KR20160029869A - 질병의 발달을 모니터링하고 치료의 효율을 평가하기 위한 새로운 바이오마커 - Google Patents

질병의 발달을 모니터링하고 치료의 효율을 평가하기 위한 새로운 바이오마커 Download PDF

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시르파 잘카넨
마르코 살미
마르쿠 잘카넨
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파론 파머수티컬스 오와이
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Abstract

본 발명은, 환자의 질병의 발달을 모니터링하거나, 환자의 시토킨 또는 스타틴 치료의 효율을 평가하기 위한 방법에 관한 것이고, 상기 방법에서 상기 환자로부터 유도된 조직액 중 CD73은 바이오마커로 사용된다. 본 발명은 또한 개체의 조직액으로부터 유도된 샘플에서 CD73 단백질을 결정하는 방법에 관한 것이다.

Description

질병의 발달을 모니터링하고 치료의 효율을 평가하기 위한 새로운 바이오마커{A NEW BIOMARKER FOR MONITORING DEVELOPMENT OF DISEASES AND ASSESSING THE EFFICACY OF THERAPIES}
본 발명은, 질병의 발달을 모니터링하거나 치료의 효율을 평가하기 위한 바이오마커(biomarker)로서 조직액에 CD73을 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 조직액에서 CD73 단백질을 결정하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 배경을 설명하기 위해 본원에 사용되는 공보 및 기타 자료와, 특히 실행에 관한 추가 상세를 제공하기 위한 자료들이 참조로 포함되어 있다.
CD73은 5'-엑토누클레오디다아제 활성을 갖는 세포 표면 효소이다. 이는 단일인산화 푸린 누클레오티드의 상응하는 누클레오시드로의 전환을 매개한다. 예를 들어, AMP의 아데노신으로의 탈인산화는 CD73에 의해 촉매된다. CD73은 또한 혈장 중에 가용성 형태로 존재하고, 가용성 효소는 막 결합 형태와 같은 효소 활성을 갖는다.
아데노신은 내피 세포 투과성의 생리학적 조절제 중 하나이며 [1, 2}, 따라서 급성 폐 손상, 전신성 염증 반응 증후군, 호흡 곤란 증후군 및 고소성 질병과 같은 많은 질병의 발병 기전 중에 수반될 수 있다. 내피 투과성의 변화는 또한 염증, 외상 및 암에서 일어난다. CD73은 정상 상태, 저산소증 및 인공호흡기 유도 페 손상에서 아데노신 매개 메커니즘을 통해 내피 투과성을 조절한다 [3-7].
CD73은 특정 시토킨에 의해 유도된다. 가장 중요하게는, 인터페논 알파 및 베타는 사람에게서 CD73의 발현 및 활성을 증가시키는 것으로 보고되었다 (8, WO 2004/084933, 11). 이들 시토킨은 또한 상이한 질병을 치료하기 위해 임상적으로 사용된다. 인터페론 알파는 예를 들어 간염 및 모발상 세포 백혈병과 같은 특정 감염 및 악성종양을 치료하기 위해 사용된다. 다른 한편으로는, 인터페론 베타는 다발성 경화증에서 염증을 감소시키기 위해 널리 사용된다. 그러나, 많은 경우에, 인터페론 치료에 대한 유용한 반응은 단지 환자의 부분 모집단에서 관찰되며, 또한 초기 반응 환자는 나중에 치료에 대해 반응하지 않게 된다. 이와 같이, 치료에 대한 신체의 생물학적 반응성을 반영하는 쉽게 측정할 수 있는 바이오마커를 개발하는 것이 요구된다.
특허 공보 WO 2004/084933에는 개체에서 내피 CD73 발현을 유도하고 후속적으로 아데노신 수준을 상승시키기 위한 시토킨의 사용이 기술되어 있다. 쥐의 다발성 장기부전의 치료에서 아데노신 모노포스페이트(AMP)와 조합하여 인터페론 베타의 사용이 기술되어 있다.
특허 공보 WO 2007/042602에는 허혈 재관류 손상 또는 다발성 장기부전의 치료 또는 예방을 위한 플레인 인터페론 베타의 사용이 기술되어 있다.
콜레스테롤 수준을 감소시키기 위해 사용되는 지질강하제(hypolipidemic agent)인 스타틴이 환자에게서 CD73 발현을 유도하는 것으로 공지되어 있다.
*그러나, 종래 기술에서는, 질병의 발달을 모니터링하고 치료 효율을 평가하기 위한 바이오마커로 사용하기 위해 혈청 또는 다른 조직액에서 CD73 단백질을 측정하는 것에 대해서는 기술되어 있지 않다.
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본 발명자들은 가용성 CD73 활성의 측정이 질병의 심각도 및 치료에 대한 반응성을 모니터링하기 위해 사용될 수 있음을 입증하였다. 따라서, 본 발명자들은 임의의 기술에 의한 CD73 발현 수준 또는 활성의 분석이 질병 또는 치료 반응의 경로에 대한 가변성 정보를 제공할 수 있음을 믿는다.
그래서, 한 가지 면에서, 본 발명은 환자의 질병의 발달을 모니터링하기 위한 방법에 관한 것이며, 상기 질병은, (a) 조직 외상, (b) 심근 경색증 또는 발작, 기관 이식 또는 다른 외과 수술로부터 유발되는 재관류 손상, (c) 암 또는 암 전이, 및 (d) 염증 질병으로 구성된 군으로부터 선택되며, 상기 환자로부터 유도되는 조직액 중의 CD73이 바이오마커로 사용된다.
다른 면에서, 본 발명은 질병에 걸린 환자에 대한 시토킨 치료 또는 스타틴 치료의 효율을 평가하기 위한 방법에 관한 것이며, 상기 환자로부터 유도되는 조직액 중의 CD73이 바이오마커로 사용된다.
세 번째 면에서, 본 발명은 (i) 개체의 조직액으로부터 유도되는 샘플에 CD73 단백질을 인지하는 결합제를 가함으로써 샘플 중의 CD73 단백질의 수준을 정량화시키고 상기 결합제를 정량화시키거나, (ii) 박층 크로마토그래피를 사용하거나 상기 샘플에 CD73 기질을 가함으로써 상기 샘플 중의 CD73 단백질의 활성을 검출하고 상기 기질의 변화를 모니터링함으로써, 개체의 조직액으로부터 유도되는 샘플 중의 CD73 단백질을 결정하기 위한 방법에 관한 것이다.
본 발명은, 질병의 발달을 모니터링하거나 치료의 효율을 평가하기 위한 바이오마커로서 조직액에 CD73을 사용하는 방법을 제공하는 효과가 있다.
도 1. 내장의 허혈 재관류 손상은 일차 및 이차 조직 손상을 유도한다. 장간막 동맥이 30분 동안 폐색된 후, 4시간 동안 재관류된다. 겉보기 시술(단지 개복) 후 및 IR-손상의 유도 후의 야생 마우스의 (A) 내장 및 (B) 폐로부터의 대표적 현미경 사진이다.
도 2. 폐 CD73/5'NT 활성은 질병 활성과 역으로 상관한다. CD73/5'NT- l - 마우스 및 이들의 야생형(WT) 새끼는 겉보기 시술(sham)을 받거나, 30분의 장내 허혈을 일으킨 후에 240분의 재관류를 일으켰다(ALI). 추가의 군에서, ALI에 노출된 동물은 INF-β로 사전처리되었다. (A) TLC에 의해 조직 용해질로부터 측정된 폐 CD73/5'NT 활성 (평균±SEM, 시간당 1㎎의 단백질에 의해 가수분해되는 AMP의 nmol), (B) 이미지 분석을 사용하여 조직학적 절편으로부터 측정된 폐의 혈관 누출{FITC-컨쥬게이트 덱스트란의 삼출(exudation)}의 반정량적 분석(임의로 선택된 백그라운드 값 이상의 형광을 나타내는 섹션 영역의 %, 평균±SEM). 표시된 군으로부터의 대표적 현미경 사진이 또한 도시되어 있다. 바아, 50㎛, * p<0.05, ** p<0.01.
도 3. 췌장염에 걸린 SIRS 환자에서의 CD73/5'NT 활성. 도면은 CD73/5'NT 활성 대 췌장염의 심각도 등급을 나타낸다: 0 = 가벼운 췌장염; 1 = 기관 손상 없는 심한 췌장염; 2 = 기관이 손상된 심한 췌장염; 3 = 건강 관리.
도 4. 모든 등급의 췌장염을 갖는 환자에 대한 CD73/5'NT 활성 대 강한 치료 단위(ITU)에서의 총 지속 기간.
정의와 바람직한 실시예
"환자" 또는 "개체(individual)"라는 용어는 사람 또는 동물을 의미한다.
"질병의 발달을 모니터링하는"이라는 용어는 질병의 진행(즉, 질병의 악화) 또는 질병의 퇴행(즉, 환자의 회복)이 바이오마커의 측정된 수준을 대조군 또는 동일한 환자에서의 바이오마커의 수준의 상이한 시점에서 수행되는 하나 이상의 이전 측정값과 비교함으로써 이루어질 수 있음을 의미한다. 예를 들어, 이전 측정값 또는 대조군으로부터의 결과와 비교하여 바이오마커의 감소된 수준은 질병의 진행을 제시하기 위해 사용되는 반면, 이전 측정값 또는 대조군으로부터의 결과와 비교하여 바이오마커의 증가된 수준은 질병의 퇴행을 제시하기 위해 사용된다. 그러나, 또한 상반된 방식으로 바이오마커의 수준에 영향을 주는 특정 질병이 있다.
"조직액(tissue fluid)"이라는 용어는 세포를 담그고 둘러싸는 임의의 유체를 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 이 용어는, 예를 들어 혈장, 혈청, 림프액, 소변, 삼출물(exudate)(흉막, 복막) 및 뇌척수액을 포함한다.
"염증 질병(inflammatory condition)"이라는 용어는 개체 내의 조직에서의 임의의 유해하고 바람직하지 않은 염증 반응을 포함하는 것을 의미하며, 상기 염증 질병은 조직 외상, 심근 경색증 또는 발작, 기관 이식 또는 다른 외과 수술로부터 유발되는 재관류 손상과 같은 급성 질병 또는 알레르기성 질병, 자가면역 질병 및 염증 질병을 포함하는 만성 질병으로부터 유발될 수 있다.
조직액 중의 CD73 단백질을 사용함으로써 그 발달이 모니터링될 수 있는 질병은, 대표적으로 (a) 조직 외상, (b) 심근 경색증 또는 발작, 기관 이식 또는 다른 외과 수술로부터 유발되는 재관류 손상, (c) 암 또는 암 전이, 및 (d) 염증 질병으로 구성된 군으로부터 선택된다.
조직액, 특히 혈청 중의 환자의 CD73 수준의 변화를 유도하는 대표적 질병은 조직 외상; 심근 경색증 또는 발작, 기관 이식 또는 다른 외과 수술로부터 유발되는 재관류 손상; 암 또는 암 전이; 또는 상기 외상 또는 재관류 손상으로부터 또는 알레르기성 질병, 자가면역 질병 및 염증 질병을 포함하는 만성 질병으로부터 유발되는 염증 질병이다. 이러한 만성 질병의 예로는, 관절염, 천식과 같은 알레르기성 질병, 염증성 장질병 또는 피부의 염증 질병과 같은 염증 질병, 건선, 파킨슨병, 알츠하이머병, 자가면역 질병, 타입 I 또는 타입 II 당뇨병, 동맥경화증, 다발성 경화증, 크론병, 또는 기관 이식으로 인한 거부 반응이 언급될 수 있다. 특히, 염증 질병인 전신성 염증 반응 증후군(SIRS), 급성 폐 손상(ALI), 다중 기관 손상(MOF), 허혈 재관류 손상(IRI) 및 약제 역반응(ADRS)가 조직액 CD73 단백질의 교대를 유도할 것이다.
"시토킨(cytokine)"이라는 용어는 신호 화합물로서 생물 내에서 사용되는 임의의 단백질 또는 펩티드를 포함한다. 특히, 이 용어는 인터페론 또는 인터루킨(interleukin)을 의미하지만, 이에 제한되지 않는다. 시토킨이 인터페론인 경우에, 인터페론은 알파-, 베타-, 감마-, 오메가- 또는 임의의 다른 인터페론일 수 있으며, 이는 상기 언급된 인터페론의 임의의 아류형일 수 있다. 인터페론은 상기 언급된 질병의 치료에 사용된다. 인터루킨의 예로서 IL-4, IL-10, IL-13 및 IL-20이 언급될 수 있다.
"스타틴(statin)"은 개체 내의 콜레스테롤을 감소시키기 위해, 특히 심혈관 질병의 위험을 감소시키기 위해 사용되는 한 종류의 지질강하제를 형성한다. 또한, 염증 질병, 치매, 암, 핵성 백내장 및 폐고혈압증이 스타틴에 의한 치료에 반응할 수 있다.
개체의 조직액으로부터 유도되는 샘플 중의 CD73 단백질의 결정은 샘플에 CD73 단백질을 인식하는 결합제를 가하여 샘플 중의 CD73 단백질을 정량화시키고, 상기 결합제를 정량화시킴으로써 면역 검출에 의해 수행될 수 있다.
대안적으로, 검출은 박층 크로마토그래피를 사용하거나 상기 샘플에 CD73 기질을 가하여 상기 샘플 중의 CD73 단백질의 활성을 검출하고, 상기 기질의 변화를 모니터링함으로써 수행될 수 있다.
"결합제(binder)"라는 용어는 단클론성 또는 다클론성이거나 유전공학 처리될 수 있는 항체; 임의의 항체 단편; 압타머(aptamer) 및 아피바디(affibody), 및 CD73 단백질 상의 항원 결정 인자에 결합할 수 있는 임의의 다른 결합제를 포함하는 것으로 이해되어야 한다. CD73 항체는 당 분야에 널리 공지되어 있다 [참조예 : http://www.biocompare.com/matrixsc/3194/6/67151/CD73.html]. 아피바디는 아피바디 Ab에 의해 개발된 작고 안정한 단백질인 새로운 종류의 결합제를 나타낸다.
결합 검정(binding assay)은 경쟁적이거나 비경쟁적일 수 있다. 하나의 바람직한 검정은 고체 지지체에 고정된 포획 항체(또는 다른 종류의 결합제)를 제 1 항원 결정 인자에서 포획 항체에 결합하고 표지된 항체(또는 다른 종류의 결합제)를 첨가하여 항원의 또 다른 항원 결정 인자로 향하는 항원을 포함하는 샘플에 가하는 샌드위치 검정이다. 표지된 항체는 직접(균질 검정) 또는 비-고정된 표지된 항체의 분리 후에 정량화된다. 표지는 방사성 동위원소, 형광 염료, 효소 또는 임의의 검출성 표지일 수 있다.
예를 들어, 면역 검출을 위해, 임의의 적합한 항-CD73 특이적 항체가 샘플로부터 가용성 CD73을 포획하기 위해 사용될 수 있으며, 결합된 단백질의 양은 다양한 기술을 사용하여 정량화될 수 있다. 예를 들어, 하나의 항-CD73 항체를 멀티웰 플레이트의 바닥에 고정시키고, 샘플을 첨가하고, 결합된 CD73을 또 다른 항-CD73 항체를 사용하여 검출하는 샌드위치 ELISA가 사용될 수 있다. 그 다음, 항-CD73 항체는 표지된 제 2단계 항체와 같은 항체 검출에 적합한 다중 기술 중 임의의 것을 사용하여 검출된다. 반응의 CD73 특이성은 포획 또는 검출 항체로서 무관한 항체를 포함시키고 이들 네거티브 대조군과 항-CD73 항체 사이의 신호를 비교함으로써 조절된다.
CD73 활성의 결정:
CD73 활성은 발표된 프로토콜에 따라 박층 크로마토그래피를 사용하여 측정될 수 있다. CD73 활성은 또한 AMP, 또는 CD73 기질로서 사용될 수 있는 또 다른 푸린 모노누클레오티드의 상응하는 누클레오시드로의 전환을 측정하는 임의의 효소 검정을 사용하여 측정될 수 있다. 예를 들어, 검정은 방사성으로 또는 형광성으로 표지된 기질의 전환에 근거할 수 있다. 검출 방법은 기질 농도의 감소 또는 생성물 농도의 증가의 정량화 또는 포스페이트기의 방출에 의존할 수 있다. 반응의 CD73 의존도는 AMPCP와 같은 공지된 CD73 억제제의 존재 및 부재하에 검정을 수행함으로써 결정될 수 있다.
CD73에 대한 적합한 기질은, 예를 들어 아데노신-5'-모노포스페이트(AMP), 이노신-5'-모노포스페이트(IMP) 등을 포함하는 누클레오시드-5'-모노포스페이트이다.
본 발명은 하기의 비제한적 실험 부분에 의해 설명될 것이다.
실험 부분
재료 및 방법
ALI 모델 및 혈관 누출
8 세대 동안 C57BL/6 백그라운드으로 역교배시킨 CD73- l - 마우스, 및 C57BL/6 야생형(WT) 마우스를 사용하였다. 이들은 CD73 mRNA, 단백질 및 효소 활성이 부족하였다 [3]. 동물들을 체중, 성별 및 나이로 매칭시켰다. 모든 마우스에 실험이 완결될 때까지 표준 마우스 음식 및 물을 공급하였다. 마우스를 케타민 염산염(체중 1 kg당 100 mg, i.p.) 및 크실라진(체중 1 kg당 10 mg, i.p.)으로 마취시켰다. 마취 동안, 마우스는 정상 공기를 자발적으로 호흡하였다. 수술 전에, 동물에 1 ml의 무균 식염수를 피하 투여하여 수술 중 유체 손실을 보충하였다. 상장간막동맥을 중심선 개복을 통해 절개하고, 30분 동안 미세혈관 클램프에 의해 폐색시켰다. 겉보기 동물은 혈관 폐색 없이 상장간막동맥을 절개하였다. 상처를 하나의 층으로 봉합하였다. 동물의 체온을 가열 램프를 사용하여 허혈 단계 전체에 걸쳐 유지시켰다. 허혈 후에, 미세혈관 클램프를 제거하고, 상처를 봉합하고, 동물에 1 ml의 식염수를 피하 투여하였다. 235분의 재관류 후에, 마우스에 FITC-콘쥬게이트된 덱스트란을 투여하였다(0.2 ml 무균 식염수 중에서 체중 1kg당 25 mg; 분자량 70000 D, 분자 프로브). 마우스를 240분의 재관류 후에 희생시키고, 조직 샘플을 수집하였다.
30분 허혈 - 240분 재관류 프로토콜이 수립되고 재현성인 ALI 모델이다 [9]. 프로토콜은 투르쿠 유니버시티의 동물 윤리 위원회(the Committee on Animal Ethics of Turku University)에 의해 승인되었다 (허가번호: 시르파 잘카넨(Sirpa Jalkanen)의 1597/05).
CD73 활성 및 투과성에 대한 IFN-β의 효과를 전처리 및 후처리 프로토콜을 사용하여 연구하였다. 마우스의 아군을 재조합 마우스 IFN-β로 전처리하였다(허혈 전 3일 동안 매일 1회 6000 IU s.c.). 후처리군에서는, 동물에 재관류 기간의 초기에 허혈 단계 후에 1회분의 IFN-β(20,000 IU)를 정맥내 투여하였다.
모든 동물에 안락사 5분 전에 FITC-콘쥬게이트된 덱스트린(70 kDa)을 정맥내 주입하였다. 혈관 누출을 계산 이미지 분석을 사용하여 저온 절개된 폐로부터 무작위로 선택된 필드로부터 취한 3색 이미지로부터 결정하였다 (이미지 J).
CD73 활성의 분석
엑토-5'-누클레오티다아제 활성을 상기 기술된 바와 같이 TLC에 의해 검정하였다 [10]. 간략하게, 표준 효소 검정은 120㎕의 최종 부피로 RPMI 1640, 폐 용해물, 5 mmol/L의 β-글리세로포스페이트, 및 미량의 [2-3H]AMP를 갖는 제시된 농도의 AMP를 함유하였다 (sp. act, 18.6 Ci/mmol; 영국, 리틀 칼폰트(Little Chalfont)의 아머샴(Amersham)). 인큐베이션 시간을 전환된 AMP의 양이 초기 도입된 기질의 7-10%를 초과하지 않도록 시간에 따른 반응의 선형성을 보장하도록 선택하였다. 혼합물의 분취물을 알루그램(Alugram) SIL G/UV254 TLC 시트 {독일, 뒤렌(Dueren)의 마헤레이-나겔(Macherey-Nagel, Duren, Germany)}에 도포하고, 용매로서 이소부탄올/이소아밀 알코올/2-에톡시에탄올/암모니아/H2O (9:6:18:9:15)을 사용하여 분리시켰다. 3H-표지된 AMP 및 이의 탈인산화 누클레오시드 유도체를 UV 광으로 가시화시키고, 왈락(Wallac)-1409β-분광계를 사용하여 정량화시켰다. CD73 활성을 시간당 단백질의 mg에 의해 가수분해된 AMP의 nM로서 표현하였다. 용해물 중의 단백질 농도를 제조업체의 지시에 따라 BCA 단백질 검정 킷(BCA Protein Assay Kit){일리노이, 록포드(Rockford)의 피어스(Pierce)}에 의해 결정하였다.
통계 검정
비모수적 일원분산분석(Non-parametric one-way ANOVA){크루스칼-월리스(Kruskal-Wallis) 및 만-휘트니(Mann-Whitney) U 테스트}를 사용하였다.
결과
CD73 활성은 질병 활성과 상관한다
장내 허혈-재관류 (IR)은 내장 및 폐 둘 모두에서 표시된 조직 손상을 유발시켰다(도 1). 겉보기 시술된 야생형 마우스의 폐에서, CD73 활성은 낮았다(도 2a). 폐에서 FITC-덱스트란의 현미경적 분석은 겉보기 시술한 WT 마우스에서 단지 최소 누출만이 있었음을 나타내었다(도 2b).
ALI가 wt 동물에 대해 유도되는 경우, CD73 활성은 25%까지 감소하였다. 동시에, 혈관 누출은 현저히 증가하였다. 혈관 투과성의 변화는 폐 유조직 및 추가로 폐포로의 혈관내 유체의 누출이 악화되는 폐 기능 및 손상된 기체 교환에 대한 주원인이므로 질병 심각도에 직접 상관한다.
예측되는 바와 같이, CD73 활성은 겉보기 시술 및 장내 IR 둘 모두 후에 CD73 결핍 마우스에서 검출될 수 없거나 극히 낮은 수준이었다. CD73 결핍 마우스에서, 겉보기 시술된 동물에서의 누출은 야생형 겉보기 시술 동물과 비교하여 완만히 증가하였다. 현저하게, ALI는 CD73 결핍 마우스에서 유도되었으며, WT 새끼보다 폐에서 약 80%를 초과하는 누출을 나타내었다 (p=0.03).
이들 데이터는 질병 심각도의 측정값인, CD73 활성과 혈관 투과성 사이의 역 상관관계가 있음을 나타낸다.
CD73 활성은 치료 반응과 상관한다
3일 동안의 IFN-β 전치료 (다발성 경화증의 치료에 임상적으로 사용되는 투여량으로)는 ALI 동안 WT 폐에서 CD73 활성의 230% 증가를 유도하였다 (p=0.002, 도 2a). 가장 현저하게, ALI의 유도 후의 WT 마우스에서의 누출 부분은 비치료 새끼와 비교하여 IFN-β 전처리 후에 90% 넘게 감소하였다 (p=0.0001, 도 2b). 사실상 이는 겉보기 시술만을 받은 동물과는 상이하지 않다. 현저하게는, IFN-β는 또한 CD73 결핍 마우스에서 ALI에 대한 보호 효과를 갖지 않았다. 이들 데이터는 인터페론 베타 치료가 엄격한 CD73 의존성 방식으로 혈관 누출을 감소시킴을 보여준다. 더욱이, 야생형 마우스에서의 CD73 활성의 증가는 IFN-β 치료에 반응하여 유익한 결과를 예측하기 위해 사용될 수 있다.
IFN-β 치료가 이미 만성화된 모세관 손상을 회복시킬 수 있는지 시험하였다. 이를 위해, 마우스를 재관류시에 허혈 기간 후에만 IFN-β로 치료하였다. 명백히, 단일 IFN-β 투여량은 후속 4시간의 재관류 기간 동안 혈관 장벽 기능을 고도로 현저히 개선시켰다. FITC 덱스트란의 누출은 대조군과 비교하여 후처리군에서 90±9%까지 감소하였다 (n=8-13 마우스/군, p<0.001). 동시에, 혈청 샘플로부터의 CD73 활성 측정값은 30% 넘게 증가하였다 (치료 없이 ALI 군에서의 427±22로부터 IFN-β로 치료된 ALI 군에서의 561±48; p=0.04, n=4/군). 이와 같이, CD73 활성의 유도는 치료 반응과 포지티브하게 상관한다. 더욱이, 혈액 샘플 중에서의 CD73 활성의 측정은 IFN-β 반응성에 대한 유용한 정보를 제공할 수 있다.
본 발명의 방법이 일부만이 본원에 기술된 다양한 실시예의 형태로 구현될 수 있음이 인지될 것이다. 다른 실시예가 존재하고 본 발명의 사상으로부터 벗어나지 않음이 당업자에게 명백해질 것이다. 이와 같이, 기술된 실시예는 예시적이고 제한적으로 구성되지 않아야 한다.

Claims (3)

  1. 질병에 걸린 환자의 시토킨 치료 (cytokine therapy) 또는 스타틴 치료 (statin therapy)의 효율을 평가하기 위한 방법에 있어서,
    상기 환자로부터 유도된 조직액의 CD73은 바이오마커(biomarker)로 사용되고,
    상기 방법은 2개 이상의 시점에서 반복되고, 이전 검정과 비교하여 샘플 중의 CD73의 변경된 농도가 치료의 효율을 평가하기 위해 사용되며,
    상기 샘플의 CD73은 상기 CD73을 인지하는 결합제에 상기 샘플을 가하여 CD73의 농도를 정량화하고, 상기 결합제를 정량화하여 결정하는,
    질병에 걸린 환자의 시토킨 치료 또는 스타틴 치료의 효율을 평가하기 위한 방법.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 시토킨 치료는
    (a) 조직 외상(tissue trauma)과,
    (b) 심근 경색증 또는 발작, 기관 이식 또는 다른 외과 수술로부터 유발되는 재관류 손상(reperfusion injury)과,
    (c) 암 또는 암 전이와,
    (d) 염증 질병으로
    이루어진 군으로부터 선택된 질병을 치료하기 위해 사용되는,
    질병에 걸린 환자의 시토킨 치료 또는 스타틴 치료의 효율을 평가하기 위한 방법.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 스타틴 치료는 심혈관 질병, 염증 질병, 치매, 암, 핵성 백내장(nuclear cataract) 및 폐고혈압증(pulmonary hypertension)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질병을 치료하기 위해 사용되는,
    질병에 걸린 환자의 시토킨 치료 또는 스타틴 치료의 효율을 평가하기 위한 방법.
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