KR20110134907A - 근변성 질환의 검출 방법 및 치료 효과 판정 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 피검체로부터 분리한 검체 중 11,15-디옥소-9α-히드록시-2,3,4,5-테트라놀프로스탄-1,20-이산(이하, 테트라놀-PGDM)을 측정함으로써, 근변성 질환을 빠른 시기에 검출할 수 있고, 및 이들 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 치료 효과를 판정할 수 있는 방법에 관한 것이다.

Description

근변성 질환의 검출 방법 및 치료 효과 판정 방법 {METHOD FOR DETECTING MUSCLE DEGENERATIVE DISEASES, AND METHOD FOR DETERMINING THERAPEUTIC EFFICACY ON THE DISEASES}
본 발명은 근변성 질환의 조기 검출 방법, 및 치료약 및/또는 치료 방법의 예측 및/또는 판정 방법에 관한 것이다.
근장해 또는 근괴사를 수반하는 질환군은 근육병증(myopathy)이라 불린다. 대표적인 질환으로서, 근디스트로피(muscular dystrophy)증, 근위축증이 있다. 근디스트로피는 서서히 근육이 약해져 근육이 위축해 가는 유전성 질환의 총칭이다. 그 중에서도, 진행성 근디스트로피는 가장 환자수가 많고, 유전성이며 진행성 근력 저하를 초래한다. 또한, 근위축증은 운동신경의 장해에 의해서 일어나는 신경원성 질환이다.
근디스트로피 중 가장 환자수가 많은 듀센느형 근디스트로피는, 성염색체 열성 유전으로 남자에게만 발병하는 질환이며, 인구 10만명당 3 내지 5명, 출생 남아 2000 내지 3000명당 1명으로 알려져 있다. 통상 3 내지 5세경, 달릴 수 없거나, 넘어지기 쉽다는 등 보행, 기립에 관한 이상이 발현되고, 10세 전후로 보행 불능이 된다. 그 후, 척주의 변형이나 관절 구축이 급속히 진행되어, 대부분은 호흡부전, 때로는 심부전, 폐렴을 일으킨다.
근디스트로피 진단을 위한 검사로서, 혈액 검사, 신경전도 검사, 근전도, 근생검, DNA 해석 등이 있다. 신경전도 검사는 운동장해, 지각장해의 원인이 말초신경 장해에 의한 것인지, 또한 그 장해 부위나 장해 정도 등을 조사하는 검사이며, 신경을 전기 자극하여 자극이 전해지는 속도를 계측한다. 검사의 성질상, 특수한 장치를 필요로 하며, 신경을 직접 전기 자극하기 때문에, 따끔거림, 아픔, 위화감을 기억하여, 다소의 고통을 수반한다.
근전도 검사는 운동장해가 근육 유래인지 신경 유래인지, 또한 그 장해 부위나 정도를 조사하는 검사로, 특수한 장치를 필요로 하며, 근육에 바늘을 찌르는 것에 의한 아픔을 수반한다. 아픔을 수반하지 않는 체표면 근전도 검사도 있지만, 측정을 위해 검사 시설에서의 구속이 불가피하다.
근생검에서는 근육조직을 채취할 필요가 있기 때문에, 침습적이고 간편한 검사라 하기 어렵다. 또한, DNA 해석은 디스트로핀 유전자의 변이가 원인인 듀센느형 또는 베커형 근디스트로피의 진단에는 필수적이지만, 근변성 질환으로의 적용은 없어, 범용성이 부족하다.
혈액 검사로는 크레아틴 키나아제가 일반적이다. 크레아틴 키나아제는 골격근, 심근의 가용성 분획에 주로 존재하는 효소이며, 세포의 손상에 의해서 혈액 내에 누출된다. 근디스트로피에서는 골격근이 장해 및 괴사함으로써, 혈액 내 크레아틴 키나아제가 현저한 높은 값을 나타낸다는 점으로 진단되지만, 혈액 내 크레아틴 키나아제값은 다른 질환에서도 높은 값을 나타내는 경우가 있기 때문에, 이 농도만으로 감별 진단은 어렵고, 그 밖의 검사도 동시에 행한다.
그 밖의 진행성 근디스트로피증, 신경 이상이 원인으로 근육이 장해 또는 괴사하는 질환에 있어서도, 혈액 검사로서 혈액 내 크레아틴 키나아제의 측정이 행해지지만, 마찬가지로 근장해 또는 근괴사만으로 높은 값을 나타낸다고는 할 수 없기 때문에, 그 밖의 근장해 또는 근괴사의 마커가 필요하다.
따라서, 근디스트로피 등의 근변성 질환을 조기, 또한 간편히 진단할 수 있는 방법, 또는 진단 키트가 요망되고 있다.
11,15-디옥소-9α-히드록시-2,3,4,5-테트라놀프로스탄-1,20-이산(11,15-Dioxo-9α-hydroxy-2,3,4,5-tetranorprostan-1,20-dioic acid)(이하, 테트라놀-PGDM)은, 프로스타글란딘 D2(이하, PGD2)의 대사물로서 알려져 있고, 인간이나 마우스에 있어서의 염증 반응에 따라 뇨 중 배설량이 증가하는 것, 추가로 PGD2의 생성을 반영하는 마커인 것이 보고되어 있다(비특허문헌 1).
한편, 근디스트로피 등의 근변성 질환의 변성 부위에서는 PGD2의 생산을 촉매하는 조혈기형 프로스타글란딘 D 합성 효소(이하, HPGDS)의 발현이 항진하고, 질환의 진행 방지 및 개선에는, PGD2가 관여하는 것이 보고되어 있다(특허문헌 1, 비특허문헌 2).
그러나, 테트라놀-PGDM이 근변성 질환의 환자의 뇨 중 배설물로서 고농도로 검출되고, 그의 테트라놀-PGDM 농도가 HPGDS 저해제의 투여에 의해 유의하게 감소하는 것은 전혀 알려져 있지 않다.
일본 특허 공개 제2005-119984호 공보
J. Biol. Chem, Vol. 283, No.2, 1179-1188(2008) Acta Neuropathol, 104, 377-384(2002)
본 발명의 목적은, 뇨 중 테트라놀-PGDM을 측정함으로써, 근변성 질환을 효율적으로 진단하는 방법, 또한 이들 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 치료 효과를 판정하는 방법을 제공하는 것이다.
또한 본 발명의 목적은 테트라놀-PGDM을 대상으로 하는 것을 특징으로 하는, 근변성 질환의 진단용 키트를 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해서 본 발명자는 예의 연구를 행하고, 다음과 같은 지견을 얻은 것에 기초하여 본 발명을 완성하였다.
1) 정상 동물에 비하여, 뇨 중 PGD2 대사물인 테트라놀-PGDM이 근디스트로피 모델 동물에서 증가하고 있었다.
2) 근디스트로피 모델 동물에게 공지된 PGD2 합성 효소 저해제를 투여함으로써, 테트라놀-PGDM의 뇨 중 배설량이 감소하였다.
본 발명은 이하의 근변성 질환의 검출 방법, 근변성 질환의 진단 측정용 키트 및 근변성 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 효과 예측 및/또는 판정용 키트를 제공하는 것이다.
항1. 피검체로부터 분리한 검체 중 테트라놀-PGDM 함량을 측정하는 공정을 포함하는 근변성 질환의 검출 방법.
항2. 근변성 질환의 환자로부터 분리한 검체 중 테트라놀-PGDM 함량을 측정하는 공정을 포함하는 근변성 질환에 대한 치료약 및/또는 치료 방법의 효과 판정 방법.
항3. 상기 항1 또는 2에 있어서, 상기 검체가 뇨인 방법.
항4. 항1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 테트라놀-PGDM의 측정이, 고속 액체 크로마토그래피-탠덤 매스 스펙트럼 측정법(HPLC-MS/MS), 효소 면역 측정법(EIA), 방사성 면역 측정법(RIA), 형광 면역 측정법(FIA), ELISA법 또는 효소법에 의해 행해지는 방법.
항5. 항1 또는 항2에 있어서, 근변성 질환이 진행성 근디스트로피증, 선천성 근디스트로피증, 지대형(limb-girdle) 근디스트로피증, 안면견갑상완형 근디스트로피증, 근강직성 근디스트로피증, 근위축성 측색경화증 또는 근육병증인 방법.
항6. 테트라놀-PGDM에 대한 항체를 포함하는 것을 특징으로 하는 근변성 질환의 진단 측정용 키트.
항7. 테트라놀-PGDM에 대한 항체를 포함하는 것을 특징으로 하는 근변성 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 효과 예측 및/또는 판정용 키트.
항8. 항6 또는 항7에 있어서, 테트라놀-PGDM에 대한 항체, 표지된 테트라놀-PGDM, 필요에 따라 추가로 항면역 글로불린 항체, 검체 희석액, 항체 내지 표지 테트라놀-PGDM의 희석액, 기지 농도의 표준 테트라놀-PGDM, EIA용 기질, EIA용 정지액으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 1종을 포함하는 키트.
본 발명에 의해, 피검체로부터 분리한 검체 중 테트라놀-PGDM을 측정함으로써, 간편하고 빠른 시기에 근변성 질환을 진단할 수 있고, 나아가 이들 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 치료 효과를 효과적으로 판정할 수 있다.
또한 본 발명에 의해, 근변성 질환에 있어서, 뇨 중에 증가하는 테트라놀-PGDM을 마커로서 이용함으로써, 이들 질환을 간편히 진단할 수 있는 진단용 키트로서 이용할 수 있다.
[도 1] Mdx 마우스에서의 HPGDS 저해제 투여 후의 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도 및 앞다리 악력의 변화를 도시한 도면이다.
[도 2] 좌측도는 HPGDS 저해제를 약 1년간에 걸쳐 투여한 후에, 용매 투여로 전환했을 때의 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도의 변화를 나타낸 도면이고, 우측도는 용매를 약 1년간에 걸쳐 투여한 후에, 저해제 투여로 전환했을 때의 근디스트로피견(CXMDJ)의 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도의 변화를 나타낸 도면이다.
본 발명에서는, 테트라놀-PGDM을 지표로서, 근변성 질환의 진단이 가능하고, 이들 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 치료 효과를 효과적으로 판정할 수 있다. 또한 테트라놀-PGDM을 마커로서 이용함으로써 이들 질환의 진단용 키트, 또한 근변성 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 효과 예측 및/또는 판정용 키트를 제공할 수 있다.
본 발명 중 하나의 실시 형태에 따르면, 근변성 질환에 걸리거나 또는 걸릴 가능성이 있는 피검체로부터 분리한 검체 중 테트라놀-PGDM을 측정함으로써, 근장해 또는 근괴사를 수반하는 질환을 검출 내지 진단할 수 있다. 구체적으로는, 검체 중 테트라놀-PGDM의 농도 또는 함량이 소정값보다도 높은 경우에 근변성 질환이라 진단할 수 있다. 피검체로부터 분리한 검체 중 테트라놀-PGDM의 소정값은, 건강한 정상인의 검체와 근변성 질환 환자의 검체의 테트라놀-PGDM을 측정함으로써 결정할 수 있다.
또한, 치료약 및/또는 치료 방법의 효과 판정 방법은, 근변성 질환의 환자의 치료 개시 전/치료약 투여 개시 전의 검체 중 테트라놀-PGDM과, 치료 개시 후/치료약 투여 개시 후의 테트라놀-PGDM의 측정값을 비교하여, 치료 개시 후/치료약 투여 개시 후인 것이 검체 중 테트라놀-PGDM의 측정값이 유의하거나 또는 유의 경향으로 저하되어 있는 경우, 치료 내지 치료약 투여가 유효하다고 판정하고, 검체 중 테트라놀-PGDM의 측정값이 치료 개시/치료약 투여 개시의 전후로 유의차가 없고, 유의 경향도 없는 경우에는, 해당 치료약/치료 방법은 유효하지 않다고 판정된다.
본 발명의 별도의 양태에 따르면, 검체 중 테트라놀-PGDM을 검출할 수 있는 항체를 이용한 진단용 키트를 제공할 수 있다.
본 발명에서의 피검체란, 포유동물, 예를 들면 인간, 원숭이, 소, 말, 래트, 마우스, 몰모트, 토끼, 개, 고양이, 양, 염소 등을 들 수 있고, 바람직하게는 인간이다.
본 발명의 방법에 의해 측정되는 테트라놀-PGDM은, PGD2의 뇨 중 대사물로서 발견된다. 또한, 테트라놀-PGDM은 혈액 내 및 분변 중에도 발견된다. 본 발명에서의 피검체로부터 분리한 검체란, 바람직하게는 뇨, 분변, 혈액, 혈장, 혈청이고, 보다 바람직하게는 뇨이다.
본 발명에서의 측정이라는 단어는, 검출, 정량 및 반정량을 모두 포함한다. 따라서, "테트라놀-PGDM을 측정한다"란, 검체 중 테트라놀-PGDM을 검출하는 것, 및 그의 발현량을 측정하는 것이 모두 포함되며, 발현량이 소정값 이상인지 아닌지를 판별하는 경우, 바꾸어 말하면, 발현량이 소정값 이상인 경우에 그의 발현을 검출하는 경우도 포함된다.
테트라놀-PGDM을 측정하는 방법으로는, GC-MS, HPLC, 고속 액체 크로마토그래피-탠덤 매스 스펙트럼 측정법(HPLC-MS/MS), 효소 면역 측정법(EIA), 방사성 면역 측정법(RIA), 형광 면역 측정법(FIA), ELISA법, 효소법 등이 예시되고, 고속 액체 크로마토그래피-탠덤 매스 스펙트럼 측정법(HPLC-MS/MS), 또는 조작의 간편성으로부터 항 테트라놀-PGDM 항체를 이용한 면역 측정법, 특히 효소 면역 측정법(EIA), 방사성 면역 측정법(RIA), 형광 면역 측정법(FIA), ELISA법이 바람직하고, 특히 효소 면역 측정법(EIA) 또는 ELISA법이 바람직하다.
근변성 질환으로는 진행성 근디스트로피증, 선천성 근디스트로피증, 지대형 근디스트로피증, 안면견갑상완형 근디스트로피증, 근강직성 근디스트로피증, 근위축성 측색경화증, 근육병증, 근육 파열, 심근육병증(Cardiomyopathy)(심근경색), 당뇨병성 말초혈관 장해(혈관 평활근 장해) 등이 예시되고, 바람직하게는 진행성 근디스트로피증, 선천성 근디스트로피증, 지대형 근디스트로피증, 안면견갑상완형 근디스트로피증, 근강직성 근디스트로피증 등의 근디스트로피증 및 근위축성 측색경화증이다.
근변성 질환의 치료 효과를 판정할 수 있는 치료약으로는 특별히 한정되지 않으며, 모든 치료약을 대상으로 할 수 있고, 예를 들면 조혈기형 프로스타글란딘 D 합성 효소(HPGDS) 저해제, 프로스타글란딘 D 수용체 길항제 등이 예시되고, 바람직하게는 조혈기형 프로스타글란딘 D 합성 효소(HPGDS) 저해제이다.
테트라놀-PGDM의 검체 중 농도 측정은, 다량의 검체를 동시에 간편히 측정할 수 있기 때문에, 면역 측정법으로 실시하는 것이 바람직하다.
면역 측정법 내지 키트에 사용할 수 있는 항 테트라놀-PGDM 항체로는, 예를 들면 항체에 대해서는 폴리클로날 항체 또는 모노클로날 항체 등을 들 수 있다.
항체의 제조에 있어서는, 테트라놀-PGDM을 동물(래트, 마우스, 몰모트, 토끼, 개, 고양이, 양, 염소 등)에 투여하여 면역 부여하고, 폴리클로날 항체 또는 모노클로날 항체를 제작할 수도 있으며, 테트라놀-PGDM을 적당한 단백질, 예를 들면 소혈청 알부민(BSA), 글로불린, 티로글로불린, 헤모시아닌 등과 결합시킨 후, 적당한 아쥬반트와 현탁 혼합하여 동물(래트, 마우스, 몰모트, 토끼, 개, 고양이, 양, 염소 등)에 투여 간격을 두고 투여하여, 소정 기간 경과 후 동물의 혈청을 채취하고, 공지된 방법으로 처리를 함으로써, 폴리클로날 항체 또는 모노클로날 항체를 취득할 수 있다.
모노클로날 항체는, 구체적으로는 폴리클로날 항체의 제작시에 이용한 테트라놀-PGDM을, 필요에 따라 적당한 단백질과 결합시켜 면역원으로서 이용하여 동물을 면역하고, 비장으로부터 얻어지는 모노클로날 항체 생산세포와 미엘로마세포를 세포 융합함으로써 제조되는 하이브리도마에 의해 생산할 수 있다.
하이브리도마는, 다음 방법으로 얻을 수 있다. 상술한 바와 같이 하여 얻은 테트라놀-PGDM 단독 또는 그의 단백질 결합체를 프로인트의 완전 아쥬반트와 함께, 수회로 나눠 마우스, 래트, 토끼 등의 적당한 포유동물에게 2 내지 3주간 간격으로 복강내 또는 정맥내 또는 피하 투여함으로써 면역한다. 이어서, 비장 등에서 유래되는 항체 생산세포와, 미엘로마세포 등의 시험관 내에서 증식 가능한 종양세포를 융합시킨다. 융합 방법으로는, 쾰러와 밀슈타인의 통상법(Nature, vol. 256, 495(1975))에 따라서 폴리에틸렌글리콜에 의해서 행할 수 있고, 또는 센다이 바이러스 등에 의해서 행할 수도 있다.
상기 방법에 의해 얻어지는 항 테트라놀-PGDM 항체를 이용하여, 테트라놀-PGDM의 면역 측정법을 실시한다. 이 면역 측정법으로는, 측정 대상 물질의 테트라놀-PGDM에 대한 주지된 경합법에 의한 면역 측정법으로 행하는 것이 바람직하고, 표지 물질로 분류한 효소 면역 측정법(EIA), 형광 면역 측정법, 발광 면역 측정법, 방사 면역 측정법(RIA) 등을 들 수 있다. EIA법이 특히 바람직하다.
통상, 경합법에는 표지된 항원이 이용된다. 표지 물질로는, 예를 들면 효소, 형광 물질, 발광 물질, 방사성 동위원소 등이다. 표지 물질과 항원과의 결합 방법은, 공지된 공유결합 또는 비공유결합을 만드는 방법을 이용하여 제조할 수 있다. 결합의 방법에는, 예를 들면 축합제를 이용하여 공유결합을 제조하는 방법, 각종 가교제를 이용하는 방법 등을 들 수 있다(예를 들면 "단백질 핵산 효소" 별책31호, 37 내지 45페이지(1985) 참조). 공유결합에 의한 방법으로는, 항원에 존재하는 관능기를 사용할 수 있을 뿐 아니라, 예를 들면 티올기, 아미노기, 카르복실기, 수산기 등의 관능기를 통상법에 의해 도입한 후, 결합법에 의해 표지 항원을 제조할 수 있다. 또한 비공유결합에 의한 방법으로는 물리흡착법 등을 들 수 있다.
테트라놀-PGDM의 측정은, 예를 들면 이하에 기재된 면역 측정법으로 실시하는 것이 바람직하다. 소정량의 표지된 테트라놀-PGDM, 항 테트라놀-PGDM항체, 테트라놀-PGDM을 함유하는 검체(특히 뇨검체)를 경합적으로 반응시키고, 항체와 결합하거나 또는 결합하지 않은 표지된 항원의 양으로부터 검체 중 테트라놀-PGDM을 정량한다.
항체와 결합한 표지된 항원을 결합하지 않은 표지된 항원과의 분리는, 추가로 항면역 글로불린 항체를 가하여, (표지 항원)-(항 테트라놀-PGDM 항체)-(항면역 글로불린 항체) 복합체를 침전시켜 분리하여, 복합체에 결합되어 있는 표지 물질 또는 결합하지 않은 표지 물질을 측정함으로써 실시할 수 있다. 이 방법은 이항체법이라 불리며, 차콜 필터를 이용한 방법 등에 의해서도 실시할 수도 있다. 항면역 글로불린 항체는, 고상에 결합시킨 항면역 글로불린 항체, 고상에 결합한 표지 물질 또는 결합하지 않은 표지 물질을 측정함으로써도 실시된다. 항면역 글로불린 항체는, 주지된 방법, 예를 들면 물리흡착법, 가교제 또는 공유결합을 이용한 화학 결합법, 아비딘-비오틴 결합을 이용한 결합법 등에 의해 고상에 결합시킬 수 있다. 표지 물질의 측정에 있어서는 표지 물질에 대응하여 선택하는 것은 물론이다.
본 발명의 키트에는, 항 테트라놀-PGDM 항체가 포함되며, 더욱 바람직한 실시 형태에서는, 표지된 테트라놀-PGDM, 항 테트라놀-PGDM 항체가 포함된다. 키트에는, 필요에 따라 예를 들면 항 테트라놀-PGDM 항체와 결합하는 항면역 글로불린 항체, 검체 희석액, 항체 내지 표지 테트라놀-PGDM의 희석액, 기지 농도의 표준 테트라놀-PGDM 등, EIA용 키트로는 기질, 정지액 등을 가할 수 있다.
본 발명에 사용하는 테트라놀-PGDM의 측정을 실시하는 검체로는, 특히 인간으로부터 채취되는 뇨를 들 수 있다.
근변성 질환 환자의 효과 판정 방법으로는, 치료약의 투여 전후의 검체(특히 뇨) 중에서의 테트라놀-PGDM의 측정값을 비교한다.
검체는, 하루분을 축뇨(蓄尿)한 검체를 이용할 수도 있고, 채취한 검체를 그대로 이용하여 측정을 행할 수도 있다. 채취한 뇨는 실온에서 보존할 수도 있지만, 측정에 이용할 때까지 저온에서 보존하는 것이 바람직하다.
검체에 포함되는 테트라놀-PGDM의 측정은, 채취되는 검체 전량을 기준으로서 실시할 수도 있고, 채취되는 검체의 일부에 대해서, 크레아티닌 등의 기준 물질에 의한 보정을 고려하여 실시할 수도 있다.
조작의 간편성으로부터, 검체에 포함되는 테트라놀-PGDM의 측정은, 채취되는 검체의 일부에 대해서, 크레아티닌에 의한 보정을 고려하여 실시하는 것이 바람직하다.
이어서 본 발명에 사용하는 소정값에 대해서 설명한다.
근변성 질환 환자의 치료 효과 판정의 소정값에 대해서는, 건강한 정상인과 환자의 검체 중 테트라놀-PGDM을 측정하고, 각각의 측정값에 의해, 통상법에 따라서 치료 효과의 유무를 판정하는 기준이 되는 "소정값"을 결정할 수 있다.
소정값을 구할 때는, 예를 들면 검체가 뇨인 경우, 건강한 정상인과 근변성 질환 환자의 1일 축뇨 또는 정해진 시각에 채취된 뇨를 사용하는 것이 바람직하다.
테트라놀-PGDM의 측정에 의한 치료 효과의 판정 방법은, 치료약 투여를 수반하는 치료 관리하에서, 치료약 투여 전의 환자의 뇨 중에 포함되는 테트라놀-PGDM 농도의 값을 소정값으로 하고, 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도의 값이 이 소정값보다도 유의하거나 또는 유의 경향으로 저하되는 경우에는 치료약 내지 치료 방법이 유효하다고 판정되어 그의 치료법 내지 치료약 투여를 계속한다. 또한, 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도의 값이 유의하거나 또는 유의 경향으로 저하되지 않은 경우에는 치료 방법 내지 치료약은 유효하지 않다고 판단되어, 다른 치료약 내지 치료 방법을 시도하게 된다.
[실시예]
이하, 본 발명을 실시예를 이용하여 보다 상세히 설명하는데, 본 발명이 이들 실시예로 한정되지 않는다.
실시예 1
1. 재료 및 방법
(1) 재료 및 검체
근디스트로피 모델 동물로서, 이하의 동물을 사용하였다.
근디스트로피 마우스: mdx(C57Bl/10 ScSn, 입수처: JAX 래브러토리)
근디스트로피 견: CXMDJ(CXMDJ, 입수처: 국립 정신·신경 센터)
또한, 비교 대조 동물로서 동일한 계통의 동물을 사용하였다.
야생형(Wild-type) 마우스(C57BL/10 ScSn, 입수처: JAX 래브러토리)
정상 비글견(입수처: 국립 정신·신경 센터)
(2) 피검 화합물
피검 화합물로서, 공지된 조혈기형 프로스타글란딘 D 합성 효소(HPGDS) 저해제로서 입수 가능한, 피검 화합물 1; 4-벤즈히드릴옥시-1-{3-(1H-테트라졸-5-일)-프로필}피페리딘(Jpn. J. Pharmacol., 78, 1-10(1998)), 피검 화합물 2; N-메톡시-N-메틸-4-(5-벤조일벤조이미다졸-2-일-3,5-디메틸피롤-2-카르복사미드(국제 공개 WO 2007007778호 공보)를 이용하였다.
(3) 마우스 뇨 채취
4주령의 mdx 마우스를 이용하여, 용매(0.5 ％ 메틸셀룰로오스 용액) 또는 피검 화합물 1을 30 mg/kg의 용량으로 5일간 경구투여하였다. 피검 화합물 1의 투여 개시 전 및 투여 5일 후의 뇨는, 마우스용 대사 케이지를 이용하여 약 12시간 동안 채취하였다. 또한, 비교대조로서 동일한 주령의 동일한 계통 야생형 마우스로부터 뇨를 채취하였다. 뇨 중 크레아티닌 농도는 측정 키트(L타입 와코 CRE·M, 와코 쥰야꾸)를 이용하여 행하였다.
(4) 견 뇨 채취
CXMDJ에 용매(0.5 ％ 메틸셀룰로오스 용액) 또는 피검 화합물 2를 약 1년간 경구투여한 후, 용매 투여견에게는 피검 화합물 2를, 또한 피검 화합물 2 투여견에게는 용매 투여를 개시하였다. 용매 투여로부터 피검 화합물 2 투여로의 전환 전에, 피검 화합물 2 투여로부터 용매 투여로의 전환 전에 각각 뇨를 채취하였다. 또한, 투여액을 전환 후에는 경시적으로 뇨를 채취하였다. 또한, 비교대조로서 정상 비글견으로부터 뇨를 채취하였다.
(5) 뇨의 전처리
채취한 마우스 또는 견의 뇨 200 ㎕에, 내부 표준으로서 테트라놀-PGDM의 중수소 표지체인 테트라놀-PGDM-d6(카이맨 케미컬(Cayman Chemical)사) 5 ng을 혼합하였다. 정제수로 용량을 2 ㎖로 하고, pH를 3으로 조정하였다. 미리 아세토니트릴 5 ㎖ 및 정제수 5 ㎖로 평형화한 Sep-Pak Vac C18 카트리지(워터스(Waters))에 뇨를 주입하였다. 정제수로 제조한 10 ％ 아세토니트릴 용액 5 ㎖ 및 헥산 10 ㎖로 세정한 후, 아세트산에틸 5 ㎖로 용출시키고, 질소 기류하에서 건고하였다. 잔사를 정제수로 제조한 10 ％ 아세토니트릴 용액 100 ㎕로 용해시키고, 측정 샘플로 하였다.
(6) 테트라놀-PGDM의 측정
전처리 후의 뇨 샘플을 이용하여, 테트라놀-PGDM 양을 측정하였다. 측정에는 고속 액체 크로마토그래피-탠덤 매스 스펙트럼 측정(HPLC-MS/MS) 장치를 사용하였다. HPLC 장치로서, 프로미넌스 시스템(Prominence system)(시스템 컨트롤러 CBM-20A, 송액 유닛 LC-20AD 2대, 온라인 탈기 장치 DGU-20A3, 칼럼 오븐 CTO-20A, 냉각 기능이 장착된 오토 샘플러 SIL-20AC, 시마즈 세이사꾸쇼 제조), 가드 칼럼으로서 이너트실(Inertsil)ODS3, 내경 2.1 mm×길이 50 mm(GL 사이언스사 제조)를, 분리 칼럼에는 이너트실ODS3, 내경 2.1 mm×길이 250 mm(GL 사이언스사 제조)를 사용하고, 이동상은 0.01 ％ 내지 0.2 ％ 포름산 또는 0.01 ％ 내지 0.2 ％ 아세트산과, 아세토니트릴 또는 아세토니트릴/메탄올(90:10)의 농도 구배에서 유속은 0.2 ㎖/분으로 하였다. 칼럼 오븐은 37 ℃, 오토 샘플러는 4 ℃로 설정하였다. MS/MS부는 일렉트로 스프레이 이온화를 이온원으로 하는 3연4중 극형 질량 분석 장치(4000 Q TRAP LC/MS/MS 시스템, 어플라이드 바이오 시스템사 제조)를 이용하였다. 정량법으로는 MRM(Multiple Reaction Monitoring)법을 이용하였다. 본 법은 친이온(프리커서 이온)과 CID(충돌 유기 해리)에 의해 생긴 프래그먼트 이온의 질량으로부터, 정확한 친이온만을 특이적으로 선택하고, 그의 면적으로부터 친이온을 정확하게 정량하는 방법이며, 즉 일렉트로 스프레이 이온화법에 의해 목적 분자의 친이온을 생성하여, 1번째의 질량 분석기(Q1)로 해당 친이온을 분리하고, 충돌부(Q2)에서는 CID(충돌 유기 해리)에 의해 해당 친이온에 특징적인 프래그먼트 이온을 생성하고, 추가로 2번째의 질량 분석기(Q3)에서는 해당 프래그먼트 이온을 분리하고, 그의 하류의 검출부에서 해당 프래그먼트 이온을 검출한다. 테트라놀-PGDM(질량수 328)의 검출은 생성된 m/z(질량수÷전하) 327의 이온을 추가로 CID(충돌 유기 해리)에 의해서 분해하고, 생성되는 프로덕트 이온 m/z155, 143, 109 중 어느 하나를 이용하여 행하였다. 내부 표준 테트라놀-PGDM-d6(질량수 334)의 검출은 생성된 m/z(질량수÷전하) 333의 이온을 추가로 CID(충돌 유기 해리)에 의해서 분해하고, 생성되는 프로덕트 이온 m/z161, 149, 109 중 어느 하나를 이용하여 행하였다. 데이터 해석은 MS/MS에 부속하는 소프트웨어 애널리스트 버전(Analyst Version) 1.4.1을 이용하여 행하였다. 제조된 매스 크로마토그램으로부터, 테트라놀-PGDM 유래의 피크에 대해서 면적 계산을 행하고, 표준 시료를 이용하여 제조한 검량선으로부터 각 피크의 정량을 행하였다. 정량시에는, 분석마다 추출 효율 및 이온화 효율을 보정하기 위해서 내부 표준으로서 도입한 테트라놀-PGDM-d6 유래 피크의 면적값을 이용하여 보정을 행하였다.
(7) 증상 평가
mdx 마우스에서의 증상 평가로서, 마우스용 악력 측정 장치(트랙션미터, 브레인 사이언스 이데아 제조)를 이용하여 앞다리의 악력을 측정하였다. 1회의 측정을 2분 이내에 행하고, 5회의 시행에 있어서의 평균값을 산출하였다.
2. 결과
(1) mdx 마우스에서 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도는 높은 값을 나타냄
뇨 중 크레아티닌 농도로 보정한 테트라놀-PGDM 농도는 야생형 마우스에 있어서 6.8±1.0 ng/mg Cre(평균값±표준오차)였지만, mdx 마우스에서는 17.8±0.8 ng/mg Cre(평균값±표준오차, p<0.0003)로, 약 3배의 높은 값을 나타내었다. 이 결과는, 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도가 근디스트로피 증상 발현에 따른 뇨 중 마커가 되는 것을 나타내고 있다.
(2) HPGDS 저해제는 mdx 마우스의 증상을 개선하고, 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도를 감소시킴
이어서, mdx 마우스의 증상에 대한 HPGDS 저해제의 작용을 평가하였다. 용매 투여군으로는 앞다리 악력의 유의한 변화는 없지만, 피검 화합물 1을 반복 경구투여함으로써 mdx 마우스의 앞다리 악력은 유의하게 증가하였다(도 1 우측). 동일한 mdx 마우스에서의 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도를 측정한 결과, 피검 화합물 1 투여군에서는 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도가 유의하게 저하되었다(도 1 좌측). 이 결과는 mdx 마우스에서의 증상 개선과 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도의 변동이 상관하는 것을 나타내고 있다.
(3) CXMDJ에서 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도는 높은 값을 나타냄
정상견에 비하여, 근디스트로피 모델견인 CXMDJ에서는 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도는 높은 값을 나타내고, 피검 화합물 2를 투여한 CXMDJ에서는 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도가 감소하였다(표 1). 이 결과는, 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도가 근디스트로피 증상 발현에 따른 뇨 중 마커가 되는 것을 나타내고 있다.
Figure pct00001
(4) HPGDS 저해제 투여에 의해 CXMDJ에서의 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도는 저하됨
약 1년간에 걸쳐 피검 화합물 2를 경구투여한 후에, 용매 투여로 전환한 CXMDJ에서는 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도가 증가하고(도 2 좌측), 증상 스코어가 증악하고 있었다. 한편, 약 1년간에 걸쳐 용매를 경구투여한 후에, 저해제 투여로 전환한 CXMDJ에서는 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도가 저하되고(도 2 우측), 증상 스코어가 경감되어 있었다. 이 결과는, 뇨 중 테트라놀-PGDM 농도의 변동이 근디스트로피 치료약 투여에 의한 효과 판정 마커, 또는 예측 마커가 될 수 있다는 것을 나타내고 있다.

Claims (8)

  1. 피검체로부터 분리한 검체 중 테트라놀-PGDM 함량을 측정하는 공정을 포함하는 근변성 질환의 검출 방법.
  2. 근변성 질환의 환자로부터 분리한 검체 중 테트라놀-PGDM 함량을 측정하는 공정을 포함하는 근변성 질환에 대한 치료약 및/또는 치료 방법의 효과 판정 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 검체가 뇨인 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 테트라놀-PGDM의 측정이 고속 액체 크로마토그래피-탠덤 매스 스펙트럼 측정법(HPLC-MS/MS), 효소 면역 측정법(EIA), 방사성 면역 측정법(RIA), 형광 면역 측정법(FIA), ELISA법 또는 효소법에 의해 행해지는 방법.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 근변성 질환이 진행성 근디스트로피증, 선천성 근디스트로피증, 지대형 근디스트로피증, 안면견갑상완형 근디스트로피증, 근강직성 근디스트로피증, 근위축성 측색경화증 또는 근육병증인 방법.
  6. 테트라놀-PGDM에 대한 항체를 포함하는 것을 특징으로 하는 근변성 질환의 진단 측정용 키트.
  7. 테트라놀-PGDM에 대한 항체를 포함하는 것을 특징으로 하는 근변성 질환의 치료약 및/또는 치료 방법의 효과 예측 및/또는 판정용 키트.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 테트라놀-PGDM에 대한 항체, 표지된 테트라놀-PGDM, 필요에 따라 추가로 항면역 글로불린 항체, 검체 희석액, 항체 내지 표지 테트라놀-PGDM의 희석액, 기지 농도의 표준 테트라놀-PGDM, EIA용 기질, EIA용 정지액으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 1종을 포함하는 키트.
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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5069804B2 (ja) * 2010-03-01 2012-11-07 隆雄 篠澤 筋萎縮性側索硬化症（ａｌｓ）の患者の進行度を判定し進行のモニターを行う方法
FR2996004B1 (fr) 2012-09-26 2017-11-03 Genethon Procede pour le diagnostic de dystrophies musculaires
EP3179250B1 (en) * 2014-08-06 2020-02-12 The University of Tokyo Method and kit for testing for food allergy
WO2020024239A1 (zh) * 2018-08-03 2020-02-06 暨南大学 一种逆转肿瘤多药耐药性药物的药效评价方法
CN110221011A (zh) * 2019-05-22 2019-09-10 南京鼓楼医院 系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法
JPWO2022177003A1 (ko) * 2021-02-22 2022-08-25
RU2755768C1 (ru) * 2021-03-09 2021-09-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Способ прогнозирования развития FUS-ассоциированных нейродегенеративных нарушений у мышей
WO2024135797A1 (ja) * 2022-12-22 2024-06-27 武田薬品工業株式会社 ジストロフィンの測定方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2173144C2 (ru) * 1998-11-03 2001-09-10 Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования Способ лечения миодистрофии дюшенна/беккера
JP4550394B2 (ja) 2003-10-14 2010-09-22 財団法人大阪バイオサイエンス研究所 筋変性疾患の治療用医薬組成物およびそのスクリーニング方法
TW200720255A (en) 2005-07-13 2007-06-01 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Benzoimidazole compound capable of inhibiting prostaglandin d synthetase
CN101223160A (zh) * 2005-07-13 2008-07-16 大鹏药品工业株式会社 抑制前列腺素d合成酶的苯并咪唑化合物
TWI410410B (zh) * 2007-08-10 2013-10-01 Ono Pharmaceutical Co Phenylacetic acid compounds
US8785682B2 (en) * 2007-09-27 2014-07-22 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Tetranor PGDM: a biomarker of PGD2 synthesis in vivo
JP2010002416A (ja) * 2008-05-22 2010-01-07 Ono Pharmaceut Co Ltd プロスタグランジンｄ２関連疾患治療のためのバイオマーカー及びその測定方法
EP3179250B1 (en) * 2014-08-06 2020-02-12 The University of Tokyo Method and kit for testing for food allergy

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WO2010104025A1 (ja) 2010-09-16

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