KR20150099655A - 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물 및 이의 제조방법 - Google Patents

벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물 및 이의 제조방법 Download PDF

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KR20150099655A KR1020140020582A KR20140020582A KR20150099655A KR 20150099655 A KR20150099655 A KR 20150099655A KR 1020140020582 A KR1020140020582 A KR 1020140020582A KR 20140020582 A KR20140020582 A KR 20140020582A KR 20150099655 A KR20150099655 A KR 20150099655A
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Abstract

본 발명은 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물에 관한 것이다. 본 발명의 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물은 산성 pH에 의해 분해되면서 ZnPP 방출에 의해 암세포 내의 항산화 수준을 저하시키고 각종 활성산소종에 대한 민감도를 증가시키며, 벤질옥시신남알데히드의 방출에 의해 활성산소(ROS)가 생성 및 축적되어 아폽토시스를 촉진시킴으로써 암세포-특이적 방식으로 이중 자극 반응 및 순차 치료 작용을 통해 시너지 항암효과를 일으키는 우수한 효과를 가지고 있는바, 항암 전구약물 및 항암제로 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 상기 마이셀에 담지된 ZnPP를 이용하여 암을 효과적으로 표적할 수 있어, 암의 치료 및 진단에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물 및 이의 제조방법{pH sensitive anticancer prodrug that is 2'-benzoyloxycinnamaldehyde-polyethylene glycol micelle carrying zinc protoporphyrin, and method for preparing the same}
본 발명은 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물로서, 낮은 pH에서 상호보완적 시너지 작용으로 산화스트레스를 증가시키면서 암세포의 사멸을 유도하는 pH 감응형 항암 전구약물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
암은 “개체의 필요에 따라 규칙적으로 증식과 억제를 할 수 있는 정상세포와 달리 조직 내에서 필요한 상태를 무시하고 무제한 증식하는 미분화 세포로 구성되어 종양을 형성하는 것”으로 정의되며, 체내의 정상세포가 특정한 이유로 하여금 세포내의 유전자에 변화가 일어나 암세포로 변형된 것이다. 세계적으로 암은 전체 사망원인 중 약 13 %를 차지하고 있으며 성별, 나이에 구분 없이 발병이 가능하며 세계 질병 중 2 위의 사망원인, 국내 사망원인 1 위를 차지하는 무서운 질병으로, 암 정복을 목표로 활발한 연구가 진행되고 있다. 이러한 연구 속에서 암의 다양성 및 발병 기전의 다양화로 인해 부작용이 적고 내성을 이겨낼 수 있는 효율적인 항암제의 개발이 요구되고 있으며, 새로운 항암제들이 계속해서 출시되고 있는 실정이다.
자극감응시스템은 pH, 온도, 이온 강도(ionic strength), 전장 (electric field), 자장 (magnetic field), 빛, 초음파 등과 같은 외부환경에 감응해서 전달체가 상전이, 팽윤, 분해 등의 변화가 일어나는 것을 말한다. 이러한 자극 감응 시스템은 약물을 보호할 뿐만 아니라 약물의 방출 속도를 조절하거나, 특정 부위에 약물이 머물 수 있도록 유도한 방출조절 시스템에 주로 이용되고 있다. 특히, 암 부위의 pH 는 일반적인 체내의 pH (7.4 ± 0.04)와 다르고 pH 에 민감한 다양한 작용기가 존재하여 매우 널리 이용되고 있다.
한편, 신남알데히드(cinnam aldehyde)는 동서양 모두에서 소화불량, 위염, 혈액 순환 장애, 염증을 치료하는데 사용되어 온 녹나무과(Lauraceae) 식물인 수피(cinnamomum cassia)의 주약효 성분 물질로서 계피 껍질(cinnamon bark)의 주요 구성 성분이다. 신남알데히드는 Micheal 수용체 약물특이분자단(michael receptor pharmacophore)으로 알려진 α,β-카보닐을 함유하고 있으며, 활성산소종(Reactive Oxygen Speacises, ROS)을 생성하여 미토콘드리아 막전위(mitochondrial membrane potential)를 저하시켜 세포에서 시토졸(cytosol)로 시토크롬 C(cytochrome C)의 방출을 통해 아폽토시스를 유도하는 물질로서 카스파제(caspase)에 의존하는 기전을 통한 항암 능력이 입증되어 있다. 하지만 신남알데히드와 그 유도체의 뛰어난 항암능력에도 불구하고, 생체 내에서 간 대식세포에 의해 빨리 포획(phagocytosis)되어 1.5시간 미만(수 분, 약 5분)의 짧은 반감기를 가져 암을 표적할 수 있는 능력이 없다는 단점이 있다. 그러므로, 임상에서 신남알데히드를 항암치료에 적용하기 위해서는 항암효과를 증진시키기 위한 물리, 화학적 개질 또는 새로운 약물 전달체의 개발이 요구되고 있다.
또한, 아연 프로토포르피린(ZnPP; Zinc protoporphyrin)은 체내에 소량 존재하는 프로토포르피린 계열의 화합물로서, 프로토포르피린이 아연(zinc) 이온과 배위결합되어 있다. ZnPP는 암세포 및 조직에서 높은 농도로 존재하는 활성산소종에 의한 산화적 손상으로부터 세포를 보호하는 항산화 효소인 Heme oxygenase 1(HO-1)의 작용을 억제하는 것으로 알려져 있다. 또한, ZnPP는 외부에너지에 의해 근적외선 영역(near IR, ~640nm)에서 형광을 발산하므로 광학영상이 가능할 뿐만 아니라 독성이 강한 singlet oxygen을 생성하여 암 세포를 파괴하는 강한 항암효과를 발휘한다. 이러한 특성을 이용하여 바이오영상을 통한 진단, 광역학치료 및 산화요법 등의 암의 진단 및 치료 분야에서 다양한 잠재력을 가지고 있다. 그러나 ZnPP의 강한 소수성으로 인해 염기성 용액이나 유기용제에 용해되며, 생리학적 조건에서 용해도가 낮아 항암치료에 응용하는데 문제점으로 지적되고 있어 생분해성 고분자와의 접합(conjugation) 및 나노입자를 이용한 가용화 기술의 개발이 요구되고 있다.
이에 본 발명자들은 아폽토시스를 유도하는 신남알데히드의 단점인 짧은 체내 머무름 시간을 개선하고, 이의 항암 효과를 증진시킬 수 있도록 ZnPP를 담지한 pH 감응형 항암 전구약물을 제조하기 위하여 연구한 결과, 아연 프로토포르피린을 담지한 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀(PECAE-PEG)을 합성하였으며, 상기 제조된 마이셀이 신남알데히드의 체내 머무름 시간을 증진시키고, ZnPP의 활용성을 증가시키며, 더 나아가 암세포에 선택적으로 작용하여 부작용을 최소화하면서 항암효과를 최대로 나타낼 수 있는 새로운 항암치료제로서의 가능성을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물로서, 낮은 pH에서 상호보완적 시너지 작용으로 산화스트레스를 증가시키면서 암세포의 사멸을 유도하는 pH 감응형 항암 전구약물 및 이의 제조방법을 제공함을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 마이셀을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공함을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 마이셀을 유효성분으로 포함하는 암의 진단용 조성물을 제공함을 목적으로 한다.
본 발명은 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 마이셀을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 마이셀을 유효성분으로 포함하는 암의 진단용 조성물을 제공한다.
본 발명의 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물은 산성 pH에 의해 분해되면서 ZnPP 방출에 의해 암세포 내의 항산화 수준을 저하시키고 각종 활성산소종에 대한 민감도를 증가시키며, 벤질옥시신남알데히드의 방출에 의해 활성산소(ROS)가 생성 및 축적되어 아폽토시스를 촉진시킴으로써 암세포-특이적 방식으로 이중 자극 반응 및 순차 치료 작용을 통해 시너지 항암효과를 일으키는 우수한 효과를 가지고 있는바, 항암 전구약물 및 항암제로 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 상기 마이셀에 담지된 ZnPP를 이용하여 암을 효과적으로 표적할 수 있어, 암의 치료 및 진단에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예 1-2에서 제조된 PBCAE-PEG 블록 공중합체의 1H-NMR 스펙트럼을 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 실시예 1-3에서 제조된 PBCAE-PEG 마이셀의 1H-NMR 스펙트럼을 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀을 투과전자현미경(TEM; transmission eletron microscope)(Bio-TEM, HITACH Corp., Japan) 및 동적광산란법(DLS; dynamic light scattering)(90Plus, Brookhaven Instrument Corp., Holtsville, NY)을 이용하여 관찰한 결과를 나타낸 도이다.
도 4A는 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀의 피렌(pyrene) 형광 방출 스펙트럼을 나타낸 도이다.
도 4B는 다양한 pH에 따른 PBCAE-PEG 마이셀의 형성 여부 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 4C는 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀의 FBS(fetal bovine serum)에서의 시간에 따른 유체학적 크기 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 5는 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀 처리시 활성산소의 생성 여부를 MTT assay를 이용하여 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 6은 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀 처리시 세포 독성을 공초점 현미경을 이용하여 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 7은 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀 처리시 세포 독성을 유세포 분석기를 이용하여 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 8은 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀 처리시 면역 블롯 분석 결과를 나타낸 도이다.
도 9는 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀의 형광 발현 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 10은 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀을 종양이 생성된 생쥐에 투여한 결과를 나타낸 도이다.
본 발명은 아연 프로토포르피린을 담지한 마이셀을 포함하고, 상기 마이셀은 하기 화학식 1로 표시되는 공중합체로 구성되는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure pat00001
상기 화학식 1에서, m 및 n은 1~10000의 정수이다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 약산성에 민감한 작용기인 벤조일옥시신남알데히드(BCA; benzoyloxycinnamaldehyde)를 포함하는 PAE(poly(β-amino ester)) 고분자와 친수성인 폴리에틸렌글리콜(PEG)이 결합한 PBCAE-PEG 공중합체로 구성된 마이셀에 아연 프로토포르피린을 담지한 pH 감응형 항암 전구약물이다.
구체적으로, 상기 PBCAE-PEG 공중합체는 poly[(3-(2-benzoyloxy)phenylprop-2-ene-1,1-diyl) bis(oxy)bis(ethane-2,1-diyl) diacrylate]-co-4,4’(trimethylenedipiperidine)-co-poly(ethylene glycol)이다.
상기 PBCAE-PEG 공중합체로 구성된 마이셀의 평균 크기는 100 nm 내지 10000 nm 인 것이 바람직하나, 이에 제한되지 않는다.
일반적으로 신남알데히드(Cinnam aldehyde)는 활성산소(Reactive Oxygen Species, ROS) 생성을 통해 아폽토시스를 유도하는 것으로 알려져 있으나, 정상 세포에는 미약한 세포 독성을 가진다. 그러나, 신남알데히드의 혈액 내에서의 짧은 반감기 및 일반적인 항암 약물에 비해 낮은 활성 때문에 활용이 제한되어 왔다. 따라서 이러한 단점을 극복하기 위해, 본 발명에서는 신남알데히드의 유도체인 벤조일옥시신남알데히드(BCA; benzoyloxycinnamaldehyde)가 포함된 벤조일옥시신남알데히드-폴리에틸렌글리콜 결합 마이셀(PBCAE-PEG)을 합성하고, 항산화 수준을 저하시키는 아연 프로토포르피린(ZnPP; zinc protoporphyrin)을 담지하여 새로운 pH 감응형 항암 전구약물을 제조하였다.
상기 pH 감응형 항암 전구약물은 마이셀로 만들어져 대식세포에 의해 고분자가 소멸되는 RES (Reticuloendothelial system)와 신진대사에 의해 체외로 배출되는 것을 피할 수 있으며, EPR 효과 (Enhanced Permeability and Retention effcts)에 의해 고분자가 암 부위에 선택적으로 축적 될 수 있다. 또한, 산성 pH에 의해 1차적으로 분해되며 ZnPP를 방출하여 항산화 수준을 저하시키고 2차적으로 BCA를 방출하여 활성산소(ROS)를 생성함으로써 아폽토시스(apoptosis)를 촉진시킬 수 있다. 항산화 수준이 저하된 상태에서 벤질옥시신남알데히드의 방출에 의해 생성되는 ROS는 대량 축적되어 아폽토시스를 더욱 촉진시킨다. 따라서, 본 발명의 pH 감응형 항암 약물은 암세포-특이적 방식으로 이중 자극 반응 및 순차 치료 작용을 통해 시너지 항암효과를 나타낸다. 또한, ZnPP는 근적외선 영역에서 형광을 발산하므로 광학영상이 가능하여 마이셀에 담지된 ZnPP를 이용하여 암을 효과적으로 표적할 수 있다.
또한, 본 발명은
(a) 벤조일옥시신남알데히드(BCA; benzoyloxycinnamaldehyde)와 아크릴레이트(acrylate) 화합물을 반응시켜 벤조일옥시신남알데히드가 포함된 디아크릴레이트(diacrylate) 화합물을 제조하는 단계;
(b) 상기 (a) 단계에서 제조된 디아크릴레이트 화합물을 아민 화합물 및 폴리에틸렌글리콜(PEG; poly(ethylene glycol))과 중합하여 PBCAE-PEG 블록 공중합체를 제조하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계에서 제조된 PBCAE-PEG 블록 공중합체를 친수성 용매에 용해시킨 후, 아연 프로토포르피린(ZnPP; Zinc Protoporphyrin)을 첨가하여 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀을 제조하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 pH 감응형 항암 전구약물의 제조방법의 대표적인 예는 하기 반응식 1 로 나타낼 수 있다.
[반응식 1]
Figure pat00002
상기 반응식 1에서, 상기 m 및 n은 화학식 1에서 정의한 바와 같다.
본 발명의 pH 감응형 항암 전구약물의 제조방법을 단계별로 상세히 설명하면 다음과 같다.
상기 (a) 단계는 벤조일옥시신남알데히드(BCA)가 포함된 디아크릴레이트 화합물을 제조하는 단계로, 상기 아크릴레이트 화합물은 2-히드록시 에틸 아크릴레이트(2-hydroxyl ethyl acrylate)일 수 있으며, 디아크릴레이트 화합물은 3-(2-benzoyloxy)phenylprop-2-ene-1,1-diyl)bis(oxy)bis(ethane-2,1-diyl)diacrylate일 수 있다. 상기 제조된 PBCAE-PEG 블록 공중합체는 아세탈 결합을 포함하여 산에서 분해 가능하므로 암세포에서 벤조일옥시신남알데히드의 방출을 가능하게 한다.
상기 (b) 단계는 PBCAE-PEG 블록 공중합체를 제조하는 단계로, 상기 (a) 단계에서 제조한 디아크릴레이트 화합물을 아민 화합물 및 폴리에틸렌글리콜(PEG)과 중합하여 얻는다. 상기 아민 화합물은 트리에틸렌-디피페리딘(triethylene-dipiperidine)이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 디아크릴레이트 화합물, 아민 화합물 및 폴리에틸렌글리콜은 0.8~1.0:0.9~1.1:0.01~0.2의 몰(mol) 비율로 반응시키는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.9:1.0:0.1이다. 상기 중합은 마이클 첨가 반응이며, 상기 제조된 PBCAE-PEG 블록 공중합체는 poly[(3-(2-benzoyloxy)phenylprop-2-ene-1,1-diyl) bis(oxy)bis(ethane-2,1-diyl) diacrylate]-co-4,4’(trimethylenedipiperidine)-co-poly(ethylene glycol)인 것이 바람직하다.
상기 (c) 단계는 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀을 제조하는 단계로, 상기 (b) 단계에서 제조한 PBCAE-PEG 블록 공중합체를 친수성 용매에 용해시킨 후, ZnPP를 첨가한다. PBCAE-PEG 블록 공중합체는 소수성 부위와 친수성 PEG로 나뉘어 있기 때문에 수상에서 마이셀을 형성한다. 상기 친수성 용매는 C1 내지 C4의 알코올인 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 메탄올이나 이에 한정되지 않는다. ZnPP는 유기용매에 용해시켜 첨가하며 상기 유기용매는 메틸렌클로라이드, 톨루엔, 테트라히드로퓨란(THF), 디옥산, 아세톤, 메탄올, 디메틸아세트아미드(DMAc), 에틸아세테이트, 디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO) 및 클로로포름 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 본 발명은 아연 프로토포르피린을 담지한 마이셀을 유효성분으로 포함하고, 상기 마이셀은 하기 화학식 1로 표시되는 공중합체로 구성되는 것을 특징으로 하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 포함한다.
[화학식 1]
Figure pat00003
상기 화학식 1에서, m 및 n은 1~10000의 정수이다.
본 발명의 마이셀은 산성 pH에 의해 분해되면서 ZnPP 방출에 의해 암세포 내의 항산화 수준을 저하시키고 각종 활성산소종에 대한 민감도를 증가시키며, 신남알데히드의 방출에 의해 활성산소(ROS)가 생성 및 축적되어 아폽토시스를 촉진시킴으로써 암세포-특이적 방식으로 이중 자극 반응 및 순차 치료 작용을 통해 시너지 항암효과를 일으켜 항암제로 유용하게 사용될 수 있다.
상기 암은 폐암, 췌장암, 대장암, 결장직장암, 골수성 백혈병, 갑상선암, 골수형 성이상증후군(MDS), 방광 암종, 표피 암종, 흑색종, 유방암, 전립선암, 두경부암, 자궁암, 난소암, 뇌암, 위암, 후두암, 식도암, 방광암, 구강암, 간엽 기원의 암, 육종, 기형암종, 신경모세포종, 신장 암종, 간암, 비-호지킨 림프종, 다발성 골수종, 및 갑상선 미분화암으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
본 발명의 조성물은 상기 마이셀과 함께 암에 대하여 예방 또는 치료의 효과를 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 더 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 또한, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제는 문헌 (Remington's Pharmaceutical Science, 최근, Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 것을 사용하는 것이 바람직하다. 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시 벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등이 있다. 상기 조성물을 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 개체에게 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.
본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 조성물은 1일 1 mg/ kg 내지 10000 mg/kg의 양으로 투여할 수 있으며, 하루에 한번 또는 수 회 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 개체에게 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물은 암의 예방 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 아연 프로토포르피린을 담지한 마이셀을 유효성분으로 포함하고, 상기 마이셀은 하기 화학식 1로 표시되는 공중합체로 구성되는 것을 특징으로 하는, 암의 진단용 조성물을 포함한다.
[화학식 1]
Figure pat00004
상기 화학식 1에서, m 및 n은 1~10000의 정수이다.
본 발명의 마이셀은 마이셀에 담지된 ZnPP를 이용하여 암을 효과적으로 표적할 수 있어 암의 치료 및 진단에 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 적용되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. ZnPP가 담지된 폴리벤조일옥시신남알데히드 아미노에스터-폴리에틸렌글리콜(PBCAE-PEG) 마이셀의 제조
1-1. (3-(2-benzoyloxy)phenylprop-2-ene-1,1-diyl) bis(oxy)bis(ethane-2,1-diyl) diacrylate (1)의 제조
Figure pat00005
2-히드록시 에틸 아크릴레이트(2-hydroxyl ethyl acrylate) (79 mmol)와 하이드로퀴논(hydroquinone) (0.8 g)을 정제된 벤젠에 용해시키고 50 ℃로 가열하였다. 여기에 벤조일옥시신남알데하이드 (19.82 mmol)와 톨루엔설폰산(p-toluenesulfonic acid) (0.595 mmol)을 추가적으로 넣고 92℃에서 12시간 동안 반응시켰다. 이 후, 반응물을 상온으로 식히고 트리에틸아민(triethylamine)을 넣어 반응을 종결하였다. 그 후 벤젠을 회전증발기(rotary evaporator)를 이용해 제거하고 디클로로메탄(DCM; dichloromathane)과 증류수를 이용하여 추출한 후 유기층을 감압 및 농축하였다. 이를 컬럼 크로마토그래피(hexane/ethyl acetate = 8/2)로 정제하여 표제 화합물 (1)을 얻었다.
1-2. 폴리벤조일옥시신남알데히드 아미노에스터-폴리에틸렌글리콜 (Poly((3-(2-benzoyloxy)phenylprop-2-ene-1,1-diyl) bis(oxy)bis(ethane-2,1-diyl) diacrylate]-co-4,4’(trimethylenedipiperidine)-co-poly(ethylene glycol)(PBCAE-PEG) 블록 공중합체 (2)의 제조
Figure pat00006
4,4'-트리에틸렌-디피페리딘(4,4'-triethylene-dipiperidine) 및 상기 실시예 1-1에서 제조한 반응물 (1)을 정제된 DCM에 용해시켰다. 여기에 메톡시 폴리에틸렌글리콜 모노아크릴레이트(mPEG-Ac; methoxy poly(ethylene glycol) monoacrylate) (MW 2,000, 1.6g)를 첨가한 후, 50℃에서 48시간동안 중합하였다. 이 후, 차가운 헥산을 이용하여 침전시키고 진공상태에서 건조하여 높은 점성을 가진 노란색의 표제 화합물 (2)를 얻었다. 상기 표제 화합물 (2)의 1H NMR 스펙트럼은 도 1에 나타내었다.
1-3. 폴리벤조일옥시신남알데히드 아미노에스터-폴리에틸렌글리콜(PBCAE-PEG) 마이셀의 제조
PBCAE-PEG 마이셀을 제조하기 위하여, 직접적 용해(direct dissolution) 방법을 이용하였다. 상기 실시예 1-2에서 제조한 PBCAE-PEG 공중합체(5mg)를 메탄올 (100μL)에 완전히 용해시켰다. 이 반응물을 PBS(phosphate buffer saline, pH 7.4) 50 mL에 천천히 풀어주었다. 그 후, 메탄올을 회전증발기를 이용해 완전히 제거하여 PBCAE-PEG 마이셀(100μg/mL)을 얻었다. 마이셀 형성 여부를 확인하기 위하여 상기 PBCAE-PEG 마이셀의 1H NMR 스펙트럼을 분석하였으며, 이의 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 수상에서 PBCAE-PEG 블록 공중합체가 마이셀을 형성하면서 친수성인 PEG에 의해 가리움 효과를 받아 소수성부분의 수소 피크들이 1H NMR 분광 스펙트럼에 나타나지 않음을 확인하였다.
또한, 수득한 PBCAE-PEG 마이셀을 투과전자현미경(TEM; transmission eletron microscope)(Bio-TEM, HITACH Corp., Japan) 및 동적광산란법(DLS; dynamic light scattering)(90Plus, Brookhaven Instrument Corp., Holtsville, NY)을 이용하여 관찰하였으며, 이의 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, PBCAE-PEG 공중합체가 약 115nm 정도의 균일한 마이셀을 형성함을 확인하였다.
1-4. ZnPP가 담지된 폴리벤조일옥시신남알데히드 아미노에스터-폴리에틸렌글리콜(PBCAE-PEG) 마이셀의 제조
ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀을 제조하기 위하여, 직접적 용해(direct dissolution) 방법을 이용하였다. 상기 실시예　1-2에서 제조한 PBCAE-PEG 공중합체(5mg)를 메탄올 (100μL)에 완전히 용해시켰다. 0.5mg의 ZnPP를 DMSO(dimethylsulfoxide)에 용해시키고 이를 PBCAE-PEG가 용해된 메탄올에 첨가하였다. 이 반응물을 PBS(phosphate buffer saline, pH 7.4) 50 mL에 천천히 풀어주었다. 그 후, 메탄올을 회전증발기를 이용해 완전히 제거하여 5 wt% ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀(100μg/mL)을 얻었다.
실험예 1. PBCAE-PEG 마이셀의 특성 확인
피렌(pyrene) 형광 측정법을 이용하여 PBS(pH 7.4) 내에 있는 PBCAE-PEG 마이셀의 임계 마이셀 농도를 확인하였다. PBS에 다양한 농도의 PBCAE-PEG 마이셀 (2×10-4~1×10-2mg/mL)을 제조한 후, 메탄올 내에 용해되어 있는 피렌(5μM)을 동일한 농도로 첨가하였다. 형광 분광광도계(fluorospectrometer, FP-6500, JASCO Corp., Japan)를 이용하여 흡광 파장 337 nm에서 PBCAE-PEG 마이셀에 담지된 피렌의 형광 방출 스펙트럼을 측정하였으며, 로그화한 PBCAE-PEG 마이셀의 농도별 방출 파장 373nm와 384nm의 비를 도 4(A)에 나타내었다.
도 4(A)에 나타낸 바와 같이, PBCAE-PEG 마이셀은 8 μg/mL 이상의 농도에서 열역학적으로 안정한 마이셀을 형성함을 확인하였다.
또한, PBCAE-PEG 마이셀의 pH 감응성을 확인하기 위하여, 동일한 방법으로 다양한 pH에 따른 PBCAE-PEG 마이셀 형성 여부를 측정하였으며, 이를 도 4B에 나타내었다.
도 4B에 나타낸 바와 같이, pH가 감소함에 따라 마이셀의 소수성이 감소하고 마이셀의 양이 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, pH 6.0 이하에서는 고분자가 더 이상 자기조립을 하지 못해 마이셀을 형성하지 못하는 것을 확인하였다. 이는 암 조직의 약산성 조건(pH <~6.8)에서 PBCAE-PEG 마이셀이 분해됨을 나타낸다.
또한, PBCAE-PEG 마이셀의 혈관에서의 안정성을 확인하기 위하여, 혈관과 비슷한 환경을 만들어주기 위한 혈청 중 하나인 FBS(fetal bovine serum)에서의 시간에 따른 유체학적 크기를 측정하였으며, 이를 도 4C에 나타내었다.
도 4C에 나타낸 바와 같이, PBCAE-PEG는 FBS에서 24시간까지 큰 크기 변화가 없는 것을 확인하였다. 이는 마이셀이 체내의 혈관 내에서도 안정할 것임을 나타낸다. 마이셀 형성 24시간 후, 염산 (HCl)을 첨가하여 pH를 5.5이하로 감소시킨 경우는 마이셀의 크기가 급속하게 감소함을 확인하였다. 이는 고분자 주쇄의 아민이 이온화됨으로써 소수성-친수성 전이가 일어난다는 것을 나타낸다.
실험예 2. PBCAE-PEG 마이셀의 세포독성 평가
상기 실시예 1에서 제조한 PBCAE-PEG 마이셀의 세포독성을 MTT assay로 측정하였다. 구체적으로는, 대장암 세포주(SW620)를 24 웰 플레이트에 3×105 세포/웰의 밀도로 접종하고 ~90% 컨플루언시에 도달하도록 24시간 동안 배양하였다. 또한, 전립선암 세포주(DU145)를 24 웰 플레이트에 1×105 세포/웰의 밀도로 접종하고 ~90% 컨플루언시에 도달하도록 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 다양한 농도의 PBCAE-PEG 마이셀 및 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀로 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 24시간 후 각 웰에 100 μL의 MTT 용액을 넣고 2시간 동안 배양하였다. 생성된 포르마잔 결정(formazan crystals)을 DMSO 용액 1mL에 용해시켰다. 10분 후, 570㎚에서의 흡광도를 마이크로 플레이트 리더(Biotek Instruments, Winooski, VT)를 사용하여 측정하였다. 세포 생존율은 대조군 세포와 PBCAE-PEG 마이셀 또는 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀이 처리된 세포의 흡광도를 비교하여 결정하였으며, 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5에 나타낸 바와 같이, 각각의 처리군에서 농도 의존적으로 세포 독성이 증가하였으며, 이는 활성산소의 생성에 의한 세포 자멸을 유도한다는 것을 나타낸다. 또한, ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀 처리시 암세포에 대한 세포 독성이 가장 증가함을 확인하였다.
실험예 3. PBCAE-PEG 마이셀의 활성산소 생성능력 평가
3-1. 공초점현미경을 이용한 PBCAE-PEG 마이셀의 활성산소 생성능력 평가
전립선암 세포주(DU145)(6×105)를 24 웰 배양 플레이트에 접종한 후, 24시간 동안 배양하고 벤조일신남알데히드, PBCAE-PEG 마이셀 및 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀을 24시간 동안 처리하였다. 여기에 배양세포내의 활성산소와 반응하는 형광시약 디클로로플오렛시디아세테이트(DCFH-DA; Dichlorofluorescein diacetate)를 20분간 처리한 후, 깨끗한 배양액으로 2회 세척하고 공초점현미경 (CLSM, 510 Meta, Carl Zeiss, Inc. Germany)을 이용하여 관찰하였으며, 이의 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀 투여시 아폽토시스를 보이며 벤조일신남알데히드 및 PBCAE-PEG 마이셀 보다 상당히 높은 세포 독성을 나타냄을 확인하였다. 이는 본 발명의 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀이 효과적으로 암세포 자멸을 유도한다는 것을 나타낸다.
3-2. 유세포 분석기(Flow cytometry)를 이용한 PBCAE-PEG 마이셀의 활성산소 생성능력 평가
대장암 세포주(SW620)를 12 웰 배양 플레이트에 접종한 후, 24시간 동안 배양하고 벤조일신남알데히드, PBCAE-PEG 마이셀 및 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀을 48시간 동안 처리하였다. 여기에 배양세포내의 활성산소와 반응하는 형광시약 디클로로플오렛시디아세테이트(DCFH-DA; Dichlorofluorescein diacetate)를 30분간 처리한 후, PBS (pH 7.4)로 세포를 2회 세척하고 PBS로 세포를 부유시켜 세포부유물을 5 mL 배양 튜브로 옮겨주었다. 이후 염색된 세포를 유세포분석기 (FACS caliber, Becton Dickinson, San Jose, CA)를 이용하여 측정하였으며, 그 결과를 도 7에 나타내었다.
도 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀 투여시 아폽토시스를 보이며 벤조일신남알데히드 및 PBCAE-PEG 마이셀 보다 상당히 높은 세포 독성을 나타냄을 확인하였다. 이는 본 발명의 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀이 효과적으로 암세포 자멸을 유도한다는 것을 나타낸다.
실험예 6. 면역 블롯 분석(Immunoblot analysis)을 이용한 PBCAE-PEG 마이셀의 세포자멸기전 확인
대장암 세포주(SW620)(1.5×106/well)를 각각 벤조일신남알데히드, PBCAE-PEG 마이셀 및 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀로 처리하고 36시간동안 배양하였다. 배양 후 각 웰을 새로운 PBS로 2번 세척하고 단백칠 추출 완충액(protein extraction buffer)을 이용하여 12시간 동안 4℃에서 배양하여 단백질을 추출하고 14000×g(MICRO 17TR centrifuge)의 속도로 10분간 원심분리하여 상층액을 얻었다. 20g의 세포 용해물을 이용하여 1%의 폴리아크릴아미드 겔(polyacrylamide gel)에서 전기 영동을 수행하고 분리된 단백질을 PVDF 막(Millipore, Billerica, MA)으로 옮겼다. 상기 단백질이 옮겨진 PVDF 막을 PARP 단일클론 항체(monoclonal antibody)(Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX) 와 함께 배양하고, 이차항체로서 HRP-결합된 항 염소 항체(anti-goat)(Millipore, Billerica, MA)를 사용하여 추가 배양하였다. 면역 블롯 신호는 SuperSignal Ultra의 화학 발광 시약(Pierce, Rockford, IL)을 사용하여 측정하였다. 또한 HO-1, Caspase3 단백질에 대해서도 동일한 방법으로 측정하였으며, 이의 결과를 도 8에 나타내었다.
도 8에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀은 농도 의존적으로 PARP-1, HO-1, Caspase3, β-actin의 발현을 감소시킴을 확인하였다. 이는 PBCAE-PEG에서 방출된 벤조일옥시신남알데히드의 활성산소종 발생과 ZnPP의 항산화 작용 억제가 함께 작용해 급격한 암세포의 세포자멸사를 유도함을 나타낸다.
실험예 7. ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀의 형광 확인
상기 실시예 1-4에서 제조된 ZnPP를 담지한 PBCAE-PEG 마이셀 100μg/mL과 DMSO에 용해시킨 ZnPP 5μg/mL 및 PBS에 용해시킨 ZnPP을 준비하고, FOBI (NEO Science)를 이용하여 2000ms 노출 후의 이미지를 관찰하였으며, 이를 도 9에 나타내었다.
도 9에 나타낸 바와 같이, 형광을 나타낼 수 있는 ZnPP는 불용성 물질이므로 수상에서 형광이 발현되지 않으며 마이셀에 ZnPP를 담지한 경우 소수성 부분에서 형광이 발현되는 것을 확인하였다. 이는 본 발명의 PBCAE-PEG 마이셀에 담지된 ZnPP를 이용하여 암을 표적 및 진단할 수 있음을 나타낸다.
실험예 8. PBCAE-PEG 마이셀의 항암효과 in vivo 실험
대장암 세포주(SW620)(1.5×106/well)를 생쥐의 피하에 주사하고 2일 후 약 3mm 정도의 종양이 생성됨을 확인하였다. 종양이 생성된 생쥐에 BCA (20μg), ZnPP (5μg), PBCAE-PEG 마이셀 (100μg) 및 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀 (100μg) 을 각각 3일에 한 번 씩 꼬리정맥을 통하여 주사하고 종양의 크기를 3일마다 측정하였다. 또한 형광 영상장치(FOBI, Neo Science)를 이용하여 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀 (100μg)이 종양에 축적됨을 확인하였으며, 이를 도 10에 나타내었다.
도 10에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀의 투여시 종양의 크기가 가장 감소함을 확인하였다. 또한, ZnPP는 대부분 간에 축적되어, ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀을 이용하여 암의 치료 및 진단에 이용될 수 있음을 확인하였다.
하기에 본 발명의 조성물을 제조하기 위한 제제예를 예시한다.
제제예 1. 약학적 제제의 제조
1. 산제의 제조
본 발명의 마이셀 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
2. 정제의 제조
본 발명의 마이셀 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
3. 캡슐제의 제조
본 발명의 마이셀 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
4. 주사제의 제조
본 발명의 마이셀 10 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO42H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 ml) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
5. 액제의 제조
본 발명의 마이셀 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ml로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.

Claims (12)

  1. 아연 프로토포르피린을 담지한 마이셀을 포함하고, 상기 마이셀은 하기 화학식 1로 표시되는 공중합체로 구성되는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물.
    [화학식 1]
    Figure pat00007

    상기 화학식 1에서, m 및 n은 1~10000의 정수이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 마이셀은 산성 pH에 의해 분해되는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 pH 감응형 항암 전구약물은 아연 프로토포르피린 및 벤조일옥시신남알데히드를 생산하는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 pH 감응형 항암 전구약물은 아폽토시스(apoptosis)를 촉진시키는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물.
  5. (a) 벤조일옥시신남알데히드(BCA; benzoyloxycinnamaldehyde)와 아크릴레이트(acrylate) 화합물을 반응시켜 벤조일옥시신남알데히드가 포함된 디아크릴레이트(diacrylate) 화합물을 제조하는 단계;
    (b) 상기 (a) 단계에서 제조된 디아크릴레이트 화합물을 아민 화합물 및 폴리에틸렌글리콜(PEG; poly(ethylene glycol))과 중합하여 PBCAE-PEG 블록 공중합체를 제조하는 단계;
    (c) 상기 (b) 단계에서 제조된 PBCAE-PEG 블록 공중합체를 친수성 용매에 용해시킨 후, 아연 프로토포르피린(ZnPP; Zinc Protoporphyrin)을 첨가하여 ZnPP가 담지된 PBCAE-PEG 마이셀을 제조하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물의 제조방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 (a) 단계에서 아크릴레이트(acrylate) 화합물은 2-히드록시 에틸 아크릴레이트(2-hydroxyl ethyl acrylate)인 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물의 제조방법.
  7. 제5항에 있어서, 상기 (b) 단계에서 디아크릴레이트 화합물, 아민 화합물 및 폴리에틸렌글리콜은 0.8~1.0:0.9~1.1:0.01~0.2의 몰(mol) 비율로 반응시키는 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물의 제조방법.
  8. 제5항에 있어서, 상기 (c) 단계에서 친수성 용매는 C1 내지 C4의 알코올인 것을 특징으로 하는, pH 감응형 항암 전구약물의 제조방법.
  9. 아연 프로토포르피린을 담지한 마이셀을 유효성분으로 포함하고, 상기 마이셀은 하기 화학식 1로 표시되는 공중합체로 구성되는 것을 특징으로 하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
    [화학식 1]
    Figure pat00008

    상기 화학식 1에서, m 및 n은 1~10000의 정수이다.
  10. 제9항에 있어서, 상기 암은 폐암, 췌장암, 대장암, 결장직장암, 골수성 백혈병, 갑상선암, 골수형 성이상증후군(MDS), 방광 암종, 표피 암종, 흑색종, 유방암, 전립선암, 두경부암, 자궁암, 난소암, 뇌암, 위암, 후두암, 식도암, 방광암, 구강암, 간엽 기원의 암, 육종, 기형암종, 신경모세포종, 신장 암종, 간암, 비-호지킨 림프종, 다발성 골수종, 및 갑상선 미분화암으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  11. 아연 프로토포르피린을 담지한 마이셀을 유효성분으로 포함하고, 상기 마이셀은 하기 화학식 1로 표시되는 공중합체로 구성되는 것을 특징으로 하는, 암의 진단용 조성물.
    [화학식 1]
    Figure pat00009

    상기 화학식 1에서, m 및 n은 1~10000의 정수이다.
  12. 제11항에 있어서, 상기 암은 폐암, 췌장암, 대장암, 결장직장암, 골수성 백혈병, 갑상선암, 골수형 성이상증후군(MDS), 방광 암종, 표피 암종, 흑색종, 유방암, 전립선암, 두경부암, 자궁암, 난소암, 뇌암, 위암, 후두암, 식도암, 방광암, 구강암, 간엽 기원의 암, 육종, 기형암종, 신경모세포종, 신장 암종, 간암, 비-호지킨 림프종, 다발성 골수종, 및 갑상선 미분화암으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 암의 진단용 조성물
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20190122064A (ko) * 2018-04-19 2019-10-29 창원대학교 산학협력단 약물이 로딩된 인산염 미셀을 포함하는 약물전달체
KR20200032409A (ko) * 2018-09-18 2020-03-26 전북대학교산학협력단 커큐민 유도체 함유 pH 민감성 블록 공중합체를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20200074899A (ko) * 2018-12-17 2020-06-25 주식회사 지아이셀 친수성 제1 블록, 소수성 제2 블록, 및 티올과 특이적으로 결합할 수 있는 작용기를 포함하는 블록 공중합체

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190122064A (ko) * 2018-04-19 2019-10-29 창원대학교 산학협력단 약물이 로딩된 인산염 미셀을 포함하는 약물전달체
KR20200032409A (ko) * 2018-09-18 2020-03-26 전북대학교산학협력단 커큐민 유도체 함유 pH 민감성 블록 공중합체를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20200074899A (ko) * 2018-12-17 2020-06-25 주식회사 지아이셀 친수성 제1 블록, 소수성 제2 블록, 및 티올과 특이적으로 결합할 수 있는 작용기를 포함하는 블록 공중합체

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