KR20090036589A - 물질을 처리하기 위한 방법 및 조성물 - Google Patents
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Abstract
조성물과 방법은 독소, 화학 작용제(chemical warfare agent), 벌레, 프라이온(prion), 미생물 또는 다른 감염원(infectious agent)에 의해 오염될 수 있는, 무-생물 표면과 같은 물질, 살아있는 조직, 토양 또는 대기를 위생화 하거나 또는 다른 방법으로 처리하는 것에 대해 기술된다. 또한 조성물을 만드는 방법들이 기술된다.
Description
본 발명은 물질을 위생화 하거나 또는 다른 방법으로 처리하기 위한 조성물 및 방법들에 관련이 있다. 이 조성물은 1개 내지 6개 탄소 원자들(C1-C6)을 포함하는 저급 알칸올의 오염 제거 효과를 개선한다. 조성물은 해로운 오염물들이 있는 살아있는 조직들(피부, 손 등등)과 같은 물질들 및 무생물들(기구, 의학 장치, 군사용 및 민간 설비들, 가구, 종이 및 인쇄물들 등등)을 소독하거나 또는 다른 방법으로 살균하며, 상기 해로운 오염물들은 제한되지 않으나 화학 작용제(VX, 겨자, 사린, 소먼 및 타분), 독소, 원생 동물(protozoa), 벌레(예를 들면, 질병 매개체) 및 박테리아, 균류, 바이러스, 균성 및 박테리아 포자들 및 형태적으로 변화된 프라이온들(CJD, CWD, BSE, 스크라피)과 같은 발병성 감염원들을 포함한다.
살균제(Germicide)는 피부소독제(antiseptics)와 소독제(disinfectant)를 포함한다. 피부소독제는 살아있는 조직과 피부에 사용되는 살균제인 반면, 소독제는 오직 무생물에 사용되는 항균제(antimicrobial)이다. 일반적으로, 피부소독제는 표면 소독에 사용되지 않고 오직 피부에 사용되고, 소독제는 피부 및 다른 조직들에 손상을 유발할 수 있기 때문에 소독제는 피부 소독에 사용되지 않는다(Rutala and Weber, 2004).
과거에는, 경질 표면들을 소독하는 것은 중요한 의사결정을 필요로 하지 않았다: 표준 분말 세제, 표백제, 또는 연마 분말을 사용할 수 있었다. 논의 끝에, 현재는, 경질-표면 소독제는 전체 상점 통로들을 채우고, 다양한 종류들의 욕실, 변기, 유리, 세라믹 및 주방 소독제들, 분말 및 크림 세제 및 청소용 걸레(wipe)들과 같은 많은 특수화된 제품들을 포함한다. 경질-표면 소독제 수가 증가하는 한가지 이유는 오늘날의 경질 표면이 과거보다 훨씬 많은 종류의 물질들을 포함한다는 단순한 사실 때문이다. 예를 들어, 과거에는, 주방 및 욕실은 주로 나무 및 다른 천연 표면으로 마감되었는데, 현대식 대체물은 몇 가지만 예를 들면, 스테인레스 강철, 플라스틱, 섬유유리, 세라믹, 대리석, 에나멜 및 자기류를 포함하며, 이들은 새로운 소독 문제(disinfecting challenge)를 창출한다.
반면에, 최근에는, 질병 통제 및 예방 센터(CDC)의 "의료 환경에서 손 위생을 위한 지침서"에 의해 손 위생과 피부 건강이 다시 새로이 강조되어 왔다. 손 위생행동(hand hyginene)은 병원에서 감염의 확산을 감소시킬 수 있는 단독의 가장 중요한 행동이다. 일부 300개의 병원들에서 데이터를 수집한 CDC 국가 병원 감염 감시 시스템(NNIS)은 미국 병원에서, 매년 거의 90,000명의 사망 및 $45억의 초과 의료 비용의 원인이 되는 매년 2백만건의 의료-관련 감염이 있는 것으로 추정한다. 최근의 문헌은 의료 노동자들(healthcare workers, HCWs) 사이의 허용할 수 없게 낮은 수준의 손 위생을 상세히 보고한다. 의료 노동자들(HCWs)이 손씻기를 준수하 는데 영향을 주는 다음의 수많은 이유들이 있다: (1) 세면대로 용이하게 접근할 수 없음; (2) 손씻기는 건조하고 따끔한 손을 초래함; (3) 의료 노동자들(HCW)이 너무 바빠서 자주 충분히 비누와 물로 손을 씻을 수 없음; (4) 장갑을 끼기 전과 후 등등의 우연한 접촉을 포함하는, 언제 손을 씻어야 하는지에 대한 인식이 부족함.
비누는 에스테르화된 지방산 및 나트륨 또는 칼륨 수산화물을 포함하는 세제-기초 제품이다. 일반 비누는 만약 있다면, 최소한의 항균 활성을 갖는다. 수개의 연구들에서, 일반 비누로 손씻기는 병원 직원의 손에서 병원체를 제거하지 못하고, 때때로, 일반 비누는 오염되어, 이것이 직원 손을 그램-음성 간균(gram-negative bacilli)으로 집락형성(colonization)에 이르게 할 수 있다(Boyce and Pittet, 2002). 알코올 손 살균제는 의료 설비들에 도입되어 의료 노동자(HCW)들이 권장 손 위생 지침서를 지키는 것에 도움을 주었다. CDC가 손에서 세균의 수를 감소시키는데 알코올 살균제의 효능이 비누와 물보다 더욱 뛰어나다는 점을 인정했기 때문에 CDC는 알코올-기초 살균제를 합법화했다. 그러나, 알코올은 포자박멸 작용이 부족하고, 단백질이 풍부한 물질을 관통하지 못하기 때문에 내과 및 외과 도구들을 멸균하는데 권장되지 않는다(Rutala and Weber, 2004). 대부분의 알코올-기초 손 피부소독제는 이소프로판올, 에탄올, n-프로판올 또는 이들 생성물들 중 두 가지의 조합을 포함한다. 알코올에 대한 대부분의 연구들은 농도를 변화시켜 개별적인 알코올들을 평가했다. 추가 연구들은 제한된 양의 헥사클로로펜, 4차 암모늄 화합물, 포비돈-요오드, 트리클로산(triclosan), 또는 클로르헥시딘 글루코네이트를 포함하는 두 가지의 알코올들 또는 알코올 용액들의 조합에 초점을 맞추었다.
Farah 등등의 미국 특허 제 4,200,655호는 생체 내에서와 시험관 내에서 국소 바이러스 박멸에 사용하기 위해, 특히 손에서 사용하기 위해 그리고 특히 리노바이러스의 전염(transmission)을 막기 위한, 활성 성분으로서 벤질 알코올을 포함하는 조성물들을 공개한다.
Yang의 미국 특허 제 4,446,153호는 특히 젖소들을 위한 유두 침지(teat dip) 또는 젖통 세척(udder wash)에 적절하고, 피부소독제 성분으로서 적어도 하나의 페닐 알칸올을 포함하는 피부 살균 조성물을 공개한다.
Tuominen 등등의 미국 특허 제 4,695,453호는 바람직하게 활성 성분으로서 에탄올, 프로판올 및 벤질 알코올을 포함하는 농축된 알코올성 항균 조성물을 공개한다.
Maignan 등등의 미국 특허 제 4,956,175호는 보습제 및 컨디셔닝제를 갖는, 손을 소독하기 위한 고 알코올 함유 항균 젤 조성물의 사용을 공개한다.
Jampani 등등의 미국 특허 제 6,022,551호는 30부피% 이상의 알코올과 트리클로산의 유효량; 및 페녹시 에탄올의 유효량, 벤잘코늄 클로라이드 또는 벤제토늄 클로라이드의 유효량; 및 PHOSPOLIPID CBM의 유효량으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 항균제를 포함하는 항균 조성물을 공개한다. 이러한 항균 조성물은 손과 같은 국소 사용을 위해 만들어졌다.
Jampani 등등의 미국 특허 제 6,248,343호는 추가적으로 피부에 치료적 이로움을 제공하는 항균 조성물과 관련이 있다. 상기 특허는 30부피% 이상의 알코올, 트리클로산의 유효량 및 이들의 혼합물; 페녹시 에탄올의 유효량, 벤잘코늄 클로라 이드 또는 벤제토늄 클로라이드의 유효량; 및 PHOSPOLIPID CDM의 유효량; 및 자연적으로 발생하는 식물 또는 그들의 추출물의 유효량으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 항균제를 포함하는 항균 조성물을 공개한다.
Narula 등등의 미국 특허 제 6,617,294호는 피부 표면 상의 미생물을 감소시키는 알코올의 유효량 및 피부 보습을 위한 연화제 또는 오일을 포함하는 무수 살균 손 세척제를 기술한다.
Brown의 미국 특허 출원 공개 제 2005/0271595호는 알코올, 물, 농축제(thickener) 및 항균제를 포함하는 손 세척 조성물로서 사용하는데 적절한 점성액 또는 젤 형태의 살균 조성물을 공개한다.
유럽 특허 출원 제 82110376.9호는 활성 성분으로서 에탄올과 적어도 하나의 알칼리성 물질을 포함하는, 식품들 또는 식품 가공 기계들 및 기구들을 위한 수용성 멸균제(aqueous sterilizing agent)를 기술한다.
유럽 특허 출원 제 83303799.7호는 60 내지 80% v/v의 C1 내지 C4 알칸올 및 용액에서 2% w/v 이하의 조합 농도를 갖는 적어도 두 개의 항균제들을 포함하고, 병원에서 경질 표면을 소독하기 위한 잔여 유해 활성을 갖는 수용성 소독 용액과 관련이 있다. 제1 항균제는 바이구아니드 화합물이고 제2 항균제는 4차 암모늄 화합물이다.
Casey 등등의 미국 특허 제 4,678,658호는 저급 알킬 알코올, 소독 계면 활성제, pH 민감성 염료 및 알칼리 수단으로 본질적으로 이루어진 미세 스프레이로 표면을 소독하는데 사용하기 위한 에어로졸 스프레이를 기술하는데, 알칼리 수단은 유체의 pH를 조절하여 액체의 색을 만들며, 그 결과 공기에 의한 빠른 중화시 에어로졸 스프레이의 염료는 색이 옅어진다.
Cusack 등등의 미국 특허 제 5,180,749호는 약 30중량%까지의 에틸 알코올 및 약 2 내지 5중량%의 벤질 알코올 및 100%까지 나머지의 물을 포함하는 수용성 항균 조성물 및 이러한 조성물을 오염된 무생물 표면 위의 미생물의 수를 없애거나 줄이기 위해 사용하는 방법을 공개한다.
Bennett 등등의 미국 특허 출원 공개 제 2004/0213750호는 알코올과 pH 조절제(pH adjusting agent)를 포함하는 수용성 경질 표면 항균 처리 조성물을 공개하는데, 상기 조성물의 pH 범위는 약 7.0 내지 약 13.0이다.
Awad의 미국 특허 출원 공개 제 2005/0202137호는 저급 알칸올 및 pH 변형제(modifying agent)를 포함하는 수용액으로 인간 소비용의 붉은 고기를 살균하기 위한 방법을 기술한다.
Bullock 등등의 미국 특허 제 6,821,940호는 농산물, 가령 과일 및 채소와 같은 식품, 식용 동물 단백질, 장난감, 유아용 의자 등등을 처리하기 위해 독물학상으로-수용가능한 성분들을 사용하는, 기질 및 세정 조성물을 포함하는 사전보습된 청소용 걸레를 기술한다.
클로스트리듐 디피실(Clostridium difficile)에 의해 발생된 널리 퍼져 유행하고 있는 의료 관련 설사 및 오염된 레터(letters)를 통한 탄저균에 의도적인 노출로 인한 미국에서 최근 발생한 인간 탄저균 감염(11개 사례의 흡입 탄저병 및 11 개 사례의 피부 탄저병)은 포자-형성 박테리아에 대한 피부소독제 및 소독제의 활성에 관한 관심을 일으키고 있다. 더 최근에는, 실험실 근무자가 탄저균을 포함한 작은 유리병 표면과 접촉하여 탄저병에 감염되었다(Page et al., 2002). 피부소독(손-세척 또는 마찰식 손-소독) 제제(preparation)에 또는 경질 표면 소독제에 사용되는 종래 기술에 보고된 작용제들(알코올, 클로르헥시딘, 헥사클로로펜, 요오드포, PCMX 및 트리클로산을 포함함)의 어느 것도 확실히 클로스트리듐 종(Clostridium spp.) 또는 바실루스 종(Bacillus spp.)에 대해 포자박멸성이 아니다(Boyce and Pittet, 2002). 게다가, 일부 이들 작용제들(예를 들어, 트리클로산)은 실험실 테스트에서 항생물질-내성 박테리아에 결합되었다. 상대적으로 고농도로 사용하는, 포자박멸 시약들의 예들은 글루타르알데히드, 포름알데히드, 염소 산소산 화합물, 과산화산 및 산화 에틸렌을 포함한다. 일반적으로, 이들 화합물들 모두는 유독성인 것으로 고려된다. 다른 한편으로는, 산화 에틸렌 멸균, 에탄올, 포르말린, 베타-프로피오락톤, 세제, 4차 암모늄 화합물, Lysol® 소독 용액(Reckitt Benckiser, 버크셔, 영국), 알코올성 요오드, 아세톤, 과망간산 칼륨, 과산화 수소 및 과산화 염소를 포함하는, 종래 기술에서 보고된 모든 화학 항균제들(포자박멸이든 또는 아니든)은 형태적으로 변화된 전염성 프라이온(prion)의 감염성을 비활성화하는데 효과가 없고(Rosenberg et al., 1986), 화학 작용제(chemical warfare agent) 상의 항균제들의 효과는 보고되지 않았다.
대량 파괴 무기의 관점에서, 화학적 및 생물학적 작용제와 관련한 테러리스 트들의 위협은 국가 방위 및 지역 법 집행에 큰 문제였다. 수십년 동안, 이러한 걱정들은 에너지부(Department of Energy) 또는 첨단 방위 프로젝트 연구소에 의해 지원된 미국 군대와 국가 무기 실험실들의 은밀한 영역에 있었다. 과학자들은 미래의 생화학테러 무기들이 유전자 공학에 의해 생성된 병원체, 프라이온 및 생물제어제(bioregulator)를 포함할 수 있다고 말한다(Brown, 2004). 2003년 봄에 시에틀에서 기획된 모의 실험의 방사능많은-폭탄 공격 중에, 반응자들은 방사능 재가 퍼지는 것을 막을 것이 아무 것도 없었음을 교훈들 중 하나로 배웠다(Weiss, 2005). 같은 이유로, 테러리스트들의 공격이 발생한 경우, 생물학적 및 화학적 작용제의 확산이 불가능한 것이 아니라면 선행 기술을 사용하여 이러한 확산을 저지하기가 매우 어렵다. 대규모의 공격이 일어난다면, 공격의 가해자들은 아마도 또 다른 공격 개시의 가치를 결정하기 위해 정화운동(clean-up)의 속도와 효능을 감시할 것이다. 과산화 염소를 사용한 하트 의회 사무실 건물(Hart Senate Office Building)의 탄저병 오염 제거(Hsu, 2002)는 대규모 생물학 공격을 처리하기 위한 준비에 관한 관심을 일으켰다. 과산화 염소 및 치아염소산 나트륨(가정용 표백제)은 환경적 표면의 소독에 사용되고, 피부에 사용되는 피부소독제로서는 사용되지 않는다.
Tadros 등등의 미국 특허 제 6,566,574호는 화학적 제제 및 생물학적 제제 모두를 중화시키기 위한 수용성 배합물(formulation)의 사용을 개시한다. 배합물은 적어도 2개의 가용화제들[4차 암모늄 염과 같은 양이온 계면 활성제 및 테트라펜틸 암모늄 브로마이드와 같은 양이온 향수성 물질(hydrotrope)], 적어도 하나의 반응성 화합물 및 물을 포함하여 수용성 배합물을 생성한다. 이러한 기술과 관련된 기 술적 문제들은 (1) 각각의 특정한 화학적 제제 및 생물학적 제제를 위한 상이한 배합물들의 필요성; (2) 전염성 프라이온에 효과를 나타내지 않음; (3) 살아 있는 조직들에 사용될 수 없음, 예를 들면, 사용된 시약의 부식성 및 유독성 때문에 피부 상의 국소 처리에 사용될 수 없음; (4) 사용된 시약이 식용 등급(food grade, GRAS)이 아니기 때문에, 농업 테러리스트(agroterrorist) 공격의 경우에, 식품의 오염을 제거하는데 사용될 수 없음; 및 (5) 비누와 물을 대체하기 위한 손 살균제로서 의료 설비들에 사용될 수 없음을 포함한다.
Tucker 등등의 미국 특허 출원 공개 제 2004/0022867호는 적어도 2개의 가용화제들(양이온 계면 활성제 및 양이온 향수성 물질), 반응성 화합물(과산화 수소, 요소 과산화 수소, 하이드로페록시카보네이트, 과아세트산(peracetic acid), 과붕산 나트륨, 소듐 퍼옥시피로포스페이트, 소듐 퍼옥시실리케이트 및 퍼카보네이트로 이루어진 그룹으로부터 선택됨), 표백 활성제 및 흡수 첨가제를 포함하는 독극물(toxant)을 중화하기 위한 수용성 배합물의 사용을 개시한다. 이러한 기술과 관련된 기술적 쟁점들은 (1) 표백 활성제의 불안정성에 기인한 해당 분야에서의 조성물의 제조; (2) 짧은 저장 기간(약 8시간), 그 결과 비누와 물을 대체하기 위한 손 살균제로서 의료 설비들에 사용될 수 없음; (3) 전염성 프라이온에 효과를 나타내지 않음; (4) 상처에 사용될 수 없음, 예를 들면, 사용된 시약의 부식성 및 유독성에 의해 상처난 피부에 대한 국소 치료에 사용될 수 없음; (5) 시약이 식용 등급(GRAS)이 아니기 때문에, 농업 테러리스트 공격의 경우에, 식품의 오염을 제거하는 데 사용될 수 없음을 포함한다.
총체적으로, 종래 기술은 무생물들과 살아 있는 조직들 모두에서 화학적 작용제(VX, 겨자, 사린, 소먼 및 타분), 독소, 벌레(예를 들어, 질병 매개체) 및 박테리아, 균류, 바이러스, 균성 및 박테리아 포자들 및 형태적으로 변화된 프라이온들(CJD, CWD, BSE, 스크라피)과 같은 발병성 감염원들로 이루어진 해로운 오염물들을 오염제거하기 위한, 단일의, 효과적이고, 일반적이고, 인간과 환경에 대해 안전하고, 및 사용하기 쉬운 배합물의 실제적이고 지속적인 필요성을 인정했다.
목적
본 발명의 목적은 물질을 살균하기 위한 조성물 및 방법을 제공하는 것이다. 여러 가지 목적들은 다음 논의와 관련하여 더욱더 명백해질 것이다.
발명의 요약
본 발명은 전례가 없는 속도, 효율적 사용(economy), 안전성, 부드러움(gentleness) 및 나머지 항균제 효과들을 갖는, 살아있는 조직(피부, 손 등등) 및 무생물들(기구, 종이 및 인쇄물들, 의학 장치, 경질 표면, 군사용 및 민간 설비들 등등)을 소독하기 위하여 저급 알칸올(C1-C6)의 활성 및 살균 및 포자박멸 스펙트럼을 개선하기 위한 방법을 제공한다. 게다가, 본 발명은 생화학적 작용제(CBW agent)를 억제하고 파괴하여 피부 침투 및 또 다른 오염을 방지하기 위하여, 생화학적 작용제에 노출된 후에 피부/상처의 오염을 제거할 수 있는 저급 알칸올(C1-C6) 조성물을 제공한다. 소비자들에게 가능한 최고의 건강 보호 표준을 제공하기 위해, 조성물은 사과, 미니당근(baby carrot), 딸기, 딱딱한 치즈 블록, 일반 달걀 및 신선한 붉은 날고기와 같은 신선한 제품들의 오염을 제거하여 형태적으로 변화된 프라이온, 박테리아, 곰팡이, 기생충 및 바이러스와 같은 감염원을 제거할 수 있다. 게다가, 조성물은 사료에 사용되는 동물 부산물의 오염을 제거하는데 사용될 수 있으므로, 전통적인 렌더링(rendering) 기술을 대체한다. 게다가, 조성물은 검은 곰팡이 포자로 감염된 집, 건축 자재 및 가구의 오염을 제거하는데 사용될 수 있다. 조성물은 전염성 병원체의 전염을 줄이기 위해 매개 곤충(insect vector) 제어(예를 들어, 진드기, 모기 등등)에 사용될 수 있다. 게다가, 조성물은 가능한 오용으로부터 소비자들을 보호하기 위해 예를 들어, 식용-등급인, GRAS(Generally Recognized As Safe)로서 확인되는 물질을 포함한다.
따라서, 본 발명은 (a) 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올 및 약 14 또는 그 이상의 pH에서 염 또는 에스테르인 지방산 유도체의 혼합물을 포함하는 수용성 조성물을 제공하는 단계, 여기서 상기 지방산 유도체는 조성물의 약 0.1중량% 내지 25중량%으로 존재하고; 및 (b) 물질을 살균하기 위한 유효량의 조성물을 물질에 도포하는 단계; 그리고 선택적으로 단계 (b)의 생성된 조성물을 제거하는 단계를 포함하는, 물질을 살균하기 위한 방법을 제공한다.
방법의 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 알칼리 또는 알칼리 토금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산은 나트륨(Na), 칼륨(K), 리튬(Li), 칼슘(Ca), 또는 마그네슘(Mg) 염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 포함하는 지방산의 알칼리 또는 알칼리 금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 라우르산의 알칼리 또는 알칼리 금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 포타슘 라우레이트이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 부틸 에스테르, 에틸 에스테르, 메틸 에스테르, 지방 아실-조효소 A(fatty acyl-Coenzyme A), 자당 에스테르 및 모노글리세리드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 에스테르이다. 또 다른 실시예에서, 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개의 탄소 원자를 갖는 하나 이상의 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자를 갖는 포화 또는 불포화 지방 알코올에 부착된 글리세롤 부분을 포함한다. 또 다른 실시예에서, 독소는 스타치보트리스(Stachybotrys) 독소이다. 또 다른 실시예에서, 미생물 또는 다른 감염원은 균류, 박테리아, 균성 포자, 박테리아 포자, 바이러스 또는 형태적으로 변화된 프라이온이다. 또 다른 실시예에서, 균성 포자는 스타치보트리스 차타룸(Stachybotrys chartarum) 포자이다. 또 다른 실시예에서, 박테리아 포자는 바실루스 애트로패우스(Bacillus atropheus) 포자이다. 또 다른 실시예에서, 화학 작용제는 VX, 겨자(mustard), 사린(sarin), 소먼(soman) 또는 타분(tabun)이다. 또 다른 실시예에서, 형태적으로 변화된 프라이온은 CJD, CWD, BSE 및 스크라피(Scrapie)로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
본 발명은 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올; 및 알칸올에 녹을 수 있는 염 또는 에스테르인 지방산 유도체의 혼합물을 포함하는 조성물을 제공하는데, 여기서 조성물은 14 또는 그 이상의 pH를 갖고, 지방산 유도체는 조성물의 0.1중량% 내지 25중량% 사이이다. 또 다른 실시예에서, 조성물은 수용액으로서 제공된다. 또 다른 실시예에서, 저급 알칸올은 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올, n-부탄올 또는 이들의 혼합물이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 알칼리 또는 알칼리 토금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산은 나트륨(Na), 칼륨(K), 리튬(Li), 칼슘(Ca) 또는 마그네슘(Mg) 염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 4개 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 지방산의 알칼리 또는 알칼리 금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 라우르산의 알칼리 또는 알칼리 금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 포타슘 라우레이트이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 부틸 에스테르, 에틸 에스테르, 메틸 에스테르, 지방 아실-조효소 A, 자당 에스테르 및 모노글리세리드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 에스테르이다. 또 다른 실시예에서, 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개의 탄소 원자를 갖는 하나 이상의 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자를 갖는 하나 이상의 포화 또는 불포화 지방 알코올에 부착된 글리세롤 부분을 포함한다. 또 다른 실시예에서, 조성물은 농축제, 연화제, 보습제, 부식 억제제, 분사제(propellant), 향수, 착향제(flavoring agent), 거품제거제, 산화방지제 및 염료로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 성분을 추가로 포함한다.
본 발명은 (a) 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올 및 약 14 또는 그 이상의 pH에서 염 또는 에스테르인 지방산 유도체의 혼합물을 포함하는 수용성 조성물을 제공하는 단계, 여기서 지방산 유도체는 조성물의 약 0.1중량%와 25중량% 사이이고; 및 (b) 물질을 처리하기 위한 유효량으로 물질에 조성물을 도포하는 단계를 포함하는 물질을 처리하는 방법을 제공한다. 또 다른 실시예에서, 단계 (b)의 생성된 조성물은 물질로부터 제거된다.
본 발명은 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올을 제공하는 단계; 알칸올에 녹을 수 있는 염 또는 에스테르인 지방산 유도체를 제공하는 단계; 및 저급 알칸올과 지방산 유도체를 혼합하여 조성물을 제공하는 단계를 포함하는 조성물을 만드는 방법을 제공하는데, 여기서 조성물은 14 또는 그 이상의 pH를 갖고, 지방산 유도체는 조성물의 약 0.1중량% 내지 25중량% 사이이다. 또 다른 실시예에서, 저급 알칸올은 에탄올이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 알칼리 또는 알칼리 토금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산은 나트륨(Na), 칼륨(K), 리튬(Li), 칼슘(Ca) 또는 마그네슘(Mg) 염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 4개 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 지방산의 알칼리 또는 알칼리 금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 라우르산의 알칼리 또는 알칼리 금속염이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 포타슘 라우레이트이다. 또 다른 실시예에서, 지방산 유도체는 부틸 에스테르, 에틸 에스테르, 메틸 에스테르, 지방 아실-조효소 A, 자당 에스테르 및 모노글리세리드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 에스테르이다. 또 다른 실시예에서, 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개의 탄소 원자를 갖는 하나 이상의 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자를 갖는 하나 이상의 포화 또는 불포화 지방 알코올에 부착된 글리세롤 부분을 포함한다.
본 발명은 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올을 제공하는 단계; 지방산을 제공하는 단계; 알칼리화제(alkalinating agent)를 제공하는 단계; 및 저급 알칸올, 지방산 및 알칼리화제를 혼합하여 조성물을 제공하는 단계를 포함하는 조성물을 만드는 방법을 제공하는데, 여기서 조성물은 14 또는 그 이상의 pH를 갖고, 지방산 유도체는 조성물의 약 0.1중량% 내지 25중량% 사이이다. 저급 알칸올은 에탄올이다. 또 다른 실시예에서, 지방산은 4개 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 지방산이다. 또 다른 실시예에서, 지방산은 라우르산이다. 또 다른 실시예에서, 알칼리화제는 알칼리 금속 수산화물, 알칼리 토금속 수산화물, 알칼리 금속 탄산염 또는 탄산 수소염 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 또 다른 실시예에서, 알칼리화제는 수산화 암모늄, 수산화 알루미늄, 수산화 나트륨, 수산화 칼륨, 수산화 리튬, 수산화 칼슘, 수산화 마그네슘, 탄산 나트륨, 탄산 수소 나트륨 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
발명의 상세한 설명
본 명세서에 인용된 모든 특허들, 특허 출원서들, 정부 발행물들, 정부 규정들 및 참조문헌들은 여기에서 전부 참조로써 통합된다. 내용상 충돌이 있는 경우, 정의를 포함한 현 상세한 설명이 적용될 것이다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "CFU"는 집락 형성 단위(colony forming unit)를 의미한다.
본원에 사용된 용어 "처리하다"는 물질이 하나 이상의 양상에서 출발 물질과 다르게 되도록 물질을 덧입히고(coat), 변화시키고(change), 바꾸고(alter), 변경하고(vary) 및/또는 일부 변경하는(modify)의 광범위한 의미의 용어이다. 상기 용어는 제한되지 않으나, 화학 반응으로부터 생성된 변화들을 포함하는 물리적 및 화학적 변화들 중 적어도 하나를 의미할 수 있고, 가용화 및 유화(emulsification) 중 적어도 하나는 상기 용어에 의해 포함될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "FB"는 표 1에 설명된 바와 같은 본 발명의 조성물의 하나의 실시예를 의미한다.
본원에 사용된 용어 "물질(material)"은 제한되지 않으나, 공기, 화학품, 무생물 표면, 살아있는 조직, 토양 또는 대기와 같은, 임의의 고체, 액체 및 기체들 중 적어도 하나를 의미한다.
본원에 사용된 용어 "살균하는(sanitizing)"은 살아있는 동물의 건강에 해로울 수 있는 작용제의 농도(level) 또는 해로운 용량을 감소시키거나 또는 제거함을 의미한다. 살아있는 동물의 건강에 해로울 수 있는 작용제의 일부 예들은 제한되지 않으나, 독소, 화학 작용제, 벌레, 프라이온, 미생물 또는 다른 감염원들과 같은 오염물(contaminant)들이다.
본 발명은 제한되지 않으나 해로운 오염물들이 있는 살아있는 조직들(피부, 손 등등) 및 무생물들(기구, 의학 장치, 군사용 및 민간 설비들, 가구, 종이 및 인쇄물들 등등)과 같은 물질들을 살균하기 위하여 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올의 오염 제거 효과를 개선하는 조성물 및 방법들을 제공하며, 상기 해로운 오염물들은 제한되지 않으나, 화학 작용제(VX, 겨자, 사린, 소먼 및 타분), 독소, 원생 동물, 벌레(예를 들면, 질병 매개체) 및 박테리아, 균류, 바이러스, 균성 및 박테리아 포자들 및 형태적으로 변화된 프라이온(CJD, CWD, BSE, 스크라피)과 같은 발병성 감염원들과 같다. 새로운 살균제 개발에 있어 지속적인 도전과제는 안전성, 편리성 및 효능 사이에서 타협점을 찾아내는 것이다. 안전성 및 사용의 용이함은 가장 효과가 있는 화학 기술을 사용하는 것만큼 중요하고, 때로는 더 중요하다. 박테리아 포자, 균성 포자 및 전염성 프라이온은 화학적 및 물리적 소독제들에 대해 매우 내성이다. 따라서, 식품, 제약품, 의료품 및 다른 제품의 멸균을 달성하도록 설계된 공정들은 당연히 높은 수준의 내성을 고려해야만 한다. 이러한 개요로부터, 더 큰 내성의 감염원들(예를 들면, 바실루스 애트로패우스 포자 및 전염성 프라이온)에 대한 활성은 가장 작은 내성의 감염원들[예를 들면, 영양 박테리아(vegetative bacteria), 지질 바이러스(lipid viruse)]에 대한 활성을 포함하는 것으로 파악될 수 있다.
전부 참조로써 본원에 통합된, Awad의 미국 특허 출원 공개 제2005/0202137호(출원 번호 제11/031,935호)는 조직을 살균하기 위하여, 생물학적 조직, 특히 인간 소비용 고기를 처리하기 위한 방법을 가르친다. 이 방법으로 조직 내에 있는 미생물 및 발병성 프라이온(단백질)을 비활성화시킨다. 살균 방법은 알칼리 금속 수산화물, 알칼리 토금속 수산화물 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 수용액 및 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올로 조직을 처리하여 그 결과 용액과 접촉한 프라이온이 비활성화되는 단계를 포함한다. 본 발명은 지방산 유도체, 알칼리화제, 물 및 이들의 혼합물을 본질적으로 포함하는 GRAS 성분들과 저급 알칸올을 혼합함으로써 C1-C6의 저급 알칸올의 오염제거 성질을 개선하기 위한 방법을 기술한다. 선택적으로, 농축제, 연화제, 보습제, 부식 억제제, 거품제거제, 착향제, 분사제, 향수, 산화방지제 및 염료로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 성분이 첨가될 수 있다. 생성된 조성물은 해로운 오염물들이 있는 살아있는 조직(피부, 손 등등) 및 무생물들(기구, 의학 장치, 군사용 및 민간 설비들, 가구, 종이 및 인쇄물들 등등)을 소독하는데 사용될 수 있으며, 상기 해로운 오염물들은 화학 작용제(VX, 겨자, 사린, 소먼 및 타분), 독소, 원생 동물, 벌레(즉, 질병 매개체) 및 박테리아, 균류, 바이러스, 균성 및 박테리아 포자들 및 형태적으로 변화된 프라이온들(CJD, CWD, BSE, 스크라피)과 같은 발병성 감염원들로 이루어져 있다.
게다가, 조성물의 활성은 용매의 증발 후 상당한 시간 동안 유지된다. 생물학적 무기 공격에서, 제1 단계는 병원체의 추가 이동을 막는 것이 되어야만 한다. 또한, 생물학적 고정화 작용제(immobilizing biological warfare agent)(예를 들어, 박테리아 포자 등등)는 구조대들이 병원체에 오염되지 않고 직무를 수행하게 할 수 있다. 본 발명의 매우 중요한 양상은 용매의 증발 후 생성된 필름이 물리적으로 박테리아 또는 균성 포자를 붙잡고, 그 결과 감염의 전염 및 환경 표면 오염의 주요한 원인이 되는 포자의 재현탁을 막는다는 것이다. 본 발명의 조성물은 측정된 양의 필수 성분들과 저급 알칸올을 단순히 혼합한 후, 선택적 성분들을 혼합하고 포장하여 매우 용이하게 제조될 수 있다.
본 발명에 유용한 저급 알칸올(C1-C6)은 제한되지 않으나, 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올, n-부탄올 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되며, 저급 알칸올은 약 3 내지 95%의 양으로 존재한다. 에탄올 또는 이소프로판올이 가장 바람직하다. 본 발명에 유용한 적절한 지방산 유도체의 예들은 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 포함하는 지방산의 알칼리 및 알칼리 토금속염(Na, K, Li, Mg 등등)을 포함한다. 본원에 유용한 다른 지방산 유도체들은 부틸-, 에틸-, 메틸 에스테르들과 같은 에스테르 유도체, 지방 아실-조효소 A, 자당 에스테르 및 원하는 지방산의 모노글리세리드를 포함한다.
본 발명에 유용한 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개의 탄소 원자들(C4-C22)을 갖는 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자들(C8-C16)을 갖는 포화 또는 불포화 지방 알코올에 부착된 글리세롤 부분이다. 일반적으로 0.1중량% 내지 약 25중량%, 특히 5 내지 10중량% 양으로 지방산 유도체를 포함하는 것이 유용한 것으로 관찰되었다. 라우르산 유도체가 가장 바람직하다.
일부 바람직한 실시예에서, 알칼리화제는 수산화 암모늄, 수산화 알루미늄, 알칼리 금속 수산화물(Na, K, Li), 알칼리 토금속 수산화물(Ca, Mg), 예를 들어 탄산 나트륨 또는 탄산 수소 나트륨과 같은 알칼리 금속 탄산염 또는 탄산 수소염 또는 이들의 혼합물을 포함하는 그룹으로부터 선택된다. 일반적으로, 알칼리화제의 양은 0.01중량% 내지 10중량%에서 및 가장 바람직하게는 예를 들면 5중량%와 같은 3 내지 6중량% 범위 내에서 변할 수 있다.
본 발명의 조성물은 용매로서 물을 포함하는데, 가장 바람직하게는 탈염수를 포함한다. 물의 양은 약 5 내지 95중량%, 가장 바람직하게는 15 내지 60중량% 범위 내에서 변할 수 있다. 조성물은 제한되지 않으나, 퓸드 실리카(fumed silica), 잔탄검(xanthan gum), 펙틴(pectin), 구아검(guar gum), 하이드록실 프로필 셀룰로오스, 젤라틴, 천연검, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 카르복시폴리메틸렌, 아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 크로스폴리머 및 수용성 왁스로 이루어진 그룹으로부터 선택된 농축제를 선택적으로 포함할 수 있고; 이러한 성분은 유효량으로 포함될 수 있다. 또한 조성물은 선택적으로 하나 이상의 부식 억제제를 포함할 수 있다. 적절한 부식 억제제의 예들은 모노- 및 트리에탄올아민, 디시클로헥실 아민 니트라이트 및 N,N-디벤질아민을 포함하고, 이러한 성분은 유효량으로 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 선택적으로 연화제 및 보습제 중 적어도 하나와 배합될 수 있다. 사용될 수 있는 연화제 및 보습제들은 당해 분야에서 잘 알려져 있고, 통상적이며, 제한되지 않지만 프로필렌 글리콜, 이소프로필 미리스테이트, 글리세린, 아세트아미도프로필 트리모늄 클라이드가 포함된다. 이러한 성분은 유효량으로 포함될 수 있다. 또한 조성물은 통상적인 분배용 분사제와 선택적으로 배합되어 통상적 가압 컨테이너를 위한 에어로졸로서 제조될 수 있다. 적절한 분사제의 예들은 제한되지 않지만, 이소부텐, n-부탄, 프로판, 디메틸 에테르 및 이들의 혼합물을 포함하고; 이러한 성분은 유효량으로 포함될 수 있다. 추가로, 조성물은 선택적으로 하나 이상의 향수를 포함할 수 있다. 원하는 향기를 제공하는 물질이 사용될 수 있다. 대량의 테르펜(terpene)을 포함하는, 예를 들면, 오렌지, 레몬, 라임 등등의 감귤류로부터 유도되는 오일이 특히 바람직하다. 이러한 성분은 유효량으로 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 선택적으로 하나 이상의 거품제거제를 포함할 수 있다. 적절한 거품제거제의 예들은 실리콘(예를 들면, 폴리디메틸 실록산), C8 내지 C18 지방족 알코올 또는 C9 내지 C12-알킬 치환된 페놀 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 또한 조성물은 선택적으로 하나 이상의 산화방지제를 포함할 수 있다. 적절한 산화방지제의 예들은 제한되지 않지만, 토코페롤(예를 들면, 비타민 E 또는 토코페롤 아세테이트), 비타민 C 및 이들의 혼합물을 포함한다. 이들 성분들은 유효량으로 포함될 수 있다. 또한 조성물은 선택적으로 하나 이상의 염료를 포함할 수 있다. 적절한 염료의 예들은 제한되지 않지만 pH 의존 염료(예를 들면, 파란색 염료 티몰프탈레인), 비착색 염료(nonstaining dye)를 포함하고, 이러한 성분은 유효량으로 포함될 수 있다. 또한, 조성물은 선택적으로 하나 이상의 착향제를 포함할 수 있다. 원하는 향을 제공하는 물질이 사용될 수 있고, 성분은 유효량으로 포함될 수 있다.
본 발명은 살균 및 포자박멸 스펙트럼 및 알칸올의 활성을 개선하기 위하여 C1-C6의 저급 알칸올의 오염제거 활성에 특정 GRAS 성분들의 조합된 효과를 통합시킨다. 본원의 실시예에서 테스트된 성분들은 안전성의 관점에서 선택되었고, 지방산 유도체, 알칼리화제, 물 및 이들의 혼합물을 포함한다. 선택적으로, 농축제, 연화제, 보습제, 부식 억제제, 분사제, 향수, 착향제, 거품제거제, 산화방지제 및 염료로부터 선택된 하나 이상의 성분들은 또한 조성물에 포함된다. 본 발명의 조성물은 두개 이상의 항균 화합물들을 사용하여 병원체의 수명 주기의 다수의 지점들에서 병원체를 공격한다. 항균 화합물은 독립적으로 작용할 뿐만 아니라 추가적으로 및 공동으로 상승되게 작용하여 병원체를 비활성화시킨다. 본원에 공개된 조성물은 비-부식성이고, 무독성이고, 다양한 종류의 담체들에 통합될 수 있다. 따라서, 조성물은 통상적인 에어로졸 용기인, 안개 발생 장치 안에 에어로졸 형태로 또는 트리거 펌프 스프레이 병 및 스퀴즈 병 안에 액체 형태(액체/젤)로 포장될 수 있다. 조성물은 물수건(직조 또는 비-직조 성질)에 스며들게 될 수 있고, 개별적으로 포장되거나 다양한 종류의 작업 목적을 만족시키도록 개별 디스펜싱을 위한 벌크로 포장될 수 있다.
본 발명은 해로운 오염물이 있는 살아있는 조직 및 무생물들을 소독하기 위하여 C1-C6 저급 알칸올의 오염 제거 성질을 개선시키는 수용성 배합물(formulation)을 제공한다. 본 발명의 조성물은 제한되지 않지만, 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올, n-부탄올 및 이들의 혼합물을 포함하는 저급 C1-C6 알칸올을 포함하는데, 저급 알칸올은 약 3 내지 95%의 양으로 존재한다. 에탄올 또는 이소프로판올이 가장 바람직하다. 또한, 조성물은 제한되지 않지만, 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 갖는 지방산의 알칼리 및 알칼리 토금속염(Na, K, Li, Mg 등등) 및 이들의 혼합물을 포함하는 지방산 유도체를 포함한다. 다른 유용한 지방산 유도체는 부틸-, 에틸-, 메틸 에스테르와 같은 에스테르 유도체, 지방 아실-조효소 A, 자당 에스테르 및 원하는 지방산의 모노글리세리드를 포함한다. 본 발명에 유용한 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개 탄소 원자들(C4-C22)을 갖는 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자들(C8-C16)을 갖는 포화 또는 불포화 지방 알코올에 부착된 글리세롤 부분 및 이들의 혼합물이다. 일반적으로, 0.1중량% 내지 약 25중량%, 특히 5 내지 10중량% 양의 지방산 유도체를 포함하는 것이 유용한 것으로 관찰되었다. 라우르산 유도체가 가장 바람직하다. 알칼리화제는 제한되지 않지만, 수산화 암모늄, 수산화 알루미늄, 알칼리 금속 수산화물(Na, K, Li), 알칼리 토금속 수산화물(Ca, Mg), 예를 들면 탄산 나트륨 또는 탄산수소 나트륨과 같은 알칼리 금속 탄산염 또는 탄산 소수염 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 일반적으로, 알칼리화제의 양은 0.01중량% 내지 10중량%에서, 및 가장 바람직하게는 예를 들면 5중량%와 같은 3 내지 6중량% 범위 내에서 변할 수 있다. 그리고 선택적으로, 하나 이상의 성분은 농축제, 연화제, 보습제, 부식 억제제, 분사제, 향수, 착향제, 거품억제제, 산화방지제 및 염료로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
본 발명이 작용하는 해로운 오염물들은 화학 작용제(VX, 겨자, 사린, 소먼 및 타분), 독소, 벌레(예를 들면, 질병 매개체) 및 박테리아, 균류, 바이러스, 균성 및 박테리아 포자들 및 형태적으로 변화된 프라이온들(CJD, CWD, BSE, 스크라피)과 같은 발병성 감염원을 포함한다. 본 발명이 작용하는 무생물들은 제한되지 않지만, 기구, 의학 장치, 군사용 및 민간 설비들, 가구, 인쇄물, 스테인레스 강철, 플라스틱, 섬유유리, 세라믹, 대리석, 에나멜 및 자기류 등등을 포함한다.
일부 실시예에서, 용매는 물이다. 또 다른 실시예에서, 알칸올은 에탄올이다. 일부 실시예에서, 용매는 에탄올이다. 또 다른 실시예에서, 오염물은 화학적 작용제(chemical warfare agent), 생물학적 작용제(biological warfare agent), 단백질(예를 들면, 전염성 프라이온), 독소(예를 들면, 스타치보트리스 독소, 보툴리늄), 벌레(예를 들면, 질병 매개체), 발병성 감염원(예를 들면, 박테리아, 곰팡이, 바이러스), 균성 포자(예를 들면, 스타치보트리스 차타룸) 또는 박테리아 포자(예를 들면, 바실루스 애트로패우스 포자)이다. 또 다른 실시예에서, 오염물은 표면 위에, 대기에, 토양에, 내과 및 외과 기구에, 식품에, 동물 사료에, 종이 및 인쇄물에, 군사용 장비에 또는 제한되지 않지만, 피부, 손, 근육, 동물 및 식물 기원으로부터의 생물학적 조직을 포함하는 살아있는 조직들에 존재한다.
도 1A-E는 검은 곰팡이[스타치보트리스 차타룸(Stchybotrys chartarum)] 포자의 박멸(killing)에 대한 상이한 농도들의 조성물 FB의 효과를 나타낸다. 도 1A는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 100% FB의 효과를 나타낸다. 도 1B는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 60% FB의 효과를 나타낸다. 도 1C는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 50% FB의 효과를 나타낸다. 도 1D는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 40% FB의 효과를 나타낸다. 도 1E는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 30% FB의 효과를 나타낸다.
도 2는 검은 곰팡이(스타치보트리스 차타룸) 포자의 박멸에 대한 상이한 농도들(30, 60 및 100%)의 조성물(FB)의 효과를 나타내는 그래프이다.
도 3A-C는 검은 곰팡이(스타치보트리스 차타룸) 포자의 박멸에 대한 상이한 농도들의 가정용 Clorox® 표백제의 효과를 나타낸다. 도 3A는 검은 곰팡이 포자의 박멸에 대한 12.5% NaOCl의 효과를 나타낸다. 도 3B는 검은 곰팡이 포자의 박멸에 대한 7.5% NaOCl의 효과를 나타낸다. 도 3C는 검은 곰팡이 포자의 박멸에 대한 3.75% NaOCl의 효과를 나타낸다.
도 4는 검은 곰팡이(스타치보트리스 차타룸) 포자의 박멸에 대한 상이한 농도들(3.75, 7.5 및 12.5% 나트륨 하이포클로라이트)의 염소 표백제의 효과를 나타낸다.
도 5는 스타치보트리스 차타룸 포자로 접종된 카페트에 대한 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제의 효과를 나타낸다.
도 6은 스타치보트리스 차타룸 포자로 접종된 천장 타일에 대한 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제의 효과를 나타낸다.
도 7은 스타치보트리스 차타룸 포자로 접종된 범용의 인쇄 용지에 대한 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제의 효과를 나타낸다.
도 8은 스타치보트리스 차타룸 포자로 접종되고 어둠 속에서 30일 동안 인공 배양된 카페트에 대한 검은 곰팡이의 증식(growth)을 나타낸다.
도 9는 스타치보트리스 차타룸 포자로 접종되고 어둠 속에서 30일 동안 인공 배양된 범용의 인쇄 용지에 대한 검은 곰팡이의 증식을 나타낸다.
도 10은 스타치보트리스 차타룸 포자로 접종되고 어둠 속에서 30일 동안 인공 배양된 천장 타일에 대한 검은 곰팡이의 증식을 나타낸다.
도 11A-F는 검은 곰팡이(스타치보트리스 차타룸) 포자로 나무조각을 접종한 후 나무조각에 조성물 FB를 분무한 효과를 나타낸다. 도 11A 및 11B는 다공성 물질로서 나무조각 위에 검은 곰팡이 포자의 접종을 나타낸다. 도 11C 및 11D는 나무조각 위로 분무된 50% FB의 성능(performance)을 나타낸다. 도 11E 및 11F는 나무조각 위로 분무된 1.84% 나트륨 하이포클로라이트의 효과를 나타낸다.
다음의 실시예들은 본 발명의 이해를 용이하게하는 것으로 간주된다. 발명의 구성들은 아래 기술된 바와 같은 특정한 배합물의 실시예에 의해 설명되지만, 이들 실시예에 제한되지는 않는다. 이들 실시예들은 오직 예증으로서 제공되는 것으로 이해되고, 본 발명의 범위 내에 포함되는 또 다른 유용한 배합물들은 발명의 범위로부터 벗어나지 않고 당업자에 의해 즉시 제조될 수 있는 것으로 이해되는 것이다.
실시예 1
성분 | 조성물(FB) | 양 |
알칸올(ml) | 에탄올 | 62 |
지방산(g) | 라우르산 | 10 |
알칼리화제(g) | 수산화 칼륨 | 3.5 |
물(ml) | 탈염수 | 26 |
pH | 14.42 |
혼합물은 탈염수를 사용하여 100ml의 부피로 만들어졌다.
다음의 결과와 데이터의 요약은 표 1의 조성물(FB)을 사용하는 검은 곰팡이 포자에 대해 수행된 시험을 기초로 한다. 통상적으로 "검은 집-곰팡이"로서 알려진 스타치보트리스 차타룸은 집과 사무실용 빌딩들에서 주된 문제가 되고 있으며, 이는 건축과 보험 업계가 매년 수십억 달러의 비용을 치르게 한다. 균류는 이전에 응축, 누출 및 홍수로부터의 수해를 받게 된 집과 같은 습하고 따뜻한 환경에서 제지 공장, 섬유판, 나무 및 석고보드와 같은 물질을 포함하는 셀룰로오스에서 가장 잘 자란다. 미국에는, 잠재적으로 이러한 수해에 영향 받기 쉬운 거의 1억 2천만채의 주택과 5백만채의 상업용 빌딩이 있다. 스타치보트리스로 오염된 밀짚 또는 곡물과 접촉하여 감염된 것으로 확인된 개인들은 피부염, 입과 목의 점막의 통증과 염증, 코 통로의 화끈감, 흉부의 긴장, 감기, 출혈성 비염, 열, 두통, 발진 및 피로와 같은 징후를 보인다. 오염된 곡물을 소비한 개인들은 입에서의 화끈감, 메스꺼움, 구토, 설사 및 복통을 호소했다. 스타치보트리스는 "빌딩증후군(sick building syndrome)"과 유아의 폐출혈 모두에 관련되어 있다. 이러한 균류는 다수의 트리코테센 마이코톡신(trichothecene mycotoxin)들을 생성하는데, 이들 중에는 사트라톡신(G, F 및 H), 로리딘, 트리코데르몰(trichodermol) 및 트리코베르롤(trichoverrol)이 있다. 비록 사트라톡신(satratoxin)의 작용기작(the mode of action)이 잘 이해되지 않을지라도, 사트라톡신은 효력있는 단백질 합성 억제제일 뿐만 아니라, 매우 낮은 농도에서조차 면역 억제제인 것으로 생각된다. 정화(remediation)는 전형적으로 스타치보트리스로 오염된 영역의 파괴 및 제거를 포함한다. 본 발명의 조성물을 사용한 이러한 균류 및 그것의 독소의 박멸은 정화 비용을 크게 감소시킬 것이다.
균성 포자 제조(preparation): 매우 독성인 것으로 확인되었던 스타치보트리스 차타룸 포자 및 공지된 사트라톡신 농도(ng/g)를 갖는 사트라톡신 추출물이 이 실험에 사용되었다. 공지된 농도의 스타치보트리스 포자는 감자 포도당 한천배지(potato dextrose agar, PDA) 또는 맥아 추출물 한천배지(malt extract agar, MEA) 플레이트 상에서 2차-배양(sub-culture)되었다. 플레이트들은 어둠 속 실온(26℃)에서 5일 내지 7일(5-7일) 동안 융합 증식(confluent growth)이 이루어질 때까지 인공 배양되었다. 포자는 pH 7.0의 인산염생리식염완충액(phosphate buffered saline, PBS)을 사용하여 인산염생리식염완충액(PBS)의 105 및 107 포자/ml의 최종 농도로 수집되었다.
처리 효능의 결정: 포자.
9ml의 조성물(FB)이 1ml의 포자 농도로 접종되었다. 초기 포자 농도는 10ml용액 당 6.65log 집락형성단위(colony forming unit, CFU)(CFU/10ml)였다. 표본추출(sampling)은 무균 테스트 튜브에서 행해졌다. 튜브들은 격렬하게 처음 10분 동안 분당 3회 휘저어진 후에 총 10분, 30분 및 60분 동안 매 5분 당 1회 휘저어졌다. 그 다음에 튜브들은 비워졌고 각각 5분 동안 탈염수(5ml)로 3회 헹구어졌으며, 동일한 방법으로, 처리가 수행되었다. 각각의 처리로부터의 용액들이 조합되었다. 양성(실험적 처리 없이 접종된 포자) 및 음성(포자가 없는 실험적 처리) 대조군이 포함되었다. 각각의 처리의 조합된 용액의 100마이크로리터(μl)가 PDA에서, 어둠 속 실온에서, 7일 동안 평판배양되었다. 이러한 과정은 3회 반복되었다. 포자의 수를 일주일 후에 세었다.
조성물(FB)의 3개의 농도들이 사용되었다(30%, 60% 및 100%). 희석액은 증류수로 만들어졌다. 3.75%, 7.5% 및 12.5%의 치아염소산 나트륨인, 염소 표백제의 수용액이 또한 사용되었다. 처리물들은 0, 1분, 5분, 30분 및 60분에서 표본추출되었다. 포자 증식의 완전한 억제는 5분 후에 30%의 FB에서 관찰되었다. 도 2에 도시된 바와 같이 1분 후에 60%와 100%의 FB에서는 증식은 관찰되지 않았다. 도 1A-E는 검은 곰팡이(스타치보트리스 차타룸) 포자의 박멸에 대한 조성물 FB의 서로 다른 농도들의 효과를 나타낸다. 도 1A는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 100% FB의 효과를 나타낸다. 도 1B는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 60% FB의 효과를 나타낸다. 도 1C는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 50% FB의 효과를 나타낸다. 도 1D는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 40% FB의 효과를 나타낸다. 도 1E는 검은 곰팡이 포자의 감소에 대한 30% FB의 효과를 나타낸다.
염소 표백제의 경우에, 포자 증식의 완전 억제는 도 4에 도시된 바와 같이 1분 후에 3가지 농도들의(3.75%, 7.5% 및 12.5% 치아염소산 나트륨) 사용된 세제들 모두에서 관찰되었다. 도 3A-C는 검은 곰팡이(스타치보트리스 차타룸) 포자의 박멸에 대한 가정용 Clorox® 표백제의 서로 다른 농도들의 효과를 나타낸다. 도 3A는 검은 곰팡이 포자의 박멸에 대한 12.5% NaOCl의 효과를 나타낸다. 도 3B는 검은 곰팡이 포자의 박멸에 대한 7.5% NaOCl의 효과를 나타낸다. 도 3C는 검은 곰팡이 포자의 박멸에 대한 3.75% NaOCl의 효과를 나타낸다.
이들 테스트의 결과들은 명백히 본 발명의 조성물이 검은 곰팡이 포자의 오염제거에 매우 효과적이라는 것을 나타낸다. 또한, 표백제가 매우 효과적인 오염제거제라는 것이 분명하다. 표백제에 대한 대체물을 찾는 중요한 이유는 표백제가 세균을 박멸할 수 없기 때문이 아니라, 표백제의 부식성 때문이다. 그 다음에 조성물(FB)은 더욱 최적화되었고, 30%, 40%, 50% 및 60%의 용액들은 1분 후에 포자 증식을 막을 최적 농도를 테스트하는데 사용되었다. 샘플들은 1분과 5분에서 취하여졌다. 증식은 이전에 관찰된 바와 같이 30% 농도에서 5분 후에 관찰되었다. 40% 농도는 5분 후에 증식을 억제했고 50%와 60% 농도 모두는 표 2에서 나타낸 바와 같이 1분 후에 증식을 억제했다. 이 시점에서는, 50% 희석이 1분 내에 포자를 억제하는 조성물(FB)의 최적 농도로서 선택되었고 이러한 농도는 빌딩 물질에 대한 추가 연구에 사용되었다.
처리물 | 포자 수 0분 | 포자 수 1분 | 포자 수 5분 |
대조군 | 5.8 | 5.8 | 5.8 |
30% FB | 5.8 | 4.75 | 3.7 |
40% FB | 5.8 | 3.3 | 0 |
50% FB | 5.8 | 0 | 0 |
60% FB | 5.8 | 0 | 0 |
처리 효능의 결정: 빌딩 물질. 조성물은 또한 다양한 물질 표면을 오염제거하는데 효과적인 것으로 증명되었다. 다음의 3가지 서로 다른 물질들이 Home Depot® 홈 개선 센터(Homer TLC, Inc. 클레이몬트, 델라웨어)로부터 수득되었다: 1) 카페트(Journey's End Loop Harbor Lig); 2) 천장 타일; 3) 일반용 프린트 종이(백색); 및 4) 나무. 샘플은 2인치 정사각형으로 절단되었고 10ml의 탈염수에 밤새도록 잠겼고 121℃에서 1시간 동안 오토클레이브에 의해 멸균되었다. 멸균된 물질은 식혀졌고 2개의 세트들로 분할되었다. 멸균된 물질의 제1 세트는 100μL의 포자 현탁액(107 포자/10ml 용액)을 섞었고, 30분 동안 후드 아래에서 공기 건조된 후에, 약 1ml의 물(대조군), 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제(Clorox 사, 오클란드, CA)로 각각 분무되었고 어둠 속 실온에서 30일 동안 인공배양되었다. 30일 후, 증식은 모든 대조군 처리(물로 처리된 물질들)에서 발견되었다. 증식은 조성물(50% FB) 또는 가정용 Clorox® 표백제로 처리된 물질들에서 관찰되지 않았다(도 5, 도 6, 도 7 및 도 11A-F). 멸균된 물질의 제2 세트는 100μL의 동일한 농도의 포자 현탁액(107 포자/10ml 용액)을 섞었고 어둠 속 실온에서 30일 동안 인공 배양되었다. 증식은 모든 샘플들에서 관찰되었고, 샘플 상의 증식은 천장 타일>카페트>종이(도 8, 도 9 및 도 10)의 순서였다. 그 다음에, 이러한 샘플들은 각각 30ml의 물(대조군), 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제에 5분 동안 잠겼고, 샘플들은 1.5 시간 동안 후드 아래에서 공기 건조되었다. 사트라톡신은 10ml의 메탄올로 추출되었다. 약 4ml의 추출물은 약 1.5ml의 최종 부피까지 후드 아래에서 밤새도록 공기 건조되었다. 각각의 샘플에서의 최소량(100μL)은 900μL의 탈염수로 재현탁되었고, 각각의 처리물/현탁액의 8μL은 효모 독성 분석시험(Yeast Toxicity Assay)에 사용되었다.
효모 독성 분석시험(Yeast Toxicity Assay): Kluyveromyces marxianus(No. 8554; ATCC, 매나싸스, 버지니아)의 배양균이 37℃에서 길러졌고, 효모-펩톤-글루코스(YPG) 한천배지(1%(중량/부피) 효모 추출물; 1%(중량/부피) 세균학적 펩톤; 2%(중량/부피) 글루코스; 및 2%(중량/부피) 한천배지)에 4℃에서 저장되었다. 분석시험을 위해, 한천배지 플레이트로부터의 단일 집락(colony)은 배양 튜브에 있는 5ml의 YPG-50 액체배지(1%(중량/부피) 효모 추출물; 1%(중량/부피) 세균학적 펩톤; 및 50mM 글루코스)에 첨가되었다. 튜브는 회전 배양기에서 약 16 시간 동안 37℃에서 인공 배양되어 YPG-50에서 1x108 세포/ml의 최종 밀도로 배양균을 획득했다. YPG-50은 생물학적 분석법을 위한 15mg/ml의 최종 농도를 제공하기 위해 황산 폴리믹신 B(PMBS)(ICN Biomedicals 사, 오로라, 오하이오)의 원액으로 보충되었다. 테스트는 3번 실행되었다. 생물학적 분석법을 위해, 136μL의 PMBS-보충된 YPG-50 배지가 96-웰 폴리스티렌 마이크로티터 플레이트(96-well polystyrene microtiter plate)의 웰에 첨가되었다. 8μL의 테스트 또는 대조군 샘플이 각 웰에 첨가된 후에, 16μL의 효모 접종물(yeast inoculum)이 첨가되어 대략 1x108 세포/ml의 초기 세포 밀도를 산출했다. 빈 웰들(음성 대조군)은 152μL의 배지(medium)를 포함했고, 8μL의 물-대조군 웰들(양성 대조군)은 144μL의 배지 및 16μL의 효모 접종물을 포함했다. 플레이트들은 밀봉되었고 8시간 동안(세포가 고정상에 도달 할 때) 37℃에서 플레이트 교반기 상에서 인공 배양되었다. 세포 밀도는 570nm의 파장의 마이크로티터 플레이트 판독기에서 흡수도를 측정함으로써 매 2시간마다 측정되었다. 흡수도는 K. marxianus 8시간 증식 곡선과 관련되어서 세포 밀도를 결정한다. 이러한 배양균은 트리코테센 마이코톡신에 민감하고, 매우 소량(100-200ng/ml)의 존재 하에서는 자라지 않을 것이다. 높은 광학 밀도(OD)는 증가된 탁도의 결과로 될 것인데, 이것은 미생물(organism)의 증식을 의미할 것이고, 낮은 OD는 미생물의 증식이 거의 없기 때문일 것이다. 모든 처리물[배지+(조성물(50% FB) 또는 가정용 Clorox® 표백제 처리물) + 효모 접종물]의 OD 값은 모든 표본추출된 시간 지점(0, 2, 4, 6.5 및 8 시간)에서 양성 대조군들(배지+물 처리물+효모 접종물)의 OD 값보다 높았다. 이것은 조성물(50% FB)이 5분 내에 빌딩 물질에 있는 독소를 저하시킬 수 있고, 따라서 해독된 물질의 메탄올 추출물은 물로 처리된 샘플(표 3, 4, 5)과 비교하면, 사트라톡신의 흔적을 산출하지 않는 것으로 나타났다.
표 3: 곰팡이 증식 후 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제(CB)로 처리된 카페트 샘플의 광학 밀도(570nm).
시간(h) | 양성 대조군 | 대조군 | 50% FB | CB |
0 | 0.335 | 0.395 | 0.952 | 0.35 |
2 | 0.33 | 0.292 | 0.912 | 0.325 |
4 | 0.319 | 0.293 | 0.808 | 0.37 |
6.5 | 0.318 | 0.301 | 0.714 | 0.436 |
8 | 0.318 | 0.301 | 0.714 | 0.436 |
표 4: 곰팡이 증식 후 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제(CB)로 처리된 다목적 종이 샘플의 광학 밀도(570nm).
시간(h) | 양성 대조군 | 대조군 | 50% FB | CB |
0 | 0.335 | 0.399 | 0.645 | 0.490 |
2 | 0.33 | 0.381 | 0.60 | 0.474 |
4 | 0.319 | 0.44 | 0.614 | 0.470 |
6.5 | 0.318 | 0.497 | 1.008 | 0.482 |
8 | 0.318 | 0.497 | 1.008 | 0.482 |
표 5: 곰팡이 증식 후 조성물(50% FB) 및 가정용 Clorox® 표백제(CB)로 처리된 천장 타일 샘플의 광학 밀도(570nm).
시간(h) | 양성 대조군 | 대조군 | 50% FB | CB |
0 | 0.335 | 0.318 | 0.811 | 0.472 |
2 | 0.33 | 0.296 | 0.895 | 0.456 |
4 | 0.319 | 0.350 | 0.798 | 0.530 |
6.5 | 0.318 | 0.424 | 0.699 | 0.596 |
8 | 0.318 | 0.424 | 0.699 | 0.596 |
실시예 2
미리-만들어진 지방산 비누 및 과량의 알칼리화제로 자유 지방산을 중성화함으로써 현장에서 생성된 지방산 비누를 갖는 조성물을 사용하여 스타치보트리스 차타룸 포자에 대한 항균제 효과가 조사되었다.
성분(I) | 조성물(I) | 양(I) |
알칸올(ml) | 에탄올 | 62 |
자유 지방산(mole) | 라우르산 | 0.05 |
알칼리화제(mole) | 수산화 칼륨 | 0.06 |
물(ml) | 탈염수 | 26 |
pH | 14.42 |
혼합물은 탈염수를 사용하여 100ml의 부피로 만들어졌다.
표 6의 조성물에 의해 스타치보트리스 차타룸 포자의 박멸이 완료되었다.
성분(II) | 조성물(II) | 양(II) |
알칸올(ml) | 에탄올 | 62 |
자유 지방산(mole) | 포타슘 라우레이트 | 0.05 |
알칼리화제(mole) | 수산화 칼륨 | 0.01 |
물(ml) | 탈염수 | 26 |
pH | 14.42 |
혼합물은 탈염수를 사용하여 100ml의 부피로 만들어졌다.
표 7의 조성물에 의해 스타치보트리스 차타룸 포자의 박멸이 완료되었다.
그러므로, 미리 만들어진 지방산 비누와 자유 지방산을 중성화시키기 위해 과량의 알칼리화제를 첨가함으로써 현장에서 생성된 지방산 비누를 사용하는 조성물들 사이에서 항균제 효과의 차이점이 없었다. 후속 실험에서, 지방산 비누는 현장에서 생성되었다.
실시예 3
박테리아 포자는 화학적 및 물리적 인자들에 매우 내성이다. 박테리아 포자는 죽이기 가장 어려운 미생물로서 인식된다. 가장 중요한 포자 형성 박테리아는 바실루스 속 및 클로스트리듐 속에 속한다. 탄저균 및 클로스트리듐 디피실은 거의 세계적으로 널리 분포되어 있다. 클로스트리듐 디피실의 대규모 발병은 병원에서 설명되었다. 이러한 병원체의 포자는 예를 들면, 바닥 및 화장실 주변의 병원 환경에서 오랜 기간 동안 살아있을 수 있다. 토양에 풍부한 바실루스 포자는 사육 및 야생 동물들 및 감염된 동물과 접촉하거나 오염된 고기를 섭취한 인간에게 감염을 일으킨다. 탄저균 포자는 매우 위험한 생물학 작용제로서 인식되었다. 이러한 감염원들을 중화시키기 위해 효율적인 제어 방안을 찾아내는 것이 매우 중요하다. 본 발명의 조성물들의 멸균 효과는 스테인레스 강철 디스크의 표면에 부착한 바실루스 애트로패우스 포자 상에서 실험되었다. 탄저균에 대해 잘 알려진 대용물인, 바실루스 애트로패우스가 모든 실험들에서 사용되었다. 3개의 샘플들(3개의 분리된 디스크들)은 모든 처리와 시간 지점에서 수행된다.
스테인레스 강철 디스크 상의 정량 생육가능한 포자 개체 분석시험을 위한 순서.
물질들: 디스크당 바실루스 애스트로패우스의 2x106 포자들로 접종된 스테인레스 강철 디스크(SGM Biotech Inc); 살균한 6mm 유리 구슬; 물에 0.1%의 Tween 80; 대두 카제인 소화 한천배지 플레이트(Tryptic soy agar plate).
실험 순서: 단일 접종된 디스크를 무균의 바닥이 평평한 신틸레이션 유리병(scintillation vial)에 넣는다. 10ml의 처리물(물, 본 발명의 조성물 등등)을 첨가하고 특정한 시간(15초, 5분, 30분 등등) 동안 실온에서 인공배양한다. 처리 후에, 불에 달군 집게로 디스크를 제거하고, 무균 여과지에 디스크의 한쪽 모서리를 접촉시킴으로써 과량의 처리물을 빨아들여 제거한다. 4개의 6mm 유리 구슬들과 5.0ml의 0.1% Tween 80으로 채워진 바닥이 평평한 테스트 튜브(21.5 x 95mm)에 처리된 디스크를 놓는다. 5분 동안 각각의 튜브를 초음파를 쬐어 분해한 후에, 5분 동안 각각의 튜브를 (Vortex Genie 2 상의 속도 5에서) 회전운동시킨다(vortex). 5.0ml의 무균 정제수를 첨가하고 다시 5분 동안 회전운동시킨다. 10분 동안 82℃에서 열충격시킨다. 10초 동안 열-충격된 튜브를 회전운동시킨다. 0.1ml를 0.9ml의 무균수를 포함하는 희석 튜브에 옮김으로써 연속적인 10배의 희석을 수행한다. 각각의 튜브를 10초 동안 회전운동시킨다. 대두 카제인 소화 한천배지 플레이트들 상에, 3통으로, 0.1ml의 초기 열-충격된 튜브 및 0.1ml의 각각의 희석물 뿐만 아니라, 1.0ml의 초기 열-충격된 튜브를 평판배양한다. 32℃에서 플레이트들을 인공 배양한다. 24시간, 48시간 및 72시간의 인공배양 후에 회수된 집락들을 센다. 마지막으로, 오직 물에서 인공 배양된 대조군 디스크들과 비교하여 생존 퍼센트와 박멸 퍼센트를 계산한다.
정량 포자 생존 시험분석을 위한 절차.
물질들: 디스크당 바실루스 애스트로패우스의 2x106 포자들로 접종된 스테인레스 강철 디스크(SGM Biotech Inc.); 및 대두 카제인 소화 액체배지(Tryptic soy broth).
실험 순서: 무균의 바닥이 평평한 신틸레이션 유리병에 단일 접종된 디스크를 놓는다. 10ml의 처리물(물, 본 발명의 조성물 등등)을 첨가하고 특정 시간(15초, 5분, 30분 등등) 동안 실온에서 인공배양한다. 처리 후에, 디스크를 불에 달군 집게로 제거하고, 무균 여과지에 디스크의 한쪽 모서리를 접촉시킴으로써 과량의 처리물을 빨아들여 제거한다. 처리된 디스크를 10ml의 대두 카제인 소화 액체배지를 포함하는 50ml 무균의 나사 뚜껑으로 된 테스트 튜브에 놓는다. 32℃에서 튜브를 인공 배양한다. 14일 동안 매일 또는 모든 튜브들이 최대 탁도에 도달할 때까지, 맥파랜드 탁도 표준(MacFarland turbidity standard)에 탁도를 비교하여 증식을 위한 튜브를 관찰한다. 0-7에서 0의 점수는 증식이 보이지 않는 것이고, 7은 밀집한 증식이다. 일단 하나의 튜브가 7의 점수에 도달하면, 실험의 나머지들에 대해서 7의 점수로서 기록한다.
발명의 조성물에 의해 박멸한 포자의 정량 시험분석: 11개의 조성물들이 표 8에 나타낸 바와 같이, 바실루스 애트로패우스의 포자를 박멸하는 조성물의 능력에 대해 정량적으로 테스트 되었다. 2x106개의 바실루스 애스트로패우스 포자들로 접종된 3개의 스테인레스 강철 디스크들는 독립적으로 30분 동안 실온에서 각각의 배합물에 노출되었다. 노출된 디스크들은 처리물에서 제거되었고, 과량의 처리물을 빨아들여 제거하고, 10ml의 대두 카제인 소화 액체배지 증식용 배지에 놓였고, 그리고 32℃에서 인공 배양되었다. 배양균의 증식을 14일 동안 매일 관찰했다. 표 9에 나타낸, 이들 실험의 결과들은 각각의 처리를 위한 3개의 분리된 배양균에 대한 점수의 합으로서 기록되었다; 최대 점수는 21이다. 6 또는 더 높은 점수는 상당한 증식을 나타낸다.
표 8: 서로 다른 성분들의 조성물의 조합
조성물 | 라우르산(g) | KOH(g) | EDTA(g) | 에탄올(g) | pH |
1 | 10 | 3.5 | 0 | 62 | 14.42 |
2 | 10 | 4.24 | 1 | 62 | 14.4 |
3 | 10 | 4.25 | 2 | 62 | 10.2 |
4 | 10 | 5.01 | 2 | 62 | 14.21 |
5 | 10 | 6.5 | 4 | 62 | 11.04 |
6 | 10 | 5.5 | 0 | 62 | 14.94 |
7 | 10 | 8.6 | 0 | 62 | 15.27 |
8 | 17.5 | 7.6 | 0 | 56.3 | 14.87 |
9 | 0 | 0 | 0 | 62 | 7 |
10 | 0 | 0.56 | 0 | 62 | 14.02 |
11 | 10 | 0 | 0 | 62 | 4.61 |
혼합물은 탈염수를 사용하여 100ml의 부피로 만들어졌다.
표 9: 서로 다른 성분들의 포자박멸 활성의 결과
조성물 | 최대 점수 | 최대점수에 도달하는데 필요한 일수 | 상당한 점수에 도달하는데 필요한 일수 |
1 | 21 | 4 | 2 |
2 | 21 | 3 | 2 |
3 | 21 | 2 | 1 |
4 | 21 | 4 | 3 |
5 | 21 | 13 | 1 |
6 | 3 | 3 | NA |
7 | 3 | 4 | NA |
8 | 3 | 3 | NA |
9 | 21 | 2 | 1 |
10 | 21 | 3 | 3 |
11 | 21 | 3 | 2 |
물 | 21 | 1 | 1 |
이들 결과들은 조성물들(6, 7 및 8)이 가장 효과적이라는 것을 제안한다. 킬레이트제 EDTA는 조성물의 포자박멸 효과에서 매우 불리한 효과를 나타낸다. 이러한 테스트들의 결과들은 명백히 포타슘 라우레이트, 에탄올 및 KOH 사이에서 상승작용(synergism )을 나타내며, 이것은 조성물들의 극적인 포자박멸 효과에 대해 설명한다. 이러한 결과로부터, 보다 더 강한 상승적인 멸균 효과를 만드는 3개의 성분들(즉, 에탄올/지방산 비누 및 알칼리화제)을 조합하여 사용하는 것은 에탄올과 알칼리화제를 각각 또는 함께 사용하는 것 또는 에탄올과 자유 라우르산을 함께 사용하는 것에서 예상되는 것보다 더 강한 상호 상승적인 멸균 효과를 생성하였으며, 개별적 성분들의 필요한 농도들을 현저하게 감소시킬수 있음을 알 수 있다. 조성물의 항균 화합물은 병원체를 비활성화하는데 필요한 개별적 화합물들의 농도를 상승적으로 감소하게 하고, 중요한 것은, 병원체 비활성화에 필요한 시간을 크게 감소시킨다. 병원체가 빠르게 비활성화될수록 병원체들은 감염을 일으키지 못할 것이다. 놀랍게도, 조성물에 의해 제공된 총 항균제 효과가 각각의 화합물의 항균제 효과를 독립적으로 검사함으로써 밝혀낼 수 있는 효과보다 훨씬 더 많이 존재하는 것으로 보임을 확인했다.
발명의 조성물들 1, 6, 8 및 11에 의한 포자 박멸의 정량 시험분석: 4개의 조성물들은 처리물에 살아남은 포자의 수를 측정하는 정량 시험분석을 사용하여, 바실루스 애트로패우스의 포자를 박멸하는 조성물의 능력에 대해 테스트되었다. 2x106개의 바실루스 애스트로패우스 포자들로 접종된 3개의 스테인레스 강철 디스크들은 독립적으로 15초 또는 30분 동안 실온에서 각각의 조성물에 노출되었다. 노출된 디스크는 처리에서 옮겨졌고, 가공처리되어 디스크로부터 포자를 제거했다. 디스크로부터 제거된 포자 현탁액은 희석되었고, 희석액은 3개의 대두 카제인 소화 한천배지 플레이트 상에 놓였다. 플레이트들은 72시간 동안 32℃에서 인공 배양되었고, 집락들을 24시간, 48시간 및 72시간 후에 세었다. 3개의 반복되는 샘플들의 평균으로서 나타낸, 이들 실험들의 결과는 표 10에 나타낸다.
표 10: 선택된 조성물을 사용하여 바실루스 애트로패우스 포자들의 감소 백분율
조성물 | 생육가능한 포자들 | 후에 박멸 % |
1 | 6.9 x 102 | 99.96% |
6 | 증식 없음 | >99.99995% |
8 | 증식 없음 | >99.99995% |
11 | 5.2 x 105 | 74% |
물 대조군 | 2 x 106 | 0% |
실시예 4
매개 곤충(예를 들어, 모기 등등) 제어는 전염성 질병(웨스트 나일, 말라리아, 뇌염 등등)의 전염을 제어하는데 중요한 부분이다. 본 발명의 조성물은 이러한 전염성 질병의 원인이 되는 병원체 및 이들 병원체를 옮기는 매개체를 박멸하는데 효과적이고, 그 결과 전염성 질병 위험을 감소시킨다. 살충제 독성은 생물학적 제어를 포함하는 매개체 제어 방법의 대안적이고 통합된 실행에 관심을 증가시켰다. 본 발명의 조성물은 독성이 아니고, 인간과 환경에 안전하며, 조성물이 GRAS 성분들로 만들어지기 때문에, 식품과 직접 접촉하는 표면을 행굴 필요가 없다.
성분 | 조성물 | 양 |
알칸올(ml) | 에탄올 | 62 |
지방산(g) | 라우르산 | 10 |
알칼리화제(g) | 수산화 칼륨 | 5.5 |
탄산수소 칼륨 | 1 | |
pH | 14.94 |
혼합물은 탈염수을 사용하여 100ml의 부피로 만들어진다.
살충제 활성은 열대집모기(Culex pipiens quinquefasciatus)의 3령유충(third instar larvae)을 사용하여 결정된다. 10개의 유충을 100ml의 본 발명의 조성물을 포함하는 6온스의 종이컵에 놓는다. 처리된 유충을 70℉에서 저장하고 48시간 후에, 사망률을 기록한다.
실시예 5
테러리스트로부터의 위협이 될 가능성이 있는 화학 작용제(chemical warfare agent)는 사린(O-이소프로필 메틸포스포노플루오리데이트), 소먼(O-피나콜릴 메틸포스포노플루오리데이트), 타분(O-에틸 N,N-디메틸포스포라미도시아니데이트) 및 VX(O-에틸 S-2-디이소프로필아미노에틸 메틸 포스포노티올레이트)를 포함한다. 이들 작용제의 화학적 구조는 작용제들이 화합물을 포함하는 인(phosphorus)이고, 본 발명의 조성물을 사용하는 친핵성 공격에 의해 화학적으로 변화될 수 있으며, 그 결과 화학 작용제로서 중화될 수 있다는 사실에서 유사점을 설명한다.
성분 | 조성물 | 양 |
알칸올(ml) | 에탄올 | 72 |
지방산(g) | 라우르산 | 10 |
알칼리화제(g) | 수산화 칼륨 | 5.5 |
수산화 알루미늄 | 1 | |
pH | 14.94 |
혼합물은 탈염수를 사용하여 100ml의 부피로 만들어진다.
알칼리화제는 존재하는 자유 지방산을 중화시키는데 충분한 양보다 1-3배 많은 양으로 조성물에 첨가된다. 라우르산의 중화반응 이상으로 과도한 양이 첨가되어 화학 작용제를 가수분해하고 전염성 프라이온을 변성시키는데 충분한 친핵제(nucleophile)를 제공한다. 이러한 발명의 조성물에서 친핵제는 수산화물과 알콕시드를 포함한다. 알칼리화제는 에탄올과 반응하여 에톡시드를 제공한다. 에톡시드는 수산화물보다 더 알칼리성이고, 더 강하다.
다음의 테스트 순서는 반응 속도를 측정하는데 사용된다: 모든 테스트들은 CASARM-등급 작용제(Chemical Agent Standard Analytical Reference Material)로 실시된다. 모든 테스트들은 실온에서 혼합기가 장착된 피복된 반응 용기에서 실시된다. 본 발명의 조성물(100ml)이 반응 용기에 놓이고 교반된다. 테스트의 초기에, 2ml의 화학 작용제를 반응 용기에 넣는다. 샘플들은 서로 다른 시간 지점에서 혼합 용기로부터 옮겨진다. 샘플들은 용매로 급냉되고, 미반응된 작용제에 대해 가스 크로마토그래피 질량 분석기(GC MS)로 샘플을 분석한다. 모든 테스트 샘플들을 3회 분석한다.
실시예 6
산발성 크로이츠펠트-야콥병(생식계열 프라이온 단백질 유전인자(PRNP) 돌연변이가 없음, PRNP 코돈 129의 호모접합의 메티오닌)에 걸린 사람으로부터의 부검에서 획득되는 조직 절편으로 인위적으로 오염된 유리 슬라이드는 실온에서 표 13에 나타낸 다음의 조성물을 사용하여 1분 및 10분 처리에 노출된다.
표 13: 서로 다른 성분들의 조성물의 조합
조성물 | 라우르산(g) | KOH(g) | 에탄올(ml) | pH |
1 | 10 | 3.5 | 62 | 14.42 |
6 | 10 | 5.5 | 62 | 14.92 |
8 | 17.5 | 7.6 | 56.3 | 14.87 |
혼합물은 탈염수를 사용하여 100ml의 부피로 만들어진다.
노출된 후, 조직은 Castelleni 등등(1996)에 의해 기술된 바와 같이 용균 완충제(lysis buffer)에서 균질화된다. 대조군 CJD 조직과 표 13에 보고된 조성물에 추후 노출된 조직을 2X 샘플 완충제로 처리하고 10분 동안 끓인다. 또한, 대조군 CJD 샘플은 1시간 동안 37℃에서 제한된 단백질 분해(100μg/ml 프로테이나아제 K)를 거치게 되고, 프로테아제 억제제(Pefabloc, Roche Applied Science, 인디아나폴리스, IN)는 반응을 중지시키고, 동일한 부피의 2X 샘플 완충제가 첨가된 후에 10분 동안 끓인다. 그 다음에 모든 샘플들은 12% 폴리아크릴아미드 미니젤에 적재되고, 2시간 동안 4℃에서 Immobilon® 전달막(Millipore Corporation, 빌레리카, 매사추세츠)으로 옮기기 전에 150V에서 전기이동이 작용된다. 막 위에 샘플들은 인간 프라이온 단백질의 잔기 109-112을 인식하는 단일클론 항체 3F4와 반응한다. 면역반응성은 화학 발광에 의해 눈에 보이게 되고, 표준 방사능 사진 촬영에 의해 검출된다.
본 발명이 설명된 실시예들을 참조하여 본원에 기술되지만, 발명은 여기에 제한되지 않는 것으로 이해되어야만 한다. 당업자들 및 본원의 가르침에 접근하기 쉬운 기술자들은 본원 발명의 범위 내에서 추가적인 변경과 구체화를 인정할 것이다. 따라서, 본 발명은 오직 여기에 첨부된 청구항들에 의해 제한된다.
조성물과 방법은 독소, 화학 작용제, 벌레, 프라이온, 미생물 또는 다른 감염원에 의해 오염될 수 있는, 무-생물 표면과 같은 물질, 살아있는 조직, 토양 또는 대기를 위생화 하거나 또는 다른 방법으로 처리하는 것에 대해 기술된다. 또한 조성물을 만드는 방법들이 기술된다.
Claims (42)
- 다음을 포함하는, 물질을 살균하기 위한 방법:(a) 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올 및 14 또는 그 이상의 pH에서 염 또는 에스테르인 지방산 유도체의 혼합물을 포함하는 수용성 조성물을 제공하는 단계, 여기서 지방산 유도체는 조성물의 0.1중량% 내지 25중량%로 존재하며;(b) 물질을 살균하기 위하여 조성물을 유효량으로 물질에 도포하는 단계; 및(c) 선택적으로 단계 (b)의 생성된 조성물을 제거하는 단계.
- 제 1항에 있어서, 지방산 유도체는 알칼리 또는 알칼리 토금속염인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 2항에 있어서, 지방산은 나트륨(Na), 칼륨(K), 리튬(Li), 칼슘(Ca) 또는 마그네슘(Mg) 염인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 2항에 있어서, 지방산 유도체는 4개 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 지방산의 알칼리 또는 알칼리 금속염인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 4항에 있어서, 지방산 유도체는 라우르산의 알칼리 또는 알칼리 금속염인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 1항에 있어서, 지방산 유도체는 포타슘 라우레이트인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 1항에 있어서, 지방산 유도체가 부틸 에스테르, 에틸 에스테르, 메틸 에스테르, 지방 아실-조효소 A, 자당 에스테르 및 모노글리세리드로 이루어진 그룹에서 선택된 에스테르인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 7항에 있어서, 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 갖는 하나 이상의 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자들을 갖는 하나 이상의 포화된 또는 불포화된 지방 알코올에 부착되는 글리세롤 부분을 포함하는 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 1항에 있어서, 독소는 스타치보트리스 독소(Stachybotrys toxin)인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 1항에 있어서, 미생물 또는 다른 감염원은 균류, 박테리아, 균성 포자, 박테리아 포자, 바이러스 또는 형태적으로 변화된 프라이온인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 10항에 있어서, 균성 포자는 스타치보트리스 차타룸(Stachybotrys chartarum) 포자인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 10항에 있어서, 박테리아 포자는 바실루스 애트로패우스(Bacillus atropheus) 포자인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 1항에 있어서, 화학 작용제는 VX, 겨자(mustard), 사린(sarin), 소먼(soman) 또는 타분(tabun)인 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 제 10항에 있어서, 형태적으로 변화된 프라이온은 CJD, CWD, BSE 및 스크라피(Scrapie)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 물질을 살균하기 위한 방법.
- 다음의 혼합물을 포함하는 조성물:(a) 1개 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 저급 알칸올; 및(b) 상기 알칸올에 녹을 수 있는 염 또는 에스테르인 지방산 유도체, 여기서 조성물은 14 또는 그 이상의 pH를 갖고, 지방산 유도체는 조성물의 0.1중량% 내지 25중량%임.
- 제 15항에 있어서, 수용액인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 15항에 있어서, 저급 알칸올은 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올, n-부탄올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 15항에 있어서, 지방산 유도체는 알칼리 또는 알칼리 토금속염인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 18항에 있어서, 지방산은 나트륨(Na), 칼륨(K), 리튬(Li), 칼슘(Ca) 또는 마그네슘(Mg) 염인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 18항에 있어서, 지방산 유도체는 4개 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 지방산의 알칼리 또는 알칼리 금속염인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 20항에 있어서, 지방산 유도체는 라우르산의 알칼리 또는 알칼리 금속염인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 21항에 있어서, 지방산 유도체는 포타슘 라우레이트인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 15항에 있어서, 지방산 유도체는 부틸 에스테르, 에틸 에스테르, 메틸 에스테르, 지방 아실-조효소 A, 자당 에스테르 및 모노글리세리드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 에스테르인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 23항에 있어서, 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 갖는 하나 이상의 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자들을 갖는 하나 이상의 포화 또는 불포화 지방 알코올에 부착된 글리세롤 부분인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 15항에 있어서, 농축제, 연화제, 보습제, 부식 억제제, 분사제, 향수, 착향제, 거품제거제, 산화방지제 및 염료로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 성분들을 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
- 다음을 포함하는, 물질을 처리하는 방법:(a) 1개 내지 6개의 탄소 원자들을 포함하는 저급 알칸올 및 14 또는 그 이상의 pH에서 염 또는 에스테르인 지방산 유도체의 혼합물을 포함하는 수용성 조성물을 제공하는 단계, 여기서 지방산 유도체는 조성물의 0.1중량% 내지 25중량%이며;(b) 물질을 처리하기 위하여 조성물을 유효량으로 물질에 도포하는 단계.
- 제 26항에 있어서, 단계 (b)의 생성된 조성물이 물질로부터 제거되는 것을 특징으로 하는 물질을 처리하는 방법.
- 다음을 포함하는, 조성물을 만드는 방법:(a) 1개 내지 6개의 탄소 원자들을 포함하는 저급 알칸올을 제공하는 단계;(b) 상기 알칸올에 녹을 수 있는 염 또는 에스테르인 지방산 유도체를 제공하는 단계; 및(c) 저급 알칸올과 지방산 유도체를 혼합하여 조성물을 제공하는 단계, 여기서 조성물은 14 또는 그 이상의 pH를 갖고, 지방산 유도체는 조성물의 0.1중량% 내지 25중량%임.
- 제 28항에 있어서, 저급 알칸올은 에탄올인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 28항에 있어서, 지방산 유도체는 알칼리 또는 알칼리 토금속염인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 30항에 있어서, 지방산은 나트륨(Na), 칼륨(K), 리튬(Li), 칼슘(Ca) 또는 마그네슘(Mg) 염인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 30항에 있어서, 지방산 유도체는 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 포함하는 지방산의 알칼리 또는 알칼리 금속염인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 32항에 있어서, 지방산 유도체는 라우르산의 알칼리 또는 알칼리 금속염인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 28항에 있어서, 지방산 유도체는 포타슘 라우레이트인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 28항에 있어서, 지방산 유도체는 부틸 에스테르, 에틸 에스테르, 메틸 에스테르, 지방 아실-조효소 A, 자당 에스테르 및 모노글리세리드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 에스테르인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 35항에 있어서, 모노글리세리드는 에스테르 또는 에테르 결합에 의해 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 갖는 하나 이상의 지방산에 부착되거나 또는 8개 내지 16개의 탄소 원자들을 갖는 하나 이상의 포화 또는 불포화 지방 알코올에 부착된 글리세롤 부분인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 다음을 포함하는, 조성물을 만드는 방법:(a) 1개 내지 6개의 탄소 원자들을 포함하는 저급 알칸올을 제공하는 단계;(b) 지방산을 제공하는 단계;(c) 알칼리화제를 제공하는 단계; 및(d) 저급 알칸올, 지방산 및 알칼리화제를 혼합하여 조성물을 제공하는 단계, 여기서 조성물은 14 또는 그 이상의 pH를 갖고, 지방산 유도체는 조성물의 0.1중량% 와 25중량% 사이임.
- 제 32항에 있어서, 저급 알칸올은 에탄올인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 32항에 있어서, 지방산은 4개 내지 22개의 탄소 원자들을 포함하는 지방산인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 32항에 있어서, 지방산은 라우르산인 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 32항에 있어서, 알칼리화제는 알칼리 금속 수산화물, 알칼리 토금속 수산화물, 알칼리 금속 탄산염 또는 탄산 수소염 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
- 제 32항에 있어서, 알칼리화제는 수산화 암모늄, 수산화 알루미늄, 수산화 나트륨, 수산화 칼륨, 수산화 리튬, 수산화 칼슘, 수산화 마그네슘, 탄산 나트륨, 탄산 수소 나트륨 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물을 만드는 방법.
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