KR20120137907A - 삼붕냐와 추출물을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 삼붕냐와 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항산화 활성을 가지는 삼붕냐와 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 노화를 완화시키는 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

삼붕냐와 추출물을 함유하는 화장료 조성물{A Composition Of Cosmetics Comprising Sambung Nyawa Extract}
본 발명은 삼붕냐와 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항산화 활성을 가지는 삼붕냐와 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 노화를 완화시키는 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다.
우리 신체는 자외선 및 유해한 외부물질에 노출되어 있어 그에 대항하기 위해 자연 치유능력을 가지고 있다. 그런 능력의 일종으로 세포의 중요한 치유시스템인 엔도시토시스 프로세스, 인체를 수호하는 면역활동의 주역인 백혈구, 그리고 유해 라디칼로부터 피부를 보호하는 멜라닌 생성, 그리고 수퍼옥사이드를 제거하는 수퍼옥사이드 디스뮤타제 등이 있다. 그러나 이러한 자연 치유능력 중 과잉 반응으로 인해 신체에 해를 입히기도 한다. 그 중 하나가 면역기구의 과잉반응인데 동물의 털이나 먼지, 꽃가루 같이 번식하지 않는 이물질들에 대해 지나친 면역반응을 보이도록 판단을 내리면 과민성질환(알레르기)을 초래하기도 하고, 지나친 염증반응에 의해 발생하는 싸이토카인이나 호르몬, 활성 산소종에 의해 피부의 색소침착이 과도하게 생성되기도 한다. 이러한 원인 중 특히 활성 산소종들은 피부 세포 및 조직 손상을 주도하여 노화, 특히 피부노화의 원인 물질로 작용하고 있다. 이들은 항산화 효소와 비효소적 항산화제들로 구성된 항산화 방어망을 파괴함으로써 산화제/항산화제 균형을 산화 상태 쪽으로 기울게 한다. 그렇게 계속된 산화적 스트레스는 피부 과잉 색소침착, 지질 과산화, 단백질 산화, 간질 성분을 파괴시키는 단백질 분해효소의 활성화, 탄력 섬유인 콜라겐과 엘라스틴의 사슬절단 및 비정상적인 교차결합, 히아루론산 사슬의 절단, 멜라닌 생성반응 촉진, DNA 산화와 같은 생체 구성 성분들의 손상을 야기 시킨다. 결국에는 탄력 감소, 주름살 및 기미, 주근깨 등으로 특징 지워지는 피부 노화가 가속화된다.
따라서 피부과잉 색소 침착 및 노화 방지를 위해서는 과잉의 활성 산소종 생성을 억제하고 또한 생성된 활성산소를 효율적으로 제거할 수 있는 시스템이 화장품의 처방에 반드시 포함될 필요가 있다. 즉, 산화제/항산화제 밸런스가 유지되는 피부의 항산화 방어 시스템 구축이 필요하다.
생체 내에서 산화제 공격과 항산화제 방어는 밀접하게 조화를 이루고 있다. 그러나 방어는 필연적으로 완벽하지 못하다. 따라서 생체 구성성분들인 지질, 단백질, 핵산 등의 생체분자들은 산화제인 자유 라디칼(freeradical)에 의해 계속적인 산화적 손상을 받으며 이들 산화반응 산물들은 나이와 더불어 축적된다. 산화제에 유리한 이러한 불균형이 노화 그 자체의 원인이 된다는 학설이 자유 라디칼(free radical)설이다.(Harman, Brunket al. pp1596-1992, 1992)
강한 산화제인 자유라디칼은 짝이 없는 전자이다. 자유라디칼은 다양한 생물체의 산화 환원 반응에서 생성되며, 식용유지의 변질 또는 여러 생체물질(지질, 단백질, 핵산, 탄수화물)에 산화적인 손상을 유발할 수 있으며 여러 단계를 거치게 되면서 결과적으로 돌연변이가 일어날 수 있다 (Yen GC et al., J. Agric. Food Chem., 43, pp27-32, 1995). 생체막 구성성분인 인지질의 불포화지방산은 활성산소종과 같은 자유라디칼에 의해 과산화 반응이 개시되며 또한 연쇄적으로 진행된다. 그러므로 자유라디칼에 의한 과산화반응은 세포막의 투과성을 항진시킬 뿐 아니라 전반적인 세포독성을 초래하여 노화현상이나 이에 따른 여러 가지 질환의 병리현상을 유도하여 발암과정에도 관여한다.
라디칼 작용은 기미, 주근깨를 비롯하여 산화적 스트레스와 관련된 질환인 아토피성 질환, 암, 고혈압, 심근경색, 동맥경화, 류머티스, 백내장, 파킨슨씨병 등 여러 가지 만성질환의 진행에 많은 영향을 주며 (De Souza LC et al., Bioorg. Med. Cehm. Lett., 14, pp5859-5861, 2004), 면역계 기능을 약화시키는 요인으로 작용될 수 있다(Pike J et al., Int. J. Vitam. Nutr. Res., 65, pp117-120,1995).
DPPH는 여러 가지 자연적 화합물의 항산화 활성의 측정에 많이 이용되는 안정적인 자유라디칼이다(Yokozawa T et al., Biochem. Pharmacol., 56, pp213-222, 1998). 항산화 즉, DPPH에 전자나 수소이온을 전달하는 DPPH와의 상호작용으로 자유라디칼의 성질을 중화시킨다.
자유라디칼로부터 인체를 보호하는 협동적인 방어시스템은 산화를 저해시키는 영양소와 효소를 가지고 있다(Halliwell B, Annu. Rev. Nutr., 16, pp33-50, 1996). 산화적인 스트레스로부터 인체를 보호하는 효과적인 방법 중 하나는 항산화 수준을 증가시키는 것이다 (De Souza LC et al., Bioorg. Med. Cehm. Lett., 14, pp 5859-5861, 2004). 따라서 산화적 손상으로부터 예방하기 위한 대체 물질의 항산화적인 평가는 매우 활발하게 연구되고 있다.
일반 화장품, 의약품, 식품의 원료로서 사용되는 활성산소를 소거시키는 항산화 효과가 있는 물질이 많이 알려져 있지만 합성품으로 장기간 인간의 피부에 적용할 경우 안전성이 문제화되므로 사용이 제한된다. 천연물은 색소침착 억제와 활성산소 소거 효과가 약한 것이 대부분이지만 사람의 피부에 대해서는 안전성이 보증된다 (대한화장품 학회 제 23권 1호 피부노화와 항산화제, pp.75, 1997).
삼붕냐와(Sambung Nyawa(Gynura procumbens (Lour.) Merr.))는 인도네시아어로 「Sambung = 영속성, Nyawa = 생명」, 즉 생명을 이어주는 잎 (영어명 : Life sustainable Plant) 이라는 뜻을 가진 약용식물로서, 과꽃(Asteraceae)과의 일종으로, 중국에서는 전통 약초로 사용하고 있다. 삼붕냐와는 She Juan Jao 또는 Fujung Jao로 불리운다. 인도네시아에서는 일명 Beluntas Cina 또는 Ngokilo라고도 불리운다. 또한, 삼붕냐와는 '中藥대사전', ' 자무', '태국약초학'등 중국, 동남아 전통의학에 따르면 기침, 기관지염, 폐결핵, 혈액순환, 타박상에 효능이 있다고 알려져 있으며, 동남아시아 및 인도네시아에서 건강 유지 및 증진을 위해서 식용으로 이용하고, 건강 증진을 위한 특정 야채로 간주되어 귀빈 접대용으로 이용되었다.
삼붕냐와의 서식지는 파푸아뉴기니를 포함한 동남아시아 일대이며, 고도 1,000 내지 1,200m에서 잘 자란다. 삼붕냐와는 줄기가 하나이며, 이 줄기를 기준으로 잎이 퍼진 형태로 자라나고, 잎은 색깔이 초록색이며, 모양은 달걀 모양이고, 크기는 길이 6㎝, 폭 3.5㎝ 정도이다. 잎의 상단부는 뾰족하고 하단부는 타원형이다. 잎 가장자리는 평평하거나 1.5㎝ 단위로 파도 꼴이다. 잎의 양 표면부는 부드럽고 선이 선명하다. 꽃이나 씨는 없다.
본 발명에서는 삼붕냐와 추출물의 자유라디칼 소거, 지질과산화 억제 효과를 분석하여 피부 보호와 노화 방지에 도움을 제공할 수 있다는 것을 확인하고 본　발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 자유라디칼 소거 효과 및 지질과산화 억제효과에 의한 피부의 노화를 완화시키는 효과를 가지는 삼붕냐와 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 화장료 조성물을 이용한 화장료를 제공하는데 있다.
상술한 바와 같은 목적을 해결하기 위하여, 본 발명은 삼붕냐와 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 완화용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 삼붕냐와 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 자유라디칼 소거능, 지질과산화 억제효과가 우수하게 나타나 활성 산소로부터 피부의 노화를 완화시키는 효과를 가지며, 천연 추출물을 이용하여 피부자극이 적다는 효과가 있다.
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명은 삼붕냐와(Sambung Nyawa, Gynura procumbens (Lour.) Merr.)) 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 삼붕냐와 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부노화를 완화시키는 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 화장료 조성물의 피부 노화 완화 효과는 자유라디칼 소거능 및 지질과산화 억제효과에 의한 것이다.
상기 삼붕냐와 추출물은 삼붕냐와를, 극성용매 또는 비극성용매를 추출용매로 사용하여 추출된 여액인 것이 바람직하다. 보다 상세하게는 상기 삼붕냐와 추출물은 상기 추출용매는 건조된 삼붕냐와 100 중량부에 대하여 100 내지 3000 중량부, 보다 바람직하게는 1000 내지 2000 중량부로 첨가하여, 2 내지 7일간 침척 추출한 후, 여과포로 여과하고, 2 내지 30℃에서 5 내지 10일간 방치하여 숙성시킨 후, 여과지로 여과하여 얻은 여액인 삼붕냐와 추출물을 수득할 수 있다.
이때, 상기 추출용매로서, 상기 극성용매는 정제수를 포함하는 물, C1 내지 C4의 저가 알코올 및 이들의 혼합용매에서 선택된 어느 하나의 용매인 것이 바람직하고, 상기 비극성용매는 헥산, 글리세린, 부틸렌글리콜, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매인 것이 바람직하다. 이때, 상기 추출용매로서 정제수를 포함하는 물, 부틸렌글리콜, 에탄올 및 이들의 혼합용매에서 선택된 어느 하나의 용매인 것이 보다 바람직하며, 가장 바람직하게는 물을 이용하는 것이나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 삼붕냐와 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 액상의 중량으로 0.1 내지 30 중량%로 함유하는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 0.1 내지 15 중량%를 함유할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 1종 또는 2종 이상을 추가로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물는 첨가제로서, 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알코올, 색소, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 안정화제, 용해화제, 향료 및 정제수로 이루어진 군에서 선택된 1종 또는 2종이상의 혼합물을 더 포함할 수 있다.
상기 첨가제는 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하며, 조성물 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 3 중량%로 배합될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다. 보다 구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크 로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 트리트먼트, 바디로션 및 바디클린저로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형일 수 있다.
본 발명의 삼붕냐와 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 피부 노화 완화 효과를 갖는 화장품 및 세안제 등의 화장료에 다양하게 이용될 수 있다.
본 발명의 삼붕냐와 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조방법은,
ⅰ) 삼붕냐와를 추출 용매를 사용하여 추출하는 단계;
ⅱ) 상기 i)에서 수득한 물질을 여과하여 숙성시키는 단계;
ⅲ) 상기 ii)에서 숙성시킨 물질을 여과하여 그 여액인 삼붕냐와 추출물을 얻는 단계; 및
iV) 상기 삼붕냐와 추출물 및 화장료 성분을 혼합하여 화장료 조성물의 제조 방법에 의해 제조된다.
상기 i) 단계에서, 상기 추출용매는 극성 용매 또는 비극성 용매를 사용하는 것이 바람직하다. 이 때, i) 단계는 삼붕냐와를 추출용매와 혼합하여, 상기 혼합물을 10 내지 50℃의 상온에서 2 내지 30일, 바람직하게는 3 내지 10일 동안 침적하여 추출하는 방법인 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 추출용매로서는 정제수를 포한한 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올을 포함하는 C1 내지 C4의 저가 알코올, 헥산, 글리세린, 부틸렌글리콜, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 용매인 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 삼붕냐와 추출물의 제조 공정에서, 상기 추출용매는 건조된 삼붕냐와 100 중량부에 대하여 100 내지 3000 중량부, 보다 바람직하게는 1000 내지 2000 중량부로 첨가하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 ii) 단계의 숙성 방법으로는, 2 내지 30℃에서 5 내지 10일간 방치하여 숙성시킬 수 있으나, 이에만 한정되는 것은 아니고 동일한 효과를 낼 수 있는 방법이라면 당 기술분야에 알려져 있는 방법을 선택하여 얻을 수 있다.
상기 iii) 단계 이후, 상기 여액으로부터 C1 내지 C4의 저가 알코올 성분을 제거하는 단계를 추가로 더 포함할 수 있다.
또한, 상기 여액을 얻는 방법에 있어서는 여과 후, 필요에 따라 탈색 및 탈취과정을 더 수행 할 수 있다.
상기 삼붕냐와 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 액상의 중량으로 0.1 내지 30 중량%로 함유하는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 0.1 내지 15 중량%를 함유할 수 있다. 상기 삼붕냐와 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.1 중량% 미만으로 함유할 경우는 유용성분에 의해 피부 노화 방지 효과가 미약하며, 30 중량%를 초과하여 함유할 경우에는 사용자의 피부에 자극을 발생시킬 소지가 있다.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예 및 실험예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예 및 실험예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 : 삼붕냐와 추출물의 제조
실시예 1
건조된 삼붕냐와 1 kg에 정제수 9 kg을 첨가하였다. 상온에서 5일간 침척 추출한 후 250 메쉬 여과포로 여과하고, 4℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후, 와트만 여과지로 여과하여 추출물을 얻었다.
실시예 2
건조된 삼붕냐와 1 kg에 30% 함수 부틸렌 글리콜 9 kg을 첨가하였다. 상온에서 5일간 침적추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하고, 4℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 여과지로 여과하여 추출물을 얻었다.
실시예 3
건조된 삼붕냐와 1 kg에 부틸렌 글리콜 30%와 70% 에탄올 70%로 혼합된 혼합 용매 9 kg을 첨가하였다. 상온에서 5일간 침적추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하고, 4℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 여과지로 여과하여 추출물을 얻었다.
실시예 4
건조된 삼붕냐와 1 kg에 95% 에탄올 9 kg을 첨가하였다. 상온에서 5일간 침적추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하고, 4℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 여과지로 여과시켜 추출물을 얻었다.
실험예 1. 세포 배양
하기 실험예에 사용한 세포로는 ATCC (America Type Culture Collect, USA)로부터 구입한 human fibroblast cell line인 CCD-1064SK (CRL-2076), mouse macrophage cell line인 RAW 264.7 (TIB-71) 및 rat mast cell line인 RBL-2H3 (CRL-2256)을 사용하였다. CCD-1064SK, RAW 264.7과 RBL-2H3의 배양 배지는 각각 IMDM (iscove's modified dulbecco's medium), DMEM (dulbecco's modified eagle's medium)과 MEM (minimum essential medium)을 Gibco(USA)로부터 구입하여 사용하였고, 각각의 배지에 FBS (fetal bovine serum, Gibco, USA) (CCD-1064SK, RAW 264.7은 FBS 10%, RBL-2H3는 FBS 15%를 배지에 첨가)와 antibiotic-antimycotic solution (Giboco, USA) 1%를 첨가하여 세포배양에 사용하였다.
하기 실험예에서 사용한 모든 세포는 37℃, 5% CO2 조건의 세포 배양기 (ELITE II, Revco, USA)에서 배양하였다.
실험예 2. 삼붕냐와 추출물의 피부 세포에서의 세포 독성 측정
상기 실시예 1 내지 4에서 제조된 삼붕냐와 추출물의 세포 독성을 측정하기 위하여 문헌에 기재된 MTT(thiazolyl blue tetrazolium bromide, Sigma, USA) 방법(J. Immunol . Methods, 141(1), 15 (1991))을 이용하여 하기와 같이 진행하였다. MTT 방법은 세포 증식이나 독성 측정에 사용되는 방법으로, 살아있는 세포의 미토콘드리아에서 숙신산탈수소효소(succinate dehydrogenase)에 의해 황색 수용성염인 MTT가 불수용성인 자주색의 MTT formazan으로 환원되는 원리를 이용한 방법이다.
상기 실험예 1의 방법으로 배양한 CCK-1064SK fibroblast를 1× 105 cells/well의 밀도로 24 well plate (Nunc, USA)에 접종하여 1일 배양한 후 serum-free IMDM으로 교체하고, 상기 실시예 1 내지 4에서 제조된 추출물을 농도별로 첨가하여 24시간 배양하였다. 2.5 mg/ml의 농도로 제조한 MTT 용액을 0.1 ml/well로 첨가하여 37℃에서 4시간 반응 후 MTT 용액을 제거하고, DMSO (dimethylsulfoxide)를 0.5 ml/well로 첨가하였다. 실온에서 MTT formazan을 녹인 후, 570 nm에서 흡광도를 측정하고 음성대조군과 흡광도 차이를 비교하여 그 결과를 표 1에 나타내었다.
시 료 농도 (μg/ml) 세포생존률 (% of control)
Control 100.00 ±2.77
실시예 1 1 104 ±2.39
10 102 ±3.01
100 105 ±2.93
1000 102 ±2.57
실시예 2 1 92±2.65
10 83 ±2.19
100 74 ±1.90
1000 45 ±1.87
실시예 3 1 110 ±2.07
10 99 ±2.41
100 75 ±1.97
1000 15 ±2.01
실시예 4 1 103 ±1.79
10 91 ±2.01
100 53 ±2.97
1000 29 ±2.97
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 상기 추출물은 피부세포인 CCK-1064SK 세포에서 세포독성이 낮음을 확인하였으며, 실시예 1의 추출물의 경우는 세포독성이 없음을 확인하였다.
실험예 3. 자유라디칼 소거 효능 측정
상기 실시예 1 내지 4의 삼붕냐와 추출물의 자유라디칼 소거 효과를 측정하기 위하여 문헌에 기재된 방법을 이용하여 하기와 같이 실험하였다 (Y. Fugita et al., Yakugak Zasshi, 108, p129, 1988).
0.2 mM의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) 용액 0.5mL에 상기 실시예 1 내지 4의 삼붕냐와 추출물을 각 농도별로 1mL을 첨가하였고, 상온에서 10분간 반응시킨 액 A를 520nm에서 최대 흡광도를 측정하였다. 실험군 색보정인 A'는 DPPH 대신 95% 에탄올을 동량 사용하였고, 대조군인 B는 DPPH 대신 95% 에탄올을 사용하였으며, 대조군의 색보정인 B'는 시료대신 용매, DPPH 대신 95% 에탄올을 동량 첨가하였다. 각 추출물의 자유라디칼 소거 효과는 하기 계산식 1로 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
계산식 1
자유라디칼 소거 효과(%) = [1-(A-A')/(B-B')] x 100
추출물 SC50 (μg/ml)
실시예 1 1501.3
실시예 2 1778.3
실시예 3 3332.2
실시예 4 1319.5
상기 표 2에서 나타나는 바와 같이, 본 발명에 따른 추출물의 자유 라디칼 소거 효과가 우수함을 확인하였으며, 그 중에서도 특히 실시예 1 및 4에 따른 삼붕냐와 추출물이 자유 라디칼 소거 효과가 뛰어남을 확인하였다.
실험예 4. 지질 과산화 억제 효과 측정
상기 실시예 1 내지 4의 삼붕냐와 추출물 지질 과산화 억제 효과를 측정하기 위하여 문헌에 기재된 방법을 이용하여 하기와 같이 실험하였다 (Ohkawa et al., Anal. Biochem. 95, pp.351, 1979).
2% 리놀렌산 20㎕, 0.5M 글리신-염산(glycine-HCl)버퍼(pH 3.6) 160㎕, 에탄올 640uL, 실시예 1 내지 4의 삼붕냐와 추출물 80㎕, 정제수 588㎕, 30mM 염화제이철(FeCl3) 32㎕ 및 1.5% TBA 80㎕를 넣어 잘 혼합한 후 끓는 물에서 1시간 동안 가열하였다.
얼음물에서 냉각한 후 증류된 액만큼 정제수로 보충하고 혼합하였다. n-부탄올을 1,600㎕를 넣어 잘 혼합한 후 3,500rpm, 5분간 원심분리하고 상층부인 n-부탄올층을 취한 A를 534nm 에서 흡광도를 측정하였다.
그리고 위와 동일한 방법으로 리놀렌산 대신 정제수를 20㎕ 넣은 색보정액을 A'라 한다. 그리고 대조군인 B는 삼붕냐와 추출물 대신에 용매를 80㎕ 첨가하여 위와 동일한 방법으로 실험하였다. 대조군의 색 보정액인 B'는 시료와 리놀렌산 대신 시료의 용매와 정제수를 동일한 양으로 첨가하여 동일한 방법으로 실험하였다.
각 추출물의 지질 과산화 억제 효과는 하기 계산식 2로 계산하였으며, 그 결과를 표 3에 나타내었다
계산식 2
지질 과산화 억제 효과(%) = [1-(A-A')/(B-B')] x 100
추출물 SC50 (μg/ml)
실시예 1 3105.7
실시예 2 4781.1
실시예 3 5990.7
실시예 4 2941.1
표 3에 나타난 바와 같이, 실시예 1 및 4의 삼붕냐와 추출물이 지질 과산화 억제 효과가 우수하였다.
따라서, 이상과 같이 세포 독성 시험과 항산화 시험 결과 실시예 1의 추출물이 독성이 가장 없고, 항산화 효과가 뛰어남으로 피부 노화 완화와 피부 자극이 적은 화장료를 제공할 수 있을 것으로 판단하여 하기에 기재한 제형예에서 실시예 1의 추출물을 사용하여 실험 진행하였다.
제형예 1 및 비교제형예 1: 로션의 제조
본 발명에 따른 삼붕냐와 추출물을 함유한 화장료 중 로션의 제형예는 다음과 같다.
제형예 1
하기 표 4의 2, 3, 4 및 5를 일정한 온도(95 내지 100℃)에서 완전 혼합 용해하였다. 상기 혼합물을 “비이온계 양친매성 지질”이라고 칭한다. 하기 표4의 원료 물질 1과 6, 7을 혼합 용해한 후, 상기 비이온계 양친매성 지질에 첨가하여 100℃에서 1시간 습윤하여 75℃로 냉각한 후 마이크로플루다이져를 통과시켰다. 이어서 하기 표 4의 원료물질 8을 일정한 온도(40 내지 50℃)에서 서서히 첨가하여 균질화한 후, 다시 마이크로플루다이져에 2회 통과시켰다. 그 후, 하기 표 4의 원료물질 9, 10, 11 및 12를 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시켰다.
비교제형예 1
하기 표 4의 원료물질 1 대신에 13을 첨가하는 것을 제외하고는, 상기 제형예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
번호 원 료 제형예 1 (중량%) 비교제형예 1(중량%)
1 실시예 1의 삼붕냐와 추출물 10.0 -
2 시토 스테롤 1.7 1.7
3 폴리글리세릴 2-올레이트 1.5 1.5
4 세테아레스-4 1.2 1.2
5 콜레스테롤 1.5 1.5
6 디세틸포스페이트 0.4 0.4
7 농글리세린 5.0 5.0
8 선플라우어오일 10.0 10.0
9 카르복시비닐폴리머 0.2 0.2
10 산탄검 0.3 0.3
11 방부제 미량 미량
12 향료 미량 미량
13 정제수 잔량 잔량
제형예 2 및 비교제형예 2 : 크림의 제조
본 발명에 따른 삼붕냐와 추출물을 함유한 화장료 중 크림의 제형예는 다음과 같다.
제형예 2
하기 표 5의 2, 3, 4 및 5를 일정한 온도(95 내지 100℃)에서 완전 혼합 용해시켰다. 이 혼합물을 “비이온계 양친매성 지질”이라 칭한다. 하기 표 5의 원료 물질 1과 6, 7을 혼합 용해한 후, 상기 비이온계 양친매성 지질에 첨가하여 100℃에서 1시간 습윤하여 75℃로 냉각한 후 마이크로플루다이져를 통과시켰다. 이어서 하기 표 5의 원료물질 8을 일정한 온도(40 내지 50℃)에서 서서히 첨가하여 균질화한 후, 다시 마이크로플루다이져에 2회 통과시켰다. 그리고 하기 표 5의 원료물질 9, 10, 11 및 12를 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시켰다.
비교제형예 2
하기 표 5의 원료물질 1 대신에 13을 첨가하는 것을 제외하고는, 상기 제형예 2와 동일한 방법으로 제조하였다.
번호 원 료 제형예 2
(중량%) 		비교제형예 2
(중량%)
1 실시예 1의 삼붕냐와 추출물 10.0 -
2 시토 스테롤 4.0 4.0
3 폴리글리세릴 2-올레이트 3.0 3.0
4 세테아레스-4 2.0 2.0
5 콜레스테롤 3.0 3.0
6 디세틸포스페이트 0.4 0.4
7 농글리세린 5.0 5.0
8 선플라우어오일 22.0 22.0
9 카르복시비닐폴리머 0.5 0.5
10 트리에탄올아민 0.5 0.5
11 방부제 미량 미량
12 향료 미량 미량
13 정제수 잔량 잔량
임상실험예 1 : 본 발명에 따른 로션, 크림의 피부 안정성 확인 시험 (폐쇄 첩포 실험)
건강한 성인 여성 20명 의 전박부에 상기 제형예 1과 2에서 제조한 로션 및 크림에 대해 인체 첩포 시험을 실시하였다.
시험대상자의 전박부를 70% 에탄올로 잘 닦은 다음 그 부위에, 통상의 화장료 기제에 상기 실시예 1와 2에서 제조한 로션 및 크림을 20㎕씩 담은 핀 챔버를 점착 테이프를 이용하여 24시간 폐쇄 부착시켰다. 24시간 후에 점착 테이프와 핀 챔버를 제거하고, 가제로 피부에 잔존된 시료를 가볍게 닦아 제거한 뒤에 피부 상태를 관찰하고 다시 24시간 후에 한번 더 관찰하였다. 그 실험 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
시료 24시간 후(n=20) 48시간 후(n=20) 비고
로션 0/20 0/20 반응양성자수/총대상자수
크림 0/20 0/20
상기 표 6에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 로션 및 크림의 피부 자극성을 확인하기 위한 인체 첩포 시험에서 양성반응을 보이지 않아, 인체 피부에 자극성이 전혀 없는 것으로 확인되었다.

Claims (7)

  1. 삼붕냐와 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 완화용 화장료 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 삼붕냐와 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 액상의 중량으로 0.1 내지 30 중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 화장료 조성물은 자유라디칼 소거능 및 지질과산화 억제효과에 의한 피부 노화 완화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 삼붕냐와 추출물은 극성용매 또는 비극성용매를 용매로 사용하여 추출된 여액인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 청구항 4에 있어서, 상기 극성용매는 물, C1 내지 C4의 저가 알코올 및 이들의 혼합용매에서 선택된 어느 하나의 용매인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 청구항 4에 있어서, 상기 비극성용매는 헥산, 글리세린, 부틸렌글리콜, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 청구항 1 내지 청구항 6 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 트리트먼트, 바디로션 및 바디클린저로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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