이 인체에 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다.

실시예 4. 항염증 활성 검정

상기 실시예 3에서 배양된 BV-2(murine microglial cells) 세포를 5×10⁴(세포/웰) 농도로 96-웰 클리어 바텀 플레이트(Costar, Cambridge, MA)에서 하루 동안 세포를 배양한 후, 각각 24시간 동안 1μ농도의 LPS(Lipopolysaccharide, Sigma-Aldrich, St. Louis, U.S.A)를 처리하여 배양하여 대조군으로 사용하였다. 상기 LPS 처리 3시간 전에, DMEM 배지(0.5% DMSO 포함)에 용해된 상기 화학식 1 내지 6의 화합물(50μM)을 처리하여 시험군으로 사용하였다.

산화질소를 검출하기 위해서, 세포 배양액의 상등액으로 그리스 시약(Griess reagent) 변색 반응을 수행하였다. LPS 처리 24시간 후, 수득한 50㎕의 세포 배양액 상등액을 그리스 시약과 1:1 부피비로 혼합하고, 96-웰 마이크로플레이트 리더 흡광도 측정기(Synergy HT, Bio-Tek Instruments, Inc., Winooski, VT)를 시용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다.

상기 BV-2 세포주을 통한 NO 생성 억제 효과 확인실험의 결과를 도 4에 나타내었다.

그 결과, 본 발명의 화학식 1 내지 6의 화합물을 처리한 시험군은 LPS 단독 처리군에 비해, 각각 41.7%(화학식 1), 23.7%(화학식 2), 68.7%(화학식 3), 57.1%(화학식 4), 97.6%(화학식 5), 및 35.1%(화학식 6) 개선된 염증억제 효과를 보였다.

한편, NO 생성 억제 효과가 가장 높게 나타난 화학식 5의 화합물을 각각 10, 20, 30, 40, 및 50μM 농도로 처리하여 상기와 같은 방법으로 NO 생성 억제 효과 확인하고 도 5에 나타내었다. 도 5를 참조하면 본 발명의 화학식 5의 화합물이 농도 의존적으로 NO 생성을 억제하는 뛰어난 효과를 보이는 것으로 나타났다.

실시예 5. INFβ 및 IL-1β 억제 활성 검정

면역과민반응 염증성질환 마우스 모델에 화학식 5의 화합물을 처리한 후 면역과민반응 염증성질환과 관련된 사이토카인인 베타 인터페론(IFN-β)과 인터루킨-1β(IL-1β) 유전자 발현의 억제 효과를 확인하였다. 무처리군(CK)은 아무 처리도 하지 않은 것이다.

염증성 사이토카인인 베타 인터페론(IFN-β)과 인터루킨-1β(IL-1β)의 유전자 발현은 real-time RT-PCR 방법을 이용하여 측정하였다. 먼저, Microglia BV-2 cell을 12 well plate 에 4×10⁵농도로 24시간 배양 후 단일 물질(화학식 5)을 10uM, 및 50uM 농도로 처리하였다. 물질 처리 3시간 후 LPS를 처리하여 염증반응을 유도하고, 3시간 후 와 24시간 후 샘플링 하여 RNA를 추출하였다. 대조구로는, DMSO 만 처리한 대조구와 DMSO 처리 후 LPS 처리한 대조구 두가지를 이용하였다.

RNA 추출을 위해 12 well plate 에서 배지를 제거하고 PBS buffer로 wash 후 1ml RiboEx buffer를 넣어주었다. 2ml tube에 시료를 수거하고, GeneAll Hybrid-R(305-101) RNA 추출 kit의 실험순서에 따라 RNA를 추출하였다. 추출한 RNA의 농도를 측정한 후, 5ug RNA를 사용하여 Promega ImProm-II Reverse Transcription System(A3800)을 이용하여 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA 25ng을 이용하여 real-time RT-PCR을 실시하였다. 개별 유전자의 발현정도는 2^-△△Ct를 이용하여 상대적인 발현량을 측정하였다. 유전자 발현의 control gene으로는 β-actin을 이용하였으며, 상대발현량 측정을 위한 △△Ct는 [(Ct, gene of interest - Ct, actin)test condition - (Ct, gene of interest - Ct, actin)control condition]으로 계산하였고, 도 6 및 도 7에 나타내었다.

도 6과 도 7에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화학식 5의 화합물은 면역과민반응 염증성질환과 관련된 사이토카인인 베타 인터페론(IFN-β)과 인터루킨-1β(IL-1β)의 농도를 감소시키는 효과가 있음을 확인하였다.

실시예 6. JS0464 균주의 염기서열 분석을 통한 동정

상기 실시예 1에서 분리된 JS0464(NIBRFGC000146694) 균주부터 DNA를 분리하였다. 분리된 DNA를 ITS1 및 ITS4 프라이머를 이용하여 ITS(Internal Transcribed Spacer) 서열을 증폭하였고, ITS 염기서열을 확보하였다(Gardes and Bruns, 1993; White et al., 1990).

확보된 염기서열은 서열분석(Sequencher) 프로그램을 이용하여 고품질 영역을 확보하고 조립하여 컨센서스 서열(consensus sequence)을 확정하고, NCBI의 뉴클레오타이드 데이터베이스를 대상으로 BLAST 검색을 수행하였다. 다중정렬 및 계통유연관계 분석은 MEGA 프로그램을 이용하였다.

ITS 염기서열 정보를 바탕으로 수행한 NCBI Blast 검색에서, JS0464(NIBRFGC000146694) 균주는 고이마노마이세스(Gaeumannomyces)(유성기)-피알로포라(Phialophora)(무성기) 속(Genus)의 종복합체(species complex)로 분류되었다(도 8 참조).

상기 JS0464(NIBRFGC000146694) 균주가 얇은 콜로니형, 파이알형(phial-like) 분생자 자루(conidiophores) 또는 겸형(sickle-shaped) 분생자(conidia) 등의 특징을 갖는 하르포포라 속과는 다른 표현형을 갖는 것을 고려하여 잠정적으로 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주 JS0464(NIBRFGC000146694)로 명명하고, 국립농업과학원 농업유전자원정보센터에 기탁번호(KACC 83010P)로 기탁하였다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

국립농업과학원 농업유전자원정보센터

KACC83010BP

20160725

Claims

하기 화학식 1 내지 화학식 6 중 어느 하나로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염:
[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 5]

[화학식 6]

.
제1항에 있어서,
상기 화합물은 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주에서 분리된 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염.
제1항에 있어서,
상기 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) 속 균주는 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) JS0464(NIBRFGC000146694)(수탁번호: KACC 83010P)인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염.
제1항에 있어서,
상기 화합물은 염증성 질환의 예방 또는 치료에 효과가 있는 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염.
제4항에 있어서,
상기 염증성 질환은 부종, 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루프스, 섬유근통(fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrom) 및 다발성 경화증으로 구성된 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제6항에 있어서,
상기 염증성 질환은 산화질소(Nitric oxide, NO) 매개 염증성 질환인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제6항에 있어서,
상기 염증성 질환은 부종, 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루프스, 섬유근통(fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrom) 및 다발성 경화증으로 구성된 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제6항에 있어서,
상기 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 전체 조성물의 0.001 내지 10 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 건강기능식품.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 이의 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 생산하기 위한 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) JS0464(NIBRFGC000146694)(수탁번호: KACC 83010P) 균주.
제11항에 있어서,
상기 화합물은 염증성 질환의 예방 또는 치료에 효과가 있는 것을 특징으로 하는 고이마노마이세스(Gaeumannomyces) JS0464(NIBRFGC000146694)(수탁번호: KACC 83010P) 균주.