KR20170118934A - 미네랄 강화된 천연 보충제 - Google Patents
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Abstract
본 기술은 1종 이상의 미네랄을 함유하는 영양 보충제에 관한 것이다. 특히 본 기술은 사상균 바이오매스 및 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및 망간에서 선택되는 1종 이상의 미네랄을 포함하는 영양 보충제, 및 영양 보충제의 제조 방법에 관한 것이다.
Description
본 기술은 진균 바이오매스 및 1종 이상의 미네랄 예컨대 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및 망간을 함유하는 천연 보충제에 관한 것이다.
인간의 영양 및 건강에서 미량 원소의 중요성은 수년 동안 인식되어져 왔다. 세계보건기구(WHO)의 1996년 보고서에 따르면, 미량 원소는 하기와 같이 그룹핑되어졌다:
A.
필수 - 요오드(I), 아연(Zn), 셀레늄(Se), 구리(Cu), 몰리브덴(Mo) 및 크롬(Cr);
B.
준필수 - 망간(Mn), 규소(Si), 니켈(Ni), 붕소(B) 및 바나듐(V).
요오드는 식염으로 널리 강화되었지만 다른 원소들은 일반적으로 다루어지지 않았다. 예를 들어, 개발 도상국에서의 아연 결핍은 건강에 해로운 결과를 초래하고 제한된 아동의 성장과 발달을 초래할 수 있다.
미량 원소 셀레늄은 다수의 효소 예컨대 글루타티온 퍼옥시다제, 티오레독신 리덕타제 및 데이오디나제에서 발견된다. 이들 효소는 항산화, 근육 기능 및 종양 예방에서의 역할을 인정받고 있다 (Mehdi, Y. et al. 2013. Selenium in the environment, metabolism and involvement in body functions. Molecules 18:3292-3311).
미량 원소 크롬은 당 및 지방 대사에 요구되는 필수 영양소로서 간주되어져 왔다. 크롬의 식이 섭취량이 불충분하면, 당뇨병 및 심혈관 질환에서 관찰되는 것과 유사한 징후 및 증상을 야기한다 (Anderson, RA et al, 1997. Elevated intakes of supplemental chromium improve glucose and insulin variables of people with type II diabetes. Diabetes 46:1786-1791). 내당능 장애 또는 당뇨병이 있는 사람들에게 보충된 크롬은 혈당, 인슐린 및 지질 프로파일을 향상시킬 수 있다 (Cefalu, WT, and Hu FB . 2004. Role of chromium in human health and in diabetes. Diabetes Care. 27(11):2741-2751).
미량 원소 구리는 일반적으로 규칙적인 식이를 통해 충분한 양으로 얻어진다. 그러나 빈혈을 가진 사람들은 또한 구리가 결핍될 수 있다. 구리는 면역 기능을 향상시킬 수 있는 아연과 같은 항산화제의 부류의 일부이다 (Maggini S. et al., 2007. Selected vitamins and trace elements support immune function by strengthening epithelial barriers and cellular and humoral immune responses. Br J Nutr. 98: S29-35).
미량 원소 망간은 많은 효소 활성에 관여하기 때문에 인간에게 또한 중요하다 (Watts, DL. 1990. The nutritional relationships of manganese. J. Ortho Med. 5(4):219-222). 망간의 결핍 및 과잉 모두 연구되어졌고 유해한 것으로 나타났다.
마그네슘은 인간 골격의 주된 미네랄이지만 칼슘과 동일한 관심을 받지 못하고 있다. 이것은 칼슘 및 인보다 중요하지는 않지만 중요하다 (Fawcett, WJ, et al 1999. Magnesium: physiology and pharmacology. Bri J Anaesthesia 83 (2): 302-320). 마그네슘은 또한 다수의 효소에 대한 보조 인자이다. 심혈관 질환의 유행은 부분적으로는 환자에게 흔히 나타나는 마그네슘 결핍에 기인한다.
시판되는 미네랄 보충제의 대부분은 무기 화합물 예컨대, 아연, 망간 또는 구리 설페이트, 아연 옥시드, 아연 또는 크롬 피콜리네이트, 나트륨 셀레나이트, 셀레메티오닌, 마그네슘 설페이트, 및 마그네슘 시트레이트, 등이다. 그러나, 이러한 화합물은 소맥분 및 쌀과 같은 주식의 강화에 사용이 제한적이다. 주식 작물의 생물영양강화가 진행되고 있지만 앞으로는 개발 시간이 오래 걸린다. 무기 미네랄의 유기물로의 생물 전환을 단축시키는 미생물의 사용은 효모에서 수행되어졌다. 아연, 철분, 크롬, 셀레늄 또는 마그네슘이 별도로 강화된 효모 제품은 미네랄 보충제로 평가되지만, 이러한 제품과 관련된 생체이용률은 확정적이지 않다.
아연, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 및 마그네슘에 대한 1일 권장 투여량이 표 1에 제시된다 (Food and Nutrition Board, Institute of Medicine, National Academies. Recommended dietary allowances and adequate intakes, elements. 2014.)
그룹 |
아연
(mg/일) |
셀레늄
(㎍/일) |
크롬
(㎍/일) |
구리
(mg/일) |
망간
(mg/일) |
마그네슘
(mg/일) |
아동 4-8 | 5 | 5 | 15 | 0.4 | 1.5 | 130 |
남성 14+ | 11 | 55 | 35 | 0.9-1.3 | 2 | 400-420 |
여성 14+ | 11 | 55 | 24 | 0.9-1.3 | 2 | 310-360 |
임산부 19+ | 11 | 60 | n/a | n/a | n/a | 350-400 |
본 출원인은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)(A. 오리재(A. oryzae)) 또는 아스퍼질러스 나이저(Aspergillus niger)(A. 나이저(A. niger))를 사용하여 철분 강화 진균 세포괴를 생산하는 공정을 개발했다 (WO 2014/040122). 최대 4% 철분이 효모에서보다 더 높은 진균의 세포괴에 도입될 수 있었다.
본 발명자들은 진균으로부터의 철분의 상승된 수준을 포함하지 않는 미네랄을 함유하는 영양 보충제를 개발했다.
진균 바이오매스 및 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간을 함유하는 영양 보충제 및 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간을 함유하는 영양 보충제의 형성 방법이 개시된다.
일 양태에서, 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄의 높은 수준을 갖는 사상균 바이오매스
를 포함하는 영양 보충제가 제공된다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 상당한 수준의 철분을 함유하지 않는다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 200 mg/kg 미만의 수준의 철분을 갖는다.
일 실시양태에서 진균 바이오매스는 아스퍼질러스 오리재(A. 오리재) 또는 아스퍼질러스 나이저(A. 나이저)로부터의 것이다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 아연을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 마그네슘을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 셀레늄을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 크롬을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 구리를 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 망간을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 아연, 마그네슘 및 셀레늄 중 2종 이상의 조합을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 아연, 마그네슘 및 셀레늄을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및 망간 중 2종 이상의 조합을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및 망간을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및 망간에서 선택되는 적어도 1종의 미네랄을 약 1 내지 약 60000 mg/kg 함유한다.
일 실시양태에서 높은 수준의 아연은 적어도 약 500 mg/kg이고, 높은 수준의 마그네슘은 적어도 약 500 mg/kg이고, 높은 수준의 셀레늄은 적어도 약 1 mg/kg이고, 높은 수준의 크롬은 적어도 약 4 mg/kg이고, 높은 수준의 구리는 적어도 약 60 mg/kg이고, 높은 수준의 망간은 적어도 약 60 mg/kg이다.
일 실시양태에서 높은 수준의 아연은 적어도 약 2500 mg/kg이고, 높은 수준의 마그네슘은 적어도 약 2500 mg/kg이고, 높은 수준의 셀레늄은 적어도 약 5 mg/kg이고, 높은 수준의 크롬은 적어도 약 20 mg/kg이고, 높은 수준의 구리는 적어도 약 300 mg/kg이고, 높은 수준의 망간은 적어도 약 300 mg/kg이다.
일 실시양태에서 높은 수준의 아연은 적어도 약 5000 mg/kg이고, 높은 수준의 마그네슘은 적어도 약 5000 mg/kg이고, 높은 수준의 셀레늄은 적어도 약 10 mg/kg이고, 높은 수준의 크롬은 적어도 약 40 mg/kg이고, 높은 수준의 구리는 적어도 약 600 mg/kg이고, 높은 수준의 망간은 적어도 약 600 mg/kg이다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 약 500 내지 약 40000 mg/kg의 아연, 약 500 내지 40000 mg/kg의 마그네슘, 및/또는 약 1 내지 3500 mg/kg의 셀레늄, 약 4 내지 8000 mg/kg의 크롬; 약 60 내지 20000 mg/kg의 구리, 및/또는 약 60 내지 20000 mg/kg의 망간을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 약 2500 내지 약 40000 mg/kg의 아연, 약 2500 내지 40000 mg/kg의 마그네슘, 약 5 내지 3500 mg/kg의 셀레늄, 약 20 내지 8000 mg/kg의 크롬; 약 300 내지 20000 mg/kg의 구리, 및/또는 약 300 내지 20000 mg/kg의 망간을 함유한다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 약 5000 내지 약 40000 mg/kg의 아연, 약 5000 내지 40000 mg/kg의 마그네슘, 약 10 내지 3500 mg/kg의 셀레늄, 약 40 내지 8000 mg/kg의 크롬, 약 600 내지 20000 mg/kg의 구리, 및/또는 약 600 내지 20000 mg/kg의 망간을 함유한다.
영양 보충제는 희석제 또는 다른 보조 성분 예컨대 칼슘, 칼륨 및 인 및 이들의 무기 염을 포함할 수 있다.
영양 보충제는 파우더, 용액, 드링크, 캡슐, 타블렛, 또는 캐플렛으로 제제화될 수 있다.
영양 보충제의 이점은 이것이 농업 부산물 또는 식품 가공 부산물에서 사상균의 배양 동안 형성되는 천연 유기 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간을 함유하는 데 있다. 영양 보충제는 피타아제 및 사상균에 의해 천연적으로 생산되는 다른 효소를 추가로 함유하도록 생산되거나 제제화될 수 있다.
영양 보충제는 사상균의 성장 동안 첨가되는 추가의 무기 아연, 마그네슘, 셀레늄 염, 크롬 염, 구리 염 및/또는 망간 염 또는 다른 높은 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간 화합물을 함유할 수 있다. 예로는 아연 클로라이드, 아연 설페이트, 마그네슘 클로라이드, 마그네슘 설페이트, 나트륨 셀레나이트, 크롬 클로라이드, 구리 및 망간을 포함한다.
영양 보충제는 인간 또는 동물용으로 제제화될 수 있다.
또 다른 양태에서는 본 기술에 따른 영양 보충제를 포함하는 영양 제품이 제공된다.
영양 제품은 식품, 가공 식품, 드링크, 스포츠 드링크, 에너지 드링크, 에너지 바, 조식용 시리얼, 유제품, 동물 사료, 펫푸드, 등일 수 있다.
파우더 형태의 생성물이 또한 식품에 첨가되어 식품 강화 성분으로서 사용될 수 있다. 식품의 강화는 조미료, 염, 유아용 조제식, 및 밀가루, 옥수수가루 및 콩가루를 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
본 발명은 또한 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및 망간 중 1종 이상을 함유하는 미네랄이 풍부한 천연 보충제를 생산하기 위한 사상균, 예컨대 아스퍼질러스 오리재(A. 오리재) 또는 나이저(A. 나이저)의 성장에 관한 것이다.
사상균은 미네랄이 풍부한 천연 보충제를 생산하기 위해 식품 등급의 농업 또는 식품 가공 부산물로 부분적으로 제제화된 배지에서 배양될 수 있다.
또 다른 양태에서는, 하기 단계를 포함하는, 높은 수준의 미네랄을 함유하는 영양 보충제의 형성 방법이 제공된다:
농업 부산물 또는 식품 가공 부산물에서 사상균을 배양하여 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄을 사상균에 축적시키는 단계; 및
사상균을 수확하여 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간, 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄의 높은 수준을 갖는 진균 바이오매스를 함유하는 영양 보충제를 얻는 단계.
일 실시양태에서 사상균은 아스퍼질러스 오리재(A. 오리재) 또는 아스퍼질러스 나이저(A. 나이저)에서 선택된다.
농업 부산물은 농업 생산으로부터의 옥수수, 밀, 사탕무, 감자당, 대두, 유청에서 유래하는 폐기물로부터의 것일 수 있다. 이러한 산물의 예는 사탕수수 및 사탕무 과육, 대두 껍질, 대두 가공 유청, 밀 껍질, 옥수수 침지액(corn steeping liquid) 및 대두 유청이다.
일부 실시양태들에서 식품 가공 부산물은 옥수수 침지주(corn steeping liquor), 대두 유청, 사탕수수 및 사탕무 당밀, 대두 껍질 및 밀기울, 밀 껍질 및 식품 가공 부산물에서 선택된다.
배양 동안 사상균의 성장 및 사상균에 의한 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간의 축적을 돕기 위해 또 다른 성장 배지가 농업 부산물 또는 식품 가공 부산물에 제공될 수 있다.
일 실시양태에서는 1종 이상의 미네랄이 진균 세포괴에서 유기 형태로 전환된다.
아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간은 농업 부산물 또는 식품 가공 부산물로부터 또는 사상균에 의한 축적을 위해 배양 배지에 첨가되는 아연, 마그네슘, 셀레늄 크롬, 구리 및/또는 망간의 제공된 염으로부터 얻어질 수 있다.
영양 보충제의 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간 함량을 추가로 증가시키기 위해 아연 염, 예컨대 아연 설페이트, 마그네슘 염, 예컨대 마그네슘 설페이트 또는 마그네슘 클로라이드, 셀레늄 염 예컨대 나트륨 셀레나이트, 크롬 염 예컨대 크롬 클로라이드, 구리 염 예컨대 구리 설페이트, 망간 염 예컨대 망간 설페이트(이들 염에 한정되지 않음)를 포함하는 또 다른 무기 염 및 다른 높은 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간 화합물이 사상균의 성장 동안 첨가될 수 있다.
아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간의 무기 염은 진균 배양 배지에 배지 1 리터 당 적어도 약 5 mg의 염의 농도로 첨가될 수 있다. 일부 실시양태들에서는, 배지 1 리터 당 약 50 내지 1500 mg의 염이 사용될 수 있다.
영양 보충제는 다른 미네랄 예컨대 칼슘 및 칼륨을 추가로 포함할 수 있다. 추가적인 미네랄 보충을 달성하기 위해, 칼슘 카보네이트, 칼륨 포스페이트 및 칼륨 클로라이드가 배양물에 첨가될 수 있다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 상당한 수준의 철분을 함유하지 않는다.
일 실시양태에서 영양 보충제는 200 mg/kg 미만의 철분을 함유한다.
사상균의 성장을 돕기 위해 또 다른 배양 배지 또는 영양소가 제공될 수 있다. 예로는 효모 추출물, 가수분해된 식물 기반 단백질, 암모늄 염, 우레아, 칼륨 인, 구리 염 및 옥수수 침지주를 포함한다.
사상균은 임의의 적합한 환경 예컨대 고체 및 액체 발효 둘다에서 사용되는 발효 용기에서 배양될 수 있다.
사상균의 배양은 실온에서 또는 25 내지 35℃와 같은 승온에서 수행될 수 있다.
사상균은 임의의 적합한 수단에 의해 수확될 수 있다. 예로는 여과, 예컨대 필터 프레스, 벨트 프레스; 원심분리, 예컨대 디캔터, 건조, 예컨대 회전식(로터리) 건조기, 스팀 건조기 및 진공 건조기를 포함한다. 건조 온도는 생성물의 임의의 원치않은 열 손상을 감소시키기 위해 전형적으로 약 95℃보다 낮다.
수확된 사상균은 아연, 마그네슘 및/또는 셀레늄을 함유하는 영양 보충제를 형성하도록 추가 가공될 수 있다. 추가 가공은 분리, 파쇄, 연삭, 분류, 추출, 과잉 염 제거를 위한 냉수 및 온수를 이용한 세척, 또는 다른 가용성 화합물의 제거를 위한 pH 2의 약한 산 또는 pH 9-10의 알칼리 세척을 포함할 수 있다.
아연 및/또는 마그네슘 함량은 40000 mg/kg보다 높을 수 있지만 진균 바이오매스 수율이 감소될 수 있으며 이는 실제로 비경제적일 수 있다. 3500 mg/kg보다 높은 셀레늄이 달성될 수 있지만 공정 중 바이오매스 수율을 또한 감소시킬 수 있다.
아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간을 함유하는 영양 보충제는 희석제 또는 다른 보조 성분 예컨대 칼슘, 칼륨, 인 및 이들의 무기 염을 포함할 수 있다.
영양 보충제는 사상균의 성장 동안 첨가되는 추가의 무기 아연, 마그네슘 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 염 또는 다른 높은 아연, 마그네슘, 셀레늄 크롬, 구리 및/또는 망간 화합물을 함유할 수 있다.
또 다른 양태에서는, 하기 단계를 포함하는, 높은 수준의 미네랄을 함유하는 영양 보충제의 형성 방법이 제공된다:
농업 부산물 또는 식품 가공 부산물 및 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄의 염 또는 화합물을 함유하는 배양 배지를 제공하는 단계;
사상균을 배양 배지에서 배양하여 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄을 사상균에 축적시키는 단계; 및
사상균을 수확하여 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간, 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄의 높은 수준을 갖는 진균 바이오매스를 함유하는 영양 보충제를 얻는 단계.
염 또는 화합물은 아연 염, 예컨대 아연 설페이트, 마그네슘 염, 예컨대 마그네슘 설페이트 또는 마그네슘 클로라이드를 포함한다.
셀레늄은 나트륨 셀레나이트의 형태로 배양 배지에 첨가될 수 있다.
크롬은 크롬 클로라이드의 형태로 배양 배지에 첨가될 수 있다.
구리는 구리 설페이트의 형태로 배양 배지에 첨가될 수 있다.
망간은 망간 설페이트의 형태로 배양 배지에 첨가될 수 있다.
추가 양태에서, 본 기술은 본원에 기재된 방법에 의해 생산되는 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간을 함유하는 영양 보충제에 관한 것이다.
추가 양태에서, 본 기술은 치료 유효량의 본원에 기재된 영양 보충제를 투여하는 단계를 포함하는, 아연, 마그네슘, 셀레늄 크롬, 구리, 망간 결핍(증) 중 하나 이상의 치료 또는 예방을 위한 방법에 관한 것이다.
추가 양태에서, 본 기술은 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 결핍(증) 중 하나 이상의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조를 위한 본원에 기재된 영양 보충제의 용도에 관한 것이다.
추가 양태에서, 본 기술은 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및 또는 망간 결핍(증)을 특징으로 하는 병태의 치료 또는 예방을 위한 방법으로서, 치료 유효량의 본원에 기재된 영양 보충제를 이를 필요로 하는 피험체에 투여하는 단계를 포함하는 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다.
추가 양태에서, 본 기술은 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 결핍(증)을 특징으로 하는 병태의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조를 위한 본원에 기재된 영양 보충제의 용도에 관한 것이다.
아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 결핍(증)을 특징으로 하는 병태는 빈약한 면역계 기능, 느린 성장, 피로 및 내당능 장애, 추위에 대한 불내증, 불안 및 근력 저하, 철분 결핍과 함께 둔화된 성장, 및 피부염 및 신경과민증을 포함할 수 있다.
추가 양태에서, 본 기술은 농업 부산물 또는 식품 가공 부산물에서 배양된 사상균으로부터 유래하거나 얻어진 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄을 함유하는 영양 보충제에 관한 것이다.
본 발명자들은 높은 수준의 철분이 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리 및/또는 망간을 함유하는 영양 보충제를 생산하는데 필요하지 않는 점을 밝혀내었다.
본 명세서 전반에 걸쳐, 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 단어 "포함하다", 또는 "포함한다" 또는 "포함하는"과 같은 변형어는 명시된 요소, 정수 또는 단계, 또는 요소, 정수 또는 단계의 그룹의 포함을 의미하지만 임의의 다른 어떤 요소, 정수 또는 단계, 또는 요소, 정수 또는 단계의 그룹의 배제를 의미하는 것이 아닌 것으로 이해될 것이다.
본 명세서에 포함된 문서, 행위, 재료, 장치, 물품 등의 논의는 단지 본 발명의 내용을 제공하기 위한 것일 뿐이다. 이러한 사안들 중 어느 것 또는 전부가 선행 기술 기반의 일부를 형성하거나 본 명세서의 각각의 청구범위의 우선일 이전에 존재했던 본 발명과 관련된 분야에서의 공통된 일반적인 지식이었음을 인정하는 것으로 받아들여서는 안된다.
본 발명이 보다 명확하게 이해될 수 있도록, 바람직한 실시양태들이 이하의 도면 및 실시예를 참조하여 설명될 것이다.
도 1은 천연 미네랄이 풍부한 진균 바이오매스의 제조에서의 기본 단계들을 도시한다.
도 2는 최종 천연 미네랄이 풍부한 생성물을 생산하기 위한 수확 후 공정 단계들에 대한 요약을 도시한다.
도 2는 최종 천연 미네랄이 풍부한 생성물을 생산하기 위한 수확 후 공정 단계들에 대한 요약을 도시한다.
진균(Fungi)
사상균을 포함한 진균은 비교적 생체 이용 불가능한 미네랄을 추가로 흡수하는 능력을 갖는다. 예를 들어, A. 오리재 및 A. 나이저는 고 농도 무기 미네랄의 첨가시 천연 공급원 예컨대 농업 및 식품 가공 폐기물/부산물로부터 유기 철분 및 다른 미네랄을 축적하는 능력을 갖는다. 따라서, 본 기술의 일부 실시양태들에서, 진균 바이오매스는 사상균 바이오매스, 예를 들어, A. 오리재 및 A. 나이저 바이오매스이다.
농업 부산물 선정 및 전처리
농업 및 식품 가공처리로부터 생산되는 다수의 부산물이 존재하지만, 이들 모두가 자연적으로 미네랄이 풍부하지는 않다. 미네랄이 강화된 진균 생성물의 제조에 사용될 수 있는 적합한 농업 부산물은 옥수수, 밀기울, 쌀겨, 대두 껍질, 왕겨, 사탕수수 또는 사탕무로부터의 당밀, 과즙 처리 과육, 포테이토 스킨, 옥수수 침지주 및 대두 유청을 포함한다.
비록 다수의 부산물이 미네랄을 함유하는 것으로 인식되지만, 대다수가 직접적인 인간 소비를 위해 승인되거나 적합하지 않다. 곡물 부산물에서의 대부분의 미네랄은 피테이트에 의해 구속되고 그 결과 천연 형태는 인간에게서 생물학적으로 이용가능하지 않다. 예를 들어, 다수의 이러한 생성물에서 철분 생체이용률을 개선하기 위한 피타아제의 사용이 잘 이해되지만 철분 상태를 개선하기 위해서는 매일의 인간 요구가 비교적 너무 크다. 본 발명자들은 선택한 진균 종이 천연 세포 형태로 미네랄을 농축시키는 수단으로 사용될 수 있음을 밝혀내었다. 진균의 성장 동안 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 망간 또는 구리의 무기 염의 첨가시, 무기 미네랄이 진균 세포괴에서 유기 형태로 전환된다. 미네랄이 풍부한 진균은 또한 글루코오스와 같은 탄소, 우레아와 같은 질소원, 칼륨 포스페이트와 같은 인 공급원으로 구성된 합성 배지로 제조될 수 있다. 농업 부산물의 사용 이점은 이들 부산물이 또한 미량영양소 및 비타민을 진균에 제공한다는 점이다. 농업 부산물은 일반적으로 가치가 낮고 활용도가 낮다.
어떠한 부산물이 미네랄-균류 생성물의 제조에 사용될 수 있기 이전에, 미생물 부패, 마이코톡신, 잔류 농약 및 중금속 오염에 대한 검사가 요구된다. 액체 원료의 경우, 진균 종, 예컨대 A. 오리재 또는 A. 나이저의 액상 발효의 경우, 최적의 총 고형분이 3-10%이기 때문에 희석이 필요할 수 있다. 건조한 원료는 파쇄, 침지 또는 조리되어 천연 미네랄을 방출하고 항-발효 인자를 감소시킬 수 있다. 원료로부터 천연 미네랄 방출을 최대화하기 위해, 부산물의 침지 및 조리 동안 효소, 예컨대 셀룰라제, 헤미셀룰라제 및 피타아제가 사용될 수 있다. 재고 가용성 및 가격에 따라 복수의 원료를 동시에 사용할 수도 있다.
원료의 영양 프로파일에 따라, 폭기된 진균 발효를 위한 성장 배지를 보충하기 위해 다른 영양소가 필요할 수 있다. 이들 영양소는 유기 및 무기 질소 공급원, 인 공급원 및/또는 미량 미네랄을 포함할 수 있다.
농업 부산물은 옥수수, 밀, 사탕무, 감자당, 대두 가공에서 유래한 폐기물(이에 한정되지 않음)로부터의 것일 수 있다. 이러한 생성물의 예는 사탕수수 및 사탕무 과육, 밀기울 및 밀 껍질, 쌀겨 및 왕겨, 대두 껍질, 대두 가공 유청, 옥수수 침지주 및 대두 유청이다.
일부 실시양태들에서 식품 가공 부산물은 옥수수 침지주, 대두 유청, 사탕수수 및 사탕무 당밀, 대두 껍질 및 밀기울 및 밀 껍질에서 선택된다.
본 기술은 동물 또는 인간 소비에 적합한 유기 형태로 미네랄을 농축시키는 수단으로서 선택한 진균 종의 용도에 관한 것이다.
어떠한 부산물이 영양 보충제의 제조에 사용될 수 있기 이전에, 바람직하게는 미생물 부패, 마이코톡신 및 중금속 오염에 대한 검사가 수행된다. 액체 원료의 경우, 진균 종, 예컨대 아스퍼질러스 오리재 또는 아스퍼질러스 나이저의 액상 발효를 위한 최적의 총 고형분이 약 3-10%이기 때문에 희석이 필요할 수 있다. 건조한 원료는 파쇄, 침지 또는 조리되어 천연 미네랄을 방출하고 항-발효 인자를 감소시킬 수 있다. 원료로부터 천연 미네랄 방출을 최대화하기 위해, 침지 및 조리 동안 효소, 예컨대 셀룰라제, 헤미셀룰라제 및 피타아제가 사용될 수 있다. 재고 가용성 및 가격에 따라 복수의 원료를 동시에 사용할 수도 있다.
공정(프로세스)
농업 부산물 또는 식품 가공 부산물을 사용하는 바람직한 공정의 일반적인 단계들이 도 1에 도시된다.
진균주
사용되는 아스퍼질러스 오리재 균주는 차이니즈 센터 오브 인더스트리얼 컬처 컬렉션(CICC)으로부터의 아스퍼질러스 오리재 2355 및 40151; 아메리칸 타입 컬처 컬렉션(ATCC)으로부터의 아스퍼질러스 오리재 22787 및 CICC로부터의 시트르산 제조를 위한 아스퍼질러스 나이저 변이체(var.) 2206 및 10557 및 ATCC로부터의 피타아제 제조를 위한 아스퍼질러스 나이저 66876을 포함한, 간장 및 된장 제조를 위해 상업적으로 승인 및 사용되는 동일한 균주였다. A. 오리재의 다른 균주가 본 기술에 사용될 수 있다.
진균 배양
아스퍼질러스 오리재 및 아스퍼질러스 나이저 균주는 분쇄된 전체 옥수수, 밀기울, 대두 껍질, 사탕무의 당밀, 사탕수수 및 과즙 가공 부산물, 및 전분, 당 및 단백질로 이루어진 임의의 다른 식품 가공 부산물로 구성된 배지에서 배양되고 유지되었다. 이러한 원료는 아밀라제, 글루코-아밀라제, 피타아제 및 프로테아제를 포함한 효소에 의해 전처리될 수 있다. 무기 염이 진균 배양 배지에 첨가되었으며, 아연, 셀레늄, 마그네슘, 크롬, 구리 및/또는 망간의 이러한 무기 염은 배지 1 리터 당 적어도 약 5 mg의 염의 농도이다. 일부 실시양태들에서는, 배지 1 리터 당 약 50 내지 1500 mg의 염이 사용될 수 있다.
진균 포자가 고체 배지, 예컨대 조리된 쌀, 대두, 및 수수 및 이들의 조합에 40-70%의 수분을 접종시켜 제조되었다. 2 내지 3주째, 포자가 발아했으며 채집 준비가 되었다. 진균 포자를 멸균 증류수에 모았다. 전배양(pre-culture) 발효조가 최종 생산 발효조의 1-10% 용량으로 준비되었다. 전배양용 배지는 상술한 생산 배지와 동일할 수 있다. 전배양 발효 시간 18-28 시간 동안의 인큐베이션은 포자가 전배양 배지에 도입 된 후 건강한 전배양물을 생성하는 데 적합하다. 전배양물을 생산 발효조에 첨가하고 아연, 셀레늄 마그네슘, 구리, 크롬 및/또는 망간을 함유하는 원하는 진균괴를 생산하도록 진균을 성장시킨다.
장치
대규모 발효가 임의의 적합한 발효 용기 또는 장치에서 수행될 수 있다. 미네랄이 강화된 바이오매스 생산을 위해, 발효가 바람직하게 호기적 조건하에 48-72 시간 동안 수행된다. 성장 및 수율을 향상시키기 위해 발효 기간 동안 멸균되거나 여과된 공기가 발효조 내에 0.5 내지 1.0 vvm으로 펌핑될 수 있다. 배양물은 바람직하게는 발효 중에 휘저어지거나 교반된다. 상업적 미생물 배양에 대한 발효 용기의 공기, 교반 및 설계의 조합은 잘 알려져 있다.
진균 발효
발효는 25-35℃의 온도에서 최대 바이오매스에 도달하도록 또는 48-72 시간 동안 수행될 수 있다. 28-30℃의 온도가 적절할 것으로 확인되었다. 인큐베이션 시간 및 온도는 사용되는 진균 타입 및 균주에 따라 달라질 수 있음은 인지할 수 있다. 일부 실시양태들에서, 온도는 약 20℃ 내지 약 40℃의 범위일 수 있다. 예를 들어, 온도는 약 20℃ 내지 약 30℃, 약 25℃ 내지 약 35℃, 약 30℃ 내지 약 40℃, 또는 약 25℃ 내지 약 30℃의 범위, 예를 들면 약 20℃, 21℃, 22℃, 23℃, 24℃, 25℃, 26℃, 27℃, 28℃, 29℃, 30℃, 31℃, 32℃, 33℃, 34℃, 35℃, 36℃, 37℃, 38℃, 39℃ 또는 40℃일 수 있다.
원료의 영양 프로파일에 따라, 폭기된 진균 발효를 위한 성장 배지를 보충하기 위해 다른 영양소가 필요할 수 있다. 이들 영양소는 유기 및 무기 탄소 공급원, 질소 공급원, 인 공급원 및 미량 미네랄을 포함할 수 있다.
미네랄이 강화된 진균 생성물의 제조
인간 식이에 가용성 무기 염을 직접 보충하면 세포 독성 반응이 일어날 수 있다는 것을 주목해야 한다. 따라서, 진균을 사용하여 무기 미네랄 염을 흡수하고 유기물 형태로 전환하면 염의 직접 소비의 부작용을 줄일 수 있다. 무기 염은 진균 발효 중에 첨가될 수 있다. 무기 염의 일반적인 선택은 최종 목적 생성물에 따라 마그네슘 염, 예컨대 마그네슘 설페이트 또는 마그네슘 클로라이드, 아연 염, 예컨대 아연 설페이트 및 아연 클로라이드, 셀레늄 염, 예컨대 나트륨 셀레나이트, 크롬 염 예컨대 크롬 클로라이드, 구리 염 예컨대 구리 설페이트, 및 망간 염 예컨대 망간 설페이트를 포함한다. 무기 미네랄은 진균에 의해 유기 형태로 전환된다. 진균 생성물에서 요구 미네랄의 수준을 최대화하기 위해, 주어진 미네랄 염이 발효 도중 점진적으로 공급될 수 있다. 미네랄 염의 투여는 사용되는 염의 종류에 달려있지만 투여 수준은 진균의 성장을 저해하지 않아야 한다. 수확 후, 과잉 미네랄 염을 제거하기 위해 진균 균사체/바이오매스가 철저히 세척될 수 있다. pH 3-4의 약한 산 세척이 이와 관련하여 효과적일 수 있다.
진균
바이오매스
수확
발효 후, 미네랄 또는 미네랄들을 함유하는 진균 바이오매스는 탈수기 예컨대 원심분리기, 벨트 프레스 등에 의해 수확될 수 있다. 물 및/또는 약한 산 예컨대 염산 또는 시트르산 0.001 M 내지 0.01 M을 이용한 세척이 무기 염 잔사를 제거하는데 사용될 수 있다. 미네랄이 강화된 진균 생성물은 이후에 강제 공기, 진공 건조, 등을 사용하여 60-95℃에서 건조될 수 있다 (도 2 참조). 생성물의 최종 수분 함량은 일반적으로 약 10 중량% 미만이다. 생성물의 최종 형태는 적용 요건에 따라 만들어질 수 있다.
보충제
영양 보충제는 약 10 내지 약 60000 mg/kg의 범위의 아연을 함유할 수 있다. 예를 들어, 영양 보충제는 약 10 내지 약 60000 mg/kg, 약 500 내지 약 40000 mg/kg, 약 500 내지 약 4000 mg/kg, 약 2000 내지 약 40000 mg/kg, 또는 약 5000 내지 약 60000 mg/kg 범위의 아연, 예를 들면 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 8500, 9000, 9500, 10000, 11000, 12000, 13000, 14000, 15000, 16000, 17000, 18000, 19000, 20000, 25000, 30000, 35000, 40000, 45000, 50000, 55000 또는 60000 mg/kg 아연을 함유할 수 있다.
영양 보충제/성분은 약 10 내지 약 60000 mg/kg 범위의 마그네슘을 함유할 수 있다. 예를 들어, 영양 보충제는 약 10 내지 약 40000 mg/kg, 약 500 내지 약 40000 mg/kg, 약 500 내지 약 4000 mg/kg, 약 2000 내지 약 40000 mg/kg, 또는 약 5000 내지 약 40000 mg/kg 범위의 마그네슘, 예를 들면 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 8500, 9000, 9500, 10000, 11000, 12000, 13000, 14000, 15000, 16000, 17000, 18000, 19000, 20000, 25000, 30000, 35000, 40000, 45000, 50000, 55000 또는 60000 mg/kg 마그네슘을 함유할 수 있다.
영양 보충제는 약 1 내지 약 4000 mg/kg 범위의 셀레늄을 함유할 수 있다. 예를 들어, 영양 보충제는 약 1 내지 약 4000 mg/kg, 약 5 내지 약 4000 mg/kg, 약 10 내지 약 4000 mg/kg, 약 100 내지 약 4000 mg/kg, 또는 약 1000 내지 약 4000 mg/kg 범위의 셀레늄, 예를 들면 1, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3100, 3200, 3300, 3400, 3500, 3600, 3700, 3800, 3900 또는 4000 mg/kg 셀레늄을 함유할 수 있다.
영양 보충제는 약 4 내지 8000 mg/kg 범위의 크롬을 함유할 수 있다. 예를 들어, 영양 보충제는 약 10 내지 약 8000 mg/kg, 약 50 내지 약 8000 mg/kg, 약 100 내지 약 8000 mg/kg, 약 1000 내지 약 8000 mg/kg, 또는 약 5000 내지 약 8000 mg/kg 범위의 크롬, 예를 들면 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3100, 3200, 3300, 3400, 3500, 3600, 3700, 3800, 3900, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500 또는 8000 mg/kg 크롬을 함유할 수 있다.
영양 보충제는 약 60 내지 20000 mg/kg 범위의 구리를 함유할 수 있다. 예를 들어, 영양 보충제는 약 300 내지 약 20000 mg/kg, 약 600 내지 약 20000 mg/kg, 약 1000 내지 약 20000 mg/kg, 약 5000 내지 약 20000 mg/kg, 또는 약 10000 내지 약 20000 mg/kg, 또는 약 15000 내지 약 20000 mg/kg 범위의 구리, 예를 들면 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 8500, 9000, 9500, 10000, 11000, 12000, 13000, 14000, 15000, 16000, 17000, 18000, 19000, 20000 mg/kg 구리를 함유할 수 있다.
영양 보충제는 약 60 내지 20000 mg/kg 범위의 망간을 함유할 수 있다. 예를 들어, 영양 보충제는 약 300 내지 약 20000 mg/kg, 약 600 내지 약 20000 mg/kg, 약 1000 내지 약 20000 mg/kg, 약 5000 내지 약 20000 mg/kg, 또는 약 10000 내지 약 20000 mg/kg, 또는 약 15000 내지 약 20000 mg/kg 범위의 망간, 예를 들면 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000, 2100, 2200, 2300, 2400, 2500, 2600, 2700, 2800, 2900, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 8500, 9000, 9500, 10000, 11000, 12000, 13000, 14000, 15000, 16000, 17000, 18000, 19000, 20000 mg/kg 망간을 함유할 수 있다.
영양 보충제는 희석제 또는 다른 보조 성분 예컨대 칼슘, 칼륨, 인 및 이들의 무기 염을 포함할 수 있다.
제제(제형)
영양 보충제는 예를 들어, 경구 전달용으로 제제화될 수 있다. 특정 제제 타입의 비제한적인 예는 타블렛, 캡슐, 캐플렛, 파우더, 과립, 앰플, 바이알, 바로 사용할 수 있는 용액 또는 현탁액, 드링크, 및 동결건조된 재료를 포함한다. 고체 제제 예컨대 타블렛 또는 캡슐은 임의 개수의 적합한 허용가능한 부형제 또는 담체를 함유할 수 있다. 식품 용도는 파우더, 플레이크 또는 압출된 형태를 포함하고/거나, 다른 미네랄, 비타민 및 식품 성분과 블렌딩될 수 있다.
영양 보충제는 인간 또는 동물 사용을 위해 제제화될 수 있다.
본 기술에 따른 영양 보충제는 영양 제품을 형성하는데 사용될 수 있다. 영양 제품은 식품, 가공 식품, 드링크, 스포츠 드링크, 에너지 드링크, 에너지 바, 조식용 시리얼, 유제품, 동물 사료, 펫푸드, 등일 수 있다.
파우더 형태의 생성물이 또한 식품에 첨가되어 식품 강화 성분으로서 사용될 수 있다. 식품의 강화는 조미료, 염, 유아용 조제식, 및 밀가루, 옥수수가루 및 콩가루를 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
높은 수준의 미네랄을 함유하는 영양 보충제는 파우더, 용액, 드링크, 캡슐, 타블렛, 또는 캐플렛으로 제제화될 수 있다. 바이오매스는, 식품에 첨가되어 식품 강화 성분으로서 사용될 수 있는 파우더, 플레이크, 및 압출된 형태를 형성하도록 가공될 수 있다. 식품의 강화는 조미료, 염, 유아용 조제식, 조식용 시리얼 및 밀가루, 옥수수가루 및 콩가루를 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
영양 보충제의 이점은 이것이 부산물의 발효에서 유래한 천연 유기 미네랄을 함유한다는 점이다. 영양 보충제는 피타아제 및 사상균에 의해 자연적으로 생산되는 다른 효소를 추가로 함유하도록 제제화될 수 있다.
영양 보충제는 인간 또는 동물 사용을 위해 제제화될 수 있다.
실시예
A. 오리재 및 A. 나이저는 고 농도 무기 미네랄의 첨가시 천연 공급원 예컨대 농업 및 식품 가공 폐기물/부산물로부터 유기 미네랄을 축적하는 능력을 갖는 것으로 확인되었다.
진균의 건강한 성장을 위한 성장 배지에서 전형적인 미네랄 농도가 표 2에 수록되어 있다. Mg, Zn 및 Se 화합물의 타입은 표 2에 수록된 것들에 한정되지 않는 것으로 이해할 수 있다. 미네랄 농도는 진균 예컨대 A. 오리재 및 A. 나이저(표 3)가 인간 보충제 또는 식품 강화제로 사용될 수 있는 미네랄 강화 진균 바이오매스를 생산하기 위해 크게 증가될 수 있다.
각각의 미네랄 강화 진균 바이오매스의 최종 형태는 고체 형태이지만, 용액을 형성하기 위해 산 또는 알칼리에 의해 재용해될 수도 있다. 고체, 예컨대 파우더, 및 용액 둘다 미네랄 보충제 단독으로 사용될 수 있거나 식품에 배합 및/또는 첨가될 수 있다.
성분 | 염으로서의 범위 | 원소로서의 범위 |
MgSO4.7H2O | 0.25-3.0 | 0.025-0.295 |
CaCO3 | 5.0-17.0 | 2.0-6.8 |
ZnSO4.8H2O | 0.1-1.0 | 0.02-0.2 |
셀레늄 | 없음 | 없음 |
크롬 | 없음 | 없음 |
구리 | 0.003-0.01 | 0.000076-0.0025 |
망간 | 0.01-0.1 | 0.0032-0.032 |
성분 | 염으로서의 범위 | 원소로서의 범위 |
MgCl2.6H2O | 2.08-4.16 | 0.25-0.5 |
ZnSO4.7H2O | 1.1-2.2 | 0.25-0.5 |
Na2SeO3 | 0.11-0.22 | 0.05-0.1 |
CrCl2.6H2O | 0.1-1.0 | 0.0195-0.195 |
CuSO4.5H2O | 0.1-1.0 | 0.025-0.25 |
MnSO4.H2O | 0.1-1.0 | 0.032-0.32 |
실시예
1
마그네슘 염, 예컨대 마그네슘 설페이트(MgSO4) 또는 마그네슘 클로라이드(MgCl2)가 모든 미생물에 대한 성장 배지에서 필수 영양소로서 사용되었다. 그러나 이들은 진균 성장을 위해 고 농도로 사용되지 않았다.
이 실험에서, 옥수수, 밀기울 및 대두 껍질의 배지 제제에서의 천연 마그네슘 농도는 마그네슘 원소(Mg)로서 50-80 mg/L였다. 추가의 MgCl2.6H2O를 사용하는 경우, Mg 수준은 0.33 내지 0.58 g/L로 증가했으며, 이는 각각 4 내지 7배 증가에 해당한다. 결과는 (표 4) A. 오리재에서의 Mg가 건조한 바이오매스의 28.3 mg/g(또는 28300 ppm)까지 유의하게 증가했음을 보여준다. 모든 결과는 평균 4회 반복되었다. 효모에 결합된 Mg의 수준과 비교하여 (표 4), 효모의 Mg는 YPD(효모 추출물-펩톤-덱스트로스) 브로쓰에 최대 1250 mg/L Mg를 첨가했을 때 3.5-8.51 mg Mg/g에 겨우 도달했다. 따라서 상기 결과에 기초했을 때, A. 오리재에 의한 Mg의 이용은 효모와 비교하여 거의 10배 더 효율적이었다.
Mg
(mg/L) |
A. 오리재
바이오매스
중의 Mg
(mg/g) |
A.
오리재에
의한 Mg 섭취
(%) |
50-801 | 2.5-3.4 | > 80 |
2502 | 15.8 | 61.6 |
5002 | 28.3 | 49.5 |
효모, 1250 3 | 8.51 | NA |
1 미가공 농산물의 천연 Mg 함량은 배치마다 상이함
2 발효 중에 첨가되는 MgCl2.6H2O와 같은 추가의 Mg
3 Duszkiewicz-Reinhard W. et al. 2005. Studies into Saccharomyces cerevisiae baker's yeast capacity for binding magnesium under batch conditions. Pol. J. Food Nutr Sci 14(55) No 3: 249-255로부터 채택됨.
국립 보건원(NIH) 산하 영양보조식품국에 기초하면, Mg 강화된 성장 환경으로부터 생산된 A. 오리재 바이오매스의 Mg 함량은 다른 모든 천연 식품 공급원보다 동일 중량 기준으로 높았다. 예를 들어, 하루에 3 밀리그램 미만(약 2 Centrum® 사이즈 타블렛)은 Mg가 풍부한 식품의 1회분에 상당하는 Mg를 제공한다 (표 5).
제품(생성물) |
중량
(g) |
일반 서빙 | 서빙 당 Mg (mg) | 1일 권장량의 비율(%) |
아몬드 | 28 | 1 오즈 | 80 | 20 |
피넛 | 28 | 1 오즈 | 60 | 16 |
검은 콩, 조리됨 | 88 | ½ 컵 | 60 | 16 |
커피, 에스프레소 | 60 | 2 오즈 | 48 | 12 |
통밀빵 | 28 | 1 슬라이스 | 23 | 6 |
근대 | 175 | 1/2 컵 | 75 | 19 |
Mg A. 오리재 | 2.8 | 2 타블렛 | 80 | 20 |
실시예
2
개별적으로 Zn 강화된 A. 오리재는 생성물을 멀티 미네랄 보충제 또는 다른 식품으로 정확하게 제제화할 수 있게 한다. 예를 들어, 노인 남성은 철분(Fe) 보충을 필요로하지 않지만 Zn 강화 식품이 필요할 수 있다. A. 오리재 및 A. 나이저 둘다 유기 Zn 풍부한 바이오매스를 형성하기 위해 그들의 세포 구조에 Zn을 도입하는 인상적인 능력을 보였다. 표 6에서는, 아연 설페이트(ZnSO4.7H2O)가 A. 오리재에 대한 성장 배지를 강화시키기 위해 무기 염으로 사용되었다. A. 오리재에 의한 Zn의 이용은 Zn의 91%가 250 mg/L의 배지에서 흡수되어 점차적으로 35%로 감소하여 매우 효율적이었다. 바이오매스의 Zn 함량은, 철분의 존재하의 A. 오리재의 Zn과 비교하여, Zn 함량의 거의 2배인 수준 39.6 mg/g(또는 39600 ppm)까지 안정적으로 증가했다. 효모에서 Zn에 대한 Stehlik-Tomas(Stehlik-Tomas, V. et al. 2004. Zinc, copper and manganese enrichment in yeast Saccharomyces cerevisae. Food Technol. Biotechnol. 42(2):115-120)의 보고는 맥주효모균(Saccharomyces cerevisae)에서의 Zn의 최고치가 겨우 0.7 mg/g이었음을 확인시켜주었다.
Zn
(mg/L) |
A. 오리재 바이오매스 중의 Zn (mg/g) |
A.
오리재에
의한 Zn 섭취
(%) |
< 101 | 0.08 | 측정되지 않음 |
2502 | 12.7 | 91 |
5002 | 25.8 | 67 |
10002 | 38.0 | 48 |
15002 | 39.6 | 35 |
1 옥수수, 밀기울, 대두 껍질 등으로 제제화된 배지에서의 천연 Zn 함량;
2 발효 중에 첨가되는 ZnSO4.7H2O와 같은 추가의 Zn.
국립 보건원(NIH) 산하 영양보조식품국에 기초하면, Zn 강화된 성장 환경으로부터 생산된 A. 오리재 바이오매스의 Zn 함량은 다른 모든 천연 식품 공급원보다 동일 중량 기준으로 높았다. 예를 들어, 하루에 0.27 그램(베이비 아스피린 사이즈 타블렛)은 1일 권장량 요건 100%에 상당하는 Zn을 제공한다.
식품 |
중량
(g) |
일반 서빙 |
서빙
당 Zn
(mg) |
1일 권장량
(%) |
굴, 조리됨 | 84 | 3 오즈 | 74 | 493 |
비프 척 로스트 | 84 | 3 오즈 | 7.0 | 47 |
아몬드 | 28 | 1 오즈 | 0.9 | 6 |
강낭콩, 조리됨 | 150 | 1/2 컵 | 0.9 | 6 |
밀크, 저지방 | 300 | 1 컵 | 1.0 | 7 |
조리된 그린피 | 175 | 1/2 컵 | 0.5 | 3 |
Zn A. 오리재 | 0.27 | < 1 타블렛 | 11 | 100 |
실시예
3
Zn과 같이, 셀레늄(Se)이 철분의 존재 또는 부재하에 공발효되어 Se 강화된 A. 오리재 바이오매스를 생산할 수 있다. 그러나 본 실시예에서는, 0.1%의 나트륨 셀레나이트 용액의 형태의 Se가 철분의 부재하에 A. 오리재의 발효 도중 첨가되었을 때, 진균 바이오매스의 Se 함량이 0.4 mg/g(400 ppm)에서 3.36 mg/g(3360 ppm)만큼 많이 증가했다 (표 8). Se의 1일 권장 용량은 매우 낮기 때문에, Se에 대한 과량 투여 또는 Fe에 대한 과소 투여를 피하기 위해 Se-강화 제품을 독립형으로 제조하는 것이 바람직하다. 선정한 식품과 비교하여, Se를 갖는 A. 오리재는 비교적 높은 Se 농도를 갖는다; 1일 0.02 그램이 1일 권장량(DV)의 100%를 전달할 수 있다.
Se
(mg/L) |
A. 오리재 바이오매스의 Se (mg/g) | A. 오리재에 의한 Se 섭취 (%) |
50 | 2.37 (2370 ㎍/g) | 59 |
100 | 3.36 (3360 ㎍/g) | 43 |
상세 |
중량
(g) |
일반 서빙 |
서빙
당 Se
(㎍) |
1일 권장량의 비율
(%) |
브라질 너트 | 28 | 1 오즈 | 544 | 777 |
햄, 로스팅됨 | 84 | 3 오즈 | 40 | 60 |
현미, 조리됨 | 300 | 1 컵 | 19 | 27 |
통밀빵 | 1 슬라이스 | 0.9 | 6 | |
렌틸콩, 삶음 | 300 | 1 컵 | 6 | 9 |
밀크, 1% | 300 | 1 컵 | 8 | 11 |
Se A. 오리재 | 0.02 | 55 | 100 |
실시예
4
진균 발효가 단일 미네랄, 크롬, 구리 또는 망간 염으로 수행되었을 때, 진균 균사의 미네랄 함량은 유의하게 향상되었다 (표 10). 모든 실시예에서, 천연 진균 미네랄은 고농축되었고 무기 염 및 합성 미네랄 킬레이트에 대한 경제적 대안을 제공했다.
A. 오리재에서의 미네랄 함량, ppm | 평균 성인에서 100% DRI를 충족하기 위한 A. 오리재의 양, g | A. 오리재 생성물 1 kg 당 투여 회수 | |
크롬 | 8000 | 0.0000034 | 228,571 |
구리 | 17400 | 0.000057 | 17,400 |
망간 | 20700 | 0.000097 | 10,350 |
실시예
5
현재, 인간 미네랄 보충은 각각의 개별 성분으로 제제화된 멀티-미네랄 및 비타민 형태로 존재할 수 있다. 유사한 접근이 식품 강화에서, 예를 들어, 조식용 시리얼에서 사용된다. 이러한 접근의 장점은 미 식품 의약품 안전청(FDA)에서 권장하는 1일 권장량(DV)에 따라 각 미네랄과 비타민의 투여량을 정확하게 조절할 수 있다는 점이다. 그러나, 멀티 미네랄이 함께 소비될 때, 하나의 흡수가 다른 것들을 방해할 수 있다. 예를 들어, Fe와 Zn간, Zn과 구리(Cu)간의 상호작용, 등. 이전의 연구자들은 식물 베이스의 식이 중의 피테이트와 미네랄들 간의 상호작용을 보여주었다. 멀티 미네랄 보충제를 제제화하기 위해 A. 오리재 결합된 미네랄을 사용하면 각 미네랄이 A. 오리재의 세포벽과 단백질에 이미 결합되어 있기 때문에 미네랄 상호 작용이 줄어들 수 있다. A. 오리재 결합된 미네랄의 서방출 특징은 또한 미네랄들 간의 상호자용을 감소시킬 수 있다.
향상된 멀티-미네랄을 갖는 천연 A. 오리재를 생산하는 것이 실용적인 것으로 밝혀졌다. 이러한 생성물은 단일 용량에서 DV 요건(예를 들어, 마그네슘의 DV는 400 mg)을 충족하지 않을 수 있지만, 매일 향상된 멀티-미네랄을 제공할 수 있다. 이러한 생성물에서 각 미네랄의 농도는 상이한 원하는 조합을 만들기 위해 발효 도중 조절될 수 있다. 표 11은 선택한 성장 배지 제제를 사용하여 단지 0.5 g 용량으로 멀티 미네랄, Fe, Zn, Cr, Se, Cu 및 Mn이 강화된 바이오매스를 얻음을 보여준다. 각 미네랄의 농도는 플러스/마이너스 4 배의 범위가 될 수 있다. 미네랄의 타입은 표 11의 미네랄에 한정되지 않는다. 본 실시예는 고 농도의 각 미네랄을 섭취하는 A. 오리재의 능력을 입증할뿐만 아니라, 또한 상이한 섭취 선호도에 의해 나타난 것처럼 천연의 균형잡힌 방식으로 멀티-미량 미네랄의 섭취를 보여준다.
미네랄 | A. 오리재 바이오매스의 미네랄 함량 mg/Kg | A. 오리재에 의한 미네랄 섭취, % | 용량 당 % DRI |
Zn | 24100 | 100 | 110 |
Mg | 10000 | 5 | 2 |
Se | 70 | 64 | 64 |
Cr | 104 | 100 | 150 |
Cu | 1240 | 100 | 31 |
Mn | 1720 | 100 | 43 |
제조상의 어려움없이 2000 L의 발효 체적을 갖는 2개의 대규모 산업 시험이 수행되었다. 발효 용기의 사이즈가 증가할수록, 공기 흐름과 같은 문제를 관리하고 제어하는 능력이 향상되었다. 두 시험은 진균 바이오매스가 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간 또는 이들의 조합의 향상된 수준을 함유하여 생성될 수 있다는 것을 확인했다.
광범위하게 기술된 본 발명의 사상 또는 범위를 벗어나지 않으면서 특정 실시양태들에 도시된 바와 같이 본 발명에 많은 변형 및/또는 수정이 이루어질 수 있다는 것은 당업자에게 명백할 것이다. 따라서 본 실시양태는 모든 면에서 예시적이고 제한적이지 않은 것으로 간주된다.
Claims (25)
- 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간, 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄의 높은 수준을 갖는 사상균 바이오매스
를 포함하는 영양 보충제. - 제1항에 있어서, 사상균 바이오매스가 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)(A. 오리재(A. oryzae)) 또는 아스퍼질러스 나이저(Aspergillus niger)(A. 나이저(A. niger))에서 선택된 진균으로부터의 것인 영양 보충제.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 미네랄이 아연을 포함하는 것인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 미네랄이 마그네슘을 포함하는 것인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 미네랄이 셀레늄을 포함하는 것인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 미네랄이 크롬을 포함하는 것인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 미네랄이 구리를 포함하는 것인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 미네랄이 망간을 포함하는 것인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 미네랄 중 적어도 1종을 약 1 내지 약 60000 mg/kg 포함하는 영양 보충제.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 아연이 적어도 500 mg/kg의 양으로 존재하고, 마그네슘이 적어도 500 mg/kg의 양으로 존재하고, 셀레늄이 적어도 1 mg/kg의 양으로 존재하고, 크롬이 적어도 4 mg/kg의 양으로 존재하고, 구리가 적어도 60 mg/kg의 양으로 존재하고, 마그네슘이 적어도 60 mg/kg의 양으로 존재하는 것인 영양 보충제.
- 제8항에 있어서, 아연이 10 내지 60000 mg/kg으로 존재하고, 마그네슘이 10 내지 60000 mg/kg으로 존재하고, 셀레늄이 1 내지 4000 mg/kg으로 존재하고, 크롬이 4 내지 8000 mg/kg으로 존재하고, 구리가 60 내지 20000 mg/kg으로 존재하고, 마그네슘이 60 내지 20000 mg/kg으로 존재하는 것인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 보충제가 파우더, 용액, 드링크, 캡슐, 타블렛, 또는 캐플렛의 형태인 영양 보충제.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항의 영양 보충제를 함유하는 영양 제품.
- 제13항에 있어서, 식품, 가공 식품, 드링크, 스포츠 드링크, 에너지 드링크, 에너지 바, 조식용 시리얼, 유제품, 조미료, 염, 유아용 조제식, 밀가루, 옥수수가루, 콩가루, 동물 사료, 및 펫푸드로 이루어진 군에서 선택되는 영양 제품.
- 사상균을 농업 부산물 또는 식품 가공 부산물에서 배양하여 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간, 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄을 사상균에 축적시키는 단계; 및
사상균을 수확하여 아연, 마그네슘, 셀레늄, 크롬, 구리, 망간, 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 미네랄의 높은 수준을 갖는 진균 바이오매스를 함유하는 영양 보충제를 얻는 단계
를 포함하는, 높은 수준의 미네랄을 함유하는 영양 보충제의 형성 방법. - 제15항에 있어서, 사상균이 아스퍼질러스 오리재(A. 오리재) 또는 아스퍼질러스 나이저(A. 나이저)에서 선택되는 것인 방법.
- 제15항 또는 제16항에 있어서, 농업 부산물이 옥수수, 밀, 사탕무, 감자당, 대두 또는 유청의 농업 생산에서 유래하는 폐기물을 포함하는 것인 방법.
- 제17항에 있어서, 농업 부산물이 사탕수수 및 사탕무 과육, 대두 껍질, 대두 가공 유청, 밀 껍질, 옥수수 침지액, 및 대두 유청으로 이루어진 군에서 선택되는 것인 방법.
- 제15항 또는 제16항에 있어서, 식품 가공 부산물이 옥수수 침지주, 대두 유청, 사탕수수 및 사탕무 당밀, 대두 껍질 및 밀기울, 밀 껍질, 및 식품 가공 부산물로 이루어진 군에서 선택되는 것인 방법.
- 제15항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 아연, 마그네슘, 셀레늄, 칼슘, 칼륨, 크롬, 망간, 구리 및 인의 1종 이상의 염을 사상균 배양물에 제공하는 단계를 포함하는 방법.
- 제20항에 있어서, 1종 이상의 염이 배지 1 리터 당 적어도 약 5 mg의 염의 농도로 첨가되는 것인 방법.
- 제21항에 있어서, 1종 이상의 염이 배지 1 리터 당 50 내지 1500 mg의 염의 농도로 첨가되는 것인 방법.
- 제15항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 배양 배지 또는 영양소를 사상균 배양물에 제공하는 단계를 더 포함하는 방법.
- 제15항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 사상균의 배양이 25℃ 내지 35℃의 온도에서 수행되는 것인 방법.
- 제15항 내지 제24항 중 어느 한 항의 방법에 의해 생성되는 영양 보충제.
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