KR20170005058A - 염증성 장 질환을 치료하는 방법 - Google Patents

염증성 장 질환을 치료하는 방법 Download PDF

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Abstract

CRP 수준을 감소시키기 위해, IBD를 앓고 있는 대상체를 항-SMAD7 요법, 예컨대 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드로 치료하는 방법이 개시되어 있다. CRP 수준에 기반하여 항-SMAD7 요법, 예컨대 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 사용하여 대상체에서 IBD를 치료 및 관리하는 방법이 또한 개시되어 있다. IBD를 앓고 있는 대상체가 항-SMAD7 요법 치료에 대하여 반응성을 보이는지 또는 반응성을 보일 것 같은지를 결정하는 방법이 또한 개시되어 있다. CRP 수준의 감소는 IBD 관해기 또는 CDAI 점수의 감소와 연관성이 있을 수 있다. 본 발명은 또한 항-SMAD7 요법 (예를 들어, 안티센스 올리고뉴클레오티드)을 추가 작용제와 함께 사용하여 IBD를 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 관련된 제약 조성물 및 키트를 특징으로 한다.

Description

염증성 장 질환을 치료하는 방법 {METHODS FOR TREATING INFLAMMATORY BOWEL DISEASE}
염증성 장 질환 (IBD)은 위장관의 만성 염증성 장애로서, 미국 내에서 대략 백만명의 환자가 이로 인해 고통받고 있다. IBD의 가장 흔한 2가지 형태는 크론병 (Crohn's disease; CD)과 궤양성 대장염 (UC)이다. CD는 전체 위장관에서 발생할 수도 있지만, 기본적으로는 회장 (소장의 말단 또는 하부 부분)과 대장에서 발생한다. UC는 기본적으로 결장과 직장에서 발생한다. 현재 CD와 UC 이들 둘 모두의 치료는 아미노살리실레이트 (예를 들어, 5-아미노살리실산, 술파살라진 및 메살라민), 항생제 (예를 들어, 시프로플록사신 및 메트로니다졸), 코르티코스테로이드 (예를 들어, 부데소니드 또는 프레드니손), 면역억제제 (예를 들어, 아자티오프린 또는 메토트렉세이트) 및 종양 괴사 인자 (TNF) 길항제 (예를 들어, 인플릭시맙 (레미케이드(Remicade)®))를 포함한다. 이러한 요법에 대한 환자의 반응은 질환의 중증도에 따라 달라지고, 또한 활동성 염증 및 관해의 사이클에 따라서도 달라질 수 있다. 게다가, 수많은 현재의 IBD 요법은 바람직하지 않은 부작용과 연관있다.
CD와 UC의 병인이 알려져 있지는 않지만, 이들은 둘다 장 점막의 염증성 질환이라 여겨진다. 최근의 연구에 따르면, TGF-β1이 점막 장 염증을 제어하는 강력한 면역조절인자로서 작용한다는 것이 입증되었다. TGF-β1은 TGF-β1 R1 및 TGF-β1 R2의 2개의 서브유닛을 함유하는 헤테로다이머 막횡단 세린/트레오닌 키나제 수용체에 결합한다. 리간드 결합시, TGF-β1 R1 수용체는 구성적 활성 TGF-β1 R2 수용체에 의해 인산화되어, SMAD 패밀리에 속하는 단백질에 의해 세포핵으로 신호가 전달된다. 활성화된 TGF-β1 R1은 직접적으로 SMAD2 및 SMAD3 단백질을 인산화시키고, 이들은 이후에 SMAD4와 상호작용한다. SMAD2/SMAD3/SMAD4 복합체는 세포핵으로 이동하여 특정 유전자의 전사를 조정한다.
추가 연구에 의해 또 다른 SMAD 단백질인 SMAD7이 또한 염증에 있어서 소정의 역할을 한다는 것이 입증되었다. 세포내 단백질인 SMAD7은 SMAD2/SMAD3이 TGF-β1 R1에 결합하는 것을 방해하여, 이들 단백질의 인산화 및 활성화를 방지하는 것으로 밝혀졌다. 추가로, SMAD7 단백질 발현의 증가는 TGF-β1 매개-신호전달의 억제와 관련있다. IBD 환자의 점막 샘플은 높은 수준의 SMAD7 및 감소한 수준의 인산화-SMAD3을 특징으로 하는데, 이는 TGF-β1-매개 신호전달이 이들 환자의 경우에 제 기능을 발휘하지 못한다는 것을 시사한다.
최근의 연구들은 IBD로 고통받고 있는 환자의 치료를 위한 표적으로서 SMAD7에 집중하였다. 이러한 요법은 항-SMAD7 안티센스 요법을 포함한다. 그러므로, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 반응할 것 같은 (또는 반응할 것 같지 않은) 환자를 식별하는데 사용가능한 예측가능한 바이오마커에 기반한 방법 및 치료의 성공을 평가하는 방법이 필요하다.
본 발명은 부분적으로 IBD 환자에서의 CRP 수준이 IBD 질환 상태와 연관성이 있으며, 질환 상태를 모니터링하고 항-SMAD7 요법을 이용한 IBD 치료에 대한 반응성을 관리하는 수단으로서 사용될 수 있다는 발견에 기초한다. 본 발명은 또한 부분적으로 IBD를 앓고 있는 대상체에서의 순환 CRP 농도의 조정이 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대한 감수성과 연관성이 있다는 발견에 기초한다. 따라서, 본 발명은 또한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 적절한 투여 수준을 결정하고 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료를 조절 및 조정하기 위해 IBD 환자에서의 CRP 수준의 모니터링 및 분석이 사용될 수 있다는 발견에 기초한다. 추가적으로, 본 발명은 부분적으로 항-SMAD7 투여 요법이 높은 순환 CRP 농도를 갖는 대상체의 치료에 효과적이고, 항-SMAD7 투여 요법이 IBD를 앓고 있는 대상체에서 CRP 수준을 감소시키는데 효과적이라는 발견에 기초한다.
IBD 환자가 항-SMAD7 요법, 특히 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용하는 치료에 대하여 반응성을 보이는지 또는 반응성을 보일 것 같은지를, 사전에, 치료를 시작한 직후에, 치료를 중단하기 직전에, 또는 치료를 중단한 직후에 예측할 수 있으면 유리하다는 것이 이해될 것이다. 본원에 기재된 바와 같이 CRP 농도의 조정은 IBD를 앓고 있는 대상체에 대한 항-SMAD7 요법을 이용한 치료의 효능을 예측하게 할 수 있다. 또한, CRP 농도는 대상체가 항-SMAD7 요법에 반응할 것 같은지를 결정하는데 사용될 수 있다. 유리하게도, 본 발명의 방법은 궁극적으로 내과의사가 효과적인 요법을 선택하도록 도울 것이고 환자의 질환 상태 개선, 우수한 의료 관리 및 환자의 전반적인 비용 절감을 이끌어 낼 것이다.
또한, 본원에 기재된 바와 같이 IBD 환자에서의 CRP 수준의 조정은 IBD를 앓고 있는 대상체에서 항-SMAD7 요법을 이용한 치료의 효능 및 그에 대한 반응성을 평가하는데 유용하다. 게다가, 질환 상태와 연관성이 있는 바이오마커, 예를 들어 CRP의 수준 또는 그 수준의 변화에 기반하여 IBD 환자에서 항-SMAD7 요법의 투여를 평가 및 조정할 수 있으면 유리하다는 것이 이해될 것이다. 따라서, 본 발명은 항-SMAD7 요법, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드로 치료받고 있거나 또는 그것을 투여받았던 환자에서 CRP 수준을 분석하고, 항-SMAD7 요법의 투여 후에 분석 단계에 의해 결정된 CRP 수준의 변화 또는 CRP 수준에 기반하여 투여량 수준을 조정하는 방법을 제공한다. 유리하게도, 본 발명의 방법은 궁극적으로 내과의사가 SMAD7 활성을 표적으로 하는 요법을 이용한 치료를 모니터링하고 조정하도록 도울 것이다. 또한, 본 발명의 방법은 환자에 대한 IBD 치료 효능의 개선을 유도할 것이다.
제1 측면에서, 본 발명은 증가한 순환 CRP 농도, 예를 들어 약 3.0 mg/리터, 약 3.5 mg/리터, 약 4.0 mg/리터 초과, 또는 그 초과의 순환 CRP 농도를 갖는 대상체에서 IBD를 치료하는 방법을 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 약 3.0 mg/리터 초과의 순환 CRP 농도를 갖는 대상체에서 IBD를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 발명은 약 3.0 mg/리터 초과의 순환 CRP 농도를 갖는 대상체에서 IBD를 치료하는 방법을 제공하고, 여기서 방법은 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 단계 (a)를 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 IBD를 앓고 있는 대상체에서 CRP 수준을 감소시키는 방법을 제공하고, 여기서 방법은 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 단계 (a)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 치료 전의 CRP 수준은 약 3.0 mg/리터, 약 3.5 mg/리터, 약 4.0 mg/리터를 초과하거나, 또는 그 초과의 값이다. 일부 실시양태에서, 치료 후의 CRP 수준은 약 0.1 mg/리터, 약 0.5 mg/리터, 약 1.0 mg/리터, 약 1.5 mg/리터, 약 2.0 mg/리터, 약 2.5 mg/리터, 또는 약 3.0 mg/리터 미만이다. 바람직한 실시양태에서, 치료 전의 CRP 수준은 3.0 mg/리터를 초과하고 치료 후의 CRP 수준은 3.0 mg/리터 미만이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 IBD 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법을 제공하고, 여기서 방법은 (a) 환자의 대조 CRP 수준을 설정하는 단계; (b) SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하는 단계; (c) 환자의 CRP 수준을 분석하는 단계; 및 (d) CRP 수준이 대조 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 대조 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 많은 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 치료를 종료하는 단계를 포함한다.
본 발명의 일부 실시양태에서, 치료 방법은 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 투여하는 단계 (a) 전에 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 단계를 포함할 것이다. 본 발명의 또 다른 실시양태에서, 치료 방법은 단계 (a) 후에, 순환 CRP 농도에서 어떤 변화가 발생하였는지를 결정하기 위해 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 추가 단계를 포함할 것이다. 따라서, 3.0 mg/리터 초과의 순환 CRP 농도를 갖는 대상체에서 IBD를 치료하는 방법 또는 IBD를 앓고 있는 대상체에서 CRP 수준을 감소시키는 방법에서, 어떤 방법이든 단계 (a) 전에 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 단계, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 환자에게 투여하는 단계 (a), 및 임의로 CRP 농도에서 어떤 변화가 발생하였는지를 결정하기 위해 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 추가 단계를 포함할 수 있다. CRP 농도에서 어떤 변화가 발생하였는지를 결정하는 것은 단계 (a) 전후로 발생하는 각각의 단계 동안에 얻어진 순환 CRP 농도 측정값을 비교함으로써 이루어질 수 있다는 것이 이해된다.
일부 실시양태에서, 순환 CRP 농도는 대상체로부터 샘플, 예를 들어 혈액 샘플을 채취하여 측정할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 치료 방법의 단계 (a) 후에 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도는 3.0 mg/리터 미만, 예를 들어 약 3.0 mg/리터 미만, 약 2.0 mg/리터 미만, 약 1.0 mg/리터 미만, 약 0.5 mg/리터 미만, 또는 약 0.1 mg/리터 미만이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대한 IBD를 앓고 있는 대상체의 반응성을 모니터링하는 방법을 제공하고, 여기서 방법은 (a) 대상체로부터 수득된 적어도 하나의 샘플에서의 CRP 농도를 결정하는 단계; 및 (b) 샘플의 CRP 농도를 대조 CRP 수준과 비교하는 단계를 포함한다.
추가로, 고려된 방법에서, 샘플에서의 CRP 농도의 감소는 대상체가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응할 것 같거나 또는 반응성을 보인다는 것을 나타낸다. 대상체로부터 수득된 샘플은 혈액 샘플일 수 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 받고 있을 때 샘플이 수득된다. 대조 CRP 수준은 항-SMAD7 요법을 투여하기 전 또는 투여한 직후에 CRP 수준을 측정함으로써 결정될 수 있다. 특정 실시양태에서, 방법은 단계 (a) 전에, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 추가 단계를 포함할 수 있다. 이러한 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 단계 (a) 직전에 또는 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 1개월, 약 6개월, 약 1년 전, 또는 그보다 더 긴 시간 전에 대상체에게 투여될 수 있다. 또한, 일부 실시양태에서, 고려된 방법은 단계 (b) 후에 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 임의적 단계를 포함할 수 있다. 이러한 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 단계 (b)의 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 1개월, 약 6개월, 약 1년 후, 또는 그보다 더 긴 시간 후에, 또는 직후에 대상체에게 투여될 수 있다.
대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도는 대상체가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응할 것 같은지 또는 반응성을 보이는지를 결정하는데 사용된다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 농도는 약 3.0 mg/리터, 약 2.0 mg/리터, 약 1.0 mg/리터, 또는 약 0.1 mg/리터 미만이고, 이는 대상체가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응성을 보이거나 또는 반응할 것 같다는 것을 나타낸다. 바람직한 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 농도는 약 3.0 mg/리터 미만이고, 이는 대상체가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응성을 보이거나 또는 반응할 것 같다는 것을 나타낸다.
마찬가지로, 대조 CRP 수준 값은 그 값을 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도와 비교함으로써 대상체가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응할 것 같은지 또는 반응성을 보이는지를 결정하는데 사용된다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 대조 CRP 수준은 약 2.5 mg/리터, 약 3.0 mg/리터, 약 3.5 mg/리터, 약 4.0 mg/리터, 약 5.0 mg/리터 이상, 또는 그 초과의 값이다. 바람직한 실시양태에서, 대조 CRP 수준은 약 3.0 mg/리터를 초과한다. 추가로, 본 발명의 일부 실시양태에서, 대조 CRP 수준은 적어도 하나의 항-SMAD7 요법의 투여 전에 환자로부터 얻어진 또는 적어도 하나의 항-SMAD7 요법의 투여 직후에 얻어진 CRP의 기준선 수준이다. 일부 실시양태에서, 대조 CRP 수준은 적어도 하나의 항-SMAD7 요법의 투여 직전에, 약 1시간 전에, 약 1일 전에, 약 1주 전에, 약 2주 전에, 약 3주 전에, 약 1개월 전에, 약 1년 전에, 또는 그보다 더 긴 시간 전에 환자로부터 얻어질 수 있다.
항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대한 IBD를 앓고 있는 대상체의 반응성을 모니터링하는 고려된 방법은 IBD를 앓고 있는 대상체에서의 항-SMAD7 요법 치료에 대한 반응성과 순환 CRP 수준 사이의 관계에 관한 본원에 기재된 발견에 기초하여, 대상체가, 일부 실시양태에서 적어도 2주 동안 150 미만의 CDAI 점수를 유지하는 것으로서 정의된 관해기에 진입할 것인지 또는 관해기에 진입할 것 같은지를 통상의 기술자가 결정할 수 있도록 한다. 마찬가지로, IBD를 앓고 있는 대상체에서의 고려된 치료 방법 및 CRP 수준의 감소 방법의 일부 실시양태는 이러한 발견에 기초하여 대상체가 관해기에 진입할 것인지 또는 관해기에 진입할 것 같은지를 통상의 기술자가 결정할 수 있도록 한다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 대상체로부터 수득된 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체가 관해기에 진입할 것 같거나 또는 관해기에 진입하였다는 것을 나타낸다. 대상체로부터 수득된 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도를, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 단계 (a) 후에 측정된 대상체의 대조 CRP 수준 및/또는 CRP 순환 농도와 비교함으로써 결정될 수 있다. 예를 들어, 샘플의 CRP 농도가 3 mg/리터의 대조 수준 미만으로 감소한 것은 대상체가 관해기에 진입할 것 같거나 또는 관해기에 진입하였다는 것을 나타낸다.
본 발명은 또한 순환 CRP 수준의 감소가 CDAI 점수, 예를 들어 약 150 미만의 CDAI 점수와 일치하도록 하는, 대상체로부터 채취한 샘플의 순환 CRP 수준의 변화와 CDAI 점수 사이의 연관성을 설정한다. 대상체로부터 수득된 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도를, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 단계 (a) 후에 측정된 대상체의 대조 CRP 수준 및/또는 CRP 순환 농도와 비교함으로써 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 170 미만, 160 미만, 150 미만, 140 미만, 130 미만, 120 미만, 110 미만, 100 미만, 또는 그 미만의 CDAI 점수와 일치한다. 바람직한 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 150 미만의 CDAI 점수와 일치한다. 바람직한 실시양태에서, 150 미만의 CDAI 점수는 CRP 수준의 감소와 일치하고, 여기서 기준선 CRP 수준은 3.0 mg/리터를 초과하고 감소한 CRP 수준은 3.0 mg/리터 미만이다.
본 발명은 또한 순환 CRP 수준의 감소가 PRO-2 점수, 예를 들어 ≤8의 PRO-2 점수 또는 PRO-2 점수의 기준선으로부터의 ≥50%의 감소와 일치하도록 하는, 대상체로부터 채취한 샘플의 순환 CRP 수준의 변화와 환자 보고 결과 2 (PRO-2) 시험 사이의 연관성을 설정한다. 대상체로부터 수득된 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도를, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여하는 단계 (a) 후에 측정된 대상체의 대조 CRP 수준 및/또는 CRP 순환 농도와 비교함으로써 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 <14점, <12점, <10점, <8점, <6점, <4점, 또는 <2점의 PRO-2 점수와 일치한다. 바람직한 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 ≤8의 PRO-2 점수와 일치한다. 바람직한 실시양태에서, ≤8의 PRO-2 점수는 CRP 수준의 감소와 일치하고, 여기서 기준선 CRP 수준은 3.0 mg/리터를 초과하고 감소한 CRP 수준은 3.0 mg/리터 미만이다.
본 발명은 또한 순환 CRP 수준의 감소가 SES-CD, 예를 들어 ≤2의 SES-CD (예를 들어, SES-CD = 0) 또는 SES-CD의 기준선으로부터의 ≥50%의 감소와 일치하도록 하는, 대상체로부터 채취한 샘플의 순환 CRP 수준의 변화와 크론병의 단순 내시경 점수 (SES-CD) 사이의 연광성을 설정한다. 대상체로부터 수득된 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도를, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여하는 단계 (a) 후에 측정된 대상체의 대조 CRP 수준 및/또는 CRP 순환 농도와 비교함으로써 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 ≤5, ≤4, ≤3, ≤2, ≤1, 또는 0의 SES-CD와 일치한다. 바람직한 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 ≤2의 SES-CD 또는 0의 SES-CD와 일치한다. 바람직한 실시양태에서, ≤2의 SES-CD 또는 0의 SES-CD는 CRP 수준의 감소와 일치하고, 여기서 기준선 CRP 수준은 3.0 mg/리터를 초과하고 감소한 CRP 수준은 3.0 mg/리터 미만이다.
청구된 발명은 또한 항-SMAD7 요법으로 이미 치료받은, 치료받고 있는, 또는 추가 치료에 대한 평가를 받는 대상체에서 관찰된 CDAI 점수가 대상체가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대하여 반응성을 보이는지를 결정하는데 도움이 되는 때를 한정하기 위한 시간적 파라미터를 제공한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소와 일치하는 CDAI 점수, 예를 들어 150 미만의 CDAI 점수가 대상체에서 적어도 1일, 1주, 2주, 또는 그보다 더 긴 시간 동안 유지된다.
추가적으로, 본 발명의 일부 실시양태에서 대상체 샘플에서의 CRP 양의 감소와 일치하는 대상체의 CDAI 점수 (예를 들어, 150 미만의 CDAI 점수)는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료의 종료와 관련하여 관찰될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일부 실시양태에서, 대상체 샘플에서의 CRP 양의 감소와 일치하는 대상체의 150 미만의 CDAI 점수가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 받는 동안에, 치료를 중단한 직후에, 또는 치료를 중단한지 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 1개월, 약 10주, 약 1년, 또는 그보다 더 긴 시간 후에 관찰가능하다. 특정 실시양태에서, 대상체 샘플에서의 CRP 양의 감소와 일치하는 대상체의 150 미만의 CDAI 점수는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일 및 약 2주 후의 두 시점 모두에서 관찰가능하다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 높은 기준선 CRP 수준 (즉, 3.0 mg/리터 초과의 CRP 수준)은 치료가 환자에서 150 미만의 CDAI 점수를 초래하도록 하여, 대상체가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료로부터 이점을 얻거나 또는 그에 대한 반응성을 보일 것 같다는 것을 나타낸다.
청구된 발명은 또한 순환 CRP 수준의 감소가 CDAI 점수의 감소와 일치하도록 하는, 대상체로부터 채취한 샘플의 순환 CRP 수준의 변화와 CDAI 점수의 변화 사이의 연관성을 설정한다. 대상체로부터 수득된 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도를, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 단계 (a) 후에 측정된 대상체의 대조 CRP 수준 및/또는 CRP 순환 농도와 비교함으로써 결정될 수 있다. CDAI 점수의 감소는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 받고 있거나 또는 치료를 받았던 대상체의 CDAI 점수를, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 받았거나, 현재 치료를 받고 있거나, 또는 치료에 대한 평가를 받고 있는 대상체의 CDAI 점수와 비교함으로써 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 약 40, 약 50, 약 60, 약 70, 약 80, 약 90, 약 100, 약 110, 약 120, 또는 약 130의 CDAI 점수의 감소와 일치한다. 일부 실시양태에서, 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 약 40 내지 약 130, 약 50 내지 약 120, 약 60 내지 약 110, 약 70 내지 약 120, 또는 약 60 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소와 일치한다. 바람직한 실시양태에서, 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체의 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소와 일치한다.
추가적으로, 본 발명의 일부 실시양태에서 대상체 샘플에서의 CRP 양의 감소와 일치하는 대상체의 CDAI 점수의 감소 (예를 들어, 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소)는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료의 종료와 관련하여 관찰될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일부 실시양태에서, 대상체 샘플에서의 CRP 양의 감소와 일치하는 대상체의 CDAI 점수의 감소가 대상체가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 받고 있는 동안에, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한 직후에, 또는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 4주, 약 8주, 또는 그보다 더 긴 시간 후에 관찰가능하다. 바람직한 실시양태에서, 대상체 샘플에서의 CRP 양의 감소와 일치하는 대상체의 CDAI 점수의 감소는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 적어도 약 1일 또는 약 2주 후에 관찰가능하다.
IBD를 앓고 있는 대상체의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대한 반응성을 결정하거나 또는 대상체가 관해기에 진입할 것인지 또는 관해기에 진입할 것 같은지를 결정하기 위한 대안의 파라미터는 CDAI 요소 (예를 들어, 복통, 배변 횟수), 환자 보고 결과 시험 점수 (예를 들어, PRO-2 시험 점수), 및 점막 치유 (예를 들어, 크론병의 단순 내시경 점수 (SES-CD) 사용)와 같은 파라미터를 포함한다.
청구된 발명은 또한 항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 대상체에서 효과적인지를 결정하거나 또는 대상체가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대하여 반응성을 보일지 또는 반응할 것 같은지를 결정하기 위해 CRP 농도를 결정하는 방법을 제공한다. CRP 농도는 면역화학 및/또는 뉴클레오티드 분석에 의해 결정될 수 있다. 면역화학에 의해 CRP 농도를 결정하는 방법은 웨스턴 블롯팅, ELISA 및 면역염색 방법을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 면역화학에 의해 CRP 농도를 결정하는 방법은 항-CRP 항체를 사용하여 수행된다. 면역화학에 의해 CRP 농도를 결정하는 방법은 또한 완충제, 차단제, 비접합 1차 항체, 및 항체 검출을 가능하게 하는 태그, 예컨대 형광 프로브 또는 기질-특이적 효소와 접합된 1차 및/또는 2차 항체의 사용을 포함할 수 있다.
뉴클레오티드 분석에 의해 CRP 농도를 결정하는 방법은 CRP mRNA 전사체 수준을 분석하는 방법, 예컨대 노던 블롯팅 및 폴리머라제 연쇄 반응 방법, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응 방법을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다. 뉴클레오티드 분석은 CRP 뉴클레오티드 서열과 결합하는 올리고뉴클레오티드 프로브 또는 폴리머라제 연쇄 반응, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응에 의해 CRP 서열을 증폭시킬 수 있는 한 쌍의 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하여 수행될 수 있다. 올리고뉴클레오티드 프로브 및 올리고뉴클레오티드 프라이머는 검출가능한 태그, 예컨대 형광 태그와 연결될 수 있다. 뉴클레오티드 분석에 의한 CRP 농도의 결정에서, 기술자는 샘플에서의 CRP mRNA 전사체 농도를 평가할 수 있다. 별법으로, 뉴클레오티드 분석에 의한 CRP 농도의 결정에서, 기술자는 CRP mRNA 전사체 풍부도의 측정값에 기반하여 CRP 단백질 농도를 추론하기 위해 CRP mRNA 전사체 풍부도와 CRP 단백질 풍부도 사이의 연관성을 설정할 수 있다.
청구된 발명의 방법은 시험관내에서(in vitro) 수행될 수 있는 단계를 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 다양한 실시양태에서, 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 단계, 샘플에서의 CRP 농도를 결정하는 단계, 대조 CRP 수준을 결정하는 단계, 및/또는 CDAI 점수를 결정하거나 또는 CDAI 점수를 결정하는데 필요한 측정값을 수집하는 단계는 시험관내에서 수행될 수 있다. 예를 들어, 샘플에서의 CRP 농도는 시험관내에서 샘플에 대한 면역화학 또는 뉴클레오티드 분석을 수행함으로써 결정될 수 있다. 별법으로, 본 발명의 일부 실시양태에서, 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 단계, 샘플에서의 CRP 농도를 결정하는 단계, 대조 CRP 수준을 결정하는 단계, 및/또는 CDAI 점수를 결정하거나 또는 CDAI 점수를 결정하는데 필요한 측정값을 수집하는 단계는 생체내에서(in vivo) 수행될 수 있다.
본 발명은 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 하나의 또는 다수의 경로에 의해, 예를 들어 경구로, 국소적으로, 비경구적으로, 예를 들어 피하 주사에 의해, 흡입 분무에 의해 또는 직장으로 투여될 수 있다. 본원에 사용된 비경구적이라는 용어는 피하 주사, 췌장내 투여, 정맥내, 근육내, 복강내, 흉골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 대상체에게 경구로 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 항-SMAD7 안티센스 요법이다. 특정 실시양태에서, 안티센스 요법은 서열식별번호(SEQ ID NO): 1로 표시되는 항-SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 안티센스 올리고뉴클레오티드, 예컨대 SEQ ID NO: 1로 표시되는 것, 또는 그의 제약상 허용되는 염 (예컨대, 나트륨 염), 및 제약상 허용되는 충전제를 포함하는 과립내(intra-granular) 상을 포함하고, 또한 제약상 허용되는 부형제, 예컨대 붕해제를 포함할 수 있는 과립외(extra-granular) 상을 포함할 수 있는, 안티센스 올리고뉴클레오티드의 경구 투여를 위한 제약 정제 제제의 형태일 수 있다. 고려된 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO: 1로 표시되는 것들을 포함하고, 여기서 적어도 하나의, 또는 특정 실시양태에서는 모든 뉴클레오시드 사이의 연결은 O,O-연결된 포스포로티오에이트이다. 제약 정제 형태의 항-SMAD7 요법은 장용성 코팅, 예를 들어 에틸아크릴레이트-메타크릴산 공중합체를 포함하는 장용성 코팅을 추가로 포함할 수 있다. 이러한 정제는 예를 들어, 충전제, 붕해제, 및/또는 윤활제를 포함할 수 있다. 예를 들어, 경구 투여 형태, 예컨대 정제는 약 35 mg 내지 약 500 mg의 안티센스 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 40 mg의 SEQ ID NO: 1로 표시되는 올리고뉴클레오티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함할 수 있다. 제약 정제 제제가 그것을 CD, UC 및 IBD의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여함으로써 CD, UC 및 IBD를 치료하는 방법에 사용될 수 있다는 것이 고려된다. 제약 제제 또는 정제 또는 경구 투여 형태를 환자에게 경구로 투여할 때, 제약 제제, 정제 또는 경구 투여 형태는 실질적으로 환자의 말단 회장 및/또는 우결장으로 전달될 수 있다.
본원에 기재된 임의의 방법이 IBD를 앓고 있는 대상체를 치료하거나 또는 IBD를 앓고 있는 대상체에서 항-SMAD7 요법에 대한 반응성 또는 반응성의 가능성을 평가하는데 사용될 수 있다는 것이 고려된다. 또한, 특정 실시양태에서 IBD는 CD 또는 UC이다. 게다가, 본원에 개시된 임의의 방법에서 언급되는 대상체는 인간 대상체일 수 있다.
본 발명의 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 다른 치료, 예를 들어 비제한적으로 면역조정제 및/또는 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 면역조정제 및/또는 메살라민 뿐만 아니라, 스테로이드 다음에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 항-SMAD7 요법은 이들 치료의 임의의 조합 다음에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 예를 들어, 항-SMAD7 요법은 단독으로의 스테로이드, 단독으로의 면역조정제, 단독으로의 메살라민, 스테로이드와 면역조정제, 스테로이드와 메살라민, 또는 면역조정제와 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다.
본 발명은 또한 면역조정제 및/또는 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 환자에게 항-SMAD7 요법을 투여하는 것을 포함하는, IBD를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 스테로이드가 항-SMAD7 요법 및 면역조정제 및/또는 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 스테로이드, 면역조정제 및/또는 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 항-SMAD7 요법을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, IBD를 치료하는 방법의 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 경구로 투여된다. 스테로이드, 면역조정제 및/또는 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 항-SMAD7 요법을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, IBD를 치료하는 방법의 일부 실시양태에서, 모든 요법 요소 (즉, 스테로이드, 면역조정제 및/또는 메살라민)는 경구로 투여된다. 다른 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 경구로 투여되고, 면역조정제 및/또는 메살라민은 상이한 경로를 통해 투여된다. 일부 실시양태에서, 예를 들어, 면역조정제 및/또는 메살라민의 투여 경로는 국소적, 비경구적, 흡입 분무 또는 직장이다.
IBD를 치료하는 방법을 제공하는 본 발명의 일부 실시양태에서, 상기에 고려된 임의의 조합 요법의 투여는 환자에게 이점을 초래한다. 예를 들어, 본 발명의 다양한 실시양태에서, 방법은 환자가 관해기에 진입하도록 하고/거나, 방법은 대상체에서 150 미만의 CDAI 점수를 초래하고/거나, 방법은 대상체에서 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소를 초래하고/거나 방법은 약 3 mg/리터 미만의 순환 CRP 수준을 초래한다.
본 발명은 또한 투여가 대상체의 CDAI 점수, 예를 들어 약 150 미만의 CDAI 점수와 일치하도록 하는, 다른 요소 (예를 들어, 면역조정제, 메살라민 및/또는 스테로이드) 다음에 또는 그와 동시에 항-SMAD7 요법을 투여하는 것을 포함하는 IBD의 치료와 CDAI 점수 사이의 연관성을 설정한다. 일부 실시양태에서, 방법은 대상체에서 170 미만, 160 미만, 150 미만, 140 미만, 130 미만, 120 미만, 110 미만, 100 미만, 또는 그 미만의 CDAI 점수를 초래한다. 바람직한 실시양태에서, 방법은 대상체에서 150 미만의 CDAI 점수를 초래한다.
청구된 발명은 또한 관찰된 CDAI 점수에서의 시간적 파라미터와 다른 요소 (예를 들어, 면역조정제, 메살라민 및/또는 스테로이드) 다음의 또는 그와 동시의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료 사이의 연관성을 밝혀낸다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 방법은 대상체에서 적어도 1일, 적어도 1주, 적어도 2주, 또는 그보다 더 긴 시간 동안 유지되는 특정 CDAI 점수, 예를 들어 150 미만의 CDAI 점수를 초래한다.
추가적으로, 본 발명의 일부 실시양태에서 대상체의 CDAI 점수 (예를 들어, 150 미만의 CDAI 점수)는 다른 요소 (예를 들어, 면역조정제, 메살라민 및/또는 스테로이드) 다음의 또는 그와 동시의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료의 종료와 관련하여 관찰될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일부 실시양태에서, 대상체의 150 미만의 CDAI 점수는 다른 요소와 조합된 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 받고 있는 동안에, 치료를 중단한 직후에, 또는 치료를 중단한지 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 1개월, 약 10주, 약 1년, 또는 그보다 더 긴 시간 후에 관찰가능하다. 특정 실시양태에서, 대상체의 150 미만의 CDAI 점수는 다른 요소 다음의 또는 그와 동시의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일 및 약 2주 후의 두 시점 모두에서 관찰가능하다.
청구된 발명은 또한 치료가 CDAI 점수의 감소와 일치하도록 하는, 다른 요소 (예를 들어, 면역조정제, 메살라민 및/또는 스테로이드) 다음의 또는 그와 동시의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료와 CDAI 점수 변화 사이의 연관성을 설정한다. CDAI 점수의 감소는 다른 요소 다음의 또는 그와 동시의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 받고 있거나 또는 치료를 받았던 대상체의 CDAI 점수를, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 받았거나, 현재 치료를 받고 있거나, 또는 치료에 대한 평가를 받고 있는 대상체의 CDAI 점수와 비교함으로써 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 방법은 대상체에서 약 40, 약 50, 약 60, 약 70, 약 80, 약 90, 약 100, 약 110, 약 120, 또는 약 130의 CDAI 점수의 감소를 초래한다. 일부 실시양태에서, 방법은 대상체에서 약 40 내지 약 130, 약 50 내지 약 120, 약 60 내지 약 110, 약 70 내지 약 120, 또는 약 60 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소를 초래한다. 바람직한 실시양태에서, 방법은 대상체에서 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소를 초래한다.
추가적으로, 본 발명의 일부 실시양태에서 다른 요소 (예를 들어, 면역조정제, 메살라민 및/또는 스테로이드) 다음의 또는 그와 동시의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료로부터 초래된 대상체의 CDAI 점수의 감소 (예를 들어, 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소)는 치료의 종료와 관련하여 관찰될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일부 실시양태에서, 치료 방법으로부터 초래된 대상체의 CDAI 점수의 감소는 대상체가 치료받고 있는 동안에, 치료를 중단한 직후에, 또는 치료를 중단한지 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 4주, 약 8주, 또는 그보다 더 긴 시간 후에 관찰가능하다. 바람직한 실시양태에서, 치료 방법으로부터 초래된 대상체의 CDAI 점수의 감소는 치료를 중단한지 적어도 약 1일 또는 약 2주 후에 관찰가능하다.
본 발명은 또한 CRP 수준을 측정하기 위한 시약 및 CDAI 점수의 측정에 관한 상세한 설명서를 갖는 키트를 제공한다. 본 발명의 특정 실시양태에서, CRP 수준을 측정하기 위한 시약은 항-CRP 항체, CRP 뉴클레오티드 서열과 결합하는 올리고뉴클레오티드 프로브, 및 CRP 뉴클레오티드 서열과 결합하고 폴리머라제 연쇄 반응을 통해 증폭시킬 수 있는 올리고뉴클레오티드 프라이머로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 키트는 완충제, 시약 및 CRP 수준의 측정에 관한 상세한 설명서 중 적어도 하나를 포함할 수 있다. 또한, 일부 실시양태에서, 키트의 항-CRP 항체는 CRP 단백질에 대한 1차 항체일 수 있고, 키트는 또한 리포터 효소와 접합된 2차 항체, 완충제, 시약 및 면역화학 및/또는 폴리머라제 연쇄 반응을 사용하는 샘플에서의 CRP 수준 측정에 관한 상세한 설명서를 임의로 포함할 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 IBD를 앓고 있는 환자에서 염증성 장 질환을 치료 또는 관리하는 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 방법은 (a) SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하는 단계; (b) 환자에서의 CRP 수준을 분석하는 단계; 및 (c) CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계를 포함한다. 별법으로, 단계 (c)에서, 단계 (b)에서 결정된 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 단계 (c)는 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
본 발명의 또 다른 측면에서, 본 발명은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 투여하는 것과 관련하여 IBD를 앓고 있는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 IBD를 앓고 있는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법을 제공하고, 여기서 방법은 (a) 환자에서의 CRP 수준을 분석하는 단계; 및 (b) CRP 수준이 역치 CRP 수준보다 높다면, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하는 단계를 포함한다. 추가적으로, 방법은 (c) 상기 투여 단계, 즉 단계 (b) 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하는 단계; 및 (d) CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 별법으로, 단계 (d)에서, 단계 (c)에서 결정된 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 단계 (d)는 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 방법은 초기 용량보다 많은 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 방법은 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 경우에, 단계 (d)에서 투여되는 후속 용량이 최대 허용 용량 (MTD)과 동일하거나 또는 그보다 많다면, 방법은 치료를 종료하는 단계를 포함한다.
CRP 수준은 투여 단계 (b) 이후의 다양한 시점에 분석할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 투여 단계 (b) 후에, CRP 수준은 상기 투여 단계의 적어도 1일, 적어도 3일, 적어도 5일, 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 4개월, 또는 적어도 6개월 후에 분석된다. 일부 실시양태에서, CRP 수준은 상기 투여 단계 직후에 분석된다. 또 다른 실시양태에서, CRP 수준은 상기 투여 단계의 약 7일, 약 10일, 약 15일, 약 20일, 약 25일, 또는 약 28일 후에 분석된다.
정상 CRP 수준은 기준 수치 값에 기반하여 또는 건강한 대조군의 CRP 수준과 관련하여 결정될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 정상 CRP 수준은 약 0.01 mg/L, 약 0.05 mg/L, 약 0.1 mg/L, 약 0.2 mg/L, 약 0.3 mg/L, 약 0.4 mg/L, 약 0.5 mg/L, 약 0.6 mg/L, 약 0.7 mg/L, 약 0.8 mg/L, 약 0.9 mg/L, 약 1.0 mg/L, 약 1.5 mg/L, 약 2.0 mg/L, 약 2.5 mg/L, 또는 약 3.0 mg/L이다. 본 발명의 다른 실시양태에서, 정상 CRP 수준은 건강한 대조군의 CRP의 중앙값 수준으로서 정의된다. 건강한 대조군은 환자에서의 동일한 세트의 기준과 매칭하여 유전적 배경, 습관 및 신체적 특징과 관련된 다양한 기준에 기반하여 정의될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 건강한 대조군 및 IBD를 앓고 있는 환자는 연령, 성별, 인종 기원, 흡연 습관, 식습관, 체질량 지수 (BMI), 기호 약물 사용, 의료 약물 사용, IBD와 관련된 약물 사용 및/또는 운동 습관과 관련하여 매칭된다. 환자와 대조군 사이에 매칭될 수 있는 다른 인자는 임상학적 기준 (예를 들어, CDAI 점수, 마요 점수(Mayo score), IBD-관련 증상의 중증도), 신진대사, IBD 환자의 개인 병력, 유전적 요인, IBD 환자의 가족 병력, 환경 요인 (예를 들어, 오염물질, 독소, 알레르겐)에 대한 노출, 및 생활 방식 (예를 들어, 도시, 교외 또는 시골의 직장 및/또는 거주지)을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다.
환자 CRP 수준 및 역치 CRP 수준의 차이는 항-SMAD7 요법에 대한 환자의 잠재적인 반응성을 나타낸다. 예를 들어, 정상 CRP 수준에 비해 상승한 역치 CRP 수준은 환자가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응성을 보일 수 있다는 것을 나타낸다. 역치 CRP 수준은 상이한 기준을 사용하여 설정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 역치 CRP 수준은 대조군의 정상 CRP 수준, 예를 들어 중앙값 CRP 수준과 관련하여 결정된다. 대조군은 건강한/정상인 대상체 (예를 들어, 건강한 대조군) 또는 IBD 환자군으로 구성될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, CRP 역치 수준은 정상 수준보다 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 5배, 적어도 8배, 적어도 10배, 적어도 20배, 적어도 30배, 적어도 50배, 적어도 80배, 또는 적어도 100배 더 높다. 다른 실시양태에서, CRP 역치 수준은 IBD 환자군의 CRP 수준, 예를 들어 중앙값 CRP 수준과 관련하여 제50 백분위수, 제60 백분위수, 제70 백분위수, 제80 백분위수 또는 제90 백분위수의 CRP 수준을 나타낸다. 일부 실시양태에서, CRP 수준은 3 mg/L 미만이다. 추가적으로, 일부 실시양태에서, 역치 CRP 수준은 0.5 mg/L를 초과하거나, 1.0 mg/L를 초과하거나, 1.5 mg/L를 초과하거나, 2.0 mg/L를 초과하거나, 2.5 mg/L를 초과하거나, 3.0 mg/L를 초과하거나, 3.5 mg/L를 초과하거나, 4.0 mg/L를 초과하거나, 4.5 mg/L를 초과하거나, 5.0 mg/L를 초과하거나, 7.5 mg/L를 초과하거나, 또는 10 mg/L를 초과한다. 일부 실시양태에서, 역치 CRP 수준은 약 0.5 mg/L, 약 1.0 mg/L, 약 1.5 mg/L, 약 2.0 mg/L, 약 2.5 mg/L, 약 3.0 mg/L, 약 3.5 mg/L, 약 4.0 mg/L, 약 4.5 mg/L, 약 5.0 mg/L, 약 7.5 mg/L, 또는 약 10 mg/L이다. 일부 실시양태에서, CRP 수준은 0.5 mg/L 내지 3 mg/L, 1 mg/L 내지 3 mg/L, 1.5 mg/L 내지 3 mg/L, 2 mg/L 내지 3 mg/L, 또는 2.5 mg/L 내지 3 mg/L이다.
본 발명의 다양한 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량은 다양할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량은 500 mg/일 미만, 400 mg/일 미만, 300 mg/일 미만, 200 mg/일 미만, 100 mg/일 미만, 90 mg/일 미만, 80 mg/일 미만, 70 mg/일 미만, 60 mg/일 미만, 50 mg/일 미만, 40 mg/일 미만, 30 mg/일 미만, 20 mg/일 미만, 또는 10 mg/일 미만이다. 별법으로, 다른 실시양태에서, 초기 용량은 적어도 1 mg/일, 적어도 5 mg/일, 적어도 10 mg/일, 적어도 20 mg/일, 적어도 30 mg/일, 적어도 40 mg/일, 적어도 50 mg/일, 적어도 60 mg/일, 적어도 70 mg/일, 적어도 80 mg/일, 적어도 90 mg/일, 적어도 100 mg/일, 적어도 200 mg/일, 적어도 300 mg/일, 적어도 400 mg/일, 또는 적어도 500 mg/일이다. 또 다른 실시양태에서, 초기 용량은 약 1 mg/일, 약 5 mg/일, 약 10 mg/일, 약 20 mg/일, 약 30 mg/일, 약 40 mg/일, 약 50 mg/일, 약 60 mg/일, 약 70 mg/일, 약 80 mg/일, 약 90 mg/일, 약 100 mg/일, 약 200 mg/일, 약 300 mg/일, 약 400 mg/일, 또는 약 500 mg/일이다. 일부 실시양태에서, 초기 용량은 5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 30 mg/일, 40 mg/일, 50 mg/일, 60 mg/일, 70 mg/일, 80 mg/일, 90 mg/일, 100 mg/일, 110 mg/일, 120 mg/일, 130 mg/일, 140 mg/일, 150 mg/일, 160 mg/일, 170 mg/일, 180 mg/일, 190 mg/일, 또는 200 mg/일이다.
본 발명의 일부 실시양태에서, 단계 (b) 또는 (c)에서 환자에서의 CRP 수준을 분석한 후에, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 방법은 초기 용량보다 많은 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 단계 (b) 또는 (c)에서 환자에서의 CRP 수준을 분석한 후에, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 방법은 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준에 기반하여 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량과 관련하여 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량 수준을 결정하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 본원에 기재된 본 발명의 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준이 초기 투여 단계 (a) 또는 (b) 후에 정상 수준보다 높다면, 단계 (c) 또는 (d)에서 투여되는 후속 용량은 초기 용량보다 적어도 약 5 mg/일, 약 10 mg/일, 적어도 약 20 mg/일, 적어도 약 30 mg/일, 적어도 약 40 mg/일, 적어도 약 50 mg/일, 적어도 약 60 mg/일, 적어도 약 70 mg/일, 적어도 약 80 mg/일, 적어도 약 90 mg/일, 적어도 약 100 mg/일, 적어도 약 110 mg/일, 적어도 약 120 mg/일, 적어도 약 130 mg/일, 적어도 약 140 mg/일, 적어도 약 150 mg/일, 적어도 약 160 mg/일, 적어도 약 170 mg/일, 적어도 약 180 mg/일, 적어도 약 190 mg/일, 또는 적어도 약 200 mg/일 더 많다.
별법으로, 일부 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준이 초기 투여 단계 (a) 또는 (b) 후에 정상 수준보다 낮다면, 단계 (c) 또는 (d)에서 투여되는 후속 용량은 초기 용량보다 적어도 약 5 mg/일, 적어도 약 10 mg/일, 적어도 약 20 mg/일, 적어도 약 30 mg/일, 적어도 약 40 mg/일, 적어도 약 50 mg/일, 적어도 약 60 mg/일, 적어도 약 70 mg/일, 적어도 약 80 mg/일, 적어도 약 90 mg/일, 또는 적어도 약 100 mg/일 더 적다. 또한, 일부 실시양태에서, 초기 투여 단계 (a) 또는 (b)에서 투여되는 초기 용량은 약 10 mg/일 내지 100 mg/일, 약 5 mg/일 내지 200 mg/일, 약 10 mg/일 내지 50 mg/일, 약 50 mg/일 내지 100 mg/일, 및 약 100 mg/일 내지 약 200 mg/일이고, 단계 (c) 또는 (d)에서 투여되는 후속 용량은 약 30 mg/일 내지 200 mg/일, 약 5 mg/일 내지 30 mg/일, 약 20 mg/일 내지 50 mg/일, 약 50 mg/일 내지 100 mg/일, 및 약 100 mg/일 내지 200 mg/일이다.
본 발명은 또한 초기 투여 단계 전후에 환자에서의 CRP 상대 수준의 비교에 기반하여 IBD 환자에서 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료를 조정하는 방법을 제공한다. 방법은 (a) 환자에서의 CRP 수준을 분석하는 단계; 및 (b) CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하는 단계; (c) 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하는 단계; 및 (d) 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계를 포함한다. 별법으로, 단계 (d)에서, 상기 투여 단계 (즉, 단계 (b)) 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 단계 (d)는 초기 용량보다 많은 후속 용량을 환자에게 투여하거나 또는 치료를 종료하는 것을 포함한다. 별법으로, 단계 (d)에서, 환자가 임상학적 관해기에 있고 상기 투여 단계 (즉, 단계 (b)) 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 단계 (d)는 치료를 종료하는 것을 포함한다.
본 발명의 방법에 따르면, 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 (SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의) 초기 투여 단계 후에 관찰되는 CRP 수준의 변화는, 예를 들어 CRP 수준의 퍼센트로 나타낸 변화율로서, IBD 환자에게 투여될 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 결정하기 위해 비교될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 상기 투여 단계 (예를 들어, 투여 단계 (b)) 후에 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 적어도 95% 감소하였다면, 방법은 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 단계 (예를 들어, 투여 단계 (d))를 포함한다.
본 발명은 또한 CRP 수준의 비교에 기반하여, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료 전후의 CRP 수준의 변화 퍼센트의 비교에 기반하여 IBD를 앓고 있는 환자가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료 후에 임상학적 관해기를 겪을 확률을 결정하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 투여 단계 (예를 들어, 투여 단계 (b)) 후의 CRP 수준이 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 또는 적어도 95% 감소하였다면, IBD를 앓고 있는 환자가 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 6주 또는 적어도 8주의 시간 동안 IBD의 임상학적 관해기를 겪을 가능성이 10%를 초과하거나, 20%를 초과하거나, 30%를 초과하거나, 40%를 초과하거나, 50%를 초과하거나, 60%를 초과하거나, 70%를 초과하거나, 80%를 초과하거나, 90%를 초과하거나 또는 100%를 초과한다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다.
본원에 기재된 임상학적 관해기는 기준 값, 예를 들어 크론병 활동성 지표 (CDAI)와 비교함으로써 결정될 수 있다. 본 발명의 일부 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자의 임상학적 관해기는 150 미만의 CDAI 점수 (CDAI <150)에 의해 나타난다.
본 발명의 일부 실시양태에서, 임상학적 관해기 또는 환자의 CDAI 점수는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여와 관련하여 주어진 시점에서 또는 주어진 시간 범위 내에서 관찰될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 임상학적 관해기는 투여 단계 (예를 들어, 투여 단계 (b))의 약 1일, 약 3일, 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 6주, 약 8주, 또는 약 10주 후에 관찰되고 적어도 3일, 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 6주, 적어도 8주, 또는 적어도 10주의 기간 동안 유지된다. 마찬가지로, 본 발명의 일부 실시양태는 IBD를 앓고 있는 환자가 IBD의 임상학적 관해기를 겪을 가능성이 있다는 것을 결정하는 방법을 포함하고, 여기서 IBD를 앓고 있는 환자는 투여 단계 (예를 들어, 투여 단계 (b))의 1주 전에 약 220 내지 약 400, 약 150 내지 약 200, 약 200 내지 약 250, 약 250 내지 약 300, 약 300 내지 약 350, 약 350 내지 약 400, 약 400 내지 약 450, 또는 약 450 초과의 CDAI를 갖는다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 정상 CRP 수준보다 높은 CRP 수준을 갖는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법을 제공하고, 여기서 방법은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 일정 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 또한, 일부 실시양태에서, 본 발명은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 일정 용량을 투여한 후에 정상 CRP 수준보다 높은 CRP 수준을 갖는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법을 제공하고, 여기서 환자는 선행 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 추가 용량을 투여받는다. 마찬가지로, 일부 실시양태에서, 본 발명은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 일정 용량을 투여한 후에 정상 CRP 수준보다 낮은 CRP 수준을 갖는 IBD를 앓고 있는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법을 제공한다. 후자의 경우에, 방법은 선행 용량보다 적거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 추가 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함할 것이다. 일부 실시양태에서, 환자에게 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 투여하는 것은 바이오마커, 예를 들어 IL8, CRP 또는 TNFα의 수준이 정상 수준에 도달할 때까지; 환자가 150 미만의 CDAI 점수를 달성할 때까지; 또는 환자가 임상학적 관해기를 달성할 때까지 반복된다.
본 발명은 또한 정상 CRP 수준보다 높은 CRP 수준을 갖는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법을 제공하고, 여기서 환자에게 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 양은 환자의 CRP 수준이 감소할 때까지 증가한다. 이러한 실시양태에서, 환자에게 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 수준은 환자의 CRP 수준이 대략 정상 CRP 수준까지 또는 정상 CRP 수준 미만으로 감소할 때까지 증가할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 각각의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하는 것을 포함하는, IBD 환자에서 IBD의 치료 또는 관리를 모니터링하는 방법을 제공한다. 이러한 방법을 이용할 때, CRP 수준 감소의 부재는 치료 또는 관리가 효과적이지 않다는 것을 나타낸다. 이러한 실시양태에서, CRP 수준은 각각의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 후에 한번 또는 여러번, 예를 들어 2번, 3번, 4번, 약 5번, 약 10번, 약 15번, 약 20번, 또는 약 30번 분석될 수 있다. 또한, CRP 수준의 측정 시기는 SMAD7 올리고뉴클레오티드의 투여 시간과 관련하여 달라질 수 있어, CRP 수준이 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 투여한 직후에, 약 1시간 후에, 약 3시간 후에, 약 6시간 후에, 약 12시간 후에, 약 1일 후에, 약 3일 후에, 약 1주 후에, 약 2주 후에, 및/또는 약 1개월 후에 분석될 수 있다.
IBD를 앓고 있는 환자에서 본원에 기재된 방법을 사용하여 바이오마커 또는 분석물질, 예를 들어 CRP의 수준을 결정하기 위해, 샘플이 환자로부터 수득될 수 있다. 따라서, 본 발명의 일부 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준은 IBD를 앓고 있는 환자로부터 수득된 샘플에서 결정된다. CRP 이외의 또는 CRP에 대한 추가의 분석물질, 예를 들어 비제한적으로 종양 괴사 인자 알파 (TNFα) 및 인터류킨 8 (IL8)이 또한 본 발명의 방법으로 결정될 수 있다. 따라서, 본 발명의 일부 실시양태에서, 방법은 IBD를 앓고 있는 환자에서의 하나 이상의 추가 분석물질의 하나의 수준 또는 다수의 수준을 결정하는 것을 포함한다. CRP의 분석물질은 NCBI 참조 서열: NG_013007.1에 의해 개시된 CRP 유전자의 또는 그로부터 유래된 RNA, DNA 및 단백질 생성물을 포함한다. TNFα의 분석물질은 NCBI 참조 서열: NG_007462.1에 의해 개시된 TNFα 유전자의 또는 그로부터 유래된 RNA, DNA 및 단백질 생성물을 포함한다. IL8의 분석물질은 NCBI 참조 서열: NG_029889.1에 의해 개시된 IL8 유전자의 또는 그로부터 유래된 RNA, DNA 및 단백질 생성물을 포함한다.
IBD를 앓고 있는 환자로부터 수득된 관심 분석물질, 예를 들어 TNFα, CRP 및/또는 IL8을 함유하는 샘플은 혈액, 혈청 또는 혈장 샘플을 포함할 수 있다. 샘플은 또한 조직 샘플, 예컨대 비제한적으로 조직, 위장, 점막, 점막하, 장, 식도, 회장, 직장 또는 림프 샘플을 포함할 수 있다. IBD를 앓고 있는 환자로부터의 샘플에서의 관심 분석물질의 수준은 다양한 분석법을 사용하여 결정할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 방법에서, CRP 및/또는 하나 이상의 추가 분석물질의 수준은 면역화학, 예를 들어 효소-결합 면역흡착 분석법 (ELISA)에 의해, 또는 뉴클레오티드 분석에 의해 결정될 수 있다.
본 발명의 방법은 다양한 형태의 IBD를 치료 및 관리하는 방법을 포함한다. 예를 들어, 본 발명은 IBD를 치료 및 관리하는 방법을 포함하고, 여기서 IBD는 크론병 (CD) 또는 궤양성 대장염 (UC)이다. 고려된 발명은 또한 상이한 유형의 IBD 환자, 예를 들어 비제한적으로 활동기 CD에 접어든 스테로이드-의존성 환자; 및 활동기 CD에 접어든 스테로이드-저항성 환자인 IBD 환자를 치료하는 방법을 제공한다.
본원에 기재된 본 발명의 방법에서 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 다양한 투여 경로에 의해 투여될 수 있다는 것이 이해될 것이다. 다양한 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 하나의 또는 다수의 경로에 의해, 예를 들어 경구로, 국소적으로, 비경구적으로, 예를 들어 피하 주사에 의해, 흡입 분무에 의해 또는 직장으로 투여될 수 있다. 본원에 사용된 비경구적이라는 용어는 피하 주사, 췌장내 투여, 정맥내, 근육내, 복강내, 흉골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 바람직한 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 IBD를 앓고 있는 환자에게 경구로 투여될 수 있다.
고려된 발명은 분해를 위해 SMAD7 RNA를 표적으로 하거나, RNA 스플라이싱(splicing)을 방해하거나 또는 SMAD7 유전자 발현 또는 단백질 번역을 방지할 수 있는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여를 포함하는 방법을 제공한다. 본 발명의 고려된 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 결합을 위해 인간 SMAD7 mRNA의 다양한 영역을 표적으로 할 수 있다. 예를 들어, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 인간 SMAD7 mRNA (SEQ ID NO: 2)의 뉴클레오티드 108-128을 표적으로 할 수 있다. 일부 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 인간 SMAD7 서열 (SEQ ID NO: 2)의 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 또는 533을 표적으로 할 수 있다. 인간 SMAD7 mRNA 서열은 NCBI 참조 서열: NM_005904.3의 서열이다 (SEQ ID NO: 2).
고려된 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 서열은 SMAD7 RNA를 표적으로 할 수 있는 다수의 서열로부터 선택될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일부 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO: 3 (5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3')의 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 환자의 세포에 전달하기에 적합한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트, 즉 뉴클레오시드 사이의 연결의 적어도 일부가 포스포로티오에이트 연결인 올리고뉴클레오티드이다. 추가적으로, 본 발명의 안티센스 올리고뉴클레오티드는 개질된 뉴클레오티드, 예를 들어 개질된 염기를 함유하는 뉴클레오티드, 예를 들어 5-메틸-2'-데옥시시티딘을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO: 4)를 포함하는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결이다. 일부 실시양태에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO: 1)를 포함하는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘을 포함하는 뉴클레오티드이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결이다. 일부 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 CAS(Chemical Abstract Service) 목록, 예를 들어 비제한적으로 CAS 등록 번호 (RN) 1443994-98-6 또는 CAS RN 1443994-46-4에 의해 한정되는 안티센스 올리고뉴클레오티드일 수 있다. 특정 실시양태에서, 고려된 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO: 1을 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드이고, 여기서 20개의 뉴클레오시드 사이의 연결은 각각 O,O-연결된 포스포로티오에이트 연결이며, 이것을 본원에서는 "몽게르센(Mongersen)"이라 한다.
본 발명은 또한 SMAD7에 대하여 지시되는 안티센스 치료제 및 하나 이상의 추가 치료제의 조합을 사용하여 IBD를 앓고 있는 환자를 치료하는 방법의 개발에 기초한다. 특정 예로, 추가 치료제는 아미노살리실레이트, 항생제, 코르티코스테로이드, 면역조정제, 또는 염증성 시토카인 길항제일 수 있다. 조합 요법의 투여는 개선된 환자 결과를 유도하거나, 부작용을 감소시키거나, 보다 적은 투여량을 가능하게 하거나, 또는 투여되는 치료제 중 어느 하나 또는 둘 모두에 대하여 투여 빈도 감소 또는 투여 기간 단축을 가능하게 할 수 있는, 상승적인 이점을 초래할 수 있다. 이러한 접근법은 또한 독립 요법에 대한 저항성 (예를 들어, 스테로이드 저항성)을 감소시킬 수 있다.
따라서, 한 측면에서, 본 발명은 IBD를 앓고 있는 환자에서 IBD (예를 들어, 크론병 (CD) 또는 궤양성 대장염 (UC))를 치료 또는 관리하는 방법을 특징으로 한다. 방법은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 작용제 및 하나 이상의 추가 치료제의 조합을 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 작용제들은 함께 치료 유효량으로 투여된다. 특정 실시양태에서, 조합은 (a) 몽게르센 및 메살라민, (b) 몽게르센 및 부데소니드, (c) 몽게르센, 메살라민 및 부데소니드, 또는 (d) 몽게르센 및 전신성 투여되는 코르티코스테로이드로 이루어지지 않는다. 하나 이상의 추가 치료제는 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 항-염증성 시토카인 작용제 및 면역조정제로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 아미노살리실레이트는 메살라민일 수 있거나 또는 5-아미노살리실산, 술파살라진, 발살라지드, 올살라진 및 메살라민으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
항생제는 페니실린, 세팔로스포린, 폴리믹신, 리팜피신, 퀴놀론, 술폰아미드, 마크롤리드, 린코사미드, 테트라시클린, 아미노글리코시드, 시클릭 리포펩티드, 글리실시클린, 옥사졸리디논 및 리피암마이신으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 다른 실시양태에서, 항생제는 시프로플록사신 또는 메트로니다졸이거나 또는 에리트로마이신, 클린다마이신, 겐타마이신, 메클리시클린, 술파세타미드, 벤조일 퍼옥시드, 시프로플록사신, 리팍시민, 리파부틴, 클로파지민, 클라리트로마이신, 아지트로마이신, 이소니아지드, 토브라마이신, 아목시실린, 테트라시클린, 티니다졸, 반코마이신, 답토마이신, 티게시클린, 리네졸리드, 피닥소마이신 및 메트로니다졸로 이루어진 군으로부터 선택된다.
스테로이드는 코르티코스테로이드, 예를 들어 부데소니드, 덱사메타손, 베타메타손, 틱소코르톨 피발레이트, 트리암시놀론 아세토니드, 모메타손, 암시노니드, 데소니드, 플루오시노니드, 할시노니드, 플루오코르톨론, 히드로코르티손, 플루티카손 프로피오네이트, 모메타손 푸로테이트, 프레드니손, 프레드니솔론, 베클로메타손 디프로피오네이트, 플루니솔리드 및 메틸프레드니솔론으로 이루어진 군으로부터 선택된 코르티코스테로이드일 수 있다. 특정 실시양태에서, 코르티코스테로이드는 부데소니드, 덱사메타손, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론 또는 프레드니손을 포함한다. 환자는 경구 용량으로 40 mg/일 이하의 프레드니솔론 또는 9 mg/일 이하의 부데소니드를 투여받을 수 있다.
면역조정제는 면역억제제, 예를 들어 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 시클로스포린 A, 닥티노마이신, 안트라시클린, 미토마이신 C, 블레오마이신, 미트라마이신, 타크롤리무스, 미톡산트론, 시클로포스파미드, 미코페놀레이트 모페틸, 라파마이신, 미노시클린 또는 메토트렉세이트일 수 있다. 염증성 시토카인 길항제는 종양 괴사 인자 (TNF) 길항제 (예를 들어, 인플릭시맙, 아달리무맙, 세톨리주맙 페골, 골리미맙, 에타너셉트, 펜톡시필린 및 부프로피온) 및 인터류킨 10 (IL10) 길항제로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
환자는 IBD 요법에 대하여 저항성을 보일 수 있거나 또는 스테로이드-저항성일 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및/또는 하나 이상의 추가 치료제는 경구로 투여될 수 있다. 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 양은 독립 요법으로서 투여될 때의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 치료 유효량보다 적을 수 있다. 다른 실시양태에서, 투여되는 하나 이상의 추가 작용제의 양은 독립 요법으로서 투여될 때의 하나 이상의 추가 작용제의 치료 유효량보다 적을 수 있다. 방법은 환자에게 조합을 투여하기 전에, 치료 유효 용량으로 단독으로의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 단독으로의 하나 이상의 추가 치료제를 일정 기간 동안 환자에게 투여하는 것을 추가로 포함할 수 있다 (예를 들어, 여기서 이 기간은 IBD를 앓고 있는 환자가 IBD 증상의 감소를 겪거나 또는 관해기를 겪도록 하는데 충분함).
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제는 공동으로 투여될 수 있다 (예를 들어, 단위 투여 형태로 조합되어 또는 별개의 단위 투여 형태로 투여될 수 있음). 다른 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제는 순차적으로 투여된다. 다른 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 최초 투여를 받기 전에 하나 이상의 추가 치료제의 투여를 포함하는 IBD 요법 중이었다. 또 다른 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자는 하나 이상의 추가 치료제의 최초 투여를 받기 전에 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여를 포함하는 IBD 요법 중이었다.
IBD를 앓고 있는 환자는 활동기 CD에 접어든 스테로이드-의존성 환자 또는 활동기 CD에 접어든 스테로이드-저항성 환자일 수 있다.
특정 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자가 일정 기간 동안 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 투여받은 후에 질환의 악화를 겪는다면, 생물제 및/또는 면역억제성 약물 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 것)을 이용한 구제 요법이 환자에게 투여된다 (예를 들어, 여기서 이 기간은 약 1주, 약 2주, 약 3주 또는 약 4주이고 질환의 악화는 ≥70점의 크론병 활동성 지표 (CDAI) 점수의 상승을 포함함).
특정 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자가 일정 기간 동안 일정 용량의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 일정 용량의 하나 이상의 추가 치료 활성제를 투여받은 후에 관해기를 겪는다면, 후속 투여에서 SMAD7의 용량 또는 추가 안티센스 올리고뉴클레오티드의 용량이 감소한다 (예를 들어, 본원에 기재된 양의 정도만큼) (예를 들어, 여기서 이 기간은 약 14일 또는 약 28일이고 관해기는 <150의 CDAI를 포함함).
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 10 mg/일 내지 약 300 mg/일 (예를 들어, 약 10 mg/일, 약 20 mg/일, 약 30 mg/일, 약 40 mg/일, 약 50 mg/일, 약 60 mg/일, 약 70 mg/일, 약 80 mg/일, 약 90 mg/일, 약 100 mg/일, 약 110 mg/일, 약 120 mg/일, 약 130 mg/일, 약 140 mg/일, 약 150 mg/일, 약 160 mg/일, 약 170 mg/일, 약 180 mg/일, 약 190 mg/일, 약 200 mg/일, 약 210 mg/일, 약 220 mg/일, 약 230 mg/일, 약 240 mg/일, 약 250 mg/일, 약 260 mg/일, 약 270 mg/일, 약 280 mg/일, 약 290 mg/일, 또는 약 300 mg/일)의 용량으로 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 용량은 약 40 mg/일, 약 80 mg/일, 또는 약 160 mg/일이다.
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 복수의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드일 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 환자에게 경구로 투여될 수 있다. 하나 이상의 추가 치료제는 경구로, 비경구적으로, 직장으로, 정맥내로, 국소적으로, 또는 흡입 분무에 의해 투여될 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 인간 SMAD7 (GCTGCGGGGAGAAGGGGCGAC SEQ ID NO:7)의 영역 108-128을 표적으로 할 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 인간 SMAD7 (SEQ ID NO:2; NM_005904.3의 코딩 서열 CDS (288-1568), 호모 사피엔스 SMAD 패밀리 멤버 7 (SMAD7), 전사 변이체 1, mRNA를 나타냄; 본원에 제공된 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO:2의 뉴클레오티드 서열을 갖는 DNA 및 T이 U에 의해 대체된 SEQ ID NO:2의 상응하는 RNA를 둘다 표적으로 할 수 있음)의 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 또는 533을 표적으로 할 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO:3 (5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3')의 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO:4)를 포함하는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트일 수 있고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결이다.
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO:1)를 포함하는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트일 수 있고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결이다 (예를 들어, CAS RN(Chemical Abstracts Service Registry Number) 1443994-98-6 또는 CAS RN 1443994-46-4에 따른 안티센스 올리고뉴클레오티드).
추가 측면에서, 본 발명은 치료 유효량의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, 상기에 또는 본원에 기재된 임의의 것) 및 치료 유효량의 하나 이상의 추가 치료제 (예를 들어, 상기에 또는 본원에 기재된 임의의 것)를 포함하는, IBD의 치료를 위한 시스템 또는 키트를 특징으로 한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 치료 유효량의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, 상기에 또는 본원에 기재된 임의의 것), 치료 유효량의 하나 이상의 추가 치료제 (예를 들어, 상기에 또는 본원에 기재된 임의의 것), 및 제약상 허용되는 아주반트 및/또는 부형제를 포함하는, IBD의 치료를 위한 제약 조성물을 특징으로 한다. 제약 조성물은 단위 투여 형태 (예를 들어, 메타크릴산-에틸 아크릴레이트 공중합체 코팅을 갖는 정제)일 수 있다. 제약 조성물은 경구 투여를 위한 것일 수 있다. 제약은 인간 SMAD7 (SEQ ID NO:2)의 영역 108-128을 표적으로 하는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드; 인간 SMAD7 (SEQ ID NO:2)의 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 또는 533을 표적으로 하는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드; SEQ ID NO:3 (5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3')의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드; 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO:4)를 포함하고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드; 또는 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO:1)를 포함하고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트인 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, CAS RN(Chemical Abstracts Service Registry Number) 1443994-98-6 또는 CAS RN 1443994-46-4에 따른 안티센스 올리고뉴클레오티드)를 포함할 수 있다. 하나 이상의 추가 치료제는 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 종양 괴사 인자 (TNF) 길항제 또는 면역조정제를 포함할 수 있다.
상기 측면 중 어느 하나의 특정 실시양태에서, 작용제의 조합은 (a) 몽게르센 및 메살라민, (b) 몽게르센 및 부데소니드, (c) 몽게르센, 메살라민 및 부데소니드, 및 (d) 몽게르센 및 전신성 투여되는 코르티코스테로이드가 아니거나 (즉, 이들만으로 이루어지는 것은 아님) 또는 이들을 포함하지 않는다. 다른 실시양태에서, 작용제의 조합은 전신성 투여되는 코르티코스테로이드, 부데소니드 또는 메살라민을 포함하지 않는다.
상기 측면 중 어느 하나의 특정 실시양태에서, 추가 요법은 스테로이드 또는 스테로이드들, 면역조정제 또는 면역조정제들 및/또는 메살라민이 아니거나 또는 이들을 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 (예를 들어, 몽게르센)은 단독으로의 스테로이드 또는 스테로이드들; 단독으로의 면역조정제 또는 면역조정제들; 단독으로의 메살라민; 스테로이드 또는 스테로이드들 및 면역조정제 또는 면역조정제들; 스테로이드 또는 스테로이드들 및 메살라민; 또는 면역조정제 또는 면역조정제들 및 메살라민과 함께 투여되지 않는다. 특정 실시양태에서, 면역조정제는 아자티오프린, 머캅토퓨린, 메토트렉세이트, 시클로스포린 A 및 타크롤리무스가 아니거나 또는 이들을 포함하지 않는다. 다른 실시양태에서, 스테로이드는 코르티코스테로이드가 아니거나 또는 이들을 포함하지 않는데, 예를 들어 프레드니손, 덱사메타손, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니손 및 부데소니드가 아니거나 또는 이들을 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 추가 요법은 살리실레이트 또는 술파살라진이 아니거나 또는 이들을 포함하지 않는다.
본 발명의 한 측면에서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 염증성 장 질환 (IBD)의 치료 또는 관리에 사용하기 위한 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드가 제공된다. 바람직하게는, 치료 또는 관리 방법은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하고; 상기 환자에서의 CRP 수준을 분석하고; CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 환자에게 투여하거나 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 별법으로, 치료 또는 관리 방법은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 투여 전에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고, CRP 수준이 역치 CRP 수준보다 높다면 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드를 투여하는 것을 포함한다. 바람직하게는, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 치료 또는 관리 방법은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 후속 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함하거나 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 방법은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 정상 및 역치 CRP 수준은 기재된 바와 같다. 초기 용량 및 후속 용량은 기재된 바와 같다. 또한 바람직하게는, 치료 또는 관리 방법은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고; SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준보다 낮다면, SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량보다 많은 SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 환자에게 투여하거나 또는 치료를 종료하는 것을 추가로 포함한다. SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드는 기재된 바와 같다.
본 발명의 추가 측면에서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 IBD의 치료 또는 관리에 사용하기 위한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 제공되고, 여기서 치료 또는 관리는 상기 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 치료 유효량의 하나 이상의 추가 치료제와 동시에 또는 연속적으로 투여하는 것을 포함하고, 이러한 추가 치료제는 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 항-염증성 시토카인 작용제 및 면역조정제로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명의 추가 측면에서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 IBD의 치료 또는 관리에 사용하기 위한 SMAD7 안티센스 및 치료 유효량의 하나 이상의 추가 치료제를 포함하는 조합이 제공되고, 여기서 조합은 (a) 몽게르센 및 메살라민, (b) 몽게르센 및 부데소니드, (c) 몽게르센, 메살라민 및 부데소니드, 또는 (d) 몽게르센 및 전신성 투여되는 코르티코스테로이드로 이루어지지 않는다. 바람직하게는, 하나 이상의 추가 치료제는 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 항-염증성 시토카인 작용제 및 면역조정제로 이루어진 군으로부터 선택된다.
예시 실시양태
1. a. 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 것
을 포함하는, 3 mg/리터 초과의 순환 CRP 농도를 갖는 대상체에서 IBD를 치료하는 방법.
2. 실시양태 1에 있어서, 단계 (a) 전에, 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 것을 포함하는 방법.
3. 실시양태 2에 있어서, 단계 (a) 후에, 순환 CRP 농도에서 어떤 변화가 발생하였는지를 결정하기 위해 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 것을 포함하는 방법.
4. a. 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 것
을 포함하는, IBD를 앓고 있는 대상체에서 CRP 수준을 감소시키는 방법.
5. 실시양태 4에 있어서, 단계 (a) 전에, 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 것을 포함하는 방법.
6. 실시양태 5에 있어서, 단계 (a) 후에, 순환 CRP 농도에서 어떤 변화가 발생하였는지를 결정하기 위해 대상체에서의 순환 CRP 농도를 측정하는 것을 포함하는 방법.
7. 실시양태 2 내지 3 또는 5 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 순환 CRP 농도가 대상체로부터 샘플을 채취하여 측정된 것인 방법.
8. a. 대상체로부터 수득된 적어도 하나의 샘플에서의 CRP 농도를 결정하고;
b. 샘플에서의 CRP 농도를 대조 CRP 수준과 비교하는 것을 포함하고,
c. 여기서 샘플에서의 CRP 농도의 감소가 대상체가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응할 것 같거나 또는 반응성을 보인다는 것을 나타내는 것인,
적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대한 IBD를 앓고 있는 대상체의 반응성을 모니터링하는 방법.
9. 실시양태 8에 있어서, 단계 (a) 전에, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
10. 실시양태 8 또는 9에 있어서, 단계 (b) 후에, 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
11. 실시양태 8에 있어서, 대상체가 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 받고 있을 때 샘플이 수득되는 것인 방법.
12. 실시양태 7 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 샘플에서의 CRP 양의 감소가 대상체가 관해기에 진입할 것 같다는 것을 나타내는 것인 방법.
13. 실시양태 7 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 샘플에서의 CRP 양의 감소가 대상체가 관해기에 진입하였다는 것을 나타내는 것인 방법.
14. 실시양태 7 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 샘플에서의 CRP 양의 감소가 대상체의 약 150 미만의 CDAI 점수와 일치하는 것인 방법.
15. 실시양태 14에 있어서, CDAI 점수가 대상체에서 적어도 1일 동안 유지되는 것인 방법.
16. 실시양태 14에 있어서, CDAI 점수가 대상체에서 적어도 1주 동안 유지되는 것인 방법.
17. 실시양태 14에 있어서, CDAI 점수가 대상체에서 적어도 2주 동안 유지되는 것인 방법.
18. 실시양태 15 내지 17 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일 후에 관찰가능한 것인 방법.
19. 실시양태 15 내지 17 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 2주 후에 관찰가능한 것인 방법.
20. 실시양태 15 내지 17 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 10주 후에 관찰가능한 것인 방법.
21. 실시양태 15 내지 17 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일 및 약 2주 후의 두 시점 모두에서 관찰가능한 것인 방법.
22. 실시양태 7 내지 21 중 어느 하나에 있어서, 샘플에서의 CRP 양의 감소가 대상체의 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소와 일치하는 것인 방법.
23. 실시양태 22에 있어서, CDAI 점수의 감소가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일 후에 관찰가능한 것인 방법.
24. 실시양태 22에 있어서, CDAI 점수의 감소가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 2주 후에 관찰가능한 것인 방법.
25. 실시양태 7 내지 24 중 어느 하나에 있어서, 샘플이 혈액 샘플인 방법.
26. 실시양태 8 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 대조 CRP 수준이 약 3 mg/리터 이상인 방법.
27. 실시양태 8 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 샘플에서의 CRP 농도가 약 3 mg/리터 미만인 방법.
28. 실시양태 8 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 대조 CRP 수준이 적어도 하나의 항-SMAD7 요법의 투여 전에 환자로부터 얻어지거나 또는 적어도 하나의 항-SMAD7 요법의 투여 직후에 얻어진 CRP의 기준선 수준인 방법.
29. 실시양태 7에 있어서, 단계 (a) 후에 대상체로부터 채취한 샘플에서의 CRP 농도가 약 3.0 mg/리터 미만인 방법.
30. 실시양태 2 내지 3 또는 5 내지 29 중 어느 하나에 있어서, CRP 농도가 면역화학 및/또는 뉴클레오티드 분석에 의해 결정되는 것인 방법.
31. 실시양태 30에 있어서, 면역화학이 항-CRP 항체를 사용하여 수행되는 것인 방법.
32. 실시양태 30에 있어서, 뉴클레오티드 분석이 CRP 뉴클레오티드 서열과 결합하는 올리고뉴클레오티드 프로브 또는 폴리머라제 연쇄 반응을 통해 CRP 서열을 증폭시킬 수 있는 한 쌍의 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하여 수행되는 것인 방법.
33. 실시양태 2 내지 3 또는 5 내지 32 중 어느 하나에 있어서, 시험관내에서 수행되는 방법.
34. 실시양태 1 내지 7 또는 9 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이 경구로 투여되는 것인 방법.
35. 상기 실시양태 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이 항-SMAD7 안티센스 요법인 방법.
36. 실시양태 35에 있어서, 항-SMAD7 안티센스 요법이 SEQ ID NO: 1로 표시되는 항-SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 것인 방법.
37. 상기 실시양태 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이
a. SEQ ID NO: 1로 표시되는 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 충전제를 포함하는 과립내 상;
b. 붕해제를 포함하는 과립외 상; 및
c. 에틸아크릴레이트-메타크릴산 공중합체를 포함하는 장용성 코팅
을 포함하는, 경구 투여를 위한 제약 정제의 형태인 방법.
38. 상기 실시양태 중 어느 하나에 있어서, IBD가 CD 및/또는 UC인 방법.
39. 상기 실시양태 중 어느 하나에 있어서, IBD가 CD인 방법.
40. 실시양태 1 내지 38 중 어느 하나에 있어서, IBD가 UC인 방법.
41. 상기 실시양태 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 인간 대상체인 방법.
42. 상기 실시양태 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이 면역조정제 및/또는 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 투여되는 것인 방법.
43. 실시양태 42에 있어서, 스테로이드를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
44. CRP 수준을 측정하기 위한 시약 및 CDAI 점수의 측정에 관한 상세한 설명서를 포함하는 키트.
45. 실시양태 44에 있어서, CRP 수준을 측정하기 위한 시약이 항-CRP 항체, CRP 뉴클레오티드 서열과 결합하는 올리고뉴클레오티드 프로브, 및 CRP 뉴클레오티드 서열과 결합하고 폴리머라제 연쇄 반응을 통해 증폭시킬 수 있는 올리고뉴클레오티드 프라이머로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 키트.
46. 실시양태 44 또는 45에 있어서, 완충제, 시약 및 CRP 수준의 측정에 관한 상세한 설명서 중 적어도 하나를 추가로 포함하는 키트.
47. 실시양태 45에 있어서, 항-CRP 항체가 CRP 단백질에 대한 1차 항체이고, 추가로 리포터 효소와 접합된 2차 항체, 완충제, 시약 및 면역화학 및/또는 폴리머라제 연쇄 반응을 사용하는 샘플에서의 CRP 수준의 측정에 관한 상세한 설명서를 임의로 포함하는 키트.
48. 항-SMAD7 요법을 면역조정제 및/또는 메살라민을 이용한 치료 다음에 또는 그와 동시에 환자에게 투여하는 것을 포함하는, IBD를 치료하는 방법.
49. 실시양태 48에 있어서, 스테로이드를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
50. 실시양태 48 또는 49에 있어서, 환자가 관해기에 진입하도록 하는 방법.
51. 실시양태 48 또는 49에 있어서, 대상체에서 150 미만의 CDAI 점수를 초래하는 방법.
52. 실시양태 51에 있어서, CDAI 점수가 대상체에서 적어도 1일 동안 유지되는 것인 방법.
53. 실시양태 51에 있어서, CDAI 점수가 대상체에서 적어도 1주 동안 유지되는 것인 방법.
54. 실시양태 51에 있어서, CDAI 점수가 대상체에서 적어도 2주 동안 유지되는 것인 방법.
55. 실시양태 52 내지 54 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 치료를 중단한지 약 1일 후에 관찰가능한 것인 방법.
56. 실시양태 52 내지 54 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 치료를 중단한지 약 2주 후에 관찰가능한 것인 방법.
57. 실시양태 52 내지 54 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 치료를 중단한지 약 10주 후에 관찰가능한 것인 방법.
58. 실시양태 52 내지 54 중 어느 하나에 있어서, CDAI 점수가 치료를 중단한지 약 1일 및 약 2주 후의 두 시점 모두에서 관찰가능한 것인 방법.
59. 실시양태 48 내지 58 중 어느 하나에 있어서, 대상체에서 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소를 초래하는 방법.
60. 실시양태 59에 있어서, CDAI 점수의 감소가 치료를 중단한지 약 1일 후에 관찰가능한 것인 방법.
61. 실시양태 59에 있어서, CDAI 점수의 감소가 치료를 중단한지 약 2주 후에 관찰가능한 것인 방법.
62. 실시양태 48 내지 61 중 어느 하나에 있어서, 약 3 mg/리터 미만의 순환 CRP 수준을 초래하는 방법.
63. 실시양태 48 내지 62 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이 경구로 투여되는 것인 방법.
64. 실시양태 48 내지 62 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이 경구로 투여되고 면역조정제 및/또는 메살라민이 상이한 경로를 통해 투여되는 것인 방법.
65. 실시양태 64에 있어서, 상이한 경로가 국소적, 비경구적, 흡입 분무 또는 직장인 방법.
66. 실시양태 48 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이 항-SMAD7 안티센스 요법인 방법.
67. 실시양태 66에 있어서, 항-SMAD7 안티센스 요법이 SEQ ID NO: 1로 표시되는 항-SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 것인 방법.
68. 실시양태 48 내지 67 중 어느 하나에 있어서, 항-SMAD7 요법이
a. SEQ ID NO: 1로 표시되는 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 충전제를 포함하는 과립내 상;
b. 붕해제를 포함하는 과립외 상; 및
c. 에틸아크릴레이트-메타크릴산 공중합체를 포함하는 장용성 코팅
을 포함하는, 경구 투여를 위한 제약 정제의 형태인 방법.
69. 실시양태 48 내지 68 중 어느 하나에 있어서, IBD가 CD 및/또는 UC인 방법.
70. 실시양태 69에 있어서, IBD가 CD인 방법.
71. 실시양태 69에 있어서, IBD가 UC인 방법.
72. 실시양태 48 내지 71 중 어느 하나에 있어서, 환자가 인간 환자인 방법.
73. a. SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하고;
b. 환자에서의 C-반응성 단백질 (CRP) 수준을 분석하고;
c. CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것
을 포함하는, IBD를 앓고 있는 환자에서 염증성 장 질환 (IBD)을 치료 또는 관리하는 방법.
74. a. 환자에서의 CRP 수준을 분석하고;
b. CRP 수준이 역치 CRP 수준보다 높다면, SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하는 것
을 포함하는, IBD를 앓고 있는 환자에서 염증성 장 질환 (IBD)을 치료 또는 관리하는 방법.
75. 실시양태 74에 있어서, 역치 CRP 수준이 정상 수준보다 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 5배, 적어도 8배, 적어도 10배, 적어도 20배, 적어도 30배, 적어도 50배, 적어도 80배, 또는 적어도 100배 더 높은 것인 방법.
76. 실시양태 74에 있어서, 역치 CRP 수준이 IBD 환자군의 CRP 수준의 제50 백분위수, 제60 백분위수, 제70 백분위수, 제80 백분위수 또는 제90 백분위수인 방법.
77. 실시양태 74 내지 76 중 어느 하나에 있어서, CRP 수준이 3 mg/L 미만인 방법.
78. 실시양태 74에 있어서, 역치 CRP 수준이 0.5 mg/L를 초과하거나, 1.0 mg/L를 초과하거나, 1.5 mg/L를 초과하거나, 2.0 mg/L를 초과하거나, 2.5 mg/L를 초과하거나, 3.0 mg/L를 초과하거나, 3.5 mg/L를 초과하거나, 4.0 mg/L를 초과하거나, 4.5 mg/L를 초과하거나, 또는 5.0 mg/L를 초과하는 것인 방법.
79. 실시양태 74 또는 78에 있어서, CRP 수준이 0.5 mg/L 내지 3 mg/L, 1 mg/L 내지 3 mg/L, 1.5 mg/L 내지 3 mg/L, 2 mg/L 내지 3 mg/L, 또는 2.5 mg/L 내지 3 mg/L인 방법.
80. 실시양태 74에 있어서,
a. (c) 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고;
b. (d) CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 그 보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것
을 추가로 포함하는 방법.
81. 실시양태 74 또는 실시양태 80에 있어서, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많은 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것인 방법.
82. 실시양태 80에 있어서, 후속 용량이 최대 허용 용량 (MTD)과 동일하거나 또는 그보다 많다면, 치료를 종료하는 것인 방법.
83. 실시양태 80에 있어서, CRP 수준이 상기 투여 단계의 적어도 1일, 적어도 3일, 적어도 5일, 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 4개월, 또는 적어도 6개월 후에 분석되는 것인 방법.
84. 실시양태 80에 있어서, CRP 수준이 상기 투여 단계 직후에 분석되는 것인 방법.
85. 실시양태 80에 있어서, CRP 수준이 상기 투여 단계의 약 15일 또는 약 28일 후에 분석되는 것인 방법.
86. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, 정상 CRP 수준이 건강한 대조군의 CRP의 중앙값 수준인 방법.
87. 실시양태 86에 있어서, 건강한 대조군 및 IBD를 앓고 있는 환자가 연령, 성별, 인종 기원, 흡연 습관, 식습관, 체질량 지수 (BMI), 및/또는 운동 습관과 관련하여 매칭되는 것인 방법.
88. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, 정상 CRP 수준이 약 0.1 mg/L, 0.2 mg/L, 0.3 mg/L, 0.4 mg/L, 0.5 mg/L, 0.6 mg/L, 0.7 mg/L, 0.8 mg/L, 0.9 mg/L 또는 1.0 mg/L인 방법.
89. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, 초기 용량이 100 mg/일 미만, 90 mg/일 미만, 80 mg/일 미만, 70 mg/일 미만, 60 mg/일 미만, 50 mg/일 미만, 40 mg/일 미만 또는 30 mg/일 미만인 방법.
90. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, 초기 용량이 적어도 10 mg/일, 적어도 20 mg/일, 적어도 30 mg/일, 적어도 40 mg/일, 적어도 50 mg/일, 적어도 60 mg/일, 적어도 70 mg/일, 적어도 80 mg/일, 또는 적어도 90 mg/일인 방법.
91. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, 초기 용량이 약 10 mg/일, 약 20 mg/일, 약 30 mg/일, 약 40 mg/일, 약 50 mg/일, 약 60 mg/일, 약 70 mg/일, 약 80 mg/일, 약 90 mg/일, 또는 약 100 mg/일인 방법.
92. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, 초기 용량이 10 mg/일, 40 mg/일, 80 mg/일, 또는 160 mg/일인 방법.
93. 실시양태 73 또는 실시양태 80에 있어서, CRP 수준이 정상 수준보다 높다면, 후속 용량이 초기 용량보다 적어도 약 10 mg/일, 적어도 약 20 mg/일, 적어도 약 30 mg/일, 적어도 약 40 mg/일, 적어도 약 50 mg/일, 적어도 약 60 mg/일, 적어도 약 70 mg/일, 적어도 약 80 mg/일, 적어도 약 90 mg/일, 적어도 약 100 mg/일, 적어도 약 110 mg/일, 적어도 약 120 mg/일, 적어도 약 130 mg/일, 적어도 약 140 mg/일, 적어도 약 150 mg/일, 또는 적어도 약 160 mg/일 더 많은 것인 방법.
94. 실시양태 73 또는 실시양태 80에 있어서, CRP 수준이 정상 수준보다 낮다면, 후속 용량이 초기 용량보다 적어도 약 10 mg/일, 적어도 약 20 mg/일, 적어도 약 30 mg/일, 적어도 약 40 mg/일, 적어도 약 50 mg/일, 적어도 약 60 mg/일, 적어도 약 70 mg/일, 또는 적어도 약 80 mg/일 더 적은 것인 방법.
95. 실시양태 73 또는 실시양태 80에 있어서, 초기 용량이 약 10 mg/일 내지 100 mg/일이고 후속 용량이 약 30 mg/일 내지 200 mg/일인 방법.
96. 실시양태 74에 있어서,
a. (c) 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고;
b. (d) 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 많은 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 치료를 종료하는 것
을 추가로 포함하는 방법.
97. 실시양태 96에 있어서, 환자가 임상학적 관해기에 있고 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 치료를 종료하는 것인 방법.
98. 실시양태 96에 있어서, 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 또는 적어도 70% 감소하였다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것인 방법.
99. 실시양태 96에 있어서, 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 또는 적어도 70% 감소하였다면, IBD를 앓고 있는 환자가 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 6주 또는 적어도 8주의 시간 동안 IBD의 임상학적 관해기를 겪을 가능성이 20%를 초과하거나, 30%를 초과하거나, 40%를 초과하거나, 50%를 초과하거나, 60%를 초과하거나, 70%를 초과하거나, 80%를 초과하거나, 90%를 초과하거나 또는 100%를 초과하는 것으로 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
100. 실시양태 99에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자의 임상학적 관해기가 <150의 크론병 활동성 지표 (CDAI)에 의해 나타나는 것인 방법.
101. 실시양태 99에 있어서, 임상학적 관해기가 상기 투여 단계의 약 1주, 약 2주, 또는 약 3주 후에 관찰되고 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 6주 또는 적어도 8주의 기간 동안 유지되는 것인 방법.
102. 실시양태 99에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 상기 투여 단계의 1주 전에 약 220 내지 약 400의 CDAI를 갖는 것인 방법.
103. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준이 IBD를 앓고 있는 환자로부터 수득된 샘플에서 결정되는 것인 방법.
104. 실시양태 103에 있어서, 샘플이 혈액, 혈청 또는 혈장 샘플인 방법.
105. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, CRP 수준이 면역화학 또는 뉴클레오티드 분석에 의해 결정되는 것인 방법.
106. 실시양태 105에 있어서, CRP 수준이 효소-결합 면역흡착 분석법 (ELISA)에 의해 결정되는 것인 방법.
107. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 하나 이상의 추가 분석물질의 수준을 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
108. 실시양태 107에 있어서, 하나 이상의 추가 분석물질이 인터류킨 8 (IL8) 또는 종양 괴사 인자 알파 (TNFα)를 포함하는 것인 방법.
109. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, IBD가 크론병 (CD) 또는 궤양성 대장염 (UC)인 방법.
110. 실시양태 109에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 활동기 CD에 접어든 스테로이드-의존성 환자인 방법.
111. 실시양태 109에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 활동기 CD에 접어든스테로이드-저항성 환자인 방법.
112. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드가 IBD를 앓고 있는 환자에게 경구로 투여되는 것인 방법.
113. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 (SEQ ID NO: 2)의 영역 108-128을 표적으로 하는 것인 방법.
114. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 (SEQ ID NO: 2)의 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 또는 533을 표적으로 하는 것인 방법.
115. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 SEQ ID NO: 3 (5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3')의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법.
116. 실시양태 73 또는 실시양태 74에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO: 4)를 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 방법.
117. 실시양태 116에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO: 1)를 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 방법.
118. 실시양태 117에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 CAS RN(Chemical Abstracts Service Registry Number) 1443994-98-6 또는 CAS RN 1443994-46-4에 따른 안티센스 올리고뉴클레오티드인 방법.
119. 선행 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 추가 용량을, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 일정 용량의 투여 후에 정상 CRP 수준보다 높은 CRP 수준을 갖는 IBD 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법.
120. 선행 용량보다 적거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 추가 용량을, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 일정 용량의 투여 후에 정상 CRP 수준보다 낮은 CRP 수준을 갖는 IBD 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법.
121. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 일정 용량을, 정상 CRP 수준보다 높은 CRP 수준을 갖는 IBD 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법.
122. 실시양태 121에 있어서, IL8 수준, CRP 수준 또는 TNFα 수준이 정상 수준에 도달할 때까지 투여가 반복되는 것인 방법.
123. 실시양태 121에 있어서, 환자가 150 미만의 CDAI 점수를 달성할 때까지 투여가 반복되는 것인 방법.
124. 실시양태 121에 있어서, 환자가 임상학적 관해를 달성할 때까지 투여가 반복되는 것인 방법.
125. 각각의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하는 것을 포함하고, 여기서 CRP 수준 감소의 부재는 치료 또는 관리가 효과적이지 않다는 것을 나타내는 것인, IBD 환자에서 IBD의 치료 또는 관리를 모니터링하는 방법.
126. 실시양태 125에 있어서, CRP 수준이 각각의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 후에 1번, 2번, 3번, 4번, 약 5번, 약 10번, 약 15번, 약 20번, 또는 약 30번 분석되는 것인 방법.
127. 실시양태 125에 있어서, CRP 수준이 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 직후에, 약 1시간 후에, 약 3시간 후에, 약 6시간 후에, 약 12시간 후에, 약 1일 후에, 약 3일 후에, 약 1주 후에, 약 2주 후에, 및/또는 약 1개월 후에 분석되는 것인 방법.
128. 환자의 CRP 수준이 감소할 때까지 환자에게 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 양을 증가시키는 것을 포함하는, 정상 CRP 수준보다 높은 CRP 수준을 갖는 IBD 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법.
129. 실시양태 128에 있어서, CRP가 대략 정상 CRP 수준까지 또는 정상 CRP 수준 미만으로 감소하는 것인 방법.
130. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 작용제 및 하나 이상의 추가 치료제의 조합을 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 작용제는 치료 유효량으로 투여되고 조합은 (a) 몽게르센 및 메살라민, (b) 몽게르센 및 부데소니드, (c) 몽게르센, 메살라민 및 부데소니드, 또는 (d) 몽게르센 및 전신성 투여되는 코르티코스테로이드로 이루어지지 않는 것인, IBD를 앓고 있는 환자에서 염증성 장 질환 (IBD)을 치료 또는 관리하는 방법.
131. 실시양태 130에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 항-염증성 시토카인 작용제 및 면역조정제로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
132. 실시양태 131에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 5-아미노살리실산, 술파살라진, 발살라지드, 올살라진 및 메살라민으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노살리실레이트를 포함하는 것인 방법.
133. 실시양태 132에 있어서, 아미노살리실레이트가 메살라민을 포함하는 것인 방법.
134. 실시양태 131에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 페니실린, 세팔로스포린, 폴리믹신, 리팜피신, 리피암마이신, 퀴놀론, 술폰아미드, 마크롤리드, 린코사미드, 테트라시클린, 아미노글리코시드, 시클릭 리포펩티드, 글리실시클린, 옥사졸리디논 및 리피암마이신으로 이루어진 군으로부터 선택된 항생제를 포함하는 것인 방법.
135. 실시양태 131에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 에리트로마이신, 클린다마이신, 겐타마이신, 메클리시클린, 술파세타미드, 벤조일 퍼옥시드, 시프로플록사신, 리팍시민, 리파부틴, 클로파지민, 클라리트로마이신, 아지트로마이신, 이소니아지드, 토브라마이신, 리팍시민, 아목시실린, 테트라시클린, 티니다졸, 반코마이신, 답토마이신, 티게시클린, 리네졸리드, 피닥소마이신 및 메트로니다졸로 이루어진 군으로부터 선택된 항생제를 포함하는 것인 방법.
136. 실시양태 135에 있어서, 항생제가 시프로플록사신 또는 메트로니다졸을 포함하는 것인 방법.
137. 실시양태 131에 있어서, 스테로이드가 코르티코스테로이드인 방법.
138. 실시양태 137에 있어서, 코르티코스테로이드가 부데소니드, 덱사메타손, 베타메타손, 틱소코르톨 피발레이트, 트리암시놀론 아세토니드, 모메타손, 암시노니드, 데소니드, 플루오시노니드, 할시노니드, 플루오코르톨론, 히드로코르티손, 플루티카손 프로피오네이트, 모메타손 푸로테이트, 프레드니손, 프레드니솔론, 베클로메타손 디프로피오네이트, 플루니솔리드 및 메틸프레드니솔론으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
139. 실시양태 137에 있어서, 코르티코스테로이드가 부데소니드, 덱사메타손, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론 또는 프레드니손을 포함하는 것인 방법.
140. 실시양태 139에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 경구 용량으로 40 mg/일 이하의 프레드니솔론 또는 9 mg/일 이하의 부데소니드를 투여받는 것인 방법.
141. 실시양태 131에 있어서, 면역조정제가 면역억제제인 방법.
142. 실시양태 141에 있어서, 면역억제제가 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 시클로스포린 A, 닥티노마이신, 안트라시클린, 미토마이신 C, 블레오마이신, 미트라마이신, 타크롤리무스, 미톡산트론, 시클로포스파미드, 미코페놀레이트 모페틸, 라파마이신, 미노시클린 또는 메토트렉세이트를 포함하는 것인 방법.
143. 실시양태 131에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 종양 괴사 인자 (TNF) 길항제 및 인터류킨 10 (IL10) 길항제로 이루어진 군으로부터 선택된 염증성 시토카인 길항제를 포함하는 것인 방법.
144. 실시양태 143에 있어서, TNF 길항제가 인플릭시맙, 아달리무맙, 세톨리주맙 페골, 골리미맙, 에타너셉트, 펜톡시필린 및 부프로피온으로 이루어진 군으롤부터 선택된 것인 방법.
145. 실시양태 130 내지 144 중 어느 하나에 있어서, 환자가 IBD 요법에 대하여 저항성을 보이는 것인 방법.
146. 실시양태 130 내지 145 중 어느 하나에 있어서, 환자가 스테로이드-저항성인 방법.
147. 실시양태 130 내지 146 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제가 경구로 투여되는 것인 방법.
148. 실시양태 130 내지 147 중 어느 하나에 있어서, (a) 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 양이 독립 요법으로서 투여되었을 때의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 치료 유효량보다 적거나, 또는 (b) 투여되는 하나 이상의 추가 작용제의 양이 독립 요법으로서 투여되었을 때의 하나 이상의 추가 작용제의 치료 유효량보다 적은 것인 방법.
149. 실시양태 130 내지 148 중 어느 하나에 있어서, 치료 유효 용량의 단독으로의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 치료 유효 용량의 단독으로의 하나 이상의 추가 치료제 중 어느 하나가, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 하나 이상의 추가 치료제 중 다른 하나가 투여되기 전 제1의 기간 동안 환자에게 투여되는 것인 방법.
150. 실시양태 149에 있어서, 기간이 IBD를 앓고 있는 환자가 IBD 증상의 경감을 겪거나 또는 관해기를 겪도록 하는데 충분한 것인 방법.
151. 실시양태 130 내지 150 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제가 공동으로 투여되는 것인 방법.
152. 실시양태 151에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제가 단위 투여 형태로 조합되어 투여되는 것인 방법.
153. 실시양태 151에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제가 별개의 단위 투여 형태로 투여되는 것인 방법.
154. 실시양태 130 내지 150 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제가 순차적으로 투여되는 것인 방법.
155. 실시양태 130 내지 154 중 어느 하나에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 최초 투여를 받기 전에 하나 이상의 추가 치료제의 투여를 포함하는 IBD 요법 중인 방법.
156. 실시양태 130 내지 154 중 어느 하나에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 하나 이상의 추가 치료제의 최초 투여를 받기 전에 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여를 포함하는 IBD 요법 중인 방법.
157. 실시양태 130 내지 156 중 어느 하나에 있어서, IBD가 크론병 (CD) 또는 궤양성 대장염 (UC)인 방법.
158. 실시양태 157에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 활동기 CD에 접어든스테로이드-의존성 환자인 방법.
159. 실시양태 157에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 활동기 CD에 접어든스테로이드-저항성 환자인 방법.
160. 실시양태 130 내지 159 중 어느 하나에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 제2의 기간 동안 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 투여받은 후에 질환의 악화를 겪는다면, 생물제 및/또는 면역억제성 약물을 이용한 구제 요법이 환자에게 투여되는 것인 방법.
161. 실시양태 160에 있어서, 기간이 약 2주이고 질환의 악화가 ≥70점의 크론병 활동성 지표 (CDAI) 점수의 상승을 포함하는 것인 방법.
162. 실시양태 130 내지 159 중 어느 하나에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 제3의 기간 동안 일정 용량의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 일정 용량의 하나 이상의 추가 치료 활성제를 투여받은 후에 관해기를 겪는다면, 후속 투여에서 SMAD7의 용량 또는 추가 안티센스 올리고뉴클레오티드의 용량이 감소되는 것인 방법.
163. 실시양태 162에 있어서, 기간이 약 14일 또는 약 28일이고 관해기는 <150의 CDAI를 포함하는 것인 방법.
164. 실시양태 130 내지 163 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 10 mg/일 내지 약 300 mg/일의 용량으로 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 것인 방법.
165. 실시양태 164에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 약 10 mg/일, 약 20 mg/일, 약 30 mg/일, 약 40 mg/일, 약 50 mg/일, 약 60 mg/일, 약 70 mg/일, 약 80 mg/일, 약 90 mg/일, 약 100 mg/일, 약 110 mg/일, 약 120 mg/일, 약 130 mg/일, 약 140 mg/일, 약 150 mg/일, 약 160 mg/일, 약 170 mg/일, 약 180 mg/일, 약 190 mg/일, 약 200 mg/일, 약 210 mg/일, 약 220 mg/일, 약 230 mg/일, 약 240 mg/일, 약 250 mg/일, 약 260 mg/일, 약 270 mg/일, 약 280 mg/일, 약 290 mg/일, 또는 약 300 mg/일의 용량으로 투여되는 것인 방법.
166. 실시양태 165에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 약 40 mg/일, 약 80 mg/일, 또는 약 160 mg/일의 용량으로 투여되는 것인 방법.
167. 실시양태 130 내지 166 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 복수의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드인 방법.
168. 실시양태 130 내지 167 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 환자에게 경구로 투여되는 것인 방법.
169. 실시양태 130 내지 167 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 경구로, 비경구적으로, 직장으로, 정맥내로, 국소적으로, 또는 흡입 분무에 의해 투여되는 것인 방법.
170. 실시양태 130 내지 169 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 (GCTGCGGGGAGAAGGGGCGAC; SEQ ID NO:7)의 영역 108-128을 표적으로 하는 것인 방법.
171. 실시양태 130 내지 169 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 mRNA (SEQ ID NO:2)의 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 또는 533을 표적으로 하는 것인 방법.
172. 실시양태 130 내지 169 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 SEQ ID NO:3 (5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3')의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법.
173. 실시양태 130 내지 169 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO:4)를 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 방법.
174. 실시양태 173에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO:1)를 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 방법.
175. 실시양태 174에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 CAS RN(Chemical Abstracts Service Registry Number) 1443994-98-6 또는 CAS RN 1443994-46-4에 따른 안티센스 올리고뉴클레오티드인 방법.
176. 실시양태 130 내지 175 중 어느 하나에 있어서, 상기 추가 치료제가 전신성 투여되는 코르티코스테로이드, 부데소니드 또는 메살라민을 포함하지 않는 것인 방법.
177. 치료 유효량의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 치료 유효량의 하나 이상의 추가 치료제를 포함하는, IBD의 치료를 위한 시스템.
178. 치료 유효량의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 치료 유효량의 하나 이상의 추가 치료제를 포함하는, IBD의 치료를 위한 키트.
179. 치료 유효량의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드, 치료 유효량의 하나 이상의 추가 치료제, 및 제약상 허용되는 아주반트 및/또는 부형제를 포함하는, IBD의 치료를 위한 제약 조성물.
180. 실시양태 179에 있어서, 단위 투여 형태인 제약 조성물.
181. 실시양태 180에 있어서, 단위 투여 형태가 메타크릴산-에틸 아크릴레이트 공중합체 코팅을 갖는 정제인 제약 조성물.
182. 실시양태 179 내지 181 중 어느 하나에 있어서, 경구 투여를 위한 제약 조성물.
183. 실시양태 179 내지 182 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 (SEQ ID NO:2)의 영역 108-128을 표적으로 하는 것인 제약 조성물.
184. 실시양태 179 내지 182 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 (SEQ ID NO:2)의 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 또는 533을 표적으로 하는 것인 제약 조성물.
185. 실시양태 179 내지 182 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 SEQ ID NO:3 (5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3')의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 제약 조성물.
186. 실시양태 179 내지 182 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO:4)를 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 제약 조성물.
187. 실시양태 179 내지 182 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO:1)를 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 제약 조성물.
188. 실시양태 179 내지 182 중 어느 하나에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 CAS RN(Chemical Abstracts Service Registry Number) 1443994-98-6 또는 CAS RN 1443994-46-4에 따른 안티센스 올리고뉴클레오티드인 제약 조성물.
189. 실시양태 179 내지 182 중 어느 하나에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 종양 괴사 인자 (TNF) 길항제 또는 면역조정제를 포함하는 것인 제약 조성물.
190. 환자의 C-반응성 단백질 (CRP) 수준을 역치 CRP 수준과 비교하는 것을 포함하고; 여기서 역치 CRP 수준보다 높은 환자의 CRP 수준은 환자가 항-SMAD 요법에 대하여 반응할 것 같거나 또는 반응성을 보인다는 것을 나타내는 것인, 항-SMAD 요법에 대한 염증성 장 질환 환자의 반응성을 예측하는 시험관내 방법.
191. (a) 환자에서의 C-반응성 단백질 (CRP) 수준을 분석하고; (b) CRP 수준이 역치 CRP 수준보다 높다면, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, IBD를 앓고 있는 환자에서 염증성 장 질환 (IBD)을 치료 또는 관리하는 방법에 사용하기 위한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드.
192. 실시양태 191에 있어서, 역치 CRP 수준이 약 0.5 mg/L 이상, 약 1.0 mg/L 이상, 약 1.5 mg/L 이상, 약 2.0 mg/L 이상, 약 2.5 mg/L 이상, 약 3.0 mg/L 이상, 약 3.5 mg/L 이상, 약 4.0 mg/L 이상, 약 4.5 mg/L 이상, 또는 약 5.0 mg/L 이상인 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드.
193. 실시양태 191에 있어서, 역치 CRP 수준이 약 3.0 mg/L인 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드.
194. 실시양태 191에 있어서, 역치 CRP 수준이 환자에게서의 IBD 증상의 발현 전 또는 IBD의 진단 전의 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준인 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드.
195. 실시양태 191 내지 194 중 어느 하나에 있어서, 방법이
(c) 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고;
(d) CRP 수준이 CRP의 기준선 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 CRP의 기준선 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 환자에게 투여하는 것
을 추가로 포함하고; 여기서 CRP의 기준선 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량의 투여 전의 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준인 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드.
196. (a) 환자에서의 C-반응성 단백질 (CRP) 수준을 분석하고; (b) CRP 수준이 역치 CRP 수준보다 높다면, CRP 길항제의 초기 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, IBD를 앓고 있는 환자에서 염증성 장 질환 (IBD)을 치료 또는 관리하는 방법.
197. 실시양태 196에 있어서, (c) 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고; (d) CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높거나 또는 CRP의 기준선 수준 이상이라면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 CRP 길항제의 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮거나 또는 CRP의 기준선 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 CRP 길항제의 후속 용량을 환자에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
198. 실시양태 196 또는 실시양태 197에 있어서, 역치 CRP 수준이 약 0.5 mg/L 이상, 약 1.0 mg/L 이상, 약 1.5 mg/L 이상, 약 2.0 mg/L 이상, 약 2.5 mg/L 이상, 약 3.0 mg/L 이상, 약 3.5 mg/L 이상, 약 4.0 mg/L 이상, 약 4.5 mg/L 이상, 또는 약 5.0 mg/L 이상인 방법.
199. 실시양태 196 또는 실시양태 197에 있어서, 역치 CRP 수준이 약 0.5 mg/L 내지 약 3 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 3 mg/L, 약 1.5 mg/L 내지 약 3 mg/L, 약 2 mg/L 내지 약 3 mg/L, 또는 약 2.5 mg/L 내지 약 3 mg/L인 방법.
200. 실시양태 196 또는 실시양태 197에 있어서, 역치 CRP 수준이 약 3.0 mg/L인 방법.
201. 실시양태 196 또는 실시양태 197에 있어서, 역치 CRP 수준이 환자에게서의 IBD 증상의 발현 전 또는 IBD의 진단 전의 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준인 방법.
202. 실시양태 196 내지 실시양태 201 중 어느 하나에 있어서, 정상 CRP 수준이 약 0.1 mg/L 이하, 약 0.2 mg/L 이하, 약 0.3 mg/L 이하, 약 0.4 mg/L 이하, 약 0.5 mg/L 이하, 약 0.5 mg/L 이하, 약 0.6 mg/L 이하, 약 0.7 mg/L 이하, 약 0.8 mg/L 이하, 약 0.9 mg/L 이하, 또는 약 1.0 mg/L 이하인 방법.
203. 실시양태 196 내지 실시양태 201 중 어느 하나에 있어서, 정상 CRP 수준이 약 1.0 mg/L 이하인 방법.
204. 실시양태 196 내지 실시양태 203 중 어느 하나에 있어서, CRP의 기준선 수준이 CRP 길항제의 초기 용량의 투여 전의 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준인 방법.
205. 실시양태 196 내지 실시양태 204 중 어느 하나에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 크론병 (CD)을 앓고 있는 환자인 방법.
206. 실시양태 196 내지 실시양태 204 중 어느 하나에 있어서, IBD를 앓고 있는 환자가 UC를 앓고 있는 환자인 방법.
207. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 위십이지장 크론병을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 위십이지장 크론병을 치료 또는 관리하는 방법.
208. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 크론 (육아종) 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 크론 (육아종) 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
209. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 교원성 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 교원성 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
210. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 림프구성 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 림프구성 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
211. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 허혈성 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 허혈성 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
212. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 전환 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 전환 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
213. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 베체트병(Behcet's disease)을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 베체트병을 치료 또는 관리하는 방법.
214. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 미세형 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 미세형 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
215. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 직장구불결장암을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 직장구불결장암을 치료 또는 관리하는 방법.
216. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 공회장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 공회장염을 치료 또는 관리하는 방법.
217. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 좌측 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 좌측 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
218. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 전결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 전결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
219. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 회장결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 회장결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
220. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 회장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 회장염을 치료 또는 관리하는 방법.
221. 치료 유효 용량의 CRP 길항제를 불확정 결장염을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 불확정 결장염을 치료 또는 관리하는 방법.
222. 실시양태 190 내지 221 중 어느 하나에 있어서, CRP 길항제가 CRP 안티센스 올리고뉴클레오티드 (CRP AON)인 방법.
223. (a) 환자에서의 C-반응성 단백질 (CRP) 수준을 분석하고; (b) CRP 수준이 역치 CRP 수준보다 높다면, CRP 길항제의 초기 용량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, IBD를 앓고 있는 환자에서 염증성 장 질환 (IBD)을 치료 또는 관리하는 방법에 사용하기 위한 CRP 길항제.
224. 대상체에서의 CRP 수준을 대조 수준에 비해 감소시키는 유효량으로 올리고뉴클레오티드를 투여하는 것을 포함하는, 염증성 장 질환을 치료하는 방법.
225. 상승한 CRP 수준을 갖는 대상체에게 올리고뉴클레오티드를 투여함으로써, 대상체에서 관해기를 유도하는 것을 포함하는, 염증성 장 질환을 치료하는 방법.
226. 올리고뉴클레오티드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 3 mg/리터 초과의 순환 CRP 농도를 갖는 환자에서 염증성 장 질환을 치료하는 방법.
227. 올리고뉴클레오티드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 염증성 장 질환을 앓고 있는 대상체에서 CRP 수준을 감소시키는 방법.
228. IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준을 측정하는 것을 포함하고, 여기서 3 mg/L 초과의 CRP 수준은 환자가 항-SMAD7 또는 항-CRP 요법에 대하여 반응성을 보인다는 것을 나타내는 것인, 항-SMAD7 또는 항-CRP 요법에 대한 IBD를 앓고 있는 환자의 반응성을 예측하는 방법.
229. 실시양태 196 내지 실시양태 228 중 어느 하나에 있어서, 항-CRP 작용제 (CRP 길항제 또는 항-CRP 요법) 또는 올리고뉴클레오티드가 하기로부터 선택된 항-CRP 안티센스 올리고뉴클레오티드인 방법.
i. 하기에 개시된 CRP AON
1. WO 2005/005599 (예를 들어, 표 2 의 AON)
2. WO 2003/010284 A2 (예를 들어, 표 1 의 AON)
3. WO 2007/143317 A2 (예를 들어, 표 9 의 AON)
a. US 8,859,514 B2 (예를 들어, 표 13 의 AON)
4. U.S. 7,425,545 B2; U.S. 7,863,252 B2,
U.S. 6,964,950 B2, U.S. 7,491,815 B2,
U.S. 7,915,231 B2, U.S. 8,093,224 B2 및
U.S. 7,326,693 B2;
ii. ISIS 329993 (ISIS- CRP Rx (포스포로티오에이트)),
ISIS 353491, ISIS 353512
iii. 단락 [00114]의 CRP mRNA (Entrez GeneID No. 1401; SEQ ID NO: 8) 및 그의 대립유전자 변이체의 8개 이상의 뉴클레오티드 서열에 상보적인 CRP AON.
230. 실시양태 223 또는 실시양태 228에 있어서, 항-CRP 작용제 (CRP 길항제 또는 항-CRP 요법)가 중화 CRP 항체인 방법.
231. 상기 실시양태 중 어느 하나의 방법에 사용하기 위한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드.
도 1은 실험을 시작하도록 허용되는 환자의 실험 및 진행에서의 적격성에 대한, 평가되는 환자의 평가를 보여주는 흐름도이다 (실험 진행이 위에서 아래로 표시됨). 나타나 있는 바와 같이, 실험을 시작하기 전에 188명의 환자를 적격성에 대하여 평가하였다. 22명의 환자는 스크리닝 과정에서 탈락하였고, 166명의 환자가 0일째에 실험을 시작하도록 허용되었다. 나타나 있는 바와 같이, 42명의 환자가 위약 투여에 배정되었고, 41명의 환자가 10 mg/일의 몽게르센 투여에 배정되었으며, 40명의 환자가 40 mg/일의 몽게르센 투여에 배정되었으며, 43명의 환자가 160 mg/일의 몽게르센 투여에 배정되었다. 위약군에서는 41명의 환자가 치료를 완료하였고, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 38명의 환자가 치료를 완료하였으며, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 39명의 환자가 치료를 완료하였으며, 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 42명의 환자가 치료를 완료하였다. 배정된 치료를 정확하게 완료한 환자 중에서, 위약군에서는 30명의 환자가, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 32명의 환자가, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 37명의 환자가, 또한 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 39명의 환자가 추적연구 절차를 완료하였다.
도 2는 2주 임상 실험 약물 치료 기간 후에 환자의 임상학적 관해기의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 나타나 있는 바와 같이, 위약군에서는 9.5%의 환자가, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 12.2%의 환자가, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 55%의 환자가, 또한 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 65.1%의 환자가 치료 종료 후에 관해기에 진입하였다. 그래프 아래에 제시된 수치는 평가 당시에 각각의 군에서 150 초과의 CDAI 점수를 갖는 실제 환자 수 및 각각의 군에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자 수를 보여준다. 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서의 관해율은 위약군 및 10 mg/일의 몽게르센 군에서의 관해율보다 유의하게 높았다 (10 mg/일 또는 위약군 중 어느 쪽이든 그에 대한 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군 모두의 P<0.0001).
도 3A는 각각의 군에서 실험 15일째에 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율을 보여주는 막대 그래프이다. 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군 및 위약군에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율은 각각 67.4%, 57.5%, 14.6% 및 21.4%였다. 15일째에, 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 퍼센트는 10 mg/일의 몽게르센 군 (두 군 모두 P<0.0001) 및 위약군 (각각 P<0.0001 및 P=0.0008)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다.
도 3B는 각각의 군에서 실험 28일째에 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율을 보여주는 막대 그래프이다. 28일째에, 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군 및 위약군에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율은 각각 72.1%, 70%, 29.3% 및 14.3%였다. 28일째에, 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 퍼센트는 10 mg/일의 몽게르센 군 (각각 P<0.0001 및 P=0.0002) 및 위약군 (두 군 모두 P<0.0001)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다.
도 3C는 각각의 군에서 실험 84일째에 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율을 보여주는 막대 그래프이다. 84일째에, 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군 및 위약군에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율은 각각 67.4%, 62.5%, 29.3% 및 21.4%였다. 84일째에, 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 퍼센트는 10 mg/일의 몽게르센 군 (각각 P=0.0005 및 P=0.003) 및 위약군 (두 군 모두 P<0.0001)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다.
도 4A는 각각의 치료군에서 기준선과 비교하여 임상 실험 15일째에 100점의 CDAI 점수 감소를 나타내는 환자의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 그래프는 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 65.1%의 환자가, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 45%의 환자가, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 22%의 환자가, 또한 위약군에서는 26.2%의 환자가 기준선과 비교하여 15일째에 100점의 CDAI 감소를 겪었다는 것을 보여준다. 100점의 임상학적 반응을 겪는 환자의 백분율은 10 mg/일의 몽게르센 군과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군 (각각 P<0.0001 및 P=0.027)에서 유의하게 높았다. 100점의 임상학적 반응을 겪는 환자의 백분율은 또한 위약군과 비교하여 160 mg/일의 몽게르센 군 (P=0.0003)에서 유의하게 높았다.
도 4B는 각각의 치료군에서 기준선과 비교하여 임상 실험 28일째에 100점의 CDAI 점수 감소를 나타내는 환자의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 그래프는 상기 기준에 따른 임상학적 반응이 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 72.1%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 57.5%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 36.6%의 환자에서, 또한 위약군에서는 16.7%의 환자에서 관찰되었다는 것을 보여준다. 28일째에 100점의 CDAI 감소를 겪는 환자의 백분율은 위약군과 비교하여 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다 (도 4B; 각각 위약군과 비교하여 각각의 군에서 160 mg/일 군의 P<0.0001, 40 mg/일 군의 P=0.0001, 및 10 mg/일 군의 P=0.039).
도 4C는 100점의 CDAI 점수 감소에 대한 12주 (84일) 데이터와 함께 도 4A 및 4B의 데이터를 보여주는 막대 그래프이다. 각 시점에서 첫번째 막대는 위약 환자군을 나타내고; 각 시점에서 두번째 막대는 10 mg/일 환자군을 나타내며; 각 시점에서 세번째 막대는 40 mg/일 환자군을 나타내며; 각 시점에서 네번째 막대는 160 mg/일 환자군을 나타낸다.
도 5A는 각각의 치료군에서 기준선과 비교하여 임상 실험 15일째에 70점의 CDAI 점수 감소를 나타내는 환자의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 그래프는 70점의 CDAI 감소가 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 81.4%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 72.5%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 34.1%의 환자에서, 또한 위약군에서는 31%의 환자에서 보고되었다는 것을 보여준다. 15일째에 70점의 CDAI 점수 감소를 겪는 환자의 백분율은 10 mg/일의 몽게르센 군 (각각 P<0.0001 및 P=0.0005) 및 위약군 (각각 P<0.0001 및 P=0.0002)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다.
도 5B는 각각의 치료군에서 기준선과 비교하여 임상 실험 28일째에 70점의 CDAI 점수 감소를 나타내는 환자의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 그래프는 70점의 CDAI 감소가 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 76.7%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 80%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 48.8%의 환자에서, 또한 위약군에서는 26.2%의 환자에서 보고되었다는 것을 보여준다. 28일째에 70점의 CDAI 점수 감소를 겪는 환자의 백분율은 위약군 (각각 P<0.0001, P<0.0001 및 P=0.033)과 비교하여 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다.
도 6A는 각각의 군에서 기준선에서 상승한 CRP 수준을 나타내는 환자의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 상승한 CRP 수준은 위약군에서는 59.5%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 65.9%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 55%의 환자에서, 또한 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 65.1%의 환자에서 관찰되었다. 도 6B는 각각의 군에서 임상 실험 15일째에 정상 CRP 수준을 나타내는 환자의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 정상 CRP 수준은 위약군에서는 4%의 환자에서, 또한 10 mg/일, 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 각각 22%, 18.18% 및 17.9%의 환자에서 관찰되었다.
도 7은 각각의 치료군에서 관해기에 진입하였고 기준선에서 상승한 기준선 CRP 수준을 나타내는 환자의 퍼센트를 보여주는 막대 그래프이다. 기준선에서 상승한 CRP 수준을 나타내는 환자 중에서, 관해기에 진입한 환자의 백분율은 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군 및 위약군에서 각각 67.9%, 45.5%, 11.1% 및 12%였다. 관해기에 진입하였고 기준선에서 상승한 CRP 수준을 나타내는 환자의 백분율은 위약군과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군 (각각 P<0.0001 및 P=0.01)에서 유의하게 높았다. 160 mg/일의 몽게르센 군과 40 mg/일의 몽게르센 군 사이에 또는 10 mg/일의 몽게르센 군과 위약군 사이에는 유의한 차이가 관찰되지 않았다.
도 8은 실험 15일 및 4주째에 3 mg/l 미만의 CRP 수준 또는 3 mg/l 이상의 CRP 수준을 갖는 환자에 대하여 임상학적 관해기에 있는 환자의 백분율을 보여주는 막대 그래프이다.
본 발명은 IBD를 앓고 있는 환자에서 IBD의 치료 및 관리에 일반적으로 유용한 방법을 제공한다. IBD를 앓고 있는 환자는 CD의 스테로이드-의존성 및 스테로이드-저항성 형태를 포함하여, UC 및 CD를 앓고 있는 환자를 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다. 방법은 항-SMAD7 요법, 예컨대 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 요법으로 치료를 받고 있는 환자에서의 치료 관리 측면에서 특히 유용하다. 임의의 이론에 구애됨이 없이, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 요법은 SMAD7 mRNA 전사체와 결합하여 RN아제 H에 의한 SMAD7 mRNA 전사체의 분해를 유도할 수 있거나, SMAD7 mRNA 전사체의 스플라이싱을 방지할 수 있거나, 또는 SMAD7 mRNA 전사체의 단백질 번역을 방지할 수 있는 올리고뉴클레오티드를 포함하는 임의의 요법일 수 있다.
본 발명의 방법은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료에 대한 IBD를 앓고 있는 환자의 반응성을 예측 및 결정하는데 유용하다. 따라서, 본 발명의 방법은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료에 대하여 반응할 것 같은 환자 뿐만 아니라, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료에 대하여 반응할 것 같지 않은 환자를 식별하는데 사용될 수 있다. 본원에 기재된 방법은 또한 환자가 IBD 치료에 대하여 반응성을 보이는지 또는 보이지 않는지를 결정하는데 유용하다. 일반적으로, 본 발명의 방법은 또한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드로 치료를 받고 있는 IBD를 앓고 있는 환자에서의 반응성 수준 또는 반응성의 가능성 수준을 결정하는데 사용될 수 있다. 반응성 수준 또는 반응성의 가능성 수준의 결정에 기반하여, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여가 개시, 반복, 유지, 증가, 감소 또는 종료될 수 있다. 반응성은 바이오마커 및/또는 다른 분석물질 (예를 들어, IL8, CRP, TNFα)의 수준 또는 수준 변화의 분석, CDAI 점수 또는 CDAI 점수의 변화, 또는 IBD 증상 (예를 들어, 체중 감소, 조직 염증, 혈변)의 평가를 비제한적으로 포함하는 다수의 인자를 사용하여 결정할 수 있다.
마찬가지로, 방법은 IBD를 앓고 있는 환자에서의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료의 효능 및 안전성을 평가하는데 유용하다. 예를 들어, 본 발명의 방법은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료가 IBD의 부분 또는 완전 관해 또는 완화를 초래하는데 효과적인지 또는 효과적이지 않은지를 나타낼 수 있는 바이오마커 발현 수준의 변화 또는 질환 상태의 다른 지표 또는 징후를 결정하는 것을 포함할 수 있다. 바이오마커의 발현 수준 또는 발현 수준 변화, 질환 증상, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 조직, 혈액 또는 전신성 수준, 또는 일반 건강 지표의 결정은 또한 질환 상태의 악화 또는 안전하지 않은 약물 수준을 나타낼 수 있다. 치료(들) 전의, 치료(들) 동안의, 치료(들) 사이의, 또한/또는 치료(들) 후의 다수의 지표 평가는 질환 단계, 진행 및 중증도를 모니터링하는데 사용될 수 있다.
본 발명은 부분적으로 IBD 질환 상태와 CRP 수준 사이의 관계 발견에 기초한다. 구체적으로, 본 발명자들은 CRP 수준이 환자가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 사용하는 IBD의 치료에 대하여 반응성을 보이는지, 반응성을 보일 것 같은지, 반응성을 보이지 않는지, 또는 반응성을 보일 것 같지 않는지를 결정하기 위한 유용한 바이오마커라는 것을 발견하였다.
또한, CRP 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 사용하는 질환의 치료를, 구체적으로 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 용량과 관련하여 관리하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, CRP 수준은 IBD를 앓고 있는 환자에게, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 선행 투여 용량, 예를 들어 초기 용량과 관련하여, 예를 들어 후속 용량에 있어서 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 특정 용량, 예를 들어 보다 많은 용량 또는 보다 적은 용량이 제공되어야 하는지를 결정하는데 사용될 수 있다. 따라서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여는 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP의 절대 수준 또는 CRP의 상대 수준과 관련하여, 예를 들어 용량 또는 빈도의 측면에서 조정될 수 있다. 예를 들어, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여는 IBD를 앓고 있는 환자로부터의 샘플에서 측정된 CRP의 절대 수준을 정상 CRP 수준과 비교함으로써 CRP의 절대 수준에 기반하여 조정될 수 있고, 여기서 정상 CRP 수준은 예를 들어, IBD를 앓고 있는 환자와 매칭되는 건강한 대조군의 CRP의 기준점 값 또는 중앙값 수준이다. 본 발명의 일부 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여는 CRP의 상대 수준에 기반하여, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 전후의, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 직후와 나중의, 또는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 중과 투여 후의 CRP 수준 비교에 기반하여 조정될 수 있다. 일부 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 환자 샘플에서의 CRP 수준의 비교를 도출하는데 사용되는 CRP 수준의 초기 검출과 CRP 수준의 후속 검출 사이에 여러번 투여될 수 있다.
본 발명의 일부 실시양태에서, 치료를 받고 있는 IBD 환자는 정상 CRP 수준보다 높은 CRP 수준을 갖는 환자이다. 일부 실시양태에서, 환자는 치료 전에 높은 CRP 수준을 갖는 것으로 확인된다. 일부 실시양태에서, IBD 환자에서의 CRP 수준은 치료 전에, 치료 후에, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량의 투여 전에, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량의 투여 후에, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량의 투여 전에, 또한/또는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량의 투여 후에 결정된다.
본 발명자들은 또한 SMAD7에 대하여 지시되는 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 하나 이상의 추가 치료제의 조합을 사용하여 환자에서 IBD (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염)를 치료하는 방법을 개발하였다. 조합 요법의 사용은 개선된 환자 결과를 유도하거나, 부작용을 감소시키거나, 보다 적은 투여량을 가능하게 하거나, 또는 투여되는 치료제 중 어느 하나 또는 둘 모두에 대하여 투여 빈도 감소를 가능하게 할 수 있는, 상승적인 이점을 초래할 수 있다. 이러한 접근법은 또한 독립 요법에 대한 저항성 (예를 들어, 스테로이드 저항성)을 감소시킬 수 있다.
염증성 장 질환
본 발명은 IBD를 치료하는 방법을 제공한다. 본원에 사용된 "염증성 장 질환" (또는 "IBD")은 크론병 (CD), 위십이지장 크론병, 크론 (육아종) 결장염, 궤양성 대장염 (UC), 교원성 결장염, 림프구성 결장염, 허혈성 결장염, 전환 결장염, 베체트병, 미세형 결장염, 궤양성 직장염, 직장구불결장암, 공회장염, 좌측 결장염, 전결장염, 회장결장염, 회장염 및 불확정 결장염을 포함하는 수많은 만성 염증성 질환을 말한다. CD 및 UC가 IBD의 가장 흔한 2가지 형태이다. IBD는 소화기 계통의 자가면역 질환이다. CD는 말단 회장을 포함하는 위장관의 임의의 부위로 국한될 수 있고, 위장관의 모든 세포 유형에 영향을 미칠 수 있다. UC는 결장 및 직장으로 국한되고, 점막 세포에만 영향을 미친다.
환경 요인과 유전적 요인이 둘다 IBD에서 소정의 역할을 하는 것으로 생각되지만, 이러한 요인의 정체가 잘 한정되지는 않았다. 환경 요소는 섭취 음식 및 약물에 대한 노출의 영향을 받는 장내 세균총의 변화를 포함할 수 있다.
IBD는 복통, 구토, 설사, 직장 출혈, 심한 경련, 근육 경련, 체중 감소, 영양실조, 발열, 빈혈, 피부 병변, 관절통, 눈 염증, 간 장애, 관절염, 괴저성 농피증, 원발성 경화성 담관염 및 비-갑상선 질병 증후군을 포함하는 증상과 연관있다. UC에 걸린 소아는 성장 결함을 겪을 수 있다.
CD의 형태는 활동기 CD를 포함하는, CD의 스테로이드-의존성 및 스테로이드-저항성 형태를 포함한다. CD의 스테로이드-의존성 형태를 앓고 있는 IBD 환자는 스테로이드 요법을 이용한 치료에 반응성을 보이지만, 스테로이드 요법을 종료 또는 단축시키면 CD와 연관있는 증상의 발생이 증가할 수 있다. CD의 스테로이드-저항성 형태를 앓고 있는 IBD 환자는 스테로이드 요법을 이용한 치료에 반응성을 보이지 않는다. 스테로이드 치료제, 예를 들어 IBD 환자에게 흔히 처방 및/또는 투여되는 스테로이드 치료제는 코르티코스테로이드, 예를 들어 프레드니손, 덱사메타손, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니손 및 부데소니드를 포함한다. 활동기 CD를 앓고 있는 인간 환자는 CD의 증상, 예를 들어 비제한적으로 혈변, 체중 감소 및/또는 복부 경련을 활동적으로 앓고 있는 환자이다.
치료, 관리 및 평가
본원에 기재된 "대상체" 또는 "환자"는 포유동물, 영장류 및 인간을 비제한적으로 포함하는, IBD의 위험이 있거나, IBD를 앓고 있거나, 또는 IBD 진단을 받은 임의의 동물을 말한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 비-인간 포유동물, 예컨대 고양이, 개 또는 말일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 대상체는 인간 대상체이다. 대상체는 IBD 발병의 고 위험 진단을 받은 개체, IBD 진단을 받았던 사람, 이미 IBD를 앓은 사람, 또는 IBD의 증상 또는 징후, 예를 들어 높은 CRP 발현 수준 또는 높은 CDAI 지표 점수의 평가를 받은 개체일 수 있다.
본원에 사용된 "IBD 환자"는 IBD의 임의의 증상 또는 징후를 앓고 있는 환자, IBD의 임의의 증상 또는 징후를 앓을 수 있는 환자, 또는 IBD를 치료하거나 또는 그의 치료를 평가하는 본 발명의 방법으로부터 이점을 얻을 수 있는 임의의 환자를 말한다. 관련되는 환자는 IBD의 발병 위험을 진단받은 환자, 과거에 IBD를 앓았던 환자, 또는 이미 IBD에 대한 치료를 받았던 환자를 포함할 수 있다. 상승한 수준의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 발현과 연관있는 IBD를 앓고 있는 환자가 특히 관련있다. 일부 실시양태에서, IBD 환자는 크론병 (CD) 환자이다. 일부 실시양태에서, IBD 환자는 궤양성 대장염 (UC) 환자이다.
용어 "치료하다", "치료", "치료하는" 등은 일반적으로 목적하는 약리학적 및/또는 생리학적 효과를 얻는 것을 의미하기 위해 본원에 사용된다. 이 효과는 질환 또는 그의 증상을 완전히 또는 부분적으로 방지하는 것의 측면에서 예방적일 수 있고/거나 질환 및/또는 질환에 기인한 역효과를 부분적으로 또는 완전히 치유하는 것의 측면에서 치료적일 수 있다. 본원에 사용된 용어 "치료"는 포유동물, 특히 인간에서의 질환의 임의의 치료를 포괄하고, (a) 질환에 취약할 수는 있으나 아직 질환에 걸린 것으로 진단받지 않은 대상체에서 질환의 발생을 방지하는 것; (b) 질환을 억제하는 것, 즉 질환의 중증도 또는 범위 상승을 방지하는 것; (c) 질환을 경감시키는 것, 즉 질환의 부분적 또는 완전한 완화를 초래하는 것; 또는 (d) 질환의 재발을 방지하는 것, 즉 질환 증상의 성공적인 선행 치료 또는 질환의 치료 후에 질환이 활동기 상태로 되돌아가는 것을 방지하는 것을 포함한다. 용어 "치료하는"은 또한 질환과 연관있는 적어도 하나의 증상 또는 치료받고 있는 병태를 경감시키는 것을 의미할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 치료 방법은 (a) 바이오마커로서 CRP를 사용하는 항-SMAD7 단일요법; (b) 항-SMAD7 조합 요법; (c) 바이오마커로서 CRP를 사용하는 항-SMAD7 조합 요법; (d) 항-CRP 단일요법; (e) 바이오마커로서 CRP를 사용하는 항-CRP 단일요법; (f) 항-CRP 조합 요법; 및 (g) 바이오마커로서 CRP를 사용하는 항-CRP 조합 요법을 말한다.
용어 "관리하다", "관리", "관리하는" 등은 일반적으로 질환 증상의 중증도 또는 징후, 또는 질환의 치료 수단을 제어하는 것을 의미하기 위해 본원에 사용된다. 일반적으로, 관리는 목적하는 약리학적 및/또는 생리학적 효과를 얻기 위해 사용된다. 이 효과는 질환 및/또는 질환에 기인한 역효과를 부분적으로 또는 완전히 치유하는 것 또는 질환의 특정 증상 또는 징후가 환자에게서 발생 또는 재발생하지 않거나 또는 환자에게서 바람직하지 않은 또는 허용되지 않는 수준으로 넘어가지 않도록 보장하는 것의 측면에서 치료적일 수 있다. 본원에 사용된 용어 "관리"는 포유동물, 특히 인간에서의 질환의 임의의 관리를 포괄하고, (a) 질환을 억제하는 것, 예를 들어 질환의 중증도 또는 범위 상승을 방지하는 것; (b) 질환을 경감시키는 것, 예를 들어 질환의 부분적 또는 완전한 완화를 초래하는 것; 또는 (c) 질환의 재발을 방지하는 것, 예를 들어 질환 증상의 성공적인 선행 치료 또는 질환의 치료 후에 질환이 활동기 상태로 되돌아가는 것을 방지하는 것을 포함한다. 본원에 사용된 "관리"는 또한 질환에 대한 특정 치료, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여와 관련하여 사용될 수 있다.
본 발명의 일부 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자는 항-SMAD7 요법, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 투여받을 것이다. 본원에 사용된 "초기 용량"은 순차적 투여로 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 항-SMAD7 요법의 용량을 말한다. 순차적 투여는 1번 이상의 투여를 포함할 수 있다. 예를 들어, 순차적 투여는 항-SMAD7 요법의 단회 투여 또는 항-SMAD7 요법의 다회 투여를 포함할 수 있다. 초기 용량은 환자에게 투여되는 임의의 후속 용량 전에 환자에게 투여되는 항-SMAD7 요법의 용량일 수 있다. 예를 들어, 초기 용량은 비제한적으로 환자의 전체 치료 이력 동안에 환자에게 투여되는 항-SMAD7 요법의 최초 용량일 수 있다. 초기 용량은 또한, 예를 들어 선행 치료 차수 동안의 항-SMAD7 요법의 선행 투여 후에 환자에게 투여되는 치료 요법에서의 최초 용량일 수 있다. 또한, 초기 용량은 어느 치료 차수 내에서의 순차적 투여에서의 최초 용량일 수 있으므로, 초기 용량이 동일한 치료 차수에서의 선행 용량 후에 투여될 수 있다. 별법으로, "초기 용량"은 환자에서의 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커 또는 바이오마커들의 수준을 분석한 후에 환자에게 투여되는 최초 용량일 수 있거나, 또는 환자에서의 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커 또는 바이오마커들의 수준을 결정하기 전 가장 마지막으로 투여된 용량일 수 있다.
본 발명의 일부 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자는 항-SMAD7 요법, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량을 투여받을 것이다. 본원에 사용된 "후속 용량"은 선행 용량, 예를 들어 초기 용량의 투여 후에, IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 항-SMAD7 요법의 용량을 말한다. 따라서, 후속 용량은 2번 이상의 투여를 포함하는 순차적 투여로 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여될 수 있다. 또한, 일부 경우에는, 후속 용량의 양이 초기 용량 또는 선행 용량과 관련하여 보정될 수 있으므로, 후속 용량이 선행 용량보다 많거나, 그와 동일하거나, 또는 그보다 적다. 후속 용량의 양의 보정은 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커 또는 바이오마커들의 수준 또는 수준 변화, 예를 들어: 선행 용량, 예를 들어 초기 용량 전후에 분석된 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준; 또는 선행 용량, 예를 들어 초기 용량 전후에 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준의 변화에 기반할 수 있다. 후속 용량은 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 항-SMAD7 요법의 최초 용량, 예를 들어 초기 용량 후에 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 용량일 수 있다. 후속 용량은 또한 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여되는 항-SMAD7 요법의 선행 용량 후에 투여되는 용량, 예를 들어 동일한 치료 차수에서의 선행 용량 또는 상이한 치료 차수, 예를 들어 선행 치료 차수 후에 투여되는 용량일 수 있다. 후속 용량은 임의의 선행 용량, 예를 들어 후속 용량 직전의 선행 용량 또는 선행 용량 다음에 이어지는 후속 용량의 투여 전에 투여되는 하나 이상의 용량에 대한 후속 용량일 수 있다.
본원에 사용된 "크론병 활동성 지표" 또는 "CDAI"는 문헌 [Best et al., GASTROENTEROLOGY, 70:439-44 (1976)]에 기재된 바와 같이, CD를 앓고 있는 환자의 진행 상태를 평가하기 위해 사용되는 측정값 또는 지표를 말한다. 150 이하의 CDAI 점수는 일반적으로 비활동적 질환과 연관있고 보다 높은 점수보다 우수한 예후를 나타낸다. 150 초과의 값은 일반적으로 활동적 질환과 연관있으며 450 초과의 값은 극히 중증의 질환과 연관있다. CDAI 점수는 환자가 요법에 대하여 얼마나 잘 반응하는지를 결정하기 위해 사용될 수 있고 관해기에 있는 환자를 식별하기 위해 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 기준 임상학적 반응은 대상체가 CDAI 점수의 적어도 100점의 감소를 보이는 것을 의미한다. 임상 실험에서, 150 이하의 CDAI 점수는 일반적으로 관해기와 연관있다.
본원에 사용된 "궤양성 대장염 질환 활동성 지표" 또는 "UCDAI"는 문헌 [Sutherland et al., Gastroenterology, 92:1894-98 (1987)]에 기재된 바와 같이, UC를 앓고 있는 환자의 진행 상태를 평가하기 위해 사용되는 측정값 또는 지표를 말한다. UCDAI는 배변 횟수, 직장 출혈, 결장 벽(colon lining)의 외형, 및 내과의사의 질환 활동성 평가를 포함하는 UC 증상에 관한 일련의 한정인자이다. 이들 한정인자는 각각 0에서 3까지의 수치로 제공되며, 3이 최고 질환 활동성을 나타낸다. 임상 실험에서, 관해기는 종종 1 이하의 UCDAI 점수로서 정의되고, 개선은 실험을 시작할 때의 점수로부터 3점 이상의 감소가 있을 때이다. UCDAI는 임상 실험에서 환자가 요법에 대하여 얼마나 잘 반응하는지를 결정하기 위해 사용될 수 있고 관해기에 있는 환자를 식별하기 위해 사용될 수 있다. UC 환자의 질환 중증도를 측정하기 위해 흔히 사용되는 다른 지표는 트루러브-위츠 지표(Truelove and Witts Index), 세인트 마크 지표(St. Mark's Index), 단순 임상 대장염 활동성 지표 (Simple Clinical Colitis Activity Index; SCCAI), 리치타이거 지표(Lichtiger Index), 궤양성 대장염 증상 점수 (Ulcerative Colitis Symptom Score; UCSS), 및 마요 임상 점수를 포함한다.
본원에 사용된 "관해기(remission)" 또는 "임상학적 관해기(clinical remission)"는 IBD의 임상학적 징후 또는 징후들 또는 증상의 부분적 또는 완전한 경감을 말한다. 예를 들어, 임상학적 관해기는 IBD와 연관있는 증상, 예를 들어 혈변, 체중 감소 또는 조직 염증의 중증도의 하락, 또는 환자의 IBD 증상의 완전한 소멸을 포함할 수 있다. 본 발명의 실시양태에서, 임상학적 관해기는 CDAI 점수의 변화 또는 측정값에 의해 나타날 수 있다. 예를 들어, 약 150 미만, 약 155 미만, 약 160 미만, 약 165 미만, 약 170 미만, 또는 약 175 미만의 CDAI 점수가 임상학적 관해기를 나타낼 수 있다. 임상학적 관해기는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여한 후에 관찰될 수 있다. 임상학적 관해기는 질환 활동성 지표 점수, 예컨대 CDAI 점수에 기여하는 요인을 측정함으로써, 또는 객관적 요인, 예를 들어 비제한적으로 환자 샘플에서의 분석물질 수준을 측정함으로써 관찰될 수 있다. 또한, 본 발명의 일부 실시양태에서, 임상학적 관해기는 투여 단계 후에 관찰되고, 초기 관찰 후에 일정 기간 동안 유지된다. 예를 들어, 일부 실시양태에서 임상학적 관해기는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여의 약 1주, 약 2주 또는 약 3주 후에 관찰되고, 임상학적 관해기의 초기 관찰 후에 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 6주 또는 적어도 8주의 기간 동안 유지된다. 특정 실시양태에서, 관해기는 적어도 2주 동안 150 미만의 CDAI 점수를 유지하는 것으로서 정의된다.
본원에 사용된, 치료에 대하여 "반응하다" 또는 "반응하는"은 CD를 앓고 있는 대상체가 (a) CDAI 점수의 감소, 예를 들어 CDAI 점수의 20점, 30점, 40점, 50점, 60점, 70점, 80점, 90점, 100점 또는 그 초과의 감소; (b) 150 미만의 CDAI 점수; 및/또는 (c) 관해기의 유도를 보이는 것을 의미한다.
UC를 앓고 있는 대상체와 관련하여, 치료에 대하여 "반응하다" 또는 "반응하는"은 대상체가 (a) UCDAI 점수의 감소, 예를 들어 UCDAI 점수의 1점, 2점 또는 그 초과의 감소; (b) 1 이하의 UCDAI 점수; 및/또는 (c) 관해기의 유도를 보이는 것을 의미한다.
일부 실시양태에서, 기준선 (예를 들어, 기준선 점수, 수준 또는 값)이 분석된다. 일부 실시양태에서, 기준선은 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 이용하는 치료를 위해 IBD를 앓고 있는 환자를 선별하는 것을 포함하는 방법에서 분석된다. 일부 실시양태에서, 기준선은 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 이용하는 치료 기간 동안에 IBD를 앓고 있는 환자를 모니터링하는 방법을 포함하는 방법에서 분석된다. 일부 실시양태에서, 환자에서의 CRP의 기준선 수준은 역치 수준이거나 또는 그보다 높고 (예를 들어, 3 mg/L 초과), 이는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법의 투여를 위한 환자의 선별을 유도할 수 있다. 일부 실시양태에서, 환자에서의 CRP의 기준선 수준은 역치 수준보다 낮고 (예를 들어, 3.0 mg/L 미만), 이는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 위한 환자의 선별을 유도할 수 있다. 일부 실시양태에서, 기준선은 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법의 초기 용량을 IBD를 앓고 있는 환자에게 투여하기 전에 분석된다. 예를 들어, 기준선은 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법의 초기 용량을 환자에게 투여하기 적어도 1일, 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 4주, 적어도 6주, 적어도 6주, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 6개월, 적어도 9개월, 적어도 1년, 적어도 3년, 또는 적어도 5년 전에 분석될 수 있다. 일부 실시양태에서, 기준선은 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법의 초기 용량을 환자에게 투여하는 동시에 또는 투여하기 직전에 또는 투여한 후에 분석된다. 예를 들어, 기준선은 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법의 초기 용량을 환자에게 투여하기 6시간 미만, 4시간 미만, 2시간 미만, 1시간 미만, 30분 미만, 15분 미만, 10분 미만, 또는 5분 미만의 전후에 분석될 수 있다. 일부 실시양태에서, 기준선은 IBD를 앓고 있는 환자의 만성 상의 IBD (급성 악화) 동안에, 예를 들어 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법의 초기 용량을 환자에게 투여하기 전에 분석된다. 일부 실시양태에서, 기준선은 환자가 관해기에 있을 때 (예를 들어, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법 이외의 IBD 치료일 수 있는, 선행 IBD 치료를 받고 있는 동안에) 분석된다. 일부 실시양태에서, 기준선은 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법의 초기 용량을 투여하기 전의 여러 시점으로부터의 평균 점수이다.
일부 실시양태에서, 대상체가 내시경 결과 (예를 들어, 점막 치유), 임상학적 파라미터 (예를 들어, CDAI), 또는 조직학적 점수에서 개선을 보인다면, 대상체 (예를 들어, IBD, 예컨대 CD 또는 UC를 앓고 있는 환자)는 치료에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 대상체 (예를 들어, IBD, 예컨대 CD 또는 UC를 앓고 있는 환자)가 점막 치유를 보인다면, 대상체는 치료에 반응하는 것이다. 일부 실시양태에서, 점막 치유는 크론병의 단순 내시경 점수 (SES-CD)를 사용하여 분석된다. 일부 실시양태에서, SES-CD의 분석은 회장, 우결장, 횡행 결장, 좌결장, 직장, 또는 나열된 결장 영역 모두에서의 또는 조합된 영역에서의 궤양의 존재 및 크기, 궤양이 형성된 표면의 크기, 병에 걸린 표면의 크기, 또는 협착의 존재 및 유형을 분석하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 점막 치유는 대상체에서의 궤양의 존재 또는 부재를 분석함으로써 분석된다. 일부 실시양태에서, 점막 치유를 보이는 대상체는 0의 SES-CD 또는 ≤2의 SES-CD를 갖는다. 일부 실시양태에서, 궤양은 점막 치유를 보이는 대상체에 존재하지 않는다.
일부 실시양태에서, SES-CD의 분석은 절대 SES-CD를 분석하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, SES-CD의 분석은 SES-CD의 기준선으로부터의 변화 (예를 들어, SES-CD의 증가 또는 감소)를 분석하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, SES-CD는 표 1에 따른 변수를 사용하여 분석된다.
<표 1>
Figure pct00001
일부 실시양태에서, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여하기 전에 ≥7의 SES-CD를 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여하기 전에 ≥220 내지 ≤450의 CDAI 점수 및 ≥7의 SES-CD를 갖는다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 SES-CD가 ≤5, ≤4, ≤3, ≤2, ≤1, 또는 0이라면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 SES-CD가 ≤2라면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 SES-CD가 0이라면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 SES-CD가 대상체의 기준선 SES-CD의 <80%, <75%, <70%, <65%, <60%, <55%, <50%, <45%, <40%, <35%, <30%, <25%, 또는 <20%이라면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 SES-CD가 대상체의 기준선 SES-CD의 <50%이라면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 SES-CD가 기준선으로부터 ≥50% 감소한다면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 SES-CD가 기준선과 비교하여 4점 감소한다면, 대상체는 항-SMAD7 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 장 점막 궤양형성이 대상체에 존재하지 않는다면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 대상체가 조직학적 점수에서 개선을 보인다면, 대상체 (예를 들어, IBD, 예컨대 CD 또는 UC를 앓고 있는 환자)는 치료에 반응하는 것이다. 조직학적 점수는 대상체의 장 점막으로부터의 절대 조직학적 점수로서 분석될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조직학적 점수는 대상체의 장 점막으로부터의 조직학적 점수의 기준선으로부터의 변화로서 분석된다.
일부 실시양태에서, CDAI의 분석은 CDAI 요소, 예컨대 복통, 배변 횟수 또는 종합 점수 (예컨대, PRO-2 또는 PRO-3)를 분석하는 것을 포함한다. 환자 보고 결과 (PRO) 분석은 환자가 그들 자신의 증상을 정량화하는 것을 포함하고, 이는 IBD 중증도의 평가에 유용할 수 있다. CD의 2항목 환자 보고 결과 (PRO-2)는 2가지의 CDAI 변수, 예를 들어 묽은 또는 무른 배변 횟수 및 복통을 고려한다. PRO-2 점수를 결정하는 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, PRO-2 총점은 환자 질문지 또는 일지에 제공된 정보에 기반하여 계산될 수 있다. 묽은 또는 무른 배변 횟수 및 복통의 1일 점수의 7일치를 평균내고, 예를 들어 CDAI 결정에도 또한 적용되는 곱셈 계수를 사용하여 가중치를 부과할 수 있다. 일부 실시양태에서, 8, 14 및 34점의 PRO-2 값은 150, 220 및 450점의 CDAI 점수에 상응할 수 있고, PRO-2 점수의 기준선으로부터의 2, 5 및 8점의 변화는 50, 70 및 100점의 CDAI 점수 변화에 상응할 수 있다.
일부 실시양태에서, 대상체가 2항목 환자 보고 결과 (PRO-2) 시험에서 개선을 보인다면, 대상체 (예를 들어, IBD, 예컨대 CD 또는 UC를 앓고 있는 환자)는 치료에 반응하는 것이다. 일부 실시양태에서, PRO-2 시험에서의 개선은 절대 PRO-2 점수의 개선을 포함한다. 일부 실시양태에서, PRO-2 시험에서의 개선은 기준선과 비교하여 PRO-2 점수의 개선 (예를 들어, PRO-2 점수의 증가 또는 감소)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 PRO-2 점수가 기준선과 비교하여 ≥2점, ≥3점, ≥4점, ≥5점, ≥6점, ≥7점, ≥8점, ≥9점, ≥10점, ≥12점, 또는 ≥14점으로 낮다면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 PRO-2 점수가 <14, <12, <10, <8, <6, <4, 또는 <2이라면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 평균 1일 묽은 또는 무른 배변 횟수 점수가 기준선과 비교하여 ≥20%, ≥30%, ≥40%, ≥50%, ≥60%, ≥70%, ≥80%, 또는 ≥90% 감소한다면 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법을 대상체에게 투여한 후에 대상체의 평균 1일 복통 점수가 기준선과 비교하여 ≥20%, ≥30%, ≥40%, ≥50%, ≥60%, ≥70%, ≥80%, 또는 ≥90% 감소한다면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 대상체가 SES-CD 점수의 기준선으로부터의 ≥50% 감소, CDAI 점수의 기준선으로부터의 ≥100점 감소; 및/또는 PRO-2 점수의 기준선으로부터의 ≥8점 감소를 보인다면, 대상체는 항-SMAD7 요법 또는 항-CRP 요법에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, 대상체가 크론병 내시경 중증도 지표 (CDEIS)에서 개선을 보인다면, 대상체 (예를 들어, IBD, 예컨대 CD 또는 UC를 앓고 있는 환자)는 치료에 반응하는 것이다.
일부 실시양태에서, "임상학적 관해기"는 PRO-2 점수 또는 SES-CD의 변화 또는 측정값에 의해 나타날 수 있다. 일부 실시양태에서, PRO-2 점수가 ≤8라면, 대상체 (예를 들어, IBD, 예컨대 CD 또는 UC를 앓고 있는 환자)는 관해기를 겪는 것이다. 일부 실시양태에서, SES-CD 점수가 ≤2이고/거나 CDAI 점수가 <150이고/거나 PRO-2 점수가 ≤8라면, 대상체는 관해기를 겪는 것이다. 일부 실시양태에서, SES-CD 점수가 0이라면, 대상체는 관해기를 겪는 것이다.
본원에 사용된 "SMAD7" (CRCS3, FLJ16482, MADH7, MADH8, MAD (모체 억제 데카펜타플레직(mothers against decapentaplegic), 초파리) 상동체 7, MAD 상동체 8, SMAD, 모체 억제 DPP 상동체 7, 모체 억제 DPP 상동체 8이라고도 함)은 Entrez GeneID No. 4092 및 그의 대립유전자 변이체에 의해 식별되는 유전자에 의해 코딩되는 인간 단백질 또는 임의의 mRNA 전사체를 의미한다.
본원에 사용된 "CRP" (C-반응성 단백질, 펜트락신-관련; 펜트락신; 및 PTX1이라고도 함)는 Entrez GeneID No. 1401 및 그의 대립유전자 변이체 (SEQ ID NO: 8)에 의해 식별되는 유전자에 의해 코딩되는 인간 단백질 또는 임의의 mRNA 전사체를 의미한다.
본원에 사용된 "IL8" (인터류킨-8 (IL-8); 종양 괴사 인자-유도 유전자 1; NAF; 과립구 화학주성 단백질 1 (GCP1); LECT; LUCT; 단백질 3-10C; 베타-트롬보글로불린-유사 단백질; 호중구-활성화 펩티드 1; 호중구-활성화 단백질 1 (NAP1; NAP-1); 에목타킨(Emoctakin); GCP-1; LYNAP; 림프구 유래 호중구 활성화 펩티드; 폐 거대 세포 암종-유래 화학주성 단백질; 소형 유도성 시토카인 서브패밀리 B, 멤버 8; 베타 내피 세포-유래 호중구 활성화 펩티드; 단핵구-유래 호중구 화학주성 인자 (MDNCF); 단핵구-유래 호중구-활성화 펩티드 (MONAP); 폐포 대식세포 화학주성 인자 I; C-X-C 모티프 케모카인 8; 및 케모카인 (C-X-C 모티프) 리간드 8 (CXCL8)이라고도 함)은 Entrez GeneID No. 3576 및 그의 대립유전자 변이체에 의해 식별되는 유전자에 의해 코딩되는 인간 단백질 또는 임의의 mRNA 전사체를 의미한다.
본원에 사용된 "TNFα" (종양 괴사 인자, DIF, 종양 괴사 인자 리간드 수퍼패밀리 멤버 2 (TNFSF2), APC1 단백질, 카켁틴, 종양 괴사 인자 A (TNFA), 종양 괴사 인자-a (TNF-a), 및 종양 괴사 인자-알파 (TNF-알파)라고도 함)는 Entrez GeneID No. 7124 및 그의 대립유전자 변이체에 의해 식별되는 유전자에 의해 코딩되는 인간 단백질 또는 임의의 mRNA 전사체를 의미한다.
대조 수준 및 대조 샘플
CRP, TNFα 및/또는 IL8의 대조 수준은 항-SMAD7 요법을 이용한 치료 전에 대상체로부터 수득된 샘플 (예를 들어, 혈액 샘플)에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 단백질 또는 mRNA 전사체의 수준을 결정함으로써 결정될 수 있다. CRP, TNFα 및/또는 IL8의 대조 수준은 대상체의 치료에 대한 반응을 모니터링하기 위한 기준선을 제공할 수 있다. 대조 샘플은 항-SMAD7 요법이 최초 투여된 당일에 (예를 들어, 치료 요법의 1일째에), 예를 들어 적어도 하나의 항-SMAD7 요법을 투여한 직후에 대상체로부터 수득될 수 있다. 다른 실시양태에서, 대조 샘플은 항-SMAD7 요법을 시작하기 하루 전에 (예를 들어, 치료 요법의 0일째에) 대상체로부터 수득될 수 있다. 별법으로, 대조 샘플은 항-SMAD7 요법을 시작하기 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일 또는 그보다 오래 전에 대상체로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, CRP, TNFα 또는 IL8 농도의 증가 또는 감소는 대상체의 요법, 예를 들어 항-SMAD7 요법에 대한 반응을 모니터링하기 위해 치료 전에 (예를 들어, 대조 샘플에서), 치료 중에, 또한/또는 치료 후에 측정될 수 있다. 본 발명의 예시 실시양태에서, 대조 CRP 수준은 약 3 mg/리터 이상이다.
일부 실시양태에서, 대조 수준은 대상체에 대하여 대상체에서의 순환 CRP, TNFα 및/또는 IL8 농도의 장기 모니터링에 기반하여 설정될 수 있다. 이러한 경우에, 대상체는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 복수의 차수로 진행할 수 있는 것으로 고려된다. 복수의 치료 차수 후에 검출된 순환 CRP, TNFα 및/또는 IL8 농도는 대상체가 요법에 반응하였는지 또한/또는 항-SMAD7 요법을 이용한 추가 치료에 반응할 것 같은지를 결정하기 위해 대상체의 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 선행 대조 수준과 비교될 수 있다. 다른 실시양태에서, 대상체의 대조 또는 기준선 수준은 시간의 경과에 따라 수득된 (예를 들어, 수일, 수주, 수개월 또는 수년에 걸쳐서 수득된) 다수의 기준선 샘플로부터 결정된 순환 CRP, TNFα 및/또는 IL8 농도의 평균 측정값에 기반하여 설정될 수 있다. 따라서, 본원에 개시된 바와 같이 수행되는 임의의 시험 또는 분석법은 이전의 또는 설정된 대조 수준과 비교될 수 있고, 예를 들어 대상체가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 여러번의 차수로 받고 있다면, 비교를 위해 대상체로부터 새로운 대조 샘플을 수득하지 않아도 될 수 있다.
CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준은 기준 수치 값에 기반하여 또는 건강한 대조군의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준과 관련하여 결정될 수 있다.
예를 들어, 일부 실시양태에서, 정상 CRP 수준은 약 0.01 mg/L, 약 0.05 mg/L, 약 0.1 mg/L, 약 0.2 mg/L, 약 0.3 mg/L, 약 0.4 mg/L, 약 0.5 mg/L, 약 0.6 mg/L, 약 0.7 mg/L, 약 0.8 mg/L, 약 0.9 mg/L, 약 1.0 mg/L, 약 1.5 mg/L, 약 2.0 mg/L, 약 2.5 mg/L, 또는 약 3.0 mg/L이다.
본 발명의 다른 실시양태에서, CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준은 건강한 대조군의 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 중앙값 수준으로서 정의된다.
건강한 대조군은 환자에서의 동일한 세트의 기준과 매칭하여 유전적 배경, 습관 및 신체적 특징과 관련된 다양한 기준에 기반하여 정의될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 건강한 대조군 및 IBD를 앓고 있는 환자는 연령, 성별, 인종 기원, 흡연 습관, 식습관, 체질량 지수 (BMI), 기호 약물 사용, 의료 약물 사용, IBD와 관련된 약물 사용 및/또는 운동 습관과 관련하여 매칭된다. 환자와 대조군 사이에 매칭될 수 있는 다른 인자는 임상학적 기준 (예를 들어, CDAI 점수, 마요 점수, IBD-관련 증상의 중증도), 신진대사, IBD 환자의 개인 병력, 유전적 요인, IBD 환자의 가족 병력, 환경 요인 (예를 들어, 오염물질, 독소, 알레르겐)에 대한 노출, 및 생활 방식 (예를 들어, 도시, 교외 또는 시골의 직장 및/또는 거주지)을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 대조군은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 투여받기 전에 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료를 받고 있는 환자이다. 일부 실시양태에서, 환자는 치료 경험이 없는 환자이다.
데이터 해석
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법의 초기 투여 전에, IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준이 분석되고 역치 수준과 비교된다. 본원에 기재된 바와 같이, 역치 수준은 건강한 대조군 또는 IBD 환자군의 CRP 수준에 기반하여 설정될 수 있다. 일반적으로, 역치 수준은 건강한 대조군의 정상 CRP 수준, 예를 들어 중앙값 CRP 수준과 관련하여 상승할 것이거나, 또는 대조군, 예를 들어 IBD 환자로 구성된 대조군의 CRP 수준 범위 내에 포함될 수 있다.
대상체의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대한 반응성은 치료 전에 대상체로부터 수득된 샘플에서의 대조 CRP 수준과 관련하여 해석될 수 있다. 대상체는 대상체로부터 수득된 샘플에서의 CRP 농도가 대조 샘플과 비교하여 감소하였다면, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 대하여 감수성을 보이는 것 (예를 들어, 치료에 대하여 반응성을 보이거나 또는 반응할 것 같은 것)으로서 식별될 수 있다. 일부 실시양태에서, 샘플은 대상체가 항-SMAD7 요법 치료를 받고 있는 동안에 수득될 수 있다. 다른 실시양태에서, 샘플은 대상체가 치료 받기를 중단한 후에, 예를 들어 치료를 중단한지 약 1일, 약 7일 (즉, 약 1주), 약 14일 (즉, 약 2주), 약 28일, 약 56일, 약 70일 및/또는 그보다 더 긴 시간 후에 수득될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 샘플은 항-SMAD7 요법 치료를 중단한지 약 1일 후에 수득될 수 있다. 일부 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 농도의 감소, 예를 들어 약 3.0 mg/리터 이상의 CRP 대조 수준 농도로부터 3.0 mg/리터 미만의 CRP 농도로의 감소는 대상체가 관해기에 진입할 것 같거나 또는 관해기에 진입하였다는 것을 나타낸다.
본 발명의 고려된 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 CDAI 점수와 일치하고, 이는 대상체가 요법에 대하여 반응성을 보이고/거나 관해기에 진입하였거나 또는 관해기에 진입할 것 같다는 것을 나타낸다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 대조 수준과 비교하여 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체에서의 약 200 미만, 약 190 미만, 약 180 미만, 약 170 미만, 약 160 미만, 또는 약 150 미만의 CDAI 점수와 일치한다. 특정 실시양태에서, 대조 수준과 비교하여 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체에서의 약 150 미만의 CDAI 점수와 일치한다. 일부 실시양태에서, CRP 농도의 감소와 일치하는 CDAI 점수는 대상체에서 적어도 1일, 적어도 1주, 적어도 2주, 또는 적어도 10주 동안 유지된다. 일부 실시양태에서, CRP 농도의 감소와 일치하는 CDAI 점수는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한 후에 관찰가능하다. 예를 들어, CRP 농도의 감소와 일치하는 CDAI 점수는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 10주, 약 1일 및 약 2주, 또는 그보다 더 긴 시간 후에 관찰가능할 수 있다.
일부 실시양태에서, 샘플에서의 CRP 양의 감소는 CDAI 점수의 감소와 일치하고, 이는 대상체가 요법에 대하여 반응성을 보이고/거나 관해기에 진입하였거나 또는 관해기에 진입할 것 같다는 것을 나타낸다. 예를 들어, 본 발명의 일부 실시양태에서, 대조 수준과 비교하여 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체에서의 약 50, 약 60, 약 70, 약 80, 약 90, 약 100, 약 110, 약 120, 약 130, 약 140, 또는 약 150의 CDAI 점수의 감소와 일치한다. 특정 실시양태에서, 대조 수준과 비교하여 샘플에서의 CRP 양의 감소는 대상체에서의 약 70 내지 약 100의 CDAI 점수의 감소와 일치한다. 일부 실시양태에서, CRP 양의 감소와 일치하는 CDAI 점수의 감소는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한 후에 관찰가능하다. 예를 들어, CRP 양의 감소와 일치하는 CDAI 점수의 감소는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일, 약 1주, 약 2주, 약 3주, 약 4주, 약 10주, 또는 그보다 더 긴 시간 후에 관찰가능할 수 있다. 일부 실시양태에서, CRP 양의 감소와 일치하는 CDAI 점수의 감소는 항-SMAD7 요법을 이용한 치료를 중단한지 약 1일 또는 약 2주 후에 관찰가능하다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법, 예컨대 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 투여받는 환자는 또한 하나 이상의 추가 IBD 요법, 예를 들어 스테로이드를 투여받는다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 및 하나 이상의 추가 IBD 요법을 받는 환자는 이들 환자가, 예를 들어 감소하는 CDAI 점수 및/또는 감소하는 CRP 수준에 의해 나타나는 바와 같이 항-SMAD7 요법에 반응하고/거나 임상학적 관해기를 겪는다면, 하나 이상의 추가 IBD 요법을 줄일 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법의 투여 후에 임상학적 관해기를 겪는 환자 (예를 들어, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 2주 치료 요법을 완료한지 14일 및 28일 후의 두 시점 모두에서 CDAI<150)는 스테로이드의 사용을 줄일 수 있다.
별법으로, 대상체는 대상체로부터 수득된 샘플에서의 순환 CRP 농도가 대조 수준과 비교하여 변화 또는 증가가 없다면, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 저항성을 보이는 것 (예를 들어, 비-반응성 또는 반응할 것 같지 않는 것)으로서 식별될 수 있다. 한 실시양태에서, 샘플은 대상체가 항-SMAD7 요법 치료를 받고 있는 동안에 수득될 수 있다. 다른 실시양태에서, 샘플은 대상체가 치료 받기를 중단한 후에, 예를 들어 치료를 중단한지 약 1일, 약 7일 (즉, 약 1주), 약 14일 (즉, 약 2주), 약 28일, 약 56일, 약 70일, 및/또는 그보다 더 긴 시간 후에 수득될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 샘플은 항-SMAD7 요법 치료를 중단한지 약 1일 후에 수득될 수 있다.
일부 실시양태에서, 예를 들어 증가하는 CDAI 점수 (예를 들어, >70의 CDAI 점수 증가) 및/또는 증가하는 CRP 수준 (예를 들어, >50%의 CRP 수준 증가)에 의해 나타나는 바와 같이, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료 과정 동안에 질환의 악화를 겪는 환자는 구제 요법 (예를 들어, 생물제, 예컨대 TNFα 억제제) 및/또는 면역억제성 약물)을 투여받는다.
환자 CRP 수준 및 역치 CRP 수준의 차이는 항-SMAD7 요법에 대한 환자의 잠재적인 반응성을 나타낸다. 예를 들어, 역치 CRP 수준에 비해 상승한 환자 CRP 수준은 환자가 항-SMAD7 요법에 대하여 반응성을 보일 수 있다는 것을 나타낸다. 역치 CRP 수준은 상이한 기준을 사용하여 설정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 역치 CRP 수준은 대조군의 정상 CRP 수준, 예를 들어 중앙값 CRP 수준과 관련하여 결정된다. 대조군은 건강한/정상인 대상체 (예를 들어, 건강한 대조군) 또는 IBD 환자군으로 구성될 수 있다.
예를 들어, 일부 실시양태에서, CRP 역치 수준은 정상 수준보다 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 5배, 적어도 8배, 적어도 10배, 적어도 20배, 적어도 30배, 적어도 50배, 적어도 80배, 또는 적어도 100배 더 높다. 다른 실시양태에서, CRP 역치 수준은 IBD 환자군의 CRP 수준, 예를 들어 중앙값 CRP 수준과 관련하여 제50 백분위수, 제60 백분위수, 제70 백분위수, 제80 백분위수 또는 제90 백분위수의 CRP 수준을 나타낸다. 추가적으로, 일부 실시양태에서, 역치 CRP 수준은 0.5 mg/L를 초과하거나, 1.0 mg/L를 초과하거나, 1.5 mg/L를 초과하거나, 2.0 mg/L를 초과하거나, 2.5 mg/L를 초과하거나, 3.0 mg/L를 초과하거나, 3.5 mg/L를 초과하거나, 4.0 mg/L를 초과하거나, 4.5 mg/L를 초과하거나, 5.0 mg/L를 초과하거나, 7.5 mg/L를 초과하거나, 또는 10 mg/L를 초과한다. 일부 실시양태에서, 역치 CRP 수준은 약 0.5 mg/L, 약 1.0 mg/L, 약 1.5 mg/L, 약 2.0 mg/L, 약 2.5 mg/L, 약 3.0 mg/L, 약 3.5 mg/L, 약 4.0 mg/L, 약 4.5 mg/L, 약 5.0 mg/L, 약 7.5 mg/L, 또는 약 10 mg/L이다.
일부 실시양태에서, 대조군은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 투여받는 환자로 이루어질 수 있다. 일부 실시양태에서, 정상 CRP 수준 또는 CRP 역치 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 투여하기 전에 환자에게서 관찰되는 CRP 기준선 수준일 수 있다. CRP 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 또는 후속 용량을 환자에게 투여한 후에, 후속적으로 시간의 경과에 따라 환자에게서 모니터링될 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 1번 이상의 투여 후에 환자에서의 CRP 수준이 환자에서의 CRP 기준선 수준과 비교될 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여 요법은 환자에서의 CRP 수준이 환자의 CRP 기준선 수준에 비해 증가하였는지, 감소하였는지, 또는 일정하게 유지되는지에 따라 조정될 수 있다.
일부 실시양태에서, 대조군은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 투여받는 환자로 이루어질 수 있다. 일부 실시양태에서, 정상 CRP 수준 또는 CRP 역치 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 투여하기 전에 환자에게서 관찰되는 CRP 기준선 수준일 수 있다. CRP 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 또는 후속 용량을 환자에게 투여한 후에, 후속적으로 시간의 경과에 따라 환자에게서 모니터링될 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 1번 이상의 투여 후에 환자에서의 CRP 수준이 환자에서의 CRP 기준선 수준과 비교될 수 있다. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여 요법은 환자에서의 CRP 수준이 환자의 CRP 기준선 수준에 비해 증가하였는지, 감소하였는지, 또는 일정하게 유지되는지에 따라 조정될 수 있다.
제약 조성물
SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합을 함유하는 제약 조성물이 투여 단위 형태로 제공될 수 있고 임의의 적합한 방법에 의해 제조될 수 있다. 제약 조성물은 의도되는 투여 경로와 부합되도록 제제화되어야 한다. 유용한 제제는 제약 업계에 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 22nd ed. (Pharmaceutical Press and Philadelphia College of Pharmacy at University of the Sciences, 2012)]을 참조한다.
제약 제제는 바람직하게는 멸균된다. 멸균은 예를 들어, 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 달성될 수 있다. 조성물이 동결건조되는 경우에는, 필터 멸균이 동결건조 및 재구성 전에 또는 그 후에 수행될 수 있다.
항- SMAD7 요법
본 개시내용은 부분적으로 항-SMAD7 요법, 예를 들어 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 제약 조성물로 대상체에서 IBD를 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 개시내용은 또한 항-SMAD7 치료제를 포함하는 치료제 조합, 예를 들어 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 제약 조성물로 환자에서 IBD를 치료하는 방법에 관한 것이다. 항-SMAD7 요법은 SMAD7에 대한 표적 요법 (예를 들어, 항-SMAD7 안티센스 요법, 예를 들어 SEQ ID NO: 1로 표시되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드, 및 SMAD7에 대한 항체)을 포함한다.
안티센스 올리고뉴클레오티드는 표적 단백질 (예를 들어, SMAD7)을 코딩하는, 메신저 RNA (mRNA)에 대하여 상보적인 짧은 합성 올리고뉴클레오티드 서열이다. 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열은 mRNA와 혼성화되어 이중-가닥 혼성체를 생성하고, 이는 DNA/RNA 혼성체 가닥을 분해시키는 어디에나 존재하는 촉매적 효소, 예컨대 RN아제 H의 활성화를 유도할 수 있으므로 단백질 번역을 방지한다. 이론에 구애됨이 없이, 본원에 제공된 안티센스 올리고뉴클레오티드는 RNA 또는 DNA로서의 그의 표적 서열과 혼성화될 수 있다. 따라서, DNA 서열이 표적으로서 제공되더라도, 상응하는 RNA 서열 (티민 대신에 우라실이 포함됨)이 포함된다.
고려된 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SMAD7 mRNA 또는 DNA의 임의의 영역을 표적으로 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 항-SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 인간 SMAD7 mRNA (예를 들어, SEQ ID NO: 2; NM_005904.3의 코딩 서열 CDS (288-1568), 호모 사피엔스 SMAD 패밀리 멤버 7 (SMAD7), 전사 변이체 1, mRNA를 나타냄; 본원에 제공된 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO: 2의 뉴클레오티드 서열을 갖는 DNA 및 T이 U에 의해 대체된 SEQ ID NO: 2의 상응하는 RNA를 둘다 표적으로 할 수 있음)의 위치 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 및/또는 533 (즉, 각각 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 및 533)을 표적으로 할 수 있다. 특정 실시양태에서, 항-SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SMAD7 코딩 서열 (GCTGCGGGGAGAAGGGGCGAC; SEQ ID NO: 7), 또는 T이 U에 의해 대체된 상응하는 RNA 서열의 뉴클레오티드 108-128을 표적으로 한다. SMAD7 코딩 서열의 뉴클레오티드 108-128은 NCBI 참조 서열 NM_005904.3의 뉴클레오티드 395-416에 상응한다.
특정 실시양태에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 하기 항-SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드: 5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3' (SEQ ID NO: 3)로부터 유래될 수 있다.
본원에서 SMAD7을 표적으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오티드는 CpG 쌍의 시토신 잔기가 5'-메틸시토신에 의해 대체된 혼합-백본을 포함할 수 있는 것으로 고려된다 (Me-dC로서 축약됨). 메틸포스포네이트 연결이 또한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 5' 및/또는 3' 말단에 위치할 수 있다 (MeP로서 축약됨).
SMAD7을 표적으로 하는 예시 안티센스 올리고뉴클레오티드 요법은 하기를 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다:
5'-GTXYCCCCTTCTCCCXYCAG-3' (SEQ ID NO: 5), 여기서 X는 시토신 및 5-메틸시토신으로 이루어진 군으로부터 선택된 질소성 염기를 포함하거나 또는 그것으로 구성된 뉴클레오시드 또는 시토신 핵염기를 포함하는 2'-O-메틸 뉴클레오시드이고, Y는 구아닌 및 5-메틸구아닌으로 이루어진 군으로부터 선택된 질소성 염기를 포함하거나 또는 그것으로 구성된 뉴클레오시드 또는 구아닌 핵염기를 포함하는 2'-O-메틸 뉴클레오시드이며, 단 임의적으로 뉴클레오시드 X 또는 Y 중 적어도 하나는 메틸화된 질소성 염기를 포함하거나 또는 그것으로 구성된다. 일부 구체적인 실시양태에서, 모든 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결이다;
5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO: 4), 여기서 X는 5-메틸 2'-데옥시시티딘이다 (예를 들어, 각각 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 7,807,818 및 6,159,697 참조);
5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO: 1), 여기서 X는 5-메틸 2'-데옥시시티딘이다;
ZTXGCCCCTTCTCCCXGCAZ-3' (SEQ ID NO: 6), 여기서 X는 5-메틸 2'-데옥시시티딘이고, Z는 2'-데옥시구아노신 메틸포스포네이트이다; 및
각각 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 8,648,186 및 국제 특허 출원 공보 WO 2010/054826에 기재된 안티센스 올리고뉴클레오티드.
고려된 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO: 1: 5'-GTC* GCC CCT TCT CCC C*GC AGC-3'를 포함하는 것들을 포함하고, 여기서 C*는 5-메틸-2'-데옥시시티딘을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 고려된 안티센스 올리고뉴클레오티드의 뉴클레오시드 사이의 연결 중 적어도 하나는 O,O-연결된 포스포로티오에이트인데, 예를 들어 SEQ ID NO: 1의 20개의 뉴클레오시드 사이의 연결은 각각 O,O-연결된 포스포로티오에이트일 수 있다. 일부 실시양태에서, 고려된 안티센스 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO: 1의 핵산 서열을 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드이고, 여기서 20개의 뉴클레오시드 사이의 연결은 각각 O,O-연결된 포스포로티오에이트 연결이며, 이것을 본원에서는 "몽게르센"이라 한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시되어 있는 고려된 조성물은 1 내지 20개의 O,O-연결된 포스포로티오에이트의 뉴클레오시드 사이의 연결을 임의로 포함할 수 있는, SEQ ID NO: 1의 안티센스 올리고뉴클레오티드의 제약상 허용되는 염, 예를 들어 나트륨 염을 포함할 수 있다. 올리고뉴클레오티드의 고려된 염은 완전 중화된 것들을 포함하는데, 예를 들어 각각의 포스포로티오에이트 연결이 Na+와 같은 이온과 회합된다. 올리고뉴클레오티드는 자연 발생적 핵염기, 당 및 공유 뉴클레오티드 (백본) 사이의 연결 뿐만 아니라, 비-자연 발생적 부분을 포함할 수 있다. 다양한 실시양태에서, 본원에 기재된 안티센스 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 및 SEQ ID NO: 6의 안티센스 올리고뉴클레오티드는 데옥시시티딘 및/또는 5-메틸 2'-데옥시시티딘을 포함하는 뉴클레오티드, 예를 들어 비제한적으로 5-메틸-2'-데옥시시티딘 5'-모노포스페이트 및 5-메틸-2'-데옥시시티딘 5'-모노포스포로티오에이트를 포함할 수 있다.
고려된 항-SMAD7 요법은 SMAD7에 대하여 작용하는 올리고뉴클레오티드를 포함하고 경구로 투여될 수 있다. 개시된 요법은, IBD를 앓고 있는 대상체에게 경구로 투여되었을 때, 유효량의 안티센스 올리고뉴클레오티드를 환자의 장 계통에 전달할 수 있고, 예를 들어 유효량의 안티센스 올리고뉴클레오티드를 환자의 말단 회장 및/또는 우결장에 전달할 수 있다.
본 발명의 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법, SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제 또는 이들의 조합은 안티센스 올리고뉴클레오티드의 경구 전달에 적합할 수 있는데, 예를 들어 장용성 코팅, 예를 들어 위-저항성 코팅을 포함하는 정제는 조성물이 안티센스 화합물을, 예를 들어 환자의 말단 회장 및 우결장에 전달될 수 있도록 한다. 예를 들어, 이러한 투여는 안티센스 화합물을 직접적으로 대상체의 장의 병에 걸린 부분에 실질적으로 국소적으로 적용하는, 국소적 효과를 초래할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 투여는 안티센스 화합물의 원치않는 전신성 흡수를 실질적으로 피할 수 있다.
예를 들어, 경구 투여를 위한 정제는 개시된 안티센스 화합물 또는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 몽게르센을 포함하는 과립 (예를 들어, 적어도 부분적으로 과립으로부터 형성된 것), 및 일부 실시양태에서는 추가 치료제, 또는 이들의 조합; 및 제약상 허용되는 부형제를 포함할 수 있다. 이러한 정제는 장용성 코팅으로 코팅될 수 있다. 고려된 정제는 제약상 허용되는 부형제, 예컨대 충전제, 결합제, 붕해제 및/또는 윤활제 뿐만 아니라, 착색제, 이형제, 코팅제, 감미제, 향미제, 예컨대 윈터그린(wintergreen), 오렌지, 크실리톨, 소르비톨, 프럭토스 및 말토덱스트린, 및 방향제, 보존제 및/또는 항산화제를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 고려된 제약 제제는 고려된 안티센스 화합물 또는 제약상 허용되는 염, 예를 들어 몽게르센, 및 일부 실시양태에서는 추가 치료제, 및 제약상 허용되는 충전제를 포함하는 과립내 상을 포함한다. 예를 들어, 몽게르센 및 충전제는, 임의로 다른 부형제와 함께 블렌딩되어, 과립으로 형성될 수 있다. 일부 실시양태에서, 과립내 상은 습식 과립화를 사용하여 형성될 수 있는데, 예를 들어 액체 (예를 들어, 물)가 블렌딩된 안티센스 화합물 및 충전제에 첨가된 다음, 조합이 건조, 밀링 및/또는 체질되어 과립을 제조한다. 관련 기술분야의 통상의 기술자라면, 과립내 상을 달성하는데 다른 방법이 사용될 수 있다는 것을 이해할 것이다.
일부 실시양태에서, 고려된 제제는 하나 이상의 제약상 허용되는 부형제를 포함할 수 있고, 과립내 상과 블렌딩되어 개시된 제제를 형성할 수 있는 과립외 상을 포함한다.
항-SMAD7 요법 제제, 또는 일부 실시양태에서는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 제제, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 충전제를 포함하는 과립내 상에 포함될 수 있다. 예시 충전제는 셀룰로스, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 소르비톨, 미정질 셀룰로스, 펙틴, 폴리아크릴레이트, 덱스트로스, 셀룰로스 아세테이트, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 부분 전호화 전분, 칼슘 카르보네이트, 및 이들의 조합을 포함하는 기타를 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법 제제, 또는 다른 실시양태에서는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 제제, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 과립내 상 및/또는 일반적으로 제약 제제의 성분들을 함께 유지하는 기능을 할 수 있는 결합제를 포함하는 과립외 상에 포함될 수 있다. 본 발명에 포함되는 예시 결합제는 전분, 당, 셀룰로스 또는 개질된 셀룰로스, 예컨대 히드록시프로필 셀룰로스, 락토스, 전호화 옥수수 전분, 폴리비닐 피롤리돈, 히드록시프로필 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 저 치환 히드록시프로필 셀룰로스, 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 당 알콜, 및 이들의 조합을 포함하는 기타일 수 있으나, 이들로 제한되지는 않는다.
예를 들어 과립내 상 및/또는 과립외 상에 포함된, 고려된 항-SMAD7 요법 제제 또는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 제제, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 붕해제, 예컨대 비제한적으로 전분, 셀룰로스, 가교 폴리비닐 피롤리돈, 전분 글리콜산나트륨, 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 알기네이트, 옥수수 전분, 크로스카르멜로스 소듐, 가교 카르복시메틸 셀룰로스, 저 치환 히드록시프로필 셀룰로스, 아카시아, 및 이들의 조합을 포함하는 기타를 포함할 수 있다. 예를 들어, 과립내 상 및/또는 과립외 상은 붕해제를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 고려된 항-SMAD7 요법 제제 또는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 제제, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 개시된 안티센스 화합물 및 만니톨, 미정질 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스 및 전분 글리콜산나트륨 또는 이들의 조합으로부터 선택된 부형제를 포함하는 과립내 상, 및 미정질 셀룰로스, 전분 글리콜산나트륨 및 마그네슘 스테아레이트 또는 이들의 혼합물 중 하나 이상을 포함하는 과립외 상에 포함된다.
일부 실시양태에서, 고려된 항-SMAD7 요법 제제 또는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 제제, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 윤활제를 포함할 수 있는데, 예를 들어 과립외 상이 윤활제를 함유할 수 있다. 윤활제는 활석, 실리카, 지방, 스테아린, 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 포스페이트, 실리콘 디옥시드, 칼슘 실리케이트, 칼슘 포스페이트, 콜로이드성 실리콘 디옥시드, 금속성 스테아레이트, 수소화된 식물성 오일, 옥수수 전분, 소듐 벤조에이트, 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 아세테이트, 칼슘 스테아레이트, 소듐 라우릴 술페이트, 소듐 클로라이드, 마그네슘 라우릴 술페이트, 활석 및 스테아르산을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 제약 제제는 장용성 코팅을 포함한다. 일반적으로, 장용성 코팅은 소화관을 따라서 약물이 흡수되는 위치를 제어하는, 경구 약물을 위한 장벽을 형성한다. 장용성 코팅은 pH에 따라 상이한 속도로 붕해되는 중합체를 포함할 수 있다. 장용성 코팅은 예를 들어, 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 메틸 아크릴레이트-메타크릴산 공중합체, 셀룰로스 아세테이트 숙시네이트, 히드록실프로필 메틸셀룰로스 프탈레이트, 메틸 메타크릴레이트-메타크릴산 공중합체, 에틸아크릴레이트-메타크릴산 공중합체, 메타크릴산 공중합체 C 유형, 폴리비닐 아세테이트-프탈레이트 및 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트를 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 장용성 코팅은 메타크릴산, 메타크릴산/아크릴산 에스테르 또는 이들의 유도체를 기재로 하는 음이온성, 양이온성 또는 중성 공중합체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 장용성 코팅은 에틸아크릴레이트-메타크릴산 공중합체를 포함한다. 시판되는 예시 장용성 코팅은 오파드라이(Opadry)® AMB, 아크릴-EZE®, 유드라지트(Eudragit)® 등급을 포함한다. 일부 실시양태에서, 장용성 코팅은 중량을 기준으로 고려된 정제의 약 5% 내지 약 10%, 약 5% 내지 약 20%, 약 8 내지 약 15%, 약 8% 내지 약 18%, 약 10% 내지 약 12%, 또는 약 12% 내지 약 16%를 구성하거나 또는 차지할 수 있다. 예를 들어, 장용성 코팅은 에틸아크릴레이트-메타크릴산 공중합체를 포함할 수 있다.
한 실시양태에서, SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 약 0.5 중량% 내지 약 10 중량%의 활성 성분 (예를 들어, 몽게르센) 또는 그의 제약상 허용되는 염; 약 30 중량% 내지 약 50 중량%의 만니톨; 및 약 10 중량% 내지 약 30 중량%의 미정질 셀룰로스를 포함하는, 경구용 정제일 수 있다.
예를 들어, 항-SMAD7 요법 또는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 약 0.5 중량% 내지 약 70 중량%, 예를 들어 약 0.5 중량% 내지 약 10 중량%, 또는 약 1 중량% 내지 약 20 중량%의 활성 성분 (예를 들어, 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 그의 제약상 허용되는 염 (예를 들어, 몽게르센))을 포함하거나 또는 본질적으로 이들로 이루어지는 정제의 형태로 제공된다. 이러한 정제는 예를 들어, 약 0.5 중량% 내지 약 60 중량%의 만니톨, 예를 들어 약 30 중량% 내지 약 50 중량%의 만니톨, 예를 들어 약 40 중량%의 만니톨; 및/또는 약 20 중량% 내지 약 40 중량%의 미정질 셀룰로스, 또는 약 10 중량% 내지 약 30 중량%의 미정질 셀룰로스를 포함할 수 있다. 예를 들어, 고려된 정제는 약 30 중량% 내지 약 60 중량%, 예를 들어 약 45 중량% 내지 약 65 중량%, 또는 별법으로 약 5 내지 약 10 중량%의 몽게르센, 약 30 중량% 내지 약 50 중량%, 또는 별법으로 약 5 중량% 내지 약 15 중량%의 만니톨, 약 5 중량% 내지 약 15 중량%의 미정질 셀룰로스, 약 0 중량% 내지 약 4 중량%, 또는 약 1 중량% 내지 약 7 중량%의 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 및 약 0 중량% 내지 약 4 중량%, 예를 들어 약 2 중량% 내지 약 4 중량%의 전분 글리콜산나트륨을 포함하는 과립내 상을 포함할 수 있다.
예시 항-SMAD7 요법 제제는 약 10 mg 내지 약 500 mg의 몽게르센을 포함하거나 또는 본질적으로 이들로 이루어지는 투여 형태를 포함하고, 예를 들어 약 10 mg, 약 15 mg, 약 20 mg, 약 25 mg, 약 30 mg, 약 35 mg, 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 200 mg, 또는 약 250 mg의 몽게르센을 포함하는 정제가 본원에서 고려된다. 한 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 약 0.5 중량% 내지 약 10 중량%의 SEQ ID NO: 1로 표시되는 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 그의 제약상 허용되는 염; 약 30 중량% 내지 약 50 중량%의 만니톨; 및 약 10 중량% 내지 약 30 중량%의 미정질 셀룰로스를 포함하는, 경구용 정제일 수 있다.
본 발명의 예시 실시양태에서, 약 50 중량%의 몽게르센 (또는 그의 염), 약 11.5 중량%의 만니톨, 약 10 중량%의 미정질 셀룰로스, 약 3 중량%의 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 및 약 2.5 중량%의 전분 글리콜산나트륨을 포함할 수 있는 과립내 상; 및 약 20 중량%의 미정질 셀룰로스, 약 2.5 중량%의 전분 글리콜산나트륨, 및 약 0.5 중량%의 마그네슘 스테아레이트를 포함할 수 있는 과립외 상을 포함하는, 경구 투여를 위한 제약상 허용되는 정제가 제공된다. 정제는 또한 장용성 코팅을 포함할 수 있다.
또 다른 예시 실시양태에서, 약 5 중량% 내지 약 10 중량%, 예를 들어 약 8 중량%의 몽게르센 (및/또는 그의 염, 예를 들어 나트륨 염, 예를 들어 여기서 뉴클레오시드 사이의 연결은 각각 O,O-연결된 포스포로티오에이트임), 약 40 중량%의 만니톨, 약 8 중량%의 미정질 셀룰로스, 약 5 중량%의 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 및 약 2 중량%의 전분 글리콜산나트륨을 포함하거나 또는 본질적으로 이들로 이루어질 수 있는 과립내 상; 및 약 17 중량%의 미정질 셀룰로스, 약 2 중량%의 전분 글리콜산나트륨, 및 약 0.4 중량%의 마그네슘 스테아레이트를 포함할 수 있는 과립외 상을 포함하거나 또는 본질적으로 이들로 이루어지는, 경구 투여를 위한 제약상 허용되는 정제가 제공된다.
고려된 정제는 또한 장용성 코팅을 포함할 수 있는데, 예를 들어 개시된 정제는 약 13 중량%, 약 14 중량%, 약 15 중량%, 약 16 중량%, 약 17 중량%의 장용성 코팅, 예를 들어 에틸아크릴레이트-메타크릴산 공중합체 (예를 들어, 아크릴EZE®)를 포함할 수 있다.
예를 들어, 항-SMAD7 요법은 과립내 상 및 과립외 상을 포함하고, 여기서 예를 들어 과립내 상은 약 5 중량% 내지 약 10 중량% (예를 들어, 약 8 중량%)의 SEQ ID NO: 1로 표시되는 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 그의 제약상 허용되는 염 (예를 들어, 몽게르센), 약 40 중량%의 만니톨, 약 8 중량%의 미정질 셀룰로스, 약 5 중량%의 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 및 약 2 중량%의 전분 글리콜산나트륨을 포함하고, 예를 들어 과립외 상은 약 17 중량%의 미정질 셀룰로스, 약 2 중량%의 전분 글리콜산나트륨, 및 약 0.4 중량%의 마그네슘 스테아레이트를 포함하는, 경구용 제약상 허용되는 정제의 형태일 수 있고, 여기서 정제는 장용성 코팅을 추가로 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 고려된 제제, 예를 들어 정제는, 환자에게 경구로 투여되었을 때, 환자에게서 최소 혈장 농도의 올리고뉴클레오티드를 초래할 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 고려된 제제는, 환자에게 경구로 투여되었을 때, 환자의 말단 회장 및/또는 우결장, 예를 들어 환자의 장의 병에 걸린 부위 또는 환부로 국소적으로 전달된다.
비경구적 투여
본 발명의 제약 조성물은 비경구적 투여용으로 제제화될 수 있는데, 예를 들면 정맥내, 근육내, 피하, 병변내, 또는 복강내 경로를 통한 주사용으로 제제화될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자라면 본 개시내용에 비추어 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합을 함유하는 수성 조성물의 제제, 예컨대 수성 제약 조성물을 알 것이다. 전형적으로, 이러한 조성물은 액체 용액제이든 또는 현탁액제이든 주사제로서 제조될 수 있고; 주사 전에 액체를 첨가하여 용액제 또는 현탁액제를 제조하는데 사용하기에 적합한 고체 형태가 또한 제조될 수 있고; 제제는 또한 유화될 수 있다.
주사용으로 적합한 제약 형태는 멸균 수성 용액제 또는 분산액제; 참깨 오일, 땅콩 오일 또는 수성 프로필렌 글리콜을 포함하는 제제; 및 멸균 주사 용액제 또는 분산액제의 즉석 조제를 위한 멸균 분말제를 포함한다. 모든 경우에 이들 형태는 멸균되어야 하고 용이한 주사능이 존재하는 정도로 유체여야 한다. 이들 형태는 제조 및 저장 조건 하에 안정해야 하고 미생물, 예컨대 박테리아 및 진균의 오염 작용에 대하여 보존처리되어야 한다.
유리 염기 또는 약리학상 허용되는 염으로서의 활성 화합물의 용액제는 계면활성제, 예컨대 히드록시프로필셀룰로스와 적합하게 혼합된 물로 제조될 수 있다. 분산액제는 또한 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜 및 이들의 혼합물로 또한 오일로 제조될 수 있다. 또한, 멸균된 고정 오일(fixed oil)이 용매 또는 현탁 매체로서 이용될 수 있다. 이러한 목적을 위해 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함하는 임의의 무자극 고정 오일이 이용될 수 있다. 또한, 지방산, 예컨대 올레산이 주사제의 제조에 사용될 수 있다. 멸균 주사 제제는 또한 비독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사 용액제, 현탁액제 또는 에멀젼제, 예를 들어 1,3-부탄디올 중의 용액제일 수 있다. 이용가능한 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액(Ringer's solution), U.S.P., 및 등장성 소듐 클로라이드 용액이 있다. 한 실시양태에서, SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합은 1% (w/v) 소듐 카르복시메틸셀룰로스 및 0.1% (v/v) 트윈(TWEEN)™ 80을 포함하는 담체 유체 중에 현탁될 수 있다. 일반적인 저장 및 사용 조건 하에, 이들 제제는 미생물의 성장을 방지하기 위해 보존제를 함유한다.
주사 제제, 예를 들어 멸균 수성 또는 유성 주사 현탁액제는 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 공지된 기술에 따라 제제화될 수 있다. 일반적으로, 분산액제는 다양한 멸균 활성 성분을 기본 분산 매체 및 상기에 열거된 것들 중 필요한 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클에 혼입함으로써 제조된다. 본 발명의 멸균 주사 용액제는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합을, 필요에 따라 상기에 열거된 다양한 다른 성분이 함유된 요구되는 양의 적절한 용매에 혼입한 다음, 여과 멸균에 의해 제조될 수 있다. 멸균 주사 용액제의 제조를 위한 멸균 분말제의 경우에, 바람직한 제조 방법은 사전에 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분과 임의의 추가 목적 성분의 분말을 제공하는, 진공-건조 및 냉동-건조이다. 주사 제제는 예를 들어, 박테리아-보유 필터를 통한 여과에 의해 멸균될 수 있다.
근육내 주사를 위한 보다 농축된 또는 고 농축된 용액제의 제조가 또한 고려된다. 이와 관련하여, 용매로서는 DMSO를 사용하는 것이 바람직한데, 그 이유는 이것이 매우 신속한 침투를 초래하여, SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합을 고 농도로 좁은 영역에 전달할 것이기 때문이다.
이러한 용액제에 사용하기에 적합한 보존제는 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 클로로부탄올, 티메로살 등을 포함한다. 적합한 완충제는 붕산, 소듐 및 포타슘 비카르보네이트, 소듐 및 포타슘 보레이트, 소듐 및 포타슘 10 카르보네이트, 소듐 아세테이트, 소듐 비포스페이트 등을, 약 pH 6 내지 pH 8, 바람직하게는 약 pH 7 내지 pH 7.5의 pH를 유지하는 충분한 양으로 포함한다. 적합한 등장화제는 안과 용액제의 소듐 클로라이드 당량이 0.9 ± 0.2%의 범위에 있도록 하는, 덱스트란 40, 덱스트란 70, 덱스트로스, 글리세린, 포타슘 클로라이드, 프로필렌 글리콜, 소듐 클로라이드 등이다. 적합한 항산화제 및 안정화제는 소듐 비술파이트, 소듐 메타비술파이트, 소듐 티오술파이트, 티오우레아 등을 포함한다. 적합한 습윤제 및 청징제는 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머 282 및 틸록사폴을 포함한다. 적합한 점도-상승제는 덱스트란 40, 덱스트란 70, 젤라틴, 글리세린, 히드록시에틸셀룰로스, 히드록시메틸프로필셀룰로스, 라놀린, 메틸셀룰로스, 페트롤라툼, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐피롤리돈, 카르복시메틸셀룰로스 등을 포함한다.
예시 실시양태에서, SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 피하 투여를 위한 제약 조성물은 안티센스 올리고뉴클레오티드, 예컨대 SEQ ID NO:1로 표시되는 것 또는 그의 제약상 허용되는 염 (예컨대, 나트륨 염, 예를 들어 몽게르센), 및 제약상 허용되는 담체를 포함한다.
용량
예시 제제는 약 10 mg 내지 약 500 mg의 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드를, 임의로 하나 이상의 추가 치료제와 함께 포함하는 투여 형태를 포함한다. 예를 들어, 약 10 mg 내지 약 500 mg의 몽게르센을 포함하는 제제 및 약 10 mg, 약 15 mg, 약 20 mg, 약 25 mg, 약 30 mg, 약 35 mg, 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 150 mg, 약 160 mg, 약 200 mg 또는 약 250 mg의 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 정제가 본원에서 고려된다. 한 실시양태에서, 제제는 약 40 mg, 80 mg 또는 160 mg의 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제제는 적어도 100 ㎍의 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 예를 들어, 제제는 약 0.1 mg, 0.2 mg, 0.3 mg, 0.4 mg, 0.5 mg, 1 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg 또는 25 mg의 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 투여되는 양은 치료될 질환 또는 징후의 유형 및 정도, 환자의 전반적인 건강 및 사이즈, 안티센스 올리고뉴클레오티드의 생체내 효능, 제약 제제, 및 투여 경로와 같은 변수에 따라 좌우될 것이다. 초기 투여량은 목적하는 혈액-수준 또는 조직 수준을 신속히 달성하기 위해 상한 수준 이상으로 증가할 수 있다. 별법으로, 초기 투여량은 최적의 양보다 적을 수 있고, 치료 과정 동안에 투여량이 점진적으로 증가할 수 있다. 인간 투여량은 예를 들어, 40 mg부터 160 mg까지 실시하도록 설계된 통상의 I상 용량 증가 연구에서 최적화될 수 있다. 투여 빈도는 투여 경로, 투여량 및 치료되는 질환과 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 예시 투여 빈도는 하루에 한번, 1주에 한번 및 2주에 한번이다. 일부 실시양태에서, 투여는 7일간 하루에 한번씩이다.
추가 작용제 또는 조합을 위한 적절한 투여량은 추가 작용제의 정체에 따라 좌우될 것이고 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다.
용량은 대상체의 임상학적 반응에 따라 필요에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 관해기가 진행되었던 대상체는 관해기 전의 용량과 비교하여 감소한 (예를 들어, 적어도 또는 대략 2%, 5%, 8%, 10%, 12%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 88%, 90%, 92%, 95%, 98% 또는 99% 감소) 개별 치료제가 1번 이상 투여될 수 있다.
투여
안티센스 올리고뉴클레오티드 및 추가 요법은 동일한 또는 별개의 투여 형태로 대략 동시에 투여될 수 있다. 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 추가 요법이 별개의 투여 제제로 투여된다면, 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 추가 요법은 짧은 간격을 두고 연속적으로, 예를 들어 서로 1분 이내에, 3분 이내에, 5분 이내에, 10분 이내에, 15분 이내에, 20분 이내에, 30분 이내에, 45분 이내에 또는 1시간 이내에 투여될 수 있다. 안티센스 올리고뉴클레오티드 및 추가 요법은 임의의 순서로 투여될 수 있으며, 예를 들어 안티센스 올리고뉴클레오티드가 먼저 투여될 수 있거나 또는 추가 요법이 먼저 투여될 수 있다.
안티센스 올리고뉴클레오티드 및 추가 요법의 투여 경로는 동일할 수 있거나 (예를 들어, 경구) 또는 상이할 수 있다 (예를 들어, 경구 및 비경구적). 특정 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 경구로 투여된다.
다른 실시양태에서, 단일 치료제가 독립 요법으로서 시작되고 여기에 제2 치료제가 추가된다 (즉, 단일 작용제에 의한 예비치료). 예를 들어, 조합 치료 방법은 독립 항-SMAD7 요법 또는 하나 이상의 추가의 치료에 효과적인 작용제를 이용한 독립 요법의 1번 이상의 초기 투여를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 독립 요법의 초기 투여(들) 다음에 항-SMAD7 요법 및 하나 이상의 추가의 치료에 효과적인 작용제를 이용한 조합 치료가 이어진다.
예비치료 기간은 미리 결정될 수 있다. 예를 들어, 예비치료는 조합된 추가 치료제(들)를 투여하기 약 12시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 7일, 10일, 14일, 21일, 28일, 1개월, 1.5개월, 2개월, 2.5개월, 3개월, 4개월, 5개월, 6개월, 8개월, 10개월, 12개월, 15개월, 18개월, 또는 24개월 전에 시작될 수 있다.
다른 경우에, 예비치료 기간은 환자의 예비치료에 대한 임상학적 반응에 기반한다. 예를 들어, 제2 치료제를 시작하기 전에 미리 결정된 바이오마커 수준 또는 CDAI 또는 UCAI 점수에 도달한다 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 수준 또는 점수).
특정 실시양태에서, 예비치료는 "역치이하(subthreshold)" 수준의 치료제, 즉 치료제가 단일요법으로서 사용될 때 전형적으로 주어지는 것보다 적은 용량의 투여를 포함한다. 예를 들어, 이 용량은 단일요법으로서의 작용제에 대하여 전형적으로 주어지는 용량보다 적어도 또는 대략 2%, 5%, 8%, 10%, 12%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 88%, 90%, 92%, 95%, 98% 또는 99% 더 적을 수 있다.
독립 요법을 사용하는 예비치료는 조합 요법에 대하여 환자를 감작화시킬 수 있다. 예를 들어, 동시에 또는 서로 짧은 간격을 두고 (예를 들어, 1일, 2일, 3일, 4일 또는 7일) 두 요법으로 치료를 시작하는 경우보다, 예비치료가 조합을 사용하였을 때 보다 큰 임상학적 효능을 초래할 수 있도록 한다. 특정 실시양태에서, 예비치료는, 그렇지 않았으면 조합 요법에 대하여 제한된 반응을 보이거나 또는 반응을 보이지 않았을 조합 요법에 대하여 환자를 감작화시킬 수 있다.
조합 요법이 악화된 환자 결과를 초래하는 경우에는, 환자에게 "구제" 요법이 제공될 수 있는데, 이는 면역억제제 또는 생물제 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 것)를 포함할 수 있다.
상승작용
조합 요법은 개별적인 두 치료제에 대하여 예상되는 상가적인 이점과 비교하여 효능에 있어서 상승적인 개선을 보일 수 있다. 상승작용은 본원에 기재된 임의의 투여 계획을 사용하여, 예를 들어 조합 요법이 동시에 시작되는 경우 (예를 들어, 동일한 조성물로 또는 상이한 조성물로), 또는 독립 요법 (예를 들어, 항-SMAD7 치료제 또는 추가 작용제)을 사용하는 예비치료가 이용되는 경우에 달성될 수 있다.
효능에 있어서의 상승적인 개선과 연관있는 장점은 개별 치료제 중 어느 하나 또는 둘 모두의 보다 적은 용량, 투여 빈도 감소, 또는 투여 기간 단축이 IBD를 치료하는데 사용될 수 있다는 것이다. 개별 치료제의 용량은 요법이 단일요법으로서 제공될 때 사용되는 투여량과 비교하여 적어도 또는 대략 2%, 5%, 8%, 10%, 12%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 88%, 90%, 92%, 95%, 98% 또는 99% 감소할 수 있다. 다른 경우에, 투여 빈도는 예를 들어, 단일요법을 위해 이용되었을 빈도의 약 95%, 90%, 80%, 75%, 60%, 50%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15% 또는 10%, 또는 그 미만의 빈도로 감소할 수 있다.
또한, 요법의 기간이 단축될 수 있다 (예를 들어, 적어도 또는 대략 2%, 5%, 8%, 10%, 12%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 88%, 90%, 92%, 95%, 98% 또는 99%의 단축). 투여가 치료 사이클에 따라 제공되는 경우에, 예를 들어 요법이 연속적으로 제공되지 않는 경우에, 예를 들어 적어도 또는 대략 2%, 5%, 8%, 10%, 12%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 88%, 90%, 92%, 95%, 98% 또는 99%의 정도로 "온(on)" 사이클이 단축될 수 있고 "오프(off)" 사이클이 연장될 수 있다.
일부 경우에, 관찰된 상승작용에 의해 허용되는 보다 적은 용량(들)으로의 투여는 요법이 시작될 때 동시에 시작될 수 있다. 다른 경우에는, 보다 많은 용량의 치료제, 예를 들어 상승작용과 연관없는 것이 초기에 사용될 수 있다. 이러한 경우에, 보다 많은 용량이 시간의 경과에 따라 서서히 또는 단계식으로 감소할 수 있다. 예를 들어, 용량은 미리 결정된 기간에 걸쳐서, 또는 환자가 임상학적 반응의 특정 측정값 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 것)을 달성할 때 감소할 수 있다.
보다 적은 용량을 가능하게 하는 것 이외에도, 조합 요법은 또한 개선된 임상학적 효능을 초래할 수 있다. 이는 개별 환자에게서 관찰될 수 있다. 예를 들어, 조합 요법을 받는 환자는 단일요법을 받는 동일한 환자와 비교하여 경감된 질환 증상을 보일 것이다. 별법으로, 효능 개선이 환자 집단에서도 관찰될 수 있는데, 예를 들어 환자 집단의 평균 임상학적 점수가 단일요법에 비해 개선되거나, 또는 보다 높은 비율의 환자가 목적하는 임상학적 역치 (예를 들어, 질환 관해기)를 달성한다. 예를 들어, 조합 요법은 각각의 단일요법의 반응 또는 관해율보다 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35% 또는 적어도 40% 더 높은 반응 또는 관해율을 초래할 수 있다.
일부 경우에, 항-SMAD7 요법 또는 추가 치료제에 대하여 저항성을 보이는 환자는 본 발명의 조합을 환자에게 투여하였을 때 감작화를 나타낸다. 특정 경우에, 항-SMAD7 요법-저항성 환자는 하나 이상의 추가의 치료에 효과적인 작용제의 투여를 포함하는 독립 요법보다 항-SMAD7 요법 및 하나 이상의 추가의 치료에 효과적인 작용제를 포함하는 조합 요법에 대하여 더 잘 반응한다. 다른 경우에, 하나 이상의 추가의 치료에 효과적인 작용제에 대하여 저항성을 보이는 환자는 항-SMAD7 독립 요법보다 항-SMAD7 요법 및 하나 이상의 추가의 치료에 효과적인 작용제의 조합에 대하여 더 잘 반응할 수 있다.
치료제에 대한 반응은 관련 기술분야에 공지된 임의의 수단에 의해, 예를 들어 본원에 기재된 임의의 바이오마커 또는 지표를 사용하여 결정될 수 있다. 상승작용과 연관있는 또 다른 장점은 부작용의 감소이다. 투여량이 감소할 수 있기 때문에, 임의의 약물-관련 독성이 또한 감소할 수 있다. 부작용의 발생률 또는 중증도가 또한 감소할 수 있다. 항-SMAD7 요법 또는 추가 치료제의 잠재적인 부작용은 구토, 구역, 빈혈, 기침, 소화불량, 크레아틴 포스포키나제의 증가, 기관지염, 식욕 감소, 졸림증, 아프타성 구내염, 누공, 백혈구 감소증, 복부 농양, 농양, 여드름, 직장 탈출증, 불안증, 혈액 칼슘의 감소, 혈액 칼륨의 감소, 혈액 우레아의 증가, 담석증, 치과적 문제, 우울증, 구강건조증, 이통, 근관치료 시술, 기외수축, 눈꺼풀 과민증, 위장 운동 장애, 혈변배설, 치핵, 다한증, 장 폐색, 황달, 관절 강직, 근육통, 경부통, 구강 헤르페스, 심계항진증, 소양증, 빈맥, 열 화상, 혀 장애, 치통, 상기도 울혈, 위장염, 대구성 빈혈, 치열, 요통, 흉부 불편감, 타박상, 피부 낭종, 어지럼증, 전염성 홍반, 평균 적혈구 용적의 증가, 혈소판 수의 증가, 및 서브-폐쇄 증상을 포함한다. 약물 독성, 또는 부작용의 발생 또는 중증도에서의 감소는 적어도 또는 대략 2%, 5%, 8%, 10%, 12%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 88%, 90%, 92%, 95%, 98% 또는 99%일 수 있다.
추가 치료제
본 발명의 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 다른 치료, 예를 들어 비제한적으로 스테로이드 또는 스테로이드들, 면역조정제 또는 면역조정제들, 및/또는 메살라민 다음에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 항-SMAD7 요법은 이들 치료의 임의의 조합 다음에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 요법은 단독으로의 스테로이드 또는 스테로이드들, 단독으로의 면역조정제 또는 면역조정제들, 단독으로의 메살라민, 스테로이드 또는 스테로이드들 및 면역조정제 또는 면역조정제들, 스테로이드 또는 스테로이드들 및 메살라민, 또는 면역조정제 또는 면역조정제들 및 메살라민과 함께 투여될 수 있다.
면역조정제의 예는 아자티오프린, 머캅토퓨린, 메토트렉세이트, 시클로스포린 A 및 타크롤리무스를 포함한다. 스테로이드의 예는 코르티코스테로이드, 예를 들어 프레드니손, 덱사메타손, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니손 및 부데소니드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 상이한 살리실레이트, 예를 들어 술파살라진이 메살라민 대신에 투여될 수 있다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 스테로이드(들), 면역조정제(들) 또는 메살라민은 항-SMAD7 요법과 동일한 경로에 의해 (즉, 경구로) 투여될 수 있다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 스테로이드(들), 면역조정제(들) 또는 메살라민은 항-SMAD7 요법과 상이한 경로에 의해 투여될 수 있다. 예를 들어, 스테로이드(들), 면역조정제(들) 또는 메살라민은 비경구적으로, 직장으로, 정맥내로, 국소적으로 또는 흡입 분무에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 방법, 키트 및 조성물은 항-SMAD7 치료제 이외의 치료제를 포함할 수 있다. 이러한 추가 작용제는 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 염증성 시토카인 길항제 및 면역조정제, 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 예시 작용제가 하기에서 더욱 상세히 기재된다.
일부 실시양태에서, 항-SMAD7 치료제는 임의의 추가 치료제와 조합될 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 치료제는 IBD (예를 들어, CD 또는 UC)의 치료에 적합한 임의의 추가 치료제와 조합될 수 있다. 일부 실시양태에서, 추가 치료제는 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 염증성 시토카인 길항제 및/또는 면역조정제 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 추가 치료제는 아미노살리실레이트를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 추가 치료제는 항생제를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 추가 치료제는 스테로이드를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 추가 치료제는 염증성 시토카인 길항제를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 추가 치료제는 메살라민, 부데소니드 및/또는 전신성 투여되는 코르티코스테로이드 중 하나 이상을 포함하지 않는다.
일부 실시양태에서, 추가 치료제는 항-SMAD7 치료제와 별도로 투여된다. 일부 실시양태에서, 추가 치료제가 먼저 투여되고 항-SMAD7 치료제가 두번째로 투여된다. 예를 들어, 추가 치료제는 항-SMAD7 치료제보다 1분이 넘는 시간 뒤에, 3분이 넘는 시간 뒤에, 5분이 넘는 시간 뒤에, 10분이 넘는 시간 뒤에, 15분이 넘는 시간 뒤에, 20분이 넘는 시간 뒤에, 30분이 넘는 시간 뒤에, 45분이 넘는 시간 뒤에, 1시간이 넘는 시간 뒤에, 2시간이 넘는 시간 뒤에, 3시간이 넘는 시간 뒤에, 6시간이 넘는 시간 뒤에, 9시간이 넘는 시간 뒤에, 12시간이 넘는 시간 뒤에, 18시간이 넘는 시간 뒤에 또는 24시간이 넘는 시간 뒤에 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-SMAD7 치료제가 먼저 투여되고 추가 치료제가 두번째로 투여된다. 예를 들어, 항-SMAD7 치료제는 추가 치료제보다 1분이 넘는 시간 뒤에, 3분이 넘는 시간 뒤에, 5분이 넘는 시간 뒤에, 10분이 넘는 시간 뒤에, 15분이 넘는 시간 뒤에, 20분이 넘는 시간 뒤에, 30분이 넘는 시간 뒤에, 45분이 넘는 시간 뒤에, 1시간이 넘는 시간 뒤에, 2시간이 넘는 시간 뒤에, 3시간이 넘는 시간 뒤에, 6시간이 넘는 시간 뒤에, 9시간이 넘는 시간 뒤에, 12시간이 넘는 시간 뒤에, 18시간이 넘는 시간 뒤에 또는 24시간이 넘는 시간 뒤에 투여된다.
아미노살리실레이트
특정 실시양태에서, 추가 작용제는 아미노살리실레이트이다. 아미노살리실레이트의 특정 예는 5-아미노살리실산 (5-ASA 또는 메살라민), 술파살라진, 발살라지드 및 올살라진을 포함한다. 일반적으로, 이들 화합물은 항-염증성 효과를 갖는다.
일부 실시양태에서, 아미노살리실레이트는 2-히드록시-4-(4-(5-(2-메틸-3-페닐프로프-2-에닐리덴)-4-옥소-2-술파닐리덴-1,3-티아졸리딘-3-일)부타노일아미노)벤조산, 2-메톡시-5-아미노-N-히드록시벤즈아미드, 3-메톡시살리실아민, 4-(N-(4-시클로헥실벤질)-2-(N,2,4,6-테트라메틸페닐술폰아미도)아세트아미도)-2-히드록시벤조산, 5-(7-히드록시-3-O-포스포노콜릴)아미노살리실산, 5-아미노메틸살리실산, 5-아미노살리실-글리신, 5-아미노살리실타우린, 아세틸 4-아미노살리실산, 아세틸-4-디메틸아미노살리실산, 아세틸-5-아미노살리실산, 아미노살리실산, 데르살라진, 덱스트란-5-아미노살리실산, 돌로-멘토뉴린, 입살라지드, 2-히드록시-5-(N-((2,5-디히드록시페닐)메틸)아미노)벤조산 3-페닐프로필 에스테르, 메틸 5-아미노살리실레이트, N-아세틸-5-아미노살리실산, N-글루코피라노실-5-아미노살리실산, N-메타크릴로일-5-아미노살리실산, N,N'-비스(5-아미노살리실)시스테인, NO-메살라민, NSC 74859, 올살라진-O-술페이트, 파시니아지드, 페닐 4-아미노살리실레이트, 디에틸아민 살리실레이트 또는 UR 12746을 포함한다.
일부 실시양태에서, 술파살라진과 관련된 화합물은 호모술파살라진, 메틸술파살라진, 살라조디메톡신, 살라조딘, 살리실아조이미노피리딘, 수살리모드 또는 TL-118을 포함한다.
항생제
특정 실시양태에서, 추가 치료제는 항생제이다. 일부 실시양태에서, 항생제는 페니실린, 세팔로스포린, 폴리믹신, 리팜피신, 리피암마이신 (피닥소마이신), 퀴놀론, 술폰아미드, 마크롤리드, 린코사미드, 테트라시클린, 아미노글리코시드, 시클릭 리포펩티드, 글리실시클린 또는 옥사인돌을 포함한다.
페니실린은 6-아미노 기에 부착된 측쇄를 갖는 6-아미노페니실란산을 함유하는 항생제 군이다. 일부 실시양태에서, 페니실린은 벤질페니실린, 페녹시메틸페니실린, 벤자틴 벤질페니실린, 벤자틴 페녹시메틸페니실린, 페니실린 G, 페니실린 G 프로카인, 페니실린 V, 카르페실린, 암피실린, 피밤피실린, 카르베니실린, 아목시실린, 카르인다실린, 바캄피실린, 피브메실리남, 아즐로실린, 메즐로실린, 피페라실린, 티카르실린, 탈람피실린, 술베니실린, 헤타실린, 프로피실린, 페네티실린, 디클록사실린, 클록사실린, 메티실린, 옥사실린, 플루클록사실린, 비아페넴, 아팔실린, 아스폭시실린, 시클라실린, 클레미졸 페니실린, 이미페넴, 레남피실린, 나프실린 또는 파니페넴을 포함한다.
세팔로스포린은 진균　아크레모늄(Acremonium)으로부터 최초 유래된 β-락탐 항생제 클래스이다. 일부 실시양태에서, 세팔로스포린은 세파트리진, 세파만돌, 세푸조남, 세프피미졸, 세파피린, 세팔로리딘, 세프술로딘, 세포티암, 세포라니드, 세프텍스졸, 세폭시틴, 라타목세프, 플로목세프, 세프메타졸, 세포테탄, 세프피라미드, 세팔로글리신, 세팔렉신, 세파드록실, 세프록사딘, 세페라딘, 세파클로르 또는 세포페라존을 포함한다.
폴리믹신은 긴 소수성 꼬리부를 갖는 시클릭 펩티드로 이루어진 구조를 일반적으로 갖는 항생제이다. 이것은 그의 인지질과 상호작용함으로써 박테리아 세포 막 구조를 파괴하고 그람-음성 박테리아에 대하여 선택적으로 독성을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 폴리믹신은 폴리스포린, 네오스포린, 폴리믹신 B, 폴리믹신 E, 폴리믹신 S 또는 폴리믹신 T를 포함한다.
리팜피신은 DNA-의존성 RNA 폴리머라제 활성을 억제하는, 스트렙토미세스 메디테라니(Streptomyces mediterranei)로부터 생산 유래되는 광역 항생제이다. 일부 실시양태에서, 리팜피신은 18,19-디히드로리팜피신, 21-(O-포스포릴)리팜피신, 23-(O-(베타-글루코피라노실))리팜피신, 23-(O-리보푸라노실)리팜피신, 25-데아세틸리팜피신, 25-데스아세틸리파펜틴, 3-포르밀-21-(O-포스포릴)리파마이신 SV, 3-포르밀-23-(O-(베타-글루코피라노실))리파마이신 SV, 3-포르밀-23-(O-리보푸라노실)리파마이신 SV, CGP 43371, CGS 24565, 코트리파지드, 데히드로리팜피신, DMB-리팜피신, 마이린 P, 리파마지드, 리팜피신 N-옥시드, 리파펜틴, 리파프림, 리비시클린 또는 시너돌 EH를 포함한다.
퀴놀론은 박테리아 DNA 이중나선 해체 및 복제를 억제하는 합성 항생제 클래스이다. 일부 실시양태에서, 퀴놀론은 시녹사신, 날리딕스산, 옥솔린산, 피로미드산, 피페미드산, 로속사신, 시프로플록사신, 에녹사신, 플레록사신, 로메플록사신, 나디플록사신, 노르플록사신, 오플록사신, 페플록사신, 루플록사신, 발로플록사신, 그레파플록사신, 레보플록사신, 파주플록사신, 스파르플록사신, 테마플록사신, 토수플록사신, 클리나플록사신, 자티플록사신, 제미플록사신, 목시플록사신, 시타플록사신, 트로바플록사신, 프룰리플록사신, 델라플록사신 JNJ-Q2 또는 네모녹사신을 포함한다.
항박테리아성　술폰아미드는 술폰아미드　기를 함유하는 합성 항미생물성 작용제 군이다. 일부 실시양태에서, 술폰아미드는 술파세타미드, 술파디아진, 술파디미딘, 술파푸라졸, 술피소미딘 (술파이소디미딘), 술파독신, 술파메톡사졸, 술파목솔, 술파디메톡신, 술파메톡시피리다진, 술파메톡시디아진, 술파독신 또는 술파메토피라진을 포함한다.
마크롤리드는 마크로시클릭 락톤 고리를 포함하는 화합물 군이다. 일부 실시양태에서, 마크롤리드는 아지트로마이신, 클라리트로마이신, 에리트로마이신, 텔리트로마이신, 카르보마이신 A, 조사마이신, 키타사마이신, 미데카마이신/미데카마이신 아세테이트, 올레안도마이신, 솔리트로마이신, 스피라마이신, 트롤레안도마이신 또는 타일로신(tylosin/tylocine)을 포함한다.
린코사미드는 피라노스 모이어티와 아미드-결합을 통해 연결된 피롤리딘 고리를 함유하는 화합물 클래스이다. 일부 실시양태에서, 린코사미드는 7-아지도-7-데옥시린코마이신, 7-데옥시린코마이신, 항생제 Bu 2545, 클로람린코마이신, 클린다마이신, 린코-HAP, 린코마이신 술폰, 린코마이신 술폭시드, 린코스펙틴, 스파르소린코마이신, 스토마핀, d1-N-에틸클린다마이신, 미린카마이신, 피를리마이신 또는 피를리마이신 아데닐레이트를 포함한다.
테트라시클린 항생제는 나프타센 구조를 가지며 단백질 합성 동안에 아미노 아실 tRNA 결합을 억제한다. 일부 실시양태에서, 테트라시클린 항생제는 테트라시클린, 클로르테트라시클린, 옥시테트라시클린, 데모클로시클린, 반-합성, 리메시클린, 메클로시클린, 메타시클린, 미노시클린 및 롤리테트라시클린을 포함한다.
아미노글리코시드 항생제는 단백질 합성을 억제하는 그람-음성 항박테리아성 치료제 군이다. 일부 실시양태에서, 아미노글리코시드 항생제는 겐타마이신, 카나마이신 A, 아미카신, 토브라마이신, 디베카신, 겐타마이신, 시소마이신, 네틸마이신, 네오마이신 B 및 C, 네오마이신 E (파로모마이신) 또는 스트렙토마이신을 포함한다.
시클릭 리포펩티드 항생제는 펩티드 모이어티와 연결된 지질 모이어티를 포함한다. 일부 실시양태에서, 시클릭 리포펩티드 항생제는 답토마이신 또는 바타신을 포함한다.
글리실시클린은 테트라시클린과 관련된 항생제 클래스로서 유사한 작용 메카니즘을 갖는다. 일부 실시양태에서, 글리실시클린은 티게시클린을 포함한다.
옥사졸리디논은 보통 2-옥사졸리돈 구조를 포함하는 항생제 클래스이다. 이것은 리보솜과 결합하는 tRNA를 억제함으로써 작용한다. 일부 실시양태에서, 옥사졸리디논은 리네졸리드, 포시졸리드, 토레졸리드, 테디졸리드, 라데졸리드 또는 시클로세린을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항생제는 벤조일 퍼옥시드, 리팍시민, 클로파지민, 이소니아지드, 티니다졸, 반코마이신 또는 메트로니다졸을 포함한다.
스테로이드
특정 실시양태에서, 추가 치료제는 스테로이드, 예를 들어 코르티코스테로이드이다. 코르티코스테로이드는 자연 발생하는 것 또는 합성일 수 있으며, 일반적으로 수소화된 시클로펜타노퍼히드로페난트렌 고리 시스템을 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 코르티코스테로이드는 부데소니드, 덱사메타손 (예를 들어, 21-아세테이트), 베타메타손 (예를 들어, 17-발레레이트), 틱소코르톨 피발레이트, 트리암시놀론, 트리암시놀론 (예를 들어, 아세토니드, 아세토니드 21-팔미테이트, 디아세테이트 또는 헥사세토니드), 모메타손, 암시노니드, 데소니드, 플루오시노니드, 할시노니드, 플루오코르톨론, 히드로코르티손, 플루티카손 프로피오네이트, 모메타손 푸로테이트, 프레드니손, 프레드니솔론, 베클로메타손 (예를 들어, 디프로피오네이트 (예를 들어, 일수화물)), 플루니솔리드 또는 메틸프레드니솔론 (예를 들어, 아세테이트 또는 소듐 숙시네이트)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 코르티코스테로이드는 6-히드록시덱사메타손, 9-플루오로코르티손, 클로베타솔 (예를 들어, 프로피오네이트), 클로베타손, 클로코르톨론 (예를 들어, 피발레이트), 코르티손 (예를 들어, 아세테이트), 디클로리손, 디플로라손 (예를 들어, 디아세테이트), 디플루코르톨론, 독시베타솔, 플럭몰론, 플루메타손 (예를 들어, 피발레이트), 플루오시놀론 (예를 들어, 아세토니드), 플루오로히드록시안드로스텐디온, 플루오로메톨론 (예를 들어, 아세테이트), 플루옥시메스테론, 플루프레디덴, 플루프레드니솔론, 할로메타손, 할로프레돈, 히드로코르티손, 이소플루프레돈 (예를 들어, 아세테이트), 메클로리손 또는 파라메타손 (예를 들어, 아세테이트)을 포함한다.
면역조정제
특정 실시양태에서, 추가 치료제는 면역조정제, 예를 들어 면역억제제이다. 일부 실시양태에서, 면역억제제는 퓨린 유사체 (예를 들어, 아자티오프린 및 6-머캅토퓨린), 폴산 유사체 (예를 들어, 메토트렉세이트), 피리미딘 유사체 (예를 들어, 플루오로우라실) 또는 세포독성 항생제 (예를 들어, 닥티노마이신, 미토마이신 C, 블레오마이신, 미트라마이신, 안트라시클린 및 미노시클린)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 면역억제제는 타크롤리무스, 미톡산트론, 시클로포스파미드, 미코페놀레이트 모페틸 또는 라파마이신을 포함한다.
염증성 시토카인 길항제
특정 실시양태에서, 추가 치료제는 염증성 시토카인 길항제, 예를 들어 종양 괴사 인자 (TNF) 길항제 또는 IL-10 길항제이다. 일부 실시양태에서, TNF 길항제는 인플릭시맙, 아달리무맙, 세톨리주맙 페골, 골리무맙, 에타너셉트, 펜톡시필린 또는 부프로피온을 포함한다.
치료를 모니터링하는 방법
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 치료, 질환 상태, 또는 IBD를 앓고 있는 환자의 질환 상태와 연관있는 바이오마커를 모니터링하는 것을 수반한다. 치료의 모니터링은 치료 효능 및 안전성을 평가하는 것 뿐만 아니라, 치료를 조정할 필요성이 있는지를 평가하는 것의 측면에서 유용할 수 있다. 치료의 모니터링은 또한 환자에게 투여되고 있는 또는 환자에게 투여될 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 양을 증가시켜야 하는지 또는 감소시켜야 하는지를 평가하는데 유용할 수 있다. 또한, 치료의 모니터링은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 용량을 조정, 즉 증가시켜야 하는 또는 감소시켜야 하는 양 또는 상대적인 양을 결정하는 것의 측면에서 유용할 수 있다.
염증성 장 질환을 치료하는데 있어서의 조합 요법의 효과는 임의의 적절한 접근법을 사용하여 모니터링할 수 있다. 예를 들어, 염증성 장 질환과 연관있는 것으로 공지된 임의의 바이오마커 또는 과잉 SMAD7 활성이 임의의 주관적 또는 객관적 임상학적 척도로서, 환자에서의 요법의 효과를 모니터링하는데 사용될 수 있다. 치료의 모니터링은 치료 효능 및 안전성을 평가하는 것 뿐만 아니라, 치료를 조정할 필요성이 있는지를 평가하는 것의 측면에서 유용할 수 있다. 치료의 모니터링은 또한 환자에게 투여되고 있는 또는 환자에게 투여될 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합의 양을 증가시켜야 하는지 또는 감소시켜야 하는지를 평가하거나 또는 요법이 효과적인지를 평가하는데 유용할 수 있다. 또한, 치료의 모니터링은 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합의 용량을 조정, 예를 들어 증가시켜야 하는 또는 감소시켜야 하는 양 또는 상대적인 양을 결정하는 것의 측면에서 유용할 수 있다.
모니터링, 예를 들어 IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 수준의 모니터링은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 전에, 초기 용량 동안에, 또는 초기 용량 후에 시작될 수 있다. 또한, 모니터링은 초기 용량 후에 계속될 수 있다. 예를 들어, 모니터링은 초기 용량의 투여 후에 수행될 수 있다. 모니터링은 또한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량 전에, 후속 용량 동안에, 또는 후속 용량 후에 수행될 수 있다. 모니터링은 연속적 또는 불연속적일 수 있으므로, 모니터링이 일정한 간격을 두고, 예를 들어 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 각 용량이 환자에게 투여된 후에, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 각 용량이 환자에게 투여되기 전에, 또는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 각 용량이 환자에게 투여된 전후에 수행될 수 있다.
예를 들어 IBD를 앓고 있는 환자에서의 바이오마커 또는 바이오마커 조합 (예를 들어, CRP, TNFα 및 IL8) 수준의 모니터링은 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합의 초기 용량 전에, 초기 용량 동안에, 또는 초기 용량 후에 시작될 수 있다. 또한, 모니터링은 초기 용량 후에 계속될 수 있다. 예를 들어, 모니터링은 초기 용량의 투여 후에 수행될 수 있다. 모니터링은 또한 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합의 후속 용량 전에, 후속 용량 동안에, 또는 후속 용량 후에 수행될 수 있다. 모니터링은 연속적 또는 불연속적일 수 있으므로, 모니터링이 일정한 간격을 두고, 예를 들어 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드, 추가 치료제, 또는 이들의 조합의 각 용량이 환자에게 투여된 후에, 각 용량이 환자에게 투여되기 전에, 또는 각 용량이 환자에게 투여된 전후에 수행될 수 있다.
모니터링은 하루에 여러번 (예를 들어, 하루에 2번, 3번, 4번, 약 5번 또는 약 10번), 하루에 한번, 1주에 여러번 (예를 들어, 1주에 2번, 3번, 4번, 약 5번 또는 약 10번), 1주에 한번, 1개월에 여러번 (예를 들어, 1개월에 2번, 3번, 4번, 약 5번 또는 약 10번), 또는 1개월에 한번 수행될 수 있다. 본 발명의 방법에서, 모니터링은 투여 단계와 관련하여 다양한 시점에 수행될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 모니터링은 투여 단계 직후에, 또는 투여 단계의 적어도 1일, 적어도 3일, 적어도 5일, 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 4개월, 또는 적어도 6개월 후에 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, 모니터링은 투여 단계의 약 15일 또는 약 28일 후에 수행된다.
상기에 기재된 바와 같이, 본 발명은 부분적으로 CRP 및 다른 바이오마커의 수준이 IBD를 앓고 있는 환자에서의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 관리 및 치료를 평가 및 수정하는데 사용될 수 있다는 발견에 기초한다. 따라서, 본 발명의 실시양태에서, 환자 또는 IBD를 앓고 있는 환자의 샘플에서의 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커의 수준을 알아내거나, 결정하거나, 분석하거나, 또는 비교하는 것이 유용하다. 예를 들어, 일부 경우에 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드, 항-SMAD7 요법, 추가 치료제, 또는 이들의 조합의 수준을 증가시켜야 하는지, 감소시켜야 하는지 또는 그대로 유지하여야 하는지를 결정하기 위해 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커의 정상 또는 비정상 수준에 대한 역치 값을 알아내는 것이 유용할 것이다. 본원에 기재된 방법에서, 정상 CRP 수준은 특정 값, 예를 들어 약 0.01 mg/L, 약 0.05 mg/L, 약 0.1 mg/L, 약 0.2 mg/L, 약 0.3 mg/L, 약 0.4 mg/L, 약 0.5 mg/L, 약 0.6 mg/L, 약 0.7 mg/L, 약 0.8 mg/L, 약 0.9 mg/L, 약 1.0 mg/L, 약 1.5 mg/L, 약 2.0 mg/L, 약 2.5 mg/L, 또는 약 3.0 mg/L의 값과 관련있을 수 있다. 혈청 중 TNFα의 정상 수준은 약 11 ㎍/L (예를 들어, 11.2 ㎍/L)일 수 있거나, 또는 대조 대상체에 따라 또 다른 값 (예를 들어, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14 또는 15 ㎍/L)일 수 있다. 혈청 중 IL8의 정상 수준은 약 13 ㎍/L (예를 들어, 12.9 ㎍/L)일 수 있거나, 또는 대조 대상체에 따라 또 다른 값 (예를 들어, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 16 또는 17 ㎍/L)일 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Arican et al., Mediators Inflamm. 2005:273, 2005]을 참조한다. 일부 실시양태에서, CRP 및/또는 또 다른 바이오마커의 정상 수준은 다양한 인자, 예를 들어 연령, 성별, 인종 기원, 흡연 습관, 식습관, 체질량 지수 (BMI), 및/또는 운동 습관과 관련하여 환자와 매칭되는 건강한 대조군의 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커의 중앙값 수준과 비교함으로써 결정될 수 있다.
CRP 및/또는 다른 분석물질의 수준은 환자로부터 샘플을 수득하여 결정할 수 있다. 바이오마커 또는 바이오마커 조합 (예를 들어, CRP, TNFα 및 IL8)의 수준은 환자로부터 샘플을 수득하여 결정할 수 있다. 본원에 기재된 방법에 따르면, 샘플은 조직 샘플 (예를 들어, 위장 조직 샘플) 또는 체액 샘플 (예를 들어, 타액 샘플, 대변, 소변 샘플, 또는 임의의 액체 생검체)일 수 있다. 샘플은 CRP-발현 또는 다른 바이오마커-발현 세포, 예를 들어 상피 결장 조직 세포를 함유하는 고형 조직 생검체를 포함할 수 있다. 샘플은 환자 조직 생검체, 예를 들어 점막 조직 생검체, 예를 들어 장 점막 조직 생검체로부터 수득된 샘플일 수 있다. 또한, 샘플은 혈액, 혈청 또는 혈장 샘플일 수 있다. 대상체의 혈액 샘플은 관련 기술분야에 널리 공지된 기술을 사용하여 수득될 수 있다. 혈액 샘플은 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC), RBC-제거 전혈 또는 혈액 혈청을 포함할 수 있다. PBMC는 상이한 밀도 구배 (예를 들어, 피콜(Ficoll) 밀도 구배) 원심분리 절차를 사용하여 전혈 샘플로부터 분리될 수 있다. 예를 들면, 전혈 (예를 들어, 항응고처리 전혈)이 분리 매체 상에서 층 분리되고 원심분리된다. 원심분리 단계가 종료되면, 위에서부터 아래로 하기 층이 시각적으로 관찰된다: 혈장/혈소판, PBMC, 분리 매체 및 적혈구/과립구.
샘플은 또한 시간적 파라미터에 기반하여 환자로부터 수득 또는 추출될 수 있다. 예를 들면, 샘플은 주어진 기간, 예를 들어 약 1시간, 약 6시간, 약 12시간, 약 1일, 약 3일, 약 1주 또는 약 1개월 동안 상이한 시점에, 예를 들어 약 30분마다, 약 1시간마다, 약 3시간마다, 약 6시간마다 또는 약 12시간마다 동일한 환자로부터 채취될 수 있다. 샘플은 또한 매번 식사 후에, 예를 들어 식사 직후에, 식후 약 30분에, 식후 약 1시간에, 식후 약 2시간에, 식후 약 3시간에, 식후 약 4시간에, 식후 약 5시간에 또는 식후 약 6시간에 채취될 수 있다.
치료를 모니터링하는 방법은 또한 다른 인자, 예를 들어 비제한적으로 다른 바이오마커 또는 분석물질 (예를 들어, CRP, TNFα, IL8)의 수준, CDAI 점수, 임상학적 관해기, 및 IBD 증상의 존재 또는 중증도를 모니터링하는 방법을 포함할 수 있다.
분석물질, 바이오마커 또는 바이오마커 조합 (예를 들어, CRP, TNFα 및 IL8)의 수준이 측정되는 본 발명의 실시양태에서, 다양한 방법이 바이오마커 또는 분석물질을 측정하는데 사용될 수 있다. 분석물질 또는 바이오마커, 예를 들어 IL8, TNFα 또는 CRP의 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예를 들어 비제한적으로 면역화학 및/또는 뉴클레오티드 분석을 사용하여 결정될 수 있다.
예를 들어, 부피를 알고 있는 혈액 또는 조직 샘플, 또는 혈액 또는 조직 샘플의 분획 중의 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커의 양은 면역화학에 의해 결정될 수 있다. 면역화학에 의해 바이오마커 또는 분석물질의 농도를 결정하는 방법은 웨스턴 블롯팅, ELISA 및 면역염색 방법을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 면역화학에 의해 바이오마커 또는 분석물질의 농도를 결정하는 방법은 관심 바이오마커 또는 분석물질과 결합할 수 있는 항체, 예를 들어 항-CRP 항체 또는 바이오마커에 대하여 지시되는 항체를 사용하여 수행된다. 면역화학에 의한 바이오마커 또는 CRP 농도의 분석은 예를 들어, 바이오마커 또는 CRP 단백질에 대한 적어도 하나의 항체, 예를 들어 적어도 하나의 항-CRP 항체를 필요로 한다. 1차 항체는 검출가능한 표지, 예를 들어 형광 마커로 태그부착될 수 있다. 별법으로, 검출가능한 표지, 예를 들어 형광 마커로 태그부착되었고, 1차 항체의 이소형 종류와 특이적으로 결합하는 2차 항체가 면역화학을 수행하는데 사용될 수 있다. 면역화학에 의해 바이오마커 또는 분석물질의 농도를 결정하는 방법은 또한 완충제, 차단제, 비접합 1차 항체, 및 항체 검출을 가능하게 하는 태그, 예컨대 형광 프로브 또는 기질-특이적 효소와 접합된 1차 및/또는 2차 항체의 사용을 포함할 수 있다.
뉴클레오티드 분석에 의해 바이오마커 또는 분석물질의 농도를 결정하는 방법은 바이오마커 또는 분석물질 mRNA 전사체 수준을 분석하는 방법, 예컨대 노던 블롯팅 및 폴리머라제 연쇄 반응 방법, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응 방법을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다. 뉴클레오티드 분석은 바이오마커 또는 분석물질 뉴클레오티드 서열 (예를 들어, CRP, TNFα 또는 IL8 뉴클레오티드 서열)과 결합하는 올리고뉴클레오티드 프로브 또는 폴리머라제 연쇄 반응, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응에 의해 분석물질 또는 바이오마커 뉴클레오티드 서열을 증폭시킬 수 있는 한 쌍의 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하여 수행될 수 있다. 올리고뉴클레오티드 프로브 및 올리고뉴클레오티드 프라이머는 검출가능한 태그, 예컨대 형광 태그와 연결될 수 있다. 뉴클레오티드 분석에 의한 분석물질 또는 바이오마커 농도의 결정에서, 기술자는 샘플 중에서의 특정 분석물질 또는 바이오마커의 mRNA 전사체 농도를 평가할 수 있다. 별법으로, 뉴클레오티드 분석에 의한 분석물질 또는 바이오마커 농도의 결정에서, 기술자는 분석물질 또는 바이오마커 mRNA 전사체 풍부도의 측정값에 기반하여 분석물질 또는 바이오마커 단백질 농도를 추론하기 위해 특정 분석물질 또는 바이오마커의 mRNA 전사체 풍부도와 특정 분석물질 또는 바이오마커의 단백질 풍부도 사이의 연관성을 설정할 수 있다.
청구된 발명의 방법은 시험관내에서 수행될 수 있는 단계를 포함한다. 예를 들어, 대상체에서의 CRP 및/또는 다른 바이오마커 수준을 측정하는 단계, 샘플에서의 CRP 수준 및/또는 다른 바이오마커 수준을 결정하는 단계, 및/또는 CDAI 점수를 결정하거나 또는 CDAI 점수를 결정하는데 필요한 측정값을 수집하는 단계가 시험관내에서 수행될 수 있는 것으로 고려된다. 예를 들어, 샘플에서의 CRP 및/또는 또 다른 바이오마커의 수준은 시험관내에서 샘플에 대하여 면역화학 또는 뉴클레오티드 분석을 수행함으로써 결정될 수 있다. 고려된 시험관내 분석법의 예는 시분해 형광 공명 에너지 전달 분석법 (TR-FRET; 예를 들어, 시스바이오(Cisbio) HTRF®), 표면 플라스몬 공명 분석법 (예를 들어, 비아코어(Biacore)® 표면 플라스몬 공명 어레이 시스템), 실시간 폴리머라제 연쇄 반응 (RT-PCR), 및 세포-기반 분석법 (예를 들어, 리포터 세포-기반 분석법)을 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다. 별법으로, 본 발명의 일부 실시양태에서, IBD를 앓고 있는 환자에서의 CRP 및/또는 다른 바이오마커 수준을 결정 및 분석하는 단계, 샘플에서의 CRP 및/또는 다른 바이오마커 수준을 결정 및 분석하는 단계, 및/또는 CDAI 점수를 결정하거나 또는 CDAI 점수를 결정하는데 필요한 측정값을 수집하는 단계는 생체내에서 수행될 수 있다.
1차 임상학적 종점은 예를 들어, 내과의사에 의해, 예를 들어 크론병 활동성 지표 (CDAI) 또는 궤양성 대장염 활동성 지표 (UCAI)에 기반하여 결정되는, 임상학적 관해기의 달성 또는 일정 기간 동안의 (예를 들어, 1주, 2주, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월 또는 1년) 임상학적 관해기의 유지를 포함할 수 있다. 예를 들어, 임상학적 종점은 환자에서의 <150, <125, <100, 또는 <75의 CDAI 점수 달성일 수 있고; 특정 최대 CDAI 점수를, 예를 들어 적어도 1주, 2주, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월 또는 1년 동안 초과하지 않을 것이다.
2차 임상학적 종점은 예를 들어, 내과의사에 의해, 예를 들어 CDAI 점수 또는 UCAI의 적어도 50점, 75점, 100점, 125점 또는 150점의 개선 관찰에 기반하여 결정되는, 임상학적 반응의 관찰을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 임상학적 반응은 조합 치료의 최초 투여로부터 특정 기간 이내에, 예를 들어 1주, 2주, 3주, 1개월 또는 2개월 이내에 관찰된다.
면역화학에 적합한 항-IL8 항체는 시판되고 있으며, 그 예로 에이비캠(Abcam)의 염소 항-인간 IL8 (Cat. No. ab10769), 산타 크루스(Santa Cruz)의 마우스 항-인간 IL8 (Cat. Nos. sc-73321, sc-52870 및 sc-7302), 피어스(Pierce)의 마우스 항-인간 IL8 (3IL8-H10) (Cat. No. M801), 및 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)의 마우스 항-인간 IL8 (Cat. No. WH0003576M5) 항체가 포함되나, 이들로 제한되지는 않는다.
면역화학에 적합한 항-TNFα 항체는 시판되고 있으며, 그 예로 에이비캠의 토끼 항-인간 TNFα (Cat. No. ab9635), 셀 시그널링 테크놀러지(Cell Signaling Technology)의 토끼 항-인간 TNFα (Cat. No. 3707), 에이피메트릭스 이바이오사이언스(affymetrix eBioscience)의 마우스 항-인간 TNFα (Cat. No. 14-7348-81), 및 록랜드 안티바디스 앤드 어세이스(Rockland Antibodies & Assays)의 토끼 항-인간 TNFα (Cat. No. 209-401-306S) 항체가 포함되나, 이들로 제한되지는 않는다.
면역화학에 적합한 항-CRP 항체는 시판되고 있으며, 예를 들면 산타 크루스 바이오테크놀러지의 염소 항-인간 CRP 폴리클로날 항체 (카탈로그 번호 sc-18304 및 sc-18306), 산타 크루스 바이오테크놀러지의 토끼 항-인간 CRP 폴리클로날 항체 (카탈로그 번호 sc-30047), 산타 크루스 바이오테크놀러지의 마우스 항-인간 CRP 모노클로날 항체 (카탈로그 번호 sc-70883), 시그마-알드리치의 마우스 항-인간 CRP 모노클로날 항체 (카탈로그 번호 C1688-.2ML), 에이비캠의 토끼 항-인간 모노클로날 항체 (카탈로그 번호 ab32412), 에이비캠의 마우스 항-인간 CRP 모노클로날 항체 (카탈로그 번호 ab13426), 및 써모 사이언트픽(Thermo Scientific)의 염소 항-인간 CRP 폴리클로날 항체 (카탈로그 번호 G0301-1B)가 있다.
효소-결합 면역흡착 분석법
일부 실시양태에서, CRP 농도는 효소-결합 면역흡착 분석법 (ELISA)에 의해 결정될 수 있다. 구체적으로, 샘플, 특히 혈액 샘플, 예를 들어 혈액 혈청 샘플에서의 CRP 수준이 ELISA에 의해 결정될 수 있다. ELISA에 의한 CRP 농도의 분석은 CRP 단백질에 대한 적어도 하나의 항체, 예를 들어 적어도 하나의 항-CRP 항체, 및/또는 적어도 하나의 2차 항체, 예를 들어 적어도 하나의 표지된 2차 항체를 필요로 한다. 일부 실시양태에서, 항-CRP 항체는, 예를 들어 형광 표지로 표지된다. 특정 실시양태에서, 항-CRP 항체는 표지되지 않고 1차 항체의 이소형 종류와 결합할 수 있는 2차 항체가, 예를 들어 형광 프로브 또는 특이적 기질과 반응할 수 있는 효소로 표지되어, 검출가능한 신호를 제공한다.
ELISA의 수행은 적어도 하나의 포획 항체, 적어도 하나의 검출 항체, 및/또는 적어도 하나의 효소-결합된 또는 형광 표지된 2차 항체를 필요로 한다. 예를 들어, ELISA에 의한 CRP 수준의 분석은 포획 항체로서 항-CRP 항체를 필요로 할 수 있다. 항-CRP 항체가 고체 지지체, 예컨대 폴리스티렌 미량정량판 상에 고정된다. 그 후에, 샘플, 예를 들어 혈액 혈청 샘플을 첨가하여 결합 항체와 복합체를 형성하게 둔다. 결합하지 못한 혈청 요소는 세척액으로 제거한다. 검출 항체, 예를 들어 상이한 항-CRP 항체, 예를 들어 포획 항체와 상이한 CRP 단백질 부분과 결합하는 항-CRP 항체를 첨가하여 포획된 CRP와 결합하게 둔다. 검출 항체는 검출가능한 태그, 예컨대 효소와, 직접적으로 또는 간접적으로, 예를 들어 검출 항체를 특이적으로 인식하는 2차 항체를 통해 연결된다. 전형적으로는 각각의 단계 사이에, 결합 단백질을 갖는 판을 세척 완충액, 예를 들어 순한 디터전트 용액으로 세척한다. 전형적인 ELISA 프로토콜은 또한 단백질 시약과 판의 원치않는 비-특이적 결합을 차단하기 위해 비-특이적-결합 단백질, 예컨대 소 혈청 알부민의 사용을 포함하는 하나 이상의 차단 단계를 포함한다. 최종 세척 단계 후에, 판을 적절한 효소 기질을 첨가하여 현상함으로써 가시적인 신호를 발생시키는데, 이것이 샘플에서의 CRP 단백질의 양을 나타낸다. 기질은 예를 들어, 발색 기질 또는 형광발생 기질일 수 있다. ELISA 방법, 시약 및 장비는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있으며 시판되고 있다.
ELISA에 적합한 다수의 항-CRP 항체가 시판되고 있으며, 예를 들면 에이비캠의 마우스 항-인간 CRP 모노클로날 항체 (카탈로그 번호 ab13426), 시그마-알드리치의 마우스 항-인간 CRP 모노클로날 항체 (카탈로그 번호 C1688-.2ML), 산타 크루스 바이오테크놀러지의 토끼 항-인간 CRP 폴리클로날 항체 (카탈로그 번호 sc-30047), 써모 사이언트픽의 염소 항-인간 CRP 폴리클로날 항체 (카탈로그 번호 G0301-1B), 및 산타 크루스 바이오테크놀러지의 염소 항-인간 CRP 폴리클로날 항체 (카탈로그 번호 sc-18306)가 있다.
뉴클레오티드 분석
일부 실시양태에서, CRP 농도는 "뉴클레오티드 분석"을 수행함으로써 결정될 수 있다. 뉴클레오티드 분석은 샘플, 예를 들어 혈액 샘플에서의 CRP 뉴클레오티드 전사체 수준 (예를 들어, CRP mRNA 전사체 수준)의 분석을 포함할 수 있다. CRP 전사체 수준은 노던 블롯팅, 예를 들어 정량적 노던 블롯팅; 또는 폴리머라제 연쇄 반응, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응에 의해 결정될 수 있다. 노던 블롯팅을 수행하는데 필요한 시약은 올리고뉴클레오티드 프로브, 예를 들어 검출가능한 표지와 연결된 올리고뉴클레오티드 프로브를 포함한다. 검출가능한 표지는 형광 표지 또는 특이적 기질과 반응할 수 있는 효소를 포함할 수 있다. 폴리머라제 연쇄 반응을 수행하는데 필요한 시약은 CRP mRNA 전사체와 특이적으로 결합하여 폴리머라제 연쇄 반응에 의해 CRP mRNA 전사체 수를 증폭시킬 수 있는 올리고뉴클레오티드 프라이머를 포함한다. 올리고뉴클레오티드 프라이머는 검출가능한 표지와 연결되어, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응을 가능하게 할 수 있다. 정량적 폴리머라제 연쇄 반응을 수행하는데 필요한 다른 시약은 제어 전사체 신호, 예를 들어 β-튜불린 전사체 신호를 증폭시킬 수 있는 프라이머를 비제한적으로 포함한다. 노던 블롯팅 및 폴리머라제 연쇄 반응을 수행하는데 필요한 완충제, 시약 (예를 들어, 올리고뉴클레오티드 프라이머 및 프로브), 기술 및 장비는 용이하게 입수가능하며 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다.
시험 키트
본 발명은 본원에 개시된 방법을 수행하기 위한 특정 요소를 포함하는 시험 키트를 포함한다. 시험 키트는 개시된 방법의 수행에서 편의성, 속도 및 재현가능성을 향상시킬 수 있다. 예시 키트는 대상체의 CDAI 지표 점수를 측정하는 것에 관한 상세한 설명서를 포함할 수 있다.
예시 면역화학-기반 시험 키트는 면역화학, 예를 들어 ELISA 또는 웨스턴 블롯팅에 의해 CRP 단백질 수준을 결정하기 위한 재료를 함유할 수 있다. 면역화학 키트는 예를 들어, CRP에 대한 1차 항체 및 리포터 효소, 예를 들어 호스래디시 퍼옥시다제, 또는 형광 프로브와 접합된 2차 항체를 함유할 수 있다. 다른 실시양태에서, 시험 키트는 항체 뿐만 아니라, 완충제, 시약 및 샘플에서의 CRP 농도 측정에 관한 상세한 설명서를 함유한다. 이러한 키트는 대상체의 CDAI 지표 점수를 측정하는 것에 관한 상세한 설명서를 포함할 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 시험 키트는 폴리머라제 연쇄 반응, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응, 또는 노던 블롯팅, 예를 들어 정량적 노던 블롯팅에 의해 CRP mRNA 전사체 수준을 결정하기 위한 재료를 함유할 수 있다. 노던 블롯팅에 의해 CRP mRNA 전사체 수준을 결정하기 위한 키트는 올리고뉴클레오티드 프로브, 예를 들어 검출가능한 표지와 연결된 올리고뉴클레오티드 프로브를 포함할 수 있다. 검출가능한 표지는 형광 표지 또는 특이적 기질과 반응할 수 있는 효소를 포함할 수 있다. 폴리머라제 연쇄 반응에 의해 CRP mRNA 전사체 수준을 결정하기 위한 키트는 CRP mRNA 전사체와 특이적으로 결합하여 폴리머라제 연쇄 반응에 의해 CRP mRNA 전사체 수를 증폭시킬 수 있는 올리고뉴클레오티드 프라이머를 포함할 수 있다. 올리고뉴클레오티드 프라이머는 검출가능한 표지와 연결되어, 예를 들어 정량적 폴리머라제 연쇄 반응을 가능하게 할 수 있다. 제어 전사체 신호, 예를 들어 베타 튜불린 전사체 신호를 증폭시킬 수 있는 프라이머를 비제한적으로 포함하는, 정량적 폴리머라제 연쇄 반응을 수행하는데 필요한 다른 시약이 키트에 포함될 수 있다. 다른 실시양태에서, CRP mRNA 전사체 수준을 결정하기 위한 키트는 올리고뉴클레오티드 프라이머 및/또는 올리고뉴클레오티드 프로브 뿐만 아니라, 완충제, 시약 및 샘플에서의 CRP mRNA 전사체 수준을 결정하는 것에 관한 상세한 설명서를 함유한다. 이러한 키트는 대상체의 CDAI 지표 점수를 측정하는 것에 관한 상세한 설명서를 포함할 수 있다.
환자를 선별하고 치료하는 방법
본 발명의 치료제 조합은 IBD에 대한 치료를 필요로 하거나 또는 IBD 발병 위험이 증가한 임의의 환자에게 투여될 수 있다. SMAD7이 염증성 장 장애, 예컨대 궤양성 대장염 및 크론병에서의 염증과 연관있는 것으로 공지되어 있으므로, 이러한 환자에서 SMAD7 활성을 감소시키는 것이 유익할 수 있다.
본 발명의 조성물 및 방법은 본원에 기재된 개별 치료제 중 하나 이상에 대하여 저항성을 보이는 환자를 치료하는데 사용될 수 있고, 또한 일부 경우에는 조합 요법이 환자의 단일 치료제에 대한 저항성을 극복하는데 사용될 수 있다. 특정 예로, 환자는 스테로이드-저항성일 수 있고, 항-SMAD7 치료제와 스테로이드 (예를 들어, 코르티코스테로이드)의 조합의 투여가 스테로이드 저항성을 극복하는데 사용될 수 있다. 다른 경우에, 환자는 IBD를 치료하는데 사용되는 또 다른 치료제, 예를 들어 항-SMAD7 요법에 대하여 저항성을 보인다.
특정 실시양태에서, 환자는 IBD 또는 염증과 연관있는 바이오마커의 수준이 달라진 것으로 식별된 대상체이다. 예를 들어, 환자는 정상 대조 또는 정상 대조 값에 비해 인터류킨-8 (IL-8), 종양 괴사 인자-α (TNF-α), 또는 C-반응성 단백질 (CRP)의 수준이 상승하였을 수 있다.
본원에 기재된 발명은 부분적으로 SMAD7-안티센스 요법에 대한 반응성을 보일 어떤 가능성을 나타내는 환자를 선별함으로써 환자를 선별하고 치료하는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 환자가 항-SMAD7 요법에 대한 반응성을 보일 어떤 가능성을 나타낸다면, 환자가 선별된다. 항-SMAD7 요법에 대하여 반응성을 보일 가능성은 부분적으로 IBD 환자에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 수준, 예를 들어 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 기존 수준 (즉, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량의 투여 전에 환자에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 수준) 또는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 또는 하나 이상의 후속 용량 후에 결정된 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 수준의 결정을 전제로 한다. 예를 들어, 본 발명의 일부 실시양태에서, 환자는 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 절대 또는 상대 수준, 또는 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준의 변화를 검출 또는 분석한 후에 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료 또는 추가 치료를 위해 선별될 것이다. IBD 환자에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준은 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준, 예를 들어 매칭되는 대조군의 중앙값 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준에 의해 정의되는 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준 또는 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 절대 수준과 비교될 수 있다. IBD 환자에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준은 또한 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 역치 수준, 예를 들어 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준에 비해 상승한 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 역치 수준과 비교될 수 있다. 특정 실시양태에서, 혈액 중의 CRP 수준이 3.0 mg/ml를 초과하거나, 3.5 mg/ml를 초과하거나, 또는 4.0 mg/ml를 초과한다면, 환자가 항-SMAD-7 요법을 이용한 치료를 위해 선별된다.
일부 실시양태에서, 환자에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준이 매칭되는 대조군의 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 평균, 중앙값 또는 대표값 수준에 비해 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 100% 넘게 상승하였다면, 환자가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료 또는 추가 치료를 위해 선별될 것이다.
일부 실시양태에서, 환자에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준이 매칭되는 대조군의 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 평균, 중앙값 또는 대표값 수준에 비해 2배 넘게, 3배 넘게, 4배 넘게, 5배 넘게, 6배 넘게, 7배 넘게, 8배 넘게, 9배 넘게 또는 10배 넘게 상승하였다면, 환자가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료 또는 추가 치료를 위해 선별될 것이다.
전형적으로, CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준은 농도, 예를 들어 샘플의 부피, 예를 들어 혈액 또는 조직의 부피 당 CRP, TNFα 및/또는 IL8 단백질, 펩티드 또는 RNA의 질량의 측면에서 측정될 것이다. 따라서, 초기 또는 연속 치료를 위한 환자의 선별은 환자에서의 CRP, TNFα 및/또는 IL8 수준과 관련있으므로, 예를 들어 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 높은 초기 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료에 대한 반응성을 보일 잠재성을 나타낼 수 있다. 게다가, CRP, TNFα 및/또는 IL8의 높은 수준 (즉, CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준보다 높은)은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 용량을 증가시킬 필요성이 있다는 것을 나타낼 수 있고, 반면에 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준 또는 정상 미만 수준은 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 용량을, 특히 하나 이상의 용량 다음에 감소시키거나 또는 변함없이 둘 필요성이 있다는 것을 나타낼 수 있다. 별법으로, 반복된 용량 다음에 계속해서 수준이 CRP, TNFα 및/또는 IL8의 정상 수준보다 높으면 이는 환자가 치료에 대하여 반응성을 보이지 않는다는 것을 나타낼 수 있다.
따라서, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 환자는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 및/또는 후속 용량을 투여받을 수 있다. 일부 실시양태에서, CRP 수준은 초기 용량의 투여 전에 정상 CRP 수준보다 높은 것으로 이미 공지되었다. 일부 실시양태에서, IBD 환자에서의 CRP 수준은 초기 용량의 투여 전에 결정될 것이다. 일부 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 후에, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높은 것으로 분석 및 결정된다면, 환자는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량, 예를 들어 초기 용량보다 많은 용량을 투여받을 것이다. 별법으로, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮은 것으로 분석 및 결정된다면, 환자는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량, 예를 들어 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 용량을 투여받을 수 있다.
또 다른 실시양태에서, CRP 수준이 IBD 환자에서 분석 및 결정될 수 있고, 그 후에 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량이 환자에게 투여될 수 있다. 또한, 일부 실시양태에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 후에 CRP 수준이 결정될 수 있고, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량이 환자에게 투여될 수 있다. 별법으로, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 후에 CRP 수준이 결정될 수 있고, CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면 초기 용량보다 적거나 또는 그와 동일한 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량이 환자에게 투여될 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 CRP 수준이 IBD 환자에서 분석 및 결정될 수 있고; CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량이 환자에게 투여될 수 있고; CRP 수준이 초기 투여 후에 분석되고; 초기 용량 투여 후의 CRP 수준이 초기 용량 투여 전의 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량이 환자에게 투여되는 방법을 제공한다. 별법으로, 초기 용량 투여 후의 CRP 수준이 초기 용량 투여 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 초기 용량보다 많은 후속 용량이 환자에게 투여되거나 치료가 종료된다.
따라서, 고려된 발명은 CRP 수준의 분석 및 결정 및 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여에 대한 환자 반응성에 기반하여 다수의 치료 시나리오를 설명함으로써 환자에서 IBD를 치료 및 관리하는 상이한 방법을 제공한다.
예를 들어, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여 후에 환자에서의 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 치료가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 동일한 용량으로 또는 증가한 용량으로 계속될 수 있다.
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 투여 후에 환자에서의 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 치료가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 동일한 용량으로 또는 감소한 용량으로 계속될 수 있다.
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 및 하나 이상의 후속 용량 후에 CRP 수준이 계속해서 정상 CRP 수준보다 높거나 또는 낮다면, 치료가 종료될 수 있다. 예를 들면, 치료는 환자가 관해기에 있거나, 환자가 치료에 대하여 반응성을 보이지 않거나, 또는 환자가 최대 허용 용량을 투여받았기 때문에 종료될 수 있다.
일부 경우에, 환자에서의 CRP 수준이 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 하나 이상의 용량 후에 감소한다면, 이는 환자가 치료에 대하여 반응성을 보인다는 것을 나타낼 수 있다. 이들 환자에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량이 투여될 수 있지만, 단지 선행 용량(들)과 비교하여 동일한 용량 또는 보다 적은 용량이다.
일부 경우에, CRP 수준이 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 초기 용량 또는 하나 이상의 후속 용량 후에 안정적이거나 또는 증가한다면, 이는 환자가 치료에 대하여 반응성을 보이지 않는다는 것을 나타낼 수 있다. 이들 환자에서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 후속 용량이 투여될 수 있지만, 단지 선행 용량(들)과 비교하여 보다 많은 용량이다. 별법으로, 예를 들어 용량이 최대 허용 용량에 근접하였다면, 치료가 중단될 수 있다.
일부 경우에, 환자가 CRP 수준 이외의 임상학적 인자에 의해 결정된 임상학적 관해를 달성하지만, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 투여 후의 CRP 수준이 본질적으로 변함없이 유지되거나 또는 정상보다 높다면, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료가 종료될 수 있다. 이러한 경우에, CRP 수준은 IBD의 진행을 나타내는 것이 아닐 수 있으며, 다른 요인, 예를 들어 또 다른 염증성 질환으로 인해 상승한 것일 수 있다.
실시예
본 발명은 하기 실시예에 의해 추가로 예시된다. 실시예는 단지 예시 목적으로 제공된 것이며, 어떤 식으로든 본 발명의 범주 또는 내용을 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
실시예 1: CD 환자에 대한 항- SMAD7 안티센스 치료의 안전성 및 효능을 평가하기 위한 2상 임상 실험의 설계
2상 임상 실험을 수행하여 CD 환자에 대한 항-SMAD7 안티센스 치료의 안전성 및 효능을 평가하였다. 실험에 적격한 남성 또는 여성 CD 환자는 18-75세이고 등록 전 적어도 1주 동안 220 내지 400 범위의 CDAI 점수를 가졌다. 실험에 등록된 환자는 말단 회장 및/또는 우결장에 염증성 병변을 가지며 스테로이드-의존성 및/또는 스테로이드-저항성이었다. 임상 실험 동안에 공동의 메살라민 및 스테로이드 요법을 그러한 약물을 이미 투여받은 환자에서 안정한 용량으로 유지하였다. 적격한 환자는, 면역조정제 요법을 연구의 치료 상을 시작하기 적어도 6개월 전에 시작하였고 환자가 실험에 등록되기 전 90일 동안 항-TNF-α 항체 또는 다른 생물제 치료를 받지 않았다면, 면역조정제 (예를 들어, 아자티오프린, 머캅토퓨린, 메토트렉세이트) 복용을 계속하는 것에 대한 옵션이 있었다.
실험에서 평가하는 항-SMAD7 요법은 항-SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 몽게르센이 말단 회장 및 우결장에 국소적 표적 전달되도록 하는 장용성 코팅을 포함하는 경구 투여 형태였다. 몽게르센의 경구 투여 형태의 활성 화합물이 말단 회장 및 우결장에 방출되었기 때문에, 위 및/또는 근위 소장 및/또는 횡행 결장 및/또는 좌결장에 병변을 갖는 환자는 실험에서 제외되었다. 환자가 협착, 누공 또는 항문주위 질환을 갖거나 또는 장외 징후를 나타낸다면, 이들 환자 역시 제외되었다. 환자가 활동성 감염 또는 최근 감염을 앓았거나 또는 악성종양의 병력을 갖는다면, 이들 환자 역시 제외되었다. 환자가 직장결장절제술 또는 장 절제술을 진행하여 단장 증후군이 발생하였거나, 또는 심전도에서 임상학적으로 유의한 이상이 나타나거나 또는 실험실 검사에서 임상학적으로 유의한 이상이 나타났다면, 이들 환자 역시 제외되었다. 임신 여성 또는 모유수유 여성 역시 제외되었다. 실험에 등록된 여성 환자는 연구 기간 동안에 2가지 형태의 피임법을 사용하도록 요구되었다.
연구는 다기관, 무작위 배정, 위약-대조, 이중-맹검, 2상 임상 실험으로서 수행하였다. 서면 고지 동의서를 제공한 후에, 환자는 적격성 및 예비치료 측정값을 결정하기 위해 9일 스크리닝 상에 진입하였다. 지역 임상연구 심사 위원회 및 윤리 위원회가 임상 실험 프로토콜을 승인한 후에 이탈리아 및 독일의 17개의 기관에서 적격성에 대하여 환자를 스크리닝하였다. 실험에 적격한 것으로 결정된 환자를 적극적인 치료군 및 위약군으로 무작위 배정하였다. 실험은 1개의 위약군 및 다양한 용량의 몽게르센 (10 mg/일, 40 mg/일 및 160 mg/일)을 투여받는 3개의 실험군을 포함하였다. 환자는 층화 또는 블록 할당 없이 독립적인, 컴퓨터-작성 무작위 배정 스케줄을 사용하여 1:1:1:1의 비율로 이들 군에 배정되었다. 전임상, 독성 및 1상 연구에 의해 생성된 데이터에 기반하여 활성 약물의 3가지 용량을 선택하였다. 4개의 환자군은 2주 (즉, 1-14일) 동안 위약 또는 몽게르센의 3가지 용량 중 어느 하나에 의한 치료를 받았다. 2주 치료 후에, 환자를 15일째, 28일째, 및 84일째에 (즉, 치료를 중단한지 1일 후, 치료를 중단한지 2주 후, 또는 치료를 중단한지 10주 후) 평가하였다.
연구에서 실험에 등록된 IBD 환자에서의 몽게르센 치료의 효능을 결정하기 위해 상이한 측정값을 사용하였다. 15일째에 달성된 150 미만의 CDAI 점수가 적어도 2주 동안 유지되는 것으로서 정의되는, 관해율을 환자에게서 평가하였다. 15일 또는 28일째에 (즉, 약물 치료를 중단한지 각각 1일 또는 2주 후) 평가된 적어도 100 또는 70점의 환자 CDAI 점수의 감소로서 정의되는, 임상학적 반응률을 또한 평가하였다. 각각의 시점에서 (즉, 15, 28 및 84일) 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자 수를 또한 평가하였다. 환자 CDAI 점수는 치료 전 및 15, 28 및 84일의 전 주 동안에 측정하였다. 치료가 종료될 때 정상 CRP 수준 (즉, 3.0 mg/리터 미만의 CRP 농도)을 달성한 환자의 백분율을 또한 결정하였다. 마지막으로, 치료 전에 CRP 수준이 상승하였고 (즉, 3.0 mg/리터 초과) 또한 임상학적 관해를 달성한 환자의 백분율을 평가하였다.
질환 악화 (≥70의 CDAI 점수 상승)를 겪는 환자는 2주 치료 기간 후에 생물제 및/또는 면역억제성 약물을 이용한 구제 요법을 받을 수 있었다. 6명의 환자 (위약군에서 2명, 10 mg/일의 몽게르센 군에서 1명, 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서 3명)가 28일 후에 질환의 악화로 인해 생물제 및/또는 면역억제성 약물을 이용한 구제 요법을 받았고, 이들은 2차 종점의 분석에서 무반응자 (CDAI >150)로 간주되었다. 2주 치료 기간 후에 임상학적 관해기에 있는 환자 (14일째 및 28일째의 두 시점 모두에서 CDAI <150)는 스테로이드를 줄일 수 있었다.
몽게르센 치료의 안전성을 또한 평가하였다. 임상학적, 생화학적 및 혈액학적 변수의 변화를 1일, 7일, 15일, 28일 및 84일째에 평가하였다. ELISA를 사용하여 환자에서의 보체 활성화를 모니터링하였다. 실험 중에 발생한 이상 반응 (AE)의 사례를 중증도에 대하여 평가하였고, 각 AE의 원인 (즉, 연구 약물 또는 절차)을 결정하였다. AE의 분석은 무작위 배정된 166명의 환자를 모두 포함하였다.
임상 실험 파라미터를 설정하고 임상 실험에서 얻은 데이터의 통계 분석을 수행할 때 하기 고려사항이 고려되었다. 샘플 규모는 0.1의 알파 오류 및 0.1의 베타 오류를 갖는 단측(one-sided) 시험 체계를 사용하여 결정되었고, 전향적 1차 가설은 몽게르센의 최고 용량으로 14일간 치료하면 14일의 위약 치료보다 높은 비율의 환자에서 임상학적 관해기가 유도될 것이라는 것이다. 최고 용량의 몽게르센을 투여받는 군은 50%의 관해율을 가질 것이고 위약군은 20%의 관해율을 가질 것이라고 추정되었다. 90%의 검정력으로 각각의 군 사이의 관해율에 있어서 유의한 차이를 검출하기 위해서는 각각의 군에 40명의 환자가 필요할 것이라고 추정되었다. 모든 효능 분석은 치료의도(intention-to-treat) 원칙에 따라 배정된 치료의 적어도 하나의 용량을 투여받은 모든 무작위 배정 환자에 대하여 수행하였다. 15일 및/또는 28일에 결측 1차 종점 데이터를 갖는 환자는 탈락자로 분류하였다. 관해율 및 반응률을 피어슨의 카이-스퀘어 검정(Pearson's chi-square test) 또는 피셔의 정확 검정(Fisher's exact test)을 사용하여 비교하였다. 각각의 3개의 몽게르센 군 및 위약군 사이에 기준선 CRP 수준으로부터의 변화가 일어난 환자의 비율을 또한 기재하였다.
188명의 환자를 임상 실험 참여에 대하여 스크리닝하였고 166명이 등록에 적격한 것으로 간주되었다 (도 1). 적격한 환자를 10 mg/일 (N=41), 40 mg/일 (N=40) 또는 160 mg/일 (N=43)의 용량으로 몽게르센을 투여받거나, 또는 위약 (N=42)을 투여받도록 무작위 배정하였다. 각각의 치료군 환자의 인구통계학적 및 임상학적 특징을 평가하고 유사하게 기록하였다 (표 1).
<표 1>
기준선 인구통계학적 및 임상학적 특징
Figure pct00002
이러한 166명의 환자군 중에서, 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 1명의 환자, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 1명의 환자, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 3명의 환자, 및 위약군에서는 1명의 환자가 약물 투여 프로토콜을 고수하지 않았다 (도 1). 실험을 시작한 166명의 환자 중 160명의 환자 (96.38%)가 2주 치료를 정확하게 완료하였고, 138명의 환자 (83.1%; 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 39명의 환자, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 37명의 환자, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 32명의 환자, 및 위약군에서는 30명의 환자)가 84일의 추적연구 기간을 포함하는 전체 프로토콜을 완료하였다 (도 1). 일부 환자는 AE, 질환 악화, 환자의 취소 요청, 환자의 불참, 또는 연구원의 결정 때문에 추적연구 기간 중에 실험이 취소되었다.
기준선에서의 중앙값 스테로이드 복용량에 있어서, 군 사이에 통계적으로 유의한 차이는 검출되지 않았다 (표 1). 위약을 투여받는 1명의 환자 및 10 mg/일의 몽게르센을 투여받는 1명이 25 mg/일의 프레드니손을 복용하고 있었고, 40 mg/일의 몽게르센을 투여받는 1명의 환자가 5 mg/일의 프레드니손을 복용하고 있었다. 위약을 투여받는 8명의 환자 (중앙값 용량: 6 mg/일), 10 mg/일의 몽게르센을 투여받는 6명의 환자 (중앙값 용량: 6 mg/일), 40 mg/일의 몽게르센을 투여받는 12명의 환자 (중앙값 용량: 6 mg/일), 및 160 mg/일의 몽게르센을 투여받는 9명의 환자 (중앙값 용량: 7.5 mg/일)가 부데소니드를 복용하였다. 84일째에, 스테로이드-부재 관해기에 도달하는 환자의 백분율은 위약 (1/9, 11%, P=0.04)에서보다 160 mg/일의 몽게르센 (6/9, 67%)에서 유의하게 높았고, 10 mg/일 (3/7, 43%) 또는 40 mg/일 (6/13, 46%)과 위약 사이에는 차이가 없었다.
실시예 2: 항- SMAD7 요법 치료는 IBD 환자에서 관해기를 유도한다
몽게르센을 이용한 치료가 CD 환자에서 관해기를 초래하였는지를 결정하기 위해, 2주 치료 기간이 종료된 후에 CDAI 점수를 평가하였다. 15일째 (약물 치료를 중단한지 1일 후) 및 28일째 (약물 치료를 중단한지 2주 후)의 두 시점 모두에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자는 관해기에 진입한 것으로 간주되었다. 위약군에서는, 42명의 환자 중 4명 (9.5%)이 관해기에 진입하였다. 이와 달리, 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 각각 40명의 환자 중 22명 (55%) 및 43명의 환자 중 28명 (65.1%)이 관해기에 진입하였다. 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 41명의 환자 중 5명 (12.2%)이 관해기에 진입하였다 (도 2). 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서의 관해율이 10 mg/일의 몽게르센 (두 군 모두 P<0.0001) 및 위약군 (두 군 모두 P<0.0001)보다 유의하게 높았다. 160 mg/일의 몽게르센 군과 40 mg/일의 몽게르센 군 사이에 또는 10 mg/일의 몽게르센과 위약군 사이에는 관해율의 유의한 차이가 없었다. 이러한 결과는 항-SMAD7 안티센스 요법의 투여가 IBD 환자에서 임상학적 관해기를 유도하는데 효과적이라는 것을 입증하였다.
항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 보다 연장된 기간 동안 150 미만의 CDAI 점수를 유지하는지를 결정하기 위해, 또한 CDAI 점수를 각각의 군에서 실험의 15일, 28일 및 84일째에 분석하였다. 15일째에, 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군, 및 위약군에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율은 각각 67.4%, 57.5%, 14.6% 및 21.4%였다 (도 3A). 15일째에, 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 퍼센트는 10 mg/일의 몽게르센 군 (두 군 모두 P<0.0001) 및 위약군 (각각 P<0.0001 및 P=0.0008)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다.
28일째에, 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군, 및 위약군에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율은 각각 72.1%, 70%, 29.3% 및 14.3%였다 (도 3B). 28일째에, 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 퍼센트는 10 mg/일의 몽게르센 군 (각각 P<0.0001 및 P=0.0002) 및 위약군 (두 군 모두 P<0.0001)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다.
84일째에, 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군, 및 위약군에서 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 백분율은 각각 67.4%, 62.5%, 29.3% 및 21.4%였다 (도 3C). 84일째에, 150 미만의 CDAI 점수를 갖는 환자의 퍼센트는 10 mg/일의 몽게르센 군 (각각 P=0.0005 및 P=0.003) 및 위약군 (두 군 모두 P<0.0001)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다. 이러한 결과는 항-SMAD7 요법을 이용한 IBD 환자의 치료가 약물 치료를 종료한 후 적어도 70일까지 환자에서 150 미만의 CDAI 점수를 유도하는데 효과적이라는 것을 입증하였다.
위약 환자의 9.5% (p<0001)와 비교하여, 160 mg/일의 몽게르센을 투여받는 환자 중 58.1%가 15일째에 관해를 달성하였고, 이는 4주 (28일) 및 12주 (84일)의 두 시점 모두에서 유지되었다.
표 2는 각각의 치료군에서 실험의 기준선, 15일, 28일 및 84일에서의 환자의 CDAI 점수의 중앙값 및 값의 범위를 제공한다. 표 2에 나타나 있는 바와 같이, 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센-치료군에서의 CDAI 점수의 중앙값 변화는 각각의 시점에서 위약군과 비교하여 유의하게 컸다. 임의의 시점에서 10 mg/일의 몽게르센 군과 위약군 사이에는 통계적 차이가 관찰되지 않았다.
<표 2>
기준선 및 15일, 28일 및 84일에서의 크론병 활동성 지표 (CDAI) 점수
Figure pct00003
데이터는 중앙값 (범위)를 나타낸다.
모든 P값은 위약군과 비교하여 각각의 몽게르센 군에서의 기준선으로부터의 변화에 대한 것이다. †P<0.01.
실시예 3: 항- SMAD7 요법 치료는 IBD 환자에서 스테로이드-부재 관해기를 유 도한다
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 요법을 이용한 치료가 스테로이드-부재 관해를 촉진할 수 있었는지를 결정하기 위해, 실험이 종료될 때 스테로이드-부재 임상학적 관해를 달성한 환자 수를 분석하였다. 실험을 시작할 때, 위약군에서는 42명의 개체 중 9명 (21.4%), 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 41명의 개체 중 7명 (17.1%), 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 40명의 개체 중 13명 (32.5%), 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 43명의 개체 중 9명 (20.9%)이 스테로이드를 적극적으로 복용하고 있었다. 실험을 시작할 때는 이러한 군 사이에 중앙값 스테로이드 복용량에 있어서 유의한 차이가 존재하지 않았다. 실험 84일째에, 위약군의 동일한 개체군과 비교하여, 160 mg/일의 군에서 실험을 시작할 때 스테로이드를 복용하고 있었던 개체 중 유의하게 증가한 비율이 스테로이드-부재 관해를 달성하였다 (P=0.04; 160 mg/일, 6명/9명의 개체 (67%)가 스테로이드-부재 관해를 달성하였음 vs. 위약, 1명/9명의 개체가 스테로이드-부재 관해를 달성하였음). 스테로이드-부재 관해기는 0 mg의 프레드니손 섭취에 상당하는 임상학적 관해기 (상기에 정의되었음)로서 정의되었다. 위약군과 다른 몽게르센 군 사이에는 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 이러한 결과는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료가 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료 전에 스테로이드를 섭취하였던 IBD를 앓는 개체의 코호트에서 스테로이드-부재 관해를 초래한다는 것을 입증하였다.
실시예 4: 항- SMAD7 요법 치료는 IBD 환자에서 임상학적 반응을 유도한다
항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 CD 환자에서 임상학적 반응을 초래하는데 효과적이었는지를 결정하기 위해, 2주 치료 기간이 종료된 후에 (즉, 15일째에) 환자 CDAI 점수를 평가하였다. 임상학적 반응은 기준선 (즉, 약물 치료 전)과 비교하여 15일째에 CDAI 점수의 100점 감소로서 정의되었다. 상기 기준에 따른 임상학적 반응이 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 65.1%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 45%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 22%의 환자에서, 또한 위약군에서는 26.2%의 환자에서 보고되었다 (도 4A). 100점의 CDAI 감소를 겪는 환자의 백분율은 10 mg/일의 몽게르센 군과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다 (각각 P<0.0001 및 P=0.027). 100점의 임상학적 반응을 겪는 환자의 백분율은 또한 위약군과 비교하여 160 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다 (P=0.0003).
추가적으로, 환자 CDAI 점수를 임상 실험 28일째에 (치료를 종료한지 2주 후) 평가하였다. 이 경우에 임상학적 반응은 기준선 (즉, 약물 치료 전)과 비교하여 28일째에 CDAI 점수의 100점 감소로서 정의되었다. 상기 기준에 따른 임상학적 반응이 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 72.1%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 57.5%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 36.6%의 환자에서, 또한 위약군에서는 16.7%의 환자에서 보고되었다 (도 4B). 100점의 CDAI 감소를 겪는 환자의 백분율은 위약군과 비교하여 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다 (도 4B; 각각 위약에 대하여 각각의 군에서 160 mg/일 군의 P<0.0001, 40 mg/일 군의 P=0.0001, 및 10 mg/일 군의 P=0.039). 이러한 결과는 약물 치료를 중단한 직후 (즉, 15일째) 및 약물 치료를 중단한지 2주 후 (즉, 28일째)의 두 시점 모두에서, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 IBD 환자에서 기준선과 비교하여 적어도 100점의 CDAI 감소로서 정의되는, 유의한 임상학적 관해율을 유도한다는 것을 입증하였다.
마찬가지로, 환자 CDAI 점수를 임상 실험 84일째에 (치료를 종료한지 10주 후) 평가하였다. 이 경우에 임상학적 반응은 기준선 (즉, 약물 치료 전)과 비교하여 84일째에 CDAI 점수의 100점 감소로서 정의되었다. 상기 기준에 따른 임상학적 반응이 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 72.1%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 70.0%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 36.6%의 환자에서, 또한 위약군에서는 26.2%의 환자에서 보고되었다 (도 4C). 100점의 CDAI 감소를 겪는 환자의 백분율은 위약군과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다. 이러한 결과는 약물 치료를 중단한 직후 (예를 들어, 15일째) 및 약물 치료를 중단한지 2주 후 (예를 들어, 28일째)의 두 시점 모두에서, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 IBD 환자에서 기준선과 비교하여 적어도 100점의 CDAI 감소로서 정의되는, 유의한 임상학적 관해율을 유도한다는 것을 입증하였다. 이러한 결과는 약물 치료를 중단한 직후 (예를 들어, 15일째) 및 약물 치료를 중단한지 2주 및 10주 후 (예를 들어, 28일 및 84일째)의 두 시점 모두에서, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 IBD 환자에서 기준선과 비교하여 적어도 100점의 CDAI 감소로서 정의되는, 유의한 임상학적 관해율을 유도한다는 것을 입증하였다.
기준선과 비교하여 70점의 환자 CDAI 점수 감소로서 정의되는 임상학적 반응을 또한 임상 실험 15일 및 28일째에 평가하였다. 15일째에 70점의 CDAI 감소가 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 81.4%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 72.5%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 34.1%의 환자에서, 또한 위약군에서는 31%의 환자에서 보고되었다 (도 5A). 15일째에 70점의 CDAI 점수 감소를 겪는 환자의 백분율은 10 mg/일 몽게르센 (각각 P<0.0001 및 P=0.0005) 및 위약군 (각각 P<0.0001 및 P=0.0002)과 비교하여 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다. 28일째에 70점의 CDAI 감소가 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 76.7%의 환자에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 80%의 환자에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서 48.8%의 환자에서, 또한 위약군에서는 26.2%의 환자에서 보고되었다 (도 5B). 28일째에 70점의 CDAI 점수 감소를 겪는 환자의 백분율은 위약군 (각각 P<0.0001, P<0.0001, 및 P=0.033)과 비교하여 160 mg/일, 40 mg/일 및 10 mg/일의 몽게르센 군에서 유의하게 높았다. 이러한 결과는 약물 치료를 중단한 직후 (즉, 15일째) 및 약물 치료를 중단한지 2주 후 (즉, 28일째)의 두 시점 모두에서, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 IBD 환자에서 기준선과 비교하여 적어도 70점의 CDAI 감소로서 정의되는, 유의한 임상학적 관해율을 유도한다는 것을 입증하였다.
실시예 5: 항- SMAD7 요법 치료는 IBD 환자에서 감소한 CRP 수준을 초래한다
항-SMAD7 요법이 순환 CRP 수준의 변화를 유도할 수 있었는지를 결정하기 위해, 실험에 등록된 환자에서의 CRP 수준을 항-SMAD7 요법 치료를 시작하기 전 및 치료 후 (즉, 15일째)의 두 시점 모두에서 평가하였다. 몽게르센 치료를 시작하기 전의 환자의 스크리닝으로 166명의 환자 중 102명 (61.4%)이 상승한 CRP 수준 (즉, 3.0 mg/리터 초과)을 갖는다는 것이 입증되었다. 구체적으로, 상승한 CRP 수준이 위약군에서는 42명의 환자 중 25명 (59.5%)에서, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 41명의 환자 중 27명 (65.9%)에서, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 40명의 환자 중 22명 (55%)에서, 또한 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 43명의 환자 중 28명 (65.1%)에서 관찰되었다 (도 6A). 15일째의 환자 평가에 의해 CRP의 정상 수준 (즉, <3 mg/리터)을 갖는 환자의 백분율이 위약군에서는 4%, 및 10 mg/일, 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 각각 22%, 18.18% 및 17.9%라는 것이 입증되었다 (도 6B). 표 3은 각각의 치료군에서, 기준선에서 상승한 CRP 수준 (>3 mg/L)을 갖는 환자에서의 중앙값 CRP 수준 및 CRP 수준의 범위를 보여준다. 기준선에서 상승한 CRP 수준을 갖는 환자 중에서는, 위약도 몽게르센 치료도 기준선과 비교하여 15일, 28일 또는 84일째에 CRP의 중앙값을 유의하게 감소시키지 않았다.
<표 3>
기준선에서 상승한 CRP 수준을 갖는 위약 및 몽게르센-치료 환자에서의 기준선 및 15일, 28일 및 84일째의 CRP 수준
Figure pct00004
데이터는 중앙값 (범위)를 나타낸다.
이러한 결과는 IBD 환자의 항-SMAD7 요법을 이용한 치료가, 심지어 낮은 농도에서도, 위약 치료와 비교하여 정상 CRP 수준을 갖는 환자 백분율의 증가를 초래한다는 것을 나타냈다.
추가적으로, 항-SMAD7 요법을 이용한 치료가 초기에 상승한 CRP 수준 (즉, 3.0 mg/리터 초과)을 갖는 환자에서 관해기를 초래하였는지를 결정하기 위해 개별 환자의 상승한 기준선 CRP 수준 및 관해기 데이터를 분석하였다. 15일째에, 상승한 기준선 CRP를 갖는 환자 중 관해환자 (<150의 CDAI 점수 및 정상 CRP에 의해 정의됨)의 비율은 위약군, 10 mg/일, 40 mg/일 및 160mg/일의 몽게르센 군에서 각각 1/6 (16.7%), 0/4 (0%), 2/11 (18.2%) 및 5/20 (25%)였다. 이 분석은 또한 기준선에서 상승한 CRP 수준을 갖는 환자 중에서, 160 mg/일 및 40 mg/일의 몽게르센 군의 15일 및 28일째의 관해율 (각각 67.9% 및 45.5%)이 위약군의 동일한 카테고리의 환자에서의 관해율보다 유의하게 높다는 것 (12%; 각각 P<0.0001 및 P=0.01; 도 6)을 보여준다. 160 mg/일의 몽게르센 군과 40 mg/일의 몽게르센 군 사이에 또는 10 mg/일의 몽게르센 군 (11.1%)과 위약군 사이에는 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 이러한 결과는 상승한 CRP 수준을 갖는 IBD 환자의 항-SMAD7 치료가 위약 치료와 비교하여 관해의 유의한 증가를 초래한다는 것을 입증하였다. 추가로 이러한 결과는 상승한 CRP 수준이, 환자가 항-SMAD7 요법을 이용한 치료에 반응할 것인지 또는 반응할 것 같은지를 결정하기 위한 유용한 기준이라는 것을 입증하였다.
실시예 6: 항- SMAD7 요법 치료는 IL8 및 TNFα 혈장 바이오마커 발현을 감소시킨다
SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료가 IBD와 연관있는 다른 바이오마커에서의 변화를 초래하는지를 결정하기 위해, 환자에서의 IL8 및 TNFα 수준을 실험의 기준선, 15일 및 28일째에 ELISA에 의해 평가하였다. 표 4에 나타나 있는 바와 같이, IL8 및 TNFα의 혈장 농도는 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서 기준선과 비교하여 15일 및 28일째에 유의하게 감소하였다 (40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서 기준선과 비교하여 15일 및 28일의 P<0.05). 위약 또는 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 이러한 결과는 2주 이하 동안의 IBD 환자의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용한 치료가 IL8 및 TNFα의 유의하게 감소한 수준을 초래한다는 것을 입증하였다.
<표 4>
10 mg/일, 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센을 이용한 치료 전후의 크론병 환자의 혈장 샘플에서의 시토카인 수준
Figure pct00005
데이터는 평균 (SD)를 나타낸다.
기준선에 대한 †P<0.05.
실시예 7: 항- SMAD7 요법 치료는 IBD 환자에게서 내약성을 보인다
몽게르센 치료가 안전성 문제 또는 AE와 연관있는지를 결정하기 위해, 이러한 문제 및 반응의 사례를 실험 동안에 추적하였다. 9가지의 심각한 이상 반응 (SAE)이 6명의 환자에게서 기록되었다. 2가지의 SAE가 위약군의 1명의 환자에게서 보고되었고, 4가지의 SAE가 10 mg/일의 몽게르센 군의 3명의 환자에게서 보고되었으며, 2가지의 SAE가 40 mg/일의 몽게르센 군의 1명의 환자에게서 보고되었으며, 1가지의 SAE가 160 mg/일의 몽게르센 군의 1명의 환자에게서 보고되었다 (표 5). 2가지의 SAE는 내과의사에 따르면 치료와 무관한 것으로 간주되었다. 대부분의 SAE는 CD와 연관있는 합병증 또는 증상으로 인한 병원 입원과 양립되었다. 160 mg의 몽게르센이 주어진 군의 1명의 환자는 요리 중에 다리에 열 화상을 입었다. 임상 실험 동안에 환자가 사망하지 않았다.
<표 5>
연구 중에 기록된 심각한 이상 반응
Figure pct00006
데이터는 적어도 하나의 심각한 이상 반응 (SAE)을 갖는 환자 (pts) 수 (%) 및 SAE의 총 발생건수를 나타낸다.
이러한 군 사이의 차이는 통계적으로 유의하지 않았다.
위약군의 28명의 환자 및 10 mg/일, 40 mg/일 및 160 mg/일의 몽게르센 군의 각각 20명, 25명 및 21명의 환자가 치료 중에 또는 치료 후에 AE를 겼었다 (표 6). 종합하면, 200가지의 AE가 임상 실험 동안에 보고되었다. 이러한 AE는 위약군에서는 64가지의 AE, 10 mg/일의 몽게르센 군에서는 39가지의 AE, 40 mg/일의 몽게르센 군에서는 50가지, 및 160 mg/일의 몽게르센 군에서는 47가지를 포함하였다. 대부분의 AE가 경증이었고 연구원에 따르면 치료와 무관한 것으로 간주되었다. 연구 중에 어떤 환자도 활력 징후의 변화가 기록되지 않았다. 실험 중에 환자에게서 혈청 보체 인자의 증가가 관찰되지 않았다. 이러한 결과는, 종합적으로 항-SMAD7 요법을 이용한 IBD 치료가 AE와 연관없고 환자에게서 강한 내약성을 보인다는 것을 입증하였다.
<표 6>
단일군(single arm)에서 >5%의 환자에 의해 보고된 이상 반응
Figure pct00007
데이터는 적어도 하나의 이상 반응 (AE)을 갖는 환자 수 (%) 및 AE의 총 발생건수를 나타낸다.
실시예 8: 기준선 CRP 수준과 연관성이 있는 임상학적 관해기
도 8에 도시된 바와 같이, 기준선 CRP 수준과 15일 및 4주째의 임상학적 관해 사이의 관계를 연구하였다. 3 mg/L 미만의 CRP 수준을 갖는 환자는 15일 후에 위약 또는 10 mg/일의 몽게르센 (각각 17.6% 및 14.3%)을 투여받는 환자와 비교하여, 40 mg/일 또는 160 mg/일의 몽게르센 (각각 66.7% 및 60.0%)을 투여받을 때 증가한 관해율을 보였다. 3 mg/L 이상의 CRP 수준을 가지며 40 mg/일 또는 160 mg/일의 몽게르센 (각각 50.0% 및 71.4%)을 투여받는 환자의 관해율은 위약 또는 10 mg/일의 몽게르센 (각각 24.0% 및 14.8%)을 투여받는 환자보다 높았다.
4주 후에, 3 mg/L 미만의 CRP 수준을 가지며 위약 또는 10, 40 또는 160 mg/일의 몽게르센을 투여받는 환자는 각각 17.6%, 35.7%, 72.2% 및 66.7%의 관해율을 보였다. 3 mg/L 이상의 CRP 수준을 가지며 위약 또는 10, 40 또는 160 mg/일의 몽게르센을 투여받는 환자는 각각 12.0%, 25.9%, 68.2% 및 75.0%의 관해율을 보였다.
등가물
본 발명은 그의 본질적인 특징으로부터 출발하여 다른 구체적인 형태로 구체화될 수 있다. 따라서, 상기의 실시양태는 본원에 기재된 발명을 제한하기보다는 예시하는 것으로 간주되어야 한다. 본 발명의 범주는 상기의 상세한 설명에 의해서가 아니라 첨부된 청구범위에 의해 지시되고, 청구범위와 등가의 의미 및 범위 내에 포함되는 모든 변화를 본원에 포괄시키고자 한다.
본 발명의 구체적인 실시양태가 논의되었지만, 상기 명세서는 제한하는 것이 아닌 예시이다. 본 발명의 다수의 변화가 본 명세서를 정독하였을 때 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 자명해질 것이다. 본 발명의 전체 범주는 등가물의 전체 범주를 포함하는 청구범위 및 그러한 변화를 포함하는 본 명세서를 참조하여 결정되어야 한다.
달리 나타내지 않는 한, 본 명세서 및 청구범위에 사용되는 성분의 양, 반응 조건 등을 표현하는 모든 수치는 모든 경우에 용어 "약"에 의해 수식되고 있는 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 반대로 나타내지 않는 한, 본 명세서 및 첨부된 청구범위에 상술된 수치 파라미터는 본 발명이 달성하고자 하는 목적하는 성질에 따라 달라질 수 있는 근사값이다.
서열
SEQ ID NO:2 (NM_005904.3의 코딩 서열 CDS (288-1568); 호모 사피엔스 SMAD 패밀리 멤버 7 (SMAD7), 전사 변이체 1, mRNA)
Figure pct00008
Figure pct00009
SEQ ID NO: 8 (CRP　C-반응성 단백질, 펜트락신-관련 [호모 사피엔스　(인간)]
Figure pct00010
Figure pct00011
SEQ ID NO: 9 (ISIS 329993 (ISIS- CRP Rx (포스포로티오에이트):
Figure pct00012
SEQ ID NO: 10 (ISIS 353491):
Figure pct00013
SEQ ID NO: 11 (ISIS 353512):
Figure pct00014
SEQ ID NO:12 (cDNA 인간 C-반응성 단백질 유전자)
Figure pct00015
Figure pct00016
SEQ ID NO:13 (아미노산 인간 C-반응성 단백질 유전자)
Figure pct00017
참고문헌 인용
본원에 인용된 모든 특허, 공개 특허 출원, 웹사이트 및 다른 참고문헌의 전체 내용은 명백하게 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> NOGRA PHARMA LIMITED <120> METHODS FOR TREATING INFLAMMATORY BOWEL DISEASE <130> PT828PCT <140> PCT/EP2015/060269 <141> 2015-05-08 <150> 62/065,609 <151> 2014-10-17 <150> 62/065,606 <151> 2014-10-17 <150> 61/991,326 <151> 2014-05-09 <160> 13 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <220> <221> modified_base <222> (3)..(3) <223> 5-methyl-2'-deoxycytidine <220> <221> modified_base <222> (16)..(16) <223> 5-methyl-2'-deoxycytidine <400> 1 gtcgcccctt ctccccgcag c 21 <210> 2 <211> 3088 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 2 cggagagccg cgcagggcgc gggccgcgcg gggtggggca gccggagcgc aggcccccga 60 tccccggcgg gcgcccccgg gcccccgcgc gcgccccggc ctccgggaga ctggcgcatg 120 ccacggagcg cccctcgggc cgccgccgct cctgcccggg cccctgctgc tgctgctgtc 180 gcctgcgcct gctgccccaa ctcggcgccc gacttcttca tggtgtgcgg aggtcatgtt 240 cgctccttag caggcaaacg acttttctcc tcgcctcctc gccccgcatg ttcaggacca 300 aacgatctgc gctcgtccgg cgtctctgga ggagccgtgc gcccggcggc gaggacgagg 360 aggagggcgc agggggaggt ggaggaggag gcgagctgcg gggagaaggg gcgacggaca 420 gccgagcgca tggggccggt ggcggcggcc cgggcagggc tggatgctgc ctgggcaagg 480 cggtgcgagg tgccaaaggt caccaccatc cccacccgcc agccgcgggc gccggcgcgg 540 ccgggggcgc cgaggcggat ctgaaggcgc tcacgcactc ggtgctcaag aaactgaagg 600 agcggcagct ggagctgctg ctccaggccg tggagtcccg cggcgggacg cgcaccgcgt 660 gcctcctgct gcccggccgc ctggactgca ggctgggccc gggggcgccc gccggcgcgc 720 agcctgcgca gccgccctcg tcctactcgc tccccctcct gctgtgcaaa gtgttcaggt 780 ggccggatct caggcattcc tcggaagtca agaggctgtg ttgctgtgaa tcttacggga 840 agatcaaccc cgagctggtg tgctgcaacc cccatcacct tagccgactc tgcgaactag 900 agtctccccc ccctccttac tccagatacc cgatggattt tctcaaacca actgcagact 960 gtccagatgc tgtgccttcc tccgctgaaa cagggggaac gaattatctg gcccctgggg 1020 ggctttcaga ttcccaactt cttctggagc ctggggatcg gtcacactgg tgcgtggtgg 1080 catactggga ggagaagacg agagtgggga ggctctactg tgtccaggag ccctctctgg 1140 atatcttcta tgatctacct caggggaatg gcttttgcct cggacagctc aattcggaca 1200 acaagagtca gctggtgcag aaggtgcgga gcaaaatcgg ctgcggcatc cagctgacgc 1260 gggaggtgga tggtgtgtgg gtgtacaacc gcagcagtta ccccatcttc atcaagtccg 1320 ccacactgga caacccggac tccaggacgc tgttggtaca caaggtgttc cccggtttct 1380 ccatcaaggc tttcgactac gagaaggcgt acagcctgca gcggcccaat gaccacgagt 1440 ttatgcagca gccgtggacg ggctttaccg tgcagatcag ctttgtgaag ggctggggcc 1500 agtgctacac ccgccagttc atcagcagct gcccgtgctg gctagaggtc atcttcaaca 1560 gccggtagcc gcgtgcggag gggacagagc gtgagctgag caggccacac ttcaaactac 1620 tttgctgcta atattttcct cctgagtgct tgcttttcat gcaaactctt tggtcgtttt 1680 ttttttgttt gttggttggt tttcttcttc tcgtcctcgt ttgtgttctg ttttgtttcg 1740 ctctttgaga aatagcttat gaaaagaatt gttgggggtt tttttggaag aaggggcagg 1800 tatgatcggc aggacaccct gataggaaga ggggaagcag aaatccaagc accaccaaac 1860 acagtgtatg aaggggggcg gtcatcattt cacttgtcag gagtgtgtgt gagtgtgagt 1920 gtgcggctgt gtgtgcacgc gtgtgcagga gcggcagatg gggagacaac gtgctctttg 1980 ttttgtgtct cttatggatg tccccagcag agaggtttgc agtcccaagc ggtgtctctc 2040 ctgccccttg gacacgctca gtggggcaga ggcagtacct gggcaagctg gcggctgggg 2100 tcccagcagc tgccaggagc acggctctgt ccccagcctg ggaaagcccc tgcccctcct 2160 ctccctcatc aaggacacgg gcctgtccac aggcttctga gcagcgagcc tgctagtggc 2220 cgaaccagaa ccaattattt tcatccttgt cttattccct tcctgccagc ccctgccatt 2280 gtagcgtctt tcttttttgg ccatctgctc ctggatctcc ctgagatggg cttcccaagg 2340 gctgccgggg cagccccctc acagtattgc tcacccagtg ccctctcccc tcagcctctc 2400 ccctgcctgc cctggtgaca tcaggttttt cccggactta gaaaaccagc tcagcactgc 2460 ctgctcccat cctgtgtgtt aagctctgct attaggccag caagcgggga tgtccctggg 2520 agggacatgc ttagcagtcc ccttccctcc aagaaggatt tggtccgtca taacccaagg 2580 taccatccta ggctgacacc taactcttct ttcatttctt ctacaactca tacactcgta 2640 tgatacttcg acactgttct tagctcaatg agcatgttta gactttaaca taagctattt 2700 ttctaactac aaaggtttaa atgaacaaga gaagcattct cattggaaat ttagcattgt 2760 agtgctttga gagagaaagg actcctgaaa aaaaacctga gatttattaa agaaaaaaat 2820 gtattttatg ttatatataa atatattatt acttgtaaat ataaagacgt tttataagca 2880 tcattattta tgtattgtgc aatgtgtata aacaagaaaa ataaagaaaa gatgcacttt 2940 gctttaatat aaatgcaaat aacaaatgcc aaattaaaaa agataaacac aagattggtg 3000 tttttttcta tgggtgttat cacctagctg aatgtttttc taaaggagtt tatgttccat 3060 taaacgattt ttaaaatgta cacttgaa 3088 <210> 3 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 3 gtcgcccctt ctccccgcag c 21 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <220> <221> modified_base <222> (3)..(3) <223> 5-methyl-2'-deoxycytidine <220> <221> modified_base <222> (16)..(16) <223> 5-methyl-2'-deoxycytidine <400> 4 gtcgcccctt ctccccgcag 20 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <220> <221> modified_base <222> (3)..(3) <223> Nitrogenous base selected from the group consisting of cytosine and 5-methylcytosine or a 2'-O-methyl nucleoside comprising a cytosine nucleobase <220> <221> modified_base <222> (4)..(4) <223> Nitrogenous base selected from the group consisting of guanine and 5-methylguanine or a 2'-O-methyl nucleoside comprising a guanine nucleobase <220> <221> modified_base <222> (16)..(16) <223> Nitrogenous base selected from the group consisting of cytosine and 5-methylcytosine or a 2'-O-methyl nucleoside comprising a cytosine nucleobase <220> <221> modified_base <222> (17)..(17) <223> Nitrogenous base selected from the group consisting of guanine and 5-methylguanine or a 2'-O-methyl nucleoside comprising a guanine nucleobase <220> <221> source <223> /note="See specification as filed for detailed description of substitutions and preferred embodiments" <400> 5 gtcgcccctt ctccccgcag 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <220> <221> modified_base <222> (1)..(1) <223> 2'-deoxyguanosine methylphosphonate <220> <221> modified_base <222> (3)..(3) <223> 5-methyl 2'-deoxycytidine <220> <221> modified_base <222> (16)..(16) <223> 5-methyl 2'-deoxycytidine <220> <221> modified_base <222> (20)..(20) <223> 2'-deoxyguanosine methylphosphonate <400> 6 gtcgcccctt ctccccgcag 20 <210> 7 <211> 21 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 7 gctgcgggga gaaggggcga c 21 <210> 8 <211> 2321 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 8 aggcaggagg aggtagctct aaggcaagag atctaggact tctagcccct gaactttcag 60 ccgaatacat cttttccaaa ggagtgaatt caggcccttg tatcactggc agcaggacgt 120 gaccatggag aagctgttgt gtttcttggt cttgaccagc ctctctcatg cttttggcca 180 gacaggtaag ggccacccca ggctatggga gagatttgat ctgaggtatg ggggtggggt 240 ctaagactgc atgaacagtc tcaaaaaaaa aaaaaaaaga ctgtatgaac agaacagtgg 300 agcatccttc atggtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tggtgtgtaa 360 ctggagaagg ggtcagtctg tttctcaatc ttaaattcta tacgtaagtg aggggataga 420 tctgtgtgat ctgagaaacc tctcacattt gcttgttttt ctggctcaca gacatgtcga 480 ggaaggcttt tgtgtttccc aaagagtcgg atacttccta tgtatccctc aaagcaccgt 540 taacgaagcc tctcaaagcc ttcactgtgt gcctccactt ctacacggaa ctgtcctcga 600 cccgtgggta cagtattttc tcgtatgcca ccaagagaca agacaatgag attctcatat 660 tttggtctaa ggatatagga tacagtttta cagtgggtgg gtctgaaata ttattcgagg 720 ttcctgaagt cacagtagct ccagtacaca tttgtacaag ctgggagtcc gcctcaggga 780 tcgtggagtt ctgggtagat gggaagccca gggtgaggaa gagtctgaag aagggataca 840 ctgtgggggc agaagcaagc atcatcttgg ggcaggagca ggattccttc ggtgggaact 900 ttgaaggaag ccagtccctg gtgggagaca ttggaaatgt gaacatgtgg gactttgtgc 960 tgtcaccaga tgagattaac accatctatc ttggcgggcc cttcagtcct aatgtcctga 1020 actggcgggc actgaagtat gaagtgcaag gcgaagtgtt caccaaaccc cagctgtggc 1080 cctgaggccc agctgtgggt cctgaaggta cctcccggtt ttttacaccg catgggcccc 1140 acgtctctgt ctctggtacc tcccgctttt ttacactgca tggttcccac gtctctgtct 1200 ctgggccttt gttcccctat atgcattgca ggcctgctcc accctcctca gcgcctgaga 1260 atggaggtaa agtgtctggt ctgggagctc gttaactatg ctgggaaacg gtccaaaaga 1320 atcagaattt gaggtgtttt gttttcattt ttatttcaag ttggacagat cttggagata 1380 atttcttacc tcacatagat gagaaaacta acacccagaa aggagaaatg atgttataaa 1440 aaactcataa ggcaagagct gagaaggaag cgctgatctt ctatttaatt ccccacccat 1500 gacccccaga aagcaggagg gcattgccca cattcacagg gctcttcagt ctcagaatca 1560 ggacactggc caggtgtctg gtttgggtcc agagtgctca tcatcatgtc atagaactgc 1620 tgggcccagg tctcctgaaa tgggaagccc agcaatacca cgcagtccct ccactttctc 1680 aaagcacact ggaaaggcca ttagaattgc cccagcagag cagatctgct ttttttccag 1740 agcaaaatga agcactaggt ataaatatgt tgttactgcc aagaacttaa atgactggtt 1800 tttgtttgct tgcagtgctt tcttaatttt atggctcttc tgggaaactc ctcccctttt 1860 ccacacgaac cttgtggggc tgtgaattct ttcttcatcc ccgcattccc aatataccca 1920 ggccacaaga gtggacgtga accacagggt gtcctgtcag aggagcccat ctcccatctc 1980 cccagctccc tatctggagg atagttggat agttacgtgt tcctagcagg accaactaca 2040 gtcttcccaa ggattgagtt atggactttg ggagtgagac atcttcttgc tgctggattt 2100 ccaagctgag aggacgtgaa cctgggacca ccagtagcca tcttgtttgc cacatggaga 2160 gagactgtga ggacagaagc caaactggaa gtggaggagc caagggattg acaaacaaca 2220 gagccttgac cacgtggagt ctctgaatca gccttgtctg gaaccagatc tacacctgga 2280 ctgcccaggt ctataagcca ataaagcccc tgtttacttg a 2321 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 9 agcatagtta acgagctccc 20 <210> 10 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 10 gcactctgga cccaaaccag 20 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 11 tcccatttca ggagacctgg 20 <210> 12 <211> 2438 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 12 aataaataac tcacattgat ttctctggtc tgaaataatt ttgcttcccc tcttcccgaa 60 gctctgacac ctgccccaac aagcaatgtt ggaaaattat ttacatagtg gcgcaaactc 120 ccttactgct ttggatataa atccaggcag gaggaggtag ctctaaggca agagatctag 180 gacttctagc ccctgaactt tcagccgaat acatcttttc caaaggagtg aattcaggcc 240 cttgtatcac tggcagcagg acgtgaccat ggagaagctg ttgtgtttct tggtcttgac 300 cagcctctct catgcttttg gccagacagg taagggccac cccaggctat gggagagttt 360 tgatctgagg tatgggggtg gggtctaaga ctgcatgaac agtctcaaaa aaaaaaaaaa 420 aagactgtat gaacagaaca gtggagcatc cttcatggtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg 480 tgtgtgtggt gtgtaactgg agaaggggtc agtctgtttc tcaatcttaa attctatacg 540 taagtgaggg gatagatctg tgtgatctga gaaacctctc acatttgctt gtttttctgg 600 ctcacagaca tgtcgaggaa ggcttttgtg tttcccaaag agtcggatac ttcctatgta 660 tccctcaaag caccgttaac gaagcctctc aaagccttca ctgtgtgcct ccacttctac 720 acggaactgt cctcgacccg tgggtacagt attttctcgt atgccaccaa gagacaagac 780 aatgagattc tcatattttg gtctaaggat ataggataca gttttacagt gggtgggtct 840 gaaatattat tcgaggttcc tgaagtcaca gtagctccag tacacatttg tacaagctgg 900 gagtccgcct cagggatcgt ggagttctgg gtagatggga agcccagggt gaggaagagt 960 ctgaagaagg gatacactgt gggggcagaa gcaagcatca tcttggggca ggagcaggat 1020 tccttcggtg ggaactttga aggaagccag tccctagtgg gagacattgg aaatgtgaac 1080 atgtgggact ttgtgctgtc accagatgag attaacacca tctatcttgg cgggcccttc 1140 agtcctaatg tcctgaactg gcgggcactg aagtatgaag tgcaaggcga agtgttcacc 1200 aaaccccagc tgtggccctg aggcccagct gtgggtcctg aaggtacctc ccggtttttt 1260 acaccgcatg ggccccacgt ctctgtctct ggtacctccc gcttttttac actgcatggt 1320 tcccacgtct ctgtctctgg gcctttgttc ccctatatgc attgaggcct gctccaccct 1380 cctcagcgcc tgagaatgga ggtaaagtgt ctggtctggg agctcgttaa ctatgctggg 1440 aaatggtcca aaagaatcag aatttgaggt gttttgtttt catttttatt tcaagttgga 1500 cagatcttgg agataatttc ttacctcaca tagatgagaa aactaacacc cagaaaggag 1560 aaatgatgtt ataaaaaact cataaggcaa gagctgagaa ggaagcgctg atcttctatt 1620 taattcccca cccatgaccc ccagaaagca ggagcattgc ccacattcac agggctcttc 1680 agtatcagaa tcaggacact ggccaggtgt ctggtttggg tccagagtgc tcatcatcat 1740 gtcatagaac tgctgggccc aggtctcctg aaatgggaag cccagcaata ccacgcagtc 1800 cctccacttt ctcaaagcac actggaaagg ccattagaat tgccccagca gagcagatct 1860 gctttttttc cagagcaaaa tgaagcacta ggtataaata tgttgttact gccaagaact 1920 taaatgactg gtttttgttt gcttgcagtg ctttcttaat tttatggctc ttctgggaaa 1980 ctcctcccct tttccacacg aaccttgtgg ggctgtgaat tctttcttca tccccgcatt 2040 cccaatatac ccaggccaca agagtggacg tgaaccacag ggtgtcctgt cagaggagcc 2100 catctcccat ctccccagct ccctatctgg aggatagttg gataggtacg tgttcctagc 2160 aggaccaact acagtcttcc caaggattga gttatggact ttgggagtga gacatcttct 2220 tgctgctgga tttccaagct gagaggacgt gaacctggga ccaccagtag ccatcttgtt 2280 tgccacatgg agagagactg tgaggacaga agccaaactg gaagtggagg agccaaggga 2340 ttgacaaaca acagagcctt gaccacgtgg agtctctgaa tcagccttgt ctggaaccag 2400 atctacacct ggactgccca ggtctataag ccaataaa 2438 <210> 13 <211> 224 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Met Glu Lys Leu Leu Cys Phe Leu Val Leu Thr Ser Leu Ser His Ala 1 5 10 15 Phe Gly Gln Thr Asp Met Ser Arg Lys Ala Phe Val Phe Pro Lys Glu 20 25 30 Ser Asp Thr Ser Tyr Val Ser Leu Lys Ala Pro Leu Thr Lys Pro Leu 35 40 45 Lys Ala Phe Thr Val Cys Leu His Phe Tyr Thr Glu Leu Ser Ser Thr 50 55 60 Arg Gly Tyr Ser Ile Phe Ser Tyr Ala Thr Lys Arg Gln Asp Asn Glu 65 70 75 80 Ile Leu Ile Phe Trp Ser Lys Asp Ile Gly Tyr Ser Phe Thr Val Gly 85 90 95 Gly Ser Glu Ile Leu Phe Glu Val Pro Glu Val Thr Val Ala Pro Val 100 105 110 His Ile Cys Thr Ser Trp Glu Ser Ala Ser Gly Ile Val Glu Phe Trp 115 120 125 Val Asp Gly Lys Pro Arg Val Arg Lys Ser Leu Lys Lys Gly Tyr Thr 130 135 140 Val Gly Ala Glu Ala Ser Ile Ile Leu Gly Gln Glu Gln Asp Ser Phe 145 150 155 160 Gly Gly Asn Phe Glu Gly Ser Gln Ser Leu Val Gly Asp Ile Gly Asn 165 170 175 Val Asn Met Trp Asp Phe Val Leu Ser Pro Asp Glu Ile Asn Thr Ile 180 185 190 Tyr Leu Gly Gly Pro Phe Ser Pro Asn Val Leu Asn Trp Arg Ala Leu 195 200 205 Lys Tyr Glu Val Gln Gly Glu Val Phe Thr Lys Pro Gln Leu Trp Pro 210 215 220

Claims (32)

  1. (a) SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하고;
    (b) 환자에서의 C-반응성 단백질 (CRP) 수준을 분석하고;
    (c) CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것
    을 포함하는, 염증성 장 질환 (IBD)을 앓고 있는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법.
  2. (a) 환자에서의 CRP 수준을 분석하고;
    (b) CRP 수준이 역치 CRP 수준보다 높다면, SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드의 초기 용량을 환자에게 투여하는 것
    을 포함하는, 염증성 장 질환 (IBD)을 앓고 있는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 정상 CRP 수준이 약 0.1 mg/L, 0.2 mg/L, 0.3 mg/L, 0.4 mg/L, 0.5 mg/L, 0.6 mg/L, 0.7 mg/L, 0.8 mg/L, 0.9 mg/L 또는 1.0 mg/L인 방법.
  4. 제2항에 있어서, 역치 CRP 수준이 0.5 mg/L를 초과하거나, 1.0 mg/L를 초과하거나, 1.5 mg/L를 초과하거나, 2.0 mg/L를 초과하거나, 2.5 mg/L를 초과하거나, 3.0 mg/L를 초과하거나, 3.5 mg/L를 초과하거나, 4.0 mg/L를 초과하거나, 4.5 mg/L를 초과하거나, 또는 5.0 mg/L를 초과하는 것인 방법.
  5. 제2항 또는 제4항에 있어서, 역치 CRP 수준이 3.0 mg/L인 방법.
  6. 제2항에 있어서,
    (c) 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고;
    (d) CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 높다면, 초기 용량보다 많거나 또는 그와 동일한 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 CRP 수준이 정상 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 그보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것
    을 추가로 포함하는 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 초기 용량이 적어도 10 mg/일, 적어도 20 mg/일, 적어도 30 mg/일, 적어도 40 mg/일, 적어도 50 mg/일, 적어도 60 mg/일, 적어도 70 mg/일, 적어도 80 mg/일 또는 적어도 90 mg/일인 방법.
  8. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 초기 용량이 10 mg/일, 40 mg/일, 80 mg/일 또는 160 mg/일인 방법.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, CRP 수준이 정상 수준보다 높다면, 후속 용량이 초기 용량보다 적어도 약 10 mg/일, 적어도 약 20 mg/일, 적어도 약 30 mg/일, 적어도 약 40 mg/일, 적어도 약 50 mg/일, 적어도 약 60 mg/일, 적어도 약 70 mg/일, 적어도 약 80 mg/일, 적어도 약 90 mg/일, 적어도 약 100 mg/일, 적어도 약 110 mg/일, 적어도 약 120 mg/일, 적어도 약 130 mg/일, 적어도 약 140 mg/일, 적어도 약 150 mg/일 또는 적어도 약 160 mg/일 더 많은 것인 방법.
  10. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, CRP 수준이 정상 수준보다 낮다면, 후속 용량이 초기 용량보다 적어도 약 10 mg/일, 적어도 약 20 mg/일, 적어도 약 30 mg/일, 적어도 약 40 mg/일, 적어도 약 50 mg/일, 적어도 약 60 mg/일, 적어도 약 70 mg/일 또는 적어도 약 80 mg/일 더 적은 것인 방법.
  11. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 초기 용량이 약 10 mg/일 내지 100 mg/일이고 후속 용량이 약 30 mg/일 내지 200 mg/일인 방법.
  12. 제2항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    (c) 상기 투여 단계 후에 환자에서의 CRP 수준을 분석하고;
    (d) 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준보다 낮다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 많은 후속 용량을 환자에게 투여하거나, 또는 치료를 종료하는 것
    을 추가로 포함하는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 환자가 임상학적 관해기에 있고 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 변함없거나 또는 증가하였다면, 치료를 종료하는 것인 방법.
  14. 제12항에 있어서, 상기 투여 단계 후의 CRP 수준이 상기 투여 단계 전의 CRP 수준과 비교하여 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50% 또는 적어도 70% 감소하였다면, 초기 용량과 동일하거나 또는 초기 용량보다 적은 후속 용량을 환자에게 투여하는 것인 방법.
  15. 제12항에 있어서, CRP 수준의 감소가 환자가 치료에 반응한다는 것을 나타내는 것인 방법.
  16. 제15항에 있어서, 치료에 대한 환자의 반응이 CDAI의 기준선으로부터의 적어도 70점의 감소, SES-CD의 기준선으로부터의 적어도 4점의 감소, 또는 PRO-2의 기준선으로부터의 적어도 4점의 감소에 의해 나타나는 것인 방법.
  17. 제12항에 있어서, CRP 수준의 감소가 환자가 관해기에 있다는 것을 나타내는 것인 방법.
  18. 제17항에 있어서, 관해기가 <150의 CDAI, ≤2의 SES-CD 점수, 또는 ≤8의 PRO-2 점수에 의해 나타나는 것인 방법.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, IBD가 크론병 (CD) 또는 궤양성 대장염 (UC)인 방법.
  20. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, SMAD7 안티센스-올리고뉴클레오티드가 IBD를 앓고 있는 환자에게 경구로 투여되는 것인 방법.
  21. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 (SEQ ID NO: 2)의 영역 108-128을 표적으로 하는 것인 방법.
  22. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 인간 SMAD7 (SEQ ID NO: 2)의 뉴클레오티드 403, 233, 294, 295, 296, 298, 299 또는 533을 표적으로 하는 것인 방법.
  23. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 SEQ ID NO: 3 (5'-GTCGCCCCTTCTCCCCGCAGC-3')의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법.
  24. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAG-3' (SEQ ID NO: 4)를 포함하는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 방법.
  25. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 하기 서열: 5'-GTXGCCCCTTCTCCCXGCAGC-3' (SEQ ID NO: 1)를 포함하는 SMAD7에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드 포스포로티오에이트이고, 여기서 X는 5-메틸-2'-데옥시시티딘이고 뉴클레오시드 사이의 연결은 포스포로티오에이트 연결인 방법.
  26. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드가 CAS RN(Chemical Abstracts Service Registry Number) 1443994-98-6 또는 CAS RN 1443994-46-4에 따른 안티센스 올리고뉴클레오티드인 방법.
  27. SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함하는 작용제 및 하나 이상의 추가 치료제의 조합을 환자에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 작용제는 치료 유효량으로 투여되며 조합은 (a) 몽게르센 및 메살라민, (b) 몽게르센 및 부데소니드, (c) 몽게르센, 메살라민 및 부데소니드, 또는 (d) 몽게르센 및 전신성 투여되는 코르티코스테로이드로 이루어지지 않는 것인, 염증성 장 질환 (IBD)을 앓고 있는 환자에서 IBD를 치료 또는 관리하는 방법.
  28. 제27항에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제가 아미노살리실레이트, 항생제, 스테로이드, 항-염증성 시토카인 작용제 및 면역조정제로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법.
  29. 제27항 또는 제28항에 있어서, 환자가 IBD 요법에 대하여 저항성을 보이는 것인 방법.
  30. 제27항 또는 제28항에 있어서, 환자가 스테로이드-저항성인 방법.
  31. 제27항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, (a) 투여되는 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 양이 독립 요법으로서 투여될 때의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드의 치료 유효량보다 적거나, 또는 (b) 투여되는 하나 이상의 추가 작용제의 양이 독립 요법으로서 투여될 때의 하나 이상의 추가 작용제의 치료 유효량보다 적은 것인 방법.
  32. 제27항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 치료 유효 용량의 단독으로의 SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 치료 유효 용량의 단독으로의 하나 이상의 추가 치료제 중 어느 하나가, SMAD7 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 하나 이상의 추가 치료제 중 다른 하나가 투여되기 전 제1의 기간 동안 환자에게 투여되는 것인 방법.
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