KR20140115730A - 겨우살이 추출물 및 편백나무 추출물을 함유하는 탈모예방 및 발모촉진용 샴푸조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 탈모 예방 및 발모 촉진용 샴푸조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 천연 계명활성제에 한국산 겨우살이 추출물, 편백나무 추출물을 첨가한 탈모예방 및 발모촉진용 조성물에 관한 것이며 겨우살이 및 편백나무 진공추출물을 제조하는 단계와; 상기 진공추출물에 겨우살이 미세캡슐 및 베타 글루칸을 더 첨가하여 본 발명 조성물을 제조하는 단계와; 상기 추출물 내 글루텐 함량을 조사하는 단계와; 마우스를 이용하여 발모촉진 실험하는 단계와; 녹 방지 실험 및 DPPH법으로 항산화능력을 측정하는 단계와; 콩 발아실험 및 수삼 새싹 실험을 진행하고 변화를 관찰하여 평가하는 단계를 통하여 달성했으며 천연식물 추출물을 이용하여 부작용이 없는 탈모 예방 및 발모 촉진용 조성물을 제공하는 효과를 제공하며 인체에 유해한 화학적 조성물과 알레르기를 일으킬 수 있는 글루텐을 포함하지 않고 항산화능력과 두피면역이 증강되는 뛰어난 효과가 있다.
Description
본 발명은 탈모 예방 및 발모 촉진용 샴푸조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 천연 계명활성제에 한국산 겨우살이 추출물, 편백나무 추출물을 첨가한 탈모예방 및 발모촉진용 조성물 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
탈모란 두피의 굵고 검은 머리털이 빠지는 것을 의미하며 최근 서구화된 생활 습관, 스트레스, 각종 환경오염 등으로 탈모는 남녀노소 불문한 현대인의 큰 고민거리가 되었다. 탈모는 두피의 건강과 밀접한 관계가 있다. 두피는 머리를 덮고 있는 피부로서 외부환경과 직접 접촉되는 인체부위이므로 세균, 바이러스, 진균 등의 감염으로부터 노출되어 있고 이들의 감염으로 인하여 두피에 염증이 생기면 탈모질환으로 이어진다.
탈모치료 또는 발모효과를 나타내는 것으로 많은 물질들이 보고되어 있으나 현재까지 탈모의 정확한 원인규명이나 탈모부위 모발의 성장을 효과적으로 촉진할 수 있는 제품의 개발은 미진한 실정이다. 탈모치료제로서 UV에 대한 차단제나 발모촉진제 등 화학물질을 샴푸에 첨가한 경우에는 사람에 따라 심각한 부작용이 일어날 수 있는 위험성이 있다. 또, 탈모의 원인으로 알려져 있는 남성호르몬(DTH)을 감소시키는 제품들이 개발되어 탈모치료 효과가 기대되었으나 체내 향상성의 불균형으로 인하여 알레르기, 우울증, 국소염증 등의 부작용이 발생하여 그 적용 위험성이 점점 커지고 있는 실정이다. 또, 약물요법의 경우에는 외관상 발모가 가장 필요한 두피부위에 대한 효과가 기대되는 수준에 이르지 못하고 있다. 따라서, 생체에 안전하고 효과가 뛰어날 뿐만 아니라 안정적이고 제조시 경제성이 있는 발모촉진, 탈모예방 또는 치료용 제품의 개발이 절실하게 요구되고 있다.
겨우살이(Viscum album)는 엽록소를 가지고 광합성작용을 하면서 부족한 영양분을 숙주식물로부터 얻는 반기생식물로 동백나무, 뽕나무에 기생한다. 한방에서는 통증완화, 혈액순환 개선, 종양 제거 등에 사용되어 왔으며 한국산 겨우살이는 유럽산에 비해 1000배 이상의 항암효과가 있음이 밝혀져 있다. 특히 겨우살이 내 렉틴(lectin)은 면역 증강 효과가 있음이 알려져 있으며 점막 면역 효과에 대한 연구들도 꾸준히 진행되고 있다. 국내 등록특허 제10-0673569호에는 인터페론-감마와 한국산 겨우살이 렉틴을 유효성분으로 함유하는 항암제용 조성물이 개시된 바 있다. 국내 등록특허 제10-1203484호에는 한국산 겨우살이를 포함하는 조류독감 억제용 약학조성물이 개시된 바 있다. 국내 등록특허 제10-0644881호에는 항암 및 면역기능증진 활성을 가지는 한국산 겨우살이유래 헤파린 결합단백질이 개시된 바 있다.
편백나무(Chamaecyparis obtusa)는 일본이 원산지로 회목(檜木), 히노끼(ヒノキ), 노송나무로 불리며 우리나라의 남부지방에 조림된 후 성공적으로 생육하여 정착된 침엽수이다. 편백나무에서 나오는 피톤치드의 양은 다른 활엽수들보다 월등하여 천연의 향균 효과로 두피를 건강하고 청결하게 관리할 수 있다. 박영옥 등의 연구에서 실험용 쥐에 증류하여 얻은 편백오일을 실험한 결과 미녹시딜(Minoxidil) 수준의 모발성장 촉진 및 탈모예방 효과를 보인 바 있다(Chamaecyparis Obtusa Oil, 한국미용학회지, 2008). 국내 등록특허 제10-1181635호에는 편백 다당체를 함유하여 피부표면 바이오필름의 형성을 억제하는 피부 외용제 조성물이 개시된 바 있다.
베타 글루칸(β-glucan)은 버섯, 효모 등에 풍부한 수용성 다당류로서 면역 증강작용을 가진다. 암세포를 직접 공격하지 않고 정상세포의 면역기능을 강화시켜 암세포의 증식을 억제하며 대식세포를 활성화시켜 여러 사이토카인들의 분비를 촉진시켜 면역세포들의 활성을 증가시킨다. 국내 공개특허 제10-2010-0000818호에는 면역세포막의 덱틴-1에 결합하는 면역증강 및 항암용 꽃송이버섯의 베타-1,3-글루칸이 개시된 바 있다. 국내 등록특허 제10-0775133호에는 베타글루칸과 버섯 균사체 추출물을 혼합하여 제조한 향균 또는 항진균 제제의 제조방법이 개시된 바 있다.
천연식물 추출물을 이용한 특허로는 국내 등록특허 제10-1141779호에 더덕 추출물 또는 사포닌 분획을 포함하는 발모 촉진용 조성물이 개시된 바 있다. 국내 등록특허 제10-0782273호에는 산삼 배양근, 살비아, 톱야쟈, 쇄기풀, 쇠뜨기 및 생강추출물을 포함하는 탈모 예방 조성물이 개시된 바 있다. 상기 문헌들에서 겨우살이, 편백나무 추출물 및 베타 글루칸을 포함하는 탈모예방 및 발모촉진용 샴푸조성물에 관하여 전혀 개시된 바 없다.
따라서 본 발명의 목적은 천연식물 추출물을 이용한 부작용 없는 탈모예방 및 발모 촉진효과가 뛰어난 샴푸조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 글루텐에 대한 민감성을 가진 사람들을 위해 글루텐을 포함하지 않는 샴푸조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 상기 목적은 겨우살이 및 편백나무 진공추출물을 제조하는 단계와; 상기 진공추출물에 겨우살이 미세캡슐 및 베타 글루칸을 더 첨가하여 본 발명 조성물을 제조하는 단계와; 상기에서 얻은 조성물 내 글루텐 함량을 조사하는 단계와; 마우스를 이용하여 발모촉진 실험하는 단계와; 녹 방지 실험 및 DPPH법으로 항산화능력 측정하는 단계와; 콩 발아실험 및 수삼 새싹 실험을 진행하고 생육변화를 관찰, 평가하는 단계를 통하여 달성하였다.
본 발명은 한국산 겨우살이 추출물과 편백나무 추출물에 베타 글루칸 및 겨우살이 미세캡슐을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 허용가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 포함하며 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형은 두피 트리트먼트제, 비누, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어팩, 로션, 컨디셔너, 헤어오일, 무스, 크림, 고형제, 용액제, 유제, 분산제, 미셀, 리포좀, 연고제를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명은 천연식물 추출물을 이용하여 부작용이 없는 탈모 예방 및 발모 촉진용 샴푸조성물을 제공하는 효과가 있으며 인체에 유해한 화학적 조성물과 알레르기를 일으킬 수 있는 글루텐을 포함하지 않고 항산화능력과 두피면역이 증강되는 뛰어난 효과가 있다.
도 1은 실시예 및 비교예의 웨스턴 블럿팅 실험결과를 나타낸 사진이다.
도 2는 글리아딘 측정을 위한 효소면역분석법의 원리를 나타낸 그림이다.
도 3은 실시예 및 비교예의 효소면역분석법 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 겨우살이 진공추출물, 편백나무 진공추출물의 녹 방지실험 결과를 나타낸 도표이다.
도 5는 겨우살이 진공추출물, 편백나무 진공추출물의 검은 새 콩 발아실험 결과를 나타낸 도표이다.
도 6은 겨우살이 진공추출물, 편백나무 진공추출물의 수삼 새싹실험 결과를 나타낸 도표이다.
도 2는 글리아딘 측정을 위한 효소면역분석법의 원리를 나타낸 그림이다.
도 3은 실시예 및 비교예의 효소면역분석법 실험결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 겨우살이 진공추출물, 편백나무 진공추출물의 녹 방지실험 결과를 나타낸 도표이다.
도 5는 겨우살이 진공추출물, 편백나무 진공추출물의 검은 새 콩 발아실험 결과를 나타낸 도표이다.
도 6은 겨우살이 진공추출물, 편백나무 진공추출물의 수삼 새싹실험 결과를 나타낸 도표이다.
글루텐(gluten)은 보리, 밀 등의 곡류에 존재하는 불용성 단백질로서 가스를 보유하는 힘으로 빵을 부풀게 한다. 글루텐은 에탄올에 녹는 글리아딘과 녹지 않는 글루텔린으로 구성되며 글루텐 전체의 조사가 어려울 때 더 작은 크기인 글리아딘으로 측정하기도 한다. 글루텐을 함유하고 있는 음식은 소화흡수과정에서 점도가 높은 물질이 형성되어 소장과 대장에 점착할 가능성이 높으며 장내 면역체계를 자극하여 염증을 유발하고 설사로 인한 영양결핍 현상이 일어난다. 또, 글루텐에 대한 민감성이 높은 사람들은 셀리악병(celiac disease), 과민성대장증후군 (irritable colon syndrome)에 쉽게 노출될 수 있으나 글루텐이 함유된 음식을 배제한 식단의 변화로 증상을 효과적으로 통제할 수 있어 환자들 뿐만 아니라 일반인들도 점차 글루텐을 함유하지 않은 제품을 선호하는 추세이다.
이하, 본 발명의 구체적인 내용을 실시예를 들어 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
1: 겨우살이 추출물의 제조
한국산 겨우살이 200g에 물 1L를 가하여 4℃에서 2시간 동안 교반하여 냉수추출액을 얻은 후 이를 동결건조하여 냉수추출물 분말을 얻어 KM-110(또는 미슬로-C)이라 명명하였다.
실시예
2: 겨우살이 및 편백나무 진공 추출물의 제조
고온진공 증숙법을 이용하여 한국산 겨우살이 및 편백나무를 무수상태에서 각각 고온진공 증숙기에 채운 후 가열용기의 온도를 270~350℃까지 가열하였다가 30~50℃으로 냉각시켜 용기 내에 진공압이 걸리게 한 다음 그 상태로 24~48시간 동안 가열하여 추출하였다.
실시예
3: 겨우살이 미세캡슐의 제조
폴리글리세롤 모노스테아레이트(PGMS: polyglycerol monostearate)를 코팅물질로 사용하여 동량의 증류수와 혼합하여 80℃에서 5시간 정도 녹인 후 4℃에서 냉장보관하면서 사용하였다. PGMS 15 g에 동량의 증류수와 혼합하여 미세캡슐을 제조하였다. 증류수와 혼합한 PGMS를 55℃에서 30분간 녹인 후 1,200 × g으로 1분 동안 섞은 후 1 g의 겨우살이 추출물을 첨가하여 혼합하였다. 상기에서 수득한 혼합액을 0.05%의 Tween-60이 용해된 4℃의 분산액에 W-300 spray gun (Wagner Spray Tech. Co., Markdorf. Germany)으로 분무하여 미세캡슐을 제조하였다. 상기 미세캡슐 분산액을 24,900 × g에서 15분간 원심분리한 후 상등액을 분리하였으며 동량의 분산액을 넣어 세척하는 방식으로 2회 더 실시한 후 미세캡슐화된 겨우살이 추출물을 제조하였다.
실시예
4: 본 발명 샴푸 조성물의 제조
상기 실시예 2 내지 3에서 제조한 겨우살이 및 편백나무 진공추출물과 겨우살이 미세캡슐, 베타 글루칸을 기존의 샴푸조성물에 농도를 달리하여 3가지 제조실시예(samples) 및 4가지 비교예를 제조하였다.
실험예
1:
Western
blot
법을 이용한 글루텐 함유 여부 조사
본 발명에서는 웨스턴 블럿법을 이용하여 글루텐의 함유 여부를 확인하였다. 상기 제조실시예(sample) 1, 2, 3 및 비교예 4를 각각 1번부터 4번 레인에 10% polyacrylamide gel을 통해 전기영동한 후 PVDF 막에 transfer하였다.
PVDF 막에 실험용 마우스에서 직접 생산한 글리아딘 다중클론항체를 1:1,000의 비율로 희석하여 반응시킨 후 그에 대한 HRP(Horseradish peroxidase)가 붙은 2차 항체를 1:2,000의 비율로 희석하여 반응시켰다. HRP에 대한 기질로 1/3로 희석한 ECL 용액을 처리 후 암실에서 필름으로 현상하였다.
실험 결과는 도 1과 같았다. 도 1에서 제조실시예 1, 2, 3번 및 비교예 모두에서 글루텐의 주성분인 글리아딘(분자량 34.5 kDa)에 대한 밴드가 보이지 않았다.
글리아딘 항체는 글루텐에 대한 상호 교차성을 가지고 있으므로 글리아딘 항체와 결합한 밴드가 보이지 않는 것으로 글루텐이 함유되어 있지 않음을 확인하였다.
실험예 2: ELISA 법을 이용한 글루텐 함량 조사
효소면역분석법(ELISA)를 이용하여 시료(제조실시예 13 및 비교예 14) 속에 함유되어 있는 글루텐 함량을 측정하였다.
글리아딘 측정을 위한 ELISA법의 원리는 도 2와 같다. 적정량의 항체를 면역분석용 플레이트에 피복한 후 HRP가 결합된 글리아딘과 시료를 동시에 넣고 경쟁반응시켰다. 각 칸을 세척한 후 HRP의 기질인 TMB solution을 넣어 발색반응을 일으키고 이를 450 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다.
실험 결과 작성된 전형적인 표준곡선은 도 3과 같았으며 1 ng의 글리아딘까지 측정할 수 있는 감도였다. 제조실시예 13 및 비교예 14 모두에서 글리아딘의 농도가 확인되지 않았으므로 글루텐이 함유되어 있지 않은 조성임을 확인하였다.
실험예 3: 발모효과 확인
발모촉진 실험 모델동물로 C57BL/6 마우스 모델을 사용하였다.
평가실험은 생후 42~56일된 마우스(C57BL/6,)를 사용하여 등 부위 털을 제거하고 실시예 및 비교예 조성물을 각각 실험군과 대조군으로 하여 각 3마리씩 1일 1회 100 mL를 28일간 도포하였으며 털을 제거한 면적대비 신생모가 자란 면적의 비율을 디지털카메라(Japan, olympia)로 촬영하고 이미지화상 분석기(Image analyzer/Image-Pro Plus, U.S.A)를 이용하여 비교한 것을 [표 2]에 나타내었다.
[표 2]에서 알 수 있는 바와 같이 실시예 1의 샴푸조성물은 대조군(비교예)에 비하여 높은 발모촉진효과가 입증되었으며 실시예 1∼3중에서는 실시예 1> 실시예 2> 실시예 3 순으로 발모효과가 높게 나타났다.
실험예
4: 녹 방지 실험
상기 실시예에 사용된 겨우살이 진공추출물과 편백나무 진공추출물의 항산화 효과를 확인하기 위해 상기 진공추출물의 녹을 방지하는 효과를 실험하였다. 반지름이 50 mm인 페트리 디쉬에 수돗물, 겨우살이 진공추출물, 편백나무 진공추출물을 각각 20 mL씩 넣고 클립을 36시간 담갔다.
도 4와 같이 음성대조군인 수돗물은 24시간이 채 지나기 전부터 녹이 생기는 것을 확인할 수 있지만 겨우살이 진공추출물 및 편백나무 진공추출물은 36시간이 지나도록 녹이 생기지 않는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 겨우살이 진공추출물 및 편백나무 진공추출물에 항산화 효과가 있음을 간접적으로 확인할 수 있었다.
실험예 5: 항산화 실험
상기 겨우살이 진공 추출물과 편백나무 진공추출물을 직접적인 항산화 측정 방법인 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)법을 통해 항산화 능력을 확인하였다.
겨우살이 진공 추출물, 편백나무 진공추출물을 0.2 mM DPPH 용액과 1:1로 희석한 후 빛을 차단한 실온에서 30분간 반응하였다. 반응 후 분광광도계의 517 nm에서 그 파장을 측정 후 자유 라디컬 소거능은 하기와 같은 공식으로 구하여 그 결과를 [표 3]에 나타내었다.
상기 실험결과 [표 3]에서 겨우살이 진공추출물과 편백나무 진공추출물이 각각 높은 항산화 효과를 보임을 확인하였다.
실험예
6: 검정 새 콩 발아실험
상기 겨우살이 진공추출물이 씨앗 발아에 미치는 영향을 확인하기 위해 검정 새 콩으로 발아실험을 진행하였다. 생수와 겨우살이 진공추출물을 각각 접시에 10 mL씩 부은 후 검정 새 콩을 같은 개수로 올려두고 마르지 않게 유지했다.
실험 결과 도 5와 같이 겨우살이 진공추출물에서는 3일 만에 싹이 난 반면, 생수에서는 6일 후에 싹이 나는 것을 관찰함으로써 겨우살이 진공추출물이 발아에 미치는 영향을 확인하였다.
실험예
7: 수삼 새싹 실험
수삼에 대한 겨우살이 진공추출물이 미치는 영향을 확인하기 위하여 새싹 성장 실험을 진행하였다. 수삼을 생수와 겨우살이 진공추출물에 각각 담근 후 그 변화를 관찰하였다.
실험 결과 도 6과 같이 생수에 담근 수삼은 3일 만에 썩어서 수면으로 떠오른 반면, 겨우살이 진공 추출물에 담근 수삼은 새싹이 자라남을 관찰하였다. 이를 통해 겨우살이 진공추출물의 새싹 발아에 미치는 독성유무를 확인하였다.
Claims (3)
- 한국산 겨우살이 진공추출물 10%(w/v);
편백나무 진공추출물 10%(w/v);
겨우살이 미세캡슐 13%(w/v);
베타 글루칸 13%(w/v)을 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모예방 및 발모촉진용 조성물. - 청구항 1의 조성물을 포함하는 제형이 두피 트리트먼트제, 비누, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어팩, 로션, 컨디셔너, 헤어오일, 무스, 크림, 고형제, 용액제, 유제, 분산제, 미셀, 리포좀, 연고제로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탈모예방 및 발모촉진용 화장료 조성물.
- 청구항 1 내지 2에 있어서, 상기 조성물이 글루텐을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 탈모예방 및 발모촉진용 화장료 조성물.
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