KR20100003737A - 시클릭 펩티드 ｃｘｃｒ４ 길항제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 암, 류마티스 관절염, 폐 섬유증 및 HIV 감염의 치료에 유용한 락탐-환화 펩티드 CXCR4 길항제를 제공한다.
CXCR4 길항제, 락탐-환화 펩티드

Description

시클릭 펩티드 ＣＸＣＲ４ 길항제 {CYCLIC PEPTIDE CXCR4 ANTAGONISTS}
본 발명은 신규 시클릭 펩티드 CXCR4 길항제 화합물 및 병인이 CXCR4 및 SDF-1에 의해 매개되는 질환을 치료하는데 있어서 그의 용도에 관한 것이다.
G-단백질-커플링된 수용체인 CXCR4 및 이의 천연 발생 리간드인 기질 세포-유래 인자-1 (SDF-1; CXCL12)은 케모카인 수용체-리간드 쌍이다. CXCR4는 매우 다양한 인간 암에서 구성적으로- 또는 과-발현된다. CXCR4의 유일한 공지 리간드 SDF-1은 종양 미세환경에서 뿐만 아니라 골수, 폐, 간 및 림프절, 즉 종양 전이에 가장 통상적으로 관여하는 기관 부위에서 고도로 발현된다. CXCR4/SDF-1 상호작용은 종양 성장, 침투, 혈관형성 및 전이를 비롯한 다수의 종양형성 단계에서 뿐만 아니라 류마티스 관절염, 폐 섬유증 및 HIV 감염에서 중요한 역할을 한다 (문헌 [Tsutsumi et al. (2006) Peptide Science 88(2):279-289] 참조).
이들 심각한 질환에 CXCR4/SDF-1이 관여하는 것에 비추어, CXCR4는 매력적인 치료 표적이다.
비시클람(bicyclam) CXCR4 길항제인 AMD3100은 현재 다수의 골수종 및 비-호지킨 림프종에 걸린 환자에서 줄기 세포의 이식을 위한 줄기 세포 이동에 대해 단계 III 임상 시험 중이다. 또다른 소분자 CXCR4 길항제인 AMD070은 현재 HIV 감염 에 대한 단계 II 임상 시험 중이다. 2가 (2량체) 펩티드 길항제인 CTCE9908은 현재 암에 대한 단계 Ib/II 임상 시험 중이다. 시클릭 펜타펩티드 CXCR4 길항제인 FC131은 CXCR4 형질감염제에 대한 25I-SDF-1의 결합을 4 nM의 IC50으로 억제한다 (문헌 [Fujii et al. (2003) Angew. Chem. Int. Ed. 42:3251-3253; Araki et al. (2003) Peptide Science. The Japanese Peptide Society (2004):207-210] 참조).
효능있고, 선택적이며, 다른 케모카인 수용체에서 활성을 거의 또는 전혀 나타내지 않는 개선된 CXCR4 길항제에 대한 필요성이 존재한다. 본 발명의 화합물이 그러한 효능적 및 선택적 CXCR4 길항제이다. 그의 고효능성은 치료 요법에서 적은 투여량을 사용케 하며, 그의 고선택성은 비-표적과 관련된 불리한 부작용을 최소화한다. 또한, 본원에 개시된 화합물은 다른 매우 바람직한 약리학적 성질, 예컨대 피하 투여시 높은 생체이용률, 양호한 생체내 대사 안정성, 및 편리한 투여를 가능케 하는 약역학적/약동학적 성질을 갖는다.
따라서, 제1 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다:
Figure 112009073236969-PCT00001
식 중,
a) 상기 락탐은 X1의 측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 (D/L)Agl/Glu, Dab/Glu, 및 Dap/Glu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 Ac 또는 n-헥사노일이거나; 또는
b) 상기 락탐은 X1의 측쇄 카르복실기와 X7의 측쇄 아미노기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 Asp/(D/L)Agl, Asp/Dab, Asp/Dap, Glu/(D/L)Agl, Glu/Dab, Glu/Dap, Glu/DDap, 및 Glu/Lys으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 Ac 또는 Bz이거나, 또는 X1 및 X7은 각각 숙시닐/(D/L)Agl, 숙시닐/Dab, 숙시닐/Dap, 숙시닐/Lys, 및 숙시닐/Orn으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
c) 상기 락탐은 X1의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 Ala/Glu, Ala/DGlu, DAla/Glu, DAla/DGlu, Dap(Ac)/Glu, Gly/Asp, Gly/Glu, Gly/DGlu, Leu/Glu, Leu/DGlu, Lys/DGlu, Lys(Ac)/Glu, 2Nal/Glu, Phe/Glu, Phe/DGlu, DPhe/Glu, 및 DPhe/DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
d) 상기 락탐은 X1의 비-α, 비-측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 β-Ala/Asp, β-Ala/Glu, 5- 아미노발레릴/Asp, 5-아미노발레릴/Glu, 4-AMB/Glu, 4-AMPA/Asp, 및 4-AMPA/Glu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
e) 상기 락탐은 X2의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X2 및 X7은 각각 Tyr/Asp, Tyr/Glu, 및 Tyr/DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1 및 X1은 각각 부재하고;
R1은 X1이 상기 락탐 아미드 결합의 구성성분이 아닌 α-아미노기를 함유하는 경우 Ac, Bz, 및 n-헥사노일로 이루어진 군으로부터 선택된, X1의 α-아미노기 상의 치환기이거나, 부재하며, 여기서 X1은 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, 및 Glu으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이고;
X1은 (D/L)Agl, Ala, β-Ala, DAla, 5-아미노발레릴, 4-AMB, 4-AMPA, Asp, Dab, Dap, Dap(Ac), Glu, Gly, Leu, Lys, Lys(Ac), 2Nal, Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X3은 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7은 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, DDap, Glu, DGlu, Lys, 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8은 β-Ala, Arg, DArg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로 부터 선택되거나, 부재하고;
X9는 Gly, 2Nal, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X10은 2Nal이거나, 부재하고;
여기서 X8이 부재하는 경우, X9 및 X10은 각각 부재하고, X9가 부재하는 경우, X10은 부재하고,
R2는 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택된다.
다르게 표현하자면, 이는 하기 화학식 I의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염과 동등하다:
<화학식 I>
Figure 112009073236969-PCT00002
식 중,
X1이 상기 락탐 아미드 결합의 구성성분이 아닌 α-아미노기를 함유하는 경우, R1은 Ac, Bz, 및 n-헥사노일로 이루어진 군으로부터 선택된, X1의 α-아미노기 상의 치환기이거나, 부재하며, 여기서 X1은 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, 및 Glu으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이고;
X1은 (D/L)Agl, Ala, β-Ala, DAla, 5-아미노발레릴, 4-AMB, 4-AMPA, Asp, Dab, Dap, Dap(Ac), Glu, Gly, Leu, Lys, Lys(Ac), 2Nal, Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X3은 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7은 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, DDap, Glu, DGlu, Lys, 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8은 β-Ala, Arg, DArg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9는 Gly, 2Nal, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X10은 2Nal이거나, 부재하고;
여기서 X8이 부재하는 경우, X9 및 X10은 각각 부재하고, X9가 부재하는 경우, X10은 부재하고,
R2는 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되며,
여기서,
a) X1 및 X7이 각각 (D/L)Agl/Glu, Dab/Glu, 및 Dap/Glu으로 이루어진 군으로 부터 선택된 쌍이고 R1이 Ac 또는 n-헥사노일인 경우, 상기 락탐은 X1의 측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되거나; 또는
b) X1 및 X7이 각각 Asp/(D/L)Agl, Asp/Dab, Asp/Dap, Glu/(D/L)Agl, Glu/Dab, Glu/Dap, Glu/DDap, 및 Glu/Lys으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고 R1이 Ac 또는 Bz인 경우, 또는 X1 및 X7이 각각 숙시닐/(D/L)Agl, 숙시닐/Dab, 숙시닐/Dap, 숙시닐/Lys, 및 숙시닐/Orn으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고 R1이 부재하는 경우, 상기 락탐은 X1의 측쇄 카르복실기와 X7의 측쇄 아미노기 간의 아미드 결합에 의해 형성되거나; 또는
c) X1 및 X7이 각각 Ala/Glu, Ala/DGlu, DAla/Glu, DAla/DGlu, Dap(Ac)/Glu, Gly/Asp, Gly/Glu, Gly/DGlu, Leu/Glu, Leu/DGlu, Lys/DGlu, Lys(Ac)/Glu, 2Nal/Glu, Phe/Glu, Phe/DGlu, DPhe/Glu, 및 DPhe/DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고 R1이 부재하는 경우, 상기 락탐은 X1의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되거나; 또는
d) X1 및 X7이 각각 β-Ala/Asp, β-Ala/Glu, 5-아미노발레릴/Asp, 5-아미노발레릴/Glu, 4-AMB/Glu, 4-AMPA/Asp, 및 4-AMPA/Glu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고 R1이 부재하는 경우, 상기 락탐은 X1의 비-α, 비-측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되거나; 또는
e) X2 및 X7이 각각 Tyr/Asp, Tyr/Glu, 및 Tyr/DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고 R1 및 X1이 각각 부재하는 경우, 상기 락탐은 X2의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성된다.
또다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
<화학식 I>
Figure 112009073236969-PCT00003
식 중, X1은 (D/L)Agl, Ala, β-Ala, DAla, 5-아미노발레릴, 4-AMB, 4-AMPA, Asp, Dab, Dap, Dap(Ac), Glu, Gly, Leu, Lys, Lys(Ac), 2Nal, Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하며,
여기서 X1이 (D/L)Agl, Dab, 또는 Dap이고 X1의 α-아미노기가 락탐 아미드 결합의 구성성분이 아닌 경우, 상기 α-아미노기는 Ac 및 n-헥사노일로 이루어진 군으로부터 선택된 R1로 치환되고;
X1이 Asp 또는 Glu이고 X1의 α-아미노기가 락탐 아미드 결합의 구성성분이 아닌 경우, 상기 α-아미노기는 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택된 R1로 치환되고;
X1이 Ala, β-Ala, DAla, 5-아미노발레릴, 4-AMB, 4-AMPA, Dap(Ac), Gly, Leu, Lys, Lys(Ac), 2Nal, Phe, DPhe 또는 숙시닐인 경우, R1은 부재하고;
X3은 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7은 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, DDap, Glu, DGlu, Lys, 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8은 β-Ala, Arg, DArg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9는 Gly, 2Nal, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X10은 2Nal이거나, 부재하고;
여기서 X8이 부재하는 경우, X9 및 X10은 각각 부재하고, X9가 부재하는 경우, X10은 부재하고,
R2는 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되고,
추가로
상기 락탐은 X1의 측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고, X1 및 X7은 각각 (D/L)Agl/Glu, Dab/Glu, 및 Dap/Glu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 Ac 또는 n-헥사노일이거나; 또는
상기 락탐은 X1의 측쇄 카르복실기와 X7의 측쇄 아미노기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고, X1 및 X7은 각각 Asp/(D/L)Agl, Asp/Dab, Asp/Dap, Glu/(D/L)Agl, Glu/Dab, Glu/Dap, Glu/DDap, 및 Glu/Lys으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 Ac 또는 Bz이거나, 또는 X1 및 X7은 각각 숙시닐/(D/L)Agl, 숙시닐/Dab, 숙시닐/Dap, 숙시닐/Lys, 및 숙시닐/Orn으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
상기 락탐은 X1의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고, X1 및 X7은 각각 Ala/Glu, Ala/DGlu, DAla/Glu, DAla/DGlu, Dap(Ac)/Glu, Gly/Asp, Gly/Glu, Gly/DGlu, Leu/Glu, Leu/DGlu, Lys/DGlu, Lys(Ac)/Glu, 2Nal/Glu, Phe/Glu, Phe/DGlu, DPhe/Glu, 및 DPhe/DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
상기 락탐은 X1의 비-α, 비-측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고, X1 및 X7은 각각 β-Ala/Asp, β-Ala/Glu, 5-아미노발레릴/Asp, 5-아미노발레릴/Glu, 4-AMB/Glu, 4-AMPA/Asp, 및 4-AMPA/Glu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
상기 락탐은 X2에서 Tyr의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고, X2 및 X7은 Asp, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고, R1 및 X1은 각각 부재한다.
화학식 I의 모든 화합물에서 반복되는 서열 모티프는 위치 X2에 Tyr의 존재, 위치 X4에 DArg의 존재, 위치 X5에 2Nal의 존재, 위치 X6에 Gly의 존재이다.
또다른 측면에서, 본 발명은
R1이 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X1이 β-Ala, 4-AMB, 4-AMPA, Asp, Dab, Dap, Dap(Ac), Glu, 2Nal, Phe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X3이 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7이 Asp, Dab, Dap, Glu, DGlu, Lys, 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 Arg 및 Lys으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9가 부재하고;
X10이 부재하고;
R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은
R1이 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X1이 DAla, 5-아미노발레릴, 4-AMPA, Asp, Glu, Leu, Lys(Ac), Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7이 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, DDap, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 Arg, DArg, 및 Lys으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9가 부재하고;
X10이 부재하고;
R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은
R1이 Ac, Bz, 및 n-헥사노일로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X1이 (D/L)Agl, Ala, β-Ala, Asp, Dap, Glu, Gly, Lys, 및 Phe으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7이 (D/L)Agl, Asp, Dap, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 β-Ala, Arg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9가 Gly, 2Nal, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X10이 2Nal이거나, 부재하고;
R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
추가 측면에서, 본 발명은
R1이 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X1이 Ala, 5-아미노발레릴, Asp, Glu, Gly, Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Arg, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7이 (D/L)Agl, Asp, Dap, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 β-Ala, Arg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9가 Gly, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X10이 2Nal이거나, 부재하고;
R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은
X1이 Gly 및 Phe으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Lys(iPr)이고;
X7이 DGlu인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은
R1이 부재하고;
X1이 Gly 및 Phe으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Lys(iPr)이고;
X7이 DGlu이고
X8이 Arg 및 Lys(iPr)로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9가 부재하고;
X10이 부재하고;
R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은
상기 락탐이 X1의 측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고;
R1이 Ac 및 n-헥사노일로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X1이 (D/L)Agl, Dab, 및 Dap로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Arg 및 Lys(iPr)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7이 Glu이고;
X8이 Arg이고;
X9가 부재하고;
X10이 부재하고;
R2가 NH2인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X1은 (D/L)Agl 또는 Dap이다.
또다른 측면에서, 본 발명은
상기 락탐이 X1의 측쇄 카르복실기와 X7의 측쇄 아미노기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고;
R1이 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X1이 Asp 및 Glu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Arg 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7이 (D/L)Agl, Dab, Dap, DDap, 및 Lys으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 Arg이고;
X9가 부재하고;
X10이 부재하고;
R2가 NH2인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X7은 (D/L)Agl, Dab, Dap, 또는 DDap이다. 더 바람직한 실시양태에서, X7은 (D/L)Agl 또는 Dap이다.
또다른 측면에서, 본 발명은
상기 락탐이 X1의 측쇄 카르복실기와 X7의 측쇄 아미노기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고;
R1이 부재하고;
X1이 숙시닐이고;
X3이 Arg이고;
X7이 (D/L)Agl, Dab, Dap, Lys, 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 Arg이고;
X9가 부재하고;
X10이 부재하고;
R2가 NH2인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X7은 (D/L)Agl 또는 Dap이다.
또다른 측면에서, 본 발명은
상기 락탐이 X1의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고;
R1이 부재하고;
X1이 Ala, DAla, Gly, Dap(Ac), Leu, Lys, Lys(Ac), 2Nal, Phe, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X7이 Asp, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 β-Ala, Arg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X9가 Gly, 2Nal, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
X10이 2Nal이거나, 부재하고;
여기서 X8이 부재하는 경우, X9 및 X10이 각각 부재하고,
R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X1은 Ala, DAla, Gly, Leu, Lys, Lys(Ac), Phe, 또는 DPhe이다. 더 바람직한 실시양태에서, X1은 Ala, Gly, Lys, 또는 Phe이다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X3은 Arg, Lys, Lys(iPr), 또는 Lys(Me2)이다. 더 바람직한 실시양태에서, X3은 Arg이다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X7은 Asp, Glu, 또는 DGlu이다. 더 바람직한 실시양태에서, X7은 Asp이다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X8은 β-Ala, Arg, Gly, Lys, Lys(iPr), Orn이거나, 부재한다. 더 바람직한 실시양태에서, X8은 β-Ala, Gly, Lys, Lys(iPr), Orn이거나, 부재한다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X9는 Gly, 2Nal, D2Nal, DPhe이거나, 부재한다. 더 바람직한 실시양태에서, X9는 Gly, 2Nal, D2Nal, 또는 DPhe이다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X10은 2Nal이거나, 부재한다. 더 바람직한 실시양태에서, X10은 2Nal이다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, R2는 NHEt이다.
또다른 측면에서, 본 발명은
상기 락탐이 X1의 비-α, 비-측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고;
R1이 부재하고;
X1이 β-Ala, 4-AMB, 5-아미노발레릴, 및 4-AMPA로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X3이 Arg이고;
X7이 Asp 및 Glu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 Arg 및 DArg으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X9가 부재하고
X10이 부재하고;
R2가 NH2인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제 공한다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X1은 β-Ala, 5-아미노발레릴, 또는 4-AMPA이다. 더 바람직한 실시양태에서, X1은 β-Ala이다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X7은 Asp이다.
본 발명의 상기 측면의 바람직한 실시양태에서, X8은 Arg이다.
또다른 측면에서, 본 발명은
상기 락탐이 X2의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되고;
R1이 부재하고;
X1이 부재하고;
X3이 Arg이고;
X7이 Asp, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
X8이 Arg이고;
X9가 부재하고;
X10이 부재하고;
R2가 NH2인
화학식 I (서열 1)의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다:
Figure 112009073236969-PCT00004
락탐은 Phe의 α-아미노기와 DGlu의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성된다. 제약상 허용되는 염은 아세트산 염일 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 상기 다양하게 기재된 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 요법에 사용하기 위한, 상기 다양하게 기재된 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 류마티스 관절염, 폐 섬유증, HIV 감염, 또는 유방암, 췌장암, 흑색종, 전립선암, 신장암, 신경아세포종, 비-호지킨 림프종, 폐암, 난소암, 결장직장암, 다발성 골수종, 다형성 교아세포종 및 만성 림프구성 백 혈병으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 치료를 위한, 상기 다양하게 기재된 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 류마티스 관절염, 폐 섬유증, HIV 감염, 또는 유방암, 췌장암, 흑색종, 전립선암, 신장암, 신경아세포종, 비-호지킨 림프종, 폐암, 난소암, 결장직장암, 다발성 골수종, 다형성 교아세포종 및 만성 림프구성 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 치료를 위한 약제의 제조에 있어서, 상기 다양하게 기재된 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 류마티스 관절염, 폐 섬유증, HIV 감염, 또는 유방암, 췌장암, 흑색종, 전립선암, 신장암, 신경아세포종, 비-호지킨 림프종, 폐암, 난소암, 결장직장암, 다발성 골수종, 다형성 교아세포종 및 만성 림프구성 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택된 암의 치료가 필요한 환자에게 유효량의 상기 다양하게 기재된 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 질환의 치료 방법을 제공한다.
본 발명의 매크로시클릭 펩티드 화합물 (서열 1)에서, 아미노산 X1 내지 X10은 아미노-말단에서 카르복시-말단으로 좌에서 우로 도시된, 통상적으로 사용되는 3개의 문자 기호로 본원에서 지칭된다. D- 및 L- (작은 대문자)은 절대 입체화학을 지칭한다. 특정 화학식에 어떤 표지도 나타나지 않은 경우, 아미노산의 L-형태는 존재한다. X1은 또한 디카르복실산기, 즉 숙시닐기일 수 있다. 괄호 "[]" 안의 아미노산 또는 카르복실산기는 시클릭 구조 내부에 있고, 괄호 바깥의 기는 환화 고리 외부에 있다. 모든 경우에서, 환화는 X1 (또는 X2, 즉 Tyr)과 X7 간의 락탐 (아미드) 결합을 통해 이루어지며, X1, X2, 및 X7의 구조에 따라 여러 상이한 방법으로 형성될 수 있다.
락탐 결합이 X1의 측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간에 형성되는 경우 (반응식 1 및 2; 실시예 1-5), X1의 α-아미노기는 Ac 또는 n-헥사노일로 캡핑된다.
락탐 결합이 X1의 측쇄 카르복실기와 X7의 측쇄 아미노기 간에 형성되는 경우, X1의 α-아미노기는 Ac 또는 Bz로 캡핑된다 (반응식 3 및 4; 실시예 6-19). X1은 또한 α-아미노산 이외에 2관능성 잔기, 예를 들어 2개의 카르복실기를 갖는 잔기, 즉 숙시닐 잔기일 수 있다. 이 경우, 1개의 카르복실기는 Tyr의 α-아미노기와 아미드 결합을 형성하고, 나머지는 X7의 측쇄 아미노기와의 아미드 결합을 통해 시클릭 락탐 구조를 형성한다 (반응식 3 및 4; 실시예 20-24). X1이 숙시닐인 경우, R1은 부재한다.
본원에 개시된 대부분의 락탐-환화 펩티드에서 (반응식 5-15; 실시예 25-28, 32-66, 및 75-89), X1의 α-아미노기는 X7의 측쇄 카르복실기와의 아미드 결합을 통해 락탐 구조를 형성하고, R1은 부재한다. 또한, 이러한 범주의 합성 반응식에는 X1 잔기, 즉 β-Ala, 4-AMB, 5-아미노발레릴, 및 4-AMPA를 함유하는 시클릭 펩티드 (여기서 아미노기는 비-측쇄, 비-α-아미노기임)가 포함된다 (반응식 5 및 6; 실시예 67-74). 또한, 이들 경우에서 R1은 부재한다.
R1 및 X1이 둘 다 부재하는 경우, 락탐 구조는 Tyr (X2)의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합을 통해 형성된다 (반응식 5 및 6; 실시예 29-31).
통상적인 아미노산, 예를 들어 알라닌, 글리신 등의 구조는 당업계에 널리 공지되어 있다. 본 발명의 화합물에 존재하는 비-표준 및 치환된 아미노산의 구조는 하기에 도시된다.
Figure 112009073236969-PCT00005
본 발명의 락탐-환화 펩티드는 제약상 허용되는 염으로서 제조될 수 있다. 이러한 염, 및 이들을 제조하기 위한 통상적인 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [P. Stahl et al. (2002) Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, VCHA/Wiley-VCH]; [Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences 66(1):1-19]을 참조한다.
본 발명의 화합물은 CXCR4/SDF-1 상호작용의 강력한 길항제이다. 본원에 구 체적으로 예시된 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 하기 기재된 CXCR4/125I-SDF-1α 결합 분석에 의해 측정한 평균 Ki 값이 약 7.5 nM 이하이다. 더 바람직한 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 상기 분석에서 약 0.2 nM 내지 약 1 nM의 평균 Ki 값을 나타낸다. 특히 바람직한 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 상기 분석에서 약 0.2 nM 미만의 평균 Ki 값을 나타낸다.
또한, 본 발명의 화합물 및 제약상 허용되는 염은 바람직하게는 CXCR4 수용체에 대해 매우 선택적이며, 시험된 농도에서 CCR1, CCR2, CXCR2, CXCR3 및 다른 G-단백질 커플링된 수용체를 비롯한 다른 케모카인 수용체에 대해 억제 활성을 거의 또는 전혀 나타내지 않으며, 세로토닌, 도파민 및 오피오이드 수용체에 대해 유의한 활성을 나타내지 않는다. 또한, 바람직하게는 혈액 및 혈장에서 양호한 안정성, 양호한 피하 생체이용률, 바람직한 약역학/약동학 성질, 종양 성장 억제에서 강력한 생체내 효능을 넓은 안정성 한계로 나타낸다.
이들 약리학적 성질에 비추어, 본 발명의 화합물은 CXCR4/SDF-1 상호작용 또는 CXCR4의 수용체 활성과 관련한 장애, 예컨대 HIV 감염의 치료를 위해 지시된다. 특히, 본 발명의 화합물은 혈관형성, 성장, 생존, 및 CXCR4 및 SDF-1에 의해 매개되는 전이 경로가 유방암, 췌장암, 흑색종, 전립선암, 신장암, 신경아세포종, 비-호지킨 림프종, 폐암, 난소암, 결장직장암, 다발성 골수종, 다형성 교아세포종 및 만성 림프구성 백혈병, 뿐만 아니라 류마티스 관절염, 폐 섬유증 및 HIV 감염을 비 롯한 병인과 관련되어 있는 악성종양을 치료하는데 유용하다 (문헌 [Tsutsumi et al. (2006) Peptide Science 88(2):279-289] 참조).
Agl (아미노글리신)은 선구-키랄성(pro-chiral) 빌딩 블록(building block)이다. 이러한 잔기가 본원의 펩티드 화학식에 나타나는 경우, α-탄소는 2개의 관련된 α-아미노기가 각각 개별적으로 상이한 기에 결합되어 있는 키랄 중심이 된다. 이 경우, 최종 펩티드 생성물은 분리되지 않은 2개의 부분입체이성질체를 함유하며 1:1 이외의 비로 존재할 수 있다. 펩티드 화학식에서 "(D/L)Agl"은 상기 부분입체이성질체의 혼합물을 지칭한다. "(DL)Agl"은 라세미체인 Agl 유도체, 예를 들어 Fmoc-(DL)Agl(Boc)를 지칭한다.
"Ki" 값은 문헌 [Enzymes, A Practical Introduction to Structure, Mechanism, and Data Analysis, Robert A. Copeland, Wiley-VCH, New York, 1996, page 207]의 식 7.22를 사용함으로써 하기 기재된 CXCR4/125I-SDF-1α 결합 분석에서 측정된 IC50 값을 이용하여 계산된다.
용어 "SDF-1"은 현재 유사한 관능성을 나타낸다고 이해되는, 2개의 이소형 SDF-1α 및 SDF-1β를 포함한다.
본원에 사용된 "치료"는 CXCR4/SDF-1 상호작용 또는 CXCR4 수용체 활성과 관련된 장애의 치유적 치료를 지칭한다. 치유적 치료는 질환 진행을 늦추고, 방해하고, 저지하고, 조절하고 또는 중단시키는데 관여하는 과정을 지칭하지만, 모든 질 환-관련 증상, 상태 또는 장애의 전부 제거를 반드시 포함하는 것은 아니다.
본 발명의 화합물은 다양한 경로에 의해 투여되는, 인간 의학 또는 수의학에서의 약제로서 사용될 수 있다. 가장 바람직하게는, 상기 조성물은 비경구 투여용이다. 상기 제약 조성물은 당업계에 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있으며 (예를 들어, 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed. (1995), A. Gennaro et al., Mack Publishing Co.] 참조), 화학식 I의 하나 이상의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염(들), 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다.
본 발명의 화합물의 유효량은 1일 기준으로 약 1 mg 내지 약 300 mg, 더 바람직하게는 약 1 mg 내지 약 200 mg, 더 바람직하게는 약 1 mg 내지 약 100 mg, 보다 더 바람직하게는 약 1 mg 내지 약 50 mg이다.
본 발명의 모든 락탐-환화 펩티드는 고체상에서의 펩티드 쇄 조립 및 수지 상 또는 용액 중에서의 환화 또는 기타 변형을 이용하여 고체상 합성 또는 용액 상 합성, 또는 이 둘의 조합에 의해 합성될 수 있다. 이러한 방법은 당업계에 널리 공지되어 있다.
본원에 사용된 하기 약어는 나타낸 의미를 갖는다:
Ac: 아세틸; Agl: 아미노글리신; AMB: 아미노메틸 벤조산; AMPA: 아미노메틸 페닐 아세트산; Bn: 벤질; Boc: tert-부틸옥시카르보닐; BOP: (벤조트리아졸-1-일옥시)-트리스(디메틸아미노)포스포늄헥사플루오로포스페이트; 2-Br-Z: 2-브로모벤 질옥시카르보닐; Bz: 벤조일; Bzl: 벤질; 2-Cl-Z: 2-클로로벤질-옥시카르보닐; Dab: 2,4-디아미노부티르산; Dap: 2,3-디아미노-프로피온산; DCC: 디시클로헥실-카르보디이미드; DCM: 디클로로메탄; DIC: 디이소프로필 카르보디이미드; DIEA: 디이소프로필-에틸아민; DMF: N,N-디메틸 포름아미드; DMSO: 디메틸-술폭시드; EDT: 1,2-에탄-디티올; Et: 에틸; Fm: 9-플루오레닐메틸; Fmoc: 9-플루오레닐메톡시 카르보닐; HATU: N-[(디메틸아미노)-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리딘-1-일메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-옥시드; HBTU: O-벤조-트리아졸릴-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트; HCTU: 1H-벤조트리아졸륨 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-5-클로로-3-옥시드 헥사플루오로포스페이트; HF: 히드로젠 플루오라이드; HOBt: 히드록시벤조트리아졸; IBCF: 이소부틸 클로로포르메이트; iPr: 이소프로필; IPA: 이소프로필 알콜; Me: 메틸; 2Nal: 2-나프틸알라닌; NMM: N-메틸모르폴린; NMP: N-메틸-피롤리돈; OtBu: tert-부틸 에스테르; Pbf: 2,2,4,6,7-펜타메틸-디히드로벤조푸란-5-술포닐; PBS: 포스페이트 완충 식염수; PyBOP: (벤조트리아졸-1-일옥시)-트리스(피롤리디노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트; PyBrOP: 브로모트리스(피롤리디노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트; tBu: tert-부틸; TFA: 트리플루오로아세트산; THF: 테트라히드로푸란; TIS: 트리이소프로필 실란; Tos: p-톨루엔-술포닐; Z: 벤질옥시카르보닐; ZOSu: N-(벤질옥시카르보닐-옥시) 숙신이미드.
하기 실시예에 기재된 바와 같은 본 발명의 화합물의 제조는 제한적이라기 보다는 예시적이다. 이들 실시예 각각에서, 관찰된 분자량은 복잡성 제거된(de- convoluted) 값으로서 기록된다. 복잡성 제거된 값은 식 MW(관찰됨) = n(m/z)-n (여기서 m/z은 하전된 이온 (양성 모드)을 나타내고, n은 특정 종의 전하 수임)으로부터 유도된다. 다수의 하전된 종이 질량 스펙트럼에 존재하는 경우, 관찰된 분자량은 평균으로서 기록된다.
이소프로필 리신 측쇄를 함유하는 시클릭 락탐 펩티드에 대한, 실시예 85-87에 개시된 합성 방법 및 실시예 89에 개시된 동위원소 표지 절차는 리신 알킬 측쇄를 함유하는 본원에 개시된 다른 펩티드에 적절한 변형과 함께 동일하게 적용가능하다. 독성 팔라듐 촉매에 대한 필요성을 제거한 실시예 86-88의 합성 방법은 또한 본원에 개시된 다른 펩티드에 적절한 변형과 함께 동일하게 적용가능하다.
실시예 1
Ac-시클로[Dap-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:2)
서열 Ac-Dap(Alloc)-Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-DArg(Pbf)-2Nal-Gly-Glu(O알릴)-Arg(Pbf) (서열:3)를 하기 반응식 1에 약술된 바와 같이 ABI 431 펩티드 합성기 (어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems))를 이용하여 표준 Fmoc 화학에 의해 조립하였다. 자동화 조립을 표준 어플라이드 바이오시스템즈 DCC/HOBt 화학 프로토콜 또는 FastMoc 화학 HBTU/DIEA 프로토콜을 사용하여 공급자 설명서 (피이 어플라이드 바이오시스템즈 인크.(PE Applied Biosystems Inc.), 미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재)에 따라 수행하였다. 고체 지지체는 C-말단 아미드에 대해 링크(Rink) 아미드 수지 (4-(2',4'-디메톡시페닐-Fmoc-아미노메틸)-페녹시 수지) 또는 C-말단 에틸 아미드에 대해 인돌 수지 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지 (노바바이오켐, EMD 바이오사이언시즈, 인크.(NovaBiochem, EMD Biosciences, Inc.), 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재)였다. 단계적 쇄 조립을 선형 펩티드의 C-말단에서 출발하여 9개 주요 단계로 수행하였다. 단계 1에서, 4 당량의 보호된 아미노산 Fmoc-Arg(Pbf)를 NMP 중 DCC/HOBt (또는 FastMoc 화학에 대한 HBTU/DIEA)로 활성화시키고, 20％ 피페리딘을 사용하여 탈보호된 링크 아미드 수지에 커플링시켰다. 단계 2에서, 4 당량의 Fmoc-Glu(O알릴)을 활성화시키고, 단계 1로부터의 탈보호된 펩티드 수지에 커플링시켰다. 단계 8, Fmoc-Dap(Alloc)의 커플링까지 적절한 단계를 수행하였다. 이어서, N-말단의 Fmoc를 DMF 중 20％ 피페리딘을 사용하여 제거하고, α-아미노기의 아세틸화를 실온에서 1시간 동안 무수 DMF 또는 NMP 중 5 당량의 아세트산 무수물, 10 당량의 DIEA를 사용하여 오프-라인으로 수행하였다.
알릴 및 Alloc 측쇄 탈보호기를 디클로로메탄 중 24 당량의 페닐실란의 존재 하에 0.1 당량의 Pd(Ph3P)4를 이용하여 제거하였다 (반응식 2). 이러한 과정을 완전한 측쇄 탈보호를 위해 1회 반복하였다. Glu의 탈보호된 카르복실산기를 PyBOP/DIEA로 활성화시키고, 수지 상에서 Dap의 측쇄 아미노기에 환화시켰다. 환화된 펩티드를 동시에 탈보호시키고, 실온에서 2시간 동안 TFA/H2O/TIS/EDT (95/2/1/2, v/v/v/v) 또는 TFA/H2O/TIS/아니솔 (92/2/4/2, v/v/v/v)의 스캐빈저 칵 테일(scavenger cocktail)을 사용하여 수지로부터 절단하였다. 이어서, 용매를 진공 하에 증발시키고, 펩티드를 침전시키고, 냉 디에틸 에테르로 3회 세척하여 스캐빈저를 제거하였다. 계산된 분자량 (MW cal.): 1142.30; 관찰된 분자량 (MW obs.): 1142.50.
Figure 112009073236969-PCT00006
펩티드 정제를 표준 정제용 HPLC 기술을 이용하여 수행하였다. 환화 직후, 펩티드 용액을 0.1％ (v/v) TFA를 함유하는 물로 희석시키고, 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 214 nm에서 모니터링하면서 수성 0.1％ 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (v/v) 구배를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 모으고, 동결건조시 켰다. 최종 생성물의 추가 특성화를 전형적인 기술에 의한 분석용 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석을 이용하여 수행하였다. 2염기성 측쇄를 갖는 펩티드의 경우, 최종 동결건조 생성물은 TFA 염이었다.
Figure 112009073236969-PCT00007
실시예 2
Ac-시클로[Dab-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:6)
단계 8에서 Fmoc-Dap(Alloc)를 Fmoc-Dab(Alloc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 1에서와 같이 제조하였다. MW cal.:1156.33; MW obs.: 1156.10.
실시예 3
Ac-시클로[Dap-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:7)
단계 6에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 1에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1156.37; MW obs.: 1156.78.
실시예 4
n-헥사노일-시클로[Dap-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:8)
단계 6에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 1에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 PyBOP/DIEA에 의해 활성화된 헥산산으로 대체하였다. MW cal.: 1212.47; MW obs.: 1212.92.
실시예 5
Ac-시클로[ (D/L) Agl-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:9)
단계 2에서 Fmoc-Glu(O알릴)을 Fmoc-Glu(OtBu)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Dap(Alloc)를 Fmoc-(DL)Agl(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 1에서와 같이 제조하였다. 쇄 조립 후, 알릴 보호가 존재하지 않기 때문에 어떤 Pd(Ph3P)4 처리도 없었다. 대신에, 선형 펩티드를 고체 지지체로부터 절단하고 탈보호시킨 후 용액 중에서 환화를 수행하였다. 절단으로부의 조 선형 펩티드 (0.25 mmol)를 진공 하에 건조시키고, 무수 DMF 10 mL 중에 용해시켰다. 이 펩티드 용액을 2시간 동안 시린지 펌프를 통해 하기 용액에 전달하였다: PyBOP 1.0 mmol 및 DIEA 4.0 mmol을 함유하는 무수 DMF 15 mL 및 무수 디클로로메탄 15 mL. 이어서, 반응을 실온에서 2시간 동안 진행시켰다. 그다음, 용매를 진공 하에 증발시키고, 잔기를 정제용 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 표적 시클릭 펩티드를 단리하고, 실시예 1에 기재된 바와 같이 특성화하였다. MW cal.: 1128.27; MW obs.: 1128.26.
실시예 6
Ac-시클로[Glu-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dap]-Arg-NH 2 (서열:10)
서열 Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Arg(Pbf)-DArg(Pbf)-2Nal-Gly-Dap(Boc)-Arg(Pbf) (서열:11)를 하기 반응식 3에 약술한 바와 같이 ABI 431 기기를 이용하여 표준 Fmoc 화학에 의해 조립하였다. 자동화 조립을 표준 어플라이드 바이오시스템즈 DCC/HOBt 화학 프로토콜 또는 FastMoc 화학 (HBTU/DIEA) 프로토콜을 사용하여 공급자 설명서 (피이 어플라이드 바이오시스템즈 인크., 미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재)에 따라 수행하였다. 고체 지지체는 C-말단 아미드에 대해 링크 아미드 수지 또는 C-말단 에틸 아미드에 대해 인돌 수지 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지였다. 단계적 쇄 조립을 선형 펩티드의 C-말단에서 출발 하여 9개 주요 단계로 수행하였다. 단계 1에서, 4 당량의 보호된 아미노산 Fmoc-Arg(Pbf)를 NMP 중 DCC/HOBt (또는 FastMoc 화학에 대한 HBTU/DIEA)로 활성화시키고, 탈보호된 링크 아미드 수지에 커플링시켰다. 단계 2에서, 4 당량의 Fmoc-Dap(Boc)를 활성화시키고, 단계 1로부터의 탈보호된 수지에 커플링시켰다. 단계 8, Fmoc-Glu(OtBu)의 커플링까지 적절한 단계를 수행하였다. 단계 9에서, N-말단의 Fmoc를 DMF 중 20％ 피페리딘을 사용하여 제거하고, α-아미노기의 아세틸화를 실온에서 1시간 동안 무수 DMF 또는 NMP 중 5 당량의 아세트산 무수물, 10 당량의 DIEA를 사용하여 오프-라인으로 수행하였다. 완성된 펩티드를 동시에 탈보호시키고, 실온에서 2시간 동안 TFA/H2O/TIS/EDT (95/2/1/2, v/v/v/v) 또는 TFA/H2O/TIS/아니솔 (92/2/4/2, v/v/v/v)의 스캐빈저 칵테일을 사용하여 수지로부터 절단하였다 (반응식 4). 이어서, 용매를 진공 하에 증발시키고, 펩티드를 침전시키고, 냉 디에틸 에테르로 3회 세척하여 스캐빈저를 제거하였다. 조 생성물을 환화 반응에 바로 사용하였다. MW cal.: 1142.30; MW obs.: 1142.83.
Figure 112009073236969-PCT00008
선형 펩티드를 고체 지지체로부터 절단하고 동시에 모든 측쇄를 탈보호시킨 후 용액 중에서 환화를 수행하였다 (반응식 4). 절단된 조 선형 펩티드 (0.25 mmol)를 진공 하에 건조시키고, 무수 DMF 10 mL 중에 용해시켰다. 이 펩티드 용액을 2시간 동안 시린지 펌프를 통해 하기 반응 혼합물에 전달하였다: PyBOP 1.0 mmol 및 DIEA 4.0 mmol을 함유하는 무수 DMF 15 mL 및 무수 디클로로메탄 15 mL. 이어서, 반응을 실온에서 2시간 동안 진행시켰다. 용매를 진공 하에 증발시키고, 잔기를 정제용 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 표적 시클릭 펩티드를 단리하고, 실시예 1에 기재된 바와 같이 특성화하였다.
Figure 112009073236969-PCT00009
실시예 7
Bz-시클로[Glu-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dap]-Arg-NH 2 (서열:14)
단계 9에서 아세트산 무수물을 벤조산 무수물로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1204.37; MW obs.: 1204.87.
실시예 8
Ac-시클로[Glu-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly- D Dap]-Arg-NH 2 (서열:15)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-DDap(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1142.30; MW obs.: 1142.73.
실시예 9
Ac-시클로[Glu-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Lys]-Arg-NH 2 (서열:16)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-Lys(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.:1184.38; MW obs.: 1184.23.
실시예 10
Ac-시클로[Glu-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dab]-Arg-NH 2 (서열:17)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-Dab(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1156.33; MW obs.: 1156.07.
실시예 11
Ac-시클로[Glu-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly- (D/L) Agl]-Arg-NH 2 (서열:18)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-(DL)Agl(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1128.27; MW obs.: 1128.86.
실시예 12
Bz-시클로[Glu-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly- (D/L) Agl]-Arg-NH 2 (서열:19)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-(DL)Agl(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 벤조산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1190.34; MW obs.: 1190.99.
실시예 13
Bz-시클로[Asp-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dab]-Arg-NH 2 (서열:20)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-Dab(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 Fmoc-Asp(OtBu)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 벤조산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1204.37; MW obs.: 1204.87.
실시예 14
Ac-시클로[Asp-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dab]-Arg-NH 2 (서열:21)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-Dab(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 Fmoc-Asp(OtBu)로 대체하는 것을 제외하고는, 단계 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1142.30; MW obs.: 1142.81.
실시예 15
Ac-시클로[Asp-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dap]-Arg-NH 2 (서열:22)
단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 Fmoc-Asp(OtBu)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1128.27; MW obs.: 1128.78.
실시예 16
Bz-시클로[Asp-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dap]-Arg-NH 2 (서열:23)
단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 Fmoc-Asp(OtBu)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 벤조산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1190.34; MW obs.: 1190.69.
실시예 17
Ac-시클로[Asp-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly- (D/L) Agl]-Arg-NH 2 (서열:24)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-(DL)Agl(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 Fmoc-Asp(OtBu)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1114.24; MW obs.: 1114.85.
실시예 18
Ac-시클로[Asp-Tyr-Lys(Me 2 )- D Arg-2Nal-Gly-Dap]-Arg-NH 2 (서열:25)
단계 6에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(Me2)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 Fmoc-Asp(OtBu)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1128.31; MW obs.: 1128.92.
실시예 19
Bz-시클로[Asp-Tyr-Lys(Me 2 )- D Arg-2Nal-Gly-Dap]-Arg-NH 2 (서열:26)
단계 6에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(Me2)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 Fmoc-Asp(OtBu)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 벤조산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1190.38; MW obs.: 1191.14.
실시예 20
시클로[숙시닐-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly- (D/L) Agl]-Arg-NH 2 (서열:27)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-(DL)Agl(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 사용하지 않고 이 단계를 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 숙신산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1057.19; MW obs.: 1057.87.
실시예 21
시클로[숙시닐-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dap]-Arg-NH 2 (서열:28)
단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 사용하지 않고 이 단계를 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 숙신산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1071.22; MW obs.: 1071.85.
실시예 22
시클로[숙시닐-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Dab]-Arg-NH 2 (서열:29)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-Dab(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc- Glu(OtBu)를 사용하지 않고 이 단계를 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 숙신산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1085.25; MW obs.: 1085.87.
실시예 23
시클로[숙시닐-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Orn]-Arg-NH 2 (서열:30)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-Orn(Boc)로 대체하고, 단게 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 사용하지 않고 이 단계를 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 숙신산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1099.27; MW obs.: 1100.23.
실시예 24
시클로[숙시닐-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Lys]-Arg-NH 2 (서열:31)
단계 2에서 Fmoc-Dap(Boc)를 Fmoc-Lys(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Glu(OtBu)를 사용하지 않고 이 단계를 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 6에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 9에서 아세트산 무수물을 숙신산 무수물로 대체하였다. MW cal.: 1113.30; MW obs.: 1114.25.
실시예 25
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Arg-NH 2 (서열:32)
서열 Gly-Tyr(tBu)-Lys(iPr)(Boc)-DArg(Pbf)-2Nal-Gly-DGlu(O알릴)-Arg(Pbf) (서열:33)를 하기 반응식 5에 약술한 바와 같이 ABI 431 기기를 이용하여 표준 Fmoc 화학에 의해 조립하였다. 자동화 조립을 표준 어플라이드 바이오시스템즈 DCC/HOBt 화학 프로토콜 또는 FastMoc 화학 HBTU/DIEA 프로토콜을 사용하여 공급자 설명서 (피이 어플라이드 바이오시스템즈 인크., 미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재)에 따라 수행하였다. 고체 지지체는 아미드에 대해 링크 아미드 수지 또는 C-말단 에틸 아미드에 대해 인돌 수지 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지였다. 단계적 쇄 조립을 선형 펩티드의 C-말단에서 출발하여 8개 주요 단계로 수행하였다 (반응식 5). 단계 1에서, 4 당량의 보호된 아미노산 Fmoc-Arg(Pbf)를 NMP 중 DCC/HOBt (또는 FastMoc 화학에 대한 HBTU/DIEA)로 활성화시키고, 탈보호된 링크 아미드 수지에 커플링시켰다. 단계 2에서, 4 당량의 Fmoc-DGlu(O알릴)을 활성화시키고, 단계 1로부터의 탈보호된 수지에 커플링시켰다. 단계 8, Fmoc-Gly의 커플링까지 적절한 단계를 수행하였다.
알릴 에스테르 측쇄 보호기를 디클로로메탄 중 24 당량의 페닐실란의 존재 하에 0.1 당량의 Pd(Ph3P)4를 이용하여 제거하였다 (반응식 6). 이러한 과정을 완전한 측쇄 탈보호를 위해 1회 반복하였다. 이어서, N-말단의 Fmoc를 DMF 중 20％ 피페리딘을 사용하여 제거하였다. DGlu의 탈보호된 카르복실산기를 PyBOP/DIEA로 활성화시키고, 수지 상에서 글리신의 α-아미노기에 환화시켰다. 환화된 펩티드를 동시에 탈보호시키고, 실온에서 2시간 동안 TFA/H2O/TIS/EDT (95/2/1/2, v/v/v/v) 또는 TFA/H2O/TIS/아니솔 (92/2/4/2, v/v/v/v)의 스캐빈저 칵테일을 사용하여 수지 로부터 절단하였다. 이어서, 용매를 진공 하에 증발시키고, 펩티드를 침전시키고, 냉 디에틸 에테르로 3회 세척하여 스캐빈저를 제거하였다. MW cal.: 1085.29; MW obs.: 1085.32.
실시예 25a
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Arg-NH 2 ·아세트산 염
(서열:34)
실시예 25의 펩티드의 TFA 염을, 2％ 아세트산/H2O (v/v)로 평형화된 적합한 크기의 정제용 C18 컬럼 상에 물질을 흡착시킴으로써 아세트산 염으로 전환시켰다. 이어서, 컬럼을 3 내지 5 컬럼 부피의 2％ 수성 아세트산 (v/v)으로 세척하였다. 펩티드를 2 부피％ 아세트산을 함유하는 1:1 물/아세토니트릴 (v/v)을 사용하여 용리시키고, 동결건조시켰다. MW cal.: 1085.29; MW obs.: 1085.32.
Figure 112009073236969-PCT00010
펩티드 정제를 표준 정제용 HPLC 기술을 이용하여 수행하였다. 환화 직후, 펩티드 용액을 0.1％ (v/v) TFA를 함유하는 물로 희석시키고, 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 214 nm에서 모니터링하면서 수성 0.1％ 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (v/v) 구배를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 모으고, 동결건조시켰다. 최종 생성물의 추가 특성화를 전형적인 방법에 의한 분석용 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석을 이용하여 수행하였다. 2염기성 측쇄를 갖는 펩티드의 경우, 최종 동결건조 생성물은 TFA 염이었다.
Figure 112009073236969-PCT00011
실시예 26
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NH 2 (서열:37)
단계 1을 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 929.10; MW obs.: 929.39.
실시예 26a
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NH 2 ·아세트산 염
(서열:38)
실시예 26의 펩티드의 TFA 염을, 2％ 아세트산/H2O (v/v)로 평형화된 적합한 크기의 정제용 C18 컬럼 상에 물질을 흡착시킴으로써 아세트산 염으로 전환시켰다. 이어서, 컬럼을 3 내지 5 컬럼 부피의 2％ 수성 아세트산 (v/v)으로 세척하였다. 펩티드를 2 부피％ 아세트산을 함유하는 1:1 물/아세토니트릴 (v/v)을 사용하여 용리시키고, 동결건조시켰다. MW cal.: 929.10; MW obs.: 929.39.
실시예 27
시클로[Gly-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Arg-NH 2 (서열:39)
단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1071.22; MW obs.: 1071.02.
실시예 28
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:40)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1099.35; MW obs.: 1099.91.
실시예 29
시클로[Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:41)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 사용하지 않고 단계 8을 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1014.17; MW obs.: 1014.78.
실시예 30
시클로[Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Arg-NH 2 (서열:42)
단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 사용하지 않고 단계 8을 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1014.17; MW obs.: 1014.65.
실시예 31
시클로[Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Arg-NH 2 (서열:43)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 사용하지 않고 단계 8을 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1000.14; MW obs.: 1000.63.
실시예 32
시클로[Gly-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Arg-NH 2 (서열:44)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1057.19; MW obs.: 1057.35.
실시예 33
시클로[Gly-Tyr-Lys(Me 2 )- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Arg-NH 2 (서열:45)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Lys(Me2)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1057.23; MW obs.: 1057.86.
실시예 34
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Arg-NH 2 (서열:46)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(알릴)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1071.26; MW obs.: 1071.76.
실시예 35
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-NH 2 (서열:47)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(알릴)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 915.07; MW obs.: 915.38.
실시예 36
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:48)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(알릴)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1085.33; MW obs.: 1085.78.
실시예 37
시클로[Gly-Tyr-Lys(Me 2 )- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:49)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Lys(Me2)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1071.26; MW obs.: 1071.05.
실시예 38
시클로[Gly-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:50)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1071.22; MW obs.: 1071.50.
실시예 39
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:51)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하는 것을 제외하고 는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1085.29; MW obs.: 1085.91.
실시예 40
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NH 2 (서열:52)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 929.10; MW obs.: 929.39.
실시예 41
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-NHEt (서열:53)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(알릴)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 943.13; MW obs.: 943.36.
실시예 42
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NHEt (서열:54)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 957.15; MW obs.: 957.50.
실시예 43
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NHEt (서열:55)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1을 생략하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 957.15; MW obs.: 957.46.
실시예 44
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Arg-NHEt (서열:56)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1113.34; MW obs.: 1113.81.
실시예 44a
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Arg-NHEt·아세트산 염
(서열:57)
실시예 44의 펩티드의 TFA 염을, 2％ 아세트산/H2O (v/v)로 평형화된 적합한 크기의 정제용 C18 컬럼 상에 물질을 흡착시킴으로써 아세트산 염으로 전환시켰다. 이어서, 컬럼을 3 내지 5 컬럼 부피의 2％ 수성 아세트산 (v/v)으로 세척하였다. 펩티드를 2 부피％ 아세트산을 함유하는 1:1 물/아세토니트릴 (v/v)을 사용하여 용리시키고, 동결건조시켰다. MW cal.: 1113.34; MW obs.: 1113.81.
실시예 45
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NHEt (서열:58)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1127.41; MW obs.: 1127.35.
실시예 46
시클로[Lys(Ac)-Tyr-Lys(Me 2 )- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:59)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(OtBu)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Lys(Me2)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Boc-Lys(Fmoc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. 쇄 조립 후, N-말단 Lys 측쇄 상의 Fmoc를 DMF 중 20％ 피페리딘을 이용하여 제고하거, 이어서 Lys 측쇄를 실온에서 1시간 동안 10 당량의 아세트산 무수물/DIEA를 사용하여 아세틸화하였다. 모든 측쇄 보호기를 제거하고, 선형 펩티드를 실온에서 2시간 동안 TFA/물/TIS/아니솔 (90/5/2.5/2.5, v/v/v/v)의 혼합물을 사용하여 고체 지지체로부터 절단하였다. 조 선형 펩티드의 환화를 용액 중에서 수행하였다. 절단된 조 선형 펩티드 (약 0.25 mmol)를 진공 하에 건조시키고, 무수 DMF 10 mL 중에 용해시켰다. 이 펩티드 용액을 2시간 동안 시린지 펌프를 통해 하기 반응 혼합물에 전달하였다: PyBOP 1.0 mmol 및 DIEA 4.0 mmol을 함유하는 무수 DMF 15 mL 및 무수 디클로로메탄 15 mL. 이어서, 반응을 실온에서 2시간 동안 진행시켰다. 그다음, 용매를 진공 하에 증발시키고, 잔기를 역상 C18 정제용 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 표적 시클릭 펩티드를 단리하고, 실시예 1에 기재된 바와 같이 특성화하였다. MW cal.: 1184.42; MW obs.: 1184.06.
실시예 47
시클로[Dap(Ac)-Tyr-Lys(Me 2 )- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NH 2 (서열:60)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(OtBu)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Lys(Me2)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Boc-Dap(Fmoc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. 쇄 조립 후, N-말단 Dap 측쇄 상의 Fmoc를 DMF 중 20％ 피페리딘을 사용하여 제거하고, 이어서 Dap 측쇄를 실온에서 1시간 동안 10 당량의 아세트산 무수물/DIEA를 사용하여 아세틸화하였다. 그다음, 모든 측쇄 보호기를 제거하고, 선형 펩티드를 실온에서 2시간 동안 TFA/물/TIS/아니솔 (90/5/2.5/2.5, v/v/v/v)의 혼합물을 사용하여 고체 지지체로부터 절단하였다. 조 선형 펩티드의 환화를 용액 중에서 수행하였다. 절단된 조 선형 펩티드 (약 0.25 mmol)를 진공 하에 건조시키고, 무수 DMF 10 mL 중에 용해시켰다. 이 펩티드 용액을 2시간 동안 시린지 펌프를 통해 하기 반응 혼합물에 전달하였다: PyBOP 1.0 mmol 및 DIEA 4.0 mmol을 함유하는 무수 DMF 15 mL 및 무수 디클로로메탄 15 mL. 이어서, 반응을 실온에서 2시간 동안 진행시켰다. 그다음, 용매를 진공 하에 증발시키고, 잔기를 정제용 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 표적 시클릭 펩티드를 단리하고, 실시예 1에 기재된 바와 같 이 특성화하였다. MW cal.: 986.15; MW obs.: 985.97.
실시예 48
시클로[Ala-Tyr-Lys(iPr)- D Arg -2Nal-Gly-Glu]-NH 2 (서열:61)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Ala으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 943.13; MW obs.: 942.92.
실시예 49
시클로[ D Ala-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NH 2 (서열:62)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-DAla으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 943.13; MW obs.: 943.44.
실시예 50
시클로[ D Ala-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NH 2 (서열:63)
단계 1을 생략하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-DAla으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 943.13; MW obs.: 943.42.
실시예 51
시클로[Ala-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NH 2 (서열:64)
단계 1을 생략하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-DAla으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 943.13; MW obs.: 943.48.
실시예 52
시클로[Leu-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NH 2 (서열:65)
단계 1을 생략하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Leu으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 985.21; MW obs.: 985.56.
실시예 53
시클로[Leu-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NH 2 (서열:66)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Leu으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 985.21; MW obs.: 985.49.
실시예 54
시클로[ D Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NH 2 (서열:67)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-DPhe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1019.22; MW obs.: 1019.52.
실시예 55
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NH 2 (서열:68)
단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1019.22; MW obs.: 1019.53.
실시예 56
시클로[ D Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NH 2 (서열:69)
단계 1을 생략하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-DPhe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1019.22; MW obs.: 1019.50.
실시예 57
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:70)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1189.48; MW obs.: 1189.92.
실시예 57a
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 ·아세트산 염
(서열:71)
실시예 57의 펩티드의 TFA 염을, 2％ 아세트산/H2O (v/v)로 평형화된 적합한 크기의 정제용 C18 컬럼 상에 물질을 흡착시킴으로써 아세트산 염으로 전환시켰다. 이어서, 컬럼을 3 내지 5 컬럼 부피의 2％ 수성 아세트산 (v/v)으로 세척하였다. 펩티드를 2 부피％ 아세트산을 함유하는 1:1 물/아세토니트릴 (v/v)을 사용하여 용리시키고, 동결건조시켰다. MW cal.: 1189.48; MW obs.: 1189.92.
실시예 58
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Arg-NH 2 (서열:72)
단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1175.41; MW obs.: 1175.81.
실시예 59
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-NH 2 (서열:73)
단계 1을 생략하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1019.22; MW obs.: 1019.56.
실시예 60
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NHEt (서열:74)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1217.53; MW obs.: 1217.97.
실시예 60a
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NHEt·아세트산 염
(서열:75)
실시예 60의 펩티드의 TFA 염을, 2％ 아세트산/H2O (v/v)로 평형화된 적합한 크기의 정제용 C18 컬럼 상에 물질을 흡착시킴으로써 아세트산 염으로 전환시켰다. 이어서, 컬럼을 3 내지 5 컬럼 부피의 2％ 수성 아세트산 (v/v)으로 세척하였다. 펩티드를 2 부피％ 아세트산을 함유하는 1:1 물/아세토니트릴 (v/v)을 사용하여 용리시키고, 동결건조시켰다. MW cal.: 1217.53; MW obs.: 1217.97.
실시예 61
시클로[DAla-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NHEt (서열:76)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-DAla으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 971.18; MW obs.: 971.49.
실시예 62
시클로[2Nal-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NHEt (서열:77)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-2Nal으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1097.34; MW obs.: 1097.53.
실시예 63
시클로[ D Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NHEt (서열:78)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-DPhe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1047.28; MW obs.: 1047.51.
실시예 64
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-NHEt (서열:79)
링크 아미드 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1047.28; MW obs.: 1047.57.
실시예 65
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Gly-2Nal-NH 2 (서열:80)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-2Nal으로 대체하고, 단계 1과 2 사이에 Fmoc-Gly을 사용하는 한 단계를 추가하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1183.39; MW obs.: 1183.26.
실시예 66
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-β-Ala- D 2Nal-NH 2 (서열:81)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-D2Nal으로 대체하고, 단계 1과 2사이에 Fmoc-β-Ala을 사용하는 한 단계를 추가하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1197.40; MW obs.: 1196.70.
실시예 67
시클로[β-Ala-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:82)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-β-Ala으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1085.25; MW obs.: 1085.05.
실시예 68
시클로[β-Ala-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Arg-NH 2 (서열:83)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-β-Ala으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1071.22; MW obs.: 1071.15.
실시예 69
시클로[5-아미노발레릴-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:84)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-5-아미노발레르산으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1113.30; MW obs.: 1113.40.
실시예 70
시클로[5-아미노발레릴-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Arg-NH 2 (서열:85)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-5-아미노발레르산으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1099.27; MW obs.: 1100.25.
실시예 71
시클로[(4-AMPA)-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Asp]-Arg-NH 2 (서열:86)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Asp(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-4-아미노메틸 페닐아세트산 (4-AMPA)으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1147.32; MW obs.: 1148.20.
실시예 72
시클로[(4-AMPA)-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:87)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-4-아미노메틸 페닐아세트산 (4-AMPA)으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1161.34; MW obs.: 1161.99.
실시예 73
시클로[(4-AMPA)-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]- D Arg-NH 2 (서열:88)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-DArg(Pbf)로 대체하고, 단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-4-아미노메틸 페닐아세트산 (4-AMPA)으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1161.34; MW obs.: 1161.83.
실시예 74
시클로[(4-AMB)-Tyr-Arg- D Arg-2Nal-Gly-Glu]-Arg-NH 2 (서열:89)
단계 2에서 Fmoc-DGlu(O알릴)을 Fmoc-Glu(O알릴)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Arg(Pbf)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-4-아미노메틸 벤조산 (4-AMB)으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1147.32; MW obs.: 1147.66.
실시예 75
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-Gly-2Nal-NH 2
(서열:90)
단계 1을 3개의 순차적 잔기 커플링, 처음에 Fmoc-2Nal, 이어서 Fmoc-Gly, 그다음 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1353.69; MW obs.: 1354.03.
실시예 76
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-Gly-2Nal-NH 2
(서열:91)
단계 1을 3개의 순차적 잔기 커플링, 처음에 Fmoc-2Nal, 이어서 Fmoc-Gly, 그다음 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. 추가로, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하였다. MW cal.: 1443.82; MW obs.: 1444.13.
실시예 77
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Gly- D Phe-NH 2 (서열:92)
단계 1을 2개의 순차적 잔기 커플링, 처음에 Fmoc-DPhe, 이어서 Fmoc-Gly으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1133.36; MW obs.: 1133.73.
실시예 78
시클로[Gly-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)- D Phe-NH 2
(서열:93)
단계 1을 2개의 순차적 잔기 커플링, 처음에 Fmoc-DPhe, 이어서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1246.58; MW obs.: 1246.88.
실시예 79
시클로[Lys-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:94)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Lys(Boc)로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1170.50; MW obs.: 1169.80.
실시예 80
시클로[Phe-Tyr-Lys- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:95)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)로 대체하고, 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 Fmoc-Lys(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1147.40; MW obs.: 1146.70.
실시예 81
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys-NH 2 (서열:96)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Lys(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1147.40; MW obs.: 1146.70.
실시예 82
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Orn-NH 2 (서열:97)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf)를 Fmoc-Orn(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1133.40; MW obs.: 1132.70.
실시예 83
시클로[Phe-Tyr-Lys- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys-NH 2 (서열:98)
단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf) 및 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 각각 Fmoc-Lys(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1105.37; MW obs.: 1105.40.
실시예 84
시클로[Phe-Tyr-Lys- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys-NHEt (서열:99)
링크 수지를 [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지로 대체하고, 단계 1에서 Fmoc-Arg(Pbf) 및 단계 6에서 Fmoc-Lys(iPr)(Boc)를 각각 Fmoc-Lys(Boc)로 대체하고, 단계 8에서 Fmoc-Gly을 Fmoc-Phe으로 대체하는 것을 제 외하고는, 실시예 25에서와 같이 제조하였다. MW cal.: 1133.36; MW obs.: 1133.82.
실시예 85
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:70)의 별법 합성 I
실시예 57은, 대량으로 입수하기 곤란하고 가격이 높은 시판용 빌딩 블록 Fmoc-Lys(iPr)Boc를 이용하여 Fmoc 고체상 펩티드 합성 화학을 통해 서열:70을 합성하는 것을 개시한다. 이 실시예에 기재된 방법은 보다 저렴한 Fmoc-Lys(Boc)를 사용한 서열:70의 합성, 용액 환화, 및 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하는 환원적 아민화를 통한 리신 알킬화를 가능케 하여, 상기 최종 생성물로의 보다 경제적인 경로를 제공한다. 추가의 이점은 반응 매질 (아세트산, 아세톤 및 메탄올)이 비교적 저렴하고, 반응 조건이 용이하게 제어되고, 용매의 비가 알킬화 반응에 영향을 미치지 않으면서 유의하게 변할 수 있으며, 회수율이 90％ 이상이라는 것이다.
서열 Phe-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-DArg(Pbf)-2Nal-Gly-DGlu(O알릴)-Lys(Boc) (서열:100)을 반응식 7에 약술된 바와 같이 ABI 431 펩티드 합성기를 이용하여 표준 Fmoc 화학에 의해 링크 아미드 수지 상에서 조립하였다. 자동화 조립을 표준 어플라이드 바이오시스템즈 DCC/HOBt 화학 프로토콜 또는 FastMoc 화학 (HBTU/DIEA) 프로토콜을 사용하여 공급자 설명서 (피이 어플라이드 바이오시스템즈 인크., 미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재)에 따라 수행하였다. 측쇄 보호기 계획은 Lys(Boc), DGlu(O알릴), DArg(Pbf), Tyr(tBu)이었다. 단계적 쇄 조립을 선형 펩티드의 C-말단에서 출발하여 8 단계로 수행하였다. 단계 1에서, 4 당량의 보호된 아미노산 Fmoc-Lys(Boc)를 NMP 중 DCC/HOBt (또는 FastMoc 화학에 대한 HBTU/DIEA)로 활성화시키고, 탈보호된 링크 아미드 수지에 커플링시켰다. 단계 2에서, 4 당량의 Fmoc-DGlu(O알릴)을 활성화시키고, 단계 1로부터의 탈보호된 수지에 커플링시켰다. 단계 8, Fmoc-Phe의 커플링까지 이들 단계를 적절히 반복하였다.
알릴 에스테르 측쇄 보호기를 디클로로메탄 중 24 당량의 페닐실란의 존재 하에 0.1 당량의 Pd(Ph3P)4를 이용하여 제거하였다 (반응식 8). 이러한 과정을 완전한 측쇄 탈보호를 위해 1회 반복하였다. 이어서, N-말단의 Fmoc를 DMF 중 20％ 피페리딘을 사용하여 제거하였다. DGlu의 탈보호된 카르복실산기를 PyBOP/DIEA로 활성화시키고, 수지 상에서 Phe의 α-아미노기에 환화시켰다. 환화된 펩티드를 동시에 탈보호시키고, 실온에서 2시간 동안 TFA/H2O/TIS/EDT (95/2/1/2, v/v/v/v) 또는 TFA/H2O/TIS/아니솔 (92/2/4/2, v/v/v/v)의 스캐빈저 칵테일을 사용하여 수지로부터 절단하였다. 이어서, 용매를 진공 하에 증발시키고, 펩티드를 침전시키고, 냉 디에틸 에테르로 3회 세척하여 스캐빈저를 제거하였다.
Figure 112009073236969-PCT00012
Figure 112009073236969-PCT00013
시클릭 전구체 펩티드의 정제를 표준 정제용 HPLC 기술을 이용하여 수행하였다. 조 절단 생성물을 최소량의 DMSO 중에 용해시키고, 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 214 nm에서 모니터링하면서 수성 0.1％ 트리플루오로아세트산/아세토니 트릴 구배 (v/v)를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 모으고, 동결건조시켰다. 중간체 전구체 시클릭 펩티드의 추가 특성화를 전형적인 기술에 의한 분석용 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석을 이용하여 수행하였다.
이어서, 동결건조된 전구체 시클릭 펩티드를 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하여 환원적 아민화를 통해 아세트산/아세톤/메탄올 (1:1:4, v/v/v) 용액 중에서 알킬화하였다 (반응식 9). 펩티드 농도는 약 10 mg/mL이고, 결과에 영향을 미치지 않으면서 유의하게 변할 수 있었다. 3 내지 5 당량의 환원제 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하고, 반응을 실온에서 2시간 이내에 통상적으로 완료하였다. 회수율은 90％ 이상이었다. 예를 들어, 전구체 시클릭 펩티드 20 mg을 메탄올 2 mL 중에 용해시키고, 여기에 아세트산 0.5 mL 및 아세톤 0.5 mL를 첨가하고, 잘 혼합한 다음, 나트륨 시아노보론히드라이드 5.6 mg (메탄올 중 2.5 당량)을 교반 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이때 나트륨 시아노보론히드라이드 추가 5.6 mg을 첨가하였다. 반응을 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 탈염시키고, 동결건조시켜, 순도 97.5％인 최종 생성물 (서열:70) 18.9 mg을 수득하였다. MW cal.: 1189.48; MW obs.: 1189.6.
Figure 112009073236969-PCT00014
실시예 60의 화합물 (서열:74)을 또한, [3-({에틸-Fmoc-아미노}-메틸)-인돌-1-일]-아세틸 AM 수지를 사용하여 상기 화합물의 구성성분 아미노산을 기준으로 적절히 변형시켜 유사한 방식으로 제조할 수 있었다. 먼저, 전구체 펩티드 (서열:99)를 실시예 84에 기재된 바와 같이 제조한 다음, 환원적 아민화를 반응식 9에 도시된 바와 같이 수행하였다. 이로써 순도 99.16％인 최종 시클릭 C-말단 에틸 아미드 펩티드를 수득하였다. MW cal.:1217.53; MW obs.: 1217.84.
실시예 86
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:70)의 별법 합성 II
실시예 85는, 비교적 저렴한 Fmoc-Lys(Boc)를 사용하는 Fmoc 고체상 펩티드 합성을 통한 비용 효과적 합성, 및 비교적 저렴한 용매 (아세트산, 아세톤, 및 메탄올) 중에서 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하는 환원적 아민화를 통한 리신의 알킬화를 개시한다. 그러나, 이러한 방법은 알릴 에스테르 측쇄 보호기의 제거를 위해 중금속 촉매 팔라듐의 사용을 포함한다. 팔라듐은 매우 독성이며, 이러한 원소의 완전한 제거를 보증하는 품질 제어는 복잡하고 어렵다. 이 실시예에 기재된 수지 상에서의 환화에 의한 Boc 고체상 펩티드 합성 방법은 독성 및 고비용의 팔라듐 촉매에 대한 필요성 없이 비교적 저렴한 Boc-Lys(2-Cl-Z)를 사용하여 서열:70의 제조를 가능케 함으로써, 보다 간단한 품질 제어 과정을 필요로 하는, 훨씬 더 경제적이고 용이하게 규모확장 가능하며 덜 독성인 최종 생성물로의 경로를 제공하였다.
서열 Fmoc-Phe-Tyr(2-Br-Z)-Lys(2-Cl-Z)-DArg(Tos)-2Nal-Gly-DGlu(OFm)-Lys(2-Cl-Z) (서열:102)을 반응식 10에 약술된 바와 같이 확립된 고체상 펩티드 합성 Boc 화학 (문헌 [Schnoelzer et al. (1992) Int. J. Pept. Protein Res. 40:180-193] 참조)을 사용하여 MBHA (4-메틸-벤즈히드릴-아민) 수지 (상품번호 D-2095, 바켐 캘리포니아 인크.(BaChem California Inc.), 미국 캘리포니아주 토란스 소재) 상에서 수동 조립하였다. 상기 문헌에 기재된 바와 같은 동일계내 중성화 /HBTU/DIEA 활성화 절차를 사용하여 쇄 조립을 수행하였다. 측쇄 보호기 계획은 Lys(2-Cl-Z), DGlu(OFm), DArg(Tos) 및 Tyr(2-Br-Z)이었다. 모든 아미노산 빌딩 블록의 α-아미노기를 tert-부톡시카르보닐 (Boc)로 보호시키고, 예외적으로 N-말단 잔기 Phe을 합성 효율을 위해 Fmoc로 보호시켰다. 단계적 쇄 조립을 선형 펩티드의 C-말단으로부터 출발하여 8 단계로 수행하였다. 단계 1에서, 5 당량의 보호된 아미노산 Boc-Lys(2-Cl-Z)를 DMF 중 HBTU/DIEA로 활성화시키고, MBHA 수지에 커플링시켰다. 단계 2에서, 5 당량의 Boc-DGlu(OFm)을 활성화시키고, 순 TFA를 사용하여 단계 1로부터의 탈보호된 펩티드 수지에 커플링시켰다. 단계 8, Fmoc-Phe의 커플링까지 이들 단계를 적절히 반복하였다.
DGlu의 Fm 측쇄 보호기를 N-말단에서의 Fmoc와 함께 DMF 중 20％ 피페리딘을 사용하여 제거하였다. DGlu의 탈보호된 카르복실산기를 PyBOP/DIEA, HCTU/DIEA, 또는 다른 적절한 활성화 시약으로 활성화시키고, 수지 상에서 Phe의 α-아미노기에 환화시켰다. 시클릭 펩티드를 동시에 탈보호시키고, 0℃에서 1시간 동안 스캐빈저로서 5％ m-크레졸 또는 p-크레졸과 함께 HF를 사용하여 수지로부터 절단하였다. 이어서, 용매를 증발시키고, 조 펩티드를 침전시키고, 냉 디에틸 에테르로 3회 세척하였다.
Figure 112009073236969-PCT00015
시클릭 전구체 펩티드 (반응식 10에 도시된 바와 같은 서열:98)의 정제를 표준 정제용 HPLC 기술을 이용하여 수행하였다. 조 절단 생성물을 최소량의 DMSO 중에 용해시키고, 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 214 nm에서 모니터링하면서 수성 0.1％ 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 구배 (v/v)를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 모으고, 동결건조시켰다. 중간체 전구체 시클릭 펩티드의 추가 특성화를 전형적인 기술에 의한 분석용 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석을 이용하여 수행하였다. 서열:98에 대해, MW cal.: 1105.29; MW obs.: 1105.4.
이어서, 동결건조된 전구체 시클릭 펩티드 (서열:98)를 반응식 9에서와 같이 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하여 환원적 아민화를 통해 아세트산/아세톤/메탄올 (1:1:4, v/v/v) 용액 중에서 알킬화하였다. 펩티드 농도는 약 10 mg/mL이고, 결과에 영향을 미치지 않으면서 유의하게 변할 수 있었다. 5 당량의 환원제 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하고, 반응을 실온에서 2시간 이내에 통상적으로 완료하였다. 회수율은 90％ 이상이었다. 예를 들어, 전구체 시클릭 펩티드 6.6 mg을 메탄올 0.8 mL 중에 용해시키고, 여기에 아세트산 0.2 mL 및 아세톤 0.2 mL를 첨가하고, 잘 혼합한 다음, 나트륨 시아노보론히드라이드 1.9 mg (메탄올 중 2.5 당량)을 2번으로 동일하게 나누어 교반 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이때 나트륨 시아노보론히드라이드 추가 1.9 mg을 첨가하였다. 반응을 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 탈염시키고, 동결건조시켜, 순도 96.5％인 최종 생성물 (서열:70)을 수득하였다. MW cal.: 1189.45; MW obs.: 1189.6.
실시예 87
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:70)의 별법 합성 III
실시예 57의 화합물 (서열:70)은 또한 팔라듐 촉매를 사용하지 않고 용액 환화를 통해 용이하게 규모확장하면서 하기와 같이 제조할 수 있다.
서열 Boc-Phe-Tyr(2-Br-Z)-Lys(Fmoc)-DArg(Tos)-2Nal-Gly-DGlu(OBzl)-Lys(Fmoc) (서열:103)를 반응식 11에 약술된 바와 같이 고체상 펩티드 합성 Boc 화학 (문헌 [Schnoelzer et al. (1992) Int. J. Pept. Protein Res. 40:180-193] 참조)을 이용하여 MBHA 수지 상에서 수동 조립하였다. 쇄 조립을 문헌 [Schnoelzer et al.]에 기재된 바와 같이 동일계내 중성화/HBTU/DIEA를 사용하여 수행하였다. 측쇄 보호기 계획은 Lys(Fmoc), DGlu(OBzl), DArg(Tos), Tyr(2-Br-Z)이었다. 모든 아미노산 빌딩 블록의 α-아미노기를 tert-부톡시카르보닐 (Boc)로 보호시켰다. 단계적 쇄 조립을 반응식 11에 도시된 바와 같이 선형 펩티드의 C-말단으로부터 출발하여 8 단계로 수행하였다. 단계 1에서, 5 당량의 보호된 아미노산 Boc-Lys(2-Cl-Z)를 DMF 중 HBTU (4 당량)/DIEA (10 당량)로 활성화시키고, MBHA 수지에 커플링시켰다. 단계 2에서, 5 당량의 Boc-DGlu(OBzl)을 활성화시키고, 순 TFA를 사용하여 단계 1로부터의 탈보호된 펩티드 수지에 커플링시켰다. 단계 8, Boc-Phe의 커플링까지 이들 단계를 적절히 반복하였다. Boc 보호기를 순 TFA에 의해 제거하고, 수지를 DIEA로 중성화하고, DMF 및 메탄올로 세척하고, 공기 중에서 건조시킨 후, HF 절단하였다. 선형 펩티드를 동시에 탈보호시키고, 0℃에서 1시간 동안 스캐빈저로서 5％ m-크레졸 또는 p-크레졸과 함께 HF를 사용하여 수지로부터 절단하였다. 이어서, 용매를 증발시키고, 조 펩티드를 침전시키고, 냉 디에틸 에테르로 3회 세 척하였다.
Figure 112009073236969-PCT00016
선형 전구체 펩티드 (서열:104)의 정제를 표준 정제용 HPLC 기술을 이용하여 수행하였다. 조 절단 생성물을 최소량의 DMSO 중에 용해시키고, 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 214 nm에서 모니터링하면서 수성 0.1％ 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 구배 (v/v)를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 모으고, 동결건 조시켰다. 중간체 전구체 시클릭 펩티드의 추가 특성화를 전형적인 기술에 의한 분석용 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석을 이용하여 수행하였다. 서열:104에 대해, MW cal.: 1567.78; MW obs.: 1567.6.
동결건조된 전구체 선형 펩티드 (서열:104)의 환화를 용액 중에서 수행하였다 (반응식 12). 선형 펩티드를 소량의 무수 DMF (약 10 mg/mL) 중에 용해시켰다. 이 펩티드 용액을 자기 교반 하에 무수 DMF 중 PyBOP (2 당량, 또는 다른 적절한 활성화 시약, 예컨대 HCTU, BOP, HBTU 등)와 DIEA (10 당량)의 반응 혼합물에 시린지 펌프를 통해 서서히 전달하였다. 이어서, 반응을 실온에서 2시간 동안 진행시켰다. 그다음, 순 피페리딘을 반응 혼합물에 최종 농도 25％ (v/v)로 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 20분 동안 교반 하에 유지하여 Fmoc 보호를 완전히 제거하였다. 용매를 진공 하에 증발시키고, 잔기를 정제용 역상 C18 HPLC 컬럼 상에 로딩하고, 214 nm에서 모니터링하면서 수성 0.1％ 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 구배 (v/v)를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 모으고, 동결건조시켜, 시클릭 전구체 펩티드 (서열:98)를 수득하였다. 중간체 전구체 시클릭 펩티드의 추가 특성화를 전형적인 기술에 의한 분석용 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석을 이용하여 수행하였다. 서열:98에 대해, MW cal.: 1105.29; MW obs.: 1105.4.
시클릭 펩티드 서열:98의 알킬화를 반응식 9에서와 같이 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하여 환원적 아민화를 통해 아세트산/아세톤/메탄올 (1:1:4, v/v/v) 용액 중에서 수행하여 최종 생성물 (서열:70)을 생성하였다. MW cal.: 1189.45; MW obs.: 1189.6.
Figure 112009073236969-PCT00017
실시예 88
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr)- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr)-NH 2 (서열:70)의 별법 합성 IV
실시예 57의 화합물 (서열:70)은 또한 팔라듐 촉매를 사용하지 않고 하기 반응식 13에 요약된 합성 방법에 의해 제조할 수 있다.
먼저 디펩티드 Fmoc-DGlu-Lys(iPr,Z)-NH2를 노출된 D글루탐산 측쇄를 함유하는 용액 중에서 제조하였다. 디펩티드를 과산 불안정성 CTC (2-클로로트리틸클로라이드) PS 수지, 1％ DVB (100-200 메쉬) 수지 (센 케미칼즈 유에스에이 인 크.(Senn Chemicals USA Inc.), 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재; 상품번호 40207)에 연결시킨 다음, 최종 펩티드 생성물을 이 수지 상에서 상기 기재된 바와 같은 표준 Fmoc 합성을 통해 합성하였다. CTC 수지로부터 펩티드의 선택적 제거는 단지 D글루탐산 측쇄를 용액 중 펩티드의 N-말단과 반응하게 하여 시클릭 펩티드 생성물을 생성하였다. 이후, 남아있는 측쇄를 95％ TFA 또는 다른 강산으로 절단하였다.
Figure 112009073236969-PCT00018
먼저 디펩티드 Fmoc-DGlu-Lys(iPr,Z)-NH2를 하기 도시된 바와 같이 제조하였다 (반응식 14):
Figure 112009073236969-PCT00019
Boc-Lys(iPr,Z)-OH를 THF 중 NMM 및 IBCF와 반응시켰다. NH4OH의 첨가 후, 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 생성물을 에틸 아세테이트 중에 취하였다. 에틸 아세테이트 상을 5％ NaHCO3 및 이어서 0.1 N HCl로 광범위하게 세척한 다음, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 황산나트륨을 여과에 의해 제거하고, 에틸 아세테이트를 감압에서 증발에 의해 제거하였다. 생성된 Boc-Lys(iPr,Z)-NH2를 DCM 중에 용해시키고, TFA를 첨가하였다. 반응이 진행하여 완료되면, 용매를 회전 증발에 의해 제거하였다. 이어서, H-Lys(iPr,Z)-NH2를 DMF 중에 용해시켰다. DIEA를 이용하여 pH를 8로 조정하였다. 별개의 용기에서, Fmoc-DGlu(OtBu)-OH, HBTU 및 HOBt를 DMF 중에 용해시키고, DIEA를 첨가하여 pH 8로 조정하였다. 두 용액을 혼 합하고, 반응을 C18 역상 HPLC에 의해 모니터링하였다. pH를 모니터링하고, 필요하다면 DIEA로 조정하였다. 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 생성물을 에틸 아세테이트 중에 용해시켰다. 에틸 아세테이트 상을 5％ NaHCO3 및 이어서 0.1 N HCl로 광범위하게 세척한 다음, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 황산나트륨을 여과에 의해 제거하고, 에틸 아세테이트를 감압에서 증발에 의해 제거하였다. 건조 잔기가 형성될 때까지 계속 회전 증발시켰다. 생성된 Fmoc-DGlu(OtBu)-Lys(iPr,Z)-NH2를 DCM 중에 용해시키고, TFA를 첨가하였다. 반응이 진행하여 완료되면, 용매를 회전 증발에 의해 제거하였다. 고체 생성물을 디에틸 에테르로 분쇄하여 수득하였다. 침전물을 에테르로 세척하고, 생성물을 진공 오븐에서 건조시켰다.
최종 생성물의 고체상 펩티드 합성을 하기와 같이 수행하였다. Fmoc-DGlu(OtBu)-Lys(iPr,Z)-NH2를 DCM 중에 용해시키고, 반응 용기에서 DIEA의 존재 하에 CTC 수지와 반응시켰다. 3시간 후, DCM을 이용하여 펩티드-수지로부터 시약을 세척 제거하고, Z-OSu를 첨가하였다. pH를 모니터링하고, 필요하다면 DIEA를 첨가하여 pH 8 내지 9로 조정하였다. 8시간 후, DCM을 이용하여 펩티드-수지로부터 시약을 세척 제거하고, 이를 폴리프로필렌 용기로 옮기고, 진공 오븐에서 건조시켰다.
보호된 펩티드-수지를 Fmoc-화학을 사용하여 하기와 같이 조립하였다. 사용된 커플링 사이클은 1) 탈-블로킹: DMF 중 25％ 피페리딘을 이용한 처리; 2) DMF, IPA 및 다시 DMF를 이용한 세척 사이클; 3) 닌히드린 시험 (정성적: 양성인 경우, 커플링 단계 4로 진행); 4) DMF 중 HOBt /DIC의 존재 하에 2 당량의 Fmoc-아미노산과의 커플링; 5) DMF를 이용한 세척 사이클; 6) 닌히드린 시험 (정성적: 양성인 경우, 다음 탈-블로킹/커플링 사이클로 진행; 양성인 경우, 재-커플링 단계 7로 진행; 약간 양성인 경우, 아세틸화 단계 10으로 진행); 7) DMF 중 HOBt, HBTU/DIEA의 존재 하에 1 당량의 Fmoc-아미노산과 재-커플링 (필요한 경우); 8) DMF를 이용한 세척 사이클; 9) 닌히드린 시험 (정성적: 음성인 경우, 다음 탈-블로킹/커플링 사이클로 진행; 양성인 경우, 아세틸화 단계 10으로 진행); 10) DMF 내 4％ DIEA 중 2％ 아세트산 무수물을 이용한 아세틸화 (필요한 경우); 11) (DMF, IPA 및 다시 DMF를 이용한) 세척 사이클; 12) 닌히드린 시험 (정성적: 양성인 경우, 다음 탈-블로킹/커플링 사이클로 진행). 최종 커플링 사이클 후, 펩티드-수지 (서열:105)를 에테르로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다.
탈보호된 펩티드-수지를 DCM으로 세척하였다. 수지로부터 완전히 보호된 선형 펩티드를 DCM 중 2％ TFA를 이용하여 절단하고, 이어서 여과하였다. 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 완전히 선형 보호된 펩티드 (서열:106)를 에테르로 분쇄하여 침전시켰다. 완전히 보호된 선형 펩티드를 폴리프로필렌 용기에 옮기고, 진공 오븐에서 건조시켰다.
완전히 보호된 선형 펩티드를 DMF 중 PyBOP, HOBt 및 DIEA의 존재 하에 환화하였다. 필요하다면 DIEA를 첨가하여 pH를 7 내지 8에서 유지하였다. 반응이 진행하여 완료되면, 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 생성물을 에틸 아세테이트 중에 취하였다. 에틸 아세테이트 상을 5％ NaHCO3 및 이어서 0.1 N HCl 및 포화 NaCl 용액으로 광범위하게 세척하였다. 그다음, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 황산 나트륨을 여과에 의해 제거하고, 에틸 아세테이트를 감압에서 회전 증발에 의해 제거하였다. 보호된 시클릭 펩티드 (서열:107)를 에테르로 분쇄하여 침전시키고, 진공 오븐에서 건조시켰다.
TFA:H2O:TIS 중에서 탈보호를 수행하였다. 반응이 완료되었을 때, 용매를 회전 증발에 의해 제거하고, 시클릭 펩티드 (서열:70)를 에테르로 분쇄하여 침전시키고, 진공 오븐에서 건조시켰다. MW cal.: 1189.48; MW obs.: 1189.50.
실시예 89
동위원소 표지의 도입:
시클로[Phe-Tyr-Lys(iPr-d 6 )- D Arg-2Nal-Gly- D Glu]-Lys(iPr-d 6 )-NH 2 (서열:108)의 합성
동위원소 표지된 아세톤, 예컨대 13C-, 14C-, 중수소-, 또는 삼중수소-표지된 아세톤 (하기 도시됨)으로 출발하는 실시예 85 내지 87의 방법은 다양한 약리학 및 영상화 연구를 위한 시클릭 펩티드 CXCR4 길항제의 부위-특이적 동위원소 표지를 가능케 하였다. 동위원소 표지된 아세톤은 다양한 공급처로부터 시판된다. 아세톤-d6을 사용하여 12개의 중수소 원자를 함유하는 펩티드를 제조하는 한 예를 하기에 제공하였다. 비-표지된 대응물과 비교시 분자량이 12 Da의 차이가 있는 생성 화합물은 질량 스펙트럼에서 용이하게 구별되며, 동일한 표적 수용체 친화성을 나타내었다.
Figure 112009073236969-PCT00020
Figure 112009073236969-PCT00021
실시예 85 내지 87 중 임의의 방법을 사용하여, 하나를 제조할 수 있으며, 시클릭 펩티드 전구체 (서열:98, 서열:99 등)를 정제할 수 있다. 표준 아세톤을 목적하는 동위원소 표지된 아세톤으로 대체하는 것을 제외하고, 반응식 9에서와 같이 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하여 환원적 아민화를 통해 아세트산/아세톤/메탄올 (1:1:4, v/v/v) 용액 중에서 알킬화를 수행하였다. 본 실시예에서는, 중수소 아세톤-d6을 사용하였다.
펩티드 (97 mg)를 아세트산/아세톤-d6/메탄올 (1:1:4, v/v/v) 15 mL 중에 용해시켰다. 펩티드 농도는 결과에 영향을 미치지 않으면서 유의하게 변할 수 있었다. 5 당량의 나트륨 시아노보론히드라이드를 사용하고, 반응을 실온에서 2시간 이내에 통상적으로 완료하였다. 반응을 HPLC 및 질량 스펙트럼 분석에 의해 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 탈염시키고, 동결견조시켜, 순도 99.9％인 최종 생성물 (서열:108) 90.5 mg을 수득하였다. MW cal.: 1201.48; MW obs.: 1201.7.
Figure 112009073236969-PCT00022
동위원소 표지된 나트륨 시아노보론히드라이드 (예컨대 NaBD3CN, NaBT3CN 등)의 사용은 부위-특이적 표지 패턴에 추가 변형의 도입을 가능케 하였다.
본 화합물의 약리학적 성질은 하기 기재된 분석을 이용하여 측정할 수 있다.
인간 CXCR4/ 125 I-SDF-1α 결합 억제 분석
CXCR4에 대한 SDF-1 결합은 CXCR4 세포내 신호전달 경로를 활성화시키는데 있어서 제1 단계이다. 화합물이 SDF-1과 CXCR4의 상호작용을 차차단할 수 있는지 측정하기 위해, 내인성 CXCR4를 발현하는 인간 백혈병 CCRF-CEM 세포 (ATCC CCL 119)를 125I-표지된 SDF-1α 결합 분석에 사용하였다. 96-웰 U-바닥의 비-처리된 폴리스티렌 플레이트 (코닝 인코포레이티드(Corning Incorporated), 코스타 소재, No. 3632)에서 분석을 수행하였다. 결합 분석 완충액을 10 mM HEPES (pH 7.5) 및 0.2％ BSA를 함유하는 RPMI 1640 배지 (기브코(Gibco), 뉴욕 그랜드 아일랜드 소재)로 제조하였다. 간단히, 300 pM SDF 리간드 (60 pM 125I-SDF-1α (퍼킨 엘머(Perkin Elmer)) 및 240 pM 냉 SDF-1α (알앤드디 시스템즈(R＆D Systems)), 분석 완충액 중 시험 화합물의 상이한 농축액, 100,000개의 인간 CCRF-CEM 세포, 및 0.5 mg SPA 비드 (맥아 아글루티닌 비드; 아머샴(Amersham))를 함유하는 200 μL 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 플레이트를 1450 마이크로베타 액체 섬광 및 발광 계수기(Microbeta Liquid Scintillation and Luminescence Counter) (왈락(Wallac))에서 SPA 모드로 계수하였다. CXCR4 길항제는 이 분석에서 결합된 방사능을 투여량-의존적 방식으로 감소시켰다. 시험 화합물의 억제 효능 (Ki 또는 IC50)을 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 소프트웨어를 사용하여 결합된 방사능의 투여량-의존적 감소를 기준으로 계산하였다.
상기 예시된 모든 화합물은 이 분석에서 약 7.5 nM 이하의 평균 Ki값을 나타냈다. 예를 들어, 실시예 1의 화합물은 이 분석에서 3.45 nM의 평균 Ki 값을 나타냈다. 이들 화합물 중 대다수는 약 0.2 nM 내지 약 1 nM의 평균 Ki 값을 나타냈다. 예를 들어, 실시예 50의 화합물은 이 분석에서 0.285 nM의 평균 Ki 값을 나타냈다. 다른 화합물은 약 0.2 nM 미만의 평균 Ki 값을 나타냈다. 예를 들어, 실시예 75의 화합물은 이 분석에서 0.096 nM의 평균 Ki 값을 나타냈다.
주화성 분석
CXCR4/SDF-1 상호작용은 표면에 CXCR4를 갖는 세포의 이동 (주화성)을 조절한다. 시험 화합물의 길항 및 세포 활성을 측정하기 위해, 내인성 CXCR4를 발현하는 인간 조직구 림프종 U937 세포 (ATCC CRL 1593)를 사용하는 주화성 분석을 이용하였다. 간단히, 10％ FBS, 1％ MEM 나트륨 피루베이트 (기브코), 1％ MEM 비필수 아미노산 (기브코), 및 1％ 글루타맥스(GlutaMAX) 1 (기브코)을 함유하는 DMEM 배지 (기브코, 미국 뉴욕주 그랜드 아일랜드 소재)에서 성장시킨 U937 세포를 수확하고, 10 mM HEPES (pH 7.5) 및 0.3％ BSA를 함유하는 1×RPMI 배지 (기브코)로 제조된 주화성 분석 완충액으로 1회 세척하였다. 세척 후, 세포를 5×106 세포/mL의 농도로 분석 완충액에 재현탁시켰다. 분석을 96-웰 케모Tx(ChemoTx) 플레이트 (뉴로프로브(NeuroProbe))에서 제조자 설명서에 따라 수행하였다. 일반적으로, 시험 화합물 존재 또는 부재의 세포 혼합물 50 μL를 상부 챔버 상에 도말하고, 1×주화성 완충액으로 제조된 SDF-1α (알앤드디 시스템즈, 10 ng/mL) 30 μL를 하부 챔버에 첨가하였다. 조립 후, 플레이트를 5％ CO2 하에 37℃에서 2.5시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 셀티터(CellTiter) 96 AQ (프로메가(Promega), 미국 위스 콘신주 매디슨 소재) 5 μL를 하부 챔버에 첨가하였다. 이어서, 플레이트를 37℃에서 60분 동안 인큐베이션하고, 테칸 스펙트라플루오르 플러스 마이크로플레이트 리더(Tecan Spectrafluor Plus Microplate Reader) (오스트리아 잘츠부르크 소재)를 이용하여 492 nm에서 흡광도를 측정함으로써 이동한 세포를 검출하였다. CXCR4 길항제는 세포 이동을 억제하므로, 흡광도 판독치를 감소시켰다. 이 분석에서 시험 화합물의 억제 효능 (IC50)은 그래프패드 프리즘 소프트웨어를 사용하여 492 nm에서의 흡광도의 투여량-의존적 감소를 기준으로 계산하였다.
상기 예시된 대부분의 화합물은 이 분석에서 약 60 nM 이하의 평균 IC50 값을 나타냈다. 이들 화합물의 대다수는 약 6 nM 이하의 평균 IC50 값을 나타냈으며, 예를 들어 실시예 19의 화합물은 이 분석에서 2.05 nM의 평균 IC50 값을 나타냈다. 이들 화합물의 대다수는 약 0.6 nM 이하의 평균 IC50 값을 나타냈으며, 예를 들어 실시예 50의 화합물은 이 분석에서 0.171 nM의 평균 IC50 값을 나타냈다.
케모카인 수용체 결합 선택성 분석
다른 케모카인 수용체, 예컨대 인간 CCR1, CCR2, CXCR2 또는 CXCR3 및 다른 G-단백질-커플링된 수용체에 대한 경우와 비교되는 CXCR4 수용체에 대한 본 화합물의 결합 선택성을, 상기 수용체를 코딩 및 발현하는 핵산으로 형질감염된 세포 또는 상기 수용체가 내부 발현되는 세포에서 평가할 수 있다. 전체 세포 또는 막 단편을 사용하여, CXCR4/125I-SDF-1α 결합 억제 분석에 대해 상기 기재된 것과 유사 한 방식으로 상기 수용체에 대한 각각의 리간드와 시험 화합물의 경쟁을 평가할 수 있었다.
예를 들어, 실시예 57a의 화합물은 인간 케모카인 수용체 CXCR2를 사용하는 리간드 결합 분석에서 73,000 nM 초과의 Ki 값을 나타냈다.
C57BL/6 마우스에서 화합물-유도된 백혈구 및 호중구 동원
골수 내의 줄기 세포는 생존 내내 모든 성숙한 혈액 세포 계통의 연속적 생성을 활발하게 유지한다. 골수는 백혈구(WBC)/호중구 생성 및 순환으로의 방출을 위한 주요 장소이다. CXCR4/SDF-1 축은 골수에서 WBC, 호중구 및 조혈 전구체 세포의 보유 및 방출에 중요한 것처럼 보이며, 골수에서 CXCR4/SDF-1 상호작용의 방해는 말초 혈액 중 이들 세포의 증가를 일으킨다. 단기 마우스 WBC/호중구 동원 모델을 사용하여 시험 화합물의 생체내 표적-조절 활성을 측정할 수 있다. 간단히, 병원균-무함유 5-6주령 암컷 C57BL/6 마우스 (타코닉(Taconic))을 분석 전 1주 이상 동안 사육하였다. 동물을 멸균된 설치류 먹이 및 산성화된 물에 연속적으로 접근시켰다. 5마리 마우스의 군에 식염수 중의 시험 화합물 또는 식염수 대조군을 피하 주사한 다음, 화합물 투여 후 여러 시점에서 CO2 질식 및 경부 탈구에 의해 희생시켰다. EDTA-코팅된 시린지 및 튜브를 사용하여 심장 천자에 의해 말초 혈액을 수집하였다. 헤마베트 마스코트(Hemavet Mascot) 혈액 분석기 (드류 사이언티픽 그룹(Drew Scientific Group), 미국 텍사스주 달라스 소재) 상에서 완전한 혈액 세포 분석을 수행하였다. 말초 혈액 중 전체 WBC, 호중구 및 림프구를 기록하였다. 마우스에 피하 투여된 유효한 CXCR4 길항제는 식염수 대조군과 비교시 말초 혈액 중 호중구 및 WBC의 개수를 증가시켰다.
상기 예시된 유의한 수의 화합물은 화합물 투여 3시간 후 측정된 평균 호중구 비 (처리군에서의 호중구 증가 대 식염수 대조군에서의 호중구 증가의 비)가 이 분석에서 약 2 초과이었다. 예를 들어, 실시예 39의 화합물은 이 분석에서 5 mg/kg의 투여량으로 4.6의 평균 호중구 비를 나타냈다.
SCID/나말와(Namalwa) 이종이식 모델에서 항-종양 활성
SDF-1/CXCR4 상호작용은 종양 성장, 침투, 혈관형성 및 전이를 비롯한 종양형성의 여러 단계에서 중요한 역할을 하는 것처럼 보인다. 시험 화합물의 생체내 항-종양 활성을 평가하기 위해, NOD/SCID 마우스 (잭슨 래보러토리즈(Jackson Laboratories)) 및 인간 비-호지킨 림프종 나말와 세포 (ATCC CRL 1432)를 사용하는 종양 이종이식 모델을 이용하였다. 간단히, 매트리겔과 (1:1) 혼합된 나말와 세포 200,000개를 동물의 배후 측면에 피하 이식하였다. 이식된 종양 세포를 고형 종양으로서 성장시키며, 이의 치수를 연속적으로 모니터링하고 캘리퍼스를 사용하여 측정하였다. 이 모델에서 시험 화합물의 생체내 효능을 측정하기 위해, 종양 세포 이식 후 48시간부터, 식염수 또는 PBS 중에 용해된 시험 화합물의 상이한 투여량으로 동물 (군 당 10마리)을 처리할 수 있었다. 화합물을 피하 투여하고, 종양 부피 및 체중을 2 또는 3일마다 측정하였다. 연구는 일반적으로 종양 성장에 따라 3 내지 4주 지속하였다. 시험 화합물의 항-종양 성장 활성을, 비히클 단독 처리된 대조군에서의 종양 부피와 비교되는 처리군에서의 종양 부피의 감소율(％) 로 측정하였다.
상기 예시된 여러 화합물, 예를 들어 실시예 26의 화합물은 1 mg/kg BID로 투여시 이 분석에서 종양 성장을 유의하게 억제하였다.
약리학적 성질, 예컨대 화합물 생체이용률, 생체내 대사 안정성 및 약역학/약동학 성질은 약물 개발 업계에 널리 공지된 방법에 의해 측정할 수 있었다. 본 발명의 바람직한 화합물은 피하 투여시 높은 생체이용률을 나타냈다. 본원에 예시된 일부 화합물, 예를 들어 실시예 44의 화합물은 래트에서 거의 100％의 생체이용률을 나타냈다. 또한, 바람직한 화합물은 양호한 생체내 대사 안정성을 나타냈다. 예를 들어, 실시예 57a의 화합물의 투여 후 24시간까지 개 및 원숭이 혈장 및 소변에서 검출가능한 대사물질이 전혀 관찰되지 않았다. 또한, 바람직한 화합물은 편리한 투여를 가능케 하는 바람직한 약역학/약동학 성질을 나타냈다. 예를 들어, 마우스에서, 실시예 58의 화합물의 반감기 (T1/2)는 약 3시간이었다. 약동학 성질에 대하여, 바람직한 화합물은 마우스에서 연장된 호중구 및 백혈구 동원을 유도하였다. 예를 들어, 실시예 25의 화합물은 마우스에서 5 mg/kg으로 단일 투여량 피하 투여된 후 6시간 이상 동안 말초 혈액 중 호중구 및 백혈구의 유의한 증가를 유도하였다.
SEQUENCE LISTING <110> Eli Lilly and Company <120> Cyclic Peptide CXCR4 Antagonists <130> X17256_WO <150> 60/940996 <151> 2007-05-31 <150> 60/940802 <151> 2007-05-30 <160> 108 <170> PatentIn version 3.4 <210> 1 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac, Bz or n-hexanoyl or is absent <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge, when Xaa at position 1 is present <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = d or l isomer Agl, Dab, Dap, Asp, Glu, Ala, d isomer Ala, Gly, Dap(Ac), Leu, Lys, Lys(Ac), 2Nal, Phe, d isomer Phe, beta-Ala or is absent <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(7) <223> Lactam bridge, when Xaa at position 1 is absent <220> <221> MOD_RES <222> (2)..(2) <223> 5-amino-valeryl, 4-AMB, 4-AMPA, succinyl or is absent <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Arg, Lys, Lys(iPr) or Lys(Me2) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Glu, d or l isomer Agl, Dab, Dap, d isomer Dap, Lys, Orn, d isomer Glu, or Asp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = beta-Ala, Arg, d isomer Arg, Gly, Lys, Lys(iPr), Orn or is absent, and when absent, Xaa at positions 9 and 10 are also absent <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa = Gly, 2Nal, d isomer 2Nal, d isomer Phe, or is absent, and when absent, Xaa at position 10 is also absent <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa = 2Nal or is absent <220> <221> MOD_RES <222> (10)..(10) <223> Amidated as NH2 or NHEt <400> 1 Xaa Tyr Xaa Arg Xaa Gly Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 10 <210> 2 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 2 Xaa Tyr Arg Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Dap(Alloc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Glu(Oallyl) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Arg(Pbf) <400> 3 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa 1 5 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Dap(Alloc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Glu(OAllyl) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Arg(Pbf) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 4 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa 1 5 <210> 5 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Dap <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Arb(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Arg(Pbf) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 5 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Glu Xaa 1 5 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Dab <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 6 Xaa Tyr Arg Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 7 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 7 Xaa Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 8 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> n-Hexanoyl modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Dap <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 8 Xaa Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 9 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = d or l isomer Agl <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 9 Xaa Tyr Arg Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 10 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 10 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 11 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Glu(OtBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap(Boc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Arg(Pbf) <400> 11 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa 1 5 <210> 12 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa = Glu(OtBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap(Boc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Arg(Pbf) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 12 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa 1 5 <210> 13 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 13 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 14 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Bz modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 14 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 15 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = d isomer Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 15 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 16 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 16 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Lys Arg 1 5 <210> 17 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dab <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 17 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 18 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = d or l isomer Agl <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 18 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 19 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Bz modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = d or l isomer Agl <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 19 Glu Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 20 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Bz modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dab <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 20 Asp Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 21 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dab <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 21 Asp Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 22 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 22 Asp Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Bz modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 23 Asp Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 24 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = d or l isomer Agl <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 24 Asp Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 25 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Ac modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(Me2) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 25 Asp Tyr Xaa Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 26 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Bz modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(Me2) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 26 Asp Tyr Xaa Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 27 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(6) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Succinyl modified <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = d or l isomer Agl <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> AMIDATION <400> 27 Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 28 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Succinyl modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(6) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = Dap <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> AMIDATION <400> 28 Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 29 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Succinyl modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(6) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = Dab <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> AMIDATION <400> 29 Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 30 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Succinyl modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(6) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa = Orn <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> AMIDATION <400> 30 Tyr Arg Arg Xaa Gly Xaa Arg 1 5 <210> 31 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Succinyl modified <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(6) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES 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Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa 1 5 <210> 34 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> acetic acid salt <400> 34 Gly Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 35 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Fmoc modified <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr)(Boc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = d isomer Glu(Oallyl) <220> 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MOD_RES <222> (1)..(6) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> d isomer <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> AMIDATION <400> 42 Tyr Arg Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 43 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(6) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (3)..(3) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> AMIDATION <400> 43 Tyr Arg Arg Xaa Gly Asp Arg 1 5 <210> 44 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 44 Gly Tyr Arg Arg Xaa Gly Asp Arg 1 5 <210> 45 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial 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Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> Amidated as NHEt <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> acetic acid salt <400> 57 Gly Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Arg 1 5 <210> 58 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> Amidated as NHEt <400> 58 Gly Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Xaa 1 5 <210> 59 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE 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bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 96 Phe Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Lys 1 5 <210> 97 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Orn <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 97 Phe Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Xaa 1 5 <210> 98 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 98 Phe Tyr Lys Arg Xaa Gly Glu Lys 1 5 <210> 99 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> Lactam bridge <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> Amidated as NHEt <400> 99 Phe Tyr Lys Arg Xaa Gly Glu Lys 1 5 <210> 100 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> FMOC modified <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(Boc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> 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<223> synthetic construct <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(Fmoc) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Lys(Fmoc) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATED <400> 104 Phe Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Xaa 1 5 <210> 105 <211> 8 <212> PRT <213> artificial <220> <223> synthetic construct <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr,Boc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = d isomer Glu(2-CTC resin) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Lys(iPr,Z) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 105 Phe Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa 1 5 <210> 106 <211> 8 <212> PRT <213> artificial <220> <223> synthetic construct <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr,Boc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa = d isomer Glu(OH) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Lys(iPr,Z) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 106 Phe Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa 1 5 <210> 107 <211> 8 <212> PRT <213> artificial <220> <223> synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa = Tyr(tBu) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr,Boc) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa = d isomer Arg(Pbf) <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Lys(iPr,Z) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 107 Phe Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Glu Xaa 1 5 <210> 108 <211> 8 <212> PRT <213> artificial <220> <223> synthetic construct <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(7) <223> lactam bridge <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa = Lys(iPr-d6) <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa = 2Nal <220> <221> MOD_RES <222> (7)..(7) <223> d isomer <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa = Lys(iPr-d6) <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> AMIDATION <400> 108 Phe Tyr Xaa Arg Xaa Gly Glu Xaa 1 5

Claims (14)

  1. 하기 화학식 I의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    <화학식 I>
    Figure 112009073236969-PCT00023
    식 중,
    a) 상기 락탐은 X1의 측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 (D/L)Agl/Glu, Dab/Glu, 및 Dap/Glu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 Ac 또는 n-헥사노일이거나; 또는
    b) 상기 락탐은 X1의 측쇄 카르복실기와 X7의 측쇄 아미노기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 Asp/(D/L)Agl, Asp/Dab, Asp/Dap, Glu/(D/L)Agl, Glu/Dab, Glu/Dap, Glu/DDap, 및 Glu/Lys으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 Ac 또는 Bz이거나, 또는 X1 및 X7은 각각 숙시닐/(D/L)Agl, 숙시닐/Dab, 숙시닐/Dap, 숙시닐/Lys, 및 숙시닐/Orn으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
    c) 상기 락탐은 X1의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합 에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 Ala/Glu, Ala/DGlu, DAla/Glu, DAla/DGlu, Dap(Ac)/Glu, Gly/Asp, Gly/Glu, Gly/DGlu, Leu/Glu, Leu/DGlu, Lys/DGlu, Lys(Ac)/Glu, 2Nal/Glu, Phe/Glu, Phe/DGlu, DPhe/Glu, 및 DPhe/DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
    d) 상기 락탐은 X1의 비-α, 비-측쇄 아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X1 및 X7은 각각 β-Ala/Asp, β-Ala/Glu, 5-아미노발레릴/Asp, 5-아미노발레릴/Glu, 4-AMB/Glu, 4-AMPA/Asp, 및 4-AMPA/Glu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1은 부재하거나; 또는
    e) 상기 락탐은 X2의 α-아미노기와 X7의 측쇄 카르복실기 간의 아미드 결합에 의해 형성되며, 여기서 X2 및 X7은 각각 Tyr/Asp, Tyr/Glu, 및 Tyr/DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택된 쌍이고, R1 및 X1은 각각 부재하고;
    R1은 X1이 상기 락탐 아미드 결합의 구성성분이 아닌 α-아미노기를 함유하는 경우 Ac, Bz, 및 n-헥사노일로 이루어진 군으로부터 선택된, X1의 α-아미노기 상의 치환기이거나, 부재하며, 여기서 X1은 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, 및 Glu으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이고;
    X1은 (D/L)Agl, Ala, β-Ala, DAla, 5-아미노발레릴, 4-AMB, 4-AMPA, Asp, Dab, Dap, Dap(Ac), Glu, Gly, Leu, Lys, Lys(Ac), 2Nal, Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X3은 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X7은 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, DDap, Glu, DGlu, Lys, 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X8은 β-Ala, Arg, DArg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X9는 Gly, 2Nal, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X10은 2Nal이거나, 부재하고;
    여기서 X8이 부재하는 경우, X9 및 X10은 각각 부재하고, X9가 부재하는 경우, X10은 부재하고,
    R2는 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택된다.
  2. 제1항에 있어서,
    R1이 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X1이 β-Ala, 4-AMB, 4-AMPA, Asp, Dab, Dap, Dap(Ac), Glu, 2Nal, Phe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X3이 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X7이 Asp, Dab, Dap, Glu, DGlu, Lys, 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X8이 Arg 및 Lys으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X9가 부재하고;
    X10이 부재하고;
    R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
    락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  3. 제1항에 있어서,
    R1이 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X1이 DAla, 5-아미노발레릴, 4-AMPA, Asp, Glu, Leu, Lys(Ac), Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X3이 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X7이 (D/L)Agl, Asp, Dab, Dap, DDap, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X8이 Arg, DArg, 및 Lys으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X9가 부재하고;
    X10이 부재하고;
    R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
    락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  4. 제1항에 있어서,
    R1이 Ac, Bz, 및 n-헥사노일로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X1이 (D/L)Agl, Ala, β-Ala, Asp, Dap, Glu, Gly, Lys, 및 Phe으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X3이 Arg, Lys, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X7이 (D/L)Agl, Asp, Dap, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X8이 β-Ala, Arg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X9가 Gly, 2Nal, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X10이 2Nal이거나, 부재하고;
    R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
    락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  5. 제1항에 있어서,
    R1이 Ac 및 Bz로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X1이 Ala, 5-아미노발레릴, Asp, Glu, Gly, Phe, DPhe, 및 숙시닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X3이 Arg, Lys(iPr), 및 Lys(Me2)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X7이 (D/L)Agl, Asp, Dap, Glu, 및 DGlu으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X8이 β-Ala, Arg, Gly, Lys, Lys(iPr), 및 Orn으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X9가 Gly, D2Nal, 및 DPhe으로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X10이 2Nal이거나, 부재하고;
    R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
    락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  6. 제1항, 제4항 및 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    X1이 Gly 및 Phe으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X3이 Lys(iPr)이고;
    X7이 DGlu인
    락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  7. 제5항에 있어서,
    R1이 부재하고;
    X1이 Gly 및 Phe으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    X3이 Lys(iPr)이고;
    X7이 DGlu이고
    X8이 Arg 및 Lys(iPr)로 이루어진 군으로부터 선택되거나, 부재하고;
    X9가 부재하고;
    X10이 부재하고;
    R2가 NH2 및 NHEt로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
    락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  8. 하기 화학식의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    Figure 112009073236969-PCT00024
  9. 제8항에 있어서, 상기 제약상 허용되는 염이 아세트산 염인 락탐-환화 펩티드.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
  11. 요법에 사용하기 위한 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  12. 류마티스 관절염, 폐 섬유증, HIV 감염, 또는 유방암, 췌장암, 흑색종, 전립선암, 신장암, 신경아세포종, 비-호지킨 림프종, 폐암, 난소암, 결장직장암, 다발성 골수종, 다형성 교아세포종 및 만성 림프구성 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 치료하기 위한 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  13. 류마티스 관절염, 폐 섬유증, HIV 감염, 또는 유방암, 췌장암, 흑색종, 전립선암, 신장암, 신경아세포종, 비-호지킨 림프종, 폐암, 난소암, 결장직장암, 다발성 골수종, 다형성 교아세포종 및 만성 림프구성 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
  14. 류마티스 관절염, 폐 섬유증, HIV 감염, 또는 유방암, 췌장암, 흑색종, 전립선암, 신장암, 신경아세포종, 비-호지킨 림프종, 폐암, 난소암, 결장직장암, 다발성 골수종, 다형성 교아세포종 및 만성 림프구성 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 치료가 필요한 환자에게 유효량의 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 락탐-환화 펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 질환의 치료 방법.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2979991A1 (en) 2014-07-31 2016-02-03 Greif International Holding BV. Multilayer material, fire protection mat with said multilayer material and transport and storage container assembly comprising said fire protection mat.

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2942798B1 (fr) 2009-03-05 2011-04-08 Centre Nat Rech Scient Peptides utilisables pour le traitement de la leucemie lymphoide chronique
IT1397901B1 (it) 2010-01-26 2013-02-04 Consiglio Nazionale Ricerche Peptidi ciclici che legano il recettore cxcr4 e relativi usi in campo medico e diagnostico.
JPWO2012118124A1 (ja) * 2011-03-01 2014-07-07 国立大学法人京都大学 新規ケモカイン受容体拮抗剤
WO2012168336A1 (en) * 2011-06-07 2012-12-13 Polyphor Ag Beta - hairpin peptidomimetics as cxc4 antagonists
WO2013044500A1 (zh) * 2011-09-30 2013-04-04 Cheng Yun 丙型肝炎病毒免疫原性肽或其衍生物在预防或治疗关节炎中的应用
EP2771484A1 (en) 2011-10-28 2014-09-03 Galderma Research & Development New leukocyte infiltrate markers for rosacea and uses thereof
ES2764840T3 (es) 2015-01-28 2020-06-04 Univ Bordeaux Uso de plerixafor para tratar y/o prevenir exacerbaciones agudas de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica
WO2017176565A1 (en) 2016-04-07 2017-10-12 Eli Lilly And Company Combinations of an anti-b7-h1 antibody and a cxcr4 peptide antagonist for treating a solid tumor
CN109922818B (zh) * 2016-09-06 2024-02-20 主线生物科学公司 Cxcr4拮抗剂及使用方法
CN106841624B (zh) * 2017-01-26 2019-02-22 庄磊靓 抗人cd4和抗人cd184单克隆抗体作为标志物的应用
KR20230145543A (ko) * 2017-09-05 2023-10-17 메인라인 바이오사이언스 고친화성 cxcr4 선택적 결합 콘쥬게이트 및 그 사용 방법
US11123437B2 (en) 2017-09-05 2021-09-21 Mainline Biosciences, Inc. Selective CXCR4 binding peptide conjugate and methods for making and using the same
US11771736B2 (en) * 2017-12-21 2023-10-03 Mainline Biosciences (Shanghai) Co., Ltd. Composition comprising a therapeutic agent and a CXCR4 selective antagonist and methods for using the same
JP2021165234A (ja) * 2018-07-03 2021-10-14 富士フイルム富山化学株式会社 Ｃｘｃｒ４結合性化合物もしくはその塩またはそれらと金属との錯体
AU2019338221B2 (en) 2018-09-12 2024-04-04 Technische Universität München CXCR4-targeted diagnostic and therapeutic agents with reduced species selectivity
US11639373B2 (en) 2018-09-12 2023-05-02 Technische Universität München Therapeutic and diagnostic agents for cancer
US20220218852A1 (en) 2019-04-18 2022-07-14 Provincial Health Services Authority Novel radiolabelled cxcr4-targeting compounds for diagnosis and therapy
EP4097120A4 (en) * 2020-01-26 2024-05-01 Mainline Biosciences (Shanghai) Co., Ltd. ISOTOPE-LABELED CXCR4 SELECTIVELY BINDING PEPTIDE CONJUGATE AND METHODS OF MAKING AND USE THEREOF
JPWO2022138891A1 (ko) * 2020-12-25 2022-06-30
EP4043041A1 (en) 2021-02-15 2022-08-17 Technische Universität München Cxcr4-ligands for diagnostic and therapeutic use and precursors thereof
WO2023201435A1 (en) * 2022-04-20 2023-10-26 Provincial Health Services Authority Cxcr4-targeting compounds, and methods of making and using the same
CN115060901A (zh) * 2022-06-21 2022-09-16 中国医学科学院基础医学研究所 苹果酸酶2在制备矽肺病或肺纤维化相关疾病诊断试剂或治疗药物中的应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4391123B2 (ja) * 2002-10-24 2009-12-24 株式会社オーファンリンク 新規ｃｘｃｒ４アンタゴニスト
KR20090041360A (ko) 2006-02-27 2009-04-28 테크니쉐 유니베르시테트 뮌헨 암 영상화 및 치료방법

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2979991A1 (en) 2014-07-31 2016-02-03 Greif International Holding BV. Multilayer material, fire protection mat with said multilayer material and transport and storage container assembly comprising said fire protection mat.

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