KR20120068851A - 생균제 안정화 - Google Patents
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Abstract
영아 및 아동의 영양에 유용한 가수분해된 포유동물 단백질, 하나 이상의 카르보히드레이트 및 화합물 결합제의 혼합물 중 함유된 생균제를 포함하는 섭취가능한 조성물.
Description
본 발명은 개체에 의한 섭취를 위한 생물학적 물질의 안정화에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 생균제 (probiotic) 유기체가 생성물 분포 및 저장 동안 개선된 안정성을 가질 수 있도록, 가수분해된 포유동물, 특히 소, 단백질을 포함하는 안정화된 박테리아 혼합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 신규한 생균제 안정화 방법을 포함한다.
인간 및 동물 둘 다의 위장관을 보충하기 위한 다양한 조성물이 현재 존재한다. 이들 보충물은 소화 시 목적하는 효과를 얻기 위하여 개체의 장(gut) 내에서 미생물총을 변경, 감소 또는 증가시키도록 제공될 수 있다. 이상적으로, 보충은 인간 위장 (GI) 관 내의 특정 박테리아의 변경을 기초로 인간을 비롯한 개체에 대해 개선된 미생물총을 기를 수 있다. 이러한 스타일의 보충은 유효량으로 투여되는 경우에 숙주에게 건강 또는 영양적 이점을 제공하는 살아있는 미생물이라고 이해되는 생균제의 사용을 통해서 수행될 수 있다. 생균제의 보다 통상적인 유형 중 하나는 당 및 다른 카르보히드레이트를 락트산으로 전환시킬 수 있는 락트산 박테리아이다. 이 전환은 숙주의 장 내 pH를 저하시키고, 해로운 유기체가 성장하여 위장 감염을 통해서 문제를 일으킬 기회를 더 줄인다.
통상적인 기술적 항원투여는 생균제의 유지 및 개인의 건강 및 기쁨 두 가지 모두를 위하여 적절한 방식으로 숙주로 생균제를 도입하는 것이다. 현재의 기술은 보호된 미생물이 개인의 GI 관 내에서 적절한 위치로 통과할 수 있도록 보호 층 또는 매트릭스로 생균제를 보호하기 위한 캡슐화 및 안정화 기술의 이용을 포함한다. 예를 들면, 바티크(Batich) 등 (미국 특허 제5,286,495호)에 장 및 복막내 투여 둘 다에서 옥살레이트-분해 효소 및 박테리아가 캡슐화될 수 있도록 세포를 마이크로캡슐화하는 방법이 제공된다. 바티크 등에 따르면, 박테리아 및 효소는 알기네이트 마이크로캡슐 또는 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트 마이크로스피어(microsphere)에서 성공적으로 캡슐화될 수 있다. 모델은 캡슐화된 세포가 동물의 적절한 위 영역에 도달하도록 생존력이 박테리아 및 효소에 대해서 남아있다는 것을 제안한다.
포드 (Ford)에 허여된 미국 특허 출원 제5,733,568호에서, 마이크로-캡슐화된 락토바실리(Lactobacilli) 박테리아가 재발성 피부 감염을 치료 또는 예방하기 위해 피부에 투여된다. 락토바실러스 (Lactobacillus) 종은 글루코스 염수 용액과 혼합되고, 니들(needle)을 강제 통과하기 전에 나트륨 알기네이트 용액과 천천히 교반되고, 건조되어 겔화된 비말 (droplet)을 형성한다. 캡슐화의 다른 방법은 박테리아를 캡슐화하기 위해 폴리비닐 포비돈 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로스의 현탁액으로의 박테리아 첨가를 포함할 수 있다.
로저스 (Rogers) 등에 허여된 미국 특허 제6,465,706호에서, 미생물의 캡슐화는 생물오염제거(biodecontamination)에 사용하기 위해 기재된다. 로저스 등은 적합한 캡슐화 물질이 젤라틴 중합체뿐만 아니라 겔 및 포말체 둘 다를 포함하는 천연 또는 합성 중합체 결합제를 포함한다고 주장한다.
비록 전달을 위한 미생물을 동물의 소화계로 함유시키는 캡슐화 및 안정화 기술에 관한 발달이 있어왔지만, 분배 및 저장 동안 생균제의 생존력을 보호하는 캡슐화 또는 안정화 기술에 있어서는 거의 발달이 없었다. 상황이 냉각을 불가능하게 하는 경우, 및 추가로 상기 제제가 다양한 환경, 특히 열대 기후와 관련된 환경에 노출될 수 있는 경우 안정화 기술이 필요하다. 또한, 생성물의 고유 수분은 생균제가 일반적으로 물, 특히 높은 온도와 조합되는 경우의 물에 민감하다는 점에서 요인으로 작용한다. 지금까지는, 영양제로 혼입되는 경우에, 분포 및 저장 동안 높은 온도 (즉, 약 30℃ 이상, 및 40℃까지 및 초과의 온도) 및 중간 수분 조건 (즉, 약 0.2 및 0.2 초과, 및 약 0.4까지 또는 0.4 초과의 수분 활성)하에 생균제에 대해서 유의한 보호를 전달하기 위한 기법 또는 기술이 확인되지 않았다.
특히, 생균제는 숙주에 대한 다양한 이점, 예컨대 건강한 위장 균총의 유지, 면역성 강화, 설사, 아토피성 피부염 및 다른 질환 등에 대한 보호를 제공할 수 있다. 이와 같이, 생균제의 생존력이 약화될 수 있는 열대 기후를 비롯한 다양한 지리적 위치에서 투여될 생균제가 필요하다. 통상의 캡슐화 및 안정화 기술은 일반적으로 비-인간체에 대해서만 적합한 것으로 고려되고, 영아용 조제분유 및 아동에게 사용하기에는 부적당한 화학적 메이크업(makeup)을 보유하거나, 또는 상업적 기회를 상당하게 제한하는 좋지 않은 안정성 특징을 갖는다.
따라서 목적하는 것은 생균제가 유용한 저장-수명을 유지하면서 다양한 지리적 위치 및 기후에서 분포될 수 있도록 개선된 안정성 특성을 가능케하는, 영아용 조제분유 또는 아동의 영양을 위한 허용되는 성분을 사용하는 안정화 기술 및 안정화된 박테리아 혼합물이다. 추가로 목적하는 것은 영아용 조제분유, 보충물 및 아동용 제품에 사용하기 위한 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus)의 보호를 위한 안정화 기법이다. 사실상, 영양 인자와 조합된 개선된 안정성을 비롯한 특징들의 조합물은 태아, 영아, 및 아동의 영양에 대해 적용할 수 있는 개선된 안정화 혼합물을 제공한다.
본 발명의 개시
본 발명은 생물학적 물질의 안정성을 개선시키는데 사용될 수 있는 안정화 기술 및 안정화된 혼합물을 제공한다. 본 발명의 실시양태에서, 안정화된 기질은 생균제일 수 있고, 여기서 안정화된 생균제와 관련된 다양한 건강상의 이점은 안정화된 미생물을 함유하는 조성물의 섭취시 개별체에게 제공될 수 있다.
생균제가 영양적으로 유익하다고 인식되지만, 대부분의 생균제는 미생물이 살아있는 경우에만 최적의 유익한 효과를 제공한다는 것이 일반적으로 받아들여진다. 최적의 효과에 있어서, 생균제는 GI 관으로 생균제를 도입하기 위한 생성물이 섭취되기 전에 소모성 품목, 예를 들어 식품 또는 음료로의 제조하는 조건 및 후속 선적(shipping) 및 저장 시간을 견디는 것이 필요하다. 유의한 수의 세포는 제조 과정, 수송, 및 저장 동안 궁극적으로 생존력을 잃고 죽는다는 점을 이해하면, 대부분의 통상의 생균제 조성물은 극히 높은 수의 박테리아 세포를 이용한다. 최근의 캡슐화 및 안정화 기술은 생균제에 대한 일부 보호를 제공하지만 영아용 조제분유 및 아동용 제품에 대해 기능적인 동시에 목적하는 안정성을 제공하지 않는다.
본 발명의 실시에 의해서, 가수분해된 포유동물 단백질은 안정화된 혼합물로 혼입되어, 매트릭스를 강화하고 생균제의 안정성은 증가시킨다. 그 결과로, 영아- 및 아동-호환성 생균제는 가수분해된 포유동물 단백질을 비롯한 혼합물로 안정화될수 있고, 생균제가 개선된 생존력을 나타내기 때문에 여러 환경에서 사용될 수 있다. 유리하게는, 본 발명에 의해 안정화된 생균제는 안정화된 매트릭스의 개선된 안정성으로 인해 확장된 수송 및 저장 시간 후에도 생존력을 유지할 것이기 때문에 영양 생성물로 혼입될 수 있고, 확장된 거리를 넘어 선적될 수 있다.
생균제를 안정화하기 위한 본 발명의 방법은 가수분해된 포유동물 단백질, 하나 이상의 카르보히드레이트 및 화합물 결합제를 비롯한 생물학적 물질을 안정화하기 위한 혼합물의 사용을 포함할 수 있다.
안정화된 매트릭스가 다양한 물질에 대해서 사용될 수 있지만, 바람직한 실시양태에서, 생균제, 예컨대 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus)에 대해서 사용된다. 락토바실러스 람노수스는 인간 장관 점막 세포에 대해서 높은 결합능을 갖지만 상대적으로 우수한 생물-안정성을 보유하는 것으로 이해된다. 생균제로서의 사용에 있어서, 락토바실러스 람노수스는 소화관에 서식하고 장 미생물총의 균형을 이루게 하는 것으로 생각된다.
생균제에 대해서 안정화된 혼합물을 형성하는데 있어서, 가수분해된 포유동물 단백질은 생균제 주위의 매트릭스를 증가 및 강화시키는데 사용될 수 있다. 가수분해된 포유동물 단백질은 광범위하게 가수분해된 카세인 및 다른 가수분해된 포유동물 단백질을 포함할 수 있고, 가수분해된 단백질을 포함하는 단쇄 펩티드와 관련된 특징으로 인해 강도에 있어서 증가를 제공한다고 가정된다. 가수분해된 단백질은 그의 성분 아미노산의 더 짧은 서열로 단백질을 파괴하기 위해 강산 또는 강염기에서, 또는 효소적 분해 기술을 통해서 포유동물 단백질을 끓여서 달성될 수 있다.
안정화된 박테리아 혼합물의 다른 성분은 모노사카라이드, 디사카라이드 및 폴리사카라이드를 비롯한 카르보히드레이트를 포함할 수 있다. 디사카라이드인 트레할로스는 안정화 혼합물 중 카르보히드레이트로써 사용될 수 있다. 이는 일반적으로 상대적으로 높은 수분 보유력을 갖는 것으로 알려져 있고, 겔 상을 형성할 수 있다. 트레할로스는 연장된 건조 기간 동안 식물 및 동물에 의해 사용되고, 무미건조한 환경에서 생물학적 물질을 보호하는데 효과적인 작용제라고 이해된다. 식물에서 형성되는 폴리사카라이드인 이눌린은 전분의 소화에 적합화 되었기 때문에 인간 효소 프티알린 및 아밀라아제에 의해 소화되기 어렵다. 그 결과로, 상당한 소화계 무손상을 통해 통과하기 때문에, 이눌린은 유용한 안정화 혼합물 성분이고, 결장에서 미생물총에 의해 대사되고, 따라서 장 박테리아 균총의 성장을 자극한다. 또한, 이눌린은 매트릭스의 유리 전이 온도를 증가시키고, 매트릭스가 고무처럼 되는 온도로 상승 이동시키고, 따라서 더 낮은 온도에서 수 이동성 및 생균제 분해의 증가를 방지하는데 사용된다.
화합물 결합제는 또한 안정화 혼합물에서 사용될 수 있고, 예로는 화학적 화합물 나트륨 알기네이트가 있다. 나트륨 알기네이트는 고무같은 물질을 형성할 수 있고, 첨가되어 혼합물의 점도를 증가시킨다. 추가로, 화합물은 나트륨 알기네이트와 같은 성분과 함께 혼합되어 더 큰 완화를 제공할 수도 있고, 유화제 특징을 소유할 수도 있다.
안정화 혼합물은 생균제의 개선된 안정성, 즉 가공, 수송 및 저장 조건 후, 더 큰 백분율의 생균제 세포가 살 수 있는 안정성을 제공한다. 명확하게는, 본원에 사용된 바와 같이 무손상 단백질, 가수분해된 비-포유동물 단백질 또는 광범위하게 가수분해되지 않은 단백질을 사용하는 캡슐화 및 안정화 기술과 비교하는 경우, 생균제의 유통 기한이 개선된다.
본 발명의 안정화 혼합물은 안정화된 생균제 생성물을 형성함에 있어서 다양한 방법으로 사용될 수 있다. 이들 방법은 냉동, 냉동-건조, 상온 통풍 건조, 진공 건조, 분무 건조, 저온 건조, 고온 건조 및 그의 조합을 포함한다. 생성된 안정화된 생균제는 단독으로든지 또는 영양 생성물로 통합되든지 개선된 저장-수명을 나타내는 반면, 광범위한 온도 및 조건에서 효과적인 생존력을 보유한다. 게다가, 안정화된 생균제는 영아 또는 아동에게 영양을 동시에 제공하면서, 태아, 영아 및 아동의 장 미생물총을 개선하기 위한 태아, 영아 및 아동의 다양한 영양 생성물로 혼입될 수 있다.
따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 생물학적 물질의 증가된 안정성을 제공하는 생물학적 물질의 안정화이다.
또다른 실시양태는 생균제에 대한 안정화 혼합물이다.
또다른 실시양태는 가수분해된 포유동물 단백질을 포함하는 생균제에 대한 안정화 혼합물이다.
또다른 실시양태는 하나 이상의 카르보히드레이트, 화합물 결합제 및 가수분해된 포유동물 단백질을 포함하는 생균제를 안정화하기 위한 혼합물이다.
추가의 실시양태는 가수분해된 포유동물 단백질을 비롯한 안정화 혼합물을 갖는 생균제를 안정화시키는 것을 포함하는 생균제의 유통 기한을 증가시키는 방법이다.
하기 기술의 관점으로는 당업자에게는 명백할 것인 이들 측면 및 다른 측면들은 생물학적 물질, 예컨대 생균제의 안정화를 위한 가수분해된 포유동물 단백질을 비롯한 혼합물을 제공함에 의해서 달성될 수 있고, 생물학적 물질의 증가된 안정성을 제공하여 생물학적 물질의 개선된, 장기 생존력의 결과를 가져온다. 일 실시양태에서, 비-가수분해거나 또는 가수분해된 비-포유동물 단백질의 사용과 비교하는 경우에, 안정화 혼합물은 유리하게는 생균제, 예컨대 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus)의 저장-수명의 연장을 제공한다. 안정화 혼합물은 생균제를 보존하기 위해 냉동 건조, 공기 건조, 진공 건조, 분무 건조 및 그의 조합을 비롯한 다양한 방법에서 생균제와 조합될 수 있다.
상기 일반적인 기술 및 하기 상술된 기술 둘 다는 개시내용을 제공하고, 청구된 바와 같이 본 발명의 성질 및 특징에 대한 이해의 개괄 또는 프레임워크를 제공하고자 함이라는 것이 이해된다.
본 발명을 수행하기 위한 최선의 방식
본 발명은 표적 미생물의 생존력을 개선하기 위한 생물학적 물질에 대한 안정성 및 보호를 제공하는 신규 안정화 제제 및 방법을 제공한다. 본 발명은 특정 실시양태에서 하나 이상의 카르보히드레이트와 조합되는 가수분해된 포유동물 단백질 및 비-가수분해거나 또는 가수분해된 비-포유동물 단백질을 사용하여 다른 캡슐화 및 안정화 생성물에 있어서 증가된 저장-수명을 야기하는 보호 매트릭스를 함께 제공하는 화합물 결합제를 포함하는 안정화 혼합물을 포함한다.
정의
용어 "생균제"는 숙주의 건강에 있어서 유익한 효과를 끼치는, 병원성이 낮거나 또는 없는 미생물을 의미한다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "영아"는 일반적으로 태어나서 12개월까지의 연령인 인간으로서 정의된다.
"조기 분만(pre-term) 영아"는 임신 후 약 37주 미만에 태어난 영아이다.
본원에 사용된 바와 같은 "정상 분만(full-term) 영아"는 임신 후 약 37주 이상에 태어난 영아이다.
"아동"은 약 12개월 내지 약 12년의 연령에 걸친 인간으로서 정의된다.
본원에 사용된 바와 같은 "유효량"은 일반적으로 투여된 대상체 내에서 관찰가능한 결과를 제공하는 작용제의 양으로서 정의된다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "영양 생성물"은 식물, 동물 또는 영양분을 함유할 수 있는 합성 공급원의 임의의 소모성 물질을 포함한다.
바람직한 실시양태
본 발명의 실시에서, 가수분해된 포유동물 단백질은 생물학적 물질을 안정화시키기 위한 안정화 혼합물 내에서 성분으로서 사용된다. 본원에 사용된 바와 같이, 가수분해된 단백질은 다발성 펩티드 단편이 제공되기 위해서 분해 또는 부패된 단백질 분자를 기재하기 위해 사용된다. 본 발명에 사용된 바와 같이, 가수분해된 단백질 및 단백질 가수분해물은 단백질 가수분해의 생성물을 기재하기 위해 호환적으로 사용되고; 광범위하게 가수분해된 단백질은 2000 달톤 미만의 분자량을 갖는 가수분해된 단백질의 20% 이상, 보다 바람직하게는 70% 이상, 및 가장 바람직하게는 약 90% 이상인 단백질 가수분해의 생성물을 기재하기 위해 사용된다.
가수분해된 포유동물 단백질은 밀크 생성물 및 동물 생성물을 비롯한 다양한 포유동물 단백질 공급원으로부터 형성될 수 있다. 포유동물 단백질은 산 가수분해의 방법을 통해서 형성될 수 있고, 목적하는 크기 범위의 아미노산 단편을 형성할 때까지 강산으로 처리되고 가열된다. 또한, 단백질 가수분해의 유형은 더 단쇄의 아미노산을 형성하는 단백질 분자를 소화하는 효소적 작용제의 사용을 포함한다. 단백질을 가수분해하기 위한 통상적인 방법은 당업계에 공지되어 있고, 콘라드 (Conrad)에 허여된 미국 특허 제4,377,601호; 체르반 (Chervan) 등에 허여된 미국 특허 제4,443,540호; 에른스터 (Ernster)에 허여된 미국 특허 제4,545,933호; 사토 (Satoh) 등에 허여된 미국 특허 제4,757,007호; 데 루이지 (De Rooij) 등에 허여된 미국 특허 제4,873,108호; 브라운 (Brown) 등에 허여된 미국 특허 제5,401,527호; 콩 (Kwong) 등에 허여된 미국 특허 제6,214,585호; 및 초 (Cho) 등에 허여된 미국 특허 제6,221,423호에 기재되어 있고 각 기술은 그 전문이 본원에 참고로 포함되어 있다.
본 발명의 안정화 혼합물에서 사용하기 위해 가수분해될 수 있는 포유동물 단백질은 난 단백질, 동물 단백질, 가금류, 미트(meat), 혈청 알부민, 글리콜 단백질, 콜라겐, 젤라틴, 밀크 단백질, 카세인, 유청 단백질, 알부민 및 그외 다른것들을 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 포유동물 단백질은 소 단백질이다. 상기 정의한 바와 같이, 상기 유형의 임의의 가수분해된 포유동물 단백질은, 바람직한 실시양태에서, 광범위하게 가수분해되고, 약 2,000 달톤 미만의 분자량을 갖는 펩티드를 산출하는 가수분해된 단백질의 약 70% 이상을 의미한다.
한 실시양태에서, 가수분해된 포유동물 단백질은 약 2,000 달톤 미만의 분자량을 갖는 펩티드의 약 80% 이상, 유리하게는 약 90% 이상을 갖는 가수분해된 카세인을 포함한다. 카세인은 우유에서 총 단백질의 거의 80%를 포함하는 인-단백질일 수 있다고 이해된다. 단백질은 디술피드 브릿지(bridges)를 포함하지 않고 그 결과 2차 또는 3차 구조가 거의 없다. 비-가수분해된 카세인은 약 19,000 달톤 내지 약 68,000 달톤의 범위의 분자량을 갖는 카세인 변이체를 포함한다. 본 발명의 실시에 사용될 수 있는 포유동물 단백질 가수분해물, 예컨대 카세인 가수분해물의 한 실시양태는 1,000 달톤 미만의 분자량을 갖는 펩티드의 90% 이상, 2,000 달톤 미만의 분자량을 갖는 펩티드의 97% 이상인 것이다. 특정 실시양태에서 포유동물 단백질 가수분해물의 0.3% 미만은 5,000 달톤 이상이고, 사실상 모든 단백질이 가수분해된 것을 예시한다.
상기 가수분해된 카세인을 비롯하여 가수분해된 포유동물 단백질의 사용은 더 큰 펩티드 단편 또는 전체 단백질의 사용을 통해서 관찰되는 보호를 넘어서 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus)를 비롯한 생균제에 대한 우수한 보호를 제공한다. 임의의 이론에 얽매이지는 않지만, 수분 및 열에 대해서 생균제에 대한 증가된 보호에 대한 한가지 가능성은 가수분해된 포유동물 단백질로부터 생성된 표면의 제타 전위 중 증가를 수반할 수 있다. 제타 전위는 분산 내에서 인접한, 유사하게 하전된 입자 사이에서의 반발의 정도를 나타내는 값이다. 용액 또는 분산액과 같이 안정성을 수여하는 높은 제타 전위를 소유하는 더 작은 화합물 및 분자는 응집에 대해서 저항할 것이다. 반대로, 제타 전위가 반발을 넘어서는 낮은 인력인 경우, 분산은 파괴되고 응집될 수 있다. 소수성이 감소하는 반면에, 제타 전위의 크기는 가수분해의 정도가 증가함에 따라 증가한다. 많은 단펩티드 서열을 제공하는 높은 정도의 가수분해는 생균제와 접촉하는 단백질 계면의 제타 전위를 증가시킬 수 있고, 따라서 열 및 습도에 대해서 생물학적 작용제의 안정성을 증가시킬 수 있다. 물론, 이것은 가수분해된 포유동물 및 비-포유동물 단백질 사이의 놀라운 차이점을 설명하지는 않는다.
특정 실시양태에서, 건조 무게 기준을 기초로 안정화 혼합물의 주성분은 하나 이상의 카르보히드레이트이고, 이는 폴리사카라이드, 디사카라이드 및 모노사카라이드를 포함할 수 있다. 모노사카라이드의 예는 글루코스, 프럭토스, 리보스, 갈락토스를 포함할 수 있고; 디사카라이드는 트레할로스, 수크로스, 말토스, 락토스, 셀로비오스를 포함할 수 있고; 및 폴리사카라이드는 글루코스, 프럭토스 및 갈락토스 중합체, 아밀로스, 글리코겐, 셀룰로스, 이눌린, 라피노스 및 스타키오스, 및 다른 예를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 카르보히드레이트는 낮은 수분 이용 가능 기간 동안 식물 및 미생물의 생명을 지원하는 것으로 알려져 있는 디사카라이드, 예컨대 수크로스 및 트레할로스를 포함할 수 있다. 마이코스 (mycose)로도 알려진 트레할로스는 진균, 식물 및 특정 동물에 의해 합성되고, 생물체가 연장된 건조 기간에 견디는 것인 탈수가사에서 핵심 카르보네이트로써 기능을 한다. 물리적으로, 트레할로스는 겔 상을 형성할 수 있고, 생균제 주위의 보호 매트릭스를 형성하는데 유용하다. 추가의 실시양태는 포함될 수 있는 이눌린을 제공하고, 영양 적용에 있어서 프리바이오틱으로서 종종 고려되는 가용성 섬유를 제공한다. 유리하게는, 장 박테리아 균총에 의해 소화될 수 있는 경우, 이눌린은 소화가 되지 않고 위 및 십이지장을 통과한다. 이눌린의 혼입은 생균제가 이눌린이 소화될 수 있는 장의 박테리아 균총에 적절하게 위치할 때까지 소화 효소 및 높은 산성으로부터 생균제를 보호하는 것을 도울 수 있다.
일부 실시양태에서 안정화 혼합물의 추가의 성분은 농화제로서 작용할 수 있고, 겔-유사 농도 (consistency)를 생성할 수 있는 화합물 결합제 (또한 겔화제로 지칭됨)일 수 있다. 화합물 결합제의 예는 알기네이트, 예컨대 나트륨 알기네이트, 키토산, 카르복시메틸셀룰로스, 및 다른 예를 포함한다. 화합물 결합제의 혼입은 유효한 매트릭스 형성을 제공하는 점성이 있는 농도 및 후속 건조에 적합한 구조적 품질의 형성을 제공한다.
안정화 혼합물은 생균제 또는 안정화된 생균제를 섭취하는 개체에 대해서 추가의 이점을 제공하는 추가 성분을 또한 포함할 수 있다. 이들 성분은 미네랄, 비타민, 항산화제, 미량 원소, 스테롤, 항산화제, 지방산, 기능적 분자, 및 그의 조합물을 포함할 수 있다. 다른 성분은 펙틴, 저항성 전분, 고 아밀로스 전분, 구아, 및 메뚜기 콩 검, 한천, 크산탄, 카라기닌, 글루칸, 프럭토-올리고사카라이드, 폴리프럭토스, 말토덱스트린, 및 그의 조합물을 포함할 수 있다.
혼합물의 발포는 슬러리 중 존재하는 공기의 양을 감소시킴에 의해서 조절될 수 있다. 특정 실시양태에서, 이는 1.0 내지 1.2 g/cm3의 범위의 표적 슬러리 밀도를 수득하기 위해서 진공 하에 혼합하여 달성될 수 있다.
안정화 혼합물은 개체의 건강 및 복지에 유익한 효과를 끼칠 수 있는 생균제 유기체에 대한 안정성을 제공하기 위해 사용될 수 있다. 적합한 생균제의 예는 효모, 예컨대 사카로마이세스 세레비세아이 (Saccharomyces cereviseae), 곰팡이, 예컨대 아스페르길루스 (Aspergillus), 리조푸스 (Rhizopus), 뮤코 (Mucor), 및 박테리아, 예컨대 락토바실러스 (Lactobacillus)를 포함하지만 이들로 한정되지는 않는다. 적합한 생균제 미생물의 특정 예는: 아스페르길루스 니거 (Aspergillus niger), 에이. 오리자이 (A. oryzae), 바실러스 코아굴란스 (Bacillus coagulans), 비. 렌투스 (B. lentus), 비. 리케니포르미스 (B. licheniformis), 비. 메센테리쿠스 (B. mesentericus), 비. 푸밀루스 (B. pumilus), 비. 수브틸리스 (B. subtilis), 비. 나토 (B. natto), 비피도박테리움 아돌레센티스 (Bifidobacterium adolescentis), 비. 아니말리스 (B. animalis), 비. 브레베 (B. breve), 비. 비피둠 (B. bifidum), 비. 인판티스 (B. infantis), 비. 락티스 (B. lactis), 비. 롱굼 (B. longum), 비. 슈도롱굼 (B. pseudolongum), 비. 써모필룸 (B. thermophilum), 칸디다 핀톨레페사이 (Candida pintolepesii), 클로스트리디움 부티리쿰 (Clostridium butyricum), 엔테로코커스 크레모리스 (Enterococcus cremoris), 이. 디아세틸락티스 (E. diacetylactis), 이. 파이시움 (E. faecium), 이. 인터메디우스 (E. intermedius), 이. 락티스 (E. lactis), 이. 문트디 (E. muntdi), 이. 써모필루스 (E. thermophilus), 락토바실러스 아시도필루스 (Lactobacillus acidophilus), 엘. 알리멘타리우스 (L. alimentarius), 엘. 아밀로보루스 (L. amylovorus), 엘. 크리스파투스 (L. crispatus), 엘. 브레비스 (L. brevis), 엘. 카세 (L. case), 엘. 쿠르바투스 (L. curvatus), 엘. 셀로비오수스 (L. cellobiosus), 엘. 델브루에카이 에스에스. 불가리쿠스 (L. delbrueckii ss . bulgaricus), 엘. 파르키미니스 (L. farciminis), 엘. 페르멘툼 (L. fermentum), 엘. 가세리 (L. gasseri), 엘. 헬베티쿠스 (L. helveticus), 엘. 락티스 (L. lactis), 엘. 플란타룸 (L. plant arum), 엘. 존소나이 (L. johnsonii), 엘. 레우테리 (L. reuteri), 엘. 람노수스 (L. rhamnosus), 엘. 사케이 (L. sakei), 및 엘. 살리바리우스 (L. salivarius)이다.
본 발명의 일 실시양태에서 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus) GG는 본 발명에 의해 안정화될 수 있는 생균제로서 사용된다. 락토바실러스 람노수스 GG는 샤우드 (Sharwood) 등에 허여된 미국 특허 출원 제4,839,281호에 기재되어 있고, 그의 전문이 본원에 포함되어 있다. 특히, 샤우드 등은 박테리아가 장 세포에 대해 강력한 (avid) 부착을 하고, 동시에 낮은 pH에서 생존하고 많은 양의 락트산을 생성할 수 있는 종으로써 락토바실러스 람노수스 GG를 기재한다.
선택된 생균제는 바람직하게는 본 발명의 안정화 화합물과 함께 조합 전 습윤 페이스트-유사 농도로까지 농축시킨다. 건조 형태에서 생균제와 함께 출발하는 것이 또한 별법이다. 선택된 생균제의 농도 수준은 약 3X 내지 약 20X의 농도를 포함하고, 특이적 생균제 바이오매스(biomass) 및 후속 프로세싱 단계에 따라서 더 적거나 또는 더 많은 농도를 포함할 수 있다. 일반적으로, 안정화된 생균제의 제조는 선택된 생균제 또는 생균제들을 농축하고; 목적하는 양으로 안정화 혼합물의 성분을 제공하고; 안정화 혼합물과 농축된 생균제를 혼합하고; 안정화된 생균제를 건조시키고, 안정화된 생균제를 영아용 조제분유를 포함할 수 있는 영양 생성물로 포장하거나 또는 조합하는 단계를 포함한다.
본 발명의 원리 및 작동(operation)을 추가로 예시하기 위해, 하기 실시예를 제공한다. 그러나, 이 실시예는 어떠한 관련을 제한하고자 해서는 안된다.
실시예
락토바실러스 람노수스 GG (LGG)를 발효조에서 기른다. 마이오매스를 후속적으로 완충제로 세척하고, 원심분리하여 LGG 모이스트 (moist) 펠렛을 수득하였다. 안정화 혼합물을 건조 무게 기준으로 대략 75% 트레할로스, 약 16.7% 가수분해된 카세인, 5.2% 이눌린 및 대략 3.1% 나트륨 알기네이트를 포함하여 예비-블렌딩한다. 37℃의 온도에서, LGG 모이스트 펠렛은 안정화 혼합물 및 충분한 물과 혼합하여 대략 55%의 총 고체 내용물을 수득하였다. 슬러리를 진공하에서 혼합하여 약 1.1 g/cm3의 밀도를 수득하였다.
안정화 혼합물 및 LGG의 조합물은 그 후 진공-건조 또는 냉동-건조시켜 대략 3%의 최종 수분 내용물을 수득하였다. 100g/ft2 내지 150g/ft2의 범위의 로드 (load)에서 트레이에 혼합물을 펼치는 것이 바람직하다. 총 수분의 80%를 제거하는 동안 생성물 온도를 30℃ 미만으로 하면서 혼합물을 건조시켰다. 남아있는 17% 수분의 제거 동안 온도는 50℃를 초과해서는 안된다. 건조되고, 안정화된 LGG를 후속적으로 분쇄하고 체를 사용하여 크기를 선택하여 목적한 크기의 생성물을 수득할 수 있다.
생균제에 대한 안정화를 최적화하는데 있어서, 다발성 구성성분은 일부 실시양태에서 다양할 수 있다. 카르보히드레이트는 건량 기준으로 안정화 혼합물의 약 70% 내지 약 85%를 포함할 수 있고; 가수분해된 포유동물 단백질은 건량 기준으로 안정화 혼합물의 약 10% 내지 약 20%를 포함할 수 있고, 화합물 결합제는 건량 기준에서 안정화 혼합물의 약 0% 내지 약 10% (즉, 약 10%까지)를 포함할 수 있다.
2,000 달톤 미만의 분자량을 갖는 매트릭스 단백질의 70% 이상을 갖는 안정화된 생균제는 포장되고 시판될 수 있거나 또는 대신에 다양한 영양 생성물과 조합될 수 있다. 이러한 영양 생성물은 개선된 저장-수명 및 안정성을 필요하게 만드는 영양 생성물로 생균제를 혼입하는 것을 목적으로 하는 경우, 적용하기 유용한 영아용 조제분유 및 유아용 상품을 포함할 수 있다.
안정화된 생균제와의 조합을 위한 영양 생성물의 한가지 유형은 영아용 조제분유일 수 있다. 용어 "영아용 조제분유"는 인간 밀크를 대체하는 것에 의해 영아의 영양분 필요조건을 만족시키는 액체 또는 분말 형태의 조성물에 적용한다. 미국에서, 영아용 조제분유의 내용물은 21 C.F.R. §§100, 106 및 107에 기재된 미국연방규정(federal regulations)에 의해 지시받는다. 이들 규정은 인간 모유의 영양 및 다른 특성을 시뮬레이션해보려는 노력으로 다량영양분, 비타민, 미네랄, 및 다른 성분 수준을 정의한다. 또다른 영양 생성물은 인간 밀크의 영양 가치를 강화시키기 위해 인간 밀크에 첨가되는 조성물을 의미하는 인간 밀크 강장제일 수 있다. 인간 밀크 강장제로서, 조성물은 안정화된 생균제와 조합된 분말 또는 액체 형태로 존재할 수 있다.
본 발명의 안정화된 생균제는 최소, 부분, 또는 총 영양 지지를 제공하는 영양 생성물과 조합될 수 있다. 조성물은 영양 보충물 또는 대체 식품일 수 있다. 조성물은 식품 또는 영양 조성물과 합하여 투여될 수 있다. 안정화된 생균제를 함유하는 조성물은 대상체에 의한 섭취 전에 식품 또는 다른 영양 조성물과 섞일 수 있거나, 또는 식품 또는 영양 조성물의 섭취 전 또는 후에 대상체에 투여될 수 있다. 조성물은 영아용 조제분유, 모유, 인간 밀크 강장제, 또는 그의 조합물을 받는 조기 분만 영아에게 투여될 수 있다.
안정화된 생균제와의 조합을 위한 조성물은 영양적으로 완전할 수 있지만 그럴 필요는 없다. 당업자는 "영양적으로 완전한" 것이 상기 용어가 적용되는 대상체의 연령, 임상 조건, 및 식이 섭취를 포함하지만 이들로만 한정되지는 않는 수많은 인자에 따라 다양할 것임을 인식할 것이다. 일반적으로, "영양적으로 완전한"은 영양 조성물이 정상 성장을 위해 필요한 적절한 양의 모든 카르보히드레이트, 지질, 필수 지방산, 단백질, 필수 아미노산, 조건부 필수 아미노산, 비타민, 미네랄, 및 에너지를 제공하는 것을 의미한다. 영양분에 적용된 바와 같이, 용어 "필수"는 정상 성장 및 건강의 유지를 위한 충분한 양으로 신체에 의해 합성될 수 없어서 식이에 의해 보충되어야만 하는 임의의 영양분을 지칭한다. 영양분에 적용된 바와 같은 용어 "조건부 필수"는 적절한 양의 전구체 화합물이 신체에 대해서 내인성 합성을 발생시키는데 이용불가능한 경우의 조건 하에서 영양분이 식이에 의해 보충되어야만 함을 의미한다.
조기 분만 영아에 대해서 "영양적으로 완전한" 조성물은 정의상으로, 조기 분만 영아의 성장에 필요한 질적 및 양적으로 적절한 양의 모든 카르보히드레이트, 지질, 필수 지방산, 단백질, 필수 아미노산, 조건부 필수 아미노산, 비타민, 미네랄, 및 에너지를 제공할 것이다. 정상 분만 영아에 대해서 "영양적으로 완전한" 조성물은 정의상으로, 정상 분만 영아의 성장에 필요한 질적 및 양적으로 적절한 양의 모든 카르보히드레이트, 지질, 필수 지방산, 단백질, 필수 아미노산, 조건부 필수 아미노산, 비타민, 미네랄, 및 에너지를 제공할 것이다. 아동에 대해서 "영양적으로 완전한" 조성물은 정의상으로, 아동의 성장에 필요한 질적 및 양적으로 적절한 양의 모든 카르보히드레이트, 지질, 필수 지방산, 단백질, 필수 아미노산, 조건부 필수 아미노산, 비타민, 미네랄, 및 에너지를 제공할 것이다.
본 발명에 의해 형성된 안정화된 생균제는 분말, 겔, 현탁, 페이스트, 고체, 액체, 액체 농축물, 또는 바로 사용가능한 생성물을 비롯하여 당업자에게 공지된 임의의 형태로 제공된 영양 조성물과 조합될 수 있다. 한가지 조합물에 있어서, 영양 조성물은 영아용 조제 분유, 특히 영아에 대해서 단독 공급 영양으로서 사용하기 위해 적합화된 영아용 조제 분유이다.
안정화된 생균제와 조합하는 것에 대해 기재된 영양 생성물은 경장적으로 투여될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, "경장적"은 위장 또는 소화관을 통하거나 또는 위장 또는 소화관 내에서를 의미하고, "경장적 투여"는 경구 공급 (feeding), 위내 공급, 유문횡단 투여, 또는 소화관으로의 임의의 다른 도입을 포함한다.
적합한 지방 또는 지질 공급원은 동물 공급원, 예를 들면, 밀크 지방, 버터, 버터 지방, 난황 지질; 해양 공급원, 예컨대 피쉬 오일, 해양 오일, 단일 세포 오일; 야채 및 식물 오일, 예컨대 옥수수 오일, 카놀라 오일, 해바라기 오일, 대두 오일, 팔몰레인 (palmolein), 코코넛 오일, 고 올레산 해바라긴 오일, 달맞이꽃 오일, 유채씨 오일, 올리브유, 아마인 (아마씨) 오일, 목화씨 오일, 고 올레산 잇꽃 오일, 팜 스테아린, 야자 핵 오일, 맥아 오일; 매질 쇄 트리글리세리드 오일 및 에멀젼 및 지방산의 에스테르; 및 그의 임의의 조합물을 포함하지만 이들로 한정되지는 않는 것으로 당업계에서 임의로 공지되거나 또는 사용될 수 있다.
영양 생성물의 소 밀크 단백질은 밀크 단백질 분말, 밀크 단백질 농축물, 밀크 단백질 단리물, 탈지 밀크 고체, 탈지 밀크, 탈지 건조 밀크, 유청 단백질, 유청 단백질 단리물, 유청 단백질 농축물, 감미 유청, 산 유청, 카세인, 산 카세인, 카세인염 (예를 들면 나트륨 카세인염, 나트륨 칼슘 카세인염, 칼슘 카세인염) 및 그의 임의의 조합물을 포함할 수 있지만 이들로 한정되지는 않는다.
안정화된 생균제는 무손상 단백질로서 제공된 그의 단백질을 갖는 영양 생성물과 조합될 수 있다. 다른 실시양태에서, 영양 생성물의 단백질은 약 4% 내지 10%의 가수분해도를 갖는 무손상 단백질 및 부분적으로 가수분해된 단백질 둘 다의 조합물로서 제공된다. 이들의 특정 실시양태는 가수분해된 단백질만을 함유하는 영양 생성물의 단백질 및 안정화제와 같이 극히 저자극성일 수 있다. 또다른 실시양태에서, 영양 생성물은 글루타민-함유 펩티드로 보충될 수 있다.
영양 생성물의 단백질 공급원의 유청:카세인 비율은 인간 모유에서 발견되는 것과 유사할 수 있다. 일 실시양태에서, 영양 생성물의 단백질 공급원은 약 40% 내지 약 80% 유청 단백질을 포함한다. 또다른 실시양태에서, 단백질 공급원은 약 20% 내지 약 60% 카세인을 포함할 수 있다.
안정화된 생균제가 영양 생성물과 조합되는 경우에, 조성물은 하루에 체중 kg 당 약 104 내지 약 1010 콜로니 형성 단위 (cfu)의 생균제의 양을 포함할 수 있다. 다른 실시양태에서, 안정화된 생균제 내에서 생균제의 양은 하루에 체중 kg 당 약 106 내지 약 109 cfu로 다양할 수 있다. 또한 추가의 실시양태에서, 영양 생성물 및 안정화된 생균제의 조성물은 하루에 체중 kg 당 약 106 cfu 이상의 생균제의 양을 포함할 수 있다. 또다른 실시양태에서, 마이크로매트릭스 내의 생균제, 예를 들면 LGG의 농도는 g 당 약 106 내지 약 1014 cfu, 보다 바람직하게는 g 당 약 109 내지 약 1011 cfu이다.
일 실시양태에서, 안정화된 생균제(들)은 살아있는 것이 바람직하지만, 살아있거나 또는 살아있지 않을 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "살아있는"은 살아있는 미생물, 즉 살아있는 미생물 세포를 포함하는 살아있는 미생물을 지칭한다. 용어 "살아있지 않은" 또는 "살아있지 않은 생균제"는 살아있지 않은 생균제 미생물, 그의 세포 성분 및 그의 대사산물을 의미한다. 그러한 살아있지 않은 생균제는 가열 사멸되거나 또는 그렇지 않다면 불활성될 수 있지만 숙주의 건강에 우호적으로 영향을 주는 일부 능력을 보유할 수 있다. 본 발명에 유용한 안정화된 생균제는 그러한 신규 공급원이 현재 공지되어 있든지 또는 나중에 개발되든지 천연적으로 발생하거나, 합성되거나 또는 유기체의 유전적 조작을 통해 개발될 수 있다. 추가로, 영양 생성물은 비-안정화된 생균제를 포함할 수 있어서, 최종 조성물은 일부 안정화된 생균제 및 일부 비-안정화된 생균제를 포함할 수 있다.
안정화된 생균제는 또한 하나 이상의 프리바이오틱을 함유하는 영양 조성물과 조합될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "프리바이오틱"은 숙주에 대해 건강상 이점을 나타내는 난소화성 식품 성분을 지칭한다. 그러한 건강상 이점은 하나 또는 한정된 수의 유익한 장 박테리아의 성장 및/또는 활성의 선택적인 자극, 섭취된 생균제 (안정화되거나 또는 되지않은) 미생물의 성장 및/또는 활성의 자극, 장 병원균에서의 선택적인 감소, 및 장 단쇄 지방산 프로파일에 대한 우호적인 영향을 포함할 수 있지만 이들로 한정되지는 않는다. 그러한 프리바이오틱은 그러한 신규 공급원이 현재 공지되어 있든지 또는 나중에 개발되든지 천연적으로 발생하거나, 합성되거나 또는 유기체 및/또는 식물의 유전적 조작을 통해 개발될 수 있다. 프리바이오틱은 올리고사카라이드, 폴리사카라이드, 및 프럭토스, 크실로스, 소야, 갈락토스, 글루코스 및 만노스를 함유하는 다른 프리바이오틱을 포함할 수 있다. 보다 구체적으로는, 본 발명에 유용한 프리바이오틱은 락툴로스, 락토수크로스, 라피노스, 글루코-올리고사카라이드, 이눌린, 폴리덱스트로스, 폴리덱스트로스 분말, 갈락토-올리고사카라이드, 프럭토-올리고사카라이드, 이소말토-올리고사카라이드, 대두 올리고사카라이드, 락토수크로스, 자일로-올리고사카라이드, 키토-올리고사카라이드, 만노-올리고사카라이드, 아라비노-올리고사카라이드, 시알릴-올리고사카라이드, 푸코-올리고사카라이드, 및 겐티오-올리고사카라이드, 및 그의 조합물을 포함할 수 있다.
안정화된 생균제를 비롯한 영양 생성물의 일부 조성물에서, 영양 조성물에 존재하는 프리바이오틱의 총량은 조성물 (액체 형태)의 약 1.0 g/L 내지 약 10.0 g/L일 수 있다. 언급한 바와 같이, 영양 조성물 존재하는 프리바이오틱의 총량은 조성물의 약 2.0 g/L 내지 약 8.0 g/L일 수 있다. 20% 이상의 프리바이오틱은, 바람직한 실시양태에서 갈락토-올리고사카라이드 (GOS)를 포함해야 한다.
갈락토-올리고사카라이드 이외에도, 프리바이오틱 조성물은 또한 폴리덱스트로스 (PDX)를 포함할 수 있다. 폴리덱스트로스가 프리바이오틱으로서 사용되는 경우, 영양 조성물에서 폴리덱스트로스의 양은 일 실시양태에서, 약 1.0 g/L 내지 약 4.0 g/L의 범위 내에 존재할 수 있다.
영양 조성물에서 갈락토-올리고사카라이드의 양은 약 0.2 mg/100 Kcal 내지 약 1.0 mg/100 Kcal일 수 있다. 다른 조성물에서, 영양 조성물에서 갈락토-올리고사카라이드의 양은 약 0.1 mg/100 Kcal 내지 약 0.5 mg/100 Kcal일 수 있다. 폴리덱스트로스가 프리바이오틱으로서 사용되는 경우, 안정화된 생균제를 비롯한 조성물의 일 실시양태에서 영양 조성물에서 폴리덱스트로스의 양은 약 0.1 mg/100 Kcal 내지 약 0.5 mg/100 Kcal의 범위 내에 존재할 수 있다. 또다른 조성물에서, 폴리덱스트로스의 양은 약 0.3 mg/100 Kcal일 수 있다. 갈락토-올리고사카라이드 및 폴리덱스트로스는 또한 약 0.6 mg/100 Kcal의 총량으로 안정화된 생균제 함유 영양 조성물로 보충될 수 있다.
본 발명의 안정화된 생균제와 조합될 수 있는 영양 제제는 도코사헥산산 (DHA)을 포함하는 장쇄 폴리불포화 지방산 (LCPUFA)의 공급원을 함유할 수 있다. 다른 적합한 LCPUFA는 α-리놀레산, γ-리놀레산, 리놀레산, 리놀렌산, 에이코사펜탄산 (EPA) 및 아라키돈산 (ARA)을 포함하지만 이들로만 한정되지는 않는다.
한 실시양태에서, 최종 조성물은 DHA 및 ARA 둘 다로 보충될 수 있다. 이 실시양태에서, ARA:DHA의 중량 비는 약 1:3 내지 약 9:1일 수 있다. 한 실시양태에서 이 비율은 약 1:2 내지 약 4:1이다.
영양 조성물에서 장쇄 폴리불포화 지방산의 양은 약 5 mg/100 kcal 내지 약 100 mg/100 kcal, 보다 바람직하게는 약 10 mg/100 kcal 내지 약 50 mg/100 kcal로 다양할 수 있다.
영양 조성물은 당업계에 공지된 표준 기술을 사용하여 DHA 및 ARA를 함유하는 오일로 보충될 수 있다. 예를 들면, DHA 및 ARA는 제제에 통상적으로 존재하는 오일, 예컨대 고 올레산 해바라기 오일의 등가량으로 대체되어 제제에 첨가될 수 있다. 또다른 예로서, DHA 및 ARA를 함유하는 오일은 DHA 및 ARA가 없는 제제에 통상적으로 존재하는, 남은 전체의 지방 블렌드의 등가량으로 대체되어 첨가될 수 있다.
사용되는 경우에, DHA 및 ARA의 공급원은 당업계에 공지된 임의의 공급원, 예컨대 해양 오일, 피쉬 오일, 단일 세포 오일, 난황 지질, 및 뇌 지질일 수 있다. 일부 조성물에서, DHA 및 ARA는 단일 세포 마르테크(Martek) 오일, DHASCO(등록상표), 또는 그의 변형물로부터 공급된다. DHA 및 ARA는 천연 형태일 수 있으며, 단, LCPUFA 공급원의 나머지는 영아에 대해서 임의의 실질적인 유해한 효과를 야기하지 않는다. 별법으로, DHA 및 ARA는 정제된 형태로 사용될 수 있다.
안정화된 생균제와 조합된 영양 조성물의 일 실시양태에서, DHA 및 ARA의 공급원은 그의 전분이 본원에 참고로 포함된 미국 특허 제5,374,567호; 제5,550,156호; 및 제5,397,591호에 교시된 바와 같이 단일 세포 오일이다.
특정 실시양태에서, 영양 조성물은 생리화학적 및 생리학상 이점을 제공하는 밀크-기반 영양 조성물일 수 있다. 당업계에 공지된 바와 같이, 소 밀크 단백질은 두가지 주요 성분: 산 가용성 유청 단백질 및 산 불용성 카세인을 포함하고, 후자는 소 밀크의 총 단백질 내용물의 약 80%를 나타낸다. 위의 산성 환경에 들어가면, 카세인은 침전하고 미네랄과 복합체를 이루어 다양한 크기 및 경성의 반-고체 커드를 형성한다. 더 부드럽고, 더 작은 커드는 더 크고, 더 단단한 커드보다 신체에서 소화시키기가 더 쉽다. 커드 형성은 영아용 조제분유, 의학적 식품, 및 미성숙 영아용 조제분유를 포함하지만 이들로 한정되지는 않는 영양 조성물의 개발에서 중요한 고려사항일 수 있다. 이와 같이, 안정화된 생균제는 표준 영아용 조제분유보다 더 부드럽고 더 작은 커드를 포함하는 조성물과 조합될 수 있다.
다른 실시양태에서, 본 발명의 안정화된 생균제는 인간 장에서 특정한 바람직하지 않은 박테리아 병원균에 대해서 그의 안정성 및 활성을 보유하는 소 락토페린을 비롯한 영양 조성물과 조합될 수 있다. 본 발명의 영양 조성물은 또한 TGF-ß를 함유할 수 있다. 영양 조성물에서, TGF-ß의 수준은 약 0.0150 (pg/μg) ppm 내지 약 0.1000 (pg/μg) ppm일 수 있다. 다른 영양 조성물에서, 안정화된 생균제를 비롯한 최종 조성물 중 TGF-ß의 수준은 약 0.0225 (pg/μg) ppm 내지 약 0.0750 (pg/μg) ppm이다.
일부 조성물에서, TGF-ß의 수준은 약 2500 pg/mL 내지 약 10,000 pg/mL, 보다 바람직하게는 약 3000 pg/mL 내지 약 8000 pg/mL이다.
한 실시양태에서, TGF-ß1: TGF-ß2의 비율은 약 1:1 내지 약 1:20의 범위, 또는, 보다 특히 약 1:5 내지 약 1:15의 범위이다.
일부 실시양태에서, 영양 조성물 중 TGF-ß의 생물활성은 생물활성 유청 분획의 첨가에 의해 강화된다. 당업계에 공지된 임의의 생물활성 유청 분획은 이 실시양태에서 사용될 수 있고, 단 이는 의도한 결과를 달성한다. 일 실시양태에서, 이 생물활성 유청 분획은 유청 단백질 농축물일 수 있다. 특정 실시양태에서, 유청 단백질 농축물은 글란비아 뉴트리셔날스 (Glanbia Nutritionals)에서 이용가능한 살리바(Salibra)(등록상표) 800일 수 있다. 특정 실시양태에서, 살리바(등록상표) 800 유청 단백질 농축물은 2.5% 산성화된다. 또다른 실시양태에서, 살리바(등록상표) 800 유청 단백질 농축물은 5% 산성화된다. 또다른 실시양태에서, 살리바(등록상표) 800 유청 단백질 농축물은 2% 산성화된다. 추가의 실시양태에서, 살리바(등록상표) 800 유청 단백질 농축물은 3% 산성화된다.
또다른 실시양태에서, 유청 단백질 농축물은 디엠브이 인터내셔날 (DMV International)에서 이용가능한 뉴트리 웨이 (Nutri Whey) 800일 수 있다. 또다른 실시양태에서, 유청 단백질 농축물은 글란비아 뉴트리셔날스에서 이용가능한 살리바-850일 수 있다. 또한 또다른 실시양태에서, 유청 단백질 농축물은 락틸러스 인더스트리즈 유.에스.에이. 인크. (Lactilus Industries U.S.A., Inc.)에서 이용가능한 프롤락타 락탈리스 (Prolacta Lactalis) WPI90일 수 있다. 추가의 실시양태에서, 유청 단백질 농축물은 엠쥐 뉴트리셔날스 (MG Nutritionals)에 의해 공급될 수 있다.
따라서, 본 발명의 실시에 의해서, 종전에는 인식되지 않는 안정성을 갖는 안정화된 생균제가 제조된다. 안정화된 박테리아 혼합물은 가수분해된 포유동물 단백질, 특히 2,000 달톤 미만의 분자량을 갖는 펩티드의 70%를 초과하는 가수분해된 포유동물 단백질의 사용을 통해서 특별히 높은 안정성을 나타낸다. 안정화된 생균제는 중간체 수분 수준 (예컨대 0.4만큼 높은 수분 활성)을 갖는 영양 적용에 대해서 유일하게 효과적이고, 뜨겁고 습한 환경에서의 증가된 유통 기한 및 안정성이 필요하다. 안정화된 생균제는 개별적으로 포장될 수 있거나, 또는 본원에 기재된 영양 조성물의 임의의 실시양태와 조합될 수 있다.
본 명세서에서 인용된 모든 참고문헌은 모든 논문, 공개문헌, 특허, 특허 출원, 프레젠테이션, 원고, 보고서, 필사본, 브로셔, 책, 인터넷 포스팅, 신문 기사, 정기간행물 등이 제한 없이 포함되어 있고, 그의 전문이 본 명세서에 참고로 포함되어 있다. 본원의 참고문헌의 논의는 단지 그의 저자에 의해 만들어진 주장을 요약하기 위함이고, 임의의 참고문헌이 선행 기술을 구성하는 것으로 도입되는 것은 아니다. 출원인은 인용된 참고문헌의 정확성 및 적절성에 이의를 제기하는 권리를 보유한다.
본 발명의 바람직한 실시양태가 특정 용어, 장치, 및 방법을 사용하여 기재되었을지라도, 상기 기술은 단지 예시의 목적만을 갖고 있다. 사용된 단어는 제한의 용어라기보다는 기술의 용어이다. 변화 및 변형은 하기 청구항에 기재된 본 발명의 취지 또는 범위로부터 출발하지 않고 당업자에 의해 만들어질 수 있다는 것이 이해된다. 또한, 다양한 실시양태의 측면이 전체 또는 일부 둘 다에서 상호교환적일 수 있다는 것이 이해되어져야 한다. 예를 들면, 상기 방법에 따라 제조된 상업적으로 멸균 액체 영양 보충물의 생성을 위한 방법이 예시되는 반면에, 다른 용도가 고려된다. 따라서 첨부된 청구항의 취지 및 범위가 본원에 함유된 바람직한 버젼의 기술을 제한해서는 안된다.
Claims (10)
- 가수분해된 포유동물 단백질, 하나 이상의 카르보히드레이트 및 화합물 결합제의 혼합물 중 함유된 생균제 (probiotic)를 포함하는 섭취가능한 조성물.
- 제1항에 있어서, 생균제가 생존가능한 미생물 세포를 포함하는 것인 조성물.
- 제2항에 있어서, 생존가능한 미생물 세포가 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus)를 포함하는 것인 조성물.
- 제1항에 있어서, 가수분해된 포유동물 단백질이 가수분해된 카세인을 포함하는 것인 조성물.
- 제1항에 있어서, 총 가수분해된 포유동물 단백질의 20% 이상이 2000 달톤 미만의 분자량을 갖는 단백질로 구성되는 것인 조성물.
- 제1항에 있어서, 총 가수분해된 포유동물 단백질의 70% 이상이 2000 달톤 미만의 분자량을 갖는 단백질로 구성되는 것인 조성물.
- 제1항에 있어서, 총 가수분해된 포유동물 단백질의 90% 이상이 2000 달톤 미만의 분자량을 갖는 단백질로 구성되는 것인 조성물.
- 제1항에 있어서, 가수분해된 단백질이 건량 기준으로 혼합물 성분의 약 10 퍼센트 내지 약 20 퍼센트를 차지하는 것인 조성물.
- 가수분해된 포유동물 단백질의 안정화 혼합물을 포함하며, 가수분해된 단백질의 70 퍼센트가 2000 달톤 미만의 분자량을 갖고, 가수분해된 포유동물 단백질이 건량 기준으로 안정화 혼합물 성분의 약 10 퍼센트 내지 약 20 퍼센트를 차지하는 것인 섭취가능한 조성물.
- 지질 또는 지방;
단백질 공급원;
도코사헥산산을 포함하는 장쇄 폴리불포화 지방산의 공급원 약 5 내지 약 100 mg/100 kcal;
20% 이상의 올리고사카라이드를 포함하는 프리바이오틱 조성물 약 0.1 내지 약 1 mg/100 kcal; 및
약 2000 달톤 미만의 분자량을 갖는 가수분해된 포유동물 단백질 70% 이상을 갖는 가수분해된 포유동물 단백질을 포함하는 안정화된 생균제
를 포함하는 영양 조성물.
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