KR20140054085A - 증가된 fcrn 결합을 갖는 tnf-알파 항원-결합 단백질 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질을 제공한다. 예를 들어, 아달리무맙에 비해 FcRn 수용체에 대한 증가된 결합 또는 증가된 반감기를 나타내는 항-TNF 항체, 예를 들어, 아달리무맙의 신규한 변이체를 제공한다. 장애 및 또는 질병의 치료에서 항원 결합 단백질을 포함하는 조성물 및 상기 조성물의 용도가 또한 제공된다.
Description
분야
본 발명은 항-TNF 항체의 신규한 변이체에 관한 것이다.
배경
항체는 적어도 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄를 포함하는 이종다합체 당단백질이다. IgM을 제외하고는, 온전한 항체는 보통 2개의 동일한 경쇄(L) 및 2개의 동일한 중쇄(H)로 구성된 약 150Kda의 이종사합체 당단백질이다. 각각의 중쇄는 한 말단에 가변 도메인(VH) 및 그 뒤에 다수의 불변 영역을 갖는다. 각각의 경쇄는 가변 도메인(VL) 및 이의 다른 말단에 불변 영역을 가지며; 경쇄의 불변 영역은 중쇄의 첫번째 불변 영역과 정렬되고, 경쇄 가변 도메인은 중쇄의 가변 도메인과 정렬된다. 인간 항체의 중쇄의 불변 영역의 아미노산 서열에 따라, 인간 항체는 5개의 상이한 클래스, IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM으로 지정될 수 있다. IgG 및 IgA는 서브클래스, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4; 및 IgA1 및 IgA2로 추가로 세분될 수 있다. 항체의 가변 도메인은 상보성 결정 영역(CDR)로 언급되는 특정 변동성을 나타내는 특정 영역을 갖는 항체에게 결합 특이성을 부여한다. 가변 영역의 더욱 보존된 부분은 프레임워크 영역(FR)로 언급된다. 온전한 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인은 각각 3개의 CDR에 의해 연결된 4개의 FR을 포함한다. 불변 영역은 항원에 대한 항체의 결합과 직접적으로 관련되지 않지만, 다양한 효과기 기능, 예를 들어, 항체 의존성 세포-매개 세포독성(ADCC), Fcγ 수용체로의 결합을 통한 포식작용, 신생아 Fc 수용체(FcRn)를 통한 반감기/청소율 및 보체 캐스케이드의 C1q 성분을 통한 보체 의존성 세포독성에서의 참여를 나타낸다. IgG 항체의 구조의 특성은 2개의 항원-결합 부위가 존재하는 것이며, 상기 둘 모두는 동일 에피토프에 대해 특이적이다. 따라서, 이들은 단일특이적이다.
성체 포유동물에서, 신생아 Fc 수용체로도 공지된 FcRn은 IgG 아이소형(isotype)의 항체에 결합하고 IgG 아이소형의 항체를 분해로부터 구제하는 보호 수용체로 작용함으로써 혈청 항체 수준을 유지시키는데 중요한 역할을 한다. IgG 분자는 내피 세포에 의해 포식화되고, 이들이 FcRn에 결합하는 경우, 순환으로 재순환된다. 대조적으로, FcRn에 결합하지 않는 IgG 분자는 세포로 진입하고, 이들이 분해되는 리소솜 경로로 표적화된다.
신생아 FcRn 수용체는 항체 청소 및 조직을 가로지르는 트랜스사이토시스(transcytosis) 둘 모두와 관련된 것으로 생각된다(Junghans R.P (1997) Immunol. Res 16. 29-57 and Ghetie et al (2000) Annu.Rev.Immunol. 18, 739-766 참조).
WO 9734631호에는 증가된 혈청 반감기 및 Fc-힌지 영역 내의 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 돌연변이 IgG 분자를 포함하는 조성물이 개시되어 있다. CH2 도메인 내의 번호 252, 254, 256, 309, 311 또는 315 또는 CH3 도메인 내의 433 또는 434로부터 선택된 아미노산 중 하나 이상에서의 아미노산 치환이 개시되어 있다.
WO 00/42072호에는 변경된 FcRn 결합 친화성을 갖는 변이체 Fc 영역을 포함하는 폴리펩티드가 개시되어 있으며, 상기 폴리펩티드는 Fc 영역의 아미노산 위치 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439, 및 447 중 임의의 하나 이상의 아미노산 위치에서 아미노산 변형을 포함한다.
WO 02/060919호에는 위치 251, 253, 255, 285-290, 308-314, 385-389, 및 428-435 중 하나 이상의 위치에서 아미노산 변형을 포함하는 IgG 불변 도메인을 포함하는 변형된 IgG가 개시되어 있다.
WO 2004035752호에는 클래스 IgG의 변형된 항체가 개시되어 있으며, 여기서 아미노산 잔기 250, 314, 및 428로 구성되는 군으로부터 선택된 중쇄 불변 영역으로부터의 적어도 하나의 아미노산 잔기는 변형되지 않은 클래스 IgG 항체에 존재하는 것과 상이하다.
문헌[Shields et al. (2001, J Biol Chem; 276:6591-604)]에서는 인간 IgG1 항체의 Fc 영역 내의 잔기를 변경시키기 위해 알라닌 스캐닝 돌연변이유발을 이용하였고, 이후 인간 FcRn으로의 결합을 평가하였다. 알라닌으로 변경되는 경우 FcRn으로의 결합을 효과적으로 폐기시킨 위치는 I253, S254, H435, 및 Y436을 포함한다. E233-G236, R255, K288, L309, S415, 및 H433과 같은 다른 위치는 결합에 있어서 덜 현저한 감소를 나타내었다. 여러 아미노산 위치는 알라닌으로 변경되는 경우 FcRn 결합에서 개선을 나타내었다.
문헌[Dall'Acqua et al. (2002, J Immunol.; 169:5171-80)]에는 마우스 FcRn에 대한 인간 IgG1 힌지-Fc 단편 파지 디스플레이 라이브러리의 무작위 돌연변이유발 및 스크리닝이 기재되어 있다. 이들에는 위치 251, 252, 254-256, 308, 309, 311, 312, 314, 385-387, 389, 428, 433, 434, 및 436의 무작위 돌연변이유발이 개시되어 있다.
WO2006130834호에는 252, 254, 256, 433, 434 및 436 중 하나 이상의 위치에서 아미노산 변형을 포함하는 IgG 불변 도메인을 포함하는 IgG를 포함하는 변형된 IgG가 개시되어 있다.
따라서, IgG 항체의 Fc 도메인의 변형은 치료 항체의 혈청 반감기를 증가시키는 수단으로 논의되어 왔다. 그러나, 다수의 상기 변형은 다양한 항체에서 다양하고 때때로 모순된 결과를 제시하였다.
치료제로서의 항원 결합 단백질의 투여는 단백질의 청소 및 반감기 특징과 관련하여 처방된 빈도의 주사를 필요로 한다.
아달리무맙(adalimumab)은 류머티스 관절염, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 및 크론병의 치료에 사용되는 TNF-알파에 대한 모노클로날 항체이다. 이는 포유동물 세포 발현 시스템을 이용한 재조합 DNA 기술에 의해 생성된다. 이는 330개의 아미노산으로 구성되고, 약 148 킬로달톤의 분자량을 갖는다. 미국 특허 6090382호를 참조하라. 0.5 ㎎/㎏(~40 ㎎)의 용량에서, 아달리무맙에 대한 청소는 11 내지 15 ㎖/시간의 범위로 언급되고, 분포 용적(Vss)은 5 내지 6리터의 범위이고, 평균 말기 반감기는 약 2주였다(www.medicines.org.uk로부터 이용가능한 제품 특징의 요약). 이들 반감기 및 청소 특성은 현재 아달리무맙은 2주에 1회로 투여되는 것이 필요함을 의미한다. 질병에 따라 일부 환자에서, 예를 들어, 건선 환자에서와 같이 로딩 용량(loading dose)을 투여하는 것이 필요할 수 있다. 상기 투여량은 유지 용량과는 상이할 수 있다.
발명의 개요
한 양태에서, 본 발명은 CDRH1(SEQ ID NO:27), CDRH2(SEQ ID NO:28), CDRH3(SEQ ID NO:29), CDRL1(SEQ ID NO:30), CDRL2(SEQ ID NO:31), 및 CDRL3(SEQ ID NO:32) 또는 이들의 변이체를 포함하는 TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질에 관한 것으로, 상기 변이체는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3과 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실; 및 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 인간 IgG1 불변 도메인의 신생아 Fc 수용체(FcRn) 결합 부분을 함유할 수 있고, 상기 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG와 비교하여 pH 6에서의 증가된 FcRn 결합 친화성 및/또는 증가된 반감기를 갖는다.
명세서 전체에 걸쳐, 용어 "인간 IgG1 불변 도메인"은 당업자에게 공지된 모든 동종이형(allotype) 및 이의 변이체를 포함한다.
한 양태에서, 본 발명은 CDRH1(SEQ ID NO:27), CDRH2(SEQ ID NO:28), CDRH3(SEQ ID NO:29), CDRL1(SEQ ID NO:30), CDRL2(SEQ ID NO:31), 및 CDRL3(SEQ ID NO:32); 또는 이들의 변이체를 포함하는 TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질에 관한 것으로, 상기 변이체는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3에 비해 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실; 및 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 인간 IgG1 불변 도메인의 신생아 Fc 수용체(FcRn) 결합 부분을 함유할 수 있고, 상기 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG와 비교하여 증가된 반감기를 갖고, 상기 항원 결합 단백질은 2주에 1회 투여되는 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG의 동일 용량에 의해 달성되는 것과 동등한 평균 항정-상태 최저 농도(mean steady-state trough concentration)를 달성하기 위해 4주에 1회 이하로 투여될 수 있다.
한 양태에서, 본 발명은 CDRH1(SEQ ID NO:27), CDRH2(SEQ ID NO:28), CDRH3(SEQ ID NO:29), CDRL1(SEQ ID NO:30), CDRL2(SEQ ID NO:31), 및 CDRL3(SEQ ID NO:32) 또는 이들의 변이체를 포함하는 TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질에 관한 것으로, 상기 변이체는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3과 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실; 및 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 인간 IgG1 불변 도메인의 FcRn 결합 부분을 함유할 수 있고, 상기 항원 결합 단백질은 25℃에서 ProteOn XPR36 단백질 상호작용 어레이 시스템에 의해 평가시 pH 6에서의 상기 변형 없이 동일 CDR을 갖는 항-TNF 항원 결합 단백질보다 2배, 또는 3배, 또는 4배 또는 5배, 또는 6배 또는 8배 또는 그 초과로 큰 큰 FcRn에 대한 친화성을 갖고, 상기 어레이 시스템은 칩 상에 고정된 항원 결합 단백질을 갖는다.
한 양태에서, 본 발명은 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG의 변이체인 항원 결합 단백질에 관한 것으로, 상기 항원 결합 단백질 변이체는 치환이 없는 IgG에 비해 항원 결합 단백질 변이체의 반감기를 증가시키기 위해 IgG 불변 도메인의 신생아 Fc 수용체(FcRn) 결합 부분 내에 하나 이상의 치환을 포함하고, 상기 변이체가 4 내지 8주 간격으로 40 ㎎의 단일 용량으로 환자에게 투여되는 경우, 환자 집단에서의 평균 항정-상태 최저 농도는 투여 간격 사이에 4 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않거나, 5 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는다. 바람직하게는, 환자 집단에서의 평균 혈청 최저 항체 농도는 투여 간격 사이에 6 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는다. 바람직하게는, 환자 집단에서의 평균 혈청 최저 항체 농도는, 변이체가 8주 간격으로 40 ㎎의 단일 용량으로 환자에 투여되는 경우 투여 간격 사이에 5 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는다. 바람직하게는, 환자 집단에서의 평균 혈청 최저 항체 농도는, 변이체가 8주 간격으로 40 ㎎의 단일 용량으로 환자에게 투여되는 경우 여전히 최적 효능을 제공하면서 투여 간격 사이에 4 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는다. 바람직하게는, 환자 집단에서의 평균 혈청 최저 항체 농도는, 변이체가 8주 간격으로 40 ㎎의 단일 용량으로 환자에 투여되는 경우 최적 효능을 여전히 제공하면서 투여 간격 사이에 3 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는다.
한 양태에서, 본 발명은 질병의 치료를 위한 본원에 개시된 바와 같은 항원 결합 단백질에 관한 것으로, 상기 항원 결합 단백질은 2주에 1회 투여되는 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG의 동일 용량에 의해 달성되는 것과 동등한 평균 항정-상태 최저 농도를 달성하기 위해 4주에 1회 이하로 환자에게 투여될 수 있다.
한 양태에서, 본 발명은 질병을 가진 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 본 발명에 따른 항원 결합 단백질을 투여하는 것을 포함한다.
한 양태에서, 본 발명은 본 발명에 따른 항원 결합 단백질, 또는 이의 일부, 예를 들어, 중쇄 또는 경쇄를 엔코딩하는 핵산 서열에 관한 것이다. 한 양태에서, 본 발명은 본 발명에 따른 항원 결합 단백질, 또는 이의 일부, 예를 들어, 중쇄 또는 경쇄를 엔코딩하는 발현 벡터에 관한 것이다.
한 양태에서, 본 발명은 본 발명에 따른 항원 결합 단백질을 엔코딩하는 핵산 서열을 포함하는 숙주 세포에 관한 것이다. 한 양태에서, 본 발명은 건선 또는 류머티스 관절염의 치료에서 사용하기 위한 본 발명에 따른 항원 결합 단백질에 관한 것이다.
한 양태에서, 본 발명은 본 발명에 따른 항원 결합 단백질 및 메토트렉세이트의 동시 전달을 위한, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질을 포함하고, 임의로 메토트렉세이트를 포함하는 키트에 관한 것이다.
한 양태에서, 본 발명은 메토트렉세이트로 이미 처리된 개체에서 류머티스 관절염의 치료를 위한 본원에 개시된 바와 같은 항원 결합 단백질, 및 류머티스 관절염의 치료를 위한 메토트렉세이트와 조합된 항원 결합 단백질에 관한 것으로, 상기 조합물은 동시에, 실질적으로 동시에, 또는 순차적으로 전달된다.
한 양태에서, 본 발명은 메토트렉세이트로 이미 처리된 개체에서 건선의 치료를 위한 본원에 개시된 바와 같은 항원 결합 단백질, 및 건선의 치료를 위한 메토트렉세이트와 조합된 항원 결합 단백질에 관한 것으로, 상기 조합물은 동시에, 실질적으로 동시에, 또는 순차적으로 전달된다.
도면의 간단한 설명
도 1 - 인간 TNFα에 대한 항-TNFα 항체의 결합
도 2 - 가속화된 스트레스인자 연구 후의 인간 TNFα에 대한 항-TNFα 항체의 결합 활성의 분석
도 3 - 2주 동안의 25% 인간 혈청에서의 인큐베이션 후 인간 TNFα에 대한 항-TNFα 항체의 결합.
도 4 - 동결-해동 후 인간 TNFα에 대한 항-TNFα 항체의 결합.
도 5 - FcγRIIIa 수용체에 대한 항-TNFα 항체의 분석. (a) 인간 FcγRIIIa (발린 158 변이체)에 대한 결합, (b) 인간 FcγRIIIA(페닐알라닌 158 변이체)에 대한 결합.
도 6 - 단일 정맥내 주입(1hr 주입) 후 암컷 시노몰구스(cynomolgus) 원숭이에서의 BPC2604 및 수컷 시노몰구스 원숭이에서의 파스콜리주맙(pascolizumab)의 평균 용량 표준화된 혈장 농도.
발명의 상세한 설명
본 발명은 TNF-알파에 특이적으로 결합하는 신규한 항원 결합 단백질에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 아달리무맙과 비교하여 FcRn 수용체에 대한 증가된 결합 및/또는 증가된 반감기를 나타내는 항-TNF 항체, 예를 들어, 아달리무맙의 신규한 변이체에 관한 것이다. 아달리무맙은 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG 모노클로날 항체이다.
본 발명자는 본원에 기재된 바와 같은 아달리무맙에 대한 특정 변형이 하기 실시예에 제시되는 바와 같이 FcRn 결합에서 특정 개선을 나타내는 것을 발견하였다. 아달리무맙의 친화성 성숙된 변이체가 또한 항-TNF-알파 결합 및/또는 중화 활성에서 개선을 나타낸다.
본 발명의 신규한 항원 결합 단백질은 FcRn 수용체에 대한 증가된 결합 및/또는 증가된 반감기 및/또는 증가된 평균 체류 시간 및/또는 감소된 청소를 갖는다. FcRn에 대한 결합은 생체내에서 더 긴 혈청 보유를 발생시키는 것으로 생각된다. 생체내에서의 Fc 단백질의 보유를 증가시키기 위해, 결합 친화성에서의 증가가 약 pH 6에서 관찰된다. 따라서, 한 양태에서, 본 발명은 FcRn에 대한 최적화된 결합을 갖는 항원 결합 단백질을 제공한다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질의 반감기는 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG와 비교하여 2 내지 6배, 예를 들어, 2배, 3배, 4배, 5배 또는 6배 증가된다. 바람직하게는, 본 발명의 항원 결합 단백질의 반감기는 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG에 비해 3배, 4배, 또는 그 초과로 증가된다. 예를 들어, IgG가 10일 또는 10 내지 20일의 범위의 반감기를 갖는 아달리무맙인 경우, 한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 약 40 내지 80일의 반감기를 나타낸다. 예를 들어, 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:5, 또는 SEQ ID NO:9, 또는 SEQ ID NO:15, 또는 SEQ ID NO:18, 또는 SEQ ID NO:21, 또는 SEQ ID NO:24, 또는 SEQ ID NO:163, 또는 SEQ ID NO:165, 또는 SEQ ID NO:167, 또는 SEQ ID NO:169로부터 선택된 중쇄 서열을 포함한다.
한 구체예에서, 환자에서 4주에 1회 이하로 투여되는 본 발명의 항원 결합 단백질은 약 2 ㎍/㎖ 내지 약 7 ㎍/㎖의 평균 항정-상태 최저 농도를 달성한다. 바람직하게는, 평균 항정-상태 최저 농도는 약 4 ㎍/㎖ 내지 약 7 ㎍/㎖, 더욱 바람직하게는 약 5 ㎍/㎖ 내지 약 6 ㎍/㎖이다.
한 구체예에서, 환자에서 28일에 1회 이하로 투여되는 본 발명의 항원 결합 단백질은 약 2 ㎍/㎖ 내지 약 7 ㎍/㎖의 평균 항정-상태 최저 농도를 달성한다. 바람직하게는, 평균 항정-상태 최저 농도는 약 4 ㎍/㎖ 내지 약 7 ㎍/㎖, 더욱 바람직하게는 약 5 ㎍/㎖ 내지 약 6 ㎍/㎖이다.
본 발명의 한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 동일 용량으로 2주에 1회 투여되는 경우의 아달리무맙에 의해 달성되는 것과 동등한 평균 항정-상태 최저 농도를 달성하기 위해 4, 5, 6, 7 또는 8주에 1회 투여될 수 있다.
본 발명의 모든 양태의 한 바람직한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 7 또는 8주에 1회 투여될 수 있다.
본 발명의 한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 동일 용량으로 14일에 1회 투여되는 경우의 아달리무맙에 의해 달성되는 것과 동등한 평균 항정-상태 최저 농도를 달성하기 위해 25-80일에 1회, 예를 들어, 40-60일에 1회, 또는, 예를 들어, 28, 35, 42, 49 또는 56일에 1회 투여될 수 있다.
본 발명의 한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 49 내지 60일, 예를 들어, 56일에 1회 투여될 수 있다.
본 발명의 모든 양태의 한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 25℃에서 ProteOn XPR36 단백질 상호작용 어레이 시스템에 의해 평가시 pH 6에서 인간 FcRn에 대해 2배, 또는 4배, 또는 6배, 또는 8배 또는 그 초과의 친화성을 가지며, 상기 항체는 칩 상에 고정된다. 바람직하게는, 항원 결합 단백질은 약 100 내지 약 500 KD(nM), 예를 들어, 약 130 내지 약 360 KD(nM) 또는 약 140 내지 약 250KD(nM) 또는 약 140 내지 약 210KD(nM)의 인간 FcRn에 대한 친화성을 갖는다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질의 청소는 약 2 내지 약 10 ㎖/hr, 바람직하게는 약 2 내지 약 5㎖/hr 또는 2 내지 4㎖/hr 또는 2 내지 3㎖/hr, 예를 들어, 약 2, 약 2.5, 3, 4 또는 5 ㎖/hr이다. 한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 아달리무맙보다 2배, 3배, 4배 또는 5배 더 낮은 청소율을 나타낸다. 한 구체예에서, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질에 대한 청소는 상기 특정된 범위 내이거나, 약 40 ㎎의 인간 용량에서 아달리무맙보다 2배, 3배, 4배 또는 5배 더 낮다.
한 양태에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 아달리무맙에 비해 변이체의 반감기를 증가시키기 위해 IgG 불변 도메인의 FcRn 결합 부분 내에 하나 이상의 치환을 포함하는 변이체인 아달리무맙의 변이체(SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG)이며, 상기 변이체가 4 내지 8주 간격, 바람직하게는 8주 간격으로 40 ㎎의 단일 용량으로 환자에 투여되는 경우, 환자 집단에서의 평균 항정-상태 최저 항체 농도는 5 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는다. 한 구체예에서, 환자 집단에서의 평균 항정-상태 최저 항체 농도는 투여 간격 사이에 6 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는다.
한 추가 구체예에서, 항원 결합 단백질은 상기 항원 결합 단백질의 Fc 영역 내에 적어도 하나의 아미노산 변형을 포함하며, 상기 변형은 아달리무맙 서열 내의 동일 위치와 비교하여 Fc 영역의 위치 250, 252, 254, 256, 257, 259, 308, 428 또는 434 중 하나 이상의 위치에 존재하고, Fc 영역 내의 아미노산의 넘버링은 케이뱃(Kabat)의 EU 인덱스의 넘버링이다.
야생형 인간 IgG1은 위치 308-314에서 아미노산 잔기 Val-Leu-His-Gln-Asp-Trp-Leu, 위치 251-256에서 아미노산 잔기 Leu-Met-Ile-Ser-Arg-Thr, 위치 428-436에서 아미노산 잔기 Met-His-Glu-Ala-Leu-His-Asn-HisTyr, 및 위치 385-389에서 아미노산 잔기 Gly-Gln-Pro-Glu-Asn을 갖는다. 잔기 넘버링은 IgG2-4에 대해 상이할 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:13의 서열을 포함하는 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 한 구체예에서, 인간 IgG1 중쇄 불변 도메인의 FcRn 결합 부분 내의 하나 이상의 아미노산 치환은 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 252, 254 및 256에 존재하며, 잔기 252에서의 아미노산 치환은 met의 tyr, phe, tryp 또는 thr로의 치환이고; 잔기 254에서의 아미노산 치환은 ser의 thr로의 치환이고; 잔기 256에서의 아미노산 치환은 thr의 ser, arg, glu, asp 또는 thr로의 치환이다. 바람직하게는, 잔기 252에서의 아미노산 치환은 tyr로의 치환이고; 잔기 254에서의 아미노산 치환은 thr로의 치환이고, 잔기 256에서의 치환은 glu으로의 치환이다. 바람직하게는, IgG1 불변 도메인은 SEQ ID NO:7에 제시되어 있다.
한 구체예에서, 인간 IgG1 불변 도메인의 FcRn 결합 부분 내의 하나 이상의 아미노산 치환은 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 250 및 428에 존재하며, 잔기 250에서의 아미노산 치환은 thr의 glu 또는 gln으로의 치환이고; 잔기 428에서의 아미노산 치환은 met의 leu 또는 phe로의 치환이다. 바람직하게는, 잔기 250에서의 아미노산 치환은 glu로의 치환이고, 잔기 428에서의 아미노산 치환은 leu으로의 치환이다. 바람직하게는, IgG1 불변 도메인은 SEQ ID NO:16에 제시되어 있다.
한 구체예에서, 인간 IgG1 불변 도메인의 FcRn 결합 부분 내의 하나 이상의 아미노산 치환은 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 428 및/또는 434에 존재한다. 바람직하게는, 잔기 428에서의 아미노산 치환은 met의 leu으로의 치환이고, 잔기 434에서의 아미노산 치환은 asn의 ser으로의 치환이다. 바람직하게는, IgG1 불변 도메인은 SEQ ID NO:10에 제시되어 있다.
한 구체예에서, 인간 IgG1 불변 도메인의 FcRn 결합 부분 내의 하나 이상의 아미노산 치환은 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 259 또는 308에 존재한다. 바람직하게는, 잔기 259에서의 치환은 val의 ile으로의 치환이고, 잔기 308에서의 아미노산 치환은 val의 phe로의 치환이다. 바람직하게는, IgG1 불변 도메인은 SEQ ID NO:19 또는 SEQ ID NO:22에 제시되어 있다.
한 구체예에서, 인간 IgG1 중쇄 불변 도메인의 FcRn 결합 부분 내의 하나 이상의 아미노산 치환은 SEQ ID NO:25에 제시된 바와 같이 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 257 및 434에 존재한다.
한 구체예에서, 인간 IgG1 중쇄 불변 도메인의 FcRn 결합 부분 내의 하나 이상의 아미노산 치환은 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 433 및 434에 존재하고, 예를 들어, 잔기는 H433K 및 N434F이다. 바람직하게는, IgG1 불변 도메인은 SEQ ID NO:165 또는 SEQ ID NO:167에 제시되어 있다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 표 A에 나열된 IgG1 불변 도메인 변형 중 임의의 것을 포함한다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 항체이다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:6 및/또는 SEQ ID NO:3의 가변 도메인, 또는 SEQ ID NO:6 또는 SEQ ID NO:3의 길이에 걸쳐 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하고/하거나, 적어도 90%의 동일성을 공유하는 SEQ ID NO:6 및/또는 SEQ ID NO:3의 가변 도메인의 변이체를 포함한다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:5, 9 또는 15에 제시된 바와 같은 중쇄 서열과 함께 임의로 SEQ ID NO:2에 제시된 바와 같은 경쇄 서열을 포함한다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:78 또는 80에 제시된 바와 같은 가변 중쇄 도메인 서열을 포함한다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:145 또는 SEQ ID NO:146에 제시된 바와 같은 중쇄 서열과 함께 임의로 SEQ ID NO:148, 150 또는 152에 제시된 바와 같은 경쇄 변이체를 포함한다.
한 구체예에서, 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:18 또는 21에 제시된 바와 같은 중쇄 서열과 함께 임의로 SEQ ID NO:2에 제시된 바와 같은 경쇄 서열을 포함한다.
한 구체예에서, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질은 표 A에 특정된 가변 도메인 중 임의의 것을 포함한다. 한 구체예에서, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질은 표 A에 제시된 바와 같은 cb1-3-VH, cb2-44-VH, cb1-39-VH, cb1-31-VH, cb2-11-VH, cb2-40-VH, cb2-35-VH, cb2-28-VH, cb2-38-VH, cb2-20-VH, cb1-8-VL 또는 cb1-43-VL의 서열을 갖는 가변 중쇄 도메인을 포함한다.
한 구체예에서, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질은 표 A에 제시된 바와 같은 cb1-45-VL, cb1-4-VL, cb1-41-VL, cb1-37-VL, cb1-39-VL, cb1-33-VL, cb1-35-VL, cb1-31-VL, cb1-29-VL, cb1-22-VL, cb1-23-VL, cb1-12-VL, cb1-10-VL, cb2-1-VL, cb2-11-VL, cb2-40-VL, cb2-35-VL, cb2-28-VL, cb2-20-VL, cb1-3-VL, cb2-6-VL 또는 cb2-44-VL의 서열을 갖는 가변 경쇄 도메인을 포함한다.
예를 들어, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질은 표 A에 제시된 바와 같은 cb1-3VH, cb2-44VH 또는 cb2-6VL의 서열을 갖는 가변 도메인을 포함한다.
한 구체예에서, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질은 표 A에 특정된 가변 도메인 중 임의의 것을 포함한다. 한 구체예에서, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:170 또는 SEQ ID NO:174 또는 SEQ ID NO:178로부터 선택된 서열을 갖는 가변 중쇄 도메인을 포함한다.
한 구체예에서, 본 발명에 따른 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:171 또는 SEQ ID NO:175 또는 SEQ ID NO:179로부터 선택된 서열을 갖는 가변 경쇄 도메인을 포함한다.
한 추가 구체예에서, 항원 결합 단백질은 표 A에 나열된 IgG1 불변 도메인 변형 중 임의의 것을 포함한다.
상기 서열 중 임의의 서열의 길이에 걸쳐 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하고/하거나 적어도 90%의 동일성을 공유하는 상기 언급된 가변 도메인 또는 중쇄 서열 또는 경쇄 서열 모두의 변이체가 또한 본 발명의 범위 내이다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은, 변이체가 SEQ ID NO:29와 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환을 갖는 CDRH3(SEQ ID NO:29)의 변이체를 포함한다. 한 구체예에서, 변이체 CDRH3는 SEQ ID NO:40 내지 49 중 어느 하나에 제시된 서열을 가질 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은, 변이체가 SEQ ID NO:27과 비교하여 1 또는 2개의 아미노산 치환을 갖는 CDRH1(SEQ ID NO:27)의 변이체를 포함한다. 한 구체예에서, 변이체 CDRH1은 SEQ ID NO:33 내지 38 중 어느 하나에 제시된 서열을 가질 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은, 변이체가 SEQ ID NO:30과 비교하여 1, 2 또는 3개의 아미노산 치환을 갖는 CDRL1(SEQ ID NO:30)의 변이체를 포함한다. 한 구체예에서, 변이체 CDRL1은 SEQ ID NO:50 내지 61 중 어느 하나에 제시된 서열을 가질 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은, 변이체가 SEQ ID NO:31과 비교하여 1, 2 또는 3개의 아미노산 치환을 갖는 CDRL2(SEQ ID NO:31)의 변이체를 포함한다. 한 구체예에서, 변이체 CDRL2는 SEQ ID NO:62 내지 72 중 어느 하나에 제시된 서열을 가질 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은, 변이체가 SEQ ID NO:32와 비교하여 1, 2 또는 3개의 아미노산 치환을 갖는 CDRL3(SEQ ID NO:32)의 변이체를 포함한다. 한 구체예에서, 변이체 CDRL3는 SEQ ID NO:73 내지 76 중 어느 하나에 제시된 서열을 가질 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명은 CDRH1(SEQ ID NO:27), CDRH2(SEQ ID NO:28), CDRH3(SEQ ID NO:29), CDRL1(SEQ ID NO:30), CDRL2(SEQ ID NO:31), 및 CDRL3(SEQ ID NO:32)로부터 선택된 CDR 중 하나 이상 또는 모두를 포함하는 TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질에 관한 것으로; 상기 CDR 중 임의의 CDR은 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3와 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하는 변이체 CDR일 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 CDRH1, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하며, 상기 CDR 중 임의의 CDR은 CDRH1, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3에 비해 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하는 변이체 CDR일 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3를 포함하며, 상기 CDR 중 임의의 CDR은 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3에 비해 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하는 변이체 CDR일 수 있다.
한 양태에서, 본 발명은 질병을 갖는 인간 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 본 발명에 따른 항원 결합 단백질을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 또한 인간에서 질병의 치료를 위한 본원에 개시된 바와 같은 항원 결합 단백질에 관한 것이다.
본 발명은 또한 질병의 치료를 위한 약제의 제조에 있어서 본원에 개시된 바와 같은 항원 결합 단백질, 및 질병의 치료에서 사용하기 위한 본원에 개시된 바와 같은 항원 결합 단백질의 용도에 관한 것이다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질에 의해 치료되는 질병은 류머티스 관절염, 다관절 소아 특발성 관절염, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 궤양성 대장염, 척추추관절병증, 크론병 또는 건선이다.
한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 메토트렉세이트와 함께 투여된다. 메토트렉세이트는 항원 결합 단백질 전, 후 또는 동시에 또는 실질적으로 동시에 전달될 수 있다. 한 바람직한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 류머티스 관절염으로 고통받는 환자에게 메토트렉세이트와 함께 투여된다. 한 구체예에서, 메토트렉세이트는 항원 결합 단백질의 면역원성 효과를 감소시키기 위해 본 발명의 항원 결합 단백질이 투여되는 환자에게 투여된다. 한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질은 메토트렉세이트가 이미 투여되는 환자에게 투여된다. 메토트렉세이트는 항원 결합 단백질에 대한 면역 반응을 감소시키는 또 다른 허용되는 화합물, 예를 들어, 코르티코스테로이드로 대체될 수 있다.
한 양태에서, 본 발명은 질병을 갖는 환자를 치료하는 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 본 발명의 항원 결합 단백질을 투여하는 것을 포함한다. 한 구체예에서, 상기 방법은 4주에 1회 이하, 바람직하게는 5, 6, 7, 또는 8주에 1회, 가장 바람직하게는 8주에 1회로 단일한 20, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75 또는 80 ㎎의 용량으로 환자에게 항원 결합 단백질을 투여하는 것을 포함한다. 바람직하게는, 용량은 40 내지 80 ㎎, 예를 들어, 40 ㎎이다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 중쇄를 포함하는 본원에 개시된 임의의 아미노산 서열을 엔코딩하는 폴리누클레오티드 서열, 및 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 경쇄를 엔코딩하는 폴리누클레오티드를 제공한다. 상기 폴리누클레오티드는 동등한 폴리펩티드 서열에 해당하는 코딩 서열을 나타내지만, 상기 폴리누클레오티드 서열은 시작 코돈, 적절한 신호 서열 및 정지 코돈과 함께 발현 벡터로 클로닝될 수 있음이 이해될 것이다. 폴리누클레오티드는 DNA 또는 RNA일 수 있다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 중쇄 및/또는 경쇄를 엔코딩하는 하나 이상의 폴리누클레오티드를 포함하는 숙주 세포, 예를 들어, 재조합 세포, 형질전환된 세포 또는 트랜스펙션된 세포를 제공한다.
본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 항원 결합 작제물 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학적 조성물을 추가로 제공한다.
본 발명은 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 생성을 위한 방법을 추가로 제공하며, 상기 방법은 제 1 및 제 2 벡터를 포함하는 숙주 세포를 혈청-비함유이고/화학적으로 규정되고/동물 유래 성분 비함유인 배양 배지에서 배양하는 단계를 포함하고, 상기 제 1 벡터는 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 중쇄를 엔코딩하는 폴리누클레오티드를 포함하고, 상기 제 2 벡터는 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 경쇄를 엔코딩하는 폴리누클레오티드를 포함한다. 대안적으로, 상기 방법은 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 중쇄를 엔코딩하는 폴리누클레오티드 및 본원에 기재된 항원 결합 작제물 중 임의의 항원 결합 작제물의 경쇄를 엔코딩하는 폴리누클레오티드를 포함하는 벡터를 포함하는 숙주 세포를 혈청-비함유이고/화학적으로 규정되고/동물 유래 성분 비함유인 배양 배지에서 적합하게 배양하는 것을 포함할 수 있다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 본원에 기재된 변형에 따라 Fc를 변형시킴으로써 항체의 반감기를 증가시키는 방법을 포함한다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 향상된 FcRn 결합을 갖고, 효과기 기능의 또 다른 특성을 조절하는 하나 이상의 추가 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 본원에 기재된 바와 같은 항원 결합 단백질을 포함한다.
요망되는 방법에 의해 발현된 후, 본 발명의 항원 결합 단백질은 적절한 검정의 사용에 의해 시험관내 활성에 대해 이후 시험된다. 현재, 항원 결합 작제물의 이의 표적으로의 정성적 및 정량적 결합을 평가하기 위해 통상적인 ELISA 및 Biacore 검정 포맷이 사용된다. 추가로, 일반적인 청소 메커니즘에도 불구하고 체내에서의 항원 결합 단백질의 존속을 평가하기 위해 수행되는 이후의 인간 임상 연구 전에 중화 효능을 확인하기 위해 다른 시험관내 검정이 또한 이용될 수 있다.
처리 용량 및 기간은 인간 순환 내의 본 발명의 분자의 상대 기간을 나타내며, 본원에 제공된 정보를 기초로 하여 치료되는 질환 및 환자의 전반적 건강에 따라 당업자에 의해 조정될 수 있다. 연장된 기간(예를 들어, 4-6개월)에 걸친 반복된 투여(예를 들어, 4주, 5주, 6주, 7주 또는 8주에 1회)가 최대 치료 효능을 달성하는데 필요할 수 있음이 예견된다.
본 발명의 치료제의 투여 방식은 숙주에게 상기 작용제를 전달하는 임의의 적합한 경로일 수 있다. 본 발명의 항원 결합 단백질, 및 약학적 조성물은 비경구 투여, 즉, 피하(s.c), 수막강내, 복막내, 근내(i.m.), 정맥내(i.v.), 또는 비내 투여에 특히 유용하다. 한 구체예에서, 본 발명의 항원 결합 단백질 및 약학적 조성물은 피하 오토 인젝터 펜(auto injector pen) 또는 피하 사전-충전 주사기를 통해 투여된다.
본 발명의 항원 결합 단백질은 약학적으로 허용되는 담체 중에 활성 성분으로서 유효량의 본 발명의 항원 결합 단백질을 함유하는 약학적 조성물로 제조될 수 있다. 본 발명의 예방적 작용제에서, 주사 준비 형태의, 바람직하게는 생리학적 pH로 완충된 항원 결합 작제물을 함유하는 수성 현탁액 또는 용액이 바람직하다. 비경구 투여를 위한 조성물은 통상적으로 약학적으로 허용되는 담체, 바람직하게는 수성 담체 중에 용해된 본 발명의 항원 결합 작제물 또는 이의 칵테일의 용액을 포함할 것이다. 다양한 수성 담체, 예를 들어, 0.9% 염수, 0.3% 글리신 등이 사용될 수 있다. 상기 용액은 멸균될 수 있고, 일반적으로 미립자 물질을 함유하지 않는다. 상기 용액은 통상적인 널리 공지된 멸균 기술(예를 들어, 여과)에 의해 멸균될 수 있다. 조성물은 생리학적 조건에 가깝게 하기 위해 필요시 약학적으로 허용되는 보조 물질, 예를 들어, pH 조정제 및 완충제 등을 함유할 수 있다. 상기 약학적 제형 내의 본 발명의 항원 결합 단백질의 농도는, 예를 들어, 약 0.5% 미만, 일반적으로 1 중량% 또는 적어도 약 1 중량%로부터 15 또는 20 중량% 만큼 매우 다양할 수 있고, 이는 주로 선택된 특정 투여 방식에 따라 유체 부피, 점도 등을 기초로 하여 선택될 것이다.
아달리무맙은 높은 농도로 제형화시키기에 어려운 것으로 보고되었었다. WO2004016286호에는 시트레이트-포스페이트 완충액 및 폴리올 및 세제를 포함하는 다른 성분을 포함하는 아달리무맙 제형이 기재되어 있다. PDA 회의에서 2005년 10월 25일에 제안된 구두 발표 "Humira® - from Development to Commercial Scale Production"에서는 (i) 시트레이트-포스페이트 완충액; (ii) 아세테이트-포스페이트 완충액; 및 (iii) 포스페이트 완충액을 포함하는 제형이 보고되었다. 시험된 아세테이트-포스페이트 완충액은 아달리무맙에 대한 가장 나쁜 안정화 효과를 나타내었다. 문헌[Curtis et al. (2008) Current Medical Research and Opinion, Volume 27, p71-78]에는 주사가능한 아달리무맙을 이용한 류머티스 관절염을 갖는 환자에서의 주사-부위 작열감 및 천자통의 발생이 보고되어 있다. 작열감 및 천자통은 시트레이트 완충액-기반 제형에 부분적으로 기인되었다(Basic and Clinical Pharmacology & Toxicology, Volume 98, p218-221, 2006; and Journal of Pharmaceutical Sciences, Volume 97, p3051-3066, 2008). 그러나, WO20100129469호에는 여전히 시트레이트-포스페이트 완충액 및 소듐 클로라이드가 없는 폴리올을 포함하는 다른 성분을 포함하는 높은 아달리무맙 농도의 제형이 기재되어 있다. 더욱 최근의 WO2012065072호에는 완충액을 갖지 않음에 따라 주사시에 임의의 시트레이트 완충액 효과를 잠재적으로 회피하는, 계면활성제 및 폴리올을 포함하는 아달리무맙 제형이 기재되어 있다.
한 구체예에서, TNF-알파 항원 결합 단백질 및 아세테이트 완충액을 포함하는 액체 제형이 제공된다. 한 추가 구체예에서, TNF-알파 결합 단백질은 SEQ ID NO:27 또는 SEQ ID NO:33-38로부터 선택된 CDRH1 및/또는 SEQ ID NO:28의 CDRH2 및/또는 SEQ ID NO:29 또는 SEQ ID NO:40-49로부터 선택된 CDRH3 및/또는 SEQ ID NO:30 또는 SEQ ID NO:50-61로부터 선택된 CDRL1 및/또는 SEQ ID NO:31 또는 SEQ ID NO:62-72로부터 선택된 CDRL2 및/또는 SEQ ID NO:32 또는 SEQ ID NO:73-76의 CDRL3를 포함한다. 예를 들어, TNF-알파 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:27의 CDRH1 및 SEQ ID NO:28의 CDRH2 및 SEQ ID NO:29의 CDRH3 및 SEQ ID NO:30의 CDRL1 및 SEQ ID NO:31로부터 선택된 CDRL2 및 SEQ ID NO:32의 CDRL3 또는 이들의 변이체를 포함한다.
TNF-알파 항원 결합 단백질은 아달리무맙일 수 있다. TNF-알파 항원 결합 단백질은 BPC1494일 수 있다. TNF-알파 항원 결합 단백질은 BPC1496일 수 있다.
본원에 기재된 TNF-알파 항원 결합 단백질은 아세테이트 완충액 중에 제형화된다. 제형은 액체 형태일 수 있다. 제형은 계면활성제; 킬레이트제; 염; 및 아미노산 중 하나 이상, 이들의 조합물, 또는 이들 전부를 추가로 포함할 수 있다. TNF-알파 항원 결합 단백질은 높은 농도, 예를 들어, 50 ㎎/㎖로 제형화된다. 한 구체예에서, 제형은 폴리올을 포함하지 않는다. 또 다른 구체예에서, 제형은 추가 완충액 성분, 예를 들어, 시트레이트를 포함하지 않는다. 따라서, 본원에 기재된 제형은 안정적 제형 내에서 높은 농도의 TNF-알파 항원 결합 단백질, 특히 표 A에 기재된 바와 같은 TNF-알파 항원 결합 단백질을 제공하는 문제를 해결하며, 시트레이트-기반 완충액의 작열감 및 천자통 효과를 회피한다.
한 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 계면활성제 및 킬레이트제를 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 계면활성제 및 염을 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 계면활성제 및 아미노산을 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 킬레이트제 및 염을 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 킬레이트제 및 아미노산을 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 염 및 아미노산을 추가로 포함한다.
한 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 계면활성제, 킬레이트제, 및 염을 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 계면활성제, 킬레이트제, 및 아미노산을 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 계면활성제, 염, 및 아미노산을 추가로 포함한다. 또 다른 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 킬레이트제, 염, 및 아미노산을 추가로 포함한다.
한 구체예에서, 완충액은 소듐 아세테이트 트리하이드레이트이다. 이는 10 내지 100 mM의 소듐 아세테이트 트리하이드레이트(1.361 내지 13.61 ㎎/㎖)의 농도로 존재할 수 있다. 소듐 아세테이트 트리하이드레이트는 20 내지 80 mM, 30 내지 70 mM, 40 내지 60 mM, 또는 약 40mM, 약 45mM, 약 50mM, 약 55mM, 또는 약 60mM의 양으로 존재할 수 있다. 한 구체예에서, 소듐 아세테이트 트리하이드레이트는 약 50mM(6.80㎎/㎖)의 농도로 존재한다.
아세테이트 완충액은 유일한 완충액일 수 있다. 즉, 제형은 또 다른 완충액 성분, 예를 들어, 포스페이트 또는 시트레이트 완충액을 포함할 수 없다. 시트레이트 완충액은, (i) 3개의 해리 상수의 값이 3개의 양성자 수용체 상의 구별을 가능케 하기에 너무 가까워서 우수한 완충제가 아닐 수 있고; (ii) 시트레이트는 금속 킬레이트제로 작용할 수 있고, 이에 따라 금속 이온 균형에 영향을 미칠 수 있고; (iii) 시트레이트는 시트르산 주기의 대사물이고, 세포 대사에 영향을 미칠 잠재성을 갖는 다수의 이유로 제형에 유해할 수 있다.
적합한 계면활성제(세제로도 공지됨)는, 예를 들어, 폴리소르베이트(예를 들어, 폴리소르베이트 20 또는 80), 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르, 예를 들어, Brij 35.RTM., 폴록사머(예를 들어, 폴록사머 188, 폴록사머 407), Tween 20, Tween 80, 크레모포르(Cremophor) A25, 심파텐스(Sympatens) ALM/230, 및 Mirj를 포함할 수 있다. 한 구체예에서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80이다. 제형은 0.01 내지 0.1% 폴리소르베이트 80(0.1 내지 1 ㎎/㎖)의 농도를 포함할 수 있다. 폴리소르베이트 80은 0.01 내지 0.05%, 또는 0.01 내지 0.03%; 또는 약 0.015%, 약 0.02%, 또는 약 0.025%의 양으로 존재할 수 있다. 한 구체예에서, 폴리소르베이트 80은 약 0.02% w/v(0.2㎎/㎖)의 농도로 존재한다. 폴리소르베이트 80의 높은 농도, 예를 들어, 0.1% 초과는 제형에 유해할 수 있는데, 이는 상기 계면활성제가 제형의 저장시 산화의 수준을 증가시키고, 이에 따라 저장 수명을 감소시킬 수 있는 높은 수준의 산화제를 함유할 수 있기 때문이다.
적합한 킬레이트 작용제는 EDTA 및 금속 복합체(예를 들어, Zn-단백질 복합체)를 포함할 수 있다. 한 구체예에서, 킬레이트 작용제는 EDTA이다. 제형은 0.02 내지 0.2 mM EDTA(0.00748 내지 0.0748㎎/㎖)의 농도를 포함할 수 있다. EDTA는 0.02 내지 0.15 mM, 0.02 내지 0.1 mM, 0.03 내지 0.08 mM, 또는 0.04 내지 0.06 mM; 또는 약 0.03 mM, 약 0.04 mM, 약 0.05 mM, 또는 약 0.06 mM의 양으로 존재할 수 있다. 한 구체예에서, EDTA는 약 0.05mM(0.018㎎/㎖)의 농도로 존재한다.
적합한 염은 임의의 염-형성 반대이온, 예를 들어, 소듐을 포함할 수 있다. 예를 들어, 소듐 클로라이드가 사용될 수 있거나, 소듐 염 내의 반대이온으로서 클로라이드 대신 음이온 아세테이트가 사용될 수 있다. 한 구체예에서, 염은 소듐 클로라이드이다. 제형은 25 내지 100 mM 소듐 클로라이드(1.461 내지 5.84㎎/㎖)의 농도를 포함할 수 있다. 소듐 클로라이드는 35 내지 90 mM, 45 내지 80 mM, 25 내지 70 mM, 또는 45 내지 60mM; 또는 45mM, 46mM, 47mM, 48mM, 49mM, 50mM, 51 mM, 52mM, 53mM, 54mM, 55mM의 양으로 존재할 수 있다. 한 구체예에서, 소듐 클로라이드는 약 51mM(2.98㎎/㎖)의 농도로 존재한다.
적합한 아미노산은 아르기닌을 포함할 수 있다. 제형은 0.5 내지 5%의 아르기닌 비함유 염기(5 내지 50㎎/㎖)의 농도를 포함할 수 있다. 아르기닌 비함유 염기는 -의 양으로 존재할 수 있다. 다른 구체예에서, 아르기닌 비함유 염기는 0.5 내지 4.0%, 0.5 내지 3.5%, 0.5 내지 3.0%, 0.5 내지 2.5%, 또는 약 0.5%, 약 0.75%, 약 1%, 약 1.5%, 약 2%, 또는 약 3%로 존재할 수 있다. 한 구체예에서, 아르기닌은 약 1%(10㎎/㎖)의 농도로 존재한다.
폴리올은 다수의 하이드록실기를 갖는 물질이며, 이는 당(환원 및 비-환원 당), 당 알코올 및 당 산을 포함한다. 폴리올의 예는 프룩토스, 만노스, 말토스, 락토스, 아라비노스, 자일로스, 리보스, 람노스, 갈락토스, 글루코스, 수크로스, 트레할로스, 소르보스, 멜레지토스, 라피노스, 만니톨, 자일리톨, 에리트리톨, 트레이톨, 소르비톨, 글리세롤, L-글루코네이트 및 이들의 금속 염을 포함한다. 한 구체예에서, 본 발명의 제형은 폴리올을 포함하지 않는다.
한 구체예에서, 아세테이트 완충액 제형은 폴리소르베이트 80, EDTA, 소듐 클로라이드, 및 아르기닌 비함유 염기 중 하나 이상, 이들의 조합물, 또는 이들 전부를 추가로 포함한다.
제형의 pH는 pH 5.0 내지 7.0으로 조정될 수 있다. 한 구체예에서, 제형을 약 pH 5.5로 조정하기 위해 아세트산(약 100 mM 아세트산)이 제공된다. 다른 구체예에서, pH는 pH 5.0, 5.5, 6.0, 6.5 또는 7.0으로 조정될 수 있다. 본 발명의 또 다른 구체예에서, pH를 5.0, 5.5, 6.0, 6.5 또는 7.0으로 조정하기 위해 NaOH 또는 HCl이 사용된다.
본원에 기재된 TNF-알파 항원 결합 단백질은 20 내지 300 ㎎/㎖ 범위의 농도로 제형화될 수 있다. 예를 들어, 항원 결합 단백질은 20-200 ㎎/㎖ 또는 50-100 ㎎/㎖; 또는 약 40 ㎎/㎖ 또는 약 45 ㎎/㎖ 또는 약 50 ㎎/㎖ 또는 약 55 ㎎/㎖ 또는 약 60 ㎎/㎖ 또는 약 70 ㎎/㎖ 또는 약 80 ㎎/㎖ 또는 약 90 ㎎/㎖, 또는 약 100㎎/㎖의 농도로 존재한다. 한 구체예에서, TNF-알파 항원 결합 단백질은 약 50 ㎎/㎖의 농도로 존재한다.
TNF-알파 항원 결합 단백질은 아달리무맙일 수 있다. TNF-알파 항원 결합 단백질은 BPC1494일 수 있다. TNF-알파 항원 결합 단백질은 BPC1496일 수 있다.
한 구체예에서, 제형은 적어도 1년, 적어도 18개월, 또는 적어도 2년 동안 안정적이다. 예를 들어, 제형은 적어도 1년, 적어도 18개월, 또는 적어도 2년 동안 약 5℃의 온도에서 안정적이다. 또 다른 구체예에서, 제형은 실온(약 25℃)에서 안정적이다. 예를 들어, 제형은 적어도 14주, 적어도 2주, 적어도 1주, 적어도 6일, 적어도 5일, 적어도 4일, 적어도 3일, 적어도 2일 또는 적어도 1일 동안 약 25℃의 온도에서 안정적이다. 또 다른 구체예에서, 제형은 약 40℃의 온도에서 안정적이다. 예를 들어, 제형은 적어도 9주 또는 적어도 4주 동안 약 40℃의 온도에서 안정적이다.
하기 실시예 25 및 26에 제시되는 바와 같이, 제형은 실온(약 25℃)에서 안정적이다. 따라서, 권고된 시간 초과 동안 실온에서 방치될 수 있는 주사용의 사전 충전된 장치에서 형성되는 응집물 또는 저분자량 단편의 위험이 최소로 존재한다. 응집물은 잠재적으로 면역원성이며(The AAPS Journal 2006; 8 (3) Article 59 Themed Issue: Proceedings of the 2005 AAPS Biotec Open Forum on Aggregation of Protein Therapeutics, Guest Editor - Steve Shire, Effects of Protein Aggregates: An Immunologic Perspective 참조), 낮은 분자량의 단편은 미리 존재하는 자가항체를 유도할 수 있다(J Immunol 2008; 181:3183-3192; Human Anti-IgG1 Hinge Autoantibodies Reconstitute the Effector Functions of Proteolytically Inactivated IgGs1 참조).
액체 제형 중의 TNF-알파 항원 결합 단백질의 안정성은 시각적 관찰에 의한 외형, 단백질 농도(A280nm), 크기 배제 크로마토그래피(SEC), 모세관 등전 초점조절(Capillary Iso-Electric Focussing, c-IEF) 중 어느 하나 또는 이들의 조합, 및 기능적 결합 검정(ELISA)에 의해 평가될 수 있다. 예를 들어, 모노머, 응집물, 또는 단편, 또는 이들의 조합물의 백분율이 안정성을 결정하기 위해 사용될 수 있다. 한 구체예에서, 안정적 액체 제형은 제형 내에 응집물로서 존재하는 약 10% 미만, 또는 약 5% 미만의 TNF-알파 항원 결합 단백질을 갖는 제형이다. 제형은 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 97%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 모노머 함량을 가질 수 있다. 제형은 약 2주 후에 실온(약 25℃)에서 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 97%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 모노머 함량을 가질 수 있다. 제형은 약 1주 후에 실온(약 25℃)에서 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 97%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 모노머 함량을 가질 수 있다. 제형은 약 1일 후에 실온(약 25℃)에서 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 97%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 모노머 함량을 가질 수 있다.
따라서, 주사를 위한 본 발명의 약학적 조성물은 1 ㎖의 멸균 완충수, 및 약 1 ㎎ 내지 약 100 ㎎, 예를 들어, 약 30 ㎎ 내지 약 100 ㎎ 또는 더욱 바람직하게는 약 35 ㎎ 내지 약 80㎎, 예를 들어, 40, 50, 80 또는 90 ㎎의 본 발명의 항원 결합 작제물을 함유하도록 제조될 수 있다. 비경구적으로 투여가능한 조성물을 제조하기 위한 실제 방법은 당업자에게 널리 공지되어 있거나 당업자에게 명백할 것이고, 이는, 예를 들어, 문헌[Remington's Pharmaceutical Science, 15th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania]에 더욱 상세히 기재되어 있다. 본 발명의 정맥내로 투여가능한 항원 결합 작제물 제형의 제조를 위해, 문헌[Lasmar U and Parkins D "The formulation of Biopharmaceutical products", Pharma. Sci.Tech.today, page 129-137, Vol.3 (3rd April 2000), Wang, W "Instability, stabilisation and formulation of liquid protein pharmaceuticals", Int. J. Pharm 185 (1999) 129-188, Stability of Protein Pharmaceuticals Part A and B ed Ahern T.J., Manning M.C., New York, NY: Plenum Press (1992), Akers,M.J. "Excipient-Drug interactions in Parenteral Formulations", J.Pharm Sci 91 (2002) 2283-2300, Imamura, K et al "Effects of types of sugar on stabilization of Protein in the dried state", J Pharm Sci 92 (2003) 266-274, Izutsu, Kkojima, S. "Excipient crystalinity and its protein-structure-stabilizing effect during freeze-drying", J Pharm. Pharmacol, 54 (2002) 1033-1039, Johnson, R, "Mannitol-sucrose mixtures-versatile formulations for protein lyophilization", J. Pharm. Sci, 91 (2002) 914-922]을 참조하라.
바람직하게는, 본 발명의 항원 결합 단백질은 약 40 ㎎의 용량으로 제공되거나 투여된다. 바람직하게는, 항원 결합 단백질은 피하 전달에 적합하고, 이는 피하 전달된다. 본원에 개시된 바와 같은 다른 투여량 또는 투여 경로가 또한 이용될 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명의 임의의 양태에 따른 항원 결합 단백질은 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG와 비교하여 증가된 평균 체류 시간을 나타낸다.
IgG 불변 도메인을 포함하는 변형된 IgG 및 분자 또는 이의 FcRn 결합 부분의 결합 능력은 다양한 시험관내 검정에 의해 특성규명될 수 있다. 워드(Ward)에 의한 PCT 공보 WO 97/34631호에는 다양한 방법이 상세히 개시되어 있다. 예를 들어, FcRn에 결합하는 변형된 IgG 또는 이의 단편의 능력과 야생형 IgG의 능력을 비교하기 위해, 변형된 IgG 또는 이의 단편 및 야생형 IgG는 방사성-표지될 수 있고, 시험관내에서 FcRn-발현 세포와 반응될 수 있다. 세포-결합된 분획의 방사능은 이후 계수될 수 있고, 비교될 수 있다. 상기 검정에 사용되는 FcRn을 발현하는 세포는 B10.DBA/2 마우스의 폐로부터 유래된 마우스 폐 모세관 내피 세포(B10, D2.PCE) 및 C3H/HeJ 마우스로부터 유래된 SV40 형질전환된 내피 세포(SVEC)(Kim et al., J Immunol., 40: 457-465, 1994)를 포함하는 내피 세포주일 수 있다. 그러나, 선택 종의 재조합 FcRn을 발현하는 포유동물 세포를 포함하는 충분한 수의 FcRn을 발현하는 다른 유형의 세포가 또한 사용될 수 있다. 대안적으로, 변형된 IgG의 결합된 분획의 방사능 또는 변형되지 않은 IgG의 결합된 분획의 방사능을 계수한 후, 결합된 분자는 이후 세제로 추출될 수 있고, 세포의 단위 수 당 방출 퍼센트가 계산될 수 있고, 비교될 수 있다.
FcRn에 대한 본 발명의 항원 결합 단백질의 친화성은 이전에 기재된 바와 같이, 예를 들어, BIAcore 2000(BIAcore Inc.)을 이용한 표면 플라즈몬 공명(SPR) 측정에 의해 측정될 수 있다(Popov et al., Mol. Immunol., 33: 493-502, 1996; Karlsson et al., J Immunol. Methods, 145: 229-240, 1991, 상기 두 문헌은 이들의 전체내용이 참조로서 포함된다). 이러한 방법에서, FcRn 분자는 BIAcore 센서 칩(예를 들어, Pharmacia에 의한 CM5 칩)에 커플링되고, 고정된 FcRn으로의 변형된 IgG의 결합은 FcRn에 대한 변형된 IgG, 불변 도메인, 또는 이들의 단편의 결합-속도(on-rate) 및 분리-속도(off-rate)가 계산될 수 있는 것을 기초로 하는 BIA evaluation 2.1 소프트웨어를 이용하여 센서그램(sensorgram)을 수득하기 위해 특정 유속에서 측정된다. FcRn에 대한 본 발명의 항원 결합 단백질 및 변형되지 않은 IgG의 상대 친화성은 또한 간단한 경쟁 결합 검정에 의해 측정될 수 있다. 또한, FcRn에 대한 변형된 IgG 또는 이의 단편, 및 야생형 IgG의 친화성은 또한 포화 연구 및 스캐차드 분석(Scatchard analysis)에 의해 측정될 수 있다.
FcRn에 의한 세포를 가로지르는 변형된 IgG 또는 이의 단편의 이동은 방사성 표지된 IgG 또는 이의 단편 및 FcRn을 발현하는 세포를 이용한 시험관내 이동 검정 및 세포 단층의 한 면의 방사능과 다른 면의 방사능을 비교함에 의해 측정될 수 있다. 대안적으로, 상기 이동은 10 내지 14일령의 어린 마우스에 방사성 표지된 변형된 IgG를 먹이고, 장을 통한 순환(또는 임의의 다른 표적 조직, 예를 들어, 폐)으로의 IgG의 이동을 나타내는 혈액 샘플 중의 방사능을 주기적으로 계수함으로써 생체내에서 측정될 수 있다. 장을 통한 IgG 이동의 용량-의존적 억제를 시험하기 위해, 특정 비율의 방사성 표지된 IgG 및 표지되지 않은 IgG의 혼합물이 마우스에 제공되고, 혈장의 방사능이 주기적으로 측정될 수 있다(Kim et al., Eur. R Immunol., 24: 2429-2434,1994).
항원 결합 단백질의 반감기는 전체내용이 본원에 참조로서 포함되는 문헌[Kim et al. (Eur. J. of Immuno. 24: 542, 1994)]에 의해 기재된 방법에 따라 약동학 연구에 의해 측정될 수 있다. 상기 방법에 따르면, 방사성 표지된 항원 결합 단백질은 마우스로 정맥내 주사되고, 이의 혈장 농도는, 예를 들어, 주사 후 3분 내지 72시간에서 시간의 함수로서 주기적으로 측정된다. 따라서, 수득된 청소 곡선은 이상(biphasic)이어야 한다. 변형된 IgG 또는 이의 단편의 생체내 반감기의 결정을 위해, β-상에서의 청소율이 계산되고, 변형되지 않은 IgG의 청소율과 비교된다.
본 발명의 항원 결합 단백질은 항원에 면역특이적으로 결합하는 능력에 대해 검정될 수 있다. 상기 검정은 용액 중(예를 들어, Houghten, BiolTechniques, 13: 412-421, 1992), 비드 상(Lam, Nature, 354: 82-84, 1991), 칩 상(Fodor, Nature, 364: 555-556, 1993), 박테리아 상(U. S. Patent No. 5,223,409), 포자 상(U. S. Patent Nos. 5,571,698; 5,403,484; 및 5,223,409), 플라스미드 상(Cull et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 1865-1869, 1992) 또는 파지 상(Scott and Smith, Science, 249: 386-390, 1990; Devlin, Science, 249: 404-406, 1990; Cwirla et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87: 6378-6382, 1990; and Felici, J: Mol. Biol., 222: 301-310, 1991)(상기 문헌들 각각은 이들의 전체내용이 참조로서 본원에 포함됨)에서 수행될 수 있다. 항원 또는 이의 단편에 면역특이적으로 결합하는 것으로 확인된 항체는 이후 이의 항원에 대한 특이성 및 친화성에 대해 검정될 수 있다.
본 발명의 항원 결합 단백질은 당 분야에 공지된 임의의 방법에 의해 항원에 대한 면역특이적 결합 및 다른 항원과의 교차-반응성에 대해 검정될 수 있다. 면역특이적 결합 및 교차-반응성을 분석하기 위해 사용될 수 있는 면역검정은 몇가지만 언급하자면 웨스턴 블롯, 방사면역측정법, ELISA(효소결합면역흡착측정법), "샌드위치" 면역검정, 면역침전 검정, 침전소 반응, 겔 확산 침전소 반응, 면역확산 검정, 응집 검정, 보체-고정 검정, 면역방사측정 검정, 형광 면역검정, 단백질 A 면역검정과 같은 기술을 이용한 경쟁 및 비-경쟁 검정 시스템을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 상기 검정은 통상적인 것이며, 당 분야에 널리 공지되어 있다(예를 들어, Ausubel et al, eds, 1994, Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 1, John Wiley & Sons, Inc., New York 참조, 본 참고문헌은 이의 전체내용이 참조로서 본원에 포함됨). 예시적 면역검정이 하기에 간단히 기재되어 있다(그러나 이로 제한하고자 하는 것은 아니다).
한 바람직한 구체예에서, 항원에 대한 항체의 결합 속도 및 분리 속도를 결정하기 위해 BIAcore 동역학 분석이 사용된다. BIAcore 동역학 분석은 칩의 표면 상에 고정된 항체를 갖는 칩으로부터의 항원의 결합 및 해리 속도를 분석하는 것을 포함한다.
항원 결합 단백질: 본원에서 사용되는 용어 "항원 결합 단백질"은 TNF-알파에 결합할 수 있는 항체, 항체 단편 및 다른 단백질 작제물에 대한 언급을 포함한다.
항체: 용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 본원에서 사용되고, 면역글로불린-유사 도메인을 갖는 분자에 대한 언급을 포함하고, 모노클로날, 재조합, 폴리클로날, 키메라, 인간화, 이중특이적 및 헤테로컨쥬게이트 항체를 포함한다.
인간 IgG1 중쇄 불변 도메인은 대립유전자 변이를 포함하는 자연적으로 발견되는 IgG1 중쇄 불변 도메인에 대한 인간 아미노산 서열을 나타낸다.
"반감기(t1/2)"는 항원 결합 폴리펩티드의 농도가 이의 본래의 값의 절반에 도달하는데 필요한 시간을 나타낸다. 단백질의 혈청 반감기는 문헌[Kim et al. (Eur. J. of Immuno. 24: 542, 1994)]에 기재된 방법에 따른 약동학 연구에 의해 측정될 수 있다. 상기 방법에 따르면, 방사성 표지된 단백질은 마우스로 정맥내 주사되고, 이의 혈장 농도가, 예를 들어, 주사 후 약 3분 내지 약 72시간에서 시간의 함수로 주기적으로 측정된다. 분자의 약동학 분석 및 반감기의 결정을 위한 다른 방법은 당업자에게 친숙할 것이다. 세부사항은 문헌[Kenneth, A et al: Chemical Stability of Pharmaceuticals: A Handbook for Pharmacists and in Peters et al, Pharmacokinetic analysis: A Practical Approach (1996)]에서 발견될 수 있다. 약동학 파라미터, 예를 들어, t 알파 및 t 베타 반감기 및 곡선하영역(AUC)을 기재하는 문헌["Pharmacokinetics", M Gibaldi & D Perron, published by Marcel Dekker, 2nd Rev. ex edition (1982)], 및 문헌["Clinical Pharmacokinetics: Concepts and Applications", Rowland and Tozer, Third Edition (1995)]이 또한 참조된다.
"청소(CL)"는 단위 시간 당 단백질이 비가역적으로 청소된 혈장의 부피를 나타낸다. 청소는 용량/AUC(AUC는 곡선하영역 또는 혈장 약물 농도 시간 곡선하 영역임)로 계산된다. 청소는 또한 약물의 혈장 농도에 의해 나누어진 약물 제거의 속도에 의해 계산될 수 있다(제거 속도 = CL*농도).
"평균 체류 시간(MRT)"은 항원 결합 폴리펩티드가 비가역적으로 제거되기 전에 체내에 존재하는 평균 시간이다. MRT= AUMC/AUC로 계산됨.
"항정 상태 농도"(Css)는 약물 제거 속도가 지속된 약물 투여의 결과로서 약물 투여 속도와 동등하게 되는 경우에 도달되는 농도이다. Css는 피크와 최저 수준 사이로 변동되고, 마이크로그램/㎖로 측정된다. "평균 항정-상태 최저 농도"는 제공된 시간에서 환자 집단에 걸친 최저 수준의 평균을 나타낸다.
"동등한 평균 항정-상태 최저 농도"는 언급된 값의 약 10% 내지 30%와 동일하거나 상기 범위 내인 평균 항정-상태 최저 농도를 나타낸다. 본 발명의 항원 결합 폴리펩티드에 대한 동등한 평균 항정-상태 최저 농도는 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG로 달성된 평균 항정-상태 최저 농도의 0.8 내지 1.25배인 평균 항정-상태 최저 농도인 것으로 간주될 수 있다.
반감기 및 AUC는 시간에 대한 약물(예를 들어, 본 발명의 항원 결합 폴리펩티드)의 혈청 농도의 곡선으로부터 결정될 수 있다. 반감기는 구획 또는 비-구획 분석을 통해 결정될 수 있다. WINNONLIN™ 분석 패키지(Pharsight Corp., Mountain View, CA94040, USA로부터 이용가능함)가, 예를 들어, 곡선을 모델링하기 위해 사용될 수 있다. 한 구체예에서, "반감기"는 말기 반감기를 나타낸다.
특이적으로 결합하다: 항원 결합 단백질과 관련하여 본 명세서 전체에 걸쳐 사용되는 용어 "특이적으로 결합하다"는 항원 결합 단백질이 다른 관련되지 않은 단백질에 결합하지 않거나, 다른 관련되지 않은 단백질에 무의미하게 결합하면서 TNF-알파에 결합하는 것을 의미한다. 그러나, 상기 용어는 항원 결합 단백질이 또한 밀접하게 관련된 분자와 교차-반응할 수 있는 사실을 배제하지 않는다. 본원에 기재된 항원 결합 단백질은 이들이 밀접하게 관련된 분자에 결합하는 것보다 적어도 2, 적어도 5, 적어도 10, 적어도 50, 적어도 100, 또는 적어도 1000배 더 큰 친화성으로 TNF-알파에 결합할 수 있다.
CDR: "CDR"은 항원 결합 단백질의 상보성 결정 영역 아미노산 서열로 정의된다. 이들은 면역글로불린 중쇄 및 경쇄의 과가변 영역이다. 면역글로불린의 가변 부분 내에 3개의 중쇄 및 3개의 경쇄 CDR(또는 CDR 영역)이 존재한다. 따라서, 본원에서 사용되는 "CDR"은 모든 3개의 중쇄 CDR, 모든 3개의 경쇄 CDR, 모든 중쇄 및 경쇄 CDR, 또는 적어도 2개의 CDR을 나타낸다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 가변 도메인 서열 및 전장 항체 서열 내의 아미노산 잔기는 케이뱃(Kabat) 넘버링 규약에 따라 넘버링된다. 유사하게, 실시예에서 사용되는 용어 "CDR", "CDRL1", "CDRL2", "CDRL3", "CDRH1", "CDRH2", "CDRH3"는 케이뱃 넘버링 규약을 따른다. 추가 정보를 위해, 문헌[Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 4th Ed., U.S. Department of Health and Human Services, National Institutes of Health (1987)]을 참조하라.
변이체의 동일성 %: 용어 "동일한" 또는 "서열 동일성"은 최적으로 정렬되고, 적절한 삽입 또는 결실과 비교되는 경우 2개의 핵산 또는 2개의 아미노산 서열 사이의 동일성의 정도를 나타낸다. 본원에 기재된 변이체는 아미노산 수준에서 자연 CDR 또는 가변 도메인 서열에 대해 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 또는 99%의 동일성을 가질 수 있다.
본원에 기재된 특정 구체예는 예시로 제시되며, 본 발명을 제한하지 않음이 이해될 것이다. 본 발명의 주요 특징은 본 발명의 범위를 벗어남이 없이 다양한 구체예에서 이용될 수 있다. 당업자는 통상적인 것을 초과하지 않는 연구를 이용하여 본원에 기재된 특정 절차에 대한 다수의 등가물을 인지하거나, 확인할 수 있을 것이다. 상기 등가물은 본 발명의 범위 내인 것으로 간주되고, 청구항에 의해 보호된다. 명세서에 언급된 모든 간행물 및 특허 출원은 본 발명이 속하는 분야의 당업자의 기술 수준을 나타낸다. 모든 간행물 및 특허 출원은, 각각의 개별적 간행물 또는 특허 출원이 참조로서 포함되는 것으로 특별히 및 개별적으로 지정되는 것과 동일한 정도로 참조로서 본원에 포함된다. 청구항 및/또는 명세서에서 용어 "포함하는"과 관련하여 사용되는 경우 단수의 용어의 사용은 "하나"를 의미하나, 이는 또한 "하나 이상", "적어도 하나" 및 "하나 또는 하나 초과"의 의미와 일치한다. 청구항에서의 용어 "또는"의 사용은 단지 대안을 나타내거나 상기 대안이 상호 배타적인 것을 명백히 지정하지 않는 한 "및/또는"을 의미하는 것으로 사용되지만, 상기 개시는 단지 대안 및 "및/또는"을 나타내는 정의를 뒷받침한다. 본 출원 전체에 걸쳐, 용어 "약"은 어떤 값이 장치에 대한 오차의 고유한 변화, 값을 결정하기 위해 이용되는 방법, 또는 연구 대상 사이에 존재하는 변화를 포함하는 것을 나타내기 위해 사용된다.
본 명세서 및 청구항(들)에서 사용되는 바와 같이, 용어 "포함하는"(및 포함하는의 임의의 형태, 예를 들어, "-들을 포함하다" 및 "-을 포함하다"), "갖는"(및 갖는의 임의의 형태, 예를 들어, "-들을 갖다" 및 "-을 갖다"), "포함하여"(및 포함하여의 임의의 형태, 예를 들어, "-을 포함하다" 및 "-들을 포함하다") 또는 "함유하는"(및 함유하는의 임의의 형태, 예를 들어, "-을 함유하다" 및 "-들을 함유하다")은 포괄적이거나 제한이 없는(open-ended) 것이며, 추가의 언급되지 않은 요소 또는 방법의 단계들을 배제하지 않는다. 한 양태에서, 상기 제한이 없는 용어는 또한 이들의 범위 내에 제한되거나 폐쇄된 정의, 예를 들어, "본질적으로 구성되는" 또는 "-로 구성되는"을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "또는 이들의 조합"은 상기 용어에 선행하는 나열된 항목의 모든 순열(permutation) 및 조합을 나타낸다. 예를 들어, "A, B, C, 또는 이들의 조합"은 A, B, C, AB, AC, BC, 또는 ABC, 및 특정 상황에서 순서가 중요한 경우, 또한 BA, CA, CB, CBA, BCA, ACB, BAC, 또는 CAB 중 적어도 하나를 포함하는 것으로 의도된다. 상기 예와 연속하여, 하나 이상의 항목 또는 항의 반복, 예를 들어, BB, AAA, AB, BBC, AAABCCCC, CBBAAA, CABABB 등을 함유하는 조합이 특별히 포함된다. 당업자는 통상적으로 문맥으로부터 달리 명백하지 않는 한 임의의 조합의 항목 또는 항의 수에 대한 제한이 없는 것을 이해할 것이다.
본원에 개시되고 청구된 조성물 및/또는 방법 모두는 본 발명의 개시에 비추어 과도한 실험 없이 제조되고 실행될 수 있다. 본 발명의 조성물 및 방법은 바람직한 구체예와 관련하여 기재되었으나, 본 발명의 개념, 사상 및 범위로부터 벗어남이 없이 조성물 및/또는 방법 및 단계들 또는 본원에 기재된 방법의 단계들의 순서에 변화가 적용될 수 있음이 당업자에게 명백할 것이다. 당업자에게 명백한 모든 상기 유사한 대용물 및 변형은 첨부된 청구항에 의해 규정된 바와 같은 본 발명의 사상, 범위 및 개념 내에 속하는 것으로 간주된다.
본원에 언급된 모든 문헌은 허용가능한 최대한의 정도로 참조로서 포함된다.
개시내용의 임의의 요소는 본 출원의 상황으로부터 달리 명백하지 않는 한 명백히 개시내용의 임의의 다른 요소와 조합하여 고려된다.
본 발명은 하기 실시예를 참조로 하여 추가로 기재되나, 이는 본 발명을 제한하는 것이 아니다.
실시예
실시예 1: 항체 발현 벡터의 클로닝
항-TNFα 항체의 가변 중쇄(VH) 및 가변 경쇄(VL) 도메인을 엔코딩하는 DNA 발현 작제물을 이전에 새로이 제조하였고, 포유동물 발현 벡터로의 클로닝을 위해 제한 부위를 포함시켰다. 중쇄 및 경쇄 가변 도메인 서열 둘 모두를 포유동물 세포에서의 발현에 대해 서열 최적화시켰다(방법에 대해, WO2009024567 및 문헌[Kotsopoulou et al, J Biotechnol (2010) 146: 186-193] 참조). 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 기재하는 정보는 미국 특허 US6090382호에서 발견될 수 있다. 본 연구에서 사용되는 작제물을 생성시키기 위해, 가변 중쇄 도메인(VH) 서열을 PCR을 이용하여 증폭시켰다. PCR 프라이머는 인간 γ1 불변 영역을 함유하는 pTT 포유동물 발현 벡터로의 클로닝을 위해 신호 서열을 함유하는 VH 도메인을 구성시키기 위해 HindIII 및 SpeI 제한 부위를 함유하였다. 유사하게, 인간 카파 불변 영역을 함유하는 pTT 포유동물 발현 벡터로의 클로닝을 촉진시키기 위해 HindIII 및 BsiWI 제한 부위를 함유하는 프라이머를 이용한 PCR에 의해 VL 도메인 서열을 증폭시켰다. 중쇄 발현 플라스미드에는 코드 SJC322를 제공하였고, 경쇄 발현 플라스미드에는 플라스미드 코드 SJC321을 제공하였다.
CDR 영역 내에 변형을 갖는 항-TNFα 항체의 대안적 가변 중쇄 및 경쇄 영역을 엔코딩하는 DNA 발현 작제물(Rajpal et al. PNAS (2005) 102(24): pg 8466-8471에 기재된 바와 같음)을 중첩 올리고누클레오티드 및 상기 기재된 것과 유사한 분자생물학 기술의 조성에 의해 새로이 제조하였다. 생성된 변이체 cb1-3, cb2-6 및 cb2-44의 중쇄 및 경쇄를 엔코딩하는 플라스미드가 표 1에 기재되어 있다.
실시예 2: Fc 영역의 공법
Quikchange 프로토콜(Promega)을 이용하여 파스콜리주맙(항-IL-4 항체)의 중쇄를 엔코딩하는 플라스미드의 인간 γ1 불변 영역으로 변형(M252Y/S254T/T256E 및 T250Q/M428L)을 도입시키기 위해 정방향 및 역방향 프라이밍 프라이머를 사용하였다.
상기 실시예 1에 기재된 바와 같이, 항-TNFα 항체의 VH 도메인을 엔코딩하는 PCR 단편을 주형으로서 이전에 작제된 코돈 최적화된 벡터를 이용하여 생성시켰다. 생성된 단편을 HindIII 및 SpeI을 이용하여 이전 단락에 기재된 변형된 인간 γ1 불변 영역을 함유하는 pTT 발현 벡터로 클로닝하였다. M252Y/S254T/T256E 변형을 갖는 항-TNFα 항체의 중쇄를 엔코딩하는 플라스미드를 SJC324로 명명하였다. T250Q/M428L 변형을 갖는 중쇄를 엔코딩하는 플라스미드를 SJC323으로 명명하였다.
Quikchange 프로토콜(Promega)을 이용하여 항-TNFα 중쇄 발현 플라스미드 SJC322의 인간 γ1 불변 영역으로 변형을 도입시키기 위해 정방향 및 역방향 프라이밍 프라이머를 사용하였다. 플라스미드 SJC326은 인간 γ1 불변 영역 내에 M428L/N434S 변형을 함유하는 항-TNFα 중쇄를 엔코딩한다. 플라스미드 SJC328은 인간 γ1 불변 영역 내에 V308F 변형을 함유하는 항-TNFα 중쇄를 엔코딩한다.
실시예 3: pTT5 에피솜 벡터를 이용한 HEK2936E 세포에서의 항체의 발현
상기 기재된 중쇄 및 경쇄를 엔코딩하는 발현 플라스미드를 HEK 293 6E 세포로 일시적으로 공동-트랜스펙션시켰다. 발현된 항체를 1 ㎖ HiTrap 단백질 A 컬럼(GE Healthcare)을 이용한 친화성 크로마토그래피에 의해 상층액으로부터 정제하였다. 하기 표 1은 생성된 항체의 목록을 제시한다.
일부 항체를 또한 발현 벡터의 다양한 세트를 이용하여 CHO 세포에서 발현시켰다. 분자생물학, 발현 및 정제의 기재에 대해 실시예 13, 14 및 15를 참조하라.
표 1: 발현된 항체의 목록
실시예
4: 직접 결합
ELISA
에서 종양 괴사 인자 알파에 대한 항체의 결합
재조합 종양 괴사 인자 알파(TNFα)에 대한 단백질 A를 이용하여 정제된 발현된 항체의 결합을 시험하기 위해 결합 ELISA를 수행하였다. ELISA 플레이트를 O.1 ㎍/㎖의 재조합 인간 TNFα로 코팅하고, 블로킹 용액(4% BSA)으로 블로킹시켰다. 정제된 항체의 다양한 희석액을 첨가하고(0.05% Tween 20을 함유하는 pH 8.0의 T Tris-완충 염수 중의 4% BSA 중에 희석됨), 플레이트를 탈이온수로 세척하기 전에 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 블로킹 용액 중 퍼옥시다제 표지된 항 인간 카파 경쇄 항체(Sigma A7164)의 첨가에 의해 결합을 검출하였다. 플레이트를 탈이온수 중에서의 세척 전에 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. OPD 기질(Sigma P9187)의 첨가에 의해 플레이트를 발달시키고, 2M HCl의 첨가에 의해 색 발달을 중지시켰다. 플레이트 판독기를 이용하여 490nm에서 흡광도를 측정하고, 농도에 대해 평균 흡광도를 플로팅하였다. 결과가 도 1에 제시되며, 이는 모든 항체가 유사한 프로파일을 갖는 것을 입증한다.
실시예 5: L929 시험관내 중화 검정에서의 항체의 분석
TNF-α를 중화시키고, 세포 사멸을 억제하는 항체의 중화 능력을 시험하기 위해 본 검정을 이용하였다. 간단히, L929 세포를 100㎕ RPMI 1640(w/o 페놀 레드(phenol red)) 중 10,000/웰로 96-웰 편평-바닥 플레이트에 시딩하고, 37℃, 5% CO2에서 밤새 인큐베이션하였다. 세포를 1시간 동안 1.25㎍/㎖의 악티노마이신 D(actinomycin D)로 민감화시켰다. 중화 연구를 위해, 0.001-60㎍/㎖(0.0067-400 nM)의 항-TNF-α mAb를 실온에서 1시간 동안 1:1의 비로 약 2ng/㎖(약 0.05nM)의 TNF-α와 함께 예비 인큐베이션하였다. 대조군을 위해, 항체 대신에 RPMI를 사용하였다. 악티노마이신 D와의 1시간의 예비-인큐베이션 후, 20 ㎕의 항체-항원 복합체를 웰 당 첨가하였다. 10㎕의 배지 단독을 음성 대조군으로서 웰에 첨가하였다. 플레이트를 37℃, 5% CO2에서 18시간 동안 인큐베이션하였다. 이러한 처리 기간 후, 제조업체의 설명서(Promega, Madison USA)에 따라 세포 역가-Glo 발광 검정 키트에 의해 세포 생존력을 결정하였다. L929 검정을 위해, 공지되지 않은 물질의 세포 생존력 백분율을 미처리된 군(100%로 설정)의 백분율로 표현하였고, 그래프패드 프리즘(Graphpad prism)에 의해 IC50 값을 결정하였다. 항체의 IC50 값에서의 차이를 1-원 ANOVA(Newman-Keuls post hoc 검정)에 의해 평가하였고, 0.05 미만의 P-값을 유의한 것으로 간주하였다. 데이터는 이중으로 측정된 n=4 실험의 평균 ± SEM으로 표현된다. 각각의 항체에 대한 IC50 값을 결정하였고, 이는 하기 표 2에 나열되어 있다. 결과는 시험된 모든 항체의 역가가 동등한 것을 나타낸다.
표 2:
L929
중화 검정에서의 다양한 항-
TNF
α 항체에 대한
IC
50
값
표 3은 실험으로부터 유래된 IC50 값을 제시한다. 상기 결과는 개선된 항-TNFα 항체(BPC1499, BPC1500, BPC1501)가 BPC1492 및 아달리무맙에 비해 상기 검정에서 증가된 역가를 나타내는 것을 나타낸다.
표 3:
L929
중화 검정에서의 개선된 항-
TNF
α 항체에 대한
IC
50
값
실시예 6: 시험관내 IL-6 방출에 대한 항체의 효과
항체의 중화 능력을 전체 혈액 세포로부터의 TNF-α 매개 IL-6 방출을 억제하는데 있어서의 이들의 효과를 측정함으로써 결정하였다. 간단히, 130 ㎕의 전체 혈액을 각각의 웰에 첨가하였고, 플레이트를 1시간 동안 습윤화된 5% CO2 인큐베이터에서 37℃에서 인큐베이션하였다. 중화 연구를 위해, 0.001-30㎍/㎖(0.0067-200 nM)의 TNF-α mAb를 4℃에서 1시간 동안 1:1의 비로 10ng/㎖(약 0.4 nM)의 TNF-알파와 함께 예비 인큐베이션하였다. 대조군을 위해, 항체 대신에 RPMI를 사용하였다. 상기 예비-처리 후, 20 ㎕의 항원-항체 복합체 또는 RPMI(음성 대조군)을 웰 당 첨가하였고, 플레이트를 37℃, 5% CO2에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. 100 ㎕의 PBS(w/o MgCl2 또는 CaCl2)를 각각의 웰에 첨가하고, 500 rpm에서 10분 동안 플레이트 진탕기 상에 배치하였다. 이후, 플레이트를 5분 동안 2000 rpm에서 회전시켰다. 120 ㎕의 상층액을 조심스럽게 분리시키고, 새로운 96-웰 둥근 바닥 플레이트로 옮기고, MSD 기반 검정 키트(Meso Scale Diagnostics, Maryland USA)를 이용하여 IL-6 방출을 결정하였다. 전체 혈액 검정을 위해, 각각의 샘플에 대한 MSD 신호를 MSD SECTOR® Imager 2400을 이용하여 판독하고, 세포로부터의 IL-6 방출을 PRISM 4.00 소프트웨어(GraphPad. San Diego, USA) 내의 표준 데이터 분석 패키지를 이용하여 정량하였다. 각각의 항체에 의한 IL-6 억제의 백분율을 TNF-α 단독 처리된 군의 백분율로 표현하였다. 그러므로, 각각의 항체에 대해 용량 반응 곡선을 수득하고, IC50 값을 결정하였다. IC50 값의 log를 이용하여, 항체의 역가에서의 차이를 1-원 ANOVA(Newman-Keuls post hoc 검정)에 의해 결정하고, 각각의 공여자(n=3)에 대해 0.05 미만의 P-값을 유의한 것으로 간주하였다. 데이터는 이중으로 측정된 3개 공여체의 평균 ± SEM으로 표현된다. 하기 표 4는 상기 데이터로부터 유래된 IC50 값을 제시한다. 상기 결과는 시험된 항체 사이의 역가에서의 유의한 차이가 없는 것을 암시한다.
표 4: TNFα-유도된 IL-6 방출 검정에서의 다양한 항-TNF 항체에 대한 IC
50
값
IC50 값은 표 5에 제시된다. 상기 결과는 개선된 항-TNFα 항체(BPC1499, BPC1500, BPC1501)가 상기 검정에서 증가된 역가를 나타내는 것을 나타낸다.
표 5:
TNF
α-유도된
IL
-6 방출 검정에서의 다양한 개선된 항-
TNF
항체에 대한
IC
50
값
실시예 7: 가속화된 스트레스인자 연구
연구 전, 시험되는 항체를 OD280nm에서 분광광도계 상에서 정량하고, PBS(pH7.4) 중에서 1.1 ㎎/㎖로 희석하였다. 분취량을 분리시키고, 10%v/v의 500mM 소듐 아세테이트를 첨가하여 pH5.5의 1 ㎎/㎖의 최종 농도를 발생시키고, 침전에 대해 샘플을 검사하였다. PBS 중의 나머지 샘플은 pH7.4의 1 ㎎/㎖의 최종 농도로 첨가된 10% PBS v/v를 가졌고, 이러한 샘플의 분취량을 분리시켜 기준선 응집 수준(크기 배제 크로마토그래피에 의해 모니터됨)을 제공하였다. 이후, 샘플을 인큐베이터에서 2주 동안 37℃에서 인큐베이션하고, 이후 샘플을 OD280nm에서 분광광도계 상에서 다시 정량하고, 응집에 대해 평가(크기 배제 크로마토그래피에 의함)하였다. 직접 결합 ELISA에서 인간 TNFα 결합에 대해 샘플을 시험하였다. 결과는 도 2에 제시되고, 이는 시험된 모든 항체의 결합 활성이 가속화된 스트레스인자 연구 후에 동등한 것을 입증한다.
실시예 8: 25% 인간 혈청에서의 안정성 연구
연구 전, 시험되는 항체를 OD280nm에서 분광광도계에서 정량하고, PBS(pH7.4) 중에서 1.25 ㎎/㎖로 희석시켰다. 분취량을 분리시키고, 25%v/v의 인간 혈청을 첨가하여 1 ㎎/㎖의 최종 농도를 발생시켰다. PBS 중의 나머지 샘플은 1 ㎎/㎖의 최종 농도로 첨가된 25% PBS v/v를 가졌고, 이러한 샘플의 분취량을 분리시켜 기준선 수준을 제공하였다. 이후, 샘플을 인큐베이터에서 2주 동안 37℃에서 인큐베이션하고, 이후 샘플을 직접 결합 ELISA에서 인간 TNFα 결합에 대해 시험하였다. 결과는 도 3에 제시되고, 이는 시험된 모든 항체의 결합 활성이 2주 동안의 25% 인간 혈청 중에서의 인큐베이션 후에 동등한 것을 입증한다.
실시예 9: 동결-해동 후의 인간 TNFα에 대한 결합의 분석
항체 샘플을 50mM 아세테이트 및 150mM NaCl(pH6.0)을 함유하는 완충액 중에서 1 ㎎/㎖로 희석시키고, 드라이아이스 중에서 급속-동결시킨 후, 4℃에서 밤새 해동시켰다. 인간 TNFα에 대한 항체의 결합을 급속-동결되지 않은 항체와 비교하여 시험하였다. 동결-해동 후의 결합 활성을 평가하기 위해, ELISA 플레이트를 1 ㎍/㎖의 재조합 인간 TNFα로 코팅하고, 블로킹 용액(Tris 완충 염수 중 4% BSA)으로 블로킹하였다. 다양한 농축물을 코팅된 플레이트에 첨가하고, 탈이온수 중에서의 세척 전에 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 블로킹 용액 중의 퍼옥시다제 표지된 항 인간 카파 경쇄 항체(Sigma A7164)의 첨가에 의해 결합을 검출하였다. 플레이트를 탈이온수 중에서의 세척 전에 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. OPD 기질(Sigma P9187)의 첨가에 의해 플레이트를 발달시키고, 2M HCL의 첨가에 의해 색 발달을 중지시켰다. 흡광도를 플레이트 판독기를 이용하여 490nm에서 측정하고, 평균 흡광도를 농도에 대해 플로팅하였다. 결과는 도 4에 제시되고, 이는 시험된 모든 항체의 결합 활성이 동결-해동 후에 동등한 것을 입증한다.
실시예 10: FcγRIIIa에 대한 항-TNFα 항체의 결합의 분석
ELISA 플레이트를 1 ㎍/㎖의 재조합 인간 FcγRIIIa(V158 및 F158 변이체)로 코팅하고, 블로킹 용액(Tris 완충 염수 중 4% BSA)으로 블로킹하였다. 다양한 농축물을 코팅된 플레이트에 첨가하고, 탈이온수 중에서의 세척 전에 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 블로킹 용액 중의 퍼옥시다제 표지된 항 인간 카파 경쇄 항체(Sigma A7164)의 첨가에 의해 결합을 검출하였다. 플레이트를 탈이온수 중에서의 세척 전에 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. OPD 기질(Sigma P9187)의 첨가에 의해 플레이트를 발달시키고, 2M HCl의 첨가에 의해 색 발달을 중지시켰다. 흡광도를 플레이트 판독기를 이용하여 490nm에서 측정하고, 평균 흡광도를 농도에 대해 플로팅하였다. 결과는 도 5a 및 5b에 제시되고, 이는 BPC1494가 BPC1492 및 BPC1496에 비해 FcγRIIIa(V158 및 F158 변이체)에 결합하는 감소된 능력을 갖는 것을 입증한다.
실시예 11:
ProteOn
분석:
FcRn
결합
시험을 위한 항체를 일차 아민 커플링에 의해 GLC 바이오센서 칩(BioRad 176-5011) 상에 유사한 수준으로 고정시켰다. 재조합 인간 및 시노몰구스(cynomolgus) FcRn을 분석물로서 2048nM, 512nM, 128nM, 32nM, 및 8nM으로 사용하였고, 완충액 단독(즉, 0nM)의 주입을 결합 곡선의 이중 참조를 위해 사용하였다. FcRn 주사 후의 항체 표면의 재생은 pH9.0의 HBS-N을 이용하였고, 검정을 25℃에서 ProteOn XPR36 Protein Interaction Array System에서 수행하였고, 적절한 완충액 중에 희석된 FcRn을 갖는 HBS-N pH7.4 및 HBS-N pH6.0 중에서 수행하였다. pH6.0에서의 결합에 대해 "글로벌 R-max(Global R-max)" 및 pH7.4에서의 친화성 계산에 대해 pH6.0에서의 결합으로부터의 R-max를 이용하여 ProteOn 분석 소프트웨어에 고유한 평형 모델을 이용하여 친화성을 계산하였다. 결합 곡선이 pH7.4에서 포화에 도달하지 않았으므로, 수득된 값은 진정한 친화성인 것 같지 않았으나, 이들은 작제물을 순위화시키는데 사용될 수 있었다. 결과는 표 6에 제시되고, 이는 BPC1494 및 BPC1496이 BPC1492와 비교하는 경우 pH6.0에서 인간 및 시노몰구스 FcRn에 대해 개선된 친화성을 갖는 것을 입증한다.
표 6: 인간 및 시노몰구스 FcRn에 결합하는 항-TNF 알파 작제물의 친화성
실시예 12: 인간 FcRn 트랜스제닉 마우스에서의
PK
연구.
단일 용량 약동학 연구에서, BPC1494 및 BPC1492를 FcRn 인간화 마우스의 2개의 상이한 계통 및 FcRn이 결핍된 하나의 계통에 1 ㎎/㎏으로 정맥내(IV) 투여하였다(Petkova et al. Int . Immunol (2010) 18(12): 1759-1769). 혈장 샘플을 확인된 Gyrolab 형광 면역검정을 이용하여 적절히 BPC1494 또는 BPC1492에 대해 분석하였다.
상기 방법은 포획 항원으로서 비오티닐화된 인간 TNF 알파 및 검출 항체로서 Alexa 표지된 항-인간 IgG(Fc 특이적) 항체를 사용하였다. 검정 완충액으로 1:10 희석된 마우스 혈장의 분취량을 이용하여, 최소 정량 한계(LLQ)는 100 ng/㎖였고, 최대 정량 한계(HLQ)는 100,000 ng/㎖였다. 가장 적은 표준 아래의 혈장 농도는 정량가능하지 않은 것으로 간주하였다. 3개의 상이한 농도로 제조되고, 연구 샘플과 함께 저장된 QC 샘플을 개별적으로 제조된 교정 표준에 대해 샘플의 각각의 배치(batch)로 분석하였다. 허용되는 분석에 대해, 각각의 농도에서의 적어도 하나의 QC는 공칭 농도로부터 20% 초과까지 벗어나지 않아야 한다. 상기 연구로부터의 QC 결과는 상기 허용 기준을 충족시켰다.
PK 분석을 WinNonLin, version 6.1을 이용하여 비-구획 약동학 분석에 의해 수행하였다. 모든 계산은 공칭 혈액 샘플링 시간을 이용하였다. BPC1494 및 BPC1492에 대한 전신 노출을, 선형 log 사다리꼴 계산 방법을 이용하여 투여 시작으로부터 마지막 정량가능 시점(AUC0-t)까지 혈장 농도 시간 곡선하 영역(AUC)을 계산함으로써 결정하였다. 추가 PK 파라미터는 샘플 표지에서의 불일치로 인해 데이터로부터 유래될 수 없었다.
표 7 - 트랜스제닉 마우스로의 1 ㎎/㎏의 표적 용량의 단일 정맥내 투여(볼루스) 후의 BPC1494 및 BPC1492에 대한 개략적 약동학 파라미터
계통 1 = mFcRn-/- hFcRn (32) Tg/Tg
계통 2 = mFcRn-/- hFcRn (276) Tg/Tg Rag1-/-
계통 3 = mFcRn -/-/Rag1-/-
유사한 Cmax 농도를 모든 군에 대해 수득하였다. 둘 모두의 인간 FcRn 넉-인(knock-in) 마우스 계통에서, BPC1494는 BPC1492보다 높은 노출(AUC0 -t)을 가졌으나, 이러한 차이는 현저하지 않았다(1.3배). 인간 및 마우스 FcRn 둘 모두의 부재하에서, BPC1492는 BPC1494보다 높은 노출을 가졌다.
실시예 13: pEF 벡터로의 항체 발현 벡터의 클로닝
일부 경우에서, 중쇄 및 경쇄에 대한 발현 카세트를 엔코딩하는 DNA를 HindIII 및 EcoRI을 이용하여 실시예 3에 기재된 벡터로부터 절제하고, pEF 벡터로 클로닝하였으며, 여기서 발현은 표준 분자생물학 기술을 이용하여 hEF1a 프로모터로부터 발생한다(벡터의 기재에 대해, Kotsopoulou et al J. Biotechnol (2010) 146: 186-193 참조).
표 8
실시예 14: pEF 발현 벡터를 이용한 CHO 세포에서의 항체의 발현
중쇄 및 경쇄를 엔코딩하는 발현 플라스미드를 CHO DG44 세포로 공동-트랜스펙션시켰고, 항체를 생성시키는 규모로 발현시켰다. BPC1492 플라스미드의 발생을 위해, SJC329 및 SJC330을 사용하였다. BPC1494 플라스미드의 발현을 위해, SJC329 및 SJC331을 사용하였다. BPC1496 플라스미드에 대해, SJC329 및 SJC332를 사용하였다.
간단히, 30 ㎍ DNA(15 ㎍ 중쇄 및 15 ㎍ 경쇄)를 Not1 제한 효소를 이용하여 밤새 선형화시켰다. 생성된 제한된 DNA를 이후 에탄올 침전시키고, TE 완충액 중에 재용해시켰다. 배양물로부터, 6X106개의 CHO DG44 세포를 수득하고, 10㎖의 PBS 중에서 세척하였다. 이후, 세포 펠렛을 300㎕의 Amaxa 용액 V에 재현탁시켰다. 이후, 100㎕의 상기 언급된 세포 현탁액을 3 ㎍의 선형화된 DNA를 또한 함유한 3개의 Amaxa 큐벳의 각각으로 첨가하였다. 큐벳을 Amaxa nucleofector II 장치로 삽입하고, 미리 설정된 프로그램 U-023을 이용하여 전기천공시켰다. 전기천공된 세포의 3개의 큐벳(300㎕)의 함유물을 10㎖의 가온된 MR14 배지(누클레오시드 및 BSA를 포함함)에 첨가하고, 48시간 동안 T75 플라스크에서 인큐베이션하였다. 상기 기간 후, 배지를 누클레오시드-비함유-MR14(BSA만을 함유하는 MR14)로 변경시켰다. 3-4일마다, 적응용 배지를 분리시키고, 새로운 선택 배지로 대체하였다. 세포가 회복을 겪은 후, 배지를 2X MR14로 대체하고, IgG 발현을 비탁법(nephlometry)에 의해 확인하였다. 2L 진탕-플라스크에 1L의 IgG-발현 세포를 0.6X106/㎖로 시딩하고, 7일 동안 성장시켰다. 세포를 원심분리에 의해 상층액으로부터 분리시키고, 상층액을 단백질 정제에 사용하였다.
1 리터의 세포 배양 상층액을 AKTA Xpress 시스템에서 2-단계 자동화 방법을 이용하여 정제하였다. 항체를 5㎖ MabSelectSure 컬럼 상에서 포획한 후, 용리 전에 세척하였다. 이후, 용리된 항체를 440㎖ Superdex 200 겔 여과 컬럼으로 로딩하고, 96-웰 블록 중에 2㎖ 분획을 수거하였다. 정제된 항체의 분획을 푸울링(pooling)하고, 0.2μm 여과시킨 후, Amicon 회전 농축기를 이용하여 ~5㎎/㎖로 농축시켰다. 최종 물질을 다시 0.2㎛ 여과시킨 후, 전달을 위해 멸균 튜브로 분배하였다. 최종 물질을 응집을 결정하기 위한 분석 SEC, 내독소 검정, 정확한 질량 결정을 위한 LC-MS(PNGaseF 및 당화를 결정하기 위한 미처리된 물질을 포함함), SDS PAGE 전기영동, 서열 확인을 위한 PMF 및 농도 결정을 위한 A280에 적용시켰다.
실시예 15: pEF 발현 벡터를 이용한 CHO 세포에서의 항체의 발현을 위한 대안적 방법
DHFR-무표지(null) CHO DG44 세포를 컬럼비아 대학의 체이신 박사(Dr. Chasin)로부터 입수하였다. 상기 세포를 이후 화학적으로 규정된 배지에 적합화시켰다. 이들 적합화된 숙주 세포를 DG44-c로 명명하였고, Glutamax 및 HT-보충물이 보충된 전매특허의 화학적으로 규정된 배지에서 배양하였다.
폴리클로날 푸울의 생성: 프로토콜에 대한 추가의 세부사항에 대해, WO2009024567호 및 문헌[Kotsopoulou et al, J. Biotechnol (2010) 164(4): 186-193]을 참조하라. 간단히, DG44-c 세포를 전기천공(Amaxa nucleofector 시스템)에 의해 중쇄 및 경쇄 및 DHFR 및 neoR을 각각 엔코딩하는 플라스미드로 트랜스펙션시켰다. 트랜스펙션 48시간 후, G418의 첨가(400 ㎍/㎖의 최종 농도) 및 HT의 제거에 의해 선택을 개시하였다. 생존력 및 세포 수가 충분히 증가한 경우(본 실시예의 경우, 트랜스펙션 2개월 후), 메토트렉세이트(MTX)를 5nM의 최종 농도로 첨가하였다. 세포를 증가시키고, 생성 곡선을 MTX의 첨가 9-16일 후에 개시하였다. 상기 생성 곡선을 위해, 세포를 화학적으로 규정된 배지 중에 0.6-0.8x106 세포/㎖로 시딩하고, 6, 9 또는 10, 12 또는 13 및/또는 16일에 영양공급하였다. 생존력이 약 50%로 감소되는 경우 상층액을 수거하고, 세포를 30분 동안 4000g에서의 원심분리 후 sartobran 캡슐을 통한 여과에 의해 분리시켰다.
항체를 2단계 크로마토그래피 절차를 이용하여 실온에서 정제하였다: 최초 포획을 50㎖ MabSelect SuRe 컬럼(GE Healthcare) 후 1.5L Superdex 200 pg SEC(GE Healthcare)를 이용한 크기 배제 크로마토그래피(SEC)를 이용하여 수행하였다. 적응용 배지를 9cm/h의 유속으로 미리 평형화된 MabSelect SuRe 컬럼 상에 로딩하였다. 평형 완충액(50mm Tris pH 8.0, 2M NaCl)을 이용한 기준선으로의 세척 후, 컬럼을 전도성이 안정적이 될 때까지 저염 완충액(50mM NaCl Tris pH 8.0, 150mM NaCl)으로 세척하였다. 이후, 컬럼을 용리 완충액(25mM 시트레이트 pH 2.5)으로 용리하였다. 피크 단백질 용리에 해당하는 분획을 1/10 부피의 1.0M Tris pH 8.0으로 즉시 중화시키고, 이후 이를 푸울링시키고, 0.2μm bottletop 필터를 통해 여과시켰다. 회수된 샘플을 SEC 완충액(50mM Na 아세테이트, 150mM NaCl)으로 미리 평형화된 SEC 컬럼 상에 21cm/h로 로딩하였다. 주요(모노머) 단백질 피크를 함유하는 분획을 푸울링하고, 필터 멸균시켰다.
상기 방법에 의해 제조된 항체를 하기 실시예에 요약된 분석 비교 연구에 사용하였다.
실시예 16: 스트레스 및 대조군 샘플에 대한 분석 비교
단백질의 응집 수준을 결정하기 위해 크기 배제 크로마토그래피를 수행하였다. 최적화된 방법은 100 mM 소듐 포스페이트, 400 mM NaCl, pH 6.8 중에 평형화된 TOSOH TSK G3000SWXL 컬럼 상으로의 샘플의 주입을 포함하였다. 흡광도를 280nm 및 214nm 둘 모두에서 측정하였다. 역상 HPLC는 소수성을 기초로 하여 단백질 및 이의 아이소형(isoform)을 분리시킨다. 단백질을 PLRP-S 1000°A 8μm 컬럼 상에 주입하고, 50% 포름산, 및 95% 아세토니트릴에 의해 생성된 구배를 이용하여 용리시켰다. 흡광도를 280nm에서 측정하였다. 분자의 순도는 전체 피크 영역에 비한 주요 피크 영역의 백분율로 보고된다. mAb의 다양한 아이소형을 모세관 등전 초점조절(cIEF)을 이용하여 이들의 pI 값을 기초로 하여 분리시켰다. 10cm, UV280 투명 카트리지 모세관 상에서 IEF 분리를 수행하였다. 최적화된 방법은 압력 주입에 의해 모세관으로 로딩된 5% pH 3-10 양성전해질, 10mM NaOH, 관심 단백질 및 내부 pI 마커(7.05 및 9.5)를 함유하는 용액을 포함하였다.
항체(아달리무맙, BPC1494, BPC1496)의 특정 활성을 MSD를 이용하여 결정하였다. 간단히, 96-웰 플레이트를 PBS 중에 1 ㎍/㎖로 희석된 TNFα를 웰 당 50㎕로 코팅하였다. 플레이트를 2시간 동안 진탕 없이 주위 온도에서 벤치 탑(bench top) 상에서 인큐베이션하였다. 코팅 용액을 분리시키고, 플레이트를 0.05% 폴리소르베이트 20과 함께 PBS 중 1% BSA의 웰 당 50㎕로 블로킹하였다. 플레이트를 400 rpm에서의 진탕과 함께 24℃에서 1시간 동안 인큐베이션시킨 후, 세척 완충액으로 4회 세척하였다. 항체를 0.05% 폴리소르베이트 20을 갖는 PBS 중 0.1% BSA 중에 희석시키고, 30㎕의 각각의 샘플을 플레이트에 첨가하였다. 플레이트를 400 rpm에서의 진탕과 함께 24℃에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 이후, 플레이트를 세척 완충액으로 4회 세척하였다. 항-인간 IgG 설포태그(sulfotag)를 검정 완충액 중에 1/5000로 희석시켰다. 30㎕를 플레이트의 각각의 웰에 첨가한 후, 400 rpm에서의 진탕과 함께 24℃에서 1.5시간 동안 인큐베이션시켰다. 이후, 플레이트를 세척 완충액으로 4회 세척하였다. 4x MSD 판독 완충액 농축액을 탈이온수를 이용하여 1x로 희석시켰다. 이후, 100㎕를 플레이트의 웰 당 첨가하였다. 이후, 플레이트를 MSD Sector Imager 기계를 이용하여 판독하였다. 검정으로부터 수득된 신호로부터, 분자의 특정 활성을 계산하였다.
탈아미드화 분석
탈아미드화는 아스파라긴 및 글루타민 잔기에 대해 발생할 수 있으나, 특히 글리신 잔기에 인접한 경우 아스파라긴 잔기에서 가장 흔하게 관찰되는 흔한 번역후 변형이다. 상기 잔기가 어떻게 민감한지 시험하고, 역가에 대한 탈아미드화의 효과를 결정하기 위해, 아달리무맙, BPC1494 및 BPC1496을 스트레스 연구에 노출시켰다. 탈아미드화를 야기시키는 것으로 이전에 밝혀진 조건인 48시간 동안 pH 9.0에서의 1% 암모늄 바이카르보네이트 중에서의 인큐베이션에 의해 스트레스를 수행하였다. 스트레스 샘플을 대조군(PBS 중)과 함께 인큐베이션시키고, 상기 대조군 뿐만 아니라 비스트레스 참조와 비교하고, c-IEF, SEC 및 결합 ELISA를 이용하여 분석하였다. 강제된 탈아미드화를 또한 EDTA의 존재 및 부재하에서 모든 샘플에 대해 수행하였다. 강제된 탈아미드화 조건이 탈아미드화에 더하여 단편화를 야기시키는 것으로 이전에 밝혀졌었다. EDTA는 단편화를 방지하고/하거나, 최소화시킨다.
산화 분석
다양한 잔기의 산화는 단백질의 가공 및 저장을 통해 발생시킬 수 있으나; 가장 흔한 산화된 잔기는 본 스크린의 초점이었던 메티오닌이다. 상기 잔기의 산화 민감성을 30분 동안 5mM 및 50 mM H2O2에서의 인큐베이션에 의해 스트레스 조건에 대한 노출을 통해 시험하고, RP-HPLC, SEC 및 ELISA를 이용하여 평가하였다.
결과의 요약
BPC1494 및 BPC1496 둘 모두는 스트레스 및 대조군 샘플 둘 모두에 대한 분석 비교에 의해 나타나는 바와 같이 아달리무맙과 비교하여 매우 유리하게 거동한다. 시험된 모든 항체에 대해, 사용된 모든 분석 기술에 의해 나타나는 바와 같이 강제된 산화 조건하에서 유의한 붕괴가 관찰되지 않았다. c-IEF에 의해 측정된 바와 같은 유의한 탈아미드화가 시험된 모든 항체에 대해 예상되는 바와 같이 pH 9.0에서 관찰되었다. 또한, 본 발명자는 EDTA가 없는 샘플 중에서의 pH 9.0의 SEC에 의해 나타나는 바와 같이 시험된 모든 항체에 대해 유의한 단편화를 관찰하였고, 이 또한 예상된 바와 같다. 아달리무맙과 비교하는 경우 BPC1494의 pi 값에서 감소(약 0.2)가 존재한다. 이는 BPC1494의 중쇄 서열 내의 추가 글루탐산 잔기의 존재에 기인되며, 따라서 이는 BPC1494를 더욱 산성으로 만든다. 강제된 탈아미드화 및 산화는 결합에 대해 최소의 영향을 가지며, 이는 BPC1494, BPC1496 및 아달리무맙에 대해 관찰되었다.
실시예 17: ELISA에 의한 개선된 항체의 결합의 분석
항체 BPC1499, 1500 및 1501을 실시예 4에 기재된 바와 같이 ELISA에 의해 결합 활성에 대해 평가하였다. 2개의 상이한 항원 코팅 농도(0.1 및 1.0 ㎍/㎖)를 이용하여, 항체는 BPC1492와 비교하는 경우 이들의 결합 프로파일에서 임의의 차이를 나타내지 않았다. 시험된 조건하에서, ELISA는 상이한 보고된 결합 활성을 갖는 항체 사이를 구별하지 않는 것으로 보인다. 동일 항체를 실시예 18에 기재된 방법을 이용하여 평가하였고, 이중 5 및 6은 더욱 민감한 검정으로 간주된다. 상기 검정에서, 항체 BPC1499, 1500 및 1501은 BPC1492와 비교하는 경우 개선된 결합 친화성 및 개선된 역가를 나타낸다.
실시예 18: 포획 표면을 이용한 TNF 알파 결합의 Biacore 분석
단백질 A 및 항-인간 IgG(GE Healthcare BR-1008-39)를 CM3 바이오센서 칩 상의 별개의 플로우 셀(flow cell) 상에 커플링시켰다. 이들 표면을 결합 분석을 위해 항체를 포획하는데 사용하였다. 재조합 인간 및 시노몰구스 TNF 알파를 분석물로서 64nM, 21.33nM, 7.11nM, 2.37nM, 0.79nM로 사용하였고, 결합 곡선의 이중 참조를 위해 완충액 단독(즉, 0nM)의 주입을 사용하였다. 포획 표면의 재생을 100mM 인산 및 3M MgCl2를 이용하여 수행하였다. 작업을 런닝 완충액(running buffer)으로서 HBS-EP를 이용하여 37℃에서 Biacore T100 기계 상에서 수행하였다. 작제물 BPC1494 및 BPC1496은 단백질 A 및 항-인간 IgG 표면에 대해 감소된 결합을 나타내었고, 이는 이들 표면을 상기 분자에 대한 동역학을 발생시키는데 부적합하게 만든다.
표 9: 포획된 항-
TNF
알파 항체에 대한 인간 및
시노몰구스
TNF
알파 결합의 동역학 분석
실시예
19:
ProteOn
역 검정 결합 분석
비오티닐화된 TNF 알파를 20 ㎍/㎖의 최종 전체 단백질 농도로 1:49의 비로 비오티닐화된 BSA와 혼합하였다(즉, 0.4 ㎍의 비오티닐화된 TNF 알파 및 19.6 ㎍의 비오티닐화된 BSA). 이러한 혼합물을 NLC 바이오센서 칩(단일 플로우셀)(Biorad 176-5021) 상에서 포획하였다. 안정적 신호가 달성될 때까지 칩 표면을 10mM 글리신 pH3.0으로 컨디셔닝(conditioning)하였다. 시험되는 항체를 분석물로서 256nM, 64nM, 16nM, 4nM 및 1nM 및 0nM로 사용하였다. 결합 곡선을 비오티닐화된 BSA 단독으로 코팅된 플로우셀에 대해 참조하였다. 10mM 글리신 pH3.0을 이용하여 재생을 달성하였다. 데이터를 ProteOn 분석 소프트웨어에 고유한 1:1 모델로 적합화시켰다.
표 10:
뉴트라비딘
(
Neutravidin
) 포획된
TNF
알파에 대한 항-
TNF
알파 항체결합의 겉보기 동역학(
apparent
kinetics)
상기 데이터는 수행된 2개의 실험의 하나의 세트이다(두번째 세트는 제시되지 않음). 데이터의 KD 등급은 둘 모두의 데이터 세트를 나타낸다.
실시예
20: 인간
TNF
α에 결합하는 대안적 항체의
작제
CDR 영역 내에 변형을 갖는 추가의 가변 중쇄 영역을 엔코딩하는 DNA 발현 작제물(Rajpal et al. PNAS (2005) 102(24): pg 8466-8471에 기재된 바와 같음)을 중첩 올리고누클레오티드 및 실시예 1에 기재된 것과 유사한 분자생물학 기술의 조성에 의해 새로이 제조하였다. 상기 변이체 항체의 가변 중쇄 도메인을 엔코딩하는 DNA 서열의 예가 SED IQ NO:81, 83, 85, 87, 89, 91, 93 및 95에 제공된다. CDR 영역 내에 변형을 갖는 추가의 가변 경쇄 도메인 영역을 엔코딩하는 DNA 발현 작제물(Rajpal et al. PNAS (2005) 102(24): pg 8466-8471에 기재된 바와 같음)을 중첩 올리고누클레오티드 및 실시예 1에 기재된 것과 유사한 분자생물학 기술의 조성에 의해 새로이 제조하였다. 상기 변이체 항체의 가변 경쇄 도메인을 엔코딩하는 DNA 서열의 예는 SED IQ NO:97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135 및 137에 제공된다. 작제된 후, 중쇄 및 경쇄를 엔코딩하는 발현 플라스미드를 HEK 293 6E 세포로 일실적으로 공동-트랜스펙션시켰다. 발현된 항체를 상층액으로부터 정제시키고, 실시예 6에 기재된 것과 유사한 방법을 이용하여 활성에 대해 평가하였다.
실시예
21:
BPC2604
(
파스콜리주맙
-
YTE
)에 대한 발현 벡터의
작제
파스콜리주맙의 중쇄를 엔코딩하는 pTT-기반 DNA 발현 작제물을 Quikchange 프로토콜(Promega)을 이용하여 다음과 같은 변화 M252Y/S254T/T256E(EU 인덱스 넘버링)를 포함하도록 설계하였다.
실시예
22:
Pasco
및
Pasco
-
YTE
벡터의 발현/정제
BPC2604의 중쇄 및 경쇄를 엔코딩하는 발현 플라스미드를 HEK 293 6E 세포로 일시적으로 공동-트랜스펙션시켰다. 발현된 항체를 친화성 크로마토그래피 및 AKTA Xpress 상의 5㎖ MabSelectSure 컬럼 및 Superdex 200 컬럼을 이용한 SEC에 의해 수행되는 2 단계 정제를 이용하여 벌크 상층액으로부터 정제하였다.
실시예
23:
FcRn
결합에 대한
Pasco
대
Pasco
YTE
의
BIAcore
분석
항체를 일차 아민 커플링에 의해 GLM 칩(아세테이트 pH4.5 중 20 ㎍/㎖) 상에 고정시켰다. 인간, 시노몰구스, 래트 및 마우스 FcRn 수용체를 2048, 512, 128, 32 및 8nM로 사용하였다. 0nM을 이중 참조를 위해 사용하였다. 검정을 HBS-EP pH7.4 및 HBS-EP pH6.0에서 수행하였다(FcRn 수용체는 각각의 pH에 대해 적절한 런닝 완충액 중에 희석되었다). FcRn 결합을 위해 200mM Tris pH9.0로 표면을 재생시켰다. 데이터를 평형 모델로 적합화시켰고, R-max를 임의의 작제물에서 수득된 가장 높은 R-max로 설정하였다. 결과가 하기 표 11에 제시되며, 이는 YTE-변형된 파스콜리주맙(BPC2604)이 파스콜리주맙에 비해 pH6.0에서 FcRn에 대한 개선된 결합을 나타내는 것을 입증한다.
표 11: 인간 및
시노몰구스
FcRn
에 대한 항-
IL
-4 항체
작제물의
친화성(n.a.b.는 분석가능한 결합이 없음이다).
실시예
24:
Pasco
대
Pasco
-
YTE
를 이용한
PK
연구
도 6은 1 ㎎/㎏의 표적 용량의 단일 정맥내(1시간 주입) 투여 후의 암컷 시노몰구스 원숭이에서의 파스콜리주맙-YTE(BPC2604) 및 수컷 시노몰구스 원숭이에서의 파스콜리주맙의 평균 용량 표준화된 혈장 농도를 도시한다. BPC2604 및 파스콜리주맙에 대한 데이터를 별개의 연구로 발생시켰다. 파스콜리주맙 및 BPC2604에 대한 혈장 항체 농도를 포획 시약으로서 IL-4 및 검출 시약으로서 항-인간 IgG(Fc 특이적)-HRP 컨쥬게이트를 이용한 화학발광 ELISA에 의해 평가하였다. 검정에 대해 확인된 범위는 50-5000 ng/㎖였다. 결과가 도 6에 제시된다. 둘 모두의 화합물은 유사한 Cmax를 가졌으나, BPC2604는 AUC에서의 3배 증가 및 반감기(T½)에서의 2배 증가를 발생시키는 3배 낮은 혈장 청소를 가졌다.
실시예
25: 5㎎/㎖에서의 제형 연구
2개의 제형 중의 아달리무맙 및 TNF-알파 변이체 BPC1494의 안정성을 비교하였다. 제형 'A'(시트레이트-포스페이트 완충액)는 pH 5.2의 6.16 ㎎/㎖ 소듐 클로라이드 + 0.30 ㎎/㎖ 소듐 시트레이트 모노베이직 + 1.30 ㎎/㎖ 시트르산 모노하이드레이트 + 12 ㎎/㎖ 만니톨 + 0.86㎎/㎖ 모노베이직 소듐 포스페이트 디하이드레이트 + 1.53㎎/㎖ 디베이직 소듐 포스페이트 디하이드레이트 + 1.0 ㎎/㎖ PS80으로 구성된 시판되는 아달리무맙 제형이다.
제형 'B'(아세테이트 완충액)는 HCl 또는 NaOH를 이용하여 pH 5.5로 조정된 6.81 ㎎/㎖(50mM) 소듐 아세테이트 트리하이드레이트 + 10㎎/㎖(1% w/v) 아르기닌 + 0.0186㎎/㎖(0.05mM) EDTA + 2.98㎎/㎖(51mM) 소듐 클로라이드 + 0.2㎎/㎖(0.02% w/v) 폴리소르베이트 80으로 구성된다.
본 연구에서 사용된 TNF-알파 변이체 BPC1494 물질을 차이니즈 햄스터 난소(Chinese Hamster Ovary)(CHO DG44) 세포주에서 제조하였고, mAb Select Sure 후 Superdex 컬럼 200pg를 포함하는 2 단계 방법을 이용하여 정제하였다. Abbott Laboratories에 의해 제조된 아달리무맙(Product code NDC 0074-3799-02, Lot number 91073LX40)을 사용하였다.
아달리무맙을 Thermo Scientific(Rockford, IL; USA)에 의해 생성된 10KDa Slide - A - Lyzer 카세트(Product Number 66830, Lot Number LJ150514)를 이용하여 5℃에서의 밤새 투석에 의해 제형 'B'로 다시 제형화시켰다. 본 실험을 다른 3개의 제형에 대해 상이한 시점에서 수행하였다. 제형 'A' 및 'B' 내의 둘 모두의 아달리무맙을 이들 각각의 제형 완충액을 이용하여 5㎎/㎖로 희석시켰다. TNF-알파 변이체 BPC1494 분자를 또한 ~5㎎/㎖로 제형 A 및 B에서 제형화시켰다. 전체 4개의 샘플을 깨끗한 층 유동 조건하에서 MillexGV 0.22㎛ 필터를 통해 여과시키고, 표지된 미리 멸균된 유리 바이얼로 옮기고, 14주 이하 동안 5℃, 25℃ 및 40℃에서 인큐베이션하였다. 샘플을 선택된 시점에 수거하고, SEC-HPLC(표 12), cIEF(표 13)를 이용하여 분석하였다. 하기 기재되는 다른 검정을 또한 항체의 안정성을 평가하기 위해 수행하였다.
시각적 관찰에 의한 외형
샘플을 일광 조건하에서 투명도에 대해 검사하였다. 각각의 제형 내의 둘 모두의 항체는 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 저장 14주 후에 변경되지 않고 유지되었다(투명한 무색 용액).
단백질 농도(A280nm) 측정
단백질 농도를 단백질 안정성을 나타내는 nanodrop 분광계를 이용하여 측정하였다. 아달리무맙에 대한 흡광계수는 1.46이며, TNF-알파 변이체 BPC1494에 대한 흡광계수는 1.48이다. 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 저장 14주 후의 결과에서 유의한 차이가 없었다.
pH
임의의 유의한 pH 변이가 발생하였는지의 여부를 결정하기 위해 다양한 저장 조건하에서 저장된 모든 샘플에 대해 pH를 측정하였다. 모든 결과는 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 저장 14주 후에 검정 변동성 내로 유지되었다.
크기 배제 크로마토그래피(
SEC
)
이러한 방법은 분자량이 아닌 크기를 기초로 하여 용액 중의 가용성 단백질 분자를 분리시킨다. 이론적으로, 작은 분자는 정지상의 모든 작은 포어를 관통할 것이며, 따라서 나중에 용리될 것이다. 수득된 크로마토그램은 응집물, 모노머 및 저분자량(MW) 단편의 영역 백분율의 결정을 가능케 한다. 응집물 및/또는 저분자량 종의 존재는 단백질 분해를 나타낸다. 증가된 안정성은 높은 백분율의 모노머 종(Mono)과 함께 낮은 백분율의 전체 응집물(TA) 및 전체 저분자량 단편(TLMWF)에 상응한다.
SEC-HPLC 데이터(표 12)는 TNF-알파 변이체 BPC1494가 14주 동안 25℃ 및 40℃에서의 저장 후에 제형 A에 비해 제형 'B'에서 비교적 더 안정적인 것을 나타낸다. 또한, TNF-알파 변이체 BPC1494는 비교적 더 안정적이었거나, 적어도 제형 A 내의 아달리무맙만큼 안정적이었다. 제형 B내의 아달리무맙에 대한 결과는 모두 5% TA 및/또는 TLMWF 내이다. 따라서, 제형 B는 TNF-알파 변이체 BPC1494 및 아달리무맙 둘 모두에 대해 제형 A에 비해 장점을 갖는다.
예를 들어, 표 12는 8주 동안 25℃에서의 저장 후, 제형 A 내의 TNF-알파 변이체 BPC1494가 2.3% TLMWF를 갖는 반면, 제형 B는 단지 1.5%를 생성시킨 것을 나타낸다. 또한, 제형 B 내의 TNF-알파 변이체 BPC1494는 제형 A 내의 아달리무맙보다 비교적 더 안정적이었다(1.8% TLMWF). 유사하게, 25℃에서 14주의 시점에서, 제형 'B'에서의 2.3% TLMWF에 비해 제형 'A' 내의 TNF-알파 변이체 BPC1494에 대해 3.15% TLMWF가 관찰되었다. 또한, 'B' 내의 TNF-알파 변이체 BPC1494는 제형 A 내의 아달리무맙보다 비교적 더 안정적이었다(3.4% TLMWF). 4주 동안 40℃에서의 인큐베이션 후 둘 모두의 분자에 대해 TLMWF에 대한 유사한 경향이 관찰되었다('A' 내의 아달리무맙: 3.6%; 'A' 내의 TNF-알파 변이체 BPC1494: 4.1%; 'B' 내의 TNF-알파 변이체 BPC1494: 2.6%).
또한, 전체 응집물(TA)에 대한 결과는 25℃에서 14주에서, TNF-알파 변이체 BPC1494가 'A'(0.5%) 보다 'B'(0.3%)에서 비교적 더 안정적이고; 제형 A 내의 아달리무맙(0.4%)보다 비교적 더 안정적인 것을 나타낸다.
모세관
등전
초점조절(c-
IEF
)
본 기술은 분자의 전하 프로파일을 결정하기 위해 사용된다. 넓은 pI 값은 생성물의 더 큰 전하 비균질성을 반영하고, 또한 ?은 pI 범위는 분해를 나타낼 수 있다. 통상적으로, 피크의 수는 분해의 증가와 함께 증가할 것이다. 표 12의 C-IEF 데이터는 표 13에서의 SEC 발견을 뒷받침한다.
주요 아이소형의 영역 %(%AMI)는 25℃에서 8주 및 14주에서 제형 A 내의 아달리무맙과 제형 B 내의 TNF-알파 변이체 BPC1494 사이에서 동등하였다(각각, 56.0-57.7 및 53.2). 상기 시점 및 온도에서, 제형 B는 TNF-알파 변이체 BPC1494에 대해 'A'에 비해 약간의 장점을 나타낸다.
유사하게, 아달리무맙은 제형 'A'에서보다 제형 'B'에서 비교적 더 안정적이다(4주 데이터 참조). 예를 들어, 전하 비균질성에서의 증가된 변화(즉, 피크의 수에서의 증가)가 제형 'B'에 비해 제형 'A'(각각, 6개의 피크 및 8개의 피크)에서 40℃에서 4주 이하 동안 인큐베이션된 아달리무맙에 대해 관찰되었다. TNF-알파 변이체 BPC1494는 모든 시점 및 온도에서 5개의 피크의 더욱 일치하는 전하 비균질성을 나타내었다.
기능적 결합 검정
2개의 제형 내의 아달리무맙 및 TNF-알파 변이체 BPC1494의 결합 활성을 Biacore에 의해 평가하였다. 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 14주의 저장 기간에 걸쳐, 샘플은 검정 변동성 내에서 유사한 결합 %를 나타내었다.
그러므로, 제형 'B'는 단백질의 안정성을 손상시키지 않고, 시판되는 아달리무맙 제형 (A)과 관련된 동통을 잠재적으로 제거하지 않으면서 임상 환경에서 제형 'A'에 대한 대안으로서 작용할 수 있는 것으로 결론내릴 수 있다.
중요하게는, 이러한 데이터는 아세테이트 제형 (B)가 시트레이트-포스페이트 제형 (A)에 비해 TNF-알파 변이체 BPC1494의 안정성을 개선시킬 뿐만 아니라; 아세테이트 제형이 아달리무맙을 안정화시키는 경우 시트레이트-포스페이트 제형과 동등하거나 이보다 약간 더 나은 것을 나타낸다.
표 12: 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 제형 '
A'
및 '
B'
내의
아달리무맙
및
TNF
-알파
변이체
BPC1494
의
SEC
-
HPLC
.
TLMWF
: 전체
저분자량
단편;
Mono
:
모노머
;
TA
: 전체
응집물
. N = 2
표 13: 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 제형 '
A'
및 '
B'
내의
아달리무맙
및
TNF
-알파
변이체
BPC1494
의
CE
-
IEF
. N = 2
NT= 시험되지 않음; pI R: Pi 범위; pMI: 주요 아이소형의 pI; % AMI: 주요 아이소형 영역 %; NoP: 피크의 수.
실시예
26: 50㎎/㎖에서의 제형 연구
이전 실시예 25에 제시된 바와 같이, 제형 'B' 내의 5㎎/㎖의 아달리무맙 및 TNF-알파 변이체 BPC1494는 제형 'A'에 대한 대안으로 작용할 수 있다. 본 실시예는 50㎎/㎖의 제형 'B' 및 다른 TNF-알파 변이체에 비한 아달리무맙의 시판되는 제형 'A'에서의 아달리무맙의 안정성을 비교하는데 중점을 둔다.
TNF-알파 변이체 BPC1494의 2개의 샘플을 분석하였고, 이 중 하나는 CHO DG44 세포에서 발현되었고, 하나는 CHOK1 세포에서 발현되었다. CHO-DG44 세포주에서 두번째 TNF-알파 변이체 BPC1496을 제조하였다. 3개 모두의 샘플을 발현시키고, mAb Select Sure를 이용하여 정제하였다. 실시예 25와 대조적으로, Superdex 컬럼 단계를 수행하지 않았다. 아달리무맙(Product code N 00515-01, Lot number 02136XH12)은 실시예 25에서와 같이 Abbott Laboratories에 의해 제조되었다. 아달리무맙을 실시예 25에서 상기 기재된 바와 같이 제형 'A'(구입함) 및 'B'(완충액 교환에 의함) 중에서 제형화시키고, TNF-알파 변이체(BPC1494 및 1496)를 'B'에서 제형화시켰으며, 상기 모두는 ~50㎎/㎖였다(5개 샘플 전체). 샘플을 깨끗한 층 유동 조건하에서 MillexGV 0.22㎛ 필터로 여과시키고, 표지된 미리 멸균된 유리 바이얼로 옮기고, 9주 이하 동안 5℃ 및 40℃에서 인큐베이션하였다. 선택된 시점에서, 샘플을 수거하고, SEC-HPLC(표 14), cIEF(표 15)를 이용하여 분석하였다. 하기 기재되는 바와 같은 다른 검정을 또한 수행하였다.
시각적 관찰에 의한 외형
샘플을 일광 조건하에서 투명도에 대해 관찰하였다. 둘 모두의 제형에서의 둘 모두의 항체는 5℃ 및 40℃에서 9주 저장 후 변경되지 않고 유지되었다(투명한 무색의 용액).
단백질 농도(A280nm) 측정
단백질 농도를 단백질 안정성을 나타내는 nanodrop 분광계를 이용하여 측정하였다. 5℃ 및 40℃에서의 9주 저장 후의 결과에서 유의한 차이가 없었다.
크기 배제 크로마토그래피(
SEC
)
SEC-HPLC 데이터(표 13)는 50㎎/㎖의 아달리무맙이 9주 동안 40℃에서의 저장 후에 제형 'A'에 비해 제형 'B'에서 비교적 더 안정적인 것을 나타내었다. 또한, TNF-알파 변이체(BPC1494 및 1496)는 'B' 내의 아달리무맙에 비해 'B'에서 비교적 안정적이거나 더 안정적이었다. 'A' 및 'B' 내의 변이체 사이의 비교를 수행하지 않았다.
TNF-알파 변이체에 대한 최초 TA 수준이 아달리무맙에 대해서보다 비교적 높은 것을 주의하라. 따라서, 결과는 40℃에서 개시로부터 9주까지의 변화를 비교하기 위해 우측 방향에서의 컬럼 변화 %를 포함한다. 예를 들어, 표 13은 9주 저장 후, 제형 'B' 중에서의 전체 저분자량 단편(TLMWF)에서의 변화 백분율이 제형 'A'에서의 6.08%에 비해 3.82 내지 4.96%인 것을 나타낸다. 유사하게, 제형 'A'에서의 모노머 백분율 변화는 'B'에 대해서보다 아달리무맙에 대해 더 컸다(각각, 4.52% 및 7.54%). 'B'에서의 TNF-알파 변이체는 모두 비교적 적어도 제형 'A' 내의 아달리무맙만큼 안정적이거나 이보다 더 안정적이었다(9주에서의 변화%). 모든 샘플에 대한 4주에서의 결과는 시판되는 제품에 대한 5%의 TA 및/또는 TLMWF 허용 범위 내이다. 따라서, 'B'는 50 ㎎/㎖에서 TNF-알파 변이체 및 아달리무맙 둘 모두에 대해 'A'에 비해 장점을 갖는다.
특히, TNF-알파 변이체 BCP1496은 40℃에서 9주에서 3.86의 낮은 TLMWF 값을 나타내었다.
모세관
등전
초점조절(c-
IEF
)
C-IEF 데이터(표 15)는 표 14에서의 발견을 뒷받침한다.
제형 B는 제형 A에 비해 아달리무맙에 대해 9주에서 %AMI의 감소된 변화 %를 나타낸다(각각, 23.53 및 27.57).
'B'에서의 TNF-알파 변이체는 아달리맙보다('A' 및 'B' 둘 모두에서) 전하 비균질성(즉, 피크의 수의 증가)과 관련하여 더 안정적이다. 예를 들어, 9주에서, 5℃ 및 40℃ 각각에서, 변이체 각각에 대해 5 및 6개의 피크가 존재하였고; 아달리무맙에 비해 6 및 9개의 피크가 존재하였다.
특히, 둘 모두 'B' 내의 TNF-알파 변이체 BCP1496 및 아달리무맙은 각각 25.83 및 23.53의 9주에서의 %AMI에서의 적은 변화 %를 나타내었다. 38.13의 TNF-알파 변이체 BCP1496(CHO DG44)에 대한 9주에서의 %AMI에서의 비교적 높은 변화 %는 75.03의 비교적 높은 최초 %AMI로 인한 것일 수 있다.
기능적 결합 검정(
ELISA
)
2개의 제형에서의 아달리무맙 및 TNF-알파 변이체의 생물학적 활성을 Biacore에 의해 평가하였다. 5℃ 및 40℃에서의 9주의 저장 기간에 걸쳐, 샘플은 검정 변동성 내에서 동일한 결합 %를 나타내었다.
그러므로, 제형 'B'가 50㎎/㎖ 투여량 강도에서 항체의 안정성을 손상시킴이 없이 임상 환경에서 제형 'A'에 대한 대안으로 작용할 수 있는 것으로 결론내릴 수 있다.
표 14: 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 제형 '
A'
및 '
B'
중의
아달리무맙
및
TNF
-알파
변이체
BPC1494
및 1496의
SEC
-
HPLC
.
TLMWF
- 전체
저분자량
단편;
Mono
-
모
노머;
TA
- 전체
응집물
. N = 2
표 15: 5℃, 25℃ 및 40℃에서의 제형 '
A'
및 '
B'
중의
아달리무맙
및
TNF
-알파
변이체
BPC1494
및 1496의
CE
-
IEF
. N = 2
NT= 시험되지 않음; pI R - Pi 범위; pMI - 주요 아이소형의 pI; % AMI - 주요 아이소형 영역 %; NoP - 피크의 수.
실시예
27: 수컷
시노몰구스
원숭이에서의
피하 투여 후의
BPC1494
의 혈장 농도
반복 용량 약동학 연구에서, BPC1494를 수컷 시노몰구스 원숭이에 30 또는 100 ㎎/㎏으로 4주 동안 매주 또는 격주로 피하 투여하였다. 그룹 2(n=3)에 대해, 동물에 1일에 2x 30㎎/㎏ 용량(약 1시간 간격)을 투여한 후, 8, 15 및 22일에 단일한 30 ㎎/㎏ 용량을 투여하였다. 그룹 3(n=3)에 대해, 동물에 1일에 2x 30㎎/㎏ 용량(약 1시간 간격)을 투여한 후, 15일에 단일한 30 ㎎/㎏ 용량을 투여하였다. 그룹 4(n=3)에 대해, 동물에 1일에 2x 100㎎/㎏ 용량(약 1시간 간격)을 투여한 후, 15일에 단일한 100 ㎎/㎏ 용량을 투여하였다. 혈장 샘플을 연구의 투여 및 회복 기간 전체에 걸쳐 간격을 두어 수집하였다.
혈장 샘플을 샘플 희석을 기초로 하는 적합한 분석 방법 및 이후 면역검정 분석을 이용하여 BPC1494에 대해 분석하고, 혈장 샘플을 BPC1494 또는 BPC1492에 대해 분석하였다. 상기 방법은 포획 항원으로서 10 ㎍/㎖의 비오티닐화된 재조합 인간 TNF-알파 및 검출 항체(G18-145)로서 AlexaFluor 647-표지된 항-인간 IgG(Fc 특이적) 항체의 1:100 희석액을 사용하였다. BPC1494에 대한 최소 정량 한계(LLQ)는 100배 희석된 원숭이 혈장의 50 ㎕ 분취량을 이용하여 1 ㎍/㎖이었고, 최대 정량 한계(HLQ)는 100 ㎍/㎖였다. 데이터를 획득하고 정량하기 위해 본 발명에서 사용된 컴퓨터 시스템은 Gyrolab Workstation Version 5.2.0, Gyrolab Companion version 1.0 및 SMS2000 version 2.3을 포함하였다. WinNonlin Enterprise Pheonix version 6.1을 이용한 비-구획 약동학 분석에 의해 PK 분석을 수행하였다.
30 ㎎/㎏/주 용량 그룹(2)에 대해 4주에 투여된 마지막 용량으로부터 투여 840시간 후의 시점(t) 및 30 & 100 ㎎/㎏/격주 용량 그룹(3 및 4)에 대해 3주에 투여된 마지막 용량으로부터 투여 1008시간 후의 시점(t)으로부터 결정된 파라미터를 갖는 표 16에서 약동학 데이터가 제시된다.
표 16: 4주의 연구 조사에 걸친 30 ㎎/㎏/주 또는 30 및 100 ㎎/㎏/격주의 BPC1494의 피하 투여 후의 수컷
시노몰구스
원숭이에서의
BPC1494
에 대한 개별적 및 평균 약동학 파라미터
a) 4주 동안 매주 30 ㎎/㎏로 투여된 그룹 2 동물
b) 30 ㎎/㎏/주에 대해 4주에 투여된 마지막 용량으로부터 투여 840시간 후의 시점(t) 및 30 & 100 ㎎/㎏/격주에 대해 3주에 투여된 마지막 용량으로부터 투여 1008시간 후의 시점(t)으로부터 결정된 약동학 파라미터
c) CI_F 및 Vz_F는 다수의 용량 후의 제거 상 및 아직 달성되지 않은 항정 상태로 인해 추정값이다. 파라미터 추정값은 i) AUC0-168 또는 336의 이용, ii) 반감기를 기초로 한 1주로부터의 데이터의 외삽 및 iii) AUC0-inf을 갖는 규정된 샘플링에 걸친 전체 용량의 이용으로부터 계산되었다.
d) 동물 274 및 277은 이들 동물이 항-약물 항체 반응을 나타낼 가능성이 있다는 과학적 판단을 기초로 하여 평균 약동학 계산으로부터 배제시켰다. 괄호 내에 제시된 평균 데이터는 상기 동물을 포함한다.
실시예
28: 단백질 L 포획된 항-
TNF
α
mAb
에 대한
FcRn
의
SPR
결합 분석
표지 비함유 동역학/친화성 측정을 위해 설계된 표면 플라즈몬 기반 기계인 ProteOnTM XPR36(BioRadTM) 바이오센서 기계를 이용하여 연구를 수행하였다. 단백질 L을 일차 아민 커플링에 의해 GLM 칩(BioRad, Cat No: 176-5012) 상에 고정시켰다. 이후, 이러한 표면을 인간화된 항체를 포획하는데 사용하였고, 이후 인간 및 시노몰구스 FcRn(둘 모두 사내(in-house) 물질)을 분석물로서 2048nM, 512nM, 128nM, 32nM, 및 8nM로 사용하였고, 완충액 단독(즉, 0nM)의 주입을 결합 곡선의 이중 참조에 사용하였다. 단백질 L 표면의 재생을 글리신-HCl pH1.5를 이용하여 수행하였다. 검정을 적절한 완충액 중에 희석된 인간 또는 시노몰구스 FcRn을 이용하여 25℃에서 수행하였고, HBS-EP pH7.4 및 HBS-EP pH6.0 중에서 수행하였다. pH6.0에서의 결합에 대해 "글로벌 R-max" 및 pH7.4에서의 친화성 계산에 대해 pH6.0에서의 결합으로부터의 R-max를 이용하여 ProteOn 분석 소프트웨어에 고유한 평형 모델을 이용하여 친화성을 계산하였다. 결합 곡선이 pH7.4에서 포화에 도달하지 않았으므로, 수득된 값은 진정한 친화성인 것 같지 않았으나, 이들을 시험된 항체의 결합을 순위화시키는데 사용하였다.
인간 FcRn에 대한 BPC1492, BPC1494 및 BPC1496의 다양한 배치의 결합 친화성을 단백질 L에 의한 항체 포획을 이용하여 비교하였다. 표 17은 상기 포맷을 이용한 일련의 실험으로부터의 결과를 제시한다. 데이터는 BPC1494 및 BPC1496이 pH6.0 및 pH7.4 둘 모두에서 BPC1492에 비해 재조합 인간 FcRn에 대해 개선된 친화성을 갖는 것을 입증한다. BPC1492에 비한 FcRn에 대한 BPC1494의 결합 친화성에서의 개선 배수는 포획 시의 단백질 L 활성에서의 변화로 인해 실험마다 상이하다. 그러나, 표 17에 제시된 실험에서, pH6.0에서의 결합 친화성에서의 개선 배수는 3.5배 내지 16.3배의 범위이다. 중성 pH에서의 FcRn에 대한 인간 IgG의 약한 결합 활성으로 인해 pH7.4에서의 결합 친화성에서의 개선 배수를 결정할 수 없었다.
시노몰구스 FcRn에 대한 BPC1492, BPC1494 및 BPC1496의 다양한 배치의 결합 친화성을 또한 단백질 L에 포획된 항체를 이용하여 비교하였다. 표 18은 상기 포맷을 이용한 실험으로부터의 결과를 제시한다. 데이터는 BPC1494가 pH6.0 및 pH7.4 둘 모두에서 BPC1492에 비해 재조합 시노몰구스 FcRn에 대해 개선된 친화성을 갖는 것을 입증한다. BPC1492(394-398nM 범위)에 비한 시노몰구스 FcRn에 대한 BPC1494(41.8-46.8nM 범위)의 결합 친화성에서의 개선 배수는 pH6에서 약 9배이다. FcRn에 대한 BPC1492의 약한 결합 활성으로 인해 pH7.4에서의 결합 친화성에서의 개선 배수를 결정할 수 없었다.
표 17: 단백질 L 포획 방법을 이용한 재조합 인간
FcRn
결합 친화성
** - 데이터 포인트가 보고되었으나, 상기 값은 조심하여 처리되어야 하는데, 이는 이들 데이터가 상기 실험 동안 동일 분자의 다른 배치에 대해 수득된 데이터와 일치하지 않기 때문이다.
NAB = 분석가능한 결합이 없음
ND = 본 실험에서 시험되지 않음
## = 기계의 민감도 밖의 높은 친화성 결합
표 18: 단백질 L 포획 방법을 이용한 재조합
시노몰구스
FcRn
결합 친화성
표 A
서열 목록
SEQ ID NO:1 - 항-TNF 항체 경쇄의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:2 - 항-TNF 항체 경쇄의 단백질 서열
SEQ ID NO:3 - 항-TNF 항체 가변 도메인(VL)의 단백질 서열
SEQ ID NO:4 - 항-TNF 항체 중쇄 + M252Y/S254T/T256E 변형의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:5 - 항-TNF 항체 중쇄 + M252Y/S254T/T256E 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:6 - 항-TNF 항체 중쇄 가변 도메인(VH)의 단백질 서열
SEQ ID NO:7 - IgG1 불변 도메인 + M252Y/S254T/T256E 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:8 - 항-TNF 항체 중쇄 + M428L/N434S 변형의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:9 - 항-TNF 항체 중쇄 + M428L/N434S 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:10 - IgG1 불변 도메인 + M428L/N434S 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:11 - 항-TNF 항체 중쇄(야생형 IgG1)의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:12 - 항-TNF 항체 중쇄(야생형 IgG1)의 단백질 서열
SEQ ID NO:13 - IgG1 불변 도메인(야생형)의 단백질 서열
SEQ ID NO:14 - 항-TNF 항체 중쇄 + T250Q/M428L 변형의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:15 - 항-TNF 항체 중쇄 + T250Q/M428L 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:16 - IgG1 불변 도메인 + T250Q/M428L 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:17 - 항-TNF 항체 중쇄 + V308F 변형의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:18 - 항-TNF 항체 중쇄 + V308F 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:19 - IgG1 불변 도메인 + V308F 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:20 - 항-TNF 항체 중쇄 + V259I 변형의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:21 - 항-TNF 항체 중쇄 + V259I 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:22 - IgG1 불변 도메인 + V259I 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:23 - 항-TNF 항체 중쇄 + P257L 및 N434Y 변이체의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:24 - 항-TNF 항체 중쇄 + P257L 및 N434Y 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:25 - IgG1 불변 도메인 + P257L 및 N434Y 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:26 - 신호 펩티드 서열
SEQ ID NO:27 - 항-TNF 항체 CDRH1
SEQ ID NO:28 - 항-TNF 항체 CDRH2
SEQ ID NO:29 - 항-TNF 항체 CDRH3
SEQ ID NO:30 - 항-TNF 항체 CDRL1
SEQ ID NO:31 - 항-TNF 항체 CDRL2
SEQ ID NO:32 - 항-TNF 항체 CDRL3
SEQ ID NO:33 - 항-TNF 항체 CDRH1 변이체
SEQ ID NO:34 - 항-TNF 항체 CDRH1 변이체
SEQ ID NO:35 - 항-TNF 항체 CDRH1 변이체
SEQ ID NO:36 - 항-TNF 항체 CDRH1 변이체
SEQ ID NO:37 - 항-TNF 항체 CDRH1 변이체
SEQ ID NO:38 - 항-TNF 항체 CDRH1 변이체
SEQ ID NO:39 - 심지아(Cimzia)(세르톨리주맙(certolizumab)) LC (VL + Ck)
SEQ ID NO:40 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:41 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:42 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:43 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:44 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:45 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:46 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:47 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:48 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:49 - 항-TNF 항체 CDRH3 변이체
SEQ ID NO:50 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:51 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:52 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:53 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:54 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:55 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:56 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:57 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:58 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:59 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:60 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:61 - 항-TNF 항체 CDRL1 변이체
SEQ ID NO:62 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:63 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:64 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:65 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:66 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:67 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:68 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:69 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:70 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:71 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:72 - 항-TNF 항체 CDRL2 변이체
SEQ ID NO:73 - 항-TNF 항체 CDRL3 변이체
SEQ ID NO:74 -항-TNF 항체 CDRL3 변이체
SEQ ID NO:75 -항-TNF 항체 CDRL3 변이체
SEQ ID NO:76 -항-TNF 항체 CDRL3 변이체
SEQ ID NO:77 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb1-3-VH(aka cb2-6-VH)의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:78 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb1-3-VH(aka cb2-6-VH)의 단백질 서열
SEQ ID NO:79 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-44-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:80 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-44-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:81 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb1-39-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:82 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb1-39-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:83 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb1-31-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:84 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb1-31-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:85 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-11-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:86 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-11-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:87 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-40-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:88 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-40-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:89 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-35-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:90 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-35-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:91 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-28-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:92 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-28-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:93 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-38-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:94 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-38-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:95 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-20-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:96 - 항-TNF 항체 가변 중쇄 도메인 변이체 cb2-20-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:97 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-8-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:98 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-8-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:99 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-43-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:100 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-43-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:101 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-45-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:102 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-45-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:103 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-4-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:104 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-4-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:105 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-41-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:106 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-41-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:107 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-37-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:108 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-37-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:109 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-39-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:110 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-39-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:111 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-33-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:112 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-33-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:113 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-35-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:114 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-35-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:115 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-31-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:116 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-31-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:117 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-29-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:118 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-29-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:119 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-22-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:120 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-22-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:121 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-23-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:122 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-23-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:123 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-12-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:124 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-12-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:125 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-10-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:126 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-10-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:127 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-1-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:128 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-1-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:129 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-11-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:130 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-11-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:131 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-40-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:132 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-40-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:133 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-35-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:134 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-35-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:135 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-28-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:136 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-28-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:137 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-20-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:138 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-20-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:139 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-3-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:140 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb1-3-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:141 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-6-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:142 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-6-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:143 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-44-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:144 - 항-TNF 항체 가변 경쇄 도메인 변이체 cb2-44-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:145 - 항-TNF 항체 중쇄 변이체 cb1-3-VH + M252Y/S254T/T256E 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:146 - 항-TNF 항체 중쇄 변이체 cb2-44-VH + M252Y/S254T/T256E 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:147 - 항-TNF 항체 경쇄 변이체 cb1-3-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:148 - 항-TNF 항체 경쇄 변이체 cb1-3-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:149 - 항-TNF 항체 경쇄 변이체 cb2-6-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:150 - 항-TNF 항체 경쇄 변이체 cb2-6-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:151 - 항-TNF 항체 경쇄 변이체 cb2-44-VL의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:152 - 항-TNF 항체 경쇄 변이체 cb2-44-VL의 단백질 서열
SEQ ID NO:153 - 항-TNF 항체 중쇄 변이체 cb1-3-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:154 - 항-TNF 항체 중쇄 변이체 cb1-3-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:155 - 항-TNF 항체 중쇄 변이체 cb2-44-VH의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:156 - 항-TNF 항체 중쇄 변이체 cb2-44-VH의 단백질 서열
SEQ ID NO:157 - M252Y/S254T/T256E 변형을 함유하는 파스콜리주맙 중쇄의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:158 - M252Y/S254T/T256E 변형을 함유하는 파스콜리주맙 중쇄의 단백질 서열
SEQ ID NO:159 - 파스콜리주맙 경쇄의 폴리누클레오티드 서열
SEQ ID NO:160 - 파스콜리주맙 경쇄의 단백질 서열
SEQ ID NO:161 - 파스콜리주맙 중쇄의 단백질 서열
SEQ ID NO:162 - 항-TNF 항체 중쇄 + M428L/N434S 변형의 대안적 단백질 서열
SEQ ID NO:163 - IgG1 불변 도메인 + M428L/N434S 변형의 대안적 단백질
SEQ ID NO:164 - 항-TNF 항체 중쇄 + H433K/N434F 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:165 - IgG1 불변 도메인 + H433K/N434F 변형의 단백질 서열
SEQ ID NO:166 - 항-TNF 항체 중쇄 + H433K/N434F 변형의 대안적 단백질 서열
SEQ ID NO:167 - IgG1 불변 도메인 + H433K/N434F 변형의 대안적 단백질 서열
SEQ ID NO:168 - 항-TNF 항체 중쇄 + M428L/N434S 변형의 대안적 단백질 서열
SEQ ID NO:169 - IgG1/2 불변 도메인 + M428L/N434S 변형의 대안적 단백질 서열
SEQ ID NO:170 - 골리무맙(Golimumab)_VH
SEQ ID NO:171 - 골리무맙_VL
SEQ ID NO:172 - 골리무맙_HC
SEQ ID NO:173 - 골리무맙_LC
SEQ ID NO:174 - 레미케이드(Remicade)_VH
SEQ ID NO:175 - 레미케이드_VL
SEQ ID NO:176 - 레미케이드_HC
SEQ ID NO:177 - 레미케이드_LC
SEQ ID NO:178 - 심지아(Cimzia)(세르톨리주맙(certolizumab)) VH
SEQ ID NO:179 - 심지아(세르톨리주맙) VL
SEQ ID NO:180 - 심지아(세르톨리주맙) HC (VH+CH1)
SEQUENCE LISTING
<110> ELLIS, johnathan
TOMLINSON, Ian
SHAH, Tejash
MOLLOY, Micheal
YASIN, Ahmed
<120> Antigen-binding proteins with increased
FcRn binding
<130> PB64705
<150> GB1112429.4
<151> 2011-07-19
<160> 180
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 642
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Humanised sequence
<400> 1
gatatccaga tgacccagag ccccagcagc ctgagcgcct ctgtgggcga tagagtgacc 60
atcacctgcc gggccagcca gggcatcaga aactacctgg cctggtatca gcagaagcct 120
ggcaaggccc ctaagctgct gatctacgcc gccagcaccc tgcagagcgg cgtgcccagc 180
agattcagcg gcagcggctc cggcaccgac ttcaccctga ccatcagcag cctgcagccc 240
gaggacgtgg ccacctacta ctgccagcgg tacaacagag ccccttacac cttcggccag 300
ggcaccaagg tggagatcaa gcgtacggtg gccgccccca gcgtgttcat cttccccccc 360
agcgatgagc agctcaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gtctgctgaa caacttctac 420
ccccgggagg ccaaagtgca gtggaaagtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gagagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaaa gtgtacgcct gcgaagtgac ccaccagggc 600
ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gc 642
<210> 2
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Humanised sequence
<400> 2
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 3
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Humanised sequence
<400> 3
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Tyr
20 25 30
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gagctgacca agaaccaggt gtccctgacc tgcctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140
atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200
gtgctggaca gcgatggcag cttcttcctg tacagcaagc tgaccgtgga caagagcaga 1260
tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgctcc gtgatgcacg aggccctgca ctatcactac 1320
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Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
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Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
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Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
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Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
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Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
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Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
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Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
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His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
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gtgctgacca tgaccaacat ggaccccgtg gacaccgcta cctactactg cgccaggagg 300
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agcgccagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420
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tcctggaaca gcggagccct gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540
agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600
acctacatct gtaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa gaaggtggag 660
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gagctgacca agaaccaggt gtccctgacc tgcctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140
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Trp Leu Ala His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val
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Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
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Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
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Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
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Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
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Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
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Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
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Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
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Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
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Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Tyr
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Ile Thr Arg Glu Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
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Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
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His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
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Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
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Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
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Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
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Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
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Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
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Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
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Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
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His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
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Pro Gly Lys
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Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
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65 70 75 80
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225
Claims (44)
- (i) CDRH1(SEQ ID NO:27), CDRH2(SEQ ID NO:28), CDRH3(SEQ ID NO:29), CDRL1(SEQ ID NO:30), CDRL2(SEQ ID NO:31), 및 CDRL3(SEQ ID NO:32); 또는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3과 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3의 CDR 변이체; 및
(ii) 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 인간 IgG1 불변 도메인의 신생아 Fc 수용체(FcRn) 결합 부분을 포함하는, TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질로서,
상기 항원 결합 단백질이 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG와 비교하여 pH 6에서의 증가된 FcRn 결합 친화성 및/또는 증가된 반감기를 갖는, 항원 결합 단백질. - (i) CDRH1(SEQ ID NO:27), CDRH2(SEQ ID NO:28), CDRH3(SEQ ID NO:29), CDRL1(SEQ ID NO:30), CDRL2(SEQ ID NO:31), 및 CDRL3(SEQ ID NO:32); 또는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3와 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3의 CDR 변이체; 및
(ii) 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 인간 IgG1 불변 도메인의 신생아 Fc 수용체(FcRn) 결합 부분을 포함하는, TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질로서,
상기 항원 결합 단백질이 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG와 비교하여 증가된 반감기를 갖고, 상기 항원 결합 단백질이 2주에 1회 투여되는 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG의 동일 용량에 의해 달성되는 것과 동등한 평균 항정-상태 최저 농도(mean steady-state trough concentration)를 달성하기 위해 4주에 1회 이하로 투여될 수 있는, 항원 결합 단백질. - (i) CDRH1(SEQ ID NO:27), CDRH2(SEQ ID NO:28), CDRH3(SEQ ID NO:29), CDRL1(SEQ ID NO:30), CDRL2(SEQ ID NO:31), 및 CDRL3(SEQ ID NO:32); 또는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 또는 CDRL3와 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하는 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, 및 CDRL3의 CDR 변이체; 및
(ii) 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하는 인간 IgG1 불변 도메인의 신생아 Fc 수용체(FcRn) 결합 부분을 포함하는, TNF-알파에 특이적으로 결합하는 항원 결합 단백질로서,
상기 항원 결합 단백질이 25℃에서 ProteOn XPR36 단백질 상호작용 어레이 시스템에 의해 평가시 pH 6에서의 상기 변형 없이 동일 CDR을 갖는 항-TNF 항원 결합 단백질보다 4배 큰 FcRn에 대한 친화성을 갖고, 상기 어레이 시스템이 칩 상에 고정된 항원 결합 단백질을 갖는, 항원 결합 단백질. - SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG의 변이체인 항원 결합 단백질로서, 상기 항원 결합 단백질 변이체가 IgG에 비해 항원 결합 단백질 변이체의 반감기를 증가시키기 위해 IgG 불변 도메인의 신생아 Fc 수용체(FcRn) 결합 부분 내에 하나 이상의 치환을 포함하고, 변이체가 4 내지 8주 간격으로 40 ㎎의 단일 용량으로 환자에 투여되는 경우, 환자 집단에서의 평균 항정-상태 최저 항체 농도가 투여 간격 사이에 5 ㎍/㎖ 미만, 바람직하게는 6 ㎍/㎖ 미만으로 떨어지지 않는, 항원 결합 단백질.
- 케이뱃(Kabat)의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 위치 250, 252, 254, 256, 257, 259, 308, 428 또는 434 중 하나 이상의 위치에서 인간 IgG1 불변 도메인에 비해 아미노산 치환을 포함하는, 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 청구된 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 인간 IgG1 불변 도메인이 아미노산 치환이 도입되기 전에 SEQ ID NO:13의 서열을 갖는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질이 2주에 1회 투여되는 SEQ ID NO:2의 경쇄 서열 및 SEQ ID NO:12의 중쇄 서열을 포함하는 IgG의 동일 용량에 의해 달성되는 것과 동등한 평균 항정-상태 최저 농도를 달성하기 위해 4주에 1회 이하로 환자에 투여될 수 있는, 질병을 치료하기 위한 약제로 사용하기 위한 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질이 4 내지 8주 간격으로 약 35 내지 약 45 ㎎의 단일 용량으로 환자에 투여되는, 질병의 치료를 위한 항원 결합 단백질.
- 제 8항에 있어서, 항원 결합 단백질이 4주에 1회 이하로 단일한 40 ㎎ 용량으로 환자에 피하 투여되는 항원 결합 단백질.
- 제 8항 또는 제 9항에 있어서, 항원 결합 단백질이 8주에 1회 이하로 단일한 40 ㎎ 용량으로 환자에 피하 투여되는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질의 반감기가 자연 IgG와 비교하여 2배, 3배, 4배 또는 5배 증가되는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 환자에서의 4주에 1회 이하의 항원 결합 단백질의 투여가 환자 집단에서 약 4 ㎍/㎖ 내지 약 7 ㎍/㎖의 평균 항정-상태 최저 농도를 달성하는 항원 결합 단백질.
- 제 12항에 있어서, 평균 항정-상태 최저 농도가 약 5 ㎍/㎖ 내지 약 6 ㎍/㎖인 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질의 청소가 약 2. ㎖/hr 내지 약 4㎖/hr인 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 14항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 아미노산 치환이 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 252, 254 및 256에 존재하고, 잔기 252에서의 치환이 tyr, phe, trp 또는 thr로의 치환이고; 잔기 254에서의 치환이 thr로의 치환이고; 잔기 256에서의 치환이 ser, arg, glu, asp 또는 thr로의 치환인, 항원 결합 단백질.
- 제 15항에 있어서, 잔기 252에서의 치환이 met의 tyr로의 치환이고; 잔기 254에서의 치환이 ser의 thr로의 치환이고, 잔기 256에서의 치환이 thr의 glu로의 치환인 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 16항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:7에 제시된 바와 같은 불변 도메인을 포함하는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 14항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 아미노산 치환이 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 250 및 428에 존재하고, 잔기 250에서의 치환이 glu 또는 gln로의 치환이고; 잔기 428에서의 치환이 leu 또는 phe로의 치환인 항원 결합 단백질.
- 제 18항에 있어서, 잔기 250에서의 치환이 thr의 glu로의 치환이고, 잔기 428에서의 치환이 met의 leu로의 치환인 항원 결합 단백질.
- 제 19항에 있어서, SEQ ID NO:16에 제시된 바와 같은 불변 도메인을 포함하는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 14항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 아미노산 치환이 케이뱃의 EU 인덱스에 따라 넘버링된 아미노산 잔기 428 및 434에 존재하고, 잔기 428에서의 아미노산 치환이 met의 leu로의 치환이고, 잔기 434에서의 아미노산 치환이 asn의 ser으로의 치환인 항원 결합 단백질.
- 제 21항에 있어서, SEQ ID NO:10에 제시된 바와 같은 불변 도메인을 포함하는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 22항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질이 항체인 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 23항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 단백질이 메토트렉세이트와 함께 투여되고, 바람직하게는, 항원 결합 단백질이 류머티스 관절염의 치료를 위해 투여되는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:6 및/또는 SEQ ID NO:3의 가변 도메인 또는 SEQ ID NO:6 또는 SEQ ID NO:3의 길이에 걸쳐 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 함유하거나, 적어도 90% 동일성을 공유하는 SEQ ID NO:6 및/또는 SEQ ID NO:3의 가변 도메인의 변이체를 포함하는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:5, 9 또는 15에 제시된 바와 같은 중쇄 서열과 함께 임의로 SEQ ID NO:2에 제시된 바와 같은 경쇄 서열을 포함하는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:78 또는 80에 제시된 바와 같은 가변 중쇄 도메인 서열을 포함하는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:145 또는 SEQ ID NO:146에 제시된 바와 같은 중쇄 서열을 포함하는 항원 결합 단백질.
- 제 1항 내지 제 28항 중 어느 한 항에 청구된 항원 결합 단백질을 투여하는 것을 포함하는, 질병을 가진 환자를 치료하는 방법.
- 4 내지 8주 간격으로 약 35 내지 약 45 ㎎의 단일 용량으로 환자에게 제 1항 내지 제 28항 중 어느 한 항에 청구된 항원 결합 단백질을 피하 투여하는 것을 포함하는, 질병을 가진 환자를 치료하는 방법.
- 질병이 류머티스 관절염, 다관절 소아 특발성 관절염, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 크론병 또는 건선인, 제 7항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 청구된 항원 결합 단백질 또는 제 29항 또는 제 30항에 청구된 방법.
- 류머티스 관절염, 다관절 소아 특발성 관절염, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 크론병 또는 건선의 치료를 위한 약제의 제조에서 사용하기 위한 제 1항 내지 제 28항 중 어느 한 항에 청구된 항원 결합 단백질의 용도.
- 제 1항 내지 제 28항 중 어느 한 항에 청구된 항원 결합 단백질을 엔코딩하는 누클레오티드 서열을 포함하는 핵산.
- 제 33항에 청구된 핵산을 포함하는 숙주 세포.
- 항원 결합 단백질 및 메토트렉세이트의 동시 전달을 위한, 제 1항 내지 제 28항 중 어느 한 항에 청구된 항원 결합 단백질을 포함하고, 메토트렉세이트를 임의로 포함하는, 키트.
- TNF-알파 항원 결합 단백질 및 아세테이트 완충액을 포함하는 액체 제형.
- 제 36항에 있어서, 제형이 폴리올을 포함하지 않는 제형.
- 제 36항 또는 제 37항에 있어서, 완충액이 계면활성제, 킬레이트제, 염, 및 아미노산 중 하나 이상, 이들의 조합물, 또는 이들 전부를 추가로 포함하는 제형.
- 제 36항 내지 제 38항 중 어느 한 항에 있어서, TNF-알파 항원 결합 단백질이 20 내지 300 ㎎/㎖의 농도로 존재하는 제형.
- 제 36항 내지 제 39항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 10 내지 100 mM의 소듐 아세테이트 트리하이드레이트; 및/또는
(b) 25 내지 100 mM의 소듐 클로라이드; 및/또는
(c) 0.5 내지 5%의 아르기닌 비함유 염기; 및/또는
(d) 0.02 내지 0.2 mM EDTA; 및/또는
(e) 0.01 내지 0.1% 폴리소르베이트 80을 포함하고,
pH 5.0 내지 7.0로 조정되는, 제형. - 제 40항에 있어서,
(a) 소듐 아세테이트 트리하이드레이트가 약 50mM의 농도로 존재하고/하거나;
(b) 소듐 클로라이드가 약 51 mM의 농도로 존재하고/하거나;
(c) 아르기닌 비함유 염기가 약 1%의 농도로 존재하고/하거나;
(d) EDTA가 약 0.05 mM의 농도로 존재하고/하거나;
(e) 폴리소르베이트 80이 약 0.02%의 농도로 존재하는, 제형. - 제 36항 내지 제 41항 중 어느 한 항에 있어서, 제형이 약 pH 5.5로 pH 조정되는 제형.
- 제 36항 내지 제 42항 중 어느 한 항에 있어서, TNF-알파 항원 결합 단백질이 50 ㎎/㎖의 농도로 존재하는 제형.
- 제 36항 내지 제 43항 중 어느 한 항에 있어서, 제형이 약 1주 후에 실온(약 25℃)에서 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 97%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99%의 모노머 함량을 갖는 제형.
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018131893A1 (ko) * | 2017-01-11 | 2018-07-19 | ㈜셀트리온 | 안정한 액체 제제 |
| WO2019045452A1 (ko) * | 2017-08-30 | 2019-03-07 | (주)셀트리온 | TNFα 관련 질환을 치료하는 방법 |
Families Citing this family (52)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2385745C (en) | 2001-06-08 | 2015-02-17 | Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. | Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies |
| AR083495A1 (es) | 2010-10-22 | 2013-02-27 | Esbatech Alcon Biomed Res Unit | Anticuerpos estables y solubles |
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| JP2015509526A (ja) | 2012-03-07 | 2015-03-30 | カディラ ヘルスケア リミティド | 医薬製剤 |
| US9181572B2 (en) | 2012-04-20 | 2015-11-10 | Abbvie, Inc. | Methods to modulate lysine variant distribution |
| WO2013158275A1 (en) * | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Abbvie Inc. | Cell culture methods to reduce acidic species |
| WO2013158279A1 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Abbvie Inc. | Protein purification methods to reduce acidic species |
| US9067990B2 (en) | 2013-03-14 | 2015-06-30 | Abbvie, Inc. | Protein purification using displacement chromatography |
| US9249182B2 (en) | 2012-05-24 | 2016-02-02 | Abbvie, Inc. | Purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography |
| JP2015519382A (ja) * | 2012-06-12 | 2015-07-09 | ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 治療用抗体のための医薬処方物 |
| CA2883272A1 (en) | 2012-09-02 | 2014-03-06 | Abbvie Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
| US9512214B2 (en) | 2012-09-02 | 2016-12-06 | Abbvie, Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
| HUE049282T2 (hu) | 2012-09-07 | 2020-09-28 | Coherus Biosciences Inc | Adalimumab stabil vizes formulációi |
| JP6461808B2 (ja) * | 2012-12-17 | 2019-01-30 | ラボラトワール フランセ ドゥ フラクションマン エ デ バイオテクノロジーズＬａｂｏｒａｔｏｉｒｅ Ｆｒａｎｃａｉｓ Ｄｕ Ｆｒａｃｔｉｏｎｎｅｍｅｎｔ Ｅｔ Ｄｅｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ | 炎症および細菌感染症処置におけるモノクローナル抗体の使用 |
| FR2999431B1 (fr) * | 2012-12-17 | 2016-03-18 | Lfb Biotechnologies | Utilisation d'anticorps monoclonaux pour le traitement de l'inflammation et d'infections bacteriennes |
| WO2014114651A1 (en) * | 2013-01-24 | 2014-07-31 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Tnf-alpha antigen-binding proteins |
| EP2830651A4 (en) | 2013-03-12 | 2015-09-02 | Abbvie Inc | HUMAN ANTIBODIES THAT BIND TNF-ALPHA AND PREPARATION METHODS |
| WO2014151878A2 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Abbvie Inc. | Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides |
| WO2014159579A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Abbvie Inc. | MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE |
| US9017687B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-28 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography |
| WO2014158231A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Abbvie Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same |
| CN105377237B (zh) * | 2013-07-19 | 2019-04-19 | 德国赫素制药集团 | 使免疫反应的调节与生物药品的给药相关的方法和制剂 |
| US9598667B2 (en) | 2013-10-04 | 2017-03-21 | Abbvie Inc. | Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins |
| WO2015057910A1 (en) | 2013-10-16 | 2015-04-23 | Oncobiologics, Inc. | Buffer formulations for enhanced antibody stability |
| US8946395B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-02-03 | Abbvie Inc. | Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography |
| US9181337B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-11-10 | Abbvie, Inc. | Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same |
| US9085618B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-07-21 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same |
| US20150139988A1 (en) | 2013-11-15 | 2015-05-21 | Abbvie, Inc. | Glycoengineered binding protein compositions |
| ES2607489T3 (es) | 2014-05-23 | 2017-03-31 | Ares Trading S.A. | Composición farmacéutica líquida |
| EP2946766B1 (en) | 2014-05-23 | 2016-03-02 | Ares Trading S.A. | Liquid pharmaceutical composition |
| HUE029849T2 (en) | 2014-05-23 | 2017-04-28 | Ares Trading Sa | Liquid pharmaceutical composition |
| TWI711629B (zh) * | 2014-09-03 | 2020-12-01 | 德商包林格因蓋爾漢國際股份有限公司 | 靶向IL-23A與TNF-α之化合物及其用途 |
| HUP1400510A1 (hu) * | 2014-10-28 | 2016-05-30 | Richter Gedeon Nyrt | Gyógyászati TNFalfa ellenes antitest készítmény |
| WO2016118707A1 (en) | 2015-01-21 | 2016-07-28 | Oncobiologics, Inc. | Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition |
| TW201636047A (zh) * | 2015-01-28 | 2016-10-16 | 麥博賽恩斯有限公司 | 抗－ＴＮＦ－α抗體之醫藥調配物 |
| WO2016189491A1 (en) * | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Novel formulation |
| US11229702B1 (en) | 2015-10-28 | 2022-01-25 | Coherus Biosciences, Inc. | High concentration formulations of adalimumab |
| GB201522394D0 (en) | 2015-12-18 | 2016-02-03 | Ucb Biopharma Sprl | Antibodies |
| EP3395835B1 (en) * | 2015-12-25 | 2021-02-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody having enhanced activity, and method for modifying same |
| WO2017136433A1 (en) | 2016-02-03 | 2017-08-10 | Oncobiologics, Inc. | Buffer formulations for enhanced antibody stability |
| US11319383B2 (en) | 2016-03-14 | 2022-05-03 | Universitetet | Oslo | Engineered immunoglobulins with altered FcRn binding |
| US11071782B2 (en) | 2016-04-20 | 2021-07-27 | Coherus Biosciences, Inc. | Method of filling a container with no headspace |
| SG11201900616UA (en) | 2016-08-02 | 2019-02-27 | Visterra Inc | Engineered polypeptides and uses thereof |
| US11286295B2 (en) * | 2016-10-20 | 2022-03-29 | Sanofi | Anti-CHIKV monoclonal antibodies directed against the E2 structural protein |
| EP3569615A4 (en) * | 2017-01-13 | 2020-07-29 | Hanx Biopharmaceutics, Inc | PROCESS FOR IMPROVING THE BINDING AFFINITY OF AN IGG ANTIBODY TOWARDS FCRN AND PROLONGING THE SERIC HALF-LIFE OF THE latter |
| US11608357B2 (en) | 2018-08-28 | 2023-03-21 | Arecor Limited | Stabilized antibody protein solutions |
| EP3372241A1 (en) | 2017-03-06 | 2018-09-12 | Ares Trading S.A. | Liquid pharmaceutical composition |
| EP3372242A1 (en) | 2017-03-06 | 2018-09-12 | Ares Trading S.A. | Liquid pharmaceutical composition |
| CA3072099A1 (en) * | 2017-08-11 | 2019-02-14 | Research Development Foundation | Engineered antibody fc variants for enhanced serum half life |
| WO2019147973A1 (en) * | 2018-01-26 | 2019-08-01 | Genzyme Corporation | Fc variants with enhanced binding to fcrn and prolonged half-life |
| MX2021010611A (es) * | 2019-03-05 | 2021-11-12 | The State Of Israel Ministry Of Agriculture & Rural Development Agricultural Res Organization Aro Vo | Aves con genoma editado. |
| TW202330032A (zh) * | 2021-11-30 | 2023-08-01 | 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 | 一種抗ｓｏｓｔ抗體醫藥組成物及其用途 |
Family Cites Families (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
| US6090382A (en) | 1996-02-09 | 2000-07-18 | Basf Aktiengesellschaft | Human antibodies that bind human TNFα |
| DE122004000004I1 (de) * | 1996-02-09 | 2004-08-12 | Abott Biotechnology Ltd | Humane Antikörper welche an Humanen TNFalpha binden. |
| WO1997034631A1 (en) | 1996-03-18 | 1997-09-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobin-like domains with increased half lives |
| PL220113B1 (pl) | 1999-01-15 | 2015-08-31 | Genentech Inc | Wariant macierzystego polipeptydu zawierającego region Fc, polipeptyd zawierający wariant regionu Fc o zmienionym powinowactwie wiązania receptora Fc gamma (FcγR), polipeptyd zawierający wariant regionu Fc o zmienionym powinowactwie wiązania noworodkowego receptora Fc (FcRn), kompozycja, wyizolowany kwas nukleinowy, wektor, komórka gospodarza, sposób otrzymywania wariantu polipeptydu, zastosowanie wariantu polipeptydu i sposób otrzymywania wariantu regionu Fc |
| US7658921B2 (en) * | 2000-12-12 | 2010-02-09 | Medimmune, Llc | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
| ES2727425T3 (es) * | 2000-12-12 | 2019-10-16 | Medimmune Llc | Moléculas con semividas prolongadas, composiciones y usos de las mismas |
| US20040033228A1 (en) | 2002-08-16 | 2004-02-19 | Hans-Juergen Krause | Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders |
| EP1562972B1 (en) | 2002-10-15 | 2010-09-08 | Facet Biotech Corporation | ALTERATION OF FcRn BINDING AFFINITIES OR SERUM HALF-LIVES OF ANTIBODIES BY MUTAGENESIS |
| US8367805B2 (en) * | 2004-11-12 | 2013-02-05 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
| ES2523666T3 (es) | 2005-05-31 | 2014-11-28 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Anticuerpos IgG1 con la parte Fc mutada para el aumento de unión al receptor FcRn y usos de los mismos |
| KR20150002896A (ko) * | 2006-10-27 | 2015-01-07 | 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 | 결정형 항-ｈＴＮＦ알파 항체 |
| BRPI0815576A2 (pt) | 2007-08-20 | 2015-02-18 | Glaxo Group Ltd | Método para produzir uma linha celular que produz uma proteína terapêutica, segunda linha celular transformada com uma segunda seqüência de polinucleotídeos, vetor, cassete de expressão amplificado, linha celular ou sua progênie, e, anticorpo. |
| CN101969971A (zh) * | 2007-11-30 | 2011-02-09 | 雅培制药有限公司 | 蛋白制剂及其制备方法 |
| ES2614284T3 (es) * | 2007-11-30 | 2017-05-30 | Glaxo Group Limited | Construcciones de unión a antígenos |
| WO2009073805A2 (en) * | 2007-12-04 | 2009-06-11 | Verdezyne, Inc. | Aglycosylated therapeutic antibodies and therapeutic antibody-encoding nucleotide sequences |
| PL2808343T3 (pl) * | 2007-12-26 | 2019-11-29 | Xencor Inc | Warianty Fc ze zmienionym wiązaniem do FcRn |
| US8399627B2 (en) * | 2007-12-31 | 2013-03-19 | Bayer Pharma AG | Antibodies to TNFα |
| FR2934599B1 (fr) | 2008-07-29 | 2012-12-21 | Arkema France | Fabrication de polyethylene a partir de matieres renouvelables, polyethylene obtenu et utilisations |
| EP2362767B1 (en) * | 2008-10-29 | 2017-12-06 | Ablynx N.V. | Formulations of single domain antigen binding molecules |
| JP2012518398A (ja) * | 2009-02-24 | 2012-08-16 | グラクソ グループ リミテッド | 抗原結合性構築物 |
| JP5836807B2 (ja) * | 2009-03-05 | 2015-12-24 | アッヴィ・インコーポレイテッド | Ｉｌ−１７結合タンパク質 |
| RU2560701C2 (ru) * | 2009-05-04 | 2015-08-20 | Эббви Байотекнолоджи Лтд. | Стабильные композиции с высокими концентрациями белков антител человека против tnf-альфа |
| US20120076787A1 (en) * | 2009-05-28 | 2012-03-29 | Peter Adamson | Combination of a tnf-alpha antagonist and a vegf antagonist for use in the treatment or prevention of diseases of the eye |
| WO2011074965A1 (en) * | 2009-12-17 | 2011-06-23 | Stichting Sanquin Bloedvoorziening | Methods and means for counteracting an activity of an fc domain |
| DK2637690T3 (da) | 2010-11-11 | 2017-01-02 | Abbvie Biotechnology Ltd | Flydende ANTI-TNF-alpha-antistofformuleringer med høj koncentration |
-
2011
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- 2014-02-12 MA MA36748A patent/MA35345B1/fr unknown
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018131893A1 (ko) * | 2017-01-11 | 2018-07-19 | ㈜셀트리온 | 안정한 액체 제제 |
| KR20180082971A (ko) * | 2017-01-11 | 2018-07-19 | (주)셀트리온 | 안정한 액체 제제 |
| US10980881B2 (en) | 2017-01-11 | 2021-04-20 | Celltrion Inc. | Stable liquid formula having an anti-TNFalpha antibody, acetate buffer and glycine |
| US11986523B2 (en) | 2017-01-11 | 2024-05-21 | Celltrion Inc. | Stable liquid formula comprising anti-TNFa antibody, acetate buffer, and glycine |
| WO2019045452A1 (ko) * | 2017-08-30 | 2019-03-07 | (주)셀트리온 | TNFα 관련 질환을 치료하는 방법 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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