KR20090083350A

KR20090083350A - 골 아나볼릭 단백질을 위한 약물 전달 방법

Info

Publication number: KR20090083350A
Application number: KR1020097008736A
Authority: KR
Inventors: 마이클 제이. 데이; 나탈리 몬도리; 베네딕뜨 리가우드; 바트 헨더슨; 씨. 리챠드 리틀
Original assignee: 라디우스 헬쓰, 인코포레이티드; 입센 파마 에스.에이.에스
Priority date: 2006-10-03
Filing date: 2007-10-03
Publication date: 2009-08-03
Also published as: ES2739459T3; US20100029556A1; WO2008063279A3; NZ576682A; UA98776C2; EP2073789B1; DK2073789T3; NL301235I2; NO344885B1; JP5375611B2; KR20180117738A; CN101578093A; PT2957278T; WO2008063279A9; EP2957278B1; KR20150020289A; NO20091545L; CN102274492B; SG175580A1; EP2957278A1

Abstract

본 발명은 부갑상선 호르몬-관련 단백질(PTHrP) 유사체를 함유하는 저장-안정성 조성물 및 본 명세서에 기재된 PTHrP 유사체와 PTHrP 조성물을 사용하여 골다공증을 치료하거나, 골 질량을 증가시키거나, 골 특질을 증가시키는 방법을 제공한다. 본 발명의 조성물은 멸균된 형태로 저장 안정성이 있으며, 일반적으로, 수주 이상 동안 실온에서 저장가능하여 사람 환자에게 비경구 투여로 투여하기에 간편하다.

Description

골 아나볼릭 단백질을 위한 약물 전달 방법{METHOD OF DRUG DELIVERY FOR BONE ANABOLIC PROTEIN}

관련 출원

본 출원은 2006년 10월 3일자로 출원된 미국 가특허출원 제 60/848,960호에 대하여 우선권을 주장한다. 상기 출원의 전체 교시내용은 참고문헌으로써 본 명세서에 통합된다.

발명의 배경

부갑상선 호르몬-관련 단백질["PTHrP(parathyroid hormone-related protein)"]은 139 내지 173개의 아미노산으로 구성된 단백질이다. PTHrP 및 특정 유사체는 골다공증 및 관련 장애의 치료시 골 질량(bone mass)과 골 특질(quality)을 개선시키는데 유용한 것으로 공지되어 있다. 그러나, 약제 물질(pharmaceutical agents)로서 이러한 단백질의 상업적 사용은 저장 안정성과 제조 용이성의 측면에서 허용가능한 제형의 개발을 필요로 한다.

더욱이, 현재 가용한 골다공증 약물은 원치 않는 부작용, 예컨대, 고칼슘혈증 및 골 재흡수의 자극 증가로 인해 적당한 투여량(dosage) 범위에 한계가 있다. 이러한 원치 않는 부작용 및 그 결과 용량 한계는 이러한 약물로부터 얻을 수 있는 유익한 효과를 감소시킨다. 따라서, 원치 않는 부작용의 증가없이 유익한 효과를 증가시킬 용량으로 투여될 수 있는 화합물에 대한 요구가 존재한다.

발명의 요약

본 발명은 부갑상선 호르몬-관련 단백질(PTHrP) 유사체를 함유하는 저장-안정성 조성물 및 본 명세서에 기재된 것과 같은 그러한 유사체 및 그러한 유사체를 함유한 조성물을 사용하여 골다공증을 치료하거나, 골 질량을 증가시키거나, 골 특질을 증가시키기 위한 방법을 제공한다. 본 발명의 조성물은 멸균된 형태로 저장 안정성이 있으며, 일반적으로, 수주 이상 동안 실온에서 저장가능하여 사람 환자에게 비경구 투여로 투여하기에 간편하다.

한 구체예에서, 본 발명은 환자(subject)(예를 들어, 사람)에게 투여하기에 적당한 저장-안정성(storage-stable) 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물은 PTHrP 유사체 및 조성물의 pH를 2와 7 사이로 유지하기 위한 유효량의 버퍼를 포함한다. 특정 구체예에서, PTHrP는 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 환자에게 투여하기에 적당한 저장-안정성 조성물을 함유한 밀봉된 용기를 제공한다. 상기 조성물은 PTHrP 또는 이의 유사체 및 조성물의 pH를 2와 7 사이로 유지하기 위한 유효량의 버퍼를 포함한다. 특정 구체예에서, 상기 PTHrP 유사체는 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 PTHrP 또는 이의 유사체 및 조성물의 pH를 2와 7 사이로 유지하기 위한 유효량의 버퍼를 포함하는 저장-안정성 조성물을 포함하는 하나 이상의 일회사용(single-use) 용기를 포함하는 약물 전달 장치를 제공한다. 특정 구체예에서, PTHrP 유사체는 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 PTHrP 또는 이의 유사체 및 조성물의 pH를 2와 7 사이로 유지하기 위한 유효량의 버퍼를 포함하는 저장-안정성 조성물을 포함하는 하나 이상의 수회사용(multi-use) 용기를 포함하는 약물 전달 장치를 제공한다. 특정 구체예에서, PTHrP 유사체는 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 환자를 치료하는데 충분한 지속 시간 동안(전형적으로 약 3개월 내지 36개월) 40 내지 160㎍의 양으로 매일 단일 피하 용량의 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골다공증의 치료가 요구되는 환자에서 골다공증을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구체예에서, 상기 치료 기간은 약 3 개월 내지 18 개월이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 환자를 치료하는데 충분한 지속 시간 동안 (전형적으로 약 3개월 내지 36개월) 40 내지 160㎍의 양으로 매일 단일 피하 용량의 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골 질량 또는 골 특질의 증가가 요구되는 환자에서 골 질량 또는 골 특질을 증가시키는 방법을 제공한다. 일부 구체예에서, 상기 치료 기간은 약 3 개월 내지 18 개월이다.

본 발명의 PTHrP 및 유사체 조성물은 호르몬 조성 및 활성의 측면에서 저장 안정성을 나타낸다. 더욱이, 이러한 조성물은, 일반적으로, 원치 않는 부작용, 예컨대, 고칼슘혈증 또는 골 재흡수 자극의 감소 또는 제거를 수반하면서, 현재 가용한 골다공증 약물보다 더 높은 투여량으로 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 증가된 투여량으로 인하여 유익한 생리학적 효과의 증가를 이점으로 지니며 결과적으로 치료 시간 길이에서의 감소를 가져올 수 있다.

도 1은 임의의 화학 안정화제 없이, 5℃와 25℃에서 24개월 내내 유지된 서열목록 2의 안정성을 보여주는 그래프이다.

도 2는 5℃, 25℃ 및 40℃에서 24개월 내내 유지된 동결건조된 서열목록 2의 안정성을 보여주는 그래프이다.

천연 hPTHrP(1-34)의 서열은 다음과 같다:

Ala Val Ser GIu His GIn Leu Leu His Asp Lys GIy Lys Ser He GIn Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu He Ala GIu He His Thr Ala (서열목록:1).

특정 구체예에서, PTHrP 유사체는 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)이다.

다른 PTHrP 유사체는 미국 특허 제6,921,750호, 5,955,574호, 6,544,949호, 5,723,577호, 및 5,696,095호에 기재되어 있고, 상기 각 문헌의 전체 내용은 참고문헌으로써 본 명세서에 통합된다.

본 명세서에 사용된 "버퍼"는 약제학적으로 허용되며 본 발명의 조성물을 요망되는 pH 범위내로 유지할 수 있는 임의의 산 또는 염 배합물이다. 개시된 조성물에서 버퍼는 pH를 약 2 내지 약 7, 약 3 내지 약 6, 약 4 내지 약 6, 약 4.5 내지 약 5.6, 또는 약 5.1로 유지시킨다. 적당한 버퍼는, 예를 들어, 아세테이트, 타르트레이트 포스페이트 또는 시트레이트 버퍼와 같은, 상기한 pH 범위를 유지시킬 수 있는 임의의 약제학적으로 허용되는 버퍼를 포함한다. 한 구체예에서, 버퍼는 아세테이트 또는 타르트레이트 버퍼이다. 또 다른 구체예에서, 버퍼는 아세테이트 버퍼이다. 한 구체예에서, 버퍼는 아세트산과 소디움 아세테이트이다.

개시된 조성물에서, 버퍼의 농도 범위는 전형적으로 약 0.1 mM 내지 약 1000 mM, 약 0.2 mM 내지 약 200 mM, 약 0.5 mM 내지 약 50 mM, 약 1 mM 내지 약 10 mM 또는 약 6 mM이다.

본 명세서에 사용된, 항-미생물제는 환자에게 투여하기에 적당한 약제학적으로 허용되는 보존제인데, 이 보존제는 본 발명의 조성물내의, 예를 들어, 세균, 바이러스 및 진균을 포함하는, 미생물의 성장을 억제, 방지 또는 지연시킨다. 본 발명의 조성물 및 방법에 사용하기 위한 적당한 항-미생물제는, 이로만 국한되는 것은 아니지만, 크레졸, 벤질 알코올, 페놀, 벤잘코니움 클로라이드, 벤즈에토니움 클로라이드(benzethonium chloride), 클로로부탄올, 페닐에틸 알코올, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 티오머살(thiomersal) 및 페닐머큐릭 나이트레이트 및 아세테이트를 포함한다. 한 구체예에서, 항-미생물제는 m-크레졸, 클로로크레졸 또는 페놀이다. 또 다른 구체예에서, 항-미생물제는 클로로크레졸 또는 페놀이다. 또 다른 구체예에서, 항-미생물제는 페놀이다.

본 명세서에서 사용된, 유효량의 항-미생물제는 본 발명의 조성물내의, 예를 들어, 세균, 바이러스 및 진균을 포함하는, 미생물의 성장을 억제, 방지 또는 지연시키는데 유효한 양이다. 본 발명의 조성물에서, 항-미생물제 양은 전형적으로 약 0.1 내지 약 20㎎/㎖, 약 0.2 내지 약 30㎎/㎖, 약 0.2 내지 약 10㎎/㎖, 약 0.25 내지 약 5㎎/㎖, 약 0.5 내지 약 50㎎/㎖, 약 1 내지 약 10㎎/㎖, 약 3㎎/㎖ 또는 약 5㎎/㎖이다.

본 발명의 조성물은 전형적으로 멸균되어 있고, 저장-안정성이 있으며, 투여 전에 재구성할 필요 없이 약제학적으로 허용되는 수성 용액으로 즉석에서 제조되어 투여된다. 본 발명의 조성물은 환자에게 투여하기에 적합한데, 이것은 상기 조성물이 약제학적으로 허용가능하고, 무독성이며, 당해 펩티드의 생물학적 또는 호르몬 효과에 악영향을 미치게 될 임의의 성분들을 함유하지 않는다는 것을 의미한다. 본 발명의 조성물은, 예를 들어, 임의의 세포를 포함하지 않는다.

본 명세서에 사용된, 본 발명의 조성물은, PTHrP의 양, 순도가 하기 조건 중 하나에서 본래 양의 약 95% 이상 잔존하는 경우, 저장-안정성이 있다: (1) 5℃에서 2년 이상 동안 저장; 또는 (2) 25℃에서 30일 이상 동안 저장.

본 발명의 조성물은 전형적으로 장기간 저장에 적당한, 밀봉된 용기, 바이얼 또는 카트리지에 대개 저장된다. "장기간 저장에 적당한"은 바이얼, 용기 또는 카트리지가 25℃에서 3개월 이상 유지될 때 본 발명의 조성물의 성분들의 유출(escape) 또는 외부 성분들, 예컨대, 미생물의 침입을 허여하지 않는다는 것을 의미한다.

본 발명의 조성물은 바람직하게는 주사(injection), 전형적으로 피하 주사로 투여된다.

본 발명의 조성물은, 단일-용량(single-dose) 또는 복수-용량(multi-dose) 밀봉 용기, 바이얼 또는 카트리지에 저장될 수 있다. 밀봉된 용기, 바이얼 또는 카트리지는 전형적으로 단일 또는 복수-용량 주사 펜(pen) 또는 약물 전달 장치로 사용하기에 적당한데, 상기 주사 펜 또는 약물 전달 장치는 대개 환자가 스스로 펩티드를 투여하는 것을 가능케 한다. 밀봉된 용기는 본 발명의 펩티드의 하나 이상의 용량을 포함할 수 잇는데, 여기서 각각의 용량은 본 명세서에 개시된 것과 같은 유효량의 펩티드를 포함한다.

단일-용량 주사 펜, 또는 약물 전달 장치는 전형적으로 본 명세서에 개시된 조성물 중에 유효량의 PTHrP를 단일 용량으로 포함하는 밀봉된 용기를 사용하는 일회사용(disposable) 장치이다. 복수-용량 주사 펜 또는 약물 전달 장치는 전형적으로 본 명세서에 기재된 조성물 중에 유효량의 PTHrP를 1 이상의 용량으로 함유한다. 복수-용량 펜은 전형적으로 본 명세서에 기재된 저장 안정성 조성물의 요망되는 부피를 투여하기 위해 조정될 수 있다. 특정 구체예에서, 복수-용량 주입은 바늘 한 개를 수회 사용함으로써 일어날 수 있는 용기 또는 카트리지내로 미생물 오염체가 침입하는 것을 막는다.

본 명세서에서 사용된, 주사 펜은, 또한 2개의 용기를 포함할 수 있는데, 하나는 본 명세서에 기재된 것과 같은, PTHrP를, 하기한 바와 같이, 동결건조된 분말로 함유하며, 제 2 용기는 상기 동결건조된 분말의 재구성을 위한 액체를 함유한다. 상기 2개의 용기의 내용물은 투여되기 전에 혼합될 수 있다.

위에서 논의된 것과 같은 본 발명의 조성물은 주사에 의해 투여될 수 있다. 주사를 위한 본 발명의 조성물의 적당한 부피는 약 0.5 내지 약 1㎖, 약 0.1 내지 약 1㎖, 약 0.02 내지 약 0.04㎖, 약 0.1 내지 약 5.0㎕, 또는 약 0.1 내지 약 1.0㎕이다.

본 발명의 조성물에서, 펩티드의 농도는 약 20㎎/㎖ 내지 약 20,000㎎/㎖, 약 100㎎/㎖ 내지 약 10,000㎎/㎖, 약 300㎎/㎖ 내지 약 300㎎/㎖, 약 500㎎/㎖ 내지 약 2000㎎/㎖ 및 약 2㎎/㎖이다.

본 발명의 조성물은 또한 당업계에 공지된 동결건조 기술을 이용하여 동결건조되며 투여 전에 재구성될 수 있는 분말로서 저장될 수 있다. 본 명세서에 사용된 용어 "동결건조"는 전형적으로 조성물이 동결된 상태로 존재할 때, 고압 진공 하에서 승화(sublimation)에 의해, 본 발명의 조성물로부터 용매, 바람직하게는 수 혼화성 용매, 더 바람직하게는 물을 제거하는 단계를 포함하는 냉동 건조 또는 탈수 기술이다. 전형적으로, 동결건조는 동결건조 장치(동결건조기)에서 수행되는데, 상기 동결건조기는 가변 온도 조절기를 지니는 건조 챔버, 물을 수집하기 위한 콘덴서, 및 상기 건조 챔버내 압력을 감소시키기 위한 진공 시스템을 포함한다.

본 명세서에 사용된, 용어 "동결건조된 조성물"은 상기 정의된 것과 같은 동결건조 절차를 거친후 생산 또는 남아있는 고체 잔류물 또는 분말을 의미한다. 본 발명의 동결건조된 조성물은 전형적으로 추가로 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함한다. 본 명세서에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 부형제"는 특질, 예컨대, 동결건조된 케이크의 색, 조직(texture), 강도, 및 부피를 향상시키기 위해 동결건조에 앞서 용액에 첨가되는 물질을 의미한다. 약제학적으로 허용되는 부형제는, 예를 들어, 버퍼 및 pH 조정제, 결정질 증량 부형제(crystalline bulking excipient), 안정화제, 및 긴장성 증강제(tonicity raising agents)일 수 있다.

임의의 바람직한 구체예에서, 약제학적으로 허용되는 부형제는 결정질 증량 부형제(crystalline bulking excipient)이다. 본 명세서에서 사용된 것과 같은, 용어 "결정질 증량 부형제" 또는 "결정질 증량제(crystalline bulking agent)"는 동결건조된 케이크에 대해 벌크 및 구조를 제공하는 부형제를 의미한다. 이러한 결정질 증량제는 불활성이며 펩티드와 반응하지 않는다. 또한, 결정질 증량제는 동결건조 조건하에서 결정화될 수 있다.

적당한 결정질 증량제의 일예는 친수성 부형제, 예컨대, 수 용해성 폴리머; 당, 예컨대, 만니톨, 소르비톨, 자일리톨, 글루시톨, 두시톨, 이노시티올, 아라비니톨, 아라비톨, 갈락티톨, 아이디톨(iditol), 알리톨(allitol), 말티톨, 프룩토스, 소르보스, 글루코스, 자일로스, 트레할로스, 알로스, 덱스트로스, 알트로스, 락토스, 글루코스, 프룩토스, 글로스(gulose), 아이도스(idose), 갈락토스, 탈로스, 리보스, 아라비노스, 자일로스, 라이소스(lyxose), 수크로스, 말토스, 락토스, 락툴로스(lactulose), 푸코스(fucose), 람노스, 멜레치토스(melezitose), 말토트리오스, 라피노스, 알트리톨, 이들의 광학적 활성 형태(D- 또는 L-형)를 비롯한 상응하는 라세미체; 무기염, 미네랄 및 미네랄 유기염, 예컨대, 칼슘염, 예컨대, 락테이트, 글루코네이트, 글리세릴포스페이트, 시트레이트, 포스페이트 1가염기(monobasic) 및 2가염기(dibasic), 석시네이트, 설페이트 및 타르트레이트, 뿐만 아니라, 알루미늄 및 마그네슘의 동일한 염; 탄수화물, 예컨대, 통상적인 단당류 및 이당류를 비롯한 상응하는 다가알코올(polyhydric alcohols) 단백질, 예컨대, 알부민; 아미노산, 예컨대, 글리신; 유화가능한 지방(emulsifiable fats) 및 폴리비닐피롤리돈을 포함한다. 바람직한 결정질 증량제는 글리신, 만니톨, 덱스트란, 덱스트로스, 락토오스, 수크로오스, 폴리비닐피롤리돈, 트레할로스, 글루코스 및 이들의 배합물로 이루어진 군에서 선택된다. 특히 유용한 증량제는 덱스트란을 포함한다.

본 명세서에 사용된 것과 같은, 안정화제는 펩티드의 화학적, 생물학적 또는 호르몬적 안정성을 유지시키는 조성물이다. 안정화제의 일예는 당류, 바람직하게는, 단당류 또는 이당류, 예를 들어, 글루코스, 트레할로스, 라피노스, 또는 수크로오스; 예를 들어, 만니톨, 소르비톨 또는 이노시톨과 같은 당알코올(sugar alcohol), 글리세린 또는 프로필렌 글리콜 또는 이들의 혼합물과 같은 다가 알코올 및 알부민을 포함하는, 폴리올을 포함한다.

본 명세서에 기재된 조성물은 환자에서 골 성장을 자극하기 위해 사용될 수 있다. 따라서, 이들 조성물은 골 성장의 부족과 연관된 질병 또는 장애, 예컨대, 골다공증 및 골절(bone fractures)의 치료에 유용하다. 한 구체예에서, 본 발명은 본 명세서에 기재된 유효량의 조성물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 환자에서 골다공증을 치료하는 방법이다.

본 명세서에 사용된, "치료하는"은 예방적, 및 치료척 치료 둘 모두를 포함할 수 있다. 예를 들어, 치료적 치료는 골다공증의 진척의 지연, 억제 또는 예방을 포함하며, 골다공증과 관련된 증상의 감소 또는 제거를 포함할 수 있다. 예방적 치료는 골다공증 발병의 예방, 억제 또는 지연을 포함할 수 있다.

본 명세서에 사용된, "유효량"은 요망되는 반응을 유도하는데 충분한 양을 의미한다. 본 발명에서, 요망되는 생물학적 반응은 환자의 골 손실율에서의 감소 및/또는 골 질량 또는 골 특질의 증가이다.

본 발명의 조성물 및 방법에 사용하기 위한 적당한 투여량은, 일일 1회, 격일당 1회, 주당 2회, 주당 1회, 2주당 1회, 1개월당 1회 투여되는, 약 40 내지 약 160㎍, 약 80 내지 약 120㎍ 약 80 내지 약 100㎍; 또는 약 40 내지 약 50㎍, 약 50 내지 약 60㎍, 약 60 내지 약 70㎍, 약 70 내지 약 80㎍, 약 80 내지 약 90㎍, 약 90 내지 약 100㎍, 약 100 내지 약 110㎍, 약 110 내지 약 120㎍, 약 120 내지 약 130㎍, 약 130 내지 약 140㎍, 약 140 내지 약 150㎍, 약 150 내지 약 160㎍; 또는 40 내지 약 45㎍, 약 45 내지 약 50㎍, 약 50 내지 약 55㎍, 약 55 내지 약 60㎍, 약 60 내지 약 65㎍, 약 65 내지 약 70㎍, 약 70 내지 약 75㎍, 약 75 내지 약 80㎍, 약 80 내지 약 85㎍, 약 85 내지 약 90㎍, 약 90 내지 약 95㎍, 약 95 내지 약 100㎍, 약 100 내지 약 105㎍, 약 105 내지 약 110㎍, 약 110 내지 약 115㎍, 약 115 내지 약 120㎍, 약 120 내지 약 125㎍, 약 125 내지 약 130㎍, 약 130 내지 약 135㎍, 약 135 내지 약 140㎍, 약 140 내지 약 145㎍, 약 145 내지 약 150㎍, 약 150 내지 약 155㎍, 약 155 내지 약 160㎍을 포함한다. 용량은, 예를 들어, 1개월당 1회의 간헐적(pulsatile) 주사일 수 있는데, 이것은 본 명세서에 기재된 조성물의 단일 용량의 간헐적 방출을 야기한다.

상기한 투여량이 1일 1회, 주당 1회 등으로 투여되는 경우, 전형적으로, 투여량은 동일한 분량이다.

본 명세서에 사용된, "환자"는 동물, 예를 들어, 포유동물, 예컨대 사람일 수 있다.

약제학적으로 허용되는 염은 환자, 예컨대, 사람에게 투여하기에 적당한 염이다. 본 발명의 펩티드는 적당한 유기 또는 무기 염기와 반응하여 염기 부가 염을 형성할 수 있는 충분히 산성인 하나 이상의 양성자를 지닐 수 있다. 염기 부가 염은 암모늄 또는 알칼리 또는 알칼리 토 금속 수산화물(hydroxides), 카보네이트, 바이카보네이트 등과 같은 무기 염기와 알콕시드, 알킬 아미드, 알킬 및 아릴 아민 등과 같은 유기 염기에서 유래된 그러한 염들을 포함한다. 따라서, 본 발명의 염을 제조하는데 유용한 그러한 염기는 염화나트륨, 염화칼륨, 염화암모늄, 탄산칼륨 등을 포함한다. 충분히 염기성인 기, 예컨대 아민을 지니는 본 발명의 펩티드는 유기 또는 무기 산과 반응하여 산 부가 염을 형성할 수 있다. 염기성 기를 지니는 화합물로부터 산 부가 염을 형성하기 위해 흔히 사용되는 산은, 염화수소산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 인산 등과 같은 무기 산, 및 p-톨루엔설폰산, 메탄설폰산, 옥살산, p-브로모페닐-설폰산, 카본산, 석신산, 시트르산, 벤조산, 아세트산과 같은 유기 산이다. 그러한 산의 일예는 설페이트, 피로설페이트, 비설페이트, 설피트, 비설피트, 포스페이트, 모노하이드로젠포스페이트, 디하이드로젠포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포름에이트, 이소부티레이트, 카프로레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수버레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말레이트, 부틴-l,4-디오에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 히드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, 감마-히드록시부티레이트, 글리콜레이트, 타르트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함한다.

본 발명의 조성물은 전형적으로 고칼슘혈증과 같은 임의의 부작용을 나타내지 않거나 감소된 부작용을 나타내며, 전형적으로 위에 나열된 투여량에서 골 재흡수의 자극을 증가시키지 않는다. 부작용에 있어서 이러한 감소는 시중에서 입수가능한 골다공증 약물에 비해 더 높은 용량의 투여를 가능케 한다.

본 발명의 조성물은 본 명세서에 개시된 바와 같이 주사에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 단독으로 투여되거나 추가의 치료제, 예컨대, 골흡수억제제(antiresorptive therapy), 예를 들어, 비스포스포네이트(bisphonsphonates) 및 칼시토닌과 조합되어 투여될 수 있다.

예시

실시예 1은 안정화제 없이, 낮은 아세테이트 농도(1mM)에서 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)의 안정성을 입증한다.

표 1

물질	공급업자	단위 제형(카트리지당)
(서열번호:2) 트리-하이드레이트 소디움 아세테이트 0.1N 아세트산 0.1N 주사용 물	Ipsen Ireland Prolabo Prolabo Meram	0.140㎎(유리 염기) 14.6㎎ 1.9 ㎎ qs pH 5.1 qs 1.4g
타입 I 클리어 글래스 카트리지 1.5㎖(세척되었으며, 실리콘화되었고, 멸균되었음) 그레이 PTFE 브로모부틸 카트리지 고무 스톱퍼 클로로부틸 고무-금속 카트리지 크림프	Bunderglass via Vetter Daikyo West Pharmaceutical	1 1 1

qs = 도달시키는데 충분한 양으로

제형은 0.1㎖당 100 mcg의 (서열목록:2)를 전달하였다. pH 5.1에 맞추기 위해 희석된 아세테이트 버퍼를 함유한 주사용 물에 용해시킨 (서열목록:2)를 사용하였다.

결과는, 도 1에 도시된 바와 같이, 5℃에서 24개월 내내 월등한 화학적 안정성을 확증시킨다. 이 용액은 안정화제 또는 보존제를 함유하지 않고 단지 6mM 아세테이트 버퍼만을 함유한다.

(서열목록:2)에 대한 개설에서, 안정화제는 용액에 양호한 안정성을 부여하기 위해 불필요하다.

실시예 2: 동결건조된 형태의 (서열목록:2)에 시트르산 버퍼의 사용.

표 2

물질	공급업자	단위 제형(카트리지당)
(서열번호:2) 덱스트란 70 시트르산 0.25%(w/v) 주사용 물^**	Ipsen Ireland Prolabo Prolabo Meram	0.1㎎(유리 염기) 50㎎ qs pH 4.5^* qs 1g
타입 I 클리어 글래스 바이얼, 11-13㎖ 그레이 클로로부틸 PTFE 스톱퍼, 20㎜ 플립-오프 금속 크림프	Verretubex Daikyo West Pharmaceutical	1 1 1

** 동결건조후 pH 5 - 5.5에 도달되도록 하기 위해 사용되며 냉동-건조 단계후 제거됨

표 2의 용액을 NaCl 0.9%로 재구성하여, 하기를 얻었다:

(200㎕ 내지 1.6㎖의 주사로) 10 내지 80㎍/d 용량을 제공하는 2㎖(= 50㎍ /ml)의 바이얼 한개, 또는

(250㎕ 내지 2㎖의 주사로) 5 내지 40㎍/d 용량을 제공하는 5㎖(= 20㎍/ml)의 바이얼 한개.

pH를 조정하기 위해 시트르산을 사용하고 동결건조 진행중 케이크 형성에 도움이 되는 증량제를 제공하기 위해 덱스트란을 사용하였다.

기재된 용액을 글래스 바이얼에서 동결건조시키고, 다양한 온도에서 최대 24개월까지 저장하였다. [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)의 함량, 순도 및 물리적 시험을 상이한 시간에 저장고에서 꺼낸 샘플에 대해 수행하였다. 펩티드 농도에 관하여, 결과는 잔류물 백분율로, 도 2에 제시되어 있다. 도 2의 데이터는 2-8℃에서 24개월 내내 월등한 안정성을 제시한다.

실시예 3: 서로 다른 보존제를 비교하기 위한 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2) 제형에 대한 스크리닝

하기 표 3은 메틸파라벤 및 벤질 알코올이 Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)와 함께 사용하기 위한 적당한 보존제가 아님을 제시하는데, 이는 침전 및/또는 보존제 활성에서의 비활성(inactivity)이 관찰되었기 때문이다.

유효 항미생물 활성에 대해 권장된 농도로 첨가된 다양하게 서로 다른 보존제와 함께, 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2) 2㎎/㎖, 아세테이트 버퍼 6mM 및 주사용 물을 함유하는, 용액을 제조하였다. 용액을 실온에서 제조하였다. 주사용 물 중에 다양한 성분들을 용해시키고, 완전한 용해를 보장하기 위해 < 30분에 걸쳐 교반하면서, 실온에서 용액을 제조하였다. 용액을 0.2미크론 필터를 통해 여과시키고, 글래스 바이얼내로 충진시키고, 고무 스톱퍼를 적용하고, 완전한 폐쇄(closure)를 보장하기 위해 제자리에서 크림프를 장치하였다.

메틸파라벤을 지닌 용액은 용액 제조 직후 침전 및 비활성으로 인해 허용도 가 더 적었다. 이후 용액을 25℃에서 최대 3개월, 5℃에서 4.5개월 동안 저장하고, 보존제 유효성 시험을, 실시예 5에 기재된 것과 같이, 반복하여 실행하였다.

실시예 4: 다양한 농도의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2) 조성물에 대한 항미생물 보존제 유효성의 평가(안정성 연구)

표 4

	P87228	P87229	P87230	P87231
(서열번호:2)	2㎎/㎖	2㎎/㎖	2㎎/㎖	2㎎/㎖
항미생물제	페놀 5㎎/㎖	클로로크레졸 3㎎/㎖	클로로크레졸 2㎎/㎖	벤질 알코올 10㎎/㎖
아세테이트 버퍼	pH 5.1	pH 5.1	pH 5.1	pH 5.1

용액을 유럽 약전, 5.1.3장 "Efficacite de Ia conservation anti-microbienne"(항미생물 유효성 시험)에 따라 시험하여 보존제의 유효성을 입증하였다.

표 5는 페놀, 클로로크레졸 및 벤질 알코올 모두가 세균 및 효모/곰팡이(moulds) 둘 모두에 대하여 제조 직후 유순한 결과를 나타내었음을 보여준다. 3개월 및 4.5 개월 저장후, 세균 및 효모/곰팡이(moulds) 둘 모두에 대하여, 페놀 및 클로로크레졸의 경우, 보존제 효능은 유지되었다.

그러나, 벤질 알코올의 경우, 세균에 대한 효능은 유순하지 않았는데, 데이터는 S. 아우레스에 대한 불충분한 사멸율을 보여주었다(표 5).

실시예 5: 상이한 제형의 화학적 안정성

표 6은 실시예 4에 기재된 제형들의 화학적 안정성에 대해 상세히 제시한다.

표 6: [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)의 안정성 결과

표 6에서 알 수 있는 바와 같이, 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2) 용액 안정성은 선택된 보존제에 의해 유의미하게 영향받지 아니하였다. 표 7은 동일한 제형에 대한 각각의 보존제의 함량에 대 하여 상세히 제시한다.

표 7: 보존제 안정성 결과

표 7로부터 알 수 있는 바와 같이, 클로로크레졸은 더 낮은 안정성을 지니는 보존제인데, 5 및 25℃ 저장하에서 보존제 함량은 더 크게 손실되었다.

본 발명이 특히 본 발명의 구체예를 참조하여 제시되고 기술되었으나, 당업계의 통상의 기술자는 다양한 형태 및 세부내용에서의 변화가 첨부된 청구항들에 의해 포함된 본 발명의 영역에서 벗어 나지 아니하면서 제시된 구체예들내에서 이루어질 수 있다는 것을 이해할 것이다.

SEQUENCE LISTING <110> Radius Health, Inc. Societe de Conseils de Recherches et D'Applications Scientifiques (S.C.R.A.S.) Dey, Michael J. Mondoly, Nathalie Rigaud, Benedicte Henderson, Bart Lyttle, C. Richard <120> Method of Drug Delivery for Bone Anabolic Protein <130> 3803.1004002 <140> PCT/US2007/021216 <141> 2007-10-03 <150> 60/848,960 <151> 2006-10-03 <160> 2 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 34 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 1 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu Ile Ala Glu Ile His 20 25 30 Thr Ala <210> 2 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> 29 <223> Aib <220> <221> AMIDATION <222> 34 <220> <221> VARIANT <222> 29 <223> Xaa = Any Amino Acid <400> 2 Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln 1 5 10 15 Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu His 20 25 30 Thr Ala

Claims

a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체; 및

b) pH 2와 7 사이로 pH를 유지시키기 위한 유효량의 버퍼를 포함하는, 환자에게 투여하기에 적당한 저장-안정성(stroage-stable) 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 버퍼가 아세테이트, 타르트레이트, 포스페이트 및 시트레이트 버퍼로 이루어진 군에서 선택된, 저장-안정성 조성물.
제 2항에 있어서, 상기 버퍼가 아세테이트 버퍼인, 저장-안정성 조성물.
제 3항에 있어서, 상기 버퍼가 아세트산과 소디움 아세테이트인, 저장-안정성 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 pH가 3과 7 사이에서 유지되는, 저장-안정성 조성물.
제 5항에 있어서, 상기 pH가 4와 6 사이에서 유지되는, 저장-안정성 조성물.
제 6항에 있어서, 상기 pH가 4.5와 5.5 사이에서 유지되는, 저장-안정성 조성물.
제 1항에 있어서, 밀봉된 용기 중에 존재하는, 저장-안정성 조성물.
제 8항에 있어서, 20℃에서 28일 이상 안정한, 저장-안정성 조성물.
제 1항에 있어서, 화학 안정화제가 비함유된, 저장-안정성 조성물.
제 1항에 있어서, 추가로 유효량의 항-미생물제를 포함하는, 저장-안정성 조성물.
제 11항에 있어서, 상기 항-미생물제가 크레졸, 페놀, 벤잘코니움 클로라이드, 벤즈에토니움 클로라이드(benxthonium chloride), 클로로부탄올, 페닐에틸 알코올, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 티메로살(thimerosal), 페닐머큐릭 나이트레이트 및 아세테이트로 이루어진 군에서 선택된, 저장-안정성 조성물.
제 12항에 있어서, 상기 항-미생물제가 페놀 또는 클로로크레졸인, 저장-안정성 조성물.
제 13항에 있어서, 상기 항-미생물제가 페놀인, 저장-안정성 조성물.
제 1항에 있어서, 20 내지 20,000㎎/㎖의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체를 포함하는, 저장-안정성 조성물.
제 15항에 있어서, 100 내지 10,000㎎/㎖의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체를 포함하는, 저장-안정성 조성물.
제 16항에 있어서, 300 내지 3,000㎎/㎖의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체를 포함하는, 저장-안정성 조성물.
제 17항에 있어서, 500 내지 2,000㎎/㎖의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체를 포함하는, 저장-안정성 조성물.
필수적으로 하기 성분들로 구성된, 환자에게 투여하기에 적당한 저장-안정성 조성물:

a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체; 및

b) pH 2와 7 사이로 pH를 유지시키기 위한 유효량의 버퍼.
필수적으로 하기 성분들로 구성된, 환자에게 투여하기에 적당한 저장-안정성 조성물:

a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체;

b) pH 2와 7 사이로 pH를 유지시키기 위한 유효량의 버퍼; 및

c) 유효량의 항-미생물제.
필수적으로 하기 성분들로 구성된, 환자에게 투여하기에 적당한 저장-안정성 조성물:

a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체; 및

b) pH 2와 7 사이로 pH를 유지시키기 위한 유효량의 버퍼.
제 21항에 있어서, 상기 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)이 500 내지 20,000㎎/㎖의 농도로 존재하고; 상기 버퍼가 아세트산과 소디움 아세테이트 버퍼이며; 상기 pH가 4.5와 5.5 사이인, 저장-안정성 조성물.
a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체;

b) 아세트산 및 소디움 아세테이트 버퍼; 및

c) 1과 10㎎/㎖ 사이의 농도 범위의 페놀로 필수적으로 구성되며, pH가 4.5와 5.5 사이인, 환자에게 투여하기에 적당한 저장-안정성 조성물.
a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체; 및

b) pH 2와 7 사이로 pH를 유지시키기 위한 유효량의 버퍼를 포함하는, 환자에게 투여하기에 적당한 저장-안정성 조성물을 함유한 밀봉된 용기.
a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체; 및

b) pH 2와 7 사이로 pH를 유지시키기 위한 유효량의 버퍼를 포함하는, 하나 이상의 일회-사용(single-use) 용기를 포함하는 약물 전달 장치.
a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체; 및

b) pH를 2와 7 사이로 유지하기 위한 유효량의 버퍼를 포함하는, 하나 이상의 수회-사용(multi-use) 용기를 포함하는 약물 전달 장치.
a) 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)을 갖는 PTHrP 유사체;

b) pH 2와 7 사이로 pH를 유지시키기 위한 유효량의 버퍼; 및

c) 유효량의 항-미생물제를 포함하는 하나 이상의 수회사용 용기를 포함하는 약물 전달 장치.
서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 약 40㎍/주(week) 내지 약 1120㎍/주의 양으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골다공증 치료가 요망되는 환자에서 골다공증을 치료하는 방법.
서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 약 280㎍/주 내지 약 1120㎍/주의 양으로 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골다공증 치료가 요망되는 환자에서 골다공증을 치료하는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 환자가 사람인, 치료 방법.
제 20항에 있어서, 상기 투여 양상(mode)이 피하 주사를 포함하는, 치료 방법.
제 28항에 있어서, 상기 (서열목록:2)가 1주당 1회 단일 용량으로 투여되는, 치료 방법.
제 28항에 있어서, 상기 (서열목록:2)가 1주당 2회 단일 용량으로 투여되는, 치료 방법.
제 33항에 있어서, 각각의 단일 용량이 동일한 양인, 치료 방법.
제 28항에 있어서, 상기 (서열목록:2)이 일(day)당 1회 단일 용량으로 투여되는, 치료 방법.
제 35항에 있어서, 상기 단일 용량의 (서열목록:2)가 약 80㎍ 내지 약 100㎍인, 치료 방법.
제 36항에 있어서, 각각의 단일 용량이 동일한 양인, 치료 방법.
일당 1회 약 40㎍ 내지 약 50㎍의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골다공증 치료가 요망되는 환자에서 골다공증을 치료하는 방법.
제 38항에 있어서, 약 40㎍ 내지 약 45㎍이 투여되는, 치료 방법.
제 39항에 있어서, 상기 환자가 사람이고, 상기 투여 양상이 피하 주사를 포함하는, 치료 방법.
일당 1회 약 70㎍ 내지 약 80㎍의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골다공증 치료가 요망되는 환자에서 골다공증을 치료하는 방법.
제 41항에 있어서, 약 75㎍ 내지 약 80㎍이 투여되는, 치료 방법.
제 42항에 있어서, 상기 환자가 사람이고, 상기 투여 양상이 피하 주사를 포함하는, 치료 방법.
일당 1회 약 40㎍ 내지 약 50㎍의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골 질량의 증가가 요망되는 환자에서 골 질량을 증가시키는 방법.
제 44항에 있어서, 약 40㎍ 내지 약 45㎍이 투여되는, 방법.
제 45항에 있어서, 상기 환자가 사람이고, 상기 투여 양상이 피하 주사를 포함하는, 방법.
일당 1회 약 70㎍ 내지 약 80㎍의 서열 [Glu^22,25, Leu^23,28,31, Aib²⁹, Lys^26,30]hPTHrP(1-34)NH₂(서열목록:2)를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 골질량 또는 골 특질(quality)의 증가가 요망되는 환자에서 골 질량 또는 골 특질을 증가시키는 방법.
제 47항에 있어서, 약 75㎍ 내지 약 80㎍이 투여되는, 방법.
제 48항에 있어서, 상기 환자가 사람이고, 상기 투여 양상이 피하 주사를 포함하는, 방법.