KR20120125465A

KR20120125465A - 건조 분말 피브린 실란트

Info

Publication number: KR20120125465A
Application number: KR1020127018109A
Authority: KR
Inventors: 제이콥 코프만; 글렌 마틴
Original assignee: 프로피브릭스 비.브이.
Priority date: 2010-01-08
Filing date: 2011-01-07
Publication date: 2012-11-15
Also published as: CA2785595C; BR112012016633A2; CN102724968A; JP2013516444A; US8846105B2; WO2011083154A1; AU2011204558A1; EP2521538A1; CA2785595A1; MX2012007922A; US20120315305A1; AU2011204558B2; JP2016074673A; EP2521538B1; IL220832A; NZ600812A

Abstract

본 발명은 수술, 외상 및 다른 상처 또는 상해에서의 이용을 위해 피브리노겐 및 트롬빈의 혼합물을 포함하는 건조 분말 피브린 실란트와 관련된다. 이는 상처의 치료에서의 이용을 위해 또는 외과적 개입을 위해 또는 국부적 지혈제로서 상기 건조 분말 피브린 실란트를 포함하는 새로운 제제와 더욱 관련된다.

Description

건조 분말 피브린 실란트 {DRY POWDER FIBRIN SEALANT}

본 발명은 수술, 외상 및 다른 상처 또는 상해에서 이용을 위한, 건조 분말 피브린 실란트와 관련된다. 이는 상처 또는 상해의 치료에서 이용을 위한, 특히 국부 지혈의 조성물로서 이용을 위한, 상기 건조 분말 피브린 실란트를 포함한 새로운 제제와 더욱 관련된다.

WO97/44015는 피브리노겐 및 트롬빈의 마이크로-입자에 기반한 건조 분말 피브린 실란트를 설명한다. 이들 마이크로입자 조성물의 더욱 최적화된 제제는 동시-계류중인 비-가출원 US 12/636,718에서 설명되고, 여기서 참조로서 편입된다. 본 출원의 실시예에서, 성분은 트레할로오스와 피브리노겐 및 트레할로오스와 트롬빈을 스프레이-건조(spraying-drying)시킴으로써 조제된다. 각각의 생산물은 지름 50μm까지의 우세한 입자크기를 가진다. 이들 성분의 혼합물인 피브린 실란트는 사용하기 쉬운, 안정한, 그리고 효과적인 국부 지혈제인 것으로 입증되었다. 피와 같은 수성의 유체와의 접촉에서, 노출 및/또는 용해된 활성 트롬빈은 노출 및/또는 용해된 피브리노겐을 불용성 피브린 중합체로 전환시킨다.

출혈 및 출혈 및/또는 출혈 조절을 위한 새로운 기술, 장비, 및 약물이 개발되고 있는 중이다. 현재 이용가능한 모든 기술에도 불구하고, 응급 의료에서 출혈 및 출혈 조절은 여전히 해결되지 않은 주요 문제이다. 입원의 첫 48시간 내에 모든 사망의 거의 50%가 적절하게 출혈을 조절하는 무능력과 관련이 있다. 첫 24시간 내에 출혈 멈춤의 실패는, 특히 다수의 외상 부위가 관여되어 있으면, 거의 항상 치명적이다.

전쟁 지역에서 응급처치를 위한 지혈제 제품은 빠르게 출혈을 조절해야하고, 바로 이용할 수 있어야 하고, 바를 수 있게 간편해야하고, 2년에 근접하는 보관 수명을 가져야하고 그리고 박테리아의 또는 바이러스성의 전염을 예방해야한다는 것이 일반적으로 받아들여진다. 제품의 지혈제 작용은 군인 및 민간인 둘 모두의 요구를 충족시키는 데에 긴급하다(time-critical).

상처 치료의 외부적인 방법으로서 오늘날 조사되고 이용된 장치는 범위가 응고제, 압박붕대, 거즈, 사지를 위한 지혈대, 및 신체의 상처를 위한 외상 키트를 포함한 흡수성의 패드에 이른다.

외부 출혈을 멈추게 하기 위해 설계된 약제는 조성과 다르고, 성분은 적용 부위에서 빠른 응고 형성을 돕기 위해 설계된다. 응고 제품은 인간 피브리노겐, 트롬빈, 칼슘, 인자 XIII 및/또는 항-피브린용해제와 같은 물질의 고농도를 일반적으로 포함한다. 피브린 이외에, 미소공성 다당류 마크로비드(macrobead), 무기물 및 합성 제올라이트, 및 키토산(폴리-N-아세틸 글루코사민)은 또한 지혈제로서 이용가능하다. 다수의 새로운 지혈제 제품, 예를 들어, 키토산을 이용한 붕대 제품(탈아세틸화된 폴리-N-아세틸 글루코사민 염기, HemCon Inc., Tigard, Oreg.)은 상처 외상의 치료를 위해 이용가능하다. 하지만, 이는 단지 18개월의 보관 수명을 가지고, 가격이 비싸다. Z-Medica Corporation, Wallingford, Conn.,은 미국 부대가 이용할 수 있도록 압박붕대 제품(QuikClot)을 판매한다. 이 제품은 액체를 흡수하고 응고를 촉진함으로써 출혈을 멈추기 위해 과립성의 합성 무기물 제올라이트를 이용한다. 하지만 QuikClot은 만약 붕대가 올바르게 적용되지 않으면 화상을 야기할 수 있는 열을 발생시킨다.

ActSys Medical Inc., Westlake Village, Calif.,는 지혈 거즈 제품인, ActCel을 제공하고, 이는 화학적으로 처리된 셀룰로오스에서 생성된 콜라겐-유사 자연 물질이다. 이는 혈액과 접촉하게 되면 원래 크기보다 3-4배 확장되며, 따라서 손상된 혈관을 봉쇄하고, 응고되는 것을 돕는다.

Medafor Inc., Minneapolis, Minn.,은 감자에서부터 합성된 생물-비활성, 미소공성 중합체 제품을 판매하고, 이는 TraumaDEX라 불린다. 이 분말의 미소공성 다당류 마크로비드 제품은 상처 부위에서 확장 및 혈액을 건조시킴으로써 출혈을 멈추게 하고, 그 결과 신체는 48시간 이내에 상기 물질을 흡수한다.

또 다른 비-붕대 방법은 친수성 중합체 및 칼륨 염(Quick Relief, Sarasota, Fla.)을 포함한 비-제올라이트 국소 분말을 이용하고, 적용 후 분말이 혈액과 접촉하고 약간의 압력이 가해지면, 상기 분말은 상처 부위를 커버하기 위해 유연하고 보호용의 딱지를 만들어 낸다.

과다 출혈의 치료를 위한 완벽한 해결책이 현재 존재하지는 않는다. 약제의 한가지 타입에 대하여 열 발생은 주요 문제이다. 깊은 상처 또는 불규칙한 모양의 상처에 적용될 때 효과적으로 부착되게 하기 위한 드레싱(dressing)의 능력은 또 다른 주요 한계를 불러일으킨다. 과다 출혈을 처리하기 위한 능력은 동맥 출혈에서의 출혈의 치료 및 압박 조절에서 그러하듯이, 또 다른 문제이다.

수술 및 외상의 상처는 상처 치료 분야에서 다루어지는 가장 흔한 타입의 상처이다. 통용되는 붕대는 거즈로 만들어지고 고무 붕대와 조합하여 종종 응용된다. 이들 붕대는 상처에 공기가 통하게끔 하지만 차후의 오염에는 불량한 장벽이다. 이들 붕대는 심각한 출혈을 멈추게 하지 못하고 동맥 출혈의 경우 압력의 적용이 필요하다. 전통적인 상처 실란트는 응고 속도의 최적화된 조합, 압박 출혈 조건하에서의 유효성, 및 외상 부위의 요구에 응하여 시간이 지남에 따라 동적인 응고를 제공하지 못한다. 전형적인 상처 실란트는 별도의 상처 드레싱과 조합하여 주로 이용된다. 분명하게, 뾰족한 물체에 의해 야기된 수술 외상은 깨끗한 환경에서 발생한다. 하지만 조절되는 환경에서 야기되지 않는 외상 상처는 종종 중간 크기이고, 광범위하며, 그리고 상당한 조직 손상을 갖는 더러운 상처는 도로 교통사고에서 또는 전쟁터에서 발견된다.

찰과상(abrasion)은 피부의 외층의 긁힘에 의해 일반적으로 야기된다; 열상(laceration)은 들쭉날쭉한, 피부의 불규칙한 상처 또는 찢어짐이다; 구멍상처(puncture)는 피부층을 뚫는 물체에 의해 야기되며, 작은 구멍을 만든다; 절개(incision)는 칼 또는 다른 뾰족한 물체에 의해 통상적으로 야기되는 상처이다; 그리고 화상(burn)은 깊이, 크기 및 심각도에서 대단히 다양한 손상을 야기시킨다. 화기에 의한 상처는 깊을 수 있고 상당한 조직 파괴를 동반할 수 있다. 외상에 의한 절단(dismemberment)은 절단한 사지에서 혈액 손실을 막기 위해 즉시 수술이 필요하다.

액상 붕대 제제는 처방전 없이 살 수 있는(Over-the-Counter, OTC) 소비 시장에서 구입가능하다. 액상 붕대 조제용 물질은 종종 경미한 열상 및 찰과상, 마찰에 의한 물집(friction blister) 및 종이에 베인 상처(paper cut)를 커버하고 보호하기 위해 종종 이용된다. 피부에 적용할 때, 용액은 적용 부위 상에 보호용의 필름을 형성하기 위해 그리고 치유를 촉진하기 위해 증발한다. 중합시킨 필름 덮개는 관습적인 드레싱과 비교하여 상처 치유를 증가시키기 위해 습한 상처 치유 환경을 만든다. 대부분의 액상 붕대 조제용 물질은 경등도 출혈을 멈추고, 상처 위에 보호용 밀봉을 형성하고, 그리고 물, 먼지 및 세균을 차단하는 것을 요구한다. 이들 조제용 물질은 흔한 미생물 유기체 및 오염의 다른 형태에 대해 기계적인 장벽으로서 일반적으로 작용한다. 액상 붕대 제품은 수많은 상업의 공급원에서 이용가능하고 New Skin Liquid Bandage, Nexcare Bandages Spray Liquid Bandage, Liquid Bandage by J&J, Skin Shield Liquid Bandage Curad Spray Bandage를 포함한다. 분말-기반한 지혈제는 QuikClot (Z-Medica), Urgent QR 과 Nosebleed QR (BIOLIFE), TraumaDEX 와 Bleed-X (Medafor), Celox (MEDTRADE Biopolymers), ActCel (ActSys Medical), 및 Quick Relief와 같은 제품에서 또한 널리 이용가능한 OTC이다.

공개 공보 WO 96/17633은 피브린 붕대를 포함한 조직 실란트를 설명한다. 상기 WO 공개 공보에서 설명된 붕대를 만들기 위해 이용한 방법에서, 활성 성분은 폐쇄성 뒤판에 의해 지지되는 분리된 층에서 동결건조된다. 따라서, 활성 성분은 붕대를 통해서 동질로 혼합되지 않는다.

EP 1073485 (Zymogenetics)는 전체적인 재조합형 조직 실란트 조성물을 설명하지만, 건조 분말 형태에 대해 언급하지 않는다.

본 발명에 따른 피브린 실란트는 WO97/44105에서 설명된 일반적인 타입이며, 그리고 이들 마이크로입자 조성물의 더욱 최적화된 제제는 동시-계류중인 출원 US 12/636,718에서 설명되고, 여기에 참조로서 편입된다. 이들 마이크로입자의 혼합물은 생체에 적합한, 물-흡수력이 있는, 물-팽창성이 있는 첨가제 물질, 또는 물-용해성이 있는 첨가제 물질 또는 생체에 적합한, 물-흡수력이 있는, 실리카 첨가제 물질을 선택적으로, 추가적으로 포함할 수도 있다. 첨가제 물질은 담체 또는 희석액으로 작용할 수 있고, 분말 유동 및 습윤성을 증진시킬 수도 있고, 출혈 상처의 유체의 흡수를 증가시키는 효과를 또한 가질 수도 있으며, 이로써 상처에서 국부적 조직 유체를 감소시키고 따라서 응고 인자의 상대적인 농도를 증가시킨다. 이에 의해, 피브린 실란트의 유효성이 증가된다. 본 발명은 또한 낮은 피브리노겐 레벨에서 효능을 가진 피브린 실란트 제품을 제공한다.

본 발명의 조성물은 좋은 유동 성질, 증진된 습윤성, 활성 부위로의 증진된, 효과적인 전달, 및 전달 시스템에서가 아닌, 오직 그 부위에서 용해를 달성하는 주요한 목적을 충족시킬 수 있다.

피브리노겐 및 트롬빈은 인간 기증자로부터의 혈액에서 단리될 수도 있고 또는, 더욱 바람직하게, 배양된 세포 또는 형질전환 동물 또는 식물에서 재조합형 DNA 기술에 의해 만들어질 수도 있다.

피브리노겐 또는 트롬빈은 전장, 야생형 (피브리노겐의 경우 625 또는 621 아미노산) 또는 이들의 임의의 활성 단편이다. 단편은 알려져 있다; Coller et al, J. Clin. Invest. 89:546-555 (1992) 참조. 또한 변이체 형태가 이용될 수도 있다. 특히 피브리노겐의 적합한 변이체 형태는 소위 감마 프라임(γ' 변이체) 및 α-ext Fib 또는 Fib420 변이체와 같은 선택적 스플라이싱(alternative splicing)의 결과인 변이체를 포함한다. 비록 스프레이-건조에 앞서 복원이 요구되는, 동결건조된 분말이 이용될 수도 있지만, 피브리노겐 원료는 냉동된 용액일 수도 있다.

이를 포함한 마이크로입자에서 피브리노겐의 함량은 약 0.1 내지 50% w/w, 바람직하게는 약 0.5 내지 20% w/w, 그리고 5 내지 10% w/w, 또는 약 6.5% w/w일 수도 있다. 이를 포함한 마이크로입자에서 트롬빈의 함량은 약 10 내지 20,000 lU/g, 바람직하게는 약 25 내지 1000 lU/g, 또는 100 내지 500 lU/g, 또는 약 270 lU/g일 수도 있다.

활성-함유 마이크로입자 및/또는 첨가제 물질은 마이크로캡슐의 경우처럼 고형 또는 중공(hollow)일 수도 있다. 피브리노겐 또는 트롬빈을 포함한 마이크로입자는 당업계에서 알려진 바와 같은 방법에 의해, 예를 들어 WO 92/18164, WO 96/09814, WO 96/18388 또는 WO 97/44015에서 설명된 바와 같이 조제될 수도 있다. 이들 스프레이-건조 및 연관된 입자 조작 과정은 예로서, 지름 최대 50 마이크로미터의 정제된 크기 분포를 갖는 용해성 단백질 마이크로캡슐의 생성을 가능하게 한다. 예를 들어, 이들 문서에서 설명되는 바와 같이, 가령, 최대 30μm의 90% 이상 (부피에 의해), 가령, 10 내지 20μm의 크기를 갖는 마이크로입자가 재생적으로 생성될 수도 있다. 이들 입자의 쉽게-유동하는 집합체는 당업계에서 숙련자에 의해 인식되는 바와 같이, 스프레이-건조기에서 공기 유동 구성을 역-전류로 조정하거나 또는 다수의 분무기(atomiser)를 "강제 일차 집합체" 설정으로 배치함으로써 원위치(in situ)에서 만들어질 수도 있다. 이러한 집합체는 지름이 50 내지 1000 미크론 또는 100 내지 500 미크론, 또는 125 내지 250 미크론일 수도 있다. 각각의 피브리노겐-함유 및 트롬빈-함유 용해성 마이크로입자는 WO03/037303에서 설명된 바와 같이, 다수-노즐 분무기의 이용에 의해 스프레이-건조 기기 내에서 형성 및 함께 혼합될 수 있다.

비록 건조 분말 제제의 바람직한 조제의 방법은 스프레이 건조를 포함하지만, 다른 건조기술은 역시 건조 분말 제제를 조제하는 데에 이용될 수도 있다. 적합한 방법은 당업계에 알려져 있고 그리고 차후의 마이크로니제이션(micronisation)과 함께, 또는 스프레이-동결 건조를 통해 유동층 건조(fluidized bed drying) 및 동결 건조(freeze-drying)을 포함한다. 만약 필요하다면 또는 바란다면, 마이크로입자는 당업계에 알려진 기술을 이용하여 멸균될 수도 있다.

본 발명의 마이크로입자는 바람직하게는 스프레이-건조에 의해 조제된다. 전형적으로, 원자화 과정 동안 압축된 공기를 이용하는데 사용되는 2-유동 노즐이 이용된다; 이는 중공 마이크로입자의 생성을 야기시킨다. Niro Mobile Minor 스프레이 건조기상에서 이 원자화 시스템을 이용하여 생산될 수 있는 마이크로입자의 최대 입자크기(Sympatec에 의해 측정된 바와 같이, X50)는 -30μm이다. 본 발명의 마이크로입자에 대한 바람직한 X50 값은 5 내지 50 미크론, 가장 바람직하게는 10 내지 20 미크론이다.

고형 또는 중공 피브리노겐-함유 마이크로입자는 그 후, 고형 또는 중공 트롬빈-함유 마이크로입자와 먼저 혼합되고 그 다음, 선택적으로, 동질의 혼합물을 생성하는 임의의 순서로, 또는 역으로, 여기서 설명된 바와 같은 첨가제와 혼합된다. 이러한 혼합은 저-전단 또는 고-전단 혼합기를 이용하여, 또는 당업계에서 숙련자에게 알려진 임의의 다른 기술을 이용하여 수행될 수 있다.

본 발명의 마이크로입자는 락토오스, 만니톨 및 트레할로오스를 포함한 단일-(mono-) 및 이-(di-) 당류, 또는 덱스트란과 같은 다당류와 같은 당류 단독으로 활성 성분의 용액을 스프레이-건조함으로써 조제될 수도 있다. 대안적인 절차는 공동-스프레이-건조로 구성되고, 여기서 피브리노겐 또는 트롬빈 및 또 다른 벽-형성 물질은 활성 성분이 입자에 편입되는 마이크로입자를 주기 위해서 형성 및 스프레이-건조된다.

적합한 다른 단백질은 자연적으로 발생할 수도 있고, 또는 배양된 세포 또는 유전자 도입된 동물 및 식물에서 재조합형 DNA 기술에 의해 만들어질 수도 있다. 이들은 여러 가지 예시가 주어진 W092/18164에서 설명된 바와 같이, "벽-형성 물질"로서 작용할 수도 있다. 바람직한 물질은 HAS(인간 혈청 알부민)이다. 예를 들어, 피브리노겐은 단독으로 또는 HAS(가령, 1:1, 1:3, 3:1의 피브리노겐 : HAS 비) 및 트레할로오스와 같은 변화하는 양의 부형제의 존재에서 스프레이-건조되었다. HAS에 대한 다른 적합한 치환제는 Tween 20, Tween 80, Poloxamer 407 또는 Poloxamer 188과 같은 계면활성제를 포함한다. 가령, 염화 칼슘과 같은 칼슘 이온은 트롬빈 공급원료에 편입될 수도 있다. 대안적으로, 염화 칼슘은 공정 후 마이크로입자에 첨가될 수도 있다.

본 발명의 실시양태에서, 첨가제 물질 역시 존재할 수도 있다. 본 발명에서 이용된 첨가제 물질은 10 nm 내지 1 mm 또는 약 10 미크론 내지 1000μm의 입자크기를 전형적으로 갖는다. 담체로서 작용하는 것으로 선택된 첨가제에 있어, 입자크기는 10 내지 1000μm, 또는 100 내지 500μm, 또는 125 내지 250μm 또는 가능한 대로 가령 10 내지 40μm일 수도 있다. 이들은 한 가지의 물질 또는 혼합물을 포함할 수도 있다.

첨가제 물질은 조성물의 중량의 약 1 %, 약 2%, 약 3%, 약 4% 약 5%, 약 6%, 약 7%, 약 8%, 약 9%, 약 10%, 약 11 %, 약 12%, 약 13%, 약 14%, 약 15%, 약 16%, 약 17%, 약 18%, 약 19%, 약 20%, 약 21 %, 약 22%, 약 23%, 약 24%, 약 25%, 약 26%, 약 27%, 약 28%, 약 29%, 약 30%, 약 31 %, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41 %, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49%, 약 50%, 약 51%, 약 52%, 약 53%, 약 54%, 약 55%, 약 56%, 약 57%, 약 58%, 약 59%, 약 60%, 약 61 %, 약 62%, 약 63%, 약 64%, 약 65%, 약 66%, 약 67%, 약 68%, 약 69%, 약 70%, 약 71 %, 약 72%, 약 73%, 약 74%, 약 75%, 약 76%, 약 77%, 약 78%, 약 79%, 약 80%, 약 81 %, 약 82%, 약 83%, 약 84%, 약 85%, 약 86%, 약 87%, 약 88%, 약 89%, 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99%, 또는 그 사이에 임의의 범위를 구성할 수 있다.

여러 가지 물질은 유동 및 습윤성 등을 증진시키기 위해, 생체에 적합한, 물-흡수력이 있는, 물-팽창성이 있는 첨가제 물질로서 이용에 적합하다. 바람직하게는 물질은 용해되지 않거나 또는 매우 느리게 용해된다. 이러한 물질은 가령, Sephadex와 같은, 상이한 입자 크기에서 이용가능한 덱스트란 중합체, 전분, 플루란 유도체, 히알루론산 에스터; 마이크로결정성셀룰로오스(Avicel 범위), 메틸셀룰로오스, 카르복실셀루로오스, 마이크로파인 셀룰로오스 또는 하이드록시프로필 셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필셀룰로오스, 저-치환 하이드록시프로필 셀룰로오스, 하이드록시에틸셀룰로오스와 같은 셀룰로오스 생산물을 포함할 수도 있고 그리고 가교-결합된 폴리비닐 피롤리돈(PVP)과 같은 다른 물질은 개별적으로 또는 혼합물로 이용될 수도 있다. 또한, 담체로서 작용하는 적합한 첨가제 물질은 바람직하게는 약 1000의 평균 분자량을 갖는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG); 바람직하게는 약 50,000의 평균 분자량을 갖는 폴리비닐피롤리돈 (PVP); 전형적으로 약 40,000 평균 분자량을 갖는 폴리(아크릴산), 폴리아크릴아마이드, 폴리비닐 알코올(PVA), 폴리(메틸비닐에테르 공동-말레산 무수물), 폴리(에틸렌옥시드), 및 덱스트란을 포함한다. 본 발명의 마이크로입자는 만약 필요하다면 또는 바란다면, 멸균될 수도 있다. 멸균 과정, 전자 빔 방사, γ-방사 및 에틸렌 옥사이드는 적합한 기술의 예시이다.

본 발명에서 이용된 추가적인 입자(여기서, "담체 입자"라고 설명됨)는 10 내지 1000μm, 가령 10 내지 40μm의 입자크기를 전형적으로 갖는다. 이들은 한 가지의 물질 또는 혼합물로 구성될 수도 있다.

여러 가지 물질은 유동 및 습윤성 등을 증진시키 위해, 피브린 실란트에 대한 거대 담체 물질로 적합하다. 이들은 락토오스, 만니톨 및 트레할로오스를 포함한 단일(mono)- 및 이(di)-당류, 또는 가령, Sephadex와 같은 상이한 입자크기에서 이용가능한 덱스트란 및 덱스트란 중합체 등과 같은 당류를 포함한다.

마이크로결정성 셀룰로오스(Avicel 범위), 메틸셀룰로오스, 카르복실메틸 셀룰로오스, 마이크로파인 셀룰로오스 또는 하이드록시 프로필 셀룰로오스와 같은 셀룰로오스 생산물, 및 가교-결합된 폴리비닐 피롤리돈(PVP)과 같은 다른 물질은 개별적으로 또는 혼합물로 이용되었다. 또한, 적합한 담체는, 바람직하게는 약 1000의 분자량을 갖는 폴리에틸렌 글리콜(PEG); 바람직하게는 약 50,000의 평균 분자량을 갖는 폴리비닐 피롤리돈(PVP); 전형적으로는 약 40,000 평균 분자량을 갖는 폴리(아크릴산), PVA, 폴리(메틸비닐에테르 공동-말레산 무수물), 폴리(에틸렌옥시드), 및 덱스트란을 포함한다.

정제 붕괴제가 포함될 수도 있다. 이들 물질은 상처에서부터 수분을 흡수할 것이고, 빠르게 확장될 것이며, 따라서 분말 혼합물에서 지혈제 성분의 습윤성을 증진시킬 것이다:

- 전분 글리코산 나트륨(Sodium starch glycolate, Explotab 또는 Primojel)은 35-55μm 범위에서 평균 입자 크기를 갖는다. 약 25%의 글루코오스 구성단위는 카르복실메틸화 된다.

- 가교-결합된 폴리비닐 피롤리돈 (폴리플라스돈)

- 알긴산 염 및 알긴산

- 가교-결합된 카르복시메틸셀룰로오스 나트륨(Ac-Di-Sol)

이용될 수 있는 검(gum) 및 겔화제(gelling agent)은 예를 들어, 트래거캔스, 카라야 검, 용해성 전분, 젤라틴, 펙틴, 구아 검, 젤란 검을 포함한다. 특히 바람직한 첨가제는 Emdex, 즉, 수화된 형태의 dextrates(적은 양의 전분 올리고당을 포함한 스프레이 결정화된 덱스트로오스)이다. 이는 190-220μm의 중간 입자 크기이며 하얗고, 자유-유동, 스프레이-결정화된 거대공성 구체로 구성된 매우 정제된 생산물이다.

또 다른 바람직한 첨가제는 NON-PAREIL SEEDS®: (구체 당)이다. 이들은 증진된 함량 균일성, 일관되고 조절되는 약물의 방출 및 약물의 고 안정성을 위해 다수의 약물 구성단위에 이용되고, 크기는 200 내지 2000mm의 범위에 있다.

PARTECK SI 및 PARTECK M (Merck KGaA, Darmstadt, Germany)의 명칭 하에 판매되는 것과 같은, 매우 다공성 및 매우 용해성의 결합된 섬유성 결정형태에서 가장 바람직한 담체 첨가제는 소비톨 또는 만니톨이다. 이들 등급(grade)은 혈액을 적용된 분말바닥을 통해 흡수하고 따라서 분말 접점 단독에서 응고를 막는 것을 허용함으로써, 가루살포를 줄이고, 습윤성, 가용화 및 건조 분말 피브린 실란트의 수행을 증진시키는 새로운 분말을 생산하기 위해, 높은 흡수 능력을 가지고 따라서 본 발명의 건조 분말 피브린 실란트 조성물과 혼합하는 데에 매우 적합하다.

본 발명의 또 다른 실시양태에서, 담체 입자는 기포 커플(effervescent couple)을 포함할 수도 있다. 기포 반응 후 생성된 기체는 피브린 실란트를 '거품'으로 확장 및/또는 피브린 실란트를 포함한 분말의 습윤성을 증가시킬 수 있다. 분말이 상처에 적용될 때, 기포 성분은 이산화탄소를 용해, 반응 및 방출시키고, 그렇게 함으로써, 지혈제 성분의 습윤성을 증가시키고 따라서 응고 형성까지의 시간을 증진시킨다. 피브린 실란트는 일단 전체적으로 반응되면 안정한 형태로 나타날 것이고, 그리고 응고가 형성된다.

기포 커플(effervescent couple)은 시트르산 또는 시트르산 수산화나트륨 및 탄산수소나트륨을 전형적으로 포함하지만, 생리학적으로 허용되는 다른 산/알칼리성 또는 알칼리성 탄산 토류 금속 혼합물이 이용될 수도 있다; 예를 들어, 타르타르산, 아디프산, 푸마르산 또는 말산, 및 나트륨, 칼륨 또는 탄산(수소)칼슘 또는 탄산 나트륨 글리신. 일반적으로 이는 화학 분자의 동등한 기준상에서 산성 성분 대 염기성 성분의 비율로 표현된 기포 커플 (effervescent couple) 성분의 상대적인 비율이 4:3 내지 1:3 범위 내에 있을 때, 더욱 바람직하게는 약 2:3일 때, 바람직한 선호 특성이 보여지는 것으로 발견되었다. 시트르산 및 탄산수소나트륨의 바람직한 조합에 관련하여 산성 성분 대 염기성 성분의 비율로 표현된 이들 값은 무게를 기반으로 1:1 내지 0.3:1 범위로, 바람직하게는 0.5:1로 나타낸다.

또 다른 바람직한 첨가제 물질은 실리카이고, 이들은 바람직하게는 친수성이다. 이러한 실리카는 콜로이드 실리카, 건식 실리카, 그라운드 실리카, 습식 실리카, 또는 이들의 혼합물일 수도 있다. 적합한 건식 실리카의 예시는 Aerosil ®90, 130, 150, 200, 300, 380, R202, R805, R812, R972, R974 (Degussa Corporation, Ridgefield Park, N.J.) 및 CAB-O-SIL.® TS-720 및 M-5 (Cabot Corporation, Tuscola, III.)를 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 일반적으로, Aerosil.®. 200, Aerosil.®. R974, CAB-O-SIL®. TS-720 및 건식 실리카의 다른 제조자로부터의 임의의 다른 일반적인 동등한 생산물이 선호된다. 친수성 AEROSIL^®콜로이드 실리카는 정제 붕괴제의 속도 및 활성 성분 방출을 증가시킨다는 것으로 알려져 있다. 콜로이드 실리카는 정제의 내부로 물을 끌어내기 위해 - 예를 들어 소화액에서부터 -"윅(wick)"으로서 작용한다. 게다가, 친수성 AEROSIL^®200 콜로이드 실리카로 "코팅된" 정제 성분은 더 쉽게 젖고 그리고 더 빠르게 팽창(붕괴제) 또는 더 빠르게 용해(활성 성분)된다. 이러한 성질은 본 발명의 분말된 피브린 실란트의 습윤성 및 용해성을 증진시킨다. 더욱이, 이러한 실리카는 활택제(glidant)로서 작용하는 것으로 알려져 있고, 그렇게 하여 이러한 점착성 마이크로입자 구성의 유동성, 필링(filing) 및 전달을 증진시킬 것이다. 게다가, 이러한 콜로이드 실리카는 혈액 응고에 대한 활성제로 알려져 있고 따라서 피브리노겐 및 트롬빈 성분과 함께 상승적으로 작용한다(Margolis, "The Effect of Colloidal Silica on Blood Coagulation", Aust. J. Exp. Biol., 39, pp. 249-258 (1961) 참조). 조성물은 0.001 내지 5 % w/w, 또는 약 0.01 내지 2 % 또는 약 0.1 내지 0.5 % w/w의 실리카를 포함할 수도 있다. 실리카는 피브리노겐-함유 성분과 간단하게 혼합될 수도 있고, 그 다음 트롬빈-함유 성분이 거기에 첨가되고 그리고 더욱 혼합되거나, 또는 역으로 된다. 가장 바람직하게는 실리카가 첫 번째 단계로서 사전-혼합된 분말 성분과 혼합된다. 적합한 혼합 기기는 당업계에서 숙련자에게 알려질 것이고, 실리카는 여기서 정의된 바와 같이, 담체 첨가제 입자와 조합하여 존재할 수도 있다.

첨가제 물질은 본 발명의 조성물에서 단일 성분으로서 또는 조합으로 존재할 수도 있고 공급원료에서 존재할 수도 있고 또는 함께 혼합하기 전 스프레이-건조된 트롬빈 또는 피브리노겐 성분 중 하나에 첨가될 수도 있거나, 또는 최종 혼합물에 첨가되고 더욱 혼합될 수도 있다. 이러한 혼합은 저-전단 또는 고-전단 혼합기, 메카노-화학적 결합, 혼성 또는 당업계에서 숙련자에게 알려진 임의의 다른 기술을 이용하여 수행될 수 있다.

비록 본 발명의 피브린 실란트에서 마이크로입자의 성분이 바람직하게는 물-용해성이 있고, 그리고 입자는 바람직하게는 적합한 스프레이-건조 용액에 의해 얻어지지만, 얻을 수 있는 마이크로입자는 자유-유동, 별개 및 상당히 건조하거나 무수(anhydrous)일 수도 있고, 여기서 잔류 수분 함량은 바람직하게는 8% 보다 크지 않고, 가장 바람직하게는 5 또는 3% w/w 보다 크지 않다. 이는 본 발명에 따른 피브린 실란트의 화합물이 축축해질 때까지 활성화되지 않는다는 것(가령, 상처 부위에서 액체와의 접촉 작용에 의해)을 의미한다. 비록 상이한 마이크로입자의 분리된 적용이 또한 예상되지만, 활성화된 성분은 따라서, 건조 혼합물로서 전달될 수도 있다. 활성-함유 마이크로입자는 매우 빠르게-용해되는 상태에서 활성을 제시할 뿐만 아니라 갇힌 단백질을 안정화시키기 위해 바람직하게는 상온(가령, 섭씨 25도)에서 무정형이거나 유리의 모양이다. 바람직하게는 조성물은 시차 주사 열량계(Differential Scanning Calorimetry) 또는 조절된 시차 주사 열량계에 의해 측정된 바와 같이, 섭씨 약 25도보다 큰, 또는 섭씨 약 30도보다 큰, 또는 섭씨 40도보다 큰, 또는 섭씨 50도보다 큰 유리전이온도를 나타낸다. 첨가제 물질은 또한 빠르게-용해되는 상태에 있기 위해 상온(가령, 섭씨 25도)에서 무정형이거나 유리의 형태이다. 바람직하게는 조성물은 Differential Scanning Calorimetry 또는 조절된 Differential Scanning Calorimetry에 의해 측정된 바와 같이, 섭씨 약 25도보다 큰, 또는 섭씨 약 30도보다 큰, 또는 섭씨 40도보다 큰, 또는 섭씨 50도보다 큰 유리전이온도를 나타낸다. 이러한 유리 조성물은 조성물이 활성에서 상당한 손실 없이, 장시간 동안, 가령, 3달 이상 또는 6달 이상, 주변온도 또는 상온(가령, 섭씨 25도)에서 저장될 수 있게 한다. 상당한 손실은 원래 효력의 약 5 또는 10 또는 20보다 큰 활성에서 손실로 정의된다.

첨가제 물질은 결정 또는 무정형의 상태에서 있을 뿐만 아니라, 자유-유동, 별개 및 상당히 무정형일 수도 있으며, 여기서 잔류 수분 함량은 바람직하게는 5% w/w보다 크지 않고, 가장 바람직하게는 3% w/w보다 크지 않다.

각각의 피브리노겐-함유 및 트롬빈-함유 용해성 마이크로입자는 안정된, 건조한 형태에서 피브린 실란트 조성물을 생산하기 위해 형성 및 함께 혼합될 수 있다. 이 형성물은 상처치료 및 수술 회복에서 유용한 피브린 실란트를 제공하기 위해, 바라던 바와 같이, 차후에 활성화될 수 있다.

본 발명의 측면에서, 피브린 실란트 분말 조성물은 경미한 찰과상, 베인 상처, 긁힌 상처, 할퀸 상처, 화상, 일광화상, 궤양 및 다른 피부 상해 및 수술 동안 및 수술 후 출혈, 및 심각한 외상 및/또는 전쟁 상처로부터의 조절되지 않는 내부 및 외부 출혈과 같은 염증에 대한 보호성의 또는 예방성의 덮개 또는 붕대를 형성하는 데에 개조된다.

또 다른 실시양태에서 건조 분말 조성물은 국부 지혈제로서 출혈을 멈추는 데에 이용될 수 있다. 본문에서, 출혈을 멈추게 하기 위한 시간은 지혈까지의 시간(time to hemostasis, TTH)이라고 불린다. 만약 압박 시트가 이용된다면, TTH의 측정은 압박 시트가 출혈 부위로 적용될 때 전형적으로 개시되고 그리고 드레싱의 시각화에 의해 출혈이 멈출 때 및/또는 드레싱을 통해 또는 드레싱 주변에 출혈이 관찰되지 않을 때까지 진행된다.

본 발명의 측면에서, 본 발명에 따른 건조 분말 조성물은 약 10분 이하, 약 5분 이하, 또는 약 3분 이하의 TTH를 야기시킨다.

본 발명의 또 다른 목적은 경등도 출혈 내지 중등도의 출혈의 치료를 위해 여기서 설명된 바와 같은 건조 분말 조성물의 이용이다. 경등도 출혈은 약 5 g/분 미만의 혈액 유동으로 전형적으로 제시되고 반면에 중등도의 출혈은 종종 선택적으로 10분 미만의 TTH로, >20 g/분이다.

본 발명의 또 다른 목적은 비-표상적인 조직에서 밀봉을 형성하는 데에 적응된 또는 경미한 찰과상, 베인 상처, 긁힌 상처, 할퀸 상처, 화상, 일광화상, 궤양 및 다른 피부 상해 및 염증을 초과한 개방된 조직을 닫는 데에 적응된, 분말 또는 유체 피브린 실란트 조성물을 제공하기 위함이다. 치료가능한 상처는 다음을 포함한다: 국부적인 상처; 깊은 상처; 수술 절개; 중증도 상처; 전쟁 상처 및 외상; 및 응급실에서의 과다 출혈 등. 따라서, 상처 실란트의 여러 가지 적용은 수술 및 의료 절차에 대한 응급 처치 및 부상자 적용을 포함한다.

본 발명의 분말 조성물은 출혈이 발생할 수 있는 상처, 봉합, 절개 및 틈에 직접적으로 적용될 것이다. 상처는 살아있는 유기체에서 임의의 조직 손상을 포함한다. 생물학적 조직은 결합조직, 내피조직, 신경조직, 근육 조직 및 기관을 포함한다. 바람직한 생물학적 조직은 뼈, 피부, 연골, 비장, 근육, 림프, 신장, 간, 혈관, 폐, 경뇌막, 창자 및 소화 조직으로 이루어진 집단에서 선택된다. 조직은 내부 조직(가령, 기관) 또는 외부 조직(가령, 눈, 피부, 등)일 수도 있고 그리고 경조직(가령, 뼈) 또는 연조직(가령, 간, 비장 등)일 수도 있다. 상처는 감염, 외과적 개입, 화상 또는 외상을 포함하는 임의의 작인(agent)에 의해 야기될 수도 있다. 외상은 물리적인 힘에 의해 야기된 상해로 정의된다; 예시로는 자동차 사고, 총상 및 화상의 결과를 포함한다.

본 발명의 또 다른 측면에서, 본 발명의 건조 분말 피브린 실란트 조성물은 간, 췌장, 비장, 폐, 신장, 부신, 림프선 및 갑상선과 같은 실질기관 상에서 위장 시스템(가령, 식도, 위장, 소장, 대장, 창자, 직장)에서와 같은 외과적 개입; 치과 수술, 비출혈(epistaxis)을 포함한 귀, 코 및 목구멍 부위(Ear, Nose, Throat, ENT)에서의 외과적 개입; 경동맥 내막절제술, 대퇴슬하혈관 우회술 또는 관상동맥 우회술(CABG)과 같은 심혈관 수술; 성형 수술, 척추 수술, 및 후방 요추체간 유합술, 현미경추간판절제술 또는 개두술과 같은 신경 수술; 림프의, 담즙의, 그리고 뇌척수의 누공, 흉부 및 폐 수술 시 공기 누출, 기관, 기관지 및 폐 수술을 포함한 흉부 수술, 무릎 또는 둔부 교체와 같은 정형외과 수술; 제왕절개, 자궁절제술, 유섬유종 수술과 같은 부인과 수술의 절차; 션트(shunt)와 같은 혈관 수술; 비뇨기과 수술, 뼈수술(가령, 해면질 절제술), 및 응급수술을 위해 이용될 수도 있다. 특히 바람직한 외과적 개입은 정형외과 수술, 간 절제술, 연조직 상해 또는 수술 및 혈관 수술을 포함한다.

본 발명의 건조 분말 피브린 실란트 조성물은 피브리노겐 및 트롬빈을 포함한 기존의 액체 시스템의 존재에 비하여 장점을 입증하고, 여기서 이들 선행기술 제품은 복원을 요구하고, 일단 복원되면 짧은 보관 수명을 가지고, 액체 상태에서 이들의 불화합성 때문에 이중-배럴 주사기를 이용하여 종종 전달된다. 더욱이, 이러한 액체의 존재는 상처 및/또는 기관의 곤란한 또는 복잡한 표면에 적용하기 어렵고 그리고 또한 복강에서 흘러넘치고 모이기 쉽다. 건조 분말 피브린 실란트 조성물 및 여기서 설명된 제제는 이러한 문제를 극복한다.

본 발명의 추가적 측면에서, 본 발명의 조성물은 수술 동안 또는 수술 후 투여된다. 본 발명의 조성물은 인간, 포유류 및 다른 가축 해당동물을 포함한 피실험자의 상처 또는 상처들에 투여될 수도 있다.

본 발명은 여기서 설명된 건조 분말 조성물의 지혈 유효량을 포함한 조성물을 적용함으로써 출혈 부위에서 출혈 감소를 위한 방법을 더욱 포함한다.

본 발명의 추가적 측면에서, 분말 조성물은 상처 부위로 단일-전달 적용을 위한 비-멸균 또는 멸균 조제용 물질 중 하나로서, 또는 다수-이용 조제용 물질로서 형성된다. 조제용 물질은 다음을 포함한 여러 가지 바람직한 제제로 포장 및 공급될 수 있다: 건조 분말, 건조 부착 코팅, 에어로졸, 건조 에어로졸, 펌프 스프레이, 의료용 압박붕대; 필름; 코팅된 깁스붕대; 약제가 든 스펀지 또는 수술용 패치(참고로, Tachosil); 지혈 플리스(hemostatic fleece, 참고로, Tachocomb); 거즈; 연고(salve); 세미-젤, 젤, 거품, 반죽, 현탁액, 연고(ointment), 유제, 주조가능한 형태, 비 마개(nasal plug), 외과적 붕대, 상처 패킹, 붕대, 탈지면, 카테테르, 광섬유, 주사기, 페서리, 좌약, 또는 액체 또는 비-수분성 액체에서의 현탁액 등. 제제는 상처부위에 국부적으로 적용된다. 대안적으로 또는 추가로, 제제는 예를 들어, 깊은 열상, 동맥 상처, 또는 외과 절차 동안인 경우에 상처 부위 내부로 도입될 수 있다.

본 발명의 또 다른 측면은 경미한 찰과상, 베인 상처, 긁힌 상처, 할퀸 상처, 화상, 일광화상, 궤양, 내부 정맥출혈, 외부 정맥출혈, 및 수술 외상에 국부적 전달을 위한, 현탁액으로서 피브린 실란트 분말을 포함한 액체 지혈제 조성물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 바람직한 실시양태는 경미한 찰과상, 베인 상처, 긁힌 상처, 할퀸 상처, 화상, 일광화상, 궤양, 내부 정맥출혈, 외부 정맥출혈, 및 수술 외상에서 국부적 전달을 위한 액체 지혈제 조성물을 제공하고, 상기 조성물은 상해 부위 위로 얇은-필름 장벽 형성을 위한 비-수분성 액체 담체에서 피브린 실란트 분말 조성물을 포함한다. 제제는 다양한 양으로 상처 부위에 쉽게 적용될 수도 있고 빠르게 출혈을 멈추게 할 것이다.

본 발명은 또한 다음의 단계를 포함한 점성의 수용성 피브린 실란트 반죽, 연고(salve), 연고(ointment) 또는 현탁액 조성물 조제를 위한 과정을 포함한다: 본 발명의 피브린 실란트 분말 조성물과 약 200 내지 6000의 분자량 범위를 갖는 폴리에틸렌 글리콜을 혼합. 바람직하게는, 여러 가지 PEG 분자량의 혼합이 이용된다. 바람직하게는, PEG는 PEG 300MW 및 1500MW의 1:1, 또는 1:2 또는 1:3 또는 1:5 또는 1:9 혼합물로서, 500 내지 1,000 범위 내의 평균 분자량을 갖는 혼합물이다. 낮은 등급의 PEG의 이용은 펌프 스프레이를 통해 포장 및 전달될 수 있는, 더 가벼운, 더 적은 점성 현탁액을 생산한다. 이러한 현탁액은 응집을 방지하기 위해 계면활성제 또는 다른 적합한 현탁제를 선택적으로 포함한다. 이러한 구성의 조제 및 제제는 당업계에서 숙련자들에게 알려져 있다.

반죽, 연고(salve), 연고(ointment) 또는 현탁제 조성물은 또한 조성물과 함께 기질로서 이러한 물질을 코팅하고 이를 출혈 부위에 적용하거나 또는 조성물을 출혈 부위에 먼저 적용하고 및 조성물 위쪽에 젤라틴 스펀지, 거즈 또는 콜라겐을 배치시키고 그것에 압력을 가하는 것 중 하나를 함으로써 가령, 젤라틴 스펀지, 거즈 또는 콜라겐 물질과 조합하여 이용될 수도 있다. 본 발명의 연고(ointment), 연고(salve), 반죽은 반죽 안으로 장갑 낀 손가락의 디핑(dipping) 및 출혈 부위 상에 반죽을 위치시킴으로써 외과의사에 의해 이의 지혈 유효한 이용을 허용할 만큼 충분히 높은 점성 및 효능을 갖는다. 이러한 측면에서 이용된 폴리에틸렌 글리콜은 약 500 내지 1000의 범위 또는 더욱 바람직하게는 약 900의 평균 분자량을 갖는다. 폴리에틸렌 글리콜의 등급은 고유의 성질을 생산하기 위해 서로 결합될 수 있다. 예를 들어, 상온에서 고형인 반면에, 상온의 액상 PEG 300에서는 불용해성인 PEG 1500은 용액을 형성하기 위해 함께 결합될 수도 있고 더욱 높은 녹는 글라이콜(즉, PEG 1500)의 녹는점 이상에서 가열될 수도 있다. 예를 들어, 액상인 PEG 300은 섭씨 43도에서 녹는 고형인 동일한 무게의 PEG 1500와 혼합되고, 그리고 이 두 가지는 PEG 1500의 녹는점에서 또는 그 이상에서 함께 가열되며 그리하여 이들은 균일한 용액으로 액화되고, 그 용액은 상온으로 냉각되면, 매끄럽고 부드러운 반죽을 형성한다. 이 반죽은 수용성이고 쉽게 조직 또는 피부에 퍼지는 것으로 충분하게 나타난다.

본 발명은 피실험자의 출혈 부위에 폴리에틸렌 글리콜을 포함한 기반에서 본 발명의 건조 분말 피브린 실란트 조성물의 지혈 유효량을 포함한 반죽 조성물을 적용함으로써 출혈 부위에서 출혈을 감소시키기 위한 방법을 더욱 포함한다. 반죽은 출혈 부위에서 반죽 형태로 섬유성 거즈 물질과 조합으로 또는 반죽 그 자체로 적용될 수도 있다.

본 발명의 추가 실시양태에서, 피브린 실란트 분말 조성물은 선택적으로 PVP와 같은 중합체와 함께 추진제와 혼합 및 에어로졸 용기에 포장된다(US 4,752,466 참조). 이는 따라서 건조 분말된 트롬빈을 직접적으로 상처에, 또는 여기서 설명된 바와 같이 직접적으로 지혈 또는 서포트(support) 물질에 전달하는 편리한 방법을 제공한다. 각각의 캔에 이용되는 피브린 실란트 분말 조성물의 양은 바라는 효능에 따라 다를 수 있지만, 전형적으로 대략 0.5 내지 1.0 그램의 규모일 수도 있다. 액화 형태의 추진제는 그 후, 그것이 액화형태로 존재하는 탱크에서부터 밸브를 통해 에어로졸 용기에 채워진다. 이용된 추진제의 양은 전형적으로 대략 10그램일 수도 있다. 에어로졸 용기를 채우는 다른 방법은 잘 알려져 있고, 만약 바란다면 이용될 수도 있다. 에어로졸 용기 내부에서, 합성 중합체, 가령, PVP는 추진제 내에서 완전히 용해된다. 피브린 실란트 분말 조성물은 용해되지 않지만, 매우 잘게 나뉜 상태로 존재한다; 즉, 이는 추진제 내에서 부유하며, 잘게 나뉜 우유 색의 현탁액으로 존재한다. 밸브는 에어로졸 용기에서부터 물질이 분무되기 위해 침체될 때, 피브린 실란트 분말 조성물, 추진제 및 선택적인 PVP의 혼합물이 방출된다. 피브린 실란트 분말 조성물은 흰색의 건조 분말로서 빠져나온다. 추진제는 빠르게 증발하고 사라진다. 분말 분무를 위해 설계된 에어로졸 및 그것의 성분은 상업적으로 이용가능하고, 그리고 본 발명에서 이용될 수도 있다. Paul Sanders에 의한 "Handbook of Aerosol Technology" (Van Nostrand, Reinhold Company, N.Y. 1979, 2nd. ed. Chapter 21 제목 "Aerosol Suspensions) (Powders)는 유용한 예비 지식을 제공한다. 바람직한 추진제는 이들의 HFA 시리즈를 포함한다.

본 발명의 에어로졸 패키지는, 분무될 때, 이의 함량이 멸균되도록 하는 방식으로 조제되고 다루어져야 한다. 박테리아성 필터 및 무균 처리 기술의 이용은 멸균 생산물을 야기시킨다.

본 발명의 에어로졸은 상온에서 저장되게끔 설계되었다. 이러한 형태에서, 이는 피브린 실란트 분말 조성물의 유리 성질 때문에 최소한 6개월의 기간 동안 상대적으로 안정하다.

본 발명의 바람직한 실시양태에서, 피브린 실란트 분말 조성물은 간, 췌장, 비장, 폐, 신장, 부신, 림프선 및 갑상선과 같은 실질기관 상에서 위장 시스템(가령, 식도, 위장, 소장, 대장, 창자, 직장)에서와 같은 외과적 개입; 치과 수술, 비출혈(epistaxis)을 포함한, 귀, 코 및 목구멍 부위 (Ear, Nose, Throat, ENT)에서의 외과적 개입; 경동맥 내막절제술, 대퇴슬하혈관 우회술 또는 관상동맥 우회술(CABG)과 같은 심혈관 수술; 성형 수술, 척추 수술, 및 후방 요추체간 유합술, 현미경추간판절제술 또는 개두술과 같은 신경 수술; 림프의, 담즙의, 그리고 뇌척수(CSF)의 누공, 흉부 및 폐 수술 시 공기 누출, 기관, 기관지 및 폐 수술을 포함한 흉부 수술, 무릎 또는 둔부 교체와 같은 정형외과 수술; 제왕절개, 자궁절제술, 유섬유종 수술과 같은 부인과 수술의 절차; 션트(shunt)와 같은 혈관 수술; 비뇨기과 수술, 뼈 수술(가령, 해면질 절제술), 및 응급수술에서의 이용을 위해, 여기서 참조로써 편입되는, 동시-계류중인 출원 WO 2010/070333, (Fibrospray^TM)의 분말 전달 장비를 이용하여 적용된다. 특히 바람직한 외과 개입은 정형외과 수술, 간 절제술, 연조직 상해 또는 수술 및 혈관 수술을 포함한다.

거즈, 스펀지, 붕대 등과 같은 서포트 물질을 포함한 본 발명의 바람직한 실시양태에서, 이는 뿌리기 위해 또는 그렇지 않으면 내장되도록 또는 서포트 상에서 가령: 20%, 40%, 60% 또는 80%, 또는 임의의 다른 바람직한 강도와 같은 미리 결정된 강도로 피브린 실란트 분말 조성물을 적용시키기 위해 그리고 거기에 적용된 피브린 실란트 분말의 강도를 확인하기 위해 여기서 제안된다. 처리된 서포트 안으로, 피브린 실란트 분말 조성물, 또는 피브린 실란트 분말 조성물과 다른 물질의 조합물의 적용방법은 당업계에서 이들 숙련자에게 잘 알려져 있다. 처리된 서포트의 표시는 처리된 서포트의 표면 상에서(한쪽 또는 양쪽 면 상) 또는 그것의 한 층 바로 밑에서, 강도 퍼센트(가령, 20%, 40% 또는 60%)을 각인하는 형태를 취할 수 있다. 퍼센트 표시는 바라던 바와 같이, 25%, 50% 및 75%, 또는 심지어 1, 2, 3, 4, 5와 같은 임의의 다른 바람직한 수치일 수도 있다. 표시가 완료되면, 처리된 서포트는 바라던 바와 같이, 멸균 대상이 된다.

이러한 건조 분말 피브린 실란트 또는 국부적 지혈제의 새로운 제공은 건조 분말 피브린 실란트가 내장 및/또는 코팅된, 상처 및 장비의 접점에서 응고 형성을 장려함으로써 분말 단독과 비교하여 동반 상승효과 및/또는 더 큰 효율성을 나타낸다. 함침된 서포트 및 스펀지 등의 존재는 응고가 발생하기 전 혈액이 구조 안으로 스며들게끔 한다.

본 발명의 다른 바람직한 방법은 절개, 구멍, 및/또는 외과 절차 동안 생물학적 조직에서의 유체 또는 기체 누출을 밀봉하는데에 유용하고, 그리고 피브린 실란트 분말 조성물의 유효량으로 조직을 접촉시키는 것을 포함하고, 따라서 절개, 구멍, 또는 유체 또는 기체 누출을 밀봉한다.

도 1 간 스캘럽(scallop) 상해 모델.
1A는 만들어진 상해를 나타낸다; 1B는 적용되는 Sephadex-혼합된 Fibrocaps^TM를 나타내고 1C는 거즈로 30초의 압박 후 분말를 커버한 Vicryl 시트를 나타낸다.
도 2 돼지 펀치-생검 모델에서 히아모스태티스(TTH)까지의 시간에 대한 다양한 지혈제의 효과.
도 3 Fibrocaps는 Surgicel와 비교하여 혈액 손실을 감소시킨다.
도 4 돼지-비장, 펀치-생검 모델에서 Fibrocaps + Surgicel은 Surgicel 단독과 비교하여 TTH를 감소시킨다.
도 5 돼지-비장, 펀치-생검 모델에서 Fibrocaps + Surgicel은 Surgicel 단독과 비교하여 혈액 손실을 감소시킨다.
도 6 Fibrocaps + Avitene은 Avitene 또는 Surgicel 단독과 비교하여 TTH를 감소시킨다.
도 7 Fibrocaps 및 Avitene은 토끼 간 모델에서 혈액 손실을 감소시킨다.
도 8 돼지 간 펀치 생검 모델에서 유사한 출혈 속도.
도 9 Fibrocaps 또는 트롬빈 + Spongostan은 Spongostan 단독과 비교하여 TTH를 단축한다.

실시예 1

건조 분말 피브린 실란트는 동시-계류중인 출원 US 61/122,063에서 설명된 바와 같이 조제되었다. 간단히 말해서, 피브리노겐(ZLB, Marburg, Germany) 및 트레할로오스 (Pfanstiehl, Waukegan, IL, USA)의 중공 구체 입자가 출원에서 설명된 바와 같이 조제되었다. 입자 내 피브리노겐의 농도는 12%(w/w)이다.

트롬빈 (SNBTS, Glasgow, Scotland) 및 트레할로오스는 중공 입자를 얻기 위해 스프레이 건조되었다.

트롬빈은 입자의 그램 당 1000 IU의 농도에서 존재하였다.

입자는 1:1 비율로 혼합되었다; 결과 분말은 6% w/w 의 피브리노겐 농도 및 500 IU/그램의 분말을 갖는다. 이 혼합물은 다음에 설명될 바와 같이 Fibrocaps^TM으로 언급된다.

본 발명의 추가 실시양태의 혼합물을 조제하기 위해, 상기 Fibrocaps 분말이 유체 흡수 입자(극상의 Sephadex G200, GE Healthcare, Uppsala, Sweden)와 1:1 무게/무게로 더욱 혼합되었다.

극상의 Sephadex G200는 10-40μm의 건조 구슬 크기를 갖는다. 명확성을 위해, 결과 분말은 3% w/w의 피브리노겐, 250 lU/그램의 트롬빈 및 50% w/w의 Sephadex G200 입자로 구성된다. 이 혼합물은 Sephadex-혼합된 Fibrocaps^TM으로 명명된다.

효능 시험

외상 출혈은 고압력을 동반한 동맥의 상해에서부터 다량의 삼출성(oozing)까지의 상이한 형태에서 출혈 그 자체를 제공하기 때문에, 이용가능한 국부적 지혈제의 효능 시험을 위한 보편적인 동물 모델은 없다. 대형 동물 모델(돼지)은 인간의 상황을 대신할 수 있는 유일한 모델이다(Pusateri et al. (2003) J. Trauma 55(3), 518 - 526). 선택된 동물 모델에서, Sephadex-혼합된 Fibrocaps^TM생산물은 시장에 있는 또는 개발 중인 다른 생산물과 비교될 것이며 그리고 외상 적용에서 잠재적으로 적용될 수 있을 것이다. 조절되지 않는 중증도 출혈을 유도하여 간에 외상적 상해를 시뮬레이션하기 위해, 간 긁힘 상처가 돼지의 간에서 4 x 5 cm 너비의 수술용 가위 한 쌍으로 1.5-2 cm 깊이의 조각으로 잘라냄으로써 가해졌다(n=2). 이 절차 동안 잘린 정맥 또는 동맥 어떠한 것도 묶여지지 않았고 그리고 동물은 상해가 만들어지기 전 ~15분간 헤파린의 표준량을 받았다.

한 가지 상해는 6 그램의 Fibrocaps^TM물질이 상처 위로 부어졌고, 30초 동안 압력이 가해진 후, 파라필름 조각으로 커버된 "표준" 프로토콜을 이용하여 처리 되었다. 파라필름의 제거 동안 분말의 상당한 부분 또한 제거되었고 그리고 추가적 1.5-2 그램이 상처에 적용되었으며 압력이 표준 수술용 거즈로 가해졌다. 출혈이 2-3분 이내에 현저하게 느려졌지만, 완전한 지혈이 되기 위해서는 ~5분이 걸린다. 두 번째 긁힘 상해는 6 그램의 Sephadex-혼합된 Fibrocaps^TM로 처리되었고 이는 단지 피브리노겐 및 트롬빈의 양의 반을 포함하지만 증가된 흡수 능력을 갖는다. 분말은 그 후, 생분해성 Vicryl 시트(Ethicon)로 커버되었고, 거즈를 이용하여 30초 동안 압력이 가해졌다. 거즈는 쉽게 제거될 수 있었고 Vicryl은 Fibrocaps^TM마개를 방해하는 것을 방지하기 위해 상처 위에 남겨졌다. 출혈이 관찰되지 않았고, 완전한 지혈이 1-1.5 분 이내에 이루어졌다(또한 도 1A-C를 참조). 이 시간은 지혈까지의 시간(TTH)으로 언급된다. Sephadex 단독으로는 동물에서 중증도 출혈을 멈추게 할 수 없었다.

이 실험은 Fibrocaps보다 Sephadex-혼합된 Fibrocaps의장점을 명백하게 입증한다. 중증도 출혈이 있는 상처에 이들 분말의 동등한 양의 적용은 Sephadex-혼합된 Fibrocaps의 경우에 1.5분 이내에 완전한 지혈을 야기시키는 반면에, Fibrocaps은 5분 이내에 출혈을 멈추게 할 수 있지만 이는 오로지 추가적인 분말을 추가한 후의 일이다. 이는 Fibrocaps과 비교하여, Sephadex-혼합된 Fibrocaps이 단지 피브리노겐 및 트롬빈 농도의 반을 포함한다는 점에서 놀라운 일이다. 더 낮은 농도의 피브리노겐 및 트롬빈은 또한 Fibrocaps와 비교하여 Sephadex-혼합된 Fibrocaps의 비용에서 상당한 감소를 나타낸다.

실시예 2

증진된 유동 및 지혈 작용을 갖는 규화시킨 조성물을 조제하기 위해, 실시예 1의 Fibrocaps 분말은 자유-유동 분말을 생산하기 위해 10분 동안 Turbula 저-전단 혼합기에서 0.5% w/w Aerosil 200 Pharma (Evonik)와 더욱 혼합되었다.

실시예 3

실시예 1의 Fibrocaps 분말은 개방된 에어로졸 캔 또는 병 내에 배치되고, 밸브 스템(stem) 및 탑(top)은 에어로졸 캔 또는 병 위쪽에 배치되고 자리에서 굽어진다. 피브린 실란트 분말 조성물의 양은 대략 1.5 그램이다. 액화 형태의 추진제는 그 후 그것이 액화 형태로 존재하는 탱크에서부터 밸브를 통해 에어로졸 용기에 채워진다. 에어로졸은 그 후, 에어로졸 캔의 내용물을 방출하는 밸브의 작동에 의해 상처에 적용되고, 이는 빠른 지혈을 야기시킨다.

실시예 4

실시예 1의 Fibrocaps 분말은 밝은, 액체 현탁액을 생산하기 위해 PEG 200 및 0.5% Tween 80과 1:1 비율로 혼합되고 병에 포장되며, 이는 그 후, 상처에 적용되고 빠른 지혈을 야기시킨다.

실시예 5

실시예 1의 Fibrocaps 분말은 반죽으로 생산하기 위해 PEG 800과 1:1 비율로 혼합되고, 튜브에 포장되며, 이는 그 후, 상처에 적용되고 빠른 지혈을 야기 시킨다.

실시예 6

이 실시예는 지혈을 촉진하고 혈액 손실을 감소시키기 위해, Fibrocaps (실시예 1에서의)를 단독 또는 여러 가지 압박 시트(젤라틴 USP, 콜라겐, 및 산화시킨 셀룰로오스)와의 조합 중 한 가지로 평가한 여러 가지 약리학 연구를 상세하게 나타낸다. 약리학 모델은 연조직(간 및 비장)에서 형성된 상처 및 혈관 모델(AV 이식편)을 포함한다. 모델은 경등도 출혈(< 5 g/ 분) 내지 중등도 출혈(> 20 g/분)을 포함한다. 여러 가지의 이들 연구는 또한 거즈 또는 인간 트롬빈 및 FloSeal과 같은 "활성" 국부적 지혈제뿐만 아니라 다른 "기계적인" 지혈의 조절을 포함하고 그러한 비교는 Fibrocaps로 이루어질 수 있다.

전체적으로, 이들 연구는 Fibrocaps가 단독으로 또는 젤라틴 콜라겐, 및 산화시킨 셀룰로오스와 같은 압박 시트와의 조합으로 중 한 가지로 하여 감소된 TTH 및 혈액 손실에 의한 측정된 대로, 약리학적으로 활성이고 지혈을 촉진시킬 수 있다는 것을 입증한다. 게다가, Fibrocaps는 판매되는 다른 국소적 지혈제와 필적하는 지혈 활성도를 입증하였다. 표면적 당 권장 Fibrocaps 용량은 1.5 g/100cm²이다.

돼지-비장 펀치- 생검 모델에서의 지혈 개발

이 연구에서, 두 마리 동물은 수술에 앞서 금식시켰고 그리고 적절하게 마비되었다. 평균 동맥 압력 (MAP)는 대퇴부 동맥에 삽입된 카테터를 통해 매 5분마다 측정 및 기록되었다. 일단 혈압이 20분 동안 안정되면, 정중선 개복술이 수행되었고 그리고 비장은 적출되었다. 비장의 처리되지 않은 부위는 식염수로 적신 랩 스펀지(lap sponge)로 커버함으로써 수분을 유지시켰다. 상처는 6mm 직경의 생검 펀치를 이용하여 3mm 깊이로 형성되었다. 생검은 가위로 절단함으로써 완료되었다. 각각의 상처는 신중한 평가를 하도록 하기 위해 충분한 공간으로 분리되었다.

실시예 1에서의 Fibrocaps 분말은 WO 2010/070333에서 설명된 Fibrospray 장치를 이용하여 건조 분말 (0.25 g)로서 각각의 상처 부위로 적용되었다. Avitene Ultrafoam (콜라겐)은 식염수로 사전에-적셨고, 그리고 Surgicel 물질로 비-막대 거즈 패드(Dukal)는 Fibrocaps가 상처 바닥과 가깝게 접촉하는데에 작용할 수 있도록 가벼운 수동 압력을 가해주는 데에 이용되었다. 대조 제품은 제조자의 권장사항을 이용하여 적용되었다. 처리된 상처는 30초 지혈 평가 후 처음 1분 동안 적용된 가벼운 수동 압력 단계를 가졌다. 만약 출혈이 지속되었다면, 추가 30초 탬퍼네이드/30초 지혈 평가가 지혈이 될 때까지 또는 시범 시험이 10분에 도달할 때까지 수행되었고 이 처리는 실패로 기록되었다. 평가하에 각각의 처리를 위해 4 내지 13개 상처가 만들어졌다. 지혈까지의 시간은 압박시트가, 드레싱의 시각화에 의해 출혈이 멈출 때까지 및/또는 드레싱을 통해 또는 드레싱 주변에 출혈이 관찰되지 않을 때까지 출혈 부위에 적용되는 시간으로부터 측정되었다.

첫 번째 돼지에서 상처의 상이한 타입/크기의 평가 후, 3mm 깊이에서의 6mm 펀치 생검이 집단 및 동물에 걸쳐 일관된 출혈 속도를 야기시켰다는 것이 관찰되었다. 이러한 접근을 이용하여, 모델은 믿을 수 있게 수행하였고, 생검은 대략 1.5 내지 2g/분의 혈액 손실을 산출한 상처를 만들었다. 부상 또는 지혈 처리의 적용 후, MAP에서 어떠한 변화도 주목되지 않았다.

처리 시험

처리	설명
Surgicel Origonal	산화시킨 셀룰로오스 스펀지
Surgicel Nuknit	얇고, 산화시킨 셀룰루오스 스펀지
RECOTHROM/Gelfoam	재조합형 인간 트롬빈 + 젤라틴 스펀지
Fibrocaps + Avitene Ultrafoam	Fibrocaps + 콜라겐 스펀지(식염수로 사전에-적신)
Fibrocaps + Dukal	Fibrocaps + 비-부착성 거즈 패드

표 1은 두 번째 돼지에서 TTH를 단축시키고 혈액 손실의 양을 감소시키는 이들의 능력에 대한 평가된 처리를 나열한다. Avitene과 조합한 Fibrocaps는 평균 TTH = 2.52분이었고, 이는 Surgicel (Nuknit) (평균 TTH = 6.27 분) 및 Surgicel Original 지혈제 (평균 TTH = 9.88 분)보다 상당히 더 단축된 것이다. TTH의 유사한 감소는 Surgicel Original 지혈제와 비교하여, 비-부착성 거즈 패드, Dukal과 조합하여 Fibrocaps로 관찰되었다. Fibrocaps는 Gelfoam (평균 TTH = 1.25 분)으로 적용된 재조합형 인간 트롬빈과 비교할 때 지혈을 달성하는데 더 오래 걸리지만, 상당히 오래 걸리는 것은 아니다. Kaplan-Meier 제시의 데이터는 도 2에서 보여진다. 게다가, 모든 시험 및 대조 부위는 Surgicel로 처리된 6개 부위 중 4 부위를 제외하고는 지혈을 달성하였다. 이들 부위는 10분의 평가 기간 후 추가적인 지혈 물질의 적용을 요구하고 지혈 실패로 기록된다. 실험 동안 혈액 손실의 양은 Fibrocaps 또는 재조합형 인간 트롬빈으로 처리된 이 2개의 집단 보다 Surgicel 처리군에서 더 많았다(도 3).

이 연구의 결과는 일관된, 경미한 출혈을 일으킨 돼지 비장에서 6 x 3 mm 펀치-생검 상처의 형성을 입증하였다. 이들 결과는 Fibrocaps(Avitene Ultrafoam 또는 Dukal Pad 중 한 가지를 압력을 가하는 데에 이용함)가, Surgicel Original 및 Surgicel NuKnit (나타나지 않음) 보다 지혈 달성 및 혈액 손실 용량 조절에서 더 우수하게 지속적으로 수행한 것을 입증한다. Avitene Ultrafoam 또는 Dukal Pad 중 한 가지 + Fibrocaps의 TTH 감소는 Gelfoam + 트롬빈의 TTH 감소와 유사하다.

돼지 비장 펀치- 생검에서의 Fibrocaps 약리학

이들 두 가지 연구는 이전에 설명(표 2)된 바와 같은 TTH 및 혈액 손실 측정에서, 6 x 3 mm 펀치 생검을 이용하고 여러 가지 지혈제를 단독으로 또는 조합하여 유효성을 평가한 돼지 비장, 펀치-생검 모델의 이용을 확장하였다.

돼지-비장 펀치- 생검 모델에서의 처리군

처리군 ¹	설명
거즈	면 거즈 패드
Fibrocaps + Surgifoam	Fibrocaps + 젤라틴 스펀지(USP)
Surgifoam	젤라틴 스펀지
Fibrocaps + Gelfoam	Fibrocaps + 젤라틴 스펀지(USP)
Gelfoam	젤라틴 스펀지
거즈	면 거즈 패드
Fibrocaps + Surgicel	Fibrocaps + 산화시킨 셀룰룰로오스
Surgicel	산화시킨 셀룰로오스

¹상처는 무작위한 일정에 따라 형성되었다. 7-10개 상처가 형성되었다/ 비장 및 각각의 집단은 n=6개 상처/처리를 가졌다.

상기 이전의 연구에서와 같이, 경미한 출혈 속도는 처리군 전체에서 거쳐 유사하였다. 대략 2g/분의 낮은 출혈 속도로, 식염수로 사전에-적신 젤라틴-스펀지는 출혈을 조절할 수 있었고 대략 2.5분 내에 지혈을 촉진시킬 수 있었다. 그러므로, TTH에서 어떠한 상당한 향상도 Fibrocaps의 첨가로 만들어질 수 없었다. 젤라틴 스펀지는 경미한 수술 출혈의 조절에서 이용에 대한 US 및 EU 시장 승인을 받은 것을 고려하면 이 결과는 예상하지 못한 것이 아니었다. 이전 연구에서와 같이, Surgicel은 이 연구에서 출혈을 조절할 수 없었다. 하지만, Surgicel과 조합한 Fibrocaps는 빠른 지혈을 촉진할 수 있었고, 이는 Surgicel 단독과 비교하여 TTH 감소를 야기시켰다(도 4). 유사한 감소가 또한 혈액 손실에 대해 관찰되었다(도 5). 예상한 바와 같이, 이 돼지 비장 펀치-생검 모델에서 단독으로 이용될 때 둘 모두의 젤라틴 스펀지(Gelfoam 및 Surgifoam)는, 단독으로 또는 Fibrocaps와 함께, 지혈을 촉진할 수 있었고 그리고 혈액 손실을 감소시킬 수 있었다. Surgicel 단독은 거즈처럼 무효하였다. 하지만, Surgicel에 Fibrocaps이 첨가될 때 지혈이 달성되었고 혈액 손실은 감소되었다. 이들 결과는 Fibrocaps 가 다른 승인된 지혈제와 이용될 때 경등도 출혈 상황일지라도 이로울 수 있다는 것을 보여준다.

토끼 간 절제술 모델에서의 Fibrocaps 의 유효성

이 연구에서, 8마리 동물의 간은 적출되었고 상처는 간의 거의 둥근 부분을 대략 지름 1 cm로 절제함으로써 형성되었다. 대부분의 경우, 여러 가지 간 엽에 걸쳐 동물 당 4 가지 병소가 형성되었다. 각 상처에서 절제된 간 부분은 모델 일관성을 평가하기 위해 칭량되었다. 혈액은 상처에서 상처로의 출혈 일관성을 평가하기 위한 혈액 속도를 결정하기 위해 30초 동안 상처에서 수집되었다. 처리는 그 후 무작위한 방식으로 부위에 적용되었다(표 3).

토끼 간 절제술 모델에서의 처리군

집단	처리(n=6)	설명
1	Avitene	콜라겐 스펀지
2	Fibrocaps + Avitene	Fibrocaps + 콜라겐
3	Surgicel Original 지혈제	산화된 셀룰로오스

Fibrocaps은 전체 상처를 커버하기 위해 Fibrospray 장치로 적용되었다. 장치는 각각의 상처에 대해 0.25 g의 Fibrocaps 분말로 적하되었다. 장치를 상처 상에서 치우고, 콜라겐 플리스로의 가벼운 수동 압력이 Fibrocaps 분말을 상처 바닥과 접촉시키는 데에 적용되었다. 건조 거즈 드레싱은 처리를 통하여 임의의 혈액 삼출성(seeping)을 모으고 그리고 혈액 손실을 측정하기 위해 처리 부위에 적용되었다. 간에서부터 절단된 단편의 출혈 속도 및 무게는 Surgicel 집단을 제외하고 평가된 처리군에 걸쳐 유사하였고, 이는 더욱 낮은 출혈 속도를 가졌다(데이터는 보여지지 않음). 도 6에서 보여지는 바와 같이, Avitene 과의 Fibrocaps는 Avitene 단독 및 Surgicel 단독과 비교하여, TTH를 감소시킬 수 있었다. Surgicel은 마지막 관찰 시간(t=300 초)에서 6개의 상처 중 단지 3개에서 지혈을 달성하였다. 혈액 손실 역시 각각의 처리군에서 측정되었다. 도 7에서 보여진 바와 같이, Avitene과 조합한 Fibrocaps 및 Avitene 단독 둘 모두는 Surgicel과 비교하여 혈액 손실을 감소시킬 수 있었다. Fibrocaps는 Avitene 또는 Surgicel 단독과 비교하여 TTH 감소에 효과적이었고, 그리고 조합하여 사용될 때 Avitene의 탬퍼네이드 이득을 넘는 부가적 지혈제 효과를 입증하였다.

돼지 간 펀치- 생검 모델에서의 Fibrocaps + 젤라틴 스펀지의 약리학

이 모델은 출혈 속도 산출의 장점을 가지며 출혈 속도 산출은 돼지 비장 모델 및 토끼 간 모델에서 관찰되는 것들보다 전형적으로 > 5-배 더 높다. 이러한 더 강력한 출혈 모델은 "중등도" 출혈 조건하에 Fibrocaps로 TTH의 평가가 가능하였다. 또 다른 목적은 Fibrospray 장치의 더 정제된 버전을 평가하기 위함이다. 돼지 간 출혈 모델은 다른 지혈제뿐만 아니라 Fibrocaps 지혈을 연구하는 데에 광범위하게 이용되었다.

처리군은 표 4에서 제시된다. 간략하게, 멸균 조건하에, 간엽은 단리 되었고 비-중복 생검은 각각의 엽에서 10mm 펀치 생검으로 형성되었으며, 이는 대략 4mm의 깊이로 가위 및 겸자를 이용하여 완전하게 절단되었다. 혈액은 출혈 속도의 기선을 결정하기 위해, 1분 동안 수집되었다. 거즈에 배인 일반 식염수는 습한 환경에서 간을 유지하는데에 이용되었다.

돼지 간 펀치- 생검 모델에 대한 처리군

집단	처리	설명
1	Fibrocaps + Spongostan¹	Fibrocaps + 젤라틴 스펀지 USP
2	인간 트롬빈 + Spongostan²	트롬빈에서 유도한 인간 혈장 + 젤라틴 스펀지 USP
3	Spongostan + 식염수³	젤라틴 스펀지 USP + 식염수

¹N=4개 상처/처리. Spongostan은 Surgifoam과 동일하다.

²N=4개 상처/처리. 인간 트롬빈은 제조자의 지시에 따라 식염수에서 1000 IU/mL로 복원되었다.

³N=2개 상처/처리

출혈 속도는 처리군 사이에서 적당하고 유사한 것으로 간주되었다(도 8). 예상한 바와 같이, 관찰된 속도는 돼지 비장 또는 토끼 간 모델에서 관찰된 이들 속도보다 평균적으로 대략 5- 내지 10-배 높았다. 도 9에 보여진 바와 같이, Spongostan과 조합한 Fibrocaps는 Spongostan 단독과 비교하여 TTH를 감소시켰다. 게다가, Spongostan과 조합한 Fibrocaps는 Spongostan과 조합한 트롬빈에서 파생한 인간 혈장과 유사하게 TTH를 감소시킬 수 있었다. 이들 데이터는 젤라틴 압박 시트와 조합한 Fibrocaps가 더 강력한 출혈 모델에서 인간 혈장 트롬빈의 지혈과 유사하게 지혈을 촉진시킬 수 있었다는 것을 입증한다.

돼지 간 수술 생검 모델에서의 Fibrocaps

이 연구에서, 22마리 돼지를 수술하기에 앞서 하룻밤 동안 단식시켰고 그리고 내부 표준 절차에 따라 마취시켰다. 간으로 접근하기 위해 정중선 개복술이 수행되었다. 메스(scalpel)를 이용하여, 왼편 안쪽의 격막 측면(부위 1 및 2) 및 간의 측엽(부위 3 및 4)에서 4개의 피막 밑의 표준화된 병소(대략 3mm 깊이의 10mm x 10mm)가 형성되었다. 비-재흡수 봉합술로의 스티치(stitch)는 조직학적인 결정을 위해 병소를 찾아내는데에 이용되었다. 사전-처리 혈액 손실은 1분 동안 거즈를 적용함으로써 측정되었다(거즈는 각각의 병소에서 혈액 손실을 평가하기 위해 적용 전후로 칭량되었다). 차후에 각각의 병소는 사전-결정된 무작위한 일정에 따른 지혈 처리 중 한 가지로 처리되었고, 따라서 표 6에서 각각의 4가지 처리는 각각의 간에서 4 가지 수술 출혈 상처 중 하나에 적용되었다.

돼지 간 수술 생검 모델에 대한 처리군

집단	처리	설명
대조 1	Avitene Ultrafoam	콜라겐 스펀지
대조 2	Gelfoam	젤라틴 스펀지 USP
처리 1	Fibrocaps + Avitene	Fibrocaps 0.5 g + Avitene
처리 2	Fibrocaps +Gelfoam	Fibrocaps 0.5 g + Avitene

이 연구에서, 처리 1 및 2에 대해, Fibrocaps 분말은 각각, 40 x 30 mm 조각의 Avitene 또는 Gelfoam을 이용하여 30초 동안 상처 위에 중등도의 수동 압력을 이용하여 압축되었다. 대조군에 대해서는, 같은 시간 및 압력이 Fibrocaps의 부재에서 이용되었다. 만약 출혈이 1분 내로 멈추지 않았다면, 압력이 30초 동안 다시 적용되었을 것이다. 이는 지혈이 달성될 때까지 1분 간격으로 반복되었다. 지혈은, 만약 압력을 풀어준 후 3분 동안 출혈이 관찰되지 않았다면 달성된 것으로 간주되었다. 처리 및 대조는 자리에 남아있었다.

TTH 및 혈액 손실 이외에도, 다음의 안전성 평가가 각각의 처리에 대해 기록되었다: 국부적 붓기, 상처 부위로 부착, 부차적인 분리, 홍조 및 임의의 다른 관련 연구결과. 사전-처리 혈액 손실은 집단에 걸쳐 유사하였고(표 참조), 이는 상처가 유사한 출혈 문제점을 제공한다는 것을 입증한다. 모든 4 가지의 처리(처리 당 n=22)는 <1 분내로 지혈을 달성할 수 있었다(표 6 및 7). Avitene과 조합한 Fibrocaps 대 Avitene 단독의 지혈 수행은 통계적으로 유의미하게 상이하지 않았다. Gelfoam과 조합한 Fibrocaps의 지혈 수행은 Gelfoam 단독과 비교했을 때 통계적으로 더욱 빠른 TTH (P=0.004)를 야기시켰다.

사전-처리 혈액 손실 및 TTH

매개 변수	Avitene	Fibrocaps + Avitene	P 값
혈액 손실 (g)	5.8	5.4	P = 0.656
TTH (분)	0.6 ± 0.2	0.5 ± 0.1	P > 0.05

처리군 당 n=22

사전-처리 혈액 손실 및 TTH

매개 변수	Gelfoam	Fibrocaps + Gelfoam	P 값
혈액 손실 (g)	4.5	4.8	P = 0.656
TTH (분)	0.7 ± 0.4	0.5 ± 0	P = 0.004

처리군 당 n=22

본 연구의 조건 하에, 국부적 붓기/두툼함, 상처 부위로 부착 및 부차적인 분리와 같은 이차적 특성이 동등한 것(데이터는 보여지지 않음)으로 간주되었다. Fibrocaps는, 콜라겐 또는 젤라틴 스펀지와의 조합으로, 토끼 간 수술 생검 모델에서 안전하고, 잘 용인되고, 유효한 것으로 밝혀졌다.

양 PTFE 혈관 이식편 모델에서 Fibrocaps 의 실험 연구

이 실험 연구에서, 한 마리 양을 하룻밤 동안 물도 주지 않고 금식시켰고, 그리고 아이소플루레인 흡입 마취제(산소 내 1-3.5%의 아이소플루레인)를 이용하여 마취시켰다. 생명 유지에 관련된 징후가 비-침입성 커프(cuff)를 이용하여 마취 동안 관찰되었고 심박동수, 산소 포화도, 및 호흡수(산소호흡기 사용시 이에 의해 조절됨)가 이에 포함된다. 좌우의 경동맥 및 좌우의 외경정맥 둘 모두가 무딘 및 날카로운 절개를 이용하여 단리되었다. 헤파린(150 U/kg, IV)이 동맥 고정에 앞서 5 분간 투여되었다. 동맥은 그 후 실리콘 정맥 폐색성 루프로 폐쇄되었고 PTFE 이식편은 폴리프로필렌 봉합(5-0 Mersilene)의 실행으로 문합되었다. 처음 두 문합(왼쪽 경동맥에서 오른쪽 경정맥으로)에 대해 Fibrocaps (0.25 g/문합 말단)은 단일 적용으로 Fibrospray 을 이용하여 동맥 및 정맥 문합 부위 상으로 직접적으로 분무되었고 폐쇄성 루프가 제거되었다. 동맥 부위에서 약간의 출혈이 있었으며, 이는 2분 미만 내로 0.25 g의 Fibrocaps의 두 번째 적용에 의해 완전하게 멈추었다. 오른쪽 경동맥-왼쪽 경정맥 이식편은 Fibrocaps 적용에 앞서 확립된 혈액 유동을 가졌다. 각각 0.25g의 두 가지 적용은 현저하게 혈액 유동을 감소시켰지만, 식염수로-적신 Gelfoam 스펀지가 Fibrocaps 상부에 적용될 때까지 이를 완전하게 멈추게 하지는 못하였다. 전체적으로 4가지 부위는 표 8에서 설명된 바와 같이 처리되었다.

양 AV 이식편 모델에 대한 연구설계

문합 부위	폐색성 루프 제거 전 적용 (Y/N)	처리
1-동맥	N	Fibrocaps (2 x 0.25 g)
2-정맥	N	Fibrocaps (2 x 0.25 g)
3-동맥	Y	Fibrocaps (2 x 0.25 g)
4-정맥	Y	Fibrocaps (2 x 0.25 g)

Fibrocaps의 적용에 의해 제공된 밀봉은 외과의사가 문합 부위에서 부드럽게 당겨 이식편의 한쪽 끝을 들어올리고 재-출혈이 발생하지 않았을 때 입증된바 같이 상대적으로 튼튼했다.

문합 부위 이외에, 세 가지 대형 바늘구멍이 첫 번째 ePTFE 이식편에 25-가우지 바늘로 만들어졌고 그 후 지혈이 이식편 양쪽 말단 상에 문합 부위에서 달성되었다. 두 번의 연속적인 Fibrocaps의 적용은 어떠한 압박 시트 없이 이들 구멍상처 부위에서 출혈을 멈추게 하는데에 실패하였다. Fibrocaps 상부에 식염수로-적신 Gelfoam의 차후의 적용에서, 출혈은 즉시 멈추었다. 단일, 바늘 구멍 상처의 구멍은 두 번째 이식편에서 만들어졌고 출혈은 Fibrocaps의 단일 적용으로 멈추었다.

혈관 외과의사는 심지어 혈관 자체에 의해 부분적으로 덮여 있는 관형의 상처 부분에서 Fibrocaps를 문합 부위에 적용시키기 위해 스프레이 장비를 이용하는 데에 어떤 문제도 찾을 수 없었다.

Fibrocaps는, 중등도 출혈에 대한 양 혈관 이식편 모델에서, 폐쇄성 루프가 Fibrocaps 적용 전 또는 후에 제거되었는지와 관계없이, 동맥 및 정맥 문합 부위(n=4)에서 2 분 미만 내에 합성 ePTFE 이식편에 부착할 수 있었고 출혈을 멈추게 할 수 있었다.

Claims

제약학적 건조 분말 조성물에 있어서, 상처의 국부적 치료에서 지혈제로서의 이용을 위해, 피브리노겐을 포함한 첫 번째 마이크로입자, 트롬빈을 포함한 두 번째 마이크로입자의 혼합물을 포함하고, 여기서 상처는 경미한 찰과상, 베인 상처, 긁힌 상처, 할퀸 상처, 화상, 일광화상, 궤양, 내부 정맥출혈, 외부 정맥출혈, 및 실질기관 상에서 위장 시스템을 포함하는 외과적 개입; 귀, 코 및 목구멍 부위(Ear, Nose, Throat, ENT)에서의 외과적 개입; 심혈관 수술, 성형 수술, 척추 수술, 신경 수술; 림프의, 담즙의, 그리고 뇌척수(CSF)의 누공, 흉부 및 폐 수술 시 공기 누출, 흉부 수술, 정형외과 수술; 부인과 수술의 절차; 혈관 수술 및 응급 수술에서 선택되는 외과적 개입에서 선택되는 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
청구항 1에 있어서, 외과적 개입은 정형외과 수술, 간 절제술, 연조직 상해 또는 수술 및 혈관 수술에서 선택되는 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
청구항 1 내지 2에 있어서, 용도는 수술 동안 또는 수술 후 상처에 국부적인 적용에 의해 특징 되는 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
상기 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물은 건조 부착 코팅, 에어로졸, 건조 에어로졸, 펌프 스프레이, 의료용 압박붕대; 필름; 코팅된 깁스붕대; 약제가 든 스펀지 또는 수술용 패치; 지혈 플리스; 거즈; 연고(salve), 세미-젤, 젤, 거품, 반죽, 현탁액, 연고(ointment), 유제, 주조가능한 형태, 비 마개(nasal plug), 외과적 붕대, 상처 패킹, 붕대, 탈지면, 카테테르, 광섬유, 주사기, 페서리, 좌약, 또는 액체 또는 비-수분성 액체에서의 현탁액으로서 형성되는 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
청구항 1 내지 4중 어느 한 항에 있어서, 상기 첫 번째 마이크로입자는 0.5 내지 20% w/w의 피브리노겐을 포함하는 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
청구항 1 내지 5중 어느 한 항에 있어서, 상기 두 번째 마이크로입자는 25 내지 1000 IU/g의 트롬빈을 포함하는 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
상기 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 0.01 내지 95 % w/w 의 첨가제 물질을 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
상기 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 피브리노겐 및/또는 트롬빈은 재조합된 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
청구항 8에 있어서, 재조합형 피브리노겐은 HMW 피브리노겐 또는 알파-확장된 피브리노겐인 것을 특징으로 하는 제약학적 건조 분말 조성물.
상처를 치료하는 방법에 있어서, 상기 청구항 중 어느 한 항에서 청구한 바와 같은 제약학적 건조 분말 조성물을 상처에 적용하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
청구항 10에 있어서, 상기 치료는 적용 후 10분 미만의 지혈 시간을 야기시키는 것을 특징으로 하는 방법.
청구항 10에 있어서, 상기 치료는 적용 후 5분 또는 그 미만의 지혈 시간을 야기시키는 것을 특징으로 하는 방법.
청구항 10에 있어서, 상기 치료는 적용 후, 3분 또는 그 미만의 지혈 시간을 야기시키는 것을 특징으로 하는 방법.