KR20150029888A - 발모 촉진 펩타이드, 이의 제조방법, 및, 이를 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 발모 촉진 효과가 검증된 발모 촉진 펩타이드를 함유하는 탈모방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것으로서, 본 발명의 펩타이드는 우수한 발모효과를 보인다. 특히, 다이머 형태 및 구리 금속 착화합물로 제조된 본 발명의 펩타이드는 기존의 펩타이드 조성물에 비해 사용상의 안전성 및 안정성이 높아 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물로서 용이하게 사용가능하다.

Description

발모 촉진 펩타이드, 이의 제조방법, 및, 이를 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물 {Peptides for promoting hair growth, method for preparing thereof, and, composition comprising thereof for preventing alopecia or promoting hair growth}
본 발명은 발모 촉진 펩타이드, 이의 제조방법, 및, 이를 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물에 관한 것이다.
인체의 모발은 약 10만 내지 15만개 정도이며, 각각의 모발은 서로 다른 주기를 가지며 성장기(anagen), 퇴행기(catagen), 휴지기(telogen)를 거쳐 성장, 탈락하게 된다. 이러한 주기는 36년에 걸쳐 반복되는데 그 결과 일일 평균 50 내지 100 개의 모발이 정상적으로 탈락하는 양상을 보인다.
일반적으로 탈모증(alopecia 또는 hair loss)이라 함은 이러한 주기 중에서 성장기의 모발 비율이 짧아지고 퇴행기 또는 휴지기의 모발이 많아져 비정상적으로 모발이 탈락하는 숫자가 많아지는 것을 의미하는데, 특히, 탈모 환자의 대부분을 차지하고 있는 남성형 탈모의 경우에는 모발 밀도의 감소는 없지만 모발의 굵기가 극단적으로 감소한다는 사실이 밝혀지고 있다.
이러한 탈모증의 치료나 예방에 있어서 현재까지 가장 널리 사용되는 제제는 미녹시딜(Minoxidil) 함유 제제로서, 현재까지 미국 FDA의 승인을 받은 두 가지 발모제 성분 중의 하나입니다. 미녹시딜은 고혈압 치료제이었지만 사용상의 부작용으로 발모 현상이 나타나면서 현재에는 발모제로 더 유명한 약물이 되었다.
미녹시딜의 발모 작용기전에 대해서는 정확히 밝혀져 있지는 않지만, 혈관 확장 효과를 통한 혈류량 증가로 모근에 영양을 공급하여 모발 성장을 촉진하는 것으로 추측하고 있다.
이러한 혈류량 증가 모델은 미녹시딜이 모근을 구성하는 주요세포인 모유두(dermal papilla)에서 혈관 확장에 관련된 성장 인자인 혈관내피성장 인자(VEGF: vascular endothelial growth factor)의 발현을 증가시킨다는 최근의 보고에 의해서 간접적으로 증명되었다(Br. J. of Dermatol., 1998, 138, 407~411). 또한, 미녹시딜의 발모효과 기전에 있어 혈관 확장 효과 이외에도 체외 배양 중인 모근의 모유두 세포 활성화(Skin Pharmacol., 1996, 9, 3~8) 및 모낭 조직배양에서 모낭의 성장을 촉진한다는 연구 보고(J. Invest. Dermatol., 1989, 92, 315~320) 등은 미녹시딜이 모근에 직접적인 성장 인자로 작용함을 시사하고 있다.
이밖에 최근에 발매가 시작된 머크(Merck)사의 프로페시아(Propecia) 주성분인 피나스테라이드(finasteride)는 남성호르몬 테스토스테론(testosterone)이 더 강력한 형태의 남성호르몬인 디히드로테스토스테론(DHT: dihydrotestosterone)으로 전환되는 것을 억제한다고 알려져 있다.
1997년 12월 남성형 탈모증의 치료제로 1㎎ 타블렛이 FDA로부터 사용 승인을 받아 현재 시판 중으로, 임상결과 유의할 만한 효과를 나타내는 것으로 판명되었으나 일부 남성 기능 억제 부작용도 보고되고 있다(J. Am. Acad. Dermatol., 1998, 39, 578~589). 그러나 이 약물 또한 미녹시딜과 같이 임상효과가 그다지 탁월하지 못하고 부작용에 대한 우려 때문에 좀 더 우수한 발모제 탐색연구가 활발히 진행되고 있는 실정이다.
이러한 각각의 효과에 편향적인 유효 성분들의 경우에는 동물 실험이나 제한적인 임상 실험에서 발모 증진에 효과가 있는 것으로 나타난다고 보고하고 있지만 복잡한 모발 성장 메커니즘을 충족시켜주지 못하고 사람 개개인의 고유한 탈모 특성 등이 고려되지 못하기 때문에 실제적으로 대다수의 사용자들이 눈에 띄는 효과를 보지 못하는 경우가 많은 실정이다. 따라서, 해외 경쟁제품과 효과 및 개념적으로 경쟁력을 보유한 발모 증진 신소개 개발 및 원천기술의 상용화가 필요하다.
본 발명자들은 기능성 펩타이드를 이용한 연구를 하던 중, 본 펩타이드가 발모 또는 탈모 억제 효과가 우수함을 확인함으로써, 본 발명을 완성할 수 있었다.
한편, 발모용 펩타이드로서, X1-X2-A-G-X3-S-C 형태의 발모 촉진용 펩타이드(한국공개특허 제2013-0032788호), ＥＤＡＲ 리간드 유래 펩타이드(한국공개특허 제2013-0015531호), 변형된 ＷＮＴ１０-유래 펩타이드(한국등록특허 제1209117호), ＦＧＦ１０－유래 펩타이드(한국등록특허 제1187871호), 노긴-유래 펩타이드(한국등록특허 제1163171호), 섬유모세포 성장 인자-9 펩타이드(한국공개특허 제2011-0092301호) 등이 개시되어 있기는 하지만, 상기 선행기술들에 개시된 펩타이드는 본 발명의 조성물에 함유되는 펩타이드와는 그 구조가 전혀 다르다.
한국공개특허 제2013-0032788호 (발모 촉진용 펩타이드 및 이의 용도, 2013.04.02. 공개) 한국공개특허 제2013-0015531호 (ＥＤＡＲ 리간드 유래 펩타이드 및 이의 용도, 2013.02.14. 공개) 한국등록특허 제1209117호 (변형된 ＷＮＴ１０-유래 펩타이드 및 그의 용도2012.11.30. 등록) 한국등록특허 제1187871호 (ＦＧＦ１０－유래 펩타이드 및 그의 용도, 2012.09.26. 등록) 한국등록특허 제1163171호 (노긴-유래 펩타이드 및 그의 용도, 2012.06.29. 등록) 한국공개특허 제2011-0092301호 (손상된 모낭의 재생을 촉진하는 섬유모세포 성장 인자-9, 2011.08.17. 공개)
Lachgar, S. et al., Minoxidil upregulates the expression of vascular endothelial growth factor in human hair dermal papilla cells. Br. J. of Dermatol., 1998, 138, 407~411. Kurata. S. et al., Effects of hypertrichotic agents on follicular and nonfollicular cells in vitro. Skin Pharmacol., 1996, 9, 3~8. Buhl, A.E. et al., Minoxidil stimulates mouse vibrissae follicles in organ culture. J. Invest. Dermatol., 1989, 92, 315~320. Kaufman K.D. et al., Finasteride in the treatment of men with androgenetic alopecia. Finasteride Male Pattern Hair Loss Study Group. J. Am. Acad. Dermatol., 1998, 39, 578~589. E. Kaiser et al. Color test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides., Anal. Biochem., 1970, 34(2), 595~598.
본 발명의 목적은 발모 촉진 펩타이드, 이의 제조방법, 및, 이를 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 하기 화학식 1 내지 화학식 8로 표현되는 탈모방지 또는 발모 촉진용 펩타이드에 관한 것이다.
[화학식 1]
[Cys-X-His-Lys]
[화학식 2]
[X-His-Lys-Cys]
[화학식 3]
[Cys-X-His-Lys]2
[화학식 4]
[X-His-Lys-Cys]2
[화학식 5]
[Cys-X-His-Lys]·Cu
[화학식 6]
[X-His-Lys-Cys]·Cu
[화학식 7]
[Cys-X-His-Lys]2·[Cu]2
[화학식 8]
[X-His-Lys-Cys]2·[Cu]2
상기 화학식 1 내지 8에서, X는 글루탐산, 아스파트산, 히스티딘, 페닐알라닌, 알라닌, 시스테인, 글라이신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌, 루이신, 메티오닌, 이소루이신, 세린, 타이로신, 트레오닌, 라이신, 트립토판, 프롤린 및 발린에서 선택되며,
[ ]2는 시스테인 잔기인 티올기(-SH)를 환원체 형태(-S-S-)로 변형한 이중체(dimer)를 나타낸다.
바람직하게는, 상기 화학식 1 내지 8의 펩타이드는,
[Cys-Phe-His-Lys] (화합물 1),
[Cys-Lys-His-Lys] (화합물 2),
[Cys-Ala-His-Lys] (화합물 3),
[Cys-Glu-His-Lys] (화합물 4),
[Phe-His-Lys-Cys] (화합물 5),
[Lys-His-Lys-Cys] (화합물 6),
[Ala-His-Lys-Cys] (화합물 7),
[Glu-His-Lys-Cys] (화합물 8),
[Cys-Phe-His-Lys]2 (화합물 9),
[Cys-Lys-His-Lys]2 (화합물 10),
[Cys-Ala-His-Lys]2 (화합물 11),
[Cys-Glu-His-Lys]2 (화합물 12),
[Phe-His-Lys-Cys]2 (화합물 13),
[Lys-His-Lys-Cys]2 (화합물 14),
[Ala-His-Lys-Cys]2 (화합물 15),
[Glu-His-Lys-Cys]2 (화합물 16),
[Cys-Phe-His-Lys]·Cu (화합물 17),
[Cys-Lys-His-Lys]·Cu (화합물 18),
[Cys-Ala-His-Lys]·Cu (화합물 19),
[Cys-Glu-His-Lys]·Cu (화합물 20),
[Phe-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 21),
[Lys-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 22),
[Ala-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 23),
[Glu-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 24),
[Cys-Phe-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 25),
[Cys-Lys-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 26),
[Cys-Ala-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 27),
[Cys-Glu-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 28),
[Phe-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 29),
[Lys-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 30),
[Ala-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 31), 및,
[Glu-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 32)
에서 선택되며, 상기 화합물에서 [ ]2는 시스테인 잔기인 티올기(-SH)를 환원체 형태(-S-S-)로 변형한 이중체(dimer)를 나타낸다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1 내지 8의 펩타이드, 또는 상기 화합물 1 내지 32의 펩타이드에서 1종 이상 선택되는 펩타이드를 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물을 제공한다.
이에, 본 발명은 상기 화학식 1 내지 8의 펩타이드, 또는 상기 화합물 1 내지 32의 펩타이드에서 1종 이상 선택되는 펩타이드를 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물을 제공한다. 상기 펩타이드는 약학적 조성물에 0.0001~1.0 중량%로 포함될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1 내지 8의 펩타이드, 또는 상기 화합물 1 내지 32의 펩타이드에서 1종 이상 선택되는 펩타이드를 함유하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물을 제공한다. 상기 펩타이드는 화장료 조성물에 0.0001~1.0 중량%로 포함될 수 있다. 또한 상기 화장료는 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스, 에어졸에서 선택되는 모발용 화장료에서 선택되는 것일 수 있다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 펩타이드 중, 화합물 9 내지 16의 펩타이드는 각각 화합물 1 내지 8의 펩타이드의 시스테인 잔기인 티올기(-SH)를 환원체 형태(-S-S-)로 변형한 이중체(dimer)이다. 즉, 상기 화합물 9 내지 16의 펩타이드는 모노머(monomer) 형태의 펩타이드의 시스테인 말단이 결합된 다이머 형태의 펩타이드이다. 예를 들어, 화합물 1의 시스테인 잔기인 티올기를 환원체 형태로 변형한 이중체가 화합물 9이며, 화합물 2의 시스테인 잔기인 티올기를 환원체 형태로 변형한 이중체가 화합물 10이다. 이와 같은 방법으로 화합물 3 내지 화합물 8로 각각 화합물 11 내지 화합물 16의 이중체를 제조할 수 있다. 또한, 이렇게 제조된 화합물 1 내지 16을 이용하여 화합물 17 내지 32의 구리착화합물을 제조할 수 있다.
본 발명의 펩타이드는 고체상에 일정하게 결합된 아미노산 골격에 하나 이상의 아미노산 또는 적합하게 보호된 아미노산을 연속적으로 아미드 결합을 형성하는 식으로 제조할 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 또한, 상기 펩타이드는 안정성을 크게 저하시키지 않는 범위에서 다른 아미노산의 삽입, 치환, 삭제가 가능하며, 이 또한 본 발명의 범주에 속한다.
또한, 본 발명의 펩타이드는 세포내 이동을 촉진하는 세포 투과성 펩타이드(cell permeable peptide)를 C-말단 또는 N-말단에 결합한 형태로서 제조될 수도 있다. 예를 들면, 상기 세포 투과성 펩타이드에는 TAT 펩타이드(Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Tyr-Arg-Arg-Arg) 및 Tat-PTD 펩타이드(Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg: Tat PTD)일 수 있으나, 본 발명이 이에 국한되는 것은 아니며, 당업계에 공지된 세포 투과성 펩타이드가 본 발명에 따른 펩타이드의 활성을 저해하지 않는 범위 내의 것이라면 어느 것이라도 사용가능하다.
본 발명의 화합물들은 금속착화합물 형태로 제조할 수도 있으며, 상기 금속은 구리, 마그네슘, 칼슘, 철, 아연, 니켈, 은, 게르마늄, 및, 갈리움에서 선택될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 바람직하게는 구리를 사용하는 것이 제일 좋다.
한편, 본 발명의 펩타이드는 염의 형태로 존재할 수도 있다. 본 발명에 사용 가능한 염의 형태는 화합물의 최종 분리 및 정제 동안 또는 아미노기를 적절한 산과 반응시키는 것에 의해 만들어지는 것일 수 있다. 예를 들면, 산 부가염으로 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 시트레이트, 아스파테이트, 벤조에이트, 벤젠설포네이트, 바이설페이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포설포네이트, 디글루코네이트, 글리세로포스페이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 포르메이트, 푸마레이트, 하이드로 클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로요오다이드, 2-하이드록시에탄설포네이트, 락테이트, 말레에이트, 메시틸렌설포네이트, 메탄설포네이트, 나프틸렌설포네이트, 니코티네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 트리클로로아테이트, 트리플루오로아세테이트, 포스페이트, 글루타메이트, 바이카보네이트, 파라-톨루엔설포네이트 및 운데카노에이트일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 산 부가염을 형성하기 위해 사용될 수 있는 산의 예로는 염산, 브롬화수소산, 황산 및 인산과 같은 무기산 및 옥살산, 말레산, 숙신산 및 시트르산과 같은 유기산일 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다. 바람직하게는 본 발명의 펩타이드는 트리플로로아세테이트 염 또는 아세테이트 염 형태로 제조할 수 있다.
본 발명의 조성물에 포함되는 펩타이드 제조를 위해 이용되는 아미노산의 아미노기 또는 카복실기는 적합한 보호기에 의해 보호될 수 있다. 보호된 아미노산은 고체 지지체에 부착되거나 아미드 결합을 형성하기에 적합한 조건하에서 다음의 아미노산을 첨가함으로써 용액 중에서 반응이 이루어질 수 있다. 또한, 보호기는 적합한 보호기로 보호된 아미노산을 첨가하기 이전에 완전히 제거될 수 있다. 모든 아미노산이 목적하는 바에 따라 연결된 후, 유리된 잔류 보호기 및 유리된 고형 지지체로부터 연속적으로 또는 동시에 분리하여 최종 목적하는 펩타이드를 얻을 수 있다.
본 발명에서는 키랄 센터가 라세미화되지 않는 조건하에서 적합하게 보호된 테트라펩타이드를 적절하게 보호된 또 다른 디펩타이드와 축합시켜 아미드결합을 형성시킨 후 탈보호하여 목적하는 헥사펩타이드를 합성하여 얻는 절편 축합반응 기술을 이용하여 펩타이드를 제조할 수 있다.
본 발명의 펩타이드 화합물을 제조하기 위한 가장 바람직한 합성 방법으로는 고체상 폴리머 지체를 이용하여 합성하는 고체상 펩타이드 합성방법을 이용할 수 있으며, 상기 방법을 통해 제조된 펩타이드의 α-아미노기는 산 또는 염기 민감성 작용기에 의해 보호될 수 있다. 이 때의 아미노산의 보호기는 펩타이드 축합반응 조건에서 안정한 성질을 가져야만 하고, 연장되는 펩타이드 사슬의 파괴 없이 또는 거기에 함유된 임의의 키랄 센터의 라세미체화 없이 용이하게 제거 가능한 성질을 가져야만 한다. 따라서, 적합한 보호기들로는 9-플루오레닐메틸옥시카보닐(Fmoc), t-부톡시카보닐(Boc), 벤질옥시카보닐(Cbz), 비페닐이소프로필-옥시카보닐, t-아밀옥시카보닐, 이소보르닐옥시카보닐, (α,α)-디메틸-3,5-디메톡시벤질옥시카보닐, O-니트로페닐설페닐, 2-시아노-t-부틸옥시카보닐 등일 수 있으며, 이러한 목적으로 당업계에 알려진 적합한 다른 보호기들 또한 본 발명의 범위 내에서 사용가능하다.
본 발명의 펩타이드 합성에서 사용된 아미노산의 가장 바람직한 보호기로는 9-플루오레닐메틸옥시카보닐(Fmoc) 보호기가 사용할 수 있다.
특히, 본 발명의 펩타이드 합성에서 사용되는 아미노산 잔기의 보호기로는 N-메틸글루타민산의 경우, t-부틸(t-Bu)이고; 라이신의 경우, t-부톡시카보닐(Boc)이고; 세린의 경우, 7t-부틸(t-Bu)이고; 트레오닌 및 알로트레오닌의 경우, t-부틸(t-Bu)이고; 시스테인의 경우, 트리틸(Trt)인 것이 바람직하지만, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
고체상 펩타이드 합성 방법에서, C-말단 아미노산은 적합한 고형 지지체 또는 수지에 부착될 수 있다. 상기 합성을 위해 유용한 적합한 고형 지지체로는 단계적 축합-탈보호 반응의 시약 및 반응 조건에 불활성이고 사용되는 매질에 불용성인 물질이 바람직하며, 예를 들면, 링크 아미드(rink amid) 또는 링크 아미드 4-메틸벤질히드릴아민 수지(rink amid MBHA resin)일 수 있다.
특히, C-말단 아미드 펩타이드에 대해 바람직한 고형 지지체는 Novabiochem Corporation으로부터 시판되는 링크 아미드 4-메틸벤질히드릴아민 수지일 수 있다.
C-말단 아미드(amide)는 디클로로메탄, N-메틸피리돈(NMP) 또는 DMF와 같은 용매 중에서 10℃ 내지 50℃의 온도에서, 바람직하게는 30℃의 온도조건에서, 1 내지 24시간 동안 4-디메틸아미노피리딘(DMAP), 1-하이드록시벤조트리아졸(HOBt), N-메틸모르폴린(NMM), 벤조트리아졸-1-일옥시-트리스(디메틸아미노)포스포늄-헥사플루오로포스페이트(BOP) 또는 비스(2-옥소-3-옥사졸리디닐)포스핀클로라이드(BOPCI)의 존재 또는 부재하에서 N,N'-디사이클로헥실카보디이미드(DCC), N,N'-디이소프로필카보디이미(DIC), [O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄헥사플루로포스페이트](HATU) 또는 O-벤조트리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트(HBTU)에 카르복실산을 활성화시켜 축합을 통해 수지 또는 고체상 지지체에 축합(결합, 커플링)될 수 있다.
고형 지지체가 링크 아미드 4-메틸벤질히드릴아민 수지인 경우, 바람직한 보호기로서 Fmoc 작용기는 C-말단 아미노산으로 축합하기 전에 2급 아민 용액, 바람직하게는 20%의 피페리딘 DMF 용액을 과량 사용하여 절단한다. 상기 탈보호된 4-(2',4'-디메톡시페닐-Fmoc-아미노메틸)페녹시아세트아미도에틸 수지에 목적하는 아미노산을 축합시키는데 사용되는 바람직한 시약들로는 적합하게 보호된 아미노산에 대하여 DMF 용매 중에서 N-메틸모르폴린(NMM), 1-하이드록시벤조트리아졸(HOBt) 및 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트](HATU), O-벤조트리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트(HBTU), N,N'-디사이클로헥실카보디이미드(DCC) 또는 N,N'-디이소프로필카보디이미드(DIC)와 같은 축합 반응 시약들이다.
본 발명에서 수행되는 연속적인 아미노산의 축합은 관련 기술 분야에서 널리 알려져 있는 자동 펩타이드 합성기를 이용하거나 또는 수동으로 직접 수행할 수 있다. 바람직한 합성 반응의 조건으로는 Fmoc 그룹으로 보호된 α-아미노산을 2급 아민 용액, 바람직하게 피페리딘으로 처리하여 탈보호시킨 후, 충분히 과량의 용매로 세척하고 축합을 원하는 또 다른 각각의 보호된 아미노산을 이어서 3~7배 몰 과량 첨가하여, 바람직하게는 DMF 용매 중에서 반응을 수행할 수 있다.
본 발명의 고체상 수지를 이용한 펩타이드의 합성 마지막 단계에서는 펩타이드를 연속적으로 또는 1회 조작으로 수지로부터 얻고자 하는 펩타이드를 제거하고 각각 아미노산의 잔기를 보호하고 있는 보호 그룹들을 탈보호시킬 수 있다. 수지로부터 펩타이드의 제거 및 잔기에 존재하는 보호기들의 탈보호 조건으로는 일반적으로 수지-펩타이드 간의 결합을 절단하는 절단 시약 칵테일, 예를 들어, 트리플루오로아세트산(TFA), 트리이소프로필실란(TIS), 티오아니졸, 물 또는 에탄디티올(EDT)등으로 구성된 디클로로메탄 혼합 칵테일 용액을 처리하여 얻을 수 있다. 이렇게 얻어진 혼합 용액은 냉장 보관된 디에틸에테르 용매를 과량 처리하므로써 침전물을 생성시킬 수 있다. 이상과 같이 얻어진 침전물을 원심분리시켜 완전히 침전시키고 과량의 트리플루오로아세트산, 트리이소프로필실란, 티오아니졸, 물 및 에탄디티올 등을 일차 제거하고 이상의 절차를 2회 이상 반복하여 고형화시킨 침전물을 얻을 수 있다. 이 때, 완전히 탈보호된 펩타이드 염은 물과 아세트나이트릴 용매로 구성된 혼합 용매 및 역상 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 분리 정제할 수 있다. 분리 정제된 펩타이드 용액은 동결건조를 이용하여 완전히 농축건조함으로써 고형의 펩타이드를 얻을 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 본 발명의 조성물은 약학적 조성물 또는 화장료 조성물로 제공될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물 또는 화장료 조성물의 적용 대상이 되는 모발로는, 두발(頭髮), 눈썹(眉毛, 미모), 속눈썹(睫毛, 첩모), 음모(陰毛), 겨드랑이털, 가슴털, 코털, 다리털 등의 각종 체모가 포함될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에 포함된 유효성분인 펩타이드의 투여량은 성인 기준으로 0.001~100㎎/kg, 바람직하게는 0.1~100㎎/kg, 보다 바람직하게는 1~50㎎/kg이며, 상기 투여량을 하루에 한번 또는 수회 나누어 투여할 수도 있다. 또한, 본 발명의 펩타이드는 상기 약학적 조성물 총중량에 대하여 바람직하게는 0.0001~1.0 중량%, 더 바람직하게는 0.001~1.0 중량%, 가장 바람직하게는 0.001~0.01% 중량%가 함유될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물이 약학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 상기 약학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 정제수, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘, 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등과 같이 통상적으로 이용되는 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 바람직하게는 비경구 투여가 좋으며, 보다 바람직하게는, 도포에 의한 국소 투여 방식으로 적용된다.
본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에 포함된 유효성분인 펩타이드의 투여량은 성인 기준으로 0.001~100㎎/kg, 바람직하게는 0.1~100㎎/kg, 보다 바람직하게는 1~50㎎/kg이며, 상기 투여량을 하루에 한번 또는 수회 나누어 투여할 수도 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분인 펩타이드 뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다. 또한, 본 발명의 조성물은 상술한 유효성분 이외에, 본 발명의 유효성분에 의한 탈모 방지 또는 발모 촉진 작용을 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용되어 오던 발모제 또는 탈모방지제를 함께 혼합하여 사용할 수 있다. 또한, 상기 담체로서, 정제수, 일가 알코올류(에탄올 또는 프로필 알코올), 다가알코올류(글리세롤, 1,3-부티렌글리콜 또는 프로필렌글리콜), 고급지방산류(팔미틸산 또는 리놀렌산), 유지류(소맥 배아유, 동백기름, 호호바유, 올리브유, 스쿠알렌, 해바라기유, 마카데미아땅콩유, 아보가드유, 또는 지방산 글리세라이드) 등을 사용할 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 또한, 필요에 따라, 계면활성제, 보습제, 방부제, 산화방지제 등을 첨가할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 사용될 수 있는 계면활성제로는, 음이온계 계면활성제로서, 알킬벤젠설폰산염, 폴리옥시알킬렌알킬황산 에스테르염, 알킬황산 에스테르염, 올레핀설폰산염, 알킬인산염, 폴리옥시알킬렌알킬에테르인산염, 디알킬설포석신산염, 지방산염 등을 들 수 있고, 비이온성 계면활성제로서, 폴리옥시에틸렌알킬에테르, 폴리옥시에틸렌지방산 에스테르, 다가 알콜지방산 부분 에스테르, 폴리옥시에틸렌 다가 알콜지방산 부분 에스테르, 폴리글리세린지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 유도체, 지방산디에탄올아미드 등을 들 수 있다. 또한, 양이온성 계면활성제로서는, 3급 지방족 아민염, 알킬트리메틸암모늄할라이드, 디알킬디메틸암모늄할라이드 등을 들 수 있고, 양쪽성 계면활성제로서는, 아미드베타인형, 이미다졸리늄베타인형, 설포베타인형 등을 들 수 있다. 상기 보습제로서는, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 소르비톨 등을 들 수 있다. 상기 방부제로서는, 벤조산, 데하이드로아세트산, 파라옥시벤조산에스테르(파라옥시벤조산메틸, 파라옥시벤조산부틸 등), 페녹시에탄올 등을 들 수 있다. 또한, 상기 산화방지제로서는, 아스코르브산, BHA 등을 들 수 있으며, 이외에도, 자외선 흡수제, 소염제 및 청량제 등을 첨가할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형은 그 유효성분과 배합할 수 있는 임의의 제형으로서 탈모방지 또는 발모용 화장품의 형태로는 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤 등과 같이 용액, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스, 에어졸 등 다양한 형태로 제조될 수 있으나 이들로 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 펩타이드는 상기 화장료 조성물 총중량에 대하여 바람직하게는 0.0001~1.0 중량%, 더 바람직하게는 0.001~1.0 중량%, 가장 바람직하게는 0.001~0.01 중량%가 함유될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물은 매일 사용할 수 있으며 또한 정해지지 않은 기간 동안에도 사용할 수 있다. 바람직하게는 사용자의 연령, 피부상태 또는 피부타입, 펩타이드의 농도에 따라 사용량, 사용횟수 및 기간을 조절할 수 있다.
본 발명은 발모 촉진 효과가 검증된 발모 촉진 펩타이드를 함유하는 탈모방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것으로서, 본 발명의 펩타이드는 우수한 발모효과를 보인다. 특히, 다이머 형태 및 구리 금속 착화합물로 제조된 본 발명의 펩타이드는 기존의 펩타이드 조성물에 비해 사용상의 안전성 및 안정성이 높아 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물로서 용이하게 사용가능하다.
도 1은 본 발명의 펩타이드 화합물이 갖는 사람 모유두 세포의 증가율(성장률)을 그래프로 도식화한 것이다.
도 2는 본 발명의 화합물 25의 마우스에서의 발모 효과를 나타내는 사진이다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지고, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
<실시예 1. 화합물 1 내지 32의 합성>
본 발명에 사용되는 아미노산의 명명 및 약어는 아래와 같이 표기한다.
Ala : 알라닌 / Cys : 시스테인 / Glu : 글루타믹산 / Phe : 페닐알라닌 / His : 히스티딘 / Lys : 라이신.
실시예 1-1. 화합물 1 및 9의 합성
Novabiochem corporation으로부터 구입한 2-chlorotrityl chloride resin (g당 1.4mmol이 로딩된 수지)을 71.4㎎(0.10mmol) 측량하여 반응용기에 넣었다. 수지를 3㎖의 DMF로 용매화시키고 5분간 충분히 반응(sweeling)시킨 다음, 20%(w/v) 피페리딘 DMF 용액을 3㎖ 첨가하고 10분간 교반(shaking)하고 피페리딘 DMF 용액을 제거한 후, 10㎖의 DMF 용매를 이용하여 5회 세척하였다(10㎖씩 5회 세척). * DMF : 디메틸포름아미드.
Fmoc-Lys(Boc)-OH(374.8㎎, 0.80mmol), HOBt(108.1㎎, 0.80mmol) 및 DIC(0.124㎖, 0.80mmol)를 2㎖의 DMF 용매에 완전히 녹인 후, 수지에 첨가하였다. 반응액을 실온에서 8시간 동안 교반(shaking)한 후, 10㎖의 DMF 용매로 5회 세척하였다. 20%(w/v) 피페리딘 DMF 용액을 3㎖ 첨가하고 10분간 교반(shaking)하고 피페리딘 용액을 제거한 후, 다시 20%(w/v) 피페리딘 DMF 용액을 첨가하여 10분간 반응시켜 수지에 보호되어 있는 Fmoc 보호기를 완전히 제거하고 10㎖의 DMF 용매를 이용하여 5회 세척하였다(10㎖씩 5회 세척). 이 단계에서 Fmoc 보호기의 탈보호 반응 여부를 Kaiser test[E. Kaiser et al. Anal. Biochem., 1970, 34(2), 595~598.]를 실시하여 확인하였다. * Fmoc : 9-플루오레닐메틸옥시카보닐 / HOBt : 1-하이드록시벤조트리아졸 / DIC : N,N'-디이소프로필카보디이미드.
다음으로는 아래와 동일한 합성 주기에 따라 연속적으로 축합(커플링)시켰다.
(1) DMF 용매(10㎖)로 5회 세척 ;
(2) 20%(w/v) 피페리딘 DMF 용액(3㎖)을 사용하여 10분간 2회 탈보호 ;
(3) DMF 용매(10㎖)로 5회 세척 ;
(4) Fmoc-아미노산 첨가 ;
(5) 축합 시약을 첨가하여 아미노산 활성화 및 2시간 축합 ;
(6) DMF 용매(10㎖)로 5회 세척 ;
상기 (1) 내지 (6)은 계속 반복하였으며, Fmoc-Lys(Boc)-OH 이후의 Fmoc으로 보호된 아미노산(0.80 mmol)은 다음에 기술된 순서로 수지 반응용기에 첨가하여 축합시켰다.
(i) Fmoc-His(Trt)-OH ;
(ii) Fmoc-Phe-OH ;
(iii) Fmoc-Cys(Trt)-OH ;
Fmoc-Cys(Trt)-OH 축합 이후의 (6) 이후에는, 마지막으로, 20% 피페리딘 DMF 용액(3㎖)을 처리하였다.
상기와 같은 합성 종결 즉시, 펩타이드가 축합된 수지를 3시간 동안 트리플루오로아세트산/티오아니졸/에탄디티올/트리이소프로필실래인/물(95:5:2.5:2.5:2.5)의 혼합물(10㎖)을 사용하여, 수지로부터 펩타이드를 절단하였다. 이렇게 얻어진 혼합 용액에 냉장 보관된 디에틸에테르 용매를 100㎖ 처리함으로써 침전물을 생성시켰다. 얻어진 침전물을 원심분리하여 완전히 침전시키고 트리플루오로아세트산, 티오아니졸 및 에탄디티올을 1차 제거하고 이상의 절차(디에틸에테르 용매를 100㎖ 첨가하여 침전물을 세척하고 원심분리하는 단계 - 1차 제거를 시도했던 트리플루오로아세트산, 티오아니졸 및 에탄디티올을 제거하기 위한 작업)를 2회 반복하여 고형화시킨 침전물을 얻었다. 상기 침전물(펩타이드)을 C-18 칼럼을 사용하여 50분에 걸쳐 0.01% 트리플루오르아세트산을 함유하는 5% 내지 100%의 아세토니트릴/물 농도구배 용매 시스템을 사용하는 HPLC로 정제하였다. 순수 정제된 분획물을 동결건조시켜 백색 분말형의 트리플루오로아세테이트염으로서 화합물 1 : H2N-[Cys-Phe-His-Lys]-CO2H(50㎎)을 얻었다.
상기 화합물 1 : H2N-[Cys-Phe-His-Lys]-CO2H 20㎎을 디메틸설폭사이드(DMSO) 2㎖에 녹인 후 10㎖의 물을 첨가하고 3일간 상온에서 교반시켜, 시스테인 잔기인 티올기(-SH)를 환원체 형태(-S-S-)로 변형한 이중체(dimer) 형태의 하기의 화합물 9(17㎎)를 얻었다.
화합물 1 : H2N-[Cys-Phe-His-Lys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 534.7 ; (50㎎)
화합물 9 : H2N-[Cys-Phe-His-Lys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 1066.4 ; (17㎎)
실시예 1-2. 화합물 2~8, 화합물 10~16의 합성
상기 화합물 1과 동일한 제조 과정을 이용하되 Fmoc으로 보호된 아미노산의 순서를 달리하여 하기의 화합물 2~8, 화합물 10~16의 펩타이드를 제조하였다.
화합물 2 : H2N-[Cys-Lys-His-Lys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 515.7 ; (49㎎)
화합물 10 : H2N-[Cys-Lys-His-Lys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 1028.4 ; (21㎎)
화합물 3 : H2N-[Cys-Ala-His-Lys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 458.6; (55㎎)
화합물 11 : H2N-[Cys-Ala-His-Lys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 914.2 ; (24㎎)
화합물 4 : H2N-[Cys-Glu-His-Lys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 516.6 ; (53㎎)
화합물 12 : H2N-[Cys-Glu-His-Lys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 1030.3 ; (22㎎)
화합물 5 : H2N-[Phe-His-Lys-Cys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 534.7; (58㎎)
화합물 13 : H2N-[Phe-His-Lys-Cys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 1066.4 ; (18㎎)
화합물 6 : H2N-[Lys-His-Lys-Cys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 515.7 ; (51㎎)
화합물 14 : H2N-[Lys-His-Lys-Cys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 1028.4 ; (20㎎)
화합물 7 : H2N-[Ala-His-Lys-Cys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 458.6 ; (48㎎)
화합물 15 : H2N-[Ala-His-Lys-Cys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 914.2 ; (21㎎)
화합물 8 : H2N-[Glu-His-Lys-Cys]-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 516.6; (52㎎)
화합물 16 : H2N-[Glu-His-Lys-Cys]2-CO2H : MS(ESI)m/e, [M+H]+= 1030.3 ; (18㎎)
실시예 1-3. 화합물 17~32의 합성
상기 실시예 1-1 및 1-2를 통해 합성한 화합물 중에서, 화합물 1 내지 8을 바탕으로 하기의 방법을 이용하여 화합물 17 내지 24를 합성하였으며, 화합물 9 내지 16을 바탕으로 화합물 25 내지 32를 합성하였다.
화합물 9(100㎎, 0.94μmol)를 H2O 2㎖에 녹이고, 쿠퍼클로라이드(CuCl2) 0.72㎎(4당량)의 수용액을 첨가하여, 상온에서 10시간 교반하였다. 교반한 상기 수용액에 1.0N 소듐하이드록사이드(NaOH) 수용액 10㎖을 첨가한 후 감압농축시키고, 동결건조하여 화합물 25([H2N-[Cys-Phe-His-Lys]2-CO2H]·[Cu]2)를 얻었다.
즉, 이와 같은 방법을 이용하여 하기의 화합물들을 얻었다.
화합물 17 : [H2N-[Cys-Phe-His-Lys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 25 : [H2N-[Cys-Phe-His-Lys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
화합물 18 : [H2N-[Cys-Lys-His-Lys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 26 : [H2N-[Cys-Lys-His-Lys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
화합물 19 : [H2N-[Cys-Ala-His-Lys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 27 : [H2N-[Cys-Ala-His-Lys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
화합물 20 : [H2N-[Cys-Glu-His-Lys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 28 : [H2N-[Cys-Glu-His-Lys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
화합물 21 : [H2N-[Phe-His-Lys-Cys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 29 : [H2N-[Phe-His-Lys-Cys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
화합물 22 : [H2N-[Lys-His-Lys-Cys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 30 : [H2N-[Lys-His-Lys-Cys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
화합물 23 : [H2N-[Ala-His-Lys-Cys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 31 : [H2N-[Ala-His-Lys-Cys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
화합물 24 : [H2N-[Glu-His-Lys-Cys]-CO2H]·Cu (구리착화합물) ;
화합물 32 : [H2N-[Glu-His-Lys-Cys]2-CO2H]·[Cu]2 (구리착화합물) ;
<실험예 1. 사람 모유두 세포의 성장 및 분열 촉진 효과>
사람의 모유두 세포(Human Follicle dermal papilla cell:HFDPC)는 성형 수술의 부산물로 생긴 사람 두피로부터 분리 및 배양된 모유두 세포를 사용한다. 사람 모유두 세포는 10% FBS(Gibco BRL)가 포함된 DMEM(Cambrex)을 배지로 하여, 37℃, 5% CO2의 조건에서 인큐베이터에서 배양하였다.
본 발명의 화합물들을 처리하기 위해, 사람 모유두 세포를 세포 배양용 96 웰 플레이트에 3,000개의 세포수로 일정하게 분주하여 0.1% FBS가 함유된 DMEM 배지에서 5시간 동안 37℃, 5% CO2 조건으로 인큐베이터에서 배양되었다. 실험 물질을 혈청 무첨가 DMEM에 100mM 농도로 녹여 stock을 제조하고, 이를 1μCi/㎕ [3H] Thymidine, 0.1% FBS가 함유된 DMEM 배지에 희석하여 각 화합물을 최종농도 10μM로 처리한 후 3~5일 동안 37℃, 5% CO2 조건으로 인큐베이터에서 배양하였다. 이 후 PBS 및 5% cold TCA로 세포들을 세척한 후 0.1N NaOH, 1% SDS(sodium dodecyl sulfate) 용액으로 세포를 파쇄하고, liquid scintillation counter(Beckman)를 이용하여 세포 파쇄 용액에 포함된 방사능 활성을 측정하였으며, 상기 결과는 표 1 및 도 1에 나타내었다.
조건 대조군 대비 화합물 처리군의
사람모유두세포 증가율 (%)
화합물 1 120
화합물 2 125
화합물 3 124
화합물 4 123
화합물 5 120
화합물 6 131
화합물 7 125
화합물 8 119
화합물 9 210
화합물 10 201
화합물 11 202
화합물 12 195
화합물 13 208
화합물 14 209
화합물 15 210
화합물 16 205
화합물 17 170
화합물 18 178
화합물 19 168
화합물 20 159
화합물 21 168
화합물 22 167
화합물 23 173
화합물 24 174
화합물 25 230
화합물 26 225
화합물 27 222
화합물 28 229
화합물 29 221
화합물 30 222
화합물 31 225
화합물 32 222
대조군 100
상기 표 1 및 도 1을 참고하면, 본 발명의 화합물들이 대조군(무처리군)보다 사람모유두 세포의 증식율이 뛰어난 것을 알 수 있어, 발모 또는 탈모방지 효과가 더 우수함을 확인할 수 있다.
<실험예 2. 발모효과 시험>
C57BL/6 쥐의 경우 모발의 성장기와 쇠퇴기가 생후 6-7주 후에 비교적 동일하게 발생되므로 발모 실험에 효과적인 모델이다.
생후 6주령 된 암컷 C57BL/6 쥐를, 1주일간 사육 환경에 적응시킨 후(12시간 낮/12시간 밤, 온도 24 , 습도 40~50% , 먹이와 물은 자유 섭취), 7주령이 되었을 때 제모기를 이용하여 쥐 등 부위를 고르게 제모하였다. 다음 날부터 5일에 걸쳐 화합물 25를 50ppm 수용액으로 제조하여 매일 2회 쥐 표피에 도포하였고, 대조군에는 물만 도포하였다. 이 후 약 14일간 관찰한 후 발모 양상의 변화를 확인하였으며, 상기 결과는 도 2에 나타내었다.
도 2를 참고하면, 본 발명의 화합물 25 처리시, 모든 개체(n=10)에서 대조군 대비 우수한 발모효과가 있음을 확인할 수 있다.
따라서, 상기 실험예 1 및 2의 결과를 통해, 본 발명의 화합물들이 우수한 발모증진 및 탈모 방지 효과가 있음을 알 수 있다.
한편, 일반적으로 펩타이드는 생체 내에 들어갔을 때에 여러 가지의 가수분해효소들에 의해 매우 빨리 분해되어 그 능력이 급감하기 때문에, 펩타이드의 분해 속도를 늦추는 것이 매우 중요하다. 일반적으로 다양한 가수분해효소들은 펩타이드의 구조 중에서 아미드 결합(-C(=O)NH-) 부위를 카르복실산(-CO2H)과 아민(-NH2)으로 분해하는데, 본 발명의 펩타이드 화합물이 갖는 시스테인 다이머 구조는 (-S-S-) 골격을 가지고 있어서 일반적인 가수분해효소들의 분해능력을 낮추거나 교란시키는 기능을 한다. 즉, 상기 펩타이드 화합물 중, 다이머(dimer) 형태의 화합물들은 모노머(monomer) 형태의 화합물들에 비해 생체 내 가수분해효소에 의해 분해되는 정도가 더디다. 따라서, 본 발명의 펩타이드 화합물 중, 시스테인 다이머를 갖는 화합물들의 경우, 체내 안정성이 매우 우수할 것으로 판단된다. 또한 본 발명의 펩타이드 중에서 구리 착화합물로 제조된 펩타이드들의 발모 효과가 우수한 것도 다이머 형태의 펩타이드를 제조하였을 때와 같이, 펩타이드의 체내 안정성 증가효과가 나타났기 때문인 것으로 판단된다.
<제형예 1: 피부외용 연고의 제조>
하기 표 2와 같은 조성으로 피부외용 연고를 통상의 방법에 따라 조제하였다.
성분명 첨가량 (중량%)
화합물 25 1.0
S-니트로소글루타치온 0.04
히알루론산 3.0
레시틴 3.0
디에틸세바케이트 8.0
경납 5.0
폴리옥시에틸렌올레일에테르 포스페이트 6.0
파라옥시안식향산에스테르 적량
바셀린 up to 100
<제형예 2. 샴푸의 제조>
하기 표 3과 같은 조성으로 샴푸를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분명 첨가량 (중량%)
화합물 25 0.01
S-니트로소글루타치온 0.04
히알루론산 1.5
레시틴 3.0
30% 라우릴황산나트륨 20.0
30% 폴리옥시에틸렌라우릴황산나트륨 20.0
야자유지방산디에탄올아미드 2.00
프로필렌글리콜 2.00
코카미도프로필베타인 3.00
카르복시비닐폴리머 0.30
폴리쿼터늄-10 0.50
파라옥시안식향산에스테르 0.20
구연산 적량
향료 적량
정제수 잔량
<제형예 3. 헤어토닉의 제조>
하기 표 4와 같은 조성으로 헤어토닉을 통상의 방법으로 제조하였다.
성분명 첨가량 (중량%)
화합물 25 0.1
S-니트로소글루타치온 0.04
히알루론산 1.5
레시틴 3.0
에탄올 50.00
L-멘톨 0.10
D-판테놀 0.20
글리세린 3.00
살리실산 0.10
토포케릴 아세테이트 0.10
폴리옥시에칠렌경화피마자유 0.50
향료 적량
정제수 잔량

Claims (10)

  1. 하기 화학식 1 및 2로 표현되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모 촉진용 펩타이드.
    [화학식 1]
    [Cys-X-His-Lys]
    [화학식 2]
    [X-His-Lys-Cys]
    상기 화학식 1 및 2에서, X는 글루탐산, 아스파트산, 히스티딘, 페닐알라닌, 알라닌, 시스테인, 글라이신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌, 루이신, 메티오닌, 이소루이신, 세린, 타이로신, 트레오닌, 라이신, 트립토판, 프롤린 및 발린에서 선택됨.
  2. 하기 화학식 3 내지 8로 표현되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모 촉진용 펩타이드.
    [화학식 3]
    [Cys-X-His-Lys]2
    [화학식 4]
    [X-His-Lys-Cys]2
    [화학식 5]
    [Cys-X-His-Lys]·Cu
    [화학식 6]
    [X-His-Lys-Cys]·Cu
    [화학식 7]
    [Cys-X-His-Lys]2·[Cu]2
    [화학식 8]
    [X-His-Lys-Cys]2·[Cu]2
    상기 화학식 3 내지 8에서, X는 글루탐산, 아스파트산, 히스티딘, 페닐알라닌, 알라닌, 시스테인, 글라이신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌, 루이신, 메티오닌, 이소루이신, 세린, 타이로신, 트레오닌, 라이신, 트립토판, 프롤린 및 발린에서 선택되며,
    [ ]2는 시스테인 잔기인 티올기(-SH)를 환원체 형태(-S-S-)로 변형한 이중체(dimer)를 나타냄.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1 및 2의 펩타이드는
    [Cys-Phe-His-Lys] (화합물 1),
    [Cys-Lys-His-Lys] (화합물 2),
    [Cys-Ala-His-Lys] (화합물 3),
    [Cys-Glu-His-Lys] (화합물 4),
    [Phe-His-Lys-Cys] (화합물 5),
    [Lys-His-Lys-Cys] (화합물 6),
    [Ala-His-Lys-Cys] (화합물 7), 및,
    [Glu-His-Lys-Cys] (화합물 8)
    에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모 촉진용 펩타이드.
  4. 제2항에 있어서,
    상기 화학식 3 내지 8의 펩타이드는,
    [Cys-Phe-His-Lys]2 (화합물 9),
    [Cys-Lys-His-Lys]2 (화합물 10),
    [Cys-Ala-His-Lys]2 (화합물 11),
    [Cys-Glu-His-Lys]2 (화합물 12),
    [Phe-His-Lys-Cys]2 (화합물 13),
    [Lys-His-Lys-Cys]2 (화합물 14),
    [Ala-His-Lys-Cys]2 (화합물 15),
    [Glu-His-Lys-Cys]2 (화합물 16),
    [Cys-Phe-His-Lys]·Cu (화합물 17),
    [Cys-Lys-His-Lys]·Cu (화합물 18),
    [Cys-Ala-His-Lys]·Cu (화합물 19),
    [Cys-Glu-His-Lys]·Cu (화합물 20),
    [Phe-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 21),
    [Lys-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 22),
    [Ala-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 23),
    [Glu-His-Lys-Cys]·Cu (화합물 24),
    [Cys-Phe-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 25),
    [Cys-Lys-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 26),
    [Cys-Ala-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 27),
    [Cys-Glu-His-Lys]2·[Cu]2 (화합물 28),
    [Phe-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 29),
    [Lys-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 30),
    [Ala-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 31), 및,
    [Glu-His-Lys-Cys]2·[Cu]2 (화합물 32)
    에서 선택되며, 상기 화합물에서 [ ]2는 시스테인 잔기인 티올기(-SH)를 환원체 형태(-S-S-)로 변형한 이중체(dimer)를 나타내는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모 촉진용 펩타이드.
  5. 제1항 내지 제4항의 어느 한 항에 따른 펩타이드에서 1종 이상 선택되는 펩타이드를 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물.
  6. 제1항 내지 제4항의 어느 한 항에 따른 펩타이드에서 1종 이상 선택되는 펩타이드를 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 펩타이드는 약학적 조성물에 0.0001~1.0 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 약학적 조성물.
  8. 제1항 내지 제4항의 어느 한 항에 따른 펩타이드에서 1종 이상 선택되는 펩타이드를 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 펩타이드는 화장료 조성물에 0.0001~1.0 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
  10. 제8항에 있어서,
    상기 화장료는 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스, 에어졸에서 선택되는 모발용 화장료에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 발모촉진용 화장료 조성물.
















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