KR20100067698A - 부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 상기 부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 피부 자극이 없으면서 보습 효과가 우수하고, 엘라스틴 및 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 있어, 피부 보습, 노화방지 및 탄력증진에 뛰어난 효과를 나타낸다. 따라서, 본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 보습용, 노화방지용 및 탄력증진용으로서, 화장료 조성물 또는 약학 조성물로 사용할 수 있다.

부용화, 피부 자극, 엘라스틴, 콜라겐, 보습, 노화방지, 탄력증진, 화장료, 외용제

Description

부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물{External compositions for skin care containing extract of Hibiscus mutabilis Linne }

본 발명은 부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.

피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 제기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주는 기능을 가지고 있다. 그러나, 나이가 들어감에 따라 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하며 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되고, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선에 자외선 함량이 증가하게 되고 환경오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 생기는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스 등은 피부의 정상기능을 저하시키고 피부의 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시키게 된다.

이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여, 종래 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부노화를 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔었다.

그러나, 아직까지 안전하고 부작용이 없으면서 유효적인 효과를 나타내는 화장품 원료는 그리 많지 않은 실정이다.

본 발명이 해결하고자 하는 과제는 상기와 같은 효과를 갖는 부용화 추출물을 함유하여 우수한 피부 보습 효과, 노화방지 효과 및 탄력증진 효과를 나타내는 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.

또한, 상기 부용화 추출물을 가능한 적은 처리과정을 거쳐 장기보존이 가능한 방법을 제공하고, 또한, 이를 사용한 화장료 조성물 또는 약학 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 부용화 추출물을 함유한다.

또한, 본 발명에 의한 피부외용제 조성물은, 보습용, 노화방지용,피부 탄력증진용중 어느 하나일 수 있다.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, a)부용화로부터 추출물을 얻는 제 1 단계; b)부용화 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과하는 제 2단계; c)무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합하는 후처리를 하는 제 3 단계; 및 상기 제 3 단계에서 후처리된 부용화 추출물을 제형화하는 제 4 단계를 포함하여 구성된다.

또한, 상기 여과는 감압여과 방식 또는 가압여과 방식을 이용할 수 있다.

또한, 상기 감압여과는 진공펌프를 이용하고, 가압여과 는 페리스테틱 펌 프(peristaltic pump)를 이용하는 것일 수 있다.

또한, 상기 제 1단계는 초임계 추출조를 사용하여 초임계 추출하는 것일 수 있다.

본 발명에 의한 부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물은 보습 효과, 엘라스틴 생성 촉진 효과, 콜라겐 생성 촉진 효과가 있다. 또한, 부용화 추출물의 저장기간을 향상시키는 효과가 있다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 부용화 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에서 사용되는 부용화(芙蓉花)는 아욱과의 갈잎떨기나무 부용(Hibiscus mutabilis Linne)의 꽃이다. 맛은 맵고, 성질은 평(平)하여, 한방에서는 약성은 평범하나 서늘한 쪽에 치우쳐 양혈(凉血), 해독(解毒) 작용이 있으므로 종기의 염증을 가라앉혀 통증을 그치게 하며, 외용으로는 환부에 붙이면 즉시 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 노폐물을 제거해 피부를 맑게 해주는 역할을 한다.또한, 상기 부용화의 부위는 꽃, 잎, 씨앗, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상일 수 있다.

본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 부용화 추출물을 조성물 총 중량에 대해 0.01~99.5중량%, 바람직하게는 0.01~60.0중량%, 더욱 바람직하게는 1.0~50.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 한다. 이는 상기 추출물의 양이 99.5중량% 초과일 경우, 제형 안정성에 문제가 발생할 수 있고, 0.01 미만일 경우 그 효과가 미미하기 때문이다. 상기 관점에서 볼 때 0.01~60.0중량% 함유하는 것이 바람직하며, 1.0~50.0 중량% 함유하는 것이 더욱 바람직하다.

또한, 상기 부용화 추출물은 부용화로부터 추출물을 얻은 후 상기 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과한 후, 무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합함으로써 장기보존이 가능하도록 후처리된 추출물인 것을 특징한다.

본 발명의 상기 부용화 추출물은 건조농축물 또는 건조된 추출물을 사용할 수 있다.

본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 보습용 조성물임을 특징으로 한다.

본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 노화방지용 조성물임을 특징으로 한다.

본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 피부 탄력증진용 조성물임을 특징으로 한다.

또한, 본 발명의 상기 피부 외용제 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤과 같은 피부 점착타입의 화장료, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션과 같은 제형을 갖는 화장료, 샴푸, 린스, 바디크렌저, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징크림, 클렌징 워터, 비누와 같은 세정용 화장료 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있으며, 또한, 산 제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 분무제와 같은 경피투여형 제형을 갖는 약학 조성물일 수 있다.

또한, 각 제형의 조성물에 있어서, 상기한 부용화 추출물 이외에 다른 성분들은 기타 조성물의 제형 또는 사용목적 등에 따라 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.

본 발명에 따른 상기 부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물의 제조방법은, 부용화로부터 추출물을 얻는 제 1 단계; 부용화 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과하는 제 2단계; 무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합하는 후처리를 하는 제 3 단계; 및 상기 제 3 단계에서 후처리된 부용화 추출물을 제형화하는 제 4 단계를 포함하여 구성되는 것을 특징으로 한다.

상기 여과는 감압여과 방식 또는 가압여과 방식을 이용하는 것을 특징으로 한다.

상기 감압여과는 진공펌프를 이용하고, 가압여과는 페리스테틱 펌프(peristaltic pump)를 이용하는 것을 특징으로 한다.

상기 제 1단계는 초임계 추출조를 사용하여 초임계 추출하는 것을 특징으로 한다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 발명자들은 이러한 약리적 효능을 지닌 부용화 추출물이 피부 수분의 흡 습성을 증가시키며 엘라스틴 생성 및 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 있음을 발견하였으며, 이들 생약재 추출물은 식물체로부터 유효성분을 추출하기 위하여 통상적으로 사용되고 당업자에게 주지된 방법에 의해 제조된 것이다.

또한, 부용화 추출물은 기존에는 마땅한 변색, 변취 방지 방법이 없었으나, 본 발명에서 개발된 새로운 처리방법을 이용하여 채취직후 방부, 항산화 처리를 한다.

부용화 추출물은 부용화의 꽃, 잎, 씨앗, 뿌리 및 줄기로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 부위를 채취하여 얻을 수 있다.

상기 부용화 추출물을 수득하기 위하여, 예를 들면, 부용화를 건조하여 분쇄한 다음, 부용화 분쇄물에 물, 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르 또는 이들의 혼합물을 분쇄물 건조중량에 대하여 일정량을 가한 다음, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 50 내지 100 ℃ 온도로 5 내지 24시간동안 가열하여 추출하거나; 상기 부용화 분쇄물에 물, 탄소수 1 내지 3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르 또는 이들의 혼합물을 분쇄물 건조중량에 대하여 일정량을 가한 다음, 4 내지 25 ℃ 온도로 3 내지 20일간 침적시켜 부용화 추출물을 수득하거나; 무수 또는 함수 에탄올, 또는 메탄올 추출물에 적당한 양의 물을 가한 뒤 생기는 침전물을 여과하여 제거하고, 여기에 에틸아세테이트, 부탄올 또는 디에틸에테르를 가하여 잘 섞은 다음 방치하여 층을 분리시킨 뒤 상층을 분리한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 부용화 추출물을 수득할 수 있다.

또한, 건조한 부용화 일정량을 100~500 ml, 바람직하게는 100 ml의 초임계 추 출조에 넣고 추출조를 밀봉한 다음, 추출조의 온도를 30~80 ℃, 바람직하게는 40 ℃까지 승온하고 고압 액체 펌프를 장착하여 용매로 물, 에틸알콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군중에서 선택된 어느 하나 이상, 바람직하게는 부틸렌글리콜을 일정량 투입하면서 동시에 이산화탄소를 고압용 기체 펌프를 이용하여 투입하여 압력을 200~400기압, 바람직하게는 300기압까지 올린 후, 추출조의 출구에 부착된 압력조절 밸브를 이용하여 추출물을 방출시키면서 압력과 온도를 약 300기압, 약 40℃로 일정하게 유지하고, 상기 용매를 20~50분, 바람직하게는 30분에 걸쳐 모두 투입하고 고압 액체 펌프의 가동을 중단하고 고압용 기체 펌프를 이용하여 이산화탄소로만 1~3시간, 바람직하게는 2시간 추출하여 추출조 내부에 남아있는 상기 용매를 모두 배출하여 추출을 종료하고, 상기에서 수득한 부용화 추출액을 원심분리하고 여과하여, 본 발명의 부용화추출물을 수득할 수 있다.

상기의 방법으로 수득된 부용화 추출물을 저장용기에 보관한다. 이때, 저장된 부용화 추출물의 방부, 항산화를 위한 처리방법은 수득직후의 부용화 추출물을 0.05~0.2μm 의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여, 진공펌프를 이용한 감압여과 방식 또는 페리스테틱 펌프(peristaltic pump)를 이용한 가압여과 방식으로 여과시켜 부용화 추출물에 존재하여 장래 균, 미생물 및 미생물의 영양분으로 이용되거나, 장기 보존시 침전, 변성의 가능성이 있는 분자량이 큰 단백질 등을 제거한 후, 무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합하여 효소의 활성을 억제하며, 처리 직후 바로 질소 분위기 하에서 밀봉보관하여 외부와 차단시켜 외부의 균이나 미생물의 침입을 방지하도록 처리한 후 실험에 사용한다.

본 발명에 따른 추출물은, 피부 외용제 조성물로써 추출물, 추출액, 농축물, 추출물의 건조분말, 추출액의 건조분말, 농축물의 건조분말 등을 그대로 도포하는 것이 적합하나, 통상의 외용의 제제, 화장료 제형 또는 약학 제형으로 제형화 할 수 있다.

본 발명에 따른 부용화 추출물을 함유하는 화장료 제형을 갖는 화장료 조성물은, 상기한 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유하는 것도 무방하다.

또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤과 같은 피부 점착타입의 화장료, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션과 같은 제형을 갖는 화장료, 샴푸, 린스, 바디크렌저, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징크림, 클렌징 워터, 비누와 같은 세정 화장료의 제형을 가질 수 있다.

각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기의 추출물 이외에 다른 성분들은 기타 화장료의 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의선정하여 배합할 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티 드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.01～5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01～3 중량%로 배합된다.

본 발명의 부용화 추출물을 함유하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 추출물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 추출물을 포함하는 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 분무제와 같은 경피투여형 제형을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 대상자의 연령, 성별, 체중, 증상, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 약학 조성물을 1일 0.001~ 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 할 수도 있고, 수회 나누어 할 수도 있다. 또한, 그 투여량은 연령, 성별, 체중, 질병의 정도, 투여경로 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 추출물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 비경구, 경구 등의 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.

이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 부용화 추출물의 제조

부용화를 채취하고 건조한 후 분쇄한 다음, 부용화 건조분쇄물 1 g에 물 100 mℓ를 가한 다음, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 60℃ 온도로 8시간동안 가열하여 부용화 추출물을 수득하였다.

실시예 2. 부용화 추출물의 제조

건조한 부용화 5 g을 100 ml의 초임계 추출조에 넣고 추출조를 밀봉한 다음, 추출조의 온도를 40 ℃까지 승온하고 고압 액체 펌프를 장착하여 부틸렌글리콜을 투입하면서 동시에 이산화탄소를 고압용 기체 펌프를 이용하여 투입하여 압력을 300 기압까지 올린 후, 추출조의 출구에 부착된 압력조절 밸브를 이용하여 추출물을 방출시키면서 압력과 온도를 300기압, 40 ℃로 일정하게 유지하면서, 부틸렌글리콜을 30분에 걸쳐 12.5 g을 모두 투입하고 고압 액체 펌프의 가동을 중단하고 고압용 기체 펌프를 이용하여 이산화탄소로만 2시간 추출하여 추출조 내부에 남아있는 부틸렌글리콜을 모두 배출하여 추출을 종료하고, 얻어진 추출액을 원심분리하고 여과하여 부용화 추출물을 수득하였다.

제제예

제제예 1. 유연화장수

조성	함량(중량%)
베타인 낫토검 셀룰로오스검 에탄올 폴리옥시에칠렌경화피마자유 초산토코페롤 방부제 색소 실시예 2의 부용화 추출물 정제수	3.0 3.0 0.08 5.0 0.5 0.2 5.0 미량 적량 100 까지

제제예 2. 영양화장수

조성	함량(중량%)
세칠에칠헥사노에이트 세토스테아릴알콜 친유형모노스테아린산 스테아레이트 스쿠알란 폴리솔베이트 60 솔비탄세스퀴올리에이트 글리세린 트리에탄올아민 카르복시비닐폴리머 방부제 색소 향 실시예 2의 부용화 추출물 정제수	5.0 1.0 0.8 2.0 1.5 0.5 8.0 0.2 0.2 미량 미량 미량 적량 100까지

제제예 3. 영양크림

조성	함량(중량%)
밀납 글리세릴스테아레이트 세토스테아레이트 폴리솔베이트 60 솔비탄세스퀴올리에이트 세칠에첼헥사노에이트 스쿠알란 유동파라핀 글리세린 프로필렌글리콜 식물 추출물 방부제 색소 향 실시예 2의 부용화 추출물 정제수	1.0 2.0 2.5 1.5 0.5 5.0 5.0 8.0 8.0 4.0 5.0 미량 미량 미량 적량 100까지

제제예 4. 에센스

조성	함량(중량%)
글리세린 프로필렌글리콜 셀룰로오스검 낫토검 히아루론산추출물 아미노프로판술포닉액시드 카르복시비닐폴리머 에탄올 폴리옥시에칠렌경화피마자유 트리에탄올아민 방부제 향 색소 실시예 2의 부용화 추출물 정제수	15.0 5.0 0.05 5.0 5.0 2.0 0.5 5.0 0.5 0.5 미량 미량 미량 적량 100까지

제제예 5. 로션

조성	함량(중량%)
글리세릴스테아레이트 폴리솔베이트 60 솔비탄세스퀴올리에이트 세칠에칠헥사노에이트 스쿠알란 라놀린 글리세린 카르복시비닐폴리머 가수분해콜라겐 트리에탄올아민 방부제 향료 색소 실시예 2의 부용화 추출물 정제수	1.5 1.5 0.5 3.0 3.0 2.0 8.0 0.5 1.0 0.5 미량 미량 미량 적량 100까지

실험예 6. 연고

조성	함량(중량%)
카프린/카프릴 트리글리세리드 액상 파라핀 솔비탄세스퀴올리에이트 옥틸도데세스-25 세칠에칠헥사노에이트 스쿠알란 살리실산 글리세린 솔비톨 실시예 2의 부용화 추출물 정제수	10.0 10.0 6.0 9.0 10.0 1.0 1.0 15.0 10.0 적량 100까지

제제예 7. 분무제

조성	함량(중량%)
트리에탄올아민 폴리비닐피롤리돈/비닐아세테이트 글리세린 폴리아크릴레이트 실시예 2의 부용화 추출물 정제수	0.2 3.0 5.0 0.2 적량 100까지

상기 처방을 펌프용기에 담아 사용한다.

실험예 1. 방부처리 실험

부용화 추출물의 가장 효과적인 방부처리 방법을 알아보기 위하여, 상기 실시예 2에서 수득한 부용화 추출물을 0.2 미크론(micron) 기공 크기를 가지는 여과막을 통과시킨 후, 이미다졸리디닐 유레아 0.3 %, 메틸파라벤(10 % 에탄올 용액 내) 0.3 %, 프로필파라벤(10 % 에탄올 용액 내) 0.3 %, 메틸파라벤/프로필파라벤(10 % 에탄올 용액 내) 0.2/0.1 %, 무수 에탄올 2.0 %, 5.0 %, 7.0 %, 10.0 %, 25.0 %를 각각처리하고, 각각, 실온, 45 ℃에서 보관하고, 1일, 7일, 30일의 시간경과에 따른 방부 효과를 확인하였고, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.

방부처리방법	함량 (% w/w)	1일 경과		7일 경과		30일 경과
		실온	45 ℃	실온	45 ℃	실온	45 ℃
이미다졸리디닐 유레아	0.3	Ｏ	Ｏ	×	×	×	×
메틸파라벤(10 % 에탄올 용액 내)	0.3	Ｏ	Ｏ	×	×	×	×
프로필파라벤(10 % 에탄올 용액 내)	0.3	Ｏ	Ｏ	×	×	×	×
메틸파라벤/프로필파라벤(10 % 에탄올 용액 내)	0.2/0.1	Ｏ	Ｏ	Ｏ	×	×	×
무수 에탄올	2.0	Ｏ	Ｏ	Ｏ	×	×	×
무수 에탄올	5.0	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	×
무수 에탄올	7.0	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ
무수 에탄올	10.0	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ
무수 에탄올	25.0	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ	Ｏ

Ｏ: 방부 유지, ×: 방부 효과가 없어서 균류 증식

그 결과, 상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 무수 에탄올을 7 %(w/w) 함유한 경우 30 일까지 방부 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다.

실험예 2. 부용화 추출물의 피부자극도 실험

피부 외용제 조성물로서 사용시 부용화 추출물의 피부자극도를 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.

먼저, 건강한 남녀 실험자 20명의 팔 하박부에 상기 제제예 1 내지 5의 처방으로 제조된 시료를 폐쇄 첩포 시험 방법에 따라, 1일 1회씩 도포한 후 외부와의 차단을 위해 플라스틱 캡을 씌운 다음 1일 후, 3일 후, 7일 후하기 표 9의 판정 방법에 따라 자극 정도를 관찰하였고, 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다. 한편, 하기 표 10의 수치는 하기 표 9의 판정 방법에 의해 산출된 자극의 평균치이다.

판정 숫자	피부 자극 정도
0 1 2 3 4	자극 없음 최소한의 자극 약간의 자극(홍반) 심한 자극(홍반, 부종) 극심한 자극(홍반, 부종)

시료	피부 자극도(%)
	1일 후	3일 후	7일 후
제제예 1	0.2	0.3	0.3
제제예 2	0.2	0.3	0.5
제제예 3	0.4	0.5	0.8
제제예 4	0.3	0.4	0.5
제제예 5	0.5	0.6	0.8

그 결과, 상기 표 10에 나타낸 바와 같이, 상기 제제예 1 내지 5의 모든 시료에 있어 피부 자극이 없음을 알 수 있었다.

실험예 3. 수분 흡습성 실험

부용화 추출물의 수분 흡습성을 실험하기 위하여, 인간으로부터 직접 채취하거나 또는 상업적으로 구입한 사람의 건조 표피 세포에 상기 실시예 2의 부용화 추출물과 증류수를 각각 포화 흡수시키고 흡수된 물의 양을 측정한 후, 48시간 건조후의 질량변화를 측정하였다. 각각의 측정된 질량의 변화로부터 피부세포 단위 질량 당 흡수된 물의 양을 비교하였다. 이러한 실험은 표피세포에 흡습되는 물의 양을 비교하기 위한 방법으로 실제 사람의 피부에 있어서도 그 보습효과를 예상할 수 있는 한가지 방법으로 사용되고 있다.

구체적으로, 사람의 표피세포를 건조시켜 단위질량 당 함유된 수분의 양을 일정하게 만든 후, 각각의 표피세포 시료의 무게와 함유된 물의 양을 카이저 방법(Kaiser method)을 사용하여 측정하였다. 물의 함량이 측정된 표피세포를 부용화 추출물(A), 정제수(B)에 각각 24시간 담지하여 포화 흡수시켜준 뒤, 세포 내에 물이 포화흡수된 표피세포를 꺼내서 무게를 달고, 일부를 채취하여 카이저 수분측정기로 함유되어 있는 단위질량 당 수분의 양을 측정하였다. 이후 다시 48시간 감압건조시키고 무게를 달고난 후, 일부를 채취하여 카이저 방법에 의해 수분량을 측정하여 함유되어 있는 단위질량 당 수분의 양을 측정하였다.

그 결과를 하기 표 11에 나타내었다.

표피세포에 대한 수분공급능력(수분 mg/표피세포 질량 g)

	수분함량
	초기 건조상태	포화상태	건조 후
부용화 추출물	450	860	540
정제수	450	840	460

상기 표 11에 나타낸 바와 같이, 부용화 추출물로 포화 흡습시킨 표피세포가 정제수에 의하여 포화흡습된 표피세포의 재건조과정에 있어 정제수보다 훨씬 많은 물을 함유하고 있음을 확인할 수 있었으며, 이로부터 부용화 추출물의 우수한 피부 흡습성을 확인할 수 있었다. 이를 통하여 부용화 추출물이 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.

실험예 4 부용화 추출물의 엘라스틴 생성 촉진 효과

부용화 추출물의 엘라스틴 생성 촉진 효과를 알아보기 위하여, 사람으로부터 직접 채취하거나 상업적으로 구입한 사람의 섬유 아세포에 상기 실시예 2의 부용화 추출물을 처리하여 엘라스타제(elastase) 활성의 억제효과를 하기와 같은 실험을 수행하였다.

먼저, 사람의 섬유 아세포를 배양용 플라스크에 넣고 약 70～80 % 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이후 부용화 추출물을 1일간 처리한 후 세포배양액을 채취하여 상업적으로 이용가능한 엘라스틴 측정기구를 이용하여 엘라스틴 생성정도를 측정하였다 ("The synthesis and analytical use of a highly sensitive and covenient substrate of elastase", Biochemical Medicine, 11, pp350-357, 1974 및 "Elastase and neutral cathepsin production by human fibroblasts effect of culture conditions on synthesis and secretion", J. Invest Dermatol., 86, pp63-68, 1986 참조). 즉, 엘라스타제의 기질인 Suc-(Ala) 3 NA를 이용하여, NA가 분해되면서 생기는 색의 변화를 흡광도를 이용하여, 엘라스타제의 활성도를 측정하였다. 이때 부용화 추출물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.

그 결과를 하기 표 12에 나타내었다.

물질	활성 억제율(%)
부용화 추출물 0.1 %	30
부용화 추출물 0.01 %	15
대조군	0

상기 표 12에 나타낸 바와 같이, 부용화 추출물은 대조군에 비하여 엘라스타제의 활성을 뛰어나게 억제함을 알 수 있으며, 활성 억제율은 부용화 추출물의 농도가 증가할수록 높아짐을 확인하였다. 이를 통하여 부용화 추출물이 우수한 노화 방지 및 탄력 증진 효과를 나타냄을 알 수 있다.

실험예 5. 부용화 추출물의 콜라젠 생성 촉진 효과

부용화 추출물의 콜라젠 생성 촉진 효과를 알아보기 위하여, 사람으로부터 직접 채취하거나 상업적으로 구입한 사람의 섬유아세포에 상기 실시예2의 부용화 추출물을 처리하여 콜라게나제 활성 억제효과를 하기와 같은 방법으로 측정하였다.

먼저, 사람의 섬유아세포를 배양용 플라스크에 넣고 약 70～80 % 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이후 부용화 추출물을 1일간 처리한 후 세포배양액을 채취하여 상업적으로 이용 가능한 콜라게나제 활성측정기구를 이용하여 콜라젠 생성 정도를 측정하였다("An assay of collagenase activity using enzyme-linked immunosorbent assay for mammalian collagenase", Anal . Biochem ., 116(1), pp172-7, 1987 참조). 즉, 콜라게나제에 대한 항체를 이용하여, 사람(Human)에서 유래한 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)을 정량하였다. 이때, 부용화 추출물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 사용하였다.

그 결과를 하기 표 13에 나타내었다.

물질	활성 억제율(%)
부용화 추출물 0.1 %	26
부용화 추출물 0.01 %	12
대조군	0

상기 표 13에 나타낸 바와 같이, 부용화 추출물은 대조군에 비하여 콜라게나제의 활성을 뛰어나게 억제함을 알 수 있으며, 활성 억제율은 부용화 추출물의 농도가 증가할수록 높아짐을 확인하였다. 이를 통하여 부용화 추출물이 우수한 탄력증진 효과를 나타냄을 알 수 있다.

Claims (8)

1. 부용화 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 피부외용제 조성물은 피부 보습용인 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
3. 제 1항에 있어서, 상기 피부외용제 조성물은 피부 노화방지용인 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 피부외용제 조성물은 피부 탄력증진용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
5. a)부용화로부터 추출물을 얻는 제 1 단계;

   b)부용화 추출물을 0.05~0.2 μm의 기공 크기(pore size)를 가지는 여과막을 사용하여 여과하는 제 2단계;

   c)무수에탄올을 전체 조성물 100을 기준으로 최소 7 %(w/w)가 되도록 혼합하는 후처리를 하는 제 3 단계; 및

   상기 제 3 단계에서 후처리된 부용화 추출물을 제형화하는 제 4 단계를 포함하여 구성되는 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물의 제조방법.
6. 제 5항에 있어서, 상기 여과는 감압여과 방식 또는 가압여과 방식을 이용하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물의 제조방법.
7. 제 6항에 있어서, 상기 감압여과는 진공펌프를 이용하고, 가압여과는 페리스테틱 펌프(peristaltic pump)를 이용하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물의 제조방법.
8. 제 5항에 있어서, 제 1단계는 초임계 추출조를 사용하여 초임계 추출하는 것을 특징으로 피부 외용제 조성물의 제조방법.