KR20100099703A

KR20100099703A - Ｎ-(ｔｅｒｔ-부톡시카르보닐)-3-메틸-ｌ-발릴-(4ｒ)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-ｎ-((1ｒ,2ｓ)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-ｌ-프롤린아미드의 결정질 형태

Info

Publication number: KR20100099703A
Application number: KR1020107013461A
Authority: KR
Inventors: 로버트 케빈 페론; 천츠 왕; 윌리엄 잉; 앤 아이. 송
Original assignee: 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date: 2007-12-21
Filing date: 2008-12-12
Publication date: 2010-09-13
Also published as: CN101903371B; PT2231639E; EP2231639B1; EP2231639A1; DK2231639T3; AU2008343423B2; US20090202476A1; US8202996B2; KR101560428B1; TW200932214A; JP2011507869A; PE20170534A1; MX2010006489A; CN106146613A; US20120230949A1; AU2008343423A1; AR106338A2; AR069886A1; PE20131130A1; HRP20150458T1

Abstract

본 발명은 개괄적으로 N-(tert-부톡시카르보닐)-3-메틸-L-발릴-(4R)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-N-((1R,2S)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-L-프롤린아미드의 결정질 형태에 관한 것이다. 본 발명은 또한 개괄적으로 하나 이상의 상기 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물, 및 또한 C형 간염 바이러스 (HCV)의 치료에서의 상기 결정질 형태의 사용 방법 및 상기 결정질 형태의 수득 방법에 관한 것이다.

Description

Ｎ-(ＴＥＲＴ-부톡시카르보닐)-3-메틸-Ｌ-발릴-(4Ｒ)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-Ｎ-((1Ｒ,2Ｓ)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-Ｌ-프롤린아미드의 결정질 형태 {CRYSTALLINE FORMS OF N-(TERT-BUTOXYCARBONYL)-3-METHYL-L-VALYL-(4R)-4-((7-CHLORO-4-METHOXY-1-ISOQUINOLINYL)OXY)-N-((1R,2S)-1-((CYCLOPROPYLSULFONYL)CARBAMOYL)-2-VINYLCYCLOPROPYL)-L-PROLINAMIDE}

관련 출원과의 상호-참조

본 출원은 2007년 12월 21일자로 출원된 미국 가출원 번호 제61/015,795호의 이점을 청구한다.

본 발명은 개괄적으로 N-(tert-부톡시카르보닐)-3-메틸-L-발릴-(4R)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-N-((1R,2S)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-L-프롤린아미드의 결정질 형태에 관한 것이다. 본 발명은 또한 개괄적으로 하나 이상의 상기 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물, 및 또한 C형 간염 바이러스 (HCV)의 치료에서의 상기 결정질 형태의 이용 방법 및 상기 결정질 형태의 수득 방법에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스 (HCV)는 전세계적으로 대략 1억 7천만명 (인간 면역결핍 바이러스 1형에 의한 감염자수의 대략 5배)을 감염시킨 주요한 인간 병원체이다. 대다수의 상기 HCV 감염된 개체에서는 간경화 및 간세포 암종을 비롯한 심각한 진행성 간 질환이 발병된다.

현재, 가장 효과적인 HCV 치료법은 환자의 40％에서 지속적인 효능을 초래하는, 알파-인터페론 및 리바비린의 조합을 사용한다. 최근의 임상 결과는 peg화된 알파-인터페론이 단일요법으로서의 비-변형된 알파-인터페론보다 우수함을 입증한다. 그러나, 대다수의 환자에서는 peg화된 알파-인터페론 및 리바비린의 조합을 수반한 실험적 치료 섭생법으로도 바이러스 로드가 지속적으로 감소되지는 않는다. 따라서, HCV 감염의 치료를 위한 효과적인 치료법을 개발해야 하는 분명하고 충족되지 않은 필요성이 존재한다.

화합물 N-(tert-부톡시카르보닐)-3-메틸-L-발릴-(4R)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-N-((1R,2S)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-L-프롤린아미드는 HCV 감염의 치료에 유용하다. 광범위한 결정화 연구 동안, 본원에서 형태 H-1 (수화물) 및 형태 T1F-1/2 (무수물)로서 나타내어지는 2종의 결정질 유리 산 형태가 단리되었다. 각각의 이들 형태가 대규모로 반복적으로 결정화될 수 있고, 각각의 다형체가 시판용으로 허용되는 특징을 보유한다는 것이 밝혀졌다.

<화학식 I>

습도에 따라, 화합물 I은 T1F-1/2 (<15％ 상대 습도), H-1 (>45％ 상대 습도), 또는 약 15 내지 45％ 상대 습도에서는 상기 2개의 혼합물로서 존재할 수 있다. 도 1은 형태 H-1 및 T1F-1/2의 상호전환을 상대 습도에 대한 함수로서 나타낸다. 수용액 중에서 화합물 I은 H-1로서 존재하고, 형태 T1F-1/2는 물 중에 현탁될 때 H-1로 빠르게 전환된다.

제1 측면에서, 본 발명은

의 형태 H-1을 제공한다.

제2 측면에서, 본 발명은 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 결정질 형태의 측정시, 하기 단위 셀 파라미터:

셀 치수: a = 10.0802 Å

b= 16.6055 Å

c = 24.9294 Å

α = 90.00 도

β = 90.00 도

γ = 90.00 도

공간군 P2₁2₁2₁

분자/단위 셀 4

를 특징으로 하는

의 형태 H-1를 나타낸다.

제3 측면에서, 본 발명은 표 3에 나열된 바와 같은 단위 셀 내의 분율 원자 좌표를 특징으로 하는

의 형태 H-1을 제공한다.

제4 측면에서, 본 발명은 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 6.3±0.1, 7.1±0.1, 9.4±0.1, 10.3±0.1, 12.7±0.1, 13.8±0.1, 17.5±0.1, 18.7±0.1, 20.6±0.1 및 22.5±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 갖는

의 형태 H-1을 제공한다.

제5 측면에서, 본 발명은

a) 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 결정질 형태의 측정시, 하기와 실질적으로 동일한 파라미터를 갖는 단위 셀:

셀 치수: a = 10.0802 Å

b = 16.6055 Å

c = 24.9294 Å

α = 90.00 도

β = 90.00 도

γ = 90.00 도

공간군 P2₁2₁2₁

분자/단위 셀 4;

b) 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 6.3±0.1, 7.1±0.1, 9.4±0.1, 10.3±0.1, 12.7±0.1, 13.8±0.1, 17.5±0.1, 18.7±0.1, 20.6±0.1 및 22.5±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크; 및/또는

c) 표 3에 나열된 바와 같은 단위 셀 내의 분율 원자 좌표

중 하나 이상을 특징으로 하는

의 형태 H-1을 제공한다.

제6 측면에서, 본 발명은

의 실질적으로 순수한 형태 H-1을 제공한다.

제6 측면의 제1 실시양태에서 형태 H-1의 순도는 95 중량％ 이상이다. 제6 측면의 제2 실시양태에서 형태 H-1의 순도는 99 중량％ 이상이다.

제7 측면에서, 본 발명은

의 형태 T1F-1/2를 제공한다.

제8 측면에서, 본 발명은 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 7.3±0.1, 9.1±0.1, 10.0±0.1, 10.6±0.1, 11.1±0.1, 12.3±0.1, 15.6±0.1, 20.1±0.1, 20.9±0.1 및 27.8±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 갖는

의 형태 T1F-1/2를 제공한다.

제9 측면에서, 본 발명은

a) 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 7.3±0.1, 9.1±0.1, 10.0±0.1, 10.6±0.1, 11.1±0.1, 12.3±0.1, 15.6±0.1, 20.1±0.1, 20.9±0.1 및 27.8±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크; 및/또는

c) 전형적으로 140 내지 145℃의 범위에서 개시되는 용융과 관련된 제1 흡열 및 그 후의 분해

중 하나 이상을 특징으로 하는

의 형태 T1F-1/2를 제공한다.

제10 측면에서, 본 발명은

의 실질적으로 순수한 형태 T1F-1/2를 제공한다.

제10 측면의 제1 실시양태에서 T1F-1/2의 순도는 95 중량％ 이상이다. 제10 측면의 제2 실시양태에서 형태 T1F-1/2의 순도는 99 중량％ 이상이다.

제11 측면에서, 본 발명은

의 형태 H-1 및 형태 T1F-1/2의 혼합물이다.

제12 측면에서, 본 발명은

의 형태 H-1, 형태 T1F-1/2 또는 이들의 혼합물, 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

제13 측면에서, 본 발명은

의 형태 H-1, 형태 T1F-1/2 또는 이들의 혼합물을, 항-HCV 활성을 갖는 1종 이상의 추가 화합물과 조합으로 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 제13 측면의 제1 실시양태에서 항-HCV 활성을 갖는 1종 이상의 추가 화합물은 인터페론 또는 리바비린이다. 제13 측면의 제2 실시양태에서 인터페론은 인터페론 알파 2B, peg화된 인터페론 알파, 컨센서스(consensus) 인터페론, 인터페론 알파 2A 및 림프아형 인터페론 타우(tau)로부터 선택된다.

제13 측면의 제3 실시양태에서 본 발명은

의 형태 H-1, 형태 T1F-1/2 또는 이들의 혼합물을, 인터류킨 2, 인터류킨 6, 인터류킨 12, 1형 헬퍼 T 세포 반응의 발생을 증대시키는 화합물, 간섭 RNA, 안티센스 RNA, 이미퀴모드, 리바비린, 이노신 5'-모노포스페이트 데히드로게나제 억제제, 아만타딘 및 리만타딘으로부터 선택된, 항-HCV 활성을 갖는 1종 이상의 추가 화합물과 조합으로 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

제14 측면에서, 본 발명은 치료 유효량의

의 형태 H-1, 형태 T1F-1/2 또는 이들의 혼합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유동물에서 HCV 감염을 치료하는 방법을 제공한다.

제14 측면의 제1 실시양태에서 포유동물은 인간이다.

본 발명의 다른 실시양태는 본원에 개시된 2개 이상의 실시양태 및/또는 측면의 적합한 조합을 포함할 수 있다.

본 발명의 또다른 실시양태 및 측면은 하기 제공되는 설명에 따라 명백해질 것이다.

본 발명의 화합물은 또한 호변이성질체 및 회전이성질체로서도 존재할 수 있고; 따라서 본 발명은 또한 모든 호변이성질체 형태 및 회전이성질체를 포함한다.

도 1은 형태 H-1 및 T1F-1/2의 상호전환을 상대 습도의 함수로써 도시한다.
도 2는 화합물 I의 H-1 결정질 형태의 실험 및 모의실험 분말화된 X-선 회절 패턴 (T = 실온에서 CuKα λ=1.54178 Å)을 도시한다.
도 3은 화합물 I의 T1F-1/2 결정질의 실험 및 인덱스 분말화된 X-선 회절 패턴 (T = 실온에서 CuKα λ=1.54178 Å)을 도시한다.
도 4는 T1F-1/2 및 H-1 형태 상호전환의 분말화된 X-선 회절 분석을 도시한다.
도 5는 화합물 I의 H-1 결정질 형태의 시차 주사 열량 패턴을 도시한다.
도 6은 화합물 I의 T1F-1/2 결정질 형태의 시차 주사 열량 패턴을 도시한다.
도 7은 화합물 I의 T1F-1/2 결정질 형태의 고체 상태 NMR 스펙트럼을 도시한다.
도 8은 화합물 I의 H-1 결정질 형태의 열중량 분석 패턴을 도시한다.
도 9는 화합물 I의 T1F-1/2 결정질 형태의 열중량 분석 패턴을 도시한다.

본 발명은 하기 화합물 I의 결정질 형태에 관한 것이다.

<화학식 I>

정의

본원에 사용된 바와 같은 "다형체"는 화학적 조성은 동일하나 결정을 형성하는 분자, 원자 및/또는 이온의 공간 배열이 상이한 결정질 형태를 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "제약상 허용되는"은 건전한 의학적 판단 범위 내에서, 합리적인 유익/위험 비율에 알맞게 과도한 독성, 자극, 알레르기성 반응 또는 다른 문제 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과의 접촉에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "실질적으로 순수한"은 약 90％ 초과로 순수한 화합물 I의 형태 H-1 또는 형태 T1F-1/2를 의미한다. 이는 화합물 I의 다형체가 임의의 다른 화합물을 약 10％ 초과로 함유하지 않음을 의미하며, 특히, 화합물 I의 임의의 다른 형태를 약 10％ 초과로 함유하지 않음을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "치료 유효량"은 단독으로 또는 조합으로 투여시 C형 간염의 치료에 효과적인 화합물 I의 결정질 형태의 양을 포함하는 것으로 의도된다. 화합물 I의 결정질 형태 및 그의 제약 조성물은 C형 간염의 치료에 유용할 수 있다. 화합물 I이 또다른 의약과 조합으로 사용되는 경우, 본원에 기재된 화합물의 조합물은 상승작용 조합을 생성할 수 있다. 예를 들면 문헌 [Chou and Talalay, Adv. Enzyme Regul. 1984, 22, 27-55]에 기재된 바와 같은 상승작용은 조합으로 투여시 화합물의 효과가 단일제로서 단독 투여시의 화합물의 효과보다 클 때 발생한다.

용어 "치료하는"은 (i) 질환, 장애 및/또는 상태의 소인이 있을 수 있지만 아직 그에 걸렸다고 진단되지 않은 환자에서 질환, 장애 또는 상태의 발생을 예방하는 것; (ii) 질환, 장애 또는 상태를 억제, 즉, 그의 진행을 정지시키는 것; 및/또는 (iii) 질환, 장애 또는 상태의 완화, 즉, 질환, 장애 및/또는 상태의 퇴행을 야기하는 것을 의미한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 화합물 I의 결정질 형태를 제공한다. 상기 화합물 I의 결정질 형태는 예를 들면 부형제, 담체, 및 상이한 분자 구조의 다른 활성 제약 성분의 활성 화학적 실체 중 하나로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 다른 성분을 임의로 포함할 수 있는 제약 조성물 중에서 사용될 수 있다.

한 실시양태에서, 결정질 형태는, 실험적으로 측정된 PXRD 패턴에서의 총 피크 면적 중 10％ 미만이, 또다른 실시양태에서는 5％ 미만이, 또다른 실시양태에서는 2％ 미만이 모의실험 PXRD 패턴에 없는 가외의 피크로부터 발생하는 것으로 나타내어지는 상 동질성을 갖는다. 또다른 실시양태에서, 결정질 형태는 실험적으로 측정된 PXRD 패턴에서의 총 피크 면적 중 1％ 미만이 모의실험 PXRD 패턴에 없는 가외의 피크로부터 발생하는 상 동질성을 갖는다.

한 실시양태에서, 화합물 I의 결정질 형태 H-1로 본질적으로 이루어진 조성물이 제공된다. 상기 실시양태의 조성물은 조성물 중 화합물 I의 중량을 기준으로 화합물 I의 결정질 형태 H-1을 90 중량％ 이상 포함할 수 있다. 나머지 물질은 상기 화합물의 다른 형태(들) 및/또는 반응 불순물, 및/또는 그의 제조로부터 발생하는 가공 불순물을 포함한다.

또다른 실시양태에서, 화합물 I의 결정질 형태 T1F-1/2로 본질적으로 이루어진 조성물이 제공된다. 상기 실시양태의 조성물은 조성물 중 화합물 I의 중량을 기준으로 화합물 I의 결정질 형태 T1F-1/2를 90 중량％ 이상 포함할 수 있다. 나머지 물질은 상기 화합물의 다른 형태(들) 및/또는 반응 불순물, 및/또는 그의 제조로부터 발생하는 가공 불순물을 포함한다.

반응 불순물 및/또는 가공 불순물의 존재는 당업계에 공지된 분석 기술, 예를 들면, 크로마토그래피, 핵 자기 공명 분광계, 질량 분석법 또는 적외선 분광계로 측정될 수 있다.

결정질 물질의 일반적인 제조:

결정질 형태는 예를 들면 적합한 용매로부터의 결정화 또는 재결정화, 승화, 용융물로부터의 성장, 또다른 상으로부터의 고체 상태 변환, 초임계 유체로부터의 결정화 및 제트 분무를 비롯한 각종 방법에 의하여 제조될 수 있다. 용매 혼합물로부터 결정질 형태의 결정화 또는 재결정화를 위한 기법에는 예를 들면 용매의 증발, 용매 혼합물의 온도 감소, 분자 및/또는 염의 과포화 용매 혼합물의 결정 씨딩(seeding), 용매 혼합물의 동결 건조, 및 역용매 (반대용매)의 용매 혼합물로의 첨가가 포함된다. 고 처리량의 결정화 기법은 다형체를 비롯한 결정질 형태를 제조하는 데 사용될 수 있다. 다형체를 비롯한 약물의 결정, 약물 결정의 제조 및 특징규명 방법은 문헌 [Solid-State Chemistry of Drugs, S. R. Byrn, R. R. Pfeiffer and J. G. Stowell, 2^nd Edition, SSCI, West Lafayette, Indiana (1999)]에 논의되어 있다.

용매를 사용하는 결정화 기법의 경우, 용매 또는 용매들의 선택은 통상적으로 하나 이상의 요인, 예컨대 화합물의 용해도, 결정화 기법 및 용매의 증기압에 따라 좌우된다. 용매의 조합을 사용할 수 있으며, 예를 들면 화합물을 제1의 용매에 가용화시켜 용액을 생성한 후, 역용매를 첨가하여 용액 중의 화합물의 용해도를 감소시켜, 결정이 형성되게 할 수 있다. 역용매는 화합물의 용해도가 낮은 용매이다.

결정을 제조하는 한 방법에서는, 화합물을 적합한 용매 중에 현탁 및/또는 교반시켜 슬러리를 생성하고, 이를 가열하여 용해를 촉진시킬 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "슬러리"는 주어진 온도에서 화합물과 용매의 불균질 혼합물을 제공하기 위하여 추가량의 화합물을 함유할 수 있는, 화합물의 포화 용액을 의미한다.

씨드 결정은 임의의 결정화 혼합물에 첨가되어 결정화를 촉진할 수 있다. 씨딩은 특정 다형체의 성장을 조절하기 위하여 또는 결정질 생성물의 입도 분포를 조절하기 위하여 사용될 수 있다. 따라서, 필요한 씨드 양의 계산은 입수가능한 씨드의 크기 및, 예를 들면 문헌 ["Programmed Cooling of Batch Crystallizers," J. W. Mullin and J. Nyvlt, Chemical Engineering Science, 1971, 26, 369-377]에 기재된 바와 같은 평균 생성물 입자의 원하는 크기에 따라 달라진다. 일반적으로, 작은 크기의 씨드는 회분식으로 결정의 성장을 효과적으로 조절하는 데 필요하다. 작은 크기의 씨드는 커다란 결정의 체질, 제분 또는 미분화에 의하여 또는 용액의 미세결정화에 의하여 생성될 수 있다. 결정을 제분 또는 미분화하는 것이 원하는 결정 형태의 결정화도에서의 어떠한 변화 (즉, 무정형으로 또는 또다른 다형체로의 변화)도 초래하지 않도록 주의를 기울여야만 한다.

냉각된 결정화 혼합물은 진공하에서 여과할 수 있으며, 단리된 고체는 적합한 용매, 예컨대 저온의 재결정화 용매로 세척하고, 질소 퍼징하에 건조시켜 원하는 결정질 형태를 생성할 수 있다. 단리된 고체는 적합한 분광학적 또는 분석 기법, 예컨대 고체 상태 핵 자기 공명, 시차 주사 열량, X-선 분말 회절 등에 의하여 분석하여 생성물의 바람직한 결정질 형태의 형성을 확인할 수 있다. 생성된 결정질 형태는 통상적으로 결정화 절차에 처음에 사용된 화합물의 중량을 기준으로, 약 70 중량％ 초과의 단리 수율, 바람직하게는 90 중량％ 초과의 단리 수율의 양으로 생성된다. 생성물은 필요할 경우, 생성물의 덩어리를 제거하기 위하여 메쉬 스크린을 통하여 통과시키거나 또는 동시제분될 수 있다.

결정질 형태는 화합물 I을 제조하기 위한 최종 공정의 반응 매질로부터 직접 제조될 수 있다. 이는 예를 들면 화합물 I이 결정화될 수 있는 용매 또는 용매 혼합물을 최종 공정 단계에 사용하여 달성될 수 있다. 별법으로, 결정질 형태는 증류 또는 용매 첨가 기법에 의하여 얻을 수 있다. 이러한 목적에 적합한 용매로는, 예를 들어 양성자성 극성 용매, 예컨대 알콜, 및 비양성자성 극성 용매, 예컨대 케톤을 비롯한 상기 비극성 용매 및 극성 용매가 포함된다.

샘플 중의 하나 초과의 다형체의 존재는 분말 X-선 회절 (PXRD) 또는 고체 상태 핵자기 공명 분광학 (SSNMR)과 같은 기법에 의하여 측정될 수 있다. 예를 들면, 모의실험 PXRD 패턴과 비교했을 때, 실험으로 측정된 PXRD 패턴에서의 가외의 피크의 존재는 샘플 중의 하나 초과의 다형체를 나타낼 수 있다. 모의실험 PXRD는 단일 결정 X-선 데이타로부터 계산될 수 있다. 문헌 [Smith, D. K., "A FORTRAN Program for Calculating X-Ray Powder Diffraction Patterns," Lawrence Radiation Laboratory, Livermore, California, UCRL-7196 (April 1963)] 참조.

특징규명:

화합물 I의 형태 H-1 및 형태 T1F-1/2는 그 작업이 당업자들에게 공지되어 있는 다양한 기법으로 특징규명될 수 있다. 특징규명 방법의 예로는 단일 결정 X-선 회절, 분말 X-선 회절 (PXRD), 모의실험 분말 X-선 패턴 (문헌 [Yin. S.; Scaringe, R. P.; DiMarco, J.; Galella, M. and Gougoutas, J. Z., American Pharmaceutical Review, 2003, 6,2, 80]), 시차 주사 열량 (DSC), 고체-상태 ¹³C NMR (문헌 [Earl, W. L. and Van der Hart, D. L., J. Magn. Reson., 1982, 48, 35-54]), 라만 분광학, 적외선 분광학, 등온 흡습 곡선, 열중량 분석 (TGA) 및 고온 단계 기법이 포함되나 이에 제한되지 않는다.

H-1 형태는 형태 H-1의 단일 결정의 단위 셀 측정에 기초하는 단일 결정 X-선 회절을 사용하여 특징규명 및 구별될 수 있다. 단위 셀의 상세한 설명은 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌 [Stout & Jensen, X-Ray Structure Determination: A Practical Guide, Macmillan Co., New York (1968), Chapter 3]에 제시되어 있다. 별법으로, 결정질 격자 내 공간 관계에서의 원자의 독특한 배열은 관찰된 분율 원자 좌표(fractional atomic coordinate)에 따라 특징규명될 수 있다. 결정질 구조의 또다른 특징규명 방법은 분말 X-선 회절 분석에 의한 것으로서, 여기서 회절 프로파일은 순수한 분말 물질을 나타내는 모의실험 프로파일과 비교하며, 둘다 동일한 분석 온도에서 실시되고, 일련의 2θ 값으로서 특징규명되는 해당 형태에 대한 측정치이다.

당업자는 X-선 회절 패턴이, 사용된 측정 조건에 따라 달라지는 오차의 측정과 동시에 얻어질 수 있다는 것을 숙지할 것이다. 특히, 일반적으로 X-선 회절 패턴에서의 세기는, 사용된 측정 조건에 따라 변동될 수 있는 것으로 공지되어 있다. 또한 상대적 세기는 실험 조건에 따라 변경될 수 있으며, 따라서 세기의 정확한 순서는 고려해서는 안된다는 것을 이해하여야 한다. 또한, 통상의 X-선 회절 패턴에 대한 회절각의 측정 오차는 통상적으로 약 5％ 이하이고, 이와 같은 측정 오차의 정도는 전술한 회절각과 관련됨을 고려해야만 한다. 따라서, 본 발명의 결정 형태는 본 명세서에 개시된 첨부 도면에 도시된 X-선 회절 패턴과 완전히 동일한 X-선 회절 패턴을 제공하는 결정 형태에 한정되지 않는 것으로 이해하여야 한다. 첨부 도면에 개시된 것과 실질적으로 동일한 X-선 회절 패턴, DSC 온도기록도 또는 SSNMR 스펙트럼을 제공하는 임의의 결정 형태는 본 발명의 범위에 포함된다. X-선 회절 패턴의 실질적인 동일성을 확인하는 능력은 당업자의 사전 검토 내에 포함된다.

활용:

화합물 I의 H-1 및 T1F-1/2 형태는 단독으로 또는 다른 화합물과의 조합으로 HCV 감염을 치료하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명은 또한 치료 유효량의 화합물 I의 형태 H-1 및 형태 T1F-1/2 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 제공한다.

상기 조성물 중 활성 성분, 즉, 화합물 I의 형태 H-1 및 형태 T1F-1/2는 전형적으로 조성물의 0.1 중량％ 내지 99.9 중량％를 구성하고, 종종 약 5 내지 95 중량％를 구성한다. 몇몇 사례에서, 제제의 pH를 제약상 허용되는 변형제 (예컨대 탄산칼슘 및 산화마그네슘)로 조정하여, 제제화된 화합물 또는 그의 전달 형태의 안정성을 향상시킬 수 있다. 본 발명의 다형체의 제제는 흡수 및 생체이용률의 향상을 위한 첨가제도 함유할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 경구적으로, 비경구적으로 또는 이식 저장소를 통해 투여될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 비경구는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 윤활막내, 흉골내, 경막내 및 병변내 주사 또는 주입 기법을 포함한다.

제약 조성물은 멸균 주사가능한 제제, 예를 들면, 멸균 주사가능한 수성 또는 유성 현탁액제의 형태로 존재할 수 있다. 상기 현탁액제는 적합한 분산화제 또는 습윤제 및 현탁화제를 이용하여 당업계에 공지된 기법에 따라 제제화될 수 있다. 상기 화합물의 제조에 관한 상세내용은 당업자들에게 공지되어 있다.

경구 투여되는 경우, 본 발명의 제약 조성물은 캡슐제, 정제, 및 수성 현탁액제 및 용액제를 포함하나 이에 제한되지 않는, 경구적으로 허용되는 임의의 투여 형태로 투여될 수 있다. 경구 사용을 위한 정제의 경우에서, 통상적으로 사용되는 담체로는 락토스 및 옥수수 전분이 포함된다. 윤활제, 예컨대 스테아르산 마그네슘도 또한 첨가될 수 있다. 캡슐 형태로의 경구 투여의 경우, 유용한 담체/희석제로는 락토스, 고분자량 및 저분자량 폴리에틸렌 글리콜, 및 건조 옥수수 전분이 포함된다. 수성 현탁액제를 경구 투여하는 경우, 활성 성분은 유화제 및 현탁화제와 배합된다. 원한다면, 특정 감미제 및/또는 향미제 및/또는 착색제가 첨가될 수 있다.

상기 언급된 조성물에 대한 다른 적합한 담체는 표준 제약 서적, 예를 들면 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences", 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, Penn., 1995]에서 발견할 수 있다. 본 발명의 제약 조성물의 적합한 전달 형태의 고안 및 제조에 관한 추가의 세부사항은 당업자들에게 공지되어 있다.

HCV 매개 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 단일요법에서, 본 발명의 화합물의 1일 당 체중 1 킬로그람 당 약 0.05 내지 약 100 밀리그람 ("mg/kg")의 투여량 수준, 보다 구체적으로는 1일 당 체중 1 킬로그람 당 약 0.1 내지 약 50 mg이 전형적이다. 전형적으로, 본 발명의 제약 조성물은 1일 당 약 1 내지 약 3회 투여되거나 또는 다르게는 연속 주입으로서 투여될 것이다. 이러한 투여는 만성 또는 급성 요법으로서 사용될 수 있다. 단일 투여 형태를 제조하기 위하여 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 숙주 및 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다.

당업자는 상기 언급된 것보다 더 낮거나 더 높은 투여량이 요구될 수 있음을 이해할 것이다. 임의의 특정 환자에 대한 구체적인 투여량 및 치료 섭생은 사용되는 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별, 식이, 투여 시간, 치료 지속기간, 배출율, 약물 조합, 감염의 중증도 및 추이, 감염에 대한 환자의 소인 및 치료 전문의의 판단을 비롯하여 다양한 인자에 의존적일 것이다. 한 실시양태에서, 단위 투여 제제는 본원에서 상기 언급된 바와 같은 일일 용량 또는 하위-용량, 또는 그의 적절한 분획의 활성 성분을 함유하는 것이다. 일반적으로, 치료는 펩티드의 최적 용량보다 실질적으로 낮은 적은 투여량으로 시작한다. 그 후, 특정 환경하에서 최적 효과에 도달할 때까지, 작은 증분으로 투여량을 증가시킨다. 일반적으로, 화합물은 일반적으로 어떠한 해로운 또는 유해한 부작용도 유발하지 않는 항바이러스성 유효 결과를 얻게 될 농도 수준으로 투여하는 것이 가장 바람직하다.

본 발명의 조성물이 본 발명의 다형체 및 1종 이상의 추가의 치료제 또는 예방제의 조합물을 포함하는 경우, 화합물 및 추가 작용제는 둘다 통상적으로 단일요법 섭생에서 일반적으로 투여되는 투여량의 약 10 내지 100％, 보다 바람직하게는 약 10 내지 80％의 투여량 수준으로 존재한다. 1종 이상의 추가 작용제는 본 발명의 다형체 이전에, 이후에 또는 그와 동시에 투여할 수 있다.

다형체가 제약상 허용되는 담체와 함께 제제화되는 경우, 생성된 조성물은 NS3/4A를 억제하거나 또는 HCV 바이러스 감염을 치료 또는 예방하기 위하여 포유동물, 예컨대 인간에게 생체내 투여될 수 있다. 상기 치료는 또한 면역조절제, 예컨대 인터페론; 다른 항바이러스제, 예컨대 리바비린, 아만타딘; 기타 NS3/4A 억제제; HCV 생명 주기에서의 다른 표적, 예컨대 헬리카제, 폴리머라제, 메탈로프로테아제, 또는 내부 리보솜 유입 부위의 억제제; 또는 그의 조합물을 포함하나 이에 제한되지 않는 작용제와 조합된 본 발명의 다형체를 이용하여 달성할 수 있다. 추가의 작용제는 단일 투여 형태를 생성하기 위하여 본 발명의 다형체와 조합될 수 있다. 별법으로, 상기 추가 작용제는 다중 투여 형태의 일부로서 포유동물에게 별도로 투여될 수 있다.

하기 표 1은 본 발명의 화합물과 함께 투여될 수 있는 화합물의 몇몇 예시적 예를 나열한다. 본 발명의 화합물은 조합 요법에서 다른 항-HCV 활성 화합물과 함께, 공동으로 또는 별도로, 또는 상기 화합물들을 조성물로 조합하여 투여될 수 있다.

본 발명의 또다른 측면은 본 발명의 다형체를 투여함으로써 환자에서 HCV NS3 활성을 억제하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 HCV NS3 활성을 감소시키는 데 유용하다. 제약 조성물이 활성 성분으로서 본 발명의 다형체만을 포함하는 경우, 상기 방법은 면역조절제, 항바이러스제, HCV NS3 억제제, 또는 HCV 생명 주기에서의 다른 표적, 예컨대 헬리카제, 폴리머라제, 프로테아제 또는 메탈로프로테아제의 억제제로부터 선택된 작용제를 상기 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 추가 작용제는 본 발명의 화합물의 투여 이전에, 동시에 또는 이후에 환자에게 투여될 수 있다.

또다른 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 바이러스 복제를 억제하기에 유용하다. 이러한 방법은 HCV 질환의 치료 또는 예방에 유용할 수 있다.

본 발명의 다형체는 또한 실험실용 시약으로서 사용될 수 있다. 상기 다형체는 HCV 질환 메카니즘의 지식을 더욱 증대시키기 위해 바이러스 복제 검정의 설계, 동물 검정 시스템의 인증 및 구조적 생물학 연구를 위한 조사 도구를 제공하는 데 도움이 될 수 있다.

본 발명의 다형체는 또한 물질의 바이러스 오염을 치료 또는 예방하여, 이러한 물질, 예를 들면, 혈액, 조직, 수술 기구 및 의복, 실험실 기구 및 의복, 및 혈액 수집 또는 수혈 기구 및 물질과 접촉하게 되는 실험실 또는 의료상의 개인 또는 환자의 바이러스 감염 위험을 감소시키기 위하여 사용될 수 있다.

하기 비제한적인 실시예는 본 발명을 예시한다.

실시예

실시예 1

형태 H-1/ T1F -1/2의 제조

무정형 N-(tert-부톡시카르보닐)-3-메틸-L-발릴-(4R)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-N-((1R,2S)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-L-프롤린아미드 (미국 특허 제6,995,174호에 기재된 절차에 따라 제조됨)를 화합물 1 g 당 용매 8 내지 10 ml의 농도로 실온에서 에탄올 중에 교반하거나 음파처리하였다. 먼저, 고체를 상기 용액 중에 즉시 용해시킨 다음, 몇분의 교반 내에 슬러리를 형성하였다. 상기 슬러리로부터 얻어진 결정 형태는 용매화물이었다 (형태 E2-2). 상기 슬러리를 단리하고 50℃에서 진공하에 건조시켜, T1F-1/2를 형성하였다. T1F-1/2 형태는 H-1로 변형될 수 있으며, 주변 습도 및 온도 조건에 따라, 두가지 형태의 혼합물을 생성하거나 또는 형태 H-1로 전환될 수 있다.

결정질 N-(tert-부톡시카르보닐)-3-메틸-L-발릴-(4R)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-N-((1R,2S)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-L-프롤린아미드를 화합물 1 g 당 용매 10 내지 12 ml의 농도로 50℃에서 에탄올 중에 용해시켰다. (이 단계에서 헵탄을 50℃에서 상기 용액에 첨가함.) 교반된 배치를 점차 20℃로 냉각시키고, 숙성시켜 결정화를 진행시켰다. 씨딩은 임의적이고; 45℃ 내지 20℃에서 씨딩하여 슬러리를 형성하였다. 상기 슬러리로부터 얻어진 결정 형태는 용매화물이었다. 이어서, 슬러리를 여과하고, 얻어진 고체를 50℃에서 진공하에 건조시켜, T1F-1/2를 형성하였다. T1F-1/2 형태는 H-1로 변형될 수 있으며, 주변 습도 및 온도 조건에 따라, 두가지 형태의 혼합물을 생성하거나 또는 형태 H-1로 전환될 수 있다.

기체-고체 수화를 통한 고체-상태 변형

수화물 H-1은 유리 산 T1F-1/2를 제어된 조건하에 습윤 공기 또는 질소를 사용한 수화를 통해 전환시킴으로써 제조될 수 있다. 습윤 공기 또는 질소 기류와 접촉한 T1F-1/2 형태는 일정 시간 동안 수화물로 변형된다 (유속 300 내지 1000 ml/분, RH >90％, 실온에서 24 시간 내). 또한 주변 조건 (RH 40-80％, 실온)에서의 공기 또는 질소 흐름 하에서, 결정화로부터 단리된 E2-2 습윤 케이크를 건조시킴으로써 용매화물이 점차 수화물로 전환될 것임이 관찰되었다.

결정화시 수화물의 슬러리 전환

EtOH 및 물의 조성을 다양하게 하여 결정화를 준비하여, 얻어진 결정 형태(들)을 검사하고, 슬러리 중에서 직접적으로 수화물을 획득하기 위한 실행가능성을 평가하였다. 슬러리 전환시 수화물을 형성하기 위해서는 높은 수분활성도가 필요하다: E2-2 습윤 케이크를 20 내지 50℃에서 일정 시간 동안 물 중에 재슬러리화하여 수화물로 전환시키며, 잔류 E2-2는 슬러리 중에 잔존하였다. 이러한 절차는 또한, 물을 함유한 슬러리 중에서 수화물로 변환하는 다른 알콜 용매화물 (예를 들면, M-1, 메탄올레이트)에도 적용할 수 있다.

실시예 2

형태 H-1 및/또는 T1F -1/2의 대안 제법

무정형 N-(tert-부톡시카르보닐)-3-메틸-L-발릴-(4R)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-N-((1R,2S)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-L-프롤린아미드 (미국 특허 제6,995,174호에 기재된 절차에 따라 제조됨)를 화합물 1 g 당 용매 5 내지 14 ml의 농도로 실온에서 이소프로필 알콜 중에 교반하거나 음파처리하였다. 먼저, 고체를 교반하면서 또는 교반 없이 상기 용액 중에 용해시킨 다음, 몇분 내에 슬러리를 형성하였다. 슬러리로부터 얻어진 결정 형태는 용매화물이었다. 슬러리를 단리하고 50℃에서 진공하에 건조시켜, T1F-1/2를 형성하였다. T1F-1/2 형태를 주변 습도 및 온도 조건에 적용하여 H-1로 변형시킬 수 있다. T1F-1/2 형태는 H-1로 변형될 수 있으며, 주변 습도 및 온도 조건에 따라, 두가지 형태의 혼합물을 생성하거나 또는 형태 H-1로 전환될 수 있다.

결정질 N-(tert-부톡시카르보닐)-3-메틸-L-발릴-(4R)-4-((7-클로로-4-메톡시-1-이소퀴놀리닐)옥시)-N-((1R,2S)-1-((시클로프로필술포닐)카르바모일)-2-비닐시클로프로필)-L-프롤린아미드를 화합물 1 g 당 용매 15 내지 17 ml의 농도로 50 내지 60℃에서 이소프로필 알콜 중에 용해시켰다. (이 단계에서 물을 60℃에서 상기 용액에 첨가함.) 씨딩은 임의적이었다. 교반된 배치를 점차 20℃로 냉각시키고, 숙성시켜 결정화를 진행시켰다. 상기 슬러리로부터 얻어진 결정 형태는 용매화물이었다. 이어서, 슬러리를 여과하고, 얻어진 고체를 50℃에서 진공하에 건조시켜, T1F-1/2를 형성하였다. T1F-1/2 형태를 주변 습도 및 온도 조건에 적용하여 H-1로 변형시킬 수 있다. T1F-1/2 형태는 H-1로 변형될 수 있으며, 주변 습도 및 온도 조건에 따라, 두가지 형태의 혼합물을 생성하거나 또는 형태 H-1로 전환될 수 있다.

실시예 3

형태 H-1의 대안 제법

결정 H-1을 또한 다음과 같이 제조하였다: 화합물 (무정형 또는 결정질)을 메탄올 중에 용해시켰다. 물을 역용매로서 첨가하였다. 1:1 메탄올 용매화물인 프리즘형 또는 플레이트형 결정을 수득하였다. 이들 결정을 주변 조건하에 잔류시키고, 결정 내의 메탄올과 공기 중의 습기 간의 저속 용매 교환을 통해 형태 H-1로 전환시켰다.

실시예 4

형태 T1F -1/2의 대안 제법

화합물 C의 제조

DMSO (264 ml)를 화합물 A (6 g, 26.31 mmol, 1.0 당량, 96.5％ 효능), 화합물 B (6.696 g, 28.96 mmol, 1.1 당량) 및 KOtBu (8.856 g, 78.92 mmol, 3 당량)의 혼합물에 질소하에 첨가하고, 36℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 어두운색 용액을 16℃로 냉각시킨 후, 이것을 물 (66 ml) 및 EtOAc (132 ml)로 처리하였다. 생성된 2상 혼합물을 11.2 내지 14.6℃에서 1 N HCl (54 ml)을 사용하여 pH 4.82로 산성화시켰다. 상들을 분리하였다. 수성상을 EtOAc (132 ml)로 1회 추출하였다. 유기상을 합하고, 25％ 염수 (2×132 ml)로 세척하였다. 풍부한 유기상 (228 ml)을 30 내지 40℃/50 mbar에서 37.2 ml까지 증류시켰다. 신선한 EtOAc (37.2 ml)를 첨가하고, 30 내지 35℃/50 mbar에서 37.2 ml까지 증류시켰다. 최종 EtOAc 용액 (37.2 ml)을 50℃로 가열한 후에, 헵탄 (37.2 ml)을 46 내지 51℃에서 첨가하고, 2 시간에 걸쳐 22.5℃로 냉각시켰다. 화합물 C 49 mg으로 씨딩하고, 23℃에서 15 분 동안 유지하여 묽은 슬러리를 생성하였다. 이것을 30 분 내에 0.5℃로 냉각시키고, 3 시간 동안 0.2 내지 0.5℃에서 유지하였다. 여과 후에, 케이크를 헵탄 (16.7 ml)으로 세척하고, 47℃/80 mm/15.5 시간으로 건조시켜 화합물 C를 베이지색 고체로서 수득하였다 (6.3717 g, 58.9％ 보정 수율, 99.2％ 효능, 97.4 AP).

화합물 E의 제조

DIPEA (2.15 ml, 12.3 mmol, 1.3 당량)에 이어 EDAC (2 g, 10.4 mmol, 1.1 당량)를 CH₂Cl₂ (40 ml) 중 화합물 C (4 g, 9.46 mmol, 97.4％ 효능, 98.5 AP), 화합물 D (4.568 g, 11.35 mmol, 1.20 당량), HOBT-H₂O (0.86 g, 4.18 mmol, 0.44 당량)의 혼합물에 23 내지 25℃에서 질소하에 첨가하였다. 반응은 3 시간 후 23 내지 25℃에서 완료하였다. 이어서, 이것을 1N HCl (12 ml), 물 (12 ml) 및 25％ 염수 (12 ml)로 세척하였다. MeOH (80 ml)를 풍부한 유기 용액에 25℃에서 첨가하고, 이것을 대기압에서 약 60 ml로 증류시켜 생성물의 결정화를 개시하였다. 이 후, 결정 슬러리를 5 분 내에 64℃에서 60℃로 냉각시키고, 60℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 이것을 추가로 1.5 시간에 걸쳐 24℃로 냉각시키고, 24℃에서 2 시간 동안 유지하였다. 여과 후에, 케이크를 MeOH (12 ml)로 세척하고, 51℃/20-40 mm/18 시간으로 건조시켜 화합물 E를 수득하였다 (5.33 g, 89％ 수율, 97.7％ 효능, 99.1 AP).

화합물 F의 제조

IPA 중 5 내지 6 N HCl (10.08 ml, 50.5 mmol, 노르말 농도: 5 N)을 1 시간 내에 IPA (120 ml) 중 화합물 E (8 g, 12.6 mmol, 97.7％ 효능, 99.1 AP)의 용액에 75℃에서 4부분으로 나누어 첨가하였다. 1 시간 동안 75℃에서 교반한 후, 생성된 슬러리를 2 시간 내에 21℃로 냉각시키고, 2 시간 동안 21℃에서 교반하였다. 이것을 여과하고, 케이크를 IPA (2×24 ml)로 세척하였다. 습윤 케이크를 45℃/하우스 진공/16 시간으로 건조시켜 화합물 F를 회백색 고체로서 수득하였다 (6.03 g, 84.5％ 수율, 98.5％ 효능, 100 AP).

화합물 I의 제조

DIPEA (9.824 ml)에 이어 HATU (7.99 g)를 CH₂Cl₂ (100 ml) 중 화합물 F (10 g, 99.2％ 효능, 99.6 AP) 및 화합물 G (4.41 g)의 교반된 혼합물에 2.7 내지 5℃에서 질소하에 첨가하였다. 생성된 밝은 갈색 용액을 0.2 내지 3℃에서 1.5 시간 동안, 3 내지 20℃에서 0.5 시간 내에 및 20 내지 23℃에서 15.5 시간 동안 교반하여 반응을 완료하였다. 이것을 23℃에서 2 N HCl (50 ml)로 켄칭하고, 20 분 동안 23 내지 24℃에서 교반하였다. 2상 혼합물을 규조토 (셀라이트^®) (10 g)를 통해 연마 여과하여 HOAT 및 HATU의 불용성 고체를 제거하였다. 필터 케이크를 CH₂Cl₂ 20 mL로 세척하였다. 유기상을 여과물로부터 분리한 후, 이것을 2 N HCl (5×50 ml) 및 물 (2×50 ml)로 세척하였다. 유기상 (115 ml)을 약 50 ml로 농축시키고, 이것을 무수 EtOH (200 프루프(proof), 100 ml)로 희석하고, 약 50 ml로 다시 농축하였다. 무수 EtOH (50 ml)를 첨가하여 최종 부피 100 ml가 되게 하였다. 이어서, 이것을 50℃로 가온시켜 투명 용액을 형성하고, 50℃에서 35 분 동안 유지하였다. 에탄올계 용액을 15 분에 걸쳐 50에서 23℃로 냉각시켜 결정 슬러리를 형성하였다. 슬러리를 23℃에서 18 시간 동안 교반하고, 30 분에 걸쳐 0.3℃로 냉각시키고, 0.2 내지 0.3℃에서 2 시간 동안 유지하였다. 여과 후에, 케이크를 차가운 EtOH (2.7℃, 2×6 ml)로 세척하고, 53℃/72 mm/67 시간으로 건조시켜 화합물 I을 형태 T1F-1/2로 회백색 고체로서 수득하였다 (10.49 g, 80.7％ 수율, 99.6 AP).

형태 H-1 및 T1F-1/2는 하기 기재된 시험 방법 중 하나 이상을 이용하여 분석하였다.

1. 단일 결정 X-선 측정

흑연-단색화 Mo Kα 방사 (λ = 0.7107 Å)가 장착된 노니우스 카파(Nonius Kappa) CCD 회절계를 이용하여 실온에서 회절 데이타를 수집하였다. 2θ 범위에 걸쳐 ω 스캔 모드를 사용하여 전체 데이타 세트를 수집하고, 회절계 (카파 CCD 소프트웨어, 노니우스 BV, 네델란드 델프트 소재, 1999)와 관련된 절차를 이용하여 프로세싱하였다. 최종 단위 셀 파라미터는 전체 데이타 세트를 이용하여 측정하였다. 모든 구조는 직접 방법에 의해 해석하고, SHELXTL 소프트웨어 패키지 (쉘드릭(Sheldrick), GM. 1997, SHELTL. 구조 결정 프로그램. 버젼 5.10 (미국 위스콘신주 매디슨 소재의 브루커(Bruker) AXS))를 사용하여 전체-행렬 최소-제곱법에 의해 정밀화하였다. 정밀화에서 최소화된 함수는

였다.

이면, R은

로서 정의되고, 이때 w는 관찰된 세기에서의 오차를 기준으로 하는 적절한 가중 함수이다. 차등 푸리에 맵(difference Fourier map)을 모든 정밀화 단계에서 검사하였다. 모든 비-수소 원자를 이방성 열 변위 파라미터로 정밀화하였다. 수소 결합과 관련된 수소 원자는 최종 차등 푸리에 맵에 위치하였지만, 다른 수소 원자의 위치는 표준 결합 길이 및 각도를 갖는 이상적인 기하학으로부터 계산하였다. 이것은 정렬된 등방성 온도 인자이고, 고정된 파라미터를 사용하는 구조 인자 계산에 포함되었다.

H-1 형태의 결정 데이타를 표 2에 나타낸다. 분율 원자 좌표를 표 3에 나열한다. 당업자는, 상기 좌표에서의 약간의 변화가 가능하며, 이것이 본 발명의 범위 내인 것으로 여겨짐을 이해해야 한다.

2. 분말 X-선 회절

X-선 분말 회절 (PXRD) 데이타는 브루커 C2 GADDS를 이용하여 획득하였다. 방사는 Cu Kα (40 KV, 50 mA)였다. 샘플-검출기 거리는 15 cm였다. 분말 샘플을 직경이 1 mm 이하인 밀봉된 유리 모세관에 넣고; 데이타를 수집하는 동안 모세관을 회전시켰다. 2000 초 이상의 샘플 노출 시간에 3≤2θ≤35°에 대해 데이타를 수집하였다. 생성된 2-차원 회절 원호를 적분하여, 3 내지 35 도의 2θ 범위에서 0.02 도의 2θ 스텝 크기로 통상적인 1-차원 PXRD 패턴을 생성하였다.

형태 H-1에 대한 단일 결정 데이타로부터 계산된 모의실험 패턴 및 PXRD 패턴의 결과는 도 2에 나타냈다.

형태 T1F-1/2에 대한 PXRD 패턴의 결과는 도 3에 나타냈다.

도 4는 형태 T1F-1/2 및 형태 H-1 상호전환의 PXRD 분석을 나타낸다.

표 4는 화합물 I의 형태 H-1 및 T1F-1/2를 설명하는 특징적 PXRD 피크를 나열한다.

3. 시차 주사 열량

시차 주사 열량 (DSC) 실험은 TA 인스트루먼츠(Instruments)™ 모델 Q2000, Q1000 또는 2920에서 실시하였다. 샘플 (약 2 내지 6 mg)을 알루미늄 팬에서 칭량하고, 밀리그람의 100분의 1까지 정확히 기록하고, DSC로 옮겼다. 기구는 50 ml/분으로 질소 기체로 퍼징하였다. 데이타는 실온 내지 300℃에서 10℃/분의 가열 속도로 수집하였다. 흡열 피크점이 하향된 플롯이 만들어졌다.

형태 H-1의 DSC 패턴은 도 5에 나타낸다. 형태 T1F-1/2의 DSC 패턴은 도 6에 나타낸다.

4. 고체-상태 NMR ( SSNMR )

모든 고체-상태 C-13 NMR 측정은 브루커 DSX-400, 400 MHz NMR 분광계로 실시하였다. 고분해능 스펙트럼은 고출력 양성자 탈커플링, 및 대략 12 kHz에서 매직-각 회전 (magic-angle spinning: MAS)을 이용한 TPPM 펄스 시퀀스 및 램프 진폭 교차-편광 (RAMP-CP)을 이용하여 수득하였다 (문헌 [A.E. Bennett et al. J. Chem. Phys. 1995, 103, 6951]. [G. Metz, X. Wu, and S.O. Smith, J. Magn. Reson. A., 1994, 110, 219-227]. 각각의 실험에서 캐니스터-디자인의 지르코니아 로터 내로 패킹된 대략 70 mg의 샘플을 사용하였다. 화학적 이동 (δ)은 38.56 ppm으로 설정된 고주파수 공명을 갖는 외부 아다만탄을 기준으로 하였다 (문헌 [W.L. Earl and D.L. VanderHart, J. Magn. Reson., 1982, 48, 35-54]).

형태 T1F-1/2에 대한 SSNMR 스펙트럼은 도 7에 나타낸다.

5. 열중량 분석 ( TGA ) (개방 팬)

열중량 분석 (TGA) 실험은 TA 인스트루먼트™ 모델 Q500 또는 2950에서 실시하였다. 샘플 (약 10 내지 30 mg)을 미리 칭량한 백금 팬에 놓았다. 샘플의 중량을 정확하게 측정하고, 기구에 의해 밀리그람의 1000분의 1까지 기록하였다. 노(furnace)를 100 ml/분으로 질소 기체로 퍼징하였다. 데이타는 실온 내지 300℃에서 가열 속도 10℃/분으로 수집하였다.

형태 H-1 및 형태 T1F-1/2의 TGA 패턴은 각각 도 9 및 도 10에 나타냈다.

Claims

의 형태 H-1.
약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 결정질 형태의 측정시, 하기 단위 셀 파라미터:
셀 치수: a = 10.0802 Å
b= 16.6055 Å
c = 24.9294 Å
α = 90.00 도
β = 90.00 도
γ = 90.00 도
공간군 P2₁2₁2₁
분자/단위 셀 4
를 특징으로 하는

의 형태 H-1.
표 3에 나열된 바와 같은 단위 셀 내의 분율 원자 좌표를 특징으로 하는

의 형태 H-1.
약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 6.3±0.1, 7.1±0.1, 9.4±0.1, 10.3±0.1, 12.7±0.1, 13.8±0.1, 17.5±0.1, 18.7±0.1, 20.6±0.1 및 22.5±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 갖는

의 형태 H-1.
a) 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 결정질 형태의 측정시, 하기와 실질적으로 동일한 파라미터를 갖는 단위 셀:
셀 치수: a = 10.0802 Å
b = 16.6055 Å
c = 24.9294 Å
α = 90.00 도
β = 90.00 도
γ = 90.00 도
공간군 P2₁2₁2₁
분자/단위 셀 1;
b) 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 6.3±0.1, 7.1±0.1, 9.4±0.1, 10.3±0.1, 12.7±0.1, 13.8±0.1, 17.5±0.1, 18.7±0.1, 20.6±0.1 및 22.5±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크; 및/또는
c) 표 3에 나열된 바와 같은 단위 셀 내의 분율 원자 좌표
중 하나 이상을 특징으로 하는

의 형태 H-1.
의 실질적으로 순수한 형태 H-1.
의 형태 T1F-1/2.
약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 7.3±0.1, 9.1±0.1, 10.0±0.1, 10.6±0.1, 11.1±0.1, 12.3±0.1, 15.6±0.1, 20.1±0.1, 20.9±0.1 및 27.8±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 갖는

의 형태 T1F-1/2.
a) 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 7.3±0.1, 9.1±0.1, 10.0±0.1, 10.6±0.1, 11.1±0.1, 12.3±0.1, 15.6±0.1, 20.1±0.1, 20.9±0.1 및 27.8±0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크; 및/또는
c) 전형적으로 140 내지 145℃의 범위에서 개시되는 용융과 관련된 제1 흡열 및 그 후의 분해
중 하나 이상을 특징으로 하는

의 형태 T1F-1/2.
의 실질적으로 순수한 형태 T1F-1/2.
의 형태 H-1 및 형태 T1F-1/2의 혼합물.
의 형태 H-1, 형태 T1F-1/2 또는 이들의 혼합물, 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.
의 형태 H-1, 형태 T1F-1/2 또는 이들의 혼합물을, 항-HCV 활성을 갖는 1종 이상의 추가 화합물과 조합으로 포함하는 제약 조성물.
제13항에 있어서, 항-HCV 활성을 갖는 1종 이상의 추가 화합물이 인터페론 또는 리바비린인 조성물.
제14항에 있어서, 인터페론이 인터페론 알파 2B, peg화된 인터페론 알파, 컨센서스(consensus) 인터페론, 인터페론 알파 2A 및 림프아형 인터페론 타우(tau)로부터 선택된 것인 조성물.
제13항에 있어서, 1종 이상의 추가 화합물이 인터류킨 2, 인터류킨 6, 인터류킨 12, 1형 헬퍼 T 세포 반응의 발생을 증대시키는 화합물, 간섭 RNA, 안티센스 RNA, 이미퀴모드, 리바비린, 이노신 5'-모노포스페이트 데히드로게나제 억제제, 아만타딘 및 리만타딘으로부터 선택된 것인 조성물.
치료 유효량의

의 형태 H-1, 형태 T1F-1/2 또는 이들의 혼합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유동물에서 HCV 감염을 치료하는 방법.
제17항에 있어서, 포유동물이 인간인 방법.