KR20080068077A

KR20080068077A - 섬유아세포 활성화제 및 섬유아세포 활성화 방법, 콜라겐합성 촉진제 및 콜라겐 합성 촉진 방법, 및 피부 노화방지제 및 피부 노화 방지 방법

Info

Publication number: KR20080068077A
Application number: KR1020087011790A
Authority: KR
Inventors: 아주마 와타나베; 카주유키 이마무라
Original assignee: 메루샹가부시키가이샤
Priority date: 2005-10-18
Filing date: 2006-10-17
Publication date: 2008-07-22
Also published as: CN101299991A; EP1949889A1; JPWO2007046353A1; WO2007046353A1; US20090297645A1

Abstract

본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 섬유아세포 활성화제, 포도 수액을 사용하는 섬유아세포 활성화 방법, 및 포도 수액을 섬유아세포 활성화제로서 사용하는 방법에 관한 것이다. 게다가 본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 합성 촉진제, 포도 수액을 사용하는 콜라겐 합성 촉진 방법, 및 포도 수액을 콜라겐 합성 촉진제로서 사용하는 방법에 관한 것이다. 게다가 본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 피부 노화 방지제, 포도 수액을 사용하는 피부 노화 방지 방법 및 포도 수액을 피부 노화 방지제로서 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 안전성이 높은 한편 유효한 노화 방지 수단을 제공한다.

섬유아세포, 포도 수액, 주름, 노화, 프롤린

Description

섬유아세포 활성화제 및 섬유아세포 활성화 방법, 콜라겐 합성 촉진제 및 콜라겐 합성 촉진 방법, 및 피부 노화 방지제 및 피부 노화 방지 방법{Fibroblast activator, method for activation of fibroblast, collagen synthesis promoter, method for promotion of collagen synthesis, skin aging-preventing agent, and method for prevention of aging of the skin}

본 발명은, 콜라겐의 분해, 합성에 관여하는 섬유아세포를 활성화하는 섬유아세포 활성화제 및 섬유아세포 활성화 방법, 콜라겐 합성 촉진제 및 콜라겐 합성 촉진 방법, 및 섬유아세포의 활성화 및 콜라겐 합성 촉진에 의해 피부의 노화를 방지할 수 있는 피부 노화 방지제 및 피부 노화 방지 방법에 관한 것이다.

일반적으로 피부 노화란, 연령 증가에 수반하는 생리적 노화와 자외선에 의한 광노화가 서로 영향을 주어 생기는 생리 현상이다. 피부에서는 20~30대 이후 연령과 함께 진피층에 있어 피부 탄력의 근원이 되는 콜라겐 등의 단백질이 감소한다. 또, 콜라겐을 만들어 내는 섬유아세포 자체의 힘도 쇠약해진다. 광노화는 피부에 자외선을 받으면 콜라겐을 분해하는 효소가 분비되어 이것에 의해 콜라겐이 부수어져 진피의 탄력이 없어지는 현상이다. 이러한 콜라겐량의 저하나 섬유아세포의 기능 저하는 주름이나 처짐 등의 노화 현상을 낳는 큰 요인이 되고 있다.

그래서, 종래, 노화 대책으로서 콜라겐 분해 효소(콜라게나제)의 활성을 억제하는 항노화 성분을 이용하는 것이 제안되고 있다. 예를 들면, 콜라게나제 저해제로서 어떤 종류의 버섯의 추출 엑기스(일본 특개평9-40552호 공보), 쑥속 식물의 추출 엑기스(일본 특개평10-194982호 공보), 포도 종자나 사과 종자, 호이초과식물전초의 추출 엑기스(일본 특개평11-71294호 공보), 타임속식물의 추출 엑기스(일본 특개평11-79970호 공보), 유칼립투스, 샐비어, 삼백초, 모란, 작약 등의 추출 엑기스(일본 특개평11-147833호 공보), 고추나물, 서양고추나물의 추출물(일본 특개평11-315008호 공보), 몬트브레티아 구근의 추출물(일본 특개2000-191512호 공보), 아선약, 감, 오이풀, 페퍼민트 등의 추출물(일본 특개2000-159631호 공보)을 이용하는 것이 제안되고 있다.

그러나, 콜라겐 분해 효소(콜라게나제)의 활성을 억제하는 것 만으로는, 자외선에 의한 콜라겐 분해(광노화)를 예방하는 것만으로, 이미 자외선이나 연령증가에 의해 진행된 피부의 노화를 효과적으로 개선할 수 없다.

보다 효과적으로 콜라겐의 합성 자체를 촉진하는 항노화 성분으로서는, 레티놀산(레티노인산, 비타민A 유도체)이 잘 알려져 있다(Methods in Enzymology, 1990, vol. 190, p352-360).

그러나, 레티놀산은 자극성이 강하고, 일본에서는 의사의 사용에 한정되고 있다. 그 때문에, 유효성이 높은 한편 안전한 노화 방지제의 개발이 절실히 요구되고 있다.

이러한 상황하에서, 본 발명은 안전성이 높은 한편 유효한 노화 방지 수단을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명자들은 상기 목적을 달성하기 위해서 열심히 검토를 거듭한 결과, 포도의 수액이 섬유아세포 활성화 작용 및 섬유아세포의 콜라겐 합성을 촉진하는 작용을 갖는 것을 찾아내어 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 섬유아세포 활성화제, 포도 수액을 사용하는 섬유아세포 활성화 방법, 및 포도 수액을 섬유아세포 활성화제로서 사용하는 방법에 관한 것이다.

또한 본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 합성 촉진제, 포도 수액을 사용하는 콜라겐 합성 촉진 방법, 및 포도 수액을 콜라겐 합성 촉진제로서 사용하는 방법에 관한 것이다.

또한 본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 피부 노화 방지제, 포도 수액을 사용하는 피부 노화 방지 방법 및 포도 수액을 피부 노화 방지제로서 사용하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에 의하면, 콜라겐의 합성을 촉진하여 피부의 노화를 효과적으로 방지할 수가 있다. 게다가 본 발명에 대해, 포도 수액에 프롤린을 병용하면, 포도 수액의 효과를 한층 더 강화할 수 있다.

이하, 본 발명에 대해 보다 상세하게 설명한다.

본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 섬유아세포 활성화제에 관한 것으로, 본 발명의 섬유아세포 활성화제는 포도 수액에 더하여 프롤린을 함유할 수도 있다.

본 발명은 포도 수액을 사용하는 섬유아세포 활성화 방법에 관한 것으로, 본 발명의 섬유아세포 활성화 방법은 포도 수액에 더하여 프롤린을 병용할 수도 있다.

본 발명은 포도 수액을 섬유아세포 활성화제로서 사용하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 사용 방법에서 섬유아세포 활성화제는 포도 수액에 더하여 프롤린을 함유할 수도 있다.

콜라겐은, 피부, 혈관, 힘줄, 이빨 등 대부분의 세포에 존재하는 섬유상의 단백질이며, 인체를 구성하는 전체 단백질의 약 30%를 차지한다. 인체는 60조개 이상의 세포로 구성되어 있지만, 세포나 세포가 구성하고 있는 장기는 세포 외 매트릭스에 의해 올바르게 형성되고 있다. 콜라겐은 이 세포 외 매트릭스를 구성하는 단백질이며, 세포의 토대가 되고 그 증식이나 기능의 유지에 도움이 되어, 연골이나 뼈에서는 기질 단백질의 구성 성분으로서 중요한 역할을 이루고 있다.

섬유아세포는 콜라겐을 생산하는 주된 세포의 하나이며, 섬유아세포로부터 분비된 콜라겐이 세포의 사이를 메워 세포간 매트릭스가 형성된다. 본 발명자들의 검토의 결과, 포도 수액이 이 섬유아세포 스스로를 활성화시키는 작용(섬유아세포 활성화 작용)을 가지는 것이 새롭게 발견되었다.

포도 수액에 프롤린을 병용함으로써, 포도 수액이 가지는 섬유아세포 활성화 효과를 한층 더 증강할 수가 있다. 프롤린은 L-프롤린인 것이 바람직하다.

본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 합성 촉진제에 관한 것으로, 본 발명의 콜라겐 합성 촉진제는 포도 수액에 더하여 프롤린을 함유할 수도 있다. 본 발명은 포도 수액을 사용하는 콜라겐 합성 촉진 방법에 관한 것으로, 본 발명의 콜라겐 합성 촉진 방법은 포도 수액에 더하여 프롤린을 병용할 수도 있다. 본 발명은 포도 수액을 콜라겐 합성 촉진제로서 사용하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 사용 방법에서 콜라겐 합성 촉진제는 포도 수액에 더하여 프롤린을 함유할 수도 있다.

전술과 같이, 포도 수액은 섬유아세포 활성화 작용을 가진다. 게다가 본 발명자들의 검토 결과, 포도 수액이 섬유아세포의 콜라겐 합성을 촉진하는 작용을 진다는 것도 새롭게 알아내었다. 본 발명의 콜라겐 합성 촉진제는, 이와 같이 섬유아세포 자체에 작용하여 세포 스스로를 활성화시키는 작용 및 섬유아세포의 콜라겐 합성을 촉진하는 작용을 가지는 포도 수액을 유효 성분으로서 포함함으로써, 콜라겐의 합성을 효과적으로 촉진할 수가 있다.

포도 수액에 프롤린을 병용함으로써, 포도 수액이 가지는 콜라겐 합성 촉진 효과를 한층 더 증강할 수가 있다. 프롤린은 L-프롤린인 것이 바람직하다.

본 발명은 포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 피부 노화 방지제에 관한 것으로, 본 발명의 피부 노화 방지제는 포도 수액에 더하여 프롤린을 함유할 수도 있다. 본 발명은 포도 수액을 사용하는 피부 노화 방지 방법에 관한 것으로, 본 발명의 피부 노화 방지 방법은 포도 수액에 더하여 프롤린을 병용할 수도 있다. 본 발명은 포도 수액을 피부 노화 방지제로서 사용하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 사용 방법에서 피부 노화 방지제는 포도 수액에 더하여 프롤린을 함유할 수도 있다.

콜라겐의 성질이나 상태의 변화, 섬유아세포의 작용은, 당김의 저하나 주름이라고 하는 피부의 노화에 깊게 관계되어 있다. 이것은, 수분을 제외한 피부의 약 80%가 콜라겐으로부터 성립되고 있는 것에 기인한다. 피부는 표면으로부터 순서대로, 표피, 진피, 피하조직의 3개의 층으로 나눌 수 있다. 콜라겐은 그 중의 진피에 존재하고, 그 대부분을 차지하여 직물과 같은 구조와 성질을 가진다. 피부에는 외계로부터 여러 가지 힘이 가해지기 때문에 강함과 유연함이 요구되지만, 이러한 성질을 지지하는 주된 기능을 하고 있는 것이 콜라겐이다. 콜라겐은 섬유아세포에 의해 그 분해나 합성이 제어되는 한편 섬유아세포의 힘으로 항상 팽팽하게 당겨진 상태로 유지되고 있다. 본 발명의 피부 노화 방지제는, 포도 수액을 유효 성분으로서 포함하여, 그 콜라겐 합성 촉진 작용이나 섬유아세포 활성화 작용에 의해 당김의 저하나 주름이라고 하는 피부의 노화를 효과적으로 방지할 수가 있다.

포도 수액에 프롤린을 병용함으로써, 포도 수액이 가지는 피부의 노화 효과를 한층 더 증강할 수가 있다. 프롤린은 L-프롤린인 것이 바람직하다.

포도 수액은 포도(Vitis과) 나무의 생체 내를 흐르는 식물도관수이다. 본 발명에 있어서 이용되는 포도 수액은 포도에 속하는 식물의 수액이면 특히 그 종속은 한정되지 않지만, 포도, 머루 등의 수액을 이용할 수 있다. 예를 들면, 포도로서는, 거봉, 갑주(甲州), 갑비로, 마스캇·베리 A, 델라웨어, 캠벨·어얼리, 피오네, 네오·마스캇, 나이아가라, 콩코드, 스튜벤, 카베르네·소비뇽, 피노·느와르, 메르로, 세미용, 리스링, 샬드네 등의 품종을 들 수가 있다. 또, 재배되고 있는 지역, 재배 방법 등도 한정되지 않지만, 그 중에서, 초봄의 발아기 전에, 전정 된 포도의 가지에서 일출하는 수액인 것이 바람직하다.

포도 수액은 포도의 줄기를 잘라 유출하는 수액을 채취하여 얻을 수 있다. 수액의 채취 방법은, 특히 한정되지 않고, 예를 들면, 작은 용기 등을 수액이 흐르도록 전정 된 부분에 달아 흘러나오는 수액을 채취하고, 이것을 방부제 등이 투입된 큰 보존 용기에 모으는 것에 의해 실시할 수가 있다. 한 번에 여러 위치로부터 수액을 채취할 수 있는 장치, 예를 들면, 일본 특개평10-295207호 공보에 기재된 채취 장치, 일본 특개2005-118035호 공보에 기재된 수액기를 이용하여 채취하는 것이 작업 효율이 높고, 또한, 품질 열화를 막을 수가 있어서 바람직하다.

채취한 포도 수액은 필요에 따라서 방부제 등과 혼합하여 액상 물질로서 이용할 수가 있고, 또는 동결건조품으로서 이용할 수가 있다. 또, 채취한 포도 수액에는 필요에 따라서 가열 처리, 청징 처리를 실시해도 괜찮다. 이것에 의해, 수액의 백탁이나 갈변을 방지할 수가 있다. 가열 처리는 포도 수액을 예를 들면 60~100℃, 바람직하게는 80~90℃으로, 예를 들면 10분 이상 가열하는 것에 의해 실시할 수가 있다. 덧붙여, 가열 처리는 채취 후의 포도 수액에 대해서 행하여도 좋고, 또는 제품으로 한 뒤에 행해도 괜찮다. 또, 청징 처리는 공지의 청징제, 예를 들면, 활성탄, 벤토나이트, 실리카 겔, 실리카 콜로이드 용액, PVPP(polyvinyl polypyrrolidone) 등을 이용하여 실시할 수 있다.

본 발명의 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제 및 피부 노화 방지제는 모두 포도 수액을 액체 그대로 포함할 수 있고, 또는 동결건조물로서 포함할 수도 있다. 제형은 특히 한정되지 않고, 로션제, 유제, 겔제, 크림제, 연고제, 분말제, 과립제 등의 여러 가지의 제형으로 제공할 수가 있다. 본 발명의 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제 및 피부 노화 방지제는, 포도 수액만, 또는 포도 수액과 프롤린으로 이루어진 것도 가능하고, 또는 필요에 따라서, 통상 의약품, 의약 부외품, 피부 화장재료 등에 배합되는 유성 성분, 계면활성제, 보습제, 안료, 자외선 흡수제, 산화 방지제, 향료, 색소, 항균제, 방미제, 알코올, 물 등을 적당 배합할 수가 있다. 또, 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위에 대하여, 다른 세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제, 노화 방지제와 병용할 수도 있다.

본 발명의 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제, 및 피부 노화 방지제는 모두 포도 수액을, 미조정 수액 환산으로 1 질량% 이상, 보다 바람직하게는 3 질량% ~ 100 질량%, 한층 더 바람직하게는 10 질량% ~ 80 질량% 포함할 수 있다. 본 발명에서는 포도 수액 그 자체를 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제, 및 피부 노화 방지제로서 이용할 수도 있다.

본 발명의 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제, 및 피부 노화 방지제에 포도 수액에 더하여 프롤린을 배합하는 경우, 배합량은 0.1~3 질량%, 바람직하게는 0.1~1.5 질량%의 범위로 하는 것이 적당하다. 프롤린 배합량은 포도 수액과의 합계를 100 질량%로 했을 때의 비율이다.

본 발명의 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제, 및 피부 노화 방지제의 피부 외용제로서의 적용 방법은, 외용제의 종류에 따라 적당하게 선택할 수가 있다. 일반적으로, 로션제, 유제, 겔제, 크림제, 연고제로서 조제된 외용제로서 적용하는 경우에는, 얼굴 등의 피부에 대해, 1일 1~2회 정도 도포하는 것이 바람직하다. 본 발명의 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제, 및 피부 노화 방지제는, 화장품으로서도 이용할 수 있어, 로션, 유액, 미용액, 크림, 리퀴드 파운데이션, 가루 파운데이션, 루즈 등에 응용할 수 있다.

본 발명의 섬유아세포 활성화제, 콜라겐 합성 촉진제, 및 피부 노화 방지제를 분말제, 과립제 등의 경구투여약으로서 이용하는 경우의 투여량은, 피투여자의 연령, 피부 상태 등의 조건에 응해 적당 선택할 수가 있다. 투여량은, 예를 들면, 성인 1 인당 100~1000 mg(유효 성분량으로서)의 범위이다. 다만, 상기의 투여량은, 상기의 조건에 따라 적당 증감할 수가 있다.

이하에, 본 발명을 실시예에 의해 한층 더 상세하게 설명한다. 단, 본 발명은 하기 실시예로 한정되는 것은 아니다.

덧붙여, 이하의 실시예에서 사용한 포도 수액은 2005년 4월 초순, 야마나시현 히가시야마이군 카츠누마쵸의 포도밭에 있어, 전정 중인 포도(품종：갑주)의 가지에서 유출하고 있는 수액을, 일본 특개평10-295207호 공보에 기재된 장치를 이용해 채취한 것이며, 포도 수액의 동결건조품 1 g는 미조정 수액 280 g에 상당한다.

실시예 1

(섬유아세포 활성화 작용 시험)

브롬화3-(4,5-디메틸-2-티아졸릴)-2,5-디페닐-2H-테트라졸륨(MTT)은 미토콘드리아에 있어서 세포 내의 에너지 대사 과정에서 생기는 NADPH 혹은 NADH에 의해 개열하여, 포르마잔을 생성한다. 이 때문에 포르마잔 생성량을, 세포 활성화 작용 의 지표로 했다.

정상인 섬유아세포를 3.0×10⁴cells/well의 세포 밀도로 96 구멍 마이크로 플레이트에 파종했다. 24 시간 1 % 소 태아 혈청(FBS) 함유 덜벡코 개변 이글 배양지(DMEM)에서 배양 후, 포도 수액의 동결건조품을 표 1에 나타내는 농도를 함유한 1 % FBS 함유 DMEM로 교환했다. 양성 컨트롤(PC)로서 5 % FBS 함유 DMEM를 이용했다. 또한 48 시간 배양 후, 0.4 mg/mL MTT(나카라이)를 함유하는 1 % FBS 함유 DMEM로 교환하여 2시간 배양했다.

세포를 세정 후, 2-프로파놀에서 세포 내에 생성한 포르마잔을 용해하고, 마이크로 플레이트 리더를 고용해 550 nm 및 650 nm의 흡광도를 측정하여, 양자의 차이를 가지고 세포 내에 생성한 포르마잔량으로서 평가했다. 세포 활성화 작용은, 시료 무첨가 배양 세포(컨트롤)의 흡광도(ABS.)를 100으로 한 활성 지표(Activation Index)(%)로 나타냈다. 결과를 표 1에 나타낸다. 모든 결과는, 평균치±표준 편차로 나타냈다. 유의차 검정에는 Student-t 검정을 이용했다. p값이 p<0.05일때 의미가 있다라고 판정했다. 표 1에 나타나듯이, 포도 수액을 첨가한 배양지에서 배양함으로써 섬유아세포를 활성화할 수 있는 것이 확인되었다.

섬유아세포에 대한 세포 활성화 작용(n=5)

	농도(μg/ml)	활성 지표(%)
	농도(μg/ml)	Mean ± SD	P (t-test)
컨트롤	-	100.0±1.7	1.000
PC	-	116.0±2.9	0.000
포도 수액 동결건조품	500.0	114.6±6.7	0.006
포도 수액 동결건조품	1000.0	120.3±6.9	0.001

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　밑줄：세포 활성화 작용 있음

실시예 2

(섬유아세포의 콜라겐 합성 촉진 작용 시험)

섬유아세포의 콜라겐 합성은 배양상청 중에 분비된 I형 콜라겐을 ELISA에서 정량함으로써 평가했다.

정상인 섬유아세포를 3.0×10⁴ cells/well의 세포 밀도로 96 구멍 마이크로 플레이트에 파종했다. 24 시간 0.5 % FBS 함유 DMEM에서 배양 후, 표 2에 나타내는 농도의 포도 수액의 동결건조품을 함유한 0.5 % FBS 함유 DMEM로 교환했다. PC로서 아스코르빈산인산 마그네슘 에스테르(VCPMg)를 이용했다. 게다가 48 시간 후, 배양상청을 회수하여 I형 콜라겐의 ELISA에 제공했다.

배양상청 및 검량선용 I형 콜라겐을 96 웰 플레이트에 넣어 4℃에서 하룻밤 코팅했다. 1 % 소 혈청 알부민(BSA) 용액을 이용해 37 ℃에서 1시간 블로킹 한 후, 일차 항체(항사람 I형 콜라겐(토끼))를 37℃에서 1.5 시간 반응시켰다. 게다가 2차 항체(히스토파인 PO(토끼))를 37℃에서 1.5 시간 반응 후, 0.3 mg/mL의 2,2＇-아디노비스(3-에틸벤조티아졸린-6-설폰산)2암모늄(ABTS) 함유 인산-구연산 완충액(0.1 M, pH 4.0)을 더했다. 20 분 후, 마이크로 플레이트 리더를 이용하여 405 nm의 흡광도를 측정했다. 배양상청 중의 콜라겐량은, 같은 플레이트로 측정한 검량선으로부터 산출했다.

동시에 세포의 단백량을 BCA Protein Assay Reagent(PIERCE)를 이용해 정량 했다. 배양상청 중의 콜라겐량을 단백량으로 제함으로써, 단위 단백량 근처의 콜라겐량을 산출해, 세포의 콜라겐 합성량으로 했다. 결과를 표 2에 나타낸다. 모든 결과는, 평균치±표준 편차로 나타냈다. 유의차 검정에는 Student-t 검정을 이용했다. p값이 p<0.05일때 의미가 있다라고 판정했다. 표 2에 나타나듯이, 포도 수액을 포함한 배지에서 배양함으로써, 무첨가시(Control)의 약 1.2배 ~ 3.6배나 섬유아세포의 콜라겐 합성이 촉진되는 것을 알 수 있다. 특히, 그 작용은 500μg/ml 이상의 포도 수액 동결건조품을 포함한 배지를 이용했을 경우, 현저했다. 또, 250μg/ml 이상의 포도 수액 동결건조품을 포함한 배지를 이용했을 경우에는, 단백량의 의미 있는 증가가 인정되었다. 덧붙여 단백질의 증가는 섬유아세포가 활성화되고 증식 하고 있는 것을 나타낸다. 표 2에 나타내는 콜라겐량은 단백량으로 나눈 값이며, 한층 더 개개의 세포의 콜라겐 합성량도 의미 있게 증가하고 있는 것을 알 수 있다.

	농도(μg/ml)	콜라겐량(ng/μg protein)		단백량(μg)
	농도(μg/ml)	Mean ± SD	p (t-test)	Mean ± SD	p (t-test)
Control	-	12.9±0.4	1.000	11.0±0.3	1.000
PC	-	32.9±4.8	0.000	11.2±0.2	0.230
포도 수액 동결건조품	125.0	15.0±1.1	0.003	11.1±0.4	0.761
	250.0	19.3±1.4	0.000	11.9±0.3	0.001
	500.0	41.9±1.9	0.000	12.3±0.2	0.000
	1000.0	46.0±2.0	0.000	12.4±0.2	0.000

밑줄：콜라겐 합성을 의미 있게 촉진

실시예 3

(프롤린 병용 시험)

시험 샘플의 조제

포도 수액에 대한 프롤린 병용의 효과를 확인하기 위해, 아래와 같이 관능 평가 시험 및 주름 평가 시험에 제공하는 크림을 표 3과 같이 처방했다. 표 3에 나타내는 조성물의 배합량은 모두 질량%를 나타낸다.

원료명	비교예 1	예 1	예 2	예 3
포도 수액	0.00	5.00	5.00	5.00
L-프롤린	1.00	0.00	0.50	1.00
키산탄감(2% 수용액)	5.00	5.00	5.00	5.00
폴리에틸렌글리콜1000	2.50	2.50	2.50	2.50
아크릴산·메타크릴산 알킬 공중합체 (2% 수용액)	15.00	15.00	15.00	15.00
카르복시비닐 폴리머(2% 수용액)	20.00	20.00	20.00	20.00
정제수	33.50	19.50	29.00	28.50
그리틸리틴산디칼륨	0.10	0.10	0.10	0.10
디프로필렌글리콜	3.00	3.00	3.00	3.00
1,3-부틸렌글리콜	5.00	5.00	5.00	5.00
진한 글리세린	4.00	4.00	4.00	4.00
페녹시에탄올	0.40	0.40	0.40	0.40
모노밀리스틴산데카글리세릴	0.50	0.50	0.50	0.50
트리2-에틸헥산산글리세릴	1.00	1.00	1.00	1.00
식물성 스쿠알렌	2.00	2.00	2.00	2.00
데카메틸시클로펜타실록산	2.00	2.00	2.00	2.00
메틸폴리실록산	1.00	1.00	1.00	1.00
수산화칼륨	0.35	0.35	0.35	0.35
정제수	3.65	3.65	3.65	3.65
합계	100.00	100.00	100.00	100.00

관능 평가 시험

피부의 건조나 유연성, 당김이 없음을 호소하는 30대에서 50대의 60명의 여성을 피험자로서 연령이 치우치지 않게 15명씩 4군으로 나누어 표 3으로 나타낸 비교예 1 및 예 1~3의 4 종류의 처방 예의 크림을 각각의 군의 피험자에게, 아침 저녁 1일 2회, 연속 30일간 사용하게 하여, 사용감：촉촉한 느낌(습윤성), 당기는 느낌(탄력성), 부드러운 느낌(유연성)에 대한 관능 평가 시험을 실시했다. 평가 기준은 표 4에 나타낸 바와 같으며, 관능 평가 시험 결과를 표 5에 나타낸다.

［평가 기준］

사용감	평가점	평가
촉촉한 느낌(습윤성)	5	매우 촉촉하다
	4	촉촉하다
	3	보통
	2	촉촉하지 않다
	1	전혀 촉촉하지 않다

당기는 느낌(탄력성)	5	매우 당김이 있다
	4	당김이 있다
	3	보통
	2	당김이 없다
	1	전혀 당김이 없다

부드러운 느낌(유연성)	5	매우 부드럽다
	4	부드럽다
	3	보통
	2	부드럽지 않다
	1	전혀 부드럽지 않다

	비교예 1	예 1	예 2	예 3
촉촉한 느낌(습윤성)	2.9	4.1	4.2	4.6
당기는 느낌(탄력성)	2.8	3.2	3.9	4.5
부드러운 느낌(유연성)	2.7	3.1	3.5	4.2
평균값	2.8	3.5	3.9	4.4

* 각 예 15명의 평균 평가 점수값 및 3 평가 항목의 토탈 평균값

주름 평가 시험

피부의 주름(특히 눈초리의 잔주름)이 신경이 쓰이는 40대에서 60대의 40명의 여성을 피험자로서 연령이 치우치지 않게 10명씩 4군으로 나누어 표 3으로 나타낸 비교예 1 및 예 1~3의 4 종류의 처방 예의 크림을 각각의 군의 피험자에게 아침 저녁 1일 2회, 주름이 생기기 쉬운 눈의 주위를 중심으로 연속 30일간 사용하여, 도포 전후의 눈초리의 주름 개수를 자외선 사진을 이용한 시관판정법으로 비교했다. 그 결과를 표 6에 나타낸다.

	비교예 1	예 1	예 2	예 3
도포 전(0일째)주름 개수	24	22	27	29
도포 후(30일째) 주름 개수	22	17	19	18
주름 개수 개선(감소)률	8%	23%	30%	38%

* 각 예 10명의 평균 주름개수 및 도포 전후의 개선(감소율)

시험 결과

관능 평가 시험 결과를 나타내는 표 5에 대해도, 주름 평가 시험 결과를 나타내는 표 6에 대해도, 예 1의 포도 수액을 포함한 크림은 비교예 1의 프롤린을 포함한 크림에 비해, 건조, 당김, 주름에 대한 개선 효과는 높았다. 게다가 예 2 및 3의 포도 수액과 프롤린을 편성한 크림은 포도 수액과 프롤린을 단독으로 이용하는 경우보다, 건조, 당김, 주름 등에 대한 개선 효과는 한층 더 높았다. 즉, 포도 수액의 건조, 당김, 주름 등에 대한 개선 효과는 뛰어나고, 게다가, 포도 수액에, 콜라겐을 구성하는 아미노산, 특히 프롤린을 조합해 사용함으로써, 피부의 보습 효과를 높이고 주름을 눈에 띄기 어렵게 하는 효과가 한층 더 높아지는 것을 알 수 있다.

본 발명에 의하면, 포도 수액의 섬유아세포 활성화 작용 및 섬유아세포의 콜라겐 합성 촉진 작용을 통해, 피부의 노화를 효과적으로 방지할 수가 있다.

본 발명의 콜라겐 합성 촉진제 및 섬유아세포 활성화제는 노화 방지에 더하여 여드름자국, 임신선의 치유, 화상 등의 창상 치료, 인공 피부의 배양 촉진 등에의 응용이 기대된다.

Claims

포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 섬유아세포 활성화제.
제1항에 있어서, 프롤린을 한층 더 함유하는 섬유아세포 활성화제.
포도 수액을 사용하는 섬유아세포 활성화 방법.
제3항에 있어서, 프롤린을 병용하는 섬유아세포 활성화 방법.
포도 수액을 섬유아세포 활성화제로서 사용하는 방법.
제5항에 있어서, 상기 섬유아세포 활성화제가 프롤린을 한층 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 합성 촉진제.
제7항에 있어서, 프롤린을 한층 더 함유하는 콜라겐 합성 촉진제.
포도 수액을 사용하는 콜라겐 합성 촉진 방법.
제9항에 있어서, 프롤린을 병용하는 콜라겐 합성 촉진 방법.
포도 수액을 콜라겐 합성 촉진제로서 사용하는 방법.
제11항에 있어서, 상기 콜라겐 합성 촉진제가 프롤린을 한층 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
포도 수액을 유효 성분으로서 함유하는 피부 노화 방지제.
제13항에 있어서, 프롤린을 한층 더 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지제.
포도 수액을 사용하는 피부 노화 방지 방법.
제15항에 있어서, 프롤린을 병용하는 피부 노화 방지 방법.
포도 수액을 피부 노화 방지제로서 사용하는 방법.
제17항에 있어서, 상기 피부 노화 방지제가 프롤린을 한층 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.