KR20100058858A - 글루타밀아미도에틸 인돌을 함유하는 항노화용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항노화용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 하기 화학식 1의 글루타밀아미도에틸 인돌(glutamylamidoethyl indole) 을 유효성분으로 하는 항노화용 화장료 조성물로, 글루타밀아미도에틸 인돌(glutamylamidoethyl indole)성분은 노화, 스트레스 또는 외부유해인자 등에 의해 감소되는 피부 신경조직을 재생하고 활성화시켜 궁극적으로 피부 노화를 방지하는 효과가 있다.

[화학식 1]

항노화용, 글루타밀아미도에틸 인돌, 노화, 스트레스

Description

글루타밀아미도에틸 인돌을 함유하는 항노화용 화장료 조성물{Anti-aging cosmetic composition containing glutamylamidoethyl indole}

본 발명은 항노화용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 글루타밀아미도에틸 인돌(glutamylamidoethyl indole)성분을 함유하는 항노화용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 기관들을 온도·습도 변화, 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 이렇게 중요한 피부 역시 인체의 다른 장기와 마찬가지로 나이가 들어감에 따라 점차 노화가 진행되게 되고, 그 결과로서 피부 탄력손실, 각질화, 주름 생성, 피부 위축 등의 현상이 나타나게 된다. 이러한 피부 노화 현상의 원인은 크게 두 가지로 세포의 유전자 변이, 조직 변화 등 내적 요인과 자외선, 열, 습도 등 외적 요인으로 분류될 수 있다(Masamitsu Ichihashi, Fragrance Journal, Vol. 32, No. 5, 24~30). 여기서 자외선에 의한 노화 현상을 광노화라고 하며, 이러한 광노화 현상은 자외선에 의하여 세포 내부에 활성 산소 라디칼(ROS, Reactive Oxygen Radical)을 생성시키게 된다. 이 활성 산소는 염증성 반응을 일으키는 신호전달 체계를 통하여 진피층의 탄력 섬유인 콜라겐, 엘라스틴 등의 단백질 분해 효소(MMP-1, MMP-3, MMP-9, etc.)의 합성을 촉진하여(Fisher G.J. et al., Nature, Vol. 379, 335~339) 진피층의 탄력을 감소시키고 결국 피부 주름을 유발시킨다.

따라서, 이러한 피부 노화 현상을 방지하고 보다 건강하고 탄력있는 피부를 유지하기 위하여 주름 개선 효과가 있는 생리활성물질을 개발하고자 하는 연구활동이 꾸준히 진행되어 왔다. 대표적으로 1995년 광노화된 피부의 개선을 위한 치료제로 트레티노인(trans-retinoic acid)이 미국 FDA 허가를 받았으며, 이보다 부작용이 적은 레티놀이 1990년대 중,후반부터 화장품 원료에 사용되기 시작하면서 본격적으로 주름 개선 화장품이 출시되기 시작하였다. 그 이후로 여성 호르몬 유사 물질, 각종 식물에서 추출한 항산화제 등이 주름 개선 원료로서 화장품에 도입되었다.

그러나 상기 화장품 원료들은 대부분 효능이 미진하거나 피부 부작용을 유발하는 등 여러 가지 문제점을 가지고 있었다. 또한 효능이 좋은 원료라고 하더라도 현재의 화장품 원료들은 피부에 작용하는 범위가 제한적이고, 대부분 콜라겐 합성 촉진, 콜라겐 분해 억제, 활성산소 제거와 같이 피부에 미치는 효능이 유사하여 보다 새롭고 보다 강력하며 보다 근본적인 주름 개선을 원하는 고객들의 요구를 충분히 만족시킬 수 없었다. 이에, 최신 피부 과학 이론에 기반하여 새로운 피부 노화 메커니즘을 규명하고 이를 차단하거나 늦출 수 있는 원료와 기술에 대한 연구가 화장품 산업에서 활발히 진행되고 있다.

최근에는 신경과학, 뇌과학 기술이 크게 진보하면서 신경조직이 피부세포들과 긴밀히 연결되어 피부노화과정에 관여한다라는 새로운 과학적 사실들이 밝혀지고 있다. 여러 연구 결과들을 살펴 보면, 신경섬유들은 표피의 과립층에까지 뻗어 있어 각질형성세포(Keratinocyte), 멜라닌형성세포(Melanocyte), 섬유아세포(Fibroblast) 등과 긴밀히 연관되어 있다고 알려지고 있는데, 대표적인 예를 들면 차가움, 통증, 압력 등의 외부 신호들은 각질 형성 세포의 수용체를 통해 가공되어 신경으로 전달된다고 보고되고 있다. 이에, 피부 속 신경 조직을 케어함으로써 피부 노화의 근본적 원인을 개선시키는 뉴로코스메틱(Neuro-cosmetic)이 스킨케어의 핫이슈로 떠오르면서 화장품 연구원들의 관심이 집중되고 있다.

피부 속 신경은 스트레스, 외부의 유해 요인, 내인성 노화 등 다양한 원인에 의해 손상을 받으면서 퇴화되고 그 밀도가 감소하게 되는데, 이에 따라 피부 구조도 붕괴되면서 주름이 깊어지게 된다. 또한 신경 세포의 손상은 신경 세포로부터 CGRP라고 하는 뉴로펩타이드를 30배까지 더 분비하게 만드는데, 이 뉴로펩타이드는 신경 세포뿐 아니라 주변의 피부세포에까지 막대한 손상을 입히게 된다. 예를 들면, 각질형성세포에 손상을 입혀 표피의 세포밀도를 떨어뜨리고, 섬유아세포에 손상을 입혀 콜라겐을 파괴시키게 되는 것이다. 또한 신경 조직은 생체 내에서 재생이 가장 어려운 조직으로 잘 알려져 있어, 한번 손상되거나 퇴화되게 되면 그 복구가 매우 어렵다. 이런 점들을 모두 종합해 볼 때, 피부 주름을 근본적으로 케어하기 위해서는 결국 피부 신경 조직이 손상되고 퇴화되지 않도록 잘 관리해 주고, 손상되었다면 바로 복구시켜 줄 수 있는 신경과학기술의 접목이 필요하다.

이에, 본 발명자들은 피부 신경 재생을 재생시키고 신경세포로부터 CGRP 뉴로펩타이드 물질의 분비를 억제시킴으로써 피부 노화방지 및 주름개선 효과가 뛰어난 화장료 개발을 위해 다방면의 연구를 거듭한 결과, 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)성분이 피부 신경 보호, 재생을 통한 항노화 효과가 매우 뛰어나다는 사실을 밝혀내었다.

본 발명의 목적은 피부 노화방지 및 주름개선을 위한 것으로, 보다 구체적으로는 신경조직을 외부유해환경으로부터 보호하고 신경성장인자 생성을 통해 손상된 신경조직을 재생시킴으로써 근본적인 주름 개선 효과가 있는 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)을 유효성분으로 함유하는 피부 항노화용 화장료 조성물을 제공하기 위한 것이다.

본 발명은 피부 신경 과학에 기반하여 근본적으로 피부 노화를 방지하고 신경조직을 외부 유해환경으로부터 보호 및 신경조직을 재생시킴으로써 근본적인 주름 개선효과가 우수한 항노화용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 항노화용 화장료 조성물은 하기 화학식 1의 글루타밀아미도에틸 인돌(glutamylamidoethyl indole) 을 유효성분으로 신경성장인자(Nerve Growth Factor, NGF)의 합성을 촉진하여 신경조직을 보호하고 재생시켜주는 피부 항노화용 화장료 조성물을 제공한다.

[화학식 1]

이하 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)성분은 상업적으로 구입한 합성 디펩타이드(Synthetic dipeptide)로서 제품명은 글리스틴(Glistin)이며 온도, pH에 안정하고 물에 용해시켜 제형에 투입한다(제조원: EXSYMOL).

상기 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)은 재생이 잘되지 않는다고 알려진 PC12 신경 세포를 UV로부터 보호하는 효과가 뛰어나고 신경세포재생에 핵심적인 역할을 담당하는 신경성장인자의 합성을 촉진함으로써 노화, 스트레스, 외부유해인자로 인한 피부 신경의 손상을 억제시켜 주고, 신경조직이 건강해지면 피부세포의 감각이 예민해져 외부유해환경에 대한 대처능력과 저항력이 강해지는 효과도 추가로 얻을 수 있다.

특히, 신경 세포의 손상은 신경세포로부터 CGRP라고 하는 뉴로펩타이드물질을 30배 이상 분비시켜 각질형성세포, 섬유아세포에게도 치명적인 피해를 입히게 된다. 결국에는 피부세포의 밀도를 떨어뜨리고 탄력섬유의 합성을 방해하여 피부구조가 붕괴되어 주름이 깊어지게 된다. 글루타밀아미도에틸 인돌은 피부에서 콜라겐 합성을 증가시킴으로써 피부 진피층의 탄력 섬유를 증가시켜 주름을 개선·완화하는 효과가 있다.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 상기 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)의 함량은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 1.0중량%로 함유하는 것을 특징으로 한다. 함유량이 0. 001중량% 미만일 경우에는 주름개선 효과를 기대하기 어려우며, 1.0중량%를 초과하는 경우에는 더 이상이 효능이 크게 증가하지 않아 그 원료 효율성이 크게 떨어지게 되고 피부에 자극을 유발할 우려도 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 상기 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)의 유효성분에 올레아놀산(oleanolic acid), 우르솔산(ursolic acid), 글리시레틴산(glycyrrhetinic acid) 및 레티놀로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화합물을 더 함유하는 것을 특징으로 한다.

상기 올레아놀산 (Oleanolic acid), 우르솔산(Ursolic acid), 글리시레틴산 (Glycyrrhetinic acid) 및 레티놀(Retinol)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 더 함유함으로써 항노화 효과를 배가할 수 있다.

상기 올레아놀산, 우르솔산, 글리시레틴산 및 레티놀의 함량은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0. 001 내지 10중량%로 함유하는 것을 특징으로 한다. 각 성분의 함유량이 0. 001중량% 미만일 경우에는 주름개선 효과를 기대하기 어려우며, 10중량%를 초과하는 경우에는 더 이상이 효능이 크게 증가하지 않아 그 원료 효율성이 떨어지게 된다.

본 발명의 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤 또는 피부 점착 타입 화장료의 제형으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있다.

이상에서 살펴 본 바와 같이, 본 발명에 따른 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)은 피부 주름의 근본이 되는 피부 신경성장인자의 합성을 촉진시켜 피부조직을 보호하고 재생시켜주는 효과가 매우 탁월하다.

또한, 본 발명에 따른 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)은 노화, 스트레스, 외부유해인자로 인해 피부 속에서 점차 감소되는 피부 신경 조직을 보호하고 재생을 촉진시켜 궁극적으로 피부 노화를 방지하는 효과가 있으며 우르솔산(ursolic acid), 글리시레틴산 (glycyrrhetinic acid) 및 레티놀(retinol)을 혼합하여 사용함으로써, 피부 항노화 효과는 더욱 상승되어 보다 근본적인 주름 개선을 원하는 고객들의 요구를 충분히 만족시킬 수 있다.

이하, 본 발명을 구체적인 실시 예에 의해 보다 더 상세하게 설명하고자 한다. 하지만, 본 발명은 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 사상과 범위 내에서 여러 가지 변형 또는 수정할 수 있음은 이 분야에서 당업자에게 명백한 것이다.

[시험예 1] 콜라겐 합성 촉진 효과

인체 섬유아세포를 24 웰(well) 평판배양기에 배양한 후, 각각 0, 1, 5, 10 ppm 농도의 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)성분(Glistin; 제조회사:EXSYMOL)이 포함된 배지로 교체하였다. 배양 3일째에 10%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM 배지를 각 well 당 0.5㎖씩 첨가한 후, L[2,3,4,5-³H]-프롤린 10μCi를 첨가하였다. 24 시간 경과 후, 각 웰(well)에 들어있는 배지와 세포들을 긁어 모아 5% 트리클로로아세트산 (Trichloroacetic acid, TCA) 용액에 넣어 수세한 후, 2개 의 시험관에 분주하고 1개의 시험관에는 타입 I 콜라게나제(type I collagenase) 1 unit/㎕를 넣고, 37℃에서 90분간 배양하였으며, 다른 시험관은 4℃에서 보관하였다. 그 후, 모든 시험관에 50% 트리클로로아세트산을 0.05㎖씩 첨가하고 4℃에서 20분간 방치한 다음, 각각 12,000rpm에서 10분간 원심분리하여, 각각의 상등액과 침전물을 액체 신틸레이션 계수기 (Liquid Scintillation Counter, LSC)로 씨피엠 (Count Per Minute, CPM) 값을 얻어, 하기 수학식 1에 의거하여 대조군과 실험군에 대해 콜라겐 생합성 값 (Relative Collagen Biosynthesis, RCB)을 측정하고 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

[수학식 1]

[표 1]

상기 표 1에서 볼 수 있는 바와 같이 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)성분이 섬유아세포의 콜라겐 생합성을 농도의존적으로 증가시킴을 알 수 있었다.

[시험예 2] 신경성장인자 합성 촉진효과

DMEM 배지에 5%의 우태아혈청, 100IU의 페니시린G를 첨가한 배지에 각질 형성 세포(HaCaT cell)를 30mm 평판 배양기에 400000 cell/dish가 되도록 분주한다. 다음날 분주 된 세포를PBS로 두 번 씻어준다. 100IU의 페니시린G만 첨가한 Phenol red free DMEM 배지에 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)(1000x stock) 이 최종농도가 0, 10, 50, 100, 200ppm이 되도록 하여 분주된 처리한 후 48시간 동안 처리하여 배양액만 수거한다. 이때 음성 대조군으로는 물질이 들어가지 않은 같은 같은 시간동안 배양된 세포로부터 배양액만 수거한다.

배양액에서 신경성장 인자(NGF; nerve growth factor)의 합성량을 알아보기 위하여 ChemiKine Nerve Growth Factor Sandwich ELISA kit(#CYT304, chemicon)을 이용하여 측정을 하였다.

측정에 들어가기 전에 수거된 배양액은 TCA를 이용하여 농축을 하였다.

수거된 배양액 1ml에 100% TCA를 100ul를 넣고 아이스(ice)에 30분간 놓아둔다. 그리고 4℃, 12000prm에서 20분간 원심분리를 한다. 상층액은 버리고 침전물(pellet)에 aceton를 1ml 넣고 vortexing을 한다. 다시 4℃, 12000pr에서 20분간 원심분리를 한 후 상층액을 버리고 침전물을 말려준다. 말려진 침전물에 Kit 에 들어있는 Assay Diluent 버퍼 100ul을 첨가하여 녹인다.

ELISA assay는 제공된 표준 실험법으로 수행하여 합성된 신경성자 인자 농도를 측정한다.

[표 2]

상기 표 2에서 볼 수 있듯이 본 발명에서 사용된 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)성분은 신경성장인자의 합성을 농도 의존적으로 촉진하였으며, 이러한 결과는 곧 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)성분이 신경조직의 재생효과가 있음을 의미한다.

[실시예 1 ~ 6 및 비교예 1]

실제 사람의 피부에서 주름 완화 효과를 시험하기 위하여 하기 표 3과 같은 조성의 유액 형태의 크림 제형을 제조하였다.

[표 3]

[시험예 3] 주름 개선 효과

상기 표 3의 실시예 1 내지 6 및 비교예 1의 주름개선효과를 알아보기 위하 여 다음과 같이 평가하였다. 30대 여성 140명을 각각 20명씩 7조로 나누어 아침 저녁 매일 2회씩 8주간 지정된 눈가 부위에 실시예 1 ~ 6 및 비교예 1의 크림을 각각 도포하게 한 후, 실리콘 재질의 모사판(replica)을 제작하여 지정 부위의 주름의 상태를 화상분석기인 비지오미터(visiometer: SV60, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하였다. 그 결과를 하기 표 4 및 도 1에 나타내었으며, 이 결과는 8주 후의 각각의 파라미터(parameter) 값에서 8주 전 파라미터 값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다. 즉, 이 값이 음수가 나올수록 주름 개선 효과가 높다는 것을 의미한다.

[표 4]

R1: 주름 등고선의 최고치와 최저치의 값의 차

R2: 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균

R3: 5개씩 나눈 R1값 중 최고치

R4: 주름 등고선의 기선(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평 균값

R5: 주름 등고선의 기선에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 평균값

상기 표 4 및 도 1에 표시된 바와 같이, 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)성분을 함유한 실시예 1 내지 6의 화장료 조성물은 비교예 1에 비하여 피부 주름 개선 효과가 탁월하였으며, 특히 글루타밀아미도에틸 인돌, 올레아놀릭산, 우루솔릭산, 글리시레틴산 및 레티놀을 모두 함유한 실시예 1의 조성물을 도포하였을 경우 피부 주름 개선 효과가 가장 우수하였다.

또한, 실시예 1 내지 6 및 비교예 1에 대해 별도로 실시한 피부 안전성 평가에서, 본 발명의 화장료 조성물은 피부에 대한 안전성 역시 우수한 것으로 나타났다. 충북대학교 피부과 병원에서 평균연령 33.2세의 건강한 성인 30명을 대상으로 등부위에 48시간 첩포 후 24시간 동안 피부반응을 살펴보았다. 피부자극의 평가기준은 CTFA guideline(1981년)과 Frosch&Kligman의 판정기준을 참고하였다. 본 화장료 조성물의 경우 건강한 성인 30명 모두 피부자극을 일으키지 않아 피부안전성이 매우 우수한 것으로 판명되었다.

도 1은 실시예 1 내지 6 및 비교예 1의 주름 개선 효과를 나타낸 그래프이다.

Claims (6)

1. 하기 화학식 1의 글루타밀아미도에틸 인돌(Glutamylamidoethyl indole)을 유효성분으로 함유하는 피부 항노화용 화장료 조성물.

   [화학식 1]

   
2. 제 1항에 있어서,

   상기 글루타밀아미도에틸 인돌은 손상 및 노화된 피부신경 조직을 재생시키고 활성화시키는 것을 특징으로 하는 피부 항노화용 화장료 조성물.
3. 제 2항에 있어서,

   상기 글루타밀아미도에틸 인돌은 신경성장인자(Nerve Growth Factor, NGF)의 합성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 피부 항노화용 화장료 조성물.
4. 제 1항 내지 제 3항의 어느 한 항에 있어서,

   상기 글루타밀아미도에틸 인돌의 함량은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 1.0 중량%으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 항노화용 화장료 조성물.
5. 제 1항 내지 제 3항의 어느 한 항에 있어서,

   상기 피부 항노화용 화장료 조성물은 우르솔산(ursolic acid), 글리시레틴산 (glycyrrhetinic acid) 및 레티놀(retinol)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화합물을 더 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 항노화용 화장료 조성물.
6. 제 5항에 있어서,

   상기 올레아놀산(oleanolic acid), 우르솔산(ursolic acid), 글리시레틴산(glycyrrhetinic acid) 및 레티놀(retinol)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화합물의 함량은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0. 001 내지10 중량%으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 항노화용 화장료 조성물.

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