KR20090011226A - Composition of skin external application containing green tea flower essential oil - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 녹차꽃(Camellia sinensis var . sinenis cv. Shuixian and Maoxie) 정유(精油)를 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물로서, 보다 상세하게는 녹차꽃 향취성분을 포함하는 녹차꽃 정유(精油)를 함유함으로써 자외선에 의해 생성되는 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)을 제거하여 세포 손상을 방지하며 피부의 염증을 감소시켜 노화를 지연시키고, 주름 생성을 억제하고 피부 탄력 저하를 방지할 수 있는 조성물에 관한 것이다.The present invention green tea flower ( Camellia sinensis var . sinenis cv. Shuixian and Maoxie) A skin external preparation composition containing essential oils as an active ingredient, more specifically, reactive oxygen species generated by ultraviolet rays by containing green tea flower essential oils containing green tea flower fragrance ingredients. The present invention relates to a composition capable of preventing cellular damage by removing species, ROS), reducing inflammation of the skin, delaying aging, inhibiting wrinkle formation, and preventing skin elasticity.
피부는 인체의 일차 방어막으로서 온도 및 습도의 변화, 자외선, 공해물질과 같은 외부환경의 자극으로부터 체내의 기관을 보호해 주는 기능을 한다. 그러나, 내적으로는 나이가 들어감에 따라 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되고, 외적으로는 오존층 파괴와 같은 환 경오염으로 인한 자외선, 자유 라디칼 및 활성산소의 증가로 인하여 발생하는 물리적, 화학적 자극 및 스트레스로 인해 피부의 정상기능이 약화되고 노화가 촉진되며 색소 침착이 일어나게 된다. 이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위해서, 기존에 알려진 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부노화를 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔다. The skin is the body's primary barrier, protecting body organs from changes in temperature and humidity, ultraviolet rays, and pollutants. However, internally, as hormones age, the secretion of various hormones that regulate metabolism decreases, and the function and activity of immune cells decreases, resulting in decreased biosynthesis of immune proteins and bioconstituent proteins necessary for living organisms. For example, physical and chemical irritation and stress caused by an increase in ultraviolet rays, free radicals and free radicals due to environmental pollution such as ozone layer destruction, weaken the normal function of the skin, promote aging and pigmentation. In order to prevent this phenomenon and maintain a healthier and more beautiful skin, by using physiologically active substances obtained from various known animals, plants, microorganisms, etc. in cosmetics, it maintains the unique function of the skin and activates skin cells. Efforts have been made to effectively inhibit aging.
녹차나무(Camellia sinensis var . sinenis cv. Shuixian and Maoxie)의 잎은 오래 전부터 관심을 가지고 녹차 추출물과 각 성분들을 중요하게 이용해 왔으며, 녹차 추출물 및 녹차의 성분인 카테킨류에 대하여서는 피부 노화에 대한 효능들이 많이 밝혀져 있다. 그러나 녹차꽃은 효용 가치가 알려져 있지 않고 녹차잎의 생산에 도움이 되지 않으므로 거의 폐기하는 실정이었다. 최근 녹차꽃은 특유의 신선한 향취를 지녀 향료식물로서의 가치가 주목되어 뛰어난 녹차꽃의 향취를 재현한 항료 조성물이 개발되기 시작하였다(한국특허 제 10-0645879호: 녹차꽃의 향취를 재현한 향료 조성물{Perfume composition for expressing the fragrance of Green tea flower}). 그러나 아직도 녹차꽃 정유(精油)(Tea flower essential oil)의 피부주름 개선, 탄력 개선, 미세 염증 제어 피부 보습 강화등의 피부 효능에 대하여서는 알려지지 않은 상황이며 이에 대한 연구도 미흡하다.Green Tea Tree ( Camellia) sinensis var . sinenis cv. The leaves of Shuixian and Maoxie have been interested for a long time and have used green tea extract and each component importantly, and the catechins, which are a component of green tea extract and green tea, have many effects on skin aging. However, green tea flowers are not known for their useful value and do not help the production of green tea leaves. Recently, green tea flowers have a distinctive fresh scent, and the value as a flavoring plant has attracted attention, and a pharmaceutical composition that reproduces the scent of green tea flowers has begun to be developed (Korean Patent No. 10-0645879: Flavor Composition Reproducing Scent of Green Tea Flower). {Perfume composition for expressing the fragrance of Green tea flower}). However, it is still unknown about the skin efficacy of tea flower essential oil (Tea flower essential oil), such as improving the wrinkles of the skin, improve elasticity, strengthen the skin moisturizing control of micro-inflammation.
이에, 본 발명자들은 외부의 유해 환경이나 자외선으로부터 피부를 보호하고 피부 노화를 지연하는 성분들에 대한 연구를 통하여, 피부 외용제 조성물에 유효성분으로 녹차꽃 정유(精油)를 포함하는 경우 자외선에 의해서 생성되는 활성산소종(ROS)을 제거하고 외부 자극에 의해서 생성되는 미세 염증을 제어함으로써 피부 세포를 보호하고 피부 노화를 지연시켜 주름 생성과 피부 탄력 저하를 억제하고 각질 형성 세포의 분화를 촉진하면서 천연 보습인자 생성을 촉진하여 피부 보습을 강화하고 색소 침착을 줄여줌을 발견하였다. Thus, the present inventors, through the study of ingredients that protect the skin from external harmful environment or ultraviolet rays and delay skin aging, when the green tea flower essential oil contains the essential oil (精油) as an active ingredient in the skin external preparation composition is produced by ultraviolet rays Natural moisturizing while eliminating reactive oxygen species (ROS) and controlling fine inflammation produced by external stimuli, protecting skin cells, delaying skin aging, suppressing wrinkle formation and skin elasticity and promoting differentiation of keratinocytes It has been found to promote factor production, enhancing skin moisturization and reducing pigmentation.
결국, 본 발명의 목적은 녹차꽃 정유를 함유하여 피부 노화를 억제하고 피부 보습을 강화할 뿐만 아니라 전반적으로 피부의 상태를 개선할 수 있는 피부외용제 조성물을 제공하는 것이다.After all, it is an object of the present invention to provide a skin external preparation composition containing green tea flower essential oil to inhibit skin aging and enhance skin moisturizing as well as to improve the condition of the skin as a whole.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 녹차꽃 정유(精油)를 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a skin external preparation composition containing the green tea flower essential oil (精油) as an active ingredient.
본 발명에 있어서 상기 녹차꽃 정유(정유)는 녹차꽃을 용제 추출 후 수증기 증류법으로 얻어진 향기성분임을 특징으로 하며, 상기 녹차꽃 향기성분은 4,8-디메칠-1,3(E),7-노나트리엔(E-4,8-dimethyl-1,3,7-nonatriene) 및 라일락알코올(lilac alcohol)을 주요성분으로 함유한다.In the present invention, the green tea flower essential oil (essential oil) is a fragrance component obtained by steam distillation after extracting the green tea flower, and the green tea flower fragrance component is 4,8-dimethyl-1,3 (E), 7 Nonatriene (E-4,8-dimethyl-1,3,7-nonatriene) and lilac alcohol (lilac alcohol) is the main ingredient.
또한, 상기 녹차꽃 정유(精油)는 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~30.0중량% 함유된다. In addition, the tea flower essential oil (精油) is contained 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the composition.
본 발명에서, 상기 조성물은 활성산소종(reactive oxygen species; ROS)을 제거하는 것임을 특징으로 할 수 있다.In the present invention, the composition may be characterized in that to remove the reactive oxygen species (ROS).
또한 본 발명은 녹차꽃 정유(精油)를 유효성분으로 함유하는 피부 노화방지용 피부 외용제 조성물을 제공한다. In another aspect, the present invention provides a skin external composition for preventing skin aging containing green tea flower essential oil (精油) as an active ingredient.
또한, 본 발명에 따른 녹차꽃 정유를 함유하는 피부 외용제 조성물은 피부노화방지, 피부 염증 예방 및 개선, 피부 주름 형성 예방 및 개선, 피부 탄력 개선, 피부 미백, 피부 보습의 효과가 있다.In addition, the external composition for skin containing the green tea flower essential oil according to the present invention has the effect of preventing skin aging, preventing and improving skin inflammation, preventing and improving skin wrinkle formation, improving skin elasticity, skin whitening, and skin moisturizing.
본 발명의 녹차꽃 정유(精油, essential oil)를 함유한 피부 외용제 조성물은 피부 세포를 보호하고 주름을 개선하고 피부 탄력 저하, 색소 침착 등을 억제하여 피부 노화를 지연시키는 효과가 우수하고 피부 보습을 강화하는 효과가 우수하다. The external composition for skin containing the essential oil of green tea flowers of the present invention protects skin cells, improves wrinkles, suppresses skin elasticity, pigmentation, etc., and has excellent effects of delaying skin aging and moisturizing the skin. The strengthening effect is excellent.
본 발명의 피부 외용제 조성물은 녹차꽃 정유(精油)를 유효성분으로 함유한다.The external preparation composition for skin of the present invention contains green tea flower essential oil (精油) as an active ingredient.
본 발명에서 사용된 녹차꽃 정유(精油)는 녹차꽃 정유의 향기성분을 함유하 는 녹차꽃 추출물로서, 녹차꽃을 용제추출한 후 수증기 증류법를 통하여 얻은 오일 성분으로 다른 정유에 비하여 4,8-디메칠-1,3(E),7-노나트리엔(E-4,8-dimethyl-1,3,7-nonatriene) 및 라일락알코올(lilac alcohol)을 함유하는 특유의 향취 및 효능을 제공하는 정유(精油)를 칭한다. Green tea flower essential oil used in the present invention (精油) is a green tea flower extract containing the fragrance component of the green tea flower essential oil, the oil component obtained by steam distillation after extracting the green tea flower 4,8- dimethyl Essential oils that provide a distinctive flavor and potency, containing -1,3 (E), 7-nonatriene and lilac alcohol精油) is called.
상기 녹차꽃 정유(精油)는 상기 두 가지 특이 성분 이외에도 장미 정유나 제라니움 정유 등에도 포함되어 있는 아세토페논(acetophenone), 알파-메칠벤질알코올(α-methylbenzyl alcohol), 2-페닐에틸알코올(2-phenylethyl alcohol), 벤질알코올(benzyl alcohol) 등의 향기성분들을 함유한다.The green tea flower essential oil (精油) is acetophenone (acetophenone), alpha-methylbenzyl alcohol (α-methylbenzyl alcohol), 2-phenylethyl alcohol (2-phenylethyl alcohol), which are included in the essential oils such as rose essential oil or geranium in addition to the two specific components alcohol) and benzyl alcohol.
녹차꽃 정유((精油)를 수득하는 방법은 하기와 같다. 그러나, 본 발명에서의 녹차꽃 정유(精油)는 녹차꽃을 이용하는 것을 목적으로 하여 그 추출 방법에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 필요와 목적에 따라 변할 수 있다.The method for obtaining green tea flower essential oil is as follows: However, the green tea flower essential oil in the present invention is not particularly limited in its extraction method for the purpose of using green tea flowers. It can change depending on the purpose.
제주도 서광다원에 피어있는 녹차꽃 720g을 따서 1리터짜리 삼각플라스크 3개에 나눈 다음 꽃들이 완전히 잠기도록 에틸 에테르(Ethyl Ether, 순도 99.0%, Fisher Scientific) 1.5리터를 붓고 4시간 15분 동안 침적시켰다. 침적물을 아드방테크 2번 여과지(Advantec No.2, 지름 185mm)로 여과 후 꽃은 버리고, 추출물은 무수황산나트륨(Na2SO4 , Sodium Sulfate, 순도 99.7%, Sigma Aldrich) 100g을 사용하여 수분을 제거하고, 다시 아드방테크 2번 여과지를 이용해서 여과했다. 그런 다음 38℃의 물중탕에서 용제인 에틸 에테르를 휘발시키고 잔류물을 얻었다. 이 잔류물에 증류수 100ml를 가하고 온도를 30℃로 유지하면서 다시 감압수증기증류를 실시하여 13.2mg의 향기농축물을 얻었다. 이 향기농축물을 분석을 위해 오염되지 않은 유리병에 담아 뚜껑을 닫은 다음 밀봉해서 냉장고에 보관했다.720 g of green tea flowers in Jeju Island Seogwang Tea Garden were divided into three 1 liter triangle flasks, and 1.5 liters of ethyl ether (99.0% purity, Fisher Scientific) were poured into the flowers so that they were completely submerged and soaked for 4 hours and 15 minutes. . Deposits the ad room Tech then filtered through a No. 2 filter paper (Advantec No.2, diameter 185mm) flowers was discarded, extract with anhydrous sodium sulfate (Na 2 SO 4, Sodium Sulfate, purity 99.7%, Sigma Aldrich) 100g of water It removed and filtered using Advantech No. 2 filter paper again. Then, the solvent ethyl ether was volatilized in a water bath at 38 ° C. to obtain a residue. 100 ml of distilled water was added to the residue, followed by steam distillation under reduced pressure while maintaining the temperature at 30 占 폚 to obtain 13.2 mg of a concentrated concentrate. The fragrance concentrate was placed in an uncontaminated glass jar for analysis, closed and sealed and stored in the refrigerator.
용제인 에틸 에테르를 휘발시키고 잔류물을 얻었다. 이 잔류물에 증류수 100ml를 가하고 온도를 30℃로 유지하면서 다시 감압수증기증류를 실시하여 13.2mg의 향기농축물을 얻었다.Ethyl ether, solvent, was volatilized to give a residue. 100 ml of distilled water was added to the residue, followed by steam distillation under reduced pressure while maintaining the temperature at 30 占 폚 to obtain 13.2 mg of a concentrated concentrate.
본 발명에서 목적하는 효과를 얻기 위하여 상기 녹차꽃 정유(精油)는 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~30.0중량% 함유된다. 성분의 함량이 0.0001중량% 미만이면 활성성분으로서의 작용을 기대하기 어려우며, 함량이 30.0중량%를 초과하면 제형 안정성에 문제가 생길 수 있다.In order to obtain the desired effect in the present invention, the green tea flower essential oil (精油) is contained in 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the composition. If the content of the component is less than 0.0001% by weight it is difficult to expect to act as an active ingredient, if the content exceeds 30.0% by weight may cause problems in formulation stability.
본 발명에 따라 녹차꽃 정유를 함유하는 피부 외용제 조성물은 자외선에 의해 생성되는 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)을 제거하여 해독작용을 함으로써 피부의 상태를 개선하는 효과가 있다. According to the present invention, the external composition for skin containing the essential oil of green tea flower has an effect of improving the condition of the skin by removing the reactive oxygen species (ROS) generated by ultraviolet rays and having a detoxifying effect.
또한, 본 발명에 따른 녹차꽃 정유를 함유하는 피부 외용제 조성물은 피부노화방지, 피부 염증 예방 및 개선, 피부 주름 형성 예방 및 개선, 피부 탄력 개선, 피부 미백, 피부 보습의 효과가 있다.In addition, the external composition for skin containing the green tea flower essential oil according to the present invention has the effect of preventing skin aging, preventing and improving skin inflammation, preventing and improving skin wrinkle formation, improving skin elasticity, skin whitening, and skin moisturizing.
본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 에센스 또는 피부 점착타입 화장료의 제형을 갖는 화장료, 또는 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투여형 화장료로 제형화 될 수 있다.The external preparation composition for skin according to the present invention is not particularly limited in the formulation, for example, a cosmetic having a formulation of softening water, nourishing cosmetics, massage cream, nourishing cream, pack, gel, essence or skin adhesive cosmetic, Or in transdermal dosage forms such as lotions, ointments, gels, creams, patches or sprays.
또한, 피부 외용제 조성물의 각 제형에 있어서, 상기한 필수 성분 이외의 다 른 성분들은 기타 피부 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 선정하여 배합할 수 있다.In addition, in each formulation of the external preparation composition for skin, other components than the essential ingredients described above may be selected and blended by those skilled in the art without difficulty according to the formulation or purpose of use of the external preparation for skin.
이하, 시험예 및 실시예를 들어 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to test examples and examples.
[참고예 1] 녹차꽃 정유(精油)의 제조 및 성분의 동정 Reference Example 1 Preparation of Green Tea Flower Essential Oil and Identification of Ingredients
녹차꽃 정유(精油, essential oil)를 추출하기 위해 제주도 서광다원에 피어있는 녹차꽃 720g을 따서 1리터짜리 삼각플라스크 3개에 나눈 다음 꽃들이 완전히 잠기도록 에틸 에테르(Ethyl Ether, 순도 99.0%, Fisher Scientific) 1.5리터를 붓고 4시간 15분 동안 침적시켰다. 침적물을 아드방테크 2번 여과지(Advantec No.2, 지름 185mm)로 여과 후 꽃은 버리고, 추출물은 무수황산나트륨(Na2SO4 , Sodium Sulfate, 순도 99.7%, Sigma Aldrich) 100g을 사용하여 수분을 제거한 후, 다시 아드방테크 2번 여과지를 이용해서 여과했다. 그런 다음 38℃의 물중탕에서 용제인 에틸 에테르를 휘발시키고, 다시 감압수증기증류를 실시하여 13.2mg의 향기농축물을 얻었다. 이 향기농축물을 분석을 위해 오염되지 않은 유리병에 담아 뚜껑을 닫은 다음 밀봉해서 냉장고에 보관했다.To extract essential oils, 720g of green tea flowers in Seogwang Dawon, Jeju Island, were divided into three 1-liter Erlenmeyer flasks and ethyl ether (99.9% purity) to immerse the flowers completely. Scientific) 1.5 liters were poured and soaked for 4 hours and 15 minutes. Deposits the ad room Tech then filtered through a No. 2 filter paper (Advantec No.2, diameter 185mm) flowers was discarded, extract with anhydrous sodium sulfate (Na 2 SO 4, Sodium Sulfate, purity 99.7%, Sigma Aldrich) 100g of water After removing, the resultant was filtered again using Advantech No. 2 filter paper. Then, ethyl ether as a solvent was evaporated in a water bath at 38 ° C., and vacuum distillation was carried out again to obtain 13.2 mg of a concentrated concentrate. The fragrance concentrate was placed in an uncontaminated glass jar for analysis, closed and sealed and stored in the refrigerator.
[참고예 2] 녹차잎 추출물의 제조Reference Example 2 Preparation of Green Tea Leaf Extract
제주도 서광다원에서 얻은 녹차잎 1㎏을 헥산 혹은 이와 유사한 유기용매 5L 를 이용하여 추출하고 유기용매 층을 분리하여 제거하였다. 위 공정을 3회 이상 반복하여 오일을 완전히 제거한 녹차잎를 얻었다. 오일이 제거된 녹차잎에 물과 물을 포함한 유기용매(에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 크로로포름 등) 또는 유기용매 5L를 넣고, 3회 상온 추출한 후, 15℃에서 하루 동안 방치하여 침적시켰다. 위 공정을 2회 반복하여 추출액을 얻었으며, 추출액을 아드방테크 2번 여과지(Advantec No.2, 지름 185mm)로 여과한 후 그 여과액을 40℃ 이하의 온도를 유지하는 진공 농축기에서 농축하여 건고물 89g을 얻었다.1 kg of green tea leaves obtained from Seogwang Dawon in Jeju Island were extracted using 5L of hexane or similar organic solvent, and the organic solvent layer was separated and removed. The above process was repeated three more times to obtain green tea leaves from which the oil was completely removed. 5 liters of organic solvent (ethanol, methanol, butanol, ether, ethyl acetate, chloroform, etc.) or organic solvent containing water and water was added to the green tea leaves, and the mixture was extracted at room temperature three times and left at 15 ° C. for one day. Was deposited. The above process was repeated twice to obtain an extract, and the extract was filtered through Advantec No. 2 filter paper (Advantec No. 2, diameter 185 mm), and the filtrate was concentrated in a vacuum concentrator maintaining a temperature of 40 ° C. or lower. 89 g of dried material was obtained.
[참고예 3] 녹차꽃 추출물의 제조Reference Example 3 Preparation of Green Tea Flower Extract
녹차꽃 추출물을 추출하기 위해 제주도 서광다원에 피어있는 녹차꽃 1Kg을 따서 에탄올 혹은 이와 유사한 유기용매 3L를 붓고 15시간 동안 침적시켰다. 침적물을 아드방테크 2번 여과지(Advantec No.2, 지름 185mm)로 여과 후 꽃은 버리고, 그 여과액을 40℃ 이하의 온도를 유지하는 진공 농축기에서 농축하여 건고물 12.5g을 얻었다.To extract the green tea flower extract, 3L of ethanol or a similar organic solvent was poured after 1Kg of green tea flowers blooming in Seogwang Dawon, Jeju Island, and deposited for 15 hours. The precipitate was filtered through Advantec No. 2 filter paper (Advantec No. 2, diameter 185 mm), and the flowers were discarded. The filtrate was concentrated in a vacuum concentrator maintaining a temperature of 40 ° C. or lower to obtain 12.5 g of dried matter.
[분석 예 1] Analysis Example 1
참고예 1에서 얻어진 녹차꽃 정유(精油)를 GC 주입구에 주입하고, GC-MS 분석을 행하였다. GC-MS 분석조건은 다음과 같다.The green tea flower essential oil obtained in Reference Example 1 was injected into the GC inlet, and GC-MS analysis was performed. GC-MS analysis conditions are as follows.
분 석 조 건Analysis condition
. 분석기기: HP 6890 II GC . 검출기: HP 5973 MSD. Analyzer: HP 6890 II GC. Detector: HP 5973 MSD
. Column: PEG-20M(60mX0.25mmX0.25um) . Carrier Gas: He. Column: PEG-20M (60mX0.25mmX0.25um). Carrier Gas: He
. Injection Temperature: 250 ℃ . Detector Temperature: 280 ℃. Injection Temperature: 250 ° C. Detector Temperature: 280 ℃
. Oven Temperature: 70℃~220℃(3℃/min) . Ionization Voltage : 70eV. Oven Temperature: 70 ° C-220 ° C (3 ° C / min). Ionization Voltage: 70eV
. Injection Volume : 1ml . Split Ratio : 1:40. Injection Volume: 1ml. Split Ratio: 1:40
그 결과, 수증기 증류법에 의해 얻어진 녹차꽃 정유(精油)의 향기성분은 하기 표 1과 같다.As a result, the fragrance components of the green tea flower essential oil obtained by the steam distillation method are shown in Table 1 below.
표 1에서 보는 바와 같이, 녹차꽃 정유(精油)는 독특한 성분으로서 4,8-디메칠-1,3(E),7-노나트리엔(E-4,8-dimethyl-1,3,7-nonatriene) 및 라일락알코올(lilac alcohol)을 함유하고, 다른 일반적으로 통용되는 정유인 장미 정유나 제라니움 정유 등과 구별되는 아세토페논, 알파-메칠벤질 알코올, 2-페닐에틸 알코올 등을 주요 향기성분으로 하고 있다. 이들 주요성분은 전체의 64.91%를 차지한다. As shown in Table 1, green tea flower essential oil is a unique ingredient, 4,8-dimethyl-1,3 (E), 7-nonatriene (E-4,8-dimethyl-1,3,7). It contains acetophenone, alpha-methylbenzyl alcohol and 2-phenylethyl alcohol, which contain nonatriene) and lilac alcohol, and are distinguished from other commonly used rose essential oils such as rose essential oil and geranium essential oil. . These major components make up 64.91% of the total.
[시험예 1] 자외선에 의한 활성산소종(reactive oxygen species, ROS) 생성 억제 효능 측정Test Example 1 Measurement of Inhibition Effect of Reactive Oxygen Species (ROS) Formation by UV Light
실험에 사용한 세포주는 독일암연구센터의 Dr. Fusenig로부터 분양받은 해캣 세포주(Human kerationocyte HaCaT cell line)로 한 공(well)당 2×104개의 농도로 형광 측정용 96공 평판배양기에 37℃, 5% CO2 조건에서 1일간 배양하였다. 참고예 1로부터 수득한 녹차꽃 정유(精油)와 효능 비교를 위해서 참고예 2의 녹차잎 단순 추출물과 참고예 3의 녹차꽃 단순 추출물을 하기 표 2와 같이 24시간 처리하였다. The cell line used in the experiment was based on the results of Dr. Human kerationocyte HaCaT cell line supplied from Fusenig at 37 ° C and 5% CO 2 in a 96-hole plate incubator for fluorescence measurement at 2 x 10 4 concentrations per well Incubated for 1 day under conditions. For comparison with the effect of the green tea flower essential oil (精油) obtained from Reference Example 1, the green tea leaf simple extract of Reference Example 2 and the green tea flower simple extract of Reference Example 3 were treated for 24 hours as shown in Table 2 below.
HCSS(HEPES-buffered control salt solution)에 20μM로 준비된 DCFH-DA(2’,7-dichlorodihydro-fluorescein diacetate, Molecular Probes, Inc)를 100㎕ 가하고 37℃, 5% CO2 조건에서 20분간 배양하고 다시 HCSS로 세척하였다. 24시간 전처리 했던 동일한 시료를 포함하는 HCSS를 100㎕ 가한 후 초기에 활성산소종(ROS)으로 산화된 DCF(dichlorofluorescein)의 형광 강도를 형광플레이트 리더(Ex=485nm, Em=530nm)로 측정하였다. UVB(30mJ/cm2)를 처리하고 처리직후 및 처리 3시간까지의 형광 강도를 형광플레이트 리더(Ex=485nm, Em=530nm)로 측정하였다. 그 결과를 자외선으로 ROS 생성을 유도한 무처리 대조군(자외선 대조군)을 100으로 하여 비교치를 하기 표 2에 나타내었다.100 μl of DCFH-DA (2 ', 7-dichlorodihydro-fluorescein diacetate, Molecular Probes, Inc) prepared at 20 μM in HEPES-buffered control salt solution (HCSS) was added and incubated for 20 minutes at 37 ° C and 5% CO 2. Washed with HCSS. After adding 100 µl of HCSS containing the same sample, which was pretreated for 24 hours, the fluorescence intensity of DCF (dichlorofluorescein) oxidized with reactive oxygen species (ROS) was measured with a fluorescent plate reader (Ex = 485 nm, Em = 530 nm). UVB (30 mJ / cm 2 ) was treated and the fluorescence intensity immediately after treatment and up to 3 hours was measured with a fluorescence plate reader (Ex = 485 nm, Em = 530 nm). The results are shown in Table 2 below as a comparison of the non-treated control (ultraviolet control) that induced ROS generation with ultraviolet rays as 100.
상기 표 2로부터, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)는 자외선에 의한 활성산소종(ROS) 생성을 효과적으로 감소시킴을 확인하였다. 녹차잎 단순 추출물이나 녹차꽃 단순 추출물보다 그 효과가 우수하다 따라서, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)는 산화적 스트레스에 대하여 효과적으로 방어할 수 있으며 자외선뿐만 아니라 대기오염, 황사, 오존 등의 유해 환경으로부터 세포를 보호하는 해독 작용을 할 수 있음을 알 수 있다.From Table 2, it was confirmed that the green tea flower essential oil (精油) of the present invention effectively reduces the generation of reactive oxygen species (ROS) by ultraviolet rays. The effect is superior to the simple extract of green tea leaf or simple extract of green tea flower Therefore, the green tea flower essential oil of the present invention can effectively protect against oxidative stress and harmful environment such as air pollution, yellow sand, ozone as well as ultraviolet rays. It can be seen that it can act as a detoxifying effect to protect the cells from.
[시험예 2] 자외선에 의한 타입 I 콜라게나제(MMP-1)의 생합성 억제 효능 측정Test Example 2 Determination of Biosynthesis Inhibition Effect of Type I Collagenase (MMP-1) by Ultraviolet Rays
인체 섬유아세포를 104개의 농도로 48공 평판배양기에 배양하고, 24시간 후에 자외선 A를 15J/cm2로 조사한 다음, 참고예 1의 녹차꽃 정유(精油)와 효능 비교를 위해서 녹차잎 단순 추출물과 녹차꽃 단순 추출물을 하기 표 3와 같이 포함한 배지로 교체하였다. 배양 2일째 상등액을 수확해서(harvest) ELISA(AP biotech RPN2610) 방법을 사용하여 생성된 타입 I 콜라게나제의 양을 정량하였다. 그 결과는 자외선 대조군을 100으로 하여 비교치를 표 3에 나타내었다.Human fibroblasts were incubated in a 48-hole flat plate incubator at 10 4 concentrations, irradiated with UV A at 15 J / cm 2 after 24 hours, and then the green tea leaf simple extract for comparison with the essential oil of reference flower 1 And the green tea flower simple extract was replaced with a medium containing as shown in Table 3. The supernatant was harvested on day 2 of culture and the amount of type I collagenase produced was quantified using ELISA (AP biotech RPN2610) method. The results are shown in Table 3 comparing the UV control group to 100.
상기 표 2로부터, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)는 자외선에 의한 타입 I 콜라게나제의 생합성을 효과적으로 감소시키며 단순 추출한 녹차잎 추출물과 녹차꽃 추출물과 비교했을 때 그 효과가 더 큼을 알 수 있다. 따라서, 콜라게나제의 발현으로 인하여 피부내에서 정상적으로 생성된 콜라겐이 분해되어 생성되는 주름을 예방 또는 억제할 수 있음을 알 수 있다.From Table 2, it can be seen that the green tea flower essential oil of the present invention effectively reduces the biosynthesis of type I collagenase by ultraviolet rays and has a greater effect when compared to the green tea leaf extract and the green tea flower extract that are simply extracted. . Therefore, it can be seen that collagen generated normally in the skin due to the expression of collagenase can be prevented or suppressed from wrinkles generated.
[시험예 3] 자외선에 의한 종양괴사인자알파의 생합성 억제 효능 측정Experiment 3 Measurement of Biosynthesis Inhibition Effect of Tumor Necrosis Factor Alpha by Ultraviolet Rays
인체 각질형성세포를 105개의 농도로 12공 평판배양기에 배양하고, 24시간 후에 자외선 B를 30mJ/cm2로 조사한 후, 참고예 1의 녹차꽃 정유(精油)와 효능 비교를 위해서 녹차잎 단순 추출물과 녹차꽃 단순 추출물을 하기 표 4와 같이 포함한 배지로 교체하였다. 배양 6-24시간 후 세포를 수확해서(harvest) ELISA(Pharmingen 555212) 방법을 사용하여 생성된 종양괴사인자알파(TNF-α)의 양을 정량하였다. 종양괴사인자알파는 피부의 미세염증반응을 측정할 수 있는 지표로 피부 기질 물질의 감소 등을 매개하는 것으로 알려져 있다. 그 결과는 자외선 대조군을 100으로 하여 비교치를 하기 표 4에 나타내었다.Human keratinocytes were cultured in a 12-hole plate incubator at a concentration of 10 5 , and after 24 hours, irradiated with ultraviolet B at 30 mJ / cm 2 , the green tea leaf was simple for comparison with the essential oil of the green tea flower of Reference Example 1. Extract and green tea flower simple extract was replaced with a medium containing as shown in Table 4. Cells were harvested 6-24 hours after culture (harvest) to quantify the amount of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) produced using the ELISA (Pharmingen 555212) method. Tumor necrosis factor alpha is an indicator for measuring the microinflammatory response of skin and is known to mediate the reduction of skin matrix material. The results are shown in Table 4 below with a UV control of 100.
상기 표 4로부터, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)는 자외선에 의한 종양괴사인자알파의 생합성을 효과적으로 감소시킴을 확인하였으며, 녹차잎 단순 추출물과 녹차꽃 단순 추출물과 비교할 때 그 효과가 더 큰 것을 알 수 있다. 따라서, 자외선으로 인해 발생할 수 있는 피부 미세 염증, 이러한 피부 미세 염증으로 인한 피부 기질 물질의 감소, 탄력 저하, 주름 형성 등을 효과적으로 예방 또는 개선할 수 있음을 알 수 있다. From Table 4, it was confirmed that the green tea flower essential oil of the present invention effectively reduces the biosynthesis of tumor necrosis factor alpha by ultraviolet rays, the effect is greater when compared to the green tea leaf simple extract and green tea flower simple extract. Able to know. Therefore, it can be seen that it is possible to effectively prevent or improve skin micro-inflammation that may occur due to ultraviolet rays, reduction of skin matrix material due to such skin micro-inflammatory, decrease in elasticity, wrinkle formation and the like.
[시험예 4] 피부세포의 콜라겐 생합성 효능 측정Test Example 4 Measurement of Collagen Biosynthesis Efficacy of Skin Cells
인체 섬유아세포를 104 개의 농도로 48공 평판배양기에 배양한 후, 참고예 1의 녹차꽃 정유(精油)와 효능 비교를 위해서 녹차잎 단순 추출물과 녹차꽃 단순 추출물을 하기 표 5과 같이 포함한 배지로 교체하였다. 배양 24시간 후 상등액을 수확해서(harvest) ELISA (Takara MK101) 방법을 사용하여 생성된 프로콜라겐의 양을 정량하였다. 그 결과는 대조군을 100으로 하여 비교치를 하기 표 5에 나타내었다.After culturing human fibroblasts in a 48-hole flat plate incubator at a concentration of 10 4 , a medium containing the green tea leaf simple extract and the green tea flower simple extract as shown in Table 5 for the comparison of the efficacy with the green tea flower essential oil of Reference Example 1 Replaced with. After 24 hours of culture, the supernatant was harvested and the amount of procollagen produced was quantified using the ELISA (Takara MK101) method. The results are shown in Table 5 below, with the control as 100.
상기 표 5로부터, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)는 타입 I 콜라겐의 생합성을 효과적으로 증가시킴을 확인하였다. 따라서, 노화에 따라서 콜라겐 생성이 감소하는 피부에 정상적으로 새로운 콜라겐의 생성을 촉진하여서 주름을 예방 또는 억제할 수 있음을 알 수 있다.From Table 5, it was confirmed that the green tea flower essential oil (精油) of the present invention effectively increases the biosynthesis of type I collagen. Therefore, it can be seen that the normal collagen production of new collagen can be prevented or suppressed in the skin in which collagen production decreases with aging.
[시험예 5] 사람 피부 섬유아세포에서의 트로포엘라스틴 및 피브릴린 생성 측정Test Example 5 Measurement of Tropoelastin and Fibrillin Production in Human Skin Fibroblasts
인체 섬유아세포를 104 개의 농도로 48공 평판배양기에 배양한 후, 참고예 1의 녹차꽃 정유(精油)와 효능 비교를 위해서 녹차잎 단순 추출물과 녹차꽃 단순 추출물을 하기 표 6과 같이 포함한 배지로 교체하였다. 배양 24시간 후 상등액을 수확해서(harvest) 트로포엘라스틴 및 피브릴린을 정량하는 방법은 웨스턴 블럿 방법(Western blot)을 사용하였다. 그 결과는 이미지 분석 후에 대조군을 100으로 하여 비교치를 표 6에 나타내었다.After culturing human fibroblasts in a 48-hole flat plate incubator at a concentration of 10 4 , a medium containing the green tea leaf simple extract and the green tea flower simple extract as shown in Table 6 for the comparison of the efficacy with the green tea flower essential oil of Reference Example 1 Replaced with. After 24 hours of culture, the supernatant was harvested and Western blot was used to quantify tropoelastin and fibrin. The results are shown in Table 6 comparing the control to 100 after image analysis.
상기 표 6로부터, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)는 피부 탄력에 중요한 두 단백질인 트로포엘라스틴과 피브릴린 생합성을 효과적으로 증가시킴을 확인하였다. 따라서, 노화에 따라서 탄력 섬유가 약화된 피부에 정상적으로 새로운 탄력섬유 구성 단백질의 생성을 촉진하여서 피부 탄력을 유지하고 저하된 탄력을 강화시켜 줄 수 있음을 알 수 있다.From Table 6, it was confirmed that the green tea flower essential oil (精油) of the present invention effectively increases tropoelastin and fibrin biosynthesis, two proteins important for skin elasticity. Therefore, it can be seen that the elastic fibers are weakened according to aging to promote the production of new elastic fiber constituent proteins normally, thereby maintaining skin elasticity and strengthening the reduced elasticity.
[시험예 6] 인간 각질형성세포의 분화유도 시험Test Example 6 Differentiation Induction Test of Human Keratinocytes
피부장벽기능 및 피부 보습능을 확인하기 위하여, 흡광도를 이용한 시험으로 일차 배양한 인간의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 후, 참고예 1의 녹차꽃 정유(精油)와 효능 비교를 위해서 녹차잎 단순 추출물과 녹차꽃 단순 추출물을 하기 표 7과 같이 조성된 배양액에 첨가하여, 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이 세포를 수확(cell harvest)하여 PBS(phosphate buffered saline)로 세척한 뒤, 2% SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 3분간 소니케이션(sonication)을 수행하고 난 후, 10분간 끓였다. 이를 1200 rpm으로 30분간 원심 분리를 하여 분리한 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정하였다. In order to confirm the skin barrier function and skin moisturizing ability, the human keratinocytes cultured in the primary culture by the absorbance test were attached to the bottom of the culture flask, and then compared to the essential oils of tea flower essential oil of Reference Example 1 For the green tea leaf simple extract and green tea flower simple extract was added to the culture solution as shown in Table 7, the cells were incubated for 5 days until the growth of 70 ~ 80% of the floor area. The cells were harvested and washed with PBS (phosphate buffered saline), followed by 10 mM Tris-HCl (Tris-HCl) containing 2% Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) and 20 mM Dithiothreitol (DTT). , pH 7.4) 1ml was added to perform sonication for 3 minutes, and then boiled for 10 minutes. The precipitate was separated by centrifugation at 1200 rpm for 30 minutes and suspended in 1 ml of PBS to measure absorbance at 340 nm.
이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액 일부를 취하여 단백질 함량을 측정하여, 세포분화정도의 평가시 기준으로 삼았다. 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2 mM) 처리군을 각각 음성/양성 대조군으로 하고, 저칼슘농도에 시험물질을 첨가하여 실시한 시험 결과를 하기 표 7 에 나타내었다. Separately, a portion of the solution after the sonication was taken to measure the protein content, which was used as a reference when evaluating the degree of cell differentiation. Low calcium (0.03mM) treated group and high calcium (1.2 mM) treated group as a negative / positive control, respectively, and the test results performed by adding the test substance to the low calcium concentration is shown in Table 7 below.
상기 표 7에 나타난 바와 같이, 각질형성세포 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)의 양을 측정하여 세포분화 촉진효과를 비교한 결과 본 발명에 의한 녹차꽃 정유(精油)는 각질형성세포에서 분화를 촉진하는 것을 알 수 있다. 따라서 피부의 장벽기능을 강화하고 피부 보습능을 증진시킴을 알 수 있다.As shown in Table 7, the result of comparing the cell differentiation promoting effect by measuring the amount of CE (Cornified Envelop) produced during keratinocyte differentiation Green tea flower essential oil (精油) according to the present invention can be seen to promote differentiation in keratinocytes. Therefore, it can be seen that it enhances the barrier function of the skin and promotes skin moisturizing ability.
[시험예 7] RT-PCR 분석을 통한 필라그린(filaggrin)의 발현측정Test Example 7 Measurement of Filaggrin Expression by RT-PCR Analysis
실험에 사용한 세포주는 독일암연구센터의 Dr. Fusenig로부터 분양받은 해캣 세포주(Human kerationocyte HaCaT cell line)로서, 상기 세포를 60㎜ 디쉬에 1×105개로 분주하고 1일간 배양한 후, 참고예 1의 녹차꽃 정유(精油)와 효능 비교를 위해서 녹차잎 단순 추출물과 녹차꽃 단순 추출물을 하기 표 8과 같이 처리한 다음 24시간 배양하였다. The cell line used in the experiment was based on the results of Dr. Human kerationocyte HaCaT cell line distributed from Fusenig, which were dispensed into 1 × 10 5 cells in 60 mm dishes and incubated for 1 day, followed by comparison with the essential oil of green tea flower of Reference Example 1 Green tea leaf simple extract and green tea flower simple extract was treated as shown in Table 8 and then incubated for 24 hours.
상기의 방법으로 배양 및 시험한 세포로부터 트리졸(Trizol, Gibco Laboratories, USA)을 이용하여 total RNA를 추출한 다음, one step RNA PCR kit (AMV)(Takara Bio Inc., Japan)에서 제공되는 방법에 준하여 RT-PCR(reverse transcriptional polymerase chain reaction) 분석을 시행하였다. 이때, 프라이머(primer)로는 필라그린(filaggrin)에 대한 프라이머(바이오니아사, 한국)를 사용하였으며, 내부 대조군(internal control)으로는 베타-액틴(β-actin)을 이용하여 발현량을 비교하였다. 이미지 분석 후에 대조군을 100으로 하여 비교치를 하기 표 8에 나타내었다.Total RNA was extracted from the cells cultured and tested by the above method using Trizol (Trizol, Gibco Laboratories, USA), and then the method provided by one step RNA PCR kit (AMV) (Takara Bio Inc., Japan). RT-PCR (reverse transcriptional polymerase chain reaction) analysis was performed. In this case, primers for filaggrin (Bionia, Korea) were used as primers, and beta-actin (β-actin) was used as an internal control to compare expression levels. After the image analysis, a comparison of the control group to 100 is shown in Table 8 below.
상기 표 8에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 녹차꽃 정유(精油)는 각질형성세포에서 필라그린의 발현을 촉진하는 것을 알 수 있다. 따라서 피부의 천연보습인자 생성을 촉진하고 피부 보습능을 강화함을 알 수 있다.As shown in Table 8, it can be seen that the green tea flower essential oil (精油) according to the present invention promotes the expression of filaggrin in keratinocytes. Therefore, it can be seen that it promotes the generation of natural moisturizing factor of the skin and strengthens the skin moisturizing ability.
[시험예 8] 쥐의 색소세포를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 측정Test Example 8 Measurement of Melanin Inhibitory Effect Using Pigment Cells
C57BL/6 마우스 유래의 쥐의 색소세포(Mel-Ab cell)를 24공 평판배양기에 105의 농도로 하여 세포를 배양하고 이틀째부터 3일 연속으로 하이드로퀴논, 참고예 1의 녹차꽃 정유(精油)를 시험물질로 가하여 배양하였다. 이때 사용하는 하이드로퀴논은 멜라닌 색소의 형성을 억제하는 성분으로 탈색 효과가 매우 강력한 성분이며, 상기 하이드로퀴논을 처리한 군은 양성대조군으로 사용하였다. 그 다음 배양액을 제거하고, PBS로 세척한 후, 1N 수산화나트륨으로 세포를 녹여 400nm에서 흡광도를 측정한 다음, 하기 수학식 1에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 9에 나타내었다(Dooley의 방법). C57BL / 6 mouse-derived pigment cells (Mel-Ab cells) in a 24-hole plate incubator at a concentration of 10 5 and cultured the cells, and the second day from the hydroquinone, green tea flower essential oil of Reference Example 1 (精油) Was added as a test substance and incubated. At this time, the hydroquinone used is a component that suppresses the formation of melanin pigment, a very strong component of the decolorizing effect, the group treated with the hydroquinone was used as a positive control group. Then, the culture medium was removed, washed with PBS, the cells were dissolved with 1N sodium hydroxide, the absorbance was measured at 400 nm, and the melanin production inhibition rate was calculated according to Equation 1 below, and the results are shown in Table 9 below. (Dooley's method).
상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)는 하이드로퀴논과 비교하여 볼 때 우수한 멜라닌 생성 억제율을 보이는 것을 확인하였다. 이를 통해 피부의 색소침착을 억제해줄 수 있음을 알 수 있어 피부 미백에 효과가 있음을 확인할 수 있었다. As shown in Table 9, the green tea flower essential oil (精油) of the present invention was confirmed to show an excellent melanin inhibition rate when compared with hydroquinone. Through this, it can be seen that the pigmentation of the skin can be suppressed, so that the effect on the skin whitening was confirmed.
[시험예 9] 주름 개선 효과 측정Test Example 9 Wrinkle Improvement Effect Measurement
본 발명의 조성물에 의한 사람에서의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 하기 표 10의 조성비에 따라 외용제를 영양크림의 제형으로 하여 실시예 1을 제조하였다. 하기 배합성분의 함량비의 단위는 중량%이다. In order to confirm the effect of improving wrinkles in humans by the composition of the present invention, Example 1 was prepared according to the formulation of the external preparation as a nutritional cream formulation. The unit of content ratio of the following compounding component is weight%.
상기 표 10의 비교예와 제조예 1의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 30대의 건강한 여성 80명을 각각 비교예 1, 제조예 1의 2개 군에 대해 20명씩 2조로 나누어 영양크림을 매일 1회씩 8주간 안면에 도포하게 한 후, 실리콘을 이용하여 레플리카를 떠서 주름의 상태를 피부측정기(visiometer, SV600, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하여 화상분석하였다. 그 결과는 하기 표 11에 나타내었다. 하기 표 11의 값은, 도포 8주 후의 각각의 변수(parameter)값에서 도포 전 변수 값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다.In order to confirm the wrinkle improvement effect of Comparative Example and Preparation Example 1 of Table 10 was evaluated as follows. Eighty healthy women in their thirties were divided into two groups of 20 people for each of the two groups of Comparative Example 1 and Preparation Example 1, and the nourishing cream was applied to the face once a day for 8 weeks. The condition was measured by a skin meter (visiometer, SV600, Courage + Khazaka electronic GmbH, Germany) for image analysis. The results are shown in Table 11 below. The values in Table 11 below represent the average of each parameter value after 8 weeks of application minus the parameter value before application.
R1 : 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값R1: difference between the highest and lowest of the wrinkle contour
R2 : 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균R2: Divide the wrinkle contours by 5 spaces, and then average the R1 values
R3 : 5개씩 나눈 R1값 중 최고 값R3: The highest value among the R1 values divided by five
R4 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값R4: The mean value of the baseline of the fold contour minus the top and valley values of each angle
R5 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 차이 값R5: Difference value of the baseline of the wrinkle contour line minus each wrinkle outline
상기 표 11에서 나타낸 바와 같이, 제조예 1의 외용제 조성물은 피부 주름 개선 효과가 아주 우수함을 알 수 있었다. 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)가 함유된 제조예 1은 비교예 1을 도포한 군에 비하여 주름 개선 효과가 있음을 알 수 있다. As shown in Table 11, the external preparation composition of Preparation Example 1 was found to have a very good skin wrinkle improvement effect. Preparation Example 1 containing the green tea flower essential oil (精油) of the present invention can be seen that there is a wrinkle improvement effect compared to the group to which Comparative Example 1 was applied.
[시험예 10] 피부 탄력 개선 효과 측정 Test Example 10 Measurement of Skin Elasticity Improvement Effect
본 발명의 조성물에 의한 사람에서의 피부 탄력 개선 효과를 확인하기 위하여 상기 시험예 9의 실시예 1과 비교예 1에 대하여 다음과 같이 평가하였다.In order to confirm the effect of improving skin elasticity in humans by the composition of the present invention, Example 1 and Comparative Example 1 of Test Example 9 were evaluated as follows.
30대의 건강한 여성 40명을 각각 비교예 1, 실시예 1의 2개 군에 대해 20명씩 2조로 나누어 외용제를 온도 24-26℃, 습도 75%의 조건에서 영양크림을 매일 2회씩 8주간 안면에 도포하게 한 후, 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 12에 나타내었다. 표 12의 결과값은 Cutometer SEM 575의 ΔR8(R8(왼쪽)-R8(오른쪽)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.40 healthy women in their 30s were divided into two groups of 20 people for the two groups of Comparative Example 1 and Example 1, and the external preparation was applied twice a day for 8 weeks on the face of nutrition cream at a temperature of 24-26 ° C and 75% humidity. After application, skin elasticity was measured using a skin elasticity measuring instrument (Cutometer SEM 575, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 12 below. The results in Table 12 are described as ΔR8 (R8 (left) -R8 (right)) values of Cutometer SEM 575, where R8 values represent the nature of skin viscoelasticity.
상기 표 12에 나타난 바와 같이, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)가 함유된 제조예 1은 비교예 1을 도포한 군에 비하여 피부 탄력성이 더 증가되었음을 알 수 있다.As shown in Table 12, Preparation Example 1 containing the green tea flower essential oil (精油) of the present invention can be seen that the skin elasticity is further increased compared to the group to which Comparative Example 1 was applied.
이와 별도로 시험을 종료한 시점에 시험 대상자들로 하여금 설문지를 작성하게 하여 기기적인 평가와 동시에 주관적인 효능 평가도 실시하였다. 그 결과는 하기 표 13에 나타내었다.Separately, at the end of the test, the subjects were asked to fill out a questionnaire, which was evaluated mechanically and subjectively. The results are shown in Table 13 below.
상기 표 13에서 나타난 바와 같이, 설문조사를 통해서도 본 발명에 의한 조성물인 제조예 1를 도포한 경우 피부탄력성이 개선됨을 확인할 수 있다.As shown in Table 13, it can be confirmed through the survey that the skin elasticity is improved when the Preparation Example 1, the composition according to the present invention is applied.
[시험예 11] 피부 보습 개선 효과 측정Test Example 11 Measurement of Skin Moisturizing Improvement
본 발명의 조성물에 의한 사람에서의 피부 보습 개선 효과를 확인하기 위하여 상기 시험예 9의 제조예 1과 비교예 1에 대하여 다음과 같이 평가하였다.In order to confirm the effect of improving skin moisturization in humans by the composition of the present invention, the following Preparation Example 1 and Comparative Example 1 of Test Example 9 were evaluated.
30대의 건강한 여성 40명을 각각 비교예 1, 실시예 1의 2개 군에 대해 20명씩 2조로 나누어 외용제를 온도 24-26℃, 습도 75%의 조건에서 영양크림을 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하게 한 후, 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점, 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대습도 40%)에서 코니오미터로 피부수분량을 측정하였다. 그 결과는 시험개시 직전에 측정한 코니오미터 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시하여 하기 표 14에 나타내었다.40 healthy women in their 30s were divided into two groups of 20 people for each of the two groups of Comparative Example 1 and Example 1, and the external preparation was applied twice a day for four weeks on the face of nutrition cream twice a day at a temperature of 24-26 ° C and a humidity of 75%. Constant temperature and constant humidity conditions (24 ° C, 40% relative humidity) after starting the application, after 1 week, 2 weeks, 4 weeks after application, and 2 weeks after the application was stopped (total 6 weeks). ), Skin moisture was measured with a conniometer. The results are shown in Table 14 below by displaying the percentage increase of the measured value after treatment for a period of time based on the Koniometer value measured immediately before the start of the test.
상기 표 14에 나타난 바와 같이, 본 발명의 녹차꽃 정유(精油)가 함유된 실시예 1은 비교예를 도포한 군에 비하여 피부 수분 보유량이 더 증가되었음을 확인하였다. 또한, 시험물질의 도포를 중지한 2주 후에 피부수분을 측정한 6주 경과 후의 수치가 1주~2주 경과후의 수치와 유사하게 나타나, 시험물질을 도포하지 않아도 어느 정도는 제조예 1의 도포에 의한 피부의 수분 보유량이 지속적으로 유지됨을 알 수 있었다. 따라서 본발명의 녹차꽃 정유(精油)는 피부 보습을 강화시킴을 알 수 있다.As shown in Table 14, Example 1 containing the green tea flower essential oil (精油) of the present invention was confirmed that the skin moisture retention amount was further increased compared to the group to which the comparative example was applied. Also, two weeks after the application of the test substance was stopped, the value after 6 weeks after the measurement of the skin moisture was similar to that after 1 to 2 weeks. It can be seen that the water retention of the skin is maintained continuously. Therefore, it can be seen that the tea flower essential oil of the present invention enhances skin moisturizing.
이하, 상기의 시험예를 근거로 하여, 본 발명에 의한 녹차꽃 정유(精油)를 함유하는 피부 외용제 조성물의 제형예를 들어 보다 구체적으로 설명하지만, 본 발명이 이들 제형예에만 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, although the formulation example of the skin external preparation composition containing the green tea flower essential oil by this invention is demonstrated more concretely based on said test example, this invention is not limited only to these formulation examples.
[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)Formulation Example 1 Flexible Cosmetic (Skin Lotion)
[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)Formulation Example 2 Nutritious Longevity (Milk Lotion)
[제형예 3] 영양크림Formulation Example 3 Nutrition Cream
[제형예 4] 마사지크림Formulation Example 4 Massage Cream
[제형예 5] 팩[Formulation Example 5] Pack
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